ES2256453T3

ES2256453T3 - Composicion detergente liquida que muestra una estabilidad de la enzima alfa-amilasa incrementada.

Info

Publication number: ES2256453T3
Application number: ES02714975T
Authority: ES
Inventors: Chandrika Kasturi; Mark Edward Wandsrat; Brian Xiaoqing Song
Original assignee: Procter and Gamble Co
Current assignee: Procter and Gamble Co
Priority date: 2001-02-28
Filing date: 2002-02-25
Publication date: 2006-07-16
Anticipated expiration: 2022-02-25
Also published as: ATE316132T1; DE60208777T2; MX254098B; US20020183226A1; WO2002068575A1; EP1373452A1; JP4267923B2; MXPA03007787A; JP2004525219A; US20060019856A1; WO2002068575A8; DE60208777D1; US7579310B2; JP2006257435A; US20110053824A1; US20100022434A1; CA2439379A1; EP1373452B1; CA2439379C

Abstract

Una composición detergente líquida acuosa o de tipo gel que comprende, en peso: (1)de 0, 1 % a 15 % de ácido bórico o un compuesto de boro capaz de formar ácido bórico en la composición; (2)de 0, 1 % a 10 % de un compuesto polihidroxilado seleccionado del grupo que consiste en etilenglicol, propilenglicol, 1, 2-propanodiol, butilenglicol, hexilenglicol, glicerol, manitol, sorbitol, eritritol, glucosa, fructosa, lactosa, 1, 4-anhídrido de eritritol y mezclas de los mismos; (3)de 10 a 100 milimoles de ion calcio por litro de composición; (4)de 5 % a 90 % de agua; y (5)una enzima á-amilasa seleccionada del grupo que consiste en: (a)á-amilasa caracterizada por tener una actividad específica al menos 25 % superior a la actividad específica de Termamyl® en un intervalo de temperatura de 25 °C a 55 °C y a un valor de pH en el intervalo de 8 a 10, medida mediante el ensayo Phadebas® de actividad de á-amilasa y/o; (b)á-amilasa según (a) que comprende la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ IDnúm. 1 o una á- amilasa que presenta una homología de al menos 80 % con la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 1 y/o; (c)á-amilasa según (a) que comprende la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 2 o una á- amilasa que presenta una homología de al menos 80 % con la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 2 y/o; (d)á-amilasa según (a) que comprende la siguiente secuencia de aminoácidos en el extremo amino: His- His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe- Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp (SEQ ID núm. 3) o una á-amilasa que presenta una homología de al menos 80 % con la secuencia de aminoácidos indicada (SEQ ID núm. 3) en el extremo amino y/o; (e)á-amilasa según (a-d), en donde la á-amilasa puede obtenerse de una especie alcalófila de Bacillus.

Description

Composición detergente líquida que muestra una estabilidad de la enzima \alpha-amilasa incrementada.

Campo técnico

La presente invención se refiere a composiciones detergentes líquidas acuosas o de tipo gel que comprenden una combinación de ácido bórico o un compuesto de boro capaz de formar ácido bórico en la composición, un compuesto polihidroxilado, preferiblemente propanodiol y un nivel relativamente elevado de ion calcio para estabilizar una enzima \alpha-amilasa seleccionada. La invención se refiere también a un proceso para mejorar la estabilidad de la enzima \alpha-amilasa en una composición detergente líquida o de tipo gel.

Antecedentes de la invención

Las composiciones detergentes líquidas acuosas y de tipo gel que contienen enzimas, incluyendo amilasas, son bien conocidas en la técnica. El principal problema de este tipo de composiciones es el de garantizar una estabilidad suficiente de las enzimas durante el almacenamiento. Es especialmente difícil estabilizar amilasas en presencia de proteasas, las cuales pueden degradar fácilmente las amilasas en las composiciones detergentes líquidas acuosas o de tipo gel.

En la memoria descriptiva GB-1.296.839 se describen amilasas de alcalinidad elevada como las alfa amilasas. En la patente US-4.537.706, Severson, se describe la utilización de un sistema estabilizador de enzimas que comprende una mezcla de ácido bórico o un borato de metal alcalino con ion calcio y, preferiblemente, con un poliol. En los documentos WO97/32961, Baeck y col. y WO96/23873 y la patente US-6.093.562 se describen ciertas \alpha-amilasas que proporcionan limpieza mejorada y eliminación de manchas mejorada.

La presente invención utiliza bajos niveles de ácido bórico y compuesto polihidroxilado en combinación con un nivel relativamente elevado de ion calcio para proporcionar una estabilidad sorprendentemente buena de enzimas \alpha-amilasa seleccionadas.

Sumario de la invención

La invención se refiere a una composición detergente líquida acuosa o de tipo gel que contiene una enzima \alpha-amilasa seleccionada que tiene estabilidad mejorada y a un proceso para estabilizar la enzima amilasa en dicha composición. Las composiciones detergentes en la presente memoria son útiles para limpiar vajilla (p. ej., material de vidrio, loza, plata, plástico, etc.), artículos de cocina, superficies domésticas como suelos, aparatos sanitarios y encimeras y tejidos. Las composiciones pueden ser productos de limpieza totalmente formulados o productos aditivos o especiales que pueden utilizarse solos o con otros productos de limpieza. Las composiciones especialmente preferidas en la presente invención son para utilización en máquinas lavavajillas.

En un aspecto de la presente invención una composición detergente líquida acuosa o de tipo gel comprende, en peso (1) de 0,1% a 15% de ácido bórico o un compuesto de boro capaz de formar ácido bórico en la composición; (2) de 0,1% a 10% de un compuesto polihidroxilado seleccionado del grupo que consiste en etilenglicol, propilenglicol, 1,2-propanodiol, butilenglicol, hexilenglicol, glicerol, manitol, sorbitol, eritritol, glucosa, fructosa, lactosa, 1,4-anhídrido de eritritol y mezclas de los mismos; (3) de 10 a 100 milimoles de ion calcio por litro de composición; (4) de 5% a 90% de agua; y (5) una enzima \alpha-amilasa, según se define a continuación.

En otro aspecto de la presente invención un proceso para estabilizar una enzima amilasa en una composición detergente líquida acuosa o de tipo gel comprende mezclar con ingredientes detergentes: (1) de 0,1% a 15% en peso de ácido bórico o un compuesto de boro capaz de formar ácido bórico en la composición, (2) de 0,1% a 10% en peso de un compuesto polihidroxilado seleccionado del grupo que consiste en etilenglicol, propilenglicol, 1,2-propanodiol, butilenglicol, hexilenglicol, glicerol, manitol, sorbitol, eritritol, glucosa, fructosa, lactosa, 1,4-anhídrido de eritritol y mezclas de los mismos, (3) de 10 a 100 milimoles de ion calcio por litro de composición y (4) una enzima \alpha-amilasa, según se define a continuación.

Descripción detallada de la invención

La presente invención se refiere a una composición detergente líquida acuosa o de tipo gel que comprende ácido bórico o un compuesto de boro capaz de formar ácido bórico en la composición, un compuesto polihidroxilado, iones calcio y una enzima \alpha-amilasa seleccionada.

El ácido bórico o compuesto de boro capaz de formar ácido bórico en la composición es deseable que se encuentre en una cantidad de 0,5% a 10% en peso, y preferiblemente de 1% a 5%, y más preferiblemente de 2% a 4% en peso (referido al ácido bórico presente). En la presente invención se prefiere especialmente ácido bórico, aunque también son adecuados otros compuestos como el óxido de boro, borax y otros boratos de metal alcalino (p. ej., ortoborato de sodio, metaborato de sodio, piroborato de sodio y pentaborato de sodio). En lugar del ácido bórico también pueden utilizarse los ácidos bóricos sustituidos (p. ej., ácido fenilborónico, ácido butanoborónico y ácido p-bromo fenilborónico).

Como se ha descrito anteriormente las composiciones de la presente invención contienen también un compuesto polihidroxilado. El compuesto polihidroxilado contiene preferiblemente de 2 a 6 átomos de carbono y de 2 a 6 grupos hidroxi, y se selecciona preferiblemente de propilenglicol, etilenglicol, glicerol, sorbitol, glucosa y mezclas de los mismos. El compuesto polihidroxilado es preferiblemente 1,2-propanodiol. En la realización preferida es deseable que el compuesto polihidroxilado se encuentre presente en una cantidad de 0,1% a 7% en peso, preferiblemente de 0,1% a 5% en peso y, más preferiblemente, de 0,1% a 3% en peso. Con máxima preferencia el compuesto polihidroxilado está presente a un nivel de 0,2% a 1% en peso.

Las composiciones en la presente invención contienen asimismo de 10 a 100, preferiblemente de 13 a 50, más preferiblemente de 15 a 30 y con máxima preferencia de 18 a 25 milimoles de ion calcio por litro de composición. El nivel de ion calcio debería seleccionarse de modo que quede siempre algún nivel mínimo para la enzima en la composición después de que tenga lugar la formación de complejos con componentes de tipo aditivo reforzante de la detergencia, ácido graso, etc. Puede utilizarse cualquier sal de calcio hidrosoluble como fuente de ion calcio, incluidos cloruro de calcio, formiato de calcio y acetato de calcio. A menudo también hay una pequeña cantidad de ion calcio en la composición, generalmente de 0,05 a 0,4 milimoles por litro, debido a la presencia de calcio en la suspensión acuosa de la enzima y en el agua de formulación.

Las composiciones en la presente invención contienen de 5% a 90%, preferiblemente de aproximadamente 20% a aproximadamente 80%, más preferiblemente de aproximadamente 40% a aproximadamente 75% de agua.

Las composiciones en la presente invención contienen también de 0,01% a aproximadamente 5%, preferiblemente de 0,1% a aproximadamente 2%, en peso de la enzima \alpha-amilasa de la presente invención, la cual se encuentra típicamente disponible en forma de suspensión acuosa diluida (p. ej., 2-4% de sustancia activa). Tomando como base una sustancia activa consistente en enzima pura las composiciones de la invención pueden contener de 0,0001% a 0,1%, preferiblemente de 0,001% a aproximadamente 0,05%, en peso de la \alpha-amilasa.

Las \alpha-amilasas en la presente memoria están descritas en el documento WO97/32961 como "enzimas amilasa específicas". Estas amilasas incluyen:

(a): \alpha-amilasas caracterizadas por tener una actividad específica al menos 25% superior a la actividad específica de Termamyl® en un intervalo de temperatura de 25ºC a 55ºC y a un valor de pH en el intervalo de 8 a 10, medida mediante el ensayo Phadebas® de actividad de \alpha-amilasa. Este ensayo Phadebas® de actividad de \alpha-amilasa se describe en las páginas 9-10 del documento WO95/26397.

(b): \alpha-amilasas según (a) que comprenden la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 1 del documento WO97/32961 o una \alpha-amilasa que presenta una homología de al menos 80% con la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 1.

(c): \alpha-amilasas según (a) que comprenden la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 2 del documento WO97/32961 o una \alpha-amilasa que presenta una homología de al menos 80% con la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 2.

(d): \alpha-amilasas según (a) que comprenden la siguiente secuencia de aminoácidos en el extremo amino: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp (SEQ ID núm. 3) o una \alpha-amilasa que presenta una homología de al menos 80% con la secuencia de aminoácidos indicada (SEQ ID núm. 3) en el extremo amino.

: Se considera que un polipéptido es homólogo en un X% respecto a la amilasa precursora si una comparación de las respectivas secuencias de aminoácidos, efectuada a través de algoritmos como el descrito por Lipman y Pearson en Science 227, 1985, pág. 1435, muestra una identidad del X%.

(e): \alpha-amilasas según (a-d), en donde la \alpha-amilasa se puede obtener de una especie alcalófila de Bacillus y, en particular, de cualquiera de las cepas NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 y DSM 935. En el contexto de la presente invención el término "que puede obtenerse de" no solo está previsto que indique una amilasa producida por una cepa de Bacillus, sino también una amilasa codificada por una secuencia de ADN aislada a partir de una de dichas cepas de Bacillus y producida en un organismo huésped transformado con dicha secuencia de ADN.

(f): \alpha-amilasa que muestra reactividad cruzada inmunológica positiva con anticuerpos frente a una \alpha-amilasa que contiene una secuencia de aminoácidos correspondiente respectivamente a las SEQ ID núm. 1, ID núm. 2 o ID núm. 3.

(g): Variantes de las siguientes \alpha-amilasas precursoras que (i) tienen una de las secuencias de aminoácidos indicadas en SEQ ID núm. 1, ID núm. 2 o ID núm. 4 respectivamente, o (ii) presentan al menos 80% de homología con una o más de dichas secuencias de aminoácidos, y/o presentan reactividad cruzada inmunológica con un anticuerpo frente a una \alpha-amilasa que tiene una de dichas secuencias de aminoácidos, y/o están codificadas por una secuencia de ADN que se hibrida con la misma sonda que una secuencia de ADN que codifica una \alpha-amilasa que tiene una de dichas secuencias de aminoácidos; en cuyas variantes:

1.: se ha delecionado al menos un residuo de aminoácido de dicha \alpha-amilasa precursora; y/o

2.: se ha sustituido al menos un residuo de aminoácido de dicha \alpha-amilasa precursora por un residuo de aminoácido diferente; y/o

3.: se ha insertado al menos un residuo de aminoácido con respecto a dicha \alpha-amilasa precursora;

teniendo dicha variante una actividad \alpha-amilasa y presentando al menos una de las siguientes propiedades relacionadas con dicha \alpha-amilasa precursora: mayor termoestabilidad, mayor estabilidad frente a la oxidación, dependencia reducida del ion Ca, mayor estabilidad y/o actividad \alpha-amilolítica a valores de pH neutros o relativamente altos, mayor actividad \alpha-amilolítica a temperatura relativamente alta e incremento o disminución del punto isoeléctrico (pI) para hacer coincidir mejor el valor pI de la variante \alpha-amilasa con el pH del medio.

Dichas variantes se describen en el documento WO96/23873 y la patente US-6.093.562, publicada el 25 de julio de 2000.

Una \alpha-amilasa particularmente preferida en la presente invención es Natalase®, comercializada por Novo, la cual tiene la secuencia de aminoácidos indicada en Seq. ID núm. 2 en el documento WO 97/32961 con el ácido aspártico (Asp o D) en posición 183 y la glicina (Gly o G) en posición 184 eliminadas.

En la presente invención se ha encontrado sorprendentemente que la combinación de ácido bórico o compuesto de boro, compuesto poihidroxi y ion calcio a los niveles de la presente invención estabiliza inesperadamente la enzima \alpha-amilasa seleccionada en comparación con otras enzimas \alpha-amilasa como Termamyl®.

Otros ingredientes detergentes

Las composiciones de la presente invención pueden contener también los componentes adicionales que se encuentran generalmente en las composiciones detergentes. Las composiciones pueden contener tensioactivos, especialmente aniónicos y/o no iónicos, disolventes, arcillas, espesantes tipo policarboxilato, bicarbonato sódico, abrillantadores, carbonatos, fosfatos, ácido dicarboxílico, siloxanos, perfumes, blanqueador y catalizadores de blanqueo, y mezclas de los mismos. A continuación se describen con mayor detalle los componentes preferidos.

(a) Espesantes

La estabilidad física del producto líquido puede mejorarse, y la viscosidad del producto líquido puede modificarse mediante adición al detergente líquido de un espesante de reticulación de poliacrilato a modo de espesante tixo-
trópico.

Los espesantes de uso en la presente invención incluyen los seleccionados de arcilla, policarboxilatos, como Polygel®, gomas, carboximetilcelulosa, poliacrilatos, y mezclas de los mismos. Los espesantes de arcilla en la presente invención tienen preferiblemente una estructura bicapa. La arcilla puede ser una arcilla natural, por ejemplo, bentonitas o bien puede ser artificial, p. ej. Laponite®. Laponite® es una arcilla suministrada por Southern Clay Products, Inc. Ver The Chemistry and Physics of Clays, Grimshaw, 4ª ed., 1971, páginas 138-155, Wiley-Interscience.

(b) Componentes ajustadores de pH

El producto detergente líquido anterior es preferiblemente poco espumante, fácilmente soluble en el medio de lavado y presenta máxima eficacia a valores de pH lo más propicios para conseguir una capacidad limpiadora mejorada, como en un intervalo deseable de pH 6,5 a pH 12,5, y preferiblemente de pH 7,0 a pH 12,0, más preferiblemente de pH 8,0 a pH 11,0, cuando se mide a una concentración de 1% en peso en agua. Preferiblemente el pH es de 8,5 a 10,5, con máxima preferencia de 8,5 a 10,0. Los componentes ajustadores de pH se seleccionan deseablemente de hidróxido de sodio o hidróxido de potasio, carbonato de sodio o carbonato de potasio o sesquicarbonato de sodio o sesquicarbonato de potasio, silicato de sodio o silicato de potasio, ácido bórico, bicarbonato de sodio o bicarbonato de potasio, borato de sodio o borato de potasio, y mezclas de los mismos. Los ingredientes preferidos para aumentar el pH hasta los intervalos arriba mencionados son NaOH o KOH. Otros ingredientes preferidos para ajustar el pH son carbonato de sodio, carbonato de potasio y mezclas de los mismos.

(c) Tensioactivo

Las composiciones de la presente invención contienen preferiblemente un tensioactivo no iónico poco espumante, preferiblemente un tensioactivo de tipo alquiletoxilado. Un tensioativo preferido es SLF18® fabricado por BASF Corporation. Los tensioactivos en la presente invención están generalmente presentes en un intervalo de 0,1% a 10% en peso de la composición. Los tensioactivos útiles en la presente invención se encuentran descritos con mayor detalle en el documento WO 98/03622, publicado el 29 de enero de 1998, y en la patente US-4.537.707.

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(d) Aditivo reforzante de la detergencia

Las composiciones de la presente invención también contienen preferiblemente uno o más aditivos reforzantes de la detergencia para ayudar a controlar la dureza mineral y a eliminar la suciedad en forma de partículas. Pueden usarse tanto aditivos reforzantes de la detergencia inorgánicos como orgánicos.

La concentración de aditivo reforzante de la detergencia puede variar ampliamente dependiendo de la aplicación a que está destinada la composición y de la forma física que se desee que tenga la composición. Cuando están presentes, las composiciones comprenderán de forma típica al menos 1% de aditivo reforzante de la detergencia. Las composiciones preferidas comprenden de 5% a 50%, más preferiblemente de 10% a 30% en peso de aditivo reforzante de la detergencia. Sin embargo, esto no significa que se excluyan niveles menores o mayores de aditivo reforzante de la detergencia.

Los aditivos reforzantes de la detergencia inorgánicos o que contienen P incluyen, aunque no de forma limitativa, las sales de metal alcalino, de amonio y de alcanolamonio de los polifosfatos (ilustrados por los tripolifosfatos y los metafosfatos poliméricos vítreos), fosfonatos, ácido fítico, silicatos, carbonatos (incluidos bicarbonatos y sesquicarbonatos) y aluminosilicatos.

Son ejemplos de aditivos reforzantes de la detergencia los silicatos de metal alcalino, en particular aquellos con una relación SiO_{2}:Na_{2}O en el intervalo de 1,6:1 a 3,2:1, y los silicatos laminares como, por ejemplo, los silicatos laminares de sodio descritos en la patente US-4.664.839, concedida a H. P. Rieck el 12 de mayo de 1987. NaSKS-6 es la marca registrada de un silicato laminar cristalino comercializado por Hoechst (abreviado habitualmente en la presente memoria como "SKS-6"). NaSKS-6 puede prepararse por métodos como los descritos en las patentes alemanas DE-A-3.417.649 y DE-A-3.742.043. En la presente invención pueden utilizarse otros silicatos laminares, como los de fórmula general NaMSi_{x}O_{2x+1}.yH_{2}O, en la que M es sodio o hidrógeno, x es un número de 1,9 a 4, preferiblemente 2, e y es un número de 0 a 20. Otros silicatos laminares de Hoechst incluyen NaSKS-5, NaSKS-7 y NaSKS-11 en sus formas alfa, beta y gamma.

Son ejemplos de agentes reforzantes de la detergencia de tipo carbonato los carbonatos de metales alcalinotérreos y los carbonatos de metales alcalinos descritos en la solicitud de patente alemana 2.321.001, publicada el 15 de noviembre de 1.973.

En la presente invención pueden ser útiles los aditivos reforzantes de la detergencia de tipo aluminosilicato. Los aditivos reforzantes de la detergencia de tipo aluminosilicato incluyen los que tienen la fórmula empírica:

M_{z}(zAlO_{2})y]xH_{2}O

en donde z e y son números enteros de al menos 6, la relación molar de z a y está en el intervalo de 1,0 a aproximadamente 0,5, y x es un número entero de aproximadamente 15 a aproximadamente 264.

Se comercializan materiales de intercambio iónico útiles basados en aluminosilicato. Un método de fabricación de materiales de intercambio iónico basados en aluminosilicato se describe en la patente US-3.985.669, concedida a Krummel y col. el 12 de octubre de 1976. Los materiales de intercambio iónico cristalinos basados en aluminosilicato sintético útiles en la presente invención preferidos se comercializan con los nombres Zeolita A, Zeolita P (B), Zeolita MAP y Zeolita X. En una realización especialmente preferida, el material intercambiador de iones de aluminosilicato cristalino tiene la fórmula:

Na_{12}[AlO_{2})_{12}(SiO_{2})_{12}] xH_{2}O

en la que x es de aproximadamente 20 a aproximadamente 30, especialmente aproximadamente 27. Este material se conoce como Zeolita A. En la presente invención pueden utilizarse también zeolitas deshidratadas (x = 0-10). Preferiblemente, el aluminosilicato tiene un tamaño de partícula de aproximadamente 0,1 a 10 micrómetros de diámetro.

Los aditivos reforzantes de la detergencia orgánicos adecuados para los fines de la presente invención incluyen, aunque no de forma limitativa, una extensa variedad de compuestos de policarboxilato. En la presente memoria el término "policarboxilato" se refiere a compuestos que tienen una pluralidad de grupos carboxilato, preferiblemente al menos 3 carboxilatos. El aditivo reforzante de la detergencia de tipo policarboxilato puede añadirse generalmente a la composición en forma ácida, aunque también puede añadirse en forma de sal neutra. Cuando se utiliza en forma de sal se prefieren sales de metales alcalinos como sodio, potasio y litio, o de alcanolamonio.

Entre los aditivos reforzantes de la detergencia de tipo policarboxilato se incluyen diferentes categorías de materiales útiles. Una categoría importante de aditivos reforzantes de la detergencia de tipo policarboxilato abarca los eter-policarboxilatos, incluyendo el oxidisuccinato, según se describe en la patente US-3.128.287, concedida a Berg el 7 de abril de 1964, y la patente US-3.635.830, concedida a Lamberti y col. el 18 de enero de 1972. Véanse también los aditivos reforzantes de la detergencia "TMS/TDS" de la patente US-4.663.071, concedida a Bush y col. el 5 de mayo de 1987. Los eter-policarboxilatos adecuados también incluyen compuestos cíclicos, especialmente compuestos alicíclicos, tales como los descritos en las patentes US-3.923.679, US-3.835.163, US-4.158.635, US-4.120.874 y US-4.102.903.

Los aditivos reforzantes de la detergencia de tipo citrato, p. ej., ácido cítrico y sales solubles de los mismos (en particular la sal de sodio) son aditivos reforzantes de la detergencia de tipo policarboxilato de importancia en las formulaciones detergentes líquidas debido a su disponibilidad a partir de recursos renovables y a su biodegradabilidad. Los oxidisuccinatos son también especialmente útiles en este tipo de composiciones y combinaciones.

También son adecuados en las composiciones de la presente invención los 3,3-dicarboxi-4-oxa-1,6-hexanodioatos y compuestos afines descritos en la patente US-4.566.984, concedida a Bush el 28 de enero de 1986. Los aditivos reforzantes de la detergencia de este grupo preferidos son los laurilsuccinatos, descritos en la solicitud EP-86200690.5/0,200,263, publicada el 5 de noviembre de 1986.

Otros policarboxilatos adecuados se describen en la US-4.144.226, concedida a Crutchfield y col. el 13 de marzo de 1979, y en la US-3.308.067, concedida a Diehl el 7 de marzo de 1967. Véase también la US-3.723.322 concedida a Diehl.

Con objeto de proporcionar una actividad reforzante adicional de la detergencia pueden incorporarse también ácidos grasos a las composiciones, por ejemplo, ácidos monocarboxílicos C_{12}-C_{18}, solos o junto con los susodichos aditivos reforzantes de la detergencia, especialmente citrato y/o los aditivos reforzantes de la detergencia tipo succinato.

Los aditivos reforzantes de la detergencia preferidos en la presente invención incluyen diferentes fosfatos de metal alcalino como los conocidos tripolifosfato de sodio, pirofosfato de sodio y ortofosfato de sodio. También pueden utilizarse aditivos reforzantes de la detergencia de tipo fosfonato, tales como el etano-1-hidroxi-1,1-difosfonato y otros fosfonatos conocidos (véanse por ejemplo, las patentes US-3.159.581, US-3.213.030, US-3.422.021, US-3.400.148 y US-3.422.137), aunque dichos materiales se utilizan más frecuentemente a concentraciones bajas como quelantes o estabilizantes. El tripolifosfato de sodio y/o de potasio es un aditivo reforzante de la detergencia especialmente preferido en la presente invención, y se utiliza preferiblemente a un nivel de aproximadamente 15% a 35%, más preferiblemente de aproximadamente 20% a aproximadamente 30%, en peso de la composición.

(e) Otros ingredientes detergentes adyuvantes

La composición detergente líquida o de tipo gel puede contener opcionalmente hasta aproximadamente 20% de un polímero dispersante seleccionado del grupo que consiste en poliacrilatos y copolímeros de poliacrilato.

Las composiciones de la presente invención pueden contener también otras enzimas y agentes estabilizantes de enzimas como los ácidos carboxílicos de cadena corta que se describen en el documento WO 98/03622, publicado el 29 de enero de 1998, la patente US-4.537.707, concedida a Severson y la patente US-4.318.818, concedida a Letton y col.

Las composiciones en la presente invención pueden contener también agentes blanqueadores y activadores, agentes conservantes del material y agentes quelantes como los descritos en el documento WO 98/03622.

Para ilustrar la presente invención y demostrar sus ventajas, se preparan las siguientes fórmulas detergentes de tipo gel que contienen \alpha-amilasa, ácido bórico, 1-2-propanodiol e ion calcio a los niveles indicados.

TABLA 1

Ingredientes (sustancia activa)	Formulación A	Formulación B
Tripolifosfato sódico	22,0	22,0
KOH	4,7	7,5
H_{2}SO_{4}	3,9	3,9
Ácido bórico	3,0	*
1,2-propanodiol	0,5	*
CaCl_{2}.2H_{2}O	*	*
Tensioactivo no iónico (SLF18)	1,0	1,0
Proteasa (3,4% de sustancia activa)	0,6	0,6
\alpha-amilasa* (2,7% de sustancia activa)	0,17	0,17
Espesante de tipo poliacrilato (Polygel DKP)	1,18	1,02
Perfume	0,10	0,10
Agua desionizada y componentes minoritarios	Resto	Resto
(pH al 1% en agua)	(8,5)	(9,5)
*Según la tabla 2.

Las composiciones anteriores se preparan mezclando los ingredientes en el orden siguiente. Se prepara una mezcla previa en solución mezclando agua, hidróxido de potasio, ácido sulfúrico, propanodiol, ácido bórico y tripolifosfato de sodio (STP) en una cuba de acero inoxidable. Se recircula la mezcla previa a través de un mezclador de alta capacidad de cizalla para triturar el STP hasta un intervalo de tamaño de partículas de aproximadamente 10-70 micrómetros. Se utiliza un intercambiador de calor para eliminar el calor de la mezcla. Se prepara una mezcla previa de polímero disolviendo el espesante tipo poliacrilato en una solución acuosa débilmente acidulada– de ácido nítrico. A continuación se neutraliza la solución de polímero con la primera mezcla previa para preparar una base de gel. El mezclado continuo con la primera mezcla previa provoca el hinchamiento del polímero, con lo cual se consigue una consistencia tipo gel. A continuación se enfría el producto antes de la adición del tensioactivo no iónico, las enzimas, el perfume y los componentes minoritarios. El producto acabado es un detergente estable de tipo gel especialmente útil como composición detergente para lavavajillas.

En la tabla 2 se expone la estabilidad de la \alpha-amilasa en las fórmulas anteriores, calculada como % de amilasa residual después de un almacenamiento a 32,2ºC (90ºF) durante 1, 2, 3 y 4 semanas.

TABLA 2

	% amilasa residual a 32,2ºC
	(90ºF) después de # semanas
Fórmula	1	2	3	4

1. A con Natalase\registrado, 0,037% CaCl_{2}.2H_{2}O (3,3 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 3,0% ácido bórico, 0,5% 1,2-propanodiol	56,1	38,3	31,1	25,0
2. A con Natalase\registrado, 0,22% CaCl_{2}.2H_{2}O (20 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 3,0% ácido bórico, 0,5% 1,2-propanodiol	89,2	82,1	75,2	70,4
3. B con Termamyl\registrado, 0,037% CaCl_{2}.2H_{2}O (3,3 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 3,0% ácido bórico, 0,5% 1,2-propanodiol	79,3	70,6	55,2	39,4
4. B con Termamyl\registrado, 0,22% CaCl_{2}.2H_{2}O (20 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 3,0% ácido bórico, 0,5% 1,2-propanodiol	80,8	75,3	59,8	48,7
5. B con Natalase\registrado, 0,073% CaCl_{2}.2H_{2}O (6,7 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 3,0% ácido bórico, 0,5% 1,2-propanodiol	76,6	65,3	50,9	39,3
6. B con Natalase\registrado, 0,147% CaCl_{2}.2H_{2}O (13,3 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 3,0% ácido bórico, 0,5% 1,2-propanodiol	88,6	77,8	70,3	61,4
7. B con Natalase\registrado, 0,22% CaCl_{2}.2H_{2}O (20 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 3,5% ácido bórico, 0% 1,2-propanodiol	59,5	42,6	31,2	26,1
8. B con Natalase\registrado, 0,22% CaCl_{2}.2H_{2}O (20 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 0% ácido bórico, 3,5% 1,2-propanodiol	44,6	20,8	9,0	5,8
9. B con Natalase\registrado, 0,22% CaCl_{2}.2H_{2}O (20 milimoles Ca^{++}/litro),
\hskip0,3cm 3,0% ácido bórico, 0,5% 1,2-propanodiol	95,6	88,9	74,5	65,8
Se presentan las fórmulas 1, 3 y 5 a efectos comparativos.

Como puede apreciarse arriba la Natalase® en la fórmula 2 de la presente invención tiene mejor estabilidad con 20 milimoles de ion calcio por litro que con el nivel bajo de calcio en la fórmula 1.

Por el contrario, al aumentar el nivel de calcio desde 3,3 a 20 milimoles de ion calcio por litro no mejora significativamente la estabilidad de Termamyl® en una fórmula B base similar (comparar resultados correspondientes a la fórmula 4 frente a la fórmula 3).

La Natalase® en la fórmula 6 de la presente invención que contiene 13,3 milimoles de ion calcio por litro también tiene mejor estabilidad que en la fórmula 5 que contiene solo 6,7 milimoles de ion calcio por litro.

Incluso a nivel más alto (20 milimoles de ion calcio por litro) se precisa ácido bórico y diol para una buena estabilidad de Natalase®, como puede apreciarse comparando los resultados correspondientes a la fórmula 9 de la invención frente a la fórmula 7 sin diol y a la fórmula 8 sin ácido bórico.

Otras composiciones de la presente invención son las siguientes:

TABLA 3

Ingredientes (sustancia activa)	Formulación C	Formulación D
Tripolifosfato de sodio	22,0
Citrato sódico		20,0
KOH	7,5	4,6
H_{2}SO_{4}	3,9	3,9
Ácido bórico	3,0	2,0
1,2-propanodiol	0,5	2,0
CaCl_{2}.2H_{2}O	0,22	0,037
Tensioactivo no iónico (SLF18)	1,0	3,5
Proteasa (3,4% de sustancia activa)	0,6	0,6
Natalase® (2,7% de sustancia activa)	0,27	0,5
Espesante de tipo poliacrilato (Polygel DKP)	1,18	1,18
Perfume	0,10	0,10
Agua desionizada y componentes minoritarios	Resto	Resto
(pH al 1% en agua)	(9,6)
La fórmula D se muestra a efectos comparativos.

Otras composiciones de la invención se obtienen cuando, en las fórmulas A-D anteriores, se sustituye el ácido bórico por borato sódico y/o el 1,2-propanodiol se sustituye por etilenglicol, propilenglicol, glicerol y sorbitol.

Por tanto, después de describir la invención detalladamente, resultará obvio para el experto en la técnica que es posible realizar varias modificaciones sin apartarse del ámbito de la invención y que la invención no debe considerarse limitada a lo descrito en la memoria descriptiva.

<110> The Procter & Gamble Company

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<120> COMPOSICIÓN DETERGENTE LÍQUIDA QUE PRESENTA ESTABILIDAD MEJORADA DE LA ENZIMA \alpha-AMILASA

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<130> Composición detergente

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<140> P&G Caso 8437/VB, reivindicación de prioridad 09/795.211

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<141> Presentación caso PCT 2002-02-25, presentación de prioridad 2001-02-28

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<160> 4

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<170> Versión patentada 3,1

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<210> 1

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<211> 485

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<212> PRT

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<213> bacillus alcalofillus

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<400> 1

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2

3

4

5

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<210> 2

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<211> 485

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<212> PRT

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<213> Alkalophiler Bazillus

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<400> 2

6

7

8

9

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<210> 3

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<211> 20

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<212> PRT

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<213> Alkalophiler Bazillus

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<400> 3

10

\hskip0.5cm

11

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<210> 4

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<211> 515

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<212> PRT

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<213> Alkalophiler Bazillus

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<400> 4

12

13

14

15

Claims

1. Una composición detergente líquida acuosa o de tipo gel que comprende, en peso:

(1): de 0,1% a 15% de ácido bórico o un compuesto de boro capaz de formar ácido bórico en la composición;

(2): de 0,1% a 10% de un compuesto polihidroxilado seleccionado del grupo que consiste en etilenglicol, propilenglicol, 1,2-propanodiol, butilenglicol, hexilenglicol, glicerol, manitol, sorbitol, eritritol, glucosa, fructosa, lactosa, 1,4-anhídrido de eritritol y mezclas de los mismos;

(3): de 10 a 100 milimoles de ion calcio por litro de composición;

(4): de 5% a 90% de agua; y

(5): una enzima \alpha-amilasa seleccionada del grupo que consiste en:

(a): \alpha-amilasa caracterizada por tener una actividad específica al menos 25% superior a la actividad específica de Termamyl® en un intervalo de temperatura de 25ºC a 55ºC y a un valor de pH en el intervalo de 8 a 10, medida mediante el ensayo Phadebas® de actividad de \alpha-amilasa y/o;

(b): \alpha-amilasa según (a) que comprende la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 1 o una \alpha-amilasa que presenta una homología de al menos 80% con la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 1 y/o;

(c): \alpha-amilasa según (a) que comprende la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 2 o una \alpha-amilasa que presenta una homología de al menos 80% con la secuencia de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 2 y/o;

(d): \alpha-amilasa según (a) que comprende la siguiente secuencia de aminoácidos en el extremo amino: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp (SEQ ID núm. 3) o una \alpha-amilasa que presenta una homología de al menos 80% con la secuencia de aminoácidos indicada (SEQ ID núm. 3) en el extremo amino y/o;

(e): \alpha-amilasa según (a-d), en donde la \alpha-amilasa puede obtenerse de una especie alcalófila de Bacillus y/o

(f): \alpha-amilasa según (e), en donde la amilasa puede obtenerse de cualquiera de las cepas NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 y DSM 935 y/o;

(g): \alpha-amilasa que presenta una reactividad cruzada inmunológica positiva con anticuerpos frente a una \alpha-amilasa que tiene una secuencia de aminoácidos que corresponde a SEQ ID núm. 1, ID núm. 2 o ID núm. 3, respectivamente, y/o;

(h): variante de una \alpha-amilasa precursora, en donde la \alpha-amilasa precursora (i) tiene una de las secuencias de aminoácidos indicada en SEQ ID núm. 1, ID núm. 2 o ID núm. 4, respectivamente, o (ii) presenta una homología de al menos 80% con una o más de dichas secuencias de aminoácidos, y/o presenta reactividad cruzada inmunológica con un anticuerpo frente a una \alpha-amilasa que tiene una de dichas secuencias de aminoácidos, y/o está codificada por una secuencia de ADN que se hibrida con la misma sonda que una secuencia de ADN que codifica una \alpha-amilasa que tiene una de dichas secuencias de aminoácidos; en cuyas variantes:

(i): al menos un residuo de aminoácido de dicha \alpha-amilasa precursora ha sido delecionado; y/o

(ii): al menos un residuo de aminoácido de dicha \alpha-amilasa precursora ha sido sustituido por un residuo de aminoácido diferente; y/o

(iii): al menos un residuo de aminoácido ha sido insertado con respecto a dicha \alpha-amilasa precur- sora;

teniendo dicha variante una actividad \alpha-amilasa y presentando al menos una de las siguientes propiedades relacionadas con dicha \alpha-amilasa precursora: mayor termoestabilidad, mayor estabilidad frente a la oxidación, menor dependencia del ion Ca, mayor estabilidad y/o actividad \alpha-amilolítica a valores de pH de neutros a relativamente altos, mayor actividad \alpha-amilolítica a temperatura relativamente alta y aumento o disminución del punto isoeléctrico (pI) para ajustar mejor el valor pI de una variante de \alpha-amilasa al pH del medio.

2. La composición detergente según la reivindicación 1, que comprende de 0,5% a 10% en peso de ácido bórico.

3. La composición detergente según la reivindicación 2, que comprende de 1% a 5% en peso de ácido bórico.

4. La composición detergente según la reivindicación 1, en la que dicho compuesto polihidroxilado es 1,2-propanodiol.

5. La composición detergente según la reivindicación 1, que comprende de 0,1% a 7% en peso de dicho compuesto polihidroxilado.

6. La composición detergente según la reivindicación 5, que comprende de 0,1% a 3% en peso de dicho compuesto polihidroxilado.

7. La composición detergente según la reivindicación 1, que comprende de 13 a 50 milimoles de ion calcio por litro de composición.

8. La composición detergente según la reivindicación 3, que comprende en peso de 0,1% a 7% de 1,2-propanodiol, de 15 a 30 milimoles de ion calcio por litro de composición, de 0,1% a 2% de la enzima \alpha-amilasa y de 40% a 70% de agua.

9. La composición detergente según la reivindicación 1, que comprende además una enzima proteasa.

10. La composición detergente según la reivindicación 8, que comprende además de 0,1% a 2% de una enzima proteasa.

11. Un proceso para estabilizar una enzima amilasa en una composición detergente líquida acuosa o de tipo gel, que comprende la mezcla con ingredientes detergentes:

(1): de 0,1% a 15% en peso de ácido bórico o un compuesto de boro capaz de formar ácido bórico en la composición;

(2): de 0,1% a 10% en peso de un compuesto polihidroxilado seleccionado del grupo que consiste en etilenglicol, propilenglicol, 1,2-propanodiol, butilenglicol, hexilenglicol, glicerol, manitol, sorbitol, eritritol, glucosa, fructosa, lactosa, 1,4-anhídrido de eritritol y mezclas de los mismos;

(3): de 10 a 100 milimoles de ion calcio por litro de composición; y

(4): una enzima \alpha-amilasa seleccionada del grupo que consiste en:

(e): \alpha-amilasa según (a-d), en donde la \alpha-amilasa puede obtenerse a partir de una especie alcalófila de Bacillus y/o

(f): \alpha-amilasa según (e), en donde la amilasa se puede obtener a partir de cualquiera de las cepas NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 y DSM 935 y/o;

(g): \alpha-amilasa que presenta reactividad cruzada inmunológica positiva con anticuerpos frente a una \alpha-amilasa que tiene una secuencia de aminoácidos que corresponde a SEQ ID núm. 1, ID núm. 2 o ID núm. 3, respectivamente, y/o;

(iii): al menos un residuo de aminoácido ha sido insertado con respecto a dicha \alpha-amilasa precursora;

teniendo dicha variante una actividad \alpha-amilasa y presentando al menos una de las siguientes propiedades relacionadas con dicha \alpha-amilasa precursora: mayor termoestabilidad, mayor estabilidad a la oxidación, menor dependencia del ion Ca, mayor estabilidad y/o actividad \alpha-amilolítica a valores de pH de neutro a relativamente alto, mayor actividad \alpha-amilolítica a temperatura relativamente alta y aumento o disminución del punto isoeléctrico (pI) para ajustar mejor el valor pI de la variante \alpha-amilasa al pH del medio.

12. Un proceso según la reivindicación 11, que comprende, en peso de la composición, de 1% a 5% de ácido bórico, de 0,1% a 7% del compuesto polihidroxilado, de 13 a 50 milimoles de ion calcio por litro de composición y de 0,1% a 2% de la enzima \alpha-amilasa.

13. Un proceso según la reivindicación 12, que comprende de 40% a 70% de agua y en el que el compuesto polihidroxilado es 1,2-propanodiol.

14. Un proceso según la reivindicación 12, que comprende además de 0,1% a 2% de una enzima proteasa.

15. Un proceso según la reivindicación 14, que comprende de 15 a 30 milimoles de ion calcio por litro de composición.