ES2241887T3 - Utilizacion de anticuerpos trifuncionales biespecificos y triespecificos para el tratamiento de la ascitis maligna. - Google Patents

Utilizacion de anticuerpos trifuncionales biespecificos y triespecificos para el tratamiento de la ascitis maligna.

Info

Publication number
ES2241887T3
ES2241887T3 ES01982241T ES01982241T ES2241887T3 ES 2241887 T3 ES2241887 T3 ES 2241887T3 ES 01982241 T ES01982241 T ES 01982241T ES 01982241 T ES01982241 T ES 01982241T ES 2241887 T3 ES2241887 T3 ES 2241887T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
tumor
antibody
cells
use according
antibodies
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES01982241T
Other languages
English (en)
Inventor
Horst Dr. Lindhofer
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Application granted granted Critical
Publication of ES2241887T3 publication Critical patent/ES2241887T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/515—Animal cells
    • A61K2039/5152—Tumor cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Colector de energía solar y dispositivo de seguimiento que comprende una serieconjunto de paneles solares rectangulares planos (34) situados en caras opuestas de un eje con orientación norte-sur; al menos un pilar (36 ó 56) que tiene una base (38 ó 58) y un elemento pivotante (40 ó 60) fijado al mismo por encima de dicha base (38 ó 58) y que sostiene de manera pivotante lael serieconjunto y permite que lael serieconjunto de paneles solares (34 ó 54) bascule sobre dicho eje norte-sur para seguir el movimiento del sol relativo respecto a la tierra; un elemento (46 ó 66) que tiene presenta una porción extrema (70) desplazada respecto a dicho eje norte-sur; y un accionador lineal (42 ó 62) que tienepresenta una porción de cuerpo (43 ó 63) y una barra (44 ó 64) que se extiende desde dicha porción de cuerpo y que tienepresenta un extremo distal acoplado a dicho elemento (46 ó 66) para rotar hacer girar dichao serieconjunto de paneles solares (34 ó 54) alrededor de dicho eje; un tubo de torsión (32 ó 52) que define dicho eje norte-sur, sujetándose lael serieconjunto de paneles solares rectangulares planos en caras opuestas de dicho tubo de torsión (32 ó 52); dicho tubo de torsión se aloja articula en el elemento pivotante (40 ó 60) de dicho por lo menos un pilar (36 ó 56), habiendo como mínimo un pilar; la base (38 ó 58) de dicho por lo menos un pilar, que es como mínimo uno, se sostiene de forma fija en unos cimientos; caracterizado por el hecho de que dicho elemento (46 ó 66) es un brazo de torsión (46 ó 66) que se extiende desde dicho tubo de torsión hasta dicha porción extrema (70) donde se acopla dicha barra; por el hecho de que la porción de cuerpo (43 ó 63) de dicho accionador lineal (42 ó 62) se monta sobre una base (45 ó 65), separada de dicha base (38 ó 58) para dicho por lo menos un pilar, habiendo como mínimo un pilar, y se fija en a dichos cimientos, a una distancia separada de dicho por lo menos un pilar (36 ó 56), habiendo como mínimo un pilar; y por el hecho de que la porción extrema se conforma como una porción de ojete.

Description

Utilización de anticuerpos trifuncionales biespecíficos y triespecíficos para el tratamiento de la ascitis maligna.
Antecedentes de la invención
La invención se refiere a la utilización de anticuerpos trifuncionales biespecíficos y/o triespecíficos para la fabricación de una preparación farmacéutica para la destrucción de células tumorales, en el líquido ascítico y/o en un derrame pleural, para tratar la ascitis maligna y un derrame pleural.
La ascitis maligna puede originarse a partir de multitud de tumores primarios como por ejemplo el cáncer de pecho, el carcinoma de ovarios o los carcinomas gastrointestinales. A pesar de que en un elevado porcentaje de pacientes ya se demuestra la presencia de la ascitis en la primera manifestación de una enfermedad tumoral, la ascitis es signo de una enfermedad avanzada.
Las posibilidades de terapia actuales para la ascitis son, entre otras, la punción, la quimioterapia local o el tratamiento diurético. Todas estas opciones tienen desventajas agravantes; por ejemplo la punción conduce sólo a un alivio a corto plazo y debe puncionarse de nuevo en término medio tras 9,5 días (Mackey et al., J. Pain Symptom Manage. 11, 19:193, 2000). Por otro lado, la quimioterapia puede aplicarse sólo en pacientes que no hayan desarrollado ya células tumorales resistentes a la quimioterapia, lo cual por desgracia es habitualmente el caso. A este respecto, prevalece una enorme necesidad de mejora de las posibilidades de tratamiento clínico para la ascitis.
La situación es similar en el caso de un derrame pleural inducido por células tumorales. El derrame pleural es una acumulación de líquidos en la zona del pecho y puede formarse de nuevo tras la punción. Dado que una de las causas del derrame pleural es la presencia de células tumorales en este compartimiento, la destrucción de las células tumorales es un prerrequisito fundamental para la prevención de la nueva formación del derrame pleural. Por lo tanto, la problemática y por tanto los procedimientos asociados para su resolución son muy similares en el caso de la ascitis maligna y de un derrame pleural basado en células tumorales.
Es objeto de la invención proporcionar un nuevo agente para el tratamiento de la ascitis maligna y para el tratamiento de un derrame pleural, el cual supero las desventajas del estado de la técnica, en particular que ofrezca un alivio notable para el paciente.
Este objeto se resuelve según la invención mediante la utilización de un anticuerpo trifuncional biespecífico o un anticuerpo trifuncional triespecífico con las siguientes características:
a) se une a una célula T;
b) se une a como mínimo un antígeno sobre una célula tumoral, cuya célula tumoral está asociada con la ascitis maligna y/o un derrame pleural;
c) se une a través de su porción Fc (en el caso de anticuerpos biespecíficos) o a través de una tercera especificidad (en el caso de anticuerpos triespecíficos) a las células positivas para el receptor Fc
para la fabricación de una preparación farmacéutica para el tratamiento de la ascitis maligna y/o en el líquido ascítico y/o en un derrame pleural.
Algunas realizaciones adicionales de la invención podrán deducirse a partir de las reivindicaciones adjuntas así como a partir de la siguiente descripción. Debe remarcarse que la invención no se limita a las realizaciones preferidas mencionadas a continuación y a los ejemplos. De hecho, un experto medio en la técnica, en el contexto de su área de conocimiento, podrá modificar la invención dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas sin desviarse de la invención.
Las figuras adjuntas sirven para ilustrar mejor la invención. Las figuras muestran:
Figura 1: Eliminación de células tumorales EpCAM+ y proliferación de células inmunes en ascitis bajo terapia con bsAc;
Figura 2: Análisis FACS de las células tumorales en base a los antígenos de superficie;
Figura 3: Destrucción de células tumorales residuales después del tratamiento con CD3 x EpCAM vía RT-PCR;
Figura 4: Determinación de las células tumorales positivas para EpCAM a partir del líquido ascítico por citometría de flujo durante el transcurso de la terapia de anticuerpos;
Figura 5: Reducción de la formación de líquido ascítico bajo la terapia con los anticuerpos REMOVAB (anti EpCAM x anti CD3) y REXOMAB (anti Her2/neu x anti CD3).
Los anticuerpos trifuncionales biespecíficos y los anticuerpos trifuncionales triespecíficos y diferentes campos de aplicación de dichos anticuerpos figuran en el estado de la técnica. Por ejemplo se hace referencia a la patente DE 198 44 157.6 así como a la patente DE 199 25 586. Dicho estado de la técnica describe la utilización de anticuerpos biespecíficos y triespecíficos con las tres características a, b y c para inmunizar contra tumores; sin embargo en dichos documentos no se describe una posibilidad directa de tratamiento de los tumores a través de la destrucción de las células tumorales, cuya destrucción se alcanza a través de la inducción de una inmunidad. En particular, a través de dichas publicaciones no se consigue que una subárea extremadamente específica de la paleta enormemente amplia de enfermedades tumorales, en particular la ascitis maligna, pero también un derrame pleural, puedan tratarse de forma extremadamente eficiente y predecible mediante los anticuerpos trifuncionales biespecíficos y triespecíficos con las características mencionadas anteriormente. Un éxito de tratamiento ha podido alcanzarse ya en dos pacientes hospitalizados, los cuales sufrían una enfermedad tumoral terminal (compárese el ejemplo 1
y 2).
La preparación farmacéutica se diseña de tal manera que se alcance como mínimo una inmunización primaria mediante la destrucción de las células tumorales. Para ello la preparación farmacéutica, que contiene los anticuerpos trifuncionales descritos con más detalle a continuación, se administra en varias dosis. La primera dosis se selecciona de tal manera que se examine una reacción del paciente contra proteínas extrañas frente al anticuerpo administrado. La segunda dosis se selecciona preferentemente de tal manera, que las células inmunes del paciente se activen y proliferen. Una tercera dosis y dosis subsiguientes se seleccionan de tal manera que conduzcan en particular a la destrucción de las células tumorales.
La administración de la primera dosis se lleva a cabo en una cantidad de 1 \mug a 20 \mug, preferentemente de 5 \mug
a 10 \mug del anticuerpo, para poner de manifiesto reacciones alérgicas. La administración de la segunda dosis se lleva a cabo en una cantidad de 20 \mug a 80\mug, preferentemente hasta 100 \mug, más preferentemente de 30 \mug a 60 \mug de anticuerpo. La administración de la tercera dosis y de cada dosis subsiguiente se lleva a cabo en una cantidad superior a 80 \mug, preferentemente de 100 \mug a 500 \mug, más preferentemente de 100, más preferentemente de 100 \mug a 300 \mug de anticuerpo. Es evidente para un experto medio en la técnica que las cantidades indicadas representan valores de referencia que pueden variar de paciente a paciente y de anticuerpo a anticuerpo. Sin embargo, la selección correspondiente de las cantidades de anticuerpos a aplicar a modo individual pertenece al área de conocimiento de un médico.
El número de aplicaciones es preferentemente desde 3 hasta 8, preferentemente desde 3 hasta 6 administraciones de una dosis. La administración se lleva a cabo a intervalos de tiempo determinados, escogiéndose en particular de 48 a 72 horas. Preferentemente se selecciona entre cada una de las aplicaciones un intervalo de tiempo de 2 a 3 días más menos varias horas. Las aplicaciones se realizan preferentemente a lo largo de un intervalo de tiempo de 12 a 14 días. El intervalo de tiempo se selecciona de tal manera que al aparecer las primeras reacciones inmunes contra la proteína anticuerpo no se administran más dosis de anticuerpo. Si se utiliza un anticuerpo de ratón, se determina por ejemplo la reacción HAMA (reacción humana anti anticuerpo de ratón), la cual se inicia en general después de 16 a 21 días, en algunos pacientes antes, en otros más tarde o no aparece en absoluto.
Tal como se ha indicado más arriba, la ascitis maligna es frecuente en una variedad de tumores primarios, como por ejemplo el cáncer de pecho, los carcinomas de ovarios y los carcinomas gastrointestinales. Las enfermedades tumorales de este tipo se tratan primero mediante la extracción quirúrgica del tejido tumoral y finalmente mediante quimioterapia. En una realización preferida de la invención, se obtienen células inmunes del paciente mediante aféresis. Dicho producto de aféresis es una colección de células sanguíneas, las cuales en particular no contienen eritrocitos. En particular contienen células T, macrófagos, monocitos, células NK, células dendríticas, granulocitos y células B. La obtención de productos de aféresis debe llevarse a cabo en particular antes de la primera quimioterapia, para asegurar la integridad de las células inmunes, la cual queda afectada prácticamente siempre a través de los agentes quimioterapéuticos.
En una realización de la invención, el paciente no sólo se trata con los anticuerpos trifuncionales biespecíficos y/o triespecíficos, sino que en el marco de la inmunización secundaria recibe adicionalmente células tumorales inactivadas autólogas y/o alogénicas y células inmunes autólogas. En el caso de las células inmunes autólogas se trata preferentemente de linfocitos T y células accesorias, por ejemplo monolitos, macrófagos y células dendríticas. Éstas se encuentran, por ejemplo, en PBMC (células mononucleares de la sangre periférica), las cuales se obtienen por ejemplo a partir de sangre heparinizada o por centrifugación en un gradiente de densidad de ficol. Sin embargo, también es posible utilizar subfracciones, por ejemplo exclusivamente los linfocitos T y células dendríticas, o bien macrófagos, etc. En una realización preferida, las células inmunes autólogas son células de aféresis, las cuales se emplean mezcladas junto al anticuerpo y las células tumorales inactivadas autólogas o alogénicas.
Para conseguir con éxito una inmunización, es además ventajoso que la cantidad de células tumorales administradas se seleccione de la manera apropiada. Así, en los ensayos de un modelo tumoral murino se puso de manifiesto que un número muy bajo de células tumorales no comportaba el éxito de inmunización deseado. A su vez, una cantidad demasiado grande de material tumoral puede resultar desventajosa, ya que pueden aparecer por ejemplo fenómenos de tolerancia. Si se transfieren estos resultados a la situación en pacientes, esto significa que para conseguir un éxito de inmunización es ventajoso administrar una cantidad definida de material tumoral en el contexto espacial correcto con una cantidad igualmente definida de anticuerpos. Es cierto que también se alcanza un éxito de inmunización cuando uno de dichos parámetros no ha sido optimizado; sin embargo, se alcanzan resultados especialmente buenos cuando tanto las cantidades de anticuerpos como la cantidad de material tumoral como también el contexto espacial se ajustan y se optimizan entre sí.
Considerando las realizaciones anteriores, si se utiliza, por ejemplo, una cantidad de células tumorales muy baja, sólo puede establecerse una protección inmune insuficiente. Por ello, para conseguir un éxito de inmunización completo, es necesario inmunizar con una cantidad definida de células tumorales inactivadas y una cantidad definida de anticuerpos biespecíficos y/o triespecíficos. Cada cantidad en particular puede ser establecida por un experto medio en la técnica con la ayuda de ensayos.
Las células tumorales se administran preferentemente en una cantidad de 10^{5} a 10^{8} células por aplicación, enfatizándose preferentemente una cantidad de células de aproximadamente 10^{7}. Las células tumorales se trataron antes de la replicación, tal como se ha indicado más arriba, de tal manera que se impida su supervivencia después de la reaplicación, pudiéndose someter adicionalmente opcionalmente a un tratamiento térmico.
Las células tumorales se obtienen a partir de material tumoral del paciente a tratar. El material tumoral se prepara para una suspensión de células aisladas por ejemplo a través de un tratamiento enzimático, preferentemente a través de un tratamiento con colagenasa. Es importante que las células tumorales estén presentes lo más intactas posible. Los lisados de células tumorales han mostrado ser inapropiados. Las células tumorales se tratan antes de su aplicación de tal manera que se excluya la supervivencia de las células tumorales en el paciente. Por lo tanto, las células tumorales se tratan según procedimientos conocidos, por ejemplo mediante irradiación o mediante tratamiento con agentes químicos. Después del tratamiento debe permanecer también invariable en particular la estructura exterior de las células tumorales, de manera que se conserve el patrón de reconocimiento para el anticuerpo.
Para la irradiación se emplea preferentemente una irradiación \gamma, la cual se lleva a cabo preferentemente con una dosis de 20 a 200 Gy. En un tratamiento químico ha mostrado ser valiosa en particular la Mitomicina C.
Puede alcanzarse una mejora adicional de la inmunogenicidad de las células tumorales sometiéndolas antes de la infusión a un pretratamiento térmico. La temperatura se encuentra en el rango de aproximadamente 40 hasta 45ºC, prefiriéndose un rango de 41 a 42ºC. Las condiciones óptimas pueden determinarse a través de ensayos. Algunos resultados exitosos se alcanzan en particular a una temperatura de aproximadamente 41,8ºC. El tiempo de tratamiento térmico es en general de 1 a 6 horas, preferentemente aproximadamente 3 horas. Tanto el tiempo como la temperatura que se emplean de forma óptima, dependen también del tipo de tumor a tratar. Cada una de las condiciones óptimas puede ser determinada por un experto medio en la técnica con ayuda de ensayos.
La administración de cada dosis individual se lleva a cabo en general de tal manera que para alcanzar una inmunización primaria, es decir, para destruir las células tumorales, se escoge una forma de aplicación peritoneal, a través de la cual se infunden los anticuerpos en el paciente. La administración de las dosis para una inmunización secundaria se lleva a cabo en general mediante una aplicación local, por ejemplo intradérmica, subcutánea o intramuscular. Sin embargo, puede llevarse a cabo también de forma intraperitoneal o intravenosa.
Si se administra también, junto al anticuerpo trifuncional, las células tumorales inactivadas autólogas y/o alogénicas y las células inmunes autólogas para conseguir una inmunidad secundaria, se emplean preferentemente las siguientes cantidades:
a) 1-200x10^{6} células tumorales inactivadas, preferentemente 10-100x10^{6} células tumorales inactivadas
b) 10-500x10^{6} células inmunitarias, preferentemente 50-200x10^{6} células inmunitarias
c) 1-10 \mug de anticuerpo trifuncional biespecífico o de anticuerpo trifuncional triespecífico, preferentemente 2-5 \mug
de anticuerpo.
Como se ha indicado anteriormente, el experto medio en la técnica podrá seleccionar cada cantidad y vía de aplicación de tal manera que se garantice un éxito terapéutico óptimo.
La preparación farmacéutica proporcionada según la invención se presenta por ejemplo en una solución salina isotónica. Otros componentes pueden ser por ejemplo agentes estabilizadores como Tween 80 o disoluciones tampón.
Para el tratamiento se emplean preferentemente anticuerpos trifuncionales biespecíficos y/o trifuncionales triespecíficos intactos. Mediante el tratamiento no sólo se alcanza, de forma sorprendente, la destrucción directa de las células tumorales, sino que se induce también una inmunidad dirigida contra el tumor a tratar.
Bajo el término "anticuerpos intactos" se entiende aquellos que poseen una porción Fc funcional. Preferentemente, se trata de anticuerpos heterólogos, es decir, que se componen de cadenas de inmunoglobulina pesadas de diferentes subclases (-combinaciones, también fragmentos) y/o origen (especie).
Junto a las características a, b y c descritas más arriba, los anticuerpos empleados presentan además, en algunas realizaciones preferidas de la invención, las siguientes características d y e:
d) activa las células positivas para el receptor Fc a través de su unión a células positivas para el receptor Fc, de manera que se inicia o se aumenta la expresión de citoquinas y/o antígenos coestimuladores;
e) Los antígenos coestimuladores y/o citoquinas transfieren a las células T como mínimo una segunda señal de activación, la cual es necesaria para una activación fisiológica de las células T, poniéndose dicha activación de manifiesto en la regulación positiva de señales de activación, la destrucción de las células tumorales y/o en una proliferación de células T.
La invención se describe a continuación en particular tomando como ejemplo los anticuerpos biespecíficos. Sin embargo, los resultados pueden alcanzarse también con anticuerpos triespecíficos.
Los anticuerpos que pueden utilizarse según la invención son capaces de activar células positivas para el receptor Fc, de manera que se inicie o se aumente la expresión de citoquinas y/o antígenos coestimuladores.
En el caso de los anticuerpos triespecíficos, la unión a las células positivas para el receptor Fc se lleva a cabo preferentemente por ejemplo a través del receptor Fc de las células positivas para el receptor Fc, pero también a través de otros antígenos situados sobre las células positivas para el receptor Fc (células presentadoras de antígeno), como por ejemplo el receptor de manosa.
A través de la combinación según la invención y de la forma de utilización de los anticuerpos heterólogos biespecíficos y/o triespecíficos, además del tratamiento de la ascitis y del derrame pleural a través de una destrucción directa de las células tumorales, se construye también en el paciente una inmunidad contra tumor, preferentemente una inmunidad a tumor a largo plazo. La administración se lleva a cabo preferentemente en un paciente después del tratamiento del tumor primario, preferentemente en un paciente en una situación de enfermedad tumoral primaria (MRD= enfermedad residual mínima). En el caso de pacientes con menos células tumorales remanentes, en los cuales, sin embargo, todavía puede haber gran peligro de una recidiva, la aplicación descrita de una preparación farmacéutica según la invención es especialmente exitosa.
Los anticuerpos biespecíficos y/o triespecíficos heterólogos que pueden utilizarse según la invención son conocidos como tal. Se han descrito por ejemplo en Lindhofer et al., Blood, 88:4651, 1996 o en Lindhofer et al., J. Immunology, 155:219, 1995.
En las célula tumoral tiene lugar una regulación positiva de MHC 1, así como una activación de la maquinaria de procesamiento intracelular (complejo del proteasoma) debido a la liberación de citoquinas (como por ejemplo INF- y TNF-) en la vecindad inmediata de la célula tumoral. Las citoquinas se liberan debido a la activación de células T y de células accesorias mediada por anticuerpos biespecíficos. Esto significa que a través de los bsAc intactos no sólo se destruyen o fagocitan las células tumorales, sino que también se aumenta de forma indirecta la inmunogenicidad contra tumor correspondiente.
La activación de las células positivas para el receptor Fc a través de los bsAc depende de la subclase, o bien de la combinación de subclases del bsAc. Como ha podido demostrarse en ensayos in vitro, los bsAc de la combinación de subclases ratón-IgG2a/rata-IgG2b son capaces de unirse a células positivas para el receptor Fc y activarlas al mismo tiempo, lo cual conduce a la regulación positiva, o bien a la generación (expresión) de antígenos coestimuladores, como por ejemplo Cd40, CD80 o CD86, sobre la superficie celular de dichas células (Zeidler et al., J. Immunol., 163:1246, 1999). Por el contrario, los bsAc de la combinación de subclases ratón-IgG1/rataIgG2b son capaces ciertamente de unirse a células positivas para el receptor Fc (Haagen et al., J. Immunology, 1995, 154: 1852-1860), sin embargo, claramente, no pueden activarlas en un grado comparable (Gast et al., Cancer Immunol. Immuntherap., 1995, 40:390).
Aunque el bsAc intacto se une a la célula T con un brazo de unión (por ejemplo a CD3 o CD2) y al mismo tiempo la activa, pueden transferirse señales coestimuladoras de la célula positiva para el receptor Fc unida a la porción Fc del bsAc a la célula T. Esto significa que simplemente la combinación de la activación de la célula T a través de un brazo de unión del bsAc y la transferencia simultánea de señales coestimuladoras de la células positiva para el receptor Fc a la célula T, conduce a una eficiente activación de la célula T. Las células T específicas de tumor, que se activen de forma insuficiente en la célula tumoral y que sean anérgicas, también pueden reactivarse mediante el tratamiento según la invención con anticuerpos biespecíficos o triespecíficos intactos.
Otro aspecto importante en la inducción de una inmunidad a tumor es la posible fagocitosis, procesamiento y presentación de componentes del tumor a través de células accesorias que se aproximan y se activan a través de la acción de los bsAc (monolitos/macrófagos o células dendríticas). A través de dichos mecanismos clásicos de presentación de antígenos pueden generarse tanto células positivas en CD4 específicas de tumor como células positivas en CD8 específicas de tumor. Además, las células CD4 específicas de tumor juegan un importante papel en la inducción de una respuesta inmune humoral en conexión con la cooperación células T-células B.
Los anticuerpos biespecíficos y triespecíficos pueden unirse con un brazo de unión al complejo receptor de la célula T; con el segundo brazo de unión a antígenos asociados a tumor sobre la célula tumoral. De esta manera activan las células T, las cuales destruyen las células tumorales mediante la liberación de citoquinas o mecanismos que facilitan la apoptosis. Además, existe claramente la posibilidad que las célula T, en el contexto de la activación con anticuerpos biespecíficos, reconozcan antígenos específicos de tumor a través de su receptor y como consecuencia se induce una inmunización duradera. Es de particular importancia la porción Fc intacta del anticuerpo biespecífico o triespecífico, la cual permite la unión a las células accesorias, como por ejemplo monocitos/macrófagos y células dendríticas, y esto provoca que se transformen en citotóxicas y/o que transfieran simultáneamente importantes señales coestimuladoras a la célula T. De esta manera puede inducirse también claramente una respuesta de las células T, de acuerdo con las condiciones, contra péptidos específicos de tumor no descritos hasta el momento.
En estas circunstancias, a través de la redirección de las células T específicas de tumor anergizadas hacia las células tumorales mediante anticuerpos biespecíficos y/o triespecíficos, junto a la coestimulación simultánea de dichas células T mediante células accesorias, las cuales se unen a la porción Fc del anticuerpo biespecífico o triespecífico, puede eliminarse la anergia de las células T citotóxicas (CTLs). Esto significa que puede romperse una tolerancia a células T contra el tumor existente en un paciente mediante anticuerpos biespecíficos y/o triespecíficos heterólogos intactos y como consecuencia puede inducirse una inmunidad contra tumor duradera.
Como último punto, existen los primeros datos in vivo a partir de ensayos en ratón, los cuales apuntan a una inmunidad a tumor duradera del tipo descrito tras el tratamiento con un tumor singénico y un bsAc intacto. En dichos ensayos sobrevivieron en conjunto 14 de 18 animales, los cuales pudieron tratarse con éxito con un bsAc después de una primera inyección de tumor y se sometieron a una segunda inyección de tumor 144 días después de la primera inyección de tumor - sin proporcionar de nuevo el bsAc.
Los anticuerpos proporcionados según la invención son capaces preferentemente de reactivar células T específicas de tumor que se encuentren en anergia. Además, son capaces de inducir anticuerpos que se unen al complemento reactivo contra tumor y como consecuencia son capaces de inducir una respuesta humoral.
La unión se lleva a cabo preferentemente a través de CD3, CD2, CD4, CD5, CD6, CD8, CD28, CD40L y/o CD44 sobre la célula T. Las células positivas para el receptor Fc presentan como mínimo un receptor Fc\gamma Tipo I ó III.
Algunos anticuerpos que pueden utilizarse según la invención son aquellos capaces de unirse a monocitos, macrófagos, células dendríticas, células "Natural Killer" (células NK) y/o células neutrófilas activadas, en su condición de células positivas para el receptor Fc\gamma Tipo I ó III.
Los anticuerpos que pueden utilizarse según la invención provocan el inicio o aumento de la expresión de CD40, CD80, CD86, ICAM-1 y/o LFA-3 en su condición de antígenos coestimuladores o/y de la secreción de citoquinas a través de las células positivas para el receptor Fc. Las citoquinas son preferentemente IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, Il-8, IL-12, IFN-\gamma y/o TNF-\alpha.
Los anticuerpos biespecíficos que pueden utilizarse según la invención son, por ejemplo:
- un anticuerpo anti-CD3 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD4 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD5 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD6 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD8 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD2 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD28 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD4OL X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD44 X anti antígeno asociado a tumor.
Los anticuerpos triespecíficos que pueden utilizarse según la invención son preferentemente:
- un anticuerpo anti-CD3 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD4 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD5 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD6 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD8 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD2 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD28 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD40L X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD44 X anti antígeno asociado a tumor.
Los anticuerpos triespecíficos que pueden utilizarse según la invención presentan como mínimo un brazo de unión a células T, un brazo de unión a célula tumoral y un brazo de unión que se une a células positivas para el receptor Fc; pudiendo ser los dos últimos brazos de unión mencionados un brazo de unión a un receptor anti-Fc o un brazo de unión a un receptor de manosa.
El anticuerpo biespecífico es preferentemente un anticuerpo biespecífico rata/ratón intacto heterólogo.
Con los anticuerpos biespecíficos y triespecíficos que pueden utilizarse según la invención, se activan células T y se redirigen contra las células tumorales. Algunos anticuerpos biespecíficos intactos heterólogos que pueden utilizarse se seleccionan a partir de una o varias de las siguientes combinaciones de isotipo:
Rata-IgG2b/ ratón-IgG2a,
Rata-IgG2b/ ratón-IgG2b,
Rata-IgG2b/ ratón-IgG3,
Rata-IgG2b/ humano-IgG1,
Rata-IgG2b/ humano-IgG12,
Rata-IgG2b/ humano-IgG3[alotipo oriental G3m(st)=unión a la Proteína A],
Rata-IgG2b/ humano-IgG4, 
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
  \hskip1,3cm    Rata  -  IgG2b/ rata IgG2c,\cr
  \hskip1,3cm   Ratón  -  IgG2a/
humano  -  IgG3 [alotipo caucasiano G3m  (b+g)=no
unión a la Proteína A, en lo sucesivo  mar-\cr 
 \hskip1,3cm   cado con
*]\cr}
Ratón-IgG2a/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[bisagra]-humano-IGG3*-[CH2-CH3]
Ratón-IgG2a/ rata-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IGG3*-[CH2-CH3]
Ratón-IgG2a/ humano-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IGG3*-[CH2-CH3]
Ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1/ rata-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IGG3*-[CH2-CH3]
Ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG4/ rata-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG4-[Bisagra]-humano-IgG4 [región N-terminal de CH2]-humano-IgG3*-[región C-terminal de CH2:> posición AS 251]-humano-IgG3*[CH3]
Rata-IgG2b/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra-CH2-CH3]
Rata-IgG2b/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG2-[Bisagra-CH2-CH3]
Rata-IgG2b/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG3-[Bisagra-CH2-CH3, alotipo oriental]
Ratón-IgG2b/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG4-[Bisagra-CH2-CH3]
Humano-IgG1/ humano-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG3*-[CH2-CH3]
Humano-IgG1/ humano-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG4 [región N-terminal de CH2]-humano-IgG3* [región C-terminal de CH2:> posición AS 251]-humano-IgG3*[CH3]
Humano-IgG1/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG4 [región N-terminal de CH2]-humano-IgG3* [región C-terminal de CH2:> posición AS 251]-humano-IgG3*[CH3]
Humano-IgG1/ rata-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG2 [región N-terminal deCH2]-humano-IgG3* [región C-terminal de CH2:> posición AS 251]-humano-IgG3*[CH3]
Humano-IgG1/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG2 [región N-terminal de CH2]-humano-IgG3* [región C-terminal de CH2:> posición AS 251]-humano-IgG3*[CH3]
Humano-IgG1/ rata-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG3*-[CH2-CH3]
Humano-IgG1/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG3*-[CH2-CH3]
Humano-IgG2/ humano-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG2-[Bisagra]-humano-IgG3*-[CH2-CH3]
Humano-IgG4/ rata-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG4-[Bisagra]-humano-IgG3*-[CH2-CH3]
Humano-IgG4/ humano-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG4-[Bisagra]-humano-IgG4 [región N-terminal de CH2]-humano-IgG3* [región C-terminal de CH2:> posición AS 251]-humano-IgG3*[CH3]
Ratón-IgG2b/ rata-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG3*-[CH2-CH3]
Ratón-IgG2b/ humano-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG3*-[CH2-CH3]
Ratón-IgG2b/ ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG3*-[CH2-CH3]
Ratón-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG4/ rata-[VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG4-[Bisagra]-humano-IgG4-[CH2]-humano-IgG3*-[CH3]
Humano IgG1/ rata [VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG4-[CH2]-humano-IgG3*-[CH3]
Humano IgG1/ ratón [VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG1-[Bisagra]-humano-IgG4-[CH2]-humano-IgG3*-[CH3]
Humano-IgG4/ humano [VH-CH1, VL-CL]-humano-IgG4-[Bisagra]-humano-IgG4-[CH2]-humano-IgG3*-[CH3]
Los anticuerpos que pueden utilizarse según la invención son preferentemente anticuerpos intactos monoclonales, quiméricos, recombinantes, sintéticos, semisintéticos o modificados químicamente, por ejemplo con fragmentos Fv-, Fab-, scFv- o F(ab)_{2}.
Preferentemente, se utilizan anticuerpos o derivados o fragmentos humanos o modificados de tal manera que sean apropiados para su utilización en humanos (los denominados "anticuerpos humanizados") (véase por ejemplo Shalaby et al., J. Exp. Med. 175 (1992), 217; Mocikat et al., Transplantation 57 (1994), 405).
La preparación de los tipos de anticuerpos y fragmentos mencionados más arriba es de común utilización por un experto medio en la técnica. La preparación de anticuerpos monoclonales, cuyo origen es preferentemente de mamíferos, por ejemplo de humano, rata, ratón, conejo o cabra, puede llevarse a cabo mediante procedimientos convencionales, como se ha descrito por ejemplo en Köhler y Milstein (Nature 256 (1975), 495), en Harlow y Lane (Antibodies, A Laboratory Manual (1988), Cold Spring Harbor) o en Galfré (Meth. Enzymol. 73 (1981), 3) o en la patente DE
195 31 346.
Además es posible preparar los anticuerpos descritos mediante tecnología de ADN recombinante según técnicas de uso común por un experto medio en la técnica (véase Kurucz et al., J. Immunol. 154 (1995), 4576; Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sc. USA 90 (1993), 6444).
La preparación de anticuerpos con dos especificidades diferentes, los denominados anticuerpos biespecíficos, es posible por un lado mediante la utilización de tecnología de ADN recombinante, pero también mediante la denominada técnica de fusión híbrido-hibridoma (véase por ejemplo Milstein et al., Nature 305 (1983), 537). En este contexto, se fusionan líneas celulares de hibridoma, las cuales producen anticuerpos con cada una de las especificidades deseadas, y se identifican y se aíslan los clones celulares (cuadroma) que producen anticuerpos con ambas especificidades.
El problema subyacente a la invención puede solventarse tanto mediante anticuerpos biespecíficos como anticuerpos triespecíficos, los cuales presentan preferentemente las características y propiedades indicadas. A continuación se describe con mayor detalle la preparación de anticuerpos con dos y tres especificidades. La preparación de dichos anticuerpos biespecíficos y triespecíficos pertenece al estado de la técnica, y se hará referencia aquí a la literatura que describe dichas técnicas de preparación.
La preparación de anticuerpos con tres especificidades, los denominados anticuerpos triespecíficos, a través de los cuales puede solucionarse también el problema subyacente a la invención, puede llevarse a cabo por ejemplo, acoplándose a una de las cadenas de Ig pesadas de un anticuerpo biespecífico un tercer sitio de unión a antígeno con una especificidad adicional, por ejemplo en forma de un "fragmento variable de cadena sencilla" (scFv). El scFv puede estar unido a una de las cadenas pesadas por ejemplo a través de un
espaciador 
\hskip0,5cm
-S-S(G_{4}S)nD-I
(S = serina, G = glicina, D = aspartato, I = isoleucina).
De forma análoga pueden prepararse constructos F(ab)_{2} triespecíficos, substituyéndose las regiones CH2-CH3 de la cadena pesada de una especificidad de un anticuerpo biespecífico por un scFv con una tercera especificidad, eliminándose las regiones CH2-CH3 de la cadenas pesada de las otra especificidad por ejemplo mediante el ensamblaje de un codón de stop (al final de la región "Bisagra") en el gen codificador, por ejemplo mediante recombinación homóloga.
También es posible la construcción de constructos scFv. En este contexto se disponen en serie de forma consecutiva tres regiones Vgh-VL, las cuales representan las tres diferentes especificidades.
Según la invención se utilizan por ejemplo anticuerpos biespecíficos intactos. Algunos anticuerpos biespecíficos intactos se componen de dos semimoléculas de anticuerpo (cada una de las cuales dispone de una cadena de inmunoglobulina H- y L-), cada una de las cuales representa una especificidad y que además posee, como también los anticuerpos normales, una porción Fc con las funciones efectoras conocidas. Estas se preparan preferentemente mediante la tecnología de cuadroma. Dicho procedimiento de preparación se has descrito por ejemplo en la solicitud de patente D-A-44 19 399. Se hace referencia completamente a la publicación completa, en relación a una definición de los anticuerpos biespecíficos. Evidentemente, también pueden emplearse otros procedimientos de preparación, siempre y cuando conduzcan a anticuerpos biespecíficos intactos necesarios según la invención, definidos más arriba.
Por ejemplo pueden producirse anticuerpos biespecíficos intactos en cantidades suficientes en un nuevo procedimiento de preparación desarrollado (Lindhofer et al., J. Immunology 1995, 155:219). La combinación de dos anticuerpos biespecíficos contra dos antígenos asociados a tumor diferentes (por ejemplo c-erb-B2 y EpCAM) en células de carcinoma de mama minimiza el peligro de que las células tumorales que sólo expresen un antígeno no sean reconocidas.
Otras ventajas de los bsAc intactos con la capacidad de redireccionar células T frente a los fragmentos bsF(ab')2 mencionados más arriba son en concreto:
1.
Las células positivas para el receptor Fc pueden unirse a bsAc intactos y por un lado contribuir directamente a la destrucción del tumor a través de ADCC (citotoxicidad mediada por célula dependiente de anticuerpo) así como por otro lado activar las células T, como se ha indicado con mayor detalle más arriba.
2.
A través de los bsAc que redirigen las células T, se aproximan también células T específicas de tumor anergizadas a la célula tumoral, cuyas células T pueden reactivarse según la invención directamente en el tumor. Lo anterior no puede alcanzarse mediante un fragmento bsF(ab')2 con las especificidades anti-CD64X anti-antígeno asociado a tumor.
La unión del bsAc a Fc\gamma-RI presenta dos ventajas evidentes en relación a una efectividad óptima anti-tumor:
(1)
Las células positivas para Fc\gamma-RI poseen la capacidad de eliminar células tumorales mediante ADCC y a este respecto pueden contribuir de forma sinérgica a la acción anti-tumor de las células T citotóxicas que se aproximan a las células tumorales a través del bsAc.
(2)
Las células positivas para Fc\gamma-RI (por ejemplo monocitos/macrófagos/dendritas) son capaces de proporcionar importantes señales coestimuladoras de la célula T, similares a las de la presentación de antígeno y como consecuencia impedir una anergización de la célula T. Además pueden, como efecto secundario deseado, ser estimuladas debido a la interacción mediada por bsAc intactos con la célula accesoria a la célula T y la célula tumoral, incluso células T, cuyo receptor de célula T reconoce péptidos específicos de tumor (presentados a través de antígenos MHC sobre la célula tumoral). Los coestímulos necesarios para conseguir una correcta activación de la célula T se proporcionan en dicha constelación de la célula accesoria (por ejemplo monocito). A este respecto, el anticuerpo según la invención, además de la destrucción de tumor directa mediada por bsAc e independiente del receptor de la célula T, debe activar y generar también células T específicas de tumor, las cuales continúan patrullando en el paciente después de la degradación del bsAc. Esto significa que mediante el bsAc intacto puede romperse la tolerancia a tumor en pacientes, de forma similar a las preparaciones de terapia génica (por ejemplo mediante la integración de antígenos coestimuladores como B-7 en la célula tumoral).
Tal como se mostró de forma sorprendente en dos pacientes, la inmunoterapia de tumores mediante anticuerpos trifuncionales biespecíficos puede utilizarse también terapéuticamente en el tratamiento de la ascitis.
En una paciente con carcinoma de ovarios, pudo impedirse la regeneración de la ascitis tras un tratamiento con bsAc durante un período de 6 meses. Además pudo ponerse de manifiesto la completa destrucción de las células tumorales presentes en el líquido ascítico.
Ejemplo 1
En una paciente con carcinoma de ovario se puncionó primero el peritoneo, se extrajo líquido ascítico (700 ml) y se analizaron las células contenidas en el mismo. Tal como se muestra en la figura 1, las células tumorales pudieron identificarse visualmente al microscopio debido a su morfología. Además, se llevo a cabo una tinción con peroxidasa anti-EpCAM.
El recuento de las células en la ascitis antes del tratamiento dio una relación de aproximadamente 50:50 de células tumorales y células inmunes.
El análisis por citometría de flujo dio una fuerte positividad de células tumorales para el antígeno de superficie EpCAM (molécula de adhesión celular epitelial, Balzar et al., Mol. Cell. Biol., 18:4833, 1998) así como una débil expresión del antígeno de superficie asociado a tumor Her2/neu (figura 2).
Para excluir la posibilidad de una reacción contra proteínas extrañas primero se infundieron peritonealmente 10 \mug
del bsAc TPBS03 REXOMAB (anti-Her2/neu x anti-CD3; combinación de isotipos ratón IgG2a x rata IgG2b). La aplicación exacta se representa en la Tabla 1.
TABLA 1
Esquema de dosificación
Día Anticuerpo biespecífico Dosis
1 CD3 x Her2/neu 10 \mug
4 CD3 x EpCAM 10 \mug
7 CD3 x EpCAM 40 \mug
9 CD3 x EpCAM 80 \mug
11 CD3 x EpCAM 160 \mug
15 CD3 x EpCAM + CD3 x Her2/neu 200 \mug + 50 \mug
Una primera variación se pudo determinar un día después de la infusión de 40 \mug. Se llevó a cabo en ese momento un lavado peritoneal y las células contenidas se analizaron, habiéndose mejorado la relación entre las células inmunes y las células tumorales a un valor de 3:1.
Sorprendentemente, el día 11, justo antes de la infusión de 160 \mug, sólo pudo encontrarse en el segundo lavado peritoneal alguna célula tumoral aislada. La relación de células inmunes había variado dramáticamente al valor de 330:1.
En el tercer lavado peritoneal el día 15 después de la adición de 160 \mug y justo antes de la infusión de 250 \mug, ya no pudo ponerse de manifiesto ninguna célula tumoral (figura 1). Este resultado pudo confirmarse mediante una RT-PCR anidado para EpCAM especialmente sensible (figura 3).
Debe remarcarse, que durante el tratamiento no se produjeron efectos secundarios severos. Solamente después de la dosis más elevada de 250 \mug de bsAc se produjo fiebre durante un corto intervalo de tiempo (38,6ºC).
En la paciente, durante un período de 6 meses, no se observó la regeneración del líquido ascítico y no fue necesario tampoco llevar a cabo una punción adicional. Este hecho es especialmente remarcable, dado que el estadio de enfermedad en esta paciente en el momento del inicio de la terapia inmune era muy avanzado y ya existían metástasis en el hígado.
Ejemplo 2
En otra paciente con carcinoma de mama y formación de ascitis se puncionó también el peritoneo, se recogió el líquido ascítico (3 litros) y las células contenidas se analizaron por citometría de flujo. En este caso se utilizaron anticuerpos de verificación contra el antígeno asociado a tumor EpCAm y CD14 para poder distinguir una unión no específica a las células positivas para el receptor Fc (del anticuerpo de verificación) de una unión a células tumorales. Tal como se representa en la figura 4, en el día 0 antes de la terapia, un 70% de las células presentes en el líquido ascítico eran células tumorales positivas para EpCAM, las cuales disminuyeron bajo la terapia al 0,7%.
El día 0, tras el drenaje del líquido ascítico, la paciente recibió por administración peritoneal 10 \mug del anticuerpo anti-EpCAM x anti-CD3 Removab (combinación de isotipo: ratón IgG2a x rata IgG2b) así como se le administró intraperitonealmente en los siguientes días 2 y 5, 40 \mug y 100 \mug de Removab, respectivamente a lo largo de un intervalo de tiempo de aproximadamente 6 horas. El día 8 se le aplicó a la paciente una combinación del anticuerpo Rexomab (anti-Her2/neu x anti-CD3; 100 \mug) y Removab (50 \mug) intraperitonealmente, después de poderse demostrar la presencia del antígeno asociado a tumor Her2/neu sobre las células tumorales mediante citometría de flujo (no mostrado).
Tal como se representa en la figura 5, la regeneración de líquido de la ascitis disminuyó continuamente y desapareció totalmente al final de la terapia.
El tratamiento se asimiló bien. Ciertamente, después de la dosis más elevada se produjo momentáneamente una elevación de los valores del hígado y se produjo fiebre durante un corto intervalo de tiempo.
Conclusiones
A partir de estos resultados puede concluirse que una dosis de 40 \mug de bsAc posee una cierta efectividad anti-tumor y que conduce a la activación y proliferación de células efectoras inmunes. Tras la adición de 160 \mug de bsAc puedo no pudo encontrarse ninguna señal de la presencia de células tumorales residuales en el lavado peritoneal de la primera paciente, incluso con las técnicas de detección más sensibles y por lo tanto se asume una destrucción efectiva de las células tumorales autólogas en el líquido ascítico. Un efecto similar pudo determinarse también en la segunda paciente tras la adición de 100 \mug de REMOVAB. La compatibilidad de las dosis administradas fue buena, únicamente se produjo en una paciente una elevación de los valores del hígado u otros efectos secundarios negativos. Después de la dosis de 250 \mug (paciente 1) o de la dosis de 100 \mug (paciente 2) se produjo fiebre (38,6ºC) durante un corto intervalo de tiempo.
A este respecto, puede derivarse la siguiente aplicación de anticuerpos trifuncionales biespecíficos para futuros tratamientos para la destrucción de células tumorales en ascitis y para evitar la regeneración de la ascitis:
Día 0: 10 \mug (dosis de inicio para examinar una reacción de hipersensibilidad a la proteína extraña)
Día 2: 40 \mug (activación y proliferación de las células inmunes)
Día 4: 200 \mug (dosis principal para la destrucción de las células tumorales)
En vista de que no existe en la actualidad ningún tratamiento satisfactorio de la ascitis maligna en enfermedades tumorales, la inmunoterapia mediante bsAc representa un nuevo procedimiento prometedor.
El tratamiento inmunoterapéutico de la ascitis intraperitoneal mediante un bsAc trifuncional puede utilizarse también como inmunización primaria para la inducción de una inmunidad anti-tumor a largo plazo.
La zona del vientre contiene un gran número de órganos inmunológicos como por ejemplo el bazo, las placas de Peyer y una multitud de nódulos linfáticos. Los bsAc trifuncionales, debido a su interacción con células tumorales, células T y células accesorias (Zeidler et al., J. Immunol. 163; 1246, 1999, Zeidler et al., British J. Cancer 83: 261, 2000) son capaces de proporcionar el material tumoral al sistema presentador de antígeno e inducir la inmigración de células dendríticas activadas en los órganos inmunológicos.
Estos procesos son prerrequisitos esenciales para la inducción de una respuesta inmune contra el tumor autólogo. Para establecer la respuesta inmune a largo plazo y en particular para generar una respuesta celular y humoral policlonal funcional, es necesaria una inmunización secundaria. La inmunización secundaria puede llevarse a cabo también vía subcutánea o intradérmica. En la ascitis maligna, pueden obtenerse las células tumorales que se encuentran en la ascitis, simplemente mediante punción y utilizarse como material tumoral autólogo.

Claims (27)

1. Utilización de un anticuerpo trifuncional biespecífico y/o triespecífico con las siguientes características:
a) se une a una célula T;
b) se une a como mínimo un antígeno sobre una célula tumoral, cuya célula tumoral está asociada con la ascitis maligna y/o una efusión pleural;
c) se une a través de su porción Fc (en el caso de anticuerpos biespecíficos) o a través de una tercera especificidad (en el caso de anticuerpos triespecíficos) a las células positivas para el receptor Fc
para la fabricación de una preparación farmacéutica para el tratamiento de la ascitis maligna y/o un derrame pleural, para la destrucción de las células tumorales en el líquido ascítico y/o en un derrame pleural.
2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada por el hecho de que la preparación farmacéutica se diseña para ser administrada en forma de una primera dosis y como mínimo una dosis adicional.
3. Utilización según la reivindicación 1 ó 2, caracterizada por el hecho de que la preparación farmacéutica se diseña para ser administrada en forma de una segunda dosis para la activación y proliferación de las células inmunitarias y como mínimo una tercera dosis para la destrucción de las células tumorales.
4. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que la preparación farmacéutica se diseña para ser administrada en forma de una primera dosis para evaluar reacciones alérgicas contra los anticuerpos administrados.
5. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que la preparación farmacéutica se diseña de tal manera que contenga en la administración del primer día una primera dosis de 1 \mug hasta 20 \mug del anticuerpo, preferentemente de 5 \mug hasta 10 \mug, en la administración de la segunda dosis una cantidad de 20 \mug hasta 100 \mug del anticuerpo, preferentemente de 30 \mug hasta 60 \mug, y en la administración de cada una de las dosis posteriores una cantidad de 100 \mug hasta 500 \mug del anticuerpo, preferentemente de 100 \mug hasta
300 \mug.
6. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que el anticuerpo se administra para la inmunización primaria en 3 hasta 8 dosis, preferentemente en 3 hasta 6 dosis, por el hecho de que existe preferentemente un intervalo de aproximadamente 2 hasta 3 días entre cada aplicación, y además, por el hecho de que se puede llevar a cabo la administración del anticuerpo preferentemente durante el tiempo suficiente para que pueda detectarse la reacción de anticuerpos contra el anticuerpo administrado.
7. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que la preparación farmacéutica se diseña de manera que para alcanzar la inmunización secundaria durante la administración de dosis posteriores, dichas dosis posteriores contienen células tumorales autólogas y/o alogénicas inactivadas y células inmunitarias autólogas.
8. Utilización según la reivindicación 7, caracterizada por el hecho de que como células inmunitarias autólogas se utilizan células de aféresis, las cuales se obtienen preferentemente antes de la primera quimioterapia.
9. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que la preparación farmacéutica para la inmunización primaria se diseña preferentemente para la administración intraperitoneal y para la inmunización secundaria se diseña para la administración intradermal, subcutánea o intramuscular.
10. Utilización según la reivindicación 7, 8 ó 9, caracterizada por el hecho de que la preparación farmacéutica para la inmunización secundaria contiene las siguientes cantidades:
a) 1-200x10^{6} células tumorales inactivadas, preferentemente 10-100x10^{6} células tumorales inactivadas
b) 10-500x10^{6} células inmunitarias, preferentemente 50-200x10^{6} células inmunitarias
c) 1-10 \mug de anticuerpo trifuncional biespecífico o de anticuerpo trifuncional triespecífico, preferentemente 2-5 \mug
de anticuerpo.
11. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que se utiliza un anticuerpo trifuncional biespecífico o un anticuerpo trifuncional triespecífico.
12. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que el anticuerpo es capaz de unirse a células positivas para el receptor Fc, las cuales presentan un receptor Fc\gamma I y/o III.
13. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que los anticuerpos son capaces de unirse a monolitos, macrófagos, células dendríticas, células "Natural Killer" (células NK) y/o células neutrófilas en su condición de células positivas para el receptor Fc\gamma I y/o III.
14. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que los anticuerpos son capaces de inducir anticuerpos que se unen al complemento reactivo contra tumor y como consecuencia son capaces de inducir una respuesta inmune humoral.
15. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que dichos anticuerpos se seleccionan de manera que se unan a la célula T vía CD2, CD3, CD4, CD5, CD6, CD8, CD28, CD40L (=CD154) y/o CD44.
16. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que dichos anticuerpos se seleccionan de manera que inicien o aumenten, después de su unión a las células positivas para el receptor Fc, la expresión de CD40, CD80, CD86, ICAM-1 y/o LFA-3 en su condición de antígenos coestimuladores y/o que inicien o aumenten la secreción de citoquinas por la célula positiva para el receptor Fc.
17. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que los anticuerpos se seleccionan de manera que aumenten la secreción de las citoquinas IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-12, INF-\gamma y/o TNF-\alpha.
18. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que el anticuerpo biespecífico se selecciona de manera que sea un anticuerpo anti-CD3 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD4 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD5 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD6 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD8 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD2 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD28 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD40L X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD44 X anti antígeno asociado a tumor.
19. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que el anticuerpo biespecífico se selecciona a partir de un anticuerpo heterólogo biespecífico o triespecífico, preferentemente un anticuerpo biespecífico heterólogo rata/ratón.
20. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que el anticuerpo triespecífico posee un brazo de unión a la célula T, un brazo de unión a la células tumoral y una tercera especificidad para unirse a células positivas para el receptor Fc.
21. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que el anticuerpo triespecífico se selecciona de manera que sea un anticuerpo anti-CD3 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD4 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD5 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD6 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD8 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD2 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD28 X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD40L X anti antígeno asociado a tumor y/o un anticuerpo anti CD44 X anti antígeno asociado a tumor.
22. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 7, 8 y 10, caracterizada por el hecho de que se utilizan células tumorales sometidas a irradiación, preferentemente irradiación \gamma, más preferentemente en una dosis de 50 Gy a 200 Gy, o tratadas con substancias químicas, preferentemente mitomicina C.
23. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 7, 8 y 10, caracterizada por el hecho de que para aumentar la inmunogenicidad de las células tumorales, dichas células tumorales se someten a un tratamiento térmico antes de su administración.
24. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que el anticuerpo se selecciona además de manera que sea capaz de activar células positivas para el receptor Fc, de manera que se inicie o aumente la expresión de citoquinas y/o antígenos coestimuladores.
25. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que se utilizan células inmunitarias provenientes de PBMC, de aféresis o de la médula ósea.
26. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que el anticuerpo biespecífico y/o triespecífico se encuentra en una cantidad de 0,1 \mug a 500 \mug, las células tumorales autólogas o alogénicas se encuentran en una cantidad de 10^{5} células a 2x10^{8} células y las células inmunitarias autólogas se encuentran en una cantidad de 5x10^{6} células a 5x10^{8} células.
27. Utilización según cualquiera o varias de las reivindicaciones anteriores, caracterizada por el hecho de que además de la destrucción de las células tumorales se establece una inmunidad contra las células tumorales contra las cuales se dirigen los anticuerpos trifuncionales biespecíficos o los anticuerpos trifuncionales triespecíficos.
ES01982241T 2000-09-04 2001-09-04 Utilizacion de anticuerpos trifuncionales biespecificos y triespecificos para el tratamiento de la ascitis maligna. Expired - Lifetime ES2241887T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE10043437 2000-09-04
DE10043437A DE10043437A1 (de) 2000-09-04 2000-09-04 Verwendung von trifunktionellen bispezifischen und trispezifischen Antikörpern zur Behandlung von malignem Aszites

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2241887T3 true ES2241887T3 (es) 2005-11-01

Family

ID=7654853

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES01982241T Expired - Lifetime ES2241887T3 (es) 2000-09-04 2001-09-04 Utilizacion de anticuerpos trifuncionales biespecificos y triespecificos para el tratamiento de la ascitis maligna.

Country Status (10)

Country Link
US (2) US8277806B2 (es)
EP (1) EP1315520B1 (es)
AT (1) ATE294591T1 (es)
DE (3) DE10043437A1 (es)
DK (1) DK1315520T3 (es)
ES (1) ES2241887T3 (es)
LU (1) LU91616I2 (es)
NL (1) NL300418I1 (es)
PT (1) PT1315520E (es)
WO (1) WO2002020039A2 (es)

Families Citing this family (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8066989B2 (en) * 2004-11-30 2011-11-29 Trion Pharma Gmbh Method of treating tumor growth and metastasis by using trifunctional antibodies to reduce the risk for GvHD in allogeneic antitumor cell therapy
DK1874821T3 (da) * 2005-04-26 2013-07-08 Trion Pharma Gmbh Kombination af antistoffer med glykokortikoider til behandling af kræft
EP1820513A1 (en) 2006-02-15 2007-08-22 Trion Pharma Gmbh Destruction of tumor cells expressing low to medium levels of tumor associated target antigens by trifunctional bispecific antibodies
EP2033657A1 (de) * 2007-09-04 2009-03-11 Trion Pharma Gmbh Intraoperative trifunktionale Antikörper-Applikation zur Prophylaxe intraperitonealer Tumorzelldissemination
EP2241576A1 (en) 2009-04-17 2010-10-20 Trion Pharma Gmbh Use of trifunctional bispecific antibodies for the treatment of tumors associated with CD133+/EpCAM+ cancer stem cells
DE102009002596B4 (de) * 2009-04-23 2012-11-08 Ford Global Technologies, Llc Verbrennungsmotor mit thermoelektrischem Generator
US9493578B2 (en) 2009-09-02 2016-11-15 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
AU2011283694B2 (en) 2010-07-29 2017-04-13 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
WO2012145714A2 (en) 2011-04-22 2012-10-26 Emergent Product Development Seattle, Llc Prostate-specific membrane antigen binding proteins and related compositions and methods
EP2578230A1 (en) 2011-10-04 2013-04-10 Trion Pharma Gmbh Removal of Tumor Cells from Intraoperative Autologous Blood Salvage
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
EP2589388A1 (en) * 2011-11-04 2013-05-08 Lunamed AG Use of a Teichoic acid for the treatment of malignant ascites
KR102091297B1 (ko) * 2012-02-03 2020-03-20 에프. 호프만-라 로슈 아게 항원-형질감염된 t 세포와 함께 사용되는 이중특이적 항체 분자 및 의약에서의 이들의 용도
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
EP3620473A1 (en) 2013-01-14 2020-03-11 Xencor, Inc. Novel heterodimeric proteins
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US9738722B2 (en) 2013-01-15 2017-08-22 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
EP2970486B1 (en) 2013-03-15 2018-05-16 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
UA119646C2 (uk) 2013-07-05 2019-07-25 Ґенмаб А/С Гуманізоване антитіло, що зв`язується з сd3 людини
US9822186B2 (en) 2014-03-28 2017-11-21 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind to CD38 and CD3
SG11201609917PA (en) 2014-05-29 2016-12-29 Macrogenics Inc Tri-specific binding molecules and methods of use thereof
IL296633A (en) 2014-07-11 2022-11-01 Genmab As Antibodies that bind axl
CN104592392B (zh) * 2015-01-21 2018-08-28 武汉友芝友生物制药有限公司 一种双特异性抗体EpCAM×CD3的构建及应用
WO2016019969A1 (en) 2014-08-08 2016-02-11 Ludwig-Maximilians-Universität München Subcutaneously administered bispecific antibodies for use in the treatment of cancer
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
JP2017536830A (ja) 2014-11-26 2017-12-14 ゼンコー・インコーポレイテッドＸｅｎｃｏｒ、 Ｉｎｃ． Ｃｄ３及びｃｄ３８に結合するヘテロ二量体抗体
EA201791139A1 (ru) 2014-11-26 2018-04-30 Ксенкор, Инк. Гетеродимерные антитела, которые связывают cd3 и опухолевые антигены
WO2016105450A2 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
CN104788567B (zh) * 2015-01-21 2019-03-26 武汉友芝友生物制药有限公司 一种靶向鼠T淋巴细胞CD3和人肿瘤抗原EpCAM的双特异性抗体制备方法及应用
WO2016141387A1 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
ME03772B (me) 2015-07-10 2021-04-20 Genmab As Konjugati antitijela specifičnog za axl i lijeka za liječenje kancera
MX2018000347A (es) 2015-07-15 2018-03-14 Genmab As Anticuerpos de grupo de diferenciacion 3 (cd3) humanizados o quimericos.
SG10202002577XA (en) 2015-09-21 2020-04-29 Aptevo Res & Development Llc Cd3 binding polypeptides
JP7320944B2 (ja) 2015-10-08 2023-08-04 マクロジェニクス，インコーポレーテッド Ｂ７‐ｈ３に特異的に結合する分子及びｐｄ‐１に特異的に結合する分子
EP3387013B1 (en) 2015-12-07 2022-06-08 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and psma
RU2767357C2 (ru) 2016-06-14 2022-03-17 Ксенкор, Инк. Биспецифические антитела-ингибиторы контрольных точек
WO2018005706A1 (en) 2016-06-28 2018-01-04 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind somatostatin receptor 2
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
RU2019114175A (ru) 2016-10-14 2020-11-16 Ксенкор, Инк. Биспецифические гетеродимерные слитые белки, содержащие fc-слитые белки il-15/il-15ra и фрагменты антитела к pd-1
CN110461868A (zh) 2016-11-01 2019-11-15 根马布私人有限公司 多肽变体及其用途
SG11201906961UA (en) 2017-02-10 2019-08-27 Genmab Bv Polypeptide variants and uses thereof
WO2018178396A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Genmab Holding B.V. Bispecific anti-cd37 antibodies, monoclonal anti-cd37 antibodies and methods of use thereof
WO2018224609A1 (en) 2017-06-07 2018-12-13 Genmab B.V. Therapeutic antibodies based on mutated igg hexamers
WO2019006472A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Xencor, Inc. TARGETED HETETRODIMERIC FUSION PROTEINS CONTAINING IL-15 / IL-15RA AND ANTIGEN-BINDING DOMAINS
CA3082383A1 (en) 2017-11-08 2019-05-16 Xencor, Inc. Bispecific and monospecific antibodies using novel anti-pd-1 sequences
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
MX2020006322A (es) 2017-12-19 2020-09-18 Xencor Inc Proteinas de fusion il-2 fc modificadas.
JP2021510740A (ja) 2018-01-24 2021-04-30 ゲンマブ ビー．ブイ． ポリペプチド変種およびそれらの用途
AU2019233523A1 (en) 2018-03-12 2020-10-01 Genmab A/S Antibodies
EP3773911A2 (en) 2018-04-04 2021-02-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
JP2021520829A (ja) 2018-04-18 2021-08-26 ゼンコア インコーポレイテッド ＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲＡ Ｆｃ融合タンパク質およびＴＩＭ−３抗原結合ドメインを含む、ＴＩＭ−３標的化ヘテロ二量体融合タンパク質
MX2020010910A (es) 2018-04-18 2021-02-09 Xencor Inc Proteinas de fusion heterodimericas dirigidas a pd-1 que contienen proteinas de fusion il-15 / il-15ra fc y dominios de union al antigeno pd-1 y usos de los mismos.
KR20210008380A (ko) 2018-05-03 2021-01-21 젠맵 비. 브이 항체 변이체 조합물 및 그의 용도
WO2019243636A1 (en) 2018-06-22 2019-12-26 Genmab Holding B.V. Anti-cd37 antibodies and anti-cd20 antibodies, compositions and methods of use thereof
JP7534281B2 (ja) 2018-07-13 2024-08-14 ジェンマブ エー／エス Ｃｄ３８抗体を使用したトロゴサイトーシスを介した治療
CA3106146A1 (en) 2018-07-13 2020-01-16 Genmab A/S Variants of cd38 antibody and uses thereof
US11358999B2 (en) 2018-10-03 2022-06-14 Xencor, Inc. IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins
JP7522106B2 (ja) 2018-10-04 2024-07-24 ジェンマブ ホールディング ビー．ブイ． 二重特異性抗ｃｄ３７抗体を含む医薬組成物
MX2021005085A (es) 2018-11-06 2021-11-04 Genmab As Formulacion de anticuerpo.
EP3930850A1 (en) 2019-03-01 2022-01-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind enpp3 and cd3
US20220315661A1 (en) 2019-05-09 2022-10-06 Genmab B.V. Dosage regimens for a combination of anti-dr5 antibodies for use in treating cancer
US20220411529A1 (en) 2019-11-06 2022-12-29 Genmab B.V. Antibody variant combinations and uses thereof
CA3165660A1 (en) 2020-01-16 2021-07-22 Genmab A/S Formulations of cd38 antibodies and uses thereof
US11919956B2 (en) 2020-05-14 2024-03-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3
JP2023534726A (ja) 2020-07-23 2023-08-10 ジェンマブ ビー．ブイ． 多発性骨髄腫の治療に使用するための抗ｄｒ５抗体と免疫調節イミド薬との併用
MX2023001962A (es) 2020-08-19 2023-04-26 Xencor Inc Composiciones anti-cd28.
WO2022049220A2 (en) 2020-09-02 2022-03-10 Genmab A/S Antibody therapy
JP2023547329A (ja) 2020-10-02 2023-11-10 ジェンマブ エー／エス Ｒｏｒ２へと結合することができる抗体ならびにｒｏｒ２およびｃｄ３に結合する二重特異性抗体
AU2022232375A1 (en) 2021-03-09 2023-09-21 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cldn6
EP4305065A1 (en) 2021-03-10 2024-01-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3
JP2024533234A (ja) 2021-09-06 2024-09-12 ジェンマブ エー／エス Ｃｄ２７に結合する能力を有する抗体、そのバリアントおよびその使用
WO2023218051A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Genmab A/S Binding agents capable of binding to cd27 in combination therapy
TW202413412A (zh) 2022-05-12 2024-04-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 在組合療法中能夠結合到ｃｄ２７之結合劑
WO2024094660A1 (en) 2022-10-31 2024-05-10 Genmab A/S Cd38 antibodies and uses thereof

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6207147B1 (en) * 1996-10-11 2001-03-27 The Regents Of The University Of California Cancer immunotherapy using tumor cells combined with mixed lymphocytes
US6410690B1 (en) * 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
DE19531348A1 (de) * 1995-08-25 1997-02-27 Gsf Forschungszentrum Umwelt Antikörper mit zwei oder mehr Spezifitäten zur selektiven Eliminierung von Zellen in vivo
US6805869B2 (en) * 1996-06-12 2004-10-19 Shanghai Cp Guojian Pharmaceutical Co., Ltd. Cellular vaccines and immunotherapeutics and methods for their preparation
ES2169299T3 (es) 1996-09-03 2002-07-01 Gsf Forschungszentrum Umwelt Procedimiento para la destruccion de celulas tumorales contaminantes en transplantes de celulas madre utilizando anticuerpos especificos.
ES2176574T3 (es) * 1996-09-03 2002-12-01 Gsf Forschungszentrum Umwelt Utilizacion de anticuerpos bi y triespecificos para la induccion de inmunidad tumoral.
DE19710497C2 (de) * 1996-09-03 1998-07-09 Gsf Forschungszentrum Umwelt Verwendung Bi- und trispezifische Antikörper zur Induktion einer Tumorimmunität
DE19725586C2 (de) * 1997-06-17 1999-06-24 Gsf Forschungszentrum Umwelt Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper
WO2000018806A1 (de) * 1998-09-25 2000-04-06 Horst Lindhofer Bispezifische und trispezifische antikörper, die spezifisch mit induzierbaren oberflächenantigenen als operationelle zielstrukturen reagieren
DE19859115A1 (de) * 1998-09-25 2000-03-30 Horst Lindhofer Verwendung von Tumorzellen zeitversetzt in Kombination mit intakten Antikörpern zur Immunisierung
US6994853B1 (en) * 1998-09-25 2006-02-07 Trion Pharma Gmbh Time-staggered utilization of tumor cells in combination with intact antibodies for immunization
WO2001078769A2 (en) * 2000-04-12 2001-10-25 University Of South Florida Regulation of systemic immune responses utilizing soluble cd40

Also Published As

Publication number Publication date
PT1315520E (pt) 2005-09-30
NL300418I1 (nl) 2010-01-04
DE50106127D1 (de) 2005-06-09
WO2002020039A3 (de) 2002-07-25
US20130095106A1 (en) 2013-04-18
DE122009000069I1 (de) 2010-01-21
EP1315520A2 (de) 2003-06-04
DK1315520T3 (da) 2005-08-22
EP1315520B1 (de) 2005-05-04
WO2002020039A2 (de) 2002-03-14
DE10043437A1 (de) 2002-03-28
ATE294591T1 (de) 2005-05-15
US20030223999A1 (en) 2003-12-04
US8277806B2 (en) 2012-10-02
LU91616I2 (fr) 2009-12-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2241887T3 (es) Utilizacion de anticuerpos trifuncionales biespecificos y triespecificos para el tratamiento de la ascitis maligna.
US6551592B2 (en) Bi-and trispecific antibodies for the induction of anti-tumor immunity
ES2212638T3 (es) Utilizacion de celulas tumorales en tiempo escalonado en combinacion con anticuerpos intactos para la inmunizacion.
US8012470B2 (en) Method for ex vivo immunization using heterologous intact bispecific and/or trispecific antibodies
US11976117B2 (en) T cell-antigen coupler with various construct optimizations
Klener et al. Immunotherapy approaches in cancer treatment
US8663638B2 (en) Intraoperative trifunctional antibody application for prophylaxis of intraperitoneal tumor cell dissemination
ES2330017T3 (es) Ligandos de cd40 y peptidos de ctl para tratar tumores.
BR112020024235A2 (pt) proteínas de ligação multiespecíficas e aprimoramento das mesmas
US11406667B2 (en) T cell-antigen coupler with various construct optimizations
US8058399B2 (en) Multispecific reagent for selectively stimulating cell surface receptors
AU2019307905B2 (en) T cell-antigen coupler with various construct optimizations
Rashidijahanabad et al. Recent advances in tumor associated carbohydrate antigen based chimeric antigen receptor T cells and bispecific antibodies for anti-cancer immunotherapy
Simmons et al. Local secretion of anti-CTLA-4 enhances the therapeutic efficacy of a cancer immunotherapy with reduced evidence of systemic autoimmunity
Donda et al. In vivo targeting of an anti-tumor antibody coupled to antigenic MHC class I complexes induces specific growth inhibition and regression of established syngeneic tumor grafts
Arlen et al. Immunotherapy of colon cancer using chimeric mAb 31.1
EP1534754A2 (en) Bi-specific antigen-binding compositions and related methods
Williams et al. Effective Cancer Immunotherapy–Are We There Yet?