ES2231818T3 - Derivados de acido betulinico y usos para los mismos. - Google Patents
Derivados de acido betulinico y usos para los mismos.Info
- Publication number
- ES2231818T3 ES2231818T3 ES96922408T ES96922408T ES2231818T3 ES 2231818 T3 ES2231818 T3 ES 2231818T3 ES 96922408 T ES96922408 T ES 96922408T ES 96922408 T ES96922408 T ES 96922408T ES 2231818 T3 ES2231818 T3 ES 2231818T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- hiv
- pharmaceutical composition
- composition according
- acid
- compounds
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J63/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by expansion of only one ring by one or two atoms
- C07J63/008—Expansion of ring D by one atom, e.g. D homo steroids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
SE HA ENCONTRADO QUE CIERTOS DERIVADOS ACILO DEL ACIDO BETULINICO Y DEL ACIDO DIHIDROBETULINICO, CON ARREGLO A LA PRESENTE INVENCION, POSEEN UNA POTENTE ACTIVIDAD ANTI-VIH. LA INTRODUCCION DE UN GRUPO ACILO C 2 - C 20 SUSTITUIDO O NO SUSTITUIDO EN EL GRUPO HIDROXILO DEL C 3 DEL ACIDO BETULINICO Y EL ACIDO DIHIDROBETULINICO, PROPORCIONA LOS CORRESPONDIENTES DERIVADOS 3 - O - ACILO. LOS COMPUESTOS DE LA PRESENTE INVENCION TIENEN LAS FORMULAS (I) Y (II), EN LA QUE R PUEDE SER UN GRUPO MONOCARBOXIACILO O DICARBOXIACILO, SUSTITUIDO O NO SUSTITUIDO, QUE TENGA ENTRE 2 Y 20 ATOMOS DE CARBONO, Y R PUEDE SER UN HIDROGENO O UN GRUPO ALQUILO O ARILO, C 2 C 10 SUSTITUIDO O NO SUSTITUIDO.
Description
Derivados de ácido betulínico y usos para los
mismos.
La presente invención se refiere a ácido
betulínico y ácido dihidrobetulínico y derivados de los mismos y a
su uso como productos farmacéuticos.
Los retrovirus son pequeños virus de RNA de
sentido positivo de una sola hebra. Una partícula retroviral
comprende dos moléculas de RNA de sentido positivo de una sola
hebra idénticas. Su genoma contiene, entre otras cosas, la
secuencia de la DNA polimerasa dependiente de RNA, también conocida
como transcriptasa inversa. Muchas moléculas de transcriptasa
inversa se encuentran en asociación estrecha con el RNA genómico en
las partículas virales maduras. Al entrar en una célula, esta
transcriptasa inversa produce una copia de DNA de doble hebra del
genoma viral, que a continuación se inserta en la cromatina de una
célula huésped. Una vez insertada, la secuencia viral se denomina un
provirus. La integración retroviral depende directamente de
proteínas virales. Los extremos del DNA viral lineal (los LTRs) son
los precursores inmediatos del DNA proviral integrado. Existe una
duplicación característica de tramos cortos del DNA del huésped en
el sitio de integración.
Los genomas virales y los mRNAs de la progenie se
transcriben desde la secuencia proviral insertada mediante RNA
polimerasa de la célula huésped en respuesta a señales reguladoras
transcripcionales en las regiones terminales de la secuencia
proviral, las repeticiones terminales largas, o LTRs. La maquinaria
de producción de proteínas de la célula huésped se usa para producir
proteínas virales, muchas de las cuales son inactivas hasta que son
procesadas por proteasas codificadas viralmente. Típicamente, las
partículas virales de la progenie brotan de la superficie celular de
una manera no lítica. La infección retroviral no interfiere
necesariamente con el ciclo vital normal de una célula o un
organismo infectado. Sin embargo, tampoco es siempre benigna con
respecto al organismo huésped. Aunque la mayoría de las clases de
virus de DNA puede estar implicada en la tumorigénesis, los
retrovirus son el único grupo taxonómico de virus de RNA que son
oncogénicos. Diversos retrovirus, tales como el virus de la
inmunodeficiencia humana (HIV), que es el agente etiológico
responsable del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) en
seres humanos, también son responsables de varias enfermedades muy
inusuales del sistema inmunitario de los animales superiores.
El virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) es
un miembro de los lentivirus, una subfamilia de los retrovirus.
Muchos retrovirus son carcinógenos bien conocidos. No se sabe que
el HIV de por sí provoque cáncer en seres humanos u otros animales,
pero presenta un reto formidable para el huésped. El genoma viral
contiene muchos elementos reguladores que permiten al virus
controlar su velocidad de replicación en células tanto en reposo
como en división. De forma más importante, el HIV infecta e invade
células del sistema inmunitario; rompe el sistema inmunitario del
cuerpo y hace al paciente susceptible a infecciones oportunistas y
neoplasmas. El defecto inmunitario parece ser progresivo e
irreversible, con un alto grado de mortalidad que se aproxima al
100% a lo largo de varios años.
El HIV-1 es trófico y citopático
para linfocitos T4, células del sistema inmunitario que expresan el
antígeno de diferenciación de la superficie celular CD4, también
conocido como OKT4, T4 y leu3. El tropismo viral se debe a las
interacciones entre la glicoproteína de envuelta viral, gp120, y las
moléculas de CD4 de la superficie celular (Dalgleish y otros,
Nature 312:763-767 (1984)). Estas
interacciones, no solo median la infección de células susceptibles
por HIV, sino que también son responsables de la fusión inducida
por virus de células T infectadas y no infectadas. Esta fusión
celular da como resultado formación de sincitios multinucleados
gigantes, muerte celular y agotamiento progresivo de células CD4 en
pacientes con SIDA. Estos sucesos dan como resultado
inmunosupresión inducida por HIV y sus secuelas subsiguientes,
infecciones oportunistas y neoplasmas.
Además de las células T CD4+, la gama de
huéspedes de HIV incluye células del linaje fagocítico mononuclear
(Dalgleish y otros, previamente), incluyendo monocitos sanguíneos,
macrófagos tisulares, células de Langerhans de la piel y células
del retículo dendrítico dentro de los nódulos linfáticos. El HIV
también es neurotrópico, capaz de infectar monocitos y macrófagos
en el sistema nervioso central provocando un daño neurológico
grave. Los macrófagos/monocitos son un reservorio principal de HIV.
Pueden interactuar y fusionarse con células T que tienen CD4,
provocando el agotamiento de las células T y contribuyendo así a la
patogénesis del SIDA.
Se están realizando actualmente esfuerzos
intensivos para desarrollar terapias para prevenir o intervenir en
el desarrollo de los síntomas clínicos en individuos infectados con
HIV. En su mayor parte, los esfuerzos se han enfocado al uso de
fármacos análogos a nucleósidos tales como la AZT (azidotimidina) y
a otros derivados de didesoxinucleósidos tales como ddA, ddT, ddI y
ddC. Estos fármacos inhiben la enzima viral transcriptasa inversa,
inhibiendo de ese modo la infección de células de novo. Sin
embargo, una vez que la infección viral se ha establecido dentro de
una célula, la replicación viral utiliza enzimas de la célula
huésped. Así, los fármacos que inhiben solo la transcriptasa
inversa tienden a tener efectos limitados. Aunque la extensión del
virus libre dentro del organismo puede bloquearse, los mecanismos de
la formación de sincitios y la patogénesis a través de extensión
intercelular directa permanecen. De acuerdo con esto, existe una
necesidad de proporcionar nuevos fármacos anti-HIV
que no estén limitados a inhibir la transcripción inversa como su
mecanismo de acción.
Se están realizando actualmente diversos
esfuerzos para desarrollar agentes terapéuticos para detener la
replicación del virus de inmunodeficiencia humana (HIV). Aunque
varios inhibidores de transcriptasa inversa (RT) de
HIV-1 nucleosídicos, incluyendo AZT, ddI, ddC y
D4T, han sido aprobados por la FDA y se usan clínicamente, todos
estos compuestos tienen efectos secundarios adversos y el HIV muta
tan rápidamente que el virus ha desarrollado resistencia a estos
fármacos. Por lo tanto, se necesitan urgentemente compuestos que
posean potente actividad anti-HIV con diferentes
modos de acción para ayudar a las terapias anti-HIV
existentes. Actualmente, el desarrollo de nuevos agentes
anti-HIV se enfoca a descubrir diferentes compuestos
que tengan nuevas estructuras o nuevos mecanismos de acción.
Se ha empleado mucho esfuerzo en productos
naturales derivados de plantas como nuevos compuestos principales
para agentes anti-HIV, así como desarrollar
modificaciones de estos compuestos principales. La modificación
estructural adecuada de las estructuras principales iniciales puede
proporcionar derivados con actividad muy mejorada. Como un ejemplo,
algunos de los presentes inventores aislaron e identificaron la
suksdorfina como un compuesto anti-HIV a partir de
Lomatium suksdorfii. Modificaciones subsiguientes de la
suksdorfina daban
3',4'-di-O-(-)-canfanoil-(+)-cis-kelactona
(DCK), compuesto que ha demostrado una actividad inhibidora
extremadamente potente contra la replicación de HIV en células
linfocíticas H9 con un valor de EC_{50} de 0,0004 \muM y un
valor del índice terapéutico (T.I.) de 136.719.
Previamente, se aislaron ácido betulínico y ácido
platánico como principios anti-HIV de Syzigium
claviflorum. El ácido betulínico (1) y el ácido platánico (12)
exhibían actividad inhibidora contra la replicación de
HIV-1 en células linfocíticas H9 con valores de
EC_{50} de 1,4 \muM y 6,5 \muM, respectivamente, y valores
del T.I. de 9,3 y 14, respectivamente. La hidrogenación de ácido
betulínico daba ácido dihidrobetulínico (6), que mostraba una
actividad anti-HIV ligeramente más potente con un
valor del EC_{50} de 0,9 y un valor del T.I. de 14. Basándose en
estos hallazgos, se ha llevado a cabo la modificación de estos
compuestos principales, ácido betulínico y ácido dihidrobetulínico,
y ha conducido al descubrimiento de potentes agentes
anti-HIV adicionales.
Un número de triterpenoides, incluyendo el ácido
betulínico, tiene varias aplicaciones médicas conocidas, incluyendo
el uso como un fármaco anticancerígeno. Anderson y otros, en WO
95/04526, analizan derivados de triterpenoides que se han usado en
la terapia del cáncer, incluyéndose actividad contra poliaminas que
son requeridas por las células para crecer a una velocidad óptima.
Se ha encontrado que algunos de estos triterpenoides interfieren con
la síntesis enzimática de poliaminas requeridas para el crecimiento
celular óptimo, y así inhiben el crecimiento de células
cancerígenas, particularmente inhibiendo ornitina descarboxilasa.
También se ha presentado que el ácido betulínico posee actividad
antiinflamatoria, que puede deberse a su capacidad para inhibir
enzimas implicadas en la biosíntesis de leucotrienos, incluyendo
5-lipoxigenasa.
Chan, en la Patente Británica 1.415.601, describe
que pueden incluirse derivados de ácido dihidrobetulínico en
composiciones farmacéuticas, pero no hay ninguna sugerencia en
cuanto a qué uso tienen estos compuestos.
T. Fujioke y otros en "Journal of Natural
Products", 1994, vol. 57, m. 2, páginas 243-247,
describen derivados de ácido betulínico como agentes
anti-SIDA;
EP 0 542 622 describe composiciones farmacéuticas
que tratan de derivados de lupano;
H. Otsuka y otros, en "Chem. Pharm. Bull.",
1981, vol. 29, m. 11, páginas 3099-3104, describen
derivados de ácido betulínico adicionales.
Se ha encontrado que los derivados acílicos de
ácido betulínico de acuerdo con la presente invención tienen
potente actividad anti-HIV. Los grupos hidroxi en
el carbono 3, ácido carboxílico en el carbono 17 y exometileno en el
carbono 20 en el ácido betulínico pueden modificarse fácilmente. Se
ha encontrado que introducir un grupo acilo substituido o no
substituido de 2 a 20 átomos de carbono en el grupo hidroxi en el
carbono 3 del ácido betulínico puede ser fácilmente eficaz para
producir los correspondientes derivados
3-O-acílicos. Así, el ácido
betulínico se trató con anhídrido
3,3-dimetilglutárico o anhídrido diglicólido en
piridina en presencia de dimetilaminopiridina para producir los
derivados 3-O-acílicos (4, 5)
correspondientes. En contraste, un tratamiento similar del ácido
betulínico con anhídrido dimetilsuccínico producía una mezcla de
3-O-(2',2'-dimetilsuccinilo) y ácido
3-O-(3',3'-dimetilsuccinil)betulínico
(2 y 3). La mezcla se separó satisfactoriamente mediante HPLC a
escala preparativa que daba muestras puras. Las estructuras de
estos isómeros se asignaron mediante exámenes de COSY de
^{1}H-^{13}C de intervalo largo.
Los compuestos de la presente invención tienen la
siguiente fórmula:
donde R puede ser un grupo mono- o
di-carboxiacilo, substituido o no substituido, de 2
a 20 átomos de carbono y R' puede ser H o un grupo alquilo
substituido o no substituido de 2 a 10 átomos de carbono o arilo,
tal como acetilo, bencilo,
etc.
De particular interés son los compuestos de la
fórmula:
Los ensayos anti-HIV indicaban
que el ácido
3-O-(3',3'-dimetilsuccinil)betulínico
(3) demostraba una actividad anti-HIV extremadamente
potente en linfocitos H9 infectados agudamente con valores del
EC_{50} de menos de 1,7 x 10^{-5} \muM. Este compuesto exhibía
valores del T.I. notables de más de 970.000 y más de 400.000. En
contraste, el compuesto 2, el isómero
2',2'-dimetílico, mostraba actividades
anti-HIV con valores del EC_{50} de 2,7 y valores
del T.I. de 5,9 que eran significativamente inferiores que los de
3. Los compuestos 4, 5 también exhibían potentes actividades
anti-HIV con EC_{50} que variaba de 0,01 a 2,3 x
10^{-3} \muM y valores del T.I. de 1172 a 1974.
Los grupos acilo en el carbono 3 de los
compuestos más activos tienen grupos dimetilo u oxígeno en la
posición del carbono 3. Puesto que los pares aislados del oxígeno
en el grupo diglicoílo podrían corresponder a los grupos dimetilo en
el carbono 3, en los grupos dimetilsuccinilo o dimetilglutarilo,
estos tres grupos acilo son estructuralmente similares entre sí.
Esta observación sugiere que el tipo de grupo acilo podría ser
importante para la actividad anti-HIV mejorada.
Como un mecanismo de estudio de acción, se
investigó la actividad inhibidora de los compuestos
1-5 contra tanscriptasa inversa de
HIV-1. Los compuestos probados no exhibían
actividad de transcriptasa inversa de HIV a una concentración de 100
\mug/\mul. Recientemente, otros derivados de ácido betulínico,
por ejemplo RPR103600, se han presentado como agentes
anti-HIV. Se mostraba que inhibían la fusión de la
membrana inducida por HIV. Por lo tanto, los compuestos
1-5 también se evaluaron con respecto a la
actividad inhibidora contra la fusión de la membrana inducida por
HIV. Los compuestos 2-5 inhibían la formación de
sincitios en un intervalo de concentración 20-40
\mug/ml, sugiriendo que un efecto inhibidor contra la fusión de
membrana inducida por HIV podría estar implicado en su mecanismo de
acción. Sin embargo, la actividad anti-HIV del
compuesto 3 es 540.000 veces mayor que la del compuesto 2, aunque
estos compuestos inhibían la formación de sincitios a la misma
concentración. Se presentó que el compuesto RPR103611 inhibía la
formación de sincitios a 3 \mug/ml y para este propósito era
aproximadamente 10 veces más potente que los compuestos
2-5 en este ensayo. Sin embargo, la línea celular
usada para ensayar los compuestos de la presente invención, CEM4,
era diferente de la línea celular usada en la literatura, H9. Las
actividades anti-HIV del compuesto 3 en células H9 y
PMBCs eran aproximadamente de 10 a 1000 veces mayores que las de
RPR103611 presentadas en la literatura. Esta observación indicaba
que al menos otro mecanismo de acción distinto a la inhibición de la
formación de sincitios podría estar implicado en la actividad
anti-HIV mostrada por estos compuestos.
La invención también se dirige a al menos uno de
los derivados de ácido betulínico, opcionalmente en combinación con
uno cualquiera o más de los agentes terapéuticos
anti-SIDA conocidos o un inmunoestimulante para usar
en el tratamiento de un sujeto infectado con
HIV-1.
La presente invención también incluye un
conjugado de un derivado de ácido betulínico para usar según se
describe previamente con CD4 soluble, derivados de CD4, anticuerpos
específicos para CD4 o glicoproteínas codificadas por HIV tales
como gp120 y gp41, o anticuerpos para las mismas.
Otras características, ventajas, modalidades,
aspectos y objetivos de la presente invención estarán claros para
los expertos en las áreas de la técnica pertinente, basándose en la
descripción, las enseñanzas y la guía presentadas aquí.
Se ha descubierto inesperadamente que los
compuestos de la presente invención tienen actividad
anti-retroviral, proporcionando así compuestos y
composiciones adecuados para tratar infecciones retrovirales,
opcionalmente con ingredientes farmacéuticamente activos
adicionales, tales como compuestos
anti-retrovirales, anti-HIV y/o
inmunoestimulantes o anticuerpos antivirales o fragmentos de los
mismos.
Por el término "actividad
anti-retroviral" o "actividad
anti-HIV" se entiende la capacidad para inhibir
al menos uno de:
(1) unión retroviral a células;
(2) entrada viral en células;
(3) metabolismo celular que permite la
replicación viral;
(4) inhibición o extensión intercelular del
virus;
(5) síntesis y/o expresión celular de antígenos
virales;
(6) actividad de enzimas codificadas por virus
(tales como transcriptasa inversa y proteasa); y/o
(7) cualesquiera acciones patógenas retrovirales
o de HIV conocidas, tales como, por ejemplo, la inmunosupresión.
Así, cualquier actividad que tienda a inhibir cualquiera de estos
mecanismos es "actividad anti-retroviral" o
"actividad anti-HIV".
Un derivado de ácido betulínico de la presente
invención puede usarse para el tratamiento de una infección
retroviral (por ejemplo, HIV) solo o en combinación con otros modos
de terapia conocidos en la técnica. Tales modos de terapia pueden
incluir quimioterapia con fármacos tales como, pero no limitados a,
al menos uno de AZT, ddC, ddA, ddT, ddI o cualesquiera otros
fármacos o anticuerpos anti-retrovirales en
combinación entre sí, o asociados con un agente terapéutico basado
biológicamente, tal como, por ejemplo, CD4 soluble, anticuerpos para
CD4 y conjugados de CD4 o anti-CD4, o según se
presenta adicionalmente aquí.
Debido a que los derivados de ácido betulínico de
la presente invención son relativamente menos tóxicos o
substancialmente atóxicos para células normales, su utilidad no
está limitada al tratamiento de infecciones retrovirales
establecidas. Por ejemplo, un derivado de ácido betulínico de
acuerdo con la presente invención puede usarse para tratar
productos sanguíneos, tales como los mantenidos en bancos de sangre.
El suministro de sangre de una nación se prueba actualmente con
respecto a anticuerpos para HIV. Sin embargo, la prueba todavía es
imperfecta y las muestras que dan pruebas negativas todavía pueden
contener virus HIV. Tratar la sangre y los productos sanguíneos con
los derivados de ácido betulínico de la presente invención puede
añadir un margen de seguridad adicional destruyendo cualquier
retrovirus que pueda haber quedado sin detectar.
Las composiciones farmacéuticas de la presente
invención pueden comprender al menos uno de los derivados de ácido
betulínico. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la
presente invención también pueden comprender adicionalmente otros
agentes anti-virales tales como, pero no limitados
a, AZT, ddI,
2'-\beta-fluoro-ddI,
ddA, ddG, ddC,
2'-\beta-fluoro-ddC,
d4T, AzddU, fosfonilmetoxietiladenina o CD4 soluble o
inmunomoduladores, por ejemplo, según se presenta más adelante. Para
una revisión de los agentes terapéuticos en infecciones por HIV,
véase Mitsuya H. y otros, FASEB J. 5:
2369-2381 (1991), referencia que se incorpora por la
presente mediante referencia.
Agentes antivirales adecuados adicionales para
uso óptimo con un derivado de ácido betulínico de la presente
invención pueden incluir, pero no se limitan a,
AL-721 (mezcla de lípidos) fabricada por Ethigen
Corporation and Matrix Research Laboratories; Amphotericin B methyl
ester; Ampligen (RNA desapareado) desarrollado por DuPont HEM
Research; anticuerpo anti-SIDA (Nisshon Food) 1
AS-101 (inmunoestimulante basado en metal pesado);
AZT (azidotimidina/Retrovir/Zidobudine) fabricado por Burroughs
Wellcome; Betaseron (\beta-interferón), fabricado
por Triton Biosciences (Shell Oil); hidroxitolueno butilado;
Carrosyn (polimanoacetato); Castanospermine; Contracan (derivado de
ácido esteárico); Creme Pharmatex (que contiene cloruro de
benzalconio) fabricado por Pharmelac; CS-87
(derivado no substituido en 5 de Zidovudine); Cytovene (ganciclovir)
fabricado por Syntex Corporation; ddC (didesoxicitidina) fabricada
por Hoffman-La Roche y otros análogos nucleosídicos;
sulfato de dextrano; D-penicilamina
(3-mercapto-D-valina)
fabricada por Carter-Wallace and Degussa
Pharmaceutical; Foscarnet (fosfonoformiato trisódico) fabricado por
Astra AB; ácido fusídico fabricado por Leo Lovens; glicirricina (un
constituyente de la raíz de regaliz); HPA-23
(21-tungsto-9-antimoniato
amónico) fabricado por Rhone-Poulenc Santé; agente
antiviral de virus inmune humano desarrollado por Porton Products
Internacional; Ornidyl (eflornitina) fabricado por
Merrell-Dow; nonoxinol; isetionato de pentamidina
(PENTAM-300) fabricado por Lipho Med; Peptide T
(secuencia octapeptídica) fabricado por Peninsula Laboratories;
Phenytoin (Warner-Lambert); Ribavirin; Rifabutin
(ansamicina) fabricada por Adria Laboratories; rsT4 (T4 soluble
recombinante) fabricada por Biogen, Genetech and Smith, Kline
Beecham; Trimetrexate fabricado por Warner-Lambert
Company; SK-818 (agente antiviral derivado de
germanio) fabricado por Sanwa Kagahu; suramina y análogos de la
misma fabricados por Miles Pharmaceuticals, UA001 fabricado por
Ueno Fine Chemicals Industry; Wellferon
(\alpha-interferón) fabricado por Borroughs
Wellcome; Zovirex (aciclovir, AZT), fabricado por Burroughs
Wellcome.
Las composiciones farmacéuticas de la presente
invención también pueden comprender inmunomoduladores.
Imunomoduladores adecuados para el uso óptimo con un derivado de
ácido betulínico de la presente invención de acuerdo con la
presente invención pueden incluir, pero no se limitan a: ABPP
(Bropririmine): Ampligen (RNA desapareado) DuPont/HEM Research);
anticuerpo anti-interferón \alpha humano (Advance
Biotherapy and Concepts); anticuerpo anti-SIDA
(Nisshon Food); AS-101 (imunoestimulante basado en
metal pesado); ácido ascórbico y derivados del mismo;
interferón-\beta; Carrosyn (polimanoacetato);
Ciamexon (Boehringer-Mannheim); ciclosporina;
cimetidina; CL-246.738 (American Cyanamide);
factores estimulantes de colonias, incluyendo GM-CSF
(Sandoz; Genetics Institute); dinitroclorobenceno;
interferón-\alpha;
interferón-gamma; glucano; gammaglobulina hiperimune
(Bayer); IMREG-1 (dializado de leucocitos) e
IMREG-2 (IMREG Corp.); inmutiol (dietiltiocarbamato
sódico) (Institut Merieux); interleuquina 1 o interleuquina 2
(Cetus Corporation; Hoffman-LaRoche; Immunex);
isoprinosina (inosina pranobex); Krestin(Sankyo);
LC-9018 (Yakult); lentinano (Ajinomoto/Yamanouchi);
LF-1695 (Fournier),
metionina-encefalina (TNI Pharmaceuticals; Sigma
Chemicals); Minophagen C; tripéptido muramílico,
MTP-PE (Ciba-Geigy); naltrexona
("Trexan" DuPont); Neutropin, inmunomodulador de RNA (Nippon
Shingaku); shosaikoto y ginseng; factor humoral tímico;
TP-05 (Thymopentin, Ortho Pharmaceuticals); Thymosin
factor 5 y Thymosin 1; Thymostimulin; TNF (Factor de necrosis
tumoral)fabricado por Genentech; y preparaciones de vitamina
B.
El sujeto animal preferido de la presente
invención es un mamífero. Por el término "mamífero" se
entiende un individuo perteneciente a la clase Mammalia. La
invención es particularmente útil en el tratamiento de pacientes
humanos.
El término "tratar" significa administrar a
sujetos un derivado de ácido betulínico o ácido dihidrobetulínico
con propósitos que pueden incluir la prevención, la mejora o la
cura de una patología relacionada con retrovirus.
Se considera que los medicamentos se proporcionan
"en combinación" entre sí si se proporcionan al paciente
simultáneamente o si el tiempo entre la administración de cada
medicamento es tal que permite un solapamiento de la actividad
biológica.
En una modalidad preferida, al menos un derivado
de ácido betulínico comprende una sola composición
farmacéutica.
Composiciones farmacéuticas para la
administración de acuerdo con la presente invención pueden
comprender al menos un derivado de ácido betulínico de acuerdo la
presente invención en una forma farmacéuticamente aceptable
opcionalmente combinado con un portador farmacéuticamente aceptable.
Estas composiciones pueden administrarse mediante cualquier medio
que alcance sus propósitos pretendidos. Las cantidades y los
regímenes para la administración de un derivado de ácido betulínico
de acuerdo con la presente invención pueden ser determinados
fácilmente por los expertos normales en la técnica clínica del
tratamiento de una patología retroviral.
Por ejemplo, la administración puede ser mediante
ruta parenteral, tal como subcutánea, intravenosa, intramuscular,
intraperitoneal, transdérmica o bucal. Alternativamente, o
simultáneamente, la administración puede ser mediante la ruta oral.
La dosificación administrada depende de la edad, la salud y el peso
del receptor, el tipo de tratamiento previo o simultáneo, si lo
hay, la frecuencia del tratamiento y la naturaleza del efecto
deseado.
Las composiciones dentro del alcance de esta
invención incluyen todas las composiciones que comprenden al menos
un derivado de ácido betulínico de acuerdo con la presente
invención en una cantidad eficaz para alcanzar su propósito
pretendido. Aunque las necesidades individuales varían, la
determinación de intervalos óptimos de cantidades eficaces de cada
componente está dentro de la experiencia de la técnica.
Dosificaciones típicas comprenden de aproximadamente 0,1 a
aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal. Las dosificaciones
preferidas comprenden de aproximadamente 1 a aproximadamente 100
mg/kg de peso corporal del ingrediente activo. Las dosificaciones
más preferidas comprenden de aproximadamente 10 a aproximadamente
100 mg/kg de peso corporal.
La administración terapéutica también puede
incluir administración previa, simultánea, subsiguiente o adjunta
de al menos un derivado de ácido betulínico adicional de acuerdo
con la presente invención u otro agente terapéutico, tal como un
agente antiviral o inmunoestimulante. En tal sistema, la
dosificación del segundo fármaco puede ser preferiblemente la misma
que o diferente de la dosificación del primer agente terapéutico.
Preferiblemente, los fármacos se administran en días alternos en
las cantidades recomendadas de cada fármaco.
La administración de un compuesto de la presente
invención también puede incluir opcionalmente terapia previa,
simultánea, subsiguiente o adjunta usando reforzadores del sistema
inmunitario o imunomoduladores. Además de los compuestos
farmacológicamente activos, una composición farmacéutica de la
presente invención también puede contener portadores
farmacéuticamente aceptables adecuados que comprenden excipientes y
adyuvantes que facilitan el procesamiento de los compuestos activos
en preparaciones que pueden usarse farmacéuticamente.
Preferiblemente, las preparaciones, particularmente las
preparaciones que pueden administrarse oralmente y que pueden usarse
para el tipo de administración preferido, tales como tabletas,
grageas y cápsulas, y también preparaciones que pueden
administrarse rectalmente, tales como supositorios, así como
soluciones adecuadas para la administración mediante inyección u
oralmente, contienen de aproximadamente 0,01 a 99 por ciento,
preferiblemente de aproximadamente 20 a 75 por ciento de compuesto o
compuestos activos, junto con el excipiente.
Las preparaciones farmacéuticas de la presente
invención se fabrican de una manera que es conocida de por sí, por
ejemplo, por medio de procedimientos de mezcladura, granulación,
elaboración de grageas, disolución o liofilización convencionales.
Así, pueden usarse preparaciones farmacéuticas para uso oral
combinando los compuestos activos con excipientes sólidos,
opcionalmente triturando la mezcla resultante y procesando la
mezcla de gránulos, después de añadir adyuvantes adecuados, si se
desea o es necesario, para obtener tabletas o núcleos de gragea.
Excipientes adecuados son, por ejemplo, cargas
tales como un sacárido, por ejemplo, lactosa o sacarosa, manitol o
sorbitol; preparaciones de celulosa y/o fosfatos cálcicos, tales
como fosfato tricálcico o hidrogenofosfato cálcico; así como
aglutinantes tales como pasta de almidón, usando, por ejemplo,
almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de
patata, gelatina, tragacanto, metilcelulosa,
hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica y/o
polivinilpirrolidona. Si se desea, pueden añadirse agentes
desintegrantes tales como los almidones mencionados previamente y
también carboximetilalmidón, polivinilpirrolidona reticulada, agar o
ácido algínico o una sal de mismo, tal como alginato sódico. Los
adyuvantes son, sobre todo, agentes reguladores del flujo y
lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico o sales
del mismo, tales como estearato magnésico o estearato cálcico, y/o
polietilenglicol. Los núcleos de gragea se proveen de revestimientos
adecuados, que, si se desea, son resistentes a los jugos gástricos.
Para este propósito, pueden usarse soluciones de sacárido
concentradas, que pueden contener opcionalmente goma arábiga, talco,
polivinilpirrolidona, polietilenglicol y/o dióxido de titanio,
soluciones de laca y disolventes orgánicos o mezclas de disolventes
orgánicos adecuados. Para producir revestimientos resistentes a los
jugos gástricos, se usan soluciones de preparaciones de celulosa
adecuadas tales como ftalato de acetilcelulosa o ftalato de
hidroxipropilmetilcelulosa. Pueden añadirse colorantes o pigmentos
a las tabletas o los revestimientos de gragea, por ejemplo, para la
identificación o para caracterizar combinaciones de dosis de
compuestos activos.
Otras preparaciones farmacéuticas que pueden
usarse oralmente incluyen cápsulas de ajuste a presión hechas de
gelatina, así como cápsulas selladas blandas hechas de gelatina y
un plastificante tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de
ajuste a presión pueden contener los compuestos activos en la forma
de gránulos que pueden mezclarse con cargas, tales como lactosa,
aglutinantes, tales como almidones, y/o lubricantes, tales como
talco o estearato magnésico, y, opcionalmente, estabilizantes. En
las cápsulas blandas, los compuestos activos se disuelven o
suspenden preferiblemente en líquidos adecuados, tales como aceites
grasos o parafina líquida. Además, pueden añadirse
estabilizantes.
Preparaciones farmacéuticas posibles que pueden
usarse rectalmente incluyen, por ejemplo, supositorios que
consisten en una combinación de los compuestos activos con una base
para supositorios. Bases para supositorios adecuadas son, por
ejemplo, triglicéridos naturales o sintéticos o hidrocarburos
parafínicos. Además, también es posible usar cápsulas rectales de
gelatina que consisten en una combinación de los compuestos activos
con una base. Posibles materiales de base incluyen, por ejemplo,
triglicéridos líquidos, polietilenglicoles o hidrocarburos
parafínicos.
Formulaciones adecuadas para la administración
parenteral incluyen soluciones acuosas de los compuestos activos en
forma soluble en agua, por ejemplo sales solubles en agua. Además,
pueden administrarse suspensiones de los compuestos activos como
suspensiones para inyección oleosas apropiadas. Disolventes o
vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos, tales como
aceite de sésamo, o ésteres de ácido graso sintéticos, tales como
oleato de etilo o triglicéridos. Suspensiones acuosas para
inyección que pueden contener substancias que incrementan la
viscosidad de la suspensión incluyen, por ejemplo,
carboximetilcelulosa sódica, sorbitol y/o dextrano. Opcionalmente,
la suspensión también puede contener estabilizantes.
Una formulación farmacéutica para la
administración sistémica de acuerdo con la invención puede
formularse para la administración enteral, parenteral o tópica. En
efecto, los tres tipos de formulación pueden usarse simultáneamente
para alcanzar la administración sistémica del ingrediente
activo.
Formulaciones adecuadas para la administración
oral incluyen cápsulas de gelatina duras o blandas, grageas,
píldoras, tabletas, incluyendo tabletas revestidas, elixires,
suspensiones, jarabes o inhalaciones y formas de liberación
controlada de las mismas.
Formas de dosificación sólidas además de las
formuladas para la administración oral incluyen supositorios
rectales.
Los derivados de ácido betulínico de la presente
invención también pueden administrarse en la forma de un implante
cuando se combinan con un portador de liberación lenta
biodegradable. Alternativamente, los derivados de ácido betulínico
de la presente invención pueden formularse como un parche
transdérmico para la liberación continua del ingrediente activo.
Formulaciones adecuadas para la administración
tópica incluyen cremas, geles, gelatinas, mucílagos, pastas y
pomadas. Soluciones inyectables adecuadas incluyen soluciones
inyectables intravenosas, subcutáneas e intramusculares.
Alternativamente, los derivados de ácido betulínico pueden
administrarse en la forma de una solución para infusión o como una
inhalación nasal o un aerosol.
Habiendo ahora descrito generalmente la
invención, la misma se entenderá más fácilmente a través de la
referencia a lo siguiente:
Los derivados de ácido betulínico de la presente
invención se sintetizaron todos sometiendo a reflujo una solución
de ácido betulínico (1), dimetilaminopiridina (1
equivalente-mol) y un anhídrido apropiado
(2,5-10 equivalentes-mol) en
piridina anhidra (5-10 ml). La mezcla de reacción se
diluyó a continuación con agua de hielo y se extrajo con
CHCl_{3}. La capa orgánica se lavó con agua, se secó sobre
MgSO_{4} y se concentró bajo presión reducida. El residuo se
cromatografió usando columna de gel de sílice o HPLC a escala
semipreparativa para dar el producto.
Se preparó ácido
3-O-(2',2'-dimetilsuccinil)betulínico
(2) como previamente usando una solución de ácido betulínico,
dimetilaminopiridina y anhídrido dimetilsuccínico en piridina
anhidra. El rendimiento era 3,1%. La cristalización en metanol daba
agujas incoloras, punto de fusión 279-280ºC;
[\alpha]_{D}^{19} + 36,2º [c=0,35,
CHCl_{3}-MeOH (1:1)]; FABMS positivo m/z 585
(M+H)^{+}; FABMS negativo m/z 583
(M-H)^{-}; HR-FABMS
calculado para C_{36}H_{57}O_{6} 585,4155, encontrado m/z
585,4156; ^{1}H NMR (piridina-d_{5}): 0,75,
0,93, 1,03 (x2), 1,06 (cada 3H, s; 4-(CH_{3})_{2},
8-CH_{3}, 10-CH_{3},
14-CH_{3}), 1,49 (6H,
2,2'-CH_{3}x_{2}), 1,80 (3H, s,
20-CH_{3}), 2,94 (2H, s, H2-3'),
3,55 (1H, m, H-19), 4,77 (1H, dd, J=5, 11,5 Hz,
H-3), 4,79, 4,95 (cada 1H, s ancho,
H-30).
Rendimiento 70% (partiendo de 542 mg de 1); la
cristalización en MeOH daba agujas incoloras; pf
274-276ºC;
[\alpha]_{D}^{19} + 23,5º (c=0,71), CHCl_{3}-MeOH (1:1)]; FABMS positivos m/z 585 (M+H)^{+}; FABMS negativos m/z 583 (M-H)^{-};
HR-FABMS calculado para C_{36}H_{57}O_{6} 585,4155, encontrado m/z 585,4161; ^{1}H NMR (piridina-d_{5}): 0,73, 0,92, 0,97, 1,01, 1,05 (cada 3H, s; 4-(CH_{3})_{2}, 8-CH_{3}, 10-CH_{3}, 14-CH_{3}), 1,55 (6H, s, 3'-CH_{3} x 2), 1,80 (3H, s, 20-CH_{3}), 2,89, 2,97 (cada 1H, d, J=15,5 Hz, H-2'), 3,53 (1H, m, H-19), 4,76 (1H, dd, J=5,0, 11,5 Hz, H-3), 4,78, 4,95 (cada 1H, s ancho, H-30).
[\alpha]_{D}^{19} + 23,5º (c=0,71), CHCl_{3}-MeOH (1:1)]; FABMS positivos m/z 585 (M+H)^{+}; FABMS negativos m/z 583 (M-H)^{-};
HR-FABMS calculado para C_{36}H_{57}O_{6} 585,4155, encontrado m/z 585,4161; ^{1}H NMR (piridina-d_{5}): 0,73, 0,92, 0,97, 1,01, 1,05 (cada 3H, s; 4-(CH_{3})_{2}, 8-CH_{3}, 10-CH_{3}, 14-CH_{3}), 1,55 (6H, s, 3'-CH_{3} x 2), 1,80 (3H, s, 20-CH_{3}), 2,89, 2,97 (cada 1H, d, J=15,5 Hz, H-2'), 3,53 (1H, m, H-19), 4,76 (1H, dd, J=5,0, 11,5 Hz, H-3), 4,78, 4,95 (cada 1H, s ancho, H-30).
Rendimiento 59,50% (partiendo de 51,3 mg de 2);
la cristalización en MeOH-H_{2}O daba agujas
incoloras; pf 214-215ºC;
[\alpha]_{D}^{19} + 9,8º (c=1,2,
CHCl_{3}-MeOH [1:1]); ^{1}H NMR
(piridina-d_{5}): 0,77, 0,91, 0,95, 1,03, 1,07,
1,80 (cada 3H, s; 4-(CH_{3})_{2},
8-CH_{3}, 10-CH_{3},
14-CH_{3}, 20-CH_{3}), 4,73 (1H,
dd, J=4,5, 11,5 Hz, H-3), 4,78, 4,95 (cada 1H, s
ancho; H-30). Análisis Calculado para
C_{37}H_{58}O_{6}\cdot4H_{2}O: C 66,24, H 9,92;
encontrado C 65,91, H 9,76.
Rendimiento 84,7% (partiendo de 49,6 mg de 1); un
polvo amorfo; [\alpha]_{D}^{20} + 2,1º (c=1,1,
CHCl_{3}-MeOH [1:1]);
^{1}H NMR (metanol-d_{4}-CDCl_{3} [1:1]): 0,85, 0,88 (x 2), 0,97, 1,00 (cada 3H, s; 4-(CH_{3})_{2} 8-CH_{3}, 10-CH_{3}, 14-CH_{3}),1,69 (20, CH_{3}), 4,21, 4,23 (cada 2H, s; HZ-2' y 4'), 4,65-475 (1H, s ancho, H-3), 4,60, 4,73 (cada 1H, s ancho, H-30). Análisis Calculado para C_{34}H_{52}O_{7}\cdot4H_{2}O: C 69,12, H 9,21; encontrado C 69,60, H 9,03.
^{1}H NMR (metanol-d_{4}-CDCl_{3} [1:1]): 0,85, 0,88 (x 2), 0,97, 1,00 (cada 3H, s; 4-(CH_{3})_{2} 8-CH_{3}, 10-CH_{3}, 14-CH_{3}),1,69 (20, CH_{3}), 4,21, 4,23 (cada 2H, s; HZ-2' y 4'), 4,65-475 (1H, s ancho, H-3), 4,60, 4,73 (cada 1H, s ancho, H-30). Análisis Calculado para C_{34}H_{52}O_{7}\cdot4H_{2}O: C 69,12, H 9,21; encontrado C 69,60, H 9,03.
La línea de células T, H9, y la línea de células
promonocíticas, U937, se mantuvieron separadamente en cultivo
continuo con medio completo (RPMI 1640 con suero de ternero fetal
al 10%) a 5% de CO_{2} y 37ºC. Las líneas celulares se usaron en
experimentos solo cuando estaban en la fase logarítmica de
crecimiento; mientras que células mononucleares de sangre periférica
(PBMCs) no infectadas se estimularon en primer lugar con PHA (1
\mug/ml) durante 3 días. Todas las dianas celulares se incubaron
con HIV-1 (aislado IIIB, TCID_{50} 10^{4}
UI/ml, a una multiplicidad de infección de 0,01-0,01
UI/célula) durante 1 hora a 37ºC y 5% de CO_{2}. Las líneas
celulares y las PBMCs se lavaron a fondo para retirar viriones no
adsorbidos y se resuspendieron a 4 x 10^{5} células/ml en medio
completo o medio completo con 10% v/v de interleuquina 2
(IL-2), respectivamente. Partes alícuotas de 1 ml se
pusieron en pocillos de placas de cultivo de 24 pocillos que
contenían un volumen igual de compuestos de prueba (diluidos en el
medio de cultivo apropiado). La toxicidad de cada compuesto se
evaluó determinando el número de células no infectadas expuestas a
compuesto que permanecía después de 4 días a 37ºC y 5% de CO_{2}.
Se usó un ensayo de ELISA de antígeno p24 para determinar los
niveles de virus liberados en el medio de los cultivos infectados
con HIV. El ensayo del antígeno p24 usaba un anticuerpo monoclonal
específico anti-p24 de HIV-1 como el
anticuerpo de captura revestido sobre placas de 96 pocillos. Después
de un período de incubación de la muestra, se usó suero de conejo
que contenía anticuerpos para p24 de HIV-1 para
etiquetar cualquier p24 "capturado": sobre la superficie de los
pocillos de microvaloración. Se usa a continuación anti-(suero de
conejo) de cabra conjugado a peroxidasa para etiquetar anticuerpos
de conejo específicos para p24 de HIV-1 que se
habían complejado con p24 capturado. La presencia de p24 en las
muestras de prueba se reveló a continuación mediante la adición de
substrato. El corte para el ensayo de ELISA de p24 era 12,5 pg/ml.
Se cuantificó p24 en el medio de cultivo frente una curva estándar
que contenía cantidades conocidas de p24. Se determinaron las
concentraciones eficaz (EC_{50}) e inhibidora (IC_{50}) (para
la actividad anti-HIV y la citotoxicidad,
respectivamente).
El microensayo de transcriptasa inversa de
HIV-1 se adaptó a partir de las técnicas descritas
por Groff y otros, J. Virol. 38:239-248
(1981) y Willey y otros, J. Virol.
62:139-147 (1988).
Se mezclaron 10 microlitros de transcriptasa
inversa IIIB de HIV-1 asociada con viriones en
Triton X-100 al 1% con 50 microlitros de un cóctel
de reacción que contenía Tris-HCl 50 mM (pH 7,8),
KCl 75 mM, ditiotreitol 2 mM, MgCl 5 mM, 5 mg/ml de poli (A)
[Pharmacia], 0,25 unidades/ml de oligo(dT) [Pharmacia];
0,05% de Nonidet P40 y 10 mCi/ml de ^{32}P-dTTP en
presencia de diversas concentraciones de compuesto de prueba.
Después de incubar durante 1 hora a 37ºC, se aplicaron 40
microlitros de la mezcla de reacción a una membrana NA 45 de
Schleicher & Schuell saturada con 2 x SSC (NaCl 0,3 M, citrato
sódico 30 mM, pH 7,0) en un Minifold de Schleicher & Schuell
sobre una lámina de papel de filtro GB003. Cada pocillo en el
Minifold se lavó cuatro veces con 2 x SSC. Se realizó una
autorradiografía y la radiactividad se cuantificó con un contador
beta directo Packard Matrix (Meriden, CT)
9600.
9600.
Se realizaron fusiones celulares según se
describe en Matthews y otros, Proc. Natl. Acad Sci. USA
84:5424-5428 (1987). Se incubaron células
MOLT-4 (7 x 10^{4}) con células CEM infectadas
crónicamente con HIV-1_{LAI} (10^{4}) en placas
de fondo plano de media área de 96 pocillos (Costar) en 100
microlitros de medio de cultivo con las mezclas de células a 37ºC
durante 24 horas. Los sincitios multinucleados se enumeraron
mediante examen microscópico de todo el contenido de cada
pocillo.
Los resultados de las pruebas previas se muestran
en la Tabla 1.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se efectuaron pruebas adicionales sobre varios
compuestos de acuerdo con la presente invención para la inhibición
de la replicación de HIV-1 en linfocitos H9 y
PBMCs. Estos resultados se muestran en la Tabla 2.
La descripción precedente de las modalidades
específicas revelará así completamente la naturaleza general de la
invención que otros pueden, aplicando el conocimiento actual,
modificar y/o adaptar fácilmente para diversas aplicaciones tales
modalidades específicas sin apartarse del concepto genérico, y por
lo tanto tales adaptaciones y modificaciones pretenden estar
comprendidas dentro del significado y la gama de equivalentes de
las modalidades descritas. Ha de entenderse que la fraseología o la
terminología presente tiene el propósito de descripción y no de
limitación.
Todas las referencias citadas en esta memoria
descriptiva se incorporan por la presente mediante referencia.
Claims (8)
1. Un compuesto de la fórmula
en la que R se selecciona del grupo
que consiste
en
y R' es uno de hidrógeno, alquilo
substituido o no substituido de 2 a 10 átomos de carbono o
arilo.
2. Una composición farmacéutica que comprende un
compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o un éster, una sal, un
éter, un sulfato o un glucurónido farmacéuticamente aceptable del
mismo y un portador farmacéuticamente aceptable.
3. Una composición farmacéutica de acuerdo con la
reivindicación 2, que comprende además un fármaco seleccionado de un
agente anti-viral o un agente inmunoestimulante.
4. Una composición farmacéutica de acuerdo con la
reivindicación 3, en la que dicho agente antiviral se selecciona del
grupo que consiste en gammaglobulina, amantadina, guanidina,
hidroxibenzimidazol, interferón \alpha, interferón \beta,
interferón \gamma, tiosemicarbazonas, metisazona, rifampina,
ribavirina, análogos de pirimidina, análogos de purina, foscarnet,
ácido fosfonoacético, aciclovir, didesoxinucleósidos y
ganciclovir.
5. Una composición farmacéutica de acuerdo con
cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, para usar en la
inhibición de una infección retroviral en células o tejido de un
animal.
6. Una composición farmacéutica de acuerdo con la
reivindicación 5, en la que dicho animal es un ser humano.
7. Una composición farmacéutica de acuerdo con la
reivindicación 5 ó 6, para usar en el tratamiento de una patología
relacionada con retrovirus.
8. Una composición farmacéutica de acuerdo con
cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, para usar en el
tratamiento de una infección por HIV.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/463,071 US5679828A (en) | 1995-06-05 | 1995-06-05 | Betulinic acid and dihydrobetulinic acid derivatives and uses therefor |
| US463071 | 1995-06-05 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2231818T3 true ES2231818T3 (es) | 2005-05-16 |
Family
ID=23838749
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES96922408T Expired - Lifetime ES2231818T3 (es) | 1995-06-05 | 1996-06-05 | Derivados de acido betulinico y usos para los mismos. |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5679828A (es) |
| EP (2) | EP1397957A2 (es) |
| AT (1) | ATE275823T1 (es) |
| AU (1) | AU6328896A (es) |
| CA (1) | CA2223513C (es) |
| DE (1) | DE69633398T8 (es) |
| DK (1) | DK0857018T3 (es) |
| ES (1) | ES2231818T3 (es) |
| PT (1) | PT857018E (es) |
| WO (1) | WO1996039033A1 (es) |
Families Citing this family (59)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5869535A (en) * | 1995-03-21 | 1999-02-09 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Method and composition for selectively inhibiting melanoma |
| US5962527A (en) * | 1995-03-21 | 1999-10-05 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Method and composition for treating cancers |
| EP0902685A1 (de) * | 1997-01-24 | 1999-03-24 | Marigen S.A. | Ultramikroemulsionen aus spontan dispergierbaren konzentraten enthaltend antitumoral, antiviral und antiparasitär wirksame ester von pentacyclischen triterpenen |
| US5750578A (en) * | 1997-02-11 | 1998-05-12 | Regents Of The University Of Minnesota | Use of betulin and analogs thereof to treat herpesvirus infection |
| DE69825446T2 (de) * | 1997-06-04 | 2005-09-29 | Cornell Research Foundation, Inc. | Betulinolderivate |
| US6228850B1 (en) * | 1997-09-30 | 2001-05-08 | Dabur Research Foundation | Antiangiogenic activity of betulinic acid and its derivatives |
| US6048847A (en) * | 1997-09-30 | 2000-04-11 | Dabur Research Foundation | Use of betulinic acid and its derivatives for inhibiting cancer growth and a method of monitoring this |
| US6670345B1 (en) * | 1997-09-30 | 2003-12-30 | Dabur Research Foundation | Betulinic acid derivatives for inhabiting cancer growth and process for the manufacture of betulinic acid |
| DE69934486T2 (de) * | 1998-03-02 | 2007-10-04 | The University Of North Carolina At Chapel Hill Office Of Technology Development | Acylierte betulin- und dihydrobetulinderivate, ihre herstellung und verwendung |
| US6303589B1 (en) | 1998-12-08 | 2001-10-16 | Micro Flo Company | Pentacyclic triterpenes |
| US6369101B1 (en) | 1999-02-26 | 2002-04-09 | Regents Of The University Of Minnesota | Therapeutic method to treat herpes virus infection |
| US6392070B1 (en) | 1999-08-10 | 2002-05-21 | Regents Of The University Of Minnesota | Birch bark processing and the isolation of natural products from birch bark |
| CA2384433C (en) * | 1999-09-09 | 2007-10-23 | Dabur Research Foundation | Novel betulinic acid derivatives having antiangiogenic activity, processes for producing such derivatives and their use for treating tumor associated angiogenesis |
| EP1476031A1 (en) * | 2001-05-11 | 2004-11-17 | University of Ottawa | Anxiolytic marcgraviaceae compositions containing betulinic acid, betulinic acid derivatives, and methods |
| AU2003278930A1 (en) * | 2002-09-26 | 2004-04-19 | Niigata University Of Pharmacy And Applied Science | Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof |
| US7365221B2 (en) * | 2002-09-26 | 2008-04-29 | Panacos Pharmaceuticals, Inc. | Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof |
| US7537765B2 (en) * | 2003-01-29 | 2009-05-26 | Panacos Pharmaceuticals, Inc. | Inhibition of HIV-1 replication by disruption of the processing of the viral capsid-spacer peptide 1 protein |
| AU2004210162A1 (en) * | 2003-01-29 | 2004-08-19 | Panacos Pharmaceuticals, Inc. | Inhibition of HIV-1 replication by disruption of the processing of the viral capsid-spacer peptide 1 protein |
| US7026305B2 (en) * | 2003-04-14 | 2006-04-11 | Meharry Medical College | Anti-HIV agents with dual sites of action |
| WO2005090380A1 (en) * | 2004-03-17 | 2005-09-29 | Panacos Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceuticals salts of 3-o-(3',3'-dimethylsuccinyl) betulinic acid |
| ZA200608624B (en) * | 2004-03-17 | 2008-05-28 | Panacos Pharmaceuticals Inc | Pharmaceutical salts of 3-0(3',3'-dimethylsuccinyl) betulinic acid |
| WO2005112929A2 (en) * | 2004-05-20 | 2005-12-01 | Cornell Research Foundation, Inc. | Anti-hiv-1 activity of betulinol derivatives |
| AU2005245506A1 (en) * | 2004-05-24 | 2005-12-01 | Panacos Pharmaceuticals, Inc. | Disruption of the processing of the viral capsid-spacer peptide 1 protein |
| WO2006031756A2 (en) | 2004-09-10 | 2006-03-23 | Cornell Research Foundation, Inc | Betulinol derivatives as anti-cancer agents |
| TW200628161A (en) * | 2004-11-12 | 2006-08-16 | Panacos Pharmaceuticals Inc | Novel betulin derivatives, preparation thereof and use thereof |
| AU2006235486A1 (en) * | 2005-04-12 | 2006-10-19 | Panacos Pharmaceuticals, Inc. | Polymorphs of 3-o-(3',3'-dimethylsuccinyl) betulinic acid di-N-methyl-D-glucamine |
| KR20080017334A (ko) * | 2005-06-22 | 2008-02-26 | 미리어드 제네틱스, 인크. | 항바이러스 화합물 |
| CA2633402A1 (en) * | 2005-12-16 | 2007-07-12 | Panacos Pharmaceuticals, Inc. | Preparation of pharmaceutical salts of 3-o-(3',3'-dimethlsuccinyl) betulinic acid |
| WO2007114978A2 (en) * | 2006-02-09 | 2007-10-11 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Method for treating hiv infection through co-administration of tipranavir and pa-457 |
| WO2007112043A2 (en) * | 2006-03-23 | 2007-10-04 | Advanced Life Sciences Inc. | Synthetic pentacyclic triterpenoids and derivatives of betulinic acid and betulin |
| US20080039428A1 (en) * | 2006-06-29 | 2008-02-14 | Panacos Pharmaceuticals, Inc. | Antiretroviral combination therapy |
| WO2008115281A2 (en) * | 2006-10-16 | 2008-09-25 | Myriad Genetics, Inc. | Compounds for treating viral infections |
| US9505800B2 (en) | 2006-11-03 | 2016-11-29 | Myrexis, Inc. | Extended triterpene derivatives |
| US20110152229A1 (en) * | 2006-11-22 | 2011-06-23 | Duke University | Betulinic acid derivatives as anti-hiv agents |
| US9067966B2 (en) | 2009-07-14 | 2015-06-30 | Hetero Research Foundation, Hetero Drugs Ltd. | Lupeol-type triterpene derivatives as antivirals |
| JP5752789B2 (ja) * | 2010-06-04 | 2015-07-22 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ | Ｈｉｖ成熟阻害剤としての修飾ｃ−３ベツリン酸誘導体 |
| JP5755731B2 (ja) | 2010-06-04 | 2015-07-29 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ | Ｈｉｖ成熟阻害剤としての修飾ｃ−３ベツリン酸誘導体のｃ−２８アミド |
| RU2448115C1 (ru) * | 2010-12-20 | 2012-04-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Новосибирский национальный исследовательский государственный университет" (Новосибирский государственный университет (НГУ) | Гидрированная бетулоновая кислота и ее амиды как противоопухолевые средства тритерпеновой природы |
| ES2653847T3 (es) | 2011-01-31 | 2018-02-09 | Viiv Healthcare Uk (No. 4) Limited | Triterpenoides C-17 y C-3 modificados con actividad inhibitoria contra maduración del VIH |
| EA023578B1 (ru) | 2011-01-31 | 2016-06-30 | Бристол-Маерс Сквибб Компани | C28-амины c3-модифицированных производных бетулиновой кислоты в качестве ингибиторов созревания вич |
| JP6100786B2 (ja) | 2011-09-21 | 2017-03-22 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ | 抗ウイルス活性を有する新規ベツリン酸誘導体 |
| US8906889B2 (en) | 2012-02-15 | 2014-12-09 | Bristol-Myers Squibb Company | C-3 cycloalkenyl triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity |
| US8889854B2 (en) | 2012-05-07 | 2014-11-18 | Bristol-Myers Squibb Company | C-17 bicyclic amines of triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity |
| CN103768078B (zh) | 2012-10-22 | 2019-02-05 | 北京大学 | 三萜衍生物及其抗流感用途 |
| WO2014105926A1 (en) | 2012-12-31 | 2014-07-03 | Hetero Research Foundation | Novel betulinic acid proline derivatives as hiv inhibitors |
| US20140221361A1 (en) | 2013-02-06 | 2014-08-07 | Bristol-Myers Squibb Company | C-19 modified triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity |
| SG11201506445PA (en) | 2013-02-25 | 2015-09-29 | Bristol Myers Squibb Co | C-3 alkyl and alkenyl modified betulinic acid derivatives useful in the treatment of hiv |
| RS60959B1 (sr) | 2014-04-11 | 2020-11-30 | Viiv Healthcare Uk No 4 Ltd | Triterpenoidi sa inhibitornom aktivnošću na sazrevanje hiv, supstituisani na položaju 3 sa alifatičnim prstenom koji sadrži haloalkil supstituent |
| WO2015195776A1 (en) | 2014-06-19 | 2015-12-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Betulinic acid derivatives with hiv maturation inhibitory activity |
| US20170129916A1 (en) | 2014-06-26 | 2017-05-11 | Hetero Research Foundation | Novel betulinic proline imidazole derivatives as hiv inhibitors |
| RU2017118576A (ru) | 2014-11-14 | 2018-12-14 | ВАЙВ ХЕЛТКЕР ЮКей (N5) ЛИМИТЕД | C-17-арил-замещённые аналоги бетулиновой кислоты |
| CA2967679A1 (en) | 2014-11-14 | 2016-05-19 | VIIV Healthcare UK (No.5) Limited | Oxolupene derivatives |
| MA40886B1 (fr) | 2015-02-09 | 2020-03-31 | Hetero Research Foundation | Nouveau triterpénone en c-3 avec des dérivés d'amide inverse en c-28 en tant qu'inhibiteurs du vih |
| US10370405B2 (en) | 2015-03-16 | 2019-08-06 | Hetero Labs Limited | C-3 novel triterpenone with C-28 amide derivatives as HIV inhibitors |
| PL227790B1 (pl) | 2015-08-13 | 2018-01-31 | Slaski Univ Medyczny W Katowicach | Fosfoniany acetylenowych pochodnych betuliny o działaniu przeciwnowotworowym, sposób ich wytwarzania i zastosowanie. |
| AR107512A1 (es) | 2016-02-04 | 2018-05-09 | VIIV HEALTHCARE UK Nº 5 LTD | Triterpenoides modificados en c-3 y c-17 como inhibidores del vih-1 |
| EP3606532A4 (en) * | 2017-04-06 | 2020-11-18 | Derm-Biome Pharmaceuticals Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS OF TREATING AN INFECTION AND NEW COSMECEUTIC PREPARATIONS |
| PL237998B1 (pl) | 2018-05-28 | 2021-06-28 | Narodowy Inst Lekow | Fosfonowe pochodne kwasu 3-karboksyacylobetulinowego, sposób ich otrzymywania oraz ich zastosowanie |
| EP3796900A4 (en) | 2018-06-29 | 2022-03-30 | DFH Therapeutics | TRITERPENE AMINE DERIVATIVES |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1415601A (en) * | 1973-03-14 | 1975-11-26 | Biorex Laboratories Ltd | Dihydrobetulinic acid derivatives |
| FR2683531B1 (fr) * | 1991-11-13 | 1993-12-31 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux derives du lupane, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent. |
| US5643884A (en) * | 1993-08-09 | 1997-07-01 | Glycomed Incorporated | Lupane triterpenoid derivatives |
-
1995
- 1995-06-05 US US08/463,071 patent/US5679828A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-06-05 AU AU63288/96A patent/AU6328896A/en not_active Abandoned
- 1996-06-05 AT AT96922408T patent/ATE275823T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-06-05 DE DE69633398T patent/DE69633398T8/de active Active
- 1996-06-05 EP EP20030027166 patent/EP1397957A2/en not_active Withdrawn
- 1996-06-05 ES ES96922408T patent/ES2231818T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-05 WO PCT/US1996/009485 patent/WO1996039033A1/en active Search and Examination
- 1996-06-05 PT PT96922408T patent/PT857018E/pt unknown
- 1996-06-05 EP EP96922408A patent/EP0857018B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-05 CA CA002223513A patent/CA2223513C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-05 DK DK96922408T patent/DK0857018T3/da active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1996039033A1 (en) | 1996-12-12 |
| CA2223513C (en) | 2009-03-24 |
| CA2223513A1 (en) | 1996-12-12 |
| US5679828A (en) | 1997-10-21 |
| PT857018E (pt) | 2005-01-31 |
| DE69633398T2 (de) | 2005-09-22 |
| EP1397957A2 (en) | 2004-03-17 |
| AU6328896A (en) | 1996-12-24 |
| EP0857018A4 (en) | 2002-10-23 |
| DE69633398T8 (de) | 2006-01-12 |
| DE69633398D1 (de) | 2004-10-21 |
| EP0857018A1 (en) | 1998-08-12 |
| DK0857018T3 (da) | 2004-11-29 |
| EP0857018B1 (en) | 2004-09-15 |
| ATE275823T1 (de) | 2004-10-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2231818T3 (es) | Derivados de acido betulinico y usos para los mismos. | |
| ES2281960T3 (es) | Derivados acilados de betulina y dihidrobetulina, su preparacion y su uso. | |
| WO2006002248A1 (en) | Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof | |
| US20120214775A1 (en) | Pharmaceutical Salts of 3-O-(3',3'-Dimethylsuccinyl) Betulinic Acid | |
| AU2006262059B2 (en) | Antiviral compounds | |
| EP2205283A2 (en) | Cholesterol derivatives of inhibitors of viral fusion | |
| US7026305B2 (en) | Anti-HIV agents with dual sites of action | |
| US20040131629A1 (en) | Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof | |
| US20050148561A1 (en) | Novel triterpene derivatives, preparation thereof and use thereof | |
| ES2264140T3 (es) | Derivados hexahidroxibifenilo bromados. | |
| MXPA06003252A (es) | Nuevos derivados de triterpeno, preparacion de los mismos y uso de los mismos | |
| CN116003258A (zh) | 12-o-辛酰基-佛波醇酯类衍生物及制备方法和应用 | |
| KR20070031888A (ko) | ３－０－(３＇,３＇-다이메틸숙시닐)베툴린산의 약리학적염 | |
| ZA200608624B (en) | Pharmaceutical salts of 3-0(3',3'-dimethylsuccinyl) betulinic acid |