ES2196187T7 - Conjugados peptidicos derivados de las homonas timicas, su utilizacion a titulo de medicamento y composiciones que lo contienen. - Google Patents
Conjugados peptidicos derivados de las homonas timicas, su utilizacion a titulo de medicamento y composiciones que lo contienen. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2196187T7 ES2196187T7 ES96939132T ES96939132T ES2196187T7 ES 2196187 T7 ES2196187 T7 ES 2196187T7 ES 96939132 T ES96939132 T ES 96939132T ES 96939132 T ES96939132 T ES 96939132T ES 2196187 T7 ES2196187 T7 ES 2196187T7
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- ser
- gly
- lys
- gln
- acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
- A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
- A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
- A61K8/362—Polycarboxylic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/4986—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with sulfur as the only hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q7/00—Preparations for affecting hair growth
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/66—Thymopoietins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
- C07K7/062—Serum thymic factor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/57—Compounds covalently linked to a(n inert) carrier molecule, e.g. conjugates, pro-fragrances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Description
Conjugados peptídicos derivados de las hormonas
tímicas, su utilización a título de medicamento y composiciones que
los contienen.
La invención se refiere a unos nuevos derivados
sintéticos de dos hormonas tímicas, la timulina y la timosina, y a
sus aplicaciones, tanto como medicamento como en el sector de la
cosmética.
Los numerosos estudios sobre el funcionamiento
del sistema inmunitario, han puesto de manifiesto el papel capital
del timo y de las hormonas tímicas, en la estimulación de las
defensas inmunitarias del organismo.
Las hormonas tímicas, en particular la timulina,
"J.F. BACH y col"., la timopoietina "GRANDSTEIN" y la
timosina "DAYNE" se identificaron por ser de naturaleza
polipeptídica y peptídica.
Dichas hormonas y principalmente la timulina y
la timopoieitina, presentan la propiedad de inducir la maduración
de los linfocitos T y de estimular la respuesta inmunitaria del
organismo.
Se ha demostrado científicamente que ha existido
una estrecha relación entre la disminución de las funciones tímicas
con la edad, y el envejecimiento cutáneo en el plano fisiológico
normal.
A nivel patológico, la pérdida de actividad del
timo, "involución" se traduce por la aparición de trastornos
fisiológicos: "enfermedades auto-inmunes,
alopecias (caída anómala de los cabellos) etc...".
Se ha demostrado asimismo que existía una
relación entre las propiedades fisiológicas del timo y determinadas
células de la epidermis.
Existe en efecto una similitud de estructura
entre determinadas células del timo y los queratinocitos. Se ha
demostrado que los queratinocitos secretan igualmente, en
determinadas condiciones, una hormona del tipo timopoietina
idéntica a la secretada por el timo, y son capaces de inducir una
maduración linfocitaria post tímica, y de este modo tomar el relevo
del timo.
Dicha relación, entre las actividades
fisiológicas de las células del timo y los queratinocitos, se ha
confirmado recientemente por haberse constatado en las células del
timo, la presencia de queratina y de queratoialina, de estructuras
idénticas a la queratina y a la queratoialina secretada por los
queratinocitos de la epidermis.
Por otra parte, la demostración aportada en el
plano científico, de que los queratinocitos en fase de
diferenciación secretaban una sustancia activando el crecimiento de
los timocitos, el ETAF confirma las relaciones fisiológicas
existentes entre el timo y los queratinocitos. (ETAF: Epidermal
Thymocyte Activating Factor).
Existe un paralelismo entre la "involución"
del timo y la disminución de la síntesis del ETAF por los
queratinocitos en función de la edad, pero con un desfase funcional
a favor de los queratinocitos, (maduración linfocitaria post
tímica).
tímica).
La utilización de las hormonas tímicas, en
particular la timulina y la timopoeitina en terapéutica, ha
representado el objeto de numerosos trabajos farmacológicos y
clínicos, a la vista de la estimulación y de la regulación de las
defensas inmunitarias del organismo.
Utilizadas en forma de extractos o de moléculas
obtenidas por síntesis química, dichos productos han dado unos
resultados irregulares y decepcionantes, debido a su falta de
estabilidad, y de un efecto ubiquitario ligado a la ausencia de las
relaciones dosis-efectos.
La solicitud de patente FR 2.411.174 da a
conocer una secuencia de aminoácido
-ALA-LYS-SER-GLN-
que presenta una actividad biológica por inyección, útil para el
sistema inmune de los seres humanos y de los animales.
La solicitud de patente EP 166 612 describe unos
penta-péptidos derivados de la timopoietina, útiles
en el tratamiento de las enfermedades que implican unas infecciones
crónicas.
La presente invención tiene por objetivo, la
obtención por síntesis química de unos derivados peptídicos de las
hormonas tímicos, cuya estructura se ha orientado con el fin de
asegurar una gran estabilidad físico-química, y una
actividad farmacológica perfectamente definida.
Utilizando el conjunto de conocimientos
adquiridos y desarrollados recientemente por nuestros equipos, con
referencia al papel primordial de la epidermis en las defensas
inmunitarias y sus relaciones con el timo (International Society of
Development and Comparative Immunology), la presente invención tiene
por objetivo, la preparación de derivados peptídicos de síntesis,
cuya actividad fisiológica y terapéutica se orienta hacia la
estimulación y la modulación de las defensas inmunitarias de la
dermis y de la epidermis preferentemente a cualquier acción
sistémica.
\newpage
Uno de los objetivos preferentes de la invención
se refiere a la preparación por síntesis química de los
metalopéptidos cuyas propiedades fisiológicas se orientan
específicamente hacia la activación del sistema inmunitario cutáneo,
y la estimulación de las funciones germinativas de las células
basales de la epidermis con exclusión de cualquier efecto
secundario sobre la inmunidad sistémica (general).
La presente invención tiene por objetivo la
preparación de moléculas peptídicas, homólogas o derivadas de las
secuencias peptídicas activas de las principales hormonas tímicas,
"la timulina y la timopoietina".
Los numerosos ensayos clínicos efectuados con
dichos mediadores hormonales no han permitido poner de manifiesto
su interés terapéutico.
En efecto, utilizados en forma de preparaciones
inyectables para el tratamiento de las deficiencias inmunitarias y
de las afecciones auto-inmunes, todos los resultados
han sido negativos, debido a su actividad ubiquitaria en función de
las dosis administradas.
Parece que dichos efectos ubiquitarios están
ligados a la estructura de dichos compuestos, obtenidos por
síntesis, que no les permite fijarse normalmente sobre las
globulinas y los receptores celulares, teniendo en cuenta su
administración parenteral.
Debido a ello uno de los objetivos de la
invención es la preparación de unos compuestos en forma de
metalopéptidos obtenidos por síntesis, cuyas propiedades
fisiológicas se orientan hacia la modulación del sistema inmunitario
y la activación de las células germinativas de la epidermis,
mediante las aplicaciones tópicas locales, según el principio
farmacológico de las
"relaciones-estructuras-actividades"
(Principio de Hänch).
Más particularmente, la presente invención tiene
por objeto una composición farmacéutica o cosmética que contiene
por lo menos un conjugado peptídico que comprende una secuencia de
por lo menos tres aminoácidos derivados de la secuencia total de la
timulina o de la timopoietina, pudiendo estar los aminoácidos en
forma D, L o DL, conjugándose dicha secuencia químicamente o
físicamente con por lo menos un compuesto seleccionado de
entre:
- -
- los ácidos monocarboxílicos de fórmula general
(I)HOOC-R
- en la que R representa un radical alifático en C_{1}-C_{20}, lineal o ramificado, eventualmente sustituido, pudiendo presentar una o diversas insaturaciones,
- así como los derivados alcohol o aldehído o amida de los ácidos de la fórmula I;
- -
- los ácidos dicarboxílicos de la fórmula general
(II)HOOC-R_{1}-COOH
en la que R_{1} representa un
radical alifático divalente, que presenta por lo menos 3 átomos de
carbono, preferentemente de 3 a 10 átomos de carbono, lineal o
ramificado, principalmente un radical alquilo, alquileno,
alquenileno o alquinileno, pudiendo presentar una o diversas
insaturaciones eventualmente sustituido, principalmente por uno o
diversos grupos amino, hidroxi, oxo o un radical alquilo en
C_{1}-C_{3}, R_{1} pudiendo además formar un
ciclo con una de las funciones
ácidas.
Los conjugados según la invención son derivados
de bajo peso molecular, que se obtienen principalmente en forma de
sales, de ésteres o de amidas de los compuestos de la fórmula I o
II.
De entre los compuestos de la fórmula I, se
prefieren particularmente los ácidos carboxílicos, con una actividad
metabólica esencial del ciclo tricarboxílico de Krebs, actuando a
nivel de las mitocondrias, como coenzima de descarboxilación
oxidativa, y cuyas propiedades son las de fijarse preferentemente
mediante un enlace covalente sobre las funciones \varepsilon
aminadas de determinados péptidos, en forma de lipo amidas,
facilitando de este modo la presentación de los conjugados
peptídicos, obtenidos según la invención, al receptor beta de clase
G de las células de la epidermis.
Para dichos ácidos, y otros aptos para la puesta
en práctica de la invención, R puede representar un radical
alifático lineal o ramificado en C_{1}-C_{20},
principalmente en C_{1}-C_{4}, sustituido o no,
principalmente por un radical alquilo, alquenilo o alquinilo,
pudiendo presentar una o diversas insaturaciones y pudiendo estar
sustituido por uno o diversos radicales seleccionados de entre el
grupo que comprende:
NH_{2}, OH, oxo, tiol o un radical cíclico no
aromático presentando de 5 a 6 átomos en el ciclo en el que 1 ó 2
pueden ser diferentes del carbono, en particular, S, O o N, pudiendo
estar dichos ciclos sustituidos por unos radicales alquilo en
C_{1} a C_{3}, principalmente metilo.
\newpage
En particular, cuando R representa una cadena
alifática en C_{1}-C_{20}, puede estar
sustituida por un ciclo seleccionado de entre
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Otros compuestos de la fórmula I adaptados para
la puesta en práctica de la invención son aquellos para los que, en
la fórmula general I, R puede representar un radical monoinsaturado
de configuración cis o trans, de la fórmula general
R_{2}-CH=CH-
en la que R_{2} puede representar
un radical alquilo lineal o ramificado que comprende por lo menos 6
átomos de carbono, preferentemente 6 a 16 átomos de carbono,
eventualmente sustituido por un grupo amino, hidroxi u
oxo.
De forma ventajosa, en la fórmula II, R_{1}
representa un residuo alquileno en C_{4}-C_{8}
eventualmente sustituido.
Unos conjugados peptídicos según la invención
son principalmente aquellos para los que el ácido de la fórmula
general I se seleccionan de entre el ácido acético, el ácido
piroglutámico, el ácido DL-lipoico, el ácido
dihidrolipoico, la N-lipoil-lisina,
los ácidos hidroxidecenoicos y decenoilicos, el ácido retinoico y
sus derivados, el retinal y el retinol, el ácido mirístico y sus
derivados, el ácido palmítico, en forma de sales, de ésteres o de
amidas, o bien el ácido de la fórmula general II se selecciona de
entre el ácido adípico, el ácido \alpha-amino
adípico, el ácido pimélico, el ácido sebácico y sus derivados.
Los ácidos de las fórmulas generales I o II se
seleccionan preferentemente de entre el ácido acético y sus
derivados, el ácido piroglutámico, el ácido
\alpha-DL-lipoico y sus derivados,
el ácido dihidrolipoico, la
N-Lipoil-Lisina, el ácido adípico,
el ácido \alpha-amino-adípico, el
ácido pimélico, el ácido sebácico y sus derivados, el ácido
trans-10-hidroxi-\Delta2-decenoico
y el ácido
trans-oxo-9-deceno-2-oico,
el ácido retinoico y sus derivados, el retinol, y el retinal, el
ácido mirístico y el ácido palmítico.
La secuencia de aminoácidos de los conjugados
según la invención contendrá una de las 3 secuencias siguientes:
- Gln-Gly-Gly
- Arg-Lys-Asp
- Lys-Asp-Val
En efecto, más específicamente, la presente
invención se refiere a la preparación de dos series de moléculas
peptídicas cuyas actividades son complementarias, a nivel de las
aplicaciones en los sectores de la medicina humana y la
dermocosmética.
La presente invención se refiere preferentemente
a unos conjugados peptídicos, derivados de la hormona tímica
circulante, la timulina, y cuyas actividades fisiológicas se
orientan hacia la maduración del sistema inmunitario y de los
diferentes mediadores del sistema inmunitario cutáneo.
Dichos conjugados se orientan particularmente
hacia el tratamiento de enfermedades auto-inmunes de
la piel, y en particular, la prevención y el tratamiento de las
alopecias ya sean de origen fisiológico (envejecimiento),
traumáticas o patológicas.
La presente invención se refiere asimismo a la
preparación de unos conjugados peptídicos, derivados de la hormona
tímica celular, la timopoietina, y cuyas actividades fisiológicas se
orientan igualmente hacia la maduración del sistema inmunitario de
la piel, presentando al mismo tiempo una actividad preferente para
la estimulación de los metabolismos, de las células de la
epidermis, en particular de los queratinocitos germinativos, de los
que estimulan las secreciones y las síntesis endocelulares de las
moléculas de estructuras "queratinas de pesos moleculares bajos y
queratoialinas".
Dicha serie de conjugados peptídicos está
particularmente indicada para el tratamiento de las enfermedades de
la piel, ligadas a unas deficiencias inmunitarias, y en particular
al tratamiento preventivo y curativo del envejecimiento cutáneo de
origen fisiológico (edad) o patológico.
\newpage
Preferentemente la secuencia de aminoácidos de
los conjugados peptídicos derivados de la timulina responde a la
fórmula general siguiente:
X-Gln-Gly-Gly-Y
en la que Gln representa la
glutamina o un derivado de la glutamina, Gly representa la glicina o
un derivado de la glicina; los derivados comprenden principalmente
los derivados halogenados de los aminoácidos implicados. Los
aminoácidos pueden estar en forma natural o
no.
Según uno de los aspectos de la invención, los
conjugados peptídicos presentarán por tanto la fórmula
siguiente:
(III)A-X-Gln-Gly-Gly-Y
en la que A es un compuesto de
fórmula general I o II tal como se ha definido anteriormente, en
particular el ácido DL-lipoico, el ácido
dihidrolipoico o la
N-lipoillisina.
\vskip1.000000\baselineskip
- - X representa:
- Ser, Lys-Ser, Ala-Lys-Ser, Pyr-Ala-Lys-Ser, un enlace o
- \quad
- Glx-Ala-Lys-Ser
\hskip0.1cmen la que Glx representa: Pyro-Glu, Glu o Gly y sus derivados
- - Y representa:
- Ser-Asn-OH
- \quad
- Ser-Asn-NH2
- \quad
- Ser-OH
- \quad
- Ser-NH2
\vskip1.000000\baselineskip
Los aminoácidos están en forma L, D o DL.
En las fórmulas que siguen, Pyr representa el
ácido piroglutámico.
Preferentemente, los conjugados peptídicos de la
fórmula III presentan una secuencia de por lo menos 4 aminoácidos,
en particular de 4 a 9 aminoácidos, presentando la misma
ventajosamente la secuencia
Gln-Gly-Gly-Ser.
La presente invención se refiere más
particularmente a los conjugados siguientes:
- I
- A-Pyr-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- II
- A-Pyr-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- III
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- IV
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- V
- A-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- VI
- A-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- VII
- A-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- VIII
- A-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- IX
- A-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- X
- A-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- XXIII
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-OH
\vskip1.000000\baselineskip
A se ha definido anteriormente así como los
derivados de dichas moléculas en forma de sales, de ésteres o de
amidas.
Las secuencias de aminoácidos mencionados
anteriormente pueden ser unas secuencias de aminoácidos naturales o
no naturales.
Se precisa asimismo que los conjugados
peptídicos mencionados anteriormente y que son el objeto de la
presente invención, se pueden obtener en la forma terminal NH_{2}
y en la forma terminal OH.
Asimismo, en determinados casos, es posible que
algunos de dichos aminoácidos presenten unas funciones, por
ejemplo, unas glicosilaciones.
Según otro aspecto, la invención se refiere a
unos conjugados peptídicos derivados de la timopoietina y que
responden a la fórmula general siguiente:
(IV)A-W-Lys-Asp-Z
en la que A es un compuesto de
fórmula general I o II tal como se ha definido anteriormente o el
radical correspondiente, y principalmente el ácido acético y sus
derivados, el ácido
\alpha-DL-lipoico y sus derivados,
el ácido dihidrolipoico, la
N-lipoil-lisina, el ácido adípico,
el ácido \alpha-amino-adípico, el
ácido pimélico, el ácido sebácico y sus derivados, el ácido
trans-oxo-9-deceno-2-oico
y el ácido
trans-hidroxi-10-deceno-2-oico.
- W representa:
- Glu-Gln-Arg, Gln-Arg, Arg,
- \quad
- Arg-Lys-, Arg-Lys-Asp o un enlace
- Z representa:
- Val-Tyr-NH_{2}, Val-Tyr-OH
- \quad
- Val-NH_{2}, Val-OH, Tyr-OH, Tyr-NH_{2},
- \quad
- OH o NH_{2}
W y Z se seleccionan de tal modo que por lo
menos una de las secuencias
Arg-Lys-Asp o
Lys-Asp-Val está presente en los
compuestos de la fórmula IV, con la excepción de los conjugados de
fórmula XI, XII, XIV, XV y XVI tal como se definen en la
reivindicación 1.
Los conjugados peptídicos de la fórmula IV y que
presentan la secuencia
Arg-Lys-Asp-Val
proporcionan unos resultados excelentes.
Los aminoácidos pueden estar en forma D, L o DL
y pueden estar eventualmente glicosilados.
Unos conjugados peptídicos particularmente
aptos, y cuyas actividades biológicas son complementarias de los
conjugados peptídicos de la fórmula III, son los conjugados de la
fórmula IV siguientes:
- XVII
- A-Lys-Asp-Val-Tyr-NH_{2}
- XVIII
- A-Lys-Asp-Val-Tyr-OH
- XIX
- A-Arg-Lys-Asp-Val-NH_{2}
- XX
- A-Arg-Lys-Asp-Val-OH
- XXI
- A-Arg-Lys-Asp-NH_{2}
- XXII
- A-Arg-Lys-Asp-OH
"A" se ha definido anteriormente así como
los derivados de dichas moléculas en forma de sales, de ésteres o
de amidas.
Las secuencias de aminoácidos mencionados
anteriormente pueden ser unas secuencias de aminoácidos naturales o
no naturales.
Se precisa asimismo que los conjugados
peptídicos mencionados anteriormente se pueden obtener en forma
terminal NH_{2} u OH.
Los conjugados según la invención pueden
asimismo presentarse en forma de complejos moleculares con un metal,
principalmente zinc.
Los conjugados según la invención podrán
asimismo obtenerse por síntesis, mediante unas técnicas conocidas
por los expertos en la materia.
Las síntesis de los péptidos libres pueden
llevarse a cabo mediante las técnicas de MERRIFIELD, según dos
procedimientos.
En un primer procedimiento, se utiliza un
derivado de la Glutamina protegido en su función de amida \gamma
por el "Mbh" 4,4-dimetoxibencidril.
En un segundo procedimiento, la síntesis se
lleva a cabo sin la protección de la amida \gamma de los residuos
de la Glutamina.
Utilizando el primer y el segundo procedimiento,
la parte protegida C-terminal del dipéptido se
asocia respectivamente al tetrapéptido protegido
Ser-Gln-Gly y al hexapéptido
protegido
Ala-Lys-Gln-Gly-Gly.
De este modo, la preparación de los polipéptidos
de secuencia
X-Gln-Gly-Gly-Y,
en la que Y representa
Ser-Asn y X representa Ser o
Ala-Lys-Ser, se lleva a cabo
asociando el dipéptido protegido Ser-Asn con el
péptido protegido
X-Gln-Gly-Gly y por
la eliminación consecutiva posible de los grupos
protectores.
protectores.
Utilizando el segundo procedimiento, se obtiene
por tanto el octapéptido
Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn,
mientras que utilizando el primer procedimiento, se prepara el
mismo octapéptido a partir del hexapéptido
Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn
pasando por el heptapéptido
Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn.
El octapéptido
Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn
permite por lo tanto preparar las dos formas, por asociación del
primer residuo PyroGlu o Gln.
El procedimiento utilizado para asociar el
residuo PyroGlu en la secuencia
Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Y
es el mismo sean cuales sean las posibles significaciones de Y, a
saber Ser y Ser-Asn, y las significaciones posibles
que de ella se derivan por la modificación de un ácido aminado, por
ejemplo Ser-Asp, Ala-Asn.
Dicha asociación se obtiene de forma ventajosa
por medio del derivado PyroGlu-OTcp en la secuencia
Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Y,
en la que determinados aminoácidos presentan la posibilidad de
estar protegidos en su función en la cadena lateral.
Los derivados peptídicos que son el objeto de la
presente invención y que se han descrito anteriormente, se pueden
utilizar en su forma peptídica o en forma de conjugados, con los
ácidos carboxílicos anteriormente descritos que responden a la
fórmula general I.
Dichos mismos conjugados petídicos se pueden
utilizar en forma de complejos moleculares con un metal.
El metal utilizado en la preparación de los
complejos metalo-peptídicos de la presente invención
es, por ejemplo, el zinc, en forma de ZnCl_{2} que se puede unir
en forma de sal, con un grupo carboxílico del aminoácido terminal,
en forma de complejos "peptídicos-Zn^{2}" en
las proporciones siguientes del 0,5 al 5% preferentemente 1% de
ZnCl_{2} por molécula peptídica.
Dichas proporciones son variables en función del
peso molecular del conjugado peptídico.
El complejo metalo-peptídico se
puede obtener principalmente en solución al 10% de ZnCl_{2}, para
una molécula peptídica, después de calentamiento a una temperatura
de 20ºC durante 10 minutos.
A continuación se purifica el complejo, por
ejemplo sobre una columna de biogel P-2, y se eluye
con agua destilada y liofilizada.
Se obtiene un coliofilizado estable conteniendo
1% de Zinc fijado sobre la molécula de péptido por afinidad.
El conjunto de los compuestos según la presente
invención puede ser útil a título de medicamento.
En particular, los conjugados según la presente
invención pueden servir para la preparación de un medicamento
destinado a corregir las deficiencias del sistema inmunitario.
Unas composiciones farmacéuticas pueden contener
por lo menos un conjugado según la invención y unos excipientes
adaptados para la administración parenteral o por vía tópica
externa.
Dichas composiciones pueden utilizarse tanto en
el sector de la medicina humana como en la veterinaria, y son
administrables por vía oral, o parenteral, pero preferentemente en
forma administrable por vía tópica externa.
Unas composiciones particularmente aptas para la
puesta en práctica de la invención son las que contienen el
conjugado siguiente:
- -
- Pyr-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-OH
eventualmente en forma de complejo
con un
metal.
Los conjugados peptídicos que son el objeto de
la invención, sus derivados y sus composiciones galénicas pueden
estar presentes en forma de cremas, de leches, de lociones o de
aerosol, y presentar unos excipientes conocidos y eventualmente
otros principios activos.
Se pueden utilizar solos o en forma de
asociaciones o de composiciones galénicas, para el tratamiento de
las enfermedades auto-inmunes en los diferentes
sectores de la dermatología.
La invención se refiere asimismo a la
utilización de los conjugados peptídicos en dermocosmética y en
cosmética.
La presente invención tiene, por tanto, por
objeto unas composiciones galénicas farmacéuticas y cosméticas, que
comprenden por lo menos uno de los conjugados peptídicos descritos
anteriormente.
Los conjugados peptídicos de la invención, sus
derivados y sus asociaciones con unos principios activos conocidos,
se pueden utilizar en forma de preparaciones cosméticas y capilares,
principalmente para el rejuvenecimiento y la renovación de las
capas superficiales de la piel, y en particular para el tratamiento
cosmético-capilar de la caída del cabello.
Los ejemplos que siguen están destinados a
ilustrar la invención, y principalmente la actividad
inmunoestimulante de los péptidos tímicos de síntesis administrados
por vía tópica, sin limitar de ningún modo el alcance de la
invención.
En los ejemplos, se hará referencia a las
figuras siguientes:
Figura 1: Acción del ETF sobre la síntesis de
ADN.
Figura 2: Acción del ETF sobre las células NK
por vía tópica (células diana: YAC1). EL porcentaje de lisis se
representa a los días 1, 3, 6, 9, 15, 18 y 21 de la inyección, para
las diferentes proporciones células efectoras/células diana.
Figura 3: Acción del ETF sobre las células NK
por vía tópica (células diana: P815).
Figura 4: Acción del ETF sobre las células NK
in vitro. El porcentaje de lisis en función de la proporción
células efectoras/células diana se proporciona para las diferentes
dosis de ETF.
Figura 5: Acción del ETF sobre las células NK
por vía inyectable. El porcentaje de lisis en función de la
proporción células efectoras/células diana se representa después de
la estimulación con 15 \mug de ETF, y para unos animales
control.
Figura 6: Papel del interferón en la
estimulación de las células NK por ETF por vía inyectable. El
porcentaje de lisis se proporciona en función de la proporción
células efectoras/células diana, en presencia o no de
anti-interferón
Figura 7: Acción del ETF sobre las células NK
por vía inyectable: cinética de la respuesta 1, 3 y 8 días después
de la administración de 15 \mug ETF por vía
intra-peritoneal.
A-Pyro-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
A= ácido DL-lipoico
La síntesis se lleva a cabo según la metodología
general descrita en las etapas siguientes:
- 1-
- Boc-Gln-Gly-Gly-OMe
- 2-
- Trifluoroacetato-Gln-Gly-Gly-OMe
- 3-
- Z-Ser-NH-NH_{2}(But) -> Bop -> DIEA -> DMF
- 4-
- Z-Ser-Glu-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- 5-
- Ácido Lipoico -> BOP -> DIEA -> DMF
- 6-
- Lipoil-Pyro-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
Análisis HPLC de los aminoácidos
Asp-1,02;
Ser-1,77; Glu-1,0;
Gly-2,00; Ala-0,91
\vskip1.000000\baselineskip
A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
A= ácido Adípico
La síntesis se lleva a cabo según la metodología
general descrita en las etapas siguientes:
- 1-
- Z-D-Ala-Lys-(Boc)-Ser(But) -> DMF
- 2-
- Lys-(Boc)-Ser(But)-Gln(Mbh) -> DMF
- 3-
- Gly-Gly-Ser (but)-Asn-O-But
- 4-
- Me.OH -> CH_{3}COOH ->D-Ala-Lys(Boc)-Ser (But)- Gln (Mbh) -> Gly-Gly-Ser - Asn(But)
- 5-
- Ácido adípico -> BOP -> DIEA
- 6-
- Adipoil-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
Análisis HPLC de los aminoácidos
Asp-1,02;
Ser-1,77; Glu-1,0;
Gly-2,00; Ala-0,91
\vskip1.000000\baselineskip
A-Pyro-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
A= ácido acético
Dicho conjugado se obtiene mediante la
metodología descrita en el ejemplo 1 a partir del derivado:
Ala-Lys
(Boc)-Ser(But-Gln-Mbh)-Gly-Gly-Ser(But)-Asn(But)
descrito anteriormente.
Se obtiene un producto homogéneo por
cromatografía en los solventes G y H, a un pH 2,3.
Análisis HPLC de los aminoácidos
Asp-0,97;
Ser-1,67; Glu-1,84;
Gly-2,00; Ala-0,98
\vskip1.000000\baselineskip
Los queratinocitos de los ratones
"C57-BL/6" estimulados con los derivados
peptídicos de las hormonas tímicas liberan los mediadores
(mensajeros celulares) tales como el ETAF, la IL1, y la IL6, que
inducen una activación de la respuesta inmunitaria de las células
inmunocompetentes de la epidermis, las células de Langerhans Ia+ y
los Timocitos Thy 1.2+.
La medición de dicha activación mediante las
técnicas de inmunofluorescencia es característica de la actividad
inmunomoduladora de los péptidos tímicos.
En solución en propilenglicol a (c) = 10^{-5}
M/ml.
ETF - péptido - nº I
ETF - péptido - nº III
ETF - péptido - nº XV
ETF - péptido - nº XIX - ejemplo comparativo
Control = propilenglicol
Unos ratones machos C57 - BL/6 de 5 a 7 semanas
de edad, repartidos a razón de 4 por jaula, con libre acceso al
agua y a la alimentación sometidos a un fotoperiodo de 12 horas de
luz por 24 horas, reciben diariamente y durante 5 días consecutivos
una aplicación tópica del péptido en propilenglicol (vol 50 \mul),
sobre la cara dorsal de la oreja.
El día 6, se sacrifican los animales. Se procede
a la extracción de las orejas con separación de la cara dorsal y de
la cara ventral.
Los tejidos de la cara dorsal se sumergen en
EDTA de Na (0,020 M) durante 2 h a una temperatura de 37ºC.
Después de la incubación, se extrae la epidermis
en forma de hojas intactas fijada en acetona y rehidratada en PBS
(tampón fosfato).
Las CED (células epidérmicas dendríticas) Thy
1-2+ y Ia + se identifican por doble marcaje en
inmunofluorescencia indirecta.
El número de células por mm^{2} se determina,
para cada hoja epidérmica, en las zonas periféricas de la misma
superficie.
Las CED (células epidérmicas dendríticas) que
presentan el marcador Ia+ se identificaron utilizando un anticuerpo
monoclonal anti-Ia+.
Las hojas epidérmicas se fijan con acetona, a
continuación se incuban durante 1 h a una temperatura 37ºC en
presencia del anticuerpo monoclonal anti-Ia+ y se
marcan por el método de la inmunoperoxidasa indirecta (kit).
Tras la incubación durante 10 minutos a una
temperatura de 37ºC con una solución de
amino-etil-carbazol, se lava la
preparación con PBS.
Las CED Thy 1,2+ se identificaron por doble
marcaje en inmunofluorescencia indirecta. Las hojas epidérmicas se
fijaron con acetona y después se rehidrataron en PBS.
Los tejidos marcados simultáneamente con unos
anticuerpos de ratón anti-Thy 1.2+ diluidos al 1:100
durante 16 h a una temperatura de 4ºC. Las muestras de tejidos se
lavaron tres veces en PBS durante 60 min y después se incubaron 60
min a una temperatura de 37ºC, o bien con unos anticuerpos de cabra
anti-ratón unidos a la rodamina, diluidos al 1:20,
o bien con unos anticuerpos de cabra anti-conejo
unidos a la fluoresceína (fluoresceína diluida al 1:20 en PBS. Los
tejidos se lavaron a continuación en el PBS antes de montarlos tal
como se ha descrito anteriormente).
Los controles presentaban unas hojas epidérmicas
no marcadas con el anticuerpo primario e incubadas únicamente en
presencia de los reactivos secundarios, con el fin de poner de
manifiesto eventuales reacciones cruzadas con los anticuerpos
conjugados con la rodamina y con la fluoresceína.
El número de células de Langerhans Ia+ o de CED
Thy 1.2+ por milímetro cuadrado se determinó en cuatro zonas
periféricas de igual superficie para cada hoja epidérmica, por
inmunofluorescencia, al microscopio confocal Zeiss equipado para
tal efecto. Se estudiaron por lo menos cuatro animales control en
cada uno de los grupos. La densidad de las células de Langerhans
Ia+ y de CED Thy 1.2 + se indica para cada medición.
Los resultados resumidos en la tabla I muestran
que ETF y sus homólogos, administrados por vía tópica a unos
ratones C57/BL6 aumentan de forma altamente significativa, la
actividad de las células residentes del sistema inmunitario.
Se observa principalmente un aumento
significativo de los fenotipos de las células dendríticas
epidérmicas de Langerhans Ia+ - (HLADR) a unas dosis de 0,1 a 1
nanogramos.
Paralelamente, se observa igualmente un aumento
significativo de la actividad de los timocitos epidérmicos de
fenotipo Thy 1.2+, es decir ETAF dependientes, a unas dosis
idénticas.
La respuesta inmunitaria cutánea se encuentra
bajo la dependencia de la actividad de los queratinocitos nucleados
que secretan el ETAF y los mediadores de la inmunidad, es decir la
2ª señal sin la que no hay función inmunitaria fisiológica normal
(Immuno-dermatologie L.D.H.). Se puede considerar
que el ETF y sus homólogos, restablecen las funciones inmunitarias
de la epidermis por activación de los queratinocitos de las capas
basales de forma fisiológica, por oposición a la estimulación
antigénica exógena.
\vskip1.000000\baselineskip
Resultados expresados sobre 4
lotes de 4 ratones C 57
BL/6
\vskip1.000000\baselineskip
Cultivo de los queratinocitos humanos
normales
- - Fuentes:
- Cirugía mamaria
- - Primocultivo:
- Los tejidos recientemente biopsiados, en asepsia total, se digieren a una temperatura de +4ºC en la tripsina al 0,25% con el fin de separar la epidermis de la dermis.
La epidermis se disocia a continuación bajo una
acción mecánica suave o enzimática con el fin de obtener unas
células individualizadas. Únicamente las células basales serán
capaces de multiplicarse in vitro.
El cultivo se lleva a cabo en atmósfera húmeda
controlada (95% O_{2} - 5% CO_{2}) a una temperatura de
37ºC.
En un cultivo monocapa, la concentración en
calcio se sitúa entre 0,05 y 0,1 mM. En dichas condiciones, los
queratinocitos proliferan rápidamente pero no forman estratos. La
síntesis de los queratinocitos se mantiene. Los espacios
intersticiales son grandes: las conexiones celulares se aseguran
mediante las microvellosidades y no mediante las
"tight-junctions". Los tonofilamentos del
espacio perinuclear son visibles pero no se han unido de nuevo a
las placas de anclaje.
La estratificación se puede inducir mediante un
aumento de la concentración final en calcio en el medio de cultivo
hasta 1,2 mM. Entonces la formación de desmosomas aparece al cabo de
2 horas.
La tasa de sodio y de potasio intracelular
aumenta a partir de la 12ª hora, además, no se bloquea por lo
inhibidores clásicos del flujo Ca^{2+}/Na^{+}.
La estratificación vertical es visible al cabo
de 2 días y la diferenciación terminal se consigue mediante unas
células de envuelta cornificada. (Hennings et col., 1980)
- I-
- Derivados ETF nº IX, liofilizado en dextrano (40 g/l) 10^{-6} M en un medio de cultivo final.
- II-
- Timopoietina Crist. SIGMA - 10^{6} M en un medio de cultivo final.
- III-
- Control: Dextrano 15.000 D - (40 g/l).
- IV-
- Proteínas celulares- Sol. de triturado celular de referencia a 50 microgramos por ml.
El cultivo de queratinocitos humanos se lleva a
cabo tal como se ha descrito por Henning y col. (1983) o Fuchs y
col. (1981), Se efectúan asimismo unos cultivos en aire líquido
según la metodología siguiente.
Se incorpora el colágeno de tipo I o IV al medio
de cultivo.
Se añaden a la solución unos fibroblastos 3T3 a
la concentración de 1,5\cdot10^{5}/ml y se siembran en placas
de petri de 35 mm que se colocan a continuación a una temperatura de
37ºC.
Después de la formación del gel, se añade de
nuevo medio de forma que se recubren completamente las matrices.
Los queratinocitos se siembran y se mantienen de este modo en un
cultivo sumergido durante 7 días.
En dicha etapa se transfieren las matrices sobre
unas parrillas de acero inoxidable. Dichas parrillas se colocan en
unas cajas conteniendo medio de cultivo durante un periodo de 7a 24
días.
Unas células endoteliales de córnea de buey se
cultivan sobre unos filtros recubiertos de colágeno. Después de la
estimulación con un factor de crecimiento de tipo FGF, dichas
células secretan colágeno IV y laminina, así como otras moléculas
que se depositan sobre el colágeno reconstituyendo de este modo una
pseudo-membrana basal.
Después de la eliminación de las células
endoteliales bovinas, los queratinocitos se siembran sobre dicho
soporte.
Unos fibroblastos se incorporan en un gel de
colágeno. Después de la retracción del gel, los queratinocitos se
siembran sobre dicha matriz.
Se desepidermizan unos fragmentos de piel humana
por inmersión durante 5 días en el PBS a una temperatura de 37ºC.
Después de tal tratamiento de la epidermis se despega completamente
sobre la membrana basal. Unas congelaciones y descongelaciones
sucesivas mataran los fibroblastos. Dicho tejido, presentando la
dermis y la basal, servirá de capa alimenticia para los
queratinocitos.
\hskip0.5cmI = sumergido
\hskip8cmE= emergente
\vskip1.000000\baselineskip
El control de diferenciación de la epidermis se
realiza por microscopia electrónico (Prunieras, 1988), por un
análisis bioquímico (Tinois y col., 1993) y por un análisis
inmunológico (Woodcock y col., 1982, Prunieras, 1988). Dicha última
puede utilizar unos anticuerpos anti-involucrina,
anti-transglutamina epidérmica,
anti-fillagrina y anti-queratinas
(AE1, AE2, AE3).
Las queratinas 48 kD son los marcadores de la
proliferación.
Las queratinas 50 y 58 kD son los marcadores
permanentes de las queratinas.
Las queratinas 56,5 y 65/67 kD son los
marcadores de la diferenciación.
Los marcadores celulares seleccionados son las
queratinas de bajo peso molecular 46/47 kD específicos del
crecimiento de las células germinativas y de su diferenciación
celular.
Las filagrinas marcadoras de la
queratoialina.
Marcaje fluorescente indirecto según la técnica
de sandwich - 48 horas después del aporte de calcio al medio de
cultivo (estratificación).
- I -
- \underline{Anticuerpos primarios "SIGMA"}
- \quad
- - Ac de rata antiqueratina humana 46-47 kD.
- \quad
- - Ac humano antiqueratina humana 56,5/68 kD.
- \quad
- - Ac humano antiqueratoialina (Filagrina).
- II -
- \underline{Anticuerpos secundarios "SIGMA"}
- \quad
- - Ac de ratón anti Ig G2 de rata marcados con FITC.
- \quad
- - Ac de cabra anti Ig G humana marcada con FITC.
- \quad
- * Dosificaciones microscópicas
- \quad
- - "Microscopio ZEISS Confocal Laser Scanner"
- \quad
- - Epi-fluorescent - LSM 310
- \quad
- - Medición de los marcadores celulares por inmunoflurescencia, con un registro gráfico.
- \quad
- * Dosificaciones espectrofluorimétricas
- \quad
- - Espectrofluorímetro Perkin Elmer LS-50 B''
- \quad
- - Sobre triturado sobrenadantes celulares.
- \quad
- * Dosificaciones de las proteínas celulares
- \quad
- - Técnica de LOWRY en el espectrofotómetro UV Perkin Elmer (Sobrenadantes de los triturados celula- {}\hskip0.26cm res).
Las tablas nº II y III resumen la actividad del
péptido nº IX "ETF" sobre el crecimiento de las células
germinativas de las capas basales y suprabasales de la epidermis -
"queratinocitos jóvenes".
La intensidad de la fluorescencia de las células
tratadas con ETF nº IX se aprecia comparativamente a la intensidad
de fluorescencia de los controles.
Se observa un aumento significativo de las
células pre-queratinocitarias germinativas y de su
actividad metabólica. En particular a nivel de las síntesis de
queratina de bajo peso molecular y de las queratoialinas
"Filagrinas", de estructuras similares a las de la médula del
timo.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La respuesta inmunitaria de la epidermis es
dependiente de los queratinocitos y de las células de Langerhans,
en asociación con otras líneas células
"granulocitos-timocitos", etc...
Las células de Langerhans son considerablemente
menos competentes para la fagocitosis que los queratinocitos, lo
cual las diferencia formalmente de los macrófagos.
Son similares fenotípicamente y funcionalmente a
las células "veladas" (Veiled Cells) de la linfa aferente y de
las células interdigitalizadas de los nódulos linfáticos.
La acción de las células de Langerhans es el
resultado de una cooperación celular, en particular con las células
granulocitarias "fagocitos" bajo la dominante de los
queratinocitos.
\newpage
Por lo tanto ha sido interesante apreciar la
actividad del ETF, sobre la actividad fagocitaria de los
granulocitos polimorfonucleados y de los sistemas celulares
vecinos, principalmente las células NK (ENKAF, Epidermal Cell
derived Natural Killer Activating Factor).
Unas células polimorfonucleadas de sangre
periférica humana (granulocitos neutrófilos), a una concentración
de 10^{6} células/ml, se preincuban durante 20 min a una
temperatura de 37ºC antes de la adición de luminolet de las
partículas zymosan opsonizadas con suero.
La quimioluminiscencia se mide cada 3 minutos
después de la adición del último reactivo. Los resultados
representan una media de 5 medidas independientes para cada punto .
(Desviación estándar inferior al 5% de media).
Se utilizan dos sistemas:
Unos granulocitos normales de sangre periférica
humana, enriquecidos por sedimentación en dextrano y desprovistos
de los eritrocitos por lisis hipotónica. Se ensaya el ETF a unas
concentraciones de 10, 1 y 0,1 \mug/ml.
B. El agente inductor ETF se elimina por el
lavado después de la preincubación y antes de la adición de los
reactivos quimioluminiscentes
Unos granulocitos normales de sangre periférica
humana, purificados por decantación sobre dextrano y lisis
hipotónica de los eritrocitos. Se incuba el ETF durante 20 min a una
temperatura de 37ºC con los granulocitos y después se eliminan por
el lavado antes de la adición de zymosan opsonizado y de
luminol.
2 - Resultados: (los valores representan
la media de 5 medidas)
Sistema A
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Sistema B
3 - Conclusiones
- A.
- ETF presenta un efecto considerable sobre la potenciación de la quimioluminiscencia a partir de los primeros instantes, a unas concentraciones de 10 y 1 \mug/ml.
- B.
- Incluso después del lavado, ETF induce una activación significativa de los granulocitos a 10 y 0,1 \mug/ml.
\vskip1.000000\baselineskip
Un conjunto de células esplénicas de ratones
normales se obtiene y se incuba en unas microplacas con ETF sólo a
unas dosis crecientes. El ADN se dosifica a J1, J3, J5.
Los resultados se presentan en la figura 1.
El ETF muestra una respuesta muy clara,
proporcional a la dosis. La dosis más elevada utilizada (10
\mug/ml) proporciona la mayor síntesis del ADN en todos los días
del control con un máximo al 3er día. Debe observarse, sin embargo,
que los valores de base son superiores al 3er día, la respuesta
específica es quizás en realidad más
precoz.
precoz.
\vskip1.000000\baselineskip
Se inyectan por vía i.v, 50 ratones Balb/c que
reciben 5 \mug de ETF por vía s.c. 108 GRM (glóbulos rojos de
cordero) en 0,1 ml de PBS a los 20, 10 y 3 días después del ETF o 2
días antes. Técnica PFC de Cunningham y Szenberg.
Se observa una respuesta que presenta un máximo
a J+4 con un aumento importante, muy significativo, del número de
PFC en los animales que han recibido el ETF 10 días antes del
antígeno.
\vskip1.000000\baselineskip
Ratones CBA/H (90 ratones)
Células diana
* YAC-1 sensibles a las NK
* P 815 no sensibles a las NK
* ETF nº VII
Los ratones reciben cada día por vía tópica 15
\mug de ETF en solución en propilenglicol al 10 ^{-5} M/ml,
durante 14 días consecutivos. Se administra una dosis idéntica de
recuerdo el 18º día.
La medición de la actividad lítica se realiza
cada 3 días mediante recuento del ^{51}Cr liberado para unas
proporciones de células efectoras: células marcadas de 200:1, 100:1,
50:1, 25:1, durante 4 horas de incubación.
Los resultados sobre las células NK por vía
tópica se presentan en las figuras 2 y 3.
Los resultados son extremadamente claros. Se
constata, en función del tiempo, después del inicio del tratamiento
con ETF, un aumento altamente significativo de la actividad NK.
Dicha actividad que es apreciable a partir del 3er día se vuelve
muy importante al 6º y al 9º día y se mantiene a un nivel muy
elevado durante todo la duración del experimento (21 días).
No se ha apreciado ninguna citotoxicidad no
específica sobre las células P 815 en ningún momento del
experimento. Esto excluye que la administración del ETF conduzca a
la inducción de células de naturaleza citolítica no específica o a
la activación policlonal de células T citolíticas.
\vskip1.000000\baselineskip
Células esplénicas normales de ratón CBA.
Incubador a una temperatura de 37ºC + CO_{2}, 10^{7} células
por ml de medio RPMI 1640 + 5% de suero bovino fetal. Incubación con
unas cantidades variables de la sustancia a estudiar. Células diana
YAC-1.
La medición de la lisis se realiza mediante
recuento del ^{51}Cr liberado para unas proporciones de células
efectoras/células diana de 200:1, 100:1, 50:1, 25:1, durante 4 horas
de incubación.
Los resultados se presentan en la figura 4.
ETF estimula muy fuertemente la actividad de las
células NK in vitro de forma proporcional a la dosis.
A una concentración de 0,1 \mug/ml, la
actividad del ETF resulta todavía muy superior a 25 \mug/ml de
poli I:C.
(Actividad por lo menos 100 veces superior a la
del producto de referencia poli I:C, inductor interferón).
\vskip1.000000\baselineskip
Ratones CBA/H de 4 a 5 meses (140 ratones)
Células diana
* YAC-1 sensibles a las NK
(linfoma inducido/virus moloney)
* P 815 insensibles a las NK (DBA/2
mastocitona)
La sustancia a ensayar (ETF nº VII) se inyecta
por vía i.p. en 0,2 ml de PBS, 24 horas antes del ensayo. La
medición de la lisis se realiza mediante recuento del ^{51}Cr
liberado para unas proporciones de células efectoras: diana de
200:1, 100:1, 50:1, 25:1, durante 4 horas de incubación.
Los resultados de la actividad de estimulación
de las células NK por ETF se representan en la figura 5. Muestran
una fuerte activación de las células NK, muy significativa (P<
0,01), en los animales que han recibido el ETF (15 mg/i.p.) en
relación con los controles. No hay citotoxicidad no específica sobre
las P 815.
En la figura 6, se observa que la activación de
las células NK por ETF se debe a un efecto inductor del interferón.
Se observa una reducción drástica de las células NK en el momento de
la administración simultánea de anti-interferón
(\alpha-IF).
La cinética de la respuesta de las células NK a
los días 1, 3 ó 8 de la inyección en relación con un control PBS,
se representa en la figura 7. La estimulación de las células NK por
ETF es de corta duración por vía inyectable.
En los animales jóvenes (7 a 9 meses), ETF
estimula a la vez las células NK y pre-NK de forma
idéntica a unas dosis de tilorone de 1 mg por animal.
\vskip1.000000\baselineskip
Figura 1:
ETF. Síntesis de ADN.
\vskip1.000000\baselineskip
Figura 2:
ETF. Células NK/vía tópica
- \circ- - - - - - -\circ
-
\vtcortauna
- \bullet- - - - - - -\bullet
-
\vtcortauna
\vskip1.000000\baselineskip
Figura 3:
ETF. Células NK/vía tópica
- \bullet- - - - - - -\bullet
-
\vtcortauna
- \circ- - - - - - -\circ
-
\vtcortauna
\vskip1.000000\baselineskip
Figura 4:
ETF. Células NK "in vitro"
Comparación ETF 0,1 \rightarrow 100
\mug/ml
Con poli I:C 25 \mug/ml
- \circ- - - - -\circ- - - -
-
\vtcortauna
- *- - - - - -*- - - -
-
\vtcortauna
- \bullet- - - - -\bullet- - - -
-
\vtcortauna
- +- - - - -+- - - -
-
\vtcortauna
- \Box- - - -\Box- - -
-
\vtcortauna
- \Delta- - - - -\Delta- - - -
-
\vtcortauna
\vskip1.000000\baselineskip
Figura 5:
ETF. Células NK vía inyectable
\vskip1.000000\baselineskip
Figura 6:
ETF. Células NK vía inyectable
Papel del interferón en la estimulación de las
células NK por ETF.
\newpage
Figura 7:
ETF. Células NK vía inyectable
Cinética de la respuesta NK ETF
Ensayo NK 1,3 ó 8 días después de 15 \mug ETF
vía (i.p.)
\vskip1.000000\baselineskip
E TINOIS, H. DUMAS, Q.
GAETANI, D. DUPONT, X. POURADIER DUTEIL, A.
ROUGIER Nouv. Dermatol. 12 nº 7, 510, 1993.
H. HENNING, K.A. HOLBROOK, S.H.
YUSPA The J. of Invest. Dermatol. 81,
50-55, 1983.
E. FUCHS, H. GREEN CELL. 25
617-625, 1981
M. PRUNIERAS Métodos in vitro en
farmaco-toxicología, Coloquio INSERM, 170
67-76, 1988.
J. WOODCOCK-MITCELL, R.
EICHNER, W.G. NELSON, T. SUN The J. of Cell
Biol., 95, 580-588, 1992.
Claims (23)
1. Composición para la administración por vía
tópica, caracterizada porque contiene:
(i) por lo menos un conjugado peptídico, que
comprende una secuencia de por lo menos 3 aminoácidos derivados de
una hormona tímica seleccionada de entre la timulina o de la
timopoietina, pudiendo estar los aminoácidos independientemente en
forma D, L o DL,
conjugándose dicha secuencia químicamente o
físicamente con por lo menos un compuesto seleccionado de entre:
- los ácidos monocarboxílicos de fórmula
general
(I)HOOC-R
en la que R representa un radical
alifático en C_{1}-C_{20}, lineal o ramificado,
eventualmente sustituido, pudiendo presentar una o diversas
insaturaciones,
así como los derivados alcohol o aldehído o
amida de los ácidos de la fórmula I;
- los ácidos dicarboxílicos de la fórmula
general
(II)HOOC-R_{1}-COOH
en la que R_{1} representa un
radical alifático divalente, que comprende por lo menos 3 átomos de
carbono, preferentemente de 3 a 10 átomos de carbono, lineal o
ramificado, principalmente un radical alquilo, alquileno,
alquenileno o alquinileno, pudiendo presentar una o diversas
insaturaciones eventualmente sustituido, principalmente por uno o
diversos grupos amino, hidroxi, oxo o un radical alquilo en
C_{1}-C_{3}, R_{1} pudiendo formar un ciclo
con una de las funciones
ácidas
(ii) en combinación con un excipiente
farmacéuticamente y/o cosméticamente aceptable, adaptado para la
administración por vía tópica externa,
y porque el conjugado presenta la fórmula
general
(III)A-X-Gln-Gly-Gly-Y
en la
que
A es un compuesto de fórmula general I o II o el
radical correspondiente
- X representa: Ser, Lys-Ser,
Ala-Lys-Ser,
Pyr-Ala-Lys-Ser, un
enlace o
Glx-Ala-Lys-Ser
en la que Glx representa:
Pyro-Glu, Glu o Gly y sus derivados
- -Y representa:
- Ser-Asn-OH
- \quad
- Ser-Asn-NH_{2}
- \quad
- Ser-OH
- \quad
- Ser-NH_{2}
estando los aminoácidos en forma D, L o DL, o el
conjugado presenta la fórmula general
(IV)A-W-Lys-Asp-Z
en la
que
A es un compuesto de fórmula general I o II o el
radical correspondiente
- W representa:
- Glu-Gln-Arg, Gln-Arg, Arg,
- \quad
- Arg-Lys-, Arg-Lys-Asp o un enlace
\newpage
- Z representa:
- Val-Tyr-NH_{2}, Val-Tyr-OH
- \quad
- Val-NH_{2}, Val-OH, Tyr-OH, Tyr-NH_{2}
- \quad
- OH o NH_{2}
estando presente, por lo menos una de las
secuencias Arg-Lys-Asp o
Lys-Asp-Val,
estando los aminoácidos en forma D, L o DL.
con la excepción de los conjugados peptídicos de
fórmula siguiente:
- XI
- A-Glu-Gln-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-NH_{2}
- XII
- A-Glu-Gln-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH
- XIII
- A-Gln-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-NH_{2}
- XIV
- A-Gln-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH
- XV
- A-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-NH_{2}
- XVI
- A-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-OH
2. Composición según la reivindicación 1,
caracterizada porque en la fórmula general I, R puede
representar:
- un radical monoinsaturado de configuración cis
o trans, de la fórmula general
R_{2}-CH=CH-
en la que R_{2} puede representar
un radical alquilo lineal o ramificado que comprende por lo menos 6
átomos de carbono, preferentemente de 6 a 16 átomos de carbono,
eventualmente sustituido por un grupo amino, hidroxi u
oxo.
- un radical alifático lineal o ramificado en
C_{1}-C_{20}, sustituido o no, principalmente
por un radical alquilo, alquenilo o alquinilo, pudiendo presentar
una o diversas insaturaciones y pudiendo estar sustituido por uno o
diversos radicales seleccionados de entre el grupo que
comprende:
NH_{2}, OH, oxo, tiol o un radical cíclico no
aromático que presenta de 5 a 6 átomos en el ciclo en el que 1 ó 2
pueden ser diferentes del carbono, en particular, S, O o N, pudiendo
estar dichos ciclos sustituidos por unos radicales alquilo en
C_{1} a C_{3}, principalmente metilo.
3. Composición según una de las reivindicaciones
1 ó 2, caracterizada porque en la fórmula II, R1 representa
un residuo alquileno en C4-C8 eventualmente
sustituido.
4. Composición según una de las reivindicaciones
1 a 3, caracterizada porque los ácidos de la fórmula general
I o II se seleccionan de entre el ácido acético y sus derivados, el
ácido piroglutámico, el ácido DL-lipoico y sus
derivados, el ácido dihidrolipoico y sus derivados, la
N-lipoil-lisina, el ácido adípico,
el ácido \alpha-amino-adípico, el
ácido pimélico, el ácido sebácico y sus derivados, los ácidos grasos
\alpha-mono-insaturados para los
que "R2" representa un residuo alquilo, lineal o ramificado en
C7, en particular los ácidos hidroxidecenoicos y decenoílicos.
5. Composición según la reivindicación 4,
caracterizada porque los ácidos de la fórmula general I o II
se seleccionan preferentemente de entre el ácido acético y sus
derivados, el ácido piroglutámico, el ácido
DL-lipoico y sus derivados, el ácido
dihidrolipoico, el ácido
N-lipoil-lisina, el ácido adípico,
el ácido \alpha-amino-adípico, el
ácido pimélico, el ácido sebácico y sus derivados, el ácido
trans-10-hidroxi-\Delta2-decenoico
y el ácido
trans-oxo-9-decenoico.
6. Composición según una de las reivindicaciones
1 a 5, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos está
asociada al ácido o al derivado de fórmula I o II, en forma de sal,
de éster o de amida.
7. Composición según una de las
reivindicaciones 1 a 6, caracterizada porque el conjugado se
selecciona de entre los derivados peptídicos siguientes:
- I
- A-Pyr-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- II
- A-Pyr-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- III
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
\newpage
- IV
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- V
- A-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- VI
- A-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- VII
- A-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- VIII
- A-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- IX
- A-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- X
- A-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- XVII
- A-Lys-Asp-Val-Tyr-NH_{2}
- XVIII
- A-Lys-Asp-Val-Tyr-OH
- XIX
- A-Arg-Lys-Asp-Val-NH_{2}
- XX
- A-Arg-Lys-Asp-Val-OH
- XXI
- A-Arg-Lys-Asp-NH_{2}
- XXII
- A-Arg-Lys-Asp-OH
- XXIII
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-OH
siendo A un compuesto de fórmula I o II, o el
radical correspondiente, y
pudiendo los aminoácidos estar en forma D, L o
DL.
8. Composición según una de las reivindicaciones
1 a 7, caracterizada porque por lo menos una parte de los
aminoácidos está en forma glicosilada.
9. Composición según una de las reivindicaciones
1 a 8, caracterizada porque por lo menos un conjugado se
encuentra en forma de complejo metalopeptídico asociado químicamente
o físicamente a una sal de Zinc.
10. Composición según una de las
reivindicaciones 1 a 9, caracterizada porque contiene el
conjugado siguiente:
- Pyr-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-OH
11. Utilización de una composición según una de
las reivindicaciones 1 a 10, para la preparación de un medicamento
destinado a corregir las deficiencias del sistema inmunitario.
12. Utilización de un conjugado según una de las
reivindicaciones 1 a 10, para la preparación de una composición
destinada al tratamiento y a la prevención de la caída del
cabello.
13. Composición según una de las
reivindicaciones 1 a 10, caracterizada porque se trata de una
preparación para utilización dermatológica, utilizable en forma de
cremas, de leches, de lociones, de aerosoles, para administración
tópica para el tratamiento preventivo y curativo de las
alopecias.
14. Composición según una de las
reivindicaciones 1 a 10, caracterizada porque se trata de una
composición dermocosmética.
15. Composición según una de las
reivindicaciones 1 a 10 ó 14, caracterizada porque se trata
de una preparación dermocosmética o cosmética, para la utilización
en cuidados de belleza y de rejuvenecimiento cutáneo en aplicaciones
locales, utilizables en forma de cremas, de geles, de leches, de
lociones y de aerosoles.
16. Composición según una de las
reivindicaciones 1 a 10 ó 14, caracterizada porque se trata
de preparaciones cosmético-capilares destinadas a
la prevención y al tratamiento de la caída del cabello, aplicables
localmente en forma de lociones, de aerosoles, y de ampollas
liofilizadas, con un solvente, para aplicaciones locales.
17. Conjugado peptídico susceptible de
incorporarse en una composición según una de las reivindicaciones
anteriores, caracterizado porque comprende una secuencia de
por lo menos 3 aminoácidos derivados de la timulina, pudiendo los
aminoácidos estar independientemente en forma D, L o DL,
conjugándose dicha secuencia químicamente o
físicamente con por lo menos un compuesto seleccionado de entre:
- los ácidos monocarboxílicos de fórmula
general
(I)HOOC-R
en la que R representa un radical
alifático en C_{1}-C_{20}, lineal o ramificado,
eventualmente sustituido, pudiendo presentar una o diversas
insaturaciones,
así como los derivados alcohol o aldehído o
amida de los ácidos de la fórmula I;
- los ácidos dicarboxílicos de la fórmula
general
(II)HOOC-R_{1}-COOH
en la que R_{1} representa un
radical alifático divalente que presenta por lo menos 3 átomos de
carbono, preferentemente de 3 a 10 átomos de carbono, lineal o
ramificado, principalmente un radical alquilo, alquileno,
alquenileno o alquinileno, pudiendo presentar una o diversas
insaturaciones eventualmente sustituido, principalmente por uno o
diversos grupos amino, hidroxi, oxo o un radical alquilo en
C_{1}-C_{3}, pudiendo R_{1} formar un ciclo
con una de las funciones
ácidas,
y porque presenta la fórmula general
(III)A-X-Gln-Gly-Gly-Y
en la
que
A es un compuesto de fórmula general I o II o el
radical correspondiente
- X representa: Ser, Lys-Ser,
Ala-Lys-Ser,
Pyr-Ala-Lys-Ser, un
enlace o
Glx-Ala-Lys-Ser
en la que Glx representa:
Pyro-Glu, Glu o Gly y sus derivados
- - Y representa:
- Ser-Asn-OH
- \quad
- Ser-Asn-NH2
- \quad
- Ser-OH
- \quad
- Ser-NH2
estando los aminoácidos en forma D, L o DL.
18. Conjugado peptídico según la reivindicación
17, caracterizado porque en la fórmula general I, R puede
representar:
- un radical monoinsaturado de configuración cis
o trans, de la fórmula general
R_{2}-CH=CH-
en la que R_{2} puede representar
un radical alquilo lineal o ramificado que comprende por lo menos 6
átomos de carbono, preferentemente de 6 a 16 átomos de carbono,
eventualmente sustituido por un grupo amino, hidroxi u
oxo.
- un radical alifático lineal o ramificado en
C_{1}-C_{20}, sustituido o no, principalmente
por un radical alquilo, alquenilo o alquinilo, pudiendo presentar
una o diversas insaturaciones y pudiendo estar sustituido por uno o
diversos radicales seleccionados de entre el grupo que
comprende:
NH_{2}, OH, oxo, tiol o un radical cíclico no
aromático presentando de 5 a 6 átomos en el ciclo en el que 1 ó 2
pueden ser diferentes del carbono, en particular, S, O o N, pudiendo
estar dichos ciclos sustituidos por unos radicales alquilo en
C_{1} a C_{3}, principalmente metilo,
en la fórmula general II, R_{1} representa un
residuo alquileno en C_{4}-C_{8}, eventualmente
sustituido.
19. Conjugado según una de las reivindicaciones
17 ó 18, caracterizado porque los ácidos de la fórmula
general I o II se seleccionan de entre el ácido acético y sus
derivados, el ácido piroglutámico, el ácido
DL-lipoico y sus derivados, el ácido dihidrolipoico
y sus derivados, la N-lipoil-lisina,
el ácido adípico, el ácido
\alpha-amino-adípico, el ácido
pimélico, el ácido sebácico y sus derivados, los ácidos grasos
\alpha-mono-insaturados para los
que "R2" representa un residuo alquilo, lineal o ramificado en
C7, en particular los ácidos hidroxidecenoicos y decenoílicos,
tales como el ácido trans-10- hidroxi-
\Delta2-decenoico y el ácido
trans-oxo-9-decenoico.
20. Conjugado según una de las reivindicaciones
17 a 19, caracterizado porque la secuencia de aminoácidos
está ligada al ácido o al derivado de fórmula I o II, en forma de
sal, de éster o de amida.
21. Conjugado según una de las reivindicaciones
17 a 20, caracterizado porque se selecciona de entre los
derivados peptídicos siguientes:
- I
- A-Pyr-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- II
- A-Pyr-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- III
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- IV
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- V
- A-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- VI
- A-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- VII
- A-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- VIII
- A-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- IX
- A-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-NH_{2}
- X
- A-Gln-Gly-Gly-Ser-NH_{2}
- XXIII
- A-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn-OH
siendo A un compuesto de fórmula I o II, o el
radical correspondiente, pudiendo estar los aminoácidos en forma D,
L o DL, pudiendo una parte de los aminoácidos estar en forma
glicosilada.
22. Conjugado según una de las reivindicaciones
17 a 21, caracterizado porque se encuentra en forma de
complejo metalo-peptídico asociado químicamente o
físicamente a una sal de zinc.
23. Conjugado según una de las reivindicaciones
17 a 22, a título de medicamento.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9513544A FR2741076B1 (fr) | 1995-11-15 | 1995-11-15 | Conjugues peptidiques derives des hormones thymiques, leur utilisation a titre de medicament et compositions les contenant |
| FR9513544 | 1995-11-15 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2196187T3 ES2196187T3 (es) | 2003-12-16 |
| ES2196187T7 true ES2196187T7 (es) | 2009-11-05 |
Family
ID=9484596
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES96939132T Active ES2196187T7 (es) | 1995-11-15 | 1996-11-15 | Conjugados peptidicos derivados de las homonas timicas, su utilizacion a titulo de medicamento y composiciones que lo contienen. |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6211155B1 (es) |
| EP (1) | EP0861266B3 (es) |
| JP (1) | JP2000500447A (es) |
| AT (1) | ATE238348T1 (es) |
| AU (1) | AU7683296A (es) |
| CA (1) | CA2237995C (es) |
| DE (2) | DE69627691D1 (es) |
| ES (1) | ES2196187T7 (es) |
| FR (1) | FR2741076B1 (es) |
| WO (1) | WO1997018239A1 (es) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6030948A (en) * | 1997-12-19 | 2000-02-29 | Mann; Morris A. | Hair regeneration compositions for treatment of alopecia and methods of application related thereto |
| US6902721B1 (en) * | 1998-07-10 | 2005-06-07 | Osteoscreen, Inc. | Inhibitors of proteasomal activity for stimulating bone growth |
| US6462019B1 (en) * | 1998-07-10 | 2002-10-08 | Osteoscreen, Inc. | Inhibitors of proteasomal activity and production for stimulating bone growth |
| EP1100529B2 (en) * | 1998-07-30 | 2010-08-25 | The Government of the United States of America, as repres. by the Secretary of Health and Human Services, Nat. Inst. of Health | Thymosin beta 4 promotes wound repair |
| US20070015698A1 (en) * | 1998-07-30 | 2007-01-18 | United States Of America As Represented By The Secretary Of Health | Treatment of skin, and wound repair, with thymosin beta 4 |
| FR2857667B1 (fr) | 2003-07-18 | 2007-07-13 | Inst Europ Biolog Cellulaire | Nouveaux conjugues peptidiques utiles dans le traitement preventif et curatif de l'alopecie |
| FR2857597B1 (fr) * | 2003-07-18 | 2008-01-25 | Inst Europeen Biolog Cellulair | Utilisation de conjugues peptidiques pour la preparation de compositions destinees au traitement preventif et curatif de l'alopecie. |
| EP1680438A2 (en) * | 2003-10-14 | 2006-07-19 | Kernel Biopharma Inc. | Amiphiphylic peptide-pna conjugates for the delivery of pna through the blood brain barrier |
| EP1737819B1 (en) * | 2004-03-26 | 2010-12-22 | DSM IP Assets B.V. | Amino acid and peptide conjugates of arylalkylic acids for cosmetic use |
| FR2899105B1 (fr) * | 2006-03-30 | 2012-07-27 | Soc Extraction Principes Actif | Composition cosmetique et/ou pharmaceutique comprenant comme ingredient actif, au moins un hydrolysat de proteines de poacees et utilisation de cet hydrolysat |
| CN101855235B (zh) * | 2007-10-29 | 2013-04-24 | 赫里克斯生物医疗公司 | 保护性皮肤护理四肽 |
| CA2707096A1 (en) * | 2007-11-30 | 2009-06-04 | Immundiagnostik Ag | Composition for treatment and prevention of hair loss and premature graying of hair |
| FR3042192B1 (fr) | 2015-10-09 | 2017-12-08 | Inst Europeen De Biologie Cellulaire | Peptides utiles dans le traitement preventif et curatif de l'alopecie |
| US20180228837A1 (en) * | 2017-02-15 | 2018-08-16 | Tanya Rhodes | Stable iodine solutions with medical applications |
| CU24626B1 (es) | 2019-12-26 | 2022-11-07 | Centro Nac De Biopreparados | Composición farmacéutica a base de proteínas con actividad neuroprotectora, inmunomoduladora, antiinflamatoria y antimicrobiana |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CH637111A5 (fr) * | 1977-05-25 | 1983-07-15 | Anvar | Composes polypeptidiques a activite thymique ou antagoniste et leurs procedes de synthese. |
| NZ189101A (en) * | 1977-12-08 | 1984-07-06 | Ortho Pharma Corp | Polypeptides having the ability to induce differentiation of both th-1+ t-lymphocytes and bu-1+ b-lymphocytes;pharmaceutical compositions |
| JPS5852225A (ja) * | 1981-09-22 | 1983-03-28 | Mitsui Pharmaceut Inc | 脱髄疾患治療剤 |
| JPS6089499A (ja) * | 1983-10-21 | 1985-05-20 | Mitsui Pharmaceut Inc | ペプチド |
| US4629723A (en) * | 1984-06-27 | 1986-12-16 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Potent thymopentin analogs |
-
1995
- 1995-11-15 FR FR9513544A patent/FR2741076B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-11-15 US US09/068,767 patent/US6211155B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-15 EP EP96939132A patent/EP0861266B3/fr not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-15 CA CA2237995A patent/CA2237995C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-15 ES ES96939132T patent/ES2196187T7/es active Active
- 1996-11-15 DE DE69627691A patent/DE69627691D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-15 AU AU76832/96A patent/AU7683296A/en not_active Abandoned
- 1996-11-15 WO PCT/FR1996/001812 patent/WO1997018239A1/fr active IP Right Grant
- 1996-11-15 AT AT96939132T patent/ATE238348T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-11-15 JP JP9518639A patent/JP2000500447A/ja active Pending
- 1996-11-15 DE DE69627691T patent/DE69627691T4/de not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0861266A1 (fr) | 1998-09-02 |
| FR2741076B1 (fr) | 1998-01-30 |
| EP0861266B3 (fr) | 2009-04-08 |
| DE69627691T2 (de) | 2004-03-11 |
| FR2741076A1 (fr) | 1997-05-16 |
| DE69627691T4 (de) | 2009-10-08 |
| CA2237995C (fr) | 2011-08-09 |
| CA2237995A1 (fr) | 1997-05-22 |
| US6211155B1 (en) | 2001-04-03 |
| JP2000500447A (ja) | 2000-01-18 |
| ATE238348T1 (de) | 2003-05-15 |
| DE69627691D1 (de) | 2003-05-28 |
| AU7683296A (en) | 1997-06-05 |
| EP0861266B1 (fr) | 2003-04-23 |
| ES2196187T3 (es) | 2003-12-16 |
| WO1997018239A1 (fr) | 1997-05-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2196187T7 (es) | Conjugados peptidicos derivados de las homonas timicas, su utilizacion a titulo de medicamento y composiciones que lo contienen. | |
| AU758903B2 (en) | Transport system conjugate | |
| US10517932B2 (en) | Compositions and uses thereof | |
| ES2199534T3 (es) | Composicion anti-inflamatoria. | |
| CN101296939B (zh) | 用于促进毛发生长和改善皱纹的肽以及包含该肽的化妆品组合物 | |
| ES2668072T3 (es) | Bioactivador metabólico cutáneo | |
| US20050065090A1 (en) | Dermopharmaceutically and cosmetically active oligopeptides | |
| RU2180590C2 (ru) | Применение по меньшей мере одного пептида в косметической композиции или для получения лекарственного средства | |
| PT88626B (pt) | Processo para a preparacao de um factor de crescimento polipeptidico proveniente de leite | |
| JPH08301729A (ja) | 髪の成長の促進または刺激および／または抜毛防止薬剤 | |
| KR20130032788A (ko) | 발모 촉진용 펩타이드 및 이의 용도 | |
| JP2022519715A (ja) | 皮膚、毛髪、爪および／または粘膜の処置および／またはケアに有用な化合物 | |
| JP2000512613A (ja) | ペプチド複合体、医薬品としてのその用途およびそれを含有する組成物 | |
| KR20180108974A (ko) | 피부 노화 방지 및 피부 주름 예방용 펜타펩타이드와 펜타펩타이드 다이머의 제조방법과 이를 포함하는 화장료 조성물 | |
| ES2401686T3 (es) | Utilización de conjugados peptídicos para la preparación de composiciones destinadas al tratamiento preventivo y curativo de la alopecia | |
| BRPI0720874A2 (pt) | Peptídeos bioativosa curtos para modulação celular e imunológica. | |
| JP6548126B2 (ja) | Ｉｉｉ型コラーゲン産生促進剤 | |
| KR101405558B1 (ko) | 카페오일알파네오엔돌핀 펩타이드 유도체 및 이의 항가려움 및 항아토피 소재로의 활용 | |
| CN112638358B (zh) | 包含脂联素衍生肽的促进毛发生长用组合物 | |
| JP2008530181A (ja) | 少なくとも１種類の天然Ａｃ−Ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏテトラペプチドまたはその類似体の１つの、毛髪喪失を遅延させ、かつ／または毛髪成長を刺激するための薬剤としての化粧料的使用 | |
| US7404948B2 (en) | Peptidic conjugates for alopecia prevention and treatment | |
| ES2536119T3 (es) | Péptidos activadores de la dermatopontina y composiciones cosméticas que los comprenden | |
| RU2221545C1 (ru) | Косметическое средство, улучшающее физиологическое состояние кожных покровов | |
| JP5940542B2 (ja) | 細胞導入ペプチドと皮膚導入促進剤とを組み合わせた皮膚導入システムおよび美白剤 |