ES2536119T3

ES2536119T3 - Péptidos activadores de la dermatopontina y composiciones cosméticas que los comprenden

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Publication number: ES2536119T3
Application number: ES11794201.1T
Authority: ES
Inventors: Claude Dal Farra; Nouha Domloge; Jean-Marie Botto
Original assignee: ISP Investments LLC
Current assignee: ISP Investments LLC
Priority date: 2010-11-09
Filing date: 2011-11-07
Publication date: 2015-05-20
Anticipated expiration: 2031-11-07
Also published as: CN103201282B; US20130288978A1; CN103201282A; EP2638059A1; JP6179771B2; HK1187063A1; FR2967160A1; JP2013542950A; FR2967160B1; WO2012062977A1; US8778891B2; EP2638059B1

Abstract

Peptido de formula general (I): R1 (AA)-X1- Arg-X2-Trp-X3-X4-X5-X6 (R3) - (AA)-R2 En la cual X1 representa el acido aspartico o algün aminoacido, X2 representa la glutamina o el acido glutarnico, X3 representa la asparagina o la lisina o la glutamina o algun aminoacido, X4 representa la fenilalanina o la tirosina o algun aminoacido, X5 representa la tirosina o la alanina o algun aminoacido, X6 representa la cisteina o algun aminoacido, AA representa cualquier aminoacido excepto la arginina, la cisteina, la leucina, la glicina y el acido glutamico, y n y p>=0 o 1, con n diferente de p; R1 representa la función amina primaria del aminoacido N-terminal, libre o sustituida por un grupo de tipo acilo (R-CO-) donde el radical R es bien una cadena alquilo de C1 a C30 saturada o insaturada de tipo acetilo, o bien un grupo aromatico de tipo benzoilo, tosilo o benciloxicarbonilo; R2 representa la funcion carboxilo del aminoacido C-terminal, que posee bien un grupo hidroxilo libre o sustituido por un grupo seleccionado entre una cadena alquilo de C1 a C30, o bien un grupo -NH2, -NHY o -NYY' con Y e Y' representando una cadena alquilo de C1 a C4; R3 representa la función tiol de la cisteina en la posicion X6, sea libre, sea sustituida por un grupo metilo o acetilo, sea unida de manera covalente por un puente disulfuro a otra cisteina.

Description

campo de la Invención

(0001) La presente invención eslá en el campo de los principios activos cosmélicos y

dennato-fannacéuticos así como las composiciones que los comprenden.

[0002] La presente invención liene por abjjeto proporcionar nuevas moléculas útiles

para prevenir o luchar contra los signos cutáneos del envejecimiento, y en particular las arrugas, la flacidez, la pérdida de volume,n y de elasticidad de la piel.

(0003) Más particularmente, la invención se refiere a péptidos activadores de la

expresión de la dermatopontina, a composiciones cosméticas o farmacéuticas que comprenden tales péptidos, al uso de tales composiciones para aumentar la expresión

de las protelnas de la matriz extracelular, prevenir la degradación de las fibras de colágeno y de las fibras elásticas por los UV y, finalmente, a métodos de cuidado

cosmético para prevenir ylo tratar los sh.~nos cutáneos del envejecimiento y del fotoenvejecimiento.

Antecedentes de la Invención

(0004) La piel es un órgano de recubrimi"nto compuesto de varias capas (dermis, unión dermo-epidérmica, epidermis). La dermis es el tejido de soporte de la piel y se compone de agua, de flbras de elaslina y de flbras de colágeno (70% de las fibras

dérmicas), envueltas en una matriz intersticial de proteoglicanos. Los flbroblastos son el principal componente celular de la dermin y están en el origen de la sfntesis de las

fibras de colágeno y de las flbras de elastinal.

[OOOS] La parte més externa es la epidermis un epitelio multlestratificado constituido esencialmente de queratinocitos estrechamelnte ligados entre ellos. El asiento basal de

la epidermis se compone de una capa do células proliferativas, principalmente de queratinocHos y melanacHos, que se anclan en la unión dermo-epidérmica (UDE). La UDE es una estructura extracelular en celos!a que constituye la interfaz entre la dermis y la epidermis.

(0006) La piel, al igual que todos los demás órganos, está sujeta al proceso fisiológico complejo de envejecimiento. Se distingue E~I envejecimiento Intrlnseco o cronológico, que es la consecuencia de una senesc:encia genéticamente programada y de aheraciones bioqufmicas debidas a factores endógenos. A nivel de la piel, se caracteriza por una ralentización de la regeneración celular y de las matrices extracelulares, dando como resultado atrofia.dérmica y epidérmica, una sequedad, una disminución de la elasticidad y la aparición de arrugas y arrugas finas.

[0007] El envejecimiento extrinseco, por su parte, es debido a agresiones ambientales que sufre el organismo durante toda la vida, como la contaminación, el sol, las enfermedades, el estilo de vida, etc. Se superpone al envejecimiento intrfnseco en

áreas expuestas crónicamente al sol; esto ... llama fotoenvejecimiento. Las principales alteraciones relacionadas con el fotoenvejecimiento se asientan en la dermis y son: la aparición de manchas pigmentarias, una diSiminuci6n y fragmentaci6n de las fibras de colágeno que causan las arrugas y la acumulación de fibras elásticas distróficas que constRuyen la elastosis solar.

[0008) Muchos enfoques de investigación se han estudiado para identificar agentes

activos capaces de luchar contra el envejecimiento cuténeo. incluyendo la protección contra el estrés ambiental (sol, contamim;lción.... ), la activación de la regeneración

celular, el fortalecimiento de la matriz extracelular de colágeno y de elasüna. Estas

investigaciones han conducido a la puesta en el mercado de muchos agentes activos más o menos eficaces. Por lo tanto, todavla es relevante identificar nuevos compuestos capaces de prevenir o luchar contra el envejecimiento de la piel. B

problema más particulanmente objetivo de la invención es luchar contra la desorganización de las estructuras flbrilar,es de la matriz extracelular cutánea que

aparece d16ante el envejecimiento o fotoen...rejecimiento.

[oo09J Los inventores han identificado reciEmtemente una diana molecuar interesante para cumplir esta función. Se trata de la delmatoponüna, una pequena proteIna ácida. rica en tirosina, presente en abundanci¡. en la dermis y más especfficamente,

alnededor de las fibras de colágeno. Desempena un papel clave en la estructura de las fibrillas de colágeno (Jonathan et al., J. Eliol. Chem., 1993, vol. 268, pp. 19.826 a 19.832), participa en el proceso de adheren,~a de los fibroblastos (Lewandowska et al.,

J. Cen Sei., 1991, vol.99, pp. 657-668), de los queratinocilos a través de la integrina a3~1 y un receptor de tipo proteoglicano. Estas propiedades hacen de la

dermatoponlina un actor importante en la cil::atrizaci6n (Akamota et aL, Biochem, 2010,

Vol. 49, pp. 1,47 a 155).

[0010] Confirmando estos resultados, la ausencia de dennatopontina en ratones modificados genéticamente resultó en una disminución del espesor de la dermis y de su contenfdo en COlágeno, así como en una menor etasticidad de la piel (Takeda et al.

J. Inves!. Dennatol. 2002, Vol. 119, pp. 678-683).

[0011) Independientemente de su papel e,dructural, la dermatopontina puede unirse en un complejo trimérico con la decerina y el TGF beta y por lo tanto potenciar la acción de TGF beta 1 (Okamoto et al, Biochem J. 1999 01 de febrero;. 337 (3): 53741).

[0012) El documento JP2008201777 divulga el uso de péptidos derivados de la denmatopontina, como agentes que favorecon la adherencia celular y la cicatrización.

[0013) El documento US20050065089 divu~ga que la denmatoponlina nativa puede ser

utilizada para potenciar la activación del TGF beta en el contexto de un tratamiento biológico de las hernias discales.

[0014) US 2010/168126 Al divulga el uso de un dipéptido modiflClldo para prevenir o

luchar contra los signos cutáneos det envejocimiento. Este documento describe que el

dipéptido puede activar la expresión de la d,,,,,,atopontina.

[0015) Sin embargo, hasta la fecha, ningún pépüdo de la invención se ha descrito para

activar la dermatopontina en las células die la piel y prevenir o reparar los signos cutáneos de envejecimiento y det fotoenveje'cimiento.

Descripción de la invención

[0016) Los inventores han demostrado que péptidos de fónmula general (1) siguiente:

R,-(M),-X,-Arg-X,-Trp-X,..X.-l<S-Xe(R,)-(M)p-R,

eran buenos agentes de activación de la dermatopontina. En consecuencia, estos péptidos están adaptados para luchar contra el envejecimiento y el fotoenvejecimiento de la piel.

[0017] Los péptidos de la invención se cara<cterizan por el hecho de que: activan la expresión de la dennatopclntina, aumentan la expresión del colágeno tipo 1, 111 Y de la fibronectina, previenen la degradación de las estructuras fibrilares de colágeno y de las fibras elásticas en una piel sometida a rayos UV.

(0018) Se entiende por "péptido o agentE! activo activador de la dermatopontina o capaz de activar la dermatopontina", todo péptido de fórmula general (1) capaz de aumentar la cantidad de dennatopontina presente en la célula, ya sea aumentando la sfntesis proteica mediante modulación directa o indirecta de la expresión génica, o por otros procesos biológicos tales como la lestabilización de la protelna o incluso la estabilización de los transcritos de RNA mensajero.

(0019) Se entiende por piel, el conjunto de I<os tejidos de recubrimiento que constijuyen la piel, las mucosas y los tegumentos, inc/ul,endo el cabello, las pastanas y las cejas.

(0020) Ast, la invención tiene por primer Objl.tO un péptido de fórmula general (1)

R.-(M),-X,-Arg-X,-Trp-X,-X,-X,.·X,(R,)-(M),-R,

(0021) En la que X, representa el ácido aspértico o alllún aminoácido, X, representa la glutamina o el ácido glutámico, ~representa la asparagina o la liBina o la glutamina o algún aminoácido, ~representa la fenilalanina o la tironina o algún aminoácido, Xs representa la tirosina o la alanina o algún aminoácido, X, representa la cistelna o algún aminoácido, AA. representa cualquier aminoácido excepto la arginina, la cistelna, la leucina, la glicina y el ácido glutámico; y n y p = Oo 1, con n d~erente de p; R1 representa una función amina primaria del aminoácido N-Ienninal, libre o sustituido por un grupo del tipo acilo (R-CO-) donde el radical R es o una cadena alquilo de el a e 30 saturad:a o insaturada de tipo acetilo, o un grupo aromático de tipo benzoilo, losilo o benciloxicarbonilo; R2 representa la función carboxilo dtlll aminoácido e-terminal, que tiene sea un grupo hidroxilo libre o sustituido C(lln un grupo seleccionado de una cadena alquilo de e, a e 30, sea un grupo -NH" -NHY o -NYY' con Y e y' representando una cadena alquilo de e, a e.; R3 representa la función tio' de lél cisteína en posición Xs, sea libre, sea sustituida por un grupo metilo o acetilo, sea unida de manera covalente por un puente disulfuro a otra cistelna

(0022) Según un método de realización de la invención más particularmente preferido,

el péptido es de secuencia: (SEe ID n'1): AspoArg-GIn-Trp-NH, (SEe ID n'2): AspoArg-Glu-Trp-NH, (SEe ID n'3) : AspoArg-GIn-Trp-Asn-Tyr-NH, (SEe ID n'4) : Arg-Glu-TrpoGln-PheCTyr-Cys-NH, (SEe ID n'S) : Arg-Glu-Trp-GIn-Phe'Tyr-Cys(eys)-(NH,) (SEe ID n' 6) : AspoArg-Glu-Trp-Gln-I'he-NH, (SEe ID n'7): AspoArg-Gln-Trp-Asn-Tyr-Ata-eys-NH, (SEe ID n'S) : AspoArg-Gln-Trp-Asn-Tyr-Ata-Cys(eys)-(NH,)

(SEC ID n'9): Asp-Arg-Glu-Trp-Gln-Phe-Tyr-Cys-NH, (SEC ID n'10) : Asp-Arg-Glu-Trp-Gln-Phe-Tyr-Cys(Cys)-(NH,) (SEC ID n'll) : Asp-Arg-Gln-Trp-Ly"-Phe-NH, (SEC ID n'12) : Arg-Glu-Trp-Gln-Ph,~Tyr-NH, (SEC ID n'13) : Arg-Glu-Trp-GIn-Ph,~Tyr.

[0023] En una realización de particular interés, el péptido corresponde a la secuencia SEC ID n' S.

(0024) En otro modo de realización de parlicular inlerés, el péptido corresponde a la secuencia SEC ID n' 9 o SEC ID n' 10.

(0025) De acuerdo con otra realización "ún de más particular interés, el péptido corresponde a la secuencia SEC ID n'12 o a la SEC ID n' 13.

(0026) Los aminoácidos, que const~uyen el péptido según la invención y designados por los términos AA, pueden estar en configuración ¡soménca l-y 0-. Preferiblemente, los aminoácidos están en fonna l

(0027) El término "péptido" designa una cadena de dos o más aminoácidos unidos entre si por enlaces peptldicos.

(0028) Por "péptido" se entiende también el péptido natural o sintético de la invención como se describe anteriormente, o al menos un fragmento del mismo, ya sea obtenido por proteolisis o de forma sintética o indusc) cualquier péptido natural o sintético Q,lya seOJenda está constituida total o parcialmente por la secuencia de péptido descrito anteriormente.

(0029) Con el fin de mejorar la resistencia a la degradación, puede ser necesario utilizar una forma protegida del péptido de 1" invención. Preferiblemente se utiliza para proteger la función amina primaria del aminoácido N-terminal, una sustitución por un grupo R, de tipo acilo (R-CO-) en la que el radical R es o bien una cadena alquilo de C1 a C30 saturada o insaturada de tipo acetilo, o un grupo aromático de tipo benzoilo, tosilo, o benciloxicarbonilo, incluso más preferiblemente un grupo acetilo. Preferiblemente, se utiliza, para proteger la función carboxilo del aminoácido Cterminal, una sustitución con un grupo ~de tipo de cadena alquilo de C1 a C30, o un grupo NH" NHY o NVY con Y representandO una cadena alquilo de C, a C" más preferiblemente un grupo NH,.

(0030) El péptido de la invención puede estar protegido en el extremo N-terminal, Cterminal o en ambos extremos.

(0031) Con el fin de inhibir la dimerizació,n de los péptidos según la invención, la función tiol de la cistelna C-leoninal puede l5er sustituida por un grupo metilo, acetilo o incluso otra cistelna. En este último caso, 1" sustHución resulta en la formación de un puente disulfuro entre los dos residuos de cisteina.

[0032] Por lo tanto, la invención se refierE! a una compoSición como se ha definido anteriormente, caracterizada porque el péptido de la invención y ventajosamente de secuencia SEC ID n' 1 a SEC ID n' 13 está en una forma protegida o no, preferiblemente bajo forma protegida en el e,xtremo C-terminal.

(0033) El péptido de fórmula general (1) según la invanción se puede obtener mediante sfntesis qufmica convencional (en fase s6~ida o en fase líquida homogénea), o por slntesis qulmica clásica (Kullman et al. J. 8iol. ehem., 1980, vol. 225, pág. 8234) a partir de aminoácidos constituyentes.

(0034) El péptido de la invención pu,"'e ser de origen natural o sintético. Preferentemente según la invención, el péptido es de origen sintético, obtenido por slntesis qufmica.

[0035] Según la invención, el agente activo puede ser un péptido único o una mezcla de péptidos. El péptido de acuerdo con la invención está disuelto preferentemente en uno o más disolventes fisiológicamente adaptados, tales como agua. glicerol. etanol, propanodiol, butilenglicol, dipropilenglicol, diglicoles etoxilados o propoxilados, polioles clclieos o cualquier mezcla de estos disofventes.

(0036) Se entiende por ''fisiológicamente adaptado" que el disolvente elegido es adecuado para entrar en contacto con la pliel sin provocar reacciones de toxicidad o intolerancia.

(0037) El péptido diluido se esteriliza después por fiKración estéril.

(0038) Después de esta etapa de dilución, el péptido puede encapsularse o incluirse en un vector cosmético o fannacéutico tal como liposomas o cualquier otra microcápsula utilizada en el campo de la cosmética o adsorbido en pollmeros orgánicos pulverulentos, soportes mineralOl' tales como talcos y bentonHas, y más en general solubilizarse, o fijarse sobre, cualquner vector fisiol6gicamente adaptado.

(0039) De acuerdo con un segundo objeto de la invención, el péptido de fórmula general (1) se puede utilizar como un medicalmento.

10040) De manera particularmente ventajelsa, el péptido de fórmula general (1) se puede usar como un agente cicatrizante.

10041) La invención tiene también por objeto una composición farmacéutica cicatrizante que comprende, en un medio fiisiológicamente adaptado, el péptido de la invención.

(0042) Según un aspeclo particular de la invención, dicho péptido puede ser utilizado para tratar los sintomas dennatológico$ relacionados con la edad o con el fotoenveJecimiento prematuro, y notablemente el retraso en la cicatrización, la laxitud y la atrofia dénnica, la elastosis solar y la disminución de la cohesión denno-epidérmica.

(0043) Ventajosamente, según esta realización de la invención, las composiciones fannacéuticas serán apropiadas para una l3plicación tópica o podrán presentarse en una forma liquida adecuada para la inyecc,ión subcutánea o en la piel, en particular apropiada a las multi-inyecciones superficiales locales de tipo mesoterapia.

[0044] la invención tiene por tercer ()bjeto una composición cosmética que comprende, en un medio fisiológicamente adecuado, un péptido de fórmula general (1) como un agente activo activador de la derm.:rtopontina.

(0045) Según una forma de realización v'lntajosa de la invención, el agente activo según la invención está presente en las compoSiciones de la invención en una concentración comprendida entre unos 10·'; M Y 10-3 M, Y preferentemente en una concentración comprendida entre 10~ M y '10'" M, Y más preferiblemente entre 5,10" M Y 5,1 O~ M con respecto al peso total de la composición final. Este intervalo de concentraciones representa la cantidad requerida de agente activo para obtener el

efecto molecular buscado, es decir, para activar la expresión de la dermatopontina, del

colágeno tipo 1, 111 Y de la fibronectina.

[0046J Preferiblemente, la composición seglún la invención se presenta en una forma

S adecuada para la aplicación tópica qUEt comprende un medio fisiológicamente adaptado para la piel. Por ''fisiológicamente adaptado" se entiende medios que son adecuados para un uso en contacto con la piel o los tegumentos humanos, sin riesgo de toxicidad, incompatibilidad, inestabilidiad, respuesta alérgica, y otros efectos secundarios.

(0047) Se entiende por "aplicación tópica" a.plicar o extender el agente activo según la

invención, o una composición que lo contiene, en la superficie de la piel.

[0048J Estas composiciones pueden prindpalmente presentarse en forma de una

1S solución acuosa, hidro-alcohólica u OleoSél; una emulsión aceite-en-agua, agua en aceite o emulsiones múltiples; gel acuoso o anhidro; coloide. Estas composiciones también pueden estar en forma de cremas, suspensiones o incluso polvos, adaptados para la aplicación a la piel, membranas mucosas, labios y/o tegl.J11entos. Estas composiciones pueden ser más o menos flUlidas y tener el aspecto de una crema, una loción, una leche, de un suero, de una pomada, de una crema, una pasta o una espuma. También pueden presentarse en forma sólida, tal como un palillo, o aplicarse a la piel en forma de aerosol. Pueden utiliz:arse como producto de cuidado y/o como

producto de maquillaje de la piel.

25 (0049) El conjunto de estas composldones incluyen, además, cualquier aditivo utilizado habitualmente en el campo de aplicación previsto y asl como los aditivos necesarios para su formulación, tales COrrlO co-disolventes (etanol, glicerol, alcohol bencílico, humectante. ..), espesantes, diluyentes, emulsionantes, antioxidantes, colorantes, filtros solares, pigmentos, cargas, conservantes, perfumes, absorbentes de olor, aceites esenciales, oligo-elementos, ácidos grasos esenciales, surfactantes, poIlmeros fonnadores de película, fiHros químicos o minerales, agentes hidratantes o aguas termales, etc. Se puede, por ejem¡plo, citar polímeros hidrosolubles de tipo polimero natural, tales como polisacáridos o polipéptidos, derivados celulósicos de tipo metilcelulosa o hidroxipropllcelulosa, o incluso polímeros sintéticos, polaxámeros,

35 carbómeros, siloxanos, PVA o PVP, y principalmente los polimeros comercializados por la sodedad ISP.

(0050) En todos los casos, el experto en la materia se asegurará de que estos

adyuvantes así como sus proporciones se eligen para no perjudicar las propiedades ventajosas investigadas de la composición según la invención. Estos adyuvantes

pueden, por ejemplo, estar presentes en co,ncentraciones que van de 0,01 a 20% del

peso total de la composición. Cuando la composición de la invención es una emulsión,

la fase grasa puede representar de 5 a 800/" en peso y preferiblemente de 5 a 50% en

peso con respecto al peso lotal de la composición. Los emulsionanles y

45 coemulsionantes utilizados en la composidón serán seleccionados entre los clásicamente utilizados en el campo considerado. Por ejemplo, se pueden utilizar en una proporción que va de 0,3 a 30% en peso, con respecto al peso total de la composición.

(0051) Se entiende que el agente activo de la invención puede ser utilizado solo o en combinación con otros agentes activos.

(0052) Ventajosamente, las composidones utilizables según la invención contienen,

además, al menos otro agente activo destintado a reforzar la acción del agente activo

55 de la invención, en el campo de la prevención y la mejora de los signos cutáneos de

S

IS

2S

envejecimiento, o incluso otro agente ~lIctNO que permrta ampliar la gama de propiedades de la composición.

[00531 Se puede citar, de forma no IimitatNa, las clases de ingredientes siguientes: agentes regenerantes, anti-envejecimientc), anti-arrugas, calmantes, anti-radecales, anti~licación, humectantes, antibacterianos, antifúngicos, queratonticos, relajantes musculares, descamantes, reafirmantes, agentes estimulantes de la sintesis de macromoléculas dérmicas o metabolismo energético, agentes moduladores de la diferenciación, la pigmentación o la despi~lmentación cutánea, agentes estimulantes

del crecimiento de tas unas o el pelo, age,..les estimulantes de la microcirculaci6n, las

pantallas o fiHros Solar o incluso los agente!; inhibidores de las metaloproteinasas.

[00541 En una realización más particular, la composición según la invención

comprenderá, además del péptido según la invención, al menos un compuesto activador del citocromo c y/o, al menos un compuesto hidratante, tal como un compuesto activador de las acuaporinas y/o, al menos un compuesto activador de' las sirtuinas y/o, al menos un compuesto que aument," la adherencia celular y/o,

al menos un compuesto que aumenta la producción de proteínas matriciales tales como colágeno, fibronectina, laminina, gllcosaminoglicanos y/o, al menos un compuesto modulador die la actividad del proteasoma y/o,

al menos un compuesto modulador dlel ritmo circadiano y/o,

al menos un compuesto modulador die las proteinas HSP y/o, al menos un compuesto que aument.:! la energla celular y/o, al menos un compuesto que modula la pigmentación de la piel y/o, al menos un compuesto activador del coenzima Q10 y/o, al menos un compuesto de mejora de la función de barrera, tal como un compuesto activador de la transglutaminasa o de la HMG-CoA reductasa y/o, al menos un compuesto de protector de la mitocondria.

[0055) Dichos compuestos anteriores pL>eden ser de origen natural, tales como

hidraizados peptidicos de plantas, o incluso de origen sintético, como péptidos.

[0056) Independientemente de sus funcione,., los otros agentes activos asociados con el agente activo de la invendón en la composición podrán tener muy diferentes estructuras quimicas. Se puede citar, pero no se limitan a, péptidos, vitamina e y sus derivados, vitaminas del grupo B, DHEA (d...hidroepiandrosterona), fitosteroles, ácido salicllico y sus derivados, retinoides, f1avonoides, aminas de azúcares, azoJes, sales metálicas, extractos peptldicos de origen v81~etal. o polimeros.

[0057] La invención tiene por cuarto objeto la utilización de una composición

cosmética q ... comprende el péptido de fórmula general (1) como agente activo, para

refOfZar la estructura de la unión derm<H!pidénnica, estimular la expresión de los

componentes de la unión dermo-epidérmicll, aumentar la densificación de la zona de

apoyo de la unión dermo-epidérmica, o mejorar el anclaje de los queratinocitos

basales y / melanocijos en la unión derm~pidérmica.

[0058] La invención tiene por quinto objeto 1," utilización de una composición cosmética que comprende el péptido de fórmula gener,al (1) como agente activo, para aumentar la expresión de las protelnas de la matriz extracelular por los fibroblastos la piel.

[0059) De acuerdo con un aspecto ventajoso de la invención, el agente activo permite aumentar la densidad y elasticidad de la dermis, y por lo tanto la firmeza de la piel, pnavenir o luchar contra la flacidez de los rasgos faciales, la pérdida de volumen, el

.delgazamiento de l. piel, l. atonl., I.s arrugas finas, I.s .rrug.s profund.s y l.

atrofia dérmica.

[0060) L. invención tiene por sexto objeto 1 .. utilización de un. composición cosmética que comprende el péptido de fórmul. ge"'.... 1 (1) como .gente .ctivo, para ev~.r l. degrad.ción de I.s fibr.s de colágeno y de I.s fibras elásticas en l. piel sometida .I.s

agresiones externas.

(0061] Se entiende por la expresión "agresiones externas", las agresiones que puede

producir el .mbiente. A titulo de ejemplo, se puede ~.r .grasiones, tales como l.

contaminación, la radiación UV, o los productos irritantes. Por contaminación, se

entiende t.nto l. cont.minación "externa", debida por ejemplo • I.s partlcul.s de

diesel, al ozono o a los metales pesados, oome la contaminación "interna" que puede ser debida, en particular, a las emisiones ~~ disolventes de pinturas, colas, o papeles

pint.dos (tales como tolueno, estireno, xileno o benzaldehldo), o incluso el humo del

cigarrillo.

[0062) Se ha demostrado que el agente activo permite lim~r l. degradación y l. desorg.nización de I.s fibras elásticas y e ..timul.r l. reorg.nización de I.s fibr.s de colágeno, consecutivas. l. radiación UV, y más particularmente a l. radi.ción UVA.

[0063) La interrupción de I.s fibras elásticas designa el conjunto de las modificaciones

consecutivas a exposiciones solares repetidas, asl como la acumulación de fibras

elásticas distróficas tlpicas de l. el.stosis s"l.r. Estas .Iteraciones, diflciles de revertir y parcialmente responsables de l. ptosis () relajación cutánea ligad •• l. edad, se deben principalmente a los rayos UVA que penetran profundamente en l. dermis.

[0064] Una realización particular de la invención tiene por objeto el uso de una composición cosmética que comprende el péptido de la invención, para prevenir o luchar contra los signos antiestéticos asociados a la elastosis solar y/o a la

desorganización de I.s fibras elásticas causo.das por l. exposición. l. radiación UV, y

más especialmente a la radiación UVA.

[0065) La invención tiene por séptimo objeto,el uso de un. composición cosmética que comprende el péptido de fórmul. general (1) como .gente activo para .umentar l. regeneración de la epidermis y de l. dermis.

[0066] Se entiende por l. expresión "regeneración de l. epidermis y de la dermis" que, de acuerdo con este aspecto ventajoso dEt la invención. el péptido de la invención provoca una mayor proliferación y migración de los queratinocitos y los fibroblastos, lo

que favorece un. renov.ción .celerad. d4. l. epidermiS y, más generalmente una

mejor regeneración de la piel.

[0087] La invención tiene por octavo objet(> un procedimiento de cuidado cosmético

para prevenir y/o tratar los signos cutáneos del envejecimiento y del fotoenvejecimiento, caracterizado porque .., .plica tópicamente • l. piel • trat.r una composición según l. invención.

[0068) Por m.nifestaciones cutáneas del envejecimiento se entiende todos los cambios en la .pariencia externa de l. piel y de los tegumentos debidos .1 envejecimiento como, por ejemplo, el adelg"zamiento de l. piel, l. fl.cidez, l. pérdida de el.sticidad y l ••tonla, I.s .rrug•• profundaS y fin.s, l. pérdida de firmeza y de tonicidad, y l ••trofi. dérmica o toda otra dEogradación interna de l. piel consecutiva •

una expoSición a la radiación UV.

[0069] En particular, la invención se retlere a un procedimiento de tratamiento cosmético para proteger la piel contra las agresiones debidas a la radiación UV..

[0070] En un modo de realización particulm, la composición se aplica antes de una 5 exposición al sol, como cuidado previo para evitar la desorganizaci6n de las fibras

elásticas.

[0071] En un segundo modo de realizaci6n de la invención, la composición se aplica después de una exposición al sol, como cuidado después del sol para reparar los

I O da~os sufridos por las fibras de colágeno y 1'8s fibras elásticas.

[0072] Otras caracteristicas y ventajas de I¡:I invenci6n se harán más evidentes tras la lectura de los ejemplos dados a titulo ilustrativo y no restrictivo.

15 Elemplo 1: Demostración del efecto actIvador de los péptldos SEC nO 5 y SEC ID ... 9 sobre la expresión de la dennatoporrUna

(0073) El propósito de este estudio es determinar la influencia del péptido SEC ID nO 5 y el péplido SEC ID nO 9 sobre la expresión de la dermatopontina en los fibroblastos.

20 Para ello, las se realizaron marcados espec::fficas por inmunofluorescencia en cuftivos de fibroblastos normales humanos y sobre pieles mantenidas cuftivo ex vivo.

[0074) Protocolo: fibroblastos humanos nonnales se cunivan durante 24 o 48 horas y se tralan una vez al dla con una solución d .. 10" M de péplido SEC ID ... 5 o péptido

25 SEC ID nO 9. Las células se lavan a continuaci6n, se fijan en formaldehido al 3,7% durante 10 minutos a temperatura ambiente.

(0075) Las muestras de piel humana se c;ultivaron en la interfase aireJIlquido. Una solución de péptido SEC ID nO 5 o de p,éptido SEC ID nO 9 a 10" M se aplica

30 t6picamente, a continuación, después las muestras se incuban durante 24 horas o 48

horas. Estas muestras de piel son a continuación fijadas con formaldehido y luego

incluidas en parafina o fijadas con OCT, por congelaci6n a ~20°C. luego se realizan secciones de 3 a 4 ~m (6 ~m para las secciones en frlo). El inmunomarcado de las

muestras incluidas en parafina se reaUza después de desenmascarar sitios

35 especificos. El inmunomarcado de las mue .. tras incluidas con el OCT se lleva a cabo después de una fijación a 37"C y acetona frl,a.

[0076] las células fijadas o las secciones Sl~ incubaron en presencia de un anticuerpo

pollelonal de conejo especifico de la dermat"pontina (grupo Proteintech, Re!: 10537-1

40 AP), seguido por un anticuerpo secundario acoplado a un marcador fluorescente.

Después de montaje en un medio ad hoc, las células se examinaron al microscopio de epifluorescencia (microscopio Nikon Eclipse E600).

[0077] Resultados: En todas las condicione!; ensayadas, se observa una fluorescencia

45 más intensa en los fibroblastos fratados con el péptido SEC ID nO 5 o el péptido SEC

ID nO 9 a 10.& M que en las condiciones de tcontrol. las pieles humanas muestran una

fluorescencia más intensa en la dermis en lals muestras tratadas por el péptido SEC ID

nO 5 o el péptido SEC ID nO 9.

50 (0078) Conclusiones: los péptidos SEC ID ... 5 Y SEC ID nO 9 estimulan muy sensiblemente la expresión de la dermatopontina por los fibroblastos dérmicos.

Elemplo 2: Estudio de la ultraestructura do las células cutáneas tratadas por el péplldo SEC ID nO 5 55

(0079) El propósito de este estudio es observar las estructuras subcelulares de los queratinocitos y los fibroblastos tratados por el péptido SEC ID n' 5 a 10~ M.

Protocolo :

5 [0080] KHN o fibroblastos se cultivan en caja o en sistema Transwell, o se tratan pieles cu~ivadas ex vivo con una soluci6n a 10~ M de péptido SEC ID n' 5 durante 48 horas (el medio se cambia cada 24 horas). Las células o las muestras de piel se lavan con PBS, y luego se fijan por la fijación hipert6nica Karnosky (4% de paraformaldehído, 5% de glutaraldehldo en tampón de fosfato 0,08 M) durante 1 hora a temperatura ambiente y luego 24 horas a 4°C. las células se separan del soporte mediante raspado, se centrifugan durante f; minutos a 1000 rpm a 4· C. Se elimina el sobrenadante y se deposita tampón cacodil"to sódico 0,1 M en la base. Las células se mezclan en 2% de agar y después se post~njan con tetróxido de osmio durante 1 hora.

1 S Las muestras de piel son directamente ~¡t fijadas por tetr6xido de osmio durante 1 hora. Los especfmenes son luego deshidratados por pasos sucesivos en una sene de alcohol (de 50 a 100%). Las células o mu",.tras de piel se aglutinan a continuación en una resina. la polimerización se efectúa durante unas 12 horas a SO*C. Secciones semidelgadas de 0,5 ~m se realizan en el ultra-micr6torno. Las secciones se colocan en una lémina unida por calor y tenida luego con azul de toluidina. Los portaobjetos se deshidratan a continuación de nuevo y se montan en un medio adecuado. Después de elegir el área óptima de estudio, el bloque se redimensiona al tamafto deseado y se realizan entonces cortes ultrafinos. Sólo las, secciones que tienen un color "gris-plata" y un tamafto adecuado se montan en la pan'illa de microscopio electrónico doblemente

25 marcada por acetato de uranilo y citrato dEt ptomo, y se examinan al microscopio de transmisión a 60 u 80 KV

(0081) Resu~ados: El estudio ultraestructural muestra un enriquecimiento de orgénulos, y especialmente en mitocondrias en los queratlnocltos tratados por el péptido SEC ID n': 5. En los cu~ivos en sistema Transwell®, los contactos intercelulares entre los queratinocitos apal'Etcen más cohesivos y las interdigitaciones más marcadas en comparación con el control sin tratar. Asimismo, en los cultivos de piel ex vivo, se observan contactos celulares más estrechos entre las células de la capa basal.

[0082) En los fibroblastos en cultivo tratados por el péptido SEC ID n' 5, se observa que los cuerpos caveolares, el retlculo endoplasmético rugoso y el aparato de GoIgi, estén significativamente més desarrollados que en las células testigo. También hay una secreción más intensa de componentes de la matriz extracelular en las células de control no tratadas.

[0083) Conclusiones: En los queratinocitos Eln cultivo, el péptido SEC ID No. 5 a 1~M provoca una estimulaci6n glOOal de la actividad celular con, en particular, un aumento de la densidad de las mitocondrias.

[0084) En los fibroblastos, el péptido SEC ID n' 5 Indujo un aumento de la síntesis de componentes de la matriz extracelular.

(0085) En cultivos de piel ex vivo, el péptido de la SEC ID n' 5 aumenta los contactos intercelulares de los queratinocitos basales.

Ejemplo 3: Demostración del efecto aclUvador del péptldo SEC ID n' 5 en la expresión de flbronectlna [OO86J El propósno de este estudio es detenninar la influencia del péptido SEC ID n" 5

sobre la expresión de la fibronectina, una protefna de la matriz extracetular sintetizada por los fibroblastos. Para ello, se realizaron marcados especificos por inmunofluorescencia sobre cuttivo de fibroblastos y sobre cultivos de pieles ex vivo.

[0087] Protocolo: Fibroblastos dénnicos humanos en cu~ivo se tratan una vez al dla con una solución a 10" M de péptido SEC ID n' 5 (el medio que contiene el activo se cambia cada 24 horas). las células se lavan a continuación, se fijan en formaldehldo 813,7% durante 10 minutos a temperatura ambiente.

(0088) las muestras de piel humana se cu~ivan en la interfase aire/llquido. Una solución de péptido SEC ID n' 5 o de péptido SEC ID n' 10 a 10" M se aplica t6picamente, después las muestras se incuban durante 24 horas o 48 horas. Estas muestras de piel se fijan luego con formaldehkto y luego se incluyen en parafina o se fijan con OCT por congelación a -20·C. Se realizan luego secciones de 3 a 4 mm (6 mm para las secciones en trio). El inmunomarcado de las muestras incluidas en parafina se realiza después de desenmascarar sitios especificos. El inmunomarcado de las muestras incluidas con el OCT se lleva a cabo después de una fijación a 37·C y acetona fría.

(0089] Las células fyadas o las secciones se inroban en presenda de un anticuerpo

policlonal de conejo especifico de la fibronElctina (Sigma, ref: F-3648), seguido por un anticuerpo secundario acoplado a un marcador fluorescente. las células se examinan entonces al microscopio de epifluorescencia. (microscopio Nikon Eclipse E600).

[0090] Resu~ados: Se observó una fluore!lcencia cnoplasmática más intensa en los fibroblastos tratados por el péptido SEC ID n' 5 a 10"" M que en las células de control.

[0091] En la piel ex vivo la fluorescencia se sitúa predominantemente en la parte

superior de la dennis papilar, justo debajo de la unión dermo-epidénnlca.

(0092] Conclysiones: El péptido SEC IOn' 5 estimula muy sensiblemente la

expresión de la fibronectina en los fibroblastlos.

[0093] En la piel humana, el péptido SEC ID n' 5 estimula la densificación de la zona de soporte de la unión dermo-epidénnica.

Ejempto 4: Dem01llraclón del efecto actlvador del péptldo SEC ID n' 5 sobre la expresión de las moléculas de la matriz extracelular d6nnlca COlágeno t y colágeno 111

(0094] El propósno de este estudio es determinar la influencia del péptido SEC ID n' 5 sobre la expresión de las moléculas de la matriz extracelular dénnlca. Para ello, se ha

estudiado la expresión de los COlágenos I )' 111 en fibroblastos humanos provenientes

de la dennis.

[0095] Protocolo: Fibroblastos humanos normales se cu~ivan durante 24 o 48 horas y se tratan una vez al dla con una solución de péptido a 10"" M de péptido SEC ID n' 5 o SEC ID n' 9. las células se lavan a continuación, se fijan en fonnaldehldo al 3,7% durante 10 minutos a temperatura ambiente.

(0096) las muestras de piel humana se cu~ivan en la interfase aire/liquido. Una solución de péptldo SEC ID n· 5 o péptldo SEC ID n' 10 a 10" M se aplica tópicamente, luego las muestras se incuban durante 24 horas o 48 horas. Estas muestras de piel se fijan luego con formaldohido y luego se incluyen en parafina o se fijan con el OCT por congelación a -20·C. Entonces se realizan secciones de 3 a 4 ~m y (6 IJm para las secciones en frio). El inlTlunomarcado de las muestras incluidas en parafina se realiza después de desenma$(~rar sitios especificos. El inmunomarcado de las muestras incluidas con el OCT se lIella a cabo después de una fijación a 3rC y acetona fria.

(0097) Las células fijadas o las secciones se incuba en presencia de un anticuerpo paliclonal de conejo especifico del colágeno I (Rocldand, Rel: 600-401-103) o de un anticuerpo paliclonal de conejo especifico del colágeno 111 (Rockland, Ref: 600-401105), luego de un anticuerpo secundario acoplado a un marcador fluorescente. Después de montar en un medio ad hoc, las células se examinan al microscopio de epifluorescencia (microscopio Nikon Eclipse ESOO).

[0098] Resultados: Se observa una fluareslcencia más intensa en los cultivos y sobre las secciones de piel tratadas por el pép>tido SEC ID n° lOa 1O~ M que en las condiciones de control.

[0099) Conclusiones: El péptido SEC ID n° 5 a 10~ M aumenta la expresión del colágeno I y del colágeno 111, dos protelnas fibrilares esenciales de la matriz extracelular dénnica.

Ejemplo 5: Demostración del efecto p"otector del péptldo SEC ID nO 5 sobre fibras de elastina sometidas a irradiaciónl por UV

(0100) El propósito de este estudio es determinar la influencia del péptido SEC ID nO 5 sobre las fibras elásticas presentes en la dermis. Para ello, se realizó una coloración específica de las fibras elásticas en muestnus de piel cultivadas ex vivo.

[0101] Protocolo: Muestras de piel humana se cultivan en la interfase aire1liquido. Una solución lO" M de péptido SEC ID n° 5 ,se aplica tópica mente, a continuación las muestras se incuban durante 48 horas antes de ser inradiadas con rayos UVA a 5 J/cm2• Controles no tratados e irradiados se realizan en paralelo.

[0102] Estas muestras de piel se fijan a c:ontinuación con fonnaldehido y luego se embeben en parafina. Se realizan entonces secciones de 4 ~m. Estas secciones de piel son sucesivamente desparafinadas y luego rehidratadas en d~erentes banas de xileno y alcohol. Las fibras de elastina se tiiien utilizando un kit de tioción Elastika van Gieson rywR Re!: 1,15974). Las secciones coloreadas de piel se deshidratan y luego se montan en el medio de montaje Eukitt y se observan al microscopio.

[0103) Resunados: Las observaciones al microscopio muestran una menor degradación de las fibras elásticas, así como una mejor conservación de la organización de las fibras elásticas en las muestras irradiadas y tratadas por el péptido

SEC 10 nO 5 a 10.0 M que en las condicioneEt de control.

[0104) Conclusión: El péptido SEC ID no 5 " 10~ M preserva las fibras elásticas contra las alteraciones causadas por la radiación UV.

Ejemplo 6: Demostración del efecto reg8l,erativo del péptido SEC ID n° 5

(0105) Et prop6stto de este estudio es detenninar el efecto regenerante del péptido SEC ID n05 sobre los fibroblastos dérmicos y los queratinocitos humanos normales (KHN). Para ello, se utilizó el modelo de cicatnzación in varo Ibidi (Integrated Bio Diagnostics, Munich, Alemania).

(0106) Protocolo: Esta prueba consiste en mantener un área libre de células en medio de una capa celular y evaluar el tiempo necesario para que las células dispuestas en cada lado de la "cicatriz" migren o proliferen y llenen la brecha. Los insertos de cultivo en silicona autoadhesivos se colocan en la parte Inferior de un pocillo de una placa de

cu~lvo. Estos insertos tienen la particularidad de estar compuestos por dos cámaras distintas separadas por una membrana impermea~e de 500 IJm de espesor. Cada cámara se siembra con ~ulas de un mismo tipo celular y se cuUivan hasta confluencia. El inserto se retira entonces con una pinza estéril creando asi una zona

libre de células de 400 ~m de ancho entre las dos capas celulares. Las células se tratan luego con una solución 10" M o 3.10" M de péptido SEC ID n' 5 anadida al

medio de cultivo, con renovación del pépUdo cada 24 horas. Se llevaron a cabo observaciones en microscopio de contrast4! de fase (Olympus CK40 microscopio X5

conectado a una cámara Olympus E-510) ,en diferentes momentos (O, 6, 24, 30 Y 46 horas) hasta que el proceso de prolWeración y la migración llega a cerrar la brecha.

(0107) Resultados: Las observaciones microscópicas muestran un llenado total de la brecha después de 30 horas por los quer"tinoc~os humanos tratados con el péptido SEC ID N' 5 a 10" M. Al mismo tiempo, "" la condición de control, la brecha celular aún no se ha llenado.

[0108] El llenado total de la brecha aparece después de 46 horas para los fibroblastos humanos tratados con el péptido SEC ID n' 5 a 10-< M. Al mismo tiempo, en la condición de control, la brecha celular aún no se ha llenado ..

(0109) El efecto del péptido es dependiente de la dosis, ya que el llenado de la brecha es más rápido cuando las células se tratan por el SEC ID N' 5 a 3.10" M.

(0110) Conclusiones: Los fibroblastos y 1"" queratinocitos humanos normales (KHN)

han regenerado más rápido la brecha cu,¡mdo estaban cutlivados en presencia de

péptido SEC ID n' 5 en comparación con la .. condiciones de control.

(0111) El péptido SEC ID n' 5 estimull. la proliferación y la migración de los

fibrobJastos y de los KHN, favoreciendo as! I'a regeneración de la piel.

Ejemplo 7: PreparaCión de composiciones 1-Crema de protección solar

(0112)

(0113) Los constituyentes de la fase A y de la fase B se calienlan por separado entre

700 e y 75°C. La fase B se emulsiona en la fase A con agitación. La fase e se ai\ade a

45·C aumentando la agitación. La fase O luego se anade cuando la temperatura está por debajo de 40·C. El enfriamiento se prosiguió hasta 25·C con agitación vigorosa.

2· Crema remodelante de la cara:

(0114)

, CetiJ][45 i250 I L-101 350 ,INel ~A i HT I (and\ 1 Parkii I I Oil (andl Dln ~~_______________________~~IO~ A _.. )Oil 1,25

H,

r~~~---jIPEt;ehY¡;;lpa;XraYeiibe;anru(a;¡-n-d)-i¡a¡an;¡~l)-MeiMc~,u¡;Y¡¡(ó';-d¡Wap¡;¡roilip'Ylpa-(r(aaOrbeníddnlrllc01i;75,,751 ;"d\1

re

~qua qsp 12

O

10 ~~0~------.-----------------4'~0~-1

I 10.18

SEC ID ~-=-----'------1fT-o-i:WM

r¡¡¡;;¡j) 11.50 r (and\ ,1 (andl 13,00 ;F

IPerfume IParfum (Fragrance)

[0115] Preparar y derretir la fa.. A a 65-70"C. Calentar la fase Ca 65-70·C. La fase B

se aflade a la fase A justo antes de emulsionar A en B. A unos 45°C, el carbómero se

neutraliza mediante la adición de la fase D. La fase E se anade a continuación con

agitación suave y el enfriamiento se continúa hasta 2SoC. La fase F se anade a continuación si se desea.

3 -Crema protectora de dla:

lO

[0116]

[0117) Preparar la fase A y calentar a 75·C con agitación. Preparar la fase B dispersando el carbopol, después la gomal de xantano con agitación. Dejar reposar.

Calentar a 75·C.

S [0118] A temperatura, emulsionar A en B con agitación rotor-estator. Neutralizar con la

fase C con ag~ación rápida. Después de enlfriar a 40· C, anadir la fase O, luego la fase

E. El enfriamiento se continua con agitación suave y se atiade la fase F.

LISTADO DE SECUENCIAS

[0119]

<110> ISP Investmento INC.

<120> NUEVOS PÉPTIOOS ACTIVAOORES DE LA OERMATOPONTINA y COMPOSICIONES COSMÉTICAS QUE LOS COMPRENDEN

<130> BV PCT 10-146

<150> FR 1004380

<151> 2010-11-09

<160> 13

<170> Patentln version 3.5

<210> 1

<211> 4

<212> PRT

<213> Péptido sintético 25 <220>

<221> MOO_RES

<222> (4) .. (4)

<223> AMIOACIÓN <400>1

<210> 2

<211> 4 35 <212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> (4)..(4)

<223> AMIOACIÓN <400>2

45 <210> 3

<211> 6

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> (6)..(6)

<223> AMIOACIÓN

<400> 3

Asp 'Arg Gln Trp

1 :

ASP ~.rg Glu Trp 1

ASp Arg Gln Trp Asn Tyr1 . . 5

<210> 4

<211> 7

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> (7) ..(7)

<223> AMIDACIÓN

<400>4

Arg Glu Trp G1n 1: phe Tyr S Cys

<210> 5

<211> 8

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> (7) ..(7) <223> AMIOACIÓN

<220>

<221> OISUlFIO

<222> (7) ..(8)

<400> 5

Arg Glu Trp1 ..: Gln phe Tyr 5 cys Cys

<210> 6

<211> 6

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> (6) ..(6) <223> AMIOACIÓN

<400>6

ASP Arg Gll U Trp Gl n 1 5: Phe

<210> 7

<211> 8

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> (8) .. (8)

<223> AMIOACIÓN

<400> 7

ASp Arg Gln Trp Asn Tyr Ala Cysl' 5

<210> 8 5 <211> 9

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> {8},.{8}

<223> AMIOACION

<220>

<221> OISULFIO

<222> {8}..{9} 15 <400> 8

ASp Arg Gl n Trp IlSn Tyr Al a cyo Cys

1--' •.

<210> 9 <211>8

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES 25 <222> {8}..{8}

<223> AMIOACION

<400> 9

ASp Arg Glu T'rp Gln Phe Tyr cys1 S

<210> 10

<211> 9

<212> PRT

<213> Péptido sintético 35 <220>

<221> MOO_RES

<222> {8}.. {8}

<223> AMIOACION

<220>

<221> OISULFIO

<222> {8}..{9}

<400> 10

<210> 11

<211> 6

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> {6}..{6}

<223> AMIDACIÓN

<400> 11

<210> 12

<211> 6

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<220>

<221> MOO_RES

<222> (6)..(6)

<223> AMIOACIÓN

<400> 12

<210> 13

<211> 6

<212> PRT

<213> Péptido sintético

<400> 13

ASp Arg GOl n Trp LyS phe

10 5

Arg Glu Trp Gln phe Tyr

l· 5

Arg Glu Trp Gln phe Tyr 1 5

Claims

Reivindicaciones

1. Péptido de fónnula general (1):

5 R, (M),-X,-Arg-X,-TIJ>'X,-X.-X.-x. (R,) -(M),-R,

En la cual Xl representa el ácido aspártico o al~lún aminoácido, X2 representa la glutamina o el ácido glutámico, Xa representa la asparagina o la lisin.a o la glutamina o algún aminoácido, x.. representa la fenilalanina o la tirm:¡ina o algún aminoácido, Xs representa la tirosina o la alanina o algún aminoácido, Xa representa la cisterna o algún aminoácido, AA representa cualquier aminoácido excepto la arginina, la cistefna, la Jeucins,

la glicina y el ácido glutámico. y n y p,:O o 1. con n diferente de p;

15 R1 representa la función amina pri'maria del aminoácido N-terminal, libre o

sustiluida por un grupo de tipo acil() (R-CO-) donde el radical R es bien una

cadena alquilo de e1 a C30 saturadla o ¡nsaturada de tipo acetilo, o bien un grupo aromático de tipo benzoilo, l05ilo o benciloxicarbonilo;

R, representa la función carboxilo del aminoácido C-tenninal. que posee bien

un grupo hidroxilo libre o sustituidlo por un grupo seleccionado entre una cadena alquilo de el a C30, o bien un grupo ·NH2• -NHY o -NYV' con Y e Y' representando una cadena alquilo dEl Cl a C. ;

R, representa la función tio! de la cisielna en la posición x.. sea libre. sea

sustituida por un grupo metilo o acetilo, sea unida de manera covalente por un 25 puente disulfuro a otra cistelna.
2. Péptido según la reivindicación 1, caracterizado porque corresponde a una de las siguientes secuencias:

(SEC ID n·l): Asp-Arg-Gln-TIJ>'NH, (SEC ID n·2): Asp-Arg-Glu-TIJ>' NH, (SEC ID n·3): Asp-Arg-Gln-TIJ>'Asn-Tyr-NH, (SEC ID n·4): Arg-Glu-TIJ>'Gln-Phe-Tyr-Cys-NH, (SEC ID n· 5): Arg-Glu-TIJ>'Gln-Phe-Tyr-Cys(Cys)-(NH,) (SEC ID n·6): Asp-Arg-Glu-Trp-Gln-Phe-NH,

35 (SEC ID n·7): Asp-Arg-Gln-TIJ>'Asn-Tyr-Ala-Cys-NH, (SEC ID n·S): Asp-Arg-Gln-TIJ>'Asn-Tyr-A1a-Cys(Cys)-(NH,) (SEC ID n·9): Asp-Arg-Glu-Trp-Gln-Phe-Tyr-Cys·NH, (SEC ID n·l0): Asp-Arg-Glu-TIJ>'Gln-Phe-Tyr-Cys(Cys)-(NH,) (SEC ID n·ll): Asp-Arg-Gln-TIJ>'Lys-Phe-NH, (SEC ID n·12): Arg-Glu-Trp-Gln·Phe-Tyr-NH, (SEC ID n·13): Arg-Glu-TIJ>'Gln-Phe-Tyr.
3. Péptido según una de las reivindicaci()nes 1 o 2. caracterizado porque está

solubilizado en uno o varios disolventes fisiológicamente aceptables, seleccionados

45 entre el agua. el glicerol. el etanol. el propanodiol. el butilenglicol. el dipropilenglicol.

los diglicoles etoxilados o propoxilados, 10l:; poliores clcllcos, o cualquier mezcla de

estos disolventes.
4. Péptido de fónnula general (1) como se define en cualquiera de las reivindicaciones

1 a 3, para su uso como medicamento.

S. Péplido según la reivindicación 4, para su uso como agente cicatrizante.
6. Composición cosmética que comprende len un medio fisiológicamente adecuado, al menos un péptido como el definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, como

agente activo activador de la dennatopontin: •.
7.

Composición según la reivindicación 6. caracterizada porque dicho péptido está presente en una concentración comprendida entre 10~ M y 10~ M. preferiblemente entre 1 O~ M y 10·' M con respecto al peso total de la composición final.
8.

Composición según una de las reivindicaciones 6 o 7. caracterizada porque está

destinada a una administración por via tópica.
9. Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, caracterizada porque contiene adicionalmente al menos otro agente activo.
10. Composición según la reivindicación 9. ,:aractarlzada porque el otro agente activo

se sefecciona entre los agentes regenerantes, anti--envejecimiento, anti-anugas, calmantes, anti-radicales, anti~licación, hidratantes, antibacterianos, antifúngicos, queratollticos, relajantes musculares, d~3scamantes, reafirmantes, los agentes

estimulantes de la slntesis de macromolécu las dénnicas o el metabolismo energético. los agentes moduladores de la diferenciación. la pigmentación o la despigmentación

cutánea, los agentes estimulantes del crecimiento de las unas o los cabellos, los agentes estimulantes de la miaocirculación, las pantallas o filtros solares o los

agentes inhibidores de las metalo-proteinasas.
11 . Utilización cosmética de una composilCión, que comprende el péptido como el definido en una de las reivindicaciones 1 a 3 como agente activo, en un medio fisiol6gicamente adecuado, para aumentar la expresión de las proteinas de la matriz

extraoelular por fibroblastos de la piel.
12. Utilización cosmética de una composic:ión. que comprende el péptido como se

define en cualquiera de las reivinclicacionel3 1 a 3 como agente activo, en un medio

fisiológicamente adecuado. para aumentar I:a densidad de la dennis y la elasticidad de

la piel, prevenir o luchar contra la flacide:z de los rasgos faciales o la pérdida de volumen, el adelgazamiento de la piel, I,a atonfa, las arrugas finas, las anugas profundas y la atrofia dénnica.
13. Utilización cosmética de una composic:ión. que comprende el péptido como se

define en una de las reivindicaciones 1 a 3 como agente activo, en un medio

fisiológicamente adecuado. para prevenir o luchar contra la degradación de las fibras de colágeno y de las fibras elásticas de la pi,el sometida a rayos UV.
14. Utilización cosmética según la reivindicoa¡ción 13 para prevenir o luchar contra los

signos antiestéticos asociados a la elastosis ylo a la desorganización de las fibras

elásticas causadas por las exposiciones a los rayos UV, y más particularmente a los

rayos UVA.
15. Utilización cosmética de una composi,;ón. que comprende el péptido como se

define en una de las reivindicaciones 1 a 3 como agente activo, en un medio

fisiológicamente adecuado. para aumentar la regeneración de la epidennis y de la dermis.
16. Método de tratamiento cosmético para prevenir ylo tratar los signos cutáneos del envejecimiento y del fotoenvejecimiento. calracterlzado porque se aplica tópicamente

sobre la piet a tratar una composición como la definida en una de las reivindicaciones

6 a10 .
17. Método de tratamiento cosmético, según la reivindicación precedente, caracterizado porque la composición se éllplica antes de una exposición al sol, para evitar la desorganización de las fibras elástitC8S, o la composición se aplica después de

una exposición al sol, para reparar los dan"s sufridos por las fibras de colágeno y las fibra. elásticas.