ES2184470T5

ES2184470T5 - Composición de pienso marino que comprende ácido araquidónico derivado microbiológicamente.

Info

Publication number: ES2184470T5
Application number: ES99931099T
Authority: ES
Inventors: Robert Franciscus Beudeker; Peter Inve N.V. Coutteau
Original assignee: DSM IP Assets BV
Current assignee: DSM IP Assets BV
Priority date: 1998-06-17
Filing date: 1999-06-17
Publication date: 2011-01-26
Anticipated expiration: 2019-06-17
Also published as: JP2002517987A; NO20006386D0; BR9911234A; EP1087669A1; BR9911234B1; IL140213A0; DK1087669T3; DE69903948D1; IL140213A; CN1309536A; CA2334720A1; JP4709380B2; ZA200007406B; WO1999065327A1; NO20006386L; US6638561B1; DK1087669T4; ID27421A; AU4773899A; IS5766A

Abstract

Una composición de pienso marino que comprende uno o más componente(s) y/o ingrediente(s) de pienso y ácido paraquidónico (para) derivado microbiológicamente, en la que dicha composición se encuentra sustancialmente libre de microorganismos que producen, o son capaces de producir, para.

Description

Composición de pienso marino que comprende ácido araquidónico derivado microbiológicamente.

Campo del invento

El presente invento se refiere al uso de ácido araquidónico (ARA) derivado microbiológicamente en composiciones de pienso marino, para la alimentación de animales acuáticos (por ejemplo, marinos) y para el uso en acuicultura. El ARA se produce o deriva de Mortierella y por lo tanto se presenta en forma de triglicérido.

Antecedentes del invento

El ácido araquidónico (ARA) es uno de un gran número de ácidos grasos polo liinsaturados de cadena larga
(LC-PUFA). Químicamente es el ácido cis-5,8,11 14 eico-satetranoico (20:4) y pertenece a la familia (n-6) de los
LC-PUFA.

El ácido araquidónico es un precursor principal (tanto en peces como en vertebrados terrestres superiores) de una gran variedad de compuestos biológicamente activos, conocidos en conjunto como eicosanoides, un grupo que incluye las prostaglandinas, tromboxanos y leucotrienos. Los peces marinos, los camarones y otros animales terrestres, como los gatos, carecen de actividad \Delta-5 desaturasa y por lo tanto no son capaces de convertir el ácido graso 18:2 (n-6) (ácido linoleico) en ARA. Ya que el ácido araquidónico es esencial para la producción de eicosanoides, es para estos animales un ácido graso esencial y debe proporcionárseles por tanto en sus dietas.

La relación de ácido eicosapentanoico (EPA) {20:5 (n-3)} con el ácido docosahexanoico (DHA) {22:6 (n-3)} con el ácido araquidónico {20:4 (n-6)} en las dietas de estos animales puede ser importante ya que un exceso relativo de EPA puede evitar la producción de eicosanoides a partir de ácido araquidónico.

Las dietas habituales para peces marinos y camarones contienen cantidades diversas de ácido araquidónico a partir de aceite de pescado. El contenido de ácido araquidónico en los aceites de pescado conocidos es variable, pero normalmente relativamente bajo, aproximadamente un 1% del total de los ácidos grasos presentes (Sargent, J.R., McEvoy, L.A. y Bell, J.G.: Aquaculture 155 (1997) p. 117-127).

La capacidad para la cría de larvas de peces marinos está frecuentemente determinada en gran medida por la composición nutricional de la dieta. Es difícil obtener proporciones deseables de ácido eicosapentanoico, ácido docosahexanoico y ácido araquidónico empleando las materias primas disponibles tales como aceite de pescado, residuos animales y similares, ya que los niveles de LC-PUFA presentan una gran variabilidad, incluso si proceden de fuentes similares, y una parte sustancial del ácido araquidónico presente es destruido en el proceso de esterilización de estas materias primas.

Uno de los objetivos del invento es proporcionar una fuente de ácido araquidónico, de calidad reproducible, para posibilitar que la industria de alimentación de acuicultura obtenga un nivel satisfactorio de ácido araquidónico en la dieta (p. ej. piensos vivos) para larvas de peces y camarones, así como la proporción adecuada de ácido araquidónico, ácido eicosapentanoico y ácido docosahexanoico para estos animales. Casi todos los sistemas de producción de cultivos marinos (maricultivo) se basan en piensos vivos, principalmente en el rotífero Brachionus plicatilis y en huevos fecundados del camarón de agua salada Artemia, aunque existen otros piensos vivos.

Se ha descrito el enriquecimiento del pienso vivo con ácido eicosapentanoico y ácido docosahexanoico procedentes de emulsiones de aceite de pescado (Sargent et al, supra). Ellos también describen la posibilidad de emplear células de algas y hongos liofilizados o secados por pulverización que contengan grandes cantidades de ácido docosahexanoico para el enriquecimiento de piensos vivos.

Sargent et al también proponen el ácido araquidónico, pero en forma de un fosfolípido. Los fosfolípidos de ácido araquidónico son una fuente natural para el pez plano y el camarón en sus piensos vivos, ya que ésta es la forma en la que está presente en el aceite de pescado. La forma fosfolipídica del ácido araquidónico es menos susceptible a la oxidación (en comparación con el ácido araquidónico libre) y por lo tanto es preferida por la industria de la acuicultura.

El documento WO-A-90/07283 (Suntory) se refiere a piensos para peces y crustáceos que contienen células micóticas las cuales contienen ácidos grasos n-3 (p. ej. EPA, DHA) o ésteres de ellos. Sin embargo, también estas fuentes contienen bajas cantidades de ARA y además el ARA se encuentra con frecuencia presente en forma de fosfolípido.

Por otra parte, los documentos WO-A-98/08967 y EP-A-0726321 describen el aislamiento de lípidos que contienen ARA mediante el cultivo de un microorganismo del género Mortierella, y describen en términos generales el uso de dichos lípidos que contienen ARA para el complemento de productos alimenticios.

Castell et al (1994) Aquaculture 128: 315-333 describe dietas purificadas que contienen combinaciones de ARA y DHA para alimentar rodaballos. McEvoy et al (1996) Aquaculture 144: 339-352 describe dietas enriquecidas de Artemia que contienen lípidos polares. Seto et al (1992) Industrial Applications of Single Cell Oils, Eds Kyle + Ratledge, páginas 219-234, informa sobre piensos marinos a base de la microalga Nannochloropsis y camarón de agua salada y rotífero enriquecidos en estos. Estevez et al (1997) Aquaculture Research 28: 279-289 informa sobre los efectos del ARA de uso alimenticio en forma de éster etílico sobre la platija japonesa. McEvoy et al describen los efectos de los niveles dietéticos de EPA y ARA sobre la pigmentación en el rodaballo y el fletán en un resumen de la Conferencia de Acuicultura de Canadá '98, 31 de mayo - 3 de junio de 1998 en St John's, Newfoundland, Canadá.

Se ha descubierto ahora que mediante la alimentación con ARA derivado microbiológicamente de los organismos marinos se puede alcanzar un contenido mucho mayor de ARA dentro del animal marino. Se ha encontrado un aumento marcado en el enriquecimiento en ARA en los animales marinos que han sido alimentados con piensos que contienen dicho ARA.

Descripción del invento

Por lo tanto, según el presente invento, se proporciona un procedimiento de alimentación de un organismo marino según la reivindicación 1.

Preferiblemente, el pienso se encontrará (sustancialmente) libre de ARA en forma de fosfolípidos. El invento puede por lo tanto evitar el uso de ARA fosfolipidico, que es la forma en la que el ARA se encuentra en las fuentes marinas (p. ej. aceite de pescado). Por lo tanto, alimentar animales marinos con una forma de ARA diferente a la fuente natural, en otras palabras, una forma que no sería normalmente ingerida por el organismo, parece contradictorio. Sin embargo, el solicitante ha descubierto que esto puede conllevar beneficios inesperados.

El ARA estará presente en forma de aceite o estará incluido en un aceite. El aceite puede contener al menos un 20%, preferiblemente al menos un 30% y ventajosamente al menos un 35% y óptimamente al menos un 40% de ARA (basado en el peso total de los ácidos grasos). El aceite puede tener un contenido de ARA de al menos 250, preferiblemente al menos 300, óptimamente al menos 350 g por kg de aceite. Adecuadamente, el aceite tiene un contenido mínimo de triglicérido del 90%, p. ej. al menos del 95%, óptimamente al menos del 97%. Del ARA presente, preferiblemente al menos un 85%, por ejemplo al menos un 90% y óptimamente al menos un 95%, se encuentra en forma de triglicéridos.

El pienso marino del invento se encuentra libre de organismos unicelulares o microbios, tales como las células microbianas de las cuales se deriva o se produce el ARA. Esto no sólo puede facilitar la formulación de las composiciones de piensos, sino que, sorprendentemente, se demuestra que el ARA es más estable una vez extraído de las células que produjeron el ARA.

Aunque se ha propuesto el ARA para el uso en piensos marinos, la tendencia ha sido la de utilizar el ARA en forma fosfolipídica, normalmente de una fuente marina. Esto no es sólo así porque la forma fosfolipídica es la que se encuentra en la naturaleza para animales marinos, sino también porque es menos susceptible a la oxidación. Sin embargo, a pesar de este prejuicio, el solicitante ha descubierto que el ARA derivado microbiológicamente (o ARA en forma de triglicérido) puede proporcionar ventajas frente a las formas fosfolipídicas de ARA. En particular, puede existir un mayor consumo y uso del ARA por los organismos marinos a los que se suministra la composición de pienso del invento. Además, con ARA microbiano de alta calidad el problema de la oxidación se puede vencer, o al menos mitigar.

Una ventaja más del ARA microbiano es que el aceite puede tener un contenido de ARA mayor que, por ejemplo, el aceite de pescado, lo que significa que se puede emplear menos aceite microbiano para suministrar la misma cantidad de ARA (dando como resultado menores costes de transporte, almacenamiento y del pienso).

La fuente microbiana de la que proviene o se produce el ARA es un microorganismo, en forma filamentosa, de un hongo Mortierella. El hongo preferido es de la especie Mortierella alpina.

Esta fuente de ARA produce cantidades predecibles de ARA, a diferencia de las fuentes marinas cuyo contenido de PUFA puede variar según las especies y las técnicas de procesamiento empleadas.

El ARA procede o se produce preferiblemente de la fuente microbiana por fermentación. Los microbios se pueden cultivar en fermentadores (de gran escala). La fermentación puede tener lugar cuando los microorganismos están presentes en una composición acuosa que contiene una fuente de carbón asimilable (por ejemplo glucosa o maltociextrina) y una fuente de nitrógeno adecuada (por ejemplo iones amonio, como los del sulfato de amonio o extracto de levadura).

Durante o después de la fermentación se obtiene un "caldo" de fermentación que contiene los microoganismos y un medio, p. ej. una solución acuosa. Estos se pueden separar entonces (p. ej. mediante filtración, centrifugación u otra técnica de separación sólido-liquido) para obtener la solución acuosa (p. ej. en forma de un filtrado) y los microorganismos (referidos como biomasa). El ARA (y otros PUFA, si fuera necesario) se puede entonces extraer y/o aislar de la biomasa. Esto se puede conseguir empleando un disolvente, por ejemplo un disolvente apolar o cualquier otro disolvente adecuado que sea capaz de disolver el ARA. Este puede ser en particular un alcano C_{3-8}, como por ejemplo un hexano.

\newpage

Antes de la extracción del ARA, la biomasa puede estar sujeta a procesamiento mecánico, químico y/o físico. Por ejemplo, la biomasa puede ser calentada y/o pasteurizada. La biomasa puede ser procesada dando lugar a una forma granulada, por ejemplo mediante extrusión.

El ARA, como se explicó anteriormente, está presente en el pienso marino en forma de aceite. Este aceite puede estar presente en forma de emulsión. Por lo tanto, el ARA puede ser suministrado como un aceite en una emulsión de aceite en agua. La emulsión contiene preferiblemente un emulsionante, y puede contener adicionalmente un antioxidante. La lecitina puede satisfacer ambas funciones.

Las composiciones se pueden utilizar como piensos para animales acuáticos y, generalmente, en acuicultura. Los organismos marinos adecuados a los que se puede suministrar la composición son organismos de agua salada o de mar. Adecuadamente, los organismos son organismos de agua fría.

Los organismos marinos a los que se les suministra la composición pueden ser larvas (p. ej. del subfilum Crustacea), rotíferos (como los del filum Rotifera) o huevos fecundados (p. ej. larvas de Artemia). Los rotíferos preferidos son de la especie Brachonius plicatilis. Todos estos organismos son relativamente pequeños y pueden estar asimismo presentes en piensos marinos para ser digeridos por organismos mayores. En este caso estos organismos son uno de los componentes o ingredientes del pienso y constituyen así un pienso "vivo". En este caso, el ARA puede estar ya en el interior de estos organismos o puede estar presente en otra parte de la composición.

Otros organismos marinos adecuados a los que se pueden suministrar las composiciones del invento incluyen los copépodos (por ejemplo de la clase Copepoda), por ejemplo de la ciase Tisbe, Acartia, Artemia y/o Eurythemora.

Los organismos marinos específicamente contemplados pertenecen al filum Mollusca, por ejemplo de la clase Bivalvia, subclase Protobranchia y Lamellibranchia (que incluye Mytilus y Ostrea, mejillones y ostras). También se incluyen organismos de la clase Cephalopoda, tales como la subclase Coleoida, por ejemplo Decapoda, Sepia, Loligo (incluyendo calamares y jibias) y Octopoda (pulpo).

Otros organismos son del subfilum Crustacea, como por ejemplo de la división Astacus, que incluye al cangrejo de río de patas rojas, y la orden Amphipoda, como la división Gammarus, que incluye gambas y camarones.

Los organismos marinos pueden incluir por lo tanto no vertebrados tales como el pulpo y el calamar, gambas (Leander) y camarones (Crangon). También están incluidos peces u otros organismos vertebrados, como el arenque, el rodaballo (p. ej. Scophthalmus maximus), el fletan, el salmón (del Atlántico, Chinook, plateado, real), la trucha (como la trucha arco iris, Oncorhynchus mykiss), el besugo (como el dentón común, Sparus aurata), el lenguado (como el lenguado común, Solea solea L, lenguado de Senegal, Solea senegalensis Kaus), el róbalo (como el mero del Pacifico, Dicentrarchus labra), platija (Parlichtys, como la platija japonesa, Parlichtys divaceus), el medregal coronado, las chovas y la trucha alpina.

También se incluyen crustáceos tales como la langosta, los mejillones, las ostras, las almejas, las gambas (Macrobrachium, como las rosenbergii), camarones (Panaeus, como el japonicus, el camarón Kurum y vannamei, el camarón de patas blancas, monodon y setiferus).

Los camarones preferidos son los de la clase Artemia. En particular, los huevos fecundados de Artemia se pueden suministrar o incluir en las composiciones del invento como pienso "vivo".

Los piensos vivos, donde se suministra un organismo marino comestible en el alimento para el consumo por un organismo mayor, son particularmente adecuados para organismos jóvenes o para aquéllos en un estadio temprano de desarrollo, p. ej. larvas, por ejemplo de hasta 3 días, de hasta 5 días o incluso de hasta 10 días de edad. La razón es que tales organismos pueden no ser capaces de asimilar las dietas preparadas adecuadamente. La inclusión de organismos vivos en el pienso se realizará además de componentes y/o ingredientes diferentes o estándar del pienso. Los huevos fecundados vivos, p. ej. de camarones de agua salada o Artemia son particularmente adecuados para las larvas.

Otros componentes o ingredientes pueden incluir, por ejemplo, harina de pescado, harina de soja, aglutinantes y/o estabilizantes de harina de trigo, y si fuera necesario, minerales y/o vitaminas. El pienso puede estar en forma de bolitas y/o gránulos. Las larvas (p. ej. de peces y crustáceos) pueden ser alimentadas inicialmente con piensos vivos, y más tarde en su desarrollo con piensos no vivos.

A continuación se ofrece una orientación sobre las cantidades de los distintos materiales que se pueden incluir:

Harina de pescado: 30 a 60%, p. ej, 40 a 50%

Harina de pescado digerida enzimáticamente (concentrado): 1 a 15%, p. ej. 5 a 10%

Harina de soja y/o trigo: 5 a 25%, p. ej. 10 a 18% (cada uno)

Minerales y/o vitaminas: 0,5 a 4%, p. ej. 1 a 2% (cada uno)

\vskip1.000000\baselineskip

Para muchos organismos marinos, en particular para los peces, la dieta puede contener de un 10 a un 40% en lípidos. También puede contener de un 35 a un 50% en proteínas. Adecuadamente, la cantidad de fósforo disponible para el organismo es menor que el 0,8%. Esta dieta puede contener carotenoides naturales o artificiales, vitaminas y/o minerales.

Se prefiere que la cantidad de ARA presente en un pienso (p. ej. no vivo) sea de 0,1 al 5%, tal como del 0,1 al 2%. Adecuadamente, el contenido total de n-6 PUFA puede ser del 1 al 15% de la dieta (en peso).

Para una composición de pienso vivo el contenido de ARA puede ser del 5 al 3 0%, por ejemplo del 10 al 25%, óptimamente del 15 al 20%. El contenido total de n-6 PUFA puede ser del 5 al 50%, p. ej. del 5 al 30%.

El pienso marino contiene otros ácidos grasos poliinsaturados (PUFA), concretamente los PUFA C20 y C22 \omega3, el ácido docosahexanoico (DHA) (a partir de algas u hongos, tales como el alga Crypthecodinium o el hongo Thraustochytrium) y EPA. Cualquiera de estos PUFA puede ser suministrado individualmente o puede estar presente en el aceite en el que el ARA está incluido.

La proporción EPA:ARA puede ser de 1:0,5 a 1:2, tal como de 1:1 a 1:1,6. La proporción DHA: ARA puede ser de 1:0,2 a 1:1, tal como de 1:0,25 a 1:0,7. La proporción DHA:EPA:ARA puede variar de 3-5:0,5-2.0:1,0-2,0 (p. ej, si el pienso es no "vivo") o de 1,0-2,0:0,71.3:0,7-1,3 para un pienso "vivo".

Las composiciones de piensos pueden por ejemplo, ser composiciones "vivas" que contienen organismos marinos pturicelulares vivos, por ejemplo larvas, huevos fecundados o rotíferos, como se describe previamente.

Uno puede complementar una composición de pienso marino preexistente con el ARA.

La alimentación puede estimular el crecimiento y/o pigmentación en un organismo marino. Puede ayudar al organismo marino para producir de eicosanoides.

El invento se describirá a continuación, a titulo de ejemplo, con referencia a los siguientes ejemplos, que se ofrecen a modo de explicación y no han de ser interpretados como limitantes.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplos comparativos 1 y 2 y Ejemplo 3

Enriquecimiento de pienso de Artemia con ácido araquidónico microbiano (ARA)

El hongo Mortierella alpina produjo aceite bruto de ácido araquidónico (ARA) empleando el protocolo del Ejemplo 1 de la solicitud internacional de patente nº PCT/EP97/01446 (WO-A-97/36996). Este aceite se encuentra disponible a través de Gist-brocades B.V con el nombre comercial VEVODAR^{TM}. El aceite se encontraba entonces preparado para la formulación de emulsiones ricas en ácido araquidónico empleando lecitina (para obtener una concentración final de lecitina del UN).

Se formuló una emulsión del aceite de ARA para dar una proporción de ácido docosahexanoico (DHA), ácido eicosapentanoico (EPA) y ácido araquidónico (ARA) de 4/1/1,5 (ejemplo 3), mientras que se formuló otra emulsión (Ejemplo comparativo 2) para dar una proporción DHA:EPA:ARA de 2,5/1/0,2 mediante el uso de aceite de pescado en lugar del aceite de ARA microbiano. Se probó entonces la estabilidad de las dos emulsiones mediante la centrifugación de las emulsiones durante 15 minutos a 3000 r.p.m. Ambas emulsiones permanecieron estables en este ensayo de centrifugación, lo cual significa que no se observó una separación en diferentes capas.

Se incubaron quistes de Artemia en agua de mar a una temperatura de 28ºC. Tras 24 horas de incubación, los huevos fecundados se recolectaron y fueron transferidos a un tanque de enriquecimiento a una densidad de 250 huevos fecundados/ml.

Se emplearon entonces las dos emulsiones (cada una por duplicado) para complementar una dieta de huevos fecundados estándar:

a): enriquecimiento con 300 ppm de emulsión de ácido araquidónico microbiano (ARA) (Ejemplo 3); y

b): enriquecimiento con 300 ppm de emulsión de aceite de pescado (Ejemplo Comparativo 2).

Después del subsiguiente enriquecimiento se tomaron muestras de huevos fecundados para realizar un análisis de ácidos grasos empleando la metodología FAME (ésteres metílicos de ácidos grasos) tal y como se describe por Lepage y Roy, J. Lip. Res, 25:1391-6 (1984), para determinar su contenido en PUFA. Se cultivaron algunos huevos fecundados como control empleando un pienso estándar sin ninguna de las emulsiones (sin ARA, Ejemplo comparativo 1).

Los niveles de ácido docosahexanoico, ácido eicosapentanoico y ácido araquidónico en los huevos fecundados enriquecidos y en los huevos fecundados del control se muestran en la Tabla 1.

TABLA 1 Niveles de ácido docosahexanoico, ácido eicosapentanoico y ácido araquidónico y la suma de todos los ácidos grasos (n-3) y (n-6) en huevos fecundados de Artemia (después del enriquecimiento)

1

Los resultados muestran que el aceite de ácido araquidónico a partir de Mortierella alpina puede ser utilizado para el enriquecimiento de piensos de Artemio. Esto dio como resultado una proporción alterada de ácido docosahexanoico, ácido eicosapentanoico y ácido araquidónico en los huevos fecundados alimentados. La proporción de los ácidos grasos suministrados por el aceite microbiano era más adecuada para aumentar el crecimiento y pigmentación de especies acuáticas mediante el aumento significativo del contenido de ARA en los organismos. Estos huevos fecundados enriquecidos con ARA pueden ser utilizados como ingredientes de pienso vivo en composiciones de piensos para animales marinos superiores.

Se repitió el mismo proceso, con la diferencia de que se empleó rotíferos (Brachionus plicatilis) en lugar de huevos fecundados de Artemio.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplos comparativos 4 y 5 y Ejemplo 6

Efecto de la dieta enriquecida con ARA en los parámetros de crecimiento del camarón tigre

Se obtuvieron postlarvas de Penaeus monodon (camarón tigre gigante) de cuatro días de edad de una fuente comercial, y se cultivaron en tanques que contenían agua de mar desinfectada con una densidad de 20 postlarvas/l a una temperatura de 28ºC. Los huevos fecundados de Anemia enriquecidos con ARA y los huevos fecundados del control (de los Ejemplos 2 y 3) se administraron a discreción a los tanques 4 veces al día (como se describe por Rees, J.F., Cure, K., Piyatiratitivorakul, Sorgeloos. P y Menasveta, P en Aquaculture 122 (1994) 193-2 07) durante 10 días.

El aumento de la masa total de las larvas se tomó como el indicador de crecimiento. El peso seco (de la biomasa total) se midió al principio y al final del experimento, y el aumento de peso se muestra en la Tabla 2.

TABLA 2 Crecimiento de las postlarvas de monodon a las que se suministró huevos fecundados de Artemia enriquecidos con ARA de una fuente microbiana en comparación con los huevos fecundados no enriquecidos y con los huevos fecundados enriquecidos con aceite de pescado (huevos fecundados preparados según los Ejemplos 2 y 3)

2

Los resultados muestran claramente los efectos favorables de los huevos fecundados de Artemia, enriquecidos con ARA microbiana, en el crecimiento de las larvas.

Al final del experimento las postiarvas de 15 días de edad fueron posteriormente liofilizadas. La composición de ácidos grasos de las larvas se analizó empleando la técnica estándar descrita en el ejemplo previo. Los resultados se expresan en mg de FAME (ésteres metílicos de ácidos grasos)/g de peso seco de camarón.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 3 Composición en ácidos grasos de las postiarvas de camarón tigre que fueron alimentadas con Artemia enriquecida con ARA microbiana en comparación con huevos fecundados enriquecidos con una emulsión de aceite de pescado y un control negativo (es decir, huevos fecundados no enriquecidos con los PUFA)

3

Los resultados demuestran el marcado incremento en el contenido de ARA en postiarvas que usan una fuente microbiana de ARA.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplos comparativos 7 y 8 y Ejemplo 9

Efecto de la dieta enriquecida con ARA en el crecimiento de las larvas de lubina blanca

Se repitió un experimento similar al descrito en los Ejemplos 4 a 6 con la diferencia de que se utilizó larvas de lubina blanca. La metodología empleada fue descrita con detalle por J.A. Clawson y T.T. Lovell en Aquaculture 108 (1992): 125-134. Los resultados obtenidos muestran que la alimentación de larvas de lubina blanca con huevos fecundados de Anemia enriquecidos con ARA microbiana mejoraba el crecimiento en comparación con los huevos fecundados de Artemia del control enriquecidos con aceite de pescado.

Claims

1. Un procedimiento de alimentación de un organismo marino, que comprende administrar al organismo una composición de pienso marino que comprende uno o más componente(s) y/o ingrediente(s) de pienso y ácido araquidónico (ARA) derivado microbiológicamente en forma de triglicérido y opcionalmente la composición se encuentra sustancialmente libre de ARA en forma fosfolipídica, en el que dicha composición está sustancialmente libre de microorganismos que producen, o son capaces de producir, ARA, en la que el ARA se produce o procede de un hongo o una alga del género Mortierella, en la que el ARA está presente en forma de aceite, en la que el contenido de ARA en al aceite es de al menos 10% y en la que dicha composición comprende adicionalmente DHA y EPA.

2. Un procedimiento según la reivindicación 1, en el que el hongo es de la especie Mortierella alpina.

3. Un procedimiento según la reivindicación 1 ó 2, en el que el contenido de ARA en el aceite es de al menos 20%.

4. Un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el aceite que comprende ARA se formula como una emulsión de aceite en agua.

5. Un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la composición es una composición de pienso "vivo" y contiene organismos marinos comestibles.

6. Un procedimiento según la reivindicación 5, en el que los organismos marinos comestibles que están presentes como un pienso vivo, o los organismos marinos a los que se administra la composición, son larvas, rotíferos o huevos fecundados.

7. Un procedimiento según la reivindicación 6, en el que los organismos son del subfilum Crustacea o del filum Rotifera.

8. Un procedimiento según las reivindicaciones 6 ó 7, en el que el ARA está presente en los organismos marinos comestibles en el pienso vivo.

9. Un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el organismo marino es de la clase Copepoda o Cephalopoda, del filum Mollusca, del subfilum Crustacea, Leander o Crangon.

10. Un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el organismo es un mejillón, una ostra, un calamar, una jibia, un pulpo, un cangrejo de río de patas rojas, una gamba, un camarón, un arenque, un rodaballo, un fletan, un salmón, una trucha, un besugo, un lenguado, un róbalo, una platija, un salvelino, una langosta o una almeja.