EA037907B1 - Напитки, содержащие -глюкан ячменя - Google Patents
Напитки, содержащие -глюкан ячменя Download PDFInfo
- Publication number
- EA037907B1 EA037907B1 EA201892351A EA201892351A EA037907B1 EA 037907 B1 EA037907 B1 EA 037907B1 EA 201892351 A EA201892351 A EA 201892351A EA 201892351 A EA201892351 A EA 201892351A EA 037907 B1 EA037907 B1 EA 037907B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- barley
- beverage
- glucans
- glucan
- subject
- Prior art date
Links
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 title claims abstract description 191
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 title claims abstract description 130
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 title claims description 247
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 title claims description 125
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 title abstract description 186
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 132
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 71
- 238000005360 mashing Methods 0.000 claims abstract description 54
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 94
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 94
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 94
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 claims description 87
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 72
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 52
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 claims description 45
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 claims description 43
- 108010087427 Endo-1,3(4)-beta-Glucanase Proteins 0.000 claims description 38
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 38
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 38
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 36
- 102100031497 Heparan sulfate N-sulfotransferase 1 Human genes 0.000 claims description 34
- 101000588589 Homo sapiens Heparan sulfate N-sulfotransferase 1 Proteins 0.000 claims description 34
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims description 29
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 claims description 25
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 claims description 23
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 22
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 15
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 14
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims description 14
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 11
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 claims description 9
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 claims description 8
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims description 6
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 5
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 claims description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000036765 blood level Effects 0.000 claims description 3
- 241000209219 Hordeum Species 0.000 claims 6
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 abstract description 4
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 abstract description 2
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 abstract 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 41
- 108010075550 termamyl Proteins 0.000 description 30
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 25
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 25
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 25
- 101710130006 Beta-glucanase Proteins 0.000 description 18
- 108010076363 licheninase Proteins 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 12
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 12
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 10
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 10
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 9
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 9
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical class C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 8
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- PXBFMLJZNCDSMP-UHFFFAOYSA-N 2-Aminobenzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC=C1N PXBFMLJZNCDSMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 7
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 description 7
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 7
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 6
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 6
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 5
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 5
- 241000122205 Chamaeleonidae Species 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 229920001218 Pullulan Polymers 0.000 description 5
- 239000004373 Pullulan Substances 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- LUEWUZLMQUOBSB-ZLBHSGTGSA-N alpha-maltotetraose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@H](O[C@@H]3[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-ZLBHSGTGSA-N 0.000 description 5
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 5
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 235000019423 pullulan Nutrition 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 5
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 5
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 4
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 4
- FYGDTMLNYKFZSV-ZWSAEMDYSA-N cellotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-ZWSAEMDYSA-N 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 239000000216 gellan gum Substances 0.000 description 4
- 235000010492 gellan gum Nutrition 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001134780 Bacillus acidopullulyticus Species 0.000 description 3
- 108700038091 Beta-glucanases Proteins 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 3
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 3
- 239000012676 herbal extract Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 2,4-Hexadienoic acid, potassium salt (1:1), (2E,4E)- Chemical compound [K+].CC=CC=CC([O-])=O CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 2
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 2
- 241000680658 Bacillus deramificans Species 0.000 description 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 125000002353 D-glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 241000193385 Geobacillus stearothermophilus Species 0.000 description 2
- 108050008938 Glucoamylases Proteins 0.000 description 2
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 2
- 241001480714 Humicola insolens Species 0.000 description 2
- 241000194105 Paenibacillus polymyxa Species 0.000 description 2
- LOUPRKONTZGTKE-WZBLMQSHSA-N Quinine Chemical compound C([C@H]([C@H](C1)C=C)C2)C[N@@]1[C@@H]2[C@H](O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-WZBLMQSHSA-N 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 2
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 230000004001 molecular interaction Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000004302 potassium sorbate Substances 0.000 description 2
- 235000010241 potassium sorbate Nutrition 0.000 description 2
- 229940069338 potassium sorbate Drugs 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N β-1,4-galactotrioside Chemical group O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N 0.000 description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-M (E,E)-sorbate Chemical compound C\C=C\C=C\C([O-])=O WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-M 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 32-alpha-galactosyl-3-alpha-galactosyl-galactose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(CO)OC(O)C2O)O)OC(CO)C1O DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXRKCOCTEMYUEG-UHFFFAOYSA-N 5-aminoisoindole-1,3-dione Chemical compound NC1=CC=C2C(=O)NC(=O)C2=C1 PXRKCOCTEMYUEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WFPZSXYXPSUOPY-ROYWQJLOSA-N ADP alpha-D-glucoside Chemical compound C([C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H]1O)O)N1C=2N=CN=C(C=2N=C1)N)OP(O)(=O)OP(O)(=O)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WFPZSXYXPSUOPY-ROYWQJLOSA-N 0.000 description 1
- WFPZSXYXPSUOPY-UHFFFAOYSA-N ADP-mannose Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C(C(C1O)O)OC1COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O WFPZSXYXPSUOPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019890 Amylum Nutrition 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 244000099147 Ananas comosus Species 0.000 description 1
- 235000007119 Ananas comosus Nutrition 0.000 description 1
- 240000006914 Aspalathus linearis Species 0.000 description 1
- 241000228215 Aspergillus aculeatus Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 241000228257 Aspergillus sp. Species 0.000 description 1
- 241000193744 Bacillus amyloliquefaciens Species 0.000 description 1
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000003538 Chamaemelum nobile Species 0.000 description 1
- 235000007866 Chamaemelum nobile Nutrition 0.000 description 1
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 1
- 235000001258 Cinchona calisaya Nutrition 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000175448 Citrus madurensis Species 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 240000000560 Citrus x paradisi Species 0.000 description 1
- 241001364569 Cofana spectra Species 0.000 description 1
- 241000254171 Curculionidae Species 0.000 description 1
- RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N D-maltotriose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 description 1
- 241000062078 Fervidobacterium sp. Species 0.000 description 1
- 235000017317 Fortunella Nutrition 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- 241000123332 Gloeophyllum Species 0.000 description 1
- 241001051240 Gloeophyllum abietinum Species 0.000 description 1
- 241000123313 Gloeophyllum sepiarium Species 0.000 description 1
- 241001492300 Gloeophyllum trabeum Species 0.000 description 1
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 235000005206 Hibiscus Nutrition 0.000 description 1
- 235000007185 Hibiscus lunariifolius Nutrition 0.000 description 1
- 244000284380 Hibiscus rosa sinensis Species 0.000 description 1
- 101001052076 Homo sapiens Maltase-glucoamylase Proteins 0.000 description 1
- 241000223198 Humicola Species 0.000 description 1
- 241001373560 Humicola sp. Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 235000019393 L-cystine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004158 L-cystine Substances 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 241001149420 Laccaria bicolor Species 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- 244000165082 Lavanda vera Species 0.000 description 1
- 235000010663 Lavandula angustifolia Nutrition 0.000 description 1
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 244000070406 Malus silvestris Species 0.000 description 1
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 description 1
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 description 1
- 235000007232 Matricaria chamomilla Nutrition 0.000 description 1
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102100026367 Pancreatic alpha-amylase Human genes 0.000 description 1
- 235000011925 Passiflora alata Nutrition 0.000 description 1
- 235000000370 Passiflora edulis Nutrition 0.000 description 1
- 235000011922 Passiflora incarnata Nutrition 0.000 description 1
- 240000002690 Passiflora mixta Species 0.000 description 1
- 235000013750 Passiflora mixta Nutrition 0.000 description 1
- 235000013731 Passiflora van volxemii Nutrition 0.000 description 1
- 241000985513 Penicillium oxalicum Species 0.000 description 1
- 241000205160 Pyrococcus Species 0.000 description 1
- 241000205192 Pyrococcus woesei Species 0.000 description 1
- 241000204671 Pyrodictium Species 0.000 description 1
- 241000220324 Pyrus Species 0.000 description 1
- 241001123227 Saccharomyces pastorianus Species 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- 240000003829 Sorghum propinquum Species 0.000 description 1
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 1
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 description 1
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000006468 Thea sinensis Nutrition 0.000 description 1
- 241000228178 Thermoascus Species 0.000 description 1
- 241000228182 Thermoascus aurantiacus Species 0.000 description 1
- 241000205184 Thermococcus celer Species 0.000 description 1
- 240000007313 Tilia cordata Species 0.000 description 1
- 241001230654 Trametes cingulata Species 0.000 description 1
- 241000499912 Trichoderma reesei Species 0.000 description 1
- 241001557886 Trichoderma sp. Species 0.000 description 1
- 241000223261 Trichoderma viride Species 0.000 description 1
- FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N UNPD130147 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(OC4C(OC(O)C(O)C4O)CO)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N UNPD55895 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N alpha-D-glucose Chemical group OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N 0.000 description 1
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000008122 artificial sweetener Substances 0.000 description 1
- 235000021311 artificial sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 235000021015 bananas Nutrition 0.000 description 1
- 229940069780 barley extract Drugs 0.000 description 1
- 229940098396 barley grain Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960004365 benzoic acid Drugs 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 235000020279 black tea Nutrition 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000012174 carbonated soft drink Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004464 cereal grain Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 1
- QWJSAWXRUVVRLH-UHFFFAOYSA-M choline bitartrate Chemical compound C[N+](C)(C)CCO.OC(=O)C(O)C(O)C([O-])=O QWJSAWXRUVVRLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960004874 choline bitartrate Drugs 0.000 description 1
- LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N cinchonine Natural products C1C(C(C2)C=C)CCN2C1C(O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008995 european elder Nutrition 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000005452 food preservative Substances 0.000 description 1
- 235000019249 food preservative Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000008369 fruit flavor Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002695 general anesthesia Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 235000020688 green tea extract Nutrition 0.000 description 1
- 229940094952 green tea extract Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000000260 hypercholesteremic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 1
- 239000001102 lavandula vera Substances 0.000 description 1
- 235000018219 lavender Nutrition 0.000 description 1
- 238000004890 malting Methods 0.000 description 1
- FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N malto-pentaose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N malto-tetraose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N maltopentaose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N mannotriose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 235000013615 non-nutritive sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000021017 pears Nutrition 0.000 description 1
- 235000020737 peppermint extract Nutrition 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920003124 powdered cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000019814 powdered cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 229960000948 quinine Drugs 0.000 description 1
- 235000021580 ready-to-drink beverage Nutrition 0.000 description 1
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 1
- 235000021067 refined food Nutrition 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 239000011265 semifinished product Substances 0.000 description 1
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229940075554 sorbate Drugs 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 239000004458 spent grain Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 1
- 235000021195 test diet Nutrition 0.000 description 1
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008371 vanilla flavor Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 244000259727 waterwort Species 0.000 description 1
- 235000020985 whole grains Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
- A23L2/382—Other non-alcoholic beverages fermented
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/52—Adding ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/52—Adding ingredients
- A23L2/66—Proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C12/00—Processes specially adapted for making special kinds of beer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C12/00—Processes specially adapted for making special kinds of beer
- C12C12/02—Beer with low calorie content
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C5/00—Other raw materials for the preparation of beer
- C12C5/004—Enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C5/00—Other raw materials for the preparation of beer
- C12C5/004—Enzymes
- C12C5/006—Beta-glucanase or functionally equivalent enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C7/00—Preparation of wort
- C12C7/04—Preparation or treatment of the mash
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C7/00—Preparation of wort
- C12C7/04—Preparation or treatment of the mash
- C12C7/047—Preparation or treatment of the mash part of the mash being unmalted cereal mash
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/32—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the digestive tract
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/326—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having effect on cardiovascular health
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/328—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having effect on glycaemic control and diabetes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Cereal-Derived Products (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способам приготовления напитка, содержащего по меньшей мере 2 г/л -глюкана, при этом указанные -глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа. Эти способы включают затирание зёрен ячменя, содержащих по меньшей мере 10% -глюканов, имеющих отношение DP3/DP4 в указанном -глюкане, равное по меньшей мере 3, при наличии активности -амилазы и активности эндо-1,3(4)--глюканазы. Напитки обладают вязкостью, обеспечивающей приятное ощущение во рту, в то же время они содержат -глюканы, которые способствуют понижению уровней LDL холестерина. Эти напитки в общем являются стабильными и могут храниться месяцами при комнатной температуре без значительного снижения содержания -глюканов.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области напитков для здоровья, а также к способам их приготовления. В частности, изобретение относится к способам изготовления напитков и полуфабрикатов для напитков, имеющих высокое содержание β -глюканов ячменя.
Сведения о предшествующем уровне техники β-Глюканы имеют ряд замечательных преимуществ для здоровья, включая улучшение работы сердца, нормальный уровень содержания глюкозы в зерне хлебных злаков, они представляют собой длинные линейные полисахариды, состоящие из единиц глюкозы, соединённых (1^3) или (1^4)-β-связями. Из всех зёрен злаков наиболее богатым источником волокон β-глюканов является ячмень.
Однако жидкости, содержащие высокий уровень β-глюканов, обычно являются очень вязкими и, таким образом, менее подходящими для применения в качестве напитков.
Сущность изобретения
Следовательно, существует неудовлетворённая потребность в способах и материалах для приготовления напитков, имеющих высокое от природы содержание β-глюкана.
Настоящее изобретение предусматривает, что при применении зёрен ячменя, имеющих высокое отношение DP3 к DP4, и при обработке экстрактов таких зёрен смесью ферментов, обладающей активностью α-амилазы и активностью эндо-1,3(4)-β-глюканазы и необязательно активностью глюкоамилазы и/или пуллуланазы, можно приготавливать стабильные напитки, обладающие вязкостью, обеспечивающей приятное ощущение во рту, и в то же само время содержащие β-глюканы, которые способны содействовать понижению уровней LDL холестерина (липопротеинов низкой плотности). Напитки предпочтительно являются стабильными и могут месяцами храниться при комнатной температуре без значительного уменьшения содержания β-глюкана.
Таким образом, данное изобретение предусматривает способы приготовления напитка, содержащего по меньшей мере 2 г/л β-глюкана, причём указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в интервале от 80 до 200 кДа, и указанный способ включает стадии:
a) обеспечения зёрен ячменя, при этом указанные зёрна имеют следующие характеристики:
i) содержат по меньшей мере 10% β-глюканов;
ii) имеют отношение DP3/DP4 в указанных β-глюканах равное по меньше мере 3;
b) затирания указанных зёрен в воде в присутствии ферментной композиции, причём указанная композиция обладает активностью α-амилазы и эндо-1,3(4)-β-глюканазы, с получением при этом водного экстракта;
c) отделения указанного водного экстракта от зёрен ячменя с получением при этом напитка или основы напитка;
d) необязательного превращения основы напитка в напиток.
Данное изобретение предусматривает также напитки, содержащие по меньшей мере 2 г/л βглюканов, при этом указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в интервале от 80 до 200 кДа и указанный напиток получается способами по изобретению для снижения риска появления клинического состояния у субъекта, который нуждается в этом, причём это клиническое состояние выбрано из группы, состоящей из ишемической болезни сердца и диабета.
Данное изобретение предусматривает также способы уменьшения риска появления клинического состояния у субъекта, который нуждается в этом, причём это клиническое состояние выбрано из группы, состоящей из ишемической болезни сердца, диабета и инфекций, при этом такой способ включает введение напитков по изобретению в эффективном количестве указанному субъекту.
Данное изобретение предусматривает также способы снижения в крови уровней по меньшей мере одного липида, выбранного из группы, состоящей из триглицеридов, холестерина и LDL у субъекта, нуждающегося в этом, при этом такой способ включает употребление напитка согласно данному изобретению указанным субъектом.
Настоящее изобретение предусматривает также способы уменьшения риска ожирения или уменьшения степени ожирения у субъекта, нуждающегося в этом, при этом такой способ включает употребление указанным субъектом напитка согласно данному изобретению.
Описание рисунков
Фиг. 1 - конечные продукты разложения β-глюкана (β-глюкан ячменя средней вязкости компании Megazyme) под действием Attenuzyme® Flex, Attenuzyme® and Termamyl® SC при 18°С;
фиг. 2 - спектр 1Н-1Н COSY β-глюкана lys5f, экстрагированного при помощи Termamyl® SC частично расщеплённого под действием побочного действия лихеназы Attenuzyme® Flex при 65°С;
фиг. 3 - кривые адсорбции Лэнгмюра β-глюканов lys5f ТА (530 кДа) и lys5f TAF (150 кДа) после добавления увеличивающихся концентраций гликохолята (0, 5, 15, 30, 45 мМ) при рН 5;
фиг. 4 - изменение уровня триглицерида (ммол/л) в сравнении с исходным уровнем через 4 нед. после лечения крыс β-глюканом. Средние величины ± SEM, n=12 на курс лечения;
фиг. 5 - изменение уровня общего холестерина (ммол/л) в сравнении с исходным уровнем через 4
- 1 037907 нед. после лечения крыс β-глюканом. Средние величины ± SEM, n=12 на курс лечения;
фиг. 6 - изменение уровня LDL-холестерина (ммол/л) в сравнении с исходным уровнем через 4 нед после лечения крыс β-глюканом. Средние величины ± SEM, n=12 на курс лечения;
фиг. 7 - изменение уровня HDL-холестерина (ммол/л) в сравнении с исходным уровнем через 4 нед после лечения крыс β-глюканом. Средние величины ± SEM, n=12 на курс лечения;
фиг. 8 - разница в общем содержании SCFA (ммол/кг), умноженная на содержимое аппендикса (г) через 4 нед. после лечения крыс β-глюканом. Средние величины ± SEM, n=12 на курс лечения;
фиг. 9 - стабильность содержания β-глюкана (г/л) в бутылках, хранившихся при комнатной температуре в течение 6 мес. Определения в суспензиях Glucagel™ и lys5f TAF проводили методом с окрашиванием калькофлуором. Средние величины ± SEM, n=2 в мес.;
фиг. 10 - выравнивание (последовательностей) между HvNST1 и ВТ1 маисом;
фиг. 11 показывает величину отношения DP3/DP4 в зёрнах ячменя различных сортов вместе с молекулярной массой (Mw) β-глюканов в вытяжке из указанных зёрен с использованием или смеси Termamyl® SC и Attenuzyme® Flex (TAF), или смеси Termamyl® SC и Attenuzyme® (ТА) или Termamyl® (T);
фиг. 12 - величину вязкости вытяжки β-глюкана после экстракции различных сортов ячменя при помощи ферментов Т, ТА и TAF.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения
Определения.
Используемые в данной заявке термины могут означать один предмет или более в зависимости от контекста, где они используются.
Применяемый при указании количества термин примерно означает +/-5%, предпочтительно +/-2%, ещё более предпочтительно +/-1%.
Термин пиво, используемый в данной заявке, относится к напитку, приготовленному путём ферментации экстракта (пивного сусла). Предпочтительно указанную ферментацию проводить в присутствии дрожжей.
Термин β-глюкан со смешанными связями, используемый в данной заявке, относится к полисахаридам на основе мономеров D-глюкозы, соединённых β-(1^3) или (1^4) гликозидными связями. Оба типа гликозидных связей могут образовываться в молекуле одного полисахарида. Термины β-глюкан и бета-глюкан используются в данной заявке как взаимозаменяемые. Термин β-глюкан, используемый в данной заявке, может относиться к любому β-глюкану, но предпочтительно термин β-глюкан относится к β-глюкану со смешанными связями.
Термин основа напитка, используемый в данной заявке, относится к жидкости, которая может быть переработана в готовый для питья напиток. В общем, основа напитка может быть превращена в готовый напиток путём добавления одного или более дополнительных соединений и/или дополнительных жидкостей, и/или путём ферментации.
Термин зерно означает зерновки злаков, называемые внутренними семенами, лемма и палеа. У большинства сортов ячменя лемма и палеа прикреплены к зерновке и являются частью зерна после молотьбы. Однако существуют голозёрные виды ячменя. У этих видов зерновка не содержит структур лемма и палеа и является голозёрной после обмолота, как пшеница. Термины зерно и жито используются в данной заявке как взаимозаменяемые.
Термин затирание означает выдержку зёрен ячменя в воде при определённой(ых) температуре(ах). Часто перед выдержкой в воде зёрна ячменя измельчают.
Величина отношения количества воды к количеству зёрен ячменя/помола ячменя, равная 1 к X, означает 1 часть воды на X частей зёрен ячменя или размолотого ячменя. Отношения могут быть также указаны как 1 к интервалу XX или YY, что означает 1 часть воды к интервалу количества XX или YY зёрен ячменя или размолотого ячменя. Все отношения приводятся как весовые.
Термин сусло означает жидкий экстракт зёрен ячменя, приготовленный путём затирания. Другие виды несоложёного сырья могут быть смешаны с зёрнами ячменя и подвергнуты затиранию для получения сусла. Другие виды несоложёного сырья могут быть добавлены к суслу. Таким несоложёным сырьём может быть любой материал, содержащий крахмал, такой как другие злаки, отличающиеся от ячменя, солода или сиропов.
Способ приготовления напитка.
Изобретение относится к способу приготовления напитка, имеющего природное высокое содержание β-глюкана. Указанный напиток может быть любым из напитков, описанных в данной заявке ниже, в разделе Напиток.
Этот способ включает затирание зёрен ячменя в воде в присутствии ферментной композиции, обладающей активностью α-амилазы и эндо-1,3(4)-β-глюканазы, и необязательно активностью глюкоамилазы и/или пуллуланазы. Согласно одному из вариантов изобретения указанные зёрна ячменя предпочтительно не подвергают никакой тепловой обработке перед затиранием. В частности, может быть предпочтительно не проводить затирание зёрен. В особенности, может быть предпочтительно не проводить соло
- 2 037907 жение. Вообще предпочтительно, чтобы указанные зёрна ячменя измельчали перед затиранием. Указанные зёрна имеют высокое содержание β-глюканов (предпочтительно, по меньшей мере равное 10%) и высокое отношение DP3/DP4 в указанном β-глюкане (предпочтительно, по меньшей мере равное 3). Ячмень может быть любым из сортов ячменя, описанных в данной заявке ниже в разделе Ячмень. Затирание включает выдержку зёрен ячменя, предпочтительно измельчённых (дроблёных) зёрен ячменя, в воде при определённой(ых) температуре(ах). Затирание можно осуществлять любым из способов, описанных ниже в разделе Затирание. Ферментная композиция обладает активностью α-амилазы и эндо-1,3(4)-βглюканазы и необязательно также второстепенной активностью глюкоамизазы и/или пуллуланазы. Эти виды активности могут быть получены на основе одного или более ферментов. Таким образом, не требуется, чтобы ферментная композиция включала 3 или 4 разных фермента, если некоторые из ферментов обладают более чем одним видом активности. Однако вообще ферментная композиция содержит фермент, который обладает активностью α-амилазы, фермент с активностью пуллуланазы и фермент с активностью эндо-1,3(4)-в-глюканазы и фермент с активностью глюкоамилазы. Указанная ферментная композиция может быть любой из ферментных композиций, описанных в данной заявке ниже в разделе Ферментная композиция.
После затирания водный экстракт отделяют от зёрен ячменя. Указанный водный экстракт может быть также назван в данной заявке суслом. Водный экстракт может быть готов для употребления в качестве напитка по изобретению. Однако часто водный экстракт нужно обрабатывать дальше для получения напитка. В таких случаях водный экстракт может также называться в данной заявке основой напитка. Основа напитка может быть переработана в напиток любым из способов, описанных в данной заявке ниже в разделе переработка основы напитка в напиток.
Таким образом, одна из целей настоящего изобретения состоит в обеспечении способов приготовления любого из напитков, описанных в данной заявке ниже в разделе Напиток, при этом указанный способ включает стадии:
a) предоставления зёрен ячменя, который может быть одним из видов ячменя, описанных ниже в данной заявке в разделе Ячмень;
b) затирания указанных зёрен любым из способов, описанных в данной заявке ниже в разделе Затирание, в присутствии ферментной композиции, которая может быть любой композицией, описанной в данной заявке ниже в разделе Ферментная композиция, с получением при этом водного экстракта;
c) отделения указанного водного экстракта от зёрен ячменя с получением при этом напитка или основы напитка;
d) необязательной переработки основы напитка в напиток любым из способов, описанных ниже в данной заявке в разделе Переработка основы напитка в напиток.
Напиток.
Данное изобретение относится к способам приготовления напитка, имеющего высокое содержание β-глюкана, но в то же самое время обладающего вязкостью, которая является достаточно низкой, чтобы придать напитку способность давать приятное ощущение во рту.
Было установлено, что β-глюканы уменьшают/снижают содержание холестерина в крови. Согласно Европейскому агентству по безопасности продуктов питания (EFSA) положительный эффект может быть получен при употреблении 3 г β-глюкана ячменя ежедневно. Положительный эффект может быть также получен при употреблении пищевого продукта, содержащего по меньшей мере 1 г β-глюкана в применяемом количестве продукта. Соответственно, предпочтительно, чтобы напитки по изобретению содержали достаточное количество β-глюкана для обеспечения дневного потребления, составляющего по меньшей мере 3 г. Так, согласно одному из вариантов напитки по изобретению содержат от 0.5 до 2 г, например от 0.5 до 1.5 г, например примерно 1 г, т.е. 1 г β-глюканов на порцию. В контексте напитков по данному изобретению такая порция составляет обычно или 250, или 330 мл. Таким образом, напитки по изобретению предпочтительно содержат указанные выше количества β-глюканов в 250-330 мл, например в 250 и/или в 330 мл.
Таким образом, напитки, приготовленные согласно настоящему изобретению, предпочтительно содержат по меньшей мере 2 г/л β-глюканов. Более предпочтительно, когда напитки содержат 3 г/л βглюканов. Ещё более предпочтительно, когда напитки содержат по меньшей мере 4 г/л β-глюканов. Изобретение также предусматривает, что напитки могут содержать больше β-глюканов, например в пределах от 4 до 20 г/л, в том числе в пределах от 4 до 15 г/л, например в пределах от 4 до 10 г/л. Напиток может быть также концентратом, содержащим очень большое количество β-глюканов, например более 8 г/л, например от 8 до 20 г/л. Такие концентраты могут быть перед употреблением разбавлены.
Содержание β-глюкана в готовом напитке можно регулировать несколькими методами. Один метод регулирования содержания β-глюкана в напитке заключается в регулировании отношения зёрен ячменя к воде во время затирания. Подходящие отношения зёрен ячменя к воде, которые могут быть использованы в способах по изобретению, описаны в разделе Затирание ниже в данной заявке. Для того чтобы получить меньшее содержание β-глюкана, основа напитка может быть также разбавлена дополнитель
- 3 037907 ным количеством жидкости.
Данное изобретение предусматривает, что β-глюканы с низкой молекулярной массой оказывают благоприятное действие на здоровье, т.е. что β-глюканы с низкой молекулярной массой способны снижать уровень холестерина в крови и, в частности, способны снижать уровень LDL в крови.
Кроме того, данное изобретение свидетельствует, что напитки, содержащие низкомолекулярные βглюканы, также имеют низкую вязкость.
Соответственно, предпочтительно, чтобы напитки, приготовленные способами по изобретению, содержали β-глюканы, имеющие в среднем низкую молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа. Например, указанные β-глюканы могут иметь в среднем молекулярную массу в пределах от 110 до 190 кДа, например в пределах от 120 до 180, например в пределах от 130 до 170, например в пределах от 140 до 160 кДа. Согласно одному из вариантов напитки, приготовленные способами по изобретению, содержат β-глюканы, имеющие среднюю молекулярную массу равную примерно 150 кДа.
Среднюю молекулярную массу предпочтительно определять по сравнению со стандартами βглюкана. Такие стандарты β-глюкана являются коммерчески доступными, например, они могут быть приобретены в компании Megazyme, Ireland. Молекулярную массу можно определять любым подходящим методом, например традиционным методом эксклюзионной хроматографии, используя стандарты βглюкана, например используя Asahipak фирмы Shodex, US. Предпочтительный метод определения молекулярной массы описан ниже в примере 5а.
Низкомолекулярные β-глюканы, содержащиеся в напитках согласно данному изобретению, полезны для здоровья в той же степени, что и β-глюкан со средней молекулярной массой (530 кДа), экстрагированный в похожих условиях. Например, указанные β-глюканы предпочтительно способны к связыванию солей жёлчных кислот, таких как гликохолят. Предпочтительно указанные β-глюканы предпочтительно способны к связыванию солей желчных кислот, таких как гликохолят при непосредственном молекулярном взаимодействии. Связывание солей жёлчных кислот можно определить, например, путём определения изменения сигналов (Δδ) для двух резонансов β-глюкана, когда изменения показывают непосредственное взаимодействие между β-глюканами и солью жёлчной кислоты в растворе, как описано ниже в примере 6. Так, β-глюканы, содержащиеся в напитках, могут характеризоваться увеличением Δδ 13С, составляющим по меньшей мере 5 б.д., например 7 б.д. после добавления 50 мМ гликохолята при проведении определения, как описано в примере 6.
Как указано выше, предпочтительно также, чтобы напиток имел достаточно низкую вязкость для того, чтобы напиток имел приятный вкус во рту. Так, предпочтительно, чтобы вязкость напитка составляла максимально 55 мПа-с, например максимально 50 мПа-с, например максимально 40 мПа-с, например максимально 35 мПа-с. Вязкость можно определить с использованием любого стандартного вискозиметра. В частности, вязкость можно определить, как описано в примере 5а.
Напитки согласно данному изобретению предпочтительно являются стабильными, т.е. содержание β-глюкана не уменьшается значительно при хранении. Так, предпочтительно, чтобы содержание βглюкана в напитках не уменьшалось более чем на 5%, например не уменьшалось более чем на 3% при хранении при комнатной температуре в течение 6 мес. Указанные напитки могут содержать стабилизатор для предотвращения осаждения β-глюкана, например содержание стабилизатора может составлять от 0.01 до 0.050%, например быть равным 0.025% в случае геллановой камеди, как описано ниже.
Напиток по изобретению может быть водным экстрактом, полученным после затирания зёрен ячменя в присутствии ферментной композиции. Этот водный экстракт в данной заявке может также называться суслом. Однако напиток может также быть пивом, полученным путём ферментации водного экстракта при помощи микроорганизмов, например дрожжей. Такой напиток может также быть смесью водного экстракта с одной или более дополнительными жидкостями. Напиток может также быть водным экстрактом, в который добавлены одно или более дополнительных соединений.
Затирание.
Способы согласно изобретению включают стадию затирания зёрен ячменя в присутствии ферментной композиции.
Затирание представляет собой выдержку зёрен ячменя в воде при определённой(ых) температуре(ах). Затирание можно рассматривать как способ получения водного экстракта зёрен ячменя. Для того чтобы сделать водную экстракцию как можно более эффективной, предпочтительно, чтобы зёрна ячменя подвергали дроблению перед затиранием. Предпочтительно, чтобы зёрна ячменя размалывали перед затиранием до получения ячменной муки и проводили затирание с использованием указанной ячменной муки. Измельчённые зёрна ячменя могут называться в данной заявке измельчённым ячменём, измельчёнными зёрнами ячменя или ячменной мукой.
Зёрна ячменя, например измельчённые зёрна ячменя, затем выдерживают в воде. Таким образом, стадия b) этого способа может включать смешение измельчённых зёрен ячменя с водой.
Отношение зёрен ячменя к воде может быть выбрано таким образом, чтобы достичь желательной концентрации β-глюканов в водном экстракте. В общем, чем выше отношение зёрен ячменя к воде, тем
- 4 037907 выше содержание β-глюкана в напитке.
Поскольку предпочтительно, чтобы содержание β-глюканов в напитке составляло по меньшей мере 2 г/л, предпочтительно, чтобы отношение зёрен ячменя к воде было достаточно высоким для получения такого содержания β-глюканов.
Соответственно, предпочтительно, чтобы отношение воды к зёрнам ячменя было равно от 1 до по меньшей мере 10, например от 1 до по меньшей мере 12, в том числе от 1 до по меньшей мере 15. В частности, отношение воды к зёрнам ячменя может составлять от 1 до 10-20, например от 1 до 12-18. Согласно одному из вариантов изобретения отношение воды к зёрнам ячменя составляет от 1 до примерно 15. Указанное отношение приведено в весовых частях воды в расчёте на сухой вес указанных зёрен ячменя.
Согласно вариантам изобретения, когда затирание включает выдержку измельчённого ячменя в воде, предпочтительно, чтобы отношение воды к зёрнам ячменя составляло от 1 до по меньшей мере 10, например от 1 до по меньшей мере 12, например от 1 до по меньшей мере 15. В частности, отношение воды к измельчённому ячменю может составлять от 1 до 10-20, например от 1 до 12-18. Согласно одному из вариантов изобретения отношение воды к измельчённому ячменю составляет от 1 до примерно 15.
Выдержка зёрен ячменя (например, измельчённого ячменя) в воде предпочтительно проводится при определённой температуре. Эта температура может иметь значение, так как её величина может влиять на активность ферментов.
Затирание можно осуществлять в присутствии несоложёного сырья, которое, как понимается, содержит любой источник углеводов, отличающийся от зёрен ячменя, такой как, например, без ограничения, ячмень, сиропы ячменя, маис, рис, сорго, рожь, овёс или пшеница - или в виде целых зёрен, или обработанных продуктов, таких как крупы, сиропы или крахмал. Все из перечисленных добавок можно использовать в основном как дополнительный источник экстракта (сиропы обычно вводятся после проведения затирания).
Затирание с водой может включать использование одного или более дополнительных соединений, например солей или агентов, регулирующих рН. Неограничивающие примеры агентов, регулирующих рН, включают буферы и кислоты, например фосфатный буфер или фосфорную кислоту. Неограничивающим примером подходящих солей является хлористый кальций.
Обычно затирание включает или даже состоит из выдержки при температуре в пределах от 60 до 72°С, например при температуре в пределах от 60 до 70°С, например при температуре от 62 до 68°С, например при температуре в пределах от 64 до 66°С, например при температуре, равной примерно 65°С. Зёрна ячменя, например измельчённый ячмень, могут быть смешаны с водой на любой стадии, но часто могут быть добавлены к воде, как только вода достигла указанной выше температуры.
Выдержка при указанной температуре может продолжаться в течение любого желательного промежутка времени, обычно в пределах от 30 до 120 мин, предпочтительно в пределах от 30 до 60 мин, например в течение примерно в течение 45 мин. Например, величина рН может быть доведена до 5-7, например до 5-6, например до примерно 5.48.
В способах согласно данному изобретению затирание проводится в присутствии ферментной композиции, обладающей активностью α-амилазы и эндо-1,3(4)-в-глюканазы и необязательно также активностью глюкоамизазы и/или пуллуланазы, это может быть любая ферментная композиция из композиций, описанных ниже в данной заявке в разделе Ферментная композиция. Указанная ферментная композиция может быть добавлена перед затиранием или после затирания. Обычно она добавляется, как только температура экстракта или воды для затирания достигнет температуры, указанной выше. Напитки, приготовленные согласно настоящему изобретению, содержат β-глюканы определённой молекулярной массы. Затирание с помощью ферментной композиции по изобретению может влиять на величину молекулярной массы. Соответственно, предпочтительно, чтобы затирание в присутствии ферментной композиции проводили в течение времени и при температуре, которые приводят к образованию βглюканов со средней молекулярной массой в пределах от 80 до 200 кДа. Этого можно достигнуть, отбирая образцы водного экстракта в определённые моменты времени во время затирания и при разных температурных условиях с последующим измерением средней молекулярной массы β-глюканов, содержащихся в водном экстракте. Таким образом, специалист в данной области сможет выбрать адекватные величины времени и температуры для затирания. Согласно одному из вариантов время и температура выбираются, как описано выше.
В конце стадии затирания часто бывает желательно нагреть смесь вода/зёрна ячменя/ферментная композиция до по меньшей мере 75°С. Это может обеспечить несколько эффектов, включая инактивацию ферментной композиции. Указанный нагрев предпочтительно осуществлять при температуре, равной по меньшей мере 75°С, предпочтительно равной по меньшей мере 85°С, более предпочтительно по меньшей мере 90°С, например при температуре в пределах от 85 до 100°С, например в пределах от 90 до 100°С. Нагрев можно проводить в течение подходящего времени, например в течение 15-120 мин, в том числе в течение 15-60 мин, например в течение примерно 30 мин.
Таким образом, согласно одному из вариантов затирание может состоять из выдержки при температуре 60-72°С, как указано выше, и последующей выдержки при температуре, равной по меньшей мере
- 5 037907
85°С, например по меньшей мере при 90°С, как описано выше.
После затирания водный экстракт отделяют от зёрен ячменя (например, от измельчённого ячменя) для того, чтобы получить или напиток, или основу напитка, которая может быть далее превращена в напиток.
Указанное отделение можно проводить любым подходящим методом, например с использованием любого из методов отделения сусла от отработанных зёрен, обычно применяемых в пивоварнях. Неограничивающие методы отделения водного экстракта от зёрен ячменя (например, от измельчённого ячменя) включают центрифугирование, декантацию, фильтрование или применение бочки для сцеживания пивного сусла.
Ячмень.
Настоящее изобретение предусматривает способы приготовления напитков с высоким содержанием β-глюкана из зёрен ячменя. Для того чтобы получить напитки с достаточно высоким содержанием βглюкана, которые в то же самое время стабильны и имеют низкую вязкость, предпочтительно использовать ячмень, имеющий высокое содержание β-глюканов и содержащий β-глюкан, характеризующийся высоким отношением DP3/DP4.
Ячмень может быть любым растением вида Hordeum vulgare (ячмень обыкновенный), включая любую линию скрещивания, или выведенный сорт, или вариетет.
Таким образом, ячмень, используемый при осуществлении способов согласно изобретению, может иметь следующие характеристики:
i) содержит по меньшей мере 10% β-глюканов;
ii) имеет отношение DP3/DP4 в указанном β-глюкане, равное по меньшей мере 3.
При варке пива обычно предпочитают использовать ячмень с низким уровнем β-глюканов, и поэтому типичные сорта пивоваренного ячменя имеют низкое содержание β-глюканов. β-Глюканы придают суслу вязкость, которая обычно менее желательна. Однако виды ячменя, которые следует использовать согласно данному изобретению, предпочтительно имеют высокое содержание β-глюканов.
Таким образом, предпочтительно, чтобы ячмень, используемый в способах по изобретению, имел зёрна, которые содержат по меньшей мере 10% β-глюканов, более предпочтительно по меньшей мере 11% β-глюканов, даже более предпочтительно по меньшей мере 12% β-глюканов, например по меньшей мере 13% β-глюканов, например по меньшей мере 14% β-глюканов, например по меньшей мере 15% βглюканов. Указанные количества приведены в % от веса сухого вещества в зёрнах.
Для того чтобы определить процентное содержание β-глюканов в зёрнах ячменя, определяют вес βглюканов в зёрнах и общий вес сухого вещества в зёрнах. Тогда рассчитывают процентное содержание β-глюкана. Содержание β-глюкана может быть определено путём экстракции β-глюканов, например путём затирания, как описано в данной заявке выше в разделе Затирание, и определения содержания βглюкана в водном экстракте. Количество β-глюкана может быть, например, определено с использованием метода окрашивания калькофлуором. Метод окрашивания калькофлуором является флуометрическим методом и может быть осуществлён в соответствии со стандартами Brewing ЕВС, 1994. Краситель калькофлуор способен связывать β-глюканы, содержащиеся в растворе, и повышать интенсивность их флуоресценции прямо пропорционально содержанию связанного β-глюкана.
Подходящий метод определения процентного содержания β-глюканов в зёрнах ячменя описан в примере 5а ниже в данной заявке.
В дополнение к высокому содержанию β-глюкана важно также, чтобы ячмень имел высокое отношение DP3/DP4. Отношение DP3/DP4 характеризует структуру блок-олигомеров β-глюкана. Так, βглюкан в ячмене содержит блоки целлотриозы и блоки целлотетраозы, и отношение DP3/DP4 характеризует отношение между блоками целлотриозы и блоками целлотетраозы. Целлотриоза является трисахаридом, в котором три единицы глюкозы соединены 1, 4-β-связями. Целлотетраоза является тетрасахаридом, в котором четыре остатка глюкозы соединены 1, 4-β-связями. Указанное отношение может быть определено путём разложения β-глюкана лихеназой и определения количества высвободившихся блоков DP3 и DP4. Лихеназа представляет собой фермент, катализирующий гидролиз (1^3)-β-глюкозидных связей, которые расположены следом за (1^4)-β-глюкозидными связями. Один подходящий способ определения отношения DP3/DP4 описан в примере 5а.
Согласно одному из вариантов настоящее изобретение охватывает затирание зёрен ячменя в присутствии ферментной композиции, обладающей активностью α-амилазы и эндо-1,3(4)-β-глюканазы и необязательно также активностью глюкоамилазы и/или пуллуланазы. Ферменты способствуют надлежащей экстракции β-глюкана, и также получению β-глюкана со средней молекулярной массой в пределах от 80 до 200 кДа. Однако, если β-глюкан имеет низкое отношение DP3/DP4, это обычно приводит к более или менее сложному расщеплению β-глюкана ферментной композицией, и, соответственно, затрудняет приготовление напитков с природным высоким содержанием β-глюкана согласно изобретению.
Соответственно, предпочтительно, когда β-глюкан, содержащийся в ячмене, используемом по изобретению, имеет высокое отношение DP3/DP4. В частности, предпочтительно, когда зёрна используемо
- 6 037907 го ячменя содержат β-глюкан, имеющий отношение DP3/DP4, составляющее по меньшей мере 3, например по меньшей мере 3.2. Согласно предпочтительному варианту зёрна используемого ячменя содержат β-глюкан, имеющий отношение DP3/DP4, равное по меньшей мере 3.4, например по меньшей мере 3.6, такое как, например, по меньшей мере 3.7.
Согласно одному из вариантов данного изобретения ячмень содержит мутацию в гене HvNst1. Такие мутации приводят к получению ячменя, содержащего по меньшей мере 10% β-глюканов и имеющего отношение DP3/DP4 в указанном β-глюкане, равное по меньшей мере 3, например по меньшей мере 3.4.
В частности, предпочтительно, чтобы мутация приводила к уменьшенной функции NST1, более предпочтительно, чтобы указанная мутация приводила к полной потере функции NST1. Последовательность NST1 в ячмене дикого типа представлена в виде SEQ ID NO:1. NST1 ячменя является транспортёром ADP-Glc, и термин полная потеря функции NST1, используемый в данной заявке, относится к одной из следующих ситуаций:
1) ячмень не содержит белка NST1;
2) ячмень содержит мутантный NST1, при этом указанный мутантный NST1 не способен транспортировать ADP-глюкозу.
Таким образом, согласно одному из вариантов данного изобретения ячмень содержит мутацию в гене HvNst1, приводящую к уменьшенной экспрессии белка NST1. Так, ячмень может содержать мутацию в гене HvNst1, приводящую к экспрессии белка NST1 со степенью по меньшей мере на 80% уменьшенной по сравнению с экспрессией белка NST1 в ячмене дикого типа, таком как сорт Quench (Квенч).
Согласно другому варианту настоящего изобретения ячмень содержит мутацию в гене HvNst1, причём указанный мутантный ген HvNst1 кодирует мутантный белок NST1 с потерей функции. В частности, указанный мутантный NST1 содержит по меньшей мере замену одной аминокислоты по сравнению с SEQ ID NO:1, такую как замена по меньшей мере одной консервативной аминокислоты по сравнению с SEQ ID NO:1. В частности, мутантный NST1 содержит замену по меньшей мере одной из аминокислот, отмеченных чёрным прямоугольником на фиг. 10, на другую аминокислоту.
Настоящее изобретение предусматривает также, что ячмень содержит мутацию в гене HvNst1 gene, причём указанный мутантный ген HvNst1 кодирует мутантный белок NST1, в котором отсутствует по меньшей мере одна аминокислота по сравнению с SEQ ID NO:1, например отсутствует по меньшей мере одна консервативная аминокислота по сравнению с SEQ ID NO:1. В частности, в мутантном NST1 отсутствует одна или более аминокислот, отмеченных чёрными прямоугольниками на фиг. 10. Так, указанный мутантный белок NST1 может не содержать по меньшей мере 10, например по меньшей мере 20, например по меньшей мере 30, например по меньшей мере 50 аминокислот, отмеченных чёрными прямоугольниками на фиг. 10.
Согласно одному варианту настоящего изобретения ячмень содержит мутацию в гене HvNst1, причём указанный мутантный ген HvNstl кодирует мутантный белок NST1, в котором аминокислота в положении 228 в последовательности SEQ ID NO:1 была делецирована или заменена на другую аминокислоту. В частности, ячмень может содержать мутацию в гене HvNst1, причём указанный мутантный ген HvNst1 кодирует мутантный белок NST1 в SEQ ID NO:1, где остаток Pro в положении 228 был заменён на остаток Ser.
Согласно другому варианту данного изобретения ячмень содержит мутацию в гене HvNst1, причём указанный мутантный ген HvNst1 кодирует мутантный белок NST1, где аминокислота 273 в последовательности SEQ ID NO:1 была делецирована или заменена на другую аминокислоту. В частности, ячмень может содержать мутацию в гене HvNst1, причём указанный мутантный ген HvNst1 кодирует NST1 в последовательности SEQ ID NO :1, где остаток Val в положении 273 был заменён на остаток Glu.
Одним неограничивающим примером ячменя, содержащего мутацию в гене HvNst1, причём мутантный ген HvNst1 кодирует NST1 в последовательности SEQ ID NO: 1, где остаток Val в положении 273 был заменён на остаток Glu, является ячмень, известный как lys5f, доступный в Nordic Genetic Resource Center под номером доступа NGB20030.
Ферментная композиция.
Данное изобретение предусматривает способы приготовления напитков с высоким содержанием βглюканов из зёрен ячменя путём затирания зёрен ячменя (например, дроблёного ячменя) в присутствии ферментной композиции. Указанная ферментная композиция обладает активностью α-амилазы и эндо1,3(4)-в-глюканазы и необязательно также активностью глюкоамилазы и/или пуллуланазы. Один фермент может обладать одним или более видами указанной активности, но в общем. Ферментная композиция содержит один фермент, обладающий активностью α-амилазы и один фермент, обладающий активностью эндо-1,3(4)-в-глюканазы и необязательно один фермент, обладающий активностью глюкоамилазы и/или один фермент, обладающий активностью пуллуланазы.
Согласно одному из вариантов ферментная композиция обладает активностью α-амилазы, глюкоамилазы и эндо-1,3(4)-в-глюканазы.
Согласно одному из вариантов ферментная композиция обладает активностью α-амилазы, глюкоамилазы, пуллуланазы и эндо-1,3(4)-в-глюканазы.
- 7 037907
Фермент, обладающий активностью α-амилазы, может быть α-амилазой. α-Амилаза согласно изобретению представляет собой фермент, способный катализировать эндогидролиз (1^4)-α-Οглюкозидных связей в полисахаридах, содержащих три или более (1^4)-α-соединённых единиц Dглюкозы. В частности, α-амилаза согласно данному изобретению представляет собой фермент αамилазу, классифицируемую согласно ЕС 3.2.1.1.
Конкретная α-амилаза, используемая в способах согласно данному изобретению, может быть αамилазой Bacillus. Хорошо известные α-амилазы Bacillus включают α-амилазу, полученную из штамма В.licheniformis, В.Amyloliquefaciens или В.stearothermophilus. Согласно одному из аспектов настоящего изобретения используемая α-амилаза Bacillus представляет собой α-амилазу, охарактеризованную в заявке WO 99/19467 на стр. 3, строка 18 - стр. 6, строка 27.
Другим примером α-амилазы, используемой согласно данному изобретению, является фермент с последовательностью SEQ ID NO: 3, описанный в заявке WO 99/19467, или его функциональный гомолог, который имеет с этим ферментом по меньшей мере 70%, например по меньшей мере 75%, например по меньшей мере 80%, например по меньшей мере 85%, например по меньшей мере 90%, например по меньшей мере 95%, например по меньшей мере 98% идентичности последовательностей. α-Амилаза может также быть α-амилазой, имеющей по меньшей мере 70%, например по меньшей мере 75%, например по меньшей мере 80%, например по меньшей мере 85%, например по меньшей мере 90%, например по меньшей мере 95%, например по меньшей мере 98% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, описанной как SEQ ID NO: 3 в заявке WO 99/19467 с мутациями: 1181* + G182* + N193F. Изобретение предусматривает также α-амилазу Termamyl® SC, доступную в Novozymes A/S, Denmark. Другой конкретной α-амилазой, используемой в способах по изобретению, может быть любая грибковая α-амилаза, например α-амилаза, полученная из вида Aspergillus, и предпочтительно из штамма Aspergillus niger. Особенно предпочтительной является α-амилаза, представленная как SEQ ID NO: 1 в заявке WO 2002/038787 или её функциональный гомолог, который имеет с ней по меньшей мере 70%, например по меньшей мере 75%, например по меньшей мере 80%, например по меньшей мере 85%, например по меньшей мере 90%, например по меньшей мере 95%, например по меньшей мере 98% идентичности последовательностей. Согласно предпочтительному варианту α-амилаза представляет собой полипептид с последовательностью SEQ ID NO:3 или его функциональный гомолог, который имеет с ним по меньшей мере 70%, например по меньшей мере 75%, например по меньшей мере 80%, например по меньшей мере 85%, например по меньшей мере 90%, например по меньшей мере 95%, например по меньшей мере 98% идентичности последовательностей.
Количество α-амилазы, которая должна добавляться, зависит от различных параметров и обычно известно специалисту в данной области. Согласно одному аспекту активность α-амилазы в экстракте составляет 0.1-1.0 KNU/г, более предпочтительно 0.2-0.4 KNU/г и наиболее предпочтительно 0.25-0.35 KNU/г в расчёте на сухой вес ячменя. Согласно другому аспекту активность α-амилазы в сусле составляет по меньшей мере 0.1 KNU/г, например по меньшей мере 0.2-0.4 KNU/г, например по меньшей мере 0.25 KNU/г в расчёте на сухой вес ячменя. Согласно другому аспекту активность α-амилазы в сусле находится в пределах от 0.1 до 10 KNU/г, например в пределах 0.1-5 KNU/г, например в пределах от по меньшей мере 0.2 до 5 KNU/г в расчёте на сухой вес ячменя. Одна единица Kilo Novozymes активности α-амилазы (KNU) равняется 1000 NU. Одна единица KNU определяется как количество фермента, которое в стандартных условиях (т.е. при 37°С +/- 0.05; 0.0003М Са2+; и рН 5.6) приводит к декстринизации 5.26 г сухого растворимого крахмального вещества Merck Amylum.
Функциональный гомолог α-амилазы представляет собой фермент, который может катализировать эндогидролиз (1^4)-α-D-глюкозидных связей в полисахаридах, содержащих три или более (1^4)-αсвязанных единиц D-глюкозы.
Фермент, обладающий активностью глюкоамилазы, может быть любой глюкоамилазой, но вообще это фермент, имеющий активность глюкан-1,4-α-глюкозидазы. В частности, глюкоамилаза может быть ферментом, успешно катализирующим гидролиз концевых (1 ^-связанных остатков α-D-глюкозы из невосстанавливающих концов цепей с высвобождением в-Э-глюкозы. В частности, глюкоамилаза согласно данному изобретению представляет ферменты α-амилазы, классифицируемые по ЕС 3.2.1.3.
Одним примером глюкоамилаз является Uniprot: B0CVJ1, который выявляет полипептид из Laccaria bicolor. Другими примерами являются глюкоамилазы из рода Trametes cingulata, описанные в заявке in WO 2006/069289.
Глюкоамилаза может быть также глюкоамилазой из грибка рода Gloeophyllum, например из G.abietinum, G.sepiarium или G.trabeum. Такие глюкоамилазы могут быть, например, полипептидом, содержащим аминокислотную последовательность, которая идентична последовательности зрелого полипептида, представленной SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16 или SEQ ID NO: 18, описанного в заявке WO 2011/068803, составляющей предпочтительно по меньшей мере 82%, более предпочтительно по меньшей мере 83%, более предпочтительно по меньшей мере 84%, более предпочтительно по меньшей мере 85%,
- 8 037907 более предпочтительно по меньшей мере 86%, более предпочтительно по меньшей мере 87%, более предпочтительно по меньшей мере 88%, более предпочтительно по меньшей мере 89%, более предпочтительно по меньшей мере 90%, более предпочтительно по меньшей мере 91%, более предпочтительно по меньшей мере 92%, даже более предпочтительно по меньшей мере 93%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 94% и ещё наиболее предпочтительно по меньшей мере 95%, например по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или даже 100%.
Г люкоамилаза может быть также глюкоамилазой из рода Penicillium oxalicum, например глюкомилазой, описанной в публикации Yoshiki YAMASAKI, Agric. Biol. Chem., 41 (5), 755-762, 1977). Глюкоамилаза может быть также глюкоамилазой полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, которая идентична последовательности SEQ ID NO: 2 зрелого полипептида, описанного в заявке WO 2011/127802, составляющей предпочтительно по меньшей мере 61.5%, более предпочтительно по меньшей мере 63%, более предпочтительно по меньшей мер 65%, более предпочтительно по меньшей мере 68%, более предпочтительно по меньшей мере 70%, более предпочтительно по меньшей мере 75%, более предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 85%, более предпочтительно по меньшей мере 90%, более предпочтительно по меньшей мере 91%, более предпочтительно по меньшей мере 92%, даже более предпочтительно по меньшей мере 93%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 94% и даже наиболее предпочтительно по меньшей мере 95%, даже по меньшей мере 96, 97, 98, 99 или 100%.
Фермент, обладающий активностью пуллуланазы, может быть любой пуллуланазой. Пуллуланаза предпочтительно представляет собой фермент, способный катализировать гидролиз a-(1^6)-Dглюкозидных связей в пуллулане, амилопектине и гликогене. Пуллулан является линейным полимером, содержащим 1^6-связанные единицы мальтотриозы. Пуллуланаза согласно настоящему изобретению предпочтительно является пуллуланазой, классифицированной согласно классификации ЕС 3.2.1.41.
Пуллуланаза согласно настоящему изобретению может быть пуллуланазой, например, из рода Pyrococcus или Bacillus, например Bacillus acidopullulyticus, например пуллуланазой, описанной в публикации Kelly et al., 1994, FEMS Microbial. Letters 115: 97-106, или пуллуланазой доступной в Novozymes A/S в виде Promozyme 400L. Пуллуланаза может быть также из рода Bacillus naganoencis или Bacillus deramificans, например из Bacillus deramificans (патент США № 5736375). Пуллуланаза может также быть полученной методом генетической инженерии из, например, штамма Bacillus. Пуллуланаза может также быть доступной в Novozymes A/S, Denmark как Attenuzyme® Flex. Другие пуллуланазы могут быть получены из Pyrococcus woesei, описанного в заявке PCT/DK 91/00219, или пуллуланаза может быть получена из рода Fervidobacterium sp. Ven, описанного в заявке PCT/DK92/00079, или пуллуланаза может быть получена из рода Thermococcus celer, описанного в заявке PCT/DK95/00097, или пуллуланаза может быть получена из рода Pyrodictium abyssei, описанного в заявке PCT/DK95/00211, или пуллуланаза может быть получена из рода FetVidobacterium pennavorans, описанного в заявке PCT/DK95/00095, или пуллуланаза может быть получена из рода Desulforococcus mucosus, описанного в заявке PCT/DK95/00098.
Наиболее предпочтительно, если пуллуланаза получена из рода Bacillus acidopullulyticus. Предпочтительная пуллуланаза, используемая в способах по изобретению, представляет собой полипептид с последовательностью SEQ ID NO:4 или его функциональный гомолог, последовательность которого идентична последовательности полипептида по меньшей мере на 70%, например по меньшей мере 75%, например по меньшей мере 80%, например по меньшей мере 85%, например по меньшей мере 90%, например по меньшей мере 95%, например по меньшей мере 98%.
Пуллуланаза может быть добавлена в эффективных количествах, хорошо известных специалисту в данной области. Согласно одному из аспектов пуллуланаза добавляется в количестве от 0.1 до 3 PUN/г в расчёте на вес сухого ячменя, например от 0.2 до 2.9, например от 0.3 до 2.8, например от 0.3 до 2.7, например от 0.3 до 2.6, например от 0.3 до 2.5, например от 0.3 до 2.4, например от 0.3 до 2.3, например от 0.3 до 2.2, например от 0.3 до 2.1, например от 0.3 до 2.0, например от 0.3 до 1.9, например от 0.3 до 1.8, например от 0.3 до 1.7, например от 0.3 до 1.6, наиболее предпочтительно добавлять пуллуланазу в количестве от 0.3 до 1.5, предпочтительно от 0.4 до 1.4, более предпочтительно от 0.5 до 1.3, более предпочтительно от 0.6 до 1.2, более предпочтительно от 0.7 до 1.1, более предпочтительно от 0.8 до 1.0, более предпочтительно от 0.9 до 1.0. Согласно конкретному варианту этот фермент добавляют в количестве примерно 0.3 PUN/г в расчёте на вес сухого ячменя, например примерно 0.4 PUN/г в расчёте на вес сухого ячменя, например примерно 0.5 PUN/г в расчёте на вес сухого ячменя.
Одна единица пуллуланазы (PUN) равна количеству фермента, которое в стандартных условиях (т.е. через 30 мин реакции при 40°С и рН 5.0; и в присутствии 0.2% пуллулана в качестве субстрата) приводит к гидролизу пуллулана, высвобождая восстанавливающий углевод с восстановительной способностью, которая эквивалентна 1 мкмоль глюкозы в минуту. Активность пуллуланазы измеряют путём определения увеличенной восстановительной способности сахара.
Функциональный гомолог полипептида последовательности SEQ ID NO:4 представляет собой фермент, который может катализировать гидролиз а-(1^6)-О-глюкозидных связей в пуллулане, амилопектине и гликогене.
- 9 037907
Фермент, обладающий активностью эндо-1,3(4)-в-глюканазы, может быть любой эндо-1,3(4)-βглюканазой. Эндо-1,3(4)-в-глюканаза предпочтительно представляет собой фермент, способный катализировать эндогидролиз (1^3)- или (1^4)-связей в β-глюканах, когда остаток глюкозы, чья восстановительная группа находится в связи, подвергающейся гидролизу, сам замещён в положении С-3.
Согласно одному из вариантов данного изобретения эндо-1,3(4)-в-глюканаза по данному изобретению является ферментом эндо-1,3(4)-β-D-глюканазой. Согласно предпочтительному варианту настоящего изобретения эндо-1,3(4)-в-глюканаза представляет собой лихеназу, предпочтительно лихеназу, классифицируемую по ЕС 3.2.1.73.
Эндо-1,3(4)-в-глюканаза может быть получена из любого подходящего организма, например эндо1,3(4)-в-глюканаза может быть лихеназой из Bacillus subtilis. Например, эндо-1,3(4)-в-глюканаза может быть полипептидом SEQ ID NO:5 или его функциональным гомологом, последовательность которого идентична последовательности полипептида по меньшей мере на 70%, например по меньшей мере на 75%, например по меньшей мере на 80%, например по меньшей мере на 85%, например по меньшей мере на 90%, например по меньшей мере на 95%, например по меньшей мере на 98%.
Согласно другому варианту эндо-1,3(4)-в-глюканаза может быть лихеназой, кодированной геном GluB Bacillus polymyxa, или её функциональным гомологом, последовательность которого идентична последовательности полипептида по меньшей мере на 70%, например по меньшей мере на 75%, например по меньшей мере на 80%, например по меньшей мере на 85%, например по меньшей мере на 90%, например по меньшей мере на 95%, например по меньшей мере на 98%.
Последовательность лихеназы, кодированная геном GluB Bacillus polymyxa, показана на фиг. 2 в публикации Gosalbes et al., JOURNAL OF BACTERIOLOGY, Dec. 1991, Vol. 173, No. 23, p. p. 7705-7710.
Согласно другому варианту эндо-1,3(4)-в-глюканаза может быть любой из лихеназ, описанных в патенте США № 6103511, в частности эндо-1,3(4)-в-глюканаза может быть полипептидом, представленным SEQ ID NO:2 в патенте США № 6103511 или его функциональным гомологом, последовательность которого идентична последовательности полипептида по меньшей мере на 70%, например по меньшей мере на 75%, например по меньшей мере на 80%, например по меньшей мере на 85%, например по меньшей мере на 90%, например по меньшей мере на 95%, например по меньшей мере на 98%.
Согласно одному из вариантов данного изобретения эндо-1,3(4)-в-глюканаза может быть βглюканазой, классифицируемой по классификации Е.С. 3.2.1.4. β-глюканаза может иметь микробное происхождение, например она может быть получена из штамма бактерий (например, Bacillus) или из нитчатого гриба (например, Aspergillus, Trichoderma, Humicola, Fusarium). Предпочтительными являются β-глюканазы, полученные из рода Trichoderma может быть полипептидом с любой из последовательностей, представленных как SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8 в заявке WO 2006/066582 или его функциональным гомологом, последовательность которого идентична последовательности полипептида по меньшей мере на 70%, например по меньшей мере на 75%, например по меньшей мере на 80%, например по меньшей мере на 85%, например по меньшей мере на 90%, например по меньшей мере на 95%, например по меньшей мере на 98%.
Коммерчески доступные препараты β-глюканазы, которые можно использовать, включают CELLUCLAST®), CELLUZYME®, CEREFLO® и ULTRAFLO® (доступные в Novozymes A/S), GC 880, LAMINEX™ и SPEZYME® СР (лоступные в Genencor Int.) и ROHAMENT® 7069 W (доступен в Rohm, Germany).
Согласно одному из вариантов эндо-1,3(4)-в-глюканаза представляет собой эндоглюканазу, полученную из Humicola sp., например эндоглюканазу из Humicola insolens, эндоглюканазу из Н. insolens или из Thermoascus sp., например эндоглюканазу из Thermoascus aurantiacus, или из Aspergillus sp., например эндоглюканазу, полученную из Aspergillus aculeatus, из Trichoderma sp., предпочтительно, из Т.reesei и/или Т.viride, например семейство 5-эндоглюканаз, семейство 7, β-глюканаз или семейство 12, β-глюканаз. Эндо-1,3(4)-в-глюканаза, в частности, может быть полипептидом с любой из последовательностей, представленных в виде SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 или SEQ ID NO: 20 в заявке WO 2005/059084, или его функциональным гомологом, последовательность которого идентична последовательности полипептида по меньшей мере на 70%, например по меньшей мере на 75%, например по меньшей мере на 80%, например по меньшей мере на 85%, например по меньшей мере на 90%, например по меньшей мере на 95%, например по меньшей мере на 98%.
Функциональный гомолог эндо-1,3(4)-в-глюканазы, например полипептид с последовательностью SEQ ГО NO: 5 является ферментом, который может катализировать эндогидролиз (1^3)- или (1^4)связей в β-глюканах, когда остаток глюкозы, чья восстановительная группа содержится в этих гидролизуемых связях, сам является замещённым в положении С-3.
Количество эндо-1,3(4)-в-глюканазы, которое следует добавлять, может зависеть от различных параметров. В общем, добавляется количество β-глюканазы, которое приводит к получению β-глюканов, после затирания имеющих среднюю молекулярную массу Mw в пределах 80-200 кДа. В общем предпочтительно, чтобы применялись довольно небольшие количества эндо-1,3(4)-β-глюканазы. Так, согласно
- 10 037907 одному из вариантов активность эндо-1,3(4)-в-глюканазы в экстракте составляет максимально 0.5 EGU/г и наиболее предпочтительно максимально 0.3 EGU/г в расчёте на вес сухого ячменя, даже максимум 0.1 EGU/г, например максимум 0.05 EGU/г, например максимум 0.03 EGU/г. Согласно другому варианту активность эндо-1,3(4)-в-глюканазы в экстракте находится в пределах от 0.0005 до 0.5 EGU/г, предпочтительно в пределах от 0.005 до 0.3 EGU/г, например в пределах от 0.001 до 0.1 EGU/г, например в пределах от по меньшей мере 0.001 до 0.05 EGU/г в расчёте на вес сухого ячменя. Активность эндо-1,3(4)-вглюканазы можно измерить в единицах эндо-глюканазы (EGU), определённых при рН 6.0 с карбоксиметилцеллюлозой (CMC) в качестве субстрата следующим образом. Готовят раствор субстрата, содержащий 34.0 г/л CMC (Hercules 7 LFD) в 0.1М фосфатном буфере при рН 6.0. Образец анализируемого фермента растворяют в том же буфере. 5 мл раствора субстрата и 0.15 мл раствора фермента смешивают и помещают в вибрационный вискозиметр (например, MIVI 3000 фирмы Sofraser, France), затем термостатируют при 40°С в течение 30 мин. Одна единица EGU означает количество фермента, которое приводит к уменьшению вязкости наполовину в указанных условиях.
Используемый в данной заявке термин X в сусле (экстракте) относится к количеству X, содержащемуся во время затирания (например, на стадии b) при осуществлении способов, описанных в данной заявке). Активность фермента в сусле можно указывать в единицах на грамм сухого ячменя, который содержится при затирании.
Согласно одному предпочтительному варианту настоящего изобретения ферментная композиция содержит Attenuzyme® Flex, доступный в Novozymes, Denmark. В частности, ферментная композиция может содержать или даже состоять из смеси Termamyl® SC и Attenuzyme® Flex, которые оба доступны в Novozymes, Denmark.
Переработка основы напитка в напиток.
Настоящее изобретение относится также к способам приготовления напитка, причём эти способы включают затирание зёрен ячменя в присутствии ферментной композиции и отделение водного экстракта от зёрен ячменя (например, дроблёного ячменя).
Указанный водный экстракт может представлять собой напиток. Однако часто водный экстракт является основой напитка, которая затем пред употреблением перерабатывается в готовый напиток.
Основа напитка часто подвергается нагреву до температуры, равной по меньшей мере 75°С. Это может обеспечить несколько эффектов, включая пастеризацию напитка. Указанный нагрев предпочтительно осуществляют при температуре, составляющей по меньшей мере 75°С, предпочтительно по меньшей мере 85°С, более предпочтительно по меньшей мере 90°С, например при температуре в пределах от 85 до 100°С, например в пределах от 90 до 100°С. Нагрев производят в течение любого подходящего промежутка времени, например в пределах от 15 до 120 мин, например в пределах от 15 до 60 мин, например в течение примерно 30 мин. Таким образом, напиток согласно данному изобретению может быть пастеризованным напитком.
Основа напитка может быть подвергнута обработке при ультравысокой температуре (UHT) при предварительном нагреве до температуры в пределах 70-80°С с последующим нагревом до температуры выше 90°С в течение короткого промежутка времени, например в течение времени от 1 до 5 с, например в течение времени от 1 до 2 с или в течение 4- 5 с.
Напиток может быть также подвергнут гомогенизации, например, обработкой при давлении 100200 бар.
Часто стадия d) включает добавление одного или более соединений и/или одной или более дополнительных жидкостей к основе напитка, полученной на стадии с), для того, чтобы получить напиток. В таких случаях указанная выше тепловая обработка или UHT могут проводиться до или после добавления одного или более соединений и/или одной или более дополнительных жидкостей.
Способы согласно изобретению могут включать стадию добавления одного или более дополнительных соединений. Дополнительное соединение может быть, например, вкусовым веществом, консервантом или функциональным ингредиентом. Дополнительное соединение может также быть красителем, подсластителем, агентом, регулирующим рН, или солью. Подсластитель может, например, быть искусственным подсластителем низкокалорийным подсластителем или сахаром. Агент, регулирующий рН, может быть, например, буфером или кислотой, такой как молочная кислота или лимонная кислота.
Функциональные ингредиенты могут быть любым ингредиентом, добавляемым для получения заданной функции. Предпочтительно, функциональный ингредиент делает напиток более полезным для здоровья. Неограничивающие примеры функциональных ингредиентов включают растворимые волокна, белки, добавляемые витамины или минералы.
Консервант может быть любым пищевым консервантом, например он может быть бензойной кислотой, сорбиновой кислотой, сорбатом (например, сорбатом калия), сульфитом и/или солями указанных кислот.
Дополнительным соединением может также быть CO2. В частности, СО2 можно добавлять для получения газированного напитка.
Используемое согласно данному изобретению вкусовое вещество может быть любым подходящим
- 11 037907 вкусовым веществом. Вкусовое вещество может, например, выбираться из группы, состоящей из ароматизаторов, растительных экстрактов, растительных концентратов, частей растений и травяных настоев.
Так, вкусовое вещество может быть, например, ароматизатором. Ароматизаторы обычно представляют собой органические соединения, например они могут быть вторичными метаболитами растений. Ароматизатор может быть любым ароматизатором, например фруктовым ароматизатором или ванильным ароматизатором.
Растительный экстракт может быть, например, травяным экстрактом. Неограничивающие примеры травяных экстрактов включают экстракт зелёного чая, чёрного чая, ройбуш, экстракт перечной мяты или хмеля. Растительный экстракт может также быть цветочным экстрактом. Неограничивающие примеры цветочных экстрактов включают экстракты гибискуса, ромашки, цветков бузины, лаванды или цветов липы.
Растительный экстракт может также быть фруктовым экстрактом. Части растений могут быть, например, высушены или используют свежие травы, например гранулы хмеля, высушенные или свежие цветы, или фрукты.
Концентрат растений может быть фруктовым, например фруктовым соком, который концентрировали путём удаления воды.
Неограничивающие примеры фруктов, пригодных для получения вкуса, фруктового экстракта или фруктового концентрата включают апельсины, яблоки, бананы, лимоны, пассифлору, манго, ананас, груши, кумкваты или помело.
Вкусовое вещество может также быть хинином, например в вариантах, где напиток является тонизирующим.
По меньшей мере одно дополнительное соединение может также быть стабилизатором. Указанный стабилизатор может быть, например, любым ингредиентом, способным стабилизировать растворимые βглюканы, например способным стабилизировать растворимые β-глюканы в эластичной гелеобразующей матрице. Указанный стабилизатор может быть, например, геллановой камедью, такой как Kelcogel® LT100, доступный в СР Kelco, Denmark. Указанный стабилизатор можно добавлять в напиток в любом подходящем количестве, например до получения конечной концентрации, составляющей величину в пределах от 0.001 до 0.1% (вес./вес.), например, до получения конечной концентрации в пределах от 0.01 до 0.05% (вес./вес.).
Дополнительной жидкостью может быть вода. Дополнительной жидкостью может также быть другой напиток, например фруктовый сок, сироп, газированный прохладительный напиток или пиво. В частности, дополнительной жидкостью может быть фруктовый сок.
Стадия d) может также включать ферментацию основы напитка с помощью одного или более микроорганизмов. В частности, основа напитка может ферментироваться с помощью дрожжей для того, чтобы получить алкогольный напиток. Указанные дрожжи могут быть любыми, например, видом S.cerevisiae или S.pastorianus. Указанные микроорганизмы могут быть также бактериями, например, бактериями Lactobacillus, например, L.lactis. Например, основу напитка можно подвергать ферментации так же, как проводят ферментацию обычного сусла при получении пива. Таким образом, можно применять любой способ получения пива, при котором обычное сусло заменяют основой пива, приготовленного по способам согласно изобретению.
Клинические условия.
Примечательно, что, как было показано, β-глюканы, полученные согласно способам по изобретению, пригодны для снижения уровня как LDL, так и общего холестерина. Соответственно, напитки, приготовленные согласно данному изобретению, пригодны для уменьшения риска развития нескольких клинических состояний, ассоциированных с повышенным содержанием LDL и холестерина.
Так, согласно одному из аспектов изобретение относится к напитку, содержащему по меньшей мере 2 г/л β-глюканов, при этом указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа, а напиток предназначен для уменьшения риска развития клинического состояния у субъекта, нуждающегося в этом, и клиническое состояние выбрано из группы, состоящей из ишемической болезни сердца и диабета.
Настоящее изобретение предусматривает также способ уменьшения риска развития клинического состояния у субъекта, нуждающегося в этом, и клиническое состояние выбрано из группы, состоящей из ишемической болезни сердца, диабета и инфекций, причём указанный способ включает введение напитка, содержащего по меньшей мере 2 г/л β-глюканов, при этом указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа, указанному субъекту в эффективном количестве.
Предпочтительно, чтобы указанный субъект принимал напитки по изобретению в количестве, достаточном для дневного потребления по меньшей мере 2 г β-глюканов, например по меньшей мере 3 г βглюканов, например в пределах от 3 до 50 г β-глюканов, например в пределах от 3 до 20 г β-глюканов, например в пределах от 3 до 10 г β-глюканов. Может быть также предпочтительно, чтобы указанный субъект потреблял β-глюканы в количестве в пределах от 0.5 до 2 г, например в пределах от 0.5 до 1.5 г, например примерно 1 г, например 1 г β-глюканов на порцию. В контексте напитков согласно данному
- 12 037907 изобретению порция обычно составляет от 250 до 330 мл, например примерно 250 мл и/или примерно 330 мл.
Таким образом, указанное эффективное количество составляет по меньшей мере 2 г β-глюканов, например по меньшей мере 3 г β-глюканов, например от 3 до 50 г β-глюканов, например от 3 до 20 г βглюканов, например от 3 до 10 г β-глюканов в день.
Данное изобретение предусматривает также способ снижения уровня по меньшей мере одного липида, выбранного из группы, состоящей из триглицеридов, холестерина и LDL в крови у субъекта, нуждающегося в этом, причём указанный способ включает потребление указанным субъектом напитка по изобретению, содержащего по меньшей мере 2 г β-глюканов, например по меньшей мере 3 г β-глюканов, например по меньшей мере от 3 до 50 г β-глюканов, например от 3 до 20 г β-глюканов, например по меньшей мере от 3 до 10 г β-глюканов, в соответствии с любым из пунктов 29-31.
Цель данного изобретения заключается также в создании способов уменьшения риска развития ожирения у субъекта, нуждающегося в этом. Эти способы включают потребление в эффективном количестве, указанном выше, указанным субъектом напитка по изобретению, содержащего по меньшей мере 2 г β-глюканов, при этом указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа. Эффективное количество предпочтительно является количеством, указанным выше.
Цель данного изобретения заключается также в создании способов уменьшения степени ожирения у субъекта, нуждающегося в этом. Эти способы включают потребление в эффективном количестве указанным субъектом напитков согласно изобретению, содержащих по меньшей мере 2 г/л β-глюканов, при этом указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа. Эффективное количество предпочтительно является количеством, указанным выше.
Указанный субъект предпочтительно является человеком. Согласно некоторым вариантам субъектом является человек, страдающий ожирением.
Перечень последовательностей
| SEQ ID NO:1 | Белковая последовательность NST1 ячменя | Номер доступа в банке генов AY560327 |
| SEQ ID NO:2 | ДНК последовательность гена Hv.Nstl ячменя | |
| SEQ ID NO:3 | Белковая последовательность а-амилазы Bacillus stearothermophilus | |
| SEQ ID NO:4 | Белковая последовательность пуллуланазы Bacillus acidopullulyticus | |
| SEQ ID NO:5 | Белковая последовательность лихеназы Bacillus subtilis | Gene Bank accession Z46862.1 |
Объекты изобретения.
Изобретение характеризуется следующими объектами изобретения.
1) Способ приготовления напитка, содержащего по меньшей мере 2 г/л β-глюкана, при этом указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа, включающий стадии:
a) предоставления зёрен ячменя, причём указанные зёрна обладают следующими характеристиками:
i) содержат по меньшей мере 10% β-глюканов;
ii) имеют отношение DP3/DP4 в указанном β-глюкане, составляющее по меньше мере 3,
b) затирания указанных зёрен с водой в присутствии ферментной композиции, при этом указанная композиция обладает активностью α-амилазы и активностью энgо-1,3(4)-β-глюканазы, с получением при этом водного экстракта;
c) отделения указанного водного экстракта от зёрен ячменя с получением при этом напитка или основы напитка;
d) необязательного превращения основы напитка в напиток.
2) Способ по п.1, где ферментная композиция обладает также активностью глюкоамилазы.
3) Способ по любому из предыдущих пунктов, где ферментная композиция обладает также активностью пуллуланазы.
4) Способ по любому из предыдущих пунктов, где напиток содержит по меньшей мере 3 г/л, например по меньшей мере 4 г/л β-глюканов.
- 13 037907
5) Способ по любому из предыдущих пунктов, где указанные зёрна содержат по меньшей мере 11%, например по меньшей мере 12% β-глюканов.
6) Способ по любому из предыдущих пунктов, где отношение DP3/DP4 в указанном β-глюкане составляет по меньшей мере 3.2, например по меньшей мере 3.4, например по меньшей мере 3.6, например по меньшей мере 3.7.
7) Способ по любому из предыдущих пунктов, где ячмень имеет мутацию в гене HvNst1.
8) Способ по любому из предыдущих пунктов, где ячмень имеет мутацию в гене HvNst1, приводящую к полной потере функции NST1.
9) Способ по любому из пп.7, 8, где мутация приводит к образованию мутировавшего гена HvNst1, кодирующего мутировавший NST1, содержащий замену по меньшей мере одной аминокислоты по сравнению с последовательностью SEQ ID NO: 1, причём эта аминокислота выбрана, например, из аминокислоты в положении 228 и аминокислоты в положении 273 последовательности SEQ ID NO: 1.
10) Способ по любому из предыдущих пунктов, где ячмень содержит мутацию в гене HvNst1, причём мутантный ген HvNst1 кодирует NST1 последовательности SEQ ID NO: 1 и остаток Pro в положении 228 заменён на остаток Ser.
11) Способ по любому из пп.1-10, где ячмень содержит мутацию в гене HvNst1, причём мутантный ген HvNst1 кодирует NST1 последовательности SEQ ID NO: 1 и остаток Val в положении 273 заменён на Glu.
12) Способ по любому из предыдущих пунктов, где ячмень содержит мутацию в гене HvNst1, приводящую к экспрессии белка NST1 со степенью по меньшей мере 80%, уменьшенной по сравнению с экспрессией белка NST1 в ячмене дикого типа, таком как ячмень сорта Quench.
13) Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадия b) включает смешение измельчённых зёрен ячменя с водой.
14) Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадия b) включает смешение измельчённых зёрен ячменя с водой при отношении воды к измельчённому ячменю от 1 до 10-20.
15) Способ по любому из предыдущих пунктов, где затирание на стадии b) включает выдержку при температуре в пределах от 60 до 72°С.
16) Способ по любому из предыдущих пунктов, где затирание на стадии b) включает выдержку при температуре в пределах от 60 до 72°С в течение времени от 30 до 60 мин.
17) Способ по любому из предыдущих пунктов, где указанная α-амилаза является ферментом, классифицируемым согласно классификации ЕС 3.2.1.1.
18) Способ по любому из предыдущих пунктов, где указанная α-амилаза является полипептидом с SEQ ID NO: 3 или его функциональным гомологом, последовательность которого идентична последовательности полипептида на по меньшей мере на 70%.
19) Способ по любому из пп.2-18, где глюкоамилаза является ферментом, классифицируемым согласно классификации ЕС 3.2.1.3.
20) Способ по любому из пп.3-19, где указанная пуллуланаза является ферментом, классифицируемым согласно классификации ЕС 3.2.1.41.
21) Способ по любому из пп.3-20, где указанная пуллуланаза является полипептидом с SEQ ID NO: 4 или его функциональным гомологом, последовательность которого идентична последовательности полипептида на по меньшей мере на 70%.
22) Способ по любому из предыдущих пунктов, где указанная эндо-1,3(4)-в-глюканаза является лихеназой.
23) Способ по любому из предыдущих пунктов, где указанная эндо-1,3(4)-в-глюканаза является ферментом, классифицируемым по классификации ЕС 3.2.1.73.
24) Способ по любому из предыдущих пунктов, где указанная эндо-1,3(4)-в-глюканаза является полипептидом с SEQ ID NO:5 или его функциональным гомологом, последовательность которого идентична последовательности полипептида на по меньшей мере на 70%.
25) Способ по любому из предыдущих пунктов, где указанная эндо-1,3(4)-в-глюканаза является ферментом, классифицируемым по классификации Е.С.3.2.1.4.
26) Способ по любому из предыдущих пунктов, где активность эндо-1,3(4)-в-глюканазы во время затирания составляет самое большое 0.5 EGU на грамм ячменя (сухой вес), предпочтительно самое большое 0.1 EGU на грамм ячменя (сухой вес).
27) Способ по любому из предыдущих пунктов, где активность эндо-1,3(4)-в-глюканазы во время затирания составляет самое большое 0.05 EGU на грамм ячменя (сухой вес).
28) Способ по любому из предыдущих пунктов, где он включает стадию инактивации ферментной композиции, например, путём выдержки при температуре более 75°С.
29) Способ по любому из предыдущих пунктов, где водный экстракт, полученный на стадии с) представляет собой напиток.
30) Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадия d) включает нагрев основы напитка до температуры, равной по меньшей мере 75°С.
- 14 037907
31) Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадия d) включает добавление одного или более дополнительных соединений или дополнительных жидкостей к основе напитка, полученной на стадии с), для получения напитка.
32) Способ по п.31, где по меньшей мере одно дополнительное соединение выбрано из группы, состоящей из вкусового вещества, консерванта и функционального ингредиента.
33) Способ по любому из пп.31, 32, где по меньшей мере одна дополнительная жидкость выбрана из группы, состоящей из фруктового сока, воды и пива.
34) Способ по любому из пп.31-33, где по меньшей мере одно дополнительное соединение представляет собой стабилизатор.
35) Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадия d) включает ферментацию основы напитка с помощью одного или более микроорганизмов.
36) Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадия d) включает ферментацию основы напитка с помощью дрожжей для получения алкогольного напитка.
37) Способ по любому из предыдущих пунктов, где напиток имеет вязкость равную самое большое 55 мПа-с.
38) Способ по любому из предыдущих пунктов, где напиток имеет вязкость равную самое большое 50 мПа-с, например самое большее 40 мПа-с, например самое большое 35 мПа-с.
39) Способ по любому из предыдущих пунктов, где напиток имеет вязкость равную самое большее 35 мПа-с.
40) Напиток, содержащий по меньшей мере 2 г/л β-глюканов, причём указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа, и указанный напиток получен способом по любому из предыдущих пунктов.
41) Напиток по п.40, который содержит по меньшей мере 3 г/л, например по меньшей мере 4 г/л βглюканов.
42) Напиток по любому из пп.40-41, который имеет вязкость самое большое 50 мПа-с, например, самое большее 40 мПа-с, например самое большое 35 мПа-с.
43) Напиток по любому из пп.40-42, который предназначен для уменьшения риска развития клинического состояния у субъекта, нуждающегося в этом, при этом клиническое состояние выбрано из группы, состоящей из ишемической болезни сердца и диабета.
44) Способ уменьшения риска развития клинического состояния у субъекта, нуждающегося в этом, при этом клиническое состояние выбрано из группы, состоящей из ишемической болезни сердца, диабета и инфекций, включающий введение напитка по любому из пп.40-42 указанному субъекту в эффективном количестве.
45) Способ снижения в крови уровня по меньшей мере одного липида, выбранного из группы, состоящей из триглицеридов, холестерина и LDL, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение напитка по любому из пп.40-42 указанному субъекту.
46) Способ уменьшения риска развития ожирения у субъекта, нуждающегося в этом, включающий потребление указанным субъектом напитка по любому из пп.40-42.
47) Способ по любому из пп.43-46, где указанный субъект является человеком.
48) Способ по любому из пп.44-47, где указанному субъекту ежедневно вводят напиток, содержащий по меньшей мере 3 г β-глюкана.
Примеры
Изобретение далее иллюстрируется следующими примерами, которые не следует считать ограничивающими данное изобретение.
Пример 1. Получение сусла с высоким содержанием β-глюкана.
Получение сусла (экстракта) с высоким содержанием β-глюкана осуществляли в электронном заторном аппарате фирмы Lochner с 8 заторными стаканами. Получали сусло с высоким содержанием βглюкана - > 8 г/л. В этом примере использовали ячмень сорта lys5f. Lys5f доступен в Nordic Genetic Resource Center под номером доступа NGB20030. Зёрна ячменя измельчали в мельнице ЕВС (до 0.5 мм). Отношение вода:мука было равно 1:15 по весу, что эквивалентно 27 г (на сухой вес) ячменной муки, заваренной в 400 мл стандартной воды для пивоварения при 65°С в металлическом стакане объёмом 500 мл. Сразу после смешения измельчённого ячменя с водой добавляли вместе два коммерческих ферментных препарата (концентрация 0.2%/влажный вес - соответствует 400 мкл каждого ферментного препарата), обладающих активностью α-амилазы, а-1,4-глюкозидазы, пуллуланазы и β-глюканазы, для того чтобы облегчить процесс декстринизации крахмала и экстракции β-глюкана. Использовали две разных ферментных смеси, или смесь Termamyl® SC и Attenuzyme® Flex (TAF), или смесь Termamyl® SC и Attenuzyme® (ТА). Все ферменты были куплены в Novozymes, Denmark. Termamyl® SC обладал активностью α-амилазы 120 KNU/r, соответственно примерно 48 KNU α-амилазы на 27 г ячменя (соответствует 1.8 KNU на г ячменя - в расчёте на сухой вес). На этой стадии величину рН устанавливали равной 5.5 добавлением фосфорной кислоты. Через 45 мин выдержки при 65°С температуру постепенно повышали
- 15 037907 до 90°С в течение 25 мин и, наконец, выдерживали смесь при 90°С в течение 30 мин. Сусло центрифугировали при 3500 об/мин (RC5C) в течение 10 мин для удаления нерастворимых отработанных зёрен. Всё количество сусла (340 мл) выливали в сосуды Blue Cap b и кипятили при 90°С в течение 30 мин. Измеренное количество β-глюкана составило 8.4 г/л для сусла lys5f TAF (применяли окрашивание калькофлуором (Brewing ЕВС standards, 1994)) (система β-глюкан Carlsberg 5700 Analyzer, Tecator, Sweden). После кипячения в сусло добавляли коммерческую геллановую смолу в качестве стабилизатора (Kelcogel® LT-100, CP Kelco, Lille Skensved, Denmark) для стабилизации растворимых β-глюканов в мягкой и эластичной гелеобразующей матрице. Конечная концентрация добавленного стабилизатора составляла 0.025%. Сусло с высоким содержанием β-глюкана хранили при 5°С до последующего дображивания и добавления вкусовых веществ.
Пример 2. Получение сусла, содержащего β-глюкан.
По существу, процесс проводили, как описано в примере 1 за исключением того, что сусло получали на пилотной установке (500 л) с применением декантера (скорость потока 700 л/ч) с последующим центрифугированием (475 л/ч, обратное давление 3 бар) для отделения нерастворимого ячменя. Выход сусла составил 85% в расчёте на количество загруженной воды, содержание β-глюкана, определённого окрашиванием калькофлуором, составило 4 г/л. Сусло помещали в пищевые контейнеры, добавляли сорбат калия (25 мг/л), величину рН устанавливали равной 4.0 при помощи раствора лимонной/молочной кислоты и сусло выдерживали при 5°С перед стабилизацией и добавлением вкусовых веществ. Ингредиенты, состоящие из 5% сахара, 0.3% вкусового вещества, 0.1% красителя и 0.025% геллановой камеди, диспергировали в основе с высоким содержанием β-глюкана при комнатной температуре, используя смеситель с высокой скоростью сдвига с последующей низкой скоростью в течение 5 мин и гидратировали в течение 15 мин. После смешения ингредиентов напиток подвергали воздействию UHT и гомогенизировали для сохранения стабильности. На первой стадии осуществляли предварительный нагрев до 80°С и гомогенизировали при давлении 180 бар. Затем подвергали действию UHT при 90°С в течение 4 с. Затем напиток охлаждали до 20°С и помещали в стерильные бутылки из PET (250 мл).
Пример 3.
Процесс, по существу, осуществляли, как описано в примере 1 за исключением того, что сусло получали на пилотной установке с применением сусловарочных котлов. Использовали опять ячмень lys5f, однако собранный в другой сезон. После проведения затирания жидкость подавали насосом в фильтрационный чан и снижали температуру до 75 °С и оставляли для осаждения на 24 ч для удаления нерастворимого ячменя. Всё сусло в количестве 160 л помещали в сусловарочный котёл и кипятили при 90°С в течение 30 мин. Определяли содержание β-глюкана при помощи калькофлуора, оно составило 6 г/л сусла.
Пример 4. Описание действия второстепенной активности β-глюканазы ферментов, использованных в примерах 1, 2 и 3.
Наличие действия β-глюканазы в трёх разных коммерческих ферментных смесях, использованных при получении экстракта, проверяли, применяя β-глюкан ячменя средней вязкости (200 кДа) фирмы Megazyme (Ireland). β-глюкан растворяли при осторожном нагреве и вихревом перемешивании до получения концентрации 1 мг в 600 мкл 50 мМ фосфата калия в качестве буфера в D2O (Cambridge Isotope Laboratories, Andover, MA, USA), pH 6. Таким образом, получали три образца субстрата и смешивали их с 0.5 мкл раствора фермента (Termamyl® SC, Attenuzyme® или Attenuzyme® Flex соответственно). После окончания реакций проводили in situ спектроскопию ядерного магнитного резонанса высокого разрешения (NMR) в течение 240 мин при 18°С. На фиг. 1 показаны конечные продукты разложения βглюкана с помощью Attenuzyme® Flex, Attenuzyme® и Termamyl® SC при 18°С. Самое высокое побочное действие β-глюканазы показал Attenuzyme® Flex (фиг. 1) с последующим действиеем Attenuzyme®. В случае Termamyl® SC активность β-глюканазы не наблюдалась. Об активности фермента судили по появлению сигналов восстанавливающих концов, отличных от звеньев глюкозы (содержащейся в ферментных смесях), как показано на фиг. 2, которая иллюстрирует спектр 1Н-1Н COSY β-глюкана lys5f, разложение которого произошло под действием активности β-глюканазы (лихеназы) Attenuzyme® Flex при 65°С.
Сайт-специфическое действие второстепенной активности β-глюканазы изучали, используя образец β-глюкана lys5f, экстрагированного одним Termamyl® SC в реальных условиях процесса (как описано в примере 1), т.е. при 65°С. Спектры 1H -1H DQF COSY гомонуклеарных молекул записывали для образцов, разложившихся под действием ферментов, используя спектрометр 800 Гц Bruker (Fallanden, Switzerland). ЯМР спектрометр, снабжённый криопробой TCI и магнитом 18.7 Т (Oxford Magnet Technology, Oxford, UK) использовали для идентификации β-глюканов, образовавшихся под действием ферментной смеси Attenuzyme® Flex (фиг. 2). Назначение сигналов сайтов промежуточных соединений разложения осуществляли путём сравнения спектров 2D с эталонными назначениями по предыдущим работам (Petersen et al., 2013). Эти назначения показывают, что преобладающие в основном сигналы сайтов разложения могут быть сигналами восстановительных β-(1-3) концов, образовавшихся при разложении активной эн
- 16 037907 до-1,3-1,4-β-D-глюканазой (Lichenase, EC 3.2.1.73) в препаратах Attenuzyme® Flex и Attenuzyme®. Наличие указанной активности эндоглюканазы объясняет быстрое уменьшение молекулярной массы βглюкана. Согласно данному изобретению предпочтительно использовать второстепенную активность коммерческих препаратов Attenuzyme® Flex и Attenuzyme®, поскольку эта активность приводит к регулируемому разложению β-глюканов ячменя до достижения нужной вязкости.
Пример 5а. Характеристики β-глюкана.
Определение характеристик и количественное определение β-глюкана из ячменного сусла, полученного, как описано в примере 1, описано в этом примере. Сусло приготавливали из нескольких сортов ячменя, включая lys5f и различные коммерческие виды. Общее содержание β-глюкана в зёрнах использованного ячменя приведено в табл. 1 ниже.
Таблица 1
| Количество β-глюкана в | различных сортах ячменя (2 параллельных анализа) | ||
| Ячмень | Сухое вещ. | Конц. | Содержание βглюкана |
| Мука | (%) | (мг/л) | (% сухого вещества) |
| lys5f(партия 1) | 94 | 779.6 | 16.5 |
| lys5f(партия 1) | 94 | 737.6 | 15.7 |
| lys5f(партия2) | 94 | 724.4 | 15.3 |
| lys5f(партия 2) | 94 | 724.1 | 15.2 |
| Colombus | 90 | 188.7 | 4.2 |
| Colombus | 90 | 177.2 | 3.6 |
| Chameleon | 91 | 208.6 | 4.6 |
| Chameleon | 91 | 217.6 | 4.7 |
Для определения содержания β-глюкана в сусле, а также в зёрнах ячменя использовали флуометрический метод (Brewing EBC standards, 1994). Использовавшийся прибор представлял собой анализатор βглюкана Carlsberg System 5700 Analyzer, Tecator, Sweden, для анализа впрыска потока, использующий в качестве основных параметров измерения изменения интенсивности флуоресценции красителя калькофлуор, основанные на его способности связываться с β-глюканом. Калькофлуор имеет способность связываться с β-глюканом с молекулярной массой >10-30 кДа, находящимся в растворе и увеличивает его интенсивность флуоресценции прямо пропорционально содержанию связанного β-глюкана.
Стабильность содержания β-глюкана определяли путём хранения сусла (4 г/л β-глюкана) в течение 6 мес. при комнатной температуре и регулярного определения содержания β-глюкана с применением метода окрашивания калькофлуором, описанного выше. Определяли содержание β-глюкана в сусле, полученном из lys5f, как описано в примере 1, и в растворе Glucagel™, результаты показаны на фиг. 9.
Вязкость сусла измеряли вискозиметром Vibro SV-10 (A&D Company Limited, Tokyo) при 20°С в течение 1 ч после центрифугирования сусла (как описано в примере 1). Затем помещали 10 мл экстракт в вискозиметр и записывали результаты измерения вязкости в мПа-с. Результаты приведены в табл. 2.
- 17 037907
Таблица 2
| Ячмень | Мука :вода | Вязкость сусла (мПа· с) |
| Chameleon | 1:15 | 2.7 |
| Colombus | 1:15 | 2.4 |
| lys5f (а) | 1:20 | 4.7 |
| lys5f (b) | 1:15 | 8.7 |
| lys5f (c) | 1:10 | 34.1 |
Вязкость (мПас ) сусла из различных сортов ячменя, экстрагированного Termamyl® SC + Attenuzyme® Flex (TAF)
В дополнение, было приготовлено сусло (экстракт) из ячменя разных линий, как описано в примере 1 после экстракции с использованием или смеси Termamyl® SC и Attenuzyme® Flex (TAF), или смеси Termamyl® SC и Attenuzyme® (ТА) или Termamyl® (Т). Определяли вязкость экстрактов, результаты приведены на фиг. 12. Экстракты ячменя, полученные при использовании TAF, имели очень низкую вязкость.
Перед определением молекулярной массы и отношения DP3/DP4 β-глюканы осаждали из сусла, используя этанол. Осаждение проводили смешением 1:1 сусла, полученного, как описано в примере 1 в 80% этаноле в стеклянном стакане при комнатной температуре. Смесь оставляли для осаждения на 30 мин. Полученный осадок β-глюканов собирали на сите и сушили при замораживании в течение 24 ч. Высушенные осадки β-глюканов взвешивали и размалывали в порошок.
Определение молекулярной массы проводили методом эксклюзионной хроматографии (SEC). Образцы помещали в колонку Asahipak GS 520HQ (7.5*300 мм) или Asahipak GS 320HQ (7.5*300 мм) (Shodex, US). Колонку калибровали с помощью пяти стандартов β-глюкана; ячмень BG 650000, овёс BG 391000, овёс BG 265000, ячмень BG 229000, овёс BG 70600 и овёс BG 35600 (Megazyme, Ireland). Элюирование проводили с помощью 50 мМ буфера NH4COOH с рН 5 и 0.01% NaN3 при 60°С с постоянной скоростью потока 0.5 мл/мин. Разделение осуществляли, используя систему GPC (Viscotek 270max, Malvern), снабжённую online дегазатором, насосом и дифференциальным рефрактометром при 40°С. Порошковый образец смачивали 20 мкл 50% этанола перед растворением в буферном растворе. Перед центрифугированием 1 мг/мл раствора нагревали до 80°С в течение 2 ч. Все образцы центрифугировали и фильтровали (0.45 мкм) перед впрыском 50 мкл. Результаты определения молекулярной массы анализировали при помощи программы Omnisec software (версия 4.7.0.406, Malvern), основанной на переходящей калибровке гомополимеров.
Результаты определения молекулярной массы трёх видов β-глюканов показаны в табл. 3.
Таблица 3. Средняя молекулярная масса (Mw) выбранных β-глюканов
Отношение DP3/DP4 (целлотриозы к целлотетраозе) описывает структуру блоков олигомера β-глюкана. Определение отношения DP3/DP4 было основано на полном разложении β-глюкана, осаждённого из сусла, приготовленного как описано выше, лихеназой. Отношение DP3/DP4 определяли для βглюканов в экстрактах, приготовленных из различных сортов ячменя, а также для β-глюканов коммерческого сорта ячменя Glucagel™. Смесь для анализа состояла из 2.5 мг образца β-глюкана в 500 мкл 10 мМ
- 18 037907 буфера NaH2PO4/Na2HPO4 и 110 мкл суспензии лихеназы (10 Ед.) (Megazyme, Ireland). Перед растворением в буферном растворе образец смачивали 10 мкл этанола (50% об./об.). Полученный раствор нагревали до 96°С в течение 2 ч перед добавлением лихеназы. Образец выдерживали в течение ночи при 60°С. Фермент инактивировали обработкой на бане с кипящей водой в течение 30 мин.
Аминобензамид (2-АВ) является распространённой флуоресцентной меткой, прикреплённой к восстановительным концам олигосахаридов путём восстановительного аминирования. Флуоресцентное мечение меткой 2-АВ (2-аминобензамидом) до UPLC анализа (Waters) проводили на эталонных стандартах и образцах следующим образом. Глюкозу, мальтозу, мальтотриозу, мальтотетраозу и мальтопентаозу растворяли в воде до получения концентрации 1 мг/мл. 200 мкл такого раствора подвергали лиофилизации. 200 мкл каждого образца также подвергали лиофилизации. К этим растворам добавляли 200 мкл 2АВ и 200 мкл NaBH3CN. Образцы перемешивали при помощи вихревой мешалки и выдерживали в течение ночи при 60°С, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли 3.6 мл H2O и промывали CH2Cl2 (2x8 мл). Из каждого слоя собирали 1 мл, центрифугировали в течение 5 мин и разбавляли 1:10 смесью 10 мМ буфера формиата аммония (рН 4.5) и ацетонитрила (22:78).
Результаты определения отношения DP3/DP4 приведены в табл. 4.
Таблица 4. Отношение DP3/DP4 в β-глюкане из отобранных сортов ячменя и Glucagel™
| βΘ выбранных сортов ячменя | Отношение DP3/DP4 |
| lys5f | 3.8 |
| Glucagel™ (DKSH) | 3.1 |
| Chameleon | 2.7 |
| Colombus | 2.6 |
Chameleon и Columbus являются коммерчески доступными сортами ячменя.
На фиг. 11 показано отношение DP3/DP4 в зёрнах ячменя различных сортов (показанных на фигуре) вместе с Mw β-глюканов в экстрактах, приготовленных из указанных зёрен ячменя, как описано в примере 1, после экстракции с использованием или смеси Termamyl® SC и Attenuzyme® Flex (TAF), или смеси Termamyl® SC и Attenuzyme® (ТА) или Termamyl® (T).
Пример 6. In vitro действие β-глюканов из экстракта (сусла).
Этот опыт проводится для определения того, как молекулярная масса β-глюканов влияет на способность полисахаридов связывать соль жёлчной кислоты in vitro. Мы использовали метод 1Н-13С ЯМР (800 МГц) высокого разрешения, описанный в публикации Mikkelsen et al. 2014 для зондирования взаимодействия между β-глюканом и гликохолятом на молекулярном уровне. Тестируемые β-глюканы представляли собой следующее.
A. Низкомолекулярный lys5f TAF (LMw - 150 кДа) - экстрагированный из Termamyl® SC и Attenuzyme® Flex, как описано в примере 1.
B. Iys5f ТА со средней молекулярной массой (MMw - 530 кДа) -экстрагированный из Termamyl® SC и Attenuzyme®, как описано в примере 1
Образцы β-глюкана растворяли (1% вес./об.) в 100 мМ буферного раствора ацетата натрия (рН 5) в D2O и гидратировали при 99°С в течение 30 мин. Ацетатный буфер с рН 5 готовили в H2O до лиофилизации и последующего растворения в D2O. Соль жёлчной кислоты смешивали с раствором eG с концентрациями 0, 5, 15, 30 или 45 мм и смеси выдерживали при 37°С в течение 120 мин. После этой выдержки образцы перемещали в трубки 5 мм для ЯМР и анализировали при 37°С методом 1H-13G гетероядерной одноквантовой корреляционной спектроскопии (HSQC).
Адсорбцию соли жёлчных кислот β-глюканами оценивали по изотерме адсорбции Лэнгмюра и при использовании разницы химических сдвигов в модели адсорбции Лэнгмюра для количественного определения влияния величины молекулярной массы β-глюканов на взаимодействие с гликохолятом. Результаты показаны на фиг. 3.
Изменения сигналов (Δδ) между резонансами двух β-глюканов свидетельствуют о непосредственном взаимодействии между β-глюканами и солью жёлчной кислоты в растворе. Это согласуется с прямым связыванием гликохолята и β-глюканов, полученным в присутствии Termamyl® SC и Attenuzyme® (Iys5f ТА на фиг. 3) при дополнительной обработке Attenuzyme® Flex (Iys5f TAF на фиг. 3). В то время как обнаруживается адсорбция соли жёлчной кислоты обоими β-глюканами, степень связывания соли жёлчной кислоты между двумя препаратами не меняется в значительной степени. Следовательно, эти in vitro результаты подтверждают, что β-глюкан с молекулярной массой 150 кДа lys5f TAF сохраняет способность β-глюкана с молекулярной массой 530 кДа lys5f ТА адсорбировать соли жёлчных кислот путём
- 19 037907 непосредственного молекулярного взаимодействия.
Пример 7. In-vivo действие β-глюкана из экстракта (сусла).
Цель исследования на животных заключалась в определении того, как вид и качество β-глюкана влияют на метаболизм холестерина в организме гиперхолестеринемических крыс. В этой in vivo модели мы выбрали три разных вида β-глюканов с сильно отличающимися структурами и молекулярными массами. Основное внимание обращалось на понижение уровня холестерина в крови. Тест начинали с подготовительного периода, составившего 3 нед., когда использовали корм с высоким содержанием липидов (2%) (плюс 0.5% холевой кислоты натриевой соли/соли жёлчной кислоты), который, как было установлено, индуцировал гиперхолестеринемию у самцов крыс линии Wistar.
Использовали тестовый режим питания, когда все порции корма содержали одно и то же количество белка, жира, крахмала и клетчатки (5%). Затем в корм добавляли 2% холестерина. Основываясь на точном определении содержания белка, крахмала и пищевой клетчатки в порошке β-глюкана, состав корма регулировали таким образом, чтобы содержание различных питательных компонентов в ежедневной порции корма было идентичным. Состав корма в трёх экспериментах (А, В, С) был основан на высоком содержании жира (клетчатку см. табл. 5), когда содержалось 5% клетчатки из следующих трёх видов β-глюкана:
А: контрольный β-глюкан - Glucagel™ (DKSH);
В: низкомолекулярный lys5f TAF (LMw) - экстрагированный с помощью Termamyl® S;
С: lys5f ТА со средней молекулярной массой (MMw) - экстрагированный Termamyl® SC & Attenuzyme® Flex, как описано в примере 5а.
Lys5f β-глюканы с низкой и средней молекулярной массами получали путём осаждения β-глюканов из экстракта. Экстракт готовили, как описано в примере 1, используя ячмень lys5f, и осаждение проводили, как описано в примере 5а.
Таблица 5. Пищевая композиция с высоким содержанием жира (% от основы)
| Ингредиенты: | |
| Белая пшеничная мука | 42.0 |
| β-глюкан | - |
| Казеин Miprodan 30 | 19.0 |
| Сахароза | 12.0 |
| Соевое масло | 5.0 |
| Шпиг | 10.0 |
| Холестерин | 2.0 |
| Порошковая целлюлоза | 5.0 |
| Минеральная смесь AIN 93G | 3.5 |
| Смесь витаминов AIN 93 | 1.0 |
| L-цистин | 0.3 |
| Битартрат холина | 0.3 |
| % содержание | 100.1 |
В эксперименте использовали всего 36 крыс линии Wistar (12 на группу) в возрасте 5 нед. Тест проводили 2 блоками с 24 или крысами, с промежутком в 3 нед. По прибытии крыс маркировали с помощью чипов и помещали в контейнеры (4/6 на контейнер). По прибытии крыс кормили ad lib (вволю) стандартным кормом AIN93G (в виде гранул), затем кормили ad libitum (без ограничения) испытуемым кормом с высоким содержанием жира в течение 3 нед. Расход корма в каждом контейнере (4-5 животных) записывали еженедельно.
Через 3 нед. животных взвешивали и отбирали кровь из хвостов под общей анестезией для определения уровня липидов в крови. Животных распределяли рандомизированно на 3 группы по весу (похожий вес в группе) и помещали по 4 животных в клетку (одна клетка на группу в блоке) и кормили ad libitum. Еженедельно записывали расход корма и вес животных.
Через 5 нед. крыс размещали по одной в метаболические клетки. Через 3 дня пребывания проводи- 20 037907 ли тесты по определению усвояемости при ежедневном добавлении 20 г корма/день. Общее количество корма (80г) фиксировали и полученные удобрения собирали в один пакет.
Через 7 нед. каждую крысу взвешивали и умерщвляли под анестезией. Отбирали кровь для определения содержания триглицеридов в плазме, общего холестерина в плазме, HDL в плазме, LDL в плазме из желудка. Содержание твёрдых веществ в% в аппендиксе анализировали по содержанию летучих жирных кислот.
Удобрение из балансового опыта сушили при замораживании и анализировали на содержание сухого вещества и золы.
Результаты изменения липидного профиля после обработки крыс показаны на фиг. 4-7. Содержание всех липидов определяли на анализаторе Pentra 400. Поскольку липопротеины низкой плотности (LDL холестерин) является основным фактором риска развития ишемической болезни сердца, предпочтительно, чтобы содержание LDL снижалось. Точно так же предпочтительно, чтобы снижался уровень общего холестерина. Однако липопротеины высокой плотности (HDL холестерин) известны как хороший холестерин, потому что он способствует предотвращению закупорки артерий, и, следовательно, предпочтительно, чтобы уровень HDL не снижался.
Численные изменения общего содержания SCFA определяли после обработки (см. фиг. 8). Определяли общее количество SCFA = масляная кислота, пропионовая кислота и уксусная кислота (ммоль во влажном образце, кг) х вес (г) содержание аппендикса.
Статистический анализ показал значительную разницу общего содержания SCFA между экспериментальным введением β-глюкана (LMw lys5f, MMw lys5f), и коммерчески доступного β-глюкана ячменя Glucagel™. Увеличение общего содержания SCFA после введения β-глюканов рассматривается как благоприятное, поскольку SCFA были связаны с механизмом снижения уровня холестерина и их функция в качестве источника энергии для клеток толстой кишки важна для хорошего здоровья кишечника.
Пример 8. Экстракт ячменя готовили путём затирки ячменной муки в следующих смесях.
Состав экстракта - опыт 1.
г т ячменной муки сорта Lys5f;
400 мл воды (водопроводная);
530 мкл 25% фосфорной кислоты;
120 мкл 35% раствора хлорида кальция;
800 мкл Termamyl® Sc;
мкл β-глюканазы (Attenuzyme® flex или Ultraflo® max).
Состав экстракта - опыт 2.
г т ячменной муки сорта Lys5f;
400 мл воды (водопроводная);
530 мкл 25% фосфорной кислоты;
120 мкл 35% раствора хлорида кальция;
800 мкл Termamyl® Sc;
0.4 мкл β-глюканазы (Attenuzyme flex или Ultraflo max).
Состав экстракта - опыт 3.
г т ячменной муки сорта Lys5f;
400 мл воды (водопроводная);
530 мкл 25% фосфорной кислоты;
120 мкл 35% раствора хлорида кальция;
800 мкл Termamyl® Sc;
0,04 мкл β-глюканазы (Attenuzyme® flex или Ultraflo® max).
Termamyl® SC, Attenuzyme® Flex или Ultraflo® max были доступны в Novozymes, Denmark. Для получения небольших количеств фермента использовали разведение 100 мкл фермента + 9,9 мл воды, однако, указанные количества соответствуют объёму первоначального ферментного препарата.
Затирание проводили при 65°С в металлическом стакане объёмом 500 мл. Через 45 мин выдержки при 65°С температуру постепенно повышали до 90°С в течение 25 мин и, наконец, выдерживали экстракт при 90°С в течение 30 мин. Экстракт подвергали центрифугированию при 5000 об/мин в течение 15 мин при комнатной температуре (20-24°С) для удаления нерастворимого отработанного зернистого материала.
Величину вязкости и содержание β-глюкана определяли практически, как описано в примере 5 выше. Результаты приведены в табл. 6.
- 21 037907
Таблица 6
| β-глюканаза | Объём βглюканазы, мкл | Вязкость, мПа-c | β-глюкан г/л* |
| Attenuzyme flex | 4 | 50,6 | 10,940 |
| 0.4 | 52,3 | 11,528 | |
| 0.04 | 46,3 | 9,826 | |
| Ultraflo max | 4 | 4,36 | 4,080 |
| 0.4 | 23,8 | 9,684 | |
| 0.04 | 52,1 | 10,856 |
Согласно данным производителя Attenuzyme® Flex содержит глюкоамилазу, α-амилазу и пуллуланазу. Однако, как описано в примере 4 выше в данной заявке, Attenuzyme® Flex также обладает второстепенной активностью β-глюканазы. Когда Attenuzyme® Flex используют в очень небольших количествах, полученный экстракт обладает вязкостью, величина которой находится в дальнем конце предела. Однако, как показано в примере 5 а, где применяли большие количества Attenuzyme® Flex, получался экстракт с меньшей вязкостью.
Согласно данным производителя Ultraflo® Max содержит β-глюканазу (700 EGU/г) и ксиланазу (250 FXU/г). Используемое в данной заявке сокращение EGU обозначает единицы эндоглюканазы. При использовании примерно 0.28 EGU Ultraflo® Max на 27 г ячменя (что соответствует 0.01 EGU/г ячменя), получался экстракт с приемлемой концентрацией β-глюкана и приемлемой вязкостью. Когда использовали примерно 2.8 EGU Ultraflo® Мах на 27 г ячменя (что соответствует 0.01 EGU/г ячменя), получался экстракт с меньшей, но всё ещё приемлемой концентрацией β-глюканов и приемлемой вязкостью. Когда использовали примерно 0.028 EGU Ultraflo® Max на 27 г ячменя (что соответствует 0.01 EGU/г ячменя), получался экстракт с приемлемой концентрацией β-глюканов, который имел вязкость, величина которой находится в дальнем конце приемлемого предела.
Claims (22)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Способ приготовления напитка, содержащего по меньшей мере 2 г/л β-глюкана, при этом указанные β-глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа, включающий стадии:a) предоставления зёрен ячменя, причём указанные зёрна обладают следующими характеристиками:i) содержат по меньшей мере 10% β-глюканов;ii) имеют отношение DP3/DP4 в указанном β-глюкане, составляющее по меньшей мере 3,4,b) затирания указанных зёрен с водой в присутствии ферментной композиции, при этом указанная композиция обладает активностью α-амилазы и активностью эндо-1,3(4)-β-глюканазы, с получением при этом водного экстракта;c) отделения указанного водного экстракта от зёрен ячменя с получением при этом напитка или основы напитка.
- 2. Способ по п.1, где ферментная композиция обладает также активностью глюкоамилазы.
- 3. Способ по любому из предыдущих пунктов, где ферментная композиция обладает также активностью пуллуланазы.
- 4. Способ по любому из предыдущих пунктов, где напиток содержит по меньшей мере 3 г/л, например по меньшей мере 4 г/л β-глюканов.
- 5. Способ по любому из предыдущих пунктов, где указанные зёрна содержат по меньшей мере 11%, например по меньшей мере 12% β-глюканов.
- 6. Способ по любому из предыдущих пунктов, где отношение DP3/DP4 в указанном β-глюкане составляет по меньшей мере 3.6, например по меньшей мере 3.7.
- 7. Способ по любому из предыдущих пунктов, где ячмень имеет мутацию в гене HvNst1, причём указанный мутантный ген HvNst1 кодирует мутантный белок NST1, причем указанный мутантный NST1 содержит замену и/или в указанном мутантном NST1 отсутствует по меньшей мере одна консервативная аминокислота по сравнению с NST1 в SEQ ID NO: 1.
- 8. Способ по любому из предыдущих пунктов, где ячмень имеет мутацию в гене HvNst1, причём указанный мутантный ген HvNst1 кодирует мутантный белок NST1 в SEQ ID NO: 1, где остаток Pro в положении 228 был заменён на остаток Ser и/или где остаток Val в положении 273 был заменён на остаток Glu.- 22 037907
- 9. Способ по любому из предыдущих пунктов, где стадия b) включает смешение измельчённых зёрен ячменя с водой при отношении вода:измельчённый ячмень от 1 до 10-20.
- 10. Способ по любому из предыдущих пунктов, где способ дополнительно включает стадию d), где стадия d) является стадией превращения основы напитка в напиток.
- 11. Способ по п.10, где стадия d) включает добавление одного или более дополнительных соединений или дополнительных жидкостей к основе напитка, полученной на стадии с), для получения напитка.
- 12. Способ по п.11, где по меньшей мере одно дополнительное соединение выбрано из группы, состоящей из вкусового вещества, консерванта и функционального ингредиента и/или по меньшей мере одна дополнительная жидкость выбрана из группы, состоящей из фруктового сока, воды и пива.
- 13. Способ по пп.10-12, где стадия d) включает ферментацию основы напитка с помощью одного или более микроорганизмов.
- 14. Способ по любому из предыдущих пунктов, где напиток имеет вязкость, равную самое большее 50 мПа· с, например самое большее 40 мПа· с, например самое большее 35 мПа· с.
- 15. Напиток, содержащий по меньшей мере 2 г/л β-глюканов, причём указанные β -глюканы имеют среднюю молекулярную массу в пределах от 80 до 200 кДа, и указанный напиток получен способом по любому из предыдущих пунктов.
- 16. Напиток по п.15, который имеет вязкость, равную самое большее 50 мПа·с, например самое большее 40 мПа· с, например самое большее 35 мПа· с.
- 17. Напиток по любому из пп.15, 16, который предназначен для уменьшения риска развития клинического состояния у субъекта, нуждающегося в этом, при этом клиническое состояние выбрано из группы, состоящей из ишемической болезни сердца и диабета.
- 18. Способ уменьшения риска развития клинического состояния у субъекта, нуждающегося в этом, при этом клиническое состояние выбрано из группы, состоящей из ишемической болезни сердца, диабета и инфекций, включающий введение напитка по любому из пп.15, 16 указанному субъекту в эффективном количестве.
- 19. Способ снижения в крови уровня по меньшей мере одного липида, выбранного из группы, состоящей из триглицеридов, холестерина и LDL, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение напитка по любому из пп.15, 16 указанному субъекту.
- 20. Способ уменьшения риска развития ожирения у субъекта, нуждающегося в этом, включающий потребление указанным субъектом напитка по любому из пп.15-17.
- 21. Способ по любому из пп.18-20, где субъектом является человек.
- 22. Способ по любому из пп.18-21, где указанному субъекту ежедневно вводят напиток, содержащий по меньшей мере 3 г β-глюкана.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DKPA201670285 | 2016-05-02 | ||
| PCT/EP2017/060376 WO2017191109A1 (en) | 2016-05-02 | 2017-05-02 | Beverages containing barley beta-glucan |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201892351A1 EA201892351A1 (ru) | 2019-04-30 |
| EA037907B1 true EA037907B1 (ru) | 2021-06-04 |
Family
ID=58701608
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201892351A EA037907B1 (ru) | 2016-05-02 | 2017-05-02 | Напитки, содержащие -глюкан ячменя |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11116242B2 (ru) |
| EP (1) | EP3451852B1 (ru) |
| JP (1) | JP6920695B2 (ru) |
| CN (1) | CN109068692B (ru) |
| AU (1) | AU2017259877B2 (ru) |
| CA (1) | CA3022530C (ru) |
| DK (1) | DK3451852T3 (ru) |
| EA (1) | EA037907B1 (ru) |
| IL (1) | IL262696B (ru) |
| NZ (1) | NZ748105A (ru) |
| SA (1) | SA518400357B1 (ru) |
| SG (1) | SG11201809013VA (ru) |
| WO (1) | WO2017191109A1 (ru) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20210235727A1 (en) * | 2018-04-25 | 2021-08-05 | Carlsberg A/S | Barley Based Beverages |
| WO2023225459A2 (en) | 2022-05-14 | 2023-11-23 | Novozymes A/S | Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections |
| WO2024117091A1 (ja) * | 2022-11-28 | 2024-06-06 | 株式会社明治 | 米麹穀物発酵糖化液、及びその製造方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20040258829A1 (en) * | 2003-04-02 | 2004-12-23 | Guo-Hua Zheng | Dietary fiber containing materials comprising low molecular weight glucan |
| CN103834709A (zh) * | 2013-12-04 | 2014-06-04 | 江南大学 | 一种低分子量β-葡聚糖的制备方法及应用 |
| WO2015017901A1 (en) * | 2013-08-06 | 2015-02-12 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Wheat having high levels of beta-glucan |
| US20150216217A1 (en) * | 2012-08-24 | 2015-08-06 | Etablissements J. Soufflet | AQUEOUS FOOD COMPOSITION ENRICHED IN Beta-GLUCAN |
| JP2015186477A (ja) * | 2014-03-10 | 2015-10-29 | 群栄化学工業株式会社 | 植物由来β−グルカン含有シロップ |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE8602971D0 (sv) | 1986-07-03 | 1986-07-03 | Novo Industri As | Low calorie bulking agent, method for production thereof, and use thereof |
| JP2000515381A (ja) * | 1996-08-05 | 2000-11-21 | モーヘン インターナショナル エヌ．ブイ． | 麦芽種子を用いるアルコール飲料の製造のための改善されたプロセス |
| AP822A (en) * | 1998-04-03 | 2000-04-20 | East African Breweries Ltd | Process for brewing beer. |
| US6451369B1 (en) | 1998-10-19 | 2002-09-17 | Cereal Base Ceba Ab | Non-dairy, ready-to-use milk substitute, and products made therewith |
| WO2000024864A1 (en) | 1998-10-26 | 2000-05-04 | Triantafylloy Oeste Angeliki | Preparation of wort and beer of high nutritional value, and corresponding products |
| EP1124441B1 (en) | 1998-10-26 | 2007-09-05 | Oatly AB | Method for the isolation of a beta-glucan composition from oats and products made therefrom |
| US6083547A (en) * | 1999-01-14 | 2000-07-04 | Conagra, Inc. | Method for obtaining a high beta-glucan barley fraction |
| AU1480402A (en) | 2000-11-09 | 2002-05-21 | Commw Scient Ind Res Org | Barley with reduced SSII activity and starch containing products with a reduced amylopectin content |
| BRPI0417686B1 (pt) | 2003-12-19 | 2019-12-10 | Novozymes As | processos para a produção de uma infusão tendo filtrabilidade realçada e/ou rendimento melhorado do extrato depois da filtração |
| US20060064780A1 (en) * | 2004-07-12 | 2006-03-23 | Norges Landbrukshogskole | Method and product |
| CN101087887A (zh) | 2004-12-22 | 2007-12-12 | 诺维信公司 | 发酵产品方法 |
| CA2504093A1 (en) | 2005-04-08 | 2006-10-08 | 1289620 Ontario Inc. | Nutraceutical fractions from cereal grains |
| WO2009028225A1 (ja) | 2007-08-29 | 2009-03-05 | Sapporo Breweries Limited | 大麦シロップの製造方法 |
| US11041139B2 (en) * | 2007-12-12 | 2021-06-22 | Novozymes A/S | Brewing process |
| FI120617B (fi) | 2008-03-04 | 2009-12-31 | Valtion Teknillinen | Menetelmä viljalesetuotteen valmistamiseksi |
| TWI441600B (zh) | 2009-08-10 | 2014-06-21 | V Products Corp Ag | 具有治療高血脂症、高血糖症及改善腸胃道機能的寡醣燕麥飲品及其三酵微分解製造方法 |
| AU2012212404B2 (en) | 2011-02-03 | 2016-05-12 | The Healthy Grain Pty Limited | Barley with modified SSIII |
| WO2015032850A1 (en) | 2013-09-05 | 2015-03-12 | Novozymes A/S | Method for production of brewers wort |
| US9681620B2 (en) * | 2014-04-10 | 2017-06-20 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture | Barley mutant lines having grain with ultra-high beta glucan content |
-
2017
- 2017-05-02 WO PCT/EP2017/060376 patent/WO2017191109A1/en active Search and Examination
- 2017-05-02 DK DK17723044.8T patent/DK3451852T3/da active
- 2017-05-02 AU AU2017259877A patent/AU2017259877B2/en active Active
- 2017-05-02 US US16/097,345 patent/US11116242B2/en active Active
- 2017-05-02 EA EA201892351A patent/EA037907B1/ru unknown
- 2017-05-02 EP EP17723044.8A patent/EP3451852B1/en active Active
- 2017-05-02 CN CN201780027376.3A patent/CN109068692B/zh active Active
- 2017-05-02 NZ NZ748105A patent/NZ748105A/en unknown
- 2017-05-02 CA CA3022530A patent/CA3022530C/en active Active
- 2017-05-02 JP JP2018557302A patent/JP6920695B2/ja active Active
- 2017-05-02 SG SG11201809013VA patent/SG11201809013VA/en unknown
-
2018
- 2018-10-31 IL IL262696A patent/IL262696B/en active IP Right Grant
- 2018-11-01 SA SA518400357A patent/SA518400357B1/ar unknown
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20040258829A1 (en) * | 2003-04-02 | 2004-12-23 | Guo-Hua Zheng | Dietary fiber containing materials comprising low molecular weight glucan |
| US20150216217A1 (en) * | 2012-08-24 | 2015-08-06 | Etablissements J. Soufflet | AQUEOUS FOOD COMPOSITION ENRICHED IN Beta-GLUCAN |
| WO2015017901A1 (en) * | 2013-08-06 | 2015-02-12 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Wheat having high levels of beta-glucan |
| CN103834709A (zh) * | 2013-12-04 | 2014-06-04 | 江南大学 | 一种低分子量β-葡聚糖的制备方法及应用 |
| JP2015186477A (ja) * | 2014-03-10 | 2015-10-29 | 群栄化学工業株式会社 | 植物由来β−グルカン含有シロップ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA3022530C (en) | 2024-01-09 |
| EP3451852B1 (en) | 2020-06-24 |
| US11116242B2 (en) | 2021-09-14 |
| IL262696B (en) | 2019-09-26 |
| JP6920695B2 (ja) | 2021-08-18 |
| SA518400357B1 (ar) | 2022-04-17 |
| EP3451852A1 (en) | 2019-03-13 |
| NZ748105A (en) | 2020-08-28 |
| US20190133152A1 (en) | 2019-05-09 |
| WO2017191109A1 (en) | 2017-11-09 |
| CN109068692A (zh) | 2018-12-21 |
| AU2017259877A1 (en) | 2018-11-29 |
| EA201892351A1 (ru) | 2019-04-30 |
| IL262696A (en) | 2018-12-31 |
| AU2017259877B2 (en) | 2019-08-01 |
| DK3451852T3 (da) | 2020-09-28 |
| CA3022530A1 (en) | 2017-11-09 |
| SG11201809013VA (en) | 2018-11-29 |
| JP2019514392A (ja) | 2019-06-06 |
| CN109068692B (zh) | 2022-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ribeiro et al. | Enzymes in juice processing: a review | |
| CN105208877B (zh) | 用于制备液体燕麦基质的方法及由该方法制备的产品 | |
| US20180327792A1 (en) | Fermented Hydrolyzed Plant-Origin Material | |
| CN105007757A (zh) | 液体燕麦基料 | |
| KR20190040223A (ko) | 음료 또는 음료 성분의 제조 방법, 이 방법에 의해 제조된 음료 또는 음료 성분, 및 이 음료 또는 음료 성분을 제조하기 위한 맥주박의 용도 | |
| US11116242B2 (en) | Beverages containing barley β-glucan | |
| CN111067018A (zh) | 一种燕麦植物基浆料及其制备工艺及应用 | |
| CN103347396A (zh) | 包含水解的全谷粒的速溶饮料粉末 | |
| KR101798855B1 (ko) | 쌀을 이용한 곡물 가공 음료의 제조방법 | |
| CN108041388A (zh) | 一种无醇的发酵葡萄饮料的加工工艺 | |
| CN108185250A (zh) | 一种杂粮全液发酵饮料的制作方法 | |
| JP4874191B2 (ja) | 組成物の製造方法 | |
| JP2009142184A (ja) | β−グルカン含有飲料 | |
| JP2020054399A (ja) | 植物由来β−グルカン含有シロップ | |
| JP2018042521A (ja) | β−グルカン含有飲料及びその製造方法 | |
| JP2018057319A (ja) | 乳含有飲食品 | |
| Hoang et al. | Developement of lactic acid fermentation of jackfruit (Artocarpus heterophyllus) seed drink and its physicochemical and sensory properties | |
| JPH04258275A (ja) | 玄米を原料とする飲料組成物 | |
| Kuddus et al. | Value-addition in Beverages Through Enzyme Technology | |
| CN108165396A (zh) | 一种基于海洋微生物酵素的海藻无酒精啤酒制备方法及所得海藻无酒精啤酒 | |
| WO2020085415A1 (ja) | 発泡性飲料用泡持ち向上剤 | |
| AU2023236464A1 (en) | Creamer composition | |
| EP4404764A1 (en) | Method for providing a whole grain cereal based extract | |
| EP2933323A1 (en) | Soluble non-starchy biopolymers usage in manufacturing of beverages containing alcohol | |
| WO2024117091A1 (ja) | 米麹穀物発酵糖化液、及びその製造方法 |