EA032643B1 - Имидазопиридазиновые соединения в качестве ингибиторов pik - Google Patents

Abstract

Настоящее описание относится к новым имидазопиридазиновым соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемой соли, содержащим их фармацевтическим композициям, способу ингибирования активности PIK и способу лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PIK, например воспалительного заболевания, аутоиммунного заболевания или рака.

Description

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ (45) Дата публикации и выдачи патента

2019.06.28 (21) Номер заявки

201790276 (22) Дата подачи заявки

2015.09.23 (51) Ιηί. С1. С07Р 487/04 (2006.01)

С071) 519/00 (2006.01)

А61К 31/5025 (2006.01)

А61К31/505 (2006.01)

А61К 31/519 (2006.01)

А61К31/52 (2006.01)

А61Р 35/00 (2006.01)

А61Р 37/00 (2006.01)

А61Р 29/00 (2006.01)

А61Р19/02 (2006.01)

А61Р11/00 (2006.01) (54) ИМИДАЗОПИРИДАЗИНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Р1₃К (31) 201410494483.5 (32) 2014.09.24 (33) СХ (43) 2017.10.31 (86) РСТ/СХ2015/090367 (87) \ΥΟ 2016/045591 2016.03.31 (71) (73) Заявитель и патентовладелец:

ХАТЧИСОН МЕДИФАРМА

ЛИМИТЕД (ΟΝ) (72) Изобретатель:

Су Вэй-Γο, Дай Гуансю, Чжан

Вэйхань, Дэн Вэй (ΟΝ) (74) Представитель:

Нилова М.И. (Ки) (56) АО-А1-2010007099

АО-А2-2012116237

ΟΝ-Α-101528748

ΟΝ-А-1248259

032643 В1 (57) Настоящее описание относится к новым имидазопиридазиновым соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемой соли, содержащим их фармацевтическим композициям, способу ингибирования активности Р1₃К и способу лечения заболевания, реагирующего на ингибирование Р1₃К, например воспалительного заболевания, аутоиммунного заболевания или рака.

032643 Β1

νν (I)

Рассмотрены новые имидазопиридазиновые соединения, их фармацевтические композиции, способы ингибирования активности ΡΣ₃Κ и способы лечения заболевания, реагирующего на ингибирование ΡΙ₃Κ с использованием указанных соединений, а также промежуточные соединения.

Полагают, что нарушения в ΡΙ₃Κ (фосфатидилинозитол-З-киназа)опосредованном сигнальном пути играют важную роль в возникновении и развитии различных злокачественных опухолей.

ΡΙ₃Κ представляют собой семейство липидкиназ, которые фосфорилируют З'-гидроксильную группу в Ρΐάΐηδ (фосфатидилинозитол) и фосфоинозитидах (фосфорилированные производные Ρΐάΐηδ). Указанные ферменты подразделяют на 3 категории: класса I, класса II и класса III, на основании их целевого субстрата и структуры. Среди указанных 3-х категорий класс I был хорошо изучен. ΡΡ,Κ класса I включает два подкласса, называемые класс и класс ГВ. Существуют три гена, кодирующих каталитические изоформы класса Каждый кодирует белковый продукт приблизительно 110 кДа, обозначаемый ρ110α, ρ110β и ρ110δ. Указанные белковые продукты образуют стабильные гетеродимеры, т.е. ΡΡ,Κα. ΡΓ,Κβ и ΡβΚδ, с регуляторными субъединицами класса ^, имеющими по меньшей мере пять изоформ (р85а, р55а, р50а, ρ85β и ρ55γ). Существует один фермент класса Ш, р110у, который ассоциируется с уникальной регуляторной субъединицей, называемой р101. Вместе указанный димер иногда называют ΡβΚγ.

Все четыре каталитические изоформы ΡΡ,Κ класса I демонстрируют характерный паттерн экспрессии ίη νίνο. Ρ110α и р110(3 экспрессируются повсеместно, в то время как р110γ и ρ110δ встречаются преимущественно в лейкоцитах (8ш1бх1гот Ή. е! а1, Огд. Вюто1. СНет., 2009, 7, 840-850).

Каталитическая субъединица Ρ110δ ΡΡ,Κ класса может играть существенную роль в развитии и активации мышиных В-клеток. Ρ110δ-дефицитные мыши демонстрировали частичное блокирование раннего развития В-клеток при переходе от про-В-клеток к пре-В-клеткам, заметное снижение количества зрелых В-клеток селезенки, а также почти полное отсутствие субпопуляции В1 зрелых В-клеток. Несколько В-клеток, которые могут быть выделены из селезенок ρ110δ-дефицитных мышей, не пролиферируют последующую кластеризацию ВСЯ (рецептора В-клеток) с антиПдМ. Пролиферация также может быть ослаблена в ответ на поликлональные В-клеточные митогенные липополисахариды и анти-СИ40. У мышей, лишенных ρ110δ, также не возникал эффективный ответ антител в отношении антигенов Ή-2 (Тнезависимого типа II) (ОккеоНаид Κ, Баевее. 2002, 297:1031-4).

Дисрегуляция и сверхактивация пути ΡΕ,Κ/ΛΙίΙ была обнаружена в раковых клетках. Специфическая роль ρ110δ в развитии В-клеток может сделать его перспективной мишенью для лекарственных средств для В-клеточных лимфопролиферативных нарушений, таких как СЬЬ (хронический лимфоцитарный лейкоз) и ΝΗΕ (неходжкинская лимфома).

ΡΕ,Κδ внутренне задействована в функционировании иммунной системы млекопитающих, такой как сигнальная трансдукция Т-клеток, В-клеток, тучных клеток, дендритных клеток, нейтрофилов, ΝΚклеток и мононуклеарных фагоцитов. Большое количество экспериментов с использованием ингибитора ΡΕ,Κδ или животных, дефицитных по Ρ^Κδ, доказали, что ΡΕ,Κδ может играть важную роль в аутоиммунных заболеваниях, таких как респираторные заболевания и ревматоидный артрит, например аллергическом воспалении дыхательных путей Щахйеб ВЕ, е! а1. Еиг 1 Iттиηο1. 2007; 37(2):416-24] и остром повреждении легких |Ριιπ ΚΌ, е! а1. В1ооб. 2004; 103(9):3448-56]. Вследствие его ключевой роли в функционировании иммунной системы ΡΕ,Κδ также может быть вовлечена в ряд заболеваний, связанных с нежелательной иммунной реакцией, таких как аллергические реакции, воспалительные заболевания, ангиогенез, опосредованный воспалением, ревматоидный артрит, аутоиммунные заболевания, такие как волчанка, астма, эмфизема и другие респираторные заболевания.

Предыдущие исследования показали, что иделалисиб (САЬ-101), активный и селективный ингибитор ΡβΚδ, обладает широкой противоопухолевой активностью в отношении раковых клеток гематологического происхождения (Уанкаехебгоеск В, Сачсег Се11, 2014, 25:269-71). Заявки на патент, такие как \УО 2005113556, И8 20130071212 и И8 20140179718, также раскрывают соединения, подходящие в качестве селективных ингибиторов ΡΕ,Κδ для лечения аутоиммунных заболеваний и рака, особенно для лечения гематологических злокачественных новообразований.

Роль активности ΡΕ,Κδ в патогенезе ХОБЛ известна из 8гМбуа 8пхкаЩ11ага]а11 е! а1. Тагдейчд ρΐιοδρΐιοίηοδίΐίώ; 3-ктахе δ !ог !1е 1геа1теШ о! κ^ρ^ο^ б1хеахех. Αηη. Ν.Υ. Асаб. 8сг 1280 (2013) 35-39 и Τίιηοΐΐιν Ό. СихНшд е! а1. ΡΕ,Κδ πη6 ΡΕ,Κγ ах Тагде!х Гог АШот-птте аиб [пПаттаЮгу Э|хеахех. 1оита1 о! Мебюта1 СНепихЦу. Уо1ите 55, Ехие 20, р. 8559-8581, Аидих! 27, 2012, где также раскрыто влияние ингибирования ΡΓΚ3δ на лечение ревматоидного артрита и волчанки, а также лечение астмы и аллергии. Взаимосвязь ингибирования ΡΕ,Κδ и лечения аллергической астмы также раскрыто в ХУегтбу С. Ρο\νπη е! а1. Тагдейчд ρНοхρНο^пοх^ι^бе 3-ктахе δ Гог а11егдю ахбипа. Вюсйеттса1 8оае1у Τ^апхасι^οпх. Уо1ите 40, Ехпе 1, р. 240-245, 2012.

Ингибирование ΡΓΚ3δ для лечения системной красной волчанки, а также волчанки известно из АЬе1 8пагех-Еиеуо е! а1. Iηй^Ь^!^οи о! ΡΓ,Κδ Яебисех Юбчеу Iηί^1!^а!^οи Ьу Мас^ορНадех аиб Ате1юга!ех 8ух!еттс Ь^их ίη !1е Моихе. ТНе 1оита1 о! ^ти^^ду, 2014, 193(2): 544-554, ρ^е-ρиЬ1^хНеб ог11те оп 16 Лте

- 1 032643

2014, Уапх1а ^апд е! а1. ПпЫЬйюп оГ ΡΙ₃Κδ 1шргоуе§ 8уз!ет1с Бириз ΐη М1се. 1пЙашша1юп, νοί. 37, Νο. 3, 1ипе 2014 и ЛЬе1 8иаге/-Риеуо е! а1. Епйапсеб РйозрйотозШбе 3-Кта§е δ Ас!М!у Ιδ а Ргедиеп! Еνеп! ΐη 8уз!ет1с Енриз Егу!йета!озиз Тйа! СопГегз Кез1з!апсе !о АОйайопЧпбисеб Т Се11 БеаШ. Тйе 1оигпа1 оГ 1шшипо1оду. Уо1ише 187, 1§§ие 5, р. 2376-2385, 2011.

В публикации Аппе Ко11ег е! а1. В1оскабе оГ Рйо8рйа11бу11по§йо1 3-Кта§е (ΡΙ₃Κ) δ ог ΡΙ₃Κγ Кебисез 1Б-17 апб Ате1юга!ез ^хдшшоббпбисеб Р§опа§18-Нке ОегтаРиз. 1оигпа1 оГ ^типокду. Уо1ише 189, Пзие 9, р. 4612-4620, 2012 показано, что ингибиторы ΡΙ₃Κδ и/или ΡΙ₃Κγ могут быть использованы для лечения псориаза у мышей. Действие ингибирования ΡΙ₃Κδ на рассеянный склероз раскрыто в 8агай Нау1оск-1асоЬз е! а1. ΡΙ₃Κδ бгйез !йе ра!йодепез1з оГ ехрептеп!а1 аи!о1шшипе епсерйа1отуе11!1з Ьу 1пЫЬ1!шд еГГес!ог Т се11 арор!оз1з апб рготобпд Тй17 б1ГГегеп!1а!юп. 1оигпа1 оГ Аи!о1ттит!у. Уо1ите 36, Пзие 3-4, р. 278-287, 2011. Согласно Оа1еб АЕ е! а1. 'Чпас!йа!юп оГ ΡΙ(3)Κ р1103 Ьгеакз геди1а!огу Т-се11-теб1а!еб 1ттипе !о1егапсе !о сапсег МПиге. 2014 Дипе 19; 509(7505):407-411 ингибиторы ΡΙ₃Κδ можно использовать для лечения солидной опухоли.

Возможность применения ингибиторов ΡΙ₃Κδ для лечения острого лимфоцитарного лейкоза (АББ), острого миелоидного лейкоза (АМБ), и хронического лимфоцитарного лейкоза (СББ) известна из документов 8аνοпа Уакка1апка е! а1. ТОК-1202 8ирргеззез АМБ апб АББ Се11з У1а 8е1ес!Не ^ЫЬйюп оГ ΡΙ₃Κбе1!а ^пазе. 54!й А8Н Аппиа1 Меейпд апб Ехрозйюп, БесетЬег 8-11, 2012. АЬз!гас! #2610; Уап Х1пд е! а1. 8е1ес!йе зта11 то1еси1е шЫЬйогз оГ р110а апб δ 1зоГогтз оГ рйозрйо1позйу1-3-к1пазе аге су!о!ох1с !о йитап аси!е туе1о1б 1еикет1а ргодепйогз. Ехрептеп!а1 Нета!о1оду (№\ν Уогк, ΝΥ, Ипйеб 8!а!ез; С В111о!!е! е! а1. А зе1ес!Не шЫЬйог оГ !йе р1103 йоГогт оГ ΡΙ 3-кшазе 1пЫЬ1!з АМБ се11 ргоБГегайоп апб зигνίνη1 апб шсгеазез !йе су!о!ох1с еГГес!з оГ νΡ16. Опсодепе. 2006; 25:6648-6659; Ап!йопу Магкйат Пбе1а1181Ь: Р1гз! С1оЬа1 Арр1^а1. Бгидз. Vο1. 74, БзиеИ, р. 1701-1707, риЬБзйеб оп1ше оп 4 8ер!етЬег 2014; 1епшГег К. Вго\п е! а1. ’ПбеХаПзхЬ, ап шЫЬйог оГ рйозрйа!1бу1тозйо1 3-кшазе р1103, Гог ге1арзеб/геГгас!огу сйгошс 1утрйосу!1с 1еикет1а. В1ооб. 29 Мау 2014, Vο1ите 123, Бзие 22, р. 3390-3397; Υί··ι1ί С1ΙΕΝ е! а1. 'ЧбекЕзЛ шбисез С1 аггез! апб арор!оз1з 1п сйтошс туе1о1б 1еикет1а Κ562 се11з ΟΝΕΟΕΟΟΥ ΚΕΡΟΚΓ8 36: 3643-3650, 2016.

В документе НнозЫ ^еба е! а1. '^ЮрИСЗ 1з а пονе1 !йегареийс !агде! ш тиШр1е туе1ота. ΒΕΟΟΌ, 2 8ер!етЬег 2010, 116(9): 1460-1468 продемонстрирована взаимосвязь между множественной миеломой и активностью ΡΙ₃Κφ110δ.

Взаимосвязь между активностью ΡΙ₃Κδ и заболеваниями такими как лимфома Ходжкина, неходжкинская лимфома (N1ΙΕ), лимфома из клеток мантийной зоны (МСБ), фолликулярная лимфома, Вклеточнаялимфома, Т-клеточная лимфома и диффузная В-клеточная лимфома (ББВСБ) показана в публикациях 8агай А. Меабо\з е! а1., ΡΙ₃Κ шЫЬйог, 08-1101 (САБ-101), а!!епиа!ез ра!й\ау з1дпа1шд, шбисез арор!оз1з, апб ονе^сοтез з1дпа1з Ггот !йе пчсгоепуиоптеп! ш се11и1аг тобе1з оГ Нобдкш 1утрйота, В1ооб. 2012; 119(8): 1897-1900; А8Н2016#1125, а+аНаЫе Ггот й!!р://\\\.!д!йегареи!1сз.сот/А8Н%202016%20Катсйапбгеп%20ЕтаЕрбГ, 58!й А8Н, БесетЬег 3-6, 2016; ^п-Нобдкш'з Бутрйота. с 216-222, БесетЬег 2013; Вгаб 8. е!а1. А рйазе 1 з!ибу оГ !йе ΡΙ₃Κδ шЫЬБ !ог 1бе1а11з1Ь ш ра!1еп!з νίΐΚ ге1арзеб/геГгас!огу тап!1е се11 1утрйота (МСБ). В1ооб. Vο1ите 123, Бзие 22, р. 3398-3405, Магсй 10, 2014; А|ау Κ. Оора1 е! а1. ΡΙ₃Κδ ^ФШоп Ьу ШеХаИзхЬ ш Ρа!^еп!з νίΐΚ Ке1арзеб ЫбокпХ Бутрйота Тйе \с\у Епд1апб 1оигпа1 оГ Мебюте. Магсй 13, 2014, 370:1008-1018; А8Н2016#4197, аνа^1аЬ1е Ггот Ь!!р://\\\.!д!йегареи!1сз.сот/А8Н%202016%20Бипптд%20Е1паЕрбГ, 58!й А8Н, БесетЬег 3-6, 2016; Сйапдсйип Бепд е! а1. Тйе ΡΙ₃Κ Бе1!а ШЫЬйог ТОК-1202 апб Ρ^ο!еазοте ^Фйог СагЕкотФ аге Н1дй1у 8упегд1збс ш Κ^11^пд Нитап В- апб Т-Се11 Бутрйота Се11з. 55!й А8Н Аппиа1 Меебпд апб Ехрозйюп, БесетЬег 7-10, 2013. АЬз!гас! #4421 соответственно.

Предложены соединения, модулирующие ΡΙ₃Κ, включая селективно модулирующие ΡΙ₃Κδ, для лечения расстройств, связанных с аутоиммунными заболеваниями и раком, особенно гематологических злокачественных новообразований.

В частности, предложено соединение формулы (Ι)

и/или его сольваты, рацемические смеси, энантиомеры, диастереомеры, таутомеры, и/или его фармацевтически приемлемая соль, где Аг, К₁, К₂ и т являются такими, как определено в настоящем документе.

Также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (Ι) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель).

Также предложен способ 1п νίνη или 1п νΐ!ΐΌ ингибирования активности ΡΙ₃Κ, включающий приве

- 2 032643 дение в контакт Р1₃К с эффективным количеством соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли.

Также предложен способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирование Р1₃К, у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли.

Заболевание, реагирующее на ингибирование Р1₃К, выбрано из воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний и раковых заболеваний.

Субъект, описанный в настоящем документе, может представлять собой человека или животное. Согласно некоторым вариантам реализации субъект, описанный в настоящем документе, представляет собой человека.

Также предложено соединение формулы (II), которое можно применять для получения соединения формулы (I)

νη₂ (И) и/или его соли, и/или его рацемической смеси или энантиомера, где Аг и К₂ являются такими, как определено в формуле (I), и оба определены ниже.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1 показано действие соединения 4, полученного в примере 1, в отношении антиЧдЭ индуцированной активации В-клеток в зависимости от дозы и времени у самок крыс линии Вистар. Данные по активации В-клеток представлены как среднее ± 8ЕМ (п=3). Данные концентрации в плазме крови представлены как среднее ± 8Ό (п=3). Данные анализировали с помощью ΑΝΟνΑ, с последующим тестом Даннетта в отношении группы (носитель+антиЧдЭ). ## показывает р <0,01 в отношении группы (носитель+РВ8); ** показывает р <0,01 в отношении группы (носитель+антиЧдО).

На фиг. 2 показано действие соединения 4, полученного в примере 1, на объем задних лап крыс линии Вистар с коллаген-индуцированным артритом. Объемы задних лап измеряли ежедневно плетизмометром. Данные объемов лап представлены в виде среднего значения ± 8ЕМ (п=6 для ранее не исследовавшейся группы, п=8 для остальных групп), остальные группы представляли собой контрольные группы носителей, группы соединений 4 с различной дозой (Οϋ) и группу положительного контроля (ООЭ). Площадь под кривой (АИС) среднего опухание лапы анализировали с помощью однофакторного дисперсионного анализа ΑΝΟνΑ с использованием статистического программного обеспечения 8щша81а1. а затем теста наименее значимого различия (Ε8Ό) критерия Фишера, и вычисляли величину р. ## показывает р <0,01 в отношении группы с ранее не исследовавшейся группы; ** показывает р <0,01 в отношении контрольной группы.

Определения

В настоящем патенте следующие слова, фразы и символы, как правило, имеют значения, указанные ниже, за исключением случаев, что контекст, в котором они используются, указывает на иное.

Черточка (-), которая расположена не между двумя буквами или символами, используется для указания места присоединения заместителя. Например, -О(С1_-4алкил) присоединен через кислород. Тем не менее, когда место присоединения группы является очевидным для специалистов в данной области технички, например, в случае галогенового заместителя, знак - могут быть опущен.

Если явно не указано иное, термины единственного числа, относятся к одному или более.

Термин алкил, используемый в настоящем описании, относится к прямому или разветвленному насыщенному углеводородному радикалу и выбран из радикала, содержащего 1-18 атомов углерода, такие как 1-12 атомов углерода, в том числе, например, 1-6 атомов углерода, и, например, 1-4 атома углерода. Например, С_!-6алкил подпадает в объем алкила и относится к алкилу, содержащему 1-6 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил (Ме), этил (Е!), нпропил (п-Рг), изопропил (ί-Рт), н-бутил (п-Ви), изо-бутил (ί-Ви), втор-бутил (втор-Ви) и третбутил (трет-Ви).

Термин алкенил, используемый в настоящем описании, относится к прямому или разветвленному углеводородному радикалу, выбранному радикала, содержащего одну или более, например, 1, 2 или 3, С=С двойных связей, а также выбран из радикала, содержащего 2-10, например, 2-6 атомов углерода и, в частности 2-4 атомов углерода. Например, С_2-6-алкенил подпадает в объем алкенила и относится к алкенилу, содержащему 2-6 атомов углерода. Примеры алкенильных групп включают, но не ограничиваются ими, винил, 2-пропенил и 2-бутенил.

Термин алкинил, используемый в настоящем описании, относится к прямому или разветвленному углеводородному радикалу, выбранному радикала, содержащего одну или более, например, 1, 2 или 3, С=С тройных связей, а также выбран из радикала, содержащего 2-10 атомов углерода, например 2-6 ато

- 3 032643 мов углерода, в частности 2-4 атомов углерода. Например, С_2-б-алкинил относится к алкинилу, содержащему 1 С=С тройную связь и также содержащему 2-б атомов углерода. Примеры алкинильных групп включают, но не ограничиваются ими, этинил, 2-пропинил и 2-бутинил.

Термин гало, используемый в настоящем описании, включает фтор, хлор, бром и йод, и термин галоген, используемый в настоящем описании, включает фтор, хлор, бром и йод.

Термин галогеналкил, используемый в настоящем описании, относится к алкильному радикалу, как определено в настоящем описании, в котором один или более, например 1, 2, 3, 4 или 5, атомов водорода заменены атомом галогена, где все атомы галогена являются одинаковыми или отличаются друг от друга. Согласно некоторым вариантам реализации термин галогеналкил, используемый в настоящем описании, относится к алкильному радикалу, как определено в настоящем описании, в котором два или более атомов водорода, например 2, 3, 4, или 5 атомов водорода, заменены атомами галогена, где все атомы галогена являются одинаковыми. Согласно другим вариантам реализации термин галогеналкил, используемый в настоящем описании, относится к алкильному радикалу, как определено в настоящем описании, в котором два или более атомов водорода, например 2, 3, 4, или 5 атомов водорода, заменены атомами галогена, где атомы галогена отличаются друг от друга. Примеры галогеналкильных групп включают, но не ограничиваются ими, -СТ₃, -СНЕ₂, -СН₂СТ₃ и т.п.

Термин алкокси, используемый в настоящем описании, относится к группе -О-алкила, где алкил определен выше. Примеры алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, нпропилокси, изопропилокси, н-бутилокси, изобутилокси, трет-бутилокси, пентилокси и гексилокси, включая их изомеры.

Термин циклоалкил, используемый в настоящем описании, относится к насыщенному или частично ненасыщенному циклическому углеводородному радикалу, который может содержать один или более, например 1 или 2, кольца, и которые также могут содержать от 3 до 12, например от 3 до 8, и в частности от 3 до б атомов углерода. Например, С_3-8циклоалкил относится к циклоалкилу, содержащему 3-8 атомов углерода в кольце. Примеры циклоалкильных групп включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил.

Термин арил, используемый в настоящем описании, относится к карбоциклическому углеводородному радикалу, содержащему моноциклическое кольцо или конденсированные кольца, содержащему б-14 атомов углерода в кольце, например б-12 атомов углерода в кольце, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим и ни один из других колец не представляет собой гетероарил, как определено ниже, и место присоединения может быть на ароматическом кольце или на других кольцах. Примеры арильных групп включают, но не ограничиваются ими, фенил, нафталенил, 1,2,3,4тетрагидронафталенил, инденил, инданил, азуленил, например, фенил и нафталенил.

Используемый в настоящем описании термин арил или ароматический следует правилу Хюккеля, где число тт-электронов равно 4п+2, где η равно нулю или любому целому числу до б.

Термин гетероциклил или гетероциклический в настоящем описании относится к кольцу, выбранному из 4-12-членных моноциклических, бициклических и трициклических насыщенных и частично ненасыщенных колец, содержащих по меньшей мере один атом углерода в дополнение к по меньшей мере одному гетероатому, например 1-4 гетероатомам, в частности 1-3, или, например, 1 или 2 гетероатомам, выбранным, например, из О, 8 и N. Место присоединения гетероциклила может быть на гетероатоме или углероде. Термин гетероциклил или гетероциклический также относится к моноциклическому кольцу, содержащему по меньшей мере один гетероатом, выбранный из О, 8 и Ν, или конденсированным кольцам, где в случае конденсированных колец, по меньшей мере одно кольцо содержит по меньшей мере один гетероатом, выбранный из О, 8 и Ν, и другие кольца не представляют собой гетероарил или арил, и место присоединения может быть на гетероциклическом кольце или на других кольцах.

Термин гетероарил, используемый в настоящем описании, относится к моноциклическому ароматическому углеводородному радикалу, содержащему 5, б или 7 атомов в кольце, предпочтительно б атомов в кольце, и содержащему один или более, например 1, 2 или 3, например 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8 (например, Ν) в кольце, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; и бициклическому ароматическому углеводородному радикалу, содержащему 8-12 атомов в кольце, например, содержащему 9 или 10 атомов в кольце, и содержащему один или более, например 1, 2, 3 или 4, например 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8 (например, Ν) в кольцах, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем по меньшей мере одно из колец является ароматическим. Например, бициклический гетероарил содержит от 5-б-членное гетероциклическое ароматическое кольцо, конденсированное с 5-б-членным циклоалкильным кольцом, гетероциклическим кольцом или арильным кольцом, в котором место присоединения может быть на гетероароматическом кольце или на циклоалкильном кольце/гетероциклическом кольце/арильном кольце.

Когда общее количество атомов 8 и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом.

Гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде Νоксида, такие как пиримидинил Ν-оксиды.

Согласно некоторым вариантам реализации гетероарил, в котором гетероатом(ы) в кольце пред

- 4 032643 ставляет собой атом(ы) Ν, определен в настоящем описании как азотсодержащий гетероарил. Азотсодержащая гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде Ν-оксида, такие как пиридил Ν-оксиды.

Примеры гетероарильной группы включают, но не ограничиваются ими, пиридил, пиридил Νоксид; пиразинил; пиримидинил; пиразолил; имидазолил; оксазолил; изоксазолил; тиазолил; изотиазолил; тиадиазолил; тетразолил; триазолил; тиенил; фурил; пиранил; пирролил; пиридазинил; бензо[4]тиазолил, бензодиоксолил, например, бензо[4][1,3]диоксолил; бензоксазолил, например бензо[4]оксазолил; имидазопиридил, например, имидазо[1,2-а]пиридил; триазолопиридил, например[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридил и [1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридил; индазолил, 2Н-индазолил; пирролопиримидинил, например, пирроло[3,4-4]пиримидинил, 7Н-пирроло[2,3-4]пиримидинил; пиразолопиримидинил, например, пиразоло[1,5-а]пиримидинил; тетразолопиридил, например, тетразоло[1,5а]пиридил; бензотиенил; бензофурил; бензоимидазолинил; индолил; индолинил; пуринил, например, 9Нпуринил и 7Н-пуринил; хинолинил, изохинолинил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолинил и 5,6,7,8тетрагидроизохинолинил.

Примеры азотсодержащей гетероарильной группы включают, но не ограничиваются ими, пирролил; пиразолил; имидазолил; пиридил; пиразинил; пиримидинил, пиримидинил Ν-оксид; пиридазинил; пирролопиримидинил, например, пирроло[3,4-4]пиримидинил, 7Н-пирроло[2,3-4]пиримидинил; пуринил, например, 9Н-пуринил и 7Н-пуринил; хинолинил; индолил; и индазолил.

Гидроксил, используемый в настоящем описании, относится к радикалу -ОН. Меркапто, используемый в настоящем описании, относится к радикалу -8Н. Оксо, используемый в настоящем описании, относится к радикалу =О. Карбоксил, используемый в настоящем описании, относится к радикалу-С(О)-ОН. Циано, используемый в настоящем описании, относится к радикалу -ΟΝ.

Когда структуры содержат звездочку как описано в настоящем описании, соединения, представленные указанными структурами, представляют собой хиральные соединения, т.е. соединения имеют либо ^-конфигурацию или 8-конфигурацию. Конфигурация соединений может быть определена с помощью различных аналитических методов, например, монокристаллический рентгеновской кристаллографией и/или оптической поляриметрией в соответствии с рутинными протоколами для обычных специалистов в данной области техники.

Термин необязательный или необязательно, используемый в настоящем описании, означает, что последовательно описываемая структура, случай или обстоятельство замещения может или не может произойти, и что описание включает случаи, когда структура замещения имеет место, и случаи, когда его нет. Например, необязательно замещенный алкил охватывает как незамещенный алкил, так и замещенный алкил, как определено в настоящем описании. Специалистам в данной области техники будет понятно в отношении к какой-либо группе, содержащей один или более заместителей, что такие группы не предназначены для введения каких-либо заместителей или структуры замещения, которые будут стерически невозможными, химически некорректными, синтетически не осуществимыми и/или нестабильными.

Термин замещенный или замещенный ..., используемый в настоящем описании, означает, что один или более водородов у указанного атома или группы замещены одним или более вариантов из указанной группы заместителей, при условии, что нормальная валентность указанного атома не превышена. Когда заместитель представляет собой оксо (т.е. =О), тогда 2 атома водорода на одном атоме заменены оксо. Комбинации заместителей и/или переменных допустимы, только если такие комбинации приводят к получению химически правильному и стабильному соединению. Химически правильное и стабильное соединение означает соединение, которое достаточно устойчивое, чтобы выдержать достаточную выделение из реакционной смеси и идентификации химической структуры соединения, а также достаточно устойчивое для последующего получения в виде агента, имеющего по меньшей мере одну практическую ценность.

Если не указано иное, заместители названы в основной структуре. Например, следует понимать, что когда (циклоалкил)алкил перечислен в качестве возможного заместителя, место присоединения указанного заместителя к основной структуре находится в алкильной части.

Термин замещенный одним или более заместителями, используемый в настоящем описании, означает, что один или более водородов у указанного атома или группы, независимо замещены одним или более вариантами из указанной группы заместителей. Согласно некоторым вариантам реализации замещенный одним или более заместителями означает, что указанный атом или группа замещены 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из указанной группы заместителей.

Специалистам в данной области техники (регаои о£ огбшагу 4411 ίη 111е ай, далее РО81ТА) будет понятно, что некоторые из соединений формулы (I) могут содержать один или более хиральных центров и, следовательно, существуют в двух или более стереоизомерных формах. Рацематы указанных изомеров, индивидуальные изомеры и смеси, обогащенные одним энантиомером, а также диастереомеры при наличии двух хиральных центров, а также смеси, частично обогащенные специфическими диастереомерами, включены в объем настоящего изобретения. Далее РО81ТА будет понятно, что настоящее изобретение включает все индивидуальные стереоизомеры (например, энантиомеры), рацемические смеси или

- 5 032643 частично разделенные смеси соединений формулы (I) и, в случае необходимости, индивидуальные таутомерные формы.

Другими словами, согласно некоторым вариантам реализации в настоящем изобретении предложены соединения различной стереоизомерной чистоты, т.е. диастереомерной или энантиомерной чистоты, с различным эи или ди. Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) (например, описанное в настоящем документе) имеет энантиомерную чистоту, составляющую по меньшей мере 60% эи (например, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5, 99,9% эи, или любые диапазоны между указанными перечисленными значениями). Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) (например, описанное в настоящем документе) имеет энантиомерную чистоту более 99,9% эи, возрастающую до 100% эи. Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) (например, описанное в настоящем документе) имеет диастереомерную чистоту, составляющую по меньшей мере 60% ди (например, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5, 99,9% ди, или любые диапазоны между указанными перечисленными значениями). Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) (например, описанное в настоящем документе) имеет диастереомерную чистоту более 99,9% ди.

Термин энантиомерный избыток или эи обозначает, сколько одного энантиомера присутствует по сравнению с другим. Для смеси К и 8 энантиомеров процент энантиомерного избытка определяется как |К-8|х 100, где К и 8 являются соответствующими мольными или массовыми долями энантиомеров в смеси, таким образом, что К+8=1. Зная об оптическом вращении хирального вещества, процент энантиомерного избытка определяется как ([а]оЬв/[а]тах)х 100, где [а]оЬв представляет собой оптическое вращение смеси энантиомеров и [а]тах представляет собой оптическое вращение чистого энантиомера.

Термин диастереомерной избыток или ди обозначает, сколько из одного диастереомера присутствует по сравнению с другим, и определяется по аналогии с энантиомерным избытком. Таким образом, для смеси диастереомеров, Ό1 и Ό2, процент диастереомерного избытка определяется как |Ό1-Ό2|χ 100, где Ό1 и Ό2 являются соответствующими мольными или массовыми долями диастереоизомеров в смеси, таким образом, что Ό1+Ό2=1.

Определение диастереомерного и/или энантиомерного избытка возможно с использованием различных аналитических методов, в том числе ЯМР-спектроскопии, хиральной колоночной хроматографии и/или оптической поляриметрии в соответствии с рутинными протоколами, известными ΡΟ8IΤΑ.

Рацематы могут быть использованы как таковые или могут быть разделены на индивидуальные изомеры. Разделение может привести к стереохимически чистым соединениям или смесям, обогащенным одним или более изомерами. Способы разделения изомеров хорошо известны (см. АШпдег N. Ь. аиб ЕИе1 Е. Ь. ίη Торюв ίη 81егеос11е1Ш51гу. νοί. 6, ХУбеу [гИегваепсе. 1971), и включают физические методы, такие как хроматография с использованием хирального адсорбента. Индивидуальные изомеры могут быть получены в хиральной форме из хиральных предшественников. Альтернативно, индивидуальные изомеры могут быть отделены химически из смеси путем образования диастереоизомерных солей с хиральной кислотой, например индивидуальными энантиомерами 10-камфорсульфоновой кислоты, камфорной кислоты, альфа-бромкамфорной кислоты, винной кислоты, диацетилвинной кислоты, яблочной кислоты, пирролидон-5-карбоновой кислоты и т.п., фракционной кристаллизации солей, с последующим выделением одного или обоих разделенных оснований, необязательно повторяя процесс, с получением, таким образом, одного из двух или обоих по существу, не содержащих друг друга; т.е. в форме, имеющей оптическую чистоту, например по меньшей мере 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 или 99,5 мас.%, требуемых стереоизомеров. Альтернативно, рацематы могут быть ковалентно связаны с хиральным соединением (вспомогательным веществом) для получения диастереомеров, которые могут быть разделены с помощью хроматографии или с помощью фракционной кристаллизации, после чего хиральное вспомогательное вещество химически удаляют с получением чистых энантиомеров, как известно РО8ГТА.

Также предложена фармацевтически приемлемая соль соединения формулы (I), такая как соль, описанная ниже, и например, фармацевтически приемлемая соль конкретных соединений, примеры которых приведены в настоящем описании, и способы применения таких солей.

Фармацевтически приемлемая соль означает соль свободной кислоты или основания соединения формулы (I), которая является нетоксичной, биологически переносимой или иным образом биологически приемлемой для введения субъекту. Примеры см. в целом в 8 8. М. Вегде, е! а1., Рйаттасеийса1 8а11ь, 1. РНагт. 8ск, 1977, 66:1-19, апб НапбЬоок о£ Ркагтасеийса1 8а115, Ргорегйев, 8е1есйоп, апб Иве, 81ак1 апб УеттиШ, Ебв., ХУбеу-УСН апб УНСА, 2штск, 2002.

Фармацевтически приемлемая соль включает, но не ограничивается ими, соли присоединения кислоты, образованные соединением формулы (I) с неорганической кислотой, например, гидрохлорид, гидробромид, карбонат, бикарбонат, фосфат, сульфат, сульфит, нитрат и т.п.; а также с органической кислотой, например, формиат, ацетат, малат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, цитрат, лактат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, 2-гидроксиэтилсульфонат, бензоат, салицилат, стеарат, и соли с алкандикарбоновой кислотой формулы НООС-(СН₂)_п-СООН, где п представляет собой 0-4, и т.п. Кроме того, фармацевтически приемлемая соль включает соли присоединения основания, образованные соединением

- 6 032643 формулы (I), содержащим кислотный фрагмент, с фармацевтически приемлемыми катионами, например, соли натрия, калия, кальция, алюминия, лития и аммония. Молярное отношение соединения формулы (I) к кислоте или катиону в полученной фармацевтически приемлемой соли включает, но не ограничиваясь ими, 1:1, 1:2, 1:3 и 1:4.

Кроме того, если соединение, описанное в настоящем описании, получают в виде соли присоединения кислоты, свободное основание может быть получено путем подщелачивания раствора соли присоединения кислоты. И наоборот, если продукт является свободным основанием, соль присоединения кислоты, в частности фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты, может быть получена путем растворения свободного основания в подходящем растворителе и обработки раствора кислотой в соответствии с традиционными методиками получения солей присоединения кислоты из основных соединений. ΡΟ8ΙΤΑ будет понятны различные синтетические методологии, которые могут быть использованы без излишних экспериментов для получения нетоксичных фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот.

Термин сольваты означает формы с присоединенным растворителем, которые содержат либо стехиометрические, либо нестехиометрические количества растворителя. Некоторые соединения склоны удерживать фиксированное молярное отношение молекул растворителя в твердом состоянии, образуя тем самым сольват. Если растворитель представляет собой воду, сольват представляет собой гидрат, если растворитель представляет собой спирт, образованный сольват представляет собой алкоголят. Гидраты образуются путем объединения одной или более молекул воды с одним из веществ, где вода сохраняет свое молекулярное состояние в виде Н₂О, причем подобное объединение позволяет образовывать один или более гидратов, например, полугидраты, моногидрат и дигидрат, а также переменные гидраты.

Используемые в настоящем описании термины группа, радикал и фрагмент являются синонимами и означают функциональных группы или фрагментов молекул, присоединяемые к другим фрагментам молекул.

Термин активный ингредиент используется для указания химического вещества, обладающего биологической активностью. Согласно некоторым вариантам реализации активный ингредиент представляет собой химическое вещество, имеющее фармацевтическое применение. Практическая фармацевтическая активность в Соединенных Штатах может быть установлена с помощью соответствующих доклинических ίη νίίτο или ίη νίνο анализов. Фармацевтическая активность достаточная для принятия регулирующим органом, таким как ΕΌΆ в США, имеет более высокий стандарт, чем доклинический анализ. Такой более высокий стандарт фармацевтической активности, успех которой, в целом, не может обоснованно ожидаться от доклинических результатов, может быть установлен с помощью соответствующего и успешного рандомизированного двойного слепого контролируемого клинического испытания на людях.

Термины лечение, лечить или излечение заболевания или расстройства, в контексте достижения терапевтического эффекта, относятся к введению одного или более фармацевтических веществ, в частности соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, субъекту, например, субъекту, представляющему собой человека, который имеет заболевание или расстройство, или имеет симптом заболевания или расстройства, или имеет предрасположенность к заболеванию или расстройству, с целью вылечить, лечить, облегчить, ослабить, изменить, поправить, смягчить, улучшить или повлиять на заболевание или расстройство, симптомы заболевания или расстройства, или предрасположенность к заболеванию или нарушению. Согласно некоторым вариантам реализации заболевание или расстройство представляет собой рак.

Термины лечение, приведение в контакт и реагирующий, в контексте химической реакции, означают добавление или смешивание двух или более реагентов при соответствующих условиях для получения указанного и/или требуемого продукта. Следует понимать, что реакция, которая приводит к указанному и/или требуемому продукту, не обязательно осуществляется непосредственно после объединения двух реагентов, которые были первоначально добавлены, т.е. может существовать одно или более промежуточных соединений, которые образуются в смеси и которые, в конечном счете, приводят к образованию указанного и/или требуемого продукта.

Термин эффективное количество, используемый в настоящем описании, относится к количеству или дозе Р1₃К-ингибирующего агента, которое достаточно, чтобы в целом обеспечить терапевтический эффект у пациентов, нуждающихся в лечении заболевания или расстройства, опосредованного активностью Р1₃К. Эффективные количества или дозы активного ингредиента согласно настоящему изобретению можно установить с помощью способов, таких как моделирование, исследования эскалации дозы или клинические испытания, а также принимая во внимание факторы, например, режим или способы введения или доставки лекарственных средств, фармакокинетики агента, тяжести и течения заболевания или расстройства, предыдущей или продолжающейся терапии субъекта, состояния здоровья субъекта и реакции на лекарственные средства, а также суждение лечащего врача. Т.е. эффективная доза, как правило, не предсказуема в Соединенных Штатах по результатам доклинических экспериментов. Фактически, дозировки могут быть достаточно непредсказуемыми, поскольку новые, непредсказуемые режимы дозирования разрабатывают после того, как дозы первоначально используют в рандомизированном, двойном слепом, контролируемом клиническом исследовании.

- 7 032643

Примерная доза составляет от примерно 0,0001 до примерно 200 мг активного вещества на 1 кг массы тела субъекта в сутки, например, от примерно 0,001 до 100 мг/кг/сутки, или приблизительно от 0,01 до 35 мг/кг/сутки или примерно от 0,1 до 10 мг/кг в сутки в виде одной или раздельных единиц дозировки (например, ВГО, ТГО, РГО). Для 70-килограммового человека, иллюстративный диапазон подходящей дозировки составляет от примерно 0,05 до приблизительно 7 г/сутки, или примерно от 0,2 до 5 г/сутки. После улучшения заболевания или расстройства пациента доза может быть изменена для поддерживающей терапии. Например, доза или частота приема или и то и другие могут быть уменьшены в зависимости от симптомов, до уровня, при котором обеспечивается требуемый терапевтический эффект. Конечно, если симптомы были облегчены до соответствующего уровня, лечение может быть прекращено. Однако пациентам может потребоваться интермиттирующая терапия на долговременной основе при любом рецидиве симптомов.

Термин ингибирование или ингибирующий указывает на уменьшение базовой биологической активности или процесса. Термин ингибирование активности Р1₃К представляет собой практическую фармацевтическую активность для целей данного описания и относится к снижению активности Р1₃К, в виде как прямого, так и косвенного ответа на присутствие соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, по отношению к активности Р1₃К в отсутствие соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли. Снижение активности может быть связано с прямым взаимодействием соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, в отношении Р1₃К, или вследствие взаимодействия соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, с одним или более другими факторами, которые в свою очередь влияют на активность Р!₃К. Например, присутствие соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, может уменьшить активность Р!₃К путем непосредственного связывания с Р!₃К, вызывая (прямо или косвенно) еще один фактор снижения активности Р!₃К, или путем (прямого или косвенного) уменьшения количества РДК, присутствующей в клетке или организме.

Термин субъект, используемый в настоящем описании, означает млекопитающих и немлекопитающих. Млекопитающие означает любого члена класса млекопитающих, в том числе, но не ограничиваются ими, человека; приматов, не относящихся к человеку, таких как шимпанзе и другие виды обезьян и мартышек; сельскохозяйственных животных, таких как крупный рогатый скот, лошади, овцы, козы и свиньи; домашних животных, таких как кролики, собаки и кошки; лабораторных животных, включая грызунов, таких как крысы, мыши и морские свинки; и тому подобное. Примеры немлекопитающих включают, но не ограничиваются ими, птиц и тому подобное. Термин субъект не означает конкретный возраст или пол. Согласно некоторым вариантам реализации субъектом является человек.

В целом, термин примерно используется в настоящем описании для модификации числового значения, выше и ниже указанного значения посредством 20% отклонения.

Технические и научные термины, используемые в настоящем документе и не определенные конкретно, имеют значения, обычно понимаемые РО8ГГА, к которой настоящее изобретение относится.

В одном из вариантов реализации описания предложено соединение формулы (I)

νν (О и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемические смеси, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, где Аг представляет собой арил, представляющий собой карбоциклический углеводородный радикал моноциклического кольца или конденсированных колец, содержащих 6-14 атомов углерода в кольце, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим и ни одно из других колец не представляет собой гетероарил; или гетероарил, представляющий собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов 8 и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде Ν-оксида;

каждый из указанного арила и гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, -ΟΝ, -ОН, -8Н, С1_-6алкила, С1_-6галогеналкила, -(С1_-6алкил)ОН и

- 8 032643

-8(О)₂(С_1-6алкил);

выбран из гетероарила и -К(К₃)гетероарила, где указанный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов 8 и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде Ν-оксида, и указанный гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -СК, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, -Ν4₂, -КН(С_1-6алкил), -К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)КН₂, -С(О)КН(С_1-6алкил), -С(О)К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5- или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов 8 и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом, и каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, -8Н, С_1-6алкила и -О(С_1-6алкил);

К₁ независимо выбран из Н, галогена, С_1-6алкила;

К₂ выбран из С_1-6алкила;

К₃ представляет собой Н или С_1-6алкил; т представляет собой 1 или 2.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I), где выбран из азотсодержащего гетероарила или -К(К₃) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -СК, -ОН, -8Н, С₁₆алкила, С_1-6галогеналкила, -О(С_1-6алкил), -(С_1-6алкил)ОН, -КН₂, -КН(С_1-6алкил), -К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)КН₂, -С(О)КН(С_1-6алкил), -С(О)К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -8О₂(С_1-6алкил), фенила и 5- или 6членного гетероарила; в котором каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -СК, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, С_1-6галогеналкила, -О(С_1-6алкил), -(С_1-6алкил)ОН, -КН₂, -КН(С_1-6алкил) и -К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил).

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I), где выбран из азотсодержащего гетероарила или -К(К₃) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СК, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, С_1-6галогеналкила, -КН₂, -КН(С_1-6алкил), -К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)КН₂, фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С_1-6алкила и -О(С_1-6алкил).

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) указанный азотсодержащий гетероарил представляет собой пиримидинил, пирролопиримидинил и пуринил.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I), выбран из:

каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СК, -ОН, -8Н, С1_-6алкила, С1_-6галогеналкила, -КН₂, -КН(С_1-6алкил), -К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -Ο(Ο)ΝΗ₂, -С(О)КН(С_1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -СК, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, С_1-6галогеналкила, -О(С_1-6алкил), -(С_1-6алкил)ОН, -КН₂, -КН(С_1-6алкил) и -К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил).

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) представляет собой

который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СК, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, С_1-6галогеналкила, -ΝΉ₂, -КН(С_1-6алкил), -К(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)КН₂, фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С_1-6алкила и -О(С_1-6алкил).

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) выбран из:

- 9 032643

каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из хлора, -СЫ, -ЫН₂, -ЫН(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)ЫН₂, фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила или тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С_1-6алкила и -О(С_1-6алкил).

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) представляет собой .ГТ .ГТ ^Кз Ύ 0

- который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из хлора, -СЫ, -ЫН₂, ЫН(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)ЫН₂, фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила или тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С_1-6алкила и -О(С_1-6алкил).

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) Аг выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиразолила, хинолила, тиенила, бензотиазолила, индолила и 2,3-дигидро-1,4бензодиоксинила, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, -СЫ, С_1-6алкила, -(С_1-6алкил)ОН, С_1-6галогеналкила или -8(О)₂(С_1-6алкил).

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) Аг представляет собой фенил или пиридил, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -СЫ и С_1-6галогеналкила.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) Аг представляет собой фенил или пиридил, каждый из которых необязательно замещен одним или более галогенами, например, необязательно замещен одним или более атомами фтора.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) К, независимо выбран из Н, галогена и С_1-6алкила.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) К₂ представляет собой С_1-6алкил, например, С_1-4алкил, в частности метил и этил.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) К₃ представляет собой Н. Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) т представляет собой 1.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) формула (I) представляет собой формулу (Ί-1)

(1-1)

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (Σ-1) выбран из азотсодержащего гетероарила или -Ы(К₃) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СЫ, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, С_1-6галогеналкила, -ЫН₂, -ЫН(С_1-6алкил), -Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (Σ-1) указанный азотсодержащий гетероарил выбран из пиримидинила, пирролопиримидинила и пуринила.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (Σ-1) выбран из:

каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СЫ, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, С_1-6галогеналкила, -ЫН₂, -ЫН(С_1-6алкил), -Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (Ί-1) выбран из:

каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из -СЫ, -ЫН₂ и

- 10 032643 тетразолила.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (1-1) представляет собой

который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СЫ, -ОН, -8Н, С_1-6алкил, С_1-6галогеналкила, -ΝΗ₂, -ЫН(С_1-6алкил), -Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (1-1) представляет собой

который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из-СЫ, -ΝΗ₂ и тетразолила.

Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (1-1) Аг выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиразолила, хинолила, тиенила, бензотиазолила, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -СЫ, С_1-6алкил, -(С_1-6алкил)ОН и С_1-6галогеналкила.

Также предложено соединение, выбранное из соединений 1-9 и 11-82, пронумерованных в экспериментальной части, и/или его фармацевтически приемлемая соль.

Согласно другому аспекту предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель).

Согласно другому аспекту предложен способ ίη νίνο или ίη νίΐτο ингибирования активности Р1₃К, включающий приведение в контакт Р1₃К с эффективным количеством соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли.

Согласно другому аспекту, предложен способ ίη νίνο или ίη νίίτο ингибирования активности Р1₃К, включающий приведение в контакт Р1₃К с количеством фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель), эффективным для ингибирования активности Р1₃К.

Согласно другому аспекту предложен способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирование Р1₃К, у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, количества соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для ингибирования РЦК у указанного субъекта.

Согласно другому аспекту предложено способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирование Р^К у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, количества фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель), эффективного для ингибирования РНК у указанного субъекта.

Согласно другому аспекту предложено применение соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанного в настоящем документе, для лечения заболевания, реагирующего на ингибирование РНК, путем ингибирования указанной РНК у указанного субъекта.

Согласно другому аспекту предложено применение соединение формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанного в настоящем документе, для получения лекарственного средства для лечения заболевания, реагирующего на ингибирование РНК.

Согласно некоторым вариантам реализации указанное заболевание, реагирующее на ингибирование РНК, представляет собой воспалительное заболевание, аутоиммунное заболевание или раковое заболевание.

Согласно некоторым вариантам реализации указанный воспалительное заболевание или аутоиммунное заболевание выбрано из ревматоидного артрита, хронической обструктивной болезни легких (СОРО), аллергического ринита, астмы, волчанки, системной красной волчанки, псориаза и рассеянного склероза.

Согласно некоторым вариантам реализации указанный раковое засоление представляет собой солидную опухоль или гематологическую злокачественную опухоль, выбранную из лейкоза, множественной миеломы (ММ) и лимфомы.

Согласно некоторым вариантам реализации указанный лейкоз выбран из острого лимфоцитарного

- 11 032643 лейкоза (ЛЬЕ), острого миелоидного лейкоза (ЛМЬ), хронического лимфоцитарного лейкоза (СЬЬ) и хронического миелогенного лейкоза (СМЬ).

Согласно некоторым вариантам реализации указанная лимфома выбрана из лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы (ΝΗΕ), лимфомы из клеток мантийной зоны (МСЬ), фолликулярной лимфомы, В-клеточной лимфомы, Т-клеточной лимфомы и диффузной В-клеточной лимфомы (ЭЕВСБ).

Согласно другому аспекту предложено соединение формулы (II), и/или его соль, и/или его рацемическая смесь или энантиомер, которое можно применять для получения соединений формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе)

νη₂ (Н) где Аг и К₂ являются такими, как определено в соединении формулы (I).

Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (II) и/или его соль выбрано из:

- 12 032643

Общие способы синтеза для описанных вариантов реализации

Соединение формулы (I), описанное в настоящем документе и/или его фармацевтически приемлемую соль, описанную в настоящем документе, можно синтезировать из коммерчески доступного исходного вещества способами, хорошо известными в данной области техники, принимая во внимание описание настоящей заявки на патент. Следующие схемы иллюстрируют общие способы получения некоторых соединений, описанных в настоящем документе.

- 13 032643

Как показано на схеме I, соединение формулы 1-1 взаимодействует с Ν,Ο-диметилгидроксиламином с получением амидного соединения формулы 1-2. В результате реакции соединения формулы 1-2 с М-Н получают соединение формулы 1-3, которое в результате сочетания Сузуки с соединением формулы АгВ(ОН)₂ (Аг определен в настоящем описании) в присутствии подходящего палладиевого катализатора приводит к получению соединения формулы 1-4. Ρά-катализируемая реакция сочетания С-С может быть осуществлена в подходящих полярных растворителях, таких как ДМФА, АСН ТГФ или ДМСО и т.п., в подходящих основаниях, таких, как ТЕА, ΌΙΡΕΑ, С§₂СО₃, КОАс и т.п., с использованием катализаторов, таких как Р6(ОАс)₂, Рб(брр1)С1₂, Рй(РРЫ₃)₄ или Рб₂(бЬа)₃ и т.п. Затем следующие реакции проводят следующим образом:

1) реакция соединения формулы 1-4 с реактивом Гриньяра (алкилгалогенидом магния) в подходящих условиях приводит к образованию соединения 1-5, которое в результате конденсации с (К)-2метилпропан-2-сульфинамидом и после восстановления в присутствии подходящих восстанавливающих реагентов приводит к получению соединения формулы 1-7; или

2) восстановление соединения формулы 1-4 в присутствии подходящих восстанавливающих реагентов приводит к образованию соединения 1-5', которое в результате конденсации с (К)-2-метилпропан-2сульфинамидом и после реакции с реактивом Гриньяра (алкилгалогенидом магния) в подходящих условиях приводит к получению соединения формулы 1-7.

Соединение формулы 1-7 в результате удаления защитной группы приводит к образованию соединения формулы 1-8, которое в результате циклизации с хлорацетальдегидом в присутствии оснований, таких, как ННСО₃ и тому подобного, приводит к получению соединения формулы 1-9, которое в результате удаления защитной группы приводит к получению соединения формулы 1-10. Соединение формулы 1-10 взаимодействует с С1-У в присутствии основания, такого как ΌΙΡΕΑ, и тому подобного, в соответствующих условиях, что приводит к получению соединения формулы 1-11, которое подвергают дальнейшей реакции(ям), такой как галогенирование, в подходящих условиях с получением соединения формулы (I).

- 14 032643

Схема II

о ϊ-4'

ϊ-5'

Как показано на схеме II, соединение формулы ΐ-1 взаимодействует с N,0диметилгидроксиламином с получением амидного соединения формулы 1-2. В результате реакции соединения формулы 1-2 с М-Н получают соединение формулы 1-3. Затем следующие реакции проводят следующим образом:

1) восстановление соединения формулы 1-3 в присутствии подходящих восстанавливающих реагентов приводит к образованию соединения 1-4, которое в результате конденсации с (К)-2-метилпропан-2сульфинамидом и после реакции с реактивом Гриньяра (алкилгалогенидом магния) в подходящих условиях приводит к получению соединения формулы 1-6; или

2) реакция соединения формулы 1-3 с реактивом Гриньяра (алкилгалогенидом магния) в подходящих условиях приводит к образованию соединения 1-4', которое в результате конденсации с (К)-2метилпропан-2-сульфинамидом и после восстановления в присутствии подходящих восстанавливающих реагентов приводит к получению соединения формулы 1-6.

Соединение формулы 1-6 в результате удаления защитной группы приводит к образованию соединения формулы 1-8, которое в результате циклизации с хлорацетальдегидом в присутствии оснований, таких, как ΝαΙ 1СО₃ и тому подобного, приводит к получению соединения формулы 1-9. Соединение формулы 1-9 в результате сочетания Стилле или сочетания Сузуки со станнанами или АгВ(ОН)₂ (Аг определен в настоящем описании), в присутствии подходящего палладиевого катализатора, такого как Рб₂(бЬа)₃ и тому подобного, подходящих лигандов, таких Х-рйо8 и тому подобного, в стандартных условиях сочетания Стилле или сочетания Сузуки, приводит к получению соединения формулы 1-10, которое в результате удаления защитной группы приводит к получению соединения формулы 1-11. Соединение формулы 1-11 взаимодействует с С1-У в присутствии основания, такого как ΏΙΡΕΑ и тому подобного, в соответствующих условиях, что приводит к получению соединения формулы 1-12, которое подвергают дальнейшей реакции(ям), такой как галогенирование, в подходящих условиях с получением соединения формулы (I).

Соединения, полученные таким образом, могут быть дополнительно модифицированы в по перифе

- 15 032643 рийным положениям с обеспечением требуемых соединений. Синтетические химические превращения описаны, например, в К. Ьатоск, Сотртейепкйе Огдатс ТтапкЕогтабопк, УСН РиЫййегк (1989); Т.^. Огееие апб Р.О.М. ХУйк, РгсИесОме Отоирк ίη Огдатс Зуййекй, 3^Г<| Еб., .Токи \Убеу апб 8опк (1999); Ь. Иекег апб М. Иекег, Иекег апб Иекег'к Кеадейк £ог Огдатс Зуййекй, 1окп ^беу апб 8опк (1994); и Ь. Радиейе, еб., Епсус1ореб1а о£ Кеадейк £ог Огдатс 8уййек1к, .Тойп ^беу апб 8опк (1995) и последующих изданиях.

Перед использованием, соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанные в настоящем документе, могут быть очищены с помощью колоночной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии, кристаллизации или других подходящих способов.

Фармацевтические композиции и практическое применение

Соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль, описанное в настоящем документе, применяют, по отдельности или в комбинации с одним или более дополнительными активными ингредиентами, с получением фармацевтических композиций. Фармацевтическая композиция содержит (а) эффективное количество соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемую соль, описанное в настоящем документе; и (Ь) фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель).

Фармацевтически приемлемый носитель относится к носителю, который совместим с активными ингредиентами композиции (и согласно некоторым вариантам реализации, способен стабилизировать активные ингредиенты) и безвреден по отношению к субъекту, подлежащего лечению. Например, солюбилизирующие агенты, такие как циклодекстрины (которые образуют специфические, более растворимые комплексы с соединением формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой солью, рассмотренными в настоящем описании), могут быть использованы в качестве фармацевтических вспомогательных веществ для доставки активных ингредиентов. Примеры других носителей включают коллоидный диоксид кремния, стеарат магния, целлюлозу, лаурилсульфат натрия и пигменты, такие как Э&С Желтый #10. Подходящие фармацевтически приемлемые носители описаны в Кеттд1оп'к Рйагтасеийса1 8с1епсек, А. Око1, стандартный справочник в данной области.

Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) (например, любое из описанных в настоящем описании), и/или его фармацевтически приемлемую соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть введены различными известными способами, например перорально, местно, ректально, парентерально, путем ингаляционного спрея или через имплантированный резервуар. Термин парентеральный, используемый в настоящем описании, включает подкожное, внутрикожное, внутривенное, внутримышечное, внутрисуставное, внутриартериальное, внутрисиновиальное, внутригрудинное, интратекальное, внутриочаговое и внутричерепное введение инъекцией или инфузией.

Фармацевтическая композиция, описанная в настоящем описании, может быть получена в форме таблеток, капсул, саше, драже, порошка, гранул, таблеток для рассасывания, порошка для восстановления, жидкого препарата или суппозиториев. Согласно некоторым вариантам реализации фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемую соль, получают для внутривенной инфузии, местного введения или перорального введения.

Композиция для перорального введения может представлять собой любую перорально приемлемой лекарственную форму, включая, но не ограничиваясь ими, таблетки, капсулы, эмульсии и водные суспензии, дисперсии и растворы. Обычно используемые носители для таблеток, включают лактозу и кукурузный крахмал. Смазывающие агенты, такие как стеарат магния, также обычно добавляют в таблетки. Для перорального введения в форме капсулы, походящие разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. Когда водные суспензии или эмульсии вводят перорально, активный ингредиент может быть суспендирован или растворен в масляной фазе в сочетании с эмульгирующими или суспендирующими агентами. При необходимости, могут быть добавлены определенные подсластители, ароматизаторы или красители.

Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль может присутствовать в количестве от 1, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 200, 250, 300, 400 и 500 мг в таблетке. Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль может присутствовать в количестве от 1, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 200, 250, 300, 400 и 500 мг в капсуле.

Стерильная композиция для инъекций (например, водная или масляная суспензия) может быть получена в соответствии с методиками, известными в данной области, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов (таких как, например, Т\тееп 80) и суспендирующих агентов. Стерильный промежуточный состав для инъекций может также представлять собой стерильный раствор или суспензию для инъекций в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди фармацевтически приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, могут быть упомянуты маннит, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используют в качестве растворителя или суспендирующей среды (например, синтетические моно- или диглицериды). Жир

- 16 032643 ные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, подходят для в промежуточных составов для инъекций, в виде природных фармацевтически приемлемых масел, таких как оливковое масло или касторовое масло, особенно в их полиоксиэтилированных вариантах. Указанные масляные растворы или суспензии могут также содержать разбавитель на основе длинноцепочечного спирта или диспергатор, или карбоксиметилцеллюлозу или аналогичные диспергирующие агенты.

Композиции для ингаляции могут быть получены в соответствии с методиками, хорошо известными в области фармацевтических составов, и могут быть получены в виде растворов в физиологическом растворе с использованием бензилового спирта или других подходящих консервантов, промоторов абсорбции для повышения биодоступности, фторуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих агентов, известных в данной области техники.

Композиция для местного применения может быть получена в виде масла, крема, лосьона, мази и тому подобного. Подходящие носители для композиции включают растительные или минеральные масла, белый вазелин (белый мягкий парафин), жиры или масла с разветвленной цепью, животные жиры и высокомолекулярные спирты (более С12). Согласно некоторым вариантам реализации фармацевтически приемлемый носитель представляет собой носитель, в котором активный ингредиент является растворимым. Эмульгаторы, стабилизаторы, увлажнители и антиоксиданты также могут быть включены, а также могут быть включены агенты придания окраски или аромата, если это необходимо. Кроме того, агенты, усиливающие трансдермальные проникновение, могут быть использованы в указанных составах для местного применения. Примеры таких усиливающих агентов можно найти в патентах США 3989816 и 4444762.

Кремы могут быть получены из смеси минерального масла, самоэмульгирующегося пчелиного воска и воды, куда примешивают смесь активного ингредиента, растворенного в небольшом количестве масла, такого как миндальное масло. Примером такого крема является крем, включающий, по массе, примерно 40 частей воды, примерно 20 частей пчелиного воска, примерно 40 частей минерального масла и примерно 1 часть миндального масла. Мази могут быть получены путем смешивания раствора активного ингредиента в растительном масле, таком как миндальное масло, с теплым мягким парафином и выдерживанием смеси для остывания. Примером такой мази является мазь, включающая примерно 30 мас.% миндального масла и примерно 70 мас.% белого мягкого парафина.

Подходящие анализы ίη νίΐτο могут быть использованы для оценки практической применимости соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, для ингибирования активности ΡΙ₃Κδ. Соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть дополнительно исследованы в отношении дополнительной практической применимости для лечения рака или аутоиммунных заболеваний с помощью анализов ίη νίνο. Например, соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть введены животному (например, в мышиной модели), имеющему рак или аутоиммунное заболевание и его терапевтические эффекты может быть оценен. Если предположить, что доклинические результаты прошли успешно, диапазон дозировки и способы введения животным, таким как люди, могут быть предсказаны.

Соединение формулы (I) (например, любое из описанных в настоящем описании) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут иметь достаточную доклиническую практическую полезность для начала клинических исследований, в результате которых можно продемонстрировать положительное терапевтического или профилактического действие, например, у пациентов с раком.

Используемый в настоящем описании термин рак относится к клеточному нарушению, характеризующемуся неконтролируемой или разрегулированной пролиферацией клеток, уменьшенной клеточной дифференцировкой, несоответствующей способностью вторгаться в окружающие ткани и/или способностью установить новый рост в эктопических участках. Термин рак включает, но не ограничивается ими, солидные опухоли и гематологические злокачественные новообразования. Термин рак охватывает заболевания кожи, тканей, органов, костей, хрящей, крови и сосудов. Термин рак дополнительно охватывает первичные и метастатические раковые заболевания.

Неограничивающие примеры солидных опухолей включают рак поджелудочной железы; рак мочевого пузыря; колоректальный рак; рак молочной железы, в том числе метастатический рак молочной железы; рак предстательной железы, в том числе андроген-зависимый и андроген-независимый рака предстательной железы; рак почек, в том числе, например, метастатический почечно-клеточный рак; гепатоклеточный рак; рак легкого, в том числе, например, немелкоклеточный рак легкого (М8СЬС), бронхиолоальвеолярную карциному (ВАС) и аденокарциному легких; рак яичников, в том числе, например, эпителиальный прогрессирующий или первичный перитонеальный рак; рак шейки матки; рак желудка; рак пищевода; рак головы и шеи, в том числе, например, плоскоклеточную карциному головы и шеи; рак кожи, в том числе, например, злокачественную меланому; нейроэндокринный рак, в том числе метастатические нейроэндокринные опухоли; опухоли головного мозга, в том числе, например, глиому, анапластическую олигодендроглиому, взрослую мультиформную глиобластому и взрослую анапластическую

- 17 032643 астроцитому; рак кости; саркому мягких тканей; и карциному щитовидной железы.

Неограничивающие примеры гематологических злокачественных новообразований включают острый миелоидный лейкоз (АМЬ); хронический миелогенный лейкоз (СМЬ), включая ускоренный СМЬ и СМЬ бласт фазы (СМЬ-ВР); острый лимфобластный лейкоз (АЬЬ); хронический лимфоцитарный лейкоз (СЬЬ); лимфому Ходжкина; неходжкинскую лимфому (ΝΗΕ), включая фолликулярную лимфому и лимфому из клеток мантийной зоны; В-клеточную лимфому; Т-клеточную лимфому; множественную миелому (ММ); макроглобулинемию Вальденстрема; миелодиспластические синдромы (МЭ8), включая рефрактерную анемию (ЕА), рефрактерную анемию с кольцевидными сидеробластами (КАК8), рефрактерную анемию с избытком бластов (КАЕВ) и КАЕВ в трансформации (КАЕВ-Т); и миелопролиферативные синдромы.

Согласно некоторым вариантам реализации, примеры гематологических злокачественных новообразований включают лейкоз, такой как, острый лимфоцитарный лейкоз (ЛЕЕ), острый миелоидный лейкоз (АМЬ), хронический лимфоцитарный лейкоз (СЬЬ), и хронический миелогенный лейкоз (СМЬ); множественную миелому (ММ); и лимфому, такую как лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому (ΝΗΕ), лимфому из клеток мантийной зоны (МСЬ), фолликулярню лимфому, В-клеточную лимфому, Тклеточную лимфому и диффузную В-клеточную лимфому (ОЕВСЬ).

Термин воспалительное заболевание относится к патологическим состояниям, в результате воспаления, как правило, вызванного хемотаксисом нейтрофилов. Примеры таких заболеваний включают воспалительные заболевания кожи, включая псориаз и атопический дерматит; системную склеродермию и склероз; реакции, связанные с воспалительным заболеванием кишечника (ТВО) (например, болезнь Крона и неспецифический язвенный колит); ишемические реперфузионные нарушения, включая хирургическое реперфузионные повреждения ткани, сердечные ишемические состоянич, такие как инфаркт миокарда, остановка сердца, реперфузия после хирургии сердца и сужением после чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластики, инсульт и аневризмы брюшной аорты; отек головного мозга после инсульта; черепно-мозговую травму, гиповолемический шок; асфиксию; синдром расстройства дыхания у взрослых; острые травмы легкого; болезнь Бехчета; дерматомиозит; полимиозит; рассеянный склероз (М8); дерматит; менингит; энцефалит; увеит; остеоартроз; волчаночный нефрит; аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит (КА), синдром Шегрена, васкулит; заболевания, связанные с диапедезом лейкоцитов; воспалительное нарушение центральной нервной системы (ЦНС), синдром полиорганной недостаточности, вторичный по отношению к септицемии или травме; алкогольный гепатит; бактериальную пневмонию; заболевания, опосредованные комплексом антиген-антитело, включая гломерулонефрит; сепсис; саркоидоз; иммунопатологические реакции на трансплантацию тканей/органов; воспаления легких, в том числе плеврит, альвеолит, васкулит, пневмонию, хронический бронхит, бронхоэктаз, диффузный панбронхиолит, гиперчувствительный пневмонит, идиопатический фиброз легких (ГРЕ) и кистозный фиброз; и т.д. Предпочтительные показания включают, без ограничения, хроническое воспаление, аутоиммунный диабет, ревматоидный артрит (РА), ревматоидный спондилит, подагрический артрит и другие артритные состояния, рассеянный склероз (М8), астму, системную красную волчанку, синдром расстройства дыхания у взрослых, болезнь Бехчета, псориаз, хроническое воспаление легких, реакцию трансплантат против хозяина, болезнь Крона, язвенный колит, воспалительное заболевание кишечника (ТВО). болезнь Альцгеймера и жар.

Соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть использованы для достижения благоприятного терапевтического или профилактического эффекта, например, у пациентов с аутоиммунным заболеванием.

Термин аутоиммунное заболевание относится к заболеванию или расстройству, вытекающему из и/или направленному против собственных тканей или органов индивидуума, или косегрегации или проявлениям, или состоянию в результате указанных проявлений. Примеры аутоиммунных заболеваний включают, но не ограничиваются ими, СОРЭ (хроническая обструктивная болезнь легких), аллергический ринит, волчанку, миастению, рассеянный склероз (РС), ревматоидный артрит (РА), псориаз, воспалительное заболевание кишечника (ВЗК), астму и идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру и миелоидное пролиферативное расстройство, такое как миелофиброз, РУ/ЕТ (после миелофиброз в результате полицитемии/эссенциальной тромбоцитемии).

Согласно некоторым вариантам реализации воспалительное заболевание и аутоиммунное заболевание включает ревматоидный артрит, хроническую обструктивную болезнь легких (СОРЭ), аллергический ринит, астму, волчанку, системную красную волчанку, псориаз и рассеянный склероз.

Кроме того, соединение формулы (I) (например, любой из описанных в настоящем описании) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть использованы в комбинации с дополнительными активными ингредиентами для лечения рака, воспалительных или аутоиммунных заболеваний. Дополнительные активные ингредиенты могут быть введены раздельно с соединением формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой солью, рассмотренными в настоящем описании, или включены с таким ингредиентом в фармацевтическую композицию согласно описанию, например, в виде лекарственного средства с фиксированной дозой, В примерном варианте реализации дополнительные активные ингредиенты представляют собой ингредиенты, которые, как известно или

- 18 032643 обнаружено, являются эффективными для лечения заболеваний, опосредованных активностью ΡΙ3Κ, например другие модуляторы ΡΙ₃Κ или соединения, являющиеся активными в отношении другой мишени, связанной с конкретным заболеванием. Комбинация может служить для повышения эффективности (например, путем включения в комбинации соединения, усиливающего активность или эффективность соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании), уменьшающего один или более побочных эффектов, или уменьшающего требуемую дозу соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании.

Примеры

Приведенные ниже примеры предназначены для иллюстрации и не должны рассматриваться как ограничивающие каким-либо образом. Если не указано иное, части являются частями по массе, температура выражена градусах Цельсия, и давление равно или близко к атмосферному. Все данные МС были получены с помощью Адйеп! 6120 и/или АдПееЦ 1100. Все реагенты, за исключением промежуточных соединений, используемых в данном описании, являются коммерчески доступными. Все названия соединений, кроме реагенто, были получены с помощью Сйешйга^ 12.0.

В следующих примерах используются приведенные ниже сокращения:

ΑΟΝ	Ацетонитрил
Вос	трет-бутоксикарбон ил
Вос2О	дт-трет-бутил-дикарбонат
ϋΑδΤ	трифторид диэтиламиносеры
ДХМ	дихлорметан
ϋΕΑ	диэтиламин
ДМФА	Л/,Л/-диметилформамид
ϋΜΑ	диметилацетамид

- 19 032643

ΟΙΒΑΙ--Η	Гидрид диизобутилалюминия
ϋΙΡΕΑ	Л/,Л/-диизопропилэтиламин
ΕϋΟΙ	1-(З-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид
ЕЮАс/ЕА	этилацетат
Εΐ3Ν	триэтиламин
НАТи гексафторфосфат	О-(7-азабензотриазол-1-ил)-Л/,Л/,Л/',Л/'-тетра-метилурония
нвти	О-бензотриазол-Л/,Ν,Ν’,N -тетраметилурония гексафторфосфат
НОАс	уксусная кислота
НОВТ	1-гидроксибензотриазол
ЭИ	энантиомерный избыток
мл	миллилитр
г	грамм
мг	миллиграмм
нг	нанограмм
моль	моль
ммоль	миллимоль
мин	минута
ч	час
тСРВА	3-хлорпербензойная кислота
МеОН	метанол
ЫаН	гидрид натрия
N08	Л/-хлорсукцинимид
ΝΜΡ	Ы-метил-2-пиролидон
РЕ	Петролейный эфир
Ρό(όρρΐ)0ΐ2	[1,1 '-бис(д ифенилфосфино)ферроцен]паллад и й (11)д ихлорид
Рс12(с1Ьа)з Рс1(РРИз)4	три(дибензилиденацетон)дипалладий (0) тетракис(трифенилфосфин)палладий (0)
РМВ	п-метоксибензил
РРпз	трифенилфосфин
ТНР	тетрагидрофуран
ТЕА	трифторуксусная кислота
ТРЕ	трифторэтанол
Т5ОН	4-метилбензолсульфоновая кислота
ХрИоз	2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил

Пример 1

Синтез соединений 1-9 и 11-82.

Соединение 1.

4-Амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил

- 20 032643

(А) 3-Хлор-6-гидроксипиридазин-4-карбоновая кислота.

Раствор 3,6-дихлорпиридазин-4-карбоновой кислоты (10 г, 51,8 ммоль) в водн. ΝαΟΗ (2 н., 200 мл) кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционный раствор подкисляли с раствором соляной кислоты до рН «1-2. Раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂О/МеОН) с получением продукта (5,2 г, выход 57%) в виде желтого твердого вещества. МС (ιηζ):175 [М+Н]⁺.

(B) Метил-3 -хлор-6-гидроксипиридазин-4-карбоксилат.

К раствору 3-хлор-6-гидроксипиридазин-4-карбоновой кислоты (5 г, 28,7 ммоль) в МеОН (30 мл) добавляли концентрированную Н₂8О₄ (1 мл). Раствор перемешивали при 100°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционный раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂0:Ме0Н=100:0-0:100) с получением продукта (5 г, выход 93%) в виде белого твердого вещества. МС (т/ζ): 189 [М+Н]⁺.

(C) Метил-6-гидрокси-3-фенилпиридазин-4-карбоксилат.

К смеси метил-3-хлор-6-гидроксипиридазин-4-карбоксилата (5 г, 26,6 ммоль), фенилборной кислоты (6,49 г, 53,2 ммоль) и КОАс (5,21 г, 53,2 ммоль) в диоксане (60 мл) и Н₂О (6 мл) в атмосфере Ν₂ в колбу добавляли Рб(брр1)С1₂ (1,08 г, 13,3 ммоль). Смесь перемешивали при 120°С в атмосфере Ν₂ в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционный раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/ЕА=1/1) с получением неочищенного продукта, который очищали снова с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂О/МеОН= 100:0 до 0:100) с получением продукта (2,3 г, выход 37,6%) в виде белого твердого вещества. МС (т/ζ): 231 [М+Н]⁺.

(О) Метил-6-хлор-3-фенилпиридазин-4-карбоксилат.

Смесь метил-6-гидрокси-3-фенилпиридазин-4-карбоксилата (2,3 г, 10 ммоль) в РОС1₃ (10 мл) перемешивали при 110°С в течение 6 ч. Избыток РОС1₃ удаляли в вакууме и добавляли водн. \а11С’О₃. Смесь концентрировали с получением неочищенного продукта, который затем очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/ЕА=3/1) с получением продукта (2 г, выход 80,6%) в виде красного твердого вещества. МС (т/ζ): 249 [М+Н]⁺.

(Е) 6-Хлор-3-фенилпиридазин-4-карбоновая кислота.

ΝπΟΙΙ (0,64 г, 16,12 ммоль) добавляли к раствору метил-6-хлор-3-фенилпиридазин-4-карбоксилата (2 г, 8,06 ммоль) в МеОН (10 мл) и Н₂О (1 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционный раствор доводили с помощью раствора соляной кислоты до рН ~3. Смесь концентрировали с получением красного твердого вещества неочищенного продукта, который использовали для

- 21 032643 следующей стадии реакции без дополнительной очистки. МС (т/ζ): 235 [М+Н]⁺.

(Е) б-Хлор-№метокси-№метил-3 -фенилпиридазин-4-карбоксамид.

Смесь б-хлор-3-фенилпиридазин-4-карбоновой кислоты (1,89 г, 8,0б ммоль), гидрохлорида Ν,Οдиметилгидроксиламина (1,5б г, 1б,12 ммоль), НВТИ (б,11 г, 1б,12 ммоль) и Εΐ₃Ν (2,44 г, 24,18 ммоль) в ДХМ (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (РЕ/ЕА=3/1) с получением продукта (1,75 г, выход 78,4%) в виде желтого твердого вещества. МС (т/ζ): 278 [М+Н]⁺.

(С) №Метокси-б-((4-метоксибензил)амино)-№метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамид.

Смесь (4-метоксифенил)метанамина (1,74 г, 12,б8 ммоль) и б-хлор-№метокси-№метил-3фенилпиридазин-4-карбоксамида (1,75 г, б,32 ммоль) в NМΡ (30 мл) перемешивали при 130°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры раствор экстрагировали ЕА. Органическую фазу концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂О/МеОН=100:0-0:100) с получением продукта (1,8 г, выход 75%) в виде желтого твердого вещества. МС (т/ζ): 379 [М+Н]⁺.

(H) б-((4-Метоксибензил)амино)-3 -фенилпиридазин-4-карбальдегид.

К раствору №метокси-б-((4-метоксибензил)амино)-№метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида (1,8 г,4,7б ммоль) в сухом ТНЕ (30 мл) при - 20°С в атмосфере Ν₂ по каплям добавляли ΌΙΒΑΕ-Н (14,3 г,14,28 ммоль). И затем смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение дополнительных 4 ч. После чего смесь гасили водн. ИН₄С1 и экстрагировали ЕА. Органическую фазу концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ΡΕ:ΕΑ=100:0 до 1:1) с получением продукта (0,7 г, выход 4б%) в виде желтого масла. МС (т/ζ): 320 [М+Н]⁺.

(I) (Е)-№((б-((4-Метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2сульфинамид.

Τί(ΟΕΐ)₄ (3 мл) добавляли к раствору б-((4-метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4карбальдегида (700 мг, 2,2 ммоль) и 2-метилпропан-2-сульфинамида (399 мг, 3,3 ммоль) в сухом ТНЕ (30 мл) в атмосфере Ν2. Смесь перемешивали при 100°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь обрабатывали 2 мл Н₂О и фильтровали, фильтрат экстрагировали ЕА и органический слой концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂О:МеОН=100:0-0:100) с получением продукта (450 мг, выход 48%) в виде желтого твердого вещества. МС (т/ζ): 423 [М+Н]⁺.

(I) №(1-(б-((4-Метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамид.

МеМдВг (1,07 мл, 3,21 ммоль) добавляли по каплям к раствору (Ε)-N-((б-((4-метоксибензил)амино)3-фенилпиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2-сульфинамида (450 мг, 1,07 ммоль) в сухом ТНЕ (30 мл) в атмосфере Ν₂ при 0°С. Затем смесь перемешивали при 0°С в течение дополнительных 2 ч. После чего водн. ΝΉ₄Ο добавляли с гашением реакции, реакционную смесь экстрагировали ЕА. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным №ь8О₄. и концентрировали. Остаток использовали для следующей стадии реакции без дополнительной очистки. МС (т/ζ): 439 [М+Н]⁺.

(К) Бензил-( 1 -(б-((4-метоксибензил)амино)-3 -фенилпиридазин-4-ил)этил)карбамат.

Концентрированный раствор соляной кислоты (1 мл) добавляли к раствору Ν-(1-(6-((4метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамиду (4б9 мг, 1,07 ммоль) в МеОН (15 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем концентрировали с удалением избытка растворителя, сушили с получением 5-(1-аминоэтил)-№(4метоксибензил)-б-фенилпиридазин-3-амина в виде неочищенного продукта, который затем смешивали с бензил-(2,5-диоксопирролидин-1-ил)карбонатом (533 мг, 2,14 ммоль) и Εΐ₃Ν (3 мл) в ДХМ (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После чего реакционную смесь обрабатывали Н₂О, экстрагировали ДХМ. Органическую фазу сушили над безводным №₂8О₄, концентрировали с получением неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии реакции без дополнительной очистки. МС (т/ζ): 4б9 [М+Н]⁺.

(Ь) 5-(1 - Аминоэтил) -б-фенилпиридазин-3 -амин.

Раствор бензил-(1-(б-((4-метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)карбамата (501 мг, 1,07 ммоль) в СЕ₃СООН (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После чего раствор доводили водн. №ьСО₃ до рН ~7, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂О:МеОН=100:0-0:100) с получением продукта (214 мг, выход 93%). МС (т/ζ): 215 [М+Н]⁺.

(М) трет-Бутил-(1-(б-амино-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)карбамат.

К раствору 5-(1-аминоэтил)-б-фенилпиридазин-3-амина (214 мг, 1 ммоль) и Εΐ₃Ν (0,5 мл) в ΕΐΟН (10 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (218 мг, 1 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего смесь концентрировали с получением неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии реакции без дополнительной очистки. МС (т/ζ): 315 [М+Н]⁺.

(Ν) трет-Бутил-( 1 -(б-фенилимидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамат.

К раствору трет-бутил-(1-(б-амино-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)карбамата (314 мг, 1 ммоль) в

- 22 032643

ЕЮН (10 мл) добавляли и №НС0₃ (252 мг, 3 ммоль) 2-хлорацетальдегид (3 мл, 40%). Смесь перемешивали при 80°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры в раствор добавляли водн. №НС0₃ до рН ~8. Смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэшхроматографии (Н₂0:Ме0Н=100:0-0:100) с получением продукта (90 мг, выход 27%) в виде желтого твердого вещества. МС (т/ζ): 339 [М+Н]⁺.

(О) 1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамин

ΝΗ₂

К раствору трет-бутил-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамата (45 мг, 0,13 ммоль) в МеОН (3 мл) добавляли конц. раствор НС1 (0,2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем концентрировали с получением неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии реакции без дополнительной очистки. МС (т/ζ): 239 [М+Н] .

(Ρ) 4-Амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Смесь 1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамина (31 мг, 0,13 ммоль) и 4-амино-6хлорпиримидин-5-карбонитрила (20 мг, 0,13 ммоль), ΏΙΡΕΑ (50 мг, 0,39 ммоль) в п-ВиОН (5 мл) перемешивали при 130°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂0:Ме0Н=100:0-0:100) с получением продукта (45 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества. МС (т/ζ): 357 [М+Н]⁺.

'И ЯМР (400 МГц, СО₃0О) δ: 8,055 (з, 1Н), 8,012 (з, 1Н), 7,881 (з, 1Н), 7,711 (й, 1=1,2 1Н), 7,6427,618 (т, 2Н), 7,494-7,441 (т, 3Н), 5,440-5,389 (т, 1Н), 1,401 (й, 1=6,8 Гц, 3Н).

Соединение 2.

4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил

Смесь 4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрила (35 мг, 0,1 ммоль) и НС8 (26 мг, 0,2 ммоль) в СНС1₃ (10 мл) перемешивали при 80°С в течение 6 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ/МеОН) с получением 15 мг целевого продукта. МС (ηι/ζ)=39'1 [М+Н]⁺.

'Н ЯМР (400 МГц, СО₃0О) δ: 8,032 (з, 1Н), 7,882 (з, 1Н), 7,715 (з, 1Н), 7,667-7,643 (т, 2Н), 7,4917,474 (т, 3Н), 5,445-5,391 (т, 1Н), 1,408 (й, 1=7,2 Гц, 3Н).

Соединения 3 и 4.

(К)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил и (8)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин5-карбонитрил

&4

Рацемическое соединение 2 разделяли с помощью хиральной ВЭЖХ с получением оптически чис тых энантиомеров соединения 3 и 4 (условия ВЭЖХ: колонка: Йа1се1 ΙΑ 4,6x250 мм; подвижная фаза: ЕЮН/0ЕА=100/0,10; скорость потока=1,0 мл/мин; детектор: ИУ 254 нм). Первый элюент (соединение 4, 8 изомер, Κΐ=6,833 мин) составлял 100% эи, МС (т/ζ): 391 [М+Н]⁺. Второй элюент (соединение 3, К изомер, Κΐ=12,51 мин) составлял 98,07% эи, МС (т/ζ): 391 [М+Н]⁺.

- 23 032643

Соединение 3:

¹Н ЯМР (400 МГц, СО₃0О) δ: 8,03 (₈, 1Н), 7,88 (₈, 1Н), 7,71 (₈, 1Н), 7,68-7,61 (т, 2Н), 7,51-7,44 (т, 3Н), 5,44-5,39 (т, 1Н), 1,40 (ά, 1=6,9 Гц, 3Н).

Соединение 4:

¹Н ЯМР (400 МГц, СО₃0О) δ: 8,04 (ά, 1=2,0 Гц, 1Н), 7,89 (ά, 1=1,7 Гц, 1Н), 7,72 (8, 1Н), 7,69-7,64 (т, 2Н), 7,53-7,44 (т, 3Н), 5,48-5,37 (т, 1Н), 1,40 (ά, 1=6,9 Гц, 3Н).

Соединение 4.

(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил

(А) 3,6-Дихлор-Х-метокси-Х-метилпиридазин-4-карбоксамид.

К раствору 3,6-дихлорпиридазин-4-карбоновой кислоты (80,0 г, 0,41 моль), N,0диметилгидроксиламина гидрохлорида (58,0 г, 0,59 моль) и НВТи (302,0 г, 0,80 моль) в ДХМ (1,0 л) добавляли Εί3Ν (160,0 г, 1,58 моль) при 0 С. Реакционную смесь перемешивали при 0 С в течение дополнительного 1 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 7 ч. Смесь промывали водой (200 млх3). Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (РЕ:ЕА=5:1-1:2) с получением 60 г 3,6-дихлор-№метокси-№метилпиридазин-4карбоксамида. МС (ηι/ζ)=236 [М+Н]⁺.

(B) 3-Хлор-№метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-№метилпиридазин-4-карбоксамид.

Смесь №метокси-№метилпиридазин-4-карбоксамида (20,0 г, 0,08 моль) и (4метоксифенил)метанамина (34,5 г, 0,25 моль) в ЭМА (200 мл) перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Смесь выливали в воду (200 мл), экстрагировали ЕА (200 мл). Органическую фазу промывали насыщ. раствором №С1 (200 млх3). Органический слой концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:ЕА=5:1-1:5) с получением 30 г неочищенного продукта. МС (т ζ) 337 [М+Н]⁺, 339 [М+2+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СОС1₃) δ: 7,30-7,16 (т, 2Н), 6,89-6,76 (т, 2Н), 6,59 (8, 1Н), 5,46 (8, 1Н), 4,50 (ά, 1=5,6 Гц, 2Н), 3,76 (8, 3Н), 3,43 (8, 3Н), 3,30 (8, 3Н).

(C) №Метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-№метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамид.

К раствору 3-хлор-№метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-№метилпиридазин-4-карбоксамида (30,0 г, 0,09 моль) и фенилборной кислоты (16,0 г, 0,13 моль) в диоксане (300 мл) и воды (30 мл) добавляли Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (5,1 г, 4,45 ммоль) и КОАс (26,0 г, 0,26 моль) в атмосфере азота. Реакционную смесь переме- 24 032643 шивали при 110°С в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду (300 мл), экстрагировали ЕА (500 млх3). Органический слой концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 40 г целевого продукта. МС (т/х)=379 [М+Н]⁺.

(Ό) 6-Амино-Н-метокси-Ы-метил-3 -фенилпиридазин-4-карбоксамид.

Смесь №метокси-6-((4-метоксибензил)амиио)-Н-метил-3-феиилпиридазин-4-карбоксамида (40,0 г, 0,10 моль) в СЕ₃СООН (150 мл) перемешивали при 80°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток растворяли в ДХМ (200 мл), промывали насыщ. раствором №1НСО₃. Водный слой экстрагировали (ДХМ+30% МеОН). Объединенный органический слой сушили над безводным №₂8О₄, концентрировали в вакууме с получением 30 г неочищенного продукта. МС (т/х)=259 [М+Н]⁺.

(Ε) 6-(2,5-Диметил-1Н-пиррол-1-ил)-Н-метокси-М-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамид.

К раствору 6-амино-№метокси-№метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида (30,0 г, 0,11 моль) и гексан-2,5-дион (66,0 г, 0,58 моль) в толуоле (300 мл) добавляли ТкОН (2,0 г, 0,01 моль). Смесь перемешивали при 120°С в течение ночи с ловушкой Дина-Старка и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ΡΕ:ΕΑ=5:1-2:1) с получением 14 г продукта. МС (т/х)=337 [М+Н]⁺.

(Е) 1-(6-(2,5-Диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этанон.

К раствору 6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-№метокси-№метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида (14,0 г, 0,04 моль) в сухом ТНЕ (150 мл) добавляли МеМдВг (27,7 мл, 0,082 моль) при -5~0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0~10°С в течение дополнительных 2 ч. Смесь выливали в насыщ. раствор N440. водный слой экстрагировали ЕА (100 млх3). Органический слой концентрировали в вакууме с получением 15 г неочищенного продукта. МС (т/х)=292 [М+Н]⁺.

(С) (Κ,Ε)-N-(1-(6-(2,5-Диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этилиден)-2-метилпропан2-сульфинамид.

К раствору 1-(6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этанона (15,0 г, 0,05 моль) и (К)-2-метилпропан-2-сульфинамида (9,3 г, 0,08 моль) в сухом ТНЕ (150 мл) добавляли Τί(ΌΕΐ)₄ (23,0 г, 0,10 моль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 80°С в течение ночи, и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду (100 мл), осадок фильтровали и фильтрат экстрагировали ЕА. Органический слой концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ΡΕ:ΕΑ=5:1-1:1) с получением 12 г продукта. МС (т/х)=395 [М+Н]⁺.

(H) (К)-Н-((8)-1-(6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамид.

К раствору (Κ,Ε)-N-(1-(6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этилиден)-2метилпропан-2-сульфинамида (12,0 г, 0,03 моль) в сухом ТНЕ (150 мл) добавляли Ь1В(С₄Н₇)₃ (6,08 мл, 0,06 моль) при -78°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительных 2 ч. Смесь выливали в насыщ. раствор ΝΉ₄Ο, водный слой экстрагировали ЕА (100 млх3), органический слой концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ΡΕ:ΕΑ=5:1-1:1) с получением 10 г указанного в заголовке продукта. МС (т/х)=397 [М+Н]⁺.

(I) (К.)-Ы-((8)-1-(6-Амино-3 -фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.

К раствору (К.)-М-((8)-1-(6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2метилпропан-2-сульфинамида (8,0 г, 0,02 моль) в ΕΐОН (40 мл) и воды (40 мл) добавляли НН₇ОН-НС.’1 (13,8 г, 0,20 моль) и №1НСО₃, (13,5 г, 0,16 моль). Смесь перемешивали при 90°С в течение ночи, и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь обрабатывали водн. NН₃·Н₂О до рН 8~9. Смесь концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О +0,5% НН₃-Н₇О) с получением 4,2 г указанного в заголовке продукта. МС (т/х)=319 [М+Н]⁺.

(1) (К.)-2-Метил-Н-((8)-1-(6-фенилимидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)пропан-2-сульфинамид.

К раствору (К.)-Н-((8)-1-(6-амино-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (4,2 г, 0,013 моль) в ΕΐОН (50 мл) добавляли 2-хлорацетальдегид (5,15 г, 0,065 моль) и №1НСО₃ (2,1 г, 0,026 моль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь выливали в воду (50 мл), водные слои экстрагировали ДХМ (50 млх3). Объединенный органический слой концентрировали в вакууме с получением 6,5 г неочищенного продукта. МС (т/х)=343 [М+Н]⁺.

(К) (8)-1 -(6-Фенилимидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-7 -ил)этанамин

νη₂

К раствору (К.)-2-метил-Н-((8)-1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)пропан-2сульфинамида (6,5 г, 0,019 моль) в ЕА (20 мл) добавляли раствор НС1 в ЕА (20 мл, 2,44 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем смесь концентрировали в вакууме

- 25 032643 и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О+0,5% ЫН3-Н2О) с получением 4,2 г неочищенного продукта. МС (т//)=239 [М+Н]⁺.

(Г) (8)-4-Амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

К раствору (8)-1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамина (3,8 г, 0,016 моль) и 4-амино-6хлорпиримидин-5-карбонитрила (3,7 г, 0,024 моль) в п-ВиОН (40 мл) добавляли ^ΣΡΕА (6,1 г, 0,048 моль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О+0,5% ЫН₃-Н₂О) с получением 2,6 г указанного в заголовке продукта. МС (т^)=357 [М+Н]⁺.

(М) (8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

Смесь (8)-4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрила (4 г, 0,011 моль) и ЫС8 (2,3 г, 0,017 моль) в СНС1₃ (40 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ/МеОН) с получением 1,8 г целевого продукта. МС (т/г)=391 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СВС1₃) δ: 8,06 (8, 1Н), 7,95 (δ, 1Н), 7,74-7,63 (т, 3Н), 7,56-7,47 (т, 3Н), 5,46 (б, 1=5,9 Гц, 1Н), 5,43-5,37 (т, 1Н), 5,36 (8, 2Н), 1,38 (б, 1=6,8 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали согласно процедурам для соединения 4 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны ΡО8ΣΤА.

Соединени е	Структура	МС(М+Н)+	ЯМР	Промежуточное соединение
	с\ Ν Г)		1Η ЯМР (400 МГц, СОС1з) б: 8,29 (5, 1Н), 8,01 (5, 1Н),	N X)
9	ηΥί Υ ν-ΝΗ	415	7,78 - 7,76 (т, 2Н), 7,66 (5, 1Н), 7,62 (5, 1Н), 7,51 - 7,49 (т, ЗН), 5,85 (б, Л = 5,8 Гц, 1Н), 5,56 - 5,46 (т, 1Н), 1,43 (б, Л =6,8 Гц, ЗН).	(У| νη2
	ЬУ		1Н ЯМР (400 МГц, СОзОО) б: 8,16 (5, 1Н), 8,09 (5,	_ Ν Γ}
11	ΗΝ___Ν	391	2Н), 7,78 - 7,77 (т, 2Н), 7,71 (5, 1Н), 7,55 - 7,41 (т,
	V- ΥΝΗ		ЗН), 5,59 - 5,45 (т, 1Н), 1,46 (б, Л = 6,8 Гц, ЗН).	νη2
			1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66) б: 8,31 (5, 1Н), 7,93 (5,
	А г в ΥχΥ		1Н), 7,79 - 7,63 (т, 2Н), 7,60 - 7,45 (т, 2Н), 7,30 (ΐ,	/Ν. гз7| νη2
12	ΗΝ Ν Λ1	409	Э= 7,4 Гц, 2Н), 7,13 (5, 2Н), 5,09 (5, 1Н), 1,45 (б, Л = 6,8 Гц, ЗН).
	νη2			МС (Μ+Η)+ : 257
			1Н ЯМР (400 МГц, СОзОО) б: 8,16 (5, 1Н), 8,04 (5,
	С1		2Н), 7,75 (5, 1Н), 7,60 (5, 1Н), 7,47-7,38 (т, 1Н), 7,19	/Υν υ ν
13	ΗΝ Ν £	409	(5, 2Н), 5,32 (Ьг, 1Н), 1,60 (б, Л = 6,9 Гц, ЗН).	Ν'^4χ<0''' νη2 МС (Μ+Η)+ : 257

- 26 032643

15	С1 ΐΑ**	ΗΝ υΑ Ν(Α^Ν νη2	409	1Η ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ: 8,30 (5, 1 Η), 7,92 (5, 1 Η), 7,86 (5, 1 Η), 7,71 (ό, Λ = 7,4 Гц, 1 Η), 7,57 - 7,44 (т, 3Η), 7,31 (όό, 2= 8,7 Гц, 2,0 Гц, 1 Η), 7,22 (5, 2Η), 5,18 (ΐ, ϋ= 7,0 Гц, 1Η), 1,39 (ό, ϋ= 6,9 Гц, ЗН).	Аг	Α Υ νη2 )+ : 257
// МС	; (М+н
	С1 \ N			1Η ЯМР (400 МГц, ДМС0-с1б) δ: 8,28 (5, 2Н), 8,09 (ό,		.Ν.	Пр
	ΛΝ' *				/Τ'	*Ν ΑΑ
16		£ ,Λ	409	ΰ = 6,8 Гц, 2Н), 7,88 (5, 1Н), 7,76 - 7,48 (т, 4Н), 7,36
(5?|		(5	Υ
		ΗΝγΑ Νν Ανη		(όό, ΰ = 9,0 Гц, 6,6 Гц, 1Н), 5,30 (5, 1Н), 1,40 (ό, ΰ = 5,7 Гц, ЗН).	νη2 МС (Μ+Η)+ : 257
17	С1		390	1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-с1б) δ: 8,30 (5, 1Н), 8,21 (5, 1Н), 8,02 (5, 1Н), 7,72 - 7,70 (т, ЗН), 7,50 - 7,48 (т,	Α	-Νχ Ά	ΑΤι Α^Α
ΗΝ Ν Α <_ΝΗ	ЗН), 7,30 (5, 1Н), 6,75 (ό, 2 = 6,8 Гц, 1Н), 5,35 - 5,21 (т, 1Н), 1,43 (ό, 2= 6,8 Гц, ЗН).	Ν'		А νη2
	Ьо	η		1Н ЯМР (400 МГц, СОзОО) δ: 7,98 (з, 1Н), 7,89 (з,	\		ΑΥι
			1Н), 7,66 - 7,64 (т, 2Н), 7,53 - 7,44 (т, 4Н), 5,45 -			Α-Α
22		ΗΝ___Ν.	371	5,40 (т, 1Н), 2,53 (з, ЗН), 1,40 (ό, 2= 6,9 Гц, ЗН).
		νη2					νη2
	V N			1Н ЯМР (400 МГц, СОзОО) δ: 8,04 (з, 1Н), 8,00 (з,			ΑΥι
	А У Д	ΑΑ>Α		1Н), 7,84 (з, 1Н), 7,78 - 7,71 (т, 2Н), 7,50 - 7,42 (т,	λ	-ν'Α	Α^Α
23		ΗΝ Ν	371	4Н), 5,52 - 5,47 (т, 1Н), 2,53 (з, ЗН), 1,42 (ό, 2 = 6,8
		+-ΝΗ		Гц, ЗН).			νη2
							ΑΑ
	. _ν. и		1Н ЯМР (400 МГц, СОС1з) δ 8,02 (з, 1Н), 7,89 (з, 1Н),		,ν. А у
58	-у \	Α++ ΗβΎΝΊ 0»% νη2	371	7,71 (з, 1Н), 7,61 - 7,60 (т, 2Н), 7,52 - 7,47 (т, ЗН),		У 1
			5,57 - 5,56 (т, 1Н), 5,53 (з, 2Н), 5,45 - 5,32 (т, 1Н), 2,48 (з, ЗН), 1,38 (ό, ΰ = 6,4 Гц, ЗН).			νη2
				МС (Μ+Η)+ : 253
	οι γ |) Υ,.,Ν.		1Н ЯМР (400 МГц, СОС1з) δ 8,03 (з, 1Н), 7,83 (з, 1Н),		ΥΥ _ .Ν. Α
	_{ N	Υ				// Ν
59		ΥλΙΑ	405	7,66 - 7,64 (т, 2Н), 7,51 - 7,48 (т, ЗН), 5,43 (ό, ΰ =		Α	Α^^
		ΗΝ^-Ν. Ύ		6,1 Ηζ, 1 Η), 5,40 - 5,36 (т, 1 Η), 5,33 (з, 2Η), 2,48 (з,			νη2
		Νθγ		ЗН), 1,36 (0,6 = 6,7 Гц, ЗН).
		νη2

Соединения 5 и 6.

(К)-4-Амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5карбонитрил и (8)-4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5карбонитрил

- 27 032643

(А) 6-Амино-3-хлор-Ы-метокси-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамид.

Раствор 3-хлор-Ы-метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамида (Соединение 4 (В), 7,4 г, 21,97 ммоль) в ТЕА (20 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток выливали в насыщ. раствор ЫаНСО₃. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, экстрагировали ЕА и органический слой затем концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 3,84 г 6-амино-3-хлор-Ы-метокси-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамида. МС (шА)=217 [М+Н]⁺, 219 [М+2+Н]⁺.

(B) 3-Хлор-6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-Ы-метокси-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамид.

К раствору 6-амино-3-хлор-Ы-метокси-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамида (3,84 г, 17,73 ммоль) и гексан-2,5-диона (8,45 г, 65,91 ммоль) в толуоле (100 мл) добавляли ТзОН (2,0 г, 0,01 моль). Смесь перемешивали при 120°С в течение ночи с ловушкой Дина-Старка и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэшхроматографии с получением 4,2 г указанного в заголовке продукта. МС (шА)=295 [М+Н]⁺, 297 [М+2+Н]⁺.

(C) 6-(2,5-Диметил-1Н-пиррол-1-ил)-Ы-метокси-Ы-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамид.

К раствору 3-хлор-6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-Ы-метокси-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамида (4,2 г, 14,25 ммоль) и фенилборной кислоты (2,61 г, 21,37 ммоль) в диоксане (80 мл) и воды (8 мл) добавляли Рб(РРй₃)₄ и КОАс в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду (300 мл), экстрагировали ЕА (100 млх3). Объединенный органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 4,3 г продукта. МС (шА)=337 [М+Н]⁺.

(Ό) 6-(2,5-Диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-карбальдегид.

К раствору 6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-Ы-метокси-Ы-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида

- 28 032643 (4,3 г, 12,78 ммоль) в сухом ТНЕ (30 мл) добавляли ΌΙΒΑΕ-Н (19 мл, 19,17 ммоль) в атмосфере азота при -20°С. Реакционную смесь перемешивали при -20°С в течение дополнительного 1 ч, и затем выливали в воду (300 мл), экстрагировали ЕА. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 0,95 г указанного в заголовке продукта. МС (μ/ζ)=310 [М+МеОН+Н]⁺.

(Е) (К.,Е)-^((6-(2,5-Диметил-1 Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2сульфинамид.

К раствору 6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-карбальдегида (0,95 г, 3,43 ммоль) и (Е)-2-метилпропан-2-сульфинамида (0,62 г, 5,14 ммоль) в сухом ТНЕ (20 мл) добавляли Т1(ОЕ1)₄ (1,56 г, 6,85 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду (5 мл), осадок фильтровали и фильтрат экстрагировали ЕА. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 1,2 г указанного в заголовке продукта. МС (т/ζ) 381 [М+Н]⁺.

(Е) (К.)-№((8)-1-(6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан2-сульфинамид и (К.)-№((К.)-1-(6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2метилпропан-2-сульфинамид.

К раствору (К.,Е)-№((6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)метилен)-2метилпропан-2-сульфинамида (1,2 г, 3,15 ммоль) в сухом ТНЕ (20 мл) добавляли Е1М§Вг (1,58 мл, 4,73 ммоль) при -78°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Смесь выливали в воду (5 мл), экстрагировали ЕА. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (РЕ:ЕА=1:0-0:1) с получением двух продуктов (первый элюент составлял 0,47 г промежуточного соединения 1-7, второй элюент ΐ составлял 0,18 г промежуточного соединения 1-8), где один представлял собой (Ε)-Ν-((8)-1-(6-(2,5диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид, и другой представлял собой (К.)-№((К.)-1-(6-(2,5-диметил-1Н-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2метилпропан-2-сульфинамид. МС (т/ζ) 411 [М+Н]⁺.

(С) (К.)^-((К.)-1-(6-Амино-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид и (Ε)-Ν((8)-1-(6-амино-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.

К раствору промежуточного соединения 1-8, полученного на последней стадии реакции (0,18 г, 0,04 ммоль), в Е1ОН (2,5 мл) и воды (2,5 мл) добавляли NН2ОН·НС1 (0,46 г, 6,58 ммоль) и Е1^ (0,44 г, 4,38 ммоль). Смесь перемешивали при 90°С в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. В смесь добавляли водн. NНз·Н2О до рН 8-9, и затем смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О+0,5% Ν^Ή^) с получением 0,08 г промежуточного соединения 1-10. МС (т/г)=333 [М+Н]⁺. Промежуточное соединение 1-9 получали с использованием промежуточного соединения 1-7 в тех же условиях.

(H) (К.)-2-Метил-^((К.)-1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)пропан-2-сульфинамид и (К.)-2-метил-№((8)-1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)пропан-2-сульфинамид.

К раствору промежуточного соединения 1-10 (80 мг, 0,24 ммоль) в Е1ОН (5 мл) добавляли 2хлорацетальдегид (0,32 мл, 1,92 ммоль) и Νηΐ 1СО₃ (40 мг, 0,48 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь выливали в воду (10 мл), водные слои экстрагировали ЕА (20 млх3). Объединенный органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О+0,5% КН₃-Н₂О) с получением 67 мг промежуточного соединения 1-12. МС (т/г)=357 [М+Н]⁺. Промежуточное соединение 1-11 получали с использованием промежуточного соединения 1-9 в тех же условиях.

(I) (Е)-1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропан-1-амин и (8)-1-(6-фенилимидазо[1,2Ь]пиридазин-7-ил)пропан-1 -амин

νη₂ νη₂

К раствору промежуточного соединения 1-12 (67 мг, 0,19 ммоль) в ЕА (3 мл) добавляли НС1 раствор в ЕА (5 Ν, 1 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, и затем смесь концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в МеОН и затем подщелачивали водн. Ν^Ή^. Избыточный растворитель выпаривали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О+0,5% Ν^Ή^) с получением 30 мг промежуточного соединения 1-14. МС (т/г)=253 [М+Н]⁺. Промежуточное соединение 1-13 получали с использованием промежуточного соединения 1-11 в тех же условиях.

(1) (Е)-4-Амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5карбонитрил и (8)-4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5

- 29 032643 карбонитрил.

К раствору промежуточного соединения Ι-14 (30 мг, 0,12 ммоль) и 4-амино-6-хлорпиримидин-5карбонитрила (27 мг, 0,19 ммоль) в п-ВиОН (3 мл) добавляли ΏΙΡΕΑ (31 мг, 0,24 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О+0,5% ΝΗ₃·Η₂Ο) с получением 30 мг промежуточного соединения Ι-16. МС (т//)=371 [М+Н]⁺. Промежуточное соединение Ι-15 получали с использованием промежуточного соединения Ι-13 в тех же условиях.

(К) (К)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5карбонитрил и (8)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)пропил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Раствор промежуточного соединения Ι-16 (30 мг, 0,08 ммоль) и NС8 (16 мг, 0,12 ммоль) в СНС1₃ (4 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэшхроматографии (МеОН/Н₂О+0,5% Ν^Ή^) с получением 24 мг одного целевого соединения 6. МС (ш//)=405 [М+Н]⁺. Другое указанное в заголовке соединение 5 получали с использованием промежуточного соединения Ι-15 в тех же условиях.

Соединение 5:

¹Н ЯМР (400 МГц, СП₃ОП) δ 8,03 (8, 1Н), 7,92 (δ, 1Н), 7,73-7,69 (т, 3Н), 7,53-7,50 (т, 3Н), 5,29-5,25 (т, 1Н), 1,83-1,71 (т, 2Н), 0,80 (1, 1=6,6 Гц, 3Н).

Соединение 6:

²Н ЯМР (400 МГц, СП₃ОП) δ 8,04 (8, 1Н), 7,93 (8, 1Н), 7,72 (άά, 1=7,2 Гц, 2,4 Гц, 3Н), 7,56-7,51 (т, 3Н), 5,27 (άά, 1=9,4 Гц, 5,0 Гц, 1Н), 1,76 (ςάά, 1=12,4 Гц, 8,3 Гц, 6,1 Гц, 2Н), 0,81 (1, 1=7,3 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали согласно процедурам для соединения 5 и 6 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны РО8ГГА. В частности, соединение 14 и 26 получали согласно процедурам для соединения 5; соединения 18, 19, 24 и 25 получали согласно процедурам для соединения 6.

Соединени е	Структура	МС(М+Н)+	ЯМР	Промежуточное соединение
	С1				1Н ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) б: 8,19(5, 1Н), 8,10(5, 1Н),
	г				8,05 (5, 1Н), 7,83 (6, 0= 3,6 Гц, 2Н), 7,70 (5, 1Н), 7,57
14	Ν'		I * хиральное	405	-7,50 (т,ЗН), 5,51-5,34 (т, 1Н), 1,86-1,71 (т, 2Н),	гзЛ
		ΕΙΝ Ν		ΝΗ,
			I		0,86 (ΐ, Λ =7,3 Гц, ЗН).
						МС (М+Н)+	: 253
			+-ΝΗ			и
	С1				1Н ЯМР (400 МГц, СОС1з) б: 8,32 (5, 1Н), 8,02 (5, 1Н),
	у				7,93 (5, 1Н), 7,89 - 7,79 (т, 2Н), 7,65 (6,0=1,4 Гц,	N	О
			I хиральное
18	Ν:			405	1Н), 7,58 - 7,47 (т, 4Н), 6,53 - 6,41 (т, 1Н), 5,48 -
		ΗΝ αΝ	5,37 (т, 1Н), 1,68- 1,59 (т, 2Н), 0,85 (5, ЗН).	N νη2
					МС (М+Н)+	: 253
	С1	р.	X)		1Н ЯМР (400 МГц, СОС1з) б 7,98 (5, 1Н), 7,93 (5, 1Н),
	Л Ί	хиральное		7,73 (5, 1Н), 7,58 - 7,46 (т, 2Н), 7,32 - 7,26 (т, 1Н),	Е	Υ^ϊι
19	Ν'	ί	ΗΝ ονΧν	423	7,22-7,18(т, 1Н), 5,50-5,41 (т, 1Н), 5,10-4,98 (т, 1Н), 1,95-1,84 (т, 1Н), 1,83 - 1,75 (т, 1Н), 0,92 (ΐ, 0	/ΎΧ
			νη2		= 7,3 Гц, ЗН).		νη2

- 30 032643

24	С| ΓΪΙ Ν ХИ Р 3 Л Ь Н ° θ	423	1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ: 8,07 (5, 1 Η), 7,92 (5, 1Η), 7,75 (5, 1 Η), 7,60 - 7,49 (т, ЗН), 7,26 (ό, = 3,0 Гц,
	ΗΝγΝ^ νη2		1 Η), 5,25 (ό, = 4,2 Гц, 1 Η), 1,88-1,72 (т, 2Η), 0,84 (ΐ, Д= 7,3 Гц, ЗН).	νη2
			МС (М+Н)+: 271
	с ж
			1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,14 (5, 1Н), 8,03 (5, 1Н),	___ΧΝ
25	\ 1 1 хиральное	423	8,00 (5, 1Н), 7,75 (5, 1Н), 7,68 (5, 1Н), 7,56 - 7,47 (т,	сзД
	1Н), 7,31 - 7,16 (т, 2Н), 5,28 - 5,15 (т, 1Н), 2,01 -	νη2
	ΝΥ		1,88 (т, 2Н), 0,95 (ΐ, ΰ = 7,3 Гц, ЗН).	МС (Μ+Η)+: 271
	Έ-νη			и
	θ' ж
26	\ 1 1 хиральное	423	1Н ЯМР (400 МГц, СО3СЮ) δ 8,14 (5, 1Н), 8,04 (5, 1Н), 8,02 (5, 1Н), 7,75 (5, 1Н), 7,67 (5, 1Н), 7,54 - 7,46 (т,
	ΗΝ^Ν		1Н), 7,32 - 7,14 (т, 2Н), 5,31 - 5,09 (т, 1Н), 2,01 -	νη2
	Ν0Ν		1,90 (т, 2Н), 0,95 (ΐ, ΰ = 7,3 Гц, ЗН).
	%νη			МС (Μ+Η)+: 271

Время удерживания (Κΐ) указанных выше соединений тестировали с помощью хиральной ВЭЖХ. Условия Κ-ВЭЖХ были следующие:

Колонка: ба1се1 ГА. 4,6x250 мм; Подвижная фаза: ΕΐΘΗ/ΏΕΆ=100/0,10; Скорость потока=1,0 мл/мин; Детектор: ИУ 254 нм.

Κΐ соединения 5 составляет 10,774 мин, Κΐ соединения 6 составляет 5,032 мин, Κΐ соединения 14 составляет 5,245 мин, Κΐ соединения 18 составляет 7,030 мин, Κΐ соединения 19 составляет 6,925 мин, Κΐ соединения 24 составляет 4,991 мин, Κΐ соединения 25 составляет 20,884 мин, Κΐ соединения 26 представляет собой 14,505 мин.

Соединения 7 и 8.

(Κ)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин5-карбонитрил и (8)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил

(А) 3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-карбальдегид.

- 31 032643

К раствору 3-хлор-К-метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-К-метилпиридазин-4-карбоксамида (10 г, 29,75 ммоль) в сухом ТИР (120 мл) добавляли гидрид диизобутилалюминия (89 мл, 89,26 ммоль) по каплям при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь гасили насыщ. раствором КН₄С1, фильтровали, фильтрат экстрагировали ЕА (50 млх3). Объединенный органический слой сушили над безводным Ка₂8О₄, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (РЕ:ЕА=4:6) с получением 2,4 г целевого продукта. МС (т//)=310 [М+Н]⁺, 312 [М+2+Н]⁺.

(B) (К,Е)-К-((3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2сульфинамид.

К раствору 3-хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-карбальдегида (2,4 г, 8,66 ммоль) и (К)2-метилпропан-2-сульфинамида (1,6 г, 13 ммоль) в сухом ТНР (30 мл) добавляли Т1(ОЕ1)₄ (4 г, 17,32 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду (20 мл), фильтровали и фильтрат экстрагировали ЕА (30 млх3). Объединенный органический слой сушили над безводным Ка₂8О₄, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (РЕ:ЕА=4:6) с получением 1,4 г указанного в заголовке продукта. МС (т/г)=381 [М+Н]⁺, 383 [М+2+Н]⁺.

(C) (К)-К-(1-(3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамид.

К раствору (К,Е)-К-((3-хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан2-сульфинамида (1,4 г, 3,68 ммоль) в сухом ТНР (20 мл) добавляли МеМдВг (3,1 мл, 9,21 ммоль) при -5-0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0~10°С в течение 2 ч. Смесь выливали в насыщ. раствор КН₄С1, экстрагировали ЕА (20 млх3). Органический слой концентрировали в вакууме с получением 1 г неочищенного указанного в заголовке продукта. МС (т/г)=397 [М+Н]⁺, 399 [М+2+Н]⁺.

(Ό) 5-(1-Аминоэтил)-6-хлорпиридазин-3-амин.

Раствор (К)-К-(1-(3-хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамида (1 г, 2,52 ммоль) в ТРА (5 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 ч. Затем смесь концентрировали в вакууме и остаток разделяли между насыщ. раствором КаНСОз и ЕА. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали ЕА (10 млх4). Объединенный органический слой сушили над безводным Ка₂8О₄, концентрировали с получением 308 мг неочищенного указанного в заголовке продукта. МС (т/г)=173 [М+Н]⁺.

(Е) трет-Бутил-( 1 -(6-амино-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)карбамат.

Раствор 5-(1-аминоэтил)-6-хлорпиридазин-3-амина (308 мг, 1,79 ммоль), (Вос)₂О (586 мг, 2,68 ммоль) и Е1₃К(543 мг, 5,37 ммоль) в ДХМ (5 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь концентрировали при 20°С и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН: Н₂О=4:6) с получением 150 мг указанного в заголовке продукта. МС (т/г)=273 [М+Н]⁺, 275 [М+2+Н]⁺.

(Р) трет-Бутил-(1-(6-хлоримидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамат.

К раствору трет-бутил-(1-(6-амино-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)карбамата (150 мг, 0,55 ммоль) в ЕЮН (5 мл) добавляли 2-хлорацетальдегид (0,245 мл, 1,38 ммоль) и КаНСО₃ (185 мг, 2,2 ммоль). Затем смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь охлаждали, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:МеОН=4:96) с получением 76 мг указанного в заголовке продукта. МС (т/г)=297 [М+Н]⁺, 299 [М+2+Н]⁺.

(О) трет-Бутил-( 1 -(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамат.

К раствору трет-бутил-(1-(6-хлоримидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамата (56 мг, 0,19 ммоль) и 2-(дибутил(пентил)станнил)пиридина (140 мг, 0,38 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли Рд2(дЬа)3 (17 мг, 0,019 тммоль), Х-рРоз(18 мг, 0,038 ммоль) и Ка₂СО₃ (61 мг, 0,57 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение 4 ч. Затем смесь охлаждали, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=55:45) с получением 20 мг указанного в заголовке продукта. МС (т/г)=340 [М+Н]⁺.

(II) 1-(6-(Пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамин ^ΝΗ2 и

(М νη₂

К раствору трет-бутил-(1-(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамата (20 мг, 0,059 ммоль) в ЕА/МеОН (20 мл) добавляли 4К НС1 раствор в ЕА (0,059 мл, 0,236 ммоль) при 0°С. Смесь нагревали до 40°С и перемешивали в течение дополнительных 0,5 ч. Затем смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О+0,5% \И3'Н2О) с

- 32 032643 получением 9 мг указанного в заголовке продукта. МС (т-ζ)=240 [М+Н]⁺.

(I) 4-Амино-6-((1-(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

К раствору 1-(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамина (9 мг, 0,037 ммоль) и 4амино-6-хлорпиримидин-5-карбонитрила (9 мг, 0,056 ммоль) в п-ВиОН (3 мл) добавляли ΌΦΕΑ (24 мг, 0,185 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=65:5 +0,5% Ν^Ή^) с получением 9 мг указанного в заголовке продукта. МС (т/ζ) 358 [М+Н]⁺.

(1) (К)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил и (8)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Раствор 4-амино-6-(( 1 -(6-(пиридин-2-ил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрила (9 мг, 0,025 ммоль) и NС8 (7 мг, 0,05 ммоль) в СНС1₃ (2 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью хиральной преп-ВЭЖХ (колонка: Оа1се1 !А: 20*250 мм; подвижная фаза: 100% ЕЮН+0,1% Г)ЕА; скорость потока: 8 мл/мин; длина волны детектирования: иУ 254 нм;) с получением 1,8 мг соединения 7 (К!=25,2 мин) и 2 мг соединения 8 (К1 29,1 мин).

Соединение 7:

МС (ι/ζ)=392 [М+Н]⁺, ¹Н ЯМР (400 МГц, СВ₃ОВ) δ 8,70 (б, 1=4,9 Гц, 1Н), 8,16 (§, 1Н), 8,01 (!б, 1=7,8 Гц, 1,8 Гц, 1Н), 7,91 (б, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,85 (б, 1=1,9 Гц, 1Н), 7,79 (§, 1Н), 7,53-7,52 (т, 1Н), 5,76 (ς, 1=7,1 Гц, 1Н), 1,51 (б, 1=7,0 Гц, 3Н).

Соединение 8:

МС (ι/ζ)=392 [М+Н]⁺, ¹Н ЯМР (400 МГц, СВ₃ОВ) δ 8,70 (ббб, 1=4,9 Гц, 1,7 Гц, 0,9 Гц, 1Н), 8,16 (б, 1=0,7 Гц, 1Н), 8,01 (!б, 1=7,7 Гц, 1,8 Гц, 1Н), 7,91 (б!, 1=7,8 Гц, 1,1 Гц, 1Н), 7,84 (§, 1Н), 7,79 (§, 1Н), 7,54-7,50 (т, 1Н), 5,76 (ς, 1=7,0 Гц,1 Н), 1,51 (б, 1=7,0 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали согласно процедурам для соединения 7 и 8 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны РО8!ТА.

Соединение	Структура	МС (Μ+Η)+	ЯМР
28	С1 иуМ \ хиральное ΗΝ νο γ νη2	406	1Η ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 8,71 (0,1 = 4,8, 1 Η), 8,33 (5, 1Η), 8,02 (1,1 = 7,7, 1 Η), 7,92 (5, 1 Η), 7,87 (ΐ, 1 = 6,9, 2Η), 7,72 (5, 1 Η), 7,60-7,52 (т, 1Η), 7,15 (δ, 2Η), 5,42 -5,33 (т, 1Η), 1,87- 1,81 (т, 2Η), 0,84 (ΐ, ΰ = 7,3, 3Η).
29	С1 Еы-иуМ \ Э Д хиральное ΗΝ Ν^ νΑΝ νη2	406	1Η ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 8,71 (сЦ ΰ = 4,9, 0,9, 1Η), 8,33 (δ, 1Η), 8,04-8,01 (т, 1Η), 7,92 (δ, 1 Η), 7,89-7,85 (т, 2Η), 7,72 (δ, 1Η), 7,57-7,54 (т, 1Η), 7,15 (δ, 2Η), 5,40-5,34 (т, 1Η), 1,90 - 1,78 (т, 2Η), 0,84 (ΐ, ΰ = 7,3, ЗН).

К! соединения 28 составляло 9,443 мин. К! соединения 29 составляло 11,080 мин. Указанные два соединения были разделены в соответствии с условиями процедуры (1) для соединения 7 и 8.

Соединение 20 (8)-9-(1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-9Н-пурин-6-амин

- 33 032643

(A) (8)-6-Хлор-^-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4,5-диамин.

Указанное в заголовке соединение получали согласно процедурам для соединения 4(1,). МС (ш/7)=366 [М+Н]⁺.

(B) (8)-6-Хлор-9-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-9Н-пурин.

Раствор (8)-6-хлор-^-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4,5-диамина (59 мг, 0,16 ммоль) и триэтоксиметана (0,5 мл) в ЕЮН (5 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 30 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН/Н₂О +0,5% ΝΗ₃·Η₂Ο) с получением 42 мг указанного в заголовке продукта. МС (т/ζ) 376 [М+Н]⁺.

(C) (8)-9-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-9Н-пурин-6-амин.

Раствор (8)-6-хлор-9-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-9Н-пурина (42 мг, 0,11 ммоль) в ΝΗ₃·Η₂Ο (2 мл) подвергали реакции в микроволновой печи при 110°С в течение 30 мин. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 26 мг указанного в заголовке продукта. МС (т/г)=357 [М+Н]⁺.

(Ό) (8)-9-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-9Н-пурин-6-амин.

Указанное в заголовке соединение получали согласно процедурам для соединения 4 (М). МС (т/г)=391 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 8,24 (§, 1Η), 7,96 (§, 1Η), 7,93 (4, >5,2 Гц, 2Η), 7,45-7,35 (т, 5Η), 7,12 (§, 2Η), 5,79 (ц, 1=6,9 Гц, 1Η), 1,81 (4, 1=7,0 Гц, 3Η).

Соединение 21.

(8)-^-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(2Н-тетразол-5-ил)пиримидин-4,6диамин

(A) (8)-Х⁴-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(2Н-тетразол-5-ил)пиримидин-4,6диамин.

Смесь соединения 4 (>) (150 мг, 0,42 ммоль), азида натрия (165 мг, 2,55 ммоль) и хлорида аммония (135 мг, 2,55 ммоль) в сухом ДМФА (4 мл) герметизировали в пробирке и подвергали реакции в микроволновой печи при 140°С в течение 40 мин. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 36 мг указанного в заголовке продукта. МС (т/ζ) 400 [М+Н]⁺.

(B) (8)-^-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(2Н-тетразол-5-ил)пиримидин4,6-диамин.

Указанное в заголовке соединение получали согласно процедурам для соединения 4 (М). МС (т/г)=434 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 8,13 (4, >6,4 Гц, 2Η), 7,90 (₈, 1Η), 7,67-7,62 (т, 2Η), 7,55-7,49 (т, 3Η), 5,39-5,23 (т, 1Η), 1,50 (4, 1=6,8 Гц, 3Η).

Соединение 27.

(8)-7-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-7Н-пирроло[2,3-4]пиримидин-4-амин

- 34 032643

(A) (8)-2-(4-Хлор-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-ил)этанол.

К раствору (8)-1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамина (соединение 4(К), 100 мг, 0,42 ммоль) и 2-(4,6-дихлорпиримидин-5-ил)этанола (122 мг, 0,63 ммоль) в п-ВиОН (5 мл) добавляли О!РЕА (109 мг, 0,84 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение ночи и затем перемешивали при комнатной температуре. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О+0,5% NΗ₃·Η₂Ο) с получением 142 мг продукта. МС (т^)=395 [М+Н]⁺.

(B) (8)-4-Хлор-7-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидин.

К раствору (8)-2-(4-хпор-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5ил)этанола (100 мг, 0,25 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли реагент Десса-Мартина (322 мг, 0,76 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч и затем выливали в насыщ. раствор №₂8₂О₃ (10 мл), экстрагировали ДХМ (30 мл). Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О+0,5% N11₃-1 ГО) с получением 55 мг продукта. МС (т^)=375 [М+Н]⁺.

(C) (8)-7-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-7Н-пирроло[2,3-с]пиримидин-4-амин.

Смесь (8)-4-хлор-7-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-7Н-пирроло[2,3-с(]пиримидина (55 мг, 0,15 ммоль) в растворе аммиака (3 мл) герметизировали в реакционной пробирке, облучали в микроволновом реакторе при 120°С в течение 30 мин, и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О+0,5% NΗ₃·Η₂Ο) с получением 35 мг продукта. МС (т^)=356 [М+Н]⁺.

(О) (8)-7-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидин-4-амин.

Указанное в заголовке соединение получали согласно процедурам для соединения 4 (М). МС (т/ζ) 390 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СО3ОО) δ 8,10 (§, 1Н), 7,99 (§, 1Н), 7,87 (§, 1Н), 7,79-7,78 (т, 1Н), 7,27 (§, 5Н), 6,98 (8, 1Н), 6,11-6,06 (т, 1Н), 1,76 (ά, 1=6,9 Гц, 4Н).

Соединение 30.

(8)-4-Амино-6-(( 1 -(3-хлор-6 -(3,5 -дифторфенил)имидазо [1,2-Ь] пиридазин-7 ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил

- 35 032643

(A) 3,6-Дихлор-Ы-метокси-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамид.

К смеси 3,6-дихлорпиридазин-4-карбоновой кислоты (100,0 г, 0,52 моль), Ы,Одиметилгидроксиламина гидрохлорида (60,6 г, 0,62 моль) и Е1)С1 (118,8 г, 0,62 моль) в ДХМ (800 мл) по каплям добавляли Ε13Ν (288 мл, 2,08 моль) при 0°С. Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО₃ (1 л) и насыщенным солевым раствором (1 л). Органический слой отделяли, сушили над безводным Ыа₂8О₄ и концентрировали с получением 99,7г неочищенного продукта. Выход: 81%. МС (μ/ζ)=236 [М+Н]⁺, 238 [М+2Н]⁺.

(B) 6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-хлор-Ы-метокси-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамид.

Раствор 3,6-дихлор-Ы-метокси-Ы-метилпиридазин-4-карбоксамида (100 г, 0,42 моль), НОВТ (68 г, 0,51 моль) и Εΐ₃Ν (149 г, 1,48 моль) в ОМА (800 мл) нагревали до 50°С. Через 2 ч ТСХ и ЖХ-МС показали, что исходное вещество было израсходовано. Затем добавляли Ы,Ы-Бис(4-метоксибензил)амин (163 г, 0,64 моль) и смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Затем смесь обрабатывали насыщенным солевым раствором (1 л) и экстрагировали ЕА (1 лх3). Объединенный органический слой сушили над безводным Ыа₂8О₄, концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:ЕА=3:1-1:1) с получением 75 г продукта. Выход: 40%. МС (μ/ζ)=457 [М+Н]⁺.

(C) 1-(6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этан-1-он.

К перемешиваемому раствору 6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-хлор-Ы-метокси-Ыметилпиридазин-4-карбоксамида (9 г, 19,73 ммоль) в сухом ТНР (100 мл) медленно добавляли МеМдВг (9,9 мл, 29,6 ммоль) при 5~10°С в защитной атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь выливали в насыщ. водный раствор ХН4С1 (30 мл), водные слои экстрагировали ЕА (100 млх2), органический слой сушили над безводным Ыа₂8О₄ и концентрировали в вакууме с получением 7,7 г неочищенного продукта, который получали для следующей стадии без очистки. МС (μ/ζ)=412 [М+Н]⁺.

(Ό) (К,Е)-Ы-(1-(6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этилиден)-2-метилпропан- 36 032643

2-сульфинамид.

К раствору 1-(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этан-1-он (7,7 г, 18,73 ммоль) и (В)-(+)-2-Метил-2-пропансульфинамида (2,5 г, 20,6 ммоль) в сухом ТНЕ (80 мл) добавляли Τί(ΌΕΐ)₄ (6,4 г, 28,1 ммоль) по каплям в атмосфере азота. Смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь выливали в воду (100 мл), осадок фильтровали и фильтрат экстрагировали ЕА (100 млх2), объединенный органический слой сушили над безводным №ь8О₄. концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ΡΕ:ΕΑ=2:1) с получением 7,9 г целевого соединения в виде бледно-желтого масла. Выход: 81%. МС (μ/ζ)=515 [М+Н]⁺.

(Ε) (К.)-Ы-((8)-1-(6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамид.

К раствору ЫВ(С₄Н₇)з (39 мл, 38,42 ммоль) в сухом ТНЕ (80 мл) добавляли (Κ,Ε)-Ν-1-(6-(6κ-(4метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этилиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид (7,9 г, 15,37 ммоль) при -78°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч. Смесь выливали в насыщ. водный раствор ΝΗ₄ί.Ί (200 мл), водный слой экстрагировали ЕА (100 млх2), органический слой сушили и концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ΡΕ:ΕΑ=65%:35%) с получением 3,8 г соединения в виде бледно-желтого масла. Выход: 48%. МС (μ/ζ)=518 [М+Н]⁺.

(Е) (К.)-Х-((8)-1-(6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-(3,5-дифторфенил)пиридазин-4-ил)этил)-2метилпропан-2-сульфинамид.

К раствору (Κ.)-Ν-((8)-1 -(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3 -хлорпиридазин-4-ил)этил)-2метилпропан-2-сульфинамида (900 мг, 1,74 ммоль) и 3,5-дифторфенилборной кислоты (551 мг, 3,49 ммоль) в диоксане (6 мл) и воды (2 мл) добавляли Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (201 мг, 0,174 ммоль) и КОАС (511 мг, 5,22 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь обрабатывали водой, экстрагировали ЕА (10 млх2). Органический слой сушили и концентрировали в вакууме, остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ΡΕ:ΕΑ=7:3) с получением 635 мг целевого соединения. Выход: 61%. МС (тА=595 [М+Н]⁺.

(С) (В)-Ы-((§)-1-(6-Амино-3-(3,5-дифторфенил)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамид.

К раствору (В)-Ы-((§)-1-(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-(3,5-дифторфенил)пиридазин-4ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (635 мг, 1,07 ммоль) в АсОН (3,2 мл) по каплям добавляли концентрировали серную кислоту (1,6 мл) при 10°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь медленно обрабатывали водным раствором №1ОН (2 М, 45 мл) при 0°С до рН 8-9, и затем экстрагировали ДХМ (30 млх3), органический слой сушили над безводным Ыа₂8О₄, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=6 :4 (+0,5% аммиака)) с получением 165 мг целевого соединения. Выход: 44%. МС (ηι/ζ)=355 [М+Н]⁺.

(H) (В)-Х-((8)-1-(6-(3,5-Дифторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамид.

К раствору (В)-Х-((8)-1-(6-амино-3-(3,5-дифторфенил)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамида (165 мг, 0,47 ммоль) в БЮН (3 мл) добавляли 2-хлорацетальдегид (55 мг, 0,70 ммоль) и №1НС.'О₃ (79 мг, 0,94 ммоль). Затем смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь охлаждали, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=7:3 (+0,5% аммиака)) с получением 150 мг соединение в виде твердого вещества. Выход: 84%. МС (щ^)=379 [М+Н]⁺.

(I) (8)-1 -(6-(3,5-Дифторфенил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-7 -ил)этан-1 -амина гидрохлорид

ΝΗ.

К раствору (К.)-Х-((8)-1-(6-(3,5-дифторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-2-метилпропан2-сульфинамида (150 мг, 0,4 ммоль) в ЕА (3 мл) добавляли НС1-ВА (2 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем смесь концентрировали в вакууме с получением 99 мг неочищенного продукта в виде бледно-желтого твердого вещества, которое использовали для следующей стадии без очистки. МС (ηι/ζ)=275 [М+Н]⁺.

(1) (8)-4-Амино-6-(( 1 -(6-(3,5-дифторфенил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

К раствору (8)-1-(6-(3,5-дифторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этан-1-амина гидрохлорида (99 мг, 0,36 ммоль) и 4-амино-6-хлорпиримидин-5-карбонитрила (84 мг, 0,54 ммоль) в п-ВиОН (3 мл) добавляли ΌΙΡΕΑ (186 мг, 1,44 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником

- 37 032643 в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н2О=55:45 (+0,5% аммиака)) с получением 95 мг целевого соединения в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 67%. МС (т/) 393 [М+Н]⁺.

(К) (8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(3,5-дифторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Раствор (8)-4-амино-6-((1-(6-(3,5-дифторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (95 мг, 0,24 ммоль) и ЫС8 (35 мг, 0,27 ммоль) в СНС1₃ (3 мл) перемешивали при 70°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=7:3 (+0,5% аммиака)) с получением 77 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества. Выход: 75%. МС (тА)=427 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР(400 МГц, СЭзОЭ) δ 8,10 (ΐ, 1=1,8 Гц, 1Н), 7,96-7,86 (т, 1Н), 7,82-7,72 (т, 1Н), 7,40-7,26 (т,2Н), 7,12-6,98 (т, 1Н), 5,44 (ς, 1=6,8 Гц, 1Н), 1,48 (ά, 1=6,9 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для соединения 30 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны РО81ТЛ.

Соединение	Структура	МС (Μ+Η)+	ЯМР	Промежуточное соединение
32	С! Ср νη2	405	1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,06 (5, 1 Η), 7,74 - 7,67 (т, 3Η), 7,53 - 7,47 (т, ЗН), 5,51 (η, ΰ = 7,0 Гц, 1 Η), 2,17 (5, 3Η), 1,39 (ό, ΰ = 7,0 Гц, ЗН).	Ο'Ύθ νη2
	с ΎΊ
			1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,14 (ό, ΰ = 0,7 Гц, 1 Η),
35	ΗΝ ΟΝ-Μ νη2	427	7,78 (ό, ΰ = 3,6 Гц, 2Η), 7,31 (сЦ ΰ = 9,3, 4,2 Гц, 1 Η), 7,19 (5, 2Η), 5,32 (5, 1 Η), 1,55 (ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).	мААу' νη2 МС (М+Н)+ : 275
	С! у		1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,15 (5, 1Н), 7,78 (ΐ, и	Е
36	,+Ά·'	427	= 2,6 Гц, 2Н), 7,31 (5, 2Н), 7,27 - 7,18 (т, 1Н), 5,40
	и. Ν ον+(>ν νη2		- 5,28 (т, 1Н), 1,55 (ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).	νη2 МС (М+Н)+ : 275

- 38 032643

41	С1 Λ Ν'	-ν'ν<	Α (1Γ' ΗΝ Ν .V νη2	425	1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,08 (ό, ΰ = 0,7 Гц, 1 Η), 7,89 (5, 1 Η), 7,75 (δ, 1 Η), 7,70 - 7,65 (т, 1 Η), 7,59 7,54 (т, 1 Η), 7,48 - 7,43 (т, 2Η), 5,42 (ό, ΰ = 6,6 Гц, 1Η), 1,46 (ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).	νη2 МС (М+Н)+ : 273/275
		Εχ	Ε		1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,21 (5, 0,29Н), 8,13 (5,	гА
	С1
		-ν'ν<			0,67Н), 7,86 - 7,83 (т, 0,65Н), 7,80 (5, 0,62Н), 7,78
45	Ν;		ΗΝ Ν οΑ νη2	459	(5, 0,27Н), 7,77 (5, 0,61 Н), 7,73-7,69 (т, 1Н), 7,69 7,57 (т, 2,69Н), 5,35 - 5,23 (т, 1Н), 1,58 (ό, ΰ = 6,8 Гц, 1Н), 1,42 (ό, ΰ = 6,9 Гц, 2Н).	// N мХу νη2
					МС (М+Н)+ : 307
			1 0=5=0			I 0=8=0
	С1	-Ν'Ν<	γ!		1Н ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,39 (5, 1Н), 8,14 (5,	ΓΙ1
46	Ν'	ϊγΑΑ	469	1Н), 8,09 - 8,04 (т, 1Н), 8,01-7,96 (т, 1Н), 7,94 (5,
		ΗΝ Ν^ ον^Υν		1Н), 7,80-7,73 (т, 2Н), 5,35 (ц, ΰ = 7,0 Гц, 1Н), 3,16 (5, ЗН), 1,46 (ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).	νη2
			νη2			МС(М+Н)+ : 317
			Ε Ε—I—Ε			Г г—I—г
	С!		εΑι		1Н ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,12 (5, 1Н), 8,01 (5,	Гн
48	Κ,-Ν,/ν	459	1Н), 7,91 (ό, ΰ = 7,6 Гц, 1Н), 7,84 (5, 1Н), 7,77-7,76
	Ν		<Μ		(т, 2Н), 7,68 (ΐ, ΰ = 7,7 Гц, 1Н), 5,42 - 5,31 (т, 1Н),
			ΗΝ Ν^ ΟΝ^Υ		1,46 (ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).	νη2
						МС (М+Н)+ : 307
	С1		ΑΥ0Η			ίΧΓ°Η
	-Ν.	ХУ		1Н ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 7,98 (5, 1Н), 7,92 (ό, и
	Λ	-Ν' С
49	Ν'	=ΧΆ	А'	407	= 0,5 Гц, 1Н), 7,68 (ό, ΰ = 0,5 Гц, 1Н), 7,52 (с1с1, ΰ =	ыХАу'
		ΗΝ Ν Λ-	6,6, 5,0 Гц, 2Н), 6,90 (όό, ΰ = 6,5, 5,0 Гц, 2Н), 5,48 (ц, ΰ = 6,8 Гц, 1Н), 1,38 (ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).	νη2
			νη2			МС (М+Н)+ : 255
			он			ОН
	С1		Δ		1Н ЯМР (400 МГц, СОзОО) δ 8,00 (5, 1Н), 7,91 (5,
54	Ν'	Ν'Ν*		407	1Н), 7,69 (5, 1Н), 7,29-7,25 (т, 1Н), 7,10-7,02 (т,	/-ν·ν<-ΑΑ
	ιΊ] ΗΝ Ν Λ-	2Н), 6,91-6,83 (т, 1Н), 5,47 (ц, ΰ = 6,8 Гц, 1Н), 1,41	мХДу'
				(ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).	ΝΗ2 МС
			νη2			(М+Н)+ : 255

- 39 032643

60	С1 Κ'Ν*	£> Й Ν νη2	397	1Η ЯМР (400 МГц, дмсо-бй) δ 8,26 (5, 1 Η), 7,95 (5, 1 Η), 7,90 (5, 1Η), 7,87 (5, 1 Η), 7,78 (ό, Й = 7,3 Гц, 1 Η), 7,76-7,69 (т, 1 Η), 7,47 (ό, Й = 4,0 Гц, 1 Η), 7,23 (5, 2Η), 5,36-5,29 (т, 1 Η), 1,36 (ό, Й = 6,9 Гц, ЗН).	МС (М+Н)+	Γ-θ Л? νη2 : 245
Ν;
	С1	-ν'ν<=	ΓΎΊ		1Η ЯМР (400 МГц, СОзОО) δ 8,91 (й, й = 4,0 Гц, 1Η),		Л4
				8,43 (й, й = 7,8 Гц, 1 Η), 8,29 (5, 1Η), 8,13 (5, 1Η),	/к/	Ή
61	Ν'		ΗΝ. ,Ν	442	8,07 (й, й = 8,4 Гц, 1 Η), 7,87 (ό, Й = 8,4 Гц, 1 Η), 7,78	νΑΛ
			Α-		(5, 1 Η), 7,68 (5, 1 Η), 7,60 (йй, Й = 8,3, 4,3 Гц, 1Η),		νη2
		Ν 1 ΝΗ?		5,54-5,47 (т, 1 Η), 1,48 (ό, Й = 6,9 Гц, 4Η).
					МС (М+Н)+	: 290
	С1	Λ			1Η ЯМР (400 МГц, СОзОО) δ 8,03 (5, 1 Η), 7,87 (5,		Γιΐ
62	// Ν \ .ок		405	1 Η), 7,72 (5, 1 Η), 7,43 - 7,38 (т, 2Η), 7,34 (ΐ, Й = 7,5
Ν
					Гц, 1Η), 7,25 (ό, Й = 7,3 Гц, 1 Η), 5,46-5,44 (т, 1Η),		νη2
			Λ»		2,38 (5, ЗН), 1,42 (ό, Й = 6,9 Гц, ЗН).
			ΝΗ2			МС (М+Н)+	: 253
	С1						А4	Ж
	-κ,'Νχ	XX		1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,08 (5, 1Н), 7,91 (й, й
	Λ	Ν	γ Ε					Т
63		-к ·χΛ X	427	= 1,3 Гц, 1Н), 7,75 (й, й = 1,4 Гц, 1Н), 7,70 - 7,60 (т,	ν-к
			ΗΝ Ν ™%Ν		1Н), 7,54 - 7,46 (т, 1Н), 7,42-7,38 (т, 1Н), 5,41-5,39 (т, 1Н), 1,45 (й, й = 6,9 Гц, ЗН).		νη2
			ΝΗ2			МС (М+Н)+	: 275
	С1		г^С1					С1
	Κ,,Ν.	XI		1Н ЯМР (400 МГц, СОзОО) δ 8,09 (5, 1Н), 7,90 (ό, й
	Λ	Ν +	Χ' X/ ρ					Т
64	Ν'		(5?| *	443	= 1,2 Гц, 1Н), 7,75 (й, й = 1,2 Гц, 1Н), 7,64 - 7,55 (т,
			ΗΝ Ν €Ν%~		2Н), 7,47 (й, й = 8,2 Гц, 1Н), 5,42-5,41 (т, 1Н), 1,46 (й, й = 6,9 Гц, ЗН).		νη2
			νη2			МС (М+Н)+	: 291
	01
		-ν'ν^	ΑΛ		1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бй) δ 8,34 (5, 1Н), 8,11 (5,			ΟΝ
65	Ν'	=к^		416	1Н), 8,00 - 7,88 (т, ЗН), 7,84 (5, 1Н), 7,71 - 7,64 (т,
			НМ.А. Λ~		2Н), 7,18(5, 2Н), 5,19-5,05 (т, 1Н), 1,41 (0, й = 6,8 Гц, ЗН).		νη2
			νη2			МС (М+Н)+	: 264
	С1	-Ν'Ν«	С1 γΊί		1Н ЯМР (400 МГц, СОзОО) δ 8,10 (5, 1Н), 7,90 (5,		ΟΙ γΛι
66		уАЛ	443	1Н), 7,77 (5, 1Н), 7,52 (5, 1Н), 7,42 - 7,36 (т, 1Н),	/Ν'Νγ	Ц^хк	Б
Ν
			ΗΝ. ,Ν.		7,29-7,26 (т, 1Н), 5,44 (η, й = 6,8 Гц, 1Н), 1,49 (ό, й	N
			Λ1		= 6,9 Гц, ЗН).	νη2
			νη2			МС (М+Н)+	: 291
	С1		Λ		1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бй) δ 8,27 (5, 1Н), 7,90 (ό,
		-ν'ν*	Χ1Γ		й = 1,3 Гц, 1Н), 7,85 (й, й = 0,8 Гц, 1Н), 7,66 (ό, й =	Ζ'Ν'ψ
67	ΝΤ		к.	423	7,4 Гц, 1Н), 7,26-7,20 (т, 4Н), 7,09 (й, й = 10,0 Гц,
			ΗΝ Ν^ νοΆ		1Н), 5,21 (ΐ, й = 7,0 Гц, 1Н), 2,33 (5, ЗН), 1,38 (ό, й = 6,7 Гц, ЗН).	νη2
			νη2		МС (М+Н)+	: 271

- 40 032643

68	С1 </ N	°=5ς°^ сзд ΗΎΑ ον^ν νη2	469	1Η ЯМР (400 МГц, СЭзОЭ) δ 8,25-8,22 (т, 0.27Η), 8,20 - 8,16 (т, 0.74Η), 8,10-8,08 (т, 0.76Н), 7,96- 7,91 (т, 1Н), 7,88-7,86 (т, 0,7Н), 7,82-7,80 (т, 0.49Н), 7,78-7,74 (т, 2.27Н), 7,77 - 7,64 (т, 0.56Н), 7,55-7,53 (т, 0.23Н), 5,65-5,55 (т, 0.25Н), 5,30 - 5,19 (т, 0.81Н), 3,25 (5, 2.12Н), 3,23 (5, 0.77Н), 1,60 (ό, Л = 6,8 Гц, 0,7Н), 1,41 (ό, Л = 6,9 Гц, 2,2Н).	νΑζΚ,α' νη2 МС(М+Н)+ : 317
	С1	гг°з		1Н ЯМР (400 МГц, дмсо-6с1) δ 8,19 (5, 1Н), 7,86 (5,	X. А )
	Л	N 0			/Γ'Ν Ο
70		449	2Н), 7,70 (ό, Л = 7,4 Гц, 1Н), 7,23 (5, 2Н), 7,13-7,07	\ _-1 Λ
	НЙ >ΥΝ I		ν^ααα/
			(т, 2Н), 6,93 (ό, Л = 8,2 Гц, 1Н), 5,30-5,26 (т, 1Н), 4,25 (5, 4Н), 1,34 (ό, Л = 6,9 Гц, ЗН).	νη2
		νη2			МС (Μ+Η)+ : 297
	ΟΙ
	у	./АА		1Н ЯМР (400 МГц, дмсо-6с1) δ 8,33 (5, 1Н), 8,21 (5,	Υ'Ν ΑΑ
71	Ν'	ΗΝ Ν .Α-	441	1Н), 8,10-7,95 (т, ЗН), 7,92 (5, 1Н), 7,85-7,73 (т,
νη2 МС (Μ+Η)+ : 289 /
		ЗН), 7,59 (р, Л = 6,4 Гц, 2Н), 7,21 (5, 2Н), 5,22 (ΐ, Л = 7,1 Гц, 1Н), 1,37 (0,6 = 6,9 Гц, ЗН).
νη2 μ -Ν·γΑΝ
	С1		1Н ЯМР (400 МГц, дмсо-6с1) δ 8,23 (5, 2Н), 7,93
72	Ν'		395	(5,1 Н),7,88 - 7,84 (т, ЗН), 7,28 (5, 2Н), 5,50-5,46 (т,
		ΗΑ I		1Н), 3,91 (5, ЗН), 1,43 (ό, Л = 6,9 Гц, ЗН).	νη2
		ΝΗΖ			МС (Μ+Η)+ : 243
		Ν=\ Ζ 3			Ν=\ 3
74	С1 N	'Ν'Α'α^	448	1Н ЯМР (400 МГц, дмсо-6с1) δ 9,47 (5, 1Н), 8,36 (5, 4Н), 8,32 (5, 1Н), 8,30 (ό, Л = 8,3, 1Н), 7,92 (5, 1Н),
НЙ Ν^	7,78-7,73 (т, ЗН), 7,21 (5, 2Н), 5,26-5,19 (т, 1Н), 1,38 (ό, ΰ = 6,9, 4Н).	νη2
		ΟΝ γ νη2			МС (Μ+Η)+: 296
		Ν=\ / 8			Ν=\
	С1			1Н ЯМР (400 МГц, дмсо-6с1) δ 9,47 (ό, Л = 0,8, 1Н),
75	>Ν'	448	8,36 (5, 1Н), 8,32 (5, 1Н), 8,29 (ό, Л = 8,3, 1Н), 7,92	Λ-γ
	ΗΝ Ν	(ό, Л = 1,2, 1Н), 7,79-7,72 (т, ЗН), 7,21 (5, 2Н), 5,25	νη2
		Α		-5,21 (т, 1Н), 1,38 (ό, Л = 6,8, ЗН).
		νη2			МС (Μ+Η)+ : 296
	С1	ь		1Н ЯМР (400 МГц.СОСЬ) δ 8,03 (5, 1Н), 7,98 (ό, Л =	\ ΓΛ
		ΓΠ -Ν'ΝαΑ^		4,7 Гц, 2Н), 7,77 (5, 1Н), 7,72 (ό, Л = 8,3 Гц, 1Н), 7,65
76		444	(5, 1Н), 7,47 (ό, Л = 8,4 Гц, 1Н), 7,13 (5, 1Н), 5,56-
		ΗΝ Ν^ ΟΝ-Υ		5,49 (т, 1Н), 5,44- 5,43 (т, 1Н), 5,32 (5, 2Н), 3,80 (5, ЗН), 1,37 (ό, Л = 6,7 Гц, ЗН).	νη2
		νη2		МС (Μ+Η)+ : 292
	С1	Α		1Н ЯМР (400 МГц, СЭзСЮ) δ 8,85 (ό, Л = 1,5 Гц,	Α
	мАк.-		1Н), 8,68 - 8,59 (т, 1Н), 8,20-8,18 (т, 1Н), 8,15 -
77		ην. _ν.	392	8,12 (т, 1Н), 7,88 (ό, Л = 1,5 Гц, 1Н), 7,78 (с1, Л = 2,6
				Гц, 1Н), 7,59-7,55 (т, 1Н), 5,36 (ц, Л = 6,8 Гц, 1Н),
		νη2		1,49 (ό, Л = 6,9 Гц, ЗН).	МС (Μ+Η)+ : 293

Соединение 31.

(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(о-толил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил

- 41 032643

(А) (8)-5-(1-Аминоэтил)-6-(о-толил)пиридазин-3-амин.

Раствор (К)-№((8)-1-(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-(о-толил)пиридазин-4-ил)этил)-2метилпропан-2-сульфинамида (указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (О)) (960 мг, 1,68 ммоль) в СР₃СООН (5 мл) нагревали и перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Затем его охлаждали до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме, доводили ρΗ 9 с помощью аммиака, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=4:6 (+0,5% аммиака)) с получением 140 мг целевого соединения в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 37%. МС (т/х)=229 [М+Н]⁺.

(B) трет-Бутил-(8)-(1-(6-амино-3-(о-толил)пиридазин-4-ил)этил)карбамат.

Раствор (8)-5-(1-аминоэтил)-6-(о-толил)пиридазин-3-амин (140 мг, 0,61 ммоль) и (Вос)₂О (200 мг, 0,92 ммоль) в ДХМ (2 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем смесь концентрировали при 20°С и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=4:6 (+0,5% аммиака)) с получением 140 мг целевого соединения в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 70%. МС (тА)=329 [М+Н]⁺.

(C) трет-Бутил-(8)-(1 -(6-(о-толил)имидазо[ 1,2-Ь] пиридазин-7 -ил)этил)карбамат.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(Н). МС (тА)=353 [М+Н]⁺.

(Ό) (8)-1-(6-(о-Т олил)имидазо[ 1,2-Ь] пиридазин-7-ил)этан-1 -амин

νη₂

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (I). МС (тА)=253 [М+Н]⁺.

(Е) (8)-4-Амино-6-((1-(6-(о-толил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(1). МС (тА)=371 [М+Н]⁺.

(Р) (8)-4-Амино-6-(( 1 -(3 -хлор-6-(о-толил)имидазо[ 1,2-Ь] пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5 карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). МС (тА)=405 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СО₃ОО) δ 8,08 (х, 1Н), 7,90-7,66 (т, 2Н), 7,53-7,16 (т, 4Н), 5,33-5,22 (т, 1Н), 2,25-2,14 (т, 3Н), 1,45 (б, 1=31,3 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для 31 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны ГО8РТА.

- 42 032643

Соединение	Структура	МС (Μ+Η)+	ЯМР	Промежуточное соединение
73	С1 ΗΝ Ν Λ» νη2	392	1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,70 - 8,66 (т, 2Η), 8,16 - 8,15 (т, 1Н), 7,90-7,88 (т, 1Н), 7,81 7,78 (т, 1Н), 7,78 - 7,73 (т, 2Н), 5,41 - 5,34 (т, 1Н), 1,50 (ό, ΰ = 7,1 Гц, ЗН).	ι^Ν νη2 МС (Μ+Η)+: 240

Соединение 33.

(8)-4-((1-(3-Хлор-б-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)-б-(метиламино)пиримидин-5карбонитрил

(Α) (8)-4-Хлор-б-((1-(б-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

(8)-1-(б-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этан-1-амин получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (I). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (I). МС (тА)=37б [М+Н]⁺.

(B) (8)-4-(Метиламино)-б-((1-(б-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

Смесь (8)-4-хлор-б-((1-(б-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрила (55,0 мг, 0,14б ммоль) и СН^Н₂ (35% ΐη СН₃ОН) (2 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 120°С в течение 1,5 ч. После концентрирования, остаток очищали с помощью флэшхроматографии с (Н₂О:МеОН=3:2-2:3) с получением 15,0 мг продукта в виде белого твердого вещества. Выход 28%. МС (тА)=371 [М+Н]⁺.

(C) (8)-4-((1-(3-Хлор-б-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)-б-(метиламино)пиримидин-5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). МС (тА)=405 [М+Н]⁺.

²Н ЯМР (400 МГц, СБ₃ОБ) δ 8,03 (з, 1Н), 7,9б (з, 1Н), 7,70 (з, 1Н), 7,69-7,65 (т, 2Н), 7,51-7,45 (т, 3Н), 5,42 (ц, >б,9 Гц, 1Н), 2,90 (з, 3Н), 1,38 (ά, >б,9 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для 33 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны РО81ТА.

Соединение	Структура	МС(М+Н)+	ЯМР
34	С1 ΗΝ Ν^ΝΗ2 сЛЕ	391	1Н ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,08 (5, 1Н), 8,01 (5, 1Н), 7,71-7,66 (т, ЗН), 7,53 - 7,48 (т, ЗН), 5,24 (ς, Л = 6,7 Гц, 1Н), 1,29 (ό,ΰ = 6,7 Гц, ЗН).
40	НА М Л νη2	400, 402	1Н ЯМР (400 МГц, дмсо-6с1) δ 8,19 (5, 1Н), 7,85 (5, 1Н), 7,71 (5, 1Н), 7,68 7,66 (т, 2Н), 7,55-7,47 (т, ЗН), 7,01 (ό, Л = 7,5 Гц, 1Н), 6,48 (5,2Н), 5,155,11 (т, 1Н), 1,31 (ό, Л = 7,0 Гц, ЗН).

Соединение 37.

(8)-№⁴-(1-(3-Хлор-б-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(3-фторфенил)пиримидин-4,бдиамин

- 43 032643

(A) (8)-5-Бром-6-хлор-Ы-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4-амин.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(1). МС (ιηζ) 431 [М+Н]⁺.

(B) (8)-5-Бром-Ы⁴-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4,6-диамин.

Смесь (8)-5-бром-6-хлор-Ы-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4-амина (850 мг, 1,97 ммоль), раствора гидроксида аммония (5 мл, 36%) и Е(ОН (2 мл) облучали в микроволновом реакторе при 150°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме с получением 1 г неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии без очистки. МС (ιηζ) 441 [М+Н]⁺.

(C) (8)-5-Бром-Ы⁴-(1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4,6-диамин.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4(М). МС (ιηζ) 446 [М+Н]⁺.

(Ό) (8)-Ы⁴-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(3-фторфенил)пиримидин-4,6диамин.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(Р). МС (ιηζ) 460 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СЭзОЭ) δ 7,92 (з, 1Н), 7,88 (з, 1Н), 7,76-7,64 (т, 3Н), 7,62-7,45 (т, 4Н), 7,25-7,04 (т, 3Н), 5,37 (ς, 1=7,0 Гц, 1Н), 1,20 (ά, 1=6,9 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали в соответствии с процедурой 37 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны РО8ГГА.

Соединение	Структура	МС (Μ+Η)+	ЯМР
	С1		Ί]
	>ν·ν«		1)		1Η Я Μ Ρ (400 МГц, СОзСЮ) 6 7,94 (5, 1 Η), 7,90
					(5, 1 Η), 7,68 (т, 3Η), 7,51 (πί, 3Η), 7,01-7,12
38		ΗΝ.. Ύ	X	476	(т, 3Η), 5,33 (я, ΰ = 6,9 Гц, 1 Η), 1,20 (ό, ΰ = 6,9
	1^. т				Гц, зн).
	ηοα		νη2
	С1 V Κ1,Ν.				1Н ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,03 (5, 1Н), 7,97
	Αν '
	Аютюте-			(5, 1Н), 7,92 (5, 1Н), 7,75 - 7,66 (т, ЗН), 7,60
39		ΗΝ	Α	473	(5, 1Н), 7,56 - 7,47 (т, ЗН), 6,96 (ό, ΰ = 8,4 Гц,
	Ν'				1Н), 5,37 (я, ΰ = 6,9 Гц, 1Н), 3,94 (5, ЗН), 1,22
	II О 1		νη2		(ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).
	С1		|1		Ή ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,25 (ό, ΰ = 4,2
		Α,	Η
					Гц, 1 Η), 7,90-7,88 (т, 2Н), 7,76 - 7,61 (т, ЗН),
50		ΗΝ^	Ν	473	7,52 (т, ЗН), 6,89 (ό, ΰ = 5,2 Гц, 1Н), 6,78 (5,
		Ύ	Α ^Ν		1Н), 5,37 (я, ΰ = 6,9 Гц, 1Н), 3,93 (5, ЗН), 1,21
	Νχ		νη2		(ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).

- 44 032643

Соединение 42.

(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)(метил)амино)пиримидин-5карбонитрил

(A) (8)-4-Хлор-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(1). МС (ηι/ζ)=376 [М+Н]⁺.

(B) (8)-4-Хлор-6-(метил(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

(8)-4-Хлор-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил (70 мг, 0,19 ммоль) растворяли в безводном ТНР (4 мл). Смесь охлаждали до 0°С, и затем к ней добавляли NаΗ (60% суспендированный в минеральном масле, 11,2 мг, 0,28 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 0,5 ч смесь снова охлаждали до 0°С, и затем к ней по каплям добавляли СНД (39,6 мг, 0,28 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли Н₂О (8 мл) и перемешивали в течение 5 мин, затем экстрагировали ДХМ. Объединенные органические слои концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:МеОН=19:1-9:1) с получением 32,0 мг продукта в виде белого твердого вещества. Выход 45%о МС (πι/ζ)=386 [М+Н]⁺.

(C) (8)-4-Амино-6-(метил(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 37(В). МС (πι/ζ)=371 [М+Н]⁺.

(Ώ) (8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)(метил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4(М). МС (πι/ζ)=405 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СО_;ОО) δ 8,12 (ά, 1=1,0 Гц, 1Н), 7,78 (8, 1Н), 7,75 (8, 1Н), 7,43-7,37 (т, 2Н), 7,317,23 (т, 3Н), 6,25 (ς, 1=6,7 Гц, 1Н), 2,77 (8, 3Н), 1,62 (ά, 1=6,7 Гц, 3Н).

Соединение 43.

(К)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-фторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)пропил)амино)пиримидин-5-карбонитрил

- 45 032643

(A) 3 -Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-карбальдегид.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 7 и 8 (А). МС (т/г)=310 [М+Н]⁺, 312 [М+2+Н]⁺.

(B) (К,Е)-Х-((3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2сульфинамид.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 7 и 8 (В). МС (т/г)=381 [М+Н]⁺, 383 [М+2+Н]⁺.

(C) (К)-Х-(1-(3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2сульфинамид.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 7 и 8 (С). МС (т/г)=411 [М+Н]⁺, 413 [М+2+Н]⁺.

(Ό) (К)-Х-((К)-1-(3-(3-Фторфенил)-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)пропил)-2метилпропан-2-сульфинамид.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (С). МС (тА)=471 [М+Н]⁺.

(Е) (К)-Х-((К)-1-(6-Амино-3-(3-фторфенил)пиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид. (К)-Х-((К)-1-(3-(3-фторфенил)-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан2-сульфинамид (1,1 г, 2,34 ммоль) растворяли в НОАс (5,5 мл). Смесь охлаждали до 10°С и медленно по каплям добавляли конц. Н₂8О₄ (2,75 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 смесь добавляли по каплям к раствору №ОН (8,0 д) в ледяной воде (100 мл) и перемешивали в течение мин, и затем экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические слои концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂О:МеОН=3:2-2:3 (+0,5%ЫН₃ЩО)) с получением 545,0 мг целевого продукта в виде светло-коричневого твердого вещества. Выход 66%; МС (т/г)=351 [М+Н]⁺.

(Е) (К)-Х-((К)-1-(6-(3-Фторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)-2-метилпропан-2сульфинамид.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (I). МС (тА)=375 [М+Н]⁺.

(О) (К)-1-(6-(3-Фторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропан-1-амина гидрохлорид

- 46 032643

νη₂

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (К). МС (т^)=271 [М+Н]⁺.

(H) (К)-4-Амино-6-((1-(6-(3-фторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (Ь). МС (т/г)=389 [М+Н]⁺.

(I) (К)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-фторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). МС (т/г)=423 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР(400 МГц, СБ₃ОБ) δ 8,06 (§, 1Н), 7,91 (ά, 1=0,9 Гц, 1Н), 7,73 (ά, 1=0,9 Гц, 1Н), 7,55-7,48 (т, 3Н), 7,28-7,21 (т, 1Н), 5,24 (ς, 1=5,2 Гц, 1Н), 1,89-1,70 (т, 2Н), 0,83 (ΐ, 1=7,3 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для 43 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны РО8ГГА.

Соединение	Структура	МС(М+Н)+	ЯМР
44	ΗΝ N Λ1 ΝΗ	423	1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,17 (5, 1Н), 8,08-8,07 (т, 2Н), 7,69 (5, 1Н), 7,64-7,62 (т,2Н), 7,56-7,48 (т, 1Н), 7,28-7,20 (т, 1Н), 5,50 - 5,28 (т, 1Н), 1,81 (р, ΰ = 7,2 Гц, 2Н), 0,87 (ΐ, ΰ = 7,3 Гц, ЗН).
47	ΗΝ Ν ϊ	423	Ή ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,17 (5, 1Н), 8,08 (5, 2Н), 7,70 (5, 1Н), 7,67 - 7,59 (т, 2Н), 7,57 - 7,50 (т, 1Н), 7,29 - 7,22 (т, 1Н), 5,46 - 5,26 (т, 1Н), 1,82 (р, ΰ = 7,2 Гц, 2Н), 0,89 (ΐ, ΰ = 7,3 Гц, ЗН).

Соединение 51.

(8)-6-Амино-4-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)-5-цианопиримидин

1-оксид

К раствору соединения 4 (40 мг, 0,10 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли тСРВА (53 мг, 0,30 ммоль) при 5°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О (+0,5% КН₃-Н₂О)) с получением 15 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества, Выход:36%; МС (т^)=407 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СБ3ОБ) δ 8,20 (δ, 1Н), 8,06 (δ, 1Н), 7,73 (δ, 1Н), 7,60-7,58 (т, 2Н), 7,50-7,47 (т, 3Н), 5,44-5,39 (т, 1Н), 1,47 (ά, 1=6,9 Гц, 3Н).

Соединение 52.

(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбоновая кислота

- 47 032643

Соединение 4 (50,0 мг, 0,13 ммоль) растворяли в водном растворе №О11 (2,0 моль/л, 2 мл) и добавляли ΕΐОН (0,4 мл). Смесь перемешивали при 60°С в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. Соляную кислоту (2 моль/л) добавляли для доведения значения рН до 8~9. Смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂О:МеОН=3:2-1:2) с получением 60,0 мг продукта в виде белого твердого вещества. Выход 95%. МС (т/) 410 [М+Н]⁺.

Ί I ЯМР (400 МГц, СЭзОЭ) δ 10,4 10,38 (ш, 1Н), 7,99 (_δ, 1Н), 7,73-7,68 (ш, 3Н), 7,68-7,64 (ш, 1Н), 7,53-7,46 (ш, 3Н), 5,33-5,22 (ш, 1Н), 1,31 (ά, 1=6,8 Гц, 3Н).

Соединение 53.

(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбоксамид

(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбоновую кислоту (20,0 мг, 0,049 ммоль), ΝΠ^1 (10,4 мг, 0,19 ммоль) и НАТИ (37,2 мг, 0,098 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл), затем медленно добавляли ОИРНА (12,7 мг, 0,098 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н₂О:МеОН=1:1-1:4) с получением 14,5 мг продукта в виде белого твердого вещества. Выход 72% МС (ш^)=409 [М+Н]⁺.

Ί I ЯМР(400 МГц, СО₃ОО) δ 8,01-7,97 (ш, 1Н), 7,82 (_δ, 1Н), 7,73-7,68 (ш, 2Н), 7,67-7,64 (ш, 1Н), 7,52-7,47 (ш, 3Н), 5,33-5,24 (ш, 1Н), 1,31 (ά, 1=6,9 Гц, 3Н).

Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для 53 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны РО8ГТА.

Соединение	Структура	МС(М+Н)+	ЯМР
56	с\ О НЙ N /Νχ. Ν	437	1Η ЯМР (400 МГц, СОзСЮ) δ 8,00 (5, 1Н), 7,85 (5, 1Н), 7,74 - 7,69 (т, 2Н), 7,69 - 7,66 (т, 1Н), 7,53 7,48 (т, ЗН), 5,38 - 5,31 (т, 1Н), 3,05 (5, ЗН), 3,03 (5, ЗН), 1,30 (ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).
57	с| Αΐ ΗΝ ν'Αι’14 Η ΝΗ2	446	1 Н ЯМР (400 МГц, сс! 3 οό) δ 7,92 (5, 1Н), 7,85 (5, 1Н), 7,76 - 7,67 (т, 4Н), 7,58 - 7,48 (т, 4Н), 5,37 5,32 (т, 1Н), 3,97 (5, ЗН), 1,22 (ό, ΰ = 6,9 Гц, ЗН).

Соединение 55.

(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)-2гидроксипиримидин-5-карбонитрил

- 48 032643

(A) (8)-4-Хлор-2-(метилтио)-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(1). МС (т/х)=422 [М+Н]⁺.

(B) (8)-4-Амино-2-(метилтио)-6-(( 1 -(6-фенилимидазо[ 1,2-Ь] пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 37 (В). МС (т/х)=403 [М+Н]⁺.

(C) (8)-4-Амино-2-(метилсульфонил)-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 51. МС (тА)=435 [М+Н]⁺.

(Ό) (8)-4-Амино-2-гидрокси-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин5-карбонитрил.

Смесь (8)-4-амино-2-(метилсульфонил)-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (150 мг, 0,34 ммоль) и водного раствора №ОН (2 мл, 2 Ν) в ТНР (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь экстрагировали ДХМ (20 млх3), объединенный органический слой концентрировали с получением 200 мг неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии без очистки. МС (т/х)=373 [М+Н]⁺.

(Е) (8)-4-Амино-6-(( 1-(3 -хлор-6-фенилимидазо [1,2-Ь] пиридазин-7-ил)этил)амино)-2-гидроксипиримидин-5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). МС (т//)=407 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СО₃ОО) δ 8,00 (х, 1Н), 7,78-7,67 (т, 3Н), 7,55-7,40 (т, 3Н), 5,44 (ς, 1=6,8 Гц, 1Н), 1,36 (б, 1=6,9 Гц, 3Н).

Соединение 69.

(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(2-гидроксифенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил

К раствору (8)-4-амино-6-((1 -(3-хлор-6-(2-метоксифенил)имидазо[ 1,2-Ь] пиридазин-7 ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (120 мг, 0,28 ммоль, указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30) в ДХМ (3 мл) по каплям добавляли ВВг₃ (1,4 мл, 1,4 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 6 ч при комнатной температуре. Затем смесь гасили МеОН, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=7:3) с получением 36 мг указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 32%. МС (т/г)=411 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СО₃ОО) δ 8,08 (х, 1Н), 7,76 (х, 1Н), 7,72 (х, 1Н), 7,31-7,19 (т, 2Н), 6,93-6,82 (т, 2Н), 5,39 (б, 1=6,9 Гц, 1Н), 1,53 (б, 1=6,9 Гц, 3Н).

- 49 032643

Соединение 78 (8)-4-Амино-6-((1-(3-фтор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрил

К раствору (8)-4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5карбонитрила (100 мг, 0,28 ммоль) в СНС1₃ (15 мл) добавляли \-фтор-\(фенилсульфонил)бензолсульфонамид (886 мг, 2,81 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 32 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с получением 5 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. МС (т/ζ)=375 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃) δ 8,05 (8, 1Н), 7,87 (ά, 1=1,4 Гц, 1Н), 7,67-7,64 (т, 2Н), 7,53-7,49 (т, 3Н), 7,49-7,43 (т, 1Н), 7,37 (ά, 1=7,0 Гц, 1Н), 5,46-5,31 (т, 3Н), 1,37 (ά, 1=6,8 Гц, 3Н).

Соединение 79.

(Хиральный)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил

(A) 5-(1-Аминоэтил)-6-хлорпиридазин-3-амин.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (О). ((Κ)-Ν-(1-(6(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамид получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (Е)).

(B) трет-Бутил-(1-(6-амино-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)карбамат.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 31 (В).

(C) трет-Бутил-(1-(6-хлоримидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамат.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 31 (С).

(Ό) трет-Бутил-(1-(6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)этил)карбамат.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (Р). МС (тА)=397 [М+Н]⁺.

(Е) 2-(3-(7-(1-Аминоэтил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-6-ил)фенил)пропан-2-ол

- 50 032643

Смесь трет-бутил-(1-(6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)этил)карбамата (120 мг, 0,30 ммоль) в ТРЕ (3 мл) перемешивали при 140°С в течение 1 ч в микроволновом реакторе. Смесь концентрировали в вакууме с получением 95 мг неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии без очистки. МС (тА)=297 [М+Н]⁺.

(Р) 4-Амино-6-((1-(6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (Б). МС (ιηζ)=415 [М+Н]⁺.

(О) 4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М).

(Н) (Хиральный)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.

Рацемическое соединение О разделяли с помощью хиральной ВЭЖХ с получением оптически чистых энантиомеров соединения 79 (условия ВЭЖХ: колонка: СНIКА^ΡАΚ 1а 20 тт Ι.Ό.χ25 см Б; подвижная фаза: Е!ΟН/^ЕА=100/0,10; скорость потока=8,0 мл/мин; детектор: υν 254 нм). Элюент (КГ=3,958 мин) составлял 97,51% эи. МС (т/ζ): 449 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-6б) δ 8,26 (з, 1Н), 7,87 (б, 1=5,3 Гц, 2Н), 7,78-7,76 (т, 2Н), 7,60-7,58 (т, 1Н), 7,43-7,72 (т, 2Н), 7,21 (з, 2Н), 5,19-5,11 (т, 1Н), 1,43 (з, 3Н), 1,43 (з, 3Н), 1,34 (б, 1=6,8 Гц, 3Н).

Соединение 79 могло представлять собой:

Следующее соединение получали в соответствии с процедурой для 79 (О) с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны ΡΟ8IТА.

Соединение	Структура	МС (Μ+Η)+	ЯМР	Промежуточное соединение
				1Η ЯМР (400 МГц,		β
	С1 °У·	||		СОСЬ) δ 8,05 (5, 1Η),	ϋ.
		II '0°		7,93 (5, 1Η), 7,70 (5,
80			396	1Η), 5,46-5,44 (т, 1Η),
	ΗΝ	χ		5,41-5,34 (т, 1 Η), 5,33		νη2
	ΟΝΛ	ΥΝ		(5, 2Η), 1,36 (ό, 7= 6,8
		νη2		Гц, ЗН).	МС (Μ+Η)+:	244

Соединение 81.

(8)-^-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2ил)пиримидин-4,6-диамин

- 51 032643

(А) (8)-№-Ацетил-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбогидразид.

К раствору (8)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбоновой кислоты (88 мг, 0,21 ммоль), уксусного гидразида (19 мг, 0,25 ммоль), НАТИ (95 мг, 0,25 ммоль) в ДМФА (2 мл) по каплям добавляли Εΐ₃Ν (64 мг, 0,63 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ТСХ и ЖХ-МС показали, что исходное вещество было израсходовано. Затем смесь разделяли между воды (2 мл) и ЕА (5 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали ЕА (5 млх3). Объединенные органические слои сушили над безводным №₂8О₄, концентрировали с получением 70 мг неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии без какой-либо очистки. МС (т/ζ) 466 [М+Н]⁺.

(В) (8)-^-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2ил)пиримидин-4,6-диамин.

К перемешиваемому раствору (8)-№-ацетил-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбогидразида (70 мг, 0,15 ммоль) в сухом ТНЕ (3 мл) добавляли метил Ж(триэтиламмонийсульфонил)карбамат (89 мг, 0,38 ммоль). Смесь нагревали и перемешивали в течение 3 ч при кипячении с обратным холодильником. Затем смесь охлаждали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=6:4) с получением 10 мг указанного в заголовке соединения. МС (т/ζ) 448 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР(400 МГц, ДМСО) δ 8,25 (б, 1=6,4 Гц, 1Н), 8,14 (в, 1Н), 7,90 (в, 1Н), 7,87 (в, 1Н), 7,71-7,66 (т,2Н), 7,54-7,50 (т, 3Н), 7,22 (в, 2Н), 5,24-5,17 (т, 1Н), 2,57 (в, 3Н), 1,37 (б, 1=6,9 Гц, 3Н).

Соединение 82.

(8)-Ν⁴-( 1 -(3 -Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(3 -метил-1,2,4-оксадиазол-5ил)пиримидин-4,6-диамин

С1 о

МеОЫа ''О О

№ОН ''О О

(A) Метил 4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксилат.

К раствору этил-4,6-дихлорпиримидин-5-карбоксилата (5 г, 22,73 ммоль) в МеОН (50 мл) партиями добавляли метоксид натрия (4,3 г, 79,55 ммоль). Реакционную смесь нагревали и перемешивали в течение ночи при кипячении с обратным холодильником. Затем смесь добавляли воды (50 мл) и экстрагировали ЕА (50 млх2). Объединенные органические слои сушили над безводным №₂8О₄, концентрировали с получением 3,9 г неочищенного продукта. Выход: 88%. МС (тА)=199 [М+Н]⁺.

(B) 4,6-Диметоксипиримидин-5-карбоновая кислота.

К раствору метил-4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксилата (3,9 г, 19,69 ммоль) в МеОН (40 мл) добавляли раствор №ОН (1,6 г, 39,38 ммоль) в воде (5 мл). Затем реакционную смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры, к смеси добавляли соляную кислоту (4 М, 10 мл) до рН 4-5. Осадок фильтровали с получением

- 52 032643

3,5 г указанного в заголовке соединения. Выход: 95%. МС (ιη/ζ)=185 [М+Н]⁺.

(С) 4,6-Диметоксипиримидин-5-карбоксамид.

К раствору 4,6-диметоксипиримидин-5-карбоновой кислоты (2,5 г, 13,58 ммоль), хлорида аммиака (864 мг, 16,3 ммоль), НАТи (6,2 г, 16,3 ммоль) в ДМФА (30 мл) добавляли по каплям Ξΐ₃Ν (4,1 г, 40,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ТСХ и ЖХ-МС показали, что исходное вещество было израсходовано. Затем смесь гасили водой (30 мл) и экстрагировали ДХМ (50 млх3). Объединенные органические слои сушили над безводным №₂8О₄, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:МеОН=8:2) с получением 1,3 г указанного в заголовке соединения. Выход: 51%. МС (ιη/ζ)=184 [М+Н]⁺.

(Ό) (Е)-№(1-(Диметиламино)этилиден)-4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксамид.

Раствор 4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксамида (1,3 г, 7,1 ммоль) и диметилацеталя Ν,Νдиметилацетамида (4,7 г, 35,5 ммоль) в сухом толуоле (20 мл) нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ЕА:МеОН=7:3) с получением 715 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 40%. МС (т^)=253 [М+Н]⁺.

(Е) 5-(4,6-Диметоксипиримидин-5 -ил)-3 -метил-1,2,4-оксадиазол.

(Е)-№(1-(Диметиламино)этилиден)-4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксамид (715 мг, 2,83 ммоль) добавляли к раствору гидрохлорида гидроксиламина (254 мг, 3,68 ммоль) в водном растворе №ЮН (2 М, 2,4 мл, 4,81 ммоль). Затем добавляли диоксан (8 мл) и АсОН (5,6 мл, 99,05 ммоль). Смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь охлаждали, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=6:4) с получением 131 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 21%. МС (ιη/ζ)=223 [М+Н]⁺.

(Е) 5-(3-Метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиримидин-4,6-диол.

К перемешиваемому раствору 5-(4,6-диметоксипиримидин-5-ил)-3-метил-1,2,4-оксадиазола (131 мг, 0,59 ммоль) в АсОН (0,2 мл) медленно по каплям добавляли концентрированную соляную кислоту (0,2 мл). Затем смесь нагревали до 50°С и перемешивали в течение 3 ч. Затем смесь охлаждали и концентрировали, остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (МеОН:Н₂О=15:85) с получением 71 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 62%. МС (ιη/ζ)=195 [М+Н]⁺.

(С) 5-(4,6-Дихлорпиримидин-5-ил)-3-метил-1,2,4-оксадиазол.

Раствор 5-(3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиримидин-4,6-диола (71 мг, 0,36 ммоль) в РОС1₃ (1 мл) нагревали до 100°С и перемешивали в течение 1 ч. Смесь охлаждали и очень медленно по каплям добавляли к ледяной воде. Водный слой экстрагировали ДХМ (5 млх3). Объединенные органические слои сушили над безводным №₂8О₄, концентрировали с получением 54 мг указанного в заголовке соединения, которое использовали для следующей стадии без какой-либо очистки. Выход: 64% МС (ιη/ζ)=231 [М+Н]⁺. (Н) 6-хлор-5 -(3 -метил-1,2,4-оксадиазол-5 -ил)пиримидин-4-амин.

Раствор 5-(4,6-дихлорпиримидин-5-ил)-3-метил-1,2,4-оксадиазола (54 мг, 0,23 ммоль) в ТНЕ (1 мл) барботировали через ИН₃ в течение 5 мин и перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем смесь концентрировали с получением 36 мг указанного в заголовке соединения, которое использовали для следующей стадии без какой-либо очистки. Выход: 75%. МС (ιη/ζ)=212 [М+Н]⁺.

(I) (8)-5-(3-Метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-^-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7ил)этил)пиримидин-4,6-диамин.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (Ь). МС (ιη/ζ)=414 [М+Н]⁺.

(1) (8)-Ν⁴-( 1 -(3 -Хлор-6-фенилимидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5 -(3 -метил-1,2,4-оксадиазол-5ил)пиримидин-4,6-диамин.

Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). МС (ιη/ζ)=448 [М+Н]⁺.

'|| ЯМР (400 МГц, СЭ_;ОЭ) δ 8,00 (8, 1Н), 7,94 (δ, 1Н), 7,72-7,69 (т, 3Н), 7,54-7,49 (т, 3Н), 5,53-5,43 (т, 1Н), 2,45 (8, 3Н), 1,45 (4, 1=6,9 Гц, 3Н).

Пример 2. Флуоресцентное определение ферментативной активности Р1₃К.

Р1₃К-киназы, включая р110а/р85а и р110у, были приобретены у 1пу11годеп, р110<5/р85а и р110в/р85а были приобретены у М1Шроге.

Первичные данные скрининга и значения 1С₅₀ измеряли с использованием анализа Тгап8сгеепег ™ КША8Е (Ве11Ьгоок, Са1а1од # 3003-10К). Анализ может быть проведен в соответствии с процедурами, предложенными изготовителем. Это универсальная, однородная высокопроизводительная технология скрининга (НТ8), использующая конкурентный иммуноанализ поляризации флуоресценции дальнего красного спектра, основанный на обнаружении АЭР для контроля активности ферментов, которые катализируют реакции группового переноса. Вкратце, анализ Тгап8сгеепег КША8Е был разработан как простой состоящий из двух частей конечный анализ, включающий:

1) Получение 25 мкл киназной реакции: 25 мкл киназную реакцию осуществляли путем получения реакционной смеси, содержащей 10 мкл киназного буфера (50 мМ НЕРЕ8, 100 мМ №С1, 1 мМ ЕСТА,

- 53 032643

0,03% СНΑΡ8, 3 мМ МдС1₂ и свежеприготовленный 1 мМ ΌΤΤ) и 10 мкл 30 мкМ ΡΙΡ2 и 10 мкМ АТР, 5 мкл раствора испытуемого соединения (соединение растворяли в ДМСО, конечные концентрации соединения в реакционной смеси составляли 1, 0,3, 0,1, 0,037, 0,012, 0,0041, 0,0014 и 0,0005 мМ и конечная концентрация ДМСО в реакционной смеси составляла 2%) или 5 мкл контроля (2% ДМСО). Реакционную смесь добавляли в требуемые лунки 96-луночного планшета. Планшет герметизировали и инкубировали в течение 80 мин при комнатной температуре.

2) Затем в каждую лунку добавляли 25 мкл смеси для детектирования ΑΌΡ. Планшет снова герметизировали и инкубировали в течение 60 мин при комнатной температуре. Затем поляризацию флуоресценции измеряли с помощью счетчика Тесап 1пйпИе Е500 Кеайег.

Данные анализировали и значения 1С₅₀ получали с использованием дополнительного программного обеспечения для М1сго§ой Ихсе1, Х1Й1™ (версия 5.3).

Скорости ингибирования вычисляли следующим образом: 1Н%=(количество ΑΌΡ при 2% ДМСО в лунке - количество ΑΌΡ в лунке с испытуемым соединением)/количество ΑΌΡ при 2% ДМСО в лункех100%.

Ниже приведены значения 1С₅₀ (мкМ) или скорости ингибирования (1Н%) при 1 мкМ некоторых соединений:

Соед и нение	ΡΙ3Κ-6	ΡΙ3Κ-γ	ΡΙ3Κ-β	ΡΙ3Κ-0
1С50 (мкМ)	1Н%	1С50 (мкМ)	1Н%	1С50 (мкМ)	1Н%	1С50 (мкМ)	!Н%
1	0,028			16,1%		28,1%	-
2	0,001		0,168		0,323		>1
3	0,048			6,9%	4,810		-
4	0,0003		0,038		0,087		>1
5		47,3%		4,1%		-10,7%	-
6	0,001			61,1%	0,303		>1
7		12,5%		-2,3%		-2,7%	-
8	0,010			-1,4%		37,7%	>1

- 54 032643

9	0,002		0,046		0,158		-
11	0,003		0,094			55,7%	-
12	0,002		0,55		0,080		-
13	0,003		0,484		1,918		>1
14		51,0%		22,5%		3,2%	-
15	0,001		0,393			59%	>1
16	0,003		0,326			27,5%	>1
17	0,026			61,2%		15,8%	>1
18	0,004		0,617			42%	>1
19	0,002		1,965		1,07		>1
20	0,073			43,1%		17,4%	>1
21	0,006		0,424		0,5			21,7%
22	0,002		0,322			76,7%		13,6%
23	0,006		0,343			28,7%		3,2%
24	0,002			44,5%		46,6%
25	0,004		2,593			22,8%
26	0,839			8%		-7,5%
27	0,025			24,9%		9,5%
28		39,8%		18,8%		11,1%
29	0,003			35%	0,174
30	0,003		0,410		1,039
31	0,004		0,146		0,371
32	0,015		0,243			23,8%
33	0,288			-6,9%		2,2%
34		8,3%		-19,3%		3,7%

- 55 032643

35	0,004			64,6%		67,6%
36	0,003		0,243		1,310
37	0,288			27,5%		-0,4%
38	0,066			54,3%		-2,2%
39	0,073			28,1%		-4,4%
40	0,002		>0,333		0,277
41	0,003		0,499		1,331
42	0,339			18,2%		7,4%
43	0,132			27,2%		23,6%
44	0,283			36,0%		18,8%
45	0,003		0,195		0,450
46	0,004		0,050		1,318
47	0,018			55,2%		32,2%
48	0,009		1,331		4,083
49	0,001		0,146		0,001
50		68,9%		5,5%		-14,1%
51	0,957			36,7%		-15,5%
52	0,080			-26,1%		-6,3%
53	0,011			34,3%		30,5%
54	0,002		0,226		0,009
55		60,3%		-4,7%		8,5%
56		21,0%		1,0%		9,0%
57	0,062			30,3%		6,3%
58	0,138			20,2%		20,5%
59	0,005		2,393		1,161

- 56 032643

60	0,001		0,048		0,034
61	0,007			26,5%		24,4%
62	0,002		0,247		1,232
63	0,006		0,105			48,1%
64	0,048		>0,333			44,1%
65	0,002		0,611		1,257
66	0,009		1,119		4,298
67	0,005		1,145		3,584
68	0,002		0,345		0,963
69	0,001		0,023		0,133
70	0,022		1,979			37,4%
71	0,129			32,6%		35,2%
72	0,004		0,513		0,089
73	0,082			62,8%		60,8%
74	0,009			40,8%		49,4%
75		1,0%		31,7%		-7,1%
76		48,9%		-14,3%		54,9%
77	0,002		0,436		0,238
78	0,001		0,712			50,1%
79	0,002			56,2%		43,8%
80	0,0005		0,059		0,272
81	0,002		0,098		0,630
82	0,013		0,203			55,2%

Пример 3. Ингибирование фосфорилирования АКТ в клеточной линии Като8.

6х10⁴/мл клетки Като8 (АТСС, СКЕ-1596, клетки культивировали в среде КРМП640 с 10% РВ8) высевали на 96-луночный планшет (Весктап В1ск1п8оп, Νο. 356692) при 80 мкл/лунка, 4800 клеток/лунка. После инкубации в течение 3 ч при 37°С при 5% СО₂ клетки Кашо8 с концентрацией 10 мкл/лунка обрабатывали различными концентрациями испытуемого соединения (конечные концентрации испытуемого соединения: 1, 0,3, 0,1, 0,037, 0,012, 0,0041, 0,0014 и 0,0005 мкМ) или 0,3% ДМСО в течение 30 мин, а затем стимулировали при 10 мкл/лунка 1 мкг/мл антиЧдМ (1аск8оп ^шипо^еагсй, 709-006-073) в течение 15-20 мин.

1) Клетки фиксировали 100 мкл 4% предварительно нагретого параформальдегида (2% конечной концентрации) и инкубировали в течение 45 мин при комнатной температуре.

2) Раствор параформальдегида удаляли. 100 мкл ледяного метанола добавляли в каждую лунку и планшет оставляли при 4°С в течение 30 мин.

3) Клетки трижды промывали 160 мкл РВ8.

4) В каждую лунку добавляли 40 мкл разведения 1:350 антитела кролика анти-р-АКТ(8ег⁴⁷³) (Се11 81§па1тд Тесйпо1о§у, 4060 л) в буфере для разведения антител (1% В8А, в РВ8). Планшет инкубировали в течение ночи при 4°С.

5) Клетки промывали 3 раза 160 мкл РВ8.

6) В каждую лунку добавляли 45 мкл козьего антикроличьего А1еха488 антитела Дпуйгодеп, А11034) в разведении 1:1000 в буфере для разведения антител (1% В8А в РВ8). Планшет покрывали фольгой для защиты от света и инкубировали в течение 90 мин при комнатной температуре.

7) Клетки промывали 3 раза 160 мкл РВ8.

8) 50 мкл 1,5 мкМ раствора йодида пропидия (81§та: Р4170) добавляли в каждую лунку для определения количества клеток (1,5 мМ стоковый раствор пропидия разводили 1:1000 в РВ8, а конечная концентрация составляла 1,5 мкМ).

9) Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем герметизировали с помощью защитного покрытия.

10) Планшет загружали в Аситеп Ехр1огег и сканировали с соответствующими настройками прибора.

Данные анализировали и значения !С\₀ получали с использованием дополнительного программного

- 57 032643 обеспечения для М1сго8ой Ехсе1, Χΐίΐΐ™ (версия 5.3).

Ниже приведены значения ΙΓ₅₀ (мкМ) некоторых соединений:

Соединение	IСзо (мкМ)	Соединение	Юбо (мкМ)	Соединение	ΙΟδο (мкМ)
2	0,001	32	0,020	62	0,001
4	0,002	35	0,013	65	0,002
6	0,0003	36	0,001	66	0,002
13	0,004	40	0,003	67	0,003
15	0,0005	41	0,012	68	0,001
22	0,004	45	0,003	74	0,023
23	0,012	46	0,006	77	0,003
24	0,007	48	0,008	78	0,007
25	0,005	53	0,016	79	0,002
30	0,001	59	0,006
31	0,002	61	0,041

Пример 4. Ингибирование передачи сигналов ΡΙ₃Κδ в базофилах из цельной крови человека. 1. Реагенты и материалы.

Реагент	Производитель	Категория
анти-1дЕ-РЕ, анти-СО63- ПТС	ΟΡΡΕΟΕΝ рпагта	компонент набора ВАТ
промывочный буфер	ΟΡΡΕΟΕΝ рпагта	компонент набора ВАТ
10х лизисный буфер	Βϋ	555899
Рекомбинантный человеческий ΙΙ.-3	Рерго1есп	АЕ-200-03
Козий античеловеческий |дЕ	ΒβΐήγΙ	А80-108А
96-луночный планшет с νобразным дном	ΝΙΙΝΟ	249952

2. Способы.

1) Гепаринизированную цельную кровь человека смешивали и пипетировали в 96-луночный планшет с ν-образным дном, 100 мкл на лунку.

2) 10 мкл буфера для стимуляции (стоковый раствор 1 мг/мл, конечная концентрация рекомбинантного человеческого ΙΙ.-3: 20 нг/мл) добавляли к образцам цельной крови каждой лунки и осторожно встряхивали. Образцы инкубировали в течение 20 мин при 37°С.

3) 10 мкл/лунку разведения испытуемого соединения (конечные концентрации испытуемого соединения в лунке: 1 мкМ, 0,3 мМ, 0,1, 0,037, 0,012, 0,0041, 0,0014 и 0,0005 мМ) или носитель (0,2% ДМСО) добавляли в каждую лунку планшета и планшет инкубировали в течение 1,5 ч при 37°С.

4) В каждую лунку планшета добавляли 100 мкл козий античеловеческий Ι§Ε (1 мг/мл стокового раствора, конечная концентрация Ι§Ε: 0,31 мкг/мл). Встряхивали все лунки еще раз и инкубировали в течение 20 мин при 37°С.

5) Маркировка окрашивающим антителом: дегрануляцию останавливали путем инкубирования образцов на льду в течение 5 мин. В каждую лунку добавляли 6 мкл смеси окрашивающих антител (антиСИ63-НТС и анти-Ι^Ε-ΡΕ). Встряхивали и инкубировали лунки в течение 20 мин на ледяной бане, закрытой для предотвращения воздействия света.

6) Образцы цельной крови лизировали с 300 мкл лизиса КВС (предварительно нагретый до комнатной температуры, от 20 до 25°С). Встряхивали и инкубировали образцы в течение 15 мин при комнатной температуре. Замедлять вращение клеток (5 мин, 250хд, 4°С). Супернатант отсасывали, оставляя приблизительно 100 мкл в каждой лунке.

7) Образцы крови снова лизировали как на этапе 6).

8) Промывка: образцы промывали один раз 0,5 мл промывочного раствора. Планшет центрифугировали (5 мин, 250хд, 4°С). Супернатант отсасывали, оставляя приблизительно 100 мкл в каждой лунке. Образец в каждой лунке промывали и снова центрифугировали, как описано выше.

9) 200 мкл фиксирующего раствора (1% паральдегида в 1% Β8Α/ΡΒ8) добавляли в каждую лунку. Планшет инкубировали в покрытой ледяной бане до анализа.

10) Проточный цитометрический анализ. Клетки анализировали методом проточной цитометрии с использованием сине-зеленого возбуждающего света (488 нм аргоно-ионный лазер, ГАСЗСаГЬиг, про

- 58 032643 граммное обеспечение СΕ^^^ие8ΐ).

3. Анализ данных.

Данные анализировали и значения !С₅₀ получали с использованием дополнительного программного обеспечения для М1сго8ой Ехсе1, Χίβΐ™ (версия 5.3).

Ниже приведены значения !С₅₀ (мкМ) некоторых соединений:

Соединение	1СбО (мкМ)	Соединение
4	0,001	20
6	0,006	22
8	0,009	23
13	0,010	24
15	0,002	25
16	0,011	27
17	0,618	30
18	0,088	41
19	0,016	48

ΙΟδο (мкМ)	Соединение	1Сбо (мкМ)
0,397	59	0,1
0,002	61	0,109
0,006	62	0,015
0,011	65	0,014
0,037	66	0,262
0,565	67	0,010
0,006	68	0,002
0,018	78	0,010
0,041

Пример 5. Анализ ίη νΐΐΓο клеточной пролиферации в клеточной линии 8υ-ΌΗΓ-6.

Анализы ингибирования роста проводили с использованием 10% ГВ8-дополненных сред. Клетки высевали при концентрации 15000 клеток на лунку в 96-луночном планшете. Разбавление испытуемого соединения в различных концентрациях (конечные концентрации испытуемого соединения: 1 мкМ, 0,3 мМ, 0,1 мМ, 0,037 мМ, 0,012 мМ, 0,0041 мМ, 0,0014 мМ и 0,0005 мМ) добавляли через 24 ч. Рост оценивали с использованием набора для подсчета клеток Се11 Соипйпд Κΐΐ-8 (ССК-8) (Όο)ΐηάο, Саΐ# СК04) после того, как испытуемые соединения инкубировали в течение 72 ч. Поглощение считывали при длине волны 450 нм на аппарате МиШзкап МК3 (Τ^μο).

Данные анализировали и значения ΚΕ₀ получали с использованием дополнительного программного обеспечения для Μί^οδοή Ехсе1, Χίβΐ™ (версия 5.3).

Ниже приведены значения !С\₀ (мкМ) некоторых соединений:

Соединение	1С5о (μΜ)	Соединение	1С5о (μΜ)	Соединение	1С5о (μΜ)
4	0,001	16	0,011	22	0,019
6	0,003	17	0,172	23	0,078
8	0,031	18	0,026	24	0,011
13	0,011	19	0,023	25	0,032
15	0,002	20	0,262	29	0,011

Пример 6. Действие соединения 4 на активацию В-клеток, индуцированных антиЯдО-антителами, в цельной крови крысы.

Известно, что активация В-клеток (В220+) в цельной крови крысы антителом антиЯдО, приводящая к активации через ^-рецепторы, включает пути РЦК и чувствительна к модуляции ингибиторами РЦК6. Был разработан фармакодинамический анализ для оценки активности ингибиторов РЦК6 ех νίνο после перорального введения ингибиторов крысам.

В экспериментах использовали крыс Ш181аг (самки, возраст 6-8 недель). Изучение зависимости от дозы и вермени и взаимосвязь с РКР1) соединения 4 проводились у нормальных крыс Ш181аг. Соединение 4 (0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1, 3 мг/кг), растворенное или суспендированное в носителе (0,5% СМС-Να, рН 2,1), вводили крысам (3 крысам на дозу) перорально один раз. Контрольную группу (6 крыс) обрабатывали только одним носителем. В назначенные моменты времени (1, 8, 16 и 24 ч после введения) образцы крови собирали у крыс с помощью ретроорбитального кровотечения при изофлюрановой анестезии в гепаринизированные пробирки. Гепариновую антикоагулированную кровь смешивали с антикрысиным ^Ό, затем инкубировали при 37°С при 5% СО₂ в течение ночи. Сигнал флуоресценции для СО86 на положительных клетках В220 (В-клетки) детектировали с использованием проточного цитометра (ΒΌ ГЛС8Са11Ьиг, ΒΌ ВюБсаепсеБ) и данные анализировали с помощью программного обеспечения Се1^ие8к Плазму собирали для измерения уровней соединения 4.

Как показано на фиг. 1, соединение 4 ингибировало индуцированную антиЯдО активацию В-клеток в цельной крови крысы, ех νίνο, зависимым от дозы и времени образом в интервале доз от 0,01 до 3 мг/кг (р<0,01). Значения ΕΌ₅₀ через 2 ч после введения дозы составляли <0,01 мг/кг при соответствующем значении ЕС₅₀, равном 1,487 нг/мл. Уровни концентрации соединения 4 были пропорциональны дозе в диа

- 59 032643 пазоне доз от 0,01 мг/кг до 3 мг/кг. После однократного перорального введения дозы 0,1 мг/кг полное ингибирование активации В-клеток (> 90%-ное ингибирование) наблюдалось в течение 24 ч.

Пример 7. Эффект соединения 4 в модели артрита, вызванного коллагеном II (СА), на крысиной модели.

Артрит, вызванный коллагеном, у крыс, является экспериментальной моделью полиартрита, которая широко используется для неклинического тестирования многочисленных противоартритных агентов, которые либо находятся в стадии неклинических, либо клинических исследований, или в настоящее время используются в качестве терапевтических средств при данном заболевании.

Защитный эффект соединения 4 оценивали в модели артрита, индуцированного коллагеном (СПА), у крыс. Крыс Ш1х1аг иммунизировали внутрикожно 200 мкг бычьего коллагена II, эмульгированного в неполном адъюванте Фрейнда (РРА, 81§та, США) на 0 и 7 день. Объем задних лапок измеряли до и после иммунизации. Для оценки противовоспалительного действия соединения 4 крыс-самок Ш1х1аг с установленным артритом, вызванным коллагеном типа II, перорально (РО) обрабатывали соединением 4 (0,03, 0,1 и 1 мг/кг) или носителем (0,5% СМС-Νβ, ρΙΙ2.1) один раз в день (01)) в течение 7 дней (дни 10-16) после индукции коллагеном типа II. Наивной группе не вводили. Υ^8а^Ρи (10 мг/кг), слитый белок Е75 рецептора фактора некроза человека р75 вводили путем внутрибрюшинной инъекции на 10, 12 и 14 день в качестве положительного контроля. Исследование было прекращено на 18-й день. Результаты исследования показаны на фиг. 2.

Как показано на фиг. 2, объем лапок для крыс, обработанных носителем, достиг максимума на 16 день. По окончанию периода лечения средний объем был значительно снижен для всех активных групп лечения по сравнению с больными животными, обработанными носителем (р <0,01), за исключением самой низкой дозы соединения 4 (0,03 мг/кг).

Площадь под кривой (АИС) от среднего набухания лапы по времени была использована в качестве параметра для оценки влияния соединения 4 на объем лапы в течение нескольких дней дозирования. Для каждой группы дозирования процентное снижение АИС по сравнению с обработанными носителем больными животными определялось в диапазоне от 0,03 до 1 мг/кг оцениваемого диапазона. АИС сокращения диаметра голеностопного сустава соединения 4 варьировалась от 15,5 до 99,5% по сравнению с контрольными носителями.

В том же исследовании лечение Υ^8а^Ρи (10 мг/кг, РОЭ) уменьшало набухание лапы АИС на 81,6% по сравнению с животными, обработанными носителем.

В заключение, ежедневное пероральное введение соединения 4 показало дозозависимое благоприятное воздействие на параметры, связанные с установленным артритом, вызванным коллагеном артритом II типа, у крыс.

Claims (21)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы (I) νν (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, где Аг представляет собой арил, представляющий собой карбоциклический углеводородный радикал моноциклического кольца или конденсированных колец, содержащих 6-12 атомов углерода в кольце, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим и ни одно из других колец не представляет собой гетероарил; или гетероарил, представляющий собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов 8 и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде Ν-оксида;

   каждый из указанного арила и гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, -С^ -ОН, -8Н, С₁.₆алкила, С₁.₆галогеналкила, -(С_1-6алкил)ОН и -8(О)₂(С_1-6алкил);

   Ш выбран из гетероарила и -^К₃)гетероарила, где указанный гетероарил представляет собой моно

   - 60 032643 циклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из Ы, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из Ы, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов 8 и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом Ы присутствует в виде Ы-оксида, и указанный гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -СЫ, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, -ЫН₂, -ЫН(С_1-6алкил), -Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)ЫН₂, -С(О)ЫН(С_1-6алкил), -С(О)Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из Ы, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов 8 и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и каждый из указанного фенила или указанного 5- или 6-членного гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, -8Н, С_1-6алкила и -О(С_1-6алкил);

   К₁ независимо выбран из Н, галогена, С_1-6алкила;

   К₂ выбран из С_1-6алкила;

   К₃ представляет собой Н или С_1-6алкил;

   т представляет собой 1 или 2.
2. 2. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры и диастереомеры, отличающееся тем, что выбран из азотсодержащего гетероарила и -Ы(К₃) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 6 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома Ы, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 атомов в кольце и содержащий в кольцах 3 или 4 гетероатома Ы, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, и указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -СЫ, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, -ЫН₂, -ЫН(С_1-6алкил), -Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)ЫН₂, -С(О)ЫН(С_1-6алкил), -С(О)Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5- или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из Ы, О и 8, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов 8 и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и каждый из указанного фенила или указанного 5- или 6-членного гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С_1-6алкила и -О(С_1-6алкил).
3. 3. Соединение формулы (I) по п.2, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры, отличающееся тем, что указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СЫ, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, -ЫН₂, -ЫН(С_1-6алкил), -Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)ЫН₂, фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С_1-6алкила и -О(С_1-6алкил).
4. 4. Соединение формулы (I) по п.3, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры, отличающееся тем, что указанный азотсодержащий гетероарил выбран из пиримидинила, пирролопиримидинила и пуринила и/или галоген выбран из фтора, хлора и брома.
5. 5. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что выбран из:

   каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СЫ, -ОН, -8Н, С_1-6алкила, -ЫН₂, -ЫН(С_1-6алкил), -Ы(С_1-6алкил)(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)ЫН₂, -С(О)ЫН(С_1-6алкил), фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С_1-6алкила и -О(С₁-С₆-алкил).

   - 61 032643
6. 6. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что выбран из:

   ΝΗ каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из хлора, -СН

   -ΝΗ₂, -КН(С_1-6алкил), -СООН, -С(О)КН₂, фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С1_-6алкила и -О(С1_-6алкил).
7. 7. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что представ- ляет собой ’ который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -СИ -ОН, -8Н, С1_-6алкила, -ЛН₂, -ЛН(С_1-6алкил), -НС^алкилХСцбалкил), -СООН,

   -С(О)КН₂, фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -ОН, С1_-6алкила и -О(С1_-6алкил).
8. 8. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-7, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что Аг выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиразолила, хинолила, тиенила, бензотиазолила, индолила и 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксинила, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из Ώ, галогена, -СП С1_-6алкила, -(С1_-6алкил)ОН, С1_-6галогеналкила и -8(О)₂(С1_-6алкил).
9. 9. Соединение формулы (I) по п.8, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что Аг представляет собой фенил или пиридил, каждый из которых необязательно замещен одним или более атомами фтора.
10. 10. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-9, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что К₁ независимо выбран из Н, галогена и С_1-6алкила, и/или К₂ представляет собой С_1-4алкил, предпочтительно метил и этил, и/или К₃ представляет собой Н, и/или т представляет собой 1.
11. 11. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-10, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что формула (I) представляет собой формулу (Ы) (1-1) .
12. 12. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, выбранное из:

    - 62 032643

    - 63 032643

    64 032643

    65 032643
13. 13. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, реагирующего на ингибирование ΡΙ₃Κ, содержащая соединение формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
14. 14. Способ ίη νίνο или ίη νίΐΐΌ ингибирования активности ΡΙ₃Κ, включающий приведение в контакт ΡΙ₃Κ с количеством соединения формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его по меньшей мере одной фармацевтически приемлемой соли, эффективным для ингибирования активности ΡΙ₃Κ.
15. 15. Способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирование ΡΙ₃Κ у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, количества соединения формулы (Ι) по любому из пп.1-12 и/или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для ингибирования указанного ΡΙ₃Κ у указанного субъекта.
16. 16. Способ по п.15, отличающийся тем, что указанное заболевание, реагирующее на ингибирование ΡΙ₃Κ, представляет собой воспалительное заболевание, аутоиммунное заболевание или рак.
17. 17. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанное воспалительное заболевание или аутоиммунное заболевание выбрано из ревматоидного артрита, хронической обструктивной болезни легких (СΟΡ^), аллергического ринита, астмы, волчанки, системной красной волчанки, псориаза и рассеянного склероза.
18. 18. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанный рак представляет собой солидную опухоль

    - 66 032643 или гематологическую злокачественную опухоль, выбранную из лейкоза, множественной миеломы (ММ) и лимфомы.
19. 19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный лейкоз выбран из острого лимфоцитарного лейкоза (АЬЬ), острого миелоидного лейкоза (ЛМЬ), хронического лимфоцитарного лейкоза (СЬЬ) и хронического миелогенного лейкоза (СМЬ); указанная лимфома выбрана из лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы (КНЬ), лимфомы из клеток мантийной зоны (МСЬ), фолликулярной лимфомы, Вклеточной лимфомы, Т-клеточной лимфомы и диффузной В-клеточной лимфомы (ВЬВСЬ).
20. 20. Соединение формулы (II) в качестве промежуточного соединения νη₂ (П) и/или его соль, и/или его рацемическая смесь или энантиомер, где Аг и К₂ определены в любом из пп. 1-11.
21. 21. Соединение формулы (II) в качестве промежуточного соединения по п.20 и/или его соль, выбранное из:

    - 67 032643

    - 68 032643 ^и Активированные В-клетки-8ч ^в Активированные В-клетки-16ч д Концентрация плазмы-1ч ух Концентрация плазмы-24ч □ Активированные В-клетки-1 ч

    В Активированные В-клетки-24ч Концентрация плазмы-16ч