EA031876B1 - Применения конъюгата, содержащего полипептид var2csa и эффекторную молекулу, для лечения и диагностики злокачественного новообразования - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к применению конъюгата или слитого белка, содержащего полипептид VAR2CSA или его фрагмент и терапевтическую или диагностическую эффекторную молекулу, для лечения или диагностики злокачественного новообразования соответственно. Также изобретение относится к применению фармацевтической композиции, включающей указанный конъюгат или слитый белок, в качестве лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования.

Description

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к конъюгатам и слитым белкам полипептидов VAR2CSA, содержащим минимальные связывающие фрагменты, и к их применению, в частности, для лечения злокачественных новообразований.

Уровень техники

Протеогликаны представляют собой белки, конъюгированные с одним или несколькими цепями гликозаминогликанов (GAG). Указанные белки распределяются внутри клеток, на клеточной мембране и во внеклеточном матриксе, выполняя ряд функций: образуют матрикс хряща, осуществление структурной организации тканей; организации базальных мембран; регулируют роль секреторных везикул; связывают цитокины, хемокины, факторы роста и морфогены, рецепторы протеиназ и ингибиторы протеиназ, корецепторы, рецепторы фактора роста типа тирозин-киназы, эндоцитозные рецепторы; облегчают прикрепления клеток, межклеточные взаимодействия и подвижность клеток, а также миграцию клеток.

Малярийный паразит Plasmodium falciparum использует протеогликаны клеток хозяина почти на всех стадиях своего сложного жизненного цикла. Спорозоит инфицирует гепатоциты печени посредством белка циркумспорозоита, экспрессируемого на поверхности и взаимодействующего с высокосульфатированными гепарансульфатпротеогликанами (HSPG). Инфицирование эритроцитов мерозоитами опосредуется связыванием ЕВА-175 с сиаловой кислотой на гликофорине А. Кроме того, ряд мембранных белков 1 эритроцитарной мембраны Plasmodium falciparum (PfEMP1), опосредующих эндотелиальную адгезию хозяина, описаны как связывающиеся с гликанами. Одним из них является VAR2CSA, который является уникальным членом семейства белков PfEMP1. VAR2CSA с высокой аффинностью связывается с необычной низкосульфатированной формой хондроитинсульфата A (CSA), прикрепленной к протеогликанам, так называемым протеогликаном хондроитинсульфатом (CSPG), в межворсинчатых пространствах плаценты. VAR2CSA представляет собой большой мультидоменный белок (350 кДа), экспрессируемый на поверхности эритроцитов, инфицированных P. falciparum (IE), и взаимодействие VAR2CSACSA ответственно за плацентарную специфичную секвестрацию при плацентарной малярии (РМ). Важно, рекомбинантный полноразмерный эктодомен VAR2CSA из паразитов типа FCR3 и 3D7 показал аффинность в отношении CSA на низком наномолярном уровне.

CSA принадлежит семейству гликозаминогликанов (GAG), которые представляют собой линейные полимеры из чередующихся аминосахаров и остатков гексуроновой кислоты, прикрепленных к протеогликанам. Существует несколько типов GAG, включая хондроитинсульфат (CS), дерматансульфат (DS или CSB), гепарансульфат (HS) и гепарин. В то время как полисахаридный скелет указанных GAG является простым, значительное разнообразие проявляется в модификациях, таких как сульфатирование и уронатная эпимеризация. Они являются основой для широкого разнообразия структуры домена и биологической активности различных GAG.

CS взаимодействует с многими важными факторами, такими как гормоны роста, цитокины, хемокины и молекулы адгезии, и, как полагают, участвует в структурной стабилизации, цитокинезе, клеточной пролиферации, дифференцировке, клеточной миграции, тканевом морфогенезе, органогенезе, инфекции и заживлении ран. Цепи CS состоят из чередующихся единиц №ацетилЮ-галактозамина (GalNAc) и остатков глюкуроновой кислоты. Глюкуроновая кислота может быть сульфатированной на позиции С2, a GalNAc может быть сульфатированным на позиции С4 и/или C6, в результате чего возникают различные дисахаридные единицы. Различающиеся модификации сахарного скелета обеспечивают структурную и функциональную гетерогенность цепей CS. Обладающие адгезией к плаценте паразиты P. falciparum специфичным образом связаны с низкосульфатированным CSA с сульфатированием только по С4 GalNAc.

Более ранние исследования указывали на CSA как ответственного за секвестрацию IE в плаценте. Специфичный рецептор, однако, не был известен. В результате дополнительных исследований было установлено, что плацента человека содержит три различных типа протеогликанов хондроитинсульфатов (CSPG), но что IE обладают специфичной адгезией к низкосульфатированным CSPG в межворсинчатых пространствах. Что является особенным для указанного типа CSPG, так это то, что только 2-8% дисахаридных единиц являются сульфатированными по С4. В сопутствующем исследовании, цель которого состояла в идентификации специфических структурных требований для CSA, было установлено, что адгезия паразитов к CSPG ингибируется CSA, содержащим 30-50% сульфатирования по С4, при этом остальные 50-70% дисахаридных единиц являются несульфатированными. Требования для CSA по минимальному ингибированию, как было показано, представляют собой додекасахарид (шесть дисахаридов), содержащий минимум 2-3 или 4-5 дисахаридных единиц, сульфатированных по С4.

Протеогликан хондроитинсульфат 4 (CSPG4), также известный как меланомасвязанный антиген с высокой молекулярной массой (HMW-MAA) или меланомасвязанный протеогликан хондроитинсульфат (MSCP), представляет собой протеогликан клеточной поверхности, который, как было показано, экспрессируется клетками меланомы.

CSPG4/MSCP/HMW-MAA представляет собой большой протеогликан, который характеризуется тем, что имеет цепи CS на белковом скелете. Сульфатирование указанных цепей CS, как представляется, происходит, главным образом, по С4 GalNAc (CSA), хотя степень сульфатирования не известна.

- 1 031876

Цель изобретения

Целью настоящего изобретения является получение минимальных функциональных связывающих фрагментов VAR2CSA, подходящих для нацеливания и/или обнаружения гликанов хондроитинсульфатов. Другими целями настоящего изобретения являются способы лечения состояний, связанных с экспрессией, например патологической экспрессией гликанов хондроитинсульфатов, таких как CSA, в которых полипептиды VAR2CSA или их фрагменты по отдельности или как часть конъюгатов или слитых белков используются для нацеливания и/или обнаружения ткани или клеток с экспрессией, такой как патологическая экспрессия гликанов хондроитинсульфатов.

Сущность изобретения

Авторы изобретение обнаружили, что VAR2CSA сохраняет свою способность к связыванию с высокой аффинностью и специфичностью в отношении определенных протеогликанов хондроитинсульфатов с минимальными структурными элементами полипептидной последовательности. Более важно, авторы обнаружили, что полипептиды VAR2CSA связываются с высокой и специфичной аффинностью с клетками злокачественных новоообразований и тканями злокачественных новоообразований, где связывание, как полагают авторы изобретения, происходит посредством специфичного взаимодействия с протеогликанами хондроитинсульфатов, экспрессируемыми на поверхности злокачественных клеток или в окружающем внеклеточном матриксе. Соответственно авторы изобретения предлагают использовать указанное специфичное и высокоаффинное связывание для нацеливания злокачественных клеток или других тканей или клеток с высокой или иной экспрессией, такой как патологическая экспрессия указанного конкретного типа протеогликанов хондроитинсульфатов.

Таким образом, в первом аспекте настоящее изобретение связано с выделенным фрагментом белка VAR2CSA, где фрагмент состоит из последовательной аминокислотной последовательности

a) ID1,

b) DBL2Xb и необязательно,

c) ID2a.

В некоторых вариантах выделенный фрагмент белка VAR2CSA содержит ID2a.

В еще одном аспекте настоящее изобретение связано с конъюгатом или слитым белком, содержащим полипептид VAR2CSA и терапевтическую или диагностическую эффекторную молекулу, такую как цитотоксическая молекула, флуоресцентная метка и/или радиоактивная метка.

Следует понимать, что для конъюгата, слитого или химерного белка, содержащего полипептид VAR2CSA, можно использовать любой полипептид VAR2CSA, как определено в настоящем документе. Соответственно указанный аспект не ограничивается использованием минимальных связывающих фрагментов. Это относится ко всем случаям использования термина полипептид VAR2CSA, и соответственно они в равной степени подходят для лечения, нацеливания или диагностики.

В еще одном аспекте настоящее изобретение связано с композицией, содержащей фрагмент белка, как определено в настоящем документе, антитело по настоящему изобретению или конъюгат по настоящему изобретению.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к слитому полипептиду VAR2CSA или конъюгату по настоящему изобретению для применения в качестве лекарственного средства или диагностического средства.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к слитому полипептиду VAR2CSA или конъюгату по настоящему изобретению для применения в диагностике.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к слитому полипептиду VAR2CSA или конъюгату по настоящему изобретению для лечения при любых показаниях, связанных с состоянием, в которое вовлечена экспрессия, такая как патологическая экспрессия CSA, например злокачественное новообразование.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к применению слитого полипептида VAR2CSA или конъюгата по настоящему изобретению в качестве биомаркера, такого как инструмент для обнаружения экспрессии, такой как патологическая экспрессия CSA, в жидкостях тела, таких как кровь, плазма, моча, слюна, фекалии, цереброспинальная жидкость, лимфа, желудочный сок, плевральная жидкость, синовиальная жидкость, сперма, и/или в ткани для диагностики и/или прогнозирования показания или состояния, связанного с экспрессией, такой как патологическая экспрессия CSA, например злокачественное новообразование, артрит, артроз, патологические состояния, вызванные повреждением нервной системы, состояния хряща и рубцовой ткани, такие как при ревматизме или заживлении ран, или псориаз, злокачественное заболевание, такое как опухоли головного мозга, опухоли печени и опухоли репродуктивной системы.

Следует понимать, что используемый в настоящем документе термин биомаркер относится к применению конъюгатов и слитых белков VAR2CSA по настоящему изобретению, если он вводится в организм для обнаружения экспрессии CSA как средство для диагностики и/или прогнозирования показания или состояния, связанного с экспрессией CSA, такой как патологическая экспрессия CSA.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к диагностическому способу обнаружения повышенных уровней CSA в жидкости тела, такой как кровь, плазма, моча, цереброспинальная жид

- 2 031876 кость, плевральные выпоты, синовиальная жидкость, костный мозг, желудочный сок, фекалии, сперма, простатическая жидкость, слюна, слезная жидкость, легочный аспират и лимфа, в ответ на злокачественное новообразование или другие состояния, связанные с патологической экспрессией CSA, где способ включает стадии приведения указанной жидкости тела в контакт с фрагментом белка, как определено в настоящем документе, полипептидом VAR2CSA или конъюгатом по настоящему изобретению и обнаружения комплексов, образованных с CSA в указанной жидкости тела.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к слитому полипептиду VAR2CSA или конъюгату по настоящему изобретению или фармацевтической композиции по настоящему изобретению в комбинации с любым другим подходящим противораковым средством.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение основано на том факте, что часть малярийного белка, так называемого VAR2CSA, может связываться с специфическим антигеном злокачественных клеток и внеклеточным CSPG с очень высокой специфичностью и очень высокой силой связывания.

VAR2CSA опосредует адгезию паразитов исключительно в отношении низкосульфатированного хондроитинсульфата A (CSA), прикрепленного к протеогликанам (CSPG) в плаценте беременных женщин. Было показано, что рекомбинантный белок связывается с CSA с беспрецедентно высокой аффинностью и специфичностью. Это может происходить благодаря взаимодействию с CSA, которое зависит не только от заряженных сульфатов, но также и от скелета CS. Авторы изобретения предполагают, что CS, присутствующий в плаценте, является очень сходным с CS, представленным на различных злокачественных клетках, включая злокачественные стволовые клетки. Это подтверждается тем фактом, что экспрессирующие VAR2CSA малярийные паразиты обладают специфичной адгезией к CSA на клетках меланомы С32 и к злокачественным клеткам головного мозга человека.

Соответственно настоящее изобретение основано на высокой аффинности и специфичности между рекомбинантными белками VAR2CSA и низкосульфатированным CSA. Благодаря нанесению метки на белок изобретение можно использовать для обширного ряда применений, включая отслеживание метастазов in vivo и диагностику метастатического заболевания. Путем прикрепления VAR2CSA к апоптотическому или цитотоксическому реагенту изобретение можно использовать для специфичного нацеливания и уничтожения злокачественных клеток и злокачественных стволовых клеток. Путем простой терапии с использованием рекомбинантного белка VAR2CSA будет возможной нейтрализация активности CSA, что ингибирует онкогенез и/или метастазирование экпрессирующих CSA злокачественных клеток. CSA может присутствовать на ряде скелетов белка, например CSPG4, CD44, бигликане, декорине, версикане, аггрекане (главном CSPG в хряще), перлекане, синдекане и других, перечисленных в табл. 1.

Таблица 1

Белок ID 1	Белок ID 2	Название гена
NG2	CSPG4	Cspg4
Нейрогликан и	CSPG5	ngc
нейрогликан-С
Нейропилин-1 CS	NRP-1-CS	NRP1
APLP2 и АРР (а когда добавлен CSA, белки называются Appicans)	предшественник амилоида - как белок 2	APLP2
Snore		Snore
Томорегулин-2	TENB2	TMEFF2
Тромбомодулин	CD141	THBD
Бетагликан	Бета-рецептор III трансформирующего фактора роста	TGFBR3
Синдекан 1	CD138	SDC1
Синдекан 2	CD362	SDC2
Синдекан 3		SDC3
Синдекан 4	Амфигликан	SDC4
CSPG8	CSPG8	Cd44
Глипикан-6 (kun 1 од 5)		GPC1-6
Бревикан	CSPG7	bean
Лубрицин	Протеогликан 4	PRG4
Белок 1 дентинного матрикса		DMP1
Нейрокан	CSPG3	ncan
Версикан	CSPG2	vean
Аггрекан	CSPG1	acan
Бамекан	CSPG6	smc3
SRPX2	Белок, содержащий повтор sushi	SRPX2
Серглицин	Ядерный белок гематопоэтического протеогликана	SRGN

- 3 031876

Настоящее изобретение, как полагают, особенно важно в случае злокачественной меланомы, включая кожную, глазную и конъюнктивальную меланому, имеющую CSPG4 с цепями CSA на поверхности клеток меланомы. Указанная цепь GAG, как полагают, участвует в митозе и метастазировании. Однако, CSPG4 является специфичным не только для меланомы. Совокупность микро- и тканевых анализов, проведенная авторами изобретения по данным из больших наборов тканевых и клеточных линий человека, предполагает, что CSPG4 и другие типы содержащих CSA протеогликанов могут присутствовать в широком ряде типов злокачественных новообразований, происходящих из всех трех клеточных зародышевых слоев. Указанные типы злокачественных новообразований включают карциному (рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак яичника, рак эндометрия, печеночно-клеточный рак, рак легкого, рак толстого кишечника, рак предстательной железы, рак шейки матки, рак яичка, базально-клеточный рак кожи, светлоклеточный рак почки, кератинизированный плоскоклеточный рак головы и шеи, плоскоклеточный рак кожи, кератинизированный плоскоклеточный рак вульвы и базально-клеточный рак вульвы), саркому (липосаркому молочной железы, фибросаркому, дедифференцированную хондро- и липосаркому, лейомиосаркому, миксоидную липосаркому, лейомиосаркому тела матки, остеосаркому, саркому Эвинга и рабдомиосаркому), рак системы кроветворения (хронический лимфолейкоз (CLL), острый лимфолейкоз (ALL), острый миелолейкоз (AML), В-клеточную, Т-клеточную и большую гранулярную лимфому), опухоли нейроэпителиальной ткани, такие как астроцитома (плеоморфная ксантоастроцитома, фибриллярные астроцитомы, анапластическая астроцитома, мультиформная глиобластома), олигодендроглиому, эпендимому, опухоль хороидного сплетения, олигоастроцитому, глиосаркому, ганглиоглиому, ретинобластому, нейроцитому, нейробластомы (эстезионейробластому и ганглионейробластому), медуллобластому, атипичные тератоидные рабдоидные опухоли и все типы нейроэндокринного рака.

Протеогликаны хондроитинсульфаты (CSPG) также составляют важный компонент внеклеточного матрикса центральной нервной системы (ЦНС), включая глаз и суставной хрящ. Внеклеточный CSPG критичным образом участвует в патогенезе артрита и отсутствии регенерации после повреждения нервной системы. Утрата внеклеточного CSPG является критичной для развития артрита и артроза, а высокие локальные концентрации внеклеточного CSPG предотвращают рост нервной ткани после повреждения нервной системы.

Рекомбинантные белки VAR2CSA могут использоваться для лечения при показаниях, связанных со злокачественным ростом, например при злокачественных новообразованиях. Для указанных стратегий заявители предполагают, что VAR2CSA можно использовать в качестве прямого ингибитора или в качестве молекулы, нацеливающейся и поддерживающей лекарственные средства, изменяющие метаболизм

- 4 031876

CSPG в отношении пораженных тканей.

Заявители идентифицировали малярийный белок, который связывается с CSA в межворсинчатых пространствах плаценты с аффинностью ниже 10 нМ. Были получены рекомбинантные части VAR2CSA меньших размеров с высокими выходами, которые связывают CSA с характеристиками, сходными с таковыми полноразмерного белка VAR2CSA и нативной природы. Рекомбинантный белок VAR2CSA не связывает другой CS, такой как хондроитинсульфат С (C6S) или высокосульфатированные GAG, такие как гепарансульфат (HS). Рекомбинантные белки могут быть получены для связывания CSA с высокой аффинностью в различных экспрессионных системах, таких как, среди прочих, клетки S2, клетки T.Ni, клетки СНО и штаммы Е. Coli, включая клетки BL21 и Snuffle (tm Lifetechnologies).

Заявители также идентифицировали единственный малый (75 кДа) антиген, который связывается с CSA с очень высокой аффинностью (нМ) и высокой специфичностью. В табл. 3 (см. пример 2) представлена аффинность в отношении CSA всех проанализированных белков VAR2CSA с использованием биосенсорной методики.

Заявители показали, что указанный рекомбинантный белок VAR2CSA прочно связывается при низких концентрациях с обширным рядом злокачественных клеточных линий, включая кожную меланому (С32, MeWo), рак легкого (А549), рак молочной железы (НСС1395), остеосаркому (U2OS, MNNG/HOS), рабдомиосаркому (RH30) и кожную Т-клеточную лимфому (табл. 4 и 5). В качестве контрольной молекулы использовали другой белок VAR2CSA, который является идентичным минимальной связывающей конструкции VAR2CSA, за исключением усечения 151 аминокислоты в С-концевой части молекулы. Указанное усечение устраняет связывание CSA. Рекомбинантный VAR2CSA связывается со всеми экспрессирующими CSPG4 клеточными линиями и злокачественными клеточными линиями, экспрессирующими другие молекулы CSPG, имеющие цепи CSA (например, с Т-клеточной лимфомой). Рекомбинантный белок VAR2CSA не способен взаимодействовать с красными кровяными клетками и мононуклеарными клетками периферической крови (РВМС) человека (табл. 4).

Заявители показали, что малярийные паразиты обладают адгезией в отношении клеток меланомы С32, возможно, посредством специфичного взаимодействия между CSPG4 и VAR2CSA. Таким образом, можно предположить, что рекомбинантный VAR2CSA и его конъюгаты можно использовать в качестве терапевтического соединения, нацеленного на CSA на различных злокачественных клетках.

Преимущества нацеливания CSA на злокачественных клетках с использованием VAR2CSA по сравнению с другими современными лекарственными средствами являются многочисленными:

1) Взаимодействие между VAR2CSA и CSA является беспрецедентно высокоаффинным и высокоспецифичным.

2) VAR2CSA является эволюционно усовершенствованным малярийным белком, и, таким образом, маловероятно, что терапия нарушит толерантность и вызовет аутоиммунные реакции у пациента.

3) VAR2CSA является стабильным белком, свойства которого хорошо известны и который может экспрессироваться в больших количествах в организмах, подходящих для получения белка в промышленных масштабах.

4) VAR2CSA является полиморфным белком, имеющим ряд серовариантов. Повторная терапия может быть предложена с использованием отличающихся серовариантов, чтобы избежать проблем с нейтрализующими антителами.

5) VAR2CSA в природе располагается внеклеточно на инфицированных P. falciparum эритроцитах и является, таким образом, по своей природе стабильным белком в сыворотке человека и, как было показано, является высокорезистентным к протеиназам.

Настоящее изобретение фокусируется на взаимодействии между VAR2CSA и CSA. Указанное взаимодействие представляет собой высокоаффинное взаимодействие, и его основным применением является нацеливание злокачественных клеток, экспрессирующих CSA.

CSA также может принимать участие в других заболеваниях и патологических состояниях, таких как, например, артрит, артроз, рассеянный склероз и восстановление после повреждения нервной системы, восстановление хряща, заживление ран и псориаз. Кроме того, взаимодействие между VAR2CSA и CSA можно использовать в качестве биотехнологического инструмента.

Соответственно заявители рассматривают несколько вариантов использования настоящего изобретения:

1) Отслеживаемые рекомбинантные полипептиды или конъюгаты VAR2CSA можно использовать для наблюдения за опухолями и метастазами у пациентов с заболеванием раком.

2) Рекомбинантные полипептиды или конъюгаты VAR2CSA можно использовать для прямого нацеливания и нейтрализации активности CSA в злокачественных клетках.

3) Рекомбинантные полипептиды или конъюгаты VAR2CSA, такие как полипептиды VAR2CSA, конъюгированные с цитотоксическими молекулами, можно использовать для нацеливания злокачественных клеток с минимальной неблагоприятной токсичностью для CSA-отрицательных тканей.

4) Меченые рекомбинантные полипептиды или конъюгаты VAR2CSA можно использовать в качестве исследовательского или клинического экспериментального инструмента для изучения CSA на злокачественных клетках.

- 5 031876

Определения.

Термин полипептид VAR2CSA, используемый в настоящем документе, относится к внеклеточной части специфического белка эритроцитарной мембраны 1 (PfEMPl), белка, экспрессируемого Plasmodium falciparum, взаимодействующей с протеогликанами хондроитинсульфатами (CSPG) и характеризующейся последовательностью SEQ ID NO:55 или SEQ ID NO:56, или к ее фрагментам или вариантам, обладающим способностью связываться с хондроитинсульфатом A (CSA), который может быть представлен на протеогликанах (CSPG).

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения полипептид VAR2CSA по настоящему изобретению, по меньшей мере, содержит фрагмент белка VAR2CSA, который состоит из последовательной аминокислотной последовательности a) ID1 и b) DBL2Xb.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения полипептид VAR2CSA по настоящему изобретению, по меньшей мере, содержит фрагмент белка VAR2CSA, который состоит из последовательной аминокислотной последовательности a) ID1, b) DBL2Xb и с) ID2a.

В определение полипептида VAR2CSA входят полипептиды, описанные в Salanti A. et al., Mol. Micro. 2003, Jul; 49(1): 179-91, Khunrae P. et al., J. Mol. Biol., 2010 Apr. 2; 397(3):826-34, Srivastava A. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2010 Mar. 16; 107 (11):4884-9, Dahlback M. et al., J. Biol. Chem., 2001 May 6; 286(18): 15908-17 или Srivastava A. et al., PLoS One., 2011; 6(5):e20270.

Термин ID1 относится к домену VAR2CSA, который характеризуется тем, что имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична аминокислотной последовательности 1-152 SEQ ID NO:1.

Термин DBL2Xb относится к домену VAR2CSA, который характеризуется тем, что имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична аминокислотной последовательности 153-577 SEQ ID NO:1.

Термин ID2a относится к домену VAR2CSA, который характеризуется тем, что имеет аминокислотную последовательность из по меньшей мере 20, по меньшей мере 21, по меньшей мере 22, по меньшей мере 23, по меньшей мере 24, по меньшей мере 25, по меньшей мере 26, по меньшей мере 27, по меньшей мере 28, по меньшей мере 29, по меньшей мере 30, по меньшей мере 31, по меньшей мере 32, по меньшей мере 33, по меньшей мере 34, по меньшей мере 35, по меньшей мере 36, по меньшей мере 37, по меньшей мере 38, по меньшей мере 39, по меньшей мере 40, по меньшей мере 41, по меньшей мере 42, по меньшей мере 43, по меньшей мере 44, по меньшей мере 45, по меньшей мере 46, по меньшей мере 47, по меньшей мере 48, по меньшей мере 49, по меньшей мере 50, по меньшей мере 51, по меньшей мере 52, по меньшей мере 53, по меньшей мере 54, по меньшей мере 55, по меньшей мере 56, по меньшей мере 57, по меньшей мере 58, по меньшей мере 59, по меньшей мере 60, по меньшей мере 61 или по меньшей мере 62, такую как 63 последовательных аминокислот, из N-концевых аминокислот 578640 SEQ ID NO:1 и меньшей мере с 70% идентичностью указанной последовательности последовательных аминокислот.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения аминокислотная последовательность, указанная в настоящем документе, по меньшей мере на 70% идентична любой последовательности SEQ ID NO:1-75 или ее фрагменту, относится к последовательности по меньшей мере с 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичностью указанной последовательности.

Термин вариант или варианты, используемый в настоящем документе, относится к полипептиду VAR2CSA, имеющему аминокислотную последовательность SEQ ID NO:55 или SEQ ID NO:56, или к фрагментам полипептида VAR2CSA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO:154; указанные фрагменты или варианты сохраняют способность связываться с хондроитинсульфатом A (CSA) на протеогликанах (CSPG), в которых одна или несколько аминокислот заменены на другую аминокислоту, и/или в которых одна или несколько аминокислот опущены, и/или в которых одна или несколько аминокислот введены в полипептид, и/или в которых одна или несколько аминокислот добавлены в полипептид. Указанное добавление может иметь место на N-конце, или на С-конце, или на обоих. Вариант или варианты в рамках настоящего определения все еще обладают функциональной активностью с точки зрения способности связываться с хондроитинсульфатом A (CSA). В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения вариант имеет по меньшей мере 70%, такую как 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичность последовательности SEQ ID NO:1-75, такой как последовательность SEQ ID NO:1, 3-5, 10, 11, 29, 34, 36-38, 41, 43-45, 48, 53-56, 60-70, 72-75.

Фразы функциональный вариант, функциональный фрагмент и функциональные производные, используемые в настоящем документе, относятся к вариантам, фрагментам, усеченным версиям, а также к производным SEQ ID NO:55 или SEQ ID NO:56, таким как SEQ ID NO:1, 3-5, 10, 11, 29, 34, 3638, 41, 43-45, 48, 53-56, 60-70, 72-75, где полипептиды содержат главные связывающие части последовательности SEQ ID NO:55 или SEQ ID NO:56 и, по меньшей мере, обладают способностью связываться с хондроитинсульфатом A (CSA). Следует понимать, что функциональный вариант или функциональный фрагмент VAR2CSA может иметь два или три признака, выбранные из существования в форме варианта,

- 6 031876 и/или фрагмента, и/или производного.

Функциональный вариант или фрагмент полипептида VAR2CSA заключает такой вариант или полипептид, который демонстрирует по меньшей мере приблизительно 25%, такую как по меньшей мере 50%, такую как по меньшей мере 75%, такую как по меньшей мере 90% аффинность связывания полипептида VAR2CSA дикого типа, который был получен тем же клеточным типом, по результатам испытаний с помощью анализов, как описано в настоящем документе.

Термин иммунологический фрагмент, используемый в настоящем документе, относится к фрагменту с аминокислотной последовательностью, обладающей практически той же функциональной активностью и той же пространственной ориентацией, которая позволяет антителу его распознавать. Соответственно специфичное антитело будет связываться как с полипептидами, так и с его иммунологическими фрагментами.

Термин другая аминокислота, используемый в настоящем документе, обозначает аминокислоту, которая отличается от той аминокислоты, которая в природе присутствует на данной позиции. Она включает, но ими не ограничивается, аминокислоты, которые могут кодироваться полинуклеотидом. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения отличающаяся аминокислота представляет собой природную L-форму и может кодироваться полинуклеотидом.

Термин производное, используемый в настоящем документе, предназначен для обозначения полипептида VAR2CSA, демонстрирующего такую же или улучшенную биологическую активность по сравнению с VAR2CSA дикого типа, идентифицируемого последовательностью SEQ ID N0:55 или SEQ ID NO:56, или его фрагмента, в котором одна или более аминокислот родительского пептида были химически модифицированы, например, алкилированием, пегилированием, ацилированием, образованием сложного эфира или образованием амида и т.п.

Термин конструкция, используемый в настоящем документе, предназначен для обозначения полинуклеотидного сегмента, который может быть основан на полной или частичной природной нуклеотидной последовательности, кодирующей полипептид, представляющий интерес. Конструкция может, необязательно, содержать другие полинуклеотидные сегменты. Сходным образом, термин аминокислоты, которые могут кодироваться полинуклеотидными конструкциями, включает аминокислоты, которые могут кодироваться полинуклеотидными конструкциями, определенными выше, т.е. такие аминокислоты как Ala, Val, Leu, Ile, Met, Phe, Trp, Pro, Gly, Ser, Thr, Cys, Tyr, Asn, Glu, Lys, Arg, His, Asp и Gln.

Термин вектор, используемый в настоящем документе, означает любую нуклеиновую кислоту, которая способна к амплификации в клетке-хозяине. Так вектор может представлять собой автономно реплицирующийся вектор, т.е. вектор, который существует в качестве внехромосомного объекта, репликация которого не зависит от хромосомной репликации, например плазмиду. Альтернативно, вектор может представлять собой объект, который, будучи введенными в клетку-хозяина, встраивается в геном клетки-хозяина и реплицируется вместе с хромосомой (хромосомами), в которую он встроился. Выбор вектора часто будет зависеть от клетки-хозяина, в которую он будет введен. Векторы включают, но ими не ограничиваются, плазмидные векторы, фаговые векторы, вирусы или космидные векторы. Векторы обычно содержат источник репликации и по меньшей мере один ген селекции, т.е. ген, который кодирует продукт, который легко обнаруживается, или присутствие которого является существенным для клеточного роста.

Используемый в настоящем документе термин подходящая питательная среда означает среду, содержащую питательный вещества и другие компоненты, требующиеся для роста клеток и экспрессии последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид VAR2CSA по настоящему изобретению.

В контексте настоящей заявки термин лечение включает профилактику, лечение и облегчение симптомов заболевания, расстройства или состояния, в которые вовлечена экспрессия, такая как патологическая экспрессия CSA, такого как рак. Профилактическое или терапевтическое введение полипептида, конъюгата или производного VAR2CSA по настоящему изобретению, таким образом, включено в термин лечение.

Термин индивид, используемый в настоящем документе, означает любое животное, в частности млекопитающих, таких как люди, и может, где это необходимо, использоваться взаимозаменяемым образом с термином пациент.

Термин идентичность последовательности, известный специалистам, относится к взаимоотношениям между последовательностями двух или более полипептидных молекул или двух или более молекул нуклеиновой кислоты в результате сравнения последовательностей. В данной области идентичность также означает степень родства между молекулами нуклеиновой кислоты или между полипептидами в зависимости от обстоятельства, что определяется количеством спариваний между цепочками из двух или нескольких нуклеотидных остатков или из двух или нескольких аминокислотных остатков. Идентичность измеряет процентную долю идентичных спариваний между меньшей из двух или более последовательностей с выравниваниями с гэпами (если они есть), что осуществляется с использованием особой математической модели или компьютерной программы (т.е. алгоритмы).

Термин сходство представляет собой родственное понятие, но в отличие от идентичности отно

- 7 031876 сится к взаимоотношениям последовательностей, которые включают как идентичные спаривания, так и спаривания консервативных замен. Если две полипептидные последовательности имеют, например, (фракция 10/20)) идентичные аминокислоты, а все остальные являются неконсервативными заменами, то процент и идентичности, и сходства будет составлять 50%. Если, в том же примере, имеют место еще 5 позиций, где есть консервативные замены, то процент идентичности остается 50%, но процент сходства составит 75% ((фракция (15/20))). Таким образом, в тех случаях, когда имеют место консервативные замены, степень сходства между двумя полипептидами будет выше, чем процент идентичности между данными двумя полипептидами.

Путем консервативных модификаций аминокислотной последовательности SEQ ID N0:1-56, 60-70 и 72-75 (и соответствующие модификации кодирующих нуклеотидов) можно получать полипептиды VAR2CSA, имеющие функциональные и химические характеристики, сходные с таковыми полипептидов VAR2CSA, встречающихся в природе. В противоположность этому существенные модификации функциональных и/или химических характеристик полипептида VAR2CSA можно осуществить путем выбора замен в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1-56, 60-70 и 72-75, которые значительно отличаются по своему влиянию на сохранение (а) структуры молекулярного скелета в области замены, например, как плоской или спиральной конформации, (b) заряда или гидрофобности молекулы в области сайта-мишени или (с) массы боковой цепи.

Например, консервативная аминокислотная замена может включать замену остатка нативной аминокислоты ненативным остатком, таким образом, что наблюдается небольшое влияние или не наблюдается влияния на полярность или заряд аминокислотного остатка на данной позиции. Кроме того, любой нативный остаток в полипептиде также может быть заменен аланином, как было ранее описано для аланинсканирующего мутагенеза (см., например, источники MacLennan et al., 1998, Acta Physiol. Scand. Suppl., 643:55-67; Sasaki et al., 1998, Adv. Biophys., 35:1-24, в которых обсуждается аланинсканирующий мутагенез).

Желательные аминокислотные замены (как консервативные, так и неконсервативные) могут быть определены специалистом, если указанные замены являются желательными. Например, аминокислотные замены можно использовать для идентификации важных остатков полипептида VAR2CSA или для увеличения или уменьшения аффинности полипептида VAR2CSA, описанной в настоящем документе.

Природные остатки можно разделить на классы на основе свойств общей боковой цепи:

1) гидрофобные: норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;

2) нейтральные гидрофильные: Cys, Ser, Thr, Asn, Gin;

3) кислые: Asp, Glu;

4) основные: His, Lys, Arg;

5) остатки, которые влияют на ориентацию цепи: Gly, Pro и

6) ароматические: Trp, Tyr, Phe.

Например, неконсервативные замены могут включать обмен члена одного из указанных классов на член другого класса. Указанные замещенные остатки можно вводить в области полипептида VAR2CSA Plasmodium falciparum, которые являются гомологичными полипептидам VAR2CSA не из Plasmodium falciparum, или в негомологичные области молекулы.

При осуществлении указанных изменений можно принимать во внимание гидропатический индекс аминокислот. Для каждой аминокислоты определен гидропатический индекс на основании их характеристик гидрофобности и заряда, а именно изолейцин (+4,5); валин (+4,2); лейцин (+3,8); фенилаланин (+2,8); цистеин/цистин (+2,5); метионин (+1,9); аланин (+1,8); глицин (-0,4); треонин (-0,7); серии (-0,8); триптофан (-0,9); тирозин (-1,3); пролин (-1,6); гистидин (-3,2); глутамат (-3,5); глутамин (-3,5); аспартат (-3,5); аспарагин (-3,5); лизин (-3,9) и аргинин (-4,5).

Важность гидропатического индекса аминокислот для придания белку интерактивной биологической функции понятна специалистам в данной области. Kyte et al., J. Mol. Biol., 157:105-131 (1982). Известно, что определенные аминокислоты можно замещать на другие аминокислоты, имеющие сходный гидропатический индекс или балльную оценку и все еще сохраняющие сходную биологическую активность. При осуществлении изменений, основанных на гидропатическом индексе, замена аминокислот, гидропатические индексы которых находятся в пределах ±2, является предпочтительной, гидропатические индексы, находящиеся в пределах ±1, являются особенно предпочтительными, а в пределах ±0,5, являются еще более предпочтительными.

Также следует понимать, что замены сходных аминокислот можно эффективно осуществить на основании гидрофильности особенно, когда биологически и функционально эквивалентный белок или пептид, созданный таким способом, предназначен для использования в иммунологических вариантах осуществления настоящего изобретения, как в настоящем случае. Наибольшая локальная средняя гидрофильность белка, определяемая гидрофильностью его располагающихся рядом аминокислот, коррелирует с его иммуногенностью и антигенностью, т.е. с биологическим свойством белка.

Следующие величины гидрофильности были определены для аминокислотных остатков: аргинин (+3,0); лизин ('3,0); аспартат (+3,0±1); глутамат (+3,0±1); серин (+0,3); аспарагин (+0,2); глутамин (+0,2); глицин (0); треонин (-0,4); пролин (-0,5±1); аланин (-0,5); гистидин (-0,5); цистеин (-1,0); метионин (-1,3);

- 8 031876 валин (-1,5); лейцин (-1,8); изолейцин (-1,8); тирозин (-2,3); фенилаланин (-2,5); триптофан (-3,4). При осуществлении изменений, основанных на сходных величинах гидрофильности, замена аминокислот, величины гидрофильности которых находятся в пределах ±2, является предпочтительной, величины гидрофильности, находящиеся в пределах ±1, являются особенно предпочтительными, а в пределах ±0,5 являются еще более предпочтительными. Можно также идентифицировать эпитопы из основных аминокислотных последовательностей на основе гидрофильности. Указанные области также называют эпитопными областями ядра.

Специалист в данной области без труда определит подходящие варианты полипептида SEQ ID N0:1-75, используя хорошо известные методы. Для идентификации подходящих областей молекулы, которые могут быть изменены без устранения активности, специалист может выбрать мишенью области, которые не считаются важными для активности. Например, если сходные полипептиды, обладающие сходной активностью, от одних и тех же видов или от разных видов известны, то специалист может сравнить аминокислотную последовательность полипептида VAR2CSA с указанными сходными полипептидами. Благодаря указанному сравнению можно идентифицировать остатки и части молекул, которые являются консервативными у сходных полипептидов. Следует оценить тот факт, что изменения в областях полипептида VAR2CSA, которые являются не консервативными по сравнению с указанными сходными полипептидами, не будут с меньшей вероятностью благоприятно влиять на биологическую активность и/или структуру полипептида VAR2CSA. Специалисту также следует знать, что даже в относительно консервативных областях можно заменять химически сходные аминокислоты на природные остатки с сохранением активности (консервативные аминокислотные замены). Таким образом, даже в областях, которые могут быть важными для биологической активности или для структуры, могут быть сделаны консервативные аминокислотные замены, не устраняя биологическую активность и не получая неблагоприятного влияния на структуру полипептида.

Кроме того, специалист может ознакомиться с исследованиями структуры-функции, идентифицирующими остатки в сходных полипептидах, которые являются важными для активности или структуры. Принимая во внимание указанное сравнение, можно предсказать важность аминокислотных остатков в полипептиде VAR2CSA, которые соответствуют аминокислотным остаткам, которые являются важными для активности или структуры в сходных полипептидах. Специалист может выбрать сходные аминокислотные замены для указанных предсказанных важных аминокислотных остатков полипептидов VAR2CSA и других полипептидов по настоящему изобретению.

Специалист также может проанализировать пространственную структуру и аминокислотную последовательность в отношении указанной структуры сходных полипептидов. С учетом указанной информации специалист может предсказать последовательное расположение аминокислотных остатков полипептида VAR2CSA с точки зрения его пространственной структуры. Специалист в данной области может выбрать отказ от радикальных изменений аминокислотных остатков, которые, как было предсказано, будут находиться на поверхности белка, поскольку указанные остатки могут участвовать в важных взаимодействиях с другими молекулами. Более того, специалист в данной области может генерировать тест-варианты, содержащие единственную аминокислотную замену по каждому желательному аминокислотному остатку. Варианты затем можно подвергнуть скринингу с использованием исследования активности, как описано в настоящем документе. Указанные варианты можно было бы использовать для получения информации о подходящих вариантах. Например, если установлено, что изменение конкретного аминокислотного остатка приводит к устранению, нежелательному уменьшению или непригодности активности, вариантов с указанным изменением следует избегать. Иными словами, на основе информации, собранной в результате указанных рутинных экспериментов, специалист в данной области может легко определить аминокислоты, в отношении которых следует избегать дальнейших замен, как в отдельности, так и в комбинации с другими мутациями.

Ряд научных публикаций был посвящен прогнозированию вторичной структуры (см. Moult J., Curr. Op. in Biotech., 7(4):422-427 (1996); Chou et al., Biochemistry, 13 (2):222-245 (1974); Chou et al., Biochemistry, 113 (2):211-222 (1974); Chou et al., Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol., 47:45-148 (1978); Chou et al., Ann. Rev. Biochem., 47:251-276 и Chou et al., Biophys. J., 26:367-384 (1979)). Кроме того, в настоящее время доступны компьютерные программы, помогающие прогнозировать вторичную структуру. Один способ прогнозирования вторичной структуры основан на моделировании гомологичности. Например, два полипептида или белка, которые имеют идентичность последовательности более 30% или сходство более 40%, часто имеют сходные структурные топологии. Недавнее увеличение базы данных по структуре белков (PDB) обеспечивает улучшение прогнозируемости вторичной структуры, включая возможное количество изгибов внутри структуры полипептида или белка (см. Holm et al., Nucl. Acid. Res., 27(1):244247 (1999)). Было сделано предположение (Brenner et al., Curr. Op. Struct. Biol., 7(3):369-376 (1997)) о том, что существует ограниченное количество складок в данном полипептиде или белке и что после решения о критическом количестве структур точность прогнозирования структуры резко возрастет.

Дополнительные способы прогнозирования вторичной структуры включают threading (Jones D., Curr. Op. Struct. Biol., 7(3):377-87 (1997); Sippl et al., Structure, 4(l):15-9 (1996)), профильный анализ (Bowie et al., Science, 253:164-170 (1991); Gribskov et al., Meth. Enzymol., 183:146-159 (1990); Gribskov et

- 9 031876 al., Proc. Natl. Acad. Sci., 84(13):4355-4358 (1987)) и эволюционную взаимосвязь (см. Home, выше, и

Brenner, выше).

Идентичность и сходство родственных полипептидов можно легко рассчитать известными способами. Указанные способы включают, но ими не ограничиваются, способы, описанные в Computational Molecular Biology, Lesk A.M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith D.W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part 1, Griffin A.M. and Griffin H.G., ed., Humana Press, Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje G., Academic Press, 1987; Sequence Analysis Primer, Gribskov M. and Devereux J., ed., M. Stockton Press, New York, 1991; и Carillo et al., SIAM J. Applied Math., 48:1073 (1988).

Предпочтительные способы определения идентичности и/или сходства выстроены таким образом, чтобы обеспечить наибольшее количество совпадений между исследуемыми последовательностями. Способы определения идентичности и сходства описаны в общедоступных компьютерных программах. Предпочтительные компьютерные способы определения идентичности и сходства между двумя последовательностями включают, но ими не ограничиваются, программный пакет GCG, включая GAP (Devereux et al., Nucl. Acid. Res., 12:387 (1984); Genetic Computer Group, University of Wisconsin, Madison, Wis.), BLASTP, BLASTN и FASTA (Altschul et al., J. Mol. Biol., 215:402-410 (1990)). Программа BLASTX имеется в общем доступе в Национальном Центре Биотехнологической Информации (NCBI) и в других источниках (BLAST Manual, Altschul et al., NCB/NLM/NIH Bethesda, Md. 20894; Altschul et al., выше). Хорошо известный алгоритм Смита-Ватермана также можно использовать для определения идентичности.

Определенные схемы выравнивания двух аминокислотных последовательностей могут привести к спариванию только очень короткого участка двух последовательностей, и указанный короткий участок выравнивания может иметь очень высокую идентичность последовательностей, даже если нет значительного родства между двумя полноразмерными последовательностями. Соответственно в предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения выбранный способ выравнивания (программа GAP) даст выравнивание, которое охватывает по меньшей мере 50 последовательных аминокислот полипептида-мишени.

Например, с использованием компьютерного алгоритма GAP (Genetic Cmputer Group, University of Wisconsin, Madison, Wis.) два полипептида, для которых необходимо определить процент идентичности последовательностей, выравниваются для оптимального спаривания их соответствующих аминокислот (совпадающий промежуток по определению алгоритма). Штраф за гэп открывающий (который рассчитан как трехкратная средняя диагональ; средняя диагональ представляет собой среднюю величину диагонали используемой сравнительной матрицы; диагональ представляет собой балльную оценку или число, определенное для каждого истинного спаривания аминокислот конкретной сравнительной матрицей) и штраф за гэп продолжающий (который обычно в {фракция (1/10)} раз превышает штраф за гэп открывающий), а также сравнительную матрицу, такую как РАМ 250 или BLOSUM 62, используют в сочетании с алгоритмом. Стандартная сравнительная матрица (см. Dayhoff et al., Atlas of Protein Sequence and Structure, vol. 5, sup. 3 (1978) для сравнительной матрицы РАМ 250; Henikoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:10915-10919 (1992) для сравнительной матрицы BLOSUM 62) также используется алгоритмом.

Предпочтительные параметры для сравнения полипептидных последовательностей включают следующие:

Алгоритм: Needleman et al., J. Mol. Biol., 48:443-453 (1970)); сравнительная матрица: BLOSUM 62 от Henikoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:10915-10919 (1992); штраф за вставку гэпов: 12, штраф за длину гэпа: 4, порог сходства: 0.

Программа GAP является эффективной с приведенными выше параметрами. Приведенные выше параметры являются параметрами по умолчанию для сравнения полипептидов (вместе с отсутствием штрафа за концевые гэпы) с использованием алгоритма GAP.

Предпочтительные параметры для сравнения последовательностей молекул нуклеиновой кислоты включают следующие:

Алгоритм: Needleman et al., J. Mol. Biol., 48:443-453 (1970); сравнительная матрица: спаривания=+10, ошибочное спаривание=0; штраф за вставку гэпов: 50, штраф за длину гэпа: 3.

Программа GAP также является эффективной с приведенными выше параметрами. Приведенные выше параметры являются параметрами по умолчанию для сравнения молекул нуклеиновой кислоты.

Другие показательные алгоритмы, штрафы за гэп открывающий, штрафы за гэп продолжающий, сравнительные матрицы, порог сходства и т.п. можно использовать, включая те, которые представлены в Program Manual, Wisconsin Package, Version 9, September, 1997. Конкретный выбор будет очевиден для специалиста в данной области и будет зависеть от конкретного сравнения, которое предстоит сделать, такого как ДНК с ДНК, белка с белком, белка с ДНК; и, кроме того, производится ли сравнение между данными парами последовательностей (в этом случае GAP или BestFit обычно являются предпочтительными) или между одной последовательностью и большой базой данных последовательностей (в этом случае FASTA или BLASTA являются предпочтительными).

Перед авторами настоящего изобретения стояли следующие вопросы, на которые были найдены от- 10 031876 веты, связанные с молекулярным механизмом, лежащим в основе плацентарной адгезии при РМ:

1) связана ли описанная дифференциальная адгезия CSA с последовательностью VAR2CSA? 2) каковы точные минимальные структурные требования для связывания VAR2CSA с CSA? 3) какой тип химического взаимодействия существует между VAR2CSA и CSA? и, наконец, 4) можно ли использовать данную информацию для конструирования оптимального вакцинного антигена?

Путем экспрессирования идентичных усечений VAR2CSA FCR3 и 3d7 заявители показали, что VAR2CSA связывается с CSA со сходной аффинностью и специфичностью независимо от происхождения штамма паразита. Указанные две последовательности имеют идентичность последовательности 79,6%. Заявители также показали, что высокая аффинность связывания с CSA сохраняется у нескольких более коротких фрагментов, и что DBL2X, включая малые области из фланкирующих интердоменов, образуют компактное ядро, которое содержит сайт связывания с CSA высокой аффинности. С помощью компьютерных технологий заявители определили в VAR2CSA предполагаемые сайты связывания с GAG, и путем делеции и замены заявители показали, что мутации в указанных сайтах не оказывают воздействия на связывание с CSPG. Используя теорию полиэлектролитных-белковых взаимодействий, заявители показали, что взаимодействие VAR2CSA-CSA может не зависеть, единственно, от ионных взаимодействий. И наконец, заявители показали, что несколько коротких фрагментов VAR2CSA способны индуцировать продукцию блокирующих адгезию антител, и что антиадгезионные антитела нацелены на предполагаемую область связывания с CSA. Указанные данные дают первое подробное ознакомление с биохимической природой взаимодействия между молекулой PfEMP1 и ее лигандом.

Получение полипептидов VAR2CSA и других полипептидов по настоящему изобретению.

Изобретение также связано с получением полипептидов VAR2CSA и других полипептидов по настоящему изобретению, как указано выше. Полипептиды VAR2CSA и другие полипептиды по настоящему изобретению, описанные в настоящем документе, могут быть получены посредством методики рекомбинантных нуклеиновых кислот. Обычно клонированную последовательность нуклеиновой кислоты VAR2CSA дикого типа модифицируют для кодирования желательного белка. Указанную модифицированную последовательность затем вводят в вектор экспрессии, который, в свою очередь, трансформируют или трансфицируют в клетки-хозяев. Высшие эукариотические клетки, в частности культивированные клетки млекопитающих можно использовать в качестве клеток-хозяев. Прокариотические клетки, такие как Lactococcus lactis или E.coli, также можно использовать для экспрессирования полипептидов, если только эти прокариоты способны продуцировать дисульфидные связи или белок вновь укладывается или может вновь укладываться корректно. Кроме того, дрожжевые штаммы также можно использовать для экспрессирования белка, например, среди прочих, Saccharomyces cerevisiae и P. Pichia.

Изменение аминокислотных последовательностей можно осуществлять с использованием ряда методик. Модификацию последовательностей нуклеиновой кислоты можно осуществлять путем сайтспецифического мутагенеза. Методики сайт-специфического мутагенеза хорошо известны и описаны, например, в Zoller and Smith (DNA 3:479-488, 1984) или в Splicing by extension overlap, Horton et al., Gene 77, 1989, pp. 61-68. Таким образом, с использованием нуклеотидных и аминокислотных последовательностей VAR2CSA можно вводить изменение (изменения) по своему выбору. Подобно этому способы для получения конструкции ДНК с использованием полимеразной цепной реакции со специфическими праймерами хорошо известны специалистам в данной области (см. PCR Protocols, 1990, Academic Press, San Diego, California, USA).

Полипептиды по настоящему изобретению также могут содержать неприродные аминокислотные остатки. Неприродные аминокислоты включают, но ими не ограничиваются, бета-аланин, дезаминогистидин, транс-3-метилпролин, 2,4-метанопролин, цис-4-гидроксипролин, транс-4-гидроксипролин, Nметилглицин, алло-треонин, метилтреонин, гидроксиэтилцистеин, гидроксиэтилгомоцистеин, нитроглутамин, гомоглутамин, пипеколиновую кислоту, тиазолидинкарбоновую кислоту, дегидропролин, 3- и 4метилпролин, 3,3-диметилпролин, трет-лейцин, норвалин, 2-азафенилаланин, 3-азафенилаланин, 4азафенилаланин и 4-фторфенилаланин. Несколько способов известны специалистам в данной области для инкорпорации неприродных аминокислотных остатков в полипептиды. Например, можно использовать систему in vitro, в которой нонсенс-мутации подавляются с использованием химически аминоацилированного супрессора тРНК. Способы синтеза аминокислот и аминоацилирования тРНК известны специалистам в данной области. Транскрипцию и трансляцию плазмид, содержащих нонсенс-мутации, осуществляют в бесклеточной системе, содержащей экстракт E.coli S30 и имеющиеся в продаже ферменты и другие реагенты. Полипептиды очищают посредством хроматографии (см., например, Robertson et al., J. Am. Chem. Soc. 113:2722, 1991; Ellman et al., Methods Enzymol. 202:301, 1991; Chung et al., Science 259:806-9, 1993; and Chung et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:10145-9, 1993)). Во втором способе трансляцию осуществляют а ооцитах Xenopus путем микроинъекции мутированной мРНК и химически аминоацилированного супрессора тРНК (Turcatti et al., J. Biol. Chem. 271:19991-8, 1996). В третьем способе клетки E.coli культивируют в отсутствие натуральной аминокислоты, подлежащей замене (например, фенилаланина), и в присутствии желательной неприродной аминокислоты (аминокислот) (например, 2азафенилаланина, 3-азафенилаланина, 4-азафенилаланина или 4-фторфенилаланина). Неприродную аминокислоту вводят в полипептид на место его натурального аналога (см. Koide et al., Biochem. 33:7470-6,

- 11 031876

1994). Остатки природных аминокислот можно конвертировать в неприродные виды путем химической модификации in vitro. Химическую модификацию можно комбинировать с сайт-направленным мутагенезом для дальнейшего расширения ряда замен (Wynn and Richards, Protein Sci. 2:395-403, 1993).

Конструкция нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептиды VAR2CSA или другие полипептиды по настоящему изобретению, может быть геномного или кДНК происхождения, например может быть получена созданием геномной или кДНК библиотеки и скринингом на последовательности ДНК, кодирующие все или часть полипептидов, путем гибридизации с использованием синтетических олигонуклеотидных зондов в соответствии со стандартными методиками (см. Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2^nd. Ed. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989).

Конструкция нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептиды VAR2CSA по настоящему изобретению, также может быть получена синтетически с использованием принятых стандартных способов, например фосфоамидитным способом, описанным Beaucage and Caruthers, Tetrahedron Letters 22 (1981), 1859-1869, или способом, описанным Matthes et al., EMBO Journal 3 (1984), 801-8 05. Согласно фосфоамидитному способу синтезируют олигонуклеотиды, например, в автоматическом ДНК-синтезаторе, очищают, отжигают, сшивают и клонируют в подходящих векторах. Последовательности ДНК, кодирующие полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению, также можно получать полимеразной цепной реакцией с использованием специфических праймеров, например, как описано в US 4683202, Saiki et al., Science 239 (1988), 487-491 или Sambrook et al., выше.

Кроме того, конструкция нуклеиновой кислоты может быть смешанного синтетического и геномного, смешанного синтетического и кДНК или смешанного геномного и кДНК происхождения, полученная сшивкой фрагментов синтетического, геномного или кДНК происхождения (при необходимости), фрагментов, соответствующих различным частям всей конструкции нуклеиновой кислоты, в соответствии со стандартными методиками.

Конструкция нуклеиновой кислоты предпочтительно представляет собой ДНК-конструкцию. Последовательности ДНК для использования при получении полипептидов VAR2CSA и других полипептидов по настоящему изобретению обычно будут кодировать пре-про полипептид на аминоконце VAR2CSA для обеспечения правильного посттрансляционного процессинга и секреции из клеткихозяина.

Последовательности ДНК, кодирующие полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению, обычно вводят в рекомбинантный вектор, который может представлять собой любой вектор, который удобно можно подвергать способам рекомбинантной ДНК, и выбор вектора часто будет зависеть от клетки-хозяина, в которую его будут вводить. Так вектор может представлять собой автономно реплицирующийся вектор, т.е. вектор, который существует в качестве внехромосомного объекта, репликация которого не зависит от хромосомной репликации, например, плазмиду. Альтернативно, вектор может представлять собой объект, который, будучи введенным в клетку-хозяина, встраивается в геном клетки-хозяина и реплицируется вместе с хромосомой (хромосомами), в которую он встроился.

Вектор предпочтительно представляет собой вектор экспрессии, в котором последовательность ДНК, кодирующая полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению, функционально связана с дополнительными сегментами, требующимися для транскрипции ДНК. Обычно вектор экспрессии получают из плазмиды или вирусной ДНК или он может содержать элементы обоих. Термин функционально связанный означает, что сегменты располагаются в таком порядке, который позволяет им функционировать в соответствии с целями, для которых они предназначены, например транскрипция инициируется в промоторе и продолжается через последовательность ДНК, кодирующую полипептид.

Векторы экспрессии для применения для экспрессии полипептидов VAR2CSA и других полипептидов по настоящему изобретению будут содержать промотор, способный контролировать транскрипцию клонированного гена или кДНК. Промотор может представлять собой любую последовательность ДНК, которая демонстрирует транскрипционную активность в выбранной клетке-хозяине, и может быть получен из генов, кодирующих белки, которые являются как гомологичными, так и гетерологичными в отношении клетки-хозяина.

Примерами подходящих промоторов для контроля транскрипции ДНК, кодирующей полипептид VAR2CSA Plasmodium falciparum в клетках млекопитающих, являются промотор SV40 (Subramani et al., Mol. Cell Biol. 1 (1981), 854-864, промотор МТ-1 (ген металлотионеина) (Palmiter et al., Science 222 (1983), 809-814), промотор CMV (Boshart et al., Cell 41:521-530, 1985) или главный поздний промотор аденовируса 2 (Kaufman and Sharp, Mol. Cell. Biol., 2:1304-1319, 1982).

Примером подходящего промотора для применения в клетках насекомых является полихедриновый промотор (Us 4745051; Vasuvedan et al., FEbS Lett., 311 (1992) 7-11), промотор Р10 (J.M. Vlak et al., J. Gen. Virology 69, 1988, pp. 765-776), промотор основного белка вируса полигедроза Autographa californica (EP 397485), промотор немедленно-раннего гена 1 бакуловируса (US 5155037; US 5162222) или промотор задержанно-раннего гена бакуловируса 39К (US 5155037; US 5162222).

- 12 031876

Примеры подходящих промоторов для применения в клетках-хозяевах дрожжей включают промоторы из гликолитических генов дрожжей (Hitzeman et al., J. Biol. Chem. 255 (1980), 12073-12080; Alber and Kawasaki, J. Mol. Appl. Gen. 1 (1982), 419-434) или генов алкогольдегидрогеназы (Young et al., в Genetic Engineering of Microorganisms for Chemicals (Hollaender et al., eds.), Plenum Press, New York, 1982) или промоторы ТРИ (US 4599311) или ADH2-4c (Russel et al., Nature 304 (1983), 652-654).

Примерами подходящих промоторов для применения в клетках-хозяевах мицелиальных грибов являются, например, промотор ADH3 (McKnight et al., The EMBO J. 4 (1985), 2093-2099) или промотор tpiA. Примерами других подходящих промоторов являются промоторы, полученные из гена, кодирующего ТАКА-амилазу A.oryzae, аспартат-протеиназу Rhizomucor miehei, нейтральную альфа-амилазу A.niger, кислую стабильную альфа-амилазу A.niger, глюкоамилазу (gluA) A.niger или A.awamori, липазу Rhizomucor miehei, щелочную протеиназу A. oryzae, триозофосфатизомеразу A.oryzae или ацетамидазу A.nidulans. Предпочтительными являются промоторы TAKA-амилазы и gluA. Подходящие промоторы упоминаются, например, в ЕР 238023 и ЕР 383779.

Последовательности ДНК, кодирующие полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению, могут также, если необходимо, функционально соединяться с подходящим терминатором, таким как терминатор гормона роста человека (Palmiter et al., Science 222, 1983, 99. 809-814) или терминаторы ТРИ (Alber and Kawasaki, J. Mol. Appl. Gen. 1 (1982), pp. 419-434) или ADH3 (McKnight et al., The EMBO J. 4, 1985, pp. 2093-2099). Векторы экспрессии также могут содержать ряд сайтов сплайсинга РНК, расположенных ниже от промотора и выше от сайта инсерции самой последовательности VAR2CSA. Предпочтительные сайты сплайсинга РНК могут быть получены из аденовируса и/или генов иммуноглобулинов. В векторах экспрессии также содержится сигнал полиаденилирования, расположенный ниже сайта инсерции. Особенно предпочтительные сигналы полиаденилирования включают ранний или поздний сигнал полиаденилирования из SV40 (Kaufman and Sharp, там же), сигнал полиаденилирования из области Elb аденовируса 5, терминатор гена гормона роста человека (DeNoto et al., Nucl. Acids Res. 9:3719-3730, 1981) или сигнал полиаденилирования из Plasmodium falciparum, генов человека или крупного рогатого скота. Векторы экспрессии могут также содержать некодирующую вирусную лидерную последовательность, такую как тройной лидер аденовируса 2, располагающуюся между промотором и сайтами сплайсинга РНК; и энхансерные последовательности, такие как энхансер SV40.

Для направления полипептидов VAR2CSA Plasmodium falciparum и других полипептидов по настоящему изобретению на секреторный путь клеток-хозяев секреторную сигнальную последовательность (также известную как лидерная последовательность, препро-последовательность или препоследовательность) можно поместить в рекомбинантный вектор. Секреторную сигнальную последовательность присоединяют к последовательностям ДНК, кодирующим полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению, в корректной рамке считывания. Секреторные сигнальные последовательности обычно позиционируют на 5' по отношению к последовательности ДНК, кодирующей пептид. Секреторная сигнальная последовательность может представлять собой последовательность, обычно связанную с белком, или может происходить из гена, кодирующего другой секретируемый белок.

Для секреции из клеток дрожжей секреторная сигнальная последовательность может кодировать любой сигнальный пептид, который гарантирует эффективное направление экспрессированных полипептидов VAR2CSA Plasmodium falciparum и других полипептидов по настоящему изобретению на секреторный путь клетки. Сигнальный пептид может представлять собой природный сигнальный пептид или его функциональную часть или он может представлять собой синтетический пептид. Установлено, что подходящими сигнальными пептидами является сигнальный пептид альфа-фактора (см. US 4870008), сигнальный пептид амилазы слюны мыши (см. О. Hagenbuchle et al., Nature 289, 1981, pp. 643-646), модифицированный сигнальный пептид карбоксипептидазы (см. L.A. Valls et al., Cell 48, 1987, pp. 887-897), сигнальный пептид дрожжей BAR1 (см. WO 87/02670) или сигнальный пептид аспартат-протеиназы дрожжей 3 (YAP3) (см. М. Egel-Mitani et al., Yeast 6, 1990, pp. 127-137).

Для эффективной секреции в дрожжах последовательность, кодирующую лидерный пептид, также можно вводить ниже по отношению к сигнальной последовательности и выше по отношению к последовательности ДНК, кодирующей полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению. Функция лидерного пептида заключается в том, чтобы обеспечить транспорт экспрессированного пептида из эндоплазматической сети в аппарат Гольджи и далее в секреторную везикулу для секреции в культуральную среду (т.е. в экспорте полипептидов VAR2CSA Plasmodium falciparum и других полипептидов по настоящему изобретению через клеточную стенку или, по меньшей мере, через клеточную мембрану в периплазматическое пространство дрожжевой клетки). Лидерный пептид может представлять собой лидер альфа-фактора дрожжей (использование которого описано, например, в US 4546082, US 4870008, ЕР 16201, ЕР 123294, ЕР 123544 и ЕР 163529). Альтернативно, лидерный пептид может представлять собой синтетический лидерный пептид, т.е. лидерный пептид, не имеющийся в природе. Синтетические лидерные пептиды можно конструировать, например, как описано в WO 89/02463 или WO 92/11378.

- 13 031876

Для применения в мицелиальных грибах сигнальный пептид можно получать из гена, кодирующего амилазу или глюкоамилазу Aspergillus sp., гена, кодирующего липазу или протеиназу Rhizomucor miehei, или липазу Humicola lanuginose. Сигнальный пептид предпочтительно получают из гена, кодирующего ТАКА-амилазу A.oryzae, нейтральную альфа-амилазу A.niger, кислую стабильную альфа-амилазу A.niger или глюкоамилазу A.niger. Подходящие сигнальные пептиды описаны, например, в ЕР 238023 и ЕР 215594.

Для применения в клетках насекомых сигнальный пептид можно получать из гена насекомого (см. WO 90/05783), такого как сигнальный пептид предшественника адипокинетического гормона Manduca sexta (см. US 5023328).

Способы, используемые для лигирования последовательностей ДНК, кодирующих полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению, промотор и, необязательно, терминатор и/или секреторную сигнальную последовательность соответственно, и для их ввода в подходящие векторы, содержащие информацию, необходимую для репликации, хорошо известны специалистам (см., например, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, New York, 1989).

Способы трансфекции клеток млекопитающих и экспрессии последовательностей ДНК, введенных в клетки, описаны, например, в Kaufman and Sharp, J. Mol. Biol. 159 (1982), 601-621; Southern and Berg. J. Mol. Appl. Genet. 1 (1982), 327-341; Loyter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 79 (1982), 422-426; Wigler et al., Cell 14 (1978), 725; Corsaro and Pearson, Somatic Cell Genetics 7 (1981), 603; Graham and van der Eb, Virology 52 (1973), 456 и Neumann et al., EMBO J. 1 (1982), 841-845).

Клонированные последовательности ДНК вводят в культивируемые клетки млекопитающих посредством, например, кальций-фосфатной трансфекции (Wigler et al., Cell 14:725-732, 1978; Corsaro and Pearson, Somatic Cell Genetics 7:603-616, 1981; Graham and van der Eb, Virology 52d:456-467,1973) или электропорации (Neumann et al., EMBO J. 1:841-845, 1982). Для идентификации и отбора клеток, которые экспрессируют экзогенную ДНК, ген, который дает фенотип селекции (маркер селекции), обычно вводят в клетки вместе с геном или кДНК, представляющими интерес. Предпочтительные маркеры селекции включают гены, которые придают резистентность к лекарственным средствам, таким как неомицин, гидромицин и метотрексат. Маркер селекции может представлять собой поддающийся амплификации маркер селекции. Предпочтительным поддающимся амплификации маркером селекции является последовательность дигидрофолат-редуктазы (DHFR). Обзор маркеров селекции осуществлен Thilly (Mammalian Cell Technology, Butterworth Publishers, Stoneham, MA; включено в настоящий документ в качестве ссылки). Специалист без труда сможет выбрать подходящие маркеры селекции.

Маркеры селекции могут быть введены в клетку с помощью отдельной плазмиды в то же самое время, что и ген, представляющий интерес, или они могут быть введены с помощью одной и той же плазмиды. В случае введения с помощью одной и той же плазмиды маркер селекции и ген, представляющий интерес, могут находиться под контролем разных промоторов или одного и того же промотора; в последнем случае возникает дицистроновый месседж. Конструкции указанного типа известны в данной области (например, Levinson and Siminsen, US 4713339). Также может быть предпочтительно добавлять дополнительную ДНК, известную как ДНК-носитель, в смесь, которую вводят в клетки.

После того как в клетки ввели ДНК, их выращивали в подходящей питательной среде, обычно 1-2 дня, после чего они экспрессировали ген, представляющий интерес. Используемый в настоящем документе термин подходящая питательная среда обозначает среду, содержащую питательные вещества и другие компоненты, требующиеся для роста клеток и экспрессии полипептида VAR2CSA Plasmodium falciparum, представляющего интерес. Среды обычно содержат источник углерода, источник азота, незаменимые аминокислоты, незаменимые сахара, витамины, соли, фосфолипиды, белок и факторы роста. Затем осуществляют выбор лекарственных средств для роста клеток, которые стабильно экспрессируют маркер селекции. Для клеток, которые были трансфицированы поддающимся амплификации маркером селекции, концентрацию лекарственного средства можно увеличить для отбора повышенного количества копий клонированных последовательностей, увеличивая, таким образом, уровни экспрессии. Клоны стабильно трансфицированных клеток затем подвергают скринингу на предмет экспрессии полипептида VAR2CSA Plasmodium falciparum, представляющего интерес.

Клетка-хозяин, в которую были введены последовательности ДНК, кодирующие полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению, может представлять собой любую клетку, которая способна продуцировать посттрансляционно модифицированные полипептиды и включает дрожжи, грибы и высшие эукариотические клетки.

Примерами клеточных линий млекопитающих для применения в настоящем изобретении являются клеточные линии COS-1 (ATCC CRL 1650), почки новорожденного сирийского хомячка (ВНК) и 293 (ATCC CRL 1573; Graham et al., J. Gen. Virol. 36:59-72, 1977). Предпочтительной клеточной линией ВНК является клеточная линия ВНК tk-tsl3 (Waechter and Baserga, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 79:1106-1110, 1982; включено в настоящий документ в качестве ссылки), далее в настоящем документе называемая клетками ВНК 570. Клеточная линия ВНК 570 хранится в Американской коллекции типовых культур 12301 Parklawn Dr., Rockville, Md. 20852, под номером ATCC CRL 10314. Клеточная линия ВНК tk-tsl3

- 14 031876 также доступна из АТСС под номером CRL 1632. Кроме того, ряд других клеточных линий можно использовать в настоящем изобретении, включая клетки Rat Hep I (гепатома крысы; ATCC CRL 1600), Rat

Hep II (гепатома крысы; ATCC CRL 1548), TCMK (ATCC CCL 139), легкого человека (ATCC HB 8065),

NCTC 1469 (ATCC CCL 9.1), CHO (ATCC CCL 61) и DUKX (Urlaub and Chasm, Proc. Natl. Acad. Sci. USA

77:4216-4220, 1980).

Примеры подходящих клеток дрожжей включают клетки Saccharomyces spp. или Schizosaccharomyces spp., в частности штаммы Saccharomyces cerevisiae или Saccharomyces kluyveri. Способы трансформации дрожжевых клеток гетерологичной ДНК и продукции из них гетерологичных полипептидов описаны, например, в US 4599311, US 4931373, US 4870008, US 5037743 и US 4845075, которые включены в настоящий документ в качестве ссылок. Трансформированные клетки отбирают по фенотипу, определяемому маркером селекции, обычно по лекарственной резистентности или способности расти в отсутствии определенного питательного вещества, например лейцина. Предпочтительным вектором для использования в дрожжах является вектор РОТ1, описанный в US 4931373. Последовательностям ДНК, кодирующим полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum и другие полипептиды по настоящему изобретению, может предшествовать сигнальная последовательность и, необязательно, лидерная последовательность, например, как описано выше. Дополнительными примерами подходящих дрожжевых клеток являются штаммы Kluyveromyces, такие как K.lactis, Hansenula, например Hpolymorpha. или Pichia, например P.pastoris (см. Gleeson et al., J. Gen. Microbiol. 132, 1986, pp. 3459-3465; US 4882279).

Примерами других клеток грибов являются клетки мицелиальных грибов, например Aspergillus spp., Neurospora spp. , Fusarium spp. или Trichoderma spp., в частности штаммы A.oryzae, A. nidulans или A.niger. Использование Aspergillus spp. для экспрессии белков описано, например, в ЕР 272277, ЕР 238 02 3, ЕР 184438. Трансформацию F.oxysporum можно осуществлять, например, как описано Malardier et al., 1989, Gene 78: 147-156. Трансформацию Trichoderma spp. можно осуществлять, например, как описано в ЕР 244234.

В случае, если в качестве клетки-хозяина используется мицелиальный гриб, то он может быть трансформирован конструкцией ДНК по настоящему изобретению удобно путем введения конструкции ДНК в хромосому хозяина для получения рекомбинантной клетки-хозяина. Указанная интеграция обычно считается имеющей преимущества, поскольку последовательность ДНК, наиболее вероятно, будет стабильно поддерживаться в клетке. Введение конструкций ДНК в хромосому хозяина можно осуществлять с использованием стандартных способов, например путем гомологичной или гетерологичной рекомбинации.

Трансформацию клеток насекомых и продукцию ими гетерологичных полипептидов можно осуществлять, например, как описано в US 4745051; US 4879236; US 5155037; 5162222; ЕР 397485; все они включены в настоящий документ в качестве ссылок. Подходящей линией клеток насекомых в качестве хозяина может быть клеточная линия Lepidoptera, такая как клетки Spodoptera frugiperda или клетки Trichoplusia ni (см. US 5077214). Подходящими условиями культивирования могут быть условия, описанные, например, в WO 89/01029, или WO 89/01028, или в любой из упомянутых выше ссылок.

Трансформированную или трансфицированную клетку затем культивируют в подходящей питательной среде в условиях, обеспечивающих экспрессию полипептида VAR2CSA Plasmodium falciparum, после чего весь или часть полученного пептида можно выделить из культуры. Средой для культивирования клеток может быть любая обычная среда, подходящая для выращивания клеток-хозяев, такая как минимальные или комплексные среды, содержащие необходимые добавки. Подходящие среды могут быть приобретены у коммерческих поставщиков или могут быть получены в соответствии с опубликованными рецептурами (например, в каталоге Американской коллекции типовых культур). Полипептиды VAR2CSA Plasmodium falciparum, продуцированные клетками, затем можно выделить из культуральной среды с использованием обычных методик, включая отделение клеток-хозяев от среды центрифугированием или фильтрованием, осаждение белковых компонентов надосадочной жидкости или фильтрата с использованием соли, например сульфата аммония, очистку с использованием разнообразных хроматографических методик, например ионообменной хроматографии, гель-хроматографии, аффинной хроматографии и т.п., в зависимости от типа полипептида, о котором идет речь.

Методики трансгенных животных можно использовать для получения полипептидов VAR2CSA и других полипептидов по настоящему изобретению. Предпочтительно продуцировать белки в молочных железах самки млекопитающего-хозяина. Экспрессия в молочной железе и последующая секреция белка, представляющего интерес, в молоко позволяет исключить многие трудности, с которыми сталкиваются при выделении белков из других источников. Молоко легко собирать, оно доступно в больших количествах и хорошо охарактеризовано биохимически. Кроме того, основные белки молока присутствуют в нем в высоких концентрациях (обычно приблизительно от 1 до 15 г/л).

С коммерческой точки зрения совершенно ясно, что предпочтительно использовать в качестве хозяина вид, который имеет большие надои молока. В то время как животные меньших размеров, такие как мыши и крысы, могут использоваться (и являются предпочтительными для испытаний на принципиальной стадии), предпочтительно использовать сельскохозяйственных животных, включая, но ими не ограничиваясь, свиней, коз, овец и крупный рогатый скот. Овцы являются особенно предпочтительными бла- 15 031876 годаря таким факторам как более ранняя история трансгенеза у данного вида, надои молока, стоимость и доступность оборудования для сбора овечьего молока (см., например, WO 88/00239 для сравнения факторов, влияющих на выбор вида-хозяина). Обычно желательно выбрать породу животного-хозяина, которая была выведена для доения, такую как восточно-фризская овца, или позднее организовать молочное стадо путем разведения трансгенной линии. В любом случае следует использовать животных с известным хорошим состоянием здоровья.

Для получения экспрессии в молочной железе используют промотор транскрипции из гена молочного белка. Гены молочных белков включают гены, кодирующие казеины (см. US 5304489), беталактоглобулин, лактальбумин и кислый сывороточный белок. Промотор бета-лактоглобулина является предпочтительным. В случае использования гена овечьего бета-лактоглобулина обычно будет использоваться область по меньшей мере из проксимальных 406 пн 5' фланкирующей последовательности гена, хотя более длинные части 5' фланкирующей последовательности, приблизительно до 5 тыс. пн, являются предпочтительными, такие как сегмент ДНК из ~4,25 тыс. пн, охватывающий 5' фланкирующий промотор и некодирующую часть гена бета-лактоглобулина (см. Whitelaw et al., Biochem. J. 286: 31-39 (1992)). Также подходящими являются сходные фрагменты ДНК промотора других видов.

Другие области гена бета-лактоглобулина также можно вводить в конструкции, также как геномные области гена, подлежащего экспрессии. В целом, специалистами в данной области принято, что конструкции, не имеющие интронов, например, плохо экспрессируют по сравнению с конструкциями, которые содержат указанные последовательности ДНК (см. Brinster et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 836-840 (1988); Palmiter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 478-482 (1991); Whitelaw et al., Transgenic Res. 1: 3-13 (1991); WO 89/01343 и WO 91/02318, которые включены в настоящий документ в качестве ссылок). Учитывая это, обычно предпочтительно, когда это возможно, использовать геномные последовательности, содержащие все или некоторые из нативных интронов гена, кодирующего белок или полипептид, представляющий интерес; так дополнительное включение в состав, по меньшей мере, некоторых интронов, например, из гена бета-лактоглобулина, является предпочтительным. Одна указанная область представляет собой сегмент ДНК, который предусматривает сплайсинг интронов и полиаденилирование РНК из 3' некодирующей области овечьего гена бета-лактоглобулина. После замены натуральными 3' некодирующими последовательностями гена указанный сегмент бета-лактоглобулина овцы может как усиливать, так и стабилизировать уровни экспрессии белка или полипептида, представляющего интерес. В других вариантах осуществления настоящего изобретения область, окружающую инициирующий ATG последовательности VAR2CSA, заменяют соответствующими последовательностями из гена специфического молочного белка. Указанная замена обеспечивает окружение предполагаемой тканеспецифической инициации для усиления экспрессии. Удобно заменять полные препро- и 5' некодирующие последовательности VAR2CSA последовательностями, например, гена BLG, хотя можно заменять и более короткие области.

Для экспрессии полипептидов VAR2CSA и других полипептидов по настоящему изобретению у трансгенных животных сегмент ДНК, кодирующий VAR2CSA, функционально связывают с дополнительными сегментами ДНК, требующимися для его экспрессии, с получением единиц экспрессии. Указанные дополнительные сегменты включают упомянутый выше промотор, а также последовательности, которые предусматривают терминацию транскрипции и полиаденилирование мРНК. Единицы экспрессии будут дополнительно включать сегмент ДНК, кодирующий секреторную сигнальную последовательность, функционально связанную с сегментом, кодирующим модифицированный VAR2CSA. Секреторная сигнальная последовательность может представлять собой нативную секреторную сигнальную последовательность или может представлять собой последовательность другого белка, такого как молочный белок (см., например, von Heijne, Nucl. Acids Res. 14:4683-4690 (1986) и Meade et al., US 4873316, которые включены в настоящий документ в качестве ссылок).

Конструирование единиц экспрессии для применения у трансгенных животных удобно осуществлять введением последовательности VAR2CSA в плазмиду или фаговый вектор, содержащие дополнительные сегменты ДНК, хотя единицу экспрессии можно сконструировать практически любой последовательностью сшивок. Особенно удобно создавать вектор, содержащий сегмент ДНК, кодирующий молочный белок, и заменять кодирующую последовательность для молочного белка последовательностью варианта VAR2CSA, обеспечивая, таким образом, слияние генов, которое включает последовательности контроля экспрессии гена молочного белка. В любом случае клонирование единиц экспрессии в плазмидах или других векторах облегчает амплификацию последовательности VAR2CSA. Амплификацию удобно осуществлять в бактериальных клетках-хозяевах (например, E.coli), таким образом, векторы обычно будут включать репликатор и маркер селекции, функциональный в бактериальных клеткаххозяевах. Единицу экспрессии затем вводят в оплодотворенные яйца (включая эмбрионы на ранних стадиях развития) выбранного вида-хозяина. Введение гетерологичной ДНК можно осуществлять одним из нескольких путей, включая микроинъекцию (например, патент США № 4873191), ретровирусную инфекцию (Jaenish, Science 240: 1468-1474 (1988)) или сайт-направленную интеграцию с использованием эмбриональных стволовых (ES) клеток (обзор Bradley et al., Bio/Technology 10: 534-539 (1992)). Яйца затем импланитируют в фаллопиевы трубы или матку псевдобеременных самок и позволяют им развивать

- 16 031876 ся до сроков. Потомок, несущий введенную ДНК в своей зародышевой линии, может передавать ДНК своему потомству нормальным менделевским наследованием, что позволяет развиваться трансгенным стадам. Основные способы получения трансгенных животных известны в данной области (см., например, Hogan et al., Manipulating the Mouse Embryo: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1986; Simons et al., Bio/Technology 6: 179-183 (1988); Wall et al., Biol. Reprod. 32: 645-651 (1985); Buhler et al., Bio/Technology 8: 140-143 (1990); Ebert et al., Bio/Technology 9: 835-838 (1991); Krimpenfort et al., Bio/Technology 9: 844-847 (1991); Wall et al., J. Cell. Biochem. 49: 113-120 (1992); US 4873191; US 4873316; WO 88/00239, WO 90/05188, WO 92/11757 и GB 87/00458). Методики введения последовательностей чужеродной ДНК в организм млекопитающих и их зародышевые клетки первоначально были разработаны на мышах (см., например, Gordon et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 7380-7384 (1980); Gordon and Ruddle, Science 214: 1244-1246 (1981); Palmiter and Brinster, Cell 41: 343-345 (1985); Brinster et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 4438-4442 (1985) и Hogan et al. (там же)). Указанные методики впоследствии были адаптированы для использования у более крупных животных, включая виды домашнего скота (см., например, WO 88/00239, WO 90/05188 и WO 92/11757 и Simons et al., Bio/Technology 6: 179-183 (1988)). Суммируя, можно сказать, что при наиболее эффективном пути, используемом в настоящее время для генерации трансгенных мышей или сельскохозяйственных животных несколько сотен линейных молекул ДНК, представляющей интерес, инъецируют в одно из пронуклеусов оплодотворенного яйца согласно разработанной методике. Можно осуществлять также инъекцию ДНК в цитоплазму зиготы.

Также можно использовать продукцию в трансгенных растениях. Экспрессия может быть генерализована или направлена в конкретный орган, такой как клубень (см. Hiatt, Nature 344: 469-479 (1990); Edelbaum et al., J. Interferon Res. 12: 449-453 (1992); Simons et al., Bio/Technology 8: 217-221 (1990) и ЕР 0255378).

Очистка VAR2CSA.

Полипептиды VAR2CSA и другие полипептиды могут быть выделены из клеточной культуральной среды или молока. Полипептиды VAR2CSA и другие полипептиды по настоящему изобретению могут быть очищены с использованием разнообразных методик, известных в данной области, включая, но ими не ограничиваясь, хроматографию (например, ионообменную, аффинную, гидрофобную, хроматофокусирующую и вытеснительную), электрофоретические методы (например, препаративное изоэлектрическое фокусирование (IEF), различающуюся растворимость (например, осаждение сульфатом аммония) или экстракцию (см., например, Protein Purification, J.-C. Janson and Lars Ryden, editors, VCH Publishers, New York, 1989). Предпочтительно они могут быть очищены аффинной хроматографией на колонке с антителами против VAR2CSA. Дополнительную очистку можно осуществлять обычными средствами химической очистки, такими как высокоэффективная жидкостная хроматография. Другие способы очистки, включая осаждение цитратом бария, известны специалистам и могут применяться для очистки новых полипептидов VAR2CSA и других полипептидов, описанных в настоящем документе (см., например, Scopes, R., Protein Purification. Springer-Verlag, N.Y., 1982).

Для терапевтических целей предпочтительно, чтобы полипептиды VAR2CSA и другие полипептиды по настоящему изобретению были практически чистыми. Так в предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения полипептиды VAR2CSA и другие полипептиды по настоящему изобретению очищают по меньшей мере приблизительно до 90-95% гомогенности, предпочтительно по меньшей мере приблизительно до 98% гомогенности. Чистоту можно оценить, например, электрофорезом в геле и аминотерминальным аминокислотных секвенированием.

Термин выделенный полипептид относится к полипептиду по настоящему изобретению, который (1) был выделен по меньшей мере из приблизительно 50% полинуклеотидов, липидов, углеводов или других материалов (т.е. загрязнений), с которыми он связан в природе. Предпочтительно выделенный полипептид практически не содержит никаких других загрязняющих полипептидов или других загрязнений, которые наблюдаются в его естественном окружении и которые могли бы препятствовать его терапевтическому, диагностическому, профилактическому или исследовательскому применению.

Термин микроорганизм, использующийся в настоящем документе, относится к бактериям, грибам, археям, протистам; микроскопическим растениям и животным (таким как зеленые водоросли или планктон), плоским червям и амебам. В данное определение включены и патогенные микроорганизмы.

Введение и фармацевтические композиции. Комбинированные лекарственные средства.

Слитый полипептид или конъюгат VAR2CSA, как определено в настоящем описании, можно вводить одновременно или последовательно с одним или более других противораковых средств или использовать в комбинированном лечении с другими известными лекарственными средствами. Факторы могут поставляться в единой лекарственной форме, которая содержит оба соединения, или в форме комплекта, содержащего препарат полипептида VAR2CSA в качестве первой стандартной лекарственной формы и препарат одного или нескольких других соединений в качестве второй стандартной лекарственной формы. Когда бы не упоминалась первая, или вторая, или третья и т.п. стандартная лекарственная форма в настоящем описании, это не указывает на предпочтительный порядок введения, но делается лишь ради удобства.

- 17 031876

Подходящие другие противораковые средства или лекарственные средства, которые можно использовать в комбинации с полипептидом VAR2CSA, включают уже имеющиеся в продаже или находящиеся на стадии разработки антитела, включая Vemurafenib (Hoffmann-La Roche), моноклональные антитела человека против MCSP, терапевтические (Micromet Inc) анти-MCSP с использованием методик антител

BITE и адоптивный перенос цитотоксических Т-клеток со специфичностью в отношении MCSP.

Под одновременным введением препарата полипептида VAR2CSA и препарата одного или нескольких других соединений подразумевается введение соединений в виде единой лекарственной формы или введение первого средства с последующим введением второго средства с интервалом времени между введениями не более 15 мин, предпочтительно 10 мин, более предпочтительно 5 мин, еще более предпочтительно 2 мин. Любой из факторов можно вводить первым.

Под последовательным введением подразумевается введение первого средства с последующим введением второго средства с интервалом времени между введениями более 15 мин. Любую из двух дозированных лекарственных форм можно вводить первой. Предпочтительно оба продукта инъецируют с использованием одного и того же внутривенного доступа.

Другой целью настоящего изобретения является создание фармацевтической композиции, содержащей полипептид VAR2CSA, который присутствует в концентрации в сыворотке/плазме от 0 до 1 мг/мл, и в которой величина pH составляет от 2,0 до 10,0. Композиция может дополнительно содержать буферную систему, консервант (консерванты), средство (средства), обеспечивающее изотоничность, хелатирующее средство (средство), стабилизаторы и поверхностно-активные средства. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция является водной, т.е. композицией, содержащей воду. Указанная композиция обычно представляет собой раствор или суспензию. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция представляет собой водный раствор. Термин водная композиция определяется как композиция, содержащая по меньшей мере 50 мас.% воды. Подобно этому водный раствор определяется как раствор, содержащий по меньшей мере 50 мас.% воды, а термин водная суспензия определяется как суспензия, содержащая по меньшей мере 50 мас.% воды.

В других вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция представляет собой лиофилизированную композицию, в которую врач или пациент перед использованием добавляет растворители и/или разбавители.

В других вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция представляет собой высушенную композицию (например, лиофилизированную или высушенную распылением), готовую для использования без предварительного растворения.

В еще одном аспекте изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей водный раствор полипептида VAR2CSA и буфер, в которой полипептид VAR2CSA присутствует в концентрации в сыворотке/плазме от 0 до 1 мг/мл или выше, и в которой величина pH составляет от 2,0 до 10,0.

В других вариантах осуществления настоящего изобретения величина pH композиции выбрана из перечня, состоящего из 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4,0, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7,0, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,8, 7,9, 8,0, 8,1, 8,2, 8,3, 8,4, 8,5, 8,6, 8,7, 8,8, 8,9, 9,0, 9,1, 9,2, 9,3, 9,4, 9,5, 9,6, 9,7, 9,8, 9,9 и 10,0.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения буфер выбран из группы, состоящей из ацетата натрия, карбоната натрия, цитрата, глицилглицина, гистидина, глицина, лизина, аргинина, дигидрофосфата натрия, гидрофосфата натрия, фосфата натрия и трис(гидроксиметил)аминометана, бицина, трицина, яблочной кислоты, сукцината, малеиновой кислоты, фумаровой кислоты, винной кислоты, аспарагиновой кислоты или их смесей. Каждый из указанных специфических буферов представляет собой альтернативный вариант осуществления настоящего изобретения.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения композиция дополнительно содержит фармацевтически приемлемый консервант. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения консервант выбран из группы, состоящей из фенола, о-крезола, м-крезола, п-крезола, метил-пгидроксибензоата, пропил-п-гидроксибензоата, 2-феноксиэтанола, бутил-п-гидроксибензоата, 2фенилэтанола, бензилового спирта, хлорбутанола и тиомеросала, бронопола, бензойной кислоты, имидомочевины, хлоргексидина, дегидроацетата натрия, хлоркрезола, этил-п-гидроксибензоата, хлорида бензетония, хлорфенезина (3п-хлорфеноксипропан-1,2-диола) или их смесей. В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения консервант присутствует в концентрации от 0,1 до 20 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения консервант присутствует в концентрации от 0,1 до 5 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения консервант присутствует в концентрации от 5 до 10 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения консервант присутствует в концентрации от 10 до 20 мг/мл. Каждый из указанных специфических консервантов представляет собой альтернативный вариант осуществления настоящего изобретения. Применение консерванта в фармацевтических композициях хорошо известно специалистам. Для удобства приводится ссылка: Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 19-е издание, 1995 г.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения композиция дополнительно содер- 18 031876 жит изотоническое средство. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения изотоническое средство выбрано из группы, состоящей из соли (например, хлорида натрия), сахара или сахарного спирта, аминокислоты (например, L-глицина, L-гистидина, аргинина, лизина, изолейцина, аспарагиновой кислоты, триптофана, треонина), алдитола (например, глицерола (глицерина), 1,2-пропандиола (пропиленгликоля), 1,3-пропандиола, 1,3-бутандиола), полиэтиленгликоля (например, PEG400) или их смесей. Можно использовать любой сахар, такой как моно-, ди- или полисахариды, или водорастворимые глюканы, включая, например, фруктозу, глюкозу, маннозу, сорбозу, ксилозу, мальтозу, лактозу, сахарозу, трегалозу, декстран, пуллулан, декстрин, циклодекстрин, растворимый крахмал, гидроксиэтилкрахмал и карбоксиметилцеллюлозу-Na. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения сахар представляет собой сахарозу. Сахарный спирт определяется как С4-С8 углеводород, имеющий по меньшей мере одну группу -ОН, и включает, например, маннит, сорбит, инозит, галактит, дульцит, ксилит и арабит. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения сахарный спирт представляет собой маннит. Сахара или сахарные спирты, упомянутые выше, можно использовать в отдельности или в комбинации. Для использующегося количества фиксированного лимита не существует, если только сахар или сахарный спирт растворяется в жидком препарате и не оказывает неблагоприятного действия на стабилизирующие эффекты, достигнутые с использованием способов по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения концентрация сахара или сахарного спирта находится в пределах приблизительно от 1 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения изотоническое средство присутствует в концентрации от до 50 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения изотоническое средство присутствует в концентрации от 1 до 7 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения изотоническое средство присутствует в концентрации от 8 до 24 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения изотоническое средство присутствует в концентрации от 25 до 50 мг/мл. Каждый из указанных специфических изотонических средств представляет собой альтернативный вариант осуществления настоящего изобретения. Применение изотонического средства в фармацевтических композициях хорошо известно специалистам. Для удобства приводится ссылка: Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 19-е издание, 1995 г.

В еще одном варианте композиция дополнительно содержит хелатирующее средство. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения хелатирующее средство выбрано из солей этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA), лимонной кислоты и аспарагиновой кислоты и их смесей. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения хелатирующее средство присутствует в концентрации от 0,1 до 5 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения хелатирующее средство присутствует в концентрации от 0,1 до 2 мг/мл. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения хелатирующее средство присутствует в концентрации от 2 до 5 мг/мл. Каждый из указанных специфических хелатирующих средств представляет собой альтернативный вариант осуществления настоящего изобретения. Применение хелатирующего средства в фармацевтических композициях хорошо известно специалистам. Для удобства приводится ссылка: Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 19-е издание, 1995 г.

В еще одном варианте композиция дополнительно содержит стабилизатор. Применение стабилизатора в фармацевтических композициях хорошо известно специалистам. Для удобства приводится ссылка: Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 19-е издание, 1995 г.

Более конкретно, композиции по настоящему изобретению представляют собой стабилизированные жидкие фармацевтические композиции, в которых их терапевтически активные компоненты содержат полипептид, который, возможно, образует агрегаты во время хранения в форме жидких фармацевтических композиций. Под образованием агрегатов подразумевается физическое взаимодействие между молекулами полипептида, результатом которого является образование олигомеров, которые могут оставаться растворимыми, или больших видимых агрегатов, которые выпадают из раствора в осадок. Под термином во время хранения подразумевается, что полученная жидкая фармацевтическая композиция не вводится индивиду немедленно. После получения ее упаковывают для хранения, или в жидкой форме, или в замороженном состоянии, или в высушенной форме для растворения позднее с получением жидкой формы или другой формы, удобной для введения индивиду. Под высушенной формой подразумевается, что жидкую фармацевтическую композицию сушат замораживанием (т.е. лиофилизацией; см., например, Williams and Polli (1984) J. Parenteral Sci. Technol. 38: 48-59), распылительной сушкой (см. Masters (1991) в Spray-Drying Handbook (5-е изд.; Longman Scientific and Technical, Essez, U.K.), с. 491-676; Broadhead et al. (1992) Drug Devel. Ind. Pharm. 18:1169-1206 и Mumenthaler et al. (1994) Pharm. Res. 11:1220) или воздушной сушкой (Carpenter and Crowe (1988) Cryobiology 25: 459-470 и Roser (1991) Biopharm. 4:47-53). Образование агрегатов полипептидом во время хранения жидкой фармацевтической композиции может неблагоприятно влиять на биологическую активность указанного полипептида, что приводит к потере терапевтической эффективности фармацевтической композиции. Кроме того, образование агрегатов может вызывать другие проблемы, такие как закупорка трубок, мембран или насосов, когда содержащую полипептид фармацевтическую композицию вводят с помощью инфузионной системы.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может дополнительно содержать ами

- 19 031876 нокислотное основание в количестве, достаточном для уменьшения образования агрегатов полипептидом во время хранения композиции. Под аминокислотным основанием подразумевается аминокислота или комбинация аминокислот, в которой каждая данная аминокислота присутствует в форме ее свободного основания или в форме ее соли. В случае использования комбинации аминокислот все аминокислоты могут присутствовать в форме их свободных оснований, все могут присутствовать в форме их солей или некоторые могут присутствовать в форме их свободных оснований, в то время как остальные - в форме их солей. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения аминокислоты для использования при получении композиций по настоящему изобретению представляют собой аминокислоты, несущие заряженную боковую цепь, такие как аргинин, лизин, аспрагиновая кислота и глутаминовая кислота. Любой стереоизомер (т.е. изомер L, D или DL) конкретной аминокислоты (например, глицина, метионина, гистидина, имидазола, аргинина, лизина, изолейцина, аспарагиновой кислоты, триптофана, треонина и их смесей) или комбинации указанных стереоизомеров могут присутствовать в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, если только конкретная аминокислота присутствует в форме ее свободного основания или в форме ее соли. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения используется L-стереоизомер. Композиции по настоящему изобретению также можно получать с использованием аналогов указанных аминокислот. Под аналогом аминокислоты подразумевается производное природной аминокислоты, которое вызывает желаемый эффект уменьшения образования агрегатов полипептидом во время хранения жидких фармацевтических композиций по настоящему изобретению. Подходящие аналоги аргинина включают, например, аминогуанидин, орнитин и N-моноэтилL-аргинин, подходящие аналоги метионина включают этионин и бутионин, а подходящие аналоги цистеина включают S-метил-Е-цистеин. Как и другие аминокислоты, аналоги аминокислот включают в состав композиций как в форме их свободных оснований, так и в форме их солей. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения аминокислоты или аналоги аминокислот используют в концентрации, которая является достаточной для предотвращения или задержки агрегации белка.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения метионин (или другие серосодержащие аминокислоты или аналоги аминокислот) можно добавлять, чтобы ингибировать окисление остатков метионина до сульфоксида метионина, в случае, когда полипептид, действующий как терапевтическое средство, представляет собой полипептид, содержащий по меньшей мере один остаток метионина, склонный к указанному окислению. Под ингибированием подразумевается минимальное накопление видов окисленного метионина в течение времени. Ингибирование окисления метионина приводит к более продолжительному сохранению полипептида в его правильной молекулярной форме. Можно использовать любой стереоизомер метионина (изомер L, D или DL) или их комбинации. Добавлять следует такое количество, которое достаточно для ингибирования окисления остатков метионина, таким образом, чтобы количество сульфоксида метионина было приемлемым для регулирующих учреждений. Обычно это означает, что композиция содержит не более приблизительно от 10% до приблизительно 30% сульфоксида метионина. В целом, этого можно достигать добавлением метионина таким образом, чтобы соотношение добавленного метионина и остатков метионина находилось в пределах приблизительно от 1:1 до приблизительно 1000:1, таких как от 10:1 до приблизительно 100:1.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения композиция дополнительно содержит стабилизатор, выбранный из группы высокомолекулярных полимеров или низкомолекулярных соединений. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения стабилизатор выбран из полиэтиленгликоля (например, PEG 3350), поливинилового спирта (PVA), поливинилпирролидона, карбокси/гидроксицеллюлозы или их производных (например, НРС, HPC-SL, HPC-L и НРМС), циклодекстринов, серосодержащих веществ, таких как монотиоглицерин, тиогликолевая кислота и 2-метилтиоэтанол, и различных солей (например, хлорида натрия). Каждый из указанных специфических стабилизаторов представляет собой альтернативный вариант осуществления настоящего изобретения.

Фармацевтические композиции могут также содержать дополнительные стабилизирующие средства, которые еще более увеличивают стабильность содержащегося в композициях терапевтически активного полипептида. Стабилизирующие средства, представляющие особенный интерес для настоящего изобретения, включают, но ими не ограничиваются, метионин и EDTA, которые защищают полипептид от окисления метионина, и неионогенное поверхностно-активное вещество, которое защищает полипептид от агрегации, связанной с замораживанием-оттаиванием или механическими сдвигами.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения композиция дополнительно содержит поверхностно-активное вещество. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения поверхностно-активное вещество выбрано из детергента, этоксилированного касторового масла, полигликозилированных глицеридов, ацетилированных моноглицеридов, эфиров сорбитана и жирных кислот, блок-полимеров полиоксипропилен-полиоксиэтилен (например, полоксамеров, таких как Pluronic® F68, полоксамер 188 и 407, Triton X-100), эфиров полиоксиэтиленсорбитана и жирных кислот, производных полиоксиэтилена и полиэтилена, таких как алкилированные и алкоксилированные производные (твины, например, Tween-20, Tween-40 Tween-80 и Brij-35), моноглицеридов или их этоксилированных производных, диглицеридов или их полиоксиэтиленовых производных, спиртов, глицерина, лектинов и фосфолипидов (например, фосфатидилсерина, фосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина, фосфатидили

- 20 031876 нозита, дифосфатидилглицерина и сфингомиелина), производных фосфолипидов (например, дипальмитоил фосфатидной кислоты) и лизофосфолипидов (например, пальмитоиллизофосфатидил-Ь-серина и 1ацил-8и-глицеро-3-фосфатных эфиров этаноламина), холина, серина или треонина) и алкильных, алкоксильных (алкильный сложный эфир), алкокси- (алкильный простой эфир) производных лизофосфатидила и фосфатидилхолинов, например лауроильных и миристоильных производных лизофосфатидилхолина, дипальмитоилфосфатидилхолина и модификаций группы полярной головки, т.е. холинов, этаноламинов, фосфатидной кислоты, серинов, треонинов, глицерина, инозита и положительно заряженных DODAC, DOTMA, DCP, BISHOP, лизофосфатидилсерина и лизофосфатидилтреонина, и глицерофосфолипидов (например, кефалинов, глицерогликолипидов (например, галактопиранозоида), сфингогликолипидов (например, церамидов, ганглиозидов), додецилфисфохолина, лизолецитина куриных яиц, производных фусидовой кислоты (например, тауродигидрофузидата и т.п.), длинноцепочечных жирных кислот и их солей С6-С12 (например, олеиновой кислоты и каприловой кислоты), ацилкарнитинов и производных, Naацилированных производных лизина, аргинина или гистидина, или ацилированных по боковой цепи производных лизина или аргинина, Na-ацилированных производных дипептидов, содержащих любую комбинацию лизина, аргинина или гистидина и нейтральной или кислой аминокислоты, Naацилированного производного трипептида, содержащего любую комбинацию нейтральной аминокислоты и двух заряженных аминокислот, DSS (докузата натрия, регистрационный № CAS [577-11-7]), докузата кальция, регистрационный № CAS [128-49-4], докузата калия, регистрационный № CAS [7491-09-0], SDS (додецилсульфата натрия или лаурилсульфата натрия), каприлата натрия, холевой кислоты или ее производных, желчных кислот и их солей и глициновых или тауриновых конъюгатов, урсодезоксихолиновой кислоты, холата натрия, дезоксихолата натрия, таурохолата натрия, гликохолата натрия, Nгексадецил-Ы,№диметил-3-аммоний-1-пропансульфоната, анионогенных (алкиларилсульфонатов) одновалентных поверхностно-активных веществ, цвиттерионогенных поверхностно-активных веществ (например, №алкил-Ы,№диметиламмоний-1 -пропансульфонатов, 3-холамид-1 -пропилдиметиламмоний-1 пропансульфоната), катионогенных поверхностно-активных веществ (четвертичных аммониевых оснований) (например, бромида цетилтриметиламмония, хлорида цетилпиридиния), неоиногенных поверхностно-активных веществ (например, додецил-Р-Э-глюкопиранозида), полоксаминов (например, Tetronic's), которые представляют собой тетрафункциональные блок-сополимеры, полученные последовательным добавлением пропиленоксида и этиленоксида к этилендиамину, или поверхностно-активное вещество можно выбрать из группы производных имидазолина или их смесей. Каждое из указанных специфических поверхностно-активных веществ представляет собой альтернативный вариант осуществления настоящего изобретения.

Применение поверхностно-активных веществ в фармацевтических композициях хорошо известно специалистам в данной области. Для удобства приводится ссылка: Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 19-е издание, 1995 г.

Возможно присутствие и других ингредиентов в пептидной фармацевтической композиции по настоящему изобретению. Указанные дополнительные ингредиенты могут включать увлажняющие средства, эмульгаторы, антиоксиданты, средства, придающие объем, модификаторы тоничности, хелатирующие средства, ионы металлов, масляные носители, белки (например, сывороточный альбумин человека, желатин или белки) и цвиттерион (например, аминокислоту, такую как бетаин, таурин, аргинин, глицин, лизин и гистидин). Указанные дополнительные ингредиенты, разумеется, не должны неблагоприятным образом влиять на общую стабильность фармацевтической композиции по настоящему изобретению.

Фармацевтические композиции, содержащие полипептид VAR2CSA, по настоящему изобретению можно вводить пациенту, который нуждается в указанном лечении, в несколько областей, например в локальные участки, например кожу и участки слизистой оболочки, в области, которые обходят всасывание, например вводить в артерию, вену, сердце, и в области, которые предусматривают всасывание, например вводить в кожу, под кожу, в мышцу или брюшную полость.

Местное введение может иметь особенные преимущества для лечения состояний, связанных с локальным воспалением, такого как лечение воспаления, связанного с ожогом, или других состояний, связанных с кожей. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения введение осуществляют местно.

В некоторых особенных вариантах осуществления настоящего изобретения можно использовать глазные капли при состояниях, связанных с глазом, таких как кератит, такой как диффузный ламеллярный кератит (DLK).

Введение фармацевтических композиций по настоящему изобретению можно осуществлять нескольким путями, например лингвальным, сублингвальным, буккальным, в рот, пероральным, в желудок и кишечник, назальным, легочным, например через бронхиолы и альвеолы или их комбинации, эпидермальным, дермальным, трансдермальным, вагинальным, ректальным, окулярным, например через конъюнктиву, уретральным и парентеральным, пациентам, которые нуждаются в указанном лечении.

Композиции по настоящему изобретению можно вводить в виде нескольких лекарственных форм, например в виде растворов, суспензий, эмульсий, микроэмульсий, двойной эмульсии, пенок, бальзамов,

- 21 031876 паст, пластырей, мазей, таблеток, таблеток в оболочке, средств для промывания, капсул, например твердых желатиновых капсул и мягких желатиновых капсул, суппозиториев, ректальных капсул, капель, гелей, спреев, порошка, аэрозолей, средств для ингаляции, глазных капель, глазных мазей, средств для промывания глаз, вагинальных пессариев, вагинальных колец, вагинальных мазей, раствора для инъекций, in situ трансформирующихся растворов, например in situ, превращающихся в гель, in situ затвердевающих, in situ осаждающихся, in situ кристаллизующихся, раствора для инфузий и имплантатов.

Композиции по настоящему изобретению также можно смешивать или присоединять, например, посредством ковалентных, гидрофобных и электростатических взаимодействий, с носителем лекарственного средства, системой доставки лекарственного средства и усовершенствованной системой доставки лекарственного средства, с целью еще большего повышения стабильности, полипептида VAR2CSA, повышения биодоступности, повышения растворимости, уменьшения неблагоприятных эффектов, достижения хронотерапии, хорошо известной специалистам в данной области, и улучшения соблюдения пациентом режима и схемы лечения или любых их комбинаций. Примеры носителей, систем доставки лекарственного средства и усовершенствованных систем доставки лекарственного средства включают, но ими не ограничиваются, полимеры, например целлюлозу и производные, полисахариды, например декстран и производные, крахмалы и производные, поли(виниловый спирт), акрилатные и метакрилатные полимеры, полимолочную и полигликолевую кислоту и их блок-сополимеры, полиэтиленгликоли, белкиносители, например альбумин, гели, например термогелеобразующие системы, например блоксополимерные системы, хорошо известные специалистам, мицеллы, липосомы, микросферы, наночастицы, вирусоподобные частицы, частицы, подобные бактериям, жидкие кристаллы и их дисперсии, L2 фазу и ее дисперсии, хорошо известные специалистам в данной области поведения фаз в системах жир-вода, полимерные мицеллы, двойные эмульсии, самоэмульгирующиеся, самомикроэмультирующиеся циклодекстрины и их производные и дендримеры.

Композиции по настоящему изобретению являются подходящими для получения твердых средств, полутвердых средств, порошка и растворов для легочного введения полипептида VAR2CSA с использованием, например, ингалятора с отмеренной дозой, ингалятора сухого порошка и небулайзера; все указанные устройства хорошо известны специалистам в данной области.

Композиции по настоящему изобретению являются особенно подходящими для получения систем доставки с контролируемым, замедленным, пролонгированным, отсроченным и медленным высвобождением лекарственного средства. Более конкретно, без ограничения, композиции являются подходящими для получения парентеральных систем доставки с контролируемым и замедленным высвобождением лекарственного средства (обе системы обеспечивают многократное уменьшение количества введений), хорошо известных специалистам в данной области. Еще более предпочтительно системы с контролируемым и замедленным высвобождением лекарственного средства вводят подкожно. Без ограничения объема настоящего изобретения примерами подходящих систем и композиций с контролируемым высвобождением лекарственного средства являются гидрогели, масляные гели, жидкие кристаллы, полимерные мицеллы, микросферы, наночастицы.

Способы получения систем с контролируемым высвобождением лекарственного средства, подходящие для композиций по настоящему изобретению, включают, но ими не ограничиваются, кристаллизацию, конденсацию, сокристаллизацию, приципитацию, сопреципитацию, эмульгирование, диспергирование, гомогенизация под высоким давлением, инкапсуляцию, распылительную сушку, микроинкапсулирование, коацервацию, фазовое разделение, выпаривание растворителя для получения микросфер, экструзию и сверхкритические флюидные методики. Общая ссылка сделана на Handbook of Pharmaceutical Controlled Release (Wise D.L., ed. Marcel Dekker, New York, 2000) и Drug and the Pharmaceutical Sciences vol. 99: Protein Formulation and Delivery (MacNally E.J., ed. Marcel Dekker, New York, 2000).

Парентеральное введение можно осуществлять подкожной, внутримышечной, интраперитонеальной или внутривенной инъекцией с помощью шприца, необязательно, с помощью шприца-ручки. Альтернативно, парентеральное введение можно осуществлять с помощью инфузионной помпы. Еще одним вариантом является композиция, которая может представлять собой раствор или суспензию для введения полипептида VAR2CSA в форме назального или легочного спрея. В качестве еще одного варианта фармацевтические композиции, содержащие полипептид VAR2CSA по настоящему изобретению, также могут быть адаптированы для чрескожного введения, например, посредством безыгольной инъекции или из накладки, необязательно, ионофоретической накладки, или чресслизистого, например, буккального, введения.

Термин стабилизированная композиция относится к композиции с повышенной физической стабильностью, повышенной химической стабильностью или повышенной физической и химической стабильностью.

Термин физическая стабильность белковой композиции, используемый в настоящем документе, относится к тенденции белка образовывать биологически неактивные и/или нерастворимые агрегаты белка в результате воздействия на белок термомеханических стрессов и/или взаимодействия с границами раздела и поверхностями, которые являются дестабилизирующими, такими как гидрофобные поверхности и границы раздела. Физическую стабильность водных белковых композиций оценивают посредством

- 22 031876 визуального осмотра и/или измерений мутности после воздействия на композицию, помещенную в подходящие контейнеры (например, картриджи или флаконы), механического/физического стресса (например, взбалтывания) при различных температурах в течение различных периодов времени. Визуальный осмотр композиций осуществляют при резком сфокусированном свете на темном фоне. Мутность композиции характеризуют посредством визуальной оценки баллов степени мутности, например, по шкале от 0 до 3 (композиция без мутности соответствует визуальному баллу 0, а композиция, демонстрирующая визуальную мутность, соответствует визуальному баллу 3). Композицию классифицируют на физически нестабильную с точки зрения агрегации белка, если она демонстрирует визуальную мутность при дневном свете. Альтернативно, мутность композиции можно оценивать простыми измерениями мутности, хорошо известными специалистам. Физическую стабильность водных белковых композиций также можно оценивать с использованием спектроскопического агента или зонда конформационного состояния белка. Зонд предпочтительно представляет собой малую молекулу, которая предпочтительно связывается с ненативным конформером белка. Одним примером малого молекулярного спектроскопического зонда структуры белка является тиофлавин Т. Тиофлавин Т представляет собой флюоресцентную краску, которая широко используется для обнаружения фибрилл амилоида. В присутствии фибрилл и, возможно, также других конфигураций белка, тиофлавин Т вызывает новый максимум возбуждения приблизительно на 450 нм и усиленную эмиссию приблизительно на 482 нм, когда связывается с фибриллярной формой белка. Несвязанный тиофлавин Т является практически нефлюоресцентным при указанных длинах волн.

Другие малые молекулы можно использовать в качестве зондов изменений в структуре белка из нативного в ненативное состояние. Например, зонды гидрофобное пятно, которые предпочтительно связываются с гидрофобными пятнами белка. Гидрофобные пятна обычно спрятаны внутри третичной структуры белка в его нативном состоянии, но становятся доступными для воздействия, когда белок начинает развертываться или денатурировать. Примерами указанных малых молекулярных спектроскопических зондов являются ароматические гидрофобные краски, такие как антрацен, акридин, фенантролин или т.п. Другие спектроскопические зонды представляют собой металлоаминокислотные комплексы, такие как комплексы металла кобальта с гидрофобными аминокислотами, такими как фенилаланин, лейцин, изолейцин, метионин и валин или т.п.

Термин химическая стабильность белковой композиции, используемый в настоящем документе, относится к химическим ковалентным изменениям в структуре белка, ведущим к образованию продуктов химической деградации, с потенциальным уменьшением биологической потенции и/или потенциальным возрастанием иммуногенных свойств по сравнению с нативной структурой белка. Различные продукты химической деградации могут образовываться в зависимости от типа и природы нативного белка и окружения, которое воздействовало на белок. Устранения химической деградации, наиболее вероятно, невозможно полностью избежать, и возрастание количества продуктов химической деградации часто наблюдается во время хранения и использования белковой композиции, что хорошо известно специалистам. Большинство белков склонно к деамидированию, процессу, при котором амидная группа боковой цепи в глутаминильных или аспарагинильных остатках гидролизуется с образованием свободной карбоновой кислоты. Другие пути деградации включают образование продуктов высокомолекулярной трансформации, когда две или несколько молекулы белка ковалентно связываются друг с другом через трансамидирование и/или дисульфидные взаимодействия, приводящие к образованию ковалентно связанных димерных, олигомерных и полимерных продуктов деградации (Stability of Protein Pharmaceuticals, Ahern. T.J. & Manning M.C., Plenum Press, New York 1992). Окисление (например, остатков метионина) можно упомянуть как другой вариант химической деградации. Химическую стабильность белковой композиции можно оценивать измерением количества продуктов химической деградации в различные временные точки после воздействия различных условий окружающей среды (образование продуктов деградации часто может быть ускорено, например, повышением температуры). Количество каждого отдельного продукта деградации часто определяют отделением продуктов деградации по размеру молекул и/или заряду с использованием различных методик хроматографии (например, SEC-HPLC и/или RP-HPLC).

Следовательно, как подчеркнуто выше, стабилизированная композиция относится к композиции с увеличенной физической стабильностью, увеличенной химической стабильностью или увеличенной физической и химической стабильностью. В целом, композиция должна быть стабильной во время использования и хранения (при соблюдении рекомендованных условий использования и хранения) до указанного срока годности.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция, содержащая полипептид VAR2CSA, является стабильной в течение более чем 6 недель использования и в течение более чем 3 лет хранения. В других вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция, содержащая полипептид VAR2CSA, является стабильной в течение более чем 4 недель использования и в течение более чем 3 лет хранения. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция, содержащая полипептид VAR2CSA, является стабильной в течение более чем 4 недель использования и в течение более чем двух лет хранения. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения фармацевтическая композиция, содержащая

- 23 031876 полипептид VAR2CSA, является стабильной в течение более чем 2 недель использования и в течение более чем двух лет хранения.

Показания к применению полипептида VAR2CSA и его конъюгатов.

Полипептиды VAR2CSA или их конъюгаты можно использовать при широком ряде показаний, связанных с экспрессией, такой как патологическая экспрессия CSA, как при различных злокачественных новообразованиях, таких как метастатический рак, включая меланомы, такие как меланома С32, саркомы, рак легких, олигодендроцитомы, опухоли головного мозга человека, включая глиомы, лейкоз, такой как лимфобластный лейкоз и острый миелолейкоз, и рак, такой как плоскоклеточный рак и рак молочной железы, почечно-клеточный рак, хондросаркома и рак поджелудочной железы. Полипептиды VAR2CSA или их конъюгаты также можно использовать для стволовых злокачественных клеток и соответственно нацеливать на указанные клетки еще до развития их в злокачественное новообразование. Полипептиды VAR2CSA или их конъюгаты можно использовать для идентификации, отслеживания и нацеливания отдаленных микрометастазов in vivo. Практически все первичные опухоли, включая рак гематопоэтической системы, имеют потенциал развития в метастатическое заболевание, которое в большой степени связано с плохим терапевтическим исходом для пациентов.

Полипептиды VAR2CSA или их конъюгаты можно использовать для нацеливания соединений, которые предотвращают деградацию или восстанавливают внеклеточный CSPG, таких как гормоны роста, противовоспалительные соединения или ингибиторы белков, в хрящевой ткани, суставах и нервной ткани.

Полипептиды VAR2CSA или их конъюгаты можно использовать для нацеливания соединений, которые усиливают деградацию или предотвращают продукцию внеклеточного CSPG, таких как хондроитиназа ABC, которая пересекает сахарные цепи ядра белка молекул CSPG. Ксилоциды, которые уменьшают продукцию CSPG, или лекарственные средства, которые ингибируют ферменты, важные для продукции CSPG, такие как хондроитин-синтетаза или хондроитин-полимеризующий фактор (такой как 4фторглюкозамин, п-нитрофенил-бета-Э-ксилоксид, 4-метилумбеллиферил-бета-О-ксилопиранозид), в поврежденной нервной ткани.

VAR2CSA, конъюгированный с нуклеиновой кислотой, среди которых малая интерферирующая РНК (siPHK), антисмысловые пептидные нуклеиновые кислоты (PNA), малая РНК-шпилька (shPHK) и недоступные нуклеиновые кислоты (LNA™), можно использовать для удаления РНК, кодирующей CSAпрезентирующие молекулы.

Конъюгаты полипептида VAR2CSA.

Терапевтическая или диагностическая эффекторная молекула, такая как цитотоксические и обнаруживающие молекулы.

Некоторые аспекты настоящего изобретения связаны с слитым полипептидом VAR2CSA или конъюгатом, как определено в настоящем описании, дополнительно содержащим терапевтическую эффекторную молекулу, такую как противовоспалительное средство, стероидный гормон, цитотоксическое или обнаруживающее средство или молекула, такую как органическая молекула, радионуклид или цитотоксический фермент.

В некоторых аспектах настоящего изобретения слитый белок VAR2CSA по настоящему изобретению содержит последовательность, как определено одной или более последовательностей, выбранных из SEQ ID NO:57-59 и 71, или ее функциональный вариант или фрагмент.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения слитый белок VAR2CSA по настоящему изобретению может содержать ингибитор протеиназ, такой как ингибитор основного панкреатического трипсина (BPTI), на конце, таком как N-конец, белковой последовательности, такой как последовательность, определенная SEQ ID NO:57.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения слитый белок VAR2CSA по настоящему изобретению может содержать белковую последовательность токсина, как определено одной или более последовательностей, выбранных из SEQ ID NO:58, 59 и 71, такую как белковая последовательность токсина, которая была оптимизирована для меньшей иммуногенности, такую как последовательность, определенная SEQ ID NO:59. В некоторых вариантах осуществления сигнальная последовательность KDEL SEQ ID NO:58 или 59 присутствует в слитом белке VAR2CSA по настоящему изобретению, а в некоторых вариантах осуществления сигнальная последовательность KDEL SEQ ID NO:58 или 59 отсутствует в слитом белке VAR2CSA по настоящему изобретению. Соответственно сигнальная последовательность KDEL может быть оптимальной для конструкций по настоящему изобретению.

Неограничивающими примерами цитотоксических частей, которые могут быть слиты или конъюгированы с полипептидами VAR2CSA по настоящему изобретению, являются химиотерапевтические средства, выбранные из калихеамицина, цисплатина, адриамицина, ауристатина, доксорубицина, майтанзиноида, таксола, эктеинасцидина, гелданамицина, метотрексата и их производных и их комбинаций и т.п., подходящих для противораковой терапии. Примерами цитотоксических белков, слитых с полипептидами VAR2CSA, являются экзотоксин A. Pseudomonas, дифтерийный токсин, токсин рицин, противовирусный белок фитолакки американской, сапорин, гелонин и их варианты.

Описаны конъюгаты альбумина с доксорубицином для использования при злокачественном ново- 24 031876 образовании (Kratz et al., J. Med. Chem. 45: 5523-33, 2002) и с метотрексатом - при ревматоидном артрите (Wunder et al., J. Immunol. 170: 4793-4801, 2003). Соединения, которые увеличивают количество активных форм кислорода, т.е. пиперлонгумин, также были описаны (Raj et al., Nature 475: 231-234, 2011).

Также можно использовать терапевтические ферменты, средства, которые индуцируют апоптоз, и т.п. с целью получения нацеленной цитотоксичности, т.е. убийства опухолевых клеток.

Полипептиды VAR2CSA, описанные в настоящем документе, могут опосредовать убийство клеток, индуцируя лизис, опосредованный комплементзависимой цитотоксичностью (CDC), лизис, опосредованный антителозависимой клеточной цитотоксичностью (ADCC), апоптоз, гомотипическую адгезию или фагоцитоз, например индуцируя CDC опосредованный лизис или ADCC опосредованный лизис. Полипептиды VAR2CSA, описанные в настоящем документе, могут взаимодействовать с компонентами иммунной системы предпочтительно через ADCC или CDC. Однако полипептиды VAR2CSA по настоящему изобретению могут также оказывать действие, просто связываясь с опухолевыми антигенами на клеточной поверхности, таким образом, например, блокируя пролиферацию клеток.

Согласно настоящему изобретению термин терапевтически эффективная молекула обозначает любую молекулу, которая может оказывать терапевтическое действие. Согласно настоящему изобретению терапевтическую эффекторную молекулу предпочтительно селективно направляют к клетке, которая экспрессирует CSA, и она включает противораковые средства, радиоизотопы, токсины, цитостатические или цитолитические лекарственные средства и т.п. Противораковые средства включают, например, антрациклины (доксорубицин, даунорубицин, эпирубицин, идарубицин, валрубицин, митоксантрон), алкилирующие средства на основе платины и не на основе платины (цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин, мехлортамин, циклофосфамид, хлорамбуцил, ифосфамид, бусульфан, кармустин, дакарбазин, ломустин, прокарбазин), алкалоиды барвинка (винкристин, винбластин, винорелбин, виндезин), таксаны (таксол и децетаксел), ингибиторы топоизомеразы I (камптотецин, иринотекан, топотекан), ингибиторы топоизомеразы II (амсакрин, этопозид, этопозида фосфат, тенипозид или другие алкалоидные производные, встречающиеся в природе в корне американского подофилла (Podophyllum peltatum), неантрациклиновые цитотоксические антибиотики (дактиномицин, блеомицин, пликамицин и митомицины), антистероиды (такие как аминоглютетимид), аналоги нуклеозидов (цитарабидин, фторурацил и меркаптопурин), антиметаболиты (метотрексат и тиогуанин), аналоги дихлордифенилтрихлорэтана (такие как митотан) и соединения, индуцирующие активные формы кислорода (ROS) (включая, без ограничения, пиперлонгумин и бета-фенилэтилизотиоцианат). Другие противораковые средства описаны, например, в Goodman and Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8-е издание, 1990, McGraw-Hill, Inc., в частности, в главе 52 (Antineoplastic Agents) (Paul Calabresi and Bruce A. Chabner). Токсины могут представлять собой белки, такие как противовирусный белок фитолакки американской, холерный токсин, коклюшный токсин, рицин, гелонин, абрин, дифтерийный экзотоксин или экзотоксин Pseudomonas. Остатки токсинов могут также представлять собой радионуклиды с высокой энергией эмиссии, такие как кобальт-60. Полипептид VAR2CSA можно использовать вместе с проникающими в клетку пептидами (СРР) для облегчения транспорта полипептида VAR2CSA и любой присоединенной к ним молекулы через плазматические мембраны клеток. Проникающие в клетку пептиды могут иметь многочисленные применения в медицине в качестве средств, доставляющих лекарственные средства, для лечения различных заболеваний, включая злокачественные новообразования, и в качестве ингибиторов вирусов. Примеры СРР включают, но ими не ограничиваются, трансдействующий активатор транскрипции (Tat) из вируса иммунодефицита человека; рер-1 (ChariotTM); R8, azo-R8; SMoC (Okuyama M. Et al. Nat. Methods 2007 Feb; 4(2): 153-9M; Soane L. and Fiskum G.J. Neurochem. 2005 Oct; 95(1): 230-43; Loudet A. et al. Org. Biomol. Chem. 2008 Dec. 21; 6(24): 4516-22).

Радионуклиды.

Полипептиды VAR2CSA, слитый белок или конъюгат согласно аспектам, описанным в настоящем документе, соединенные с полиаминополикарбоксилатным хелатирующим средством, можно использовать для получения радиоактивно меченого полипептида, состоящего из радиоактивного хелата полипептида, слитого белка или конъюгата VAR2CSA, соединенного с хелатирующим средством, и радионуклида, подходящего для медицинских визуализирующих методик; радионуклид выбран из группы, состоящей из ⁶¹Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁶Ga, ⁶⁸Ga, ¹¹⁰In, 'In. ⁴⁴Sc, ⁸⁹Zr и ⁸⁶Y, или радионуклида, подходящего для лечения, радионуклид выбран из группы, состоящей из ²²⁵Ас, ²¹²Bi, ²¹³Bi, ⁶⁷Cu, ¹⁶⁶Ho, ¹⁷⁷Lu, ²¹²Pb, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ²²⁷Th и ⁹⁰Y, в котором радионуклид комплексирован с полипептидом VAR2CSA, например, через хелатирующее средство.

Соответственно полипептиды VAR2CSA, слитый белок или конъюгат согласно аспектам, описанным в настоящем документе, можно использовать для радиоактивной визуализации злокачественных клеток, включая солидные опухоли или метастазы, например, у пациентов с меланомой.

В некоторых вариантах на полипептид также можно наносить радиоактивную метку неметаллическими радиоактивными изотопами с использованием так называемого непрямого мечения. Так для мечения, например, ¹⁸F, ⁷⁶Br, различными изотопами йода и ²¹¹At используют промежуточные линкерные молекулы. Указанная линкерная молекула должна содержать две функциональные части, одну, обеспечивающую быстрое и эффективное радиоактивное мечение, и другую, делающую возможным быстрое и

- 25 031876 эффективное присоединение к белкам, например к аминогруппам или предпочтительно к тиоловой группе уникального цистеина. Например, малемидная группа взаимодействует с тиоловыми группами с образованием стабильной тиоэфирной связи. Линкерная молекула сначала может взаимодействовать с радиоактивной меткой, а впоследствии с тиоловой или селентиоловой группой белка.

Другие альтернативные обнаруживающие части включают флюорофоры или флюорохромы, такие как любой, выбранный из гидроксикумарина, аминокумарина, метоксикумарина, каскадного голубого, пасифик голубого, пасифик оранжевого, люцифер желтого, NBD, R-фикоэритрина (РЕ), конъюгатов РЕСу5, конъюгатов РЕ-Су7, красного 613, PerCP, TruRed, FluorX, флюоросцеина, BODIPY-FL, Х-родамина, TRITC, Lissamin родамина В, техасского красного, аллофикоцианина (АРС) и конъюгатов АРС-Су7.

Указанные конъюгаты с обнаруживающими частями включают флюорофоры или флюорохромы и могут использоваться для визуализации злокачественных клеток или опухолей.

Конъюгаты с CSPG4.

Нацеливание CD44 или других протеогликанов.

Для целей применения конъюгатов полипептидов VAR2CSA для лечения злокачественного новообразования предполагается, что конъюгаты по настоящему изобретению можно использовать для нацеливания не только на опухолевые клетки, экспрессирующие CSPG4, но также на клетки, экспрессирующие CD44, такие как злокачественные стволовые клетки; примеры клеток, экспрессирующих протеогликаны, представлены, без ограничения, в табл. 1. Указанное нацеливание опосредуется через связывание с CSA на антигене CD44. Соответственно конъюгаты по настоящему изобретению можно использовать для нацеливания на CSPG4-отрицательные, но CD44-положительные клетки. Это можно использовать в качестве альтернативы или одновременно с нацеливанием опухолевых клеток, экспрессирующих CSPG4.

Применение для выделения или обнаружения циркулирующих опухолевых клеток (СТС) через связывание с CSA-содержащими протеогликанами.

Специфичное и высокоаффинное связывание полипептидов VAR2CSA по настоящему изобретению, таких как в форме конъюгатов полипептидов VAR2CSA, можно использовать для выделения или обнаружения СТС эпителиального и неэпителиального происхождения, которые экспрессируют один или более CSA-содержащих протеогликанов, таких, которые представлены в табл. 1.

Конкретные варианты осуществления настоящего изобретения.

Как описано в настоящем документе, изобретение связано с выделенным фрагментом белка VAR2CSA, где фрагмент состоит из последовательной аминокислотной последовательности:

a) ID1,

b) DBL2Xb и необязательно

c) ID2a.

В некоторых вариантах выделенный фрагмент белка VAR2CSA по настоящему изобретению содержит ID2a.

В некоторых вариантах выделенный фрагмент белка VAR2CSA по настоящему изобретению не содержит ID2a.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична любой аминокислотной последовательности 1-577 SEQ ID NO:1, 1-592 SEQ ID NO:3, 1-579 SEQ ID NO:4, 1-576 SEQ ID NO:5, 1-586 SEQ ID NO:10, 1-579 SEQ ID NO:11, 1-565 SEQ ID NO:29, 1-584 SEQ ID NO:34, 1-569 SEQ ID NO:36, 1-575 SEQ ID NO:37, 1-592 SEQ ID NO:38, 1-603 SEQ ID NO:41, 1-588 SEQ ID NO:43, 1-565 SEQ ID NO:44, 1-589 SEQ ID NO:45, 1-573 SEQ ID NO:48, 1-583 SEQ ID NO:53 или 1-569 SEQ ID NO:54.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична аминокислотной последовательности 578-640 SEQ ID NO:1, 593-656 SEQ ID NO:3, 580-643 SEQ ID NO:4, 577-640 SEQ ID NO:5, 587-650 SEQ ID NO:10, 580-643 SEQ ID NO:11, 566-628 SEQ ID NO:29, 585-647 SEQ ID NO:34, 570-632 SEQ ID NO:36, 576-639 SEQ ID NO:37, 593-655 SEQ ID NO:38, 604-667 SEQ ID NO:41, 589-652 SEQ ID NO:43, 566-628 SEQ ID NO:44, 590-653 SEQ ID NO:45, 574-637 SEQ ID NO:48, 584-646 SEQ ID NO:53 или 570-632 SEQ ID NO:54.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична аминокислотной последовательности из SEQ ID NO:2, 6, 8, 9, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 30, 31, 32, 33, 35, 39, 40, 42, 46, 47, 49, 50, 51 или 52.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению состоит из аминокислотной последовательности, которая по меньшей мере на 70% идентична любой аминокислотной последовательности 1-577 SEQ ID NO:1, 1-592 SEQ ID NO:3, 1-579 SEQ ID NO:4, 1-576 SEQ ID NO:5, 1-586 SEQ ID NO:10, 1-579 SEQ ID NO:11, 1-565 SEQ ID NO:29, 1-584 SEQ ID NO:34, 1-569 SEQ ID NO:36, 1-575 SEQ ID NO:37, 1-592 SEQ ID NO:38, 1-603 SEQ ID NO:41, 1-588 SEQ ID NO:43, 1-565 SEQ ID NO:44, 1-589 SEQ ID NO:45, 1-573 SEQ ID NO:48, 1-583 SEQ ID NO:53 или 1-569 SEQ ID NO:54.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению состоит из аминокислотной последовательности из перечня, состоящего из SEQ ID NO:1, 3-5, 10, 11, 29, 34, 36-38, 41, 43-45, 48, 53 и

- 26 031876

54.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению состоит из аминокислотной последовательности, имеющей длину менее 700 аминокислот, такой как менее 690 аминокислот, такой как менее 680 аминокислот, такой менее 670 аминокислот, такой как менее 660 аминокислот, такой как менее 650 аминокислот, такой как менее 640 аминокислот, такой как менее 630 аминокислот, такой как менее 620 аминокислот, такой как менее 610 аминокислот, такой как менее 600 аминокислот, такой как менее 590 аминокислот, такой как менее 580 аминокислот, такой как менее 570 аминокислот.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению имеет молекулярную массу менее приблизительно 100 кДа в невосстанавливающих условиях по результатам SDS-PAGE.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению представляет собой рекомбинантный белок.

В некоторых вариантах фрагмент белка по настоящему изобретению является негликозилированным.

Изобретение также связано с фрагментом белка, как определено в настоящем документе, слитым полипептидом VAR2CSA или конъюгатом по настоящему изобретению для лечения по любым показаниям, связанным с состоянием, в которое вовлечена экспрессия, такая как патологическая экспрессия CSA, например злокачественное новообразование.

В некоторых вариантах настоящего изобретения конъюгат или слитый белок VAR2CSA является фрагментом белка VAR2CSA по настоящему изобретению или содержит его.

Соответственно конъюгат или слитый белок VAR2CSA по настоящему изобретению может содержать аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична аминокислотной последовательности, идентифицированной любой последовательностью из SEQ ID NO:1-75.

В некоторых вариантах полипептид VAR2CSA по настоящему изобретению состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO:60-70, 72-75.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения злокачественное новообразование выбрано из кожной, окулярной или конъюнктивальной меланомы, рака (тройной негативный и метапластический рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак яичника, рак эндометрия, печеночноклеточный рак, рак легкого, рак толстого кишечника, рак предстательной железы, рак шейки матки, рак яичка, базально-клеточный рак кожи, светлоклеточный рак почки, кератинизированный плоскоклеточный рак головы и шеи, плоскоклеточный рак кожи, кератинизированный плоскоклеточный рак вульвы и базально-клеточный рак вульвы), сарком (липосаркома молочной железы, фибросаркома, дедифференцированная хондро- и липосаркома, лейомиосаркома, миксоидная липосаркома, лейомиосаркома тела матки, остеосаркома, саркома Эвинга и рабдомиосаркома), рака системы кроветворения (хронический лимфолейкоз (CLL), острый лимфолейкоз (ALL), острый миелолейкоз (AML), В-клеточная, Т-клеточная и большая гранулярная лимфома), опухолей нейроэпителиальной ткани, таких как астроцитомы (плеоморфная ксантоастроцитома, фибриллярные астроцитомы, анапластическая астроцитома, мультиформная глиобластома), олигодендроглиома, эпендимома, опухоль хороидного сплетения, олигоастроцитома, глиосаркома, ганглиоглиома, ретинобластома, нейроцитома, нейробластомы (эстезионейробластома и ганглионейробластома), медуллобластомы и атипичных тератоидных рабдоидных опухолей и любых других CSA-экспрессирующих типов злокачественных новообразований.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения злокачественное новообразование выбрано из CSA-экспрессирующих злокачественных новообразований, включая злокачественное новообразование (включая, но ими не ограничиваясь, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак яичника, рак эндометрия, печеночно-клеточный рак, рак легкого, рак толстого кишечника, рак предстательной железы, рак шейки матки, рак яичка, базально-клеточный рак кожи, светлоклеточный рак почки, плоскоклеточный рак головы и шеи, плоскоклеточный рак кожи, кератинизированный плоскоклеточный рак вульвы и базально-клеточный рак вульвы), саркому (включая, но ими не ограничиваясь, фибросаркому, дедифференцированную хондро- и липосаркому, лейомиосаркому, липосаркому, миксоидную липосаркому, лейомиосаркому тела матки, остеосаркому, саркому Эвинга и рабдомиосаркому, синовиальную саркому, солитарную фиброзную опухоль), рак системы кроветворения (включая, но ими не ограничиваясь, хронический лимфолейкоз (CLL), острый лимфолейкоз (ALL), острый миелолейкоз (AML), Вклеточную, Т-клеточную и большую гранулярную лимфому), опухоли нейроэпителиальной ткани, такие как, но ими не ограничиваясь, астроцитома (плеоморфная ксантоастроцитома, фибриллярные астроцитомы, анапластическая астроцитома, мультиформная глиобластома), олигодендроглиома, эпендимома, опухоль хороидного сплетения, олигоастроцитома, глиосаркома, ганглиоглиома, ретинобластома, нейроцитома, нейробластомы (эстезионейробластома и ганглионейробластома), медуллобластома, атипичные тератоидные рабдоидные опухоли и все типы нейроэндокринного рака.

Последовательности, включая последовательности полипептидов VAR2CSA:

- 27 031876 >fcr3 745 аминокислот | 640 a/к; подчеркнутая последовательность соответствует ID1 домену FCR3, выделенная жирным шрифтом последовательность соответствует DBL2Xb домену FCR3. Оставшаяся последовательность представляет собой ID2a (SEQ ID N0:1)

NYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISSVGQAQTSGPSSNKT CITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNDSCDNKNQDECOKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEEGLOEEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKKRYPQNKN SGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKKNNTAEQDTS YSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFL QEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIEACGTAGGGIGT AGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQSDIDSFFKHL IDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDTLVWNVPSP

LGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPT TVRSNSSKLD >giI 254952610 IgbIACT97135.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 341 а/к (SEQ ID N0:2) KCDKCKSGTSRSRKIWTWRKSSGNKEGLQEEYANTIGLSPRTQLLYLGNLRKLENVCEDVTDI NFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKKRYLEKKKGDNNSKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDND FTKDLELNLQQIFGKLFRKYIKKKNISTEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMN STTCSCSGDSSSGENQTNSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQAKVKDVITNCNSCKE SGGTCNSDCEKKCKNKCDAYKTFIEDCKGVGGTGTAGSSWVKRWYQIYMRYSKYIEDAKRNRK AGTKSCGTSSTTNVSVSTDENKCVQS>M2 4 745 аминокислот | 656 а/к (SEQ ID N0:3)

DYIKGDPYFAEYATKLSFILNSSDANNPSGETANHNDEVCNPNESEISSVGQAQTSDPSSNKT CNTHSSIKANKKKVGKHVKLGINNNDKVTjRVCVIEDTSLSGVENCCFKDLLGILQENCSDNKS GSSSNGSCNNKNQEACEKNLEKVbASLTNCYKCDKCKSGTSTVNKNWIWKKSSGNKEGLQKEY ANTIGLPPRTHSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKKRYPQNKN DDNNSKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQQIFGKLFRKYIKKNISTEQDTL YSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNITTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFL QEWVEHFCKQRQEKVKDVINSCNSCKNTSSKTKLGDTCNSDCEKKCKIECEKYKKFIEECRTA VGGTAGSSWSKRWDQIYKMYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGITTGTISGESSGANSGVTTTENKC VQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDDNICGDDKAPWTTYTTYTTYTTTEKCNKERDKSK

SQQSNTSVWNVPSPLGNTPHGYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWISDTSKNPKGSGSTN NDYELYTYNGVKETKLPKKLNSPKLD >KMWII 745 аминокислот | 643 а/к (SEQ ID N0:4)

DYIKDDPYSKEYTTKLSFILNSSDANTSSGETANHNDEACNCNESEISSVGQAQTSGPSSNKT CITHSFIKANKKKVCKDVKLGVRENDKVLRVCVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNGSCNNKNQDECQKKLEKV’FVSLTNGYKCDKCKSGTSTVNKKWIWKKSSGNEKGLQKEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLGNVCEDVTDINFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKISHEKKKG DNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKAFGKLFGKYIKKNIASDENTSY SSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNSTMCNADGSVTGSGSSCDDIPTTDFIPQYLRFLQ EWVEHFCKQRQEKVNAVIENCNSCKNTSGERKIGGTCNGDCKTECKNKCEAYKNFIEDCKGGD GTAGSSWVKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKSCGPSSITNASVSTDENKCVQSDIDSFFK HLIDIGLTTPSSYLSIVLDENNCGEDNAPWTTYTTYTTTEKCNKDKKKSKSQSCNTAVWNVP

SPLGNTPHEYKYACQCKIPTTEETCDDRKEYMNQWISDTSKKQKGSGSTNNDYELYTYTGVKE TKLPKKLNSPKLD >1248 745 аминокислот | 640 а/к (SEQ ID N0:5)

SYVKNDPYSKEYVTKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNPNESEIASVGQAQTSDRLSQKA CITHSFIGANKKIVCKDVKLGVREKDKDLKICVIEDDSLRGVENCCFKDLLGILQENCSDNKS GSSSNGSCNNKNQDECQKKLDEALASLHNGYKCDKCKSGTSRSKKIWTWRKFPGNGEGLQKEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLRKLENVCKGVTDINFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKISNKKKND DNGKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNIASDENTLY SSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGTTCSSGSGDNGDGSVTGSGSSCDDMSTIDLIPQYLRFL QEWVEHFCKQRQEKVKDVIENCKSCKNTSGERIIGGTCGSDCKTKCKGECDAYKNFIEECKRG DGTAGSPWSKRWDQIYMRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAENKCVQSDIDSFFKHLI DIGLTTPSSYLSIVLDENICGDDKAPWTTYTTYTTTEKCNKETDKSKSQSCNTAVWNVPSPL

GNTPHGYKYACECKIPTTEETCDDRKEYMNQWISDTSKKPKGGRSTNNDYELYTYNGVKETKL PKKSSSSKLD >giI 254952618 IgbIACT97139.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 358 а/к (SEQ ID NO:6)

KCEKCKSEQSKKNNNIWIWRKFPGNGEGLQKEYANTIGLPPRTHSLYLGNLPKLENVCKDVKD

- 28 031876

INFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTTYPQNKNADNNSKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDN DFTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNIASDENTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAEMN STMCNGDGSVTGSSDSGSTTCSGDNGSISCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVKP VIENCKSCKNTSGERIIGGTCGSDCEKKCKGECDAYKKFIEECKGGGGGTGTAGSPWSKRWDQ IYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKSCGPSSTTNAAASTTESKCVQS >giI 254952592 IgbIACT97126.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 333 а/к (SEQ ID N0:7)

KCDKCKSEQSKKNNKNWIWKQFPGNGEGLQKEYANTIGLPPRTHSLYLGNLPKLENVCKGVTD INFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTSHEKKKGDNGKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDND FTKDLELNLQQIFGKLFRKYIKKNISAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGTTCSS GSGDNGDGSVTGSGSSCDDMPTTDFIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVNAVITNCKSCKESGG TCNSDCEKKCKDECEKYKKFIEECRTAADGTAGSSWSKRWDQIYKMYSKHIEDAKRNRKAGTK NCGTSSTTNAAENKCVQS >giI 90193467 IgbIABD92329.1I белок эритроцитарной мембраны 1 [Plasmodium falciparum] | 269 а/к (SEQ ID N0:8)

DYIKDDPYSKEYTTKLSFILNSSDANTSSGETANHNDEACNCNESEIASVEQASISDRSSQKA YITHSSIKTNKKKVCKYVKLGINNNDKVLRVCVIEDTSLSGVENCCFKDLLGILQENCSDNKR GSSFNDSCNNNNEEACQKKLEKVLASLTNGYKCEKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGKEGGLQKEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCKGVTDINFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKPSHQNKND DNNSKLCKDLKYS EADY >giI 254952616 IgbIACT97138.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

333 а/к (SEQ ID N0:9)

KCDKCKSGTSRSKKKWTWRKSSGNKEGLQKEYANTIGLPPRTHSLYLGNLRKLENVCEDVTDI NFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTTYPQNKNDDNNSKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDND FTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNISTEQHTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAEMNG TTCSCSGDSSDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQAKVNAVINSCNSCKNTSGERKLGGT CGSECKTECKNKCDAYKEFIDGTGSGGGTGTAGSSWVKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGSK NCGTSSTTNAAESKCVQS >hb31 745 аминокислот | 650 а/к (SEQ ID N0:10)

SYVKNNPYSAEYVTKLSFILNSSDANTSSETPSKYYDEVCNCNESEISSVGQAQTSGPSSNKT CITHSSIKTNKKKVCKDVKLGINNNDKVLRVCVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDKNQ SGSSSNGSCNNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWRKSSGNEEGLQKE YANTIGLPPRTQSLYLGNLRKLENVCKGVTDINFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTTYPQNK KKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKAFGKLFRKYIKKNISTEQHTLYSSL DELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWV EHFCKQRQEKVNAVIENCNSCKECGDTCNGECKTECEKKCKIECEKYKTFIEECVTAVGGTSG SPWSKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGITTGTISGESSGANSGVTTTENKCVQSDID SFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDDNICGADNAPWTTYTTYTTYTTTKNCDIKKKTPKSQPINT SVWNVPSPLGNTPHGYKYACQCKIPTTEESCDDRKEYMNQWIIDTSKKQKGSGSTNNDYELY TYNGVKETKLPKKSSSSKLD >hb32 745 аминокислот | 643 а/к (SEQ ID N0:11)

SYVKDDPYSAEYVTKLSFILNSSDANTSSETPSKYYDEVCNCNESEISSVGQAQTSGPSSNKT CITHSSIKTNKKKVCKDVKLGINNNDKVLRVCVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDKNQ SGSSSNGSCNNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWRKSSGNEEGLQKE YANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCKGVTDIIYDTKEKFLSGCLIAAFHEGKNLKTSHEKKN DDNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNDFTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTS YSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNSTTCSGDGSVTGSGSSCDDMPTIDLIPQYLRFL QEWVE HFCKQRQE KVKDVITNCNSCKE CGD TCNGE CKTE CKTKCKGE CEKYKNFIEE CNGTAD GGTSGSSWSKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTTENKCVQSDIDSFF KHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGEDKAPWTTYTTYTTKNCDIQKKTPKPQSCDTLVWNVP SPLGNTPHGYKYVCECKIPTTEETCDDRKEYMNQWIIDTSKKQKGSGSTNNDYELYTYNGVQI KQAAGTLKNSKLD >giI 90193475 IgbIABD92333.1I белок эритроцитарной мембраны 1 [Plasmodium falciparum] | 269 а/к (SEQ ID N0:12)

NYIKGDPYSAEYATKLSFILNSSDTENASEKIQKNNDEVCNCNESEIASVEQAPISDRSSQKA CITHSSIKANKKKVCKHVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKS GSSSNGSCNNNNEEICQKKLEKVLASLTNGYKCDKCKSGTSTVNKNWIWKKYSGKEGGLQEEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTSNKKKND DNNSKLCKALKYS EADY >giI 254952600 IgbIACT97130.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 344 а/к (SEQ ID N0:13)

KCDKCKSGTSTVNKKWIWKKYSGTEGGLQEEYANTIALPPRTQSLYLGNLPKLENVCKDVTDI NFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTTYLEKKKGDNGKKNDDNNSKLCKALKYSFADYGDLIKG TSIWDNDFTKDLELNLQQIFGKLFRKYIKKNIASDENTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMK HGAGMNS TMCNADGSVTGS GS S ODDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQAKVKDVITNCNS CKECGGTCNGECKTECEKKCKGECDAYKKFIEECKGKADEGTSGSSWSKRWDQIYKRYSKYIE DAKRNRKAG TKNCGPSSTTS T AE S КСVQ S >giI 254952598 IgbIACT97129.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

334 а/к (SEQ ID N0:14)

KCDKCKSEQSKKNNNIWIWKKSSGTEGGLQKEYANTIALPPRTQSLYLGNLRKLENVCEDVKD INFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKKRYLEKKNGDNNSKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDN EYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQHTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGTTCS

- 29 031876

SGSGDNGSISCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQGKVNAVIENCNSCKNTSSKTKLGG TCNGECKTECKGECDAYKEFIEKCKGTAAEGTSGSSWVKRWYQIYMRYSKYIEDAKRNRKAGT KNCGTSSTTSTAESKCVQS >giI 254952596 IgbIACT97128.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

332 а/к (SEQ ID N0:15)

KCDKCKSEQSKKNNNIWIWKKSSGTEGGLQKEYANTIALPPRTQSLYLGNLRKLENVCEDVKD INFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKKRYLEKKNGDNNSKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDN EYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGTTCS SGSGDNGSISCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQEKVKDVIKNCNSCKECGGTCNGEC KTECKNKCKDECDAYKKFIEECEGKAAEGTSGSSWSKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKN CGTSSTTSTAENKCVQS >giI 90193465 IgbIABD92328.1I белок эритроцитарной мембраны 1 [Plasmodium falciparum] | 267 а/к (SEQ ID N0:16)

NYIKDDPYSAEYTTKLSFILNSSDTENASEKIQKNNDEVCNPNESGIACVELAQTSGSSSNKT CNTHSFIKANKKKVCKDVKLGINKKDKDLKICVIEDDSLRGVDNCCCQDLLGILQENCSDKNQ SGSSSNGSCNNKNQEACQKKLENVFASLTNGYKCEKCKSEQSKKNNKNWIWKKYSVKEEGLQK EYANTIALPPRTQSLYLGNLPKLGNVCKGVTDINFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTTYLQN KKKLCKALKYS EADY >giI 90193477 IgbIABD92334.1I белок эритроцитарной мембраны 1 [Plasmodium falciparum] | 263 а/к (SEQ ID N0:17)

DYIKGDPYFAEYATKLSFILNSSDANTSSGETANHNDEACNPNESEIASVEQASISDRSSQKA CNTHSSIKANKKKECKHVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNGSCDKNSEEICQKKLDEALASLHNGYKNQKCKSEQSKKNKNKWIWKKSSGNEKGLQKE YANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVTDINFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTTYPQNK NDDNGKKLCKD >giI 254952594 IgbIACT97127.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

338 а/к (SEQ ID N0:18)

KCDKCKSEQSKKNNNIWIWKKSSGNKKGLQKEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCKDVTD INFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKISNEKKNDDNGKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNE YTKDLELNLQNNFGKLFRKYIKKNNTAEQHTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGTTCSS GSGDNGDGSVTGSGSSCDDMSTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVNAVIENCNSCKNTSS KTKLGGTCNGECKTECEKKCKDECEKYKEFIEECKRGDGTAGSPWVKRWDQIYMRYSKYIEDA KRNRKAGTKSCGTSAAENKCVQS >giI 254952602 IgbIACT97131.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

341 а/к (SEQ ID N0:19)

KCDKCKSEQSKKNNNIWIWKKSSGDEKGLQKEYANTIALPPRTQSLYLGNLPKLENVCKDVTD

INFDTKEKFLAGCLIAAFHEGKNLKTSHQNKNADNGKKNDDNGKKLCKALKYSFADYGDLIKG TSIWDNEYTKDLELNLQQIFGKLFRKYIKRNNTAEQHTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMK HGTTCSSGSGDNGDGSVTGSGSSCDDMSTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVKDVITNCN SCKECGGTCGSDCKTKCEAYKKFIEECNGTADGGTSGSSWSKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRK AGTKNCGPSSGANSGVTTTENKCVQS >giI 254952660 IgbIACT97160.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

352 а/к (SEQ ID N0:20)

KCEKCESEQSKKNNKYWIWKKSSGNGEGLQEEYANTIALPPRTHSLCLVCLHEKEGKKTQELK NIRTNSELLKERIIAAFHEGKNLKTSPQNKNDNGKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYT KDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQHTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTM CNADGSVTGSSDSGSTTCCGDNGSISCDDMPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQEKVNAVIT NCKSCKECGGTCNSDCEKKCKAYKEFIEKCKGGGTEGTSGSSWSKRWDQIYKRHSKHIEDAKR NRKAGTKNCGITTGTISGESSGANSGVTTTENKCVQS >giI 254952652 IgbIACT97156.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

344 а/к (SEQ ID N0:21)

KCDKCKSGTSRSRKIWTWRKFRGNGEGLQKEYANTIGLSPRTQLLYLVCLHEKGKKTQELKNI STNSELLKEWIIAAFHEGKNLKTTYPQKKNDDNGKKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDNDFT KDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNIASDENTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNGTT CCGDGSVTGSSDSGSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQEKVK DVITNCKSCKESEKKCKNKCDAYKEFIDGTGSGGGTGTAGSSWSKRWDQIYMRYSKYIEDAKR NRKAGTKNCGTSSGANSGVTTTENKCVQS >giI 254952622 IgbIACT97141.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

350 а/к (SEQ ID N0:22)

KCEKCKSEQSKKNNKIWTWRKFPGNGEGLQKEYANTIGLSPRTQLLYLVCLHEKGKKTQHKTI STNSELLKEWIIAAFHEGKNLKKRYLEKKKGDNNSKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNDFT KDLELNLQQIFGKLFRKYIKKNIASDENTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNSTM CNGDGSVTGSSDSGSTTCSGDNGSISCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQEKVKDVIK NCNSCKECGGTCNGECKTECKNKCKDECEKYKNFIEVCTGGDGTAGSPWSKRWYQIYMRYSKY IEDAKRNRKAGTKSCGTSSGANSGVTTTESKCVQS >giI 254952626 IgbIACT97143.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] |

359 а/к (SEQ ID N0:23)

KCEKCKSEQSKKNNKNWIWRKFPGNGEGLQKEYANTIGLPPRTHSLYLVCLHEKGKKTQELKN IRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKKRYHQNNNSGNKKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEY TKDLELNLQQIFGKLFRKYIKKNISTEQDTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNST TCCGDGSVTGSSDSGSTTCSGDNGSISCDDMPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQEKVKDVI ENCKSCKNTSGERIIGGTCNGECKTECEKKCKAACEAYKTFIEECEGKAAEGTSGSSWSKRWY

- 30 031876

QIYMRYS КYIE DAKRNRKAGTKNCGKS S GANSGVT T TENKCVQS >giI 90193469|gbIABD92330.1| белок эритроцитарной мембраны 1 [Plasmodium falciparum] | 270 а/к (SEQ ID N0:24)

NYIKDDPYSKEYVTKLSFIPNSSDANNPSGETANHNDEVCNPNESEISSVEHAQTSVLLSQKA YITHSSIKANKKKVCKYVKLGVRENDKDLKICVIEDDSLRGVENCCFKDFLRILQENCSDNKR ESSSNGSCNNNNEEACEKNLDEALASLTNCYKNQKCKSGTSTVNNNKWIWKKSSGKEGGLQKE YANTIGLPPRTQSLCLVVCLDEKEGKTQELKNIRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKKRYHQNKN DDNNSKLCKALKYS EADY >giI 254952644 IgbIACT97152.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 334 а/к (SEQ ID N0:25)

KCDKCKSEQSKKNNKYWIWKKYSVKEGGLQKEYANTIALPPRTQSLCLWCLDEKEGKTQELK NIRTNSELLKERIIAAFHEGKNLKTYHEKKKGDDGKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNDF TKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQHTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNGT TCSCSGDSSNDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQAKVNAVIKNCKSCKECGGTCNGECKT ECKTKCKGECEKYKEFIEKCEGQAAEGTSGSSWSKRWYQIYMRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCG TSSGANSGVTTTENKCVQS >giI 254952642 IgbIACT97151.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 351 а/к (SEQ ID N0:26)

KCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKYSGTEGGLQKEYANTIALPPRTQSLYLVCLHEKEEKTQELKN ISTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKISPQNKNDNGKNLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNDFTK DLELNLQQIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNGTTC CGDGSVTGSSDSGSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQAKVKD VIKNCNSCKECGGTCNGECKTECEKKCKGECEAYKKFIEKCNGGGGEGTSGSSWSKRWDQIYM RY S КYIE DAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAENKCVQS >giI 254952658 IgbIACT97159.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 353 а/к (SEQ ID N0:27) KCDKCKSGTSTVNKKWIWKKFPGKEGGLQEEYANTIALPPRTQSLCLWCLDEKEGKTQHKTI STNSELLKEWIIAAFHEGKNLKISNKKKNDENNSKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNDFTK DLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGTTCSSGSG DNGDGSVTGSSDSGSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQAKVK DVIENCKSCKNTSSKTKLGDTCNSDCKTKCKVACEKYKEFIEKCVSAAGGTSGSSWVKRWDQI YMRY S КYIE DAKRNRKAGTKNCGPSSTTS TAE S KGVQS >giI 254952640 IgbIACT97150.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 327 а/к (SEQ ID N0:28)

KCDKCKSGTSTVNKKWIWKKYSGKEGGLQKEYANTIGLPPRTQSLCLVCLHEKEGKTQELKNI STNSELLKEWIIAAFHEGKNLKISNKKKNDDNGKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNDFTK DLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNSTTC SCSGDSSNDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVNAVITNCKSCKESGGTCNSDCEKKC KIECEKYKNFIEKCVTAAGGTSGSSWSKRWDQIYKMYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTNA AASTDENKCVQS >dd2full 745 аминокислот | 628 а/к (SEQ ID N0:29)

NYIKGDPYFAEYATKLSFILNSSDTENASETPSKYYDEACNCNESEIASVGQAQTSGPSSNKT CITHSSIKTNKKKECKDVKLGINNNDKVLRVCVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNGSCDKNSEEICQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEEGLQKEY ANTIGLPPRTQSLCLVCLHEKE GKTQHKTIS TNSE LLKEWIIAAFHE GKNLKTSHEKKNDDNG KKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQHTSYSSL DELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNGTTCSCSGDSSNDMPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQ RQEKVNAVIENCNSCKESGGTCNSDCKTECKNKCEAYKEFIEDCKGGGTGTAGSPWSKRWDQI YKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQSDVDSFFKHLIDIGLTTPSSYL SNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTKNCDIQKKTPKSQSCDTLVWNVPSPLGNTPHEYKYAC

ECKIPTTEETCDDRKEYMNQWSCGSAQTVRGRSGKDDYELYTYNGVKETKPLGTLKNSKLD >giI 254952636 IgbIACT97148.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 350 а/к (SEQ ID N0:30)

KCEKCKSEQSKKNNKNWIWRKFRGTEGGLQEEYANTIGLPPRTQSLCLWCLDEKGKKTQELK NIRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKPSHQNKNSGNKENLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDNDF TKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQHTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNGT TCNADGSVTGSSDSGSTTCSGDNGSISCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVNAVI NSCNSCKNTSSKTKLGDTCNSDCKTKCKIECEKYKTFIEKCVTAAGGTSGSPWSKRWDQIYKR YSKYIEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTSTAESKCVQS >giI 254952638 IgbIACT97149.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 330 а/к (SEQ ID N0:31)

KCDKCKSEQSKKNNKNWIWRKYSGNGEGLQKEYANTIGLPPRTHSLYLVCLHEKEGKTQELKN IRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKTTYLENKNDENKKKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDNDF TKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNIASDENTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNGT TCSSGSGDNGSISCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVGHFCKQRQEKVNAVITNCNSCKESGGTCN SDCEKKCKIECEKYKKFIEECRTAAGGTSGSPWSKRWDQIYKMYSKYIEDAKRNRKAGTKNCG PSSTTSTAESKCVQS >giI 254952628 IgbIACT97144.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 334 а/к (SEQ ID N0:32)

KCDKCKSEQSKKNNKNWIWRKYSGNGEGLQKEYANTIGLPPRTHSLYLVCLHEKEGKTQHKTI STNSELLKEWIIAAFHEGKNLKKRYPQNNNSGNKKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYT KDLELNLQKAFGKLFRKYIKKNIASDENTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAEMNGTM

- 31 031876

CNADGSVTGSGSSCDDMSTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQAKVKDVINSCKSCKESGDTCN SDCEKKCKNKCDAYKTFIEEFCTADGGTAGSPWSKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCG TSSGANSGVTTTENKCVQS >giI 254952630 IgbIACT97145.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 350 а/к (SEQ ID N0:33)

KCDKCKSGTSTVNKNWIWKKYSGKEEGLQKEYANTIALPPRTHSLYLVCLHEKGKKTQELKNI RTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKTSPQNNNSGNKKKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDNDFTK DLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQHTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAEMNGTTC CGDGSVTGSSDSGSTTCSGDNGSISCDDMPTTDFIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVKHVMES CKSCKECGDTCNGECKTECEKKCKNKCEAYKTFIEKCVSADGGTSGSSWSKRWDQIYMRYSKY IE DAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAAS TAENKCVQS >P13 745 аминокислот | 647 а/к (SEQ ID N0:34)

DYIKDDPYSAEYATKLSFILNPSDANTSSGETANHNDEVCNCNESEIASVELAPISDSSSNKT CITHSFIGANKKKECKDVKLGVREKDKDLKICVIEDDSLRGVENCCCQDLLGILQENCSDNKS GSSSNGSCDKNSEDECQKKLENVFASLKNGYKCDKCKSGTSTVNKKWIWRKYSGNGEGLQKEY ANTIGLPPRTHSLYLVCLHEKEGKTQHKTISTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKTSHQNNNSGNK KKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDNDFTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNIASDENTSYSSL DELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAEMNSTMCNGDGSVTGSSDSGSTTCSGDNGSISCDDIPTID LIPQYLRFLQEWVE HFCKQRQEKVKDVITNCKSCKE SGD TCNSDCEKKCKNKCEAYKKFIEER RTAAQGTAE S SWVKRWDQIYMRYSKYIEDAKRNRKAGTKSCGPS S TTNAAAS TAENKCVQSDI DSFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDDNICGADNAPWTTYTTYTTTKNCDIKKKTPKPQSCDTLV WNVPSPLGNTPHEYKYACQCRTPNKQESCDDRKEYMNQWSSGSAQTVRGRSTNNDYELYTYN GVKETKPLGTLKNSKLD >giI 254952608 IgbIACT97134.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 341 а/к (SEQ ID N0:35)

KCDKCKSGTSTVNKKWIWRKSSGNKEGLQKEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDI NFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKTSHEKKNDDNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEY TKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNIT TCCGDGSSGENQTNSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVNAWTNCKSCKESGGT CNGECKTKCKNKCEVYKTFIDNVGDGTAGSPWVKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGI TTGTISGESSGATSGVTTTENKCVQS >7g8 745 аминокислот | 632 а/к (SEQ ID N0:36)

NYIKDDPYSKEYVTKLSFIPNSSDANTSSEKIQKNNDEVCNPNESGISSVEQAQTSGPSSNKT СITHSSIKANKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNDSCDNKNQDECQKKLDEALESLHNGYKNQKCKSGTSTVNKKWIWKKSSGNKEGLQKEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVSKGVTDIIYDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKTSHEKKND

DNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKAFGKLFRKYIKKNISAEQDTSY SSLDELRESWWNTNKKYIWIAMKHGAGMNGTTCCGDGSSGENQTNSCDDIPTIDLIPQYLRFL QEWVEHFCEQRQAKVKDVITNCKSCKNTSGERKIGGTCNGECKTKCKNKCEAYKTFIEHCKGG DGTAGSSWVKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKSCGTSTAENKCVQSDIDSFFKHLIDIGL TTPSSYLSIVLDENNCGEDKAPWTTYTTTKNCDIQKDKSKSQSSDTLVWNVPSPLGNTPHGY KYACQCKIPTTEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSSSTK LD >Indo 745 аминокислот | 639 а/к (SEQ ID N0:37)

DYIKGDPYSAEYVTKLSFIPNSSDANNPSEKIQKNNDEVCNCNESEISSVGQASISDPSSNKT CNTHSSIKANKKKVCKDVKLGVRENDKVLKICVIEHTSLRGVDNCCFKDLLGILQEPRIDKNQ SGSSSNGSCDKNSEEACEKNLEKVLASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKYSGKEGGLQEE YANTIGLPPRTQSLCLWCLDEKEGKTQE LKNIS TNSE LLKEWIIAAFPE GKNLKPSPEKKKG DNGKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNIASDENTLY SSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTMCNADGSVTGSGSSCDDMPTIDLIPQYLRFLQ EWVEHFCKQRQEKVKPVIENCNSCKNTSSERKIGGTCNSDCKTECKNKCEVYKKFIEDCKGGD GTAGSSWSKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTNAAENKCVQSDIDSFFKHLID IGLTTPSSYLSTVLDDNICGEDNAPWTTYTTYTTTKNCDKDKKKSKSQSCDTLVWNVPSPLG NTPHEYKYACECRTPNKQESCDDRKEYMNQWISDNTKNPKGSGSGKDYYELYTYNGVDVKPTT VRSSSTKLD >MC 745 аминокислот | 655 а/к (SEQ ID N0:38)

DYIKGDPYFAEYATKLSFILNSSDANTSSGETANHNDEACNCNESEISSVEHASISDPSSNKT CNTHSSIKANKKKVCKHVKLGVRENDKDLRVCVIEHTSLSGVENCCFKDFLRILQENCSDNKS GS S SNGSCDKNNE EACE KNLE KVFASLTNCYKCEKCKSE QSKKNNKKWTWRKS SGNKGGLQEE YANTIGLPPRTQSLCLWCLDE KEGKKTQE LKNIRTNSE LLKEWIIAAFHE GKNLKPSHEKKN DDNGKKNDDNNSKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNI ASDENTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAEMNGTTCNADGSVTGSGSSCDDIPTIDLI PQYLRFLQEWVEHFCKQRQAKVKDVIENCKSCKESGNKCKTECKNKCEAYKKFIENCKGGDGT AGS SWVKRWDQIYMRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGPSSITNVSAS TDENKCVQSDIDSFFKHL IDIGLTTPSSYLSIVLDDNICGDDKAPWTTYTTYTTYTTYTTYTTYTTYTTTKNCDKERDKSK

SQSCNTAVWNVPSPLGNTPHEYKYACECRTPSNKELCDDRKEYMNQWSSGSAQTVRDRSGKD YYELYTYNGVKETKLPKKLNSSKLD >giI 254952650 IgbIACT97155.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 347 а/к (SEQ ID N0:39)

KCDKCKSEQSKKNNKYWIWKKSSVKEEGLQKEYANTIALPPRTHSLCLWCLDEKGKKTQELK NISTNSELLKERIIAAFHEGKNLKTTYLEKKNADNNSKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDNE YTKDLELNLQQIFGKLFRKYIKKNNTAEQHTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNG

- 32 031876

TTCCGDGSVTGSSDSGSTTCSGDNGSISCDDMPTTDFIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVKDV IENCNSCKNNLGKTEINEKCKTECKNKCEAYKNFIEKFCTADGGTSGSPWSKRWDQIYKRYSK ΥΙΕ DAKRNRKAG TKNCGTSSTTS TAENKCVQ S >giI 254952648 IgbIACT97154.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 335 а/к (SEQ ID N0:40)

KCEKCKSGTSTVNKYWIWRKSSGNKEGLQKEYANTIALPPRTHSLCLWCLDEKEGKTQELKN ISTNSELLKERIIAAFHEGENLKTSHEKKKGDDGKKNADNNSKLCKALKYSFADYGDLIKGTS IWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNIASDENTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHG AGMNGTTCSCSGDSSDDMPTTDFIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQENVNAVIENCNSCKECGGTC NSDCEKKCKTECKNKCEAYKNFIEKFCTADGGTSGYSWSKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAG TKSCGTSSTTSTAESKCVQS >ghana2 745 аминокислот | 667 а/к (SEQ ID N0:41)

SYVKNNPYSKEYVTKLSFILNPSDANNPSETPSKYYDEVCNCNESGIACVGQAQTSGPSSNKT CITHSFIGANKKKVCKDVKLGVREKDKDLKICVIEDTYLSGVDNCCFKDFLGMLQENCSDNKS GSSSNGSCNNKNQDECEKNLDEALASLTNGYKCEKCKSGTSTVNKYWIWRKSSGNKEGLQKEY ANTIALPPRTHSLCLWCLDEKEGKTQHKTIS TNSE LLKEWIIAAFHE GKNLKTSHEKKKGDD GKKNADNNSKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDNDFTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNIASD ENTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTTCCGDGSVTGSSDSGSTTCCGDGSVTG SGSSCDDMPTTDFIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQENVNAVIENCNSCKECGGTCNSDCEKKCKT ECKGECDAYKEFIEKCNGGAAEGTSGSSWSKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGTSST TSTAESKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDENICGADNAPWTTYTTYTTYTTYTTT EKCNKETDKSKLQQCNTSVWNVPSPLGNTPHGYKYVCECRTPNKQETCDDRKEYMNQWISDN TKNPKGSRSTNNDYELYTYNGVQIKPTTVRSNSTKLD >giI 254952634 IgbIACT97147.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 348 а/к (SEQ ID N0:42)

KCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKSSGNEKGLQKEYANTIGLPPRTQSLCLWCLDEKEGKTQELK NIRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKTSHEKKKGDNNSKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEY TKDLELNLQNNFGKLFRKYIKKNIASDENTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNST TCSSGSGSTTCSSGSGSTTCSSGSGDSCDDMPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVNAVI KNCNSCKESGGTCNGECKTECKNKCEAYKTFIEEFCTADGGTSGSPWSKRWDQIYKMYSKHIE DAKRNRKAGTKNCGPS S T TNVSVS TDENKCVQS >ghanal 745 аминокислот | 652 а/к (SEQ ID N0:43)

DYIKDDPYFAEYVTKLSFILNSSDANNPSGETANHNDEVCNPNESGIASVEQAQTSDPSSNKT CNTHSSIKANKKKVCKHVKLGVRENDKDLKICVIEHTSLSGVENCCCQDFLRILQENCSDNKS GSSSNGSCNNKNQEACEKNLEKVLASLTNCYKCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKSSGNEKGLQKE YANTIGLPPRTQSLCLWCLDEKE GKTQE LKNIRTNSE LLKEWIIAAFHE GKNLKKRYPQNKN DDNNSKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFRKYIKKNISTEQDTL YSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTTCSSGSGSTTCSSGSGSTTCSSGSGDSCDDM PTTDFIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVNAVIKNCNSCKESGGTCNGECKTECKNKCEAYKTF IEEFCTADGGTSGSPWSKRWDQIYKMYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTNVSVSTDENKCV QSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDDNICGEDKAPWTTYTTYTTTKKCNKETDKSKSQSC NTAVWNVPSPLGNTPHGYKYACECKIPTTEETCDDRKEYMNQWIIDTSKKQKGSGSGKDDYE LYTYNGVDVKPTTVRSNSTKLD >V1S1 745 аминокислот | 628 а/к (SEQ ID N0:44)

DYIKDDPYSAQYTTKLSFILNPSDANTSSEKIQKNNDEACNCNESGISSVGQAQTSGPSSNKT CITHSSIKANKKKVCKDVKLGINNNDKVLRVCVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNGSCNNNNEEACEKNLDEAPASLHNGYKNQKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEKGLQEEY ANTIGLPPRTQSLCLVCLHEKE GKTQHKTIS TNSE LLKEWIIAAFHE GKNLKTSHEKKNDDNG KKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKAFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSL DELRESWWNTNKKYIWIAMKHGAGMNGTTCSCSGDSSNDMPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQ RQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKTFIEDCNGGGTGTAGSSWVKRWDQI YKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGPSSITNAAASTDENKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYL SNVLDENSCGDDKAPWTTYTTYTTTKNCDIQKDKSKSQPINTSVWNVPSPLGNTPYRYKYAC ECKIPTTEESCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSNSSKLD >raj116_var25 745 аминокислот | 653 а/к (SEQ ID N0:45)

DYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDTENASETPSKYYDEACNPNESEIASVEQAQTSGPSSNKT CITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCFKDLLGILQENCSDNKR GSSSNDSCNNNNEEACEKNLDEALASLTNGYKCDKCKSGTSTVNKKWTWRKSSGNEEGLQKEY ANTIGLPPRTQSLCLVCLHEKE GKTKHKTIS TNSE LLKEWIIAAFHE GKNLKTSHEKKNDDNG KKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKAFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSL DELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNGTTCSSGSGDNGDSSITGSSDSGSTTCSGDNGSISCD DIPTTDFIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQAKVKDVINSCNSCNESGGTCNGECKTKCKDECEKYK KFIEDCNGGDGTAGSSWVKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGPSSITNAAASTDENKC VQSDVDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDENSCGDDKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQS

SDTLVWNVPSPLGNTPHEYKYACECKIPTNEETCDDRKDYMNQWISDTSKKQKGSGSGKDYY ELYTYNGVQIKQAAGRSSSTKLD >giI 31323048 IgbIAAP37940.1 I var2csa [Plasmodium falciparum] | 490 а/к (SEQ ID N0:46)

KCDKCKSEQSKKNNNKWIWKKYSGNGEGLQKEYANTIGLPPRTQSLCLVCLHEKEGKTQHKTI STNSELLKEWIIAAFHEGKNLKKRYPQNKNDDNNSKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYT KDLELNLQKAFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNGTT CSSGSGDNGDSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQAKVKDVINSCNSCKNTSGERKI

- 33 031876

GGTCNSDCEKKCKVACDAYKTFIEECRTAVGGTAGSSWVKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAG TKNCGPSSTTNAAENKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDENSCGADKAPWTTYTTY TTYTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQQSNTSVWNVPSPLGNTPHEYKYACECKIPTTEETCDD RKEYMNQW11DNTKNPKGS GS TDNDYELYTYNGVQIKQAAGRSS S TKLD >giI 254952620 IgbIACT97140.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 335 а/к (SEQ ID N0:47)

KCEKCKSGTSTVNNKWIWRKSSGKEGGLQKEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCKGVTDI IYDTKEKFLSGCLIAAFHEGKNLKTTYLEKKNDDNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNE YTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWIAMKHGAGMNG TTCSSGSGDSSNDIPTTDFIPQYLRFLQEWVENFCEQRQAKVKPVIENCNSCKESGGTCNGEC KTKCKVACDAYKKFIDGTGSGGGSRPTGIAGSSWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNC GPSSITNVSVSTDENKCVQS >T2C6 745 аминокислот | 637 а/к (SEQ ID N0:48)

NYIKDDPYSKEYVTKLSFIPNSSDANTSSEKIQKNNDEVCNPNESGISSVEQAQTSDPSSNKT CITHSSIKANKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEHTSLSGVDNCCFKDFLRMLQEPRIDKNQ RGSSSNGSCDKNSEEACEKNLDEALASLTNGYKCDKCKSEQSKKNNNKWIWKKFPGKEGGLQE EYANTIGLPPRTQYLCLWCLDEKEGKTQE LKNIRTNSE LLKEWIIAAFHE GKNLKTTYPQKK NDDNGKKLCKDLKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKNVELNLQNNFGKLFRKYIKKNNTAEQDT SYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAEMNSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRF LQEWVEHFCKQRQAKVKDVITNCNSCKESGNKCKTECKNKCKDECEKYKKFIEACGTAVGGTG TAGS PWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGPS S TTNAAENKCVQSDIDSFFKHLIDI GLTTPSSYLSIVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTENCDIQKKTPKSQSCDTLVWNVPSPLGNT PHGYKYACQCRTPNKQESCDDRKEYMNQWIIDNTKNPKGSGSGKDYYELCKYNGVKETKPLGT LKNSKLD >giI 254952632 IgbIACT97146.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 330 а/к (SEQ ID N0:49)

KCDKCKSEQSKKNNNKWIWRKFPGKEGGLQKEYANTIGLPPRTQSLCLVCLHEKEGKTQHKTI STNSELLKEWIIAAFHEGKNLKTTYLEKKNAENKKKLCKALKYSFADYGDLIKGTSIWDNEYT KDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNGTM CNADGSVTGSGSSCDDMPTTDFIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQAKVKDVIENCKSCKESGNKCK TECKNKCDAYKTFIEECGTAVGGTAGSSWVKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSST TNAAAS TAENKCVQS >giI 90193487 IgbIABD92339.1I белок эритроцитарной мембраны 1 [Plasmodium falciparum] | 269 а/к (SEQ ID N0:50)

NYIKDDPYSKEYVTKLSFILNSSDAENASETPSKYYDEACNCNESGISSVEQASISDRSSQKA CNTHSFIGANKKKVCKHVKLGVRENDKDLKICVIEDDSLRGVENCCFKDFLRMLQEPRIDKNQ

RGSSSNDSCNNNNEEACEKNLDEALASLHNGYKNQKCKSEQSKKNNNKWIWKKSSGKEGGLQK EYANTIGLPPRTQSLCLVCLHEKEGKTQHKTISTNSELLKEWIIDAFHEGKNLKTTYLEKKKG DNGKKLCKALKYS EADY >giI 254952646 IgbIACT97153.1 I VAR2CSA [Plasmodium falciparum] | 347 а/к (SEQ ID N0:51)

KCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKSSGKEGGLQKEYANTIALPPRTQSLCLWCLHEKEGKTQHKT ISTNSELLKEWIIDAFHEGKNLKTTYLEKQNADNGKKNADNNSKLCKDLKYSFADYGDLIKGT SIWDNEYTKDLELNLQQIFGKLFRKYIKKNIASDENTLYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKH GAEMNGTTCSSGSGDSSSGENQTNSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCEQRQAKVKDVITN CKSCKESGGTCNSDCKTKCKGECEKYKKFIEKCKGGGTEGTSGSSWVKRWYQIYMRYSKYIED AKRNRKAGTKSCGTSSGANSGVTTTESKCVQS >giI 90193485 IgbIABD92338.1I белок эритроцитарной мембраны 1 [Plasmodium falciparum] | 269 а/к (SEQ ID N0:52)

DYIKDDPYSKEYTTKLSFILNSSDANTSSEKIQKNNDEVCNPNESEISSVEQAQTSRPSSNKT CITHSSIKANKKKVCKDVKLGVRENDKVLRVCVIEHTSLSGVENCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNGSCDKNSEEACEKNLDEALASLTNCYKNQKCKSEQSKKNNNKWIWKKSSGNEKGLQKE YANTIGLPPRTQSLCLVCLHEKEGKTQELKNISTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKTTYPQNKND DNGKKLFKDLKYSFADY >MTS1 745 аминокислот | 646 а/к (SEQ ID N0:53)

DYIKDDPYSKEYTTKLSFILNSSDANTSSEKIQKNNDEVCNPNESEISSVEQAQTSRPSSNKT CITHSSIKANKKKVGKDVKLGVRENDKVLRVCVIEHTSLSGVENCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNGSCDKNSEEACEKNLDEALASLTNCYKNQKCKSEQSKKNNNKWIWKKSSGKEGGLQKE YANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCKGVTDINFD TKEKFLAGCLIAAFHE GKNLKTTYLEKK NDDNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKAFGKLFRKYIKKNNTAEQDT SYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAGMNGTTCSSGSGDSSNDIPTTDFIPQYLRFLQEWV ENFCEQRQAKVKDVIENCNSCKNTSGERKIGDTCNSDCEKKCKDECEKYKKFIEDCKGGDGTA GSSWVKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGITTGTISGESSGATSGVTTTENKCVQSDI DSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGEDNAPWTTYTTYTTEKCNKETDKSKSQQSNTAW

VNVPSPLGNTPHGYKYACECKIPTTEETCDDRKEYMNQWSCGSAQTVRDRSGKDDYELCKYNG VQIKQAAGTLKNSKLD >Q8I639 (Q81639_PLAF7) Plasmodium falciparum (изолят 3D7), 632 а/к внеклеточная часть (SEQ ID N0:54)

NYIKGDPYFAEYATKLSFILNSSDANNPSEKIQKNNDEVCNCNESGIASVEQEQISDPSSNKT CITHSSIKANKKKVCKHVKLGVRENDKDLRVCVIEHTSLSGVENCCCQDFLRILQENCSDNKS GSSSNGSCNNKNQEACEKNLEKVLASLTNCYKCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKSSGKEGGLQKE YANTIGLPPRTQSLCLWCLDEKGKKTQELKNIRTNSE LLKEWIIAAFHE GKNLKPSHEKKND

- 34 031876

DNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSY SSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQ EWVEHFCKQRQEKVKPVIENCKSCKESGGTCNGECKTECKNKCEVYKKFIEDCKGGDGTAGSS WVKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTNAAENKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTP S S YLSIVLDDNICGADKAPWT TY T TY T T ТЕ KCNKE TDKSKLQQCNTAVWNVPS PLGNTPHGY KYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSNSSK LD >Q8I639 (Q8I639_PLAF7) Plasmodium falciparum (изолят 3D7), полноразмерная 2730 a/к внеклеточная часть (SEQ ID N0:55)

MDKSSIANKIEAYLGAKSDDSKIDQSLKADPSEVQYYGSGGDGYYLRKNICKITVNHSDSGTN DPCDRIPPPYGDNDQWKCAIILSKVSEKPENVFVPPRRQRMCINNLEKLNVDKIRDKHAFLAD VLLTARNEGERIVQNHPDTNSSNVCNALERSFADIADIIRGTDLWKGTNSNLEQNLKQMFAKI RENDKVLQDKYPKDQNYRKLREDWWNANRQKVWEVITCGARSNDLLIKRGWRTSGKSNGDNKL ELCRKCGHYEEKVPTKLDYVPQFLRWLTEWIEDFYREKQNLIDDMERHREECTSEDHKSKEGT SYCSTCKDKCKKYCECVKKWKSEWENQKNKYTELYQQNKNETSQKNTSRYDDYVKDFFKKLEA NYSSLENYIKGDPYFAEYATKLSFILNSSDANNPSEKIQKNNDEVCNCNESGIASVEQEQISD PSSNKTCITHSSIKANKKKVCKHVKLGVRENDKDLRVCVIEHTSLSGVENCCCQDFLRILQEN CSDNKSGSSSNGSCNNKNQEACEKNLEKVLASLTNCYKCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKSSGKE GGLQKEYANTIGLPPRTQSLCLVVCLDEKGKKTQELKNIRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKPS HEKKNDDNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTA EQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQ YLRFLQEWVEHFCKQRQEKVKPVIENCKSCKESGGTCNGECKTECKNKCEVYKKFIEDCKGGD GTAGSSWVKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTNAAENKCVQSDIDSFFKHLID IGLTTPSSYLSIVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKETDKSKLQQCNTAVWNVPSPLG NTPHGYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTV RSNSSKLDDKDVTFFNLFEQWNKEIQYQIEQYMTNTKISCNNEKNVLSRVSDEAAQPKFSDNE RDRNSITHEDKNCKEKCKCYSLWIEKINDQWDKQKDNYNKFQRKQIYDANKGSQNKKWSLSN FLFFSCWEEYIQKYFNGDWSKIKNIGSDTFEFLIKKCGNDSGDGETIFSEKLNNAEKKCKENE STNNKMKSSETSCDCSEPIYIRGCQPKIYDGKIFPGKGGEKQWICKDTIIHGDTNGACIPPRT QNLCVGELWDKRYGGRSNIKNDTKESLKQKIKNAIQKETELLYEYHDKGTAIISRNPMKGQKE KEEKNNDSNGLPKGFCHAVQRSFIDYKNMILGTSVNIYEYIGKLQEDIKKIIEKGTTKQNGKT VGSGAENVNAWWKGIEGEMWDAVRCAITKINKKQKKNGTFSIDECGIFPPTGNDEDQSVSWFK EWSEQFCIERLQYEKNIRDACTNNGQGDKIQGDCKRKCEEYKKYISEKKQEWDKQKTKYENKY VGKSASDLLKENYPECISANFDFIFNDNIEYKTYYPYGDYSSICSCEQVKYYEYNNAEKKNNK SLCHEKGNDRTWSKKYIKKLENGRTLEGVYVPPRRQQLCLYELFPIIIKNKNDITNAKKELLE TLQIVAEREAYYLWKQYHAHNDTTYLAHKKACCAIRGSFYDLEDIIKGNDLVHDEYTKYIDSK

LNEIFDSSNKNDIETKRARTDWWENEAIAVPNITGANKSDPKTIRQLVWDAMQSGVRKAIDEE KEKKKPNENFPPCMGVQHIGIAKPQFIRWLEEWTNEFCEKYTKYFEDMKSNCNLRKGADDCDD NSNIECKKACANYTNWLNPKRIEWNGMSNYYNKIYRKSNKESEDGKDYSMIMEPTVIDYLNKR CNGEINGNYICCSCKNIGENSTSGTVNKKLQKKETQCEDNKGPLDLMNKVLNKMDPKYSEHKM KCTEVYLEHVEEQLKEIDNAIKDYKLYPLDRCFDDKSKMKVCDLIGDAIGCKHKTKLDELDEW NDVDMRDPYNKYKGVLIPPRRRQLCFSRIVRGPANLRNLKEFKEEILKGAQSEGKFLGNYYNE DKDKEKALEAMKNSFYDYEYIIKGSDMLTNIQFKDIKRKLDRLLEKETNNTEKVDDWWETNKK SIWNAMLCGYKKSGNKIIDPSWCTIPTTETPPQFLRWIKEWGTNVCIQKEEHKEYVKSKCSNV TNLGAQESESKNCTSEIKKYQEWSRKRSIQWEAISEGYKKYKGMDEFKNTFKNIKEPDANEPN ANEYLKKHCSKCPCGFNDMQEITKYTNIGNEAFKQIKEQVDIPAELEDVIYRLKHHEYDKGND YICNKYKNINVNMKKNNDDTWTDLVKNSSDINKGVLLPPRRKNLFLKIDESDICKYKRDPKLF KDFIYSSAISEVERLKKVYGEAKTKVVHAMKYSFADIGSIIKGDDMMENNSSDKIGKILGDGV GQNEKRKKWWDMNKYHIWESMLCGYKHAYGNISENDRKMLDIPNNDDEHQFLRWFQEWTENFC TKRNELYENMVTACNSAKCNTSNGSVDKKECTEACKNYSNFILIKKKEYQSLNSQYDMNYKET KAEKKESPEYFKDKCNGECSCLSEYFKDETRWKNPYETLDDTEVKNNCMCKPPPPASNNTSDI LQKTIPFGIALALGSIAFLFMKKKPKTPVDLLRVLDIPKGDYGIPTPKSSNRYIPYASDRYKG KTYIYMEGDTSGDDDKYIWDL >FCR3 (SEQ ID N0:56) полноразмерная 2734 a/к внеклеточная часть (577 a/к выделенное соотв. IDl-DBL2b)

MDSTSTIANKIEEYLGAKSDDSKIDELLKADPSEVEYYRSGGDGDYLKNNICKITVNHSDSGK YDPCEKKLPPYDDNDQWKCQQNSSDGSGKPENICVPPRRERLCTYNLENLKFDKIRDNNAFLA DVLLTARNEGEKIVQNHPDTNSSNVCNALERSFADLADIIRGTDQWKGTNSNLEKNLKQMFAK IRENDKVLQDKYPKDQKYTKLREAWWNANRQKVWEVITCGARSNDLLIKRGWRTSGKSDRKKN FELCRKCGHYEKEVPTKLDYVPQFLRWLTEWIEDFYREKQNLIDDMERHREECTREDHKSKEG TSYCSTCKDKCKKYCECVKKWKTEWENQENKYKDLYEQNKNKTSQKNTSRYDDYVKDFFEKLE ANYSSLENYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISSVGQAQTS GPSSNKTCITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQE NCSDNKRGSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNE EGLQEEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKK RYPQNKNSGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKKNN TAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTIDLI PQYLRFLQEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIEACGT AGGGIGTAGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQSDI DSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDTLV WNVPSPLGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYN GVDVKPTTVRSNSSKLDGNDVTFFNLFEQWNKEIQYQIEQYMTNANISCIDEKEVLDSVSDEG

- 35 031876

TPKVRGGYEDGRNNNTDQGTNCKEKCKCYKLWIEKINDQWGKQKDNYNKFRSKQIYDANKGSQ NKKWSLSNFLFFSCWEEYIQKYFNGDWSKIKNIGSDTFEFLIKKCGNNSAHGEEIFNEKLKN AEKKCKENESTDTNINKSETSCDLNATNYIRGCQSKTYDGKIFPGKGGEKQWICKDTIIHGDT NGACIPPRTQNLCVGELWDKSYGGRSNIKNDTKELLKEKIKNAIHKETELLYEYHDTGTAIIS KNDKKGQKGKNDPNGLPKGFCHAVQRSFIDYKNMILGTSVNIYEHIGKLQEDIKKIIEKGTPQ QKDKIGGVGSSTENVNAWWKGIEREMWDAVRCAITKINKKNNNSIFNGDECGVSPPTGNDEDQ SVSWFKEWGEQFCIERLRYEQNIREACTINGKNEKKCINSKSGQGDKIQGACKRKCEKYKKYI SEKKQEWDKQKTKYENKYVGKSASDLLKENYPECISANFDFIFNDNIEYKTYYPYGDYSSICS CEQVKYYKYNNAEKKNNKSLCYEKDNDMTWSKKYIKKLENGRSLEGVYVPPRRQQLCLYELFP IIIKNEEGMEKAKEELLETLQIVAEREAYYLWKQYNPTGKGIDDANKKACCAIRGSFYDLEDI IKGNDLVHDEYTKYIDSKLNEIFGSSDTNDIDTKRARTDWWENETITNGTDRKTIRQLVWDAM QSGVRYAVEEKNENFPLCMGVEHIGIAKPQFIRWLEEWTNEFCEKYTKYFEDMKSKCDPPKRA DTCGDNSNIECKKACANYTNWLNPKRIEWNGMSNYYNKIYRKSNKESEGGKDYSMIMAPTVID YLNKRCHGEINGNYICCSCKNIGAYNTTSGTVNKKLQKKETECEEEKGPLDLMNEVLNKMDKK YSAHKMKCTEVYLEHVEEQLNEIDNAIKDYKLYPLDRCFDDQTKMKVCDLIADAIGCKDKTKL DELDEWNDMDLRGTYNKHKGVLIPPRRRQLCFSRIVRGPANLRSLNEFKEEILKGAQSEGKFL GNYYKEHKDKEKALEAMKNSFYDYEDIIKGTDMLTNIEFKDIKIKLDRLLEKETNNTKKAEDW WKTNKKSIWNAMLCGYKKSGNKIIDPSWCTIPTTETPPQFLRWIKEWGTNVCIQKQEHKEYVK SKCSNVTNLGAQASESNNCTSEIKKYQEWSRKRSIRWETISKRYKKYKRMDILKDVKEPDANT YLREHCSKCPCGFNDMEEMNNNEDNEKEAFKQIKEQVKIPAELEDVIYRIKHHEYDKGNDYIC NKYKNIHDRMKKNNGNFVTDNFVKKSWEISNGVLIPPRRKNLFLYIDPSKICEYKKDPKLFKD FIYWSAFTEVERLKKAYGGARAKWHAMKYSFTDIGSIIKGDDMMEKNSSDKIGKILGDTDGQ NEKRKKWWDMNKYHIWESMLCGYREAEGDTETNENCRFPDIESVPQFLRWFQEWSENFCDRRQ KLYDKLNSECISAECTNGSVDNSKCTHACVNYKNYILTKKTEYEIQTNKYDNEFKNKNSNDKD APDYLKEKCNDNKCECLNKHIDDKNKTWKNPYETLEDTFKSKCDCPKPLPSPIKPDDLPPQAD EPFDPTILQTTIPFGIALALGSIAFL FMKVIYIYIYVCСICMYVCMYVCMYVCMYVCMYVCMH VCML СVYVIYVEKIСIYIEKEKRKK >BPTI, ингибитор протеиназ (SEQ ID N0:57)

RPDFCLEPPYTGPCKARIIRYFYNAKAGLCQTFVYGGCRAKRNNFKSAEDCMRTCGGA >PE38, Pseudomonas exotoxin A (SEQ ID N0:58), (подчеркнутое KDEL представляет сигнальную последовательность, которая может быть необязательной для конструкций по настоящему изобретению) RHRQPRGWEQLEQCGYPVQRLVALYLAARLSWNQVDQVIRNALASPGSGGDLGEAIREQPEQA RLALTLAAAESERFVRQGTGNDEAGAANGPADSGDALLERNYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQ NWTVERLLQAHRQLEERGYVFVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALA YGYAQDQEPDARGRIRNGALLRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDA ITGPEEEGGRLETILGWPLAERTWIPSAIPTDPRNVGGDLDPSSIPDKEQAISALPDYASQP GKPPRKDEL >PE38LR, вариант РЕ38 (SEQ ID N0:59) (подчеркнутое KDEL представляет сигнальную последовательность, которая может быть необязательной для конструкций по настоящему изобретению) RHRQPRGWEQLYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYVFVGYHGTFLE AAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGALLRVYVPRSSL PGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLAERTWIPSAI PTDPRNVGGDLDPSSIPDKEOAISALPDYASOPGKPPRKDEL

Последовательности полипептидов VAR2CSA, гибридизированные с усеченными фрагментами экзотоксина Pseudomonas (РЕ38)

Слитые белки	VAR2CSA-PE38	могут	иметь	модификации,	такие
как ингибитор	протеиназ	(BPTI)	на	N-конце,	и/или
оптимизированная	последовательность	РЕ38,	которая является

менее иммуногенной (PE38LR) >BPTI-IDl-ID2aFCR3-PE38LR, (SEQ ID N0:60) подчеркнутая последовательность соответствует ID1 домену FCR3, выделенная жирным шрифтом последовательность соответствует DBL2Xb домену FCR3, подчеркнутая и выделенная жирным шрифтом последовательность представляет собой ID2a

RPDFCLEPPYTGPCKARIIRYFYNAKAGLCQTFVYGGCRAKRNNFKSAEDCMRTCGGANYIKG DPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISSVGQAQTSGPSSNKTCITHS SIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKRGSSSN DSCDNKNQDECOKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEEGLOEEYANTIG LPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKKRYPQNKNSGNKE NLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKKNNTAEQDTSYSSLD ELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVE NFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIE ACGTAGGGIGTAGS PW SKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQSDIDSFFKHLIDIGL TTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDTLVWNVPSPLGNTP YRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSN SSKLDRHROPRGWEOLYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTONWTVERLLOAHROLEERGYVFVGYH GTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGALLRVYV PRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLAERTW IPSAIPTDPRNVGGDLDPS SIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >BPTI-IDl-ID2aFCR3-PE38 (SEQ ID N0:61)

- 36 031876

RPDFCLEPPYTGPCKARIIRYFYNAKAGLCQTFVYGGCRAKRNNFKSAEDCMRTCGGANYIKG DPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISSVGQAQTSGPSSNKTCITHS SIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKRGSSSN DSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEEGLQEEYANTIG LPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKKRYPQNKNSGNKE NLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKKNNTAEQDTSYSSLD ELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVE NFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIEACGTAGGGIGTAGSPW SKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQSDIDSFFKHLIDIGL TTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDTLVWNVPSPLGNTP YRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSN SSKLDPEGGSLAALTAHQACHLPLETFTRHRQPRGWEQLEQCGYPVQRLVALYLAARLSWNQV DQVIRNALASPGSGGDLGEAIREQPEQARLALTLAAAESERFVRQGTGNDEAGAANGPADSGD ALLERNYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYVFVGYHGTFLEAAQSI VFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGALLRVYVPRSSLPGFYR TSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLAERTWIPSAIPTDPR NVGGDLDPS SIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >IDl-ID2aFCR3-PE38 (SEQ ID N0:62)

NYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISSVGQAQTSGPSSNKT CITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEEGLQEEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKKRYPQNKN SGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKKNNTAEQDTS YSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFL QEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIEACGTAGGGIGT AGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQSDIDSFFKHL IDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDTLVWNVPSP LGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPT TVRSNSSKLDPEGGSLAALTAHQACHLPLETFTRHRQPRGWEQLEQCGYPVQRLVALYLAARL SWNQVDQVIRNALASPGSGGDLGEAIREQPEQARLALTLAAAESERFVRQGTGNDEAGAANGP ADSGDALLERNYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYVFVGYHGTFLE AAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGALLRVYVPRSSL PGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLAERTWIPSAI PTDPRNVGGDLDPSSIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >IDl-ID2aFCR3-PE38LR (SEQ ID N0:63)

NYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISSVGQAQTSGPSSNKT

CITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEEGLQEEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKKRYPQNKN SGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKKNNTAEQDTS YSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFL QEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIEACGTAGGGIGT AGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQSDIDSFFKHL IDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDTLVWNVPSP LGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPT TVRSNSSKLDRHRQPRGWEQLYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYV FVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGAL LRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLA ERTWIPSAIPTDPRNVGGDLDPSSIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >BPTI-DBLl-ID2aFCR3-PE38LR (SEQ ID N0:64)

RPDFCLEPPYTGPCKARIIRYFYNAKAGLCQTFVYGGCRAKRNNFKSAEDCMRTCGGANHSDS GKYDPCEKKLPPYDDNDQWKCQQNSSDGSGKPENICVPPRRERLCTYNLENLKFDKIRDNNAF LADVLLTARNEGEKIVQNHPDTNSSNVCNALERSFADLADIIRGTDQWKGTNSNLEKNLKQMF AKIRENDKVLQDKYPKDQKYTKLREAWWNANRQKVWEVITCGARSNDLLIKRGWRTSGKSDRK KNFELCRKCGHYEKEVPTKLDYVPQFLRWLTEWIEDFYREKQNLIDDMERHREECTREDHKSK EGTSYCSTCKDKCKKYCECVKKWKTEWENQENKYKDLYEQNKNKTSQKNTSRYDDYVKDFFEK LEANYSSLENYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISSVGQAQ TSGPSSNKTCITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGIL QENCSDNKRGSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSG NEEGLQEEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNL KKRYPQNKNSGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKK NNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTID LIPQYLRFLQEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIEAC GTAGGGIGTAGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQS DIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDT LVWNVPSPLGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCK YNGVDVKPTTVRSNSSKLDRHRQPRGWEQLYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAH RQLEERGYVFVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDA RGRIRNGALLRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRL ETILGWPLAERTWIPSAIPTDPRNVGGDLDPSSIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >BPTI-DBLl-ID2aFCR3-PE38 (SEQ ID N0:65)

RPDFCLEPPYTGPCKARIIRYFYNAKAGLCQTFVYGGCRAKRNNFKSAEDCMRTCGGANHSDS

- 37 031876

GKYDPCEKKLPPYDDNDQWKCQQNSSDGSGKPENICVPPRRERLCTYNLENLKFDKIRDNNAF LADVLLTARNEGEKIVQNHPDTNSSNVCNALERSFADLADIIRGTDQWKGTNSNLEKNLKQMF AKIRENDKVLQDKYPKDQKYTKLREAWWNANRQKVWEVITCGARSNDLLIKRGWRTSGKSDRK KNFELCRKCGHYEKEVPTKLDYVPQFLRWLTEWIEDFYREKQNLIDDMERHREECTREDHKSK EGTSYCSTCKDKCKKYCECVKKWKTEWENQENKYKDLYEQNKNKTSQKNTSRYDDYVKDFFEK LEANYS S LENYIKGDPY FAEYATKL S FILNP S DANNP S GE TANHNDEACNCNE S GIS SVGQAQ TSGPSSNKTCITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGIL QENCSDNKRGSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSG NEEGLQEEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNL KKRYPQNKNSGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKK NNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTID LIPQYLRFLQEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIEAC GTAGGGIGTAGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQS DIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDT LVWNVPSPLGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCK YNGVDVKPTTVRSNSSKLDPEGGSLAALTAHQACHLPLETFTRHRQPRGWEQLEQCGYPVQRL VALYLAARLSWNQVDQVIRNALASPGSGGDLGEAIREQPEQARLALTLAAAESERFVRQGTGN DEAGAAnGPADSGDALLERNYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYVF VGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGALL RVYVPRSSLPGFYRTsLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLAE RTWIPSAIPTDPRNVGGDLDPS SIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >DBLl-ID2aFCR3-PE38LR (SEQ ID N0:66)

NHSDSGKYDPCEKKLPPYDDNDQWKCQQNSSDGSGKPENICVPPRRERLCTYNLENLKFDKIR DNNAFLADVLLTARNEGEKIVQNHPDTNSSNVCNALERSFADLADIIRGTDQWKGTNSNLEKN LKQMFAKIRENDKVLQDKYPKDQKYTKLREAWWNANRQKVWEVITCGARSNDLLIKRGWRTSG KSDRKKNFELCRKCGHYEKEVPTKLDYVPQFLRWLTEWIEDFYREKQNLIDDMERHREECTRE DHKSKEGTSYCSTCKDKCKKYCECVKKWKTEWENQENKYKDLYEQNKNKTSQKNTSRYDDYVK DFFEKLEANYSSLENYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISS VGQAQTSGPSSNKTCITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQD LLGILQENCSDNKRGSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIW KKSSGNEEGLQEEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFH EGKNLKKRYPQNKNSGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFG KYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDD IPTIDLIPQYLRFLQEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKK FIEACGTAGGGIGTAGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDEN KCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKS QSSDTLVWNVPSPLGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDN YELCKYNGVDVKPTTVRSNSSKLDRHRQPRGWEQLYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVER LLQAHRQLEERGYVFVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQD QEPDARGRIRNGALLRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEE EGGRLETILGWPLAERTWIPSAIPTDPRNVGGDLDPS SIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRK DEL >DBLl-ID2aFCR3-PE38 (SEQ ID N0:67)

NHSDSGKYDPCEKKLPPYDDNDQWKCQQNSSDGSGKPENICVPPRRERLCTYNLENLKFDKIR DNNAFLADVLLTARNEGEKIVQNHPDTNSSNVCNALERSFADLADIIRGTDQWKGTNSNLEKN LKQMFAKIRENDKVLQDKYPKDQKYTKLREAWWNANRQKVWEVITCGARSNDLLIKRGWRTSG KSDRKKNFELCRKCGHYEKEVPTKLDYVPQFLRWLTEWIEDFYREKQNLIDDMERHREECTRE DHKSKEGTSYCSTCKDKCKKYCECVKKWKTEWENQENKYKDLYEQNKNKTSQKNTSRYDDYVK DFFEKLEANYSSLENYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISS VGQAQTSGPSSNKTCITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQD LLGILQENCSDNKRGSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIW KKSSGNEEGLQEEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFH EGKNLKKRYPQNKNSGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFG KYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDD IPTIDLIPQYLRFLQEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKK FIEACGTAGGGIGTAGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDEN KCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKS QSSDTLVWNVPSPLGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDN YELCKYNGVDVKPTTVRSNSSKLDPEGGSLAALTAHQACHLPLETFTRHRQPRGWEQLEQCGY PVQRLVALYLAARLSWNQVDQVIRNALASPGSGGDLGEAIREQPEQARLALTLAAAESERFVR QGTGNDEAGAANGPADSGDALLERNYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEE RGYVFVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIR NGALLRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILG WPLAERTWIPSAIPTDPRNVGGDLDPS SIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >IDl-ID2a3D7-PE38 (SEQ ID N0:68)

LSFILNSSDANNPSEKIQKNNDEVCNCNESGIASVEQEQISDPSSNKTCITHSSIKANKKKVC KHVKLGVRENDKDLRVCVIEHTSLSGVENCCCQDFLRILQENCSDNKSGSSSNGSCNNKNQEA CEKNLEKVLASLTNCYKCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKSSGKEGGLQKEYANTIGLPPRTQSLC LWCLDEKGKKTQELKNIRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKPSHEKKNDDNGKKLCKALEYSFA DYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNK KYIWLAMKHGAGMNSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVK PVIENCKSCKESGGTCNGECKTECKNKCEVYKKFIEDCKGGDGTAGSSWVKRWDQIYKRYSKY

- 38 031876

IEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTNAAENKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDDNICGA DKAPWTTYTTYTTTEKCNKETDKSKLQQCNTAVWNVPSPLGNTPHGYKYACQCKIPTNEETC DDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSNSSKLDPEGGSLAALTAHQ ACHLPLETFTRHRQPRGWEQLEQCGYPVQRLVALYLAARLSWNQVDQVIRNALASPGSGGDLG EAIREQPEQARLALTLAAAESERFVRQGTGNDEAGAANGPADSGDALLERNYPTGAEFLGDGG DISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYVFVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRG FYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGALLRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLI GHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLAERTWIPSAIPTDPRNVGGDLDPSSIPDKEQAI SALPDYASQPGKPPRKDEL >IDl-ID2a3D7-PE38LR (SEQ ID N0:69)

LSFILNSSDANNPSEKIQKNNDEVCNCNESGIASVEQEQISDPSSNKTCITHSSIKANKKKVC KHVKLGVRENDKDLRVCVIEHTSLSGVENCCCQDFLRILQENCSDNKSGSSSNGSCNNKNQEA CEKNLEKVLASLTNCYKCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKSSGKEGGLQKEYANTIGLPPRTQSLC LWCLDEKGKKTQELKNIRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKPSHEKKNDDNGKKLCKALEYSFA DYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNK KYIWLAMKHGAGMNSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVK PVIENCKSCKESGGTCNGECKTECKNKCEVYKKFIEDCKGGDGTAGSSWVKRWDQIYKRYSKY IEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTNAAENKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDDNICGA DKAPWTTYTTYTTTEKCNKETDKSKLQQCNTAVWNVPSPLGNTPHGYKYACQCKIPTNEETC DDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSNSSKLDRHRQPRGWEQLYP TGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYVFVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRAR SQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGALLRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAP EAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLAERTWIPSAIPTDPRNVGGDLDP SSIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >IDl-DBL2bFCR3-PE38LR (SEQ ID N0:70)

NYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGISSVGQAQTSGPSSNKT CITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKR GSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEEGLQEEY ANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKNLKKRYPQNKN SGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLFGKYIKKNNTAEQDTS YSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFL QEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYKKFIEACGTAGGGIGT AGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDENKCVQSDIDSFFKHL IDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSKSQSSDTLVWNVPSP LGNTPYRYKYRHRQPRGWEQLYPTGAEFLGDGGDISFSTRGTQNWTVERLLQAHRQLEERGYV FVGYHGTFLEAAQSIVFGGVRARSQDLDAIWRGFYIAGDPALAYGYAQDQEPDARGRIRNGAL

LRVYVPRSSLPGFYRTSLTLAAPEAAGEVERLIGHPLPLRLDAITGPEEEGGRLETILGWPLA ERTWIPSAIPTDPRNVGGDLDPS SIPDKEQAISALPDYASQPGKPPRKDEL >DT388, последовательность дифтерийного токсина (SEQ ID N0:71) MGADDWDSSKSFVMENFSSYHGTKPGYVDSIQKGIQKPKSGTQGNYDDDWKGFYSTDNKYDA AGYSVDNENPLSGKAGGWKVTYPGLTKVLALKVDNAETIKKELGLSLTEPLMEQVGTEEFIK RFGDGASRWLSLPFAEGSSSVEYINNWEQAKALSVELEINFETRGKRGQDAMYEYMAQACAG NRVRRSVGSSLSCINLDWDVIRDKTKTKIESLKEHGPIKNKMSESPNKTVSEEKAKQYLEEFH QTALEHPELSELKTVTGTNPVFAGANYAAWAVNVAQVIDSETADNLEKTTAALSILPGIGSVM GIADGAVHHNTEEIVAQSIALSSLMVAQAIPLVGELVDIGFAAYNFVESIINLFQWHNSYNR PAYSPGHKTQPMHEF

Последовательности полипептидов VAR2CSA, гибридизированные с усеченными фрагментами дифтерийного токсина >DT388-DBLl-ID2a 3D7 (SEQ ID N0:72)

MGADDWDSSKSFVMENFSSYHGTKPGYVDSIQKGIQKPKSGTQGNYDDDWKGFYSTDNKYDA AGYSVDNENPLSGKAGGWKVTYPGLTKVLALKVDNAETIKKELGLSLTEPLMEQVGTEEFIK RFGDGASRWLSLPFAEGSSSVEYINNWEQAKALSVELEINFETRGKRGQDAMYEYMAQACAG NRVRRSVGSSLSCINLDWDVIRDKTKTKIESLKEHGPIKNKMSESPNKTVSEEKAKQYLEEFH QTALEHPELSELKTVTGTNPVFAGANYAAWAVNVAQVIDSETADNLEKTTAALSILPGIGSVM GIADGAVHHNTEEIVAQSIALSSLMVAQAIPLVGELVDIGFAAYNFVESIINLFQWHNSYNR PAYSPGHKTQPMHEFHSDSGTNDPCDRIPPPYGDNDQWKCAIILSKVSEKPENVFVPPRRQRM CINNLEKLNVDKIRDKHAFLADVLLTARNEGERIVQNHPDTNSSNVCNALERSFADIADIIRG TDLWKGTNSNLEQNLKQMFAKIRENDKVLQDKYPKDQNYRKLREDWWNANRQKVWEVITCGAR SNDLLIKRGWRTSGKSNGDNKLELCRKCGHYEEKVPTKLDYVPQFLRWLTEWIEDFYREKQNL IDDMERHREECTSEDHKSKEGTSYCSTCKDKCKKYCECVKKWKSEWENQKNKYTELYQQNKNE TSQKNTSRYDDYVKDFFKKLEANYSSLENYIKGDPYFAEYATKLSFILNSSDANNPSEKIQKN NDEVCNCNESGIASVEQEQISDPSSNKTCITHSSIKANKKKVCKHVKLGVRENDKDLRVCVIE HTSLSGVENCCCQDFLRILQENCSDNKSGSSSNGSCNNKNQEACEKNLEKVLASLTNCYKCDK CKSEQSKKNNKNWIWKKSSGKEGGLQKEYANTIGLPPRTQSLCLWCLDEKGKKTQELKNIRT NSELLKEWIIAAFHEGKNLKPSHEKKNDDNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDL ELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTTCCG DGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVEHFCKQRQEKVKPVIENCKSCKESGGTCNGEC KTECKNKCEVYKKFIEDCKGGDGTAGSSWVKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGPSST TNAAENKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSIVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKE TDKSKLQQCNTAVWNVPSPLGNTPHGYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKR GYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSNSSKLDSGR >DT388-DBLl-ID2a FCR3 (SEQ ID N0:73)

- 39 031876

MGADDWDSSKSFVMENFSSYHGTKPGYVDSIQKGIQKPKSGTQGNYDDDWKGFYSTDNKYDA AGYSVDNENPLSGKAGGVVKVTYPGLTKVLALKVDNAETIKKELGLSLTEPLMEQVGTEEFIK RFGDGASRWLSLPFAEGSSSVEYINNWEQAKALSVELEINFETRGKRGQDAMYEYMAQACAG NRVRRSVGSSLSCINLDWDVIRDKTKTKIESLKEHGPIKNKMSESPNKTVSEEKAKQYLEEFH QTALEHPELSELKTVTGTNPVFAGANYAAWAVNVAQVIDSETADNLEKTTAALSILPGIGSVM GIADGAVHHNTEEIVAQSIALSSLMVAQAIPLVGELVDIGFAAYNFVESIINLFQWHNSYNR PAYSPGHKTQPMHEFHSDSGKYDPCEKKLPPYDDNDQWKCQQNSSDGSGKPENICVPPRRERL CTYNLENLKFDKIRDNNAFLADVLLTARNEGEKIVQNHPDTNSSNVCNALERSFADLADIIRG TDQWKGTNSNLEKNLKQMFAKIRENDKVLQDKYPKDQKYTKLREAWWNANRQKVWEVITCGAR SNDLLIKRGWRTSGKSDRKKNFELCRKCGHYEKEVPTKLDYVPQFLRWLTEWIEDFYREKQNL IDDMERHREECTREDHKSKEGTSYCSTCKDKCKKYCECVKKWKTEWENQENKYKDLYEQNKNK TSQKNTSRYDDYVKDFFEKLEANYSSLENYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANH NDEACNCNESGISSVGQAQTSGPSSNKTCITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIE DTSLSGVDNCCCQDLLGILQENCSDNKRGSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDK CKSGTSRSKKKWIWKKSSGNEEGLQEEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDT KEKFLAGCLIVSFHEGKNLKKRYPQNKNSGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKD LELNLQNNFGKLFGKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCN ADGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTE CKTKCKDECEKYKKFIEACGTAGGGIGTAGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCG TSSTTNAAASTDENKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYT TTEKCNKERDKSKSQSSDTLVWNVPSPLGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSC GSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSNSSKLDSGR >DT388-IDl-ID2a 3D7 (SEQ ID N0:74)

MGADDWDSSKSFVMENFSSYHGTKPGYVDSIQKGIQKPKSGTQGNYDDDWKGFYSTDNKYDA AGYSVDNENPLSGKAGGWKVTYPGLTKVLALKVDNAETIKKELGLSLTEPLMEQVGTEEFIK RFGDGASRWLSLPFAEGSSSVEYINNWEQAKALSVELEINFETRGKRGQDAMYEYMAQACAG NRVRRSVGSSLSCINLDWDVIRDKTKTKIESLKEHGPIKNKMSESPNKTVSEEKAKQYLEEFH QTALEHPELSELKTVTGTNPVFAGANYAAWAVNVAQVIDSETADNLEKTTAALSILPGIGSVM GIADGAVHHNTEEIVAQSIALSSLMVAQAIPLVGELVDIGFAAYNFVESIINLFQWHNSYNR PAYSPGHKTQPMHEFLSFILNSSDANNPSEKIQKNNDEVCNCNESGIASVEQEQISDPSSNKT CITHSSIKANKKKVCKHVKLGVRENDKDLRVCVIEHTSLSGVENCCCQDFLRILQENCSDNKS GSSSNGSCNNKNQEACEKNLEKVLASLTNCYKCDKCKSEQSKKNNKNWIWKKSSGKEGGLQKE YANTIGLPPRTQSLCLWCLDEKGKKTQELKNIRTNSELLKEWIIAAFHEGKNLKPSHEKKND DNGKKLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQKIFGKLFRKYIKKNNTAEQDTSY SSLDELRESWWNTNKKYIWLAMKHGAGMNSTTCCGDGSVTGSGSSCDDIPTIDLIPQYLRFLQ EWVEHFCKQRQEKVKPVIENCKSCKESGGTCNGECKTECKNKCEVYKKFIEDCKGGDGTAGSS

WVKRWDQIYKRYSKYIEDAKRNRKAGTKNCGPSSTTNAAENKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTP

SSYLSIVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKETDKSKLQQCNTAVWNVPSPLGNTPHGY KYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKNDNYELCKYNGVDVKPTTVRSNSSK LDSGR >DT388-IDl-ID2a FCR3 (SEQ ID N0:75)

MGADDWDSSKSFVMENFSSYHGTKPGYVDSIQKGIQKPKSGTQGNYDDDWKGFYSTDNKYDA AGYSVDNENPLSGKAGGWKVTYPGLTKVLALKVDNAETIKKELGLSLTEPLMEQVGTEEFIK RFGDGASRWLSLPFAEGSSSVEYINNWEQAKALSVELEINFETRGKRGQDAMYEYMAQACAG NRVRRSVGSSLSCINLDWDVIRDKTKTKIESLKEHGPIKNKMSESPNKTVSEEKAKQYLEEFH QTALEHPELSELKTVTGTNPVFAGANYAAWAVNVAQVIDSETADNLEKTTAALSILPGIGSVM GIADGAVHHNTEEIVAQSIALSSLMVAQAIPLVGELVDIGFAAYNFVESIINLFQWHNSYNR PAYSPGHKTQPMHEFNYIKGDPYFAEYATKLSFILNPSDANNPSGETANHNDEACNCNESGIS SVGQAQTSGPSSNKTCITHSSIKTNKKKECKDVKLGVRENDKDLKICVIEDTSLSGVDNCCCQ DLLGILQENCSDNKRGSSSNDSCDNKNQDECQKKLEKVFASLTNGYKCDKCKSGTSRSKKKWI WKKSSGNEEGLQEEYANTIGLPPRTQSLYLGNLPKLENVCEDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSF HEGKNLKKRYPQNKNSGNKENLCKALEYSFADYGDLIKGTSIWDNEYTKDLELNLQNNFGKLF GKYIKKNNTAEQDTSYSSLDELRESWWNTNKKYIWTAMKHGAEMNITTCNADGSVTGSGSSCD DIPTIDLIPQYLRFLQEWVENFCEQRQAKVKDVITNCKSCKESGNKCKTECKTKCKDECEKYK KFIEACGTAGGGIGTAGSPWSKRWDQIYKRYSKHIEDAKRNRKAGTKNCGTSSTTNAAASTDE NKCVQSDIDSFFKHLIDIGLTTPSSYLSNVLDDNICGADKAPWTTYTTYTTTEKCNKERDKSK SQSSDTLVWNVPSPLGNTPYRYKYACQCKIPTNEETCDDRKEYMNQWSCGSARTMKRGYKND NYELCKYNGVDVKPTTVRSNSSKLDSGR

Примеры

Пример 1. Продукция усеченных рекомбинантных белков VAR2CSA.

Все усечения белков осуществляли согласно ранее определенным границам доменов (Dahlback M., Jorgensen L.M., Nielsen M.A., Clausen T.M., Ditlev S.B., et al., J. Biol. Chem. 286:15908-15917). Для упрощения заявители разделили домен CIDR_PAM на два домена ID2a и ID2b, где ID2a представляет собой Nконцевую часть CIDR_PAM, не содержащую CIDR-подобную последовательность, a ID2b соответствует CIDR-подобной последовательности. Заявители также использовали новую границу DBL2X, содержащую 93 аминокислоты ID2a. Для упрощения заявители назвали указанную границу DBL2Xb, в то время как старая граница будет называться DBL2Xa. Праймеры, использованные для клонирования, перечислены в табл. 2. Фрагменты экспрессировались клетками насекомых, зараженных бакуловирусом, в форме растворимых белков, как описано в способе 1. Большинство белков продуцировались на основе генотипа FCR3. Некоторые фрагменты FCR3 не экспрессировались, и вместо них использовалась основа генотипа

- 40 031876

3D7. Белки использовали в анализе взаимозаменяемым образом, поскольку заявители показали, что рекомбинантный VAR2CSA из обоих генотипов в равной степени связывается с CSA. Все белки показали сдвиг мобильности в геле по сравнению с восстановленными и невосстановленными образцами по результатам SDS-PAGE (способ 2). Это согласуется с образованием интрамолекулярных дисульфидных мостиков. Некоторые белки образовывали высокомолекулярные комплексы, обнаруживаемые SDSPAGE в невосстанавливающих условиях. Это происходит, возможно, благодаря образованию интрамолекулярных дисульфидных мостиков между неспаренными цистеинами. Это было подтверждено путем восстановления комплексов до мономерного белка с использованием DDT.

Таблица 2

Праймеры для клонирования.

Праймеры FCR3

Белок	Прямой праймер	Обратный праймер
IDl-ID2b	AACTACATCAAGGGCGAC (SEQ ID N0:76)	CTTGTTGATATTGGTGTCGGT (SEQ ID N0:77)
DBLlX-ID2a	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:78)	GTCCAGCTTGCTGGAGTT (SEQ ID N0:79)
IDl-ID2a	AACTACATCAAGGGCGAC (SEQ ID N0:80)	GTCCAGCTTGCTGGAGTT (SEQ ID N0:81)
IDl-DBL2Xa	AACTACATCAAGGGCGAC (SEQ ID N0:82)	AGCGGCGTTGGTGGTGGA (SEQ ID N0:83)
IDl-DBL2Xb	AACTACATCAAGGGCGAC (SEQ ID N0:84)	GTACTTGTACCGGTAGGG (SEQ ID N0:85)
DBLlX-DBL2Xb	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:86)	GTACTTGTACCGGTAGGG (SEQ ID N0:87)

Праймеры 3d7

Белок	Прямой праймер	Обратный праймер
DBL2X-DBL4e	CTGACCAACTGCTACAAG (SEQ ID N0:88)	GGTCCAGAGGGTACAGCTT (SEQ ID N0:89)
IDl-DBL3e	CTGTCCTTCATCCTGAAC (SEQ ID N0:90)	TTCAGCGTTGTTGTACTCGTA (SEQ ID N0:91)
IDl-DBL4e	CTGTCCTTCATCCTGAAC (SEQ ID N0:92)	GTCCAGAGGGTACAGCTT (SEQ ID N0:93)
DBLlX-ID2b	CACTCTGACTCTGGCACC (SEQ ID N0:94)	AGAGGACTTCATCTTGTTGTTGGT (SEQ ID N0:95)
IDl-ID2b	CTGTCCTTCATCCTGAAC (SEQ ID N0:96)	AGAGGACTTCATCTTGTTGTTGGT (SEQ ID N0:97)
DBLlX-ID2a	CACTCTGACTCTGGCACC (SEQ ID N0:98)	GTCCAGCTTAGAGGAGTT (SEQ ID N0:99)
IDl-ID2a	CTGTCCTTCATCCTGAAC (SEQ ID N0:100)	GTCCAGCTTAGAGGAGTT (SEQ ID N0:101)
DBLlX-DBL2Xa	CACTCTGACTCTGGCACC (SEQ ID N0:102)	GGCGGCGTTGGTGGTAGA (SEQ ID N0:103)
IDl-DBL2Xa	CTGTCCTTCATCCTGAAC (SEQ ID N0:104)	GGCGGCGTTGGTGGTAGA (SEQ ID N0:105)
DBLlX-DBL2Xb	CACTCTGACTCTGGCACC (SEQ ID N0:106)	GTACTTGTATCCGTGGGG (SEQ ID N0:107)
IDl-DBL2Xb	CTGTCCTTCATCCTGAAC (SEQ ID N0:108)	GTACTTGTATCCGTGGGG (SEQ ID N0:109)

сайты связывания с CSA

	PCR1
Фрагмент 1
Белок	Прямой	Обратный
DBLlX-ID2a (DSM		GGTGTCGAAGTTGATGTCGGGCAGATTGCCCAGGTA
делеция)	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:110)	(SEQ ID N0:111)
Аланин зам. K(626, 629, 630) ,		AGCTGCGGCCAGATTAGCGCCCTCGTGGAAGGACAC
R(631)	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:112)	(SEQ ID N0:113)
Аланин зам.		AGCGCATTCAGCTGCGGCGTTGGTCTTGATGGAGCT
К(459,460,461,464)	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:114)	(SEQ ID N0:115)
	Фрагмент 2
Белок	Прямой	Обратный
DBLlX-ID2a (DSM делеция)	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:116)	GTCCAGCTTGCTGGAGTT (SEQ ID N0:117)
Аланин зам. К(626, 629, 630) ,	GCTAATCTGGCCGCAGCTTACCCCCAGAATAAGAAC
R(631)	(SEQ ID N0:118)	GTCCAGCTTGCTGGAGTT (SEQ ID N0:119)
Аланин зам.	GCCGCAGCTGAATGCGCTGACGTGAAGCTGGGCGTG
К(459,460,461,464)	(SEQ ID N0:120)	GTCCAGCTTGCTGGAGTT (SEQ ID N0:121)

PCR2

Конечная конструкция

Белок	Прямой	Обратный
DBLlX-ID2a (DSM
делеция)	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:122)	GTCCAGCTTGCTGGAGTT (SEQ ID N0:123)
Аланин зам.
K(626, 629, 630) ,
R(631)	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:124)	GTCCAGCTTGCTGGAGTT (SEQ ID N0:125)
Аланин зам.
К(459,460,461,464)	CACAGCGATAGCGGCAAG (SEQ ID N0:126)	GTCCAGCTTGCTGGAGTT (SEQ ID N0:127)

Пример 2. VAR2CSA из FCR3 и 3D7 связывается с CSA со сходной аффинностью и специфичностью.

Инфицированные FCR3 эритроциты (IE) обладают гораздо более сильной адгезией к CSA in vitro по сравнению с 3D7 или NF54 (IE). Если различия связаны с различиями последовательностей экспрессиро- 41 031876 ванного VAR2CSA, информацию можно было бы использовать для определения остатков, вовлеченных в процесс адгезии. Для того чтобы это проверить, заявители получили ряд перекрывающихся 3D7 фрагментов VAR2CSA, идентичных тем, которые ранее заявители испытывали для FCR3.

Сначала белки подвергали скринингу на предмет специфичного связывания с CSPG с использованием твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) (описан в разделе Способ 3). Белки, которые специфичным образом связывались с CSPG, затем дополнительно очищали с использованием вытеснительной хроматографии с получением чистого мономерного белка и подвергали кинетическому анализу с использованием Quartz Crystal Microbalance (Attana A100) (способы 2 и 4 соответственно). 3D7 фрагменты VAR2CSA показали характеристики связывания, весьма сходные с характеристиками их аналогами в FCR3, по результатам твердофазного иммуноферментного анализа. То же самое верно и в отношении кинетического анализа (табл. 3). Сенсограммы показывают данные по ассоциации и диссоциации, полученные при разных концентрациях белка. Это позволяет определить константу скорости ассоциации (K_on), константу скорости диссоциации (K_off) и константу равновесия (K_D). Вместе с уровнями пиковых ответов указанные параметры дают оценку аффинности связывания с CSPG. He существует очевидной разницы между фрагментами 3D7 и FCR3. Некоторые фрагменты показывают более низкую аффинность, но указанная характеристика сохраняется у аналогичных фрагментов. Этот факт указывает на то, что у белков VAR2CSA 3D7 и FCR3 фолдинг и функция одинаковые.

Таблица 3

Аффинность связывания с CSA полученных белков VAR2CSA.

Аффинность приводится как величина K_D (нМ), определенная в кинетических экспериментах с использованием биосенсора кварцевого кристаллического микробаланса (Attana A100). N/A: белки, KD которых невозможно было определить из-за отсутствия связывания с CSA

	FCR3	3D7
Фрагмент VAR2CSA	Бакуловирус	E. coll	Бакуловирус
FV2	5, 2*		8,2
IDl-DBL4e	8, 6*		9, 4
IDl-DBL3e	0,3*		8,5
DBL2X-DBL4e	2,4*		1,2
DBLl-ID2b	1,5*
DBLl-ID2a	8,0	3,5	29, 5
IDl-ID2a	7, 6	18,3	5, 7
DBLlX-DBL2Xb		14, 6
DBLlX-DBL2Xa	N/A
IDl-DBL2Xb			21,8
IDl-DBL2Xa			N/A

* - белки опубликованы в Dahlback et al., JBC, 2011.

Пример 3. Сайт связывания с CSA ядра лежит в пределах домена DBL2X.

Было высказано предположение о том, что минимальная область связывания с CSA в VAR2CSA лежит в пределах домена DBL2X-ID2b с необходимостью фланкирующих доменов для полного аффинного связывания (Dahlback M., Jorgensen L.M., Nielsen М.А., Clausen T.M., Ditlev S.B., et al., J. Biol. Chem. 286:15908-15917). Заявители подвергли анализу более короткие фрагменты VAR2CSA для дальнейшего составления карты областей, требующихся для связывания с CSA.

Усеченные белки сначала подвергали скринингу на предмет связывания с протеогликаном CSA (CSPG) с использованием ELISA, а затем очищали с получением мономеров для изучения с использованием кварцевого кристаллического микробаланса (способы 3, 2 и 4 соответственно). Минимальной областью связывания является ID1-DBL2Xb (табл. 3). Указанная область показала аффинность связывания 21,8 нМ, что сравнимо с аффинностью связывания полноразмерного белка VAR2CSA.

Плацентарные IE являются высокоселективными в отношении низкосульфатированного плацентарного CSPG. Они не показывают адгезии ни к каким другим гликозаминогликанам (GAG), таким как гепарансульфат (HS). Последнее верно и для рекомбинантного полноразмерного белка VAR2CSA. Анализ твердофазного связывания показал, что фрагменты VAR2CSA, содержащие минимальную область связывания с CSA, специфичным образом связываются с CSA. Для подтверждения данного факта минимальные связывающие фрагменты далее изучались на предмет связывания с протеогликаном гепарансульфатом (HSPG) с использованием кварцевого кристаллического микробаланса (способ 4). Ни один из фрагментов не связывался с HSPG.

Пример 4. Антитела, индуцированные против новых минимальных областей связывания, индуцируют мощный антиадгезивный иммунный ответ в отношении паразитов.

Вакцина против РМ на основе VAR2CSA должна быть способна индуцировать сильный защитный иммунный ответ. Для этого наиболее важным аспектом является образование анти-VAR2CSA антител IgG, способных ингибировать плацентарную секвестрацию. Заявители изучили молекулярный механизм,

- 42 031876 лежащий в основе взаимодействия VAR2CSA-CSA, с целью создания оптимальных вакцинных антигенов. Чтобы изучить, показывают ли полученные заявителями рекомбинантные фрагменты VAR2CSA способность индуцировать блокирующий адгезию иммунный ответ, использовали иммунизацию крыс (способ 6).

Сыворотку, специфичную в отношении фрагмента VAR2CSA, изучали на предмет способности ингибировать адгезию IE к CSPG (способ 11). Антитела, образованные против всех CSA-связывающих фрагментов, представляли собой весьма мощные ингибиторы связывания. Фактически, связывание ингибировалось почти на 100% во всех случаях. DBL1X-DBL2Xa и ID1-DBL2Xa не были хорошими ингибиторами, что согласуется с отсутствием связывания с CSA у указанных фрагментов (табл. 3). Данные предполагают, что CSA-связывающие белки имеют должный фолдинг и поддерживают локализацию определенной выше минимальной области связывания.

Пример 5. Эпитопы, ответственные за индукцию антиадгезивных антител, лежат в пределах минимальной области связывания.

Для того чтобы изучить, направлен ли ингибирующий анти-FV2 ответ на минимальную область связывания, заявители аффинно очищали FV2 антитела на четырех ранее описанных фрагментах VAR2CSA (способ 7). Фрагментспецифичные антитела затем изучали на предмет способности ингибировать связывание экспрессирующих VAR2CSA паразитов с CSPG (способ 11). Антитела, очищенные на иммобилизованных ID1-DBL4e, DBL1X-ID2a и ID1-ID2a, полностью ингибировали адгезию паразитов. Кроме того, истощенные образцы FV2 утрачивают значительную часть своей ингибирующей способности. Это указывает на то, что эпитопы, индуцирующие антиадгезивные антитела, присутствуют в пределах указанных фрагментов. Антитела, очищенные на DBL1X-DBL2Xa, демонстрируют уменьшенную ингибирующую способность, что согласуется с отсутствием связывания с CSA у данного фрагмента (табл. 3). Данные предполагают, что эпитопы, ответственные за индукцию ингибирующих антител, расположены в пределах минимальной области связывания (здесь проиллюстрировано на примере ID1ID2a).

Пример 6. Мутирующие предполагаемые сайты связывания с GAG в минимальной области связывания не оказывают влияния на связывание с CSPG.

Изучение природы взаимодействия между VAR2CSA и CSA является важным для разработки поливалентных вакцин против РМ. Для этого главной частью является идентификация специфичного сайта связывания с CSA и изучение лежащих в основе химических взаимодействий. Анализ последовательности минимальной области связывания с CSA выявил два консервативных предполагаемых сайта связывания с GAG. Один из них расположен в области ID1 и имеет классический мотив Кардена-Вейнтрауба ХВВВХХВХ (Cardin A.D. and Weintraub H.J. (1989) Arteriosclerosis 9, 21-32 (458-NKKKECKD-465). Другой, в DBL2X, имеет тот же обратный мотив (625-GKNLKKRY-632). Также была выдвинута гипотеза о том, что диморфический мотив последовательности (DSM), обнаруженный в N-концевой части DBL2X, участвует в связывании с CSA (Sander A.F., Salanti A., Lavstsen Т., Nielsen M.A., Magistrado P., Lusingu J., Ndam N.T. and Arnot D.E. (2009) PLoS One 4, e6667). Для того чтобы определить, имеют ли указанные предполагаемые сайты функцию связывания с CSA, заявители заменили основные аминокислоты в классических сайтах связывания с GAG аланинами и осуществили делецию десяти аминокислот (590KLENVCEDVK-603) в середине представленной на поверхности петли в пределах области DSM. Все мутации осуществляли во фрагменте DBL1X-ID2a.

Замена основных аминокислот в предполагаемых сайтах связывания с GAG ID1 и DBL2X на аланины не оказала влияния на связывание с CSPG. По результатам ELISA не наблюдалось уменьшения связывания с CSPG по сравнению с белком дикого типа (способ 3). Конструкция с четырьмя заменами на аланины, алании зам. K (459, 460, 461, 464) показал значительное связывание с HSPG, которое могло быть вызвано изменение структуры белка в ответ на мутацию. Два мутанта, аланин зам. K (626, 629, 630), R(631) и аланин зам. K (459, 460, 461, 464), показали кинетику связывания с CSPG, сходную с положительным контролем (способ 4). Это ясно по сходным величинам KD и пиковых ответов.

Делеция области DSM не уменьшала связывания с CSPG (способы 3 и 4). Мутант с нокаутом DSM показывает значительное связывание с HSPG по результатам ELISA. Это, вероятно, вызвано ошибочным клонированием, при котором было утрачено 100 аминокислот DBL1X. Важно, что связывание с CSPG не пострадало.

Пример 7. Связывание VAR2CSA с CSPG не зависит от ионных взаимодействий.

Мутация классических мотивов связывания с GAG Кардена-Вейнтрауба не оказывала влияния на связывание с CSPG. Это указывает на то, что механизм связывания VAR2CSA-CSA отличается от обычного способа связывания сульфата в классических моделях связывания с GAG. Существуют примеры связывающихся с GAG белков, демонстрирующие малую зависимость от ионных взаимодействий с сульфатированной структурой GAG. Для того чтобы определить, так ли это, заявители изучили ионную зависимость в соответствии с полиэлектролитной теорией (Record М.Т., Jr., Lohman M.L. and De Haseth P. (1976) J. Mol. Biol. 107, 145-158).

Гликозаминогликаны, как и ДНК, представляют собой полимеры с высоким зарядом, часто называемые полиэлектролитами. Отрицательно заряженные группы подвергаются высокой степени энергии

- 43 031876 отталкивания внутри каждого полимера. Одновалентные катионы, такие как Na⁺, взаимодействуют с отрицательно заряженными группами для минимизации энергии отталкивания. Связывание основных аминокислот с сульфатными группами вытесняет связанные катионы и приводит к высвобождению свободной энергии. Благоприятное высвобождение связанных ионов Na⁺ называется полиэлектролитным эффектом.

Теория гласит, что связывание белка с GAG можно описать следующим образом:

Белок+GAG (m сайтов) θБелок-GAG+m(1-f)Na⁺, где m представляет собой количество ионов Na⁺, высвобожденных в результате связывания с одним белком, a f представляет собой фракцию анионов, не экранированных ионами Na⁺. Согласно теории наблюдающаяся величина K_D связана с ионными и неионными вкладами следующим образом:

^LogKD,на6людающаяся=^LogKD,неионная^+m(1-f)^Log[Na ]?

где Кп_неионная представляет собой константу диссоциации в отсутствии ионных взаимодействий. График ЬодК^_{наблюдающаяся} против Log[Na⁺] является линейным с наклоном m(1-f). Так, если фракция неэкранированных анионов (f) известна, можно определить количество ионных взаимодействий, участвующих в связывании. Для гепарина (1-f) составляет 0,8 (Olson S.T., Halvorson H.R. and Bjork I. (1991) J. Biol. Chem. 266, 6342-6352). Данная величина для CSA не известна, но (1-f) не должна превышать 1. Заявители могут, таким образом, установить максимальное количество вовлеченных ионных взаимодействий. Кроме того, когда |№'|=1М. Log[Na⁺]=0, что означает, что при указанной концентрации Na⁺ LogK_D ,наблюдающаяся’ =LogKD ,неионная^.

Заявители изучили связывание FV2, DBL1X-ID2a и ID1-ID2a с CSPG с использованием анализа связывания в твердом состоянии при различных концентрациях NaCl (150 мМ, 200 мМ, 250 мМ, 300 мМ), осуществляя титрование связывания белка 400-1,65 нМ в ряде разведений 1:2 (способ 5). Наблюдающиеся величины KD определяли как концентрацию белка, дающую половину максимального ответа (B_max). Это осуществляли с использованием нелинейной регрессии (метод наименьших квадратов с наклоном Hill) в Graphpad Prism. Более высокие концентрации соли не включали в анализ, поскольку связывание почти полностью ингибировалось. Это происходило, возможно, вследствие изменения структуры белка. Данное наблюдение подтверждает тот факт, что график LogKD _{на6людающаяся} против Log[Na⁺] был линейным только между 150 и 300 мМ, что предполагает, что при более высоких концентрациях NaCl играют роль другие факторы.

LogKD _{на6людающаяс}я против Log[Na⁺] демонстрирует линейные взаимоотношения. Наклон m(1-f) находится в пределах от 2,7 для ID1-ID2a до 3,4 для полной длины (FV2). Заявителям не известна величина для f, но максимальное количество ионных взаимодействий, вовлеченных в связывание, должно быть в пределах между 2 и 3. Интересно, что величина для полноразмерного белка выше, чем для коротких фрагментов, что указывает на то, что данный белок осуществляет дополнительное ионное взаимодействие с CSPG. Величины K_D при 150 мМ NaCl служат заявителям базисной точкой, поскольку это физиологическая концентрация NaCl. Путем экстраполяции линейного взаимоотношения и нахождения пересечения с у заявители установили, что ^,^^^=5,9 мкМ для FV2, ^^^^=3,4 мкМ для DBL1X-ID2a и K_{D> неионна}я=0,7 мкМ для ID1-ID2a. Сравнивая логарифмические величины указанных параметров и базисной точки (150 мМ NaCl), заявители установили, что 25-35% связывания VAR2CSA может быть отнесено на счет ионных взаимодействий. Это предполагает, что высокую аффинность CSA в отношении VAR2CSA нельзя объяснить только ионными взаимодействиями со структурой сульфатированного GAG. Высокая аффинность может достигаться посредством комплексного сайта связывания, осуществляющего поливалентное взаимодействие с углеводным скелетом CSA.

Пример 8. Минимальная область связывания с CSA в VAR2CSA специфичным образом связывается с обширным рядом злокачественных клеток.

Множество различных злокачественных клеток связаны с высокой экспрессией протеогликана CSPG4. Указанную молекулу исходно описывали как маркер меланомы, однако недавно ее обнаружили при многих формах рака, включая злокачественные стволовые клетки. Цепь (цепи) CS, присоединенные к CSPG4, известна как первичный CSA. Один из самых маленьких фрагментов VAR2CSA (ID1-ID2a) изучали на предмет связывания с обширным рядом различных злокачественных клеточных линий посредством проточной цитометрии (способы 12а и 12b). Белок ID1-DBL2Xa, не связывающийся с CSA, использовали в качестве отрицательного контроля. Рекомбинантный белок VAR2CSA (ID1-ID2a) при 75 нМ прочно связывается со всеми злокачественными клеточными линиями, транскрибирующими CSPG4 (данные микроматрицы), включая кожную меланому (С32, MeWo), рак легкого (А549), рак молочной железы (НСС1395), остеосаркому (U2OS, MNNG/HOS), рабдомиосаркому (RH30) (табл. 4 и 5). Указанный белок также прочно связывается с кожной Т-клеточной лимфомой, которая не экспрессирует CSPG4 (табл. 4). Отрицательный контроль ID1-DBL2Xa не связывался ни с одной из тестированных линий (табл. 4). Кроме того, ID1-ID2a не взаимодействовал с красными кровяными клетками человека, которые использовались в качестве контрольных клеток. Клетки яичника китайского хомячка (СНО) дикого типа и с дефицитом GAG также изучали на предмет взаимодействия с ID1-ID2a. Выраженное взаимодействие ID1-ID2a, наблюдавшееся с клетками СНО дикого типа, полностью устранялось при изучении клеточной линии СНО-745, в которой синтез GAG нарушен. CSA-специфичность взаимодействия также была под- 44 031876 тверждена ингибированием связывания VAR2CSA с клетками путем предварительного смешивания

VAR2CSA с CSA, CSC или HS. CSC и HS не оказывали никакого влияния на связывание, в то время как

CSA эффективно устранял связывание VAR2CSA со злокачественными клетками.

После получения указанных результатов более обширный ряд злокачественных клеток был подвергнут скринингу с использованием проточной цитометрии (табл. 6 и 7) с использованием фрагмента VAR2CSA DBL1-ID2a или ID1-ID2a. Главной целью указанного скрининга была идентификация клеточных линий, подходящих для моделирования ксенотрансплантата in vivo.

Таблица 4

Окрашивание злокачественных клеточных линий и клеток отрицательного контроля с использованием минимального домена связывания VAR2CSA (ID 1 -ID2a)

Тип клеток	Контроль	IDl-DBL2Xa	IDl-ID2a
С32	5, 77	6, 94	63, 81
MyLa 2059	5, 61	5, 61	145,35
MyLa 1850	5, 87	5, 6	137,86
Cho WT	3, 09	4,35	34,79
Cho 745	4,24	4,29	4,38
PBMC	1,34	1,36	1, 67
Эритроциты	1,11	1,17	1,07

Клетки инкубировали только со средой (контроль) или с рекомбинантными белками (ID1-DBL2 или ID1-ID2a) при 75 нМ в течение 30 мин с последующей инкубацией с анти-У5-ЕТГС (Invitrogen) при 1:800, клетки трижды промывали перед каждой инкубацией. Показаны средние величины флюоресценции FITC, от минимум 5000 клеток с использованием флоуцитометра FC500 (Becton Dickinson)

Таблица 5

Окрашивание злокачественных клеточных линий с использованием

+ - слабое;

++ - среднее;

+++ - сильное;

++++ - очень сильное.

Клетки инкубировали только со средой (контроль) или с рекомбинантными белками (DBL1-ID2a или ID1-ID2a) при 75 нМ в течение 30 мин с последующей инкубацией с анти-V5-FITC (Invitrogen) при 1:800, клетки трижды промывали перед каждой инкубацией. Показаны средние величины оценки интенсивности флюоресценции FITC, зарегистрированные минимум от 4 изображений полей большой мощности с помощью микроскопа HAL100 Zeiss.

- 45 031876

Таблица 6

Скрининг разных злокачественных клеточных линий человека на предмет связывания с рекомбинантным VAR2CSA (с использованием DBLl-ID2a или ID 1-ID2a)

Тип клеток	Контроль	VAR2CSA 7 5 нМ	VAR2CSA 150 нМ	Комментарии
MeWo	НО	+ + +	+ + + +	Меланома
				(фибробластная морфология, получено из лимфоузла)
А549	НО	+ + +	+ + +	Аденокарцинома легкого (K-RasG12S)
НСС1395	НО			Инвазивный рак протоков молочной железы TNM стадия 1 степень 3, без метастазов в лимфоузлах; Нег2нег., ER-нег., PRнег. (тройной негативный)
RH3 0	НО			Рабдомиосаркома (ТРр53 негативная; гибрид PAX7-FOXO1A позитивная; высокая геномная нестабильность (> 50 хромосомных реаранжировок))
MNNG	НО			Остеосаркома от 13летней белой девочки (TPR-Met позитивная)
U2OS	НО			Остеосаркома от 15летней белой девочки (IGF-R1 и IGFR-II позитивная; ТРр53 wt, pRb wt, р16-нег.; высокая анеуплоидность)
Н1792	НО	++	++	Аденокарцинома
				легкого (К— RasG12S:TPp53het)))
MDA-MD-435	НО	+ +		Рак молочной железы меланоцитарного происхождения (ERнег., Нег2-поз., PR-поз.)
MG63	НО	+++	++++	Остеосаркома
ТС32	НО	+ +	++	Саркома Эвинга
CHLA9	НО	++	+ +	Саркома Эвинга
CHLA10	НО	++	+ +	Саркома Эвинга
ТС71	но	++	++	Саркома Эвинга
HOS	но	+++	++++	Остеосаркома
РСЗ	но	+ +	++	Рак предстательной железы
SKNMC	но	++	+++	Саркома Эвинга
MCF-7	но	+	++	Рак молочной железы

НО - нет окрашивания;

+ - слабое;

++ - среднее;

+++ - сильное;

++++ - очень сильное.

Связывание измеряли проточной цитометрией, как описано в способе 12.

- 46 031876

Таблица 7

Скрининг дополнительных злокачественных клеточных линий человека на предмет связывания с рекомбинантным VAR2CSA (с использованием DBLl-ID2a или ID1-ID2a)

Связывание измеряли проточной цитометрией, как описано в способе 12. Показаны средние величины интенсивности флюоресценции при концентрации белка 200 нМ.

Пример 9. Рекомбинантный VAR2CSA связывается со злокачественными клетками с высокой аффинностью.

Аффинность связывания рекомбинантного фрагмента VAR2CSA DBL1-ID2a со злокачественными клеточными линиями, меланомой С32 и двумя клеточными линиями Cho (описанными в примере 8), изучали с использованием биосенсора кварцевого кристаллического микробаланса (Attana Cell200). Серии двукратных разведений (25-400 нМ) белка анализировали на предмет связывания с клеточной поверхностью, с регенерацией связывающей поверхности перед каждой новой инъекцией белка. Аффинность связывания была определена как лежащая в наномолярных пределах (табл. 8), что сходно с аффинностью связывания с чистым рецептором (табл. 3).

- 47 031876

Таблица 8 Установленная аффинность связывания (K_D) рекомбинантного DBL1-ID2a (E.coli) со злокачественными клетками, экспрессирующими CSA (C32 и Cho WT), и отсутствие связывания с CSA-отрицательной клеточной линией (Cho 745) N/A: K_D невозмо^о было определить из-за отсутствия связывания с клетками

Тип клеток	KD (нМ)
Клетки меланомы С32	13
Cho WT	1,4
Cho 745	N/A

Пример 10. Рекомбинантный белок VAR2CSA связывается со злокачественной тканью с высокой специфичностью.

Связывание рекомбинантного VAR2CSA с первичной злокачественной тканью, полученной от пациентов-людей, изучали с использованием иммуногистохимии (IHC). Способ был разработан с использованием ткани плаценты человека в качестве положительного контроля и ткани миндалины и печени в качестве отрицательного контроля. Протокол окрашивания был оптимизирован на платформе Ventana Discovery XT без восстановления эпитопов. Залитую парафином ткань, помещенную на предметные стекла, инкубировали с 0,1-500 нМ V5-VAR2CSA (ID1-ID2a) или V5-контрольного белка (DBL4) в течение 1 ч при комнатной температуре, промывали в течение 8 мин. Связанные анти-У5 затем выявляли с использованием антимышиных HRP UltraMap. V5-VAR2CSA окрашивает плаценту человека при концентрациях 0,5 нМ, при отсутствии окрашивания миндалины или нормальной печени. Окрашивание можно полностью блокировать добавлением 200 мкг/мкл CSA в реакционный буфер. V5-контрольный белок не окрашивает плаценту человека ни в каких изученных концентрациях. Мультиорганная тканевая микроматрица (ТМА), представляющая 24 нормальных органа, показала слабое окрашивание или отсутствие окрашивания при использовании 1 нМ V5-VAR2CSA, в то время как злокачественные образцы молочной железы, толстой кишки, прямой кишки, предстательной железы, почки, печени, мочевого пузыря, поджелудочной железы, плоских клеток, легкого, желчного пузыря, желудка, семенника, яичника, матки, надпочечника, щитовидной железы и тимуса, гематопоэтической системы и соединительной ткани (саркомы) окрашивались положительно с интенсивностью, равной или более высокой, чем ткань плаценты человека, служившая положительным контролем (табл.9).

Таблица 9 Обнаружение CSA на образцах первичных опухолей человека с использованием рекомбинантного VAR2CSA. Таблица показывает количество положительных/общее количество случаев, окрашенных, как описано в примере 10, для основных групп рака. Положительное окрашивание определяют как интенсивность, равную или превышающую интенсивность, которая наблюдалась в ткани плаценты

Рак предстательной железы	71/76
Рак молочной железы	64/75
Меланома	5/6
Саркома	23/25
Плоскоклеточный рак пищевода	2/3
Аденокарцинома желудка	3/3
Рак толстой кишки	2/3
Аденокарцинома прямой кишки	3/3
Рак печени	3/3
Рак почки	3/3
Рак легкого	2/3
Рак шейки матки	3/3
Рак яичника	2/3
Диффузная В-клеточная лимфома	1/3
Астроцитома	3/3
Рак поджелудочной железы	3/3

Пример 11. Ингибирование параметров трансформации in vitro рекомбинантными белками VAR2CSA.

Ингибирующее действие неприсоединенного VAR2CSA на морфологию опухолевых клеток in vitro изучали тремя различными способами:

i) Анализ колониеобразования на мягком агаре определяет, может ли VAR2CSA ингибировать способность злокачественных клеток пролиферировать в трехмерном матриксе.

ii) Анализ миграции определяет, может ли VAR2CSA ингибировать способность злокачественных

- 48 031876 клеток мигрировать вертикально в направлении хемоаттрактанта в камере Бойдена.

iii) Анализ инвазии определяет, может ли VAR2CSA ингибировать способность злокачественных клеток проникать через искусственную базальную мембрану.

Анализ колониеобразования на мягком агаре: Клетки обрабатывают 25-100 нМ VAR2CSA в течение 24 ч перед засеванием на матрикс из мягкого агара и оставляют на 10-12 дней при 37°C. Изображения фиксируют с помощью фазово-контрастного микроскопа и дают ему количественную оценку с использованием компьютерной программы ImageJ. Рекомбинантный VAR2CSA ингибирует образование на мягком агаре колоний клетками остеосаркомы MG63 и рабдомиосаркомы RH30 в концентрациях от 75 до 150 нМ.

Анализ инвазии клеток с использованием покрытия из экстракта базальной мембраны (ВМЕ).

Для моделирования инвазивного процесса заявители использовали 24-луночную платформу для клеточной инвазии с покрытием ВМЕ CultreCoat® (Cedarlane) в соответствии с инструкциями производителя и со следующими модификациями. Клетки лишали сыворотки на один день до проведения анализов в присутствии или отсутствие 25-100 нМ VAR2CSA. На второй день клетки, поддерживавшиеся в описанных выше условиях, высевали на верхние камеры (1х10⁵ клеток на лунку) планшетов, среды с добавлением 10% ФБС, в то время как нижние камеры содержали или среды, лишенные сыворотки, в качестве отрицательного контроля, или среды с добавлением 10% ФБС. Клетки затем инкубировали в течение еще 18 ч. Клетки, проникшие через ВМЕ, собирали с использованием буфера диссоциации, содержавшего кальцеин AM, который в живых клетках превращается в соединение с сильной флюоресценцией. Испускаемую флюоресценцию измеряли с использованием планшет-ридера флюоресценции, анализировали с использованием компьютерной программы FLUOStar, совмещали со стандартной кривой и конвертировали в соответствующее количество клеток.

Анализ миграции.

Анализ миграции представляет собой практически ту же методику, что и анализ инвазии клеток с использованием покрытия из экстракта базальной мембраны (ВМЕ), но без ВМЕ.

Миграцию и инвазивную способность клеток остеосаркомы MG63, рабдомиосаркомы RH30 и тройного негативного рака молочной железы MDA-MB-2 31 ингибировал рекомбинантный VAR2CSA в концентрациях 75-150 нМ.

Пример 12. Анализ внутриклеточных сигнальных явлений, контролирующих параметры трансформации злокачественных клеток, регулируемых CSA-содержащими протеогликанами.

CSPG4 облегчает пролиферацию, миграцию и инвазию посредством Ras-, Rac1- и PI3киназазависимого механизма. На основе результатов, полученных в примере 10, заявители будут изучать внутриклеточные сигнальные явления, ведущие к потенциальному VAR2CSA-опосредуемому ингибированию пролиферации, миграции и инвазии. Это сделано с использованием новейших методов биохимии и молекулярной биологии, включая, без ограничения, анализы активности Rac1, иммуноблоттинг компонентов пути и внутриклеточные измерения генерации активных форм кислорода (ROS). Указанная линейка экспериментов прояснит сигнальные пути, на которые влияет связывание VAR2CSA с CSAсодержащими протеогликанами.

Анализ активности Rac1.

Анализы активности Rac1 осуществляют на подходящих линиях злокачественных клеток человека, необработанных или обработанных рекомбинантным VAR2CSA, согласно протоколам производителей (Thermo Scientific).

Анализы активных форм кислорода (ROS).

Исходные уровни ROS измеряют посредством CM-H2DCFDA (Invitrogen) в соответствии с инструкциями производителя. Уровни супероксида будут измеряться с использованием дигидроэтидия (DHE). В присутствии супероксид-аниона O2^- дигидроэтидий быстро окисляется до оксиэтидия, который связывается с ДНК и испускает свет в диапазонах 570-580 нм, когда возбуждается при 488 нм. Для клеточной культуры после соответствующих обработок клетки промывают в сбалансированном солевом растворе Хенкса (HBSS), инкубируют в течение 30-60 мин в HBSS, содержащем 10 мкМ DHE, промывают в HBSS и непосредственно анализируют на предмет флюоресценции оксиэтидия с использованием эпифлюоресцентного микроскопа HAL100 (Zeiss). Для получения срезов опухолей мгновенно замороженные опухоли нарезают на 20 мкм секции с использованием криостата, промывают и обрабатывают DHE, как описано для клеточных линий, помещают на покровные стекла и анализируют, как описано для клеточных линий. Эмиссию оксиэтидия анализируют и подвергают количественной оценке с использованием компьютерной программы ImageJ. Для всех образцов опухолей осуществляли окрашивание гематоксилин-эозином (Н&Е) рядами для верификации целостности и патологии тканей с использованием стандартных методик. Предварительные данные показывают, что рекомбинантный VAR2CSA ингибирует генерацию ROS в клетках MG63 и U2OS.

Иммунодетекция.

Для иммуноблоттинга белки, разделенные с использованием SDS-PAGE и перенесенные на мембрану из нитроцеллюлозы, обнаруживали с использованием соответствующих первичных и подходящих

- 49 031876 вторичных антител, реагентов для вестерн-блоттинга ECL (Thermo Scientific) и пленки (Kodak и Covance (НА). Для микроскопии клетки фиксируют в 4%-ном формальдегиде, инкубируют с соответствующими вторичными FITC-конъюгированными антителами и анализируют под микроскопом, как описано в примере 9. Злокачественные клеточные линии человека (MDA-MB-231, MG63, U2OS, ТС32, ТС71 и RH30) были лишены сыворотки на 24 ч с рекомбинантным VAR2CSA (ID1-ID2a) или контрольным белком (DBL4) и лизатами, полученными через 0, 1, 2, 3, 4, 5, 5 и 12 ч после повторного добавления сыворотки к клеткам. При использовании указанного подхода 100 нМ VAR2CSA эффективно ингибировал фосфорилирование протоонкогенной тирозиновой протеинкиназы Src на Т416, фосфорилирование киназы фокальной адгезии (FAK) на Т397, 1- и 2-фосфорилирование внеклеточной сигнал-регулируемой киназы (ERK) на Thr202/Tyr204 для ERK1 человека и на Thrl85/Tyrl87 для ERK2 человека. Это предполагает, что рекомбинантный VAR2CSA ингибирует канонический сигналинг ERK в злокачественных клетках.

Пример 13. Несмещенный анализ событий внутриклеточного сигналинга, модифицированных рекомбинантным VAR2CSA.

Обширное влияние VAR2CSA на события внутриклеточного сигналинга можно анализировать с использованием способа микроматрицы экспрессии. Клетки остеосаркомы MG63 были лишены сыворотки на 24 ч без обработки с VAR2CSA или с контролем (DBL4), и РНК собирали через 1 ч после добавления сыворотки. Общую РНК подвергали качественной оценке (RIN<8), использовали в качестве матрицы для зондовой конструкции Affymetrix® и гибридизировали с системой чипов Affymetrix U133Aplus2.0®. Указанное считывание показаний обеспечивает моментальное изображение активированных или неактивированных сигнальных путей через 1 ч после повторного добавления сыворотки. Предварительные данные подтвердили ингибирующее действие на сигналинг ERK.

Пример 14. Ингибирование роста злокачественных клеток in vivo рекомбинантными белками VAR2CSA.

На основе результатов анализа in vitro будут отобраны подходящие клеточные линии для in vivo подкожных и метастатических трансплантационных моделей у иммунокомпрометированных мышей. Перед исследованием in vivo ставятся следующие вопросы:

i) Может ли в/в или и/п введенный рекомбинантный VAR2CSA обнаружить и связаться со злокачественными клетками человека in vivo?

ii) Может ли в/в или и/п введение рекомбинантного VAR2CSA ингибировать образование опухолей in vivo?

iii) Может ли в/в или и/п введение рекомбинантного VAR2CSA ингибировать рост уже имеющихся опухолей in vivo?

iv) Может ли в/в или и/п введение рекомбинантного VAR2CSA ингибировать метастатическое распространение злокачественных клеток человека in vivo?

v) Изменяет ли в/в или и/п введение рекомбинантного VAR2CSA события сигналинга, управляемые CSA-содержащими протеогликанами, в злокачественных клетках человека in vivo (посмертную патологию и биохимию)?

Модели in vivo.

Отобранные злокачественные клеточные линии человека, представляющие типы злокачественных новообразований, демонстрирующие сильное связывание с VAR2CSA, инокулируют подкожно иммунокомпрометированным мышам Rag2m или SCID в количестве приблизительно 5х10⁶ клеток на животное. Когда опухоль разовьется, мыши получают первую инъекцию носителя (физиологический раствор) и рекомбинантного VAR2CSA (1 мг/кг). Лечение повторяют один раз в неделю в течение экспериментального периода продолжительностью приблизительно 30 дней. Массу тела животных и объемы опухолей измеряют каждый второй или третий день, и по завершении опухоли удаляют и разделяют на две половины, одну из которых мгновенно замораживают в жидком азоте, а другую половину фиксируют в парафине. Мгновенно замороженные опухоли обрабатывают для детекции супероксида (DHE), как описано в примере 11 (вместе с соответствующим окрашиванием тех же образцов опухолей гематоксилин-эозином [Н&Е]).

Пример 15. Отслеживание микрометастазов in vivo пептидами рекомбинантного VAR2CSA с прикрепленным индикатором.

Рекомбинантный VAR2CSA будет прикрепляться к различным подходящим молекуламиндикаторам при сотрудничестве с зарубежными партнерами или в другом учреждении на контрактной основе. Отслеживаемые молекулы рекомбинантного VAR2CSA анализируют на способность обнаруживать и сообщать о микрометастазах у мышей с ксенотрансплантатами и у трансгенных мышей. In vivo модели получали, как описано в примере 12. Для тестирования VAR2CSA с прикрепленным индикатором in vivo мышей с метастатическим раком обследовали с использованием визуализации in vivo на способность VAR2CSA обнаруживать и связываться с микрометастазами.

Пример 16. Интернализация рекомбинантных белков VAR2CSA.

Рекомбинантный VAR2CSA интернализируется злокачественными клетками. Это было показано сначала конъюгированием фрагмента VAR2CSA (DBL1-ID2a) с флюорофором, а затем изучением захва

- 50 031876 та VAR2CSA как при прижизненной визуализации, так и на фиксированных клетках. Злокачественные клеточные линии (меланому С32 и MDA-MB-231) засевали и выращивали в течение ночи до 60-80% конфлюэнтности. Клетки инкубировали с флюорофор-конъюгированным VAR2CSA в течение 10-15 мин при 4°C для связывания VAR2CSA на поверхности. Клетки затем промывали для удаления несвязанного VAR2CSA, а затем инкубировали при 37°C для того, чтобы инициировать интернализацию, в течение 10 мин, 1, 2, 4 ч и до 22 ч. Флюорофорконъюгированный трансферрин использовали для следующего классического клатринзависимого захвата трансферрина, оказывающегося в лизосомах. Кроме того, в некоторых экспериментах флюорофорконъюгированный декстран использовали для детекции лизосом. Анализ прижизненной визуализации показал, что VAR2CSA начинает достигать лизосом приблизительно через 4 ч, а через 22 ч весь VAR2CSA может локализоваться в лизосомальных компартментах. Однако совместная локализация VAR2CSA и трансферрина наблюдалась редко, и VAR2CSA захватывался гораздо медленнее, чем трансферрин. Тот факт, что рекомбинантный VAR2CSA захватывается злокачественными клетками, позволяет заявителям гибридизировать или конъюгировать VAR2CSA с цитотоксическими соединениями, которые становятся активными внутри злокачественной клетки. В табл. 10 суммированы результаты по указанным злокачественным клеточным линиям, тестированным на интернализацию рекомбинантного VAR2CSA.

Система оценки:

+ - слабая;

++ - средняя;

+++ - сильная;

++++ - очень сильная.

Клетки инкубировали только со средой (контроль) или с рекомбинантными белками (DBL1-ID2a или ID1-ID2a) в концентрации 75 нМ в течение 1ч с последующей инкубацией с анти-V5-FITC (Invitrogen) в разведении 1:800, перед каждой инкубацией клетки трижды промывали. Показаны средние величины оценки интенсивности флюоресценции FITC на плазматической мембране или во внутриклеточных структурах, зарегистрированные минимум от 4 изображений полей большой мощности с помощью микроскопа HAL100 Zeiss.

Пример 17. Слитый белок VARZCSA-токсин убивает злокачественные клетки.

Фрагменты гена VAR2CSA DBL1-ID2a и ID1-ID2a сливали с экзотоксином A. Pseudomonas и дифтерийным токсином в качестве различных конструкций (SEQ ID NO:60-70, 72). Указанные слитые белки VARZCSA-токсин экспрессировались в E.coli. Конструкция белка, названная BPTI-ID1-ID2aFCR3PE38LR (SEQ ID NO:60), которая основана на ID1-ID2a из VAR2CSA и РЕ38, была успешно получена и изучена на предмет связывания со злокачественными клетками (табл. 11), а также на предмет цитотоксичности, как описано в способе 13.

Предварительные данные показывают, что указанный слитый белок VAR2CSA-токсин связывается с экспрессирующими CSA злокачественными клетками и способен вызвать смерть клетки (IC₅₀ для клеточной линии U20S составляет менее 1 нМ).

Таблица 11

Связывание VAR2CSA-PE38 со злокачественными клетками, проанализированное с использованием проточной цитометрии

	DBLl-ID2a	IDl-ID2a-PE38	Контроль
Связывание с клетками	24,7	12,4	2,3
Связывание с обработанными клеткамиа	4,4	2,5	2,5
Ингибирование связывания13	3,2	2,1	-

- 51 031876

Связывание DBL1-ID2a (голого белка) и ID1-ID2a-PE38 в концентрации 200 нМ с клетками Myla2059 (Т-клеточной лимфомы) обнаруживали с помощью анти-PENTA HIS антитела и антимышиного-FITC антитела и анализировали с использованием проточной цитометрии. Связывание приводится как средняя интенсивность флюоресценции (MFI). а) клетки обрабатывали хондроитиназой ABC для удаления цепей CS с клеточной поверхности, b) белок смешивали с растворимым CSA (400 мкг/м) перед добавлением к клеткам, с) контроль равен клеткам, окрашенным только первым и вторым слоями антител.

Пример 18. Изучение противоопухолевого эффекта цитотоксических соединений, прикрепленных к рекомбинантному VAR2CSA.

На основе результатов примера 14, рекомбинантный VAR2CSA попытаются прикрепить к соответствующим цитотоксическим соединениям и испытать его действие in vivo. Прикрепление соответствующих соединений к VAR2CSA будет осуществляться при сотрудничестве с зарубежными партнерами или в другом учреждении на контрактной основе. В частности, заявители изучают, могут ли указанные гибриды VAR2CSA-соединение:

i) доставляться специфичным образом в окружении опухоли in vivo;

ii) концентрироваться и сохранять специфичность в окружении опухоли in vivo;

iii) специфичным образом убивать опухолевые клетки с минимальным повреждением нормальных тканей in vivo.

In vivo модели получали, как описано в примере 12. Мышей лечили цитотоксическими конъюгатами VAR2CSA, а эффект изучали, как описано для неконъюгированного белка в примере 12.

Пример 19. Выделение CSA-экспрессирующих стволовых клеток из гетерогенных клеточных популяций.

Плюрипотентные стволовые клетки, как сообщается, экспрессируют высокие уровни CSPG4. Стволовые клетки также экспрессируют другие содержащие CSA протеогликаны, такие как CD44, с которым может связываться VAR2CSA. Соответственно рекомбинантный VAR2CSA будет конъюгирован с подходящей смолой (гранулами), смешан с гетерогенными, но состоящими из стволовых клеток или содержащими злокачественные стволовые клетки клеточными популяциями, и очищен с использованием обычных протоколов центрифугирования. Выделенные клетки будут изучаться на предмет экспрессии разнообразных маркеров стволовых клеток, включая CD44, CD31, CD4, ОСТ4, SOX2, Nestin и Nanog, с использованием иммуноблоттинга (как в примере 11), микроскопии и FACS (как в примере 9). Характерной чертой злокачественных стволовых клеток является высокая экспрессия альдегиддегидрогеназы 1А (ALDH1 High). Ее можно удобно измерить с использованием набора AldeFluor® (Stem Cell Technologies). Связывание рекомбинантного VAR2CSA с MDA-MB-2 31 выявляет субпопуляцию клеток ALDH1 High, что предполагает, что VAR2CSA может связываться со злокачественными стволовыми клетками человека.

Пример 20. Идентификация и нацеливание CD44-экспрессирующих злокачественных стволовых клеток.

CD44 в настоящее время является наиболее популярным маркером злокачественных стволовых клеток, и именно с CSA-содержащим протеогликаном может связываться рекомбинантный VAR2CSA. С использованием тех же подходов, что и в примерах 12-15, будет изучено, могут ли немодифицированные и модифицированные пептиды VAR2CSA локализовываться, связываться, выделять и потенциально убивать высокорезистентные CD-44-положительные злокачественные стволовые клетки.

Пример 21. Детекция циркулирующих опухолевых клеток.

Заявители будут изучать, можно ли использовать рекомбинантный VAR2CSA в качестве прогностического маркера рецидивов рака. Злокачественные клетки распространяются посредством кровеносной системы после отсоединения от первичной опухоли. Последующим риском циркулирующих опухолевых клеток (СТС) является экстравазация и метастазирование. Современные анализы, используемые для обнаружения СТС, имеют низкую чувствительность и не могут непосредственно коррелироваться с риском появления метастазов. Используя магнитные гранулы с прикрепленным VAR2CSA и проточную цитометрию, заявители будут изучать прогностическую ценность детекции CS-экспрессирующих злокачественных клеток в кровотоке. Указанный способ можно было бы использовать в качестве быстрого и безболезненного обследования пациентов.

Пример 22. Идентификация потенциальных молекул CSPG, на которые был нацелен VAR2CSA.

Рекомбинантный белок VAR2CSA (DBL1-ID2a) с меткой V5 подвергался скринингу на связывание с панелью трансфицированных клеток HEK293, экспрессирующих >3000 мембранных рецепторов человека. Ряд из 25 рецепторов был идентифицирован как потенциальные мишени VAR2CSA (табл. 12). Взаимодействие между VAR2CSA и указанными рецепторами будет дополнительно подтверждено анализом специфичности связывания, через ингибирование CSA и HS, оба в системе HEK293 и в ELISA.

- 52 031876

Таблица 12

Рецепторы, которые были экспериментально идентифицированы в качестве потенциальных мишеней VAR2CSA

Ген ID	Название	UniProt/SwissProt
В CAN	Бревикан	PGCB HUMAN, Q96GW7
BDKRB2	Брадикининовый рецептор В2	BKRB2 HUMAN, P30411
СА9	Угольная ангидраза IX	CAH9 HUMAN, Q16790
CCR10	Хемокиновый (мотив С-С) рецептор 10	CCR10 HUMAN, P46092
CD44	Молекула CD44 (индийская группа крови)	CD44 HUMAN, P16070
CDH8	Кадхерин 8, тип 2	CADH8 HUMAN, P55286
CFB	Фактор комплемента В	CFAB HUMAN, P00751
GABBR2	Рецептор гамма- аминомасляной кислоты В (GABA), 2	GABR2 HUMAN, 075899
GPC3	Глипикан 3	GPC3 HUMAN, P51654
GPC5	Глипикан 5	GPC5 HUMAN, P78333
GPR65	Рецептор, соединенный с Gбелком, 65	PSYR HUMAN, Q8IYL9
GPRC5B	Рецептор, соединенный с G- белком, семейство С, группа 5, член В	GPC5B HUMAN, Q9NZH0
KCNA2	Калиевый потенциалозависимый канал, подсемейство shaker-related, член 2	KCNA2 HUMAN, P16389
PKD2	Поликистозная болезнь почек 2 (аутосомная доминанта)	PKD2 HUMAN, Q13563
PODXL2	Подокаликсин- подобный 2	PDXL2 HUMAN, Q9NZ53
PTPRG	Протеин тирозин фосфатаза, тип рецептора, G	PTPRG HUMAN, P23470
S100A9	S100 кальций- связывающий белок А9	S10A9 HUMAN, P06702
SDC1	Синдекан 1	SDC1 HUMAN, P18827
SDC4	Синдекан 4	SDC4 HUMAN, P31431
STX2	Синтаксин 2	STX2 HUMAN, P32856
STXBP5	Синтаксин- связывающий белок 5 (томозин)	STXB5 HUMAN, Q5T5C0
TGFBR3	Трансформирующий фактор роста, бета рецептор III	TGBR3 HUMAN, Q03167
TMEFF1	Трансмембранный белок с EGF-подобным и двумя фоллистатинподобными доменами 1	TEFF1 HUMAN, Q8IYR6
TMEFF2/TENB2	Трансмембранный белок с EGF-подобным и двумя фоллистатинподобными доменами 2	TEFF2 HUMAN, Q9UIK5
ТМЕМ154	Трансмембранный белок 154	(Нет)

- 53 031876

Ген ID	Название	UniProt/SwissProt
BCAN	Бревикан	PGCB HUMAN, Q96GW7
BDKRB2	Брадикининовый рецептор В2	BKRB2 HUMAN, P30411
CA9 CCR10 CD44 CDH8 CFB GABBR2 GPC3 GPC5 GPR65	Угольная ангидраза IX Хемокиновый (мотив С-С) рецептор 10 Молекула CD44 (индийская группа крови) Кадхерин 8, тип 2 Фактор комплемента В Рецептор гамма- аминомасляной кислоты В (GABA), 2 Глипикан 3 Глипикан 5 Рецептор, соединенный с G- белком, 65	CAH9 HUMAN, Q16790 CCR10 HUMAN, P46092 CD44 HUMAN, P16070 CADH8 HUMAN, P55286 CFAB HUMAN, P00751 GABR2 HUMAN, 075899 GPC3 HUMAN, P51654 GPC5 HUMAN, P78333 PSYR HUMAN, Q8IYL9
GPRC5B	Рецептор, соединенный с G- белком, семейство С, группа 5, член В	GPC5B HUMAN, Q9NZH0
KCNA2	Калиевый потенциалезависимый канал, подсемейство shaker-related, член 2	KCNA2 HUMAN, Pl 6389
PKD2	Поликистозная болезнь почек 2 (аутосомная доминанта)	PKD2 HUMAN, Q13563
P0DXL2	Подокаликсин- подобный 2	PDXL2 HUMAN, Q9NZ53
PTPRG	Протеин тирозин фосфатаза, тип рецептора, G	PTPRG HUMAN, P23470
S100A9	S100 кальций- связывающий белок А9	S10A9 HUMAN, P06702
SDC1	Синдекан 1	SDC1 HUMAN, P18827
SDC4	Синдекан 4	SDC4 HUMAN, P31431
STX2	Синтаксин 2	STX2 HUMAN, P32856
STXBP5	Синтаксин- связывающий белок 5 (томозин)	STXBP5 HUMAN, Q5T5C0
TGFBR3	Трансформирующий фактор роста, рецептор бета III	TGBR3 HUMAN, Q03167
TMEFF1	Трансмембранный белок с EGF-подобным и двумя фоллистатин-	TEFF1 HUMAN, Q8IYR6
	подобными доменами 1
TMEFF2/TENB2	Трансмембранный белок с EGF-подобным и двумя фоллистатинподобными доменами 2	TEFF2 HUMAN, Q9UIK5
TMEM154	Трансмембранный белок 154	(Нет )
THBD	Тромбомодулин	TRBM HUMAN, P07204
CSPG5	Протеогликан хондроитинсульфат 5 (нейрогликан С)	CSPG5 HUMAN, 095196
STXBP5	Синтаксин- связывающий белок 5 (томозин)	STXB5 HUMAN, Q5T5C0

- 54 031876

Обсуждение.

Малярия представляет собой одно из наиболее распространенных инфекционных заболеваний и одну из самых больших глобальных проблем здоровья. Беременные женщины особенно чувствительны к инфекции, несмотря на ранее приобретенный иммунитет. В данном исследовании заявители поставили ключевые вопросы, связанные с молекулярным механизмом, лежащим в основе взаимодействия VAR2CSA-CSA при РМ.

Предыдущая работа предполагала, что минимальной областью связывания с CSA в VAR2CSA является DBL2X-ID2b с потребностью в DBL1X или DBL3X полного аффинного связывания (Dahlback M., Jorgensen L.M., Nielsen M.A., Clausen T.M., Ditlev S.B., Resende M., Pinto V.V., Arnot D.E., Theander T.G., and Salanti A.J. Biol. Chem. 286, 15908-15917). Как продолжение указанной работы заявители осуществили дальнейшие усечения VAR2CSA, фокусируясь на область DBL2X. Заявители показали, что ядерный CSA-связывающий сайт лежит в пределах домена DBL2X, содержащего малые части фланкирующих междоменных областей. Связывание не зависит от области ID2b или от DBL1X или от фланкирующих доменов DBL3X, как предполагалось ранее. Это является очевидным из специфичного CSPG-связывания ID1-ID2a и ID1-DBL2Xb (табл. 3). Минимальной областью связывания является ID1-DBL2Xb, которая связывается с CSPG с характеристиками, сравнимыми с характеристиками полноразмерного VAR2CSA.

Интересно, что указанные новые данные помещают ядерный сайт связывания с CSA в одиночный домен. Связывание DBL2X (и любого другого одиночного домена DBL) с CSA, как было показано ранее, является неспецифичным и имеет слабую аффинность (Resende M., Ditlev S.B., Nielsen M.A., Bodevin S., Bruun S., Pinto V.V., Clausen H., Turner L., Theander T.G., Salanti A. and Dahlback M. (2009) Int. J. Parasitol. 39, 1195-1204). Понятно, что ID1 и части ID2a интердоменов являются существенными для связывания с CSA. DBL1X-DBL2Xa и ID1-DBL2Xa не связываются с CSPG. Две С-концевых границы DBL2X (DBL2Xa и DBL2Xb) отличаются между собой 93 аминокислотами. Поскольку делеция указанных аминокислот устраняет связывание, они должны быть важными для связывания с CSA.

Минимальная область связывания ID1-DBL2Xb гораздо меньше полноразмерного VAR2CSA и имеет молекулярную массу лишь 62 кДа. Маловероятно, что дальнейшие существенные усечения VAR2CSA будут функциональными в смысле связывания с CSA. Данные заявителей повторно определяют DBL2X как более длинный функциональный домен, содержащий части фланкирующих интердоменов ID1 и ID2a.

Вакцина против РМ на основе VAR2CSA должна обладать способностью индуцировать мощный защитный иммунный ответ. В данном вопросе наиболее важным аспектом является генерация антител IgG, способных ингибировать специфичную в отношении плаценты адгезию паразитов. Для изучения иммуногенных характеристик полученных фрагментов заявители использовали их для иммунизации крыс. Сыворотки, полученные против всех фрагментов, содержащих сайт связывания с CSA, ингибировали адгезию паразитов к CSA. Важно, что сыворотки, полученные против ID1-ID2a, демонстрировали почти полное ингибирование. Это предполагает, что минимальные CSA-связывающие фрагменты сохраняют способность индуцировать мощный антиадгезионный иммунный ответ. Данное заключение было дополнительно подтверждено тем фактом, что антитела, выделенные из анти-FV2 сыворотки на ID1ID2a, сохраняли большую часть блокирующей адгезию активности, и что анти-FV2 образец с истощением анти-ID1-ID2a антител утрачивал большую часть своей активности. Это указывает на то, что эпитопы, требующиеся для индукции блокирующих адгезию антител, располагаются в пределах указанной области.

В данном исследовании заявители изучали анти-VAR2CSA сыворотки на предмет гомологичного ингибирования связывания паразитов FCR3 с CSA. Важно, что вакцина является способной ингибировать плацентарную адгезию вне зависимости от происхождения штамма паразита. Главной проблемой при разработке вакцины, таким образом, является высокое межклональное разнообразие среди вариантов паразитов. В то время как полноразмерный VAR2CSA является очень иммуногенным, полученные антитела не являются перекрестно ингибирующими (Avril M., Hathaway M.J., Srivastava A., Dechavanne S., Hommel M., Beeson J.G., Smith J.D. and Gamain, B. PLoS One 6, el6622). Недавнее исследование показало, что ДНК-вакцинация с использованием ID1-DBL2X из FCR3 индуцирует антитела, которые являются перекрестно ингибирующими, ингибируя CSA-адгезию других лабораторных штаммов, а также паразитов, выделенных в полевых условиях (Bordbar В., Tuikue-Ndam N., Bigey P., Doritchamou J., Scherman D. and Deloron P., Vaccine). Это поддерживает использование указанного малого фрагмента в вакцине против РМ.

Cardin и Weintraub предсказали, что сайт связывания с GAG будет принимать одну из двух форм (Cardin A.D. and Weintraub H.J. (1989) Arteriosclerosis 9, 21-32). Это Х-В-В-Х-В-Х и Х-В-В-В-Х-Х-В-Х, где X представляет собой любой гидропатический остаток, а В представляет собой любой основной остаток, с предпочтительным аргинином. Обе указанные схемы описывают сайт связывания для сульфатированного дисахарида. В то время как может наблюдаться множество взаимодействий, ионное взаимодействие между отрицательно заряженными сульфатами и основными аминокислотами, как представляется, является наиболее важным. Заявители подвергли мутации два указанных сайта в пределах минимальной области связывания; 625-GKNLKKRY-632 в DBL2X и 458-NKKKECKD-465 в ID1. Заявители

- 55 031876 также осуществили делецию большой области в пределах мотива диморфной последовательности (DSM), расположенного в N-концевой части DBL2X, поскольку предполагалось, что она имеет свою функцию в связывании. Делеция области DSM не оказало влияния на связывание с CSA. Также не оказали никакого влияния замены в предполагаемых GAG-связывающих сайтах. Это является очевидным показателем того, что указанные сайты имеют малую функцию в связывании с CSA или не имеют ее.

Было показано, что минимальным требованием связывания для рецептора CSA человека является додекасахарид с 2-4 С4 сульфатированными GalNAc моносахаридами (Alkhalil A., Achur R.N., Valiyaveettil M., Ockenhouse C.F. and Gowda D. С. (2000) J. Biol. Chem. 275, 40357-40364). Достойно внимания, что паразиты, экспрессирующие VAR2CSA in vivo, являются очень специфичными в отношении CSA, несущего только 2-8% С4 сульфатированных дисахаридных единиц. Для того чтобы установить, зависит ли образование комплекса VAR2CSA-CSA от ионных взаимодействий, заявители изучили связывание при различных концентрациях соли. Связывание ID1-ID2a, DBL1X-ID2a и FV2 при концентрациях NaCl 150-300 нМ показало линейные отношения при построении графика зависимости Log (K_D>на_{блюдающаяся}) от Log[Na+]. Заявители установили, что связывание зависит от максимум 2-3 ионных взаимодействий. Интересно, что величина для полноразмерного белка выше, чем величина для более коротких фрагментов, что указывает на то, что указанный белок осуществляет дополнительное ионное взаимодействие с CSA. В данном исследовании заявители осуществляли скрининг для поиска фрагментов, содержащих CSA-специфичную область связывания высокой аффинности. Возможно, что больше взаимодействий наблюдается в нижележащих областях белка, но что ядерный сайт лежит в пределах DBL2X. Экстраполяция и установление Y отрезка ([Na+]=1M, Log [Na+]=0) показывает нам, что Кднеионная =5,9 мкМ для FV2, ^,^»^<.=3.4 мкМ для DBL1X-ID2a и 14...,,.....,.0.7 мкМ для ID1-ID2a. Это показывает, что только 25-30% связывания VAR2CSA-CSA может быть отнесено на счет ионных взаимодействий. В противоположность другим белкам, связывающимся с GAG, которые показали 80-90% зависимость от ионных взаимодействий в аналогичных исследованиях (Faller В., Mely Y., Gerard D. and Bieth J.G. (1992) Biochemistry 31, 8285-8290; Hileman R.E., Fromm J.R., Weiler J.M. and Linhardt R.J. (1998) Bioessays 20, 156-167).

Данные заявителей предполагают, что взаимодействие VAR2CSA-CSA не соответствует обычным взаимодействиям GAG-белок. Заявители выдвинули гипотезу, которая гласит, что высокая аффинность CSA достигается посредством поливалентного взаимодействия, которое может включать множество сайтов связывания, осуществляющих неионные взаимодействия с углеводородным скелетом CSA. Некоторые из взаимодействий являются ионными, и некоторая степень сульфатирования необходима для связывания с VAR2CSA. Таким образом, вероятным является то, что имеет место взаимодействие между основными аминокислотами и сульфатами, но что оно не является определяющим фактором аффинности.

В данном исследовании заявители определили малый однодоменный фрагмент VAR2CSA, который может продуцироваться эукариотическими клетками как функциональный CSA-связывающий белок, и обладает способностью индуцировать антитела с выраженным свойством блокировать адгезию. Указанный фрагмент потенциально является мощным кандидатом для вакцины против РМ.

Данные идентифицируют малую рекомбинантную часть VAR2CSA, которая специфичным образом связывается с CSA, опосредуя, таким образом, плацентарное связывание инфицированных эритроцитов. Заявители показывают, что указанный фрагмент VAR2CSA также специфичным образом связывается со злокачественными клетками, хотя взаимодействие с CSA, презентированного на CSPG4 или других скелетах белка, которые были идентифицированы в данном исследовании. Кроме того, заявители обнаружили, что связывание полипептидов VAR2CSA, основанное на указанном малом фрагменте, со злокачественными клетками ингибирует миграцию и инвазию клеток. Указанные полипептиды VAR2CSA также ингибируют канонический сигналинг ERK, и заявители установили, что полипептиды VAR2CSA, которые были слиты с токсином, эффективно убивают злокачественные клетки.

Способы.

Способ 1. Клонирование и экспрессия белков в клетках насекомых.

Фрагменты последовательности VAR2CSA были амплифицированы из кодоноптимизированного FCR3 (инвентарный номер в GeneBank GU249598) или 3D7 (инвентарный номер в GeneBank JQ247428) генов VAR2CSA с использованием специфических праймеров (табл. 2). Простые фрагменты амплифицировали одностадийной ПЦР. Конструкции с замеными аминокислот осуществляли двухстадийной ПЦР. Первая ПЦР амплифицировала два фрагмента из кодоноптимизированной матрицы FCR3, содержащей перекрывающиеся комплементарные концы. Вторая ПЦР амплифицировала полную конструкцию с использованием двух перекрывающихся фрагментов в качестве матрицы с праймерами, специфическими в отношении внешних границ. Все фрагменты секвенировали с целью верификации. Фрагменты клонировали в бакуловирусный вектор pAcGP67-A (BD Biosciences), модифицировали таким образом, чтобы они содержали V5 и метку His на С-конце. Белки экспрессировали инфицированные бакуловирусом клетки насекомых в качестве растворимого белка, секретируемого в надосадок клеточной культуры. Кратко, линеаризованную бакуловирусную ДНК Вакракб (BD Biosciences) сотрансфицировали с использованием плазмид pAcGP67-A в клетки насекомых Sf9 для генерации рекомбинантных вирусных частиц. 10 мл

- 56 031876 продукта второй амплификации использовали для инфицирования клеток High-Five в 400 мл не содержащей сыворотки среды (10486, GIBCO) с плотностью 1х10⁶ клеток на мл. Секретированный рекомбинантный белок собирали из надосадка через 3 дня после первоначального инфицирования. Надосадок фильтровали (0,2 мкм), подвергали диализу и концентрировали перед выделением белка.

Способ 2. Выделение белка и SDS-PAGE.

Отфильтрованный надосадок, содержащий секретированный рекомбинантный белок, подвергали диализу с использованием поперечного потока АСТА (GE Healthcare). Диализ осуществляли в 10 мМ NaH₂PO₄ (pH 7,4, Sigma-Aldrich) и 500 мМ NaCl. Полученный раствор фильтровали (0,2 мкм), и добавляли имидиазол до конечной концентрации 15 мМ. Белок затем очищали на 1-мл колонке HisSelect (H8286, Sigma-Aldrich). Связанный белок элюировали с использованием 10 мМ NaH₂PO₄ (pH 7,4), 500 мМ NaCl и 500 мМ имидиазола. Белки, необходимые для измерений кварцевого кристаллического микробаланса и SAXS, подвергали дальнейшей очистке для получения мономеров путем вытеснительной хроматографии с использованием колонки HiLoad 16/60 Superdex 200 (GE Healthcare) в 20 мМ Tris (pH 8) и 200 мМ NaCl. Чистоту и структурную целостность белка проверяли с помощью SDS-PAGE.

Способ 3. ELISA.

Микротитрационные планшеты Falcon (351172, BD Biosciences) инкубировали при концентрации 3 мкг/мл для CSPG (бычий) (D8428, Sigma) или HSPG (H4777, Sigma) и 100 мкг/мл для CSA (C9819, Sigma), CSC (400675, Seikagaku) и CSB (C3788, Sigma) в течение ночи при 4°C. Планшеты затем блокировали связывающим буфером ТСМ (20 мМ Tris, 150 мМ NaCl, 2 мМ CaCl₂, 0,05% Tween-20, 1% BSA, pH 7,4 при 25°C) в течение 2 ч при 37°C на шейкере. Получали серии двукратных разведений (1,56-100 мМ) белка в связывающем буфере ТСМ и добавляли в планшеты, которые инкубировали в течение 1 ч при 37°C на шейкере. Все измерения повторяли трижды. Планшеты промывали три раза в связывающем буфере ТСМ (20 мМ Tris, 150 мМ NaCl, 2 мМ CaCl₂, 0,05% Tween-20, pH 7,4 при 25°C). Планшеты затем инкубировали с анти-V5-HRP антителом 1:3000 (R96125, Invitrogen) в связывающем буфере ТСМ в течение 1 ч при 37°C на шейкере. Планшеты промывали три раза в связывающем буфере ТСМ. В конце планшеты проявляли о-фенилендиаминовым субстратом (DAKO) в течение 15 мин. Реакцию гасили 2,5 М H₂SO₄. Поглощение измеряли на 490 нм.

Способ 4. Кварцевый кристаллический микробаланс (Attana А100).

Эксперименты осуществляли на Attana A100 (Attana AB) с использованием золотого покрытия 10 МГц, АТ-среза кварцевого кристалла, полистироловых чипов (3611-3101 Attana AB). Все буферы и реагенты фильтровали до 0,2 мкм. Лигандом служил CSPG (бычий) (D8428, Sigma) или HSPG (H4777, Sigma), нанесенный в концентрации 100 мкм/мл. Покрытие было получено в стационарном состоянии добавлением раствора лиганда и инкубацией в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем планшет блокировали с использованием PBS, содержащего 0,1% BSA без Ig (BSA-50, Rockland), в течение 30 мин при комнатной температуре. Attana А100 промывали 1% SDS перед каждым экспериментом с использованием встроенной производителем программы ежедневного промывания. После промывания подвижный буфер был подключен к PBS со скоростью потока 25 мкл/мин при 25°C, и машину оставляли стабилизироваться на максимальном изменении частоты 0,5 Гц/мин. Стабилизированный PBS инъецировали множество раз, чтобы показать, что процесс инъекции минимально влияет на исходный уровень. Перед инъекцией образца в качестве контроля инъецировали PBS. Аналит инъецировали сериями разведений 1:3 (0,25-60 мкг/мл), начиная с самой низкой концентрации. Время ассоциации было установлено 84 с, а время диссоциации - 5 мин. В силу высокой аффинности связывания было невозможно регенерировать поверхность связывания после инъекций. Собранные данные обрабатывали с использованием компьютерной программы Attester Evaluation (Attana AB). Кривые вычерчивали по простой модели 1:1. kon и kof определяли подбором кривой, a KD рассчитывали на основе KD=koff/kon.

Способ 5. Анализ титрования соли.

Ионную зависимость связывания VAR2CSA-CSA изучали в анализе связывания на основе ELISA. Покрытие CSPG наносили в концентрации 3 мкг/мл. Серии 1:2 разведений белка (400-1,56 нМ) добавляли в несколько разных концентраций NaCl (150, 200, 250 и 300 мМ). Все эксперименты повторяли трижды. Величины KD рассчитывали для каждой серии титрований в Graphpad Prism с использованием нелинейной регрессии (метод наименьших квадратов с наклоном hill).

Способ 6. Иммунизация животных и извлечение сыворотки.

Иммунизацию животных осуществляли в соответствии с национальными и Европейскими протоколами. Крысам Wistar подкожно инъецировали 30 мкг рекомбинантного белка в полном адъюванте Фрейнда (F5881, Sigma-Aldrich). Иммунизацию повторяли три раза с 3-недельными интервалами с использованием 15 мкг белка в полном адъюванте Фрейнда (F5881, Sigma-Aldrich). Образцы крови брали спустя неделю после каждого буста, и сыворотку извлекали центрифугированием.

Способ 7. Аффинная очистка IqG.

Пулы сывороток от крыс, иммунизированных FCR3 полноразмерного VAR2CSA (FV2), подвергали аффинной очистке на 1-мл NHS-активированной колонке HP (HiTrap NHS-activated HP, 17-0716-01, GE Healthcare), содержащей иммобилизованные мультидоменные белки FCR3 (DBL1X-DBL2Xa, DBL1X- 57 031876

ID2a, ID1-ID2a или ID1-DBL4e) и полноразмерного FV2. Очистку осуществляли в соответствии с протоколом производителя. Кратко, прикрепление лиганда к колонке осуществляли добавлением в колонку 1 мл 1:1 раствора буфера для иммобилизации (0,2М NaHCO₃, 0,5М NaCl, pH 8,3) и лиганда (концентрация 0,5-10 мг/мл). Колонку запечатывали и инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре с последующей инкубацией при 4°C в течение ночи. Колонку промывали 6 мл буфера А (0,5М этаноламин, 0,5М NaCl, pH 8,3), 6 мл буфера В (0,1М ацетат, 0,5М NaCl, pH 4) и, наконец, еще 6 мл буфера А. После периода инкубации 30 мин при комнатной температуре промывание повторяли в обратном порядке (буфер В, А, В). 8-10 мл PBS инъецировали для регулирования pH перед очисткой сыворотки. Образец пропускали через колонку 3-5 раз. Колонку промывали 10 мл PBS перед элюированием антител с использованием 10 мл элюирующего буфера (0,1М лимонная кислота, pH 2,7).

Способ 8. Культуры паразита P.falciparum.

Паразитов F.falciparum типа FCR3 культивировали с использованием 5%-ного гематокрита (группа крови человека 0 Rh+) в паразитарной среде RPMI-1640 (BE12115F, Lonza) с добавлением 25 мМ NaHCO₃, 0,125 мкг/мл гентамицина сульфата (ВЕ02012Е, Lonza), 0,125 мкг/мл AlbuMAX II (11021029, Invitrogen) и 2%-ной нормальной сыворотки человека. IE повторно сортировали на клетках BeWo (CCL98, АТСС) для поддержания фенотипа с адгезией к CSA. Кроме того, изоляты тестировали на микоплазма-отрицательность и регулярно генотипировали с помощью ПЦР с использованием вложенных праймеров GLURP (белка с высоким содержанием глутамата) и MSP-2 (поверхностного белка мерозоитов 2).

Способ 9. Выделение трофозоитов поздней стадии.

Культуры паразитов обогащали поздними трофозоитами и стадией шизонта в сильном магнитном поле с использованием CS-колонки MACS (130-041-305, Miltenyi Biotec) и магнита Vario-MACS (Miltenyi Biotec). Кратко, суспензию паразитарной культуры наносили на колонку. Колонку затем промывали 2% фетальной бычьей сывороткой (F6178, Sigma-Aldrich) в PBS. Инфицированные эритроциты поздней стадии элюировали из колонки после отделения от магнита, откручивали и ресуспендировали в 2%-ной фетальной бычьей сыворотке в PBS и разбавляли до концентрации 2х10⁶ 1Е/мл.

Способ 10. Проточная цитометрия (FCM).

Связывание антител с нативным VAR2CSA на выделенных эритроцитах, инфицированных трофозоитами поздней стадии, измеряли проточной цитометрией (FCM). 100 мкл выделенных паразитов поздней стадии в концентрации 2х10⁵ IE/мл с 2% FCS были помечены сывороткой (лишенной неспецифичного связывания предварительной инкубацией с неинфицированными эритроцитами) в конечной концентрации 1:10. Клетки трижды промывали в PBS с 2% FCS. Клетки затем дополнительно метили бромидом этидия (15585011, Invitrogen) в конечной концентрации 2 мкг/мл и 1:100 разведением FITC-меченным вторичным антикрысиным-IgG антителом (62-9511, Invitrogen). В качестве отрицательных контролей паразитов поздней стадии также инкубировали с сывороткой от крыс, иммунизированных антигеном, не являющимся VAR2CSA, и только с вторичными антителами. Данные от 5000 положительных по бромиду этидия IE с использованием проточного цитометра FC500 (Beckmann Coulter). В конечном итоге определяли медианную интенсивность флюоресценции с использованием компьютерной программы WinList 5.0 (Verify Software House).

Способ 11. Ингибирование связывания паразитов с CSPG.

Сывороточные антитела анализировали на предмет их способности ингибировать связывание IE с CSPG. Это осуществляли в формате 96-луночных планшетов с использованием роботстандартизированного промывочного метода. На лунки наносили покрытие из 2 мкг/мл CSPG (D8428, Sigma-Aldrich). Всего 2х10⁵ меченных тритием (моногидрохлорид гипоксантина, PerkinElmer, NET177005MC) IE поздней стадии в 100 мкл добавляли в трех повторностях в лунки. Меченые IE затем инкубировали с сывороткой в течение 90 мин при 37°C. Несвязанные IE смывали с использованием пипетирующего робота (Beckmann Coulter). Пропорцию IE, осуществивших адгезию, определяли жидкостным сцинтилляционным подсчетом на Topcount NXT (Perkin Elmer).

Способ 12а. Анализы связывания со злокачественными клетками.

Проточную цитометрию (FCM) использовали для изучения реактивности минимального связывающего полипептида VAR2CSA по отношению к CSPG, экспрессированному на поверхности различных клеточных линий. Клетки культивировали в RPMI с добавлением 10%-ной фетальной бычьей сыворотки (клетки СНО, С32), Hams F12 (BeWo), содержали в 5%-ном диоксиде углерода при 37°C или выделяли из образца крови человека в буфере CPD (красные кровяные клетки). Аликвоты клеток (1х10⁵) последовательно подвергали воздействию минимального связывающего полипептида VAR2CSA (150, 75 или 37 нМ) и a-V5-FITC (1:800) (Invitrogen), разведенных в FACS2 (PBS+2% FCS) в течение 30 мин при +4°C в темноте при умеренном перемешивании. В качестве отрицательных контролей использовали усеченную версию минимального связывающего полипептида и буфер FACS2. Интактные клетки пропускали на основе сигнала переменной связи и сигнала бокового рассеяния. Данные получали с использованием проточного цитометра FC500 (Beckman Coulter) минимум от 5000 клеток. Все образцы, относящиеся к конкретной клеточной линии, обрабатывались и анализировались в одном исследовании.

- 58 031876

Способ 12b. Анализы связывания со злокачественными клетками.

В качестве альтернативы анализу проточной цитометрии, описанному выше, клетки инкубировали с минимальным связывающим полипептидом VAR2CSA и a-V5-FITC (1:500) (Invitrogen), разведенными в HBSS. Полипептид VAR2CSA использовали в тех же концентрациях, как написано выше. После окрашивания a-V5-FITC клетки промывали 3 раза в HBSS, собирали в не содержащий ферментов буфер для открепления клеток (Invitrogen) и анализировали с использованием FACS Calibur (BD Biosciences) на интенсивность сигнала FL-1.

Сокращения: CIDR - междоменная область с высоким содержанием цистеина; CSA - хондроитинсульфат A; CSPG - протеогликан хондроитинсульфат; DBL - домен, подобный Duffy-связыванию; FCM проточная цитометрия; FV2 - полноразмерный эктодомен белка VAR2CSA без N-концевого сегмента; HSPG - протеогликан гепарансульфат; ID - интер-домен; IE - эритроцит, инфицированный F.falciparum; NTC - N-концевой сегмент; РМ - плацентарная малярия; PfEMP1 - белок 1 эритроцитарной мембраны Plasmodium falciparum; PM - плацентарная малярия.

Способ 13. Тест на цитотоксичность in vitro слитых белков VAR2CSA-токсин.

Злокачественные клеточные линии засевали на 96-луночный планшет, 500 клеток на лунку, за один день до эксперимента. В день эксперимента в отдельные лунки добавляли серии 10-кратных разведений (от 10 мкг/мл до 0,01 нг/мл) слитого VAR2CSA-токсин и контрольного белка (VAR2CSA без токсина). Аналогичные серии разведений, которые содержали также 400 мкг/мл CSA, получали для обоих белков и добавляли в отдельные лунки. Клетки с белками инкубировали в течение 72 ч при 37°C. Смерть клеток анализировали с использованием анализа пролиферации клеток МТТ, где считывание данных представляет собой поглощение на 570 нм.

Способ 14. Окрашивание залитых в парафин образцов тканей человека.

Связывание рекомбинантного VAR2CSA с первичной злокачественной тканью, полученной от пациентов-людей, изучали с использованием иммуногистохимии (IHC). Залитую в парафин ткань, помещенную на предметные стекла, не подвергавшуются antigen retrieval, инкубировали с 0,1-500 нМ V5VAR2CSA или V5-контрольного белка (DBL4) в течение 1 ч при комнатной температуре, промывали в течение 8 мин, инкубировали с 1:700 антитело мыши против V5 в течение 30 мин, промывали в течение 5 мин. Связанные анти-У5 впоследствии обнаруживали с использованием антимышиных HRP UltraMap на платформе Ventana Discovery XT.

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ <110> VAR2 Pharmaceuticals ApS <120> ПРИМЕНЕНИЯ КОНЪЮГАТА, СОДЕРЖАЩЕГО ПОЛИПЕПТИД VAR2CSA И

ЭФФЕКТОРНУЮ МОЛЕКУЛУ, ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ДИАГНОСТИКИ

ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ <130> 19034PCT00 <160>127 <170> PatentIn version 3.5 <210>1 <211>640 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 1

Asn Tyr Ile Lys Gly Asp Pro Tyr Phe Ala Glu Tyr Ala Thr Lys Leu

5 10 15

Ser Phe Ile

Leu

Asn Pro Ser Asp Ala

Asn Asn Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

- 59 031876

Ala

Ser

Ile

Val

Ile

Leu

Ser

Lys

145

Lys

Lys

Ile

Lys

Lys

225

Lys

Glu

Leu

Asn His

Asn Asp

Glu

Ala

Cys 40

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser 45

Gly

Ile

Ser

35

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

50

55

60

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

Asp

70

75

80

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

85

90

95

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

100

105

110

Leu Gly 115

Ile

Leu

Gln Glu

Asn Cys 120

Ser

Asp Asn

Lys 125

Arg

Gly

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

Cys

Asp

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

Lys

130

135

140

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

Asp

150

155

160

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

165

170

175

Ser Ser Gly Asn Glu Glu Gly Leu Gln Glu Glu Tyr Ala Asn Thr

180 185 190

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

195

200

205

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

210

215

220

Glu Lys

Phe

Leu

Ala 230

Gly

Cys

Leu

Ile

Val 235

Ser

Phe

His

Glu

Gly 240

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Ser

Gly

Asn

Lys

245

250

255

Asn

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

260

265

270

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

275

280

285

- 60 031876

Glu Leu

Asn Leu

Gln

Asn

Asn Phe Gly 295

Lys

Leu

Phe 300

Gly

Lys

Tyr

Ile

290

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

305

310

315

320

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

325

330

335

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

Asp

340

345

350

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

355

360

365

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Asn

370

375

380

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Thr

Asn

Cys

385

390

395

400

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Asn

Lys

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Thr

405

410

415

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

Cys

420

425

430

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

Ile

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

435

440

445

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

450

455

460

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

465

470

475

480

Thr

Asn

Ala Ala

Ala 485

Ser

Thr

Asp

Glu Asn 490

Lys

Cys

Val

Gln

Ser 495

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

500

505

510

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

515

520

525

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

530 535 540

- 61 031876

Asn Lys 545

Glu

Arg

Asp

Lys 550

Ser

Lys

Ser Gln Ser 555

Ser

Asp

Thr

Leu

Val 560

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

Tyr

Arg

Tyr

Lys

565

570

575

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

580

585

590

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

595

600

605

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

Asn

Tyr

Glu

Leu

Cys

Lys

Tyr

Asn

Gly

610

615

620

Val

Asp

Val

Lys

Pro

Thr

Thr

Val

Arg

Ser

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

625

630

635

640

<210>2 <211>341 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>2

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser 10

Arg

Ser

Arg Lys

Ile 15

Trp

Thr

Trp

Arg

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

20

25

30

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Ser

Pro

Arg

Thr

Gln

Leu

Leu

Tyr

Leu

Gly

35

40

45

Asn

Leu

Arg

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Thr

Asp

Ile

Asn

50

55

60

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

65

70

75

80

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Leu

Glu

Lys

Lys

Lys

Gly

85

90

95

Asp

Asn

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

100

105

110

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

115

120

125

- 62 031876

Lys

Asp 130

Leu

Glu

Leu Asn Leu 135

Gln

Gln

Ile

Phe

Gly 140

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Lys

Asn

Ile

Ser

Thr

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

145

150

155

160

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

165

170

175

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

180

185

190

Cys

Ser

Cys

Ser

Gly

Asp

Ser

Ser

Ser

Gly

Glu

Asn

Gln

Thr

Asn

Ser

195

200

205

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

210

215

220

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

225

230

235

240

Lys

Asp

Val

Ile

Thr

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

245

250

255

Cys

Asn

Ser

Asp

Cys

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Asp

Ala

Tyr

260

265

270

Lys

Thr

Phe

Ile

Glu

Asp

Cys

Lys

Gly

Val

Gly

Gly

Thr

Gly

Thr

Ala

275

280

285

Gly

Ser

Ser

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Tyr

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

290

295

300

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Ser

305

310

315

320

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Val

Ser

Val

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

325

330

335

Lys Cys Val Gln Ser

340 <210> 3 <211>

<212>

<213>

656

Белок

Искусственная

- 63 031876 <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 3

Asp 1

Tyr

Ile

Lys

Gly 5

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala 10

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys 15

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

20

25

30

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Val

Cys

Asn

Pro

Asn

Glu

Ser

Glu

Ile

Ser

35

40

45

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Asp

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

50

55

60

Asn

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

His

65

70

75

80

Val

Lys

Leu

Gly

Ile

Asn

Asn

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Arg

Val

Cys

Val

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Phe

Lys

Asp

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Ser

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Glu

Ala

Cys

Glu

Lys

130

135

140

Asn

Leu

Glu

Lys

Val

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Cys

Asp

145

150

155

160

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Thr

Val

Asn

Lys

Asn

Trp

Ile

Trp

Lys

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

His

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

195

200

205

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

210

215

220

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

225

230

235

240

- 64 031876

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys 245

Arg

Tyr

Pro Gln Asn 250

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn 255

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

260

265

270

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

275

280

285

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Gln

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

290

295

300

Lys

Lys

Asn

Ile

Ser

Thr

Glu

Gln

Asp

Thr

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

305

310

315

320

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

325

330

335

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

Asp

340

345

350

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

355

360

365

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

370

375

380

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Asn

Ser

Cys

385

390

395

400

Asn

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Ser

Lys

Thr

Lys

Leu

Gly

Asp

Thr

Cys

405

410

415

Asn

Ser

Asp

Cys

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Ile

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

420

425

430

Lys

Phe

Ile

Glu

Glu

Cys

Arg

Thr

Ala

Val

Gly

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

435

440

445

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Met

Tyr

Ser

Lys

His

450

455

460

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

465

470

475

480

Ile

Thr

Thr

Gly

Thr

Ile

Ser

Gly

Glu

Ser

Ser

Gly

Ala

Asn

Ser

Gly

- 65 031876

485

490

495

Val

Thr

Thr

Thr 500

Glu

Asn

Lys

Cys

Val 505

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp 510

Ser

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

515

520

525

Ser

Ile

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Asp

Asp

Lys

Ala

Pro

530

535

540

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

545

550

555

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Gln

Ser

Asn

Thr

Ser

Val

565

570

575

Val

Asn

Val

Pro 580

Ser

Pro

Leu

Gly Asn 585

Thr

Pro

His

Gly

Tyr 590

Lys

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

595

600

605

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ile

Ser

Asp

Thr

Ser

Lys

Asn

Pro

610

615

620

Gly

Ser

Gly

Ser

Thr

Asn

Asn

Asp

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

Tyr

Asn

625

630

635

Val

Lys

Glu

Thr

Lys

Leu

Pro

Lys

Lys

Leu

Asn

Ser

Pro

Lys

Leu

645

650

655

Phe

Leu

Trp

Asn

560

Val

Tyr

Arg

Lys

Gly

640

Asp <210> 4 <211> 643 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 4

Asp

Tyr

Ile

Lys

Asp

Asp

Pro

Tyr

Ser

Lys

Glu

Tyr

Thr

Thr

Lys

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Thr

Ser

Ser

Gly

Glu

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Glu

Ile

Leu

Thr

Ser

- 66 031876

Ser

Val 50

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr 55

Ser

Gly Pro

Ser

Ser 60

Asn

Lys

Thr

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Phe

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

Asp

65

70

75

80

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Arg

Val

Cys

Val

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

Lys

130

135

140

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Val

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

Asp

145

150

155

160

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Thr

Val

Asn

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Lys

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

195

200

205

Lys

Leu

Gly

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Thr

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

210

215

220

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

225

230

235

240

Lys

Asn

Leu

Lys

Ile

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Lys

Gly

Asp

Asn

Gly

Lys

245

250

255

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

260

265

270

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

275

280

285

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ala

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Gly

Lys

Tyr

Ile

Lys

- 67 031876

290

295

300

Lys

305

Leu

Met

Ser

Phe

Cys

385

Ser

Gly

Phe

Val

Asp

465

Ser

Ser

Thr

Glu

Asn

Ile

Ala

Ser

Asp 310

Glu

Asn

Thr

Ser Tyr 315

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu 320

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

325

330

335

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Ser

Thr

Met

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

340

345

350

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Thr

Asp

355

360

365

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

370

375

380

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Asn

Ala

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Asn

390

395

400

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Gly

Glu

Arg

Lys

Ile

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

405

410

415

Asp

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

Asn

420

425

430

Ile

Glu

Asp

Cys

Lys

Gly

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

435

440

445

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

450

455

460

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Ser

Cys

Gly

Pro

Ser

470

475

480

Ile

Thr

Asn

Ala

Ser

Val

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

485

490

495

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

500

505

510

Pro

Ser

515

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

520

Val

Leu

Asp

Glu

Asn

525

Asn

Cys

Gly

Asp

530

Asn

Ala

Pro

Trp

Thr

535

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

540

Thr

Thr

Thr

Glu

- 68 031876

Lys 545

Cys

Asn

Lys

Asp

Lys 550

Lys

Lys

Ser Lys

Ser 555

Gln Ser

Cys

Asn

Thr 560

Ala

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Glu

565

570

575

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Thr

Glu

Glu

Thr

Cys

580

585

590

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ile

Ser

Asp

Thr

Ser

Lys

595

600

605

Lys

Gln

Lys

Gly

Ser

Gly

Ser

Thr

Asn

Asn

Asp

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

610

615

620

Tyr

Thr

Gly

Val

Lys

Glu

Thr

Lys

Leu

Pro

Lys

Lys

Leu

Asn

Ser

Pro

625

630

635

640

Lys Leu Asp <210> 5 <211> 640 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 5

Ser Tyr Val Lys Asn Asp Pro Tyr

5

Ser Lys Glu Tyr Val Thr Lys Leu

15

Ser

Phe

Ile

Leu Asn 20

Pro

Ser Asp

Ala 25

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly 30

Glu

Thr

Ala

Asn

His 35

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys 40

Asn

Pro

Asn

Glu

Ser 45

Glu

Ile

Ala

Ser

Val 50

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr 55

Ser

Asp

Arg

Leu

Ser 60

Gln

Lys

Ala

Cys

Ile 65

Thr

His

Ser

Phe

Ile 70

Gly

Ala

Asn

Lys

Lys 75

Ile

Val

Cys

Lys

Asp 80

Val

Lys

Leu

Gly

Val 85

Arg

Glu

Lys

Asp

Lys 90

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys 95

Val

Ile

Glu

Asp

Asp

Ser

Leu

Arg

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Phe

Lys

Asp

- 69 031876

100 105

Leu	Leu Gly 115	Ile	Leu	Gln	Glu	Asn 120	Cys
Ser	Ser 130	Asn	Gly	Ser	Cys	Asn 135	Asn	Lys
Lys 145	Leu	Asp	Glu	Ala	Leu 150	Ala	Ser	Leu
Lys	Cys	Lys	Ser	Gly 165	Thr	Ser	Arg	Ser
Lys	Phe	Pro	Gly 180	Asn	Gly	Glu	Gly	Leu 185
Ile	Gly	Leu 195	Pro	Pro	Arg	Thr	Gln 200	Ser
Lys	Leu 210	Glu	Asn	Val	Cys	Lys 215	Gly	Val
Lys 225	Glu	Lys	Phe	Leu	Ala 230	Gly	Cys	Leu
Lys	Asn	Leu	Lys	Ile 245	Ser	Asn	Lys	Lys
Lys	Leu	Cys	Lys 260	Asp	Leu	Lys	Tyr	Ser 265
Ile	Lys	Gly 275	Thr	Ser	Ile	Trp	Asp 280	Asn
Leu	Asn 290	Leu	Gln	Lys	Ile	Phe 295	Gly	Lys
Lys 305	Asn	Ile	Ala	Ser	Asp 310	Glu	Asn	Thr
Leu	Arg	Glu	Ser	Trp 325	Trp	Asn	Thr	Asn
Met	Lys	His	Gly	Thr	Thr	Cys	Ser	Ser

340 345

	110
Asp	Asn	Lys 125	Ser	Gly	Ser
Gln	Asp 140	Glu	Cys	Gln	Lys
Asn 155	Gly	Tyr	Lys	Cys	Asp 160
Lys	Ile	Trp	Thr	Trp 175	Arg
Lys	Glu	Tyr	Ala 190	Asn	Thr
Tyr	Leu	Gly 205	Asn	Leu	Arg
Asp	Ile 220	Asn	Phe	Asp	Thr
Ala 235	Ala	Phe	His	Glu	Gly 240
Asn	Asp	Asp	Asn	Gly 255	Lys
Ala	Asp	Tyr	Gly 270	Asp	Leu
Tyr	Thr	Lys 285	Asp	Leu	Glu
Phe	Arg 300	Lys	Tyr	Ile	Lys
Tyr 315	Ser	Ser	Leu	Asp	Glu 320
Lys	Tyr	Ile	Trp	Leu 335	Ala
Ser	Gly	Asp	Asn 350	Gly	Asp

- 70 031876

Gly

Asp

Phe

385

Lys

Gly

Asn

Trp

Glu

465

Ser

Asp

Ser

Ala

Lys

545

Val

Ala

Lys

Ser Val 355

Thr Gly

Ser

Gly Ser 360

Ser

Cys

Asp

Asp

Met 365

Ser

Thr

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

370

375

380

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Glu

Asn

390

395

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Gly

Glu

Arg

Ile

Ile

Gly

Gly

Thr

405

410

415

Ser

Asp

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Gly

Glu

Cys

Asp

Ala

Tyr

420

425

430

Phe

Ile

Glu

Glu

Cys

Lys

Arg

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

435

440

445

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

450

455

460

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

470

475

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

485

490

495

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

500

505

510

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

Leu

Asp

Glu

Asn

Ile

Cys

Gly

Asp

Asp

515

520

525

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

530

535

540

Glu

Thr

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Cys

Asn

Thr

Ala

Val

550

555

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Gly

Tyr

Lys

565

570

575

Cys

Glu

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Thr

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

580

585

590

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ile

Ser

Asp

Thr

Ser

Lys

Lys

Pro

595

600

605

Ile

His

Cys

400

Cys

Lys

Pro

Ile

Thr

480

Ile

Ser

Lys

Asn

Val

560

Tyr

Arg

Lys

- 71 031876

Gly Gly Arg Ser Thr Asn Asn Asp

610 615

Tyr Glu Leu Tyr Thr Tyr Asn

620

Val

625

Lys Glu Thr Lys Leu Pro Lys

630

Lys

Ser Ser Ser Ser Lys Leu

635

<210>	6
<211>	358
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	6

Lys 1

Cys

Glu

Lys

Cys 5

Lys

Ser Glu

Gln

Ser 10

Lys

Lys

Asn

Asn

Asn 15

Trp

Ile

Trp

Arg

Lys

Phe

Pro

Gly

Asn

Gly

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

20

25

30

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

His

Ser

Leu

Tyr

35

40

45

Gly

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Lys

Asp

Val

Lys

Asp

50

55

60

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

65

70

75

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

85

90

95

Ala

Asp

Asn

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

100

105

110

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

115

120

125

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

130

135

140

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala

Ser

Asp

Glu

Asn

Thr

Leu

145

150

155

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

165

170

175

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Ser

Thr

180

185

190

Gly

Asp

640

Ile

Glu

Leu

Ile

Ala

Asn

Ala

Phe

Phe

Tyr

160

Lys

Met

- 72 031876

Cys

Asn

Gly

195

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

200

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

205

Gly

Ser

Thr

Thr Cys

Ser Gly

Asp

Asn

Gly 215

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp 220

Asp

Ile

Pro

Thr

210

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

225

230

235

240

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Pro

Val

Ile

Glu

Asn

245

250

255

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Gly

Glu

Arg

Ile

Ile

Gly

Gly

Thr

260

265

270

Cys

Gly

Ser

Asp

Cys

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Gly

Glu

Cys

Asp

Ala

Tyr

275

280

285

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Glu

Cys

Lys

Gly

Gly

Gly

Gly

Gly

Thr

Gly

Thr

290

295

300

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

305

310

315

320

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

325

330

335

Ser

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Thr

Glu

340

345

350

Ser

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

355 <210>7 <211>333 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>7

Lys Cys Asp Lys Cys Lys

Ser Glu Gln Ser Lys

Lys Asn Asn Lys Asn

Trp

Ile

Trp

Lys

Gln

Phe

Pro

Gly

Asn

Gly

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

His

Ser

Leu

Tyr

Leu

- 73 031876

Gly Asn 50

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu 55

Asn

Val

Cys

Lys

Gly 60

Val

Thr

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

65

70

75

80

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Lys

Gly

85

90

95

Asp

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

100

105

110

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

115

120

125

Lys

Asp 130

Leu Glu Leu

Asn

Leu Gln 135

Gln

Ile

Phe

Gly 140

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ser

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

145

150

155

160

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

165

170

175

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

Ser

Gly

180

185

190

Asp

Asn

Gly

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

195

200

205

Met

Pro

Thr

Thr

Asp

Phe

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

210

215

220

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Asn

Ala

Val

225

230

235

240

Ile

Thr

Asn

Cys

Lys 245

Ser Cys

Lys

Glu

Ser Gly Gly 250

Thr

Cys

Asn 255

Ser

Asp

Cys

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

260

265

270

Ile

Glu

Glu

Cys

Arg

Thr

Ala

Ala

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

275

280

285

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Met

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

290 295 300

- 74 031876

Asp Ala Lys Arg Asn Arg Lys Ala

305

310

Gly Thr Lys

315

Asn Cys Gly Thr Ser

320

Ser Thr Thr Asn Ala Ala Glu Asn Lys Cys Val Gln Ser 325 330

<210>	8
<211>	269
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	8

Asp 1

Tyr

Ile

Lys

Asp 5

Asp

Pro

Tyr

Ser

Lys 10

Glu

Tyr

Thr

Thr

Lys 15

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Thr

Ser

Ser

Gly

Glu

Thr

20

25

30

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Glu

Ile

Ala

35

40

45

Ser

Val

Glu

Gln

Ala

Ser

Ile

Ser

Asp

Arg

Ser

Ser

Gln

Lys

Ala

Tyr

50

55

60

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

Tyr

65

70

75

80

Val

Lys

Leu

Gly

Ile

Asn

Asn

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Arg

Val

Cys

Val

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Phe

Lys

Asp

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Phe

Asn

Asp

Ser

Cys

Asn

Asn

Asn

Asn

Glu

Glu

Ala

Cys

Gln

Lys

130

135

140

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

Glu

145

150

155

160

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

180

185

190

- 75 031876

Ile

Gly

Leu 195

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln 200

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly 205

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Lys

Gly

Val

Thr

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

210

215

220

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

225

230

235

240

Lys

Asn

Leu

Lys

Pro

Ser

His

Gln

Asn

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Asn

Ser

245

250

255

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

260

265

<210>9 <211>333 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>9

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser 10

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys 15

Trp

Thr

Trp

Arg

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

20

25

30

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

His

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

35

40

45

Asn

Leu

Arg

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Thr

Asp

Ile

Asn

50

55

60

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

65

70

75

80

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Asp

85

90

95

Asp

Asn

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

100

105

110

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

115

120

125

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

130

135

140

- 76 031876

Lys 145

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn 150

Ile

Ser Thr

Glu

Gln 155

His

Thr

Ser

Tyr

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

165

170

175

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

180

185

190

Ser

Cys

Ser

Gly

Asp

Ser

Ser

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

195

200

205

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

210

215

220

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Asn

Ala

Val

Ile

Asn

Ser

Cys

Asn

Ser

225

230

235

Lys

Asn

Thr

Ser

Gly

Glu

Arg

Lys

Leu

Gly

Gly

Thr

Cys

Gly

Ser

245

250

255

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Asp

Ala

Tyr

Lys

Glu

Phe

260

265

270

Asp

Gly

Thr

Gly

Ser

Gly

Gly

Gly

Thr

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

275

280

285

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

290

295

300

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Ser

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

305

310

315

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Glu

Ser

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

325

330

Ser

160

Tyr

Cys

Ile

Lys

Cys

240

Glu

Ile

Trp

Glu

Ser

320

<210>	10
<211>	650
<212>	Белок
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная конструкция
<400>	10

Ser Tyr Val Lys Asn Asn Pro Tyr Ser Ala Glu Tyr Val Thr Lys

5 10 15

Leu

- 77 031876

Ser

Ser

Ser

Ile

Val

Ile

Leu

Ser

Lys

145

Asp

Arg

Thr

Arg

Thr

225

Gly

Lys

Phe

Ile

Leu 20

Asn

Ser

Ser

Asp Ala 25

Asn

Thr

Ser

Ser

Glu 30

Thr

Lys

Tyr

Tyr

Asp

Glu

Val

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Glu

Ile

35

40

45

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

50

55

60

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

70

75

Lys

Leu

Gly

Ile

Asn

Asn

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Arg

Val

Cys

85

90

95

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

100

105

110

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Lys

Asn

Gln

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

130

135

140

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

150

155

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

195

200

205

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Lys

Gly

Val

Thr

Asp

Ile

Asn

Phe

210

215

220

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

His

230

235

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Lys

Lys

Leu

245

250

255

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

260

265

270

Pro

Ser

Cys

Asp

Val

Asp

Gly

Gln

Cys

160

Trp

Asn

Leu

Asp

Glu

240

Cys

Gly

- 78 031876

Thr

Ser

Ile 275

Trp

Asp

Asn

Glu Tyr Thr Lys 280

Asp

Leu

Glu 285

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ala

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

290

295

300

Ser

Thr

Glu

Gln

His

Thr

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

305

310

315

320

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

325

330

335

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

340

345

350

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

355

360

365

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

370

375

380

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Asn

Ala

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys

385

390

395

400

Glu

Cys

Gly

Asp

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Glu

Lys

405

410

415

Lys

Cys

Lys

Ile

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Thr

Phe

Ile

Glu

Glu

Cys

420

425

430

Val

Thr

Ala

Val

Gly

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

435

440

445

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

450

455

460

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Ile

Thr

Thr

Gly

Thr

Ile

465

470

475

480

Ser

Gly

Glu

Ser

Ser

Gly

Ala

Asn

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

Thr

Glu

Asn

485

490

495

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

500

505

510

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

Leu

Asp

Asp

- 79 031876

515

520

525

Asn

Ile 530

Cys

Gly Ala Asp Asn 535

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr 540

Tyr

Thr

Thr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Lys

Asn

Cys

Asp

Ile

Lys

Lys

Lys

Thr

545

550

555

Lys

Ser

Gln

Pro

Ile

Asn

Thr

Ser

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

565

570

575

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Gly

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

580

585

590

Pro

Thr Thr 595

Glu

Glu

Ser Cys

Asp 600

Asp Arg

Lys

Glu

Tyr 605

Met

Asn

Trp

Ile

Ile

Asp

Thr

Ser

Lys

Lys

Gln

Lys

Gly

Ser

Gly

Ser

Thr

610

615

620

Asn

Asp

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

Tyr

Asn

Gly

Val

Lys

Glu

Thr

Lys

625

630

635

Asn

Leu

640

Tyr

Pro

560

Pro

Ile

Gln

Pro

Lys

Lys

Ser

Ser

645

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

650 <210> 11 <211> 643 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 11

Ser 1

Tyr

Val

Lys

Asp Asp 5

Pro

Tyr

Ser

Ala 10

Glu

Tyr

Val

Thr

Lys 15

Ser

Phe

Ile

Leu 20

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala 25

Asn

Thr

Ser

Ser

Glu 30

Thr

Ser

Lys

Tyr 35

Tyr

Asp

Glu

Val

Cys 40

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser 45

Glu

Ile

Ser

Val 50

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr 55

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser 60

Asn

Lys

Thr

Ile 65

Thr

His

Ser

Ser

Ile 70

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys 75

Lys

Val

Cys

Lys

Leu

Pro

Ser

Cys

Asp

- 80 031876

Val

Lys

Leu Gly

Ile Asn 85

Asn Asn

Asp

Lys 90

Val

Leu

Arg

Val

Cys 95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Lys

Asn

Gln

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

130

135

140

Lys

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

145

150

155

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

165

170

175

Arg

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

180

185

190

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

195

200

205

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Lys

Gly

Val

Thr

Asp

Ile

Ile

Tyr

210

215

220

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ser

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

His

225

230

235

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

245

250

255

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

260

265

270

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

Lys

Asp

275

280

285

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

290

295

300

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

305

310

315

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Val

Asp

Gly

Gln

Cys

160

Trp

Asn

Leu

Asp

Glu

240

Gly

Asp

Leu

Ile

Asp

320

Thr

- 81 031876

325

Ala	Met	Lys	His 340	Gly	Ala	Gly	Met	Asn 345
Gly	Ser	Val 355	Thr	Gly	Ser	Gly	Ser 360	Ser
Asp	Leu 370	Ile	Pro	Gln	Tyr	Leu 375	Arg	Phe
Phe 385	Cys	Lys	Gln	Arg	Gln 390	Glu	Lys	Val
Asn	Ser	Cys	Lys	Glu 405	Cys	Gly	Asp	Thr
Glu	Cys	Lys	Thr 420	Lys	Cys	Lys	Gly	Glu 425
Ile	Glu	Glu 435	Cys	Asn	Gly	Thr	Ala 440	Asp
Trp	Ser 450	Lys	Arg	Trp	Asp	Gln 455	Ile	Tyr
Glu 465	Asp	Ala	Lys	Arg	Asn 470	Arg	Lys	Ala
Ser	Ser	Thr	Thr	Asn 485	Ala	Ala	Ala	Ser
Gln	Ser	Asp	Ile 500	Asp	Ser	Phe	Phe	Lys 505
Thr	Thr	Pro 515	Ser	Ser	Tyr	Leu	Ser 520	Asn
Gly	Glu 530	Asp	Lys	Ala	Pro	Trp 535	Thr	Thr
Asn 545	Cys	Asp	Ile	Gln	Lys 550	Lys	Thr	Pro
Leu	Val	Val	Val	Asn	Val	Pro	Ser	Pro

565

	335
Thr	Thr	Cys	Ser 350	Gly	Asp
Asp	Asp	Met 365	Pro	Thr	Ile
Gln	Glu 380	Trp	Val	Glu	His
Asp 395	Val	Ile	Thr	Asn	Cys 400
Asn	Gly	Glu	Cys	Lys 415	Thr
Glu	Lys	Tyr	Lys 430	Asn	Phe
Gly	Thr	Ser 445	Gly	Ser	Ser
Arg	Tyr 460	Ser	Lys	Tyr	Ile
Thr 475	Lys	Asn	Cys	Gly	Thr 480
Thr	Glu	Asn	Lys	Cys 495	Val
Leu	Ile	Asp	Ile 510	Gly	Leu
Leu	Asp	Asp 525	Asn	Ile	Cys
Thr	Thr 540	Tyr	Thr	Thr	Lys
Pro 555	Gln	Ser	Cys	Asp	Thr 560
Gly	Asn	Thr	Pro	His 575	Gly

- 82 031876

Tyr

Lys

Tyr

Val 580

Cys

Glu Cys

Lys

Ile 585

Pro

Thr Thr

Glu

Glu 590

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ile

Ile

Asp

Thr

Ser

Lys

595

600

605

Lys

Gln

Lys

Gly

Ser

Gly

Ser

Thr

Asn

Asn

Asp

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

610

615

620

Tyr

Asn

Gly

Val

Gln

Ile

Lys

Gln

Ala

Ala

Gly

Thr

Leu

Lys

Asn

Ser

625

630

635

640

Lys Leu Asp

<210>	12
<211>	269
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	12

Asn 1

Tyr

Ile

Lys

Gly 5

Asp

Pro

Tyr

Ser

Ala 10

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys 15

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Thr

Glu

Asn

Ala

Ser

Glu

Lys

Ile

20

25

30

Gln

Lys

Asn

Asn

Asp

Glu

Val

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Glu

Ile

Ala

35

40

45

Ser

Val

Glu

Gln

Ala

Pro

Ile

Ser

Asp

Arg

Ser

Ser

Gln

Lys

Ala

Cys

50

55

60

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

His

65

70

75

80

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Ser

Gly

Ser

115

120

125

Ser Ser Asn Gly Ser Cys

Asn Asn Asn Asn Glu

130

135

Glu

140

Ile Cys

Gln Lys

- 83 031876

Lys 145

Leu

Glu Lys

Val

Leu Ala 150

Ser

Leu

Thr Asn 155

Gly

Tyr

Lys

Cys

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Thr

Val

Asn

Lys

Asn

Trp

Ile

Trp

165

170

175

Lys

Tyr

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

195

200

205

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

210

215

220

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

225

230

235

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

Asn

Lys

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Asn

245

250

255

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

260

265

Asp

160

Lys

Thr

Pro

Thr

Gly

240

Ser <210>13 <211>344 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>13

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser Thr 10

Val

Asn

Lys

Lys 15

Ile

Trp

Lys

Lys 20

Tyr

Ser

Gly

Thr

Glu 25

Gly

Gly

Leu

Gln

Glu 30

Glu

Ala

Asn

Thr 35

Ile

Ala

Leu

Pro

Pro 40

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu 45

Tyr

Leu

Asn

Leu 50

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn 55

Val

Cys

Lys

Asp

Val 60

Thr

Asp

Ile

Phe 65

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys 70

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys 75

Leu

Ile

Ala

Ala

His

Glu

Gly

Lys

Asn 85

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr 90

Leu

Glu

Lys

Lys

Lys 95

Trp

Tyr

Gly

Asn

Phe

Gly

- 84 031876

Asp Asn Gly

Lys 100

Lys

Asn

Asp Asp Asn 105

Asn Ser

Lys

Leu

Cys 110

Lys

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

115

120

125

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

130

135

140

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala

145

150

155

Asp

Glu

Asn

Thr

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

165

170

175

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

180

185

190

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Met

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

195

200

205

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

210

215

220

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

225

230

235

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Thr

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys

Glu

245

250

255

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Glu

Lys

Lys

260

265

270

Lys

Gly

Glu

Cys

Asp

Ala

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Glu

Cys

Lys

275

280

285

Lys

Ala

Asp

Glu

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

290

295

300

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

305

310

315

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Ser

325

330

335

Ala

Ser

Gln

Ser

160

Trp

Ala

Ser

Tyr

Gln

240

Cys

Cys

Gly

Asp

Asn

320

Thr

Ala Glu Ser Lys Cys Val Gln Ser

340

- 85 031876 <210>14 <211>334 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>14

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser

Glu

Gln Ser Lys 10

Lys

Asn

Asn

Asn 15

Ile

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Thr

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

20

25

30

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Ala

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

35

40

45

Gly

Asn

Leu

Arg

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

50

55

60

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

65

70

75

80

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Leu

Glu

Lys

Lys

Asn

85

90

95

Gly

Asp

Asn

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

100

105

110

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

115

120

125

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

130

135

140

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

His

Thr

Ser

Tyr

145

150

155

160

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

165

170

175

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

Ser

180

185

190

Gly

Asp

Asn

Gly

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

195

200

205

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

210

215

220

- 86 031876

Glu 225

Gln Arg

Gln

Gly

Lys 230

Val

Asn

Ala Val

Ile Glu Asn 235

Cys

Asn

Ser 240

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Ser

Lys

Thr

Lys

Leu

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

245

250

255

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Gly

Glu

Cys

Asp

Ala

Tyr

Lys

Glu

Phe

260

265

270

Ile

Glu

Lys

Cys

Lys

Gly

Thr

Ala

Ala

Glu

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

275

280

285

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Tyr

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

290

295

300

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

305

310

315

320

Ser

Ser

Thr

Thr

Ser

Thr

Ala

Glu

Ser

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

325

330

<210>15 <211>332 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>15

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser

Glu

Gln Ser Lys 10

Lys

Asn

Asn

Asn 15

Ile

Trp

Ile

Trp

Lys 20

Lys

Ser

Ser

Gly

Thr 25

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln 30

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn 35

Thr

Ile

Ala

Leu

Pro 40

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser 45

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn 50

Leu

Arg

Lys

Leu

Glu 55

Asn

Val

Cys

Glu

Asp 60

Val

Lys

Asp

Ile

Asn 65

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu 70

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly 75

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala 80

Phe

His

Glu

Gly

Lys 85

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg 90

Tyr

Leu

Glu

Lys

Lys 95

Asn

Gly

Asp

Asn

Asn 100

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys 105

Ala

Leu

Lys

Tyr

Ser 110

Phe

Ala

- 87 031876

Asp Tyr Gly Asp Leu Ile Lys Gly Thr Ser Ile Trp Asp Asn Glu 115 120 125

Thr

Lys 130

Asp

Leu Glu

Leu

Asn 135

Leu Gln

Lys

Ile

Phe 140

Gly

Lys

Leu

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

145

150

155

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

165

170

175

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

180

185

190

Gly

Asp

Asn

Gly

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

195

200

205

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

210

215

220

Glu

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Lys

Asn

Cys

Asn

225

230

235

Cys

Lys

Glu

Cys

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

245

250

255

Lys

Asn

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Asp

Ala

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

260

265

270

Glu

Cys

Glu

Gly

Lys

Ala

Ala

Glu

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

Trp

275

280

285

Lys

Arg

290

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

295

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

300

Tyr

Ile

Glu

Ala Lys Arg Asn Arg Lys Ala Gly Thr Lys Asn Cys Gly Thr Ser 305 310 315

Tyr

Phe

Tyr

160

Lys

Ser

Leu

Cys

Ser

240

Cys

Glu

Ser

Asp

Ser

320

Thr Thr Ser Thr Ala Glu Asn Lys

Cys Val Gln Ser

325

330

<210>	16
<211>	267
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	16

- 88 031876

Asn

Ser

Gln

Cys

Asn

Val

Ile

Leu

Ser

Lys

145

Glu

Trp

Asn

Leu

Asp

225

Glu

Tyr

Ile

Lys

Asp 5

Asp

Pro

Tyr

Ser

Ala 10

Glu

Tyr

Thr

Thr

Lys 15

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Thr

Glu

Asn

Ala

Ser

Glu

Lys

20

25

30

Lys

Asn

Asn

Asp

Glu

Val

Cys

Asn

Pro

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

35

40

45

Val

Glu

Leu

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

50

55

60

Thr

His

Ser

Phe

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

70

75

Lys

Leu

Gly

Ile

Asn

Lys

Lys

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

85

90

95

Glu

Asp

Asp

Ser

Leu

Arg

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

100

105

110

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Lys

Asn

Gln

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Glu

Ala

Cys

130

135

140

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

150

155

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Asn

Trp

165

170

175

Lys

Lys

Tyr

Ser

Val

Lys

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

180

185

190

Thr

Ile

Ala

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

195

200

205

Pro

Lys

Leu

Gly

Asn

Val

Cys

Lys

Gly

Val

Thr

Asp

Ile

Asn

210

215

220

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

230

235

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Leu

Gln

Asn

Lys

Lys

Lys

245

250

255

Leu Ile Ala

Cys

Asp

Val

Asp

Gly

Gln Cys

160

Ile Ala Asn

Phe His

240

Leu

- 89 031876

Cys Lys Ala Leu Lys Tyr Ser Phe Ala Asp Tyr

260 265

<210>	17
<211>	263
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	17

Asp 1

Tyr

Ile

Lys

Gly 5

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala 10

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys 15

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Thr

Ser

Ser

Gly

Glu

Thr

20

25

30

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys

Asn

Pro

Asn

Glu

Ser

Glu

Ile

Ala

35

40

45

Ser

Val

Glu

Gln

Ala

Ser

Ile

Ser

Asp

Arg

Ser

Ser

Gln

Lys

Ala

Cys

50

55

60

Asn

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

His

65

70

75

80

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asp

Lys

Asn

Ser

Glu

Glu

Ile

Cys

Gln

Lys

130

135

140

Lys

Leu

Asp

Glu

Ala

Leu

Ala

Ser

Leu

His

Asn

Gly

Tyr

Lys

Asn

Gln

145

150

155

160

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Lys

Asn

Lys

Trp

Ile

Trp

165

170

175

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Lys

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

180

185

190

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

195

200

205

- 90 031876

Pro

Lys 210

Leu

Glu

Asn Val

Cys 215

Glu

Asp Val

Thr

Asp 220

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

225

230

235

240

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

245

250

255

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

260

<210>18 <211>338 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>18

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser Glu

Gln

Ser 10

Lys

Lys

Asn

Asn

Asn 15

Ile

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Lys

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

20

25

30

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

35

40

45

Gly

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Lys

Asp

Val

Thr

Asp

Ile

50

55

60

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

65

70

75

80

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Ile

Ser

Asn

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

85

90

95

Asp

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

100

105

110

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

115

120

125

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Asn

Asn

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

130

135

140

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

His

Thr

Leu

Tyr

Ser

145

150

155

160

- 91 031876

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

165

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

170

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

175

Ile

Trp

Leu

Ala

180

Met

Lys

His

Gly

Thr

185

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

190

Ser

Asp

Asn

Gly

195

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

200

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

205

Cys

Asp

Met

Ser

210

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

215

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

220

Phe

Leu

Gln

Trp

225

Val

Glu

His

Phe

Cys

230

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

235

Lys

Val

Asn

Ala

Ile

Glu

Asn

Cys

Asn

245

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

250

Ser

Ser

Lys

Thr

Lys

255

Gly

Gly

Thr

Cys

260

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

265

Thr

Glu

Cys

Glu

Lys

270

Lys

Lys

Asp

Glu

275

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

280

Glu

Phe

Ile

Glu

Glu

285

Cys

Lys

Gly

Asp

290

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

295

Pro

Trp

Val

Lys

Arg

300

Trp

Asp

Gln

Tyr

305

Met

Arg

Tyr

Ser

Lys

310

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

315

Lys

Arg

Asn

Arg

Ala

Gly

Thr

Lys

Ser

325

Cys

Gly

Thr

Ser

Ala

330

Ala

Glu

Asn

Lys

Cys

335

Tyr

Gly

Asp

Glu

Val

240

Leu

Cys

Arg

Ile

Lys

320

Val

Gln

Ser <210>

<211>

<212>

<213>

341

Белок

Plasmodium falciparum <400>

Lys Cys Asp

Lys

Cys Lys Ser Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Asn

Trp Ile Trp

Lys

Lys Ser Ser Gly

Asp

Glu

Lys

Gly

Leu

Gln

Lys

Ile

Glu

- 92 031876

Tyr Ala

Asn 35

Thr

Ile Ala

Leu

Pro 40

Pro Arg

Thr Gln

Ser 45

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Lys

Asp

Val

Thr

Asp

Ile

50

55

60

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

65

70

75

80

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

His

Gln

Asn

Lys

Asn

Ala

85

90

95

Asp

Asn

Gly

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

100

105

110

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

115

120

125

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Gln

130

135

140

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Arg

Asn

Asn

Thr

Ala

145

150

155

160

Glu

Gln

His

Thr

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

165

170

175

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Thr

180

185

190

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

Ser

Gly

Asp

Asn

Gly

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

195

200

205

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Met

Ser

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

210

215

220

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

225

230

235

240

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Thr

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys

Glu

245

250

255

Cys

Gly

Gly

Thr

Cys

Gly

Ser

Asp

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

260

265

270

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Glu

Cys

Asn

Gly

Thr

Ala

Asp

Gly

Gly

Thr

Ser

- 93 031876

275

280

285

Gly Ser

Ser

Trp

Ser Lys

Arg 295

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr 300

Lys

Arg

Tyr

Ser

290

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

305

310

315

320

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Gly

Ala

Asn

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

Thr

Glu

Asn

325

330

335

Lys Cys Val Gln Ser

340 <210>20 <211>352 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>20

Lys 1

Cys

Glu

Lys

Cys 5

Glu

Ser

Glu Gln

Ser 10

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys 15

Tyr

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Gly

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

20

25

30

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Ala

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

His

Ser

Leu

Cys

Leu

35

40

45

Val

Cys

Leu

His

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

50

55

60

Ile

Arg

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Arg

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

65

70

75

80

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Asp

Asn

85

90

95

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

100

105

110

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

115

120

125

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

130

135

140

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

His

Thr

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

- 94 031876

145

150

155

Asp Glu

Leu Arg Glu 165

Ser

Trp

Trp Asn Thr 170

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile 175

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Met

Cys

Asn

180

185

190

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

Cys

195

200

205

Gly

Asp

Asn

Gly

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp

Met

Pro

Thr

Ile

Asp

210

215

220

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

225

230

235

Glu

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Asn

Ala

Val

Ile

Thr

Asn

Cys

Lys

245

250

255

Cys

Lys

Glu

Cys

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Ser

Asp

Cys

Glu

Lys

Lys

260

265

270

Lys

Ala

Tyr

Lys

Glu

Phe

Ile

Glu

Lys

Cys

Lys

Gly

Gly

Gly

Thr

275

280

285

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

290

295

300

Arg

His

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

305

310

315

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Ile

Thr

Thr

Gly

Thr

Ile

Ser

Gly

Glu

Ser

325

330

335

Gly

Ala

Asn

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

Thr

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

340

345

350

160

Trp

Ala

Cys

Leu

Cys

240

Ser

Cys

Glu

Lys

Gly

320

Ser

Ser

<210>	21
<211>	344
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	21

Lys Cys Asp Lys Cys Lys Ser Gly Thr Ser Arg Ser Arg Lys Ile

5 10 15

Thr Trp Arg Lys

Phe Arg Gly Asn Gly Glu Gly Leu Gln Lys

Glu

Trp

Tyr

- 95 031876

Ala

Cys

Thr

Gly

Gly

Asp

Leu

Ile

145

Asp

Thr

Asp

Gly

Thr

225

Glu

Asn

Asn Thr 35

Ile Gly Leu

Ser

Pro 40

Arg

Thr Gln

Leu Leu 45

Tyr

Leu

Val

Leu

His

Glu

Lys

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

Ser

50

55

60

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

70

75

80

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Pro

Gln

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

85

90

95

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

100

105

110

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

Lys

Asp

115

120

125

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

130

135

140

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala

Ser

Asp

Glu

Asn

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

150

155

160

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

165

170

175

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

180

185

190

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

Cys

Cys

195

200

205

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

210

215

220

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

230

235

240

His

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Thr

245

250

255

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

260

265

270

- 96 031876

Asp Ala Tyr

Lys

Glu

Phe

Ile

Asp 280

Gly Thr

Gly Ser Gly Gly Gly 285

Thr

275

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Met

290

295

300

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

305

310

315

320

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Gly

Ala

Asn

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

325

330

335

Thr

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

340

<210>22 <211>350 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>22

Lys 1

Cys

Glu Lys

Cys 5

Lys

Ser Glu

Gln

Ser 10

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys 15

Ile

Trp

Thr

Trp

Arg

Lys

Phe

Pro

Gly

Asn

Gly

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

20

25

30

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Ser

Pro

Arg

Thr

Gln

Leu

Leu

Tyr

Leu

35

40

45

Val

Cys

Leu

His

Glu

Lys

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

His

Lys

Thr

Ile

Ser

50

55

60

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

65

70

75

80

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Leu

Glu

Lys

Lys

Lys

Gly

Asp

Asn

85

90

95

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

100

105

110

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

Lys

Asp

115

120

125

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Gln

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

130

135

140

- 97 031876

Ile 145

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala 150

Ser

Asp

Glu

Asn

Thr 155

Ser

Tyr

Ser

Ser

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

165

170

175

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Met

Cys

Asn

180

185

190

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

Cys

195

200

205

Gly

Asp

Asn

Gly

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

210

215

220

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

225

230

235

Glu

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Lys

Asn

Cys

Asn

245

250

255

Cys

Lys

Glu

Cys

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

260

265

270

Lys

Asn

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Asn

Phe

Ile

275

280

285

Val

Cys

Thr

Gly

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

290

295

300

Trp

Tyr

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

305

310

315

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Ser

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Gly

325

330

335

Asn

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

Thr

Glu

Ser

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

340

345

350

Leu

160

Trp

Gly

Ser

Leu

Cys

240

Ser

Cys

Glu

Arg

Lys

320

Ala

<210>	23
<211>	359
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	23

Lys Cys Glu Lys Cys Lys Ser Glu

5

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Asn

- 98 031876

Trp

Ile

Trp

Arg 20

Lys

Phe

Pro Gly Asn 25

Gly Glu Gly Leu

Gln 30

Lys

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

His

Ser

Leu

Tyr

35

40

45

Val

Cys

Leu

His

Glu

Lys

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

50

55

60

Arg

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

65

70

75

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

His

Gln

Asn

Asn

Asn

Ser

85

90

95

Asn

Lys

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

100

105

110

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

115

120

125

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Gln

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

130

135

140

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ser

Thr

Glu

Gln

Asp

Thr

Leu

Tyr

Ser

145

150

155

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

165

170

175

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

Cys

180

185

190

Gly

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

195

200

205

Ser

Gly

Asp

Asn

Gly

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp

Met

Pro

Thr

Ile

210

215

220

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

225

230

235

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

245

250

255

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Gly

Glu

Arg

Ile

Ile

Gly

Gly

Thr

Cys

260

265

270

Glu

Leu

Ile

His

Gly

Tyr

Lys

Lys

Ser

160

Ile

Cys

Cys

Asp

Phe

240

Lys

Asn

- 99 031876

Gly Glu Cys

Lys

Thr Glu

Cys

Glu 280

Lys

Lys

Cys

Lys

Ala 285

Ala

Cys

275

Ala

Tyr

Lys

Thr

Phe

Ile

Glu

Glu

Cys

Glu

Gly

Lys

Ala

Ala

Glu

290

295

300

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Tyr

Gln

Ile

Tyr

Met

305

310

315

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

325

330

335

Lys

Asn

Cys

Gly

Lys

Ser

Ser

Gly

Ala

Asn

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

340

345

350

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

355

Glu

Gly

Arg

320

Thr

Thr

<210>	24
<211>	270
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	24

Asn 1

Tyr

Ile

Lys

Asp 5

Asp

Pro

Tyr

Ser

Lys 10

Glu

Tyr

Val

Thr

Lys 15

Ser

Phe

Ile

Pro

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

20

25

30

Ala Asn His

Asn

Asp

Glu Val

Cys 40

Asn

Pro

Asn

Glu

Ser 45

Glu

Ile

35

Ser

Val 50

Glu

His

Ala

Gln

Thr 55

Ser

Val

Leu

Leu

Ser 60

Gln

Lys

Ala

Ile 65

Thr

His

Ser

Ser

Ile 70

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys 75

Lys

Val

Cys

Lys

Val

Lys

Leu

Gly

Val 85

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys 90

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys 95

Ile

Glu

Asp

Asp 100

Ser Leu Arg

Gly

Val 105

Glu

Asn

Cys

Cys

Phe 110

Lys

Phe

Leu

Arg

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Glu

115

120

125

Leu

Thr

Ser

Tyr

Tyr

Val

Asp

Ser

- 100 031876

Ser	Ser 130	Asn	Gly	Ser	Cys	Asn 135	Asn	Asn
Asn 145	Leu	Asp	Glu	Ala	Leu 150	Ala	Ser	Leu
Lys	Cys	Lys	Ser	Gly 165	Thr	Ser	Thr	Val
Lys	Lys	Ser	Ser 180	Gly	Lys	Glu	Gly	Gly 185
Thr	Ile	Gly 195	Leu	Pro	Pro	Arg	Thr 200	Gln
Leu	Asp 210	Glu	Lys	Glu	Gly	Lys 215	Thr	Gln
Asn 225	Ser	Glu	Leu	Leu	Lys 230	Glu	Trp	Ile
Lys	Asn	Leu	Lys	Lys 245	Arg	Tyr	His	Gln
Ser	Lys	Leu	Cys 260	Lys	Ala	Leu	Lys	Tyr 265

<210>25 <211>334 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>25

Lys 1	Cys	Asp	Lys	Cys 5	Lys	Ser	Glu	Gln
Trp	Ile	Trp	Lys 20	Lys	Tyr	Ser	Val	Lys 25
Tyr	Ala	Asn 35	Thr	Ile	Ala	Leu	Pro 40	Pro
Val	Val 50	Cys	Leu	Asp	Glu	Lys 55	Glu	Gly
Ile 65	Arg	Thr	Asn	Ser	Glu 70	Leu	Leu	Lys

Glu Glu Ala Cys Glu Lys

140

Asn Cys Tyr Lys Asn Gln

155 160

Asn Asn Lys Trp Ile Trp

175

Gln Lys Glu Tyr Ala Asn

190

Leu Cys Leu Val Val Cys

205

Leu Lys Asn Ile Arg Thr

220

Ala Ala Phe His Glu Gly

235 240

Lys Asn Asp Asp Asn Asn

255

Phe Ala Asp Tyr

270

Lys Lys Asn Asn Lys Tyr

Gly Gly Leu Gln Lys Glu

Thr Gln Ser Leu Cys Leu

Thr Gln Glu Leu Lys Asn

Arg Ile Ile Ala Ala Phe

80

- 101 031876

His

Asp

Gly

Asp

Tyr

145

Leu

Trp

Cys

Gln

Arg

225

Glu

Lys

Glu

Trp

Arg

305

Asn

Glu

Gly Lys

Asn 85

Leu

Lys

Thr Tyr

His 90

Glu

Lys

Lys

Lys

Gly 95

Asp

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

100

105

110

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

Lys

115

120

125

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

130

135

140

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

His

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

150

155

160

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

165

170

175

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

180

185

190

Ser

Gly

Asp

Ser

Ser

Asn

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

195

200

205

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Glu

Gln

210

215

220

Gln

Ala Lys

Val

Asn 230

Ala

Val

Ile

Lys

Asn 235

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys 240

Cys

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Thr

245

250

255

Cys

Lys

Gly

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Glu

Phe

Ile

Glu

Lys

Cys

260

265

270

Gly

Gln

Ala

Ala

Glu

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

275

280

285

Tyr

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

290

295

300

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Gly

Ala

310

315

320

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

Thr

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

325 330

- 102 031876 <210>26 <211>351 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>26

Lys 1	Cys	Asp	Lys	Cys 5	Lys	Ser	Glu	Gln
Trp	Ile	Trp	Lys 20	Lys	Tyr	Ser	Gly	Thr 25
Tyr	Ala	Asn 35	Thr	Ile	Ala	Leu	Pro 40	Pro
Val	Cys 50	Leu	His	Glu	Lys	Glu 55	Glu	Lys
Ser 65	Thr	Asn	Ser	Glu	Leu 70	Leu	Lys	Glu
Glu	Gly	Lys	Asn	Leu 85	Lys	Ile	Ser	Pro
Lys	Asn	Leu	Cys 100	Lys	Asp	Leu	Lys	Tyr 105
Leu	Ile	Lys 115	Gly	Thr	Ser	Ile	Trp 120	Asp
Glu	Leu 130	Asn	Leu	Gln	Gln	Ile 135	Phe	Gly
Lys 145	Lys	Asn	Asn	Thr	Ala 150	Glu	Gln	Asp
Glu	Leu	Arg	Glu	Ser 165	Trp	Trp	Asn	Thr
Ala	Met	Lys	His 180	Gly	Ala	Gly	Met	Asn 185
Gly	Ser	Val 195	Thr	Gly	Ser	Ser	Asp 200	Ser
Asp	Gly 210	Ser	Val	Thr	Gly	Ser 215	Gly	Ser

Lys	Lys	Asn	Asn	Lys 15	Asn
Gly	Gly	Leu	Gln 30	Lys	Glu
Thr	Gln	Ser 45	Leu	Tyr	Leu
Gln	Glu 60	Leu	Lys	Asn	Ile
Ile 75	Ile	Ala	Ala	Phe	His 80
Asn	Lys	Asn	Asp	Asn 95	Gly
Phe	Ala	Asp	Tyr 110	Gly	Asp
Asp	Phe	Thr 125	Lys	Asp	Leu
Leu	Phe 140	Arg	Lys	Tyr	Ile
Leu 155	Tyr	Ser	Ser	Leu	Asp 160
Lys	Lys	Tyr	Ile	Trp 175	Thr
Thr	Thr	Cys	Cys 190	Gly	Asp
Ser	Thr	Thr 205	Cys	Cys	Gly
Cys	Asp 220	Asp	Ile	Pro	Thr

- 103 031876

Ile Asp 225

Leu

Ile

Pro

Gln Tyr 230

Leu

Arg

Phe

Leu Gln 235

Glu

Trp

Val

Glu 240

His

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Lys

Asn

245

250

255

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys

Glu

Cys

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

260

265

270

Thr

Glu

Cys

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Gly

Glu

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

Lys

275

280

285

Phe

Ile

Glu

Lys

Cys

Asn

Gly

Gly

Gly

Gly

Glu

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

290

295

300

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

305

310

315

320

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

325

330

335

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

340

345

350

<210>27 <211>353 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>27

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser 10

Thr Val

Asn

Lys

Lys 15

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys 20

Phe

Pro

Gly

Lys

Glu 25

Gly

Gly

Leu

Gln

Glu 30

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr 35

Ile

Ala

Leu

Pro

Pro 40

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu 45

Cys

Leu

Val

Val

Cys 50

Leu

Asp

Glu

Lys

Glu 55

Gly

Lys

Thr

Gln

His 60

Lys

Thr

Ile

Ser

Thr 65

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu 70

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile 75

Ala

Ala

Phe

His

Glu 80

Gly Lys Asn Leu Lys Ile Ser Asn Lys 85

Lys Lys Asn Asp Glu Asn Asn

95

- 104 031876

Ser

Leu

Glu

Lys

145

Glu

Ala

Asp

Gly

Thr

225

Glu

Asn

Thr

Tyr

Gly

305

Lys

Cys

Lys

Leu

Cys 100

Lys

Asp

Leu Lys

Tyr 105

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr 110

Gly

Asp

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

Lys

Asp

Leu

115

120

125

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

130

135

140

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

150

155

160

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

165

170

175

Met

Lys

His

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

Ser

Gly

Asp

Asn

Gly

180

185

190

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

Cys

Cys

195

200

205

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

210

215

220

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

230

235

240

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Glu

245

250

255

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Ser

Lys

Thr

Lys

Leu

Gly

Asp

260

265

270

Cys

Asn

Ser

Asp

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Val

Ala

Cys

Glu

Lys

275

280

285

Lys

Glu

Phe

Ile

Glu

Lys

Cys

Val

Ser

Ala

Ala

Gly

Gly

Thr

Ser

290

295

300

Ser

Ser

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

310

315

320

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

325

330

335

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Ser

Thr

Ala

Glu

Ser

Lys

Cys

Val

Gln

- 105 031876

340 345

350

Ser <210>28 <211>327 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>28

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser 10

Thr

Val

Asn

Lys

Lys 15

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Tyr

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

20

25

30

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

35

40

45

Cys

Leu

His

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

Ser

50

55

60

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

65

70

75

80

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Ile

Ser

Asn

Lys

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

85

90

95

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

100

105

110

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

Lys

Asp

Leu

115

120

125

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

130

135

140

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

145

150

155

160

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

165

170

175

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

Cys

Ser

Cys

Ser

180

185

190

Gly

Asp

Ser

Ser

Asn

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

- 106 031876

195

200

205

Leu Arg

Phe

Leu

Gln Glu

Trp 215

Val

Glu

His

Phe

Cys 220

Lys

Gln

Arg

210

Glu

Lys

Val

Asn

Ala

Val

Ile

Thr

Asn

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

225

230

235

Gly

Gly

Thr Cys

Asn 245

Ser

Asp

Cys

Glu

Lys 250

Lys

Cys

Lys

Ile

Glu 255

Glu

Lys

Tyr

Lys

Asn

Phe

Ile

Glu

Lys

Cys

Val

Thr

Ala

Ala

Gly

260

265

270

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

275

280

285

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

290

295

300

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

305

310

315

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

325

Thr

Asp

320

Gln

Ser

240

Cys

Gly

Met

<210>	29
<211>	628
<212>	Белок
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная конструкция
<400>	29
Asn Tyr Ile Lys Gly Asp Pro Tyr Phe	Ala Glu Tyr Ala	Thr Lys
1	5	10	15

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu Asn 20

Ser

Ser Asp

Thr 25

Glu

Asn

Ala

Ser

Glu 30

Thr

Ser

Lys

Tyr 35

Tyr

Asp

Glu

Ala

Cys 40

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser 45

Glu

Ile

Ser

Val 50

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr 55

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser 60

Asn

Lys

Thr

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

70 75

Pro

Ala

Cys

Asp

- 107 031876

Val

Ile

Leu

Ser

Lys

145

Lys

Lys

Ile

Glu

Leu

225

Lys

Lys

Thr

Gln

Thr

305

Ser

Lys

Leu

Gly

Ile 85

Asn

Asn

Asn

Asp

Lys 90

Val

Leu

Arg

Val

Cys 95

Val

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

100

105

110

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asp

Lys

Asn

Ser

Glu

Glu

Ile

Cys

Gln

Lys

130

135

140

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

Asp

150

155

160

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

165

170

175

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

180

185

190

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Cys

Leu

His

195

200

205

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

His

Lys

Thr

Ile

Ser

Thr

Asn

Ser

Glu

210

215

220

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

230

235

240

Thr

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

245

250

255

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

260

265

270

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

275

280

285

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

290

295

300

Ala

Glu

Gln

His

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

310

315

320

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

- 108 031876

325

330

335

Gly

Asn

Gln

Ala

385

Asn

Glu

Pro

Ile

Thr

465

Val

Leu

Cys

Thr

Asp

545

His

Ala Gly

Met Asn 340

Gly

Thr Thr

Cys 345

Ser

Cys

Ser Gly

Asp 350

Ser

Ser

Asp

Met

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

355

360

365

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Asn

370

375

380

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

Cys

390

395

400

Ser

Asp

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

405

410

415

Phe

Ile

Glu Asp 420

Cys

Lys

Gly Gly 425

Gly Thr Gly

Thr

Ala 430

Gly

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

435

440

445

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

450

455

460

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

470

475

480

Gln

Ser

Asp

Val

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

485

490

495

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

500

505

510

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

515

520

525

Lys

Asn

Cys

Asp

Ile

Gln

Lys

Lys

Thr

Pro

Lys

Ser

Gln

Ser

Cys

530

535

540

Thr

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

550

555

560

Glu Tyr Lys Tyr Ala Cys Glu Cys

565

Lys Ile Pro Thr Thr Glu Glu

570 575

- 109 031876

Thr Cys	Asp	Asp 580	Arg	Lys	Glu Tyr Met Asn Gln 585	Trp	Ser	Cys 590	Gly
Ala Gln	Thr	Val	Arg	Gly	Arg Ser Gly Lys Asp	Asp	Tyr	Glu	Leu
	595				600		605
Thr Tyr	Asn	Gly	Val	Lys	Glu Thr Lys Pro Leu	Gly	Thr	Leu	Lys
610					615	620
Ser Lys	Leu	Asp
625
<210>	30
<211>	350
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	30
Lys Cys	Glu	Lys	Cys	Lys	Ser Glu Gln Ser Lys	Lys	Asn	Asn	Lys
1			5		10				15
Trp Ile	Trp	Arg	Lys	Phe	Arg Gly Thr Glu Gly	Gly	Leu	Gln	Glu
		20			25			30
Tyr Ala	Asn	Thr	Ile	Gly	Leu Pro Pro Arg Thr	Gln	Ser	Leu	Cys
	35				40		45
Val Val	Cys	Leu	Asp	Glu	Lys Gly Lys Lys Thr	Gln	Glu	Leu	Lys
50					55	60
Ile Arg	Thr	Asn	Ser	Glu	Leu Leu Lys Glu Trp	Ile	Ile	Ala	Ala
65				70	75
His Glu	Gly	Lys	Asn	Leu	Lys Pro Ser His Gln	Asn	Lys	Asn	Ser
			85		90				95
Asn Lys	Glu	Asn	Leu	Cys	Lys Ala Leu Lys Tyr	Ser	Phe	Ala	Asp
		100			105			110
Gly Asp	Leu	Ile	Lys	Gly	Thr Ser Ile Trp Asp	Asn	Asp	Phe	Thr
	115				120		125
Asp Leu	Glu	Leu	Asn	Leu	Gln Lys Ile Phe Gly	Lys	Leu	Phe	Arg
130					135	140
Tyr Ile	Lys	Lys	Asn	Asn	Thr Ala Glu Gln His	Thr	Ser	Tyr	Ser
145				150	155

Ser

Tyr

Asn

Asn

Glu

Leu

Asn

Phe

Gly

Tyr

Lys

Lys

Ser

160

- 110 031876

Leu Asp

Glu

Leu

Arg 165

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn Thr 170

Asn

Lys

Lys

Tyr 175

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

180

185

190

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

195

200

205

Ser

Gly

Asp

Asn

Gly

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

210

215

220

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

225

230

235

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln 245

Glu

Lys

Val

Asn Ala Val 250

Ile

Asn Ser

Cys 255

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Ser

Lys

Thr

Lys

Leu

Gly

Asp

Thr

Cys

260

265

270

Ser

Asp

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Ile

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

275

280

285

Phe

Ile

Glu

Lys

Cys

Val

Thr

Ala

Ala

Gly

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

290

295

300

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

305

310

315

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

325

330

335

Ser

Ser

Thr

Thr

Ser

Thr

Ala

Glu

Ser

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

340

345

350

Ile

Asn

Cys

Asp

Phe

240

Asn

Asn

Thr

Pro

Ile

320

Pro

<210>	31
<211>	330
<212>	Белок
<213>	Plasmodium falciparum
<400>	31
Lys Cys	Asp Lys	Cys Lys Ser Glu	Gln Ser Lys	Lys Asn Asn Lys
1		5	10	15

Trp Ile Trp Arg Lys	Tyr Ser Gly Asn Gly Glu Gly Leu Gln Lys
20	25	30

Asn

Glu

- 111 031876

Tyr Ala Asn

Thr

Ile Gly

Leu

Pro 40

Pro Arg Thr

His

Ser 45

Leu

Tyr

35

Val

Cys

Leu

His

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

50

55

60

Arg

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

65

70

75

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Leu

Glu

Asn

Lys

Asn

Asp

85

90

95

Asn

Lys

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

100

105

110

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

115

120

125

Asp

Leu 130

Glu

Leu Asn

Leu

Gln Lys 135

Ile

Phe

Gly

Lys 140

Leu

Phe

Arg

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala

Ser

Asp

Glu

Asn

Thr

Leu

Tyr

Ser

145

150

155

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

165

170

175

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

180

185

190

Ser

Gly

Ser 195

Gly

Asp

Asn

Gly

Ser 200

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp 205

Ile

Pro

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

210

215

220

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Asn

Ala

Val

Ile

Thr

225

230

235

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys 245

Glu

Ser

Gly Gly

Thr Cys 250

Asn

Ser

Asp

Cys 255

Lys

Lys

Cys

Lys

Ile

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

260

265

270

Cys

Arg

Thr

Ala

Ala

Gly

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

275

280

285

Leu

Ile

His

Glu

Tyr

Lys

Lys

Ser

160

Ile

Ser

Thr

Gly

Asn

240

Glu

Glu

Arg

- 112 031876

Trp Asp Gln Ile Tyr Lys Met Tyr

290 295

Arg Asn Arg Lys Ala Gly Thr Lys

305 310

Ser Thr Ala Glu Ser Lys Cys Val 325

Ser Lys Tyr Ile Glu Asp Ala Lys

300

Asn Cys Gly Pro Ser Ser Thr Thr

315 320

Gln Ser

330 <210>32 <211>334 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>32

Lys Cys Asp Lys Cys Lys

Ser Glu Gln Ser Lys

Lys Asn Asn Lys Asn

Trp

Ile

Trp

Arg

Lys

Tyr

Ser

Gly

Asn

Gly

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr Ala Asn Thr

Ile Gly Leu

Pro 40

Pro

Arg

Thr His

Ser 45

Leu

Tyr

Leu

35

Val

Cys

Leu

His

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

His

Lys

Thr

Ile

Ser

50

55

60

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

65

70

75

80

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Asn

Asn

Ser

Gly

Asn

85

90

95

Lys

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

100

105

110

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

115

120

125

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ala

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

130

135

140

Ile Lys Lys Asn Ile Ala Ser Asp Glu Asn Thr Leu Tyr Ser

145 150 155

Ser Leu

160

Asp Glu Leu Arg Glu Ser Trp Trp Asn 165

Thr Asn

170

Lys

Lys

Tyr Ile Trp

175

- 113 031876

Leu

Ala

Met

Lys 180

His

Gly Ala

Glu Met 185

Asn Gly

Thr

Met

Cys 190

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Met

Ser

Thr

195

200

205

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

210

215

220

His

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Asn

Ser

225

230

235

240

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys 245

Glu

Ser Gly

Asp

Thr 250

Cys

Asn

Ser

Asp

Cys 255

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Asp

Ala

Tyr

Lys

Thr

Phe

Ile

Glu

Glu

260

265

270

Phe

Cys

Thr

Ala

Asp

Gly

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

275

280

285

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

290

295

300

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Gly

Ala

305

310

315

320

Asn

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

Thr

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

325

330

<210>33 <211>350 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>33

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser

Gly Thr

Ser 10

Thr

Val

Asn

Lys

Asn 15

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys 20

Tyr

Ser

Gly

Lys

Glu 25

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys 30

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr 35

Ile

Ala

Leu

Pro

Pro 40

Arg

Thr

His

Ser

Leu 45

Tyr

Leu

Val

Cys

Leu 50

His

Glu

Lys

Gly

Lys 55

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu 60

Lys

Asn

Ile

Arg

- 114 031876

Thr

Gly

Lys

Leu

Glu

Lys

145

Glu

Ala

Gly

Asp

Pro

225

Gln

Lys

Lys

Cys

Trp

305

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu 70

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile 75

Ala

Ala

Phe

His

Glu 80

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

Pro

Gln

Asn

Asn

Asn

Ser

Gly

Asn

Lys

85

90

95

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

100

105

110

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Asp

Phe

Thr

Lys

Asp

Leu

115

120

125

Leu 130

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile 135

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe 140

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

His

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

150

155

160

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

165

170

175

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

Asp

180

185

190

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

Cys

Ser

Gly

195

200

205

Asn

Gly

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp

Met

Pro

Thr

Thr

Asp

Phe

Ile

210

215

220

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

230

235

240

Arg

Gln

Glu

Lys

245

Val

Lys

His

Val

Met

250

Glu

Ser

Cys

Lys

Ser Cys

255

Glu Cys

Gly 260

Asp

Thr

Cys

Asn Gly 265

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu 270

Cys

Glu

Lys

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

Thr

Phe

Ile

Glu

Lys

275

280

285

Val

Ser

Ala

Asp

Gly

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

290

295

300

Asp

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

310 315 320

- 115 031876

Arg Asn Arg Lys Ala Gly Thr Lys Asn 325

Asn Ala Ala Ala Ser Thr Ala Glu Asn

340 345 <210> 34 <211> 647 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 34

Asp 1	Tyr	Ile	Lys	Asp 5	Asp	Pro	Tyr	Ser
Ser	Phe	Ile	Leu 20	Asn	Pro	Ser	Asp	Ala 25
Ala	Asn	His 35	Asn	Asp	Glu	Val	Cys 40	Asn
Ser	Val 50	Glu	Leu	Ala	Pro	Ile 55	Ser	Asp
Ile 65	Thr	His	Ser	Phe	Ile 70	Gly	Ala	Asn
Val	Lys	Leu	Gly	Val 85	Arg	Glu	Lys	Asp
Ile	Glu	Asp	Asp 100	Ser	Leu	Arg	Gly	Val 105
Leu	Leu	Gly 115	Ile	Leu	Gln	Glu	Asn 120	Cys
Ser	Ser 130	Asn	Gly	Ser	Cys	Asp 135	Lys	Asn
Lys 145	Leu	Glu	Asn	Val	Phe 150	Ala	Ser	Leu
Lys	Cys	Lys	Ser	Gly 165	Thr	Ser	Thr	Val

Gly Thr Ser Ser Thr Thr

335

Cys Val Gln Ser

350

Glu Tyr Ala Thr Lys Leu

Thr Ser Ser Gly Glu Thr

Asn Glu Ser Glu Ile Ala

Ser Ser Asn Lys Thr Cys

Lys Lys Glu Cys Lys Asp

80

Asp Leu Lys Ile Cys Val

Asn Cys Cys Cys Gln Asp

110

Asp Asn Lys Ser Gly Ser

125

Glu Asp Glu Cys Gln Lys

140

Asn Gly Tyr Lys Cys Asp

155 160

Lys Lys Trp Ile Trp Arg

175

- 116 031876

Lys	Tyr	Ser Gly 180	Asn	Gly	Glu	Gly	Leu 185
Ile	Gly	Leu 195	Pro	Pro	Arg	Thr	His 200	Ser
Glu	Lys 210	Glu	Gly	Lys	Thr	Gln 215	His	Lys
Leu 225	Leu	Lys	Glu	Trp	Ile 230	Ile	Ala	Ala
Lys	Thr	Ser	His	Gln 245	Asn	Asn	Asn	Ser
Lys	Ala	Leu	Lys 260	Tyr	Ser	Phe	Ala	Asp 265
Thr	Ser	Ile 275	Trp	Asp	Asn	Asp	Phe 280	Thr
Gln	Lys 290	Ile	Phe	Gly	Lys	Leu 295	Phe	Arg
Ala 305	Ser	Asp	Glu	Asn	Thr 310	Ser	Tyr	Ser
Ser	Trp	Trp	Asn	Thr 325	Asn	Lys	Lys	Tyr
Gly	Ala	Glu	Met 340	Asn	Ser	Thr	Met	Cys 345
Gly	Ser	Ser 355	Asp	Ser	Gly	Ser	Thr 360	Thr
Ile	Ser 370	Cys	Asp	Asp	Ile	Pro 375	Thr	Ile
Arg 385	Phe	Leu	Gln	Glu	Trp 390	Val	Glu	His
Lys	Val	Lys	Asp	Val 405	Ile	Thr	Asn	Cys
Asp	Thr	Cys	Asn	Ser	Asp	Cys	Glu	Lys

420 425

Lys	Glu	Tyr	Ala 190	Asn	Thr
Tyr	Leu	Val 205	Cys	Leu	His
Ile	Ser 220	Thr	Asn	Ser	Glu
His 235	Glu	Gly	Lys	Asn	Leu 240
Asn	Lys	Lys	Lys	Leu 255	Cys
Gly	Asp	Leu	Ile 270	Lys	Gly
Asp	Leu	Glu 285	Leu	Asn	Leu
Tyr	Ile 300	Lys	Lys	Asn	Ile
Leu 315	Asp	Glu	Leu	Arg	Glu 320
Trp	Leu	Ala	Met	Lys 335	His
Gly	Asp	Gly	Ser 350	Val	Thr
Ser	Gly	Asp 365	Asn	Gly	Ser
Leu	Ile 380	Pro	Gln	Tyr	Leu
Cys 395	Lys	Gln	Arg	Gln	Glu 400
Ser	Cys	Lys	Glu	Ser 415	Gly
Cys	Lys	Asn	Lys 430	Cys	Glu

- 117 031876

Ala Tyr Lys Lys Phe Ile Glu

435

Glu Arg Arg Thr Ala Ala Gln Gly

440 445

Ala Glu Ser Ser Trp Val Lys

450 455

Arg Trp Asp Gln Ile Tyr Met Arg 460

Ser Lys Tyr Ile Glu Asp Ala

465 470

Lys Arg Asn Arg Lys Ala Gly Thr

475

Ser

Cys

Gly

Pro

Ser 485

Ser

Thr

Thr

Asn Ala 490

Ala

Ala

Ser

Thr

Ala 495

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

500

505

510

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

Leu

515

520

525

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Asn

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

530

535

540

Tyr

Thr

Thr

Thr

Lys

Asn

Cys

Asp

Ile

Lys

Lys

Lys

Thr

Pro

Lys

545

550

555

Gln

Ser

Cys

Asp

Thr

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

565

570

575

Asn

Thr

Pro

His

Glu

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Arg

Thr

Pro

580

585

590

Lys

Gln

Glu

Ser

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

595

600

605

Ser

Gly

Ser

Ala

Gln

Thr

Val

Arg

Gly

Arg

Ser

Thr

Asn

Asn

Asp

610

615

620

Glu

Leu

Tyr

Thr

Tyr

Asn

Gly

Val

Lys

Glu

Thr

Lys

Pro

Leu

Gly

625

630

635

Thr

Tyr

Lys

480

Glu

Ile

Asp

Thr

Pro

560

Gly

Asn

Ser

Tyr

Thr

640

Leu Lys Asn Ser Lys Leu Asp

645 <210> 35 <211> 341 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum

- 118 031876 <400> 35

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser Gly

Thr

Ser 10

Thr

Val

Asn

Lys

Lys 15

Trp

Ile

Trp

Arg

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

20

25

30

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

35

40

45

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

50

55

60

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

65

70

75

80

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

85

90

95

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

100

105

110

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

115

120

125

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

130

135

140

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

145

150

155

160

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

165

170

175

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Cys

180

185

190

Gly

Asp

Gly

Ser

Ser

Gly

Glu

Asn

Gln

Thr

Asn

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

195

200

205

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

210

215

220

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Asn

Ala

Val

Val

225

230

235

240

Thr

Asn

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

- 119 031876

245

250

255

Cys

Lys

Thr

Lys 260

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys 265

Glu

Val

Tyr

Lys

Thr 270

Phe

Asp

Asn

Val

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Val

Lys

Arg

275

280

285

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

290

295

300

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Ile

Thr

Thr

Gly

Thr

305

310

315

Ser

Gly

Glu

Ser

Ser

Gly

Ala

Thr

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

Thr

Glu

325

330

335

Ile

Trp

Arg

Ile

320

Asn

Lys Cys Val Gln Ser

340 <210> 36 <211> 632 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 36

Asn 1

Tyr

Ile

Lys

Asp 5

Asp

Pro

Tyr

Ser

Lys 10

Glu

Tyr

Val

Thr

Lys 15

Ser

Phe

Ile

Pro

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Thr

Ser

Ser

Glu

Lys

20

25

30

Gln

Lys

Asn

Asn

Asp

Glu

Val

Cys

Asn

Pro

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

35

40

45

Ser

Val

Glu

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

50

55

60

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

65

70

75

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

100

105

110

Leu

Ile

Ser

Cys

Asp

Val

Asp

- 120 031876

Leu Leu Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn Cys 120

Ser Asp

Asn

Lys 125

Arg

Gly

Ser

115

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

Cys

Asp

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

Lys

130

135

140

Lys

Leu

Asp

Glu

Ala

Leu

Glu

Ser

Leu

His

Asn

Gly

Tyr

Lys

Asn

Gln

145

150

155

160

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Thr

Val

Asn

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

195

200

205

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Ser

Lys

Gly

Val

Thr

Asp

Ile

Ile

Tyr

Asp

Thr

210

215

220

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

Gly

225

230

235

240

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

Lys

245

250

255

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

260

265

270

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

275

280

285

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ala

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

290

295

300

Lys

Asn

Ile

Ser

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

305

310

315

320

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Ile

Ala

325

330

335

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

Asp

Gly

340

345

350

Ser

Ser

Gly

Glu

Asn

Gln

Thr

Asn

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

- 121 031876

355

360

365

Asp

Phe

385

Lys

Asn

Thr

Trp

Glu

465

Ser

Lys

Ile

Thr

Ser

545

Gly

Thr

Ser

Leu 370

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu 375

Arg

Phe

Leu

Gln Glu 380

Trp

Val

Glu

His

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Thr

Asn

Cys

390

395

400

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Gly

Glu

Arg

Lys

Ile

Gly

Gly

Thr

Cys

405

410

415

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

420

425

430

Phe

Ile 435

Glu His

Cys

Lys

Gly 440

Gly

Asp

Gly Thr

Ala 445

Gly

Ser

Ser

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

450

455

460

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Ser

Cys

Gly

Thr

470

475

480

Thr

Ala

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

485

490

495

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

500

505

510

Val

Leu

Asp

Glu

Asn

Asn

Cys

Gly

Glu

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

515

520

525

Tyr 530

Thr

Thr

Thr

Lys

Asn 535

Cys

Asp

Ile

Gln

Lys 540

Asp

Lys

Ser

Lys

Gln

Ser

Ser

Asp

Thr

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

550

555

560

Asn

Thr

Pro

His 565

Gly

Tyr Lys

Tyr

Ala 570

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile 575

Pro

Thr

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

580

585

590

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

Asn

595

600

605

- 122 031876

Tyr

Glu Leu Cys

610

Lys Tyr Asn Gly Val

615

Asp

Val

Lys

620

Pro

Thr

Thr

Val

Arg Ser Ser Ser Thr Lys Leu Asp

625 630 <210> 37 <211> 639 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 37

Asp

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

Pro

Tyr

Ser

Ala

Glu

Tyr

Val

Thr

Lys

Ser

Phe

Ile

Pro

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Glu

Lys

Gln Lys Asn Asn Asp Glu Val

Cys Asn Cys Asn Glu Ser Glu Ile

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

Ser

Ile

Ser

Asp

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Asn

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

Val

Lys

Leu

Gly

Val 85

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys 90

Val

Leu

Lys

Ile

Cys 95

Ile

Glu

His

Thr

Ser

Leu

Arg

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Phe

Lys

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Pro

Arg

Ile

Asp

Lys

Asn

Gln

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asp

Lys

Asn

Ser

Glu

Glu

Ala

Cys

130

135

140

Lys 145

Asn

Leu Glu

Lys

Val 150

Leu Ala

Ser Leu

Thr Asn 155

Gly

Tyr

Lys

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

165

170

175

Lys

Lys

Tyr

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Leu

Ile

Ser

Cys

Asp

Val

Asp

Gly

Glu

Cys

160

Trp

Asn

- 123 031876

180 185

Thr	Ile	Gly 195	Leu	Pro	Pro	Arg	Thr 200	Gln
Leu	Asp 210	Glu	Lys	Glu	Gly	Lys 215	Thr	Gln
Asn 225	Ser	Glu	Leu	Leu	Lys 230	Glu	Trp	Ile
Lys	Asn	Leu	Lys	Pro 245	Ser	Pro	Glu	Lys
Lys	Leu	Cys	Lys 260	Asp	Leu	Lys	Tyr	Ser 265
Ile	Lys	Gly 275	Thr	Ser	Ile	Trp	Asp 280	Asn
Leu	Asn 290	Leu	Gln	Lys	Ile	Phe 295	Gly	Lys
Lys 305	Asn	Ile	Ala	Ser	Asp 310	Glu	Asn	Thr
Leu	Arg	Glu	Ser	Trp 325	Trp	Asn	Thr	Asn
Met	Lys	His	Gly 340	Ala	Gly	Met	Asn	Ser 345
Ser	Val	Thr 355	Gly	Ser	Gly	Ser	Ser 360	Cys
Leu	Ile 370	Pro	Gln	Tyr	Leu	Arg 375	Phe	Leu
Cys 385	Lys	Gln	Arg	Gln	Glu 390	Lys	Val	Lys
Ser	Cys	Lys	Asn	Thr 405	Ser	Ser	Glu	Arg
Ser	Asp	Cys	Lys	Thr	Glu	Cys	Lys	Asn

420 425

	190
Leu	Cys	Leu 205	Val	Val	Cys
Leu	Lys 220	Asn	Ile	Ser	Thr
Ala 235	Ala	Phe	Pro	Glu	Gly 240
Lys	Gly	Asp	Asn	Gly 255	Lys
Ala	Asp	Tyr	Gly 270	Asp	Leu
Tyr	Thr	Lys 285	Asp	Leu	Glu
Phe	Arg 300	Lys	Tyr	Ile	Lys
Tyr 315	Ser	Ser	Leu	Asp	Glu 320
Lys	Tyr	Ile	Trp	Leu 335	Ala
Met	Cys	Asn	Ala 350	Asp	Gly
Asp	Met	Pro 365	Thr	Ile	Asp
Glu	Trp 380	Val	Glu	His	Phe
Val 395	Ile	Glu	Asn	Cys	Asn 400
Ile	Gly	Gly	Thr	Cys 415	Asn
Cys	Glu	Val	Tyr 430	Lys	Lys

- 124 031876

Phe

Ile

Glu 435

Asp

Cys

Lys

Gly Gly Asp Gly Thr Ala Gly

Ser

Ser

Trp

440

445

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

450

455

460

Asp 465

Ala

Lys

Arg Asn Arg 470

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys 475

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser 480

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

485

490

495

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

500

505

510

Tyr

Leu

Ser

Thr

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Glu

Asp

Asn

Ala

515

520

525

Pro

Trp

530

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

535

Tyr

Thr

Thr

Thr

Lys

540

Asn

Cys

Asp

Lys

Asp 545

Lys

Lys

Lys

Ser

Lys 550

Ser

Gln

Ser

Cys

Asp 555

Thr

Leu Val

Val

Val 560

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Glu

Tyr

Lys

Tyr

Ala

565

570

575

Cys

Glu

Cys

Arg

Thr

Pro

Asn

Lys

Gln

Glu

Ser

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

580

585

590

Glu

Tyr

Met 595

Asn Gln Trp

Ile

Ser 600

Asp Asn

Thr

Lys

Asn 605

Pro

Lys

Gly

Ser

Gly

Ser

Gly

Lys

Asp

Tyr

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

Tyr

Asn

Gly

Val

610

615

620

Asp

Val

Lys

Pro

Thr

Thr

Val

Arg

Ser

Ser

Ser

Thr

Lys

Leu

Asp

625

630

635

<210> 38 <211> 655 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 38

Asp Tyr Ile Lys Gly Asp Pro Tyr Phe Ala Glu Tyr Ala Thr Lys Leu

- 125 031876

Ser

Ala

Ser

Asn

Val

Ile

Phe

Ser

Asn

145

Lys

Arg

Thr

Leu

Thr

225

Gly

Phe

Ile

Leu Asn 20

Ser

Ser

Asp Ala 25

Asn

Thr

Ser

Ser

Gly 30

Glu

Thr

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Glu

Ile

Ser

35

40

45

Val

Glu

His

Ala

Ser

Ile

Ser

Asp

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

50

55

60

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

His

70

75

80

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Arg

Val

Cys

Val

85

90

95

Glu

His

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Phe

Lys

Asp

100

105

110

Leu

Arg

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Ser

Gly

Ser

115

120

125

Ser 130

Asn Gly

Ser

Cys

Asp 135

Lys

Asn

Asn

Glu Glu 140

Ala

Cys

Glu

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Cys

Glu

150

155

160

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Lys

Trp

Thr

Trp

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Gly

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Val

Cys

195

200

205

Asp

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

Arg

210

215

220

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

230

235

240

Lys

Asn

Leu

Lys

Pro

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

245

250

255

- 126 031876

Lys

Ser

Asn

Lys

305

Thr

Asn

Gly

Cys

Leu

385

Lys

Cys

Glu

Arg

Lys

465

Thr

Ile

Lys

Asn

Asp Asp Asn Asn Ser Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu 270

Lys

260

265

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

275

280

285

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

290

295

300

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala

Ser

Asp

Glu

310

315

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

325

330

335

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

340

345

350

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

355

360

365

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

370

375

380

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

390

395

Asp

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Asn

405

410

415

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

Lys

Phe

420

425

430

Asn

Cys 435

Lys

Gly

Gly

Asp Gly 440

Thr Ala Gly

Ser

Ser 445

Trp

Val

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Met

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

450

455

460

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

470

475

Asn

Val

Ser

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

485

490

495

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

500

505

510

Tyr

Asp

Gly

Asn

320

Thr

Asn

Ser

Phe

Val

400

Lys

Ile

Lys

Ala

Ile

480

Asp

Pro

- 127 031876

Ser

Ser Tyr Leu 515

Ser

Ile

Val

Leu Asp 520

Asp

Asn

Ile

Cys 525

Gly

Asp

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

530

535

540

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Lys

Asn

Cys

Asp

545

550

555

560

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Cys

Asn

Thr

Ala

Val

Val

565

570

575

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Glu

Tyr

Lys

Tyr

580

585

590

Ala

Cys

Glu

Cys

Arg

Thr

Pro

Ser

Asn

Lys

Glu

Leu

Cys

Asp

Asp

Arg

595

600

605

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ser

Ser

Gly

Ser

Ala

Gln

Thr

Val

Arg

610

615

620

Asp

Arg

Ser

Gly

Lys

Asp

Tyr

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

Tyr

Asn

Gly

Val

625

630

635

640

Lys

Glu

Thr

Lys

Leu

Pro

Lys

Lys

Leu

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

645

650

655

<210>39 <211>347 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>39

Lys Cys Asp Lys Cys Lys	Ser Glu Gln Ser Lys Lys Asn Asn Lys Tyr
1	5	10	15

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Val

Lys

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn 35

Thr

Ile Ala

Leu

Pro 40

Pro

Arg

Thr

His

Ser 45

Leu

Cys

Leu

Val

Val

Cys

Leu

Asp

Glu

Lys

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

50

55

60

Ile

Ser

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Arg

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

65

70

75

80

- 128 031876

His	Glu	Gly	Lys	Asn 85	Leu	Lys	Thr	Thr
Asp	Asn	Asn	Ser 100	Lys	Leu	Cys	Lys	Ala 105
Tyr	Gly	Asp 115	Leu	Ile	Lys	Gly	Thr 120	Ser
Lys	Asp 130	Leu	Glu	Leu	Asn	Leu 135	Gln	Gln
Lys 145	Tyr	Ile	Lys	Lys	Asn 150	Asn	Thr	Ala
Ser	Leu	Asp	Glu	Leu 165	Arg	Glu	Ser	Trp
Ile	Trp	Leu	Ala 180	Met	Lys	His	Gly	Ala 185
Cys	Gly	Asp 195	Gly	Ser	Val	Thr	Gly 200	Ser
Cys	Ser 210	Gly	Asp	Asn	Gly	Ser 215	Ile	Ser
Asp 225	Phe	Ile	Pro	Gln	Tyr 230	Leu	Arg	Phe
Phe	Cys	Lys	Gln	Arg 245	Gln	Glu	Lys	Val
Asn	Ser	Cys	Lys 260	Asn	Asn	Leu	Gly	Lys 265
Lys	Thr	Glu 275	Cys	Lys	Asn	Lys	Cys 280	Glu
Lys	Phe 290	Cys	Thr	Ala	Asp	Gly 295	Gly	Thr
Arg 305	Trp	Asp	Gln	Ile	Tyr 310	Lys	Arg	Tyr
Lys	Arg	Asn	Arg	Lys	Ala	Gly	Thr	Lys

Leu	Glu	Lys	Lys	Asn 95	Ala
Lys	Tyr	Ser	Phe 110	Ala	Asp
Trp	Asp	Asn 125	Glu	Tyr	Thr
Phe	Gly 140	Lys	Leu	Phe	Arg
Gln 155	His	Thr	Leu	Tyr	Ser 160
Asn	Thr	Asn	Lys	Lys 175	Tyr
Met	Asn	Gly	Thr 190	Thr	Cys
Asp	Ser	Gly 205	Ser	Thr	Thr
Asp	Asp 220	Met	Pro	Thr	Thr
Gln 235	Glu	Trp	Val	Glu	His 240
Asp	Val	Ile	Glu	Asn 255	Cys
Glu	Ile	Asn	Glu 270	Lys	Cys
Tyr	Lys	Asn 285	Phe	Ile	Glu
Gly	Ser 300	Pro	Trp	Ser	Lys
Lys 315	Tyr	Ile	Glu	Asp	Ala 320
Cys	Gly	Thr	Ser	Ser 335	Thr

325

- 129 031876

Thr Ser Thr Ala Glu Asn Lys Cys Val Gln Ser

340345 <210>40 <211>335 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>40

Lys 1

Cys

Glu Lys

Cys 5

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser 10

Thr Val

Asn

Lys

Tyr 15

Trp

Ile

Trp

Arg

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

20

25

30

Ala

Asn

Thr

Ile

Ala

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

His

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

35

40

45

Val

Cys

Leu

Asp

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

50

55

60

Ser

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Arg

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

65

70

75

80

Glu

Gly

Glu

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Lys

Gly

Asp

Asp

85

90

95

Gly

Lys

Lys

Asn

Ala

Asp

Asn

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Lys

100

105

110

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

115

120

125

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

130

135

140

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala

Ser

Asp

Glu

145

150

155

160

Asn

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

165

170

175

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

180

185

190

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

Cys

Ser

Gly

Asp

Ser

Ser

Asp

Asp

Met

Pro

195

200

205

- 130 031876

Thr Thr

Asp

Phe

Ile

Pro Gln 215

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu 220

Gln

Glu

Trp

Val

210

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Asn

Val

Asn

Ala

Val

Ile

Glu

225

230

235

240

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys

Glu

Cys

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Ser

Asp

Cys

245

250

255

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

260

265

270

Asn

Phe

Ile

Glu

Lys

Phe

Cys

Thr

Ala

Asp

Gly

Gly

Thr

Ser

Gly

Tyr

275

280

285

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

290

295

300

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Ser

Cys

Gly

305

310

315

320

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Ser

Thr

Ala

Glu

Ser

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

325 330 335 <210> 41 <211> 667 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223>

Искусственная конструкция

<400>

41

Ser

Tyr

Val

Lys

Asn

Asn

Pro

Tyr

Ser

Lys

Glu

Tyr

Val

Thr

Lys

Leu

1

5

10

15

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Pro

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Glu

Thr

Pro

20

25

30

Ser

Lys

Tyr

Tyr

Asp

Glu

Val

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

Ala

35

40

45

Cys

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

50

55

60

Ile

Thr

His

Ser

Phe

Ile

Gly

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

Asp

70 75 80

- 131 031876

Val

Ile

Phe

Ser

Asn

145

Lys

Lys

Ile

Asp

Glu

225

Leu

Ala

Asp

Thr

Arg

305

Ser

Lys

Leu

Gly

Val 85

Arg Glu

Lys

Asp

Lys 90

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys 95

Val

Glu

Asp

Thr

Tyr

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Phe

Lys

Asp

100

105

110

Leu

Gly

Met

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Ser

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

130

135

140

Leu

Asp

Glu

Ala

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

Glu

150

155

160

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Thr

Val

Asn

Lys

Tyr

Trp

Ile

Trp

Arg

165

170

175

Ser

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

180

185

190

Ala

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

His

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Val

Cys

Leu

195

200

205

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

His

Lys

Thr

Ile

Ser

Thr

Asn

Ser

210

215

220

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

230

235

240

Lys

Thr

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Lys

Gly

Asp

Asp

Gly

Lys

Lys

Asn

245

250

255

Asp

Asn

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

260

265

270

Tyr

Gly Asp 275

Leu

Ile

Lys

Gly 280

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp 285

Asn

Asp

Phe

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

290

295

300

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala

Ser

Asp

Glu

Asn

Thr

Ser

Tyr

310

315

320

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

325 330 335

- 132 031876

Tyr

Cys

Thr

Asp

385

Glu

Val

Ser

Ala

Thr

465

Tyr

Lys

Val

Leu

Cys

545

Tyr

Ser

Ile

Trp

Leu Ala Met 340

Lys

His

Gly 345

Ala Gly

Met Asn

Ser 350

Thr

Thr

Cys

Gly

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Ser

Asp

Ser

Gly

Ser

Thr

355

360

365

Cys

Cys

Gly

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

370

375

380

Met

Pro

Thr

Thr

Asp

Phe

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

390

395

400

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Asn

Val

Asn

Ala

405

410

415

Ile

Glu

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

Lys

Glu

Cys

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

420

425

430

Asp

Cys

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Gly

Glu

Cys

Asp

435

440

445

Tyr

Lys

Glu

Phe

Ile

Glu

Lys

Cys

Asn

Gly

Gly

Ala

Ala

Glu

Gly

450

455

460

Ser

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

470

475

480

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

485

490

495

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Ser

Thr

Ala

Glu

Ser

Lys

Cys

500

505

510

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

515

520

525

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

Leu

Asp

Glu

Asn

Ile

530

535

540

Gly

Ala

Asp

Asn

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

550

555

560

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Thr

Asp

Lys

565

570

575

Lys

Leu

Gln

Gln

Cys

Asn

Thr

Ser

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

- 133 031876

580

585

590

Pro

Leu Gly 595

Asn

Thr

Pro

His

Gly 600

Tyr Lys

Tyr

Val

Cys 605

Glu

Cys

Thr

Pro

Asn

Lys

Gln

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

610

615

620

Gln

Trp

Ile

Ser

Asp

Asn

Thr

Lys

Asn

Pro

Lys

Gly

Ser

Arg

Ser

625

630

635

Asn

Asn

Asp

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

Tyr

Asn

Gly

Val

Gln

Ile

Lys

645

650

655

Thr

Thr

Val

Arg

Ser

Asn

Ser

Thr

Lys

Leu

Asp

660

665

Arg

Asn

Thr

640

Pro <210>42 <211>348 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>42

Lys

Cys

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Lys

Gly

Leu

Gln

Lys

Tyr Ala Asn Thr

Ile

Gly

Leu

Pro 40

Pro Arg Thr Gln

Ser 45

Leu

Cys

35

Val

Val

Cys

Leu

Asp

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

50

55

60

Ile

Arg

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

65

70

75

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Lys

Gly

85

90

95

Asn

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

100

105

110

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

115

120

125

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Asn

Asn

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Asn

Glu

Leu

Asn

Phe

Asp

Tyr

Lys

Lys

- 134 031876

130

135

140

Tyr 145

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile 150

Ala

Ser

Asp

Glu

Asn 155

Thr

Ser

Tyr

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

165

170

175

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

Cys

180

185

190

Ser

Gly

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

Ser

Gly

Ser

Thr

195

200

205

Cys

Ser

Ser

Gly

Ser

Gly

Asp

Ser

Cys

Asp

Asp

Met

Pro

Thr

Ile

210

215

220

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

225

230

235

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln Glu 245

Lys

Val

Asn Ala 250

Val

Ile

Lys

Asn

Cys 255

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

260

265

270

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

Thr

Phe

Ile

Glu

Glu

Phe

275

280

285

Thr

Ala

Asp

Gly

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

290

295

300

Gln

Ile

Tyr

Lys

Met

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

305

310

315

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

325

330

335

Ser

160

Ile

Ser

Thr

Asp

Phe

240

Asn

Glu

Cys

Asp

Asn

320

Val

Ser Val Ser Thr Asp Glu Asn Lys

Cys Val Gln Ser

340

345

<210>	43
<211>	652
<212>	Белок
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная конструкция

- 135 031876 <400> 43

Asp 1

Tyr

Ile

Lys

Asp 5

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala 10

Glu

Tyr

Val

Thr

Lys 15

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

20

25

30

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Val

Cys

Asn

Pro

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

Ala

35

40

45

Ser

Val

Glu

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Asp

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

50

55

60

Asn

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

His

65

70

75

80

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

85

90

95

Ile

Glu

His

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

100

105

110

Phe

Leu

Arg

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Ser

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Glu

Ala

Cys

Glu

Lys

130

135

140

Asn

Leu

Glu

Lys

Val

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Cys

Asp

145

150

155

160

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Asn

Trp

Ile

Trp

165

170

175

Lys

Lys

Ser

Ser 180

Gly

Asn Glu

Lys

Gly 185

Leu

Gln Lys

Glu

Tyr Ala 190

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Val

Cys

195

200

205

Leu

Asp

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

Arg

Thr

210

215

220

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

225

230

235

240

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Asn

- 136 031876

245

250

255

Ser

Leu

Glu

Lys

305

Glu

Ala

Ser

Ser

Pro

385

Gln

Lys

Asn

Asp

Tyr

465

Ala

Lys

Leu Cys 260

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr 265

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr 270

Gly Asp

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

275

280

285

Leu 290

Asn

Leu

Gln

Asn

Asn 295

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe 300

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Asn

Ile

Ser

Thr

Glu

Gln

Asp

Thr

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

310

315

320

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

325

330

335

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

340

345

350

Gly

Ser

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

Ser

Gly

Ser

Thr

Thr

Cys

Ser

355

360

365

Gly Ser Gly Asp

Ser Cys Asp Asp Met

Pro Thr Thr Asp Phe

Ile

370

375

380

Gln

Tyr

Leu Arg

Phe 390

Leu

Gln

Glu

Trp

Val 395

Glu

His

Phe

Cys

Lys 400

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Asn

Ala

Val

Ile

Lys

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

405

410

415

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

420

425

430

Lys

Cys

Glu

Ala

Tyr

Lys

Thr

Phe

Ile

Glu

Glu

Phe

Cys

Thr

Ala

435

440

445

Gly

Gly

Thr

Ser

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

450

455

460

Lys

Met

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

470

475

480

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Val

Ser

Val

485

490

495

- 137 031876

Ser

Thr Asp

Glu 500

Asn

Lys

Cys

Val

Gln 505

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser 510

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

515

520

525

Ile

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Glu

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

530

535

540

Thr 545

Tyr Thr

Thr

Tyr Thr 550

Thr Thr Lys

Lys

Cys 555

Asn

Lys

Glu

Thr

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Cys

Asn

Thr

Ala

Val

Val

Val

Asn

Val

565

570

575

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Gly

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Glu

580

585

590

Lys

Ile

Pro

Thr

Thr

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

595

600

605

Asn

Gln

Trp

Ile

Ile

Asp

Thr

Ser

Lys

Lys

Gln

Lys

Gly

Ser

Gly

610

615

620

Gly

Lys

Asp

Asp

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

Tyr

Asn

Gly

Val

Asp

Val

625

630

635

Pro

Thr

Thr

Val

Arg

Ser

Asn

Ser

Thr

Lys

Leu

Asp

645

650

Phe

Ser

Thr

Asp

560

Pro

Cys

Met

Ser

Lys

640 <210> 44 <211> 628 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 44

Asp 1

Tyr

Ile

Lys

Asp 5

Asp

Pro

Tyr

Ser

Ala 10

Gln

Tyr

Thr

Thr

Lys 15

Ser

Phe

Ile

Leu 20

Asn

Pro

Ser

Asp

Ala 25

Asn

Thr

Ser

Ser

Glu 30

Lys

Gln

Lys

Asn 35

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys 40

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser 45

Gly

Ile

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Leu

Ile

Ser

Cys

- 138 031876

Ile 65

Thr

His

Ser

Ser

Ile 70

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys 75

Lys

Val

Cys

Lys

Val

Lys

Leu

Gly

Ile

Asn

Asn

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Arg

Val

Cys

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

115

120

125

Ser Ser Asn Gly Ser Cys

Asn Asn Asn Asn Glu Glu Ala Cys

Glu

130

135

140

Asn Leu 145

Asp

Glu

Ala

Pro 150

Ala

Ser

Leu

His

Asn 155

Gly

Tyr

Lys

Asn

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Lys

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Cys

Leu

195

200

205

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

His

Lys

Thr

Ile

Ser

Thr

Asn

Ser

210

215

220

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

225

230

235

Lys

Thr

Ser

His

Glu 245

Lys

Lys

Asn Asp

Asp 250

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu 255

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

260

265

270

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

275

280

285

Gln

Lys

Ala

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

290

295

300

Asp

Val

Asp

Ser

Lys

Gln

160

Lys

Thr

His

Glu

Leu

240

Cys

Gly

Leu

Asn

- 139 031876

Thr 305

Ala Glu Gln

Asp

Thr 310

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu 315

Asp Glu

Leu

Arg

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Ile

Ala

Met

Lys

325

330

335

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

Cys

Ser

Gly

Asp

Ser

340

345

350

Asn

Asp

Met

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

355

360

365

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

370

375

380

Asp

Val

Ile

Thr

Asn

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Asn

Lys

385

390

395

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

405

410

415

Thr

Phe

Ile Glu Asp 420

Cys

Asn Gly Gly 425

Gly

Thr

Gly Thr

Ala 430

Gly

Ser

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

435

440

445

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

450

455

460

Pro

Ser

Ser

Ile

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

465

470

475

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

485

490

495

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Glu

Asn

500

505

510

Cys

Gly

Asp

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

515

520

525

Thr

Lys

Asn

Cys

Asp

Ile

Gln

Lys

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Pro

530

535

540

Asn

Thr

Ser

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

545

550

555

Glu

320

His

Ser

Leu

Lys

Cys

400

Lys

Ser

His

Gly

Cys 480

Gly

Ser

Thr

Ile

Pro

560

- 140 031876

Tyr	Arg Tyr	Lys	Tyr 565	Ala	Cys	Glu	Cys
Ser	Cys	Asp	Asp	Arg	Lys	Glu	Tyr	Met
			580					585
Ala	Arg	Thr	Met	Lys	Arg	Gly	Tyr	Lys
		595					600
Lys	Tyr	Asn	Gly	Val	Asp	Val	Lys	Pro
	610					615
Ser	Lys	Leu	Asp

625 <210> 45 <211> 653 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 45

Asp 1	Tyr	Ile	Lys	Gly 5	Asp	Pro	Tyr	Phe
Ser	Phe	Ile	Leu 20	Asn	Pro	Ser	Asp	Thr 25
Ser	Lys	Tyr 35	Tyr	Asp	Glu	Ala	Cys 40	Asn
Ser	Val 50	Glu	Gln	Ala	Gln	Thr 55	Ser	Gly
Ile 65	Thr	His	Ser	Ser	Ile 70	Lys	Thr	Asn
Val	Lys	Leu	Gly	Val 85	Arg	Glu	Asn	Asp
Ile	Glu	Asp	Thr 100	Ser	Leu	Ser	Gly	Val 105
Leu	Leu	Gly 115	Ile	Leu	Gln	Glu	Asn 120	Cys

Ile Pro Thr Thr Glu Glu

575

Gln Trp Ser Cys Gly Ser

590

Asp Asn Tyr Glu Leu Cys

605

Thr Val Arg Ser Asn Ser

620

Glu Tyr Ala Thr Lys Leu

Asn Ala Ser Glu Thr Pro

Asn Glu Ser Glu Ile Ala

Ser Ser Asn Lys Thr Cys

Lys Lys Glu Cys Lys Asp

80

Asp Leu Lys Ile Cys Val

Asn Cys Cys Phe Lys Asp

110

Asp Asn Lys Arg Gly Ser

125

- 141 031876

Ser

Asn

145

Lys

Lys

Ile

Glu

Leu

225

Lys

Lys

Thr

Gln

Thr

305

Ser

Gly

Gly

Ser

Ser Asn Asp 130

Ser

Cys

Asn 135

Asn

Asn

Asn

Glu

Glu 140

Ala

Cys

Glu

Leu

Asp

Glu

Ala

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

150

155

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Thr

Val

Asn

Lys

Lys

Trp

Thr

Trp

165

170

175

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

180

185

190

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Cys

Leu

195

200

205

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Lys

His

Lys

Thr

Ile

Ser

Thr

Asn

Ser

210

215

220

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

230

235

Thr

Ser

His

Glu Lys 245

Lys

Asn Asp

Asp 250

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu 255

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

260

265

270

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

275

280

285

Lys

Ala

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

290

295

300

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

310

315

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

325

330

335

Ala

Glu

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

Gly

Ser

Gly

Asp

340

345

350

Asp

Ser 355

Ser

Ile

Thr Gly

Ser 360

Ser

Asp

Ser

Gly Ser 365

Thr

Thr

Gly

Asp

Asn

Gly

Ser

Ile

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Thr

370

375

380

Lys

Asp

160

Arg

Thr

His

Glu

Leu

240

Cys

Gly

Leu

Asn

Glu

320

His

Asn

Cys

Asp

- 142 031876

Phe

385

Cys

Ser

Cys

Gly

Ile

465

Lys

Ala

Phe

Ser

Thr

545

Asp

Pro

Cys

Met

Ser

625

Ile

Pro

Gln Tyr

Leu 390

Arg

Phe

Leu Gln

Glu Trp 395

Val

Glu

His

Phe 400

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Asn

Ser

Cys

Asn

405

410

415

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys

420

425

430

Lys

Asp 435

Glu

Cys

Glu Lys

Tyr 440

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu 445

Asp

Cys

Asn

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

450

455

460

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

470

475

480

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Ile

Thr

Asn

Ala

Ala

485

490

495

Ser

Thr

Asp 500

Glu

Asn

Lys

Cys

Val 505

Gln

Ser

Asp

Val

Asp 510

Ser

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

515

520

525

Ile

Val

Leu

Asp

Glu

Asn

Ser

Cys

Gly

Asp

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

530

535

540

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

550

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

555

Cys Asn Lys Glu Arg

560

Lys

Ser

Lys

Ser Gln 565

Ser

Ser Asp

Thr 570

Leu

Val

Val

Val

Asn 575

Val

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Glu

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Glu

580

585

590

Lys

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Asp

Tyr

595

600

605

Asn

Gln

Trp

Ile

Ser

Asp

Thr

Ser

Lys

Lys

Gln

Lys

Gly

Ser

Gly

610

615

620

Gly

Lys

Asp

Tyr

Tyr

Glu

Leu

Tyr

Thr

Tyr

Asn

Gly

Val

Gln

Ile

630 635 640

- 143 031876

Lys Gln Ala Ala Gly Arg Ser Ser Ser Thr Lys Leu Asp 645650 <210>46 <211>490 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>46

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser Glu Gln

Ser Lys 10

Lys

Asn

Asn

Asn 15

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Tyr

Ser

Gly

Asn

Gly

Glu

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

20

25

30

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

35

40

45

Val

Cys

Leu

His

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

His

Lys

Thr

Ile

Ser

50

55

60

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

65

70

75

80

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

85

90

95

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

100

105

110

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

115

120

125

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ala

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

130

135

140

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

145

150

155

160

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

165

170

175

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser

180

185

190

Gly

Ser

Gly

Asp

Asn

Gly

Asp

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

195

200

205

- 144 031876

Asp

Phe

225

Asn

Asn

Thr

Ser

Ile

305

Pro

Ile

Ser

Lys

Thr

385

Lys

Leu

Pro

Trp

Leu 210

Ile

Pro Gln

Tyr

Leu 215

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu Trp 220

Val

Glu His

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Asn

Ser

Cys

230

235

240

Ser

Cys

Lys

Asn

Thr

Ser

Gly

Glu

Arg

Lys

Ile

Gly

Gly

Thr

Cys

245

250

255

Ser

Asp

Cys

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Val

Ala

Cys

Asp

Ala

Tyr

Lys

260

265

270

Phe

Ile

Glu

Glu

Cys

Arg

Thr

Ala

Val

Gly

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

275

280

285

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

290

295

300

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

310

315

320

Ser

Ser

Thr

Thr 325

Asn

Ala

Ala

Glu

Asn 330

Lys

Cys

Val

Gln

Ser 335

Asp

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

340

345

350

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Glu

Asn

Ser

Cys

Gly

Ala

Asp

355

360

365

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

370

375

380

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

390

395

400

Ser

Gln

Gln

Ser

Asn

Thr

Ser

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

405

410

415

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Glu

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Glu

Cys

Lys

Ile

420

425

430

Thr

Thr

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

435

440

445

Ile

Ile

Asp

Asn

Thr

Lys

Asn

Pro

Lys

Gly

Ser

Gly

Ser

Thr

Asp

- 145 031876

450

455

460

Asn

465

Asp Tyr

Glu Leu

Tyr

470

Thr Tyr

Asn

Gly

Val

475

Gln

Ile

Lys

Gln

Ala

480

Ala

Gly Arg

Ser Ser

485

Ser

Thr Lys

Leu

Asp

490 <210>47 <211>335 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>47

Lys 1

Cys

Glu

Lys

Cys 5

Lys

Ser Gly

Thr

Ser Thr Val 10

Asn

Asn

Lys 15

Trp

Ile

Trp

Arg

Lys

Ser

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

20

25

30

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

35

40

45

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Lys

Gly

Val

Thr

Asp

Ile

Ile

50

55

60

Tyr

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ser

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

65

70

75

80

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Leu

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

85

90

95

Asp

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

100

105

110

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

115

120

125

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

130

135

140

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

145

150

155

160

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

165

170

175

Ile

Trp

Ile

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

- 146 031876

180

185

190

Ser

Ser

Gly 195

Ser

Gly

Asp

Ser

Ser Asn 200

Asp

Ile

Pro

Thr 205

Thr

Asp

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Asn

Phe

210

215

220

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Pro

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Asn

225

230

235

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly 245

Gly

Thr

Cys

Asn Gly 250

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys 255

Lys

Val

Ala

Cys

Asp

Ala

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Asp

Gly

Thr

Gly

260

265

270

Gly

Gly

Gly

Ser

Arg

Pro

Thr

Gly

Ile

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

Ser

275

280

285

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

290

295

300

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

305

310

315

Thr

Asn

Val

Ser

Val

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

325

330

335

Phe

Cys

Ser

240

Cys

Ser

Lys

Ala

Ile

320

<210>	48
<211>	637
<212>	Белок
<213>	Искусственная
<220> <223>	Искусственная

<400> 48 конструкция

Asn 1

Tyr

Ile

Lys

Asp 5

Asp

Pro

Tyr

Ser

Lys 10

Glu

Tyr

Val

Thr

Lys 15

Ser

Phe

Ile

Pro 20

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala 25

Asn

Thr

Ser

Ser

Glu 30

Lys

Gln

Lys

Asn 35

Asn

Asp

Glu

Val

Cys 40

Asn

Pro

Asn

Glu

Ser 45

Gly

Ile

Ser

Val

Glu

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Asp

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

55 60

Leu

Ile

Ser

Cys

- 147 031876

Ile 65

Thr

His

Ser

Ser

Ile 70

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys 75

Lys

Glu

Cys

Lys

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

85

90

95

Ile

Glu

His

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Phe

Lys

100

105

110

Phe

Leu

Arg

Met

Leu

Gln

Glu

Pro

Arg

Ile

Asp

Lys

Asn

Gln

Arg

115

120

125

Ser

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asp

Lys

Asn

Ser

Glu

Glu

Ala

Cys

130

135

140

Lys

Asn

Leu

Asp

Glu

Ala

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

145

150

155

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Asn

Lys

Trp

165

170

175

Trp

Lys

Lys

Phe

Pro

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

180

185

190

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Tyr

Leu

Cys

Leu

Val

195

200

205

Cys

Leu

Asp

Glu

Lys

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

210

215

220

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

225

230

235

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Pro

Gln

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

245

250

255

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

Leu

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

260

265

270

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

275

280

285

Val

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Asn

Asn

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

290

295

300

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Asp

Val

Asp

Gly

Glu

Cys

160

Ile

Ala

Val

Arg

Glu

240

Asn

Gly

Asn

Tyr

Leu

- 148 031876

305

Asp

Leu

Asp

Ile

His

385

Cys

Asn

Cys

Lys

Ala

465

Thr

Phe

Leu

Trp

Lys

545

310

315

320

Glu Leu

Arg

Glu 325

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr 330

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile 335

Trp

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

340

345

350

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

355

360

365

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

370

375

380

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Thr

Asn

390

395

400

Asn Ser

Cys

Lys 405

Glu

Ser Gly

Asn

Lys 410

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys 415

Lys

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

420

425

430

Gly

Thr

Ala

Val

Gly

Gly

Thr

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

435

440

445

Arg 450

Trp

Asp Gln

Ile

Tyr Lys 455

Arg Tyr

Ser

Lys 460

His

Ile

Glu

Asp

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

470

475

480

Thr

Asn

Ala

Ala

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

485

490

495

Phe

Lys

His 500

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly 505

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser 510

Ser

Tyr

Ser

Ile

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

515

520

525

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Glu

Asn

Cys

Asp

Ile

Gln

Lys

530

535

540

Thr

Pro

Lys

Ser

Gln

550

Ser

Cys

Asp

Thr

Leu

555

Val

Val

Val

Asn

Val

560

- 149 031876

Pro	Ser	Pro	Leu	Gly 565	Asn	Thr	Pro	His
Cys	Arg	Thr	Pro	Asn	Lys	Gln	Glu	Ser
			580					585
Met	Asn	Gln	Trp	Ile	Ile	Asp	Asn	Thr
		595					600
Ser	Gly	Lys	Asp	Tyr	Tyr	Glu	Leu	Cys
	610					615
Thr	Lys	Pro	Leu	Gly	Thr	Leu	Lys	Asn
625					630

<210>49 <211>330 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>49

Lys 1	Cys	Asp	Lys	Cys 5	Lys	Ser	Glu	Gln
Trp	Ile	Trp	Arg 20	Lys	Phe	Pro	Gly	Lys 25
Tyr	Ala	Asn 35	Thr	Ile	Gly	Leu	Pro 40	Pro
Val	Cys 50	Leu	His	Glu	Lys	Glu 55	Gly	Lys
Thr 65	Asn	Ser	Glu	Leu	Leu 70	Lys	Glu	Trp
Gly	Lys	Asn	Leu	Lys 85	Thr	Thr	Tyr	Leu
Lys	Lys	Lys	Leu 100	Cys	Lys	Ala	Leu	Lys 105
Asp	Leu	Ile 115	Lys	Gly	Thr	Ser	Ile 120	Trp
Leu	Glu 130	Leu	Asn	Leu	Gln	Lys 135	Ile	Phe

Tyr Lys Tyr Ala Cys Gln

575

Asp Asp Arg Lys Glu Tyr

590

Asn Pro Lys Gly Ser Gly

605

Tyr Asn Gly Val Lys Glu

620

Lys Leu Asp

635

Lys Lys Asn Asn Asn Lys

Gly Gly Leu Gln Lys Glu

Thr Gln Ser Leu Cys Leu

Gln His Lys Thr Ile Ser

Ile Ala Ala Phe His Glu

80

Lys Lys Asn Ala Glu Asn

Ser Phe Ala Asp Tyr Gly

110

Asn Glu Tyr Thr Lys Asp

125

Lys Leu Phe Arg Lys Tyr

140

- 150 031876

Ile 145	Lys	Lys	Asn	Asn	Thr 150	Ala	Glu	Gln
Asp	Glu	Leu	Arg	Glu 165	Ser	Trp	Trp	Asn
Thr	Ala	Met	Lys 180	His	Gly	Ala	Gly	Met 185
Asp	Gly	Ser 195	Val	Thr	Gly	Ser	Gly 200	Ser
Thr	Asp 210	Phe	Ile	Pro	Gln	Tyr 215	Leu	Arg
His 225	Phe	Cys	Lys	Gln	Arg 230	Gln	Ala	Lys
Cys	Lys	Ser	Cys	Lys 245	Glu	Ser	Gly	Asn
Asn	Lys	Cys	Asp 260	Ala	Tyr	Lys	Thr	Phe 265
Val	Gly	Gly 275	Thr	Ala	Gly	Ser	Ser 280	Trp
Tyr	Lys 290	Arg	Tyr	Ser	Lys	His 295	Ile	Glu
Ala 305	Gly	Thr	Lys	Asn	Cys 310	Gly	Thr	Ser
Ser	Thr	Ala	Glu	Asn 325	Lys	Cys	Val	Gln

<210>50 <211>269 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>50

Asn Tyr Ile Lys Asp Asp Pro Tyr Ser

Ser Phe Ile Leu Asn Ser Ser Asp Ala

25

Thr 155	Ser	Tyr	Ser	Ser	Leu 160
Asn	Lys	Lys	Tyr	Ile 175	Trp
Gly	Thr	Met	Cys 190	Asn	Ala
Cys	Asp	Asp 205	Met	Pro	Thr
Leu	Gln 220	Glu	Trp	Val	Glu
Lys 235	Asp	Val	Ile	Glu	Asn 240
Cys	Lys	Thr	Glu	Cys 255	Lys
Glu	Glu	Cys	Gly 270	Thr	Ala
Lys	Arg	Trp 285	Asp	Gln	Ile
Ala	Lys 300	Arg	Asn	Arg	Lys
Thr	Thr	Asn	Ala	Ala	Ala

315 320

Glu	Tyr	Val	Thr	Lys 15	Leu
Asn	Ala	Ser	Glu 30	Thr	Pro

- 151 031876

Ser	Lys	Tyr 35	Tyr	Asp	Glu	Ala	Cys 40	Asn
Ser	Val 50	Glu	Gln	Ala	Ser	Ile 55	Ser	Asp
Asn 65	Thr	His	Ser	Phe	Ile 70	Gly	Ala	Asn
Val	Lys	Leu	Gly	Val 85	Arg	Glu	Asn	Asp
Ile	Glu	Asp	Asp 100	Ser	Leu	Arg	Gly	Val 105
Phe	Leu	Arg 115	Met	Leu	Gln	Glu	Pro 120	Arg
Ser	Ser 130	Ser	Asn	Asp	Ser	Cys 135	Asn	Asn
Lys 145	Asn	Leu	Asp	Glu	Ala 150	Leu	Ala	Ser
Gln	Lys	Cys	Lys	Ser 165	Glu	Gln	Ser	Lys
Trp	Lys	Lys	Ser 180	Ser	Gly	Lys	Glu	Gly 185
Asn	Thr	Ile 195	Gly	Leu	Pro	Pro	Arg 200	Thr
Leu	His 210	Glu	Lys	Glu	Gly	Lys 215	Thr	Gln
Ser 225	Glu	Leu	Leu	Lys	Glu 230	Trp	Ile	Ile
Asn	Leu	Lys	Thr	Thr 245	Tyr	Leu	Glu	Lys
Lys	Leu	Cys	Lys 260	Ala	Leu	Lys	Tyr	Ser 265

Asn	Glu	Ser 45	Gly	Ile	Ser
Ser	Ser 60	Gln	Lys	Ala	Cys
Lys 75	Lys	Val	Cys	Lys	His 80
Asp	Leu	Lys	Ile	Cys 95	Val
Asn	Cys	Cys	Phe 110	Lys	Asp
Asp	Lys	Asn 125	Gln	Arg	Gly
Asn	Glu 140	Glu	Ala	Cys	Glu
His 155	Asn	Gly	Tyr	Lys	Asn 160
Asn	Asn	Asn	Lys	Trp 175	Ile
Leu	Gln	Lys	Glu 190	Tyr	Ala
Ser	Leu	Cys 205	Leu	Val	Cys
Lys	Thr 220	Ile	Ser	Thr	Asn
Ala 235	Phe	His	Glu	Gly	Lys 240
Lys	Gly	Asp	Asn	Gly 255	Lys
Ala	Asp	Tyr

<210> 51 <211> 347 <212> Белок

- 152 031876 <213> Plasmodium falciparum <400> 51

Lys 1

Cys

Asp

Lys

Cys 5

Lys

Ser Glu

Gln

Ser 10

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys 15

Trp

Ile

Trp

Lys 20

Lys

Ser

Ser

Gly

Lys 25

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln 30

Lys

Tyr

Ala

Asn 35

Thr

Ile

Ala

Leu

Pro 40

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser 45

Leu

Cys

Val

Val 50

Cys

Leu

His

Glu

Lys 55

Glu

Gly

Lys

Thr

Gln 60

His

Lys

Thr

Ser

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Asp

Ala

Phe

65

70

75

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Leu

Glu

Lys

Gln

Asn

Ala

85

90

95

Asn

Gly

Lys

Lys

Asn

Ala

Asp

Asn

Asn

Ser

Lys

Leu

Cys

Lys

Asp

100

105

110

Lys

Tyr

Ser 115

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly Asp 120

Leu

Ile

Lys

Gly 125

Thr

Ser

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Gln

130

135

140

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Ile

Ala

Ser

145

150

155

Glu

Asn

Thr

Leu

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

165

170

175

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

180

185

190

Met

Asn

Gly 195

Thr

Thr

Cys

Ser

Ser 200

Gly

Ser

Gly

Asp

Ser 205

Ser

Ser

Glu

Asn

Gln

Thr

Asn

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

210

215

220

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

225

230

235

Asn

Glu

Leu

Ile

His

Asp

Leu

Ile

Ile

Asp

160

Trp

Glu

Gly

Ile

Glu

240

- 153 031876

Gln	Arg	Gln	Ala	Lys 245	Val	Lys	Asp	Val
Lys	Glu	Ser	Gly 260	Gly	Thr	Cys	Asn	Ser 265
Gly	Glu	Cys 275	Glu	Lys	Tyr	Lys	Lys 280	Phe
Gly	Thr 290	Glu	Gly	Thr	Ser	Gly 295	Ser	Ser
Ile 305	Tyr	Met	Arg	Tyr	Ser 310	Lys	Tyr	Ile
Lys	Ala	Gly	Thr	Lys 325	Ser	Cys	Gly	Thr
Val	Thr	Thr	Thr 340	Glu	Ser	Lys	Cys	Val 345

<210>52 <211>269 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>52

Asp 1	Tyr	Ile	Lys	Asp 5	Asp	Pro	Tyr	Ser
Ser	Phe	Ile	Leu 20	Asn	Ser	Ser	Asp	Ala 25
Gln	Lys	Asn 35	Asn	Asp	Glu	Val	Cys 40	Asn
Ser	Val 50	Glu	Gln	Ala	Gln	Thr 55	Ser	Arg
Ile 65	Thr	His	Ser	Ser	Ile 70	Lys	Ala	Asn
Val	Lys	Leu	Gly	Val 85	Arg	Glu	Asn	Asp
Ile	Glu	His	Thr 100	Ser	Leu	Ser	Gly	Val 105

Thr	Asn	Cys	Lys	Ser 255	Cys
Cys	Lys	Thr	Lys 270	Cys	Lys
Glu	Lys	Cys 285	Lys	Gly	Gly
Val	Lys 300	Arg	Trp	Tyr	Gln
Asp 315	Ala	Lys	Arg	Asn	Arg 320
Ser	Gly	Ala	Asn	Ser	Gly

335

Ser

Glu	Tyr	Thr	Thr	Lys 15	Leu
Thr	Ser	Ser	Glu 30	Lys	Ile
Asn	Glu	Ser 45	Glu	Ile	Ser
Ser	Ser 60	Asn	Lys	Thr	Cys
Lys 75	Lys	Val	Cys	Lys	Asp 80
Val	Leu	Arg	Val	Cys 95	Val
Asn	Cys	Cys	Cys 110	Gln	Asp

- 154 031876

Leu	Leu	Gly 115	Ile	Leu	Gln	Glu	Asn 120	Cys
Ser	Ser 130	Asn	Gly	Ser	Cys	Asp 135	Lys	Asn
Asn 145	Leu	Asp	Glu	Ala	Leu 150	Ala	Ser	Leu
Lys	Cys	Lys	Ser	Glu 165	Gln	Ser	Lys	Lys
Lys	Lys	Ser	Ser 180	Gly	Asn	Glu	Lys	Gly 185
Thr	Ile	Gly 195	Leu	Pro	Pro	Arg	Thr 200	Gln
His	Glu 210	Lys	Glu	Gly	Lys	Thr 215	Gln	Glu
Ser 225	Glu	Leu	Leu	Lys	Glu 230	Trp	Ile	Ile
Asn	Leu	Lys	Thr	Thr 245	Tyr	Pro	Gln	Asn
Lys	Leu	Phe	Lys 260	Asp	Leu	Lys	Tyr	Ser 265

<210>	53
<211>	646
<212>	Белок
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная конструкция
<400>	53
Asp Tyr Ile Lys Asp Asp Pro Tyr Ser
1	5

Ser Phe Ile Leu Asn Ser Ser Asp Ala

25

Gln Lys Asn Asn Asp Glu Val Cys Asn

40

Asp	Asn	Lys 125	Arg	Gly	Ser
Glu	Glu 140	Ala	Cys	Glu	Lys
Asn 155	Cys	Tyr	Lys	Asn	Gln 160
Asn	Asn	Lys	Trp	Ile 175	Trp
Gln	Lys	Glu	Tyr 190	Ala	Asn
Leu	Cys	Leu 205	Val	Cys	Leu
Lys	Asn 220	Ile	Ser	Thr	Asn
Ala 235	Phe	His	Glu	Gly	Lys 240
Asn	Asp	Asp	Asn	Gly	Lys

255

Ala Asp Tyr

Glu Tyr Thr Thr Lys Leu

Thr Ser Ser Glu Lys Ile

Asn Glu Ser Glu Ile Ser

- 155 031876

Ser

Ile

Val

Ile

Leu

Ser

Asn

145

Lys

Lys

Thr

Pro

Thr

225

Gly

Gly

Asp

Leu

Val 50

Glu

Gln Ala

Gln

Thr 55

Ser

Arg

Pro

Ser

Ser 60

Asn

Lys

Thr

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

70

75

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Arg

Val

Cys

85

90

95

Glu

His

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

100

105

110

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

115

120

125

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asp

Lys

Asn

Ser

Glu

Glu

Ala

Cys

Glu

130

135

140

Leu

Asp

Glu

Ala

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Asn

150

155

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Asn

Lys

Trp

Ile

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

195

200

205

Lys 210

Leu Glu

Asn

Val

Cys 215

Lys

Gly Val

Thr

Asp 220

Ile

Asn

Phe

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Ala

Ala

Phe

His

230

235

Lys

Asn

Leu

Lys

Thr

Thr

Tyr

Leu

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

245

250

255

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

260

265

270

Leu

Ile 275

Lys

Gly Thr

Ser

Ile 280

Trp Asp

Asn

Glu

Tyr 285

Thr

Lys

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ala

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

290

295

300

Cys

Asp

Val

Asp

Ser

Lys

Gln

160

Trp

Asn

Leu

Asp

Glu

240

Asn

Gly

Asp

Tyr

- 156 031876

Ile 305

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr 310

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr 315

Ser

Tyr

Ser

Ser

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

325

330

335

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Gly

Thr

Thr

Cys

Ser

340

345

350

Gly

Ser

Gly

Asp

Ser

Ser

Asn

Asp

Ile

Pro

Thr

Thr

Asp

Phe

Ile

355

360

365

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Asn

Phe

Cys

Glu

370

375

380

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Asn

Ser

Cys

385

390

395

Asn Thr Ser

Gly

Glu 405

Arg Lys

Ile

Gly

Asp Thr 410

Cys Asn

Ser

Asp 415

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

420

425

430

Asp

Cys

Lys

Gly

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

Val

Lys

435

440

445

Trp

Asp Gln 450

Ile

Tyr

Lys

Arg Tyr 455

Ser

Lys

His

Ile Glu 460

Asp

Ala

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Ile

Thr

Thr

Gly

465

470

475

Ile

Ser

Gly

Glu

Ser

Ser

Gly

Ala

Thr

Ser

Gly

Val

Thr

Thr

Thr

485

490

495

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

500

505

510

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

515

520

525

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Glu

Asp

Asn

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

530

535

540

Tyr Thr Thr Glu Lys Cys Asn Lys Glu Thr Asp Lys Ser Lys Ser 545 550 555

Leu

320

Trp

Ser

Pro

Gln

Lys

400

Cys

Glu

Arg

Lys

Thr

480

Glu

Ile

Asp

Thr

Gln

560

- 157 031876

Gln	Ser	Asn	Thr	Ala 565	Val	Val	Val	Asn
Thr	Pro	His	Gly	Tyr	Lys	Tyr	Ala	Cys
			580					585
Glu	Glu	Thr	Cys	Asp	Asp	Arg	Lys	Glu
		595					600
Gly	Ser	Ala	Gln	Thr	Val	Arg	Asp	Arg
	610					615
Leu	Cys	Lys	Tyr	Asn	Gly	Val	Gln	Ile
625					630
Lys	Asn	Ser	Lys	Leu	Asp
				645

<210>54 <211>632 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>54

Asn 1	Tyr	Ile	Lys	Gly 5	Asp	Pro	Tyr	Phe
Ser	Phe	Ile	Leu 20	Asn	Ser	Ser	Asp	Ala 25
Gln	Lys	Asn 35	Asn	Asp	Glu	Val	Cys 40	Asn
Ser	Val 50	Glu	Gln	Glu	Gln	Ile 55	Ser	Asp
Ile 65	Thr	His	Ser	Ser	Ile 70	Lys	Ala	Asn
Val	Lys	Leu	Gly	Val 85	Arg	Glu	Asn	Asp
Ile	Glu	His	Thr 100	Ser	Leu	Ser	Gly	Val 105
Phe	Leu	Arg 115	Ile	Leu	Gln	Glu	Asn 120	Cys

Pro	Ser	Pro	Leu	Gly 575	Asn
Cys	Lys	Ile	Pro 590	Thr	Thr
Met	Asn	Gln 605	Trp	Ser	Cys
Gly	Lys 620	Asp	Asp	Tyr	Glu
Gln 635	Ala	Ala	Gly	Thr	Leu 640

Glu	Tyr	Ala	Thr	Lys 15	Leu
Asn	Pro	Ser	Glu 30	Lys	Ile
Asn	Glu	Ser 45	Gly	Ile	Ala
Ser	Ser 60	Asn	Lys	Thr	Cys
Lys 75	Lys	Val	Cys	Lys	His 80
Asp	Leu	Arg	Val	Cys 95	Val
Asn	Cys	Cys	Cys 110	Gln	Asp
Asp	Asn	Lys 125	Ser	Gly	Ser

- 158 031876

Ser

Ser 130

Asn Gly

Ser

Cys

Asn 135

Asn

Lys

Asn Gln

Glu 140

Ala

Cys

Glu

Asn

Leu

Glu

Lys

Val

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Cys

145

150

155

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Asn

Trp

Ile

165

170

175

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

180

185

190

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Val

195

200

205

Leu

Asp

Glu

Lys

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

Arg

210

215

220

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

225

230

235

Lys

Asn

Leu

Lys

Pro

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

245

250

255

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

260

265

270

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

275

280

285

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

290

295

300

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

305

310

315

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

325

330

335

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

Asp

340

345

350

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

355

360

365

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Lys

Asp

160

Trp

Asn

Cys

Thr

Gly

240

Lys

Leu

Glu

Lys

Glu

320

Ala

Gly

Asp

Phe

- 159 031876

370

375

380

Cys 385

Lys

Gln

Arg Gln

Glu 390

Lys

Val

Lys

Pro

Val 395

Ile Glu

Asn

Cys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

405

410

415

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Val

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Asp

Cys

420

425

430

Gly

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

435

440

445

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

450

455

460

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

465

470

475

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

485

490

495

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

500

505

510

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

515

520

525

Thr Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu Lys 535

Cys

Asn

Lys

Glu

Thr 540

Asp

Lys

Ser

530

Leu

Gln

Gln

Cys

Asn

Thr

Ala

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

545

550

555

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Gly

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

565

570

575

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

580

585

590

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

595

600

605

Tyr

Glu

610

Leu

Cys

Lys

Tyr

Asn

615

Gly

Val

Asp

Val

Lys

620

Pro

Thr

Thr

Lys

400

Glu

Lys

Gln

Arg

Ala

480

Leu

Leu

Thr

Lys

Leu

560

Pro

Trp

Asn

Val

- 160 031876

Arg Ser Asn Ser Ser Lys Leu Asp

625630 <210>55 <211>2730 <212> Белок <213> Plasmodium falciparum <400>55

Met 1

Asp

Lys

Ser

Ser 5

Ile Ala Asn

Lys

Ile Glu Ala Tyr 10

Leu

Gly 15

Ala

Lys

Ser

Asp

Asp

Ser

Lys

Ile

Asp

Gln

Ser

Leu

Lys

Ala

Asp

Pro

Ser

20

25

30

Glu

Val

Gln

Tyr

Tyr

Gly

Ser

Gly

Gly

Asp

Gly

Tyr

Tyr

Leu

Arg

Lys

35

40

45

Asn

Ile

Cys

Lys

Ile

Thr

Val

Asn

His

Ser

Asp

Ser

Gly

Thr

Asn

Asp

50

55

60

Pro

Cys

Asp

Arg

Ile

Pro

Pro

Pro

Tyr

Gly

Asp

Asn

Asp

Gln

Trp

Lys

65

70

75

80

Cys

Ala

Ile

Ile

Leu

Ser

Lys

Val

Ser

Glu

Lys

Pro

Glu

Asn

Val

Phe

85

90

95

Val

Pro

Pro

Arg

Arg

Gln

Arg

Met

Cys

Ile

Asn

Asn

Leu

Glu

Lys

Leu

100

105

110

Asn

Val

Asp

Lys

Ile

Arg

Asp

Lys

His

Ala

Phe

Leu

Ala

Asp

Val

Leu

115

120

125

Leu

Thr

Ala

Arg

Asn

Glu

Gly

Glu

Arg

Ile

Val

Gln

Asn

His

Pro

Asp

130

135

140

Thr

Asn

Ser

Ser

Asn

Val

Cys

Asn

Ala

Leu

Glu

Arg

Ser

Phe

Ala

Asp

145

150

155

160

Ile

Ala

Asp

Ile

Ile

Arg

Gly

Thr

Asp

Leu

Trp

Lys

Gly

Thr

Asn

Ser

165

170

175

Asn

Leu

Glu

Gln

Asn

Leu

Lys

Gln

Met

Phe

Ala

Lys

Ile

Arg

Glu

Asn

180

185

190

Asp

Lys

Val

Leu

Gln

Asp

Lys

Tyr

Pro

Lys

Asp

Gln

Asn

Tyr

Arg

Lys

195

200

205

- 161 031876

Leu

Ile

225

Arg

Lys

Pro

Glu

Thr

305

Cys

Ser

Asn

Val

Asn

385

Ser

Gln

Ser

Ile

Arg Glu 210

Asp

Trp

Trp

Asn Ala Asn Arg 215

Gln

Lys 220

Val

Trp

Glu

Thr

Cys

Gly

Ala

Arg

Ser

Asn

Asp

Leu

Leu

Ile

Lys

Arg

Gly

230

235

Thr

Ser

Gly

Lys

Ser

Asn

Gly

Asp

Asn

Lys

Leu

Glu

Leu

Cys

245

250

255

Cys

Gly

His

Tyr

Glu

Glu

Lys

Val

Pro

Thr

Lys

Leu

Asp

Tyr

260

265

270

Gln

Phe

Leu

Arg

Trp

Leu

Thr

Glu

Trp

Ile

Glu

Asp

Phe

Tyr

275

280

285

Lys

Gln

Asn

Leu

Ile

Asp

Asp

Met

Glu

Arg

His

Arg

Glu

Glu

290

295

300

Ser

Glu

Asp

His

Lys

Ser

Lys

Glu

Gly

Thr

Ser

Tyr

Cys

Ser

310

315

Lys

Asp

Lys

Cys

Lys

Lys

Tyr

Cys

Glu

Cys

Val

Lys

Lys

Trp

325

330

335

Glu

Trp

Glu

Asn

Gln

Lys

Asn

Lys

Tyr

Thr

Glu

Leu

Tyr

Gln

340

345

350

Lys

Asn

Glu

Thr

Ser

Gln

Lys

Asn

Thr

Ser

Arg

Tyr

Asp

Asp

355

360

365

Lys 370

Asp

Phe

Phe

Lys

Lys 375

Leu

Glu

Ala

Asn

Tyr 380

Ser

Ser

Leu

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys

390

395

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Glu

Lys

405

410

415

Lys

Asn

Asn 420

Asp

Glu Val

Cys

Asn 425

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly 430

Ile

Val

Glu

Gln

Glu

Gln

Ile

Ser

Asp

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

435

440

445

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

450

455

460

Val

Trp

240

Arg

Val

Arg

Cys

Thr

320

Lys

Gln

Tyr

Glu

Leu

400

Ile

Ala

Cys

His

- 162 031876

Val

465

Ile

Phe

Ser

Asn

Lys

545

Lys

Thr

Leu

Asn

Lys

625

Lys

Ile

Leu

Lys

Leu

705

Lys

Leu

Gly Val

Arg 470

Glu

Asn Asp

Lys

Asp 475

Leu

Arg

Val

Cys

Glu

His

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

485

490

495

Leu

Arg

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Ser

Gly

500

505

510

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Glu

Ala

Cys

Glu

515

520

525

Leu

Glu

Lys

Val

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Cys

530

535

540

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Asn

Trp

Ile

550

555

Lys

Ser

Ser Gly Lys 565

Glu Gly

Gly Leu 570

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala 575

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Val

580

585

590

Asp

Glu

Lys

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

Arg

595

600

605

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

610

615

620

Asn

Leu

Lys

Pro

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

630

635

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

645

650

655

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

660

665

670

Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

675

680

685

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

690

695

700

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

710 715

Val

480

Asp

Ser

Lys

Asp

Trp

560

Asn

Cys

Thr

Gly

Lys

640

Leu

Glu

Lys

Glu

Ala

720

- 163 031876

Met

Lys

His

Gly Ala Gly Met Asn Ser Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

Asp 735

Gly

725

730

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

740

745

750

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

755

760

765

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Pro

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Lys

770

775

780

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

785

790

795

800

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Val

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Asp

Cys

Lys

805

810

815

Gly

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

820

825

830

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

835

840

845

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

850

855

860

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

865

870

875

880

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

Leu

885

890

895

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

900

905

910

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Thr

Asp

Lys

Ser

Lys

915

920

925

Leu

Gln

Gln

Cys

Asn

Thr

Ala

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

930

935

940

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Gly

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro

945

950

955

960

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

- 164 031876

965

970

975

Ser Cys Gly Ser Ala Arg

980

Thr Met Lys Arg Gly Tyr Lys Asn Asp Asn

985 990

Tyr

Glu

Leu

995

Cys

Lys Tyr

Asn Gly Val Asp Val Lys Pro Thr Thr Val 1000

1005

Arg

Ser 1010

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu 1015

Asp

Asp

Lys

Asp

Val 1020

Thr

Phe

Phe

Asn

Leu

Phe

Glu

Gln

Trp

Asn

Lys

Glu

Ile

Gln

Tyr

Gln

Ile

Glu

1025

1030

1035

Gln

Tyr

Met

Thr

Asn

Thr

Lys

Ile

Ser

Cys

Asn

Asn

Glu

Lys

Asn

1040

1045

1050

Val

Leu

Ser

Arg

Val

Ser

Asp

Glu

Ala

Ala

Gln

Pro

Lys

Phe

Ser

1055

1060

1065

Asp

Asn

Glu

Arg

Asp

Arg

Asn

Ser

Ile

Thr

His

Glu

Asp

Lys

Asn

1070

1075

1080

Cys

Lys

Glu

Lys

Cys

Lys

Cys

Tyr

Ser

Leu

Trp

Ile

Glu

Lys

Ile

1085

1090

1095

Asn

Asp

Gln

Trp

Asp

Lys

Gln

Lys

Asp

Asn

Tyr

Asn

Lys

Phe

Gln

1100

1105

1110

Arg

Lys

Gln

Ile

Tyr

Asp

Ala

Asn

Lys

Gly

Ser

Gln

Asn

Lys

Lys

1115

1120

1125

Val

Val

Ser

Leu

Ser

Asn

Phe

Leu

Phe

Phe

Ser

Cys

Trp

Glu

Glu

1130

1135

1140

Tyr

Ile

Gln

Lys

Tyr

Phe

Asn

Gly

Asp

Trp

Ser

Lys

Ile

Lys

Asn

1145

1150

1155

Ile

Gly

Ser

Asp

Thr

Phe

Glu

Phe

Leu

Ile

Lys

Lys

Cys

Gly

Asn

1160

1165

1170

Asp

Ser

Gly

Asp

Gly

Glu

Thr

Ile

Phe

Ser

Glu

Lys

Leu

Asn

Asn

1175

1180

1185

Ala

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

Glu

Asn

Glu

Ser

Thr

Asn

Asn

Lys

Met

1190

1195

1200

- 165 031876

Lys

Ser 1205

Ser

Glu

Thr

Ser

Cys 1210

Asp

Cys

Ser

Glu

Pro 1215

Ile

Tyr

Ile

Arg

Gly

Cys

Gln

Pro

Lys

Ile

Tyr

Asp

Gly

Lys

Ile

Phe

Pro

Gly

1220

1225

1230

Lys

Gly

Gly

Glu

Lys

Gln

Trp

Ile

Cys

Lys

Asp

Thr

Ile

Ile

His

1235

1240

1245

Gly

Asp

Thr

Asn

Gly

Ala

Cys

Ile

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Asn

Leu

1250

1255

1260

Cys

Val

Gly

Glu

Leu

Trp

Asp

Lys

Arg

Tyr

Gly

Gly

Arg

Ser

Asn

1265

1270

1275

Ile

Lys

Asn

Asp

Thr

Lys

Glu

Ser

Leu

Lys

Gln

Lys

Ile

Lys

Asn

1280

1285

1290

Ala

Ile

Gln

Lys

Glu

Thr

Glu

Leu

Leu

Tyr

Glu

Tyr

His

Asp

Lys

1295

1300

1305

Gly

Thr

Ala

Ile

Ile

Ser

Arg

Asn

Pro

Met

Lys

Gly

Gln

Lys

Glu

1310

1315

1320

Lys

Glu

Glu

Lys

Asn

Asn

Asp

Ser

Asn

Gly

Leu

Pro

Lys

Gly

Phe

1325

1330

1335

Cys

His

Ala

Val

Gln

Arg

Ser

Phe

Ile

Asp

Tyr

Lys

Asn

Met

Ile

1340

1345

1350

Leu

Gly

Thr

Ser

Val

Asn

Ile

Tyr

Glu

Tyr

Ile

Gly

Lys

Leu

Gln

1355

1360

1365

Glu

Asp

Ile

Lys

Lys

Ile

Ile

Glu

Lys

Gly

Thr

Thr

Lys

Gln

Asn

1370

1375

1380

Gly

Lys

Thr

Val

Gly

Ser

Gly

Ala

Glu

Asn

Val

Asn

Ala

Trp

Trp

1385

1390

1395

Lys

Gly

Ile

Glu

Gly

Glu

Met

Trp

Asp

Ala

Val

Arg

Cys

Ala

Ile

1400

1405

1410

Thr

Lys

Ile

Asn

Lys

Lys

Gln

Lys

Lys

Asn

Gly

Thr

Phe

Ser

Ile

1415

1420

1425

Asp

Glu

Cys

Gly

Ile

Phe

Pro

Pro

Thr

Gly

Asn

Asp

Glu

Asp

Gln

1430

1435

1440

- 166 031876

Ser Val Ser Trp Phe Lys Glu Trp

1445 1450

Ser Glu Gln Phe Cys Ile Glu

1455

Arg

Leu 1460

Gln Tyr

Glu

Lys

Asn 1465

Ile Arg Asp Ala

Cys 1470

Thr

Asn

Asn

Gly

Gln

Gly

Asp

Lys

Ile

Gln

Gly

Asp

Cys

Lys

Arg

Lys

Cys

Glu

1475

1480

1485

Glu

Tyr

Lys

Lys

Tyr

Ile

Ser

Glu

Lys

Lys

Gln

Glu

Trp

Asp

Lys

1490

1495

1500

Gln

Lys

Thr

Lys

Tyr

Glu

Asn

Lys

Tyr

Val

Gly

Lys

Ser

Ala

Ser

1505

1510

1515

Asp

Leu

Leu

Lys

Glu

Asn

Tyr

Pro

Glu

Cys

Ile

Ser

Ala

Asn

Phe

1520

1525

1530

Asp

Phe

Ile

Phe

Asn

Asp

Asn

Ile

Glu

Tyr

Lys

Thr

Tyr

Tyr

Pro

1535

1540

1545

Tyr

Gly

Asp

Tyr

Ser

Ser

Ile

Cys

Ser

Cys

Glu

Gln

Val

Lys

Tyr

1550

1555

1560

Tyr

Glu

Tyr

Asn

Asn

Ala

Glu

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Ser

Leu

Cys

1565

1570

1575

His

Glu

Lys

Gly

Asn

Asp

Arg

Thr

Trp

Ser

Lys

Lys

Tyr

Ile

Lys

1580

1585

1590

Lys

Leu

Glu

Asn

Gly

Arg

Thr

Leu

Glu

Gly

Val

Tyr

Val

Pro

Pro

1595

1600

1605

Arg

Arg

Gln

Gln

Leu

Cys

Leu

Tyr

Glu

Leu

Phe

Pro

Ile

Ile

Ile

1610

1615

1620

Lys

Asn

Lys

Asn

Asp

Ile

Thr

Asn

Ala

Lys

Lys

Glu

Leu

Leu

Glu

1625

1630

1635

Thr

Leu

Gln

Ile

Val

Ala

Glu

Arg

Glu

Ala

Tyr

Tyr

Leu

Trp

Lys

1640

1645

1650

Gln

Tyr

His

Ala

His

Asn

Asp

Thr

Thr

Tyr

Leu

Ala

His

Lys

Lys

1655

1660

1665

Ala

Cys

Cys

Ala

Ile

Arg

Gly

Ser

Phe

Tyr

Asp

Leu

Glu

Asp

Ile

1670 1675 1680

- 167 031876

Ile

Lys 1685

Gly

Asn Asp

Leu

Val 1690

His

Asp

Glu

Tyr

Thr 1695

Lys

Tyr

Ile

Asp

Ser

Lys

Leu

Asn

Glu

Ile

Phe

Asp

Ser

Ser

Asn

Lys

Asn

Asp

1700

1705

1710

Ile

Glu

Thr

Lys

Arg

Ala

Arg

Thr

Asp

Trp

Trp

Glu

Asn

Glu

Ala

1715

1720

1725

Ile

Ala

Val

Pro

Asn

Ile

Thr

Gly

Ala

Asn

Lys

Ser

Asp

Pro

Lys

1730

1735

1740

Thr

Ile

Arg

Gln

Leu

Val

Trp

Asp

Ala

Met

Gln

Ser

Gly

Val

Arg

1745

1750

1755

Lys

Ala

Ile

Asp

Glu

Glu

Lys

Glu

Lys

Lys

Lys

Pro

Asn

Glu

Asn

1760

1765

1770

Phe

Pro

Pro

Cys

Met

Gly

Val

Gln

His

Ile

Gly

Ile

Ala

Lys

Pro

1775

1780

1785

Gln

Phe

Ile

Arg

Trp

Leu

Glu

Glu

Trp

Thr

Asn

Glu

Phe

Cys

Glu

1790

1795

1800

Lys

Tyr

Thr

Lys

Tyr

Phe

Glu

Asp

Met

Lys

Ser

Asn

Cys

Asn

Leu

1805

1810

1815

Arg

Lys

Gly

Ala

Asp

Asp

Cys

Asp

Asp

Asn

Ser

Asn

Ile

Glu

Cys

1820

1825

1830

Lys

Lys

Ala

Cys

Ala

Asn

Tyr

Thr

Asn

Trp

Leu

Asn

Pro

Lys

Arg

1835

1840

1845

Ile

Glu

Trp

Asn

Gly

Met

Ser

Asn

Tyr

Tyr

Asn

Lys

Ile

Tyr

Arg

1850

1855

1860

Lys

Ser

Asn

Lys

Glu

Ser

Glu

Asp

Gly

Lys

Asp

Tyr

Ser

Met

Ile

1865

1870

1875

Met

Glu

Pro

Thr

Val

Ile

Asp

Tyr

Leu

Asn

Lys

Arg

Cys

Asn

Gly

1880

1885

1890

Glu

Ile

Asn

Gly

Asn

Tyr

Ile

Cys

Cys

Ser

Cys

Lys

Asn

Ile

Gly

1895

1900

1905

Glu

Asn

Ser

Thr

Ser

Gly

Thr

Val

Asn

Lys

Lys

Leu

Gln

Lys

Lys

- 168 031876

1910

1915

1920

Glu Thr 1925

Gln Cys

Glu

Asp Asn 1930

Lys

Gly

Pro

Leu

Asp 1935

Leu

Met

Asn

Lys

Val

Leu

Asn

Lys

Met

Asp

Pro

Lys

Tyr

Ser

Glu

His

Lys

Met

1940

1945

1950

Lys

Cys

Thr

Glu

Val

Tyr

Leu

Glu

His

Val

Glu

Glu

Gln

Leu

Lys

1955

1960

1965

Glu

Ile

Asp

Asn

Ala

Ile

Lys

Asp

Tyr

Lys

Leu

Tyr

Pro

Leu

Asp

1970

1975

1980

Arg

Cys

Phe

Asp

Asp

Lys

Ser

Lys

Met

Lys

Val

Cys

Asp

Leu

Ile

1985

1990

1995

Gly

Asp

Ala

Ile

Gly

Cys

Lys

His

Lys

Thr

Lys

Leu

Asp

Glu

Leu

2000

2005

2010

Asp

Glu

Trp

Asn

Asp

Val

Asp

Met

Arg

Asp

Pro

Tyr

Asn

Lys

Tyr

2015

2020

2025

Lys

Gly

Val

Leu

Ile

Pro

Pro

Arg

Arg

Arg

Gln

Leu

Cys

Phe

Ser

2030

2035

2040

Arg

Ile

Val

Arg

Gly

Pro

Ala

Asn

Leu

Arg

Asn

Leu

Lys

Glu

Phe

2045

2050

2055

Lys

Glu

Glu

Ile

Leu

Lys

Gly

Ala

Gln

Ser

Glu

Gly

Lys

Phe

Leu

2060

2065

2070

Gly

Asn

Tyr

Tyr

Asn

Glu

Asp

Lys

Asp

Lys

Glu

Lys

Ala

Leu

Glu

2075

2080

2085

Ala

Met

Lys

Asn

Ser

Phe

Tyr

Asp

Tyr

Glu

Tyr

Ile

Ile

Lys

Gly

2090

2095

2100

Ser

Asp

Met

Leu

Thr

Asn

Ile

Gln

Phe

Lys

Asp

Ile

Lys

Arg

Lys

2105

2110

2115

Leu

Asp

Arg

Leu

Leu

Glu

Lys

Glu

Thr

Asn

Asn

Thr

Glu

Lys

Val

2120

2125

2130

Asp

Asp

Trp

Trp

Glu

Thr

Asn

Lys

Lys

Ser

Ile

Trp

Asn

Ala

Met

2135

2140

2145

- 169 031876

Leu

Cys 2150

Gly

Tyr

Lys

Lys

Ser 2155

Gly

Asn

Lys

Ile

Ile 2160

Asp

Pro

Ser

Trp

Cys

Thr

Ile

Pro

Thr

Thr

Glu

Thr

Pro

Pro

Gln

Phe

Leu

Arg

2165

2170

2175

Trp

Ile

Lys

Glu

Trp

Gly

Thr

Asn

Val

Cys

Ile

Gln

Lys

Glu

Glu

2180

2185

2190

His

Lys

Glu

Tyr

Val

Lys

Ser

Lys

Cys

Ser

Asn

Val

Thr

Asn

Leu

2195

2200

2205

Gly

Ala

Gln

Glu

Ser

Glu

Ser

Lys

Asn

Cys

Thr

Ser

Glu

Ile

Lys

2210

2215

2220

Lys

Tyr

Gln

Glu

Trp

Ser

Arg

Lys

Arg

Ser

Ile

Gln

Trp

Glu

Ala

2225

2230

2235

Ile

Ser

Glu

Gly

Tyr

Lys

Lys

Tyr

Lys

Gly

Met

Asp

Glu

Phe

Lys

2240

2245

2250

Asn

Thr

Phe

Lys

Asn

Ile

Lys

Glu

Pro

Asp

Ala

Asn

Glu

Pro

Asn

2255

2260

2265

Ala

Asn

Glu

Tyr

Leu

Lys

Lys

His

Cys

Ser

Lys

Cys

Pro

Cys

Gly

2270

2275

2280

Phe

Asn

Asp

Met

Gln

Glu

Ile

Thr

Lys

Tyr

Thr

Asn

Ile

Gly

Asn

2285

2290

2295

Glu

Ala

Phe

Lys

Gln

Ile

Lys

Glu

Gln

Val

Asp

Ile

Pro

Ala

Glu

2300

2305

2310

Leu

Glu

Asp

Val

Ile

Tyr

Arg

Leu

Lys

His

His

Glu

Tyr

Asp

Lys

2315

2320

2325

Gly

Asn

Asp

Tyr

Ile

Cys

Asn

Lys

Tyr

Lys

Asn

Ile

Asn

Val

Asn

2330

2335

2340

Met

Lys

Lys

Asn

Asn

Asp

Asp

Thr

Trp

Thr

Asp

Leu

Val

Lys

Asn

2345

2350

2355

Ser

Ser

Asp

Ile

Asn

Lys

Gly

Val

Leu

Leu

Pro

Pro

Arg

Arg

Lys

2360

2365

2370

Asn

Leu

2375

Phe

Leu

Lys

Ile

Asp

2380

Glu

Ser

Asp

Ile

Cys

2385

Lys

Tyr

Lys

- 170 031876

Arg

Asp 2390

Pro

Lys

Leu

Phe

Lys 2395

Asp

Phe

Ile

Tyr

Ser 2400

Ser

Ala

Ile

Ser

Glu

Val

Glu

Arg

Leu

Lys

Lys

Val

Tyr

Gly

Glu

Ala

Lys

Thr

2405

2410

2415

Lys

Val

Val

His

Ala

Met

Lys

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Ile

Gly

Ser

2420

2425

2430

Ile

Ile

Lys

Gly

Asp

Asp

Met

Met

Glu

Asn

Asn

Ser

Ser

Asp

Lys

2435

2440

2445

Ile

Gly

Lys

Ile

Leu

Gly

Asp

Gly

Val

Gly

Gln

Asn

Glu

Lys

Arg

2450

2455

2460

Lys

Lys

Trp

Trp

Asp

Met

Asn

Lys

Tyr

His

Ile

Trp

Glu

Ser

Met

2465

2470

2475

Leu

Cys

Gly

Tyr

Lys

His

Ala

Tyr

Gly

Asn

Ile

Ser

Glu

Asn

Asp

2480

2485

2490

Arg

Lys

Met

Leu

Asp

Ile

Pro

Asn

Asn

Asp

Asp

Glu

His

Gln

Phe

2495

2500

2505

Leu

Arg

Trp

Phe

Gln

Glu

Trp

Thr

Glu

Asn

Phe

Cys

Thr

Lys

Arg

2510

2515

2520

Asn

Glu

Leu

Tyr

Glu

Asn

Met

Val

Thr

Ala

Cys

Asn

Ser

Ala

Lys

2525

2530

2535

Cys

Asn

Thr

Ser

Asn

Gly

Ser

Val

Asp

Lys

Lys

Glu

Cys

Thr

Glu

2540

2545

2550

Ala

Cys

Lys

Asn

Tyr

Ser

Asn

Phe

Ile

Leu

Ile

Lys

Lys

Lys

Glu

2555

2560

2565

Tyr

Gln

Ser

Leu

Asn

Ser

Gln

Tyr

Asp

Met

Asn

Tyr

Lys

Glu

Thr

2570

2575

2580

Lys

Ala

Glu

Lys

Lys

Glu

Ser

Pro

Glu

Tyr

Phe

Lys

Asp

Lys

Cys

2585

2590

2595

Asn

Gly

Glu

Cys

Ser

Cys

Leu

Ser

Glu

Tyr

Phe

Lys

Asp

Glu

Thr

2600

2605

2610

Arg

Trp

2615

Lys

Asn

Pro

Tyr

Glu

2620

Thr

Leu

Asp

Asp

Thr

2625

Glu

Val

Lys

- 171 031876

Asn

Asn 2630

Cys

Met

Cys

Lys

Pro 2635

Pro

Pro

Pro

Ala

Ser 2640

Asn

Asn

Thr

Ser

Asp

Ile

Leu

Gln

Lys

Thr

Ile

Pro

Phe

Gly

Ile

Ala

Leu

Ala

2645

2650

2655

Leu

Gly

Ser

Ile

Ala

Phe

Leu

Phe

Met

Lys

Lys

Lys

Pro

Lys

Thr

2660

2665

2670

Pro

Val

Asp

Leu

Leu

Arg

Val

Leu

Asp

Ile

Pro

Lys

Gly

Asp

Tyr

2675

2680

2685

Gly

Ile

Pro

Thr

Pro

Lys

Ser

Ser

Asn

Arg

Tyr

Ile

Pro

Tyr

Ala

2690

2695

2700

Ser

Asp

Arg

Tyr

Lys

Gly

Lys

Thr

Tyr

Ile

Tyr

Met

Glu

Gly

Asp

2705

2710

2715

Thr

Ser

Gly

Asp

Asp

Asp

Lys

Tyr

Ile

Trp

Asp

Leu

2720

2725

2730

<210> 56 <211> 2734 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 56

Met Asp Ser Thr Ser Thr Ile Ala

5

Asn Lys Ile Glu Glu Tyr Leu Gly

15

Ala Lys Ser Asp Asp Ser Lys Ile

Asp Glu Leu Leu Lys Ala Asp Pro

30

Ser Glu Val Glu Tyr Tyr Arg Ser

40

Gly Gly Asp Gly Asp Tyr Leu Lys 45

Asn Asn Ile Cys Lys Ile Thr Val

55

Asn His Ser Asp Ser Gly Lys Tyr

Asp Pro Cys Glu Lys Lys Leu Pro

70

Pro Tyr Asp Asp Asn Asp Gln Trp

80

Lys Cys Gln Gln Asn Ser Ser Asp 85

Gly Ser Gly Lys Pro Glu Asn Ile

95

- 172 031876

Cys

Leu

Leu

Asp

145

Asp

Ser

Asn

Lys

Val

225

Trp

Arg

Val

Arg

Cys

305

Thr

Lys

Val

Pro

Pro Arg Arg 100

Glu Arg

Leu 105

Cys

Thr

Tyr

Asn

Leu 110

Glu

Asn

Lys

Phe

Asp

Lys

Ile

Arg

Asp

Asn

Asn

Ala

Phe

Leu

Ala

Asp

Val

115

120

125

Leu

Thr

Ala

Arg

Asn

Glu

Gly

Glu

Lys

Ile

Val

Gln

Asn

His

Pro

130

135

140

Thr

Asn

Ser

Ser

Asn

Val

Cys

Asn

Ala

Leu

Glu

Arg

Ser

Phe

Ala

150

155

160

Leu

Ala

Asp

Ile

Ile

Arg

Gly

Thr

Asp

Gln

Trp

Lys

Gly

Thr

Asn

165

170

175

Asn

Leu

Glu

Lys

Asn

Leu

Lys

Gln

Met

Phe

Ala

Lys

Ile

Arg

Glu

180

185

190

Asp

Lys

Val

Leu

Gln

Asp

Lys

Tyr

Pro

Lys

Asp

Gln

Lys

Tyr

Thr

195

200

205

Leu 210

Arg Glu Ala

Trp

Trp Asn 215

Ala Asn

Arg

Gln 220

Lys

Val

Trp

Glu

Ile

Thr

Cys

Gly

Ala

Arg

Ser

Asn

Asp

Leu

Leu

Ile

Lys

Arg

Gly

230

235

240

Arg

Thr

Ser

Gly

Lys

Ser

Asp

Arg

Lys

Lys

Asn

Phe

Glu

Leu

Cys

245

250

255

Lys

Cys

Gly

His

Tyr

Glu

Lys

Glu

Val

Pro

Thr

Lys

Leu

Asp

Tyr

260

265

270

Pro

Gln

Phe

Leu

Arg

Trp

Leu

Thr

Glu

Trp

Ile

Glu

Asp

Phe

Tyr

275

280

285

Glu

Lys

Gln

Asn

Leu

Ile

Asp

Asp

Met

Glu

Arg

His

Arg

Glu

Glu

290

295

300

Thr Arg Glu

Asp

His 310

Lys

Ser

Lys

Glu

Gly 315

Thr

Ser Tyr

Cys

Ser 320

Cys

Lys

Asp

Lys

Cys

Lys

Lys

Tyr

Cys

Glu

Cys

Val

Lys

Lys

Trp

325

330

335

Thr

Glu

Trp

Glu

Asn

Gln

Glu

Asn

Lys

Tyr

Lys

Asp

Leu

Tyr

Glu

340

345

350

- 173 031876

Gln Asn Lys

Asn

Lys

Thr

Ser Gln Lys 360

Asn

Thr

Ser

Arg 365

Tyr

Asp

Asp

355

Tyr

Val

Lys

Asp

Phe

Phe

Glu

Lys

Leu

Glu

Ala

Asn

Tyr

Ser

Ser

Leu

370

375

380

Glu

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys

385

390

395

400

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Pro

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

405

410

415

Thr

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

420

425

430

Ser

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

435

440

445

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

450

455

460

Asp

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

465

470

475

480

Val

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

485

490

495

Asp

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

500

505

510

Ser

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

Cys

Asp

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

515

520

525

Lys

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

530

535

540

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

545

550

555

560

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

565

570

575

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

580

585

590

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

- 174 031876

595

600

605

Thr

Gly

625

Lys

Asp

Leu

Ile

Asp

705

Thr

Asp

Ile

Asn

Cys

785

Thr

Cys

Lys

Lys 610

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala 615

Gly

Cys

Leu

Ile

Val 620

Ser

Phe

His

Glu

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Ser

Gly

Asn

630

635

640

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

645

650

655

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

660

665

670

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Asn

Asn

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Gly

Lys

Tyr

675

680

685

Lys 690

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala 695

Glu Gln

Asp

Thr

Ser 700

Tyr

Ser

Ser

Leu

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

710

715

720

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

725

730

735

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

740

745

750

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

755

760

765

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

Ile

Thr

Asn

770

775

780

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu 790

Ser Gly Asn Lys

Cys 795

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys 800

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

805

810

815

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

Ile

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

820

825

830

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

835

840

845

- 175 031876

Ala

Lys 850

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala 855

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys 860

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

865

870

875

880

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

885

890

895

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

900

905

910

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

915

920

925

Cys

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Ser

Asp

Thr

Leu

930

935

940

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

Tyr

Arg

Tyr

945

950

955

960

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

965

970

975

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

980

985

990

Met Lys Arg Gly Tyr Lys

995

Asn Asp Asn Tyr Glu Leu Cys Lys

1000 1005

Tyr Asn

Gly Val

Asp

Val

Lys

Pro

Thr 1015

Thr

Val

Arg

Ser

Asn 1020

Ser

Ser

Lys

1010

Leu

Asp

Gly

Asn

Asp

Val

Thr

Phe

Phe

Asn

Leu

Phe

Glu

Gln

Trp

1025

1030

1035

Asn

Lys

Glu

Ile

Gln

Tyr

Gln

Ile

Glu

Gln

Tyr

Met

Thr

Asn

Ala

1040

1045

1050

Asn

Ile

Ser

Cys

Ile

Asp

Glu

Lys

Glu

Val

Leu

Asp

Ser

Val

Ser

1055

1060

1065

Asp

Glu

Gly

Thr

Pro

Lys

Val

Arg

Gly

Gly

Tyr

Glu

Asp

Gly

Arg

1070

1075

1080

Asn

Asn

Asn

Thr

Asp

Gln

Gly

Thr

Asn

Cys

Lys

Glu

Lys

Cys

Lys

1085

1090

1095

- 176 031876

Cys

Tyr 1100

Lys

Leu Trp

Ile

Glu 1105

Lys

Ile Asn

Asp

Gln 1110

Trp

Gly

Lys

Gln

Lys

Asp

Asn

Tyr

Asn

Lys

Phe

Arg

Ser

Lys

Gln

Ile

Tyr

Asp

1115

1120

1125

Ala

Asn

Lys

Gly

Ser

Gln

Asn

Lys

Lys

Val

Val

Ser

Leu

Ser

Asn

1130

1135

1140

Phe

Leu

Phe

Phe

Ser

Cys

Trp

Glu

Glu

Tyr

Ile

Gln

Lys

Tyr

Phe

1145

1150

1155

Asn

Gly

Asp

Trp

Ser

Lys

Ile

Lys

Asn

Ile

Gly

Ser

Asp

Thr

Phe

1160

1165

1170

Glu

Phe

Leu

Ile

Lys

Lys

Cys

Gly

Asn

Asn

Ser

Ala

His

Gly

Glu

1175

1180

1185

Glu

Ile

Phe

Asn

Glu

Lys

Leu

Lys

Asn

Ala

Glu

Lys

Lys

Cys

Lys

1190

1195

1200

Glu

Asn

Glu

Ser

Thr

Asp

Thr

Asn

Ile

Asn

Lys

Ser

Glu

Thr

Ser

1205

1210

1215

Cys

Asp

Leu

Asn

Ala

Thr

Asn

Tyr

Ile

Arg

Gly

Cys

Gln

Ser

Lys

1220

1225

1230

Thr

Tyr

Asp

Gly

Lys

Ile

Phe

Pro

Gly

Lys

Gly

Gly

Glu

Lys

Gln

1235

1240

1245

Trp

Ile

Cys

Lys

Asp

Thr

Ile

Ile

His

Gly

Asp

Thr

Asn

Gly

Ala

1250

1255

1260

Cys

Ile

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Asn

Leu

Cys

Val

Gly

Glu

Leu

Trp

1265

1270

1275

Asp

Lys

Ser

Tyr

Gly

Gly

Arg

Ser

Asn

Ile

Lys

Asn

Asp

Thr

Lys

1280

1285

1290

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Lys

Ile

Lys

Asn

Ala

Ile

His

Lys

Glu

Thr

1295

1300

1305

Glu

Leu

Leu

Tyr

Glu

Tyr

His

Asp

Thr

Gly

Thr

Ala

Ile

Ile

Ser

1310

1315

1320

Lys

Asn

1325

Asp

Lys

Lys

Gly

Gln

1330

Lys

Gly

Lys

Asn

Asp

1335

Pro

Asn

Gly

- 177 031876

Leu

Pro 1340

Lys

Gly

Phe

Cys

His 1345

Ala

Val

Gln

Arg

Ser 1350

Phe

Ile

Asp

Tyr

Lys

Asn

Met

Ile

Leu

Gly

Thr

Ser

Val

Asn

Ile

Tyr

Glu

His

1355

1360

1365

Ile

Gly

Lys

Leu

Gln

Glu

Asp

Ile

Lys

Lys

Ile

Ile

Glu

Lys

Gly

1370

1375

1380

Thr

Pro

Gln

Gln

Lys

Asp

Lys

Ile

Gly

Gly

Val

Gly

Ser

Ser

Thr

1385

1390

1395

Glu

Asn

Val

Asn

Ala

Trp

Trp

Lys

Gly

Ile

Glu

Arg

Glu

Met

Trp

1400

1405

1410

Asp

Ala

Val

Arg

Cys

Ala

Ile

Thr

Lys

Ile

Asn

Lys

Lys

Asn

Asn

1415

1420

1425

Asn

Ser

Ile

Phe

Asn

Gly

Asp

Glu

Cys

Gly

Val

Ser

Pro

Pro

Thr

1430

1435

1440

Gly

Asn

Asp

Glu

Asp

Gln

Ser

Val

Ser

Trp

Phe

Lys

Glu

Trp

Gly

1445

1450

1455

Glu

Gln

Phe

Cys

Ile

Glu

Arg

Leu

Arg

Tyr

Glu

Gln

Asn

Ile

Arg

1460

1465

1470

Glu

Ala

Cys

Thr

Ile

Asn

Gly

Lys

Asn

Glu

Lys

Lys

Cys

Ile

Asn

1475

1480

1485

Ser

Lys

Ser

Gly

Gln

Gly

Asp

Lys

Ile

Gln

Gly

Ala

Cys

Lys

Arg

1490

1495

1500

Lys

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Tyr

Ile

Ser

Glu

Lys

Lys

Gln

Glu

1505

1510

1515

Trp

Asp

Lys

Gln

Lys

Thr

Lys

Tyr

Glu

Asn

Lys

Tyr

Val

Gly

Lys

1520

1525

1530

Ser

Ala

Ser

Asp

Leu

Leu

Lys

Glu

Asn

Tyr

Pro

Glu

Cys

Ile

Ser

1535

1540

1545

Ala

Asn

Phe

Asp

Phe

Ile

Phe

Asn

Asp

Asn

Ile

Glu

Tyr

Lys

Thr

1550

1555

1560

Tyr

Tyr

Pro

Tyr

Gly

Asp

Tyr

Ser

Ser

Ile

Cys

Ser

Cys

Glu

Gln

- 178 031876

1565 1570 1575

Val

Lys 1580

Tyr

Tyr Lys

Tyr

Asn 1585

Asn

Ala Glu Lys

Lys 1590

Asn

Asn

Lys

Ser

Leu

Cys

Tyr

Glu

Lys

Asp

Asn

Asp

Met

Thr

Trp

Ser

Lys

Lys

1595

1600

1605

Tyr

Ile

Lys

Lys

Leu

Glu

Asn

Gly

Arg

Ser

Leu

Glu

Gly

Val

Tyr

1610

1615

1620

Val

Pro

Pro

Arg

Arg

Gln

Gln

Leu

Cys

Leu

Tyr

Glu

Leu

Phe

Pro

1625

1630

1635

Ile

Ile

Ile

Lys

Asn

Glu

Glu

Gly

Met

Glu

Lys

Ala

Lys

Glu

Glu

1640

1645

1650

Leu

Leu

Glu

Thr

Leu

Gln

Ile

Val

Ala

Glu

Arg

Glu

Ala

Tyr

Tyr

1655

1660

1665

Leu

Trp

Lys

Gln

Tyr

Asn

Pro

Thr

Gly

Lys

Gly

Ile

Asp

Asp

Ala

1670

1675

1680

Asn

Lys

Lys

Ala

Cys

Cys

Ala

Ile

Arg

Gly

Ser

Phe

Tyr

Asp

Leu

1685

1690

1695

Glu

Asp

Ile

Ile

Lys

Gly

Asn

Asp

Leu

Val

His

Asp

Glu

Tyr

Thr

1700

1705

1710

Lys

Tyr

Ile

Asp

Ser

Lys

Leu

Asn

Glu

Ile

Phe

Gly

Ser

Ser

Asp

1715

1720

1725

Thr

Asn

Asp

Ile

Asp

Thr

Lys

Arg

Ala

Arg

Thr

Asp

Trp

Trp

Glu

1730

1735

1740

Asn

Glu

Thr

Ile

Thr

Asn

Gly

Thr

Asp

Arg

Lys

Thr

Ile

Arg

Gln

1745

1750

1755

Leu

Val

Trp

Asp

Ala

Met

Gln

Ser

Gly

Val

Arg

Tyr

Ala

Val

Glu

1760

1765

1770

Glu

Lys

Asn

Glu

Asn

Phe

Pro

Leu

Cys

Met

Gly

Val

Glu

His

Ile

1775

1780

1785

Gly

Ile

Ala

Lys

Pro

Gln

Phe

Ile

Arg

Trp

Leu

Glu

Glu

Trp

Thr

1790

1795

1800

- 179 031876

Asn

Glu 1805

Phe

Cys

Glu

Lys

Tyr 1810

Thr

Lys

Tyr

Phe

Glu 1815

Asp

Met

Lys

Ser

Lys

Cys

Asp

Pro

Pro

Lys

Arg

Ala

Asp

Thr

Cys

Gly

Asp

Asn

1820

1825

1830

Ser

Asn

Ile

Glu

Cys

Lys

Lys

Ala

Cys

Ala

Asn

Tyr

Thr

Asn

Trp

1835

1840

1845

Leu

Asn

Pro

Lys

Arg

Ile

Glu

Trp

Asn

Gly

Met

Ser

Asn

Tyr

Tyr

1850

1855

1860

Asn Lys

Ile

Tyr Arg Lys

Ser 1870

Asn

Lys

Glu

Ser

Glu 1875

Gly

Gly

Lys

1865

Asp

Tyr

Ser

Met

Ile

Met

Ala

Pro

Thr

Val

Ile

Asp

Tyr

Leu

Asn

1880

1885

1890

Lys

Arg

Cys

His

Gly

Glu

Ile

Asn

Gly

Asn

Tyr

Ile

Cys

Cys

Ser

1895

1900

1905

Cys

Lys

Asn

Ile

Gly

Ala

Tyr

Asn

Thr

Thr

Ser

Gly

Thr

Val

Asn

1910

1915

1920

Lys

Lys

Leu

Gln

Lys

Lys

Glu

Thr

Glu

Cys

Glu

Glu

Glu

Lys

Gly

1925

1930

1935

Pro

Leu

Asp

Leu

Met

Asn

Glu

Val

Leu

Asn

Lys

Met

Asp

Lys

Lys

1940

1945

1950

Tyr

Ser

Ala

His

Lys

Met

Lys

Cys

Thr

Glu

Val

Tyr

Leu

Glu

His

1955

1960

1965

Val

Glu

Glu

Gln

Leu

Asn

Glu

Ile

Asp

Asn

Ala

Ile

Lys

Asp

Tyr

1970

1975

1980

Lys

Leu

Tyr

Pro

Leu

Asp

Arg

Cys

Phe

Asp

Asp

Gln

Thr

Lys

Met

1985

1990

1995

Lys

Val

Cys

Asp

Leu

Ile

Ala

Asp

Ala

Ile

Gly

Cys

Lys

Asp

Lys

2000

2005

2010

Thr

Lys

Leu

Asp

Glu

Leu

Asp

Glu

Trp

Asn

Asp

Met

Asp

Leu

Arg

2015

2020

2025

Gly

Thr

Tyr

Asn

Lys

His

Lys

Gly

Val

Leu

Ile

Pro

Pro

Arg

Arg

2030

2035

2040

- 180 031876

Arg Gln 2045

Leu

Cys

Phe

Ser Arg 2050

Ile

Val

Arg

Gly

Pro 2055

Ala

Asn

Leu

Arg

Ser

Leu

Asn

Glu

Phe

Lys

Glu

Glu

Ile

Leu

Lys

Gly

Ala

Gln

2060

2065

2070

Ser

Glu

Gly

Lys

Phe

Leu

Gly

Asn

Tyr

Tyr

Lys

Glu

His

Lys

Asp

2075

2080

2085

Lys

Glu

Lys

Ala

Leu

Glu

Ala

Met

Lys

Asn

Ser

Phe

Tyr

Asp

Tyr

2090

2095

2100

Glu

Asp

Ile

Ile

Lys

Gly

Thr

Asp

Met

Leu

Thr

Asn

Ile

Glu

Phe

2105

2110

2115

Lys

Asp

Ile

Lys

Ile

Lys

Leu

Asp

Arg

Leu

Leu

Glu

Lys

Glu

Thr

2120

2125

2130

Asn

Asn

Thr

Lys

Lys

Ala

Glu

Asp

Trp

Trp

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

2135

2140

2145

Ser

Ile

Trp

Asn

Ala

Met

Leu

Cys

Gly

Tyr

Lys

Lys

Ser

Gly

Asn

2150

2155

2160

Lys

Ile

Ile

Asp

Pro

Ser

Trp

Cys

Thr

Ile

Pro

Thr

Thr

Glu

Thr

2165

2170

2175

Pro

Pro

Gln

Phe

Leu

Arg

Trp

Ile

Lys

Glu

Trp

Gly

Thr

Asn

Val

2180

2185

2190

Cys

Ile

Gln

Lys

Gln

Glu

His

Lys

Glu

Tyr

Val

Lys

Ser

Lys

Cys

2195

2200

2205

Ser

Asn

Val

Thr

Asn

Leu

Gly

Ala

Gln

Ala

Ser

Glu

Ser

Asn

Asn

2210

2215

2220

Cys

Thr

Ser

Glu

Ile

Lys

Lys

Tyr

Gln

Glu

Trp

Ser

Arg

Lys

Arg

2225

2230

2235

Ser

Ile

Arg

Trp

Glu

Thr

Ile

Ser

Lys

Arg

Tyr

Lys

Lys

Tyr

Lys

2240

2245

2250

Arg

Met

Asp

Ile

Leu

Lys

Asp

Val

Lys

Glu

Pro

Asp

Ala

Asn

Thr

2255

2260

2265

Tyr

Leu

Arg

Glu

His

Cys

Ser

Lys

Cys

Pro

Cys

Gly

Phe

Asn

Asp

2270

2275

2280

- 181 031876

Met

Glu 2285

Glu Met

Asn

Asn

Asn 2290

Glu

Asp Asn

Glu

Lys 2295

Glu

Ala

Phe

Lys

Gln

Ile

Lys

Glu

Gln

Val

Lys

Ile

Pro

Ala

Glu

Leu

Glu

Asp

2300

2305

2310

Val

Ile

Tyr

Arg

Ile

Lys

His

His

Glu

Tyr

Asp

Lys

Gly

Asn

Asp

2315

2320

2325

Tyr

Ile

Cys

Asn

Lys

Tyr

Lys

Asn

Ile

His

Asp

Arg

Met

Lys

Lys

2330

2335

2340

Asn

Asn

Gly

Asn

Phe

Val

Thr

Asp

Asn

Phe

Val

Lys

Lys

Ser

Trp

2345

2350

2355

Glu

Ile

Ser

Asn

Gly

Val

Leu

Ile

Pro

Pro

Arg

Arg

Lys

Asn

Leu

2360

2365

2370

Phe

Leu

Tyr

Ile

Asp

Pro

Ser

Lys

Ile

Cys

Glu

Tyr

Lys

Lys

Asp

2375

2380

2385

Pro

Lys

Leu

Phe

Lys

Asp

Phe

Ile

Tyr

Trp

Ser

Ala

Phe

Thr

Glu

2390

2395

2400

Val

Glu

Arg

Leu

Lys

Lys

Ala

Tyr

Gly

Gly

Ala

Arg

Ala

Lys

Val

2405

2410

2415

Val

His

Ala

Met

Lys

Tyr

Ser

Phe

Thr

Asp

Ile

Gly

Ser

Ile

Ile

2420

2425

2430

Lys

Gly

Asp

Asp

Met

Met

Glu

Lys

Asn

Ser

Ser

Asp

Lys

Ile

Gly

2435

2440

2445

Lys

Ile

Leu

Gly

Asp

Thr

Asp

Gly

Gln

Asn

Glu

Lys

Arg

Lys

Lys

2450

2455

2460

Trp

Trp

Asp

Met

Asn

Lys

Tyr

His

Ile

Trp

Glu

Ser

Met

Leu

Cys

2465

2470

2475

Gly

Tyr

Arg

Glu

Ala

Glu

Gly

Asp

Thr

Glu

Thr

Asn

Glu

Asn

Cys

2480

2485

2490

Arg

Phe

Pro

Asp

Ile

Glu

Ser

Val

Pro

Gln

Phe

Leu

Arg

Trp

Phe

2495

2500

2505

Gln

Glu

Trp

Ser

Glu

Asn

Phe

Cys

Asp

Arg

Arg

Gln

Lys

Leu

Tyr

- 182 031876

2510

2515

2520

Asp

Lys 2525

Leu

Asn

Ser

Glu

Cys 2530

Ile

Ser

Ala

Glu

Cys 2535

Thr Asn

Gly

Ser

Val

Asp

Asn

Ser

Lys

Cys

Thr

His

Ala

Cys

Val

Asn

Tyr

Lys

2540

2545

2550

Asn

Tyr

Ile

Leu

Thr

Lys

Lys

Thr

Glu

Tyr

Glu

Ile

Gln

Thr

Asn

2555

2560

2565

Lys

Tyr

Asp

Asn

Glu

Phe

Lys

Asn

Lys

Asn

Ser

Asn

Asp

Lys

Asp

2570

2575

2580

Ala

Pro

Asp

Tyr

Leu

Lys

Glu

Lys

Cys

Asn

Asp

Asn

Lys

Cys

Glu

2585

2590

2595

Cys

Leu

Asn

Lys

His

Ile

Asp

Asp

Lys

Asn

Lys

Thr

Trp

Lys

Asn

2600

2605

2610

Pro

Tyr

Glu

Thr

Leu

Glu

Asp

Thr

Phe

Lys

Ser

Lys

Cys

Asp

Cys

2615

2620

2625

Pro

Lys

Pro

Leu

Pro

Ser

Pro

Ile

Lys

Pro

Asp

Asp

Leu

Pro

Pro

2630

2635

2640

Gln

Ala

Asp

Glu

Pro

Phe

Asp

Pro

Thr

Ile

Leu

Gln

Thr

Thr

Ile

2645

2650

2655

Pro

Phe

Gly

Ile

Ala

Leu

Ala

Leu

Gly

Ser

Ile

Ala

Phe

Leu

Phe

2660

2665

2670

Met

Lys

Val

Ile

Tyr

Ile

Tyr

Ile

Tyr

Val

Cys

Cys

Ile

Cys

Met

2675

2680

2685

Tyr

Val

Cys

Met

Tyr

Val

Cys

Met

Tyr

Val

Cys

Met

Tyr

Val

Cys

2690

2695

2700

Met

Tyr

Val

Cys

Met

His

Val

Cys

Met

Leu

Cys

Val

Tyr

Val

Ile

2705

2710

2715

Tyr

Val

Phe

Lys

Ile

Cys

Ile

Tyr

Ile

Glu

Lys

Glu

Lys

Arg

Lys

2720

2725

2730

Lys

- 183 031876 <210> 57 <211> 58 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400>57

Arg 1

Pro

Asp

Phe

Cys 5

Leu Glu

Pro

Pro

Tyr 10

Thr

Gly

Pro

Cys

Lys 15

Ala

Arg

Ile

Ile

Arg

Tyr

Phe

Tyr

Asn

Ala

Lys

Ala

Gly

Leu

Cys

Gln

Thr

20

25

30

Phe

Val

Tyr

Gly

Gly

Cys

Arg

Ala

Lys

Arg

Asn

Asn

Phe

Lys

Ser

Ala

35

40

45

Glu

Asp

Cys

Met

Arg

Thr

Cys

Gly

Gly

Ala

55 <210>58 <211>324 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция

<400> !

58

Arg 1

His

Arg

Gln

Pro 5

Arg

Gly

Trp

Glu

Gln 10

Leu

Glu

Gln

Cys

Gly 15

Tyr

Pro

Val

Gln

Arg 20

Leu

Val

Ala

Leu

Tyr 25

Leu

Ala

Ala

Arg

Leu 30

Ser

Trp

Asn

Gln

Val 35

Asp

Gln

Val

Ile

Arg 40

Asn

Ala

Leu

Ala

Ser 45

Pro

Gly

Ser

Gly

Gly 50

Asp

Leu

Gly

Glu

Ala 55

Ile

Arg

Glu

Gln

Pro 60

Glu

Gln

Ala

Arg

Leu 65

Ala

Leu

Thr

Leu

Ala 70

Ala

Ala

Glu

Ser

Glu 75

Arg

Phe

Val

Arg

Gln 80

Gly

Thr

Gly

Asn

Asp 85

Glu

Ala

Gly

Ala

Ala 90

Asn

Gly

Pro

Ala

Asp 95

Ser

Gly

Asp

Ala

Leu 100

Leu

Glu

Arg

Asn

Tyr 105

Pro

Thr

Gly

Ala

Glu 110

Phe

Leu

- 184 031876

Gly

Asp

Gly

Gly

Asp

Ile

Ser

Phe

Ser

Thr

Arg

Gly

Thr

Gln

Asn

Trp

115

120

125

Thr

Val

Glu

Arg

Leu

Leu

Gln

Ala

His

Arg

Gln

Leu

Glu

Glu

Arg

Gly

130

135

140

Tyr Val 145

Phe Val

Gly Tyr 150

His

Gly

Thr

Phe

Leu Glu 155

Ala

Ala

Gln

Ser 160

Ile

Val

Phe

Gly

Gly

Val

Arg

Ala

Arg

Ser

Gln

Asp

Leu

Asp

Ala

Ile

165

170

175

Trp

Arg

Gly

Phe

Tyr

Ile

Ala

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

Ala

Tyr

Gly

Tyr

180

185

190

Ala

Gln

Asp

Gln

Glu

Pro

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

Arg

Asn

Gly

Ala

195

200

205

Leu

Leu

Arg

Val

Tyr

Val

Pro

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro

Gly

Phe

Tyr

Arg

210

215

220

Thr

Ser

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Gly

Glu

Val

Glu

Arg

225

230

235

240

Leu

Ile

Gly

His

Pro

Leu

Pro

Leu

Arg

Leu

Asp

Ala

Ile

Thr

Gly

Pro

245

250

255

Glu

Glu

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

Trp

Pro

Leu

Ala

260

265

270

Glu

Arg

Thr

Val

Val

Ile

Pro

Ser

Ala

Ile

Pro

Thr

Asp

Pro

Arg

Asn

275

280

285

Val

Gly

Gly

Asp

Leu

Asp

Pro

Ser

Ser

Ile

Pro

Asp

Lys

Glu

Gln

Ala

290

295

300

Ile

Ser

Ala

Leu

Pro

Asp

Tyr

Ala

Ser

Gln

Pro

Gly

Lys

Pro

Pro

Arg

305

310

315

320

Lys Asp Glu Leu <210> 59 <211> 231 <212> Белок <213> Искусственная <220>

- 185 031876 <223> Искусственная конструкция <400> 59

Arg His 1	Arg	Gln	Pro 5	Arg	Gly	Trp	Glu
Glu	Phe	Leu	Gly	Asp	Gly	Gly	Asp	Ile
			20					25
Gln	Asn	Trp	Thr	Val	Glu	Arg	Leu	Leu
		35					40
Glu	Arg	Gly	Tyr	Val	Phe	Val	Gly	Tyr
	50					55
Ala	Gln	Ser	Ile	Val	Phe	Gly	Gly	Val
65					70
Asp	Ala	Ile	Trp	Arg	Gly	Phe	Tyr	Ile
				85
Tyr	Gly	Tyr	Ala	Gln	Asp	Gln	Glu	Pro
			100					105
Asn	Gly	Ala	Leu	Leu	Arg	Val	Tyr	Val
		115					120
Phe	Tyr	Arg	Thr	Ser	Leu	Thr	Leu	Ala
	130					135
Val	Glu	Arg	Leu	Ile	Gly	His	Pro	Leu
145					150
Thr	Gly	Pro	Glu	Glu	Glu	Gly	Gly	Arg
				165
Pro	Leu	Ala	Glu	Arg	Thr	Val	Val	Ile
			180					185
Pro	Arg	Asn	Val	Gly	Gly	Asp	Leu	Asp
		195					200
Glu	Gln	Ala	Ile	Ser	Ala	Leu	Pro	Asp
	210					215
Pro	Pro	Arg	Lys	Asp	Glu	Leu
225					230

Leu	Tyr	Pro	Thr	Gly 15	Ala
Phe	Ser	Thr	Arg 30	Gly	Thr
Ala	His	Arg 45	Gln	Leu	Glu
Gly	Thr 60	Phe	Leu	Glu	Ala
Ala 75	Arg	Ser	Gln	Asp	Leu 80
Gly	Asp	Pro	Ala	Leu 95	Ala
Ala	Arg	Gly	Arg 110	Ile	Arg
Arg	Ser	Ser 125	Leu	Pro	Gly
Pro	Glu 140	Ala	Ala	Gly	Glu
Leu 155	Arg	Leu	Asp	Ala	Ile 160
Glu	Thr	Ile	Leu	Gly 175	Trp
Ser	Ala	Ile	Pro 190	Thr	Asp
Ser	Ser	Ile 205	Pro	Asp	Lys
Ala	Ser 220	Gln	Pro	Gly	Lys

- 186 031876 <210> 60 <211> 929 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 60

Arg 1

Pro

Asp

Phe

Cys 5

Leu

Glu

Pro

Pro

Tyr 10

Thr

Gly

Pro

Cys

Lys 15

Arg

Ile

Ile

Arg

Tyr

Phe

Tyr

Asn

Ala

Lys

Ala

Gly

Leu

Cys

Gln

20

25

30

Phe

Val

Tyr

Gly

Gly

Cys

Arg

Ala

Lys

Arg

Asn

Asn

Phe

Lys

Ser

35

40

45

Glu

Asp

Cys

Met

Arg

Thr

Cys

Gly

Gly

Ala

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

50

55

60

Pro

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

65

70

75

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

Ala

Asn

His

Asn

Asp

85

90

95

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

Ser

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

100

105

110

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Ser

115

120

125

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

Asp

Val

Lys

Leu

Gly

Val

130

135

140

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

145

150

155

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

165

170

175

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

180

185

190

Asp

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

Lys

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

195

200

205

Ala

Thr

Ala

Asp

Pro

Glu

Gln

Ile

Arg

Leu

160

Gln

Cys

Phe

- 187 031876

Ala

Ser

225

Glu

Thr

Glu

Gly

Tyr

305

Leu

Ile

Asn

Glu

Trp

385

Glu

Gly

Leu

Ala

Ser Leu Thr Asn Gly Tyr Lys Cys Asp Lys

210 215

Cys Lys Ser Gly

220

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys 230

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys 235

Ser

Ser

Gly

Asn

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

245

250

255

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

260

265

270

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

275

280

285

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

290

295

300

Pro Gln Asn Lys Asn Ser Gly Asn Lys 310

Glu Asn Leu Cys

Lys

315

Glu

Tyr

Ser

Phe 325

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp 330

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr 335

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

340

345

350

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Gly

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

355

360

365

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

370

375

380

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

390

395

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

405

410

415

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

420

425

430

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Asn

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

435

440

445

Lys Val Lys Asp Val Ile Thr Asn Cys Lys

450 455

Ser Cys Lys Glu

460

Thr

Glu

240

Arg

Cys

Ala

Arg

Ala

320

Ser

Asn

Ala

Trp

Ala

400

Ser

Tyr

Gln

Ser

- 188 031876

Gly 465

Asn Lys

Cys

Lys

Thr 470

Glu Cys

Lys

Thr

Lys 475

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys 480

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

Cys

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

485

490

495

Ile

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

500

505

510

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

515

520

525

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

530

535

540

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

545

550

555

560

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

565

570

575

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

580

585

590

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

595

600

605

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Ser

Asp

Thr

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

610

615

620

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

Tyr

Arg

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

625

630

635

640

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

645

650

655

Gln

Trp

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

660

665

670

Asp

Asn

Tyr

675

Glu

Leu

Cys

Lys

Tyr

680

Asn

Gly

Val

Asp

Val

685

Lys

Pro

Thr

Thr

Val

690

Arg

Ser

Asn

Ser

Ser

695

Lys

Leu

Asp

Arg

His

700

Arg

Gln

Pro

Arg

Gly Trp Glu Gln Leu Tyr Pro Thr Gly Ala Glu Phe Leu Gly Asp Gly

705 710 715 720

- 189 031876

Gly	Asp	Ile	Ser	Phe 725	Ser	Thr	Arg	Gly
Arg	Leu	Leu	Gln	Ala	His	Arg	Gln	Leu
			740					745
Val	Gly	Tyr	His	Gly	Thr	Phe	Leu	Glu
		755					760
Gly	Gly	Val	Arg	Ala	Arg	Ser	Gln	Asp
	770					775
Phe	Tyr	Ile	Ala	Gly	Asp	Pro	Ala	Leu
785					790
Gln	Glu	Pro	Asp	Ala	Arg	Gly	Arg	Ile
				805
Val	Tyr	Val	Pro	Arg	Ser	Ser	Leu	Pro
			820					825
Thr	Leu	Ala	Ala	Pro	Glu	Ala	Ala	Gly
		835					840
His	Pro	Leu	Pro	Leu	Arg	Leu	Asp	Ala
	850					855
Gly	Gly	Arg	Leu	Glu	Thr	Ile	Leu	Gly
865					870
Val	Val	Ile	Pro	Ser	Ala	Ile	Pro	Thr
				885
Asp	Leu	Asp	Pro	Ser	Ser	Ile	Pro	Asp
			900					905
Leu	Pro	Asp	Tyr	Ala	Ser	Gln	Pro	Gly
		915					920

Gln	Asn	Trp	Thr	Val 735	Glu
Glu	Arg	Gly	Tyr 750	Val	Phe
Ala	Gln	Ser 765	Ile	Val	Phe
Asp	Ala 780	Ile	Trp	Arg	Gly
Tyr 795	Gly	Tyr	Ala	Gln	Asp 800
Asn	Gly	Ala	Leu	Leu 815	Arg
Phe	Tyr	Arg	Thr 830	Ser	Leu
Val	Glu	Arg 845	Leu	Ile	Gly
Thr	Gly 860	Pro	Glu	Glu	Glu
Pro 875	Leu	Ala	Glu	Arg	Thr 880
Pro	Arg	Asn	Val	Gly 895	Gly
Glu	Gln	Ala	Ile 910	Ser	Ala
Pro	Pro	Arg 925	Lys	Asp	Glu

Leu <210> 61 <211> 1045 <212> Белок <213> Искусственная

- 190 031876 <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 61

Arg 1

Pro

Asp

Phe

Cys 5

Leu

Glu

Pro

Pro

Tyr 10

Thr

Gly

Pro

Cys

Lys 15

Arg

Ile

Ile

Arg

Tyr

Phe

Tyr

Asn

Ala

Lys

Ala

Gly

Leu

Cys

Gln

20

25

30

Phe

Val

Tyr

Gly

Gly

Cys

Arg

Ala

Lys

Arg

Asn

Asn

Phe

Lys

Ser

35

40

45

Glu

Asp

Cys

Met

Arg

Thr

Cys

Gly

Gly

Ala

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

50

55

60

Pro

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

65

70

75

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

Ala

Asn

His

Asn

Asp

85

90

95

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

Ser

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

100

105

110

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Ser

115

120

125

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

Asp

Val

Lys

Leu

Gly

Val

130

135

140

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

145

150

155

Ser

Gly Val

Asp

Asn 165

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp 170

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu 175

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

180

185

190

Asp

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

Lys

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

195

200

205

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

210

215

220

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

225 230 235

Ala

Thr

Ala

Asp

Pro

Glu

Gln

Ile

Arg

Leu

160

Gln

Cys

Phe

Thr

Glu

240

- 191 031876

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

245

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

250

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

255

Thr

Gln

Ser

Leu

260

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

265

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

270

Val

Glu

Asp Val 275

Lys

Asp

Ile Asn Phe 280

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys 285

Phe

Leu

Gly

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

290

295

300

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys

305

310

315

Leu Glu

Tyr

Ser

Phe 325

Ala Asp

Tyr

Gly

Asp 330

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr 335

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

340

345

350

Asn

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Gly

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

355

360

365

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

370

375

380

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

385

390

395

Glu

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

405

410

415

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

420

425

430

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Asn

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

435

440

445

Ala

Lys Val 450

Lys

Asp

Val

Ile 455

Thr

Asn

Cys

Lys

Ser 460

Cys

Lys

Glu

Gly

Asn

Lys

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

465

470

475

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

Cys

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Arg

Cys

Ala

Arg

Ala

320

Ser

Asn

Ala

Trp

Ala

400

Ser

Tyr

Gln

Ser

Cys

480

Gly

- 192 031876

485

Ile	Gly Thr	Ala 500	Gly	Ser	Pro	Trp	Ser 505
Lys	Arg	Tyr	Ser	Lys	His	Ile	Glu	Asp
		515					520
Gly	Thr	Lys	Asn	Cys	Gly	Thr	Ser	Ser
	530					535
Thr	Asp	Glu	Asn	Lys	Cys	Val	Gln	Ser
545					550
His	Leu	Ile	Asp	Ile	Gly	Leu	Thr	Thr
				565
Val	Leu	Asp	Asp	Asn	Ile	Cys	Gly	Ala
			580					585
Tyr	Thr	Thr	Tyr	Thr	Thr	Thr	Glu	Lys
		595					600
Ser	Lys	Ser	Gln	Ser	Ser	Asp	Thr	Leu
	610					615
Pro	Leu	Gly	Asn	Thr	Pro	Tyr	Arg	Tyr
625					630
Ile	Pro	Thr	Asn	Glu	Glu	Thr	Cys	Asp
				645
Gln	Trp	Ser	Cys	Gly	Ser	Ala	Arg	Thr
			660					665
Asp	Asn	Tyr	Glu	Leu	Cys	Lys	Tyr	Asn
		675					680
Thr	Val	Arg	Ser	Asn	Ser	Ser	Lys	Leu
	690					695
Ala	Ala	Leu	Thr	Ala	His	Gln	Ala	Cys
705					710
Thr	Arg	His	Arg	Gln	Pro	Arg	Gly	Trp

725

	495
Arg	Trp	Asp	Gln 510	Ile	Tyr
Lys	Arg	Asn 525	Arg	Lys	Ala
Thr	Asn 540	Ala	Ala	Ala	Ser
Ile 555	Asp	Ser	Phe	Phe	Lys 560
Ser	Ser	Tyr	Leu	Ser 575	Asn
Lys	Ala	Pro	Trp 590	Thr	Thr
Asn	Lys	Glu 605	Arg	Asp	Lys
Val	Val 620	Asn	Val	Pro	Ser
Tyr 635	Ala	Cys	Gln	Cys	Lys 640
Arg	Lys	Glu	Tyr	Met 655	Asn
Lys	Arg	Gly	Tyr 670	Lys	Asn
Val	Asp	Val 685	Lys	Pro	Thr
Pro	Glu 700	Gly	Gly	Ser	Leu
Leu 715	Pro	Leu	Glu	Thr	Phe 720
Gln	Leu	Glu	Gln	Cys 735	Gly

- 193 031876

Tyr

Pro

Val

Gln 740

Arg

Leu

Val

Ala Leu 745

Tyr Leu Ala Ala

Arg 750

Leu

Trp

Asn

Gln

Val

Asp

Gln

Val

Ile

Arg

Asn

Ala

Leu

Ala

Ser

Pro

755

760

765

Ser

Gly

Gly

Asp

Leu

Gly

Glu

Ala

Ile

Arg

Glu

Gln

Pro

Glu

Gln

770

775

780

Arg

Leu

Ala

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Ala

Glu

Ser

Glu

Arg

Phe

Val

785

790

795

Gln

Gly

Thr

Gly

Asn

Asp

Glu

Ala

Gly

Ala

Ala

Asn

Gly

Pro

Ala

805

810

815

Ser

Gly

Asp

Ala

Leu

Leu

Glu

Arg

Asn

Tyr

Pro

Thr

Gly

Ala

Glu

820

825

830

Leu

Gly

Asp

Gly

Gly

Asp

Ile

Ser

Phe

Ser

Thr

Arg

Gly

Thr

Gln

835

840

845

Trp

Thr

Val

Glu

Arg

Leu

Leu

Gln

Ala

His

Arg

Gln

Leu

Glu

Glu

850

855

860

Gly

Tyr

Val

Phe

Val

Gly

Tyr

His

Gly

Thr

Phe

Leu

Glu

Ala

Ala

865

870

875

Ser

Ile

Val

Phe

Gly 885

Gly Val

Arg Ala

Arg 890

Ser

Gln

Asp

Leu

Asp 895

Ile

Trp

Arg

Gly

Phe

Tyr

Ile

Ala

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

Ala

Tyr

900

905

910

Tyr

Ala

Gln

Asp

Gln

Glu

Pro

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

Arg

Asn

915

920

925

Ala

Leu

Leu

Arg

Val

Tyr

Val

Pro

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro

Gly

Phe

930

935

940

Arg

Thr

Ser

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Gly

Glu

Val

945

950

955

Arg

Leu

Ile

Gly

His 965

Pro

Leu

Pro

Leu

Arg 970

Leu

Asp

Ala

Ile

Thr 975

Pro

Glu

Glu

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

Trp

Pro

980

985

990

Ser

Gly

Ala

Arg

800

Asp

Phe

Asn

Arg

Gln

880

Ala

Gly

Gly

Tyr

Glu

960

Gly

Leu

- 194 031876

Ala Glu Arg Thr Val Val Ile Pro Ser Ala Ile Pro Thr Asp Pro Arg

995 1000 1005

Asn

Val

1010

Gly

Gly

Asp

Leu

Asp Pro Ser Ser Ile Pro Asp Lys Glu 1015 1020

Gln Ala Ile Ser Ala Leu

1025

Pro Asp Tyr Ala Ser Gln

1030 1035

Pro Gly Lys

Pro Pro Arg Lys Asp Glu Leu

1040

1045 <210> 62 <211> 987 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 62

Asn 1

Tyr

Ile

Lys

Gly 5

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala 10

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys 15

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Pro

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

20

25

30

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

Ser

35

40

45

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

50

55

60

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

Asp

65

70

75

80

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

Cys

Asp

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

Lys

130

135

140

- 195 031876

Lys 145

Leu

Glu Lys

Val

Phe 150

Ala

Ser Leu

Thr

Asn Gly 155

Tyr

Lys

Cys

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

195

200

205

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

210

215

220

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

225

230

235

Lys

Asn

Leu Lys

Lys 245

Arg Tyr

Pro Gln

Asn 250

Lys

Asn

Ser

Gly

Asn 255

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

260

265

270

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

275

280

285

Glu

Leu 290

Asn Leu

Gln

Asn

Asn 295

Phe

Gly Lys

Leu

Phe 300

Gly

Lys

Tyr

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

305

310

315

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

325

330

335

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

340

345

350

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

355

360

365

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

370

375

380

Phe Cys Glu Gln Arg Gln Ala Lys Val Lys Asp Val Ile Thr Asn

385 390 395

Asp

160

Lys

Thr

Pro

Thr

Gly

240

Lys

Asp

Leu

Ile

Asp

320

Thr

Asp

Ile

Asn

Cys

400

- 196 031876

Lys

Ser Cys

Lys

Glu 405

Ser

Gly

Asn

Lys

Cys 410

Lys

Thr

Glu Cys

Lys 415

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

Cys

420

425

430

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

Ile

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

435

440

445

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

450

455

460

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

465

470

475

480

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

485

490

495

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

500

505

510

Ser

Ser

Tyr 515

Leu

Ser

Asn Val

Leu 520

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys 525

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

530

535

540

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Ser

Asp

Thr

Leu

Val

545

550

555

560

Val

Val

Asn

Val

Pro 565

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn Thr 570

Pro

Tyr

Arg

Tyr 575

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

580

585

590

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

595

600

605

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

Asn

Tyr

Glu

Leu

Cys

Lys

Tyr

Asn

Gly

610

615

620

Val

Asp

Val

Lys

Pro

Thr

Thr

Val

Arg

Ser

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

625

630

635

640

Pro

Glu

Gly

Gly

Ser

Leu

Ala

Ala

Leu

Thr

Ala

His

Gln

Ala

Cys

His

645 650 655

- 197 031876

Leu

Gln

Leu

Ala

705

Glu

Ser

Ala

Pro

Thr

785

Arg

Phe

Ser

Pro

Gly

865

Ser

Ala

Pro

Leu Glu 660

Thr

Phe

Thr Arg His 665

Arg Gln

Pro

Arg

Gly 670

Trp

Glu

Leu

Glu

Gln

Cys

Gly

Tyr

Pro

Val

Gln

Arg

Leu

Val

Ala

Leu

Tyr

675

680

685

Ala

Ala

Arg

Leu

Ser

Trp

Asn

Gln

Val

Asp

Gln

Val

Ile

Arg

Asn

690

695

700

Leu

Ala

Ser

Pro

Gly

Ser

Gly

Gly

Asp

Leu

Gly

Glu

Ala

Ile

Arg

710

715

720

Gln

Pro

Glu

Gln

Ala

Arg

Leu

Ala

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Ala

Glu

725

730

735

Glu

Arg

Phe

Val

Arg

Gln

Gly

Thr

Gly

Asn

Asp

Glu

Ala

Gly

Ala

740

745

750

Asn

Gly

Pro

Ala

Asp

Ser

Gly

Asp

Ala

Leu

Leu

Glu

Arg

Asn

Tyr

755

760

765

Thr

Gly

Ala

Glu

Phe

Leu

Gly

Asp

Gly

Gly

Asp

Ile

Ser

Phe

Ser

770

775

780

Arg

Gly

Thr

Gln

Asn

Trp

Thr

Val

Glu

Arg

Leu

Leu

Gln

Ala

His

790

795

800

Gln

Leu

Glu

Glu

Arg

Gly

Tyr

Val

Phe

Val

Gly

Tyr

His

Gly

Thr

805

810

815

Leu

Glu

Ala

Ala

Gln

Ser

Ile

Val

Phe

Gly

Gly

Val

Arg

Ala

Arg

820

825

830

Gln

Asp

Leu

Asp

Ala

Ile

Trp

Arg

Gly

Phe

Tyr

Ile

Ala

Gly

Asp

835

840

845

Ala

Leu

Ala

Tyr

Gly

Tyr

Ala

Gln

Asp

Gln

Glu

Pro

Asp

Ala

Arg

850

855

860

Arg

Ile

Arg

Asn

Gly

Ala

Leu

Leu

Arg

Val

Tyr

Val

Pro

Arg

Ser

870

875

880

Leu

Pro

Gly

Phe

Tyr

Arg

Thr

Ser

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

885

890

895

Ala

Gly

Glu

Val

Glu

Arg

Leu

Ile

Gly

His

Pro

Leu

Pro

Leu

Arg

- 198 031876

900

905

910

Leu

Asp Ala 915

Ile

Thr Gly

Pro

Glu 920

Glu

Glu Gly

Gly

Arg 925

Leu

Glu

Ile

Leu

Gly

Trp

Pro

Leu

Ala

Glu

Arg

Thr

Val

Val

Ile

Pro

Ser

930

935

940

Ile

Pro

Thr

Asp

Pro

Arg

Asn

Val

Gly

Gly

Asp

Leu

Asp

Pro

Ser

945

950

955

Ile

Pro

Asp

Lys

Glu

965

Gln

Ala

Ile

Ser

Ala

970

Leu

Pro

Asp

Tyr

Ala

975

Thr

Ala

Ser

960

Ser

Gln

Pro

Gly

Lys

980

Pro

Pro

Arg

Lys

Asp

985

Glu

Leu <210> 63 <211> 871 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 63

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Pro

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Ala Asn His

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys 40

Asn Cys

Asn

Glu

Ser 45

Gly

Ile

35

Ser

Val 50

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr 55

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser 60

Asn

Lys

Thr

Ile 65

Thr

His

Ser

Ser

Ile 70

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys 75

Lys

Glu

Cys

Lys

Val

Lys

Leu

Gly

Val 85

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys 90

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys 95

Ile

Glu

Asp

Thr

100

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

105

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

110

Gln

Leu

Leu

Gly

115

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

120

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

125

Arg

Gly

Leu

Thr

Ser

Cys

Asp

Val

Asp

Ser

- 199 031876

Ser

Ser Asn 130

Asp

Ser

Cys

Asp 135

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp 140

Glu

Cys

Gln

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

145

150

155

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

195

200

205

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

210

215

220

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

225

230

235

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Ser

Gly

Asn

245

250

255

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

260

265

270

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

275

280

285

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Asn

Asn

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Gly

Lys

Tyr

290

295

300

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

305

310

315

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

325

330

335

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

340

345

350

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

355

360

365

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Lys

Asp

160

Lys

Thr

Pro

Thr

Gly

240

Lys

Asp

Leu

Ile

Asp

320

Thr

Asp

Ile

Asn

- 200 031876

370	375
Phe 385	Cys	Glu	Gln	Arg	Gln 390	Ala	Lys	Val
Lys	Ser	Cys	Lys	Glu 405	Ser	Gly	Asn	Lys
Lys	Cys	Lys	Asp 420	Glu	Cys	Glu	Lys	Tyr 425
Gly	Thr	Ala 435	Gly	Gly	Gly	Ile	Gly 440	Thr
Arg	Trp 450	Asp	Gln	Ile	Tyr	Lys 455	Arg	Tyr
Lys 465	Arg	Asn	Arg	Lys	Ala 470	Gly	Thr	Lys
Thr	Asn	Ala	Ala	Ala 485	Ser	Thr	Asp	Glu
Ile	Asp	Ser	Phe 500	Phe	Lys	His	Leu	Ile 505
Ser	Ser	Tyr 515	Leu	Ser	Asn	Val	Leu 520	Asp
Lys	Ala 530	Pro	Trp	Thr	Thr	Tyr 535	Thr	Thr
Asn 545	Lys	Glu	Arg	Asp	Lys 550	Ser	Lys	Ser
Val	Val	Asn	Val	Pro 565	Ser	Pro	Leu	Gly
Tyr	Ala	Cys	Gln 580	Cys	Lys	Ile	Pro	Thr 585
Arg	Lys	Glu 595	Tyr	Met	Asn	Gln	Trp 600	Ser
Lys	Arg 610	Gly	Tyr	Lys	Asn	Asp 615	Asn	Tyr

380

Asp 395	Val	Ile	Thr	Asn	Cys 400
Lys	Thr	Glu	Cys	Lys 415	Thr
Lys	Phe	Ile	Glu 430	Ala	Cys
Gly	Ser	Pro 445	Trp	Ser	Lys
Lys	His 460	Ile	Glu	Asp	Ala
Cys 475	Gly	Thr	Ser	Ser	Thr 480
Lys	Cys	Val	Gln	Ser 495	Asp
Ile	Gly	Leu	Thr 510	Thr	Pro
Asn	Ile	Cys 525	Gly	Ala	Asp
Thr	Thr 540	Thr	Glu	Lys	Cys
Ser 555	Ser	Asp	Thr	Leu	Val 560
Thr	Pro	Tyr	Arg	Tyr 575	Lys
Glu	Glu	Thr	Cys 590	Asp	Asp
Gly	Ser	Ala 605	Arg	Thr	Met
Leu	Cys	Lys	Tyr	Asn	Gly

620

- 201 031876

Val

625

Arg

Glu

Gln

Glu

Ala

705

Asp

Tyr

Asn

Phe

Val

785

Thr

Pro

Pro

Glu

Pro

865

Asp Val

Lys

Pro

Thr 630

Thr Val

Arg

Ser

Asn 635

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp 640

His

Arg

Gln

Pro

Arg

Gly

Trp

Glu

Gln

Leu

Tyr

Pro

Thr

Gly

Ala

645

650

655

Phe

Leu

Gly

Asp

Gly

Gly

Asp

Ile

Ser

Phe

Ser

Thr

Arg

Gly

Thr

660

665

670

Asn

Trp

Thr

Val

Glu

Arg

Leu

Leu

Gln

Ala

His

Arg

Gln

Leu

Glu

675

680

685

Arg

Gly

Tyr

Val

Phe

Val

Gly

Tyr

His

Gly

Thr

Phe

Leu

Glu

Ala

690

695

700

Gln

Ser

Ile

Val

Phe

Gly

Gly

Val

Arg

Ala

Arg

Ser

Gln

Asp

Leu

710

715

720

Ala

Ile

Trp

Arg

Gly

Phe

Tyr

Ile

Ala

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

Ala

725

730

735

Gly

Tyr

Ala

Gln

Asp

Gln

Glu

Pro

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

Arg

740

745

750

Gly

Ala

Leu

Leu

Arg

Val

Tyr

Val

Pro

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro

Gly

755

760

765

Tyr Arg Thr

770

Ser Leu Thr Leu Ala Ala

Pro Glu Ala Ala Gly Glu

775

780

Glu

Arg

Leu

Ile

Gly 790

His

Pro

Leu

Pro

Leu 795

Arg

Leu

Asp

Ala

Ile 800

Gly

Pro

Glu

Glu

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

Trp

805

810

815

Leu

Ala

Glu

Arg

Thr

Val

Val

Ile

Pro

Ser

Ala

Ile

Pro

Thr

Asp

820

825

830

Arg

Asn

Val

Gly

Gly

Asp

Leu

Asp

Pro

Ser

Ser

Ile

Pro

Asp

Lys

835

840

845

Gln

Ala

Ile

Ser

Ala

Leu

Pro

Asp

Tyr

Ala

Ser

Gln

Pro

Gly

Lys

850

855

860

Pro

Arg

Lys

Asp

Glu

Leu

870

- 202 031876 <210> 64 <211> 1258 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 64

Arg Pro Asp Phe Cys Leu Glu Pro Pro Tyr Thr Gly Pro Cys Lys Ala

5 10 15

Arg

Ile

Ile Arg 20

Tyr

Phe

Tyr

Asn Ala 25

Lys

Ala

Gly

Leu

Cys 30

Gln

Thr

Phe

Val

Tyr

Gly

Gly

Cys

Arg

Ala

Lys

Arg

Asn

Asn

Phe

Lys

Ser

Ala

35

40

45

Glu

Asp

Cys

Met

Arg

Thr

Cys

Gly

Gly

Ala

Asn

His

Ser

Asp

Ser

Gly

50

55

60

Lys

Tyr

Asp

Pro

Cys

Glu

Lys

Lys

Leu

Pro

Pro

Tyr

Asp

Asp

Asn

Asp

65

70

75

80

Gln

Trp

Lys

Cys

Gln

Gln

Asn

Ser

Ser

Asp

Gly

Ser

Gly

Lys

Pro

Glu

85

90

95

Asn

Ile

Cys

Val

Pro

Pro

Arg

Arg

Glu

Arg

Leu

Cys

Thr

Tyr

Asn

Leu

100

105

110

Glu

Asn

Leu

Lys

Phe

Asp

Lys

Ile

Arg

Asp

Asn

Asn

Ala

Phe

Leu

Ala

115

120

125

Asp

Val

Leu

Leu

Thr

Ala

Arg

Asn

Glu

Gly

Glu

Lys

Ile

Val

Gln

Asn

130

135

140

His

Pro

Asp

Thr

Asn

Ser

Ser

Asn

Val

Cys

Asn

Ala

Leu

Glu

Arg

Ser

145

150

155

160

Phe

Ala

Asp

Leu

Ala

Asp

Ile

Ile

Arg

Gly

Thr

Asp

Gln

Trp

Lys

Gly

165

170

175

Thr

Asn

Ser

Asn

Leu

Glu

Lys

Asn

Leu

Lys

Gln

Met

Phe

Ala

Lys

Ile

180

185

190

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Gln

Asp

Lys

Tyr

Pro

Lys

Asp

Gln

Lys

195

200

205

- 203 031876

Tyr Thr Lys	Leu	Arg	Glu	Ala 215	Trp	Trp
	210
Trp 225	Glu	Val	Ile	Thr	Cys 230	Gly	Ala	Arg
Arg	Gly	Trp	Arg	Thr 245	Ser	Gly	Lys	Ser
Leu	Cys	Arg	Lys 260	Cys	Gly	His	Tyr	Glu 265
Asp	Tyr	Val 275	Pro	Gln	Phe	Leu	Arg 280	Trp
Phe	Tyr 290	Arg	Glu	Lys	Gln	Asn 295	Leu	Ile
Glu 305	Glu	Cys	Thr	Arg	Glu 310	Asp	His	Lys
Cys	Ser	Thr	Cys	Lys 325	Asp	Lys	Cys	Lys
Lys	Trp	Lys	Thr 340	Glu	Trp	Glu	Asn	Gln 345
Tyr	Glu	Gln 355	Asn	Lys	Asn	Lys	Thr 360	Ser
Asp	Asp 370	Tyr	Val	Lys	Asp	Phe 375	Phe	Glu
Ser 385	Leu	Glu	Asn	Tyr	Ile 390	Lys	Gly	Asp
Thr	Lys	Leu	Ser	Phe 405	Ile	Leu	Asn	Pro
Gly	Glu	Thr	Ala 420	Asn	His	Asn	Asp	Glu 425
Gly	Ile	Ser 435	Ser	Val	Gly	Gln	Ala 440	Gln
Lys	Thr 450	Cys	Ile	Thr	His	Ser 455	Ser	Ile

Ala	Asn 220	Arg	Gln	Lys	Val
Asn 235	Asp	Leu	Leu	Ile	Lys 240
Arg	Lys	Lys	Asn	Phe 255	Glu
Glu	Val	Pro	Thr 270	Lys	Leu
Thr	Glu	Trp 285	Ile	Glu	Asp
Asp	Met 300	Glu	Arg	His	Arg
Lys 315	Glu	Gly	Thr	Ser	Tyr 320
Tyr	Cys	Glu	Cys	Val 335	Lys
Asn	Lys	Tyr	Lys 350	Asp	Leu
Lys	Asn	Thr 365	Ser	Arg	Tyr
Leu	Glu 380	Ala	Asn	Tyr	Ser
Tyr 395	Phe	Ala	Glu	Tyr	Ala 400
Asp	Ala	Asn	Asn	Pro 415	Ser
Cys	Asn	Cys	Asn 430	Glu	Ser
Ser	Gly	Pro 445	Ser	Ser	Asn
Thr	Asn 460	Lys	Lys	Lys	Glu

- 204 031876

Cys

465

Ile

Cys

Arg

Cys

Lys

545

Ile

Ala Asn Phe

His

625

Gly

Tyr

Lys

Lys

Ser

705

Lys

Asp

Val

Lys

Leu 470

Gly

Val

Arg

Glu

Asn 475

Asp

Lys

Asp

Leu

Cys

Val

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

485

490

495

Gln

Asp

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

500

505

510

Gly Ser

Ser

Ser Asn Asp

Ser Cys 520

Asp

Asn

Lys

Asn 525

Gln

Asp

515

Gln

Lys

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

530

535

540

Cys

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

550

555

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

565

570

575

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

580

585

590

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

595

600

605

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

610

615

620

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

630

635

Asn

Lys

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

645

650

655

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

660

665

670

Asp

Leu 675

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln 680

Asn

Asn

Phe

Gly

Lys 685

Leu

Phe

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

690

695

700

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

710 715

Lys

480

Cys

Lys

Glu

Tyr

Trp

560

Tyr

Gly

Asn

Phe

Ser

640

Asp

Thr

Gly

Ser

Tyr

720

- 205 031876

Ile Asn

Pro

Val

Thr

785

Cys

Glu

Trp

Glu

Ser

865

Gln

Thr

Gly

Glu

Thr

945

Arg

Trp

Thr

Ala Met 725

Lys

His

Gly

Ala Glu 730

Met

Asn

Ile

Thr

Thr 735

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

740

745

750

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

755

760

765

Glu

Asn

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

Lys

Asp

Val

770

775

780

Asn

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Asn

Lys

Cys

Lys

Thr

790

795

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

805

810

815

Ala

Cys

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

Ile

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

820

825

830

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

835

840

845

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

850

855

860

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

870

875

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

885

890

895

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

900

905

910

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

915

920

925

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Ser

930

935

940

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

950

955

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Cys

Ile

Trp

Ile

Glu

800

Ile

Pro

Ile

Thr

Val

880

Leu

Cys

Thr

Asp

Tyr

960

Thr

- 206 031876

965

970

975

Cys Asp Asp Arg Lys Glu

980

Tyr Met Asn Gln Trp Ser Cys Gly Ser Ala

985 990

Arg

Thr

Met

995

Lys

Arg Gly

Tyr Lys Asn Asp Asn Tyr Glu Leu Cys Lys 1000

1005

Tyr Asn

Gly

Val

Asp

Val

Lys 1015

Pro

Thr

Thr

Val

Arg 1020

Ser

Asn

Ser

1010

Ser

Lys

Leu

Asp

Arg

His

Arg

Gln

Pro

Arg

Gly

Trp

Glu

Gln

Leu

1025

1030

1035

Tyr

Pro

Thr

Gly

Ala

Glu

Phe

Leu

Gly

Asp

Gly

Gly

Asp

Ile

Ser

1040

1045

1050

Phe

Ser

Thr

Arg

Gly

Thr

Gln

Asn

Trp

Thr

Val

Glu

Arg

Leu

Leu

1055

1060

1065

Gln

Ala

His

Arg

Gln

Leu

Glu

Glu

Arg

Gly

Tyr

Val

Phe

Val

Gly

1070

1075

1080

Tyr

His

Gly

Thr

Phe

Leu

Glu

Ala

Ala

Gln

Ser

Ile

Val

Phe

Gly

1085

1090

1095

Gly

Val

Arg

Ala

Arg

Ser

Gln

Asp

Leu

Asp

Ala

Ile

Trp

Arg

Gly

1100

1105

1110

Phe

Tyr

Ile

Ala

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

Ala

Tyr

Gly

Tyr

Ala

Gln

1115

1120

1125

Asp

Gln

Glu

Pro

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

Arg

Asn

Gly

Ala

Leu

1130

1135

1140

Leu

Arg

Val

Tyr

Val

Pro

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro

Gly

Phe

Tyr

Arg

1145

1150

1155

Thr

Ser

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Gly

Glu

Val

Glu

1160

1165

1170

Arg

Leu

Ile

Gly

His

Pro

Leu

Pro

Leu

Arg

Leu

Asp

Ala

Ile

Thr

1175

1180

1185

Gly

Pro

Glu

Glu

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

Trp

1190

1195

1200

- 207 031876

Pro Leu Ala Glu Arg Thr Val Val

1205 1210

Ile Pro Ser Ala Ile Pro Thr

1215

Asp Pro Arg Asn Val

Gly Gly Asp Leu Asp

Pro

1220

1225

Ser

1230

Ser Ile Pro

Asp Lys Glu Gln Ala Ile Ser

Ala Leu Pro Asp Tyr Ala Ser Gln

1235

1240

1245

Pro Gly Lys Pro Pro	Arg Lys Asp Glu Leu 1255
125	.0
<210>	65
<211>	1374
<212>	Белок
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная	конструкция

<400> 65

Arg 1

Pro

Asp

Phe

Cys 5

Leu

Glu

Pro

Pro

Tyr 10

Thr Gly

Pro

Cys

Lys 15

Ala

Arg

Ile

Ile

Arg 20

Tyr

Phe

Tyr

Asn

Ala 25

Lys

Ala

Gly

Leu

Cys 30

Gln

Thr

Phe

Val

Tyr 35

Gly

Gly

Cys

Arg

Ala 40

Lys

Arg

Asn

Asn

Phe 45

Lys

Ser

Ala

Glu

Asp 50

Cys

Met

Arg

Thr

Cys 55

Gly

Gly

Ala

Asn

His 60

Ser

Asp

Ser

Gly

Lys 65

Tyr

Asp

Pro

Cys

Glu 70

Lys

Lys

Leu

Pro

Pro 75

Tyr

Asp

Asp

Asn

Asp 80

Gln

Trp

Lys

Cys

Gln 85

Gln

Asn

Ser

Ser

Asp 90

Gly

Ser

Gly

Lys

Pro 95

Glu

Asn

Ile

Cys

Val 100

Pro

Pro

Arg

Arg

Glu 105

Arg

Leu

Cys

Thr

Tyr 110

Asn

Leu

Glu

Asn

Leu 115

Lys

Phe

Asp

Lys

Ile 120

Arg

Asp

Asn

Asn

Ala 125

Phe

Leu

Ala

Asp

Val 130

Leu

Leu

Thr

Ala

Arg 135

Asn

Glu

Gly

Glu

Lys 140

Ile

Val

Gln

Asn

His

Pro

Asp

Thr

Asn

Ser

Ser

Asn

Val

Cys

Asn

Ala

Leu

Glu

Arg

Ser

- 208 031876

145

Phe

Thr

Arg

Tyr

Trp

225

Arg

Leu

Asp

Phe

Glu

305

Cys

Lys

Tyr

Asp

Ser

385

150

155

Ala

Asp

Leu

Ala Asp 165

Ile

Ile Arg

Gly Thr 170

Asp

Gln

Trp

Lys 175

Asn

Ser

Asn

Leu

Glu

Lys

Asn

Leu

Lys

Gln

Met

Phe

Ala

Lys

180

185

190

Glu

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Gln

Asp

Lys

Tyr

Pro

Lys

Asp

Gln

195

200

205

Thr

Lys

Leu

Arg

Glu

Ala

Trp

Trp

Asn

Ala

Asn

Arg

Gln

Lys

210

215

220

Glu

Val

Ile

Thr

Cys

Gly

Ala

Arg

Ser

Asn

Asp

Leu

Leu

Ile

230

235

Gly

Trp

Arg

Thr

Ser

Gly

Lys

Ser

Asp

Arg

Lys

Lys

Asn

Phe

245

250

255

Cys

Arg

Lys

Cys

Gly

His

Tyr

Glu

Lys

Glu

Val

Pro

Thr

Lys

260

265

270

Tyr

Val

Pro

Gln

Phe

Leu

Arg

Trp

Leu

Thr

Glu

Trp

Ile

Glu

275

280

285

Tyr

Arg

Glu

Lys

Gln

Asn

Leu

Ile

Asp

Asp

Met

Glu

Arg

His

290

295

300

Glu

Cys

Thr

Arg Glu 310

Asp

His

Lys

Ser Lys 315

Glu

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Cys

Lys

Asp

Lys

Cys

Lys

Lys

Tyr

Cys

Glu

Cys

Val

325

330

335

Trp

Lys

Thr

Glu

Trp

Glu

Asn

Gln

Glu

Asn

Lys

Tyr

Lys

Asp

340

345

350

Glu

Gln

Asn

Lys

Asn

Lys

Thr

Ser

Gln

Lys

Asn

Thr

Ser

Arg

355

360

365

Asp

Tyr

Val

Lys

Asp

Phe

Phe

Glu

Lys

Leu

Glu

Ala

Asn

Tyr

370

375

380

Leu

Glu

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

390

395

160

Gly

Ile

Lys

Val

Lys

240

Glu

Leu

Asp

Arg

Tyr

320

Lys

Leu

Tyr

Ser

Ala

400

- 209 031876

Thr

Gly

Gly

Lys

Cys

465

Ile

Cys

Arg

Cys

Lys

545

Ile

Ala Asn Phe

His

625

Gly

Lys

Leu

Ser

Phe

405

Ile

Leu

Asn

Pro

Ser

410

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

415

Glu

Thr

Ala

420

Asn

His

Asn

Asp

Glu

425

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

430

Glu

Ile

Ser 435

Ser

Val

Gly

Gln

Ala 440

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro 445

Ser

Ser

Thr

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

450

455

460

Lys

Asp

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

470

475

Cys

Val

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

485

490

495

Gln

Asp

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

500

505

510

Gly

Gln

530

Ser

515

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

520

Cys

Asp

Asn

Lys

Asn

525

Gln

Asp

Lys

Lys

Leu

Glu

Lys

535

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

540

Thr

Asn

Gly

Cys

Asp

Lys

Cys

Lys 550

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg 555

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

565

570

575

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

580

585

590

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

595

600

605

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

610

615

620

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

630

635

Asn

Lys

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

645

650

655

Ser

Ser

Asn

Glu

Lys

480

Cys

Lys

Glu

Tyr

Trp

560

Tyr

Gly

Asn

Phe

Ser

640

Asp

- 210 031876

Tyr Gly Asp Leu Ile Lys Gly Thr

Ser Ile Trp Asp Asn Glu Tyr

660

665

670

Lys Asp Leu

675

Lys Tyr Ile

690

Ser Leu Asp

705

Ile Trp Thr

Asn Ala Asp

Pro Thr Ile

755

Glu Leu Asn

Lys Lys Asn

Glu Leu Arg

710

Ala Met Lys

725

Gly Ser Val

740

Asp Leu Ile

Leu Gln Asn

680

Asn Thr Ala

695

Glu Ser Trp

His Gly Ala

Thr Gly Ser

745

Pro Gln Tyr

760

Asn Phe Gly

Glu Gln Asp

700

Trp Asn Thr

715

Glu Met Asn

730

Gly Ser Ser

Leu Arg Phe

Lys Leu Phe

685

Thr Ser Tyr

Asn Lys Lys

Ile Thr Thr

735

Cys Asp Asp

750

Leu Gln Glu

765

Val

Glu

770

Asn

Phe

Cys

Glu

Gln

775

Arg

Gln

Ala

Lys

Val

780

Lys

Asp

Val

Thr 785

Asn

Cys

Lys

Ser

Cys 790

Lys

Glu

Ser

Gly

Asn 795

Lys

Cys

Lys

Thr

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

805

810

815

Glu

Ala

Cys

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

Ile

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

820

825

830

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

835

840

845

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

850

855

860

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

865

870

875

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

885

890

895

Thr

Thr

Pro

Ser

900

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

905

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

910

Ile

Thr

Gly

Ser

Tyr

720

Cys

Ile

Trp

Ile

Glu

800

Ile

Pro

Ile

Thr

Val

880

Leu

Cys

- 211 031876

Gly Ala Asp Lys Ala Pro Trp Thr

915 920

Thr Tyr Thr Thr Tyr Thr Thr Thr 925

Glu Lys Cys Asn Lys Glu Arg Asp

930 935

Lys Ser Lys Ser Gln Ser Ser Asp

940

Thr Leu Val Val Val Asn Val Pro

945 950

Ser Pro Leu Gly Asn Thr Pro Tyr

955 960

Arg Tyr Lys Tyr Ala Cys Gln Cys 965

Lys Ile Pro Thr Asn Glu Glu Thr

970 975

Cys Asp Asp Arg Lys Glu Tyr Met

980

Asn Gln Trp Ser Cys Gly Ser Ala

985 990

Arg

Thr

Met

995

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

1000

Asn Asp Asn Tyr Glu Leu Cys Lys 1005

Tyr

Asn 1010

Gly

Val

Asp Val

Lys 1015

Pro

Thr

Thr

Val

Arg 1020

Ser

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

Pro

Glu

Gly

Gly

Ser

Leu

Ala

Ala

Leu

Thr

Ala

1025

1030

1035

His

Gln

Ala

Cys

His

Leu

Pro

Leu

Glu

Thr

Phe

Thr

Arg

His

Arg

1040

1045

1050

Gln

Pro

Arg

Gly

Trp

Glu

Gln

Leu

Glu

Gln

Cys

Gly

Tyr

Pro

Val

1055

1060

1065

Gln

Arg

Leu

Val

Ala

Leu

Tyr

Leu

Ala

Ala

Arg

Leu

Ser

Trp

Asn

1070

1075

1080

Gln

Val

Asp

Gln

Val

Ile

Arg

Asn

Ala

Leu

Ala

Ser

Pro

Gly

Ser

1085

1090

1095

Gly

Gly

Asp

Leu

Gly

Glu

Ala

Ile

Arg

Glu

Gln

Pro

Glu

Gln

Ala

1100

1105

1110

Arg

Leu

Ala

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Ala

Glu

Ser

Glu

Arg

Phe

Val

1115

1120

1125

Arg

Gln

Gly

Thr

Gly

Asn

Asp

Glu

Ala

Gly

Ala

Ala

Asn

Gly

Pro

1130

1135

1140

Ala

Asp

Ser

Gly

Asp

Ala

Leu

Leu

Glu

Arg

Asn

Tyr

Pro

Thr

Gly

- 212 031876

1145

1150

1155

Ala Glu 1160

Phe

Leu Gly

Asp

Gly 1165

Gly

Asp

Ile

Ser

Phe 1170

Ser

Thr

Arg

Gly

Thr

Gln

Asn

Trp

Thr

Val

Glu

Arg

Leu

Leu

Gln

Ala

His

Arg

1175

1180

1185

Gln

Leu

Glu

Glu

Arg

Gly

Tyr

Val

Phe

Val

Gly

Tyr

His

Gly

Thr

1190

1195

1200

Phe

Leu

Glu

Ala

Ala

Gln

Ser

Ile

Val

Phe

Gly

Gly

Val

Arg

Ala

1205

1210

1215

Arg

Ser

Gln

Asp

Leu

Asp

Ala

Ile

Trp

Arg

Gly

Phe

Tyr

Ile

Ala

1220

1225

1230

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

Ala

Tyr

Gly

Tyr

Ala

Gln

Asp

Gln

Glu

Pro

1235

1240

1245

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

Arg

Asn

Gly

Ala

Leu

Leu

Arg

Val

Tyr

1250

1255

1260

Val

Pro

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro

Gly

Phe

Tyr

Arg

Thr

Ser

Leu

Thr

1265

1270

1275

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Gly

Glu

Val

Glu

Arg

Leu

Ile

Gly

1280

1285

1290

His

Pro

Leu

Pro

Leu

Arg

Leu

Asp

Ala

Ile

Thr

Gly

Pro

Glu

Glu

1295

1300

1305

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

Trp

Pro

Leu

Ala

Glu

1310

1315

1320

Arg

Thr

Val

Val

Ile

Pro

Ser

Ala

Ile

Pro

Thr

Asp

Pro

Arg

Asn

1325

1330

1335

Val

Gly

Gly

Asp

Leu

Asp

Pro

Ser

Ser

Ile

Pro

Asp

Lys

Glu

Gln

1340

1345

1350

Ala

Ile

Ser

Ala

Leu

Pro

Asp

Tyr

Ala

Ser

Gln

Pro

Gly

Lys

Pro

1355

1360

1365

Pro Arg

1370

Lys Asp Glu Leu

- 213 031876 <210> 66 <211> 1200 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 66

Asn His Ser Asp Ser Gly Lys Tyr Asp

5

Pro Cys Glu Lys Lys Leu Pro

15

Pro Tyr Asp Asp Asn Asp Gln Trp Lys

25

Cys Gln Gln Asn Ser Ser Asp 30

Gly Ser Gly Lys Pro Glu Asn Ile Cys

40

Val Pro Pro Arg Arg Glu Arg

Leu Cys Thr Tyr Asn Leu Glu Asn Leu

55

Lys Phe Asp Lys Ile Arg Asp

Asn Asn Ala Phe Leu Ala Asp Val Leu

70

Leu Thr Ala Arg Asn Glu Gly

80

Glu Lys Ile Val Gln Asn His Pro Asp 85

Thr Asn Ser Ser Asn Val Cys

95

Asn Ala Leu Glu Arg Ser Phe Ala Asp

100 105

Leu Ala Asp Ile Ile Arg Gly

110

Thr Asp Gln Trp Lys Gly Thr Asn Ser

115 120

Asn Leu Glu Lys Asn Leu Lys

125

Gln Met Phe Ala Lys

Ile Arg Glu Asn Asp Lys Val

Leu Gln Asp Lys

130

135

140

Tyr Pro Lys Asp Gln Lys Tyr Thr

145 150

Lys Leu Arg Glu Ala Trp Trp Asn

155 160

Ala Asn Arg Gln Lys Val Trp Glu 165

Val Ile Thr Cys Gly Ala Arg Ser

170 175

Asn Asp Leu Leu Ile Lys Arg Gly

180

Trp Arg Thr Ser Gly Lys Ser Asp

185 190

Arg Lys Lys Asn Phe Glu Leu Cys

195 200

Arg Lys Cys Gly His Tyr Glu Lys 205

Glu Val Pro Thr Lys Leu Asp Tyr

Val Pro Gln Phe Leu Arg Trp Leu

- 214 031876

210	215
Thr 225	Glu	Trp	Ile	Glu	Asp 230	Phe	Tyr	Arg
Asp	Met	Glu	Arg	His 245	Arg	Glu	Glu	Cys
Lys	Glu	Gly	Thr 260	Ser	Tyr	Cys	Ser	Thr 265
Tyr	Cys	Glu 275	Cys	Val	Lys	Lys	Trp 280	Lys
Asn	Lys 290	Tyr	Lys	Asp	Leu	Tyr 295	Glu	Gln
Lys 305	Asn	Thr	Ser	Arg	Tyr 310	Asp	Asp	Tyr
Leu	Glu	Ala	Asn	Tyr 325	Ser	Ser	Leu	Glu
Tyr	Phe	Ala	Glu 340	Tyr	Ala	Thr	Lys	Leu 345
Asp	Ala	Asn 355	Asn	Pro	Ser	Gly	Glu 360	Thr
Cys	Asn 370	Cys	Asn	Glu	Ser	Gly 375	Ile	Ser
Ser 385	Gly	Pro	Ser	Ser	Asn 390	Lys	Thr	Cys
Thr	Asn	Lys	Lys	Lys 405	Glu	Cys	Lys	Asp
Asn	Asp	Lys	Asp 420	Leu	Lys	Ile	Cys	Val 425
Gly	Val	Asp 435	Asn	Cys	Cys	Cys	Gln 440	Asp
Asn	Cys 450	Ser	Asp	Asn	Lys	Arg 455	Gly	Ser

220

Lys 235	Gln	Asn	Leu	Ile	Asp 240
Arg	Glu	Asp	His	Lys 255	Ser
Lys	Asp	Lys	Cys 270	Lys	Lys
Glu	Trp	Glu 285	Asn	Gln	Glu
Lys	Asn 300	Lys	Thr	Ser	Gln
Lys 315	Asp	Phe	Phe	Glu	Lys 320
Tyr	Ile	Lys	Gly	Asp 335	Pro
Phe	Ile	Leu	Asn 350	Pro	Ser
Asn	His	Asn 365	Asp	Glu	Ala
Val	Gly 380	Gln	Ala	Gln	Thr
Thr 395	His	Ser	Ser	Ile	Lys 400
Lys	Leu	Gly	Val	Arg 415	Glu
Glu	Asp	Thr	Ser 430	Leu	Ser
Leu	Gly	Ile 445	Leu	Gln	Glu
Ser	Asn	Asp	Ser	Cys	Asp

460

- 215 031876

Asn

465

Ser

Arg

Gly

Gln

Asp

545

Cys

Pro

Glu

Trp

Phe

625

Gln

Asn

Met

Ser

Arg

705

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu Cys 470

Gln

Lys

Lys

Leu 475

Glu

Lys

Val

Phe

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

485

490

495

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

500

505

510

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

515

520

525

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

530

535

540

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

550

555

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

565

570

575

Gln

Asn

Lys 580

Asn

Ser Gly

Asn

Lys 585

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys 590

Ala

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

595

600

605

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Asn

610

615

620

Gly

Lys

Leu

Phe

Gly

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

630

635

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

645

650

655

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

660

665

670

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

675

680

685

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

690

695

700

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Asn

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

710

715

Ala

480

Ser

Glu

Thr

Glu

Gly

560

Tyr

Leu

Ile

Asn

Glu

640

Trp

Glu

Gly

Leu

Ala

720

- 216 031876

Lys

Val

Lys

Asp

Val 725

Ile

Thr

Asn Cys

Lys 730

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser 735

Gly

Asn

Lys

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

740

745

750

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

Cys

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

Ile

755

760

765

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

770

775

780

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

785

790

795

800

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

805

810

815

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

820

825

830

Leu

Ile

Asp 835

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr 840

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu 845

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

850

855

860

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

865

870

875

880

Lys

Ser

Gln

Ser

Ser

Asp

Thr

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

885

890

895

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

Tyr

Arg

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

900

905

910

Pro

Thr Asn 915

Glu

Glu

Thr Cys

Asp 920

Asp Arg Lys

Glu

Tyr 925

Met

Asn

Gln

Trp

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

930

935

940

Asn

Tyr

Glu

Leu

Cys

Lys

Tyr

Asn

Gly

Val

Asp

Val

Lys

Pro

Thr

Thr

945

950

955

960

Val

Arg

Ser

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

Arg

His

Arg

Gln

Pro

Arg

Gly

965 970 975

- 217 031876

Trp Glu Gln Leu Tyr Pro Thr Gly Ala Glu Phe Leu Gly Asp Gly Gly

980 985 990

Asp Ile Ser Phe Ser Thr Arg Gly Thr Gln Asn Trp Thr Val Glu Arg

995 1000 1005

Leu

Leu 1010

Gln

Ala

His

Arg

Gln 1015

Leu

Glu Glu

Arg

Gly 1020

Tyr

Val

Phe

Val

Gly

Tyr

His

Gly

Thr

Phe

Leu

Glu

Ala

Ala

Gln

Ser

Ile

Val

1025

1030

1035

Phe

Gly

Gly

Val

Arg

Ala

Arg

Ser

Gln

Asp

Leu

Asp

Ala

Ile

Trp

1040

1045

1050

Arg

Gly

Phe

Tyr

Ile

Ala

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

Ala

Tyr

Gly

Tyr

1055

1060

1065

Ala

Gln

Asp

Gln

Glu

Pro

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

Arg

Asn

Gly

1070

1075

1080

Ala

Leu

Leu

Arg

Val

Tyr

Val

Pro

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro

Gly

Phe

1085

1090

1095

Tyr

Arg

Thr

Ser

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Gly

Glu

1100

1105

1110

Val

Glu

Arg

Leu

Ile

Gly

His

Pro

Leu

Pro

Leu

Arg

Leu

Asp

Ala

1115

1120

1125

Ile

Thr

Gly

Pro

Glu

Glu

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

1130

1135

1140

Gly

Trp

Pro

Leu

Ala

Glu

Arg

Thr

Val

Val

Ile

Pro

Ser

Ala

Ile

1145

1150

1155

Pro

Thr

Asp

Pro

Arg

Asn

Val

Gly

Gly

Asp

Leu

Asp

Pro

Ser

Ser

1160

1165

1170

Ile

Pro

Asp

Lys

Glu

Gln

Ala

Ile

Ser

Ala

Leu

Pro

Asp

Tyr

Ala

1175

1180

1185

Ser

Gln

Pro

Gly

Lys

Pro

Pro

Arg

Lys

Asp

Glu

Leu

1190

1195

1200

<210> 67

- 218 031876 <211> 1316 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 67

Asn 1

His

Ser

Asp

Ser 5

Gly

Lys

Tyr

Asp

Pro 10

Cys

Glu

Lys

Lys

Leu 15

Pro

Pro

Tyr

Asp

Asp

Asn

Asp

Gln

Trp

Lys

Cys

Gln

Gln

Asn

Ser

Ser

Asp

20

25

30

Gly

Ser

Gly

Lys

Pro

Glu

Asn

Ile

Cys

Val

Pro

Pro

Arg

Arg

Glu

Arg

35

40

45

Leu

Cys

Thr

Tyr

Asn

Leu

Glu

Asn

Leu

Lys

Phe

Asp

Lys

Ile

Arg

Asp

50

55

60

Asn

Asn

Ala

Phe

Leu

Ala

Asp

Val

Leu

Leu

Thr

Ala

Arg

Asn

Glu

Gly

65

70

75

80

Glu

Lys

Ile

Val

Gln

Asn

His

Pro

Asp

Thr

Asn

Ser

Ser

Asn

Val

Cys

85

90

95

Asn

Ala

Leu

Glu

Arg

Ser

Phe

Ala

Asp

Leu

Ala

Asp

Ile

Ile

Arg

Gly

100

105

110

Thr

Asp

Gln

Trp

Lys

Gly

Thr

Asn

Ser

Asn

Leu

Glu

Lys

Asn

Leu

Lys

115

120

125

Gln Met Phe Ala Lys

Ile Arg Glu Asn Asp Lys Val

Leu Gln Asp Lys

130

135

140

Tyr 145

Pro

Lys

Asp

Gln

Lys 150

Tyr

Thr

Lys

Leu Arg 155

Glu

Ala

Trp

Trp

Asn 160

Ala

Asn

Arg

Gln

Lys

Val

Trp

Glu

Val

Ile

Thr

Cys

Gly

Ala

Arg

Ser

165

170

175

Asn

Asp

Leu

Leu

Ile

Lys

Arg

Gly

Trp

Arg

Thr

Ser

Gly

Lys

Ser

Asp

180

185

190

Arg

Lys

Lys

195

Asn

Phe

Glu

Leu

Cys

200

Arg

Lys

Cys

Gly

His

205

Tyr

Glu

Lys

Glu

Val

210

Pro

Thr

Lys

Leu

Asp

215

Tyr

Val

Pro

Gln

Phe

220

Leu

Arg

Trp

Leu

- 219 031876

Thr Glu Trp 225

Ile

Glu Asp 230

Phe

Tyr Arg

Glu Lys 235

Gln

Asn

Leu

Ile

Asp 240

Asp

Met

Glu

Arg

His

Arg

Glu

Glu

Cys

Thr

Arg

Glu

Asp

His

Lys

Ser

245

250

255

Lys

Glu

Gly

Thr

Ser

Tyr

Cys

Ser

Thr

Cys

Lys

Asp

Lys

Cys

Lys

Lys

260

265

270

Tyr

Cys

Glu

Cys

Val

Lys

Lys

Trp

Lys

Thr

Glu

Trp

Glu

Asn

Gln

Glu

275

280

285

Asn

Lys

Tyr

Lys

Asp

Leu

Tyr

Glu

Gln

Asn

Lys

Asn

Lys

Thr

Ser

Gln

290

295

300

Lys

Asn

Thr

Ser

Arg

Tyr

Asp

Asp

Tyr

Val

Lys

Asp

Phe

Phe

Glu

Lys

305

310

315

320

Leu

Glu

Ala

Asn

Tyr

Ser

Ser

Leu

Glu

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

Pro

325

330

335

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Pro

Ser

340

345

350

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Ala

355

360

365

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

Ser

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

370

375

380

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

385

390

395

400

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

Asp

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

405

410

415

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

420

425

430

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

435

440

445

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

Cys

Asp

450

455

460

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

Lys

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

- 220 031876

465

470

475

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly 485

Tyr

Lys

Cys

Asp

Lys 490

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr 495

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

500

505

510

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

515

520

525

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

530

535

540

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

545

550

555

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

565

570

575

Pro

Gln Asn

Lys 580

Asn

Ser

Gly Asn

Lys 585

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys 590

Ala

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

595

600

605

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Asn

610

615

620

Phe

Gly

Lys

Leu

Phe

Gly

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

625

630

635

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

645

650

655

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

660

665

670

Met

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

675

680

685

Ser

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

690

695

700

Arg

Phe

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Asn

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

705

710

715

480

Ser

Glu

Thr

Glu

Gly

560

Tyr

Leu

Ile

Asn

Glu

640

Trp

Glu

Gly

Leu

Ala

720

- 221 031876

Lys

Asn

Lys

Gly

Arg

785

Thr

Asp

Leu

Leu

Thr

865

Lys

Leu

Pro

Trp

Asn

945

Val

Val

Lys

Asp

Val 725

Ile

Thr Asn

Cys

Lys 730

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser 735

Gly

Lys

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

740

745

750

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

Cys

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

Ile

755

760

765

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

770

775

780

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

790

795

800

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

805

810

815

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

820

825

830

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

835

840

845

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

850

855

860

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

870

875

880

Ser

Gln

Ser

Ser

Asp

Thr

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

885

890

895

Gly

Asn

Thr

Pro

Tyr

Arg

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

900

905

910

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

915

920

925

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

930

935

940

Tyr

Glu

Leu

Cys

Lys

Tyr

Asn

Gly

Val

Asp

Val

Lys

Pro

Thr

Thr

950

955

960

Arg

Ser

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

Pro

Glu

Gly

Gly

Ser

Leu

Ala

965

970

975

- 222 031876

Ala Leu Thr Ala His Gln Ala Cys His Leu Pro Leu Glu Thr Phe Thr

980 985 990

Arg His Arg Gln Pro Arg Gly Trp Glu Gln Leu Glu Gln Cys Gly Tyr

995 1000 1005

Pro Val

Gln

Arg

Leu Val

Ala 1015

Leu

Tyr

Leu Ala

Ala 1020

Arg

Leu

Ser

1010

Trp

Asn

Gln

Val

Asp

Gln

Val

Ile

Arg

Asn

Ala

Leu

Ala

Ser

Pro

1025

1030

1035

Gly

Ser

Gly

Gly

Asp

Leu

Gly

Glu

Ala

Ile

Arg

Glu

Gln

Pro

Glu

1040

1045

1050

Gln

Ala

Arg

Leu

Ala

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Ala

Glu

Ser

Glu

Arg

1055

1060

1065

Phe

Val

Arg

Gln

Gly

Thr

Gly

Asn

Asp

Glu

Ala

Gly

Ala

Ala

Asn

1070

1075

1080

Gly

Pro

Ala

Asp

Ser

Gly

Asp

Ala

Leu

Leu

Glu

Arg

Asn

Tyr

Pro

1085

1090

1095

Thr

Gly

Ala

Glu

Phe

Leu

Gly

Asp

Gly

Gly

Asp

Ile

Ser

Phe

Ser

1100

1105

1110

Thr

Arg

Gly

Thr

Gln

Asn

Trp

Thr

Val

Glu

Arg

Leu

Leu

Gln

Ala

1115

1120

1125

His

Arg

Gln

Leu

Glu

Glu

Arg

Gly

Tyr

Val

Phe

Val

Gly

Tyr

His

1130

1135

1140

Gly

Thr

Phe

Leu

Glu

Ala

Ala

Gln

Ser

Ile

Val

Phe

Gly

Gly

Val

1145

1150

1155

Arg

Ala

Arg

Ser

Gln

Asp

Leu

Asp

Ala

Ile

Trp

Arg

Gly

Phe

Tyr

1160

1165

1170

Ile

Ala

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

Ala

Tyr

Gly

Tyr

Ala

Gln

Asp

Gln

1175

1180

1185

Glu

Pro

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

Arg

Asn

Gly

Ala

Leu

Leu

Arg

1190

1195

1200

Val

Tyr

Val

Pro

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro

Gly

Phe

Tyr

Arg

Thr

Ser

1205 1210 1215

- 223 031876

Leu

Thr

1220

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

1225

Ala

Ala

Gly

Glu

Val

1230

Glu

Arg

Leu

Ile

Gly

1235

His

Pro

Leu

Pro

Leu

1240

Arg

Leu

Asp

Ala

Ile

1245

Thr

Gly

Pro

Glu

Glu

1250

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

1255

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

1260

Trp

Pro

Leu

Ala

Glu

1265

Arg

Thr

Val

Val

Ile

1270

Pro

Ser

Ala

Ile

Pro

1275

Thr

Asp

Pro

Arg

Asn

1280

Val

Gly

Gly

Asp

Leu

1285

Asp

Pro

Ser

Ser

Ile

1290

Pro

Asp

Lys

Glu

Gln

1295

Ala

Ile

Ser

Ala

Leu

1300

Pro

Asp

Tyr

Ala

Ser

1305

Gln

Pro

Gly

Lys Pro Pro Arg Lys Asp Glu Leu

1310

1315 <210> 68 <211> 964 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400>68

Leu Ser Phe Ile Leu Asn Ser Ser

Asp Ala Asn Asn Pro Ser Glu Lys

1015

Ile Gln Lys Asn Asn Asp Glu Val

Cys Asn Cys Asn Glu Ser Gly Ile

30

Ala Ser Val Glu Gln Glu Gln Ile

40

Ser Asp Pro Ser Ser Asn Lys Thr 45

Cys Ile Thr His Ser Ser Ile Lys

55

Ala Asn Lys Lys Lys Val Cys Lys

His Val Lys Leu Gly Val Arg Glu

70

Asn Asp Lys Asp Leu Arg Val Cys

80

Val Ile Glu His Thr Ser Leu Ser 85

Gly Val Glu Asn Cys Cys Cys Gln

95

- 224 031876

Asp

Ser

Lys

Asp

145

Trp

Asn

Cys

Thr

Gly

225

Lys

Leu

Glu

Lys

Glu

305

Ala

Gly

Phe

Leu Arg 100

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn Cys 105

Ser

Asp

Asn

Lys 110

Ser

Gly

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Glu

Ala

Cys

Glu

115

120

125

Asn

Leu

Glu

Lys

Val

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Cys

130

135

140

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Asn

Trp

Ile

150

155

160

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

165

170

175

Thr

Ile Gly 180

Leu

Pro

Pro Arg

Thr Gln 185

Ser Leu

Cys

Leu 190

Val

Val

Leu

Asp

Glu

Lys

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

Arg

195

200

205

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

210

215

220

Lys

Asn

Leu

Lys

Pro

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

230

235

240

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

245

250

255

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

260

265

270

Leu Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe 280

Gly Lys

Leu

Phe

Arg 285

Lys

Tyr

Ile

275

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

290

295

300

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

310

315

320

Met Lys His Gly Ala Gly Met Asn Ser Thr Thr Cys

325 330

Cys Gly Asp

335

Ser Val Thr Gly Ser Gly Ser Ser Cys Asp Asp Ile Pro Thr Ile

340 345 350

- 225 031876

Asp

Leu

Ile 355

Pro

Gln Tyr

Leu

Arg 360

Phe

Leu Gln Glu

Trp 365

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

Lys

Pro

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

370

375

380

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Gly

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

385

390

395

400

Glu

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

Val

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Asp

Cys

405

410

415

Lys

Gly

Gly

Asp

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

420

425

430

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

435

440

445

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

450

455

460

Ala

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

465

470

475

480

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

485

490

495

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

500

505

510

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Thr

Asp

Lys

Ser

515

520

525

Lys

Leu

Gln

Gln

Cys

Asn

Thr

Ala

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

530

535

540

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Gly

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

545

550

555

560

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

565

570

575

Trp

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

580

585

590

Asn

Tyr

Glu

Leu

Cys

Lys

Tyr

Asn

Gly

Val

Asp

Val

Lys

Pro

Thr

Thr

- 226 031876

	595	600
Val	Arg 610	Ser	Asn	Ser	Ser	Lys 615	Leu	Asp
Ala 625	Leu	Thr	Ala	His	Gln 630	Ala	Cys	His
Arg	His	Arg	Gln	Pro 645	Arg	Gly	Trp	Glu
Pro	Val	Gln	Arg 660	Leu	Val	Ala	Leu	Tyr 665
Asn	Gln	Val 675	Asp	Gln	Val	Ile	Arg 680	Asn
Gly	Gly 690	Asp	Leu	Gly	Glu	Ala 695	Ile	Arg
Leu 705	Ala	Leu	Thr	Leu	Ala 710	Ala	Ala	Glu
Gly	Thr	Gly	Asn	Asp 725	Glu	Ala	Gly	Ala
Gly	Asp	Ala	Leu 740	Leu	Glu	Arg	Asn	Tyr 745
Gly	Asp	Gly 755	Gly	Asp	Ile	Ser	Phe 760	Ser
Thr	Val 770	Glu	Arg	Leu	Leu	Gln 775	Ala	His
Tyr 785	Val	Phe	Val	Gly	Tyr 790	His	Gly	Thr
Ile	Val	Phe	Gly	Gly 805	Val	Arg	Ala	Arg
Trp	Arg	Gly	Phe 820	Tyr	Ile	Ala	Gly	Asp 825
Ala	Gln	Asp 835	Gln	Glu	Pro	Asp	Ala 840	Arg

605
Glu	Gly 620	Gly	Ser	Leu	Ala
Pro 635	Leu	Glu	Thr	Phe	Thr 640
Leu	Glu	Gln	Cys	Gly 655	Tyr
Ala	Ala	Arg	Leu 670	Ser	Trp
Leu	Ala	Ser 685	Pro	Gly	Ser
Gln	Pro 700	Glu	Gln	Ala	Arg
Glu 715	Arg	Phe	Val	Arg	Gln 720
Asn	Gly	Pro	Ala	Asp 735	Ser
Thr	Gly	Ala	Glu 750	Phe	Leu
Arg	Gly	Thr 765	Gln	Asn	Trp
Gln	Leu 780	Glu	Glu	Arg	Gly
Leu 795	Glu	Ala	Ala	Gln	Ser 800
Gln	Asp	Leu	Asp	Ala 815	Ile
Ala	Leu	Ala	Tyr 830	Gly	Tyr
Arg	Ile	Arg	Asn	Gly	Ala

845

- 227 031876

Leu

Leu 850

Arg Val

Tyr

Val

Pro 855

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro 860

Gly

Phe

Tyr

Arg

Thr

Ser

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Gly

Glu

Val

Glu

Arg

865

870

875

880

Leu

Ile

Gly

His

Pro

Leu

Pro

Leu

Arg

Leu

Asp

Ala

Ile

Thr

Gly

Pro

885

890

895

Glu

Glu

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

Trp

Pro

Leu

Ala

900

905

910

Glu

Arg

Thr

Val

Val

Ile

Pro

Ser

Ala

Ile

Pro

Thr

Asp

Pro

Arg

Asn

915

920

925

Val

Gly

Gly

Asp

Leu

Asp

Pro

Ser

Ser

Ile

Pro

Asp

Lys

Glu

Gln

Ala

930

935

940

Ile

Ser

Ala

Leu

Pro

Asp

Tyr

Ala

Ser

Gln

Pro

Gly

Lys

Pro

Pro

Arg

945

950

955

960

Lys Asp Glu Leu <210> 69 <211> 848 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400>69

Leu Ser Phe Ile Leu Asn Ser Ser 15

Ile Gln Lys Asn Asn Asp Glu Val

Ala Ser Val Glu Gln Glu Gln Ile

3540

Cys Ile Thr His Ser Ser Ile Lys

5055

Asp Ala Asn Asn Pro Ser Glu Lys

15

Cys Asn Cys Asn Glu Ser Gly Ile

30

Ser Asp Pro Ser Ser Asn Lys Thr 45

Ala Asn Lys Lys Lys Val Cys Lys

His Val Lys Leu Gly Val Arg Glu Asn Asp Lys Asp Leu Arg Val

70 75

Cys

Val

Ile Glu His

Thr Ser Leu Ser Gly Val Glu Asn Cys

Cys

Cys Gln

- 228 031876

Asp

Ser

Lys

Asp

145

Trp

Asn

Cys

Thr

Gly

225

Lys

Leu

Glu

Lys

Glu

305

Ala

Phe

Leu Arg 100

Ile

Leu Gln

Glu

Asn 105

Cys

Ser

Asp Asn

Lys 110

Ser

Gly

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Glu

Ala

Cys

Glu

115

120

125

Asn

Leu

Glu

Lys

Val

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Cys

130

135

140

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu 150

Gln Ser

Lys

Lys

Asn 155

Asn

Lys

Asn

Trp

Ile 160

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

165

170

175

Thr

Ile Gly 180

Leu

Pro

Pro Arg

Thr Gln 185

Ser Leu

Cys

Leu 190

Val

Val

Leu

Asp

Glu

Lys

Gly

Lys

Lys

Thr

Gln

Glu

Leu

Lys

Asn

Ile

Arg

195

200

205

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

210

215

220

Lys

Asn

Leu

Lys

Pro

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

230

235

240

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

245

250

255

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

Trp

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

260

265

270

Leu Asn

Leu

Gln

Lys

Ile

Phe 280

Gly Lys

Leu

Phe

Arg 285

Lys

Tyr

Ile

275

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

290

295

300

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

310

315

320

Met Lys His Gly Ala Gly Met Asn Ser Thr Thr Cys

325 330

Cys Gly Asp

335

- 229 031876

Gly	Ser	Val	Thr 340	Gly	Ser Gly	Ser	Ser 345
Asp	Leu	Ile 355	Pro	Gln	Tyr	Leu	Arg 360	Phe
Phe	Cys 370	Lys	Gln	Arg	Gln	Glu 375	Lys	Val
Lys 385	Ser	Cys	Lys	Glu	Ser 390	Gly	Gly	Thr
Glu	Cys	Lys	Asn	Lys 405	Cys	Glu	Val	Tyr
Lys	Gly	Gly	Asp 420	Gly	Thr	Ala	Gly	Ser 425
Gln	Ile	Tyr 435	Lys	Arg	Tyr	Ser	Lys 440	Tyr
Arg	Lys 450	Ala	Gly	Thr	Lys	Asn 455	Cys	Gly
Ala 465	Glu	Asn	Lys	Cys	Val 470	Gln	Ser	Asp
Leu	Ile	Asp	Ile	Gly 485	Leu	Thr	Thr	Pro
Leu	Asp	Asp	Asn 500	Ile	Cys	Gly	Ala	Asp 505
Thr	Thr	Tyr 515	Thr	Thr	Thr	Glu	Lys 520	Cys
Lys	Leu 530	Gln	Gln	Cys	Asn	Thr 535	Ala	Val
Leu 545	Gly	Asn	Thr	Pro	His 550	Gly	Tyr	Lys
Pro	Thr	Asn	Glu	Glu 565	Thr	Cys	Asp	Asp
Trp	Ser	Cys	Gly 580	Ser	Ala	Arg	Thr	Met 585

Asp	Asp	Ile	Pro 350	Thr	Ile
Gln	Glu	Trp 365	Val	Glu	His
Pro	Val 380	Ile	Glu	Asn	Cys
Asn 395	Gly	Glu	Cys	Lys	Thr 400
Lys	Phe	Ile	Glu	Asp 415	Cys
Trp	Val	Lys	Arg 430	Trp	Asp
Glu	Asp	Ala 445	Lys	Arg	Asn
Ser	Ser 460	Thr	Thr	Asn	Ala
Asp 475	Ser	Phe	Phe	Lys	His 480
Ser	Tyr	Leu	Ser	Ile 495	Val
Ala	Pro	Trp	Thr 510	Thr	Tyr
Lys	Glu	Thr 525	Asp	Lys	Ser
Val	Asn 540	Val	Pro	Ser	Pro
Ala 555	Cys	Gln	Cys	Lys	Ile 560
Lys	Glu	Tyr	Met	Asn 575	Gln
Arg	Gly	Tyr	Lys 590	Asn	Asp

- 230 031876

Asn

Val

Trp

625

Asp

Leu

Gly

Gly

Tyr

705

Glu

Tyr

Leu

Pro

Gly

785

Val

Leu

Pro

Tyr

Glu Leu Cys 595

Lys

Tyr

Asn Gly 600

Val

Asp

Val

Lys 605

Pro

Thr

Thr

Arg

Ser

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

Arg

His

Arg

Gln

Pro

Arg

Gly

610

615

620

Glu

Gln

Leu

Tyr

Pro

Thr

Gly

Ala

Glu

Phe

Leu

Gly

Asp

Gly

Gly

630

635

640

Ile

Ser

Phe

Ser

Thr

Arg

Gly

Thr

Gln

Asn

Trp

Thr

Val

Glu

Arg

645

650

655

Leu

Gln

Ala

His

Arg

Gln

Leu

Glu

Glu

Arg

Gly

Tyr

Val

Phe

Val

660

665

670

Tyr

His

Gly

Thr

Phe

Leu

Glu

Ala

Ala

Gln

Ser

Ile

Val

Phe

Gly

675

680

685

Val

Arg

Ala

Arg

Ser

Gln

Asp

Leu

Asp

Ala

Ile

Trp

Arg

Gly

Phe

690

695

700

Ile

Ala

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

Ala

Tyr

Gly

Tyr

Ala

Gln

Asp

Gln

710

715

720

Pro

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

Arg

Asn

Gly

Ala

Leu

Leu

Arg

Val

725

730

735

Val

Pro

Arg 740

Ser

Ser

Leu

Pro

Gly 745

Phe

Tyr

Arg

Thr

Ser 750

Leu

Thr

Ala

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Gly

Glu

Val

Glu

Arg

Leu

Ile

Gly

His

755

760

765

Leu

Pro

Leu

Arg

Leu

Asp

Ala

Ile

Thr

Gly

Pro

Glu

Glu

Glu

Gly

770

775

780

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

Trp

Pro

Leu

Ala

Glu

Arg

Thr

Val

790

795

800

Ile

Pro

Ser

Ala

Ile

Pro

Thr

Asp

Pro

Arg

Asn

Val

Gly

Gly

Asp

805

810

815

Asp Pro Ser Ser Ile Pro Asp Lys Glu Gln Ala Ile Ser Ala Leu

820 825 830

Asp Tyr Ala Ser Gln Pro Gly Lys

835 840

Pro Pro Arg Lys Asp Glu Leu

845

- 231 031876 <210> 70 <211> 808 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 70

Asn 1

Tyr

Ile

Lys

Gly 5

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala 10

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys 15

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Pro

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

20

25

30

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

Ala

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

Ser

35

40

45

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

50

55

60

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

Asp

65

70

75

80

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

Val

85

90

95

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

100

105

110

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

115

120

125

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

Cys

Asp

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

Lys

130

135

140

Lys 145

Leu

Glu

Lys

Val

Phe Ala 150

Ser Leu Thr

Asn Gly 155

Tyr

Lys

Cys

Asp 160

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

165

170

175

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

180

185

190

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

195

200

205

- 232 031876

Lys	Leu 210	Glu	Asn	Val	Cys	Glu 215	Asp	Val
Lys 225	Glu	Lys	Phe	Leu	Ala 230	Gly	Cys	Leu
Lys	Asn	Leu	Lys	Lys 245	Arg	Tyr	Pro	Gln
Glu	Asn	Leu	Cys 260	Lys	Ala	Leu	Glu	Tyr 265
Leu	Ile	Lys 275	Gly	Thr	Ser	Ile	Trp 280	Asp
Glu	Leu 290	Asn	Leu	Gln	Asn	Asn 295	Phe	Gly
Lys 305	Lys	Asn	Asn	Thr	Ala 310	Glu	Gln	Asp
Glu	Leu	Arg	Glu	Ser 325	Trp	Trp	Asn	Thr
Ala	Met	Lys	His 340	Gly	Ala	Glu	Met	Asn 345
Gly	Ser	Val 355	Thr	Gly	Ser	Gly	Ser 360	Ser
Asp	Leu 370	Ile	Pro	Gln	Tyr	Leu 375	Arg	Phe
Phe 385	Cys	Glu	Gln	Arg	Gln 390	Ala	Lys	Val
Lys	Ser	Cys	Lys	Glu 405	Ser	Gly	Asn	Lys
Lys	Cys	Lys	Asp 420	Glu	Cys	Glu	Lys	Tyr 425
Gly	Thr	Ala 435	Gly	Gly	Gly	Ile	Gly 440	Thr
Arg	Trp 450	Asp	Gln	Ile	Tyr	Lys 455	Arg	Tyr

Asp	Ile 220	Asn	Phe	Asp	Thr
Val 235	Ser	Phe	His	Glu	Gly 240
Lys	Asn	Ser	Gly	Asn 255	Lys
Phe	Ala	Asp	Tyr 270	Gly	Asp
Glu	Tyr	Thr 285	Lys	Asp	Leu
Leu	Phe 300	Gly	Lys	Tyr	Ile
Ser 315	Tyr	Ser	Ser	Leu	Asp 320
Lys	Lys	Tyr	Ile	Trp 335	Thr
Thr	Thr	Cys	Asn 350	Ala	Asp
Asp	Asp	Ile 365	Pro	Thr	Ile
Gln	Glu 380	Trp	Val	Glu	Asn
Asp 395	Val	Ile	Thr	Asn	Cys 400
Lys	Thr	Glu	Cys	Lys 415	Thr
Lys	Phe	Ile	Glu 430	Ala	Cys
Gly	Ser	Pro 445	Trp	Ser	Lys
Lys	His 460	Ile	Glu	Asp	Ala

- 233 031876

Lys

465

Thr

Ile

Ser

Lys

Asn

545

Val

Tyr

Ala

Thr

Glu

625

Ala

Leu

Ala

Arg

Gly

Arg Asn

Arg

Lys

Ala 470

Gly Thr

Lys

Asn

Cys 475

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr 480

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

485

490

495

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

500

505

510

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

515

520

525

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

530

535

540

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Ser

Asp

Thr

Leu

Val

550

555

560

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

Tyr

Arg

Tyr

Lys

565

570

575

Arg

His

Arg

Gln

Pro

Arg

Gly

Trp

Glu

Gln

Leu

Tyr

Pro

Thr

Gly

580

585

590

Glu

Phe

Leu

Gly

Asp

Gly

Gly

Asp

Ile

Ser

Phe

Ser

Thr

Arg

Gly

595

600

605

Gln

Asn

Trp

Thr

Val

Glu

Arg

Leu

Leu

Gln

Ala

His

Arg

Gln

Leu

610

615

620

Glu

Arg

Gly

Tyr

Val

Phe

Val

Gly

Tyr

His

Gly

Thr

Phe

Leu

Glu

630

635

640

Ala

Gln

Ser

Ile

Val

Phe

Gly

Gly

Val

Arg

Ala

Arg

Ser

Gln

Asp

645

650

655

Asp

Ala

Ile

Trp

Arg

Gly

Phe

Tyr

Ile

Ala

Gly

Asp

Pro

Ala

Leu

660

665

670

Tyr

Gly

Tyr

Ala

Gln

Asp

Gln

Glu

Pro

Asp

Ala

Arg

Gly

Arg

Ile

675

680

685

Asn

Gly

Ala

Leu

Leu

Arg

Val

Tyr

Val

Pro

Arg

Ser

Ser

Leu

Pro

690

695

700

Phe

Tyr

Arg

Thr

Ser

Leu

Thr

Leu

Ala

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Gly

- 234 031876

705

710

715

720

Glu

Val

Glu

Arg Leu 725

Ile

Gly

His

Pro

Leu 730

Pro

Leu Arg

Leu

Asp 735

Ala

Ile

Thr

Gly

Pro

Glu

Glu

Glu

Gly

Gly

Arg

Leu

Glu

Thr

Ile

Leu

Gly

740

745

750

Trp

Pro

Leu

Ala

Glu

Arg

Thr

Val

Val

Ile

Pro

Ser

Ala

Ile

Pro

Thr

755

760

765

Asp

Pro

Arg

Asn

Val

Gly

Gly

Asp

Leu

Asp

Pro

Ser

Ser

Ile

Pro

Asp

770

775

780

Lys

Glu

Gln

Ala

Ile

Ser

Ala

Leu

Pro

Asp

Tyr

Ala

Ser

Gln

Pro

Gly

785

790

795

800

Lys

Pro

Pro

Arg

Lys

Asp

Glu

Leu

805

<210>

71

<211>

393

<212>

Белок

<213>

Искусственная

<220>

<223>

Искусственная конструкция

<400>

71

Met

Gly

Ala

Asp

Asp

Val

Val

Asp

Ser

Ser

Lys

Ser

Phe

Val

Met

Glu

1

5

10

15

Asn

Phe

Ser

Ser

Tyr

His

Gly

Thr

Lys

Pro

Gly

Tyr

Val

Asp

Ser

Ile

20

25

30

Gln

Lys

Gly

Ile

Gln

Lys

Pro

Lys

Ser

Gly

Thr

Gln

Gly

Asn

Tyr

Asp

35

40

45

Asp

Asp

Trp

Lys

Gly

Phe

Tyr

Ser

Thr

Asp

Asn

Lys

Tyr

Asp

Ala

Ala

50

55

60

Gly

Tyr

Ser

Val

Asp

Asn

Glu

Asn

Pro

Leu

Ser

Gly

Lys

Ala

Gly

Gly

65

70

75

80

Val

Val

Lys

Val

Thr

Tyr

Pro

Gly

Leu

Thr

Lys

Val

Leu

Ala

Leu

Lys

85

90

95

Val

Asp

Asn

Ala

Glu

Thr

Ile

Lys

Lys

Glu

Leu

Gly

Leu

Ser

Leu

Thr

100

105

110

- 235 031876

Glu

Gly

Ser

145

Ser

Asp

Arg

Val

Gly

225

Glu

Glu

Val

Val

Leu

305

Ala

Ser

Asp

Pro

Leu Met 115

Glu

Gln

Val

Gly 120

Thr

Glu

Glu

Phe

Ile 125

Lys

Arg

Phe

Asp

Gly

Ala

Ser

Arg

Val

Val

Leu

Ser

Leu

Pro

Phe

Ala

Glu

Gly

130

135

140

Ser

Ser

Val

Glu

Tyr

Ile

Asn

Asn

Trp

Glu

Gln

Ala

Lys

Ala

Leu

150

155

160

Val

Glu

Leu

Glu

Ile

Asn

Phe

Glu

Thr

Arg

Gly

Lys

Arg

Gly

Gln

165

170

175

Ala

Met

Tyr

Glu

Tyr

Met

Ala

Gln

Ala

Cys

Ala

Gly

Asn

Arg

Val

180

185

190

Arg

Ser

Val

Gly

Ser

Ser

Leu

Ser

Cys

Ile

Asn

Leu

Asp

Trp

Asp

195

200

205

Ile

Arg

Asp

Lys

Thr

Lys

Thr

Lys

Ile

Glu

Ser

Leu

Lys

Glu

His

210

215

220

Pro

Ile

Lys

Asn

Lys

Met

Ser

Glu

Ser

Pro

Asn

Lys

Thr

Val

Ser

230

235

240

Glu

Lys

Ala

Lys

Gln

Tyr

Leu

Glu

Glu

Phe

His

Gln

Thr

Ala

Leu

245

250

255

His

Pro

Glu

Leu

Ser

Glu

Leu

Lys

Thr

Val

Thr

Gly

Thr

Asn

Pro

260

265

270

Phe

Ala

Gly

Ala

Asn

Tyr

Ala

Ala

Trp

Ala

Val

Asn

Val

Ala

Gln

275

280

285

Ile

Asp

Ser

Glu

Thr

Ala

Asp

Asn

Leu

Glu

Lys

Thr

Thr

Ala

Ala

290

295

300

Ser

Ile

Leu

Pro

Gly

Ile

Gly

Ser

Val

Met

Gly

Ile

Ala

Asp

Gly

310

315

320

Val

His

His

Asn

Thr

Glu

Glu

Ile

Val

Ala

Gln

Ser

Ile

Ala

Leu

325

330

335

Ser

Leu

Met

Val

Ala

Gln

Ala

Ile

Pro

Leu

Val

Gly

Glu

Leu

Val

340

345

350

Ile

Gly

Phe

Ala

Ala

Tyr

Asn

Phe

Val

Glu

Ser

Ile

Ile

Asn

Leu

- 236 031876

355

360

365

Phe Gln Val Val

370

His Asn Ser Tyr Asn Arg Pro Ala Tyr Ser

375380

Pro Gly

His Lys Thr Gln Pro Met His Glu Phe

385390 <210>72 <211>1356 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400>72

Met Gly Ala Asp Asp Val Val Asp 15

Asn Phe Ser Ser Tyr His Gly Thr

Gln Lys Gly Ile Gln Lys Pro Lys

3540

Asp Asp Trp Lys Gly Phe Tyr Ser

5055

Ser Ser Lys Ser Phe Val Met Glu

15

Lys Pro Gly Tyr Val Asp Ser Ile

30

Ser Gly Thr Gln Gly Asn Tyr Asp 45

Thr Asp Asn Lys Tyr Asp Ala Ala

Gly Tyr 65

Ser

Val

Asp

Asn 70

Glu

Asn

Pro

Leu

Ser 75

Gly

Lys

Ala

Gly

Gly 80

Val

Val

Lys

Val

Thr

Tyr

Pro

Gly

Leu

Thr

Lys

Val

Leu

Ala

Leu

Lys

85

90

95

Val

Asp

Asn

Ala

Glu

Thr

Ile

Lys

Lys

Glu

Leu

Gly

Leu

Ser

Leu

Thr

100

105

110

Glu

Pro

Leu

Met

Glu

Gln

Val

Gly

Thr

Glu

Glu

Phe

Ile

Lys

Arg

Phe

115

120

125

Gly

Asp

Gly

Ala

Ser

Arg

Val

Val

Leu

Ser

Leu

Pro

Phe

Ala

Glu

Gly

130

135

140

Ser

Ser

Ser

Val

Glu

Tyr

Ile

Asn

Asn

Trp

Glu

Gln

Ala

Lys

Ala

Leu

145

150

155

160

Ser

Val

Glu

Leu

Glu

Ile

Asn

Phe

Glu

Thr

Arg

Gly

Lys

Arg

Gly

Gln

165 170 175

- 237 031876

Asp

Arg

Val

Gly

225

Glu

Glu

Val

Val

Leu

305

Ala

Ser

Asp

Phe

His

385

Asp

Lys

Ala

Met

Tyr 180

Glu

Tyr

Met

Ala Gln 185

Ala

Cys

Ala Gly

Asn 190

Arg

Val

Arg

Ser

Val

Gly

Ser

Ser

Leu

Ser

Cys

Ile

Asn

Leu

Asp

Trp

Asp

195

200

205

Ile

Arg

Asp

Lys

Thr

Lys

Thr

Lys

Ile

Glu

Ser

Leu

Lys

Glu

His

210

215

220

Pro

Ile

Lys

Asn

Lys

Met

Ser

Glu

Ser

Pro

Asn

Lys

Thr

Val

Ser

230

235

240

Glu

Lys

Ala

Lys

Gln

Tyr

Leu

Glu

Glu

Phe

His

Gln

Thr

Ala

Leu

245

250

255

His

Pro

Glu

Leu

Ser

Glu

Leu

Lys

Thr

Val

Thr

Gly

Thr

Asn

Pro

260

265

270

Phe

Ala

Gly

Ala

Asn

Tyr

Ala

Ala

Trp

Ala

Val

Asn

Val

Ala

Gln

275

280

285

Ile

Asp

Ser

Glu

Thr

Ala

Asp

Asn

Leu

Glu

Lys

Thr

Thr

Ala

Ala

290

295

300

Ser

Ile

Leu

Pro

Gly

Ile

Gly

Ser

Val

Met

Gly

Ile

Ala

Asp

Gly

310

315

320

Val

His

His

Asn

Thr

Glu

Glu

Ile

Val

Ala

Gln

Ser

Ile

Ala

Leu

325

330

335

Ser

Leu

Met

Val

Ala

Gln

Ala

Ile

Pro

Leu

Val

Gly

Glu

Leu

Val

340

345

350

Ile

Gly

Phe

Ala

Ala

Tyr

Asn

Phe

Val

Glu

Ser

Ile

Ile

Asn

Leu

355

360

365

Gln

Val

Val

His

Asn

Ser

Tyr

Asn

Arg

Pro

Ala

Tyr

Ser

Pro

Gly

370

375

380

Lys

Thr

Gln

Pro

Met

His

Glu

Phe

His

Ser

Asp

Ser

Gly

Thr

Asn

390

395

400

Pro

Cys

Asp

Arg

Ile

Pro

Pro

Pro

Tyr

Gly

Asp

Asn

Asp

Gln

Trp

405

410

415

Cys

Ala

Ile

Ile

Leu

Ser

Lys

Val

Ser

Glu

Lys

Pro

Glu

Asn

Val

- 238 031876

420

425

430

Phe Val

Pro 435

Pro Arg

Arg Gln

Arg 440

Met

Cys

Ile

Asn

Asn 445

Leu

Glu

Leu

Asn

Val

Asp

Lys

Ile

Arg

Asp

Lys

His

Ala

Phe

Leu

Ala

Asp

450

455

460

Leu

Leu

Thr

Ala

Arg

Asn

Glu

Gly

Glu

Arg

Ile

Val

Gln

Asn

His

465

470

475

Asp

Thr

Asn Ser

Ser 485

Asn Val

Cys

Asn Ala 490

Leu

Glu

Arg

Ser

Phe 495

Asp

Ile

Ala

Asp

Ile

Ile

Arg

Gly

Thr

Asp

Leu

Trp

Lys

Gly

Thr

500

505

510

Ser

Asn

Leu

Glu

Gln

Asn

Leu

Lys

Gln

Met

Phe

Ala

Lys

Ile

Arg

515

520

525

Asn

Asp

Lys

Val

Leu

Gln

Asp

Lys

Tyr

Pro

Lys

Asp

Gln

Asn

Tyr

530

535

540

Lys

Leu

Arg

Glu

Asp

Trp

Trp

Asn

Ala

Asn

Arg

Gln

Lys

Val

Trp

545

550

555

Val

Ile

Thr

Cys

Gly 565

Ala

Arg

Ser

Asn

Asp 570

Leu

Leu

Ile

Lys

Arg 575

Trp

Arg

Thr

Ser

Gly

Lys

Ser

Asn

Gly

Asp

Asn

Lys

Leu

Glu

Leu

580

585

590

Arg

Lys

Cys

Gly

His

Tyr

Glu

Glu

Lys

Val

Pro

Thr

Lys

Leu

Asp

595

600

605

Val

Pro

Gln

Phe

Leu

Arg

Trp

Leu

Thr

Glu

Trp

Ile

Glu

Asp

Phe

610

615

620

Arg

Glu

Lys

Gln

Asn

Leu

Ile

Asp

Asp

Met

Glu

Arg

His

Arg

Glu

625

630

635

Cys

Thr

Ser

Glu

Asp

His

Lys

Ser

Lys

Glu

Gly

Thr

Ser

Tyr

Cys

645

650

655

Thr

Cys

Lys

Asp

Lys

Cys

Lys

Lys

Tyr

Cys

Glu

Cys

Val

Lys

Lys

660

665

670

Lys

Val

Pro

480

Ala

Asn

Glu

Arg

Glu

560

Gly

Cys

Tyr

Tyr

Glu

640

Ser

Trp

- 239 031876

Lys

Ser

Glu 675

Trp

Glu

Asn

Gln Lys 680

Asn

Lys

Tyr

Thr

Glu 685

Leu

Tyr

Gln

Asn

Lys

Asn

Glu

Thr

Ser

Gln

Lys

Asn

Thr

Ser

Arg

Tyr

Asp

690

695

700

Tyr

Val

Lys

Asp

Phe

Phe

Lys

Lys

Leu

Glu

Ala

Asn

Tyr

Ser

Ser

705

710

715

Glu

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

725

730

735

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Ser

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Glu

740

745

750

Ile

Gln

Lys

Asn

Asn

Asp

Glu

Val

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

755

760

765

Ala

Ser 770

Val

Glu Gln Glu

Gln 775

Ile

Ser Asp

Pro

Ser 780

Ser

Asn

Lys

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

785

790

795

His

Val

Lys

Leu

Gly 805

Val

Arg

Glu Asn

Asp 810

Lys

Asp

Leu

Arg

Val 815

Val

Ile

Glu

His

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Cys

820

825

830

Asp

Phe

Leu

Arg

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Ser

835

840

845

Ser

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

Cys

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Glu

Ala

Cys

850

855

860

Lys

Asn

Leu

Glu

Lys

Val

Leu

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

865

870

875

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

Gln

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Asn

Trp

885

890

895

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

900

905

910

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

915

920

925

Gln

Asp

Leu

720

Lys

Lys

Ile

Thr

Lys

800

Cys

Gln

Gly

Glu

Cys

880

Ile

Ala

Val

- 240 031876

Cys

Leu Asp Glu 930

Lys

Gly

Lys 935

Lys

Thr Gln

Glu

Leu 940

Lys

Asn

Ile

Arg

Thr

Asn

Ser

Glu

Leu

Leu

Lys

Glu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

945

950

955

960

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Pro

Ser

His

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

965

970

975

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

980

985

990

Leu Ile Lys Gly Thr Ser Ile

995

Trp Asp Asn Glu Tyr Thr Lys Asp Leu 1000 1005

Glu

Leu 1010

Asn

Leu Gln

Lys

Ile 1015

Phe Gly

Lys

Leu

Phe 1020

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

1025

1030

1035

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

1040

1045

1050

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Gly

Met

Asn

Ser

Thr

Thr

1055

1060

1065

Cys

Cys

Gly

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

Asp

1070

1075

1080

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

Leu

1085

1090

1095

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

His

Phe

Cys

Lys

Gln

Arg

Gln

Glu

Lys

Val

1100

1105

1110

Lys

Pro

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

Gly

Gly

1115

1120

1125

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

Glu

1130

1135

1140

Val

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Asp

Cys

Lys

Gly

Gly

Asp

Gly

Thr

1145

1150

1155

Ala

Gly

Ser

Ser

Trp

Val

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

Arg

1160 1165 1170

- 241 031876

Tyr

Ser 1175

Lys

Tyr

Ile

Glu

Asp 1180

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg 1185

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Glu

Asn

1190

1195

1200

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

1205

1210

1215

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

Leu

1220

1225

1230

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

1235

1240

1245

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Thr

Asp

Lys

1250

1255

1260

Ser

Lys

Leu

Gln

Gln

Cys

Asn

Thr

Ala

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

1265

1270

1275

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Gly

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

1280

1285

1290

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

1295

1300

1305

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

Lys

Arg

1310

1315

1320

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

Asn

Tyr

Glu

Leu

Cys

Lys

Tyr

Asn

Gly

Val

1325

1330

1335

Asp

Val

Lys

Pro

Thr

Thr

Val

Arg

Ser

Asn

Ser

Ser

Lys

Leu

Asp

1340

1345

1350

Ser Gly Arg

1355

<210>	73
<211>	1364
<212>	Белок
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная конструкция
<400>	73

- 242 031876

Met 1

Gly Ala

Asp

Asp 5

Val

Val

Asp

Ser

Ser 10

Lys

Ser

Phe

Val

Met 15

Glu

Asn

Phe

Ser

Ser 20

Tyr

His

Gly

Thr

Lys 25

Pro

Gly

Tyr

Val

Asp 30

Ser

Ile

Gln

Lys

Gly 35

Ile

Gln

Lys

Pro

Lys 40

Ser

Gly

Thr

Gln

Gly 45

Asn

Tyr

Asp

Asp

Asp 50

Trp

Lys

Gly

Phe

Tyr 55

Ser

Thr

Asp

Asn

Lys 60

Tyr

Asp

Ala

Ala

Gly 65

Tyr

Ser

Val

Asp

Asn 70

Glu

Asn

Pro

Leu

Ser 75

Gly

Lys

Ala

Gly

Gly 80

Val

Val

Lys

Val

Thr

Tyr

Pro

Gly

Leu

Thr

Lys

Val

Leu

Ala

Leu

Lys

85

90

95

Val

Asp

Asn

Ala

Glu

Thr

Ile

Lys

Lys

Glu

Leu

Gly

Leu

Ser

Leu

Thr

100

105

110

Glu

Pro

Leu

Met

Glu

Gln

Val

Gly

Thr

Glu

Glu

Phe

Ile

Lys

Arg

Phe

115

120

125

Gly

Asp

Gly

Ala

Ser

Arg

Val

Val

Leu

Ser

Leu

Pro

Phe

Ala

Glu

Gly

130

135

140

Ser

Ser

Ser

Val

Glu

Tyr

Ile

Asn

Asn

Trp

Glu

Gln

Ala

Lys

Ala

Leu

145

150

155

160

Ser

Val

Glu

Leu

Glu

Ile

Asn

Phe

Glu

Thr

Arg

Gly

Lys

Arg

Gly

Gln

165

170

175

Asp

Ala Met

Tyr 180

Glu

Tyr

Met

Ala Gln 185

Ala

Cys

Ala

Gly Asn 190

Arg

Val

Arg

Arg

Ser

Val

Gly

Ser

Ser

Leu

Ser

Cys

Ile

Asn

Leu

Asp

Trp

Asp

195

200

205

Val

Ile

Arg

Asp

Lys

Thr

Lys

Thr

Lys

Ile

Glu

Ser

Leu

Lys

Glu

His

210

215

220

Gly

Pro

Ile

Lys

Asn

Lys

Met

Ser

Glu

Ser

Pro

Asn

Lys

Thr

Val

Ser

225

230

235

240

Glu

Glu

Lys

Ala

Lys

Gln

Tyr

Leu

Glu

Glu

Phe

His

Gln

Thr

Ala

Leu

245 250 255

- 243 031876

Glu

Val

Val

Leu

305

Ala

Ser

Asp

Phe

His

385

Asp

Lys

Cys

Leu

Leu

465

Asp

Asp

His

Pro

Glu 260

Leu

Ser

Glu

Leu

Lys 265

Thr

Val

Thr

Gly

Thr 270

Asn

Pro

Phe

Ala

Gly

Ala

Asn

Tyr

Ala

Ala

Trp

Ala

Val

Asn

Val

Ala

Gln

275

280

285

Ile

Asp

Ser

Glu

Thr

Ala

Asp

Asn

Leu

Glu

Lys

Thr

Thr

Ala

Ala

290

295

300

Ser

Ile

Leu

Pro

Gly

Ile

Gly

Ser

Val

Met

Gly

Ile

Ala

Asp

Gly

310

315

320

Val

His

His

Asn

Thr

Glu

Glu

Ile

Val

Ala

Gln

Ser

Ile

Ala

Leu

325

330

335

Ser

Leu

Met

Val

Ala

Gln

Ala

Ile

Pro

Leu

Val

Gly

Glu

Leu

Val

340

345

350

Ile

Gly

Phe

Ala

Ala

Tyr

Asn

Phe

Val

Glu

Ser

Ile

Ile

Asn

Leu

355

360

365

Gln

Val

Val

His

Asn

Ser

Tyr

Asn

Arg

Pro

Ala

Tyr

Ser

Pro

Gly

370

375

380

Lys

Thr

Gln

Pro

Met

His

Glu

Phe

His

Ser

Asp

Ser

Gly

Lys

Tyr

390

395

400

Pro

Cys

Glu

Lys

Lys

Leu

Pro

Pro

Tyr

Asp

Asp

Asn

Asp

Gln

Trp

405

410

415

Cys

Gln

Gln

Asn

Ser

Ser

Asp

Gly

Ser

Gly

Lys

Pro

Glu

Asn

Ile

420

425

430

Val

Pro

Pro

Arg

Arg

Glu

Arg

Leu

Cys

Thr

Tyr

Asn

Leu

Glu

Asn

435

440

445

Lys

Phe

Asp

Lys

Ile

Arg

Asp

Asn

Asn

Ala

Phe

Leu

Ala

Asp

Val

450

455

460

Leu

Thr

Ala

Arg

Asn

Glu

Gly

Glu

Lys

Ile

Val

Gln

Asn

His

Pro

470

475

480

Thr

Asn

Ser

Ser

Asn

Val

Cys

Asn

Ala

Leu

Glu

Arg

Ser

Phe

Ala

485

490

495

Leu

Ala

Asp

Ile

Ile

Arg

Gly

Thr

Asp

Gln

Trp

Lys

Gly

Thr

Asn

- 244 031876

500

505

510

Ser

Asn

Lys

545

Val

Trp

Arg

Val

Arg

625

Cys

Thr

Lys

Gln

Tyr

705

Glu

Leu

Asn Leu

Glu Lys

Asn Leu

Lys 520

Gln

Met

Phe

Ala Lys 525

Ile Arg

Glu

515

Asp

Lys

Val

Leu

Gln

Asp

Lys

Tyr

Pro

Lys

Asp

Gln

Lys

Tyr

Thr

530

535

540

Leu

Arg

Glu

Ala

Trp

Trp

Asn

Ala

Asn

Arg

Gln

Lys

Val

Trp

Glu

550

555

560

Ile

Thr

Cys

Gly 565

Ala

Arg

Ser Asn

Asp 570

Leu

Leu

Ile

Lys

Arg 575

Gly

Arg

Thr

Ser

Gly

Lys

Ser

Asp

Arg

Lys

Lys

Asn

Phe

Glu

Leu

Cys

580

585

590

Lys

Cys

Gly

His

Tyr

Glu

Lys

Glu

Val

Pro

Thr

Lys

Leu

Asp

Tyr

595

600

605

Pro

Gln

Phe

Leu

Arg

Trp

Leu

Thr

Glu

Trp

Ile

Glu

Asp

Phe

Tyr

610

615

620

Glu

Lys

Gln

Asn

Leu

Ile

Asp

Asp

Met

Glu

Arg

His

Arg

Glu

Glu

630

635

640

Thr

Arg Glu

Asp 645

His

Lys

Ser

Lys

Glu Gly Thr 650

Ser

Tyr

Cys 655

Ser

Cys

Lys

Asp

Lys

Cys

Lys

Lys

Tyr

Cys

Glu

Cys

Val

Lys

Lys

Trp

660

665

670

Thr

Glu

Trp

Glu

Asn

Gln

Glu

Asn

Lys

Tyr

Lys

Asp

Leu

Tyr

Glu

675

680

685

Asn Lys 690

Asn Lys

Thr

Ser 695

Gln Lys

Asn

Thr

Ser 700

Arg

Tyr

Asp

Asp

Val

Lys

Asp

Phe

Phe

Glu

Lys

Leu

Glu

Ala

Asn

Tyr

Ser

Ser

Leu

710

715

720

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

Pro

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys

725

730

735

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Pro

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

740

745

750

- 245 031876

Thr

Ser

Cys

785

Asp

Val

Asp

Ser

Lys

865

Asp

Lys

Thr

Pro

Thr

945

Gly

Lys

Asp

Ala Asn

His

Asn

Asp

Glu Ala 760

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu 765

Ser

Gly

Ile

755

Ser

Val

Gly

Gln

Ala

Gln

Thr

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

770

775

780

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

Lys

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

790

795

800

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Lys

Ile

Cys

805

810

815

Ile

Glu

Asp

Thr

Ser

Leu

Ser

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

820

825

830

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

835

840

845

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

Cys

Asp

Asn

Lys

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys

Gln

850

855

860

Lys

Leu

Glu

Lys

Val

Phe

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

870

875

880

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

Ser

Arg

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

885

890

895

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

Glu

Gly

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

900

905

910

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

915

920

925

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

Glu

Asp

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

930

935

940

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

950

955

960

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

Tyr

Pro

Gln

Asn

Lys

Asn

Ser

Gly

Asn

965

970

975

Glu

Asn

Leu

Cys

Lys

Ala

Leu

Glu

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

980

985

990

Leu

Ile

995

Lys

Gly

Thr

Ser

Ile

1000

Trp Asp Asn Glu Tyr Thr Lys Asp 1005

- 246 031876

Leu

Glu 1010

Leu

Asn Leu

Gln

Asn 1015

Asn

Phe

Gly Lys

Leu 1020

Phe

Gly

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

Glu

Gln

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

1025

1030

1035

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

Trp

Asn

Thr

Asn

Lys

Lys

1040

1045

1050

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

Glu

Met

Asn

Ile

Thr

1055

1060

1065

Thr

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

Gly

Ser

Ser

Cys

1070

1075

1080

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

Leu

Arg

Phe

1085

1090

1095

Leu

Gln

Glu

Trp

Val

Glu

Asn

Phe

Cys

Glu

Gln

Arg

Gln

Ala

Lys

1100

1105

1110

Val

Lys 1115

Asp

Val

Ile

Thr

Asn 1120

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys 1125

Glu

Ser

Gly

Asn

Lys

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

1130

1135

1140

Glu

Lys

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

Cys

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

1145

1150

1155

Gly

Ile

Gly

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

1160

1165

1170

Ile

Tyr

Lys

Arg

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

1175

1180

1185

Arg

Lys

Ala

Gly

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

1190

1195

1200

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Asp

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

1205

1210

1215

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

1220

1225

1230

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

1235 1240 1245

- 247 031876

Asp

Lys 1250

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr 1255

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr 1260

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

Lys

Ser

Gln

Ser

Ser

Asp

1265

1270

1275

Thr

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

1280

1285

1290

Tyr Arg

Tyr

Lys

Tyr Ala

Cys 1300

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro 1305

Thr

Asn

Glu

1295

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ser

Cys

1310

1315

1320

Gly

Ser

Ala

Arg

Thr

Met

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

Asn

Tyr

1325

1330

1335

Glu Leu

1340

Cys Lys Tyr Asn Gly Val Asp Val Lys 1345

Pro

1350

Thr Thr Val

Arg Ser Asn Ser Ser Lys

Leu Asp Ser Gly Arg

1355

1360 <210> 74 <211> 1013 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400>74

Met Gly Ala Asp Asp Val Val Asp

Ser Ser Lys Ser Phe Val Met Glu

1015

Asn Phe Ser Ser Tyr His Gly Thr

Lys Pro Gly Tyr Val Asp Ser Ile

30

Gln Lys Gly Ile Gln Lys Pro Lys

40

Ser Gly Thr Gln Gly Asn Tyr Asp 45

Asp Asp Trp Lys Gly Phe Tyr Ser

55

Thr Asp Asn Lys Tyr Asp Ala Ala

Gly Tyr Ser Val Asp Asn Glu Asn

70

Pro Leu Ser Gly Lys Ala Gly Gly

80

- 248 031876

Val

Val

Lys

Val

Thr 85

Tyr

Pro

Gly

Leu

Thr 90

Lys

Val

Leu

Ala

Leu 95

Lys

Val

Asp

Asn

Ala

Glu

Thr

Ile

Lys

Lys

Glu

Leu

Gly

Leu

Ser

Leu

Thr

100

105

110

Glu

Pro

Leu

Met

Glu

Gln

Val

Gly

Thr

Glu

Glu

Phe

Ile

Lys

Arg

Phe

115

120

125

Gly

Asp

Gly

Ala

Ser

Arg

Val

Val

Leu

Ser

Leu

Pro

Phe

Ala

Glu

Gly

130

135

140

Ser

Ser

Ser

Val

Glu

Tyr

Ile

Asn

Asn

Trp

Glu

Gln

Ala

Lys

Ala

Leu

145

150

155

160

Ser

Val

Glu

Leu

Glu

Ile

Asn

Phe

Glu

Thr

Arg

Gly

Lys

Arg

Gly

Gln

165

170

175

Asp

Ala Met

Tyr Glu 180

Tyr Met

Ala Gln 185

Ala

Cys

Ala

Gly Asn 190

Arg

Val

Arg

Arg

Ser

Val

Gly

Ser

Ser

Leu

Ser

Cys

Ile

Asn

Leu

Asp

Trp

Asp

195

200

205

Val

Ile

Arg

Asp

Lys

Thr

Lys

Thr

Lys

Ile

Glu

Ser

Leu

Lys

Glu

His

210

215

220

Gly

Pro

Ile

Lys

Asn

Lys

Met

Ser

Glu

Ser

Pro

Asn

Lys

Thr

Val

Ser

225

230

235

240

Glu

Glu

Lys

Ala

Lys

Gln

Tyr

Leu

Glu

Glu

Phe

His

Gln

Thr

Ala

Leu

245

250

255

Glu

His

Pro

Glu

Leu

Ser

Glu

Leu

Lys

Thr

Val

Thr

Gly

Thr

Asn

Pro

260

265

270

Val

Phe

Ala

Gly

Ala

Asn

Tyr

Ala

Ala

Trp

Ala

Val

Asn

Val

Ala

Gln

275

280

285

Val

Ile

Asp

Ser

Glu

Thr

Ala

Asp

Asn

Leu

Glu

Lys

Thr

Thr

Ala

Ala

290

295

300

Leu

Ser

Ile

Leu

Pro

Gly

Ile

Gly

Ser

Val

Met

Gly

Ile

Ala

Asp

Gly

305

310

315

320

Ala

Val

His

His

Asn

Thr

Glu

Glu

Ile

Val

Ala

Gln

Ser

Ile

Ala

Leu

325 330 335

- 249 031876

Ser

Ser

Leu

Met 340

Val

Ala

Gln Ala

Ile 345

Pro

Leu

Val

Gly

Glu 350

Leu

Asp

Ile

Gly

Phe

Ala

Ala

Tyr

Asn

Phe

Val

Glu

Ser

Ile

Ile

Asn

355

360

365

Phe

Gln

Val

Val

His

Asn

Ser

Tyr

Asn

Arg

Pro

Ala

Tyr

Ser

Pro

370

375

380

His

Lys

Thr

Gln

Pro

Met

His

Glu

Phe

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

385

390

395

Ser

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Glu

Lys

Ile

Gln

Lys

Asn

Asn

Asp

405

410

415

Val

Cys

Asn

Cys

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile

Ala

Ser

Val

Glu

Gln

Glu

420

425

430

Ile

Ser

Asp

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Ser

435

440

445

Lys

Ala

Asn

Lys

Lys

Lys

Val

Cys

Lys

His

Val

Lys

Leu

Gly

Val

450

455

460

Glu

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu

Arg

Val

Cys

Val

Ile

Glu

His

Thr

Ser

465

470

475

Ser

Gly

Val

Glu

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

Phe

Leu

Arg

Ile

Leu

485

490

495

Glu

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Ser

Gly

Ser

Ser

Ser

Asn

Gly

Ser

500

505

510

Asn

Asn

Lys

Asn

Gln

Glu

Ala

Cys

Glu

Lys

Asn

Leu

Glu

Lys

Val

515

520

525

Ala

Ser

Leu

Thr

Asn

Cys

Tyr

Lys

Cys

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Glu

530

535

540

Ser

Lys

Lys

Asn

Asn

Lys

Asn

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

545

550

555

Glu

Gly

Gly

Leu

Gln

Lys

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

565

570

575

Arg

Thr

Gln

Ser

Leu

Cys

Leu

Val

Val

Cys

Leu

Asp

Glu

Lys

Gly

Val

Leu

Gly

Ser

400

Glu

Gln

Ile

Arg

Leu

480

Gln

Cys

Leu

Gln

Lys

560

Pro

Lys

- 250 031876

580

585

590

Lys

Glu

His

625

Glu

Trp

Phe

Gln

Asn

705

Met

Ser

Arg

Lys

Gly

785

Val

Gly

Thr Gln Glu 595

Leu Lys

Asn

Ile Arg 600

Thr

Asn

Ser

Glu 605

Leu

Leu

Trp

Ile

Ile

Ala

Ala

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Pro

610

615

620

Glu

Lys

Lys

Asn

Asp

Asp

Asn

Gly

Lys

Lys

Leu

Cys

Lys

Ala

630

635

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

645

650

655

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Lys

660

665

670

Gly

Lys

Leu

Phe

Arg

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

675

680

685

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

690

695

700

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Leu

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

710

715

Asn

Ser

Thr

Thr

Cys

Cys

Gly

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

725

730

735

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

740

745

750

Phe

Leu Gln 755

Glu

Trp

Val

Glu His 760

Phe

Cys

Lys

Gln 765

Arg

Gln

Val

Lys

Pro

Val

Ile

Glu

Asn

Cys

Lys

Ser

Cys

Lys

Glu

Ser

770

775

780

Thr

Cys

Asn

Gly

Glu

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Asn

Lys

Cys

790

795

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Asp

Cys

Lys

Gly

Gly

Asp

Gly

Thr

805

810

815

Ser Ser Trp Val Lys Arg Trp Asp Gln Ile 820 825

Tyr Lys Arg Tyr

830

Lys

Ser

Leu

640

Ile

Ile

Glu

Trp

Gly

720

Gly

Leu

Glu

Gly

Glu

800

Ala

Ser

- 251 031876

Lys

Tyr

Ile 835

Glu Asp

Ala

Lys

Arg 840

Asn

Arg Lys

Ala

Gly 845

Thr

Lys

Asn

Cys

Gly

Pro

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

850

855

860

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

Leu

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

865

870

875

880

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Ile

Val

Leu

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

885

890

895

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

900

905

910

Lys

Cys

Asn Lys 915

Glu

Thr

Asp

Lys 920

Ser

Lys

Leu Gln Gln 925

Cys

Asn

Thr

Ala

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

Leu

Gly

Asn

Thr

Pro

His

Gly

930

935

940

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

Pro

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

945

950

955

960

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

Trp

Ser

Cys

Gly

Ser

Ala

Arg

965

970

975

Thr

Met

Lys

Arg

Gly

Tyr

Lys

Asn

Asp

Asn

Tyr

Glu

Leu

Cys

Lys

Tyr

980

985

990

Asn Gly Val Asp Val Lys

995

Pro Thr Thr Val Arg Ser Asn Ser Ser Lys

10001005

Leu Asp Ser Gly Arg

1010 <210>75 <211>1036 <212> Белок <213> Искусственная <220>

<223> Искусственная конструкция <400> 75

Met Gly Ala Asp Asp Val Val Asp Ser Ser Lys Ser Phe Val Met Glu

5 10 15

Asn Phe Ser Ser Tyr His Gly Thr Lys Pro Gly Tyr Val Asp Ser Ile

- 252 031876

Gln

Lys

Gly

Ile

Gln

Lys

Pro

Lys

Ser

Gly

Thr

Gln

Gly

Asn

Tyr

35

40

45

Asp

Asp

Trp

Lys

Gly

Phe

Tyr

Ser

Thr

Asp

Asn

Lys

Tyr

Asp

Ala

50

55

60

Gly Tyr 65

Ser Val

Asp

Asn Glu Asn 70

Pro

Leu

Ser 75

Gly

Lys

Ala

Gly

Val

Val

Lys

Val

Thr

Tyr

Pro

Gly

Leu

Thr

Lys

Val

Leu

Ala

Leu

85

90

95

Val

Asp

Asn

Ala

Glu

Thr

Ile

Lys

Lys

Glu

Leu

Gly

Leu

Ser

Leu

100

105

110

Glu

Pro

Leu

Met

Glu

Gln

Val

Gly

Thr

Glu

Glu

Phe

Ile

Lys

Arg

115

120

125

Gly

Asp

Gly

Ala

Ser

Arg

Val

Val

Leu

Ser

Leu

Pro

Phe

Ala

Glu

130

135

140

Ser

Ser

Ser

Val

Glu

Tyr

Ile

Asn

Asn

Trp

Glu

Gln

Ala

Lys

Ala

145

150

155

Ser

Val

Glu

Leu

Glu

Ile

Asn

Phe

Glu

Thr

Arg

Gly

Lys

Arg

Gly

165

170

175

Asp Ala Met

Tyr 180

Glu

Tyr

Met

Ala Gln Ala 185

Cys

Ala

Gly

Asn 190

Arg

Arg

Arg

Ser

Val

Gly

Ser

Ser

Leu

Ser

Cys

Ile

Asn

Leu

Asp

Trp

195

200

205

Val

Ile

Arg

Asp

Lys

Thr

Lys

Thr

Lys

Ile

Glu

Ser

Leu

Lys

Glu

210

215

220

Gly

Pro

Ile

Lys

Asn

Lys

Met

Ser

Glu

Ser

Pro

Asn

Lys

Thr

Val

225

230

235

Glu

Glu

Lys

Ala

Lys

Gln

Tyr

Leu

Glu

Glu

Phe

His

Gln

Thr

Ala

245

250

255

Glu His Pro Glu Leu Ser Glu Leu

260

Lys

265

Thr Val

Thr Gly Thr Asn

270

Asp

Ala

Gly

Lys

Thr

Phe

Gly

Leu

160

Gln

Val

Asp

His

Ser

240

Leu

Pro

- 253 031876

Val

Phe

Ala

275

Gly

Ala

Asn

Tyr

Ala

280

Ala

Trp

Ala

Val

Asn

285

Val

Ala

Val

Ile

290

Asp

Ser

Glu

Thr

Ala

295

Asp

Asn

Leu

Glu

Lys

300

Thr

Thr

Ala

Leu 305

Ser

Ile

Leu

Pro

Gly 310

Ile

Gly

Ser

Val

Met 315

Gly

Ile

Ala

Asp

Ala

Val

His

His

Asn

Thr

Glu

Glu

Ile

Val

Ala

Gln

Ser

Ile

Ala

325

330

335

Ser

Ser

Leu

Met

Val

Ala

Gln

Ala

Ile

Pro

Leu

Val

Gly

Glu

Leu

340

345

350

Asp

Ile

Gly

Phe

Ala

Ala

Tyr

Asn

Phe

Val

Glu

Ser

Ile

Ile

Asn

355

360

365

Phe

Gln

Val

Val

His

Asn

Ser

Tyr

Asn

Arg

Pro

Ala

Tyr

Ser

Pro

370

375

380

His

Lys

Thr

Gln

Pro

Met

His

Glu

Phe

Asn

Tyr

Ile

Lys

Gly

Asp

385

390

395

Tyr

Phe

Ala

Glu

Tyr

Ala

Thr

Lys

Leu

Ser

Phe

Ile

Leu

Asn

Pro

405

410

415

Asp

Ala

Asn

Asn

Pro

Ser

Gly

Glu

Thr

Ala

Asn

His

Asn

Asp

Glu

420

425

430

Cys

Asn

Cys 435

Asn

Glu

Ser

Gly

Ile 440

Ser

Ser

Val

Gly

Gln 445

Ala

Gln

Ser

Gly

Pro

Ser

Ser

Asn

Lys

Thr

Cys

Ile

Thr

His

Ser

Ser

Ile

450

455

460

Thr

Asn

Lys

Lys

Lys

Glu

Cys

Lys

Asp

Val

Lys

Leu

Gly

Val

Arg

465

470

475

Asn

Asp

Lys

Asp

Leu 485

Lys

Ile

Cys

Val

Ile 490

Glu Asp

Thr

Ser

Leu 495

Gly

Val

Asp

Asn

Cys

Cys

Cys

Gln

Asp

Leu

Leu

Gly

Ile

Leu

Gln

500

505

510

Asn

Cys

Ser

Asp

Asn

Lys

Arg

Gly

Ser

Ser

Ser

Asn

Asp

Ser

Cys

515

520

525

Gln

Ala

Gly

320

Leu

Val

Leu

Gly

Pro

400

Ser

Ala

Thr

Lys

Glu

480

Ser

Glu

Asp

- 254 031876

Asn

Ser

545

Arg

Gly

Gln

Asp

Cys

625

Pro

Glu

Trp

Phe

Gln

705

Asn

Met

Ser

Arg

Lys 530

Asn

Gln

Asp

Glu

Cys 535

Gln

Lys

Lys

Leu

Glu 540

Lys

Val

Phe

Leu

Thr

Asn

Gly

Tyr

Lys

Cys

Asp

Lys

Cys

Lys

Ser

Gly

Thr

550

555

Ser

Lys

Lys

Lys

Trp

Ile

Trp

Lys

Lys

Ser

Ser

Gly

Asn

Glu

565

570

575

Leu

Gln

Glu

Glu

Tyr

Ala

Asn

Thr

Ile

Gly

Leu

Pro

Pro

Arg

580

585

590

Ser

Leu

Tyr

Leu

Gly

Asn

Leu

Pro

Lys

Leu

Glu

Asn

Val

Cys

595

600

605

Val

Lys

Asp

Ile

Asn

Phe

Asp

Thr

Lys

Glu

Lys

Phe

Leu

Ala

610

615

620

Leu

Ile

Val

Ser

Phe

His

Glu

Gly

Lys

Asn

Leu

Lys

Lys

Arg

630

635

Gln Asn

Lys

Asn 645

Ser

Gly

Asn

Lys

Glu Asn 650

Leu

Cys

Lys

Ala 655

Tyr

Ser

Phe

Ala

Asp

Tyr

Gly

Asp

Leu

Ile

Lys

Gly

Thr

Ser

660

665

670

Asp

Asn

Glu

Tyr

Thr

Lys

Asp

Leu

Glu

Leu

Asn

Leu

Gln

Asn

675

680

685

Gly

Lys

Leu

Phe

Gly

Lys

Tyr

Ile

Lys

Lys

Asn

Asn

Thr

Ala

690

695

700

Asp

Thr

Ser

Tyr

Ser

Ser

Leu

Asp

Glu

Leu

Arg

Glu

Ser

Trp

710

715

Thr

Asn

Lys

Lys

Tyr

Ile

Trp

Thr

Ala

Met

Lys

His

Gly

Ala

725

730

735

Asn

Ile

Thr

Thr

Cys

Asn

Ala

Asp

Gly

Ser

Val

Thr

Gly

Ser

740

745

750

Ser

Cys

Asp

Asp

Ile

Pro

Thr

Ile

Asp

Leu

Ile

Pro

Gln

Tyr

755

760

765

Phe Leu Gln Glu Trp Val Glu Asn Phe Cys Glu Gln Arg Gln

770 775 780

Ala

Ser

560

Glu

Thr

Glu

Gly

Tyr

640

Leu

Ile

Asn

Glu

Trp

720

Glu

Gly

Leu

Ala

- 255 031876

Lys

785

Asn

Lys

Gly

Arg

Thr

865

Asp

Leu

Leu

Thr

Lys

945

Leu

Pro

Trp

Asn

Thr

Val

Lys

Asp

Val

Ile 790

Thr

Asn

Cys

Lys

Ser Cys 795

Lys

Glu

Ser

Gly 800

Lys

Cys

Lys

Thr

Glu

Cys

Lys

Thr

Lys

Cys

Lys

Asp

Glu

Cys

Glu

805

810

815

Tyr

Lys

Lys

Phe

Ile

Glu

Ala

Cys

Gly

Thr

Ala

Gly

Gly

Gly

Ile

820

825

830

Thr

Ala

Gly

Ser

Pro

Trp

Ser

Lys

Arg

Trp

Asp

Gln

Ile

Tyr

Lys

835

840

845

Tyr

Ser

Lys

His

Ile

Glu

Asp

Ala

Lys

Arg

Asn

Arg

Lys

Ala

Gly

850

855

860

Lys

Asn

Cys

Gly

Thr

Ser

Ser

Thr

Thr

Asn

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

870

875

880

Glu

Asn

Lys

Cys

Val

Gln

Ser

Asp

Ile

Asp

Ser

Phe

Phe

Lys

His

885

890

895

Ile

Asp

Ile

Gly

Leu

Thr

Thr

Pro

Ser

Ser

Tyr

Leu

Ser

Asn

Val

900

905

910

Asp

Asp

Asn

Ile

Cys

Gly

Ala

Asp

Lys

Ala

Pro

Trp

Thr

Thr

Tyr

915

920

925

Thr

Tyr

Thr

Thr

Thr

Glu

Lys

Cys

Asn

Lys

Glu

Arg

Asp

Lys

Ser

930

935

940

Ser

Gln

Ser

Ser

Asp

Thr

Leu

Val

Val

Val

Asn

Val

Pro

Ser

Pro

950

955

960

Gly

Asn

Thr

Pro

Tyr

Arg

Tyr

Lys

Tyr

Ala

Cys

Gln

Cys

Lys

Ile

965

970

975

Thr

Asn

Glu

Glu

Thr

Cys

Asp

Asp

Arg

Lys

Glu

Tyr

Met

Asn

Gln

980

985

990

Ser Cys Gly Ser Ala Arg

995

Thr Met Lys Arg Gly Tyr

1000 1005

Tyr Glu Leu Cys Lys Tyr Asn Gly Val Asp Val

1010

1015

1020

Lys Asn Asp

Lys Pro Thr

Val Arg Ser Asn Ser Ser Lys Leu Asp Ser Gly Arg

- 256 031876

1025

1030

1035

<210>	76
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	76
aactacatca agggcgac	18

<210>	77
<211>	21
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	77
cttgttgata ttggtgtcgg t	21

<210>	78
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	78
cacagcgata gcggcaag	18

<210>	79
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	79
gtccagcttg ctggagtt	18

<210>

<211>

<212>

<213>

ДНК

Искусственная <220>

<223>

Последовательность праймера <400> 80 aactacatca agggcgac

- 257 031876 <210> 81 <211> 18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>81 gtccagcttg ctggagtt18

<210>	82
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	82
aactacatca agggcgac	18

<210>	83
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	83
agcggcgttg gtggtgga	18

<210>	84
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	84
aactacatca agggcgac	18

<210>85 <211>

<212>

<213>

ДНК

Искусственная <220>

<223>

Последовательность праймера <400>85 gtacttgtac cggtaggg <210>86 <211>18 <212> ДНК

- 258 031876

<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	86
cacagcgata gcggcaag	18

<210>	87
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	87
gtacttgtac cggtaggg	18

<210>	88
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	88
ctgaccaact gctacaag	18

<210>	89
<211>	19
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	89
ggtccagagg gtacagctt	19

<210>	90
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	90
ctgtccttca tcctgaac	18

<210> 91 <211> 21 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

- 259 031876 <223> Последовательность праймера <400>91 ttcagcgttg ttgtactcgt a

<210>	92
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	92
ctgtccttca tcctgaac	18

<210>	93
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	93
gtccagaggg tacagctt	18

<210>	94
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	94
cactctgact ctggcacc	18

<210>	95
<211>	24
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	95
agaggacttc atcttgttgt tggt	24

<210>96 <211>18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400> 96

- 260 031876 ctgtccttca tcctgaac

<210>	97
<211>	24
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	97
agaggacttc atcttgttgt tggt	24

<210>	98
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	98
cactctgact ctggcacc	18

<210>	99
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	99
gtccagctta gaggagtt	18

<210>	100
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	100
ctgtccttca tcctgaac	18

<210>	101
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	101
gtccagctta gaggagtt	18

- 261 031876 <210> 102 <211> 18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>102 cactctgact ctggcacc18

<210>	103
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	103
ggcggcgttg gtggtaga	18

<210>	104
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	104
ctgtccttca tcctgaac	18

<210>	105
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	105
ggcggcgttg gtggtaga	18

<210>106 <211>

<212>

<213>

ДНК

Искусственная <220>

<223>

Последовательность праймера <400>106 cactctgact ctggcacc <210>107 <211>18 <212> ДНК

- 262 031876 <213>

Искусственная <220>

<223>

Последовательность праймера

107 <400>107 gtacttgtat ccgtgggg <210>108 <211>18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>108 ctgtccttca tcctgaac18 <210>109 <211>18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>109 gtacttgtat ccgtgggg18 <210>110 <211>18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>110 cacagcgata gcggcaag18 <210>111 <211>36 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>111 ggtgtcgaag ttgatgtcgg gcagattgcc caggta36 <210>112 <211>18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

- 263 031876 <223> Последовательность праймера <400>112 cacagcgata gcggcaag <210>113 <211>36 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>113 agctgcggcc agattagcgc cctcgtggaa ggacac36

<210>	114
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	114
cacagcgata gcggcaag	18

<210>115 <211>36 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>115 agcgcattca gctgcggcgt tggtcttgat ggagct36

<210>	116
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	116
cacagcgata gcggcaag	18

<210>117 <211>18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400> 117

- 264 031876 gtccagcttg ctggagtt

<210>	118
<211>	36
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	118
gctaatctgg ccgcagctta cccccagaat aagaac	36

<210>	119
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	119
gtccagcttg ctggagtt	18

<210>	120
<211>	36
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	120
gccgcagctg aatgcgctga cgtgaagctg ggcgtg	36

<210>	121
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	121
gtccagcttg ctggagtt	18

<210> 122 <211> 18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400> 122 cacagcgata gcggcaag 18

- 265 031876 <210> 123 <211> 18 <212> ДНК <213> Искусственная <220>

<223> Последовательность праймера <400>123 gtccagcttg ctggagtt18

<210>	124
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	124
cacagcgata gcggcaag	18

<210>	125
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	125
gtccagcttg ctggagtt	18

<210>	126
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Последовательность праймера
<400>	126
cacagcgata gcggcaag	18

<210>127 <211>

<212>

<213>

ДНК

Искусственная <220>

<223>

Последовательность праймера <400> 127 gtccagcttg ctggagtt

Claims (10)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Применение конъюгата или слитого белка, содержащего полипептид VAR2CSA или его фрагмент и терапевтическую эффекторную молекулу, в качестве лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования.
2. 2. Применение по п.1, где терапевтическая эффекторная молекула выбрана из противоракового средства, радиоизотопа, токсина, цитостатического или цитолитического средства.
3. 3. Применение по п.1 или 2, где терапевтическая эффекторная молекула выбрана из калихеамицина, ауристатина, доксорубицина, майтанзиноида, таксола, эктеинасцидина, гелданамицина, метотрексата и их производных, цитотоксических белков, таких как экзотоксин A Pseudomonas, дифтерийный токсин, токсин рицин, противовирусный белок фитолакки американской, сапорин, гелонин и их функциональные варианты, фрагменты и комбинации.
4. 4. Применение по п.1 или 2, где фрагмент полипептида VAR2CSA образован доменом ID1 и доменом DBL2Xb.
5. 5. Применение по п.4, где фрагмент полипептида VAR2CSA дополнительно содержит домен ID2a.
6. 6. Применение по п.4, где фрагмент полипептида VAR2CSA содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична любой аминокислотной последовательности 1577 SEQ ID NO:1, 1-592 SEQ ID NO:3, 1-579 SEQ ID NO:4, 1-576 SEQ ID NO:5, 1-586 SEQ ID NO:10, 1579 SEQ ID NO:11, 1-565 SEQ ID NO:29, 1-584 SEQ ID NO:34, 1-569 SEQ ID NO:36, 1-575 SEQ ID NO:37, 1-592 SEQ ID NO:38, 1-603 SEQ ID NO:41, 1-588 SEQ ID NO:43, 1-565 SEQ ID NO:44, 1-589 SEQ ID NO:45, 1-573 SEQ ID NO:48, 1-583 SEQ ID NO:53 или 1-569 SEQ ID NO:54.
7. 7. Применение по любому из пп.4-6, где фрагмент полипептида VAR2CSA содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична аминокислотной последовательности 578-640 SEQ ID NO:1, 593-656 SEQ ID NO:3, 580-643 SEQ ID NO:4, 577-640 SEQ ID NO:5, 587-650 SEQ ID NO:10, 580-643 SEQ ID NO:11, 566-628 SEQ ID NO:29, 585-647 SEQ ID NO:34, 570-632 SEQ ID NO:36, 576-639 SEQ ID NO:37, 593-655 SEQ ID NO:38, 604-667 SEQ ID NO:41, 589-652 SEQ ID NO:43, 566-628 SEQ ID NO:44, 590-653 SEQ ID NO:45, 574-637 SEQ ID NO:48, 584-646 SEQ ID NO:53 или 570632 SEQ ID NO:54.
8. 8. Применение по любому из пп.4-7, где фрагмент полипептида VAR2CSA содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2, 6, 8, 9, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 30, 31, 32, 33, 35, 39, 40, 42, 46, 47, 49, 50, 51 или 52.
9. 9. Применение фармацевтической композиции, включающей конъюгат или слитый белок, содержащий полипептид VAR2CSA и терапевтическую эффекторную молекулу, в качестве лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования.
10. 10. Применение конъюгата или слитого белка, содержащего полипептид VAR2CSA и диагностическую эффекторную молекулу, для диагностики злокачественного новообразования.