EA030437B1

EA030437B1 - Антитела к cd48 и их применение

Info

Publication number: EA030437B1
Application number: EA201370081A
Authority: EA
Inventors: Брендан Дж. Классон; Ана Костик; Цзянбао Дуан
Original assignee: Регенерон Фармасьютикалс, Инк.
Priority date: 2010-09-27
Filing date: 2011-09-26
Publication date: 2018-08-31
Also published as: AR083044A1; JP2013542194A; MY165273A; IL225484A; CN103261226A; EP2621952A1; CA2812748A1; KR20140014067A; WO2012047567A1; AU2011312623B2; SG189089A1; TW201305206A; JP6096117B2; US20120076790A1; CL2013000843A1; MX2013003468A; BR112013007314A2; NZ608660A; TWI507416B; US9228014B2

Abstract

Изобретение предусматривает антитела, которые связываются с CD48, и способ их применения. Согласно некоторым вариантам изобретения антитела являются полностью человеческими антителами, которые связываются с человеческим CD48. Согласно некоторым вариантам антитела по настоящему изобретению блокируют связывание CD48 с одним или более CD48 рецептором. Антитела по изобретению применимы, среди прочего, для лечения заболеваний и нарушений, ассоциированных с одной или более биологических активностей CD48, включая лечение аллергических состояний и других воспалительных состояний.

Description

изобретение относится к антителам и их антиген-связывающим фрагментам, специфическим к человеческому СЭ48.

Сведения о предшествующем уровне техники

СГО48 является ГФИ (ОР1)-заякоренным белком, который существует как в мембраносвязанной, так и в растворимой форме. СГО48 представляет собой высокоаффинный лиганд к 2В4 и низкоаффинный лиганд к СГО2. В научной литературе СЭ48 также имеет обозначения "ТСТ.1" (Мапп-С’кошнк е! а1., 1. Ехр. Меб. 172: 1071-1082 (1990)), "В-ЬЛ8Т 1" (ТкогЬ-баихоп е! а1., Се11 30: 415-425 (1982)) и З1.АМР2 (1)е1ге е! а1., 8еш1и. 1ттипора!ко1. 32:157-171 (2010)). Было показано, что взаимодействие между СЭ48 и 2В4 вызывает активацию ΝΚ клеток. Было также показано, что СО48 стимулирует активацию Т-клеток ίη νίΐΐΌ, а у мышей, нокаутированных по СЭ48. наблюдался пониженный пролиферативный ответ Т-клеток.

Некоторые научные данные говорят об участии СГО48 в прогрессировании астмы и в воспалительных заболеваниях кишечника (ΙΒΌ). Например, было показано, что СЭ48 активируется при экспериментальной астме (например, на моделях индуцированной овальбумином и АхрегдШих аллергического эозинофильного воспаления дыхательных путей). См., например, Миши е! а1., Ат. 1. Рехрп. Сгк. Саге Меб. 175: 911-918 (2007). Более того, мыши, нокаутированные по СЭ48, не заболевали воспалительным колитом при изучении на модели адаптивного переноса ΙΒΌ. Далее было показано, что СЭ48 антагонизм оказывал благотворное действие на ранее установленный колит.

О применении антагонистов СЭ48 для терапевтических целей говорится в патентной заявке США 2007/0212353 и в Международной патентной заявке АО 97/35614. Тем не менее в уровне техники остаётся необходимость в новых СО48-модулирующих агентах, включая антитела против СЭ48, которые можно применять для лечения заболеваний и состояний, опосредованных СГО48.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение предусматривает антитела, которые связывают человеческий СГО48. Антитела по изобретению применимы, среди прочего, для ингибирования СО48-опосредованной передачи сигнала и для лечения заболеваний и нарушений, вызванных или связанных с активностью или передачей сигнала СГО48.

Антитела по настоящему изобретению блокируют взаимодействие между СГО48 и рецептором СЭ48 (например, 2В4 и/или СЭ2) и/или ингибируют активацию первичных человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС). Согласно некоторым вариантам антитела по изобретению связывают эпитоп в первом иммуноглобулиновом домене человеческого СГО48.

Антитела по изобретению могут быть полноразмерными (например, Ι§01 или Ι§04 антитело) или могут содержать только антигенсвязывающий участок (например, фрагмент Рак, Р(ак')₂ или 8θΡν), и могут быть модифицированы с целью воздействовать на функциональность, например, с целью исключения остаточных эффекторных функций (Кеббу е! а1., 2000, 1. 1ттипо1. 164: 1925-1933).

Настоящее изобретение предусматривает антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела, содержащие вариабельную область тяжёлой цепи (НСУК), имеющую последовательность, выбранную из группы, состоящей из ЗЕО ГО N0: 2, 18, 34, 50, 66, 82, 98, 114, 130, 162, 178, 192, 208, 212, 228, 232, 248, 252, 268, 272, 288, 292, 308, 312, 328, 332, 348, 352 и 368, или последовательность, по существу аналогичную ей, степень идентичности которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%.

Настоящее изобретение предусматривает антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела, содержащие вариабельную область лёгкой цепи (ЬСУК), имеющую последовательность, выбранную из группы, состоящей из ЗЕО ГО N0: 10, 26, 42, 58, 74, 90, 106, 122, 138, 146, 154, 170, 180, 182, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 372 и 380, или по существу аналогичную ей последовательность, степень идентичности которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%.

Настоящее изобретение предусматривает антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела, содержащие пару последовательностей НСУК и БСУР (НСУК/ЕСУР), выбранную из группы, состоящей из ЗЕО ГО N0: 2/10, 18/26, 34/42, 50/58, 66/74, 82/90, 98/106, 114/122, 130/138, 162/170, 178/180, 162/182, 178/190, 192/200, 208/210, 212/220, 228/230, 232/240, 248/250, 252/260, 268/270, 272/280, 288/290, 292/300, 308/310, 312/320, 328/330, 332/340, 348/350, 352/360, 368/370, 352/372 и 368/380.

Настоящее изобретение предусматривает антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела, содержащие домен СГОР3 тяжёлой цепи (НСЭК3), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из ЗЕО ГО N0: 8, 24, 40, 56, 72, 88, 104, 120, 136, 168, 198, 218, 238, 258, 278, 298, 318, 338 и 358, или последовательность, по существу аналогичную ей, степень идентичности которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%; и домен СЭК3 лёгкой цепи (ЕСЭК3), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из ЗЕО ГО N0: 16, 32, 48, 64, 80, 96, 112, 128, 144, 152, 160, 176, 188, 206, 226, 246, 266, 286, 306, 326, 346, 366 и 378, или по существу аналогичную ей последовательность, степень идентичности которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%.

- 1 030437

Согласно некоторым вариантам антитело или антигенсвязывающий участок антитела содержит пару аминокислотных последовательностей НСОК3/ЬСОК3, выбранную из группы, состоящей из 8ЕЦ ГО N0: 8/16, 24/32, 40/48, 56/64, 72/80, 88/96, 104/112, 120/128, 136/144, 168/176, 168/188, 198/206, 218/226, 238/246, 258/266, 278/286, 298/306, 318/326, 338/346, 358/366 и 358/378.

Настоящее изобретение предусматривает также антитело или его фрагмент, включающий далее домен СГОР1 тяжёлой цепи (НСОК1), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8Ш ГО N0: 4, 20, 36, 52, 68, 84, 100, 116, 132, 164, 194, 214, 234, 254, 274, 294, 314, 334 и 354, или последовательность, по существу аналогичную ей, степень идентичности которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%; домен СОК2 тяжёлой цепи (НСОК2), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8НС ГО N0: 6, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 118, 134, 166, 196, 216, 236, 256, 276, 296, 316, 336 и 356, или последовательность, по существу аналогичную ей, степень идентичности которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%; домен СГОР1 лёгкой цепи (ЕСОК1), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8НС ГО N0: 12, 28, 44, 60, 76, 92, 108, 124, 140, 148, 156, 172, 184, 202, 222, 242, 262, 282, 302, 322, 342, 362 и 374, или по существу аналогичную ей последовательность, степень идентичности которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%; и домен СГОК2 лёгкой цепи (ЬСОК2), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8ЕЦ ГО N0: 14, 30, 46, 62, 78, 94, 110, 126, 142, 150, 158, 174, 186, 204, 224, 244, 264, 284, 304, 324, 344, 364 и 376, или последовательность, по существу, аналогичную ей, степень идентичности которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%.

Некоторые неограничивающие типичные антитела и антигенсвязывающие фрагменты по изобретению содержат домены НСОК1-НСОК2-НСОК3-ЕСОК1-ЕСОК2-ЕСОК3, соответственно, имеющие аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из: 8ЕЦ ГО N0: 4-6-8-12-14-16 (например, Н2М1707^; 20-22-24-28-30-32 (например, Н2М1709Ц); 36-38-40-44-46-48 (например,

Н2М1710^; 52-54-56-60-62-64 (например, Н2М1712Щ; 68-70-72-76-78-80 (например, Н2М1713Ц); 8486-88-92-94-96 (например, Н2М1763Ц); 100-102-104-108-110-112 (например, Н2М1764Ц); 116-118-120124-126-128 (например, Н2М181Ш); 132-134-136-140-142-144 (например, Н2М1766Ц); 164-166-168-172174-176 (например, Н4Н1769№а); 164-166-168-184-186-188 (например, Н4Н1769№Ъ); 194-196-198-202204-206 (например, Н4Н1770Ц); 214-216-218-222-224-226 (например, Н4Н177Ш); 234-236-238-242-244246 (например, Н4Н1772Щ; 254-256-258-262-264-266 (например, Н4Н1774Щ; 274-276-278-282-284-286 (например, Н4Н1775Щ; 294-296-298-302-304-306 (например, Н4Н1778Щ; 314-316-318-322-324-326 (например, Н4Н1779^; 334-336-338-342-344-346 (например, Н4Н178Ш); 354-356-358-362-364-366 (например, Н4Н1789№ и Ра); и 354-356-358-374-376-378 (например, Н4Н1789№> и РЪ).

Настоящее изобретение включает также антитела, или их антигенсвязывающие фрагменты, которые содержат домены НСОК1-НСОК2-НСОК3-ЕСОК1-ЕСОК2-ЕСОК3, соответственно, имеющие следующие аминокислотные последовательности: НСОК1 = ОРТРЗЬТУО (8ЕЦ ГО N0: 254); НСОК2 = Ι^ΥΌΌδΧΚ, где X обозначает 3 или N (8ЕЦ ГО N0: 381); 11С1Ж.3 = ЛКПК^ТУЗНХРЕУ, где X обозначает Υ или Р (8ЕЦ ГО N0: 382); 1.С0К1 = (ΥΧΙ88Υ. где X обозначает Ό или С (8ΙΓ) ГО N0: 383); 1.С0К2 = АА8 (8ΙΓ) ГО N0: 264); и ЬСОК3 = ООАЖРРРТ (8ЕЦ ГО N0: 266). Неограничивающие типичные антитела по изобретению, которые имеют такие характеристики последовательностей, включают Н4Н1774Ц Н4Н1775Н Н4Н1778Н Н4Н1779N и Н4Н178Ш.

В родственных вариантах изобретение включает антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела, которые специфически связывают СГО48. причём антитело или фрагмент включают домены СОК тяжёлой и лёгкой цепей, содержащиеся в аминокислотных последовательностях тяжёлой и лёгкой цепей, выбранные из группы, состоящей 8ЕЦ ГО N0: 2/10, 18/26, 34/42, 50/58, 66/74, 82/90, 98/106, 114/122, 130/138, 162/170, 178/180, 162/182, 178/190, 192/200, 208/210, 212/220, 228/230, 232/240, 248/250, 252/260, 268/270, 272/280, 288/290, 292/300, 308/310, 312/320, 328/330, 332/340, 348/350, 352/360, 368/370, 352/372 и 368/380. Методы и приёмы для идентификации СОК в пределах аминокислотных последовательностей НСУК и ЬСУК общеизвестны в данной области техники и могут применяться для идентификации СОК в пределах аминокислотных последовательностей НСУК и/или ЬСУК, раскрываемых в настоящей заявке. Типичные правила, которые можно использовать для идентификации границ СОК, включают, например, номенклатуру КаЪа!, номенклатуру Сбобна и номенклатуру АЪМ. В общих чертах, номенклатура КаЪа! основана на вариабельности последовательностей, номенклатура Сбобна основана на определении положения структурных петель, а номенклатура АЪМ представляет собой компромисс между подходами КаЪа! и Сбобна. См., например, КаЪа!, "8сцнспсс5 οί Рго1еш8 οί 1ттипо1од1са1 1и1еге81," №бопа1 бъбЦЦех οί Неабб, Ве1бе8ба, Мб. (1991); Абба/Пинн е! а1., ί. Мо1. ΒίοΙ. 273:927-948 (1997) и Магбп е! а1., Ргос. №И. Асаб. 8с1. И8А 56:9268-9272 (1989). Также является доступной общая база данных для идентификации СОК последовательностей антитела.

В другом аспекте изобретение предусматривает молекулы нуклеиновых кислот, кодирующих антитела против СО48 или их фрагменты. Рекомбинантные экспрессирующие векторы, несущие нуклеиновые

- 2 030437

кислоты по изобретению, и клетки-хозяева, в которые включены такие векторы, также охватываются изобретением, как и методы получения антител путём культивирования клеток-хозяев в условиях, способствующих продуцированию антител, и методы выделения полученных антител.

Согласно одному варианту изобретение предусматривает антитело или его фрагмент, содержащие последовательность НСУК, кодированную нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из δΕφ ΙΌ N0: 1, 17, 33, 49, 65, 81, 97, 113, 129, 161, 177, 191, 207, 211, 227, 231, 247, 251, 267, 271, 287, 291, 307, 311, 327, 331, 347, 351 и 367, или по существу идентичной ей последовательностью, степень гомологии которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%.

Настоящее изобретение предусматривает также антитело или его фрагмент, содержащие последовательность ЬСУК, кодированную нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из δΕφ ΙΌ N0: 9, 25, 41, 57, 73, 89, 105, 121, 137, 145, 153, 169, 179, 181, 189, 199, 209, 219, 229, 239, 249, 259, 269, 279, 289, 299, 309, 319, 329, 339, 349, 359, 369, 371 и 379 или, по существу, идентичной ей последовательностью, степень гомологии которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%.

Настоящее изобретение предусматривает также антитело или его фрагмент, содержащие домен НСИК3, кодированный нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из δΕφ ΙΌ N0: 7, 23, 39, 55, 71, 87, 103, 119, 135, 167, 197, 217, 237, 257, 277, 297, 317, 337 и 357, или, по существу, идентичной ей последовательностью, степень гомологии которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%; и домен ЬСИК3, кодированный нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из δΕφ ΙΌ N0: 15, 31, 47, 63, 79, 95, 111, 127, 143, 151, 159, 175, 187, 205, 225, 245, 265, 285, 305, 325, 345, 365, аий 377, или, по существу, идентичной ей последовательностью, степень гомологии которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%.

Настоящее изобретение предусматривает также антитело или его фрагмент, которые дополнительно содержат домен НСИК1, кодированный нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из δΕφ ΙΌ N0: 3, 19, 35, 51, 67, 83, 99, 115, 131, 163, 193, 213, 233, 253, 273, 293, 313, 333 и 353 или по существу идентичной ей последовательностью, степень гомологии которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%; домен НСИК2, кодированный нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из δΕφ ΙΌ N0: 5, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 117, 133, 165, 195, 215, 235, 255, 275, 295, 315, 335 и 355 или, по существу, идентичной ей последовательностью, степень гомологии которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%; домен ЬСЭК1, кодированный нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из δΕφ ΙΌ N0: 11, 27, 43, 59, 75, 91, 107, 123, 139, 147, 155, 171, 183, 201, 221, 241, 261, 281, 301, 321, 341, 361 и 373 или, по существу, идентичной ей последовательностью, степень гомологии которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%; и домен ЬСЭК2, кодированный нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из δΕφ ΙΌ N0: 13, 29, 45, 61, 77, 93, 109, 125, 141, 149, 157, 173, 185, 203, 223, 243, 263, 283, 303, 323, 343, 363 и 375, или, по существу, идентичной ей последовательностью, степень гомологии которой составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%.

Согласно некоторым вариантам антитело, или его фрагмент, содержит последовательности СЭР тяжёлой и лёгкой цепей, кодированные нуклеотидными последовательностями δΕφ ΙΌ N0: δΕφ ΙΌ N0: 1 и 9 (например, Н2М1707Щ, 17 и 25 (например, Н2М1709И), 33 и 41 (например, Н2М1710И), 49 и 57 (например, Н2М1712Щ, 65 и 73 (например, Н2М1713Щ, 81 и 89 (например, Н2М1763Щ, 97 и 105 (например, Н2М1764Щ, 113 и 121 (например, Н2М181Ш), 129 и 137 (например, Н2М1766И), 161 и 169 (например, Н4Н1769^а), 177 и 179 (например, Н4Н1769Р-а), 161 и 181 (например, Н4Н1769^Ъ), 177 и 189 (например, Н4Н1769Р-Ъ), 191 и 199 (например, Н4Н1770И), 207 и 209 (например, Н4Н1770Р), 211 и 219 (например, Н4Н177Ш), 227 и 229 (например, Н4Н1771Р), 231 и 239 (например, Н4Н1772И), 247 и 249 (например, Н4Н1772Р), 251 и 259 (например, Н4Н1774И), 267 и 269 (например, Н4Н1774Р), 271 и 279 (например, Н4Н1775И), 287 и 289 (например, Н4Н1775Р), 291 и 299 (например, Н4Н1778И), 307 и 309 (например, Н4Н1778Р), 311 и 319 (например, Н4Н1779И), 327 и 329 (например, Н4Н1779Р), 331 и 339 (например, Н4Н178Ш), 347 и 349 (например, Н4Н1781Р), 351 и 359 (например, Н4Н1789№), 367 и 369 (например, Н4Н1789Ра), 351 и 371 (например, Н4Н1789ИЪ) или 367 и 379 (например, Н4Н1789РЪ).

Настоящее изобретение включает антитела против С.Н48. имеющие модифицированный паттерн гликозилирования. Для некоторых вариантов применения может быть пригодной модификация с целью удаления сайтов гликозилирования, или, например, в олигосахаридной цепи у антитела отсутствует фрагмент фукозы для того, чтобы повысить функцию антителозависимой клеточной цитотоксичности (ЛЭСС) (см. δΗίοΙΗ с1 а1. (2002) 1БС 277: 26733). Для другого применения можно осуществить модификацию галактозилирования, чтобы изменить комплемент-зависимую цитотоксичность (СЭС).

Согласно другому аспекту изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую рекомбинантное человеческое антитело или его фрагмент, специфически связывающие СИ48, и

- 3 030437

фармацевтически приемлемый носитель. Согласно близкому аспекту изобретение включает композицию, которая представляет собой комбинацию ингибитора СГО48 и второго терапевтического агента. Согласно одному варианту ингибитор СО48 представляет собой антитело или его фрагмент. Согласно одному варианту изобретения второй терапевтический агент представляет собой агент, который может предпочтительно связываться с ингибитором СГО48. Типичные агенты, которые могут предпочтительно связываться с ингибитором СГО48. включают, но без ограничения, другие агенты, которые ингибируют СГО48 активность (включая другие антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, пептидные ингибиторы, низкомолекулярные антагонисты и т.д.) и/или агенты, которые препятствуют передаче сигнала СГО48 в обратном или прямом направлении (ирЦгсат или бо\уп51гсат).

Согласно ещё одному аспекту изобретение предусматривает методы ингибирования СГО48 активности с помощью антитела против СГО48 или антигенсвязывающего участка антитела по изобретению, причём терапевтические методы включают введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела по изобретению. Поддающееся терапии нарушение представляет собой любое заболевание или состояние, которое улучшается, интенсивность которого уменьшается, которое ингибируется или предупреждается в результате подавления, ингибирования или снижения СГО48 активности. Антитело против СГО48 или фрагмент антитела по изобретению может блокировать взаимодействие между СГО48 и рецептором СГО48 (например, 2В4 и/или СГО2) или иным образом ингибировать процесс передачи сигнала СГО48.

Настоящее изобретение включает также применение антитела против СГО48 или антигенсвязывающего участка антитела по изобретению для получения лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения, связанного с или вызванного СГО48 активностью у пациента.

Другие варианты изобретения станут очевидными из приведённого ниже подробного описания. Краткое описание фигур

Фиг. 1 - линейное изображение человеческого СГО48 полипептида (§Еф ГО N0: 384). Участок, представленный аминокислотами 1- 26, обозначает сигнальную последовательность; Участок, представленный аминокислотами 29- 127, обозначает 1д Домен 1; участок, представленный аминокислотами 132212, обозначает 1д Домен 2. Области §Еф ГО N0:384, соответствующие аминокислотам 60-68 (ΥΤΡΌΟΚίνΕ) и 107-125 (ΥΙΜΚνΕΚΚΤΟΝΕρΕ^ΚΙΚΕ), представляют собой эпитоп, детерминированный для типичного антитела, обозначенного Н4Н1789Ра (см. пример 4).

Фиг. 2 - графические изображения эффекта лечения антителом против СГО48 на мышиной модели гомологичной болезни (трансплантат против хозяина). (см. пример 9). На панели А показана потеря в весе, наблюдаемая у пролеченных и контрольных животных; на панели В показан процент выживаемости пролеченных и контрольных животных. На обеих панелях (·) обозначает отсутствие обработки;!*) обозначает обработку Ы§04 изотипным контролем и () обозначает обработку типичным антителом против СГО48 Н4Н1789Ра.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения

До того, как представить описание настоящего изобретения, следует уяснить, что данное изобретение не ограничивается конкретными описанными методами и экспериментальными условиями, поскольку такие методы и условия могут меняться. Следует также понимать, что употребляемая в данной заявке терминология предназначена только для описания конкретных вариантов изобретения и не претендует на ограничение, так как объём настоящего изобретения ограничен только прилагаемой формулой изобретения.

Если не указано иначе, все технические и научные термины, применяемые в данном описании, имеют то же значение, которое обычно понимает специалист в области техники, к которой относится данное изобретение. Применяемый в данной заявке термин "около" по отношению к конкретному приведённому числовому значению означает, что это значение может отличаться не более чем на 1% от приведённого значения. Например, выражение по данному описанию "около 100" включает 99 и 101 и все значения между ними (например, 99.1, 99.2, 99.3, 99.4 и т.д.).

Хотя при практическом применении или испытании настоящего изобретения могут применяться любые методы и материалы, аналогичные или эквивалентные методам и материалам, приведённым в данном описании, ниже представлены предпочтительные методы и материалы.

Определения

Выражения "СГО48" и " фрагмент СГО48 " по данному описанию относятся к человеческому белку СГО48 или фрагменту, если конкретно не указано, что он не является не человеческим, а относится к другому виду (например, "мышиный СО48," "фрагмент мышиного СЭ48," "обезьяний СЭ48," "фрагмент обезьяньего СГО48" и т.д.). Человеческий СГО48 имеет аминокислотную последовательность §Еф ГО N0: 384. Аминокислотные последовательности молекул СГО48 видов, отличных от человека (например, мыши, обезьяны, кролика, собаки, свиньи и т.д.) имеются в общедоступных источниках, таких как ОепВапк (например, ОепВапк номера доступа ВАЕ96326.1 (мыши); ΌΑΑ31966.1 (бычий); ΕΌΕ94663.1 (крысы); и т.д.).

Термин "рецептор СО48," применяемый в настоящей заявке, обозначает белок, с которым взаимодействует человеческий СГО48 для передачи биологического сигнала ш νΐνο. Термин "рецептор СГО48"

- 4 030437

включает человеческий 2В4 и человеческий СО2. Термин "человеческий 2В4," применяемый в настоящей заявке, означает белок, содержащий аминокислотную последовательность БЕР ГО N0: 390, или её участок, способный взаимодействовать с СО48. Термин "человеческий СО2", применяемый в настоящей заявке, означает белок, содержащий аминокислотную последовательность БЕр ГО N0: 392, или её участок, способный взаимодействовать с СО48.

Предполагается, что термин "антитело" по настоящему описанию относится к молекулам иммуноглобулина, содержащим четыре полипептидных цепи, две тяжёлых (Н) цепи и две лёгких (Ь) цепи, связанных между собой дисульфидными связями, а также их мультимеры (например, 1дМ). Каждая тяжёлая цепь содержит вариабельную область тяжёлой цепи (обозначаемую в настоящей заявке сокращением НСУК или ν_Η) И

константную область тяжёлой цепи. Константная область тяжёлой цепи содержит три домена, С_Н1, С_Н2 и С_Н3. Каждая лёгкая цепь содержит вариабельную область лёгкой цепи (обозначаемую в настоящей заявке сокращением ЬСАВ или V,) И константную область лёгкой цепи. Константная область лёгкой цепи содержит один домен (С_ь1). Области V,, и V,. можно далее подразделять на области (домены) гипервариабельности, называемые областями (доменами), определяющими комплементарность (СОК), вперемежку с более консервативными областями, называемыми каркасными областями (РК). Каждая область V И V,. состоит из трёх СОК и четырёх РК, расположенных от аминоконца к карбоксиконцу в следующем порядке: РК1, СОК1, РК2, СОК2, РК3, СОК3, РК4. Согласно различным вариантам изобретения РК антитела против СО48 (или его антигенсвязывающего участка) могут быть идентичны последовательностям зародышевой линии человека или могут быть естественно или искусственно модифицированными. Аминокислотную консенсусную последовательность можно определить совместным анализом одной или более областей СОК.

Термин "антитело" по настоящему описанию включает также антигенсвязывающие фрагменты молекул полного антитела. Термины "антигенсвязывающий участок" антитела, "антигенсвязывающий фрагмент" антитела и т.п. по настоящему описанию включают любой природный, получаемый ферментативным путём, синтетический или генно-инженерный полипептид или гликопротеин, который специфически связывается с антигеном с образованием комплекса. Антигенсвязывающие фрагменты антитела можно получать из молекул полного антитела любыми подходящими стандартными методами, такими как протеолитическое расщепление или методами рекомбинантных ДНК, которые включают обработку и экспрессию ДНК, кодирующей вариабельный и, возможно, константный домены антитела. Такая ДНК известна и/или её легко получить, например, из коммерческих источников, библиотек ДНК (включая, например, фаговые библиотеки антител) или её можно синтезировать. ДНК можно секвенировать и изучать химическими методами или методами молекулярной биологии, например, расположить один или более вариабельных и/или константных доменов в подходящей конфигурации или ввести кодоны, создать цистеиновые остатки, модифицировать, добавить или удалить аминокислоты и т.д.

Неограничивающие примеры антигенсвязывающих фрагментов включают: (ί) фрагменты РаЬ; (ΐΐ) фрагменты Р(аЬ')2; (ΐΐΐ) фрагменты Ρά; (ίν) фрагменты Ρν; (ν) одноцепочечные молекулы Ρν (δοΡν); (νί) фрагменты бЛЬ; и (νΐΐ) минимальные распознающие компоненты, состоящие из аминокислотных остатков, имитирующих гипервариабельную область антитела (например, выделенную область, определяющую комплементарность (СОК), такую как СОК3 пептид), или заторможенный пептид РК3-СОК3-РК4. Другие генно-инженерные молекулы, такие как домен-специфические антитела, однодоменные антитела, антитела с делетированным доменом, химерные антитела, СОК-привитые антитела, диатела, триатела, татратела, миниантитела, наноантитела (например, одновалентные наноантитела, двухвалентные наноантитела и т.д.), малые модульные иммунофармацевтические белки (δΜΙΡδ) и вариабельные домены 1дNΑК (нового рецептора антигенов) акулы также охватываются выражением "антигенсвязывающий фрагмент" по настоящему описанию.

Антигенсвязывающий фрагмент антитела, как правило, содержит по меньшей мере один вариабельный домен. Вариабельный домен может быть любого размера и аминокислотного состава и обычно содержит по меньшей мере одну область СОК, которая прилегает к или находится в рамке считывания с одной или более каркасной последовательностью. В антигенсвязывающих фрагментах, имеющих VI, домен, ассоциированный с V доменом, V и V домены могут быть расположены друг относительно друга в любом подходящем порядке. Например, вариабельная область может быть димерной и содержать димеры Цт^, ^-½ ог V,-V,.. Или же, антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать мономерный домен V или

Согласно некоторым вариантам изобретения антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать по меньшей мере один вариабельный домен, связанный ковалентной связью по меньшей мере с одним константным доменом. Неограничивающие типичные конфигурации вариабельных и константных доменов, которые могут находиться в антигенсвязывающем фрагменте антитела, включают: (ί) ^-С_Н1; (11) ^-Сн2; (111) ^-С|3; (ίν) ^Сн1-Сн2; (ν) ^04-0,2-0,3; (νί) ^-Сн2-Сн3; (νΐΐ) Ю-С ; (νίίί) У.-СД; (ΐχ) V -С..2; (χ) V -СА; (χί) V -С..1-С..2; (χίί) V -С.1-С..2-С. А (χίίί) V -С.2-С.3 и (χίν) V -С . В любой конфигурации вариабельного и константного доменов, включая типичные конфигурации, перечисленные выше, вариабельные и константные домены могут быть либо непосредственно связаны друг с другом,

- 5 030437

либо могут связываться с помощью полной или частичной шарнирной или линкерной области. Шарнирная область может состоять по меньшей мере из 2 (например, из 5, 10, 15, 20, 40, 60 или более) аминокислот, которые в результате обеспечивают гибкую или полугибкую связь между соседними вариабельными и/или константными доменами в одной полипептидной молекуле. Кроме того, антигенсвязывающий фрагмент антитела по настоящему изобретению может содержать гомодимер или гетеродимер (или другой мультимер) любых конфигураций вариабельного и константного доменов, перечисленных выше, связанных нековалентными связями друг с другом и/или с одним или более мономерным ν_Η или V,. доменом (например, дисульфидной(ыми) связью (связями)).

Как и в случае молекул полных антител антигенсвязывающие фрагменты могут быть моноспецифическими или мультиспецифическими (например, биспецифическими). Мультиспецифический антигенсвязывающий фрагмент антитела обычно содержит по меньшей мере два различных вариабельных домена, причём каждый вариабельный домен способен специфически связываться с отдельным антигеном или с различными эпитопами на одном и том же антигене. Любой формат мультиспецифического антитела, включая типичные форматы биспецифического антитела по настоящему изобретению, можно адаптировать для применения в контексте антигенсвязывающего фрагмента антитела по настоящему изобретению, используя стандартные методы, имеющиеся в данной области техники.

Антитела по настоящему изобретению могут действовать по механизму комплемент-зависимой цитотоксичности (СЭС) или антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (АОСС). "Комплемент-зависимая цитотоксичность" (СЭС. КЗЦ) относится к лизису антиген-экспрессирующих клеток антителом по изобретению в присутствии комплемента. "Антителозависимая клеточноопосредованная цитотоксичность" (АОСС, АЗКЦ) относится к клеточно-опосредованной реакции, в которой неспецифические цитотоксические клетки, экспрессирующие Рс рецепторы (РсКк) (например, естественные киллерные (ΝΚ) клетки, нейтрофилы и макрофаги), узнают связанное антитело на клеткемишени и тем самым вызывают лизис клетки-мишени. С.ОС и АОСС можно количественно определять хорошо известными в области техники и доступными методами анализа. (См., например, патенты США 5500362 и 5821337, и С1уиек е! а1. (1998) Ргос. Ναΐΐ. Асай. 8с1. (И8А) 95: 652-656). Константная область антитела играет важную роль в способности антитела фиксировать комплемент и опосредовать клеточнозависимую цитотоксичность. Поэтому изотип антитела можно выбирать, исходя из того, нужно ли, чтобы антитело опосредовало цитотоксичность.

Предполагается, что термин "человеческое антитело", "антитело человека" по данному описанию включает антитела, имеющие вариабельные и константные области из последовательностей иммуноглобулина из зародышевой линии человека. Человеческие антитела по изобретению могут включать аминокислотные остатки, не кодированные последовательностями иммуноглобулина зародышевой линии человека (например, имеющие мутации, введённые случайным или сайт-специфическим мутагенезом ίη νίίτο или с помощью соматической мутации ίη νίνο), например, в СОК и, в частности, в СОК3. Однако, не предполагается, что термин "человеческое антитело" по данному описанию включает антитела, в которых последовательности СОК из зародышевой линии млекопитающего другого вида, такого как мышь, привиты к человеческим каркасным последовательностям.

Предполагается, что термин "рекомбинантное человеческое антитело" по данному описанию включает все человеческие антитела, которые получены, экспрессированы, созданы или выделены методами рекомбинантной ДНК, такие как антитела, экспрессированные с применением рекомбинантного экспрессирующего вектора, трансфецированного в клетку-хозяина (подробнее описанного ниже), антитела, выделенные из комбинаторной библиотеки человеческих антител (подробнее описанной ниже), антитела, выделенные из организма животного (например, мыши), трансгенного по генам иммуноглобулина человека (см., например, Тау1ог е1 а1. (1992) №с1. Ααάκ Кек. 20:6287-6295), или антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные любым другим способом, который включает сплайсинг последовательностей генов иммуноглобулина человека с последовательностями других ДНК. Такие рекомбинантные человеческие антитела имеют вариабельные и константные области из последовательностей иммуноглобулина зародышевой линии человека. Однако, согласно некоторым вариантам такие рекомбинантные человеческие антитела претерпевают ίη νίίτο мутагенез (или, когда используют животное, трансгенное по последовательностям человеческого 1д, ίη νίνο соматический мутагенез), и поэтому аминокислотные последовательности ν_Η И V,. областей рекомбинантных антител представляют собой последовательности, которые, хотя и получены с использованием последовательностей и являются родственными последовательностям ν_Η И V,. зародышевой линии человека, могут не существовать в природе в репертуаре антител зародышевой линии человека ίη νίνο.

Человеческие антитела могут существовать в двух формах, которые связаны с гетерогенностью шарнирной области. В одной форме молекула иммуноглобулина представляет собой устойчивую четырёхцепную конструкцию с молекулярной массой около 150-160 кДа, в которой димеры удерживаются вместе за счёт межцепной дисульфидной связи между тяжёлыми цепями. Во второй форме димеры не связаны межцепными дисульфидными связями, и образуется молекула с молекулярной массой около 7580 кДа, состоящая из связанных ковалентной связью тяжёлой и лёгкой цепей (полуантитело). Эти формы чрезвычайно трудно разделить, даже с помощью очистки методом аффинной хроматографии.

- 6 030437

Частота, с которой встречается вторая форма в различных изотипах интактного 1дС. определяется, но без ограничения, структурными различиями, связанными с изотипом шарнирной области антитела. Одна аминокислотная замена в шарнирной области человеческого 1§С4 может значительно понизить появление второй формы (Апда1 с1 а1. (1993) Мо1еси1аг 1ттипо1оду 30: 105) до уровня, обычно наблюдаемого при использовании шарнирной области 1§С1 человека. Настоящее изобретение охватывает антитела, имеющие одну или более мутаций в шарнирной области, Сц2 или Сц3 область, которая может быть нужна, например, при получении, для повышения выхода заданной формы антитела.

"Выделенное антитело" по настоящему изобретению означает антитело, которое было идентифицировано и отделено от и/или извлечено из по меньшей мере одного компонента его естественной среды. Например, антитело, которое было отделено от или извлечено из по меньшей мере одного компонента организма, или ткани или клетки, в которой антитело находится или получается в естественных условиях, представляет собой "выделенное антитело" для целей настоящего изобретения. Выделенное антитело включает также антитело ίη δίίυ в рекомбинантной клетке. Выделенные антитела представляют собой антитела, которые прошли по меньшей мере одну стадию очистки или выделения. Согласно некоторым вариантам выделенное антитело может практически не содержать другого клеточного материала и/или химических веществ.

Термин "специфически связывается," или подобные термины, означает, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент образует комплекс с антигеном, относительно устойчивый в физиологических условиях. Методы определения, связывается ли антитело специфически с антигеном, хорошо известны в уровне техники и включают, например, равновесный диализ, поверхностный плазмонный резонанс и т.п.. Например, антитело, которое "специфически связывает" человеческий СИ48, применяемое в контексте настоящего изобретения, включает антитела, которые связывают человеческий СИ48 или его участок с определённой методом поверхностного плазмонного резонанса величиной К_с менее, примерно, 1000 нМ, менее примерно 500 нМ, менее примерно 300 нМ, менее примерно 200 нМ, менее примерно 100 нМ, менее примерно 90 нМ, менее примерно 80 нМ, менее примерно 70 нМ, менее примерно 60 нМ, менее примерно 50 нМ, менее примерно 40 нМ, менее примерно 30 нМ, менее примерно 20 нМ, менее примерно 10 нМ, менее примерно 5 нМ, менее примерно 4 нМ, менее примерно 3 нМ, менее примерно 2 нМ, менее примерно 1 нМ, менее примерно 0.5 нМ (см., например, Пример 3, в данном описании). Выделенное антитело, которое специфически связывает человеческий СИ48, может, однако, проявлять перекрёстную реактивность к другим антигенам, таким как молекулы СП48 от другого вида (отличного от человека).

Предполагается, что "нейтрализующее" или "блокирующее" антитело по настоящему описанию относится к антителу, связывание которого с СП48: (ί) препятствует взаимодействию между СИ48 или фрагментом СП48 и рецептором СИ48 (например, 2В4 и/или СИ2), и/или (ίί) приводит к ингибированию по меньшей мере одной биологической функции СП48. Ингибирование, вызванное антителом, нейтрализующим или блокирующим СИ48, необязательно является полным при условии, что оно детектируется соответствующим методом анализа. Типичные анализы для детекции ингибирования СИ48 описаны в данной заявке.

Антитела против СП48 по настоящему изобретению могут содержать одну или более аминокислотных замен, инсерций и/или делеций в каркасной и/или СИК областях вариабельных доменов тяжёлой и лёгкой цепи по сравнению с соответствующими последовательностями в клетках зародышевой линии, из которых получены эти антитела. Такие мутации можно легко подтвердить, сравнивая аминокислотные последовательности, раскрываемые в настоящем изобретении, с последовательностями зародышевой линии, имеющимися, например, в общедоступных базах данных для последовательностей антител. Настоящее изобретение включает антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые получены с использованием любых аминокислотных последовательностей, раскрываемых в настоящем изобретении, в которых происходит мутация одной или более аминокислот в одной или более каркасных и/или СИК областей в соответствующий(ие) остаток (остатки) последовательности зародышевой линии, из которой они получены, или в соответствующий(ие) остаток (остатки) другой последовательности зародышевой линии человека, или в консервативную аминокислотную замену соответствующего(-их) остатка(-ов) зародышевой линии (в данном описании такие изменения последовательности в целом называются "мутациями зародышевой линии"). Рядовой специалист в данной области техники, исходя из последовательностей вариабельной области тяжёлой и лёгкой цепей по данному описанию, может легко получить множество антител и антигенсвязывающих фрагментов, которые содержат одну или более отдельных мутаций зародышевой линии или их комбинации. Согласно некоторым вариантам изобретения все каркасные и/или СИК остатки в ν_Η и/или V, доменах претерпевали обратную мутацию в остатки исходной последовательности зародышевой линии, из которой было получено антитело. Согласно другим вариантам изобретения только некоторые остатки претерпевали обратную мутацию в остатки исходной зародышевой линии, например, только мутантные первые 8 аминокислот РК1 или последние 8 аминокислот РК4, или только мутантные остатки, находящиеся в СИК1, СИК2 или СИК3. Согласно другим вариантам изобретения происходила мутация одного или более каркасных и/или СИК остатков в соответствующий(е) остаток(остатки) другой последовательности зародышевой линии (например, последовательности

- 7 030437

зародышевой линии, отличной от последовательности зародышевой линии, из которой изначально происходит антитело). Кроме того, антитела по настоящему изобретению могут содержать любую комбинацию двух или более мутаций зародышевой линии в каркасных и/или СЭР областях, например, в которых происходила мутация некоторых отдельных остатков в соответствующий остаток конкретной последовательности зародышевой линии, тогда как некоторые другие остатки, отличные от остатков в исходной последовательности зародышевой линии, сохранялись или подвергались мутации в соответствующий остаток другой последовательности зародышевой линии. После получения антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые содержат одну или более мутаций зародышевой линии, можно легко проверить на одно или более желательных свойств, такое как повышенная специфичность связывания, повышенная аффинность связывания, улучшенные или повышенные антагонистические или агонистические биологические свойства (в зависимости от обстоятельств), пониженная иммуногенность и т.д.. Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, полученные таким общим способом, охватываются настоящим изобретением.

Настоящее изобретение включает также антитела против С'П48. содержащие варианты аминокислотных последовательностей НСУК, ЬСУК и/или СОК по настоящему изобретению, имеющие одну или более консервативных замен. Например, настоящее изобретение включает антитела против СЭ48, имеющие НСУК, ЬСУК и/или СОК аминокислотные последовательности, например, с 10 или менее, 8 или менее, 6 или менее, 4 или менее, и т.д. консервативными аминокислотными заменами по сравнению с любой из НСУК, ЬСУК и/или СОК аминокислотными последовательностями, раскрываемыми в настоящей заявке.

Термин "поверхностный плазмонный резонанс" по настоящему описанию относится к оптическому явлению, которое позволяет проводить анализ взаимодействий в реальном времени, детектируя изменение концентрации белка в матрице биосенсора, например, с применением системы В1Асоге™ (В1аеоге ЫГс §с1еисе8 άίνίδίοη оГ СЕ НеаННеаге, N1).

Предполагается, что термин "К_с " по настоящему описанию относится к равновесной константе диссоциации конкретного взаимодействия антиген-антитело.

Термин "эпитоп" относится к антигенной детерминанте, которая взаимодействует со специфическим сайтом связывания антигена в вариабельной области молекулы антитела, известным как паратоп. Один антиген может иметь более одного эпитопа. Таким образом, различные антитела могут связываться с различными областями на антигене и могут проявлять различные биологические эффекты. Эпитопы могут быть либо конформационными, либо линейными. Конформационный эпитоп образует пространственно близкие аминокислоты из различных сегментов линейной полипептидной цепи. Линейный эпитоп представляет собой эпитоп, образуемый соседними аминокислотными остатками в полипептидной цепи. В некоторых случаях эпитоп может включать (поли)сахаридные фрагменты, фосфорильные группы или сульфонильные группы антигена.

Выражение "фактическая (практическая, существенная) идентичность " или "по существу идентичный," "практически идентичный" по отношению к нуклеиновой кислоте или её фрагменту показывает, что при оптимальном выравнивании с соответствующими нуклеотидными инсерциями или делециями с другой нуклеиновой кислотой (или её комплементарной нитью) степень идентичности нуклеотидных последовательностей, определяемая с помощью хорошо известного алгоритма идентичности последовательностей, такого как РА8ТА, ВЬА8Т или Сар, обсуждаемых ниже, составляет по меньшей мере около 95%, и более предпочтительно по меньшей мере около 96, 97, 98 или 99% нуклеотидных оснований. Нуклеотидная молекула, по существу идентичная эталонной нуклеотидной молекуле, может, в некоторых случаях, кодировать полипептид, имеющий такую же или, по существу, (практически) аналогичную аминокислотную последовательность, что и полипептид, кодированный эталонной нуклеотидной молекулой.

В применении к полипептидам термин "фактическая (практическая, существенная) аналогия", "фактическое (практическое, существенное) сходство" или "по существу (практически) сходный, аналогичный" означает, что две пептидные последовательности, будучи оптимально выравнены, например, с применением программ САР или ВЕ8ТР1Т при использовании веса гэпа по умолчанию, имеют степень идентичности последовательностей по меньшей мере 95%, ещё более предпочтительно по меньшей мере 98 или 99%. Предпочтительно неидентичные положения остатков отличаются консервативными аминокислотными заменами. "Консервативная аминокислотная замена" означает аминокислотную замену, в которой аминокислотный остаток заменён на другой аминокислотный остаток, имеющий боковую цепь (К группу) с аналогичными химическими свойствами (например, зарядом или гидрофобностью). Как правило, консервативная аминокислотная замена не меняет по существу функциональные свойства белка. В тех случаях, когда две или более аминокислотных последовательности отличаются друг от друга консервативными заменами, идентичность последовательностей в процентах или степень сходства можно регулировать в сторону повышения, вводя поправку на консервативную природу замены. Способы осуществления такой регулировки хорошо известны специалистам в данной области техники. См., например, Реагкоп (1994) МеШойк Мо1. Вю1. 24: 307-331. Примеры групп аминокислот, которые имеют боковые цепи со сходными (аналогичными) химическими свойствами, включают: (1) алифатические боко- 8 030437

вые цепи: глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин; (2) алифатические гидроксилсодержащие боковые цепи: серин и треонин; (3) амидсодержащие боковые цепи: аспарагин и глутамин; (4) ароматические боковые цепи: фенилаланин, тирозин и триптофан; (5) основные боковые цепи: лизин, аргинин и гистидин; (6) кислые боковые цепи: аспартат и глутамат, и (7) серосодержащие боковые цепи: цистеин и метионин. Предпочтительными группами консервативных аминокислотных замен являются: валин-лейцинизолейцин, фенилаланин-тирозин, лизин-аргинин, аланин-валин, глутамат-аспартат и аспарагинглутамин. Или же консервативная замена представляет собой изменение положительной величины при использовании матрицы логарифмического правдоподобия РАМ250, раскрываемой в Оопие! е! а1. (1992) 8с1еисе 256: 1443-1445. "Умеренно консервативная замена" означает любое изменение, имеющее неотрицательное значение при использовании матрицы логарифмического правдоподобия РАМ250.

Сходство (подобие) последовательностей полипептидов, которое также называют идентичностью последовательностей, обычно определяют количественно с помощью программы анализа последовательностей. Программа анализа белков сравнивает сходные последовательности с применением величин сходства (подобия), относящихся к различным заменам, делециям и другим модификациям, включая консервативные аминокислотные замены. Например, пакет программ ОСО содержит такие программы, как Оар и ВеМГп. которые можно применять с параметрами по умолчанию для определения гомологии последовательностей или идентичности последовательностей близкородственных полипептидов, таких как гомологичные полипептиды организмов различных видов или белка дикого типа и его мутеина. См., например, ОСО Уегеюи 6.1. Полипептидные последовательности можно сравнивать также, используя программу РА8ТА, использующую параметры по умолчанию или рекомендуемые параметры, программу ОСО Уегеюи 6.1. РА8ТА (е.д., РА8ТА2 апй РА8ТА3) предоставляет выравнивания и степень идентичности последовательностей в процентах с наилучшим перекрыванием между запрашиваемой и искомой последовательностями (Реаг5оп (2000) зирга). Другим предпочтительным алгоритмом для сравнения последовательности по изобретению с базой данных, содержащей большое число последовательностей различных организмов, является компьютерная программа ВЬА8Т, в особенности ВЬА8ТР или ТВЬА8ТХ, использующая параметры по умолчанию. См., например, Л115с1ш1 е! а1. (1990) 1. Мо1. ΒίοΙ. 215: 403-410 и А118сйи1 е! а1. (1997) ИиОею Ас1Й5 Ке5. 25: 3389-402.

Биологические характеристики антител

Антитела по настоящему изобретению блокируют взаимодействие между человеческим СИ48 и по меньшей мере одним рецептором СИ48. Применяемое в данном описании выражение "блокируют взаимодействие между человеческим СИ48 и по меньшей мере одним рецептором СИ48" означает, что в анализе, в котором можно обнаружить и/или количественно определить физическое взаимодействие между СИ48 и рецептором СИ48 (например, человеческим 2В4 и/или человеческим СИ2), добавление антитела по изобретению снижает взаимодействие между СИ48 и рецептором по меньшей мере на 50%. Неограничивающий типичный метод анализа, который можно применять для того, чтобы определить, действительно ли антитело блокирует взаимодействие между человеческим СИ48 и рецептором СИ48 (например, человеческим 2В4), иллюстрируется в примере 5 данной заявки. В этом Примере антитела смешивают с белком СИ48, а затем смесь антитело/СИ48 наносят на поверхность с иммобилизованным 2В4 белком. После отмывки несвязанных молекул определяют количество СИ48, связанного с поверхностью с иммобилизованным на ней 2В4. Используя различные количества антитела в этом формате анализа, можно рассчитать количество антитела, необходимое для того, чтобы блокировать 50% связывания СИ48 с 2В4, и выразить его в виде величины 1С₅₀ Настоящее изобретение включает антитела против СИ48, которые показывают 1С₅₀ менее, примерно, 400 пМ при тестировании в анализе связывания СИ48/СИ48 рецептор, описанном выше, или по существу аналогичном анализе. Например, изобретение включает антитела против СИ48, величина 1С₅₀ для которых меньше чем примерно 400, 300, 290, 280, 270, 260, 250, 240, 230, 220, 210, 200, 190, 180, 170, 160, 150, 140, 130, 120, 110, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 18, 16, 14, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 пМ при тестировании в анализе связывания СИ48/СИ48 рецептор, описанном выше, или, по существу, аналогичном анализе.

Антитела по настоящему изобретению способны ингибировать также активацию первичных мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС5) человека. Употребляемое в настоящем описании выражение "ингибирует активацию первичных мононуклеарных клеток периферической крови человека " означает, что в анализе, в котором можно обнаружить и/или количественно определить активацию РВМС5 (например, при количественном определении высвобождения ΙΡΝ- гамма или другого цитокина), добавление антитела по изобретению снижает количество высвобождаемого

ΙΡΝ-гамма (или другого цитокина) по меньшей мере на 50%. Неограничивающие типичные методы анализа, которые можно применять для того, чтобы определить, действительно ли антитело ингибирует активацию РВМС5, проиллюстрированы в примерах 6 и 7 данного описания. В одном примере антитело против СИ48 добавляют к выделенным человеческим РВМС5 перед активацией РВМС5 с помощью агонистических анти-СИ3 и анти-СИ28 антител. После некоторого периода инкубации определяют количество высвобожденного ΙΡΝ-гамма. Используя различные количества антитела в этом формате анализа, можно рассчитать количество антитела, необходимое для того, чтобы ингибировать 50% максимального высвобождения ΙΡΝ-гамма и выразить его в виде величины 1С₅₀. Настоящее изобретение включает анти- 9 030437

тела против СИ48, которые показывают значение 1С₅₀ менее, примерно, 500 пМ при тестировании в анализе активации в РВМС (МКПК), описанном выше, или по существу аналогичном анализе. Например, изобретение включает антитела против СИ48, величина 1С₅₀ для которых меньше чем примерно 500, 400, 300, 290, 280, 270, 260, 250, 240, 230, 220, 210, 200, 190, 180, 170, 160, 150, 140, 130, 120, 110, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 18, 16, 14, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 пМ при тестировании в анализе активации в РВМС, описанном выше, или, по существу, аналогичном анализе.

Эпитопное картирование и родственные методы

Человеческий белок СИ48 содержит два иммуноглобулиноподобных домена, называемых в данном описании "1д домен 1" и "1§ домен 2". 1§ домен 1 имеет последовательность аминокислот, представленную аминокислотами с 29 по 127 последовательности 8ЕС ГО N0: 384, а 1д домен 2 имеет последовательность аминокислот, представленную аминокислотами со 132 по 212 последовательности 8ЕС ГО N0: 384 (см. фиг. 1).

Настоящее изобретение включает антитела против СГО48. которые специфически связываются с эпитопом в 1§ домене 1 человеческого СИ48. Эпитоп может состоять из одной непрерывной последовательности из 3 или более (например, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более) аминокислот, локализованных в 1§ домене 1 белка СИ48. Или же эпитоп может состоять из множества не прилегающих аминокислот (или аминокислотных последовательностей), локализованных в 1§ домене 1 белка СИ48. Согласно некоторым вариантам настоящего изобретения предусматриваются антитела против СИ48, которые взаимодействуют с одной или более аминокислот, локализованных между аминокислотами от 60 до 125 последовательности 8ЕС ГО N0: 384. Например, настоящее изобретение включает антитела против СИ48, локализованные между аминокислотами от 60 до 60 до 68 и/или от 107 до 125 последовательности 8ЕС ГО N0:384.

Различные методы, известные рядовому специалисту в данной области техники, можно применять для того, чтобы определить, действительно ли антитело "взаимодействует с одной или более аминокислот " в полипептиде или белке. Типичные методы включают, например, стандартный перекрёстный конкурентный анализ, такой как анализ, описанный в ЛиНЬоШек, Наг1о\у апб Ьапе (Со1б 8ргшд НагЬог Рге88, Со1б 8ргш§ НагЬ., ЩУ), аланин-сканирующий мутагенез, блоттинг пептидов (Решеке, 2004, Ме1йоб8 Мо1 Вю1 248:443-463) и расщепление пептидов. Кроме того, можно применять такие методы как исключение эпитопа, извлечение эпитопа и химическая модификация антигенов (Тотег, 2000, Рго1еш 8с1епсе 9: 487496). Другим методом, который можно применять для идентификации аминокислот в полипептиде, с которым реагирует антитело, является обмен водород/дейтерий, детектируемый масс-спектрометрией. (См., например, пример 4 в данной заявке). В общих чертах, метод обмена водород/дейтерий включает введение в целевой белок дейтерия в качестве метки с последующим связыванием антитела с белком, меченным дейтерием. Затем комплекс белок/антитело переносят в воду, чтобы обмен водород-дейтерий мог происходить во всех остатках, за исключением остатков, защищенных антителом (который остаётся меченным дейтерием). После диссоциации антитела целевой белок расщепляют протеазами и проводят масс-спектрометрический анализ, при этом выявляются остатки, меченные дейтерием, которые соответствуют специфическим аминокислотам, с которыми взаимодействует антитело. См., например, ЕЬгшд (1999) Апа1уИса1 ВюскениЦгу 267(2): 252- 259; Епдеп апб §тйй (2001) Апа1. Сйет. 73: 256А-265А.

Далее настоящее изобретение включает антитела против СИ48, которые связываются с тем же эпитопом, что и любое из специфических типичных антител по данной заявке (например, Н4Н1789Ра, Н4Н1763Ц Н2М1707Ц Н2М1709Щ Н4Н1770Щ Н4Н177Ш и т.д.). Кроме того, настоящее изобретение включает также антитела против СИ48, которые конкурируют за связывание с СИ48 или фрагментом СИ48 с любым из специфических типичных антител по данной заявке (например, Н4Н1789Ра, Н4Н1763Ц Н2М1707Ц Н2М1709Щ Н4Н1770Щ Н4Н177Ш и т.д.).

Стандартными методами, известными в области техники, можно легко определить, действительно ли антитело связывается с тем же самым эпитопом, что и эталонное антитело против СИ48, или конкурирует за связывание с эталонным антителом против СИ48. Например, чтобы определить, действительно ли антитело связывается с тем же самым эпитопом, что и эталонное антитело против СИ48 по изобретению, эталонное антитело оставляют связываться с СИ48 белком или пептидом в условиях насыщения.

Далее определяют способность тестируемого антитела связываться с молекулой СИ48. Если тестируемое соединение способно связываться с СИ48 после насыщения связывания, можно сделать вывод, что тестируемое соединение связывается с эпитопом, отличным от эпитопа, с которым связывается эталонное антитело против СИ48. С другой стороны, если тестируемое антитело не способно связываться с молекулой СИ48 после насыщения связывания с эталонным антителом против СИ48, тогда тестируемое антитело может связываться с тем же эпитопом, что и эпитоп, связанный с эталонным антителом против СИ48 по изобретению. Затем можно провести дополнительные стандартные эксперименты, чтобы подтвердить, действительно ли наблюдаемое отсутствие связывания тестируемого антитела вызвано связыванием с тем же эпитопом, с которым связывается эталонное антитело, или пространственное блокирование (или другое явление) ответственно за наблюдаемое отсутствие связывания. Такие эксперименты можно проводить, применяя методы ЕША (ИФА), Р1А (РИА), В1асоге, проточную цитометрию или любой другой количественный или качественный анализ связывания с антителом, известный в области тех- 10 030437

ники. Согласно некоторым вариантам настоящего изобретения два антитела связываются (или перекрываются) с одним и тем же эпитопом, если, например, 1-, 5-, 10-, 20- или 100-кратный избыток одного антитела ингибирует связывание с другим антителом по меньшей мере на 50%, но предпочтительно на 75, 90 или даже на 99% по определению методом конкурентного связывания (см., например, 1ипдйап8 е! а1., Сапсег Ке8. 1990: 50: 1495-1502). Или же полагают, что два антитела связываются с одним и тем же эпитопом, если по существу все мутации аминокислот в антигене, которые снижают или исключают связывание одного антитела, снижают или исключают связывание другого. Два антитела считаются имеющими "перекрывающиеся эпитопы", если только набор мутаций аминокислот, которые снижают или исключают связывание одного антитела, снижает или исключает связывание другого. Для того, чтобы определить, конкурирует ли некое антитело за связывание с эталонным антителом против СИ48, вышеописанную методику связывания осуществляют по двум направлениям: по первому направлению эталонное антитело оставляют связываться с молекулой СИ48 в условиях насыщения с последующей оценкой связывания тестируемого антитела с молекулой СИ48. По второму направлению тестируемое антитело оставляют связываться с молекулой СИ48 в условиях насыщения с последующей оценкой связывания эталонного антитела с молекулой СИ48. Если, по обоим направлениям, только первое (насыщающее) антитело способно связываться с молекулой СИ48, тогда делается вывод, что тестируемое антитело и эталонное антитело конкурируют за связывание с СИ48. Как понимает рядовой специалист в данной области техники, антитело, которое конкурирует за связывание с эталонным антителом, может не обязательно связываться с тем же самым эпитопом, что и эталонное антитело, но может пространственно блокировать связывание эталонного антитела, связывая перекрывающийся или прилегающий эпитоп.

Получение человеческих антител

Методы получения моноклональных антител, включая полностью человеческие моноклональные антитела, известны в уровне техники. Любые такие известные методы можно применять в контексте настоящего изобретения для получения человеческих антител, которые специфически связываются с человеческим СИ48.

Используя технологию УЕЬОСГММиМЕ™ или любой другой метод получения моноклональных антител, сначала выделяли высокоаффинные химерные антитела к СИ48, имеющие человеческую константную область и мышиную константную область. Как показано ниже, в экспериментальной части, антитела характеризовали и проводили отбор по нужным характеристикам, включая аффинность, селективность, эпитоп и т. д. Мышиные константные области заменяли на нужную человеческую константную область, чтобы получить полностью человеческое антитело по изобретению, например, дикого типа или модифицированный 1§С1 или 1§С4. В то время как выбранная константная область может меняться в соответствии с конкретным применением, за такие характеристики как высокоаффинное связывание с антигеном и специфичность по отношению к мишени, отвечает вариабельная область.

Биоэквиваленты

Антитела против СИ48 и фрагменты антител по настоящему изобретению охватывают белки, имеющие аминокислотные последовательности, которые отличаются от последовательностей описанных антител, но сохраняют способность связывать человеческий СИ48. Такие варианты антител и фрагментов антител содержат одно или более добавлений, одну или более делеций или замен аминокислот по сравнению с исходной последовательностью, но проявляют биологическую активность, которая по существу эквивалента биологической активности описанных антител. Аналогично, последовательности ДНК по настоящему изобретению, кодирующие антитела против СИ48, охватывают последовательности, которые содержат одно или более добавлений, одну или более делеций или замен нуклеотидов по сравнению с раскрываемой последовательностью, но которые кодируют антитело против СИ48 или фрагмент антитела, по существу, биоэквивалентные антителу против СИ48 или фрагменту антитела по изобретению. Примеры таких вариантов аминокислотных и ДНК-последовательностей обсуждаются выше.

Два антигенсвязывающих белка, или антитела, считаются биоэквивалентными, если, например, они являются фармацевтически эквивалентными или фармацевтически альтернативными антигенсвязывающими белками или антителами, скорость и степень всасывания которых отличаются незначительно при введении в той же самой молярной дозе в аналогичных экспериментальных условиях, либо в виде единичной дозы, либо в виде многократной дозы. Некоторые антитела считаются эквивалентными или фармацевтически альтернативными, если эквивалентна степень их всасывания, но не скорость всасывания, и всё же они могут считаться биоэквивалентными, так как такая разница скорости всасывания является намеренной и отражается в этикетке, не существенна для достижения эффективных концентраций вызывающих привыкание наркотиков, например, при постоянной приёме, и считается незначительной с медицинской точки зрения для конкретного изучаемого лекарственного продукта.

Согласно одному варианту два антигенсвязывающих белка являются биоэквивалентными, если отсутствует клинически значимая разница в их безопасности, чистоте и эффективности (активности).

Согласно одному варианту два антигенсвязывающих белка являются биоэквивалентными, если пациенту можно заменять один или более раз эталонный продукт на биологический продукт без ожидаемого увеличения риска вредных побочных эффектов, включая клинически значимое изменение иммуногенности или пониженную эффективность по сравнению с непрерывной терапией без такого изменения (пе- 11 030437

реключения).

Согласно одному варианту два антигенсвязывающих белка являются биоэквивалентными, если они оба действуют по общему механизму или общим механизмам на состояние или состояния, в той степени, в какой эти механизмы изучены.

Биоэквивалентность можно продемонстрировать методами ίη νίνο и ίη νίίτο. Методы количественного определения биоэквивалентности включают, например, (а) ίη νίνο тест на людях или других млекопитающих, в котором определяют концентрацию антитела или его метаболитов в крови, плазме, сыворотке или другой биологической жидкости в зависимости от времени; (б) тест ίη νίίτο, корелированный с ίη νίνο данными по биодоступности и позволяющий обоснованно прогнозировать эти данные; (в) ίη νίνο тест на людях или других млекопитающих, у которых соответствующий острый (кратковременный, резкий) фармакологический эффект антитела (или его мишени) определяют как функцию времени; и (г) строго контролируемое клиническое испытание, в котором устанавливают безопасность, эффективность, или биодоступность или биоэквивалентность антитела.

Биоэквивалентные варианты антител против СЭ48 по изобретению можно конструировать, например, вводя различные замены остатков или последовательностей или осуществляя делеции концевых или внутренних остатков или последовательностей, не являющиеся обязательными с точки зрения биологической активности. Например, цистеиновые остатки, не являющиеся существенными для биологической активности, можно удалить или заменить на других аминокислоты, чтобы предупредить образование при ренатурации необязательных или некорректных внутримолекулярных дисульфидных мостиков. В другом контексте биоэквивалентные антитела могут включать варианты антител против СЭ48, содержащие аминокислотные замены, которые модифицируют характеристики гликозилирования антител, например, мутации, которые исключают или удаляют гликозилирование.

Видовая селективность и видовая перекрёстная реактивность

Согласно некоторым вариантам изобретения антитела против СО48 связываются с человеческим СЭ48. но не с СЭ48 другого вида. Настоящее изобретение включает также антитела против СО48, которые связываются с человеческим СЭ48 и с СЭ48 одного или более видов, отличных от человека. Например, антитела против СО48 по изобретению могут связываться с человеческим СЭ48 и могут связываться или не связываться, соответственно, с одним или более белком из белков СЭ48 мыши, крысы, морской свинки, хомяка, песчанки, свиньи, кошки, собаки, кролика, козы, овцы, коровы, лошади, верблюда, обезьяны циномолгус, мармозетки, макака резус или шимпанзе.

Иммуноконъюгаты

Изобретение охватывает моноклональные антитела против СЭ48. конъюгированные с терапевтическим агентом ("иммуноконъюгат"), таким как цитотоксин, химиотерапевтическое лекарство, иммунодепрессант или радиоизотоп. Цитотоксические агенты включают любой агент, губительный для клеток. Примеры цитотоксических агентов и химиотерапевтических агентов, подходящих для образования иммуноконъюгатов, известны в уровне техники (см., например, Международную заявку на патент ΥΘ 05/103081).

Мультиспецифические антитела

Антитела по настоящему изобретению могут быть моноспецифическими, биспецифическими или мультиспецифическими. Мультиспецифические антитела могут быть специфическими к различным эпитопам одного целевого полипептида или могут содержать антигенсвязывающие домены, специфические более чем к одному полипептиду. См., например, Тий е! а1., 1991, I. ^шим! 147: 60-69; КиЕег е! а1., 2004, ТгенЖ Вю1ес1ию1. 22: 238- 244. Антитела против СЭ48 по настоящему изобретению могут быть связаны или совместно экспрессироваться с другой функциональной молекулой, например другим пептидом или белком. Например, антитело или фрагмент антитела может функционально связываться (например, химической связью, слиянием методом генной инженерии, нековалентной ассоциацией или иным способом) с одной или более молекулярных частиц, таких как другое антитело или фрагмент антитела, давая биспецифическое или мультиспецифическое антитело со второй специфичностью связывания. Например, настоящее изобретение включает биспецифические антитела, в которых одно плечо иммуноглобулина является специфическим к человеческому СЭ48 или его фрагменту, а второе плечо иммуноглобулина является специфическим ко второй терапевтической мишени или конъюгировано с терапевтическом агентом, таким как ингибитор трипсина.

Типичный формат биспецифического антитела, который можно использовать в контексте настоящего изобретения, включает применение С_н3 домена первого иммуноглобулина (1д) и С_н3 домена второго 1д С_н3, где С_н3 домены первого и второго 1д С_н3 отличаются друг от друга по меньшей мере одной аминокислотой, и при этом отличие по меньшей мере на одну аминокислоту ослабляет связывание биспецифического антитела с Белком А по сравнению с биспецифическим антителом, в котором этого отличия нет. Согласно одному варианту С_н3 домен первого 1д связывает Белок А, а С_н3 домен второго 1д содержит мутацию, которая ослабляет или аннулирует связывание Белка А, такая как модификация н95К (согласно нумерации экзонов в 1МСТ; н435К согласно ЕЙ нумерации). Второй С_н3 домен может дополнительно содержать модификацию Υ96Ρ (по 1МСТ; Υ436Ρ по ЕЙ). Другие модификации, которые могут быть во втором домене С_н3, включают Ό16Ε, Ь18М, N443, Κ52Ν, У57М и У821 (по 1МСТ; Ό356Ε,

- 12 030437

Й358М, N3848, Κ392Ν, У397М и У4221 по ЕЙ) в случае 1§01 антител; N448, Κ52Ν и У821 (ΙΜΟΤ; N3848, Κ392Ν и У4221 по ЕЙ) в случае Ι§02 антител; и О15К, N448, Κ52Ν, У57М, Κ69Κ, Е79О и У821 (по ΙΜΟΤ; О355К, N3848, Κ392Η У397М, Κ409Κ, Е419О и У4221 по ЕЙ) в случае Ι§04 антител. Варианты формата биспецифических антител, описанные выше, рассматриваются в объёме настоящего изобретения.

Лекарственные формы и их введение

Изобретение предусматривает фармацевтические композиции, содержащие антитела против СЭ48 или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему изобретению. Фармацевтические композиции по изобретению готовят с соответствующими носителями, эксципиентами и другими агентами, которые обеспечивают лучший перенос, лучшую доставку, переносимость и т.п. Огромное число соответствующих лекарственных форм можно найти в фармакологическом справочнике, известном всем химикам фармацевтам: РеттдЮп'к РЬагтасеийса1 8с1спес5. Маек РиЪЬкЬтд Сотрапу, ЕаЧоп. РА. Эти лекарственные формы включают, например, порошки, пасты, мази, желе, воски, масла, липиды, липид (катионный или анионный)-содержащие везикулы (такие как ЛИПОФЕКТИН™), ДНК- конъюгаты, безводные рассасывающие пасты, эмульсии масло-в- воде и вода-в- масле, эмульсии карбовакс (полиэтиленгликоли различной молекулярной массы), полутвёрдые гели и полутвёрдые смеси, содержащие карбовакс. См. также РохуеП е1 а1. "СотрепФит оГ е\С1р1еШ5 Гог рагеп1ега1 ГогтиЬЛюпк" РЭА (1998) 1 Рйагт 8с1 ТесЬпо1 52: 238-311.

Доза антитела, вводимого пациенту, может в большой степени зависеть от возраста и габаритов пациента, от заболевания, пути введения и т.п. Предпочтительную дозу обычно рассчитывают с учётом массы тела и площади поверхности тела. Если антитело по настоящему изобретению применяют для лечения состояния или заболевания, ассоциированного с активностью СЭ48 у взрослого пациента, обычно целесообразно вводить антитело по настоящему изобретению внутривенно в виде разовой дозы от около 0.01 до около 20 мг/кг массы тела, более предпочтительно, от около 0.02 до около 7, от около 0.03 до около 5 или от около 0.05 до около 3 мг/кг массы тела. Можно корректировать частоту и продолжительность лечения в зависимости от тяжести состояния. Эффективные дозы и схемы введения антител против СЭ48 можно определять эмпирически; например, можно контролировать течение заболевания у пациента с помощью регулярного обследования и в соответствии с этим корректировать дозу. Более того, можно делать пересчёт доз, используя методы, хорошо известные в области техники (межвидовой коэффициент пересчёта доз) (см., Могйепй е1 а1., 1991, РНагтасеШ. Ке8. 8: 1351).

Известны различные системы доставки, которые могут применяться для введения фармацевтической композиции по изобретению, например, инкапсулирование в липосомы, микрочастицы, микрокапсулы, рекомбинантные клетки, способные экспрессировать мутантные вирусы, рецепторопосредованный эндоцитоз, (см., например, \Уи е1 а1., 1987, 1. Вю1. СЬет. 262: 4429- 4432). Методы введения включают, но без ограничения, интрадермальный, внутримышечный, внутрибрюшинный (интраперитонеальный), внутривенный, подкожный, интраназальный, эпидуральный и пероральный пути. Композицию можно вводить любым обычным способом, например, с помощью инфузии или болюсной инъекции, всасыванием через эпителиальную или кожно-слизистую выстилку (например, через слизистую оболочку рта, ректальную и интестинальную слизистую оболочку и т.д.) и можно вводить вместе с другими биологически активными агентами. Введение может быть системным или местным.

Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно доставлять подкожно или внутривенно с помощью стандартной иглы и шприца. Кроме того, шприц-ручка находит применение для подкожной доставки фармацевтической композиции по настоящему изобретению. Такая шприц-ручка может быть многоразового или одноразового пользования. В шприц-ручке многоразового пользования обычно применяется сменный картридж, который содержит фармацевтическую композицию. Когда вся фармацевтическая композиция в картридже используется и картридж становится пустым, пустой картридж легко можно выкинуть и заменить на новый картридж, содержащий фармацевтическую композицию. После этого шприц-ручку можно снова использовать. В одноразовой шприц-ручке сменный картридж отсутствует. Точнее, одноразовая шприц-ручка поступает с предварительно заполненным фармацевтической композицией резервуаром, находящимся в устройстве. Когда фармацевтическая композиция в резервуаре израсходуется, выбрасывают всё устройство.

Многочисленные многоразовые шприц-ручки и автоинжекторы (шприц-тюбики) находят применение для подкожной доставки фармацевтической композиции по настоящему изобретению. Примеры включают, но без ограничения, АиТОРЕ№™ (О\уеп МишГогй, 1пс., ^оойккск, υΚ), шприц-ручку Э18ЕТКОМС™ (ОЩеКошс МеФса1 8у51етк, ВегдйогГ, 8^11хег1апН), шприц-ручку НиМАЬОО М1Х 75/25™, шприц-ручку НиМАЬОО™, шприц-ручку НиМАБШ 70/30™ (ЕЬ ЬЫу апй Со., ШФапароЬк, Ш), NОУОРЕЫ™ I, II и III (№уо №гФкк, СорепЬадеп, Эептагк), NОVОРЕN 1иХ1ОР'™ (№уо №гФкк, СорепЬадеп, Эептагк), шприц-ручку ΒΌ™ (ВесЮп Пюкткоп, ЕгапкЬп Ьакек, N1), ОРТШЕИ™, ОРΤIРЕN РКО™, ОРΤIРЕN 8ТАРБЕТ™ и ОРМСБПС™ (5аиοй-аνеиί^5, ЕгапкГиП, Оегтапу), и это только некоторые. Примеры одноразовых шприц-ручек, применяющихся для подкожной доставки фармацевтической композиции по настоящему изобретению включают, но без ограничения, шприц-ручку 8ОЬО8ТАК™ (капой- 13 030437

ауеийк), Ρί-ΕΧΡΕΝ'™ (Νονο ΝοΓάίκΚ). и ΚΧνίΚΡΕΝ'¹™ (Ε1ί ЬШу), автоинжектор ЗИКЕСЫСК™ (Атдеи, ТЬоикаий Оакк, СА). РЕЖЕТ¹™ (Наке1те1ег, §1ийдай, Оегтаиу), ΕΡΙΡΕΝ (Эеу. Ь.Р.) и шприц-ручку НИΜΙΚΑ™ (АЬЬой ЬаЬк, АЬЬой Рагк 1Ь), и это только некоторые.

В некоторых случаях фармацевтическую композицию можно доставлять в виде системы с контролируемым высвобождением. Согласно одному варианту можно применять насос (см. Ьаидег, кирга; 8е£ΐοη, 1987, СКС Сгй. Кек. Вютей. Ειμ. 14: 201). Согласно дому варианту можно применять полимерные материалы; см. Мей1са1 АррНса1юик οί СотгоПей Ке1еаке, Ьаидег апй \У1ке (ейк.), 1974, СКС Ргек., Βοса КаФп, Р^пйа. Согласно ещё одному варианту изобретения систему с контролируемым высвобождением можно помещать поблизости от цели композиции, при этом требуется только часть системной дозы (см., например, Οοο^ο^ 1984, ш Мейюа1 Арр1юа1юик οί Сοηΐ^ο11ей Ке1еаке, кирга, νοί. 2, рр. 115-138). Другие системы с контролируемым высвобождением обсуждаются в обзоре Ьаидег, 1990, §с1еисе 249: 15271533.

Препараты для инъекций могут включать лекарственные формы для внутривенных, подкожных, внутрикожных и внутримышечных инъекций, капельные инфузии и т.п. Эти препараты для инъекций можно приготовить общеизвестными методами. Например, препараты для инъекций можно приготовить, растворяя, суспендируя или эмульгируя антитело или его соль, описанные выше, в стерильной водной среде или масляной среде, обычно применяемой для инъекций. В качестве водной среды для инъекций применяются, например, физиологический солевой раствор, изотонический раствор, содержащий глюкозу и другие добавки, и т.д., которые можно использовать в комбинации с соответствующим солюбилизирующим агентом, таким как спирт (например, этанол), полиол (например, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль), неионное поверхностно-активное вещество [например, полисорбат 80, НСО-50 (аддукт гидрированное касторовое масла/полиоксиэтилена (50 мол.))] и т.д. В качестве масляной среды применяются, например, кунжутное масло, соевое масло и т.д., которые можно использовать в комбинации с солюбилизирующим агентом, таким как бензилбензоат, бензиловый спирт и т.д. Полученные при этом препараты для инъекций помещают в соответствующую ампулу.

Целесообразно готовить вышеописанные фармацевтические композиции для перорального или парентерального применения в лекарственной форме в виде разовой дозы, в зависимости от дозы активных ингредиентов. Такие лекарственные формы в виде разовой дозы включают, например, таблетки, пилюли, капсулы, ампулы для инъекций, суппозитории и т.д. Количество вышеуказанного антитела обычно составляет от около 5 до около 500 мг на лекарственную форму в виде разовой дозы; в частности, предпочтительно, чтобы в форме для инъекций содержалось от около 5 до около 100 мг, а для других лекарственных форм от около 10 до около 250 мг вышеуказанного антитела.

Терапевтическое применение антител

Антитела по изобретению применимы, среди прочего, для лечения, предупреждения и/или уменьшения интенсивности любого заболевания или расстройства, ассоциированного с или обусловленного активностью СО48 или поддающегося лечению путём блокирования взаимодействия между СО48 и рецептором СЭ48. Типичные заболевания и расстройства, которые можно лечить антителами против СО48 по настоящему изобретению, включают, например, астму, аллергию, атопический дерматит, конъюнктивит, воспалительное заболевание кишечника (например, язвенный колит), целиакию (глютеновую болезнь) и рак (например, рак крови (гемобластоз), рак мозга, рак молочной железы, колоректальный рак, рак головы и шеи, рак печени, рак лёгкого, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак кожи, рак желудка и т.д.). Антитела против СО48 по настоящему изобретению можно вводить пациентам также для лечения псориаза. Другие заболевания и расстройства, которые можно лечить антителами против СО48 по настоящему изобретению, включают, например, системную красную волчанку (8ΕΕ, СКВ), ревматоидный артрит, гомологичную болезнь (ΟνΗΌ) (например, хроническую ΟνΗΌ или острую ΟνΗΌ) и отторжение трансплантата.

Комбинированная терапия

Настоящее изобретение предусматривает терапевтические схемы, которые включают введение антитела против СЭ48 по настоящему изобретению в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным терапевтически активным компонентом. Неограничивающие примеры таких дополнительных терапевтически активных компонентов включают другие антагонисты СЭ48 (например, второе антитело против СЭ48 или низкомолекулярный ингибитор СО48), ингибиторы цитокинов (например, ингибитор интерлейкина-1 (Ю-1) (такой как рилонацепт или анакинра, низкомолекулярный антагонист 1Ь-1 или антитело против 1Ь-1); ингибитор Ιί-18 (такой как низкомолекулярный антагонист Ю-18 или антитело против 1Ь-18); ингибитор 1Ь-4 (такой как низкомолекулярный антагонист 1Ь-4, антитело против 1Ь-4 или антитело против рецептора Ю-4); ингибитор 1Ь-б (такой как низкомолекулярный антагонист 1Ь-б, антитело против 1Ь-б или антитело против 1Ь-б рецептора); аспирин; НСПВС (NδАI^к); стероиды (например, преднизон, метотрексат и т.д.); низкодозовый циклоспорин А; ингибиторы фактора некроза опухолей (ΤΝΡ) или ΤΝΡ рецептора (например, низкомолекулярный антагонист ΤΝΡ или ΤΝΡΡ или антитело против ΤΝΡ или ΤΝΡΡ); ингибиторы синтеза мочевой кислоты (например, аллопуринол); промоторы выделения мочевой кислоты (например, пробенецид, сульфинпиразон, бензбромарон и т.д.); другие ингиби- 14 030437

торы воспаления (например, ингибиторы каспазы- 1, р38, ΙΚΚ1/2, СТЬА- 4Ι§, и т.д.); и/или кортикостероиды. Другой(-ие) терапевтически активный(-е) компонент(-ы) можно вводить до введения, одновременно с введением или после введения антитела против СЭ48 по настоящему изобретению (для целей настоящего изобретения такие схемы введения рассматриваются как введение антитела против СО48 "в комбинации с " терапевтически активным компонентом по изобретению).

Применение антител в диагностике

Антитела против СО48 по настоящему изобретению могут также применяться для обнаружения (детекции) и/или количественного определения СЭ48 в образце, например, с целью диагностики. Например, антитело против СО48 или его фрагмент можно применять для диагностики состояния или заболевания, характеризующегося аберрантной экспрессией (например, сверхэкспрессией, пониженной экспрессией или отсутствием экспрессии и т.д.) СО48. Примеры методов диагностики для СЭ48 могут включать, например, контактирование образца, полученного от пациента, с антителом против С.О48 по изобретению, причём антитело против С.О48 мечено детектируемой меткой или репортёрной группой. Или же, немеченое антитело против С.О48 можно применять для диагностики в комбинации со вторичным антителом, которое само по себе является меченным детектируемой меткой. Детектируемая метка или репортёрная группа может представлять собой радиоизотоп, , такой как Н, С, Р, 8 или I; флуоресцентную или хемилюминесцентную молекулу, такую как молекула флуоресцеина или родамина; или фермент, такой как щелочная фосфатаза, бета-галактозидаза, пероксидаза хрена или люцифераза. Конкретные примеры анализов, которые можно применять для обнаружения или количественного определения СЭ48 в образце, включают твердофазный иммуноферментный анализ (ЕЫ8А, ИФА), радиоиммуноанализ (К1А, РИА) и сортинг флуоресцентно-активированных клеток (РАС8).

Образцы, которые можно использовать в диагностике С.О48 по настоящему изобретению, включают любой образец ткани или жидкости, который можно получить от пациента, здорового или больного, содержащий детектируемые количества белка СО48, или его фрагмента. Как правило, уровни СЭ48 в конкретном образце, полученном от здорового пациента (например, пациента, не страдающего заболеванием или состоянием, ассоциированным с аномальными уровнями или аномальной активностью СО48), определяют количественно с целью сначала установить базовый, или стандартный, уровень СЭ48. Этот базовый уровень СЭ48 можно затем сравнить с уровнями СЭ48 в образцах, полученных от индивидуумов с подозрением на заболевание или состояние, связанное с СЭ48.

Примеры

Нижеприведённые примеры предлагаются с целью предоставить рядовым специалистам в данной области техники полное раскрытие и описание получения и применения композиций и методов по изобретению, и не претендуют на ограничение объёма того, что заявители рассматривают как своё изобретение. Попытки подтвердить точность применяемых величин (например, количеств, температуры и т.д.) предпринимались, но следует принимать во внимание некоторые экспериментальные ошибки и девиации. Если не указано иначе, части означают весовые части, молекулярная масса означает среднюю молекулярную массу, температура даётся в градусах Цельсия, а давление равно или близко к атмосферному.

Пример 1. Получение человеческих антител к человеческому СЭ48

Иммуноген, содержащий эктодомен человеческого С.О48 (аминокислоты 27-220 последовательности 8ЕЦ ГО N0:384), вводился непосредственно с адъювантом для стимуляции иммунного ответа, мышам νΕΡΟΕΙΜΜυΝΕ®, содержащим ДНК, кодирующую вариабельные области тяжёлой и каппа лёгкой цепей иммуноглобулина. За иммунным ответом антитела следили с помощью СО48-специфического иммуноанализа. Когда достигался нужный иммунный ответ, спленоциты (селезёночные макрофаги) собирали и проводили слияние с миеломными клетками мыши с целью сохранить их выживаемость и образовать гибридомные клеточные линии. Гибридомные клеточные линии подвергали скринингу и отбору с целью идентифицировать клеточные линии, которые продуцируют СГО48-специфические антитела. С помощью этого метода было получено несколько химерных антител против СГО48 (т.е. антител, содержащих человеческие вариабельные домены и мышиные константные домены); типичные антитела, полученные таким способом, обозначены так, как представлено ниже: Η2Μ1707Ν, Η2Μ1709Ν, Η2Μ1710Ν, Η2Μ1712Ν, Η2Μ1713Ν, Η2Μ1763Ν, Η2Μ1811Ν, Η3Μ1766Ν, Η2Μ1798Ν и Н2М171Ш.

Антитела против СГО48 выделяли непосредственно из антиген-положительных В-клеток без слияния с миеломными клетками, как описано в заявке на патент США υ.8. 2007/0280945А1. Этим методом было получено несколько полностью человеческих антител против СГО48 (т.е. антител, имеющих человеческие вариабельные домены и человеческие константные домены); типичные антитела, полученные таким способом, обозначены так, как представлено ниже: Η4Η1769№, Н4Н1769Ра, Η4Η1769ΝΒ, Н4Н1769РБ, Η4Η1770Ν, Н4Н1770Р, Η4Η1771Ν, Н4Н1771Р, Η4Η1772Ν, Н4Н1772Р, Η4Η1774Ν, Н4Н1774Р, Η4Η1775Ν, Н4Н1775Р, Η4Η1778Ν, Н4Н1778Р, Η4Η1779Ν, Н4Н1779Р, Η4Η1781Ν, Н4Н1781Р, Н4Н1789№к Н4Н1789Ра, Η4Η1789ΝΒ, Н4Н1789РБ.

Биологические свойства типичных антител против €048, полученных в соответствии с методами, приведёнными в примерах, подробно описаны в примерах, представленных ниже.

Пример 2. Аминокислотные последовательности вариабельных областей тяжёлой и лёгкой цепи

В табл. 1 представлены пары последовательностей вариабельных областей тяжёлой и лёгкой цепи

- 15 030437

выбранных антител против СИ48 и обозначения соответствующих им антител. Обозначения Ν, Р и О относятся к антителам, имеющим тяжёлые и лёгкие цепи с идентичными последовательностями СИК, но с вариантами последовательностей вне СИК последовательностей (т.е. в каркасных областях). Таким образом, варианты Ν, Р и О конкретного антитела имеют идентичные СИК последовательности в вариабельных областях тяжёлой и лёгкой цепи, но отличаются друг от друга своими каркасными областями. Приставки Н2М, Н3М, Н4Н в обозначении антител, применяемые в данной заявке, указывают на конкретную Тс область антитела. Например, "Н2М" антитело имеет 1дО2 Тс мыши, тогда как "Н4Н" антитело имеет 1дО4 Тс человека. Как понятно рядовому специалисту в данной области техники, Н2М или Н3М антитело можно превратить в Н4Н антитело и наоборот, но вариабельные домены (включая СИК) остаются теми же самыми.

Таблица 1

	8ЕО Ιϋ ΝΟ:
Обозначение антитела	НСУК	НСОК1	НСОК2	нсокз	ЬСУК	ьсыи	ЬСОК2	ьсокз
Η2Μ1707Ν	2	4	6	8	10	12	14	16
Η2Μ1709Ν	18	20	22	24	26	28	30	32
Η2Μ1710Ν	34	36	38	40	42	44	46	48
Η2Μ1712Ν	50	52	54	56	58	60	62	64
Η2Μ1713Ν	66	68	70	72	74	76	78	80
Η2Μ1763Ν	82	84	86	88	90	92	94	96
Η2Μ1764Ν	98	100	102	104	106	108	110	112
Η2Μ1811Ν	114	116	118	120	122	124	126	128
Η3Μ1766Ν	130	132	134	136	138	140	142	144
Η4Η1769Ν3	162	164	166	168	170	172	174	176
Н4Н1769Ра	178	164	166	168	180	172	174	176
Н4Н17691ЧЬ	162	164	166	168	182	184	186	188
Н4Н1769РЬ	178	164	166	168	190	184	186	188
Η4Η1770Ν	192	194	196	198	200	202	204	206
Н4Н1770Р	208	194	196	198	210	202	204	206
Η4Η1771Ν	212	214	216	218	220	222	224	226
Н4Н1771Р	228	214	216	218	230	222	224	226
Η4Η1772Ν	232	234	236	238	240	242	244	246
Н4Н1772Р	248	234	236	238	250	242	244	246
Η4Η1774Ν	252	254	256	258	260	262	264	266
Н4Н1774Р	268	254	256	258	270	262	264	266
Η4Η1775Ν	272	274	276	278	280	282	284	286
Н4Н1775Р	288	274	276	278	290	282	284	286
Η4Η1778Ν	292	294	296	298	300	302	304	306
Н4Н1778Р	308	294	296	298	310	302	304	306
Η4Η1779Ν	312	314	316	318	320	322	324	326
Н4Н1779Р	328	314	316	318	330	322	324	326
Η4Η1781Ν	332	334	336	338	340	342	344	346
Н4Н1781Р	348	334	336	338	350	342	344	346
Η4Η1789Ν3	352	354	356	358	360	362	364	366
Н4Н1789Ра	368	354	356	358	370	362	364	366
Н4Н17891ЧЬ	352	354	356	358	372	374	376	378
Н4Н1789РЬ	368	354	356	358	380	374	376	378

Пример 3. Связывание антитела с растворимым СИ48, определяемое методом поверхностного плазменного резонанса

Аффинность и кинетические константы связывания человеческих моноклональных антител против ЙСИ48 с человеческим и обезьяньим растворимым рекомбинантным СИ48 определяли методом поверхностного плазмонного резонанса как при 25°С, так и при 37°С и как для мономерной, так и для димерной конфигурации СИ48. Измерения проводили на приборе Т100-2 В1АСОКЕ™ (Ыасоге ЫГе 8с1епсез άΐνΐзюп о£ ОЕ НеаЙНсаге, Р1зса1а\\'ау, N1). Антитела (либо с мышиным Тс [обозначенные "Н2М" или "Н3М"], либо с человеческим 1дО4 Тс [обозначенные "Н4Н"]) улавливали на поверхности чипа с антителом против Тс, а СИ48 омывал поверхность либо в мономерном формате (растворимый СИ48, экспрессированный с С-концевым шус-шус-гексагистидиновым хвостом [ттН]), либо в димерном формате (растворимый СИ48, экспрессированный с С-концевым Тс слиянием [тТс]). Обозначения аминокислотных последовательностей реагентов, применяемых в этом примере, представлены в табл. 2.

- 16 030437

Таблица 2

Конструкция	δΕρίϋΝΟ:
Мономерный человеческий СИ48ттН	385
Мономерный обезьяний СИ48ттН	386
Димерный человеческий СО48-тРс	387
Димерный человеческий СО48-тРс	388

Растворимый СЭ48 подавали в проточную ячейку в виде отдельных инжекций в различных концентрациях и определяли кинетические константы скорости ассоциации (к_а) и диссоциации (к_й) подгонкой к данным по кинетике связывания, используя программное обеспечение Ыасоге. Равновесные константы диссоциации и полупериод диссоциации рассчитывали из констант скорости: К_п = к_й/к_а; ΐ_1/2 = (1п2/к_й) (ед. изм.: к_а = М^-1*с^-1; кй = с^-1; К_о = М; ТХ₂ = мин) (табл. 3-6).

Таблица 3 (25°С)

	Мономерный человеческий СО48	Димерный человеческий СБ48
Антитело	ка	кб	К_о	Т¹/₂	ка	кб	К_о	Т¹/₂
Η2Μ1707Ν	1.31Е+05	6.42Е04	4.92Е09	18	7.14Е+05	6.59Е-05	9.23Е-11	175
Η4Η1707Ν	1.68Е+05	6.01Е04	3.57Е09	19	3.85Е+05	2.83Е-05	7.36Е-11	408
Η2Μ1709Ν	2.92Е+05	5.80Е03	1.98Е08	2	9.28Е+05	2.88Е-04	3.11Е-10	40
Η2Μ1710Ν	3.73Е+04	1.46Е03	3.91Е08	8	1.12Е+05	9.38Е05	8.41 Е10	123
Η2Μ1711Ν	6.92Е+05	1.13Е03	1.64Е09	10	1.64Е+06	1.02Е04	6.23Е11	113
Η2Μ1712Ν	5.24Е+05	6.1 ЭЕ03	1.18Е08	2	1.84Е+06	5.30Е04	2.88Е10	22
Η2Μ1713Ν	1.61Е+05	2.17Е04	1.35Е09	53	8.26Е+05	1.11Е05	1.34Е11	1043
Η4Η1713Ν	1.94Е+05	1.74Е04	8.93Е10	67	8.94Е+05	1.90Е05	2.12Е11	609
Η2Μ1763Ν	5.48Е+05	6.48Е03	1.18Е08	2	1.95Е+06	4.99Е04	2.56Е10	23
Η4Η1763Ν	7.69Е+05	6.31 Е03	8.20Е09	2	2.05Е+06	5.48Е05	2.68Е11	211
Η2Μ1764Ν	1.21Е+05	2.85Е03	2.35Е08	4	2.59Е+05	2.66Е04	1.03Е09	43
Η4Η1764Ν	1Ό5Ε+05	2.48Е03	2.36Е08	5	2.68Е+05	6.05Е05	2.26Е10	191
Η3Μ1766Ν	6.34Е+04	1.77Е04	2.79Е09	65	1.29Е+05	6.57Е05	5.10Е10	176
Н4Н1769Р	1.93Е+05	7.79Е05	4.03Е10	148	9.69Е+05	1.08Е05	ГИЕ11	1071
Н4Н1770Р	5.89Е+05	1.53Е04	2.59Е10	76	1.71Е+06	5.54Е06	3.25Е12	2084
Н4Н1771Р	8Ό5Ε+05	2.09Е04	2.60Е10	55	2.07Е+06	1.52Е05	7.36Е12	759
Н4Н1772Р	1.27Е+05	1.76Е04	1.38Е09	66	3.76Е+05	1.29Е05	3.44Е11	894
Н4Н1774Р	1Ό4Ε+05	4.72Е05	4.54Е10	245	3.11Е+05	4.65Е06	1.49Е11	2486
Н4Н1775Р	1.45Е+05	4.92Е05	3.40Е10	235	7.34Е+05	1.31Е05	1.79Е11	881
Н4Н1778Р	9.86Е+04	4.69Е05	4.76Е10	246	2.94Е+05	8.95Е06	3.04Е11	1291
Н4Н1779Р	1.58Е+05	3.90Е05	2.46Е10	296	7.74Е+05	1.17Е05	1.51Е11	990
Н4Н1781Р	1.70Е+05	3.30Е05	1.94Е10	351	8.54Е+05	1.23Е05	1.44Е11	940
Н4Н1789Ра	1.43Е+05	4.58Е04	3.20Е09	25	3.82Е+05	3.66Е05	9.58Е11	315
Η2Μ1798Ν	9.14Е+05	2.47Е03	2.70Е09	5	2.05Е+06	2.71Е04	1.32Е10	43
Η2Μ1811Ν	5Ό0Ε+04	8.49Е04	1.70Е08	14	1.44Е+05	2.30Е04	1.60Е09	50

- 17 030437

Таблица 4 (37°С)

Антитело	Мономерный человеческий СБ48	Димерный человеческий СО48
ка	кб	К_о	Т¹/₂	ка	кс1	К_о	Т¹/₂
Η2Μ1707Ν	2.14Е+05	3.14Е03	1.47Е08	4	9.20Е+05	2.27Е04	2.47Е10	51
Η4Η1707Ν	2.84Е+05	2.73Е03	9.63Е09	4	9.81Е+05	6.42Е05	6.54Е11	180
Η2Μ1709Ν	1.14Е+06	4.00Е02	3.51Е08	0	1.52Е+06	3.77Е04	2.48Е10	31
Η2Μ1710Ν	3.40Е+04	5.20Е03	1.53Е07	2	4.81Е+05	4.26Е04	8.85Е10	27
Η2Μ1711Ν	9.26Е+05	3.02Е03	3.26Е09	4	2.08Е+06	2.39Е04	1.15Е10	48
Η2Μ1712Ν	8.46Е+05	1.40Е02	1.66Е08	1	2.72Е+06	6.85Е04	2.52Е10	17
Η2Μ1713Ν	2.35Е+05	6.44Е04	2.74Е09	18	1.25Е+06	8.27Е05	6.63Е11	140
Η4Η1713Ν	2.86Е+05	6.36Е04	2.23Е09	18	1.26Е+06	4.53Е05	3.60Е11	255
Η2Μ1763Ν	1.49Е+06	2.01Е-	1.35Е-	1	3Ό2Ε+06	8.83Е-	2.93Е-	13
		02	08			04	10
Η4Η1763Ν	1.33Е+06	1.69Е02	1.27Е08	1	2.35Е+06	6.28Е05	2.67Е11	184
Η2Μ1764Ν	1.69Е+05	1.60Е02	9.47Е08	1	7.02Е+05	4.12Е04	5.86Е10	28
Η4Η1764Ν	1.05Е+05	1.14Е02	1.09Е07	1	3.01Е+05	9.94Е05	3.30Е10	116
Η3Μ1766Ν	1.61Е+05	6.20Е04	3.84Е09	19	9.49Е+05	3.24Е04	3.42Е10	36
Н4Н1769Р	2.25Е+05	3.14Е04	1.40Е09	37	1.21Е+06	3.63Е05	3.01Е11	319
Н4Н1770Р	8.04Е+05	5.33Е04	6.62Е10	22	2.23Е+06	3.08Е05	1.38Е11	375
Н4Н1771Р	1.12Е+06	5.47Е04	4.88Е10	21	2.89Е+06	4.81Е05	1.66Е11	240
Н4Н1772Р	1.72Е+05	1.02Е03	5.94Е09	11	9.20Е+05	5.98Е05	6.50Е11	193
Н4Н1774Р	1.30Е+05	1.07Е04	8.24Е10	108	3.63Е+05	1.60Е05	4.39Е11	724
Н4Н1775Р	1.77Е+05	9.48Е05	5.36Е10	122	5.22Е+05	2.27Е05	4.34Е11	509
Н4Н1778Р	1.35Е+05	1.13Е04	8.37Е10	102	4.73Е+05	3.53Е05	7.46Е11	327
Н4Н1779Р	2.07Е+05	1.02Е04	4.95Е10	113	7.72Е+05	4.59Е05	5.94Е11	252
Н4Н1781Р	2.26Е+05	1.01Е04	4.48Е10	114	8.12Е+05	4.89Е05	6.03Е11	236
Н4Н1789Ра	1.99Е+05	1.79Е03	8.97Е09	6	2.21 Е+05	3.57Е05	1.61Е10	324
Η2Μ1798Ν	1.41Е+06	8.35Е03	5.94Е09	1	2.91Е+06	2.17Е04	7.47Е11	53
Η2Μ1811Ν	1.30Е+05	2.95Е03	2.27Е08	4	2.65Е+05	2.56Е04	9.66Е10	45

18 030437

Таблица 5 (25°С)

	Мономерный СБ48 обезьяны	Димерный СБ48 обезьяны
Антитело	ка	кб	К_о	Т%	ка	кй	К_о	Т¹/₂
Η4Η1707Ν	2.89Е+05	3.62Е04	1.25Е09	32	8.05Е+05	1.ГОЕ03	1.48Е09	10
Η4Η1713Ν	3.15Е+05	2.65Е04	8.43Е10	44	8.61 Е+05	2.42Е04	2.81Е10	48
Η4Η1763Ν	5.27Е+05	1.24Е03	2.34Е09	9	1.33Е+06	6.88Е05	5.19Е11	168
Η4Η1764Ν	8.77Е+04	2.06Е04	2.34Е09	56	2.51Е+05	1.32Е04	5.25Е10	88
Н4Н1769Р	5.88Е+05	3.93Е04	6.69Е10	29	4.82Е+05	2.56Е05	5.31Е11	451
Н4Н1770Р	7.20Е+05	2.15Е04	2.98Е10	54	8.58Е+05	1.ГОЕ04	1.31Е10	103
Н4Н1771Р	1.05Е+06	4.77Е04	4.53Е10	24	9.39Е+05	5.51Е05	5.87Е11	210
Н4Н1772Р	4.61 Е+05	5.08Е04	1.ГОЕ09	23	5.19Е+05	5.02Е05	9.68Е11	230
Н4Н1774Р	2.63Е+05	7.63Е05	2.89Е10	151	3.95Е+05	2.07Е05	5.25Е11	558
Н4Н1775Р	2.91Е+05	4.07Е05	1.40Е10	284	4.88Е+05	6.60Е06	1.35Е11	1750
Н4Н1778Р	2.76Е+05	8.98Е05	3.25Е10	129	3.84Е+05	1.77Е05	4.60Е11	654
Н4Н1779Р	3.01 Е+05	1.13Е04	3.75Е10	102	5.22Е+05	3.17Е05	6.06Е11	364
Н4Н1781Р	2.98Е+05	7.80Е05	2.62Е10	148	5.99Е+05	2.ГОЕ05	3.56Е11	542
Н4Н1789Ра	4.16Е+05	1.38Е03	3.31Е09	8	6.51 Е+05	2.76Е04	4.23Е10	42

Таблица 6 (37°С)

Антитело	мономерный СБ48 обезьяны	димерный СБ48 обезьяны
ка	ка	К_о	Т¹/₂	ка	ка	Ко	Т¹/₂
	3.27Е+05	1.22Е03	3.72Е09	9	1.64Е+06	5.24Е-03	3.20Е-09	2
Η4Η1707Ν	3.20Е+05	30	1.72Е+06	5.16Е-04	3.00Е-10	22
3.82Е04	1.ГОЕ09
Η4Η1713Ν
	5.34Е+05	1.33Е03	2.49Е09	9	2.42Е+06	1.14Е-04	4.70Е-11	101
Η4Η1763Ν
	2.13Е+05	6.20Е04	2.91 Е09	19	1.92Е+05	1.42Е-03	7.40Е-09	8
Η4Η1764Ν
	2.80Е+05	1.ГОЕ03	3.92Е09	11	6.97Е+05	9.80Е-05	1.41Е-10	118
Н4Н1769Р
	3.96Е+05	1.74Е04	4.40Е10	66	1.53Е+06	1.39Е-04	9.11Е-11	83
Н4Н1770Р
	6.57Е+05	8.77Е04	1.34Е09	13	1.64Е+06	1.02Е-04	6.21Е-11	113
Н4Н1771Р
	3.20Е+05	1.45Е03	4.53Е09	8	7.72Е+05	7.31 Е-05	9.47Е-11	158
Н4Н1772Р
	1.97Е+05	2.67Е04	1.36Е09	43	5Ό8Ε+05	5.40Е-05	1.07Е-10	214
Н4Н1774Р
	2.60Е+05	1.29Е04	4.98Е10	90	6.69Е+05	3.97Е-05	5.93Е-11	291
Н4Н1775Р
	1.89Е+05	2.53Е04	1.34Е09	46	5.25Е+05	3.60Е-05	6.86Е-11	321
Н4Н1778Р
	2.77Е+05	2.89Е04	1.04Е09	40	7.21Е+05	5.98Е-05	8.29Е-11	193
Н4Н1779Р
	3.50Е+05	3.07Е04	8.75Е10	38	8.75Е+05	6.61 Е-05	7.55Е-11	175
Н4Н1781Р
	4.37Е+05	2.06Е03	4.71 Е09	6	9.90Е+05	7.68Е-04	7.76Е-10	15
Н4Н1789Ра

Как показано в табл. 3-6, типичные антитела, тестированные в данном примере, проявляли высокую аффинность связывания как с человеческим, так и с обезьяньим растворимым белком СЭ48. Когда бивалентный СЭ48 применяли в качестве аналита в жидкой фазе, наблюдалось заметное повышение аффинности связывания по сравнению с одновалентным СЭ48.

- 19 030437

Пример 4. Эпитопное картирование связывания Н4Н1789Ра с СГО48 с помощью обмена Η/Ό

Проводили эксперименты по определению аминокислотных остатков СЭ48, с которыми взаимодействует Н4Н1789Ра. Для этой цели проводили эпитопное картирование с Η/Ό обменом. Общее описание метода Η/Ώ обмена представлено, например, в Ейппд (1999) Апа1уйса1 Вюсйет18йу 267(2): 252-259 и Епдеп апб §тйй (2001) Апа1. Сйет. 73: 256А-265А.

С целью картирования эпитопа С.ГО48 для связывания Н4Н1789Ра с помощью Η/Ώ обмена использовали слитую конструкцию СЭ48-тус-тус-Й18 ("йСЭ48-ттИ"; §Еф ГО N0:391). йСЭ48-ттИ сначала дегликозилировали с использованием РNОаδе Р (ПНГ-азы Р) Епд1апб ВюЬайв) в естественных условиях. Затем Н4Н1789Ра связывали ковалентной связью с антителом к человеческому 1дО, иммобилизованному на гранулах агарозы (§1дта), с помощью кросслинкера В§³ (Тйегто §аепййс).

В эксперименте 'ассоциация-раствор/диссоциация-гранулы' (обмен-ассоциация в растворе с последующим обменом-диссоциацией в гранулах) лиганд (дегликозилированный йСЭ48-ттИ) дейтерировали в течение 5 или 10 мин в буфере РВ§, приготовленном с Э₂0, а затем связывали с Н4Н1789Ра гранулами при инкубации в течение 2 мин. Гранулы, связанные с СЭ48, промывали РВ§ водным буфером (приготовленным с Н₂О) и инкубировали половину времени обмена-ассоциации). После диссоциации связанный СГО48 элюировали с гранул охлаждённым льдом раствором ТФК (ТРА) с низким рН. Далее элюированный СГО48 расщепляли иммобилизованным пепсином (Тйегто 8аеиййс) в течение 5 мин. Полученные пептиды выделяли на хроматографической пипетке с наконечником ΖίρΤίρ® и сразу же анализировали на времяпролётном ионизационном лазерном масс- спектрометре с матрицей ийгаПеХЕете (МАЬΌΙ-Τ0Γ)-Τ0Ρ (М8).

В эксперименте 'ассоциация-в-гранулах/диссоциация-в-гранулах' (обмен с ассоциацией в гранулах с последующим обменом-диссоциацией в гранулах) СГО48 сначала связывали с гранулами Н4Н1789Ра, а затем инкубировали в течение 5 или 10 мин в Ό₂0 для обмена-ассоциации. Следующие стадии (обмендиссоциация, расщепление пепсином и М§ анализ) проводили как описано в методике 'ассоциация в растворе/диссоциация в гранулах'. Центроидные значения всех детектируемых пептидов рассчитывали и сравнивали для этих двух наборов соединений в экспериментах.

Результаты представлены в табл. 7а, в которой приводится количественное сравнение центроидных отношений массы-к-заряду для всех детектированных пептидов, идентифицированных методом жидкостной хроматографии-матрично-активированной лазерной десорбции/ионизации (ЕС-МАЙЭ1) М§ после Η/Ώ обмена и расщепления пепсином. Хотя для большинства полученных в результате расщепления пепсином пептидов наблюдались сходные центроидные отношения массы к заряду как в экспериментах ассоциация-в-растворе/диссоциация-в-гранулах, так и в экспериментах ассоциация-вгранулах/диссоциация-в-гранулах, три различных полученных при расщеплении пепсином пептида, соответствующих остаткам 60-76 последовательности §Еф ГО N0: 384, и семь пептидов, соответствующих остаткам 107-125 последовательности §Еф ГО N0: 384, стабильно показывали более высокие центроидные значения (т.е. повышенное удерживание дейтерия) в эксперименте 'ассоциация (в таблицах-асс.) в растворе/диссоциация (в таблицах-дисс.) в гранулах'. В настоящем примере положительная разница (А) по меньшей мере 0.20 является показателем аминокислот, защищенных связыванием с антителом. Такие остатки в таблице 7а показаны жирным шрифтом и звёздочкой (*).

- 20 030437

Таблица 7а. Связывание Н4Н1789Ра с йСЭ48-шшИ

	5 мин асе.-	/ 2.5 мин дисс.-обмен	10 мин асе.- / 5 мин дисс.-обмен
Остатки (8ЕО П) N0:384)	Асе. в растворе /Дисс в гранулах	Асе. в гранулах /Дисс. в гранулах	Δ	Асе. в растворе /Дисс в гранулах	Асе. в гранулах /Дисс. в гранулах	Δ
27-33	804.97	804.95	0.03	804.93	804.98	-0.05
32-50	2001.88	2001.78	0.11	2001.68	2001.77	-0.09
45-59	1856.18	1856.19	-0.01	1856.37	1856.32	0.04
53-59	986.77	986.75	0.02	986.26	986.15	0.12
60 - 68*	1143.72	1143.33	0.39	1143.78	1143.41	0.37
60 - 76*	2195.08	2194.74	0.34	2195.13	2194.82	0.31
63 - 76*	1783.45	1783.24	0.21	1783.51	1783.26	0.25
69-76	1070.35	1070.29	0.06	1070.30	1070.29	0.01
77-94	2036.78	2036.65	0.13	2036.73	2036.87	-0.13
95-106	1413.74	1413.70	0.03	1413.64	1413.65	-0.01
95-107	1576.79	1576.86	-0.07	1576.83	1576.84	-0.02
107-120*	1711.01	1710.73	0.28	1710.97	1710.73	0.24
107-125*	2379.65	2379.19	0.47	2379.64	2379.33	0.31
108-120*	1547.48	1547.04	0.44	1547.38	1547.12	0.26
108-125*	2216.50	2216.02	0.48	2216.54	2216.15	0.39
110-120*	1303.49	1303.23	0.26	1303.46	1303.24	0.22
110-121*	1489.25	1488.79	0.46	1489.22	1488.89	0.34
110-125*	1972.12	1971.70	0.42	1972.10	1971.77	0.33
161-175	1902.09	1902.05	0.04	1902.07	1902.05	0.02
161-178	2257.67	2257.70	-0.02	2257.70	2257.92	-0.22
161-181	2557.23	2557.13	0.10	2557.09	2557.35	-0.27
163-175	1688.45	1688.40	0.05	1688.31	1688.29	0.01
163-181	2343.05	2343.03	0.02	2342.94	2343.22	-0.28
166-181	1893.07	1892.97	0.10	1892.89	1893.21	-0.33
168-181	1672.12	1672.13	-0.02	1672.14	1672.21	-0.07
225 - 236	1318.53	1318.53	0.01	1318.51	1318.63	0.12
225 - 248	2828.26	2828.14	0.12	2828.09	2828.30	-0.21
228 - 248	2498.76	2498.69	0.07	2498.71	2498.83	-0.12
237 - 248	1528.63	1528.56	0.07	1528.49	1528.58	-0.08

Результаты И/Ό обмена, приведённые в табл. 7а, показывают, что две области (соответствующие аминокислотам 60-76 и 107-125 последовательности δΕ^ ГО N0:384) защищены от протонного обменадиссоциации с помощью связывания Н4Н1789Ра с этими специфическими эпитопами на СЭ48 после обмена-диссоциации. Так как у пептидов, соответствующих остаткам 69-76, не наблюдается заметной разницы масс, то область ^концевого эпитопа можно уменьшить до остатков 60-68 последовательности δΕ^ ГО N0: 384. Следовательно, два сегмента (соответствующих аминокислотам 60-76 и 107-125 последовательности δΕ^ ГО N0: 384) на СЭ48 определяются методом И/Ό обмена как эпитоп прерывистого типа для связывания антитела Н4Н1789Ра с растворимым человеческим белком СЭ48. Эти области взаимодействия антитела локализованы в 1д Домене 1 белка СЭ48 и схематически показаны на фиг. 1.

Для подтверждения обоснованности и точности вышеуказанного эпитопного картирования проводили дополнительные эксперименты с применением контрольного антитела, содержащего определённый предварительно эпитоп. В частности, проводили эксперименты по обмену ИГО с применением описанной выше конструкции СЭ48-шшИ (δΕ^ ГО N0: 391) и анти-Мус антитела 9Е10. Эпитоп Мус соответствует аминокислотам 195-216 последовательности δΕ^ ГО N0:391.

Все методы в этих подтверждающих экспериментах были такими же, как в описанных выше экспериментах с Н4Н1789Ра, за исключением того, что в качестве тестируемого антитела использовали антитело против Мус 9Е10. Результаты, полученные в подтверждающих экспериментах с антителом против Мус, представлены в табл. 7Ь. (Следует отметить, что нумерация остатков в первой графе в табл. 7Ь соответствует фактической нумерации аминокислот в конструкции йСЭ48-шшИ [δΕ^ ГО N0: 391], тогда как нумерация остатков в первой графе табл. 7а скорректирована таким образом, чтобы соответствовать номеру аминокислоты в полипептиде полноразмерного человеческого СЭ48 [δΕ^ ГО N0: 384]). Как и в предыдущем случае, положительная разница (А) по меньшей мере 0.20 является показателем аминокислот, защищенных связыванием с антителом. Такие остатки показаны жирным шрифтом и звёздочкой (*) в табл. 7Ь.

- 21 030437

Таблица 7Ь. Связывание 9Е10 с ЬСП48-шшН

	5 мин асе.- / 2.5 мин дисс.-обмен	10 мин асе.- / 5 мин дисс.-обмен
Остатки (8Е0 ГО N0:391)	Асе. в растворе /Дисс в гранулах	Асе. в гранулах /Дисс. в гранулах	Δ	Асе. в растворе /Дисс в гранулах	Асе. в гранулах /Дисс. в гранулах	Δ
1-7	804.93	804.91	0.02	804.99	804.95	0.04
19-33	1856.16	1856.24	-0.09	***	***
34-50	2194.74	2194.68	0.06	2194.75	2194.64	0.10
37-50	1783.23	1783.21	0.02	1783.27	1783.19	0.08
43-50	1070.04	1070.07	-0.03	1070.09	1070.08	0.01
51-68	2036.51	2036.52	0.00	2036.53	2036.50	0.02
69-80	1413.96	1413.89	0.07	1413.78	1413.80	-0.02
69-81	1576.94	1577.07	-0.13	1577.05	1577.09	-0.04
81-94	1710.59	1710.62	-0.02	1710.59	1710.57	0.03
81-99	2379.16	2379.23	-0.07	2379.26	2379.24	0.02
82-94	1546.91	1546.84	0.07	1546.90	1546.84	0.06
82-99	2215.89	2215.89	0.00	2215.88	2215.87	0.00
84-94	1303.32	1303.34	-0.02	1303.29	1303.20	0.09
84-99	1972.13	1972.14	-0.02	1972.21	1972.11	0.10
135-155	2556.75	2556.64	0.12	2556.71	2556.66	0.05
137-145	1186.27	1186.33	-0.06	1186.27	1186.29	-0.02
137-155	2342.71	2342.93	-0.22	2342.99	2342.94	0.05
140-155	1891.85	1891.90	-0.05	1891.90	1891.92	-0.02
199-210	1318.80	1318.57	0.22	1318.59	1318.61	-0.02
199-222*	2830.27	2828.66	1.61	2829.99	2828.63	1.36
202-222*	2500.60	2499.30	1.30	2500.31	2499.28	1.03
211-220*	1255.00	1254.38	0.62	1254.86	1254.38	0.48
211-222*	1529.30	1528.69	0.60	1529.21	1528.76	0.45

Как и предполагалось, эпитоп, узнаваемый антителом 9Е10, идентифицируется как область, определяемая аминокислотами 199-222 последовательности 8ЕР ΙΌ N0: 391. Таким образом, результаты, представленные в табл. 7Ь, подтверждают, что метод Н/Ό обмена, применявшийся в данном примере, можно использовать для надёжной и точной идентификации аминокислотных остатков в полипептидном антигене, с которым взаимодействует антитело.

Пример 5. Блокада антителом взаимодействия СЭ48-2В4, количественно определяемая методом ЕБ18Л

Способность человеческих моноклональных антител против СЭ48 блокировать связывание человеческого СЭ48 и СЭ48 обезьяны с когнатным человеческим лигандом, человеческим 2В4, количественно определяли конкурентным ИФА (ЕЫ8Л) в сэндвич варианте (табл. 8). Постоянные количества биотинилированного димерного человеческого белка СЭ48, экспрессированного в виде слияния с мышиным 1§О2а Рс ("Ью-ЪСП48-шРс" [8ЕР ΙΌ N0: 387]), или мономерого СЭ48 обезьяны, экспрессированного с хвостом (тэгом), состоящим из 2 тус и одного б-Ηΐδ эпитопов ("шГСП48-шшН" [8ЕР ΙΌ N0: 386]), по отдельности титровали различными количествами антител. Эти комплексы антитело-белок инкубировали (1 ч, 25°С) перед тем, как переносить их на микротитрационные планшеты, на которых иммобилизована димерная конструкция, экспрессирующая человеческий 2В4 рецептор, слитый либо с человеческим Ι§Θ1 (Б2В4-БРс [К&Э 8у§1еш§, 1пс., МтпеароБз, МН Са!. N0. 1039-2В]), либо с мышиным 1§О2а Рс (Б2В4-шРс [8ЕР ΙΌ N0: 389). Через 1 ч при 25°С лунки отмывали и связанный человеческий СЭ48 детектировали стрептавидином, конъюгированным с пероксидазой хрена (НКР), а обезьяний СЭ48 детектировали с применением конъюгированного с НКР поликлонального антитела против шус. Образцы ЕЫ8Л проявляли раствором ТМВ с протеканием колориметрической реакции и гасили серной кислотой, а затем считывали поглощение при 450 нм на планшет-ридере V^сΐо^ Х5. По этим данным строили сигмоидальные кривые доза-эффект с помощью программы Рпзш™. Вычисленную величину ГС₅₀, определяемую как концентрация антитела, необходимая, чтобы блокировать 50% связывания НСЭ48 или шГСЭ48 с 2В4, применяли в качестве показателя блокирующей активности. (Табл. 8 и 9, NВ = связывание не наблюдается)

- 22 030437

Таблица 8

Антитело	Ь2В4-ЬГс + Ью-ЬСО48-шГс 1С_5Й (М)	Ь2В4-ЬГс + шГСО48-ттН 1С₅₀ (М)
Η2Μ1707Ν	2.2Е-11	2.3Е-11
Η2Μ1709Ν	4.5Е-11	1.2Е-10
Η2Μ1710Ν	5.8Е-10	3.7Е-10
Η2Μ1711Ν	5.9Е-12	2.9Е-11
Η2Μ1712Ν	1.4Е-11	1.7Е-11
Η2Μ1713Ν	2.6Е-11	2.4Е-11
Η2Μ1763Ν	8.8Е-12	1.3Е-11
Η2Μ1764Ν	6.4Е-11	2.4Е-10
Η3Μ1766Ν	ΝΒ	ΝΒ
Η2Μ1798Ν	5.0Е-12	ΝΒ
Η2Μ1811Ν	4.9Е-10	2.2Е-10

Таблица 9

Антитело	Ь2В4-шГс + Ыо-ЬС048-шГс 1С₅₀ (М)	Ь2В4-шГс + шГСО48-ттН 1С₅₀ (М)
Η2Μ1707Ν	8.6Е-12	4.9Е-12
Η4Η1707Ν	2.2Е-11	4.5Е-11
Η2Μ1710Ν	4.9Е-10	2.6Е-10
Η2Μ1711Ν	4.1Е-12	7.7Е-13
Η2Μ1713Ν	2.2Е-11	2.5Е-12
Η4Η1713Ν	1.8Е-11	3.4Е-12
Η2Μ1763Ν	5.5Е-12	2.3Е-12
Η4Η1763Ν	7.4Е-12	7.2Е-12
Η2Μ1764Ν	2.9Е-11	6.2Е-11
Η4Η1764Ν	7.6Е-11	1.6Е-10
Н4Н1769Р	1.5Е-11	1.8Е-11
Н4Н1770Р	2.0Е-11	2.2Е-11
Н4Н1771Р	9.9Е-12	2.2Е-12
Н4Н1772Р	1.4Е-11	4.4Е-12
Н4Н1774Р	2.5Е-11	1.6Е-11
Н4Н1775Р	4.4Е-11	4.3Е-11
Н4Н1778Р	5.6Е-11	8.4Е-12
Н4Н1779Р	1.6Е-11	5.7Е-12
Н4Н1781Р	1.8Е-11	8.1Е-12
Н4Н1789Ра	5.3Е-11	3.8Е-11

Как показано в табл. 8 и 9, все тестированные антитела эффективно блокировали взаимодействие между СБ48 и 2В4.

Пример 6. Блокада антителом высвобождения ΙΤΝ-гамма в первичных человеческих РВМС Способность человеческих моноклональных антител против СБ48 по настоящему изобретению

блокировать активацию первичных человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) количественно определяли, анализируя высвобождение ΙΤΝγ. Человеческие РВМС выделяли из концентрата лейкоцитов от нескольких доноров (Беикорак, №а Уогк Βίοοά Сеп!ег, №а Уогк, ΝΥ) центрифугированием в градиенте Т1со11-Нурацие. Клетки ресуспендировали в среде ΚΡΜΙ-1640, дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой с конечной концентрацией 1 млн/мл, и засевали в 96-луночные микротитрационные планшеты (200 мкл на лунку). Клетки инкубировали с различными количествами СБ48-специфических антител (1 ч, 37°С), затем добавляли агонистические антитела против СБ3 (Β&Ό Рйагшшдеп, 8ап 1о§е, СаНГогша, Са!# 555336) и против СБ28 (Β&Ό Рйагшшдеп, 8ап 1о§е, СаНГогша, Са!# 555725) (оба в конечной концентрации 40 нг/мл), предварительно смешанные с белком С (в конечной концентрации 0.8 мг/мл, Мдша-ЛШпсй, δ!. Бош§, МО, Са!# Р4689). Через 48 ч при 37°С и 5% СО₂ супернатанты собирали и определяли концентрацию ΙΤΝγ, применяя набор ЕБ18Л (Β&Ό В1о§с1епсе§, 8ап 1о§е, СаИГогша, Са!# 555142) в соответствии с протоколом производителя. По этим данным строили сигмоидальные кривые доза-эффект с помощью программы Рпзш™. Вычисленную величину 1С₅₀, определяемую как концентрация антитела, необходимую, чтобы блокировать 50% максимального высвобождения ΙΤΝγ, применяли в качестве показателя блокирующей активности. (Табл. 10-12, ΝΒ = связывание не наблюдается; ΝΌ = не определяли; NС = данные не сходящиеся).

- 23 030437

Таблица 10

	1Сэо (М) для ингибирования высвобождения ΙΡΝ-гамма
Антитело	Донор 1	Донор 2	Донор 3	Донор 4	Донор 5
Η2Μ1707Ν	4.9Е-11	З.ОЕ-11	1.1Е-10	1.7Е-10	1.5Е-11
Η2Μ1709Ν	4.8Е-11	5.7Е-11	1.2Е-10	1.1Е-10	3.2Е-11
Η2Μ1763Ν	4.9Е-11	3.4Е-11	1.3Е-10	7.5Е-11	1.9Е-11
Η2Μ1798Ν	4.3Е-11	3.4Е-11	9.5Е-11	5.7Е-10	6.0Е-11
Η2Μ1764Ν	2.7Е-11	1.1Е-10	1.9Е-10	9.5Е-11	1.9Е-11
Η2Μ1711Ν	ΝΒ	ΝΒ	ΝΒ	ΝΒ	ΝΒ
Η2Μ1710Ν	7.8Е-10	1.9Е-10	1.1Е-06	1.5Е-09	2.7Е-10
Η2Μ1712Ν	2.0Е-11	2.8Е-11	7.2Е-11	4.8Е-11	1.1Е-11
Η3Μ1766Ν	ΝΒ	ΝΒ	ΝΒ	ΝΒ	ΝΒ
Η2Μ1811Ν	9.1Е-11	4.6Е-10	8.3Е-11	4.8Е-10	9.4Е-11
Η2Μ1713Ν	2.1Е-11	7.6Е-11	ΝΒ	1.1Е-10	1.1Е-11

Таблица 11

	1С50 (М) для ингибирования высвобождения ΙΡΝ-гамма
Антитело	Донор 6	Донор 7
Η2Μ1707Ν	9.3Е-12	1.9Е-11
Η2Μ1763Ν	2.6Е-11	1.8Е-11
Η2Μ1764Ν	1.0Е-10	Не тестировали
Η2Μ1710Ν	5.0Е-11	1.4Е-10
Η2Μ1713Ν	2.2Е-11	1.0Е-10
Н4Н1769Ра	ΝΒ	ΝΟ
Н4Н1770Р	ΝΒ	ΝΒ
Н4Н1771Р	ΝΒ	ΝΒ
Н4Н1772Р	2.0Е-12	2.2Е-11
Н4Н1774Р	2.5Е-11	9.5Е-12
Н4Н1775Р	ΝΟ	5.1Е-12
Н4Н1778Р	9.8Е-12	ΝΟ
Н4Н1779Р	1.7Е-12	1.5Е-11
Н4Н1781Р	3.6Е-11	1.5Е-11
Н4Н1789Ра	1.2Е-11	1.8Е-11

Таблица 12

	1С50 (М) для ингибирования высвобождения ΙΡΝ-гамма
Антитело	Донор 8	Донор 9	Донор 10	Донор 11
Η4Η1707Ν	ΝΟ	5.10Е-11	ΝΟ	ΝΟ
Η4Η1763Ν	8.60Е-12	9.ЗОЕ-12	1.00Е-12	3.40Е-12
Η4Η1764Ν	5.30Е-12	3.10Е-11	5.10Е-12	2.30Е-11
Н4Н1769Ра	ΝΒ	5.70Е-12	ΝΒ	1.90Е-11
Н4Н1771Р	ΝΟ	ΝΒ	ΝΒ	1.50Е-11
Н4Н1772Р	ΝΒ	ΝΟ	1.40Е-12	8.60Е-11
Н4Н1775Р	3.10Е-12	2.ЗОЕ-12	2.00Е-11	ΝΟ
Н4Н1789Ра	3.70Е-11	1.60Е-11	1.ЗОЕ-11	1.ЗОЕ-11

Как показано в табл. 10, 11 и 12, большинство тестированных антител эффективно блокировали высвобождение Не ΙΡΝγ в первичных человеческих РВМС.

Пример 7. Блокада высвобождения ΙΡΝ-гамма в анализах реакции первичных человеческих смешанных лейкоцитов (МБК)

Способность человеческих моноклональных антител против СБ48 блокировать активацию первичных человеческих клеток периферической крови (РВМС, МКПК) количественно определяли анализом реакции смешанных лейкоцитов (табл. 13 и 14). Человеческие РВМС выделяли из концентрата лейкоцитов (Ьеикорак, Ν'\ν Уогк В1оой Сеи1ег, Ν'\ν Уогк, ΝΥ) или из образцов цельной крови (полученных в соответствии с собственной программой сбора (образцов) градиентным центрифугированием на Рюо11Иурадие). Клетки ресуспендировали в среде КРМБ 1640, дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой до конечной концентрации 1 миллион/мл. Свежевыделенные клетки смешивали с предварительно облучёнными клетками от другого донора в соотношении 10:1 и засевали в 96-луночные микротитрационные планшеты (200 мкл на лунку). Сразу же после засевания клеток добавляли антитела до конечной концентрации от 0.01 до 10 нМ. Клетки инкубировали в течение 7 дней при 37°С и 5% СО₂. Супернатанты собирали и определяли концентрацию ΙΡΝγ, применяя набор ЕП8А (В&Б В1о5с1епсе5, 8ап 1о5е, СаНГогша, Са!# 555142) в соответствии с протоколом производителя. По этим данным строили сигмоидаль- 24 030437

ные кривые доза-эффект с помощью программы Рп§т™. Уровень блокады ΓΕΝγ определяли как разницу между максимальными и минимальными значениями на кривых, построенных по данным доза-эффект, нормализованным по максимальному значению ("блокада %" в табл. 13 и 14; "пк" = связывание не наблюдается; NС = данные не сходящиеся). Вычисленную величину 1С₅₀, определяемую как концентрация антитела, необходимую, чтобы блокировать 50% максимального высвобождения ΓΕΝγ, применяли в качестве показателя блокирующей активности (Табл. 14).

Таблица 13

Антитело	Блокирование в % для девяти индивидуальных доноров (О1-И9)
ϋ1	ϋ2	ϋ3	ϋ4	ϋ5	ϋ6	ϋ7	ϋ8	ϋ9
Н4Н1769Ра	пЬ	60	39	пЬ	43	60	51	40	пЬ
Н4Н1771Р	78	79	88	пЬ	47	50	36	пЬ	32
Н4Н1772Р	пЬ	65	62	39	62	63	58	25	59
Н4Н1775Р	42	77	87	37	70	72	69	22	60
Н4Н1789Ра	65	66	88	36	89	82	75	65	66
Η4Η1707Ν	66	87	78	20	62	77	62	42	60
Η4Η1763Ν	59	89	68	52	63	75	48	30	53
Η4Η1764Ν	69	46	80	пЬ	75	59	48	пЬ	пЬ
Огепаа®	пЬ	52	пЬ	пЬ	68	80	53	58	75
Αηΐθνίνθ®	54	53	76	66	78	40	79	пЬ	пЬ
Ье1а1асер1	81	77	74	90	82	83	80	64	66

Таблица 14

Донор	Η4Η1763Ν	Н4Н1789Ра
Блокирование в %	1С₅₀ (Μ)	Блокирование в %	1С₅₀ (Μ)
ϋ1	59	~1.0x10 ¹¹	65	-12 -1.4x10
02	89	ΝΟ	66	-12 -9.3x10
ОЗ	68	-12 -6.4x10	88	ΝΟ
ϋ4	52	-10 2.1x10	36	-10 2.3x10
ϋ5	63	-11 -2.7x10	89	~9.0χ10’^ΊΊ
ϋ6	75	-11 2.3x10	82	-1Ζ 2.8x10
ϋ7	48	ΝΟ	75	ΝΟ
ϋ8	30	-3.7x1 θ’⁹	65	2.9x1 θ’¹¹
ϋ9	53	-4.1x1 θ’⁹	66	-ιυ 1.8x10
ϋ10	79	-8.4x1 θ’¹¹	77	-11 -5.0x10
ϋ11	72	-11 7.3x10	80	-11 -9.2x10
ϋ12	79	-5.6x1 θ’¹¹	55	-ιυ -3.0x10
ϋ13	72	-11 9.2x10	64	~9.6χ10’^ΊΊ
ϋ14	90	6.3x1 θ’¹¹	83	-ιυ 2.0x10
ϋ15	82	-14 -5.9x10	95	-12 -2.7x10
ϋ16	90	-12 7.6x10	85	-11 -1.2x10

Как показано в табл. 13 и 14, все тестированные антитела эффективно блокировали высвобождение ΓΕΝγ в реакции первичных человеческих смешанных лимфоцитов (РВМС МкК). Способность кандидатных антител против СБ48 эффективно блокировать высвобождение ΓΕΝγ в первичных человеческих РБМС§, продемонстрированная в примерах 6 и 7, говорит о том, что эти антитела применимы для блокады неадекватных аутоиммунных реакций при таких заболеваниях и состояниях, как системная красная волчанка, ревматоидный артрит, гомологичная (вторичная) болезнь, воспалительное заболевание кишечника, аллергия, целиакия (глютеновая болезнь), псориаз, астма и т.п.

- 25 030437

Пример 8. Блокада антителом высвобождения человеческих цитокинов у мышей Кад2'^/'у_с'^/', реконструированных с использованием человеческих гемопоэтических стволовых клеток

Способность человеческих моноклональных антител против ΟΌ48 блокировать активацию человеческих иммунных клеток ΐη νΐνο определяли количественно на химерной животной модели, представляющей собой иммунодефицитных Кад2'^/'у_с'^/' мышей, клетки которых реконструированы с использованием человеческих гемопоэтических стволовых клеток. Животных реконструировали с использованием человеческих стволовых клеток вскоре после рождения и реконструкцию подтверждали проточной цитометрией. Полностью реконструированным животным (в возрасте 12-16 недель) вводили в виде внутрибрюшинной инъекции 5 мг/кг СБ48-специфических антител или соответствующий изотипный контроль (человеческое 1§С4(8108Р) антитело собственного производства), а через 24 ч вводили агонистическое мышиное антитело против человеческого СБ3 (ОКТ3, 1 мкг/животное, 1Р инъекция, ВюБедепй, Зап Бхедо, СаБ&гша, Са1#317315) или изотипный контроль (мышиное 1дО2а антитело собственного производства). Образцы крови получали через 24 ч после стимуляции и сывороточные уровни девяти человеческих цитокинов определяли количественно с применением наборов для мультиплексного анализа Μ3Ό (Нитап Рготйатта&гу 9-Р1ех ийга-3епз11туе Κΐΐ, МезоЗса1е ^^δсονе^у, ОаййешЬигд, Магу1апй, Са1#К15007С-2) в соответствии с протоколом производителя. Оба тестированных антитела ингибировали продуцирование человеческих цитокинов (табл. 15 и 16).

Таблица 15

Экспериментальная группа	Сывороточный уровень цитокинов (пг/мл)
ΙΡΝγ	1Ь-6	1Ь-10	ΤΝΓα	1Ь-2
1дС2а + И1дС4ти1	206.5+30.1	145.9+18.5	394.0+37.8	261.0+25.6	173.2+21.4
1дС2а + Η4Η1763Ν	166.3+9.8	153.9+13.7	343.8+15.0	301.2+16.8	194.7+11.5
1дС2а + Н4Н1789Ра	185.6+14.5	169.1 + 13.1	380.1 + 11.5	326.3+27.3	184.9+15.5
ОКТЗ	8383.1 + 425.8	1144.1 + 120.6	21128.3+ 1276.0	1457.4+69.4	2900.6+ 209.7
ОКТЗ +	5967.7+	1124.4+	3853.8+	2668.4+	521.6+85.9
И1дС4ти1	1659.4	190.1	742.3	555.6
ОКТЗ + Η4Η1763Ν	493.9+55.4	180.2+12.4	536.2+34.0	497.1+56.6	295.1+35.3
ОКТЗ + Н4Н1789Ра	617.0+116.9	249.0+38.8	460.9+30.2	339.4+20.7	244.4+15.3

Таблица 16

Экспериментальная группа	Сывороточный уровень цитокинов (пг/мл)
ΙΙ_-8	11_-12р70	ΙΙ_-1β	6М-С5Р
1дС2а + Ыд64тЫ	2186.8+885.4	202.7+7.3	490.7+37.7	177.7+14.8
1дС2а + Η4Η1763Ν	5808.0+926.0	217.9+10.4	437.4+26.7	175.6+10.3
1дС2а + Н4Н1789Ра	2740+651	213.4+11.4	408.8+15.9	172.3+7.7
ОКТЗ	5241.8+ 1237.0	225.6+13.0	445.0+8.8	1107.7+90.9
ОКТЗ + И1дО4тЫ	19899.0+3138.1	279.0+18.2	603.9+41.4	676.3+59.2
ОКТЗ + Η4Η1763Ν	3381.0±1169.0	182.1 + 10.5	410.4+22.4	243.3+10.4
ОКТЗ + Н4Н1789Ра	1585.7+ 269.2	206.3+4.2	395.0+16.4	559.3+76.8

Как показано в табл. 15 и 16, оба тестированных антитела эффективно блокировали высвобождение цитокинов, индуцированное поликлональной стимуляцией человеческих иммунных клеток в химерной т νΐνο системе (мыши Кад2'^/'у_с'^/', реконструированные с помощью человеческих гемопоэтических стволовых клеток).

Пример 9. Ингибирование антителом потери в весе и пролонгированной выживаемости на ксеногенной модели гомологичной болезни (ΟνΗΌ)

Способность человеческого моноклонального антитела против СБ48, Н4Н1789Ра блокировать ак- 26 030437

тивацию человеческих иммунных клеток ίη νίνο определяли, используя ксеногенную животную модель гомологичной болезни (трансплантат-против-хозяина, ΟνΗΌ), развившейся у иммунодефицитных ΝΟΌ/καίά/'γ^- (N80) мышей, которым пересадили человеческие мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС). Восьминедельным мышам внутривенно вводили свежевыделенные РВМС здоровых нормальных добровольцев (День 0). Скорость приживления трансплантата оценивали как процентное содержание клеток, позитивных к человеческому поверхностному маркеру ΟΌ45, (детектируемое проточной цитометрией) в периферической крови через три дня после инъекции РВМС. Введённая внутрибрюшинно за 24 ч до индукции человеческими РВМС разовая доза Н4Н1789Ра (10 мг/кг) полностью ингибировала приживление человеческих клеток (<10% клеток в "воротах" для лимфоцитов по сравнению с -99% в крови мышей, получавших изотипный контроль).

У 100% интактных животных наблюдалось успешное приживление человеческих клеток, приведшее к развитию симптомов ΟνΗΌ (потеря в весе, "сутулость, сгорбленность", взъерошенная шерсть, слабость и т.д.), через 7-8 дней после инъекции РВМС. У мышей, которым на 3 День вводили внутрибрюшинно разовую дозу Н4Н1789Ра (10 мг/кг), наблюдались замедление потери в весе (статистически значимое на 10 День) и тенденция к пролонгированной выживаемости (фиг. 2). Кроме того, определяли уровни человеческих цитокинов в сыворотке, полученной из терминальной крови (День 13 или ранее), используя набор Μ8Ό для мультиплексных анализов (Нитап РготЛаттаЮгу 9-Р1ех υΐίΓα-δοηκίίίνο Κίΐ, Меко8еа1е Όίκαοννιν. ОайЬегкЪигд, ΜΌ, Са1. Νο. К15007С-2) в соответствии с протоколом производителя. Обработка с помощью Н4Н1789Ра дала пониженные уровни человеческого 1Ь-8 (55.2±21.3 пг/мл по сравнению с 142.7±22.2 пг/мл в группе изотипного контроля), ΙΌ-10 (85.4±2.6 пг/мл по сравнению с 171.8±44.2 пг/мл), ΙΌ-6 (20.5±12.3 пг/мл по сравнению с 30.0±8.9 пг/мл) и ΤΝΡ@ (35.3±4.5 пг/мл по сравнению с 51.6±1.1 пг/мл). Не наблюдалось никакого снижения уровней человеческого ОМ-С8Р (554.9±131.8 пг/мл по сравнению с 348.9±20.7 пг/мл) и ΙΡΝγ (4.8±0.9 нг/мл по сравнению с 5.0±0.5 нг/мл). Уровни человеческого 1Ь-1$, 1Ь-2 и 1Ь-12р70 были ниже предела обнаружения.

Как показано на фиг. 2, антитело против СО48, Н4Н1789Ра замедляло потерю в весе (р<0.05, тест множественного сравнения Даннета) и продлевало выживаемость у ксеногенной модели ΟνΗΌ (мыши Ν8Ο с трансплантированными человеческими РВМС). Эти результаты подтверждают возможность применения антител против ΟΌ48 в терапии ΟνΗΌ.

Пример 10. Клинические испытания антитела к ΟΌ48 в качестве лекарственного средства против целиакии (глютеновой болезни)

Глютеновая болезнь является хронической ΗΕΑ-ΌΟ2 или О08-ограниченной ΟΌ4+ Т-клеточноопосредованной энтеропатией, являющейся результатом секреции интерферона-γ в ответ на специфические пищевые деамидированные глютеновые пептиды пшеницы, ячменя и ржи, обладающие высокой аффинностью связывания с этими специфическими молекулами ΗΡΆ класса II.

6-недельное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование для доказательства механизма проводили с целью оценить эффективность, безопасность и переносимость лечения антителом против ΟΌ48 доказанной с помощью биопсии бессимптомной целиакии, вызванной пероральным приёмом глютена. Двенадцати пациентам (рандомизация 3:1) внутривенно в виде однократной инфузии вводили 12 мг/кг антитела против ΟΌ48 по изобретению (например, Н4Н1789Ра) или плацебо.

Пациенты, включённые в это исследование, были на безглютеновой диете по меньшей мере в течение 2 лет (ежедневный приём глютена < 5 тд), у них отсутствовала непереносимость глютена в течение 8 недель, они имели положительный ΗΕΛ-ΌΟ2 генотип, отрицательную реакцию на антитела против трансглутаминазы (анти- ΤΟΑ) и отрицательную Ευ8ροΙ реакцию на РВМС интерферон-у при инкубации с глиадином.

Через две недели после плацебо-контролируемого лечения все пациенты получали дозу глютена 16 г в день (эквивалентную, примерно, четырём кускам хлеба в день) в течение 3 дней в виде мучной суспензии, смешанной с апельсиновым соком или соевым молоком.

Симптомы целиакии регистрировали в ежедневнике симптомов, начиная за две недели до, во время и кончая спустя две недели после введения глютена, регистрировали наличие и тяжесть (по трёхбалльной шкале) тошноты, метеоризма, боли в животе, сонливости, рвоты, диареи и других симптомов.

Биопсию тонкого кишечника проводили, отбирая образец ткани из второй половины двенадцатиперстной кишки с целью анализа на мРНК, гистологии, иммуногистохимического анализа, определения соотношения высота ворсин/глубина крипт (УЪ/Сй, ВВ/ГК) и подсчёта внутриэпителиальных лимфоцитов (1ЕЬ, ВЭЛ), через две недели после рандомизации и через 2 недели после перорального введения глютена. Общую структуру слизистой тонкого кишечника оценивали по модифицированной классификации Марша. Нормальная слизистая (0 по шкале Марша), слабо выраженное воспаление с внутриэпителиальным лимфоцитозом (Ι по шкале Марша), слабо выраженное воспаление с внутриэпителиальным лимфоцитозом и гиперплазией крипт (II по шкале Марша), и "золотой стандарт" для установления диагноза "целиакия" с внутриэпителиальным лимфоцитозом, гиперплазией крипт и атрофией ворсин (III по шкале Марша).

Перед пероральным введением глютена и через одну и 2 недели после введения глютена у пациен- 27 030437

тов (все НЬА-Эр2 или Ό08) брали образцы периферической крови и очищенные Т-лимфоциты инкубировали с деамидированными и контрольными пептидами глиадина (нативным @-глиадином5_7-7з и вариантом О65Е). Т-клеточный ответ у этих субъектов количественно анализировали, определяя разницу ЖЛ-у ЕЬ1§ро1 ответа на деамидированный пептид по сравнению с ответом на нативный пептид @глиадин_57-73, и нормализовали по ШЫ-у ЕШро! ответу на пан-НЬА-ЭР эпитоп гемаглютинина вируса гриппа пептид НА307-319, который, как можно было ожидать, не изменяется после введения глютена.

Безопасность и переносимость оценивали при медосмотре пациента, с помощью клинического лабораторного исследования и с помощью сообщений о нежелательном явлении.

Основным критерием оценки, через 2 недели после введения глютена, являлось улучшение медианного индекса УЬ/Сб. Вторичные критерии оценки включали улучшение общей гистологической оценки интестинальной биопсии по шкале Марша, снижение ежедневной оценки симптомов целиакии и ослабление РВМС интерферон-γ ЕЬ1§ро1 ответа на введение пептида @-глиадина_57-73. Эксплоративная конечная точка включала изменение ткани и мРНК АВ, фенотипы Т-клеток периферической крови, медианное число 1ЕЬ ткани и сывороточные цитокины, определяемые методом ЕША (ИФА).

Пример 11. Клинические испытания антитела к С.Н48 в качестве лекарственного средства против системной красной волчанки (8ЬЕ, СКВ)

§ЬЕ является аутоиммунным заболеванием, характеризующимся множеством нарушений иммунной системы, включая выработку аутоантител к эндогенным нуклеиновым кислотам апоптоза, которые могут вызвать воспаление и поражение тканей. Активируется как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ. Аутоантитело-содержащие иммунные комплексы и хронические вирусные инфекции стимулируют Типа I интерфероны, которые регулируют как наследственную, так и адаптивную иммунную систему, включая Т-клетки, В-клетки, дендритные клетки и ИК клетки, образующие бессменный цикл аутоиммунитета.

12-недельное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование для доказательства механизма проводили с целью оценить эффективность, безопасность и переносимость лечения антителом против СЭ48А стойкой §ЬЕ от слабой до умеренной и до тяжёлой. Двадцати пациентам (рандомизация 4:1) внутривенно в виде однократной инфузии вводили 12 мг/кг антитела против СЭ48 по изобретению (например, Н4Н1789Ра) или плацебо. Пациентов регулярно оценивали с помощью индекса активности системной красной волчанки (СКВ) |5>аГе1у оГ Екйодепк апб Ьирик Егу1Ьета1окик №Иопа1 Аккекктей (8ЕБЕНА)-8у51ет1с Ьирик ЕгуШетаЮкик О1кеаке Асйуйу 1пбех (§ЬЕНА1)], индекса вспышки СКВ (§ЬЕ Р1аге 1пбех) и критерия общей оценки врача (РОА). Биологические маркеры для оценки включали: (ί) СЭ20+ В-клетки и СО 138+ плазмоцитоидные клетки, СЭ40Ь' Т-клетки, антитела к дцДНК, антинуклеарные антитела (АНА, АNА), иммуноглобулины (1дО, 1дМ, 1дЕ и 1дА) и компоненты комплемента С1ц, С3,С4 и С5а; (ίί) уровни цитокинов, включая интерферон-@ и интерферон-γ, 1Ь-10, 1Ь-6, Ш-15, Ш-21 и ВЬу§ методом ЕША (ИФА); (ίίί) общее число циркулирующих Т, В, ЯК и Т-регуляторных клеток с анализом поверхностных маркеров методом РАС8; и/или (ίν) количественное определение изменения числа лейкоцитов в цельной крови (например, нормализация лейкопении) и соответствующей генной регуляции мРНК в коже. Лабораторные измерения могли включать также серийные разведения РК и антител против лекарств.

Главные критерии включения в исследование/исключения из исследования: (ί) взрослые пациенты в возрасте от 18 до 70 лет; (ίί) стойкая активность заболевания §ЬЕ в течение по меньшей мере двух месяцев до скрининга и (ίίί) соблюдение режима без приёма лекарственных средств или неизменяемой схемы лечения низкими дозами преднизона, противомалярийных препаратов, ΗδΆΙΌ (НСПВС), азатиоприна или микофенолата мофетила.

Пациенты, выбранные для данного исследования, имели поддающиеся измерению количества антител к дцДНК, к антигену Смита, к К\Р или к антигенам синдрома Шегрена. Исключали пациентов с активным волчаночным нефритом, требующим лечения гемодиализом, циклофосфамидом или высокими дозами преднизона. Исключали пациентов с серьёзной инфекцией в течение четырёх недель в анамнезе.

Эффективность оценивали по уменьшению количества антител к дцДНК и повышению в комплементе С3 и С4 между исходным уровнем и уровнем на 4 неделе лечения с помощью антитела к С.Н48. Эксплоративные конечные точки включали критерии §Е^ЕNА-§^Е^АI, РОА и индекс 8ЬЕ Р1аге (вспышки). Безопасность и переносимость оценивали с помощью врачебного осмотра, клинических лабораторных тестов и сообщений о нежелательных явлениях.

Пример 12. Клинические испытания антитела к С.Н48 в качестве лекарственного средства против псориаза

Патофизиология псориаза связана с аберрантными воспалительными реакциями, иммуноопосредованными ТЬ1 и ТЬ17 лимфоцитами, приводящими к секреции цитокинов, хемокинов и факторов роста, которые могут активировать и пролиферировать кератиноциты. Эти процессы приводят к заметной инфильтрации лейкоцитов и утолщению слоя эпидермиса, которое характеризует особенность патологии псориатических бляшек.

12-недельное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование для проверки обоснованности

- 28 030437

концепции проводили с целью оценить эффективность, безопасность и переносимость лечения антителом к СЭ48А (например, Н4Н1789Ра) от умеренного до тяжёлого псориаза. Двадцати пациентам (рандомизация 4:1) внутривенно в виде однократной инфузии вводили 12 мг/кг антитела против СЭ48 или плацебо. Пациентов регулярно оценивали с применением индекса активности в баллах по шкале расчёта (ΡΆ8Ι) (Индекса распространённости и тяжести псориаза, РюпаГО Агеа анй ЗеуегПу Юйех) общей оценки врача в баллах (РСА), ЭЕО (ДИКЖ, дерматологического индекса качества жизни), фотографии, результатов клинических наблюдений и лабораторных исследований, включая РК и антитела против лекарств.

Эффективность оценивали по изменению ΡΑ3Ι между исходным уровнем и уровнем на 8 неделе лечения антителом против СЭ48. Основным критерием оценки являлось улучшение на 75% оценки ΡΑ3Ι между исходным уровнем и уровнем на 8 неделе. Вторичные критерии оценки включали улучшение на 50% оценок ΡΑ3Ι, РСА и ОЬ-О между исходным уровнем и уровнем на 8 неделе. Безопасность и переносимость оценивали с помощью врачебного осмотра, клинических лабораторных тестов и сообщений о нежелательных явлениях.

Главные критерии включения в исследование/исключения из исследования: (ί) взрослые пациенты в возрасте от 18 до 70 лет; (ίί) хронический бляшечный псориаз в течение по меньшей мере шести месяцев; (ίίί) В3А (площадь поверхности тела) > 10%; (ίν) ΡΑ3Ι > 12; (ν) кандидат на системную или фототерапию; (νί) в настоящее время не применяет системной терапии или не применяет в точно определённые периоды выведения из организма; и/или (νίί) не было ранее прерывания биологической терапии псориаза, вызванного её неэффективностью.

Пример 13. Клинические испытания антитела к СЭ48 в качестве лекарственного средства против язвенного колита

Патофизиология язвенного колита характеризуется гиперреактивным СЭ4+ Т-клеточным адаптивным иммунным ответом в кишечной стенке, специфическим к симбиотической флоре кишечника. Активированные ТЫ и ТЫ7 лимфоциты высвобождают провоспалительные хемокины и цитокины, которые вызывают рекрутинг нейтрофилов и моноцитов в кишечнике. Блокада совместной стимуляции антителом к СЭ48 имеет потенциал предотвратить активированное бактериями взаимодействие ΑΡС8 с наивными Т хелперными клетками, которое усиливает и поддерживает хронический воспалительный ответ слизистой оболочки.

12-недельное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование для проверки обоснованности концепции проводили с целью оценить эффективность, безопасность и переносимость 4-недельного лечения антителом к СЭ48А от умеренных до тяжёлых симптомов язвенного колита. Семидесяти пациентам (рандомизация 1:1) внутривенно в виде однократной инфузии вводили 12 мг/кг антитела против СЭ48 (например, Н4Н1789Ра) или плацебо. Возраст пациентов, участвовавших в данном исследовании, составлял 18-70 лет, у них при массовом обследовании был диагностирован язвенный колит с оценкой индекса активности заболевания (по 12-балльной шкале) 6-10 включительно. Пациенты проходили лечение аминосалицилатом по меньшей мере в течение 1 месяца перед обследованием с постоянной дозой по меньшей мере в течение 2 недель до рандомизации. Если пациент перед исследованием принимал другие лекарственные средства против язвенного колита, дозы таких лекарственных средств должны были быть постоянными по меньшей мере в течение 1 месяца до рандомизации. Что касается пациентов, принимавших азатиоприн или 6-меркаптопурин, то в исследование включали только тех пациентов, которые принимали это(эти) лекарственное(ые) средство(а) по меньшей мере в течение 3 месяцев перед исследованием.

Главный анализ эффективности оценивал среднее изменение индекса активности язвенного колита в баллах от исходного значения до 4 недели в зависимости от распределения в группы лечения. Размер лечебной группы 35 пациентов (29 подлежащих оценке пациентов в группе на 4 неделе) составлял мощность 80% при уровне значимости 5% при детекции разницы между группой плацебо и группой активного лечения при условии, что средняя разница между лечебными группами составляла по меньшей мере 3 балла, с обычным 3Ό 4 или менее.

Вторичный анализ эффективности оценивал соотношение пациентов, у которых наблюдалось уменьшение индекса активности заболевания на 3 балла или более от исходного значения до значения на 4 неделе (пациент с лечебным эффектом). Учитывая, что частота ответа на плацебо составляет не более 60%, а частота ответа в группе активного лечения по меньшей мере на 40% выше, чем в группе плацебо (например, 30% пациентов с лечебным эффектом в группе плацебо по сравнению с >70% пациентов с лечебным эффектом в активной группе), размер группы 35 человек в группе (29 подлежащих оценке пациентов в группе на 4 неделе) составлял мощность 80% при уровне значимости 5% при детекции разницы между группой плацебо и группой активного лечения.

Для вторичных критериев оценки (изменение частоты стула, аноректальное кровотечение, удерживание кала, результаты эндоскопического исследования, общая оценка врача-исследователя и общая оценка пациента) также проводили сравнение в зависимости от лечебной группы исходного значения со значением на 4 неделе. Помимо этого собирали данные по биопсии ткани кишечника с целью количественного определения инфильтрации лейкоцитов (Т-клеток, активированных макрофагов) и подтвержда- 29 030437

ли фенотипированием клеток с помощью анализа иммуногистохимических поверхностных маркеров.

Объём настоящего изобретения не ограничивается конкретными вариантами по данному описанию.

На самом деле различные модификации изобретения помимо вариантов представленных в данной заявке, будут очевидны специалистам в данной области техники из вышеприведённого описания и прилагающихся фигур. Предполагается, что такие модификации входят в объём прилагаемой формулы изобретения.

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Регенерон Фармасьютикалс, Инк.

<120> АНТИТЕЛА К СБ48 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

<130> 6350А-ИО

<140> Будет назначено

<141> Подано

<150> 61/386,746

<151> 2010-09-27

<150> 61/475,280

<151> 2011-04-14

<150> 61/515,490

<151> 2011-08-05

<160> 392

<170> ЕазЬЗЕ12 для версии Виндоус 4.0

<210> 1

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 1

даддддсадс ЬдЬЬддааЬс Ьдддддаддс ЬЬддсасадс сдддддддЬс ссЬдадасЬс 60

ЬссЬдЬдсад ссЬсЬддааЬ сассЬЬЬддс адаЬаЬдсса ЬдадсЬдддЬ ссдссаддсЬ 120

ссадддаадд ддсЬддадЬд ддЬсЬсасЬЬ аЬаадЬддса дЬддЬддЬад сасаЬассас 180

дсадасЬссд Ьдаадддссд дЬЬсассаЬс Ьссададаса аЬЬссаадаа сасасЬаЬаЬ 240

сЬдсаааЬда асадссЬдад адссдаддас асддссдЬаЬ аЬЬасЬдЬдс даЬсЬасааЬ 300

аасЬасаасЬ ддЬЬсдассс сЬддддссад ддаасссЬдд ЬсассдЬсЬс сЬса 354

<210> 2

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 2

О1и

О1у

О1п

Ьеи

О1и

Бег

О1у

Ьеи

А1а

О1п

Рго

О1у

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

11е

ТЪг

РЪе

О1у

Агд

Туг

20

25

30

- 30 030437

А1а Мек

Зег 35

Тгр Уа1

Агд О1п А1а 40

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи О1и Тгр Уа1 45

Зег

Ьеи

11е

Зег

О1у

Зег

О1у

Зег

ТЬг

Туг

Няз

А1а

Азр

Зег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

ТЬг

11е

Зег

Агд

Азр

Азп

Зег

Ьуз

Азп

ТЬг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

Мек

Азп

Зег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

11е

Туг

Азп

Туг

Азп

Тгр

РЬе

Азр

Рго

Тгр

О1у

О1п

О1у

ТЬг

100

105

110

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Зег

115

<210> 3

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 3

ддааксасск ккддсадака кдсс

<210> 4

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 4

О1у 11е ТЬг РЬе О1у Агд Туг А1а 1 5

<210> 5

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 5

акаадкддса дкддкддкад саса

<210> 6

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 6

11е Зег О1у Зег О1у О1у Зег ТЬг 1 5

24

<210> 7

- 31 030437

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 7

дсдаЕсЕаса аЕаасЕасаа сЕддЕЕсдас ссс 33

<210> 8

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 8

А1а 11е Туг Азп Азп Туг Азп Тгр РЬе Азр Рго 1 5 10

<210> 9

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 9

даааЕЕдЕдЕ ЕдасдсадЕс Ессаддсасс ЕЕдЕсЕЕЕдЕ сЕссадддда аададссасс 60

сЕсЕссЕдса дддссадЕса дадЕдЕЕадс адсаасЕасЕ ЕадссЕддЕа ссадсадааа 120

ссЕддссадд сЕсссаддсЕ ссЕсаЕсЕаЕ даЕдсаЕсса дсадддссас ЕдасаЕссса 180

дасаддЕЕса дЕддсадЕдд дЕсЕдддаса дасЕЕсасЕс ЕсассаЕсад садасЕддад 240

ссЕдаадаЕЕ ЕЕдсадЕдЕа ЕЕасЕдЕсад садЕаЕддЕа дсЕсассЕсд дасдЕЕсддс 300

саадддасса аддЕддаааЕ сааа 324

<210> 10

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 10

О1и 1

11е

Уа1

Ьеи

ТЬг 5

О1п

Бег

Рго

С1у

ТЬг 10

Ьеи

Бег

Ьеи

Бег

Рго 15

О1у

О1и

Агд

А1а

ТЬг

Ьеи

Бег

Суз

Агд

А1а

Бег

С1п

Бег

Уа1

Бег

Азп

20

25

30

Туг

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

С1п

Ьуз

Рго

С1у

С1п

А1а

Рго

Агд

Ьеи

35

40

45

11е

Туг

Азр

А1а

Бег

Агд

А1а

ТЬг

Азр

11е

Рго

Азр

Агд

РЬе

Бег

50

55

60

О1у

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Агд

Ьеи

О1и

65

70

75

80

Рго

О1и

Азр

РЬе

А1а

Уа1

Туг

Суз

С1п

Туг

О1у

Бег

Рго

85

90

95

Агд

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

- 32 030437

21

<210> 11

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 11

сададЬдЬЬа дсадсаасЬа с

<210> 12

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 12

О1п Зег Уа1 Зег Зег Азп Туг 1 5

<210> 13

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>
<223>	Искусственная
<400>	13
даЬдсаЬсс
<210>	14
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная

последовательность

<400> 14 Азр А1а Зег

1

<210> 15

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 15

садсадЬаЬд дЬадсЬсасс Ьсддасд

<210> 16

<211> 9

<212> БЕЛОК

27

- 33 030437

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 16

Οίη Οίη Туг О1у Бег Бег Рго Агд ТЬг 1 5

<210> 17

<211> 348

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 17

саддЕссадс ЕддЕасадЕс аддддеЕдад дЕдаадаадс сЕддддссЕс адЕдааддЕс 60

ЕссЕдсаадд ЕЕЕссддаЕа сасссЕсасЕ дааЕЕаЕсса ЕасасЕдддЕ дсдасаддсЕ 120

ссЕддаааад ддсЕЕдадЕд даЕдддаддЕ ЕЕЕдаЕссЕд аадаЕддЕда аасааЕсЕас 180

дсасадаадЕ Ессадддсад адЕсаасаЕд ассдаддаса саЕсЕасада сасадссЕас 240

аЕддадсЕда дсадссЕдад аЕсЕдаЕдас асдассдЕдЕ аЕЕЕсЕдЕдс аЕсасЕЕсЕЕ 300

сссЕасЕЕЕд асЕасЕдддд ссадддаасс сЕддЕсассд ЕсЕссЕса 348

<210> 18

<211> 116

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 18

Ο1η

Уа1

Ο1η

Ьеи

Уа1

Ο1η

Бег

О1у

А1а

О1и

Уа1

Ьуз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

Бег

Уа1

Ьуз

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

Уа1

Бег

О1у

Туг

ТЬг

Ьеи

ТЬг

О1и

Ьеи

20

25

30

Бег

11е

Няз

Тгр

Уа1

Агд

Ο1η

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЕ

35

40

45

О1у

РЬе

Азр

Рго

О1и

Азр

О1у

О1и

ТЬг

11е

Туг

А1а

Ο1η

Ьуз

РЬе

50

55

60

Ο1η

О1у

Агд

Уа1

Азп

МеЕ

ТЬг

О1и

Азр

ТЬг

Бег

ТЬг

Азр

ТЬг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЕ

О1и

Ьеи

Бег

Ьеи

Агд

Бег

Азр

ТЬг

Уа1

Туг

РЬе

Суз

85

90

95

А1а

Бег

Ьеи

Рго

Туг

РЬе

Азр

Туг

Тгр

О1у

Ο1η

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

100

105

110

ТЬг

Уа1

Бег

115

<210> 19

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 19

ддаЕасассс ЕсасЕдааЕЕ аЕсс 24

- 34 030437

<210> 20

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 20

О1у Туг ТЬг Беи ТЬг О1и Беи Бег 1 5

<210> 21

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 21

бббдабссбд аадабддбда ааса

<210> 22

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 22

РЬе Азр Рго О1и Азр О1у О1и ТЬг 1 5

<210> 23

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 23

дсабсасббс ббсссбасбб бдасбас

<210> 24

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 24

А1а Бег Ьеи Ьеи Рго Туг РЬе Азр Туг 1 5

24

27

<210> 25

- 35 030437

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 25

даааббдбдб бдасдсадбс бссаддсасс сбдбсбббдб сбссадддда аададссасс 60

сбсбссбдса дддссадбса дадбдббадс адсадббасб бадссбддба ссадсадааа 120

ссбддссадд сбсссаддсб ссбсабсбаб ддбдсабсса дсадддссас бддсабссса 180

дасаддббса дбддсадбдд дбсбдддаса дабббсасбс бсбссабсад бадасбддад 240

сссдаадабб ббдсадбдба бббббдбсад садбабддса дсбсаабдба сасббббддс 300

саддддасса адсбддадаб сааа 324

<210> 26

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 26

О1и

11е

Уа1

Ьеи

ТЬг

О1п

Бег

Рго

С1у

ТЬг

Ьеи

Бег

Ьеи

Бег

Рго

О1у

1

5

10

15

О1и

Агд

А1а

ТЬг

Ьеи

Бег

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

Бег

Уа1

Бег

20

25

30

Туг

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

С1у

О1п

А1а

Рго

Агд

Ьеи

35

40

45

11е

Туг

О1у

А1а

Бег

Агд

А1а

ТЬг

С1у

11е

Рго

Азр

Агд

РЬе

Бег

50

55

60

О1у

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

Бег

11е

Бег

Агд

Ьеи

О1и

65

70

75

80

Рго

О1и

Азр

РЬе

А1а

Уа1

Туг

РЬе

Суз

О1п

Туг

О1у

Бег

Меб

85

90

95

Туг

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Ьеи

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 27

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 27

сададбдбба дсадсадбба с 21

<210> 28

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 28

О1п Бег Уа1 Бег Бег Бег Туг 1 5

- 36 030437

<210> 29

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 29

ддЕдсаЕсс

9

<210> 30

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 30

О1у А1а Зег

1

<210> 31

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 31

садсадЕаЕд дсадсЕсааЕ дЕасасЕ 27

<210> 32

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 32

О1п О1п Туг О1у Зег Зег МеЕ Туг ТИг 1 5

<210> 33

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 33

саддЕдсадс ЕддЕдсадЕс ЕддддсЕдас аЕдаадаадс сЕддддссЕс адЕдадддЕс 60

ЕссЕдсаадд сЕЕсЕддаЕа сассЕЕсасс дасЕасЕЕЕа ЕЕсасЕдддЕ дсдасаддсс 120

ссЕддасаад дассЕдааЕд даЕдддаЕдд аЕсаасссЕд асадЕддЕдс сасааасЕаЕ 180

дсасадсадЕ ЕЕсадддсад ддЕсассаЕд ассадддаса сдЕссаЕсад сдсаассЕас 240

аЕддадаЕда дсаддсЕдад аЕсЕдасдас асддссдЕдЕ ЕЕЕаЕЕдЕдс дададаЕаад 300

- 37 030437

даЬддсадЬд дсЬддЬассЬ ЬдасдасЬдд ддссадддаа сссЬддЬсас сдЬсЬссЬса 360

<210> 34

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 34

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1п

Зег

О1у

А1а

Азр

МеЬ

Ьуз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

Зег

Уа1

Агд

Уа1

Зег

Суз

Ьуз

А1а

Зег

О1у

Туг

ТЪг

РЪе

ТЪг

Азр

Туг

20

25

30

РЪе

11е

Ηΐ3

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

О1п

О1у

Рго

О1и

Тгр

МеЬ

35

40

45

О1у

Тгр

11е

Азп

Рго

Азр

Зег

О1у

А1а

ТЪг

Азп

Туг

А1а

О1п

РЪе

50

55

60

О1п

О1у

Агд

Уа1

ТЪг

МеЬ

ТЪг

Агд

Азр

ТЪг

Зег

11е

Зег

А1а

ТЪг

Туг

65

70

75

80

МеЬ

О1и

МеЬ

Зег

Агд

Ьеи

Агд

Зег

Азр

ТЪг

А1а

Уа1

РЪе

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Ьуз

Азр

О1у

Зег

О1у

Тгр

Туг

Ьеи

Азр

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЪг

Ьеи

Уа1

ТЪг

Уа1

Зег

115

120

<210> <211> <212> <213>	35 24 ДНК Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность

<400> 35

ддаЬасассЬ ЬсассдасЬа сЬЬЬ

24

<210> <211> <212> <213>	36 8 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	36
О1у Туг ТЪг РЪе ТЪг	Азр Туг РЪе
1	5

<210> <211> <212> <213>	37 24 ДНК Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	37

- 38 030437

аксаассскд асадкддкдс саса

<210> 38

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 38

11е Азп Рго Азр Зег О1у А1а ТЬг 1 5

<210> 39

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 39

дсдададака аддакддсад кддскддкас сккдасдас

24

39

<210> 40

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 40

А1а Агд Азр Ьуз Азр О1у Зег О1у Тгр Туг Ьеи Азр Азр

1 5 10

<210> 41

<211> 327

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 41

даааккдкдк кдасксадкс кссадссасс скдкскккдк скссадддда аададссасс 60

сксксскдса дддссадкса дадкдккаас акскасккад сскддкасса асадааасск 120

ддссаддскс ссаддсксск сакскакдак дсакссааса дддсскскдд саксссадсс 180

аддкксадкд дсадкдддкс кдддасадас кксаскскса ссаксадсад сскададсск 240

даадаккккд садкккакка скдксадсад сдкадсааск ддсскссакс даксассккс 300

ддссааддда сасдаскдда даккааа 327

<210> 42

<211> 109

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

- 39 030437

<400> 42

О1и

11е

Уа1

Ьеи

ТЬг

О1п

Зег

Рго

А1а

ТЬг

Ьеи

Зег

Ьеи

Зег

Рго

О1у

1

5

10

15

О1и

Агд

А1а

ТЬг

Ьеи

Зег

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

Зег

Уа1

Азп

11е

Туг

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

О1п

А1а

Рго

Агд

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

Азр

А1а

Зег

Азп

Агд

А1а

Зег

О1у

11е

Рго

А1а

Агд

РЬе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

О1у

Зег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Зег

Ьеи

О1и

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

Уа1

Туг

Суз

О1п

Агд

Зег

Азп

Тгр

Рго

85

90

95

Зег

11е

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Агд

Ьеи

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 43

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 43

сададкдкка асакскас

18

<210> 44

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 44

О1п Зег Уа1 Азп 11е Туг 1 5

<210> 45

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 45

дакдсаксс

<210> 46

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 46 Азр А1а Зег

1

- 40 030437

<210> 47

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 47

садсадсдЬа дсаасЬддсс ЬссаЬсдаЬс асе 33

<210> 48

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 48

О1п О1п Агд Бег Азп Тгр Рго Рго Бег 11е ТЪг

1 5 10

<210> 49

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 49

садаЬЬсаас ЬддЬдсадЬс ЬддадсЬдад аЬдаададдс сЬдддассЬс адЬдааддЬс 60

ЬссЬдсаадд ссЬсЬддЬЬа сассЬЬЬЬсс адсЬаЬддЬа ЬсаасЬдддЬ дсдЬсаддсс 120

ссЬддасаад ддсЬЬдадЬд даЬдддаЬдд аЬсадсдсЬЬ асааЬддЬда сасааасЬаЬ 180

дсасадааас Ьссадддсад адЬсассаЬд ассасддаса саЬссасдас сасадссЬаЬ 240

аЬддаддЬда ддадссЬдад аЬсЬдасдас асддссдЬЬЬ аЬЬасЬдЬдс дадаЬЬЬЬЬа 300

асЬддаасЬа аддассЬсЬа сЬасддЬаЬд дасдЬсЬддд дссаадддас сасддЬсасс 360

дЬсЬссЬса 369

<210> 50

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 50

О1п

11е

О1п

Ьеи

Уа1

О1п

Бег

О1у

А1а

О1и

МеЬ

Ьуз

Агд

Рго

О1у

ТЪг

1

5

10

15

Бег

Уа1

Ьуз

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

А1а

Бег

О1у

Туг

ТЪг

РЪе

Бег

Туг

20

25

30

О1у

11е

Азп

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

О1п

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЬ

35

40

45

О1у

Тгр

11е

Бег

А1а

Туг

Азп

О1у

Азр

ТЪг

Азп

Туг

А1а

О1п

Ьуз

Ьеи

50

55

60

О1п

О1у

Агд

Уа1

ТЪг

МеЬ

ТЪг

Азр

ТЪг

Бег

ТЪг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЬ

О1и

Уа1

Агд

Бег

Ьеи

Агд

Бег

Азр

ТЪг

А1а

Уа1

Туг

Суз

- 41 030437

85

90

95

А1а Агд РЬе Ьеи ТЬг О1у ТЬг Ьуз Азр Ьеи Туг Туг О1у Меб Азр Уа1

110

100

105

Тгр О1у О1п О1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Бег Бег

	115	120
<210>	51
<211>	24
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	51
ддббасассб бббссадсба бддб
<210>	52
<211>	8
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	52
О1у Туг ТЬг РЬе Бег	Бег Туг О1у
1	5
<210>	53
<211>	24
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	53
абсадсдсбб асаабддбда саса
<210>	54
<211>	8
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	54
11е Бег А1а Туг Азп	О1у Азр ТЬг
1	5
<210>	55
<211>	48
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность

24

- 42 030437

<400> 55

дсдадаЬЬЬЬ ЬаасЬддаас ЬааддассЬс ЬасЬасддЬа ЬддасдЬс 48

<210> 56

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 56

А1а Агд РИе Ьеи ТЬг О1у ТЬг Ьуз Азр Ьеи Туг Туг О1у МеЬ Азр Уа1 1 5 10 15

<210> 57

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 57

дасаЬссада ЬдасссадЬс ЬссаЬссЬсс сЬдЬсЬдсаЬ сЬдЬаддада сададЬсасс 60

аЬсасЬЬдсс аддсдадЬса ддасаЬЬадс аасЬЬЬЬЬаа аЬЬддЬаЬса дсадааасса 120

дддааадссс сЬдаЬсЬссЬ даЬсаасдаЬ дсаЬссаЬЬЬ Ьддааасадд ддЬсссаЬса 180

аддЬЬсадЬд дсадЬддаЬс ЬдддасадаЬ ЬЬЬасЬсЬса ссаЬсаасад ссЬдсадссЬ 240

даадаЬаЬЬд саасаЬаЬЬа сЬдЬсаасаа ЬаЬдаЬааЬс ЬсссЬсЬсас ЬЬЬсддсдда 300

дддассаадд ЬддадаЬсаа а 321

<210> 58

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 58

Азр 1

11е

О1п

МеЬ

ТЬг 5

О1п

Зег

Рго

Зег

Зег 10

Ьеи

Зег

А1а

Зег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

О1п

А1а

Зег

О1п

Азр

11е

Зег

Азп

РЬе

20

25

30

Ьеи

Азп

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Азр

Ьеи

11е

35

40

45

Азп

Азр

А1а

Зег

11е

Ьеи

О1и

ТЬг

О1у

Уа1

Рго

Зег

Агд

РЬе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

О1у

Зег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Азп

Зег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

11е

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

Туг

Азр

Азп

Ьеи

Рго

Ьеи

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 59

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

- 43 030437

<223> Искусственная последовательность

<400> 59

саддасаЕЕа дсаасЕЕЕ

<210> 60

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 60

О1п Азр 11е Зег Азп РЬе 1 5

<210> 61

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 61

даЕдсаЕсс

<210> 62

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 62

Азр А1а Зег

1

<210> 63

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 63

саасааЕаЕд аЕааЕсЕссс ЕсЕсасЕ

<210> 64

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 64

О1п О1п Туг Азр Азп Ьеи Рго Ьеи ТЬг

18

27

- 44 030437

<210> 65

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 65

саддЕдсадЕ ЕддЕдсадЕс ЕддддсЕдад дЕдаадаадс сЕддддссЕс адЕдааддЕЕ 60

ЕссЕдсаадд саЕсЕддаса сассЕЕсасс аасЕасЕаса ЕЕсасЕдддЕ дсдасаддсс 120

ссЕддасаад ддсЕЕдааЕд даЕдддааЕа ассаасссЕа аЕдаЕддЕаа сасаадаЕас 180

дсасадаадЕ Ессадддсад ааЕсЕссаЕд ассЕдддаса сдЕссасдад сасадЕсЕЕс 240

аЕддаасЕда дсадссЕааа аЕсЕдаддас асддссдЕдЕ аЕЕасЕдЕдс дддасЕЕсдс 300

ЕасЕддЕЕсЕ ЕсдаЕсЕсЕд дддссдЕддс ассссддЕса сЕдЕсЕссЕс а 351

<210> 66

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 66

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1п

Бег

О1у

А1а

О1и

Уа1

Ьуз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

Бег

Уа1

Ьуз

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

А1а

Бег

О1у

ΗΪ8

ТЬг

РЬе

ТЬг

Азп

Туг

20

25

30

Туг

11е

Ηΐ3

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

О1п

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЕ

35

40

45

О1у

11е

ТЬг

Азп

Рго

Азп

Азр

О1у

Азп

ТЬг

Агд

Туг

А1а

О1п

Ьуз

РЬе

50

55

60

О1п

О1у

Агд

11е

Бег

МеЕ

ТЬг

Тгр

Азр

ТЬг

Бег

ТЬг

Бег

ТЬг

Уа1

РЬе

65

70

75

80

МеЕ

О1и

Ьеи

Бег

Ьеи

Ьуз

Бег

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

О1у

Ьеи

Агд

Туг

Тгр

РЬе

Азр

Ьеи

Тгр

О1у

Агд

О1у

ТЬг

Рго

100

105

110

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

<210> 67

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 67

ддасасассЕ ЕсассаасЕа сЕас 24

<210> 68

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

- 45 030437

<223> Искусственная <400> 68 О1у Нгз ТЬг РЬе ТЬг	последовательность Азп Туг Туг
1	5
<210>	69
<211>	24
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	69
ассаасссЕа аЕдаЕддЕаа саса
<210>	70
<211>	8
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	70
ТЬг Азп Рго Азп Азр	О1у Азп ТЬг
1	5
<210>	71
<211>	30
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	71
дсдддасЕЕс дсЕасЕддЕЕ сЕЕсдаЕсЕс
<210>	72
<211>	10
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	72
А1а О1у Ьеи Агд Туг	Тгр РЬе РЬе Азр Ьеи
1	5	10
<210>	73
<211>	321
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность

24

30

- 46 030437

<400> 73

дасаЕссада ЕдасссадЕс ЕссаЕсЕЕсс дЕдЕсЕдсаЕ сЕдЕаддада сададЕсасс 60

аЕсасЕЕдЕс дддсдадсса ддаЕаЕЕадс адсЕддЕЕад ссЕддЕаЕса дсадааасса 120

дддааадссс сЕаассЕссЕ даЕсЕЕЕдсЕ дсаЕссадЕЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕса 180

аддЕЕсадсд дсадЕддаЕс ЕдддасадаЕ ЕЕсасЕсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадссЕ 240

даадаЕЕЕЕд даасЕЕасЕа ЕЕдЕсаасад асЕдасааЕЕ ЕсссЕсддас дЕЕсддссаа 300

дддассаадд ЕддаааЕсаа с 321

<210> 74

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 74

Азр 1

11е

О1п

МеЕ

ТЬг 5

О1п

Зег

Рго

Зег

Зег Уа1 10

Зег

А1а

Зег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

Азр

11е

Зег

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Азп

Ьеи

11е

35

40

45

РЬе

А1а

Зег

Ьеи

О1п

Зег

О1у

Уа1

Рго

Зег

Агд

РЬе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

О1у

Зег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Зег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

О1у

ТЬг

Туг

Суз

О1п

ТЬг

Азр

Азп

РЬе

Рго

Агд

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Азп

100

105

<210> <211> <212> <213>	75 18 ДНК Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность

<400> 75

саддаЕаЕЕа дсадсЕдд

18

<210> <211> <212> <213>	76 6 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность
<400> 76 О1п Азр 11е Зег Зег	Тгр
1	5

<210> 77

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

- 47 030437

9

<223>	Искусственная
<400>	77
дсбдсабсс
<210>	78
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная
<400>	78
А1а А1а Бег
1
<210>	79
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная

последовательность

<400> 79

саасадасбд асаабббссс бсддасд

27

<210> 80

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 80

Ο1η Ο1η ТЬг Азр Азп РЬе Рго Агд ТЬг 1 5

<210> 81

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 81

садаббсаас бддбдсадбс бддадсбдад абдаададдс сбдддассбс адбдааддбс 60

бссбдсаадд ссбсбддбба сассбббасс адсбабддба бсаасбдддб дсдбсаддсс 120

ссбддасаад ддсббдадбд дабдддабдд абсадсдсбб асаабддбда сасааасбаб 180

дсасадааас бссадддсад адбсассабд ассасддаса сабссасдас сасадссбаб 240

абддаддбда ддадссбдад абсбдасдас асддссдббб аббасбдбдс дадаббббба 300

асбддаасба аддасбасба сбасддбабд дасдбсбддд дссаадддас сасддбсасс 360

дбсбссбса 369

<210> 82

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

- 48 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 82

Ο1η

11е

Ο1η

Ьеи

Уа1

Ο1η

Бег

О1у

А1а

О1и

МеЕ

Ьуз

Агд

Рго

О1у

ТЬг

1

5

10

15

Бег

Уа1

Ьуз

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

А1а

Бег

О1у

Туг

ТЬг

РЬе

ТЬг

Бег

Туг

20

25

30

О1у

11е

Азп

Тгр

Уа1

Агд

Ο1η

А1а

Рго

О1у

Ο1η

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЕ

35

40

45

О1у

Тгр

11е

Бег

А1а

Туг

Азп

О1у

Азр

ТЬг

Азп

Туг

А1а

Ο1η

Ьуз

Ьеи

50

55

60

Ο1η

О1у

Агд

Уа1

ТЬг

МеЕ

ТЬг

Азр

ТЬг

Бег

ТЬг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЕ

О1и

Уа1

Агд

Бег

Ьеи

Агд

Бег

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

РЬе

Ьеи

ТЬг

О1у

ТЬг

Ьуз

Азр

Туг

О1у

МеЕ

Азр

Уа1

100

105

110

Тгр

О1у

Ο1η

О1у

ТЬг

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

<210> 83

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 83

ддЕЕасассЕ ЕЕассадсЕа ЕддЕ

<210> 84

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 84

О1у Туг ТЬг РЬе ТЬг Бег Туг О1у 1 5

24

<210> 85

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 85

аЕсадсдсЕЕ асааЕддЕда саса

<210> 86

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

24

- 49 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 86

11е Зег А1а Туг Азп О1у Азр ТИг 1 5

<210> 87

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 87

дсдадаЬЬЬЬ ЬаасЬддаас ЬааддасЬас ЬасЬасддЬа ЬддасдЬс 48

<210> 88

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 88

А1а Агд РИе Ьеи ТИг О1у ТИг Ьуз Азр Туг Туг Туг О1у МеЬ Азр Уа1 1 5 10 15

<210> 89

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 89

аддЬЬсадЬд даадЬддаЬс ЬдддасадаЬ ЬЬЬасЬсЬса ссаЬсаасаа ссЬдсадссЬ 240

дддассаадд ЬададаЬсаа а 321

<210> 90

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 90

Азр 1

11е

О1п МеЬ

ТИг 5

О1п

Зег

Рго

Зег

Зег 10

Ьеи

Зег А1а

Зег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТИг

11е

ТИг

Суз

О1п

А1а

Зег

О1п

Азр

11е

Зег

Азп

РИе

20

25

30

Ьеи

Азп

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Азр

Ьеи

11е

35

40

45

- 50 030437

Азп Азр 50

А1а

Бег

11е

Ьеи

О1и 55

ТЬг О1у

Уа1

Рго

Бег 60

Агд

РЬе

Бег

О1у

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Азп

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

11е

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

Туг

Азр

Азп

Ьеи

Рго

Ьеи

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 91

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 91

саддасаЕЕа дсаасЕЕЕ

<210> 92

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 92

О1п Азр 11е Бег Азп РЬе 1 5

18

<210> 93

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220> <223>	Искусственная
<400>	93
даЕдсаЕсс
<210>	94
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная

последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 94

Азр А1а Бег

1

<210> 95

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

- 51 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 95

саасаабабд абаабсбссс бсбсасб 27

<210> 96

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 96

О1п О1п Туг Азр Азп Ьеи Рго Ьеи ТЬг 1 5

<210> 97

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 97

саддбдсадс бддбддадбс бдддддаддс дбддбссадс сбдддаддбс ссбдадасбс 60

бссбдбдсад сдбсбддабб сассббсадб дасбабддса бдсасбдддб ссдссаддсб 120

ссаддсаадд ддсбддадбд ддбддсадбб абабддаабд абддаадбаа баааааббаб 180

дсадасбссд бдаадддссд аббсадсабс бссадбдаса дббссаадаа сасдсбдбаб 240

сбасабабда асадссбдад адссдаддас асддсбдбдб аббасбдбдс дадабсдббд 300

бабадбасса дбсссбддба бббсдабсбс бддддссдбд дсасссбддб сасбдбсбсс 360

бса 363

<210> 98

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 98

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РЬе

ТЬг

РЬе

Бег

Азр

Туг

20

25

30

О1у

Меб

Н1з

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Азп

Азр

О1у

Бег

Азп

Ьуз

Азп

Туг

А1а

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

Бег

11е

Бег

Азр

Бег

Ьуз

Азп

ТЬг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

Н1з

Меб

Азп

Бег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Бег

Ьеи

Туг

Бег

ТЬг

Бег

Рго

Тгр

Туг

РЬе

Азр

Ьеи

Тгр

О1у

100

105

110

Агд

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

- 52 030437

<210> <211> <212> <213>

99 24 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 99

ддаЬЬсассЬ ЬсадЬдасЬа Ьддс 24

<210> <211> <212> <213>

100 8 БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 100

О1у РЪе ТЪг РЪе Зег Азр Туг О1у

1	5
<210> <211> <212> <213>	101 24 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 101

аЬаЬддааЬд аЬддаадЬаа Ьааа 24

<210> <211> <212> <213>

102 8 БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 102

11е Тгр Азп Азр О1у Зег Азп Ьуз 1 5

<210> <211> <212> <213>

103 42 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 103

дсдадаЬсдЬ ЬдЬаЬадЬас садЬсссЬдд ЬаЬЬЬсдаЬс Ьс 42

<210> <211> <212> <213>

104 14 БЕЛОК Искусственная последовательность

- 53 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 104

А1а Агд Бег Ьеи Туг Бег ТЬг Бег Рго Тгр Туг РЬе Азр Туг

1 5 10

<210> 105

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 105

дасабссада бдасссадбс бссабссбсс сбдбсбдсаб сбдбаддада сададбсасс 60

абсасббдсс дддсаадбса дадсаббадс адсбабббаа аббддбабса ддадааабса 120

дддааадссс сбаадсбссб дабсбабдсб дсабссадбб бдсааадбдд ддбсссабса 180

аддббсадбд дсадбддабс бдддасадаб ббсасбсбса ссабсадсад бсбдсаассб 240

даадаббббд саасббасба сбдбсаасад адббасадба сссссасббб сддсддаддд 300

ассааддбдд адабсааа 318

<210> 106

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 106

Азр 1

11е

Ο1η

Меб

ТЬг 5

Ο1η

Бег

Рго

Бег

Бег 10

Ьеи

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

Ο1η

Бег

11е

Бег

Туг

20

25

30

Ьеи

Азп

Тгр

Туг

Ο1η

О1и

Ьуз

Бег

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

Ο1η

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Ьеи

Ο1η

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

Ο1η

Бег

Туг

Бег

ТЬг

Рго

ТЬг

85

90

95

РЬе

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 107

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 107

сададсабба дсадсбаб 18

<210> 108 <211> 6

- 54 030437

<212> <213>

БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 108

О1п Бег 11е Бег Бег Туг

1	5
<210> <211> <212> <213>	109 9 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 109

дсбдсабсс 9

<210> <211> <212> <213>

110 3 БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 110 А1а А1а Бег

1

<210> <211> <212> <213>

111 24 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 111

саасададбб асадбасссс сасб 24

<210> <211> <212> <213>

112 8 БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 112

О1п О1п Бег Туг Бег ТЬг Рго ТЬг

1	5
<210> <211> <212> <213>	113 360 ДНК Искусственная последовательность

- 55 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 113

саддЬасаас ЬддЬдсадЬс ЬддддсЬдад дсдадддадс сЬддддссЬс адЬдадддЬс 60

ЬссЬдсаадд ссЬсЬддаЬа сассЬЬсасс дасЬасЬЬЬа ЬЬсасЬдддЬ дсдасаддсс 120

ссЬддасаад ддсЬЬдадЬд даЬдддаЬдд аЬсаасссЬа асадЬддЬдс сасааасЬЬЬ 180

дсасадаадЬ ЬЬсадддсад ддЬсассаЬд ассадддаса сдЬсссЬсаЬ ЬасадссЬас 240

аЬддассЬда дсаддсЬдаа аЬсЬдасдас дсддссдЬдЬ ЬЬЬасЬдЬдс дададаЬдЬд 300

даЬддсадЬд дсЬддЬассЬ ЬдасЬЬЬЬдд ддссадддаа сссЬддЬсас сдЬсЬссЬса 360

<210> 114

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 114

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1п

Бег

О1у

А1а

О1и

А1а

Агд

О1и

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

Бег

Уа1

Агд

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

А1а

Бег

О1у

Туг

ТЪг

РЪе

ТЪг

Азр

Туг

20

25

30

РЪе

11е

Нчз

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

О1п

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЬ

35

40

45

О1у

Тгр

11е

Азп

Рго

Азп

Бег

О1у

А1а

ТЪг

Азп

РЪе

А1а

О1п

Ьуз

РЪе

50

55

60

О1п

О1у

Агд

Уа1

ТЪг

МеЬ

ТЪг

Агд

Азр

ТЪг

Бег

Ьеи

11е

ТЪг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЬ

Азр

Ьеи

Бег

Агд

Ьеи

Ьуз

Бег

Азр

А1а

Уа1

РЪе

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Уа1

Азр

О1у

Бег

О1у

Тгр

Туг

Ьеи

Азр

РЪе

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЪг

Ьеи

Уа1

ТЪг

Уа1

Бег

115

120

<210> 115

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 115

ддаЬасассЬ ЬсассдасЬа сЬЬЬ 24

<210> 116

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 116

О1у Туг ТЪг РЪе ТЪг Азр Туг РЪе 1 5

- 56 030437

24

<210> 117

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 117

аксаассска асадкддкдс саса

<210> 118

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 118

11е Азп Рго Азп Зег О1у А1а ТЬг 1 5

<210> 119

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 119

дсдададакд кддакддсад кддскддкас сккдасккк

39

<210> 120

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 120

А1а Агд Азр Уа1 Азр О1у Зег О1у Тгр Туг Ьеи Азр РЬе

1 5 10

<210> 121

<211> 327

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 121

сксксскдса дддссадкса дадкдккадс акскасккад сскддкасса асадааасск 120

ддссаддскс ссаддсксск сакскакдак дсакссааса дддссаскдд саксссадсс 180

аддкксадкд дсадкдддкс кдддасадас кксаскскса ссаксадсад дккададсск 240

даадаккккд садкккакка скдксадсад сдкадсдаск ддсскссакс даксассккс 300

- 57 030437

ддссааддда сасдасБдда даББааа

<210> 122

<211> 109

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 122

327

О1и 1

11е

Уа1

Беи

ТЬг 5

О1п

Бег

Рго

А1а

ТЬг 10

Беи

Бег

Беи

Бег

Рго 15

О1у

О1и

Агд

А1а

ТЬг

Беи

Бег

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

Бег

Уа1

Бег

11е

Туг

20

25

30

Беи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Буз

Рго

О1у

О1п

А1а

Рго

Агд

Беи

11е

35

40

45

Туг

Азр

А1а

Бег

Азп

Агд

А1а

ТЬг

О1у

11е

Рго

А1а

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Беи

ТЬг

11е

Бег

Агд

Беи

О1и

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

Уа1

Туг

Суз

О1п

Агд

Бег

Азр

Тгр

Рго

85

90

95

Бег

11е

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Агд

Беи

О1и

11е

Буз

100

105

<210> 123

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223>	Искусственная	последовательность
<400>	123
сададБдББа дсаБсБас
<210>	124
<211>	6
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	124
О1п Бег Уа1 Бег 11е	Туг
1	5
<210>	125
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	125
даБдсаБсс
<210>	126

18

9

- 58 030437

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 126

Азр А1а Бег

1

<210> 127

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 127

садсадсдБа дсдасБддсс БссаБсдаБс асе 33

<210> 128

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 128

О1п О1п Агд Бег Азр Тгр Рго Рго Бег 11е ТЪг 1 5 10

<210> 129

<211> 384

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 129

даддБдсадБ БддБддадБс Бдддддаддс ББддсасадс сБддадддБс ссБдадасБд 60

БссБдБдсад ссБсБддаББ сассББсадБ адББаБдада БдаасБдддБ ссдссаддсБ 120

ссадддаадд ддсБддадБд ддБББсаБас аББасБасБа дБддБадсас саБаБасБас 180

дсадасБсБд Бдаадддссд аББсассаБд Бссададаса асдссаадаа дБсасБдБаБ 240

сБддаааБда асадссБдад адссдаддас асддсБдБББ аББасБдБдс дададаадад 300

БдБасБааБд дБдБаБдББа БааадасБас садБасБасд дБаБддасдБ сБддддссаа 360

дддассасдд БсассдБсБс сБса 384

<210> 130

<211> 128

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 130

О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Бег О1у О1у О1у Ьеи А1а О1п Рго О1у О1у

- 59 030437

1

5

10

15

Зег

Ьеи

Агд

Ьеи

Зег

Суз

А1а

Зег

О1у

РЪе

ТЪг

РЪе

Зег

Туг

20

25

30

О1и

Меб

Азп

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

Зег

Туг

11е

ТЪг

Зег

О1у

Зег

ТЪг

11е

Туг

А1а

Азр

Зег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЪе

ТЪг

Меб

Зег

Агд

Азр

Азп

А1а

Ьуз

Зег

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1и

Меб

Азп

Зег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТЪг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

О1и

Суз

ТЪг

Азп

О1у

Уа1

Суз

Туг

Ьуз

Азр

Туг

О1п

Туг

100

105

110

Туг

О1у

Меб

Азр

Уа1

Тгр

О1у

О1п

О1у

ТЪг

Уа1

ТЪг

Уа1

Зег

115

120

125

<210> 131

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 131

ддаббсассб бсадбад+ба бдад

<210> 132

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 132

О1у РЪе ТЪг РЪе Зег Зег Туг О1и 1 5

<210> 133

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 133

аббасбасба дбддбадсас саба

<210> 134

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 134

11е ТЪг ТЪг Зег О1у Зег ТЪг 11е 1 5

24

- б0 030437

<210> 135

<211> 63

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 135

дсдададаад адЬдЬасЬаа ЬддЬдЬаЬдЬ ЬаЬааадасЬ ассадЬасЬа сддЬаЬддас 60 дЬс 63

<210> 136

<211> 21

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 136

А1а Агд О1и О1и Суз ТИг Азп О1у Уа1 Суз Туг Ьуз Азр Туг О1п Туг 1 5 10 15

Туг О1у МеЬ Азр Уа1 20

<210> 137

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 137

дасаЬссада ЬдасссадЬс ЬссаЬсЬЬсс дЬдЬсЬдсаЬ сЬдЬаддЬда сададЬсасс 60

аЬсасЬЬдЬс дддсдадЬса дааЬаЬЬаас ассЬддЬЬад ссЬддЬаЬса дсадааасса 120

дддааадЬсс сЬаадсЬссЬ даЬсЬаЬдсЬ дсаЬссадЬЬ ЬдсааадЬдд ддЬсссаЬса 180

адаЬЬсадсд дсадЬддаЬс ЬдддасадаЬ ЬЬсасЬсЬса ссаЬсадсад ссЬдсадссЬ 240

даадаЬЬЬЬд саасЬЬасЬа ЬЬдЬсаасад дсЬаасадЬЬ ЬсссЬсЬсас ЬЬЬсддсдда 300

дддассаадд ЬддадаЬсаа а 321

<210> 138

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 138

Азр 1

11е

О1п МеЬ

ТИг 5

О1п

Зег

Рго

Зег

Зег Уа1 10

Зег

А1а

Зег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТИг

11е

ТИг

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

Азп

11е

Азп

ТИг

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

Уа1

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Зег

Ьеи

О1п

Зег

О1у

Уа1

Рго

Зег

Агд

РИе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

С1у

Зег

С1у

ТИг

Азр

РИе

ТИг

Ьеи

ТИг

11е

Зег

Ьеи

О1п

Рго

- 61 030437

65

70

75

80

О1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз О1п О1п А1а Азп Бег РЬе Рго Ьеи

95

85

90

ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз

	100	105
<210>	139
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	139
садааЕаЕЕа асассЕдд
<210>	140
<211>	6
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	140
О1п Азп 11е Азп ТЬг	Тгр
1	5
<210>	141
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	141
дсЕдсаЕсс
<210>	142
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	142
А1а А1а Бег
1
<210>	143
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность

18

- 62 030437

<400> 143

саасаддсЕа асадЕЕЕссс ЕсЕсасЕ 27

<210> 144

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 144

О1п О1п А1а Азп Зег РЬе Рго Ьеи ТЬг 1 5

<210> 145

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 145

даааЕЕдЕаЕ ЕдасасадЕс Ессадссасс сЕдЕсЕЕЕдЕ сЕссадддда аададссасс 60

сЕсЕссЕдса дддссадЕса дадЕдЕЕадс аасЕасЕЕад ссЕддЕасса асадааассЕ 120

ддссаддсЕс ссаддсЕссЕ саЕсЕаЕдаЕ дсаЕссааса дддссасЕдд саЕсссадсс 180

аддЕЕсадЕд дсадЕдддЕс Едддасадас ЕЕсасЕсЕса ссаЕсадсад ссЕЕдаассЕ 240

даадаЕЕЕЕд сЕдЕЕЕаЕЕа сЕдЕсадсад сдЕдасдасЕ ддссЕссдЕа сасЕЕЕЕддс 300

саддддасса ддсЕддадаЕ сааа 324

<210> 146

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 146

О1и 1

11е

Уа1

Ьеи

ТЬг 5

О1п

Зег

Рго

А1а

ТЬг 10

Ьеи

Зег

Ьеи

Зег

Рго 15

О1у

О1и

Агд

А1а

ТЬг

Ьеи

Зег

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

Зег

Уа1

Зег

Азп

Туг

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

О1п

А1а

Рго

Агд

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

Азр

А1а

Зег

Азп

Агд

А1а

ТЬг

О1у

11е

Рго

А1а

Агд

РЬе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

О1у

Зег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Зег

Ьеи

О1и

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

Уа1

Туг

Суз

О1п

Агд

Азр

Тгр

Рго

85

90

95

Туг

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Агд

Ьеи

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 147

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

- 63 030437

<223> Искусственная последовательность

<400> 147

сададбдбба дсаасбас

<210> 148

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 148

О1п Бег Уа1 Бег Азп Туг 1 5

<210>	149
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная
<400>	149
дабдсабсс

последовательность

<210> 150

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 150

Азр А1а Бег

1

<210> 151

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 151

садсадсдбд асдасбддсс бссдбасасб

<210> 152

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 152

О1п О1п Агд Азр Азр Тгр Рго Рго Туг ТЬг

18

30

- 64 030437

10

<210> 153

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 153

даааЬадЬда ЬдасдсадЬс Ьссадссасс сЬдЬсЬдЬдЬ сЬссадддда аададЬсасс 60

сЬсЬссЬдса дддссадЬса дадЬдЬЬадЬ адЬаасЬЬад ссЬддЬасса дсадааассЬ 120

ддссаддсЬс сссддсЬссЬ саЬсЬаЬддЬ ЬсаЬссасса дддссасЬдд ЬаЬсссадсс 180

аддЬЬсадЬд дсадЬдддЬс Ьдддасадаа ЬЬсасЬсЬса ссаЬсадсад ссЬдсадЬсЬ 240

даддаЬЬЬЬд садЬЬЬаЬЬа сЬдЬсадсад ЬаЬдаЬдасЬ ддссЬссдсЬ сасЬЬЬсддс 300

ддадддасса аддЬддаЬаЬ сааа 324

<210> 154

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 154

О1и 1

11е

Уа1

МеЬ

ТЬг 5

О1п

Зег

Рго

А1а

ТЬг 10

Ьеи

Зег

Уа1

Зег

Рго 15

О1у

О1и

Агд

Уа1

ТЬг

Ьеи

Зег

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

Зег

Уа1

Зег

Азп

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

О1п

А1а

Рго

Агд

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

О1у

Зег

ТЬг

Агд

А1а

ТЬг

О1у

11е

Рго

А1а

Агд

РЬе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

О1у

Зег

О1у

ТЬг

О1и

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Зег

Ьеи

О1п

Зег

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

Уа1

Туг

Суз

О1п

Туг

Азр

Тгр

Рго

85

90

95

Ьеи

ТЬг

РЬе

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

Азр

11е

Ьуз

100

105

<210> 155

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 155

сададЬдЬЬа дЬадЬаас 18

<210> 156

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

- 65 030437

<400> 156

Ο1η Бег Уа1 Бег Бег Азп

1	5
<210>	157
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность

<400> 157 ддЕЕсаЕсс

<210> <211> <212> <213>	158 3 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность

<400> 158 О1у Бег Бег

1
<210>	159
<211>	30
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность

<400> 159

садсадЕаЕд аЕдасЕддсс ЕссдсЕсасЕ

30

<210> <211> <212> <213>	160 10 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность
<400> 160 Ο1η Ο1η Туг Азр Азр	Тгр Рго Рго Ьеи ТЬг
1	5	10

<210> <211> <212> <213>	161 363 ДНК Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	161

саддЕдсдас ЕддЕддадЕс ЕддадсЕдад дЕдаадаадс сЕддддссЕс адЕдааддЕс 60

- 66 030437

ЕссЕдсаада сЕЕсЕддЕЕа сассЕЕЕдсс ддсЕаЕддЕа ЕсасЕЕдддЕ дсдасаддсс 120

ссЕддасдад дасЕЕдадЕд даЕдддаЕдд дЕсадсдсЕЕ асааЕддЕда сасадасЕаЕ 180

дсасададсс Ессадддсад адЕсассаЕд ассасадаса саЕссасдад сасадссЕас 240

аЕддадсЕда ддадссЕдад аЕсЕдасдас асддссаЕдЕ аЕЕасЕдЕдс дададаЕсдд 300

ЕаЕадсадсЕ сдЕсдддсЕа сЕЕЕдасЕас Еддддссадд даасссЕддЕ сассдЕсЕсс 360

Еса 363

<210> 162

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 162

О1п

Уа1

Агд

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

А1а

О1и

Уа1

Ьуз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

Бег

Уа1

Ьуз

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

ТЬг

Бег

О1у

Туг

ТЬг

РЬе

А1а

О1у

Туг

20

25

30

О1у

11е

ТЬг

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Агд

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЕ

35

40

45

О1у

Тгр

Уа1

Бег

А1а

Туг

Азп

О1у

Азр

ТЬг

Азр

Туг

А1а

О1п

Бег

Ьеи

50

55

60

О1п

О1у

Агд

Уа1

ТЬг

МеЕ

ТЬг

Азр

ТЬг

Бег

ТЬг

Бег

ТЬг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЕ

О1и

Ьеи

Агд

Бег

Ьеи

Агд

Бег

Азр

ТЬг

А1а

МеЕ

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Туг

Бег

О1у

Туг

РЬе

Азр

Туг

Тгр

О1у

100

105

110

О1п

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

<210> 163

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 163

ддЕЕасассЕ ЕЕдссддсЕа ЕддЕ 24

<210> 164

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная

<400> 164

О1у Туг ТЬг РЬе А1а 1 5

последовательность

О1у Туг О1у

<210> 165

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

- 67 030437

24

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 165

дЛсадсдсЛЛ асааЛддЛда саса

<210> 166

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 166

ναΐ Бег А1а Туг Азп О1у Азр ТИг 1 5

<210> 167

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 167

дсдададаЛс ддЛаЛадсад сЛсдЛсдддс ЛасЛЛЛдасЛ ас

42

<210> 168

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 168

А1а Агд Азр Агд Туг Бег Бег Бег Бег О1у Туг РИе Азр Туг 1 5 10

<210> 169

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 169

дасаЛсдЛда ЛдасссадЛс ЛссаЛсЛЛсс дЛдЛсЛдсаЛ сЛдЛаддада сададЛсасс 60

аЛсасЛЛдЛс дддсдадЛса дддЛаЛЛадс адсЛддЛЛад ссЛддсаЛса дсадааасса 120

дддааадссс сЛааддЛссЛ даЛсЛаЛдсд дсаЛссадЛЛ ЛдсаЛадЛдд ддЛссссЛса 180

аддЛЛсадсд дсадЛддаЛс Лдддасадаа ЛЛсасЛсЛса ссаЛсадсад ссЛдсадссЛ 240

даадаЛЛЛЛд саасЛЛасЛа ЛЛдЛсаасад дсЛаасасЛЛ ЛсссдЛасас ЛЛЛЛддссад 300

дддассаадд ЛддадаЛсаа асда 324

<210> 170

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

- 68 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 170

Азр 1

11е Уа1

Мек

ТЬг 5

О1п

Зег

Рго

Зег

Зег 10

Уа1

Зег

А1а

Зег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

О1у

11е

Зег

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Н1з

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Уа1

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Зег

Ьеи

Н1з

Зег

О1у

Уа1

Рго

Зег

Агд

РЬе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

О1у

Зег

О1у

ТЬг

О1и

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Зег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

ТЬг

РЬе

Рго

Туг

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210> 171

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 171

садддкакка дсадскдд

<210> 172

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 172

О1п О1у 11е Зег Зег Тгр 1 5

18

<210> 173

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 173

дсддсаксс

<210> 174

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

9

- 69 030437

<400> 174 А1а А1а Зег

1

<210> 175

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 175

саасаддсДа асасДДДссс дДасасД 27

<210> 176

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 176

О1п О1п А1а Азп ТЬг РЬе Рго Туг ТЬг 1 5

<210> 177

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 177

саддДдсадс ДддДасадДс ДддадсДдад дДдаадаадс сДддддссДс адДдааддДс 60

ДссДдсаада сДДсДддДДа сассДДДдсс ддсДаДддДа ДсасДДдддД дсдасаддсс 120

ссДддасдад дасДДдадДд даДдддаДдд дДсадсдсДД асааДддДда сасадасДаД 180

дсасададсс Дссадддсад адДсассаДд ассасадаса саДссасдад сасадссДас 240

аДддадсДда ддадссДдад аДсДдасдас асддссаДдД аДДасДдДдс дададаДсдд 300

ДаДадсадсД сдДсдддсДа сДДДдасДас Дддддссадд даасссДддД сассдДсДсс 360

Дса 363

<210> 178

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 178

О1п

Уа1

О1п

Беи

Уа1

О1п

Зег

О1у

А1а

О1и

Уа1

Буз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

Зег

Уа1

Буз

Уа1

Зег

Суз

Буз

ТЬг

Зег

О1у

Туг

ТЬг

РЬе

А1а

О1у

Туг

20

25

30

О1у

11е

ТЬг

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Агд

О1у

Беи

О1и

Тгр

МеД

35

40

45

О1у

Тгр

Уа1

Зег

А1а

Туг

Азп

О1у

Азр

ТЬг

Азр

Туг

А1а

О1п

Зег

Беи

- 70 030437

50

55

60

О1п

О1у

Агд

Уа1

ТЬг

Меб

ТЬг

Азр

ТЬг

Бег

ТЬг

Бег

ТЬг

А1а

Туг

65

70

75

80

Меб

О1и

Ьеи

Агд

Бег

Ьеи

Агд

Бег

Азр

ТЬг

А1а

Меб

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Туг

Бег

О1у

Туг

РЬе

Азр

Туг

Тгр

О1у

100

105

110

О1п

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

<210> 179

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 179

дасабссада бдасссадбс бссабсббсс дбдбсбдсаб сбдбаддада сададбсасс 60

абсасббдбс дддсдадбса дддбаббадс адсбддббад ссбддсабса дсадааасса 120

дддааадссс сбааддбссб дабсбабдсд дсабссадбб бдсабадбдд ддбссссбса 180

аддббсадсд дсадбддабс бдддасадаа ббсасбсбса ссабсадсад ссбдсадссб 240

даадаббббд саасббасба ббдбсаасад дсбаасасбб бсссдбасас ббббддссад 300

дддассаадс бддадабсаа а 321

<210> 180

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 180

Азр 1

11е

О1п

Меб

ТЬг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

О1у

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Нтз

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Уа1

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

Н1з

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

О1и

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

ТЬг

РЬе

Рго

Туг

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Ьеи

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 181

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 181

дссабссадб бдасссадбс бссабсббсс дбдбсбдсаб сбдбаддада сададбсасс 60 абсасббдбс дддсдадбса дддбаббадс адсбддббад ссбддбабса дсадааасса 120

- 71 030437

дддааадссс сЬаадсЬссЬ даЬдЬЬЬддЬ дсаЬссадЬЬ ЬдсааадЬдд ддЬсссаЬса 180

аддЬЬсадсд дсадЬддаЬс ЬдддасадаЬ ЬЬсаЬЬсЬса ссаЬсадсад ссЬдсадссЬ 240

даадаЬЬЬЬд саасЬЬасЬа ЬЬдЬсаасад дсЬаасадЬЬ ЬсссдЬасЬс ЬЬЬЬддссад 300

дддассаадд ЬддаааЬсаа асда 324

<210> 182

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 182

А1а 1

11е

О1п

Ьеи

ТИг 5

О1п

Зег

Рго

Зег

Зег Уа1 10

Зег

А1а

Зег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТИг

11е

ТИг

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

О1у

11е

Зег

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

МеЬ

35

40

45

РИе

О1у

А1а

Зег

Ьеи

О1п

Зег

О1у

Уа1

Рго

Зег

Агд

РИе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

О1у

Зег

О1у

ТИг

Азр

РИе

11е

Ьеи

ТИг

11е

Зег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РИе

А1а

ТИг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Зег

РИе

Рго

Туг

85

90

95

Зег

РИе

О1у

О1п

О1у

ТИг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210>	183
<211>	18
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная
<400>	183
садддЬаЬЬа дсадсЬдд
<210>	184
<211>	6
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная
<400>	184
О1п О1у 11е Зег Зег
1	5
<210>	185
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная
<400>	185

последовательность

Тгр

последовательность

18

- 72 030437

9

ддЕдсаЕсс
<210>	186
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	186
О1у А1а Бег 1
<210>	187
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	187
саасаддсЕа асадЕЕЕссс дЕасЕсЕ
<210>	188
<211>	9
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	188
Ο1η Ο1η А1а Азп Бег	РЬе Рго Туг Бег
1	5
<210>	189
<211>	321
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность

27

<400> 189

аЕсасЕЕдЕс дддсдадЕса дддЕаЕЕадс адсЕддЕЕад ссЕддЕаЕса дсадааасса 120

дддааадссс сЕаадсЕссЕ даЕдЕЕЕддЕ дсаЕссадЕЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕса 180

аддЕЕсадсд дсадЕддаЕс ЕдддасадаЕ ЕЕсаЕЕсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадссЕ 240

даадаЕЕЕЕд саасЕЕасЕа ЕЕдЕсаасад дсЕаасадЕЕ ЕсссдЕасЕс ЕЕЕЕддссад 300

дддассаадс ЕддадаЕсаа а 321

<210> 190

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

- 73 030437

<400> 190

Азр 1

11е

О1п

МеЕ

ТЬг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

О1у

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

МеЕ

35

40

45

РЬе

О1у

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

11е

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЬе

Рго

Туг

85

90

95

Бег

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Ьеи

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 191

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 191

даддЕдсадс ЕдЕЕддадЕс ЕддадсЕдад дЕдаадаадс сЕддддссдс адЕдааддЕс 60

ЕссЕдсаадд сЕЕсЕддЕЕа сассЕЕЕасс дссЕаЕддЕа ЕсадсЕдддЕ дсдасаддсс 120

ссЕддасаад ддсЕададЕд даЕдддаЕдд аЕсадсдсЕЕ асдаЕддЕда сасааасааЕ 180

дсасадаадЕ Ессадддсад адЕсассаЕд ассасадаса саЕссЕсдад сасадссЕас 240

аЕддадсЕда ддадссЕддд аЕсЕдасдас асддссдЕдЕ аЕЕасЕдЕдс дададаЕсдс 300

ЕаЕадсадсЕ ссЕсдддсЕа сЕЕЕдасЕас Еддддссадд даасссЕддЕ сассдЕсЕсс 360

Еса 363

<210> 192

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 192

О1и

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

А1а

О1и

Уа1

Ьуз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

А1а

Уа1

Ьуз

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

А1а

Бег

О1у

Туг

ТЬг

РЬе

ТЬг

А1а

Туг

20

25

30

О1у

11е

Бег

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

О1п

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЕ

35

40

45

О1у

Тгр

11е

Бег

А1а

Туг

Азр

О1у

Азр

ТЬг

Азп

А1а

О1п

Ьуз

РЬе

50

55

60

О1п

О1у

Агд

Уа1

ТЬг

МеЕ

ТЬг

Азр

ТЬг

Бег

ТЬг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЕ

О1и

Ьеи

Агд

Бег

Ьеи

О1у

Бег

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Туг

Бег

О1у

Туг

РЬе

Азр

Туг

Тгр

О1у

100

105

110

О1п

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

<210> 193

<211> 24

- 74 030437

<212> <213>

ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 193

ддббасассб ббассдссба бддб 24

<210> <211> <212> <213>

194 8 БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 194

О1у Туг ТЬг РЬе ТЬг А1а Туг О1у 1 5

<210> <211> <212> <213>

195 24 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 195

абсадсдсбб асдабддбда саса 24

<210> <211> <212> <213>

196 8 БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 196

11е Бег А1а Туг Азр О1у Азр ТЬг

1	5
<210> <211> <212> <213>	197 42 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 197

дсдададабс дсбабадсад сбссбсдддс басбббдасб ас 42

<210> <211> <212> <213>	198 14 БЕЛОК Искусственная последовательность
<220>

- 75 030437

<223> Искусственная

последовательность

<400> 198

А1а Агд Азр Агд Туг Бег Бег Бег Бег О1у Туг РЪе Азр Туг

1 5 10

<210> 199

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 199

дасаБсдБда БдасссадБс БссаБсББсс дБдБсБдсаБ сБдБаддада сададБсасс 60

аБсасББдБс дддсдадБса ддаБаББадс адсБддББад ссБддБсБса дсадаадсса 120

дддааадссс сБааддсссБ даБсБаБдсБ дсаБссадББ БдсааадБдд ддБсссаБса 180

аддББсадсд дсадБддаБс БдддасадаБ ББсасБсБса ссаБсадсад ссБдсадссБ 240

даадаББББд саасББасБа ББдБсаасад дсБаасадББ БсссдБасас ББББддссад 300

дддассаадд БддадаБсаа асда 324

<210> 200

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 200

Азр 1

11е Уа1

МеБ

ТЪг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег 10

Уа1

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЪг

11е

ТЪг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

Азр

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Бег

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

А1а

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЪе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЪг

Азр

РЪе

ТЪг

Ьеи

ТЪг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЪе

А1а

ТЪг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЪе

Рго

Туг

85

90

95

ТЪг

РЪе

О1у

О1п

О1у

ТЪг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210> 201

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 201

саддаБаББа дсадсБдд 18

<210> 202

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

- 76 030437

<220> <223> Искусственная <400> 202 Ο1η Азр 11е Бег Бег	последовательность Тгр
1	5
<210>	203
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	203
дсбдсабсс
<210>	204
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	204
А1а А1а Бег
1
<210>	205
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	205
саасаддсба асадбббссс дбасасб
<210>	206
<211>	9
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	206
Ο1η Ο1η А1а Азп Бег	РЬе Рго Туг ТЬг
1	5
<210>	207
<211>	363
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>

27

- 77 030437

<223> Искусственная последовательность

<400> 207

саддЕдсадс ЕддЕасадЕс ЕддадсЕдад дЕдаадаадс сЕддддссдс адЕдааддЕс 60

ЕаЕадсадсЕ ссЕсдддсЕа сЕЕЕдасЕас Еддддссадд даасссЕддЕ сасЕдЕсЕсс 360

Еса 363

<210> 208

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 208

Ο1η

Уа1

Ο1η

Ьеи

Уа1

Ο1η

Бег

О1у

А1а

О1и

Уа1

Ьуз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

А1а

Уа1

Ьуз

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

А1а

Бег

О1у

Туг

ТЬг

РЬе

ТЬг

А1а

Туг

20

25

30

О1у

11е

Бег

Тгр

Уа1

Агд

Ο1η

А1а

Рго

О1у

Ο1η

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЕ

35

40

45

О1у

Тгр

11е

Бег

А1а

Туг

Азр

О1у

Азр

ТЬг

Азп

А1а

Ο1η

Ьуз

РЬе

50

55

60

Ο1η

О1у

Агд

Уа1

ТЬг

МеЕ

ТЬг

Азр

ТЬг

Бег

ТЬг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЕ

О1и

Ьеи

Агд

Бег

Ьеи

О1у

Бег

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Туг

Бег

О1у

Туг

РЬе

Азр

Туг

Тгр

О1у

100

105

110

Ο1η

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

<210> 209

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 209

аЕсасЕЕдЕс дддсдадЕса ддаЕаЕЕадс адсЕддЕЕад ссЕддЕсЕса дсадаадсса 120

дддааадссс сЕааддсссЕ даЕсЕаЕдсЕ дсаЕссадЕЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕса 180

даадаЕЕЕЕд саасЕЕасЕа ЕЕдЕсаасад дсЕаасадЕЕ ЕсссдЕасас ЕЕЕЕддссад 300

дддассаадс ЕддадаЕсаа а 321

<210> 210

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 210

- 78 030437

Азр 1

11е

О1п

МеЬ

ТЪг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЪг

11е

ТЪг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

Азр

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Бег

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

А1а

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЪе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЪг

Азр

РЪе

ТЪг

Ьеи

ТЪг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЪе

А1а

ТЪг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЪе

Рго

Туг

85

90

95

ТЪг

РЪе

О1у

О1п

О1у

ТЪг

Ьуз

Ьеи

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 211

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 211

саддЬдсдас ЬддЬддадЬс ЬдддасЬдад дЬдаадаадс сЬддддссЬс адЬдааддЬс 60

ЬссЬдсаадд ЬЬЬссддаЬа сасссЬсаЬЬ дасЬЬаЬсса ЬасасЬдддЬ дсдасаддсЬ 120

ссЬддадаад дссЬЬдадЬд даЬддддддЬ ЬЬЬдаЬссЬд аадааадЬда аасааЬсЬаЬ 180

дсасадаааЬ Ьссадддсад адЬсассаЬд ассдаддаса саЬсЬасада сасадссЬас 240

аЬддадсЬаа дсадссЬдад аЬсЬдаддас асддссдЬсЬ аЬЬасЬдЬдЬ дасададссд 300

аЬЬЬЬЬддаа ЬссЬЬаЬсса ЬдадЬссЬдд ддссадддаа сссЬддЬсас ЬдЬсЬссЬса 360

<210> 212

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 212

О1п

Уа1

Агд

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

ТЪг

О1и

Уа1

Ьуз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

Бег

Уа1

Ьуз

Уа1

Бег

Суз

Ьуз

Уа1

Бег

О1у

Туг

ТЪг

Ьеи

11е

Азр

Ьеи

20

25

30

Бег

11е

Нгз

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

О1и

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЬ

35

40

45

О1у

РЪе

Азр

Рго

О1и

Бег

О1и

ТЪг

11е

Туг

А1а

О1п

Ьуз

РЪе

50

55

60

О1п

О1у

Агд

Уа1

ТЪг

МеЬ

ТЪг

О1и

Азр

ТЪг

Бег

ТЪг

Азр

ТЪг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЬ

О1и

Ьеи

Бег

Ьеи

Агд

Бег

О1и

Азр

ТЪг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

Уа1

ТЪг

О1и

Рго

11е

РЪе

О1у

11е

Ьеи

11е

Нгз

О1и

Бег

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЪг

Ьеи

Уа1

ТЪг

Уа1

Бег

115

120

<210> 213 <211> 24 <212> ДНК

- 79 030437

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 213

ддаЛасассс ЛсаЛЛдасЛЛ аЛсс

<210> 214

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 214

О1у Туг ТИг Ьеи 11е Азр Ьеи Бег 1 5

<210> 215

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 215

ЛЛЛдаЛссЛд аадааадЛда ааса

24

<210> <211> <212> <213>	216 8 БЕЛОК Искусственная
<220> <223>	Искусственная
<400> 216 РИе Азр Рго О1и О1и
1	5

последовательность

Бег О1и ТИг

<210>	217
<211>	39
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная

последовательность

<400> 217

дЛдасададс сдаЛЛЛЛЛдд ааЛссЛЛаЛс саЛдадЛсс

<210> 218

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

39

- 80 030437

<400> 218

Уа1 ТЪг О1и Рго 11е РЪе О1у 11е Ьеи 11е НФз О1и Зег

1 5 10

<210> 219

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 219

даааббдбдс бдасбсадас бссасбсбсс бсассбдбса сссббддаса дссддссбсс 60

абсбссбдса ддбсбадбса садссссдба сасадбаабд дасабассба сббдадббдд 120

сббсадсада ддссаддсса дссбссаада абссбааббб абаадабббс бадасддббс 180

бсбддддбсс садасадабб садбддсадб ддддсаддда садабббсас дсбдаадабс 240

адсадддбдд ааасбдадда бдбсдддабб баббасбдса бдсаадсббс асаабббссд 300

бддасдббсд дссаадддас сааадбддаб абсааасда 339

<210> 220

<211> 113

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 220

О1и 1

11е

Уа1

Ьеи

ТЪг 5

О1п

ТЪг

Рго

Ьеи

Зег 10

Зег

Рго

Уа1

ТЪг

Ьеи 15

О1у

О1п

Рго

А1а

Зег

11е

Зег

Суз

Агд

Зег

НФз

Зег

Рго

Уа1

НФз

Зег

20

25

30

Азп

О1у

НФз

ТЪг

Туг

Ьеи

Зег

Тгр

Ьеи

О1п

Агд

Рго

О1у

О1п

Рго

35

40

45

Рго

Агд

11е

Ьеи

11е

Туг

Ьуз

11е

Зег

Агд

РЪе

Зег

О1у

Уа1

Рго

50

55

60

Азр

Агд

РЪе

Зег

О1у

Зег

О1у

А1а

О1у

ТЪг

Азр

РЪе

ТЪг

Ьеи

Ьуз

11е

65

70

75

80

Зег

Агд

Уа1

О1и

ТЪг

О1и

Азр

Уа1

О1у

11е

Туг

Суз

Меб

О1п

А1а

85

90

95

Зег

О1п

РЪе

Рго

Тгр

ТЪг

РЪе

О1у

О1п

О1у

ТЪг

Ьуз

Уа1

Азр

11е

Ьуз

100

105

110

Агд

<210> 221

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 221

сасадссссд басасадбаа бддасабасс бас 33

<210> 222 <211> 11 <212> БЕЛОК

- 81 030437

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 222

Н1з Бег Рго Уа1 Н1з Бег Азп О1у Н1з ТЬг Туг

1 5 10

<210> 223

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 223

аадабббсб

<210> 224

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 224

Ьуз 11е Бег

1

<210> 225

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 225

абдсаадсбб сасаабббсс дбддасд

27

<210> 226

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 226

Меб О1п А1а Бег О1п РЬе Рго Тгр ТЬг

<210> 227

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

- 82 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 227

саддЕдсадс ЕддЕасадЕс ЕдддасЕдад дЕдаадаадс сЕддддссЕс адЕдааддЕс 60

ЕссЕдсаадд ЕЕЕссддаЕа сасссЕсаЕЕ дасЕЕаЕсса ЕасасЕдддЕ дсдасаддсЕ 120

ссЕддадаад дссЕЕдадЕд даЕддддддЕ ЕЕЕдаЕссЕд аадааадЕда аасааЕсЕаЕ 180

дсасадаааЕ Ессадддсад адЕсассаЕд ассдаддаса саЕсЕасада сасадссЕас 240

аЕддадсЕаа дсадссЕдад аЕсЕдаддас асддссдЕсЕ аЕЕасЕдЕдЕ дасададссд 300

аЕЕЕЕЕддаа ЕссЕЕаЕсса ЕдадЕссЕдд ддссадддаа сссЕддЕсас сдЕсЕссЕса 360

<210> 228

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 228

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1п

Зег

О1у

ТЬг

О1и

Уа1

Ьуз

Рго

О1у

А1а

1

5

10

15

Зег

Уа1

Ьуз

Уа1

Зег

Суз

Ьуз

Уа1

Зег

О1у

Туг

ТЬг

Ьеи

11е

Азр

Ьеи

20

25

30

Зег

11е

Нтз

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

О1и

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

МеЕ

35

40

45

О1у

РЬе

Азр

Рго

О1и

Зег

О1и

ТЬг

11е

Туг

А1а

О1п

Ьуз

РЬе

50

55

60

О1п

О1у

Агд

Уа1

ТЬг

МеЕ

ТЬг

О1и

Азр

ТЬг

Зег

ТЬг

Азр

ТЬг

А1а

Туг

65

70

75

80

МеЕ

О1и

Ьеи

Зег

Ьеи

Агд

Зег

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

Уа1

ТЬг

О1и

Рго

11е

РЬе

О1у

11е

Ьеи

11е

Нтз

О1и

Зег

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Зег

115

120

<210> 229

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 229

даЕаЕЕдЕда ЕдасЕсадас ЕссасЕсЕсс ЕсассЕдЕса сссЕЕддаса дссддссЕсс 60

аЕсЕссЕдса ддЕсЕадЕса садссссдЕа сасадЕааЕд дасаЕассЕа сЕЕдадЕЕдд 120

сЕЕсадсада ддссаддсса дссЕссаада аЕссЕааЕЕЕ аЕаадаЕЕЕс ЕадасддЕЕс 180

ЕсЕддддЕсс садасадаЕЕ садЕддсадЕ ддддсаддда садаЕЕЕсас дсЕдаадаЕс 240

адсадддЕдд ааасЕдадда ЕдЕсдддаЕЕ ЕаЕЕасЕдса ЕдсаадсЕЕс асааЕЕЕссд 300

ЕддасдЕЕсд дссаадддас сааддЕддаа аЕсааа 336

<210> 230

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

- 83 030437

<400> 230

Азр 1

11е

Уа1

МеЬ

ТЬг 5

О1п

ТЬг

Рго

Ьеи

Зег 10

Зег

Рго

Уа1

ТЬг

Ьеи 15

О1у

О1п

Рго

А1а

Зег

11е

Зег

Суз

Агд

Зег

НФз

Зег

Рго

Уа1

НФз

Зег

20

25

30

Азп

О1у

НФз

ТЬг

Туг

Ьеи

Зег

Тгр

Ьеи

О1п

Агд

Рго

О1у

О1п

Рго

35

40

45

Рго

Агд

11е

Ьеи

11е

Туг

Ьуз

11е

Зег

Агд

РЬе

Зег

О1у

Уа1

Рго

50

55

60

Азр

Агд

РЬе

Зег

О1у

Зег

О1у

А1а

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

Ьуз

11е

65

70

75

80

Зег

Агд

Уа1

О1и

ТЬг

О1и

Азр

Уа1

О1у

11е

Туг

Суз

МеЬ

О1п

А1а

85

90

95

Зег

О1п

РЬе

Рго

Тгр

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

110

<210> 231

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 231

саддЬдсагс ЬддЬддадЬс Ьдддддаддс ЬЬддЬссадс сЬдддддаЬс ссЬдадасЬс 60

ЬссЬдЬдсад ссЬсЬддаЬЬ сассЬЬЬадЬ адЬЬаЬЬдда ЬдадЬЬдддЬ ссдссаддсЬ 120

ссадддаадд ддсЬддадЬд ддЬддссаас аЬааЬдсдад аЬддаадЬда даааЬаЬЬаЬ 180

дЬддасЬсЬд Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададаса асдссаадаа сЬсасЬдЬаЬ 240

сЬдсаааЬда асадссЬдад аддсдаддас асддсЬдЬсЬ аЬЬасЬдЬдс дададааадд 300

дддЬЬсЬаса сЬаасЬасдд даасЬддЬЬс дассссЬддд дссадддаас ссЬддЬсасс 360

дЬсЬссЬса 369

<210> 232

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 232

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Зег

О1у

Ьеи

Уа1

О1п

Рго

О1у

1

5

10

15

Зег

Ьеи

Агд

Ьеи

Зег

Суз

А1а

Зег

О1у

РЬе

ТЬг

РЬе

Зег

Туг

20

25

30

Тгр

МеЬ

Зег

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Азп

11е

МеЬ

Агд

Азр

О1у

Зег

О1и

Ьуз

Туг

Уа1

Азр

Зег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

ТЬг

11е

Зег

Агд

Азр

Азп

А1а

Ьуз

Азп

Зег

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеЬ

Азп

Зег

Ьеи

Агд

О1у

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

О1и

Агд

О1у

РЬе

Туг

ТЬг

Азп

Туг

О1у

Азп

Тгр

РЬе

Азр

Рго

100

105

110

Тгр

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Зег

115

120

<210> 233

<211> 24

- 84 030437

<212> <213>

ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 233

ддаЕЕсассЕ ЕЕадЕадЕЕа ЕЕдд 24

<210> <211> <212> <213>

234 8 БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 234

О1у РЬе ТЬг РЬе Бег Бег Туг Тгр

1	5
<210> <211> <212> <213>	235 24 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 235

аЕааЕдсдад аЕддаадЕда дааа 24

<210> <211> <212> <213>

236 8 БЕЛОК Искусственная последовательность

<220> <223>

Искусственная последовательность

<400> 236

11е МеЕ Агд Азр О1у Бег О1и Ьуз

1	5
<210> <211> <212> <213>	237 48 ДНК Искусственная последовательность

<220> <223>	Искусственная последовательность
<400>	237

дсдададааа дддддЕЕсЕа сасЕаасЕас дддаасЕддЕ Есдасссс 48

<210> <211> <212> <213>	238 16 БЕЛОК Искусственная последовательность
<220>

- 85 030437

<223> Искусственная

последовательность

<400> 238

А1а Агд О1и Агд О1у РЬе Туг ТЬг Азп Туг О1у Азп Тгр РЬе Азр Рго 1 5 10 15

<210> 239

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 239

дасабссбда бдасссадбс бссасбсбсс сбдассдбса ссссбддада дбсддссбсс 60

абсбссбдса ддбсбадбса дадссбссбд сабадббабд дабасааббс бббддаббдд 120

бассбдсада адссадддса дбсбссасад ббссбдабсб абббддбббс баабсдддсс 180

бссддддбсс сбдасаддбб садбддсадб ддабсаддса садаббббас асбдаааабс 240

адсададбдд аддсбдадда бдббддддбб баббасбдса бдсаадббсб асааасбссд 300

басасббббд дссаддддас сааддбддад абсааасда 339

<210> 240

<211> 113

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 240

Азр 1

11е

Ьеи

Меб

ТЬг 5

Ο1η

Бег

Рго

Ьеи

Бег 10

Ьеи

ТЬг

Уа1

ТЬг

Рго 15

О1у

О1и

Бег

А1а

Бег

11е

Бег

Суз

Агд

Бег

Ο1η

Бег

Ьеи

Няз

Бег

20

25

30

Туг

О1у

Туг

Азп

Бег

Ьеи

Азр

Тгр

Туг

Ьеи

Ο1η

Ьуз

Рго

О1у

Ο1η

Бег

35

40

45

Рго

Ο1η

РЬе

Ьеи

11е

Туг

Ьеи

Уа1

Бег

Азп

Агд

А1а

Бег

О1у

Уа1

Рго

50

55

60

Азр

Агд

РЬе

Бег

О1у

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

Ьуз

11е

65

70

75

80

Бег

Агд

Уа1

О1и

А1а

О1и

Азр

Уа1

О1у

Уа1

Туг

Суз

Меб

Ο1η

Уа1

85

90

95

Ьеи

Ο1η

ТЬг

Рго

Туг

ТЬг

РЬе

О1у

Ο1η

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

110

Агд

<210> 241

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 241

сададссбсс бдсабадбба бддабасааб бсб 33

<210> 242 <211> 11

- 86 030437

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 242

О1п Зег Ьеи Ьеи Н1з Зег Туг О1у Туг Азп Зег

1 5 10

<210> 243

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 243

ккддкккск

<210> 244

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 244

Ьеи Уа1 Зег

1

<210> 245

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 245

акдсаадккс касааасксс дкасаск

27

<210> 246

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 246

Мек О1п Уа1 Ьеи О1п ТЬг Рго Туг ТЬг

<210> 247

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

- 87 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 247

даддЬдсадс ЬддЬддадЬс Ьдддддаддс ЬЬддЬссадс сЬдддддаЬс ссЬдадасЬс 60

дЬсЬссЬса 369

<210> 248

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 248

О1и

Уа1

О1п

Ьей

Уа1

О1и

Бег

О1у

Ьей

Уа1

О1п

Рго

О1у

1

5

10

15

Бег

Ьей

Агд

Ьей

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РЬе

ТЬг

РЬе

Бег

Туг

20

25

30

Тгр

МеЬ

Бег

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьей

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Азп

11е

МеЬ

Агд

Азр

О1у

Бег

О1и

Ьуз

Туг

Уа1

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

ТЬг

11е

Бег

Агд

Азр

Азп

А1а

Ьуз

Азп

Бег

Ьей

Туг

65

70

75

80

Ьей

О1п

МеЬ

Азп

Бег

Ьей

Агд

О1у

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

О1и

Агд

О1у

РЬе

Туг

ТЬг

Азп

Туг

О1у

Азп

Тгр

РЬе

Азр

Рго

100

105

110

Тгр

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьей

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

<210> 249

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 249

дасаЬсдЬда ЬдасссадЬс ЬссасЬсЬсс сЬдассдЬса ссссЬддада дЬсддссЬсс 60

аЬсЬссЬдса ддЬсЬадЬса дадссЬссЬд саЬадЬЬаЬд даЬасааЬЬс ЬЬЬддаЬЬдд 120

ЬассЬдсада адссадддса дЬсЬссасад ЬЬссЬдаЬсЬ аЬЬЬддЬЬЬс ЬааЬсдддсс 180

ЬссддддЬсс сЬдасаддЬЬ садЬддсадЬ ддаЬсаддса садаЬЬЬЬас асЬдааааЬс 240

адсададЬдд аддсЬдадда ЬдЬЬддддЬЬ ЬаЬЬасЬдса ЬдсаадЬЬсЬ асааасЬссд 300

ЬасасЬЬЬЬд дссаддддас саадсЬддад аЬсааа 336

<210> 250

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

- 88 030437

<400> 250

Азр

11е

Уа1

МеЕ

ТЪг

О1п

Бег

Рго

Ьеи

Бег

Ьеи

ТЪг

Уа1

ТЪг

Рго

О1у

1

5

10

15

О1и

Бег

А1а

Бег

11е

Бег

Суз

Агд

Бег

О1п

Бег

Ьеи

Няз

Бег

20

25

30

Туг

О1у

Туг

Азп

Бег

Ьеи

Азр

Тгр

Туг

Ьеи

О1п

Ьуз

Рго

О1у

О1п

Бег

35

40

45

Рго

О1п

РЪе

Ьеи

11е

Туг

Ьеи

Уа1

Бег

Азп

Агд

А1а

Бег

О1у

Уа1

Рго

50

55

60

Азр

Агд

РЪе

Бег

О1у

Бег

С1у

Бег

С1у

ТЪг

Азр

РЪе

ТЪг

Ьеи

Ьуз

11е

65

70

75

80

Бег

Агд

Уа1

О1и

А1а

О1и

Азр

Уа1

С1у

Уа1

Туг

Суз

МеЕ

О1п

Уа1

85

90

95

Ьеи

О1п

ТЪг

Рго

Туг

ТЪг

РЪе

С1у

О1п

С1у

ТЪг

Ьуз

Ьеи

О1и

11е

Ьуз

100

105

110

<210> 251

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 251

саддЕдсадс ЕддЕддадЕс Едддддаддс дЕддЕссадс сЕдддаддЕс ссЕдадасЕс 60

ЕссЕдЕдсад сдЕсЕддаЕЕ сассЕЕсадЕ ааЕЕаЕддса ЕдсасЕдддЕ ссдссаддсЕ 120

ссаддсаадд ддсЕддадЕд ддЕддсадЕЕ аЕЕЕддЕаЕд аЕдааадЕад ЕаааЕасЕаЕ 180

асадасЕссд Едаадддссд аЕЕсассаЕс Ессададаса аЕЕсссадаа сасдсЕдЕаЕ 240

сЕдсаааЕда ссадссЕдад адссдаддас асддсЕдЕдЕ аЕЕасЕдЕдс дададаЕсдс 300

ЕддассЕасЕ сссасЕасЕЕ ЕдааЕаЕЕдд ддссадддаа сссЕддЕсас ЕдЕсЕссЕса 360

<210> 252

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 252

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РЪе

ТЪг

РЪе

Бег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

МеЕ

Няз

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

О1и

Бег

Ьуз

Туг

ТЪг

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЪе

ТЪг

11е

Бег

Агд

Азр

Азп

Бег

О1п

Азп

ТЪг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеЕ

ТЪг

Бег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТЪг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТЪг

Туг

Бег

Няз

Туг

РЪе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЪг

Ьеи

Уа1

ТЪг

Уа1

Бег

115

120

<210> 253

- 89 030437

24

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 253

ддаДДсассД ДсадДааДДа Дддс

<210> 254

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 254

О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Азп Туг О1у 1 5

<210> 255

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 255

аДДДддДаДд аДдааадДад Дааа

24

<210> 256

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 256

11е Тгр Туг Азр О1и Зег Зег Ьуз 1 5

<210> 257

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 257

дсдададаДс дсДддассДа сДсссасДас ДДДдааДаД

39

<210> 258

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

- 90 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 258

А1а Агд Азр Агд Тгр ТЬг Туг Бег Н1з Туг РЬе О1и Туг

1 5 10

<210> 259

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 259

дасабссадб бдасссадбс бссабсббсс дбдбсбдсаб сбдбаддада сададбсасс 60

абсасббдбс дддсдадбса дддбаббадс адсбдддбад ссбддбабса дсадааасса 120

дддааадссс сбааасбссб дабсбабдсб дсабссадбб бдсааадбдд ддбсссабсб 180

даадаббббд саасббасба ббдбсаасад дсбаасадбб бсссбсддас дббсддссаа 300

дддассааад бддадабсаа асда 324

<210> 260

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 260

Азр 1

11е

О1п

Ьеи

ТЬг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

О1у

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Уа1

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЬе

Рго

Агд

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210> 261

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 261

садддбабба дсадсбдд 18

<210> 262 <211> 6 <212> БЕЛОК

- 91 030437

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 262

О1п О1у 11е Бег Бег Тгр 1 5

<210> 263

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>
<223>	Искусственная
<400>	263
дсЛдсаЛсс
<210>	264
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная

последовательность

<400> 264 А1а А1а Бег

1

<210> 265

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 265

саасаддсЛа асадЛЛЛссс Лсддасд

<210> 266

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 266

О1п О1п А1а Азп Бег РИе Рго Агд ТИг 1 5

27

<210> 267

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

- 92 030437

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 267

саддкдсадс кддкддадкс кдддддаддс дкддкссадс скдддаддкс сскдадаскс 60

ксскдкдсад сдкскддакк сасскксадк ааккакддса кдсаскдддк ссдссаддск 120

ссаддсаадд ддскддадкд ддкддсадкк акккддкакд акдааадкад кааакаскак 180

асадаскссд кдаадддссд акксассакс кссададаса акксссадаа сасдскдкак 240

скдсааакда ссадсскдад адссдаддас асддскдкдк аккаскдкдс дададаксдс 300

кддасскаск сссаскаскк кдаакаккдд ддссадддаа ссскддксас сдксксскса 360

<210> 268

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 268

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Зег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Зег

Ьеи

Агд

Ьеи

Зег

Суз

А1а

Зег

О1у

РИе

ТИг

РИе

Зег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

Мек

Нтз

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

О1и

Зег

Ьуз

Туг

ТИг

Азр

Зег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РИе

ТИг

11е

Зег

Агд

Азр

Азп

Зег

О1п

Азп

ТИг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

Мек

ТИг

Зег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТИг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТИг

Туг

Зег

Н1з

Туг

РИе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТИг

Ьеи

Уа1

ТИг

Уа1

Зег

115

120

<210> 269

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 269

дасакссада кдасссадкс кссакскксс дкдкскдсак скдкаддада сададксасс 60

аксасккдкс дддсдадкса дддкаккадс адскдддкад сскддкакса дсадааасса 120

дддааадссс скааасксск дакскакдск дсакссадкк кдсааадкдд ддксссакск 180

аддкксадсд дсадкддакс кдддасадак кксаскскса ссаксадсад сскдсадсск 240

даадаккккд саасккаска ккдксаасад дскаасадкк ксссксддас дкксддссаа 300

дддассаадд кддадаксаа а 321

<210> 270

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

- 93 030437

<400> 270

Азр 1

11е

О1п

МеЕ

ТЬг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

О1у

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Уа1

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЬе

Рго

Агд

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 271

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 271

ЕссЕдЕдсад сдЕсЕддаЕЕ сассЕЕсадЕ аасЕаЕддса ЕдсаЕЕдддЕ ссдссаддсЕ 120

ссаддсаадд дЕсЕддадЕд ддЕддсадЕЕ аЕЕЕддЕаЕд аЕдааадЕдд ЕааасасЕаЕ 180

дсадасЕссд Едаадддссд аЕЕсассаЕс Ессададаса аЕЕсссадаа сасдсЕдЕаЕ 240

ЕддассЕасЕ сссасЕасЕЕ ЕдааЕаЕЕдд ддссадддаа сссЕддЕсас сдЕсЕссЕса 360

<210> 272

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 272

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РЬе

ТЬг

РЬе

Бег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

МеЕ

ΗΪ8

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

О1и

Бег

О1у

Ьуз

Н1з

Туг

А1а

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

ТЬг

11е

Бег

Агд

Азр

Азп

Бег

О1п

Азп

ТЬг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеЕ

ТЬг

Бег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТЬг

Туг

Бег

Н1з

Туг

РЬе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

<210> 273

<211> 24

- 94 030437

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 273

ддакксасск ксадкааска кддс

<210> 274

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 274

О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Азп Туг О1у 1 5

<210> 275

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 275

акккддкакд акдааадкдд кааа

24

<210> <211> <212> <213>	276 8 БЕЛОК Искусственная
<220> <223>	Искусственная
<400> 276 11е Тгр Туг Азр О1и
1	5

последовательность

Зег О1у Ьуз

<210>	277
<211>	39
<212>	ДНК
<213>	Искусственная
<220>
<223>	Искусственная

последовательность

<400> 277

дсдададакс дскддасска сксссаскас кккдаакак

39

<210> 278

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

- 95 030437

<223> Искусственная

последовательность

<400> 278

1 5 10

<210> 279

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 279

абсасббдбс дддсдадбса ддабаббадс адсбдддбад ссбддбабса асадааасса 120

дддассаадд бддадабсаа асда 324

<210> 280

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 280

Азр 1

11е

О1п

Меб

ТЬг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

Азр

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Уа1

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЬе

Рго

Агд

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210> 281

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 281

саддабабба дсадсбдд 18

<210> 282

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

- 96 030437

<220> <223> Искусственная <400> 282 О1п Азр 11е Зег Зег	последовательность Тгр
1	5
<210>	283
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	283
дсДдсаДсс
<210>	284
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	284
А1а А1а Зег
1
<210>	285
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	285
саасаддсДа асадДДДссс Дсддасд
<210>	286
<211>	9
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	286
О1п О1п А1а Азп Зег	РЬе Рго Агд ТЬг
1	5
<210>	287
<211>	360
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>

27

- 97 030437

<223> Искусственная последовательность

<400> 287

саддЬдсадс ЬддЬддадЬс Ьдддддаддс дЬддЬссадс сЬдддаддЬс ссЬдадасЬс 60

ЬссЬдЬдсад сдЬсЬддаЬЬ сассЬЬсадЬ аасЬаЬддса ЬдсаЬЬдддЬ ссдссаддсЬ 120

ссаддсаадд дЬсЬддадЬд ддЬддсадЬЬ аЬЬЬддЬаЬд аЬдааадЬдд ЬааасасЬаЬ 180

дсадасЬссд Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададаса аЬЬсссадаа сасдсЬдЬаЬ 240

сЬдсаааЬда ссадссЬдад адссдаддас асддсЬдЬдЬ аЬЬасЬдЬдс дададаЬсдс 300

ЬддассЬасЬ сссасЬасЬЬ ЬдааЬаЬЬдд ддссадддаа сссЬддЬсас ЬдЬсЬссЬса 360

<210> 288

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 288

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Зег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Зег

Ьеи

Агд

Ьеи

Зег

Суз

А1а

Зег

О1у

РИе

ТИг

РИе

Зег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

МеЬ

Няз

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

О1и

Зег

О1у

Ьуз

Няз

Туг

А1а

Азр

Зег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РИе

ТИг

11е

Зег

Агд

Азр

Азп

Зег

О1п

Азп

ТИг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеЬ

ТИг

Зег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТИг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТИг

Туг

Зег

Няз

Туг

РИе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТИг

Ьеи

Уа1

ТИг

Уа1

Зег

115

120

<210> 289

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 289

дасаЬссада ЬдасссадЬс ЬссаЬсЬЬсс дЬдЬсЬдсаЬ сЬдЬаддада сададЬсасс 60

аЬсасЬЬдЬс дддсдадЬса ддаЬаЬЬадс адсЬдддЬад ссЬддЬаЬса асадааасса 120

дддааадссс сЬааасЬссЬ даЬсЬаЬдсЬ дсаЬссадЬЬ ЬдсааадЬдд ддЬсссаЬсЬ 180

аддЬЬсадсд дсадЬддаЬс ЬдддасадаЬ ЬЬсасЬсЬса ссаЬсадсад ссЬдсадссЬ 240

даадаЬЬЬЬд саасЬЬасЬа ЬЬдЬсаасад дсЬаасадЬЬ ЬсссЬсддас дЬЬсддссаа 300

дддассаадд ЬддадаЬсаа а 321

<210> 290

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 290

- 98 030437

Азр 1

11е

О1п

МеБ

ТЪг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЪг

11е

ТЪг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

Азр

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Уа1

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЪе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЪг

Азр

РЪе

ТЪг

Ьеи

ТЪг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЪе

А1а

ТЪг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЪе

Рго

Агд

85

90

95

ТЪг

РЪе

О1у

О1п

О1у

ТЪг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 291

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 291

даддБдсадБ БдББддадБс Бдддддаддс дБддБссадс сБдддаддБс ссБдадасБс 60

БссБдБдсад сдБсБддаББ сассББсадБ ааББаБддса БдсасБдддБ ссдссаддсБ 120

ссаддсаадд ддсБддадБд ддБддсадББ аБББддБаБд аБдааадБад БаааБасБаБ 180

асадасБссд Бдаадддссд аББсассаБс Бссададаса аББсссадаа сасдсБдБаБ 240

сБдсаааБда ссадссБдад адссдаддас асддсБдБдБ аББасБдБдс дададаБсдс 300

БддассБасБ сссасБасББ БдааБаББдд ддссадддаа сссБддБсас сдБсБссБса 360

<210> 292

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 292

О1и

Уа1

О1п

Ьеи

О1и

Бег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РЪе

ТЪг

РЪе

Бег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

МеБ

Н1з

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

О1и

Бег

Ьуз

Туг

ТЪг

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЪе

ТЪг

11е

Бег

Агд

Азр

Азп

Бег

О1п

Азп

ТЪг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеБ

ТЪг

Бег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТЪг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТЪг

Туг

Бег

Н1з

Туг

РЪе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЪг

Ьеи

Уа1

ТЪг

Уа1

Бег

115

120

<210> 293 <211> 24 <212> ДНК

- 99 030437

24

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 293

ддаЛЛсассЛ ЛсадЛааЛЛа Лддс

<210> 294

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 294

О1у РИе ТИг РИе Бег Азп Туг О1у 1 5

<210> 295

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 295

аЛЛЛддЛаЛд аЛдааадЛад Лааа

24

<210> 296

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 296

11е Тгр Туг Азр О1и Бег Бег Ьуз 1 5

<210> 297

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 297

дсдададаЛс дсЛддассЛа сЛсссасЛас ЛЛЛдааЛаЛ

<210> 298

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

39

- 100 030437

<400> 298

А1а Агд Азр Агд Тгр ТЬг Туг Бег НФз Туг РЬе О1и Туг 1 5 10

<210> 299

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 299

аЕсасЕЕдЕс дддсдадЕса дддЕаЕЕадс адсЕдддЕад ссЕддЕаЕса дсадааасса 120

дддааадссс сЕааасЕссЕ даЕсЕаЕдсЕ дсаЕссадЕЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕсЕ 180

даадаЕЕЕЕд саасЕЕасЕа ЕЕдЕсаасад дсЕаасадЕЕ ЕсссЕсддас дЕЕсддссаа 300

дддассаадд ЕддадаЕсаа асда 324

<210> 300

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 300

Азр 1

11е

Ο1η

МеЕ

ТЬг 5

Ο1η

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

Ο1η

О1у

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Уа1

А1а

Тгр

Туг

Ο1η

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

Ο1η

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Ьеи

Ο1η

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

Ο1η

А1а

Азп

Бег

РЬе

Рго

Агд

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

Ο1η

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210> 301

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 301

садддЕаЕЕа дсадсЕдд

<210> 302

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

18

- 101

030437

<220> <223> Искусственная <400> 302 О1п О1у 11е Зег Зег	последовательность Тгр
1	5
<210>	303
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	303
дскдсаксс
<210>	304
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	304
А1а А1а Зег
1
<210>	305
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	305
саасаддска асадкккссс ксддасд
<210>	306
<211>	9
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	306
О1п О1п А1а Азп Зег	РЬе Рго Агд ТЬг
1	5
<210>	307
<211>	360
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность

27

- 102 030437

<400> 307

саддДдсадс ДддДддадДс Ддддддаддс дДддДссадс сДдддаддДс ссДдадасДс 60

ДссДдДдсад сдДсДддаДД сассДДсадД ааДДаДддса ДдсасДдддД ссдссаддсД 120

ссаддсаадд ддсДддадДд ддДддсадДД аДДДддДаДд аДдааадДад ДаааДасДаД 180

асадасДссд Ддаадддссд аДДсассаДс Дссададаса аДДсссадаа сасдсДдДаД 240

сДдсаааДда ссадссДдад адссдаддас асддсДдДдД аДДасДдДдс дададаДсдс 300

ДддассДасД сссасДасДД ДдааДаДДдд ддссадддаа сссДддДсас ДдДсДссДса 360

<210> 308

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 308

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Зег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Зег

Ьеи

Агд

Ьеи

Зег

Суз

А1а

Зег

О1у

РЬе

ТЬг

РЬе

Зег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

МеД

Н1з

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

О1и

Зег

Ьуз

Туг

ТЬг

Азр

Зег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

ТЬг

11е

Зег

Агд

Азр

Азп

Зег

О1п

Азп

ТЬг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеД

ТЬг

Зег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТЬг

Туг

Зег

Н1з

Туг

РЬе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Зег

115

120

<210> 309

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 309

дасаДссада ДдасссадДс ДссаДсДДсс дДдДсДдсаД сДдДаддада сададДсасс 60

аДсасДДдДс дддсдадДса дддДаДДадс адсДдддДад ссДддДаДса дсадааасса 120

дддааадссс сДааасДссД даДсДаДдсД дсаДссадДД ДдсааадДдд ддДсссаДсД 180

аддДДсадсд дсадДддаДс ДдддасадаД ДДсасДсДса ссаДсадсад ссДдсадссД 240

даадаДДДДд саасДДасДа ДДдДсаасад дсДаасадДД ДсссДсддас дДДсддссаа 300

дддассаадд ДддадаДсаа а 321

<210> 310

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 310

Азр 11е О1п МеД ТЬг О1п Зег Рго Зег Зег Уа1 Зег А1а Зег Уа1 О1у

- 103 030437

1

5

10

15

Азр

Агд

Уа1

ТИг

11е

ТИг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

О1у

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Уа1

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РИе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТИг

Азр

РИе

ТИг

Ьеи

ТИг

11е

Бег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РИе

А1а

ТИг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РИе

Рго

Агд

85

90

95

ТИг

РИе

О1у

О1п

О1у

ТИг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 311

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 311

саддЛдсадс ЛддЛддадЛс Лдддддаддс дЛддЛссадс сЛдддаддЛс ссЛдадасЛс 60

ЛссЛдЛдсад сдЛсЛддаЛЛ сассЛЛсадЛ аасЛаЛддса ЛдсасЛдддЛ ссдссаддсЛ 120

ссаддсаадд ддсЛддадЛд ддЛддсадЛЛ аЛЛЛддЛаЛд аЛдааадЛад ЛааасасЛаЛ 180

дсадасЛссд Лдаадддссд аЛЛсассаЛс Лссададаса аЛЛсссадаа сасдсЛдЛаЛ 240

сЛдсаааЛда ссадссЛдад адссдаддас асддсЛдЛдЛ аЛЛасЛдЛдс дададаЛсдс 300

ЛддассЛасЛ сссасЛасЛЛ ЛдааЛаЛЛдд ддссадддаа сссЛддЛсас сдЛсЛссЛса 360

<210> 312

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 312

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РИе

ТИг

РИе

Бег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

МеЛ

Н1з

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

О1и

Бег

Ьуз

Н1з

Туг

А1а

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РИе

ТИг

11е

Бег

Агд

Азр

Азп

Бег

О1п

Азп

ТИг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеЛ

ТИг

Бег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТИг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТИг

Туг

Бег

Н1з

Туг

РИе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТИг

Ьеи

Уа1

ТИг

Уа1

Бег

115

120

<210> 313

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

- 104

030437

24

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 313

ддаЕЕсассЕ ЕсадЕаасЕа Еддс

<210> 314

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 314

О1у РЬе ТЬг РЬе Бег Азп Туг О1у 1 5

<210> 315

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 315

аЕЕЕддЕаЕд аЕдааадЕад Еааа

24

<210> 316

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 316

11е Тгр Туг Азр О1и Бег Бег Ьуз 1 5

<210> 317

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 317

дсдададаЕс дсЕддассЕа сЕсссасЕас ЕЕЕдааЕаЕ

<210> 318

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

39

- 105 030437

<400> 318

А1а Агд Азр Агд Тгр ТЬг Туг Бег Няз Туг РЬе О1и Туг 1 5 10

<210> 319

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 319

абсасббдбс дддсдадбса ддабаббадс адсбдддбад ссбддбабса дсадааасса 120

дддассаадд бддадабсаа асда 324

<210> 320

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 320

Азр 1

11е

Ο1η

Меб

ТЬг 5

Ο1η

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

Ο1η

Азр

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Уа1

А1а

Тгр

Туг

Ο1η

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

Ο1η

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

Бег

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Ьеи

Ο1η

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

Ο1η

А1а

Азп

Бег

РЬе

Рго

Агд

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

Ο1η

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210> 321

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 321

саддабабба дсадсбдд

<210> 322

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

18

- 106

030437

<223> Искусственная <400> 322 О1п Азр 11е Зег Зег	последовательность Тгр
1	5
<210>	323
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	323
дсбдсабсс
<210>	324
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	324
А1а А1а Зег
1
<210>	325
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	325
саасаддсба асадбббссс бсддасд
<210>	326
<211>	9
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	326
О1п О1п А1а Азп Зег	РЪе Рго Агд ТЪг
1	5
<210>	327
<211>	360
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность

27

- 107 030437

<400> 327

бссбдбдсад сдбсбддабб сассббсадб аасбабддса бдсасбдддб ссдссаддсб 120

ссаддсаадд ддсбддадбд ддбддсадбб абббддбабд абдааадбад бааасасбаб 180

дсадасбссд бдаадддссд аббсассабс бссададаса аббсссадаа сасдсбдбаб 240

<210> 328

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 328

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РЬе

ТЬг

РЬе

Бег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

Меб

Н1з

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

О1и

Бег

Ьуз

Н1з

Туг

А1а

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

ТЬг

11е

Бег

Агд

Азр

Азп

Бег

О1п

Азп

ТЬг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

Меб

ТЬг

Бег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТЬг

Туг

Бег

Н1з

Туг

РЬе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

120

<210> 329

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 329

дддассаадд бддадабсаа а 321

<210> 330

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 330

Азр 11е О1п Меб ТЬг О1п Бег Рго Бег Бег Уа1 Бег А1а Бег Уа1 О1у 1 5 10 15

- 108 030437

Азр

Агд

Уа1

ТЬг 20

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а 25

Зег

О1п

Азр

11е

Зег 30

Зег

Тгр

Уа1

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Ьуз

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Зег

Ьеи

О1п

Зег

О1у

Уа1

Рго

Зег

Агд

РЬе

Зег

О1у

50

55

60

Зег

О1у

Зег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Зег

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Зег

РЬе

Рго

Агд

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 331

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 331

даддЕдсадс ЕддЕддадЕс Едддддаддс дЕддЕссаас сЕдддаддЕс ссЕдадасЕс 60

ЕссЕдЕдсад сдЕсЕддаЕЕ сассЕЕсадЕ аасЕаЕддса ЕдсасЕдддЕ ссдссаддсЕ 120

ссаддсаадд дасЕддадЕд ддЕддсадЕЕ аЕаЕддЕаЕд аЕдаЕадЕаа ЕаааааЕЕаЕ 180

дсадасЕссд Едаадддссд аЕЕсассаЕс Ессададаса аЕЕссаадаа сасдсЕдЕаЕ 240

сЕдсаааЕда асадссЕдад адЕсдаддас асддсЕдЕдЕ аЕЕасЕдЕдс дададаЕсдс 300

ЕддассЕасЕ сссасЕЕсЕЕ ЕдадЕасЕдд ддссадддаа сссЕддЕсас сдЕсЕссЕса 360

<210> 332

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 332

О1и

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Зег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Зег

Ьеи

Агд

Ьеи

Зег

Суз

А1а

Зег

О1у

РЬе

ТЬг

РЬе

Зег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

МеЕ

Н1з

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

Зег

Азп

Ьуз

Азп

Туг

А1а

Азр

Зег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

ТЬг

11е

Зег

Агд

Азр

Азп

Зег

Ьуз

Азп

ТЬг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеЕ

Азп

Зег

Ьеи

Агд

Уа1

О1и

Азр

ТЬг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТЬг

Туг

Зег

Н1з

РЬе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЬг

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Зег

115

120

<210> 333

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

- 109

030437

24

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 333

ддакксасск ксадкааска кддс

<210> 334

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 334

О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Азп Туг О1у 1 5

<210> 335

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 335

акакддкакд акдакадкаа кааа

24

<210> 336

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 336

11е Тгр Туг Азр Азр Зег Азп Ьуз 1 5

<210> 337

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 337

дсдададакс дскддасска сксссасккс кккдадкас

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 338

39

<210> 338

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

- 110 030437

А1а Агд Азр Агд Тгр ТЬг Туг Бег Н1з РЬе РЬе О1и Туг

1 5 10

<210> 339

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 339

дддааадссс сЕаассЕссЕ даЕсЕаЕдсЕ дсЕЕссадЕЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕса 180

аддЕЕсддсд дсадЕддаЕс ЕдддасадаЕ ЕЕсЕсЕсЕса ссаЕсадсдд ссЕасадссЕ 240

даадаЕЕЕЕд саасЕЕасЕа ЕЕдЕсадсад дсЕаасадЕЕ ЕсссЕсддас дЕЕсддссаа 300

дддассаадд ЕддадаЕсаа асда 324

<210> 340

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 340

Азр 1

11е

О1п

МеЕ

ТЬг 5

О1п

Бег

Рго

Бег

Бег Уа1 10

Бег

А1а

Бег

Уа1 15

О1у

Азр

Агд

Уа1

ТЬг

11е

ТЬг

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

О1у

11е

Бег

Тгр

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Азп

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЬе

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

Бег

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

О1у

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЬе

А1а

ТЬг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЬе

Рго

Агд

85

90

95

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210> 341

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 341

садддЕаЕЕа дсадсЕдд

<210> 342

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

18

- 111

030437

<400> 342

О1п О1у 11е Бег Бег Тгр

1	5
<210>	343
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность

<400> 343 дсбдсббсс

<210> <211> <212> <213>	344 3 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность

<400> 344 А1а А1а Бег

1
<210>	345
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность

<400> 345

садсаддсба асадбббссс бсддасд

27

<210> <211> <212> <213>	346 9 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	346
О1п О1п А1а Азп Бег	РЬе Рго Агд ТЬг
1	5

<210> <211> <212> <213>	347 360 ДНК Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	347

- 112 030437

саддбдсадс бддбддадбс бдддддаддс дбддбссаас сбдддаддбс ссбдадасбс 60

ссаддсаадд дасбддадбд ддбддсадбб абабддбабд абдабадбаа баааааббаб 180

дсадасбссд бдаадддссд аббсассабс бссададаса аббссаадаа сасдсбдбаб 240

сбдсааабда асадссбдад адбсдаддас асддсбдбдб аббасбдбдс дададабсдс 300

бддассбасб сссасббсбб бдадбасбдд ддссадддаа сссбддбсас сдбсбссбса 360

<210> 348

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 348

О1п

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Зег

О1у

Уа1

О1п

Рго

О1у

Агд

1

5

10

15

Зег

Ьеи

Агд

Ьеи

Зег

Суз

А1а

Зег

О1у

РЪе

ТЪг

РЪе

Зег

Азп

Туг

20

25

30

О1у

Меб

НФз

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

А1а

Уа1

11е

Тгр

Туг

Азр

Зег

Азп

Ьуз

Азп

Туг

А1а

Азр

Зег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЪе

ТЪг

11е

Зег

Агд

Азр

Азп

Зег

Ьуз

Азп

ТЪг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

Меб

Азп

Зег

Ьеи

Агд

Уа1

О1и

Азр

ТЪг

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Агд

Азр

Агд

Тгр

ТЪг

Туг

Зег

НФз

РЪе

О1и

Туг

Тгр

О1у

О1п

100

105

110

О1у

ТЪг

Ьеи

Уа1

ТЪг

Уа1

Зег

115

120

<210> 349

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 349

абсасббдбс дддсдадбса дддбаббадс адсбддббад ссбддбабса дсадааасса 120

дддааадссс сбаассбссб дабсбабдсб дсббссадбб бдсааадбдд ддбсссабса 180

аддббсддсд дсадбддабс бдддасадаб ббсбсбсбса ссабсадсдд ссбасадссб 240

даадаббббд саасббасба ббдбсадсад дсбаасадбб бсссбсддас дббсддссаа 300

дддассаадд бддадабсаа а 321

<210> 350

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 350

Азр 11е О1п Меб ТЪг О1п Зег Рго Зег Зег Уа1 Зег А1а Зег Уа1 О1у 1 5 10 15

Азр Агд Уа1 ТЪг 11е ТЪг Суз Агд А1а Зег О1п О1у 11е Зег Зег Тгр

- 113 030437

20

25

30

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

Ьуз

А1а

Рго

Азп

Ьеи

11е

35

40

45

Туг

А1а

Бег

Ьеи

О1п

Бег

О1у

Уа1

Рго

Бег

Агд

РЪе

О1у

50

55

60

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЪг

Азр

РЪе

Бег

Ьеи

ТЪг

11е

Бег

О1у

Ьеи

О1п

Рго

65

70

75

80

О1и

Азр

РЪе

А1а

ТЪг

Туг

Суз

О1п

А1а

Азп

Бег

РЪе

Рго

Агд

85

90

95

ТЪг

РЪе

О1у

О1п

О1у

ТЪг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 351

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 351

даддЬдсадс ЬддЬддадЬс Ьдддддаддс ЬЬддЬасасс сЬддддддЬс ссЬдадасЬс 60

ЬссЬдЬдсад ссЬсЬддаЬЬ сассЬЬЬддс ддсЬаЬдсса ЬдадсЬдддЬ ссдссаддсЬ 120

ссадддаадд дссЬддадЬд ддЬсЬсасЬЬ аЬЬадЬддЬа дЬддЬддЬад сасаЬасЬас 180

дсадасЬссд Ьдаадддссд дЬЬсассаЬЬ ЬЬЬададаса аЬЬссаадаа сасдсЬдЬаЬ 240

сЬдсаааЬда ЬсадссЬдад адссдаддаЬ ЬсддссдЬаЬ аЬЬасЬдЬдс даааЬасадЬ 300

аасЬаЬдасЬ асЬЬсдассс сЬддддссад ддаасссЬдд ЬсасЬдЬсЬс сЬса 354

<210> 352

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 352

О1и

Уа1

О1п

Ьеи

Уа1

О1и

Бег

О1у

Ьеи

Уа1

Н1з

Рго

О1у

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РЪе

ТЪг

РЪе

О1у

Туг

20

25

30

А1а

МеЬ

Бег

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

Бег

Ьеи

11е

Бег

О1у

Бег

О1у

Бег

ТЪг

Туг

А1а

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЪе

ТЪг

11е

РЪе

Агд

Азр

Азп

Бег

Ьуз

Азп

ТЪг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

МеЬ

11е

Бег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

Бег

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Ьуз

Туг

Бег

Азп

Туг

Азр

Туг

РЪе

Азр

Рго

Тгр

О1у

О1п

О1у

ТЪг

100

105

110

Ьеи

Уа1

ТЪг

Уа1

Бег

115

<210> 353

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

- 114

030437

<400> 353

ддакксасск ккддсддска кдсс

24

<210> 354

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 354

О1у РЬе ТЬг РЬе О1у О1у Туг А1а 1 5

<210> 355

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 355

аккадкддка дкддкддкад саса

24

<210> 356

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 356

11е Зег О1у Зег О1у О1у Зег ТЬг 1 5

<210> 357

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 357

дсдааакаса дкааскакда скаскксдас ссс

33

<210> 358

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 358

А1а Ьуз Туг Зег Азп Туг Азр Туг РЬе Азр Рго

1 5 10

- 115 030437

<210> 359

<211> 327

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 359

даааЕЕдЕдЕ ЕдасасадЕс Ессаддсасс сЕдЕсЕЕЕдЕ сЕссадддда аададЕсасс 60

сЕсЕссЕдса дддссадЕса дадЕдЕЕадс адсадсЕасЕ ЕадссЕддЕа ссадсадааа 120

ссЕддссадд сЕсссаддсЕ ссЕсаЕсЕаЕ ддЕдсаЕсса дсадддссас ЕддсаЕссса 180

саадддасса аддЕддадаЕ сааасда 327

<210> 360

<211> 109

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 360

О1и 1

11е

Уа1

Ьеи

ТЬг 5

Ο1η

Бег

Рго

О1у

ТЬг 10

Ьеи

Бег

Ьеи

Бег

Рго 15

О1у

О1и

Агд

Уа1

ТЬг

Ьеи

Бег

Суз

Агд

А1а

Бег

Ο1η

Бег

Уа1

Бег

20

25

30

Туг

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

Ο1η

Ьуз

Рго

О1у

Ο1η

А1а

Рго

Агд

Ьеи

35

40

45

11е

Туг

О1у

А1а

Бег

Агд

А1а

ТЬг

О1у

11е

Рго

Азр

Агд

РЬе

Бег

50

55

60

О1у

Бег

О1у

Бег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Бег

Агд

Ьеи

О1и

65

70

75

80

Рго

О1и

Азр

РЬе

А1а

Уа1

Туг

Суз

Ο1η

Туг

О1у

Бег

Рго

85

90

95

Агд

ТЬг

РЬе

О1у

Ο1η

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

Агд

100

105

<210> 361

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 361

сададЕдЕЕа дсадсадсЕа с 21

<210> 362

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 362

- 116

030437

О1п Зег Уа1 Зег Зег Зег Туг

1	5
<210>	363
<211>	9
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	363
ддкдсаксс
<210>	364
<211>	3
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	364
О1у А1а Зег
1
<210>	365
<211>	27
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	365
садсадкакд дкадсксасс ксддасд
<210>	366
<211>	9
<212>	БЕЛОК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	366
О1п О1п Туг О1у Зег	Зег Рго Агд ТИг
1	5
<210>	367
<211>	354
<212>	ДНК
<213>	Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<400>	367

27

даддкдсадс кдккддадкс кдддддаддс ккддкасасс скддддддкс сскдадаскс 60 ксскдкдсад сскскддакк сасскккддс ддскакдсса кдадскдддк ссдссаддск 120

- 117 030437

ссадддаадд дссбддадбд ддбсбсасбб аббадбддба дбддбддбад сасабасбас 180

дсадасбссд бдаадддссд дббсассабб бббададаса аббссаадаа сасдсбдбаб 240

сбдсааабда бсадссбдад адссдаддаб бсддссдбаб аббасбдбдс дааабасадб 300

аасбабдасб асббсдассс сбддддссад ддаасссбдд бсасбдбсбс сбса 354

<210> 368

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 368

О1и

Уа1

О1п

Ьеи

О1и

Бег

О1у

Ьеи

Уа1

Н1з

Рго

О1у

1

5

10

15

Бег

Ьеи

Агд

Ьеи

Бег

Суз

А1а

Бег

О1у

РЬе

ТЬг

РЬе

О1у

Туг

20

25

30

А1а

Меб

Бег

Тгр

Уа1

Агд

О1п

А1а

Рго

О1у

Ьуз

О1у

Ьеи

О1и

Тгр

Уа1

35

40

45

Бег

Ьеи

11е

Бег

О1у

Бег

О1у

Бег

ТЬг

Туг

А1а

Азр

Бег

Уа1

50

55

60

Ьуз

О1у

Агд

РЬе

ТЬг

11е

РЬе

Агд

Азр

Азп

Бег

Ьуз

Азп

ТЬг

Ьеи

Туг

65

70

75

80

Ьеи

О1п

Меб

11е

Бег

Ьеи

Агд

А1а

О1и

Азр

Бег

А1а

Уа1

Туг

Суз

85

90

95

А1а

Ьуз

Туг

Бег

Азп

Туг

Азр

Туг

РЬе

Азр

Рго

Тгр

О1у

О1п

О1у

ТЬг

100

105

110

Ьеи

Уа1

ТЬг

Уа1

Бег

115

<210> 369

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 369

даааббдбдб бдасдсадбс бссаддсасс сбдбсбббдб сбссадддда аададбсасс 60

сбсбссбдса дддссадбса дадбдббадс адсадсбасб бадссбддба ссадсадааа 120

дасаддббса дбддсадбдд дбсбдддаса дасббсасбс бсассабсад садасбддад 240

ссбдаадабб ббдсадбдба ббасбдбсад садбабддба дсбсассбсд дасдббсддс 300

саадддасса аддбддадаб сааа 324

<210> 370

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 370

О1и

11е

Уа1

Ьеи

ТЬг

О1п

Бег

Рго

О1у

ТЬг

Ьеи

Бег

Ьеи

Бег

Рго

О1у

1

5

10

15

О1и

Агд

Уа1

ТЬг

Ьеи

Бег

Суз

Агд

А1а

Бег

О1п

Бег

Уа1

Бег

20

25

30

Туг

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

О1п

А1а

Рго

Агд

Ьеи

35

40

45

- 118

030437

11е

Туг О1у 50

А1а

Зег

Зег Агд А1а 55

ТИг

О1у

11е

Рго 60

Азр

Агд

РИе

Зег

О1у

Зег

О1у

Зег

О1у

ТИг

Азр

РИе

ТИг

Ьеи

ТИг

11е

Зег

Агд

Ьеи

О1и

65

70

75

80

Рго

О1и

Азр

РИе

А1а

Уа1

Туг

Суз

О1п

Туг

О1у

Зег

Рго

85

90

95

Агд

ТИг

РИе

О1у

О1п

О1у

ТИг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 371

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 371

даааЬЬдЬдЬ ЬдасасадЬс Ьссаддсасс сЬдЬсЬЬЬдЬ сЬссадддда аададЬсасс 60

сЬсЬссЬдса дддссадЬса дадЬдЬЬадс адсадсЬасЬ ЬадссЬддЬа ссадсадааа 120

ссЬддссадд сЬсссаддсЬ ссЬсаЬсЬаЬ ддЬдсаЬсса дсадддссас ЬддсаЬссса 180

дасаддЬЬса дЬддсадЬдд дЬсЬдддаса дасЬЬсасЬс ЬсассаЬсад садасЬддад 240

ссЬдаадаЬЬ ЬЬдсааЬдЬа ЬЬасЬдЬсад садЬаЬддЬа дсЬсассЬсд дасдЬЬсддс 300

саадддасса аддЬддаааЬ сааа 324

<210> 372

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 372

О1и 1

11е

Уа1

Ьеи

ТИг 5

О1п

Зег

Рго

О1у

ТИг 10

Ьеи

Зег

Ьеи

Зег

Рго 15

О1у

О1и

Агд

Уа1

ТИг

Ьеи

Зег

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

Зег

Уа1

Зег

20

25

30

Туг

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

О1п

А1а

Рго

Агд

Ьеи

35

40

45

11е

Туг

О1у

А1а

Зег

Агд

А1а

ТИг

О1у

11е

Рго

Азр

Агд

РИе

Зег

50

55

60

О1у

Зег

О1у

Зег

О1у

ТИг

Азр

РИе

ТИг

Ьеи

ТИг

11е

Зег

Агд

Ьеи

О1и

65

70

75

80

Рго

О1и

Азр

РИе

А1а

МеЬ

Туг

Суз

О1п

Туг

О1у

Зег

Рго

85

90

95

Агд

ТИг

РИе

О1у

О1п

О1у

ТИг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> 373

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 373

сададЬдЬЬа дсадсадсЬа с 21

<210> 374

- 119

030437

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 374

О1п Зег Уа1 Зег Зег Зег Туг 1 5

<210> 375

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 375

ддЬдсаЬсс

<210> 376

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 376

О1у А1а Зег

1

<210> 377

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 377

садсадЬаЬд дЬадсЬсасс Ьсддасд

27

<210> 378

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 378

О1п О1п Туг О1у Зег Зег Рго Агд ТЬг 1 5

<210> 379 <211> 324 <212> ДНК

- 120 030437

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 379

даааДДдДдД ДдасасадДс Дссаддсасс сДдДсДДДдД сДссадддда аададДсасс 60

сДсДссДдса дддссадДса дадДдДДадс адсадсДасД ДадссДддДа ссадсадааа 120

ссДддссадд сДсссаддсД ссДсаДсДаД ддДдсаДсса дсадддссас ДддсаДссса 180

дасаддДДса дДддсадДдд дДсДдддаса дасДДсасДс ДсассаДсад садасДддад 240

ссДдаадаДД ДДдсааДдДа ДДасДдДсад садДаДддДа дсДсассДсд дасдДДсддс 300

саадддасса аддДддаааД сааа 324

<210> 380

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 380

О1и 1

11е

Уа1

Ьеи

ТЬг 5

О1п

Зег

Рго

О1у

ТЬг 10

Ьеи

Зег

Ьеи

Зег

Рго 15

О1у

О1и

Агд

Уа1

ТЬг

Ьеи

Зег

Суз

Агд

А1а

Зег

О1п

Зег

Уа1

Зег

20

25

30

Туг

Ьеи

А1а

Тгр

Туг

О1п

Ьуз

Рго

О1у

О1п

А1а

Рго

Агд

Ьеи

35

40

45

11е

Туг

О1у

А1а

Зег

Агд

А1а

ТЬг

О1у

11е

Рго

Азр

Агд

РЬе

Зег

50

55

60

О1у

Зег

О1у

Зег

О1у

ТЬг

Азр

РЬе

ТЬг

Ьеи

ТЬг

11е

Зег

Агд

Ьеи

О1и

65

70

75

80

Рго

О1и

Азр

РЬе

А1а

МеД

Туг

Суз

О1п

Туг

О1у

Зег

Рго

85

90

95

Агд

ТЬг

РЬе

О1у

О1п

О1у

ТЬг

Ьуз

Уа1

О1и

11е

Ьуз

100

105

<210> <211> <212> <213>	381 8 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность
<220> <221> <222> <223>	ВАРИАНТ (7)...(7) Хаа = Зег ог Азп
<400> 381 11е Тгр Туг Азр Азр	Зег Хаа Ьуз
1	5

<210> <211> <212> <213>	382 13 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220> <223>	Искусственная	последовательность

- 121

030437

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)...(10)

<223> Хаа = Туг ог РЬе

<400> 382

А1а Агд Азр Агд	Тгр	ТЬг Туг Зег Н1з Хаа РЬе О1и Туг
1	5	10

<210> <211> <212> <213>	383 6 БЕЛОК Искусственная	последовательность
<220>
<223>	Искусственная	последовательность
<220> <221> <222> <223>	ВАРИАНТ (2)...(2) Хаа = Азр ог '	31у

<400> 383

О1п Хаа 11е Зег Зег Тгр 1 5

<210> 384

<211> 243

<212> БЕЛОК <213> Ното заргепз

<400> 384

Мек

Суз

Зег Агд О1у

Тгр

Азр

Зег

Суз

Ьеи

А1а

Ьеи

О1и

Ьеи

1

5

10

15

Ьеи

Рго

Ьеи

Зег

Ьеи

Уа1

ТЬг

Зег

11е

О1п

О1у

Н1з

Ьеи

Уа1

Н1з

20

25

30

Мек

ТЬг

Уа1

Зег

О1у

Зег

Азп

Уа1

ТЬг

Ьеи

Азп

11е

Зег

О1и

Зег

35

40

45

Ьеи

Рго

О1и

Азп

Туг

Ьуз

О1п

Ьеи

ТЬг

Тгр

РЬе

Туг

ТЬг

РЬе

Азр

О1п

50

55

60

Ьуз

11е

Уа1

О1и

Тгр

Азр

Зег

Агд

Ьуз

Зег

Ьуз

Туг

РЬе

О1и

Зег

Ьуз

65

70

75

80

РЬе

Ьуз

О1у

Агд

Уа1

Агд

Ьеи

Азр

Рго

О1п

Зег

О1у

А1а

Ьеи

Туг

11е

85

90

95

Зег

Ьуз

Уа1

О1п

Ьуз

О1и

Азр

Азп

Зег

ТЬг

Туг

11е

Мек

Агд

Уа1

Ьеи

100

105

110

Ьуз

ТЬг

О1у

Азп

О1и

О1п

О1и

Тгр

Ьуз

11е

Ьуз

Ьеи

О1п

Уа1

Ьеи

115

120

125

Азр

Рго

Уа1

Рго

Ьуз

Рго

Уа1

11е

Ьуз

11е

О1и

Ьуз

11е

О1и

Азр

Мек

130

135

140

Азр

Азп

Суз

Туг

Ьеи

Ьуз

Ьеи

Зег

Суз

Уа1

11е

Рго

О1у

О1и

Зег

145

150

155

160

Уа1

Азп

Туг

ТЬг

Тгр

Туг

О1у

Азр

Ьуз

Агд

Рго

РЬе

Рго

Ьуз

О1и

Ьеи

165

170

175

О1п

Азп

Зег

Уа1

Ьеи

О1и

ТЬг

Ьеи

Мек

Рго

Н1з

Азп

Туг

Зег

Агд

180

185

190

Суз

Туг

ТЬг

Суз

О1п

Уа1

Зег

Азп

Зег

Уа1

Зег

Ьуз

Азп

О1у

ТЬг

195

200

205

Уа1

Суз

Ьеи

Зег

Рго

Суз

ТЬг

Ьеи

А1а

Агд

Зег

РЬе

О1у

Уа1

О1и

210

215

220

- 122

030437

Тгр 11е А1а Бег Тгр 225

Ьеи Ьеи ТЬг

Ьеи Уа1 Уа1 ТЬг Уа1 Рго ТЬг 11е Ьеи О1у Ьеи 230 235 240

<210> 385

<211> 222

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная

<220>

<223> Искусственная

<400> 385

Ο1η О1у Няз Ьеи Уа1 1 5

Ьеи Азп 11е Бег О1и

20

РЬе Туг ТЬг РЬе Азр 35

Ьуз Туг РЬе О1и Бег 50

Бег О1у А1а Ьеи Туг 65

Туг 11е Меб Агд Уа1 85

11е Ьуз Ьеи Ο1η Уа1

100

О1и Ьуз 11е О1и Азр 115

Уа1 11е Рго О1у О1и

130

Рго РЬе Рго Ьуз О1и 145

Рго Няз Азп Туг Бег 165

Бег Бег Ьуз Азп О1у 180

Агд Бег О1и Ο1η Ьуз 195

Ьуз Ьеи 11е Бег О1и 210

последовательность

Няз	Меб	ТЬг	Уа1	Уа1 10	Бег	О1у	Бег	Азп	Уа1 15	ТЬг
Бег	Ьеи	Рго	О1и	Азп	Туг	Ьуз	Ο1η	Ьеи	ТЬг	Тгр
			25					30
Ο1η	Ьуз	11е	Уа1	О1и	Тгр	Азр	Бег	Агд	Ьуз	Бег
		40					45
Ьуз	РЬе	Ьуз	О1у	Агд	Уа1	Агд	Ьеи	Азр	Рго	Ο1η
	55					60
11е	Бег	Ьуз	Уа1	Ο1η	Ьуз	О1и	Азр	Азп	Бег	ТЬг
70					75					80
Ьеи	Ьуз	Ьуз	ТЬг	О1у	Азп	О1и	Ο1η	О1и	Тгр	Ьуз
				90					95
Ьеи	Азр	Рго	Уа1	Рго	Ьуз	Рго	Уа1	11е	Ьуз	11е
			105					110
Меб	Азр	Азр	Азп	Суз	Туг	Ьеи	Ьуз	Ьеи	Бег	Суз
		120					125
Бег	Уа1	Азп	Туг	ТЬг	Тгр	Туг	О1у	Азр	Ьуз	Агд
	135					140
Ьеи	Ο1η	Азп	Бег	Уа1	Ьеи	О1и	ТЬг	ТЬг	Ьеи	Меб
150					155					160
Агд	Суз	Туг	ТЬг	Суз	Ο1η	Уа1	Бег	Азп	Бег	Уа1
				170					175
ТЬг	Уа1	Суз	Ьеи	Бег	Рго	Рго	Суз	ТЬг	Ьеи	А1а
			185					190
Ьеи	11е	Бег	О1и	О1и	Азр	Ьеи	О1у	О1у	О1и	Ο1η
		200					205
О1и	Азр	Ьеи	Нтз	Нтз	Нтз	Няз	Нтз	Нтз
	215					220

<210> 386

<211> 218

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная

<220>

<223> Искусственная

<400> 386

О1у Агд Ьеи Уа1 Няз 1 5

Азп 11е Бег О1и Бег

20

Туг ТЬг РЬе Азр Ο1η 35

Туг РЬе О1и Бег Ьуз 50

О1у А1а Ьеи Туг 11е

последовательность

Меб	ТЬг	Уа1	Уа1	Бег 10	О1у	Бег	Азп	Уа1	ТЬг 15	Ьеи
Ьеи	Рго	О1и	Азп 25	Туг	Ьуз	Ο1η	Ьеи	ТЬг 30	Тгр	РЬе
Ьуз	11е	Уа1 40	О1и	Тгр	Азр	Бег	О1у 45	Ьуз	Бег	Ьуз
РЬе	Ьуз 55	О1у	Агд	Уа1	Агд	Ьеи 60	Азр	Рго	Ο1η	Бег
Бег	Ьуз	Уа1	Ο1η	Ьуз	О1и	Азр	Азп	Бег	ТЬг	Туг

- 123

030437

65

70

75

80

Уа1

МеЕ

Агд

Уа1

Ьеи

Ьуз

Азр

О1у

Туг

О1и

О1п

О1и

Тгр

Ьуз

11е

85

90

95

Ьуз

Ьеи

О1п

Уа1

Ьеи

Азр

Рго

Уа1

Рго

Ьуз

Рго

Уа1

11е

Ьуз

11е

О1и

100

105

110

Ьуз

Агд

О1и

Азр

Уа1

Азр

Азп

Суз

Туг

Ьеи

Ьуз

Ьеи

Бег

Суз

Уа1

115

120

125

11е

Рго

О1у

О1и

Бег

Уа1

Азп

Туг

ТЬг

Тгр

Туг

О1у

О1и

Ьеи

Рго

Ьуз

130

135

140

О1и

11е

О1п

Азп

Бег

Уа1

Ьеи

О1и

ТЬг

Ьеи

Ьуз

Рго

Нтз

Ьуз

Нтз

145

150

155

160

Бег

Агд

Суз

Туг

ТЬг

Суз

О1п

Уа1

Бег

Азп

Бег

Уа1

Бег

Ьуз

Азп

165

170

175

О1у

ТЬг

РЬе

Суз

РЬе

Бег

Рго

Суз

ТЬг

А1а

Агд

Бег

О1и

О1п

180

185

190

Ьуз

Ьеи

11е

Бег

О1и

Азр

Ьеи

О1у

О1и

О1п

Ьуз

Ьеи

11е

Бег

195

200

205

О1и

Азр

Ьеи

Нтз

210 215

<210> 387

<211> 427

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 387

О1п 1

О1у

Нтз

Ьеи Уа1 5

Нтз

МеЕ

ТЬг Уа1

Уа1 10

Бег

О1у

Бег

Азп

Уа1 15

ТЬг

Ьеи

Азп

11е

Бег

О1и

Бег

Ьеи

Рго

О1и

Азп

Туг

Ьуз

О1п

Ьеи

ТЬг

Тгр

20

25

30

РЬе

Туг

ТЬг

РЬе

Азр

О1п

Ьуз

11е

Уа1

О1и

Тгр

Азр

Бег

Агд

Ьуз

Бег

35

40

45

Ьуз

Туг

РЬе

О1и

Бег

Ьуз

РЬе

Ьуз

О1у

Агд

Уа1

Агд

Ьеи

Азр

Рго

О1п

50

55

60

Бег

О1у

А1а

Ьеи

Туг

11е

Бег

Ьуз

Уа1

О1п

Ьуз

О1и

Азр

Азп

Бег

ТЬг

65

70

75

80

Туг

11е

МеЕ

Агд

Уа1

Ьеи

Ьуз

ТЬг

О1у

Азп

О1и

О1п

О1и

Тгр

Ьуз

85

90

95

11е

Ьуз

Ьеи

О1п

Уа1

Ьеи

Азр

Рго

Уа1

Рго

Ьуз

Рго

Уа1

11е

Ьуз

11е

100

105

110

О1и

Ьуз

11е

О1и

Азр

МеЕ

Азр

Азп

Суз

Туг

Ьеи

Ьуз

Ьеи

Бег

Суз

115

120

125

Уа1

11е

Рго

О1у

О1и

Бег

Уа1

Азп

Туг

ТЬг

Тгр

Туг

О1у

Азр

Ьуз

Агд

130

135

140

Рго

РЬе

Рго

Ьуз

О1и

Ьеи

О1п

Азп

Бег

Уа1

Ьеи

О1и

ТЬг

Ьеи

МеЕ

145

150

155

160

Рго

Нтз

Азп

Туг

Бег

Агд

Суз

Туг

ТЬг

Суз

О1п

Уа1

Бег

Азп

Бег

Уа1

165

170

175

Бег

Ьуз

Азп

О1у

ТЬг

Уа1

Суз

Ьеи

Бег

Рго

Суз

ТЬг

Ьеи

А1а

180

185

190

Агд

Бег

О1и

Рго

Агд

О1у

Рго

ТЬг

11е

Ьуз

Рго

Суз

Рго

Суз

Ьуз

195

200

205

Суз

Рго

А1а

Рго

Азп

Ьеи

О1у

Рго

Бег

Уа1

РЬе

11е

РЬе

Рго

210

215

220

Рго

Ьуз

11е

Ьуз

Азр

Уа1

Ьеи

МеЕ

11е

Бег

Ьеи

Бег

Рго

11е

Уа1

ТЬг

225

230

235

240

Суз

Уа1

Азр

Уа1

Бег

О1и

Азр

Рго

Азр

Уа1

О1п

11е

Бег

245

250

255

Тгр

РЬе

Уа1

Азп

Уа1

О1и

Уа1

Нтз

ТЬг

А1а

О1п

ТЬг

О1п

ТЬг

Нтз

- 124

030437

260

265

270

Агд

О1и

Азр

Туг

Азп

Бег

ТЪг

Ьеи

Агд

Уа1

Бег

А1а

Ьеи

Рго

11е

275

280

285

О1п

Нтз

О1п

Азр

Тгр

МеЕ

Бег

О1у

Ьуз

О1и

РЪе

Ьуз

Суз

Ьуз

Уа1

Азп

290

295

300

Азп

Ьуз

Азр

Ьеи

Рго

А1а

Рго

11е

О1и

Агд

ТЪг

11е

Бег

Ьуз

Рго

Ьуз

305

310

315

320

О1у

Бег

Уа1

Агд

А1а

Рго

О1п

Уа1

Туг

Уа1

Ьеи

Рго

О1и

325

330

335

О1и

МеЕ

ТЪг

Ьуз

О1п

Уа1

ТЪг

Ьеи

ТЪг

Суз

МеЕ

Уа1

ТЪг

Азр

РЪе

340

345

350

МеЕ

Рго

О1и

Азр

11е

Туг

Уа1

О1и

Тгр

ТЪг

Азп

О1у

Ьуз

ТЪг

О1и

355

360

365

Ьеи

Азп

Туг

Ьуз

Азп

ТЪг

О1и

Рго

Уа1

Ьеи

Азр

Бег

Азр

О1у

Бег

Туг

370

375

380

РЪе

МеЕ

Туг

Бег

Ьуз

Ьеи

Агд

Уа1

О1и

Ьуз

Азп

Тгр

Уа1

О1и

Агд

385

390

395

400

Азп

Бег

Туг

Бег

Суз

Бег

Уа1

Нтз

О1и

О1у

Ьеи

Нтз

Азп

Нтз

405

410

415

ТЪг

Ьуз

Бег

РЪе

Бег

Агд

ТЪг

Рго

О1у

Ьуз

420 425

<210> 388

<211> 423

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 388

О1у 1

Агд

Ьеи

Уа1

Нтз 5

МеЕ

ТЪг Уа1

Уа1

Бег 10

О1у

Бег

Азп

Уа1

ТЪг 15

Ьеи

Азп

11е

Бег

О1и

Бег

Ьеи

Рго

О1и

Азп

Туг

Ьуз

О1п

Ьеи

ТЪг

Тгр

РЪе

20

25

30

Туг

ТЪг

РЪе

Азр

О1п

Ьуз

11е

Уа1

О1и

Тгр

Азр

Бег

О1у

Ьуз

Бег

Ьуз

35

40

45

Туг

РЪе

О1и

Бег

Ьуз

РЪе

Ьуз

О1у

Агд

Уа1

Агд

Ьеи

Азр

Рго

О1п

Бег

50

55

60

О1у

А1а

Ьеи

Туг

11е

Бег

Ьуз

Уа1

О1п

Ьуз

О1и

Азр

Азп

Бег

ТЪг

Туг

65

70

75

80

Уа1

МеЕ

Агд

Уа1

Ьеи

Ьуз

Азр

О1у

Туг

О1и

О1п

О1и

Тгр

Ьуз

11е

85

90

95

Ьуз

Ьеи

О1п

Уа1

Ьеи

Азр

Рго

Уа1

Рго

Ьуз

Рго

Уа1

11е

Ьуз

11е

О1и

100

105

110

Ьуз

Агд

О1и

Азр

Уа1

Азр

Азп

Суз

Туг

Ьеи

Ьуз

Ьеи

Бег

Суз

Уа1

115

120

125

11е

Рго

О1у

О1и

Бег

Уа1

Азп

Туг

ТЪг

Тгр

Туг

О1у

О1и

Ьеи

Рго

Ьуз

130

135

140

О1и

11е

О1п

Азп

Бег

Уа1

Ьеи

О1и

ТЪг

Ьеи

Ьуз

Рго

Нтз

Ьуз

Нтз

145

150

155

160

Бег

Агд

Суз

Туг

ТЪг

Суз

О1п

Уа1

Бег

Азп

Бег

Уа1

Бег

Ьуз

Азп

165

170

175

О1у

ТЪг

РЪе

Суз

РЪе

Бег

Рго

Суз

ТЪг

А1а

Агд

Бег

О1и

Рго

180

185

190

Агд

О1у

Рго

ТЪг

11е

Ьуз

Рго

Суз

Рго

Суз

Ьуз

Суз

Рго

А1а

Рго

195

200

205

Азп

Ьеи

О1у

Рго

Бег

Уа1

РЪе

11е

РЪе

Рго

Ьуз

11е

Ьуз

210

215

220

Азр

Уа1

Ьеи

МеЕ

11е

Бег

Ьеи

Бег

Рго

11е

Уа1

ТЪг

Суз

Уа1

225

230

235

240

Азр

Уа1

Бег

О1и

Азр

Рго

Азр

Уа1

О1п

11е

Бег

Тгр

РЪе

Уа1

Азп

- 125

030437

245

250

255

Азп

Уа1

О1и

Уа1

Нтз

ТИг

А1а

О1п

ТИг

О1п

ТИг

Нтз

Агд

О1и

Азр

Туг

260

265

270

Азп

Зег

ТИг

Ьеи

Агд

Уа1

Зег

А1а

Ьеи

Рго

11е

О1п

Нтз

О1п

Азр

275

280

285

Тгр

Мек

Зег

О1у

Ьуз

О1и

РИе

Ьуз

Суз

Ьуз

Уа1

Азп

Ьуз

Азр

Ьеи

290

295

300

Рго

А1а

Рго

11е

О1и

Агд

ТИг

11е

Зег

Ьуз

Рго

Ьуз

О1у

Зег

Уа1

Агд

305

310

315

320

А1а

Рго

О1п

Уа1

Туг

Уа1

Ьеи

Рго

О1и

Мек

ТИг

Ьуз

325

330

335

Ьуз

О1п

Уа1

ТИг

Ьеи

ТИг

Суз

Мек

Уа1

ТИг

Азр

РИе

Мек

Рго

О1и

Азр

340

345

350

11е

Туг

Уа1

О1и

Тгр

ТИг

Азп

О1у

Ьуз

ТИг

О1и

Ьеи

Азп

Туг

Ьуз

355

360

365

Азп

ТИг

О1и

Рго

Уа1

Ьеи

Азр

Зег

Азр

О1у

Зег

Туг

РИе

Мек

Туг

Зег

370

375

380

Ьуз

Ьеи

Агд

Уа1

О1и

Ьуз

Азп

Тгр

Уа1

О1и

Агд

Азп

Зег

Туг

Зег

385

390

395

400

Суз

Зег

Уа1

Нтз

О1и

О1у

Ьеи

Нтз

Азп

Нтз

ТИг

Ьуз

Зег

405

410

415

РИе

Зег

Агд

ТИг

Рго

О1у

Ьуз

420

<210> 389

<211> 436

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная последовательность

<400> 389

Суз

О1п

О1у

Зег

А1а

Азр

Нтз

Уа1

Зег

11е

Зег

О1у Уа1

Рго

Ьеи

1

5

10

15

О1п

Ьеи

О1п

Рго

Азп

Зег

11е

О1п

ТИг

Ьуз

Уа1

Азр

Зег

11е

А1а

Тгр

20

25

30

Ьуз

Ьеи

Рго

Зег

О1п

Азп

О1у

РИе

Нтз

11е

Ьеи

Ьуз

Тгр

35

40

45

О1и

Азп

О1у

Зег

Ьеи

Рго

Зег

Азп

ТИг

Зег

Азп

Азр

Агд

РИе

Зег

РИе

50

55

60

11е

Уа1

Ьуз

Азп

Ьеи

Зег

Ьеи

11е

Ьуз

А1а

О1п

Азр

65

70

75

80

Зег

О1у

Ьеи

Туг

Суз

Ьеи

О1и

Уа1

ТИг

Зег

11е

Зег

О1у

Ьуз

Уа1

О1п

85

90

95

ТИг

А1а

ТИг

РИе

О1п

Уа1

РИе

Уа1

РИе

Азр

Ьуз

Уа1

О1и

Ьуз

Рго

Агд

100

105

110

Ьеи

О1п

О1у

О1п

О1у

Ьуз

11е

Ьеи

Азр

Агд

О1у

Агд

Суз

О1п

Уа1

А1а

115

120

125

Ьеи

Зег

Суз

Ьеи

Уа1

Зег

Агд

Азр

О1у

Азп

Уа1

Зег

Туг

А1а

Тгр

Туг

130

135

140

Агд

О1у

Зег

Ьуз

Ьеи

11е

О1п

ТИг

А1а

О1у

Азп

Ьеи

ТИг

Туг

Ьеи

Азр

145

150

155

160

О1и

Уа1

Азр

11е

Азп

О1у

ТИг

Нтз

ТИг

Туг

ТИг

Суз

Азп

Уа1

Зег

165

170

175

Азп

Рго

Уа1

Зег

Тгр

О1и

Зег

Нтз

ТИг

Ьеи

Азп

Ьеи

ТИг

О1п

Азр

Суз

180

185

190

О1п

Азп

А1а

Нтз

О1п

О1и

РИе

Агд

РИе

Тгр

Рго

О1и

Рго

Агд

О1у

Рго

195

200

205

ТИг

11е

Ьуз

Рго

Суз

Рго

Суз

Ьуз

Суз

Рго

А1а

Рго

Азп

Ьеи

210

215

220

О1у

Рго

Зег

Уа1

РИе

11е

РИе

Рго

Ьуз

11е

Ьуз

Азр

Уа1

Ьеи

- 126

030437

225

230

235

240

МеЬ

11е

Зег

Ьеи

Зег

Рго

11е

Уа1

ТЬг

Суз

Уа1

Азр

Уа1

Зег

245

250

255

О1и

Азр

Рго

Азр

Уа1

О1п

11е

Зег

Тгр

РЬе

Уа1

Азп

Уа1

О1и

260

265

270

Уа1

НФз

ТЬг

А1а

О1п

ТЬг

О1п

ТЬг

НФз

Агд

О1и

Азр

Туг

Азп

Зег

ТЬг

275

280

285

Ьеи

Агд

Уа1

Зег

А1а

Ьеи

Рго

11е

О1п

НФз

О1п

Азр

Тгр

МеЬ

Зег

290

295

300

О1у

Ьуз

О1и

РЬе

Ьуз

Суз

Ьуз

Уа1

Азп

Ьуз

Азр

Ьеи

Рго

А1а

Рго

305

310

315

320

11е

О1и

Агд

ТЬг

11е

Зег

Ьуз

Рго

Ьуз

О1у

Зег

Уа1

Агд

А1а

Рго

О1п

325

330

335

Уа1

Туг

Уа1

Ьеи

Рго

О1и

МеЬ

ТЬг

Ьуз

О1п

Уа1

340

345

350

ТЬг

Ьеи

ТЬг

Суз

МеЬ

Уа1

ТЬг

Азр

РЬе

МеЬ

Рго

О1и

Азр

11е

Туг

Уа1

355

360

365

О1и

Тгр

ТЬг

Азп

О1у

Ьуз

ТЬг

О1и

Ьеи

Азп

Туг

Ьуз

Азп

ТЬг

О1и

370

375

380

Рго

Уа1

Ьеи

Азр

Зег

Азр

О1у

Зег

Туг

РЬе

МеЬ

Туг

Зег

Ьуз

Ьеи

Агд

385

390

395

400

Уа1

О1и

Ьуз

Азп

Тгр

Уа1

О1и

Агд

Азп

Зег

Туг

Зег

Суз

Зег

Уа1

405

410

415

Уа1

НФз

О1и

О1у

Ьеи

НФз

Азп

НФз

ТЬг

Ьуз

Зег

РЬе

Зег

Агд

420

425

430

ТЬг

Рго

О1у

Ьуз

435

<210> 390 <211> 365 <212> БЕЛОК <213> Ното £

зарчепз

<400> 390

МеЬ

Ьеи

О1у

О1п

Уа1

ТЬг

Ьеи

11е

Ьеи

Ьуз

Уа1

1

5

10

15

Туг

О1п

О1у

Ьуз

О1у

Суз

О1п

О1у

Зег

А1а

Азр

НФз

Уа1

Зег

11е

20

25

30

Зег

О1у

Уа1

Рго

Ьеи

О1п

Ьеи

О1п

Рго

Азп

Зег

11е

О1п

ТЬг

Ьуз

Уа1

35

40

45

Азр

Зег

11е

А1а

Тгр

Ьуз

Ьеи

Рго

Зег

О1п

Азп

О1у

РЬе

НФз

50

55

60

НФз

11е

Ьеи

Ьуз

Тгр

О1и

Азп

О1у

Зег

Ьеи

Рго

Зег

Азп

ТЬг

Зег

Азп

65

70

75

80

Азр

Агд

РЬе

Зег

РЬе

11е

Уа1

Ьуз

Азп

Ьеи

Зег

Ьеи

11е

Ьуз

А1а

85

90

95

А1а

О1п

Азр

Зег

О1у

Ьеи

Туг

Суз

Ьеи

О1и

Уа1

ТЬг

Зег

11е

100

105

110

Зег

О1у

Ьуз

Уа1

О1п

ТЬг

А1а

ТЬг

РЬе

О1п

Уа1

РЬе

Уа1

РЬе

Азр

Ьуз

115

120

125

Уа1

О1и

Ьуз

Рго

Агд

Ьеи

О1п

О1у

О1п

О1у

Ьуз

11е

Ьеи

Азр

Агд

О1у

130

135

140

Агд

Суз

О1п

Уа1

А1а

Ьеи

Зег

Суз

Ьеи

Уа1

Зег

Агд

Азр

О1у

Азп

Уа1

145

150

155

160

Зег

Туг

А1а

Тгр

Туг

Агд

О1у

Зег

Ьуз

Ьеи

11е

О1п

ТЬг

А1а

О1у

Азп

165

170

175

Ьеи

ТЬг

Туг

Ьеи

Азр

О1и

Уа1

Азр

11е

Азп

О1у

ТЬг

НФз

ТЬг

Туг

180

185

190

ТЬг

Суз

Азп

Уа1

Зег

Азп

Рго

Уа1

Зег

Тгр

О1и

Зег

НФз

ТЬг

Ьеи

Азп

195

200

205

Ьеи

ТЬг

О1п

Азр

Суз

О1п

Азп

А1а

НФз

О1п

О1и

РЬе

Агд

РЬе

Тгр

Рго

210

215

220

- 127

030437

РЪе

Ьеи

Уа1

11е

Уа1

11е

Ьеи

Бег А1а

Ьеи

РЪе

Ьеи

О1у

ТЪг

Ьеи

225

230

235

240

А1а

Суз

РЪе

Суз

Уа1

Тгр

Агд

Ьуз

Агд

Ьуз

О1и

Ьуз

О1п

Бег

О1и

245

250

255

ТЪг

Бег

Рго

Ьуз

О1и

РЪе

Ьеи

ТЪг

11е

Туг

О1и

Азр

Уа1

Ьуз

Азр

Ьеи

260

265

270

Ьуз

ТЪг

Агд

Азп

Н1з

О1и

О1п

О1и

О1п

ТЪг

РЪе

Рго

О1у

275

280

285

Бег

ТЪг

11е

Туг

Бег

МеБ

11е

О1п

Бег

О1п

Бег

А1а

Рго

ТЪг

Бег

290

295

300

О1п

О1и

Рго

А1а

Туг

ТЪг

Ьеи

Туг

Бег

Ьеи

11е

О1п

Рго

Бег

Агд

Ьуз

305

310

315

320

Бег

О1у

Бег

Агд

Ьуз

Агд

Азп

Н1з

Бег

Рго

Бег

РЪе

Азп

Бег

ТЪг

11е

325

330

335

Туг

О1и

Уа1

11е

О1у

Ьуз

Бег

О1п

Рго

Ьуз

А1а

О1п

Азп

Рго

А1а

Агд

340

345

350

Ьеи

Бег

Агд

Ьуз

О1и

Ьеи

О1и

Азп

РЪе

Азр

Уа1

Туг

Бег

355

360

365

<210> 391 <211> 222 <212> БЕЛОК <213> Искусственная	последовательно	ть
<220>
<223> Искусственная	последовательность
<400> 391
О1п О1у Н1з Ьеи Уа1	Н1з МеБ ТЪг Уа1	Уа1 Бег О1у Бег Азп Уа1 ТЪг
1 5		10 15
Ьеи Азп 11е Бег О1и	Бег Ьеи Рго О1и	Азп Туг Ьуз О1п Ьеи ТЪг Тгр
20	25	30
РЪе Туг ТЪг РЪе Азр	О1п Ьуз 11е Уа1	О1и Тгр Азр Бег Агд Ьуз Бег
35	40	45
Ьуз Туг РЪе О1и Бег	Ьуз РЪе Ьуз О1у	Агд Уа1 Агд Ьеи Азр Рго О1п
50	55	60
Бег О1у А1а Ьеи Туг	11е Бег Ьуз Уа1	О1п Ьуз О1и Азр Азп Бег ТЪг
65	70	75 80
Туг 11е МеБ Агд Уа1	Ьеи Ьуз Ьуз ТЪг	О1у Азп О1и О1п О1и Тгр Ьуз
85		90 95
11е Ьуз Ьеи О1п Уа1	Ьеи Азр Рго Уа1	Рго Ьуз Рго Уа1 11е Ьуз 11е
100	105	110
О1и Ьуз 11е О1и Азр	МеБ Азр Азр Азп	Суз Туг Ьеи Ьуз Ьеи Бег Суз
115	120	125
Уа1 11е Рго О1у О1и	Бег Уа1 Азп Туг	ТЪг Тгр Туг О1у Азр Ьуз Агд
130	135	140
Рго РЪе Рго Ьуз О1и	Ьеи О1п Азп Бег	Уа1 Ьеи О1и ТЪг ТЪг Ьеи МеБ
145	150	155 160
Рго Н1з Азп Туг Бег	Агд Суз Туг ТЪг	Суз О1п Уа1 Бег Азп Бег Уа1
165		170 175
Бег Бег Ьуз Азп О1у	ТЪг Уа1 Суз Ьеи	Бег Рго Рго Суз ТЪг Ьеи А1а
180	185	190
Агд Бег О1и О1п Ьуз	Ьеи 11е Бег О1и	О1и Азр Ьеи О1у О1у О1и О1п
195	200	205
Ьуз Ьеи 11е Бег О1и	О1и Азр Ьеи Н1з	Н1з Н1з Н1з Н1з Н1з
210	215	220

<210>	392
<211>	351
<212>	БЕЛОК
<213>	Ното заргепз

- 128

030437

<400> 392

МеЬ

Бег

РЬе

Рго

Суз

Ьуз

РЬе

Уа1

А1а

Бег

РЬе

Ьей

11е

РЬе

Азп

1

5

10

15

Уа1

Бег

Ьуз

О1у

А1а

Уа1

Бег

Ьуз

О1и

11е

ТЬг

Азп

А1а

Ьей

О1и

20

25

30

ТЬг

Тгр

О1у

А1а

Ьей

О1у

О1п

Азр

11е

Азп

Ьей

Азр

11е

Рго

Бег

РЬе

35

40

45

О1п

МеЬ

Бег

Азр

11е

Азр

11е

Ьуз

Тгр

О1и

Ьуз

ТЬг

Бег

Азр

50

55

60

Ьуз

11е

А1а

О1п

РЬе

Агд

Ьуз

О1и

Ьуз

О1и

ТЬг

РЬе

Ьуз

О1и

65

70

75

80

Ьуз

Азр

ТЬг

Туг

Ьуз

Ьей

РЬе

Ьуз

Азп

О1у

ТЬг

Ьей

Ьуз

11е

Ьуз

Н1з

85

90

95

Ьей

Ьуз

ТЬг

Азр

О1п

Азр

11е

Туг

Ьуз

Уа1

Бег

11е

Туг

Азр

ТЬг

100

105

110

Ьуз

О1у

Ьуз

Азп

Уа1

Ьей

О1и

Ьуз

11е

РЬе

Азр

Ьей

Ьуз

11е

О1п

О1и

115

120

125

Агд

Уа1

Бег

Ьуз

Рго

Ьуз

11е

Бег

Тгр

ТЬг

Суз

11е

Азп

ТЬг

Ьей

130

135

140

ТЬг

Суз

О1и

Уа1

МеЬ

Азп

О1у

ТЬг

Азр

Рго

О1и

Ьей

Азп

Ьей

Туг

О1п

145

150

155

160

Азр

О1у

Ьуз

Н1з

Ьей

Ьуз

Ьей

Бег

О1п

Агд

Уа1

11е

ТЬг

Н1з

Ьуз

Тгр

165

170

175

ТЬг

Бег

Ьей

Бег

А1а

Ьуз

РЬе

Ьуз

Суз

ТЬг

А1а

О1у

Азп

Ьуз

Уа1

180

185

190

Бег

Ьуз

О1и

Бег

Уа1

О1и

Рго

Уа1

Бег

Суз

Рго

О1и

Ьуз

О1у

Ьей

195

200

205

Азр

11е

Туг

Ьей

11е

О1у

11е

Суз

О1у

Бег

Ьей

МеЬ

210

215

220

Уа1

РЬе

Уа1

А1а

Ьей

Уа1

РЬе

Туг

11е

ТЬг

Ьуз

Агд

Ьуз

О1п

225

230

235

240

Агд

Бег

Агд

Азп

Азр

О1и

Ьей

О1и

ТЬг

Агд

А1а

Н1з

Агд

Уа1

245

250

255

А1а

ТЬг

О1и

Агд

О1у

Агд

Ьуз

Рго

Н1з

О1п

11е

Рго

А1а

Бег

ТЬг

260

265

270

Рго

О1п

Азп

Рго

А1а

ТЬг

Бег

О1п

Н1з

Рго

О1у

Н1з

275

280

285

Агд

Бег

О1п

А1а

Рго

Бег

Н1з

Агд

Рго

О1у

Н1з

Агд

Уа1

290

295

300

О1п

Н1з

О1п

Рго

О1п

Ьуз

Агд

Рго

А1а

Рго

Бег

О1у

ТЬг

О1п

Уа1

305

310

315

320

Н1з

О1п

Ьуз

О1у

Рго

Ьей

Рго

Агд

Рго

Агд

Уа1

О1п

Рго

Ьуз

325

330

335

Рго

Нтз

О1у

А1а

О1и

Азп

Бег

Ьей

Бег

Рго

Бег

Азп

340

345

350

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связывают человеческий СГО48 (8Е0 ΙΌ ΝΟ: 384) и блокируют взаимодействие между человеческим СГО48 и рецептором СЭ48, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены определяющих комплементарность областей (СОК) тяжелой и легкой цепи, содержащиеся в вариабельной области тяжелой цепи (НСУК), имеющей аминокислотную последовательность 8Е0 ГО ΝΟ: 368, и вариабельной области легкой цепи (ЬСУК), имеющей аминокислотную последовательность 8Е0 ГО ΝΟ: 370.

2. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где рецептор СГО48 представляет собой человеческий СГО2 (8ЕО ГО ΝΟ: 392).

3. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где рецептор СГО48 представляет собой человеческий 2В4 (8ЕО ГО ΝΟ: 390).

4. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-3, которые ингибируют активацию первичных человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС5) ш νίΙΐΌ.

- 129 030437

5. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-4, которые связывают эпитоп в 1д домене 1 человеческого СБ48 (аминокислоты с 29 до 127 последовательности 8Ер ГО N0: 384).

6. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.5, которые взаимодействуют с одной или более аминокислот, локализованных в аминокислотах от 60 до 125 последовательности 8Ер ГО N0: 384.

7. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.6, которые взаимодействуют с одной или более аминокислот, локализованных в аминокислотах от 60 до 68 последовательности 8ЕР ГО N0: 384 и/или в аминокислотах от 107 до 125 последовательности 8ЕР ГО N0: 384.

8. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.7, которые взаимодействуют с одной или более аминокислот, локализованных в аминокислотах от 60 до 68 последовательности 8ЕР ГО N0: 384 и с одной или более аминокислот, локализованных в аминокислотах от 107 до 125 последовательности 8ЕР ГО N0: 384.

9. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-8, которые содержат области СБК тяжёлой цепи, имеющие аминокислотные последовательности 8Ер ГО N0: 354, 356 и 358 и области СБК лёгкой цепи, имеющие аминокислотные последовательности 8Ер ГО N0: 362, 364 и 366.

10. Фармацевтическая композиция, ингибирующая СБ48, содержащая антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

11. Применение выделенного антитела или антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-9 для получения лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения, опосредованного взаимодействием между СБ48 и рецептором СБ48.

12. Применение фармацевтической композиции по п.10 для получения лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения, опосредованного взаимодействием между СБ48 и рецептором СБ48.

13. Применение по п.11 или 12, где заболевание или нарушение выбрано из группы, состоящей из целиакии, системной красной волчанки, язвенного колита и псориаза.

14. Способ лечения целиакии, системной красной волчанки, язвенного колита или псориаза, который включает введение нуждающемуся в этом субъекту антитела или антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-9 или фармацевтической композиции по п.10.

60 68 107 125

: сигнал ί: ί :: 1д Домен 1 1д Домен 2 : :: 1 26: 132 212 243

29 127