EA028879B1 - АНТИТЕЛА К ErbB3 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ - Google Patents

АНТИТЕЛА К ErbB3 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ Download PDF

Info

Publication number
EA028879B1
EA028879B1 EA201490717A EA201490717A EA028879B1 EA 028879 B1 EA028879 B1 EA 028879B1 EA 201490717 A EA201490717 A EA 201490717A EA 201490717 A EA201490717 A EA 201490717A EA 028879 B1 EA028879 B1 EA 028879B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
antibody
antigen
antibodies
tumor
binding fragment
Prior art date
Application number
EA201490717A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201490717A1 (ru
Inventor
Кристофер ДЕЙЛИ
Дуглас МАКДОНАЛД
Сюньбао Дуань
Original Assignee
Ридженерон Фармасьютикалз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46970445&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA028879(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. filed Critical Ридженерон Фармасьютикалз, Инк.
Publication of EA201490717A1 publication Critical patent/EA201490717A1/ru
Publication of EA028879B1 publication Critical patent/EA028879B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3023—Lung
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3046—Stomach, Intestines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3053—Skin, nerves, brain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material

Abstract

Изобретение относится к выделенному антителу или его антиген-связывающему фрагменту, которые специфически связывают с ErbB3. Также представлены фармацевтическая композиция, содержащая антитело или его антиген-связывающий фрагмент, способ ингибирования опухолевого роста, способ ингибирования или ослабления роста опухоли у индивидуума и применение фармацевтической композиции для ингибирования опухолевого роста у индивидуума с опухолью и применение антитела при получении лекарственного средства для ингибирования или ослабления опухолевого роста у индивидуума. Изобретение расширяет арсенал средств для лечения заболеваний и расстройств, вызванных или связанных с ErbB3-активностью и/или передачей сигнала.

Description

Изобретение относится к выделенному антителу или его антиген-связывающему фрагменту, которые специфически связывают с ЕгЬВ3. Также представлены фармацевтическая композиция, содержащая антитело или его антиген-связывающий фрагмент, способ ингибирования опухолевого роста, способ ингибирования или ослабления роста опухоли у индивидуума и применение фармацевтической композиции для ингибирования опухолевого роста у индивидуума с опухолью и применение антитела при получении лекарственного средства для ингибирования или ослабления опухолевого роста у индивидуума. Изобретение расширяет арсенал средств для лечения заболеваний и расстройств, вызванных или связанных с ЕгЬВ3-активностью и/или передачей сигнала.
028879
Область техники изобретения
Настоящее изобретение относится к антителам и его антиген-связывающим фрагментам, которые являются специфическими для ЕгЬВЗ человека.
Уровень техники
ЕгЬВЗ (также известный как НЕВЗ) является членом ЕгЬВ/НЕВ семейства рецепторных тирозинкиназ (ВТК). Другие члены этого семейства включают ЕСРВ (также известный как ЕгЬВ1 или НЕВ1), ЕгЬВ2 (также известный как НЕВ2 или Ыеи) и НЕВ4. ЕгЬВ-рецепторы регулируют пролиферацию клеток, выживание и дифференциацию путем активизации внутриклеточных сигнальных каскадов, что приводит к изменениям в экспрессии генов.
ЕгЬВ-рецепторы активизируются путем образования либо гомо-, либо гетеродимеров. Например, когда ЕгЬВЗ совместно экспрессируют с ЕгЬВ2, формируется активный гетеродимерный сигнальный комплекс. Образование ЕгЬВЗ-димера стимулируется связыванием со своим лигандом. Нейрегулин 1 (ΝΒΟ1) является основным лигандом для ЕгЬВЗ, что стимулирует гомо- или гетеродимеризацию рецептора.
Было обнаружено, что ЕгЬВЗ сверхэкспрессируется в различных видах рака, включая рак молочной железы, рак желудочно-кишечного тракта и рак поджелудочной железы. Было показано, что антитела к ЕгЬВЗ подавляют рост некоторых опухолевых клеточных линий человека в мышиных ксенотрансплантатных моделях. Антитела к ЕгЬВЗ упоминаются, например, в И8 5480968; И8 5968511; И8 2004/0197ЗЗ2; И8 7ЗЗ2580; И8 77051З0 и И8 7846440. Тем не менее, в рассматриваемой области существует необходимость в новых антагонистах ЕгЬВЗ, таких как антитела к ЕгЬВЗ для лечения злокачественного новообразования и других связанных с этим расстройств.
Краткое изложение сущности изобретения
Настоящее изобретение предоставляет антитела, которые связывают ЕгЬВЗ человека. Антитела по изобретению пригодны, ш1ег айа, для ингибирования ЕгЬВЗ-опосредованной передачи сигналов, а также для лечения заболеваний и расстройств, вызванных или связанных с ЕгЬВЗ-активностью и/или передачей сигнала.
Антитела по настоящему изобретению, в соответствии с определенными вариантами осуществления, блокируют взаимодействие между ЕгЬВЗ и ЕгЬВЗ-лигандом (например, ΝΒΟ1 и/или ΝΒΟ2). Антитела также могут иметь одно или несколько дополнительных биологических свойств, как, например, индуцирование ЕгЬВЗ-интернализации клеточной поверхности, подавляя ΝΒΟ1-стимулированный рост опухоли ίη νίΐτο и/или ингибируя рост опухоли ίη νίνο.
Антитело по настоящему изобретению может быть полноразмерным (например, антитело 1§С1 или 1дС4) либо может включать только антиген-связывающий фрагмент (например, РаЬ, Р(аЬ')2 или δοΡνфрагмент) и может быть модифицированным для воздействия на функциональность, например, для ликвидации остаточных эффекторных функций (Ве44у е1 а1., 2000, ί. 1ттипо1. 164:1925-19ЗЗ).
Настоящее изобретение предоставляет антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела, содержащий вариабельную область тяжелой цепи (НСУВ), с аминокислотной последовательностью, выбранной из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З06 или З22.
Настоящее изобретение также предоставляет антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела, содержащий вариабельную область легкой цепи (ЬСУВ), с аминокислотной последовательностью, выбранной из 8ЕЦ ГО ΝΟ: 314 или ЗЗ0.
Настоящее изобретение также предоставляет антитело или его антиген-связывающий фрагмент, содержащий пару последовательностей НСУВ и ЬСУВ (НСУВ/ЬСУВ), выбранных из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З06/З14 или З22/ЗЗ0.
Настоящее изобретение также предоставляет антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела, содержащий домен СГОВЗ тяжелой цепи (НСГОВЗ). с аминокислотной последовательностью, выбранной из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З12 или З28; и домен СГОВЗ легкой цепи (ЬСНВЗ), имеющей аминокислотную последовательность, выбранную из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З20 или ЗЗ6.
В определенных вариантах осуществления антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела содержат пару аминокислотных последовательностей НСНВЗ/ЬСНВЗ, выбранных из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З12/З20 или З28/ЗЗ6.
Настоящее изобретение также предоставляет антитело или его антиген-связывающий фрагмент, дополнительно содержащий домен СГОВ1 тяжелой цепи (НСГОВ1) с аминокислотной последовательностью, выбранной из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З08 или З24; домен СГОВ2 тяжелой цепи (НСГОВ2) с аминокислотной последовательностью, выбранной из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З10 или З26; домен СГОВ1 легкой цепи (ЪСНВ1) с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З16 или ЗЗ2; и домен СГОВ2 легкой цепи (ТОСГОВ2) с аминокислотной последовательностью, выбранной из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З18 или ЗЗ4.
Определенные неограничивающие иллюстративные антитела и их антиген-связывающие фрагменты по изобретению содержат домены НСНВ1-НСНВ2-НСНВЗ-ЕСНВ1-ЕСНВ2-ЕСНВЗ, соответственно, с аминокислотными последовательностями, выбранными из группы, состоящей из 8ЕЦ ГО ΝΟ: З08-З10З12-З16-З18-З20 (например, Н1М1819Ц) и З24-З26-З28-ЗЗ2-ЗЗ4-ЗЗ6 (например, Н2М182Ш).
- 1 028879
В родственном варианте осуществления изобретение включает антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела, которое специфически связывает ЕтЬВЗ, где антитело или фрагмент содержит СОКдомены тяжелой и легкой цепи, содержащиеся в последовательностях тяжелой и легкой цепи, выбранных из группы, состоящей из 8ЕЦ ГО N0: 306/314 и 322/330. Способы и методики определения СОК. в аминокислотных последовательностях НСУК и ЬСУК хорошо известны в рассматриваемой области и могут быть использованы для идентификации СОК в специфических аминокислотных последовательностях НСУК и/или ЬСУК, описанных в настоящем документе. Типичные методики, которые могут быть использованы для определения границ СОК, представляют собой, например, определение по КаЬа!, определение по С'.’1ю11иа и определение по АЬМ. В общих чертах, определение по КаЬа! основывается на вариабельности последовательности, определение по С1ю11иа основывается на местонахождение структурного цикла регионов, и определение по АЬМ - это компромисс между подходами по КаЬа! и по С1оЙиа. См., например, КаЬа!, "Зециеисек οί Рго1еш8 οί пптипо1ощса1 1п1сгс51". Νηΐίοηηΐ иъОЦНех οί НеаНЬ, ВеШезйа, Мй. (1991); Λ1-Τ;·ιζί1<;·ιηί е! а1., ί. Μοί. ΒίοΙ. 273:927-948 (1997); и МаШи е! а1., Ргос. №ц1. Асай. 8с1. И8А 86:9268-9272 (1989). Общедоступные базы данных также пригодны для идентификации СОКпоследовательностей в пределах антитела.
В другом аспекте изобретение предоставляет молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие антитела к ЕгЬВ3 или их фрагменты. Рекомбинантные векторы экспрессии, несущие нуклеиновые кислоты по изобретению, и клетки-хозяева, в которые такие векторы были введены, также охватываются изобретением, как и способы получения антител, культивированием клеток-хозяев в условиях, пригодных для получения антител, и извлечение полученных антител.
Настоящее изобретение включает антитела к ЕгЬВ3 с модифицированной структурой гликозилирования. В некоторых приложениях могут быть полезны модификации для удаления нежелательных сайтов гликозилирования, или антитело с отсутствием остатка фукозы, присутствующего на олигосахаридной цепи, например, для повышения зависимой от антитела функции клеточной цитотоксичности (АОСС) (см. §Ые1й е! а1. (2002), ЕВС 277:26733). В других приложениях может быть сделана модификация галактозилирования для модификации комплемент-зависимой цитотоксичности (СОС).
В другом аспекте изобретение предоставляет фармацевтическую композицию, содержащую рекомбинантное антитело человека или его фрагмент, который специфически связывается с ЕгЬВ3, и фармацевтически приемлемый носитель. В связанном аспекте изобретение описывает композицию, которая представляет собой комбинацию ингибитора ЕгЬВ3 и второго терапевтического средства. В одном варианте осуществления ингибитор ЕгЬВ3 представляет собой антитело или его фрагмент. В одном варианте осуществления второе терапевтическое средство представляет собой любое средство, которое эффективно сочетается с ингибитором ЕгЬВ3. Типичные средства, которые могут эффективно сочетается с ингибитором ЕгЬВ3, включают, в качестве неограничивающих примеров, другие средства, которые подавляют активность ЕгЬВ3 (в том числе другие антитела или их антиген-связывающие фрагменты, пептидные ингибиторы, малые молекулы-антагонисты и т.д.) и/или средства, которые препятствуют передачи сигнала ЕгЬВ3 в клетку или обратно.
В еще одном аспекте изобретение предоставляет способы ингибирования ЕгЬВ3 активности с использованием антитела к ЕгЬВ3 или антиген-связывающего фрагмента антитела по изобретению, где терапевтические способы включают введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела по изобретению. Подвергаемое лечению любое заболевание или состояние, которое улучшается, облегчается, ингибируется или предотвращается путем удаления, подавления или уменьшения активности ЕгЬВ3. Антитело к ЕгЬВ3 или фрагмент антитела по изобретению может блокировать взаимодействие между ЕгЬВ3 и партнером ЕгЬВ3 по связыванию (например, нейрегулин-1), или иным образом препятствовать сигнальной активности ЕгЬВ3.
Настоящее изобретение также включает применение фармацевтической композиции, содержащей антитело или его фрагмент, для ингибирования опухолевого роста у индивидуума с опухолью.
Настоящее изобретение также включает применение антитела к ЕгЬВ3 или антиген-связывающую часть антитела по изобретению при получении лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства, связанного с или вызванного активностью ЕгЬВ3 у пациента.
Другие варианты осуществления станут очевидными из обзора последующего подробного описания.
Подробное описание
До описания настоящего изобретения следует понять, что это изобретение не ограничивается конкретными способами и описанными экспериментальными условиями, поскольку такие способы и условия могут варьировать. Также следует понимать, что терминология, используемая в настоящем документе, предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения, поскольку сфера действия настоящего изобретения будет ограничена только пунктами формулы изобретения.
Если не определено иначе, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то же значение, которое обычно подразумевается любым специалистом в области, к кото- 2 028879
рой это изобретение принадлежит. В настоящем документе термин "около", когда используется применительно к конкретному заявленному числовому значению, означает, что значение может отличаться от заявленного значения не более чем на 1%. Например, как используется в настоящем документе, выражение "около 100" содержит 99 и 101 и все промежуточные значения (например, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4 и др.).
Хотя любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в настоящем документе, могут быть использованы в практике или тестировании по настоящему изобретению, сейчас описываются предпочтительные способы и материалы.
Определения
Выражения "ЕгЬВЗ" и "фрагмент ЕтЪВЗ", используемые в настоящем документе, относятся к белку или фрагменту ЕгЬВЗ человека, если не указано, что он происходит из биологических видов, отличных от человека (например, "ЕгЬВЗ мыши", "фрагмент ЕгЬВЗ мыши", "ЕгЬВЗ обезьяны", "фрагмент ЕгЬВЗ обезьяны" и др.). Внеклеточный домен ЕгЬВЗ человека имеет аминокислотную последовательность, показанную, например, в аминокислотах 1-61З 8ЕС ГО N0: 497-499.
Термин "лиганд ЕгЬВЗ", используемый в настоящем документе, означает белок, способный связываться с внеклеточным доменом белка ЕгЬВЗ человека для передачи биологического сигнала ίη νίνο. Термин "лиганд ЕгЬВЗ" содержит нейрегулин-1 (ΝΕΟ1) и нейрегулин-2 (ΝΚΟ2).
Термин "антитело", используемый в настоящем документе, предназначен для обозначения молекулы иммуноглобулина, состоящей из четырех полипептидных цепей, двух тяжелых (Н) цепей и двух легких (Ь) цепей, взаимосвязанных дисульфидными связями, а также их мультимеры (например, 1дМ). Каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи (сокращенно именуется в настоящем документе как нСУК или Ун) и константную область тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи содержит три домена, СН1, СН2 и СНЗ. Каждая легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи (сокращенно именуется ЬСУК или Уь) и константную область легкой цепи. Константная область легкой цепи состоит из одного домена (Съ1). Области Ун и Уь могут быть далее подразделены на области гипервариабельности, называемые гипервариабельными участками (СОК), вперемешку с областями, которые являются более консервативными, называемыми каркасными областями (РК). Каждая Ун и Уъ состоит из трех СОК и четырех РК, расположенных от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: РК1, СОК1, РК2, СОК2, РКЗ, СОКЗ, РК4. В разных вариантах осуществления изобретения РК антитела к ЕгЬВЗ (или его антиген-связывающей части) могут быть идентичны эмбриональным последовательностям человека или могут быть модифицированы естественным или искусственным образом. Последовательность аминокислотного консенсуса может быть определена на основе анализа примыкания двух или более СОК.
Термин "антитело", используемый в настоящем документе, также содержит антигенсвязывающие фрагменты полноразмерных молекул антител. Термины "антигенсвязывающая часть" антитела, "антигенсвязывающий фрагмент" антитела и так далее, как используется в настоящем документе, включают любой природный, получаемый ферментативно, синтетический или генно-инженерный полипептид или гликопротеин, который специфически связывается с антигеном с образованием комплекса. Антигенсвязывающие фрагменты антитела могут быть получены, например, из полноразмерных молекул антитела с помощью любых подходящих стандартных способов, таких как протеолитическое расщепление или рекомбинантные генно-инженерные методики, включающие манипуляции и экспрессию ДНК, кодирующую вариабельный и необязательно константный домены антитела. Такая ДНК известна и/или легко доступна, например, из коммерческих источников, ДНК-библиотек (в том числе, например, библиотеки фаг-антитело) или может быть синтезирована. ДНК можно секвенировать и с ней можно манипулировать химически или с помощью способов молекулярной биологии, например, расположить один или более вариабельных и/или константных доменов в наиболее подходящей конфигурации, или ввести кодоны, создать остатки цистеина, модифицировать, добавлять или удалять аминокислоты и др.
Неограничивающие примеры антигенсвязывающих фрагментов включают (ί) РаЬ-фрагменты; (ίί) Р(аЬ')2-фрагменты; (ίίί) Εά-фрагменты; (ίν) Ρν-фрагменты; (ν) одноцепочечные Ρν (δοΡν) молекулы; (νί) άΑЬ-фрагменты; (νίί) минимальные узнающие единицы, состоящие из остатков аминокислот, которые имитируют гипервариабельную область антитела (например, изолированный гипервариабельный участок (СОК), такой как СОКЗ-пептид) или ограниченный РКЗ-СОКЗ-РК4 пептид. Другие сконструированные молекулы, такие как домен-специфические антитела, однодоменные антитела, антитела с удаленным доменом, химерные антитела, антитела с присоединенным СОК, диатела, триатела, тетратела, минитела, нанотела (например, моновалентные нанотела, двухвалентные нанотела и др.), малые модульные иммунные лекарственные препараты (§М1Р), и шарк-вариабельные ΙβΝΛΡ домены, также охватываются выражением "антиген-связывающий фрагмент", как используется в настоящем документе.
Антиген-связывающий фрагмент антитела обычно содержит не менее одного вариабельного домена. Вариабельный домен может быть любого размера или любой аминокислотной композиции и, как правило, включает как минимум один СОК, который находится рядом или в рамке с одной или более каркасной последовательностью. В антигенсвязывающих фрагментах, имеющих Ун-домен, связанный с У[-доменом, Ун и Уъ домены могут быть расположены относительно друг друга в любой подходящей конфигурации. Например, вариабельная область может быть димерной и содержать димеры Ун-Ун, Ун- З 028879
У или Уь-Уь. Кроме того, антиген-связывающий фрагмент антитела может содержать мономерный домен νΗ или Уъ.
В определенных вариантах осуществления антиген-связывающий фрагмент антитела может содержать по меньшей мере один вариабельный домен, ковалентно связанный как минимум с одним константным доменом. Неограничивающие типичные конфигурации вариабельного и константного доменов, которые могут быть найдены в пределах антиген-связывающего фрагмента антитела по изобретению, включают (ΐ) Ун-Сн1; (й) Ун-Сн2; (ΐΐΐ) Ун-Сн3; (ΐν) Ун-Сн1-Сн2; (ν) Ун-Сн1-Сн2-Сн3; (νΐ) Ун-Сн2Сн3; (νΐΐ) Ун-Съ; (νΐΐΐ) Уь-Сн1; (ίχ) Уь-Сн2; (χ) Уь-Сн3; (χΐ) Уъ-Сн1-Сн2; (χΐΐ) Уъ-Сн1-Сн2-Сн3; (χΐΐΐ) УъСн2-Сн3; (χΐν) Уь-Сь. В любой конфигурации вариабельных и константных доменов, включая любые типичные конфигурации, описанные выше, вариабельный и константный домены могут быть либо непосредственно связаны друг с другом, либо они могут быть связаны при помощи полной или частичной шарнирной или линкерной области. Шарнирная область может состоять как минимум из 2 (например, 5, 10, 15, 20, 40, 60 или больше) аминокислот, которые дают в результате гибкую или полугибкую связь между соседними вариабельным и/или константным доменами в одной полипептидной молекуле. Кроме того, антиген-связывающий фрагмент антитела по изобретению может содержать гомодимер или гетеродимер (или другой мультимер) любых конфигураций вариабельного и константного доменов, перечисленных выше, в нековалентной связи друг с другом и/или с одним или несколькими мономерными Ун или Уь доменами (например, при помощи дисульфидной связи(ей)).
Как и полноразмерные молекулы антитела, антиген-связывающие фрагменты могут быть моноспецифическими или мультиспецифическими (например, биспецифическими).
Мультиспецифический антиген-связывающий фрагмент антитела обычно состоит по меньшей мере из двух различных вариабельных доменов, где каждый вариабельный домен способен специфически связываться с отдельным антигеном или с разными эпитопами одного и того же антигена. Любой мультиспецифический формат антитела, включая типичные биспецифические форматы антитела, описанные в настоящем документе, может быть адаптирован для использования в контексте антиген-связывающего фрагмента антитела по изобретению с помощью рутинных способов, применяемых в рассматриваемой области.
Антитела по настоящему изобретению могут функционировать через зависимую от комплемента цитотоксичность (СЭС) или антитело-зависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (АЭСС). "Зависимая от комплемента цитотоксичность" (СЭС) относится к лизису антиген-экспрессирующих клеток при помощи антитела по изобретению в присутствии комплемента. "Антитело-зависимая клеточноопосредованная цитотоксичность" (АЭСС) относится к клеточно-опосредованной реакции, при которой неспецифические цитотоксические клетки, которые экспрессируют Ре-рецепторы (РсКк) (например, клетки-естественные киллеры (ΝΚ), нейтрофилы и макрофаги) узнают связанное антитело на клеткемишени и, тем самым, приводят к лизису клетки-мишени. СЭС и АЭСС можно определять с помощью анализов, которые хорошо известны в рассматриваемой области (см., например, υδ 5500362 и 5821337, и СГупс5 с1 а1. (1998), Ргос. Ναΐΐ. Асаб. δει. (υδΑ) 95:652-656). Константная область антитела важна в способности антитела фиксировать комплемент и опосредовать клеточно-зависимую цитотоксичность. Таким образом, изотип антитела может быть выбран на основании того, предпочтительно ли для антитела опосредовать цитотоксичность.
Термин "человеческое антитело", используемый в настоящем документе, предназначен для включения антител с вариабельной и константной областями, полученными от последовательностей зародышевой линии иммуноглобулинов человека. Человеческие антитела по изобретению могут включать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями зародышевой линии иммуноглобулинов человека (например, мутации, введенные случайным или сайт-направленным мутагенезом ΐη νΐίτο или при помощи соматической мутации ΐη νίνο), например, в СОК, и в определенную СЭК3. Однако термин "человеческое антитело", используемый в настоящем документе, не должен включать антител, в которых СЭК-последовательности, полученные от зародышевой линии других видов млекопитающих, таких как мышь, были подстыкованы к каркасным последовательностям человека.
Термин "рекомбинантное антитело человека", используемый в настоящем документе, предназначен для включения всех человеческих антител, которые подготавливаются, экспрессируются, создаются или изолируются рекомбинантными способами, например, антитела, экспрессируемые с помощью рекомбинантного вектора экспрессии, трансфицированного в клетку-хозяин (описано дополнительно ниже), антитела, изолированные из рекомбинантных, комбинаторных библиотек человеческих антител (дополнительно описано ниже), антитела, изолированные из животного (например, мыши), которое является трансгенным для генов иммуноглобулина человека (см., например, Тау1ог с1 а1. (1992), Νιιεί. Αεΐάκ Кек. 20:6287-6295) или антитела, подготовленные, экспрессируемые, создаваемые или изолируемые любыми другими средствами, которые предполагают сплайсинг последовательностей генов иммуноглобулина человека в другие последовательности ДНК. Такие рекомбинантные антитела человека имеют вариабельные и константные области, полученные из последовательностей зародышевой линии иммуноглобулинов человека. В определенных вариантах осуществления, однако, такие рекомбинантные антитела человека подвергают мутагенезу ΐη νΐίτο (или, когда используются животные, трансгенные для 1д- 4 028879
последовательностей человека, соматический мутагенез ίη νΐνο) и, таким образом, аминокислотные последовательности Ун и Уъ областей рекомбинантных антител являются последовательностями, которые, несмотря на то, что получены от и родственны Ун и Уъ последовательностям зародышевой линии человека, могут не естественным образом существовать в пределах совокупности зародышевой линии антител человека ίη νΐνο.
Антитела человека могут существовать в двух формах, которые связаны с гетерогенностью шарнира. В одной форме, молекула иммуноглобулина человека состоит из стабильной четырехцепочечной конструкции около 150-160 кДа, в которой димеры удерживаются вместе с помощью соединяющих тяжелые цепи дисульфидных связей. Во второй форме, димеры не связаны между собой через межцепочечные дисульфидные связи, и образуется молекула около 75-80 кДа, составленная из ковалентно связанных легких и тяжелых цепей (полуантитело). Эти формы чрезвычайно трудно отделить, даже после аффинной очистки.
Частота появления второй формы в различных изотипах интактных 1дС обусловлена, без ограничения, структурными различиями, связанными с шарнирной областью изотипа антитела. Единичная аминокислотная замена в шарнирной области шарнира 1§С4 человека позволяет значительно уменьшить появление второй формы (Апда1 с1 а1. (1993), Мо1еси1аг 1ттипо1оду 30:105) до уровней, обычно наблюдаемых при помощи шарнира 1§С1 человека. Настоящее изобретение содержит антитела, имеющие одну или несколько мутаций в шарнирной, СН2 или СН3 области, что может оказаться желательным, например, при производстве, для повышения выхода требуемой формы антитела.
"Выделенное антитело", как используется в настоящем документе, означает, что антитело, которое было идентифицировано и выделено и/или очищено по меньшей мере от одного компонента окружающей среды. Например, антитело, которое было отделено или удалено по меньшей мере из одного компонента организма, или из ткани или клетки, в которой антитело, естественным образом существует или образуется естественным путем, является "изолированным антителом" для целей по настоящему изобретению. Выделенное антитело также включает антитело ίη δίίπ внутри рекомбинантной клетки. Изолированные антитела представляют собой антитела, которые подвергались по меньшей мере одной стадии очистки или выделения. В соответствии с определенными вариантами осуществления, выделенное антитело может быть в существенной степени свободно от другого клеточного материала и/или химических веществ.
Термин "специфически связывается" или подобное, означает, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент образует комплекс с антигеном, который является относительно стабильным в физиологических условиях. Способы определения того, связывается ли антитело специфически с антигеном, хорошо известны специалистам и включают, например, равновесный диализ, поверхностный плазмонный резонанс и тому подобное. Например, антитело, которое "специфически связывается" с ЕгЬВЗ человека, как используется в контексте настоящего изобретения, содержит антитела, которые связывают ЕгЬВЗ человека или его части с Кс, меньшей чем примерно 1000 нМ, меньшей чем примерно 500 нМ, меньшей чем примерно 300 нМ, меньшей чем примерно 200 нМ, меньшей чем примерно 100 нМ, меньшей чем примерно 90 нМ, меньшей чем примерно 80 нМ, меньшей чем примерно 70 нМ, меньшей чем примерно 60 нМ, меньшей чем примерно 50 нМ, меньшей чем примерно 40 нМ, меньшей чем примерно 30 нМ, меньшей чем примерно 20 нМ, меньшей чем примерно 10 нМ, меньшей чем примерно 5 нМ, меньшей чем примерно 4 нМ, меньшей чем примерно 3 нМ, меньшей чем примерно 2 нМ, меньшей чем примерно 1 нМ или меньшей чем примерно 0,5 нМ, что определяется в анализе поверхностного плазмонного резонанса (см., например, пример 3, содержащийся в этом документе). Выделенное антитело, которое специфически связывается с ЕгЬВ3 человека, может, однако, иметь перекрестную реактивность с другими антигенами, такими как молекулы ЕгЬВ3 из других видов (отличных от человека).
"Нейтрализирующее" или "блокирующее" антитело, как используется в настоящем документе, предназначено для обозначения антитела, чье связывание с ЕгЬВ3: (ί) влияет на взаимодействие между ЕгЬВ3 или ЕгЬВ3-фрагментом и ЕгЬВ3-лигандом (например, нейрегулином 1), и/или (ίί) приводит к ингибированию по меньшей мере одной биологической функции ЕгЬВ3. Ингибирование, вызванное нейтрализующим или блокирующим ЕгЬВ3 антителом, не обязательно должно быть полным, пока оно детектируется с помощью соответствующего анализа. Типичные анализы для детектирования ЕгЬВ3ингибирования описаны в настоящем документе.
Антитело к ЕгЬВ3, раскрытое в настоящем документе, может содержать одну или более аминокислотных замен, вставок и/или делеций в шарнирной и/или СБК областях вариабельных областей тяжелой и легкой цепи доменов, по сравнению с аналогичными последовательностями зародышевой линии, из которой антитела были получены. Такие мутации могут быть легко установлены в результате сравнения последовательностей аминокислот, описанных в настоящем документе, с последовательностями зародышевой линии, доступными, например, из общедоступных баз данных антител. Настоящее изобретение содержит антитела и его антиген-связывающие фрагменты, которые получены из любой из аминокислотных последовательностей, описанных в настоящем документе, где одна или более аминокислот в пределах одной или нескольких шарнирных и/или СБК областей мутируют в соответствующий остаток(ки) последовательностей зародышевой линии, из которой антитело было получено, или соответст- 5 028879
вующий остаток(ки) другой последовательности зародышевой линии человека, или консервативной аминокислотной замене соответствующего остатка(ов) зародышевой линии (такие изменения последовательности называются в настоящем документе в совокупности "мутации эмбрионального типа"). Любой специалист в рассматриваемой области, начиная с последовательностей вариабельных областей тяжелой и легкой цепи, описанных в настоящем документе, может легко получить множество антител и антигенсвязывающих фрагментов, которые содержат одну или нескольких отдельных мутаций эмбрионального типа или их комбинаций. В определенных вариантах осуществления, каждый из каркасных и/или СЭР остатков в Ун и/или Уъ доменах мутируют обратно в остатки, обнаруживаемые в исходной эмбриональной последовательности, из которой антитела были получены. В других вариантах осуществления, только некоторые остатки мутируют обратно к исходной эмбриональной последовательности, например, только мутантные остатки, расположенные в пределах первых 8 аминокислот РК1 или в пределах последних 8 аминокислот РК4, или только мутантные остатки, расположенные в СЭВ1. СЭВ2 или СЭРЗ. В других вариантах осуществления один или несколько каркасных и/или СОК остатков(а) мутируют в соответствующие остатки(ок) отличной эмбриональной последовательности (т.е. эмбриональной последовательности, которая отличается от эмбриональной последовательности, из которой антитело было изначально получено). Кроме того, антитела по настоящему изобретению могут содержать любую комбинацию из двух или более эмбриональных мутаций в пределах каркасной и/или СОК областей, например, где определенные индивидуальные остатки мутируют в соответствующие остатки в определенной эмбриональной последовательности, в то время как некоторые другие остатки, которые отличаются от исходной эмбриональной последовательности, сохраняются или мутируют в соответствующие остатки отличной эмбриональной последовательности. Получив это, антитела и антиген-связывающие фрагменты, которые содержат один или несколько эмбриональных мутаций, могут быть легко проверены на одно или более необходимых свойств, как, например, улучшение специфичности связывания, увеличение аффинности связывания, увеличенные или усиленные антагонистические или агонистические биологические свойства (в зависимости от обстоятельств), сниженная иммуногенность и др. Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, полученные этим общим способом, охватываются настоящим изобретением.
Настоящее изобретение также содержит антитела к ЕгЪВЗ, включающие варианты любых из НСУК, ЬСУК и/или СОК аминокислотных последовательностей, описанных в настоящем документе, имеющих одну или более консервативных замен. Например, изобретение содержит антитело к ЕгЪВЗ, имеющее НСУК, ЬСУК и/или СОК аминокислотные последовательности, например, с 10 или меньше, 8 или меньше, 6 или меньше, 4 или меньше и т.д. консервативных аминокислотных замен по отношению к любой из НСУК, ЬСУК, и/или СОК аминокислотных последовательностей, описанных в настоящем документе.
Термин "поверхностный плазмонный резонанс", используемый в настоящем документе, относится к оптическому явлению, которое позволяет проводить анализ взаимодействий в режиме реального времени путем выявления изменений в концентрации белков в биосенсорной матрице, например, с помощью системы В1Аеоге™ (В1асоге Ьйе 8с1спсс5 άίνίδίοη οί ОЕ НеаНйсаге, Р1зса1а№ау, N1).
Термин "Кс", используемый в настоящем документе, предназначен для обозначения равновесной константы диссоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген.
Термин "эпитоп" относится к антигенному детерминанту, который взаимодействует с сайтом связывания определенного антигена в вариабельной области молекулы антитела, известной как паратоп. Один антиген может иметь более одного эпитопа. Таким образом, различные антитела могут связаться с различными областями на антигене и могут иметь различные биологические эффекты. Эпитопы могут быть либо конформационными, либо линейными. Конформационный эпитоп образуется пространственно сближенными аминокислотами из разных сегментов линейной полипептидной цепи. Линейный эпитоп представляет собой эпитоп, образуемый соседними аминокислотными остатками в полипептидной цепи. В определенных обстоятельствах эпитоп может включать части сахаридов, фосфорильных групп или сульфонильных групп на антигене.
Термин "существенная идентичность" или "в существенной степени идентичный" в случае, когда речь идет о нуклеиновой кислоте или ее фрагменте, указывает на то, что в случае оптимального выравнивания с соответствующими нуклеотидными вставками или делециями с другой нуклеиновой кислотой (или ее комплементарной цепью) идентичность нуклеотидной последовательности составляет по меньшей мере около 95%, еще предпочтительнее по меньшей мере около 96, 97, 98 или 99% нуклеотидных оснований, как определено при помощи любого хорошо известного алгоритма идентичности последовательности, такого как РА8ТА, ВЬА§Т или Оар, как описано ниже. Молекула нуклеиновой кислоты, имеющая существенную идентичность со ссылочной молекулой нуклеиновой кислоты может, в некоторых случаях, кодировать полипептид, имеющий ту же или в существенной степени сходную последовательность аминокислот, что и полипептид, кодируемый ссылочной молекулой нуклеиновой кислоты.
Применительно к полипептидам, термин "значительное сходство" или "по существу сходный" означает, что две пептидные последовательности в случае выравнивания оптимальным образом, например, по программам ОАР или ВЕ8ТР1Т, используя по умолчанию весы пробелов, составляют по меньшей мере 95% идентичности последовательности, даже более предпочтительно как минимум 98 или 99% идентичности последовательности. Предпочтительно положения остатков, которые не идентичны, отличают- 6 028879
ся путем консервативных аминокислотных замен. "Консервативная аминокислотная замена" представляет собой замену, при которой аминокислотный остаток заменяется другим аминокислотным остатком, имеющим боковую цепь (К-группу) с аналогичными химическими свойствами (например, заряд или гидрофобность). В общем, консервативная аминокислотная замена не приведет к существенному изменению функциональных свойств белка. В случаях, когда две или более последовательностей аминокислот отличаются друг от друга консервативными заменами, процент идентичности последовательности или степени сходства могут быть скорректированы в сторону увеличения, чтобы скорректировать консервативный характер замещения. Средства для реализации этого корректирования хорошо известны специалистам в рассматриваемой области. См., например, Реагкои (1994), Мебюбк Μοί. ΒίοΙ. 24: 307-331. Примеры групп аминокислот, которые имеют боковые цепи с подобными химическими свойствами, включают (1) алифатические боковые цепи: глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин; (2) алифатические-гидроксильные боковые цепи: серии и треонин; (3) амидсодержащие боковые цепи: аспарагин и глутамин; (4) ароматические боковые цепи: фенилаланин, тирозин и триптофан; (5) основные боковые цепи: лизин, аргинин, и гистидин; (6) кислые боковые цепи: аспартат и глутамат (7) содержащие серу боковые цепи: цистеин и метионин. Предпочтительные группы консервативных аминокислотных замен: валин-лейцин-изолейцин, фенилаланин-тирозин, лизин-аргинин, аланин-валин, аспарагиновая кислота-глутаминовая кислота и аспарагин-глутамин. Кроме того, консервативная замена представляет собой какие-либо изменения, имеющие положительное значение в РАМ250 1од-матрице вероятности, раскрытой в Соппе! е! а1. (1992), 8с1еисе 256: 1443-1445. "Умеренно-консервативная" замена представляет собой любую замену, имеющую неотрицательное значение в РАМ250 1од-матрице вероятности.
Сходство последовательностей для полипептидов, которое также называют идентичностью последовательностей, как правило, оценивают с использованием программного обеспечения для анализа последовательностей. Программное обеспечение для белкового анализа сопоставляет сходные последовательности с помощью средств сходства, определенных для различных замен, делеций и других модификаций, в том числе консервативных аминокислотных замен. Например, программное обеспечение ССС содержит программы, такие как Сар и Вея1П1, которые могут быть использованы с параметрами по умолчанию, чтобы определить гомологию последовательностей или идентичность последовательностей близкородственных полипептидов, например, таких как гомологичные полипептиды из разных видов организмов или между белком дикого типа и белком, образуемым в результате их мутации. См., например, ССС Версия 6.1. Полипептидные последовательности также могут быть сравнены с помощью ΡΆ8ΤΆ, используя параметры по умолчанию или рекомендуемые параметры, программа в ССС Версия 6.1. ΡΑδΤΑ (например, ΡΑ8ΤΑ2 и ΡΑ8ΤΑ3) предоставляет выравнивания и процент идентичности последовательности областей наилучшего перекрытия между последовательностями запроса и поиска (Реагкои (2000) выше). Другой рекомендуемый алгоритм сравнения последовательности по изобретению с базой данных, содержащей большое количество последовательностей из разных организмов, представляет собой компьютерную программу ΒΡΑδΤ, особенно ΒΡΑδΤΡ или ΤΒΡΑδΤΝ, используя параметры по умолчанию. См., например, ЛЙ5с1ш1 е! а1. (1990), 1. Мо1. Βώί. 215:403-410 и ЛЙ5с1ш1 е! а1. (1997), №.1с1ею ΑΟ6δ Кек. 25:3389-402.
Биологические характеристики антител
Антитела по настоящему изобретению блокируют взаимодействие между Ег№3 и его лигандом нейрегулином-1 (ΝΚΟ1). Как используется в настоящем документе, экспрессия "блокирует взаимодействие между Ετ6Β3 и ΝΚΟ1" означает, что в анализе, в котором физическое взаимодействие между ЕгЬЕ3 и ИКС1 может быть обнаружено и/или количественно оценено, добавление антитела по изобретению уменьшает взаимодействие между Ετ6Β3 и ИКС1 по меньшей мере на 50%. Неограничивающий типичный анализ, который можно использовать, чтобы определить, блокирует ли антитело взаимодействие Ετ6Β3 человека и МКС1, показан в Примере 4 настоящего документа. В этом примере, антитела смешивают с белком Ет№3, и затем смесь антитело/Ε^ЬΒ3 наносят на поверхность, покрытую белком ИКС1. После вымывания несвязанных молекул, измеряют количество Ег№3. связанного с ИКС-покрытой поверхностью. Используя различные количества антитела в этом формате анализа, количество антител, необходимых для блокировки 50% связывания Ετ6Β3 с ΝΚΟ1, можно вычислить и выразить как значение 1С50. Настоящее изобретение включает антитело к Ετ6Β3, которое обладает 1С50, меньшим чем примерно 600 пМ, при тестировании в анализе Ε^ЪΒ3/NΚС1-связывания, как описано выше, или в аналогичном по существу анализе. Например, изобретение содержит антитело к Ετ№3, которые обладают 1С50, меньшим чем примерно 600, 500, 400, 300, 290, 280, 270, 260, 250, 240, 230, 220, 210, 200, 190, 180, 170, 160, 150, 140, 130, 120, 110, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 18, 16, 14, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или в 1 пМ при тестировании в анализе Εγ6Β3/ΝΡΟ1-связывания, как описано выше, или в аналогичном по существу анализе.
В качестве альтернативы можно установить, блокирует ли антитело взаимодействие между Ετ6Β3 и ΝΚΟ1 с помощью формата анализа на основе клеток, который обнаруживает изменения в ΝΚΟ-1индуцированной клеточной сигнализации. Типичные тестовые форматы такого типа показаны в Примерах 6 и 8 настоящего документа. В этих примерах измеряется степень фосфорилирования киназы ΑΕΙ и/или Ετ6Β3 в клетках после обработки ΝΚΟ1 в присутствии различных количеств антитела к Ετ№3. В
- 7 028879
этих тестовых форматах, процент ингибирования фосфорилирования Лк! и/или ЕгЬВЗ, вызванного наличием антитела к ЕгЬВЗ, служит показателем того, в какой степени антитело блокирует взаимодействие между ЕгЬВЗ и ΝΚΟ. Настоящее изобретение включает антитела, которые ингибируют фосфорилирование Ак! или ЕгЬВЗ по меньшей мере на 60% при тестировании в анализе фосфорилирования Ак! или ЕгЬВЗ, как описано выше, или в, по существу, аналогичном анализе. Например, изобретение содержит антитела к ЕгЬВЗ, которые ингибируют фосфорилирование Ак! или ЕгЬВЗ по меньшей мере на 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 или 100% при тестировании в анализе фосфорилирования Ак! или ЕгЬВЗ, как описано выше, или в, по существу аналогичном анализе.
Антитела к ЕгЬВЗ по настоящему изобретению также проявляют одно или несколько из следующих свойств: (1) способность к индуцированию интернализации клеточной поверхности, экспрессирующей ЕгЬВЗ (см., например, пример 5 в настоящем документе); (2) способность ингибировать ΝΚΟ1стимулированный рост опухолевых клеток ίη νίΐτο, либо самостоятельно, либо в сочетании с ЕСРКингибированием (см., например, пример 7 в настоящем документе); и (З) способность ингибировать рост опухолей у животных (см., например, пример 9 в настоящем документе).
Эпитопное картирование и родственные технологии
Белок ЕгЬВЗ, подобно всем членам семейства ЕгЬВ/НЕК, содержит четыре внеклеточных домена, названных "Домен I", "Домен II", "Домен III" и "Домен IV". Домен I представляет собой аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами через 1-190 8Еф ГО ΝΟ: 498; домен II представляет собой аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 191-З08 8Еф ГО ΝΟ: 498; домен III представляет собой аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами З09-499 8Еф ГО ΝΟ: 498; и домена IV представляет собой аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами 500-624 8Еф ГО ΝΟ: 498.
Настоящее изобретение включает антитела к ЕгЬВЗ, которые взаимодействуют с одним или более эпитопов, расположенных в пределах домена III внеклеточного домена ЕгЬВЗ. Эпитоп(ы) может состоять из одной или более прилегающих последовательностей из З или больше (например, З, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 1З, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или больше) аминокислот, расположенных в пределах Домена III ЕгЬВЗ. Кроме того, эпитоп может состоять из множества неприлегающих аминокислот (или аминокислотных последовательностей), расположенных в пределах домена III ЕгЬВЗ. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления по настоящему изобретению предоставлены антитела к ЕгЬВЗ, которые взаимодействуют с одной или более аминокислотами, расположенными в пределах одного или более аминокислотных сегментов домена III, выбранных из группы, состоящей из аминокислот З45-З67 8Еф ГО ΝΟ: 498, аминокислот 42З-4З9 8Еф ГО ΝΟ: 498 и аминокислот 451-46З 8Еф ГО ΝΟ: 498. Например, настоящее изобретение включает антитела к ЕгЬВЗ, которые взаимодействуют с хотя бы одной аминокислотой в пределах каждой из указанных аминокислотных сегментов домена III (т.е. в пределах каждой из аминокислот З45-З67, 42З-4З9 и 451-46З δί Т) ГО ΝΟ: 498).
Различные способы, известные любому специалисту в рассматриваемой области, могут быть использованы для определения того, "взаимодействует" ли антитело "с одной или более аминокислот" в полипептиде или белке. Типичные способы содержат, например, обычный кросс-блокирующий анализ, такой как анализ, описанный в АпбЬоб1е8. Наг1о\у апб Ьапе (Со1б Зрппд НагЬог Ргезз, Со1б Зрппд НагЬ., ΝΥ), аланиновый сканирующий мутационный анализ, анализ пептидных блотов (Кешеке, 2004. МеШобз Мо1 Вю1 248:44З-46З) и анализа пептидного расщепления. Кроме того, могут быть использованы такие способы, как иссечение эпитопа, экстракция эпитопа и химическая модификация антигенов (Тотег, 2000, Рго!ет 8с1епсе 9:487-496). Другой способ, который может быть использован для определения аминокислот в полипептиде, с которым антитело взаимодействует, является водород/дейтериевый обмен, детектируемый способом масс-спектрометрии (см., например, пример 11 в настоящем документе). В общих чертах, способ водород/дейтериевого обмена предусматривает мечение дейтерием представляющего интерес белка, с последующим связыванием антитела с дейтерий-меченым белком. Далее, комплекс белок/антитело переносят в воду, чтобы дать возможность водород/дейтериевому обмену произойти во всех остатках, кроме остатков, защищенных антителом (которые остаются дейтерий-мечеными). После диссоциации антитела, белок-мишень подвергается протеазному расщеплению и массспектрометрическому анализу, тем самым раскрывая дейтерий-меченые остатки, которые соответствуют конкретным аминокислотам, с которыми антитела взаимодействует. См., например, ЕЬгшд (1999), Апа1убса1 ВюсЬет18!гу 267 (2):252-259; Епдеп апб 8тЪЬ (2001), Апа1. СЬет. 7З:256А-265А.
Настоящее изобретение также включает антитела к ЕгЬВЗ, которые связываются с тем же эпитопом, как и любое из специфических иллюстративных антител, описанных в настоящем документе (например, Η1Μ1819Ν, Η2Μ1821Ν, Η2Μ1824Ν, Η2Μ1827Ν, Н1т1828^ Η2Μ1829Ν, Н2М19З0Н Н2М19З4Н Н2М19З8К Η1Μ1940Ν и др.). Аналогичным образом, изобретение также включает антитела к ЕгЬВЗ, которые конкурируют за связывание с ЕгЬВЗ или ЕгЬВЗ-фрагментом с любым из специфических иллюстративных антител, описанных в настоящем документе (например, Η1Μ1819Ν, Η2Μ1821Ν, Η2Μ1824Ν, Η2Μ1827Ν, Η1Μ1828Ν, Η2Μ1829Ν, Н2М19З0Н Н2М19З4Н Н2М19З8Н Η1Μ1940Ν и др.).
Можно легко определить, связывается ли антитело с тем же эпитопом или конкурирует за связывание с, что и ссылочное антитело к ЕгЬВЗ, с помощью рутинных способов, известных в рассматриваемой
- 8 028879
области. Например, чтобы определить, связывается ли тестируемое антитело с тем же эпитопом, что и ссылочное антитело к ЕгЬВЗ по изобретению, ссылочному антителу дают возможность связаться с белком или пептидом ЕгЬВЗ при насыщающих условиях. Далее, способность теста на антитела, чтобы привязать его к ЕгЬВЗ молекулы оценивается. Если тестируемое антитело способно связываться с ЕгЬВЗ после насыщающего связывания с ссылочным антителом к ЕгЬВЗ, можно сделать вывод, что тестируемое антитело связывается с другим эпитопом, чем ссылочное антитело к ЕгЬВЗ. С другой стороны, если тестируемое антитело не способно связываться с молекулой ЕгЬВЗ после насыщающего связывания с ссылочным антителом к ЕгЬВЗ, то тестируемое антитело может связываться с тем же эпитопом, что и эпитоп, связывающийся с ссылочным антителом к ЕгЬВЗ по изобретению. Дополнительные рутинные эксперименты (например, пептид мутации и связывание анализов) можно затем провести для подтверждения того, происходит ли наблюдаемое отсутствие связывания тестируемого антитела на самом деле из-за связывания с тем же эпитопом, что и ссылочное антитело, или же стерическая блокировка (или другое явление) ответственна за отсутствие рассматриваемого связывания. Эксперименты такого рода можно выполнять с помощью ЕЫ§Л, ΚΙΆ, В1асоге, проточной цитометрии или любого другого количественного или качественного анализа связывания антитела, имеющегося в рассматриваемой области. В соответствии с определенными вариантами осуществления по настоящему изобретению, два антитела связываются с тем же (или перекрывающимся) эпитопом, если, например, 1-, 5-, 10-, 20- или 100-кратное превышение одного антитела ингибирует связывание другого по меньшей мере на 50%, но предпочтительно на 75, 90 или даже 99%, измеряемое в анализе конкурентного связывания (см., например, 1ипдЬап5 е! а1., Сапсег Ке8. 1990:50:1495-1502). Кроме того, два антитела считаются связывающимися с одним и тем же эпитопом, если по существу, все аминокислотные мутации в антигене, которые уменьшают или устраняют связывание одного антитела, уменьшают или устраняют связывание другого. Два антитела считаются имеющими "перекрывающиеся эпитопы", если только часть аминокислотных мутации, которые уменьшают или устраняют связывание одного антитела, уменьшают или устраняют связывание другого.
Чтобы определить, конкурируют ли антитела за связывание с ссылочным антителом к ЕгЬВЗ, описанная выше методология связывания осуществляется в двух ориентациях: в первой ориентации, ссылочному антителу дают возможность связываться с молекулой ЕгЬВЗ при насыщающих условиях с последующей оценкой их эффективности связывания тестируемого антитела с молекулой ЕгЬВЗ. Во второй ориентации, тестируемому антителу дают возможность связываться с молекулой ЕгЬВЗ при насыщающих условиях с последующей оценкой их эффективности связывания ссылочного антитела с молекулой ЕгЬВЗ. Если в обеих ориентациях только первое (насыщающее) антитело способно связываться с молекулой ЕгЬВЗ, то можно сделать вывод, что тестируемое антитело и ссылочное антитело конкурируют за связывание с ЕгЬВЗ. Как может оценить специалист в рассматриваемой области, антитело, которое конкурирует за связывание с ссылочным антителом, может не обязательно связываться с тем же эпитопом, что и ссылочное антитело, но может стерически блокировать связывание ссылочного антитела путем связывания перекрывающегося или примыкающего эпитопа.
Подготовка человеческих антител
Способы создания моноклональных антител, в том числе полностью человеческих моноклональных антител, известны в рассматриваемой области. Любые такие известные способы могут быть использованы в контексте настоящего изобретения, чтобы сделать человеческие антитела, которые связываются ЕгЬВЗ человека.
С помощью технологии УЕЬОС1ММи№7м или любого другого известного способа получения моноклональных антител, первоначально изолируют высокоаффинные антитела к ЕгЬВЗ, с человеческой вариабельной областью и константной областью мыши. Как в экспериментальном разделе ниже, антитела характеризуют и отбирают по желательным характеристикам, в том числе аффинность, селективность, эпитоп и др. Константную область мыши заменяют нужной константной областью человека для создания полноценного человеческого антитела по изобретению, например, дикого типа или измененного 1дС1 или 1дС4. В то время как выбранная константная область может варьировать в зависимости от конкретного использования, характеристики высокой аффинности антиген-связывания и направленной специфики находятся в вариабельной области.
Биоэквиваленты
Антитела к ЕгЬВЗ и фрагменты антител по настоящему изобретению охватывают белки, обладающие аминокислотными последовательностями, которые отличаются от таковых описанных антител, но которые сохраняют способность связывать ЕгЬВЗ человека. Такие вариантные антитела и фрагменты антител включают одну или более вставок, делеций или замен аминокислот, по сравнению с родительской последовательностью, но проявляют биологическую активность, которая в существенной степени эквивалентна таковой описанных антител. Аналогичным образом, кодирующие антитело к ЕгЬВЗ последовательности ДНК по изобретению охватывают последовательности, которые включают одну или более вставок, делеций или замен нуклеотидов, по сравнению с раскрытой последовательностью, но которые кодируют антитело к ЕгЬВЗ или фрагмент антитела, который в существенной степени биоэквивалентен антителу к ЕгЬВЗ или фрагменту антитела по изобретению. Примеры таких вариантных аминокислотных и ДНК-последовательностей обсуждаются выше.
- 9 028879
Два антиген-связывающих белка, или антитела, считаются биоэквивалентными, если, например, они являются фармацевтическими эквивалентами или фармацевтическими альтернативами, чья скорость и степень абсорбции не проявляют существенной разницы, при назначении в одной и той же молярной дозе при аналогичных условиях эксперимента, либо однократной дозе или множественной дозе. Некоторые антитела следует считать эквивалентами или фармацевтическими альтернативами, если они эквивалентны по степени их абсорбции, но не по скорости их абсорбции, и еще могут считаться биоэквивалентными, поскольку такие различия в скорости абсорбции являются преднамеренными и отражаются в мечении, не являются существенными для достижения эффективной концентрации препарата в организме, например, при постоянном применении, и по медицинским показаниям считаются несущественными для конкретного исследуемого лекарственного препарата.
В одном варианте осуществления два антиген-связывающих белка являются биоэквивалентными, если не выявлено клинически значимых различий в их безвредности, чистоте и эффективности.
В одном варианте осуществления два антиген-связывающих белка являются биоэквивалентными, если пациент может быть переключен один или несколько раз между ссылочным продуктом и биологическим продуктом без ожидаемого увеличения риска развития побочных эффектов, включая клинически значимые изменения в иммуногенности или уменьшенную эффективность, по сравнению с непрерывным лечением без такого переключения.
В одном варианте осуществления два антиген-связывающих белка являются биоэквивалентными, если они оба действуют по общему механизму или механизмам действия для условия или условий использования, при условии, что такие механизмы известны.
Биоэквивалентность может быть продемонстрирована с помощью способов ίη νινο и ίη νίίτο. Определения биоэквивалентности включают, например, (а) тест ίη νινο у людей или других млекопитающих, в котором концентрация антител или его метаболитов измеряется в крови, плазме, сыворотке крови или других биологических жидкостях, как функция времени; (Ь) тест ίη νίίτο, который коррелирует с и является обоснованно предсказательным с данными биодоступности ίη νινο у человека; (с) тест ίη νινο у людей или других млекопитающих, в котором соответствующая высокая фармакологическая активность антитела (или его мишени) измеряется как функция времени; и (ά) строго контролируемые клинические испытания, которые устанавливают безопасность, эффективность или биодоступность или биоэквивалентность антитела.
Биоэквивалентные варианты антител к ЕгЬВЗ по изобретению можно сконструировать, например, при совершении различных замен остатков или последовательностей или удалении концевых или внутренних остатков или последовательностей, не являющихся необходимыми для биологической активности. Например, остатки цистеина, не являющиеся существенными для биологической активности, могут быть удалены или заменены на другие аминокислоты, чтобы предотвратить образование ненужных или некорректных внутримолекулярных дисульфидных мостиков при ренатурации. В других контекстах, биоэквивалентные антитела могут содержать варианты антител к ЕгЬВЗ, содержащие аминокислотные изменения, которые изменяют характеристики гликозилирования антител, например, мутации, которые устраняют или удаляют гликозилирование.
Видовая специфичность и видовая перекрестная реактивность
В соответствии с некоторыми вариантами осуществления изобретения, антитела к ЕгЬВЗ связываются с ЕгЬВЗ человека, но не с ЕгЬВЗ других видов. Настоящее изобретение также содержит антитела к ЕгЬВЗ, которые связывают ЕгЬВЗ человека и ЕгЬВЗ одного или более видов, отличных от человека. Например, антитела к ЕгЬВЗ по изобретению могут связываться с ЕгЬВЗ человека и могут связываться или не связываться, в зависимости от обстоятельств, с одним или несколькими из ЕгЬВЗ мыши, крысы, свинки, хомяка, песчанки, свиньи, кошки, собаки, кролика, козы, овцы, коровы, лошади, верблюда, яванского макака, игрунка, резуса или шимпанзе.
Иммуноконъюгаты
Изобретение охватывает моноклональные антитела к ЕгЬВЗ, конъюгированные с терапевтическим компонентом ("иммуноконъюгат"), таким как цитотоксин, химиотерапевтический препарат, иммунодепрессант или радиоизотоп. Цитотоксические средства включают любое средство, которое является пагубным для клеток. Примеры подходящих цитотоксических средств и химиотерапевтических препаратов для формирования иммуноконъюгатов известны в рассматриваемой области (см., например, ЩО 05/10З081).
Мультиспецифические антитела
Антитела по настоящему изобретению могут быть моноспецифические, биспецифические или мультиспецифические. Мультиспецифические антитела могут быть специфичными для разных эпитопов одной полипептидной цели или могут содержать антиген-связывающие домены, специфичные для более чем одного полипептида-мишени. См., например, Тип с1 а1., 1991, ί. Iттиηο1. 147:60-69; КиГсг с1 а1., 2004, Ττβηάδ ΕίοΙοΟιηοΙ. 22:2З8-244. Антитела к ЕгЬВЗ по настоящему изобретению могут быть соединены с или коэкспрессироваться с другой функциональной молекулой, например, другим пептидом или белком. Например, антитело или его фрагмент может быть функционально связано (например, при помощи химической связи, генетического слияния, нековалентной ассоциации или иным образом) с одной или не- 10 028879
сколькими другими молекулярными субстанциями, такими как другое антитело или фрагмент антитела, для получения биспецифического или мультиспецифического антитела со второй специфичностью связывания. Например, настоящее изобретение содержит биспецифические антитела, в которых одно плечо иммуноглобулина является специфичным для ЕтЬВЗ человека или его фрагмент, а другое плечо иммуноглобулина является специфичным для второй терапевтической мишени (например, ЕОРК, ΕΟΡΚνΙΙΙ, ЕтЬВ2/НЕК2, ЕгЬВ4, УЕОР или Апд2) или конъюгировано с терапевтическим фрагментом.
Типичный формат биспецифического антитела, который может использоваться в контексте настоящего изобретения, предполагает использование первого СН3-домена иммуноглобулина (1д) и второго 1д СН3-домена, где первый и второй Ι§ СН3-домены отличаются друг от друга по меньшей мере на одну аминокислоту, и где, по меньшей мере, разница в одну аминокислоту уменьшает связывание биспецифического антитела с белком А, по сравнению с биспецифическим антителом с отсутствием аминокислотного различия. В одном варианте осуществления, первый 1д СН3-домен связывает белок А и второй 1д СН3-домен содержит в себе мутацию, которая снижает или отменяет связывание с Белком А, такую как модификация Н95К (по ΙΜΟΤ-нумерации экзонов; Н435К по ЕИ-нумерации). Второй СН3 может дополнительно содержать модификацию Υ96Ρ (по ΙΜΟΤ; Υ436Ρ по ЕЙ). Дальнейшие модификации, которые могут быть обнаружены в рамках второго СН3, включают Э16Е. Ь18М, N448, Κ52Ν, У57М и ν82Ι (по ΙΜΟΤ; Э356Е, Б358М, N3848, Κ392Ν, ν397Μ и ν422Ι по ЕЙ) в случае ЦОРантител; N448, Κ52Ν и ν82Ι (ΙΜΟΤ; N3848, Κ392Ν и ν422Ι по ЕЙ) в случае ^02-антител; и О15К, N448, Κ52Ν, ν57Μ, К69К, Е79О и ν82Ι по (ΙΜΟΤ; Р355К, N3848, Κ392Ν, ν397Μ, Κ409Κ, Е419О и ν4221Ι по ЕЙ) в случае IёΟ4-антител. Вариации формата биспецифического антитела, описанного выше, предусмотрены в рамках настоящего изобретения.
Терапевтические составы и введение
Изобретение предоставляет фармацевтические композиции, содержащие антитела к ЕгЬВ3 или их антиген-связывающие фрагменты по настоящему изобретению. Фармацевтические композиции по изобретению сформулированы с подходящими носителями, наполнителями и другими средствами, которые обеспечивают улучшенную передачу, доставку, переносимость и так далее. Множество соответствующих составов можно найти в справочнике, известном всем фармацевтическим химикам: КетшдЮп'к РЬаттасеийса1 8с1епсек, Μаск РиЬЬкЬтд Сотрапу, ЕакГОп, РА. Эти составы включают, например, порошки, пасты, кремы, желе, воски, масла, липиды, липид- (катионные или анионные) содержащие везикулы (например, ^IРΟРΕСΤIN'™). ДНК-конъюгаты, безводные абсорбционные пасты, эмульсии типа масло-вводе и вода-в-масле, эмульсии карбовакс (полиэтиленгликоли различной молекулярной массы), полутвердые гели и полутвердые смеси, содержащие карбовакс. См. также Ро\уе11 е! а1. "Сотрепйшт оГ ехС1р1еп18 Гог ратеп1ега1 Готти1айоп5" РЭА (1998), I. РЬагт 8с1 ΤесЬηо1 52:238-311.
Доза антитела, вводимого пациенту, может меняться в зависимости от возраста и размера пациента, выявленного заболевания, состояний, способа введения и тому подобное. Предпочтительную дозу рассчитывают, как правило, в зависимости от массы тела или площади поверхности тела. В случае, когда антитело по настоящему изобретению применяется для лечения состояния или заболевания, связанного с активностью ЕгЬВ3 у взрослого пациента, может быть выгодно внутривенное введение антитела по изобретению, как правило, при однократной дозе от примерно 0,01 до примерно 20 мг/кг массы тела, более предпочтительно от примерно 0,02 до примерно 7, от примерно 0,03 до примерно 5 или от примерно 0,05 до примерно 3 мг/кг массы тела. В зависимости от степени тяжести заболевания, частота и длительность лечения может быть скорректирована. Эффективные дозировки и графики введения антител к ЕгЬ83 могут быть определены эмпирически, например, прогресс у пациента можно контролировать путем проведения периодической оценки, и доза подбирается соответственно. Кроме того, межвидовое масштабирование дозировок может быть выполнено с помощью способов, хорошо известных в рассматриваемой области (например, Μо^άеηί^ е! а1., 1991, РЬаттасеиЕ Кек 8:1351).
Различные системы доставки известны и могут использоваться для введения фармацевтической композиции по изобретению, например, инкапсуляция в липосомы, микрочастицы, микрокапсулы, рекомбинантные клетки, способные экспрессировать мутантные вирусы, рецептор-опосредованный эндоцитоз (см., например, Аи е! а1., 1987, I. Вю1. СЬет. 262:4429-4432). Способы внедрения включают, в качестве неограничивающих примеров, внутрикожный, внутримышечный, внутрибрюшинный, внутривенный, подкожный, интраназальный, эпидуральный и оральный способы. Композицию можно вводить любым удобным способом, например, путем инфузии или болюсной инъекции, путем абсорбции через эпителиальные или кожно-слизистые накладки (например, слизистая оболочка ротовой полости, прямой кишки и слизистая оболочка кишечника и др.) и можно назначать вместе с другими биологически активными веществами. Введение может быть системным или местным.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть доставлена подкожно или внутривенно при помощи стандартной иглы и шприца. Кроме того, в отношении подкожной доставки, при доставке фармацевтической композиции по настоящему изобретению легко применять устройство доставки в виде ручки. Такое устройство доставки в виде ручки может быть многоразовым или одноразовым. Многоразовое устройство доставки в виде ручки, как правило, использует сменный картридж, содержащий фармацевтическую композицию. После того, как вся фармацевтическая композиция в кар- 11 028879
тридже была проведена и картридж был пустой, пустой картридж можно легко изъять и заменить на новый картридж, содержащий фармацевтическую композицию. Устройство доставки в виде ручки может быть использовано повторно. В одноразовом устройстве доставки в виде ручки сменного картриджа нет. Предпочтительно одноразовое устройство доставки в виде ручки поставляется предварительно заполненным фармацевтической композицией, содержащейся в резервуаре внутри устройства. После того, как резервуар опорожняется от фармацевтической композиции, все устройство выбрасывается.
Многочисленные устройства для доставки на основе ручек многократного действия и автоинжекторов применяются при подкожной доставке фармацевтической композиции по настоящему изобретению. Примеры включают, без ограничения, ΛυΤΘΡΕΝ'™ (О\усп МитГогб. 1пс., ХУообЧоск. ИК), ручку ΌΙδΕΤΡΟΝίΕ™ (ЭксПошс Меб1са1 8у51ет5, ВегдбогГ, Швейцария), ручку НИМЛЬОС ΜΙΧ 75/25™, ручку НИМЛЬОС™, ручку НИМАЬШ 70/30™ (Ε1ί ЬШу апб Со., 1пб1апароЙ5, ΙΝ), ΝΟνΟΡΕΝ™ I, II апб ΙΙΙ (Νονο ΝοιΗΜν Сорепйадеп, Дания), ΝΟνΟΡΕΝ ΐυΝΙΟΚ™ (Νονο ΝοιΗΜν Сорепйадеп, Дания), ручку ΒΌ™ (ВесЮп 1Мск1 ιιβοιι, Ргапкйп Ьаке8, ΝΤ), ΟΡΤΙΡΕΝ™, ΟΡΤΙΡΕΝ ΡΚΘ™, ΟΡΤΙΡΕΝ δΤΑΗΙ.ΡΤ™ и ΟΡΤΙСЫК™ (δанοй-аνепйδ, РгапкГий, Германия), назовем только некоторые из них. Примеры устройств для доставки на основе ручек многократного действия, имеющих применения для подкожной доставке фармацевтической композиции по настоящему изобретению, включают, без ограничения, ручку δΟΕΟδΤΑΚ™ (δаηοй-аνеηύδ), ΡΕΕΧΡΕΝ™ (Νονο Νογ6ι51<) и Κ^ΙΚΡΕΝ™ (Ε1ί ЬШу), автоинжектор δυΚΕСЫСК™ (Атдеп, ΤЬοиδапб Оак8, СА), ΡΕΝΕΕΤ™ (На8е1те1ег, δΙπΟβηΓΐ, Германия), ΕΡΙΡΕΝ (Эеу, ЬТ.) и ручку НиМША™ (ΛόόοΙΙ ЬаЬ8, ΛόόοΙΙ Иагк ΙΕ), назовем только некоторые из них.
В определенных ситуациях фармацевтическая композиция может быть доставлена в системе с контролируемым высвобождением. В одном варианте осуществления может быть использован насос (см. Ьапдег, выше; δейοп, 1987, СКС Сгй. КеГ. Вюшеб. Ьпд. 14:201). В другом варианте осуществления могут быть использованы полимерные материалы; см. МебЮа1 АррИстюю οΓ СотгоПеб Ке1еазе, Ьапдег апб \УШе (ебв.), 1974, СКС ΡϊΌδ., Βοса КаТОп., Флорида. В еще одном варианте осуществления система контролируемого высвобождения может быть размещена в непосредственной близости мишени композиции, поэтому требуется лишь фракция системной дозы (см., например, Сοοбδοη, 1984, ш Меб1са1 АррйсаΙίοπδ οΓ СготгоПеб Ке1еаве, выше, νο1. 2, р. 115-138). Другие системы с контролируемым высвобождением обсуждаются в обзоре Ьапдег, 1990, δΦι^ 249:1527-1533.
Препараты для инъекций могут включать лекарственные формы для внутривенных, подкожных, внутрикожных и внутримышечных инъекций, капельной инфузии и др. Эти препараты для инъекций могут быть подготовлены с помощью общеизвестных способов. Например, препараты для инъекций могут быть подготовлены, например, путем растворения, суспендирования или эмульгирования описанного выше антитела или его соли в стерильной водной среде или маслянистой среде, традиционно используемой для инъекций. В качестве водной среды для инъекций, существует, например, физиологический раствор, изотонический раствор, содержащий глюкозу и другие вспомогательные вещества и др., которые могут быть использованы в сочетании с соответствующим солюбилизирующим веществом, таким как алкоголь (например, этанол), многоатомный спирт (например, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль), неионогенное поверхностно-активное вещество [например, полисорбат 80, НСО-50 (полиоксиэтилена (50 моль) аддукт из гидрогенизированного касторового масла)] и др. В качестве маслянистой среды применяются, например, кунжутное масло, соевое масло и др., которые могут быть использованы в сочетании с солюбилизирующим средством, например, бензилбензоатом, бензиловым спиртом и др. Инъекцией, подготовленной таким образом, предпочтительно заполняют соответствующую ампулу.
Предпочтительно фармацевтические композиции для перорального или парентерального применения, описанные выше, готовятся в лекарственных формах в единичной дозе, подходящей, чтобы соответствовать дозе активных ингредиентов. Такие лекарственные формы в единичной дозе включают, например, таблетки, драже, капсулы, инъекции (ампулы), суппозитории и др. Количество содержащегося вышеуказанного антитела составляет, как правило, от 5 до 500 мг на лекарственную форму в единичной дозе; в частности, в форме инъекции, предпочтительно, чтобы вышеуказанное антитело содержалось в количестве примерно от 5 до примерно 100 мг и в количестве примерно от 10 до примерно 250 мг для других лекарственных форм.
Терапевтическое применение антител
Антитела по изобретению пригодны, в частности, для лечения, профилактики и/или облегчения любого заболевания или расстройства, связанного с или опосредованного активностью ΕΦΒ3 или поддающегося лечению путем блокирования взаимодействия между ΕΦΒ3 и ЬгЬВ3-лигандом (например, ИКС1). Антитела и антиген-связывающие фрагменты по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения, например, начальных и/или метастазирующих опухолей, возникающих в мозге и мозговых оболочках, ротоглотке, легких и бронхиальном дереве, желудочно-кишечном тракте, мужской и женской половой системах, мышцах, костях, коже и дериватах, соединительной ткани, селезенке, иммунной системе, кроветворных клетках и костном мозге, печени и мочевыводящих путях, и специальных органах чувств, например, глаза. В определенных вариантах осуществления антитела и антигенсвязывающие фрагменты по изобретению используются для лечения одного или более следующих видов
- 12 028879
рака: почечно-клеточной карциномы, карциномы поджелудочной железы, рака легкого, рака молочной железы, рака головы и шеи, рака предстательной железы, злокачественные глиомы, остеосаркомы, рака толстой кишки, рака желудка (например, рака желудка с МЕТ-усилением), злокачественной мезотелиомы, множественной миеломы, рака яичников, мелкоклеточного рака легких, немелкоклеточного рака легких (например, ЕОРК-зависимый немелкоклеточный рак легких), синовиальной саркомы, рака щитовидной железы или меланомы.
Настоящее изобретение также предоставляет способы лечения опухоли, которая устойчива к или стала устойчивой к терапии к ЕОРК или к НЕК2. Например, изобретение включает способы, которые содержат (а) выявление пациентов, имеющих опухоль, которая устойчива к, или стала устойчива к одному или нескольким антителам к ЕОРК (например, цетуксимаб), малой молекуле-ингибитору ЕОРК (например, ерлотиниб), антителу к НЕК2 (например, трастузумаб) и/или малой молекуле-ингибитору НЕК2; и (Ь) введение пациенту антитела к ЕтЬВЗ по изобретению, либо самого по себе, либо в сочетании с антителом к ЕОРК (например, цетуксимаб), малой молекулой-ингибитором ЕОРК (например, ерлотиниб), антителом к НЕК2 (например, трастузумаб) и/или малой молекулой-ингибитором НЕК2. Комбинированная терапия более подробно обсуждается ниже.
Комбинированная терапия
Настоящее изобретение включает терапевтические схемы введения, которые включают введение антитела к ЕгЬВЗ по настоящему изобретению в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным терапевтически активным компонентом.
Неограничивающие примеры таких дополнительных терапевтически активных компонентов включают другие антагонисты ЕгЬВЗ (например, второе антитело к ЕгЬВЗ или малую молекулу-ингибитор ЕгЬВЗ), антагонисты ЕгЬВ2/НЕК2 (например, антитело к НЕК2 [например, трастузумаб] или малая молекула-ингибитор активности НЕК2), антагонист ЕгЬВ4 (например, антитело к ЕгЬВ4 или малая молекулаингибитор активности ЕгЬВ4), антагонист рецептора эпидермального фактора роста (ЕОРК) (например, антитело к ЕОРК [например, цетуксимаб или панитумумаб] или малая молекула-ингибитор активности ЕОРК [например, эрлотиниб или гефитиниб]), антагонист ЕОРКуШ (например, антитело, которое специфически связывает ЕОРКуШ), антагонист УБОР (например, УБОР Тгар (см., например, И8 7087411 (также именуемые как "УЕОР-ингибирующий слитый белок"), антитело к УЕОР (например, бевацизумаб), малый молекулярный киназный ингибитор УЕОР-рецептора (например, сунитиниб, сорафениб или пазопаниб), или антитело к ПЬЬ4 (например, антитело к ПЬЬ4, раскрытое в И8 2009/0142З54, такое как КЕОЫ421) и др.). Другие средства, которые можно успешно применять в сочетании с антителом к ЕгЬВЗ по изобретению, включают ингибиторы цитокинов, в том числе малые молекулярные цитокиновые ингибиторы и антитела, которые связываются с цитокинами, такими как Ш-1, Ш-2, Ш-З, 1Ь-4, 1Ь-5, Ш-б, Ш8, Ш-9, Ш-11, Ш-12, Ш-1З, Ш-17, Ш-18 или с их соответствующими рецепторами. Настоящее изобретение также содержит терапевтические комбинации, состоящие из любых антител к ЕгЬВЗ, упомянутых в данном документе, и ингибитора одного или более из УЕОР, ПЬЬ4, ЕОРК или любых из вышеперечисленных цитокинов, где ингибитор представляет собой аптамер, антисмысловую молекулу, рибозим, 81КΝΑ, пептитело, нанотело или фрагмент антитела (например, РаЬ-фрагмент; Р(аЬ')2-Фрагмент; РДфрагмент; Ру-фрагмент; 8сРу; ДАЬ-фрагмент; или другие сконструированные молекулы, такие, как диатела, триатела, тетратела, минитела и минимальные узнающие единицы). Антитела к ЕгЬВЗ по изобретению можно вводить в комбинации с противовирусными препаратами, антибиотиками, анальгетиками, кортикостероидами и/или ΝδΑΙΌ. Антитела к ЕгЬВЗ по изобретению можно также вводить как часть схемы лечения, которая также содержит лучевую терапию и/или традиционную химиотерапию. Дополнительный терапевтически активный компонент(ы) можно вводить до, одновременно с или после введения антитела к ЕгЬВЗ по изобретению; для целей настоящего раскрытия такие схемы введения рассматривают введение антитела к ЕгЬВЗ "в комбинации с" терапевтически активным компонентом по изобретению.
Схемы введения
В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения многократные дозы антител к ЕгЬВЗ можно вводить пациенту в течение определенного временного курса. Способы в соответствии с этим аспектом изобретения включают последовательное введение индивидууму нескольких доз антитела к ЕгЬВЗ. Как используется в настоящем документе, "последовательное введение" означает, что каждую дозу антитела к ЕгЬВЗ вводят индивидууму в различные моменты времени, например, в разные дни, разделенные предопределенным интервалом времени (например, часы, дни, недели или месяцы). Настоящее изобретение содержит способы, которые включают последовательное введение пациенту однократной начальной дозы антитела к ЕгЬВЗ, за которой следует одна или более вторичных доз антитела к ЕгЬВЗ, и, при необходимости, следует одна или более третичных доз антитела к ЕгЬВЗ.
Термины "начальная доза", "вторичные дозы" и "третичные дозы" относятся к временной последовательности введения антитела к ЕгЬВЗ. Поэтому "начальная доза" представляет собой дозу, которую назначают в начале лечения (также упоминается как "исходная доза"); "вторичные дозы" представляют собой дозы, которые вводят после начальной дозы; и "третичные дозы" представляют собой дозы, которые вводят после вторичных доз. Каждая из начальной, вторичных и третичных доз может содержать
- 1З 028879
одинаковое количество антитела к ЕтЬВЗ, но, как правило, могут отличаться друг от друга в плане частоты введения. При этом в определенных вариантах осуществления количество антитела к ЕгЬВЗ, содержащееся в начальной, вторичной и/или третичной дозах, различается друг от друга (например, корректируется вверх или вниз в соответствующих случаях) в течение курса лечения. В определенных вариантах осуществления, две или больше (например, 2, 3, 4, или 5) дозы назначают в начале схемы лечения, в качестве "загружающей дозы", за которой последовали другие дозы, которые вводят реже (например, "поддерживающие дозы").
В одном типичном варианте осуществления по настоящему изобретению, в каждой вторичной и/или третичной дозе вводят от 1 до 26 (например, 1, 1!/2, 2, 2'/2. 3, 3!/2, 4, 4'/2. 5, 5!/2, 6, 6!/2, 7, 7'/2. 8, 8'/2. 9, 9/, 10, 101/2, 11, 111/2, 12, 12%, 13, 13^, 14, 14^, 15, 15%, 16, 16^, 17, 17%, 18, 18%, 19, 19%, 20, 201/2, 21, 21!/2, 22, 22!/2, 23, 23!/2, 24, 24!/2, 25, 2 5!/2, 26, 26'/2 или больше) недель после предыдущей дозы. Используемая в настоящем документе фраза "непосредственно предшествующая доза" означает, в последовательности из нескольких введений, дозу антитела к ЕгЬВ3, которую вводят пациенту до введения ближайшей следующей дозы в последовательности при отсутствии промежуточных доз.
Способы в соответствии с этим аспектом изобретения могут включать введение пациенту любое количество вторичных и/или третичных доз антител к ЕгЬВ3. Например, в некоторых вариантах осуществления, только однократная вторичная доза вводится пациенту. В других вариантах осуществления, две или больше (например, 2, 3, 4, 5, 5, 7, 8 или больше) вторичных доз вводят пациенту. Аналогичным образом, в определенных вариантах осуществления, только однократную третичную дозу вводят пациенту, в других вариантах осуществления, две или больше (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или больше) третичных доз вводят пациенту.
В вариантах осуществления, включающих несколько вторичных доз, каждая вторичная доза может назначаться с той же частотой, что и другие вторичные дозы. Например, каждую вторичную дозу можно вводить пациенту через 1-2 недели после непосредственно предшествующей дозы. Аналогичным образом, в вариантах осуществления с участием нескольких третичных доз, каждую третичную дозу можно вводить с той же частотой, что и другие третичные дозы. Например, каждую третичную дозу можно вводить пациенту через 2-4 недели после непосредственно предшествующей дозы. Альтернативно, частота, на которой вторичные и/или третичные дозы вводят пациенту, может меняться в течение всего курса лечения. Частота введения также может быть скорректирована в течение курса лечения по назначению врача в зависимости от потребностей конкретного пациента после клинического обследования.
Любые типичные антитела к ЕгЬВ3, раскрываемые в настоящем документе, могут использоваться в контексте вышесказанных схем введения.
Диагностические применения антител
Антитела к ЕгЬВ3 по настоящему изобретению могут также быть использованы для детекции и/или измерения ЕгЬВ3 в образцах, например, для диагностических целей. Например, антитело к ЕгЬВ3 или его фрагмент может быть использовано для диагностики состояния или заболевания, характеризующегося аномальной экспрессией (например, сверхэкспрессией, пониженной экспрессией, отсутствием экспрессии и т.д.) ЕгЬВ3. Типичные диагностические тесты для ЕгЬВ3 могут включать, например, контактирование образца, полученного от пациента, с антителом к ЕгЬВ3 по изобретению, где антитело к ЕгЬВ3 мечено детектируемой меткой или репортерной молекулой. Кроме того, немеченые антитела к ЕгЬВ3 могут использоваться в диагностических приложениях в комбинации с вторичным антителом, которое само детектируемо мечено. Детектируемая метка или репортерная молекула может представлять радиоизотоп, такой как 3Н, 4С, 32Р, δ или I; флуоресцентный или хемилюминесцентный радикал, такой как флуоресцеинизотиоцианат или родамин; или фермент, например, щелочной фосфатазы, бета-галактозидаза, пероксидаза хрена или люцифераза. Специфические типичные анализы, которые могут быть использованы для обнаружения или измерения ЕгЬВ3 в образце, включают иммуноферментный анализ (ЕЬКА), радиоиммуноанализ (К1А) и флуоресценце-активированная сортировка клеток (ΡΑΟδ).
Образцы, которые могут быть использованы в ЕгЬВ3 диагностических тестах, в соответствии с настоящим изобретением, включают любой образец ткани или жидкости, получаемый от пациента, который содержит детектируемые количества белка ЕгЬВ3 или его фрагментов, при нормальных или патологических состояниях. Как правило, уровни ЕгЬВ3 в конкретном образце, полученном от здорового пациента (например, пациента, не страдающего заболеванием или состоянием, связанным с аномальными уровнями ЕгЬВ3 или активности), будут определяться на первоначально установленном базовом уровне, или стандартном уровне ЕгЬВ3. Этот базовый уровень ЕгЬВ3 затем можно сравнить с уровнем ЕгЬВ3, измеренным в образцах, полученных от лиц, подозреваемых в заболевании или состоянии, связанном с ЕгЬВ3.
Примеры
Следующие примеры используются, чтобы предоставить специалистам в рассматриваемой области полное раскрытие и описание того, как создавать и применять способы и композиции по изобретению, и они не предназначены для ограничения объема того, что авторы изобретения рассматривают в качестве своего изобретения. Были предприняты усилия, чтобы обеспечить точность в отношении чисел (например, количества, температуры и др.), но некоторые экспериментальные ошибки и отклонения должны
- 14 028879
быть учтены. Если не указано иначе, части являются массовыми частями, молекулярная масса представляет собой среднюю молекулярную массу, температура представлена в градусах Цельсия, а давление представляет собой атмосферное или примерно атмосферное.
Пример 1. Получение человеческих антител к ЕгЬВЗ человека.
Иммуноген, содержащий экто-домен ЕгЬВЗ человека, вводили непосредственно, с адъювантом, чтобы стимулировать иммунную реакцию, у мыши νΕΕΟΟΙΜΜϋΝΕ®, содержащей ДНК, кодирующую вариабельные области тяжелых и каппа легких цепей иммуноглобулина человека. Иммунный ответ антител отслеживали при помощи ЕгЬВЗ-специфического иммуноферментного анализа. Когда требуемый иммунный ответ был достигнут, спленоциты собирали и сливали с миеломными клетками мыши, чтобы сохранить их жизнеспособность и сформировать гибридомные клеточные линии. Гибридомные клеточные линии были скринированы и отобраны клеточные линии, которые продуцировали ЕгЬВЗспецифические антитела. Используя эту методику, были получены несколько химерных антител к ЕгЬВЗ (т.е. антител, обладающих вариабельным доменом человека и константным доменом мыши); иллюстративные антитела, образованные таким образом, были обозначены следующим образом: Η1Μ1819Ν, Η2Μ1821Ν, Η2Μ1824Ν, Η2Μ1827Ν, Η1Μ1828Ν, Η2Μ1829Ν, Η2Μ1930Η Η2Μ1934Η Н2М19З6Н Н2М19З7Н И2М19З8Х и Η1Μ1940Ν.
Антитела к ЕгЬВЗ также были изолированы непосредственно из антиген-положительных В-клеток без слияния с миеломными клетками, как описано в ИЗ 2007/0280945 А1. Используя этот способ, были получены несколько полностью человеческих антител к ЕгЬВЗ (т.е. антител, обладающих вариабельным доменом человека и константным доменом человека); иллюстративные антитела, образованные таким образом, были обозначены следующим образом: Н4Н2084Р, Н4Н2092Р, Н4Н2094Р, Н4Н2098Р, Н4Н2102Р, Н4Н2108Р, Н4Н2111Р, Н4Н2114Р, Н4Н21З2Р, Н4Н21З8Р, Н4Н2140Р, Н4Н214ЗР, Н4Н2146Р, Н4Н2147Р, Н4Н2148Р, Н4Н2151Р, Н4Н215ЗР, Н4Н2154Р и Н4Н2290Р.
Определенные биологические свойства иллюстративных антител к ЕгЬВЗ, образованных в соответствии со способами из этого примера, подробно описаны в примерах, изложенных ниже.
Пример 2. Аминокислотные последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепей.
В табл. 1 приводятся пары аминокислотных последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей выбранных антител к ЕгЬВЗ и их соответствующие идентификаторы антител.
Таблица 1
5Е<2 Ю N0:
Обозначение антител НСУК НСРК1 НСЭК2 НСРКЗ ЬСУК ЬСРК1 ЬСЭК2 ЬСРКЗ
2084Р 2 4 6 8 10 12 14 16
2092Р 18 20 22 24 26 28 30 32
2094Р 34 36 38 40 42 44 46 48
2098Р 50 52 54 56 58 60 62 64
2102Р 66 68 70 72 74 76 78 80
2108Р 82 84 86 88 90 92 94 96
2111Р 98 100 102 104 106 108 110 112
2114Р 114 116 118 120 122 124 126 128
2132Р 130 132 134 136 138 140 142 144
2138Р 146 148 150 152 154 156 158 160
2140Р 162 164 166 168 170 172 174 176
2143Р 178 180 182 184 186 188 190 192
2146Р 194 196 198 200 202 204 206 208
2147Р 210 212 214 216 218 220 222 224
2148Р 226 228 230 232 234 236 238 240
2151Р 242 244 246 248 250 252 254 256
2153Р 258 260 262 264 266 268 270 272
2154Р 274 276 278 280 282 284 286 288
2290Р 290 292 294 296 298 300 302 304
1819Ν 306 308 310 312 314 316 318 320
1821Ν 322 324 326 328 330 332 334 336
1824Ν 338 340 342 344 346 348 350 352
- 15 028879
1827Ν 354 356 358 360 362 364 366 368
1828Ν 370 372 374 376 378 380 382 384
1829Ν 386 388 390 392 394 396 398 400
1930Ν 402 404 406 408 410 412 414 416
1934Ν 418 420 422 424 426 428 430 432
193 6Ν 434 436 438 440 442 444 446 448
1937Ν 450 452 454 456 458 460 462 464
1938Ν 466 468 470 472 474 476 478 480
1940Ν 482 484 486 488 490 492 494 496
Антитела обычно обозначаются в настоящем документе в соответствии со следующей номенклатурой: префикс Ре (например, "Н4Н", "Н1М", "Н2М"), за которыми следуют числовой идентификатор (например, "2084", как показано в табл. 1), за которыми следует суффикс "Р" или "Ν". Таким образом, в соответствии с этой номенклатурой, антитело в настоящем документе может называться как, например, "Н4Н2084Р". Префиксы Н4Н, Н1М и Н2М в обозначениях антител, используемых в настоящем документе, указывают на конкретный регион Рс антитела. Например, антитело "Н2М" имеет Рс 1дС2 мыши, в то время как антитело "Н4Н" имеет Рс 1дС4 человека. Как оценит любой специалист в рассматриваемой области, антитело Н1М или Н2М может быть преобразовано в антитело Н4Н, и наоборот, но в любом случае, вариабельные домены (в том числе СИК) - которые указаны при помощи числовых идентификаторов, показанных в табл. 1 -должны остаться прежними. Суффиксы Р и N на обозначениях антител, используемых в настоящем документе, относятся к антителам, имеющим тяжелую и легкую цепи с идентичными СИК-последовательностями, но с вариациями последовательности в областях, которые находятся за пределами СИК-последовательностей (т.е. в каркасных областях). Таким образом, Р- и Νварианты определенного антитела обладают идентичными СИК-последовательностями в пределах своих вариабельных областей тяжелой и легкой цепи, но и отличаются один от другого в пределах своих каркасных областей.
Контрольные конструкции, используемые в следующих примерах
Различные контрольные конструкции (антитела к ЕгЬВЗ) были включены в следующие эксперименты для сравнительных целей. Контрольные конструкции обозначены следующим образом. Контроль I: Антитело к ЕгЬВЗ человека с вариабельными доменами тяжелой и легкой цепи, имеющими аминокислотные последовательности соответствующих доменов "МаЬ#6" как указано в ИЗ 7846440. Контроль II: человеческое антитело к ЕгЬВЗ с вариабельными доменами тяжелой и легкой цепи, имеющими аминокислотные последовательности соответствующих доменов "И1-59," как указано в ИЗ 7705130. Контроль III: человеческое антитело к ЕгЬВЗ с вариабельными доменами тяжелой и легкой цепи, имеющими аминокислотные последовательности соответствующих доменов "ЦТ-53", как указано в ИЗ 7705130.
Пример 3. Аффинности связывания и кинетические константы моноклонального антитела к ЕгЬВЗ человека, полученные при помощи поверхностного плазмонного резонанса.
Аффинности связывания и кинетические константы человеческих моноклональных антител к ЕгЬВЗ определяли при помощи поверхностного плазмонного резонанса при 25 и 37°С (табл. 2-4). Измерения проводились на приборе В1асоге 2000 или Т100. Антитела, экспрессированные либо Рс мыши (префикс Н1М; Н2М) или ЦС4 Рс человека (префикс Н4Н), были захвачены поверхностью, чувствительной к анти-мышиному Рс или античеловеческому Рс (формат МаЬ-захвата), и растворимый мономерный (ЕгЬВЗ.шшй; ЗЕЦ ГО ΝΟ: 497) или димерный (ЕгЬВЗ-РРс; ЗЕЦ ГО ΝΟ: 498 или ЕгЬВЗ-тРс; ЗЕЦ ГО ΝΟ: 499) белок инъецировали на поверхность. Константы скорости кинетики ассоциации (ка) и диссоциации (ка) были определены при помощи обработки и выравнивания данных в модели связывания 1:1 с помощью программного обеспечения выравнивания кривых ЗсгиЬЬег 2.0. Равновесные константы диссоциации связывания (Ко) и диссоциативное время полужизни (ΐ1/2) были рассчитаны на основе кинетических констант скорости как: Ко(М)=ка/ка; и ΐϊ/2 (тт) = (1п2/(60-ка)). Несколько клонов показали субнаномолярную аффинность к мономерному белку ЕгЬВЗ (РЕгЬВЗ.ттР).
- 16 028879
Таблица 2
В1асоге-аффинности связывания гибридомных тАВ (Н1М и Н2М) при 25°С
Связывание 25°С/Формат МаЬ-захвата
Антитело Аналит. ка (Мс-1) кб (с1) КЕ (Молярн. ) ТЧ
Η1Μ1819Ν ЬЕгЬВЗ. штк 3,19Е+05 3,22Е-04 1,01Е-09 36
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,80Е+05 5,88Е-05 1,22Е-10 196
Η2Μ1821Ν ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,29Е+05 1,99Е-04 8,67Е-10 58
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,61Е+05 1,90Е-05 4,13Е-11 608
Η2Μ1824Ν ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,23Е+05 4,56Е-05 2,05Е-10 254
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,31Е+05 1,44Е-06 3,34Е-12 8026
Η2Μ1827Ν ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,19Е+05 8,96Е-05 4,09Е-10 129
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,39Е+05 7,58Е-06 1,73Е-11 1524
Η1Μ1828Ν ЬЕгЬВЗ. ттк 5,13Е+05 2,65Е-04 5,15Е-10 44
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 1,56Е+06 4,34Е-05 2,79Е-11 266
Η2Μ1829Ν ЬЕгЬВЗ. ттк 2,30Е+05 6,46Е-05 2,81Е-10 179
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,36Е+05 8,61Е-06 1,98Е-11 1341
Η2Μ1930Ν ЬЕгЬВЗ.ттЬ 1,96Е+05 1,09Е-04 5,59Е-10 106
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,04Е+05 8,27Е-06 2,05Е-11 1396
Η2Μ1934Ν ЬЕгЬВЗ. ттк 1,68Е+05 7,35Е-05 4,38Е-10 157
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 3,59Е+05 7,97Е-06 2,22Е-11 1450
Η2Μ1936Ν ЬЕгЬВЗ. ттк 4,32Е+04 2,85Е-04 б,59Е-09 41
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс б,41Е+04 б,97Е-05 1,09Е-09 166
Η2Μ1937Ν ЬЕгЬВЗ. ттк 8,26Е+04 5,63Е-05 б,82Е-10 205
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 1,10Е+05 1,27Е-05 1,16Е-10 908
Η2Μ1938Ν ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,41Е+05 1,44Е-04 5,99Е-10 80
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,51Е+05 1,36Е-05 3,01Е-11 851
Η1Μ1940Ν ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,89Е+05 1,38Е-04 4,77Е-10 84
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,60Е+05 2,43Е-05 5,29Е-11 475
Контроль I ЬЕгЬВЗ. ттк 5,14Е+04 2,15Е-04 4,18Е-09 54
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 4,63Е+04 1,63Е-05 3,51Е-10 711
Контроль II ЬЕгЬВЗ. ттк 1,41Е+05 3,24Е-04 2,ЗОЕ-09 36
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 1,53Е+05 4,28Е-05 2,80Е-10 270
Контроль III ЬЕгЬВЗ. ттк 1,54Е+06 3,15Е-02 2,05Е-08 0,4
ЬЕгЬВЗ.ЬЕс 3,78Е+06 8,84Е-05 2,34Е-11 131
- 17 028879
Таблица 3
Ыасоге-аффинности связывания человеческих Тс тАВ (Н4Н) при 25°С
Связывание 25°С/Формат МаЬ-захвата
Антитело Аналит. ка (Мс Т) кН (с1) КЕ (Молярн.) ТЧ
Η4Η1819Ν ЬЕгЬВЗ.ттЬ 8, 10Е+06 3,51Е-04 4,35Е-11 33
ЬЕгЬВЗ.тЕс 1,64Е+07 1,54Е-05 9,43Е-13 748
Η4Η1821Ν ЬЕгЬВЗ.ттЬ 3,80Е+06 1,92Е-04 5,10Е-11 60
ЬЕгЬВЗ.тЕс 1,22Е+07 4,ЗЗЕ-Об 3,55Е-13 2665
Н4Н2084Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,49Е+06 5,96Е-05 2,39Е-11 179
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3,83Е+06 3,95Е-06 1,ОЗЕ-12 2695
Н4Н2092Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 3,72Е+06 1,03Е-04 2,78Е-11 103
ЬЕгЬВЗ.тЕс 5,16Е+ 0 б 7,46Е-06 1,45Е-12 1429
Н4Н2094Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 1,89Е+06 1,37Е-05 7,22Е-12 780
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3,ОЗЕ+Об 1,37Е-06 4,52Е-13 7779
Н4Н2098Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 1,14Е+06 7,89Е-05 б,90Е-11 135
ЬЕгЬВЗ.тЕс 2,21Е+06 8,97Е-06 4,ОбЕ-12 1188
Н4Н2102Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 8,86Е+05 4,88Е-05 5,51Е-11 218
ЬЕгЬВЗ.тЕс 1,58Е+06 2,26Е-06 1,43Е-12 4721
Н4Н2108Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 1,95Е+06 8,13Е-05 4,18Е-11 131
ЬЕгЬВЗ.тЕс 2,96Е+06 4,ЗЗЕ-Об 1,46Е-12 2458
Н4Н2111Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,21Е+06 1,18Е-04 5,31Е-11 91
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3,50Е+06 8,69Е-06 2,49Е-12 1225
Н4Н2114Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 9,29Е+05 9,88Е-05 1,06Е-10 108
ЬЕгЬВЗ.тЕс 1,48Е+06 7,98Е-06 5,41Е-12 1335
Н4Н2132Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,16Е+06 3,81Е-05 1,77Е-11 279
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3,49Е+06 3,35Е-06 9,58Е-13 3183
Н4Н2138Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,39Е+06 5,01Е-05 2,09Е-11 213
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3,71Е+06 5,46Е-06 1,47Е-12 1952
Н4Н2140Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 1,б 6Е+ 0 б 3,27Е-05 1,98Е-11 326
ЬЕгЬВЗ.тЕс 2,51Е+06 9,86Е-07 3,93Е-13 10797
Н4Н2143Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 1,83Е+06 9,73Е-05 5,31Е-11 109
ЬЕгЬВЗ.тЕс 2,86Е+06 4,63Е-06 1,75Е-12 2302
Н4Н2146Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,79Е+06 3,46Е-05 1,24Е-11 308
ЬЕгЬВЗ.тЕс 4,54Е+06 1,98Е-06 4,35Е-13 5392
Н4Н2147Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,47Е+06 1,08Е-04 4,38Е-11 98
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3,ЗЗЕ+Об 4,58Е-06 1,50Е-12 2325
Н4Н2148Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 3,98Е+06 3,47Е-05 8,71Е-12 307
ЬЕгЬВЗ.тЕс 5,91Е+06 1,74Е-06 2,95Е-13 6110
Н4Н2151Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 3,04Е+06 2,86Е-05 9,42Е-12 372
ЬЕгЬВЗ.тЕс 4,48Е+06 9,52Е-07 2,13Е-13 11186
Н4Н2153Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,94Е+06 3,43Е-05 1,17Е-11 311
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3,67Е+06 1,24Е-06 3,37Е-13 8603
Н4Н2154Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 2,13Е+06 3,73Е-05 1,76Е-11 285
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3,25Е+06 9,77Е-07 3,00Е-13 10901
Н4Н2290Р ЬЕгЬВЗ.ттЬ 5,8 2Е+ 0 5 б,72Е-05 1,15Е-10 159
ЬЕгЬВЗ.тЕс 8,00Е+05 1,13Е-05 1,40Е-11 945
- 18 028879
Таблица 4
В^асο^е-аффинности связывания выбранных МаЬ при З7°С_
Связывание 37°С/Формат МаЬ-захвата
Антитело Аналит. ка (Мс 7) кЬ (с-1) Кп (Молярн.) ТЧ
Η4Η1819Ν ЬЕгЬВЗ. ттЬ 1,21Е+07 1,56Е-03 1,29Е-10 7
ЬЕгЬВЗ.тЕс 3, 68Е+07 5,62Е-05 1,53Е-12 206
Η4Η1821Ν ЬЕгЬВЗ. ттЬ 6,49Е+06 1,08Е-03 1,67Е-10 11
ЬЕгЬВЗ.тЕс 1,87Е+07 3,55Е-05 1,89Е-12 326
Контроль I ЬЕгЬВЗ.ттЬ 1,58Е+05 5,48Е-04 3,47Е-09 21
ЬЕгЬВЗ.тЕс 2,60Е+05 1,01Е-04 3,90Е-10 114
Контроль II ЬЕгЬВЗ.ттЬ 3,23Е+05 1,34Е-03 4,13Е-09 9
ЬЕгЬВЗ.тЕс 1,44Е+06 1,37Е-04 9,50Е-11 84
Контроль ЬЕгЬВЗ.ттЬ 3,40Е+06 7,90Е-02 2,40Е-08 0, 1
III ЬЕгЬВЗ.тЕс 1,05Е+07 1,77Е-04 1,68Е-11 65
Как показано в табл. 2-4, многие из иллюстративных антител, испытанных в этом примере, продемонстрировали высокую аффинность связывания с ЕгЬВЗ, что было выше или эквивалентно аффинности связывания проверенного контрольного антитела. Следует отметить, что некоторые из антител к ЕгЬВЗ по настоящему изобретению проявляли субнаномолярную аффинность к мономерному (ЬЕгЬВЗ.шшЬ) белку ЕгЬВЗ.
Пример 4. Антитела к ЕгЬВЗ блокируют связывание нейрегулина 1Ь с ЕгЬВЗ человека.
Для дальнейшего описания тАЬ к ЬЕгЬВЗ по настоящему изобретению, их способность блокировать связывание лиганда проверяли при помощи ЕЫЗА. Планшеты были покрыты нейрегулином (1 мкг/мл) в течение ночи, и затем антитела (0-50 нМ) инкубировали (1 ч, 25°С) либо с 50 пМ ЕгЬВЗ-ЬЕе (ЗЕ^ ΙΌ ΝΟ: 498; для гибридом) или 50 пМ ЕгЬВЗ-тГе (ЗЕ^ ΙΌ ΝΟ: 499; для антител Ы§О4), затем добавляли, чтобы покрыть планшеты, и давали возможность инкубироваться в течение дополнительно 1 ч при 25°С. Планшеты промывали, и несеквестированный (связанный с планшетами) ЕгЬВЗ детектировали с помощью анти-Ее поли, конъюгированным с пероксидазой хрена (ИКР). Планшеты обрабатывати ТМВ (З,З',5,5'-тетраметилбензидин) и нейтрализовали серной кислотой перед считыванием поглощения при 450 нм на ридере планшетов νΐοίοΓ Х5. Анализ данных использовал сигмоидальную модель дозового ответа в пределах программного обеспечения Рп§т™. Рассчитанное значение 1С50, определенное как 50% концентрации антитела, необходимой для достижения максимальной блокировки, был использован как индикатор эффективности блокировки. Максимальное блокирование для каждого антитела было рассчитано путем получения разницы в оптической плотности от нуля до 50 нМ антитела на кривой ингибирования, деленной на разницу в абсорбции от 50 пМ до 0 ЕгЬВЗ на дозовой кривой. Результаты приведены в табл. 5 и 6.
Таблица 5
Значения 1С50 для гибридомных тАЬ к ЕгЬВЗ (Н1М и Н2М)
Антитело 1С50(М) Максимальное блокирование (%)
Η1Μ1819Ν 3,15Е-11 92
Η2Μ1821Ν 2,85Е-11 96
Η2Μ1824Ν 2,51Е-11 99
Η2Μ1827Ν 2,29Е-11 98
Η1Μ1828Ν 3,00Е-11 95
Η2Μ1829Ν 2,38Е-11 98
Η2Μ1930Ν 2,22Е-11 87
Η2Μ1934Ν 2,61Е-11 80
Η2Μ1936Ν 5,27Е-10 91
Η2Μ1937Ν 4,40Е-11 95
Η2Μ1938Ν 2,49Е-11 85
Η1Μ1940Ν 5,ЗОЕ-10 80
- 19 028879
Таблица 6
Значения 1С50 для человеческих Ес тАЬ к ЕгЬВ3 (Н4Н)
Антитело 1С50(М) Максимальное блокирование (%)
Η4Η1819Ν 2,00Е-11 99
Η4Η1821Ν 1,80Е-11 99
Н4Н2084Р 8,73Е-11 95
Н4Н2092Р 5,94Е-11 100
Н4Н2094Р 9,00Е-11 92
Н4Н2098Р 1,35Е-10 95
Н4Н2102Р 1,86Е-10 90
Н4Н2108Р 1,16Е-10 91
Н4Н2111Р 4,97Е-11 92
Н4Н2114Р 1,63Е-10 91
Н4Н2132Р 9,57Е-11 94
Н4Н2138Р 1,06Е-10 96
Н4Н2140Р 9,46Е-11 83
Н4Н2143Р 8,35Е-11 92
Н4Н2146Р 1,77Е-10 83
Н4Н2147Р 5,06Е-11 99
Н4Н2148Р 5,08Е-11 100
Н4Н2151Р 7,51Е-11 85
Н4Н2153Р 7,40Е-11 82
Н4Н2154Р 9,01Е-11 91
Н4Н2290Р 6,64Е-11 99
Контроль I 5,74Е-10 98
Контроль III 8,32Е-11 96
Как показано в табл. 5 и 6, некоторые антитела к ЕгЬВ3 по настоящему изобретению показали эффективное блокирование и имели значения 1С50, которые были на теоретически нижнем значении (25 пМ) анализа.
Пример 5. тАЬ к ЕгЬВ3 эффективно интернализируют ЕгЬВ3 клеточной поверхности.
Чтобы определить, интернализируют ли эффективно тАЬ к ЕгЬВ3 связанный с клеточной поверхностью ЕгЬВ3, клетки МСЕ-7 инкубировали с выбранным антителом к ЕгЬВ3 (10 мкг/мл) в течение 30 мин на льду, промывали, а затем окрашивали ОуПдЫ 488-конъюгированным античеловеческий ЕаЬ (10 мкг/мл) в течение 30 мин на льду. Пробирки затем промывали и разделяли между инкубацией в течение 1 ч на льду и при 37°С. После инкубации все пробирки помещали в лед и добавляли гасящие антитела ОуПдЫ 488 (50 г/мл). Растворы дополнительно инкубировали в течение 1 ч на льду. Флуоресцентные сигналы измеряли с помощью проточного цитометра Ассип.
В качестве относительного показателя количества ЕгЬВ3, которое было интернализировано после связывания антитела и последующей инкубации при 37°С, интернализированная средняя флуоресцентная интенсивность (МЕ1) рассчитывается следующим образом:
Расчет ()Е (эффективность гашения) предполагает, что при 4°С не происходит никакой интернализации. Табл. 7 показывает, что все протестированные антитела вызывают НЕК3-интернализацию.
- 20 028879
Таблица 7
Антитело-индуцированная НЕКЗ-интернализация при З7°С
Общая МИ Поверхностная Интернализация %
Антитело среднее МИ среднее МИ среднее Интернализации
±5.Ό. 13.И. 13.ϋ. среднее 13.ϋ.
Η4Η1819Ν 3923319261 2266315026 1657015329 4217
Η4Η1821Ν 3235115658 1160714781 2074414993 64114
Контроль I 1900415903 1159816602 740611776 42120
Контроль II 4151715696 23540111994 1797716299 45121
Контроль III 2734915310 80101729 1933815934 6918
Пример 6. Ингибирование ИКС1-зависимого Ак!-фосфорилирования при помощи антител к ЕгЬВЗ. Антитела к ЕгЬВЗ были проверены на их способность подавлять фосфорилирование Лк! в клетках
рака простаты ИИ 145. Связывание ИКС1 с ЕгЬВЗ приводит к фосфорилированию ЕгЬВЗ, что ведет к привлечению и активации фосфатидилинозитол-З-киназы (Р1З-К). Активированная Р1З-К фосфорилирует и активирует киназу Ак!. Таким образом, фосфорилирование Лк! представляет собой расположенный ниже по течению маркер активации ЕгЬВЗ-рецептора. Клетки Ώυ145 засевали в 96-луночные планшеты и затем подвергали сывороточному голоданию в среде, содержащей 1% РВ8, в течение ночи. Клетки затем стимулировали 0,5 нМ ΝΚΟ1 (К&1) 8уз!етз) в течение З0 мин в присутствии 0,5 мкг/мл контрольного белка Рс человека или различных антител к ЕгЬВЗ в концентрации 0,01, 0,1 или 0,5 мкг/мл. Каждую концентрацию антитела проверяли в трех повторностях. Клетки лизировали и относительные уровни фосфорилированной Ак! определяли при помощи набора рйозрйо-Ак! сеИ-Ьазеб ЕЕ18А (К&1) 8у5!етз) в соответствии с инструкциями производителя. Средний процент ингибирования Ак!-фосфорилирования для каждого антитела к ЕгЬВЗ против контрольной группы Рс показан в табл. 8.
Таблица 8
Ингибирование Ак!-фосфорилирования при помощи антител к ЕгЬВЗ
Антитело Процент ингибирования фосфорилирования АкЬ
0,01 мкг/мл ЕгЬВЗ антитело 0, 1 мкг/мл ЕгЬВЗ антитело 0,5 мкг/мл ЕгЬВЗ антитело
Η1Μ1819Ν 29 72 75
Η2Μ1821Ν 11 68 73
Η2Μ1824Ν 25 63 74
Η2Μ1827Ν 16 73 75
Η1Μ1828Ν 22 66 75
Η2Μ1829Ν 22 74 74
Η2Μ1930Ν 39 64 66
Η2Μ1934Ν 20 56 67
Η2Μ1936Ν 6 30 67
Η2Μ1937Ν -13 41 71
Η2Μ1938Ν 40 63 74
Η1Μ1940Ν 13 50 68
Контроль I -1 46 60
Контроль II 4 7 51
Контроль III 3 45 55
Этот пример демонстрирует, что некоторые из антител к ЕгЬВЗ по настоящему изобретению проявляют более эффективную блокаду Ак!-фосфорилирования, чем контрольные антитела к ЕгЬВЗ. Например, антитела Η1Μ1819Ν, Η2Μ1821Ν, Η2Μ1824Ν, Η2Μ1827Ν, Η1Μ1828Ν, Η2Μ1829Ν, Н2Мί930N и Η2Мί938N ингибировали Ак!-фосфорилирование по меньшей мере на 60% в дозе 0,1 мкг/мл, в то время ни одно из контрольных ЕгЬВЗ-антител не достигало ингибирования более чем на 46% при этой дозе.
Пример 7. Ингибирование роста опухолевых клеток при помощи антител к ЕгЬВЗ.
Выбранные антитела к ЕгЬВЗ проверяли на их способность подавлять рост клеток эпидермоидной карциномы А4З1 при использовании в комбинации с ЕСРК-блокадой. Клетки А4З1 в 96-луночных планшетах инкубировали в среде, содержащей 0,5% РВ8, и стимулировали 1 нМ нейрегулина-1 (ΝΚΟ1) в присутствии антитела к ЕСРК (1 мкг/мл), антитела к ЕгЬВЗ (1 мкг/мл) или антитела к ЕСРК (1 мкг/мл)
- 21 028879
плюс антитела к ЕгЪВЗ в 0,05, 0,25 или 1,0 мкг/мл. Лиганд (ΝΕΟΙ) и блокирующие антитела (ЕОРК и ЕгЪВЗ) были добавлены в 0, 24 и 48 ч в течение 72-часового эксперимента. Относительное изменение количества жизнеспособных клеток от начала лечения до того момента, как будет достигнута временная точка 72 часа, определяли с помощью стандартных способов (Се11 РгоПГегаВоп Аззау Κΐΐ; Ргошеда). Средний процент снижения клеточного роста для каждого антитела к ЕгЪВЗ против изотипической контрольной группы представлен в табл. 9.
Таблица 9
Ингибирование роста клеток А4З1 при помощи антител к ЕгЪВЗ
Антитело Процент ? ингибирования фосфорилирования А431
1,0 мкг/мл ЕгЪВЗ антитело антитело к ЕСЕК + 0,05 мкг/мл ЕгЪВЗ антитело антитело к ЕСЕК + 0,25 мкг/мл ЕгЪВЗ антитело антитело к ЕСЕК + 1,0 мкг/мл ЕгЪВЗ антитело
Η1Μ1819Ν 34 61 78 91
Η2Μ1821Ν 16 35 62 85
Η2Μ1824Ν 33 45 68 85
Η2Μ1827Ν 15 53 7 5 84
Η1Μ1828Ν 30 55 73 85
Η2Μ1829Ν 31 53 76 89
Η2Μ1930Ν 3 23 36 39
Η2Μ1934Ν -3 24 30 28
Η2Μ1938Ν 5 37 56 60
Η1Μ1940Ν -4 19 20 19
Контроль I 19 31 37 56
Контроль III 7 22 21 32
Этот пример демонстрирует, что некоторые из антител к ЕгЪВЗ по настоящему изобретению проявляют более эффективное ингибирование роста клеток А4З1, чем контрольные антитела к ЕгЪВЗ. Например, антитела Η1Μ1819Ν, Η2Μ1821Ν, Η2Μ1824Ν, Η2Μ1827Ν, Η1Μ1828Ν и Η2Μ1829Ν ингибируют рост клеток по меньшей мере на 60% в дозе 0,25 мкг/мл в комбинации с антителом к ЕОРК, в то время как контрольные антитела I и III ингибировали клеточный рост клеток всего на З7 и 21% соответственно в этих условиях эксперимента.
Пример 8. Ингибирование фосфорилирования ЕгЪВЗ и Ак! антителами к ЕгЪВЗ.
Выбранные антитела к ЕгЪВЗ были проверены на их способность подавлять ΝΡΟ1стимулированное фосфорилирование ЕгЪВЗ и Ак! клетках эпидермоидной карциномы А4З1 и клетках рака молочной железы ΜСР7. В первом эксперименте клетки А431 засевали в 6-луночные планшеты и инкубировали в полной среде в течение ночи. Клетки затем подвергали сывороточному голоданию (0,5% РВ8) в течение 1 ч и стимулировали 1 нМ ΝΡΟ1 (К&Э 8у81ешз) в течение З0 мин в присутствии 5,0 мкг/мл изотипного контроля или антитела к ЕгЪВЗ с 0,05; 0,25 или 5,0 мкг/мл. Клетки лизировали и проводили Вестерн-блоттинг с использованием антител против ЕгЪВЗ и Ак!, а также их фосфорилированных форм, с использованием стандартных способов. Соотношения фосфорилированных ЕгЪВЗ или Ак! к общим ЕгЪВЗ или Ак! были рассчитаны и использованы для определения процента ингибирования фосфорилирования Ак! или ЕгЪВЗ для каждого из антител к ЕгЪВЗ относительно изотипного контроля. Результаты ингибирования фосфорилирования ЕгЪВЗ или Ак! в клетках А4З1 приведены в табл. 10 и 11 соответственно.
Таблица 10
Процент ингибирования фосфорилирования ЕгЪВЗ в клетках А4З1
Антитело 0,05 мкг/мл 0,25 мкг/мл 5,0 мкг/мл
Η4Η1819Ν 98 105 107
Η4Η1821Ν 63 113 120
Контроль I -11 14 72
Контроль III -30 -9 -57
- 22 028879
Таблица 11
Процент ингибирования фосфорилирования Лк! в клетках А4З1
Антитело 0,05 мкг/мл 0,25 мкг/мл 5, 0 мкг/мл
Η4Η1819Ν 84 104 113
Η4Η1821Ν 67 106 117
Контроль I 32 47 75
Контроль III 43 51 58
В подобном эксперименте клетки МСР7 засевали в 6-луночный планшет и инкубировали в полной среде в течение 2 дней. Клетки затем подвергали сывороточному голоданию (0,5% РВ5) в течение 1 ч, а затем стимулировали 1 нМ ΝΕΘ1 (К&Б 8у8!етз) в течение З0 мин в присутствии 5,0 мкг/мл изотипного контрольного антитела или антитела к ЕгЬВЗ с 0,05, 0,25, и 1,0 или 5,0 мкг/мл. Вестерн-блоттинг анализ и анализ данных проводили сходным образом с экспериментами, проведенными на клетках А4З1. Результаты для ингибирования фосфорилирования ЕгЬВЗ или Ак! в клетках МСР7 приведены в табл. 12 и 1З соответственно.
Таблица 12
Процент ингибирования фосфорилирования ЕгЬВЗ в клетках МСР7
Антитело 0, 05 мкг/мл 0,25 мкг/мл 1, 0 мкг/мл 5,0 мкг/мл
Η4Η1819Ν 37 79 92 96
Η4Η1821Ν 57 92 96 97
Контроль I 0 17 44 81
Контроль III 4 12 60 61
Таблица 1З
Процент ингибирования фосфорилирования Ак! в клетках МСР7
Антитело 0, 05 мкг/мл 0,25 мкг/мл 1,0 мкг/мл 5, 0 мкг/мл
Η4Η1819Ν 13 36 80 90
Η4Η1821Ν 17 69 82 89
Контроль I 21 29 34 46
Контроль III 35 28 29 35
Этот пример показывает, что характерные антитела к ЕгЬВЗ по изобретению проявляют исключительную способность ингибировать фосфорилирование ЕгЬВЗ и Ак! по сравнению с контрольными антителами, при большинстве проверенных экспериментальных условий в клетках А4З1, например, н4Ш8^ и н4Ш82Ш полностью ингибировали фосфорилирование ЕгЬВЗ и Ак! при 0,25 мкг/мл, в то время как контрольные антитела никогда не достигали полного ингибирования, даже при 5,0 мкг/мл. Аналогичным образом, в клетках МСР7, Н4Н1819N и н4Ш82Ш при 1,0 мкг/мл ингибировали фосфорилирование ЕгЬВЗ и Ак! в большей степени, чем контрольные антитела к ЕгЬВЗ даже при 5,0 мкг/мл.
Пример 9. Ингибирование опухолевого роста антителами к ЕгЬВЗ.
Выбранные антитела к ЕгЬВЗ были проверены на их способность подавлять рост опухолевых ксенотрансплантатов человека у мышей с ослабленным иммунитетом. Вкратце, 1-5х106 клеток эпидермоидной карциномы А4З1 человека или клеток немелкоклеточного рака легких А549 человека (АТСС) было имплантировано подкожно в бок 6-8-недельных старый мышей 5С1Б (Тасошс, Гудзон, Нью-Йорк). После того, как опухоли достигали в среднем объема 100-150 ммЗ, мышей рандомизировали в группы лечения (η=6 мышей в каждой группе), в первом эксперименте мышам, несущим опухоли А4З1, вводили Рс человека (5Е9 II) ΝΟ: 500, 12,5 мг/кг) или антитело к ЕгЬВЗ (0,5 или 12,5 мг/кг). Все антитела вводили посредством подкожной инъекции два раза в неделю в течение приблизительно З недель. Опухолевые объемы измеряли два раза в неделю в течение эксперимента, и массы опухолей определяли после иссечения опухолей в конце эксперимента. Средний размер опухоли по отношению к группе, получавшей лечение с Рс, а также окончательную массу опухолей рассчитывали для каждой группы. Результаты обобщены в табл. 14.
- 2З 028879
Таблица 14
Ингибирование опухолевого роста А431 у мышей 8СЮ (гибридомные тАЬ - Н1М и Н2М)
Антитело (мг/кг) Опухолевый рост в мм3 от начала лечения (среднее ± 3 .Ό. ) Средний % уменьшения опухолевого роста Средняя масса опухоли (г) Средний % уменьшения опухолевой массы
ЬКс контроль (12,5) 860+358 - 0, 778 + 0,268 -
Η1Μ1819Ν (0,5) 355+178 59 0,520±0,155 33
Η2Μ1821Ν (0,5) 280+131 67 0, 428±0,209 45
Η2Μ1827Ν (0,5) 246+71 71 0,432+0,152 45
Η2Μ1829Ν (0,5) 392+265 54 0,480+0,283 38
Контроль I (0,5) 862+199 0 0,815+0,190 -5
Контроль I (12,5) 299+139 65 0,438+0,217 44
В подобном эксперименте с использованием выбранных антител в формате 1§О4 человека получаются сходные результаты, как обобщено в табл. 15.
Таблица 15
Ингибирование опухолевого роста А431 у мышей 8СЮ (Рс тАЬ человека . - Н4Н)
Антитело (мг/кг) Опухолевый рост в мм3 от начала лечения (среднее ± 3.Ώ. ) Средний % уменьшения опухолевого роста Средняя масса опухоли (г) Средний % уменьшения опухолевой массы
ЬКс контроль (12,5) 797+65 - 1,31+0,142 -
Η4Η1819Ν (0,5) 161+69 80 0,453+0,010 65
Η4Η1819Ν (12,5) 110+47 86 0,458+0,108 65
Η4Η1821Ν (0,5) 148+73 81 0,482+0,058 63
Η4Η1821Ν (12,5) 74+100 91 0,392+0,117 70
Контроль I (0,5) 675+228 15 0,928+0,215 29
Контроль I (12,5) 95+51 88 0,361+0,063 72
Контроль III (0,5) 409+254 49 0,687+0,269 48
Контроль III (12,5) 219+129 73 0,545+0,096 58
- 24 028879
В подобном эксперименте определяли влияние различных антител к ЕгЬВЗ на рост А549опухолевых ксенотрансплантатов, как показано в табл. 16.
Таблица 16
Ингибирование опухолевого роста А5З9 у мышей §СЮ
Антитело (мг/кг) Опухолевый рост в мм3 от начала лечения (среднее ± 5 .ϋ. ) Средний % уменьшения опухолевого роста Средняя масса опухоли (г) Средний % уменьшения опухолевой массы
ЬГс контроль (12,5) 727±184 - 1,27±0,332 -
Η4Η1821Ν (0,2) Збб±90 50 0,811±0,145 37
Η4Η1821Ν (0,5) 347±52 52 0, 820±0,245 36
Η4Η1821Ν (2,5) 34б±10б 52 0,783±0,175 39
Контроль I (0,5) 719±230 1 1,328±0,363 -3,78
Контроль I (2,5) 6145177 15 0,985±0,198 23
Как показано в этом примере, каждое из антител Η4Η1819Ν и Η4Η1821Ν значительно ингибировало опухолевый рост т υι\ό, насколько, что это было превосходно, или эквивалентно степени ингибирования роста опухоли, наблюдаемой при введении тестируемых контрольных антител к ЕгЬВЗ.
Пример 10. Ингибирование опухолевого роста при помощи антител к ЕгЬВЗ в комбинации со средствами, которые блокируют другие члены семейства ЕгЬВ.
Проверяли эффект комбинированного лечения с Η4Η1821Ν плюс ингибирующее антитело к ЕОРК ("тАЬ к ЕОРК") на рост опухолевого ксенотрансплантата человека. Вкратце, 2х106 клеток гипофарингеальной карциномы РаОи человека (АТСС) имплантировали подкожно в бок 6-8 недельных мышей 8СГО (Тасошс, Гудзон, Нью-Йорк). После того, как опухоли достигали в среднем объема 150-200 ммЗ, мышей рандомизировали в группы лечения (п=6 мышей в каждой группе). Мышам вводили контрольный белок Рс человека (12,5 мг/кг), Η4Η1821Ν (2,5 мг/кг), тАЬ к ЕОРК (10 мг/кг) или комбинацию Η4Η1821Ν плюс тАЬ к ЕОРК (2,5+10 мг/кг). Все антитела вводили посредством подкожной инъекции два раза в неделю. Опухолевые объемы измеряли два раза в неделю в течение эксперимента, и массы опухолей определяли после иссечения опухолей в конце эксперимента. Среднее (среднее +/- стандартное отклонение) опухолевого роста от начала лечения и массы опухолей рассчитывали для каждой группы лечения. Процентное снижение опухолевого роста и массы опухоли рассчитывали, исходя из сравнения с Рс контрольной группой. Результаты приведены в табл. 17.
- 25 028879
Таблица 17
Ингибирование роста опухолевого ксенотрансплантата РаРи у мышей δΟΙΡ
В подобном эксперименте, проверяли эффект комбинированной терапии с н4Ш82Ш плюс ингибирующие антитела к ИЕК2 клон 4Ώ5ν8, как описано в Сайег е! а1., Ргос. Ναίΐ. Асаб. δει. υδΑ 89:42854289 (1992), на рост опухолевого ксенотрансплантата человека. Вкратце, 1х107 клеток рака молочной железы ВТ474 человека (АТСС) имплантируют подкожно в бок 6-8 недельных голых мышей ΝΟΚ (Тасошс. Хадсон, штат Нью-Йорк). После того, как опухолей достигали в среднем объема 150-200 мм3, мышей рандомизировали в группы лечения (п=5 мышей в каждой группе). Мышам вводили контрольный белок Рс человека (25 мг/кг), н4Ш82Ш (12,5 мг/кг), 4Ό5ν8 (12,5 мг/кг) или комбинацию н4Ш82Ш плюс 4Ό5ν8 (12,5+12,5 мг/кг). Все антитела вводили путем подкожной инъекции два раза в неделю. Объемы опухолей измеряли два раза в неделю в течение эксперимента. Средний (среднее +/- стандартное отклонение) опухолевый рост от начала лечения рассчитывали для каждой группы лечения. Процентное снижение опухолевого роста рассчитывали, исходя из сравнения с контрольной Рс группой. Результаты показаны в табл. 18.
Таблица 18
Ингибирование роста опухолевого ксенотрансплантата ВТ474 у голых мышей
Антитело (мг/мл) Опухолевый рост в мм3 от начала лечения (среднее ± 5Ό) Средний % уменьшения опухолевого роста
йЕс контроль (25) 194 ± 39 -
Η4Η1821Ν (12,5) 137 ± 65 29
4ϋ5ν8 (12,5) 34 + 121 82
Η4Η1821Ν + 4ϋ5ν8 (12,5 + 12,5) -79 ± 39 141
Этот пример показывает, что комбинированное лечение с н4Ш82Ш плюс антитела к ЕОРК или к нЕК2 обеспечивает более эффективное ингибирование роста опухолей, чем лечение отдельным средством. Как для РаИи-, так и для ВТ474-опухолевых ксенотрансплантатов, уменьшение среднего размера опухоли (регресс опухоли) вызывало комбинированное лечение, но не отдельные средства.
Пример 11. Эпитопное картирование связывания н4Ш82Ш с ЕгЪВ3 при помощи н/И-обмена.
Эксперименты были проведены для определения аминокислотных остатков ЕгЪВ3, с которыми н4Ш82Ш взаимодействует. Для этой цели проводилось эпитопное картирование при помощи н/Ообмена. Общее описание способа н/О-обмена изложено, например, в Ейппд (1999), Апа1уйса1 Вюсйеш1з!гу 267(2):252-259; и Епдеп апб δοΐίΗ (2001) Апа1. Сйеш, 73:256А-265А.
Для картирования эпитопа(ов) связывания антитела н4Ш82Ш на ЕгЪВ3 посредством н/О-обмена была использована рекомбинантная конструкция, состоящая из внеклеточного домена НЕгЪВ3 (аминокислоты 1-613 δЕ^ Ю ΝΟ: 498) с С-концевым шус-шус-гексагистидиновым тэгом ("РЕгЪВ3-шшн"). НЕгЪВ3-шшн был сначала дегликозилирован РNОазе Ι;(Ναυ Епд1апб ВюБаЪз) при нативных условиях. Антитело н4Ш82Ш было ковалентно присоединено к Ν-гидроксисукцинимидным (ΝΙ1δ) агарозным бусам (ОЕ РйезОепсе).
В эксперименте "оп-раствор/ой-бусы" (оп-обмен в растворе после ой-обмена на бусах), лиганд (дегликозилированный йЕгЪВ3-шшн) дейтерировали в течение 5 мин или 10 мин в буфере РВδ, подго- 26 028879
товленном с Э20, а затем связывали с Н4Н182Ш-бусами через 2 мин инкубации. Бусы со связанным ЕгЬВЗ промывали водным буфером РВ8 (подготовленном на Н20) и инкубировали в течение половины времени оп-обмена в буфере РВ8. После ойй-обмена, связанный ЕгЬВЗ элюировали с бус охлажденным во льду раствором ТРА с низким рН. Элюированный ЕгЬВЗ затем переваривали иммобилизованным пепсином (ТЬегто 8с1епййс) в течение 5 мин. Полученные в результате пептиды обессоливали с помощью хроматографических пипеточных наконечников ΖΐρΤΐρ® и сразу же анализировали при помощи массспектрометрии (МС) на основе времени вылета лазерной десорбционной ионизации (ΜΑΕΏΙ-ΤΟΡ) с использованием матрицы ИНгайеХйете.
В эксперименте "оп-бусы/ой-бусы" (оп-обмен на бусах с последующим ой-обменом на бусах), ЕгЬВЗ сначала связывали с Н4Н182Ш-бусами, а затем инкубировали в течение 5 мин или 10 мин в ϋ2Ο для оп-обмена. Следующие стадии (ойй-обмен, пепсиновый перевар и М8-анализ) были проведены, как описано для процедуры "оп-раствор/ой-бусы". Рассчитывали центроидные значения или средние соотношения масса-заряд (т/ζ) всех обнаруженных пептидов и сравнивали между этими двумя сериями экспериментов.
Результаты обобщены в табл. 19, в которой приводится сравнение центроидных значений т/ζ для всех детектируемых пептидов, выявленных способом жидкостной хроматографии-лазерной ионизации и десорбции из матрицы (ЕС-МАЙЭ1) М8 с последующим Н/Э-обменом и процедурой пепсинового расщепления. В то время как большинство наблюдаемых пептических пептидов дали сходные центроидные значения как для экспериментов оп-раствор/ойй-бусы, так и для экспериментов оп-бусы/ойй-бусы, три сегмента, соответствующие остаткам З45-З67, 42З-4З9 и 451-46З внеклеточного домена ЕгЬВЗ (8ЕЭ ГО ΝΟ: 498), имели дельта центроидные значения (А), большие чем или равные 0,20 т/ζ как в эксперименте "5 мин оп-/2,5 мин ой-обмен" (эксперимент I), так и в эксперименте "10 мин оп-/5 мин ой-обмен" (эксперимент II). Для целей настоящего примера положительная разница (Δ) в по меньшей мере 0,20 т/ζ в обоих экспериментах указывает аминокислоты, защищенные связыванием антител. Сегменты, отвечающие этому критерию, обозначаются полужирным шрифтом и символом "звездочка" (*) в табл. 19.
Таблица 19
Связывание Н4Н182Ш с ЬЕгЬВЗ-ттН
Эксперимент I 5 мин/2,5 мин обмен Эксперимент II 10 мин/5 мин обмен
Остатки (5Е0 Ю N0:498) Раствор /Бусы Бусы/Бусы Δ Раствор/ Бусы Бусы/Бусы Δ
46-57 1287,52 1287,41 0, 11 1287,58 1287,64 -0, 06
58-63 844,97 844,97 0, 00 845,04 844,99 0, 06
58-66 1102,34 1102,25 0, 09 1102,25 1102,30 -0, 05
58-67 1265,65 1265,60 0, 05 1265,57 1265,50 0, 07
58-69 1477,84 1477,77 0, 07 1477,79 1477,79 0, 01
- 27 028879
59-69 1364,46 1364,48 -0, 02 1364,39 1364,42 -0, 03
61-69 1050,70 1050,67 0, 03 1050,75 1050,68 0, 07
75-96 2509,35 2509,27 0, 08 2509,21 2509,21 0, 01
76-96 2362,11 2362,09 0, 01 2362,11 2361,97 0, 14
84-96 1526,22 1526, 05 0,16 1526,09 1526,08 0, 01
84-98 1710,14 1710,11 0, 03 1710,17 1710,07 0, 11
84-99 1857,37 1857,34 0, 03 1857,39 1857,33 0, 06
86-96 1270,52 1270,50 0, 02 1270,50 1270,45 0, 05
100-114 1750,75 1750,60 0, 15 1750,85 1750,75 0, 11
100-114 1766,52 1766,55 -0, 03 1766,63 1766,47 0,16
100-120 2476,03 2475,80 0,23 2476,04 2475,96 0, 08
103-117 1789,63 1789,48 0, 14 1789,69 1789,44 0,24
112-120 1142,00 1141,95 0, 05 1142,01 1142,06 -0, 05
144-154 1431,72 1431,72 0, 00 1431,76 1431,67 0, 08
345-365 2328,64 2328,64 0, 00 2328,57 2328,64 -0, 07
345-367* 2542,60 2542,34 0,26 2542,67 2542,47 0,20
366-378 1568,81 1568,70 0, 11 1568,88 1568,78 0, 10
368-373 807,97 807,95 0, 02 807,94 807,88 0, 06
368-376 1079,25 1079,30 -0, 04 1079,38 1079,30 0, 08
368-377 1242,49 1242,40 0, 09 1242,48 1242,43 0, 05
368-378 1355,82 1355,68 0, 14 1355,70 1355,73 -0, 03
368-379 1469,55 1469,56 -0, 01 1469,63 1469,57 0, 06
368-380 1583,09 1583,10 -0, 01 1583,04 1583,03 0, 01
369-378 1208,29 1208,25 0, 03 1208,33 1208,30 0, 03
397-408 1295,45 1295,47 -0, 01 1295,41 1295,36 0, 05
397-411 1643,12 1643,04 0, 08 1643,03 1642,98 0, 05
397-412 1756,26 1756,08 0, 18 1756,18 1756,04 0, 14
405-411 857,06 856, 97 0, 09 857,09 857,02 0, 07
423-435 1434,94 1434,82 0, 11 1434,96 1434,78 0, 18
423-436* 1598,08 1597,89 0,20 1598,27 1598,06 0,21
424-439* 1812,55 1812,27 0,28 1812,76 1812,37 0,39
423-439* 1869,57 1869,29 0,28 1869,79 1869,41 0,38
424-435 1377,85 1377,69 0,16 1378,16 1377,93 0,22
424-436* 1541,12 1540,90 0,21 1541,20 1541,00 0,20
425-439* 1665,29 1665,04 0,26 1665,55 1665,22 0,33
451-463* 1585,74 1585,51 0,23 1585,77 1585,53 0,24
618-641 2828,04 2827,98 0, 06 2827,98 2827,89 0, 10
621-629 989,16 989,14 0, 02 989,27 989,28 -0, 01
621-641 2498,60 2498,59 0, 01 2498,65 2498,53 0, 12
Результаты Н/Э-обмена, обобщенные в табл. 19, показывают, что три области, соответствующие аминокислотам 345-367, 423-439 и 451-463 8Е0 ГО N0: 498, защищены от полного оГГ-обмена при помощи Η4Η1821Ν, связанных с ЕгЬВ3 после оп-обмена. Примечательно, что все три области находятся в домене ΙΙΙ внеклеточного домена ЕгЬВ3. Таким образом, этот Пример показывает, что антитело Η4Η1821Ν связывается с прерывистым эпитопом в пределах домена ΙΙΙ внеклеточного домена ЕгЬВ3 человека, состоящим из этих трех аминокислотных сегментов, или иным образом приводит к защите этих остатков от НГО обмена (например, через конформационное изменение или аллостерические эффекты после связывания антител).
Пример 12. Клиническое испытания антитела к ЕгЬВ3 в комбинации с эрлотинибом или цетуксимабом у пациентов с развитым колоректальным раком (СКС), немелкоклеточным раком легких (N864.0 или раком головы и шеи (8ССНК).
Клиническое исследование проводилось с типичным антителом к ЕгЬВ3 Η4Η1821Ν у пациентов с развитым колоректальным раком (СКС), немелкоклеточным раком легкого (№СЬС) или раком головы и
- 28 028879
шеи (§ССН№). Исследование разделено на две стадии: стадия дозовой эскалации и стадии безопасного расширения. В стадии дозовой эскалации всем пациентам первоначально вводили Η4Η1821Ν внутривенно (IV) в дозе 3, 10 или 20 мг/кг. После начальной дозы Η4Η1821Ν схему лечения изменяли в зависимости от типа ракового заболевания: пациенты с ΝδΟΈί'.' начинали режим со 150 мг эриотиниба один раз ежедневно в сочетании с Η4Η1821Ν 3, 10 или 20 мг/кг IV, один раз в 14 дней; пациенты СКС и δί'.’ί'.ΉΝ начинали режим с цетуксимаба 250 мг/м2 IV один раз в неделю в сочетании с Η4Η1821Ν 3, 10 или 20 мг/кг IV, один раз каждые 14 дней. В стадии безопасного расширения №СЬС-пациенты получали Η4Η1821Ν (при рекомендуемой для стадии 2 дозе) IV один раз в 14 дней в сочетании с 150 мг эриотиниба один раз в день; СКС и δССΗN-пациенты получали Η4Η1821Ν (рекомендуется фаза 2 дозы) IV один раз в 14 дней в сочетании с цетуксимабом 250 мг/м2 IV один раз в неделю.
Ожидается, что комбинированная терапия, включающая антитело к Εγ6Β3 Η4Η1821Ν или эриотиниб или цетуксимаб, обеспечит наблюдаемые клинические улучшения у пациентов с ΝδΟΈΟ СКС и/или δί'.'ί'.ΉΝ в большей степени, чем монотерапия с эриотинибом или цетуксимабом по отдельности.
Настоящее изобретение не ограничивается объемом конкретных вариантов осуществления, описанных в настоящем документе. Действительно, различные модификации изобретения в дополнение к описанным в настоящем документе, станут очевидными для специалистов в рассматриваемой области из вышеизложенного описания и сопутствующих фигур. Такие модификации предназначены для того, чтобы попасть в сферу действия прилагаемых пунктов формулы изобретения.
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Кедепегоп РйагтасеиЕ1са1з, 1пс. <120> Антитела к ЕгЬБЗ и их применение
<130> 6550А-ИО
<140> Быть определенным
<141> Поданный настоящим
<150> 61/541,312
<151> 2011-09-30
<150> 61/557,460
<151> 2011-11-09
<150> 61/614,565
<151> 2012-03-23
<160> 500
<170> ЕазЕ5Е12 £ог Άίηάον’β Уегзчоп 4.0
<210> 1
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 1
саддЕдсадс ЕддЕддадЕс Едддддаддс дЕддЕссадЕ сЕдддаадЕс ссЕдадасЕс 60
ЕссЕдЕдЕад сдЕсЕддаЕЕ сассЕЕсадЕ ааЕЕаЕддса ЕдсасЕдддЕ ссдссадасЕ 120
ссаддсаадд ддсЕддадЕд ддЕддсасдЕ аЕаЕддЕЕЕд аЕддаасЕаа ЕаааЕасЕас 180
асадасЕссд Едаадддссд аЕЕсасссЕд Ессададаса дЕЕссаадаа сасдсЕдЕаЕ 240
сЕдсаааЕда асадссЕдад адссдаддас асддсЕдЕсЕ аЕЕЕсЕдЕдс дададаадад 300
ЕсаЕЕддаас ЕадассасЕа ЕдЕЕаЕддас дЕсЕддддсс аадддассас ддЕсассдЕс 360
ЕссЕса 366
- 29 028879
<210> 2
<211> 122
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 2
О1п Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 О1п Зег О1у Ьуз
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз Уа1 А1а Зег О1у РИе ТИг РИе Зег Азп Туг
20 25 30
О1у МеС Ηΐ3 Тгр Уа1 Агд О1п ТИг Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а Агд 11е Тгр РИе Азр О1у ТИг Азп Ьуз Туг Туг ТИг Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РИе ТИг Ьеи Зег Агд Азр Зег Зег Ьуз Азп ТИг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеС Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТИг А1а Уа1 Туг РИе Суз
85 90 95
А1а Агд О1и О1и Зег Ьеи О1и Ьеи Азр Ηΐ3 Туг Уа1 МеС Азр Уа1 Тгр
100 105 110
О1у О1п О1у ТИг ТИг Уа1 ТИг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 3
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 3
ддаССсассС СсадСааССа Сддс
<210> 4
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
24
<400> 4
О1у РИе ТИг РИе Зег Азп Туг О1у 1 5
<210> 5
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 5
аСаСддСССд аСддаасСаа Сааа
<210> 6
24
- 30 028879
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 6
11е Тгр РЬе Азр О1у ТЬг Азп Ьуз 1 5
<210> 7
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 7
дсдададаад адЬсаЬЬдда асЬадассас ЬаЬдЬЬаЬдд асдЬс 45
<210> 8
<211> 15
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 8
А1а Агд О1и О1и Бег Ьеи О1и Ьеи Азр Ηΐ3 Туг Уа1 МеЬ Азр Уа1
1 5 10 15
<210> 9
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 9
дссаЬссада ЬдасссадЬс ЬссаЬссЬсс сЬдЬсЬдсаЬ сЬдЬаддада сададЬсасс 60
аЬсасЬЬдсс дддсаадЬса ддасаЬЬада даЬдаЬЬЬад дсЬддЬЬЬса дсадааассс 120
дддааадссс сЬаассЬссЬ даЬсЬаЬдсЬ дсаЬссадЬЬ ЬасааадЬдд ддЬсссаЬса 180
аддЬЬсадсд дсадЬддаЬс ЬддсасадаЬ ЬЬсасЬсЬса ссаЬсадсад ссЬдсадссЬ 240
даддаЬЬЬЬд саасЬЬаЬЬа сЬдЬсЬасаа даЬЬасааЬЬ аЬссдсЬсас ЬЬЬсддсдда 300
дддассаадд ЬддадаЬсаа асда 324
<210> 10
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 10
А1а 11е О1п МеЬ ТЬг О1п Бег Рго Бег Бег Ьеи Бег А1а Бег Уа1 О1у 1 5 10 15
- З1 028879
Азр Агд Уа1 ТЬг 20 11е ТЬг Суз Агд А1а 25 Зег О1п Азр 11е Агд 30 Азр Азр
Ьеи О1у Тгр РЬе О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Азп Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз Ьеи О1п Азр Туг Азп Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 11
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 11
саддасаССа дадаСдаС
18
<210> 12
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 12
О1п Азр 11е Агд Азр Азр 1 5
<210> 13
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 13
дсСдсаСсс
<210> 14
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 14 А1а А1а Зег
1
<210> 15
- З2 028879
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
27
<400> 15
сБасаадаББ асааББаБсс дсБсасБ
<210> 16
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 16
Ьеи О1п Азр Туг Азп Туг Рго Ьеи ТЪг 1 5
<210> 17
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 17
даддБдсадс
БссБдБдсад
ссадддаадд
асаддсБсБд
сБасаааБда
ддддаБсаад
БддБддадБс
ссБсБддаББ
ддсБддадБд
Бдаадддссд
асадБсБдад
аБдсББББда
БдддддаддБ
сассБББдаа
ддБсБсБддБ
аББсассаБс
адссдаддас
БаБсБддддс
дБддБасддс
даББаБддса
асБааББдда
Бссададаса
асддссББдБ
саадддасаа
сБддддддБс
БдааББдддБ
аБддБддБаБ
асдссаадаа
аБсасБдБдс
БддБсассдБ
ссБдадасБс 60 ссдссаадББ 120 сасаддББаБ 180 сБсссБаБаБ 240 дададаБадс 300 сБсББса 357
<210> 18
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 18
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 Агд Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе О1и Азр Туг
20 25 30
О1у МеБ Азп Тгр Уа1 Агд О1п Уа1 Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег О1у ТЬг Азп Тгр Азп О1у О1у 11е ТЬг О1у Туг ТЬг О1у Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеБ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Ьеи Туг Нчз Суз
85 90 95
А1а Агд Азр Зег О1у Азр О1п Азр А1а РЬе Азр 11е Тгр О1у О1п О1у
100 105 110
ТЬг МеБ Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
- 33 028879
115
<210> 19
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 19
ддаЕЕсассЕ ЕЕдаадаЕЕа Еддс
<210> 20
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 20
О1у РИе ТИг РИе О1и Азр Туг О1у 1 5
<210> 21
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 21
асЕааЕЕдда аСддЕддСаС саса
24
24
<210> 22
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 22
ТИг Азп Тгр Азп О1у О1у 11е ТИг 1 5
<210> 23
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 23
дсдададаЕа дсддддаЕса адаСдсЕЕЕЕ даЕаЕс
<210> 24
36
- З4 028879
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 24
А1а Агд Азр Зег О1у Азр О1п Азр А1а РНе Азр 11е 1 5 10
<210> 25
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 25
дасакссадк кдасссадкс кссакссккс скдкскдсак скдкаддада сададксасс 60
аксасккдск дддссадкса ддасаккадс адккакккад сскддкакса дсааааасса 120
дддааадссс скааасксск дакскакдск дсакссаскк кссааадкдд ддксссакса 180
адакксадсд дсадкддакс кдддасадаа кксаскскса сааксадсаа сскдсадсск 240
даадаккккд саасккакка скдксаасад сккдакадкк ассскскскс ккксддсдда 300
дддассаадд кддадаксаа асда 324
<210> 26
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 26
Азр 1 11е О1п Ьеи ТНг 5 О1п Зег Рго Зег РНе 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Тгр А1а Зег О1п Азр 11е Зег Зег Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег ТНг РНе О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТНг О1и РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Зег Азп Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз О1п О1п Ьеи Азр Зег Туг Рго Ьеи
85 90 95
Зег РНе О1у О1у О1у ТНг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 27
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 27
саддасакка дсадккак 18
- 35 028879
<210> 28
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 28
О1п Азр 11е Бег Бег Туг 1 5
<210> 29
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 29 дсЬдсаЬсс
<210> 30
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 30 А1а А1а Бег
1
<210> 31
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 31
саасадсЬЬд аЬадЬЬассс ЬсЬсЬсЬ
27
<210> 32
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 32
О1п О1п Ьеи Азр Бег Туг Рго Ьеи Бег 1 5
<210> 33
- З6 028879
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 33
даддСдсадс СддСддадСс Сдддддаддс ССддСасадс сСддддддСс ссСдадасСс 60
СссСдСдсад ссСсСддаСС сассСССадС адсСасдаса СдсасСдддС ссдссаадса 120
асаддаааад дСсСддадСд ддСсСсадсС аССддСссСд сСддСдасас аСасСаСсса 180
дСсСссдсда СдддссдаСС сассаСсСсс ададаСдаСд ссаадаасСс сССдСаСсСС 240
саааСдааса дссСдададс сддддасасд дсСдСсСаСС асСдСдсаад ададддддСс 300
асааССсдСс сддасдасСа сСССддСсСд дасдСсСддд дссааддаас сасддСсасс 360
дСсСссдсс 369
<210> 34
<211> 123
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 34
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Бег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго О1у О1у
1 5 10 15
Бег Ьеи Агд Ьеи Бег Суз А1а А1а Бег О1у РЬе ТЬг РЬе Бег Бег Туг
20 25 30
Азр МеС Ηΐ3 Тгр Уа1 Агд О1п А1а ТЬг О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Бег А1а 11е О1у Рго А1а О1у Азр ТЬг Туг Туг Рго Уа1 Бег А1а МеС
50 55 60
О1у Агд РЬе ТЬг 11е Бег Агд Азр Азр А1а Ьуз Азп Бег Ьеи Туг Ьеи
65 70 75 80
О1п МеС Азп Бег Ьеи Агд А1а О1у Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд О1и О1у Уа1 ТЬг 11е Агд Рго Азр Азр Туг РЬе О1у Ьеи Азр Уа1
100 105 110
Тгр О1у О1п О1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Бег А1а
115 120
<210> 35
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 35
ддаССсассС ССадСадсСа сдас 24
<210> 36
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 36
- З7 028879
О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Зег Туг Азр
1 5
<210> <211> <212> <213> 37 21 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 37
аЕЕддЕссЕд сЕддЕдасас а 21
<210> <211> <212> <213> 38 7 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 38
11е О1у Рго А1а О1у Азр ТЬг 1 5
<210> <211> <212> <213> 39 51 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 39
дсаадададд дддЕсасааЕ ЕсдЕссддас дасЕасЕЕЕд дЕсЕддасдЕ с 51
<210> <211> <212> <213> 40 17 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 40
А1а Агд О1и О1у Уа1 ТЬг 11е Агд Рго Азр Азр Туг РЬе О1у Ьеи Азр 1 5 10 15
Уа1
<210> <211> <212> <213> 41 324 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 41
- 38 028879
дасаСссадС СдасссадСс СссаСссССс сСдСсСдсаС сСдСдддада сададСсасс 60
аСсасССдсС дддссадСса дддсаССадс даССаСССад ссСддСаСса даааааасса 120
дддааадссс сСсадсСссС даСсСаСдсС дсаассасСС СдсааадСдд ддСсссаСсС 180
аддССсадсд дсадСддаСс Сдддасадаа ССсасСсСса сааСсадсад ссСдсадссС 240
даадаССССд саасССаССа сСдСсаасад сССааСасСС асссасСсас СССсддсдда 300
дддассаадд СддадаСсаа асда 324
<210> 42
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 42
Азр 1 11е О1п Ьеи ТЬг 5 О1п Зег Рго Зег РЬе 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Тгр А1а Зег О1п О1у 11е Зег Азр Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п Ьуз Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго О1п Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а ТЬг ТЬг Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг О1и РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз О1п О1п Ьеи Азп ТЬг Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 43
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 43
садддсаССа дсдаССаС
<210> 44
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 44
О1п О1у 11е Зег Азр
1 5
последовательность
последовательность
Туг
18
<210> 45
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
- З9 028879
<400> 45
дсЬдсаасс
<210> 46
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 46
А1а А1а ТЬг
1
<210> 47
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 47
саасадсЬЬа аЬасЬЬассс асЬсасЬ
27
<210> 48
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 48
О1п О1п Ьеи Азп ТЬг Туг Рго Ьеи ТЬг 1 5
<210> 49
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 49
саддЬдсадс ЬддЬддадЬс Ьдддддаддс дЬддЬссадс сЬдддаддЬс ссЬдадасЬс 60
ЬссЬдЬдсад сдЬсЬддаЬЬ сассЬЬсадЬ адсЬЬЬддса ЬдсасЬдддЬ ссдссаддсЬ 120
ссаддсаадд ддсЬддадЬд ддЬддсадЬЬ аЬаЬддЬаЬд ЬЬдаааЬЬаа ЬаааЬассаЬ 180
дсадасЬссд Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададасд аЬЬссаадаа сасддЬаЬаЬ 240
сЬдсаааЬда асадссЬдад адссдаддас асддсЬдЬдЬ аЬЬасЬдЬдс дададасЬдд 300
аасдасдддд асЬасддЬаЬ ддасдЬсЬдд ддссааддда ссасддЬсас сдЬсЬссЬса 360
<210> 50
<211> 120
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
- 40 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 50
О1п Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 О1п Рго О1у Агд
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Зег РЬе
20 25 30
О1у МеЬ Ηΐ3 Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а Уа1 11е Тгр Туг Уа1 О1и 11е Азп Ьуз Туг ΗΪ8 А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азр Зег Ьуз Азп ТЬг Уа1 Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЬ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр Тгр Азп Азр О1у Азр Туг О1у МеЬ Азр Уа1 Тгр О1у О1п
100 105 110
О1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 51
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 51
ддаЬЬсассЬ ЬсадЬадсЬЬ Ьддс
24
<210> 52
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 52
О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Зег РЬе О1у 1 5
<210> 53
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 53
аЬаЬддЬаЬд ЬЬдаааЬЬаа Ьааа
<210> 54
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
24
- 41 028879
<223> Синтетический
<400> 54
11е Тгр Туг Уа1 О1и 11е Азп Ьуз 1 5
<210> 55
<211> 39
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 55
дсдададасС ддаасдасдд ддасСасддС аСддасдСс 39
<210> 56
<211> 13
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 56
А1а Агд Азр Тгр Азп Азр О1у Азр Туг О1у МеС Азр Уа1
1 5 10
<210> 57
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 57
дасаСссадС СдасссадСс СссаСссССс сСдСсСдсаС сСдСаддада сададСсасс 60
аСсасССдсС дддссадСса дддсаССадс адССССССад ссСддСаСса дсааааадса 120
дддааадссс сдаддсСссС даСсСаСдсС дсаСссасСС СдсааасСдд ддСсссаСса 180
аддССсадсд дсадСддаСс Сдддасадаа ССсасСсСса сааСсадсад ссСдсадссС 240
ддадаССССд саасССаСса сСдСсаасад сССааСадСС асссдСасас ССССддссад 300
дддассаадс СддадаСсаа асда 324
<210> 58
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 58
Азр 1 11е О1п Ьеи ТИг 5 О1п Зег Рго Зег РИе 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТИг 11е ТИг Суз Тгр А1а Зег О1п О1у 11е Зег Зег РИе
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз А1а О1у Ьуз А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег ТИг Ьеи О1п ТИг О1у Уа1 Рго Зег Агд РИе Зег О1у
- 42 028879
50 55
Зег 65 О1у Зег О1у ТЬг О1и 70 РЬе ТЬг
О1у Азр РЬе А1а ТЬг 85 Туг Ηΐ3 Суз
ТЬг РЬе О1у О1п 100 О1у ТЬг Ьуз Ьеи
60
Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи С1п Рго
75 80
О1п О1п Ьеи Азп Зег Туг Рго Туг
90 95
О1и 11е Ьуз Агд
105
<210> 59
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 59
садддсаЬЬа дсадЬЬЬЬ
<210> 60
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 60
С1п О1у 11е Зег Зег
1 5
<210> 61
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 61
дсЬдсаЬсс
<210> 62
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 62
А1а А1а Зег
1
<210> 63
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
последовательность
последовательность
РЬе
последовательность
последовательность
последовательность
18
- 4З 028879
<223> Синтетический
<400> 63
саасадсЕЕа аЕадЕЕассс дЕасасЕ 27
<210> 64
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 64
О1п О1п Ьеи Азп Зег Туг Рго Туг ТЪг 1 5
<210> 65
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 65
даддЕдсадс ЕддЕддадЕс Едддддаддс ЕЕддЕасадс сЕддддддЕс ссЕдадасЕс 60
ЕссЕдЕдсад ссЕсЕддаЕЕ сассЕЕсадЕ аасЕасдаса ЕасасЕдддЕ ссдссаадсЕ 120
асаддаааад дЕсЕддадЕд ддЕсЕсадсЕ аЕЕддЕссЕд сЕддЕдасас аЕасЕаЕЕса 180
дасЕссдЕаа адддссдаЕЕ сассаЕсЕсс ададаадаЕд ссаадаасЕс сЕЕдЕаЕсЕЕ 240
саааЕдадса дссЕдададс сддддасасд дсЕдЕЕЕаЕЕ асЕдЕдсаад сдаддддаЕа 300
дсадЕЕсдЕс сддасдасЕа сЕасддЕаЕд дасдЕсЕддд дссаадддас сасддЕсасс 360
дЕсЕссдсс 369
<210> 66
<211> 123
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 66
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Азп Туг
20 25 30
Азр 11е Ηΐ3 Тгр Уа1 Агд О1п А1а ТЬг О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег А1а 11е О1у Рго А1а О1у Азр ТЬг Туг Туг Зег Азр Зег Уа1 Ьуз
50 55 60
О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд О1и Азр А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг Ьеи
65 70 75 80
О1п МеЕ Зег Зег Ьеи Агд А1а О1у Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Зег О1и О1у 11е А1а Уа1 Агд Рго Азр Азр Туг Туг О1у МеЕ Азр Уа1
100 105 110
Тгр О1у О1п О1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег А1а
115 120
<210> 67
- 44 028879
<211> <212> <213> 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 67
ддаЕЕсассЕ ЕсадЕаасЕа сдас 24
<210> <211> <212> <213> 68 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 68
О1у РИе ТИг РИе Бег Азп Туг Азр
1 5
<210> <211> <212> <213> 69 21 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 69
аЕЕддЕссЕд сЕддЕдасас а 21
<210> <211> <212> <213> 70 7 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 70
11е О1у Рго А1а О1у Азр ТИг 1 5
<210> <211> <212> <213> 71 51 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 71
дсаадсдадд ддаЕадсадЕ ЕсдЕссддас дасЕасЕасд дЕаЕддасдЕ с 51
<210> <211> <212> <213> 72 17 РКТ Искусственная последовательность
- 45 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 72
А1а Зег О1и О1у 11е А1а Уа1 Агд Рго Азр Азр Туг Туг О1у Меб Азр 1 5 10 15
Уа1
<210> 73
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 73
дасабссадб бдасссадбс бссабссббс сбдбсбдсаб сбдбаддада сададбсасс 60
абсасббдсб дддссадбса ддасаббасс адббабббад ссбддбабса даааааасса 120
дддааадссс сбаадсбссб дабсбабдсб дсабссасбб бдсааадбдд ддбсссабса 180
аддббсадсд дсадбддабс бдддасадаа ббсасбсбса саабсадсад ссбдсадссб 240
даадаббббд садсббабба сбдбсаасад сббаабадбб асссдсбсас бббсддсдда 300
дддассаадд бддадабсаа асда 324
<210> 74
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 74
Азр 1 11е О1п Ьеи ТЬг 5 О1п Зег Рго Зег РЬе 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Тгр А1а Зег О1п Азр 11е ТЬг Зег Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п Ьуз Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег ТЬг Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг О1и РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а А1а Туг Туг Суз О1п О1п Ьеи Азп Зег Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 Азр 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 75
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 75
саддасабба ссадббаб 18
<210> 76
- 46 028879
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 76
О1п Азр 11е ТЬг Бег Туг 1 5
<210> 77
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 77
дсЬдсаЬсс
<210> 78
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 78
А1а А1а Бег
1
<210> 79
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 79
саасадсЬЬа аЬадЬЬассс дсЬсасЬ
27
<210> 80
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 80
О1п О1п Ьеи Азп Бег Туг Рго Ьеи ТЬг 1 5
<210> 81 <211> 381 <212> ДНК
- 47 028879
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 81
даддЕдсадс ЕдЕЕддадЕс Едддддадас ЕЕддЕасадс сЕддддддЕс ссЕдадасЕс 60
ЕссЕдЕдсаа ссЕсЕддаЕЕ садЕЕЕЕадЕ адЕдаЕдсса ЕдаасЕдддЕ ссдссаддсЕ 120
ссадддаадд дссЕддадЕд ддЕсЕсаддЕ аЕЕадЕддЕа дЕддЕддЕаа сасаЕасЕас 180
дсадасЕссд Едаадддссд дЕЕсассаЕс Ессададаса ЕЕЕссаадад сасдсЕдЕсЕ 240
сЕдсаааЕда асадссЕдад адссдаддас асддссдЕаЕ аЕЕаЕЕдЕдс дааададддЕ 300
асЕааЕаЕдд ЕЕсддддадЕ ЕдЕЕаЕддад дасаасддЕа ЕддасдЕсЕд дддссааддд 360
ассасддЕса ссдЕсЕссдс с 381
<210> 82
<211> 127
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 82
О1и Уа1 О1п Ьеи Ьеи О1и Зег О1у О1у Азр Ьеи Уа1 О1п Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а ТКг Зег О1у РКе Зег РКе Зег Зег Азр
20 25 30
А1а МеЕ Азп Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег О1у 11е Зег О1у Зег О1у О1у Азп ТКг Туг Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РКе ТКг 11е Зег Агд Азр 11е Зег Ьуз Зег ТКг Ьеи Зег
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЕ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТКг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Ьуз О1и О1у ТКг Азп МеЕ Уа1 Агд О1у Уа1 Уа1 МеЕ О1и Азр Азп
100 105 110
О1у МеЕ Азр Уа1 Тгр О1у О1п О1у ТКг ТКг Уа1 ТКг Уа1 Зег А1а
115 120 125
<210> 83
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 83
ддаЕЕсадЕЕ ЕЕадЕадЕда Едсс 24
<210> 84
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 84
О1у РКе Зег РКе Зег Зег Азр А1а 1 5
- 48 028879
<210> 85
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 85
аЕЕадЕддЕа дЕддЕддЕаа саса
24
<210> <211> <212> <213> 86 8 РКТ Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 86
11е Зег О1у Зег О1у О1у Азп ТЬг
1 5
<210> 87
<211> 60
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 87
дсдааададд дЕасЕааЕаЕ ддЕЕсдддда дЕЕдЕЕаЕдд
аддасаасдд ЕаЕддасдЕс
60
<210> <211> <212> <213> 88 20 РКТ Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 88
А1а Ьуз О1и С1у ТЬг Азп МеЕ Уа1 Агд О1у Уа1
1 5 10
О1у МеЕ Азр Уа1
20
Уа1 МеЕ О1и Азр Азп 15
<210> 89
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 89
дасаЕссада ЕдасссадЕс дссаЕсЕЕсс дЕдЕсЕдсаЕ сЕдЕдддада сададЕсасс 60
- 49 028879
аЕсасЕЕдЕс дддсдадЕса дддЕаЕЕадс дасЕасЕЕад ссЕддЕаЕса дсадааасса 120
ддаааадссс сЕааасЕссЕ даЕсЕаЕдсЕ дсаЕссадЕЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕсс 180
аддЕЕсадсд дссдЕддсЕс ЕдддасадаЕ ЕЕсасЕсЕса ссаЕсадсас ссЕдсадссЕ 240
даадаЕЕЕЕд саасЕЕасЕа ЕЕдЕсаасад дсЕаасадЕЕ ЕсссдсЕсас ЕЕЕсддсдда 300
дддассаадд ЕддадаЕсаа асда 324
<210> 90
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 90
Азр 11е О1п МеЕ ТЬг О1п Зег Рго Зег Зег Уа1 Зег А1а Зег Уа1 О1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Агд А1а Зег О1п О1у 11е Зег Азр Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Агд О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег ТЬг Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз О1п О1п А1а Азп Зег РЬе Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 Азр 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 91
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 91
садддЕаЕЕа дсдасЕас
<210> 92
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 92
О1п О1у 11е Зег Азр
1 5
последовательность
последовательность
Туг
18
<210> 93
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
- 50 028879
<400> 93
дсЬдсаЬсс
<210> 94
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 94
А1а А1а Зег
1
<210> 95
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 95
саасаддсЬа асадЬЬЬссс дсЬсасЬ
27
<210> 96
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 96
О1п О1п А1а Азп Зег РЬе Рго Ьеи ТЬг 1 5
<210> 97
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 97
саддЬдсадс ЬддЬддадЬс Сдддддаддс дЬддЬссадс сЬдддаддЬс ссЬдадасЬс 60
ЬссЬдЬдсад сдЬсЬддаЬЬ сассЬЬсааЬ аасЬаЬддса ЬдсасЬдддЬ ссдссаддсЬ 120
ссаддсаадд ддсЬддсдЬд ддЬддсадЬЬ аЬдЬддЬаЬа дЬдааадЬса ЬаааЬасЬаЬ 180
дсадасЬссд Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададаса аЬЬссаадаа сасдсЬдЬаЬ 240
сЬддаааЬда асадссЬдад адЬсдаддас асддсЬаЬаЬ аЬЬасЬдЬдс дададаЬсЬс 300
ддЬдассссд аЬдсЬЬЬЬда ЬаЬсЬддддс саадддасаа ЬддЬсассдЬ сЬсЬЬса 357
<210> 98
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
- 51 028879
<400> 98
О1п Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Бег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 О1п Рго О1у Агд
1 5 10 15
Бег Ьеи Агд Ьеи Бег Суз А1а А1а Бег О1у РЬе ТЬг РЬе Азп Азп Туг
20 25 30
О1у МеЬ ΗΪ8 Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи А1а Тгр Уа1
35 40 45
А1а Уа1 МеЬ Тгр Туг Бег О1и Бег Н1з Ьуз Туг Туг А1а Азр Бег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Бег Агд Азр Азп Бег Ьуз Азп ТЬг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1и МеЬ Азп Бег Ьеи Агд Уа1 О1и Азр ТЬг А1а 11е Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр Ьеи О1у Азр Рго Азр А1а РЬе Азр 11е Тгр О1у О1п О1у
100 105 110
ТЬг МеЬ Уа1 ТЬг Уа1 Бег Бег
115
<210> 99
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 99
ддаЬЬсассЬ ЬсааЬаасЬа Ьддс
24
<210> 100
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 100
О1у РЬе ТЬг РЬе Азп Азп Туг О1у 1 5
<210> 101
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 101
аЬдЬддЬаЬа дЬдааадЬса Ьааа
<210> 102
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
24
- 52 028879
<400> 102
МеЕ Тгр Туг Бег О1и Бег Н1з Ьуз 1 5
<210> 103
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 103
дсдададаЕс ЕсддЕдассс сдаЕдсЕЕЕЕ даЕаЕс 36
<210> 104
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 104
А1а Агд Азр Ьеи О1у Азр Рго Азр А1а РИе Азр 11е 1 5 10
<210> 105
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 105
дасаЕссадЕ ЕдасссадЕс ЕссаЕссЕЕс сЕдЕсЕдсаЕ сЕдЕаддада сададЕсасс 60
аЕсасЕЕдсЕ дддссадЕса дддсаЕЕадс адЕЕаЕЕЕад ссЕддЕаЕса дсааааасса 120
дддааадссс сЕаадсЕссЕ даЕЕЕаЕддЕ дсаЕссасЕЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕса 180
аддЕЕсадсд дсадЕддаЕс Едддасадаа ЕЕсасЕсЕса сааЕсадсад ссЕдсадссЕ 240
даадаЕЕЕЕд саасЕЕаЕЕа сЕдЕсаасад сЕЕааЕадЕЕ асссЕсЕсас сЕЕсддсдда 300
дддассаадд ЕддадаЕсаа асда 324
<210> 106
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 106
Азр 1 11е О1п Ьеи ТИг 5 О1п Бег Рго Бег РИе 10 Ьеи Бег А1а Бег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТИг 11е ТИг Суз Тгр А1а Бег О1п О1у 11е Бег Бег Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг О1у А1а Бег ТИг Ьеи О1п Бег О1у Уа1 Рго Бег Агд РИе Бег О1у
50 55 60
Бег О1у Бег О1у ТИг О1и РИе ТИг Ьеи ТИг 11е Бег Бег Ьеи О1п Рго
- 5З 028879
65 70 75 80
О1и Азр РИе А1а ТИг Туг Туг Суз О1п О1п Ьеи Азп Зег Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТИг РИе О1у О1у О1у ТИг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 107
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 107
садддсаССа дсадССаС
<210> 108
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 108
О1п О1у 11е Зег Зег
1 5
последовательность
последовательность
Туг
18
<210> 109
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 109
ддСдсаСсс
<210> 110
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 110
О1у А1а Зег
1
последовательность
последовательность
<210> 111
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
- 54 028879
<400> 111
саасадсЕЕа аЕадЕЕассс ЕсЕсасс 27
<210> 112
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 112
Ο1η Ο1η Ьеи Азп Зег Туг Рго Ьеи ТЪг 1 5
<210> 113
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 113
саддЕдсадс ЕддЕддадЕс Едддддаддс дЕддЕссадс сЕдддаддЕс ссЕдадасЕс 60
ЕссЕдЕдсад ссЕсЕддаЕЕ сассЕЕсадЕ адсЕаЕддса ЕдсасЕдддЕ ссдссаддсЕ 120
ссаддсаадд ддсЕддадЕд ддЕддсаддЕ аЕдЕсаЕаЕд аЕддаадЕад ЕаааЕасЕаЕ 180
даадасЕссд Едаадддссд аЕЕсассаЕс Ессададаса аЕЕссаадаа сасдсЕдааЕ 240
сЕдсаааЕда асадссЕдад адЕЕдаддас асддсЕдЕдЕ аЕЕасЕдЕдс дааадааадд 300
дасЕасдЕЕд адЕасдЕада сЕссЕасЕас ддЕаЕддасд ЕсЕддддсса адддассасд 360
дЕсассдЕсЕ ссдсс 375
<210> 114
<211> 125
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 114
Ο1η Уа1 Ο1η Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 Ο1η Рго О1у Агд
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЪе ТЪг РЪе Зег Зег Туг
20 25 30
О1у МеЕ Ηΐ3 Тгр Уа1 Агд Ο1η А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а О1у МеЕ Зег Туг Азр О1у Зег Зег Ьуз Туг Туг О1и Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЪе ТЪг 11е Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТЪг Ьеи Азп
65 70 75 80
Ьеи Ο1η МеЕ Азп Зег Ьеи Агд Уа1 О1и Азр ТЪг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Ьуз О1и Агд Азр Туг Уа1 О1и Туг Уа1 Азр Зег Туг Туг О1у МеЕ
100 105 110
Азр Уа1 Тгр О1у Ο1η О1у ТЪг ТЪг Уа1 ТЪг Уа1 Зег А1а
115 120 125
<210> 115 <211> 24 <212> ДНК
- 55 028879
<213> Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 115
ддаЕЕсассЕ ЕсадЕадсЕа Еддс 24
<210> <211> <212> <213> 116 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 116
О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Зег Туг О1у
1 5
<210> <211> <212> <213> 117 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 117
аЕдЕсаЕаЕд аЕддаадЕад Еааа 24
<210> <211> <212> <213> 118 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 118
МеЕ Зег Туг Азр О1у Зег Зег Ьуз
1 5
<210> <211> <212> <213> 119 54 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 119
дсдааадааа дддасЕасдЕ ЕдадЕасдЕа дасЕссЕасЕ асддЕаЕдда сдЕс 54
<210> <211> <212> <213> 120 18 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
- 56 028879
<400> 120
А1а Ьуз О1и Агд Азр Туг Уа1 О1и Туг Уа1 Азр Зег Туг Туг О1у МеС 1 5 10 15
Азр Уа1
<210> 121
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 121
дссаСссада СдасссадСс СссаСссСсс сСдСсСдсаС сСдСаддада сададСсасс 60
аСсасССдсс дддсаадСса дддсаССада ааСдаСССад дсСддСаСса дсадааасса 120
дддааадссс сСааддСссС ааСсСаСдсС дсаСссадСС СасааадСдд ддСсссаСса 180
аддССсадсд дсадСддаСс СддаасадСС ССсасСсСса ссаСсадсад ссСдсадссС 240
даадаССССд саасССаССа сСдСсСасаа даССасааСС асссдсСсас СССсддсдда 300
дддассаадд СддадаСсаа асда 324
<210> 122
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 122
А1а 11е О1п МеС ТЬг О1п Зег Рго Зег Зег Ьеи Зег А1а Зег Уа1 О1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Агд А1а Зег О1п О1у 11е Агд Азп Азр
20 25 30
Ьеи О1у Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Уа1 Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг Уа1 РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз Ьеи О1п Азр Туг Азп Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 123
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 123
садддсаССа даааСдаС 18
<210> 124 <211> 6 <212> РКТ
- 57 028879
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 124
О1п О1у 11е Агд Азп Азр 1 5
<210> <211> <212> <213> 125 9 ДНК Искусственная
<220> <223> Синтетический
<400> 125
дсБдсаБсс
последовательность
<210> 126
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 126 А1а А1а Зег
1
<210> 127
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 127
сБасаадаББ асааББассс дсБсасБ
27
<210>
<211>
<212>
<213>
128
9
РКТ
Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 128
Ьеи О1п Азр Туг Азп Туг Рго Ьеи ТЪг 1 5
<210> 129
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная
последовательность
- 58 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 129
даддЬдсадс ЬддЬддадЬс ЬдддддаддЬ дЬддЬасддс сЬддддддЬс ссЬдадасЬс 60
ЬссЬдЬдсад ссЬсЬддаЬЬ сассЬЬЬдаЬ даЬЬаЬддса ЬдадсЬдддЬ ссдссааЬЬЬ 120
ссадддаадд ддсЬддадЬд ддЬсЬсЬадЬ аЬЬдаЬддаа аЬддЬддЬаа сасаддЬЬаЬ 180
ЬсадасЬсЬд Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададаса асдссааааа сЬсссЬдсаЬ 240
сЬдсаааЬда асадЬсЬдад адссдаддас асддссЬЬдЬ аЬсасЬдЬдс дададаЬссс 300
даЬЬаЬдаЬЬ ссдЬЬЬдддд дааЬЬаЬсдЬ сссЬЬЬдасЬ асЬддддсса дддаасссЬд 360
дЬсассдЬсЬ ссЬса 375
<210> 130
<211> 125
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 130
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 Агд Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РНе ТНг РНе Азр Азр Туг
20 25 30
О1у МеЬ Зег Тгр Уа1 Агд О1п РНе Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Зег 11е Азр О1у Азп О1у О1у Азп ТНг О1у Туг Зег Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РНе ТНг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Н1з
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЬ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТНг А1а Ьеи Туг ΗΪ8 Суз
85 90 95
А1а Агд Азр Рго Азр Туг Азр Зег Уа1 Тгр О1у Азп Туг Агд Рго РНе
100 105 110
Азр Туг Тгр О1у О1п О1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120 125
<210> 131
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 131
ддаЬЬсассЬ ЬЬдаЬдаЬЬа Ьддс 24
<210> 132
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 132
О1у РНе ТНг РНе Азр Азр Туг О1у 1 5
- 59 028879
24
<210> 133
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 133
аССдаСддаа аСддСддСаа саса
<210> 134
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 134
11е Азр О1у Азп О1у О1у Азп ТИг 1 5
<210> 135
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 135
дсдададаСс ссдаССаСда ССссдСССдд дддааССаСс дСсссСССда сСас
<210> 136
<211> 18
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 136
А1а Агд Азр Рго Азр Туг Азр Зег Уа1 Тгр О1у Азп Туг Агд Рго РИе 1 5 10 15
Азр Туг
<210> 137
<211> 342
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 137
даСаССдСда СдасСсадСс СссадасСсс сСддсСдСдС сСсСдддсда дадддссасс аСсаасСдса адСссадсса дадСдССССа СссадсСсса асдаСаасаа сСасССадсС СддССссадс адааассадд асадссЬссС аассСасСса СССасСдддс аСссасссдд даССссдддд СсссСдассд аССсадСдсс адсдддСсСд ддасадаССС сасссСсдсс
54
60
120
180
240
- 60 028879
аЕсадсадсс ЕдсаддсЕда адаЕдЕддса дЕЕЕаЕЕасЕ дЕсассааЕа ЕЕаЕадЕЕсЕ 300 ссЕссдасдЕ Есддссаадд дассааддЕд дадаЕсааас да 342
<210> 138
<211> 114
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 138
Азр 1 11е Уа1 МеЕ ТЬг 5 О1п Зег Рго Азр Зег 10 Ьеи А1а Уа1 Зег Ьеи 15 О1у
О1и Агд А1а ТЬг 11е Азп Суз Ьуз Зег Зег О1п Зег Уа1 Ьеи Зег Зег
20 25 30
Зег Азп Азр Азп Азп Туг Ьеи А1а Тгр РЬе О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п
35 40 45
Рго Рго Азп Ьеи Ьеи 11е Туг Тгр А1а Зег ТЬг Агд Азр Зег О1у Уа1
50 55 60
Рго Азр Агд РЬе Зег А1а Зег О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи А1а
65 70 75 80
11е Зег Зег Ьеи О1п А1а О1и Азр Уа1 А1а Уа1 Туг Туг Суз Н1з О1п
85 90 95
Туг Туг Зег Зег Рго Рго ТЬг РЬе О1у О1п О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е
100 105 110
Ьуз Агд
<210> 139
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 139
сададЕдЕЕЕ ЕаЕссадсЕс саасдаЕаас аасЕас 36
<210> <211> <212> <213> 140 12 РКТ Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 140
О1п Зег Уа1 Ьеи Зег Зег Зег Азп Азр Азп Азп Туг
1 5 10
<210> 141
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 141
- 61 028879
СдддсаСсс
<210> 142
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 142
Тгр А1а Зег
1
<210> 143
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 143
сассааСаСС аСадССсСсс Сссдасд
27
<210> 144
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 144
Ηΐ3 О1п Туг Туг Зег Зег Рго Рго ТЬг 1 5
<210> 145
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 145
саддСдсадс СдсаддадСс дддсссадда сСддСдаадс сССсасадас ссСдСсссСс 60
ассСдсасСд СсСсСддСдд сСссаССаас адСддСддСС аССасСддад сСддаСссдс 120
садсасссад ддаадддссС ддадСддаСС дддСасаСсС сССасадСдд дааСассаас 180
СасаасссдС сссСсаадад СсдадССасс аСаСсадСад асасдСсСаа даассадССс 240
СсссСдасас СдассСсСдС дасСдссдсд дасасддссд СдСаССасСд Сдсдададас 300
адСдасдСдд аСасаддСсС ддССдаСддС СССдаСдСсС ддддссаадд аасааСддСс 360
ассдСсСсСС са 372
<210>
<211>
<212>
<213>
146
124
РКТ
Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
- 62 028879
<400> 146
О1п Уа1 О1п Ьеи О1п О1и Зег О1у Рго О1у Ьеи Уа1 Ьуз Рго Зег О1п
1 5 10 15
ТЪг Ьеи Зег Ьеи ТЪг Суз ТЪг Уа1 Зег О1у О1у Зег 11е Азп Зег О1у
20 25 30
О1у Туг Туг Тгр Зег Тгр 11е Агд О1п Нчз Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и
35 40 45
Тгр 11е О1у Туг 11е Зег Туг Зег О1у Азп ТЪг Азп Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ьеи Ьуз Зег Агд Уа1 ТЪг 11е Зег Уа1 Азр ТЪг Зег Ьуз Азп О1п РЪе
65 70 75 80
Зег Ьеи ТЪг Ьеи ТЪг Зег Уа1 ТЪг А1а А1а Азр ТЪг А1а Уа1 Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр Зег Азр Уа1 Азр ТЪг О1у Ьеи Уа1 Азр О1у РЪе Азр
100 105 110
Уа1 Тгр О1у О1п О1у ТЪг МеБ Уа1 ТЪг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 147
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 147
ддБддсБсса ББаасадБдд БддББаББас
30
<210> 148
<211> 10
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 148
О1у О1у Зег 11е Азп Зег О1у О1у Туг Туг 1 5 10
<210> 149
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 149
аБсБсББаса дБдддааБас с
<210> 150
<211> 7
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
21
- 63 028879
<400> 150
11е Зег Туг Зег О1у Азп ТНг 1 5
<210> 151
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 151
дсдададаса дкдасдкдда касаддкскд дккдакддкк ккдакдкс 48
<210> 152
<211> 16
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 152
А1а Агд Азр Зег Азр Уа1 Азр ТНг О1у Ьеи Уа1 Азр О1у РНе Азр Уа1
1 5 10 15
<210> 153
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 153
дакаккдкда кдасссадкс кссакскксс дкдкскдсак скдкаддада сададксасс 60
аксасккдсс дддсдадкса дддкдккадс адскддккад сскддкакса дсадааасса 120
дддааадссс ссаадсксск дакккакаск асакссадкк кдсааадкдд ддксссакса 180
аддкксадсд дсадкддакс кдддасадак кксаскскса ссаксадсад сскдсадсск 240
даддаккккд саасккаска ккдксаасад кскаасадкк ккссакксас ккксддссск 300
дддассаадд кддадаксаа а 321
<210> 154
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 154
Азр 1 11е Уа1 Мек ТНг 5 О1п Зег Рго Зег Зег 10 Уа1 Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Агд А1а Зег О1п О1у Уа1 Зег Зег Тгр
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг ТНг ТНг Зег Зег Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТНг Азр РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
- 64 028879
65 70 75 80
О1и Азр РИе А1а ТИг Туг Туг Суз О1п О1п Зег Азп Зег РИе Рго РИе
85 90 95
ТИг РИе О1у Рго О1у ТИг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 155
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 155
садддСдССа дсадсСдд
<210> 156
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 156
О1п О1у Уа1 Зег Зег
1 5
последовательность
последовательность
Тгр
18
<210> 157
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 157
асСасаСсс
<210> 158
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 158
ТИг ТИг Зег
1
последовательность
последовательность
<210> 159
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
- 65 028879
<400> 159
саасадЬсЬа асадЬЬЬЬсс аЬЬсасЬ 27
<210> 160
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 160
О1п О1п Зег Азп Зег РЬе Рго РЬе ТЬг 1 5
<210> 161
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 161
даддЬдсадс ЬддЬддадЬс Ьдддддаддс ЬЬддЬасадс сЬддддддЬс ссЬаадасЬс 60
ЬссЬдЬдсад ссЬсЬддаЬЬ сЬссдЬсадЬ ЬасЬасдаса ЬдсасЬдддЬ ссдссаадЬЬ 120
асаддаааад дЬсЬддадЬд ддЬсЬсадсЬ аЬЬддЬссЬд саддЬдасас аЬаЬЬассса 180
ддсЬссдЬда адддссдаЬЬ сассаЬсЬсс ададаадаЬд ссасдаасЬс сЬЬаЬаЬсЬЬ 240
саааЬасаса дссЬдддадс сддддасасд дсЬдЬдЬаЬЬ асЬдЬдсаад ададддддсЬ 300
аЬадсадсЬс дЬссддасда сЬасЬасддЬ аЬддасдЬсЬ ддддссаадд дассасддЬс 360
ассдЬсЬссЬ са 372
<210> 162
<211> 124
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 162
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе Зег Уа1 Зег Туг Туг
20 25 30
Азр МеЬ ΗΪ8 Тгр Уа1 Агд О1п Уа1 ТЬг О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег А1а 11е О1у Рго А1а О1у Азр ТЬг Туг Туг Рго О1у Зег Уа1 Ьуз
50 55 60
О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд О1и Азр А1а ТЬг Азп Зег Ьеи Туг Ьеи
65 70 75 80
О1п 11е ΗΪ8 Зег Ьеи О1у А1а О1у Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд О1и О1у А1а 11е А1а А1а Агд Рго Азр Азр Туг Туг О1у МеЬ Азр
100 105 110
Уа1 Тгр О1у О1п О1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 163 <211> 24 <212> ДНК
- 66 028879
<213> Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 163
ддаЕЕсЕссд ЕсадЕЕасЕа сдас 24
<210> <211> <212> <213> 164 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 164
О1у РИе Бег Уа1 Бег Туг Туг Азр
1 5
<210> <211> <212> <213> 165 21 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 165
аЕЕддЕссЕд саддЕдасас а 21
<210> <211> <212> <213> 166 7 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 166
11е О1у Рго А1а О1у Азр ТИг 1 5
<210> <211> <212> <213> 167 54 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 167
дсаадададд дддсЕаЕадс адсЕсдЕссд дасдасЕасЕ асддЕаЕдда сдЕс 54
<210> <211> <212> <213> 168 18 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
- 67 028879
<400> 168
А1а Агд О1и О1у А1а 11е А1а А1а Агд Рго Азр Азр Туг Туг О1у МеС 1 5 10 15
Азр Уа1
<210> 169
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 169
дасаСссадС СдасссадСс СссаСссССс сСдСсСдсаС сСдСаддада сададСсасс 60
аСсасССдсС дддссадСса ддасаССадс адССаСССад ссСддСаСса дсааааасса 120
дддааадссс сСаадсСссС даСсСаСдсС дсаСссасСС СдсааадСдд ддСсссаСса 180
аддССсадсд дсадСддаСс Сдддасадаа ССсасСсСса сааСсадсад ссСдсадссС 240
даадаССССд саасССаССа сСдСсаасаа сССааСадСС асссдсСсас СССсддсдда 300
дддассаадд СддадаСсаа асда 324
<210> 170
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 170
Азр 1 11е О1п Ьеи ТЬг 5 О1п Бег Рго Бег РЬе 10 Ьеи Бег А1а Бег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Тгр А1а Бег О1п Азр 11е Бег Бег Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Бег ТЬг Ьеи О1п Бег О1у Уа1 Рго Бег Агд РЬе Бег О1у
50 55 60
Бег О1у Бег О1у ТЬг О1и РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Бег Бег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз О1п О1п Ьеи Азп Бег Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 171
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 171
саддасаССа дсадССаС 18
<210> 172 <211> 6 <212> РКТ
- 68 028879
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 172
О1п Азр 11е Бег Бег Туг
<210> 173
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 173
дсЬдсаЬсс
<210> 174
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 174
А1а А1а Бег
1
<210> 175
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 175
саасаасЬЬа аЬадЬЬассс дсЬсасЬ
27
<210> 176
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 176
О1п О1п Ьеи Азп Бег Туг Рго Ьеи ТЬг
<210> 177
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
- 69 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 177
даддЕдсадс ЕддЕддадЕс Едддддаддс ЕЕддЕасадс сЕддсаддЕс ссЕдадасЕс 60
ЕссЕдЕдсад ссЕсЕддаЕЕ сассЕЕЕддЕ даЕЕаЕдсса ЕдсасЕдддЕ ссддсаадсЕ 120
ссадддаадд дссЕддадЕд ддЕсЕсаддЕ аЕЕааЕЕЕда аЕадЕддсас саЕаддсЕаЕ 180
дсддасЕсЕд Едаадддссд аЕЕсассаЕЕ Есаададаса асдссаадаа сЕсссЕдЕаЕ 240
сЕдсаааЕда асадЕсЕдад адсЕдаддас асддссЕЕсЕ аЕЕасЕдЕдс аааадаЕаЕа 300
дасддсЕасЕ аЕсасЕасдс ЕаЕддасдЕс Еддддссаад ддассасддЕ сассдЕсЕсс 360
Еса 363
<210> 178
<211> 121
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 178
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго О1у Агд
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЪе ТЪг РЪе О1у Азр Туг
20 25 30
А1а МеЕ Н1з Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег О1у 11е Азп Ьеи Азп Зег О1у ТЪг 11е О1у Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЪе ТЪг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЕ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЪг А1а РЪе Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Ьуз Азр 11е Азр О1у Туг Туг Н1з Туг А1а МеЕ Азр Уа1 Тгр О1у
100 105 110
О1п О1у ТЪг ТЪг Уа1 ТЪг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 179
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 179
ддаЕЕсассЕ ЕЕддЕдаЕЕа Едсс 24
<210> 180
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 180
О1у РНе ТЪг РЪе О1у Азр Туг А1а 1 5
- 70 028879
24
<210> 181
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 181
аббаабббда абадбддсас саба
<210> 182
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 182
11е Азп Ьеи Азп Зег О1у ТЪг 11е 1 5
<210> 183
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 183
дсаааадаба бадасддсба сбабсасбас дсбабддасд бс
42
<210> 184
<211> 14
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 184
А1а Ьуз Азр 11е Азр О1у Туг Туг Н1з Туг А1а Меб Азр Уа1 1 5 10
<210> 185
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 185
дасабссадб бдасссадбс бссабссббс сбдбсбдсаб сбдбаддада сададбсасс 60
абсасббдсб дддссадбса дддсаббадс адббабббад ссбддбабса дсааааасса 120
дддааадссс сбааасбссб дабсбабдаб дсабссасбб бддааадбдд ддбсссабса 180
аддббсадсд дсадбддабс бдддасадаа ббсасбсбса саабсадсаа ссбдсадссб 240
даадаббббд саасббабба сбдбсаасад дббаабадбб асссбсбсас бббсддсдда 300
дддассаадд бддааабсаа асда 324
- 71 028879
<210> 186
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 186
Азр 1 Уа1 Уа1 МеЕ ТИг 5 О1п Бег Рго Бег РИе 10 Ьеи Бег А1а Бег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТИг 11е ТИг Суз Тгр А1а Бег О1п О1у 11е Бег Бег Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Бег ТИг Ьеи О1и Бег О1у Уа1 Рго Бег Агд РИе Бег О1у
50 55 60
Бег О1у Бег О1у ТИг О1и РИе ТИг Ьеи ТИг 11е Бег Азп Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РИе А1а ТИг Туг Туг Суз О1п О1п Уа1 Азп Бег Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТИг РИе О1у О1у О1у ТИг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 187
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 187
садддсаЕЕа дсадЕЕаЕ
<210> 188
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
18
<400> 188
О1п О1у 11е Бег Бег Туг 1 5
<210> 189
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 189 даЕдсаЕсс
<210> 190 <211> 3
9
- 72 028879
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 190
Азр А1а Бег
1
<210> 191
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 191
саасаддЬЬа аЬадЬЬассс ЬсЬсасЬ 27
<210> 192
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 192
О1п О1п Уа1 Азп Бег Туг Рго Ьеи ТЬг 1 5
<210> 193
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 193
саддЬдсадс ЬддЬддадЬс Ьдддддаддс дЬддЬссадс сЬдддаддЬс ссЬдадасЬс 60
ЬссЬдЬдсад сдЬсЬддаЬЬ сассЬЬсаЬЬ аасЬаЬддса ЬасаЬЬдддЬ ссдссадддЬ 120
ссаддсаадд ддсЬддадЬд ддЬддсадЬЬ аЬаЬддЬаЬд аЬддаадЬаа ЬдааЬддЬаЬ 180
дсадасЬссд Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададаса аЬЬссаадаа сасддЬдЬаЬ 240
сЬддаааЬда аЬааасЬдад адссдаддас асддсЬдЬдЬ аЬЬасЬдЬдс дададаадаа 300
даддасЬасд дЬаЬддасдЬ сЬддддЬсаа дддассасдд ЬсассдЬсЬс сЬса 354
<210> 194
<211> 118
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 194
О1п Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Бег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 О1п Рго О1у Агд
1 5 10 15
Бег Ьеи Агд Ьеи Бег Суз А1а А1а Бег О1у РЬе ТЬг РЬе 11е Азп Туг
- 7З 028879
20 25 30
О1у 11е Н1з Тгр Уа1 Агд О1п О1у Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а Уа1 11е Тгр Туг Азр О1у Зег Азп О1и Тгр Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТЬг Уа1 Туг
65 70 75 80
Ьеи О1и МеС Азп Ьуз Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд О1и О1и О1и Азр Туг О1у МеС Азр Уа1 Тгр О1у О1п О1у ТЬг
100 105 110
ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115
<210> 195
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 195
ддаССсассС СсаССаасСа Сддс
<210> 196
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 196
О1у РЬе ТЬг РЬе 11е Азп Туг О1у 1 5
<210> 197
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 197
аСаСддСаСд аСддаадСаа Сдаа
24
24
<210> 198
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 198
11е Тгр Туг Азр О1у Зег Азп О1и 1 5
- 74 028879
<210> 199
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 199
дсдададаад аададдасСа сддСаСддас дСс 33
<210> 200
<211> 11
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 200
А1а Агд О1и О1и О1и Азр Туг О1у МеС Азр Уа1
1 5 10
<210> 201
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 201
дасаСссада СдасссадСс СссадасСсс сСддсСдСдС сСсСдддсда дадддссдсс 60
аСсаасСдса адСссадсса дадСдССССа СасаСсСсса асааСаасаа сСасССадсС 120
СддСассадс адааассадд асадссдссС аадсСссСса СССасСдддс аСссасссдд 180
дааСссдддд СсссСдассд аССсадСддс адсдддСсСд ддасадаССС сасСсСсасс 240
аСсадсадсс СдсаддсСда адаСдСддсС аСССаССасС дСсаасааСа ССаСадССсС 300
ссСссдасдС Ссддссаадд дассааадСд даСаСсааа 339
<210> 202
<211> 113
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 202
Азр 1 11е О1п МеС ТИг 5 О1п Зег Рго Азр Зег 10 Ьеи А1а Уа1 Зег Ьеи 15 О1у
О1и Агд А1а А1а 11е Азп Суз Ьуз Зег Зег О1п Зег Уа1 Ьеи Туг 11е
20 25 30
Зег Азп Азп Азп Азп Туг Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п
35 40 45
Рго Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е Туг Тгр А1а Зег ТИг Агд О1и Зег О1у Уа1
50 55 60
Рго Азр Агд РИе Зег О1у Зег О1у Зег О1у ТИг Азр РИе ТИг Ьеи ТИг
65 70 75 80
11е Зег Зег Ьеи О1п А1а О1и Азр Уа1 А1а 11е Туг Туг Суз О1п О1п
85 90 95
Туг Туг Зег Зег Рго Рго ТИг РИе О1у О1п О1у ТИг Ьуз Уа1 Азр 11е
100 105 110
- 75 028879
Ьуз
<210> 203
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 203
сададЕдЕЕЕ ЕаЕасаЕсЕс саасааЕаас аасЕас
36
<210>
<211>
<212>
<213>
204
12
РКТ
Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 204
О1п Зег Уа1 Ьеи Туг 1 5
11е Зег Азп Азп Азп Азп Туг 10
<210> 205
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 205 ЕдддсаЕсс
<210> 206
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 206 Тгр А1а Зег
1
<210> 207
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 207
саасааЕаЕЕ аЕадЕЕсЕсс Ессдасд
27
- 76 028879
<210> 208
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 208
О1п О1п Туг Туг Зег Зег Рго Рго ТЬг 1 5
<210> 209
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 209
саддЕдсадс ЕддЕддадЕс Едддддаддс ЕЕддЕЕаадс сЕддадддЕс ссЕдадасЕс 60
ЕссЕдЕдсад ссЕсЕддаЕЕ сассЕЕсадЕ дасЕЕсааса ЕдддсЕддаЕ ссдссаддсЕ 120
ссадддаадд ддсЕддадЕд ддЕЕЕсасас аЕЕадЕддЕа дЕддЕааЕдЕ саЕЕЕасЕас 180
дсадасЕсЕд Едаадддссд аЕЕсдссаЕс Ессадддаса асддсаадаа сЕсасЕдЕаЕ 240
сЕдсаадЕда асадссЕдад адссдаддас асддссдЕдЕ аЕЕасЕдЕдс дададаЕаЕс 300
ддЕдасЕссд аЕдсдЕЕЕда ЕаЕсЕддддс саадддасаа ЕддЕсассдЕ сЕсЕЕса 357
<210> 210
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 210
О1п Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 Ьуз Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Азр РЬе
20 25 30
Азп МеЕ О1у Тгр 11е Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Нтз 11е Зег О1у Зег О1у Азп Уа1 11е Туг Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе А1а 11е Зег Агд Азр Азп О1у Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п Уа1 Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр 11е О1у Азр Зег Азр А1а РЬе Азр 11е Тгр О1у О1п О1у
100 105 110
ТЬг МеЕ Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115
<210> 211
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
- 77 028879
<400> 211
ддаССсассС СсадСдасСС саас 24
<210> <211> <212> <213> 212 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 212
О1у РИе ТИг РИе Зег Азр РИе Азп
1 5
<210> <211> <212> <213> 213 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 213
аССадСддСа дСддСааСдС саСС 24
<210> <211> <212> <213> 214 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 214
11е Зег О1у Зег О1у Азп Уа1 11е
1 5
<210> <211> <212> <213> 215 36 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 215
дсдададаСа СсддСдасСс сдаСдсдССС даСаСс 36
<210> <211> <212> <213> 216 12 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 216
А1а Агд Азр 11е О1у Азр Зег Азр А1а РИе Азр 11е
1 5 10
- 78 028879
<210> 217
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 217
дасаСссадС СдасссадСс СссаСссССс сСдСсСдсаС сСдСаддада сададСсасс 60
аСсасССдсС дддссадСса ддасаССадс адССаСССад ссСддСаСса дсааааасса 120
дддааадссс сСаадсСссС даСсСаСддС дсаСссасСС СддааадСдд ддСсссаСса 180
аддССсадсд дсадСддаСс Сдддасадаа ССсасСсСса сааСсадсад ссСдсадссС 240
даадаСдССд саасССаССа сСдСсаасад сССааСасСС асссдсСсас СССсддсдда 300
дддассаадд СддадаСсаа асда 324
<210> 218
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 218
Азр 1 11е О1п Ьеи ТЬг 5 О1п Зег Рго Зег РЬе 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Тгр А1а Зег О1п Азр 11е Зег Зег Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг О1у А1а Зег ТЬг Ьеи О1и Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг О1и РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр Уа1 А1а ТЬг Туг Туг Суз О1п О1п Ьеи Азп ТЬг Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 219
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 219
саддасаССа дсадССаС
<210> 220
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 220
18
- 79 028879
О1п Азр 11е Зег Зег Туг 1 5
<210> 221
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 221
ддбдсабсс
<210> 222
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 222
О1у А1а Зег 1
<210> 223
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 223
саасадсбба абасббассс дсбсасб
27
<210> 224
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 224
О1п О1п Ьеи Азп ТЪг Туг Рго Ьеи ТЪг 1 5
<210> 225
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 225
даддбдсадс бддбддадбс бдддддаддс ббддбасабс сбддсаддбс ссбдадасбс 60 бссбдбдсад ссбсбддабб бассбббдаб даббабдсса бдсасбдддб ссддсаабсб 120
- 80 028879
ссадддаадд дссЕддадЕд ддЕсЕсаддЕ аЕЕадЕЕдда аЕадЕдЕЕаЕ сааасасЕсЕ 180
асддасЕсЕд Едаддддссд аЕЕсассаЕс Ессададаса асдссаадаа сЕсссЕдЕаЕ 240
сЕдсаааЕда асадЕсЕдаа ассЕдаддас асддссЕЕЕЕ аЕЕасЕдЕдс аааддаЕдад 300
даЕдасЕдда асЕассЕЕда сЕасЕддддс садддаассс ЕддЕсассдЕ сЕссЕса 357
<210> 226
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 226
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 Н1з Рго О1у Агд
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе Азр Азр Туг
20 25 30
А1а МеЕ Н1з Тгр Уа1 Агд О1п Зег Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег О1у 11е Зег Тгр Азп Зег Уа1 11е Ьуз Н1з Зег ТЬг Азр Зег Уа1
50 55 60
Агд О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЕ Азп Зег Ьеи Ьуз Рго О1и Азр ТЬг А1а РЬе Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Ьуз Азр О1и Азр Азр Тгр Азп Туг Ьеи Азр Туг Тгр О1у О1п О1у
100 105 110
ТЬг Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115
<210> 227
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 227
ддаЕЕЕассЕ ЕЕдаЕдаЕЕа Едсс 24
<210> 228
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 228
О1у РЬе ТЬг РЬе Азр Азр Туг А1а 1 5
<210> 229
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
- 81 028879
24
<400> 229
аЕЕадЕЕдда аЕадЕдЕЕаЕ сааа
<210> 230
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 230
11е Зег Тгр Азп Зег Уа1 11е Ьуз 1 5
<210> 231
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 231
дсаааддаЕд аддаЕдасЕд даасЕассЕЕ дасЕас
36
<210> 232
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 232
А1а Ьуз Азр О1и Азр Азр Тгр Азп Туг Ьеи Азр Туг 1 5 10
<210> 233
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 233
дасаЕссада ЕдасссадЕс ЕссаЕсЕЕсс дЕдЕсЕдсаЕ сЕдЕаддада сададЕсасс 60
аЕсасЕЕдЕс дддсдадЕса ддаЕаЕЕаас адсЕддЕЕад ссЕддЕаЕса дсадааасса 120
дддааадссс сЕааасЕссЕ даЕсЕаЕасЕ ЕсаЕссааЕЕ ЕдсааадЕдд ддЕсссаЕса 180
адаЕЕсадсд дсадЕдддЕс ЕдддасадаЕ ЕЕсасЕсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадссЕ 240
даадаЕЕЕЕд саасЕЕасЕа ЕЕдЕсаасад ЕсЕдасадЕЕ ЕсссаЕЕсас ЕЕЕсддсссЕ 300
дддассааад ЕддаЕаЕсаа асда 324
<210>
<211>
<212>
<213>
234
108
РКТ
Искусственная последовательность
<220>
- 82 028879
<223> Синтетический
<400> 234
Азр 1 11е О1п Мек ТНг 5 О1п Зег Рго Зег Зег Уа1 10 Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Агд А1а Зег О1п Азр 11е Азп Зег Тгр
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг ТНг Зег Зег Азп Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТНг Азр РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз О1п О1п Зег Азр Зег РНе Рго РНе
85 90 95
ТНг РНе О1у Рго О1у ТНг Ьуз Уа1 Азр 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 235
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 235
саддакакка асадскдд
18
<210> 236
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 236
О1п Азр 11е Азп Зег Тгр 1 5
<210> 237
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 237 аскксаксс
<210> 238
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 238
9
- 83 028879
ТЬг Бег Бег
1
<210> 239
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 239
саасадЬсЬд асадЬЬЬссс аЬЬсасЬ 27
<210> 240
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 240
О1п О1п Бег Азр Бег РЬе Рго РЬе ТЬг 1 5
<210> 241
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 241
саддЬдсадс ЬддЬддадЬс Ьдддддаддс дЬддЬссадс сЬдддаддЬс ссЬдадасЬс 60
ЬссЬдЬдсад сдЬсЬддаЬЬ сассЬЬЬадЬ аасЬаЬддса ЬдсасЬдддЬ ссдссаддсЬ 120
ссаддсаадд ддсЬддадЬд ддЬддсасдЬ аЬаЬддЬаЬд аЬддаадЬаа ЬаадЬасЬаЬ 180
дсадасЬссд Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададаса дЬЬссаадаа сасдсЬдЬаЬ 240
сЬдсаааЬда асадссЬдад адссдаддас асддсЬдЬдЬ аЬЬасЬдЬдс дадададддд 300
дадсадаасс ЬддасЬаЬЬа сссЬЬЬадас дЬсЬддддсс аадддассас ддЬсассдЬс 360
ЬссЬса 366
<210> 242
<211> 122
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 242
О1п Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Бег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 О1п Рго О1у Агд
1 5 10 15
Бег Ьеи Агд Ьеи Бег Суз А1а А1а Бег О1у РЬе ТЬг РЬе Бег Азп Туг
20 25 30
О1у МеЬ Нчз Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а Агд 11е Тгр Туг Азр О1у Бег Азп Ьуз Туг Туг А1а Азр Бег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Бег Агд Азр Бег Бег Ьуз Азп ТЬг Ьеи Туг
- 84 028879
65 70 75 80
Ьеи Ο1η МеЕ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЪг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд О1и О1у О1и Ο1η Азп Ьеи Азр Туг Туг Рго Ьеи Азр Уа1 Тгр
100 105 110
О1у Ο1η О1у ТЪг ТЪг Уа1 ТЪг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 243
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 243
ддаЕЕсассЕ ЕЕадЕаасЕа Еддс
<210> <211> <212> <213> 244 8 РКТ Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 244
О1у РЪе ТЪг РЪе Зег Азп Туг О1у
1 5
<210> 245
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 245
аЕаЕддЕаЕд аЕддаадЕаа Еаад
24
24
<210> <211> <212> <213> 246 8 РКТ Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 246
11е Тгр Туг Азр О1у Зег Азп Ьуз
1 5
<210> 247
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 85 028879
<223> Синтетический
<400> 247
дсдадададд дддадсадаа ссСддасСаС СасссСССад асдСс 45
<210> 248
<211> 15
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 248
А1а Агд О1и О1у О1и О1п Азп Ьеи Азр Туг Туг Рго Ьеи Азр Уа1 1 5 10 15
<210> 249
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 249
дасаСсдСда СдасссадСс СссаСссСсс сСдСсСдсаС сСдССддада сададСсасс 60
аСсасССдсс дддсаадСса ддасаССада ааСдаСССад дсСддСаСса асадааасса 120
дддааадссс сСаадсСссС даСсСаСдсС дсаСссадСС СасааасСдд ддСсссаСса 180
аддССсадсд дсадСдСаСс СддсасадаС ССсасСсСса ссаСсадсад ссСдсадссС 240
даадаССССд саасССаССа сСдСсСасаа даССасасСС асссСсСсас СССсддсдда 300
дддассаадд СддадаСсаа а 321
<210> 250
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 250
Азр 1 11е Уа1 МеС ТИг 5 О1п Зег Рго Зег Зег 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТИг 11е ТИг Суз Агд А1а Зег О1п Азр 11е Агд Азп Азр
20 25 30
Ьеи О1у Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи О1п ТИг О1у Уа1 Рго Зег Агд РИе Зег О1у
50 55 60
Зег Уа1 Зег О1у ТИг Азр РИе ТИг Ьеи ТИг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РИе А1а ТИг Туг Туг Суз Ьеи О1п Азр Туг ТИг Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТИг РИе О1у О1у О1у ТИг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 251
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
- 86 028879
18
<220>
<223> Синтетический
<400> 251
саддасаББа даааБдаБ
<210> 252
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 252
О1п Азр 11е Агд Азп Азр 1 5
<210> <211> <212> <213> 253 9 ДНК Искусственная
<220> <223> Синтетический
<400> 253
дсБдсаБсс
последовательность
<210> 254
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 254 А1а А1а Зег
1
<210> 255
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 255
сБасаадаББ асасББассс БсБсасБ
<210> 256
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
27
- 87 028879
<400> 256
Ьеи О1п Азр Туг ТЪг Туг Рго Ьеи ТЪг 1 5
<210> 257
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 257
саддбдсадс бддбдсадбс бддадсбдад дбдаадаадс сбддддссбс адбдааддбс 60
бссбдсаадд сббсбддбба сассбббасс адабабддба бсадсбдддб дсдасаддсс 120
ссбддасбад ддсббдадбд дабдддсбдд абсадсдсбб асдабддаба сасааасббб 180
дсасадаадб бссадддсад аббсассабд ассасадаса сабссасдаа сасадссбас 240
абддаасбда ддддссбдад абсбдасдас асддссдбдб аббасбдбдс дадададдад 300
даддабдсбд сббббдабаб сбддддссаа дддасаабдд бсассдбсбс ббса 354
<210> 258
<211> 118
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 258
О1п Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1п Зег О1у А1а О1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго О1у А1а
1 5 10 15
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег О1у Туг ТЪг РЪе ТЪг Агд Туг
20 25 30
О1у 11е Зег Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьеи О1у Ьеи О1и Тгр Меб
35 40 45
О1у Тгр 11е Зег А1а Туг Азр О1у Туг ТЪг Азп РЪе А1а О1п Ьуз РЪе
50 55 60
О1п О1у Агд РЪе ТЪг Меб ТЪг ТЪг Азр ТЪг Зег ТЪг Азп ТЪг А1а Туг
65 70 75 80
Меб О1и Ьеи Агд О1у Ьеи Агд Зег Азр Азр ТЪг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд О1и О1и О1и Азр А1а А1а РЪе Азр 11е Тгр О1у О1п О1у ТЪг
100 105 110
Меб Уа1 ТЪг Уа1 Зег Зег
115
<210> 259
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 259
ддббасассб ббассадаба бддб 24
<210> 260
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
- 88 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 260
О1у Туг ТЪг РНе ТЪг Агд Туг О1у 1 5
<210> <211> <212> <213> 261 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 261
аЕсадсдсЕЕ асдаЕддаЕа саса 24
<210> <211> <212> <213> 262 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 262
11е Зег А1а Туг Азр О1у Туг ТЪг
1 5
<210> <211> <212> <213> 263 33 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 263
дсдадададд аддаддаЕдс ЕдсЕЕЕЕдаЕ аЕс 33
<210> <211> <212> <213> 264 11 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 264
А1а Агд О1и О1и О1и Азр А1а А1а РЪе Азр 11е 1 5 10
<210> <211> <212> <213> 265 342 ДНК Искусственная последовательность
<220>
- 89 028879
<223> Синтетический
<400> 265
дасаСсдСда СдасссадСс СссадасСсс сСадаСдСдс сСсСдддсда дадддссасс 60
аСсаасСдса адСссадсса дадСаССССа ССсддсСсса асааСааааа сСасССадсС 120
СддСассадс адаааСсадд асадссСсса аадсСдсСса СССасСдддс аСсСасссдд 180
дааСссдддд СсссСдассд аССсадСддс адсдддСсСд ддасадаССС сасСсСсасс 240
аСсадсадсс СдсаддсСда адаСдСддса дСССаССасС дСсадсааСа ССаСадСасС 300
ссСсасасСС ССддссаддд дассаадсСд дадаСсааас да 342
<210> 266
<211> 114
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 266
Азр 11е Уа1 МеС ТЬг О1п Бег Рго Азр Бег Ьеи Азр Уа1 Рго Ьеи О1у
1 5 10 15
О1и Агд А1а ТЬг 11е Азп Суз Ьуз Бег Бег О1п Бег 11е Ьеи РЬе О1у
20 25 30
Бег Азп Азп Ьуз Азп Туг Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Бег О1у О1п
35 40 45
Рго Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е Туг Тгр А1а Бег ТЬг Агд О1и Бег О1у Уа1
50 55 60
Рго Азр Агд РЬе Бег О1у Бег О1у Бег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг
65 70 75 80
11е Бег Бег Ьеи О1п А1а О1и Азр Уа1 А1а Уа1 Туг Туг Суз О1п О1п
85 90 95
Туг Туг Бег ТЬг Рго НФз ТЬг РЬе О1у О1п О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е
100 105 110
Ьуз Агд
<210> <211> <212> <213> 267 36 ДНК Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 267
сададСаССС СаССсддсСс саасааСааа аасСас 36
<210> 268
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 268
О1п Бег 11е Ьеи РНе О1у Бег Азп Азп Ьуз Азп Туг
1 5 10
<210> 269 <211> 9
- 90 028879
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 269
ЕдддсаЕсЕ 9
<210> 270
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 270
Тгр А1а Бег 1
<210> 271
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 271
садсааЕаЕЕ аЕадЕасЕсс ЕсасасЕ 27
<210> 272
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 272
О1п О1п Туг Туг Бег ТИг Рго Н1з ТИг 1 5
<210> 273
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 273
саддЕдсадс ЕдсаддадЕс дддсссадда сЕдаЕЕаасс сЕЕсасадас ссЕдЕссдЕс 60
ассЕдсасЕд ЕсЕсЕддЕдд сЕссаЕсадс адЕддЕддЕЕ аЕЕаЕЕддас сЕддаЕасдс 120
садсасссад дааадддссЕ ддадЕддаЕЕ дддЕасаЕсЕ сЕЕасадЕдд даасассаас 180
ЕаЕааЕссдЕ сссЕсаадад ЕсдадЕЕасс аЕаЕсадЕад асасддсЕаа даассадЕЕс 240
ЕсссЕдаадс ЕдадсЕсЕдЕ дасЕдссдсд дасасддссд ЕсЕасЕЕсЕд Едсдададас 300
адЕдасдЕдд асасадсЕаЕ ддЕЕдаЕддЕ аЕЕдаЕаЕсЕ ддддссаадд дасааЕддЕс 360
ассдЕсЕсЕЕ са 372
- 91 028879
<210> 274
<211> 124
<212> РКТ
<213> Искусственная
последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 274
О1п Уа1 О1п Ьеи О1п О1и Зег О1у Рго О1у Ьеи 11е Азп Рго Зег О1п
1 5 10 15
ТЪг Ьеи Зег Уа1 ТЪг Суз ТЪг Уа1 Зег О1у О1у Зег 11е Зег Зег О1у
20 25 30
О1у Туг Туг Тгр ТЪг Тгр 11е Агд О1п Нчз Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и
35 40 45
Тгр 11е О1у Туг 11е Зег Туг Зег О1у Азп ТЪг Азп Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ьеи Ьуз Зег Агд Уа1 ТЪг 11е Зег Уа1 Азр ТЪг А1а Ьуз Азп О1п РЪе
65 70 75 80
Зег Ьеи Ьуз Ьеи Зег Зег Уа1 ТЪг А1а А1а Азр ТЪг А1а Уа1 Туг РЪе
85 90 95
Суз А1а Агд Азр Зег Азр Уа1 Азр ТЪг А1а МеБ Уа1 Азр О1у 11е Азр
100 105 110
11е Тгр О1у О1п О1у ТЪг МеБ Уа1 ТЪг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 275
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 275
ддБддсБсса БсадсадБдд БддББаББаБ
30
<210> 276
<211> 10
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 276
О1у О1у Зег 11е Зег Зег О1у О1у Туг Туг 1 5 10
<210> 277
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 277
аБсБсББаса дБдддаасас с
<210> 278
21
- 92 028879
<211> 7
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 278
11е Зег Туг Зег О1у Азп ТЪг 1 5
<210> 279
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 279
дсдададаса дЕдасдЕдда сасадсЕаЕд дЕЕдаЕддЕа ЕЕдаЕаЕс 48
<210> 280
<211> 16
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 280
А1а Агд Азр Зег Азр Уа1 Азр ТЪг А1а МеЕ Уа1 Азр О1у 11е Азр 11е
1 5 10 15
<210> 281
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 281
дасаЕссада ЕдасссадЕс ЕссаЕсЕЕсс дЕдЕсЕдсаЕ сЕдЕаддада сададЕсасс 60
аЕсасЕЕдЕс дддсдадЕса ддаЕаЕЕадс адсЕддЕЕад ссЕддЕаЕса дсадааассд 120
дддададссс сЕааасЕссЕ даЕсЕаЕасЕ дсаЕссадЕЕ ЕасааадЕдд ддЕсссаЕса 180
аддЕЕсадсд дсадЕддаЕс ЕдддасадаЕ ЕЕсасЕсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадссЕ 240
даадаЕЕЕЕд саасЕЕасЕЕ ЕЕдЕсаасад дсЕаасадЕЕ ЕсссаЕЕсас ЕЕЕсддсссЕ 300
дддассааад ЕддаЕаЕсаа асда 324
<210> 282
<211> 108
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 282
Азр 11е О1п МеЕ ТЪг О1п Зег Рго Зег Зег Уа1 Зег А1а Зег Уа1 О1у
1 5 10 15
- 93 028879
Азр Агд Уа1 ТЬг 20 11е ТЬг Суз Агд А1а 25 Зег О1п Азр 11е Зег 30 Зег Тгр
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Агд А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг ТЬг А1а Зег Зег Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг РЬе Суз О1п О1п А1а Азп Зег РЬе Рго РЬе
85 90 95
ТЬг РЬе О1у Рго О1у ТЬг Ьуз Уа1 Азр 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 283
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 283
саддаСаССа дсадсСдд
18
<210> 284
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 284
О1п Азр 11е Зег Зег Тгр 1 5
<210> 285
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 285 асСдсаСсс
<210> 286
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 286 ТЬг А1а Зег
1
<210> 287
- 94 028879
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 287
саасаддсЬа асадЬЬЬссс аЬЬсасЬ 27
<210> 288
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 288
О1п О1п А1а Азп Зег РЬе Рго РЬе ТЬг 1 5
<210> 289
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 289
даддЬдсадс ЬдЬЬддадЬс Ьдддддаддс ЬЬддЬасадс сдддддддЬс ссЬдадасЬс 60
ЬссЬдЬдЬад ссЬсЬддаЬЬ сассЬЬсадс адЬЬЬЬдсса ЬдадЬЬдддЬ ссдссаддсЬ 120
ссадддаадд ддсЬддадЬд ддЬсЬсадЬс аЬЬадЬддЬа дЬддЬддсад сасаааЬсас 180
дсадасЬссд Ьдаддддссд дЬЬсассаЬс Ьссададаса аЬЬсссЬдаа сасддЬдЬаЬ 240
сЬасаааЬдс асадЬсЬдад адссдаддаЬ асддссЬЬаЬ аЬЬасЬдЬдЬ дааадсддад 300
ассадсЬсЬЬ ссЬасЬЬсЬа сЬасддЬаЬд дасдЬсЬддд дссаадддас сасддЬсасс 360
дЬсЬссЬса 369
<210> 290
<211> 123
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 290
О1и Уа1 О1п Ьеи Ьеи О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз Уа1 А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Зег РЬе
20 25 30
А1а МеЬ Зег Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Уа1 11е Зег О1у Зег О1у О1у Зег ТЬг Азп Н1з А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Агд О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп Зег Ьеи Азп ТЬг Уа1 Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЬ Н1з Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Ьеи Туг Туг Суз
85 90 95
Уа1 Ьуз А1а О1и ТЬг Зег Зег Зег Туг РЬе Туг Туг О1у МеЬ Азр Уа1
100 105 110
- 95 028879
Тгр О1у О1п О1у ТИг ТИг Уа1 ТИг Уа1 Зег Зег 115 120
<210> <211> <212> <213> 291 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 291
ддаССсассС СсадсадССС Сдсс 24
<210> <211> <212> <213> 292 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 292
О1у РИе ТИг РИе Зег Зег РИе А1а
1 5
<210> <211> <212> <213> 293 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 293
аССадСддСа дСддСддсад саса 24
<210> <211> <212> <213> 294 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 294
11е Зег О1у Зег О1у О1у Зег ТИг
1 5
<210> <211> <212> <213> 295 48 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 295
дСдааадсдд адассадсСс ССссСасССс СасСасддСа СддасдСс 48
- 96 028879
<210> 296
<211> 16
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 296
Уа1 Ьуз А1а О1и ТЪг Зег Зег Зег Туг РЪе Туг Туг О1у МеЕ Азр Уа1 1 5 10 15
<210> 297
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 297
дасаЕссадЕ ЕдасссадЕс ЕссаЕссЕЕс сЕдЕсЕдсаЕ сЕдЕаддада сададЕсасс 60
аЕсасЕЕдсЕ дддссадЕса ддасаЕЕадс адЕЕаЕЕЕад ссЕддЕаЕса дсааааасса 120
дддааадЕсс сЕаассЕссЕ даЕсЕаЕддЕ дсаЕссЕсЕЕ ЕдсаассЕдд ддЕсссаЕса 180
сддЕЕсадсд дсадЕддаЕс Едддасадаа ЕЕсасЕсЕса сааЕсадсад ссЕдсадссЕ 240
даадаЕЕЕЕд саасЕЕаЕЕа сЕдЕсаасад ЕЕаааЕааЕЕ ассссасЕЕЕ сддсддаддд 300
ассаадсЕдд адаЕсааасд а 321
<210> 298
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 298
Азр 1 11е Ο1η Ьеи ТЪг 5 Ο1η Зег Рго Зег РЪе 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТЪг 11е ТЪг Суз Тгр А1а Зег Ο1η Азр 11е Зег Зег Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг Ο1η Ο1η Ьуз Рго О1у Ьуз Уа1 Рго Азп Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг О1у А1а Зег Зег Ьеи Ο1η Рго О1у Уа1 Рго Зег Агд РЪе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЪг О1и РЪе ТЪг Ьеи ТЪг 11е Зег Зег Ьеи Ο1η Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЪе А1а ТЪг Туг Туг Суз Ο1η Ο1η Ьеи Азп Азп Туг Рго ТЪг
85 90 95
РЪе О1у О1у О1у ТЪг Ьуз Ьеи О1и 11е Ьуз Агд
100 105
<210> 299
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 299
- 97 028879
саддасаЕЕа дсадЕЕаЕ
<210> 300
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 300
О1п Азр 11е Зег Зег Туг 1 5
<210> 301
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 301 ддЕдсаЕсс
<210> 302
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 302 О1у А1а Зег
1
<210> 303
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 303
саасадЕЕаа аЕааЕЕассс сасЕ
18
24
<210> 304
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 304
О1п О1п Ьеи Азп Азп Туг Рго ТЪг 1 5
- 98 028879
<210> 305
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 305
даадСдсадс СддСддадСс СдддддаддС дСддСасддс сСддддддСс ссСдадасСс 60
СссСдСдсад ссСсСддаСС сассСССдаС даССаСдсса СдсасСдддС ссддсаадсС 120
ссадддаадд дссСддадСд ддСсдсаддс аССадССдда аСадСддСад СаСадасСаС 180
дсддасСсСд Сдаадддссд аССсассаСС Сссададаса асдссааааа сСсссСдСаС 240
сСдсаааСда асадСсСдсд адсСддддас асддссССдС аССасСдСдс аааадаСаСС 300
сСддаСсСад асСасСасдд СССддасдСс Сддддссаад ддассасддС сассдСсСсс 360
Сса 363
<210> 306
<211> 121
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 306
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 Агд Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе Азр Азр Туг
20 25 30
А1а МеС Н1з Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а О1у 11е Зег Тгр Азп Зег О1у Зег 11е Азр Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеС Азп Зег Ьеи Агд А1а О1у Азр ТЬг А1а Ьеи Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Ьуз Азр 11е Ьеи Азр Ьеи Азр Туг Туг О1у Ьеи Азр Уа1 Тгр О1у
100 105 110
О1п О1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 307
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 307
ддаССсассС ССдаСдаССа Сдсс 24
<210> 308
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
- 99 028879
<400> 308
О1у РНе ТНг РНе Азр Азр Туг А1а
1 5
<210> <211> <212> <213> 309 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 309
аЬЬадЬЬдда аЬадЬддЬад ЬаЬа 24
<210> <211> <212> <213> 310 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 310
11е Зег Тгр Азп Зег О1у Зег 11е
1 5
<210> <211> <212> <213> 311 42 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 311
дсаааадаЬа ЬЬсЬддаЬсЬ адасЬасЬас ддЬЬЬддасд Ьс 42
<210> <211> <212> <213> 312 14 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 312
А1а Ьуз Азр 11е Ьеи Азр Ьеи Азр Туг Туг О1у Ьеи Азр Уа1 1 5 10
<210> <211> <212> <213> 313 321 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 313
дасаЬссада ЬдасссадЬс ЬссаЬссЬсс сЬдЬсЬдсаЬ сЬдЬаддада сададЬсасс 60
- 100 028879
аЕсасЕЕдсс дддсдадЕса ддасаЕЕадс адЕЕаЕЕЕад ссЕддЕаЕса дсадааасса 120
дддааадЕЕс сЕаассЕссЕ даЕсЕаЕдаЕ дсаЕссЕсЕЕ ЕдсааЕсадд ддЕсссаЕсЕ 180
сддЕЕсадЕд дсадЕддаЕс ЕдддасадаЕ ЕЕсасЕсЕса сссЕсадсад ссЕдсадссЕ 240
даадаЕЕЕЕд сЕадЕЕаЕЕа сЕдЕсааааЕ ЕаЕаасадЕд ссссдЕасас ЕЕЕЕддссад 300
дддассаадс ЕддадаЕсаа а 321
<210> 314
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 314
Азр 1 11е О1п МеЕ ТИг 5 О1п Бег Рго Бег Бег 10 Ьеи Бег А1а Бег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТИг 11е ТИг Суз Агд А1а Бег О1п Азр 11е Бег Бег Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз Уа1 Рго Азп Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Бег Бег Ьеи О1п Бег О1у Уа1 Рго Бег Агд РИе Бег О1у
50 55 60
Бег О1у Бег О1у ТИг Азр РИе ТИг Ьеи ТИг Ьеи Бег Бег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РИе А1а Бег Туг Туг Суз О1п Азп Туг Азп Бег А1а Рго Туг
85 90 95
ТИг РИе О1у О1п О1у ТИг Ьуз Ьеи О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 315
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 315
саддасаЕЕа дсадЕЕаЕ
<210> 316
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 316
О1п Азр 11е Бег Бег
1 5
последовательность
последовательность
Туг
18
<210> 317
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
- 101
028879
<400> 317
даЕдсаЕсс
<210> 318
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 318
Азр А1а Зег 1
<210> 319
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 319
сааааЕЕаЕа асадЕдсссс дЕасасЕ
27
<210> 320
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 320
О1п Азп Туг Азп Зег А1а Рго Туг ТЬг 1 5
<210> 321
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 321
даадЕдсаас ЕддЕддадЕс Едддддаддс ЕЕддЕасадс сЕддсаддЕс ссЕдадасЕс 60
ЕссЕдЕдсад ссЕсЕддаЕЕ сассЕЕЕдаЕ даЕЕаЕдсса ЕдсасЕдддЕ ссддсаадсЕ 120
ссадддаадд дссЕддадЕд ддЕсЕсаадЕ аЕЕадЕЕдда аЕадЕддЕад саЕаддсЕаЕ 180
дсддасЕсЕд Едаадддссд аЕЕсассаЕЕ Ессададаса асдссаадаа ЕЕсссЕдЕаЕ 240
сЕЕсаааЕда асадЕсЕдаа ассЕдаддас асддссЕЕдЕ аЕЕасЕдЕас аааадаЕасс 300
дасЕасддЕд асЕассЕЕда ЕдсЕЕЕЕдаЕ аЕсЕддддсс аадддасааЕ ддЕсдссдЕс 360
дсЕЕса 366
<210>
<211>
<212>
<213>
322
122
РКТ
Искусственная последовательность
<220>
- 102 028879
<223> Синтетический
<400> 322
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго О1у Агд
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РНе ТНг РНе Азр Азр Туг
20 25 30
А1а Мек Н1з Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Зег 11е Зег Тгр Азп Зег О1у Зег 11е О1у Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РНе ТНг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п Мек Азп Зег Ьеи Ьуз Рго О1и Азр ТНг А1а Ьеи Туг Туг Суз
85 90 95
ТНг Ьуз Азр ТНг Азр Туг О1у Азр Туг Ьеи Азр А1а РНе Азр 11е Тгр
100 105 110
О1у О1п О1у ТНг Мек Уа1 А1а Уа1 А1а Зег
115 120
<210> 323
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 323
ддакксасск ккдакдакка кдсс
24
<210> 324
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 324
О1у РНе ТНг РНе Азр Азр Туг А1а 1 5
<210> 325
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 325
аккадккдда акадкддкад сака
<210> 326
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
24
- 103
028879
<400> 326
11е Зег Тгр Азп Зег О1у Зег 11е 1 5
<210> 327
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 327
асаааадаЕа ссдасЕасдд ЕдасЕассЕЕ даЕдсЕЕЕЕд аЕаЕс 45
<210> 328
<211> 15
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 328
ТЬг Ьуз Азр ТЬг Азр Туг О1у Азр Туг Ьеи Азр А1а РЬе Азр 11е 1 5 10 15
<210> 329
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 329
даЕаЕЕдЕда ЕдасссадЕс ЕссадасЕсс сЕддсЕдЕдЕ сЕсЕдддсда дадддссасс 60
аЕсаасЕдса адЕссадсса дадЕдЕЕЕЕа ЕасаасЕссд асааЕаадаа дЕасЕЕадсЕ 120
ЕддЕассадс адааассЕдд асадссЕссЕ аадсЕдсЕса ЕЕЕасЕдддс аЕсЕасссдд 180
дааЕссдддд ЕсссЕдассд аЕЕсадЕддс адсдддЕсЕд ддасадаЕЕЕ сасЕсЕсасс 240
аЕсадсадсс ЕдсаддсЕда ддаЕдЕддса дЕЕЕаЕЕасЕ дЕсассааЕа ЕЕаЕасЕасЕ 300
ссЕссдасдЕ Есддссаадд дассааддЕд даааЕсааа 339
<210> 330
<211> 113
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 330
Азр 1 11е Уа1 МеЕ ТЬг 5 О1п Зег Рго Азр Зег 10 Ьеи А1а Уа1 Зег Ьеи О1у 15
О1и Агд А1а ТЬг 11е Азп Суз Ьуз Зег Зег О1п Зег Уа1 Ьеи Туг Азп
20 25 30
Зег Азр Азп Ьуз Ьуз Туг Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п
35 40 45
Рго Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е Туг Тгр А1а Зег ТЬг Агд О1и Зег О1у Уа1
50 55 60
- 104
028879
Рго Азр Агд РЬе Зег О1у Зег О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг
65 70 75 80
11е Зег Зег Ьеи О1п А1а О1и Азр Уа1 А1а Уа1 Туг Туг Суз Н1з О1п
85 90 95
Туг Туг ТЬг ТЬг Рго Рго ТЬг РЬе О1у О1п О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е
100 105 110
Ьуз
<210> 331
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 331
сададЬдЬЬЬ ЬаЬасаасЬс сдасааЬаад аадЬас
<210> 332
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
36
<400> 332
О1п Зег Уа1 Ьеи Туг Азп Зег Азр Азп Ьуз Ьуз Туг 1 5 10
<210> <211> <212> <213> 333 9 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 333
ЬдддсаЬсЬ 9
<210> 334
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 334
Тгр А1а Зег
1
<210> 335
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
- 105
028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 335
сассааЕаЕЕ аЕасЕасЕсс Ессдасд 27
<210> 336
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 336
Н1з О1п Туг Туг ТЪг ТЪг Рго Рго ТЪг 1 5
<210> 337
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 337
даддЕдсадс ЕддЕддадЕс ЕдддддаддЕ дЕддЕасддс сЕддддддЕс ссЕдадасЕс 60
ЕссЕдЕдсад ссЕсЕддаЕЕ сассЕЕЕдаЕ даЕЕаЕддса ЕдадсЕдддЕ ссдссаадсЕ 120
ссадддаадд ддсЕддадЕд ЕдЕсЕсЕддЕ аЕЕааЕЕдда аЕддЕддЕад сасадаЕЕаЕ 180
дсадасЕсЕд Едаадддссд аЕЕсассаЕс Ессададаса асдссаадаа сЕсссЕдЕаЕ 240
сЕдсаааЕда асадЕсЕдад адссдаддас асддссЕсдЕ аЕЕасЕдЕдс дададаЕддЕ 300
ддддаЕЕддд асЕасЕЕсда ЕсЕсЕддддс сдЕддсассс ЕддЕсасЕдЕ сЕссЕса 357
<210> 338
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 338
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 Агд Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЪе ТЪг РЪе Азр Азр Туг
20 25 30
О1у МеЕ Зег Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Суз Уа1
35 40 45
Зег О1у 11е Азп Тгр Азп О1у О1у Зег ТЪг Азр Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЪе ТЪг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЕ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЪг А1а Зег Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр О1у О1у Азр Тгр Азр Туг РЪе Азр Ьеи Тгр О1у Агд О1у
100 105 110
ТЪг Ьеи Уа1 ТЪг Уа1 Зег Зег
115
<210> 339
- 106
028879
24
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 339
ддаЕЕсассЕ ЕЕдаЕдаЕЕа Еддс
<210> 340
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 340
О1у РЬе ТЬг РЬе Азр Азр Туг О1у 1 5
<210> 341
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 341
аЕЕааЕЕдда аЕддЕддЕад саса
24
<210> 342
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 342
11е Азп Тгр Азп О1у О1у Зег ТЬг 1 5
<210> 343
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 343
дсдададаЕд дЕддддаЕЕд ддасЕасЕЕс даЕсЕс
<210> 344
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
36
- 107 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 344
А1а Агд Азр О1у О1у Азр Тгр Азр Туг РЪе Азр Ьеи
1 5 10
<210> 345
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 345
даааЕадЕда ЕдасдсадЕс Ессадссасс сЕдЕсЕдЕдЕ сЕссадддда аададссасс 60
сЕсЕссЕдса дддссадЕса дадЕдЕЕадс адсаасЕЕад ссЕддЕасса дсадааассЕ 120
ддссаддсЕс ссаддсЕссЕ саЕаЕаЕдда дсаЕссасса дддссасЕдд ЕаЕсссадсс 180
аддЕЕсадЕд дсадЕдддЕс Едддасадад ЕЕсасЕсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадЕсЕ 240
даадаЕЕЕЕд садЕЕЕаЕЕЕ сЕдЕсаддад ЕаЕааЕдасЕ ддссдсЕсас ЕЕЕсддсдда 300
дддассаадд ЕддадаЕсаа а 321
<210> 346
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 346
О1и 1 11е Уа1 МеЕ ТЪг 5 О1п Зег Рго А1а ТЪг 10 Ьеи Зег Уа1 Зег Рго 15 О1у
О1и Агд А1а ТЪг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег О1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг О1у А1а Зег ТЪг Агд А1а ТЪг О1у 11е Рго А1а Агд РЪе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЪг О1и РЪе ТЪг Ьеи ТЪг 11е Зег Зег Ьеи О1п Зег
65 70 75 80
О1и Азр РЪе А1а Уа1 Туг РЪе Суз О1п О1и Туг Азп Азр Тгр Рго Ьеи
85 90 95
ТЪг РЪе О1у О1у О1у ТЪг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 347
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 347
сададЕдЕЕа дсадсаас 18
<210> 348 <211> 6
<212> РКТ
- 108
028879
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 348
О1п Зег Уа1 Зег Зег Азп 1 5
<210> <211> <212> <213> 349 9 ДНК Искусственная
<220> <223> Синтетический
<400> 349
ддадсаСсс
последовательность
<210> 350
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 350 О1у А1а Зег
1
<210> 351
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 351
саддадСаСа аСдасСддсс дсСсасС
27
<210>
<211>
<212>
<213>
352
9
РКТ
Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 352
О1п О1и Туг Азп Азр Тгр Рго Ьеи ТИг 1 5
<210> 353
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная
последовательность
- 109 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 353
даддЬдсаас ЬддЬддадЬс ЬдддддаддЬ дЬддЬасддс сЬддддддЬс ссЬдадасЬс 60
ЬссЬдЬдсад ссЬсЬддаЬЬ сассЬЬЬдаЬ даЬЬаЬддса ЬдадсЬдддЬ ссдссаадсЬ 120
ссадддаадд ддсЬддадЬд ЬдЬсЬсЬддЬ аЬЬадЬЬдда аЬддЬддЬаа сасадаЬЬаЬ 180
дсадасЬсЬд Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададаса асдссаадаа сЬсссЬдЬаЬ 240
сЬдсаааЬда асадЬсЬдад адссдаддас асддссЬЬдЬ аЬсасЬдЬдс дададаЬддЬ 300
ддддаЬЬддд асЬасЬЬсда ЬсЬсЬддддс сдЬддсассс ЬддЬсасЬдЬ сЬссЬса 357
<210> 354
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 354
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 Агд Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РНе ТНг РНе Азр Азр Туг
20 25 30
О1у МеЬ Зег Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Суз Уа1
35 40 45
Зег О1у 11е Зег Тгр Азп О1у О1у Азп ТНг Азр Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РНе ТНг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЬ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТНг А1а Ьеи Туг Н1з Суз
85 90 95
А1а Агд Азр О1у О1у Азр Тгр Азр Туг РНе Азр Ьеи Тгр О1у Агд О1у
100 105 110
ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115
<210> 355
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 355
ддаЬЬсассЬ ЬЬдаЬдаЬЬа Ьддс 24
<210> 356
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 356
О1у РНе ТНг РНе Азр Азр Туг О1у 1 5
<210> 357
- 110
028879
24
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 357
аССадССдда аСддСддСаа саса
<210> 358
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 358
11е Зег Тгр Азп О1у О1у Азп ТИг 1 5
<210> 359
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 359
дсдададаСд дСддддаССд ддасСасССс даСсСс
36
<210> 360
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 360
А1а Агд Азр О1у О1у Азр Тгр Азр Туг РИе Азр Ьеи
1 5 10
<210> 361
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 361
даааСасСда СдасдсадСс Сссадссасс сСдСсСдСдС сСссадддда аададссасс 60
сСсСссСдса дддссадСса дадСдССадС адсаасССад ссСддСасса дсадааассС 120
ддссаддсСс ссаддсСссС саСаСаСдда дсаСссасса дддссасСдд СаСсссадсс 180
аддССсадСд дсадСдддСс Сдддасадад ССсасСсССа ссаСсадсад ссСдсадСсС 240
даадаССССд сааСССаССа сСдСсаддад СаСааСдасС ддссдсСсас СССсддсдда 300
дддассаадд СддадаСсаа а 321
- 111 028879
<210> 362
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 362
О1и 1 11е Ьеи МеЕ ТЬг 5 О1п Зег Рго А1а ТЬг 10 Ьеи Зег Уа1 Зег Рго 15 О1у
О1и Агд А1а ТЬг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег О1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг О1у А1а Зег ТЬг Агд А1а ТЬг О1у 11е Рго А1а Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг О1и РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Зег
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а 11е Туг Туг Суз О1п О1и Туг Азп Азр Тгр Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 363
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 363
сададЕдЕЕа дЕадсаас
<210> 364
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 364
О1п Зег Уа1 Зег Зег
1 5
последовательность
последовательность
Азп
18
<210> <211> <212> <213> 365 9 ДНК Искусственная
<220> <223> Синтетический
<400> 365
ддадсаЕсс
последовательность
<210> 366 <211> 3 <212> РКТ
9
- 112
028879
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 366
О1у А1а Зег 1
<210> 367
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 367
саддадбаба абдасбддсс дсбсасб 27
<210> 368
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 368
О1п О1и Туг Азп Азр Тгр Рго Ьеи ТЪг 1 5
<210> 369
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 369
даадбдсаас бддбддадбс бдддддаддс ббддбасадс сбддсаддбс ссбдадасбс 60
бссбдбдсад ссбсбддабб сассбббдаб даббабдсса бдбасбдддб ссддсаадсб 120
ссадддаадд дссбддадбд ддбсбсаддб аббадббдда абадбддсад сабаддсбаб 180
дсддасбсбд бдаадддссд аббсассабс бсбададаса асдссаадаа сбсссбдбаб 240
сбдсааабдд асадссбдад адсбдаддас асддссббдб аббасбдбдс аададабабд 300
абддаадббд ассбсбасдд бабддасдбс бддддссаад ддассасддб сассдбсбсс 360
бса 363
<210>
<211>
<212>
<213>
370
121
РКТ
Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 370
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго О1у Агд
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЪе ТЪг РЪе Азр Азр Туг
- 113 028879
20 25 30
А1а МеС Туг Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег О1у 11е Зег Тгр Азп Зег О1у Зег 11е О1у Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеС Азр Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Ьеи Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр МеС МеС О1и Уа1 Азр Ьеи Туг О1у МеС Азр Уа1 Тгр О1у
100 105 110
О1п О1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 371
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 371
ддаССсассС ССдаСдаССа Сдсс
<210> 372
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 372
О1у РЬе ТЬг РЬе Азр Азр Туг А1а 1 5
<210> 373
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 373
аССадССдда аСадСддсад саСа
24
24
<210> 374
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 374
11е Зег Тгр Азп Зег О1у Зег 11е 1 5
- 114
028879
<210> 375
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 375
дсаададаСа СдаСддаадС СдассСсСас ддСаСддасд Сс 42
<210> 376
<211> 14
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 376
А1а Агд Азр МеС МеС О1и Уа1 Азр Ьеи Туг О1у МеС Азр Уа1
1 5 10
<210> 377
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 377
дасаСссада СдасссадСс СссаСсССсс дСдСсСдсаС сСдСаддада сададСсасд 60
аСсасССдСс дддсдадСса ддаСаССадс адССддССад ссСддСаСса дсадааасса 120
дддасадссс сСаадССссС даСсСаСдаа асаСссадСС СдсааадСдд ддСсссССса 180
аддССсадсд дсадСддаСс СдддасадаС ССсаССсСса ссаСсадСад ссСдсадссС 240
даадаССССд саасССасСа ССдСсаасаа асСдасадСС Ссссдсасас ССССддссад 300
дддассаадс СддадаСсад а 321
<210> 378
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 378
Азр 1 11е О1п МеС ТИг 5 О1п Зег Рго Зег Зег Уа1 10 Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТИг 11е ТИг Суз Агд А1а Зег О1п Азр 11е Зег Зег Тгр
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у ТИг А1а Рго Ьуз РИе Ьеи 11е
35 40 45
Туг О1и ТИг Зег Зег Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РИе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТИг Азр РИе 11е Ьеи ТИг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РИе А1а ТИг Туг Туг Суз О1п О1п ТИг Азр Зег РИе Рго Няз
85 90 95
ТИг РИе О1у О1п О1у ТИг Ьуз Ьеи О1и 11е Агд
100 105
- 115
028879
<210> 379
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 379
саддаЬаЬЬа дсадЬЬдд
18
<210> 380
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 380
О1п Азр 11е Бег Бег Тгр 1 5
<210> 381
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 381
дааасаЬсс
<210> 382
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 382
О1и ТЬг Бег
1
<210> 383
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 383
саасааасЬд асадЬЬЬссс дсасасЬ
<210> 384 <211> 9
27
- 116 028879
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 384
О1п О1п ТИг Азр Зег РИе Рго Н1з ТИг 1 5
<210> 385
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 385
даддСдсадс СддСддадСс СдддддаддС дСддСасддс сСддддддСс ссСдадасСс 60
СссСдСдСад ссСсСддаСС сассСССдаС даССаСддса СдадсСдддС ссдссаадсС 120
ссадддаадд ддсСддадСд СдСсСсСддС аССааССдда аСддСддСад сасадаССаС 180
дсадасСсСд Сдаадддссд аССсасСаСс Сссададаса асдссаадаа сСсссСдСаС 240
сСдсаааСда асадСсСдад адссдаддас асддссССдС аСсасСдСдс дададаСддС 300
ддддаССддд асСасССсда СсСсСддддс сдСддсассс СддСсасСдС сСссСса 357
<210> 386
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 386
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 Агд Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз Уа1 А1а Зег О1у РИе ТИг РИе Азр Азр Туг
20 25 30
О1у МеС Зег Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Суз Уа1
35 40 45
Зег О1у 11е Азп Тгр Азп О1у О1у Зег ТИг Азр Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РИе ТИг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеС Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТИг А1а Ьеи Туг Н1з Суз
85 90 95
А1а Агд Азр О1у О1у Азр Тгр Азр Туг РИе Азр Ьеи Тгр О1у Агд О1у
100 105 110
ТИг Ьеи Уа1 ТИг Уа1 Зег Зег
115
<210> 387
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 387
- 117
028879
ддаЕЕсассЕ ЕЕдаЕдаЕЕа Еддс 24
<210> <211> <212> <213> 388 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 388
О1у РЬе ТЬг РЬе Азр Азр Туг О1у
1 5
<210> <211> <212> <213> 389 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 389
аЕЕааЕЕдда аЕддЕддЕад саса 24
<210> <211> <212> <213> 390 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 390
11е Азп Тгр Азп О1у О1у Зег ТЬг
1 5
<210> <211> <212> <213> 391 36 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 391
дсдададаЕд дЕддддаЕЕд ддасЕасЕЕс даЕсЕс 36
<210> <211> <212> <213> 392 12 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 392
А1а Агд Азр О1у О1у Азр Тгр Азр Туг РЬе Азр Ьеи 1 5 10
- 118 028879
<210> 393
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 393
даааСасСда СдасдсадСс Сссадссасс сСдСсСдСдС сСссадддда аададссасс 60
сСсСссСдса дддссадСса дадСдССадс адсаасССад ссСддСасса дсадааассС 120
ддссаддсСс ссаддсСссС саСаСаСдда дсаСссасса дддссасСдд СаСсссадсс 180
аддССсадСд дсадСдддСс Сдддасадад ССсасСсСса ссаСсадсад ссСдсадСсС 240
даадаССССд сааСССаССа сСдСсаддад СаСааСдасС ддссдсСсас СССсддсдда 300
дддассаадд СддадаСсаа а 321
<210> 394
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 394
О1и 1 11е Ьеи МеС ТЬг 5 О1п Бег Рго А1а ТЬг 10 Ьеи Бег Уа1 Бег Рго 15 О1у
О1и Агд А1а ТЬг Ьеи Бег Суз Агд А1а Бег О1п Бег Уа1 Бег Бег Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг О1у А1а Бег ТЬг Агд А1а ТЬг О1у 11е Рго А1а Агд РЬе Бег О1у
50 55 60
Бег О1у Бег О1у ТЬг О1и РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Бег Бег Ьеи О1п Бег
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а 11е Туг Туг Суз О1п О1и Туг Азп Азр Тгр Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 395
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 395
сададСдССа дсадсаас
18
<210> 396
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 396
О1п Бег Уа1 Бег Бег Азп 1 5
- 119
028879
<210> 397
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 397 ддадсаБсс
<210> 398
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 398
О1у А1а Зег
1
<210> 399
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 399
саддадБаБа аБдасБддсс дсБсасБ 27
<210> 400
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 400
О1п О1и Туг Азп Азр Тгр Рго Ьеи ТЪг 1 5
<210> 401
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 401
даддБдсаас БддБддадБс Бдддддаддс сБддБсаадс сБддддддБс ссБдадасБс 60
БссБдБдБад ссБсБддаББ сассББсадБ адсБаБааса БдаасБдддБ ссдссаддсБ 120
ссадддаадд ддсБддадБд ддБсБсаБББ аБаадБддБа дБадБааББа саБасасБас 180
дсадасБсад Бдаадддссд аББсассаББ Бссададаса асдссаадаа БдсасБдБаБ 240
- 120 028879
сЁдсадаЁда асадссЁдад адссдаддас асддсЁдЁаЁ аЁЁасЁдЁдс дададасдас ддЁдасЁасд асЁддЁЁсда ссссЁддддс садддаассс ЁддЁсассдЁ сЁссЁса
<210> 402
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 402
300
357
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 Ьуз Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз Уа1 А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Зег Туг
20 25 30
Азп МеЁ Азп Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег РЬе 11е Зег О1у Зег Зег Азп Туг 11е Н1з Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп А1а Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЁ Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр Азр О1у Азр Туг Азр Тгр РЬе Азр Рго Тгр О1у О1п О1у
100 105 110
ТЬг Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115
<210> 403
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 403
ддаЁЁсассЁ ЁсадЁадсЁа Ёаас
<210> 404
<211> 8
<212> РКТ
24
последовательность
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 404
О1у РЬе ТЬг РЬе Зег
1 5
<210> 405
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
<400> 405
Зег Туг Азп
последовательность
- 121
028879
аЕаадЕддЕа дЕадЕааЕЕа саЕа
24
<210> 406
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 406
11е Зег О1у Зег Зег Азп Туг 11е 1 5
<210> 407
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 407
дсдададасд асддЕдасЕа сдасЕддЕЕс дасссс
36
<210> 408
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 408
А1а Агд Азр Азр О1у Азр Туг Азр Тгр РЪе Азр Рго 1 5 10
<210> 409
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 409
даааЕЕдЕдЕ ЕдасдсадЕс Ессаддсасс сЕдЕсЕЕЕдЕ сЕссадддда аададссасс 60
сЕсЕссЕдса дддссадЕса дадЕдЕЕадЕ адЕадЕЕасЕ ЕадссЕддЕа ссадсааааа 120
ссЕддссадд сЕсссаддсЕ ссЕсаЕсЕаЕ ддЕасаЕсса дсадддссас ЕддсаЕссса 180
дасаддЕЕса дЕддсадЕдд дЕсЕдддаса дасЕЕсасЕс ЕсассаЕсад садасЕддад 240
ссЕдаадаЕЕ ЕЕдсадЕдЕа ЕЕасЕдЕсад садЕаЕдаЕа асЕсаЕасас ЕЕЕЕддссад 300
дддассаадс ЕддадаЕсаа а 321
<210>
<211>
<212>
<213>
410
107
РКТ
Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
- 122 028879
<400> 410
О1и 1 11е Уа1 Ьеи ТИг 5 О1п Бег Рго О1у ТИг 10 Ьеи Бег Ьеи Бег Рго 15 О1у
О1и Агд А1а ТИг Ьеи Бег Суз Агд А1а Бег О1п Бег Уа1 Бег Бег Бег
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
11е Туг О1у ТИг Бег Бег Агд А1а ТИг О1у 11е Рго Азр Агд РИе Бег
50 55 60
О1у Бег О1у Бег О1у ТИг Азр РИе ТИг Ьеи ТИг 11е Бег Агд Ьеи О1и
65 70 75 80
Рго О1и Азр РИе А1а Уа1 Туг Туг Суз О1п О1п Туг Азр Азп Бег Туг
85 90 95
ТИг РИе О1у О1п О1у ТИг Ьуз Ьеи О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 411
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 411
сададЕдЕЕа дЕадЕадЕЕа с
21
<210> 412
<211> 7
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 412
О1п Бег Уа1 Бег Бег Бег Туг 1 5
<210> 413
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 413 ддЕасаЕсс
<210> 414
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 414 О1у ТИг Бег
1
- 123
028879
<210> 415
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 415
садсадЬаЬд аЬаасЬсаЬа сасЬ 24
<210> 416
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 416
О1п О1п Туг Азр Азп Бег Туг ТЬг 1 5
<210> 417
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 417
даддЬдсадс ЬддЬдсадЬс Ьдддддаддс сЬддЬсаадс сЬддддддЬс ссЬдадасЬс 60
ЬссЬдЬдсад ссЬсЬддаЬЬ сассЬЬсадЬ аасЬЬЬааса ЬдаасЬдддЬ ссдссаддсЬ 120
ссадддаадд ддсЬддадЬд ддЬсЬсаЬЬс аЬЬадЬадЬс ЬЬадЬасЬЬа ЬасаЬасЬас 180
дсадасЬсад Ьдаадддссд аЬЬсассаЬс Ьссададаса асдссаадаа сЬсасЬдЬаЬ 240
сЬдсаааЬда асадссЬдад адссдаддас асддсЬдЬдЬ аЬЬасЬдЬдс дададасдас 300
ддЬдассасд асЬддЬЬсда ссссЬддддс садддаассс ЬддЬсассдЬ сЬссЬса 357
<210> 418
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 418
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1п Бег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 Ьуз Рго О1у О1у
1 5 10 15
Бег Ьеи Агд Ьеи Бег Суз А1а А1а Бег О1у РЬе ТЬг РЬе Бег Азп РЬе
20 25 30
Азп МеЬ Азп Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Бег РЬе 11е Бег Бег Ьеи Бег ТЬг Туг ТЬг Туг Туг А1а Азр Бег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Бег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Бег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеЬ Азп Бег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
- 124
028879
А1а Агд Азр Азр О1у Азр Н1з Азр Тгр РЬе Азр Рго Тгр О1у О1п О1у 100 105 110
ТЬг Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег 115
<210> <211> <212> <213> 419 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 419
ддаЬЬсассЬ ЬсадЬаасЬЬ Ьаас 24
<210> <211> <212> <213> 420 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 420
О1у РЬе ТЬг РЬе Зег Азп РЬе Азп
1 5
<210> <211> <212> <213> 421 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 421
аЬЬадЬадЬс ЬЬадЬасЬЬа Ьаса 24
<210> <211> <212> <213> 422 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 422
11е Зег Зег Ьеи Зег ТЬг Туг ТЬг
1 5
<210> <211> <212> <213> 423 36 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 423
- 125 028879
дсдададасд асддЕдасса сдасЕддЕЕс дасссс
36
<210> 424
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 424
А1а Агд Азр Азр О1у Азр Н1з Азр Тгр РЬе Азр Рго
1 5 10
<210> 425
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 425
даааЕЕдЕдЕ ЕдасдсадЕс Ессадасасс сЕдЕсЕЕЕдЕ сЕссадддда аададссасс 60
сЕсЕссЕдса дддссадЕса дадЕдЕЕадЕ адсаасЕасЕ ЕадссЕддЕа ссаасааааа 120
ссЕддссадд сЕсссаддсЕ ссЕсаЕсЕаЕ адЕдсаЕсса асадддссас ЕддсаЕссса 180
дасадаЕЕса дЕддсадЕдд дЕсЕдддаса дасЕЕсасЕс ЕсассаЕсад ссдасЕддад 240
ссЕдаадаЕЕ ЕЕдсадЕдЕа ЕЕасЕдЕсаа садЕаЕдаЕа дЕЕсаЕасас ЕЕЕЕддссад 300
дддассаадс ЕддадаЕсаа а 321
<210> 426
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 426
О1и 11е Уа1 Ьеи ТЬг О1п Зег Рго Азр ТЬг Ьеи Зег Ьеи Зег Рго О1у
1 5 10 15
О1и Агд А1а ТЬг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег О1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
11е Туг Зег А1а Зег Азп Агд А1а ТЬг О1у 11е Рго Азр Агд РЬе Зег
50 55 60
О1у Зег О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Агд Ьеи О1и
65 70 75 80
Рго О1и Азр РЬе А1а Уа1 Туг Туг Суз О1п О1п Туг Азр Зег Зег Туг
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1п О1у ТЬг Ьуз Ьеи О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 427
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
- 126
028879
21
<400> 427
сададСдССа дСадсаасСа с
<210> 428
<211> 7
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 428
О1п Зег Уа1 Зег Зег Азп Туг 1 5
<210> 429
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 429 адСдсаСсс
<210> 430
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 430
Зег А1а Зег 1
<210> 431
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 431
саасадСаСд аСадССсаСа сасС
24
<210> 432
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 432
О1п О1п Туг Азр Зег Зег Туг ТЬг 1 5
- 127 028879
<210> 433
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 433
дааакдсадс кддкададкс кдддддаддс ккддкасадс скдасаддкс сскдадаскс 60
ксскдкдсад сскскддакк сааскккдак ааккакдсса касаскдддк ссддсаадск 120
ссадддаадд дссксдадкд ддксксаддк аккадккдда акадкддкаа сакаддккак 180
дсддаскскд кдаадддссд акксассакс кссададаса асдссаадаа скссскдккк 240
скдскаакда асадкскдад асскдасдас ксддссккдк аккаскдкас аададдакас 300
ааскддаасд сдккаксссс какддасдкс кддддссаад ддассасддк сассдксксс 360
кса 363
<210> 434
<211> 121
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 434
О1и Мек О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Ьеи Уа1 О1п Рго Азр Агд
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РНе Азп РНе Азр Азп Туг
20 25 30
А1а 11е Н1з Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег О1у 11е Зег Тгр Азп Зег О1у Азп 11е О1у Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РНе ТНг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи РНе
65 70 75 80
Ьеи Ьеи Мек Азп Зег Ьеи Агд Рго Азр Азр Зег А1а Ьеи Туг Туг Суз
85 90 95
ТНг Агд О1у Туг Азп Тгр Азп А1а Ьеи Зег Рго Мек Азр Уа1 Тгр О1у
100 105 110
О1п О1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 435
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 435
ддакксааск ккдакаакка кдсс 24
<210> 436
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 128
028879
<223> Синтетический
<400> 436
О1у РЪе Азп РЪе Азр Азп Туг А1а
1 5
<210> <211> <212> <213> 437 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 437
аббадббдда абадбддбаа саба 24
<210> <211> <212> <213> 438 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 438
11е Зег Тгр Азп Зег О1у Азп 11е
1 5
<210> <211> <212> <213> 439 42 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 439
асаададдаб асаасбддаа сдсдббабсс ссбабддасд бс 42
<210> <211> <212> <213> 440 14 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 440
ТЪг Агд О1у Туг Азп Тгр Азп А1а Ьеи Зег Рго Меб Азр Уа1 1 5 10
<210> <211> <212> <213> 441 321 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
- 129 028879
<400> 441
дасаЕссааа ЕдасссадЕс ЕссаЕссЕсс сЕдЕсЕдсаЕ сЕдЕадддда сададЕсасс 60
дЕсасЕЕдсс дддсдадЕса дддсаЕЕадс ааЕЕаЕЕЕад ссЕддЕаЕса дсааааассЕ 120
ддЕааадЕЕс сЕааасЕссЕ даЕсЕаЕдсЕ дсаЕссасЕЕ ЕдсааЕсадд ддЕсссаЕсЕ 180
сддЕЕсадЕд дсадЕддаЕс ЕдддасадаЕ ЕЕсасЕсЕса ссаЕсадсад ссЕдсадссЕ 240
даадаЕдЕЕд саадЕЕаЕЕа сЕдЕсаааас ЕаЕаасадЕд ссссЕаЕдас дЕЕсддссаа 300
дддассаадд ЕддаааЕсаа а 321
<210> 442
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 442
Азр 1 11е О1п МеЕ ТЬг 5 О1п Зег Рго Зег Зег 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТЬг Уа1 ТЬг Суз Агд А1а Зег О1п О1у 11е Зег Азп Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз Уа1 Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег ТЬг Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр Уа1 А1а Зег Туг Туг Суз О1п Азп Туг Азп Зег А1а Рго МеЕ
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1п О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 443
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 443
садддсаЕЕа дсааЕЕаЕ
18
<210> <211> <212> <213> 444 6 РКТ Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 444
О1п О1у 11е Зег Азп Туг
1 5
<210> 445
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 130
028879
9
<223> Синтетический
<400> 445
дсБдсаБсс
<210> 446
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 446
А1а А1а Зег
1
<210> 447
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 447
саааасБаБа асадБдсссс БаБдасд
27
<210> 448
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 448
О1п Азп Туг Азп Зег А1а Рго МеБ ТЪг 1 5
<210> 449
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 449
саддБдсадс БасаасадБд ддасдсадда сБдББдаадс сББсддадас ссБдБсссБс 60
ассБдсдсБд БсБаБддБдд дБссББсадБ БсББасБасБ ддадсБддаБ ссдссадссс 120
ссадддаадд ддсБддааБд даББддддаа аБсааБсаБс дБддаадсас саасБасаас 180
ссдБсссБса ададБсдадБ сассаБсБса дБадасасдБ ссаадаасса дББсБсссБа 240
аадсБдаддБ сБдБдассдс сдсддасасд дсБдБдБаББ асБдБдсдсд адддддддБа 300
дсадсБсдБс сддасБддса сББсБББдас БасБддддсс адддаасссБ ддБсассдБс 360
БссБса 366
<210> 450 <211> 122 <212> РКТ
<213> Искусственная
последовательность
- 1З1 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 450
Ο1η Уа1 Ο1η Ьеи Ο1η Ο1η Тгр Азр А1а О1у Ьеи Ьеи Ьуз Рго Зег О1и
1 5 10 15
ТЪг Ьеи Зег Ьеи ТЪг Суз А1а Уа1 Туг О1у О1у Зег РЪе Зег Зег Туг
20 25 30
Туг Тгр Зег Тгр 11е Агд Ο1η Рго Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр 11е
35 40 45
О1у О1и 11е Азп Нтз Агд О1у Зег ТЪг Азп Туг Азп Рго Зег Ьеи Ьуз
50 55 60
Зег Агд Уа1 ТЪг 11е Зег Уа1 Азр ТЪг Зег Ьуз Азп Ο1η РЪе Зег Ьеи
65 70 75 80
Ьуз Ьеи Агд Зег Уа1 ТЪг А1а А1а Азр ТЪг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд О1у О1у Уа1 А1а А1а Агд Рго Азр Тгр Нтз РЪе РЪе Азр Туг Тгр
100 105 110
О1у Ο1η О1у ТЪг Ьеи Уа1 ТЪг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 451
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 451
ддЕдддЕссЕ ЕсадЕЕсЕЕа сЕас
24
<210> 452
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 452
О1у О1у Зег РЪе Зег Зег Туг Туг 1 5
<210> 453
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 453
аЕсааЕсаЕс дЕддаадсас с 21
<210> 454
<211> 7
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
- 132
028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 454
11е Азп Н1з Агд О1у Зег ТЪг 1 5
<210> 455
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 455
дсдсдадддд дддЕадсадс ЕсдЕссддас ЕддсасЕЕсЕ ЕЕдасЕас 48
<210> 456
<211> 16
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 456
А1а Агд О1у О1у Уа1 А1а А1а Агд Рго Азр Тгр Н1з РЪе РЪе Азр Туг
1 5 10 15
<210> 457
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 457
дасаЕссада ЕдасссадЕс ЕссаЕссЕсс сЕсЕсЕдссЕ сЕдЕаддада сададЕсасс 60
аЕсасЕЕдсс дддсаадЕса ддЕсаЕЕсда ааЕдаЕЕЕад дсЕддЕЕЕса дсададасса 120
дддааадссс сЕаадсдссЕ даЕсЕаЕдсЕ дсаЕссадЕЕ ЕасааадЕда ддЕсссаЕса 180
адаЕЕсадсд дсадЕддаЕс Едддасадаа ЕЕсасЕсЕса сааЕсассад ссЕдсадссЕ 240
даадаЕЕЕЕд саасЕЕаЕЕа сЕдЕсЕЕсад саЕааЕадЕЕ асссдсЕсас сЕЕсддссаа 300
дддасасдас ЕддадаЕЕаа а 321
<210> 458
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 458
Азр 1 11е О1п МеЕ ТЪг 5 О1п Зег Рго Зег Зег 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТЪг 11е ТЪг Суз Агд А1а Зег О1п Уа1 11е Агд Азп Азр
20 25 30
Ьеи О1у Тгр РЪе О1п О1п Агд Рго О1у Ьуз А1а Рго Ьуз Агд Ьеи 11е
35 40 45
- 133
028879
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи О1п 55 Зег О1и Уа1 Рго Зег 60 Агд РЪе Зег О1у
50
Зег О1у Зег О1у ТЪг О1и РЪе ТЪг Ьеи ТЪг 11е ТЪг Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЪе А1а ТЪг Туг Туг Суз Ьеи О1п Н1з Азп Зег Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТЪг РЪе О1у О1п О1у ТЪг Агд Ьеи О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 459
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 459
саддЕсаЕЕс даааЕдаЕ
18
<210> 460
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 460
О1п Уа1 11е Агд Азп Азр 1 5
<210> 461
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 461 дсЕдсаЕсс
<210> 462
<211> 3
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 462
А1а А1а Зег 1
<210> 463
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
- 134
028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 463
сССсадсаСа аСадССассс дсСсасс 27
<210> 464
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 464
Ьеи О1п Н1з Азп Зег Туг Рго Ьеи ТЬг 1 5
<210> 465
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 465
даддСдсадс СддСддадСс СдддддаддС дСддСасддс сСддддддСс ссСдадасСс 60
СссСдСдсад ссСсСддаСС сассСССдаС даССаСддса СдадсСдддС ссдссаадСС 120
ссадддаадд ддсСддадСд ддСсСсСддС сССааССдда аСддСддааС сасаддССаС 180
асадасСсСд Сдаадддссд аССсассаСс Сссададаса асдссаадаа сСсссСдСаС 240
сСдсаааСда асадСсСдад адссдаддас асддссССсС аСсасСдСдс дсдадаСадС 300
ддддаСсадд аСдсССССда СаСаСддддс саддддасаа СддСсассдС сСссСса 357
<210> 466
<211> 119
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 466
О1и Уа1 О1п Ьеи Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 Агд Рго О1у О1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЬе ТЬг РЬе Азр Азр Туг
20 25 30
О1у МеС Зег Тгр Уа1 Агд О1п Уа1 Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег О1у Ьеи Азп Тгр Азп О1у О1у 11е ТЬг О1у Туг ТЬг Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЬе ТЬг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ьуз Азп Зег Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п МеС Азп Зег Ьеи Агд А1а О1и Азр ТЬг А1а РЬе Туг Н1з Суз
85 90 95
А1а Агд Азр Зег О1у Азр О1п Азр А1а РЬе Азр 11е Тгр О1у О1п О1у
100 105 110
ТЬг МеС Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115
<210> 467
- 135
028879
24
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 467
ддаЬЬсассЬ ЬЬдаЬдаЬЬа Ьддс
<210> 468
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 468
О1у РЬе ТЬг РЬе Азр Азр Туг О1у 1 5
<210> 469
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 469
сЬЬааЬЬдда аЬддЬддааЬ саса
24
<210> 470
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 470
Ьеи Азп Тгр Азп О1у О1у 11е ТЬг 1 5
<210> 471
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 471
дсдсдадаЬа дЬддддаЬса ддаЬдсЬЬЬЬ даЬаЬа
<210> 472
<211> 12
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
36
- 1З6 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 472
А1а Агд Азр Зег О1у Азр О1п Азр А1а РЬе Азр 11е 1 5 10
<210> 473
<211> 318
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 473
саааСадСда СдасдсадСс Сссадссасс сСдСсСдСаС сСссадддда аададссасс 60
сСсСссСдса дддссадСса дадСаССасС сссСасССад ссСддСасса дсааааассС 120
ддссадасСс ссаддсСссС саСсСаСддС дСаСссассс дддссасСдд СаСсссадсс 180
аддССсадСд дсадСдддСс Сдддасадад ССсасСсСса ссаСсадсад ссСдсадСсС 240
даадаССССд садСССаССа сСдСсадсад СаСдасаасС ддСаСасССС Сддссадддд 300
ассаадсСдд адаСсааа 318
<210> 474
<211> 106
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 474
О1п 1 11е Уа1 МеС ТЬг 5 О1п Зег Рго А1а ТЬг 10 Ьеи Зег Уа1 Зег Рго 15 О1у
О1и Агд А1а ТЬг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег О1п Зег 11е ТЬг Рго Туг
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у О1п ТЬг Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг О1у Уа1 Зег ТЬг Агд А1а ТЬг О1у 11е Рго А1а Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг О1и РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Зег
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а Уа1 Туг Туг Суз О1п О1п Туг Азр Азп Тгр Туг ТЬг
85 90 95
РЬе О1у О1п О1у ТЬг Ьуз Ьеи О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 475
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 475
сададСаССа сСсссСас 18
<210> 476 <211> 6 <212> РКТ
- 1З7
028879
<213> Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 476
О1п Зег 11е ТНг Рго Туг
1 5
<210> <211> <212> <213> 477 9 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 477
ддЬдЬаЬсс 9
<210> <211> <212> <213> 478 3 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 478 О1у Уа1 Зег
1
<210> <211> <212> <213> 479 24 ДНК Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 479
садсадЬаЬд асаасЬддЬа ЬасЬ 24
<210> <211> <212> <213> 480 8 РКТ Искусственная последовательность
<220> <223> Синтетический
<400> 480
О1п О1п Туг Азр Азп Тгр Туг ТНг
1 5
<210> <211> <212> <213> 481 366 ДНК Искусственная последовательность
- 1З8 028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 481
саддБдсадд БддБддадБс Бдддддаддс дБддБссадс сБдддаддБс ссБдадасБс 60
БссБдБдсдд ссБсБддаББ сассББсадБ дасБаБддса БдсасБдддБ ссдссаддсБ 120
ссаддсаадд ддсБддадБд ддБддсааББ аБаБсаБаБд аБддаадБаа БаааБасБаБ 180
дсадасБссд Бдаадддссд аББсассдБд Бссададаса аББссаадаа сасБсБдБаБ 240
сБдсааББдд асадссБдад ассБдаддас дсддсБдБсБ БББасБдБдс дадададддд 300
дсаБББаасБ БадасБасБа сдссаБддас дБсБддддсс аадддасаас ддБсассдБс 360
БссБса 366
<210> 482
<211> 122
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 482
О1п Уа1 О1п Уа1 Уа1 О1и Зег О1у О1у О1у Уа1 Уа1 О1п Рго О1у Агд
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег О1у РЪе ТЪг РЪе Зег Азр Туг
20 25 30
О1у МеБ Нчз Тгр Уа1 Агд О1п А1а Рго О1у Ьуз О1у Ьеи О1и Тгр Уа1
35 40 45
А1а 11е 11е Зег Туг Азр О1у Зег Азп Ьуз Туг Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз О1у Агд РЪе ТЪг Уа1 Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТЪг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи О1п Ьеи Азр Зег Ьеи Агд Рго О1и Азр А1а А1а Уа1 РЪе Туг Суз
85 90 95
А1а Агд О1и О1у А1а РЪе Азп Ьеи Азр Туг Туг А1а МеБ Азр Уа1 Тгр
100 105 110
О1у О1п О1у ТЪг ТЪг Уа1 ТЪг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 483
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 483
ддаББсассБ БсадБдасБа Бддс 24
<210> 484
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 484
О1у РЪе ТЪг РЪе Зег Азр Туг О1у 1 5
- 1З9
028879
24
<210> 485
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 485
абабсабабд абддаадбаа бааа
<210> 486
<211> 8
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 486
11е Зег Туг Азр О1у Зег Азп Ьуз 1 5
<210> 487
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 487
дсдадададд дддсабббаа сббадасбас басдссабдд асдбс
45
<210> 488
<211> 15
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 488
А1а Агд О1и О1у А1а РЪе Азп Ьеи Азр Туг Туг А1а Меб Азр Уа1 1 5 10 15
<210> 489
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 489
дссабссада бдасссадбс бссабссбсс сбдбсбдссб сбдбаддада сададбсасс 60
абсасббдсс дддсаадбса ддасаббада аабдабббад дббддбабса дсадааасса 120
дддааадссс сбаассбссб дабсбабдсб дсабссадбб басааадбдд ддбсссабса 180
аддббсадсд дсадбдддбс бддсасадаб ббсасбсбса ссабсадсад ссбдсадссб 240
даадаббббд саасббабба сбдбсбасаа даббссаабб асссдсбсас бббсддсдда 300
дддассаадд бддадабсаа д 321
- 140 028879
<210> 490
<211> 107
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 490
А1а 1 11е О1п МеЕ ТЬг 5 О1п Зег Рго Зег Зег 10 Ьеи Зег А1а Зег Уа1 15 О1у
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Агд А1а Зег О1п Азр 11е Агд Азп Азр
20 25 30
Ьеи О1у Тгр Туг О1п О1п Ьуз Рго О1у Ьуз А1а Рго Азп Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег Зег Ьеи О1п Зег О1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег О1у
50 55 60
Зег О1у Зег О1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи О1п Рго
65 70 75 80
О1и Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз Ьеи О1п Азр Зег Азп Туг Рго Ьеи
85 90 95
ТЬг РЬе О1у О1у О1у ТЬг Ьуз Уа1 О1и 11е Ьуз
100 105
<210> 491
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 491
саддасаЕЕа даааЕдаЕ
<210> 492
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
18
<400> 492
О1п Азр 11е Агд Азп Азр 1 5
<210> 493
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 493 дсЕдсаЕсс
<210> 494 <211> 3
9
- 141 028879
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 494
А1а А1а Зег 1
<210> 495
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 495
сЬасаадаЬЬ ссааЬЬассс дсЬсасЬ
27
<210> 496
<211> 9
<212> РКТ
<213> Искусственная
<220>
<223> Синтетический
последовательность
<400> 496
Ьеи О1п Азр Зег Азп Туг Рго Ьеи ТЬг 1 5
<210> 497
<211> 670
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 497
Зег О1и Уа1 О1у Азп Зег О1п А1а Уа1 Суз Рго О1у ТЬг Ьеи Азп О1у
1 5 10 15
Ьеи Зег Уа1 ТЬг О1у Азр А1а О1и Азп О1п Туг О1п ТЬг Ьеи Туг Ьуз
20 25 30
Ьеи Туг О1и Агд Суз О1и Уа1 Уа1 МеЬ О1у Азп Ьеи О1и 11е Уа1 Ьеи
35 40 45
ТЬг О1у Н1з Азп А1а Азр Ьеи Зег РЬе Ьеи О1п Тгр 11е Агд О1и Уа1
50 55 60
ТЬг О1у Туг Уа1 Ьеи Уа1 А1а МеЬ Азп О1и РЬе Зег ТЬг Ьеи Рго Ьеи
65 70 75 80
Рго Азп Ьеи Агд Уа1 Уа1 Агд О1у ТЬг О1п Уа1 Туг Азр О1у Ьуз РЬе
85 90 95
А1а 11е РЬе Уа1 МеЬ Ьеи Азп Туг Азп ТЬг Азп Зег Зег Н1з А1а Ьеи
100 105 110
Агд О1п Ьеи Агд Ьеи ТЬг О1п Ьеи ТЬг О1и 11е Ьеи Зег О1у О1у Уа1
115 120 125
Туг 11е О1и Ьуз Азп Азр Ьуз Ьеи Суз Н1з МеЬ Азр ТЬг 11е Азр Тгр
130 135 140
Агд Азр 11е Уа1 Агд Азр Агд Азр А1а О1и 11е Уа1 Уа1 Ьуз Азр Азп
- 142
028879
145 150 155 160
О1у Агд Зег Суз Рго Рго Суз Н1з О1и Уа1 Суз Ьуз О1у Агд Суз Тгр
165 170 175
О1у Рго О1у Зег О1и Азр Суз О1п ТНг Ьеи ТНг Ьуз ТНг 11е Суз А1а
180 185 190
Рго О1п Суз Азп О1у Н1з Суз РНе О1у Рго Азп Рго Азп О1п Суз Суз
195 200 205
Н1з Азр О1и Суз А1а О1у О1у Суз Зег О1у Рго О1п Азр ТНг Азр Суз
210 215 220
РНе А1а Суз Агд Н1з РНе Азп Азр Зег О1у А1а Суз Уа1 Рго Агд Суз
225 230 235 240
Рго О1п Рго Ьеи Уа1 Туг Азп Ьуз Ьеи ТНг РНе О1п Ьеи О1и Рго Азп
245 250 255
Рго Н1з ТНг Ьуз Туг О1п Туг О1у О1у Уа1 Суз Уа1 А1а Зег Суз Рго
260 265 270
Н1з Азп РНе Уа1 Уа1 Азр О1п ТНг Зег Суз Уа1 Агд А1а Суз Рго Рго
275 280 285
Азр Ьуз МеЬ О1и Уа1 Азр Ьуз Азп О1у Ьеи Ьуз МеЬ Суз О1и Рго Суз
290 295 300
О1у О1у Ьеи Суз Рго Ьуз А1а Суз О1и О1у ТНг О1у Зег О1у Зег Агд
305 310 315 320
РНе О1п ТНг Уа1 Азр Зег Зег Азп 11е Азр О1у РНе Уа1 Азп Суз ТНг
325 330 335
Ьуз 11е Ьеи О1у Азп Ьеи Азр РНе Ьеи 11е ТНг О1у Ьеи Азп О1у Азр
340 345 350
Рго Тгр Н1з Ьуз 11е Рго А1а Ьеи Азр Рго О1и Ьуз Ьеи Азп Уа1 РНе
355 360 365
Агд ТНг Уа1 Агд О1и 11е ТНг О1у Туг Ьеи Азп 11е О1п Зег Тгр Рго
370 375 380
Рго Н1з МеЬ Н1з Азп РНе Зег Уа1 РНе Зег Азп Ьеи ТНг ТНг 11е О1у
385 390 395 400
О1у Агд Зег Ьеи Туг Азп Агд О1у РНе Зег Ьеи Ьеи 11е МеЬ Ьуз Азп
405 410 415
Ьеи Азп Уа1 ТНг Зег Ьеи О1у РНе Агд Зег Ьеи Ьуз О1и 11е Зег А1а
420 425 430
О1у Агд 11е Туг 11е Зег А1а Азп Агд О1п Ьеи Суз Туг Н1з Н1з Зег
435 440 445
Ьеи Азп Тгр ТНг Ьуз Уа1 Ьеи Агд О1у Рго ТНг О1и О1и Агд Ьеи Азр
450 455 460
11е Ьуз Н1з Азп Агд Рго Агд Агд Азр Суз Уа1 А1а О1и О1у Ьуз Уа1
465 470 475 480
Суз Азр Рго Ьеи Суз Зег Зег О1у О1у Суз Тгр О1у Рго О1у Рго О1у
485 490 495
О1п Суз Ьеи Зег Суз Агд Азп Туг Зег Агд О1у О1у Уа1 Суз Уа1 ТНг
500 505 510
Н1з Суз Азп РНе Ьеи Азп О1у О1и Рго Агд О1и РНе А1а Н1з О1и А1а
515 520 525
О1и Суз РНе Зег Суз Н1з Рго О1и Суз О1п Рго МеЬ О1и О1у ТНг А1а
530 535 540
ТНг Суз Азп О1у Зег О1у Зег Азр ТНг Суз А1а О1п Суз А1а Н1з РНе
545 550 555 560
Агд Азр О1у Рго Н1з Суз Уа1 Зег Зег Суз Рго Н1з О1у Уа1 Ьеи О1у
565 570 575
А1а Ьуз О1у Рго 11е Туг Ьуз Туг Рго Азр Уа1 О1п Азп О1и Суз Агд
580 585 590
Рго Суз Н1з О1и Азп Суз ТНг О1п О1у Суз Ьуз О1у Рго О1и Ьеи О1п
595 600 605
Азр Суз Ьеи О1у О1п О1у ТНг Ьуз ТНг Н1з Ьеи Агд Агд О1у Зег О1у
610 615 620
Тгр Агд ТНг Ьуз ТНг Н1з Ьеи Агд Агд О1у Зег А1а Рго Зег Рго Зег
625 630 635 640
Рго Ьеи О1и О1п Ьуз Ьеи 11е Зег О1и О1и Азр Ьеи О1у О1у О1и О1п
645 650 655
- 14З
028879
Ьуз Ьеи 11е Бег О1и О1и Азр Ьеи Нчз Нчз Нчз Нчз Нчз Нчз 660 665 670
<210> 498
<211> 840
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 498
Бег О1и Уа1 О1у Азп Бег О1п А1а Уа1 Суз Рго О1у ТЬг Ьеи Азп О1у
1 5 10 15
Ьеи Бег Уа1 ТЬг О1у Азр А1а О1и Азп О1п Туг О1п ТЬг Ьеи Туг Ьуз
20 25 30
Ьеи Туг О1и Агд Суз О1и Уа1 Уа1 МеЬ О1у Азп Ьеи О1и 11е Уа1 Ьеи
35 40 45
ТЬг О1у Нчз Азп А1а Азр Ьеи Бег РЬе Ьеи О1п Тгр 11е Агд О1и Уа1
50 55 60
ТЬг О1у Туг Уа1 Ьеи Уа1 А1а МеЬ Азп О1и РЬе Бег ТЬг Ьеи Рго Ьеи
65 70 75 80
Рго Азп Ьеи Агд Уа1 Уа1 Агд О1у ТЬг О1п Уа1 Туг Азр О1у Ьуз РЬе
85 90 95
А1а 11е РЬе Уа1 МеЬ Ьеи Азп Туг Азп ТЬг Азп Бег Бег Нчз А1а Ьеи
100 105 110
Агд О1п Ьеи Агд Ьеи ТЬг О1п Ьеи ТЬг О1и 11е Ьеи Бег О1у О1у Уа1
115 120 125
Туг 11е О1и Ьуз Азп Азр Ьуз Ьеи Суз Нчз МеЬ Азр ТЬг 11е Азр Тгр
130 135 140
Агд Азр 11е Уа1 Агд Азр Агд Азр А1а О1и 11е Уа1 Уа1 Ьуз Азр Азп
145 150 155 160
О1у Агд Бег Суз Рго Рго Суз Нчз О1и Уа1 Суз Ьуз О1у Агд Суз Тгр
165 170 175
О1у Рго О1у Бег О1и Азр Суз О1п ТЬг Ьеи ТЬг Ьуз ТЬг 11е Суз А1а
180 185 190
Рго О1п Суз Азп О1у Нчз Суз РЬе О1у Рго Азп Рго Азп О1п Суз Суз
195 200 205
Нчз Азр О1и Суз А1а О1у О1у Суз Бег О1у Рго О1п Азр ТЬг Азр Суз
210 215 220
РЬе А1а Суз Агд Нчз РЬе Азп Азр Бег О1у А1а Суз Уа1 Рго Агд Суз
225 230 235 240
Рго О1п Рго Ьеи Уа1 Туг Азп Ьуз Ьеи ТЬг РЬе О1п Ьеи О1и Рго Азп
245 250 255
Рго Нчз ТЬг Ьуз Туг О1п Туг О1у О1у Уа1 Суз Уа1 А1а Бег Суз Рго
260 265 270
Нчз Азп РЬе Уа1 Уа1 Азр О1п ТЬг Бег Суз Уа1 Агд А1а Суз Рго Рго
275 280 285
Азр Ьуз МеЬ О1и Уа1 Азр Ьуз Азп О1у Ьеи Ьуз МеЬ Суз О1и Рго Суз
290 295 300
О1у О1у Ьеи Суз Рго Ьуз А1а Суз О1и О1у ТЬг О1у Бег О1у Бег Агд
305 310 315 320
РЬе О1п ТЬг Уа1 Азр Бег Бег Азп 11е Азр О1у РЬе Уа1 Азп Суз ТЬг
325 330 335
Ьуз 11е Ьеи О1у Азп Ьеи Азр РЬе Ьеи 11е ТЬг О1у Ьеи Азп О1у Азр
340 345 350
Рго Тгр Нчз Ьуз 11е Рго А1а Ьеи Азр Рго О1и Ьуз Ьеи Азп Уа1 РЬе
355 360 365
Агд ТЬг Уа1 Агд О1и 11е ТЬг О1у Туг Ьеи Азп 11е О1п Бег Тгр Рго
370 375 380
Рго Нчз МеЬ Нчз Азп РЬе Бег Уа1 РЬе Бег Азп Ьеи ТЬг ТЬг 11е О1у
385 390 395 400
- 144
028879
О1у Агд Зег Ьеи Туг 405 Азп Агд О1у РИе Зег 410 Ьеи Ьеи 11е МеС Ьуз 415 Азп
Ьеи Азп Уа1 ТИг Зег Ьеи О1у РИе Агд Зег Ьеи Ьуз О1и 11е Зег А1а
420 425 430
О1у Агд 11е Туг 11е Зег А1а Азп Агд О1п Ьеи Суз Туг Н1з Н1з Зег
435 440 445
Ьеи Азп Тгр ТИг Ьуз Уа1 Ьеи Агд О1у Рго ТИг О1и О1и Агд Ьеи Азр
450 455 460
11е Ьуз Н1з Азп Агд Рго Агд Агд Азр Суз Уа1 А1а О1и О1у Ьуз Уа1
465 470 475 480
Суз Азр Рго Ьеи Суз Зег Зег О1у О1у Суз Тгр О1у Рго О1у Рго О1у
485 490 495
О1п Суз Ьеи Зег Суз Агд Азп Туг Зег Агд О1у О1у Уа1 Суз Уа1 ТИг
500 505 510
Н1з Суз Азп РИе Ьеи Азп О1у О1и Рго Агд О1и РИе А1а Н1з О1и А1а
515 520 525
О1и Суз РИе Зег Суз Н1з Рго О1и Суз О1п Рго МеС О1и О1у ТИг А1а
530 535 540
ТИг Суз Азп О1у Зег О1у Зег Азр ТИг Суз А1а О1п Суз А1а Н1з РИе
545 550 555 560
Агд Азр О1у Рго Н1з Суз Уа1 Зег Зег Суз Рго Н1з О1у Уа1 Ьеи О1у
565 570 575
А1а Ьуз О1у Рго 11е Туг Ьуз Туг Рго Азр Уа1 О1п Азп О1и Суз Агд
580 585 590
Рго Суз Н1з О1и Азп Суз ТИг О1п О1у Суз Ьуз О1у Рго О1и Ьеи О1п
595 600 605
Азр Суз Ьеи О1у О1п Азр Ьуз ТИг Н1з ТИг Суз Рго Рго Суз Рго А1а
610 615 620
Рго О1и Ьеи Ьеи О1у О1у Рго Зег Уа1 РИе Ьеи РИе Рго Рго Ьуз Рго
625 630 635 640
Ьуз Азр ТИг Ьеи МеС 11е Зег Агд ТИг Рго О1и Уа1 ТИг Суз Уа1 Уа1
645 650 655
Уа1 Азр Уа1 Зег Н1з О1и Азр Рго О1и Уа1 Ьуз РИе Азп Тгр Туг Уа1
660 665 670
Азр О1у Уа1 О1и Уа1 Н1з Азп А1а Ьуз ТИг Ьуз Рго Агд О1и О1и О1п
675 680 685
Туг Азп Зег ТИг Туг Агд Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ьеи ТИг Уа1 Ьеи Н1з О1п
690 695 700
Азр Тгр Ьеи Азп О1у Ьуз О1и Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Зег Азп Ьуз А1а
705 710 715 720
Ьеи Рго А1а Рго 11е О1и Ьуз ТИг 11е Зег Ьуз А1а Ьуз О1у О1п Рго
725 730 735
Агд О1и Рго О1п Уа1 Туг ТИг Ьеи Рго Рго Зег Агд Азр О1и Ьеи ТИг
740 745 750
Ьуз Азп О1п Уа1 Зег Ьеи ТИг Суз Ьеи Уа1 Ьуз О1у РИе Туг Рго Зег
755 760 765
Азр 11е А1а Уа1 О1и Тгр О1и Зег Азп О1у О1п Рго О1и Азп Азп Туг
770 775 780
Ьуз ТИг ТИг Рго Рго Уа1 Ьеи Азр Зег Азр О1у Зег РИе РИе Ьеи Туг
785 790 795 800
Зег Ьуз Ьеи ТИг Уа1 Азр Ьуз Зег Агд Тгр О1п О1п О1у Азп Уа1 РИе
805 810 815
Зег Суз Зег Уа1 МеС Н1з О1и А1а Ьеи Нтз Азп Нтз Туг ТИг О1п Ьуз
820 825 830
Зег Ьеи Зег Ьеи Зег Рго О1у Ьуз
835 840
<210> 499
<211> 846
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
- 145
028879
<220>
<223> Синтетический
<400> 499
Зег О1и Уа1 О1у Азп Зег О1п А1а Уа1 Суз Рго О1у ТЪг Ьеи Азп О1у
1 5 10 15
Ьеи Зег Уа1 ТЪг О1у Азр А1а О1и Азп О1п Туг О1п ТЪг Ьеи Туг Ьуз
20 25 30
Ьеи Туг О1и Агд Суз О1и Уа1 Уа1 Меб О1у Азп Ьеи О1и 11е Уа1 Ьеи
35 40 45
ТЪг О1у Нчз Азп А1а Азр Ьеи Зег РЪе Ьеи О1п Тгр 11е Агд О1и Уа1
50 55 60
ТЪг О1у Туг Уа1 Ьеи Уа1 А1а Меб Азп О1и РЪе Зег ТЪг Ьеи Рго Ьеи
65 70 75 80
Рго Азп Ьеи Агд Уа1 Уа1 Агд О1у ТЪг О1п Уа1 Туг Азр О1у Ьуз РЪе
85 90 95
А1а 11е РЪе Уа1 Меб Ьеи Азп Туг Азп ТЪг Азп Зег Зег Нчз А1а Ьеи
100 105 110
Агд О1п Ьеи Агд Ьеи ТЪг О1п Ьеи ТЪг О1и 11е Ьеи Зег О1у О1у Уа1
115 120 125
Туг 11е О1и Ьуз Азп Азр Ьуз Ьеи Суз Нчз Меб Азр ТЪг 11е Азр Тгр
130 135 140
Агд Азр 11е Уа1 Агд Азр Агд Азр А1а О1и 11е Уа1 Уа1 Ьуз Азр Азп
145 150 155 160
О1у Агд Зег Суз Рго Рго Суз Нчз О1и Уа1 Суз Ьуз О1у Агд Суз Тгр
165 170 175
О1у Рго О1у Зег О1и Азр Суз О1п ТЪг Ьеи ТЪг Ьуз ТЪг 11е Суз А1а
180 185 190
Рго О1п Суз Азп О1у Нчз Суз РЪе О1у Рго Азп Рго Азп О1п Суз Суз
195 200 205
Нчз Азр О1и Суз А1а О1у О1у Суз Зег О1у Рго О1п Азр ТЪг Азр Суз
210 215 220
РЪе А1а Суз Агд Нчз РЪе Азп Азр Зег О1у А1а Суз Уа1 Рго Агд Суз
225 230 235 240
Рго О1п Рго Ьеи Уа1 Туг Азп Ьуз Ьеи ТЪг РЪе О1п Ьеи О1и Рго Азп
245 250 255
Рго Нчз ТЪг Ьуз Туг О1п Туг О1у О1у Уа1 Суз Уа1 А1а Зег Суз Рго
260 265 270
Нчз Азп РЪе Уа1 Уа1 Азр О1п ТЪг Зег Суз Уа1 Агд А1а Суз Рго Рго
275 280 285
Азр Ьуз Меб О1и Уа1 Азр Ьуз Азп О1у Ьеи Ьуз Меб Суз О1и Рго Суз
290 295 300
О1у О1у Ьеи Суз Рго Ьуз А1а Суз О1и О1у ТЪг О1у Зег О1у Зег Агд
305 310 315 320
РЪе О1п ТЪг Уа1 Азр Зег Зег Азп 11е Азр О1у РЪе Уа1 Азп Суз ТЪг
325 330 335
Ьуз 11е Ьеи О1у Азп Ьеи Азр РЪе Ьеи 11е ТЪг О1у Ьеи Азп О1у Азр
340 345 350
Рго Тгр Нчз Ьуз 11е Рго А1а Ьеи Азр Рго О1и Ьуз Ьеи Азп Уа1 РЪе
355 360 365
Агд ТЪг Уа1 Агд О1и 11е ТЪг О1у Туг Ьеи Азп 11е О1п Зег Тгр Рго
370 375 380
Рго Нчз Меб Нчз Азп РЪе Зег Уа1 РЪе Зег Азп Ьеи ТЪг ТЪг 11е О1у
385 390 395 400
О1у Агд Зег Ьеи Туг Азп Агд О1у РЪе Зег Ьеи Ьеи 11е Меб Ьуз Азп
405 410 415
Ьеи Азп Уа1 ТЪг Зег Ьеи О1у РЪе Агд Зег Ьеи Ьуз О1и 11е Зег А1а
420 425 430
О1у Агд 11е Туг 11е Зег А1а Азп Агд О1п Ьеи Суз Туг Нчз Нчз Зег
435 440 445
Ьеи Азп Тгр ТЪг Ьуз Уа1 Ьеи Агд О1у Рго ТЪг О1и О1и Агд Ьеи Азр
450 455 460
11е Ьуз Нчз Азп Агд Рго Агд Агд Азр Суз Уа1 А1а О1и О1у Ьуз Уа1
- 146
028879
465 470 475 480
Суз Азр Рго Ьеи Суз Зег Зег О1у О1у Суз Тгр О1у Рго О1у Рго О1у
485 490 495
О1п Суз Ьеи Зег Суз Агд Азп Туг Зег Агд О1у О1у Уа1 Суз Уа1 ТИг
500 505 510
Н1з Суз Азп РИе Ьеи Азп О1у О1и Рго Агд О1и РИе А1а Н1з О1и А1а
515 520 525
О1и Суз РИе Зег Суз Н1з Рго О1и Суз О1п Рго МеС О1и О1у ТИг А1а
530 535 540
ТИг Суз Азп О1у Зег О1у Зег Азр ТИг Суз А1а О1п Суз А1а Н1з РИе
545 550 555 560
Агд Азр О1у Рго Н1з Суз Уа1 Зег Зег Суз Рго Н1з О1у Уа1 Ьеи О1у
565 570 575
А1а Ьуз О1у Рго 11е Туг Ьуз Туг Рго Азр Уа1 О1п Азп О1и Суз Агд
580 585 590
Рго Суз Н1з О1и Азп Суз ТИг О1п О1у Суз Ьуз О1у Рго О1и Ьеи О1п
595 600 605
Азр Суз Ьеи О1у О1п О1и Рго Агд О1у Рго ТИг 11е Ьуз Рго Суз Рго
610 615 620
Рго Суз Ьуз Суз Рго А1а Рго Азп Ьеи Ьеи О1у О1у Рго Зег Уа1 РИе
625 630 635 640
11е РИе Рго Рго Ьуз 11е Ьуз Азр Уа1 Ьеи МеС 11е Зег Ьеи Зег Рго
645 650 655
11е Уа1 ТИг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег О1и Азр Азр Рго Азр Уа1
660 665 670
О1п 11е Зег Тгр РИе Уа1 Азп Азп Уа1 О1и Уа1 Н1з ТИг А1а О1п ТИг
675 680 685
О1п ТИг Н1з Агд О1и Азр Туг Азп Зег ТИг Ьеи Агд Уа1 Уа1 Зег А1а
690 695 700
Ьеи Рго 11е О1п Н1з О1п Азр Тгр МеС Зег О1у Ьуз О1и РИе Ьуз Суз
705 710 715 720
Ьуз Уа1 Азп Азп Ьуз Азр Ьеи Рго А1а Рго 11е О1и Агд ТИг 11е Зег
725 730 735
Ьуз Рго Ьуз О1у Зег Уа1 Агд А1а Рго О1п Уа1 Туг Уа1 Ьеи Рго Рго
740 745 750
Рго О1и О1и О1и МеС ТИг Ьуз Ьуз О1п Уа1 ТИг Ьеи ТИг Суз МеС Уа1
755 760 765
ТИг Азр РИе МеС Рго О1и Азр 11е Туг Уа1 О1и Тгр ТИг Азп Азп О1у
770 775 780
Ьуз ТИг О1и Ьеи Азп Туг Ьуз Азп ТИг О1и Рго Уа1 Ьеи Азр Зег Азр
785 790 795 800
О1у Зег Туг РИе МеС Туг Зег Ьуз Ьеи Агд Уа1 О1и Ьуз Ьуз Азп Тгр
805 810 815
Уа1 О1и Агд Азп Зег Туг Зег Суз Зег Уа1 Уа1 Н1з О1и О1у Ьеи Нтз
820 825 830
Азп Нтз Нтз ТИг ТИг Ьуз Зег РИе Зег Агд ТИг Рго О1у Ьуз
835 840 845
<210> 500
<211> 227
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический
<400> 500
Азр Ьуз ТИг Н1з ТИг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго О1и Ьеи Ьеи О1у
1 5 10 15
О1у Рго Зег Уа1 РИе Ьеи РИе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТИг Ьеи МеС
20 25 30
11е Зег Агд ТИг Рго О1и Уа1 ТИг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нтз
- 147
028879
35 40 45
О1и Азр Рго О1и Уа1 Ьуз РИе Азп Тгр Туг Уа1 Азр О1у Уа1 О1и Уа1
50 55 60
Н1з Азп А1а Ьуз ТИг Ьуз Рго Агд О1и О1и О1п Туг Азп Бег ТИг Туг
65 70 75 80
Агд Уа1 Уа1 Бег Уа1 Ьеи ТИг Уа1 Ьеи Н1з О1п Азр Тгр Ьеи Азп О1у
85 90 95
Ьуз О1и Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Бег Азп Ьуз А1а Ьеи Рго А1а Рго 11е
100 105 110
О1и Ьуз ТИг 11е Бег Ьуз А1а Ьуз О1у О1п Рго Агд О1и Рго О1п Уа1
115 120 125
Туг ТИг Ьеи Рго Рго Бег Агд Азр О1и Ьеи ТИг Ьуз Азп О1п Уа1 Бег
130 135 140
Ьеи ТИг Суз Ьеи Уа1 Ьуз О1у РИе Туг Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 О1и
145 150 155 160
Тгр О1и Бег Азп О1у О1п Рго О1и Азп Азп Туг Ьуз ТИг ТИг Рго Рго
165 170 175
Уа1 Ьеи Азр Бег Азр О1у Бег РИе РИе Ьеи Туг Бег Ьуз Ьеи ТИг Уа1
180 185 190
Азр Ьуз Бег Агд Тгр О1п О1п О1у Азп Уа1 РИе Бег Суз Бег Уа1 МеЕ
195 200 205
Н1з О1и А1а Ьеи Нтз Азп Н1з Туг ТИг О1п Ьуз Бег Ьеи Бег Ьеи Бег
210 215 220
Рго О1у Ьуз
225

Claims (17)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Выделенное антитело или его антиген-связывающий фрагмент, который специфически связывает ЕгЬВЗ, где антитело или его антиген-связывающий фрагмент содержат гипервариабельные участки (СИК) пары вариабельных областей тяжелой и легкой цепи (НСУК/ЬСУК), выбранной из группы ЛЕС ГО N0: 306/314 и 322/330.
  2. 2. Выделенное антитело или его антиген-связывающий фрагмент по п.1, которые связывают эпитоп в пределах домена III внеклеточного домена ЕгЬВ3 (аминокислоты с 309 по 499 ЛЕС ГО N0: 498) и блокируют связывание ИКО1 с ЕгЬВ3 с 1С50 менее чем 30 пМ в ИФА при 25°С.
  3. 3. Антитело или его антиген-связывающий фрагмент по п.2, которые взаимодействуют с одной или более аминокислотами, расположенными в пределах одного или нескольких аминокислотных сегментов, выбранных из группы, состоящей из аминокислот 345-367 ЛЕС ГО N0: 498, аминокислот 423-439 ЛЕС ГО N0: 498 и аминокислот 451-463 ЛЕС ГО N0: 498.
  4. 4. Антитело или его антиген-связывающий фрагмент по п.3, которые взаимодействуют с аминокислотами 345-367 ЛЕС ГО N0: 498, аминокислотами 423-439 ЛЕС ГО N0: 498 и аминокислотами 451-463 ЛЕС ГО N0: 498, как определяется при помощи водород-дейтериевого обмена.
  5. 5. Выделенное антитело или его антиген-связывающий фрагмент по п.1, содержащие домены НСИК1-НСИК2-НСИК3-ЕСИК1-ЕСИК2-ЕСИК3, соответственно, выбранные из ЛТ) ГО N0: 308-310312-316-318-320 и 324-326-328-332-334-336.
  6. 6. Выделенное антитело или его антиген-связывающий фрагмент по п.5, где антитело или его антиген-связывающий фрагмент содержат пару аминокислотных последовательностей НСУК/ЬСУК, выбранных из ЛЕС ГО N0: 306/314 и 322/330.
  7. 7. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело или его антиген-связывающий фрагмент по любому из пп.1-6 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель, для лечения заболеваний и расстройств, вызванных или связанных с ЕгЬВ3-активностью и/или передачей сигнала, опосредованной ЕгЬВ3.
  8. 8. Способ ингибирования опухолевого роста, включающий введение фармацевтической композиции по п.7 индивидууму с опухолью.
  9. 9. Способ по п.8, где опухоль выбрана из группы, состоящей из опухоли почки, опухоли поджелудочной железы, опухоли молочной железы, опухоли предстательной железы, опухоли толстой кишки, опухоли желудка, опухоли яичников, опухоли легкого и опухоли кожи.
  10. 10. Способ ингибирования или ослабления роста опухоли у индивидуума, включающий введение индивидууму антитела или его антиген-связывающего фрагмента по любому из пп.1-6 и второго терапевтического средства, где второе терапевтическое средство представляет собой антитело или его антиген-связывающий фрагмент, которые специфически связывают ЕОРК или НЕК2.
  11. 11. Способ по п.10, где второе терапевтическое средство представляет собой антитело или его анти- 148 028879
    ген-связывающий фрагмент, которые специфически связывают ЕСРК.
  12. 12. Способ по п.10, где второе терапевтическое средство представляет собой антитело или его антиген-связывающий фрагмент, которые специфически связывают НЕК2.
  13. 13. Применение фармацевтической композиции по п.7 для ингибирования опухолевого роста у индивидуума с опухолью.
  14. 14. Применение по п.13, где опухоль выбрана из группы, состоящей из опухоли почки, опухоли поджелудочной железы, опухоли молочной железы, опухоли предстательной железы, опухоли толстой кишки, опухоли желудка, опухоли яичников, опухоли легкого и опухоли кожи.
  15. 15. Применение антитела или его антиген-связывающего фрагмента по любому из пп.1-6 при получении лекарственного средства для ингибирования или ослабления опухолевого роста у индивидуума, где лекарственное средство предназначено для использования в комбинации со вторым лекарственным средством, где второе лекарственное средство представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связывают ЕСРК или НЕК2.
  16. 16. Применение по п.15, где второе лекарственное средство представляет собой антитело или его антиген-связывающий фрагмент, которые специфически связывают ЕСРК.
  17. 17. Применение по п.15, где второе лекарственное средство представляет собой антитело или его антиген-связывающий фрагмент, которые специфически связывают НЕК2.
EA201490717A 2011-09-30 2012-09-21 АНТИТЕЛА К ErbB3 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ EA028879B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161541312P 2011-09-30 2011-09-30
US201161557460P 2011-11-09 2011-11-09
US201261614565P 2012-03-23 2012-03-23
PCT/US2012/056446 WO2013048883A2 (en) 2011-09-30 2012-09-21 Anti-erbb3 antibodies and uses thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201490717A1 EA201490717A1 (ru) 2014-09-30
EA028879B1 true EA028879B1 (ru) 2018-01-31

Family

ID=46970445

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490717A EA028879B1 (ru) 2011-09-30 2012-09-21 АНТИТЕЛА К ErbB3 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
EA201791393A EA201791393A3 (ru) 2011-09-30 2012-09-21 Антитела к erbb3 и их применение

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201791393A EA201791393A3 (ru) 2011-09-30 2012-09-21 Антитела к erbb3 и их применение

Country Status (21)

Country Link
US (5) US8791244B2 (ru)
EP (1) EP2760893B1 (ru)
JP (2) JP6271432B2 (ru)
KR (1) KR20140069331A (ru)
CN (1) CN103917562B (ru)
AR (1) AR088171A1 (ru)
AU (2) AU2012316402B2 (ru)
BR (1) BR112014007382A2 (ru)
CA (1) CA2849508C (ru)
CL (1) CL2014000758A1 (ru)
CO (1) CO6940383A2 (ru)
EA (2) EA028879B1 (ru)
ES (1) ES2694153T3 (ru)
HK (1) HK1200468A1 (ru)
IL (2) IL231318B (ru)
IN (1) IN2014CN03042A (ru)
MX (1) MX357391B (ru)
SG (1) SG11201400150TA (ru)
TW (2) TW201329103A (ru)
WO (1) WO2013048883A2 (ru)
ZA (1) ZA201401424B (ru)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE029026T2 (en) 2009-12-22 2017-01-30 Roche Glycart Ag Anti-HER3 antibodies and their applications
IN2014CN03042A (ru) 2011-09-30 2015-07-03 Regeneron Pharma
US9273143B2 (en) 2011-09-30 2016-03-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions comprising a combination of an anti-ErbB3 antibody and an anti-EGFR antibody
EP3608340A1 (en) 2011-11-23 2020-02-12 Medlmmune, LLC Binding molecules specific for her3 and uses thereof
SG11201502534UA (en) 2012-11-08 2015-05-28 Hoffmann La Roche Anti-her3/her4 antigen binding proteins binding to the beta-hairpin of her3 and the beta-hairpin of her4
US20140309278A1 (en) * 2013-03-15 2014-10-16 Mirna Therapeutics, Inc. Combination cancer treatments utilizing micrornas and egfr-tki inhibitors
US11305012B2 (en) 2013-09-24 2022-04-19 Medimmune, Llc Binding molecules specific for HER3 and uses thereof
WO2015058108A1 (en) * 2013-10-17 2015-04-23 Sanford-Burnham Medical Research Institute Drug sensitivity biomarkers and methods of identifying and using drug sensitivity biomarkers
KR102127408B1 (ko) 2014-01-29 2020-06-29 삼성전자주식회사 항 Her3 scFv 단편 및 이를 포함하는 항 c-Met/항 Her3 이중 특이 항체
SG11201607109QA (en) * 2014-02-28 2016-09-29 Merus Nv Antibodies that bind egfr and erbb3
SG11201607104RA (en) 2014-02-28 2016-09-29 Merus Nv Antibody that binds erbb-2 and erbb-3
WO2015157634A1 (en) * 2014-04-11 2015-10-15 Kolltan Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbb antibodies and methods of use thereof
WO2016011432A2 (en) * 2014-07-17 2016-01-21 Czerniecki Brian J Identification of immunogenic mhc class ii peptides for immune-based therapy
CN110642952B (zh) * 2014-08-14 2021-05-25 上海生物制品研究所有限责任公司 抗her3抗体、其制法及其应用
CA2959775A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Yeda Research And Development Co. Ltd. Compositions and methods for treating cancer resistant to a tyrosine kinase inhibitor (tki)
US10526416B2 (en) 2014-09-08 2020-01-07 Yeda Research And Development Co. Ltd. Anti-HER3 antibodies and uses of same
US10308711B2 (en) * 2015-08-14 2019-06-04 Allergan, Inc. Heavy chain only antibodies to PDGF
DK3365373T3 (da) 2015-10-23 2021-04-06 Merus Nv Bindingsmolekyler, der hæmmer cancervækst
KR101746152B1 (ko) * 2015-12-07 2017-06-13 주식회사 이수앱지스 ＥｒｂＢ3에 특이적으로 결합하는 항체 및 그의 용도
MA43416A (fr) 2015-12-11 2018-10-17 Regeneron Pharma Méthodes pour ralentir ou empêcher la croissance de tumeurs résistantes au blocage de l'egfr et/ou d'erbb3
SG10201601719RA (en) 2016-03-04 2017-10-30 Agency Science Tech & Res Anti-LAG-3 Antibodies
SG10201603721TA (en) 2016-05-10 2017-12-28 Agency Science Tech & Res Anti-CTLA-4 Antibodies
JP6729926B2 (ja) * 2016-05-12 2020-07-29 国立大学法人神戸大学 ＥｒｂＢ３活性化に伴うシグナルの伝達抑制物質及びそのスクリーニング方法
JP7181181B2 (ja) 2017-02-28 2022-11-30 第一三共株式会社 抗ｈｅｒ３抗体－薬物コンジュゲート投与によるｅｇｆｒ－ｔｋｉ抵抗性の非小細胞肺癌の治療方法
IL269656B1 (en) 2017-03-31 2024-02-01 Merus Nv Bispecific antibodies that bind ERBB-2 and ERBB3 for use in the treatment of cells with NRG1 fusion gene
MA49846A (fr) 2017-08-09 2020-06-17 Merus Nv Anticorps qui se lient à l'egfr et à cmet
CN107860925B (zh) * 2017-11-03 2019-07-12 合肥瀚科迈博生物技术有限公司 用于检测血清中HuA21抗体的ELISA检测试剂盒
WO2019185164A1 (en) 2018-03-29 2019-10-03 Hummingbird Bioscience Holdings Pte. Ltd. Her3 antigen-binding molecules
US20220072144A1 (en) 2018-09-20 2022-03-10 Daiichi Sankyo Company, Limited Treatment of her3-mutated cancer by administration of anti-her3 antibody-drug conjugate
WO2020072937A1 (en) * 2018-10-04 2020-04-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Antibodies against basement membrane zone adhesion proteins bp180 and bp230

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007077028A2 (en) * 2005-12-30 2007-07-12 U3 Pharma Ag Antibodies directed to her-3 and uses thereof
WO2008100624A2 (en) * 2007-02-16 2008-08-21 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Antibodies against erbb3 and uses thereof
WO2011044311A2 (en) * 2009-10-09 2011-04-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Generation, characterization and uses thereof of anti-her 3 antibodies
WO2011076683A1 (en) * 2009-12-22 2011-06-30 Roche Glycart Ag Anti-her3 antibodies and uses thereof
WO2011136911A2 (en) * 2010-04-09 2011-11-03 Aveo Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbb3 antibodies

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4943533A (en) 1984-03-01 1990-07-24 The Regents Of The University Of California Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
US5183884A (en) 1989-12-01 1993-02-02 United States Of America Dna segment encoding a gene for a receptor related to the epidermal growth factor receptor
LU91067I2 (fr) 1991-06-14 2004-04-02 Genentech Inc Trastuzumab et ses variantes et dérivés immuno chimiques y compris les immotoxines
AU2071695A (en) 1994-03-17 1995-10-03 Merck Patent Gmbh Anti-EGFR single-chain FVS and anti-EGFR antibodies
US7060808B1 (en) 1995-06-07 2006-06-13 Imclone Systems Incorporated Humanized anti-EGF receptor monoclonal antibody
US5968511A (en) 1996-03-27 1999-10-19 Genentech, Inc. ErbB3 antibodies
JP3925943B2 (ja) 1996-03-27 2007-06-06 ジェネンテック インコーポレーテッド ＥｒｂＢ３抗体
US20010023241A1 (en) 1998-02-04 2001-09-20 Sliwkowski Mark X. Use of heregulin as a growth factor
DK1510579T3 (da) 1998-02-04 2009-11-30 Genentech Inc Anvendelse af heregulin som en epitelcellevækstfaktor
US7087411B2 (en) 1999-06-08 2006-08-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fusion protein capable of binding VEGF
EP1228766A1 (en) 2001-01-31 2002-08-07 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. PYK2 phosphorylation by HER3 induces tumor invasion
IL159225A0 (en) 2001-06-13 2004-06-01 Genmab As Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor (egfr)
US7595378B2 (en) 2001-06-13 2009-09-29 Genmab A/S Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor (EGFR)
CA2450793A1 (en) * 2001-06-20 2002-12-27 Prochon Biotech Ltd. Antibodies that block receptor protein tyrosine kinase activation, methods of screening for and uses thereof
WO2003012072A2 (en) 2001-08-03 2003-02-13 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Monoclonal antibodies to activated erbb family members and methods of use thereof
EP1283053A1 (en) 2001-08-09 2003-02-12 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Inhibitors of HER3 activity
US7332585B2 (en) 2002-04-05 2008-02-19 The Regents Of The California University Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof
US7332580B2 (en) 2002-04-05 2008-02-19 The Regents Of The University Of California Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof
BR0312534A (pt) 2002-07-15 2007-03-13 Genentech Inc método de identificação de um tumor, método para a identificação de células de tumor, método para prever a resposta de um indivìduo diagnosticado com um tumor de her2-positivo, método para a identificação de um individuo responsivo ao tratamento com anticorpo anti-her2 e métodos de tratamento de um paciente e artigo de manufatura
US7291293B2 (en) 2003-02-28 2007-11-06 Northwestern University Vapor deposited electro-optic films self-assembled through hydrogen bonding
KR20160114727A (ko) * 2003-05-30 2016-10-05 제넨테크, 인크. 항-ｖｅｇｆ 항체를 사용한 치료
US8323987B2 (en) 2004-02-17 2012-12-04 The University Of North Carolina At Chapel Hill Modulation of epidermal growth factor heterodimer activity
EP1740946B1 (en) 2004-04-20 2013-11-06 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20
CA2629095A1 (en) * 2005-11-12 2007-05-24 Eli Lily And Company Anti-egfr antibodies
US7498142B2 (en) 2006-01-31 2009-03-03 Yeda Research And Development Co., Ltd. Methods of identifying combinations of antibodies with an improved anti-tumor activity and compositions and methods using the antibodies
TW200813091A (en) 2006-04-10 2008-03-16 Amgen Fremont Inc Targeted binding agents directed to uPAR and uses thereof
ATE537190T1 (de) 2006-06-02 2011-12-15 Regeneron Pharma Hochaffine antikörper gegen den humanen il-6- rezeptor
NO347649B1 (no) 2006-12-14 2024-02-12 Regeneron Pharma Humant antistoff eller antistoff fragment som spesifikt binder human deltaliknende ligand 4 (hDII4), nukleinsyremolekyl som koder for slike og vektor og vert-vektorsystemer, samt fremgangsmåte for fremstilling, sammensetning og anvendelse.
EP2138511A1 (en) 2008-06-27 2009-12-30 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. HER3 as a determinant for the prognosis of melanoma
PE20120015A1 (es) * 2008-08-15 2012-01-26 Merrimack Pharmaceuticals Inc Metodos y sistemas para predecir la respuesta de las celulas tumorales a un agente terapeutico
AU2010204555B2 (en) * 2009-01-19 2013-03-07 Abbvie Inc. Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer and immune and autoimmune diseases
WO2010085845A1 (en) 2009-01-28 2010-08-05 The University Of Queensland Cancer therapy and/or diagnosis
SG174378A1 (en) * 2009-03-20 2011-10-28 Genentech Inc Bispecific anti-her antibodies
US8362215B2 (en) 2009-04-29 2013-01-29 Trellis Bioscience, Llc Antibodies immunoreactive with heregulin-coupled HER3
BR112012003809A2 (pt) 2009-08-21 2019-09-24 Merrimack Pharmaceuticals Inc anticorpa monoclonal isolado ou porção de ligação a antígeno do mesmo, composição e, método para tratar câncer em um indivíduo.
WO2011056997A1 (en) 2009-11-04 2011-05-12 Fabrus Llc Methods for affinity maturation-based antibody optimization
EP2896632B1 (en) 2009-11-13 2017-10-25 Daiichi Sankyo Europe GmbH Material and methods for treating or preventing HER-3 associated diseases
MX348312B (es) * 2010-03-02 2017-06-06 Abbvie Inc Proteínas terapéuticas de enlace dll4.
PL2544680T3 (pl) 2010-03-11 2015-08-31 Merrimack Pharmaceuticals Inc Zastosowanie inhibitorów ERBB1 w leczeniu potrójnie ujemnego raka gruczołu sutkowego
WO2012019024A2 (en) 2010-08-04 2012-02-09 Immunogen, Inc. Her3-binding molecules and immunoconjugates thereof
PE20140230A1 (es) 2010-08-20 2014-02-26 Novartis Ag Anticuerpos para el receptor del factor de crecimiento epidermico 3(her3)
IN2014CN03042A (ru) * 2011-09-30 2015-07-03 Regeneron Pharma
US9273143B2 (en) 2011-09-30 2016-03-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions comprising a combination of an anti-ErbB3 antibody and an anti-EGFR antibody
TW201843172A (zh) 2012-06-25 2018-12-16 美商再生元醫藥公司 抗－ｅｇｆｒ抗體及其用途

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007077028A2 (en) * 2005-12-30 2007-07-12 U3 Pharma Ag Antibodies directed to her-3 and uses thereof
WO2008100624A2 (en) * 2007-02-16 2008-08-21 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Antibodies against erbb3 and uses thereof
WO2011044311A2 (en) * 2009-10-09 2011-04-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Generation, characterization and uses thereof of anti-her 3 antibodies
WO2011076683A1 (en) * 2009-12-22 2011-06-30 Roche Glycart Ag Anti-her3 antibodies and uses thereof
WO2011136911A2 (en) * 2010-04-09 2011-11-03 Aveo Pharmaceuticals, Inc. Anti-erbb3 antibodies

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AURISICCHIO L., MARRA E., ROSCILLI G., MANCINI R., CILIBERTO G.: "The promise of anti-ErbB3 monoclonals as new cancer therapeuticals", ONCOTARGET, vol. 3, no. 8, 10 August 2012 (2012-08-10), pages 744-758, XP002690058, the whole document *
G. SALA ET AL.: "An ErbB-3 antibody, MP-RM-1, inhibits tumor growth by blocking ligand-dependent and independent activation of ErbB-3/Akt signaling", ONCOGENE, vol. 31, no. 10, 8 August 2011 (2011-08-08), pages 1275-1286, XP055042235, ISSN: 0950-9232, DOI: 10.1038/onc.2011.322, the whole document *
LUIGI AURISICCHIO ET AL.: "Novel anti-ErbB3 monoclonal antibodies show therapeutic efficacy in xenografted and spontaneous mouse tumors", JOURNAL OF CELLULAR PHYSIOLOGY, 29 December 2011 (2011-12-29), pages n/a-n/a, XP055017238, ISSN: 0021-9541, DOI: 10.1002/jcp.24037, the whole document *
MAITREYEE K. JATHAL ET AL.: "Targeting ErbB3: the New RTK(id) on the Prostate Cancer Block", IMMUNOLOGY ENDOCRINE & METABOLIC AGENTS - MEDICINAL CHEMISTRY (FORMERLY CURRENT MEDICINAL CHEMISTRY - IMMUNOLOGY ENDOCRINE & METABOLIC AGENTS), vol. 11, no. 2, 1 June 2011 (2011-06-01), pages 131-149, XP055024891, ISSN: 1871-5222, DOI: 10.2174/187152211795495643, p. 13-15 *
SCHOEBERL BIRGIT ET AL.: "An ErbB3 antibody, MM-121, is active in cancers with ligand-dependent activation", CANCER RESEARCH, AACR, US PHILADELPHIA, PA, vol. 70, no. 6, 15 March 2010 (2010-03-15), pages 2485-2494, XP002581703, ISSN: 1538-7445, DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-09-3145 [retrieved on 2010-03-09], the whole document *
ZHANG L., LUAN B., YANG K., CASTANARO C., PAPADOPOULOS N., THURSTON G., DALY C: "REGN1400, a fully-human ERBB3 antibody, potently inhibits tumor growth in preclinical models, both as a monotherapy and in combination with EGFR or HER2 blockers", CANCER RESEARCH, vol. 72, no. 8, supplement 1, 15 April 2012 (2012-04-15), page 2718, XP002690057, DOI: 10.1158/1538-7445.AM2012-2718, the whole document *

Also Published As

Publication number Publication date
US20180036406A1 (en) 2018-02-08
SG11201400150TA (en) 2014-03-28
CN103917562A (zh) 2014-07-09
KR20140069331A (ko) 2014-06-09
ZA201401424B (en) 2016-01-27
IL231318A0 (en) 2014-04-30
CN103917562B (zh) 2016-07-06
IL251697A0 (en) 2017-06-29
US9827310B2 (en) 2017-11-28
CA2849508C (en) 2020-12-22
WO2013048883A2 (en) 2013-04-04
US8791244B2 (en) 2014-07-29
MX357391B (es) 2018-07-06
AU2012316402B2 (en) 2017-04-20
US9284380B2 (en) 2016-03-15
CL2014000758A1 (es) 2014-08-22
HK1200468A1 (en) 2015-08-07
JP6563472B2 (ja) 2019-08-21
US20160144029A1 (en) 2016-05-26
EA201791393A3 (ru) 2018-03-30
ES2694153T3 (es) 2018-12-18
NZ623438A (en) 2015-10-30
MX2014003711A (es) 2014-07-22
US20200276307A1 (en) 2020-09-03
JP2018080185A (ja) 2018-05-24
US20130084297A1 (en) 2013-04-04
US20140308279A1 (en) 2014-10-16
AU2017206185A1 (en) 2017-08-03
AR088171A1 (es) 2014-05-14
IL231318B (en) 2018-03-29
TW201329103A (zh) 2013-07-16
TW201809012A (zh) 2018-03-16
JP2014530215A (ja) 2014-11-17
EA201490717A1 (ru) 2014-09-30
EA201791393A2 (ru) 2017-11-30
CA2849508A1 (en) 2013-04-04
US11771762B2 (en) 2023-10-03
AU2012316402A1 (en) 2014-04-17
EP2760893B1 (en) 2018-09-12
WO2013048883A3 (en) 2013-06-27
BR112014007382A2 (pt) 2017-04-04
EP2760893A2 (en) 2014-08-06
IN2014CN03042A (ru) 2015-07-03
US10632194B2 (en) 2020-04-28
CO6940383A2 (es) 2014-05-09
AU2017206185B2 (en) 2019-01-17
JP6271432B2 (ja) 2018-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA028879B1 (ru) АНТИТЕЛА К ErbB3 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
WO2020016662A2 (en) Antibodies specific to trophoblast antigen 2 (trop2)
EA030437B1 (ru) Антитела к cd48 и их применение
EA030421B1 (ru) Антитела анти-egfr и их применение
US20220041748A1 (en) Antibodies specific to muc18
JP2022523710A (ja) Ｃｄ４４に特異的な抗体
EP3821006A2 (en) Antibodies specific to folate receptor alpha
US9273143B2 (en) Methods and compositions comprising a combination of an anti-ErbB3 antibody and an anti-EGFR antibody
JP2022514786A (ja) Ｍｕｃ１８に特異的な抗体
CN116323657B (zh) 同时靶向PD-L1和TGFβ的双功能分子及其医药用途
EP4071170A1 (en) Pharmaceutical composition, preparation method therefor and use thereof
JP2013199492A (ja) Ｆｄｆ０３抗体およびそれの使用
CN114729013A (zh) 抗cd22抗体及其用途
CN114641307A (zh) 抗cd19抗体及其用途
KR20230006824A (ko) Ige 항체를 포함하는 조성물
NZ623438B2 (en) Anti-erbb3 antibodies and uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU