EA030250B1

EA030250B1 - Применение 2-[4-(3- или 2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидов с высокой степенью чистоты и содержащие их фармацевтические композиции

Info

Publication number: EA030250B1
Application number: EA201400105A
Authority: EA
Inventors: Елена Барбанти; Лаура Фаравелли; Патрисия Сальвати; Ренато Каневотти; Франческо Понзини
Original assignee: Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А.
Priority date: 2007-12-11
Filing date: 2008-12-01
Publication date: 2018-07-31
Also published as: MX2010006278A; AR071267A1; HK1204960A1; LT2229351T; RS56803B1; CA2936209A1; KR101709498B1; JP6023727B2; PT2229351T; CN104523668A; EA019898B1; DK2229351T3; SI2229351T1; HUE036232T2; CN101896456B; TW200932209A; EP2229351B1; IL205872A0; CA2936209C; NO2229351T3

Abstract

В изобретении описано применение терапевтически активных 2-[4-(3- и 2-(фторбензилокси)бензиламино]пропанамидов и их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами с высокой степенью чистоты, в частности с содержанием примесей дибензиловых производных менее 0,03%, предпочтительно менее 0,01 мас.% для лечения различных расстройств, в условиях, которые не препятствуют цитохромам системы CYP450, в частности CYP3A4, CYP2D6, CYP2C19, CYP2C9, и не характеризуются свойствами блокирования каналов HERG. Данные высокочистые терапевтически активные пропанамиды получают способом, в котором подвергают промежуточные основания Шиффа 2-[4-(3- и 2-фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамидов реакции восстановления восстановителем, выбранным из боргидрида натрия и боргидрида калия в соответствующем количестве органического растворителя, выбранного из низших (C-C)алканолов, обеспечивая образование и присутствие в ходе значительной части реакции восстановления суспензии основания Шиффа в насыщенном растворе основания Шиффа в том же органическом растворителе. Также описаны фармацевтические композиции, содержащие указанные высокочистые терапевтически активные соединения, предназначенные для лечения вышеупомянутых расстройств.

Description

изобретение относится к применению 2-[4-(3- или 2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидного соединения, выбранного из К-энантиомера сафинамида (1'а), т.е. (К)-2[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, К-энантиомера ралфинамида (1'Ь), т.е. (К)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида

и их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами (1'с), (Ι'ά) с очень высокой энантиомерной и химической чистотой, полученных способом согласно настоящему изобретению.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей Кэнантиомер сафинамида (1'а) или К-энантиомер ралфинамида (1'Ь) или их соли с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты.

Сафинамид (ΝΥ-1015, ЕСЕ-26743А, ΡΝυ-151774Ε) представляет собой блокатор натриевых каналов, модулятор кальциевых каналов, ингибитор моноаминооксидазы В (МАО-В), ингибитор высвобождения глутамата и модулятор метаболизма дофамина.

Сафинамид пригоден для лечения нарушений ЦНС, в частности эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, депрессии, синдрома беспокойных ног и мигрени (ΥΟ 90/14334, ΥΟ 2004/089353, \ΥΟ 2005/102300 и \ΥΟ 2004/062655).

Ралфинамид (ΝΥ-1029, ЕСЕ-26742А, ΡΝυ-0154339Ε) представляет собой блокатор натриевых каналов, пригодный для лечения характеризующихся болью состояний, включая хроническую боль и невропатическую боль, мигрень, биполярных нарушений, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений (ΥΟ 99/35125, ΥΟ 03/020273, \ΥΟ 2004/062655, \ΥΟ 2005/018627, \ΥΟ 2005/070405, \ΥΟ 2005/102300).

В частности, сафинамид описан в ΥΟ 90/14334. Сафинамид, его К-энантиомер, их рацемическая смесь, их соли с фармацевтически приемлемыми кислотами и их применение для получения фармацевтических композиций, активных в качестве противоэпилептических, противопаркинсонических, нейропротекторных, антидепрессивных, противоспастических и/или снотворных средств, охарактеризованы в формуле изобретения ΥΟ 90/14334.

Ралфинамид описан в ΥΟ 90/14334. Ралфинамид, его К-энантиомер, их рацемическая смесь, их соли с фармацевтически приемлемыми кислотами и их применение для получения фармацевтических композиций, активных в качестве противоэпилептических, противопаркинсонических, нейропротективных, антидепрессорных, противоспастических и/или снотворных средств, охарактеризованы в формуле изобретения ΥΟ 90/14334.

Кроме того, в формуле изобретения ΥΟ 99/035125 представлено применение сафинамида, ралфинамида, соответствующих К-энантиомеров, соответствующих рацемических смесей и их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами в качестве анальгетиков.

В ΥΟ 2006/027052 А2 описано и содержится в формуле изобретения применение одного Кэнантиомера ралфинамида, т.е. (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'Ь) и его солей с фармацевтически приемлемыми кислотами, в качестве селективного модулятора натриевых и кальциевых каналов для селективного лечения патологических повреждений, где патологическую роль играет механизм действия натриевых или кальциевых каналов, включая боль, мигрень, воспалительные процессы, затрагивающие все системы организма, нарушения, затрагивающие кожу и родственную ткань, нарушения дыхательной системы, нарушения иммунной и эндокринной систем, нарушения желудочнокишечной и мочеполовой систем, где терапевтическая активность указанного соединения, по существу, не оказывает какого-либо побочного эффекта в виде ингибирования МАО или демонстрирует значимо сниженный побочный эффект в виде ингибирования МАО.

В настоящее время выявлено, что крупномасштабное получение сафинамида и ралфинамида способами, известными из уровня техники, включает две нежелательных примеси, т.е. соответственно (δ-2-[3(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (11а) и (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (11Ь) и их соль, в частности соответствующие метансульфонаты (11с) и (ΙΙά)

- 1 030250

Такая же ситуация возникает при получении способами, известными из уровня техники, Кэнантиомеров (1'а) и (1*Ь), соответственно сафинамида и ралфинамида, соответствующих рацемических смесей (1а, 1'а) и (1Ь, 1'Ь) и их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами, (1'с), (Гб), и соответствующих рацемических смесей (1с, 1'с) и (1б, 1'б), в частности метансульфонатов, которые в результате загрязняются соответствующими К-изомерами (11'а), (П'Ь), (11'с), и (11'б) указанных выше примесей (11а), (11Ь), (11с) и (116) или соответствующих рацемических смесей (11а, 11'а), (11Ь, П'Ь), (11с, 11'с) и (116, 11'б).

Этот факт имеет особую важность, так как выявлено, что указанные выше примеси демонстрируют очень высокую токсичность в отношении ферментов системы цитохрома Р450.

Многие из кандидатов в лекарственные средства потерпели неудачу в клинических испытаниях вследствие непредусмотренного действия на метаболизм человека или токсичности вследствие наличия нежелательных примесей и, таким образом, удаление таких примесей на ранней преклинической фазе является важным и очень желательным.

На преклиническом уровне "способность быть лекарственным средством" новых соединений можно оценивать с применением очень хорошо разработанной группы анализов ίη νίίτο, таких как взаимодействие с метаболизирующими лекарственными средствами, ферментами, цитотоксичность, метаболическая стабильность и профилирование, мембранная проницаемость, собственный клиренс и блокада каналов, кодируемых геном человека, родственным гену еШег-а-до-до (НЕКО) и т.д.

Система цитохрома Р450 (СУР 450) представляет собой основную систему метаболизма липофильных ксенобиотиков, включая лекарственные средства, канцерогены и загрязнители окружающей среды. СУР 450 представляет собой содержащую гем мембраносвязанную мультиферментную систему, представленную во многих тканях, но на наибольшем уровне представленную в печени. Установлено, что в печени человека существует от 15 до 20 различных форм СУР 450, метаболизирующих ксенобиотики. До настоящего времени у млекопитающих идентифицировано более четырнадцати семейств генов СУР. В обширных исследованиях выявлено, что несмотря на наличие высокой гомологии, каждое семейство и подсемейство СУР обладает особой ролью в метаболизме ксенобиотиков. Три семейства СУР: СУР1, СУР2 и СУР3, составляют приблизительно 70% СУР микросом печени человека с СУР3, составляющим приблизительно 30%. Эти СУР являются основными ответственными за метаболизм большинства продаваемых лекарственных средств.

Семейство СУР1 содержит несколько членов, включая СУР1А1, СУР1А2 и СУР1В1, и они вовлечены в метаболизм ацетаминофена, кломипрамина и имипрамина.

Семейство СУР2 содержит несколько подсемейств, включая СУР2А, СУР2В, СУР2С, СУР2Э и СУР2Е. Подсемейство СУР2С содержит по меньшей мере семь членов. СУР2С9 отвечает за метаболизм ибупрофена, диклофенака, толбутамида и торсемида. СУР2С19 представляет собой основной изофермент, метаболизирующий диазепам и омеопразол. Показано, что СУР2Э6 отвечает за метаболизм более 30% лекарственных средств на рынке, включая антидепрессанты и сердечно-сосудистые и антипсихотические лекарственные средства.

В семействе СУР3 в печени человека идентифицированы три изоформы. Показано, что СУР3А4 человека является наиболее важной изоформой в метаболизме лекарственных средств. В настоящее время катализируемый СУР3А4 метаболизм представляет собой основной маршрут элиминации почти 50% продаваемых лекарственных средств.

Вследствие их важности в метаболизме лекарственных средств, СУР3А4 и СУР2Э6 часто вовлечены во взаимодействия лекарственное средство-лекарственное средство и в качестве эффективного ингибитора этих изоформ СУР 450 идентифицировано несколько клинически используемых соединений, таких как кетоконазол, терфенадин, эритромицин, миконазол, пропанолол и хинидин соответственно. Это накладывает явное ограничение на использование этих лекарственных средств.

Дополнительная проблема, заключающаяся во внезапной смерти в качестве побочного эффекта от действия не противоаритмических лекарственных средств, является главной задачей фармакологической безопасности, стоящей перед фармацевтической индустрией и контролирующими органами в здравоохранении. В последние годы вследствие сообщений о внезапной смерти с рынка отозваны по меньшей мере пять имеющих большой успех лекарственных средств (астемизол, сертиндол, терфенадин, цисаприд, грепафлоксацин). Во всех случаях в качестве предрасполагающего фактора для "трепетаниямерцания", полиморфной желудочковой тахикардии, которая затем может спонтанно ухудшаться до фибрилляции желудочков и вызывать внезапную смерть, участвовал синдром удлинения интервала ЦТ (ЪОТ8). аномалия реполяризации сердечной мышцы, характеризующаяся удлинением интервала ЦТ на электрокардиограмме. Врожденный ЪСТ8 может восходить к нескольким возможным мутациям, приводящим к дефектам натриевых каналов и двух различных калиевых каналов: быстро активирующегося задержанного выпрямления (1кг) и медленно активирующегося задержанного выпрямления (1_К,). Важно, что фактически каждый случай увеличенной длительности сердечного действия, потенциально связанного с воздействием лекарственных средств (приобретенный Б-ОТЗ), можно свести к одному конкретному механизму: блокада 1_Кг тока в сердце. Этот ток, основное составляющее реполяризации фазы 3 в конце интервала ЦТ, осуществляется тетрамерными порами, где отдельные субъединицы кодирует НЕКО. При блокаде К+-каналов НЕКО, широко признаваемой в качестве основной причины пролонгации ЦТ, вызы- 2 030250

ваемой лекарственными средствами, важной задачей в фармацевтической индустрии стало раннее определение соединений с этим нежелательным побочным эффектом.

У соединений с сильным ингибированием метаболизирующих лекарственные средства ферментов, в частности ферментов СУР 450, и со свойствами блокирования каналов НЕКС существует высокая вероятность оказаться токсичными и то, что их разработка будет остановлена на ранней стадии.

Как показано в табл. 1, примеси (11а), (НЪ), (11'а), (11'Ь) и соответствующие рацематы (11а, 11'а) и (11Ь, 11'Ь), в виде метансульфонатной соли (11с), (11'с), (116), (11'6) и соответствующих рацематов (11с, 11'с) и (116, 11'6), в микро- и субмикромолярном диапазоне сильно ингибируют СУР3Л4, СУР2Ъ6, СУР2С19, СУР2С9 и токи НЕКС и являются крайне цитотоксичными по сравнению с метансульфонатом сафинамида (1с) и метансульфонатом ралфинамида (16) с высокими степенями чистоты, содержащими менее 0,03 мас.%указанных выше примесей.

Таблица 1

мас.% указанных выше примесей по сравнению с теми же образцами высокочистых сафинамида и ралфинамида с дополнением 0,3 мас.% примесей (11с) и (116) соответственно.

Когда к высокочистым метансульфонатам сафинамида и ралфинамида добавляют 0,3 мас.% примесей (11с) и (116), наблюдают значимое уменьшение 1С₅₀ для СУР3Л4 в обоих случаях, что означает, что примеси способствуют сильному ингибированию ферментативной активности.

Таблица 2

Соединение	СУРЗА4 1С₅₀, мкМ
Метансульфонат сафинамида	>40
Метансульфонат сафинамида и 0,3% примеси (11с)	18
Метансульфонат ралфинамида	>40
Метансульфонат ралфинамида и 0,3% примеси (ΙΙΒ)	7,76

Как показано в табл. 3, примесь (11с), начиная с 3 мг/кг в/в, увеличивает смертность в тесте максимального электрошока (МЕ8) мышей без какой-либо фармакологической активности, т.е. защиты от судорог.

Таблица 3

Соединение	МЕЗ
3 мг/кг в/в	10 мг/кг в/в	30 мг/кг в/в
защиты	Погибшие/ живые	защиты	Погибшие/ живые	защиты	Погибшие/ живые
Метансульфонат сафинамида	50	0/10	100	0/10	100	0/10
Примесь 11с	0	5/10	0	4/10	0	4/10

В табл. 4 показано, что примесь (116) при п/о введении при 10 и 20 мг/кг в тесте максимального

- 3 030250

электрошока (ΜΕδ) не защищает мышей от судорог по сравнению с теми же дозами метансульфоната ралфинамида.

Таблица 4

Соединение	МЕЗ
10 мг/кг п/о	20	мг/кг п/о
О, о защиты	Погибшие/живые	О, о защиты	Погибшие/живые
Метансульфонат ралфинамида	60%	0/10	90%	0/10
Примесь (11с1)	0%	0/10	0%	0/10

На основе всех этих данных примеси (Не), (П'с), (ΙΙά) и (ΙΙ'ά) и соответствующие рацемические смеси (11с, П'с) и (ΙΙά, ΙΙ'ά), которые в нежелательных количествах присутствуют в сафинамиде, ралфинамиде, их К-изомерах и соответствующих рацемических смесях, соответственно синтезируемых способом, описанным в АО 90/14334 и в Ре\тие11о е! а1. в I. Μοά. СНет, 1998, 41, 579-590 или в АО 2006/027052, демонстрируют ΐη νότο некоторые нежелательные свойства, такие как токсичность для клеток, сильное ингибирование некоторых изоформ СУР 450, блокада каналов НЕКО и отсутствие защитной активности в модели эпилепсии "ΐη νίνο".

Одним из важных свойств СУР является вариация в различных популяционных группах. Вариации в метаболизме лекарственных средств имеют большую важность в клинических исследованиях. Значительная вариация ферментативной активности СУР3А4 и СУР2О6 показана между различными этническими группами и даже между различными индивидуумами в одной этнической группе. Различия в активности СУР у индивидуумов значимо варьируют в зависимости от различных изоферментов. Изменения в уровне экспрессии СУР у различных индивидуумов могут являться причиной вариаций метаболизма лекарственных средств. Кроме того, полиморфизм также может приводить к вариантам ферментов СУР с большей или меньшей ферментативной активностью, что приводит к вариациям метаболизма лекарственных средств. Полиморфизм СУР2О6 представляет собой хорошо исследованную тему в области метаболизма лекарственных средств. В клинических исследованиях указанные вариации у индивидуумов впервые выявили в метаболизме антигипертензивных и противоэпилептических лекарственных средств. Элиминация метаболизируемых СУР2О6 лекарственных средств у индивидуумов, несущих дефектные аллели СУР2О6 происходит медленнее. Индивидуумов с медленным метаболизмом классифицируют как медленных метаболизаторов (РМ), тогда как каталитически компетентных индивидуумов классифицируют как быстрых метаболизаторов (ЕМ) : частота фенотипа РМ в популяциях различного расового происхождения варьирует: у приблизительно от 5 до 10% европеоидов присутствует фенотип РМ, тогда как у монголоидов он составляет только 1%. Другую важную полиморфную изоформу с клинической значимостью представляет собой СУР2С19.

Учитывая эти наблюдения, у соединения, которое не воздействует на изоформы СУР450 (ни ингибируя, ни индуцируя), существует очень низкий риск взаимодействий вида лекарственное средстволекарственное средство в клинической практике и лечащие врачи могут его легко и безопасно выписывать.

В частности, лекарственные средства, которые не воздействуют на цитохромы системы СУР450, особенно показаны для терапевтического лечения индивидуумов, классифицируемых как медленные метаболизаторы (РМ), или для терапевтического лечения пациентов, которые одновременно принимают другие лекарственные средства, для которых известно, что они воздействуют на указанные цитохромы, такие как кетоконазол, терфенадин, эритромицин, миконазол, пропанолол и хинидин, и/или для которых известно, что у них есть свойство блокировать каналы НЕКО.

В соответствии с общей клинической практикой метансульфонаты сафинамида и ралфинамида (Ш) и (Ιά), как правило, вводят нуждающемуся в этом пациенту в течение длительного периода времени, подразделяя на несколько суточных доз. В частности, это происходит в случае терапевтического применения, где подлежащее лечению заболевание представляет собой болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера и синдром беспокойных ног (для применения сафинамида) или хроническая или нейропатическая боль, сердечно-сосудистые или воспалительные нарушения (для применения ралфинамида). Хотя суточное дозирование может варьировать в зависимости от конкретного состояния и потребностей пациентов, суточное дозирование метансульфоната сафинамида, как правило, может варьировать от 10 до 800 мг/сутки, тогда как суточное дозирование метансульфонатов ралфинамида, как правило, может варьировать от 10 мг/сутки до 1 г/сутки. В этих условиях и учитывая представленные выше данные очень желательно сохранить уровень примесей (На) и (НЪ) или их солей, в частности метансулвфонатнных солей (Нс) и (ΙΙά) в фармацевтических лекарственных формах сафинамида и ралфинамида или их солей, настолько низким, насколько возможно, в любом случае ниже 0,03, предпочтительно ниже 0,01 мас.% по отношению к количеству соответственно сафинамида и ралфинамида или их солей, в частности метан- 4 030250

сульфонатных солей.

Те же принципы применяют для К-энантиомеров сафинамида и ралфинамида (1'а) и (1'Ь), соответствующей рацемической смеси (1а, 1'а) и (1Ь, 1'Ь) и их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами по отношению к соответствующим примесям (11'а), (11'Ь), соответствующим рацемическим смесям (11а, 11'а) и (11Ь, 11'Ь) и их солям с фармацевтически приемлемыми кислотами.

Изучение и экспериментальные исследования, проведенные авторами изобретения, показали, что сафинамид, ралфинамид, соответствующие К-энантиомеры, соответствующие рацемические смеси или их соли с фармацевтически приемлемыми кислотами при получении способами, известными из уровня техники, содержат количество соответствующих примесей (11а), (11Ь), их К-энантиомеров (11'а) и (11'Ь), соответствующих рацемических смесей (11а, 11'а) и (11Ь, 11'Ь) или их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами (таких как (11с), (1Ш), (11'с) и (ΙΙ'ά), или соответствующих рацемических смесей (11с, 11'с) и (ΙΙά, Π'ά)), которое составляет более 0,03 мас.%. Таким образом, указанные выше продукты непригодны для широкого и безопасного терапевтического применения. В частности, фармацевтические препараты, содержащие сафинамид, ралфинамид, соответствующий К-энантиомер (1'а) или (1'Ь), соответствующую рацемическую смесь (1а, 1'а) и (1Ь, 1'Ь) или их соли с фармацевтически приемлемыми кислотами, где содержание соответствующих примесей (11а), (11Ь), (11'а), (11'Ь), их рацемических смесей (11а, 11'а) и (11Ь, 11'Ь) или их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами составляет не ниже 0,03, предпочтительно 0,01 мас.% относительно указанных выше терапевтически активных веществ, непригодны для использования в качестве лекарственных средств в конкретных группах пациентов, как описано выше.

В частности, фармацевтические препараты, содержащие сафинамид, ралфинамид, соответствующие К-энантиомеры (1'а) или (1'Ь) или соответствующие рацемические смеси (1а, 1'а) и (1Ь, 1'Ь) или их соли с фармацевтически приемлемыми кислотами, где содержание соответствующих примесей (11а), (11Ь), (11'а), (11'Ь), соответствующих рацемических смесей (11а, 11'а) и (11Ь, 11'Ь) или их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами не ниже 0,03, предпочтительно 0,01 мас.% относительно указанных выше активных веществ, непригодны для использования для терапевтического лечения большого множества пациентов, включающих индивидуумов, классифицируемых в качестве медленных метаболизаторов (РМ), или которые одновременно принимают другие лекарственные средства, для которых известно, что они воздействуют на цитохромы системы СУР 450.

В данных описании и формуле изобретения значения указанных выше пределов, если не указано иначе, следует полагать как обозначающие процентное отношение от массы "активных веществ", т.е. эффективное содержание токсически активных примесей (11а), (11Ь), (11'а), (11'Ь) или соответствующих рацемических смесей (11а, 11'а) и (11Ь, 11'Ь) измеряют относительно эффективного содержания терапевтически активных веществ (1а), (1Ь), (1'а), (1'Ь) или соответствующих рацемических смесей (11а, 11'а) и (11Ь, 11'Ь).

Такие выражения как "высокая чистота", "высокая степенв чистоты", высокая химическая чистота", "высокочистый" и т.п., когда они в данных описании и формуле изобретения относятся к сафинамиду, ралфинамиду, соответствующим К-энантиомерам, соответствующим рацемическим смесям или их солям с фармацевтически приемлемыми кислотами, идентифицируют продукты, содержащие не менее 98,5% (оцениваемых как процент площади способами ВЭЖХ) сафинамида (1а), ралфинамида (1Ь), соответствующих К-энантиомеров (1'а) и (1'Ь), соответствующих рацемических смесей (1а, 1'а) и (1Ь, 1'Ь) или их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами, где содержание соответствующей примеси (11а), (11Ь), (11'а), (11'Ь), соответствующих рацемических смесей (11а, 11'а) и (11Ь, 11'Ь) или их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами составляет менее 0,03, предпочтительно менее 0,01 мас.% (относительно "активных веществ"), определяемых способами ВЭЖХ.

Другие примеси, с трудом детектируемые, происходят от очень малых количеств бензила, 2- и 4фторбензилхлорида и 3- и 4-фторбензилхлорида, которые содержатся в коммерчески доступном 3фторбензилхлориде и 2-фторбензилхлориде, соответственно используемых для синтеза 4-(3фторбензилокси)бензальдегида (1Уа) и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ), промежуточных соединений для получения соответственно соединений (1а), (1Ь), (1'а), (1'Ь) (1а, 1'а) и (1Ь, 1'Ь) и их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами.

Аналогично, указанные выше термины "высокая чистота", "высокая степень чистоты", "высокая химическая чистота", "высокочистый", когда относятся к промежуточным 4-(3- или 2фторбензилокси)бензальдегидам (1Уа) и (1УЬ), идентифицируют продукты, содержащие не менее чем 98,5 процентов (оцениваемых как процент площади способами ОС) каждого из указанных выше соединений, и где содержание соответствующей дибензилированной примеси (У1а) или (У1Ь) составляет менее 0,03, предпочтительно менее 0,01 мас.% (оцениваемых способами ОС).

Описанный в настоящем изобретении способ посредством сильного уменьшения количества примесей обеспечивает продукты с высокой химической чистотой и более безопасным биологическим профилем.

В соответствии со способом, описанным в настоящем изобретении, К-энантиомеры сафинамида (1'а) и ралфинамида (1'Ь) и их соли с фармацевтически приемлемыми кислотами, в частности с метансульфоновой кислотой, получают с высокими выходами и высокой чистотой, где содержание соответст- 5 030250

вующих примесей (К)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'а), (К)-2[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (П'Ь), соответствующих солей с фармацевтически приемлемыми кислотами, в частности с метансульфоновой кислотой (обобщенно называемых "дибензиловыми производными") составляет менее 0,03, предпочтительно 0,01 мас.% относительно "активных веществ".

Дополнительной целью данного изобретения является получение для целей изобретения Кэнантиомеров сафинамида и ралфинамида или их солей с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, с высокой степенью чистоты, в частности с содержанием соответствующих дибензиловых производных формул (11'а), (П'Ь), или их солей с фармацевтически приемлемой кислотой, например метансульфоновой кислотой, менее 0,03, предпочтительно менее 0,01 мас.% (относительно "активных веществ"), что является подходящим для их безопасного использования в качестве лекарственных средств.

Другой целью настоящего изобретения является предоставление фармацевтических композиций, содержащих сафинамид, ралфинамид, соответствующие К-энантиомеры сафинамида (1'а) и ралфинамида (1'Ь) или их соль с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой в качестве активных средств, где содержание К-энантиомеров соответствующих дибензиловых производных (11'а) и (П'Ь) или их солей с фармацевтически приемлемой кислотой, например метансульфоновой кислотой, составляет менее 0,03, предпочтительно менее 0,01 мас.% (относительно "активных веществ").

Более конкретно, по предпочтительному варианту осуществления данного изобретения описанный в настоящем документе способ обеспечивает получение лекарственного средства, содержащего высокочистый (ί) К-энантиомер сафинамида (1'а) или его соль с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, или (ίί) К-энантиомер ралфинамида (1'Ь) или его соль с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, пригодного для лечения расстройств, выбранных из эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, депрессии, синдрома беспокойных ног, мигрени, характеризующихся болью состояний, включающих хроническую и невропатическую боль, биполярных нарушений, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений, в условиях, не препятствующих цитохромам системы СУР450, в частности СУР3А4, СУР2Э6. СУР2С19, СУР2С9, и не проявляет свойств блокирования каналов НЕКС.

Кроме того, по дополнительному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения описанный в настоящем документе способ обеспечивает получение лекарственного средства, содержащего высокочистый единственный К-энантиомер ралфинамида или его соль с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, пригодного для селективного (т.е. где терапевтическая активность активного вещества, которое вводят пациенту, по существу, не обладает каким-либо ингибирующим МАО побочным действием или демонстрирует значительно сниженное ингибирующее МАО побочное действие) лечения патологических аффектаций, где патологическую роль играет механизм(ы) натриевых и/или кальциевых каналов, которые описаны в АО 2006/027052 А2, выбранных из таких состояний, как боль, мигрень, воспалительные процессы, затрагивающие все системы организма, нарушения, затрагивающие кожу и родственные ткани, нарушения дыхательной системы, нарушения иммунной и эндокринной систем, желудочно-кишечные и мочеполовые нарушения, в условиях, не препятствующих цитохромам системы СУР450, в частности СУР3А4, СУР2Н6, СУР2С19, СУР2С9 и не характеризуются свойствами блокирования каналов НЕКС.

Таким образом, способ по данному изобретению обеспечивает получение фармацевтических композиций, содержащих К-энантиомер сафинамида (1'а), К-энантиомер ралфинамида (1'Ь), или их соль с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, которые пригодны для лечения указанных выше нарушений у пациентов, которые классифицируют как медленные метаболизаторы (РМ) или для терапевтического лечения пациентов, одновременно принимающих другие лекарственные средства, для которых известно, что они воздействуют на цитохромы системы СУР450, и/или для которых известно, что они обладают свойствами блокирования каналов НЕКС.

Все эти новые фармацевтические составы не были ни предложены, ни доступны при использовании фармакотоксикологических данных о сафинамиде и ралфинамиде, ни с использованием этих активных средств, полученных способами, доступными на существующем уровне техники.

Указанные выше фармацевтические составы, кроме К-энантиомеров сафинамида или ралфинамида или их солей с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, с описанной выше высокой степенью чистоты, необязательно могут содержать одно или несколько дополнительных активных средств.

Например, новая фармацевтическая композиция, пригодная для дополнительного лечения болезни Паркинсона или синдрома беспокойных ног, в дополнение к его К-энантиомеру сафинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, полученным способом по данному изобретению и с указанной выше высокой степенью чистоты, может содержать одно или несколько дополнительных активных средств против болезни Паркинсона, таких как активные

- 6 030250

средства, описанные в АО 2004/089353 и АО 2005/102300, предпочтительно агонист дофамина и/или ингибитор катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ).

В качестве дополнительного примера новая фармацевтическая композиция по данному изобретению, пригодная для лечения характеризующихся болью состояний, включая хроническую боль и невропатическую боль и мигрень, в дополнение к К-энантиомеру ралфинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, полученным способом по данному изобретению и с указанной выше высокой степенью чистоты, может необязательно содержать дополнительное активное средство, такое как габапентин и прегабалин или их фармацевтически приемлемую соль, как описано в ЕР 1423168.

Аналогично, новая фармацевтическая композиция по данному изобретению, пригодная в качестве лекарственных средств, селективно активных в качестве модуляторов натриевых и/или кальциевых каналов для селективного лечения патологических аффектаций, где патологическую(ие) роль(и) играет(ют) механизм(ы) натриевых и/или кальциевых каналов в соответствии с АО 2006/027052 А2, таких как боль, мигрень, воспалительные процессы, затрагивающие все системы организма, нарушения, затрагивающие кожу и родственные ткани, нарушения дыхательной системы, нарушения иммунной и эндокринной систем, желудочно-кишечные и мочеполовые нарушения, может необязательно содержать дополнительное активное средство. Например, фармацевтическая композиция для лечения характеризующихся болью состояний в дополнение к одному из К-энантиомеров ралфинамида (1*Ь) или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, полученным способом по данному изобретению и с указанной выше высокой степенью чистоты, может содержать габапентин или прегабалин.

Фармацевтические композиции, содержащие К-энантиомеры сафинамида или ралфинамида или их соли с фармацевтически приемлемыми кислотами высокой степени чистоты по настоящему изобретению, можно получать стандартными способами, известными в данной области, например, смешивая активные соединения с веществами фармацевтически, терапевтически инертных органических и/или неорганических носителей. Композиции по изобретению могут находиться в жидкой форме, например в форме раствора, суспензии, эмульсии; или в твердой форме, например таблетки, пастилки, капсулы, пластыри.

Подходящие вещества фармацевтически, терапевтически инертных органических и/или неорганических носителей, пригодные для получения композиции по настоящему изобретению, включают, например, воду, желатин, гуммиарабик, лактозу, крахмал, целлюлозу, стеарат магния, тальк, растительные масла, полиалкиленгликоли, циклодекстрины и т.п. Фармацевтические композиции по изобретению можно стерилизовать и они, кроме активного ингредиента(ов), могут содержать дополнительные компоненты, хорошо известные специалистам в данной области, такие как, например, консерванты, стабилизаторы, увлажнители или эмульгаторы, например парафиновое масло, моноолеат маннида, соли для регулировки осмотического давления, буферы и т.п.

Дополнительной целью данного изобретения является применение для лечения нарушений ЦНС, таких как эпилепсия, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера и синдром беспокойных ног, Кэнантиомера сафинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, высокой степени чистоты с содержанием соответствующих дибензиловых производных (11'а) или их соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, менее 0,03, предпочтительно менее 0,01 мас.% (относительно "активных веществ"). Указанное применение включает лечение болезни Паркинсона или синдрома беспокойных ног посредством введения нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества К-энантиомера сафинамида (1'а) или его соли высокой степени чистоты, как описано выше, необязательно в сочетании с одним или несколькими активными средствами против болезни Паркинсона, как описано в АО 2004/089353, такими как, например, агонист дофамина и/или ингибитор катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ).

Кроме того, дополнительной целью данного изобретения является применение для лечения характеризующихся болью состояний, включая хроническую боль и невропатическую боль, мигрень, биполярные нарушения, депрессии, сердечно-сосудистые, воспалительные, мочеполовые, метаболические и желудочно-кишечные нарушения, где это включает введение нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества К-энантиомера ралфинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, высокой степени чистоты с содержанием дибензиловых производных (ПЪ) или их соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, менее 0,03, предпочтительно менее 0,01 мас.% (относительно "активных веществ").

Указанное выше применение включает лечение характеризующихся болью состояний, включающих хроническую боль и невропатическую боль и мигрень К-энантиомером ралфинамида или его солью с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно метансульфоновой кислотой, высокой степени чистоты, необязательно в сочетании с габапентином или прегабалином.

Кроме того, дополнительной целью данного изобретения является применение для селективного лечения патологических аффектаций, где патологическую роль играет(ют) механизм(ы) натриевых или кальциевых каналов, где указанные патологические аффектации выбраны из боли, мигрени, воспали- 7 030250

тельных процессов, затрагивающих все системы организма, нарушений, затрагивающих кожу и родственные ткани, нарушений дыхательной системы, нарушений иммунной и эндокринной систем, желудочно-кишечные и мочеполовые нарушений, где терапевтическая активность указанного соединения, по существу, не оказывает какого-либо ингибирующего МАО побочного эффекта или демонстрирует значимо сниженный ингибирующий МАО побочный эффект, где данное применение включает введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества одного К-энантиомера ралфинамида (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно соли с метансульфоновой кислотой, с содержанием примеси (К)-2[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (П’Ъ) или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, предпочтительно с метансульфоновой кислотой, менее 0,03, предпочтительно менее 0,01 мас.%, необязательно в сочетании с дополнительным активным средством, например, в случае лечения характеризующихся болью состояний, с габапентином или прегабалином.

Указанные выше применения для лечения особенно пригодны для пациентов, страдающих перечисленными выше заболеваниями, которых классифицируют в качестве медленных метаболизаторов (РМ) или которые одновременно принимают другие лекарственные средства, для которых известно, что они воздействуют на цитохромы системы СУР450.

В данном описании и формуле изобретения термины "лечить" или "лечение" включают профилактику, облегчение и излечение.

Известный уровень техники

В АО 90/14334, в статье Реуагейо е! а1. ΐη I. Меб. Сйет., 1998, 41, 57 9-590 описан двухстадийный способ получения бензилоксибензиламиноалканамидов:

a) синтез промежуточных 4-бензилоксибензальдегидов посредством О-бензилирования соответствующих 4-гидроксибензальдегидов соответствующими бензилхлоридами;

b) восстановительное алкилирование α-аминоамидов 4-бензилоксибензальдегидами с применением цианоборгидрида натрия или боргидрида натрия в качестве восстановителя как здесь схематически показано ниже

где К, кроме других заместителей, представляет собой 3-Р и 2-Р; К¹, кроме других заместителей, 2 3

представляет собой водород; К , кроме других заместителей, представляет собой водород; К , кроме других заместителей, представляет собой СН₃; К⁴ и К⁵, кроме других заместителей, представляют собой водород, в частности, поскольку рассматривается получение сафинамида и ралфинамида, восстановительное алкилирование представляет собой восстановительное алкилирование Ь-аланинамида 4-(3фторбензилокси)бензальдегидом и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегидом соответственно, как здесь показано ниже

В I. Меб. Сйет. (Реуагейо е! а1.), 1998, 41, 579-590 сообщалось о выходах в размере 45 и 60% для получения сафинамида и метансульфоната ралфинамида соответственно, начиная от соответствующих (фторбензилокси)бензальдегидов.

Способ, описанный в АО 90/14334 и процитированной выше статье, является таким же и позволяет однореакторную систему, где иминоалкилирование и восстановление проводят в одном реакторе. К смеси гидрохлорида Ь-аланинамида, цианоборгидрида натрия, метанола и порошковых молекулярных сит сразу добавляют подходящий альдегид.

В соответствии с Реуагейо е! а1., в Огд. Ргер. Ргос. Ιη!. 1996, 28, 179-183 (где описан синтез некоторых производных α-бензиламиноамида посредством восстановительного алкилирования) применение αаминоамида в качестве гидрохлорида важно для образования иминиевого иона вместо соответствующего имина, так как иминиевый ион более легко реагирует с цианоборгидридом натрия, чем с карбонильной группой альдегида.

В соответствии с утверждением указанных выше авторов, по-видимому, однореакторный способ позволяет избежать проблем с рацемизацией оснований Шиффа, а молекулярные сита ускоряют реакцию (хотя выходы ухудшаются).

Цианоборгидрид заявлен как предпочтительное используемое средство, и, по-видимому, этот его выбор сделан вследствие его селективности (см. обзор "Зобшт СуапоЪогойубпбе - А Н1§й1у Зе1есйуе Кебистд Адеп! йог Огдашс Рипс!юпа1 Огоирз" - С.Р. Ьапе, Зуп!йе§1§ 1975, 132-146), что делает его спо- 8 030250

собным различить протонированное основание Шиффа и исходный альдегид.

Синтез, описанный в статье Реуаге11о е! а1., позволяет выделение продуктов посредством колоночной хроматографии с последующим преобразованием в соответствующие соли посредством обработки кислотами. Информации о энантиомерной и/или химической чистоте сафинамида и ралфинамида и/или их солей не предоставлено.

Способ, описанный в современном уровне техники, страдает от многих недостатков, которые ограничивают его применение в большом масштабе; ниже здесь перечислены некоторые примеры указанных недостатков:

образование цианидов и цианопроизводных;

использование порошковых молекулярных сит, которые физически изменчивы и являются дорогостоящими;

выходы, как правило, составляют менее 70%;

продукты реакции с низкой чистотой и трудны для очистки;

применение больших количеств растворителя (приблизительно от 5 до 7 л на 1 моль), используемого в реакции восстановительного алкилирования, приводящее в низкой конечной концентрации продукта в конечной реакционной смеси (приблизительно 4-6% мас./об.);

выделение продукта реакции посредством колоночной хроматографии, которую рассматривают как сложный и дорогостоящий способ выделения в крупномасштабном получении активных средств с применением химического синтеза.

Способ получения (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'Ъ), описанный в ШО 2006/027052 А2, основан на восстановлении боргидридом натрия продукта, являющегося результатом реакции гидрохлорида (К)-аланинамида с 4-(2-фторбензилокси)бензальдегидом (данных относительно степени чистоты данного реагента не приведено) и триэтиламином в сухом метаноле в присутствии молекулярных сит в течение 4 ч. Данных относительно чистоты получаемого конечного соединения не приведено. Также в этом случае недостатками способа, когда его применяют для широкомасштабного получения, являются использование порошковых или гранулированных молекулярных сит, использование больших количеств растворителя и, несмотря на операции очистки, присутствие в конечном продукте (1'Ъ) нежелательной примеси (11'Ъ) в количестве, более 0,03 мас.%, что делает активное вещество (1'Ъ), полученное указанным способом, непригодным для терапевтического применения без риска или с низким риском побочных эффектов, вследствие воздействия на цитохромы системы СУР450. Низкая степень чистоты и низкие выходы (30-32 мол.%) конечного продукта способа, описанного в ШО 2006/027052, показаны посредством нескольких воспроизводств в различном масштабе описанного в публикации способа, репрезентативный пример которого описан в примере 2 3.3 данной заявки.

Одной из принципиальных характеристик, отличающих способ, описанный в ШО 2006/027052, от способа по данному изобретению, и которая, как выявлено, отвечает за необычайно низкие выходы способа на указанном известном уровне техники, состоит в том, что количество органического растворителя (метанола), который используют в указанном способе, относительно молярного количество основания Шиффа составляет приблизительно 5 л на моль основания Шиффа. Выявлено, что эти условия вызывают увеличение нежелательных примесей в конечном продукте, получаемых из молекул, вовлеченных в равновесие между основанием Шиффа и его предшественниками, такими как тот же исходный альдегид, его ацетали и аминоацетали.

Иллюстративные примеры (примеры по изобретению и справочные примеры), следующие за данным описанием, подтверждают, что продукты, получаемые способами, описанными на современном уровне техники, содержат такое количество примесей (11а)-(11б), (П'а)-(1Г4), (11а, 11'а)-(11с, 11'с) или (НИ, П'И), которое выше 0,03 мас.% относительно соответствующих терапевтически активных веществ (1а)(1И), (Га)-(ГИ), (1а, 1'а)-(1с, 1'с) или (1И, 1'И). Кроме того, показано, что указанные примеси, присутствующие в конечном продукте сафинамида, ралфинамида, соответствующих К-энантиомеров, соответствующих рацемических смесях или их солях с фармацевтически приемлемыми кислотами, трудно устранить с применением общеизвестных способов очистки на основе кристаллизации из растворов или хроматографии, которые в любом случае приводят к уменьшению выходов.

Сущность изобретения

Данное изобретение относится к применению соединения 2-[4-(3- или 2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида высокой степени чистоты, выбранного из (К)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (К-энантиомера сафинамида, 1'а), (К)-2-[4-(2фторбензилокси)-бензиламино]пропанамида (К-энантиомера ралфинамида, 1'Ъ)

- 9 030250

и их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами для получения лекарственного средства для лечения расстройств, выбранных из эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, синдрома беспокойных ног, мигрени, характеризующихся болью состояний, биполярных нарушений, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений, в условиях, которые не препятствуют цитохромам системы СУР450 и не характеризуются свойствами блокирования каналов ΗΕΚΘ, причем К-энантиомер сафинамида (1'а) или ралфинамида (1'Ь) или их соль с фармацевтически приемлемой кислотой имеет содержание соответствующей примеси, (К)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (П’а), (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'Ь)

или их соли с фармацевтически приемлемой кислотой, которое составляет менее 0,03, предпочтительно менее 0,01 мас.%, и при этом упомянутые К-энантиомер сафинамида (1'а) или ралфинамида (1'Ь) или их соль с фармацевтически приемлемой кислотой получены способом, характеризующимся тем, что промежуточные К-энантиомеры оснований Шиффа формулы (111'а) или (111'Ь)

(а) получают реакцией иминоалкилирования 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегида Όаланинамидом без добавления молекулярных сит в растворителе, выбранном из (С₁-С₅)алканолов, при температуре от 20 до 30°С в таком количестве растворителя, которое обеспечивает образование суспензии основания Шиффа в насыщенном растворе основания Шиффа в том же растворителе, и (Ь) после завершения реакции иминоалкилирования подвергают реакции восстановления с восстановителем, выбранным из боргидрида натрия и боргидрида калия, в выбранном количестве органического растворителя, выбранного из низших (С₁-С₅)алканолов или их смеси, необязательно с небольшим количеством воды, где отношение органического растворителя к основанию Шиффа обеспечивает образование и присутствие в ходе существенной части реакции восстановления суспензии основания Шиффа в насыщенном растворе основания Шиффа в том же органическом растворителе и находится в диапазоне от 0,5 до 3,0 л, предпочтительно от 0,7 до 2,5 л, наиболее предпочтительно от 0,8 до 2,0 л на каждый 1 моль основания Шиффа, где исходное вещество 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегид, применяемое для получения промежуточных оснований Шиффа (111'а), (111'Ь), имеет содержание примеси 3-(3- или 2фторбензил)-4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегида менее 0,03 мас.%, в результате чего Кэнантиомеры сафинамида (1'а) или ралфинамида (1'Ь) получают в форме свободного основания и, необязательно, преобразуют указанную форму свободного основания в ее соль с фармацевтически приемлемой кислотой.

По предпочтительному варианту осуществления изобретения способ дополнительно характеризуется тем, что исходное вещество 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегид, применяемое для получения промежуточных оснований Шиффа (111'а), (111'Ь) имеет содержание примеси 3-(3- или 2-фторбензил)-4(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегида менее 0,01 мас.%.

Формулы (111'а) и (111'Ь), как представлено в данном описании и формуле изобретения, идентифицируют промежуточное основание Шиффа и в Е-, и в Ζ-конфигурации.

По предпочтительному варианту осуществления данного изобретения способ по настоящему изобретению включает три следующие стадии:

a) получение высокочистого исходного вещества, представляющего собой исходное вещество 4-(3или 2-фторбензилокси)бензальдегид посредством О-бензилирования 4-гидроксибензальдегида производными следующей общей формулы 3- или 2-Т-С₆Н₄-СН₂-У (Уа) или (УЬ), где Υ представляет собой уходящую группу (С1, Вг, I, О8О₂СН₃ и т.д.); где данное О-бензилирование проводят в условиях, которые высокоселективны для О-алкилирования и оно приводит к получению 4-(3фторбензилокси)бензальдегида или 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида высокой чистоты;

b) завершение образования промежуточного основания Шиффа конденсацией исходного вещества 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегида с Ь-аланинамидом, Ό-аланинамидом или их рацемической смесью в форме основания или соли без какого-либо использования молекулярных сит;

- 10 030250

с) обработка основания Шиффа восстановительной системой, выбранной из боргидрида натрия и боргидрида калия в присутствии органического растворителя, выбранного из (С1-С₅)алканолов в соответствующем отношении с основанием Шиффа, обеспечивая одновременное присутствие основания Шиффа в твердой форме и форме насыщенного раствора основания Шиффа в указанном растворителе (т.е. суспензии основания Шиффа в насыщенном растворе основания Шиффа в указанном органическом растворителе) в ходе существенной части реакции восстановления для получения после выделения продукта реакции и кристаллизации, соответственно сафинамида, ралфинамида, соответствующих Кэнантиомеров или соответствующей рацемической смеси с очень высоким выходом и с определенной выше химической чистотой, и, необязательно, получение их солей с фармацевтически приемлемыми кислотами известными способами образования солей.

Фармацевтически приемлемые кислоты выбирают, например, из азотной, соляной, бромистоводородной, серной, хлорной, фосфорной, метансульфоновой, п-толуолсульфоновой, уксусной, трифторуксусной, пропионовой, гликолевой, молочной, щавелевой, малоновой, яблочной, малеиновой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной и салициловой кислот.

Синтез исходных веществ 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегидов.

В соответствии с известными способами исходные вещества (фторбензилокси)бензальдегидов, необходимые для получения промежуточных оснований Шиффа (111'а), (111'Ь), которые применяют для синтеза К-энантиомеров, соответственно сафинамида и ралфинамида по данному изобретению, получают бензилированием 4-гидроксибензальдегида в основной среде. Бензилирование феноловых солей, представляющих собой амбидентные нуклеофилы, приводит к образованию двух разных продуктов, т.е. желаемых О-алкилированных производных и нежелаемых С-алкилированных производных.

По существу, выявлено, что фторбензилирование 4-гидроксибензальдегида 3-фторбензилхлоридом, проводимое в соответствии с известным уровнем техники, приводит к образованию 4-(3фторбензилокси)бензальдегида (1Уа) в качестве основного продукта совместно с 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегидом (У1а), который образуется вследствие алкилирования гидроксигруппы в положении 4 и атома углерода в положении 3 4-гидроксибензальдегида. То же самое происходит при фторбензилировании 4-гидроксибензальдегида 2-фторбензилхлоридом по следующей схеме:

Восстановление основания Шиффа, образуемого иминоалкилированием 4-(3- или 2фторбензилокси)бензальдегида Ό-аланинамидом с исходным веществом альдегидом, содержащим диалкилированную примесь, приводит к образованию конечного продукта формул (1'а), (1'Ь), которые также загрязнены соответствующим диалкилированным соединением, дибензиловым производным, ((11'а), (11'Ь), в виде свободного основания или соединения в виде соли, предпочтительно с метансульфоновой кислотой, (11'с), (ΙΙ'ά), как показано в следующей схеме, демонстрирующей образование дибензилатных примесей (11'с) и (Π'ά), относящихся соответственно к К-энантиомерам сафинамида и ралфинамида.

Вместо предпочтительной метансульфоновой кислоты можно использовать фармацевтически приемлемые кислоты, например азотную, соляную, бромисто-водородную, серную, хлорную, фосфорную, метансульфоновую, п-толуолсульфоновую, уксусную, трифторуксусную, пропионовую, гликолевую, молочную, щавелевую, малоновую, яблочную, малеиновую, винную, лимонную, бензойную, коричную, миндальную и салициловую кислоты.

Моноалкилированное производное (К-энантиомеры сафинамида, ралфинамида) и соответствующие диалкилированные примеси имеют сходные химико-физические свойства, и это делает трудной их очистку традиционными способами.

- 11 030250

Кроме того, известные способы бензилирования, и среди них фторбензилирование, страдают от следующих дополнительных недостатков:

1) использование в качестве растворителя низшего спирта; в основных условиях растворитель, например метанол, может сам действовать в качестве нуклеофильного реагента и приводить к образованию с 3- или 2-фторбензилхлоридом некоторого количества простого метилфторбензилового эфира;

2) экстракция конечного продукта водой-несмешивающимся органическим растворителем возможна только после удаления спиртового реакционного растворителя из реакционной смеси.

Выявлено, что используя указанные выше способы по известному уровню техники, для получения конечного продукта формул (1а), (1Ь), (1'а), (1'Ь) или соответствующей рацемической смеси (1а, 1’Ь) или (1Ь, 1'Ь), где содержание примеси (11а), (11Ь), (11'а), (11'Ь) или соответствующей рацемической смеси (11а, 11'а) или (11Ь, 11'Ь) составляет менее 0,03 мас.%, необходимо существенно очистить промежуточный 4-(3фторбензилокси)бензальдегид (1Уа) или 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (1УЬ) для уменьшения содержания соответствующих примесей формул (У1а) и (У1Ь).

Указанную очистку предпочтительно проводят, подвергая продукты реакции кристаллизации, более предпочтительно добавляя к раствору неочищенного соединения (1Уа) или (1УЬ) в инертном органическом растворителе смешивающийся инертный органический осадитель. Органический инертный растворитель предпочтительно выбирают из ароматических углеводородов, а более предпочтительно он представляет собой толуол. Смешивающийся инертный органический осадитель предпочтительно выбирают из низших алифатических углеводородов, более предпочтительно он представляет собой н-гексан. Дополнительный способ кристаллизации может состоять из растворения указанных выше соединений (1Уа) или (1УЬ) в горячем растворителе, например циклогексане или простом ди(С₃-С₄)алкиловом эфире, таком как простой диизопропиловый эфир при температуре кипения с обратным холодильником, а затем охлаждения раствора до комнатной температуры, предпочтительно при 10-15°С, наиболее предпочтительно индуцируя кристаллизацию добавлением чистых кристаллов чистого соединения (1Уа) или (1УЬ).

По одному из аспектов настоящего изобретения исходное вещество 4-(3- или 2фторбензилокси)бензальдегид, необходимое для получения промежуточных оснований Шиффа, получают реакцией между алкилирующим средством формулы (Уа) или (УЬ) (см. схему ниже, где в положении 2 или 3 находится атом Р, а Υ представляет собой уходящую группу, такую как, например, С1, Вг, I, О5О₂СН₃, О5О₂С₆Н₄-рСН₃ и т.д.) и 4-гидроксибензальдегидом, которую проводят в условиях межфазного катализа. В указанных условиях соответствующие 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегиды получают с высокими выходами и с очень низкими уровнями С,О-бис-алкилированных примесей предпочтительно после кристаллизации.

Данное новое фторбензилирование 4-гидроксибензальдегида в условиях межфазного катализа можно осуществлять в системе твердое вещество/жидкость, где в жидкой органической фазе растворены реагенты и катализатор фазового переноса, а твердая фаза состоит из неорганического основания или соли 4-гидроксибензальдегида (возможно образующейся ΐη зйи из 4-гидроксибензальдегида и самого неорганического основания), и в системе жидкость/жидкость органическая/водная, где неорганическое основание растворяют в водной фазе.

Предпочтительная система представляет собой систему твердое вещество/жидкость, где неорганическое основание предпочтительно выбирают из Ыа₂СО₃, К₂СО₃, КОН и ЫаОН.

Органические растворители, используемые в реакции, и в случае системы жидкость/жидкость, и в случае системы твердое вещество/жидкость, могут представлять собой простые диалкиловые эфиры, такие как, например, простой ди-трет-бутиловый эфир, простой этил-трет-бутиловый эфир, или ароматические углеводороды, такие как, например, толуол, этилбензол, изопропилбензол и ксилолы. Все эти растворители можно легко восстановить посредством дистилляции.

Применяемые катализаторы фазового переноса могут представлять собой четвертичный аммоний или соли фосфония, такие как, например, бромид тетрабутиламмония, бромид тетрадецилтриметиламмония, бромид гексадецилтрибутилфосфония, хлорид трикаприлилметиламмония (аликват), хлорид метилтри(С₈-С₁₀)-алкиламмония (адоген), где предпочтительным является бромид тетрадецилтриметиламмония.

Также в качестве катализаторов фазового переноса можно использовать полиэтиленгликоли низкой молекулярной массы, такие как, например, ΡΕΘ-200 (СА5 25322-68-3) или ΡΕΘ-400 (СА5 25322-68-3).

Используемое количество катализатора фазового переноса составляет 0,02-1 моль на 1 моль 4гидроксибензальдегида, предпочтительно 0,1-1 моль на 1 моль 4-гидроксибензальдегида, так как в этих условиях количество С,О-бис-фторбензилированных примесей в результате может составить менее

- 12 030250

0,03%, предпочтительно равным 0,01 мас.% или менее.

Отношение между алкилирующими средствами формулы (V) и 4-гидроксибензальдегидом составляет от 0,6 до 1,5, предпочтительно оно составляет от 0,9 до 1,1.

Температура реакции составляет от 60 до 160°С, предпочтительно интервал составляет от 80 до 120°С.

Время реакции составляет, как правило, от 4 до 8 ч.

Выходы реакции являются очень большими, как правило, более 90%.

Эффективность реакции, т.е. концентрация продуктов реакции в реакционной смеси, в описанных реакционных условиях является очень высокой, как правило, она больше или равна 25% (мас./об.).

Синтез К-энантиомеров сафинамида и ралфинамида посредством восстановления оснований шиффа, формируемых реакцией 4-(3- или 2-бензилокси)бензальдегида с Ό-аланинамидом или их рацемическими смесями и их солями.

Способ, используемый согласно настоящему изобретению, включает две стадии:

a) законченное образование промежуточного основания Шиффа;

b) восстановление основания Шиффа восстановителем, выбранным из боргидрида натрия и боргидрида калия

Эти две стадии можно проводить последовательно в одном и том же реакторе (однореакторная реакция) с выделением или без выделения основания Шиффа, в обоих случаях с высокими выходами.

Образование промежуточных оснований Шиффа включает конденсацию 4-(3- или 2фторбензилокси)бензальдегида с Ό-аланинамидом или их солью с кислотой ("аланинамидное соединение"), предпочтительно неорганической кислотой, такой как соляная, бромистоводородная, серная, метансульфоновая кислоты и т.д. Рацемическую смесь 4-(3- или 2-бензилокси)бензиламинопропанамида получают, когда вместо Ό-энантиомера аланинамида применяют рацемическую смесь его Ь- и Όэнантиомеров.

В случае выделения основания Шиффа, экспериментальные условия, используемые для его образования, позволяют получать выделенное основание Шиффа в форме осадка с высокими выходами и в очень чистой форме.

Получение основания Шиффа надлежащим образом проводят в органическом протонном растворителе, который должен быть инертным относительно реагентов и продуктов, а также быть инертным относительно условий восстановления иминной двойной связи. Если желательно проводить последующую стадию восстановления в той же реакционной среде, подходящими растворителями являются, например, низшие (С(-С₅)алканолы, предпочтительно метанол, этанол и изопропанол.

Образование промежуточного основания Шиффа должно быть полным и это представляет собой важный фактор для получения высоких выходов в последующей стадии восстановления. В соответствии со способом осуществления по данному изобретению перед проведением восстановления иминной двойной связи выделяют К-энантиомер промежуточного основания Шиффа (111'а) или (111'Ь)

являющиеся результатом реакции конденсации между 4-(3-или 2-фторбензилокси)бензальдегидом Ό-аланинамидом.

Альтернативно,, способствовать завершению реакции иминоалкилирования можно, действуя в таких условиях, чтобы вызвать осаждение промежуточных К-энантиомеров иминосоединений (111'а) или (111'Ь) в реакционном растворителе, а затем подвергнуть суспензию, содержащую указанное промежуточное иминопроизводное, стадии восстановления.

Отношение между Ό-аланинамидом (основанием или солью) и 4-(3- или 2фторбензилокси)бензальдегидом может составлять 1:1, но также предпочтительно можно использовать 10% избыток аланинамидного соединения.

Аланинамидное соединение можно добавлять или в виде свободного основания или в виде его соли присоединения кислоты. Предпочтительно его добавляют в реакционную смесь в виде соли, наиболее предпочтительно в виде гидрохлорида, вместе со стехиометрическим количеством основания, предпочтительно третичного амина, такого как, например, триэтиламин или диизопропилэтиламин.

Температура реакции при получении основания Шиффа составляет от 0 до 60°С, предпочтительно от 20 до 30°С.

Время реакции, как правило, составляет от 1 до 15 ч, предпочтительно от 2 до 6 ч.

В определенных условиях, когда Ό-аланинамид используют в виде свободного основания и время реакции иминоалкилирования превышает 8 ч, получаемое в результате основание Шиффа может претерпевать рацемизацию по хиральному центру. Это в особенности верно, когда основание Шиффа не кристаллизуется в ходе реакции иминоалкилирования.

- 13 030250

Восстановление основания Шиффа восстановителем, выбранным из боргидрида натрия и боргидрида калия, начинают только тогда, когда завершается образование основания Шиффа: если оно начинается до этого, важность, иногда превалируя, приобретают вторичные реакции с потерей в выходе и чистоте. Одна из этих вторичных реакций, наиболее важная, вызывает образование бензиловых спиртов посредством восстановления карбонильной группы выбранного (фторбензилокси)бензальдегида.

Завершение образования основания Шиффа можно контролировать известными в данной области аналитическими способами, например посредством анализа количественной ОС исходного раствора.

Восстановление основания Шиффа представляет собой наиболее важную стадию способа по данному изобретению и его проведение требует определенных условий.

Восстановитель боргидрид натрий или калия применяют в молекулярном количестве, которое относительно основания Шиффа находится в диапазоне от 0,5 до 1,4.

Применение боргидрида натрия является предпочтительным ввиду его коммерческой доступности и стоимости. Как правило, реакцию проводят в растворителе, который может представлять собой тот же растворитель, в котором после завершения реакции конденсации с аланинамидом основание Шиффа находится в форме суспензии. В таком случае в качестве реакционного растворителя, как правило, применяют низший (С₁-С₅)алканол, такой как метанол, этанол, 1-пропанол и 2-пропанол, предпочтительно метанол. Альтернативно,, когда основание Шиффа выделяют из реакционной среды (например, посредством фильтрации или центрифугирования) продукт в виде выделенного основания Шиффа добавляют к выбранному количеству органического растворителя, предпочтительно протонного органического растворителя, такого как низший (С₁-С₅)алканол, предпочтительно метанол, или смеси указанного протонного органического растворителя, необязательно в присутствии небольшого количества воды (предпочтительно менее 1,5 мас.% относительно количества органического растворителя).

Если реакцию конденсации 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегида с аланинамидным соединением проводят, добавляя данное последнее вещество в реакционную смесь в виде соли с кислотой, тогда для доведения рН до значения от 7 до 9 добавляют соответствующее количество основания, такого как гидроксид натрия или калия, третичные (С₁-С₄)алкиламины, пирролидин, 4-метилморфолин и т.п. Если в конце реакции иминоалкилирования значение рН реакционной смеси снижается ниже этого интервала, в реакционную смесь, содержащую основание Шиффа, дополнительно добавляют соответствующее количество указанного выше основания, для повторного доведения рН до указанного значения перед любым добавлением восстановителя боргидрида натрия или калия. Восстановитель боргидрид натрия или калия в ходе реакции, как правило, добавляют к смеси основания Шиффа и реакционного растворителя несколькими отдельными частями (как правило, от 15 до 20 частей) в твердой форме, такой как порошок или мелкоизмельченные кристаллы, в контролируемых условиях.

Альтернативно,, боргидрид натрия или калия добавляют в реакционную смесь частями или по каплям в форме раствора в метаноле, стабилизированного добавлением гидроксида натрия (как правило, приблизительно 15 мас.% гидроксида натрия относительно боргидрида натрия) или гидроксида калия.

В соответствии с предпочтительным способом проведения восстановления основания Шиффа стабилизированный раствор боргидрида натрия или калия в метаноле к реакционной смеси, содержащей основание Шиффа и выбранное количество реакционного растворителя, предпочтительно метанола, добавляют частями в количестве от 15 до 25 или по каплям в течение от 1 до 2 ч.

Для осуществления стадии восстановления в условиях, где отношение выбранного растворителя к основанию Шиффа обеспечивает одновременное присутствие насыщенного раствора основания Шиффа в указанном растворителе и основания Шиффа в твердой форме, где количество основания Шиффа вне фазы растворителя максимизировано, следует соответствующим образом выбрать количество используемого растворителя.

Таким образом, общее количество органического растворителя, используемого на стадии восстановления, может находиться в диапазоне от 0,5 до 3,0 л, предпочтительно от 0,7 до 2,5 л, наиболее предпочтительно от 0,8 до 2,0 л на каждый 1 моль основания Шиффа. В этих условиях значительная часть основания Шиффа, присутствующего в реакционной среде, проходящей стадию восстановления, в ходе существенной части реакции находится в форме твердого вещества. В этих условиях выход конечного продукта является очень высоким и это имеет положительное экономическое влияние на промышленное производство.

рН реакционной смеси, в которой проводят стадию восстановления, когда конденсацию между альдегидом и производным аланинамида проводят с его солью, доводят до значения от 7 до 9, предпочтительно от 8 до 8,5 (определяемого непосредственно в реакционной смеси посредством рН-метра), добавляя, если необходимо, соответствующее количество основания, такого как гидроксид натрия или калия, третичные (С1-С₄)-алкиламины, пирролидин, 4-метилморфолин и т.п.

Температуру реакции в ходе стадии восстановления поддерживают от -10 до 30°С, предпочтительно от 5 до 15°С.

Время восстановления может варьировать от 0,5 до 5 ч в зависимости от используемого растворителя, температуры, концентрации и т.д., где все факторы хорошо известны специалистам в данной области.

- 14 030250

Лучшие результаты получают при времени реакции приблизительно 3 ч с применением в качестве восстановителя боргидрида натрия, в качестве растворителя метанола в соотношении от 0,8 до 2,0 л на каждый 1 моль количества основания Шиффа при температуре от 5 до 10°С.

В конце реакции реакционный растворитель отгоняют при пониженном давлении, остаток растворяют в водонерастворимом органическом растворителе, а неорганические соли удаляют посредством отмывки водой.

Конечный неочищенный продукт, т.е. К-энантиомер сафинамида или ралфинамида, восстанавливают, удаляя посредством отгонки органический растворитель, где растворен продукт реакции.

Затем неочищенный К-энантиомер сафинамида или ралфинамида очищают посредством кристаллизации. Кристаллизацию можно проводить, добавляя к раствору соответствующего неочищенного соединения формулы (1'а) или (1'Ь)+ в инертном органическом растворителе смешивающийся инертный органический осадитель. Органический инертный растворитель предпочтительно выбирают из ароматических углеводородов, таких как бензол, толуол, диметилбензол и этилбензол и ацетаты низших алкилов, а более предпочтительно он представляет собой этилацетат. Смешивающийся инертный органический осадитель предпочтительно выбирают из низших алифатических углеводородов, таких как гексан и гептан и циклогексан, более предпочтительно он представляет собой н-гексан.

Альтернативно, кристаллизацию проводят, растворяя конечный неочищенный продукт в горячем органическом растворителе, предпочтительно толуоле или циклогексане, а затем охлаждая раствор при комнатной температуре и восстанавливая чистый продукт посредством фильтрации.

Затем основания преобразуют в желаемые соли известными способами, в частности их преобразуют в метансульфонатную соль, физические/химические свойства которой (стабильность, гранулометрические свойства, текучесть и т.д.) подходят для последующего составления в фармацевтический препарат для применения в качестве лекарственного средства.

Пример 1. Получение очищенного 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ) посредством межфазного катализа.

Смесь 2-фторбензилхлорида (6,0 кг, 41,50 моль), 4-гидроксибензальдегида (4,7 кг, 38,33 моль), карбоната калия (5,2 кг, 37,33 моль) и бромида тетрадецилтриметиламмония (0,49 кг, 1,46 моль) в толуоле (11,4 кг), при перемешивании и в атмосфере азота, медленно доводят до температуры кипения с обратным холодильником и кипятят с обратным холодильником в течение 6 ч.

Затем раствор концентрируют при атмосферном давлении, добавляют 3,6 кг толуола и отгоняют, и эту процедуру повторяют еще раз.

Затем гетерогенную смесь охлаждают до комнатной температуры и твердое вещество удаляют посредством фильтрации. Затем остаточный растворитель удаляют при пониженном давлении и к масляному остатку добавляют 1,4 кг толуола. Смесь нагревают приблизительно до 30-35°С и осаждают несколькими граммами чистого 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида.

Гетерогенную смесь перемешивают в течение 30 мин при 30-35°С, а затем к смеси, поддерживаемой при перемешивании при 30-35°С, добавляют н-гексан (11 кг) в течение 30 мин.

После охлаждения до 0-5°С и перемешивания в течение дополнительного часа при данной температуре твердое вещество собирают посредством фильтрации и высушивают при пониженном давлении с получением 8,0 кг (89% выход) 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида; т.плавл. 56,7°С (ПЗС. 5°С/мин), с чистотой по ОС 98,2 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида (У1Ь), определенным посредством ОС (см. пример 24В), 0,01 мас.%.

(*) Выходы, приведенные в этом и следующих примерах, если не указано иначе, приведены в виде молярных выходов.

1.1. Дополнительная очистка 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ) посредством кристаллизации.

1 кг продукта, полученного в соответствии со способом, описанным в примере 1, растворяют в 2 кг простого диизопропилового эфира при температуре кипения с обратным холодильником при перемешивании.

Раствор охлаждают до 50-55°С в течение 10-15 мин и осаждают с 5 г высокочистого 4-(2фторбензилокси)бензальдегида (чистота по ОС 99,9% площади; см. пример 24А, и содержание (У1Ь) менее 0,005%).

Суспензию охлаждают до 10-15°С в течение 45-60 мин и перемешивают в течение дополнительного

часа.

В заключение осадок собирают посредством фильтрации, отмывают холодным простым диизопропиловым эфиром (0,2 кг) и высушивают при пониженном давлении с получением 0,93 кг 4-(2фторбензилокси)бензальдегида с чистотой по ОС 99,8 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (У1Ь), определенными посредством ОС в соответствии с примером 24В, 0,005 мас.%.

1.2. Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ) посредством межфазного катализа (РТС), с применением различных катализаторов.

4-(2-Фторбензилокси)бензальдегид получают алкилированием 4-гидроксибензальдегида (0,39 г) 2- 15 030250

фторбензилхлоридом, следуя той же процедуре из примера 1, но используя три различных катализатора фазового переноса.

Результаты приведены в следующей табл. 5

Таблица 5

Эксперимент	Катализатор фазового переноса РСТ	% (У1Ь) **	%Выход
1,2	(а)	Бромид тетрабутилфосфония	0, 02	85, 0
1,2	(Ь)	Аликват 336*	0,04***	88,8
1,2	(с)	РЕС 400	0,16***	96, 0

* Аликват 336: хлорид трикаприлилметиламмония.

**% (У1Ь): содержание 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (ОС: мас.%). Пример 24В.

*** Для снижения содержания примеси (У1Ь) ниже 0,03 мас.% продукт можно дополнительно очищать способом из примера 1.1 (см. пример 24В).

1.3. Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ) посредством межфазного катализа (РТС) в ксилоле.

4-(2-Фторбензилокси)бензальдегид получают с 87,2% выходом с содержанием 3-(2-фторбензил)-4(2-фторбензилокси)бензальдегида, определенным посредством ОС (см. пример 24В), 0,02 мас.% реакцией 4-гидроксибензальдегида (47 г) с 2-фторбензилхлоридом тем же способом, как и в примере 1, но с заменой толуола ксилолом в качестве растворителя.

1.4. Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ) посредством межфазного катализа с применением в качестве основания гидроксида калия

4-(2-Фторбензилокси)бензальдегид получают с 88% выходом с содержанием 3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида, определенным посредством ОС (см. пример 24В), 0,49 мас.% реакцией 4-гидроксибензальдегида (121 г) с 2-фторбензилхлоридом, тем же способом, как и в примере 1, но с применением гидроксида калия (108,6 г) вместо карбоната калия.

Этот продукт дополнительно очищают посредством кристаллизации в соответствии с примером 1.1 для снижения содержания примеси (У1Ь) ниже 0,03 мас.% (см. пример 24В).

1.5. Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ) посредством межфазного катализа с применением 2-фторбензилбромида.

4-(2-Фторбензилокси)бензальдегид получают с 89,2% выходом с содержанием 3-(2-фторбензил)-4(2-фторбензилокси)бензальдегида (У1Ь), определенным посредством ОС (см. пример 24В), 0,06 мас.% реакцией 4-гидроксибензальдегида (161 г) с 2-фторбензилбромидом вместо 2-фторбензилхлорида тем же способом, как и в примере 1.

Этот продукт дополнительно очищают посредством кристаллизации в соответствии с примером 1.1 для снижения содержание примеси (У1Ь) ниже 0,03 мас.% (см. пример 24В).

1.6. Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ) в изопропаноле.

В реактор помещают изопропанол (206 кг), карбонат калия (29,4 кг, 0,21 кмоль), иодид калия (11,4 кг, 0,068 кмоль) и 4-гидроксибензальдегид (26 кг, 0,21 кмоль). Смесь перемешивают при 20-25°С в течение 15 мин. Затем добавляют 2-фторбензилхлорид (33 кг, 0,23 кмоль). Смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 3 ч.

Растворитель удаляют в вакууме до остаточного объема 70 л.

Добавляют циклогексан (70 кг) и воду (95 кг), смесь нагревают до 50°С и перемешивают при данной температуре в течение 30 мин. Перемешивание останавливают и фазам позволяют разделиться.

Органическую фазу отмывают водой (48 кг) при 50°С. Отделенную органическую фазу концентрируют в вакууме до остаточного объема 60 л.

Гетерогенную смесь охлаждают до 20°С приблизительно в течение 2 ч и перемешивают при данной температуре в течение 30 мин.

Смесь центрифугируют и твердое вещество отмывают циклогексаном.

Влажное твердое вещество сушат в вакууме с получением указанного в заголовке продукта: 40,2 кг (0,18 кмоль); выход: 82% с чистотой по ОС 99,87 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (У1Ь), определенным посредством ОС в соответствии с примером 24В, 0,063 мас.%.

1.7. Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ) в этаноле

В реактор помещают 4-гидроксибензальдегид (30,3 г, 248 ммоль), этанол (400 мл), 2фторбензилхлорид (28,92 г; 198 ммоль), карбонат калия (103,8 г, 751 ммоль), иодид натрия (1,34 г, 0,05 ммоль). Смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании и в атмосфере азота и поддерживают в этих условиях в течение 5 ч.

- 16 030250

Смесь охлаждают до комнатной температуры и экстрагируют этилацетатом и отмывают 2 М водным раствором гидроксида натрия (3x300 мл).

Растворитель выпаривают в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (40,75 г) с чистотой по ОС 91,77 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (У1Ь), определенным в соответствии с примером 24В, 0,346 мас.%.

Справочный пример 2. Получение (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1Ь) высокой степени чистоты (однореакторная реакция).

a) В реактор при перемешивании помещают метанол (25 л) и гидрохлорид Ь-аланинамида (2,0 кг) и смесь перемешивают при 23°С в течение 15 мин (значение рН 3,8); затем к ранее полученному раствору добавляют триэтиламин (1,65 кг) и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (3,32 кг), полученные в соответствии с примером 1.1, доводя значение рН до 8,3. Смесь перемешивают при 25°С в течение 3 ч (гетерогенной смеси рН 8) и охлаждают при перемешивании до 8°С. К смеси при перемешивании в течение 3 ч добавляют боргидрид натрия (0,53 кг), разделенный на двенадцать небольших частей, после чего смесь поддерживают в течение дополнительных 30 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме при 40°С до получения остатка (5,2 л). К реакционной смеси при перемешивании в атмосфере азота добавляют толуол (13,9 кг) и воду (23,0 л). Смесь нагревают до 60°С и поддерживают при данной температуре при перемешивании в течение 30 мин. После разделения фаз органическую фазу отмывают водой (6,4 л) при 60°С и воду выливают. Органическую фазу охлаждают до 18°С в течение 2 ч и поддерживают в этих условиях в течение 1 ч.

Гетерогенную смесь фильтруют, твердое вещество отмывают толуолом (3x1,0 л) и высушивают приблизительно при 40°С в вакууме с выходом 3,96 кг (δ)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамида, 1Ь) с чистотой по ВЭЖХ 99,4 (% площади), определенной способом из примера 25А и содержанием С,О-диалкилированного (8)-2-[3-(2-фторбензил)4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, определенным ВЭЖХ способом из примера 25В, менее 0,005 мас.%.

b) Реакцию проводят в тех же условиях, как описано выше, за исключением того, что боргидрид натрия предварительно растворяют в смеси метанола (приблизительно 5,8 г метанола на каждый грамм боргидрида натрия) и 30% гидроксида натрия (приблизительно 0,5 г 30% гидроксида натрия на каждый грамм боргидрида натрия), а затем по каплям добавляют в течение приблизительно 30 мин в смесь с основанием Шиффа, поддерживая температуру 8°С.

Степень чистоты полученного продукта по ВЭЖХ, определенная в соответствии с примером 25А, составляет 99,5%, а содержание С,О-диалкилированной примеси, определенное ВЭЖХ в соответствии с примером 25В, - менее 0,005 мас.%.

c) К смеси метанола (275 л) и гидрохлорида Ь-аланинамида (24,4 кг, 0,20 кмоль) при комнатной температуре при перемешивании добавляют безводный триэтиламин (19,8 кг, 0,20 кмоль).

К указанной выше смеси в течение приблизительно 20 мин добавляют 4-(2фторбензилокси)бензальдегид (40,0 кг, 0,17 кмоль), полученный в примере 1.6, и реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч при 25°С, после чего температуру снижают до 8°С (смесь А).

Во втором реакторе при 0-5°С смешивают метанол (50 л) и гидроксид натрия 30% в воде (3,2 кг). К указанной выше смеси, частями, добавляют порошок боргидрида натрия (6,6 кг, 0,17 кмоль) при 0-5°С. Смесь перемешивают в течение 2 ч при 0-5°С в атмосфере азота (смесь В).

Смесь В при перемешивании и в атмосфере азота приблизительно в течение 4 ч добавляют к указанной выше реакционной смеси А, поддерживая температуру 8°С.

Реакционную смесь концентрируют в вакууме до остаточного объема 70 л. К остатку при перемешивании и в атмосфере азота добавляют толуол (170 кг) и воду (280 кг) и смесь нагревают до 60-65°С.

Органическую фазу отделяют и добавляют воду (70 кг) и двухфазную смесь перемешивают при 6065°С.

Органическую фазу отделяют и постепенно охлаждают до 20°С.

Смесь центрифугируют, и твердое вещество отмывают толуолом с получением после сушки при пониженном давлении указанного в заголовке продукта (48,4 кг, 0,16 кмоль), с выходом: 92%.

Чистота продукта по ВЭЖХ составляет 99,87 (% площади, см. пример 25А), а содержание С,Одиалкилированного (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет менее 0,005 мас.% (см. пример 25В); т.плавл. 109,5°С (капилляр).

Энантиомерный состав ралфинамида, определенный на хиральной колонке ВЭЖХ, представляет собой 100% δ-энантиомера (% площади, см. пример 26А).

Справочный пример 3. Получение метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (И) высокой степени чистоты.

а) Ралфинамид (2,8 кг, 9,26 моль), полученный как описано в примере 2а), растворяют в 2- 17 030250

пропаноле (19,5 кг) и поддерживают при 65-70°С и при перемешивании в атмосфере инертного газа.

После обработки древесным углем (150 г) и фильтрации раствор осаждают чистым метансульфонатом ралфинамида и в течение 30 мин при перемешивании при 50-55°С добавляют метансульфоновую кислоту (900 г, 9,36 моль). Затем суспензию охлаждают до 15-20°С в течение 2 ч и перемешивание продолжают в течение дополнительного часа. В заключение твердое вещество собирают посредством фильтрации и высушивают при пониженном давлении с получением 3,46 кг (94,0% выход) метансульфоната ралфинамида.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,6 (% площади, см. пример 25А) и содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет менее 0,005 мас.% (см. пример 25В); т.плавл. 240,6°С посредством Б8С (5°С/мин).

Энантиомерная чистота метансульфоната ралфинамида, определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет более 99,9 (% площади, см. пример 26А).

b) Ралфинамид (2,8 кг, 9,26 моль), полученный как описано в примере 2Ь), преобразуют в его метансульфонатную соль описанным выше способом. Выход составляет 95,8%.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,6 (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет менее 0,005 мас.% (см. пример 25В); т.плавл. 240,6°С посредством Б8С (5°С/мин).

Энантиомерная чистота метансульфоната ралфинамида, определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет более 99,8 (% площади, см. пример 26А).

c) Смесь 2-пропанола (385 кг) и (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамид, 48,1 кг, 0,16 кмоль), полученную в примере 2с), нагревают при перемешивании до 60°С и поддерживают в этих условиях до получения прозрачного раствора.

К раствору медленно при 60°С добавляют безводную метансульфоновую кислоту.

Гетерогенную смесь охлаждают до 20°С и перемешивают при данной температуре в течение 2 ч.

Смесь центрифугируют и твердое вещество отмывают 2-пропанолом с получением, после сушки в вакууме, 61 кг (0,15 кмоль) указанного в заголовке продукта; выход 96%; с чистотой по ВЭЖХ 99,83 (% площади, см. пример 25А) и менее 0,005 мас.% С,О-диалкилированного метансульфоната (8)-2-[3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (см. пример 25В); т.плавл. 237°С (капилляр).

Энантиомерный состав метансульфоната ралфинамида, определенный на хиральной колонке ВЭЖХ, представляет собой 100% 8-энантиомера (% площади, см. пример 26А).

Справочный пример 4. Получение метансульфоната (К,8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (И, М) высокой степени чистоты с применением основания Ь-аланинамида (однореакторная реакция).

а) (К,8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1Ь, 1'Ь).

Свободное основание Ь-аланинамида получают посредством добавления эквимолярного количества метилата натрия к раствору гидрохлорида Ь-аланинамида (30 г) в этаноле (351 мл). Смесь перемешивают в течение 30 мин в атмосфере азота при комнатной температуре. Твердое вещество фильтруют и растворитель полностью удаляют в вакууме с получением 21,1 г Ь-аланинамида.

В круглодонной колбе 21,1 г Ь-аланинамида растворяют в 320 г (приблизительно 405 мл) метанола.

Через 15 мин при 20°С добавляют 48,8 г 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида, полученного в соответствии с примером 1.1, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч.

Смесь охлаждают до 8±2°С и к смеси частями добавляют 8 г твердого ΝαΒΗ·|. поддерживая температуру при 8±2°С.

Реакционную смесь перемешивают в течение по меньшей мере 12 ч, затем концентрируют в минимальном объеме.

Добавляют толуол (248 мл) и воду (355 мл) и двухфазную смесь перемешивают при 70°С, а затем отделяют органический слой.

Органический раствор отмывают водой (70 мл) при 70°С, затем охлаждают при комнатной температуре, получая суспензию, которую фильтруют и отмывают толуолом.

Твердое вещество высушивают при 40°С в вакууме с выходом 47,7 г (74,4% выход) указанного в заголовке продукта в виде белого порошка.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 95,85 (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет менее 0,005 мас.% (см. пример 2 5В).

Отношение К/8 энантиомеров ралфинамида, определенное на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет 52,5/47,5 (% площади, см. пример 26А).

Дополнительный контроль течения реакции иминоалкилирования показывает, что рацемизация происходит на этой стадии.

- 18 030250

Ь) Метансульфонат (К,8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1б,1'б).

В круглодонную колбу добавляют 129,5 г 2-пропанола и 16,5 г продукта со стадии а) и нагревают при 70±3°С при перемешивании до получения полного раствора.

Поддерживая температуру при 70±3°С, по каплям добавляют 5,2 г метансульфоновой кислоты. После перемешивания в течение 30 мин при 70±3°С смесь медленно охлаждают до 20±3°С и затем перемешивают в течение 1 ч.

Продукт фильтруют, отмывают 2-пропанолом и сушат в вакууме при 40°С с выходом 19,4 г указанного в заголовке продукта в виде белого порошка.

Выход: 92%; с чистотой по ВЭЖХ 99,74 (% площади, см. пример 25А) и менее 0,005 мас.% С,Одиалкилированного метансульфоната (К,8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (см. пример 25В). Посредством хиральной колонки ВЭЖХ показано, что полученный таким образом (К,8)-ралфинамид представляет собой смесь энантиомеров, 8:К=53,8:47,0 (% площади, см. пример 26А).

Пример 5. Получение метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'б) высокой степени чистоты (однореакторная реакция).

a) (К)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ГЬ).

В реактор при перемешивании помещают метанол (28 л) и гидрохлорид Ό-аланинамида (2,1 кг) и смесь перемешивают при 23°С в течение 15 мин; затем к ранее полученному раствору добавляют триэтиламин (1,65 кг) и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (3,30 кг), полученный в соответствии с примером 1.1. Смесь перемешивают при 25°С в течение 3 ч и охлаждают при перемешивании до 8°С. Небольшими частями в течение 3 ч при перемешивании добавляют боргидрид натрия (0,50 кг) и смесь перемешивают в течение дополнительных 30 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме при 40°С до остатка (5,0 л), а затем к реакционной смеси при перемешивании в атмосфере азота добавляют толуол (14 кг) и воду (25,0 л). Смесь нагревают до 60°С и поддерживают при данной температуре при перемешивании в течение 30 мин. После разделения фаз органическую фазу отмывают водой (7,0 л) при 60°С и воду выливают. Органическую фазу охлаждают до 18°С в течение 2 ч и поддерживают в этих условиях в течение 1 ч.

Гетерогенную смесь фильтруют, твердое вещество отмывают толуолом (3x1,2 л) и высушивают приблизительно при 40°С в вакууме с получением 3,90 кг (К)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'Ъ) с чистотой по ВЭЖХ, определенной способом из примера 25А, 99,9 (% площади) и содержанием С,О-диалкилированного (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, определенным ВЭЖХ способом из примера 25В, менее 0,005 мас.%.

b) Метансульфонат (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'б).

К-энантиомер ралфинамида, полученный в соответствии с приведенным выше примером 5а), преобразуют в метансульфонатную соль таким же способом, как в примере 3 а.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,9 (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет менее 0,005 мас.% (см. пример 25В); т.плавл. 241,0°С посредством Ό8Ο (5°С/мин).

Энантиомерная чистота (1'б), определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет более 99,9 (% площади, см. пример 26В).

Справочный пример 6. Получение метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1б) высокой степени чистоты, с выделением промежуточного основания Шиффа (8)-2-[4-(2-фторбензилокси) бензилиденамино]пропанамида (111Ь).

а) (8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамид (111Ь).

К суспензии 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (60,0 г, 0,26 моль), полученной как в примере 1.1, и гидрохлорида Ь-аланинамида (35,7 г, 0,29 моль) в метаноле (280 мл) при комнатной температуре при перемешивании в атмосфере азота добавляют триэтиламин (29,1 г, 0,29 моль). Перемешивание продолжают в течение одного дополнительного часа.

Затем раствор осаждают несколькими мг (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамида, температуру снижают до 5-10°С и перемешивание продолжают в течение 2 ч.

Твердое вещество собирают посредством фильтрации и отмывают метанолом при 0°С.

После сушки при пониженном давлении получают указанное в заголовке соединение с т.плавл. 122°С (капилляр), с 90% выходом.

’Н-ЯМР: (СОС1₃, 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМ8): 1,46 (3Н, д, 1=7,0 Гц, СН₃); 3,91 (1Н, кв, 1=7,0 Гц, СН-СО); 5,17 (2Н, с, О-СН₂); 7,02 (2Н, д, 1=8,9 Гц ароматический Н в орто-положении ОСН₂); 7,09 (1Н, ддд, 1_Н-Р=9,78 Гц 1 _орто=8,55 Гц 1 _мета=1,23 Гц ароматический Н в орто-положении Р); 7,15 (1Н, дт, 1 _орто=7,35 Гц 1 _мета=1,23 Гц ароматический Н в пара-положении Р); 7,27-7,40 (1Н, м, ароматический Н в пара-положении СН₂); 7,48 (1Н, дт, 1 _орто=1_Н-Р=7, 35 Гц 1 _мета=1,53 Гц ароматический Н в орто- 19 030250

положении СН₂); 7,71 (2Н, д, 1=8,9 Гц ароматический Н в орто-положении СН=Ы); 8,17 (1Н, с, С=Ы).

¹³С-ЯМР: (СОС1₃, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 21,4 (СН₃); 63,8 (ОСН₂); 68,4 (Н₂ЫСОСН); 115,0 (д, 1_С1=22,4 Гц, ароматический СН), 115,5 (д, 1_С-Р=20,7 Гц, ароматический СН); 123,7 (д, 1_С-Р=14,4 Гц, четвертичный ароматический С); 124,5 (ушир.д, ароматический СН); 129,0 (четвертичный ароматический С);

129,8 (ушир.д, ароматический СН); 130,1 (ушир.д, 2 ароматический СН); 160,5 (д, 1_С-Р=246,4 Гц, четвертичный ароматический С); 161,1 (ароматический С-О); 161,1 (С=Ы); 176,9 (СОНН₂).

b) (8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1Ь).

Смесь (8)-2-[4-(2-фторбензилокси) бензилиденамино] пропанамида (111Ь), полученную как описано выше (30 г), и метанола (180 мл) охлаждают при перемешивании до 2-5°С. Восемнадцатью небольшими частями в течение 90 мин к ранее полученной холодной смеси добавляют боргидрид натрия (3,8 г), поддерживая температуру ниже 5°С. Затем смесь перемешивают в течение дополнительных 10 мин при 5°С. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и обрабатывают как описано в примере 2 с получением 28,75 г (95% выход) (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамид, 1Ь) с чистотой по ВЭЖХ, определенной способом из примера 25А, 99,5 (% площади) и содержанием С,Одиалкилированного (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, определенным способом ВЭЖХ из примера 25В, менее 0,005 мас.%.

c) Метансульфонат (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (И).

Проводят реакцию ралфинамида, полученного, как описано в приведенном выше примере 6Ь), с метансульфоновой кислотой, как описано в примере 3, с получением метансульфонатной соли (И) с выходом 95%.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,9 (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет менее 0,005 мас.% (см. пример 25В); т.плавл. 240,6°С посредством Э8С (5°С/мин).

Пример 7. Получение метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Гй) высокой степени чистоты, с выделением промежуточного основания Шиффа (К)-2-[4-(2фторбензилокси)бензилиденамино] пропанамида (Ш'Ь).

a) (К)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамид (Ш'Ь).

К суспензии 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (60,0 г, 0,26 моль), полученной как в примере 1.1, и гидрохлорида Ό-аланинамида (35,7 г, 0,29 моль) в метаноле (280 мл) при комнатной температуре при перемешивании в атмосфере азота добавляют триэтиламин (29,1 г, 0,29 моль). Перемешивание продолжают в течение одного дополнительного часа.

Затем раствор осаждают несколькими мг (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамида, температуру снижают до 5-10°С и перемешивание продолжают в течение 2 ч.

После сушки при пониженном давлении получают указанное в заголовке соединение с выходом 91% с т.плавл. 121°С (капилляр).

’Н-ЯМР: (СЭС1₃, 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМ8): 1,46 (3Н, д, 1=7,0 Гц, СН₃); 3,91 (1Н, кв, 1=7,0 Гц, СН-СО); 5,17 (2Н, с, О-СН₂); 7,02 (2Н, д, 1=8,9 Гц ароматический Н в орто-положении ОСН₂); 7,09 (1Н, ддд, 1_Н-Р=9,78 Гц 1 _орто=8,55 Гц 1 _мета=1,23 Гц ароматический Н в орто-положении Р); 7,15 (1Н, дт, 1 _орто=7,35 Гц 1 _мета=1,23 Гц ароматический Н в пара-положении Р); 7,27-7,40 (1Н, м, ароматический Н в пара-положении СН₂); 7,48 (1Н, дт, 1 _орто=1_Н-Р=7, 35 Гц 1 _мета=1,53 Гц ароматический Н в ортоположении СН₂); 7,71 (2Н, д, 1=8,9 Гц ароматический Н в орто-положении СН=Ы); 8,17 (1Н, с, С=Ы).

¹³С-ЯМР: (СЭС1₃, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 21,4 (СН₃); 63,8 (ОСН₂); 68,4 (НЛ'СОСН); 115,0 (д, 1_СР=22,4 Гц, ароматический СН), 115,5 (д, 1_С-Р=20,7 Гц, ароматический СН); 123,7 (д, 1_С-Р=14,4 Гц, четвертичный ароматический С); 124,5 (ушир.д, ароматический СН); 129,0 (четвертичный ароматический С);

b) (К)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1'Ь).

Смесь (К)-2-[4-(2-фторбензилокси) бензилиденамино] пропанамида (Ш'Ь) (30 г) и метанола (180 мл) охлаждают при перемешивании до 2-5°С. Двенадцатью небольшими частями в течение 90 мин к ранее полученной холодной смеси добавляют боргидрид натрия (3,8 г), поддерживая температуру ниже 5°С. Затем смесь перемешивают в течение дополнительных 10 мин при 5°С. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и обрабатывают, как описано в примере 2, с получением 28,44 г (94% выход (К)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'Ь) с чистотой по ВЭЖХ, определенной способом из примера 25А, 99,8 (% площади) и содержанием С,О-диалкилированного (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, определенным способом ВЭЖХ из примера 25В, менее 0,005 мас.%.

- 20 030250

с) Получение метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (М).

Проводят реакцию К-энантиомера ралфинамида, полученного в соответствие с приведенным выше примером 7Ь, с метансульфоновой кислотой, как описано в примере 3а, с получением метансульфонатной соли (М) с выходом 95%.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,9 (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет менее 0,005 мас.% (см. пример 25В); т.плавл. 240,6°С посредством Э§С (5°С/мин).

Энантиомерная чистота метансульфоната ралфинамида, определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет более 99,8 (% площади, см. пример 26В).

Справочный пример 7А. Метансульфонат (К,§) 2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (И,М).

a) Метанол (54 мл) и гидрохлорид (К,§)-аланинамида (10,09 г, 82 ммоль) помещают в 250 мл стеклянный реактор и по каплям при 25°С добавляют безводный триэтиламин (11,36 мл, 96 ммоль).

В течение приблизительно 10 мин добавляют 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (15,99 г, 69 ммоль), полученный в примере 1.6, и смесь перемешивают в течение 12 ч при 25°С (смесь А).

Во втором реакторе (50 мл) при перемешивании смешивают метанол (20 мл) и гидроксид натрия 30% в воде (1,3 г) и температуру снижают до 0,6°С. К раствору частями при 1°С добавляют порошковый боргидрид натрия (2,61 г, 69 ммоль). Смесь перемешивают в течение 2 ч при 1°С в атмосфере азота (смесь В).

При перемешивании и в атмосфере азота, в течение приблизительно 30 мин к указанной выше смеси А добавляют смесь В, поддерживая температуру 10°С.

Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при 10°С и концентрируют в вакууме до остаточного объема 20 мл. К остатку при перемешивании и в атмосфере азота добавляют толуол (70 мл) и воду (120 мл) и смесь нагревают до 60-65°С.

Органическую фазу отделяют, добавляют воду (20 мл) и смесь перемешивают при 60-65°С.

Органическую фазу отделяют, постепенно охлаждают приблизительно до 7°С и поддерживают в этих условиях в течение 3 ч.

Смесь фильтруют и твердое вещество отмывают толуолом (3x5 мл) с получением, после сушки при пониженном давлении, (К,§) 2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (13,59 г); 65,2% выход.

Чистота продукта по ВЭЖХ составляет 97,73% (% площади, см. пример 25А) и содержание С,Одиалкилированного (К,§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,020 мас.% (см. пример 25В).

Показано, что полученный таким образом (К,§)-ралфинамид представляет собой смесь энантиомеров §:К=52,3:47,7 (% площади, см. пример 26А) посредством хиральной колонки ВЭЖХ.

b) Смесь 2-пропанола (102 мл) и (К,§)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (10 г, 33 ммоль), полученного в примере 7а), нагревают при перемешивании до 70°С и поддерживают в этих условиях до получения прозрачного раствора.

К предыдущему раствору при 60°С медленно добавляют безводную метансульфоновую кислоту (3,18 г; 2,15 мл).

Смесь центрифугируют и твердое вещество отмывают 2-пропанолом с получением, после сушки в вакууме, 10,77 г указанного в заголовке продукта; 92% выход; с чистотой по ВЭЖХ 99,50 (% площади, см. пример 25А) и 0,009 мас.% С,О-диалкилированного метансульфоната (К,§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (см. пример 25В).

Показано, что полученный таким образом (К,§)-ралфинамид представляет собой смесь энантиомеров, §:К=52,8:47,2 (% площади, см. пример 26А) посредством хиральной колонки ВЭЖХ. [а]²⁵с (с 2% в метаноле): 0,0473.

Справочный пример 8. Получение метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ΙΙά).

а) 3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (У1Ь).

В 5-л круглодонную колбу последовательно добавляют 4-гидроксибензальдегид (293 г, 2,407 моль), карбонат калия (315,85 г, 2,287 моль), толуол (900 мл) и 2-фторбензилхлорид (1392 г, 9,628 моль).

К реакционной смеси при перемешивании добавляют воду (150 мл).

Смесь быстро нагревают до температуры кипения с обратным холодильником и поддерживают в этих условиях в течение трех суток.

Анализ ОС выявил присутствие 3,2 мас.% (см. пример 24В) 3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида (У1Ь).

Смесь охлаждают до 60°С и при перемешивании добавляют воду (1000 мл).

Слои разделяют. Органическую фазу отмывают солевым раствором (500 мл); затем растворитель отгоняют при пониженном давлении (10 мм рт. ст.) при 35°С до тех пор, пока растворитель больше не

- 21 030250

отгоняется.

Остаток отгоняют при 3 мм рт. ст., собирая фракцию при 180-220°С. Остаток после холодной отгонки растворяют в СН₂С1₂, и растворитель удаляют в вакууме с получением остатка. Чистота по ОС составляет 89%, хотя исходный альдегид составляет 0,5%.

Хроматография на силикагеле с использованием гексана:этилацетата=95:5 дает продукт (15,7 г) с чистотой по ОС более 99% (% площади; относительно условий ОС см. пример 24В). Т.плавл. продукта составляет 71°С (капилляр).

¹Н-ЯМР: (СОС1₃, 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМ§): 4,06 (2Н, с, СН₂); 5,23 (2Н, с, ОСН₂); 6,95-7,40 (9Н, м, ароматический Н); 7,67 (1Н, ушир.д, 1=0.9 Гц, ароматический Н в орто-положении относительно С=О и СН₂); 7,76 (1Н, дд, 1₁=2,1 Гц, 1₂=8,3 Гц, ароматический Н в орто-положении относительно С=О и ароматический СН); 9,84 (1Н, с, СНО).

¹³С-ЯМР: (СОС1₃, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 29,2 (СН₂); 64,1 (ОСН₂); 111,4 (ароматический СН); 115,4 (д, 1_С-Р=22,0 Гц, ароматический СН), 115,5 (д, 1_С-Р=21,1 Гц, ароматический СН); 123,3 (д, 1_С-Р=14,2 Гц, четвертичный ароматический С); 124,1 (д, 1_С-Р=2,6 Гц, ароматический СН); 124,5 (д, 1_С-Р=3,2 Гц, ароматический СН); 126,6 (д, Ч_С-Р=15,5 Гц, четвертичный ароматический С); 128,2 (д, 1_С-Р=8,1 Гц, ароматический СН); 129,6 (д, 1_С-Р=6,2 Гц, ароматический СН); 129,6 (четвертичный ароматический С); 130,0 (четвертичный ароматический С); 130,2 (д, Ч_С-Р=8,3 Гц, ароматический СН); 131,1 (ароматический СН); 131,3 (д, 1_С-Р=4,1 Гц, ароматический СН); 131,8 (ароматический СН); 160,5 (д, 1_С-Р=246,8 Гц, четвертичный ароматический С); 161,2 (д, Ч_С-Р=245,1 Гц, четвертичный ароматический С); 161,3 (четвертичный ароматический С); 191,1 (СНО).

b) (§)-2-[3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (11Ъ).

К раствору 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегиду (3,56 г, 0,0105 моль) в 50-мл колбе при комнатной температуре добавляют раствор, ранее полученный посредством осторожного добавления при перемешивании триэтиламина (1,2 г, 0,0119 моль) к 17 мл раствора гидрохлорида Ьаланинамида (1,48 г, 0,0119 моль) в метаноле.

Эту реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре (осаждение происходит соответствующим имином), а затем его переносят в 0,18 л автоклав и к смеси добавляют 0,34 г влажного (50% Н₂О) 5% Р!/С.

Воздух удаляют из автоклава азотом, а затем при 5,0 бар вводят водород.

Реакцию проводят при температуре 35°С в течение 3-5 ч.

После охлаждения до комнатной температуры и удаления катализатора посредством фильтрации растворитель отгоняют при пониженном давлении до получения остатка приблизительно 6,5 г. К этому остатку добавляют воду (22 мл) и поддерживают при данной температуре при перемешивании в течение по меньшей мере 2 ч.

Полученные кристаллы фильтруют и отмывают водой. Получают указанное в заголовке соединение с выходом 83% (0,00872 моль); т.плавл. 161°С (капилляр).

⁹Н-ЯМР: (ΟϋΟ1₃, 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМ§): 1,32 (3Н, д, 1=6,7 Гц, СН₃); 1,97 (1Н, ушир.с, ЫН); 3,22 (1Н, кв, 1=6,7 Гц, СН-СО); 3,67 (2Н, АБд, 1=12,8 Гц, диастереотопный Н ЫСН₂); 4,03 (2Н, с, СН₂); 5,12 (2Н, с, ОСН₂); 5,98 (1Н, ушир.с, ЫН₂); 6,89 (1Н, д, 1 _орто=8,3 Гц, ароматический Н в ортоположении СН₂ЫН и ароматический СН); 6,95-7,40 (10Н, м, ароматический Н).

¹³С-ЯМР: (СБС1₃, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 19,6 (СН₃); 29,2 (СН₂); 52,0 (ЫНСН₂); 57,7 (Н₂ЫСОСН);

63,8 (ОСН₂); 111,7 (ароматический СН); 115,2 (д, 1_С-Р=21,9 Гц, ароматический СН), 115,3 (д, 1_С-Р=21,3 Гц, ароматический СН); 124,0 (д, 1_С-Р=3,5 Гц, ароматический СН); 124,3 (д, 1_С-Р=2,9 Гц, ароматический СН); 124,3 (д, 1_С-Р=14,4 Гц, четвертичный ароматический С); 127,5 (ароматический СН); 127,6 (д, 1_С-Р=15, 0 Гц, четвертичный ароматический С); 127,8 (д, 1_С-Р=7,5 Гц, ароматический СН); 128,8 (четвертичный ароматический С); 129,0-130,0 (м, 2 ароматический СН); 130,5 (ароматический СН); 131,3 (д, 1_С-Р=4,6 Гц, ароматический СН); 131,8 (четвертичный ароматический С); 155,6 (четвертичный ароматический С); 160,4 (д, 1_С-Р=245, 8 Гц, четвертичный ароматический С); 161,2 (д, 1_С-Р=244,6 Гц, четвертичный ароматический С); 17 8,2 (СОЫН₂).

c) Метансульфонат (§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11б).

В 0,2-л стеклянном реакторе в 40,0 мл 2-пропанола растворяют 3,59 г (0,00872 моль) основания (§)3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида. Раствор нагревают при перемешивании при 55-60°С и поддерживают при данной температуре в течение 1 ч. К этому раствору в течение 15 мин добавляют метансульфоновую кислоту (0,00881 моль), и температуру снижают до 20°С в течение 90 мин. После одной ночи твердое вещество собирают посредством фильтрации, высушивают при 50°С при пониженном давлении, а затем кристаллизуют из метанола с получением метансульфоната (§)-2-[3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида с выходом 89%; т.плавл. 190°С (капилляр).

⁹Н-ЯМР: (ДМСО-б₆, 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМ§): 1,42 (3Н, д, 1=6,8 Гц, СН₃СН); 2,33 (3Н, с, СН₃§О₃); 3,50-4,20 (5Н, м, СН-СО, СН₂, диастереотопный Н ЫСН₂,); 5,19 (2Н, с, ОСН₂); 6,958,00 (11Н, м, ароматический Н); 9,02 (2Н, ушир.с, ЫН₂+).

¹³С-ЯМР: (ДМСО-б₆, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 16,5 (СН₃); 28,8 (СН₂); 48,6 (ЫНСН₂); 54,9

- 22 030250

(11₂ЖХ)СН): 64,3 (ОСН₂); 112,8 (ароматический СН); 115,0-117,0 (2 ароматический СН); 124,2 (д, 1_СР=14,4 Гц, четвертичный ароматический С); 124,4 (четвертичный ароматический С); 124,8 (ароматический СН); 125,0 (ароматический СН); 127,3 (д, 1_С._Р=16,1 Гц, четвертичный ароматический С); 128,6 (четвертичный ароматический С); 128,8 (ароматический СН); 129,0-133,0 (м, 5 ароматический СН); 156,9 (четвертичный ароматический С); 160,8 (д, 1_С._Р=245,2 Гц, четвертичный ароматический С); 160,9 (д, 1_С_ _Р=243,5 Гц, четвертичный ароматический С); 171,1 (СОХН₂).

ά) Выделение (ПЬ) посредством препаративной ВЭЖХ метансульфоната ралфинамида (Ιά), содержащего 0,13 мас.% (ΙΙά).

Образец (100 мг) (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ПЬ) также выделяют посредством препаративной ВЭЖХ из 200 г метансульфоната ралфинамида (Ιά), полученного способом А из I. Μοά. СНет., 1998, 41, 579, содержащего указанную примесь (ПЬ) в виде метансульфоната (ΙΙά), в количестве 0,13 мас.%.

Анализ ВЭЖХ на хиральной колонке (см. пример 27С) демонстрирует соотношение между 8энантиомером (КТ 7,3) и К-энантиомером (КТ 7,6) более 99,5/0,5.

Разделение проводят в двух стадиях (стадии 1 и 2) в соответствии со следующей схемой.

Стадия 1.

Назначение первой стадии состоит в выделении сырого продукта, обогащенного ПЬ/ТРЛ (трифторуксусная кислота). Ниже приведены условия препаративной ВЭЖХ.

Условия препаративной ВЭЖХ:

устройство: ^а!егз Эе11а Ргер 4000 (возвратно-поступательный насос, устройство для создания градиентов со смесителем низкого давления);

модуль Каά^а1 Сошргеззюп Мос1и1е Ргер ГС Вазе (^а!егз); переменный детектор УФ 1азсо 7125, о.р. 0,2 мм; принтер-плоттер Мегк Ό2000;

колонка: Эека Рак С18, 15 мкм, 40x100 мм (^а!егз); элюент А: 70/30, вода/ацетонитрил + 0,1% ТРА; элюент В: 30/70, вода/ацетонитрил + 0,1% ТРА; скорость потока: 27,0 мл/мин;

градиент: 40 мин, изократический 100% А, затем до 100% В в течение 1 мин; детекция: УФ 227 нм;

впрыск: 5 г в 50 мл воды (посредством впускного канала насоса □);

Стадия 2.

Эта стадия необходима для удаления ТРА из ПЬ/ТРА и для дальнейшей очистки (ПЬ).

ПЬ/ТРА подвергают хроматографии с применением условий препаративной ВЭЖХ, приведенных ниже.

Фракции 4 и 5 объединяют вместе и выпаривают при 40°С в вакууме до полного удаления ацетонитрила. Оставшийся водный раствор поддерживают в холодильнике при 4°С. Нерастворимое вещество выделяют посредством фильтрации и сушат в вакууме при комнатной температуре с получением (ПЬ) (100 мг; чистота по ВЭЖХ 100%).

Условия препаративной ВЭЖХ:

устройство: ^а!егз Эека Ргер 4000 (возвратно-поступательный насос, устройство для создания гра- 23 030250

диентов со смесителем низкого давления);

переменный детектор УФ 1азсо 7125, о.р. 0,2 мм; принтер-плоттер Мегк Ό2000;

колонка: 8утте!гу С18, 7 мкм, 20x250 мм (Ша1ег8); элюент А: 70/30, вода/ацетонитрил; элюент В: 30/70, вода/ацетонитрил; скорость потока: 15,0 мл/мин;

градиент: 20 мин, изократический 100% А, затем до 100% В в течение 10 мин; детекция: УФ 227 нм;

впрыск: 50 мл раствора примеси "Па/ТРЛ" (посредством впускного канала насоса Ό);

Пример 9. Получение метансульфоната (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'И).

a) 3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (У1Ъ) Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с примером 8а).

b) (К)-2-[3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид.

Указанное в заголовке соединение получают реакцией 3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида (У1Ъ), полученного как в примере 9а), с гидрохлоридом Ό-аланинамида способом из примера 8Ъ).

c) Метансульфонат (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'И).

(К)-2-[3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид, полученный на стадии Ъ),

преобразуют в указанное в заголовке соединение тем же способом, который описан в примере 8с).

На основе данных 'Н-ЯМР. ¹³С-ЯМР структуру (11'И) приписали полученному таким образом метансульфонату. Спектры ^!Н-ЯМР, ¹³С-ЯМР и т.плавл. 190°С (капилляр) полностью совпадают со спектрами ^!Н-ЯМР, ¹³С-ЯМР и т.плавл. 8-энантиомера (11И) (см. пример 8с).

Анализ ВЭЖХ на хиральной колонке (см. пример 27С) продемонстрировал отношение между Кэнантиомером (КТ 7,6) и 8-энантиомером (КТ 7,3) более 99,5/0,5.

Справочный пример 9А. Получение метансульфоната (К,8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11И, 11'И) (К,8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид получают из 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (У1Ъ) (5 г), полученного в соответствии с предыдущим примером 8а), и гидрохлорида (К,8)-аланинамида как в способе, приведенном в примере 8Ъ).

Продукт преобразуют в соль метансульфоновой кислоты способом, описанным в примере 9с). Соль из (У1Ъ) получают с выходом 70%.

Спектроскопические данные полностью совпадают с данными К-энантиомера (11'И) (см. пример 9с).

Анализ ВЭЖХ на хиральной колонке (см. пример 27С) продемонстрировал отношение между Кэнантиомером (КТ 7,6) и 8-энантиомером (КТ 7,3) 1:1.

[α]²⁵ϋ (с 1% в метаноле) 0°С.

Пример 10. Получение очищенного 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа).

a) К смеси 4-гидроксибензальдегида (2,28 кг, 18,68 моль), карбоната калия (2,84 кг, 20,54 моль), иодида калия (0,33 кг, 1,98 моль) в этаноле (21,0 кг) при перемешивании при комнатной температуре добавляют 3-фторбензилхлорид (2,70 кг, 18,68 моль).

Смесь постепенно нагревают до температуры кипения с обратным холодильником, а затем поддерживают при этой температуре в течение 6 ч.

Затем реакционной смеси позволяют охлаждаться до 25°С, суспензию фильтруют и твердое вещество отмывают этанолом (1,5 кг); растворы в этаноле объединяют, а затем концентрируют при пониженном давлении до получения остатка приблизительно 6,0 кг.

К этому остатку добавляют толуол (10 кг) и воду (2,5 кг), смесь растворителей энергично перемешивают в течение 30 мин и после отделения водной фазы органический слой выпаривают до сухого состояния при пониженном давлении с получением неочищенного 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида.

К этому продукту, растворенному в толуоле (3 кг), при перемешивании при 20-25°С добавляют затравку кристаллизации 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида, затем в течение 45 мин добавляют н-гексан (6,0 кг) и смесь охлаждают до 0°С при перемешивании.

Через 3 ч твердое вещество фильтруют и отмывают н-гексаном (2,0 кг). После сушки получают 3,95 кг (92,0% выход) желаемого продукта, с чистотой по газовой хроматографии 99,8 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида, определенным посредством ОС, 0,01 мас.% (% площади, см. пример 24В); т.плавл. 43,1°С посредством О8С 5°С/мин.

Дальнейшее получение указанного в заголовке соединения проводят следующим образом.

b) В 10-л реактор помещают 2-пропанол (5,51 кг), карбонат калия (793 г, 5,74 моль), иодид калия (305 г, 1,8 4 моль) и 4-гидроксибензальдегид (700 г, 5,74 моль). Смесь перемешивают при 20-25°С в течение 15 мин.

В реактор помещают 3-фторбензилхлорид (871 г, 6,03 моль) посредством капельной воронки в те- 24 030250

чение приблизительно 20 мин.

Смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником при перемешивании в течение 3 ч.

По истечении этого времени смесь охлаждают приблизительно до 50°С и отбирают образец для контроля в процессе производства.

Растворитель удаляют в вакууме до достижения объема приблизительно 1,8 л.

Добавляют циклогексан (1,84 кг) и воду (2,5 кг), а затем смесь нагревают до 65±3°С и перемешивают при данной температуре в течение 30 мин. Перемешивание останавливают и фазам позволяют разделяться в течение 20 мин; водную фазу удаляют.

К органической фазе добавляют воду (1,31 кг) и двухфазную смесь перемешивают в течение 30 мин при 65±3°С. Фазам позволяют разделяться в течение 20 мин. Водную фазу удаляют и органическую фазу концентрируют в вакууме до объема приблизительно 3 л при температуре, включающей от 40 до 55°С.

Смесь охлаждают приблизительно до 30°С, осаждают и перемешивают при данной температуре в течение 30 мин.

Смесь охлаждают до 20±2°С и перемешивают при данной температуре в течение по меньшей мере 3 ч.

Продукт фильтруют в вакууме и твердое вещество отмывают циклогексаном (3x150 г).

Влажное твердое вещество (1,5 кг) высушивают при 20-25°С при давлении ниже 100 мбар в течение 12 ч с получением 1,17 кг (5,09 моль); 88% выходом с чистотой по газовой хроматографии 99,43 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (У1а), определенным посредством ОС, 0,063 мас.% (% площади, см. пример 24В). Этот продукт дополнительно очищают способом, описанным в примере 11.1 с выходом продукта, где содержание примеси (У1а), определенное посредством ОС, составляет 0,01 мас.% (см. пример 24В).

Пример 11. Получение 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа) посредством межфазного катализа.

Смесь 3-фторбензилхлорида (10 кг, 69,16 моль), 4-гидроксибензальдегида (7,8 кг, 63,88 моль), карбоната калия (9,46 кг, 68,44 моль) и бромида тетрадецилтриметиламмония (1,03 кг, 3,72 моль) в толуоле (30,0 кг) медленно доводят до температуры кипения с обратным холодильником при перемешивании и в атмосфере азота, а затем кипятят с обратным холодильником в течение 7 ч.

Раствор концентрируют при комнатном давлении, а затем добавляют 6 кг толуола и отгоняют. Эту процедуру повторяют еще раз.

Затем гетерогенную смесь охлаждают до комнатной температуры и твердое вещество удаляют посредством фильтрации. Оставшийся растворитель удаляют при пониженном давлении, а затем к масляному остатку добавляют 2,6 кг толуола.

Смесь перемешивают при 20-25°С и осаждают несколькими граммами чистого 4-(3фторбензилокси)бензальдегида, а затем к перемешиваемой смеси, поддерживаемой при 20-25°С, в течение 45 мин добавляют н-гексан (18 кг).

После охлаждения до 3-6°С и перемешивания в течение дополнительного часа при данной температуре твердое вещество собирают посредством фильтрации и высушивают при пониженном давлении с получением 13,5 кг с 86,3% выходом, чистотой по ОС 99,8 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида 0,01 мас.% (см. пример 24В).

11.1. Дополнительная очистка 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа) посредством кристаллизации.

1 кг 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида, полученного в соответствии с примером 10Ь), растворяют в 2 кг простого диизопропилового эфира при температуре кипения с обратным холодильником при перемешивании.

Раствор охлаждают до 50-55°С в течение 10-15 мин и осаждают несколькими граммами чистого 4(3 -фторбензилокси)бензальдегида.

часа.

В заключение осадок собирают посредством фильтрации, отмывают холодным простым диизопропиловым эфиром (0,2 кг) и высушивают при пониженном давлении с получением 0,90 кг 4-(3фторбензилокси)бензальдегида с чистотой по ОС 99,9 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида, определенным посредством ОС, 0,01 мас.% (см. пример 24В).

11.2. Получение 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа) посредством межфазного катализа с применением 3-фторбензилбромида.

4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид получают с 87,0% выходом с содержанием 3-(3-фторбензил)-4(3-фторбензилокси)бензальдегида, определенным посредством ОС, 0,05 мас.% (см. пример 24В) реакцией 4-гидроксибензальдегида (26,52 г) с 3-фторбензилбромидом тем же способом, как в примере 11, но с применением вместо 3-фторбензилхлорида 3-фторбензилбромида.

- 25 030250

Полученный таким образом 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид очищают в соответствии с примером 11.1 с выходом указанного в заголовке продукта 95,0% с содержанием 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида, определенным посредством ОС, 0,01 мас.% (см. пример 24В).

11.3. Получение 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (Ινα) посредством межфазного катализа с применением метансульфоната 3-фторбензила.

4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид получают с 97,5% выходом с содержанием 3-(3-фторбензил)-4(3-фторбензилокси)бензальдегида (νΙα), определенным посредством ОС, 0,45 мас.% (см. пример 24В), реакцией 4-гидроксибензальдегида (15,6 г) с метансульфонатом 3-фторбензила вместо 3фторбензилхлорида тем же способом, как и в примере 11. Этот продукт дополнительно очищают способом из примера 11.1 для снижения содержание примеси (νΙα) до 0,01 мас.%.

Справочный пример 12. Получение метансульфоната (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Тс) высокой степени чистоты (однореакторная реакция).

а) Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Ια).

В 2-л четырехгорлую круглодонную колбу, оборудованную механической мешалкой, термометром, обратным холодильником и в потоке азота помещают гидрохлорид Ь-аланинамида (124,6 г, 0,49 моль) и метанол (840 мл) и перемешивают в течение 15 мин при 20°С. Добавляют триэтиламин (49,5 г, 0,49 моль) при такой скорости, что температура остается ниже 30°С. Смесь перемешивают в течение 10 мин, после чего частями в течение приблизительно 30 мин добавляют твердый 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (100 г), полученный в примере 10Ъ). После перемешивания в течение 3 ч при 20°С смесь охлаждают до 5°С и десятью частями с осторожностью в течение 1,5 ч добавляют твердый ΝαΒΗ₄ (16,4 г, 0,44 моль). После окончания добавления смесь перемешивают в течение 30 мин при 5°С. Смесь концентрируют при пониженном давлении до объема 100-150 мл.

К остатку добавляют толуол (550 мл) и воду (750 мл) и температуру повышают до 75°С. После перемешивания в течение 30 мин фазы разделяют и органическую фазу отмывают водой (140 мл). После разделения фаз органическую фазу охлаждают до 68°С, осаждают и перемешивают при данной температуре в течение 1 ч. Смесь охлаждают до 20°С приблизительно в течение 2 ч и перемешивают при данной температуре в течение 2 ч. Твердое вещество выделяют посредством фильтрации, отмывают толуолом (2x40 мл) и сушат в вакууме с выходом 118 г твердого вещества белого цвета; 90% выход.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,95 (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,008 мас.% (см. пример 25В).

Энантиомерная чистота сафинамида, определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет 100% (% площади, см. пример 27А).

¹Н-ЯМР (Э₂О) (Вгикег А ν300) δ (м.д., относительно Н₂О при 4,7 м.д.): 1,43 (3Н, д, 1=7 Гц, СН₃); 2,66 (3Н, с, СН₃8О₃Н); 3,87 (1Н, кв, 1=7 Гц, Н-2); 3,97 (2Н, ушир.с, СН-ΝΚ); 4,89 (2Н, с, СН₂ОК); 6,88 и

7,23 (4Н, АА'ХХ' ароматическая п-дизамещенная система; 6,90-7,22 (4Н, ароматический Н).

¹³С-ЯМР Ю₂О) (Вгикег Αν300) δ м.д.: 15,68 (СН₃); 38,27 (СН₃8О₃Н); 48,99 (СН^); 54,81 (СН); 69,00 (ОСН₂); 114,15 (д, 1_С-Р=21 Гц, ароматический СН); 114,76 (д, 1_С-Р=20 Гц, ароматический СН); 115,38 (ароматический СН); 123,06 (д, 1_С-Р=24 Гц, ароматический СН); 123,24; 130,29 (д, 1_С-Р=6 Гц, ароматический СН); 131,54 (ароматический СН); 138,76 (д, 1_С-Р=7 Гц, ароматический СН); 158,52; 162,89 (д, 1_С-Р=245 Гц, С-Р); 171,92 (СО).

α1) В качестве альтернативного способа восстановление проводят с применением вместо твердого ΝαΒΚ, раствора ΝαΒΚ, в метаноле.

Получают раствор ΝαΒΗ в метаноле, добавляя ΝαΒΗ (16,4 г) при перемешивании и в атмосфере азота при 0-5°С к смеси метанола (120 мл) и 30% водного раствора №ЮН (5,8 мл).

В 2-л четырехгорлую круглодонную колбу, оборудованную механической мешалкой, термометром, обратным холодильником, и в потоке азота помещают гидрохлорид Ь-аланинамида (124,6 г, 0,49 моль) и метанол (720 мл) и перемешивают в течение 15 мин при 20°С. При такой скорости, что температура остается ниже 30°С, добавляют триэтиламин (49,5 г, 0,49 моль). Смесь перемешивают в течение 10 мин, после чего частями в течение приблизительно 30 мин добавляют твердый 4-(3фторбензилокси)бензальдегид (100 г), полученный в примере 10Ъ). После перемешивания в течение 3 ч при 20°С смесь охлаждают до 5°С и через капельную воронку в течение 1,5 ч осторожно добавляют ранее полученный раствор №-1ВН₄. После окончания добавления смесь перемешивают в течение 30 мин при 5°С. Смесь концентрируют при пониженном давлении до объема 100-150 мл.

К остатку добавляют толуол (550 мл) и воду (750 мл) и температуру повышают до 75°С. После перемешивания в течение 30 мин фазы разделяют и органическую фазу отмывают водой (140 мл). После разделения фаз органическую фазу охлаждают до 68°С, осаждают и перемешивают при данной температуре в течение 1 ч. Смесь охлаждают до 20°С приблизительно в течение 2 ч и перемешивают при данной температуре в течение 2 ч. Твердое вещество выделяют посредством фильтрации, отмывают толуолом (2x40 мл), высушивают при 40°С в вакууме: 116 г твердого вещества белого цвета, 88,5% выход.

Чистота продукта по ВЭЖХ составляет 100,0% (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О- 26 030250

диалкилированного (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,009 мас.% (см. пример 25В).

Ь) Метансульфонат (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1с).

Смесь (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (20 г, 66 ммоль, полученного в примере 12а) и этилацетата (510 г) нагревают при перемешивании до 65°С и поддерживают в этих условиях до получения прозрачного раствора. К предварительно охлажденному до 55°С раствору в течение 40 мин добавляют метансульфоновую кислоту (7 г, 72,6 ммоль). Смесь постепенно охлаждают до 20°С в течение 3 ч, поддерживают при 20°С в течение 2 ч. Гетерогенную смесь фильтруют, твердое вещество высушивают при пониженном давлении при 40°С с выходом 26,1 г указанного в заголовке соединения в виде порошка белого цвета (99% выход).

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,94% (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,005 мас.% (см. пример 25В).

Энантиомерная чистота метансульфоната сафинамида, определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет 100% (% площади, см. пример 2 7А).

Ь1) (8)-2-[4-(3-Фторбензилокси) бензиламино] пропанамид (20 г, 66 ммоль), полученный в соответствии с примером 12а1), преобразуют в метансульфонатную соль (1с) способом, приведенным в примере 12Ь), с выходом 26,2 г указанного в заголовке соединения с 99% выходом.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,95% (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,005 мас.% (см. пример 25В).

Энантиомерная чистота метансульфоната сафинамида, определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет 100% (% площади, см. пример 27А).

Справочный пример 13. Получение метансульфоната (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1с) высокой степени чистоты.

Указанный в заголовке продукт получают с 87% выходом таким же способом, как в примере 12а1) за исключением того, что 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид получают в соответствии с примером 11 и преобразуют таким образом полученный (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид в метансульфонат (1с), с 99,7% (% площади) чистотой, определенной способом из примера 25А, а содержание С,О-диалкилированной примеси (11а), определенное способом из примера 25В, составляет 0,005 мас.%.

Справочный пример 14. Получение метансульфоната (К,§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1с, 1'с) высокой степени чистоты с применением основания Ь-аланинамида (однореакторная реакция).

а) (К,§)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1а, 1'а).

В 1-л четырехгорлую круглодонную колбу, оборудованную механической мешалкой, термометром, и в потоке азота добавляют гидрохлорид Ь-аланинамида (59 г, 0,47 моль) и этанол (690 мл) и смесь перемешивают при 20±3°С в течение 20 мин. В течение приблизительно 15 мин добавляют 30% раствор метилата натрия в метаноле (83,9 г, 0,47 моль). Смесь перемешивают в течение 1 ч при 20±3°С, твердое вещество (ЫаС1) отфильтровывают и прозрачный раствор концентрируют при пониженном давлении.

Остаток разводят метанолом (640 г, приблизительно 800 мл) и частями в течение периода 30 мин добавляют 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (96,5 г, 0,42 моль), полученный в примере 10Ь). После перемешивания в течение 20 ч при комнатной температуре прозрачный раствор охлаждают до 5±2°С и осторожно частями в течение 1,5 ч добавляют твердый ЫаВН₄ (15,8 г, 0,42 моль), поддерживая температуру ниже 10°С. После окончания добавления смесь перемешивают в течение 30 мин при 5±2°С. Смесь концентрируют при пониженном давлении до объема 100-150 мл.

К остатку добавляют толуол (550 мл) и воду (750 мл) и температуру повышают до 75±2°С. После перемешивания в течение 30 мин фазы разделяют и органическую фазу отмывают водой (140 мл). После разделения фаз органическую фазу охлаждают до 68±2°С, осаждают и перемешивают при данной температуре в течение 1 ч. Смесь охлаждают до 20°С приблизительно в течение 2 ч и перемешивают при данной температуре в течение 2 ч. Твердое вещество собирают посредством фильтрации в вакууме и отмывают толуолом (2x40 мл).

Влажное твердое вещество высушивают при 40°С в вакууме в течение 12 ч с выходом 70 г (К,§)-2[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида с выходом 65% с чистотой по ВЭЖХ 99,88 (% площади, см. пример 25А) и содержанием (К,§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, определенным ВЭЖХ, 0,008 мас.% (см. пример 25В).

Анализ продукта на хиральной колонке ВЭЖХ, в соответствии с примером 27А, продемонстрировал, что полученное соединение имеет соотношение К:8, составляющее 52:48.

Дополнительный контроль течения реакции иминоалкилирования показал, что рацемизация происходит на указанной стадии иминоалкилирования.

- 27 030250

Ь) Метансульфонат (К,8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1с, 1'с).

Соединение, полученное в соответствии с примером 14а), преобразуют в метансульфонатную соль тем же способом, как и в примере 4Ь), с 85,0% выходом с чистотой по ВЭЖХ 99,8 (см. пример 25А).

Содержание примеси метансульфоната (К,8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11с, 11'с), определенное посредством ВЭЖХ (см. пример 25В), составляет менее 0,005 мас.%.

Пример 15. Получение метансульфоната (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'с) высокой степени чистоты с применением гидрохлорида Ό-аланинамида (однореакторная реакция).

a) (К)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1'а).

Соединение получают в соответствии с примером 12а1), заменяя гидрохлорид Ь-аланинамида гидрохлоридом Ό-аланинамида с получением (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида с выходом 91% с чистотой по ВЭЖХ 99,8 (% площади, см. пример 25А), а содержание (К)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, определенное ВЭЖХ, (см. пример 25В) составляет 0,005 мас.%.

b) Метансульфонат (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'с).

К-энантиомер сафинамида, полученный в соответствии с примером 15а), преобразуют в метансульфонатную соль (1'с) таким же способом, как в примере 12Ь с 92,0% выходом, чистотой по ВЭЖХ 99,9% (см. пример 25А).

Содержание примеси метансульфоната (К)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'с), определенное посредством ВЭЖХ (см. пример 25В), составляет менее 0,005 мас.%. Указанное в заголовке соединение имеет т.плавл. 216,8°С посредством Ό8Ο (5°С/мин).

Энантиомерная чистота, определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет более 99,9 (% площади, см. пример 27В).

'Н-ЯМР (Ό₂Θ) (Вгикег А У300) δ (м.д., относительно Н₂О при 4,7 м.д.): 1,43 (3Н, д 1=7 Гц, СН₃); 2,66 (3Н, с, СН₃8О₃Н); 3,87 (1Н, кв, 1=7 Гц, Н-2); 3,97 (2Н, ушир.с, СН₂МК); 4,89 (2Н, с, СН₂ОК); 6,88 и

¹³С-ЯМР (Ό₂Ο) (Вгикег АУ300) δ м.д.: 15,68 (СН₃); 38,27 (СН₃8О₃Н); 48,99 (СПАИ); 54,81 (СН); 69,00 (ОСН₂); 114,15 (д, 1_С-Р=21 Гц, ароматический СН); 114,76 (д, 1_С-Р=20 Гц, ароматический СН); 115,38 (ароматический СН); 123,06 (д, 1_С-Р=24 Гц, ароматический СН); 123,24; 130,29 (д, 1_С-Р=6 Гц, ароматический СН); 131,54 (ароматический СН); 138,76 (д, 1_С-Р=7 Гц, ароматический СН); 158,52; 162,89 (д, 1_СР=245 Гц, С-Р); 171,92 (СОМ Р).

Дальнейшее получение соединения по данному примеру 15 проводили следующим образом. а1) (К)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1'а).

В круглодонной колбе в 166,8 мл метанола растворяют 12,2 г гидрохлорида Ό-аланинамида и добавляют последовательно 9,9 г триэтиламина, поддерживая температуру менее 30°С, а затем 20 г 4-(3фторбензилокси)бензальдегида. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, а затем охлаждают при 8±2°С и добавляют 3,3 г твердого ЫаВН₄, поддерживая температуру около 8°С.

Реакционную смесь перемешивают в течение по меньшей мере 1 ч, концентрируют до минимального объема, а затем добавляют толуол (110 мл) и воду (152 мл).

Двухфазную смесь перемешивают при 70°С и отделяют органический слой и отмывают водой (30 мл) при 70°С.

Полученный в результате раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и отмывают толуолом.

Твердое вещество высушивают при 40°С в вакууме с выходом 22,6 г указанного в заголовке продукта в виде порошка белого цвета (86,1% выход).

[α]²⁵ϋ (с 2% в метаноле): +10,63°.

300 МГц Ή-ЯМР (ДМСО-б₆): 7,55-7,48 (1Н, м), 7,37-7,30 (5Н, м) 7,26-7,19 (1Н, м), 7,02-7,01 (3Н, м), 5,19 (2Н, с), 3,70 (1Н, д), 3,57-5,53 (1Н, д), 3,10-3,04 (1Н, кв), 1,21-1,19 (3Н, д).

Ь1) Метансульфонат (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'с).

В круглодонную колбу добавляют 65 г 2-пропанола и 8,25 г соединения, полученного на стадии а1) выше, и нагревают при 70°С при перемешивании до получения полного раствора.

Поддерживая температуру при 70±3°С, по каплям добавляют 2,6 г метансульфоновой кислоты.

После перемешивания в течение 30 мин при 70°С смесь медленно охлаждают до 20°С, а затем перемешивают в течение 1 ч.

Продукт фильтруют, отмывают изопропанолом и сушат в вакууме при 40°С с выходом 10 г указанного в заголовке продукта в виде порошка белого цвета (92% выход).

т.плавл. 218,4°С (капилляр); [а]²⁵с (с 2% в метаноле): +0,6°.

Чистота полученного продукта по ВЭЖХ составляет 99,88% (% площади, см. пример 25А), а содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (К)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,006 мас.% (см. пример 25В); т.плавл. 218,4°С (капилляр).

Энантиомерная чистота К-метансульфоната сафинамида, определенная на хиральной колонке

- 28 030250

ВЭЖХ, составляет 100% (% площади, см. пример 27В).

300 МГц ¹Н-ЯМР (ДМСО-й₆): 7,97 (1Н, ушир.с), 7,70 (1Н, ушир.с), 7,56-7,47 (3Н, м), 7,38-7,34 (2Н, м), 7,27-7,21 (1Н, дт), 7,17-7,15 (2Н, д), 5,25 (2Н, с), 4,10 (2Н, ушир.с), 3,81-3,79 (1Н, кв), 2,39 (3Н, с), 1,50-1,48 (3Н, д).

Справочный пример 16. Получение метансульфоната (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1с) высокой степени чистоты, с выделением промежуточного основания Шиффа (8)-2-[4-(3-фторбензилокси) бензилиденамино]пропанамида (111а).

a) (8)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамид (111а).

К суспензии 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (192,0 г 0,83 моль), полученной как в примере 10, и гидрохлорида Ь-аланинамида (114,2 г, 0,93 моль) в метаноле (960 мл) при комнатной температуре при перемешивании в атмосфере азота добавляют триэтиламин (93,12 г, 0,93 моль). Перемешивание продолжают в течение двух дополнительных часов.

Затем раствор осаждают несколькими миллиграммами (8)-2-[4-(3фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамида, температуру снижают до 5-10°С и перемешивание продолжают в течение 3 ч.

Твердое вещество собирают посредством фильтрации и отмывают метанолом при 2°С.

После сушки при пониженном давлении 190,4 г (76,0% выход) указанного в заголовке соединения получают с т.плавл. 112,0°С посредством Э8С (5°С/мин).

'Н-ЯМР (ДМСО-й₆) (Вгикег АУ300) δ (м.д., относительно ТМ8 при 2,55 м.д.; растворитель ДМСО при 3,35 м.д.): 1,31 (3Н, д, 1=7 Гц, СН₃); 3,86 (1Н, кв, 1=7 Гц, Н-2); 5,18 (2Н, с, СН₂ОК); 7,08 и 7,79 (4Н, АА'ХХ' п-дизамещенная ароматическая система); 7,10-7,50 (4Н, м, ароматический Н); 8,27 (1Н, с, СН \К).

¹³С-ЯМР (ДМСО-й₆) (Вгикеи АУ300) δ (м.д.): 20,5 (СН₃); 67,6 (СН); 68,4 (ОСН₂); 114,1 е 114,4 (д, .1_Р=21 Гц, ароматическийСН); 114,5 е 114,8 (д, Л_С-г=21 Гц; ароматический СН; 114,8 (ароматический СН);

123,5 (д, 1_;-ι=2 Гц, ароматический СН); 129,0 и 129,9 (ароматический СН); 130,4 и 130,5 (д, 1_;-ι=7 Гц, ароматический СН); 139,6 и 139,7 (д, 1_;-ι=6 Гц ароматический четвертичный С); 160,2; 160,5 и 163,8 (д, Й_С-Р=245 Гц С-Р); 160,6 (СН=Ы); 174,8 (СО).

[α]²⁵ϋ (с 1% в хлороформе): +68,1°.

b) (8)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1а).

Смесь (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамида (III а) (150 г), полученного как описано в примере 16а), и метанола (900 мл) охлаждают при перемешивании до 2-5°С. к ранее полученной холодной смеси небольшими частями в течение 2 ч добавляют боргидрид натрия (19,0 г), поддерживая температуру ниже 5°С. Затем смесь перемешивают в течение дополнительных 20 мин при 5°С. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и обрабатывают, как описано в примере 2, с получением 135 г (89,2% выход) (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида 0а) с чистотой по ВЭЖХ 98,8 (% площади), определенной способом из примера 25А, и содержанием С,О-диалкилированного (8)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, определенным способом ВЭЖХ из примера 25В, 0,005 мас.%.

c) Метансульфонат (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Ю).

Сафинамид, полученный в соответствии с примером 16Ь), преобразуют в метансульфонатную соль 0с) таким же способом, как в примере 12Ь), с 94,0% выходом с чистотой по ВЭЖХ 99,9% (см. пример 25А).

Содержание примеси метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси) бензиламино] пропанамида (Нс), определенное посредством ВЭЖХ (см. пример 25В), составляет менее 0,005 мас.%.

Энантиомерная чистота, определенная на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет более 99,9 (% площади, см. пример 27А).

Пример 17. Получение метансульфоната (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Гс) высокой степени чистоты, с выделением промежуточного основания Шиффа (К)-2-[4-(3фторбензилокси)бензилиденамино] пропанамида (Ш'а).

а) (К)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамид (Ш'а).

В 250-мл 4-горловую круглодонную колбу, оборудованную механической мешалкой, термометром, обратным холодильником, и в потоке азота, помещают гидрохлорид Ό-аланинамида (6,1 г) и метанол (80 мл) и перемешивают в течение 15 мин при 20°С. Добавляют триэтиламин (5 г) при такой скорости, что температура остается ниже 30°С. Смесь перемешивают в течение 10 мин, после чего частями в течение приблизительно 30 мин добавляют твердый 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (10 г, пример 10Ь). После перемешивания в течение 3 ч при 20°С смесь охлаждают до 5°С. После перемешивания в течение 3 ч при данной температуре твердое вещество фильтруют и отмывают небольшим количеством предварительно охлажденного метанола. Влажное твердое вещество сушат в вакууме в течение 12 ч при 25°С с выходом 6,4 г указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета, с выходом 46,4%; т.плавл. 111,9°С. [а]_с=-67,9° (с=1 в хлороформе).

¹Н-ЯМР (ДМСО-й₆) (Вгикег АУ300) δ (м.д., относительно ТМ8 при 2,55 м.д.; растворитель ДМСО

- 29 030250

при 3,35 м.д.): 1,31 (3Н, д, 1=7 Гц, СН₃); 3,86 (1Н, кв, 1=7 Гц, Н-2); 5,18 (2Н, с, СН₂ОК); 7,08 и 7,79 (4Н, АА'ХХ' п-дизамещенная ароматическая система); 7,10-7,50 (4Н, м, ароматический Н); 8,27 (1Н, с,

СН \К).

¹³С-ЯМР (ДМСО-й₆) (Вгикеп Αν300) δ (м.д.): 20,5 (СН₃); 67,6 (СН); 68,4 (ОСН₂); 114,1 е 114,4 (д, 1_СР=21 Гц, ароматическийСН); 114,5 е 114,8 (д, 1_С-Р=21 Гц; ароматический СН; 114,8 (ароматический СН);

123,5 (д, 1_С-|=2 Гц, ароматический СН); 129,0 и 129,9 (ароматический СН); 130,4 и 130,5 (д, 1_С-Р=7 Гц, ароматический СН); 139,6 и 139,7 (д, 1_С-|=6 Гц ароматический четвертичный С); 160,2; 160,5 и 163,8 (д, 1_С-Р=245 Гц С-Р); 160,6 (СН=Ы); 174,8 (СО).

b) (К)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1'а) Соединение получают способом из примера 16Ь), но с применением (К)-2-[4-(3-фторбензилокси) бензилиденамино] пропанамида (111'а), полученного в примере 17а), вместо его энантиомера (Ша).

c) Метансульфонат (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'с).

(К)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид, полученный в соответствии с примером

17Ь), преобразуют в метансульфонатную соль (1'с) таким же способом, как в примере 12Ь с 92% выходом.

Содержание примеси метансульфоната (К)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'с), определенное посредством ВЭЖХ (см. пример 25В), составляет менее 0,005 мас.%. Указанное в заголовке соединение имеет т.плавл. 216,8°С посредством Э8С (5°С/мин).

Справочный пример 17а. Метансульфонат (К,§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1с, 1'с).

a) Метанол (80 мл) и гидрохлорид (К,§)-аланинамида (15,14 г, 12 3 ммоль) помещают в 1000-мл стеклянный реактор и по каплям при 25°С добавляют безводный триэтиламин (17,04 мл, 144 ммоль).

В течение приблизительно 10 мин добавляют 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (23,99 г, 103,5 ммоль), полученный в примере 10Ь), и смесь перемешивают в течение 10 ч при 25°С (смесь А).

Во втором реакторе (100 мл) при перемешивании смешивают метанол (30 мл) и гидроксид натрия 30% в воде (1,3 г) и температуру снижают до 0-6°С. Частями к раствору при 1°С добавляют порошковый боргидрид натрия (3,92 г, 103,5 ммоль). Смесь перемешивают в течение 2 ч при 1-2°С в атмосфере азота (смесь В).

Смесь В добавляют при перемешивании и в атмосфере азота в течение приблизительно 30 мин к указанной выше смеси А, поддерживая температуру при 5-10°С.

Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при 5-10°С и концентрируют в вакууме до остаточного объема 20 мл. К остатку при перемешивании и в атмосфере азота добавляют толуол (120 мл) и воду (100 мл) и смесь нагревают до 60-65°С.

Органическую фазу отделяют, добавляют воду (30 мл) и смесь перемешивают при 60-65°С.

Органическую фазу отделяют и постепенно охлаждают приблизительно до 7°С и поддерживают в этих условиях в течение 3 ч.

Смесь фильтруют и твердое вещество отмывают толуолом (3x10 мл) с получением, после сушки при пониженном давлении, (К,§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (21,40 г).

b) 2-Пропанол (65 г) и (К,§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (8,2 г), полученный в примере 17Аа), помещают в реактор.

Смесь нагревают при перемешивании до 70°С и поддерживают в этих условиях до получения прозрачного раствора.

К предыдущему раствору при 70°С медленно добавляют безводную метансульфоновую кислоту (2,6 г).

Гетерогенную смесь охлаждают до 20°С и перемешивают при данной температуре в течение по меньшей мере 2 ч.

Смесь центрифугируют и твердое вещество отмывают изопропанолом с получением, после сушки в вакууме, 9,4 г указанного в заголовке продукта с 86,4% выходом с чистотой по ВЭЖХ 99,9 (% площади, см. пример 25А) и менее 0,005 мас.% С,О-диалкилированного метансульфоната (К,8)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (см. пример 25В).

На хиральной колонке ВЭЖХ показано, что у полученного таким образом (К,§)-сафинамида смесь энантиомеров §:К=50,30:49,70 (% площади, см. пример 27А).

Справочный пример 18. Получение метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино] пропанамида (11с).

а) 3-(3-Фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (νΐα).

В 4-л круглодонную колбу, поддерживаемую в атмосфере азота, последовательно добавляют 4гидроксибензальдегид (400 г, 3,28 моль), карбонат калия (453 г, 3,28 моль), толуол (2 л) и 3фторбензилхлорид (1400 г, 9,68 моль) и смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 5 суток. Да этой стадии анализ ОС выявляет, что реакционная смесь содержит 4-(3- 30 030250

фторбензилокси)бензальдегид и 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегид в соотношении 91,4:8,6 (площадь/площадь, см. пример 24А).

Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, а затем при перемешивании добавляют 2 л воды. Органическую фазу отделяют и растворитель отгоняют при пониженном давлении (20 мм рт. ст.) при 35°С до тех пор, пока растворитель больше не отгоняется. Затем давление снижают до 3 мм рт.ст. и внешнюю температуру поднимают до 300°С и собирают фракцию, отгоняющуюся при температурах от 255°С до 265°С (40,6 г).

Анализ ОС демонстрирует отношение площадь/площадь С,О-дибензилированного производного (У1а) и моноалкилированного (1Уа) 99,6:0,4 (площадь, относительно условий ОС, см. пример 24В).

¹Н-ЯМР (СПС1₃) (Вгикег АУ300) δ (м.д., относительно ТМ8): 4,05 (2Н, с, СН₂); 5,13 (2Н, с, ОСН₂); 6,85-7,40 (9Н, м, ароматический Н); 7,73-7,79 (2Н, м, ароматический Н в орто-положении относительно С=О); 9,88 (с, СНО).

¹³С-ЯМР (СПС1₃) (Вгикег АУ300) δ (м.д.): 36,1 (СН₂); 69,4 (СН₂О); 111,4 (ароматический СН); 112,9 и 113,2 (д, 1_С-р=20 Гц, ароматический СН), 113,9 и 114,2 (д, 1_С-р=22 Гц, ароматический СН); 114,9 и 115,0 (д, 1_;-ι=21 Гц, ароматический СН; 115,7 е 115,9 (д, 1_С-р=25 Гц ароматический СН); 122,6 (д, 1_С-р=3 Гц, ароматический СН); 124,4 (д, 1_;-ι=3 Гц, ароматический СН); 129,6 и 129,8 (д, 1_С-р=8 Гц, ароматический СН); (д, 1_;-ι=7 Гц, четвертичный ароматический С); 129,9 (С четвертичный ароматический С); 130,0 (четвертичный ароматический С); 130,1 и 130,2 (д, 1_;-ι=7 Гц, СН ароматический); 131,2 (ароматический СН);

131,5 (ароматический СН); 138,3 (д, 1_;-ι=7 Гц, четвертичный ароматический С); 142,3 (д, 1_С-р=7 Гц, четвертичный ароматический С); 161,0, 161,2 и 164,4 (д, 1_;-ι=240 Гц, перекрывание 2 С-Р); 190,8 (СНО).

b) (8)-2-[3-(3-Фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (11а).

К 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегиду (35,6 г, 0,105 моль) в 500-мл колбе при комнатной температуре добавляют раствор, ранее полученный посредством осторожного добавления при перемешивании триэтиламина (12 г, 0,119 моль) к 170 мл раствора гидрохлорида Ь-аланинамида (14,8 г, 0,119 моль) в метаноле.

Эту реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем ее помещают в 1,8 л автоклав и к смеси добавляют 3,4 г влажного (50% Н₂О) 5% Ρί/С.

Воздух из автоклава удаляют азотом, а затем вводят водород при 5,0 бар.

После охлаждения до комнатной температуры и удаления катализатора посредством фильтрации растворитель отгоняют при пониженном давлении до получения остатка приблизительно 65 г. К этому остатку добавляют смесь этилацетата (340 мл) и воды (250 мл), гетерогенную смесь нагревают до 40°С и поддерживают при данной температуре без перемешивания до получения прозрачной фазы. Две фазы разделяют и органическую фазу отгоняют при пониженном давлении до получения остатка приблизительно 50 г.

Этот остаток растворяют в 220 мл этилацетата и растворитель отгоняют при пониженном давлении с внешней температурой 40°С. Эту операцию повторяют дважды и получают указанное в заголовке соединение в виде твердого остатка (42,4 г).

c) Метансульфонат (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11с).

В 2-л стеклянном реакторе в 950 мл этилацетата растворяют 42,4 г (0,103 моль) (8)-3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, полученного в примере 18Ь. Раствор нагревают при перемешивании при 50-55°С и поддерживают при данной температуре в течение 1 ч. К этому раствору в течение 20 мин добавляют 14,5 г (0,15 моль) метансульфоновой кислоты и температуру снижают до 20°С в течение 90 мин. Через 30 мин твердое вещество собирают посредством фильтрации, высушивают при 50°С при пониженном давлении, а затем кристаллизуют из метанола (метанол:продукт 1:5 по массе) с получением 25,1 г энантиомерно чистого (см. пример 27Ό) метансульфоната (8)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, т.плавл. 187°С (капилляр).

^!Н-ЯМР (ДМСО-Л₆) (Вгикег АУ300) δ (м.д., относительно ТМ8): 1,44 (3Н, д, 1=7 Гц, СН₃); 2,35 (3Н, с, СН₃8О₃); 3,81 (1Н, кв, 1=7 Гц, Н-2), 3,99 (2Н, ушир.с, бензильный СН₂); 4,02 (2Н, система АВ, СН₂Ы-); 5,17 (2Н, с, СН₂ОК); 6,98-7,63 (11Н, м, ароматический Н); 7,62 и 7,75 (2Н, ушир.с, ΝΉ₂ амида); 9,02 (2Н, широкий, ΝΉ₂ ⁺).

¹³С-ЯМР (ДМСО-Л₆) (Вгикег АУ300) δ (м.д.): 15,9 (СН₃); 35,5 (СН₂); 39,7 (СН₃8О₃Н); 48,1 (Ο^ΝΚ); 54,4 (СН); 68,4 (ОСН₂); 112,2 (ароматический СН); 112,7 (д, 1_С-р=22 Гц, ароматический СН); 113,8 (д, 1_Ср=22 Гц, ароматический СН); 114,5 (д, 1_С-р=22 Гц, ароматический СН); 115,2 (д, 1_С-р=22 Гц, ароматический СН); 123,2 (ароматический СН); 123,8; 124,6 (ароматический СН); 128,7 и 130,0 (д, 1Н_С-р=6 Гц, ароматический СН); 130,04 (ароматический СН); 130,3 (д, 1_С-р=6 Гц, ароматический СН); 132,6 (ароматический СН); 139,8 (Л, 1_С-р=7 ГЦ); 143,4 (д, 1_С-р=7 Гц); 158,1, 160,5 и 163,7 (д, 1_С-р=240, С-Т); 160,6 и 163,8 (д, 1_с-р=240, С-Г); 170,5 (СО1МН₂).

Л) Выделение (11а) посредством препаративной ВЭЖХ метансульфоната сафинамида (1с), содержащего 0,12 мас.% (11с).

Образец (90 мг) (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11а) также

- 31 030250

выделяют посредством препаративной ВЭЖХ из 200 г метансульфоната сафинамида (1с), полученного способом А из I. Мей. СЬет., 1998, 41, 579, содержащего указанную примесь (11а) в виде метансульфоната (11с) с 0,12 мас.%.

Разделение проводят в двух стадиях (стадии 1 и 2), в соответствии со следующей схемой.

Стадия 1.

Назначение первой стадии состоит в выделении сырого продукта, обогащенного 11а/ТРА (трифторуксусная кислота).

Ниже приведены условия препаративной ВЭЖХ.

Условия препаративной ВЭЖХ:

устройство: ^а1егз 1)е11а Ргер 4000 (возвратно-поступательный насос, устройство для создания градиентов со смесителем низкого давления);

модуль КаФа1 Сотргеззюп Мойи1е Ргер РС Вазе (^а1егз); переменный детектор УФ 1азсо 7125, о.р. 0,2 мм; принтер-плоттер Мегк 1)2000;

колонка: 1)е11а Рак С18, 15 мкм, 40x100 мм (^а1егз); элюент А: 70/30, вода/ацетонитрил + 0,1% ТРА; элюент В: 30/70, вода/ацетонитрил + 0,1% ТРА; скорость потока: 27,0 мл/мин;

впрыск: 5 г в 50 мл воды (посредством впускного канала насоса Ό).

Стадия 2.

Эта стадия необходима для удаления ТРА из 11а/ТРА и для дальнейшей очистки (11а).

11а/ТРА подвергают хроматографии с применением условий препаративной ВЭЖХ, приведенных ниже.

Фракции 4 и 5 объединяют вместе и выпаривают при 40°С в вакууме до полного удаления ацетонитрила. Оставшийся водный раствор поддерживают в холодильнике при 4°С. Нерастворимое вещество выделяют посредством фильтрации и сушат в вакууме при комнатной температуре с получением (11а) (90 мг; чистота по ВЭЖХ 100%).

Условия препаративной ВЭЖХ:

переменный детектор УФ 1азсо 7125, о.р. 0,2 мм;

принтер-плоттер Мегк 1)2000;

колонка: 8утте1гу С18, 7 мкм, 20x250 мм (^а1егз);

элюент А: 70/30, вода/ацетонитрил;

элюент В: 30/70, вода/ацетонитрил;

скорость потока: 15,0 мл/мин;

градиент: 20 мин, изократический 100% А, затем до 100% В в течение 10 мин;

- 32 030250

детекция: УФ 227 нм;

впрыск: 50 мл раствора примеси "11а/ТРА" (посредством впускного канала насоса Ό).

Пример 19. Получение метансульфоната (К)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'с).

Свободное основание указанного выше соединения получают тем же способом, как и в примере 18Ь, но с применением вместо гидрохлорида Б-аланинамида гидрохлорида Ό-аланинамида.

(К)-2-[3-(3-Фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид преобразуют в его метансульфонатную соль способом из примера 18с).

Таким образом (11'с) получают с выходом 50%, начиная с 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида (У1а).

На основе данных ¹Н-ЯМР, ¹³С-ЯМР структуру (11'с) приписали полученному таким образом метансульфонату. Спектры ³Н-ЯМР, ¹³С-ЯМР и т.плавл. 196°С (капилляр) полностью совпадают со спектрами ³Н-ЯМР, ¹³С-ЯМР и т.плавл. 8-энантиомера (11с) (см. пример 18с).

Справочный пример 19А. Получение метансульфоната (К,8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11с, 11'с).

Указанное в заголовке соединение получают с 75% выходом из 2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида, полученного в примере 18а), и из рацемического гидрохлорида аланинамида, как в способе, приведенном в примере 18Ь).

Полученный таким образом (К,8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид преобразуют с выходом 88% в его соль с метансульфоновой кислотой способом, описанным в примере 18с).

Анализ ВЭЖХ на хиральной колонке (см. пример 27Ό) полностью согласуется с рацемическим характером продукта.

Справочный пример 20. Получение метансульфоната (8)-2-[4-3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1с) из 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа), загрязненного 1 мас.% примеси 3(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (У1а).

К 4-(3-фторбензилокси)бензальдегиду (10 г; чистота по ОС 98,8, % площади), добавляют 1% 3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида и смесь преобразуют в (8)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамид таким же способом, как в примере 12а). Выход составляет 90% с содержанием примеси (11а) 0,88 мас.% (см. пример 25В).

Свободное основание (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а) преобразуют в соответствующий метансульфонат таким же способом, как в примере 12Ь), с получением метансульфоната (1с) с выходом 96% с содержанием примеси метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси) бензиламино] пропанамида (11с), определенным ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,72 мас.%.

Справочный пример 21. Кристаллизация метансульфоната (8)-2-[4-3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1с) с добавкой примеси (11с).

Образцы метансульфоната сафинамида, полученные в примере 20, кристаллизуют с применением пяти различных систем растворителей, растворяя при температуре кипения с обратным холодильником и охлаждая при комнатной температуре.

Результаты приведены в приведенной ниже табл. 6.

Таблица 6

№ теста	СИСТЕМА И КОЛИЧЕСТВО РАСТВОРИТЕЛЕЙ(мл/г)	% масс./масс. (Нс) в (1с) после кристаллизации (*)	% молярного выхода
21а	2-РгОН/МеОН 2:1, 45	0,35	42,3
21Ь	ЕЕОАс/МеОН 4:1, 50	0,20	26, 6
21с	ЕСОН, 10	0,37	71,2
21ά	Ацетон/Н₂0 « 27:1, 40,5	0, 10	18,2
21е	Ацетонитрил/Н₂0 60:1, 30,5	1,1	65, 0

(*) % (мас./мас.) оценивают в соответствии с примером 25В.

Справочный пример 22. Получение метансульфоната (1с) (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а) способами, описанными на современном уровне техники.

22.1. Получение 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа).

22.1. а) Способ из примера 1а И8 6335354 В2.

4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид (1Уа) получают способом, описанным в примере 1а И8 6335354 В2.

Соответственно смесь 3-фторбензилхлорида (2,86 г, 19,80 ммоль), 4-гидроксибензальдегида (3,03 г, 24,80 ммоль), К₂СО₃ (10,30 г, 74,50 ммоль), №1 (137,1 мг, 0,91 ммоль) и этанола (40 мл) нагревают до

- 33 030250

температуры кипения с обратным холодильником в течение 70 мин и поддерживают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 4 ч и 15 мин.

После обработки реакционной смеси выделяют 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид в виде желтого масла с выходом 95%.

Продукт имеет чистоту по ОС 97,6 (% площади, см. пример 25А) и содержание 3-(3-фторбензил)-4(3-фторбензилокси)бензальдегида (У1а), определенное посредством ОС, 0,14 мас.% (см. пример 25В).

22.1. Ь) Способ из 1. Адйс. Ροοά СЬет, 27, 4, 1979.

4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид (1Уа) получают способом, опубликованным в 1. Адпс. Ροοά СЬет, 27, 4, 1979.

Соответственно 3-фторбензилхлорид (14,5 г, 100 ммоль) при перемешивании и в атмосфере азота добавляют к раствору 4-гидроксибензальдегида (12,2 г, 100 ммоль) и ЫаОН (4,0 г, 100 ммоль) в этаноле (100 мл).

Смесь постепенно нагревают в течение 25 мин до температуры кипения с обратным холодильником и перемешивают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 6 ч и 20 мин. Реакционную смесь фильтруют, а затем концентрируют при пониженном давлении с получением 4-(3фторбензилокси)бензальдегида (23,43 г) в виде твердого остатка желтого цвета. К остатку добавляют дихлорметан (250 мл), нерастворимое вещество фильтруют и полученный в результате раствор концентрируют при пониженном давлении с получением 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида в виде твердого вещества желтого цвета с выходом 80,4%.

Продукт имеет чистоту по ОС 91,6 (% площади, см. пример 24А) и содержание 3-(3-фторбензил)-4(3-фторбензилокси)бензальдегида (У1а), определенное посредством ОС (см. пример 25В), 0,13 мас.%.

22.2. Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а) и его метансульфонатной соли (1с).

22.2. а) Способ А из 1. Мей. СЬет., 1998, 41, 579.

(8)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1а) получают реакцией 4-(3фторбензилокси)бензальдегида (10 ммоль), полученного как описано в примере 22.1а) и гидрохлорида Ьаланинамида (1,37 г, 11 ммоль) с последующим восстановлением ЫаВН₃СЫ (0,50 г, 8 ммоль). После обработки реакционной смеси и очистки посредством флэш-хроматографии (8)-2[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамид выделяют в виде твердого вещества белого цвета с выходом 68,7%. Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 96,2 (% площади, см. пример 25А) и содержание (8)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси) бензиламино] пропанамида (11а) 0,15 мас.% (см. пример 25В).

Смесь (8)-2[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамцда (1,50 г, 4,96 ммоль) и этилацетата (40,2 мл) нагревают до 50°С до получения прозрачного раствора. К раствору при перемешивании в течение 15 мин добавляют метансульфоновую кислоту (0,53 г, 5,51 ммоль) и полученную в результате гетерогенную смесь охлаждают при перемешивании до 20°С в течение 90 мин. Через 30 мин при 20°С твердое вещество собирают посредством фильтрации, отмывают этилацетатом (6 мл) и высушивают при 50°С при пониженном давлении в течение 15 ч с получением метансульфоната (8)-2[4-(3фторбензцлоксц)бензцламцно]пропанамцда (1с) в виде твердого вещества белого цвета с 96,1% выходом. Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 98,6 (% площади, см. пример 25А) и содержание метансульфоната (8)2-[3-(3-фторбензцл)-4-(3-фторбензцлоксц)бензцламцно]пропанамцда (11с), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,10 мас.%.

22.2. Ь) Способ А из 1. Мей. СЬет., 1998, 41, 579.

(8)-2-[4-(3-Фторбензцлоксц)бензцламцно]пропанамцд (1а) получают в соответствии с примером

22.2.а) из 4-(3-фторбензцлоксц)бензальдегцда (10 ммоль), полученного как описано в примере 22.1.Ь), и гидрохлорида Ь-аланинамида (1,37 г, 11 ммоль) с последующим восстановлением ЫаВН₃СЫ (0,50 г, 8 ммоль).

(8)-2[4-(3-Фторбензцлоксц)бензцламцно]пропанамцд (1а) получают в виде твердого вещества белого цвета с выходом 66,5%. Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 88,5 (% площади, см. пример 25А) и содержание (8)-2-[3-(3-фторбензцл)-4-(3-фторбензцлоксц)бензцламцно]пропанамцда (11а), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,064 мас.%. (8)-2-[4-(3-фторбензцлоксц)бензцламцно]пропанамцд (1а) преобразуют в соответствующий метансульфонат (1с) с 88,9% выходом, обрабатывая метансульфоновой кислотой в соответствии с примером 22.2.а). Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 97,7 (% площади, см. пример 25А) и содержание метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензцл)-4-(3-фторбензцлоксц) бензиламино] пропанамида (11с), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,05 мас.%.

Пример 23. Получение метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензцлоксц)бензцламцно]пропанамцда (ралфинамида, 1Ь) (1й) и его К-энантиомеров (1'й) способами, описанными на современном уровне техники.

23.1. Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ).

23.1. а) Способ из примера 1а И8 6335354 В2.

4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (1УЬ) получают в соответствии с примером 22.1.а) из 2фторбензилхлорида (14,3 г, 98 ммоль), 4-гидроксибензальдегида (15,1 г, 123 ммоль), К₂СО₃ (51 г, 369 ммоль), Ν;·ι! (500 мг, 3,3 ммоль) и этанола, 75 мл.

- 34 030250

Смесь поддерживают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 12 ч. После обработки реакционной смеси получают (2-фторбензилокси)бензальдегид с выходом 75% в виде масла желтого цвета. Продукт имеет чистоту по ОС 94,21 (% площади, см. пример 24А) и содержание 3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида, определенное посредством ОС (см. пример 24В), 0,39 мас.%.

23.1. Ь) Способ из б. Адпс. Роой Скет, 27, 4, 1979.

4-(2-Фторбензилокси)бензальдегид (бУЬ) получают в соответствии с примером 22.1.Ь) из 2фторбензилхлорида (18,0 г, 123 ммоль), 4-гидроксибензальдегида (15,3 г, 125 ммоль), ΝαΟΗ (5,0 г, 12 ммоль) и этанола (125 мл).

Смесь нагревают в течение 25 мин до температуры кипения с обратным холодильником и поддерживают при температуре кипения с обратным холодильником при перемешивании в течение 12 ч.

После обработки реакционной смеси в соответствии с примером 22.1.Ь) получают 4-(2фторбензилокси)бензальдегид в виде твердого вещества желтого цвета с выходом 90,0%. Продукт имеет чистоту по ОС 90,4 (% площади, см. пример 24А) и содержание 3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида (УбЬ), определенное посредством ОС, 0,14 мас.% (см. пример 24В).

23.2. Получение (3)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1Ь) и его метансульфонатной соли (И).

23.2. а) Способ А из б. Мей. Скет, 1998, 41, 579.

(З)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1Ь) получают способом из примера 22.2.а) с использованием вместо 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (10 ммоль, полученного как в примере 23.1а).

(З)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид получают с выходом 67,3% в виде твердого вещества белого цвета. Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 86,7 (% площади, см. пример 25А) и содержание (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ббЬ), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,22 мас.%.

Смесь (3)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1,50 г, 4,96 ммоль) и пропан-2-ола (10,5 мл) нагревают до 50°С и поддерживают при данной температуре до получения прозрачного раствора. При перемешивании в течение 15 мин добавляют метансульфоновую кислоту (0,48 г, 5,01 ммоль).

Затем гетерогенную смесь охлаждают при перемешивании до 20°С в течение 2 ч. Через 1 ч твердое вещество собирают посредством фильтрации при 20°С, высушивают при пониженном давлении с получением метансульфоната (З)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в виде твердого вещества белого цвета с выходом 89,1%. Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 96,9 (% площади, см. пример 25А) и содержание метансульфоната (3)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ббй), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,14 мас.%.

23.2. Ь) Способ А из б. Мей. Скет. 1998, 41, 579.

(3)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1Ь) получают в соответствии с примером

22.2.Ь) с применением вместо 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (10 ммоль, полученный в соответствии с примером 23.1.Ь).

(3)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид получают в виде твердого вещества белого цвета с выходом 58,8%. Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 83,8 (% площади, см. пример 25А) и содержание (3)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ббЬ), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,15 мас.%.

(3)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1Ь) преобразуют в соответствующий метансульфонат (бй) с 89,4% выходом в виде твердого вещества белого цвета. Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 95,2 (% площади, см. пример 25А) и содержание метансульфоната (3)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,11 мас.%.

23.3. Получение (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (б'Ь) и его метансульфонатной соли (б'й) способом из патентной заявки АО 2006/027052.

а) В 250-мл стеклянный реактор при перемешивании и в атмосфере азота при комнатной температуре помещают сухой метанол (109 мл), содержащий 0,01% воды (рН смеси 7,30), гидрохлорид Όаланинамида (3 г; 24 ммоль) (Νονα Вюскет А36136821) (рН смеси 3,98), триэтиламин (2,43 г; 24 ммоль), 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (5,06 г, 22 ммоль) (рН смеси 8,60), полученный как описано в примере (23.1а) с чистотой по ОС 94,21 (% площади, см. пример 24А) и содержанием 3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида, определенным посредством ОС, см. пример 24В; 0,39 мас.% и 3А молекулярные сита (2,19 г). Смесь нагревают до 40°С и перемешивают при данной температуре в течение 4 ч. Затем температуру реакционной смеси снижают до 10°С (рН смеси 8,24) и частями в течение 15 мин добавляют боргидрид натрия (0,42 г, 11 ммоль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры при перемешивании в течение дополнительных 6 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтруют и выпаривают до сухости в вакууме. Остаток разводят водой (80 мл) и при 60°С добавляют толуол (70 мл), органическую фазу отделяют и добавляют воду (80 мл). Двухфазную смесь нагревают до 60°С при перемешивании. Органическую фазу отделяют и добавляют воду (80 мл). Двухфазную смесь нагревают до 60°С при перемешивании. Органическую фазу высушивают при 60°С над безводным суль- 35 030250

фатом натрия. Водные фазы объединяют вместе (раствор А, приблизительно 240 мл). Смесь с толуолом фильтруют, и раствор постепенно охлаждают до 10°С. Смесь поддерживают при перемешивании и в атмосфере азота при 10°С в течение 3 ч. Смесь фильтруют и твердое вещество отмывают холодным (10°С) толуолом (10 мл), сушат в вакууме при комнатной температуре с получением 2,13 г (7,1 ммоль; 32% выход) (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Ι'Β) в виде белых кристаллов.

Продукт имеет 98,00% (% площади, см. пример 25А) чистоты по ВЭЖХ и содержание (К)-2-[3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ПЪ), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,15 мас.%.

Соотношение энантиомеров К:8=99,6:0,4, как определено на хиральной колонке ВЭЖХ (% площади, см. пример 26В).

Исходный раствор в толуоле и отмывку толуолом объединяют вместе, и раствор концентрируют в вакууме в роторном испарителе с получением остатка желтого цвета (1,97 г).

Остаток растворяют в метаноле (30 мл) и известные молекулы, присутствующие в растворе, количественно определяют посредством ВЭЖХ относительно внешнего стандарта (см. пример 25А):

(К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (Ι’Ε) (0,81 г; 2,7 ммоль);

4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (0,16 г; 0,7 ммоль);

4-(2-фторбензилокси)бензиловый спирт (0,53 г; 2,2 ммоль) и другие количественно не определяемые примеси.

Чистота (Ι'Ε) по ВЭЖХ составляет 28,65% (% площади, см. пример 25А).

Водный раствор А выпаривают в роторном испарителе в вакууме до остатка. Остаток суспендируют в метаноле (30 мл), фильтруют, растворитель выпаривают в вакууме до остатка (4,5 г). Остаток растворяют в метаноле (30 мл) и известные молекулы, присутствующие в растворе, количественно определяют посредством ВЭЖХ относительно внешнего стандарта (см. пример 25А):

(К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (Ι’Ε) (0,69 г; 2,3 ммоль);

4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (0,07 г; 0,3 ммоль);

4-(2-фторбензилокси)бензиловый спирт (0,06 г; 0,2 ммоль) и другие количественно не определяемые примеси.

Чистота (Ι'Ε) по ВЭЖХ составляет 53,87% (% площади, см. пример 25А).

Как указано выше, общее количество получаемого (Ι'Ε) составляет 3,63 г; 12,1 ммоль; с 55% выходом. Массовый баланс насчитывает приблизительно 90% заряженного 4-(2фторбензилокси)бензальдегида.

Ь) К раствору (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1,28 г; 4 ммоль) (чистота 98,00%, полученному на стадии а), с содержанием (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ПЪ) 0,15 мас.%, в этилацетате (21 мл)) по каплям при перемешивании при комнатной температуре добавляют раствор метансульфоновой кислоты (0,27 мл) в этилацетате (5 мл). Через 1 ч посредством фильтрации выделяют кристаллы белого цвета, отмывают этилацетатом (3 мл) и сушат в вакууме с получением 1,40 г (86% выход) указанного в заголовке соединения.

Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 99,25 (% площади, см. пример 25А) и содержание метансульфоната (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Ι1'ά), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,07 мас.%.

Описанное выше получение повторяют в большом масштабе следующим образом.

а1) В 50-л стеклянный реактор при перемешивании и в атмосфере азота при комнатной температуре

помещают сухой метанол 21,43 л, содержащий 0,01% воды, гидрохлорид Ό-аланинамида (589,9 г; 4,72 моль), триэтиламин (477,8 г; 4,72 моль), 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (1000 г, 4,33 моль), полученный как описано в примере 23.1а) с чистотой по ОС 93,20 (% площади, см. пример 24А) и содержанием

3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида, определенным посредством ОС (см. пример 24В), 0,43 мас.% и 3А молекулярные сита (430,62 г). Смесь нагревают до 40°С и перемешивают при данной температуре в течение 4 ч. Затем температуру реакционной смеси снижают до 10°С и частями в течение 30 мин добавляют боргидрид натрия (82,58 г, 2,16 моль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры при перемешивании в течение дополнительных 6 ч при 20±2°С. Реакционную смесь фильтруют и выпаривают до сухости в вакууме. Остаток разводят водой (16 л) и толуолом (14 л) при 60°С, органическую фазу отделяют, и добавляют воду (16 л). Двухфазную смесь нагревают до 60°С±2 при перемешивании. Органическую фазу отделяют, и добавляют воду (16 л). Двухфазную смесь нагревают до 60°С±2 при перемешивании. Органическую фазу высушивают в вакууме посредством азеотропной перегонки приблизительно при 60°С. Водные фазы объединяют вместе (раствор А, приблизительно 50 л). Раствор в толуоле постепенно охлаждают до 10°С. Смесь поддерживают при перемешивании и в атмосфере азота при 10°С±2 в течение 4 ч. Смесь фильтруют и фильтрационный осадок отмывают холодным (10°С) толуолом (2 л), сушат в вакууме при комнатной температуре с получением 393,3 г (1,31 моль; 30,3% выход) (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Ι'Ε) в виде твердого вещества белого цвета.

Продукт имеет 97,70 (% площади, см. пример 25А) чистоту по ВЭЖХ и содержание (К)-2-[3-(2- 36 030250

фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'Ь), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,16 мас.%.

Соотношение энантиомеров, как определено на хиральной колонке ВЭЖХ, составляет К:8=99,5:0,5 (% площади, см. пример 26В).

Ь1) К раствору (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида 393,3 г (1,31 моль) полученному на стадии а1), с чистотой по ОС 97,70 (% площади, см. пример 24А) и содержанием (К)-2-[3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11'Ь), определенным посредством ОС (см. пример 24В), 0,16 мас.% в этилацетате (6,5 л), при перемешивании при комнатной температуре добавляют раствор метансульфоновой кислоты (83 мл) в этилацетате (1,5 л). Через 1 ч кристаллы белого цвета выделяют посредством фильтрации, отмывают этилацетатом (3 мл) и сушат в вакууме с получением 420,1 г (84% выход) указанного в заголовке соединения.

Продукт имеет чистоту по ВЭЖХ 99,15 (% площади, см. пример 25А) и содержание метансульфоната (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (П'б), определенное ВЭЖХ (см. пример 25В), 0,08 мас.%.

Приведенные выше данные демонстрируют, что, даже принимая во внимание количество соединения (1'Ь), которое из процесса, описанного в АО 2006/027052 (см. под стадией а) выше), не восстанавливается в качестве конечного продукта, выходы для промышленного получения соединения (1'Ь) являются неудовлетворительными.

Пример 24А. Определение посредством ОС чистоты 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа) и 4(2-фторбензилокси)бензальдегида (1УЬ).

Тестируемый препарат.

Растворить приблизительно 100 мг образца в 10 мл метиленхлорида.

Условия хроматографии.

Хроматографию проводят с применением:

капиллярной колонки с плавленым кварцем длиной 60 м и внутренним диаметром 0,32 мм. КТХ 35 (35% дифенил-65% диметилполисилоксан). Толщина пленки=0,25 мкм;

гелия в качестве газа-носителя при давлении 150 кПа; разделенного потока 25 мл/мин; темп. инжектора 290°С; темп. детектора (РГО) 290°С;

при следующей температурной программе:_

Время (мин)	Температура (°С)	Скорость (°С/мин)	Комментарий
0-5	150	-	изотермально
5-11	150—>240	15	линейный градиент
11-19	240	-	изотермально
19-20,7	240—>290	30	линейный градиент
20,7-40	290	-	изотермально

Процедура.

Впрыск 1 мкл тестируемого препарата. Запись хроматограммы и подсчет чистоты продукта посредством вычисления процента площади.

Идентификация примесей.

4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид (1Уа).

Время удерживания.

Время удерживания 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно 17. Относительное время удерживания 4-гидроксибензальдегида составляет приблизительно 0,52. Относительное время удерживания 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно

0,98.

Относительное время удерживания 4-(4-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно

1,01.

Относительное время удерживания 4-бензилоксибензальдегида составляет приблизительно 1,02. Относительное время удерживания 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно 1,78.

4-(2-Фторбензилокси)бензальдегид (1УЬ).

Время удерживания.

Время удерживания 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно 17. Относительное время удерживания 4-гидроксибензальдегида составляет приблизительно 0,53. Относительное время удерживания 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно

1,02.

- 37 030250

1,03.

Относительное время удерживания 4-бензилоксибензальдегида составляет приблизительно 1,04.

Относительное время удерживания 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно 1,81.

Пример 24В. Определение посредством ОС содержания 3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида (У1Ь) в 4-(2-фторбензилокси)бензальдегиде (1УЬ) и 3-(3-фторбензил)-4(3-фторбензилокси)бензальдегида (У1а) в 4-(3-фторбензилокси)бензальдегиде (1Уа).

Известное родственное вещество, учитываемое для 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида, представляет собой 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид, а для 4-(3фторбензилокси)бензальдегида оно представляет собой 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегид. Определение проводят в соответствии со следующими условиями.

Раствор внутреннего стандарта.

Получить раствор 3,4,5-триметоксибензальдегида с концентрацией 1,5 мг/мл в метиленхлориде (18).

Референсный раствор для определения 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси) бензальдегида в 4(2-фторбензилокси)бензальдегиде.

Аккуратно взвесить приблизительно 20 мг референсного стандарта 3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида и 20 мг референсного стандарта 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида в 20 мл мерной колбе, растворить и развести объем разбавителем; перенести 500 мкл данного раствора в 5 мл мерную колбу, добавить 500 мкл раствора 18 и разбавить до объема разбавителем с получением раствора, содержащего 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид приблизительно при 100 мкг/мл (соответствующим приблизительно 0,10%).

Референсный раствор для определения 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси) бензальдегида в 4(3 -фторбензилокси)бензальдегиде:

Аккуратно взвесить 20 мг референсного стандарта 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида и 20 мг референсного стандарта 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида в 20 мл мерной колбе, растворить и разбавить до объема разбавителем; перенести 500 мкл данного раствора в 5 мл мерную колбу, добавить 500 мкл раствора 18 и разбавить до объема разбавителем с получением раствора, содержащего 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегид и 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид приблизительно при 100 мкг/мл (соответствующих приблизительно 0,10%).

Тестируемый раствор.

Аккуратно взвесить 500 мг тестируемого продукта в 5-мл мерной колбе, добавить 500 мкл раствора 18, растворить и разбавить до объема разбавителем с получением раствора с известной концентрацией приблизительно 100 мг/мл.

Условия хроматографии.

Хроматографию проводят с применением

капиллярной колонки с плавленым кварцем КТХ 35 (35% дифенил-65% диметилполисилоксан) длиной 60 м и внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки 0,25 мкм;

носителя (гелия) при давлении 150 кПа; разделенного потока 25 мл/мин; темп. инжектора 290°С; темп. детектора (РГО) 290°С;

температурной программы: 0-5 мин изотермально при 150°С, 5-11 мин линейно от 150 до 240°С при скорости 15°С/мин, 11-19 мин изотермально при 240°С, 19-21 мин линейно от 240 до 290°С при скорости 30°С/мин, 21-40 мин изотермально при 290°С;

разбавителя: метиленхлорида; объема впрыска 1 мкл.

Процедура.

Впрыснуть раствор сравнения (разбавитель), референсный раствор, тестируемый раствор и записать хроматограммы.

В референсной хроматограмме проверить, что

время удерживания 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно 18 мин; относительное время удерживания 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет

приблизительно 1,7 или время удерживания 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно 18 мин;

относительное время удерживания 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет приблизительно 1,7;

относительное время удерживания 3,4,5-триметоксибензальдегида (18) составляет приблизительно 0,7

Подсчитать процент содержания 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида в тестируемом 4-(2-фторбензилокси)бензальдегиде или 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида в тестируемом 4-(3-фторбензилокси)бензальдегиде посредством вычисления внутреннего стандарта.

- 38 030250

Значение предела дискретизации (ЬОЦ) для (3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида и 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет 0,005 мас.%. Значение предела детекции (БОЭ) для обеих рассматриваемых примесей составляет 0,0025 мас.%.

Справочный пример 25А. Определение чистоты по ВЭЖХ (§)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а), его метансульфоната (1с), (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1Ь) и его метансульфоната (И).

Для обеих форм свободного основания (1а) и (1Ь) и метансульфонатной соли (1с) и (И) продуктов подходит приведенный ниже способ хроматографии.

Разбавитель.

Подвижная фаза.

Тестируемый раствор.

Аккуратно взвесить 25 мг продукта в 25-мл мерной колбе, растворить и разбавить до объема разбавителем с получением раствора с известной концентрацией приблизительно 1,0 мг/мл.

Условия хроматографии.

Хроматографию проводят с применением:

колонка: Аа1ег5 §уттеПу С8, 150x4,6 мм, размером 5 мкм;

детекция: УФ 220 нм;

температура колонки: 30°С;

подвижная фаза: 40% растворитель А + 10% растворитель В + 50% растворитель С, содержащие 1,0 г/л октансульфонат натрия;

растворитель А: буферный раствор=КН₂РО₄ 0,05М; растворитель В: ацетонитрил; растворитель С: метанол;

изократическая элюция, продолжительность: 60 мин; скорость потока: 1,0 мл/мин; объем впрыска: 10 мкл.

Процедура.

Впрыснуть тестируемый раствор, записать хроматограмму и подсчитать чистоту продукта посредством вычисления процента площади.

Идентификация (§)-2-[4-(3-фторбензилокси) бензиламино] пропанамида (сафинамид) и родственных примесей

Время удерживания.

Время удерживания (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 5,5 мин.

Относительное время удерживания (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропионовой кислоты составляет приблизительно 0,73.

Относительное время удерживания (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 4,08.

Идентификация (§)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамид) и родственных примесей

Время удерживания.

Время удерживания (§)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 5,5 мин.

Относительное время удерживания (§)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропионовой кислоты составляет приблизительно 0,73.

Относительное время удерживания (§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 4,08.

Такую же процедуру и референсные значения использовали для определения чистоты Кэнантиомеров (Га)-(Гб) и соответствующих рацемических смесей.

Справочный пример 25В. Определение посредством ВЭЖХ (§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободного основания 11Ь и метансульфоната 116) в (§)-2-[4(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде (свободном основании 1Ь и метансульфонате 16) и (8)-2[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободного основания 11а и метансульфоната 11с) в (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде (свободном основании 1а и метансульфонате 1с).

Определение (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободного основания и метансульфоната) в образцах (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободном основании и метансульфонате) и (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободного основания и метансульфоната) в образцах (8)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободном основании и метансульфонате) проводят в соответствии со следующими условиями:

Референсный раствор для определения (§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в (§)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде:

- 39 030250

Аккуратно взвесить 30 мг референсного стандарта метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 20 мг референсного стандарта (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 50 мл мерной колбе, растворить и разбавить до объема разбавителем; разбавить 1,0 мл данного раствора до 20 мл разбавителем (1^ое разбавление); разбавить 1,0 мл последнего раствора до 20 мл разбавителем (2^ое разбавление) с получением раствора, содержащего 2[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (приблизительно 0,12%) приблизительно при 1,20 мкг/мл и метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида приблизительно при 1,00 мкг/мл (приблизительно 0,10%).

Референсный раствор для определения метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в метансульфонате (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино1пропанамида.

Аккуратно взвесить 30 мг референсного стандарта метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 20 мг референсного стандарта метансульфоната (8)-2-[4(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 50 мл мерной колбе, растворить и разбавить до объема разбавителем; разбавить 1,0 мл данного раствора до 20 мл разбавителем (1^ое разбавление); разбавить 1,0 мл последнего раствора до 20 мл разбавителем (2^ое разбавление) с получением раствора, содержащего 2[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (приблизительно 0,15% в качестве метансульфоновой соли) приблизительно при 1,20 мкг/мл и метансульфонат (§)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида приблизительно при 1,00 мкг/мл (приблизительно 0,10%).

Референсный раствор для (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси) бензиламино] пропанамида в (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде.

Аккуратно взвесить 24 мг референсного стандарта (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 20 мг референсного стандарта (8)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 50 мл мерной колбе, растворить и разбавить до объема разбавителем; разбавить 1,0 мл данного раствора до 20 мл разбавителем (1^ое разбавление); разбавить 1,0 мл последнего раствора до 20 мл разбавителем (2^ое разбавление) с получением раствора, содержащего 2[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (приблизительно 0,12%) приблизительно при 1,20 мкг/мл и метансульфонат (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида приблизительно при 1,00 мкг/мл (приблизительно 0,10%).

Референсный раствор для метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в метансульфонате (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида.

Аккуратно взвесить 24 мг референсного стандарта (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 20 мг метансульфоната референсного стандарта (8)-2-[4(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 50 мл мерной колбе, растворить и разбавить до объема разбавителем; разбавить 1,0 мл данного раствора до 20 мл разбавителем (1 разбавление); разбавить 1,0 мл последнего раствора до 20 мл разбавителем (2 разбавление) с получением раствора, содержащего 2[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (приблизительно 0,15% в качестве метансульфоновой соли) приблизительно при 1,20 мкг/мл и метансульфонат (§)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида приблизительно при 1,00 мкг/мл (приблизительно 0,10%).

Тестируемый раствор.

Аккуратно взвесить 25 мг тестируемого продукта в 25 мл мерной колбе, растворить и разбавить до объема разбавителем с получением раствора с известной концентрацией приблизительно 1,0 мг/мл.

Условия хроматографии.

Хроматографию проводят с применением:

колонка: Аа1ег§ 5>ппте1гу С8 150x4,6 мм, размером 5 мкм или эквивалентная; температура колонки: 30°С.

Подвижная фаза: смесь 40% растворителя А: 10% растворителя В: 50% растворителя С, содержащего 1 г/л октансульфоната натрия

растворитель А: буферный раствор 0,05М КН₂РО₄;

растворитель В: ацетонитрил;

растворитель С: метанол;

изократическая элюция;

продолжительность: 60 мин;

скорость потока: 1,0 мл/мин;

детекция: УФ 220 нм;

объем впрыска: 100 мкл;

разбавитель: подвижная фаза.

Процедура.

В референсной хроматограмме проверить следующие параметры пригодности системы: время

- 40 030250

удерживания (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 5,2 мин; асимметрия для пика (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида по И8Р находится в диапазоне от 0,8 до 1,5;

относительное время удерживания (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 5,1 или

время удерживания (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 5,5 мин;

асимметрия для пика (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид по И8Р находится в диапазоне от 0,8 до 1,5;

относительное время удерживания (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 4,1.

Отрегулировать подвижную фазу для обеспечения пригодности системы.

Подсчитать процентное содержание (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободного основания и метансульфоната) в образцах тестируемого (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде (свободном основании и метансульфонате) и (8)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободного основания и метансульфоната) в образцах тестируемого (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободном основании и метансульфонате) посредством расчета внешнего стандарта.

Значение предела дискретизации (ТОО) для (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и для (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в соответствующем (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде и (8)-2[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде составляет 0,004 мас.%.

Значение предела дискретизации (ТОО) для метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и для метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в соответствующем метансульфонате (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и метансульфонате (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,005 мас.%. Значение предела детекции для всех рассматриваемых примесей составляет 0,001 мас.%.

Ту же процедуру и референсные значения использовали для определения С,О-дибензилированных примесей (П'а)-(П'б) и соответствующих рацемических смесей, в К-энантиомерах (1'а)-(1'б) и соответствующих рацемических смесях.

Справочный пример 26А. Определение энантиомерной чистоты (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1Ь) и его метансульфоната (1б) посредством ВЭЖХ.

Энантиомерную чистоту образца оценивают посредством ВЭЖХ. Определение проводят в соответствие с приведенным ниже.

Раствор стандарта 1.

Растворить приблизительно 5,3 мг референсного стандарта метансульфоната (К)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 25 мл подвижной фазы.

Раствор стандарта 2.

Растворить приблизительно 8,0 мг референсного стандарта метансульфоната (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 0,2 мл раствора стандарта 1 в 50 мл подвижной фазы.

Концентрация метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, рассчитанная относительно концентрации метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 0,5%.

Тестируемые растворы 1 и 2.

Растворить приблизительно 8,0 мг тестируемого продукта в 50 мл подвижной фазы в двух повторениях.

Условия хроматографии:

колонка: СЫга1рак АН 250 ммх4,6 мм, внутренний диаметр 5 мкм; температура колонки: 45°С;

подвижная фаза: 0,25 мМ Си8О₄ (аккуратно навесить 40 мг Си8О₄ в 1000 мл воды)/МеОН 60/40;

изократическая элюция;

скорость потока: 1,0 мл/мин;

детекция: УФ 230 нм;

объем впрыска: 10 мкл;

продолжительность: 15 мин.

Процедура.

Анализировать раствор сравнения (подвижная фаза) однократно, раствор стандарта 2 дважды, тестируемые растворы 1 и 2 однократно и проверить, что

для впрыска стандарта определение процента референсного стандарта (% Κ8Ό) для метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида процент площади составляет менее чем 2,0%;

для растворов стандартов и образцов для каждого впрыска процент площади основного пика нахо- 41 030250

дится между средним значением ± 0,1%.

Подсчитать содержание метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (процент площади) в виде среднего из двух определений.

Время удерживания.

Время удерживания (§)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 5,7 мин.

Относительное время удерживания (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 1,7.

Этот способ также применяют для определения отношения δ-изомеров соответствующих рацемических соединений (К,§) (1Ь, 1'Ь) и (И, Ι'ά).

Пример 26В. Определение энантиомерной чистоты (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'Ь) и его метансульфоната (Ι'ά) посредством ВЭЖХ.

Энантиомерную чистоту образца оценивают посредством ВЭЖХ. Определение проводят в соответствии с указанным ниже:

Раствор стандарта 1.

Растворить приблизительно 5,3 мг референсного стандарта метансульфоната (δ)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 25 мл подвижной фазы.

Раствор стандарта 2.

Растворить приблизительно 8,0 мг референсного стандарта метансульфоната (К)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 0,2 мл раствора стандарта 1 в 50 мл подвижной фазы.

Концентрация метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, рассчитанная относительно концентрации метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, составляет приблизительно 0,5%.

Тестируемые растворы 1 и 2.

Растворить приблизительно 8,0 мг тестируемого продукта в 50-мл подвижной фазы в двух повторениях.

Условия хроматографии:

колонка: СЫга1рак ΥΗ 250x4,6 мм, внутренний диаметр 5 мкм; температура колонки: 45°С;

подвижная фаза: 0,25 мМ &ιδΟ.·ι (аккуратно навесить 40 мг &ιδΟ.·ι в 1000 мл воды)/МеОН 60/40;

изократическая элюция;

скорость потока: 1,0 мл/мин;

детекция: УФ 230 нм;

объем впрыска: 10 мкл;

продолжительность: 15 мин.

Процедура.

для впрыска стандарта определение процента референсного стандарта (% ΒδΩ) для (δ)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида процент площади составляет менее чем 2,0%;

для растворов стандартов и образцов для каждого впрыска процент площади основного пика находится между средним значением ± 0,1%.

Подсчитать содержание метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (процент площади) в виде среднего из двух определений.

Время удерживания.

Время удерживания (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 9,69 мин.

Относительное время удерживания (§)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 0,58.

Этот способ также применяют для определения отношения К-изомеров соответствующих рацемических соединений (К,§) (Ш, Щ) и (Ιά, Ι'ά).

Справочный пример 27А. Определение энантиомерной чистоты посредством ВЭЖХ (δ)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида 0а) и его метансульфоната 0с).

Энантиомерную чистоту образца оценивают посредством ВЭЖХ. Определение происходит в соответствии со следующими условиями:

Тестируемый раствор.

Растворить приблизительно 10 мг тестируемого образца в 10 мл подвижной фазы.

Условия хроматографии:

колонка: СЫга1рак ΥΗ 250x4,6 мм, внутренний диаметр 10 мкм; температура колонки: 50°С; подвижная фаза: 0,25 мМ ΟιδΟ^

- 42 030250

изократическая элюция; скорость потока: 1,0 мл/мин; детекция: УФ 200 нм; объем впрыска: 10 мкл; продолжительность: 30 мин.

Процедура.

Впрыснуть тестируемый раствор и подсчитать максимальный отклик энантиомеров в виде процента площади.

Время удерживания (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 9,2 мин.

Относительное время удерживания (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 1,9.

Этот способ также применяют для определения отношения 8-изомеров соответствующих рацемических соединений (К,8) (1а, 1'а) и (1с, 1'с)

Пример 27В. Определение энантиомерной чистоты (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1'а) и его метансульфоната (1'с) посредством ВЭЖХ.

Тестируемый раствор.

Условия хроматографии:

колонка: Сйга1рак АН 250x4,6 мм, внутренний диаметр 10 мкм;

температура колонки: 50°С;

подвижная фаза: 0,25 мМ Си8О₄

изократическая элюция;

скорость потока: 1,0 мл/мин;

детекция: УФ 200 нм;

объем впрыска: 10 мкл;

продолжительность: 30 мин.

Процедура.

Время удерживания (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 17,48 мин.

Относительное время удерживания (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет приблизительно 0,56.

Этот способ также применяют для определения отношения К-изомеров соответствующих рацемических соединений (К,8) (1а, 1'а) и (1с, 1'с).

Пример 27С. Определение энантиомерной чистоты (8)- и (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободного основания 11Ь и метансульфоната 11й) посредством ВЭЖХ.

Тестируемый раствор.

В 20-мл мерную колбу аккуратно навесить приблизительно 20,0 мг подлежащих тестированию веществ, растворить и разбавить до объема подвижной фазой.

Условия хроматографии.

Хроматографию проводят с применением: колонка: СН1КАЬРАК АЭ-Н 25 смх4,6 мм.

Подвижная фаза:

80% растворителя А: н-гексан;

20% растворителя В: н-этанол;

0,3% диэтиламин (ΌΕΑ); скорость потока: 0,8 мл/мин; детекция: УФ при 240 нм; объем впрыска: 10 мкл; продолжительность: 20 мин.

Процедура.

Впрыснуть раствор образца и записать хроматограммы.

Рассчитать содержание энантиомеров как % площади.

Энантиомер 8: КТ=7,298.

Энантиомер К: КТ=7,617.

Соотношение КТ=1,04.

- 43 030250

Этот способ также применяют для определения соотношения изомеров 8/К соответствующих рацемических соединений (11Ь, 11'Ь) и (ΙΙά, ΙΙ'ά).

Пример 27Ό. Определение энантиомерной чистоты (8)- и (К)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободного основания 11а и метансульфоната 11с) посредством.

ВЭЖХ.

Тестируемый раствор.

Условия хроматографии.

Хроматографию проводят с применением: колонка: СШКАЬРАК АИ-Н 25 смх4,6 мм;

Подвижная фаза:

80% растворителя А: н-гексан;

20% растворителя В: н-этанол;

0,3% диэтиламин (ИЕА); скорость потока: 0,8 мл/мин; детекция: УФ при 240 нм; объем впрыска: 10 мкл; продолжительность: 20 мин.

Процедура.

Энантиомер 8: КТ=8,211.

Энантиомер К: КТ=8,714.

Соотношение КТ=1,061.

Этот способ также применяют для определения соотношения изомеров К/8 соответствующих рацемических соединений (11а, 11'а) и (11с, 11'с)

Пример 28. Анализ цитохрома Р450.

Ингибирование пяти наиболее важных изоформ цитохрома Р450 (СУР1А2, СУР2С9, СУР2С19, СУР2И6 и СУР3А4), вовлеченных в метаболизм лекарственных средств, измеряли с применением специфических субстратов, которые флуоресцируют при метаболизме СУР (анализ СеШеД Кй аззау).

Соединения тестировали в 96-луночном планшете, содержащем инкубационный/восстанавливающий ЫЛИРН буфер. Добавляли специфические рекомбинантные изоферменты и субстраты человека и инкубировали при 37°С в течение 15 мин для СУР1А2/СЕС, 40 мин для СУР2Е1/МРС, 45 мин для СУР2С9/МРС и 30 мин для других СУР450.

Специфические субстраты представляли собой следующее: 3-циано-7-этоксикумарин (СУР2С19 и СУР1А2), 7-метокси-4-трифторметилкумарин (СУР2С9), 3-[2-(Ы,М-диэтил-Н-метиламино)этил]-7метокси-4-метилкумарин (СУР2И6) бензилфенилкумарин (СУР3А4)

Планшеты сканировали на спектрофотометре для чтения планшетов Ую1ог (Регкш Е1тег) при подходящих длинах волн испускания/возбуждения и определяли 1С₅₀ (концентрация, ингибирующая 50% активности фермента). Результаты представлены в табл. 1 и 2.

Пример 29. Анализ цитотоксичности в клеточной линии нейробластомы человека 8Η-8Υ-5Υ.

В начальный момент времени клетки высевали при 1,10⁴/см² в 96-луночные планшеты в среду для выращивания ИМЕМ + 10% инактивированной нагреванием ЭТС + 2 мМ Ь-глутамин + 100 Ед/мл - 100 мкг/мл пенициллин/стрептомицин.

Через 72 ч в субконфлуэнтной фазе роста среду удаляли и клетки инкубировали в течение 24 ч при 37°С в 180 мкл нейробазальной среде + 2 мМ Ь-глутамин (Ы£е ТесЬопо1од1е8) с тестируемыми соединениями или без них (20 мкл, по меньшей мере 5 концентраций в трех повторениях).

В конце инкубации непосредственно в клеточную среду добавляли 20 мкл красителя А1атаг В1ие (набор для анализа А1атагВ1ие™, Рготеда).

Через 4 ч оценивали цитотоксичность, измеряя флуоресценцию при возбуждении 530 нм и испускании 595 нм с применением спектрофотометра для чтения планшетов Тесап 8рес1гайиог.

Перед обработкой и после нее культуры проверяли микроскопически посредством инвертированного оптического микроскопа О1утрн5 1X70 подходящего для 1таде Апа1у/ег (1таде Рго Р1из, 5.1) для оценки морфологии клеток.

Результаты представлены в табл. 1 в виде концентрации, индуцирующей 50% гибели.

Пример 30. Ток НЕКО в трансфицированных клеточных линиях СНО.

Ингибирование тока НЕКО тестировали в клетках СНО, стабильно экспрессирующих рекомбинантный канал НЕКО.

Для оценки воздействия тестируемых соединений на ток НЕКО клетки подвергали пэтч-клампу при

- 44 030250

-80 мВ, деполяризовали до 0 мВ в течение 5 с, обеспечивая активацию тока НЕКО, и реполяризовали до -50 мВ в течение 5 с обеспечивая деактивацию следового тока НЕКО. Эту процедуру повторяли с частотой 0,06 Гц. Амплитуду тока после реполяризации (следовой ток НЕКО) измеряли перед воздействием тестируемого соединения и после него.

Ингибирование тока подсчитывали как разницу между амплитудой следового тока НЕКО, измеренного в конце периода перфузии внешнего раствора, и амплитудой следового тока НЕКО, измеренного в конце периода перфузии тестируемого соединения (при достижении устойчивого эффекта), деленную на контрольный следовой ток НЕКО.

Кривые концентрация лекарственного средства-ингибирование получали, нанося на график тонических блоков в зависимости от концентраций лекарственных средств. Кривые зависимости "доза-эффект" аппроксимировали к данным тонических блоков в соответствии с логистическим уравнением: у=А2+(А1А2)/[1+(х/ГС₅₀)^р]. А1 и А2 представляют собой постоянные значения 0 и 1 соответствующие 0 и 100% ингибирования тока, х представляет собой концентрацию лекарственного средства, 1С₅₀ представляет собой концентрацию лекарственного средства, приводящую к 50% ингибированию тока, и р представляет собой соответствующий угловой коэффициент.

Результаты представлены в табл. 1.

Пример 31. Тест максимального электрошока (МЕ8) у мышей.

Тест максимального электрошока (МЕ8), как правило, применяют в скрининге противоэпилептических лекарственных средств в моделях на грызунах.

Животные и устройство.

Использовали самцов мышей С1)1 с весом 25 г. Использовали способ, описанный в ШНИе е! а1. (ШНИе Н.8., ШооИНеаИ ГН., РгапкНп М.К., 8\ушуагИ Е.А. и Шо1Г Н.Н. АпНерНерНс 1)гидз (1995) 4¹'¹ еИ.: 99110, Кауеп Ргезз, ЫИ., Ж\у Уогк). Для проведения электрической стимуляции, достаточной для обеспечения тонического ответа разгибателей задних конечностей по меньшей мере у 97% контрольных животных, использовали генератор электрошока Идо ВазНе (МоИе1 ЕСТ ϋΝΓΓ 7801). Стимуляцию у мышей проводили внутри уха через зажимные электроды (0,7-секундный разряд 40 мА, с серией импульсов с 80 Гц с длительностью импульса 0,4 мс). Тестировали немедленное действие соединений, вводимых интраперитонеально или перорально за 15-60 мин до индукции МЕ8, и сравнивали с контрольной группой, которой вводили носитель. Исследовали по десять мышей на группу. За доказательство противосудорожной активности принимали полное подавление тонического компонента судорог разгибателей задних конечностей. Соединения по изобретению вводили перорально или интраперитонеально в дозах 3-30 мг/кг.

Результаты представлены в табл. 3 и 4 в виде % защиты.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Применение имеющих высокую степень чистоты К-энантиомера сафинамида (Г'а), т.е. (К)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, или К-энантиомера ралфинамида (Г'Ъ), т.е. (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой, в которых содержание соответствующих примесей, (К)2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ГГ'а), (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ГГ'Ъ), или их солей с фармацевтически приемлемой кислотой составляет менее 0,03 мас.% и которые получены способом, характеризующимся тем, что промежуточное основание Шиффа формулы (ГГГ'а), (ГГГ'Ъ)

(а) получают реакцией иминоалкилирования 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегида Ώаланинамидом без добавления молекулярных сит в растворителе, выбранном из (С_гС₅)алканолов, при температуре от 20 до 30°С в таком количестве растворителя, которое обеспечивает образование суспензии основания Шиффа в насыщенном растворе основания Шиффа в том же растворителе, и (Ъ) после завершения реакции иминоалкилирования подвергают реакции восстановления восстановителем, выбранным из боргидрида натрия и боргидрида калия в органическом растворителе, выбранном из (С₁С5)алканолов или их смеси, где отношение органического растворителя к основанию Шиффа обеспечивает получение и присутствие в ходе существенной части реакции восстановления суспензии основания Шиффа в насыщенном растворе основания Шиффа в том же органическом растворителе и находится в диапазоне от 0,5 до 3,0 л на каждый 1 моль основания Шиффа, где способ дополнительно характеризуется тем, что исходное вещество 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегид, применяемое для получения промежуточных оснований Шиффа (ГГГ'а), (ГГГ'Ъ), имеет содержание примеси 3-(3- или 2-фторбензил)-4- 45 030250

(3-или 2-фторбензилокси)бензальдегида менее 0,03 мас.%; в результате чего К-энантиомер сафинамида (1'а), К-энантиомер ралфинамида (1'Ъ) получают в форме свободного основания, и, если предпочтительной является форма соли, указанную форму свободного основания преобразуют в их соль с фармацевтически приемлемой кислотой для получения лекарственного средства для лечения расстройств, выбранных из эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, синдрома беспокойных ног, мигрени, характеризующихся болью состояний, биполярных нарушений, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений, в условиях, которые не препятствуют цитохромам системы СУР450 и не характеризуются свойствами блокирования каналов НЕКО.
2. Применение по п.1 К-энантиомера сафинамида, К-энантиомера ралфинамида или их солей с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты для получения лекарственного средства для лечения нарушений, определенных в указанном п.1, у пациентов, которых классифицируют как медленных метаболизаторов (РМ), или для терапевтического лечения пациентов, одновременно принимающих другие лекарственные средства, о которых известно, что они воздействуют на цитохромы системы СУР450 и/или о которых известно, что они обладают свойствами блокирования каналов НЕКО.
3. Применение по п.1 или 2 К-энантиомера сафинамида, К-энантиомера ралфинамида в виде их солей с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты, где фармацевтически приемлемая кислота является метансульфоновой кислотой и содержание соответствующих примесей формул (11'а), (П'Ъ) в виде их солей с метансульфоновой кислотой составляет менее 0,01 мас.%.
4. Применение по любому из пп.1-3, где болевые состояния выбраны из хронической боли и невропатической боли.
5. Применение по любому из пп.1-4 К-энантиомера ралфинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты для получения лекарственного средства для селективного лечения патологических аффектаций, где патологическую(ие) роль(и) играет(ют) механизм(ы) натриевых и/или кальциевых каналов, выбранных из боли, мигрени, воспалительных процессов, затрагивающих все системы организма, нарушений, затрагивающих кожу и родственные ткани, нарушений дыхательной системы, нарушений иммунной и эндокринной систем, желудочно-кишечных и мочеполовых нарушений, у пациентов, страдающих от любого из указанных нарушений, в условиях, не препятствующих цитохромам системы СУР450 и не характеризующихся свойствами блокирования каналов НЕКО.
6. Применение по п.5 К-энантиомера ралфинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты для получения лекарственного средства для лечения нарушений, приведенных в указанном п.5, у пациентов, которых классифицируют как медленных метаболизаторов (РМ), или для терапевтического лечения пациентов, одновременно принимающих другие лекарственные средства, о которых известно, что они воздействуют на цитохромы системы СУР450, и/или о которых известно, что они обладают свойствами блокирования каналов НЕКО.
7. Применение по любому из пп.1-6, где цитохромы системы СУР450 выбраны из группы, состоящей из СУР3А4, СУР2Э6, СУР2С19, СУР2С9.
8. Применение по п.5 или 6 К-энантиомера ралфинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты, где фармацевтически приемлемая кислота представляет собой метансульфоновую кислоту и содержание примеси формулы (П'Ъ) в виде соли с метансульфоновой кислотой составляет менее 0,01 мас.%.
9. Применение по любому из пп.1-4 К-энантиомера сафинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты для получения лекарственного средства для лечения болезни Паркинсона в сочетании с одним или несколькими активными средствами против болезни Паркинсона, который(е) представляет(ют) собой агонист дофамина и/или ингибитор катехол-Ометилтрансферазы (СОМТ).
10. Применение по любому из пп.1-4 К-энантиомера ралфинамида или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты для получения лекарственного средства для лечения характеризующихся болью состояний в сочетании с габапентином или прегабалином.
11. Фармацевтическая композиция, содержащая К-энантиомер сафинамида (1'а) или К-энантиомер ралфинамида (1'Ъ) или их соли с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты, которые получают способом, определенным в п.1, где содержание соответствующих примесей формул (11'а), (П'Ъ), определенных, как указано в п.1, или их солей с фармацевтически приемлемой кислотой составляет менее 0,03 мас.% для лечения расстройств, выбранных из эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, синдрома беспокойных ног, мигрени, характеризующихся болью состояний, биполярных нарушений, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений, в условиях, которые не препятствуют цитохромам системы СУР450 и не характеризуются свойствами блокирования каналов НЕКО.
12. Фармацевтическая композиция по п.11 для селективного лечения патологических аффектаций, где патологическую(ие) роль(и) играет(ют) механизм(ы) натриевых и/или кальциевых каналов, выбранных из боли, мигрени, воспалительных процессов, затрагивающих все системы организма, нарушений, затрагивающих кожу и родственные ткани, нарушений дыхательной системы, нарушений иммунной и

- 46 030250

эндокринной систем, желудочно-кишечных и мочеполовых нарушений, содержащая К-энантиомер ралфинамида (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (I'Ъ) или его соль с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты с содержанием примеси (К)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (П'Ъ) или его соли с фармацевтически приемлемой кислотой менее 0,03 мас.%.
13. Фармацевтическая композиция по п.12, пригодная для лечения состояний, характеризующихся болью, которая содержит дополнительное активное средство, выбранное из габапентина и прегабалина.
14. Фармацевтическая композиция по любому из пп.11-13, содержащая К-энантиомер сафинамида, К-энантиомер ралфинамида в виде их солей с фармацевтически приемлемой кислотой высокой степени чистоты, где фармацевтически приемлемая кислота является метансульфоновой кислотой и содержание соответствующих примесей формул (И'я), (П'Ъ) в виде их солей с метансульфоновой кислотой составляет менее 0,01 мас.%.