EA019008B1 - Макроциклические производные индола, пригодные в качестве ингибиторов вируса гепатита с - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к ингибиторам репликации HCV формулы (I)включая их стереохимически изомерные формы, соли, гидраты, сольваты, где R, R, R, R, Rи Rимеют значения, определенные в формуле изобретения. Настоящее изобретение также относится к способам получения указанных соединений, фармацевтическим композициям, содержащим соединения, и к их применению в терапии HCV-инфекции.

Description

Изобретение относится к макроциклическим производным индола, оказывающим ингибирующее действие на репликацию вируса гепатита С (НСУ). Изобретение также касается композиций, содержащих указанные соединения в качестве активных ингредиентов, а также способов получения указанных соединений и композиций.

Предыдущий уровень техники

Вирус гепатита С является основной причиной хронического заболевания печени, распространенного по всему миру, и становится центром внимания большинства медицинских исследований. НСУ является членом семейства вирусов Е1ау1ушбае рода йерас1у1гик и тесно связан с родом Πηνίνίπικ, который включает ряд вирусов, причастных к болезни человека, таких как вирус денге и вирус желтой лихорадки, и с семейством вирусов животных рек11У1гик, которое включает вирус диареи крупного рогатого скота (ВУОУ). Геном вируса НСУ представлен положительно-смысловой одноцепочечной линейной РНК, содержащей около 9600 оснований. Геном включает как 5'-, так и З'-нетранслируемые области, которые принимают вторичные структуры РНК, и центральную открытую рамку считывания, которая кодирует единственный полипротеин, размером около 3010-3030 аминокислотных остатков. Полипротеин кодирует десять генных продуктов, которые образуются из полипротеина-предшественника посредством организованной серии ко- и посттрансляционных эндопротеолитических расщеплений, опосредованных как протеазами хозяина, так и вирусными протеазами. Структурные белки вирусов включают ядерный нуклеокапсидный белок и два гликопротеина вирусной оболочки Е1 и Е2. Участки РНК НСУ, кодирующие неструктурные (N8) белки с несколькими существенными для вируса ферментативными функциями (хеликаза, полимераза, протеаза), также кодируют белки с неизвестной функцией. Репликация вирусного генома опосредуется РНК-зависимой РНК-полимеразой, информацию о которой несет участок неструктурного белка РНК 5Ь (Ν85Β). В дополнение к полимеразе, функции геликазы и протеазы, обусловленные бифункциональным белком, кодированным участком N83, как показано, являются существенными для репликации РНК вируса НСУ. Помимо сериновой протеазы, кодированной участком N83, НСУ также кодирует металлопротеиназу в области N82.

Репликация НСУ предпочтительно протекает в гепатоцитах, но не является непосредственно цитопатической, приводя к стабильной инфекции. В частности, оказалось, что недостаток сильной ответной реакции Т-лимфоцитов и большая склонность вируса к мутации стимулируют высокую частоту хронической инфекции. Существует 6 основных генотипов НСУ и более 50 подтипов, которые географически распределены различным образом. НСУ типа 1 является доминирующим генотипом в США и Европе. Например, НСУ типа 1 насчитывает от 70 до 75% всех НСУ инфекций в Соединенных Штатах. Большая генетическая гетерогенность НСУ имеет важные диагностические и клинические последствия, возможно, объясняя трудности в разработке вакцин и недостаточную ответную реакцию на лечение. Как оценивается, 170 млн человек во всем мире инфицировано вирусом гепатита С (НСУ). После появления первоначальной острой инфекции у большинства инфицированных индивидуумов развивается хронический гепатит, который может перейти в фиброз печени, приводящий к циррозу, конечной стадии заболевания печени, и НСС (гепатоклеточная карцинома) (№1юпа1 1пк1йи1ек оГ НеаНй Сопкепкик Пеуе1ортеп1 СопГегепсе 81а1етеп1: Мападетеп! оГ Нераййк С. Нера!о1оду, 36, 5 8ирр1. 83-820, 2002). Цирроз печени, возникающий вследствие инфекции НСУ, приводит примерно к 10000 смертям в год только в США и является основной причиной для трансплантации печени. Передача НСУ может происходить за счет контакта с зараженной кровью и продуктами крови, например, после переливания крови или внутривенного введения лекарственных средств. Включение диагностических тестов, используемых при скрининге крови, привело к снижению случаев распространения инфекции НСУ после переливания крови. Однако, принимая во внимание медленное прогрессирование заболевания печени до конечной стадии заболевания, существующие инфекции будут продолжать еще в течение десятилетий представлять собой серьезную медицинскую и экономическую проблему (К1т, ν.Κ Нера1о1оду, 36, 5 8ирр1. 830-834, 2002).

Существующая в настоящее время терапия основана на (пэгилированном) интерфероне-альфа (1Е№ α) в комбинации с рибавирином. Такая комбинированная терапия проводит к стойкому вирологическому ответу более чем у 40% больных, инфицированных вирусами генотипа 1, и примерно у 80% больных, инфицированных генотипами 2 и 3. Помимо ограниченного действия на НСУ типа 1, комбинированная терапия имеет значительные побочные действия и плохо переносится большинством пациентов. Например, в зарегистрированных исследованиях с использованием пэгилированного интерферона и рибавирина заметные побочные действия приводили к приостановке лечения у приблизительно от 10 до 14 процентов больных. Основные побочные эффекты комбинированной терапии включают симптомы подобного гриппу заболевания, гематологические нарушения и нейропсихиатрические симптомы. Разработка более эффективного, удобного и легче переносимого лечения является главной задачей общественного здравоохранения. Таким образом, лечение такого хронического заболевания представляет собой неудовлетворенную клиническую потребность, поскольку существующая терапия только частично эффективна и ограничена нежелательными побочными эффектами.

Одной областью особого интереса был поиск ингибиторов №5Ь РНК-зависимой РНК-полимеразы (ВДКр). Близкие структурные гомологи данной полимеразы не существуют в неинфицированной клетке

- 1 019008 хозяина, и обнаружение ингибиторов указанной выше полимеразы предоставит более конкретный тип действия. Ингибиторы, которые в настоящее время рассматриваются, могут быть классифицированы либо как нуклеозидные ингибиторы (N1), либо как ненуклеозидные ингибиторы (NN1). N1 непосредственно конкурируют с нуклеотидными субстратами за связывание с высококонсервативными активными участками. Большей специфичности можно достичь ингибиторами NN1, которые могут взаимодействовать вне высококонсервативного активного участка у уникального аллостерического участка, присущего только структурно родственным полимеразам.

Описаны производные индола с ингибирующей НСУ активностью. Международная публикация \νϋ 2007/092000 описывает тетрациклические производные индола в качестве ингибиторов НСУ N856 для лечения и/или предотвращения инфицирования вирусом НСУ. Заявка И8 2008/0146537 описывает конденсированные с циклопропилом индолобензазепиновые ингибиторы НСУ N856. Международная публикация νθ 2008/075103 описывает макроциклические производные индола, пригодные для лечения или предотвращения инфекции вирусом гепатита С.

В настоящее время предварительные клинические испытания претерпели много неудач, тем самым, выдвигая на первый план необходимость продолжить поиск новых ингибиторов N856. До сих пор существует высокая медицинская потребность в безопасной и эффективной терапии, направленной против вируса НСУ. Такие ингибиторы НСУ могут преодолеть недостатки существующей терапии инфекции НСУ, такие как побочные эффекты, ограниченная эффективность, появление устойчивости и нарушения соблюдения режима терапии, а также улучшить устойчивый вирусологический ответ. В частности, в случаях, где терапевтические соединения имеют подходящую биодоступность и благоприятный фармакокинетический и метаболический профиль.

Сущность изобретения

Было обнаружено, что некоторые макроциклические производные индола проявляют противовирусную активность у субъектов, инфицированных вирусом НСУ, с пригодными свойствами относительно одного или более следующих параметров: противовирусная эффективность, благоприятный мутантный профиль, отсутствие токсичности, благоприятный фармакокинетический и метаболический профиль и легкость получения и введения. Следовательно, указанные соединения пригодны в лечении или борьбе с инфекциями НСУ.

Настоящее изобретение относится к ингибиторам репликации НСУ, которые могут быть представлены формулой (I)

К⁷ (I) включая их стереохимически изомерные формы и ^оксиды, соли, гидраты и сольваты, где В¹ представляет собой двухвалентную цепь, выбранную из

- 2 019008

каждая группа К³ независимо выбрана из группы, состоящей из водорода, С1_₄алкила и Сз.₅циклоалкила;

а равно 3, 4, 5 или 6;

каждый Ь независимо равен 1 или 2;

с равно 1 или 2;

макроцикл А содержит от 14 до 18 атомов в цикле; каждая группа К² независимо означает водород, галоген или С_1-4алкокси;

группы К⁴ и К⁵ означают водород, или К⁴ и К⁵ вместе образуют двойную связь или метиленовую группу с образованием конденсированного циклопропила;

К⁶ является водородом или метилом;

К⁷ означает С₃_7циклоалкил, необязательно замещенный галогеном.

Изобретение также относится к способам получения соединений формулы (I), включая их стереохимически изомерные формы и Ν-оксиды, четвертичные амины, комплексы с металлами, соли, гидраты и сольваты, их промежуточные соединения и применение промежуточных соединений в получении соединений формулы (I).

Изобретение относится к соединениям формулы (I) как таковым, включая их стереохимически изомерные формы и Ν-оксиды, четвертичные амины, комплексы с металлами, соли, гидраты или сольваты, для их применения в качестве лекарственного средства. Изобретение относится к соединениям формулы (I) как таковым, включая их стереохимически изомерные формы и Ν-оксиды, четвертичные амины, комплексы с металлами, соли, гидраты или сольваты, для лечения гепатита С. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим носитель и эффективное против вирусов количество соединения формулы (I), как указано в описании. Фармацевтические композиции могут содержать комбинации упомянутых выше соединений с другими средствами, направленными против вируса НСУ. Фармацевтические композиции могут содержать комбинации упомянутых выше соединений со средствами против вируса ВИЧ. Изобретение также относится к указанным выше фармацевтическим композициям для введения субъекту, страдающему от инфекции НСУ.

Изобретение также относится к применению соединения формулы (I), включая его стереохимически изомерные формы и Ν-оксиды, четвертичные амины, комплексы с металлами, соли, гидраты или сольваты, для производства лекарственного средства для ингибирования репликации НСУ. Изобретение также относится к применению соединения формулы (I), включая его стереохимически изомерные формы и Ν-оксиды, четвертичные амины, комплексы с металлами, соли, гидраты или сольваты, для производства лекарственного средства для предотвращения или лечения состояний, ассоциированных с НСУ.

- 3 019008

Изобретение также относится к способу ингибирования репликации вируса НСУ у теплокровных животных, где указанный способ включает введение эффективного количества соединения формулы (I), включая его стереохимически изомерные формы и Ν-оксиды, четвертичные амины, комплексы с металлами, соли, гидраты или сольваты. Изобретение также относится к способу предотвращения или лечения состояний, ассоциированных с НСУ, у теплокровных животных, где указанный способ включает введение эффективного количества соединения формулы (I), включая его стереохимически изомерные формы и Νоксиды, четвертичные амины, комплексы с металлами, соли, гидраты или сольваты.

Подробное описание изобретения

Далее будет описано настоящее изобретение. В следующих параграфах различные аспекты или варианты осуществления изобретения определены в деталях. Каждый аспект или вариант осуществления изобретения, определенный таким образом, может быть объединен с любым другим аспектом(ами) или вариантом(ами) осуществления изобретения, если четко не указано иное. В частности, любой признак, указанный как предпочтительный или благоприятный, может быть комбинирован с любым другим признаком или признаками, указанными как предпочтительные или благоприятные, для разработки конкретного случая осуществления изобретения.

Как употребляют в описании выше и ниже, следующие определения используют, если не указано иное.

В описании настоящего изобретения термины субъект или инфицированный субъект или больной относятся к индивидууму, инфицированному вирусом НСУ, при необходимости лечения.

Термин галоид или галоген является обобщенным для фтора, хлора, брома и йода.

Как употребляют в описании, С_1-4алкил, как группа или часть группы, означает насыщенные углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, содержащие от 1 до 4 атомов углерода, такие как, например, метил, этил, проп-1-ил, проп-2-ил, бут-1-ил, бут-2-ил, изобутил, 2-метилпроп-1-ил; С_1-залкил, как группа или часть группы, означает насыщенные углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, содержащие от 1 до 3 атомов углерода, такие как, например, метил, этил, проп-1ил, проп-2-ил.

Термин С_1-6алкилен, как группа или часть группы, относится к С_1-6алкильным группам, которые являются двухвалентными, т.е. с двумя простыми связями для присоединения к двум другим группам. Неограничивающие примеры алкиленовых групп включают метилен, этилен, метилметилен, пропилен, этилэтилен, 1-метилэтилен и 1,2-диметилэтилен.

Термин С_3-7циклоалкил является обобщенным для циклопропила, циклобутила, циклопентила, циклогексила и циклогептила. Термин С_3-5циклоалкил обозначает циклопропил, циклобутил и циклопентил.

Термин С_1-4алкокси или С_1-4алкилокси, как группа или часть группы, относится к радикалу формулы -ОК', где К является С_1-4алкилом, как определено выше. Неограничивающие примеры подходящей С1-4алкоксигруппы включают метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, вторбутокси и трет-бутокси.

Следует отметить, что положения радикала на любом фрагменте молекулы, используемом в определениях, могут быть где угодно на таком фрагменте до тех пор, пока он является химически устойчивым.

Радикалы, используемые в определениях переменных, включают все возможные изомеры, если не указано иное. Например, пиперидинил включает пиперидин-1-ил, пиперидин-2-ил, пиперидин-3-ил и пиперидин-4-ил; пентил включает пент-1-ил, пент-2-ил и пент-3-ил.

В случае, когда любая переменная встречается более одного раза в любой составной части, каждое определение является независимым.

Всякий раз, когда используется термин соединения формулы (I) или соединения согласно настоящему изобретению или подобные термины, он предназначен включать соединения формулы (I), включающие их стереохимически изомерные формы и их Ν-оксиды, четвертичные амины, комплексы с металлами, соли, гидраты и сольваты. Один вариант осуществления изобретения включает соединения формулы (I) или любую их подгруппу, определенную в описании, включая их возможные стереохимически изомерные формы, а также Ν-оксиды, соли, гидраты и сольваты. Другой вариант осуществления изобретения включает соединения формулы (I) или любые их подгруппы, определенные в описании, включая их возможные стереохимически изомерные формы, а также Ν-оксиды, соли, гидраты и сольваты.

Всякий раз, когда используется термин необязательно замещенный, он предназначен включать незамещенный, а также замещенный по меньшей мере одним из определенных замещающих радикалов. Например, С_1-4алкил, необязательно замещенный хлором, предназначен включать незамещенный С1-4алкил, а также С1-4алкил, замещенный хлором.

Соединения формулы (I) могут иметь один или более центров хиральности и могут существовать в виде стереохимически изомерных форм. Термин стереохимически изомерные формы, как он использован в описании, означает все возможные соединения, построенные из одинаковых атомов, связанных одинаковой последовательностью связей, но имеющие различные трехмерные структуры, которыми соединения формулы (I) могут обладать.

- 4 019008

Согласно примерам, где (К) или (8) используют для обозначения абсолютной конфигурации хирального атома в заместителе, обозначение приведено, принимая во внимание соединение целиком, а не отдельный заместитель.

В одном аспекте настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I)

включая их стереохимически изомерные формы и Ν-оксиды, соли, гидраты и сольваты, где К¹, К², К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ и А имеют такое же значение, как определено в описании. Варианты осуществления настоящего изобретения касаются соединений формулы (I) или любой их подгруппы, как определено в описании, где одно или более определений для К¹, К², К⁴, К⁵, К⁶ и К⁷, предусмотренных в вариантах осуществления изобретения ниже, используют:

отдельные подгруппы соединений формулы (I) являются соединениями формулы (II), (III) или (IV)

где К¹, К², К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ и А имеют такие же значения, как определены в описании.

В одном варианте осуществления изобретения К¹ является двухвалентной цепью, выбранной из

В отдельном варианте осуществления изобретения К¹ выбирают из

и где а и с являются такими, как определено в описании выше, или где а равно 4 или 5, с равно 1 или 2.

В другом отдельном варианте осуществления изобретения К¹ выбирают из о о ¹ Ъ^3 I _:_*³!:_

-Ы(В³)-(СН₂)₄-М(К³)-. 'ή и

- 5 019008

Когда Я¹ является ' , понятно, что группа Я¹ может быть ориентирована в двух направлениях, т.е. пиперазинильный фрагмент может быть соединен с сульфонамидной группой, в то время как алифатический амин соединен с карбонильной группой, или пиперазинильный фрагмент соединен с карбонильной группой, и алифатический амин соединен с сульфонамидной группой.

с карбонильной группой и алифатический амин соединен с сульфонамидной группой. В частном варианте осуществления изобретения Я¹ выбирают из

СНз

Альтернативно, Я¹ выбирают из

СН_Э

-•'К

СНз .

В предпочтительном варианте осуществления изобретения Я¹ является | Г ?*:

В другом варианте осуществления изобретения Я¹ является : ?^Нз —;^_Ν< I

В другом варианте осуществления изобретения Я¹ является !

Ν—; I : сн₃

В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения Я¹ является

Каждую группу Я³ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, С_1-4алкила и С_3-5циклоалкила. В частном варианте осуществления изобретения Я³ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, метила, этила, изопропила и циклопропила. В более конкретном варианте осуществления изобретения каждую группу Я³ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и метила; или Я³ означает метил.

Макроцикл А содержит от 14 до 18 атомов в цикле. В частном варианте осуществления изобретения макроцикл А содержит 16, 17 или 18 атомов в цикле. В более конкретном варианте осуществления изобретения А содержит 17 атомов в цикле.

Группу Я² выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена или С_1-4алкокси. В конкретном варианте осуществления изобретения Я² выбирают из группы, состоящей из водорода, хлора, фтора или метокси. В более конкретном варианте осуществления изобретения Я² означает водород, или метокси, или хлор; или, альтернативно, Я² означает фтор или метокси; или в предпочтительном варианте осуществления изобретения Я² означает метокси. В другом варианте осуществления изобретения группа Я² расположена в мета- или пара-положении бензольного кольца по отношению к связи, связывающей бензол с индольной группой. В предпочтительном варианте осуществления изобретения группа Я² расположена в пара-положении бензольного кольца по отношению к связи, связывающей данный бензол с индольной группой.

Группы Я⁴ и Я⁵ означают водород, или Я⁴ и Я⁵ вместе образуют двойную связь или метиленовую группу с образованием конденсированного циклопропила. В частном варианте осуществления изобрете

- 6 019008 ния К⁴ и К⁵ означают водород, или К⁴ и К⁵ вместе образуют метиленовую группу с образованием конденсированного циклопропила. В другом частном варианте осуществления изобретения К⁴ и К⁵ вместе образуют двойную связь. В другом варианте осуществления изобретения группу К⁶ выбирают из водорода и метила. В отдельном варианте осуществления изобретения К⁶ означает водород, когда соединение формулы (I) является соединением формулы (III) или (IV). В другом частном варианте осуществления изобретения К⁶ означает метил, когда соединением формулы (I) является соединение формулы (II).

Группа К⁷ означает С_3-7циклоалкил, необязательно замещенный галогеном. В частном варианте осуществления изобретения К⁷ выбирают из циклопентила, циклогексила и фторциклогексила (в частности, 2-фторциклогексила). В предпочтительном варианте осуществления изобретения К⁷ означает цикло гексил.

Отдельная подгруппа соединений формулы (I) представлена соединениями формулы (I), где К⁴ и К⁵ вместе образуют двойную связь и где используют одно или более определений для К¹, К², К⁶ и К⁷ в соответствии с вариантами осуществления изобретения. Более конкретной подгруппой соединений формулы (I) являются соединения формулы (II), где К¹, К², К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ и А имеют такое же значение, как определено в описании. Более специфическими являются такие соединения, представленные следующими структурными формулами (П-1), (П-2) и (П-3), где К², К⁶ и К⁷ имеют такое же значение, как определено в описании для соединений формулы (I) или их подгрупп.

В частном варианте осуществления изобретение предоставляет соединения, независимо, формулы (II), (П-1), (П-2) и (П-3), где К⁶ означает водород или метил, более предпочтительно где К⁶ означает метил.

В другом варианте осуществления изобретение предоставляет соединения формулы (II) или их подгруппы, где К⁷ означает циклогексил или 2-фторциклогексил.

В другом варианте осуществления изобретение предоставляет соединения формулы (II) или их подгруппы, где К² означает водород, метокси или хлор. Альтернативно, изобретение предоставляет соединения формулы (II) или их подгруппы, где К² означает фтор или метокси.

Частной подгруппой соединений формулы (I) являются соединения формулы (III), где К¹, К², К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ и А имеют такое же значение, как определено в описании. Более специфическими являются такие соединения, представленные следующими структурными формулами (Ш-1), (Ш-2), (Ш-3) и (Ш-4), где К², К⁶ и К⁷ имеют такое же значение, как определено в описании для соединений формулы (I).

- 7 019008

В частности, изобретение предоставляет соединения, независимо, формулы (III), (ΙΙΙ-1), (ΙΙΙ-2), (III3) и (ΙΙΙ-4), где К⁶ означает водород.

В другом варианте осуществления изобретение предоставляет соединения формулы (III) или их подгруппы, где К⁷ означает циклогексил или 2-фторциклогексил.

В другом варианте осуществления изобретение предоставляет соединения формулы (III) или их подгруппы, где К² означает водород, метокси или хлор.

Частная подгруппа соединений формулы (I) представлена соединениями формулы (IV), где К¹, К², К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ и А имеют такое же значение, как определено в описании. Более специфическими являются такие соединения, представленные следующими структурными формулами (Ιν-1), (Ιν-2) и (Ιν-3), где К², К⁶ и К⁷ имеют такое же значение, как определено в описании для соединений формулы (I).

В другом варианте осуществления изобретение предоставляет соединения формулы (IV) или их подгруппы, где К⁷ означает циклогексил или 2-фторциклогексил.

В другом варианте осуществления изобретение предоставляет соединения формулы (IV) или их подгруппы, где К² означает водород, метокси или хлор.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (ΙΙ-1), (ΙΙΙ-1) и (Ιν-1). Другой вариант настоящего изобретения касается соединений формулы (ΙΙ-2), (III2) и (Ιν-2). Другой вариант настоящего изобретения касается соединений формулы (ΙΙ-3), (ΙΙΙ-3) и (Ιν-3).

- 8 019008

В определенном варианте осуществления изобретение предоставляет соединения формулы (I), выбранные из группы, состоящей из

- 9 019008

В особенности, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I), выбранные из

Альтернативно, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I), выбранные из

» >

» > Э

- 10 019008

> » ϊ

В особенности, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I), выбранные из

Если не упомянуто или не указано иное, химическое обозначение соединения охватывает смесь некоторых или всех возможных стереохимически изомерных форм, которые указанное соединение может иметь. Указанная выше смесь может содержать все диастереомеры и/или энантиомеры основной молекулярной структуры указанного соединения. Все стереохимически изомерные формы соединений согласно настоящему изобретению, в чистом виде или в виде смеси с любой другой формой, предназначены быть включенными в объем настоящего изобретения.

Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений, как отмечено в данном описании, определены как изомеры, по существу не содержащие других энантиомерных или диастереомерных форм той же основной молекулярной структуры указанных соединений или промежуточных соединений. В частности, термин стереоизомерно чистый относится к соединениям или промежуточным соединениям, имеющим избыток стереоизомера по меньшей мере 80% (т.е. минимум 90% одного изомера и максимум 10% других возможных изомеров), вплоть до избытка стереоизомера 100% (т.е. 100% одного изомера и отсутствие других), более конкретно к соединениям или промежуточным соединениям, имеющим избыток стереоизомера от 90 до 100%, еще более конкретно, имеющим избыток стереоизомера от 94 до 100%, и наиболее конкретно, имеющим избыток стереоизомера от 97 до 100%. Термины энантиомерно чистый и диастереомерно чистый следует понимать аналогичным образом, но имеющим отношение к избытку энантиомера и избытку диастереомера соответственно в рассматриваемых смесях.

Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений согласно данному изо

- 11 019008 бретению могут быть получены с использованием известных в данной области способов. Например, энантиомеры могут быть отделены друг от друга путем селективной кристаллизации их диастереомерных солей, образованных с оптически активными кислотами или основаниями. Примерами являются винная кислота, дибензоилвинная кислота, дитолуоилвинная кислота и камфорсульфоновая кислота. Альтернативно, энантиомеры могут быть разделены хроматографическими методами с использованием хиральных стационарных фаз. Указанные чистые стереохимически изомерные формы могут быть получены из соответствующих чистых стереохимически изомерных форм подходящих исходных веществ при условии, что реакция протекает стереоспецифически.

Предпочтительно, если желателен определенный стереоизомер, указанное соединение синтезируют стереоспецифическими способами получения. В данных способах преимущественно будут использованы энантиомерно чистые исходные вещества.

Диастереомерные рацематы соединений формулы (1) или любой их подгруппы могут быть получены традиционными способами. Подходящие физические способы разделения, которые предпочтительно можно использовать, представляют собой, например, селективную кристаллизацию и хроматографию, например колоночную хроматографию.

Для некоторых из соединений формулы (1), их Ν-оксидов, солей, гидратов, сольватов, четвертичных аминов, или комплексов с металлами и промежуточных соединений, используемых для их получения, абсолютная стереохимическая конфигурация не была определена экспериментально. Специалист в данной области способен определить абсолютную конфигурацию таких соединений с использованием способов, известных в данной области, например таких, как дифракция рентгеновских лучей.

В варианте осуществления изобретения настоящее изобретение относится к соединениям формулы (ΙΙΙΑ), (ΙΙΙΒ), (ΙΥΑ) и (ТУБ)

где В¹, К², К⁶, К⁷ и А имеют такое же значение, как определено в описании.

В более конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (ΙΙΙΑ-1), (ΙΙΙΑ-2), (ΙΙΙΑ-3), (ΙΙΙΑ-4), (ΙΙΙΒ-1), (ΙΙΙΒ-2), (ΙΙΙΒ-3), (ΙΙΙΒ-4), (ΙνΑ-1), (ΙνΑ-2), (ΙνΑ-3), (ΙΥΒ-1), (ΙνΒ-2) и (ΙνΒ-3).

- 12 019008

- 13 019008

СНз

где Я², Я⁶ и Я⁷ имеют такое же значение, как определено в описании.

В другом варианте осуществления изобретения, при необходимости, соединения формулы (I) или их подгруппы имеют стереохимическую конфигурацию, иллюстрируемую формулой (ΙΑ)

Настоящее изобретение предназначено включать все изотопы атомов, существующих в настоящих соединениях. Изотопы включают те атомы, которые имеют тот же самый атомный номер, но различные массовые числа. В качестве общего примера и без ограничения изотопы водорода включают тритий и дейтерий. Изотопы углерода включают С-13 и С-14.

Что касается терапевтического применения, соли соединений формулы (I) представлены такими солями, у которых противоион является фармацевтически приемлемым. Однако соли кислот и оснований, которые не являются фармацевтически приемлемыми, также могут найти применение, например, в получении или очистке фармацевтически приемлемого соединения. Все соли, являются ли они фармацевтически приемлемыми или нет, включены в объем настоящего изобретения.

Фармацевтически приемлемые соли кислоты или основания, как отмечено в описании выше, предназначены включать терапевтически активные нетоксичные аддитивные соли кислоты и основания, которые соединения формулы (I) могут образовывать. Фармацевтически приемлемые аддитивные соли кислоты можно получить обычным образом путем обработки основания такой подходящей кислотой. Подходящие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например хлористо-водородная или бромисто-водородная кислота, серная, азотная, фосфорная и т.п. кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гидроксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая (т.е. этандиовая), малоновая, янтарная (т.е. бутандиовая), малеиновая,

- 14 019008 фумаровая, яблочная (т.е. гидроксибутандиовая кислота), винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая и т.п. кислоты.

В свою очередь, указанные солевые формы могут быть преобразованы при обработке подходящим основанием в форму свободного основания.

Соединения формулы (I) или любая их подгруппа, содержащие кислый протон, также могут быть преобразованы в их нетоксичные аддитивные соли металлов или аминов путем обработки подходящими органическими и неорганическими основаниями. Подходящие формы основных солей включают, например, соли аммония, соли щелочных и щелочно-земельных металлов, например лития, натрия, калия, магния, соли кальция и т.п., соли с органическими основаниями, например бензатином, Ν-метил-Бглюкамином, соли гидрабамина и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и т.п.

Термин четвертичный амин, как он использован ранее в данном описании, относится к определению четвертичных аммониевых солей, которые соединения формулы (I) или любая их подгруппа способны образовывать при реакции между основным азотом соединения формулы (I) или любой его подгруппы и подходящим средством кватернизации, таким как, например, необязательно замещенный алкилгалогенид, арилгалогенид и арилалкилгалогенид, например метилйодид или бензилйодид. Другие реагенты с подходящими удаляемыми группами также можно использовать, такие как алкилтрифторметансульфонаты, алкилметансульфонаты и алкил-п-толуолсульфонаты. Четвертичный амин содержит положительно заряженный азот. Фармацевтически приемлемые противоионы включают хлор, бром, йод, трифторацетат и ацетат. Выбранный противоион может быть введен с использованием ионообменных смол.

Подразумевается, что Ν-оксидные формы настоящих соединений включают соединения формулы (I) или любую их подгруппу, где один или несколько атомов азота окислены до так называемого Νоксида.

Следует понимать, что соединения формулы (I) или любая их подгруппа могут обладать металлсвязывающими, хелатирующими, комплексообразующими свойствами и, следовательно, могут существовать в виде металлокомплексов и хелатов металлов. Предполагается, что такие металлопроизводные соединений формулы (I) или любой их подгруппы включены в объем настоящего изобретения.

Некоторые из соединений формулы (I) или любая их подгруппа и промежуточные соединения также могут существовать в одной или более таутомерных формах. Подразумевается, что такие формы, хотя и не указаны подробно в приведенной выше формуле, включены в объем настоящего изобретения. Таким образом, соединения и промежуточные соединения могут существовать в виде смеси таутомеров или в виде индивидуального таутомера.

В изобретении особое предпочтение отдается соединениям формулы I или любой их подгруппе, которые в описанном ниже анализе ингибирования имели величину ингибирования менее чем 100 мкМ, предпочтительно менее чем 50 мкМ, более предпочтительно менее чем 10 мкМ, предпочтительно менее чем 5 мкМ, еще более предпочтительно менее чем 1 мкМ, предпочтительно менее чем 100 нМ и в особенности менее чем 10 нМ, как определено подходящим анализом, таким как анализы, используемые в примерах ниже.

Понятно, что определенные выше подгруппы соединений формулы (I), а также любая другая подгруппа, указанная в описании, предназначены включать стереохимически изомерные формы и любые Νоксиды, соли, четвертичные амины, гидраты, сольваты и металлокомплексы таких соединений.

Получение соединений формулы (I).

Общие схемы синтеза.

Соединения формулы (I) могут быть синтезированы следующими различными способами А, В, С, Ό, Е, Г и С, описанными ниже, из производных индола А-1

к⁷ А-1 где К², К⁴, К⁵, К⁶ и К⁷ являются такими, как определено для соединений формулы (I) или их подгрупп;

Ка выбирают из метила и трет-бутила;

КЬ выбирают из метила.

Соединения формулы А-1 являются либо известными соединениями в данной области, либо могут быть получены, как описано в заявке ϋδ 20070270406А1, международных публикациях ШО 2007/054741 и ШО 2007/092000.

- 15 019008

Способ А.

Схематическое представление синтеза соединений формулы (I) дано на схеме 1. Способ начинается с соединения формулы А-1.

Соединения формулы А-2 могут быть получены посредством региоселективного гидролиза сложного эфира, содержащего ВЬ-группу. в щелочных условиях, используя гидроксид, такой как БЮН или ΝαΟΗ, в полярных растворителях, таких как вода, спирт, такой как метанол или этанол, тетрагидрофуран (ТГФ) или их смеси. Данный способ может быть использован в случае, если КЬ является метильной группой и Ка является трет-бутильной группой или Ка является метильной группой.

Монозащищенный бифункциональный ^-производный реагент формулы РС-К¹-Н, где группа К¹ является такой, как определено для соединений формулы (I) или их подгрупп, может быть конденсирован с карбоновой кислотой соединений А-2 с образованием амидной связи, приводя к соединениям А-3. РС, как определено в описании, является подходящей защитной группой для амина, выбранной из защитных групп, известных в данной области. Предпочтительно РС является трет-бутоксикарбонильной (Вос) защитной группой или 4-нитробензолсульфонильной (нозильной) группой.

Образование амидных связей может быть осуществлено стандартными методиками, такими, которые используют для связывания аминокислот в пептидном синтезе. Пептидный синтез включает взаимодействие карбоновой кислоты одного вещества с аминогруппой другого вещества с образованием связывающей амидной связи с сопровождающейся дегидратацией. Образование амидной связи можно осуществлять путем взаимодействия исходных веществ в присутствии связующего реагента или путем превращения карбоксильной функциональности в активную форму, такую как активный сложный эфир, смешанный ангидрид или хлорангидрид или бромангидрид карбоновой кислоты. Общие описания таких реакций связывания и используемых в них веществ можно найти в руководствах по химии пептидов, например, М. Войапх/ку, Рерййе Сйетщйу, 2пй геу. ей., 8рппдег-Уег1ад, Вегйп, Сегтапу (1993).

Схема 1

А-1 А-2 А-3

А-4 А-5 А-6

Примеры реакций связывания с образованием амидной связи включают азидный метод, метод смешанных ангидридов карбоновой кислоты и угольной кислоты (изобутилхлорформиат), карбодиимидный (дициклогексилкарбодиимид (ОСС), диизопропилкарбодиимид (Э1С) или водорастворимый карбодиимид, такой как №этил-№-[3-(диметиламино)пропил]карбодиимид (БОС)) метод, метод активированных эфиров (например, п-нитрофенил, п-хлорфенил, трихлорфенил, пентахлорфенил, пентафторфенил, Νгидроксисукцинимидо и подобные сложные эфиры), метод с К-реагентом Вудворда, метод с 1,1карбонилдиимидазолом (СЭ1 или Ν,Ν'-карбонилдиимидазол), метод с применением фосфорсодержащих реагентов и методы с применением реакций окисления-восстановления. Некоторые из указанных выше методов могут быть улучшены путем добавления подходящих катализаторов, например в карбодиимидном методе при добавлении 1-гидроксибензотриазола или 4-диметиламинопиридина (4-ЭМЛР). Также связующими средствами являются (бензотриазол-1-илокси)-трис-(диметиламино)фосфония гексафторфосфат, или как таковой, или в присутствии 1-гидроксибензотриазола или 4-ЭМЛР; или 2-(1Нбензотриазол-1-ил)-^^№,№-тетраметилурония тетрафторборат или О-(7-азабензотриазол-1-ил)

- 16 019008

Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметилурония гексафторфосфат. Указанные реакции связывания могут быть осуществлены либо в растворе (жидкая фаза), либо в твердой фазе.

Реакции связывания предпочтительно проводят в инертном растворителе, таком как галогенированные углеводороды, например дихлорметан (ΌΟΜ), хлороформ, диполярные апротонные растворители, такие как ацетонитрил, диметилформамид (ДМФ), диметилацетамид, ДМСО, НМРТ, простые эфиры, такие как тетрагидрофуран (ТГФ).

Во многих примерах реакции связывания осуществлены в присутствии подходящего основания, такого как третичный амин, например триэтиламин, диизопропилэтиламин (ΌΓΡΕΑ), Ν-метилморфолин, Νметилпирролидин, 4-ΌΜΑΡ или 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (ΌΒυ). Температура реакции может колебаться между 0 и 50°С, время реакции может составлять интервал между 15 мин и 24 ч.

Удаление защитной группы способами, известными в данной области, может привести к получению соединений А-4. Указанные способы включают взаимодействие соединений А-3 с трифторуксусной кислотой (ТФУ) в подходящем растворителе, таком как ΌΟΜ, когда РС является Вос-защитная группа, или взаимодействие соединений А-3 с тиолсодержащей меркаптоуксусной кислотой или тиофенолом, в растворе или в твердой фазе, в присутствии основания, такого как карбонат цезия или Ь1ОН, в подходящем растворителе, таком как ДМФ, ТГФ, когда РС является нозил. В случае, когда Ра означает третбутильную группу, и РС является Вос-защитная группа, удаление РС, как описано выше, может привести к соединению А-4 с Ра, означающим ОН.

Затем соединения А-4 подвергают взаимодействию с сульфамидом в подходящем растворителе, например, диоксане, в условиях нагревания, т.е. 100°С. Данная реакция может протекать при микроволновом излучении и приводить к соединениям А-5. Другой способ введения сульфамидного фрагмента может состоять из взаимодействия соединения А-4 с аминосульфонилхлоридом в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин, ΌΙΡΕΆ или пиридин, в подходящем растворителе, таком как хлорсодержащий растворитель, подобный ΌΟΜ, или в ДМФ, ТГФ.

Сложноэфирная функция соединений А-5, т.е. -СО-О-Ра, затем может быть гидролизована, используя условия, известные в данной области, и включая омыление в основной среде, как описано выше, с образованием соединений А-6. Нагревание может потребоваться для завершения данной реакции. Кислые условия также могут быть использованы для гидролиза сложноэфирной функции соединений А-5, например ТФУ в подходящем растворителе, подобном ΌΟΜ, когда Ра представляет собой третбутильную группу.

Соединения (I) могут быть получены макроциклизацией путем образования внутримолекулярной ацилсульфамидной связи в присутствии связующих средств, таких как ίΌΙ, который превращает карбоксильную группу в активный ацилимидазол при нагревании. Затем, полученный ацилимидазол может быть очищен до добавления подходящего основания, такого как ΌΒυ, для осуществления замыкания кольца, которое может происходить в условиях нагревания. Растворители, используемые для указанных реакций, могут включать ацетонитрил или ТГФ. Другие связующие средства, такие как средства, известные в данной области, также могут быть использованы для достижения замыкания кольца.

Способ В.

Схема 2

А-2 А-4

Альтернативный способ, приводящий к соединениям А-4, иллюстрированный на схеме 2, может заключаться в образовании амидной связи между соединениями А-2 и реагентом, представленным симметричной двухвалентной цепью Р¹, используемым в избытке по сравнению с соединениями А-2. Указанная амидная связь может быть образована, как описано выше, в частности, с использованием связующего средства, такого как [диметиламино-([1,2,3]триазоло[4,5-Ь]пиридин-3илокси)метилен]диметиламмония гексафторфосфат (НАТи), в присутствии основания, такого как ΌΙΡΕΑ, и в подходящем растворителе, подобном ΌΟΜ, ДМФ, или более предпочтительно ТГФ. Далее соединения А-4 могут взаимодействовать, как описано выше в способе А, с получением соединений (I).

- 17 019008

Способ С.

Схема 3

А-2 А-5

Соединения могут быть непосредственно получены из соединений А-2 способом, подобным описанному выше способу синтеза соединений А-3, но используя реагент, представленный двухвалентной цепью К¹, включающей один сульфамидный фрагмент вместо защитной группы. Такой сульфамидный фрагмент может быть введен в цепь К¹ на Н-К¹-Н при нагревании реагента формулы Н-К¹-Н, который может быть либо монозащищенным подходящей защитной группой (т.е. РС-К'-Н). либо незащищенным, если реагент представлен симметричной цепью, с сульфамидом в подходящем растворителе, таком как диоксан, в условиях микроволнового излучения. Далее защитная группа может быть удалена способами, известными в данной области, например реакцией с ТФУ в дихлорметане, когда защитной группой является Вос-защитная группа, приводящей к дериватизированной К¹-цепи, включающей моносульфамид.

Способ Ό.

Соединения формулы А-3 или А-4 могут подвергаться модификации функциональной группы, такой как алкилирование или восстановительное аминирование, до удаления РС у соединений А-3 и/или реакции, приводящей к сульфамиду А-4.

Способ Е.

Схема 4

Сложный эфир, несущий Ка-группу, соединений А-1 (Ка является, например, трет-бутильной группой, КЬ является метильной группой) может быть гидролизован, как описано выше, в кислых условиях, используя, например, ТФУ в подходящем растворителе, подобном ΌΟΜ, с получением производного карбоновой кислоты Е-2.

Взаимодействие соединений Е-2 с сульфамидным фрагментом, введенным в монозащищенную двухвалентную цепь К¹, может привести к ацилсульфамидным соединениям Е-3 в условиях, описанных для последней стадии способа А. Предпочтительно связующим средством, используемым для активации карбоксильной группы, может быть СЭ1, в подходящем растворителе, подобном ацетонитрилу или ТГФ, в условиях нагревания. Добавление сульфамидной цепи в присутствии основания, такого как ΌΒυ, в результате может привести к соединениям Е-3. РС является подходящей защитной группой для амина, выбранной из групп, известных в данной области. Предпочтительно в способе Е, РС является Вос-защитная группа.

Удаление защитной группы РС у соединений Е-3 способами, известными в данной области, может привести к соединениям Е-4. Указанные способы включают взаимодействие соединений Е-3 с ТФУ в подходящем растворителе, таком как ΌΟΜ, когда РС является Вос-защитная группа.

Далее сложноэфирная функция соединений Е-4 (КЬ означает метильную группу) может быть гидролизована в условиях, известных в данной области и включающих омыление в основной среде, как описано выше, приводя к соединениям Е-5.

Альтернативно, соединения Е-3 могут подвергаться реакции омыления в основной среде для гидролиза сложного эфира, содержащего КЬ-группу, до удаления защитной группы у амина в условиях, опи

- 18 019008 санных выше и приводящих к соединениям Е-5.

Соединения (I) могут быть получены макроциклизацией соединений Е-5 путем образования внутримолекулярной амидной связи в присутствии связующих средств, как описано в способе А. Предпочтительно указанная стадия образования амидной связи может быть осуществлена в условиях сильного раз ведения.

Способ Р.

Схема 5

Соединения Р-3 могут быть получены реакцией образования амида, исходя из соединений А-2 и алкиленамина, как описано для второй стадии способа А. Последующий гидролиз сложного эфира в основных или кислых условиях, как описано ранее, может привести к соединениям Р-4. Далее ацилсульфамидная связь может быть образована способом, описанным для последней стадии способа А, используя алкиленсульфамидное соединение и получая соединения Р-5.

Альтернативно, ацилсульфамидная группа может быть введена в соединение формулы Е-2 до гидролиза сложного эфира, включающего ЯЬ-группу, и связывания полученной карбоновой кислоты с алкенамином, как описано выше, приводя к соединению Р-5.

Образование макроцикла, т.е. соединения формулы Р-6, которое является соединением формулы (I),

-ί-Ν<ν^Γ:“ ι <

содержащим следующую двухвалентную цепь, как Я ³ < может быть осуществлено реакцией метатезиса олефинов в присутствии подходящего металла-катализатора, такого как, например, Яи-основанный катализатор, как описано МШег, 8.1, В1аск^с11. Н.Е., СгиЬЬк, Я.Н. 1. Ат. СЬет. 8ос. 118, (1996), 9606-9614; КтдкЬигу, 18., Наггйу, ГР.А., Вош1а1еЬи8, Р.Г, Ноуеуба, А.Н., 1. Ат. СЬет. 8ос. 121, (1999), 791-799; и Ниапд е! а1., 1. Ат. СЬет. 8ос. 121, (1999), 2674-2678; например, катализатор НоуеуйаСгиЬЬк.

Устойчивые на воздухе рутениевые катализаторы, такие как бис-(трициклогексилфосфин)-3-фенил1Н-инден-1-илиденрутения хлорид (№о1у§1 М1®) или бис-(трициклогексилфосфин)[(фенилтио)метилен]рутения(1У) дихлорид, могут быть использованы. Другими катализаторами, которые могут быть использованы, являются катализаторы Граббса первого и второго поколения, т.е. бензилиден-бис-(трициклогексилфосфин)дихлоррутений и (1,3-бис-(2,4,6-триметилфенил)-2имидазолидинилиден)дихлор(фенилметилен)(трициклогексилфосфин)рутений соответственно. Особый интерес представляют катализаторы Ноуеуба-СгиЬЬк первого и второго поколения, которыми являются дихлор(о-изопропоксифенилметилен)(трициклогексилфосфин)рутений(11) и 1,3-бис-(2,4,6триметилфенил)-2-имидазолидинилиден)дихлор(о-изопропоксифенилметилен)рутений соответственно. Также, другие катализаторы, содержащие другие переходные металлы, такие как Мо, могут быть использованы для данной реакции.

Реакции метатезиса могут быть осуществлены в подходящем растворителе, таком как, например, простые эфиры, например ТГФ, диоксан; галогенированные углеводороды, например дихлорметан, СНС1₃, 1,2-дихлорэтан и т.п., углеводороды, например толуол. Указанные реакции осуществляют при повышенных температурах в атмосфере азота.

Соединения формулы (I) или любая их подгруппа или любые их подгруппы могут быть превращены друг в друга посредством реакций трансформации функциональной группы, известных в данной области. Например, аминогруппы могут быть Ν-алкилированы, нитрогруппы могут быть восстановлены до аминогрупп, атом галогена может быть обменен на другой галоген.

- 19 019008

Соединения формулы Р-6 могут быть подвергнуты каталитическому гидрированию с использованием, например, Ρά/С в качестве катализатора, в подходящем растворителе, таком как метанол, этанол, ТГФ, уксусная кислота или их смесь, с получением соединений формулы Р-7, где алкен двухвалентной цепи К¹ восстановлен до соответствующего алкана. Соединения формулы Р-6, принадлежащие к группе соединений формулы (II), могут быть превращены в соединения Р-7, имеющие структуру соединений формулы (Ιν), после указанной стадии гидрирования.

В общем, соединения формулы (II) могут быть превращены в соединение формулы (Ιν) путем каталитического гидрирования, как показано ниже.

Схема 6

Соединения формулы (I) могут быть превращены в соответствующие формы Ν-оксидов известными в данной области способами, предназначенными для превращения трехвалентного азота в его Νоксидную форму. Указанная реакция Ν-окисления может быть в основном осуществлена путем взаимодействия исходного вещества формулы (Ι) с соответствующей органической или неорганической перекисью. Соответствующие неорганические перекиси включают, например, перекись водорода, перекиси щелочного металла или щелочно-земельного металла, например перекись натрия, перекись калия; соответствующие органические перекиси могут включать пероксикислоты, такие как, например, бензолкарбопероксикислота или галогензамещенная бензолкарбопероксикислота, например 3хлорбензолкарбопероксикислота, пероксиалкановые кислоты, например пероксиуксусная кислота, алкилгидроперекиси, например трет-бутилгидроперекись. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например, этанол и т.п., углеводороды, например толуол, кетоны, например 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например дихлорметан, и смеси указанных растворителей.

Чистые стереохимически изомерные формы соединений формулы (Ι) могут быть получены способами, известными в данной области. Диастереомеры могут быть разделены физическими методами, такими как селективная кристаллизация и хроматографические методы, например противоточное распределение, жидкостная хроматография и т.п.

Соединения формулы (Ι) могут быть получены в виде рацемических смесей энантиомеров, которые могут быть отделены один от другого способами разделения, известными в данной области. Рацемические соединения формулы (Ι), которые являются в меру основными или кислотными, могут быть превращены в соответствующие диастереомерные солевые формы путем взаимодействия с подходящей хиральной кислотой, соответственно хиральным основанием. Далее указанные диастереомерные солевые формы разделяют, например, селективной или фракционированной кристаллизацией, и энантиомеры выделяются отсюда посредством щелочи или кислоты. Альтернативный способ разделения энантиомерных форм соединений формулы (Ι) включает жидкостную хроматографию, в частности жидкостную хроматографию с использованием хиральной стационарной фазы. Указанные чистые стереохимически изомерные формы также могут быть получены из соответствующих чистых стереохимически изомерных форм соответствующих исходных веществ, при условии, что реакция протекает стереоспецифически. Предпочтительно, если специфический стереоизомер является желательным, тогда указанное соединение может быть синтезировано стереоспецифическими методами получения. В указанных методах преимущественно могут быть использованы энантиомерно чистые исходные вещества.

Способ С описывает синтез энантиомерно чистых исходных веществ А-2, принадлежащих к группам соединений (ΙΙΙ) и (Ιν).

- 20 019008

Способ 6.

Схема 7

рацемическая смесь введение хирального вспомогател ь кого компонента разделение диастереоизомеров и удаление хирального вспомогательного компонента

V

,0 но-4	а но-£ н*
Вахо	ίϊί
йг	ЙТ
А-2’	А-2
энантиомер 1	энантиомер 2

Рацемическая смесь А-2 может быть подвергнута взаимодействию с хиральным вспомогательным компонентом, таким как (§)-4-бензил-2-оксазолидинон, после превращения ее в ацилхлорид способами, известными в данной области, такими как взаимодействие А-2 с оксалилхлоридом в подходящем растворителе, подобном ТГФ, в присутствии каталитического количества ДМФ. Затем, хлорангидрид может взаимодействовать с анионом (§)-4-бензил-2-оксазолидинона, образованным реакцией с сильным основанием, таким как бутиллитий, в подходящем растворителе, таком как ТГФ, при низких температурах, обычно при -78°С, и в инертной атмосфере, с получением диастереоизомеров С1 и С2, которые могут быть выделены способами, известными в данной области, такими как хроматография на силикагеле.

Далее удаление хирального вспомогательного компонента из каждого из диастереоизомеров 01 и 62 может быть выполнено обработкой основанием, таким как ΝαΟΗ, в подходящем растворителе, таком как метанол, вода, ТГФ, с получением энантиомерно чистых соединений А-2' и А-2''. Используя указанные энантиомерно чистые исходные вещества, можно получить энантиомерно чистые соединения формулы (I), содержащие один стереоцентр, такие как соединения формулы (ΙΙΙΑ), (ΙΙΙΒ).

Чистые стереохимически изомерные формы соединений формулы (I) или любых их подгрупп могут быть получены способами, известными в данной области. Диастереомеры могут быть разделены физическими способами, такими как селективная кристаллизация и хроматографические методы, например, противоточное распределение, жидкостная хроматография и т.п.

Соединения формулы (Ι) или любые их подгруппы могут быть получены в виде рацемических смесей энантиомеров, которые могут быть отделены один от другого методами разделения, известными в данной области. Рацемические соединения формулы (Ι) или любые их подгруппы, которые являются в меру основными или кислотными, могут быть превращены в соответствующие диастереомерные солевые формы путем взаимодействия с подходящей хиральной кислотой, соответственно хиральным основанием. Далее указанные диастереомерные солевые формы разделяют, например, селективной или фракционированной кристаллизацией, и энантиомеры выделяются отсюда посредством щелочи или кислоты. Альтернативный способ разделения энантиомерных форм соединений формулы (Ι) или любых их подгрупп включает жидкостную хроматографию, в частности жидкостную хроматографию с использованием хиральной стационарной фазы. Указанные чистые стереохимически изомерные формы также могут быть произведены из соответствующих чистых стереохимически изомерных форм соответствующих исходных веществ, при условии, что реакция протекает стереоспецифически.

Предпочтительно, если специфический стереоизомер является желательным, тогда указанное соединение может быть синтезировано стереоспецифическими методами получения. В указанных методах преимущественно могут быть использованы энантиомерно чистые исходные вещества.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (Ι) или любых его подгрупп, как определено в описании, и фармацевтически приемлемый носитель. Терапевтически эффективное количество в данном контексте означает количество, достаточное для профилактического действия, стабилизации или

- 21 019008 уменьшения вирусной инфекции и, в частности, вирусной инфекции НСУ, у инфицированных субъектов или субъектов, подверженных риску инфицирования. В другом аспекте данное изобретение относится к способу получения фармацевтической композиции, как указано в описании, который включает равномерное смешивание фармацевтически приемлемого носителя с терапевтически эффективным количеством соединения формулы (I) или любых его подгрупп, как указано в описании.

В связи с этим согласно варианту осуществления настоящего изобретения соединения формулы (I) или любая их подгруппа могут быть получены в виде различных фармацевтических форм для введения. Понятно, что все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств, включены как подходящие композиции. Для получения фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению эффективное количество отдельного соединения, необязательно в солевой форме или в виде металлокомплекса, в качестве активного ингредиента смешивают в виде однородной смеси с фармацевтически приемлемым носителем, где носитель может иметь различные формы в зависимости от формы препарата, желаемой для введения. Указанные фармацевтические композиции желательно получить в единичной дозированной форме, в особенности, для введения перорально, ректально, чрескожно или путем парентеральной инъекции. Например, при получении композиций в пероральной дозированной форме любые из обычных фармацевтических сред могут быть использованы, такие как, например, вода, гликоли, масла, спирты и т.п. в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, лубриканты, связующие вещества, дезинтегрирующие средства и т.п.в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Благодаря легкости их введения таблетки и капсулы представляют наиболее благоприятные пероральные единичные дозированные формы, в случае которых с очевидностью используют твердые фармацевтические носители. Для парентеральных композиций носитель, как правило, будет включать стерилизованную воду, по меньшей мере, в значительной степени, хотя другие ингредиенты, например те, которые способствуют растворимости, могут быть включены в состав. Например, могут быть получены растворы для инъекций, в которых носитель включает физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Также могут быть получены суспензии для инъекций, в случае которых можно использовать подходящие жидкие носители, суспендирующие средства и тому подобное. Также включены препараты в твердом виде, которые предназначены для преобразования, незадолго до применения, в жидкие препараты. В композициях, подходящих для чрескожного введения, носитель необязательно включает средство, усиливающее проницаемость, и/или подходящее смачивающее средство, необязательно в сочетании с подходящими вспомогательными добавками любой природы в небольших долях, где указанные добавки не оказывают существенного вредного воздействия на кожу.

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть введены путем ингаляции или вдувания в ротовую полость посредством способов и препаратов, используемых в данной области для введения таким путем. Таким образом, в целом, соединения согласно настоящему изобретению могут быть введены в легкие в виде раствора, суспензии или сухого порошка, раствор является предпочтительным. Любая система, разработанная для доставки растворов, суспензий или сухих порошков посредством ингаляции или вдувания в ротовую полость, является подходящей для введения данных соединений.

Таким образом, настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, приспособленной для введения путем ингаляции или вдувания через рот, включающей соединение формулы (I) или любые его подгруппы и фармацевтически приемлемый носитель. Предпочтительно соединения согласно настоящему изобретению вводят путем ингаляции раствора в дозах, распыляемых посредством небулайзера или аэрозольного баллона.

Наиболее предпочтительно получать описанные выше фармацевтические композиции в единичной дозированной форме для легкости введения и однородности дозировки. Единичная дозированная форма, используемая в изобретении, относится к физически дискретным единицам, подходящим в виде единичных доз, где каждая единица содержит предопределенное количество активного ингредиента, рассчитанное для оказания желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных дозированных форм являются таблетки (включающие таблетки с насечкой или покрытые оболочкой), капсулы, пилюли, суппозитории, пакетики с порошками, облатки, растворы или суспензии для инъекций и т.п., и отдельное их множество.

Соединения формулы (I) и любая их подгруппа проявляют противовирусные свойства. Вирусные инфекции и связанные с ними заболевания, подвергаемые лечению при использовании соединений и способов согласно настоящему изобретению, включают такие инфекции, вызванные НСУ и другими патогенными флавивирусами, такими как желтая лихорадка, лихорадка денге (типы 1-4), энцефалит СентЛуиса, японский энцефалит, энцефалит долины Муррея, вирус Западного Нила и вирус Кунжин. Заболевания, связанные с НСУ, включают прогрессирующий фиброз печени, воспаление и некроз, приводящие к циррозу, конечной стадии заболевания печени, и НСС, а для других патогенных флавивирусов состояния включают желтую лихорадку, лихорадку денге, геморрагическую лихорадку и энцефалит.

Однако соединения согласно изобретению также могут привлечь внимание благодаря тому факту, что они не проявляют активность против других вирусов, в частности против ВИЧ. ВИЧ

- 22 019008 инфицированные больные часто страдают от сопутствующих инфекций, таких как НСУ. Лечение таких больных ингибитором НСУ, который также ингибирует ВИЧ, может привести к появлению устойчивых штаммов ВИЧ.

Благодаря их противовирусным свойствам, особенно их действию против вируса НСУ, соединения формулы (I) или любая их подгруппа, включая их стереохимически изомерные формы и их Ν-оксиды, четвертичные амины, металлокомплексы, соли, гидраты и сольваты, являются пригодными в лечении индивидуумов, испытывающих вирусную инфекцию, особенно инфекцию НСУ, и для профилактики таких инфекций. В целом, соединения согласно настоящему изобретению могут быть пригодны в лечении теплокровных животных, зараженных вирусами, в частности флавивирусами, такими как НСУ.

Следовательно, соединения согласно настоящему изобретению или любая их подгруппа могут быть применены в качестве лекарственных средств. Указанное применение в качестве лекарственного средства или способа лечения включает системное введение инфицированным вирусом субъектам или субъектам, чувствительным к вирусным инфекциям, эффективного количества для лечения состояний, связанных с вирусной инфекцией, в частности инфекцией НСУ.

Настоящее изобретение также относится к применению данных соединений или любой их подгруппы в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения вирусных инфекций, особенно инфекции НСУ.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения теплокровного животного, зараженного вирусом, или подверженного риску заражения вирусом, в частности вирусом НСУ, где указанный способ включает введение эффективного против вируса количества соединения формулы (I) или любых его подгрупп, как определено в описании.

Настоящее изобретение также относится к комбинации соединения формулы (I) или любой его подгруппы, как определено в описании, с другими средствами против НСУ. В варианте осуществления изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или любой его подгруппы по меньшей мере с одним средством против НСУ. В частном варианте осуществления изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или любой его подгруппы по меньшей мере с двумя средствами против НСУ. В частном варианте осуществления изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или любой его подгруппы по меньшей мере с тремя средствами против НСУ. В частном варианте осуществления изобретение относится к комбинации соединения формулы (I) или любой его подгруппы по меньшей мере с четырьмя средствами против НСУ.

Комбинация ранее известного соединения против НСУ, такого как интерферон-α (ΓΡΝ-α), пэгилированный интерферон-α, рибавирин или их комбинация, и соединения формулы (I) или любой его подгруппы может быть применена в качестве лекарственного средства в комбинированной терапии. В варианте осуществления изобретения комбинированная терапия относится к продукту, содержащему обязательно (а) соединение формулы (I) и (Ь) по меньшей мере одно другое соединение против вируса НСУ, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении инфекций НСУ, в частности в лечении инфекций вирусом НСУ.

Соединения против вируса НСУ охватывают средства, выбранные из ингибиторов полимеразы НСУ, К-7128, МК-0608, УСН759, РБ-868554, 689190, ΝΜ283, валопицитабина, Ρ8Σ-6130, ХТЬ-2125, ΝΜ-107, К7128 (К4048), 68К625433, К803, К-1626, ЫЬВ-1941, НСУ-796, ЛК-109 и ЛК-003, ΑΝΑ-598, ШХ-184, МК-3281, МК-1220, производных бензимидазола, производных бензо-1,2,4-тиадиазина, производных фенилаланина, А-831 и А-689; ингибиторов протеаз НСУ (Ν82-Ν83 и Ν83-Ν84Α), соединений, описанных в международной публикации νΟ 02/18369 (см., например, с. 273, строчки 9-22 и от с. 274, строчка 4 до с. 276, строчка 11), ΒΣ-1335, ТМС435350, МК7009, ΕΓΜΝ-191, ВШК-2061, УХ-950, ВШЫ2065, ΒΜ8-605339, УХ-500, 8СН 503034; ингибиторов других мишеней в жизненном цикле НСУ, включающих ингибиторы хеликазы и металлопротеиназы, ^^-14803; иммуномодуляторов, таких как α-, β- и γ-интерфероны, такие как ΗΡΝ-α2Κ НЖ-аЛЬа. консенсус ШЫ-а (инферген), ферон, реаферон, интермакс α, ΗΡΝ-β, инферген + актиммун, ШИ-омега с ΌυΚΟ8, албуферон, локтерон, ребиф, пероральный ШИ-а, ΣΕΝ-α 2Ь ХЬ, АУ1-005, пэгилированный-инферген, пэгилированные производные соединения интерферона-α, такие как пэгилированный ΗΡΝ-α 2Ь, пэгилированный ΗΡΝ-α 2а, пэгилированный [ΕΝ-β, соединения, которые стимулируют синтез интерферона в клетках, интерлейкины, агонисты Толл-подобных рецепторов (ЛК), соединения, которые усиливают развитие ответа Т-хелперов 1 типа, и тимозин; других противовирусных средств, таких как рибавирин, аналоги рибавирина, такие как ребетол, копегус и вирамидин (тарибавирин), амантадин и телбивудин, ингибиторов внутренней посадки рибосомы, ингибиторов альфа-глюкозидазы 1, таких как МХ-3253 (целгосивир) и ИТ-231В, гепатопротекторов, таких как [^N-6556. ΜΕ-3738, ЬВ-84451 и ΜίΙοΟ, ингибиторов вирусов широкого спектра, таких как ингибиторы IΜΡ^Н (например, соединения документов И8 5807876, И8 6498178, И8 6344465, И8 6054472, международных публикаций νΟ 97/40028, νΟ 98/40381, νΟ 00/56331, микофеноловая кислота и ее производные, и включающие, но не ограничивающиеся ими, УХ-497, УХ-148, и/или УХ-944); и других лекарственных средств для лечения НСУ, таких как задаксин, нитазоксадин, ΒIVN-401 (виростат), ΡΥΝ-17 (алтирекс), КРЕ02003002, актилон (СР6-10101), ККХ-7000, сКаси, 6Р5005, ΑΝΑ-975, ХТЬ-6865, ΑΝΑ

- 23 019008

971, ΝΟν-205, 1агуасш, ΕΗΟ-18, ММ811, ПЕВЮ-025, νθΧ-410Ο, ΕΜΖ-702, Αν 4065, бавитуксимаб и оглуфанид; или комбинаций любых из описанных выше соединений.

Таким образом, для борьбы с инфекциями НСV или для лечения инфекций НСV соединения формулы (I) или любые их подгруппы могут быть введены совместно в комбинации, например, с интерфероном-α (ΕΕΝ-α), пэгилированным интерфероном-α, рибавирином или с их комбинацией, а также терапевтическими средствами, основанными на антителах, таргетированных против эпитопов НСV, короткой интерферирующей РНК (81 ΡΝΑ), рибозимов, ДНКзимов, антисмысловой РНК, низкомолекулярных антагонистов, например, протеазы N83, хеликазы N83 и полимеразы Ν85Β.

Комбинации согласно настоящему изобретению могут быть применены в качестве лекарственных средств. В связи с этим, настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) или любой его подгруппы, как определено выше, для производства лекарственного средства, пригодного для ингибирования активности НСV у млекопитающего, инфицированного вирусами НСV, где указанное лекарственное средство применяют в комбинированной терапии, где указанная комбинированная терапия предпочтительно включает соединение формулы (I) и по меньшей мере одно другое соединение, ингибирующее НСV, например ΣΕΝ-α, пэгилированный ΕΕΝ-α, рибавирин или их комбинацию.

Кроме того, известно, что большой процент больных, инфицированных вирусом 1 иммунодефицита человека (ВИЧ), также инфицированы ΗΟν, т.е. они являются соинфицированными вирусами ΗΟν/ВИЧ. Инфекция ВИЧ, по-видимому, неблагоприятно воздействует на все стадии заражения НСV, приводя к повышенной персистенции вируса и ускоренному развитию связанного с ΗΟν заболевания печени. В свою очередь, инфекция НСV может воздействовать на лечение инфекции ВИЧ, увеличивая случаи печеночной токсичности, вызванной противовирусными лекарственными средствами.

Кроме того, настоящее изобретение относится к комбинациям соединения формулы (I) или любой его подгруппы со средствами против вируса ΗΟν. Также, комбинация одного или более дополнительных соединений против вируса ΗΟν и соединения формулы (I) или любых его подгрупп может быть применена в качестве лекарственного средства. В частности, указанная комбинация может быть использована для ингибирования репликации ΗΟν и ВИЧ.

Термин комбинированная терапия также охватывает продукт, содержащий (а) соединение формулы (I) или любую его подгруппу, (Ь) по меньшей мере одно соединение против вируса ΗΟν и (с) необязательно, по меньшей мере одно другое соединение против ΗΟν, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении инфекций ΗΟν и ВИЧ, в частности в лечении инфекций ΗΟν и ВИЧ, или для предотвращения или лечения состояний, связанных с вирусами ΗΟν и ВИЧ.

Таким образом, настоящее изобретение относится к продукту, содержащему (а) соединение формулы (I) или любую его подгруппу и (Ь) одно или более дополнительные соединения, проявляющие активность против вируса ВИЧ, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении инфекций ΗΟν и ВИЧ. Различные лекарственные средства могут быть комбинированы в одном препарате вместе с фармацевтически приемлемыми носителями. Указанные соединения, проявляющие активность против ВИЧ, могут быть любыми известными антиретровирусными соединениями, такими как сурамин, пентамидин, тимопентин, кастаноспермин, декстран (сульфат декстрана), фоскарнет натрия (тринатрия фосфоноформиат); нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (ИКИ), например, зидовудин (ΑΖΤ), диданозин (6Л), залцитабин (άάΟ), ламивудин (3ТС), ставудин (ά4Τ), эмтрицитабин (ΕΤΟ), абакавир (ΑΒΟ), амдоксовир (ΌΑΡΌ), элвуцитабин (АСН-126443), ΑνΧ 754 ((-)-άΟΤΟ), фозивудина тидоксил (ΕΖΤ), фосфазид, ΗΌΡ-990003, ΚΡ-1461, Μν210, рацивир (Ρ8Κ5004), ϋΟ-781 и т.п.; ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (ΝΝΡΤΗ), такие как делавирдин (ΌΕν), эфавиренз (ΕΕν), невирапин (ΝνΡ), дапивирин (ТМС 120), этравирин (ТМС 125), рилпивирин (ТМС278), ΌΡΟ-082, (+)-каланолид Α, В[ЕК-355 и т.п.; нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы (ΝίΒΉ), например терофовир ((К)-РМРА) и тенофовир дисопроксил фумарат (ΤΌΕ) и т.п.; конкурирующие с нуклеотидом ингибиторы обратной транскриптазы (ΝΒΤΊ), например, NсКΤI-I и т.п.; ингибиторы транс-действующих белков, такие как ТАТ-ингибиторы, например, КО5-3335, ВЕ201 и т.п.; ингибиторы ΡΕν; ингибиторы протеаз, например, ритонавир (ΕΤν), саквинавир (8ρν), лопинавир (АВТ-378 или ΕΡν), индинавир (ГО^, ампренавир (νΧ-478), ТМС 126, нелфинавир (Α6-1343), атазанавир (ВМ8 232,632), дирунавир (ΤΜΟ1 14), фосампренавир (6\У433908 или νΧ-175), бреканавир (6^-640385, νΧ-385), Р-1946, РЬ-337, РЬ-100, типранавир (ΡΝυ-140690), Α6-1859, Α61776, Ко-0334649 и т.п.; ингибиторы входа, которые включают слитые ингибиторы (например, энфувирдит (Т-20)), ингибиторы присоединения и ингибиторы корецепторов, последние включают антагонисты ΟΟΒ5 (например, анкривирок, ΟΟК5тΑЬ004, маравирок (υΚ-427,857), РКО-140, ТАК-220, ТАК-652, викривирок (8ΟΗ-Ό, 8ΟΗ-417,690)) и антагонисты ΟΧΒ4 (например, ΑΜΌ-070, ΚΒΗ-27315), примерами ингибиторов входа являются РКО-542, ΤΝΧ-355, ВМ8-488043, Β^ΕΑ^ο/Ο^^ ΕΡ 21399, 11ΝΜΟ1, нонакин, νΟν-Ε; ингибитором созревания является, например, РА-457; ингибиторы вирусной интегразы, например, ралтегравир (МК-0518), элвитегравир (ΣΤΚ-303, 68-9137), ВМ8-538158; рибозимы; иммуномодуляторы; моноклональные антитела; генная терапия; вакцины; 81ΡΗΚ; антисмысловые РНК; бактерици

- 24 019008 ды; ингибиторы цинковых пальцев.

Следовательно, НСУ-инфицированные больные, также страдающие от состояний, связанных с ВИЧ или даже другими патогенными ретровирусами, такими как ΑΙΌ8, ΑΙΌδ-родственный комплекс (ЛВС), прогрессирующей генерализованной лимфаденопатии (РСЬ), а также хроническими заболеваниями СИ8, вызванными ретровирусами, такими как, например, опосредованная ВИЧ деменция и рассеянный склероз, могут успешно подвергаться лечению настоящими соединениями.

Композиции могут быть получены в подходящих фармацевтических дозированных формах, таких как дозированные формы, описанные выше. Любой из активных ингредиентов может быть получен отдельно, и препараты могут быть введены совместно, или один препарат, содержащий к тому же, если желательно, другие активные ингредиенты, может быть предоставлен.

Как используют в описании, термин композиция предназначен охватить продукт, содержащий определенные ингредиенты, а также любой продукт, который получен, прямо или косвенно, путем комбинирования определенных ингредиентов.

Термин терапевтически эффективное количество, как он использован в описании, означает такое количество активного соединения или компонента или фармацевтического средства, которое вызывает биологический или медицинский ответ в ткани, системе, включающий ослабление симптомов заболевания, у подвергаемого лечению животного или человека, которого добивается, в свете настоящего изобретения, исследователь, ветеринар, лечащий врач или другой клиницист. Поскольку настоящее изобретение также относится к комбинациям, содержащим два или более средства, терапевтически эффективное количество в контексте комбинаций также означает такое количество средств, вместе взятых, комбинированное действие которых вызывает желаемый биологический или медицинский ответ. Например, терапевтически эффективное количество композиции, содержащей (а) соединение формулы (Ι) и (Ь) другое средство, проявляющее активность против НСУ, должно быть количеством соединения формулы (Ι) и количеством другого средства, проявляющего активность против НСУ, которое, когда взято вместе, имеет комбинированное действие, являющееся терапевтически эффективным.

В целом, подразумевается, что противовирусное эффективное суточное количество будет составлять от 0,01 до 500 мг/кг веса тела, более предпочтительно от 0,1 до 50 мг/кг веса тела. Может оказаться удобным вводить требуемую дозу в виде двух, трех, четырех или более субдоз с подходящими интервалами в течение дня. Указанные субдозы могут быть получены в виде единичных дозированных форм, например, содержащих от 1 до 1000 мг и, в частности, от 5 до 200 мг активного ингредиента на единичную дозированную форму.

Точная дозировка и частота введения зависят от конкретного используемого соединения формулы (Ι), конкретного состояния, подвергаемого лечению, тяжести состояния, подвергаемого лечению, возраста, веса, пола, степени нарушения и общего физического состояния отдельного больного, а также другого лекарственного средства, которое может принимать индивидуум, что хорошо известно специалистам в данной области. Кроме того, очевидно, что указанное эффективное суточное количество может быть снижено или повышено в зависимости от ответной реакции субъекта, подвергаемого лечению, и/или в зависимости от оценки врача, предписывающего соединения согласно настоящему изобретению. Отмеченные выше диапазоны эффективного суточного количества, следовательно, являются только руководящими указаниями.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения, изобретение предоставляет изделие, содержащее композицию, проявляющую эффективность в лечении инфекции НСУ или в ингибировании полимеразы Ν85Β вируса НСУ; и упаковочный материал, включающий этикетку, на которой указано, что композиция может быть использована для лечения инфицирования вирусом гепатита С, где композиция содержит соединение формулы (Ι) или любую его подгруппу или комбинацию, описанную выше.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к набору или контейнеру, содержащему соединение формулы (Ι) или любую его подгруппу в количестве, эффективном для использования в качестве стандарта или средства в тесте или анализе для определения способности возможных фармацевтических препаратов ингибировать полимеразу Ν85Β вируса НСУ, рост НСУ или и то и другое. Данный аспект изобретения может найти свое применение в фармацевтических исследовательских программах.

Соединения и комбинации согласно настоящему изобретению могут быть использованы в высокопроизводительных анализах мишеней, таких как исследования, направленные на измерения эффективности указанной комбинации в лечении инфекции НСУ.

- 25 019008

Примеры

Следующие примеры предназначены иллюстрировать настоящее изобретение и не ограничивать его. Если не указано иное, очистку синтезированных соединений колоночной хроматографией или флэшхроматографией осуществляли на колонке с силикагелем.

Пример 1. Синтез соединения 1.

Стадия 1.

1а 1Ь

Раствор ΝαΟΗ (6,38 г) в 25 мл воды добавляли к перемешиваемому раствору 1а (10-трет-бутил 6метил 13 -циклогексил-3 -метокси-7Н-индоло [2,1 -а] [2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата, синтезированного, как описано в заявке США 2007270406 А1, в ТГФ (100 мл) и МеОН (150 мл). Через 1 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, затем разбавляли охлажденной льдом водой (150 мл). рН полученного раствора доводили до рН 6 уксусной кислотой (АсОН). Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и сушили в вакууме с получением 1,90 г (98%) 1Ь в виде желтоватого порошка: т/ζ = 488 (М+Н)⁺.

Стадия 2.

1Ь 1с

НАТи (1,17 г, 3,08 ммоль) добавляли в атмосфере азота к перемешиваемому раствору 1Ь (1,00 г, 2,05 ммоль), ОШЕА (1,07 мл, 6,15 ммоль) и 2,2'-окси-бис-(№метилэтанамина) (1,08 г, 8,20 ммоль) в 30 мл сухого ТГФ. Через 1 ч реакцию гасили водой (100 мл) и реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (ЕЮАс). Органический слой последовательно сушили (Να₂8Ο₄), фильтровали и упаривали. Остаток растирали в воде, фильтровали и сушили с получением 1,15 г (93%) конечного соединения 1с в виде желтоватого порошка: т/ζ = 602 (М+Н)⁺.

Стадия 3.

1с 1(1

Раствор 1с (1,15 г, 1,91 ммоль) и сульфамида (1,84 г, 19,1 ммоль) в диоксане (10 мл) нагревали при 100° в СВЧ-печи в течение 20 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем

- 26 019008 упаривали в вакууме. Остаток растирали в воде, фильтровали и промывали водой. Порошок реконструировали в ЕЮЛс, сушили (Ыа₂8О₄) и упаривали с получением 1,15 г (88%) желаемого продукта 1ά в виде желтоватого порошка: т/ζ = 681 (М+Н)⁺.

Стадия 4.

1<1 1е

ТФУ (3,0 г, 26,3 ммоль) добавляли к раствору 1ά (1,15 г, 1,70 ммоль) в дихлорметане (3 мл). Через 1 ч реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток растирали в эфире, фильтровали и промывали эфиром, затем очищали хроматографией (градиент от ЕЮЛс до ЕЮЛс/ЕЮН, 9:1) с получением 802 мг (76%) желаемого продукта 1е: т/ζ = 625 (М+Н)⁺.

Стадия 5.

1е И

Карбонилдиимидазол (389 мг, 2,40 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 1е (500 мг, 0,80 ммоль) в сухом ТГФ (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч: полное превращение в промежуточное соединение 1£ наблюдали. Полученный раствор упаривали, затем остаток очищали флэш-хроматографией (градиент от ЕЮЛс до СН₃СЫ от 1:0 до 0:1) с получением 550 мг конечного продукта 1£, который использовали как таковой на следующей стадии: т/ζ = 675 (М+Н)⁺.

Стадия 6.

ΌΒυ (244 мг, 0,32 ммоль) добавляли к раствору 1£ (550 мг) в ацетонитриле (25 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в воде (30 мл) и рН полученного раствора доводили до 5. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и сушили. Перекристаллизацией из этанола с последующей очисткой колоночной хроматографией (градиент от ЕЮЛс до ЕЮЛс/ЕЮН 9:1) получали 380 мг (78%) указанного в заголовке продукта 1 в виде белого порошка: т/ζ = 607 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (ДМСО-а₆) δ 1,15 (м, 1Н), 1,40 (м, 3Н), 1,71 (м, 2Н), 1,88 (м, 1Н), 2,01 (м, 3Н), 2,56 (м, 3Н), 2,77 (м, 1Н), 2,99 (с, 3Н), 3,26 (м, 2Н), 3,50-3,71 (м, 6Н), 3,87 (с, 3Н), 4,44 (д, 1=14,1 Гц, 1Н), 5,09 (д, 1=15,0 Гц, 1Н), 6,95 (с, 1Н), 7,13 (с, 1Н), 7,19 (д, 1=8,6 Гц, 1Н), 7,47 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,54 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,88

- 27 019008 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,33 (с, 1Н), 11,40 (с, 1Н).

Пример 2. Синтез соединения 2.

виРаствор 1 (56 мг, 0,092 ммоль) в МеОН (15 мл) и ТГФ (5 мл) подвергали гидрированию в аппарате Н-сиЬе, используя 10% Рб на углеродном картридже. Затем, растворитель упаривали и остаток очищали колоночной хроматографией (СН₂С1₂/СН₃СЫ, 9:1) с получением 23 мг (41%) желаемого продукта 2 в де белого порошка: т/ζ = 609 (М+Н)⁺.

Примеры 3 и 4. Синтез соединений 3 и 4.

Рацемическую смесь 2 очищали хроматографией 8РС в течение 6,5 мин, используя хиральную колонку СШКЛЬСЕЬ ΘΌ-Н (250x10 мм, с покрытием на 5-мкм силикагеле) и 55% метанол/45% СО₂ в качестве подвижной фазы, при скорости потока 10 мл/мин и получали два чистых энантиомера 3 и 4. При данных условиях время удерживания составляло 4,25 и 5,54 мин.

Пример 5. Синтез соединения 5.

Стадия 1.

Соединение 5а синтезировали с 96% выходом из промежуточного соединения 1Ь и 2-[4-(третбутилоксикарбонил)пиперазин-1-ил]этиламина способом, описанным для синтеза промежуточного соединения 1с: т/ζ = 699 (М+Н)⁺.

- 28 019008

Стадия 2.

Трифторуксусную кислоту (5,00 г, 43,9 ммоль) добавляли к 740 мг промежуточного соединения 5а. Через 1 ч при комнатной температуре растворитель упаривали. Остаток растирали в ΕΐΟΗ/Εΐ₂Ο, фильтровали и сушили в высоком вакууме с получением 380 мг (64%) желаемого продукта 5Ь в виде желтоватого порошка: т/ζ = 543 (Μ+Η)⁺.

Стадия 3.

5Ь 5с

Раствор 5Ь (380 мг, 0,700 ммоль) и сульфамида (673 мг, 7,00 ммоль) в диоксане (10 мл) нагревали при 100°С в СВЧ-печи в течение 15 мин. Затем, реакционную смесь последовательно охлаждали при комнатной температуре, концентрировали в вакууме, растирали в воде и фильтровали. Очистка колоночной хроматографией (градиент ЕЮАс/СН₂С1₂ от 1:1 до 1:0) привела к 210 мг (46%) желаемого продукта 5с: т/ζ = 622 (М+Н)⁺.

Указанный в заголовке продукт 5ά синтезировали с 11% выходом способом (стадии 5 и 6), описанным для синтеза соединения 1, с последующей перекристаллизацией из этанола с получением желаемого продукта в виде белого порошка, т/ζ = 604 (М+Н)⁺.

Пример 6. Синтез соединения 6.

- 29 019008

Стадия 1.

6а 6Ь

К раствору Н-(2-аминоэтил)-Н-метилэтан-1.2-диамина (10,58 г, 90 ммоль) в ЭСМ (350 мл) медленно добавляли раствор 2-нитробензол-1-сульфонилхлорида, растворенного в ЭСМ (50 мл). Через 2 ч при кт реакционную смесь (рс) промывали водой, сушили над Мд§0₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле в градиенте метанола в ЭСМ (от 0 до 10%) с получением 6,9 г №(2-((2-аминоэтил)(метил)амино)этил)-2-нитробензолсульфонамида 6а и 3,9 г N,N'-(2,2'(метилазанедиил)-бис-(этан-2,1-диил))-бис-(2-нитробензолсульфонамида) 6Ь; т/ζ = (6а) = 303 (М+Н)⁺, т/ζ = (6Ь) = 488 (М+Н)⁺.

К раствору карбоновой кислоты 1Ь (500 мг, 1,025 ммоль), НАТИ (585 мг, 1,5 экв.) и диизопропилэтиламина (212 мг, 1,6 экв.) в сухом ДМФ (10 мл) добавляли №(2-((2-аминоэтил)(метил)амино)этил)-2нитробензолсульфонамид 6а (341 мг, 1,1 экв.). Через 30 мин при кт рс разбавляли водой.

Желтый осадок отфильтровывали и промывали водой. Затем, его реконструировали в ЕЮАс, сушили над Мд§0₄, фильтровали, концентрировали и сушили в вакууме с получением 800 мг желаемого продукта трет-бутилового эфира 13-циклогексил-3-метокси-6-(2-{метил-[2-(2-нитробензолсульфониламино)этил]амино}этилкарбамоил)-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2-а]индол-10-карбоновой кислоты 6с в виде желтого порошка; т/ζ = 772 (М+Н)⁺.

Стадия 3.

К раствору трет-бутилового эфира 13-циклогексил-3-метокси-6-(2-{метил-[2-(2нитробензолсульфониламино)этил]амино}этилкарбамоил)-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2-а]индол-10карбоновой кислоты 6с (650 мг, 0,842 ммоль) и карбоната цезия (1,646 г, 6 экв.) в сухом ДМФ (10 мл) медленно добавляли раствор метилйодида (122 мг, 1,02 ммоль) в сухом ДМФ (2 мл). После перемешивания в течение 1 ч при кт рс разбавляли водой и экстрагировали ЕЮАс. Затем, органический слой промывали водой, сушили над Мд§0₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией на силикагеле, используя градиент ЕЮАс в ЭСМ (от 0 до 100%), с получением 550 мг (83% выход) желаемого продукта трет-бутилового эфира 13-циклогексил-3-метокси-6-[2-(метил-{2[метил-(2-нитробензолсульфонил)амино]этил}амино)этилкарбамоил]-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2-а]индол10-карбоновой кислоты 6ά в виде твердого вещества желтого цвета; т/ζ = 786 (М+Н)⁺.

- 30 019008

нитробензолсульфонил)амино]этил}амино)этилкарбамоил]-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2-а]индол-10карбоновой кислоты 6й (380 мг, 0,483 ммоль), карбоната цезия (315 мг, 2 экв.) и тиофенола (107 мг, 2 экв.) в ДМФ (5 мл) перемешивали при кт в течение ночи. Затем, карбонат цезия (315 мг, 2 экв.) и тиофенол (107 мг, 2 экв.) добавляли в рс и рс перемешивали в течение 1ч. По окончании реакции рс фильтровали и помещали на фильтрующий элемент, содержащий 8СХ-смолу, предварительно промывали ЭСМ. После промывки фильтрующего элемента ЭСМ (несколько раз до получения бесцветной фракции) продукт элюировали ΝΗ₃ в МеОН с получением 240 мг желаемого продукта трет-бутилового эфира 13циклогексил-3-метокси-6-{2-[метил-(2-метиламиноэтил)амино]этилкарбамоил}-7Нбензо[3,4]азепино[1,2-а]индол-10-карбоновой кислоты 6е, который затем очищали препаративной ВЭЖХ; т/ζ = 601 (М+Н)⁺.

Стадия 5.

Синтез продукта 6£ осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1й, используя промежуточное соединение 6е вместо промежуточного соединения 1с, с получением 200 мг (50%) конечного продукта; т/ζ = 680 (М+Н)⁺.

Стадия 6.

Синтез продукта 6д осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1е, используя промежуточное соединение 6£ вместо промежуточного соединения 1й, с получением 187 мг (количественный выход) конечного продукта; т/ζ = 624 (М+Н)⁺.

Синтез продукта 6 осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1, используя промежуточное соединение 6д вместо промежуточного соединения 1е, с получением 43 мг (22% выход) конечного продукта; т/ζ = 606 (М+Н)⁺.

- 31 019008

Стадия 1.

6Ь 7а

К раствору ^№-(2,2'-(метилазанедиил)-бис-(этан-2,1-диил))-бис-(2-нитробензолсульфонамида) 6Ь (3 г, 6,15 ммоль) в сухом ДМФ (50 мл) добавляли порциями гидрид натрия (738 мг, 3 экв., 60% в минеральном масле) при 0°С. Через 20 мин раствор метилйодида, растворенного в сухом ДМФ (5 мл), медленно добавляли к реакционной смеси. После перемешивания в течение 1 ч при кт реакцию гасили водой и реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс. Органический слой промывали водой, сушили над Μ§8Ο₄, фильтровали и концентрировали. Очисткой флэш-хроматографией в градиенте ЕЮАс в ΌίΜ (от 20 до 80%) получали 1,94 г (61%) желаемого продукта ^№-(2,2'-(метилазанедиил)-бис-(этан-2,1-диил))-бис(№метил-2-нитробензолсульфонамида) 7а; т/ζ = 516 (М+Н)⁺.

Стадия 2.

7а 7Ь

Смесь ^№-(2,2'-(метилазанедиил)-бис-(этан-2,1-диил))-бис-^-метил-2-нитробензолсульфонамида) 7а (1,24 г, 2,405 ммоль), карбоната цезия (2,35 г, 3 экв.) и тиофенола (795 мг, 3 экв.) в ДМФ (25 мл) перемешивали при кт в течение 1 ч. По окончании реакции рс фильтровали и помещали на фильтрующий элемент МР-ТзОН, предварительно промытый ΌίΜ. После промывания фильтрующего элемента ΌίΜ (несколько раз до получения бесцветной фракции) продукт элюировали ΝΗ₃ в МеОН с получением 220 мг (63%) ^№-диметил-^-(2-(метиламино)этил)этан-1,2-диамина 7Ь, который непосредственно использовали на следующей стадии; т/ζ = 146 (М+Н)⁺.

Синтез трет-бутилового эфира 13-циклогексил-3-метокси-6-(метил{2-[метил-(2метиламиноэтил)амино]этил}карбамоил)-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2-а]индол-10-карбоновой кислоты 7с осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1с, используя ^^₂-диметил-^-(2(метиламино)этил)этан-1,2-диамин 7Ь вместо метил[2-(2-метиламиноэтокси)этил]амина. После очистки флэш-хроматографией в градиенте аммиака в метаноле 7М в ЕЮАс (от 5 до 15%), 100 мг желаемого продукта 7с получали в виде желтого масла; т/ζ = 615 (М+Н)⁺.

- 32 019008

Синтез 7ά осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1ά, используя третбутиловый эфир 13-циклогексил-3-метокси-6-(метил-{2-[метил-(2-метиламиноэтил)амино]этил}карбамоил)-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2-а]индол-10-карбоновой кислоты 7с вместо трет-бутилового эфира 13-циклогексил-3-метокси-6-{метил-[2-(2-метиламиноэтокси)этил]карбамоил}-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2а]индол-10-карбоновой кислоты 1с. После очистки флэш-хроматографией в градиенте метанола в Е1ОЛс (от 0 до 10%) получали 50 мг желаемого продукта 7ά; т/ζ = 694 (М+Н)⁺.

Стадия 5.

Синтез 7е осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1е, используя промежуточное соединение 7ά вместо промежуточного соединения 1ά; т/ζ = 638 (М+Н)⁺.

Стадия 6.

Синтез продукта 7 осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1, используя промежуточное соединение 7е вместо промежуточного соединения 1е.

Пример 8. Синтез соединения 8.

Стадия 1.

осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1Ь, используя метиловый 1а. Желаемый продукт 8Ь получали с выходом 95% в виде светло-желтого твердого веСинтез 8Ь эфир 8а вместо щества; т/ζ = 502 (М+Н)⁺.

- 33 019008

Стадия 2.

При 0°С и в защитной атмосфере оксалилхлорид (4,07 мл, 47,4 ммоль) добавляли к раствору карбоновой кислоты 8Ь (19,83 г, 39,5 ммоль) и ДМФ (5 капель) в тетрагидрофуране (сухой) (100 мл). При добавлении оксалилхлорида наблюдали немедленное образование газа. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч. Затем добавляли дополнительное количество 0,5 экв. оксалилхлорида и реакционную смесь перемешивали в течение более 1 ч (повторяли один раз до полного превращения). Далее реакционную смесь упаривали досуха в вакууме с получением 20,5 г (97%) хлорангидрида 8с в виде белого твердого вещества; т/ζ = (метиловый эфир, образованный путем добавления метанола до анализа) = 516 (М+Н)⁺.

Стадия 3.

8с 8<1 8е

К раствору (8)-4-бензил-2-оксазолидинона (7,50 г, 42,3 ммоль) в тетрагидрофуране (сухой) (60 мл) в атмосфере азота медленно добавляли н-бутиллитий (26,4 мл, 42,3 ммоль) при -78°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 40 мин при -78°С. Через 40 мин раствор аниона добавляли через трубочку к раствору хлорангидрида 8с (20 г, 38,5 ммоль) в 60 мл ТГФ при -78°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при -78°С. По окончании реакции ее гасили раствором хлорида аммония при -70°С. Затем, реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и экстрагировали Е1ОАс, промывали насыщенным раствором соли и сушили над №ь8О₄. Органический слой фильтровали и концентрировали с получением 26,34 г желтого твердого вещества. Два энантиомера 8ά и 8е разделяли колоночной флэшхроматографией, используя смесь 5:1 гептан/Е1ОАс, с получением твердых веществ светло-желтого цвета; т/ζ = 661 (М+Н)⁺.

Стадия 4.

Диастереоизомер 8ά (11,17 г, 16,90 ммоль) вначале растворяли в ТГФ (130 мл), затем добавляли метанол (130 мл). Далее 1н. раствор №ОН (101 мл, 101 ммоль) медленно добавляли, так что температуру поддерживали ниже 30°. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. По окончании реакции 1н. раствор НС1 добавляли до достижения рН, составляющего рН 2. Затем, добавляли 500 мл Н₂О и реакционную смесь экстрагировали Е1ОАс, промывали насыщенным раствором соли и концентрировали. Очисткой колоночной флэш-хроматографией, используя смесь 1:1 гептан/Е1ОАс, получали 5,24 г (60%) желаемого энантиомера (4ЬК,5а8)-9-(трет-бутоксикарбонил)-12-циклогексил-3метокси-4Ь,5,5а,6-тетрагидробензо[3,4]циклопропа[5,6]азепино[1,2-а]индол-5а-карбоновой кислоты 8£ с э.и. (ее) (энантиомерный избыток) 97%; т/ζ = 502 (М+Н)⁺.

- 34 019008

Стадия 5.

8ί 8£

К перемешиваемому раствору промежуточного соединения 8£ (2 г, 3,99 ммоль) в сухом ДМФ (50 мл) при 0°С добавляли диизопропилэтиламин (ΌΙΕΑ, 1,54 г, 11,9 ммоль), НАТи (2,27 г, 5,98 ммоль) и 2,2'-окси-бис-(№метилэтанамин) (2,1 г, 15,95 ммоль). Образовавшуюся смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем оставляли при комнатной температуре в течение 12 ч. Затем, реакционную смесь по следовательно выливали в охлажденную льдом воду, экстрагировали дихлорметаном, сушили над Мд80₄, затем концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя градиент метанола в дихлорметане (от 0 до 10%), с получением 0,94 г (38% выход) желаемого продукта трет-бутил (1аК,12Ь8)-8-циклогексил-11-метокси-1а-(метил-{2-[2-(метиламино)этокси]этил}карбамоил)-1,1а,2,12Ьтетрагидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-5-карбоксилата 8д в виде белого твердого вещества; т/ζ = 616 (М+Н)⁺.

Стадия 6.

I

8з 8Ь

Синтез (1аК,12Ь8)-8-циклогексил-11-метокси-1а-(метил-{2-[2-(метиламино)этокси]этил}карбамоил)-1,1а,2,12Ь-тетрагидроциклопропа[б]индоло[2,1-а] [2]-бензазепин-5-карбоновой кислоты 811 осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 1е, используя промежуточное соединение 8д вместо 1ά. Затем, полученный остаток растворяли в ЭСМ. промывали водой, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали досуха с получением 0,474 г (56% выход) указанного в заголовке соединения 81; т/ζ = 560 (М+Н)⁺.

Стадия 7.

К раствору промежуточного соединения 81 (0,474 г, 0,847 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли сульфамид (0,814 г, 8,47 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 100°С в СВЧ-печи в течение 4 ч. Затем, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя градиент метанола в дихлорметане (от 0 до 10%), с получением 143 мг (26%) указанного а заголовке продукта (1аК,12Ь8)-1а-[(2-{2-[(аминосульфонил)(метил)амино]этокси}этил)(метил)карбамоил]-8-циклогексил-11-метокси-1,1а,2,12Ь-тетрагидроциклопропа[б]индоло[2,1-а]][2]бензазепин-5-карбоновой кислоты 8ί; т/ζ = 639 (М+Н)⁺.

- 35 019008

Стадия 8.

Синтез (1аК,12Ь8)-8-циклогексил-11-метокси-16,22-диметил-1,12Ь-дигидро-5,1а-(метаноиминотиоиминоэтанооксиэтаноиминометано)циклопропа[б] -индоло [2,1 -а]] [2]бензазепин-13,23(2Н)-диона 15,15диоксида 8 осуществляли, следуя 2-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 1, используя промежуточное соединение 81 вместо 1е, с получением 90 мг (52% выход) белого твердого порошка; т/ζ = 621 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ м.д. 1,3-1,5 (м, 3Н), 1,75-1,8 (м, 5Н), 1,85-2,05 (м, 6Н), 2,5-3 (м, 3Н), 3,2 (с, 3Н), 3,22 (с, 3Н), 3,4-3,7 (м, 6Н), 3,87 (с, 3Н), 3,75-3,9 (м, 1Н), 4,9-5,1 (м, 1Н), 6,95-7,16 (д, 1=8,39 Гц, 1Н), 7,28 (с, 1Н), 7,44-7,55 (м, 2Н), 7,80 (д, 1=8,39 Гц, 1Н), 9,4 (ушир.с, 1Н).

Пример 9. Синтез соединения 9.

Стадия 1.

8е 9а

Энантиомер (4Ь8,5аК)-9-(трет-бутоксикарбонил)-12-циклогексил-3-метокси-4Ь,5,5а,6тетрагидробензо[3,4]циклопропа[5,6]азепино[1,2-а]индол-5а-карбоновой кислоты 9а получали с выходом 27% и 96% э.и. способом, описанным для синтеза соединения 81, используя в качестве исходного материала диастереоизомер 8е вместо 8б; т/ζ = 502 (М+Н)⁺.

трет-Бутил (1а8,12ЬК)-8-циклогексил-11-метокси-1а-(метил-{2-[2-(метиламино)этокси]этил}карбамоил)-1,1а,2,12Ь-тетрагидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-5-карбоксилат 9Ь получали с 60% выходом из 9а и 2,2'-окси-бис-(Ы-метилэтанамина) способом, используемым для получения соединения 1с; т/ζ = 616 (М+Н)⁺.

- 36 019008

Стадия 3.

I

9Ь 9с

К раствору промежуточного соединения 9Ь (0,73 г, 1,185 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли сульфамид (1,4 г, 11,85 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 100°С в СВЧ-печи в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя градиент метанола в дихлорметане (от 0 до 10%), с получением 743 мг (80%) указанного в заголовке продукта трет-бутил (1а5,12ЬЯ)-1а-[(2-{2[(аминосульфонил)(метил)амино]этокси}этил)(метил)карбамоил]-8-циклогексил-11-метокси-1,1а,2,12Ьтетрагидроциклопропа[й] индоло [2,1 -а] [2] бензазепин-5 -карбоксилата 9с.

Стадия 4.

Синтез (1а8,12ЬЯ)-1а-[(2-{2-[(аминосульфонил)(метил)амино]этокси}этил)(метил)карбамоил]-8циклогексил-11-метокси-1,1а,2,12Ь-тетрагидроциклопропа[й]индоло[2,1-а][2]бензазепин-5-карбоновой кислоты 9ά осуществляли способом, описанным для получения соединения 1е, используя промежуточное соединение 9с вместо 1ά, с получением 517 мг (79% выход) коричневатой пены; т/ζ = 639 (М+Н)⁺.

Стадия 5.

Синтез (1а8,12ЬЯ)-8-циклогексил-11-метокси-16,22-диметил-1,12Ь-дигидро-5,1а-(метаноиминотиоиминоэтанооксиэтаноиминометано)циклопропа[а]индоло[2,1-а][2]бензазепин-13,23(2Н)-диона 15,15диоксида 9 осуществляли, следуя 2-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 1, используя промежуточное соединение 9ά вместо 1е, с получением 80 мг (16% выход) белого твердого вещества; т/ζ = 621 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-0) δ м.д. 1,3-1,5 (м, 3Н), 1,75-1,8 (м, 5Н), 1,85-2,05 (м, 6Н), 2,5-3 (м, 3Н), 3,2 (с, 3Н), 3,22 (с, 3Н), 3,4-3,7 (м, 6Н), 3,87 (с, 3Н), 3,75-3,9 (м, 1Н), 4,9-5,1 (м, 1Н), 6,95-7,16 (д, 1=8,39 Гц, 1Н), 7,28 (с, 1Н), 7,44-7,55 (м, 2Н), 7,80 (д, 1=8,39 Гц, 1Н), 9,4 (ушир.с, 1Н).

- 37 019008

Пример 10. Синтез соединения 10.

Стадия 1.

5-трет-бутил

К раствору

1а-метил 8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а,5(2Н)-дикарбоксилата 8а (2 г, 3,88 ммоль) в дихлорметане (25 мл) добавляли ТФУ (22,34 г, 194 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч, затем концентрировали досуха. Остаток последовательно растворяли в дихлорметане, промывали водой, сушили над Мд§0₄, фильтровали и концентрировали. Затем, остаток очищали колоночной хроматографией, используя дихлорметан и этилацетат в качестве элюента, с получением 1,7 г (95%) указанного в заголовке продукта 8-циклогексил-11-метокси-1а-(метоксикарбонил)-1,1а,2,12Ьтетрагидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-5-карбоновой кислоты 10а в виде белого порошка; т/ζ = 460 (М+Н)⁺.

Стадия 2.

1,1'-Карбонилдиимидазол (0,847 г, 5,22 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 8циклогексил-11-метокси-1а-(метоксикарбонил)-1,1а,2,12Ь-теграгидроциклопропа[й]-индоло[2,1а][2]бензазепин-5-карбоновой кислоты 10а (0,8 г, 1,74 ммоль) в ТГФ (15 мл) при 25°С. Выделение СО₂ было мгновенным, и когда оно замедлялось, раствор нагревали при 50°С в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. трет-Бутил{4-[(аминосульфонил)(метил)амино]бутил}карбамат 10Ь (0,735 г, 2,61 ммоль) добавляли с последующим добавлением ΌΒυ (0,53 г, 3,48 ммоль). Перемешивание продолжали в течение 12 ч при 50°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры, затем распределяли между дихлорметаном и водой. Водный слой экстрагировали дихлорметаном. Органические слои сушили над Мд§0₄, затем концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя дихлорметан и этилацетат, с получением 0,66 г (53%) указанного в заголовке продукта метил 5-({[{4-[(третбутоксикарбонил)амино]бутил}(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ьдигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а(2Н)-карбоксилата 10с в виде белой пены; т/ζ = 723 (М+Н)⁺.

К раствору промежуточного соединения 10с (0,65 г, 0,899 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли гидроксид лития (0,75 г, 1,8 ммоль), растворенный в воде (5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем разбавляли водой и нейтрализовали 2 М водным раствором

- 38 019008

НС1. Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном, сушили над Мд8О₄, затем концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя градиент метанола в СН₂С1₂, с получением 0,55 г (86%) указанного в заголовке продукта 5-({[{4-[(трет-бутоксикарбонил)амино]бутил}(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1а][2]бензазепин-1а(2Н)-карбоновой кислоты 10б в виде белого твердого вещества; т/ζ = 709 (М+Н)⁺.

ТФУ (2,5 г, 22 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 10б (0,52 г, 0,734 ммоль) в ЭСМ (10 мл). Полученную смесь перемешивали при кт в течение приблизительно 10 ч. Затем, реакционную смесь упаривали досуха и остаток очищали колоночной хроматографией, используя градиент метанола в ЭСМ, с получением 0,3 г (68%) указанного в заголовке соединения 5-({[(4аминобутил)(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а(2Н)-карбоновой кислоты 10е в виде ТФУ-соли; т/ζ = 609 (М+Н)⁺.

К перемешиваемому раствору промежуточного соединения 10е (0,22 г, 0,36 ммоль) в сухом ДМФ (100 мл) при 0°С добавляли ΌΙΡΕΑ (0,14 г, 1,08 ммоль) и НЛТИ (0,206 г, 0,542 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем смесь оставляли при комнатной температуре в течение 12 ч. Далее реакционную смесь последовательно выливали в охлажденную льдом воду, экстрагировали дихлорметаном, сушили над Мд8О₄ и затем концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией с получением 0,188 г (88%) указанного в заголовке продукта 8-циклогексил-11-метокси-16метил- 1,12Ь -дигидро-5, 1 а-(метаноиминотиоиминобутаноимино)циклопропа[б] индоло [2,1а][2]бензазепин-13,22(2Н)-диона 15,15-диоксида 10 в виде белого твердого вещества.

Ή ЯМР (ДМСО-б₆): 11,5 (с, 1Н), 8,4 (с, 1Н), 8,3 (с, 1Н), 7,8 (д, 1=8,2 Гц, 1Н), 7,3 (д, 1=8,2 Гц, 1Н), 7,25 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,15 (с, 1Н), 7 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 5,6 (д, 1=16 Гц, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,55 (д, 1=16 Гц, 1Н), 3-3,2 (м, 2Н), 3 (с, 3Н), 2,7-2,9 (м, 4Н), 1,8-2,1 (м, 5Н), 1,6-1,7 (м, 2Н), 1,3-1,6 (м, 6Н), 1-0,7 (м, 3Н); т/ζ = 609 (М+Н)⁺.

Пример 11. Синтез соединения 11.

И

1,1'-Карбонилдиимидазол (0,522 г, 3,22 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 8- 39 019008 циклогексил-11-метокси-1а-(метоксикарбонил)-1,1а,2,12Ь-тетрагидроциклопропа[й]индоло[2,1а][2]бензазепин-5-карбоновой кислоты 10а (0,74 г, 1,61 ммоль) в ТГФ (15 мл) при 25°С. Выделение СО₂ было мгновенным, и когда оно замедлялось, раствор нагревали при 50°С в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. трет-Бутил 4-{2-[(аминосульфонил)(метил)амино]этил}пиперазин-1карбоксилат 11а (1,038 г, 3,22 ммоль) добавляли с последующим добавлением ΌΒυ (0,49 г, 3,22 ммоль). Перемешивание продолжали в течение 12 ч при 50°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры, затем распределяли между дихлорметаном и водой. Водный слой экстрагировали дихлорметаном и органические слои сушили над Мд§О₄, затем концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя дихлорметан и этилацетат, с получением 0,83 г (68%) указанного в заголовке соединения метил 5-({ [{2-[4-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-1-ил]этил}(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а] [2]бензазепин-1а(2Н)карбоксилата 11Ь в виде белой пены; т/ζ = 764 (М+Н)⁺.

К раствору промежуточного соединения 11Ь (0,6 г, 0,785 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли Ь1ОН (0,82 г, 1,96 ммоль) в воде (5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем разбавляли водой и нейтрализовали 2 М водным раствором НС1. Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном, сушили над Мд§О₄, затем концентрировали. Образовавшийся осадок очищали колоночной хроматографией, используя СН2С12 и метанол, с получением 0,4 г (68%) указанного в заголовке соединения 5-({ [{2-[4-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-1-ил]этил}(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а] [2]бензазепин-1а(2Н)карбоновой кислоты 11с в виде белого твердого вещества; т/ζ = 750 (М+Н)⁺.

ммоль) в дихлорметане (10 мл). Полученную смесь перемешивали при кт в течение приблизительно 10 ч. Затем, реакционную смесь упаривали досуха и остаток очищали колоночной хроматографией, используя дихлорметан и метанол, с получением указанного в заголовке соединения 8-циклогексил-11-метокси-5({[метил-(2-пиперазин-1 -илэтил)амино]сульфонил}карбамоил)-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло [2,1а][2]-бензазепин-1а(2Н)-карбоновой кислоты 11ά (0,24 г, 73%); т/ζ = 650 (М+Н)⁺.

К перемешиваемому раствору промежуточного соединения 11ά (0,24 г, 0,37 ммоль) в сухом ДМФ (100 мл) при 0°С добавляли диизопропилэтиламин (0,143 г, 1,1 ммоль) и НАТи (0,211 г, 0,554 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем оставляли при комнатной температуре в течение 12 ч. Далее реакционную смесь последовательно выливали в охлажденную льдом воду, экстрагировали дихлорметаном, сушили над Мд§О₄ и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя дихлорметан/метанол, с получением 0,018 г (18%) указанного в заголовке соединения 31 -циклогексил-8-метокси-22-метил-21 -тиа-1,13,20,22,25-пентаазагептацикло

- 40 019008 [23.2.2.1^3,13.1¹²’¹⁵.1¹⁴’¹⁸.0³’⁵.0^6,11]дотриаконта-6,8,10,12 (31),14(30),15,17-гептаен-2,19-диона 21,21-диоксида 11 в виде белого твердого вещества; т/ζ = 632 (М+Н)⁺.

Пример 12. Синтез соединения 12.

Стадия 1.

К раствору 5-трет-бутил-1а-метил-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло [2,1-а][2]бензазепин-1а,5(2Н)-дикарбоксилата 8а (2 г, 3,88 ммоль) в дихлорметане (25 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (22,34 г, 194 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч, затем концентрировали досуха. Остаток последовательно растворяли в дихлорметане, промывали водой, сушили над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя дихлорметан и этилацетат в качестве элюента, с получением 1,7 г (95%) указанного в заголовке продукта 8-циклогексил-11-метокси-1а-(метоксикарбонил)-1,1а,2,12Ьтетрагидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-5-карбоновой кислоты 12а в виде белого порошка; т/ζ = 460 (М+Н)⁺.

Стадия 2.

К раствору промежуточного соединения 12а (1,73 г, 3,76 ммоль) в ТГФ (25 мл) при 0°С добавляли последовательно 4-диметиламинопиридин (ΌΜΑΡ) (1,38 г, 3,76 ммоль), хлоргидрат ^-((этилимино) метилен)-№,№-диметилпропан-1,3-диамина (ЕЭС) (2,16 г, 11,29 ммоль) и аллил(метил)аминосульфонамид 12Ь (1,3 г, 8,66 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение 8 ч. Далее добавляли воду и реакционную смесь фильтровали. Образовавшееся твердое вещество очищали колоночной хроматографией, используя дихлорметан и этилацетат, с получением 500 мг (23%) указанного в заголовке продукта метил 5({[аллил(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ьдигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]-бензазепин-1а(2Н)-карбоксилата 12с; т/ζ = 592 (М+Н)⁺.

Стадия 3.

К раствору промежуточного соединения 12с (0,5 г, 0,845 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли гидроксид лития (0,73 г, 1,69 ммоль) в воде (5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной темпера- 41 019008 туре в течение ночи, затем разбавляли водой и нейтрализовали 2 М водным раствором НС1. Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном, сушили над Мд8О₄, затем концентрировали. Образовавшийся остаток очищали колоночной хроматографией, используя СН₂С1₂ и метанол, с получением 0,4 г (75%) указанного в заголовке продукта 5-({[аллил(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а(2Н)-карбоновой кислоты 12ά в виде белого твердого вещества; т/ζ = 578 (М+Н)⁺.

Стадия 4.

12(1 12е

К раствору промежуточного соединения 12ά (0,2 г, 0,346 ммоль) в ТГФ (15 мл) при 0°С добавляли последовательно 4-диметиламинопиридин (ΌΜΆΡ) (0,127 г, 1,04 ммоль), хлоргидрат N1((этилимино)метилен)-N3,N3-диметилпропан-1,3-диамина (ЕЭС) (0,199 г, 1,04 ммоль) и бут-3-ен-1-амин (0,062 г, 0,866 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение 8 ч. Далее добавляли воду и полученную смесь фильтровали. Твердое вещество промывали дихлорметаном, затем фильтрат последовательно экстрагировали дихлорметаном, сушили над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали. Образовавшийся остаток очищали колоночной хроматографией посредством дихлорметана и этилацетата с получением 70 мг (32%) указанного в заголовке продукта №-{ [аллил(метил)амино] сульфонил} -№ ^а-бут-3 -ен-1 -ил-8-циклогексил-11 -метокси- 1,12Ьдигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а,5(2Н)-дикарбоксамида 12е; т/ζ = 631 (М+Н)⁺.

Раствор промежуточного соединения 12е (0,1 г, 0,16 ммоль) в дихлорэтане (50 мл) дегазировали посредством аргона в течение 10 мин, затем добавляли катализатор 1-го поколения Ноуеуба-СгиЬЬк (0,03 мг, 0,032 ммоль). Полученную смесь нагревали до 70°С и оставляли в атмосфере аргона в течение ночи. Далее смесь охлаждали до комнатной температуры и растворитель удаляли в вакууме. Образовавшийся темный остаток очищали колоночной хроматографией, используя ЭСМ и этилацетат, с получением 15 мг (16%) указанного в заголовке продукта 8-циклогексил-11-метокси-16-метил-1,12Ь-дигидро-5,1а(метаниминотиоиминопент[2]еноиминометано)циклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-13,23(2Н)диона 15,15-диоксида 12 в виде белого твердого вещества; т/ζ = 603 (М+Н)⁺.

Пример 13. Синтез соединения 13.

Стадия 1.

- 42 019008

-Циклогексил-3 -метокси-7Н-бензо [3,4]азепино [1,2-а]индол-6,10-дикарбоновой кислоты 10-третбутиловый эфир 6-метиловый эфир 1а (1 г, 1 экв.) растворяли в сухом дихлорметане в атмосфере Ν₂ с последующим добавлением трифторуксусной кислоты (ТФУ) (8,88 мл, 60 экв.). Раствор перемешивали при кт в течение 24 ч. Затем, растворитель удаляли при пониженном давлении. Сырой продукт растирали в диэтиловом эфире. Образовавшиеся кристаллы отфильтровывали и сушили в вакууме в течение ночи с получением указанного в заголовке продукта 13-циклогексил-3-метокси-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2а]индол-6,10-дикарбоновой кислоты 6-метилового эфира 13а (89%, 0,86 г); ЖХ-МС: К₁ 3,19 мин, т/ζ = 446 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

13а 12Ь 13Ь

-Циклогексил-3 -гидрокси-7Н-бензо [3,4]азепино [ 1,2-а]индол-6,10-дикарбоновой кислоты 6метиловый эфир 13а (0,86 г, 1 экв.), диамид Ν-метил-Ы-аллилсерной кислоты 12Ь (0,67 г, 2,03 экв.), хлоргидрат №-((этилимино)метилен)-Ы³,Ы³-диметилпропан-1,3-диамина (ΈΩΓΊ) (1,14 г, 3,06 экв.) и диметилпиридин-4-иламин (ΌΜΑΡ) (0,67 г, 3,04 экв.) растворяли в сухом диметилформамиде (20 мл) в атмосфере Ν2. Раствор перемешивали при кт в течение 3 дней. Данный раствор медленно добавляли в ледяную воду. Водный слой экстрагировали этилацетатом (3x50 мл) и промывали тетрагидрофураном (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Сырой продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 0,63 г (55%) указанного в заголовке продукта 13Ь; ЖХ-МС: К₁ 6,16 мин, т/ζ = 578 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (ДМСО) δ (м.д.), 1,13-1,20 (м, 1Н, СН₂), 1,30-1,47 (м, 3Н, СН₂ (2х)), 1,62-1,78 (м, 2Н, СН₂), 1,81-1,93 (м, 1Н, СН₂), 1,93-2,12 (м, 3Н, СН₂ (2х)), 2,70-2,82 (м, 1Н, СН), 2,86 (с, 3Н, СН₃Ы), 3,79 (с, 3Н, СН₃О), 3,88 (с, 3Н, СН₃О), 3,90-3,98 (м, 2Н, СН₂), 4,21 (д, 1Н, 1=12,97 Гц, СН₂), 5,21 (д, 1Н, 1=10,15 Гц, СН₂), 5,31 (д, 1Н, 1=17,13 Гц, СН₂), 5,61 (д, 1Н, 1=13,12 Гц, СН₂), 5,78-5,90 (м, 1Н, СН_аром), 7,25 (дд, 1Н, 1=2,50 и 1=8,60 Гц, СН_аром), 7,32-7,35 (м, 1Н, СН_аром), 7,54 (д, 1Н, 1=8,60 Гц, СН_аром), 7,61 (д, 1Н, 1=8,45 Гц, СН_аром), 7,88 (д, 1Н, 1=9,01 Гц, СН_аром), 7,91 (с, 1Н, СН), 8,31-8,34 (ушир.с, 1Н, ΝΉ80₂).

Соединение 13Ь (0,60 г, 1 экв.) растворяли в смеси тетрагидрофуран:метанол (1:1) (20 мл) с последующим добавлением раствора Ы0Н в воде (0,09 г, 2 экв.). Раствор перемешивали в течение ночи при кт в течение нескольких дней. Затем, растворители упаривали при пониженном давлении и водный слой подкисляли 3н. раствором НС1 до рН 2. Образовавшиеся кристаллы отфильтровывали, промывали водой и изопропиловым эфиром и сушили в вакууме в течение ночи с получением 0,44 г (74%) указанного в заголовке продукта 13с; ЖХ-МС: К 5,84 мин, т/ζ = 562 [М-Н]^-.

Стадия 4. о _ о ι·,ο II	СК.ОН	*^нн2	НАШ. ΟΙΡΕΑ	1 Н
ДМФ
	13с				134

Соединение 13с (0,44 г, 1 экв.) и НΑΤυ (0,47 г, 1,6 экв.) растворяли в диметилформамиде в атмосфере Ν₂ с последующим добавлением ΌΙΡΕΑ (0,15 г, 0,20 мл, 1,5 экв.) и аллиламина (0,07 мл, 1,2 экв.). Раствор перемешивали при кт в течение 3 дней. Затем, диметилформамидный раствор медленно вылива- 43 019008 ли в ледяную воду. Образовавшиеся кристаллы отфильтровывали, промывали водой и сушили в вакууме в течение ночи с получением 0,47 г (100%) указанного в заголовке продукта 13й; ЖХ-МС: К₁ 3,01 мин, т/ζ = 603 [М+Н]⁺.

Стадия 5.

13й 13

Ν₂ пропускали через раствор соединения 13й (0,47 г, 1 экв.) в 50 мл дихлорэтана в течение 1 ч. Затем, катализатор Граббса 2-го поколения (0,13 г, 0,2 экв.) добавляли и реакционную смесь нагревали при 80°С в течение ночи. Раствор охлаждали до кт и некоторое дополнительное количество катализатора добавляли (65 мг). Раствор нагревали при 80°С в атмосфере Ν₂ в течение нескольких часов. Затем, раствор упаривали при пониженном давлении. Продукт очищали флэш-хроматографией при элюции смесью дихлорметан:метанол (от 100 до 95:5) и далее перекристаллизовывали из метанола. И наконец, продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 30 мг (5,86%) указанного в заголовке продукта 13; ЖХМС: К 5,33 мин, т/ζ = 575 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (ДМСО) δ (м.д.), 1,05-1,21 (м, 1Н, СН₂), 1,30-1,48 (м, 3Н, СН₂ (2х)), 1,62-1,78 (м, 2Н, СН₂), 1,82-1,93 (м, 1Н, СН₂), 1,93-2,12 (м, 3Н, СН₂ (2х)), 2,65-2,90 (м, 4Н, СН и СН₃Ц), 3,56 (д, 2Н, 1=18,10 Гц, СН₂), 3,80-3,97 (ушир.с, 5Н, СН₂ и СН₃О), 4,21 (д, 1Н, 1=15,12 Гц, СН₂), 4,28-4,46 (м, 1Н, СН), 5,72 (д, 1Н, 1=14,15 Гц, СН₂), 5,78-5,88 (м, 1Н, СН), 6,53 (с, 1Н, СН_аром), 7,18-7,28 (м, 2Н, СН_аром (2х)), 7,39-7,49 (м, 1Н, СН_аром), 7,55 (д, 1Н, 1=8,38 Гц, СН_аром), 7,62 (с, 1Н, СН_аром), 7,72-7,84 (м, 1Н, N4), 8,29 (с, 1Н, СН), 8,51-8,62 (ушир.с, 1Н, Ν^.

Пример 14. Синтез соединения 14.

-Циклогексил-3 -метокси-7Н-бензо [3,4]азепино [ 1,2-а]индол-6,10-дикарбоновой кислоты 6метиловый эфир 13а (0,60 г, 1 экв.) растворяли в сухом ацетонитриле (50 мл) в атмосфере Ν₂ с последующим добавлением диимидазол-1-ил-метанона (СЭ1) (0,66 г, 3 экв.). Раствор перемешивали в течение ночи при 50°С. Затем, растворитель упаривали при пониженном давлении и сырой продукт очищали флэш-хроматографией при элюции смесью гептан:ацетонитрил и, наконец, этилацетатом. Продукт перекристаллизовывали из этилацетата с получением 0,50 г (75%) указанного в заголовке продукта 14а.

- 44 019008

Соединение 14а (0,50 г, 1 экв.) растворяли в сухом ацетонитриле (50 мл) с последующим добавлением трет-бутил 4-(2-(сульфамоиламино)этил)пиперазин-1-карбоксилата 14Ь (0,47 г, 1,50 экв.) и 2,3,4,6,7,8,9,10-оксагидропиримидо[1,2-а]азепина (ΌΒυ) (0,31 г, 2 экв.). Раствор нагревали при 50°С в течение ночи, затем упаривали при пониженном давлении. Образовавшийся остаток перемешивали в 0,1н. водном растворе лимонной кислоты. Образовавшиеся кристаллы отфильтровывали и сушили в вакууме в течение ночи. Продукт очищали колоночной хроматографией при элюции дихлорметаном для удаления первой примеси. Другие полученные фракции добавляли вместе. Далее данный продукт очищали флэш-хроматографией при элюции смесью дихлорметан:метанол (от 100 до 99:1) с получением 0,41 г (55%) указанного в заголовке продукта 14с; ЖХ-МС: К, 5,59 мин, т/ζ = 736 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (СПС1₃) δ (м.д.), 1,18-1,34 (м, 1Н, СН₂), 1,35-1,50 (ушир.с, 10Н, СН₂ и С(СН₃)₃), 1,70-1,85 (м, 3Н, СН₂ (2х)), 1,90-2,12 (м, 5Н, СН₂ (3х)), 2,30-2,41 (м, 4Н, СН₂ (2х)), 2,52-2,62 (м, 2Н, СН₂), 2,77-2,90 (м, 1Н, СН), 3,13-3,22 (м, 2Н, СН₂), 3,43-3,57 (м, 4Н, СН₂ (2х)), 3,83 (с, 3Н, СН₃О), 3,92 (с, 3Н, СН₃О), 4,164,23 (м, 1Н, СН₂), 5,58-5,69 (м, 1Н, СН₂), 7,00 (д, 1Н, 1=2,54 Гц, СН_аром), 7,11 (дд, 1Н, 1=2,67 и 1=8,59 Гц, СНаром), 7,48 (д, 1Н, 1=8,44 Гц, СНаром), 7,53 (д, 1Н, 1=8,61 Гц, СНаром), 7,83 (с, 1Н, СНаром), 7,90 (д, 1Н, 1=8,48 Гц, СНаром), 8,09 (с, 1Н, СН).

Соединение 14с (0,41 г, 1 экв.) растворяли в сухом дихлорметане (10 мл) в атмосфере Ν₂ с последующим добавлением трифторуксусной кислоты (1,30 мл, 30 экв.). Раствор перемешивали при кт в течение ночи. Затем, растворитель удаляли при пониженном давлении и сырой продукт перемешивали в диэтиловом эфире. Образовавшиеся кристаллы отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 0,31 г (87%) указанного в заголовке продукта 144; ЖХ-МС: К, 3,81 мин, т/ζ = 634 [М-Н]^-.

Стадия 4.
9 5 Д к .8^ А м к	50%ЫаОН-Н2О	ηνΆ	€к,он 1 » » <4
Йо' N	ТГФ-СНзОН	1
			йо й ΙΑλΟ-β'
14а			14е

Соединение 144 (0,31 г, 1 экв.) растворяли в смеси тетрагидрофуран:метанол (1:1) с последующим добавлением 50% водного раствора №1ОН (1 мл). Раствор перемешивали при кт в течение ночи, затем упаривали при пониженном давлении. Водный слой подкисляли уксусной кислотой до рН 4 и экстрагировали этилацетатом (7х50 мл). Объединенные этилацетатные слои сушили над сульфатом натрия, отфильтровывали и упаривали при пониженном давлении с получением желаемого соединения 14е в виде желтого порошка (0,30 г, 100%); ЖХ-МС: К, 3,64 мин, т/ζ = 622 [М+Н]⁺.

Синтез указанного в заголовке соединения 14 осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 11, используя промежуточное соединение 14е вместо 114.

- 45 019008

Пример 15. Синтез соединения 15.

Соединение 13а (0,20 г, 1 экв.) растворяли в сухом ацетонитриле в атмосфере Ν₂ с последующим добавлением ί'ΌΙ (0,1 г, 1,3 экв.). Раствор перемешивали при 60°С в течение 1 ч. Согласно ТСХ реакция протекала до завершения. Затем, добавляли ΌΒυ (0,10 мл, 1,52 экв.) и диамид диаминосерной кислоты 15а (0,29 г, 2 экв.). Раствор перемешивали при 60°С в течение 3 ч, затем упаривали при пониженном давлении. Водный раствор лимонной кислоты (0,1н.), охлажденный на льду, добавляли к сырому продукту. Остаточный раствор экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (50 мл), сушили над сульфатом натрия, отфильтровывали и упаривали при пониженном давлении с получением 0,21 г (62%) указанного в заголовке продукта 15Ь; ЖХ-МС: К₁: 5,63 мин, т/ζ = 750 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

15Ь 15с

Синтез соединения 15с осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 5-({[{2-[4(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-1 -ил] этил}(метил)амино] сульфонил} карбамоил) -8-циклогексил-11метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а(2Н)-карбоновой кислоты (11с), используя промежуточное соединение 15Ь вместо метил 5-({[{2-[4-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-1ил]этил}(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ьдигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а(2Н)-карбоксилата (11Ь); т/ζ = 736 [М+Н]⁺.

Синтез указанного в заголовке соединения 15б осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 8-циклогексил-11-метокси-5-({ [метил-(2-пиперазин-1-илэтил)амино]сульфонил}карбамоил)1,12Ь-дигидроциклопропа[б]-индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а(2Н)-карбоновой кислоты (11б), используя промежуточное соединение 15с вместо 5-({[{2-[4-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-1-ил]этил}(метил)амино]сульфонил}карбамоил)-8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1а][2]бензазепин-1а(2Н)-карбоновой кислоты (11с), с получением 448 мг (количественный выход) желаемого продукта; т/ζ = 636 [М+Н]⁺.

- 46 019008

Стадия 4.

15<1 15

Синтез указанного в заголовке соединения 15 осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 31-циклогексил-8-метокси-22-метил-21-тиа-1,13,20,22,25-пентаазагептацикло [23.2.2.1³’¹³.1¹²’¹⁵.1¹⁴’¹⁸.0³’⁵.0⁶’¹¹]дотриаконта-6,8,10,12 (31),14(30),15,17-гептаен-2,19-диона 21,21-диоксида 11, используя промежуточное соединение 15ά вместо 8-циклогексил-11-метокси-5-({[метил(2-пиперазин1 -илэтил)амино] сульфонил} карбамоил)-1,12Ь-дигидроциклопропа[б] индоло [2,1 -а] [2] бензазепин-1 а(2Н)карбоновой кислоты 11ά, с получением 150 мг (34% выход) твердого вещества кремового цвета; т/ζ = 618 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 1,06-1,18 (м, 1Н), 1,19-1,31 (м, 2Н), 1,31-1,50 (м, 2Н), 1,62-1,78 (м, 2Н), 1,81-1,93 (м, 1Н), 1,93-2,10 (м, 2Н), 2,53-3,21 (м, 12Н), 3,31-3,67 (м, 4Н), 3,86 (с, 3Н), 4,33-4,51 (м, 1Н), 4,99-5,16 (м, 1Н), 7,06-7,14 (м, 2Н), 7,17 (д, 1=8,02 Гц, 1Н), 7,52 (д, 1=8,22 Гц, 1Н), 7,55-7,68 (м, 1Н), 7,77 (м, 1Н), 8,39 (м, 1Н).

Пример 16. Синтез соединения 16

Стадия 1.

16а 16Ь

Раствор 50% ΝαΟΗ мас./мас. в воде (9,31 г) добавляли к перемешиваемому раствору 16а (3,0 г, 5,82 ммоль) в ТГФ (100 мл) и МеОН (150 мл). Через 1 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и далее разбавляли охлажденной льдом водой (150 мл). рН полученного раствора доводили до рН 6 разбавленной НС1. Осадок образовывался, который собирали фильтрованием, промывали водой и сушили в вакууме с получением 3,17 г (89%) 16Ь в виде желтоватого порошка. Продукт использовали на следующей стадии без какой-либо дальнейшей очистки; т/ζ = 502 (М+Н)⁺.

Стадия 2.

НАТи (3,6 г, 9,48 ммоль) добавляли в атмосфере азота к перемешиваемому раствору 16Ь (3,17 г, 6,32 ммоль), ЭРЕА (3,3 мл, 3 экв.) и 2,2'-окси-бис-(№метилэтанамина) (3,34 г, 4 экв.) в 60 мл сухого ТГФ. Через 1 ч реакцию гасили водой (100 мл) и реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (ЕЮАс). Органический слой последовательно сушили (Να₂8Ο₄), фильтровали и упаривали. Остаток рас- 47 019008 тирали в воде, фильтровали и сушили с получением 4,05 г (количественный выход) конечного соедине-

Раствор 16с (3,90 г, 6,33 ммоль) и сульфамида (3,04 г, 6 экв.) в диоксане (100 мл) кипятили с обратным холодильником при 100°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем упаривали в вакууме. Остаток вновь растворяли в ЭСМ, промывали водой, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением 4,48 г (количественный выход) желаемого продукта 166, используемого непосредственно на следующей стадии: т/ζ = 695 (М+Н)⁺.

Стадия 4.

16(1 16е

ТФУ (14,7 г, 129 ммоль) добавляли к раствору 166 (4,48 г, 6,45 ммоль) в дихлорметане (50 мл). Через 1 ч реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток растирали в эфире, фильтровали и промывали эфиром, затем очищали хроматографией (градиент от ЕЮАс до ЕЮАс/ЕЮН, 9:1) с получением 3,05 г (68%) желаемого продукта 16е: т/ζ = 639 (М+Н)⁺.

Карбонилдиимидазол (1,07 г, 6,59 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 16е (3,05 мг, 4,39 ммоль) в сухом СΑN (40 мл). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч: наблюдали полное превращение в промежуточное соединение ацилимидазола. Полученный раствор охлаждали до кт, разбавляли сухим ΑСN (300 мл) и добавляли ΌΒυ (1,34 г, 2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток вновь растворяли в ЭСМ, промывали водой, сушили, фильтровали и концентрировали. Очисткой колоночной хроматографией (градиент от ЭСМ до ЭСМ/МсОН 9:1) получали 930 мг (33%) указанного в заголовке продукта 16 в виде белого порошка: т/ζ = 621 (М+Н)⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-6) δ м.д. 1,15-1,31 (м, 1Н), 1,31-1,52 (м, 3Н), 1,69-1,81 (м, 2Н), 1,84 (с, 3Н), 1,88-2,13 (м, 7Н), 2,45 (д, 1=14,87 Гц, 1Н), 2,76-2,92 (м, 1Н), 3,14 (с, 3Н), 3,40 (д, 1=15,65 Гц, 1Н), 3,54-3,70 (м, 3Н), 3,81-3,90 (м, 1Н), 3,93 (с, 3Н), 4,03-4,18 (м, 1Н), 4,37 (д, 1=14,67 Гц, 1Н), 4,64-4,80 (м, 2Н), 7,06 (д, 1=8,80 Гц, 1Н), 7,09 (с, 1Н), 7,48 (д, 1=8,22 Гц, 1Н), 7,57 (с, 1Н), 7,70 (д, 1=8,22 Гц, 1Н), 7,89 (д, 1=8,41 Гц, 1Н), 10,01 (ушир.с, 1Н).

- 48 019008

Пример 17. Синтез соединения 17.

Стадия 1.

Синтез указанного в заголовке соединения 17а осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 16с, используя №,Ы⁴-диметилбутан-1,4-диамин вместо 2,2'-окси-бис-(Ы-метилэтанамина), с получением 1,25 г (количественный выход) белого твердого вещества; т/ζ = 600 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

Синтез указанного в заголовке соединения 17Ь осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 16ά, используя соединение 17а вместо соединения 16с, с получением 1 г (54% выход) желтоватого твердого вещества; т/ζ = 679 [М+Н]⁺.

Стадия 3.

Синтез указанного в заголовке соединения 17с осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 16е, используя соединение 17Ь вместо соединения 16ά, с получением 538 мг (62% выход) слабо-коричневого твердого вещества; т/ζ = 623 [М+Н]⁺.

- 49 019008

Синтез указанного в заголовке соединения 17 осуществляли способом, описанным для синтеза соединения 16, используя соединение 17с вместо соединения 16е, с получением 70 мг (15% выход) белого твердого вещества; т/ζ = 605 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 1,08-1,20 (м, 1Н), 1,22-1,79 (м, 13Н), 1,88 (с, 6Н), 2,40-2,47 (м, 1Н), 2,69-2,83 (м, 1Н), 2,92-3,14 (м, 4Н), 3,56-3,72 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н), 3,92-4,04 (м, 1Н), 4,26 (д, 1=14,67 Гц, 1Н), 4,86 (д, 1=14,09 Гц, 1Н), 7,18 (дд, 1=8,61, 2,15 Гц, 1Н), 7,22 (д, 1=2,15 Гц, 1Н), 7,46-7,57 (м, 2Н), 7,80-7,92 (м, 1Н), 8,48 (с, 1Н), 11,39 (ушир.с, 1Н).

Пример 18. Синтез соединения 18.

Синтез указанного в заголовке соединения 18 осуществляли, следуя 4-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 17, исходя из промежуточного соединения 1Ь вместо 16Ь, и получали 0,5 г белого твердого вещества; т/ζ = 591 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 1,01-1,19 (м, 1Н), 1,18-1,52 (м, 5Н), 1,54-1,79 (м, 4Н), 1,80-2,08 (м, 4Н), 2,42-2,48 (м, 1Н), 2,63-2,80 (м, 1Н), 2,93 (с, 3Н), 2,98-3,14 (м, 1Н), 3,43-3,75 (м, 5Н), 3,85 (с, 3Н), 4,43 (д, 1=14,87 Гц, 1Н), 5,04 (д, 1=14,48 Гц, 1Н), 6,84 (ушир.с, 1Н), 7,09 (с, 1Н), 7,18 (д, 1=8,22 Гц, 1Н), 7,45 (д, 1=8,22 Гц, 1Н), 7,55 (д, 1=8,41 Гц, 1Н), 7,87 (д, 1=8,41 Гц, 1Н), 8,35 (ушир.с, 1Н), 11,33 (ушир.с, 1Н).

Пример 19. Синтез соединения 19.

Синтез указанного в заголовке соединения 19 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 1, исходя из промежуточного соединения 10-трет-бутил 6-метил 13циклогексил-3-фтор-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 19а вместо 10-трет-бутил 6метил 13-циклогексил-3-метокси-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 1а, и получали 180 мг белого твердого вещества; т/ζ = 595 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-а) δ м.д. 1,11-1,29 (м, 1Н), 1,29-1,53 (м, 3Н), 1,67-1,83 (м, 3Н), 1,872,11 (м, 4Н), 2,30 (ушир.с, 3Н), 2,69-2,82 (м, 1Н), 2,81-2,98 (м, 1Н), 3,11 (с, 3Н), 3,46-3,58 (м, 1Н), 3,593,79 (м, 3Н), 3,90-4,08 (м, 1Н), 4,24-4,38 (м, 1Н), 4,43 (дд, 1=14,73, 1,27 Гц, 1Н), 4,97 (д, 1=14,63 Гц, 1Н), 6,73 (с, 1Н), 7,11 (дд, 1=9,27, 2,63 Гц, 1Н), 7,17-7,30 (м, 1Н), 7,57 (дд, 1=8,68, 5,76 Гц, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 7,67 (дд, 1=8,78, 1,56 Гц, 1Н), 7,90 (д, 1=8,78 Гц, 1Н), 9,84 (ушир.с, 1Н).

- 50 019008

Пример 20. Синтез соединения 20.

Синтез указанного в заголовке соединения 20 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 1, исходя из промежуточного соединения 10-трет-бутил 6-метил 13циклогексил-3-фтор-5-метил-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 20а вместо 10-третбутил 6-метил 13-циклогексил-3-метокси-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 1а, и получали 130 мг белого твердого вещества; т/ζ = 609 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-ό) δ м.д. 1,14-1,31 (м, 1Н), 1,32-1,46 (м, 3Н), 1,64-1,81 (м, 3Н), 1,84 (с, 3Н), 1,87-1,99 (м, 3Н), 2,01 (с, 3Н), 2,47 (д, 1=14,63 Гц, 1Н), 2,73-2,87 (м, 1Н), 3,14 (с, 3Н), 3,43 (д, 1=15,02 Гц, 1Н), 3,56-3,64 (м, 2Н), 3,65 (д, 1=3,12 Гц, 1Н), 3,74-3,88 (м, 1Н), 4,00-4,12 (м, 1Н), 4,35 (д, 1=14,83 Гц, 1Н), 4,64-4,75 (м, 1Н), 4,81 (д, 1=14,63 Гц, 1Н), 7,16-7,32 (м, 2Н), 7,53 (дд, 1=8,39, 6,05 Гц, 1Н), 7,64 (с, 1Н), 7,70 (д, 1=8,39 Гц, 1Н), 7,91 (д, 1=8,39 Гц, 1Н), 10,09 (ушир.с, 1Н).

Пример 21. Синтез соединения 21.

Синтез указанного в заголовке соединения 21 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 1, исходя из промежуточного соединения 10-трет-бутил 6-метил 3-хлор-13циклогексил-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 21а вместо 10-трет-бутил 6-метил 13циклогексил-3-метокси-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 1а, и получали 270 мг белого твердого вещества; т/ζ = 611 [М+Н]⁺.

'|| ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 1,08-1,22 (м, 1Н), 1,31-1,52 (м, 3Н), 1,63-1,78 (м, 2Н), 1,81-2,09 (м, 4Н), 2,50 (с, 3Н), 2,69-2,80 (м, 1Н), 3,00 (с, 3Н), 3,08-3,19 (м, 1Н), 3,19-3,28 (м, 1Н), 3,46-3,88 (м, 6Н), 4,52 (д, 1=14,87 Гц, 1Н), 5,12 (д, 1=13,11 Гц, 1Н), 6,97 (с, 1Н), 7,49 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 7,58-7,70 (м, 3Н), 7,94 (д, 1=8,61 Гц, 1Н), 8,36 (с, 1Н), 11,39 (ушир.с, 1Н).

Пример 22. Синтез соединения 22.

Синтез указанного в заголовке соединения 22 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 1, используя №^⁶-диметилгексан-1,6-диамин вместо 2,2'-окси-бис-(№ метилэтанамина) на стадии 2, и получали 50 мг белого твердого вещества; т/ζ = 619 [М+Н]⁺.

'|| ЯМР (400 МГц, хлороформ-0) δ м.д. 1,00-1,64 (м, 11Н), 1,66-1,87 (м, 3Н), 1,87-2,15 (м, 4Н), 2,47 (с, 3Н), 2,66-2,91 (м, 2Н), 3,23 (с, 3Н), 3,25-3,33 (м, 1Н), 3,33-3,45 (м, 1Н), 3,90 (с, 3Н), 4,09-4,25 (м, 1Н), 4,39 (д, 1=14,28 Гц, 1Н), 5,14 (д, 1=14,48 Гц, 1Н), 6,81 (с, 1Н), 6,90 (с, 1Н), 7,06 (дд, 1=8,61, 2,15 Гц, 1Н), 7,45 (д, 1=8,22 Гц, 1Н), 7,50 (д, 1=8,61 Гц, 1Н), 7,81-7,96 (м, 2Н), 8,94 (ушир.с, 1Н).

- 51 019008

Пример 23. Синтез соединения 23.

Синтез указанного в заголовке соединения 23 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 1, используя №^²-диметил-№-(2-(метиламино)этил)этан-1,2-диамин вместо 2,2'-окси-бис-(№метилэтанамина), используемого на стадии 2 синтеза соединения 1, и получали 20 мг белого твердого вещества; т/ζ = 592 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,04 (д, 1=5,87 Гц, 1Н), 1,06-1,22 (м, 1Н), 1,27-1,51 (м, 3Н), 1,601,78 (м, 2Н), 1,80-1,92 (м, 1Н), 1,92-2,07 (м, 3Н), 2,12 (с, 3Н), 2,27-2,41 (м, 1Н), 2,69-2,83 (м, 2Н), 2,83-2,97 (м, 2Н), 3,01-3,15 (м, 2Н), 3,17-3,28 (м, 2Н), 3,86 (с, 3Н), 4,21 (д, 1=15,65 Гц, 1Н), 5,54 (д, 1=15,65 Гц, 1Н), 7,11-7,25 (м, 2Н), 7,35 (с, 1Н), 7,47 (д, 1=8,22 Гц, 1Н), 7,53 (д, 1=9,00 Гц, 1Н), 7,70-7,83 (м, 1Н), 8,32 (ушир.с, 1Н), 8,37-8,50 (м, 1Н).

Пример 24. Синтез соединения 24.

Синтез указанного в заголовке соединения 24 осуществляли, следуя 4-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 17, исходя из промежуточного соединения 10-(трет-бутоксикарбонил)-2хлор-13-циклогексил-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6-карбоновой кислоты 24Ь вместо 10-(третбутоксикарбонил)-13-циклогексил-3-метокси-5-метил-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6-карбоновой кислоты 16Ь, и получали 0,25 г белого твердого вещества; т/ζ = 595 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-б) δ м.д. 1,25-1,5 (м, 4Н), 1,5-1,8 (м, 4Н), 1,9-2,1 (м, 4Н), 1,8 (с, 3Н), 2,8-2,13 (м, 3Н), 2,5-2,6 (м, 2Н), 3,2 (с, 3Н), 3,6 (ушир.с, 1Н), 4,1 (ушир.с, 1Н), 4,45 (д, 1=15 Гц, 1Н), 5 (д, 1=15 Гц, 1Н), 6,6 (с, 1Н), 7,25 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,4 (дд, 1=8,5, 1=2,5 Гц, 1Н), 7,5-7,6 (м, 2Н), 7,69 (с, 1Н), 7,9 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 9,1 (ушир.с, 1Н).

Пример 25. Синтез соединения 25.

Синтез указанного в заголовке соединения 25 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 10, исходя из промежуточного соединения 10-трет-бутил 6-метил 13циклогексил-3-метокси-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 1а вместо 5-трет-бутил 1аметил 8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а,5(2Н)дикарбоксилата 8а, и получали 45 мг белого твердого вещества; т/ζ = 577 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,03-1,19 (м, 1Н), 1,25-1,49 (м, 4Н), 1,49-2,29 (м, 10Н), 2,67-2,82 (м, 1Н), 2,84-3,04 (м, 1Н), 3,05-3,24 (м, 1Н), 3,48-3,72 (м, 5Н), 3,86 (с, 3Н), 4,42 (д, 1=14,67 Гц,1Н), 5,00 (д, 1=14,28 Гц, 1Н), 6,84 (ушир.с, 1Н), 7,09 (с, 1Н), 7,18 (д, 1=8,41 Гц, 1Н), 7,47 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 7,55 (д, 1=8,41 Гц, 1Н), 7,75-7,92 (м, 1Н), 8,19-8,41 (м, 1Н), 11,27 (ушир.с, 1Н).

- 52 019008

Пример 26. Синтез соединения 26

Стадия 1.

Раствор 606 мг (1,24 ммоль) 1Ь, 410 мг (1,1 экв.) 26а, 710 мг (1,5 экв.) НАТи и 0,65 мл (3 экв.) диизопропилэтиламина в сухом ДМФ (10 мл) перемешивали при кт в течение 1 ч. Затем, рс разбавляли водой, образовавшийся желтый осадок отфильтровывали, промывали водой и очищали флэшхроматографией (элюент от ЭСМ до ЭСМ/МеОН 0,5%) с получением желаемого продукта 26Ь с количественным выходом в виде желтого порошка; т/ζ = 771 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

К раствору 1,1 г (1,44 ммоль) 26Ь и тиофенола (0,32 г, 2 экв.) в сухом ДМФ (15 мл) добавляли карбонат цезия (0,94 г, 2 экв.) при кт. Через 2 ч рс разбавляли водой и экстрагировали ЕЮ Ас. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Образовавшийся остаток затем очищали флэш-хроматографией (элюент: от ЭСМ до ОСМ/ЯНз в МеОН 85/15) с получением 0,77 г (90% выход) 26с в виде желтого порошка; т/ζ = 586 [М+Н]⁺.

Стадия 3.

Смесь 26с (0,72 г, 1,23 ммоль) и сульфамида (0,35 г, 3 экв.) в диоксане (15 мл) кипятили с обратным холодильником до завершения реакции (~7 ч). Затем, рс концентрировали в вакууме и остаток растирали в ЭСМ. Образовавшийся осадок, составляющий избыток сульфамида, отфильтровывали. Органический слой концентрировали и очищали флэш-хроматографией (элюент: от ЭСМ до ЭСМ/МеОН 1%) с получением 776 мг (95% выход) желаемого продукта 26ά в виде светло-желтого порошка; т/ζ = 665 [М+Н]⁺.

- 53 019008

Стадия 4.

26ά 26е

Раствор 261 (0,72 г, 1,086 ммоль) в 10 мл НС1 в изопропаноле и 5 мл ЭСМ перемешивали при кт в течение 3 ч. Затем, рс концентрировали в вакууме и остаток растирали в диэтиловом эфире. Образовавшийся осадок отфильтровывали, промывали эфиром и сушили в вакууме в течение ночи с получением 661 мг (97% выход) желаемого продукта 26е в виде светло-желтого порошка; т/ζ = 609 [М+Н]⁺.

Стадия 5.

26е 26

Раствор 26е (0,6 г, 0,971 ммоль) и СЛ (0,205 г, 1,3 экв.) в ацетонитриле (10 мл) нагревали при 60°С до полного образования промежуточного соединения ацилимидазола (~1 ч). Затем, рс разбавляли 20 мл ацетонитрила и ΌΒυ (0,296 г, 2 экв.) добавляли при кт. РС перемешивали при кт до окончания реакции, затем концентрировали. Остаток вновь растворяли в воде и затем уксусную кислоту добавляли до рН 2. Образовавшийся осадок отфильтровывали, промывали водой и очищали флэш-хроматографией (элюент: от ЭСМ до ΩΓΜ/ΜοΟΜ 5%) с получением 0,315 г (55% выход) желаемого продукта 26 в виде желтоватого порошка; т/ζ = 591 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 1,07-2,09 (м, 16Н), 2,71-2,84 (м, 1Н), 2,94 (с, 3Н), 3,01-3,18 (м, 2Н), 3,19-3,31 (м, 2Н), 3,87 (с, 3Н), 4,25 (д, Л=15,06 Гц, 1Н), 5,52 (д, Л=15,26 Гц, 1Н), 7,16-7,26 (м, 2Н), 7,32-7,44 (м, 2Н), 7,54 (д, 1=9,19 Гц, 1Н), 7,86 (д, 1=8,61 Гц, 1Н), 8,26 (с, 1Н), 8,40-8,51 (м, 1Н), 11,61 (ушир.с, 1Н).

Синтез указанного в заголовке соединения 27 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 26, исходя из промежуточного соединения 10-(трет-бутоксикарбонил)-2хлор-13-циклогексил-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6-карбоновой кислоты 24Ь вместо 10-(третбутоксикарбонил)-13-циклогексил-3-метокси-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6-карбоновой кислоты 1Ь, и получали 85 мг желтого твердого вещества; т/ζ = 596 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-0) δ м.д. 1,21-1,5 (м, 10Н), 1,75-1,8 (м, 2Н), 1,9-2,1 (м, 4Н), 2,75 (ушир.с, 1Н), 3,01 (с, 3Н), 3,1-3,2 (м, 2Н), 3,5-3,6 (м, 2Н), 4,23 (дд, 1=15,28, 1,27 Гц, 1Н), 5,6 (д, 1=15,28 Гц, 1Н), 7,4 (с, 1Н), 7,5-7,6 (м, 3Н), 7,65 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 7,8 (с, 1Н), 7,9 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 8,64 (ушир.с, 1Н).

- 54 019008

Пример 28. Синтез соединения 28

Синтез указанного в заголовке соединения 28 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 10, исходя из промежуточного соединения 10-трет-бутил 6-метил 13циклогексил-3-метокси-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 1а вместо 5-трет-бутил 1аметил 8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[й]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а,5(2Н)дикарбоксилата 8а, и используя №[4-(метиламино)бутил]-№(1-метилэтил)сульфамид 28а вместо N-(4аминобутил)-№метилсульфамида 10Ь, и получали 50 мг желаемого продукта 28; т/ζ = 619 [М+Н]⁺.

Ή ЯМР (400 МГц, хлороформ-й) δ м.д. 1,05-1,15 (м, 1Н), 1,18 (д, 1=6,65 Гц, 3Н), 1,25 (д, 1=6,46 Гц, 3Н), 1,28-1,51 (м, 4Н), 1,53-2,31 (м, 13Н), 2,67-2,85 (м, 1Н), 3,01-3,19 (м, 1Н), 3,51-3,73 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н), 3,95-4,15 (м, 1Н), 4,42 (д, 1=14,48 Гц, 1Н), 4,52-4,72 (м, 1Н), 5,01 (д, 1=14,48 Гц, 1Н), 6,68 (с, 1Н), 6,87 (с, 1Н), 7,05 (д, 1=8,41 Гц, 1Н), 7,52 (д, 1=8,41 Гц, 1Н), 7,63 (д, 1=8,22 Гц, 1Н), 7,77-7,99 (м, 2Н), 9,42 (ушир.с, 1Н).

Пример 29. Синтез соединения 10Ь νη₂

0=3=0 О |

Н юь

Смесь трет-бутил 4-(метиламино)бутилкарбамата (4 г, 19,77 ммоль) и диамида серной кислоты (7,6 г, 4 экв.) в диоксане (10 мл) нагревали при 100°С в СВЧ-печи в течение 30 мин. Затем, рс концентрировали в вакууме и ЭСМ добавляли. Образовавшийся белый осадок, составляющий избыток диамида серной кислоты, отфильтровывали и фильтрат последовательно промывали разбавленной НС1, затем насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Растирание в диизопропиловом эфире приводило к 3,55 г (64% выход) трет-бутил 4-(метил(сульфамоил)амино)бутилкарбамата 10Ь в виде белого твердого вещества; т/ζ = 282 [М+Н]⁺.

Пример 30. Синтез соединения 26а

К раствору трет-бутил 5-аминопентилкарбамата 30а (20 г, 99 ммоль) и 2-нитробензол-1сульфонилхлорида 30Ь (23 г, 1,05 экв.) в ЭСМ (200 мл) добавляли по каплям диизопропилэтиламин (19,2 г, 1,5 экв.) при 0°С. После перемешивания при кт в течение ночи рс последовательно промывали водным раствором лимонной кислоты, затем насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Растирание в диизопропиловом эфире приводило к 32,61 г (85% выход) трет-бутил 5-(2-нитрофенилсульфонамидо)пентилкарбамата 30с в виде белого твердого вещества; т/ζ = 388 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

30с

Ме1, К_гСО_э ацетон

ЗОй

К смеси трет-бутил 5-(2-нитрофенилсульфонамидо)пентилкарбамата 30с (32,61 г, 84 ммоль) и карбоната калия (13,96 г, 1,2 экв.) в ацетоне (300 мл) добавляли метилйодид (5,5 мл, 1,05 экв.). После пере- 55 019008 мешивания при кт в течение ночи еще добавляли метилйодид (1 экв.) и карбонат калия (0,6 экв.) и рс перемешивали при кт до завершения реакции. Затем, рс разбавляли водой и экстрагировали ЭСМ. Органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Растирание в диизопропиловом эфире приводило к 31,59 г (93% выход) трет-бутил 5-(№метил-2-нитрофенилсульфонамидо)пентилкарбамата 30ά в виде белого твердого вещества; т/ζ = 402 [М+Н]⁺.

Стадия 3.

Раствор трет-бутил 5-(№метил-2-нитрофенилсульфонамидо)пентилкарбамата 30ά (31,5 г, 79 ммоль) и трифторуксусной кислоты (29,2 мл, 5 экв.) в ЭСМ (300 мл) перемешивали при кт до завершения реакции (~16 ч). Затем, рс концентрировали в вакууме, растворяли вновь в ЭСМ. промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2 раза), затем насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Растирание в диизопропиловом эфире приводило к 23,7 г (количественный выход) №(5-аминопентил)-№метил-2-нитробензолсульфонамида 26а в виде желтоватого твердого вещества; т/ζ = 302 [М+Н]⁺.

Пример 31. Синтез соединения 28а.

Стадия 1.

Смесь трет-бутил 4-аминобутил(метил)карбамата 31а (287 мг, 1,42 ммоль), ацетона (75 мг, 1,29 ммоль) и триацетоксиборгидрида натрия (383 мг, 1,8 ммоль) перемешивали в атмосфере азота при кт до завершения реакции. Затем, рс концентрировали, разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали эфиром (2 раза). Органические слои объединяли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением 200 мг (63% выход) желаемого продукта третбутил 4-(изопропиламино)бутил(метил)карбамата 31Ь, используемого без дальнейшей очистки на следующей стадии; т/ζ = 245 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

Смесь трет-бутил 4-(изопропиламино)бутил(метил)карбамата 31Ь (3,38 г, 13,8 ммоль) и диамида серной кислоты (3,99 г, 3 экв.) в диоксане (10 мл) нагревали при 110°С в СВЧ-печи в течение 60 мин. Затем, рс концентрировали в вакууме и добавляли ЭСМ. Образовавшийся белый осадок, составляющий избыток диамида серной кислоты, отфильтровывали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали флэш-хроматографией (элюент: от ЭСМ до ЭСМ/МсОН 20%) с получением 1,7 г (38% выход) желаемого продукта трет-бутил 4-(изопропил(сульфамоил)амино)бутил(метил)карбамата 28а; т/ζ = 324 [М+Н]⁺.

- 56 019008

Пример 32. Синтез соединения 19а.

Смесь трет-бутил 2-бром-3-циклогексил-1Н-индол-6-карбоксилата 32а (5 г, 13,22 ммоль, синтезированного, как описано в заявке США 2007270406 А1), пинаколборана (5,75 мл, 3 экв.) и триэтиламина (7,35 мл, 4 экв.) в ТГФ (50 мл) перемешивали при кт в течение 3 ч. Затем, к реакционной смеси добавляли ацетат палладия (90 мг, 0,03 экв.) и бифенил-2-илдициклогексилфосфин (556 мг, 0,12 экв.) и рс нагревали при 80°С в течение 2 ч. Затем, реакционную смесь оставляли охлаждать до кт и выливали в водный раствор ЫН₄С1, далее экстрагировали этилацетатом. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя градиент этилацетата в гептане, с получением 3,5 г (70% выход) желаемого продукта трет-бутил 3-циклогексил-2(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индол-6-карбоксилата 32Ь; т/ζ = 426 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

32Ь 32с 32(1

К смеси трет-бутил 3-циклогексил-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксоборолан-2-ил)-1Н-индол-6карбоксилата 32Ь (2,77 г, 6,5 ммоль) и 2-бром-5-фторбензальдегида 32с (1,58 г, 1,2 экв.) в ΌΜΕ (40 мл) добавляли раствор карбоната натрия (2,07 г, 3 экв.) в воде (15 мл). Затем, полученную смесь продували азотом при кт в течение 10 мин. После добавления тетракис-трифенилфосфинпалладия (376 мг, 0,05 экв.) рс нагревали при 70°С в течение 1 ч. Затем, смесь оставляли охлаждать до кт и выливали в воду, затем экстрагировали этилацетатом (3 раза). Остаток перекристаллизовывали из смеси диизопропиловый эфир/гептан с получением 2 г (73% выход) желаемого продукта трет-бутил 3-циклогексил-2-(4-фтор-2формилфенил)-1Н-индол-6-карбоксилата 32ά в виде белого твердого вещества; т/ζ = 422 [М+Н]⁺.

Стадия 3.

Смесь трет-бутил 3-циклогексил-2-(4-фтор-2-формилфенил)-1Н-индол-6-карбоксилата 32ά (2 г, 4,75 ммоль), карбоната цезия (1,85 г, 1,2 экв.) и метил 2-(диметоксифосфорил)акрилата (16,475 мл, 0,36 М раствор в толуоле, 1,25 экв.) в ДМФ (80 мл) перемешивали при 60°С в течение 2 ч. Затем, реакционную смесь оставляли охлаждать до комнатной температуры, выливали в воду и экстрагировали этилацетатом. Далее органический слой сушили над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя смесь гептаны/дихлорметан, с получением 2 г (8 6% выход) желае- 57 019008 мого продукта 10-трет-бутил 6-метил дикарбоксилата 19а; т/ζ = 490 [М+Н]⁺.

Пример 33. Синтез соединения 20а.

13-циклогексил-3 -фтор-7Н-индоло[2,1-а] [2]бензазепин-6,10-

Стадия 1.

К раствору 2-бром-5-фторбензонитрила 33а (10 г, 50 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (100 мл) в атмосфере азота добавляли метилмагнийбромид (3,2 М в эфире, 19 мл, 60,0 ммоль) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 ч. Затем, рс охлаждали до кт, выливали в 2н. раствор НС1 (100 мл) и далее разбавляли метанолом (100 мл). Образовавшийся раствор зеленого цвета концентрировали на паровой бане в течение 1 ч, при этом органические растворители удалялись и сырой продукт выпадал в осадок. Затем, реакционную смесь экстрагировали этилацетатом, сушили над Мд8О₄ и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией, используя гептан и дихлорметан, с получением 4,88 г (45% выход) желаемого продукта 1-(2-бром-5-фторфенил)этанона 33Ь в виде масла розового цвета; т/ζ = 218 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

Указанный в заголовке продукт трет-бутил 2-(2-ацетил-4-фторфенил)-3-циклогексил-1Н-индол-6карбоксилат 33с синтезировали способом, описанным для синтеза трет-бутил 3-циклогексил-2-(4-фтор-2формилфенил)-1Н-индол-6-карбоксилата 32ά, используя 1-(2-бром-5-фторфенил)этанон 33Ь вместо 2бром-5-фторбензальдегида 32с, и получали продукт с 65% выходом в виде белого твердого вещества; т/ζ = 436 [М+Н]⁺.

Стадия 3.

33с 20а

Указанный в заголовке продукт 6-метил 13-циклогексил-3-фтор-5-метил-7Н-индоло[2,1а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилат 20а синтезировали способом, описанным для синтеза 10-трет-бутил 6-метил 13-циклогексил-3-фтор-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 19а, используя третбутил 2-(2-ацетил-4-фторфенил)-3-циклогексил-1Н-индол-6-карбоксилат 33с вместо трет-бутил 3циклогексил-2-(4-фтор-2-формилфенил)-1Н-индол-6-карбоксилата 32ά, и продукт получали с выходом 11% в виде белого твердого вещества; т/ζ = 504 [М+Н]⁺.

- 58 019008

Пример 34. Синтез соединения 21а.

Стадия 1.

Производное броминдола 32а (5 г, 13,22 ммоль), 4-хлор-2-формилфенилбороновую кислоту 34а (3,17 г, 17,18 ммоль) и карбонат калия (4,20 г, 30,4 ммоль) растворяли в 100 мл смеси 1,2-диметоксиэтан (80 мл)/вода (20 мл) 4/1 и полученный раствор тщательно продували аргоном. Далее добавляли бис(трифенилфосфин)палладия(П) хлорид (0,464 г, 0,661 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 63°С в атмосфере аргона в течение 3 ч. Затем, реакционную смесь разбавляли ЕЮАс, промывали водой и насыщенным водным раствором NаΗСΟз, сушили (насыщенный раствор соли, сульфат) и упаривали. Остаток поглощали в ОГРЕ и перемешивали и подвергали действию ультразвука в гептане с несколькими мл добавленного ОГРЕ. Образовавшееся твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением 4,97 г (86% выход) желаемого продукта трет-бутил 2-(4-хлор-2-формилфенил)-3-циклогексил-1Н-индол-6карбоксилата 34Ь; т/ζ = 431 [М+Н]⁺.

Стадия 2.

Производное индола 34Ь (4,95 г, 11,30 ммоль) и карбонат цезия (4,42 г, 13,56 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (сухой) (50 мл) и добавляли метил 2-(диметоксифосфорил)акрилат (3,23 г, 14,13 ммоль). РС перемешивали при 65°С в течение 2 ч. Затем, реакционную смесь охлаждали до кт и добавляли по каплям в 300 мл воды при энергичном перемешивании. Образовавшееся желтоватое твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили с получением 5,40 г (94% выход) желаемого продукта 10-трет-бутил-6-метил-3-хлор-13-циклогексил-7Н-индоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 21а, используемого без дальнейшей очистки на следующей стадии; т/ζ = 507 [М+Н]⁺.

Пример 35. Синтез соединения 24а.

Указанное в заголовке соединение 24а синтезировали, следуя 2-стадийному способу, описанному для синтеза 10-трет-бутил-6-метил-3-хлор-13-циклогексил-7Н-индоло[2,1-а] [2]бензазепин-6,10дикарбоксилата 21а, используя 5-хлор-2-формилфенилбороновую кислоту на первой стадии вместо 4хлор-2-формилфенилбороновой кислоты 34а, и получали продукт с выходом 70% в виде желтоватого твердого вещества; т/ζ = 507 [М+Н]⁺.

- 59 019008

Пример 36. Синтез соединения 24Ь.

1 X X	I НО-.О X х
° ифб	ЫаОН	1 Г нч
Ζ V С1		'С|
24а		24Ь

Раствор NаΟН (6,38 г) в 25 мл воды добавляли к перемешиваемому раствору производного индола 24а в ТГФ (100 мл) и МеОН (150 мл). Через 1 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, затем разбавляли охлажденной льдом водой (150 мл). Далее рН полученного раствора доводили до рН 6 НС1, затем раствор экстрагировали дихлорметаном и сушили над Мд^^ Растворитель удаляли, далее остаток очищали колоночной хроматографией, используя смесь ^СМ/МеΟН в качестве элюента, с получением 1,7 г (87% выход) желтоватого твердого вещества; т/ζ = 492 [М+Н]⁺.

Пример 37. Синтез соединения 16а.

НО—^0Н

Стадия 1.

37а

Р-ТЗА ловушка Дина-Старка нагревание о обратным холодильником

Этан-1,2-диол (4,06 г) и ТокЮН (0,41 г) добавляли к раствору 1-(2-бром-5-метоксифенил)этанона 37а (5 г) в толуоле (950 мл). Раствор нагревали с обратным холодильником при перемешивании в 3горлой круглодонной колбе с ловушкой Дина-Старка в течение 3 ч. Затем, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь переносили в делительную воронку и добавляли раствор карбоната натрия (1 М, 50 мл). Смесь перемешивали и две фазы образовывались. Органический слой отделяли, промывали водой (2х 50 мл), сушили над Мд§Ο₄ и концентрировали в вакууме с получением 6,5 г (количественный выход) желаемого продукта 2-(2-бром-5-метоксифенил)-2-метил-1,3-диоксолана 37Ь в виде белого твердого вещества.

Стадия 2.

Бромпроизводное соединение 37Ь (6 г) растворяли в сухом ТГФ (60 мл) и раствор охлаждали до -78°С. Затем, п-ВиЬ1 (16,5 мл) осторожно добавляли при такой скорости, при которой температура не превышала -60°С. Через 1 ч В(О-1-Рг)₃ (6,2 г) аккуратно добавляли по каплям при -78°С. После добавления всего количества охлаждающую ванну отставляли. Смесь перемешивали при 0°С в течение 2,5 ч, затем 2н. НС1 (60 мл) добавляли и РС перемешивали при кт в течение 2 ч. Далее органический растворитель удаляли в вакууме и водный слой насыщали №1С1 и экстрагировали ЕЮАс. Органический слой сушили над Ν;·ι₂8Ο.·ι и упаривали в вакууме с получением 3 г желаемого продукта 2-ацетил-4метоксифенилбороновой кислоты 37с.

- 60 019008

Стадия 3.

32а 37с 37Л

Указанный в заголовке продукт трет-бутил 2-(2-ацетил-4-метоксифенил)-3-циклогексил-1Н-индол6-карбоксилат 37ά синтезировали способом, подобным способу, описанному для синтеза трет-бутил 2-(4хлор-2-формилфенил)-3-циклогексил-1Н-индол-6-карбоксилата 34Ь, используя 2-ацетил-4метоксифенилбороновую кислоту 37с вместо 4-хлор-2-формилфенилбороновой кислоты 34а.

Стадия 4.

37(1 16а

Указанный в заголовке продукт 10-трет-бутил 6-метил 13-циклогексил-3-метокси-5-метил-7Ниндоло[2,1-а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилат 16а синтезировали способом, подобным способу, описанному для синтеза 10-трет-бутил 6-метил 13-циклогексил-3-фтор-5-метил-7Н-индоло[2,1а][2]бензазепин-6,10-дикарбоксилата 20а, используя трет-бутил 2-(2-ацетил-4-метоксифенил)-3циклогексил-1Н-индол-6-карбоксилат 37ά вместо трет-бутил 2-(2-ацетил-4-фторфенил)-3-циклогексил1Н-индол-6-карбоксилата 33с.

Пример 38. Синтез соединения 38.

ЗЯ

Синтез указанного в заголовке соединения 38 осуществляли, следуя 5-стадийному способу, описанному для синтеза соединения 10, исходя из промежуточного соединения 10-трет-бутилового эфира 6метилового эфира 13-циклогексил-3-метокси-7Н-бензо[3,4]азепино[1,2-а]индол-6,10-дикарбоновой кислоты 1а вместо 5-трет-бутил 1а-метил 8-циклогексил-11-метокси-1,12Ь-дигидроциклопропа[б]индоло[2,1-а][2]бензазепин-1а,5(2Н)-дикарбоксилата 8а, и получали 60 мг твердого вещества бежевого цвета; т/ζ = 577 [М+Н]⁺.

Пример 39. Активность соединений формулы (I).

Анализ репликона.

Соединения формулы (I) исследовали относительно их способности к ингибированию репликации РНК вируса ΗΟν в клеточном анализе. Данный анализ показал, что соединения формулы (I) ингибировали ΗΟν функциональную репликацию в клеточной линии, также известной как ΗΟν репликоны. Клеточный анализ основан на бицистронной экспрессионной конструкции, как описано ЬоЬтапп с1 а1. (1999), 8с1епсе νοί. 285, р. 110-113, с модификациями, описанными Кпедег с1 а1. (2001), 1онгпа1 оГ νίτοίоду 75: 4614-4624, при многоцелевой стратегии скрининга. В сущности, метод представлял собой сле дующее.

В анализе использовали стабильно трансфицированную клеточную линию Ηιι1ι-7 1ис/пео (далее упоминаемую как Ηιιΐι-Гис). Данная клеточная линия содержит РНК, кодирующую бицистронную экспрессионную конструкцию, включающую области N83-N85Β дикого типа ΗΟν типа 1Ь, транслируемые из участка внутренней посадки рибосомы (№8) вируса энцефаломиокардита (ЕМС^, с предшествующей репортерной частью (ΕίΕ-люцифераза) и частью селектируемого маркера (пео®, неомицин фос

- 61 019008 фотрансфераза). Конструкция была ограничена 5' и 3' ΝΤΡ (нетранслируемые области) НСУ типа 1Ь. Постоянная культура клеток, содержащих репликон, в присутствии С418 (пео®) была зависимой от репликации РНК НСУ. Для скрининга противовирусных соединений использовали стабильно трансфицированные содержащие репликон клетки, которые экспрессировали РНК НСУ, которая реплицировала автономно и до высоких уровней, кодируя, помимо прочего, люциферазу.

Содержащие репликон клетки помещали в 384-луночные планшеты в присутствии тестируемых и контрольных соединений, которые добавляли в различных концентрациях. После инкубирования в течение трех дней, репликацию НСУ измеряли путем анализирования активности люциферазы (с использованием стандартных субстратов и реагентов анализа люциферазы и системы визуализации для микропланшетов Регкш Е1тег У1е^Ьих™ и11гаНТ8). Клетки, содержащие репликон, в контрольных культурах имели высокую экспрессию люциферазы в отсутствие какого-либо ингибитора. Ингибирующую активность соединения контролировали на клетках Ний-Ьис, что дало возможность выстроить кривую дозаответ для каждого тестируемого соединения. Затем рассчитывали значения ЕС₅₀, где значение представляло собой количество соединения, требуемое для снижения на 50% уровня обнаруживаемой активности люциферазы, или, более конкретно, способность генетически связанного НСУ репликона РНК к репликации.

Ферментативный анализ

1. НСУ Ν85Β 1Ы4.

1.а) Очистка белка.

кДНК, кодирующая аминокислоты Ν85Β 1-570 (НС-14, генотип 1Ь, рСУ-14Ь68, номер доступа в генобанке АЕ054247), была субклонирована в ΝΙκΙ и ΧΙιοΙ сайты рестрикции рЕТ-21Ь. Экспрессию полученного белка Ν85Β, лишенного 21 аминокислоты, с Н18-тагом на С-конце осуществляли следующим образом.

Экспрессионную конструкцию Ν85Β трансформировали в Е.сой ΒΕ21(ΌΕ3) (Ыоуадеп, МабЕоп, VI). 5 мл ΕΒ-среды, снабженной ампициллином (50 мкг/мл), засевали одной колонией. Когда прекультура достигала оптической плотности 0,6, измеренной при 600 нм, ее переносили в свежую ΕΒ-среду, снабженную ампициллином, при отношении 1:200. Клетки растили до оптической плотности 0,6 при 600 нм, после чего температура роста экспрессирующих культур составляла 20°С после индукции изопропил-1тио-в-б-галактопиранозидом и МдС1₂ при конечной концентрации 0,4 мМ и 10 мкМ соответственно. Через 10 ч индукции клетки собирали центрифугированием и ресуспендировали в буфере 20 мМ трис-НС1, рН 7,5, 300 мМ ИаС1, 10% глицерина, 0,1% ΝΓ40, 4 мМ МдС1₂, 5 мМ ΌΤΤ, снабженном ЭДТАсвободным полным протеазным ингибитором (КосЕе, Ба5е1, З\\)^ег1апб).

Суспензии клеток разрушали действием ультразвука и инкубировали с 10-15 мг/л ДНК-азы Ι (КосЕе, Ба^еР З\\тМег1апб) в течение 30 мин. Клеточный детрит удаляли ультрацентрифугированием при 30000хд в течение 1 ч и осветленный клеточный лизат быстро замораживали и хранили при -80°С до очистки.

Осветленный клеточный лизат размораживали и далее помещали на 5-мл упакованную НЕ Тгар ЕЕ колонку, уравновешанную 25 мМ НЕРЕЗ, рН 7,5, 500 мМ ИаС1, 10% глицерина и 5 мМ ΌΤΤ. Белки элюировали 500 мМ имидазолом при скорости потока 1 мл/мин. Фракции, содержащие представляющий интерес белок, переносили на упакованную 26/10 НтРгер БекаШпд колонку, уравновешанную 25 мМ НЕРЕЗ, рН 7,5, 150 мМ ИаС1, 10% глицерина и 5 мМ ΌΤΤ. Буфером элюированную пиковую фракцию Ν35Β затем помещали на 20-мл колонку с Ро1у-и ЗерЕагоке. Белок элюировали с использованием увеличивающегося солевого градиента и фракции собирали. Чистоту белка оценивали, используя заводские гели Νιι-РЛСЕ (1пуИгодеп, СагкЬаб, СА). Очищенные пробы Ν35Β концентрировали, используя концентраторы Сеп1п-Ргер (М1Шроге, Βί1^Γ^η, МА, иЗА), и концентрации белка определяли методом Бредфорда (йегсе, КоскЕогб, Ι4, иЗА).

1.Ь) Последовательность белка.

РББ: 1 пЬ4, Аро-форма.

Белковая последовательность является таковой, как описана в международной публикации νθ 2007/026024. Рассчитанные молекулярные характеристики: 64941,4 г/моль.

1.с) Анализ ингибирования NЗ5Β 1Ы4.

Измерение активности полимеризации НСУ ХЗ5Б осуществляли путем оценки количества меченого радиоактивным изотопом СΤР, включенного посредством фермента во вновь синтезированную РНК, используя гетерополимерную РНК матрицу/праймер. Анализ КбКр выполняли в 384-луночных планшетах, используя 50 нМ очищенного фермента Ν^Β, который инкубировали с 300 нМ 5'биотинилированного олиго(гС1₃)/поли(гС) или олиго(гШ5)/поли(гА) праймера-матрицы, 600 нМ СΤР и 0,1 мкКи [³Н]ОТР или [^ОТР в 25 мМ трис-НС1, рН 7,5, 5 мМ М§С1₂, 25 мМ КС1, 17 мМ ХаС1 и 3 мМ ΌΤΤ. Затем, 30 мкл реакционной смеси инкубировали при комнатной температуре в течение 2 ч до остановки реакции путем добавления 30 мкл стрептавидином покрытых ЗРА-шариков (СЕ НеаИЕсаге, иррка1а, З\тебеп) в 0,5 М ЭДТА. Реакцию завершали после 2 ч при 25°С при добавлении 30 мкл стрептавидином покрытых ЗРА-шариков (СЕ НеаИЕсаге, иррка1а, З\уебеп, 5 мг/мл в 0,5 М ЭДТА). После инкуба

- 62 019008 ции при 25°С в течение 30 мин, планшет просчитывали, используя считывающее устройство для микропланшетов Раскагй ТорСоип! (30 с/лунку, задержка счета 1 мин), и величины 1С₅₀ рассчитывали (табл. 1: 1С₅₀ 1Ы4). Величины 1С₅₀ представляют собой концентрацию соединения, требуемую для уменьшения на 50% количества продуцируемой РНК, которую измеряют путем определения включенного СТР, меченого радиоактивным изотопом.

2. НСУ Ν85Β соп 1Ь.

2.а) Клонирование, экспрессия и очистка Ν85Β соп1Ь.

Кодирующую последовательность для Ν85Β (консенсус генотипа 1Ь штамма Соп1) с отсутствующими 21 С-концевыми аминокислотными остатками амплифицировали из плазмиды ρΕΙ<Ι₃₈₉₁/π53-3'_Ν (по. доступа в генобанке А1242654) и субклонировали в плазмиду рЕТ21Ь, как описано ранее (Раи\уе15 е! а1., 2007, 1. У1го1. 81:6909-19). Экспрессионная конструкция N85ΒΔС21 была трансформирована в Е. сой Яокейа 2 (ЭЕ3) (Ыоуадеп, Майкоп, XVI). Сто миллилитров ΕΒ-среды, снабженной карбенициллином (50 мкг/мл) и хлорамфениколом (34 мкг/мл), засевали одной колонией, выращивали в течение ночи и переносили в свежую ΕΒ-среду, снабженную 3% этанола, карбенициллином и хлорамфениколом, при отношении 1:200. Остальная методика была, как описано ранее (Раи\уе15 е! а1., 2007, 1. У1го1. 81:6909-19), за исключением того, что колонка, используемая для ионообменной хроматографии, была 6 мл Яекоигсе 8 (СЕ Неаййсаге) и что концентрацию белка определяли посредством спектрофотометра Nаηоά^ор (№1пойгор ТесНпо1о§1е5. '№11т1пд1оп, ЭЕ. и8А).

2.Ь) Анализ РНК-зависимой РНК-полимеразы.

Концентрации, обусловливающие 50% ингибирования (табл. 1: 1С₅₀ соп1Ь), определяли способом, описанным ранее (Раи\уе15 е! а1., 2007, 1. У1го1. 81:6909-19), используя зависимый от праймера транскрипционный анализ. После 10 мин преинкубации с ингибитором 20 нМ очищенного фермента Соп1Ь Ν85Β инкубировали в течение 10 мин с 150 нМ 5'-биотинилированного олиго(гС1₃) праймера, 15 нМ поли (гС) матрицы, 19 мМ трис-НС1, 5 мМ МдС1₂, 17 мМ №С1, 21 мМ КС1 и 2,5 мМ ОТТ. Затем, добавляли 600 нМ СТР и 0,13 мкКи [³Н]СТР для инициирования 40-мкл реакционной смеси, которую затем инкубировали при комнатной температуре в течение 2 ч до остановки реакции путем добавления 40-мкл стрептавидином покрытых 8РА-шариков.

В следующей табл. 1 приведены соединения согласно любому одному из приведенных выше примеров. Активности тестируемых соединений также представлены в табл. 1.

Таблица 1

№	Структура		ЕС» (мкМ)		1С» 1Ы4 (мкМ)		1С»Соп1Ь (мкМ)
2			0.09		0.41

- 63 019008

1	о*3мн >4.		0.07		0.24		0.038
11	X “λ? N ^®с° οβ^<Η ο 'μη		0.055		0.22
5	νΧ^ν'^λνη ο^η СД.		0.92		0.29
12	'Ν ζ*Χ<%χ^·ΝΗ ^ίΟ 0₽ ΝΗ лЧ		0.29		0.93
10	Η Λ И5 ьй 0* 'ΜΗ /ΧΙ		0.06		0.28

- 64 019008

13	ι ~Ύ°		0.39		0.19
3	ч 1 °“/-ΝΗ .V		0.079				0.53
4	ч 1 нЖо-^уО ^ΟόξΟν		3.83				2.42
6	°гт Л		0.550
8	. 1 Ν'^_θ'Λχ-'ΝΎ>9 °о^к И °44όν		0.040

- 65 019008

9	. 1 4Ν'Χ^Ο'^'Ν'γ”°		0.800
15	ΟΛθδ>/		0.180
16	°ο^Τ Λ ЧЖУ-/		0.078				0.040
17	. 1 ΝγΟ °*/-νη /“Α		0.170
18	°0Ау А		0.079				0.026

- 66 019008

- 67 019008

24	Οβ8-ΝΗ / < \ с*		14.48
25	°^δ-ΝΗ ^Д^		0.550
26	4 -χ/Χ^Ν 0 °*/~ΝΗ Д. 0 /		0.130
27	X '“^^Λ'ΝΗ 0=5=0 ^ίθ ΗΝ Д_		10.20
28	°'δ-ΝΗ ^Д^		0.330
38	— N ο-3-ο ρ N 0ΎΧλΟν		0.912

Ферментсвязывающая активность.

Соединения формулы (Ι) исследовали относительно их кинетики ферментативного связывания, используя метод, основанный на поверхностном плазмонном резонансе (8РК), т.е. В1асоге. Медленная диссоциация комплекса ингибирующего соединения и его вирусной мишени (низкий к_о££, низкий К₆), как полагают, потенциально снижает развитие лекарственной резистентности от противовирусных лекарственный средств (Э|егупск е1 а1. 2007, 1оигиа1 о£ νίΓοΙοβν, νοί. 81, Νο. 24, 13845-13851). Все измерения были выполнены на приборе В1асоге Т100 (СЕ НеаНсаге). Очищенные Ν85ΒΔί.’21 полимеразы с Н!8₆тагом были иммобилизованы, используя нековалентный захват к сенсорному чипу NТΑ (СЕ НеаНсаге) в

- 68 019008 буфере для иммобилизации (20 мМ МОР8 рН 7,4, 500 мМ №С1, 0,005% твин-Р20, 1 мМ ΌΤΤ, 50 мкМ ЭДТА). Все исследования взаимодействия были выполнены при 25°С. Ингибиторы последовательно разбавляли в рабочем буфере (20 мМ трис-НС1 рН 7,4, 150 мМ №С1, 50 мкМ ЭДТА, 1 мМ ΌΤΤ, 0,005% твин-Р20), содержащем 5% диметилсульфоксида (ДМСО). Использовали кинетику одного цикла, при котором 5 повышающихся концентраций соединения вносили в течение периода 300 с для каждой концентрации при одном цикле и диссоциацию контролировали в течение периода 1200 с. Поверхность сенсора была полностью регенерирована в период между циклами. Данные анализировали, используя одновременный нелинейный регрессионный анализ (глобальный подбор), приспособленный для кинетики одного цикла с программным обеспечением для оценки В1асоге Т100 В1аЕуа1 коП\\аге 2.0 (СЕ НеаИйсаге). Индивидуальные константы скорости к_оп и к_оГГ и выведенную константу сродства, К_б=к_о[|/к_оп, определяли путем оценки кинетических кривых сенсограмм. Кинетические модели обусловливали значительные и ограниченные эффекты массопереноса. Каждый анализ осуществляли, по меньшей мере, в виде двух независимых экспериментов. Скорость диссоциации кинетического взаимодействия может быть переведена во время удержания соединения (полупериод диссоциации 1_1/2=1п(2)/к_о{Г), характерное для времени взаимодействия между полимеразой и ее ингибитором.

Наблюдаемые константы скорости ассоциации (к_оп), константы скорости диссоциации (к_оГГ), выведенная константа сродства (1<_б) и полупериод диссоциации (!_1/2), измеренные для соединений формулы (I) или их подгрупп относительно фермента №5В дикого типа (генотип 1Ь, Соп1Ь), представлены в табл.

2.

Табл. 3 иллюстрирует данные связывающего сродства для соединения номер 1 относительно различных форм НСУ №5В полимеразы. Различные изученные формы ^85В-мишень) включают различные клинические изоляты различных генотипов фермента дикого типа и различные мутантные №5В полимеразы. Мутантные ферменты получали путем сайт-направленного мутагенеза фермента 1Ы4 или Соп1Ь Ж5В. Мутации Р495Ь, У494А и Ь3921 расположены в связывающем кармане соединений согласно изобретению с полимеразой Ж5В.

Показали, что сильное связывание соединений формулы (I) или их подгрупп является постоянным в пределах одного генотипа, что соединения формулы (I) или их подгруппы проявляют сродство к полимеразе №5В различных генотипов, а также к полимеразам №5В с мутацией в индолсвязывающем кармане, и что связывание соединений формулы (I) или их подгрупп не изменяется под действием мутаций относительно других участков в ферменте.

Таблица 2

Номер	коп (1/Мз)	коГГ (1/5}	Ка (М)	£1/2 (мин)
16	2,2Е+04	3,6Е-05	1,6Е-09	321,5
18	2,0Е+04	4,8Е-05	2,4Е-09	241,0
1	2,0Е+04	9,0Е-05	4,4Е-09	128,4
28	7,ЗЕ+ОЗ	6,6Е-05	9,0Е-09	175,5
25	2,9Е+04	3,1Е-04	1,1Е-08	37,8
17	8,7Е+03	1,6Е-04	1,8Е-08	72,0
27	9,5Е+03	3,8Е-03	4,0Е-07	3,1
24	4,8Е+03	3,7Е-03	7,6Е-07	3,1
38	5,ЗЕ+ОЗ	4,1Е-05	7,7Е-09	283,8

- 69 019008

Таблица 3

Ν35Β мишень	коп (1/Мз)	коЯ(1/8)	Ка(М)	1-1/2 ( МИН )
1а изолят 1	7,4Е+04	4,8Е-04	6, 5Е-09	24,2
1а изолят 2	3,9Е+04	3,7Е-04	9,4Е-09	31, 3
1а изолят 3	8ДЕ+04	6,ОЕ-04	7,4Е-09	19,2
1а изолят 4	7,4Е+04	7,7Е-04	1,1Е-08	14,9
1а изолят 5	1,1Е+05	3,1Е-04	2,8Е-09	37,2
1Ь изолят 1	2,6Е+04	1,ОЕ-04	4,0Е-09	110,2
1Ь изолят 2	2,9Е+04	й,7Е-05	2,ЗЕ-09	172,1
1Ь изолят 3	3,7Е+04	1,2Е-04	3,ЗЕ-09	96, 4
1Ь изолят 4	3,5Е+04	1,7Е-04	4,9Е-09	67,5
2Ь изолят 1	1,8Е + 04	1,4Е-02	8,2Е-07	0, 8
2Ь изолят 2	4,ЗЕ+04	1,2Е-02	2,7Е-07	1,0
2Ь изолят 3	4,4Е+03	1,7Е-02	3,8Е-06	0,7
За изолят 1	9,5Е+04	3,7Е-04	3,9Е-09	31,1
За изолят 2	2,5Е+04	4,7Е-04	1,9Е-08	24,6
За изолят 3	6,0Е+04	3, 6Е-04	6, 1Е-09	31,7
4а изолят 1	2, 0Е+05	4,ЗЕ-04	2,1Е-09	26,7
4а изолят 2	2,8Е+05	3,8Е-04	1,4Е-09	30,1
4а изолят 3	1,8Е+05	6,ОЕ-04	3,4Е-09	19,1
5а изолят 4	4,ЗЕ+04	9,7Е-04	2,2Е-08	12,0

6а изолят 5	5,0Е+04	1,6Е-03	3,2Е-08	7,3
1ЬЛ4	2,0Е+04	1,0Е-04	5,2Е-09	110,2
Соп1Ь	2,0Е+04	9,0Е-05	4,4Е-09	128, 4
Р495Ь (1ЬЛ4)	5,9Е+03	2,2Е-02	3,8Е-06	0,5
Ь3921 (Сол1Ь)	1,8Е+04	9,7Е-04	5,5Е-08	11,9
Р495Ь (Соп1Ь)	3,4Е+03	2,2Е-02	6,4Е-06	0, 5
У494А (СОЛ1Ь)	5,5Е+04	8,4Е-04	1,5Е-08	13,8
М414Т (1ЬЛ4)	2,6Е+04	1,5Е-04	5,9Е-09	75,4
М423Т (1ЬЛ4)	2,5Е+04	1,5Е-04	6,ЗЕ-09	75,0
3282Т (1Ь34)	3,4Е+04	1,ЗЕ-04	3,9Е-09	88, 9
С316У (Соп1Ь)	3,5Е+04	7,6Е-О5	2,2Е-09	151,7

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims (18)

1. Соединение формулы (I) включая его стереохимически изомерные формы, и Ν-оксиды, соли, гидраты и сольваты, где Я¹ означает двухвалентную цепь, выбранную из

- 70 019008 каждая группа К³ независимо выбрана из группы, состоящей из водорода, С_!-4алкила и С_3-5циклоалкила;

а равно 3, 4, 5 или 6;

каждый Ь независимо равен 1 или 2;

с равно 1 или 2;

макроцикл А содержит от 14 до 18 атомов в цикле, в частности макроцикл А имеет 17 или 18 атомов в цикле;

каждая группа К² независимо означает водород, галоген или С1_-4алкокси;

группы К⁴ и К⁵ означают водород или К⁴ и К⁵ вместе образуют двойную связь или метиленовую группу с образованием конденсированного циклопропила;

К⁶ является водородом или метилом;

К⁷ означает С_3-7циклоалкил, необязательно замещенный галогеном.

2. Соединение по п.1, где

К¹ выбирают из -Ы(К³)-(СН₂)₄-Ы(К³)-, и каждая группа К³ независимо выбрана из водорода и метила.

3. Соединение по любому из пп.1 или 2, где К² расположен в пара-положении бензольной группы относительно связи, связывающей указанный бензол с индольной группой.

4. Соединение по любому из пп.1-3, где К² выбирают из фтора и метокси.

5. Соединение по любому из пп.1-4, где К⁷ выбирают из циклогексила и 2-фторциклогексила.

6. Соединение по любому из пп.1-5, где К⁴ и К⁵ вместе образуют двойную связь.

7. Соединение по любому из пп.1-5, где соединения формулы (I) имеют стереохимическую конфи- 71 019008 гурацию, как представлено формулой (ΙΑ)

8. Соединение по любому из пп.1-3, имеющее одну из структурных формул ΙΙ-1, ΙΙ-2, ΙΙ-3, ΙΙΙ-1, III2, ΙΙΙ-3, ΙΙΙ-4, ΙΥ-1, ΙΥ-2 или ΙΥ-3

- 72 019008

9. Соединение, имеющее структуру формулы

10. Фармацевтическая композиция, содержащая носитель и в качестве активного ингредиента соединение по любому из пп.1-9, в эффективном против вируса количестве.

11. Фармацевтическая композиция по п.10, содержащая в качестве активного ингредиента соединение по п.9.

12. Фармацевтическая композиция по п.10 или 11, дополнительно содержащая по меньшей мере одно другое соединение, проявляющее эффективность против НСУ.

13. Фармацевтическая композиция по любому из пп.10-12, дополнительно содержащая по меньшей мере одно соединение, проявляющее эффективность против ВИЧ.

14. Применение соединения по любому из пп.1-9 в качестве лекарственного средства.

15. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.10-13 в качестве лекарственного средства.

16. Применение соединения по любому из пп.1-9 для ингибирования репликации НСУ.

17. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.10-13 для ингибирования репликации НСУ.

18. Применение соединения по любому из пп.1-9 для производства лекарственного средства для ингибирования репликации НСУ.

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2