BRPI0915887B1 - Derivados de indol macrocíclicos úteis como inibidores do vírus da hepatite c - Google Patents

Abstract

derivados de indol macrocíclicos úteis como inibidores do vírus da hepatite c a presente invenção refere-se a inibidores de replicação de hcv de fórmula (1) incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, e sais, hidratos, solvatos dos mesmos, em que r1, r2, r4, r5, r6 e r7 têm o significado definido nas reivindicações. a presente invenção também refere-se a processos para preparar os referidos compostos, composições farmacêuticas contendo-os e seu uso na terapia de hcv.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “DERIVADOS DE INDOL MACROCÍCLICOS ÚTEIS COMO INIBIDORES DO VÍRUS DA HEPATITE C”.

Campo da invenção

A presente invenção refere-se a compostos de indol macrocíclicos tendo atividade inibidora sobre a replicação do vírus da hepatite C (HCV). Ela também diz respeito à composições compreendendo estes compostos como ingredientes ativos assim como processos para a preparação destes compostos e composições.

Antecedente da invenção

O vírus da hepatite C é a causa principal da doença crônica do fígado no mundo inteiro e se tomou um foco de pesquisa médica considerável. HCV é um membro da família Flavivirídae de vírus no gênero hepacivirus, e está íntimamente relacionado ao gênero flavivirus, que inclui vários vírus envolvidos na doença humana, tal como vírus da dengue e vírus da febre amarela, e à família pestivirus animal, que inclui vírus de diarréia viral bovina (BVDV). HCV é um vírus de RNA de filamento único de sentido positivo, com um genoma de cerca de 9.600 bases. O genoma compreende ambas as regiões não transladadas 5' e 3' que adotam estruturas secundárias de RNA, e uma estrutura de leitura aberta central que codifica uma poliproteína única de cerca de 3.010 a 3.030 aminoácidos. A poliproteína codifica dez produtos de gene, que são gerados a partir da poliproteína precursora por uma série orquestrada de clivagens endoproteolíticas co e pós-translacionais mediadas por ambas as proteases hospedeiras e virais. As proteínas estruturais virais incluem a proteína de nucleocapsídeo de núcleo, e duas glicoproteínas envelope E1 e E2. As proteínas não estruturais (NS) codificam algumas funções enzimáticas virais essenciais (helicase, polimerase, protease), assim como proteínas de função desconhecida. A replicação do genoma viral é mediada por uma RNA polimerase dependente de RNA, codificada por proteína não estrutural 5b (NS5B). Além da polimerase, as funções de helicase e protease viral, ambas codificadas na proteína NS3 bifuncional, têm mostrado ser essenciais para a replicação de RNA de HCV. Além da

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NS3 serina protease, HCV também codifica uma metaloproteinase na região de NS2.

HCV replica preferencialmente em hepatócitos mas não é diretamente citopático, levando à infecção persistente. Em particular, a ausência de uma resposta de linfócito T vigorosa e a propensão elevada do vírus para mutar, parecem promover uma alta taxa de infecção crônica. Há 6 genótipos de HCV principais e mais de 50 subtipos, que são diferentemente distribuídos geograficamente. HCV do tipo 1 é o genótipo predominante nos Estados Unidos e Europa. Por exemplo, HCV do tipo 1 responde por 70 a 75 porcento de todas as infecções por HCV nos Estados Unidos. A extensa heterogeneidade genética de HCV tem importantes implicações clínicas e diagnosticas, talvez explicando dificuldades no desenvolvimento de vacina e na falta de resposta à terapia. Em uma estimativa, 170 milhões de pessoas no mundo inteiro são infectadas com vírus da hepatite C (HCV). Depois da infecção aguda inicial, uma maior parte dos indivíduos infectados desenvolve hepatite crônica, que pode progredir para fibrose hepática levando à cirrose, doença hepática em estágio final, e HCC (carcinoma hepatocellular) (National Institute of Health Consensus Development Conference Statement: Management of Hepatitis C. Hepatology, 36, 5 Suppl. S3-S20, 2002). Cirrose hepática devido à infecção por HCV é responsável por cerca de 10.000 mortes por ano apenas nos Estados Unidos, e é a causa principal para transplantes de fígado. A transmissão do HCV pode ocorrer através do contato com sangue contaminado ou produtos de sangue, por exemplo, após transfusão de sangue ou uso de fármaco intravenoso. A introdução de testes diagnósticos usados na avaliação de sangue levou a uma tendência descendente na incidência de HCV pós-transfusão. Entretanto, determinado o progresso lenta para a doença hepática em estágio final, as infecções existentes continuarão a apresentar uma responsabilidade econômica e médica séria durante décadas (Kim, W.R. Hepatology, 36, 5 Suppl. S30-S34, 2002).

Terapias para HCV atuais são baseadas em interfero/V-alfa (IF/Va) (pegilado) em combinação com ribavirina. Esta terapia de combinação produz uma resposta virológica prolongada em mais que 40% de pacientes

3/121 infectados por vírus de genótipo 1 e cerca de 80% daqueles infectados por genótipos 2 e 3. Em comparação com a eficácia limitada no HCV tipo 1, a terapia de combinação tem efeitos colaterais significantes e é tolerada pobremente em muitos pacientes. Por exemplo, em tentativas de inscrição de interferona pegilada e ribaviria, efeitos colaterais significantes resultaram em descontinuação de tratamento em aproximadamente 10 a 14 porcento de pacientes. Efeitos colaterais principais de terapia de combinação incluem sintomas como gripe, anormalidades hematológicas, e sintomas neuropsiquiátricos. O desenvolvimento de tratamentos mais eficazes, convenientes e tolerados é um objetivo de saúde pública principal. Desse modo, o tratamento desta doença crônica é uma necessidade clínica não atendida, desde que a terapia atual seja apenas parcialmente eficaz e limitada por efeitos colaterais indesejáveis.

Uma área de foco particular foi a procura quanto a inibidores de RNA polimerase dependente de RNA (RdRp) de NS5b. Homólogos estruturais próximos desta polimerase não existem dentro da célula hospedeira não infectada, e a descoberta de inibidores da referida polimerase fornecería um modo mais específico de ação. Inibidores que estão atualmente sob investigação podem ser classificados como quaisquer inibidores de nucleosídeo (Nls) ou inibidores de não nucleosídeo (NNIs). Nls competem diretamente com substratos de nucleotídeo para ligarem-se a sítios ativos altamente conservados. Maior especificidade pode ser obtida por NNIs, que só podem interagir fora do sítio ativo altamente conservado em um sítio alostérico único comum apenas para polimerases estruturalmente relacionadas.

Derivados de indol foram descritos quanto a atividade de inibidora de HCV. WO 2007/092000 descreve derivados de indol tetracíclicos como inibidores de NS5B de HCV para o tratamento e/ou prevenção de infecção por vírus HCV. US 2008/0146537 descreve inibidores de NS5B de HCV de indolobenzazepina fundida por ciclopropila. WO 2008/075103 descobre derivados de indol macrocíclicos úteis para o tratamento ou prevenção de infecção por vírus da hepatite C.

Até hoje, tentativas clínicas preliminares resultaram em uma taxa

4/121 de fracasso alta, desse modo realçando a necessidade de prosseguir a procura quanto a novos inibidores de NS5b. Há uma necessidade médica alta quanto ao tratamento anti-HCV eficaz e seguro. Tais inibidores de HCV podem superar as desvantagens de terapia de HCV atual tais como efeitos colaterais, eficácia limitada, o aparecimento de resistência, e fracassos de complacência, bem como melhorar a resposta viral prolongada. Em particular, onde os compostos terapêuticos têm biodisponibilidade boa e um perfil farmacocinética e metabólico favorável.

Sumário da invenção

Foi constatado que certos derivados de indol macrocíclicos exibem a atividade antiviral em indivíduos infectados com HCV com propriedades úteis que consideram um ou mais dos seguintes parâmetros: eficácia antiviral, prophile mutante favorável, falta de toxicidade, perfil farmacocinético e metabólico favorável, e facilidade de formulação e administração. Estes compostos são, portanto, úteis no tratamento ou combate de infecções por HCV.

A presente invenção diz respeito a inibidores de replicação de HCV, que podem ser representados por fórmula (I),

incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, e /V-óxidos, sais, hidratos, e solvatos dos mesmos, em que:

- R¹ é uma cadeia bivalente selecionada a partir de

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R³ R³ ,

R³

R³

I

- cada R³ é independentemente selecionado a partir do grupo que compreende hidrogênio, Ci^ alquila e C3.5 cicloalquila;

- a é 3, 4, 5 ou 6;

- cada b é independentemente 1 ou 2;

- c é 1 ou 2;

- macrociclo A tem átomos de 14 a 18 membros;

- cada R² é independentemente hidrogênio, halo ou alcóxi;

- R⁴ e R⁵ são hidrogênio ou R⁴ e R⁵ juntos formam uma ligação dupla ou um grupo metileno para formar uma ciclopropila fundida;

- R⁶ é hidrogênio ou metila; e

- R⁷ é uma C₃_7cicloalquila opcionalmente substituída com halo.

A invenção também refere-se a métodos para a preparação dos compostos de fórmula (I), incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, e /V-óxidos, aminas quaternárias, complexos de metal, sais, hidratos ou sol15 vatos dos mesmos, seus intermediários, e o uso dos intermediários na preparação dos compostos de fórmula (I).

A invenção refere-se aos compostos de fórmula (I) per se, incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, e /V-óxidos, aminas quaterná

6/121 rias, complexos de metal, sais, hidratos ou solvatos dos mesmos, para uso como um medicamento. A invenção refere-se aos compostos de fórmula (I) per se, incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, e /V-óxidos, aminas quaternárias, complexos de metal, sais, hidratos ou solvatos dos mesmos, para tratar hepatite C. A invenção também refere-se às composições farmacêuticas que compreendem um veículo e uma quantidade antiviralmente eficaz de um composto de fórmula (I) como especificado aqui. As composições farmacêuticas podem compreender combinações dos compostos acima mencionados com outros agentes anti-HCV. As composições farmacêuticas podem compreender combinações dos compostos acima mencionados com agentes anti-HIV. A invenção também refere-se às composições farmacêuticas acima mencionadas para administração a um indivúdo sofrendo de infecção por HCV.

A invenção também refere-se ao uso de um composto de fórmula (I), incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, ou /V-óxidos, aminas quaternárias, complexos de metal, sais, hidratos ou solvatos dos mesmos, para a fabricação de um medicamento para inibir a replicação de HCV. A invenção também refere-se ao uso de um composto de fórmula (I), incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, ou /V-óxidos, aminas quaternárias, complexos de metal, sais, hidratos ou solvatos dos mesmos, para a fabricação de um medicamento para prevenir ou tratar condições associadas com HCV. A invenção também refere-se a um método de inibir a replicação de HCV em um animal homeotérmico o referido método compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, ou /V-óxidos, aminas quaternárias, complexos de metal, sais, hidratos ou solvatos dos mesmos. A invenção também refere-se a um método para prevenir ou tratar condições associadas com HCV em um animal homeotérmico o referido método compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, ou /V-óxidos, aminas quaternárias, complexos de metal, sais, hidratos ou solvatos dos mesmos.

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Descrição detalhada

A presente invenção será agora também descrita. Nas passagens seguintes, aspectos ou modalidades diferentes da invenção são definidos em mais detalhes. Cada aspecto ou modalidade desse modo definido pode ser combinado com qualquer(quaisquer) outro(s) aspecto(s) ou modalidade (s) a menos que indicado claramente ao contrário. Em particular, qualquer característica indicada como sendo preferida ou vantajosa pode ser combinada com qualquer outra característica ou características indicadas como sendo preferidas ou vantajosas para formular uma modalidade particular.

Como usado no antecedente e em seguida, as seguintes definições aplicam-se a menos que de outra maneira notado.

Com a finalidade da presente invenção, os termos “indivíduo” ou “indivíduo infectado” ou “paciente” refere-se a um indivíduo infectado com HCV, em necessidade de tratamento.

O termo “halo” ou “halogênio” é genérico para flúor, cloro, bromo e iodo.

Quando aqui usado “Ci^ alquila” como um grupo ou parte de um grupo define radicais de hidrocarboneto saturados de cadeia reta ou ramificada tendo de 1 a 4 átomos de carbono tais como por exemplo metila, etila, prop-1-ila, prop-2-ila, but-1 ila, but-2-ila, isobutila, 2-metilprop-1-ila; “Ci_ ₃alquila” como um grupo ou parte de um grupo define radicais de hidrocarboneto saturados de cadeia reta ou ramificada tendo de 1 a 3 átomos de carbono tal como por exemplo metila, etila, prop-1-ila, prop-2-ila.

O termo “Ci_₆alquileno” como um grupo ou parte de um grupo refere-se a grupos Ci^alquila que são divalentes, isto é, com duas ligações simples para ligação a dois outros grupos. Exemplos não limitantes de grupos alquileno incluem metileno, etileno, metilmetileno, propileno, etiletileno, 1-metiletileno e 1,2-dimetiletileno.

“C3.₇cicloalquila” é genérico a ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila e cicloeptila. O termo “C₃.₅ cicloalquila” é significado compreender ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila.

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O termo “Ci^alcóxi ou “C^alquílóxi” como um grupo ou parte de um grupo refere-se a um radical tendo a fórmula -OR^a, em que R^a é Ci. ₄alquila como definido acima. Exemplos não limitantes de Ci_₄alcóxi adequado incluem metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, butóxi, isobutóxi, sec-butóxi e terc-butóxi.

Deve ser notado que as posições do radical em qualquer porção molecular usada nas definições podem estar em qualquer lugar em tal porção contanto que seja quimicamente estável.

Radicais usados nas definições das variáveis incluem todos os possíveis isômeros a menos que de outra maneira indicado. Por exemplo, piperidinila inclui piperidi/V-1 -ila, piperidi/V-2-ila, piperidi/V-3-ila, e piperidi/V-4ila; pentila inclui pent-1-ila, pent-2-ila e pent-3-ila.

Quando qualquer variável ocorre mais de uma vez em qualquer constituinte, cada definição é independente.

Sempre usado em seguida, o termo “compostos de fórmula (I)”, ou “os compostos presentes” ou termos similares, é significado incluir os compostos de fórmula (I), incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, e seus /V-óxidos, aminas quaternárias, complexos de metal, sais, hidratos ou solvatos dos mesmos. Uma modalidade compreende os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo especificado aqui, incluindo as possíveis formas estereoquimicamente isoméricas, bem como os /V-óxidos, sais, hidratos, e solvatos dos mesmos. Outra modalidade compreende os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo especificado aqui, incluindo as possíveis formas estereoquimicamente isoméricas, bem como os /V-óxidos, sais, hidratos, e solvatos dos mesmos.

Sempre usado em seguida, o termo “opcionalmente substituído” é significado incluir não substituído bem como substituído com pelo menos um dos radicais de substituição especificados. Com a finalidade de exemplo, “Ci^alquila opcionalmente substituída com cloro” é significado incluir Ci. ₄alquila não substituída bem como C^alquila substituída com cloro.

Os compostos de fórmula (I) podem ter um ou mais centros quiralidade e podem existir como formas estereoquimicamente isoméricas. O

9/121 termo “formas estereoquimicamente isoméricas” como usado aqui define todos os possíveis compostos preparados dos mesmos átomos ligados pela mesma sequência de ligações porém tendo estruturas tridimensionais diferentes, que os compostos de fórmula (I) podem possuir.

Com referência aos exemplos onde (/?) ou (S) é usado para designar a configuração absoluta de um átomo quiral dentro de um substituinte, a designação é feita levando em consideração o composto inteiro e não o substituinte no isolamento.

Em um aspecto, a presente invenção fornece compostos de fórmula (I)

incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, e /V-óxidos, sais, hidratos, e solvatos dos mesmos, em que R¹, R², R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ e A têm o mesmo significado como definido aqui. Modalidades da presente invenção diz respeito a compostos de fórmula (I), ou qualquer subgrupo dos mesmos como definido aqui, em que uma ou mais das definições para R¹, R², R⁴, R⁵, R⁶, e R⁷ como especificado nas modalidades aqui abaixo aplicam-se:

Subgrupos particulares dos compostos de fórmula (I) são compostos de fórmula (II), (III) ou (IV)

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mo significado como definido aqui.

Em uma modalidade, R^{1 *} é uma cadeia bivalente selecionada a partir de

R³

R³

¹ Ai ' -;-N^ 'a'N—i*fill'

Em uma modalidade particular, R é selecionado a partir de R₃ R₃ , .R

Ii³ o— ^NT, . r₃ r₃ . , R³ r^N-;-I-NvyN^J ¹ r³ , e ¹ rfc , em que a e c são como definidos aqui acima, ou, em que a é 4 ou 5 e c é 1 ou 2. Em outra modalidade particular, R¹ é selecionado a partir de r₃ r | R³ R³¹ ;i³ ?³·

-N(R³)-(CH2)4-N(R³)-, I ; r3 ₎ e “'^_N<A^N\x^ ¹ 1

Quando Ré' , é entendido que R pode ser orientado em duas direções, isto é, a porção de piperazinila pode ser conectada ao grupo sulfonamida enquanto a amina alifática é conectado ao grupo 15 carbonila, ou, a porção de piperazinila é conectada ao grupo carbonila, e a amina alifática é conectada ao grupo sulfonamida.

11/121 r’ rN-íPreferivelmente, quando Ré¹ Vic , a porção de piperazinila é conectada ao grupo carbonila, e a amina alifática é conectado ao grupo sulfonamida.

Em uma modalidade mais particular, R¹ é selecionado a partir de f^H3 θ^Η3.

—!—^Nx ^N—·— ' O :

çh₃ 'XQ. ÇH₃ —I—N./x „

I ch₃

Alternativamente, . ch₃ ÇH₃; I

I I — -N.

, N~;—I çh₃₁

I t N—' , e

R¹ é p N—I—

N

I ch₃ selecionado a partir de . ÇH₃ —N. /x ;

N— H

N—i— I ^! CH₃

Γ N—!

! ¹ —I—N ! I e ch₃

ÇH₃ ^N\

Em uma modalidade preferida, Ré!

. çh₃ —N. /x.

Ό'

Ç_H3

N—·

Em outra modalidade, R¹ é

N— H çh₃ —;-N.

Em outra modalidade, R¹ é

N—

I ^! ch₃ ,

I^^N—I—

Em outra modalidade preferida, R¹ é ' ch₃

Cada R³ é independentemente selecionado a partir do grupo que compreende hidrogênio, Ci^alquila e C₃.₅cicloalquila. Em uma modalidade particular, R³ é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em hidrogênio, metila, etila, isopropila e ciclopropila. Em uma modalidade mais particular, cada R³ é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em hidrogênio e metila; ou, R³ é metila.

Macrociclo A tem átomos de 14 a 18 membros. Em uma modalidade particular, macrociclo A tem 16, átomos de 17 ou 18 membros. Em

12/121 uma modalidade mais particular, A tem 17 átomos de membro.

R² é selecionado a partir do grupo que compreende hidrogênio, halo ou C^alcóxi. Em uma modalidade particular, R² é selecionado a partir do grupo que compreende hidrogênio, cloro, flúor ou metóxi. Em uma modalidade mais particular, R² é hidrogênio ou metóxi ou cloro; ou, alternativamente, R² é flúor ou metóxi; ou, em uma modalidade preferida, R² é metóxi. Em outra modalidade, R² está posicionado no anel de benzeno em meta ou para com respeito à ligação que liga o benzeno ao grupo indol. Em uma modalidade preferida, R² está posicionado no anel de benzeno em para com respeito à ligação que liga este benzeno ao grupo indol.

R⁴ e R⁵ são hidrogênio ou R⁴ e R⁵ juntos formam uma ligação dupla ou um grupo metileno para formar uma ciclopropila fundida. Em uma modalidade particular, R⁴ e R⁵ são hidrogênio ou R⁴ e R⁵ juntos formam um grupo metileno para formar uma ciclopropila fundida. Em outra modalidade particular, R⁴ e R⁵ juntos formam uma ligação dupla.

Em outra modalidade, R⁶ é selecionado a partir de hidrogênio e metila. Em uma modalidade particular, R⁶ é hidrogênio quando o composto de fórmula (I) é um composto de fórmula (III) ou (IV). Em outra modalidade particular, R⁶ é metila quando o composto de fórmula (I) é um composto de fórmula (II).

R⁷ é uma C3.7 cicloalquila opcionalmente substituída com halo. Em uma modalidade particular, R⁷ é selecionado a partir de ciclopentila, ciclo-hexila, e fluorociclo-hexila (em particular, 2-fluorociclo-hexila). Em uma modalidade preferida, R⁷ é ciclo-hexila.

Um subgrupo particular dos compostos de fórmula (I) é os compostos de fórmula (I), em que R⁴ e R⁵ juntos formam uma ligação dupla, e, em que uma ou mais das definições para R¹, R², R⁶, e R⁷ como especificado nas modalidades aplicam-se aqui. Um subgrupo mais particular dos compostos de fórmula (I) é os compostos de fórmula (II), em que R¹, R², R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ e A têm o mesmo significado como definido aqui. Mais particular são aqueles compostos representados pelas seguintes fórmulas estruturais (11-1), (II-2), e (II-3), em que R², R⁶ e R⁷ têm 0 mesmo significado como definido

13/121 aqui para os compostos de fórmula (I) ou subgrupos dos mesmos.

Em uma modalidade particular, a invenção fornece compostos de, independentemente, fórmula (II), (11-1), (II-2) e (II-3), em que R⁶ é hidrogênio ou metila, mais em particular, em que R⁶ é uma metila.

Em outra modalidade, a invenção fornece compostos de fórmula (II) ou subgrupos dos mesmos, em que R⁷ é ciclo-hexila ou 2-fluorociclohexila.

Em outra modalidade, a invenção fornece compostos de fórmula (II) ou subgrupos dos mesmos, em que R² é hidrogênio, metóxi ou cloro. Al10 ternativamente, a invenção fornece compostos de fórmula (II) ou subgrupos dos mesmos, em que R² é flúor ou metóxi.

Um subgrupo particular dos compostos de fórmula (I) é os compostos de fórmula (III), em que R¹, R², R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ e A têm o mesmo significado como definido aqui. Mais particular são aqueles compostos represen15 tados pelas seguintes fórmulas estruturais (111-1), (III-2), (III-3) e (III-4), em que R², R⁶ e R⁷ têm o mesmo significado como definido aqui para os compostos de fórmula (I).

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Em particular, a invenção fornece compostos de, independentemente, fórmula (III), (III 1), (III-2), (III-3) e (HI-4), em que R⁶ é hidrogênio.

Em outra modalidade, a invenção fornece compostos de fórmula (III) ou subgrupos dos mesmos, em que R⁷ é ciclo-hexila ou 2-fluorociclo- hexila.

Em outra modalidade, a invenção fornece compostos de fórmula (III) ou subgrupos dos mesmos, em que R² é hidrogênio, metóxi ou cloro.

Um subgrupo particular dos compostos de fórmula (I) é os compostos de fórmula (IV), em que R¹, R², R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ e A têm o mesmo signi10 ficado como definido aqui. Mais particular são aqueles compostos representados pelas seguintes fórmulas estruturais (IV-1), (IV-2), e (IV-3), em que R², R⁶ e R⁷ têm o mesmo significado como definido aqui para os compostos de

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(IV) ou subgrupos dos mesmos, em que R⁷ é ciclo-hexila ou 2-fluorociclohexila.

Em outra modalidade, a invenção fornece compostos de fórmula 5 (IV) ou subgrupos dos mesmos, em que R² é hidrogênio, metóxi ou cloro.

Em uma modalidade particular, a presente invenção diz respeito aos compostos de fórmula (II 1), (111-1), e (IV-1). Outra modalidade da presente invenção diz respeito aos compostos de fórmula (II-2), (III-2) e (IV-2). Outra modalidade da presente invenção diz respeito aos compostos de fór10 mula (II-3), (III-3) e (IV-3).

Em uma modalidade particular, a invenção fornece compostos de fórmula (I) selecionados a partir do grupo compreendendo

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Alternativamente, a presente invenção fornece compostos de fórmula (I) selecionados de

18/121

Mais em particular, a presente invenção fornece compostos de fórmula (I) selecionados de

A menos que de outra maneira mencionado ou indicado, a designação química de um composto abrange a mistura de algumas ou todas 5 as possíveis formas estereoquimicamente isoméricas, as quais o referido composto poderia possuir. A referida mistura pode conter todos os diastereômeros e/ou enantiômeros da estrutura molecular básica do referido composto. Todas as formas estereoquimicamente isoméricas dos compostos da presente invenção ambas em forma pura ou misturada entre si são pretendi10 das ser abrangidas dentro do escopo da presente invenção.

Formas estereoisoméricas puras dos compostos e intermediários como mencionado aqui são substancialmente definidos como isômeros livres de outras formas enantioméricas ou diastereoméricas da mesma estrutura molecular básica dos referidos compostos ou intermediários. Em parti15 cular, o termo “estereoisomericamente puro” diz respeito a compostos ou intermediários tendo um excesso estereoisomérico de pelo menos 80% (isto é, mínimo 90% de um isômero e máximo 10% dos outros possíveis isôme19/121 ros) até um excesso estereoisomérico de 100% (isto é, 100% de um isômero e nenhum do outro), mais em particular, compostos ou intermediários tendo um excesso estereoisomérico de 90% até 100%, ainda mais em particular tendo um excesso estereoisomérico de 94% até 100% e tendo um excesso estereoisomérico de 97% em particular até 100%. Os termos “enantiomericamente puro” e “diastereomericamente puro” deveria ser entendido de uma maneira similar, porém em seguida tendo consideração ao excesso enantiomérico, e o excesso diastereomérico, respectivamente, da mistura em questão.

Formas estereoisoméricas puras dos compostos e intermediários desta invenção podem ser obtidos pela aplicação de procedimentos conhecidos na técnica. Por exemplo, enantiômeros podem ser separados um do outro pela cristalização seletiva de seus sais diastereoméricos com ácidos oticamente ativos ou bases. Exemplos dos mesmos são ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido ditoluoiltartárico e ácido canforsulfônico. Alternativamente, os enantiômeros podem ser separados por técnicas cromatográficas usando fases estacionárias quirais. As referidas formas estereoquimicamente puras que podem da mesma forma ser derivadas de formas estereoquimicamente isoméricas puras correspondentes dos materiais de partida apropriados, contanto que a reação ocorra estereoespecificamente. Preferivelmente, se um estereoisômero específico é desejado, o referido composto é sintetizado por métodos estereoespecíficos de preparação. Estes métodos empregarão vantajosamente os materiais de partida enantiomericamente puros.

Os racematos diastereoméricos dos compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos, podem ser obtidos separadamente por métodos convencionais. Métodos de separação física apropriados que podem ser empregados vantajosamente são, por exemplo, cristalização e cromatografia seletivas, por exemplo cromatografia de coluna.

Para alguns dos compostos de fórmula (I), seus /V-óxidos, sais, hidratos, solvatos, aminas quaternárias, ou complexos de metal, e os intermediários usados na preparação dos mesmos, a configuração estereoquími

20/121 ca absoluta não foi determinada experimentalmente. Uma pessoa versada na técnica pode determinar a configuração absoluta de tais compostos usando métodos conhecidos na técnica tal como, por exemplo, difração de raios x.

Em uma modalidade, a presente invenção diz respeito aos com-

em que R¹, R², R⁶, R⁷ e A têm o mesmo significado como aquele definido aqui.

Em uma modalidade mais particular, a presente invenção diz respeito aos compostos de fórmula (IIIA-1), (IIIA-2), (IIIA-3), (IIIA-4), (IIIB-1), (IIIB-2), (IIIB-3), (IIIB-4), (IVA-1), (IVA-2), (IVA-3), (IVB-1), (IVB-2) e (IVB-3)

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çh₃

ch₃

em que R², R⁶ e R⁷ têm o mesmo significado como aquele definido aqui.

Em outra modalidade, onde aplicável, os compostos de fórmula

22/121 (I) ou subgrupos dos mesmos têm a configuração estereoquímica como ilustrado pela fórmula (IA).

A presente invenção é da mesma forma pretendida incluir todos os isótopos de átomos que ocorrem nos compostos presentes. Os isótopos incluem aqueles átomos tendo o mesmo número atômico, porém, números de massa diferentes. Por meio de exemplo geral e sem limitação, os isótopos de hidrogênio incluem trício e deutério. Isótopos de carbono incluem C13eC-14.

Para uso terapêutico, sais dos compostos de fórmula (I) são aqueles em que o contraíon é farmaceuticamente aceitável. Entretanto, os sais de ácidos e bases que não são farmaceuticamente aceitáveis, podem da mesma forma encontrar uso, por exemplo, na preparação ou purificação de um composto farmaceuticamente aceitável. Todos os sais, se farmaceuticamente aceitáveis ou não, são incluídos dentro do âmbito da presente invenção.

Os sais de base e ácido farmaceuticamente aceitáveis como aqui anteriormente mencionado são pretendidos compreender as formas de sal de adição de base e ácido não tóxico terapeuticamente ativo em que os compostos de fórmula (I) pode formar-se. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser obtidos convenientemente tratando-se a forma de base com tal ácido apropriado. Ácidos apropriados compreendem, por exemplo, ácidos inorgânicos tais como ácidos hidroálicos, por exemplo, ácido clorídrico ou bromídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico e ácidos similares; ou ácidos orgânicos tais como, por exemplo, acético, propanoico, hidroxiacético, lático, pirúvico, oxálico (isto é, etanodioico), malônico, sucínico (isto é, ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico (isto é, ácido hidroxibutanodioico), tartárico, cítrico, metanossulfônico, etanossulfônico, benzenossulfôni

23/121 co, p-toluenossulfônico, ciclâmico, salicílico, p-amino-salicílico, pamoico e os ácidos similares.

Reciprocamente, as referidas formas de sal podem ser convertidas por tratamento com uma base apropriada na forma de base livre.

Os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos contendo um próton ácido podem da mesma forma ser convertidos em suas formas de sal de adição de amina ou metal não tóxicas por tratamento com bases orgânicas e inorgânicas apropriadas. Formas de sal de base apropriadas compreendem, por exemplo, os sais de amônio, os sais de metal de álcali e alcalinoterrosos, por exemplo, os sais de lítio, sódio, potássio, magnésio, cálcio e similares, sais com bases orgânicas, por exemplo, a benzatina, /V-metil-D-glicamina, sais de hidrabamina, e sais com aminoácidos tal como, por exemplo, arginina, lisina e similares.

O termo “amina quaternária” como usado aqui anteriormente define os sais de amônio quaternários em que os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos podem formar-se por reação entre um nitrogênio básico de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos e agente de quaternização apropriado, tal como, por exemplo, um alquilaleto, arilaleto ou arilalquilaleto opcionalmente substituído, por exemplo, metiliodeto ou benziliodeto. Outros reagentes com bons grupos de saída também podem ser usados, tal como trifluorometanossulfonatos de alquila, metanossulfonatos de alquila, e p-toluenossulfonatos de alquila. Uma amina quaternária tem um nitrogênio positivamente carregado. Contraíons farmaceuticamente aceitáveis incluem cloro, bromo, iodo, trifluoroacetato e acetato. O contraíon de escolha pode ser introduzido usando as resinas de troca iônica.

As formas de /V-óxido dos compostos presentes são significadas compreender os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos, em que um ou vários átomos de nitrogênio são oxidados ao denominado /V-óxido.

Será apreciado que os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos podem ter propriedades de formação de complexo,

24/121 quelaçâo, ligação de metal e, portanto, podem existir como complexos de metal ou quelatos de metal. Tais derivados metalados dos compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos são pretendidos ser incluídos dentro do escopo da presente invenção.

Alguns dos compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos e intermediários podem da mesma forma existir em um ou mais formas tautoméricas. Tais formas embora não explicitamente indicadas na fórmula acima são pretendidas ser incluídas dentro do escopo da presente invenção. Consequentemente, os compostos e intermediários podem estar presentes como uma mistura de tautômeros ou como um tautômero individual.

Na invenção, preferência particular é dada a compostos de fórmula I ou qualquer subgrupo dos mesmos, que nos ensaios de inibição descritos abaixo têm um valor de inibição menor que 100 μΜ, preferivelmente menor que 50 μΜ, mais preferivelmente menor que 10 μΜ, preferivelmente menor que 5 μΜ, ainda mais preferivelmente menor que 1 μΜ, preferivelmente menor que 100 nM, e em particular menor que 10 nM, como determinado por um ensaio adequado, tais como os ensaios usados nos exemplos abaixo.

Deve ser entendido que os subgrupos acima definidos dos compostos de fórmula (I) bem como qualquer outro subgrupo definido aqui, são significados para incluir formas estereoquimicamente isoméricas, e quaisquer /V-óxidos, sais, aminas quaternárias, hidratos, solvatos e complexos de metal de tais compostos.

Preparação dos compostos de fórmula (I)

Esquemas sintéticos gerais

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados seguindo os métodos diferentes A, B, C, D, E, F e G descritos abaixo, de derivados de indol A-1

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em que R², R⁴, R⁵, R⁶ e R⁷ são como definidos para os compostos de fórmula (I) ou subgrupos dos mesmos, e Ra é selecionado a partir de metila e tercbutila e Rb é selecionado a partir de metila. Os compostos de fórmula (A-1) são conhecidos na técnica ou podem ser obtidos como descrito em US20070270406A1, W02007/054741 e W02007/092000.

Método A

Uma avaliação esquemática para a síntese dos compostos de fórmula (I) é determinado no esquema 1. O método começa a partir de um composto de fórmula A-1.

Os compostos de fórmula A-2 pode ser preparado pela hidrólise regiosseletiva do éster transportando o grupo Rb, sob condições básicas, usando um hidróxido tal como LiOH ou NaOH, em solventes polares tal como água, um álcool tal como metanol ou etanol, tetra-hidrofurano (THF), ou uma mistura dos mesmos. Este método pode ser usado quando Rb for um grupo metila e Ra for um grupo terc-butila, ou Ra for um grupo metila.

Um reagente derivado de R¹ bifuncional monoprotegido de fórmula PG-R¹-H, em que R¹ é como definido para fórmula (I) ou subgrupos dos mesmos, pode ser em seguida acoplado ao ácido carboxílico dos compostos A-2 para formar uma união de amida, levando a compostos A-3. “PG”, como usado aqui, é um grupo protetor de amina adequado, selecionado a partir daqueles conhecidos na técnica. Preferivelmente, PG é um grupo protetor de terc-butiloxicarbonila (Boc) ou um grupo 4-nitrobenzenossulfonila (nosila).

A formação de ligações de amida pode ser realizada usando procedimentos padrões tais como aqueles usados para acoplar aminoácidos na síntese de peptídeo. O último envolve o acoplamento desidrativo de um grupo carboxila de um reagente com um grupo amino do outro reagente para

26/121 formar uma união de amida de ligação. A formação de união de amida pode ser realizada reagindo-se os materiais de partida na presença de um agente de acoplamento ou convertendo-se a funcionalidade de carboxila em uma forma ativa tal como um éster ativo, anidrido misturado ou um brometo ou 5 cloreto de ácido de carboxila. Descrições gerais de tais reações de acoplamento e os reagentes usados nestas podem ser encontradas em livros didáticos gerais sobre química de peptídeo, por exemplo, M. Bodanszky, “Peptide Chemistry”, 2^a ed. rev., Springer-Verlag, Berlim, Germany, (1993).

Esquema 1

A-1 Α-2 A-3

A-4 Α-5 Α-6

Legenda do esquema:

- divagem de éster regiosseletiva

- introdução de R¹ monoprotegido

- remoção de PG

- introdução de sulfamida

- hidrólise de éster

- fechamento de anel

Exemplos de reações de acoplamento com formação de união de amida incluem o método de azida, método de anidrido de ácido carboxíli

27/121 co-carbônico misturado (cloroformato de isobutila), carbodi-imida (diciclohexilcarbodi-imida (DCC), di-isopropilcarbodi-imida (DIC), ou carbodi-imida solúvel em água tal como o método A/-etil-/V-[3-(dimetilamino)propil]carbodiimida (EDC)), método de éster ativo (por exemplo p-nitrofenila, p-clorofenila, triclorofenila, pentaclorofenila, pentafluorofenila, ΛΖ-hidroxissucínico imido e os ésteres similares), o método K do reagente de Woodward, o método 1,1carbonildi-imidazol (CDI ou Λ/,Λ/'-carbonildi-imidazol), os métodos de reagentes de fósforo ou de oxidação-redução. Alguns destes métodos podem ser realçados adicionando-se os catalisadores adequados, por exemplo, no método de carbodi-imida adicionando-se 1-hidroxibenzotriazol, ou 4dimetilaminopiridina (4-DMAP). Outros agentes de acoplamento são hexafluorofosfato de(benzotriazol-1-ilóxi)-t/7s-(dimetilamino)fosfônio, por si só ou na presença de 1-hidróxi-benzotriazol ou 4-DMAP; ou tetrafluoroborato de 2(1H-benzotriazol-1-il)-/\/,/V,/V’,/\/-tetra-metilurônio, ou hexafluorofosfato O-(7azabenzotriazol-l-iO-A/.A/’/V^/V'-tetrametiluronio. Estas reações de acoplamento podem ser realizadas em qualquer solução (fase líquida) ou fase sólida.

As reações de acoplamento são conduzidas preferivelmente em um solvente inerte, tal como hidrocarboneto halogenado, por exemplo, diclorometano (DCM), clorofórmio, solventes apróticos dipolares tal como acetonitrila, dimetilformamida (DMF), dimetilacetamida, DMSO, HMPT, éteres tal como tetra-hidrofurano (THF).

Em muitos exemplos, as reações de acoplamento são feitas na presença de uma base adequada tal como uma amina terciária, por exemplo trietilamina, di-isopropiletilamina (DIPEA), N-metil-morfolina, Nmetilpirrolidina, 4-DMAP ou 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU). A temperatura de reação pode variar entre 0 °C e 50 °C, e o tempo de reação pode variar entre 15 min e 24 h.

A remoção do grupo protetor a seguir aos métodos conhecidos na técnica pode levar aos compostos A-4. Estes métodos incluem a reação dos compostos A-3 com ácido trifluoroacético (TFA) em um solvente adequado tal como DCM, quando PG é um grupo Boc protetor, ou a reação dos

28/121 compostos A-3 com um tiol como ácido mercapto acético ou tiofenol, em solução ou em fase sólida, na presença de uma base, tal como carbonato de césio ou LiOH, em um solvente adequado, tal como DMF, THF quando PG é nosila. Quando Ra é um grupo terc-butila e PG é um grupo Boc protetor, a remoção de PG como descrito acima, pode levar a um composto A-4, com Ra sendo OH.

Os compostos A-4 são em seguida reagidos com sulfamida, em um solvente adequado, por exemplo dioxano, sob condições de aquecimento, isto é, 100°C. Esta reação pode ocorrer sob irradiação de micro-ondas e pode levar aos compostos A-5. Outro método para introduzir a porção de sulfamida pode consistir em reação do composto A-4 com cloreto de aminossulfonila, na presença de uma base adequada, tal como trietilamina, DIPEA, ou piridina, em um solvente adequado, tal como um solvente dorado como DCM, ou DMF, THF.

A função de éster dos compostos A-5, isto é, -CO-O-Ra, pode ser em seguida hidrolizada, usando condições conhecidas na técnica, e incluindo a saponificação em meios básicas como descrito acima, levando a compostos A-6. O aquecimento pode ser requerido para completar esta reação. Condições ácidas podem da mesma forma ser usadas para hidrolisar a função do éster dos compostos A-5, por exemplo TFA em um solvente adequado como DCM, quando Ra é um grupo terc- butila.

Os compostos (I) podem ser obtidos por macrociclização formando-se a união de acilsulfamida intramolecular, na presença de agentes de acoplamento, tal como CDI que converte o grupo ácido carboxílico em uma espécie reativa acilimidazol, sob aquecimento. Este acilimidazol pode em seguida ser purificado antes de adicionar uma base adequada tal como DBU para realizar o fechamento de anel, que pode ocorrer sob condições de aquecimento. Os solventes usados para estas reações podem incluir acetonitrila ou THF. Outros agentes de acoplamento, tais como aqueles conhecidos na técnica, podem da mesma forma ser usados para alcançar o fechamento de anel.

Método B

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Esquema 2

Legenda do esquema:

- introdução de R¹

Um método alternado que leva aos compostos A-4 como ilustrado no esquema 2, pode ser a formação de uma união de amida entre os compostos A-2 e uma cadeia bivalente simétrica R1, usada em excesso em comparação aos compostos A-2. Esta união de amida pode ser sintetizada como descrito acima, em particular usando um agente de acoplamento tal como hexafluorofosfato [dimetilamino-([1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-ilóxi)metileno]-dimetil-amônio (HATU), na presença de uma base tal como DIPEA e em um solvente adequado como DCM, DMF, ou mais preferivelmente THF. Os compostos A-4 podem em seguida ser reagidos como descrito acima no método A para preparar os compostos (I).

Método C

Esquema 3

Legenda do esquema:

- introdução de R1

Os compostos podem ser diretamente preparados a partir dos compostos A-2, de um modo similar como descrito acima para a síntese dos compostos A-3, porém usando uma cadeia bivalente R¹ transportando uma porção de sulfamida em vez de um grupo protetor. Uma tal cadeia de sulfamida R¹ pode ser introduzida em H-R¹-H aquecendo um reagente de fórmula

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H-R¹-H, que ou pode ser monoprotegido por um grupo protetor adequado (isto é, PG-R¹-H), ou não se for simétrico, com sulfamida em um solvente adequado, tal como dioxano, sob irradiação de micro-ondas. O grupo protetor pode em seguida ser removido por métodos conhecidos na técnica, por exemplo, por reação com TFA em diclorometano quando o grupo protetor for um grupo Boc protetor, levando à cadeia de R¹ derivada de monossulfamida. Método D

Os compostos de fórmula A-3 ou A-4 podem sofrer manipulação de grupo funcional, tal como alquilação ou aminação redutiva, antes da remoção de PG dos compostos A-3 e/ou reação levando à sulfamida A-4.

Método E

Legenda do esquema:

- divagem de éster regiosseletiva

- introdução de R1

- remoção de PG

- hidrólise de éster

- fechamento de anel

O éster transportando o grupo Ra dos compostos A-1 (Ra sendo por exemplo um grupo terc-butila e Rb um grupo metila) pode ser hidrolisado como descrito acima, em condições ácidas, usando TFA por exemplo em um solvente adequado como DCM, para produzir o derivado de ácido carboxílico E-2.

A reação dos compostos E-2 com a porção de sulfamida intro

31/121 duzida em uma cadeia bivalente monoprotegida R1, pode levar aos compostos de acilsulfamida E-3, usando as condições descritas para a última etapa do método A. Preferivelmente, o agente de acoplamento usado para ativar o grupo ácido carboxílico pode ser CDI, em um solvente adequado como acetonitrila ou THF, sob condições de aquecimento. A adição da cadeia de sulfamida na presença de uma base tal como DBU pode subsequentemente levar aos compostos E-3. PG é um grupo protetor de amina adequado, selecionado a partir daqueles conhecidos na técnica. Preferivelmente, dentro do método E, PG é um grupo Boc protetor.

A remoção do grupo protetor PG dos compostos E-3 a seguir aos métodos conhecidos na técnica pode levar aos compostos E-4. Estes métodos incluem a reação dos compostos E-3 com TFA em um solvente adequado tal como DCM, quando PG for um grupo Boc protetor.

A função do éster dos compostos E-4 (Rb é um grupo metila) pode ser em seguida hidrolisado, usando condições conhecidas na técnica, e incluindo a saponificação em meios básicos como descrito acima, levando aos compostos E-5.

Alternativamente, os compostos E-3 pode sofrer a reação de saponificação em meios básicos para hidrolisar o éster transportando Rb, antes da remoção do grupo protetor amina usando as condições descritas acima, e levando aos compostos E-5.

Os compostos (I) podem ser obtidos por macrociclização dos compostos E-5 formando-se a união de amida intramolecular, na presença de agentes de acoplamento, como descrito no método A. Preferivelmente, esta etapa de formação de amida pode ser realizada sob condições de diluição altas. Método F Esquema 5

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A-2 F-3 F-4

F-5 F-6

Legenda do esquema:

- acoplamento de amida

- hidrólise de éster

- formação de acil sulfamida

- fechamento de anel

- redução

Os compostos F-3 podem ser obtidos por uma reação de formação de amida, começando dos compostos A-2 e uma alquenilamina, como descrito para a segunda etapa do método A. A hidrólise de éster subsequente sob condições básicas ou ácidas como previamente descrito pode levar aos compostos F-4. A união de acilsulfamida pode ser em seguida formada usando o método descrito para a última etapa do método A, usando um composto de alquenilsulfamida e levando aos compostos F-5.

Alternativamente, o grupo acilsulfamida pode ser introduzido em um composto de fórmula E-2, antes da hidrólise do éster transportando o grupo Rb e o acoplamento do ácido de carboxílico obtido com um alquenamina como descrito acima, levando ao composto F-5.

A formação do macrociclo, isto é, composto de fórmula F-6, que é um composto de fórmula (I) transportando a seguinte cadeia bivalente co-

mo R¹: ^r3 , pode ser realizada por meio de uma reação de metátese de olefina na presença de um catalisador de metal adequado tal

33/121 como, por exemplo, o catalisador com base em Ru relatado por Miller, S.J., Blackwell, H.E., Grubbs, R.H. J. Am. Chem. Soc. 118, (1996), 9606-9614; Kingsbury, J. S., Harrity, J. P. A., Bonitatebus, P. J., Hoveyda, A. H., J. Am. Chem. Soc. 121, (1999), 791-799; e Huang e outros, J. Am. Chem. Soc. 121, (1999), 2674-2678; por exemplo um catalisador de Hoveyda-Grubbs.

Os catalisadores de rutênio estáveis a ar tal como cloreto de rutênio de bis(triciclo-hexilfosfina)-3-fenil-1H-inden-1-ilideno (Neolyst M1®) ou dicloreto de bis(triciclo-hexilfosfina)-[(feniltio)metileno]rutênio (IV) podem ser usados. Outros catalisadores que podem ser usados são catalisadores de primeira e segunda geração de Grubbs, isto é benzilideno-b/s(triciclohexilfosfina)diclororrutênio e (1,3-b/s-(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolid inilideno)dicloro(fenilmetileno)(triciclo-hexilfosfina)rutênio, respectivamente. De interesse particular são os catalisadores de primeira e segunda geração de Hoveida-Grubbs, que são dicloro(o-isopropoxifenilmetileno)(triciclohexilfosfina)-rutênio(ll) e 1,3-b/s-(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidinilideno) dicloro-(o- isopropoxifenilmetileno)rutênio respectivamente. Da mesma forma, outros catalisadores contendo outros metais de transição tal como Mo podem ser usados para esta reação.

As reações de metátese podem ser conduzidas em um solvente adequado tal como por exemplo éteres, por exemplo THF, dioxano; hidrocarbonetos halogenados, por exemplo, diclorometano, CHCI₃, 1,2dicloroetano e similares, hidrocarbonetos, por exemplo, tolueno. Estas reações são conduzidas em temperaturas aumentadas sob atmosfera de nitrogênio.

Os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos ou quaisquer subgrupos dos mesmos podem ser convertidos entre si a seguir às reações de transformação de grupo funcional conhecidas na técnica. Por exemplo, grupos amino podem ser N-alquilados, grupos nitro reduzidos a grupos amino, um átomo de halo pode ser trocado para outro halo.

Os compostos de fórmula F-6 podem ser submetidos à hidrogenação catalítica, usando por exemplo Pd/C como um catalisador, em um solvente adequado tal como metanol, etanol, THF, ácido acético ou uma mistu

34/121 ra dos mesmos, para produzir os compostos de fórmula F-7, onde o alqueno da cadeia bivalente R1 é reduzido ao alcano correspondente. Os compostos de fórmula F-6 que pertencem ao grupo de compostos de fórmula (II) podem levar aos compostos F-7 tendo a estrutura dos compostos de fórmula (IV) depois desta etapa de hidrogenação.

Mais geralmente, um composto de fórmula (II) pode ser transformado a um composto de fórmula (IV) por hidrogenação catalítica como mostrado abaixo.

Esquema 6

Legenda do esquema:

- redução

Os compostos de fórmula (I) podem ser convertidos às formas de /V-óxido correspondentes seguindo os procedimentos conhecidos na técnica para converter um nitrogênio trivalente em sua forma de N-óxido. A referida reação de /V-oxidação geralmente pode ser realizada reagindo-se o material de partida de fórmula (I) com um peróxido orgânico ou inorgânico apropriado. Peróxidos inorgânicos apropriado compreendem, por exemplo, peróxido de hidrogênio, peróxidos de metal de álcali ou de metal alcalinoterroso, por exemplo, peróxido de sódio, peróxido de potássio; peróxidos orgânicos apropriados podem compreender ácidos de peróxi tal como, por exemplo, ácido benzenocarbo-peroxoico ou ácido benzenocarboperoxoico substituído por halo, por exemplo, ácido 3-clorobenzeno-carboperoxoico, ácidos peroxoalcanoicos, por exemplo, ácido peroxoacético, alquilidroperóxidos, por exemplo, hidroperóxido de terc-butila. Solventes adequados são, por exemplo, água, alcoóis inferiores, por exemplo, etanol e similares, hidrocarboneto, por exemplo tolueno, cetonas, por exemplo, 2-butanona, hidrocarboneto halogenado, por exemplo diclorometano, e misturas de tais solventes.

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Formas estereoquimicamente isoméricas puras dos compostos de fórmula (I) podem ser obtidas pela aplicação de procedimentos conhecidos na técnica. Diastereômeros podem ser separados por métodos físicos tal como cristalização seletiva e técnicas cromatográficas, por exemplo, distribuição de contracorrente, cromatografia líquida e similares.

Os compostos de fórmula (I) podem ser obtidos como misturas racêmicas de enantiômeros que podem ser separados um do outro seguindo os procedimentos de resolução conhecidos na técnica. Os compostos racêmicos de fórmula (I), que são suficientemente básicos ou ácidos podem ser convertidos nas formas de sal diastereomérico correspondentes por reação com um ácido quiral adequado, respectivamente base quiral. As referidas formas de sal diastereoméricas são subsequentemente separadas, por exemplo, por cristalização seletiva ou fracional, e os enantiômeros são liberados disto por álcali ou ácido. Uma maneira alternativa de separar as formas enantioméricas dos compostos de fórmula (I) envolve cromatografia líquida, em particular cromatografia líquido usando uma fase estacionária quiral. As referidas formas estereoquimicamente isoméricas puras podem da mesma forma ser derivadas das formas estereoquimicamente isoméricas puras correspondentes dos materiais de partida apropriados, contanto que a reação ocorra estereoespecificamente. Preferivelmente se um estereoisômero específico é desejado, o referido composto pode ser sintetizado por métodos estereoespecíficos de preparação. Estes métodos podem empregar enantiomericamente vantajosamente os materiais de partida puros.

O método G descreve a síntese de materiais de partida enantiomericamente puros A-2, que pertencem aos grupos dos compostos (III) e (IV).

Método G

Esquema 7

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racemic mixture

enantiomer 2 enantiomer 1

Legenda do esquema:

- introdução de auxiliar quiral

- mistura racêmica

- diastereoisômero

- separação de diastereoisômeros e remoção de auxiliar quiral

- enantiômero

Uma mistura racêmica A-2 pode ser reagida com um auxiliar quiral, tal como (S)-4-benzil-2-oxazolidinona, depois de ter sido transformado em seu acilcloreto usando os métodos conhecidos na técnica, tal como rea10 ção de A-2 com cloreto de oxalila em um solvente adequado como THF, na presença de uma quantidade catalítica de DMF. O cloreto ácido pode em seguida ser reagido com o ânion de (S)-4-benzil-2-oxazolidinona formado pela reação com uma base forte, tal como butil lítio, em um solvente adequado tal como THF, em baixas temperaturas, tipicamente -78°C, e sob uma 15 atmosfera inerte, levando aos diastereoisômeros G1 e G2 que podem ser isolados por métodos conhecidos na técnica, tal como cromatografia em sílica-gel.

A remoção do auxiliar quiral de cada um do diastereoisômeros G1 e G2 pode em seguida ser realizada com uma base tal como NaOH em

37/121 um solvente adequado, tal como metanol, água, THF, levando aos compostos enantiomericamente puros A-2 e A-2'Usando estes materiais de partida enantiomericamente puros podem levar a compostos enantiomericamente puros de fórmula (I) transportando um estereocentro, tais como compostos de fórmula (IIIA), (IIIB).

Formas estereoquimicamente isoméricas puras dos compostos de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos podem ser obtidas pela aplicação de procedimentos conhecidos na técnica. Diastereômeros podem ser separados por métodos físicos tais como técnicas de cristalização e cromatográficas seletivas, por exemplo, distribuição contracorrente, cromatografia líquida e similares.

Os compostos de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos podem ser obtidos como misturas racêmicas de enantiômeros, que podem ser separados um do outro seguindo os procedimentos de resolução conhecidos na técnica. Os compostos racêmicos de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos, que são suficientemente básicos ou ácidos podem ser convertidos nas formas de sal diastereoméricas correspondentes por reação com um ácido quiral adequado, respectivamente base quiral. As referidas formas de sal diastereoméricas são subsequentemente separadas, por exemplo, por cristalização seletiva ou fracional, e os enantiômeros são liberados disto por álcali ou ácido. Uma maneira alternativa de separar as formas enantioméricas dos compostos de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos envolve cromatografia líquido, em particular cromatografia líquida usando uma fase estacionária quiral. As referidas formas estereoquimicamente isoméricas puras podem da mesma forma ser derivadas das formas estereoquimicamente isoméricas puras correspondente dos materiais de partida apropriados, contanto que a reação ocorra estereoespecificamente. Preferivelmente, se um estereoisômero específico é desejado, o referido composto pode ser sintetizado por métodos estereoespecíficos de preparação. Estes métodos podem empregar vantajosamente materiais de partida enantiomericamente puros.

Em um aspecto adicional, a presente invenção diz respeito a

38/121 uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos, como especificado aqui, e um veículo farmaceuticamente aceitável. Uma quantidade terapeuticamente eficaz neste contexto é uma quantidade suficiente para profilaticamente agir contra, para estabilizar ou reduzir a infecção viral, e em particular infecção viral por HCV, em indivíduos infectados ou indivíduos estando em risco de ser infectados. Em ainda um aspecto adicional, esta invenção refere-se a um processo de preparar uma composição farmacêutica como especificado aqui, que compreende misturar intimamente um veículo farmaceuticamente aceitável com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos, como especificado aqui.

Portanto, de acordo com uma modalidade da presente invenção, os compostos de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos podem ser formulados em várias formas farmacêuticas para propósitos de administração. É compreendido que todas as composições normalmente empregadas para sistemicamente administrar os fármacos são incluídas como composições apropriadas. Para preparar as composições farmacêuticas desta invenção, uma quantidade eficaz do composto particular, opcionalmente em forma de sal ou um complexo de metal, como o ingrediente ativo é combinada em mistura íntima com um veículo farmaceuticamente aceitável, cujo veículo pode tomar uma ampla variedade de formas que depende da forma de preparação desejada para administração. Estas composições farmacêuticas são desejáveis em forma de dosagem unitária adequada, particularmente, para administração oralmente, retalmente, percutaneamente, ou através de injeção parenteral. Por exemplo, na preparação das composições em forma de dosagem oral, quaisquer dos meios farmacêuticas habituais podem ser empregados tal como, por exemplo, água, glicois, óleos, alcoóis e similares no caso de preparações líquidas orais tais como suspensões, xaropes, elixires, emulsões e soluções; ou veículos sólidos tais como amidos, açúcares, caulim, lubrificantes, aglutinantes, agentes desintegrantes e similares no caso de pós, pílulas, cápsulas, e comprimidos. Por causa de sua facilidade na

39/121 administração, os comprimidos e cápsulas representam as formas de unidade de dosagem oral mais vantajosas, caso em que os veículos farmacêuticos sólidos são empregados obviamente. Para composições parenterais, o veículo compreenderá normalmente água estéril, pelo menos em grande parte, entretanto outros ingredientes, por exemplo, para ajudar a solubilidade, podem ser incluídos. Soluções injetáveis, por exemplo, podem ser preparadas em que o veículo compreende solução salina, solução de glicose ou uma mistura de solução salina e solução de glicose. Suspensões injetáveis podem da mesma forma ser preparadas caso em que veículos líquidos apropriados, agentes de suspensão e similares podem ser empregados. Da mesma forma incluídos são as preparações em forma sólida que são pretendidas ser convertidas, logo antes uso, em preparações em forma líquida. Nas composições adequadas para administração percutânea, o veículo opcionalmente compreende um agente de realce de penetração e/ou um agente de umectação adequado, opcionalmente combinado com aditivos adequados de qualquer natureza em proporções menores, cujos aditivos não introduzem um efeito danoso significante na pele.

Os compostos da presente invenção podem da mesma forma ser administrados por meio de insuflação ou inalação oral por meio de métodos e formulações empregadas na técnica para administração por esta maneira. Deste modo, em geral os compostos da presente invenção podem ser administrados aos pulmões na forma de uma solução, uma suspensão ou um pó seco, uma solução sendo preferida. Qualquer sistema desenvolvido para a liberação de soluções, suspensões ou pós secos por meio de insuflação ou inalação oral são adequados para a administração dos compostos presentes.

Desta maneira, a presente invenção da mesma forma fornece uma composição farmacêutica adaptada para a administração por insuflação ou inalação pela boca compreendendo um composto de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos e um veículo farmaceuticamente aceitável. De preferência, os compostos da presente invenção são administrados por inalação de uma solução em doses nebulizadas ou aerossolizadas.

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É especialmente vantajoso formular as composições farmacêuticas acima mencionadas na forma de dosagem unitária para facilitar a administração e uniformidade de dosagem. Formas de dosagem unitária quando aqui usadas referem-se às unidades fisicamente discretas adequadas tais como dosagens unitárias, cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo calculado para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o veículo farmacêutico exigido. Exemplos de tais formas de dosagem unitárias são comprimidos (incluindo comprimidos revestidos ou marcados), cápsulas, pílulas, supositórios, pacotes de pó, pastilhas, soluções ou suspensões injetáveis e outros mais, e múltiplos segregados dos mesmos.

Os compostos de fórmula (I) e qualquer subgrupo dos mesmos mostram propriedades antivirais. Infecções virais e suas doenças associadas tratáveis usando os compostos e métodos da presente invenção incluem essas infecções causadas por HCV e outras flaviviroses patogênicas tais como febre amarela, febre da Dengue (tipos 1 a 4), encefalite de St. Louis, encefalite japonesa, encefalite do Vale Murray, vírus do Nilo Ocidental e vírus Kunjin. As doenças associadas com HCV incluem fibrose hepática progressiva, inflamação e necrose levando à cirrose, doença hepática em estágio final, e HCC; e quanto as outras flaviviroses patogênicas as doenças incluem febre amarela, febre da dengue, febre hemorrágica e encefalite.

Entretanto, os compostos da invenção podem da mesma forma ser atrativos devido ao fato que eles necessitam da atividade contra outros vírus, em particular contra HIV. Pacientes infectados por HIV frequentemente sofrem de coinfecções tal como HCV. O tratamento de tais pacientes com um inibidor de HCV que da mesma forma inibe o HIV pode levar ao surgimento de cepas de HIV resistentes.

Devido as suas propriedades antivirais, particularmente suas propriedades anti-HCV, os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos, incluindo formas estereoquimicamente isoméricas, e seus Nóxidos, aminas quaternárias, complexos de metal, sais, hidratos e solvatos, são úteis no tratamento de indivíduos que experimentam uma infecção viral,

41/121 particularmente uma infecção por HCV, e para a profilaxia destas infecções. Em geral, os compostos da presente invenção podem ser úteis no tratamento de animais homeotérmicos tinfectados com vírus, em particular flaviviroses tal como HCV.

Os compostos da presente invenção ou qualquer subgrupo dos mesmos podem, portanto, ser usados como medicamentos. O referido uso como um medicamento ou método de tratamento compreende a administração sistêmica a indivíduos viralmente infectados ou a indivíduos suscetíveis às infecções virais de uma quantidade eficaz para combater as condições associadas com a infecção virótica, em particular a infecção por HCV.

A presente invenção da mesma forma refere-se ao uso dos compostos presentes ou qualquer subgrupo dos mesmos na fabricação de um medicamento para o tratamento ou a prevenção de infecções virais, particularmente infecção por HCV.

A presente invenção refere-se além disso a um método de tratar um animal homeotérmico infectado por um vírus, ou estando em risco de infecção por um vírus, em particular por HCV, o referido método compreendendo a administração de uma quantidade antiviralmente eficaz de um composto de fórmula (I), ou qualquer subgrupo do mesmo, como especificado aqui.

A presente invenção da mesma forma diz respeito às combinações de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo, como especificado aqui com outros agentes anti-HCV. Em uma modalidade, a invenção diz respeito a combinação de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo com pelo menos um agente anti-HCV. Em uma modalidade particular, a invenção diz respeito à combinação de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo com pelo menos dois agentes anti-HCV. Em uma modalidade particular, a invenção diz respeito à combinação de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo com pelo menos três agentes anti-HCV. Em uma modalidade particular, a invenção diz respeito à combinação de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo com pelo menos quatro agentes anti-HCV.

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A combinação de composto anti-HCV previamente conhecido, tal como interferona-α (IFN-a), interferona-α pegilada, ribavirina ou uma combinação dos mesmos, e, um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo pode ser usado como um medicamento em uma terapia de combinação. Em uma modalidade, o termo “terapia de combinação” refere-se a um produto contendo obrigatoriamente (a) um composto de fórmula (I), e (b) pelo menos um outro composto anti-HCV, como uma preparação combinada para uso simultâneo, separe ou sequencial no tratamento de infecções por HCV, em particular, no tratamento de infecções com HCV.

Os compostos anti-HCV abrangem os agentes selecionados a partir de inibidores de HCV polimerase, R 7128, MK-0608, VCH759, PF868554, GS9190, NM283, valopicitabina, PSI-6130, XTL-2125, NM-107, R7128 (R4048), GSK625433, R803, R-1626, BILB 1941, HCV 796, JTK-109 e JTK-003, ANA-598, IDX-184, MK-3281, MK-1220, derivados de benzimidazol, derivados de benzo-1,2,4-tiadiazina, derivados de fenilalanina, A-831 e A-689; inibidores de HCV protease (NS2-NS3 e NS3-NS4A), os compostos de WO02/18369 (vide, por exemplo, página 273, linhas 9-22 e página 274, linha 4 à página 276, linha 11), BI-1335, TMC435350, MK7009, ITMN 191, BILN 2061, VX-950, BILN-2065, BMS-605339, VX-500, SCH 503034; inibidores de outros alvos no ciclo de vida de HCV, incluindo helicase, e inibidores de metaloprotease, ISIS 14803; agentes imunomoduladores tais como, α, β e γ-interferonas tais como rlFN-α 2b, rlFN-a 2ba, IFN-a de consenso (infergen), ferona, reaferona, intermax a, rlFN-β, infergen + actimmune, IFNômega com DUROS, albuferona, locterona, Rebif, IFN-α Oral, IFN-a 2b XL, AVI-005, infergen pegilado, compostos de interferona-α derivados pegilados tais como rlFN-α 2b pegilada, rlFN-α 2a pegilada, IFN-β pegilada, compostos que estimulam a síntese de interferona em células, interleucinas, agonistas do receptor tipo Dobre de sino (TLR), compostos que realçam o desenvolvimento de resposta à célula T auxiliar tipo 1, e timosina; outros agentes antivirais tal como ribavirina, análogos de ribavirina tais como rebetol, copegus e viramidina (taribavirina), amantadina, e telbivudina, inibidores de entrada de ribossoma interna, inibidores de alfa-glicosidase 1 tais como MX

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3253 (celgosivir) e UT 231B, hepatoprotetores tais como IDN 6556, ME3738, LB-84451 e MitoQ, inibidores virais de amplo espectro, tais como inibidores de IMPDH (por exemplo, compostos de US5.807.876, US6.498.178, US6.344.465, US6.054.472, W097/40028, WO98/40381, WOOO/56331, ácido micofenólico e derivado do mesmo, e incluindo, porém não limitados a VX-497, VX-148, e/ou VX 944); e outros fármacos para tratar HCV tais como zadaxina, nitazoxanida, BIVhMOl (virostate), PYN-17 (altirex), KPE02003002, actilona (CPG-10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, ANA975, XTL-6865, ANA-971, NOV 205, tarvacina, EHC-18, NIM811, DEBIO025, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, Bavituximabe, e Oglufanida; ou combinações de qualquer dos acima.

Desse modo, para combater ou tratar infecções por HCV, os compostos de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos podem ser co-administrados em combinação com, por exemplo, interferona-α (IFN-oc), interferona-α pegilada, ribavirina ou uma combinação dos mesmos, bem como terapêuticos com base em anticorpos alvejados contra epítopos de HCV, RNA interferente pequeno (si RNA), ribozimas, DNAzimes, RNA antissentido, antagonistas de molécula pequena de, por exemplo, NS3 protease, NS3 helicase e NS5B polimerase.

As combinações da presente invenção podem ser usadas como medicamentos. Consequentemente, a presente invenção refere-se ao uso de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo como definido acima para a fabricação de um medicamento útil para inibir a atividade de HCV em um mamífero infectado com vírus HCV, em que o referido medicamento é usado em uma terapia de combinação, a referida terapia de combinação preferivelmente compreendendo um composto de fórmula (I) e pelo menos um outro composto inibidor de HCV, por exemplo, IFN-α, IFN-a pegilado, ribavirina ou uma combinação dos mesmos.

Além disso, é conhecido que uma porcentagem grande de pacientes infectados com vírus da imunodeficiência humana 1 (HIV) também é infectada com HCV, isto é, eles são co-infectados por HCV/HIV. Infecção por HIV parece afetar adversamente todos os estágios da infecção do HCV, le

44/121 vando à persistência viral aumentada e progresso acelerada de doença hepática relacionada ao HCV. Por sua vez, a infecção por HCV pode afetar o controle da infecção por HIV, aumentando a incidência de toxicidade do fígado causada por medicamentos antivirais.

A presente invenção, portanto, da mesma forma diz respeito às combinações de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos com agentes anti-HIV. Da mesma forma, a combinação de um ou mais compostos anti-HIV adicionais e um composto de fórmula (I) ou quaisquer subgrupos dos mesmos pode ser usada como um medicamento. Em particular, a referida combinação pode ser usada para inibição da replicação de HCV e HIV.

O termo “terapia de combinação” da mesma forma abrange um produto compreendendo (a) um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo, e (b) pelo menos um composto anti-HIV, e (c) opcionalmente pelo menos um outro composto anti-HCV, como uma preparação combinada para uso simultâneo, separado ou sequencial no tratamento de infecções por HCV e HIV, em particular, no tratamento de infecções com HCV e HIV, ou para prevenir ou tratar condições associadas com HCV e HIV.

Desse modo, a presente invenção da mesma forma refere-se a um produto contendo (a) pelo menos um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo do mesmo, e (b) um ou mais compostos anti-HIV adicionais, como uma preparação combinada para uso simultâneo, separado ou sequencial no tratamento anti-HCV e anti-HIV. Os fármaco diferentes podem ser combinados em uma única preparação juntamente com veículos farmaceuticamente aceitáveis. Os referidos compostos anti-HIV podem ser qualquer composto antirretroviral conhecido tais como suramina, pentamidina, timopentina, castanospermina, dextrana (sulfato de dextrana), foscarnete sódico (formiato de fosfono trissódico); inibidores de transcriptase reversa de nucleosídeo (NRTIs), por exemplo, zidovudina (AZT), didanosina (ddl), zalcitabina (ddC), lamivudina (3TC), estavudina (d4T), entricitabina (FTC), abacavir (ABC), andoxovir (DAPD), elvucitabina (ACH-126,443), AVX 754 ((-)

45/121 dOTC), fozivudina tidoxil (FZT), fosfazida, HDP-990003, KP-1461, MIV-210, racivir (PSI-5004), UC-781 e similares; inibidores de transcriptase reversa de não nucleosídeo (NNRTIs) tais como delavirdina (DLV), efavirenz (EFV), nevirapina (NVP), dapivirina (TMC120), etravirina (TMC125), rilpivirina (TMC278), DPC-082, (+)-Calanolida A, BILR-355, e similares; inibidores de transcriptase reversa de nucleotídeo (NtRTIs), por exemplo tenofovir ((R)PMPA) e fumarato de tenofovir disoproxila (TDF), e similares; inibidores de transcriptase reversa de competição de nucleotídeo (NcRTIs), por exemplo, NcRTI-1 e similares; inibidores de proteínas transativadoras, tais como inibidores de TAT, por exemplo, RO-5-3335, BI-201, e similares; inibidores de REV; inibidores de protease, por exemplo, ritonavir (RTV), saquinavir (SQV), lopinavir (ABT 378 ou LPV), indinavir (IDV), amprenavir (VX-478), TMC126, nelfinavir (AG 1343), atazanavir (BMS 232,632), darunavir (TMC114), fosamprenavir (GW433908 ou VX-175), brecanavir (GW-640385, VX-385), P1946, PL-337, PL-100, tipranavir (PNU-140690), AG-1859, AG-1776, Ro0334649 e similares; inibidores de entrada que compreendem inibidores de fusão (por exemplo, enfuvirtida (T-20)), inibidores de ligação e inibidores de co-receptor, o último compreende os antagonistas de CCR5 (por exemplo, ancriviroc, CCR5mAb004, maraviroc (UK-427,857), PRO-140, TAK-220, TAK-652, vicriviroc (SCH-D, SCH-417,690)) e antagonistas de CXR4 (por exemplo AMD-070, KRH 27315), exemplos de inibidores de entrada são PRO-542, TNX-355, BMS-488043, BlockAide/CR™, FP 21399, hNM01, nonacina, VGV-1; um inibidor de maturação é, por exemplo, PA-457; inibidores de integrase viral, por exemplo, raltegravir (MK-0518), elvitegravir (JTK-303, GS-9137), BMS-538158; ribozimas; imunomoduladores; anticorpos monoclonais; terapia de gene; vacinas; siRNAs; RNAs antissentido; microbicidas; inibidores de ligador de Zinco.

Portanto, pacientes infectados pelo HCV que da mesma forma sofrem de condições associadas com HIV ou até mesmo outros retrovirus patogênicos, tais como AIDS, complexo relacionado à AIDS (ARCO), linfadenopatia generalizada progressiva (PGL), bem como doenças do CNS crônicas causadas por retrovirus, tal como, por exemplo, demência mediada por

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HIV e esclerose múltipla, podem ser tratados convenientemente com a composição presente.

As composições podem ser formuladas em formas de dosagem farmacêutica adequadas tais como as formas de dosagem descritas acima. Cada um dos ingredientes ativos pode ser formulado separadamente e as formulações podem ser co-administradas ou uma formulação contendo ambas e, se desejado, outros ingredientes ativos podem ser fornecidos.

Quando aqui usado, o termo “composição” é pretendido abranger um produto compreendendo os ingredientes especificados, bem como qualquer produto que resulta, diretamente ou indiretamente, da combinação dos ingredientes especificados.

O termo “quantidade terapeuticamente eficaz” quando aqui usado significa que a quantidade do composto ativo ou componente ou agente farmacêutico que elicia a resposta biológica ou medicinal em um tecido, sistema, animal ou humano que está sendo buscado, na luz da presente invenção, aqui, por investigador, veterinário, doutor médico ou outro clínico, que inclui alívio dos sintomas da doença a ser tratada. Visto que a presente invenção refere-se também às combinações que compreendem dois ou mais agentes, a “quantidade terapeuticamente eficaz” no contexto das combinações é da mesma forma aquela quantidade dos agentes empregados juntos de forma que o efeito combinado elicia a resposta biológica ou medicinal desejada. Por exemplo, a quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição que compreende (a) o composto de fórmula (I) e (b) outro agente anti-HCV, seria a quantidade do composto de fórmula (I), e a quantidade do outro agente anti-HCV que quando empregado junto têm um efeito combinado que é terapeuticamente eficaz.

Em geral, é considerado que uma quantidade diário eficaz antiviral seria de 0,01 mg/kg a 500 mg/kg de peso corporal, mais preferivelmente de 0,1 mg/kg a 50 mg/kg de peso corporal. Pode ser apropriado administrar a dose requerida como duas, três, quatro ou mais subdoses em intervalos apropriados ao longo do dia. As referidas subdoses podem ser formuladas como formas de dosagem unitária, por exemplo, contendo 1 a 1000 mg, e

47/121 em particular 5 a 200 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária.

A dosagem exata e frequência de administração dependem do composto particular de fórmula (I) usado, da condição particular a ser tratada, da severidade da condição a ser tratada, da idade, peso, sexo, extensão do distúrbio e condição física geral do paciente particular bem como outro medicamento que o indivíduo pode estar tomando, visto que é bem conhecido por aqueles versados na técnica. Além disso, é evidente que a referida quantidade diária eficaz pode ser diminuída ou aumentada dependendo da resposta do indivíduo tratado e/ou dependendo da avaliação do médico que prescreve os compostos da presente invenção. As faixas de quantidade diárias eficazes mencionadas aqui anteriormente são, portanto, apenas normas.

Em uma modalidade da presente invenção, é fornecido um artigo de fabricação compreendendo uma composição eficaz para tratar uma infecção por HCV ou inibir a NS5B polimerase de HCV; e material de empacotamento compreendendo um rótulo que indica que a composição pode ser usada para tratar a infecção pelo vírus da hepatite C; em que a composição compreende um composto da fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos, ou a combinação como descrito aqui.

Outra modalidade da presente invenção diz respeito a um kit ou recipiente compreendendo um composto da fórmula (I) ou qualquer subgrupo dos mesmos, em uma quantidade eficaz para uso como um padrão ou reagente em um teste ou ensaio para determinar a capacidade de farmacêuticos potenciais para inibir a NS5B polimerase de HCV, crescimento de HCV, ou ambos. Este aspecto da invenção pode encontrar seu uso em programas de pesquisa farmacêutica.

Os compostos e combinações da presente invenção podem ser usados em ensaios de analisado alvo de alta produtividade tais como aqueles para medir a eficácia da referida combinação no tratamento de HCV. Exemplos

Os exemplos seguintes são pretendidos ilustrar a presente invenção e não limitá-la a estes. A menos que de outra maneira indicado, a purificação dos compostos sintetizados por cromatografia de coluna ou cro48/121 matografia rápida é realizada em uma coluna de sílica-gel.

Uma solução de NaOH (6,38 g) em 25 mL de água foi adicionado a uma solução agitada de 1a (10-terc-butil 6-metil 13-ciclo-hexil-3-metóxi7/7-indolo[2,1-a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato, sintetizado como descrito em US 2007270406 A1) em THF (100 mL) e MeOH (150 mL). Depois de 1 hora, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, em seguida diluída 10 com água gelada (150 mL). O pH da solução resultante foi ajustado em 6 com ácido acético (AcOH). O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e secado sob vácuo para produzir 1,90 g (98%) de 1b como um pó amarelado: m/z = 488 (M+H)⁺

Etapa 2

HATU (1,17 g, 3,08 mmols) foi adicionado sob nitrogênio a uma solução agitada de 1b (1,00 g, 2,05 mmols), DIPEA (1,07 mL, 6,15 mmols) e 2,2'-oxibis(N-metiletanamina) (1,08 g, 8,20 mmols) em 30 mL de THF seco. Depois de 1 h, a mistura reacional foi extinguida com água (100 mL) e extra49/121 ida com acetato de etila (EtOAc). A camada orgânica foi secada sucessivamente (Na₂SO₄), filtrada e evaporada. O resíduo foi triturado em água, filtrado e secado para produzir 1,15 g (93%) do composto alvo 1c como um pó amarelado: m/z = 602 (M+H)⁺

Uma solução de 1c (1,15 g, 1,91 mmol) e sulfamida (1,84 g, 19,1 mmol) em dioxano (10 mL) foi aquecida a 100°C em um forno de microondas durante 20 minutos. A mistura reacional foi resfriada em temperatura ambiente, em seguida evaporada sob vácuo. O resíduo foi triturado em água, filtrado e lavado com água. O pó foi reconstituído em EtOAc, secado (Na₂SO₄) e evaporado para produzir 1,15 g (88%) do produto desejado 1d como um pó amarelado: m/z = 681 (M+H)⁺

TFA (3,0 g, 26,3 mmols) foi adicionado a uma solução de 1d (1,15 g, 1,70 mmol) em diclorometano (3 mL). Depois de 1 h, a mistura reacional foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi triturado em éter, filtrado e lavado com éter, em seguida purificado por cromatografia (gradiente EtOAc para EtOAc/EtOH, 9:1) para produzir 802 mg (76%) do produto desejado 1e:

50/121 m/z = 625 (Μ + H)⁺

Carbonildi-imidazol (389 mg, 2,40 mmols) foi adicionado a uma solução agitada de 1e (500 mg, 0,80 mmol) em THF seco (3 mL). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h: conversão completa para o intermediário 1f foi observada. A solução resultante foi evaporada, em seguida o resíduo foi purificado por cromatografia rápida (gradiente EtOAc para CH₃CN 1:0 para 0:1) para produzir 550 mg do produto alvo 1f que foi usado como tal na próxima etapa: m/z = 675 (M + H)⁺

DBU (244 mg, 0,32 mmol) foi adicionado a uma solução de 1f (550 mg) em acetonitrila (25 mL). A mistura reacional foi agitada durante a noite em temperatura ambiente, em seguida concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água (30 mL) e o pH da solução resultante foi ajustado em 5. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e secado. A recristalização de etanol seguido por uma purificação por cromatografia de coluna (gradiente EtOAc para EtOAc/EtOH 9:1) forneceu 380 mg (78%) do produto do título 1 como um pó branco: m/z = 607 (M + H)⁺, ¹H

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RMN (DMSO-cfe) δ 1,15 (m, 1H), 1,40 (m, 3H), 1,71 (m, 2 H), 1,88 (m, 1H), 2,01 (m, 3 H), 2,56 (m, 3H), 2,77 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 3,26 (m, 2H), 3,503,71 (m, 6H), 3,87 (s, 3H), 4,44 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 5,09 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,19 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 (d, J= 8,3 Hz, 1H), 7,88 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H), 11,40 (s, 1H).

Exemplo 2 - síntese do composto 2

Uma solução de 1 (56 mg, 0,092 mmol) em MeOH (15 mL) e THF (5 mL) foi hidrogenada em um mecanismo de cubo H usando um cartucho de Pd em Carbono a 10%. Em seguida, o solvente foi evaporado, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (CH2CI2/CH3CN, 9:1) para produzir 23 mg (41%) do produto desejado 2 como um pó branco: m/z = 609 (M+H)⁺.

Exemplos 3 e 4 - síntese dos compostos 3 e 4

A mistura racêmica 2 foi purificada por SFC, usando um ciclo de 6,5 minutos em uma coluna CHIRALCEL OD-H quiral (250 x 10 mm, revestida em 5 pm de sílica-gel) e metanol a 55%/CO2 a 45% como fase móvel, a uma taxa de fluxo de 10 mL/minuto e conduz a dois enantiômeros puros 3 e 4. Os tempos de retenção sob estas condições foram observados em 4,25 min. e 5,54 min.

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Exemplo 5 - síntese do composto 5

O composto 5a foi sintetizado em 96% de rendimento a partir do intermediário 1b e 2-[4-(terc-butiloxicarbonil)piperazin-1-il]etilamina seguindo o procedimento relatado para a síntese do intermediário 1c: m/z = 699 (M+H)⁺.

Etapa 2

Ácido trifluoroacético (5,00 g, 43,9 mmol) foi adicionado a 740 mg do intermediário 5a. Depois de 1 hora em temperatura ambiente, o solvente foi evaporado. O resíduo foi triturado em EtOH/Et₂O, filtrado e secado sob alto vácuo para produzir 380 mg (64%) do produto desejado 5b como um pó amarelado: m/z = 543 (M+H)⁺.

Etapa 3

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Uma solução de 5b (380 mg, 0,700 mmol) e sulfamida (673 mg,

7,00 mmol) em dioxano (10 mL) foi aquecida a 100 °C em um forno de micro-ondas durante 15 minutos. Em seguida, a mistura reacional foi resfriada 5 sucessivamente em temperatura ambiente, concentrada sob vácuo, triturada em água e filtrada. A purificação por cromatografia de coluna (gradiente EtOAc/CH₂Cl2 1:1 a 1:0) produziu 210 mg (46%) do produto desejado 5c: m/z

O produto do título 5d foi sintetizado em 11% de rendimento seguindo o procedimento (etapas 5 e 6) relatado para a síntese do composto 1, seguida por uma recristalização a partir de etanol, proporcionando o produto desejado como pó branco, m/z = 604 (M+H)⁺.

Exemplo 6 - síntese do composto 6

Etapa 1

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N.

6a

6b

Em uma solução de A/r(2-aminoetil)-/Vi-metiletano-1,2diamina(10,58 g, 90 mmoles) em DCM (350 mL) foi adicionada uma solução de cloreto de 2-nitrobenzeno-1-sulfonila dissolvida em DCM lentamente (50 mL). Depois de 2 h em temperatura ambiente, a mistura reacional (RM) foi lavada com água, secada em MgSO₄, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel com um gradiente de metanol em DCM (0 a 10%), produzindo 6,9 g de /V-(2-((2aminoetil)(metil)amino)etil)-2-nitrobenzenossulfonamida 6a e 3,9 g de N,N'~ (2,2'-(metilazanedi-il)bis(etano-2,1-di-il))bis(2-nitrobenzenossulfonamida) 6b; m/z (6a) = 303 (M+H)⁺, m/z (6b) = 488 (M+H)⁺.

Etapa 2

1b

6a

6c

Em uma solução de ácido carboxílico 1b (500 mg, 1,025 mmol),

HATU (585 mg, 1,5 eq) e di-isopropiletilamina (212 mg, 1,6 eq) em DMF seco (10 mL) foi adicionado N-(2-((2 aminoetil)(metil)amino)etil)-2nitrobenzenossulfonamida 6a (341 mg, 1,1 eq). Depois de 30 minutos em temperatura ambiente, a RM foi diluída com água. O precipitado amarelo foi filtrado e lavado com água. Foi em seguida reconstituído em EtOAc, secado em MgSO₄, filtrado, concentrado e secado sob vácuo para produzir 800 mg do produto desejado terc-butil éster de ácido 13-Ciclo-hexil-3-metóxi-6-(2{metil-[2-(2-nitro-benzenossulfonilamino)-etil]-amino}-etilcarbamoil)-7H benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-10-carboxílico 6c como um pó amarelo; m/z =

772 (M+H)⁺.

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Em uma solução de terc-butil éster de ácido 13-ciclo-hexil-3metóxi-6-(2-{metil-[2-(2-nitro-benzenossulfonila carboxílico de amino)-etil]amino}-etilcarbamoil)-7H-benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-10 6c (650 mg, 0,842 mmol) e carbonato de césio (1,646 g, 6 eq) em DMF seco (10 mL) foi adicionada uma solução de iodeto de metila lentamente (122 mg, 1,02 mmol) em DMF seco (2 mL). Depois de agitar durante 1 h em temperatura ambiente, a RM foi diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi em seguida lavada com água, secada em MgSO₄, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel, usando um gradiente de EtOAc em DCM (0 a 100%), produzindo a 550 mg (83% de rendimento) do produto desejado terc-butil éster de ácido 13-Ciclo-hexil-3-metóxi-

6-[2-(metil-{2-[metil-(2-nitro-benzenossulfonil)-amino]-etil}-amino)etilcarbamoil]-7H-benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-10-carboxílico 6d como um sólido amarelo; m/z = 786 (M+H)⁺.

Uma mistura de terc-butil éster de ácido 13-ciclo-hexil-3-metóxi-

6-[2-(metil-{2-[metil-(2-nitro-benzenossulfonil)amino]-etil}-amino)etilcarbamoil]-7H-benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-10-carboxílico 6d (380 mg,

56/121

0,483 mmol), carbonato de césio (315 mg, 2 eq) e tiofenol (107 mg, 2 eq) em DMF (5 mL) foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. Carbonato de césio (315 mg, 2 eq) e tiofenol (107 mg, 2 eq) foram em seguida adicionados à RM, e a RM foi agitada durante 1 h. Na conclusão da reação, a RM foi filtrada e carregada em um cartucho contendo uma resina SCX, prélavada com DCM. Depois de enxaguar o cartucho com DCM (várias vezes, até que uma fração incolor fosse obtida) o produto foi eluído com NH3 em MeOH, produzindo 240 mg do produto desejado terc-butil éster de ácido 13ciclo-hexil-3-metóxi-6-{2-[metil-(2-metilamino-etil)-amino]-etilcarbamoil}-7Hbenzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-10-carboxílico 6e, que também foi purificado por HPLC preparativa; m/z = 601 (M+H)⁺.

A £0 h₂n nh₂

1c, produzindo 200 mg (50%) do produto alvo; m/z = 680 síntese de produto 6f foi realizada usando o procedimento descrito para a síntese do composto 1d, usando o intermediário 6e em vez do intermediário (M+H)⁺.

A síntese

TFA

de produto 6g foi realizada usando o procedimento descrito para a síntese do composto 1e, usando o intermediário 6f em vez do intermediário 1d, produzindo 187 mg (rendimento quantitativo) do produto alvo; m/z = 624 (M+H)⁺.

Etapa 7

57/121

A síntese de produto 6 foi realizada usando o procedimento descrito para a síntese do composto 1, usando o intermediário 6g em vez do intermediário 1e, produzindo 43 mg (22% de rendimento) do produto alvo; m/z = 606 (M+H)⁺.

6b 7a

Em uma solução de /V,/V’-(2,2'-(metilazanodi-il)bis(etano-2,1-diil))bis(2-nitrobenzenossulfonamida) 6b (3 g, 6,15 mmoles) em DMF seco (50 mL) foi adicionado porção a porção hidreto de sódio (738 mg, 3 eq, 60% em óleo mineral) a 0°C. Depois de 20 minutos, uma solução de iodeto de metila dissolvida em DMF seca (5 mL) foi adicionada lentamente à RM. Depois de agitar durante 1 h em temperatura ambiente, a RM foi extinguida com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água, secada em MgSO₄, filtrada e concentrada. A purificação por cromatografia rápida com um gradiente de EtOAc em DCM (20 a 80%) proporcionou 1,94 g (61%) do produto desejado A/,A/-(2,2'-(metilazanodi-il)bis(etano-2,1-di-il))bis(N-metil-2nitrobenzenossulfonamida) 7a; m/z = 516 (M+H)⁺.

Etapa 2

58/121

7a

7b °<^δ

Uma mistura de A/,/\/’-(2,2'-(metilazanodi-il)bis(etano-2,1-diil))bis(N-metil-2-nitro benzenossulfonamida) 7a (1,24 g, 2,405 mmoles), carbonato de césio (2,35 g, 3 eq) e tiofenol (795 mg, 3 eq) em DMF (25 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. Na conclusão da reação, a RM foi filtrada e carregada em um cartucho de MP-TsOH, pré-lavado com DCM. Depois de enxaguar o cartucho com DCM (várias vezes, até que uma fração incolor fosse obtida) o produto foi eluído com NH₃ em MeOH, produzindo a 220 mg (63%) de /Vi,/V₂-dimetil-/Vi-(2-(metilamino)etil)etano-1,2diamina 7b que foi diretamente usado na próxima etapa; m/z =146 (M+H)⁺.

A síntese de terc-butil éster de ácido 13-ciclo-hexil-3-metóxi-6(metil-{2-[metil-(2-metilamino-etil)-amino]-etil}-carbamoil)-7Hbenzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-10-carboxílico 7c foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto 1c, usando Ni ,/V₂-dimetil-/Vi(2-(metilamino)etil)etano-1,2 diamina 7b em vez de Metil-[2-(2-metilaminoetóxi)-etil]-amina. Depois da purificação por cromatografia rápida com um gradiente de amônia em metanol 7M em EtOAc (5 a 15%), foram obtidos 100 mg do produto desejado 7c como um óleo amarelo; m/z = 615 (M+H)⁺.

59/121

7c 7d

A síntese de 7d foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto 1d, usando terc-butil éster de ácido 13-ciclohexil-3-metóxi-6-(metil-{2-[metil-(2-metila amino-etil)-amino]-etil}-carbamoil)7H-benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-10-carboxílico 7c em vez de terc-butil éster de ácido 13-ciclo-hexil-3-metóxi-6-{metil-[2 (2-metilamino-etóxi)-etil]carbamoil}-7H-benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-10 carboxílico 1c. Depois da purificação por cromatografia rápida com um gradiente de metanol em EtOAc (0 a 10%), foram obtidos 50 mg do produto desejado 7d; m/z = 694

A síntese de 7e foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto 1e, usando o intermediário 7d em vez do intermediário 1d; m/z = 638 (M+H)⁺.

A síntese de produto 7 está sendo realizada usando o procedimento descrito para a síntese do composto 1, usando o intermediário 7e em vez do intermediário 1e.

Exemplo 8 - síntese do composto 8

60/121

A síntese de 8b foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto 1b, usando metil éster 8a em vez de 1a. O pro5 duto desejado 8b foi obtido em 95% de rendimento como um sólido amarelo claro; m/z - 502 (M+H)⁺.

Etapa 2

Legenda da Figura:

-THF seco

A 0 °C e sob atmosfera protetora, cloreto de oxalila (4,07 ml,

47.4 mmols) foi adicionado a uma solução de ácido carboxílico 8b (19,83 g,

39.5 mmols) e DMF (5 gotas) em tetra-hidrofurano (seco) (100 mL). Na adição de cloreto de oxalila foi observada formação imediata de gás. A reação foi agitada a 0 °C durante 1,5 hora. Em seguida, uma quantidade extra de

0,5 eq de cloreto de oxalila foi adicionada, e a reação foi agitada durante mais 1 hora (repetida uma vez até que a conversão completo fosse obtida). A reação foi em seguida evaporada até a secura em vácuo para proporcionar 20,5 g (97%) do cloreto ácido 8c como um sólido branco; m/z (metil éster

61/121 formado por adição de metanol antes da análise) =516 (M+H)⁺.

Em uma solução de (S)-4-benzil-2-oxazolidinona (7,50 g, 42,3 mmol) em tetra-hidrofurano (seco) (60 ml) sob atmosfera de nitrogênio, nbutilítio (26,4 ml, 42,3 mmols) foi adicionado lentamente a -78°C. A mistura reacional foi agitada durante 40 minutos a -78°C. Depois de 40 minutos, a solução de ânion foi adicionada por meio de uma cânula em uma solução do cloreto ácido 8c (20 g, 38,5 mmols) em 60 mL de THF a -78°C. A mistura reacional foi agitada durante 1,5 horas a -78°C. Quando a reação foi finalizada, foi extinguida com uma solução de cloreto de amônia a -70°C. A mistu ra reacional foi em seguida aquecida em temperatura ambiente e extraída com EtOAc, lavada com salmoura e secada em Na₂SO₄. A camada orgânica foi filtrada e concentrada para proporcionar 26,34 g de um sólido amarelo. O dois enantiômeros 8d e 8e foram separados por cromatografia de coluna rápida usando 5:1 Heptano/EtOAc e foram obtidos como sólidos amarelos claros; m/z = 661 (M+H)⁺.

Etapa 4

8f

Diastereoisômero 8d (11,17 g, 16,90 mmol) foi primeiro dissolvido em THF (130 ml) em seguida metanol (130 ml) foi adicionado. Solução de NaOH a 1N (101 mL, 101 mmol) foi adicionada lentamente de forma que a temperatura foi mantida abaixo de 30°C. A mistura reacional foi agitada em

62/121 temperatura ambiente durante 2 horas. Quando a reação foi finalizada, solução de HCI a 1 N foi adicionada até que o pH alcançasse 2. 500 ml_ de H₂O foram em seguida adicionados, e a mistura reacional foi extraída com EtOAc, lavada com salmoura e concentrada. A purificação por cromatografia de coluna rápida usando 1:1 Heptano/EtOAc proporcionou 5,24 g (60%) do enantiômero desejado ácido (4bR,5aS)-9-(terc-butoxicarbonil)-12-ciclo-hexil3-metóxi-4b,5,5a,6-tetra-hidrobenzo[3,4]ciclopropa[5,6]azepino[1,2-a]indol5a-carboxílico 8f com um ee de 97%; m/z = 502 (M+H)⁺.

Em uma solução agitada do intermediário 8f (2 g, 3,99 mmol) em DMF seca (50 ml_) a 0°C, foram adicionados di-isopropil etilamina (DIEA, 1,54 g, 11,9 mmol), HATU (2,27 g, 5,98 mmol) e 2,2'-oxibis(Nmetiletanamina) (2,1 g, 15,95 mmols). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 1 hora, em seguida mantida em temperatura ambiente durante 12 horas. A mistura reacional foi em seguida sucessivamente vertida em uma solução de água gelada, extraída com diclorometano, secada em MgSO₄, em seguida concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando um gradiente de metanol em diclorometano (0 a 10%) para produzir 0,94 g (38% de rendimento) do produto desejado terc-butil(1aR,12bS)8-ciclo-hexil-11 -metóxi-1 a-(metil{2-[2-(metilamino)etóxi]etil}carbamoil)-

1,1 a,2,12b-tetra-hidrociclopropa[d]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-5-carboxilato 8g como um sólido branco; m/z 616 (M+H)⁺.

Etapa 6

63/121

8g

A síntese

de ácido (1aR,12bS)-8-ciclo-hexil-11-metóxi-1aamino)etóxi]etil}carbamoil)-1,1 a,2,12b-tetra(metil{2-[2-(metila hidrociclopropa[c/]indolo[2,1-a][2] benzazepina-5-carboxílico 8h foi realizada seguindo o procedimento relatado para a preparação do composto 1e, usando o intermediário 8g em vez de 1d. O resíduo obtido também foi dissolvido em DCM, lavado com água, secado em sulfato de magnésio, filtrado e concentrado até a secura, levando a 0,474 g (56% de rendimento) de composto do título 8h; m/z = 560 (M+H)⁺.

Em uma solução do intermediário 8h (0,474 g, 0,847 mmol) em dioxano (10 mL) foi adicionada sulfamida (0,814 g, 8,47 mmol). A mistura resultante foi agitada a 100°C em um forno de micro-ondas durante 4 horas. A mistura reacional foi em seguida resfriada em temperatura ambiente e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando um gradiente de metanol em diclorometano (0 a 10%) para produzir 143 mg (26%) do produto do título [(aminossulfonil)(metil)amino]etóxi}etil) metóxi-1,1 a,2,12b-tetra-hidrociclopropa[c(] carboxílico 8i; m/z = 639 (M+H)⁺.

ácido (1aR,12bS)-1a-[(2-{2(metil)carbamoil]-8-ciclo-hexil-11 indolo[2,1 -a][2]benzazepina-564/121

A síntese de 15,15-dióxido de (1aR,12bS)-8-ciclo-hexil-11metóxi-16,22-dimetil-1,12 b-d i-id ro-5,1 a-(metanoiminotioiminoetano5 oxietanoiminometano)ciclopropa[d]-indolo[2,1 -a][2]benzazepina-13,23(2H)diona 8 foi realizada seguindo o procedimento da etapa 2 relatado para a síntese do composto 1, usando o intermediário 8i em vez de 1e, produzindo 90 mg (52% de rendimento) de um sólido branco; m/z = 621 (M+H)⁺. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,3-1,5 (m, 3 H) 1,75-1,8 (m, 5 H)

1,85-2,05 (m, 6 H) 2,5-3 (m, 3 H) 3,2 (s, 3 H) 3,22 (s, 3H) 3,4-3,7 (m, 6 H)

3,87 (s, 3 H) 3,75-3,9 (m, 1 H) 4,9-5,1 (m, 1 H) 6,95-7,16 (d, J = 8,39 Hz, 1 H) 7,28 (s, 1 H) 7,44-7,55 (m, 2 H) 7,80 (d, J = 8,39 Hz, 1 H) 9,4 (br. s., 1 H).

O enantiômero ácido (4bS,5aR)-9-(terc-butoxicarbonil)-12-ciclohexil-3-metóxi-4b,5,5a,6-tetra-hidrobenzo[3,4]ciclopropa[5,6]azepino[1,2a]indol-5a-carboxílico 9a foi obtido em 27% de rendimento, e 96% ee, se

65/121 guindo o procedimento relatado para a síntese do composto 8f, a partir do diastereoisômero 8e em vez de 8d; m/z = 502 (M+H)⁺.

terc-butil

(1 aS, 12bR)-8-ciclo-hexil-11 -metóxi-1 a-(metil{2-[2etil}carbamoil)-1,1 a,2,12b-tetra(metilamino)etóxi] hidrociclopropa[c(]indolo[2,1-a][2]benzazepina-5-carboxilato 9b foi preparado em 60% de rendimento a partir de 9a e 2,2'-oxibis(N-metiletanamina) seguindo o procedimento usado para a preparação do composto 1c; m/z = 616

o ?S'^NH2 h₂n

um

Em uma solução do intermediário 9b (0,73 g, 1,185 mmol) em dioxano (10 mL) foi adicionada sulfamida (1,14 g, 11,85 mmol). A mistura resultante foi agitada a 100°C em um forno de micro-ondas durante 3 horas. A mistura reacional foi resfriada em temperatura ambiente, em seguida concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando gradiente de metanol em diclorometano (0 a 10%) para produzir 743 (80%) do terc-butil produto do título] 1,1a,2,12b-tetra-hidro mg de (1 aS, 12bR)-1 a-[(2-{2-[(aminossulfonil)(metil)amino etóxi}etil)(metil) carbamoil]-8-ciclo-hexil-11-metóxiciclopropa[c/]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-5-carboxilato

9c.

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Etapa 4

[(aminossulfonil)(metil)amino]etóxi} etil)(metil)carbamoil]-8-ciclo-hexil-11 metóxi-1,1a,2,12b-tetra-hidrociclopropa [c/]indolo[2,1-a][2]benzazepina-5carboxílico 9d foi realizada seguindo o procedimento relatado para a preparação do composto 1e, usando o intermediário 9c em vez de 1d, produzindo 517 mg (79% de rendimento) de uma espuma castanha; m/z = 639 (M+H)⁺.

A síntese de 15,15-dióxido de (1aS,12bR)-8-ciclo-hexil-11metóxi-16,22-dimetil-1,12b-di-idro-5,1 a-(metanoiminotioiminoetanooxietanoiminometano)ciclopropa[c/]indolo [2,1 -a][2]benzazepina-13,23(2H) diona 9 foi realizada seguindo o procedimento da etapa 2 relatado para a síntese do composto 1, usando o intermediário 9d em vez de 1e, produzindo a 80 mg (16% de rendimento) de um sólido branco; m/z = 621 (M+H)⁺. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,3-1,5 (m, 3 H) 1,75-1,8 (m, 5 H)

1,85-2,05 (m, 6 H) 2,5-3 (m, 3 H) 3,2 (s, 3 H) 3,22 (s, 3H) 3,4-3,7 (m, 6 H)

3,87 (s, 3 H) 3,75-3,9 (m, 1 H) 4,9-5,1 (m, 1 H) 6,95-7,16 (d, J = 8,39 Hz, 1

H) 7,28 (s, 1 H) 7,44-7,55 (m, 2 H) 7,80 (d, J = 8,39 Hz, 1 H) 9,4 (br. s., 1 H).

Exemplo 10 - síntese do composto 10

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Em uma solução

10a de 5-terc-butil a-metil8-ciclo-hexil-11 -metóxi1,12b-di-idrociclo propa[d]indolo[2,1-a][2]benzazepina-1a,5(2H)-dicarboxilato 8a (2 g, 3,88 mmol) em diclorometano (25 mL) foi adicionado TFA (22,34 g, 194 mmol). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente duran te 6 horas, em seguida concentrada até a secura. O resíduo foi dissolvido sucessivamente em diclorometano, lavado com água, secado sob MgSO₄, filtrado e concentrado. O resíduo foi em seguida purificado por cromatografia de coluna usando diclorometano e acetato de etila como eluente para produzir 1,7 g (95%) do produto do título ácido 8-ciclo-hexil-11-metóxi-1a(metoxicarbonil)-l, 1 a,2,12b-tetra-hidrociclopropa[d]indolo[2,1 a][2]benzazepina-5-carboxílico 10a como um pó branco; m/z 460 (M+H)⁺.

CDI. DBU

adicionado

1,1 '-Carbonildi-imidazol uma solução agitada de ácido 8 1,1 a,2,12b-tetra-hidrociclopropa[c/] (0,847 g, 5,22 mmol) foi ciclo-hexil-11 -metóxi-1 a-(metoxicarbonil)indolo[2,1-a][2]benzazepina-5-carboxílico

10a (0,8 g, 1,74 mmol) em THF (15 mL) a 25°C. A evolução de CO₂ foi ins tantânea e quando retardada, a solução foi aquecida a 50°C durante 2 ho68/121 ras, e em seguida resfriada em temperatura ambiente. 7erc-butil {4-[(amino sulfonil)(metil)amino]butil}carbamato 10b (0,735 g, 2,61 mmol) foi adicionado, seguido pela adição de DBU (0,53 g, 3,48 mmol). A agitação foi continuada durante 12 horas a 50°C. A mistura foi resfriada em temperatura ambiente, em seguida dividida entre diclorometano e água. A água foi extraída com diclorometano. As camadas orgânicas foram secadas em MgSO₄, em seguida concentradas até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando diclorometano e acetato de etila para produzir 0,66 g (53%) do produto do título metil 5-({[{4-[(terc-butoxicarbonil)amino]butil} (metil)amino]sulfonil}carbamoil)-8-ciclo-hexil-11 -metóxi-1,12b-diidrociclopropa[c/]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a(2H)-carboxilato 10c como uma espuma branca; m/z 723 (M+H)⁺

Em uma solução do intermediário 10c (0,65 g, 0,899 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado hidróxido de lítio (0,75 g, 1,8 mmol) dissolvido em água (5 mL). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida diluída com água e neutralizada com um solução aquosa de HCI a 2M. A mistura resultante foi extraída com diclorometano, secada em MgSO₄, em seguida concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando um gradiente de metanol em CH2CI2 para produzir 0,55 g (86%) do produto do título ácido 5-({[{4-[(tercbutoxicarbonil)amino]butil}(metil)amino]sulfonil} carbamoil)-8-ciclo-hexil-11 metóxi-1,12b-di-idrociclopropa[c(]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a(2H)carboxílico 10d como um sólido branco; m/z 709 (M+H)⁺

Etapa 4

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10d 10e

TFA (2,5 g, 22 mmol) foi adicionado a uma solução do intermediário 10d (0,52 g, 0,734 mmol) em DCM (10 mL). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante aproximadamente 10 horas. A reação foi em seguida evaporada até a secura, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando um gradiente de metanol em DCM para proporcionar 0,3 g (68%) do composto do título ácido 5-({[(4aminobutil)(metil]amino]sulfonil}carbamoil)-8-ciclo-hexil-11 -metóxi-1,12b-diidrociclopropa[c/|indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a(2H)-carboxílico 10e como um sal de TFA; m/z 609 (M+H)⁺

Em uma solução agitada do intermediário 10e (0,22 g, 0,36 mmol) em DMF seca (100 mL), a 0°C, foram adicionados DIPEA (0,14 g, 1,08 mmol) e HATU (0,206 g, 0,542 mmol). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 1 hora, em seguida mantida em temperatura ambiente durante 12 horas. A mistura reacional foi em seguida sucessivamente vertida em um solução diluída com água gelada, extraída com diclorometano, secada em MgSC>4 e em seguida concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna para produzir 0,188 g (88%) do produto do título 15,15-dióxido de 8-ciclo-hexil-11 -metóxi-16-metil-1,12b-di-idro-5,1 a-(metanoiminotioiminobutanoimino)ciclopropa[c/]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-13,22(2H)-diona 10 como um sólido branco. ¹H RMN (DMSO-cfe): 11,5 (s, 1H), 8,4 (s, 1H), 8,3 (s, 1H), 7,8 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,3 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,4 Hz, 1H),

7,15 (s, 1H), 7 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,6 (d, J = 16Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,55

70/121 (d, J = 16 Hz, 1H), 3-3,2 (m, 2 H), 3 (s, 3H), 2,7-2,9 (m, 4H), 1,8-2,1 (m, 5H),

1,6-1,7 (m, 2H), 1,3-1,6 (m, 6H), 1-0,7 (m, 3H); m/z 609 (M+H)⁺

Exemplo 11 - síntese do composto 11

1,T-carbonildi-imidazol (0,522 g, 3,22 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de ácido 8-ciclo-hexil-11-metóxi-1a-(metoxicarbonil)-

1,1 a,2,12b-tetra-hidrociclopropa [c/]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-5-carboxilico

10a (0,74 g, 1,61 mmol) em THF (15 mL) a 25°C. A evolução de CO₂ foi instantânea e quando retardada, a solução foi aquecida a 50°C durante 2 horas e em seguida resfriada em temperatura ambiente. Terc-butil 4-{2[(aminossulfonil)(metil)amino]etil}piperazina-1-carboxilato 11a (1,038 g, 3,22 mmol) foi adicionado, seguido pela adição de DBU (0,49 g, 3,22 mmol). A agitação foi continuada durante 12 horas a 50°C. A mistura foi resfriada em temperatura ambiente, em seguida dividida entre diclorometano e água. A água foi extraída com diclorometano, e as camadas orgânicas foram secadas em MgSO₄, em seguida concentradas até a secura. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando diclorometano e acetato de etila para produzir 0,83 g (68%) do composto do título metil 5-({[{2-[4-(tercbutoxicarbonil)piperazin-1-il]etil}(metil)amino]sulfonil}carbamoil)-8-ciclo-hexil11 -metóxi-1,12b-di-idrociclopropa[d]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a(2H)carboxilato 11b como uma espuma branca; m/z 764 (M+H)⁺ Etapa 2

71/121

11b

LÍOHH2O

11c

Em uma solução do intermediário 11b (0,6 g, 0,785 mmol) em THF (20 mL) foi adicionado LiOH (0,82 g, 1,96 mmol) em água (5 mL). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida diluída com água e neutralizada com uma solução aquosa de HCI a 2M. A mistura resultante foi extraída com diclorometano, secada em MgSO₄, em seguida concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de coluna usando CH2CI2 e metanol para produzir 0,4 g (68%) do composto do título ácido 5-({[{2-[4-(terc-butoxicarbonil)piperazin-1il]etil}(metil)amino]sulfonil} ciclo-hexil-11 -metóxi-1,12b-diidrociclopropa[d]indolo[2,1-a][2 de carbamoil)-8] benzazepina-1a(2H)carboxílico 11c como um sólido branco; m/z 750 (M+H)⁺

TFA (1,44 g, 12,7 mmol) foi adicionado a uma solução do intermediário 11c (0,38 g, 0,507 mmol) em diclorometano (10 mL). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante aproximadamente 10 horas. A reação foi em seguida evaporada até a secura, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando diclorometano e metanol para proporcionar o composto do título ácido 8-ciclo-hexil-11-metóxi-5-({[metil(2piperazin-1-ila etil)amino]sulfonil}carbamoil)-1,12b-di-idrociclopropa [d]indolo[2,1-a][2] benzazepina-1a(2H)-carboxílico 11d (0,24 g, 73%); m/z 650 (M+H)⁺

Etapa 4

72/121

11d 11

Em uma solução agitada do intermediário 11d (0,24 g, 0,37 mmol) em DMF seca (100 mL), a 0°C, foram adicionados di-isopropil etilamina (0,143 g, 1,1 mmol) e HATU (0,211 g, 0,554 mmol). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 1 hora, em seguida mantida em temperatura ambiente durante 12 horas. A mistura reacional foi em seguida sucessivamente vertida em uma solução diluída com água gelada, extraída com diclorometano, secada em MgSO₄ e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando diclorometano / metanol para produzir 0,018 g (18%) do composto do título 21,21-dióxido de 31-ciclo-hexil-8-metóxi-22metil-21 -tia-1,13,20,22,25-pentaazaeptaciclo [23.2.2.1³·¹³ 1¹²¹⁵.1¹⁴’¹⁸ 0³’⁵.0⁶'¹¹]dotriaconta-6,8,10,12(31),14(30),15,17heptaeno-2,19-diona 11 como um sólido branco; m/z 632 (M+H)⁺ Exemplo 12 - síntese do composto 12

Em uma solução de 5-ferc-butil-1a-metil-8-ciclo-hexil-11-metóxi1,12b-di-idrociclo propa[c(]indolo[2,1-a][2]benzazepina-1a,5(2H)-dicarboxilato 8a (2 g, 3,88 mmols) em diclorometano (25 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (22,34 g, 194 mmol). A mistura resultante foi agitada em tempera

73/121 tura ambiente durante 6 horas, em seguida concentrada até a secura. O resíduo foi dissolvido sucessivamente em diclorometano, lavado com água, secado sob MgSO₄, filtrado e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando diclorometano e acetato de etila como eluente para produzir 1,7 g (95%) do produto do título ácido 8-ciclo-hexil-11-metóxi1 a-(metoxicarbonil)-1,1 a,2,12b-tetra-hidrociclopropa[c/]indolo[2,1 a][2]benzazepina-5-carboxílico 12a como um pó branco; m/z 460 (M+H)⁺ Etapa 2

HO12a

12b

12c

Em uma solução do intermediário 12a (1,73 g, 3,76 mmol) em

THF (25 mL) a 0°C foram adicionados sucessivamente 4dimetilaminopiridina (DMAP) (1,38 g, 3,76 mmol), cloridrato de Λ/1((etilimino)metileno)-A/3,/V3-dimetilpropano-1,3-diamina (EDC) (2,16 g, 11,29 mmols) e alil(metil)aminossulfonamida 12b (1,3 g, 8,66 mmol). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 2 h, em seguida em temperatura ambiente durante 8 h. Água foi em seguida adicionada, e a mistura reacional foi filtrada. O sólido resultante foi purificado por cromatografia de coluna usando diclorometano e acetato de etila para produzir 500 mg (23%) do produto do título metil 5-({[alil(metil)amino]sulfonil}carbamoil)-8-ciclo-hexil-11-metóxi1,12b-di-idrociclopropa[d|indolo[2,1 -a][2] benzazepina-1 a(2H)-carboxilato 12c; m/z 592 (M+H)⁺

Etapa 3

12c

LÍOHH2O

12d

Em uma solução do intermediário 12c (0,5 g, 0,845 mmol) em

74/121

THF (20 mL) foi adicionado hidróxido de lítio (0,73 g, 1,69 mmol) em água (5 mL). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida diluída com água e neutralizada com uma solução aquosa de HCI a 2M. A mistura resultante foi extraída com diclorometano, secada em MgSO₄, em seguida concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de coluna usando CH2CI2 e metanol para produzir 0,4 g (75%) do produto do título ácido 5 ({[alil(metil)amino]sulfonil}carbamoil)-8-ciclohexil-11 -metóxi-1,12b-di-idrociclopropa[d]indolo[2,1 -a][2]benzazepina1a(2H)-carboxílico 12d como um sólido branco; m/z 578 (M+H)⁺ Etapa 4

12d

12e

Em uma solução do intermediário 12d (0,2 g, 0,346 mmol) em

THF (15 mL), a 0°C, foram adicionados sucessivamente 4dimetilaminopiridina (DMAP) (0,127 g, 1,04 mmol), cloridrato de Λ/1((etilimino)rnetileno)-/\/3,/V3-dimetilpropano-1,3-diamina (EDC) (0,199 g, 1,04 mmol) e but-3-en-1 -amina (0,062 g, 0,866 mmol). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 2 h, em seguida em temperatura ambiente durante 8 h. Água foi em seguida adicionada, e a mistura resultante foi filtrada. O sólido foi lavado com diclorometano, em seguida o filtrado foi sucessivamente extraído com diclorometano, secado em MgSO₄, filtrado e concentrado. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de coluna com diclorometano e acetato de etila para produzir 70 mg (32%) do produto do título Λ/⁵{[alil(metil)amino]sulfonil}-/V^1a.but-3-en-1-il-8-ciclo-hexil-11-metóxi-1,12b-diidrociclopropa[d]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a,5(2H)-dicarboxamida 12e; m/z 631 (M+H)⁺

Etapa 5

75/121

Uma solução do intermediário 12e (0,1 g, 0,16 mmol) em dicloroetano (50 ml_) foi desgaseificada com argônio durante 10 minutos, em seguida catalisador de 1^a. geração Hoveida-Grubbs (0,03 mg, 0,032 mmol) foi adicionado. A mistura resultante foi aquecida a 70°C e mantida durante a noite sob argônio. A mistura foi em seguida resfriada em temperatura ambiente, e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo escuro resultante foi purificado por cromatografia de coluna usando DCM e acetato de etila para produzir 15 mg (16%) do produto do título 15,15-dióxido de 8-ciclo-hexil-11metóxi-16-metil-1,12b-di-idro-5,1a-(metaniminotio imino pent[2]enoiminometano)ciclopropa[d]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-13,23(2H) diona 12 como um sólido branco; m/z 603 (M+H)⁺

Exemplo 13 - síntese do composto 13

Etapa 1

10-terc-Butil éster 6-metil éster de ácido 13-ciclo-hexil-3-metóxi

7H-benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-6,10-dicarboxílico 1a (1 g, 1 eq) foi dissolvido em diclorometano seco sob N₂, seguido pela adição de ácido trifluoroacético (TFA) (8,88 ml, 60 eq). A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 24 h. O solvente foi em seguida removido sob pressão reduzida.

76/121

O produto cru foi triturado com dietil éter. Os cristais foram filtrados e secados durante a noite sob vácuo para proporcionar o produto do título 6-metil éster de ácido 13-ciclo-hexil-3 metóxi-7H-benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-6,10dicarboxílico 13a (89%, 0,86 g); LC-MS: Tempo de Retenção 3,19 min., m/z 446 [M+H]⁺.

6-Metil éster de

ácido 13-ciclo-hexil-3-hidróxi-7Hbenzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-6,10-dicarboxílico 13a (0,86 g, 1 eq), diamida N-metil-N-alil-sulfúrica 12b (0,67 g, 2,03 eq), cloridrato de Λ/¹((etiliminoJmetilenoJ-A^.A^-dimetilpropano-I.S-diamina (EDCI) (1,14 g, 3,06 eq) e dimetil-piridin-4-il-amina (DMAP) (0,67 g, 3,04 eq) foram dissolvidos em dimetilformamida seca (20 ml) sob N2. A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 3 dias. Esta solução foi adicionada lentamente em água gelada. A camada de água foi extraída com acetato de etila (3 x 50 ml) e lavado com tetra-hidrofurano (3 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secadas em sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida. O produto cru foi purificado por HPLC preparativa para produzir 0,63 g (55%) do produto do título 13b; LC-MS: Tempo de Retenção 6,16 min., m/z 578 [M+H]⁺. ¹H-RMN (DMSO) δ (ppm) 1,13-1,20 (m, 1H, CH2), 1,30-1,47 (m, 3H, CH₂ (2x)), 1,62-1,78 (m, 2H, CH₂), 1,81-1,93 (m, 1H, CH₂), 1,93-2,12 (m, 3H, CH₂ (2x)), 2,70-2,82 (m, 1H, CH), 2,86 (s, 3H, CH₃N), 3,79 (s, 3H, CH₃O), 3,88 (s, 3H, CH₃O), 3,90-3,98 (m, 2H, CH₂), 4,21 (d, 1H, J = 12,97 Hz, CH₂), 5,21 (d, 1H, J= 10,15 Hz, CH₂), 5,31 (d, 1H, J= 17,13 Hz, CH₂), 5,61 (d, 1H, J = 13,12 Hz, CH₂), 5,78-5,90 (m, 1H, CH_arom), 7,25 (dd, 1H, J = 2,50 e J = 8,60 Hz, CH_arom), 7,32-7,35 (m, 1H, CH_arom), 7,54 (d, 1H, J = 8,60 Hz, CHarom), 7,61 (d, 1H, J = 8,45 Hz, CH_arom), 7,88 (d, 1H, J = 9,01 Hz, CHarom), 7,91 (s, 1H, CH), 8,31-8,34 (brs, 1H, NHSO₂).

Etapa 3

77/121

LÍOH-H2O

THF-MeOH

O composto 13b (0,60 g, 1 eq) foi dissolvido em uma mistura de tetra-hidrofurano:metanol (1:1) (20 ml), seguido pela adição de uma solução de LiOH em água (0,09 g, 2 eq). A solução foi agitada durante a noite em temperatura ambiente durante vários dias. Os solventes foram em seguida evaporados sob pressão reduzida, e a camada aquosa foi acidificada com uma solução de HCI a 3 N até o pH 2. Os cristais resultantes foram filtrados, lavados com água e isopropil éter e secados durante a noite sob vácuo para proporcionar 0,44 g (74%) do produto do título 13c; LC-MS: Tempo de Retenção 5,84 min., m/z 562 [M-H]'.

O composto 13c (0,44 g, 1 eq) e HATU (0,47 g, 1,6 eq) foram dissolvidos em dimetilformamida sob N₂, seguido pela adição de DIPEA (0,15 g, 0,20 ml, 1,5 eq) e alilamina (0,07 ml, 1,2 eq). A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 3 dias. A solução de dimetilformamida foi em seguida vertida lentamente em água gelada. Os cristais resultantes foram filtrados, lavados com água e secados durante a noite sob vácuo para proporcionar 0,47 g (100%) do produto do título 13d; LC-MS: Tempo de Retenção 3,01 min., m/z 603 [M+H]⁺.

Etapa 5

78/121

N₂ foi borbulhado através de uma solução do composto 13d (0,47 g, 1 eq) em 50 ml de dicloroetano durante 1 h. Em seguida, catalisador de 2^a. geração de Grubbs (0,13 g, 0,2 eq) foi adicionado, e a mistura reacional foi aquecida durante a noite a 80°C. A solução foi resfriada em RT e uma quantidade extra de catalisador foi adicionada (65 mg). A solução foi aquecida a 80°C sob N₂ durante várias horas. A solução foi em seguida evaporada sob pressão reduzida. O produto foi purificado por cromatografia rápida em eluição de diclorometano:metanol (100 a 95:5), e foi subsequentemente recristalizado a partir de metanol. Finalmente, o produto foi purificado por cro matografia HPLC preparativa para proporcionar 30 mg (5,86%) do produto do título 13; LC-MS: Tempo de Retenção 5,33 min., m/z 575 [M+H]⁺. ¹HRMN (DMSO) δ (ppm) 1,05-1,21 (m, 1H, CH₂), 1,30-1,48 (m, 3H, CH₂ (2x)), 1,62 1,78 (m, 2H, CH₂), 1,82-1,93 (m, 1H, CH₂), 1,93-2,12 (m, 3H, CH₂ (2x)), 2,65-2,90 (m, 4H, CH e CH₃N), 3,56 (d, 2H, J = 18,10 Hz, CH₂), 3,80-3,97 (brs, 5H, CH₂ e CH₃O), 4,21 (d, 1H, J = 15,12 Hz, CH₂), 4,28-4,46 (m, 1H, CH), 5,72 (d, 1H, J = 14,15 Hz, CH₂), 5,78-5,88 (m, 1H, CH), 6,53 (s, 1H, CHarom), 7,18-7,28 (m, 2H, CH_arom (2x)), 7,39-7,49 (m, 1H, CH_arom), 7,55 (d, 1H, J= 8,38 Hz, CH_arom), 7,62 (s, 1H, CH_arom), 7,72-7,84 (m, 1H, NH), 8,29 (s, 1H, CH), 8,51-8,62 (brs, 1H, NH).

Exemplo 14 - síntese do composto 14

Etapa 1

79/121

13a

6-Metil éster de ácido

13-ciclo-hexil-3-metóxi-7Hbenzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-6,10-dicarboxílico 13a (0,60 g, 1 eq) foi dissolvido em acetonitrila seca (50 ml) sob N₂, seguido pela adição de di-imidazol1-il-metanona (CDI) (0,66 g, 3 eq). A solução foi agitada durante a noite a 50°C. O solvente foi em seguida evaporado sob pressão reduzida, e o produto cru foi purificado por cromatografia rápida em eluição com heptano:acetonitrila e finalmente acetato de etila. O produto foi recristalizado a partir de acetato de etila para produzir 0,50 g (75%) do produto do título 14a.

H₂N, _ZO

0^'NH

N

O^O'

14b

DBU

ACN

O composto 14a (0,50 g, 1 eq) foi dissolvido em acetonitrila seca seguido pela adição de terc-butil 14b (0,47 g, (50 (sulfamoilamino)etil)piperazina-1-carboxilato 14b (0,47 g, 1,50 eq) e 2,3,4,6,7,8,9,10-octaidro-pirimido[1,2-a]azepina (DBU) (0,31 g, 2 eq). A solu ção foi aquecida durante a noite a 50°C, em seguida evaporada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi agitado em uma solução aquosa de ácido cítrico a 0,1 N. Os cristais foram filtrados e secados durante a noite sob vá cuo. O produto foi purificado por cromatografia de coluna em eluição com diclorometano para remover a primeira impureza. As outras frações obtidas foram adicionadas. Este produto também foi purificado por cromatografia rápida em eluição com diclorometano:metanol (100 a 99:1) para proporcionar 0,41 g (55%) do produto do título 14c; LC-MS: Tempo de Retenção 5,59 min., m/z 736 [M+H]⁺. ¹H-RMN (CDCI₃) δ (ppm) 1,18-1,34 (m, 1H, CH₂),

80/121

1,35-1,50 (brs, 10H, CH₂ e C(CH₃)₃), 1,70-1,85 (m, 3H, CH₂ (2x)), 1,90-2,12 (m, 5H, CH₂ (3x)), 2,30-2,41 (m, 4H, CH₂ (2x)), 2,52-2,62 (m, 2H, CH₂), 2,772,90 (m, 1H, CH), 3,13-3,22 (m, 2H, CH₂), 3,43-3,57 (m, 4H, CH₂ (2x)), 3,83 (s, 3H, CH₃O), 3,92 (s, 3H, CH₃O), 4,16-4,23 (m, 1H, CH₂), 5,58-5,69 (m, 1H, CH₂), 7,00 (d, 1H, J = 2,54 Hz, CH_arom), 7,11 (dd, 1H, J = 2,67 e J = 8,59 Hz, CHarom), 7,48 (d, 1H, J = 8,44 Hz, CH_arom), 7,53 (d, 1H, J = 8,61 Hz, CH_arom), 7,83 (s, 1H, CH_arom), 7,90 (d, 1H, J= 8,48 Hz, CH_arom), 8,09 (s, 1H, CH).

Etapa 3

14c

TFA

CH2CI2

HN

TFA

14d

O composto 14c (0,41 g, 1 eq) foi dissolvido em diclorometano seco (10 ml) sob N₂, seguido pela adição de ácido trifluoroacético (1,30 ml, 30 eq). A solução foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. O solvente foi em seguida removido sob pressão reduzida, e o produto cru foi agitado em dietil éter. Os cristais resultantes foram filtrados e secados sob pressão reduzida para proporcionar 0,31 g (87%) do produto do título 14d; LC-MS: Tempo de Retenção 3,81 min., m/z 634 [M-H]'.

Etapa 4

HN

14d

14e

O composto 14d (0,31 g, 1 eq) foi dissolvido em uma mistura de tetra-hidrofurano:metanol (1:1), seguido pela adição de solução de NaOHágua a 50% (1 ml). A solução foi agitada durante a noite em temperatura ambiente, em seguida evaporada sob pressão reduzida. A camada aquosa foi acidificada com ácido acético em pH 4, e extraída com acetato de etila (7

81/121 x 50 ml). As camadas de acetato de etila combinadas foram secadas em sulfato de sódio, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida para obter o composto desejado 14e como um pó amarelo (0,30 g, 100%); LC-MS: Tempo de Retenção 3,64 min., m/z 622 [M+H]⁺.

A síntese do composto do título 14 está sendo realizado seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto 11, usando o intermediário 14e em vez de 11d.

Exemplo 15 - síntese do composto 15

O composto 13a (0,20 g, 1 eq) foi dissolvido em acetonitrila seca sob N₂, seguido pela adição de CDI (0,1 g, 1,3 eq). A solução foi agitada a 60°C durante 1 h. De acordo com TLC, a reação foi para conclusão. DBU (0,10 ml, 1,52 eq) e diamida diaminossulfúrica 15a (0,29 g, 2 eq) foram em seguida adicionados. A solução foi agitada a 60°C durante 3 h, em seguida foi evaporado sob pressão reduzida. Uma solução aquosa de ácido cítrico (0,1 N) resfriada em gelo, foi adicionada ao produto cru. A solução residual foi extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). As camadas orgânicas combi82/121 nadas foram lavadas com salmoura (50 ml), secadas em sulfato de sódio, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida para proporcionar 0,21 g (62%) do produto do título 15b; LC-MS: Rt: 5,63 min., m/z 750 [M+H]⁺.

15b 15c

A síntese do composto 15c foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto ácido 5-({[{2-[4-(tercbutoxicarbonil)piperazin-1-il]etil}(metil)amino]sulfonil}carbamoil)-8-ciclo-hexil11 -metóxi-1,12b-di-idrociclopropa[c/]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a(2H). 10 carboxílico (11c), usando o intermediário 15b em vez de metil 5-({[{2-[4-(tercbutoxicarbonil)piperazin-1-il]etil}(metil)amino]sulfonil}carbamoil)-8-ciclo-hexil11-metóxi-1,12b-di-idrociclopropa[c(]indolo[2,1-a][2]benzazepina-1a(2H)carboxilato (11b); m/z 736 [M+H]⁺.

A síntese do composto do título 15d foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto ácido 8-ciclo-hexil-11metóxi-5-({[metil-(2-piperazin-1-iletil)amino]sulfonil}carbamoil)-1,12b-diidrociclopropa[c(]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a(2H)-carboxílico (11 d), usan20 do o intermediário 15c em vez de ácido 5-({[{2-[4-(ferc-butoxicarbonil) piperazin-1 -il]etil}(metil)amino]sulfonil}carbamoil)-8-ciclo-hexil-11 -metóxi-1,12b-diidrociclopropa[c(]indolo[2,1-a][2]benzazepina-1a(2H)-carboxílico (11c), produzindo 448 mg (rendimento quantitativo) do produto desejado; m/z 636 [M+H]⁺.

Etapa 4

83/121

A síntese do composto do título 15 foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto 21,21-dióxido de 31-ciclohexil-8-metóxi-22-metil-21-tia-1,13,20,22,25-pentaaza5 heptaciclo[23,2,2,1³’¹³,1¹²·¹⁵,1¹⁴’¹⁸,0³⁵,0⁶·¹¹]dotriaconta6,8,10,12(31),14(30),15,17-heptaeno-2,19-diona 11, usando o intermediário 15d em vez de ácido 8-ciclo-hexil-11-metóxi-5-({[metil(2-piperazin-1iletil)amino]sulfonil}carbamoil)-1,12b-di-hidrociclopropa[c/]indolo[2,1 a][2]benzazepina-1a(2H)-carboxílico 11 d, produzindo 150 mg (34% de ren10 dimento) de um creme sólido; m/z 618 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, DMSOc/6) δ ppm 1,06-1,18 (m, 1 H) 1,19-1,31 (m, 2 H) 1,31-1,50 (m, 2 H) 1,62-1,78 (m, 2 H) 1,81-1,93 (m, 1 H) 1,93-2,10 (m, 2 H) 2,53-3,21 (m, 12 H) 3,31-3,67 (m, 4H) 3,86 (s, 3 H) 4,33-4,51 (m, 1 H) 4,99-5,16 (m, 1 H) 7,06-7,14 (m, 2

H) 7,17 (d, J = 8,02 Hz, 1 H) 7,52 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 7,55-7,68 (m, 1 H) 15 7,77 (m, 1 H) 8,39 (m, 1 H).

Exemplo 16 - síntese do composto 16

Uma solução de NaOH a 50% em p/p em água (9,31 g) foi adi

84/121 cionada a uma solução agitada de 16a (3,0 g, 5,82 mmols) em THF (100 mL) e MeOH (150 mL). Depois de 1 hora, a mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, e subsequentemente diluída com água gelada (150 mL). O pH da solução resultante foi ajustado em 6 com HCI diluído. Um precipitado foi formado, o qual foi coletado por filtração, lavado com água e secado sob vácuo para produzir 3,17g (89%) de 16b como um pó amarelado. O produto foi usado sem qualquer outra purificação na próxima etapa; m/z = 502 (M+H)⁺.

Etapa 2

HATU (3,6 g, 9,48 mmols) foi adicionado sob nitrogênio a uma solução agitada de 16b (3,17 g, 6,32 mmols), DIPEA (3,3 mL, 3 eq) e 2,2'oxibis(N-metiletanamina) (3,34 g, 4 eq) em 60 mL de THF seco. Depois de 1 h, a mistura reacional foi extinguida com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (EtOAc). A camada orgânica foi sucessivamente secada (Na₂SO₄), filtrada e evaporada. O resíduo foi triturado em água, filtrado e secado para produzir 4,05 g (rendimento quantitativo) do composto-alvo 16c, usado diretamente na próxima etapa: m/z = 616 (M+H)⁺

Uma solução de 16c (3,90 g, 6,33 mmols) e sulfamida (3,04g, 6 eq) em dioxano (100 mL) foi refluxada durante a noite a 100°C. A mistura

85/121 reacional foi resfriada em temperatura ambiente, em seguida evaporada sob vácuo. O resíduo foi redissolvido em DCM, lavado com água, secado em sulfato de magnésio, filtrado e concentrado para produzir 4,48 g (rendimento quantitativo) do produto desejado 16d, usado diretamente na próxima etapa:

m/z = 695 (M+H)

16d

TFA (14,7 g, 129 mmols) foi adicionado a uma solução de 16d (4,48 g, 6,45 mmols) em diclorometano (50 mL). Depois de 1 h, a mistura reacional foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi triturado em éter, filtrado e lavado com éter, em seguida purificado por cromatografia (gradiente EtOAc para EtOAc/EtOH, 9:1) para produzir 3,05 g (68%) do produto desejado 16e: m/z = 639 (M + H)⁺

Carbonildiimidazol (1,07 g, 6,59 mmols) foi adicionado a uma solução agitada de 16e (3,05 mg, 4,39 mmols) em ACN seco (40 mL). A mistura reacional foi agitada a 60°C durante 1 h: conversão completa para o intermediário de acil imidazol foi observada. A solução resultante foi resfriada em TA, diluída com ACN seco (300 mL) e DBU (1,34 g, 2 eq) foi adicionado. A mistura reacional foi agitada durante a noite em temperatura ambiente, em

86/121 seguida concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi redissolvido em DCM, lavado com água, secado, filtrado e concentrado. A purificação por cromatografia de coluna (gradiente DCM para DCM/MeOH 9:1) forneceu 930 mg (33%) do produto do título 16 como um pó branco: m/z = 621 (M + H)⁺, 5 ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,15-1,31 (m, 1 H) 1,31-1,52 (m, 3

H) 1,69-1,81 (m, 2 H) 1,84 (s, 3 H) 1,88-2,13 (m, 7 H) 2,45 (d, J = 14,87 Hz, 1 H) 2,76-2,92 (m, 1 H) 3,14 (s, 3 H) 3,40 (d, J = 15,65 Hz, 1 H) 3,54-3,70 (m, 3 H) 3,81-3,90 (m, 1 H) 3,93 (s, 3 H) 4,03-4,18 (m, 1 H) 4,37 (d, J =

14,67 Hz, 1 H) 4,64-4,80 (m, 2 H) 7,06 (d, J = 8,80 Hz, 1 H) 7,09 (s, 1 H)

7,48 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 7,57 (s, 1 H) 7,70 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 7,89 (d, J =

8,41 Hz, 1 H) 10,01 (br. s., 1 H)

procedimento relatado para a síntese do composto 16c, usando N^N⁴dimetilbutano-1,4-diamina em vez de 2,2'-oxibis(/V-metiletanamina), produzindo 1,25 g (rendimento quant.) de um sólido branco; m/z 600 [M+H]⁺. Etapa 2

87/121

17a o o® Η₂|Λ^ΝΗ*

A síntese do composto do título 17b foi realizada seguindo ο procedimento relatado para a síntese do composto 16d, usando composto 17a em vez do composto 16c, produzindo 1 g (54% de rendimento) de um sólido ligeiramente amarelo; m/z 679 [M+H]⁺.

17b fJLf

ΌΗ

A síntese do composto do título 17c foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto 16e, usando composto 17b em vez do composto 16d, produzindo 538 mg (62% de rendimento) de um sólido ligeiramente marrom; m/z 623 [M+H]⁺.

Etapa 4

A síntese do composto do título 17 foi realizada seguindo o procedimento relatado para a síntese do composto 16, usando composto 17c em vez do composto 16e, produzindo 70 mg (15% de rendimento) de um

88/121 sólido branco; m/z 605 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 1,081,20 (m, 1 H) 1,22-1,79 (m, 13 H) 1,88 (s, 6 H) 2,40-2,47 (m, 1 H) 2,69-2,83 (m, 1 H) 2,92-3,14 (m, 4 H) 3,56-3,72 (m, 1 H) 3,89 (s, 3 H) 3,92-4,04 (m, 1

H) 4,26 (d, J = 14,67 Hz, 1 H) 4,86 (d, J = 14,09 Hz, 1 H) 7,18 (dd, J = 8,61,

2,15 Hz, 1 H) 7,22 (d, J = 2,15 Hz, 1 H) 7,46-7,57 (m, 2 H) 7,80-7,92 (m, 1 H)

8,48 (s, 1 H) 11,39 (br. s., 1 H)

Exemplo 18 - síntese do composto 18

cedimento da etapa 4 relatado para a síntese do composto 17, a partir do • 10 intermediário 1b em vez de 16b, e produzindo 0,5 g de um sólido branco; m/z 591 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 1,01-1,19 (m, 1 H) 1,18-1,52 (m, 5 H) 1,54-1,79 (m, 4 H) 1,80-2,08 (m, 4 H) 2,42-2,48 (m, 1 H) 2,63-2,80 (m, 1 H) 2,93 (s, 3 H) 2,98-3,14 (m, 1 H) 3,43-3,75 (m, 5 H) 3,85 (s, 3 H) 4,43 (d, J = 14,87 Hz, 1 H) 5,04 (d, J = 14,48 Hz, 1 H) 6,84 (br. s., 1

H) 7,09 (s, 1 H) 7,18 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 7,45 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 7,55 (d, J = 8,41 Hz, 1 H) 7,87 (d, J = 8,41 Hz, 1 H) 8,35 (br. s., 1 H) 11,33 (br. s., 1 H) Exemplo 19 - síntese do composto 19

A síntese do composto do título 19 foi realizada seguindo o procedimento de etapa 5 relatado para a síntese do composto 1, a partir do in20 termediário 13-ciclo-hexil-3-fluoro-7H-indolo[2,1 -a][2]benzazepina-6,10dicarboxilato10-terc-butil 6-metila de a 19a em vez de 13-ciclo-hexil-3metóxi-7H-indolo[2,1-a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6

89/121 metila 1a, e produziu 180 mg de um sólido branco; m/z 595 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,11-1,29 (m, 1 H) 1,29-1,53 (m, 3 H) 1,671,83 (m, 3 H) 1,87-2,11 (m, 4 H) 2,30 (br. s„ 3 H) 2,69-2,82 (m, 1 H) 2,812,98 (m, 1 H) 3,11 (s, 3 H) 3,46-3,58 (m, 1H) 3,59-3,79 (m, 3 H) 3,90-4,08 (m, 1 H) 4,24-4,38 (m, 1 H) 4,43 (dd, J = 14,73, 1,27 Hz, 1 H) 4,97 (d, J = 14,63 Hz, 1 H) 6,73 (s, 1 H) 7,11 (dd, J = 9,27, 2,63 Hz, 1 H) 7,17-7,30 (m, 1 H) 7,57 (dd, J = 8,68, 5,76 Hz, 1 H) 7,69 (s, 1 H) 7,67 (dd, J = 8,78, 1,56 Hz, 1 H) 7,90 (d, J = 8,78 Hz, 1 H) 9,84 (br. s., 1 H)

Exemplo 20 - síntese do composto 20

A síntese do composto do título 20 foi realizada seguindo o procedimento de etapa 5 relatado para a síntese do composto 1, a partir do intermediário 13-ciclo-hexil-3-fluoro-5-metil-7H-indolo[2,1 -a][2]benzazepina6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 20a em vez de 13-ciclo-hexil-3metóxi-7H-indolo[2,1-a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6metila 1a, e produziu 130 mg de um sólido branco; m/z 609 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,14-1,31 (m, 1 H) 1,32-1,46 (m, 3 H) 1,641,81 (m, 3 H) 1,84 (s, 3 H) 1,87-1,99 (m, 3 H) 2,01 (s, 3 H) 2,47 (d, J = 14,63 Hz, 1 H) 2,73-2,87 (m, 1 H) 3,14 (s, 3 H) 3,43 (d, J = 15,02 Hz, 1 H) 3,563,64 (m, 2 H) 3,65 (d, J = 3,12 Hz, 1 H) 3,74-3,88 (m, 1 H) 4,00-4,12 (m, 1H) 4,35 (d, J = 14,83 Hz, 1 H) 4,64-4,75 (m, 1 H) 4,81 (d, J = 14,63 Hz, 1 H) 7,16-7,32 (m, 2 H) 7,53 (dd, J = 8,39, 6,05 Hz, 1 H) 7,64 (s, 1 H) 7,70 (d, J = 8,39 Hz, 1 H) 7,91 (d, J = 8,39 Hz, 1 H) 10,09 (br. s., 1 H)

Exemplo 21 - síntese do composto 21

90/121

A síntese do composto do título 21 foi realizada seguindo o procedimento de etapa 5 relatado para a síntese do composto 1, a partir do intermediário 3-cloro-13-ciclo-hexil-7H-indolo[2,1 -a][2]benzazepina-6,10dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 21a em vez de 13-ciclo-hexil-3-metóxi7H-indolo[2,1-a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 1a, e produzindo 270 mg de um sólido branco; m/z 611 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 1,08-1,22 (m, 1 H) 1,31-1,52 (m, 3 H) 1,63-1,78 (m, 2 H) 1,81 -2,09 (m, 4 H) 2,50 (s, 3H) 2,69-2,80 (m, 1 H) 3,00 (s, 3 H) 3,08-3,19 (m, 1 H) 3,19-3,28 (m, 1 H) 3,46-3,88 (m, 6 H) 4,52 (d, J = 14,87 Hz, 1 H) 5,12 (d, J = 13,11 Hz, 1 H) 6,97 (s, 1 H) 7,49 (d, J = 7,83 Hz, 1 H) 7,58-7,70 (m, 3 H) 7,94 (d, J = 8,61 Hz, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 11,39 (br. s„ 1 H) Exemplo 22 - síntese do composto 22

cedimento de etapa 5 relatado para a síntese do composto 1, usando Λ/¹ ,Λ/⁶dimetilexano-1,6-diamina em vez de 2,2'-oxibis(N-metiletanamina) na etapa 2, e produziu 50 mg de um sólido branco; m/z 619 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,00-1,64 (m, 11 H) 1,66-1,87 (m, 3 H) 1,87-2,15 (m, 4H) 2,47 (s, 3 H) 2,66-2,91 (m, 2 H) 3,23 (s, 3 H) 3,25-3,33 (m, 1 H) 3,333,45 (m, 1 H) 3,90 (s, 3 H) 4,09 -4,25 (m, 1 H) 4,39 (d, J = 14,28 Hz, 1 H) 5,14 (d, J = 14,48 Hz, 1 H) 6,81 (s, 1 H) 6,90 (s, 1 H) 7,06 (dd, J = 8,61, 2,15 Hz, 1 H) 7,45 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 7,50 (d, J = 8,61 Hz, 1 H) 7,81 -7,96 (m, 2 H) 8,94 (br. s., 1 H)

91/121

Exemplo 23 - síntese do composto 23

A síntese do composto do título 23 foi realizada seguindo o procedimento de etapa 5 relatado para a síntese do composto 1, usando Λ/¹ ,Λ/²dimetil-/V¹-(2-(metilamino)etil)etano-1,2-diamina em vez de 2,2'-oxibis(Nmetiletanamina) na etapa 2, e produziu 20 mg de um sólido branco; m/z 592 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 1,04 (d, J = 5,87 Hz, 1 H) 1,061,22 (m, 1 H) 1,27-1,51 (m, 3 H) 1,60-1,78 (m, 2 H) 1,80-1,92 (m, 1 H) 1,922,07 (m, 3 H) 2,12 (s, 3 H) 2,27-2,41 (m, 1 H) 2,69-2,83 (m, 2 H) 2,83-2,97 (m, 2 H) 3,01-3,15 (m, 2 H) 3,17-3,28 (m, 2 H) 3,86 (s, 3 H) 4,21 (d, J = 15,65 Hz, 1 H) 5,54 (d, J = 15,65 Hz, 1 H) 7,11-7,25 (m, 2H) 7,35 (s, 1 H) 7,47 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 7,53 (d, J = 9,00 Hz, 1 H) 7,70-7,83 (m, 1 H) 8,32 (br. s., 1 H) 8,37-8,50 (m, 1 H)

Exemplo 24 - síntese do composto 24

A síntese do composto do título 24 foi realizada seguindo o procedimento de etapa 4 relatado para a síntese do composto 17, a partir do intermediário ácido 10-(terc-butoxicarbonil)-2-cloro-13-ciclo-hexil-7Hindolo[2,1-a][2]benzazepina-6-carboxílico 24b em vez de ácido 10-(tercbutoxicarbonil)-13-ciclo-hexil-3-metóxi-5-metil-7H indolo[2,1-a][2]benzazepina-6-carboxílico 16b, e produziu 0,25 g de um sólido branco; m/z 595 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,25-1,5 (m, 4 H) 1,5-1,8 (m, 4 H) 1,9-2,1 (m, 4 H) 1,8 (s., 3 H) 2,8-2,13 (m, 3 H) 2,5-2,6 (m, 2 H) 3,2

92/121 (s, 3 Η) 3,6 (br. s., 1 H) 4,1 (br. s., 1H) 4,45 (d, J = 15 Hz, 1 H) 5 (d, J = 15 Hz, 1 H) 6,6 (s, 1 H) 7,25 (d, J = 8,4 Hz, 1 H) 7,4 (dd, J = 8,5, J = 2,5 Hz, 1 H) 7,5-7,6 (m, 2H) 7,69 (s, 1 H) 7,9 (d, J = 8,4 Hz, 1 H) 9,1 (br. s„ 1 H) Exemplo 25 - síntese do composto 25

A síntese do composto do título 25 foi realizada seguindo o procedimento de etapa 5 relatado para a síntese do composto 10, a partir do intermediário 13-ciclo-hexil-3-metóxi-7H-indolo[2,1 -a][2]benzazepina-6,10dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 1a em vez de 1a-metil8-ciclo-hexil-11metóxi-1,12b-di-hidrociclopropa[d]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a,5(2H)10 dicarboxilato de 5-terc-butila 8a, e produziu 45 mg de um sólido branco; m/z 577 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 1,03-1,19 (m, 1 H) 1,251,49 (m, 4 H) 1,49-2,29 (m, 10 H) 2,67-2,82 (m, 1 H) 2,84-3,04 (m, 1 H) 3,053,24 (m, 1 H) 3,48-3,72 (m, 5 H) 3,86 (s, 3 H) 4,42 (d, J = 14,67 Hz,1 H) 5,00 (d, J = 14,28 Hz, 1 H) 6,84 (br. s„ 1 H) 7,09 (s, 1 H) 7,18 (d, J = 8,41 Hz, 1

H) 7,47 (d, J = 7,83 Hz, 1H) 7,55 (d, J = 8,41 Hz, 1 H) 7,75-7,92 (m, 1 H) 8,19-8,41 (m, 1 H) 11,27 (br. s.,1 H) Exemplo 26 - síntese do composto 26

Etapa 1

93/121

Uma solução de 606 mg (1,24 mmol) de 1b, 410 mg (1,1 eq) de

26a, 710 mg (1,5 eq) de HATU e 0,65 mL de (3 eq) de di-isopropiletilamina em DMF seca (10 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A 5 RM foi em seguida diluída com água, e o precipitado amarelo resultante foi filtrado, lavado com água e purificado por cromatografia rápida (eluante DCM para DCM/MeOH 0,5%) para produzir um rendimento quantitativo do produto desejado 26b como um pó amarelo; m/z 771 [M+Hf.

26b 26c

Em uma solução de 1,1 g (1,44 mmol) de 26b e tiofenol (0,32 g, eq) em DMF seca (15 mL) foi adicionado carbonato de césio (0,94 g, 2 eq) em temperatura ambiente. Depois de 2 h, a RM foi diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada em 15 sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. O resíduo resultante também foi purificado por cromatografia rápida (eluante: DCM para DCM / NH₃ em MeOH 85/15) para produzir 0,77 g (90% de rendimento) de 26c como um pó amarelo; m/z 586 [M+H]⁺.

Etapa 3

94/121

Legenda da Figura:

- sulfamida

26d

- dioxano

Uma mistura de 26c (0,72g, 1,23 mmol) e sulfamida (0,35 g, 3 eq) em dioxano (15 mL) foi refluxada até a conclusão (~7h). A RM foi em seguida concentrada sob vácuo, e o resíduo foi triturado em DCM. O precipitado resultante de sulfamida em excesso foi filtrado. A camada orgânica foi concentrada e purificada por cromatografia rápida (eluante: DCM para DCM/MeOH 1%) para produzir 776 mg (95% de rendimento) do produto desejado 26d como um pó amarelo-claro; m/z 665 [M+H]⁺.

Etapa 4

26d

26e

Legenda da Figura:

- HCI em isopropanol

Uma solução de 26d (0,72 g, 1,086 mmol) em 10 mL de HCI em isopropanol e 5 mL de DCM foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h. A RM foi em seguida concentrada sob vácuo, e o resíduo foi triturado em dietil éter. O precipitado resultante foi filtrado, lavado com éter e secado durante a noite em um forno a vácuo para produzir 661 mg (97% de rendimen to) do produto desejado 26e como um pó amarelo-claro; m/z 609 [M+H] .

95/121

Etapa 5

26e 26

Uma solução de 26e (0,6g, 0,971 mmol) e CDI (0,205 g, 1,3 eq) em acetonitrila (10 mL) foi aquecida a 60°C até a formação completa do intermediário acil imidazol (~1 h). A RM foi em seguida diluída com 20 mL de acetonitrila, e DBU (0,296 g, 2 eq) foi adicionado em temperatura ambiente. A RM foi agitada em temperatura ambiente até a conclusão, em seguida foi concentrada. O resíduo foi redissolvido em água e ácido acético foi em seguida adicionado até o pH 2, O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água e purificado por cromatografia rápida (eluante: DCM para DCM/MeOH 5%) para produzir 0,315 g (55% de rendimento) do produto desejado 26 como um pó ligeiramente amarelo; m/z 591 [M+H]⁺. ¹H RMN (400 MHz, DMSOd₆) δ ppm 1,07-2,09 (m, 16 H) 2,71-2,84 (m, 1 H) 2,94 (s, 3 H) 3,01-3,18 (m, 2 H) 3,19-3,31 (m, 2 H) 3,87 (s, 3 H) 4,25 (d, J = 15,06 Hz, 1 H) 5,52 (d, J = 15,26 Hz, 1 H) 7,16-7,26 (m, 2H) 7,32-7,44 (m, 2 H) 7,54 (d, J = 9,19 Hz, 1 H) 7,86 (d, J = 8,61 Hz, 1 H) 8,26 (s, 1 H) 8,40-8,51 (m, 1 H) 11,61 (br. s., 1 H)

Exemplo 27 - síntese do composto 27

A síntese do composto do título 27 foi realizada seguindo o procedimento da etapa 5 relatado para a síntese do composto 26, a partir do intermediário ácido 10-(terc-butoxicarbonil)-2-cloro-13-ciclo-hexil-7Hindolo[2,1-a][2]benzazepina-6-carboxílico 24b em vez de ácido 10-(terc

96/121 butoxicarbonil)-13-ciclo-hexil-3-metóxi-7H-indolo[2,1-a][2]benzazepina-6carboxílico 1b, e produziu 85 mg de um sólido amarelo; m/z 596 [M+Hf. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,21-1,5 (m, 10 H) 1,75-1,8 (m, 2 H) 1,9-2,1 (m, 4 H) 2,75 (br. s., 1 H) 3,01 (s, 3 H) 3,1-3,2 (m, 2 H) 3,5-3,6 (m, 2 H) 4,23 (dd, J = 15,28, 1,27 Hz, 1 H) 5,6 (d, J = 15,28 Hz, 1 H) 7,4 (s, 1 H) 7,5-7,6 (m, 3 H) 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) 7,8 (s, 1 H) 7,9 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) 7,69 (s, 1 H) 8,64 (br. s., 1 H)

Exemplo 28 - síntese do composto 28

A síntese do composto do título 28 foi realizada seguindo o procedimento da etapa 5 relatado para a síntese do composto 10, a partir do intermediário 13-ciclo-hexil-3-metóxi-7H-indolo[2,1 -a][2]benzazepina-6,10dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 1a em vez de 8-ciclo-hexil-11-metóxi1,12b-di-hidrociclopropa[d]indolo[2,1 -a][2]benzazepina-1 a,5(2H)dicarboxilato de 5-terc-butil 1a-metila 8a, e usando N-[4-(metilamino)butil]-N(l-metiletil)sulfamida 28a em vez de N-(4 aminobutil)-N-metilsulfamida 10b, e produziu 50 mg do produto 28 desejado; m/z 619 [M+Hf. ¹H RMN (400 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 1,05-1,15 (m, 1 Η) 1,18 (d, J = 6,65 Hz, 3 Η) 1,25 (d, J = 6,46 Hz, 3 H) 1,28-1,51 (m, 4 H) 1,53-2,31 (m, 13 H) 2,67-2,85 (m, 1 H) 3,01-3,19 (m, 1 H) 3,51-3,73 (m, 1H) 3,89 (s, 3 H) 3,95-4,15 (m, 1 H) 4,42 (d, J = 14,48 Hz, 1 H) 4,52-4,72 (m, 1 H) 5,01 (d, J = 14,48 Hz, 1 H) 6,68 (s, 1 H) 6,87 (s, 1 H) 7,05 (d, J = 8,41 Hz, 1 H) 7,52 (d, J = 8,41 Hz, 1 H) 7,63 (d, J = 8,22 Hz, 1 H) 7,77 -7,99 (m, 2 H) 9,42 (br. s., 1 H)

Exemplo 29 - síntese do composto 10b nh₂

O=S=O O I ι || I /

10b

97/121

Uma mistura de 4-(metilamino)butilcarbamato de terc-butila (4 g,

19,77 mmols) e diamida sulfúrica (7,6 g, 4 eq) em dioxano (10 mL) foi aquecida a 100°C em um forno de microondas durante 30 minutos. A RM foi em seguida concentrada em vácuo, e DCM foi adicionado. O precipitado branco resultante de diamida sulfúrica em excesso foi filtrado, e o filtrado foi lavado sucessivamente com HCI diluído, em seguida salmoura, secado em sulfato de magnésio, filtrado e concentrado. Trituração em di-isopropil éter proporcionou 3,55 g (64% de rendimento) de 4-(metil(sulfamoil) amino)butilcarbamato de terc-butila 10b como um sólido branco; m/z 282 [M+H]⁺.

Exemplo 30 - síntese do composto 26a

/ o ©

26a

Etapa 1

30a 30b 30c

Em uma solução de 5-aminopentilcarbamato de terc-butila 30a (20 g, 99 mmols) e cloreto de 2-nitrobenzeno-1-sulfonila 30b (23 g, 1,05 eq) em DCM (200 mL) foi adicionado di-isopropil etilamina gota a gota (19,2 g, 1,5 eq) a 0°C. Depois de agitar durante a noite em temperatura ambiente, a

RM foi lavada sucessivamente com uma solução aquosa de ácido cítrico, em seguida salmoura, secada em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. Trituração em di-isopropil éter proporcionou 32,61 g (85% de rendimento) de 5-(2-nitrofenilsulfonamido)pentilcarbamato de terc-butila 30c como um sólido branco; m/z 388 [M+H]⁺.

Etapa 2

Mel, K₂CO₃ acetone

98/121

30c 30d

Legenda da Figura:

- acetona

Em uma mistura de 5-(2-nitrofenilsulfonamido)pentilcarbamato de terc-butila 30c (32,61 g, 84 mmols) e carbonato de potássio (13,96 g, 1,2 eq) em acetona (300 mL) foi adicionado iodeto de metila (5,5 mL, 1,05 eq). Depois de agitar durante a noite em temperatura ambiente, mais iodeto de metila (1 eq) e carbonato de potássio (0,6 eq) foram adicionados, e a RM foi agitada em temperatura ambiente até a conclusão. A RM foi em seguida diluída com água e extraída com DCM. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. Trituração em di-isopropil éter proporcionou 31,59 g (93% de rendimento) de 5-(N-metil-2-nitrofenilsulfonamido)pentilcarbamato de terc-butila 30d como um sólido branco; m/z 402 [M+H]⁺.

Etapa 3

30d 26a

Uma solução de 5-(N-metil-2-nitrofenilsulfonamido) pentilcarbamato de terc-butila 30d (31,5 g, 79 mmols) e ácido trifluoroacético (29,2 mL, 5 eq) em DCM (300 mL) foi agitada em temperatura ambiente até a conclusão (~ 16 h). A RM foi em seguida concentrada sob vácuo, redissolvida em DCM, lavada com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio saturada (2 vezes), em seguida salmoura, secada em sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. Trituração em di-isopropil éter proporcionou 23,7 g (rendimento quantitativo) de N-(5-aminopentil)-N-metil-2-nitrobenzenossulfonamida 26a como um sólido ligeiramente amarelo; m/z 302 [M+Hf.

Exemplo 31 - síntese do composto 28a

99/121

Etapa 1

31a

28a

Uma mistura de 4-aminobutil(metil)carbamato de terc-butila 31a (287 mg, 1,42 mmol), acetona (75 mg, 1,29 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (383 mg, 1,8 mmol) foi agitada sob nitrogênio em temperatura ambiente até a conclusão. A RM foi em seguida concentrada, diluída com um solução aquosa de bicarbonato de sódio saturada, e extraída com éter (2 vezes). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas para produzir 200 mg (63% de rendimento) do produto desejado 4-(isopropilamino)butil(metil)carbamato de terc-butila 31b, usado sem outra purificação na próxima etapa; m/z 245 [M+H]⁺.

Etapa 2

31b ^H2N _{o Z}S< h₂n °

28a

Uma mistura de 4-(isopropilamino)butil(metil)carbamato de tercbutila 31b (3,38 g, 13,8 mmols) e diamida sulfúrica (3,99 g, 3 eq) em dioxano (10 mL) foi aquecida a 110°C em um forno de microondas durante 60 minutos. A RM foi em seguida concentrada em vácuo, e DCM foi adicionado. O precipitado branco resultante de diamida sulfúrica em excesso foi filtrado, e o filtrado foi concentrado em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (eluante: DCM para DCM/MeOH 20%) para produzir 1,7 g (38% de rendimento) do produto desejado 4-(isopropil(sulfamoil)amino) butil(metil)carbamato de terc-butila 28a; m/z 324 [M+H]⁺.

Exemplo 32 - síntese do composto 19a

100/121

Uma mistura de 2-bromo-3-ciclo-hexil-1H-indol-6-carboxilato de terc-butila 32a (5 g, 13,22 mmols, sintetizada como descrito em US 2007270406 A1), pinacolborano (5,75 mL, 3 eq) e trietilamina (7,35 mL, 4 eq) em THF (50 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h. Acetato de paládio (90 mg, 0,03 eq) e bifenil-2-ildiciclo-hexilfosfina (556 mg, 0,12 eq) foram em seguida adicionados, e a RM foi aquecida a 80°C durante 2 h.

A mistura reacional foi em seguida permitida resfriar em TA e vertida em uma solução de NH₄CI diluída em água em seguida extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas foram secadas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando um gradiente de acetato de etila em heptano para produzir 3,5 g (70% de rendimento) do produto desejado 3-ciclo-hexil-2-(4,4,5,5-tetrametil1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1 H-indol-6-carboxilato de terc-butila 32b; m/z 426

32b

32c

32d

101/121

Em uma mistura de 3-ciclo-hexil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2 il)-1H-indol-6-carboxilato de terc-butila 32b (2,77 g, 6,5 mmols) e 2-bromo-5-fluorobenzaldeído 32c (1,58 g, 1,2 eq) em DME (40 mL) foi adicionada uma solução de carbonato de sódio (2,07 g, 3 eq) em água (15 mL). A mistura resultante foi em seguida estimulada com nitrogênio em temperatura ambiente durante 10 minutos. Depois da adição de tetracis trifenilfosfina de paládio (376 mg, 0,05 eq), a RM foi aquecida a 70°C durante 1 h. A mistura foi em seguida permitida resfriar em TA e vertida em água, em seguida extraída com acetato de etila (3 vezes). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas em MgSO₄, filtradas e concentradas. O resíduo foi recristalizado a partir de di-isopropil éter / heptano para produzir 2 g (73% de rendimento) do produto desejado 3-ciclo-hexil-2-(4-fluoro-2-formilfenil)1 H-indol-6-carboxilato de terc-butila 32d como um sólido branco; m/z 422 [M+H]⁺.

Etapa 3

Uma mistura de 3-ciclo-hexil-2-(4-fluoro-2-formilfenil)-1 H-indol-6carboxilato de terc-butila 32d (2 g, 4,75 mmols), carbonato de césio (1,85 g,

1,2 eq) e 2-(dimetoxifosforil)acrilato de metila (16,475 mL, solução 0,36M em tolueno, 1,25 eq) em DMF (80 mL) foi agitada a 60°C durante 2 h. A mistura reacional foi em seguida permitida resfriar em temperatura ambiente, vertida em água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi em seguida secada em MgSO₄, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando heptanos / diclorometano para produzir 2 g (86% de rendimento) do produto desejado 13-ciclo-hexil-3-fluoro-7Hindolo[2,1-a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 19a; m/z 490 [M+H]⁺.

102/121

Exemplo 33 - síntese do composto 20a

Etapa 1

33a 33b

Em uma solução de 2-bromo-5-fluoro-benzonitrila 33a (10 g, 50 mmols) em tetraidrofurano seco (100 mL) sob nitrogênio foi adicionado brometo de metilmagnésio (3,2 M em éter, 19 mL, 60,0 mmols), e a mistura resultante foi aquecida em refluxo durante 4 horas. A RM foi em seguida resfriada em TA, vertida em uma solução de HCI a 2 N (100 mL) e em seguida 10 diluída com metanol (100 mL). A solução verde resultante foi concentrada em um banho a vapor durante 1 h, no ponto em que os solventes orgânicos tinham sido removidos, e o produto cru tinha precipitado. A mistura reacional foi em seguida extraída com acetato de etila, secada em MgSO₄ e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando heptano e diclorometano para produzir 4,88 g (45% de rendimento) do produto desejado 1-(2-bromo-5-fluorofenil)etanona 33b como um óleo rosa; m/z 218 [M+H]⁺.

32b

Na₂CO₃, Pd(P<t>₃)₄

33c

DME, H₂O

33b

103/121

O produto do título 2-(2-acetil-4-fluorofenil)-3-ciclo-hexil-1 H-indol-

6-carboxilato de terc-butila 33c foi sintetizado seguindo o procedimento relatado para a síntese de 3-ciclo-hexil-2-(4-fluoro-2-formilfenil)-1H-indol-6carboxilato de terc-butila 32d, usando 1-(2-bromo-5-fluorofenil)etanona 33b 5 em vez de 2-bromo-5-fluorobenzaldeído 32c, e foi obtido em 65% de rendimento como um sólido branco; m/z 436 [M+H]⁺.

Etapa 3

33c

33c 20a

O produto do título 13-ciclo-hexil-3-fluoro-5-metil-7H-indolo[2,110 a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 20a foi sintetizado seguindo o procedimento relatado para a síntese de 13-ciclo-hexil-3fluoro-7H-indolo[2,1-a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6metila 19a, usando 2-(2-acetil-4 fluorofenil)-3-ciclo-hexil-1H-indol-6carboxilato de terc-butila 33c em vez de 3-ciclo-hexil-2-(4-fluoro-215 formilfenil)-1H-indol-6-carboxilato de terc-butila 32d, e foi obtido em 11% de rendimento como um sólido branco; m/z 504 [M+H]⁺.

Exemplo 34 - síntese do composto 21a

o.

o

0'

21a

Etapa 1

Ι 04/121

K2CO3, PdCl2(P03)2

DME, H₂O

34a

34b

O derivado de bromoindol 32a (5 g, 13,22 mmols), ácido 4-cloro-

2-formilfenilborônico 34a (3,17 g, 17,18 mmols) e carbonato de potássio (4,20 g, 30,4 mmols) foi dissolvido em 100ml_ de 1,2-dimetoxietano (80 ml)/água (20 ml) 4/1 e a solução obtida, foram estimulados completamente com argônio. Em seguida, cloreto de bis(trifenilfosfina)paládio(ll) (0,464 g, 0,661 mmol) foi adicionado, e a reação foi aquecida a 63°C sob argônio durante 3 h. A reação foi em seguida diluída com EtOAc, lavada com água e com NaHCO₃ sat. aq., secada (salmoura, sulfato) e evaporada. O resíduo foi extraído com DIPE e agitado e sonicado em heptano com alguns mL de Dl-

PE adicionados. O sólido foi filtrado e secado para proporcionar 4,97 g (86% de rendimento) do produto desejado 2-(4-cloro-2-formilfenil)-3-ciclo-hexil-1 Hindol-6-carboxilato de terc-butila 34b; m/z 437 [M+H]⁺.

Etapa 2

Cs₂CO₃, DMF

O derivado de indol 34b (4,95 g, 11,30 mmols) e carbonato de césio (4,42 g, 13,56 mmols) foram dissolvidos em /V,/V-dimetilformamida (se ca) (50 ml) e 2-(dimetoxifosforil)acrilato de metila (3,23 g, 14,13 mmols) foi adicionado. A RM foi agitada a 65°C durante 2 h. Foi em seguida resfriada em temperatura ambiente e gotejada sobre 300 ml de água vigorosamente agitada. O sólido amarelado resultante foi filtrado, lavado com água e secado para proporcionar 5,40 g (94% de rendimento) do produto desejado 3 cloro-13-ciclo-hexil-7H-indolo[2,1 -a][2]benzazepma-6,10-dicarboxilato de 10

105/121 ferc-butil 6-metila 21a, usado sem outra purificação na próxima etapa; m/z

507 [M+Hf.

Exemplo 35 - síntese do composto 24a

O composto do título 24a foi sintetizado seguindo o procedimento da etapa 2 relatado para a síntese de 3-cloro-13-ciclo-hexil-7H-indolo[2,1a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 21a, usando ácido 5-cloro-2-formilfenilborônico na primeira etapa, em vez de ácido 4 cloro-2-formilfenilborônico 34a, e foi obtido com um rendimento global de

70% como um sólido amarelado; m/z 507 [M+H]⁺.

Exemplo 36 - síntese do composto 24b

Uma solução de NaOH (6,38 g) em 25 mL de água foi adicionada a uma solução agitada do derivado de indol 24a em THF (100 mL) e MeOH (150 mL). Depois de 1 hora, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, em seguida diluída com água gelada (150 mL). O pH da solução resultante foi ajustado em 6 com HCI, em seguida extraído com diclorometano e secado em MgSO₄. O solvente foi removido, em seguida o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna usando DCM/MeOH como eluente para produzir 1,7 g (87% de rendimento) de um sólido amarelado; m/z 492 [M+H]⁺.

Exemplo 37 - síntese do composto 16a

106/121

37a 37b

Legenda da Figura:

- Refluxado

Etano-1,2-diol (4,06 g) e Tos-OH (0,41 g) foram adicionados a uma solução de 1-(2-bromo-5-metoxifenil)etanona 37a (5 g) em tolueno (950 ml). A solução foi aquecida sob refluxo com agitação em um frasco de base arredondada com 3 gargalos equipado com urn receptor de Dean-Stark durante 3 horas. A mistura reacional foi em seguida resfriada em temperatura ambiente. A mistura foi transferida para um funil separador e uma solução de carbonato de sódio (1 M, 50 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada e duas fases formadas. A camada orgânica foi separada, lavada com água (2 x 50 ml), secada em MgSO₄ e concentrada sob vácuo para proporcionar 6,5 g (rendimento quantitativo) do produto desejado 2-(2-bromo-5-metoxifenil)-2metil-1,3-dioxolano 37b como um sólido branco.

Etapa 2

37c

37b

Legenda da Figura:

107/121

- tnmetilborato

O derivado de bromo 37b (6 g) foi dissolvido em THF seco (60 ml), e a solução foi resfriada a -78°C. Em seguida, n-BuLi (16,5 ml) foi adicionado cuidadosamente a uma tal taxa, a fim de que a temperatura não excedesse -60 °C. Depois de 1 h, B(O-i-Pr)₃ (6,2 g) foi adicionado gota a gota de forma líquida a -78 °C. Depois que tudo foi adicionado, o banho de resfriamento foi removido. A mistura foi agitada a 0 °C durante 2,5 h, em seguida HCI a 2 N (60 ml) foi adicionado, e a RM agitada em temperatura ambiente durante 2 h. O solvente orgânico foi em seguida removido sob vácuo, e a camada aquosa foi saturada com NaCI e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi secada em Na₂SO₄ e evaporada sob vácuo para produzir 3 g do produto desejado ácido 2-acetil-4-metoxifenilborônico 37c.

Legenda da Figura:

- tolueno

O produto do título 2-(2-acetil-4-metoxifenil)-3-ciclo-hexil-1Hindol-6-carboxilato de terc-butila 37d foi sintetizado seguindo um procedimento similar àquele usado para a síntese de 2-(4-cloro-2-formilfenil)-3-ciclo hexil-1 H-indol-6-carboxilato de terc-butila 34b, usando ácido 2-acetil-4 metoxifenilborônico 37c em vez de ácido 4-cloro-2-formilfenilborônico 34a.

Etapa 4

CS2CO3, DMF

108/121

37d 16a

O produto do título 13-ciclo-hexil-3-metóxi-5-metil-7H-indolo[2,1a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 16a foi sintetizado seguindo um procedimento similar àquele usado para a síntese de 13ciclo-hexil-3-fluoro-5-metil-7H-indolo[2,1-a][2]benzazepina-6,10-dicarboxilato de 10-terc-butil 6-metila 20a, usando 2-(2-acetil-4-metoxifenil)-3-ciclo-hexil1 H-indol-6-carboxilato de terc-butila 37d em vez de 2-(2-acetil-4-fluorofenil)-

3-ciclo-hexil-1 H-indol-6-carboxilato de terc-butila 33c.

Exemplo 38 - síntese do composto 38

A síntese do composto do título 38 foi realizada seguindo o procedimento da etapa 5 relatado para a síntese do composto 10, a partir do intermediário 10-terc-butil éster 6-metil éster de ácido 13-ciclo-hexil-3metóxi-7H-benzo[3,4]azepino[1,2-a]indol-6,10-dicarboxílico 1a em vez de 1ametil8-ciclo-hexil-11 -metóxi-1,12b-di-hidrociclopropa[cf|indolo[2,1a][2]benzazepina-1a,5(2H)-dicarboxilato de 5-terc-butila 8a, e produziu 60 mg de um sólido bege; m/z 577 [M+H]⁺.

Exemplo 39 - Atividade dos compostos de fórmula (I)

Ensaio de replicon

Os compostos de fórmula (I) foram examinados quanto a atividade na inibição de replicação de RNA de HCV em um ensaio celular. O ensaio demonstrou que os compostos de fórmula (I) exibiram uma linhagem celular de replicação celular funcional de HCV, da mesma forma conhecida como replicons de HCV. O ensaio celular foi baseado em uma construto de expressão bicistrônica, como descrito por Lohmann e outros (1999) Science vol. 285 páginas 110-113 com modificações descritas por Krieger e outros

109/121 (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624, em uma estratégia de análise multi-alvo. Em essência, o método foi como segue.

O ensaio utilizou a linhagem celular estavelmente transfectada Huh-7 luc/neo (daqui em diante referida como Huh-Luc). Esta linhagem celular aloja um RNA que codifica um construto de expressão bicistrônica compreendendo as regiões NS3-NS5B tipo silvestre de HCV tipo 1b trasladadas de um Sítio de Entrada de Ribossoma Interno (IRES) do vírus de encefalomiocardite (EMCV), precedidas por uma porção repórter (FfLluciferase), e uma porção marcadora selecionável (neo®, neomicina fosfotransferase). O construto é limitado pelas NTRs 5’ e 3’ (regiões não trasladadas) de HCV tipo 1b. A cultura continuada das células de replicon na presença de G418 (neo®) é dependente da replicação do RNA de HCV. As células de replicon estavelmente transfectadas que expressão RNA de HCV, que replica autonomamente e a níveis elevados, codificando entre outros luciferase, são empregadas para a análise dos compostos antivirais.

As células de replicon foram semeadas em placas de 384 poços na presença dos compostos de teste e de controle que foram adicionados em várias concentrações. Depois de uma incubação de três dias, a replicação de HCV foi medida pelo ensaio da atividade de luciferase (usando substratos e reagentes de ensaios de luciferase padrão e imageador de microplaca Perkin Elmer ViewLux® ultraHTS). As células de replicon nas culturas de controle têm alta expressão de luciferase na ausência de qualquer inibidor. A atividade inibidora do composto foi monitorada sobre as células HuhLuc, permitindo uma curva de dose-resposta ser regenerada para cada composto de teste. Valores de EC50 foram em seguida calculados, cujo valor representa a quantidade do composto requerida para diminuir por 50% o nível de atividade de luciferase detectada, ou mais especificamente, a capacidade do RNA de replicon de HCV geneticamente ligado replicar-se.

Ensaio enzimático

1, 1bJ4 de NS5B de HCV ,a) Purificação de proteína

O cDNA que codifica o aminoácido de NS5B 1-570 (HC-J4, ge

110/121 nótipo 1b, pCV-J4L6S, número de acesso genebank AF054247) foi subclonado nos sítios de restrição Nhe I e Xho I de pET-21b. A expressão do NS5B deletado por aminoácido 21 C-terminal alvejado por His subsequente foi realizada como segue:

O construto de expressão de NS5B foi transformado em BL21 de E. coli (DE3) (Novagen, Madison, Wl). Cinco mililitros de meio de LB suplementado com ampicilina (50 pg/mL) foram inoculados com uma colônia. Quando a pré-cultura alcançou uma densidade óptica de 0,6 medida em 600 nm, foi transferida para meio de LB fresco suplementado com ampicilina, em uma relação de 1:200, As células foram cultivadas em uma densidade óptica em 600 nm de 0,6, depois que as culturas de expressão foram mudadas para uma temperatura de crescimento de 20°C depois da indução com isopopropil-1-tio-P-D-galactopiranosídeo e MgCI₂ a uma concentração final de 0,4 mM e 10 μΜ, respectivamente. Depois de 10 h de indução, as células foram colhidas por centrifugação e ressuspensas em Tris-HCI a 20 mM, pH 7,5, NaCI a 300 mM, glicerol a 10%, NP40 a 0,1%, MgCI₂ a 4 mM, DTT a 5 mM suplementado com Inibidor de Protease Completo sem EDTA (Roche, Basel, Switzerland). As suspensões celulares foram rompidas por sonicação e incubadas com 10-15 mg/L de DNase I (Roche, Basel, Switzerland) durante 30 min. Os detritos celulares foram removidos através de ultracentrifugação a 30,000 x g durante 1 hora e lisado celular purificado foi congelado rápida e armazenado a -80°C antes da purificação.

O lisado celular purificado foi descongelado e subsequentemente carregado em uma coluna HisTrap FF pré-acondicionada de 5 mL equilibrada com HEPES a 25 mM, pH 7,5, NaCI a 500 mM, glicerol a 10% e DTT a 5 mM. As proteínas foram eluídas com imidazol a 500 mM a uma taxa de fluxo de 1 mL/minuto. As frações que contêm a proteína de interesse foram aplicadas em uma Coluna de Desalinização 26/10 HiPrep pré-acondicionada equilibrada com HEPES a 25 mM, pH 7,5, NaCI a 150 mM, glicerol a 10% e DTT a 5 mM. O pico de NS5B trocado por tampão foi em seguida aplicado em uma coluna Poly-U Sepharose de 20 mL. A proteína foi eluída com um gradiente salgado crescente e frações coletadas. A pureza de proteína foi

111/121 avaliada em géis de pré-fundidos Nu-PAGE (Invitrogen, Carlsbad, CA). As amostras de NS5B purificadas foram concentradas usando concentradores Centri-Prep (Millipore, Billerica, MA, USA) e as concentrações de proteína foram determinadas por ensaio de Bradford (Pierce, Rockford, IL, USA).

,b) Sequência de Proteína PDB: 1nb4, forma de Apo,

A sequência de proteína é como descrito no WO 2007/026024, Propriedades Mol. Cale.: 64941,4 g/mol.

1, c) ensaio de Inibição com 1bJ4 de NS5b

A medida da atividade de polimerização de NS5B de HCV foi realizada avaliando-se a quantidade de GTP radiorrotulado incorporada pela enzima em um RNA recentemente sintetizado usando padrão/iniciador de RNA heteropolimérico. O ensaio de RdRp foi realizado em placas de 384 poços usando 50 nM de enzima de NS5B purificada, que foi incubada com iniciador-padrão de oligo(rGi₃)/poli(rC) ou oligo(rU15)/poli(rA) biotinilado em 5' a 300 nM, 600 nM de GTP, e 0,1 pCi de [³H]GTP ou [³H]UTP em Tris-HCI a 25 mM, pH 7,5, MgCfe a 5 mM, KCI a 25 mM, NaCI a 17 mM e 3 mM de DTT. A mistura reacional de 30 pL foi incubada em temperatura ambiente durante 2 h, antes de parar a reação adicionando 30 pL de contas de SPA revestida com estreptavidina (GE Healthcare, Uppsala, Sweden) em EDTA a 0,5 Μ. A reação de 30 pL foi terminada depois de 2 horas a 25°C, na adição de 30 pl de contas de SPA revestida com estreptavidina (GE Healthcare, Uppsala, Sweden 5 mg/ml em EDTA a 0,5 M). Depois da incubação a 25°C durante 30 min, a placa foi contada usando uma leitora de microplaca Packard TopCount (30 seg/cavidade, retardo de contagem de 1 min) e os valores de IC₅o foram calculados (Tabela 1: IC501bJ4). Os valores de IC₅₀ representam a concentração do composto exigida para diminuir por 50% a quantidade de RNA produzida, que é medida pela detecção de GTP radiorotulado incorporado.

2, conlbde NS5Bde HCV

2,a) Clonagem, expressão e purificação de conib de NS5B.

A sequência de codificação para NS5B (cepa de consenso de

112/121 genótipo 1b Con1) deficiente de 21 resíduos C-terminais foi amplificada a partir de plasmídeo pFKI₃₈9/ns3-3'_N (no. de acesso Genbank AJ242654) e subclonada no plasmídeo pET21b como previamente descrito (Pauwels e outro, 2007, J Virol 81:6909-19). O construto de expressão de NS5BAC21 foi transformada em Rosetta 2 de E. coli (DE3) (Novagen, Madison, Wl). Cem mililitros de meio de LB suplementados com carbenicilina (50 pg/mL) e cloranfenicol (34 pg/mL) foram inoculados com uma colônia, cultivada durante a noite e transferida para meio de LB fresco suplementado com etanol a 3%, carbenicilina e cloranfenicol, em uma relação de 1:200, O restante do procedimento foi como previamente descrito (Pauwels e outro, 2007, J Virol 81:6909-19), a não ser que a coluna usada para cromatografia de troca de íons fosse uma coluna Resource S de 6 mL (GE Healthcare), e que as concentrações de proteína fossem determinadas com Nanodrop (Nanodrop Technologies, Wilmington, DE, USA).

2,b) Ensaio de RNA polimerase dependente de RNA.

Concentrações inibidoras de cinquenta por cento (Tabela 1: IC₅₀ conib) foram determinadas de acordo com o método como previamente descrito (Pauwels e outro, 2007, J Virol 81:6909-19) usando um ensaio de transcrição dependente de iniciador. Depois de uma pré-incubação de 10 minutos com o inibidor, 20 nM de enzima de NS5B de Conib purificada foram incubados durante 10 min. com oligo (rG13) iniciador 5'-biotinilado a 150 nM, poli (rC) padrão a a 15 nM, Tris-HCI a 19 mM, MgCI₂ a 5 mM, NaCI a 17 mM, KCI a 21 mM e DTT a 2,5 mM. GTP a 600 nM e 0,13 pCi de [³H]GTP foram em seguida adicionados para iniciar a mistura reacional de 40 pl, que foi em seguida incubada em temperatura ambiente durante 2 h antes da reação ter sido interrompida por adição de contas de SPA revestida com estreptavidina de 40 μΙ.

A seguinte Tabela 1 lista compostos de acordo com qualquer um dos exemplos acima. As atividades dos compostos testados também são descritas na Tabela 1, Tabela 1

113/121

Nr.	Estrutura		ec50 (μΜ)		ICgQ 1bJ4 (μΜ)		ICso Conlb (μΜ)
2	GO „ V ο==\ υ%Ο'0/		0,09		0,41
1	^Ν'ΧΧχχ'°'χ-ζΧ^Ν'^ À° θ< Οχ ΝΗ QKw		0,07		0,24		0,038
11	N N ο^\χΊ 0 NH rv AOhOv		0,055		0,22
5	N NH O=\ O' NH uirOv		0,92		0,29
12	^Ν'Χ^χ^Χχ^ΧΝΗ .*$' °^\x1 Ο NH ΩΧλΟ-Α		0,29		0,93

114/121

Nr.	Estrutura		ec50 (μΜ)		IC50 1bJ4 (μΜ)		IC50 Conib (μΜ)
10	Η \ Ό Ν I .0 I Ui 0' ΝΗ UKP		0,06		0,28
13	Η χο Τ I 0 ΝΗ r'S °'SrvN\_z~k V-hO-o7		0,39		0,19
3	χ I Ν'^χ_Ο'^—Ν'^° OajS—ΝΗ Η. Ο \ / \ i/WN S ΎΧλΟν		0,079				0,53
4	. I θ^-ΝΗ Ο \ / \		3,83				2,42
6	\ Η ν^^ν'^χ-^νύ*° °Τ-νη χ Α ο \ / \ θχά-όν		0,550

115/121

Nr.	Estrutura		ec50 (μΜ)		ICso 1bJ4 (μΜ)		ICso Conlb (μΜ)
8	x I °'S-NH Xa ’Wk		0,040
9	x I Ν-^.ο^^Νγο θόβ'ΝΗ X °°Wòu		0,800
15	θ’β-ΝΗ okoXò'°/		0,180
16	x I N^VO^Ny° θΧ-ΝΗ O \ / \ ,Ax/y N ΑΛ XzO-í'		0,078				0,040
17	x I 0 °*/-NH Ay o \ / \ λΑ/^ν A. umo/		0,170

116/121

Nr.	Estrutura		ec50 (μΜ)		Ιθ50 1bJ4 (μΜ)		IC50 Conlb (μΜ)
18	I °'S-NH Á. d \ / \ rA/W		0,079				0,026
19	x I Ν'Χ^,Ο'^—Νν^° °'S-NH X °' x/1 kX//yF		0,072				0,031
20	x I ΝΧο'^^'γ0 O'S-NH d \ / \ n>VVN X. lXH>f		0,081				0,038
21	x I Ν'νίΧ'^γ0 O=S-NH /L d \ / \ nA/VN X. 1 Τ X/'Ci		0,280
22	x 1 ΧΝ\Λ/\-ΝγΟ O=S-NH Á. d \ / \ °Yó-Ov		0,160

117/121

Nr.	Estrutura		ec50 (μΜ)		IC5o 1bJ4 (μΜ)		IC50 Conib (μΜ)
23	Η _κι /λ^Ν _r \ y° ο ηΝ-ι \ r >wOv		0,470
24	v I 0=S-NH o' \ / \ J--.., ΤΧλν) ίλ Cl		14,48
25	I ΗΝ^/^ΝγΟ OcrS-NH J. °' U/O®		0,550
26	x H θζε-ΝΗ Á ό \ 1 \ XX/xA		0,130
27	o=s=o y=o HN A. xxxo ίλ Cl		10,20

118/121

Nr.	Estrutura		ec50 (μΜ)		IC50 1bJ4 (μΜ)		IC5o Conlb (μΜ)
28	J I ^N N χ^θ °'S-NH Jx O \ 1 \		0,330
38	/''''''''''''Ή — N\ o=s=o j NZ ZXx J---. ° Π/Ml z		0,912

Afinidade de Ligação Enzima

Os compostos da fórmula (I) foram examinados quanto a seus cinéticos de ligação enzimática usando um método com base em Ressonância de Plásmon Superficial (SPR), isto é, Biacore. Uma dissociação lenta do 5 composto inibidor de seu alvo viral (baixo k_Off, baixo K_d) acredita-se que reduz potencialmente o desenvolvimento da resistência ao fármaco contra fármacos antivirais (Dierynck e outro. 2007, Journal of Virology, vol. 81, No. 24, 13845-13851). Todas as medidas foram realizadas em uma instrumento Biacore T100 (GE Healthcare). As NS5BÁC21 polimerases rotuladas por 10 HIS6 purificadas foram imobilizadas usando captura não covalente em um chip sensor de NTA (GE Healthcare) em tampão de imobilização (MOPS a 20 mM pH 7,4, NaCI a 500 mM, Tween-P20 a 0,005%, DTT a 1 mM, EDTA a 50 μΜ). Estudos de interação foram todos realizados a 25°C. Os inibidores foram serialmente diluídos em tampão fluente (Tris-HCI a 20 mM pH 7,4, 15 NaCI a 150 mM, EDTA a 50 μΜ, DTT a 1 mM, Tween-P20 a 0,005%) contendo dimetilsulfóxido a 5% (DMSO). Cinéticos de único ciclo foram usados, em que 5 concentrações crescentes do composto foram injetadas durante um período de 300 s cada em 1 único ciclo, e a dissociação foi monitorada

119/121 durante um período de 1200 s. A superfície sensora foi completamente regenerada entre os ciclos. Os dados foram analisados usando análise de regressão não linear simultânea (ajuste global) adaptada para cinéticos de Cínico ciclo com software avaliação Biacore T100 BiaEval 2,0 (GE Healthcare). As constantes de taxa individuais Ko_n e k_Off e uma constante de afinidade derivada, Kd = koff/kon, foi determinada por uma avaliação cinética dos sensógrafos. Os modelos cinéticos responderam pelos efeitos de transporte de massa limitados e de volume. Cada análise foi realizada pelo menos em duas experiências independentes. A taxa de dissociação de uma interação cinética pode ser transladada em um tempo de residência de composto (meiavida dissociativa t_1/2 = ln(2)/k_Off) representativo para o tempo de interação entre a polimerase e seu inibidor.

As constantes de taxa de associação observadas (k_on), constantes de taxa de dissociação (k_Off), constante de afinidade derivada (Kd) e meiavida dissociativa (ti/₂) medida para compostos de fórmula (I) ou subgrupos dos mesmos em enzima tipo silvestre de NS5B (genótipo 1b, Conlb) são determinados na Tabela 2,

A Tabela 3 listas dados de afinidade de ligação para o composto nr. 1 em formas diferentes de NS5B polimerase de HCV. As diferentes formas estudadas (Alvo de NS5B) compreendem diferentes isolados clínicos de diferentes genótipos da enzima tipo selvagem, e, NS5B polimerases mutantes diferentes. As enzimas mutantes foram obtidas por mutagênese direcionada ao sítio da enzima de NS5B 1bJ4 ou Conlb. Mutações P495L, V494A e L392I ficam situadas na bolsa de ligação dos compostos da invenção para NS5B polimerase.

Foi observado que a forte ligação dos compostos de fórmula (I) ou subgrupos dos mesmos é consistente dentro de um genótipo, em que os compostos de fórmula (I) ou subgrupos dos mesmos mostram afinidade para NS5B polimerase dos genótipos diferentes, bem como para NS5B polimerases com mutação na bolsa de ligação de indol, e em que a ligação dos compostos de fórmula (I) ou subgrupos dos mesmos não é afetada por mutações para outros sítios na enzima.

120/121

Tabela 2

Número	kon (1/Ms)	koff(1/s)	Kd (M)	t1/2 (min)
16	2,2E+04	3,6E-05	1,6E-09	321,5
18	2.0E+04	4.8E-05	2.4E-09	241,0
1	2,0E+04	9.0E-05	4.4E-09	128,4
28	7.3E+03	6,6E-05	9.0E-09	175,5
25	2.9E+04	3,1E-04	1.1E-08	37,8
17	8.7E+03	1.6E-04	1,8E-08	72,0
27	9,5E+03	3,8E-03	4.0E-07	3,1
24	4.8E+03	3.7E-03	7.6E-07	3,1
38	5.3E+03	4.1E-05	7.7E-09	283,8

Tabela 3

Alvo de NS5B	kon (1/Ms)	koff(1/s)	Kd(M)	ti/2 (min)
1a isola 1	7.4E+04	4.8E-04	6.5E-09	24,2
1a isola 2	3.9E+04	3.7E-04	9,4E-09	31,3
1a isola 3	8,1E+04	6.0E-04	7,4E-09	19,2
1a isola 4	7.4E+04	7,7E-04	1,1E-08	14,9
1a isola 5	1.1E+05	3.1E-04	2.8E-09	37,2
1 b isola 1	2.6E+04	1.0E-04	4.0E-09	110,2
1b isola 2	2,9E+04	6.7E-05	2.3E-09	172,1
1b isola 3	3.7E+04	1.2E-04	3,3E-09	96,4
1 b isola 4	3,5E+04	1,7E-04	4.9E-09	67,5
2b isola 1	1.8E+04	1.4E-02	8.2E-07	0,8
2b isola 2	4,3E+04	1,2E-02	2.7E-07	1,0
2b isola 3	4,4E+03	1.7E-02	3,8E-06	0,7
3a isola 1	9.5E+04	3.7E-04	3.9E-09	31,1
3a isola 2	2,5E+04	4.7E-04	1.9E-08	24,6
3a isola 3	6,0E+04	3.6E-04	6,1E-09	31,7
4a isola 1	2,0E+05	4.3E-04	2.1E-09	26,7
4a isola 2	2,8E+05	3.8E-04	1,4E-09	30,1
4a isola 3	1.8E+05	6.0E-04	3,4E-09	19,1
5a isola 4	4.3E+04	9.7E-04	2,2E-08	12,0
6a isola 5	5.0E+04	1.6E-03	3,2E-08	7,3

121/121

Alvo de NS5B	kon (1/Ms)	koff(1/s)	Kd(M)	ti/2 (min)
1bJ4	2.0E+04	1.0E-04	5.2E-09	110,2
Con 1b	2.0E+04	9.0E-05	4.4E-09	128,4
P495L (1bJ4)	5.9E+03	2.2E-02	3.8E-06	0,5
L392I (Con 1b)	1.8E+04	9.7E-04	5.5E-08	11,9
P495L (Conib)	3,4E+03	2,2E-02	6,4E-06	0,5
V494A(Con1b)	5.5E+04	8,4E-04	1,5E-08	13,8
M414T (1bJ4)	2.6E+04	1,5E-04	5.9E-09	75,4
M423T (1bJ4)	2.5E+04	1.5E-04	6.3E-09	75,0
S282T (1bJ4)	3,4E+04	1.3E-04	3.9E-09	88,9
C316Y (Con 1b)	3.5E+04	7,6E-05	2,2E-09	151,7

1/5

Claims (5)

1. Composto, caracterizado

Fórmula (I):

pelo fato de que apresenta a

incluindo sais, dos mesmos, em que:

- R¹ é uma cadeia bivalente selecionada a partir de -j-n^O-n—II ι I ^{1 R}3 ^R3 ,

.. R3 .

R3 . R³ R3.

R³

I •N

J

- cada R³ é independentemente selecionado a partir do grupo que compreende hidrogênio, C1-4 alquila e C3-5 cicloalquila;

- a é 3, 4, 5 ou 6;

cada b é independentemente 1 ou 2;

c é 1 ou 2;

Petição 870190114064, de 07/11/2019, pág. 4/12

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que,

R¹ é selecionado a partir de -N(R³)-(CH2)4-N(R³)-,

N ' 'a N— I I ^R3 ^R3

R3

^R3 ^R3 I

R³

R³

R³

I •N

- cada R³ é independentemente selecionado a partir de hidrogênio e metila.

2/5 macrociclo A tem átomos de 14 a 18 membros, em particular macrociclo A tem átomos de 17 ou 18 membros;

cada R² é independentemente hidrogênio, halo ou C1-4 alcóxi;

R⁴ e R⁵ são hidrogênio ou R⁴ e R⁵ juntos formam uma ligação dupla ou um grupo metileno para formar uma ciclopropila fundida;

R⁶ é hidrogênio ou metila; e

R⁷ é uma C3-7 cicloalquila opcionalmente substituída com halo.

3/5 a 3, caracterizado pelo fato de que R² é selecionado a partir de fluoro e metóxi.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que R7 é selecionado a partir de ciclo-hexila e 5 2-fluorociclo-hexila.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que R⁴ e R⁵ juntos formam uma ligação dupla.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1

10 a 5, caracterizado pelo fato de que os compostos de fórmula (I) têm a configuração estereoquímica como ilustrado pela fórmula (IA).

(IA)

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que tem uma das fórmulas estruturais II-1, II2, II-3, III-1, III-2, III-3, III-4, IV-1, IV-2 ou IV-3,

Petição 870190114064, de 07/11/2019, pág. 6/12

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que R² está posicionado no grupo benzeno em para, com respeito à ligação que liga este benzeno ao grupo indol.

4/5

Fórmula:

incluindo sais dos mesmos.

5 10. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um veículo, e como ingrediente ativo um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9 ou uma composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 10, 10 caracterizado(a) pelo fato de ser para uso como um medicamento.

Petição 870190114064, de 07/11/2019, pág. 7/12

5/5

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9 ou uma composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 10 ou 11, caracterizado(a) pelo fato de ser para inibir a replicação de HCV.

13. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1

Petição 870190114064, de 07/11/2019, pág. 5/12

5 reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para inibir a replicação de HCV.