EA017797B1

EA017797B1 - Бициклические диазомиметики smac, способы их получения, их применения, содержащие их фармацевтические композиции и набор, содержащий указанные композиции

Info

Publication number: EA017797B1
Application number: EA200901400A
Authority: EA
Inventors: Шаомэн Ван; Юэфэн Пэн; Хайин Сунь; Цянь Цай; Занета Николовска-Цолеска; Цзяньфэн Лу; Су Цю
Original assignee: Дзе Риджентс Оф Дзе Юниверсити Оф Мичиган
Priority date: 2007-04-13
Filing date: 2008-04-14
Publication date: 2013-03-29
Also published as: IL201474A; WO2008128171A3; ES2504216T3; US8664212B2; BRPI0810522A2; CA2683318A1; HRP20140885T1; CN101686981A; KR101081685B1; PT2139490E; BRPI0810522B1; EP2139490A4; ZA200907055B; CY1115735T1; HK1141456A1; KR20100005213A; SI2139490T1; IL201474A0; JP2010523722A; US20100273812A1

Abstract

Изобретение относится к бициклическим диазомиметикам Smac, которые функционируют как ингибиторы ингибитора белков апоптоза, и к применению этих миметиков для индуцирования апоптотической смерти клетки и для сенсибилизации клеток к индукторам апоптоза. Изобретение также относится к способам получения указанных миметиков, к фармацевтическим композициям, содержащим их, и к набору, включающему указанные композиции.

Description

Предпосылки создания изобретения

Область техники

Данное изобретение относится к области медицинской химии. В частности, изобретение относится к конформационно ограниченным миметикам Ν-терминальной последовательности Зтас, которые функционируют как ингибиторы ингибитора белков апоптоза. Изобретение также относится к применению этих миметиков для индуцирования или сенсибилизации клеток к индукции апоптотической смерти клеток.

Предшествующий уровень техники

Агрессивный фенотип раковой клетки представляет собой результат разнообразия генетических и эпигенетических изменений, приводящих к прекращению регулирования внутриклеточных сигнальных путей (Ропбег, Ыа!иге 411:336 (2001)). Общим для всех раковых клеток, однако, является их неспособность выполнить апоптотическую программу, а отсутствие соответствующего апоптоза вследствие дефектов в механизме апоптоза при нормальном развитии является признаком рака (Бо\\е е! а1., Сагсшодепез1з 21:485 (2000)). Большая часть применяемых в настоящее время противораковых терапий, включая химиотерапевтические агенты, облучение и иммунотерапию, действует, косвенно вызывая апоптоз в раковых клетках. Неспособность раковых клеток выполнять апоптотическую программу вследствие дефектов в механизме апоптоза при нормальном развитии, таким образом, часто связана с увеличением резистентности к химиотерапии, облучению или апоптозу, вызванному иммунотерапией. Первичная или приобретенная резистентность рака различного происхождения у человека к текущим протоколам лечения пациента вследствие дефектов апоптоза является главной проблемой в современной терапии рака (Бо\ге е! а1., Сагсшодепез1з 21:485 (2000); №сйо1зоп, Ыа!иге 407:810 (2000)). Соответственно, в настоящее время и в будущем усилия по созданию и разработке новых молекулярных специфичных противораковых терапий, для улучшения выживаемости и состояния больных раком должны включать стратегии, которые специфически направлены на изменение сопротивления раковой клетки к апоптозу. В этом отношении целевое воздействие на критические отрицательные регуляторы, которые играют центральную роль в прямом ингибировании апоптоза в раковых клетках, представляет очень многообещающую терапевтическую стратегию для нового подхода к созданию противораковых препаратов.

Было идентифицировано два класса центральных отрицательных регуляторов апоптоза. Первый класс регуляторов представляет собой семейство белков Вс1-2, примером которого являются две эффективные анти-апоптотические молекулы, белки Вс1-2 и Вс1-ХЬ (Абатз е! а1., Зс1епсе 281:1322 (1998); Вееб, Αάν. Рйагтасо1. 41:501 (1997); Вееб е! а1., 1. Се11. Вюсйет. 60:23 (1996)). Терапевтические стратегии для таргетирования Вс1-2 и Вс1-ХЬ при раке, позволяющие восстановить чувствительность раковой клетки и преодолеть резистентность раковых клеток к апоптозу, уже широко рассматривались (Абатз е! а1., 8с1еисе 281:1322 (1998); Вееб, Αάν. Рйагтасо1. 41:501 (1997); Вееб е! а1., 1. Се11. Вюсйет. 60:23 (1996)). Несколько лабораторий занято созданием небольших молекул - ингибиторов Вс1-2 и Вс1-ХЬ.

Второй класс центральных отрицательных регуляторов апоптоза представляют собой ингибиторы белков апоптоза (1АР) (Оетеганх е! а1., Оеиеб Эем. 13:239 (1999); Закезеп е! а1., Ыа!. Κεν. Мо1. Се11. Вю1. 3:401 (2002)). Этот класс включает белки, например, Х1АР, с1АР-1, с1АР-2, МЬ-1АР, Н1АР, К1АР, ТЗ1АР, ΝΑΙΡ, сурвивин, ливин, 1БР-2, аполлон и ВВИСЕ. Белки 1АР эффективно подавляют апоптоз, вызванный целым рядом апоптотических стимулов, включая химиотерапевтические агенты, облучение и иммунотерапию в раковых клетках.

Связанный с Х-хромосомой ингибитор белков апоптоза (Х1АР) является самым эффективным ингибитором в подавлении апоптоза среди всех представителей 1АР (Но1с1к е! а1., Арор!оз1з 6:253 (2001); ЬаСаззе е! а1., Опсодепе 17:3247 (1998); Такайазй1 е! а1., 1. Вю1. Сйет. 273:7787 (1998); Оемегаих е! а1., Ыа!иге 388:300 (1997); Зип е! а1., Ыа!иге 401:818 (1999); Оемегаих е! а1., ЕМВО 1. 18:5242 (1999); Аззейп е! а1., Сапсег Вез. 61:1862 (2001)). Х1АР играет ключевую роль в отрицательном регулировании апоптоза в путях, опосредованных как рецептором смерти, так и митохондриями. Х1АР функционирует как эффективный эндогенный ингибитор апоптоза, действующий путем непосредственного связывания и сильного ингибирования трех представителей семейства ферментов каспаз: каспазы-3, -7 и -9 (Такайазй1 е! а1., 1. Вю1. Сйет. 273:7787 (1998); Оемегаих е! а1., Ыа!иге 388:300 (1997); Зип е! а1., Ыа!иге 401:818 (1999); Эеуегаих е! а1., ЕМВО 1. 78:5242 (1999); Аззейп е! а1., Сапсег Вез. 67:1862 (2001); В1еб1. е! а1., Се11 704:791 (2001); Сйа1 е! а1., Се11 104:769 (2001); Ниапд е! а1., Се11 704:781 (2001)). Х1АР содержит три повторяющихся домена бакуловирусного ингибитора апоптоза (В1В), а также С-терминальный В1ЫС-домен. Третий домен В1В (В1В3) селективно нацелен на каспазу-9, инициаторную каспазу в митохондриальном пути, тогда как область линкера между В1В1 и В1В2 ингибирует и каспазу-3 и каспазу-7 (Закезеп е! а1., Ыа!. Веν. Мо1. Се11. Вю1. 3:401 (2002)). В то время как связывание с Х1АР предотвращает активацию всех трех каспаз, очевидно, что взаимодействие с каспазой-9 является наиболее важным для ингибирования апоптоза (Екей е! а1., 1. Се11 Вю1. 752:483 (2001); Згшкази1а е! а1., Ыа!иге 470:112 (2001)). Поскольку Х1АР блокирует апоптоз в нисходящей эффекторной фазе в точке, где сходятся многочисленные пути передачи сигналов, для преодоления сопротивления раковых клеток к апоптозу особенно эффективными могут оказаться стратегии, нацеленные на Х1АР (Еи1ба е! а1., Ыа!иге Меб. 8:808 (2002); Ат! е! а1., 1. Вю1. Сйет. 277:44236 (2002)).

- 1 017797

Хотя точная роль ΧΙΑΡ при каждом типе рака далека от полного понимания, появляются свидетельства, указывающие на то, что XIΑΡ сверхэкспрессируется при многих типах рака и может играть важную роль в резистентности раковых клеток к разнообразным современным терапевтическим агентам (Но1с1к е1 а1., Αρορΐοβίβ 6:253 (2001); ЬаСавве е1 а1., Опсодепе 77:3247 (1998)).

Найдено, что белок ΧΙΑΡ экспрессируется в большинстве линий раковых клеток ЫС1 60 человека (Татт е1 а1., С1ш. Сапсег Кее. 6:1796 (2000)). Анализ образцов опухоли у 78 ранее не подвергавшихся лечению пациентов показал, что пациенты с более низкими уровнями ΧΙΑΡ имели значительно более длительный срок существования (Татт е1 а1., С1ш. Сапсег Кее. 6:1796 (2000)). Найдено, что ΧΙΑΡ экспрессируется при злокачественной глиоме человека (АУадепкпесЫ е1 а1., Се11 Эеа111 Э|ГГег. 6:370 (1999); Ри1йа е1 а1., Ыа1иге Мей. 8:808 (2002)). Найдено, что при митохондриальной активации ΧΙΑΡ экспрессируется в раковых клетках простаты человека и блокирует апоптоз раковых клеток простаты, опосредованный апоптоз-индуцирующим лигандом Аро-2, связанным с фактором некроза опухоли (МсЕ1епу е1 а1., ΡΐΌβΙηΦ 57:133 (2002); Ν§ е1 а1., Мо1. Сапсег Тйег. 1:1051 (2002)). ΧΙΑΡ сверхэкспрессируется у пациентов при немелкоклеточном раке легкого (Νδί'Ό’) и участвует в патогенезе Νδί'Ό’ (НоРшапп е1 а1., 1. Сапсег Кее. С11п. Опсо1. 128:554 (2002)). Экспрессия ΧΙΑΡ и отсутствие понижающей регуляции ΧΙΑΡ при лечении цисплатином приводили к резистентности по отношению к цисплатину при раке яичника человека (Ь1 е1 а1., Епйосгшо1оду 142:370 (2001); СЛепд е1 а1., Эгид Кев151. Ирйа1е 5:131 (2002)). Взятые вместе, эти данные дают возможность предположить, что ΧΙΑΡ может играть важную роль в резистентности некоторых видов рака человека к имеющимся терапевтическим агентам.

Целостность стенок кровеносных сосудов является существенной для гомеостаза сосудов и функционирования органа. Динамический баланс между выживанием и апоптозом эндотелиальной клетки вносит свой вклад в эту целостность в процессе развития сосудов и патологического ангиогенеза. Было показано, что ΟΑΡ-1 является необходимым для поддержания выживания эндотелиальной клетки и гомеостаза кровеносных сосудов при развитии сосудов (8ап!ого е1 а1., М-Ииге Сепейсв 39: 1397 (2007). Как таковой, ΟΑΡ-1 может играть важную роль в контроле ангиогенеза и гомеостаза кровеносных сосудов при эмбриогенезе, регенерации и туморогенезе.

Апоптоз не является отдельным процессом, скорее он связан с множеством различных, иногда взаимосвязанных, сигнальных путей, приводящих к распаду клетки. Пути, участвующие в конкретной форме апоптоза, зависят от многих факторов, например, поражения или поражений, которые инициируют процесс. Другие факторы включают активацию или гиперактивацию специфических рецепторов, например, активацию рецепторов смерти альфа-фактором некроза опухоли (ΤΝΡα), апоптоз-индуцирующим лигандом, связанным с фактором некроза опухоли (ΤΚΑΙΤ или Αρο2^), или лигандом ΡΑ8. Другим определяющим фактором является тип участвующей клетки, поскольку после активации рецептора ΡΑ8 или ΤΝΡα для клеток так называемого типа Ι и типа ΙΙ показаны различные пути передачи сигналов.

Было показано, что ТКЛГБ ^роЗЬ) является селективным и эффективным индуктором апоптоза в раковых клетках (но не в нормальных клетках) при связывании с любым из двух про-апоптотических ТКЛ^ рецепторов, ΤКΑI^-К1 (или ΌΚ4) (Гап е1 а1., 8с1епсе 276:111 (1997)) или таЛЮ-КЗ (КШЬЕК, или ΌΚ5) (\и е1 а1., №1. 6епе1. 17:141-143 (1997); Бап е1 а1., 8аепсе 277:815 (1997); АаА/ак е1 а1., ЕМВО 1. 16:5386 (1997)). Активация про-апоптотических рецепторов смерти с помощью ΤΚΑI^ индуцирует образование сигнального комплекса, индуцирующего смерть (ΌΙδΟ), который содержит рецептор ΡΑΌΌ в качестве адаптера (К1всйке1 е1 а1., Iттишίу 72:611 (2000); Киапд е1 а1., 1. Вю1. Сйет. 275:25065 (2000)), и каспазу-8 в качестве инициирующей каспазы. После образования ΟΙ8Ρ. каспаза-8 аутопроцессируется и активируется путем индуцирования при сближении (Мейета е1 а1., ЕМВО 1. 76:2794 (1997); Михю е1 а1., 1. Вю1. Сйет. 273:2926 (1998)).

ΕΠΑΙΤ вызывает значительный интерес в качестве потенциального терапевтического средства при лечении рака (Ргепск е1 а1., ΝηΙ. Мей. 5:146 (1999)) благодаря своему селективному нацеливанию на раковые клетки, тогда как большинство нормальных клеток, по-видимому, является устойчивыми к ΈΚΑΙΤ ^вИкешх! е1 а1., 8аепсе 287:1305 (1998); \Уа1схак е1 а1., ΝηΙ. Мей. 5:157 (1999)). Доказано, что систематическое назначение ΤΚΑI^ является безопасным и эффективным при лизисе опухоли молочной железы или толстой кишки в модели ксенотрансплантата и для продления длительности жизни мышей (\Уа1схак е1 а1., ΝηΙ. Мей.5:157 (1999)). Хотя ΤΚΑI^ может специфично подавлять многие типы раковых клеток, многие другие проявляют резистентность к ^ΑΙΤ (К1т е1 а1., С1ш. Сапсег Кее. 6:335 (2000); 2Ьапд е1 а1., Сапсег Кее. 59:2747 (1999)). Кроме того, раковые клетки подавляли путем применения антител (моноклональных или поликлональных), которые специфично опознают как ΤΚΑI^-Κ1, так и ΤΚΑI^-Κ2.

В качестве потенциальных факторов, ответственных за резистентность к ΤΚΑI^, было определено множество механизмов. Такие механизмы существуют на множестве уровней, включая рецепторный уровень, митохондриальный уровень, пост-митохондриальный уровень и уровень ΩΙδΡ. Например, недостаточная экспрессия каспазы-8 (Тей/ е1 а1., ΝηΙ. Мей. 6:529 (2000); ΟπΓΓηΙι е1 а1., 1. Iттиηο1. 161:2833 (1998)) или высокая экспрессия клеточного ингибирующего протеина РОСЕ (сРР-ΙΡ) (К1т е1 а1., С1ш.

Сапсег Кее. 6:335 (2000); 211апд е1 а1., Сапсег Кее. 59:2747 1999; Ка!аока е1 а1., 1. Iттипο1. 161:3936 (1998)) делают раковые клетки устойчивыми к ΤΚΑI^. Уе11 е1 а1. показали, что сРОТ-дефицитные фибропласты

- 2 017797 эмбрионов мышей, в частности, чувствительны к рецептор-опосредованному апоптозу (Уей е! а1., 1ттиийу 12:533 (2000)). Известно несколько вариантов сРЫР, включая вариант короткого соединения, сРЫР8, и вариант более длинного соединения, сРЫР-Ь. Было показано, что сРЫР-дефицитные фибропласты эмбрионов мышей становятся резистентными к ТВА1Ь-индуцированному апоптозу в результате ретровирус-опосредованной трансдукции сРЬ1Р-8 (Βίη е! а1., РЕВ8 Бей. 510:37 (2002)).

Хотя ТКА1Ь является потенциально многообещающим кандидатом для специфической активации рецептора смерти опухоли (то есть, он вызывает апоптоз предпочтительно в клетках опухоли, а не в нормальных тканях), многие раковые клетки являются резистентными к лекарствам, вызывающим апоптоз, как обсуждалось выше. В результате для достижения терапевтического эффекта лечение такими лекарствами часто требует совместной обработки облучением и/или цитостатическими веществами. Однако как облучение, так и химиотерапия имеют существенные побочные эффекты, и по возможности их вообще избегают.

Таким образом, имеется потребность в агенте, который может селективно и эффективно сенсибилизировать клетки опухоли к селективным лекарственным препаратам, вызывающим апоптоз, например, ТКАГО или антителам ТКАГО-рецептора, при этом не сенсибилизируя окружение нормальных клеток. Такой агент также был бы полезным для уменьшения или предотвращения резистентности к препарату, обычно связанной с использованием рецептор-опосредованных апоптотических противораковых лекарств, таким образом, улучшая их эффективность и устраняя необходимость применения комбинационных терапий.

Недавно был идентифицирован 8тас/И1ЛВЬО (второй активатор каспаз, полученный из митохондрий) в виде белка, выделяемого митохондриями в цитозоль в ответ на апоптотические стимулы (ВиФйагфо е! а1., Аппи. Веу. Се11 Иеу. Βίο1. 15:269 (1999); Ии е! а1., Се11 102:33 (2000)). 8тас синтезируют с помощью Ν-терминальной митохондриальной таргетирующей последовательности, которую протеолитически удаляют при созревании до зрелого полипептида. Показано, что 8тас непосредственно взаимодействует с Х1АР и другими 1АР и разрушает их связывание с каспазами, а также облегчает активацию каспаз. 8тас является эффективным эндогенным ингибитором Х1АР.

Недавно с высокой разрешающей способностью были определены экспериментальные трехмерные (3И) структуры области В1В3 Х1АР в комплексе с белком 8тас и пептидом (8ип е! а1., 1. Βίο1. Сйет. 275:36152 (2000); Аи е! а1., №1Шге 408:1008 (2000)) (Фиг. 1). Ν-терминальный тетрапептид 8тас (А1аУа1-Рго-Пе или АУР1 (последовательность 8ЕО ГО N0:1)) распознает бороздку на поверхности области В1В3 Х1АР путем образования нескольких водородных связей и Ван-дер-Ваальсового взаимодействия. Также было показано, что взаимодействие между В1В3 и каспазой-9 включает четыре остатка (А1а-ТйгРго-Рйе или АТРР (последовательность 8ЕО ГО N0:2)) на амино-сайте терминации транскрипции небольшой субъединицы каспазы-9 с этой же бороздкой на поверхности области В1В3. Некоторые недавние исследования убедительно показали, что 8тас промотирует каталитическую активность каспазы-9 путем конкурирующего взаимодействия каспазы-9 за то же связывание с бороздкой на поверхности области В1В3 (Екег! е! а1., 1. Се11 Вю1. 152:483 (2001); 8пшуа8и1а е! а1., №1Шге 410:112 (2001)).

В отличие от большинства взаимодействий белка с белком, взаимодействие 8тас-Х1АР опосредуется только четырьмя аминокислотными остатками на белке 8тас и хорошо выраженной бороздкой на поверхности области В1В3 Х1АР. Величина К, для 8тас пептида АУР1 (последовательность 8ЕО ГО N0:1) относительно Х1АР (Κ,ι = 0,4 мкМ) является практически той же, что и для зрелого белка 8тас (Κ,ι = 0,42 мкМ). Этот хорошо выраженный участок взаимодействия является идеальным для разработки небольших целевых непептидных молекул, подобных лекарственному препарату, которые подражают связыванию 8тас с Х1АР.

Проникающий в клетку 8тас пептид, который состоит из первых четырех аминокислотных остатков (АУР1 (последовательность 8ЕО ГО N0: 1)) Ν-сайта терминации транскрипции 8тас, связанный с белком-носителем для улучшения внутриклеточной доставки, как недавно было показано, повышает чувствительность различных клеток опухоли ίη νίίτο и клеток злокачественной глиомы ίη νίνο к апоптозу, индуцированному лигированием рецептора смерти или цитотоксическими лекарственными препаратами ((Ри1,а е! а1., №1Шге Ме,. 8:808 (2002)). Что важно, этот 8тас пептид сильно увеличивал противоопухолевую активность Аро2Ь/ТКА1Ь во внутричерепной злокачественной глиоме в модели ксенотрансплантата ίη νί\Ό. Полное уничтожение установленных опухолей и выживание мышей были достигнуты только после совместной обработки пептидами 8тас и Аро2Ь/ТКА1Ь Важно отметить, что у 8тас пептида нет заметной токсичности по отношению к нормальной ткани мозга.

Второе недавнее независимое исследование также показало, что пептиды, состоящие из первых четырех-восьми аминокислотных остатков №сайта терминации транскрипции 8тас, соединенные с различными белками-носителями, увеличивали индукцию апоптоза и долговременные антипролиферативные эффекты разнообразных химиотерапевтических лекарственных препаратов, включая паклитаксел, этопозид, 8№38. и доксорубицин в МКР-7 и других клеточных линиях рака молочной железы человека (Агп! е! а1., 1. Вю1. Сйет. 277:44236 (2002). Это исследование окончательно показало, что Х1АР и с1АР-1 представляют собой первичные молекулярные цели для этих пептидов в клетках.

Третье исследование показало, что пептид 8тас из первых семи остатков №сайта терминации

- 3 017797 транскрипции, соединенный с полиаргинином, восстанавливал апоптосомную активность и полностью изменял резистентность к апоптозу в клетках Н460 немелкоклеточного рака легкого (Уапд с1 а1., Сапсег Век. 63:831 (2003)). Было показано, что ΧΙΑΡ является ответственным за недостаток апоптосомной активности и подавление активности каспазы в клетках Н460. При использовании в комбинации с химиотерапией, проникающий в клетку пептид 8тас вызывал замедление роста опухоли ίη νίνο при незначительной токсичности в отношении крыс. В своей совокупности эти последние независимые исследования дают веские основания предположить, что эффективный, устойчивый, проникающий в клетку 8тас миметик может обладать большим терапевтическим потенциалом при лечении рака молочной железы человека и других типов рака.

Ингибиторы на основе пептидов являются полезными инструментами для объяснения антиапоптотической функции ΙΑΡ и роли ΙΑΡ в ответе раковых клеток на действие химиотерапевтических агентов. Но ингибиторы на основе пептидов обычно имеют ограничения, свойственные им как потенциально полезным терапевтическим агентам. Эти ограничения включают их плохую проникаемость в клетки и плохую стабильность ίη νίνο. Действительно, в этих трех опубликованных исследованиях с использованием пептидных ингибиторов на основе 8тас, указанные пептиды должны были быть гибридизованы с пептидами носителя, чтобы сделать их относительно проницаемыми в клетку.

Чтобы преодолеть ограничения, свойственные ингибиторам на основе пептидов, настоящее изобретение включает разработку конформационно ограниченных 8тас миметиков.

Краткое описание изобретения

Общепринято, что неспособность раковых клеток или поддерживающих их клеток подвергаться апоптозу в ответ на генетические повреждения или воздействие индукторов апоптоза (например, противораковых агентов и облучения) является главным фактором в начальной стадии и при прогрессирующем раке. Полагают, что индукция апоптоза в раковых клетках или поддерживающих их клетках (например, неоваскулярных клетках в сосудистой сети опухоли) является универсальным механизмом действия практически для всех эффективных противораковых терапевтических лекарственных средств или радиационных методов лечения, предлагаемых рынком или имеющихся в медицинской практике сегодня. Одной из причин неспособности клетки подвергаться апоптозу является увеличенная экспрессия и накопление ΙΑΡ.

В настоящем изобретении предполагается, что воздействие на животных, страдающих от рака или других гиперпролиферативных расстройств или заболеваний, связанных с дисрегуляцией апоптоза, терапевтически эффективного количества лекарственного препарата(ов) (например, небольших молекул), которые ингибируют функцию(и) ΙΑΡ, подавляет больные клетки или поддерживающие их клетки (те клетки, продолжительное выживание которых зависит от гиперактивности или сверхэкспрессии ΙΑΡ), и/или делает такие клетки как популяцию более восприимчивыми к действию терапевтических лекарственных препаратов или радиационных методов лечения, индуцирующих гибель раковой клетки. В настоящем изобретении предполагается, что ингибиторы ΙΑΡ соответствуют неудовлетворенной потребности в лечении разнообразных типов рака, при назначении как монотерапии, чтобы вызвать апоптоз в раковых клетках, зависящих от функции ΙΑΡ, так и при назначении временно связанных с другими лекарственными средствами или радиационными методами лечения, стимулирующими гибель раковой клетки, чтобы создать большую долю раковых клеток или поддерживающих их клеток, восприимчивых к выполнению программы апоптоза, по сравнению с соответствующей долей клеток в животном, подвергающемся лечению только противораковым лекарственным препаратом или только радиационной терапией.

В настоящем изобретении также предполагается, что лечение животных, страдающих от заболеваний, связанных с эндотелиальными клетками (таких как опухолевый ангиогенез, ретинопатия и атеросклероз) с помощью терапевтически эффективных количеств препарата(ов) (например, небольшими молекулами), которые ингибируют функцию(и) ΙΑΡ (например, с ΙΑΡ-1), может предотвратить или ингибировать ангиогенез и разрушить гомеостаз кровеносного сосуда при развитии сосуда в патологических условиях. Конкретные расстройства, которые можно лечить с помощью соединений по изобретению, включают дегенерацию жёлтого пятна, ревматоидный артрит, псориаз, диабетическую ретинопатию, ретинопатию недоношенных, отторжение роговичного имплантата, неоваскулярную глаукому, ретролентальную фиброплазию, покраснение радужки, синдром Ослера-Веббера, миокардиальный ангиогенез, неоваскуляризацию бляшки, телангиэктазию, кровоизлияния в суставы при гемофилии, ангиофиброму, грануляцию раны, кишечные спайки, атеросклероз, склеродерму и гипертрофические рубцы.

Заявители также обнаружили, что введение ΝΒ⁵ в бициклическую кольцевую систему неожиданно оказывает определенное влияние на связывание с ΧΙΑΡ по сравнению с карбоциклическими аналогами (например, 8М-122) (диаграмма 1). Например, сродство к связыванию с ΧΙΑΡ ΒΙΒ3 и клеточная активность в линиях раковых клеток ΜΌΑ-ΜΒ-231 и 8К-ОУ-3 для соединений 8М-245РЗ (В⁵ = Ме) и 8М-246Р (В⁵ = Βη) меньше, чем сродство для соединения 8М-122. Как ни странно, сродство к связыванию с ΧΙΑΡ ΒΙΒ3 и клеточная активность в линиях раковых клеток МЭА-МВ-231 и 8К-ОУ-3 для соединений 8М-337 (В⁵ = СОСН2Рй) и 8М-406 (В⁵ = СОСН2СН(СН₃)₂ равно или лучше, чем сродство для соединения 8М-122. В дополнение к определенным биологическим свойствам, заявители нашли, что соединение 8М-406 и

- 4 017797 другие родственные аналоги проявляют неожиданно лучшие результаты в отношении перорального бионакопления по сравнению с соединением 8М-122.

Диаграмма 1

Заявители также нашли, что соединения по настоящему изобретению при объединении с другими противораковыми агентами (такими как Тайкерб®, таксотер, гемцитабин, митоксантрон, этопозид) проявляют неожиданно лучшую активность ίη νίΐΓΟ в линиях раковой клетки. Кроме того, заявители нашли, что соединения по настоящему изобретению при объединении с другими противораковыми агентами (такими как Тайкерб®, таксотер, гемцитабин) проявляют удивительное уменьшение среднего объема опухоли ίη νίνο в модели ксенотрансплантата рака. Таким образом, в определенных примерах осуществления изобретения комбинированное лечение животных сочетанием терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению и курса противоракового агента или облучения производит больший ответ опухоли и клиническую пользу в таких животных по сравнению с животными, которых подвергали лечению только указанным соединением или только одними противораковыми лекарственными препаратами/облучением. Другими словами, поскольку соединения по настоящему изобретению понижают апоптотический порог всех клеток, которые экспрессируют ΙΑΡ, увеличивается доля клеток, которые успешно выполняют программу апоптоз в ответ на апоптоз-индуцирующую активность противораковых лекарственных препаратов/облучения. С другой стороны, соединения по настоящему изобретению можно применять для назначения более низкой, и поэтому менее токсичной и более переносимой, дозы противоракового агента и/или облучения, чтобы продуцировать тот же ответ/клиническую пользу в опухоли, как и обычная доза одного только противоракового агента/облучения. Поскольку дозы для всех одобренных противораковых лекарственных препаратов и радиационных методов лечения известны, в настоящем изобретении рассмотрены различные сочетания их с соединениями по настоящему изобретению. Кроме того, поскольку соединения по настоящему изобретению, по меньшей мере частично, действуют путем ингибирования ΙΑΡ, может оказаться, что воздействие терапевтически эффективного количества соединений на раковые клетки и поддерживающие их клетки по времени совпадает с попытками клеток выполнить программу апоптоза в ответ на противораковый агент или радиационную терапию. Таким образом, в некоторых примерах осуществления изобретения, назначение соединения по настоящему изобретения в связи с определенными временными отношениями, обеспечивает особенно эффективные способы лечения.

Настоящее изобретение относится к 8шае миметикам, которые полезны для ингибирования активности белков ΙΑΡ и - среди прочего - для увеличения чувствительности клеток к индукторам апоптоза. В одном специфическом примере осуществления изобретения 8шае миметики являются соединениями формулы I

где Α₁ и А₂ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С_1-18 алкила, необязательно замещенного гидроксильной группой;

V представляет собой Ν;

представляет собой СН;

X представляет собой С_1-3алкил, необязательно замещенный индолилом;

Υ представляет собой NΗСΟ;

Ζ представляет собой (СК¹К²)_Г;

- 5 017797

Ό представляет собой (СК¹К²)п-ЫК⁵-(СК³К⁴)т;

представляет собой незамещенный С_1-4алкиленил;

Т выбирают из группы, состоящей из С=О и СК¹К²; и выбирают из группы, состоящей из ΝΚ¹Κ² и Ы(К¹)СОК⁷;

η и т независимо выбирают из 1, 2 или 3;

г равно 0;

каждую из групп К¹, К², К³ и К⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода; С_1-18 алкила, необязательно замещенного:

а) одним или двумя фенилами, необязательно замещенными фтором, трифторметилом или фенилом;

б) нафтилом или

в) пиридилом, циклогексилом, инданилом, тетранилом и СОК⁷;

К⁵ представляет собой СОК⁷;

К⁷ выбирают из группы, состоящей из С_1-18 алкила, необязательно замещенного:

а) фенилом, необязательно замещенным одним или двумя атомами фтора;

б) циклопентилом, необязательно замещенным гидроксильной группой;

в) оксопиперизинилом;

г) гидроксильной группой и -СО₂Н;

д) имидазолилом или

е) тетрагидрофуранилом; и циклопентила, необязательно замещенного гидроксильной группой; или его фармацевтически приемлемая соль.

В другом конкретном примере осуществления изобретения 8тас миметики представляют собой соединения формулы VI

где А₁, А₂, К⁵, Т и и имеют то же значение, как описано выше для формулы I;

или их фармацевтически приемлемую соль.

Настоящее изобретение относится к соединениям, представленным формулами Ι-Х, которые являются ингибиторами белков ΙΑΡ. Изобретение относится к применению соединений по изобретению, которые индуцируют апоптоз в клетках и ингибируют ангиогенез. Изобретение также относится к применению соединений по изобретению для сенсибилизации клеток к индукторам апоптоза. Данные соединения полезны для лечения, улучшения состояния или предотвращения расстройств, чувствительных к индукции апоптотической гибели клетки, например расстройств, характеризующихся дисрегуляцией апоптоза, включая гиперпролиферативные болезни, такие как рак. В определенных примерах осуществления изобретения данные соединения могут применяться для лечения, улучшения состояния или предотвращения рака, который характеризуется резистентностью к методам лечения (например, видов рака, которые являются химиорезистентными, устойчивыми к облучению, гормонам и т.п.). В других примерах осуществления изобретения данные соединения можно применять для лечения гиперпролиферативных заболеваний, характеризующихся сверхэкспрессией ΙΑΡ. В других примерах осуществления изобретения, данные соединения можно применять в качестве способа предотвращения или ингибирования ангиогенеза у животных, нуждающихся в этом.

Настоящее изобретение представляет фармацевтические композиции, содержащие соединение формул Ι-Х в терапевтически эффективном количестве, чтобы вызвать апоптоз в клетках или сенсибилизировать клетки к индукторам апоптоза.

Изобретение дополнительно представляет наборы, включающие соединение формулы Ι и инструкции по введению соединения животному. Наборы могут необязательно содержать другие терапевтические вещества, например противораковые агенты или апоптоз-модулирующие агенты.

Настоящее изобретение также обеспечивает способ получения соединения формулы XI

V представляет собой Ν;

представляет собой СН;

- 6 017797

X представляет собой С1_₃ алкил, необязательно замещенный индолилом;

Υ представляет собой ЫНСО;

Ζ представляет собой (СК¹К²)_Г;

Т выбирают из группы, состоящей из С=О и СК¹К²;

и выбирают из группы, состоящей из ΝΚ¹Κ² и Ы(К¹)СОК⁷;

т равно 1 или 2;

г равно 0;

каждую из групп К¹, К², К³ и К⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода;

С_1-18 алкила, необязательно замещенного:

а) одним или двумя фенилами, необязательно замещенными фтором, трифторметилом или фени лом;

б) нафтилом или

в) оксопиперизинилом;

г) гидроксильной группой и -СО₂Н;

д) имидазолилом или

е) тетрагидрофуранилом; и циклопентила, необязательно замещенного гидроксильной группой; включающий конденсацию соединения формулы XII

где А₁, А₂, V, Ш, X, Υ, Ζ, Т, и и т имеют то же значение, как описано выше для формулы XI, с К⁷СО-Ь, где

в) оксопиперизинилом;

г) гидроксильной группой и -СО2Н;

д) имидазолилом или

е) тетрагидрофуранилом; и циклопентила, необязательно замещенного гидроксильной группой; и Ь представляет собой уходящую группу, с образованием соединения формулы XI.

Настоящее изобретение также обеспечивает способ получения соединения формулы XIX

где т равно 1 или 2, а Р¹ представляет собой защитную группу для амина, включающий:

а) конденсацию соединения формулы XX

с соединением формулы XXI

где Р¹ и Р² представляют собой защитные группы для амина, и Р¹ не равно Р², с получением соединения формулы XXII

б) превращение алкена формулы XXII в альдегид, с получением соединения формулы XXIII;

- 7 017797

в) удаление Р² из соединения формулы XXIII, с получением соединения формулы XXIV;

и г) восстановление С=Х двойной связи в соединении формулы XXIV, с получением соединения формулы XIX.

Краткое описание графических материалов

На фиг. 1 представлена диаграмма, иллюстрирующая противоопухолевую активность соединения 8М-406 (АТ-406) в модели ксенотрансплантата рака молочной железы.

На фиг. 2 представлена диаграмма, иллюстрирующая противоопухолевую активность соединения 8М-406 (АТ-406) и таксотера в модели ксенотрансплантата рака простаты.

На фиг. 3 представлена диаграмма, иллюстрирующая противоопухолевую активность соединения 8М-406 (АТ-406) и Тайкерб® в модели ксенотрансплантата рака простаты.

На фиг. 4 представлена диаграмма, иллюстрирующая противоопухолевую активность соединения 8М-406 (АТ-406) и таксотера в модели ксенотрансплантата рака молочной железы.

На фиг. 5 представлена диаграмма, иллюстрирующая противоопухолевую активность соединения 8М-406 (АТ-406) и Тайкерб® в модели ксенотрансплантата рака молочной железы.

На фиг. 6 представлена диаграмма, иллюстрирующая противоопухолевую активность соединения 8М-406 (АТ-406) и гемцитабина в модели ксенотрансплантата рака поджелудочной железы.

На фиг. 7 представлена диаграмма, иллюстрирующая исследования по оптимизации схемы применения соединения 8М-406 (АТ-406) в модели ксенотрансплантата рака молочной железы.

На фиг. 8 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением 8М-406 в линии клеток рака молочной железы МОА-МВ-231, в клеточных линиях рака яичника 8Κ-θν3 и ΟVСАК-4 и в линии клеток меланомы 8К-МеВ2.

На фиг. 9 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением 8М-406 в клеточных линиях лейкемии НЬ-60 и 8К.

На фиг. 10 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением 8М-406 в клеточных линиях рака молочной железы человека ВТ-549, МОА-МВ-415, 8иМ-159, М1)АМВ-468, МОА-МВ-453 и 2ЬМР.

На фиг. 11 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением ΤΝΡα в сочетании с соединением 8М-406 в линии клеток рака молочной железы человека МОА-МВ-436.

На фиг. 12 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением ΤΝΡα в сочетании с соединением 8М-406 в линии клеток рака молочной железы человека 8иМ-159.

На фиг. 13 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением ТРАДВ в сочетании с соединением 8М-406 в линии клеток рака поджелудочной железы человека Рапс-1.

На фиг. 14 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением ТРАДВ в сочетании с соединением 8М-406 в линии клеток рака молочной железы человека МОА-МВ231(2ЬМР).

На фиг. 15 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток гемцитабином в сочетании с соединением 8М-406 в линии клеток рака поджелудочной железы человека Рапс-1.

На фиг. 16 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста митоксантроном в сочетании с соединением 8М-406 в линии клеток рака поджелудочной железы человека Рапс-1.

На фиг. 17 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением 8М-406 в сочетании с росковитином (Коз) в линии клеток рака простаты человека РС3.

На фиг. 18 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток таксотером (ТХТ) в сочетании с соединением 8М-406 в линии клеток рака молочной железы человека МОА-МВ-453.

На фиг. 19 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста клеток соединением VР-16 в сочетании с соединением 8М-406 в линии клеток рака поджелудочной железы человека Рапс-1.

На фиг. 20 представлена диаграмма, иллюстрирующая эффект 8тас миметиков на белок йАР-1 в раковых клетках МОА-МВ-231.

На фиг. 21 представлена диаграмма, иллюстрирующая эффект 8тас миметиков на белки сРАР-1/2 в раковых клетках 8Κ-θν-3.

На фиг. 22 представлена диаграмма, иллюстрирующая индукцию апоптоза соединением 8М-406 в клетках рака молочной железы МОА-МВ-231.

На фиг. 23 представлена диаграмма, иллюстрирующая индукцию апоптоза соединением 8М-406 в

- 8 017797 клетках рака яичников 8К-ОУ-3.

На фиг. 24 представлена диаграмма, иллюстрирующая индукцию апоптоза соединением 8М-406 в клетках рака поджелудочной железы Рапс-1.

На фиг. 25 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста опухоли соединением 8М-406 в модели ксенотрансплантата рака молочной железы человека МОА-МВ-231 в мышах, пораженных тяжёлым комбинированным иммунодефицитом (8СШ).

На фиг. 26 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста опухоли соединением 8М-406 в модели ксенотрансплантата рака простаты человека РС-3 в голой мыши.

На фиг. 27 представлена диаграмма, иллюстрирующая ингибирование роста опухоли соединением 8М-406 в модели ксенотрансплантата рака молочной железы человека 2ЕМР в голой мыши.

На фиг. 28 представлена серия диаграмм, иллюстрирующих кривые конкурирующего связывания соединений 8М-406 и 8М-428 с доменами ΒΙΒ3 в четырех представителях белков ΙΑΡ ((Α) ΧΙΑΡ; (Б) с1АР1; (В) с1АР2; (Г) МЬ-ΙΑΡ), что определено с использованием анализа связывания на основе флуоресцентной поляризации.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к конформационно ограниченным соединениям, представленными формулами 1-Х, которые являются 8шас миметиками и функционируют как ингибиторы 1АР. Эти соединения увеличивают чувствительность клеток к индукторам апоптоза и, в некоторых случаях, непосредственно вызывают апоптоз, ингибируя 1АР. Следовательно, изобретение относится к способам увеличения чувствительности клеток к индукторам апоптоза и к способам индуцирования апоптоза в клетках, включая контакт клеток только с соединениями формул 1-Х или в сочетании с индуктором апоптоза. Кроме того, данное изобретение относится к способам лечения, улучшения состояния или предотвращения расстройств у животного, которые являются восприимчивыми к индукции апоптоза, включая назначение животному соединения формул 1-Х и индуктора апоптоза. Такие расстройства включают расстройства, характеризующиеся дисрегуляцией апоптоза, и расстройства, характеризующиеся сверхэкспрессией 1АР. Кроме того, данное изобретение относится к способам предотвращения или ингибирования ангиогенеза у животного, нуждающегося в этом, включающим введение животному соединения формул 1-Х.

Термин белки 1АР, применяемый здесь, относится к любому известному представителю семейства 1АР (ингибитор белков апоптоза), включающего, но не ограниченного ими, Х1АР, с1АР-1, с1АР-2, МЬ1АР, Н1АР, Т81АР, К1АР, ЫА1Р, сурвивин, ливин, 1БР-2. аполлон и ВВИСЕ.

Термин сверхэкспрессия 1АР, применяемый здесь, относится к повышенному уровню (например, аберрантному уровню) иРНК, кодирующих белок(белки) 1АР, и/или к повышенным уровням белка(белков) 1АР в клетках по сравнению с подобными соответствующими непатологическими клетками, экспрессирующими основные уровни иРНК, кодирующих белки 1АР или имеющих основные уровни белков 1АР. Способы определения уровней иРНК, кодирующих белки 1АР, или уровней белков 1АР в клетке включают, но не ограничиваются ими, Вестерн-блоттинг с использованием антител белков 1АР, иммуногистохимические методы, а также методы амплификации нуклеиновой кислоты или прямого обнаружения РНК. Столь же важным, как и определение абсолютного уровня белков 1АР в клетках должно быть определение того, что они сверхэкспрессируют белки 1АР, а также уровень белков 1АР по отношению к другим проапоптотическим сигнальным молекулам (например, проапоптотическим белкам семейства Вс1-2) в таких клетках. Когда баланс этих двух параметров таков, что, если бы это не относилось к уровням белков 1АР, проапоптотических, сигнальных молекул было бы достаточно, чтобы заставить клетки выполнить программу апоптоза и погибнуть, то указанные клетки будут зависеть от белков 1АР для своего выживания. В таких клетках воздействие ингибирующих эффективных количеств ингибитора белка 1АР будет достаточно, чтобы заставить клетки выполнить программу апоптоза и погибнуть. Таким образом, термин сверхэкспрессия белка 1АР также относится к клеткам, которые из-за относительных уровней проапоптотических сигналов и антиапоптотических сигналов подвергаются апоптозу в ответ на ингибирующие эффективные количества соединений, которые ингибируют функцию белков 1АР.

Термины противораковый агент и противораковый препарат, используемые здесь, относятся к любым терапевтическим агентам (например, химиотерапевтическим соединениям и/или молекулярным терапевтическим соединениям), радиационным методам лечения или хирургическим вмешательствам, используемым при лечении гиперпролиферативных болезней, таких как рак (например, у млекопитающих).

Термин пролекарство, применяемый здесь, относится к фармакологически неактивному производному молекулы исходного лекарства, которое требует биотрансформации (например, самопроизвольной или ферментативной) в целевой физиологической системе для высвобождения или преобразования (например, ферментативного, физиологического, механического, электромагнитного) пролекарства в активный лекарственный препарат. Пролекарства разрабатывают для решения проблем, связанных со стабильностью, токсичностью, неспецифичностью или ограниченным бионакоплением. Типичные пролекарства включают непосредственно молекулу активного препарата и химическую маскирующую группу (например, группу, которая обратимо подавляет активность препарата). Некоторые предпочтительные

- 9 017797 пролекарства представляют собой вариации или производные соединений, имеющих группы, которые легко отщепляются в метаболических условиях. Типичные пролекарства становятся фармацевтически активными ίη νίνο или ίη νίίτο, где они подвергаются сольволизу в физиологических условиях или подвергаются ферментативному расщеплению или другому биохимическому преобразованию (например, фосфорилированию, гидрированию, дегидрированию, гликозилированию). Пролекарства часто предоставляют преимущества, заключающиеся в растворимости, тканевой совместимости или отсроченном высвобождении в организме млекопитающих. (См., например, публикацию Випйдагй, Оек1дп οί Ртойтидк, рр. 7-9, 21-24, Е15СУ1СГ. ЛтЫсгйаш (1985); а также публикацию Зйусгшап. Т11С Отдашс СксилЫгу οί Эгид Эек1дп апй Эгид Άοΐίοη, рр. 352-401, Асайетк Ргекк, 8ап Όκ§ο, СА (1992)). Обычные пролекарства включают производные кислот, например, сложные эфиры, получаемые взаимодействием исходных кислот с подходящим спиртом (например, низшим алканолом), амиды, получаемые взаимодействием исходной кислоты с амином или основными группами, которые реагируют с образованием ацилированного производного основания (например, низшего алкиламида).

Термин фармацевтически приемлемая соль, применяемый здесь, относится к любой соли (например, получаемой взаимодействием с кислотой или основанием) соединения по настоящему изобретению, которое физиологически допустимо в целевом животном (например, млекопитающем). Соли соединений по настоящему изобретению можно получать из неорганических или органических кислот и оснований. Примеры кислот включают, но не ограничиваются ими, хлористоводородную, бромистоводородную, серную, азотную, хлорную, фумаровую, малеиновую, фосфорную, гликолевую, молочную, салициловую, янтарную, п-толуолсульфо-, винную, уксусную, лимонную, метансульфо-, этансульфо-, муравьиную, бензойную, малоновую, сульфоновую, нафталин-2-сульфо-, бензолсульфо- и т.п. кислоту. Другие кислоты, например щавелевая кислота, хотя сами и не являются фармацевтически приемлемыми, могут применяться для получения солей, полезных в качестве полупродуктов при получении соединений по изобретению и их фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты.

Примеры оснований включают, но не ограничиваются ими, гидроксиды щелочного металла (например, натрия), гидроксиды щелочно-земельного металла (например, магния), аммиак и соединения формулы Ν^₄ ⁺, где представляет собой С_1-4 алкильную группу и т.п.

Примеры солей включают, но не ограничиваются ими: ацетат, адипинат, альгинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, цитрат, камфорат, камфорсульфонат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, глюкогептаноат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, хлорид, бромид, йодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, мезилат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, оксалат, пальмоат, пектинат, персульфат, фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, тиоцианат, тозилат, ундеканоат и т.п. Другие примеры солей включают анионы соединений по настоящему изобретению, в сочетании с подходящим катионом, например, Νο / ΝΗ₄ ⁺ и Ν\ν₄' (где представляет собой С_1-4 алкильную группу) и т.п. Соли соединений по настоящему изобретению рассматриваются как фармацевтически приемлемые для терапевтического применения. Однако соли кислот и оснований, которые не являются фармацевтически приемлемыми, могут также найти применение, например, при получении или очистке фармацевтически приемлемого соединения.

Термин терапевтически эффективное количество, применяемый здесь, относится к такому количеству терапевтического агента, которого достаточно для того, чтобы привести к улучшению одного или более чем одного симптома расстройства или предотвратить прогрессирование расстройства или вызвать ослабление симптомов расстройства. Например, относительно лечения рака, терапевтически эффективное количество предпочтительно относится к количеству терапевтического агента, которое уменьшает скорость роста опухоли, уменьшает массу опухоли, сокращает количество метастазов, увеличивает время до прогрессирования опухоли или увеличивает продолжительность выживания по меньшей мере на 5%, предпочтительно по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 15%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 25%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 35%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 100%.

Термины сенсибилизировать и сенсибилизирующий, используемые здесь, относятся к тому, как путем назначения первого агента (например, соединения формулы II), сделать животное или клетку животного более восприимчивыми или более чувствительными к биологическим эффектам (например, промотированию или замедлению аспекта клеточной функции, включая, но не ограничиваясь ими, деление клетки, рост клетки, пролиферацию, инвазию, ангиогенез или апоптоз) второго агента. Сенсибилизирующий эффект первого агента на целевую клетку может быть измерен как различие в предполагаемом биологическом эффекте (например, промотирование или замедление аспекта клеточной функции, включая, но не ограничиваясь ими, рост клетки, пролиферацию, инвазию, ангиогенез или апоптоз), наблюдаемом при назначении второго агента с назначением и без назначения первого агента. Ответ сенсибилизированной клетки можно увеличить по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей

- 10 017797 мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 100%, по меньшей мере на 150%, по меньшей мере на 200%, по меньшей мере на 250%, по меньшей мере на 300%, по меньшей мере на 350%, по меньшей мере на 400%, по меньшей мере на 450% или по меньшей мере на 500% относительно ответа в отсутствии первого агента.

Термин дисрегуляция апоптоза, применяемый здесь, относится к любому отклонению в способности (например, предрасположенности) клетки подвергаться гибели через апоптоз. Дисрегуляция апоптоза связана или вызвана множеством условий, включающих, например, аутоиммунные расстройства (например, системную красную волчанку, ревматоидный артрит, реакцию трансплантат против хозяина, злокачественную миастению или синдром Шёгрена), хронические воспалительные состояния (например, псориаз, астму или болезнь Крона), гиперпролиферативные расстройства (например, опухоли, лимфомы В клетки или лимфомы Т клетки), вирусные инфекции (например, герпес, папиллому или ВИЧ), и другие состояния, такие как остеоартрит и атеросклероз. Следует отметить, что, когда дисрегуляция индуцирована или связана с вирусной инфекцией, вирусная инфекция может обнаруживаться или не обнаруживаться в то время, когда имеет место или наблюдается дисрегуляция. Таким образом, индуцированная вирусами дисрегуляция может иметь место даже после исчезновения признаков вирусной инфекции.

Термин ангиогенез, применяемый здесь, означает образование новых кровеносных сосудов в ткани или органе. Термин антиангиогенез, применяемый здесь, относится к предотвращению или уменьшению роста новых кровеносных сосудов. Примеры болезней или расстройств, связанных с ангиогенезом, которые можно лечить с помощью соединений по изобретению, включают дегенерацию жёлтого пятна, ревматоидный артрит, псориаз, диабетическую ретинопатию, ретинопатию недоношенных, отторжение роговичного имплантата, неоваскулярную глаукому, ретролентальную фиброплазию, покраснение радужки, синдром Ослера-Веббера, миокардиальный ангиогенез, неоваскуляризацию бляшки, телангиэктазию, кровоизлияния в суставы при гемофилии, ангиофиброму, грануляцию раны, кишечные спайки, атеросклероз, склеродерму и гипертрофические рубцы.

Термин гиперпролиферативная болезнь, применяемый здесь, относится к любому состоянию, при котором локализованная популяция пролиферирующих клеток в животном не управляется обычными ограничениями нормального роста. Примеры гиперпролиферативных расстройств включают, но не ограничиваются ими, виды рака (опухоли, новообразования, лимфомы и т.п.) и аутоиммунные расстройства. Г оворят, что новообразование является доброкачественным, если оно не подвергается инвазии или метастазам, и злокачественным, если оно подвергается любому из них. Термин метастатическая клетка означает, что клетка может распространяться и разрушать соседние структуры тела. Гиперплазия представляет собой форму пролиферации клетки, включающую увеличение числа клеток в ткани или органе без существенного изменения в структуре или функции. Метаплазия представляет собой форму контролируемого роста клетки, при котором один тип полностью дифференцированной клетки заменяется другим типом дифференцированной клетки. В другом примере осуществления изобретения гиперпролиферативная болезнь представляет собой ревматоидный артрит, воспалительное кишечное заболевание, остеоартрит, лейомиомы, аденомы, липомы, гемангиомы, фибромы, окклюзию сосуда, рестеноз, атеросклероз, повреждения, предшествующие новообразованию (например, аденоматозная гиперплазия и простатическая интраэпителиальная неоплазия), карцинома ίη δίΐυ. волосистая лейкоплакия языка или псориаз.

Патологический рост активированных лимфоидных клеток часто приводит к аутоиммунному расстройству или хроническому воспалительному состоянию. Применяемый здесь термин аутоиммунное расстройство относится к любому состоянию, при котором организм продуцирует антитела или иммунные клетки, которые распознают молекулы, клетки или ткани собственного организма. Неограничивающие примеры аутоиммунных расстройств включают аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунный гепатит, болезнь Бергера или 1дА нефропатию, нетропическую энтеропатию, хронический синдром усталости, болезнь Крона, дерматомиозит, фибромиалгию, реакцию трансплантат против хозяина, болезнь Грейва, тиреоидит Хашимото, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, красный плоский лишай, рассеянный склероз, злокачественную миастению, псориаз, ревматизм, ревматоидный артрит, склеродерму, синдром Шёгрена, системную красную волчанку, диабет 1 типа, язвенный колит, витилиго и т.п.

Термин новообразование, применяемый здесь, относится к любому аномальному росту клеток, являющемуся доброкачественным (нераковым) или злокачественным (раковым).

Термин противоопухолевый агент, применяемый здесь, относится к любому соединению, которое замедляет пролиферацию, рост или распространение целевого (например, злокачественного) новообразования.

Термины предотвращать, предотвращающий и предотвращение, применяемые здесь, относятся к уменьшению возникновения патологических клеток (например, гиперпролиферативных или опухолевых клеток) в животном. Предотвращение может быть полным, например полное отсутствие патологических клеток в субъекте. Предотвращение также может быть частичным, так что возникновение патологических клеток в субъекте является меньшим, чем возникновение, которое произошло бы без настоя

- 11 017797 щего изобретения.

Термин апоптоз-модулирующие вещества, применяемый здесь, относится к веществам, которые участвуют в модуляции (например, ингибировании, уменьшении, увеличении, промотировании) апоптоза. В одном примере осуществления изобретения апоптоз-модулирующий агент представляет собой индуктор апоптоза. Термин индуктор апоптоза, применяемый здесь, относится к агенту, который индуцирует апоптоз в клетках (например, раковых клетках), делая такие клетки более восприимчивыми к выполнению программы апоптоза. В одном примере осуществления изобретения агент, который вызывает апоптоз, представляет собой противораковый агент. Примеры апоптоз-модулирующих веществ включают белки, которые включают домен смерти, такие как, не ограничиваясь ими, Ра§/СИ95, ΤΚΆΜΡ, ΤΝΤ К1, ИК1, ΌΚ2, ИК3, ИК4, ИК5, ИК6, ΤΆΌΌ и К1Р. Другие примеры апоптоз-модулирующих веществ включают, но не ограничиваются ими, ΤΝΡα, лиганд Та§, антитела к Ра§/СИ95 и другим рецепторам семейства ΤΝΤ, ТКА1Ь (также известный как лиганд Аро2 или Аро2Т/ТКА1Т), агонисты (например, моноклональные или поликлональные агонистические антитела) ΤΚΑΙΤ-Κ1 или ΤΚΑΙΤ-Κ2, Вс1-2, р53, ВАХ, ΒΑΌ, Ак1, САБ, ΡΙ3 киназу, РР1 и белки каспазы. Модулирующие вещества широко включают агонисты и антагонисты рецепторов семейства ΤΝΡ и лиганды семейства ΤΝΡ. Апоптоз-модулирующие вещества могут быть растворимыми или связаны с мембраной (например, лиганд или рецептор). Предпочтительные апоптоз-модулирующие вещества являются индукторами апоптоза, например, ΤΝΡ или ΤΝΡсвязанный лиганд, в частности лиганд ΤΚΛΜΡ, лиганд Ра§/СИ95, лиганд ΤΝΡΚ-1 или ΤΚΛΙΡ.

Ингибиторы 1АР по настоящему изобретению представляют собой 8шас миметики общей формулы Ι

где А₁ и А₂ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С_1-18 алкила, необязательно замещенного гидроксильной группой;

V представляет собой Ν; представляет собой СН;

X представляет собой С_1-3 алкил, необязательно замещенный индолилом;

Υ представляет собой КНСО;

Ζ представляет собой (СК¹К²)_Г;

Ό представляет собой (СК^Т^К^С^К⁴)^ представляет собой незамещенный С_1-4 алкиленил;

и выбирают из группы, состоящей из ΝΚ¹Κ² и Ν(Κ^ΟΚ⁷;

п и т независимо выбирают из 1, 2 или 3;

г равно 0;

б) нафтилом или

К⁵ представляет собой СОК⁷;

в) оксопиперизинилом;

г) гидроксильной группой и -СО₂Н;

д) имидазолилом или

е) тетрагидрофуранилом; и циклопентила, необязательно замещенного гидроксильной группой;

или его фармацевтически приемлемая соль.

В одном примере осуществления изобретения необязательные заместители не включают карбоновую кислоту, циклоалкил, необязательно замещенный одним или более алкилом, галогеном, гидроксильной или галогеналкильной группами, или арил, необязательно замещенный арильной группой, и необязательно замещенная гетероциклическая группа не включает оксопиперизинил.

В другом примере осуществления изобретения п и т независимо выбирают из 1-3 таким образом, чтобы п+т равнялось 3 или 4.

В другом конкретном примере осуществления изобретения 8тас миметики представляют собой со- 12 017797 единения формулы VI

где Αχ, А₂, К⁵, Т и и имеют значение как описано выше для формулы I; или их фармацевтически приемлемую соль.

В одном примере осуществления изобретения Т представляет собой С=О, и представляет собой ΝΚ^χΚ² и К⁵ представляет собой СОК⁷. В другом примере осуществления изобретения А1 представляет собой необязательно замещенный гидроксильной группой С1-18 алкил, а А2 представляет собой водород. В другом примере осуществления изобретения К¹ представляет собой -СНРН2. В другом примере осуществления изобретения К⁷ представляет собой С_1-18 алкил, необязательно замещенный: а) фенилом, необязательно замещенным одним или двумя атомами фтора; б) циклопентилом, необязательно замещенным гидроксильной группой; в) оксопиперизинилом; г) гидроксильной группой и -СО₂Н; д) имидазолилом или е) тетрагидрофуранилом. В другом примере осуществления изобретения К⁷ представляет собой -СН2СН(СНз)2.

Применимые алкильные группы включают С_1-18 алкильные группы с прямой или разветвленной цепью, в частности метильную, этильную, пропильную, изопропильную, трет-бутильную, втор-бутильную, 3-пентильную и 3-гексильную группы. В одном примере осуществления изобретения алкил представляет собой С_1-6 алкильную группу.

Термин алкиленил относится к двухвалентному алкильному радикалу, содержащему 1, 2, 3 или 4 соединенных друг с другом метиленовые группы, примером чего является -(СН₂)₄-.

Применимые алкенильные группы включают С_2-18 алкенильные группы с прямой или разветвленной цепью, в частности, этенил, пропенил, изопропенил, бутенил, изобутенил и гексенил.

Применимые алкинильные группы представляют собой С_2-18 алкинильные группы, в частности этинильную, пропинильную, бутинильную и 2-бутинильную группы.

Применимые циклоалкильные группы включают С_3-10циклоалкильные группы. Типичные циклоалкильные группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, адамантил и норборнил.

Применимые арильные группы включают С_6-14 арил, в частности фенильную (сокращенное обозначение РН), нафтильную, фенантренильную, антраценильную, инденильную, азуленильную, бифенильную, бифениленильную и флуоренильную группы.

Применимые гетероарильные группы включают С_2-14 гетероарильные группы, в частности тиенил, бензо[Ь]тиенил, нафто[2,3-Ь]тиенил, тиантренил, фурил, пиранил, изобензофуранил, хроменил, ксантенил, феноксантенил, 2Н-пирролил, пирролил, имидазолил, триазолил, пиразолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, индолизинил, изоиндолил, 3Н-индолил, индолил, индазолил, пуринил, 4Нхинолизинил, изохинолил, хинолил, фталзинил, нафтиридинил, хинозалинил, циннолинил, птеридинил, карбазолил, β-карболинил, фенантридинил, акридинил, перимидинил, фенантролинил, феназинил, изотиазолил, фенотиазинил, изоксазолил, фуразанил, феноксазинил, 1,4-дигидрохиноксалин-2,3-дион, 7аминоизокумарин, пиридо[1,2-а]пиримидин-4-он, 1,2-бензоизоксазол-3-ил, бензимидазолил, 2-оксиндолил и 2-оксобензимидазолил. Если гетероарильная группа содержит атом азота в кольце, такой атом азота может быть в форме Ν-оксида, например пиридил^-оксида, пиразинил^-оксида, пиримидинил-Νоксида и т.п.

Необязательные заместители включают один или более алкил; галоген; гидроксил; карбоновую кислоту (например, -СО₂Н и ее соли); галогеналкил; циклоалкил, необязательно замещенный одним или более алкилом, галогеном, гидроксильной или галогеналкильной группами; арил, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеном, галогеналкилом, арильной или гетероарильной группами; арилокси, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеналкильной или гетероарильной группами; аралкил; гетероарил, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеналкильной и арильной группами; гетероарилокси, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеналкильной и арильной группами; алкокси; алкилтио; арилтио; амидо; амино; ацилокси; арилацилокси, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеналкильной и арильной группами; дифенилфосфинилокси, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеном или галогеналкильной группами; гетероцикло, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеналкильной и арильной группами; гетероциклоалкокси, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеналкильной и арильной группами; частично ненасыщенный гетероциклоалкил, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеналкильной и арильной группами; или частично ненасыщенный гетероциклоалкилокси, необязательно замещенный одним или более низшим алкилом, галогеналкильной и арильной группами.

Применимые насыщенные или частично насыщенные карбоциклические группы представляют со

- 13 017797 бой циклоалкильные группы как определено выше, а также циклоалкенильные группы, например циклопентенил, циклогептенил и циклооктенил. Карбоциклические группы также включают группы, имеющие конденсированные, необязательно замещенные арильные группы, например, тетралин.

Применимые галогенгруппы или группы галогена включают фтор, хлор, бром и йод.

Применимые аралкильные и гетероаралкильные группы включают любую из вышеупомянутых С_!1₈ алкильных групп, замещенных одним или более из вышеупомянутых необязательно замещенных С_6-14арильных групп или гетероарильных групп. В одном примере осуществления изобретения аралкил замещен двумя необязательно замещенными С_6-14 арильными группами. В другом примере осуществления изобретения аралкил замещен одной необязательно замещенной С_6-14 арильной группой. В одном примере осуществления изобретения необязательно замещенная С_6-14 арильная группа представляет собой необязательно замещенную фенильную группу. Применимые аралкильные группы включают бензил (сокращенное обозначение Вп), фенэтил и нафтилметил.

Применимые галогеналкильные группы включают С_1-10 алкильные группы, замещенные одним или более атомом фтора, хлора, брома или йода, например, фторметильную, дифторметильную, трифторметильную, пентафторэтильную, 1,1-дифторэтильную, хлорметильную, хлорфторметильную и трихлорметильную группы.

Применимые алкокси группы включают кислород, замещенный одной из С_1-18 алкильных групп, упомянутых выше.

Применимые алкилтио группы включают серу, замещенную одной из С_1-18 алкильных групп, упомянутых выше. Примеры таких алкилтио групп также включают сульфоксиды и сульфоны.

Применимые амидогруппы включают карбониламидо, а также любой С_1-6 ацил (алканоил), присоединенный к азоту аминогруппы, например, ацетамидо, пропионамидо, бутаноиламидо, пентаноиламидо, гексаноиламидо, а также арил-замещенные С_2-6 замещенные ацильные группы.

Применимые ацилокси группы представляют собой любой С_1-6 ацил (алканоил), присоединенный к окси(-О-)группе, например формилокси, ацетокси, пропионоилокси, бутаноилокси, пентаноилокси, гексаноилокси и т.п.

Применимые арилацилокси группы включают любую из вышеупомянутых арильных групп, замещенных любой из вышеупомянутых ацилокси групп, например 2,6-дихлорбензоилокси, 2,6-дифторбензоилокси и 2,6-ди-(трифторметил)бензоилокси группы.

Применимые аминогруппы включают -ΝΗ₂, -ΝΗΒ₁₁ и -ΝΚ₁₁Β₁₂, где Я₁₁ и В₁₂ представляют собой ^С1-18 алкильные или циклоалкильные группы, как определено выше.

Применимые насыщенные и частично насыщенные гетероциклические группы включают тетрагидрофуранильную, пиранильную, пиперидинильную, пиперизинильную, оксопиперизинильную, пирролидинильную, имидазолидинильную, имидазолинильную, индолинильную, изоиндолинильную, хинуклидинильную, морфолинильную, изохроманильную, хроманильную, пиразолидинильную, пиразолинильную, тетроноильную и тетрамоильную группы.

Применимые ариленовые группы включают С6-14 ариленовые, в частности фениленовую, нафтиленовую, фенантрениленовую, антрацениленовую, индениленовую, азулениленовую, бифениленовую, бифенилениленовую и флуорениленовую группы.

Применимые гетероариленовые группы включают дизамещенные гетероарильные группы, такие как 2,5-тиенилен, 2,4-имидазоилен и 1,3-триазолилен.

Термин уходящая группа, применяемый здесь, относится к атому или группе, которая отделяется от атома или группы, рассматриваемой как остающаяся или главная часть субстрата в указанной реакции. В реакциях сочетания амидов примеры уходящих групп включают -Р, -С1, -Вг, -ОН, -ОС₆Р₅, -О(СО)алкил и т.п. В одном примере осуществления изобретения уходящая группа представляет собой -С1. В другом примере осуществления изобретения уходящая группа представляет собой активириованную форму -ОН (например, ОВ1, О-ацилизомочевина). При образовании амида для активации карбоновой кислоты (т.е., уходящая группа представляет собой -ОН) может применяться активирующий агент (например, дициклогексилкарбодиимид (ОСС), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (Р-ЭС), бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфониум гексафторфосфат (РуВор)). Такие активирующие агенты хорошо известны специалистам в данной области органического синтеза. Для оптимизации параметров реакции (например, скорости, выхода, чистоты, рацемизации) также могут добавляться другие добавки, такие как Ν-гидроксибензотриазол (НОВ!) или Ν-гидроксисукцинимид (НО8и).

Термин выделенный, применяемый здесь к продукту химической реакции, означает, что желательный продукт или продукты отделяют от нежелательных компонентов реакционной смеси (например, растворителей, исходных материалов, химических реагентов) перед последующим химическим превращением. Желательный продукт(ы) химической реакции можно отделить от нежелательных компонентов с помощью разнообразных методов, например, фильтрации через целит или силикагель, с последующим удалением летучих (например, растворителя) компонентов.

Термин защитные группы для амина, применяемый здесь, относится к группе, которая блокирует (т.е. защищает) аминную группировку при проведении реакции по другой функциональной группе или частям молекулы. Специалисты в данной области знакомы с подбором, присоединением и снятием за

- 14 017797 щитных групп для амина и понимают, что в технике существует множество различных защитных групп, причем применимость той или иной защитной группы зависит, в частности, от планируемой схемы синтеза. Для справки доступны монографии по данному предмету, такие как Огеепе апб ШиК Рго1ес11уе Огоирз ίη Огдашс 8уп1Ее518, 3гб Еб., рр. 17-245 (1. ШИеу & 8опз, 1999), описание которой включено здесь в виде ссылки. Подходящие защитные группы для амина включают карбобензилокси (СЬ/), третбутилоксикарбонильную (ВОС), 9-флуоренилметилоксикарбонильную (ЕМОС) и бензильную (Вп) группы.

Термин примерно, применяемый здесь, включает упоминаемое значение ± 10%. Таким образом, примерно 10 означает от 9 до 11.

В данной спецификации выбирают такие группы и их необязательные заместители, чтобы обеспечить устойчивые фрагменты и соединения.

Определенные соединения по настоящему изобретению могут существовать в виде стереоизомеров, включая оптические изомеры. Изобретение включает все стереоизомеры, как чистые индивидуальные препараты стереоизомеров, так и обогащенные препараты каждого стереоизомера и рацемические смеси таких стереоизомеров, а также индивидуальные энантиомеры, которые могут быть выделены согласно методам, которые хорошо известны специалистам в данной области.

В определенных примерах осуществления изобретения соединение формулы I выбирают из группы, состоящей из

- 15 017797

- 16 017797

- 17 017797

- 18 017797

или их фармацевтически приемлемой соли.

В другом примере осуществления изобретения соединение формулы I представляет собой:

- 19 017797

или его фармацевтически приемлемую соль.

Настоящее изобретение также относится к способу получения соединения формулы XI

включающему конденсацию соединения формулы XII

с соединением К⁷СО-Ь, где Аь А2, V, Ш, X, Υ, Ζ, Т, и и К⁷ имеют значение, как описано выше для формулы I, т равно 1 или 2, и Ь представляет собой уходящую группу. В одном примере осуществления изобретения Ь представляет собой С1 или ОБЕ В одном примере осуществления изобретения Ζ представляет собой (СК¹К²)Г, и г равно 0. В другом примере осуществления изобретения т равно 1.

В одном примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят в инертном органическом растворителе, таком как ацетонитрил, бензол, хлороформ, 1,2-дихлорэтан, 1,2-диметоксиэтан, диметилформамид, диметилсульфоксид, диоксан, дихлорметан, №метил-2-пирролидинон или тетрагидрофуран. В другом примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят в тетрагидрофуране. В другом примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят в дихлорметане. В одном примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят при температуре примерно от -20 до примерно 25°С. В другом примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят примерно при 20°С. В одном примере осуществления изобретения реакция конденсации завершается в течение примерно от 1 ч до примерно 48 ч. В другом примере осуществления изобретения реакция конденсации завершается примерно за 12 ч.

В одном примере осуществления изобретения Ь представляет собой -ОН. В другом примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят в присутствии активирующего агента. В другом примере осуществления изобретения активирующий агент представляет собой дициклогексилкарбодиимид, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид или бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфониум гексафторфосфат. В другом примере осуществления изобретения активирующий агент представляет собой 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид. В другом примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят в присутствии активирующего агента и аддитива, что позволяет оптимизировать параметры реакции, такие как чистота и выход. В другом примере осуществления изобретения аддитив представляет собой Ν-гидроксибензотриазол.

Протекание реакции конденсации между соединением формулы XII и соединением К⁷СО-Ь можно контролировать с помощью аналитических методов, хорошо известных в технике, например ТСХ, ЖХ, ЖХ/МС, ВЭЖХ, ЯМР и т.д. Соединение формулы XI можно выделить и очистить с помощью любых способов, известных в технике, таких как колоночная хроматография с нормальной и обращенной фазой (например, колоночная хроматография на силикагеле или ВЭЖХ с обращенной фазой), кристаллизация, экстракция и т.д. Выделенный таким образом продукт может быть подвергнут дальнейшей очистке (например, перекристаллизации), пока не будет достигнут требуемый уровень чистоты. В одном примере осуществления изобретения соединение формулы XI имеет чистоту 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более.

Настоящее изобретение относится к получению соединения формулы XIX где т равно 1 или 2, и Р¹ представляет собой защитную группу для амина, включающему

а) конденсацию соединения формулы XX

- 20 017797

с соединением формулы ΧΧΙ

ΗΝ^ он

Ρ¹~ΝΗ О

XXI где Р¹ и Р² представляют собой защитные группы для амина, и Р¹ не равно Р², с получением соединения формулы ΧΧΙΙ

б) превращение алкена формулы ΧΧΙΙ в альдегид, с получением соединения формулы ΧΧΙΙΙ;

в) удаление защитной группы для амина Р² из соединения формулы ΧΧΙΙΙ, с получением соединения формулы ΧΧΙν;

и г) восстановление С=N двойной связи в соединении формулы ΧΧΙν, с получением соединения формулы ΧΙΧ.

В одном примере осуществления изобретения соединение формулы ΧΧΙ представляет собой Ν-α(трет-бутоксилкарбонил)^-в-(бензоксилкарбонил)-Е-диаминопропионовую кислоту (Βοс-^ар(Ζ)-ОН). В одном примере осуществления изобретения конденсацию соединения формулы ΧΧ с соединением формулы ΧΧΙ проводят в присутствии активирующего агента. В другом примере осуществления изобретения активирующий агент представляет собой дициклогексилкарбодиимид, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид или бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфониум гексафторфосфат. В другом примере осуществления изобретения активирующий агент представляет собой 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид. В другом примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят в присутствии активирующего агента и аддитива, что позволяет оптимизировать параметры реакции, такие как чистота и выход. В другом примере осуществления изобретения аддитив представляет собой Ν-гидроксибензотриазол.

Защитные группы для амина Р¹ и Р², которые пригодны для применения в способах по настоящему изобретению, представляют собой хорошо известные группы, но не ограничиваются ими, например: трифторацетил, трет-бутоксикарбонил фос), бензилоксикарбонил ^Βζ), аллилоксикарбонил (А11ос), тритил (трифенилметил), 9-флуоренилметиленоксикарбонил (Ртос) и т.п. Обычно такие группы можно селективно вводить и удалять с использованием мягких реакционных условий, что позволяет не затрагивать другие части рассматриваемых соединений. Эти защитные группы можно вводить или удалять на подходящей стадии с использованием методов, хорошо известных в технике. Химические свойства таких защитных групп, способы их введения и их удаления хорошо известны в технике и могут быть найдены, например, в публикации Сгеепе апй ΨιιΚ Рго1ес1гуе Сгоирз ίη Огдашс 8уп1йез1з, 3гй Ей., рр. 17-245 (Е ^11еу & 8опз, 1999), включенной здесь во всей полноте в виде ссылки.

В одном примере осуществления изобретения Р¹ и Р² выбирают из группы, включающий трифторацетил, трет-бутоксикарбонил ^ос), бензилоксикарбонил ^Βζ), аллилоксикарбонил (А11ос), тритил (трифенилметил) и 9-флуоренилметиленоксикарбонил (Ртос), так что Р¹ не равно Р². В одном примере осуществления изобретения Р¹ и Р² являются ортогональными защитными группами, т.е., защитную группу Р¹ можно селективно удалить в присутствии защитной группы Р², или защитную группу Р² можно селективно удалить в присутствии защитной группы Р¹. Стратегии ортогональных защитных групп хорошо известны в технике. В одном примере осуществления изобретения Р¹ представляет собой третбутоксикарбонил ^ос). В одном примере осуществления изобретения Р² представляет собой бензилок

- 21 017797 сикарбонил (СВ/). В одном примере осуществления изобретения Р¹ представляет собой третбутоксикарбонил (Вос) и Р² представляет собой бензилоксикарбонил (СВ/).

В одном примере осуществления изобретения конденсацию соединения формулы XX с соединением формулы XXI проводят в инертном органическом растворителе, таком как ацетонитрил, бензол, хлороформ, 1,2-дихлорэтан, 1,2-диметоксиэтан, диметилформамид, диметилсульфоксид, диоксан, дихлорметан, №метил-2-пирролидинон или тетрагидрофуран. В другом примере осуществления изобретения конденсацию соединения формулы XX с соединением формулы XXI проводят в тетрагидрофуране. В другом примере осуществления изобретения конденсацию соединения формулы XX с соединением формулы XXI проводят в дихлорметане.

В одном примере осуществления изобретения конденсацию соединения формулы XX с соединением формулы XX) проводят при температуре примерно от -20 до примерно 30°С. В другом примере осуществления изобретения реакцию конденсации проводят при температуре примерно от 20 до примерно 30°С. В одном примере осуществления изобретения реакция конденсации завершается в течение примерно от 1 до примерно 48 ч. В другом примере осуществления изобретения реакция конденсации завершается примерно за 12 ч.

В другом примере осуществления изобретения алкен формулы XXII обрабатывают озоном с получением альдегида формулы XXIII, и т равно 1. В одном примере осуществления изобретения реакцию с озоном проводят в инертном органическом растворителе, например хлороформе, 1,2-дихлорэтане, диоксане, дихлорметане или тетрагидрофуране. В другом примере осуществления изобретения реакцию с озоном проводят в дихлорметане. В одном примере осуществления изобретения реакцию с озоном проводят при температуре от примерно -100 до примерно 0°С. В другом примере осуществления изобретения реакцию с озоном проводят приблизительно при -78°С. В одном примере осуществления изобретения реакцию с озоном завершают, когда цвет реакционной массы становится голубым, указывая на избыток озона в растворе.

В одном примере осуществления изобретения алкен формулы XXII сначала превращают в первичный спирт, а спирт окисляют с получением альдегида формулы XXIII, и т равно 2. В одном примере осуществления изобретения алкен формулы XXII превращают в первичный спирт путем гидроборирования. В одном примере осуществления изобретения гидроборирование проводят в инертном органическом растворителе, например ацетонитриле, бензоле, 1,2-диметоксиэтане, диоксане или тетрагидрофуране. В другом примере осуществления изобретения гидроборирование проводят в тетрагидрофуране. В другом примере осуществления изобретения гидроборирование проводят с использованием 9борабицикло[3.3.1]нонана (9-ΒΒΝ). В одном примере осуществления изобретения первичный спирт окисляют в альдегид с помощью периодинана по Дессу-Мартину с получением альдегида формулы XXIII, и т равно 2. В одном примере осуществления изобретения окисление проводят в инертном органическом растворителе, например, дихлорметане. В одном примере осуществления изобретения окисление проводят при температуре от примерно -20 до примерно 25°С. В другом примере осуществления изобретения окисление проводят примерно при 20°С. В одном примере осуществления изобретения окисление завершается в течение примерно от 1 до примерно 48 ч. В другом примере осуществления изобретения окисление завершается примерно через 12 ч.

В одном примере осуществления изобретения Р² представляет собой СЬ/ группу. В другом примере осуществления изобретения Р² представляет собой СЬ/ группу и отщепляется путем гидрирования в присутствии палладия на угле. В одном примере осуществления изобретения гидрирование проводят в метаноле, этаноле, 1-бутаноле, 2-бутаноле, 3-бутаноле, трет-бутаноле, 1-пропаноле или 2-пропаноле. В другом примере осуществления изобретения гидрирование проводят в 2-пропаноле. В одном примере осуществления изобретения гидрирование проводят при температуре от примерно 0 до примерно 40°С. В другом примере осуществления изобретения гидрирование проводят при температуре от примерно 20 до примерно 30°С. В одном примере осуществления изобретения гидрирование завершается в течение от примерно 1 до примерно 24 ч. В другом примере осуществления изобретения гидрирование завершается примерно через 12 ч.

В одном примере осуществления изобретения соединение формулы XXIV выделяют перед восстановлением С=N двойной связи. В одном примере осуществления изобретения соединение формулы XXIV выделяют путем фильтрации через целит. В одном примере осуществления изобретения соединение формулы XXIV выделяют путем фильтрации через целит с последующим испарением растворителя(ей).

В одном примере осуществления изобретения С=N двойную связь в соединении формулы XXIV восстанавливают с помощью Н₂ и палладия на угле, Να(ί.'Ν)ΒΗ₃ или ΝαΒΗ^Α^. В другом примере осуществления изобретения восстановитель представляет собой №1ВН(ОЛс)₃. В одном примере осуществления изобретения восстановление проводят в инертном органическом растворителе, например метаноле, этаноле, 1-бутаноле, 2-бутаноле, 3-бутаноле, трет-бутаноле, 1-пропаноле, 2-пропаноле, ацетонитриле, бензоле, хлороформе, 1,2-дихлорэтане, 1,2-диметоксиэтане, диметилформамиде, диметилсульфоксиде, диоксане, дихлорметане, №метил-2-пирролидиноне или тетрагидрофуране. В другом примере осуществления изобретения восстановление проводят в тетрагидрофуране. В одном примере осуществления

- 22 017797 изобретения восстановление проводят при температуре примерно от 0 до примерно 25°С. В одном примере осуществления изобретения восстановление проводят при температуре примерно от 20 до примерно 30°С. В одном примере осуществления изобретения восстановление завершается в течение примерно от 1 до примерно 24 ч. В другом примере осуществления изобретения реакция с озоном завершается примерно через 12 ч.

Протекание любой из вышеупомянутых реакций для получения соединения формулы XIX можно контролировать с помощью любых аналитических методов, хорошо известных в технике, например ТСХ, ЖХ, ЖХ/МС, ВЭЖХ, ЯМР и т.д. Соединение формулы XIX можно выделить и очистить с помощью любых способов, известных в технике, таких как колоночная хроматография с нормальной и обращенной фазой (например, колоночная хроматография на силикагеле или ВЭЖХ с обращенной фазой), кристаллизация, экстракция и т.д. Выделенный таким образом продукт может быть подвергнут дальнейшей очистке (например, перекристаллизации), пока не будет достигнут требуемый уровень чистоты. В одном примере осуществления изобретения соединение формулы XIX имеет чистоту 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более.

Соединения по этому изобретению можно получить с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области. Конкретно, соединения формул I-XXIII можно получить как показано на примере реакций, приведенных в примерах.

Важным аспектом настоящего изобретения является то, что соединения формул КХ индуцируют апоптоз, а также усиливают индукцию апоптоза в ответ на сигналы индукции апоптоза. Поэтому предполагают, что эти соединения сенсибилизируют клетки к индукторам апоптоза, включая клетки, которые являются резистентными к таким индукторам. Ингибиторы IАР по настоящему изобретению могут применяться для того, чтобы индуцировать апоптоз при любом расстройстве, которое можно подвергать лечению, улучшать условия жизни при нем или предотвращать путем индукции апоптоза. Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает композиции и способы таргетирования животных, характеризующихся сверхэкспрессией белка IАР. В некоторых примерах осуществления изобретения, клетки (например, раковые клетки) проявляют повышенные уровни экспрессии белков IАР по сравнению с непатологическими образцами (например, незлокачественными клетками). В других примерах осуществления изобретения клетки оперативно проявляют повышенные уровни экспрессии белков IАР посредством выполнения программы апоптоза и гибели в ответ на ингибирующее эффективное количество соединения формул КХ, причем указанный ответ проявляется, по меньшей мере частично, вследствие зависимости в таких клетках от функции белка IАР, необходимой для их выживания.

В другом примере осуществления изобретение относится к модуляции апоптозсвязанного состояния, которое связано с одним или более чем одним апоптоз-модулирующим агентом. Примеры апоптозмодулирующих агентов включают, но не ограничиваются ими, Еа8/СЭ95, ТКАМР, ΤΝΕ К1, ЭК1, ЭК2, ЭК3, ЭК4, ЭК5, ЭК6, ΕΑΌΌ, ШР, ΤΝΕα, лиганд Раз, ТКАЖ, антитела к ТКАЖ-Ю или ТКАЖ-К2, Вс1-2, р53, ВА№, ВАЭ. Ак1. САЭ. ΡΣ3 киназу, РР1 и протеины каспазы. Также участвуют другие агенты, которые вовлечены в фазу инициации, выбора решения и деградации апоптоза. Примеры апоптозмодулирующих агентов включают вещества, активность, присутствие или изменение концентрации которых может смодулировать апоптоз в субъекте. Предпочтительные апоптоз-модулирующие агенты представляют собой индукторы апоптоза, например, ΙΝΡ или Т№-связанный лиганд, в частности, лиганд ТКАМР, лиганд Ра8/СЭ95, лиганд Т№К-1 или ТКАЖ.

В некоторых примерах осуществления изобретения применяются композиции и способы по настоящему изобретению для лечения больных клеток, тканей, органов или патологических состояний и/или болезненных состояний в животном (например, млекопитающем, включая, но не ограничиваясь ими, людей и домашних животных). В этой связи, различные заболевания и патологии поддаются лечению или профилактике с использованием настоящих способов и композиций. Неограничивающий примерный список этих заболеваний и состояний включает, но не ограничивается ими, рак молочной железы, рак простаты, лимфому, рак кожи, рак поджелудочной железы, рак толстой кишки, меланому, злокачественную меланому, рак яичников, рак мозга, первичную карциному мозга, рак головы и шеи, глиому, глиобластому, рак печени, рак мочевого пузыря, немелкоклеточный рак легкого, карциному головы или шеи, карциному молочной железы, карциному яичников, карциному легкого, мелкоклеточную карциному легкого, опухоль Вильмса, карциному шейки матки, карциному яичек, карциному мочевого пузыря, карциному поджелудочной железы, карциному желудка, карциному толстой кишки, карциному простаты, карциному мочеполовой системы, карциному щитовидной железы, карциному пищевода, миелому, множественную миелому, карциному надпочечников, почечно-клеточную карциному, эндометриальную карциному, карциному коры надпочечников, злокачественную инсулиному поджелудочной железы, злокачественную карциноидную карциному, хориокарциному, фунгоидный микоз, злокачественную гиперкальцемию, гиперплазию шейки матки, лейкемию, острую лимфоцитарную лейкемию, хроническую лимфоцитарную лейкемию, острую миелогенную лейкемию, хроническую миелогенную лейкемию, хроническую гранулоцитарную лейкемию, острую гранулоцитарную лейкемию, волосатоклеточный лейкоз, нейробластому, рабдомиосаркому, саркому Капоши, истинную полицитемию, существенный тромбоцитоз, болезнь Ходжкина, не-ходжкинскую лимфому, саркому мягких тканей, остеогенную саркому, пер

- 23 017797 вичную макроглобулинемию, ретинобластому и т.п., аутоиммунные заболевания, опосредованные Т и Вклетками; воспалительные заболевания; инфекции (например, в качестве противоязвенных средств, например, в контексте инфекции Н. ру1оп); гиперпролиферативные болезни; СПИД; дегенеративные состояния, заболевания кровеносных сосудов (например, первичный варикоз) и т.п. Соединения по настоящему изобретению также могут быть полезны при лечении заболеваний, в которых присутствует дефект в программируемой смерти клетки или апоптотическом механизме, таких как рассеянный склероз, астма, атеросклероз и т.п. В некоторых примерах осуществления изобретения, раковые клетки, подвергаемые лечению, являются метастатическими. В других примерах осуществления изобретения, раковые клетки, подвергаемые лечению, являются стойкими к противораковым агентам.

В некоторых примерах осуществления изобретения, инфекции, подходящие для лечения с помощью композиций и способов по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, инфекции, вызванные вирусами, бактериями, грибами, микоплазмой, прионами и т.п.

Некоторые примеры осуществления настоящего изобретения обеспечивают способы введения эффективного количества соединения формул ПХ и по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства (включая, но не ограничиваясь ими, химиотерапевтические противоопухолевые средства, апоптоз-модулирующие агенты, антибактериальные препараты, противовирусные средства, противогрибковые средства и противовоспалительные агенты) и/или терапевтическую технику (например, хирургическое вмешательство, и/или радиотерапию).

Для применения в способах по настоящему изобретению предлагается ряд подходящих противораковых агентов. Действительно, в настоящем изобретении предполагается, но не ограничивается ими, введение многочисленных противораковых агентов, таких как агенты, которые индуцируют апоптоз; полинуклеотиды (например, антисмысловые, рибозимы, малая интерферирующая РНК); полипептиды (например, ферменты и антитела); биологические миметики (например, госсипол или ВН₃ миметики); агенты, которые связываются (например, образуют олигомеры или комплекс) с белком семейства Вс1-2, например, Вах; алкалоиды; алкилирующие агенты; противоопухолевые антибиотики; антиметаболиты; гормоны; соединения платины; моноклональные или поликлональные антитела (например, антитела, конъюгированные с противораковыми препаратами, токсинами, дефензинами), токсины; радионуклиды; биологические модификаторы ответа (например, интерфероны (например, ΓΕΝ-α) и интерлейкины (например, Τ-Σ)); агенты для адоптивной иммунотерапии; гематопоэтические факторы роста; агенты, которые вызывают дифференциацию клетки опухоли (например, полностью транс-ретиноевая кислота); реагенты для генной терапии (например, реактивы и нуклеотиды для антисмысловой терапии); противоопухолевые вакцины; ингибиторы ангиогенеза; ингибиторы протеосом: модуляторы ΝΕ-КВ; соединения анти-СИК; ингибиторы НЭАС; и т.п. Другие многочисленные примеры химиотерапевтических соединений и противораковых терапий, пригодные для совместного назначения с описанными соединениями, хорошо известны специалистам в данной области.

В определенных примерах осуществления изобретения противораковые агенты включают агенты, которые индуцируют или стимулируют апоптоз. Агенты, которые индуцируют апоптоз, включают, но не ограничиваются ими, облучение (например, рентгеновское излучение, гамма-лучи, ультрафиолет); факторы, связанные с фактором некроза опухоли (ΤΝΕ) (например, белки рецептора семейства ΤΝΕ, лиганды семейства ΤΝΕ, ΤΡΆ^, антитела к ΤКАI^-К1 или ингибиторы киназы (например, ингибитор киназы эпидермального рецептора фактора роста (ЕСЕК), ингибитор киназы сосудистого рецептора фактора роста (νΟΕΚ), ингибитор киназы рецептора фибробластного фактора роста (ЕСЕК), ингибитор киназы рецептора фактора роста, полученного из тромбоцитов (РЭСЕК). и ингибиторы киназы Всг-АЫ (например, гливек)); антисмысловые молекулы; антитела (например, герцептин, ритуксан, зевалин и авастин); антиэстрогены (например, ралоксифен и тамоксифен); анти-андрогены (например, флутамид, бикалутамид, финастерид, аминоглутетамид, кетоконазол, и кортикостероид); ингибиторы циклооксигеназы 2 (СОХ-2) (например, целекоксиб, мелоксикам, N8-398, а также нестероидные противовоспалительные лекарственные препараты (N8.^0)); противовоспалительные лекарственные препараты (например, бутазолидин, декадрон, дельтазон, дексаметазон, дексаметазон интензол, дексон, гексадрол, гидроксихлорохин, метикортен, орадексон, оразон, оксифенбутазон, педиапред, фенилбутазон, плаквенил, преднизолон, преднизон, прелон и тандеарил); и химиотерапевтические противораковые препараты (например, иринотекан (камптосар), СРТ-11, флударабин (флудара), дакарбазин (ДТИК), дексаметазон, митоксантрон, милотарг, ν₽-16, цисплатин, карбоплатин, оксалиплатина, 5-ФУ, доксорубицин, гемцитабин, бортезомиб, гефитиниб, бевацизумаб, таксотер или таксол); сигнальные молекулы клеток; керамиды и цитокины; стауроспорин и т.п.

В других примерах осуществления изобретения композиции и способы по настоящему изобретению обеспечивают соединения формул ЕХ и по меньшей мере один антигиперпролиферативный или противоопухолевый агент, выбранный из алкилирующих веществ, антиметаболитов и природных продуктов (например, трав и других соединений растительного и/или животного происхождения).

Алкилирующие агенты, пригодные для применения в настоящих композициях и способах, включают, но не ограничиваются ими: 1) нитроген мустард (например, мехлорэтамин, циклофосфамид, ифосфамид, мелфалан (Ь-сарколизин); и хлорамбуцил); 2) этиленимины и метилмеламины (например, гекса

- 24 017797 метилмеламин и тиотепа); 3) алкилсульфонаты (например, бусульфан); 4) нитрозомочевины (например, кармустин (ΒСNυ); ломустин (ССNυ); семустин (метил-ССNυ); и стрептозоцин (стрептозотоцин)); и 5) триазены (например, дакарбазин (ДТИК; диметилтриазеноимидазолкарбоксамид).

В некоторых примерах осуществления изобретения антиметаболиты, пригодные для применения в настоящих композициях и способах, включают, но не ограничиваются ими: 1) аналоги фолиевой кислоты (например, метотрексат (аметоптерин)); 2) аналоги пиримидина (например, фторурацил (5фторурацил; 5-ФУ), флоксуридин (фтордезоксиуридин; ЕибК), и цитарабин (цитозин арабинозид)); и 3) аналоги пурина (например, меркаптопурин (6-меркаптопурин; 6-МП), тиогуанин (6-тиогуанин; ТГ), и пентостатин (2'-дезоксикоформицин)).

В других примерах осуществления изобретения химиотерапевтические агенты, пригодные для применения в композициях и способах по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими: 1) алкалоиды барвинка (например, винбластин (УЕВ), винкристин); 2) эпиподофиллотоксины (например, этопозид и тенипозид); 3) антибиотики (например, дактиномицин (актиномицин Ό), даунорубицин (дауномицин; рубидомицин), доксорубицин, блеомицин, пликамицин (митрамицин) и митомицин (митомицин С)); 4) ферменты (например, Ь-аспарагиназа); 5) биологические модификаторы ответа (например, интерферон-альфа); 6) координационные комплексы платины (например, цисплатин (цис-ДДП) и карбоплатин); 7) антрацендионы (например, митоксантрон); 8) замещенные мочевины (например, гидроксимочевина); 9) производные метилгидразина (например, прокарбазин (Ν-метилгидразин; ΜΙΗ)); 10) адренокортикальные супрессивные средства (например, митотан (о,п'-ДДД) и аминоглутетимид); 11) адренокортикостероиды (например, преднизон); 12) прогестины (например, гидроксипрогестерон капроат, медроксипрогестерон ацетат и мегестрол ацетат); 13) эстрогены (например, диэтилстильбэстрол и этинил эстрадиол); 14) антиэстрогены (например, тамоксифен); 15) андрогены (например, тестостерон пропионат и флуоксиместерон); 16) антиандрогены (например, флутамид): и 17) аналоги гонадотропинрилизинг гормона (например, лейпролид).

Любой онколитический агент, который обычно применяют при лечении рака, находит применение в композициях и способах по настоящему изобретению. Например, 1·Ί)Λ (Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США) утверждает формуляр онколитических агентов, одобренных для применения в Соединенных Штатах. Международные агентства, являющиеся партнерами 1·Ί)Λ, утверждают подобные формуляры. В таблице 1 представлен список типичных противоопухолевых агентов, одобренных для применения в США. Специалисты в данной области согласятся с тем, что в товарных этикетках, требуемых для всех одобренных в США химиотеравпевтических агентов, описаны утвержденные указания по применению, информация о дозировке, данные о токсичности и т.п. для указанных типичных агентов.

Таблица 1

Апьдеслейкин (дез-аланил-1, серин-125 человеческий интерлейкин- 2)	Пролейкин	СЫгоп Согр., Эмервилль, Калифорния
Алемтузумаб (антитело 1дС1К апб СО52)	Кампат	ΜίΙΙθηηίιίΓη апб ИЕХ Рабпегз, ЬР, Кембридж, Массачусетс
Апитретиноин (9-цис-ретиноевая кислота)	Панретин	1_\|дапс1 РЬагтасеибса1з, 1пс., Сан Диего, Калифорния
Аллопуринол (1,5-дигидро-4Н-пиразоло[3,4-фпиримидин-4-он мононатриевая соль)	Зилоприм	(31ахоЗт№\|КНпе, Резеагсб Тпапд1е Рагк, Сев. Каролина
Апьтретамин (Ν,Ν,Ν',Ν',ΝΝ-Γβκο3ΜθΤΗΠ-1,3,5-τρπ33ΜΗ-2,4,6триамин)	Гексален	из Вюзаепсе, \А/ев1 Коншохокен, Пенсильвания
Амифостин (этантиол, 2-[(3-аминопропил)амино]-дигидрофосфат (эфир))	Эти о л	из Вюваепсе
Анастрозол (1,3-бензолдиацетонитрил, а,а,а',а'-тетраметил-5(1Н-1,2,4-триазол-1-илметил))	Аримидекс	А51гагепеса РНагтасеибса15, 1_Р, Уилмингтон, Делавэр
Мышьяк триоксид	Трисенокс	Се11 Тбегареибс, 1пс., Сиэтл, Вашингтон
Аспарагиназа (Ь-аспарагин амидогидролаза, тип ЕС-2)	Элспар	Мегск & Со., 1пс., Уайтхаус-стейшн, НьюДжерси
БЦЖ живая вакцина (лиофилизированный препарат аттенуированного штамма МусоЬас/епит ЬсМз (ВасШиз Са/теНе-Оик/п [ВСС], субштамм Моп1геа1)	Т1СЕ ВСС	Огдапоп Текп1ка, Согр., Дурам, Сев. Каролина
Бексаротен капсулы (4-[1-(5,6,7,8-тетрагидро-3,5,5,8,8-пентаметил-2нафталенил) этенил] бензойная кислота)	Таргретин	1_\|дапб РКагтасеибса1в
Бексаротен гель	Таргретин	□далс) Рбагтасеибса15
Блеомицин (цитотоксический гликопептидный антибиотик продуцируемый 8/гер/отусез УвгИсШиз; блеомицин А₂	Бленоксан	Впвкй-Муегв ЗдыЬЬ Со., Нью-Йорк, Нью-Йорк

- 25 017797

и блеомицин В₂)
Капецитабин (5'-дезокси-5-фтор-М-[(пентилокси)карбонил]цитидин)	Кселода	Роспе
Карбоплатин (платина, диаммино[1,1- циклобутандикарбоксилато(2-)-0, 0']-, (ЗР-4-2))	Параплатин	Впэ1о1-Муег5 ЗяипЬЬ
Кармустин (1,3-бис(2-хлорэтил)-1-нитрозомочевина)	БХНМ	Впз1о1-Муегз 8ди\|ЬЬ
Имплант кармустина с полифепросаном 20	Глиадел Вафер	СиИТогс! РКагтасеийса1з, 1пс., Балтимор, Мэриленд
Целекоксиб (в виде 4-[5-(4-метилфенил)-3-(трифторметил)-1 Нпиразол-1 -ил] бензолсульфонамида)	Целебрекс	8еаг1е РКагтасеийса1з, Англия
Хлорамбуцил (4-[бис(2хлорэтил)амино]бензолбутановая кислота)	Лейкеран	С1ахо8тйРК1\|пе
Цисплатин (ΡίΰΙ₂Η₆Ν₂)	Платинол	Впз1о1-Муег$ 8цц\|ЬЬ
Кладрибин (2-хлор-2'-дезокси-Ь-0-аденозин)	Лейстатин, 2- ХдА	Ρ.νν. йоИлзоп РКагтасеийса! РезеагсК 1пз1Ии1е, Раритан, НьюДжерси
Циклофосфамид (2-[бис(2-хлорэтил)амино]тетрагидро-2Н-13,2- оксазафосфорин 2-оксид моногидрат)	Цитоксан, Неозар	Впз1о1-Муегз ЗяыЬЬ
Цитарабин (1-Ь-О-арабинофуранозилцитозин, Ο₉Ηΐ3Ν₃Ο₅)	Цитозар-У	Рпагтааа & υρίοΗη Сотрапу
Цитарабин липосомальный	ДепоЦит	Зкуе РКагтасеи11са1з, 1пс., Сан Диего, Калифорния
Дакарбазин (5-(3,3-диметил-1-триазено)-имидазол-4-карбоксамид (ДТИЮ)	ЭТ1С-Ооте	Вауег АС, Леверкузен, Германия
Дактиномицин, Актиномицин ϋ (актиномицин продуцируемый 51гер1отусез рап/и11из, С₆₂Н₈бМ₁₂О₁₆)	Космеген	Мегск
Дарбепоэтин альфа (гесотЫпап! рерйбе)	Аранесп	Атдеп, 1пс., Тысяча Дубов, Калифорния
Даунорубицин липосомальный ((88-цис)-8-ацетил-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-а-1_ликсо-гексопиранозил)окси]-7,8,9,10-тетрагидро6,8,11 -тригидрокси-1 -метокси-5,12-нафтацендион гидрохлорид)	ЭапиоХоте	Мехз1аг Рпагтасеийса1з, 1пс., Боулдер, Колорадо
Даунорубицин НС1, Дауномицин ((18,38)-3-ацетил-1,2,3,4,6,11-гексагидро-3,5,12тригидрокси-10-метокси-6,11-диоксо-1-нафтаценил 3амино-2,3,6-тридезокси-(альфа)-1_-ликсогексопиранозид гидрохлорид)	Церубидин	\Л/уеШ Ауегз1, Мэдисон, Нью-Джерси
Денилейкин дифтитокс (рекомбинантный пептид)	Онтак	Зегадеп, 1пс., Хопкинтон, Массачусетс
Дексразоксан ((8)-4,4'-(1 -метил-1,2-этандиил)бис-2,6пиперазиндион)	Зинекард	РНагтааа & 11ρ]οήη Сотрапу
Доцетаксел ((2Р,38)-Ы-карбокси-3-фенилизосерин, Ν-третбутиловый эфир, 13-эфир с 5Ь-20-эпокси12а,4,7Ь,10Ь,13а-гексагидрокситакс-11-ен-9-он 4ацетат 2-бензоатом, тригидрат)	Таксотер	ΑνβηΐίΒ Рпагтасеи11са1з, 1пс., Бриджуотер, НьюДжерси
Доксорубицин НС1 (88,108)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-а-1_-ликсогексопиранозил)окси]-8-гликолил-7,8,9,10-тетрагидро6,8,11 -тригидрокси-1 -метокси-5,12-нафтацендион гидрохлорид)	Адриамицин, Рубеке	Рпагтааа & ир]о!пп Сотрапу
Доксорубицин	Адриамицин РР8 для в/в инъекций	РКагтааа & ир]опп Сотрапу
Доксорубицин липосомальный	Доксил	Зедииз РНагтасеийса1з, 1пс., Менло Парк, Калифорния
Дромостанолон пропионат (17р-гидрокси-2а-метил-5а-андростан-3-он пропионат)	Дромостанол он	ЕН ЫПу & Сотрапу, Индианаполис, Индиана
Дромостанолон пропионат	Мастерон для инъекций	8уп1ех, Согр., Пало Альто, Калифорния
Раствор Эллиота Б	Раствор Эллиота Б	ОгрНап МесНса!, 1пс
Эпирубицин ((88-цис)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-а-Ь-арабиногексопиранозил)окси]-7,8,9,10-тетрагидро-6,8,11 тригидрокси-8-(гидроксиацетил)-1 -метокси-5,12нафтацендион гидрохлорид)	Элленс	РНагтааа & иррпп Сотрапу
Эпоэтин альфа (рекомбинантный пептид)	Эпоген	Атдеп, 1пс
Эстрамустин (эстра-1,3,5(10)-триен-3,17-диол(17(бета))-, 3-[бис(2хлорэтил)карбамат] 17-(д и гидрофосфат), динатриевая соль, моногидрат или эстрадиол 3[бис(2-хлорэтил карбамат] 17-(дигидрофосфат), динатриевая соль, моногидрат)	Эмцит	РЬагтааа & υρϊοΗη Сотрапу
Этопозид фосфат (4'-деметилэпиподофилиотоксин 9-[4,6-О-(Р)этилиден-(бета)-Э-глюкопиранозид], 4'(дигидрофосфат))	Этопофос	Влз1о1-Муегз ЗциПэЬ
Этопозид, \/Р-16 (4'-деметилэпиподофинотоксин 9-[4,6-О-(Р)этилиден-(бета)-Э-глюкопиранозид])	Вепезид	Впз1о1-Муегз ЗдЫЬЬ
Экземестан (6-метиленандроста-1,4-диен-3,17-дион)	Аромазин	РНагтааа & 11 ρ]οήη Сотрапу
Филграстим (г-теШиС-СЗР)	Нейпоген	Атдеп, 1пс
Флоксуридин (внутриартериальный) (2'-дезокси-5-фторуридин)	ФУДР	РосНе

- 26 017797

Флударабин (фторированный нуклеотидный аналог противовирусного средства видарабин, Э-Ь-ϋарабинофуранозиладенин (ара-А))	Флудара	ВеПех 1_аЬога1опез,1пс., Сидар Нолле, НьюДжерси
Фторурацил, 5-ФУ (5-фтор-2,4(1Н,ЗН)-пиримидиндион)	Адруцил	ΙΟΝ Рпагтасеийса1з, 1пс., Хумакао, ПуэртоРико
Фулвестрант (7-альфа-[9-(4,4,5,5,5-пентафторпентилсульфинил) нонил]эстра-1,3,5-(10)-триен-3,17-бета-диол)	Фазлодекс	ЕРР РКагтасеийса1з, Гуаяма, Пуэрто-Рико
Гемцитабин (2'-дезокси-2',2'-дифторцитидин моногидрохлорид (Ьизомер))	Гемзар	ЕН ЫПу
Гемтузумаб Озогамицин (анти-СЭЗЗ НР67.6)	Милотарг	ХЛ/уе1Ь Ауегз!
Гозерелин ацетат (ацетат [О-8ег(Ви1)⁶,Агд1у¹⁰]1_НКН; руго-О1и-Н1з-Тгр8ег-Туг-О-8ег(Ви1)-1еи-Агд-Рго-Агд1у-НН2 ацетат [0₅₉Η₈₄Ν₁₈Ο₁₄ *(С₂Н₄О₂)_х	Золадекс имплант	Азкагепеса Рпагтасеийса1з
Гидроксимочевина	Г идреа	Впз1о1-Муегз δςιιϊόό
Ибритумомаб тиуксетан (иммуноконъюгат, образующийся через ковалентную связь тиомочевины между моноклональным антителом ибритумомабом и мостиковым хелатообразующим веществом тиуксетаном [N-[2бис(карбоксиметил)амино]-3-(пизотиоцианатофенил)-пропил]-[М-[2бис(карбоксиметил)амино]-2-(метил)-этилглицин)	Зевалин	Вюдеп ЮЕС, 1пс., Кембридж, Массачусетс
Идарубицин (5,12-нафтацендион, 9-ацетил-7-[(3-амино-2,3,6тридезокси-(альфа)-Ьликсо-гексопиранозил)окси]7,8,9,10-тетрагидро-6,9,11-тригидроксигидрохлорид, (73-цис))	Идамицин	РНагтас1а & ΙΙρίοήη Сотрапу
Ифосфамид (3-(2-хлорэтил)-2-[(2-хлорэтил)амино]тетрагидро-2Н- 1,3,2-оксазафосфорин 2-оксид)	Ифекс	Впз1о1-Муегз ЗяиНэЬ
Иматиниб мезилат (4-[(4-метил-1-пиперазинил)метил]-Ы-[4-метил-3-[[4(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]- ~ фенил]бензамид метансульфонат)	Гливек	Ыоуагйз АО, Базель, Швейцария
Интерферон альфа-2а (рекомбинантный пептид)	Роферон-А	НоТГтапп-Ьа Еосйе, 1пс., Натри, Нью-Джерси
Интерферон альфа-2Ь (рекомбинантный пептид)	Интрон А (лиофилизир ованный Бетасерон)	Зспеппд АО, Берлин, Германия
Иринотекан НС1 ((48)-4,11 -диэтил-4-гидрокси-9-[(4пиперидинопиперидино)карбонилокси]-1Нпирано[3',4':6,7] индол изино[1,2-Ь] хинолин- 3,14(4Н,12Н) дион гидрохлорид тригидрат)	Камптосар	Рпагтас1а & ΙΙρρΙιη Сотрапу

Леналидомид 3-(4-ам ино-1-оксо 1,3-дигидро-2Н-изоиндол-2-ил) пиперидин-2,6-дион	Ревлимид	Се1депе
Летрозол (4,4'-(1Н-1,2,4-триазол-1-илметилен) дибензонитрил)	Фемара	МоуэгФз
Лейковорин (Ь-глутаминовая кислота, Ы-[4[[(2-амино-5-формил 1,4,5,6,7,8-гексагидро-4-оксо-6птеридинил)метил]амино]бензоил], кальциевая соль (1:1))	Веллковорин, Лейковорин	1ттипех, Согр., Сиэтл, Вашингтон
Левамизол ΗΟΙ ((-)-( 3)-2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо [2,1-Ь] тиазол моногидрохлорид, Ο₁₁Η₁₂Ν₂8*ΗΟΙ)	Эргамизол	йапэзеп РезеагсК Еоипбайоп, Титусвилл, Нью-Джерси
Ломустин (1-(2-Хлорэтил)-3-циклогексил-1-нитрозомочевина)	СииНУ	Впз1о1-Муегз 8ηυί66
Мехлорэтамин, нитроген мустард (2-хлор-1Ч-(2-хлорэтил)-М-метилэтанамин гидрохлорид)	Мустарген	Мегск
Мегестрол ацетат 17а(ацетилокси)-6-метилпрегна-4,6-диен-3,20-дион	Мегейс	Впз1о1-Муегз ЗдФЬЬ
Мелфалан, Е-РАМ (4-[бис(2-хлорэтил) амино]-Б-фенилаланин)	Апкеран	О1ахо8тН1тКНле
Меркаптопурин, 6-МП (1,7-дигидро-6Н-пурин-6-тион моногидрат)	Пуринтиол	О1ахо8тИКК1\|пе
Месна (натрий 2-меркаптоэтан сульфонат)	Меснекс	Аз1а МесКса
Метотрексат (М-[4-[[(2,4-диамино-6птеридинил)метил]метиламино]бензоил]-1_глутаминовая кислота)	Метотрексат	Ьес1ег1е 1_аЬога1опез
Метоксален (9-метокси-7Н-фуро[3,2-д][1]-бензопиран-7-он)	Увадекс	Тйегакоз, 1пс., Уэй Экстон, Пенсильвания
Митомицин С	Мутамицин	Впз1о1-Муегз ЗчийэЬ
Митомицин С	Митозитрекс	8ирегСеп, 1пс., Дублин, Калифорния
Митотан (1,1-дихлор-2-(о-хлорфенил)-2-(п-хлорфенил)этан)	Лизодрен	Впз1о1-Муегз 3ςυί66
Митоксантрон (1,4-дигидрокси-5,8-бис[[2-[(2гидроксиэтил)амино]этил]амино]-9,10-антрацендион дигидрохлорид)	Новантрон	1ттипех Согрогайоп
Нандролон фенпропионат	Дураболин-50	Огдапоп, 1пс., УэстОриндж, Нью-Джерси
Нофетумомаб	\/ег1ита	ВоеКппдег 1пде1Ие1т РЬагта КО, Германия
Опрелвекин (ИЛ-11)	Ньюмега	Оепейсз 1пзй1и1е, 1пс., Александрия, Вирджиния
Оксалиплатина (цис-[(1 Р,2П)-1,2-циклогександиамин-М,М'] [оксалато(2-)-0,0'] платина)	Элоксатин	Запой 8упФе1аЬо, 1пс., Нью-Йорк, Нью-Йорк

- 27 017797

Паклитаксел (5р,20-эпокси-1, 2α, 4,7β, 1Οβ, 13а-гексагидрокситакс-11 ен-9-он 4,10-диацетат 2-бензоат 13-эфир с (2Р, 38)Ν-бензоил-З-фенилизосерином)	Такеол	Впз(о1-Муегз ЗцыЬЬ
Памидронат (фосфоновая кислота (З-амино-1гидроксипропифиден) бис-, динатриевая соль, пентагидрат, (АФД))	Аредиа	ΝονθΓΐίδ
Пегадемаза ((монометоксиполиэтиленгликоль сукцинимидил) 11- 17-аденозин деаминаза)	Адаген (пегадемаза бычья)	Εηζοη РИагтасеи11са1з, 1пс., Бриджуотер, НьюДжерси
Пегаспаргаза (монометоксиполиэтиленгликоль сукцинимидил 1_аспарагиназа)	Онкаспар	Εηζοη
Пегфилграстим (ковалентный коньюгат рекомбинантного метионил СС8Р человека (Филграстим) и монометоксиполиэтиленгликоля)	Невласта	Атдеп, 1пс
Пентостатин	Нипент	Рагке-0ау\|5 РИагтасеийса! Со., Роквилл, Мэриленд
Пипоброман	Верцит	АЬЬоН 1_аЬога1:опез, Эббот Парк, Иллинойс
Пликамицин, Митрамицин (антибиотик продуцируемый Зйер1отусез рНса1из)	Митрацин	РЛгег, 1пс., Нью-Йорк, Нью-Йорк
Порфимер натрия	Фотофрин	О1_Т РИокМегареиЕсэ, 1пс., Ванкувер, Канада
Прокарбазин (Ы-изопропил-п-(2-метилгидразино)-п-толуамид моногидрохлорид)	Матулан	8\|дта Таи РЬагтасеи1:1са15,1пс., Гейтерсберг, Мэриленд
Хинакрин (6-хлор-9-(1-метил-4-диэтиламин)бутиламино-2метоксиакридин)	Атабрин	АЬЬоП ЬаЬз
Расбуриказа (рекомбинантный пептид)	Элитек	8апоЛ-8уп(Не1аЬо, 1пс.
Ритуксимаб (рекомбинантное антитело ап6-СО20)	Ритуксан	Оепеп1есН, 1пс., 8ои(К Сан-Франциско, Калифорния
Сарграмостим (рекомбинантный пептид)	Прокин	1ттипех Согр
Стрептозоцин (стрептозоцин 2-дезокси-2[[(метилнитрозоамино)карбонил]амино]-а (и β)-ϋглюкопираноза и 220 мг лимонной кислоты безводной)	Занозар	РЬагтааа & иррпп Сотрапу
Тальк (Мд₃8\|₄О₁₀(ОН)₂)	8с1егозо1	Вгуап, Согр., Вобурн, Массачусетс
Тамоксифен ((г)2-[4-(1,2-дифенил-1-бутенил) фенокси]-1М,1Мдиметилэтанамин 2-гидрокси-1,2,3пропантрикарбоксилат (1:1))	Нолвадекс	Аз1га2епеса РКагтасеи(юа1з
Темозоломид 3,4-дигидро-3-метил-4-оксоимидазо [5,1-ф-1,2,3,5-	Темодар	ЗоЬеппд
тетразин-8-карбоксамид
Тенипозид, \/М-26 (4'-деметилэпиподофиллотоксин 9-[4,6-0-(Н)-2фенилиден-(бета)-О-глюкопиранозид)	Вумон	Впз1о1-Муегз ЗдшЬЬ
Тестолактон (13-гидрокси-З-оксо-13,17-секоандроста-1,4-диен-17карбоновой кислоты лактон)	Теслак	Впз1о1-Муегз бдшЬЬ
Тиогуанин, 6-ТГ (2-амино-1,7-дигид ро-6Н-пурин-6-тион)	Тиогуанин	О1ахо8тИИК1\|пе
Тиотепа (азиридин, 1,Т,1-фосфинотиоилидинтрис- или трис(1 -азиридинил)фосфин сульфид)	Тиоплекс	1ттипех Согрогайоп
Топотекан НС1 ((8)-10-[(диметиламино)метил]-4-этил-4,9-дигидрокси1Н-пирано[3',4':6,7] индолизино[1,2-Ь] хинолин-3,14(4Н,12Н)-дион моногидрохлорид)	Гикамтин	<Э1ахоЗтКЬКНпе
Торемифен (2-(π-[(Ζ)-4-χπορ-1,2-дифенил-1 -бутенил]-фенокси)- Ν,Ν-диметилэтиламин цитрат (1:1))	Фарестон	РоЬеНз РЬагтасеиЕса! Согр., Итонтаун, НьюДжерси
Тозитумомаб, 1131 Тозитумомаб (рекомбинантное мышиное иммунотерапевтическое моноклональное антитело 1дО28 ламбда апЕ-СО20 (1131 представляет собой радиоиммунотерапевтическое антитело))	Бексар	Сопха Согр., Сиэтл, Вашингтон
Трастузумаб (рекомбинантное моноклональное антитело 1дС, каппа апЕ-НЕР2)	Г ерцептин	(Зепепгёсф 1пс
Третиноин, АТРА (полностью-транс ретиноевая кислота)	Весаноид	ПосНе
Урацил мустард	Урацил мустард капсулы	ПоЬег1з 1_аЬз
Вальрубицин, Ы-трифторацетиладриамицин-14-валерат ((28-цис)-2[1,2,3,4,6,11-гексагидро-2,5,12-тригидрокси-7 метокси6,11-диоксо-[[4 2,3,6-тридезокси-3-[(трифторацетил)амино-а-!_-ликсо-гексопиранозил]оксил]-2нафтаценил]-2-оксоэтил пентаноат)	Вальстар	АпФга -> Μθάβνθ
Винбластин, Лейкокристин (θ4₆Η₅₆Ν4θ₁₀*Η₂8θ4)	Велбан	Εΐί ину
Винкристин (С₄бН5бМ4О₁₀*Н₂8О4)	Онковин	ειϊ ину
Винорелбин (3',4’-дидегидро-4’-дезокси-С'-норвинкалейкобластин [П-(Р,Р)-2,3-дигидроксибутандиоат (1:2) (соль)])	Навельбин	О1ахо8тПНК11пе
Золедронат, Золедроновая кислота ((1-гидрокси-2-имидазол-1-ил-фосфоноэтил) фосфоновая кислота моногидрат)	Зомета	ΝονθίΤίβ

- 28 017797

Противораковые агенты дополнительно включают соединения, которые, как уже было определено, обладают противораковой активностью, но в настоящее время не одобрены Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США или другими партнерскими агентствами или же проходят испытания для нового применения. Примеры включают, но не ограничиваются ими, 3-АР, 12-О-тетрадеканоилфорбол-13-ацетат, 17ААС, 852А, АВ1-007, АВК-217620, АВТ-751, ΑΌΙРЕС 20, АЕ-941, АС-013736, АСКО100, аланозин, АМС 706, антитело С250, антинеопластоны, АР23573, апазиквон, АРС8015, атипримод, ΛΤΝ-161, атрасентан, азацитидин, ВВ-10901, ВСХ-1777, бевацизумаб, ВС00001, бикалутамид, ВМ8 247550, бортезомиб, бриостатин-1, бусерелин, кальцитриол, СС1-779, СЭВ2914, цефиксим, цетуксимаб, СС0070, циленгитид, клофарабин, комбретастатин А4 фосфат, СР-675206, СР-724714, СрС 7909, куркумин, децитабин, ΌΕΝ8ΡΜ, доксеркальциферол, Е7070, Е7389, эктеинасцидин 743, эфапроксирал, эфломитин, ЕКВ-569, энзастаурин, эрлотиниб, эксисулинд, фенретинид, флавопиридол, флударабин, флутамид, фотемустин, РК901228, С17ОТ, галиксимаб, гефитиниб, генистеин, глюфосфамид, СТ1-2040, гистрелин, ΗΚΙ-272, гомогаррингтонин, Н8РРС-96, гибридный белок Ьи14.18интерлейкин-2, НиМах-СИ4, илопрост, имихимод, инфликсимаб, интерлейкин-12, 1Р1-504, ирофульвен, иксабепилон, лапатиниб, лестауртиниб, лейпролид, иммунотоксин ЬМВ-9, лонафарниб, лумиликсимаб, мафосфамид, МВ07133, МИХ-010, ΜΕΝ2704, моноклональное антитело 3Р8, моноклональное антитело 1591, мотексафин, М8-275, МУА-МиС1-Ш2, нилутамид, нитрокамптотецин, нолатрексед дигидрохлорид, нолвадекс, №-9,О,6-бензилгуанин, облимерсен натрий, ΟΝΥΧ-015, ореговомаб, Ο8Ι-774, панитумумаб, параплатин, РИ-0325901, пеметрексед, ΡΗΥ906, пиоглитазон, пирфенидон, пиксантрон, Р8-341, Р8С 833, РХИ101, пиразолоакридин, К115777, КАИ001, ранпирназа, аналог ребеккамицина, белок гЬиангиостатин, гЬиМаЬ 2С4, розиглитазон, рубитекан, 8-1, 8-8184, сатраплатин, 8В-15992, 8С№0010, 8СМ 40, сорафениб, 8К31747А, 8Т1571, 8И011248, субероиланилид-гидроксамовая кислота, сурамин, талабостат, талампанел, тарихидар, темсиролимус, иммунотоксин ТСРа-РЕ38, талидомид, тимальфазин, типифарниб, тирапазамин, ТЕК286, трабектедин, триметрексат глюкуронат, ТюХах, υθΝ-1, вальпроевая кислота, винфлунин, У№40101М, волоциксимаб, вориностат, УХ-680, ΖΌ1839, ΖΌ6474, зилейтон и зосуквидар тригидрохлорид.

В одном примере осуществления изобретения противораковый агент выбирают из группы, состоящей из таксотера, гемцитабина, лапатиниба (Тайкерб®) и этопозида.

Для более детального описания противораковых агентов и других терапевтических агентов специалисты в данной области адресуются к любым полезным руководствам, включающим, но не ограниченным ими, публикации РЬукШап'к Иекк КеГегепсе а также Сοοйтаη апй Сйтап'к РЬагтасеийса1 Вак1к οί ТЬегареийск 1еп1В ей^ι^οη. Ейк. Нагйтап е1 а1., 2002.

Настоящее изобретение обеспечивает способы введения соединения формул 1-Х с радиационной терапией. Изобретение не ограничено типами, количествами или системами доставки и введения, применяемыми для доставки терапевтической дозы радиации животному. Например, животное может быть подвергнуто фотонной радиотерапии, радиационной терапии с помощью потока частиц, другим типам радиотерапии и их комбинациям. В некоторых примерах осуществления изобретения животное подвергают облучению с использованием линейного ускорителя. В других примерах осуществления изобретения, подвергают облучению с использованием гамма пучка.

Источник облучения может быть внешним или внутренним по отношению к животному. Внешняя радиационная терапия наиболее распространена и включает направление пучка высокоэнергетического излучения на участок опухоли через кожу с использованием, например, линейного ускорителя. Поскольку пучок лучей ограничен участком опухоли, почти невозможно избежать воздействия на нормальную, здоровую ткань. Однако внешнее облучение обычно хорошо переносится животными. Внутренняя радиационная терапия включает введение источника излучения, например, бусинок, проводов, гранул, капсул, частиц и т.п., внутрь тела на участок или около участка опухоли, включая применение систем доставки, которые специфично таргетируют раковые клетки (например, с использованием частиц, которые соединяются с лигандами, которые связываются с раковой клеткой). Такие импланты можно удалять после лечения или оставлять в теле неактивными. Типы внутренней радиационной терапии включают, но не ограничиваются ими, брахитерапию, внутритканевое облучение, внутриполостное облучение, радиоиммунотерапию и т.п.

Животное может необязательно получать радиосенсибилизирующее вещество (например, метронидазол, мизонидазол, БДУ (Вийг) внутриартериально, йододезоксиуридин (1ийК) внутривенно, нитроимидазол, 5-замещенные-4-нитроимидазолы, 2Н-изоиндолдионы, [[(2-бромэтил)амино]метил]нитро-1Нимидазол-1-этанол, производные нитроанилина, цитотоксины со сродством к ДНК, селективные по отношению к гипоксии, галогенированные ДНК лиганды, оксиды 1,2,4-бензотриазина, производные 2нитроимидазола, фторсодержащие производные нитроазола, бензамид, никотинамид, акридининтеркалатор, производные 5-тиотетразола, 3-нитро-1,2,4-триазол, производные 4,5-динитроимидазола, гидроксилированные тексафрины, цисплатин, митомицин, тирипазамин, нитрозомочевина, меркаптопурин, метотрексат, фторурацил, блеомицин, винкристин, карбоплатин, эпирубицин, доксорубицин, циклофосфамид, виндезин, этопозид, паклитаксел, высокая температура (гипертермия), и т.п.), радиопротекторы (например, цистеамин, аминоалкилдигидрофосфотиоаты, амифостин (\УК 2721), 1Ь-1, 1Ь-6 и т.п.).

- 29 017797

Радиосенсибилизирующие вещества увеличивают лизис опухолевых клеток. Радиопротекторы защищают здоровую ткань от губительного воздействия излучения.

На животное можно воздействовать любым типом радиации настолько долго, насколько доза радиации переносится пациентом без недопустимых отрицательных побочных эффектов. Подходящие типы радиотерапии включают, например, ионизирующую (электромагнитную) радиотерапию (например, рентгеновскими или гамма-лучами) или радиотерапию пучком лучей (например, излучением высокой энергии). Ионизирующее излучение определяется как излучение, содержащее частицы или фотоны, которые имеют достаточную энергию, чтобы осуществить ионизацию, то есть, отрыв или потерю электронов (как описано, например, в публикации и.8. 5770581, включенной здесь ссылкой во всей полноте). Эффектами облучения, по меньшей мере частично, может управлять врач-клиницист. Дозу облучения предпочтительно фракционируют для максимального воздействия на целевую клетку и уменьшения токсичности.

Общая доза радиации, которую назначают животному, предпочтительно составляет от приблизительно 0,01 Грей (Гр) до приблизительно 100 Гр. Более предпочтительно, в ходе лечения назначают приблизительно от 10 до 65 Гр (например, приблизительно 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 или 60 Гр). Тогда как в некоторых примерах осуществления полную дозу излучения можно назначать в течение одного дня, общую дозу идеально фракционировать и назначать в течение нескольких дней. По желанию, радиотерапию назначают в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, например по меньшей мере 5, 7, 10, 14, 17, 21, 25, 28, 32, 35, 38, 42, 46, 52 или 56 дней (приблизительно 1-8 недель). Соответственно, ежедневная доза облучения включает приблизительно 1-5 Гр (например, приблизительно 1, 1,5, 1,8, 2, 2,5, 2,8, 3, 3,2, 3,5, 3,8, 4, 4,2 или 4,5 Гр), предпочтительно 1-2 Гр (например, 1,5-2 Гр). Ежедневная доза облучения должна быть достаточной, чтобы вызывать разрушение целевых клеток. При растяжении во времени облучение предпочтительно назначают не каждый день, таким образом, давая животному возможность отдохнуть, а терапевтическим эффектам проявиться. Например, облучение по желанию назначают в течение 5 последовательных дней и не назначают в течение 2 дней, в течение каждой недели обработки, таким образом, давая 2 дня отдыха в неделю. Однако облучение можно назначать 1 день в неделю, 2 дня в неделю, 3 дня в неделю, 4 дня в неделю, 5 дней в неделю, 6 дней в неделю или все 7 дней в неделю, в зависимости от отклика животного и любых потенциальных побочных эффектов. Лучевую терапию можно начать в любое время в период лечения. Предпочтительно, облучение начинают через 1 неделю или через 2 недели и назначают в течение остающейся продолжительности периода лечения. Например, облучение назначают на 1-6 неделях или 2-6 неделях периода лечения, включающего 6 недель, для лечения, например, твердой опухоли. С другой стороны, облучение назначают на 1-5 неделях или 2-5 неделях периода лечения, включающего 5 недель. Эти примерные режимы назначения радиотерапии, однако, не предназначены для ограничения настоящего изобретения.

В качестве терапевтических агентов в настоящем изобретении также можно применять антибактериальные терапевтические агенты. Можно применять любой агент, который может подавлять, ингибировать или иным образом уменьшать функцию микробных организмов, а также любой агент, который, как предполагается, обладает такой активностью. Антибактериальные агенты включают, но не ограничиваются ими, природные и синтетические антибиотики, антитела, ингибирующие белки (например, дефензины), антисмысловые нуклеиновые кислоты, вещества, вызывающие разрушение мембраны и т.п., с использованием по отдельности или в сочетании. Действительно, можно применять любой тип антибиотика, включая, но не ограничиваясь ими, антибактериальные средства, антивирусные средства, противогрибковые средства и т.п.

В некоторых примерах осуществления настоящего изобретения соединение формул Ι-Х и один или более чем один терапевтический агент или противораковый агент назначают животному при наличии одного или больше чем одного следующего условия: при различных периодичностях, при различных продолжительностях, при различных концентрациях, при различных способах введения препарата, в отдельной композиции, в различных композициях и т.д. В некоторых примерах осуществления изобретения соединение назначают перед терапевтическим агентом или противораковым агентом, например, за 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12 или 18 ч, за 1, 2, 3, 4, 5 или 6 дней, за 1, 2, 3 или 4 недели до назначения терапевтического агента или противоракового агента. В некоторых примерах осуществления изобретения, соединение назначают после терапевтического агента или противоракового агента, например, через 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12 или 18 ч, через 1, 2, 3, 4, 5 или 6 дней, через 1, 2, 3 или 4 недели после назначения противоракового агента. В некоторых примерах осуществления изобретения соединение и терапевтический агент или противораковый агент назначают попеременно, но в различных режимах, например соединение назначают ежедневно, в то время как терапевтический агент или противораковый агент назначают один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели или один раз в четыре недели. В других примерах осуществления изобретения соединение назначают один раз в неделю, в то время как терапевтический агент или противораковый агент назначают ежедневно, один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели или один раз в четыре недели.

Соединения, охватываемые настоящим изобретением, включают все композиции, где соединения по настоящему изобретению содержатся в количестве, которое является эффективным для достижения

- 30 017797 намеченной цели. Поскольку количества, необходимые в каждом конкретном случае, отличаются, определение оптимальных диапазонов эффективных количеств каждого компонента относится к компетенции специалиста в данной области. Обычно указанные соединения или их эквивалентное количество фармацевтически приемлемой соли можно вводить млекопитающим, например людям, перорально в дозировке от 0,0025 до 50 мг/кг в день на единицу массы тела млекопитающего, подвергающегося лечению от расстройств, чувствительных к индукции апоптоза. Например, вводят приблизительно от 0,01 до 25 мг/кг перорально, для лечения, улучшения состояния или предотвращения таких расстройств. При внутримышечной инъекции доза обычно составляет половину пероральной дозы. Например, подходящая внутримышечная доза приблизительно составляла бы от 0,0025 до 25 мг/кг, т.е. приблизительно от 0,01 до 5 мг/кг.

Разовая пероральная доза может включать приблизительно от 0,01 до 1000 мг, приблизительно от 0,1 до 100 мг соединения. Разовую дозу можно назначать один или более чем один раз в день в виде одной или более чем одной таблетки или капсулы, причем каждая содержит приблизительно от 0,1 до 10, удобнее всего, приблизительно от 0,25 до 50 мг соединения или его сольватов.

В лекарственной форме для наружного применения соединение может присутствовать в концентрации приблизительно от 0,01 до 100 мг на грамм носителя. В предпочтительном примере осуществления изобретения соединение присутствует в концентрации приблизительно 0,07-1,0 мг/мл, например приблизительно 0,1-0,5 мг/мл, например приблизительно 0,4 мг/мл.

В дополнение к введению соединения в виде сырого химического продукта соединения по изобретению можно вводить как часть фармацевтического препарата, содержащего подходящие фармацевтически приемлемые носители, включающие наполнители и вспомогательные средства, которые облегчают технологическую обработку соединений в препараты, которые можно применять фармацевтически. Предпочтительно препараты, в частности, те препараты, которые можно назначать перорально или местно и которые можно применять для предпочтительного типа введения, например таблетки, драже, таблетки для рассасывания и капсулы с замедленным высвобождением, растворы для полоскания полости рта и зубные эликсиры, гели, жидкие суспензии, ополаскиватели для волос, гели для укладки волос, шампуни, а также препараты, которые можно назначать ректально, например свечи, а также подходящие растворы для введения путем внутривенной инфузии, инъекции, местно или перорально, содержат приблизительно от 0,01 до 99%, например от 0,25 до 75% активного соединения(ий), вместе с наполнителем.

Фармацевтические композиции по изобретению можно назначать любому животному, которое может подвергаться благоприятному воздействию соединений по изобретению. Прежде всего, такими животными являются млекопитающие, например люди, хотя изобретение не подразумевает такое ограничение. Другие животные включают домашних животных (коровы, овцы, свиньи, лошади, собаки, кошки и т.п.).

Соединения и их фармацевтические композиции можно вводить любым способом, при котором достигается намеченная цель. Например, введение может быть парентеральным, подкожным, внутривенным, внутримышечным, внутрибрюшным, трансдермальным, буккальным, интратекальным, внутричерепным, внутриносовым или местным. Альтернативно или одновременно, введение может быть пероральным. Назначаемая дозировка зависит от возраста, здоровья и массы реципиента, вида параллельного лечения, если таковые имеются, частоты лечения и природы желательного воздействия.

Фармацевтические препараты по настоящему изобретению получают любым хорошо известным способом, например с помощью обычных процессов смешивания, гранулирования, дражеирования, растворения или лиофилизации. Таким образом, фармацевтические препараты для перорального применения можно получать путем объединения активных соединений с твердыми наполнителями, необязательного измельчения образующейся смеси и обработки смеси гранул, после добавления подходящих вспомогательных средств, если желательно или необходимо получить ядра драже или таблеток.

Подходящими эксципиентами являются, в частности? наполнители, например сахариды, например, лактоза или сахароза, маннит или сорбит, препараты целлюлозы и/или фосфаты кальция, например трикальций фосфат или кальций гидрофосфат, а также связующие, например крахмальный клейстер, с использованием, например, кукурузного крахмала, пшеничного крахмала, рисового крахмала, картофельного крахмала, желатина, трагаканта, метилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы натрия и/или поливинилпирролидона. Если желательно, может быть добавлено дезинтегрирующее вещество, например вышеупомянутые крахмалы, а также карбоксиметилкрахмал, сшитый поливинилпирролидон, агар или же альгиновая кислота или ее соль, например альгинат натрия. Вспомогательными веществами являются, прежде всего, вещества, регулирующие текучесть, и скользящие вещества, например кварц, тальк, стеариновая кислота или ее соли, например стеарат магния или стеарат кальция, и/или полиэтиленгликоль. На ядра драже наносят подходящие покрытия, которые, если желательно, являются устойчивыми к желудочному соку. С этой целью можно применять концентрированные растворы сахарида, которые могут необязательно содержать гуммиарабик, тальк, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, растворы лака и подходящие органические растворители или смеси растворителей. Для получения покрытий, устойчивых к желудочному соку, применяют растворы подходящих препаратов целлюлозы, например фталата ацетилцеллюлозы или фталата гидроксипропил

- 31 017797 метилцеллюлозы. К таблеткам или покрытиям драже могут быть добавлены красители или пигменты, например, для идентификации или для того, чтобы охарактеризовать сочетания доз активных соединений.

Другие фармацевтические препараты, которые могут применяться перорально, включают плотно заполненные капсулы, изготовленные из желатина, а также мягкие герметичные капсулы, изготовленные из желатина и пластификатора, например глицерина или сорбита. Плотно заполненные капсулы могут содержать активные соединения в форме гранул, которые могут быть смешаны с наполнителями, например лактозой, связующими веществами, например крахмалом, и/или скользящими веществами, например тальком или стеаратом магния и, необязательно, стабилизаторами. В мягких капсулах активные соединения предпочтительно растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, например жирных маслах или жидком парафине. Кроме того, могут быть добавлены стабилизаторы.

Возможные фармацевтические препараты, которые могут применяться ректально, включают, например, свечи, которые состоят из сочетания одного или больше чем одного активного соединения с основой суппозитория. Подходящими основами суппозитория являются, например, природные или синтетические триглицериды или парафиновые углеводороды. Кроме того, также возможно применять желатиновые ректальные капсулы, которые состоят из сочетания активных соединений с основой. Возможные материалы основы включают, например, жидкие триглицериды, полиэтиленгликоли или парафиновые углеводороды.

Подходящие препараты для парентерального введения включают водные растворы активных соединений в водорастворимой форме, например в форме водорастворимых солей, и щелочные растворы. Кроме того, суспензии активных соединений можно вводить в виде соответствующих масляных суспензий для инъекции. Подходящие липофильные растворители или носители включают жирные масла, например, сезамовое масло или эфиры синтетических жирных кислот, например этилолеат, или триглицериды или же полиэтиленгликоль-400. Водные суспензии для инъекций могут содержать вещества, которые увеличивают вязкость суспензии, и включают, например, карбоксиметилцеллюлозу натрия, сорбит и/или декстран. Суспензия может также необязательно содержать стабилизаторы.

Лекарственные формы для наружного применения по настоящему изобретению предпочтительно получают в виде масел, кремов, лосьонов, мазей и т.п. путем подбора соответствующих носителей. Подходящие носители включают растительные или минеральные масла, белый петролатум (белый мягкий парафин), жиры или масла с разветвленной цепью, животные жиры и высокомолекулярный спирт (больше чем С₁₂). Предпочтительными носителями являются носители, в которых активный компонент является растворимым. Также могут быть включены эмульгаторы, стабилизаторы, смачиватели и антиоксиданты, а также, если желательно, окрашивающие или ароматизирующие вещества. Дополнительно в этих лекарственных формах для наружного применения могут применяться вещества, усиливающие проникновение через кожу. Примеры таких веществ можно найти в патентах США № 3989816 и 4444762.

Крема предпочтительно получают из смеси минерального масла, самоэмульгирующегося воска и воды, в которую добавляют активный компонент, растворенный в небольшом количестве масла, например миндальном масле. Типичным примером такого крема является крем, который включает приблизительно 40 частей воды, приблизительно 20 частей воска, приблизительно 40 частей минерального масла и приблизительно 1 часть миндального масла.

Мази можно получать путем смешения раствора активного компонента в растительном масле, например миндальном масле, с теплым мягким парафином и охлаждения этой смеси. Типичным примером такой мази является мазь, которая включает приблизительно 30% миндального масла и приблизительно 70% белого мягкого парафина по весу.

Лосьоны можно удобно получать путем растворения активного компонента в подходящем высокомолекулярном спирте, например пропиленгликоле или полиэтиленгликоле.

Следующие примеры приведены для наглядности и не ограничивают способ и композиции по настоящему изобретению. Другие подходящие модификации и адаптации разнообразных условий и параметров, с которым обычно сталкиваются в клинической терапии и которые являются очевидными для специалиста в данной области, находятся в пределах сущности и объема данного изобретения.

Пример 1. Синтез ковалентно ограниченных Зтас миметиков.

Общие способы: спектры ЯМР регистрировали при резонансной частоте протона 300 МГц. Химические сдвиги 'Н приведены относительно Ме₄З1 (0,00 м.д.), СНС1₃ (7,26 м.д.), СЭ₂НОО (3,31 м.д.) или ЭНО (4,79 м.д.) в качестве внутренних стандартов. Химические сдвиги ¹³С приведены относительно СИС1₃ (77,00 м.д.), СО₃ОЭ (49,00 м.д.) или 1,4-диоксана (67,16 м.д.) в качестве внутренних стандартов. Оптическое вращение измеряли при комнатной температуре. Соединения по изобретению могут быть очищены с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (0,1% трифторуксусной кислоты ТФУК в воде и 0,1% ТФУК в ацетонитриле в качестве элюента) и выделены в виде солей с ТФУК.

Общая методика А (конденсация карбоновой кислоты и амина).

К раствору двух субстратов в СН2С12 (20 мг/мл для субстрата, находящегося в меньшем количестве) добавляли ЕЭС (1,1 экв. на аминогруппу), НОВ! (1,1 экв. на аминогруппу) и Ν,Ν-диизопропилэтиламин (4 экв. на аминогруппу) при 0°С при перемешивании. Смесь перемешивали при комнатной температуре в

- 32 017797 течение восьми часов и затем концентрировали. Остаток очищали хроматографически с получением продукта.

Общая методика Б (удаление Вос-группы).

К раствору субстрата в метаноле (20 мг/мл) добавляли раствор НС1 в 1,4-диоксане (4 М, 10-20 экв. на одну Вос-группу). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем конденсировали с получением продукта.

Пример 2. Синтез полупродуктов для получения Бшас миметиков.

Полупродукты согласно схеме получения конформационно ограниченных Бшас миметиков могут быть получены с использованием методологии, описанной в схемах 1-7.

Реагенты и условия: (а) 1. 4 N НС1 в 1,4-диоксане, метанол; Ν. Вос-Эар(2)-ОН, ЕЭС, НОВ!, Ν,Νдиизопропилэтиламин, СН₂С1₂, 52% для двух стадий; (б) О₃, затем РРй₃, СН₂С1₂, 90%; (в) Н₂, 10% Рд-С, изо-РгОН, 41%; (г) Н₂, 10% Ρά-С, изо-РгОН; (д) №ВН(ОЛс)₃, ТГФ; (е) 9^Ν (2 экв.), ТГФ, нагревание с обратным холодильником, 12 ч, затем 3 Ν №О11 (2 экв.), 35% Н₂О₂ (2,5 экв.), 0°С - комнатная температура, 85%; (ж) 1. периодинан по Дессу-Мартину, СН₂С1₂; й. Н₂, 10% Рд-С, изо-РЮН, 50% для двух стадий; (з) Н2,10% Рд-С, изо-РгОН; (и) \аВ11(ОДс);. ТГФ.

Синтез интермедиатов 5 и 7 представлен на схеме 1. Соединение 2 может быть получено в пять стадий из пироглутаминовой кислоты 1 согласно опубликованным методам (см.: (1) 2йапд, 1.; Хюпд, С; \апд, \.; Ушд, 1.; НгиЬу, V., 1. Огд. Гей, 2002, 4 (23), 4029-4032, (2) Ро1уак, Р. апд ЬиЬе11, ϋ. 1. Огд, Сйеш. 1998, 63, 5937-5949, и (3) Те!гайедгоп Гейегз 2005, 46, 945-947) в виде смеси двух диастереомеров с К-формой в качестве основного продукта (соотношение составляет примерно 4:1). Удаление Восгруппы в соединении 2 и последующая конденсация с ^а^трет-бутоксилкарбонил^^Р^бензоксилкарбонил)-Г-диаминопропионовой кислотой (Вос-Оар(2)-ОН) дали амид 3. Окисление озоном двойной связи углерод-углерод в соединении 3 приводило к альдегиду 4. Отщепление СЬ/-группы в соединении 4, внутримолекулярная конденсация образующегося амина с альдегидной группой и последующее восстановление енамина осуществляли в одном реакторе с получением соединения 5 при продолжительном времени реакции. С другой стороны, удаление защитной СВ/ группы в соединении 4, внутримолекулярная циклизация, выделение енаминового интермедиата и восстановление давали соединение 5. В этом превращении получали только соединение 5, и не было обнаружено образования его изомера, что дает возможность предположить, что в этих условиях аминоальдегид из изомера, находящегося в меньшем количестве, не циклизуется.

К раствору соединения 2 (540 мг, 2 ммол) в 20 мл метанола добавляли 4 мл 4 Ν раствора НС1 в 1,4диоксане. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрировали с получением аммонийной соли. К смеси этой соли в 15 мл дихлорметана добавляли 1,17 г (2,4 экв.) ВосОар(2)-ОН-ПСНЛ, 460 мг (2,4 ммол) ЕОС, 320 мг (2,4 ммол) НОВ! и 3 мл Ν,Ν-диизопропилэтиламина. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрировали. Остаток очищали хроматографически с получением соединения 3 (УР-348) (580 мг, 59%). ЯМР ^ХН (300 МГц, СПС13, ТМС) (основной изомер) δ 7,34-7,28 (м, 5Н), 5,80-5,77 (м, 1Н), 5,59 (м, 1Н), 5,36-5,33 (д, 1 = 10,0 Гц, 2Н), 5,19-5,01 (м, 4Н), 4,67-4,62 (м, 1Н), 4,47-4,44 (м, 1Н), 3,76-3,74 (с, 1Н), 3,74-3,71 (с, 2Н), 2,32-2,30 (м, 1Н), 2,16-2,12 (м, 1Н), 1,99-1,95 (м, 2Н), 1,42 (с, 9Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СОС13) δ 172,4, 170,5, 156,5, 155,2, 136,4, 134,6, 133,8, 128,3, 127,9, 118,5, 117,1, 80,0, 66,6, 59,7, 58,2, 52,6, 43,4, 29,2, 28,1, 26,6.

О3 пропускали через раствор соединения 3 (490 мг, 1 ммол) в 20 мл СН2С12 при -78°С до перехода в

- 33 017797 бледно-голубой цвет. О₃ пропускали в течение еще 15 мин перед пропусканием воздуха, чтобы избавиться от избытка О₃. После добавления 3 мл Εΐ₃Ν смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Растворитель испаряли, а остаток очищали хроматографически с получением альдегида 4 (ΥΡ-367) (340 мг, 69%). ЯМР ¹Н (300 МГц, СОС1з, ТМС) (основной изомер) δ 9.78-9,67 (м, 1Н), 7,53-7,32 (м, 5Н), 5,44 (с, 1/2 Н), 5,32 (с, 1/2 Н), 5,15-5,06 (м, 2Н), 4,64 (м, 1Н), 4,40-4,39 (м, 1Н), 3,78-3,76 (с, 3/2 Н), 3,76-3,74 (с, 3/2Н), 3,48-3,42 (м, 3Н), 2,78-2,52 (м, 1Н), 2,40-2,20 (м, 1Н), 2,16 (м, 2Н), 2,06-1,89 (м, 1Н), 1,44-1,43 (м, 9Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, С'ОСБ) δ 200,3, 199,5, 172,6, 172,2, 170,3, 156,5, 136,4, 128,4, 128,0, 66,7, 59,7, 59,1, 54,3, 52,4, 52,3, 48,4, 43,3, 29,6, 28,2, 21,0.

К раствору соединения 4 (290 мг, 0,6 ммол) в 20 мл изопропанола добавляли 0,2 г 10% Ρά/С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Н₂ в течение ночи, фильтровали через целит и концентрировали. Остаток растворяли в сухом ТГФ. К этому раствору добавляли №ВН(ОАс)₃ (380 мг, 1,8 ммол). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, разбавляли СН₂С1₂, промывали насыщенным раствором хлористого натрия, сушили над №₂8О₄ и концентрировали. Остаток очищали хроматографически с получением соединения 5 (72 мг, 35%). [α]²⁰ο -30.2 (с = 1,7, СНС13); ЯМР ^ХН (300 МГц, СВС13, ТМС) δ 5,45 (шд, I = 8,0 Гц, 1Н), 4,67 (м, 1Н), 4,52 (т, I = 9,0 Гц, 1Н), 4,23 (м, 1Н), 3,74 (с, 3Н), 3,20 (м, 2Н), 2,94 (м, 1Н), 2,74 (дд, I = 13,6, 10,9 Гц, 1), 2,35 (м, 1Н), 2,14 (м, 1Н), 1,99 (м, 1Н), 1,86-1,74 (м, 3Н), 1,66 (м, 1Н), 1,43 (шс, 9Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СБС1₃, ТМС) δ 173,42, 170,60, 155,16, 79,68, 59,46, 58,39, 54,92, 52,44, 46,72, 37,45, 32,15, 29,64, 28,29, 26,98.

Гидроборирование С=С двойной связи в соединении 3 с помощью 9-ΒΒΝ и последующее щелочное окисление образующегося в результате борана приводило к спирту 6. Окисление соединения 6 периодинаном по Дессу-Мартину давало смесь двух альдегидов, которые циклизовали по той же самой методике, что и для соединения 5 с получением соединения 7. Как и для соединения 5, при этом превращении получали только один изомер.

Аналитические данные для соединения 7: [α]²⁰ _ο -23,2 (с = 1,0, СНС1₃); ЯМР *Н (300 МГц, СОС1₃, ТМС) δ 5,23 (шд, I = 8,0 Гц, 1Н), 4,79 (м, 1Н), 4,65 (дд, I = 9,7, 8,2 Гц), 4,22 (м, 1Н), 3,74 (с, 3Н), 3,02-2,80 (м, 4Н), 2,38-1,70 (м, 9Н), 1,43 (шс, 9Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СЭС13, ТМС) δ 173,38, 171,59, 155,09, 79,68, 62,03, 59,82, 53,72, 53,15, 52,48, 50,09, 34,66, 34,55, 29,47, 28,31, 27,33.

Схема 2

амидный интермедиат

Аналитические данные для ΥΡ-248Ρ: Спектр ЯМР ^ХН показывает, что это соединение содержит два ротамера в соотношении 2:1. ЯМР ^ХН (300 МГц, СВС13, ТМС) δ 7.47-7,44 (м, 1Н), 7,38-7,32 (м, 4Н), 5,655,62 (д, I = 8 Гц, 1Н), 5,31-5,16 (м, 2Н), 4,64-4,60 (м, 1Н), 4,51-4,46 (т, I = 8 Гц, 1Н), 4,24-4,23 (м, 1Н), 4,234,21 (м, 1Н), 3,75 (с, 1Н), 3,73 (с, 2Н), 3,66-3,63 (м, 1Н), 3,63-3,61 (м, 1Н), 3,61-3,31 (м, 1Н), 2,36-2,34 (м, 1Н), 2,11-1,76 (м, 6Н), 1,44-1,45 (с, 9Н).

Аналитические данные для амидного полупродукта: ЯМР *Н (300 МГц, СОС1₃, ТМС) δ 5.79 (шд, I = 7,0 Гц, 1Н), 4,50-4,35 (м, 2Н), 4,05 (м, 1Н), 3,98-3,85 (м, 2Н), 3,70 (с, 3Н), 3,32-3,04 (м, 2Н), 2,54 (м, 1Н), 2,40-2,26 (м, 2Н), 2,25-1,60 (м, 6Н), 1,39 (с, 9Н), 0,98-0,89 (м, 6Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СОС^) δ 173,12, 172,52, 168,85, 154,69, 79,80, 59,51, 56,11, 54,38, 53,51, 52,23, 46,18, 42,02, 32,51, 31,12, 28,12, 26,54, 25,81, 22,69, 22,40.

- 34 017797

Аналитические данные для ΥΡ-237Ρ: [α]²⁰ο -21.5° (с = 1,0, СНС13); ЯМР ¹Н (300 МГц, СПС13, ТМС) δ 3,71 (т, 1 = 6,5 Гц, 3Н), 3,60 (дд, 1 = 9,0, 5,4 Гц, 1Н), 3,11 (м, 1Н), 2,05 (м, 1Н), 1,95-1,63 (м, 3Н), 1,46 (с, 9Н), 1,25 (м, 1Н), 0,89 (с, 9Н), 0,05 (с, 6Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СПС1₃) δ 174,5, 80,8, 61,5, 60,6, 57,5, 38,8,

31,8, 30,4, 28,0, 25,9, 18,2, -5,4; масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ для [М+Н]⁺330,2464; обнаружено 330,2466.

Аналитические данные для ΥΡ-238Ρ: [α]²⁰ο -90,0° (с = 1,67, СНС13); Спектр ЯМР ¹Н показывает, что это соединение содержит два ротамера в соотношении 1:1. ЯМР ¹Н (300 МГц, СЭС13, ТМС) δ 7.28 (м, 5Н), 5,59 (м, 1Н), 5,35 (м, 1Н), 5,20-5,05 (м, 2Н), 4,85 (м, 1/2 Н), 4,65 (м, 1/2 Н), 4,46 (м, 1Н), 4,35 (м, 1Н), 3,80 (м, 1/2 Н), 3,70-3,50 (м, 2Н), 3,40 (м, 1Н), 3,25 (м, 1/2 Н), 2,32 (м, 1Н), 2,20-1,50 (м, 4Н), 1,46 (с, 4,5н), 1,44 (с, 4,5Н), 1,43 (с, 4,5Н), 1,41 (с, 4,5Н); масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ 558,2791 для |М-\а|'; обнаружено 558,2794.

Аналитические данные для ΥΡ-239: [α]²⁰ο -51,6° (с = 1,67, СНС13); Спектр ЯМР ¹Н показывает, что это соединение содержит два ротамера в соотношении 2:1. ЯМР ¹Н (300 МГц, СЭС13, ТМС) δ 9,76 (с, 2/3 Н), 9,71 (с, 1/3 Н), 7,40-7,28 (м, 5Н), 5,72-5,30 (м, 2Н), 5,20-4,95 (м, 2Н), 4,90-4,25 (м, 3Н), 3,52-3,05 (м, 3Н), 2,90-1,60 (м, 4Н), 1,50-1,35 (м, 18Н); масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ 556,2635 для [М+№]⁺; обнаружено 556,2629.

Аналитические данные для ΥΡ-239Ρ: [α]²% -8,4° (с = 0,65, СНС13); ЯМР ¹Н (300 МГц, СЭС13, ТМС) δ 5,49 (шд, 1 = 8,1 Гц, 1Н), 4,70 (м, 1Н), 4,41 (т, 1 = 9,3 Гц, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 3,25-3,18 (м, 2Н), 2,89 (м, 1Н), 2,75 (дд, 1 = 13,5, 11,1 Гц, 1Н), 2,34 (м, 1Н), 2,18-1,60 (м, 6Н), 1,49 (с, 9Н), 1,44 (с, 9н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СПС1₃) δ 171,8, 170,4, 155,2, 81,7, 79,5, 60,6, 58,5, 54,9, 52,3, 46,9, 37,5, 32,1, 28,3, 28,0, 27,0; массспектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ 406,2318 для [М+№]⁺; обнаружено 406,2317.

Аналитические данные для ΥΡ-244: ЯМР ¹Н (300 МГц, СПС1₃, ТМС) δ 7,92-7,75 (м, 1Н), 7,48-7,46 (м, 1Н), 7,37-7,24 (м, 15Н), 6,24-6,18 (т, 1 = 8,3 Гц, 1Н), 5,76-5,70 (т, 1 = 7,3 Гц, 1Н), 5,15 (с, 2Н), 4,70-4,65 (м, 1Н), 4,57-4,54 (м, 1Н), 4,15-4,10 (м, 2Н), 3,60-3,40 (м, 1Н), 2,67-2,61 (м, 2Н), 2,12-2,01 (м, 2Н), 1,821,76 (м, 2Н), 1,48-1,47 (с, 9Н).

Аналитические данные для ΥΡ-244Ρ2: Спектр ЯМР ¹Н показывает, что это соединение содержит два ротамера в соотношении 1:1. ЯМР ¹Н (300 МГц, СЭС1₃, ТМС) δ 7.83-7,69 (м, 1Н), 7,47-7,45 (м, 1Н), 7,36-7,26 (м, 15Н), 6,24-6,18 (т, 1 = 8,2 Гц, 1Н), 5,15 (с, 2Н), 4,89-4,79 (м, 1Н), 4,70-4,62 (кв, 1 = 6,9 Гц, 1Н), 4,23-4,07 (м, 2Н), 3,60-3,47 (1Н), 2,82 (с, 3/2 Н), 2,79 (с, 3/2 Н), 2,62-2,59 (м, 2Н), 2,48-2,30 (м, 1Н), 2,132,03 (м, 2Н), 1,86-1,79 (м, 2Н), 1,51 (с, 9/2 Н), 1,49 (с, 9/2 Н), 1,38-1,35 (д, 1 = 7,0 Гц, 3Н).

Аналитические данные для ΥΡ-245: ЯМР ¹Н (300 МГц, СПС1₃, ТМС) δ 9,09-9,07 (д, 1 = 7,2 Гц, 1Н), 7,32-7,18 (м, 10Н), 6,99-6,80 (ш, 1Н), 6,23-6,20 (д, 1 = 7,3 Гц, 1Н), 5,08-5,04 (м, 1Н), 4,72-4,67 (т, 1 = 8,5 Гц, 1Н), 4,33-4,18 (м, 1Н), 3,07-2,94 (м, 1Н), 2,80 (с, 3Н), 2,73-2,54 (м, 1Н), 2,53-2,38 (м, 1Н), 2,31-2,24 (т, 1 = 11 Гц, 1Н), 2,18-2,00 (м, 2Н), 1,75-1,74 (м, 2Н), 1,53 (с, 9Н), 1,35-1,26 (д, 1 = 7,1 Гц, 3Н).

Аналитические данные для ΥΡ-370: ЯМР ¹Н (300 МГц, СПС1₃, ТМС) δ 7.60-7,05 (м, 9Н), 5,78-5,50 (м, 1Н), 5,20-5,11 (м, 2Н), 4,65-4,30 (м, 2Н), 4,28-4,22 (м, 1Н), 3,60-3,48 (м, 1Н), 3,42-3,38 (м, 1Н), 2,932,68 (м, 2Н), 2,58-2,40 (м, 1Н), 2,28-1,98 (м, 4Н), 1,98-1,70 (м, 6Н), 1,44 (с, 9Н).

Аналитические данные для ΥΡ-372; Спектр ЯМР ¹Н показывает, что это соединение содержит два ротамера в соотношении 1:1. ЯМР ¹Н (300 МГц, СПС1₃, ТМС) δ 7.45 (м, 1Н), 7,36-7,10 (м, 9Н), 6,72-6,58

- 35 017797 (м, 1Н), 5,21-5,14 (т, 1 = 9,9 Гц, 2Н), 4,82 (м, 1Н), 4,48-4,41 (м, 1Н), 4,14-4,09 (м, 2Н), 3,82-3,60 (м, 1Н),

3.20- 2,90 (м, 2Н), 2,79 (с, 3/2 Н), 2,77 (с, 3/2 Н), 2,50-2,36 (м, 1Н), 2,18-2,01 (м, 4Н), 1,89-1,82 (м, 6Н), 1,49 (с, 9/2 Н), 1,46 (с, 9/2 Н), 1,37-1,33 (м, 3Н); масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ 698,3530 для [М+№]⁺; обнаружено 698,3541.

Аналитические данные для ΥΡ-373: ЯМР ¹Н (300 МГц, СПС1₃, ТМС) δ 8,77-8,75 (д, 1 = 7,1 Гц, 1Н),

7.21- 7,05 (м, 4Н), 6,90-6,73 (ш, 1Н), 5,06-4,98 (м, 2Н), 4,65-4,59 (т, 1 = 8,1 Гц, 1Н), 4,23-4,17 (м, 1Н), 3,023,01 (м, 1Н), 2,76 (с, 3Н), 2,70-2,68 (м, 2Н), 2,60-2,48 (м, 2Н), 2,38 (м, 1Н), 2,12-2,03 (м, 4Н), 1,82-1,72 (м, 6Н), 1,47 (с, 9Н), 1,32-1,29 (д, 1 = 7,1 Гц, 3Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СОС^) δ 170,6, 168,4, 137,6, 136,4, 129,3, 128,9, 127,2, 125,8, 60,3, 58,2 54,4, 49,3, 47,4, 46,8, 34,9, 31,8, 29,0, 28,2, 27,6, 18,7, 14,1; массспектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ 564,3162 для [М+№]⁺; обнаружено 564,3163.

Схема 5

Соединение, представленное формулой А, где т равно 1-2, а К₁ и К₂ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенной карбоциклической, необязательно замещенной гетероциклической, необязательно замещенной арильной и необязательно замещенной гетероарильной группой, может быть получено методом, показанным на схеме 5. Вкратце, защита аминогруппы в интермедиате а с помощью ϋδζ защитной группы дает интермедиат б. Гидролиз эфирной группы в соединении б приводит к кислоте в. Конденсация соединения в с амином Ν^Ε² дает соединение формулы А.

Схема 6

е

Формула Б

Соединение, представленное формулой Б, где Α¹, Α², Ζ, Χ, Т, и, т и К⁵ имеют значения как описано выше для формулы Ι, может быть получено как показано на схеме 6. Вкратце, удаление защитной Восгруппы в соединении а дает амин б. Конденсация соединения б с соответствующей Вос-защищенной аминокислотой дает амид в. Удаление защитной С^-группы в соединении в дает амин г. Введение К⁵ в аминогруппу в соединении г привело к соединению д. К5 можно ввести путем замещения в соединении г соответствующим алкилгалогенидом (например, Ме1) или другими реакциями нуклеофильного замещения с помощью подходящих электрофилов. Если К⁵ представляет собой СОК⁷, СОК⁷ можно ввести путем конденсации соединения г с соединением К⁷СО-Ь, где Г· представляет собой уходящую группу. Например, К⁷СО-Ь может представлять собой соответствующую карбоновую кислоту (т.е., К⁷СО₂Н) или ацилхлорид (т.е., К⁷СОС1). Удаление защитной Вос-группы в соединении д дает соединение е. Введение

- 36 017797 группы Α₁ путем замещения алкилгалогенидом в соединении е или путем восстановительного аминирования соединения е с соответствующим альдегидом дает 8тас-миметик, представленный формулой Б.

В одном примере осуществления изобретения СОК⁷ вводят путем конденсации соединения г с соответствующей карбоновой кислотой (т.е., К⁷СО2Н). В другом примере осуществления изобретения конденсацию К⁷СО2Н с соединением г проводят в присутствии активирующего агента (например, дициклогексилкарбодиимида, 1 -этил-3 -(3 -диметиламинопропил)карбодиимида, бензотриазол-1 -илокси)трипирролидинофосфониум гексафторфосфата). В другом примере осуществления изобретения активирующий агент представляет собой 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид. В другом примере осуществления изобретения конденсацию К⁷СО₂Н с соединением г проводят в присутствии активирующего агента и одного или более чем одного дополнительного аддитива (например, Ν-гидроксибензотриазола) для оптимизации параметров реакции, таких как выход. В одном примере осуществления изобретения реакция завершается в течение примерно от 1 ч до примерно 24 ч. В одном примере осуществления изобретения реакцию проводят при температуре примерно от -20 до примерно 25°С. В одном примере осуществления изобретения реакцию проводят в инертном органическом растворителе, например, ацетонитриле, бензоле, хлороформе, 1,2-дихлорэтане, 1,2-диметоксиэтане, диметилформамиде, диметилсульфоксиде, диоксане, дихлорметане, №метил-2-пирролидиноне или тетрагидрофуране.

Соединение, представленное формулой В, где т равно 1 или 2, а К¹, К² и К⁷ имеют значения как описано выше для формулы I, может быть получено способом, представленным на схеме 7. Восстановление эфирной группы в соединении а дает спирт 6. Мезилирование гидроксильной группы в соединении б и последующее замещение в образующемся в результате мезилате с помощью азида натрия дает азид в. Восстановление азида с помощью ΡΡΕ3 в ТГФ-Н2О дает амин г. Восстановительное аминирование соединения г с альдегидом К¹СНО дает амин д. Введение К в аминогруппу в соединении д дает соединение формулы В. Когда К равно К², его можно присоединить к аминогруппе путем замещения алкилгалогенидом или другим подходящим электрофилом, или же путем восстановительного аминирования альдегида. Если К представляет собой СОК⁷, его можно ввести путем конденсации соединения д с соединением К⁷СО-Ь, где Б представляет собой уходящую группу. В одном примере осуществления изобретения К⁷СО-Ь представляет собой кислоту (т.е., К⁷СО2Н) или ацилхлорид (т.е., К⁷СОС1).

Пример 3.

Аналитические данные для ΥΡ-245Ρ3: ЯМР ¹Н (300 МГц, Б2О, ТМС) δ 7,28-7,20 (м, 10Н), 5,97 (с, 1Н), 5,25 (ш, 1Н), 4,51 (ш, 1Н), 3,91-3,84 (кв, 1 = 7,1 Гц, 1Н), 3,82-3,70 (м, 1Н), 3,58-3,55 (м, 1Н), 3,48-3,43 (м, 1Н), 3,23-3,19 (т, 1 = 12 Гц, 1Н), 2,90 (с, 3Н), 2,56 (с, 3Н), 2,40-2,36 (м, 1Н), 2,13-1,73 (м, 5Н), 1,41-1,38 (д, 1 = 7,1 Гц, 3Н); масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ для [М+Н]⁺ 492,2975; обнаружено 492,2971.

Пример 4.

- 37 017797

Аналитические данные для ΥР-246Р: ЯМР ¹Н (300 МГц, Б₂О, ТМС) δ 7,33-7,13 (м, 15Н), 6,03-6,01 (м, 1Н), 5,32-5,30 (м, 1Н), 4,64-4,61 (м, 1Н), 4,31 (с, 2Н), 3,85-3,83 (кв, 1 = 7,1 Гц, 1Н), 3,69 (м, 1Н), 3,593,51 (м, 1Н), 3,12-3,08 (т, 1 = 11,6 Гц, 1Н), 2,55 (с, 3Н), 2,40-2,28 (м, 1Н), 2,09-2,04 (м, 1Н), 1,81-1,66 (м, 4Н), 1,37-1,35 (д, 1 = 7,1 Гц, 3Н); масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ для [М+Н]⁺568,3288; обнаружено 568,3284.

Пример 5.

8М-330

Аналитические данные для 8М-330: ЯМР ¹Н (300 МГц, Б₂О, ТМС) δ 8,88-8,76 (м, 1Н), 7,30-7,18 (м, 10Н), 5,95-5,93 (д, 1 = 4,7 Гц, 1Н), 4,93-4,91 (м, 1Н), 4,38-4,26 (м, 1Н), 4,24 (м, 1Н), 3,90-3,86 (м, 1Н), 3,693,65 (м, 1Н), 3,50-3,38 (м, 2Н), 2,58 (с, 3Н), 2,23-2,18 (м, 1Н), 2,04 (с, 3Н), 1,93 (с, 2Н), 1,81-1,74 (м, 4Н), 1,43-1,41 (д, 1 = 7,0 Гц, 3Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, О2О) δ 175,3, 173,3, 172,9, 170,2, 141,2, 129,2, 128,1, 127,7,

62,3, 62,1 58,5, 57,8, 57,3, 52,6, 51,8, 32,2, 31,3, 27,5, 21,5, 20,7, 15,5; масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ для [М+Н]⁺ 520,2924; обнаружено 520,2924.

Пример 6.

Аналитические данные для 8М-337: ЯМР ^ХН (300 МГц, СВ3ОБ, ТМС) δ 7,34-7,27 (м, 15Н), 6,18-6,15 (д, 1 = 8,0 Гц, 1Н), 4,60-4,57 (м, 1Н), 4,28 (м, 1Н), 4,12-4,07 (м, 1Н), 3,99-3,82 (м, 4Н), 3,50-3,40 (м, 1Н), 2,67 (с, 3/2Н), 2,66 (с, 3/2Н), 2,34 (м, 1Н), 2,07-2,00 (м, 3Н), 1,88-1,81 (м, 2Н), 1,56-1,52 (д, 1 = 6,8 Гц, 3Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СВ3ОВ) δ 174,6, 174,0, 169,6, 169,4, 143,1, 136,4, 130,3, 129,5, 128,6, 128,2, 127,8, 62,7,

58,3, 54,2, 41,6, 33,3, 31,9, 28,2, 16,3.

Пример 7.

3Μ-350

Аналитические данные для 8М-350: ЯМР ¹Н (300 МГц, СВ3ОБ, ТМС) δ 8,94-8,92 (д, 1 = 7,9 Гц, 1Н), 7,34-7,26 (м, 12Н), 7,04-6,98 (м, 2Н), 6,18-6,15 (д, 1 = 7,9 Гц, 1Н), 4,60-4,57 (м, 1Н), 4,31 (ш, 1Н), 4,02-3,76 (м, 4Н), 3,50 (м, 1Н), 2,68 (с, 3Н), 2,34 (м, 1Н), 2,11-1,82 (м, 5Н), 1,55-1,53 (д, 1 = 7,0 Гц, 3Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СВ3ОВ) δ 173,2, 170,2, 169,7, 164,8, 161,5, 143,1, 132,5, 131,9, 129,6, 128,6, 128,1, 116,2, 62,7, 58,4,

53,9, 40,5, 33,3, 32,3, 31,8, 28,3, 16,3; масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ для | М-№|' 636,2962; обнаружено 636,2974.

Пример 8.

Аналитические данные для 8М-356: ЯМР ¹Н (300 МГц, СВ3ОБ, ТМС) δ 8,93-8,91 (д, 1 = 8,0 Гц, 1Н), 7,38-7,26 (м, 11Н), 6,90-6,86 (м, 2Н), 6,18-6,16 (д, 1 = 7,9 Гц, 1Н), 5,10-5,00 (м, 1Н), 4,61-4,58 (м, 1Н), 4,404,28 (м, 1Н), 4,15-3,91 (м, 4Н), 3,36 (м, 2Н), 2,69 (с, 2Н), 2,67 (с, 1Н), 2,42-2,28 (м, 1Н), 2,02-1,95 (м, 5Н), 1,55-1,53 (д, 1 = 7,0 Гц, 3Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СВ3ОВ) δ 173,2, 172,4, 170,2, 169,7, 169,4, 143,2, 134,1,

129,6, 128,4, 128,1, 120,1, 112,0, 104,1, 62,7, 58,4, 53,9, 34,2, 33,3, 32,3, 31,7, 28,3, 16,2; массспектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ для |М-№|' 654,2868; обнаружено 654,2866.

Пример 9.

Аналитические данные для 8М-376: ЯМР ¹Н (300 МГц, СВ₃ОБ, ТМС) δ 8,50-8,43 (м, 1Н), 7,46-7,44

- 38 017797 (м, 1Н), 7,32-7,31 (м, 4Н), 7,26-7,24 (м, 1Н), 7,15-7,11 (м, 3Н), 5,09 (м, 2Н), 4,43 (м, 1Н), 4,20(м, 1Н), 4,013,92 (м, 4Н), 3,58-3,42 (м, 1Н), 2,83-2,81 (м, 2Н), 2,70 (с, 1Н), 2,68 (с, 2Н), 2,38-2,25 (м, 1Н), 2,09-1,82 (м, 8Н), 1,27-1,53 (д, 1 = 7,0 Гц, 3Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, (СГОГ.)) δ 174,1, 173,6, 169,6, 169,3, 138,5, 137,9,

136,5, 130,2, 129,8, 128,0, 127,0, 62,9, 58,3, 54,4, 41,6, 32,1, 31,9, 31,4, 30,2, 28,4, 21,7, 16,4; массспектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ для | М-№|' 582,3056; обнаружено 582,3080.

Пример 10.

Аналитические данные для 8М-377: ЯМР ¹Н (300 МГц, СП3ОБ, ΤМС) δ 8,50-8,40 (м, 1Н), 7,47-7,44 (м, 1Н), 7,36-7,31 (м, 2Н), 7,15-7,01 (м, 5Н), 5,09 (м, 2Н), 4,43 (м, 1Н), 4,38-4,28 (м, 1Н), 4,12 (м, 1Н), 4,023,93 (м, 4Н), 2,83-2,81 (м, 2Н), 2,70 (с, 3Н), 2,38-2,28 (м, 1Н), 2,12-1,82 (м, 8Н), 1,56-1,53 (д, 1 = 7,0 Гц, 3Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, СП3ОП) δ 173,8, 173,5, 169,7, 169,3, 138,5, 132,5, 131,8, 129,9, 126,9, 116,3, 62,9,

58,3, 57,8, 54,1, 40,6, 33,4, 32,2, 31,7, 30,2, 28,4, 21,7, 16,3; масс-спектрометрия высокого разрешения: рассчитано т/ζ для [М+Н]⁺ 578,3143; обнаружено 578,3147.

Пример 11.

Аналитические данные для 8М-401: ЯМР *Н (МеОН-й₄, 300 МГц) δ 7,37 (м, 2Н), 7,30 (м, 5Н), 7,05 (м, 2Н), 4,46 (м, 2Н), 4,33 (м, 2Н), 3,92-3,81 (м, 6Н), 3,54 (м, 1Н), 3,32 (м, 1Н), 2,74 (с, 3Н), 2,34 (м, 1Н), 2,16-1,78 (м, 5Н), 1,54 (д, I = 6,3 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-ά^ 300 МГц) δ 173,2, 168,8, 168,5, 164,0, 160,8,

135,3, 129,4, 129,2, 128,8, 126,9, 115,3, 115,0, 62,0, 61,2, 57,3, 57,1, 53,2, 53,0, 42,9, 42,3, 40,7, 32,5,

31,3,27,5, 15,5.

Пример 12.

Аналитические данные для 8М-402: ЯМР *Н (МеОН-й₄, 300 МГц) δ 8,60 (м, 1Н), 7,40 (м, 4Н), 7,02 (м, 4Н), 4,52-4,43 (м, 2Н), 4,35-4,29 (м, 2Н), 4,08-3,80 (м, 6Н), 3,54 (м, 1Н), 3,38 (м, 1Н), 2,70 (с, 3Н), 2,33 (м, 1Н), 2,13-1,82 (м, 5Н), 1,54 (д, I = 6,9 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-04, 300 МГц) δ 173,1, 172,8, 168,8,

168,5, 164,1, 135,1, 131,5, 131,0, 129,2, 115,3, 115,0, 61,9, 57,3, 52,9, 42,3, 39,6, 32,4, 31,3, 30,9, 27,3, 15,3.

Пример 13.

Аналитические данные для 8М-403: ЯМР *Н (МеОН-й₄, 300 МГц) δ 7,39-7,22 (м, 9Н), 7,08-7,02 (м, 4Н), 6,15 (д, I = 6,0, 1Н), 4,97 (м, 1Н), 4,54 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 4,02-3,66 (м, 6Н), 3,59-3,54 (м, 1Н), 2,66 (с, 3Н), 2,33 (м, 1Н), 2,11-1,80 (м, 5Н), 1,53 (д, I = 6,6 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-дд, 300 МГц) δ 173,4,

172,4, 168,8, 168,4, 164,2, 160,9, 138,1, 135,3, 129,8, 129,7, 129,6, 129,5, 129,4, 129,0, 128,7, 128,6, 126,9,

115,6, 115,3, 115,0, 72,6, 61,9, 57,3, 56,2, 53,1, 47,0, 40,6, 32,3, 31,5, 31,1, 27,4, 15,5.

Пример 14.

- 39 017797

Аналитические данные для 8М-404: ЯМР 'Н (МеОН-й₄, 300 МГц) δ 7,37-7,25 (м, 6Н), 7,11-6,91 (м, 6Н), 6,15 (д, I = 7,5, 1Н), 4,83 (м, 1Н), 4,54 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 4,02-3,60 (м, 6Н), 3,51 (м, 1Н), 2,94 (м, 2Н), 2,72 (с, 3Н), 2,23 (т, 1Н), 2,11-1,80 (м, 5Н), 1,53 (д, I = 6,6 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-<1₄, 300 МГц) δ 174,0, 172,4, 168,7, 168,4, 163,7, 160,8, 137,9, 137,4, 130,7, 130,6, 129,9, 129,8, 129,6, 129,5, 115,6, 115,3,

115,1, 115,0, 114,0, 71,5, 67,2, 57,4, 56,0, 55,9, 52,8, 51,7, 35,0, 32,3, 31,5, 31,1, 30,7, 27,4, 15,4.

Пример 15.

Аналитические данные для 8М-405: ЯМР ¹Н (МеОН-О4, 300 МГц) δ 7,40-7,25 (м, 10Н), 6,15 (с, 1Н), 4,61-4,55 (м, 1Н), 4,28-4,22 (м, 1Н), 4,00-3,95 (м, 2Н), 3,86-3,81 (м, 1Н), 3,68-3,66 (м, 1Н), 3,45-3,40 (м, 1Н), 2,94-2,92 (м, 1Н), 2,72 (с, 3Н), 2,68-2,57 (м, 2Н), 2,34-2,23 (м, 2Н), 2,16-1,79 (м, 7Н), 1,66-1,53 (м, 4Н), 1,52 (д, I = 7,2 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-<14, 300 МГц) δ 176,1, 172,2, 168,8, 168,3, 142,2, 142,1, 132,2, 132,0, 129,1, 128,7, 128,4, 127,9, 127,8, 127,7, 127,5, 127,2, 61,8, 57,5, 57,3, 53,1, 38,9, 38,7, 37,2, 32,5, 32,2,

31,4, 31,0, 27,4, 24,9, 15,3.

Пример 16.

Аналитические данные для 8М-406: ЯМР ¹Н (МеОН-О4, 300 МГц) δ 7,38-7,25 (м, 10Н), 6,14 (д, I = 7,5 Гц, 1Н), 4,62-4,56 (м, 1Н), 4,30-4,25 (м, 1Н), 4,05-3,96 (м, 2Н),3,87-3,49 (м, 4Н), 2,72-(с, 3Н), 2,46 (м, 2Н), 2,37-2,32 (м, 1Н), 2,15-2,00 (м, 5Н), 1,84-1,80 (м, 1Н), 1,56 (д, I = 5,4 Гц, 3Н), 1,00 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-О4, 300 МГц) δ 175,7, 172,3, 168,8, 168,3, 142,2, 142,1, 132,2, 132,0, 129,1, 129,0, 128,7, 128,4, 127,8,

127,7, 127,5, 127,2, 61,8, 57,4, 57,3, 53,2, 41,7, 38,6, 37,2, 32,2, 31,4, 31,0, 27,4.,26,3.,22,0, 15,3.

Пример 17.

ЭМ-407

Аналитические данные для 8М-407: ЯМР 'Н (МеОН-4₄, 300 МГц) δ 7,31-7,27 (м, 12Н), 6,94 (м, 2Н),

6,15 (м, 1Н), 4,82-4,70 (м, 1Н), 4,53 (м, 1Н), 4,09-3,58 (м, 5Н), 3,36 (м, 1Н), 3,05-2,72 (м, 4Н), 2,71 (с, 3Н), 2,30 (м, 1Н), 2,05-1,81 (м, 5Н), 1,56 (м, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-0₄, 300 МГц) δ 173,9, 172,3, 169,4, 168,5,

163,5, 160,2, 142,3, 142,1, 137,5, 132,9, 132,2, 130,8, 130,6, 129,0, 128,6, 127,7, 127,5, 127,3, 115,2, 114,9,

61,9, 57,6, 57,2, 53,1, 52,9, 46,8, 38,2, 35,3, 34,9, 32,4, 31,6, 30,8, 27,5, 15,8.

Пример 18.

Аналитические данные для 8М-408: ЯМР ¹Н (МеОН-О4, 300 МГц) δ 7,35-7,16 (м, 15Н), 6,18 (м, 1Н), 4,82-4,70 (м, 1Н), 4,53 (м, 1Н), 4,09-3,58 (м, 5Н), 3,30 (м, 1Н), 3,10 (м, 1Н), 2,98 (т, I = 6,0 Гц, 2Н), 2,75 (м, 1Н), 2,72 (с, 3Н), 2,30 (м, 1Н), 2,05-1,81 (м, 5Н), 1,56 (м, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-д4, 300 МГц) δ 174,3, 172,4, 169,0, 168,5, 142,3,141,8, 132,9, 132,1, 129,1, 128,9, 128,7, 128,5, 127,7, 127,6, 127,3, 126,2, 61,8, 57,4, 57,2, 52,8, 46,6, 34,9, 32,3, 31,7, 30,9, 27,5, 15,4.

Пример 19.

5Μ-409

- 40 017797

Аналитические данные для 8М-409: ЯМР ¹Н (МеОН-,₆, 300 МГц) δ 7,37-7,26 (м, 10Н), 6,16 (с, 1Н),

4,60 (м, 1Н), 4,26 (м, 1Н), 4,06-3,92 (м, 2Н), 3,80 (м, 1Н), 3,68-3,35 (м, 2Н), 2,72 (с, 3Н), 2,56 (м, 2Н), 2,30 (м, 1Н), 2,05-1,81 (м, 5Н), 1,64 (кв, I = 7,5 Гц, 2Н), 1,56 (д, I = 6,6 Гц, 3Н), 0,96 (т, I = 7,5 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-,₄, 300 МГц) δ 175,6, 172,3, 168,7, 168,5, 142,2, 142,1, 132,9, 132,8, 132,2, 132,0, 129,1, 129,0, 128,7,

Вп'

ΗΝ

ΒοοΗΝ

СООМе

8М-207

Реагенты и условия: 1. фенилуксусная кислота, ЕБС, НОВ!, ^^диизопропилэтиламин, СН₂С1₂; и. 3N ЫОН, 1,4-диоксан, затем 1 N НС1; ίίί. аминодифенилметан, ЕОС, НОВ!, ^^диизопропилэтиламин, СН₂С1₂; ίν. 4N НС1 в 1,4-диоксане, ν. ^Вос^-метилаланин, ЕОС, НОВ!, ^^диизопропилэтиламин, СН₂С1₂; νί. 4N НС1 в 1,4-диоксане, 62% для шести стадий.

Конденсация соединения 7 с фенилуксусной кислотой и последующий гидролиз метилового эфира привели к кислоте, которую конденсировали с аминодифениламином с получением амида. Удаление защитной Вос-группы в этом амиде дало аммонийную соль. Конденсация этой соли с №Вос^-метилаланином и последующее удаление защитной Вос-группы дало соединение 8Н-207.

8М-207

ΗΝ. НС1

Аналитические данные для 8М-207: ЯМР ¹Н (300 МГц, О2О) δ 7,22-6,80 (м, 15Н), 5,95 (с, 1Н), 4,75 (м, 1Н), 4,38 (м, 1Н), 4,18-3,45 (м, 5Н), 3,42-2,85 (м, 3Н), 2,67 (с, 3Н), 2,12-0,80 (м, 11Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, В2О) δ 174,27, 172,09, 170,94, 169,24, 142,01, 141,83, 141,68, 134,86, 129,32, 128,16, 128,99, 127,76, 127,34, 71,92, 61,13, 58,57, 57,31, 49,77, 49,21, 49,05, 41,46, 31,44, 18,06, 15,73, 15,62.

Пример 21.

Аналитические данные для 8М-412: ЯМР ¹Н (МеОН-,6, 300 МГц) δ 8,81 (м, 1Н), 7,41-7,26 (м, 10Н), 6,06 (м, 1Н), 4,56-4,43 (м, 3Н), 4,11 (м, 2Н), 3,99-3,76 (м, 4Н), 3,58-3,47 (м, 4Н), 3,32 (м, 1Н), 2,72 (м, 3Н), 2,34-1,80 (м, 6Н), 1,60 (м, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-,4, 300 МГц) δ 172,1, 169,2, 168,7, 164,1, 163,6, 160,2,

142,3, 142,0, 128,7, 128,2, 127,9, 127,7, 127,5, 127,3, 116,3, 62,2, 58,0, 57,8, 53,5, 50,3, 46,4, 37,3, 32,0,30,8,27,9,15,2.

Пример 22.

НО₂С

Аналитические данные для 8М-413: ЯМР ¹Н (МеОН-,6, 300 МГц) δ 9,00 (д, I = 8,1Гц, 1Н), 7,41-7,26 (м, 10Н), 6,17 (м, 1Н), 4,62 (м, 2Н), 4,32 (м, 1Н), 4,00 (м, 2Н), 3,75 (м, 3Н), 3,47 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 2,92 (м, 1Н), 2,72 (2с, 3Н), 2,30 (м, 1Н), 2,07-1,80 (м, 5Н), 1,54 (д, 1 = 7,2 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-,4, 300 МГц)

Пример 23.

8М-414

Аналитические данные для 8М-414: ЯМР ¹Н (МеОН-,4, 300 МГц) δ 8,80 (м, 1Н), 7,41-7,26 (м, 12Н),

6,09 (м, 1Н), 5,12 (м, 1Н), 4,56 (м, 2Н), 4,32 (м, 1Н), 4,18 (м, 1Н), 4,03 (м, 2Н), 3,75 (м, 2Н), 3,46 (м, 1Н),

3,16 (м, 1Н), 2,72 (с, 3Н), 2,30-1,80 (м, 6Н), 1,54 (м, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-,_б, 300 МГц) δ 172,2, 171,4,

- 41 017797

170,4, 169,1, 168,7, 142,3, 142,2, 136,0, 128,7, 128,4, 128,1, 127,9, 127,6, 127,5, 127,1, 122,4, 119,6, 62,1, 57,6, 57,3, 46,4, 45,4, 33,4, 32,3, 30,8, 27,7, 15,2.

Пример 24.

Аналитические данные для 8М-415: ЯМР ¹Н (МеОН-О6, 300 МГц) δ 8,97 (д, I = 8,4 Гц, 1Н), 7,38-7,25 (м, 10Н), 6,16 (м, 1Н), 4,80 (м, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,25 (м, 1Н), 3,96 (м, 3Н), 3,47 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 2,72 (с, 3Н), 2,62 (м, 1Н), 2,49 (м, 1Н), 2,34 (м, 1Н), 2,15-1,87 (м, 5Н), 1,56 (м, 3Н), 1,08 (с, 9Н), ЯМР ¹³С (МеОН-О4, 300 МГц) δ 174,2, 172,5, 169,0, 168,4, 142,1, 142,0, 128,7, 128,5, 127,8, 127,7, 127,5, 127,3, 61,7,

57,4, 57,3, 53,1, 51,9, 46,7, 44,6, 32,5, 31,5, 31,2, 30,8, 29,4, 27,2, 15,3.

Пример 25.

Аналитические данные для 8М-416: ЯМР ¹Н (МеОН-О₄, 300 МГц) δ 8,95 (д, I = 8,1 Гц, 1Н), 7,38-7,25 (м, 10Н), 6,16 (м, 1Н), 4,80 (м, 1Н), 4,56 (м, 1Н), 4,25 (м, 2Н), 3,92 (м, 3Н), 3,47 (м, 1Н), 2,72 (с, 3Н), 2,60 (м, 3Н), 2,34 (м, 1Н), 2,12-1,81 (м, 8Н), 1,56 (м, 4Н), 1,47 (м, 1Н), 1,30 (м, 1Н), ЯМР ¹³С (МеОН-ά^ 300 МГц) δ 174,6, 172,4, 169,5, 168,4, 142,2, 142,0, 128,7, 128,4, 127,8, 127,7, 127,5, 127,3, 73,0, 61,7, 57,3, 57,2, 53,1, 51,9, 46,6, 42,0, 39,4, 34,4, 32,5, 31,2, 30,8, 27,2, 15,2.

Пример 26.

Аналитические данные для 8М-418: ЯМР ¹Н (МеОН-О₄, 300 МГц) δ 7,37-7,25 (м, 10Н), 6,16 (м, 1Н),

4,89 (м, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,40 (м, 1Н), 4,26 (м, 1Н), 4,03-3,83 (м, 3Н), 3,66-3,48 (м, 3Н), Н), 2,70 (м, 3Н), 2,33 (м, 1Н), 2,08-1,75 (м, 10Н), 1,54 (м, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-Оъ 300 МГц) δ 177,6, 172,4, 169,2, 168,6,

142,2, 142,0, 128,7, 128,5, 128,4, 127,8, 127,7, 127,6, 127,5, 127,3, 73,4, 61,7, 57,3, 57,1, 53,0, 51,9, 46,9, 39,4,

38,9, 34,7, 32,7, 31,3, 30,8, 28,0, 27,3, 15,2.

Пример 27.

Аналитические данные для 8М-419: ЯМР ¹Н (МеОН-О₄, 300 МГц) 5 7,37-7,25 (м, 10Н), 6,16 (м, 1Н),

4,89 (м, 1Н), 4,58 (м, 2Н), 4,26 (м, 1Н), 4,03-3,71 (м, 5Н), 3,55-3,37 (м, 2Н), 2,70 (м, 3Н), 2,67 (м, 2Н), 2,33 (м, 1Н), 2,08-1,75 (м, 6Н), 1,54 (м, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-О_ъ 300 МГц) δ 173,5, 172,2, 169,2, 168,6, 142,2,

141,9, 128,8, 128,7, 128,5, 128,4, 128,2, 127,8, 127,7, 127,6, 127,5, 127,3, 127,2, 73,1, 67,5, 61,8, 57,3, 46,6, 37,1, 35,9, 32,5, 32,1, 31,4, 30,8, 27,4, 15,2.

Пример 28.

Аналитические данные для 8М-420: ЯМР ¹Н (МеОН-О₆, 300 МГц) δ 7,38-7,25 (м, 10Н), 6,16 (с, 1Н),

4,87 (м, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,24 (м, 1Н), 3,98 (м, 2Н), 3,75 (м, 1Н), 3,42 (м, 1Н), 3,24 (м, 1Н), 2,68 (с, 3Н),

2,49 (м, 2Н), 2,37-2,32 (м, 1Н), 2,15-2,00 (м, 5Н), 1,84-1,80 (м, 1Н), 1,56 (м, 6Н), 1,00 (2д, I = 6,0Гц, 6Н),

ЯМР ¹³С (МеОН-04, 300 МГц) δ 175,4, 172,4, 168,9, 168,6, 142,2, 142,0, 128,7, 128,5, 127,8, 127,7, 127,5,

127,3, 61,8, 57,3, 53,0, 52,0, 46,6, 34,4, 32,5, 31,5, 30,9, 28,0, 27,3, 22,0, 21,9, 15,3.

- 42 017797

Пример 29.

Аналитические данные для ЗМ-421: ЯМР ¹Н (МеОН-б₄, 300 МГц) δ 8,95 (м, 1Н), 7,38-7,14 (м, 15Н),

6,17 (м, 1Н), 4,85 (м, 1Н), 4,56 (м, 1Н), 4,23 (м, 1Н), 4,04-3,85 (м, 2Н), 3,73 (м, 1Н), 3,46 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 2,70 (2с, 3Н), 2,62 (т, 1 = 7,8 Гц, 2Н), 2,45 (м, 2Н), 2,30 (м, 1Н), 2,05-1,81 (м, 7Н), 1,54 (д, I = 7,2 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-б4, 300 МГц) δ 174,8, 172,3, 169,0, 168,6, 142,2, 142,1, 141,9, 128,7, 128,5, 128,4,

127,8, 127,5, 127,3, 126,0, 61,8, 57,3, 52,8, 52,0, 46,6, 35,2, 32,9, 32,5, 31,8, 31,4, 30,8, 27,2, 15,3.

Пример 30.

Аналитические данные для ЗМ-422: ЯМР ¹Н (МеОН-б4, 300 МГц) δ 7,38-7,25 (м, 10Н), 6,18 (с, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 4,57 (м, 1Н), 4,22 (м, 1Н), 3,98 (м, 2Н), 3,76 (м, 1Н), 3,42 (м, 1Н), 3,24 (м, 1Н), 2,70 (2с, 3Н), 2,49 (м, 2Н), 2,37-2,32 (м, 1Н), 2,15-2,00 (м, 4Н), 1,78 (м, 1Н), 1,68-1,58 (м, 3Н), 1,55 (2д, I = 7,2 Гц, 3Н), 1,27-1,19 (м, 2Н), 0,95 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-б4, 300 МГц) δ 175,3, 172,4, 169,0, 168,6, 142,2, 142,1, 128,7, 128,5, 127,8, 127,7, 127,5, 127,3, 61,8, 57,4, 57,3, 52,9, 51,9, 46,6, 38,7, 32,9, 32,5, 31,3, 30,8, 28,2, 27,3, 23,5, 22,0, 21,9, 15,3.

Пример 31.

Аналитические данные для ЗМ-423: ЯМР ¹Н (МеОН-б4, 300 МГц) 6 4,84 (м, 1Н), 4,42 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 3,95 (м, 3Н), 3,42 (м, 1Н), 3,24 (м, 1Н), 2,71 (с, 3Н), 2,50 (д, I = 7,2 Гц, 2Н), 2,34 (м, 1Н), 2,15-2,00 (м, 10Н), 1,65 (м, 1Н), 1,55 (2д, I = 7,2 Гц, 3Н), 1,16 (м, 6Н), 1,00 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-б4, 300 МГц) δ

174.7, 172,2, 169,1, 168,6, 61,7, 57,3, 57,2, 56,6, 53,2, 50,3, 46,7, 41,8, 32,7, 32,6, 31,3, 30,8, 27,4, 27,2, 26,0,

25.7, 25,1, 22,0, 21,8, 15,2.

Пример 32.

Аналитические данные для ЗМ-425: ЯМР ¹Н (МеОН-б6, 300 МГц) δ 7,25-7,18 (м, 4Н), 5,36 (т, I = 7,5 Гц, 1Н), 4,89 (м, 1Н), 4,47 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 3,90 (м, 3Н), 3,40 (м, 1Н), 3,00 (м, 2Н), 2,71 (с, 3Н), 2,552,41 (м, 3Н), 2,38 (м, 2Н), 2,15-2,00 (м, 6Н), 1,81 (м, 1Н), 1,54 (м, 3Н), 1,00 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-б4, 300 МГц) δ 174,7, 173,1, 169,1, 168,7, 143,6, 143,4, 128,0, 126,7, 124,7, 124,0, 61,8, 57,3, 56,9, 54,9, 53,1,

51,8, 46,8, 42,1, 41,5, 33,3, 32,7, 31,2, 30,8, 30,0, 27,6, 26,1, 25,9, 22,2, 21,9, 15,2.

Пример 33.

Аналитические данные для ЗМ-426: ЯМР ¹Н (МеОН-б₆, 300 МГц) δ 7,64-7,55 (м, 4Н), 4,65 (д, 1 =

16,2 Гц, 1Н), 4,55 (м, 1Н), 4,39 (д, 1 = 16,2 Гц, 1Н), 4,22 (м, 1Н), 3,98 (м, 2Н), 3,76 (м, 1Н), 3,42 (м, 1Н),

2,70 (с, 3Н), 2,47 (м, 2Н), 2,37-2,32 (м, 1Н), 2,15-2,00 (м, 6Н), 1,83 (м, 1Н), 1,54 (м, 3Н), 0,95 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-б4, 300 МГц) δ 174,7, 173,5, 169,5, 168,7, 143,6, 143,4, 127,8, 127,5, 125,4, 125,3, 123,0, 61,8,

57,4, 57,2, 56,6, 52,9, 51,8, 46,7, 42,4, 42,1, 41,5, 32,5, 31,3, 30,8, 27,4, 26,2, 23,5, 22,0 ,21,9, 15,3.

- 43 017797

Пример 34.

Аналитические данные для 8М-427: ЯМР ¹Н (МеОН-й4, 300 МГц) δ 7,45 (м, 1Н), 7,20-7,10 (м, 3Н), 5,07 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 4,43 (м, 1Н), 4,22 (м, 1Н), 3,98 (м, 3Н), 3,48 (м, 1Н), 2,89 (м, 2Н), 2,75 (с, 3Н), 2,55 (д, 1 = 6,6 Гц, 2Н), 2,44 (м, 1Н), 2,30-1,78 (м,11Н), 1,55 (м, 3Н), 1,00 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-й4, 300 МГц) δ 174,7, 172,7, 169,5, 168,5, 137,6, 136,9, 128,8, 127,1, 126,0, 61,9, 57,3, 56,7, 53,2, 51,9, 46,7, 42,1,

41,5, 32,6, 31,2, 30,8, 29,3, 27,4, 26,1, 22,2, 21,9, 20,8, 15,2.

Пример 35.

Аналитические данные для 8М-429: ЯМР ¹Н (МеОН-й4, 300 МГц) δ 7,64 (м, 3Н), 7,53-7,32 (м, 6Н), 4,87 (м, 1Н), 4,55-4,40 (м, 3Н), 4,23 (м, 1Н), 3,98 (м, 2Н), 3,82 (м, 1Н), 3,38 (м, 1Н), 2,71 (с, 3Н), 2,46 (д, I = 7,2 Гц, 2Н), 2,33 (м, 1Н), 2,15-1,78 (м, 7Н), 1,53 (2д, 1 = 6,9 Гц, 3Н), 0,98 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-й4, 300 МГц) δ 174,8, 173,2, 169,6, 168,7, 141,7, 141,2, 139,6, 129,2, 128,9, 127,5, 127,1, 126,1, 125,9, 61,8, 57,2,

56,5, 53,0, 51,8, 46,7, 43,2, 42,1, 41,5, 35,0, 32,6, 31,2, 30,8, 27,3, 26,0, 22,2, 21,9, 15,3.

Пример 36.

Аналитические данные для 8М-430: ЯМР ¹Н (МеОН-й₄, 300 МГц) δ 8,05 (д, I = 7;8 Гц, 1Н), 7,88 (м,1Н), 7,81 (д, I = 8,1 Гц, 1Н), 7,57-7,43 (м, 4Н), 4,87-4,80 (м, 3Н), 4,49 (м, 1Н), 4,23 (м, 1Н), 3,98 (м, 2Н), 3,85(м, 1Н), 3,43 (м, 1Н), 2,71 (с, 3Н), 2,50 (д, I =6,9Гц, 2Н), 2,33 (м, 1Н), 2,15-1,78 (м, 7Н), 1,53 (2д, I = 7,2 Гц, 3Н), 0,99 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-й4, 300 МГц) δ 174,7, 173,0, 169,3, 168,7, 134,3, 133,9, 131,7, 128,8,

128.2, 126,4, 125,8, 125,5, 123,4, 61,8, 57,3, 56,7, 53,1, 51,8, 46,7, 42,1, 41,4, 41,3, 35,0, 32,6, 31,1, 30,8, 27,3,

26.2, 22,2, 21,9, 15,2.

Пример 37.

Аналитические данные для 8М-431: ЯМР ¹Н (МеОН-й4, 300 МГц) δ 7,45 (м, 1Н), 7,25-7,17 (м, 3Н), 5,40 (т, I = 7,8 Гц, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 4,46 (м, 1Н), 4,25 (м, 1Н), 3,98 (м, 3Н), 3,40 (м, 1Н), 3,00 (м, 2Н), 2,71 (с, 3Н), 2,55 (м, 2Н), 2,44 (м, 1Н), 2,34 (м, 2Н), 2,15-2,00 (м, 6Н), 1,81 (м, 1Н), 1,53 (м, 3Н), 1,00 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-й4, 300 МГц) δ 174,7, 173,1, 169,5, 168,6, 143,6, 143,3, 127,8, 126,5, 124,5, 61,9, 57,3, 56,6,

54,8, 53,2, 51,8, 46,7, 42,1, 41,5, 35,1, 33,4, 32,6, 31,2, 30,8, 30,0, 27,4, 26,1, 22,2, 21,9, 15,2.

Пример 38.

Аналитические данные для 8М-432: ЯМР ¹Н (МеОН-й₆, 300 МГц) δ 7,38-7,25 (м, 10Н), 4,80 (м, 1Н),

4,32 (м, 2Н), 4,18 (м, 1Н), 3,98(м, 2Н), 3,87 (м, 1Н), 3,63 (м, 1Н), 3,49 (м, 1Н), 2,70 (с, 3Н), 2,50 (д, I = 7,2

Гц, 2Н), 2,32 (м, 1Н), 2,15-1,74 (м, 7Н), 1,56 (м, 3Н), 1,00 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-й₄, 300 МГц) δ 174,7,

173,0, 169,1, 168,6, 142,8, 128,6, 128,4, 128,1, 126,7, 61,8, 57,2, 56,7, 53,1, 50,9, 46,7, 44,0, 42,0, 41,5, 32,6,

30,8, 27,1, 26,1, 22,2, 21,9, 15,2.

- 44 017797

Пример 39.

3Μ-433

Аналитические данные для 8М-433: ЯМР ¹Н (МеОН-б4, 300 МГц) δ 7,54-7,22 (м, 9Н), 4,86 (м, 1Н), 4,48 (м, 1Н), 4,4-4,19 (м, 3Н), 4,09-3,84 (м, 3Н), 3,40 (м, 1Н), 2,71 (с, 3Н), 2,49 (д, 1 = 6,6 Гц, 2Н), 2,33-1,74 (м, 8Н), 1,53 (2д, 1 = 6,9 Гц, 3Н), 0,98 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-б4, 300 МГц) δ 174,7, 173,1, 169,3, 168,7,

141,9, 141,2, 135,6, 130,0, 129,2, 128,3, 128,1, 127,8, 127,3, 61,8, 57,3, 56,9, 53,2, 51,8, 46,7, 42,0, 41,5, 41,3, 35,0, 32,6, 31,2, 30,8, 27,3, 26,0, 22,2, 21,9, 15,2.

Пример 40.

Аналитические данные для 8М-434: ЯМР *Н (МеОН-б₆, 300 МГц) δ 7,60 (м, 4Н), 7,38 (м, 4Н), 7,30 (м, 1Н), 4,86 (м, 1Н), 4,57-4,36 (м, 3Н), 4,22 (м, 1Н), 4,04-3,89 (м, 3Н), 3,42 (м, 1Н), 2,71 (с, 3Н), 2,49 (д, 1 = 6,6 Гц, 2Н), 2,35-1,79 (м, 8Н), 1,53 (2д, 1 = 6,9 Гц, 3Н), 0,98 (м, 6Н), ЯМР ¹³С (МеОН-б₄, 300 МГц) δ 174,7,

173,2, 169,2, 168,7, 141,1, 140,3, 138,0, 128,9, 128,0, 127,3, 127,1, 126,9, 61,8, 57,3, 56,9, 53,1, 51,8, 46,7,

42,8, 42,1, 41,5, 35,2, 32,6, 31,2, 30,8, 27,4, 26,0, 22,2, 21,9, 15,2.

Пример 41.

5Μ-227

Аналитические данные для 8М-227: ЯМР ¹Н (300 МГц, Б2О) δ 7,34-7,12 (м, 10Н), 5,92 (шс, 1Н), 5,23 (дд, 1 = 12,06, 5,34 Гц, 1Н), 4,65 (м, 1Н), 4,50 (м, 1Н), 3,88 (м, 1Н), 3,52 (м, 1Н), 3,45 (м, 1Н), 3,31 (м, 1Н), 3,13 (м, 1Н), 2,58 (с, 3Н), 2,36 (м, 1Н), 2,20-1,72 (м, 5Н), 1,41 (д, 1 = 7,05 Гц, 3Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, В2О) δ 173,93, 170,10, 168,28, 140,81, 140,63, 129,37, 128,33, 128,24, 127,53, 61,31, 59,11, 58,52, 57,15, 48,68, 47,50, 46,10, 31,82, 31,26, 30,94, 27,13, 15,46.

Пример 42.

Аналитические данные для 8М-211: ЯМР ^ХН (300 МГц, Б2О) δ 7,23-7,02 (м, 10Н), 5,85(с, 1Н), 4,70 (м, 1Н), 4,32 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 3,85 (м, 1Н), 3,65-3,20 (м, 4Н), 2,90-2,70 (м, 2Н), 2,27-2,03 (м, 3Н), 2,011,43 (м, 8Н), 1,36 (д, 1 = 6,90 Гц, 3Н), 0,78 (т, 1 = 7,3 Гц, 3Н), 0,76-0,70 (м, 6Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, Б2О) δ 176,89, 173,57, 170,10, 170,06, 142,14, 142,08, 129,86, 129,77, 128,72, 128,62, 128,35, 128,21, 62,77, 58,54, 56,95, 49,58, 49,29, 48,82, 48,72, 48,43, 48,14, 43,00, 31,92, 26,74, 22,83, 22,64, 20,33, 16,55, 11,20.

Пример 43.

8Μ-212

Аналитические данные для 8М-212: ЯМР ¹Н (300 МГц, Б2О) δ 7,37-7,16 (м, 10Н), 6,12 (м, 1Н), 4,82 (м, 1Н), 4,56 (м, 1Н), 4,20 (м, 1Н), 4,08 (м, 1Н), 3,96 (м, 1Н), 3,87 (м, 1Н), 3,42-3,25 (м, 2Н), 2,52-1,70 (м, 14Н), 1,52 (т, 1 = 7,2 Гц, 3Н), 0,98 (т, 1 = 7,5 Гц, 6Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, Б2О) δ 176,45, 173,01, 169,39, 168,33, 141,38, 141,23, 129,27, 129,16, 128,10, 127,73, 127,55, 127,52, 62,77, 62,11, 57,92, 57,01, 52,49, 51,96, 47,58, 46,71, 41,39, 31,82, 27,26, 26,29, 23,69, 22,14, 8,50.

Пример 44.

- 45 017797

Аналитические данные для 8М-213: ЯМР ^ХН (300 МГц, Б2О) δ 7,38-7,20 (м, 10Н), 6,05 (с, 1Н), 4,89 (м, 1Н), 4,62 (м, 1Н), 4,53 (м, 1Н), 4,36-4,10 (м, 2Н), 3,95-3,40 (м, 4Н), 3,28-3,10 (м, 1Н), 2,50-1,75 (м, 9Н), 1,59 (д, 1 = 7,2 Гц, 3Н), 1,01-1,85 (м, 6Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, В2О) δ 177,09, 173,01, 169,46, 167,43, 141,52, 141,39, 129,24, 129,16, 128,11, 127,96, 127,78, 127,64, 61,80, 58,06, 57,17, 56,51, 51,72, 49,30, 48,73, 48,25, 47,87, 41,42, 27,32, 26,29, 22,25, 22,15, 21,88, 15,92.

Пример 45.

8М-209

Аналитические данные для 8М-209: ЯМР ^ХН (300 МГц, Б₂О) δ 7,22-7,05 (м, 4Н), 6,95-6,77 (м, 4Н),

5,90 (с, 1Н), 4,90 (м, 1Н), 4,45 (м, 1Н), 4,13 (м, 1Н), 3,97 (м, 1Н), 3,85-3,60 (м, 1Н), 3,50-3,10 (м, 3Н), 2,80 (м, 1Н), 2,65 (с, 3Н), 2,30-1,60 (м, 6Н), 1,46 (д, 1 = 7,2 Гц, 3Н), 1,12-0,85 (м, 6Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, В₂О) δ 180,27, 172,52, 169,36, 160,48, 137,37, 137,19, 129,55, 129,45, 115,81, 115,53, 61,98, 57,32, 56,43, 51,92, 49,98, 46,81, 35,07, 32,70, 31,30, 30,82, 27,44, 19,18, 18,76, 15,53.

Пример 46.

Аналитические данные для 8М-210: ЯМР ^ХН (300 МГц, Б₂О) δ 7,22-7,03 (м, 4Н), 6,95-6,80 (м, 4Н),

5,90 (с, 1Н), 4,82 (м, 1Н), 4,35 (м, 1Н), 4,12 (м, 1Н), 3,89 (м, 1Н), 3,82-3,15 (м, 4Н), 2,60 (с, 3Н), 2,30-1,50 (м, 9Н), 1,42 (д, 1 = 7,2 Гц, 3Н), 0,82-0,65 (м, 6Н); ЯМР ¹³С (75 МГц, Б2О) δ 176,09, 172,70, 169,50, 160,53, 137,27, 137,14, 129,49, 129,35, 115,92, 115,84, 115,80, 115,62, 62,10, 61,80, 58,07, 56,54, 52,26, 46,59, 42,28, 41,38, 32,40, 31,35, 27,43, 25,98, 22,16, 15,59.

Пример 47.

Аналитические данные для 8М-230: ЯМР ^ХН (300 МГц, Б₂О) δ 7,32-7,16 (м, 3Н), 7,12-7,05 (м, 2Н), 5,02 (м, 1Н), 4,32-4,12 (м, 3Н), 4,02-3,20 (м, 5Н), 3,10 (м, 1Н), 2,52 (с, 3Н), 2,28-1,52 (м, 12Н), 1,42-1,39 (м, 3Н), 0,82-0,60 (м, 6Н).

Пример 48.

Пример 49.

Пример 50.

- 46 017797

Пример 51.

Аналитические данные для 8М-437: ЯМР ¹Н (МеОН-д₆, 300 МГц) δ 7,45 (м, 1Н), 7,30 (м, 4Н), 7,14 (м, 1Н), 7,02-6,84 (м, 2Н), 5,43 (т, I = 8,1 Гц, 1Н), 4,79 (м, 1Н), 4,39 (м, 1Н), 4,00-3,77 (м, 4Н), 3,56 (м, 1Н), 3,40 (м, 1Н), 3,00 (м, 6Н), 2,70 (с, 3Н), 2,49 (м, 1Н), 2,28 (м, 1Н), 2,00-1,75 (м, 6Н), 1,54 (д, I = 6,6 Гц, 3Н), ЯМР ¹³С (МеОН-Й4, 300 МГц) δ 174,1, 173,0, 169,1, 168,5, 143,6, 143,2, 137,4, 130,6, 127,7, 126,5, 124,5,124,4762,1, 57,3, 54,8, 52,6, 51,6, 46,6, 35,1, 33,4; 32,4, 31,4, 30,8, 30,0, 27,5, 15,2.

Пример 52. Связывание ингибиторов с Х1АР.

Для исследования связывающей способности конформационно ограниченных Зшас-миметиков с белками 1АР был разработан и применен чувствительный и количественный способ анализа связывания ш уйго на основе флуоресцентной поляризации (ФП), чтобы определить связывающее сродство Зшас миметиков к белку Х1АР (Мкокузка-Сокзка е! а1., Апа1 Вюсйеш. 332:261-73 (2004)). В этом анализе 5карбоксифлуоресцеин (5-Раш) сшивали с боковой цепью лизина видоизмененного Зшас пептида, АЬиКРЕ-К-^-Еаш)^! (обозначаемого как 8М5Е). Было установлено, что значение Κ_ά связывания пептида 8М5Е с белком Х1АР В1К3 составляет 17,92 нМ, указывая на то, что этот пептид с высоким сродством связывается с поверхностным карманом белка Х1АР. Рекомбинантный белок Х1АР В1К3 человеческого Х1АР (остатки 241-356), гибридизованный с гистидиновым тэгом, являлся устойчивым и растворимым и применялся для анализа связывания на основе ФП.

Эксперименты по связыванию в зависимости от дозы выполняли путем последовательных разбавлений испытуемых соединений в диметилсульфоксиде. 5 мкл испытуемого образца, а также предварительно инкубированный белок Х1АР В1К3 (30 нМ) и пептид 8М5Е (5 нМ) в буфере для анализа (100 мМ фосфата калия, рН 7,5; 100 мкг/мл бычьего гамма-глобулина; 0,02% азида натрия, приобретенного в 1пу1!годеп™ Ьйе Тесйпо1оду), добавляли в 96-луночные черные круглодонные планшеты Эупех (Е18Йег 8с1еп!Шс) с получением конечного объема 125 мкл. Каждый анализ включал контроль связывания пептида, содержащего рекомбинантный белок Х1АР В1К3 и 8М5Е (что эквивалентно 0%-ному ингибированию), а также контроль свободного пептида, содержащий только свободный 8М5Е (что эквивалентно 100%-ному ингибированию). Величины поляризации измеряли после 3 ч инкубации, когда связывание достигало равновесия, с использованием иЬТКА КЕАОЕК (Тесап И.8. 1пс., Ресеч Триэнгл Парк, Северная Каролина). Значения ИК₅₀, ингибирующей концентрации, при которой замещается 50% связанного пептида, определяли графически методом наименьших квадратов для нелинейных функций. Подбор аппроксимирующей функции осуществляли с использованием программы СКАРНРАЭ РК18М (СгарйРай Зой^аге, 1пс., Сан Диего, Калифорния).

С другой стороны, в оптимизированной методике, эксперименты с ФП проводили в черных круглодонных планшетах Мисгойиог® компании ТйегшоЕаЬзу^ешз (Еййег 8с1еп!Шс), с использованием устройства и1!га р1а!е геадег (Тесап, Ресеч Триэнгл Парк, Северная Каролина). Эксперименты по связыванию в зависимости от дозы выполняли путем последовательных разбавлений активных соединений. Образец испытуемого соединения в количестве 5 мкл и предварительно инкубированный Х1АР В1К3 (30 нМ) и пептид 8М5Е 8шас-Е1и (5 нМ) в буфере для анализа (100 мМ фосфата калия, рН 7,5; 100 мкг/мл бычьего гамма-глобулина; 0,02% азида натрия), добавляли в 96-луночные планшеты с получением конечного объема 125 мкл. Каждый анализ включал отрицательные контрольные пробы, содержащие Х1АР-В1К3 и 8М5Е 8шас-Е1и (что эквивалентно 0%-ному ингибированию) и положительные контрольные пробы, содержащие только свободный пептид 8шас-Е1и (что эквивалентно 100%-ному ингибированию) на каждом планшете для анализа. Планшеты встряхивали на встряхивающем устройстве в течение 15 мин и инкубировали при комнатной температуре в течение 1-3 ч. Величины поляризации измеряли с возбуждением при длине волны 485 нм и эмиссией при 530 нм. Процент ингибирования определяли по уравнению:

% ингибирования = 100[1 - (шР - шРг)/(шР_Ь - шР^)], где шРг представляет собой свободный пептидный контроль (минимальное значение шР), а шР_Ьпредставляет собой связанный пептидный контроль (максимальное значение шР). Значения ИК50, ингибирующей концентрации, при которой замещается 50% связанного пептида, определяли графически методом наименьших квадратов для нелинейных функций. Подбор аппроксимирующей функции осуществляли с использованием программы Сгарйрай Рпзш®. Значение К для Зшас-миметика получали из определенного значения ИК₅₀ и значения Κ_ά для 8М5Е с использованием математического метода и программного обеспечения, специально разработанного для анализов на основе ФП.

При испытании в анализе связывания конформационно ограниченные Зшас-миметики по настоящему изобретению проявляют сильное сродство к связыванию белка Х1АР В1К3, как показано в таблице 2. Это сродство к связыванию было более чем в 10 раз больше, чем сродство к связыванию природного

- 47 017797

Зтас-белка АУ1Ч (δЕ^ ΙΌ NО: 1) (1,183 ± 441 нМ). Эти данные дают возможность предположить, что конформационно ограниченные Зтас-миметики действуют как эффективные ингибиторы активности ΙΑΡ.

Таблица 2

Наименование	ИК50 (мкМ)
8М-401	<1
8М-402	<1

8М-403	<1
ΥΡ-245Ρ3	<100
ΥΡ-246Ρ	<10
8М-330	<1
8М-337	<1
8М-350	<1
8М-356	<1
8М-376	<0,1
8М-377	<0,1
8М-404	<1
8М-405	<1
8 М-406	<0,1
8М-407	<1
8М-408	<1
8М-409	<1
8М-412	<10
8М-413	<1
8М-414	<1
8М-415	<1
8М-416	<1
8М-418	<1
8М-419	<1
8М-420	<1
8М-421
8М-422	<1
8М-423	<10
8М-424	<10
8М-425	<1
8М-426	<10
8М-427	<1
8М-428	>10
8М-429	<1

8М-430	<1
8М-431	<1
8М-432	<1
8М-433	<1
8М-434	<10
8М-207	<1
8М-209	<1
8М-210	<1
8М-211	<1
8М-212	<1
8М-213	<1
8М-222	<1
8М-230	<10
8М-227	<1

- 48 017797

Пример 53. Связывание ингибиторов с другими белками ^Р.

Для того чтобы проверить связывающую способность конформационно ограниченных 8тасмиметиков по отношению к другим белкам Ш³ (МЕНАР, сIАР1 и сIАР2), были разработаны и оптимизированы условия проведения анализа связывания. В этих анализах связывания применяли домен ВIК3 рекомбинантного сIАР1 (остатки 253-363), домен ВЖЗ СЛАР2 (остатки 238-349) и домен ВЖЗ МЕНАР (остатки 63-179), гибридизованные с Н18-тегом. Анализы конкурирующего связывания для других белков Ш³ проводили подобно тому, как описано для XIАР ВЖЗ. Вкратце, применяли такой же трейсерный пептид 8тас-Е1и с высоким сродством 8М5Е, который связывается с с1АР1, СЛАР2 и МЕНАР с высоким сродством: 4,1 нМ, 6,6 нМ и 160 нМ, соответственно. В данном анализе конкурирующего связывания применяли следующие концентрации белка и трейсера: 10 нМ с1АР1 и 2 нМ 8М5Е, 25 нМ сIАР2 и 2 нМ 8М5Е, 300 нМ МЕНАР и 5 нМ 8М5Е.

Пример 54. Ингибирование роста клетки конформационно ограниченными 8тас миметиками.

Исследовали влияние соединений по настоящему изобретению на рост различных линий раковой клетки. Клетки высевали в 96-луночные плоскодонные планшеты для клеточных культур при плотности 3000 клеток на лунку вместе с испытуемым соединением и инкубировали при 37°С в атмосфере, состоящей из 95% воздуха и 5% СО₂, в течение 4 дней. Коэффициент ингибирования роста клетки после обработки при различных концентрациях соединения определяли с использованием набора Ш8'Г-8 (2-(2метокси-4-нитрофенил)-3-(4-нитрофенил)-5-(2,4-дисульфофенил)-2Н-тетразолиум мононатриевая соль; Όο]ΐηάο Мо1еси1аг Τесйηο1ο§^е8, ^с., Гейтерсберг, Мэриленд). Ш8'Г-8 добавляли в каждую лунку до достижения конечной концентрации равной 10% и затем планшеты инкубировали при 37°С в течение 2-3 ч. Оптическую плотность образцов измеряли при 450 нм с использованием устройства ^ΕΤΕΑ. Τесаη Кеайег (Мо1еси1аг ОеуЕе). Концентрацию испытуемого соединения, которая ингибирует рост клетки на 50% (ИК₅₀), рассчитывали путем сравнения оптической плотности в необработанных клетках и в клетках, обработанных испытуемым соединением.

В испытании против линии клеток рака молочной железы человека МБА-МВ-2131, соединения по настоящему изобретению проявляли сильную ингибирующую активность, как показано в табл. 3, что дает возможность предположить, что данные соединения являются эффективными ингибиторами роста раковых клеток. В испытании против линии клеток рака яичников 8Κ-(')ν-3, данные соединения были еще более эффективными (табл. 3).

Таблица 3

- 49 017797

3Μ-432	<10	<10
8М-433	<10	<10
8М-434	<10	<10
8М-207	<10	<10
8М-209	<10	<10
8М-210	<1	<1
8М-211	<10	<10
8М-212	<10	<10
3Μ-213	<10	<10
8М-222	<1	<1
8М-230	<100	<100
8М-227	<10	<10

Пример 55. Индуцирование гибели клетки соединением ΥΡ-337.

Способность соединения ΥΡ-337 индуцировать гибель клетки испытывали на клеточных линиях рака молочной железы МЭА-МВ-231 и рака яичников 8К-ОУ-3 (табл. 4). Клетки обрабатывали соединением ΥΡ-337 в течение 48 ч, и жизнеспособность клеток определяли методом исключения с использованием трипанового синего.

Таблица 4

Концентрация (нМ)	Приблизительный % погибших клеток через 48 ч
ΜϋΑ-Μ В-231	8К-СЛ/-3
Контрольная проба	<5%	<5%
0,1	10%	20%
1	35%	40%
10	60%	65%
100	75%	75%

Пример 56. Противоопухолевая активность соединения 8М-406 (АТ-406) в модели ксенотрансплантата рака молочной железы.

Способность соединения 8М-406 (АТ-406) действовать как противоопухолевый агент проверяли в модели ксенотрансплантата рака молочной железы МЭА-МВ-231 (голая мышь). Соединение 8М-406 (АТ-406) вводили по схеме цй х 5 (каждый день пять раз в неделю) в течение двух недель. Как показано на фиг. 1, соединение 8М-406 (АТ-406) в дозах 30, 100 и 200 мг/кг соединения 8М-406 (АТ-406) проявляло противоопухолевую активность. При дозах 100 и 200 мг/кг наблюдалась потеря веса до 11%, зависящая от дозы.

Пример 57. Противоопухолевая активность соединения 8М-406 (АТ-406) и таксотера в модели ксенотрансплантата рака простаты.

Способность соединения 8М-406 (АТ-406) действовать как противоопухолевый агент отдельно и в комбинации с таксотером проверяли в модели ксенотрансплантата рака простаты РС-3 (голая мышь). Соединение 8М-406 (АТ-406) вводили по схеме цй х 5 (каждый день пять в неделю), а таксотер один раз в неделю, в течение двух недель. Как показано на фиг. 2, соединение 8М-406 (АТ-406) в дозах 100 и 200 мг/кг проявляло противоопухолевую активность. Кроме того, соединение 8М-406 (АТ-406) (100 мг/кг) в комбинации с таксотером (8 мг/кг) проявляло повышенную противоопухолевую активность.

Пример 58. Противоопухолевая активность соединения и Тайкерб® в модели ксенотрансплантата рака простаты.

Способность соединения 8М-406 (АТ-406) действовать как противоопухолевый агент отдельно и в комбинации с Тайкерб® проверяли в модели ксенотрансплантата рака простаты РС-3 (голая мышь). Соединение 8М-406 (АТ-406) вводили по схеме цй х 5 (каждый день пять раз в неделю), Тайкерб® вводили по схеме Ь1й х 5 (два раза в день пять раз в неделю) в течение двух недель. Как показано на фиг. 3, соединение 8М-406 (АТ-406) в дозах 100 и 200 мг/кг проявляло противоопухолевую активность. Кроме того, соединение 8М-406 (АТ-406) (100 мг/кг) в комбинации с Тайкерб® (90 мг/кг) проявляло повышенную противоопухолевую активность.

Пример 59. Противоопухолевая активность соединения 8М-406 (АТ-406) и таксотера в модели ксенотрансплантата рака молочной железы.

Способность соединения 8М-406 (АТ-406) действовать как противоопухолевый агент отдельно и в комбинации с таксотером проверяли в модели ксенотрансплантата рака молочной железы 2ЬМР. Соединение 8М-406 (АТ-406) вводили по схеме цй х 5 (каждый день пять раз в неделю), а таксотер один раз в неделю, в течение двух недель. Как показано на фиг. 4, соединение 8М-406 (АТ-406) при дозе 100 мг/кг проявляло противоопухолевую активность. Кроме того, соединение 8М-406 (АТ-406) (100 мг/кг) в комбинации с таксотером (12 мг/кг) проявляло повышенную противоопухолевую активность.

Пример 60. Противоопухолевая активность соединения 8М-406 (АТ-406) и Тайкерб® в модели ксенотрансплантата рака молочной железы.

Способность соединения 8М-406 (АТ-406) действовать как противоопухолевый агент отдельно и в

- 50 017797 комбинации с Тайкерб® проверяли в модели ксенотрансплантата рака молочной железы 2ЬМР. Соединение 8М-406 (АТ-406) вводили по схеме с.|й х 5 (каждый день пять раз в неделю), а Тайкерб® один раз в день, в течение двух недель. Как показано на фиг. 5, соединение 8М-406 (АТ-406) в дозах 30, 100 и 200 мг/кг проявляло противоопухолевую активность. Кроме того, соединение 8М-406 (АТ-406) (30, 100 и 200 мг/кг) в комбинации с Тайкерб® (90 мг/кг) проявляло повышенную противоопухолевую активность.

Пример 61. Противоопухолевая активность соединения 8М-406 (АТ-406) в модели ксенотрансплантата рака поджелудочной железы.

Способность соединения 8М-406 (АТ-406) действовать как противоопухолевый агент проверяли в модели ксенотрансплантата рака поджелудочной железы Рапс-1. Соединение 8М-406 (АТ-406) вводили по схеме с.|й х 5 (каждый день пять раз в неделю). Как показано на фиг. 6, соединение 8М-406 (АТ-406) в дозах 30 и 100 мг/кг проявляло противоопухолевую активность.

Пример 62. Оптимизация схемы применения соединения 8М-406 (АТ-406) в модели ксенотрансплантата рака молочной железы.

Как показано на фиг. 7, проводили исследования, направленные на оптимизацию схемы применения соединения 8М-406 (АТ-406) в модели ксенотрансплантата рака молочной железы МЭА-МВ-231 (голая мышь) с использованием 200 мг/кг соединения 8М-406 (АТ-406). Введение по схемам с.|й х 5 (15 дни недели), с.|й х 3 (1-3 дни недели) и один раз в неделю вызывали противоопухолевую активность. Потеря веса при еженедельном приеме была меньше (<5%), чем при других схемах применения.

Пример 63. Активность ίη νίίΓΟ соединения 8М-406 в линиях раковых клеток.

Способность соединения 8М-406 ингибировать рост клеток как отдельного агента испытывали на линии клеток рака молочной железы МОА-МВ-231, на линиях клеток рака яичников δΚ^ν^ и ОVСΑК4, а также на линии раковых клеток меланомы 8К-Ме1-2. Клетки обрабатывали в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе ^8Т. Как показано на фиг. 8, соединение 8М406 ингибировало все четыре линии раковых клеток со значением ИК₅₀, равным 82 нМ, 238 нМ, 6638 нМ и 926 нМ для линий МОА-МВ-231, δΚ^ν-3, 8К-Ме1-2 и ОVСΑК-4 соответственно.

Пример 64. Активность ίη νίΐτο соединения 8М-406 в линиях раковых клеток.

Способность соединения 8М-406 ингибировать рост клеток как отдельного агента испытывали на линиях раковых клеток лейкемии НЬ-60 и 8К. Клетки обрабатывали в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \У8Т. Как показано на фиг. 9, соединение 8М-406 ингибировало обе клеточные линии со значением ИК₅₀, равным 58 нМ и 7290 нМ соответственно.

Пример 65. Активность ίη νίΐτο соединения 8М-406 в линиях раковых клеток.

Способность соединения 8М-406 ингибировать рост клеток как отдельного агента испытывали на линиях клеток рака молочной железы человека ВТ-549, МЭА-МВ-415. 8ИМ-159, МЭА-МВ-468. МЭАМВ-453 и 2ЬМР. Клетки обрабатывали в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \У8Т. Как показано на фиг. 10, соединение 8М-406 ингибировало рост клеток во всех шести клеточных линиях.

Пример 66. Активность ίη νίΐτο соединения 8М-406 в комбинации с ΤΝΡα в линии раковых клеток МОА-МВ-436.

Способность соединения 8М-406 в комбинации с ΤΝΡα и отдельно соединения 8М-428 ингибировать рост клеток испытывали на линиях клеток рака молочной железы человека МОА-МВ-436. Клетки обрабатывали только ΤΝΡα или в комбинации с различными концентрациями соединения 8М-406, или же соединением 8М-428 в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \У8Т. Как показано на фиг. 11, соединение 8М-406 в комбинации с ΤΝΡα проявляло увеличенное ингибирование роста клеток по сравнению с обработкой только ТЫРа.

Пример 67. Активность ίη νίΐτο соединения 8М-406 в комбинации с ТЫРа в линии клеток 8ИМ-159.

Способность соединения 8М-406 в комбинации с ТЫРа и отдельно соединения 8М-428 ингибировать рост клеток испытывали на линиях клеток рака молочной железы человека 8ИМ-159. Клетки обрабатывали только ТКРа или в комбинации с различными концентрациями соединения 8М-406, или же соединением 8М-428 в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \У8Т. Как показано на фиг. 12, соединение 8М-406 в комбинации с ТЫРа проявляло увеличенное ингибирование роста клеток по сравнению с обработкой только Т№а.

Пример 68. Активность ίη νίΐτο соединения 8М-406 в комбинации с ТКА1Ь в линии клеток Рапс-1.

Способность соединения 8М-406 в комбинации с ТКА1Ь ингибировать рост клеток испытывали на линиях клеток рака поджелудочной железы человека Раис-1. Клетки обрабатывали только ТКА1Ь или в комбинации с различными концентрациями соединения 8М-406 в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \У8Т. Как показано на фиг. 13, соединение 8М-406 в комбинации с ТКА1Ь проявляло увеличенное ингибирование роста клеток по сравнению с обработкой только ТКА1Ь.

Пример 69. Активность ίη νίΐτο соединения 8М-406 в комбинации с ТКА1Ь в линии клеток МЭА231 (2ЬМР).

Способность соединения 8М-406 в комбинации с ТКА1Ь ингибировать рост клеток испытывали на линиях клеток рака молочной железы человека МПА-МВ-231(2ЬМР). Клетки обрабатывали только

- 51 017797

ТВА1Б или в комбинации с различными концентрациями соединения ЗМ-406 в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \УЗТ. Как показано на фиг. 14, соединение ЗМ-406 в комбинации с ТВА1Б проявляло увеличенное ингибирование роста клеток по сравнению с обработкой только ТВА1Б.

Пример 70. Активность ш νίΙΐΌ соединения ЗМ-406 в комбинации с гемцитабином в линии клеток Рапс-1.

Способность соединения ЗМ-406 в комбинации с гемцитабином ингибировать рост клеток испытывали на линиях клеток рака поджелудочной железы человека Рапс-1. Клетки обрабатывали только гемцитабином или в комбинации с различными концентрациями соединения ЗМ-406 в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \УЗТ. Как показано на фиг. 15, соединение ЗМ406 в комбинации с гемцитабином проявляло увеличенное ингибирование роста клеток по сравнению с обработкой только гемцитабином.

Пример 71. Активность ш νίΙΐΌ соединения ЗМ-406 в комбинации с митоксантроном в линии клеток Рапс-1.

Способность соединения ЗМ-406 в комбинации с митоксантроном ингибировать рост клеток испытывали на линии клеток рака поджелудочной железы человека Рапс-1. Клетки обрабатывали только митоксантроном или в комбинации с различными концентрациями соединения ЗМ-406 в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \УЗТ. Как показано на фиг. 16, соединение ЗМ-406 в комбинации с митоксантроном проявляло увеличенное ингибирование роста клеток по сравнению с обработкой только митоксантроном.

Пример 72. Активность ш νίΙΐΌ соединения ЗМ-406 в комбинации с росковитином в линии клеток РС3.

Способность соединения ЗМ-406 в комбинации с росковитином (Воз) ингибировать рост клеток испытывали на линиях клеток рака простаты человека РС3. Клетки обрабатывали только соединением ЗМ406 или в комбинации с различными концентрациями росковитина в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \УЗТ. Как показано на фиг. 17, соединение ЗМ-406 в комбинации с росковитином ингибировало рост клеток.

Пример 73. Активность ш νίΙΐΌ соединения ЗМ-406 в комбинации с таксотером в линии клеток МОА-МВ-453.

Способность соединения ЗМ-406 в комбинации с таксотером (ТХТ) ингибировать рост клеток испытывали на линиях клеток рака молочной железы человека МЭА-МВ-453. Клетки обрабатывали только ТХТ или в комбинации с различными концентрациями соединения ЗМ-406 в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \УЗТ. Как показано на фиг. 18, соединение ЗМ-406 в комбинации с таксотером проявляло увеличенное ингибирование роста клеток по сравнению с обработкой только таксотером.

Пример 74. Активность ш νίΙΐΌ соединения ЗМ-406 в комбинации с соединением УР-16 в линии клеток Рапс-1.

Способность соединения ЗМ-406 в комбинации с соединением УР-16 ингибировать рост клеток испытывали на линиях клеток рака поджелудочной железы человека Рапс-1. Клетки обрабатывали только соединением УР-16 или в комбинации с различными концентрациями соединения ЗМ-406 в течение 4 дней. Рост клеток определяли с использованием анализа на основе \УЗТ. Как показано на фиг. 19, соединение ЗМ-406 в комбинации с соединением УР-16 проявляло увеличенное ингибирование роста клеток по сравнению с обработкой только соединением УР-16.

Пример 75. Влияние соединения ЗМ-406 на белок с1АР-1 в клетках МОА-МВ-231.

Исследовали влияние соединений ЗМ-406 и ЗМ-428 на белок с1АР-1 в раковых клетках МОА-МВ231. Клетки обрабатывали соединением ЗМ-406 или ЗМ-428 при различных концентрациях и в различные моменты времени. Уровни белка анализировали с помощью Вестерн-блоттинга. Как показано на Фиг. 20, соединение ЗМ-406 уменьшало уровни белка с1АР-1.

Пример 76. Влияние соединения ЗМ-406 на белки с1АР-1 и с1АР-2 в клетках ЗК-ОУ-3.

Исследовали влияние соединений ЗМ-406 и ЗМ-428 на белки с1АР-1 и с1АР-2 в раковых клетках ЗК-ОУ-3. Клетки обрабатывали соединением ЗМ-406 или ЗМ-428 при различных концентрациях и в различные моменты времени. Уровни белка анализировали с помощью Вестерн-блоттинга. Как показано на Фиг. 21, соединение ЗМ-406 уменьшало уровни белков с1АР-1 и с1АР-2.

Пример 77. Индукция апоптоза соединением ЗМ-406 в клетках МЭА-МВ-231.

Исследовали индукцию апоптоза соединением ЗМ-406 или ЗМ-428 в клетках рака молочной железы МОА-МВ-231. Клетки обрабатывали соединением ЗМ-406 или ЗМ-428 в течение различных периодов времени, и апоптоз исследовали с помощью окрашивания ФИТЦ (флуоресцеин йзотиоцианат) - Аннексин У/пропидиум йодид с использованием проточного цитометра. Как показано на фиг. 22, 3 мкМ соединения ЗМ-406 индуцировали апоптоз в клетках рака молочной железы МОА-МВ-231.

Пример 78. Индукция апоптоза соединением ЗМ-406 в клетках ЗК-ОУ-3.

Исследовали индукцию апоптоза соединением ЗМ-406 или ЗМ-428 в клетках рака яичников ЗКОУ-3. Клетки обрабатывали соединением ЗМ-406 или ЗМ-428 при различных концентрациях. Апоптоз

- 52 017797 исследовали с помощью окрашивания ФИТЦ (флуоресцеин изотиоцианат) - Аннексин ν/пропидиум йодид с использованием проточного цитометра. Как показано на фиг. 23, 0,1, 0,3, 1 и 3 мкМ соединения 8М-406 индуцировали апоптоз в клетках рака яичников δΚ^ν^.

Пример 79. Индукция апоптоза соединением 8М-406 в клетках Рапс-1.

Исследовали индукцию апоптоза соединением 8М-406 или 8М-428 в клетках рака поджелудочной железы Рапс-1. Клетки обрабатывали соединением 8М-406 или 8М-428 при различных концентрациях. Апоптоз исследовали с помощью окрашивания ФИТЦ (флуоресцеин изотиоцианат) - Аннексин ν/пропидиум йодид с использованием проточного цитометра. Как показано на фиг. 24, 0,3, 1 и 3 мкМ соединения 8М-406 индуцировали апоптоз в клетках рака поджелудочной железы Рапс-1.

Пример 80. Противоопухолевая активность соединения 8М-406 в модели ксенотрансплантата МБА-МВ-231.

Способность соединения 8М-406 действовать как противовоопухолевый агент испытывали в модели ксенотрансплантата рака молочной железы человека МБА-МВ-231 в мыши с тяжёлым комбинированным иммунодефицитом (8СГО). Обработку начинали, когда опухоли вырастали до среднего размера 150 мм³. Соединение 8М-406 давали ежедневно, 5 дней в неделю в течение 2 недель путем искусственного питания. Таксотер вводили внутривенно (ι.ν.) один раз в неделю в течение 2 недель. Как показано на фиг. 25, соединение 8М-406 проявляло противовоопухолевую активность при пероральных дозах 30 и 100 мг/кг.

Пример 81. Противоопухолевая активность соединения 8М-406 в модели ксенотрансплантата РС-3.

Способность соединения 8М-406 действовать как противоопухолевый агент испытывали в модели ксенотрансплантата рака простаты человека РС-3 в голой мыши. Обработку начинали, когда опухоли вырастали до среднего размера 100 мм³. Соединение 8М-406 давали ежедневно, 5 дней в неделю в течение 2 недель путем искусственного питания между 15 и 25 днями и в течение еще 2 недель между 43 и 53 днями. Таксотер вводили внутривенно (ι.ν.) один раз в неделю в течение 3 недель на 16, 23 и 44 дни. Как показано на фиг. 26, соединение 8М-406 одно или в комбинации с таксотером проявляло противоопухолевую активность.

Пример 82. Противоопухолевая активность соединения 8М-406 в модели ксенотрансплантата 2ЬМР.

Способность соединения 8М-406 действовать как противовоопухолевый агент испытывали в модели ксенотрансплантата рака молочной железы человека 2ЬМР в голой мыши. Соединение 8М-406 давали ежедневно в течение 10 дней интраперитонеально (1.р.) или перорально (р.о.) на 16-26 дни. Таксотер вводили внутривенно (ι.ν.) один раз в неделю в течение 2 недель. Апоптоз-индуцирующий лиганд, связанный с фактором некроза опухоли (ТОТ) (ТКАН.) вводили интраперитонеально один раз в день в течение 10 дней на 16-26 дни. Как показано на фиг. 27, соединение 8М-406, одно или в комбинации с ТКАН., проявляло противовоопухолевую активность.

Пример 83. Связывание соединения 8М-406 с доменами ВГКЗ белков !АР.

Кривые конкурирующего связывания для соединений 8М-406 и 8М-428 с доменами ВГКЗ четырех представителей белков !АР получали с использованием анализа связывания на основе флуоресцентной поляризации. Испытуемые белки !АР включали: (А) XIΑР; (Б) с£АР1; (В) ЛАР2; (Г) МЬПАР. Как показано на фиг. 28, соединение 8М-406 связывалось со всеми четырьмя белками !АР.

После полного описания настоящего изобретения, специалисту в данной области понятно, что то же самое можно осуществить в пределах широкого и эквивалентного диапазона условий, составов и других параметров, не затрагивая возможности настоящего изобретения или какого-либо примера его осуществления. Все патенты, заявки на патенты и публикации, упомянутые здесь, полностью включены ссылкой здесь в своей полноте.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы I где А1 и А₂ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С1_1₈ алкила, необязательно замещенного гидроксильной группой;

V представляет собой Ν;

Ш представляет собой СН;

X представляет собой С1_-3 алкил, необязательно замещенный индолилом;

Υ представляет собой ΝΙΚΤ');

Ζ представляет собой (СК^ХК²)_Г;

Ό представляет собой (СК^^-ОТ^С^К⁴^;

- 53 017797

I представляет собой незамещенный С_1-4 алкиленил;

Т выбирают из группы, состоящей из С=О и СК¹К²;

и выбирают из группы, состоящей из NΚ¹Κ² и ^К^СОК⁷;

п и ш независимо выбирают из 1, 2 или 3;

г равно 0;

каждую из групп К¹, К², К³ и К⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода; С_1-18 алкила, необязательно замещенного:

а) одним или двумя фенилами, необязательно замещенными фтором, трифторметилом или фени лом;

б) нафтилом или

в) пиридилом, циклогексилом, инданилом, тетранилом и СОК⁷;

К⁵ представляет собой СОК⁷;

К⁷ выбирают из группы, состоящей из Сыз алкила, необязательно замещенного:

а) фенилом, необязательно замещенным одним или двумя атомами фтора;

б) циклопентилом, необязательно замещенным гидроксильной группой;

в) оксопиперазинилом;

г) гидроксильной группой и -СО₂Н;

д) имидазолилом или

е) тетрагидрофуранилом;

и циклопентила, необязательно замещенного гидроксильной группой;

или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1 формулы ΥΙ и

х ν-α₂ а' ¹ VI
3. Соединение по п.2, где А¹ представляет собой незамещенный С_1-18 алкил, а А² представляет собой водород.
4. Соединение по п.2, где К¹ выбирают из группы, состоящей из С1_-1₈ алкила, необязательно замещенного одним или двумя фенилами, необязательно замещенными фтором, трифторметилом или фени лом; инданила и тетранила.
5. Соединение по п.4, где К¹ представляет собой С_1-18 алкил, необязательно замещенный двумя фенилами, необязательно замещенными атомом фтора.
6. Соединение по п.5, где К⁷ представляет собой незамещенный С_1-18 алкил.
7. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из

- 54 017797

- 55 017797

- 56 017797 ρ

Ε или их фармацевтически приемлемая соль.
8. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из

- 57 017797

- 58 017797 или их свободного основания или другой фармацевтически приемлемой соли.
9. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
10. Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения, улучшения состояния или предотвращения рака у животного, содержащая соединение по любому из пп.1-8 и фармацевтически приемлемый носитель.
11. Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения, улучшения состояния или предотвращения рака у животного, содержащая соединение по п.9 и фармацевтически приемлемый носитель.
12. Способ индуцирования апоптоза в клетке, включающий контактирование клетки с соединением по любому из пп.1-9.
13. Способ сенсибилизации клетки к индуктору апоптоза, включающий контактирование клетки с соединением по любому из пп.1-9.
14. Способ по п.13, отличающийся тем, что дополнительно включает контактирование указанной клетки с индуктором апоптоза.
15. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанный индуктор апоптоза представляет собой химиотерапевтический агент.
16. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанный индуктор апоптоза представляет собой облучение.
17. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанный индуктор апоптоза представляет собой фактор некроза опухоли (ΤΝΕ), связанный с ΤΝΕ лиганд или агонист ТКΑI^-К1 или ТКΑI^-К2.
18. Способ по п.17, отличающийся тем, что указанный связанный с ΤΝΕ лиганд выбирают из группы, состоящей из лиганда ΤКΑМΡ, лиганда Еа8/СЭ95, лиганда ТИЕК-1 и ΤΕΑΣ^
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный связанный с ΤΝΕ лиганд представляет собой ΤΒΑΙΕ.
20. Способ по п.19, отличающийся тем, что указанный агонист ΤКΑI^-К1 или ΤΕΑ^-^ представляет собой антитело.
21. Способ лечения, улучшения состояния или предотвращения рака у животного, включающий введение указанному животному терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-9.
22. Способ по п.21, отличающийся тем, что дополнительно включает введение противоракового агента, выбранного из группы, состоящей из митоксантрона, росковитрина, VΡ-16, таксотера и гемцитабина.
23. Способ по п.21, отличающийся тем, что дополнительно включает введение индуктора апоптоза, выбранного из группы, состоящей из ΤΝΕα и ΤΕΑΣ^
24. Способ по п.21, отличающийся тем, что рак выбран из группы, состоящей из рака груди, рака яичника, рака простаты, рака поджелудочной железы, лейкемии и меланомы.
25. Способ по п.24, отличающийся тем, что рак выбран из группы, состоящей из рака груди, рака простаты и рака поджелудочной железы.
26. Способ предотвращения или ингибирования ангиогенеза у животного, нуждающегося в этом, включающий введение указанному животному терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-9.
27. Способ по п.26, отличающийся тем, что указанное животное имеет заболевание или расстройство, выбранное из группы, включающей дегенерацию жёлтого пятна, ревматоидный артрит, псориаз, диабетическую ретинопатию, ретинопатию недоношенных, отторжение роговичного имплантата, неоваскулярную глаукому, ретролентальную фиброплазию, покраснение радужки, синдром Ослера-Вебера, миокардиальный ангиогенез, неоваскуляризацию бляшки, телангиэктазию, кровоизлияния в суставы при гемофилии, ангиофиброму, грануляцию раны, кишечные спайки, атеросклероз, склеродерму и гипертрофические рубцы.
28. Набор, включающий фармацевтическую композицию по п.10 или 11 и инструкции по введению указанной композиции животному.
29. Набор по п.28, отличающийся тем, что дополнительно включает противораковый агент, выбранный из группы, состоящей из митоксантрона, росковитина, VΡ-16, таксотера и гемцитабина.
30. Набор по п.28, отличающийся тем, что дополнительно включает индуктор апоптоза, выбранный из группы, состоящей из ΤΝΕα и ΤКΑI^.
31. Набор по п.28, отличающийся тем, что указанные инструкции предназначены для введения ука- 59 017797 занного соединения животному, имеющему рак.
32. Способ получения соединения формулы XI где Αι и А₂ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода и С1_1₈ алкила, необязательно замещенного гидроксильной группой;

V представляет собой Ν;

Ш представляет собой СН;

X представляет собой С1_₃ алкил, необязательно замещенный индолилом;

Υ представляет собой NНСО;

Ζ представляет собой (СК‘К²)_г;

Т выбирают из группы, состоящей из С=О и СК‘К²;

и выбирают из группы, состоящей из ΝΚ/Κ² и ^К^СОК⁷;

т равно 1 или 2;

г равно 0;

каждую из групп К¹, К², К³ и К⁴ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода; С1_1₈ алкила, необязательно замещенного:

а) одним или двумя фенилами, необязательно замещенными фтором, трифторметилом или фени лом;

б) нафтилом или

в) пиридилом, циклогексилом, инданилом, тетранилом и СОК⁷;

К⁷ выбирают из группы, состоящей из С1_1₈ алкила, необязательно замещенного:

а) фенилом, необязательно замещенным одним или двумя атомами фтора;

б) циклопентилом, необязательно замещенным гидроксильной группой;

в) оксопиперазинилом;

г) гидроксильной группой и -СО2Н;

д) имидазолилом или

е) тетрагидрофуранилом;

и циклопентила, необязательно замещенного гидроксильной группой; включающий конденсацию соединения формулы XII где Αχ, А₂, V, Ш, X, Υ, Ζ, Т, и и т имеют то же значение, как описано выше для формулы XI, с соединением К⁷СО-Ь, где

К⁷ выбирают из группы, состоящей из С1_1₈ алкила, необязательно замещенного:

а) фенилом, необязательно замещенным одним или двумя атомами фтора;

б) циклопентилом, необязательно замещенным гидроксильной группой;

в) оксопиперазинилом;

г) гидроксильной группой и -СО₂Н;

д) имидазолилом или

е) тетрагидрофуранилом;

и циклопентила, необязательно замещенного гидроксильной группой; и

Ь представляет собой уходящую группу, с образованием соединения формулы XI.
33. Способ по п.32, отличающийся тем, что и представляет собой КК?К².
34. Способ по п.32, отличающийся тем, что Ь выбирают из группы, состоящей из С1 и ОН.
35. Способ по п.34, отличающийся тем, что Ь представляет собой ОН, и указанную конденсацию проводят в присутствии активирующего агента.
36. Способ получения соединения формулы XIX где т равно 1 или 2, а Р¹ представляет собой защитную группу для амина, включающий:

а) конденсацию соединения формулы XX

- 60 017797 с соединением формулы XXI где Р¹ и Р² представляют собой защитные группы для амина и Р¹ не равно Р², с получением соединения формулы XXII

б) превращение алкена формулы XXII в альдегид с получением соединения формулы XXIII о.

XXIII

в) удаление Р² из соединения формулы XXIII с получением соединения формулы XXIV и

г) восстановление двойной связи ϋ=Ν в соединении формулы XXIV с получением соединения формулы XIX.
37. Способ по п.36, отличающийся тем, что Р¹ представляет собой трет-бутилоксикарбонил.
38. Способ по п.37, отличающийся тем, что Р² представляет собой карбобензилокси.
39. Способ по п.36, отличающийся тем, что указанное соединение формулы XXIV выделяют перед указанным восстановлением двойной связи ΟΝ.
40. Способ по п.39, отличающийся тем, что указанное восстановление проводят с помощью №ВН(ОАс)₃.