ES2504216T3

ES2504216T3 - Miméticos de Smac diazo bicíclicos y sus usos

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Publication number: ES2504216T3
Application number: ES08745750.3T
Authority: ES
Inventors: Shaomeng Wang; Yuefeng Peng; Haiying Sun; Qian Cai; Zaneta Nikolovska-Coleska; Jianfeng Lu; Su Qiu
Original assignee: University of Michigan
Current assignee: University of Michigan
Priority date: 2007-04-13
Filing date: 2008-04-14
Publication date: 2014-10-08
Anticipated expiration: 2028-04-14
Also published as: PL2139490T3; JP5416089B2; KR101081685B1; BRPI0810522A2; US8664212B2; ZA200907055B; PT2139490E; BRPI0810522B8; NZ580468A; CY1115735T1; BRPI0810522B1; CN101686981A; EA017797B1; EP2139490A4; JP2010523722A; EP2139490A2; IL201474A0; AU2008240119A1; AU2008240119B2; EP2139490B1

Abstract

Un compuesto que tiene la Fórmula VI:**Fórmula** en donde: A1 y A2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo opcionalmente sustituido; X es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo de C1-3 opcionalmente sustituido; T es C>=O; U es NR1R2; R1 y R2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido; R5 es COR7; y R7 es -CH2CH(CH3)2; o una sal farmacéuticamente aceptable de éste.

Description

Miméticos de smac diazo bicíclicos y sus usos.

Antecedentes de la invención

Campo de la invención

Esta invención está en el campo de la química medicinal. Particularmente, la invención se relaciona con miméticos conformacionalmente restringidos de la secuencia N-terminal de Smac que funcionan como inhibidores de las proteínas inhibidoras de la Apoptosis. La invención además se relaciona con el uso de estos miméticos para inducir o sensibilizar las células a la inducción de la muerte celular apoptótica.

Técnica relacionada

El fenotipo celular de cáncer agresivo es el resultado de una variedad de alteraciones genéticas y epigenéticas que conducen a la desregulación de las rutas de señalización intracelular (Ponder, Nature 411:336 (2001)). El común denominador de todas las células cancerosas, sin embargo, es su falla para ejecutar un programa apoptótico, y es un sello distintivo del cáncer la falta de apoptosis adecuada debido a defectos en la maquinaria normal de la apoptosis (Lowe y otros, Carcinogenesis 21:485 (2000)). Las terapias contra el cáncer más actuales, que incluyen agentes quimioterapéuticos, radiación e inmunoterapia, trabajan induciendo indirectamente la apoptosis en las células cancerosas. La incapacidad de las células cancerosas para ejecutar un programa apoptótico debido a defectos en la maquinaria apoptótica normal se asocia así frecuentemente con un aumento en la resistencia a la apoptosis inducida por quimioterapia, radiación o inmunoterapia. La resistencia primaria o adquirida de cáncer humano de diferentes orígenes a los protocolos actuales de tratamiento debido a defectos de la apoptosis es un problema importante en la terapia del cáncer actual (Lowe y otros, Carcinogenesis 21:485 (2000); Nicholson, Nature 407:810 (2000)). Como consecuencia, los esfuerzos actuales y futuros hacia el diseño y desarrollo de nuevas terapias contra el cáncer específicas al objetivo molecular para mejorar la supervivencia y calidad de la vida de pacientes con cáncer deben incluir estrategias que se dirigen específicamente a la resistencia de las células cancerosas a la apoptosis En este sentido, enfocar los reguladores negativos cruciales que juegan un papel central al inhibir directamente la apoptosis en las células cancerosas representa una estrategia terapéutica muy prometedora para el diseño del nuevo fármaco anticancerígeno.

Dos clases de reguladores negativos centrales de la apoptosis se han identificado. La primera clase de reguladores es la familia de proteínas Bcl-2, según de ejemplifica por dos moléculas anti-apoptóticas potentes, las proteínas Bcl-2 y Bcl-XL (Adams y otros., Science 281:1322 (1998); Reed, Adv. Pharmacol. 41:501 (1997); Reed y otros, J. Cell. Biochem. 60:23 (1996)). Las estrategias terapéuticas para enfocar Bcl-2 y Bcl-XL en el cáncer para restablecer la sensibilidad de células cancerosas y superar la resistencia de las células cancerosas a la apoptosis se ha revisado ampliamente (Adams y otro., Science 281:1322 (1998); Reed, Adv. Pharmacol. 41:501 (1997); Reed y otros, J. Cell. Biochem. 60:23 (1996)). Varios laboratorios se interesan en diseñar inhibidores de molécula pequeña de Bcl -2 y Bcl-XL.

La segunda clase de reguladores negativos centrales de la apoptosis es el inhibidor de las proteínas de la apoptosis (IAPs) (Deveraux y otros, Genes Dev. 13:239 (1999); Salvesen y otros, Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 3:401 (2002)). Esta clase incluye proteínas tales como XIAP, cIAP-1, cIAP-2, ML-IAP, HIAP, KIAP, TSIAP, NAIP, survivina, livina, ILP-2, apollon, y BRUCE. Las proteínas IAP suprimen potentemente la apoptosis inducidas por una gran variedad de estímulos apoptóticos, que incluyen agentes quimioterapéuticos, radiación, e inmunoterapia en las células cancerosas.

IAP del cruzamiento X (XIAP) es el inhibidor más potente en la supresión de la apoptosis entre todos los miembros de IAP (Holcik y otros, Apoptosis 6:253 (2001); LaCasse y otros, Oncogene 17:3247 (1998); Takahashi y otros, J. Biol. Chem. 273:7787 (1998); Deveraux y otros, Nature 388:300 (1997); Sun y otros, Nature 401:818 (1999); Deveraux y otros, EMBO J. 18:5242 (1999); Asselin y otros, Cancer Res. 61:1862 (2001)). XIAP juega un papel clave en la regulación negativa de la apoptosis tanto las rutas mediada por el receptor para la muerte como mediadas por mitocondrias. XIAP funciona como un potente inhibidor endógeno de la apoptosis uniendo directamente e inhibiendo potentemente tres miembros de la familia de las enzimas caspasa, caspasa-3, -7, y -9 (Takahashi y otros, J. Biol. Chem. 273:7787 (1998); Deveraux y otros, Nature

388:300 (1997);Sun y otros, Nature 401:818 (1999); Deveraux y otros, EMBO J. 18:5242 (1999); Asselin y otros, Cancer Res. 61:1862 (2001); Riedl y otros, Cell 104:791 (2001); Chai y otros, Cell 104:769 (2001); Huang y otros, Cell 104:781 (2001)). XIAP contiene tres dominios repetitivos de baculovirus (BIR) inhibidores de la apoptosis, así como un C-terminal dedo RING. El tercer dominio BIR (BIR3) se dirige selectivamente a la caspasa-9, la caspasa iniciadora en la ruta mitocondrial, mientras que la región de enlace entre BIR1 y BIR2 inhibe tanto la caspasa-3 como la caspasa-7(Salvesen y

otros, Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 3:401 (2002)). Mientras que la unión a XIAP previene la activación de las tres caspasas, es evidente que la interacción con la caspasa-9 es el más crítica para su inhibición de la apoptosis (Ekert y otros, J. Cell Biol.

152:483 (2001); Srinivasula y otros, Nature 410:112 (2001)). Debido a que XIAP bloquea la apoptosis en la fase efectora corriente abajo, un punto donde convergen múltiples rutas de señalización, las estrategias que enfocan XIAP pueden demostrar ser especialmente eficaces para superar la resistencia de las células cancerosas a la apoptosis (Fulda y otros, Nature Med. 8:808 (2002); Arnt y otros, J. Biol. Chem. 277:44236 (2002)).

Aunque la función precisa de XIAP en cada tipo de cáncer está lejos de ser completamente entendida, se acumula evidencia para indicar que XIAP se sobreexpresa ampliamente en muchos tipos de cáncer y puede desempeñar un papel importante en la resistencia de las células cancerosas a una variedad de agentes terapéuticos actuales (Holcik y otros, Apoptosis 6:253 (2001); LaCasse y otros, Oncogene 17:3247 (1998)).

La proteína XIAP se encontró que se expresa en la mayoría de las líneas celulares de cáncer humano NCI 60 (Tamm y otros, Clin. Cancer Res. 6:1796 (2000)). El análisis de las muestras de tumores en 78 pacientes no tratados previamente demostró que aquellos con niveles inferiores de XIAP tuvieron supervivencia significativamente más larga (Tamm y otros, Clin. Cancer Res. 6:1796 (2000)). XIAP se encontró que se expresa en el glioma maligno humano (Wagenknecht y otros, Cell Death Differ. 6:370 (1999); Fulda y otros, Nature Med. 8:808 (2002)). XIAP se encontró que se expresa en células cancerosas de próstata humano y bloquea la apoptosis relacionada con ligando Apo2/factor de necrosis tumoral induciendo la apoptosis mediada por ligando de las células cancerosas de próstata en presencia de activación mitocondrial (McEleny y otros, Prostate 51:133 (2002); Ng y otros, Mol. Cancer Ther. 1:1051 (2002)). XIAP se sobreexpresa en cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) en los pacientes y se ha implicado en la patogénesis de NSCLC (Hofmann y otros, J. Cancer Res. Clin. Oncol. 128:554 (2002)). La expresión de XIAP y la falta de regulación negativa de XIAP tras el tratamiento con cisplatino se han implicado en la resistencia a cisplatino de cáncer de ovario humano (Li y otros, Endocrinology 142:370 (2001); Cheng y otros, Drug Resist. Update 5:131 (2002)). Tomados conjuntamente, estos datos sugieren que XIAP puede jugar un papel importante en la resistencia de varios cánceres humanos a los agentes terapéuticos actuales.

La integridad de la pared del vaso sanguíneo es esencial para la homeostasis vascular y la función del órgano. Un equilibrio dinámico entre la supervivencia de la célula endotelial y la apoptosis contribuye a esta integridad durante el desarrollo vascular y la angiogénesis patológica. Se ha demostrado que la cIAP-1 es esencial para mantener la supervivencia de la célula endotelial y la homeostasis del vaso sanguíneo durante el desarrollo vascular (Santoro y otros, Nature Genetics 39:1397 (2007). Como tal, la cIAP-1 puede jugar un papel importante en el control de la angiogénesis y la homeostasis del vaso sanguíneo durante la embriogénesis, regeneración y tumorigénesis.

La apoptosis no es un proceso único, más bien, se implica con un número de diferentes rutas de señalización, a veces interconectadas, que conducen a la degradación celular. Las rutas implicadas en una forma particular de la apoptosis dependen de muchos factores, tales como el insulto o insultos que inician el proceso. Otros factores incluyen la activación o sobreactivación de los receptores específicos, tales como la activación de los receptores de la "muerte" por el factor de necrosis tumoral alfa ((TNFα), ligando inductor de apoptosis relacionado con el factor de necrosis tumoral (TRAIL o Apo2L),

o el ligando FAS. Otro factor determinante es el tipo de célula que se implica, ya que las diferentes rutas de señalización se muestran para las de esta manera llamadas células de tipo I y tipo II después de la activación del receptor de Fas o TNFα.

TRAIL (Apo2L) ha demostrado ser un inductor potente y selectivo de la apoptosis en las células cancerosas (pero no en células normales) tras la unión a ya sea los dos receptores pro-apoptóticos TRAIL, TRAIL-R1 (o DR4)(Pan y otros, Science

276:111 (1997)) o TRAIL-R2 (KILLER, o DR5) (Wu y otros, Nat. Genet. 17:141-143 (1997); Pan y otros, Science 277:815 (1997); Walczak y otros, EMBO J. 16:5386 (1997)). La activación de los receptores de muerte pro-apoptóticos por TRAIL induce la formación de complejo de señalización inductor de la muerte (DISC), que consiste de receptor FADD como un adaptador (Kischkel y otros, Immunity 12:611 (2000); Kuang y otros, J. Biol. Chem. 275:25065 (2000)), y la caspasa-8. como una caspasa iniciadora. Una vez que se forma DISC, la caspasa-8 se auto-procesa y activa por la proximidad inducida (Medema y otros, EMBO J. 16:2794 (1997); Muzio y otros, J. Biol. Chem. 273:2926 (1998)).

TRAIL ha generado un interés significativo como un terapéutico potencial para el cáncer (French y otros, Nat. Med. 5:146 (1999)) debido a su enfoque selectivo de las células cancerosas, mientras que la mayoría de las células normales parecen ser resistentes a TRAIL (Ashkenazi y otros, Science 281:1305 (1998); Walczak y otros, Nat. Med. 5:157 (1999)). La administración sistémica de TRAIL ha demostrado ser segura y eficaz en la destrucción de los tumores xenoinjertados de mama o de colon y prolongación de la supervivencia en ratones (Walczak y otros, Nat. Med.5:157 (1999)). Aunque TRAIL puede destruir específicamente muchos tipos de células cancerosas, muchas otras muestran resistencia a TRAIL (Kim y otros, Clin. Cancer Res. 6:335 (2000);Zhang y otros, Cancer Res. 59:2747 (1999)). Adicionalmente, se han destruido células

cancerosas por la aplicación de anticuerpos (monoclonales o policlonales) que reconocen específicamente ya sea TRAIL-R1

o TRAIL-R2.

Numerosos mecanismos se han identificado como factores potenciales responsables de la resistencia a TRAIL. Tales mecanismos existen en un número de niveles, que se incluyen a nivel del receptor, nivel de mitocondria, nivel postmitocondria, y a nivel de DISC Por ejemplo, la pérdida de la expresión de la caspasa-8 (Teitz y otros, Nat. Med. 6:529 (2000); Griffith y otros, J. Immunol. 161:2833 (1998)), o la alta expresión de la proteína inhibitoria FLICE celular (cFLIP) (Kim y otros, Clin. Cancer Res. 6:335 (2000); Zhang y otros, Cancer Res. 59:2747 1999; Kataoka y otros, J. Immunol. 161:3936 (1998)) hacen las células cancerosas resistentes a TRAIL. Yeh y otros han demostrado que los fibroblastos embrionarios de ratón deficientes en cFLIP son particularmente sensibles a la apoptosis mediada por el receptor (Yeh y otros, Immunity

12:533 (2000)). Algunas variantes de empalme de cFLIP son conocidos, que incluyen una variante corta de empalme, cFLIP-S, y una variante de empalme más larga, cFLIP-L. Se ha demostrado que los fibroblastos embrionarios de ratón deficientes en cFLIP se vuelven resistentes a la apoptosis inducida por TRAIL como resultado de la transducción de cFLIP-S mediada por retrovirus (Bin y otros, FEBS Lett. 510:37 (2002)).

Aunque TRAIL representa un candidato potencialmente prometedor para la activación selectiva del receptor de muerte del tumor (es decir, induce la apoptosis preferentemente en las células tumorales pero no en los tejidos normales), muchas células cancerosas son resistentes a los fármacos inductores de la apoptosis, como se discutió anteriormente. Como resultado, el tratamiento con tales fármacos frecuentemente requiere co-tratamiento con irradiación y/o productos químicos citotóxicos para lograr un efecto terapéutico. Sin embargo, tanto la radiación como la quimioterapia tienen efectos secundarios significativos, y generalmente se evitan, si es posible.

Así, existe una necesidad de un agente que puede sensibilizar selectivamente y eficientemente las células tumorales para seleccionar, fármacos inductores de la apoptosis tales como TRAIL o anticuerpos receptores de TRAIL, sin sensibilizar además a las células normales circundantes. Tal agente sería útil además para reducir o prevenir la resistencia a los fármacos comúnmente asociada con el uso de fármacos apoptóticos para el cáncer mediados por el receptor, mejorando así su eficacia y eliminando la necesidad de terapias de combinación.

Recientemente, Smac/DIABLO (segundo activador de las caspasas derivado de mitocondria) se identificó como una proteína liberada a partir de la mitocondria dentro del citosol en respuesta al estímulo apoptótico (Budihardjo y otros, Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 15:269 (1999); Du y otros, Cell 102:33 (2000)). Smac se sintetiza con una secuencia de acceso mitocondrial N-terminal que se elimina de forma proteolítica durante la maduración al polipéptido maduro. Smac se demostró que interactúa directamente con XIAP y otras IAPs y que interrumpe su unión a las caspasas y facilita la activación de la caspasa. Smac es un potente inhibidor endógeno de XIAP.

Recientemente se han determinado estructuras tridimensionales (3D) experimentales de alta resolución del dominio BIR3 de XIAP en el complejo con la proteína Smac y el péptido (Sun y otros, J. Biol. Chem. 275:36152 (2000); Wu y otros, Nature 408:1008 (2000)) (Figura 1). El tetrapéptido N-terminal de Smac (Ala-Val-Pro-Ile, o AVPI (sec. con núm. de ident.: 1)) reconoce una ranura de la superficie en el dominio BIR3 de XIAP a través de varias interacciones de enlaces de hidrógeno y contactos van der Waals. La interacción entre BIR3 y la caspasa-9 además se ha demostrado que implica cuatro residuos (Ala-Thr-Pro-Phe, o ATPF (sec. con núm. de ident.: 2)) en el extremo amino terminal de la subunidad pequeña de la caspasa-9 a la misma ranura de la superficie en el dominio BIR3. Varios estudios recientes han demostrado de forma convincente que Smac promueve la actividad catalítica de la caspasa-9 compitiendo con la caspasa-9 por la misma ranura de unión en la superficie del dominio BIR3 (Ekert y otros., J. Cell Biol. 152:483 (2001); Srinivasula y otros, Nature 410:112 (2001)).

A diferencia de la mayoría de las interacciones proteína-proteína, la interacción Smac-XIAP se media por sólo cuatro residuos de aminoácidos en la proteína Smac y una ranura de superficie bien definida en el dominio BIR3 de XIAP. El valor Kd del péptido AVPI de Smac (sec. con núm. de ident.:1) a BIR3 de XIAP (Kd = 0.4 µM) es esencialmente el mismo que la proteína Smac madura (Kd = 0.42 µM). Este sitio de interacción bien definido es ideal para el diseño de pequeñas moléculas no peptídicas similares a fármacos, que imitan la unión de Smac a XIAP.

Un péptido Smac permeable a la célula , que consiste de los primeros cuatro residuos de aminoácidos (AVPI (sec. con núm. de ident.: 1)) de la N-terminal de Smac atado a un péptido portador que facilita el suministro intracelular, se demostró recientemente que sensibiliza a diversas células tumorales in vitro y células de glioma maligno in vivoa la apoptosis inducida por la ligazón del receptor de muerte o fármacos citotóxicos (Fulda y otros, Nature Med. 8:808 (2002)). De forma importante, este péptido Smac mejoró fuertemente la actividad anti-tumoral de Apo2L/TRAIL en un modelo intracraneal de xenoinjerto de glioma maligno in vivo. La erradicación completa de los tumores establecidos y la supervivencia de los

ratones sólo se logró tras el tratamiento combinado con péptidos Smac y Apo2L/TRAIL. De importancia, el péptido Smac no tiene toxicidad detectable al tejido cerebral normal. .

Un segundo estudio reciente independiente demostró además que péptidos que consisten de los primeros cuatro a ocho residuos de aminoácidos del N-terminal de Smac atado a un péptido portador diferente mejoraron la inducción de la apoptosis y los efectos antiproliferativos a largo plazo de diversos fármacos quimioterapéuticos, que incluyen paclitaxel, etopósido, SN-38, y doxorrubicina en MCF-7 y otras líneas celulares de cáncer de mama humano (Arnt y otros., J. Biol. Chem. 277:44236 (2002). Este estudio concluyentemente demostró que XIAP y cIAP-1 son los objetivos moleculares primarios de estos péptidos en las células.

Un tercer estudio demostró que un péptido Smac de los primeros siete residuos N-terminal atados a poliarginina restauró la actividad apoptosoma y revirtió la resistencia a la apoptosis en las células H460 de cáncer de pulmón de células no pequeñas (Yang y otros, Cancer Res. 63:831 (2003)). XIAP se demostró que es responsable del defecto en la actividad apoptosoma y supresión de la actividad de la caspasa en células H460. Cuando se usa en conjunto con la quimioterapia, el péptido Smac permeable a la célula retrocede el crecimiento del tumor in vivo con poca toxicidad murina. Tomados conjuntamente, estos estudios independientes recientes sugieren fuertemente que un mimético de Smac permeable a la célula, potente, estable, puede tener gran potencial terapéutico para el tratamiento de cáncer de mama humano y otros tipos de cáncer.

Los inhibidores basados en péptidos son herramientas útiles para dilucidar la función anti-apoptótica de IAPs y el papel de IAPs en la respuesta de las células cancerosas a los agentes quimioterapéuticos. Pero los inhibidores basados en péptidos, generalmente, tienen limitaciones intrínsecas como agentes terapéuticos potencialmente útiles. Estas limitaciones incluyen su pobre permeabilidad a la célula y pobre estabilidad in vivo. Claramente, en estos tres estudios publicados usando inhibidores de péptidos basados en Smac, los péptidos tuvieron que ser fusionados a péptidos portadores para hacerlos relativamente permeables a la célula.

WO2005069894 yWO2006010118 ambos describen miméticos de Smac restringidos conformacionalmente que funcionan como inhibidores de IAPs. Estas descripciones se relacionan además con al uso de estos miméticos para inducir la muerte celular apoptótica y para sensibilizar las células a los inductores de la apoptosis.

Para superar las limitaciones intrínsecas de los inhibidores basados en péptidos, la presente invención implica el diseño de miméticos de Smac restringidos conformacionalmente.

Resumen de la invención

Se acepta generalmente que la incapacidad de las células cancerosas o sus células de apoyo para experimentar la apoptosis en respuesta a lesiones genéticas o la exposición a inductores de la apoptosis (tales como agentes contra el cáncer y radiación) es un factor importante en la aparición y progresión del cáncer. La inducción de la apoptosis en las células cancerosas o sus células de apoyo (por ejemplo, células neovasculares en la vasculatura del tumor) se piensa que es un mecanismo universal de acción para prácticamente todos los fármacos terapéuticos para el cáncer eficaces o terapias de radiación en el mercado o en la práctica de hoy. Una razón de la incapacidad de una célula para experimentar la apoptosis es la expresión aumentada y la acumulación de IAPs.

La presente invención contempla que la exposición de los animales que sufren de cáncer u otros trastornos hiperproliferativos o enfermedades asociadas con la desregulación de la apoptosis a las cantidades terapéuticamente eficaces de fármaco (s) (por ejemplo, pequeñas moléculas) que inhiben la (s) función (es) de IAPs destruirá (n) a las células enfermas o células de apoyo por completo (aquellas células cuya supervivencia continuada es dependiente de la hiperactividad o sobreexpresión de IAPs) y/o rinde tales células como una población más susceptible a la actividad de fármacos terapéuticos de cáncer o terapias de radiación que inducen la muerte celular. La presente invención contempla que los inhibidores de IAPs satisfacen una necesidad no satisfecha para el tratamiento de múltiples tipos de cáncer, ya sea cuando se administran como monoterapia para inducir la apoptosis en células cancerosas dependiente de la función IAP, o cuando se administran en una relación temporal con otro tipo de fármacos terapéuticos o terapias de radiación para el cáncer que inducen muerte celular de manera que rinda una mayor proporción de células cancerosas o células de apoyo susceptibles para ejecutar el programa de apoptosis en comparación con la proporción correspondiente de células en un animal tratado solamente con el fármaco terapéutico o terapia de radiación para el cáncer solo.

La presente invención contempla además que el tratamiento de los animales que sufren de enfermedades asociadas a células endoteliales (por ejemplo, angiogénesis tumoral, retinopatías y aterosclerosis) con cantidades terapéuticamente

eficaces de fármaco (s) (por ejemplo, moléculas pequeñas) que inhiben la (s) función (es) de IAPs (por ejemplo, cIAP-1) puede prevenir o inhibir la angiogénesis y alterar la homeostasis del vaso sanguíneo durante el desarrollo vascular en afecciones patológicas. Los trastornos particulares que se pueden tratar con los compuestos de la invención incluyen degeneración macular, artritis reumatoide, psoriasis, retinopatía diabética, retinopatía del prematuro, rechazo de injerto de

5 córnea, glaucoma neovascular, fibroplasia retrolental, rubeosis, Síndrome de Osler-Webber, angiogénesis miocárdica, neovascularización de placas, telangiectasia, articulaciones hemofílicas, angiofibroma, granulación de heridas, adherencias intestinales, aterosclerosis, esclerodermia y cicatrices hipertróficas.

Los solicitantes han encontrado que la inserción de NR 5 en el sistema de anillo bicíclico tiene cierta influencia inesperada

10 sobre la unión a XIAP en comparación con análogos carbocíclicos (por ejemplo, SM-122) (Gráfico 1). Por ejemplo, la afinidad de unión a BIR3 de XIAP y la actividad celular en líneas celulares de cáncer MDA-MB-231 y 3-SK-OV de SM-245P3 , (R5 = Me) y SM-246P (R5 = Bn) son menos que la de SM-122. Sorprendentemente, la afinidad de unión a BIR3 de XIAP y la actividad celular en líneas celulares de cáncer MDA-MB-231 y SK-OV-3 de SM-337, (R5 = COCH2Ph) y SM-406 (R5 = COCH2CH(CH3)2 son igual o mejor que la de SM-122. Adicionalmente a ciertas propiedades biológicas, los solicitantes han

15 encontrado que SM-406 y otros análogos relacionados muestran una mejora inesperada en la biodisponibilidad oral en relación con SM-122.

Los solicitantes han encontrado además que los compuestos de la presente invención cuando se combinan con otros agentes contra el cáncer (por ejemplo, Tykerb®, taxotere, gemcitabina, mitoxantrona, etopósido) visualiza mejoras inesperadas en la actividad in vitroen las lineas celulares de cáncer. Adicionalmente, los solicitantes han encontrado que los compuestos de la presente invención cuando se combinan con otros agentes contra el cáncer (por ejemplo, Tykerb®, 50 taxotere, gemcitabina) visualizan reducciones sorprendentes en el volumen medio del tumor en modelos de xenoinjertos de cáncer in vivo. Así, en ciertas modalidades de la invención, el tratamiento de combinación de los animales con una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención y un curso de un agente contra el cáncer o radiación produce una mayor respuesta del tumor y beneficio clínico en estos animales en comparación con los tratados con solo el compuesto o fármacos anticancerígenos/radioterapia. En otras palabras, debido a que los compuestos de la presente 55 invención bajan el umbral apoptótico de todas las células que expresan IAPs, se aumenta la proporción de células que ejecutan con éxito el programa de la apoptosis en respuesta a la actividad que induce la apoptosis de los fármacos anticancerígenos/radiación. Alternativamente, los compuestos de la presente invención se pueden usar para permitir la administración de una dosis inferior, y por lo tanto menos tóxica y más tolerable, de un agente contra el cáncer y/o radiación

para producir la misma respuesta tumoral/beneficio clínico como la dosis convencional sola del agente contra el cáncer/radiación. Ya que las dosis para todos los fármacos anticancerígenos y tratamientos de radiación aprobados son conocidos, la presente invención contempla las diversas combinaciones de ellos con los compuestos de la presente invención. Además, ya que los compuestos de la presente invención actúan al menos en parte inhibiendo IAPs, la

5 exposición de las células cancerosas y células de apoyo a cantidades terapéuticamente eficaces de los compuestos se puede temporalmente enlazar para coincidir con los intentos de las células para ejecutar el programa de apoptosis en respuesta al agente contra el cáncer o terapia de radiación. Así, en algunas modalidades, administrar las composiciones de la presente invención en conexión con ciertas relaciones temporales, proporciona prácticas terapéuticas especialmente eficaces.

10 La presente invención se relaciona con miméticos de Smac que son útiles para inhibir la actividad de las proteínas IAP y entre otros aumentar la sensibilidad de las células a los inductores de la apoptosis. En una modalidad particular, los miméticos de Smac son compuestos de la fórmula VI:

en donde:

A1 y A2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo opcionalmente sustituido;

30 X es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo de C1-3 opcionalmente sustituido; T es C=O; U es NR1R2; cada uno de R1 y R2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y

35 heteroarilo opcionalmente sustituido; R5 es COR7; y R7 es -CH2CH(CH3)2;

o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.

La invención se relaciona con compuestos representados por la Fórmula VI que son inhibidores de las proteínas IAP. La invención se relaciona con los compuestos de la invención para el uso al inducir la apoptosis en las células e inhibir la angiogénesis. La invención se relaciona además con los compuestos de la invención para el uso al sensibilizar las células a los inductores de la apoptosis. Los compuestos son útiles para el tratamiento, mejora o prevención de trastornos sensibles a 45 la inducción de la muerte celular apoptótica, por ejemplo, trastornos caracterizados por la desregulación de la apoptosis, que incluyen enfermedades hiperproliferativas tal como el cáncer. En ciertas modalidades, los compuestos se pueden usar para tratar, mejorar o prevenir el cáncer que se caracteriza por la resistencia a terapias para el cáncer (por ejemplo, aquellos que son quimiorresistente, resistente a la radiación, resistente a hormonas, y similares). En otras modalidades, los compuestos se pueden usar para tratar enfermedades hiperproliferativas caracterizadas por la sobreexpresión de IAPs. En otras

50 modalidades, los compuestos se pueden usar como un método para prevenir o inhibir la angiogénesis en animales que lo necesitan.

La presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de la Fórmula VI en una cantidad terapéuticamente eficaz para inducir la apoptosis en las células o para sensibilizar las células a los inductores de la 55 apoptosis.

La invención proporciona además kits que comprenden un compuesto de la Fórmula VI e instrucciones para administrar el

compuesto a un animal. Los kits pueden contener opcionalmente otros agentes terapéuticos, por ejemplo, agentes contra el cáncer o agentes moduladores de la apoptosis.

La presente invención proporciona además un proceso para preparar un compuesto de la Fórmula XI

en donde:

20 V es N; W es CH; X es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo de C1-3 opcionalmente sustituido; Y es NHCO; Z es (CR1R2)r cuando r es 0;

25 T es C=O; U es NR1R2; m es 1; cada uno de R1 y R2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y

30 heteroarilo opcionalmente sustituido; y R7 es -CH2CH(CH3)2;

que comprende condensar un compuesto de la Fórmula XII

en donde A1, A2, V, W, X, Y, Z, T, U y m tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula XI, con R7CO-L, 50 en donde:

R7 es -CH2CH(CH3)2; y L es un grupo saliente, para formar un compuesto de la Fórmula XI.

55 Breve descripción de las figuras

La Figura 1 es un gráfico que ilustra la actividad anti-tumoral de SM-406 (AT-406) en un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama.

La Figura 2 es un gráfico que ilustra la actividad anti-tumoral de SM-406 (AT-406) y taxotere en un modelo de xenoinjerto de cáncer de próstata. La Figura 3 es un gráfico que ilustra la actividad anti-tumoral de SM-406 (AT-406) y Tykerb® en un modelo de xenoinjerto de cáncer de próstata. La Figura 4 es un gráfico que ilustra la actividad anti-tumoral de SM-406 (AT-406) y taxotere en un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama. La Figura 5 es un gráfico que ilustra la actividad anti-tumoral de SM-406 (AT-406) yTykerb® en un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama. La Figura 6 es un gráfico que ilustra la actividad anti-tumoral de SM-406 (AT-406) y gemcitabina en un modelo de xenoinjerto de cáncer pancreático. La Figura 7 es un gráfico que ilustra los estudios de optimización del programa de dosis de SM-406 (AT-406) en un modelo de xenoinjerto de cáncer de mama. La Figura 8 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular por SM-406 en la línea celular de cáncer de mama MDA-MB-231, líneas celulares de cáncer de ovario SK-OV-3 y OVCAR-4 y línea celular de cáncer melanoma SKMel-2. La Figura 9 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular por SM-406 en las líneas celulares de leucemia HL-60 y SR. La Figura 10 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular por SM-406 en lineas celulares de cáncer de mama humano BT-549, MDA-MB-415, SUM-159, MDA-MB-468, MDA-MB-453 y 2LMP. La Figura 11 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular de TNFα en conjunto con SM-406 en la línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-436. La Figura 12 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular de TNFα en conjunto con SM-406 en la línea celular de cáncer de mama humano SUM-159. La Figura 13 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular por TRAIL en conjunto con SM-406 en la línea celular pancreática humana Panc-1. La Figura 14es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular por TRAIL en conjunto con SM-406 en línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-23 (2LMP). La Figura 15 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular por gemcitabina en conjunto con SM-406 en la línea celular pancreática humana Panc-1. La Figura 16 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular por la mitoxantrona en conjunto con SM-406 en la línea celular pancreática humana Panc-1. La Figura 17 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular por SM-406 en conjunto con roscovitina (Ros) en la línea celular de próstata humano PC3. La Figura 18 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular de taxotere (TXT) en conjunto con SM-406 en la línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-453. La Figura 19 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento celular de VP-16 en conjunto con SM-406 en la línea celular pancreática humana Panc-1. La Figura 20 es una figura que ilustra el efecto de los miméticos de Smac sobre la proteína cIAP-1 en las células cancerosas MDA-MB-231. La Figura 21 es una figura que ilustra el efecto de los miméticos de Smac sobre las proteínas cIAP-1/2 en las células cancerosas SK-OV-3. La Figura 22 es una figura que ilustra la inducción de apoptosis por SM-406-231 en células de cáncer de mama MDA- MB. La Figura 23 es una figura que ilustra la inducción de apoptosis por SM-406 en células de cáncer de ovario SK-OV-3. La Figura 24 es una figura que ilustra la inducción de apoptosis por SM-406 en células de cáncer pancreático Panc-1. La Figura 25 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento tumoral por SM-406 en el modelo de xenoinjerto MDAMB-231 de cáncer de mama humano en ratones inmunodeficientes combinados graves (SCID). La Figura 26 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento tumoral por SM-406 en el modelo de xenoinjerto PC-3 de cáncer de próstata humano en ratones desnudos. La Figura 27 es un gráfico que ilustra la inhibición del crecimiento tumoral por SM-406 en el modelo de xenoinjerto 2LMP de cáncer de mama humano en ratones desnudos. La Figura 28 es una serie de gráficos que ilustran las curvas de unión competitiva SM-406 y SM-428 a dominios BIR3 de cuatro miembros de proteínas IAPs ((A) XIAP; (B) cIAP1; (C) cIAP2; (D) ML -IAP) según se determina usando un ensayo de unión basado en la polarización de fluorescencia.

Descripción detallada de la invención

La presente invención se relaciona con compuestos conformacionalmente restringidos representados por la Fórmula VI, que son miméticos de Smac y funcionan como inhibidores de IAPs. Estos compuestos sensibilizan las células a inductores de la apoptosis y, en algunos casos, ellos mismos inducen apoptosis por la inhibición de IAPs. Por lo tanto, la invención se relaciona con los compuestos de la fórmula VI para el uso en métodos para sensibilizar las células a los inductores de la apoptosis y a métodos para inducir la apoptosis en células, que comprenden poner en contacto las células con un compuesto de la Fórmula VI solo o en conjunto con un inductor de la apoptosis. La invención se relaciona además con compuestos de la fórmula VI para el uso en métodos para tratar, mejorar o prevenir trastornos en animales que son sensibles a la inducción de la apoptosis que comprende administrar a los animales un compuesto de la Fórmula VI y un inductor de la apoptosis. Tales trastornos incluyen los caracterizados por una desregulación de la apoptosis y los caracterizados por la sobreexpresión de IAPs. La invención se relaciona además con compuestos de la fórmula VI para el uso en métodos para prevenir o inhibir la angiogénesis en un animal que lo necesita que comprende administrar a un animal un compuesto de la Fórmula VI.

El término "proteínas IAP," como se usa en la presente descripción, se relaciona con cualquier miembro conocido de la familia de Proteínas Inhibidoras de la Apoptosis, que incluyen, pero sin limitarse a XIAP, cIAP-1, cIAP-2, ML-IAP, HIAP, TSIAP, KIAP, NAIP, survivina, livina, ILP-2, apollon, y BRUCE.

El término "sobreexpresión de IAPs," como se usa en la presente descripción, se refiere a un nivel elevado (por ejemplo, nivel aberrante) de los ARNm que codifican para una proteína (s) IAP (s), y/o a niveles elevados de proteína (s) IAP (s) en las células en comparación con células no patológicas similares correspondientes que expresan niveles basales de los ARNm que codifican proteínas IAP o que tienen niveles basales de proteínas IAP. Los métodos para detectar los niveles de ARNm que codifican proteínas IAP o niveles de proteínas IAP en una célula incluyen, pero sin limitarse a, inmunoelectrotransferencia usando anticuerpos de proteínas IAP, métodos inmunohistoquímicos y métodos de amplificación de ácido nucleico o detección directa de ARN. Tan importante como el nivel absoluto de proteínas IAP en las células es determinar que sobreexpresan proteínas IAP, así además es el nivel relativo de proteínas IAP con otras moléculas de señalización pro-apoptóticas (por ejemplo, proteínas pro-apoptóticas de la familia Bcl-2 ) dentro de tales células. Cuando el equilibrio de estos dos son de manera que, si no fuera por los niveles de proteínas IAP, las moléculas de señalización proapoptóticas serían suficientes para causar que las células ejecuten el programa de apoptosis y mueran, dichas células dependerían de las proteínas IAP para su supervivencia. En tales células, la exposición a una cantidad eficaz inhibidora de un inhibidor de la proteína IAP será suficiente para causar a las células ejecutar el programa de apoptosis y morir. Así, el término "sobreexpresión de una proteína IAP" se refiere además a las células que, debido a los niveles relativos de señales pro-apoptóticas y señales anti-apoptóticas, experimentan la apoptosis en respuesta a cantidades eficaces inhibidoras de los compuestos que inhiben la función de las proteínas IAP.

Los términos "agente contra el cáncer" y "fármaco contra el cáncer", como se usa en la presente descripción, se refieren a cualquiera de los agentes terapéuticos (por ejemplo, compuestos quimioterapéuticos y/o compuestos terapéuticos moleculares), terapias de radiación, o intervenciones quirúrgicas, usados en el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas, tales como cáncer (por ejemplo, en los mamíferos).

El término "sal farmacéuticamente aceptable", como se usa en la presente descripción, se refiere a cualquier sal (por ejemplo, obtenida por reacción con un ácido o una base) de un compuesto de la presente invención que se tolera fisiológicamente en el animal objetivo (por ejemplo, un mamífero). Las sales de los compuestos de la presente invención se pueden derivar de ácidos inorgánicos u orgánicos y bases. Los ejemplos de ácidos incluyen, pero sin limitarse a, ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, nítrico, perclórico, fumárico, maleico, fosfórico, glicólico, láctico, salicílico, succínico, tolueno-p-sulfónico, tartárico, acético, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, fórmico, benzoico, malónico, sulfónico, naftaleno-2-sulfónico, bencenosulfónico, y similares. Otros ácidos, tales como el oxálico, aún cuando no sean farmacéuticamente aceptables por si mismos, se pueden emplear en la preparación de sales útiles como intermediarios en la obtención de compuestos de la invención y sus sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables.

Ejemplos de bases incluyen, pero sin limitarse a, hidróxidos de metal alcalino (por ejemplo, sodio), hidróxidos de metal alcalinotérreo (por ejemplo, magnesio), amoniaco y compuestos de la Fórmula NW 4+, en donde W es C1-4 alquil, y similares.

Ejemplos de sales incluyen, pero sin limitarse a: acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, butirato, citrato, canforato, canforsulfonato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, flucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, cloruro, bromuro, yoduro, 2-hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, mesilato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, tosilato, undecanoato y similares. Otros ejemplos de sales incluyen aniones de los compuestos de la presente invención compuestos con un catión adecuado tal como Na +,

NH4+, y NW4+ (en donde W es un grupo alquilo C1-4 ), y similares. Para uso terapéutico, las sales de los compuestos de la presente invención se contemplan que sean farmacéuticamente aceptable No obstante, pueden encontrar uso también sales de ácidos y bases que no son farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, en la preparación o purificación de un compuesto farmacéuticamente aceptable.

El término "cantidad terapéuticamente eficaz", como se usa en la presente descripción, se refiere a la cantidad del agente terapéutico suficiente para resultar en la mejora de uno o mas de los síntomas de un trastorno, o prevenir el avance de un trastorno, o causar la regresión del trastorno. Por ejemplo, con respecto al tratamiento del cáncer, una cantidad terapéuticamente eficaz se refiere preferentemente a la cantidad de un agente terapéutico que disminuye la tasa de crecimiento del tumor, disminuye la masa del tumor, disminuye el número de metástasis, aumenta el tiempo hasta la progresión del tumor, o aumenta el tiempo de supervivencia por lo menos 5%, preferentemente al menos 10%, al menos 15%, al menos 20%, al menos 25%, al menos 30%, al menos 35%, al menos 40%, al menos 45%, al menos 50%, al menos 55%, al menos 60%, al menos 65%, al menos 70%, al menos 75%, al menos 80%, al menos 85%, al menos 90%, al menos 95%, o al menos 100%.

Los términos "sensibilizar" y "sensibilización", como se usa en la presente descripción, se refieren a decisiones, a través de la administración de un primer agente (por ejemplo, un compuesto de la Fórmula I), un animal o una célula dentro de un animal más susceptible, o más sensible, a los efectos biológicos (por ejemplo, promoción o retraso de un aspecto de la función celular, que incluyen, pero sin limitarse a, división celular, crecimiento celular, proliferación, invasión, angiogénesis, o apoptosis) de un segundo agente. El efecto sensibilizador de un primer agente en una célula objetivo se puede medir como la diferencia en el efecto biológico previsto (por ejemplo, promoción o retraso de un aspecto de la función celular, que incluyen, pero sin limitarse a, crecimiento celular, proliferación, invasión, angiogénesis, o apoptosis) observada tras la administración de un segundo agente con y sin la administración del primer agente. La respuesta de la célula sensibilizada se puede aumentar por al menos 10%, al menos 20%, al menos 30%, al menos 40%, al menos 50%, al menos 60%, al menos 70%, al menos 80%, al menos 90%, al menos 100%, al menos 150%, al menos 200%, al menos 350%, al menos 300%, al menos 350%, al menos 400%, al menos 450%, o al menos 500% por encima de la respuesta en ausencia del primer agente.

El término "desregulación de la apoptosis", como se usa en la presente descripción, se refiere a cualquier aberración en la capacidad de (por ejemplo, predisposición) una célula a experimentar la muerte celular a través de la apoptosis. La desregulación de la apoptosis se asocia con o induce por una variedad de afecciones, que incluyen por ejemplo, trastornos autoinmunes (por ejemplo, lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide, enfermedad de injerto contra huésped, miastenia grave, o síndrome de Sjögren), afecciones inflamatorias crónicas (por ejemplo, psoriasis, asma o enfermedad de Crohn), trastornos hiperproliferativos (por ejemplo, tumores, linfomas de células B o linfomas de células T), infecciones virales (por ejemplo, herpes, papiloma o VIH) y otras afecciones como la osteoartritis y la aterosclerosis. Se debería señalar que cuando la desregulación se induce por o asocia con una infección viral, la infección viral puede ser o puede no ser detectable en el momento que ocurre o se observa la desregulación. Es decir, la desregulación inducida por virus puede ocurrir incluso después de la desaparición de los síntomas de la infección viral.

El término "angiogénesis", como se usa en la presente descripción significa la generación de nuevos vasos sanguíneos en un tejido u órgano. El término "antiangiogénesis," como se usa en la presente descripción, se refiere a la prevención o reducción del crecimiento de nuevos vasos sanguíneos. Ejemplos de enfermedades o trastornos asociados con la angiogénesis que se pueden tratar con los compuestos de la invención incluyen degeneración macular, artritis reumatoide, psoriasis, retinopatía diabética, retinopatía del prematuro, rechazo de injerto de córnea, glaucoma neovascular, fibroplasia retrolental, rubeosis, Síndrome Osler-Webber, angiogénesis miocárdica, neovascularización de la placa, telangiectasia, articulaciones hemofílicas, angiofibroma, granulación de heridas, adherencias intestinales, aterosclerosis, esclerodermia y cicatrices hipertróficas..

El término "enfermedad hiperproliferativa", como se usa en la presente descripción, se refiere a cualquier afección en la cual una población localizada de células proliferativas en un animal no está gobernada por las limitaciones habituales de crecimiento normal. Ejemplos de trastornos hiperproliferativos incluyen, pero no se limitan a los cánceres (por ejemplo, tumores, neoplasias, linfomas y similares) o trastornos autoinmunes. Una neoplasia se dice que es benigna si no experimenta invasión o metástasis y maligno si hace cualquiera de estos. Una célula "metastásica "significa que la célula puede invadir y destruir estructuras corporales vecinas. La hiperplasia es una forma de proliferación celular que involucra un aumento en el número de células en un tejido u órgano, sin alteración significativa en la estructura o función. La metaplasia es una forma de crecimiento celular controlado en que un tipo de célula completamente diferenciada se sustituye por otro tipo de célula diferenciada. En otra modalidad, la enfermedad hiperproliferativa es la artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino, osteoartritis, leiomiomas, adenomas, lipomas, hemangiomas, fibromas, oclusión vascular,

restenosis, aterosclerosis, lesiones pre-neoplásicas (tales como hiperplasia adenomatosa y neoplasia intraepitelial prostática), carcinoma in situ, leucoplasia vellosa oral, o psoriasis.

El crecimiento patológico de células linfoides activadas frecuentemente resulta en un trastorno autoinmune o una afección

5 inflamatoria crónica. Como se usa en la presente descripción, el término "trastorno autoinmune" se refiere a cualquier afección en la cual un organismo produce anticuerpos o células inmunes que reconocen moléculas, células o tejidos del propio organismo. Los ejemplos no limitantes de trastornos autoinmunes incluyen anemia hemolítica autoinmune, hepatitis autoinmune, enfermedad de Berger o nefropatía por IgA, esprue celíaco, síndrome de fatiga crónica, enfermedad de Crohn, dermatomiositis, fibromialgia, enfermedad de injerto contra el huésped, enfermedad de Grave, tiroiditis de Hashimoto,

10 púrpura trombocitopenia idiopática, liquen plano, esclerosis múltiple, miastenia gravis, psoriasis, fiebre reumática, artritis reumática, esclerodermia, síndrome de Sjögren, lupus eritematoso sistémico, diabetes tipo 1, colitis ulcerativa, vitiligo, y similares. .

El término "enfermedad neoplásica", como se usa en la presente descripción, se refiere a cualquier crecimiento anormal de 15 células que son benignos (no cancerosos) o malignos (cancerosos).

El término "agente antineoplásico", como se usa en la presente descripción, se refiere a cualquier compuesto que retrasa la proliferación, crecimiento, o propagación de una neoplasia específica (por ejemplo, maligna).

20 Los términos "previene", "prevenir" y "prevención", como se usa en la presente descripción, se refieren a una disminución en la aparición de células patológicas (por ejemplo, células hiperproliferativas o neoplásicas) en un animal. La prevención puede ser completa, por ejemplo, la ausencia total de células patológicas en un sujeto. La prevención puede ser además parcial, tal que la ocurrencia de células patológicas en un sujeto es menor que la que se habría ocurrido sin la presente invención.

25 El término "agentes moduladores de la apoptosis", como se usa en la presente descripción, se refiere a agentes que se implican para modular (por ejemplo, inhibir, disminuir, aumentar, promover) la apoptosis En una modalidad, el agente modulador de la apoptosis es un inductor de apoptosis. El término "inductor de la apoptosis", como se usa en la presente descripción, se refiere a un agente que induce la apoptosis en las células (por ejemplo, células cancerosas), haciendo las

30 células más susceptibles a la ejecución del programa de apoptosis. En una modalidad, un agente que induce la apoptosis es un agente contra el cáncer. Ejemplos de agentes moduladores de la apoptosis incluyen proteínas que comprenden un dominio de muerte, tales como, pero sin limitarse a, Fas/CD95, TRAMP, TNF RI, DR1, DR2, DR3, DR4, DR5, DR6, FADD, y RIP. Otros ejemplos de agentes moduladores apoptóticos incluyen, pero sin limitarse a, ligando de Fas TNFα, anticuerpos para Fas/CD95 y otros receptores de la familia TNF, TRAIL (además conocido como ligando Apo2 o Apo2L/TRAIL),

35 agonistas (por ejemplo, anticuerpos agonistas monoclonales o policlonales) de TRAIL-R1 o TRAIL-R2, Bcl-2, p53, BAX, BAD, Akt, CAD, PI3 quinasa, PP1, y proteínas caspasas. Los agentes moduladores incluyen en sentido amplio agonistas y antagonistas de receptores de la familia TNF y ligandos de la familia TNF. Los agentes moduladores de la apoptosis pueden ser solubles o unidos a membrana (por ejemplo, ligando o receptor). Los agentes moduladores de la apoptosis preferidos son inductores de la apoptosis, tales como TNF o un ligando relacionado con TNF, particularmente un ligando TRAMP, un

40 ligando Fas/CD95, un ligando TNFR-1, o TRAIL.

Descrito en la presente descripción están los inhibidores de IAPs que son miméticos de Smac que tienen la Fórmula general

I:

en donde:

A1 y A2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo opcionalmente sustituido, en donde A2 está ausente cuando V es O; V es seleccionado del grupo que consiste de N, CH y O;

5 W es seleccionado del grupo que consiste de CH y N; X es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo de C1-3 opcionalmente sustituido; Y es seleccionado del grupo que consiste de CONH, NHCO, C(O)O, OC(O), (CH2)1-3, en donde uno o más grupos CH2 pueden reemplazarse por O, S, o NR1, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido; Z es (CR1R2)r;

10 D es (CR1R2)n-NR5-(CR3R4)m; J es seleccionado del grupo que consiste de alquilenilo opcionalmente sustituido y (CR1R2)p-R6-(CR3R4)q; T es seleccionado del grupo que consiste de C=O, C=S, C=NR1, S, S=O, SO2, O, NR', CR1R2, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido;

15 U es seleccionado del grupo que consiste de H, NR1R2, N(R1)COR7, OR', SR1, alquilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo; n, m, p y q son independientemente seleccionados del grupo que consiste de 0-5; r es 0-3; cada R1, R2, R3 y R4 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente

20 sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido; R5 es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, heteroalquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido y COR7;

25 R6 es seleccionado del grupo que consiste de O, S, NR1, CR1R2, C=O, C=S y C=NR1; y R7 es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido;

o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.

Se describen además los compuestos en donde, R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son seleccionados del grupo que consiste de arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos haloalquilo, arilo y alquilo inferiores.

Se describen además los compuestos de la Fórmula II:

en donde:

A1 y A2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo opcionalmente sustituido, en donde A2 está ausente cuando V es O; V es seleccionado del grupo que consiste de N, CH y O; W es seleccionado del grupo que consiste de CH y N;

55 X es alquilo de C1-3 opcionalmente sustituido; Y es seleccionado del grupo que consiste de CONH, C(O)O, (CH2)1-3en donde uno o más grupos CH2 pueden reemplazarse por O, S, o NR1, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido; D es (CR1R2)n-NR5-(CR3R4)m;

J es seleccionado del grupo que consiste de alquilenilo opcionalmente sustituido y (CR1R2)p-R6-(CR3R4)q; T es seleccionado del grupo que consiste de C=O, C=S, C=NR', S, O, NR1, CR1R2, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido; U es seleccionado del grupo que consiste de H, NR1R2, OR1, SR1, alquilo opcionalmente sustituido y arilo opcionalmente

5 sustituido; n, m, p y q son independientemente seleccionados de 0-5; cada R1, R2, R3 y R4 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido;

10 R5 es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, heteroalquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido y COR7; R6 es seleccionado del grupo que consiste de O, S, NR1, CR1R2, C=O, C=S y C=NR1; y R7 es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente

15 sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido;

o una sal farmacéuticamente aceptable de este.

En una modalidad descrita, los sustituyentes opcionales no incluyen ácido carboxílico, cicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo, halo, hidroxilo o haloalquilo, o arilo opcionalmente sustituido con un grupo arilo, y un grupo 20 heterocíclico opcionalmente sustituido no incluye oxopiperizinilo.

En una modalidad adicional descrita, n y m son independientemente seleccionados de 0-4 de manera que n + m sea 3 o 4. En una modalidad adicional, p y q son independientemente seleccionados de 0 y 1 de manera que p + q sea 1. En una modalidad adicional, n y m son independientemente seleccionados de 0-4 de manera que n + m sea 3 o 4 y p y q son 25 independientemente seleccionados de 0 y 1 de manera que p + q sea 1. En una modalidad adicional, n y m son independientemente seleccionados de 0-4 de manera que n + m sea 3 o 4, p y q son independientemente seleccionados de 0 y 1 de manera que p + q sea 1 y T es C=O. En una modalidad adicional, n y m son independientemente seleccionados de 0-4 de manera que n + m sea 3 o 4, p y q son independientemente seleccionados de 0 y 1 de manera que p + q sea 1 y U es NR1R2. En una modalidad adicional, n y m son independientemente seleccionados de 0-4 de manera que n + m sea 3 o 30 4, p y q son independientemente seleccionados de 0 y 1 de manera que p + q sea 1 y R6 es CH2. En una modalidad adicional, n y m son independientemente seleccionados de 0-4 de manera que n + m sea 3 o 4 , p y q son independientemente seleccionados de 0 y 1 de manera que p + q sea 1, Y es CONH, W es CH y V es N. En otra modalidad, R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son seleccionados del grupo que consiste de arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores y heteroarilo

35 opcionalmente sustituido con uno o más grupos haloalquilo, arilo y alquilo inferiores.

En otra modalidad particular descrita, los miméticos de Smac son compuestos de la Fórmula III:

50 en donde A1, A2, V, W, X, Y, R5, T y U tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula I; o sales farmacéuticamente aceptable de estos.

En una modalidad descrita, A1, A2, V, W, X, Y, R5, T y U tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula II.

En otra modalidad descrita, W es CH, V es N, T es C=O, U es NR1R2 y R5 es COR7. En otra modalidad descrita, A1 es 55 alquilo opcionalmente sustituido y A2 es hidrógeno. En otra modalidad descrita, R1 es seleccionado del grupo que consiste

de carbocíclico opcionalmente sustituido y alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son

seleccionados del grupo que consiste de arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o

alquilo inferiores, y heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos haloalquilo, arilo y alquilo inferiores. En otra

modalidad, R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y R2 es hidrógeno. En otra modalidad, R1 es -CHPh2. En otra modalidad descrita, R7 es alquilo opcionalmente sustituido. En otra modalidad, R7 es -CH2CH(CH3).

En otra modalidad particular descrita, los miméticos de Smac son compuestos de la Fórmula IV:

en donde A1, A2, V, W, X, Y, R5, T y U tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula I; o una sal 20 farmacéuticamente aceptable de estos.

En otra modalidad descrita, W es CH, V es N, T es C=O, U es NR1R2 y R5 es COR7. En otra modalidad descrita, A1 es

alquilo opcionalmente sustituido y A2 es hidrógeno. En otra modalidad descrita, R1 es seleccionado del grupo que consiste 25 de carbocíclico opcionalmente sustituido y alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son

modalidad descrita, R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son arilo opcionalmente

sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y R2 es hidrógeno. En otra modalidad 30 descrita, R1 es -CHPh2. En otra modalidad, R7 es alquilo opcionalmente sustituido. En otra modalidad descrita, R7 es -

CH2CH(CH3)2.

En otra modalidad particular descrita, los miméticos de Smac son compuestos de la Fórmula V:

en donde A1, A2, V, W, X, R5, T y U tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula I; o una sal 50 farmacéuticamente aceptable de estos.

Se describen además los compuestos en donde, A1, A2, V, W, X, Y, R5, T y U tienen los significados descritos anteriormente

para la Fórmula II. En otra modalidad descrita, W es CH, V es N, T es C=O, U es NR1R2 y R5 es COR7. En otra modalidad

descrita, A1 es alquilo opcionalmente sustituido y A2 es hidrógeno. En otra modalidad descrita, R1 es seleccionado del grupo 55 que consiste de carbocíclico opcionalmente sustituido y alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes

opcionales son seleccionados del grupo que consiste de arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo,

haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos haloalquilo, arilo y

alquilo inferiores. En otra modalidad descrita, R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales

son arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y R2 es hidrógeno. En otra modalidad descrita, R1 es -CHPh2. En otra modalidad, R es alquilo opcionalmente sustituido. En otra modalidad descrita, R7 es -CH2CH(CH3)2.

En otra modalidad particular, los miméticos de Smac son compuestos de la Fórmula VI:

en donde A1, A2, R5, T y U tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula I, y X es alquilo opcionalmente sustituido; o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.

25 En una modalidad descrita, A1, A2, X, R5, T y U tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula II. En otra modalidad descrita, T es C=O, U es NR1R2 y R5 es COR7. En otra modalidad, A1 es alquilo opcionalmente sustituido y A2 es hidrógeno. En otra modalidad, R1 es seleccionado del grupo que consiste de carbocíclico opcionalmente sustituido y alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son seleccionados del grupo que consiste de arilo

30 opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y heteroarilo opcionalmente R1

sustituido con uno o más grupos haloalquilo, arilo y alquilo inferiores. En otra modalidad descrita, es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales are arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y R es hidrógeno. En otra modalidad descrita, R1 es -CHPh2. En otra modalidad, R7 es alquilo opcionalmente sustituido. En otra modalidad, R7 es -CH2CH(CH3)2.

En otra modalidad particular descrita, los miméticos de Smac son compuestos de la Fórmula VII:

en donde A1, A2, V, W, X, Y, R5, T y U tienen los mismos significados descritos anteriormente para la Fórmula I; o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.

55 En una modalidad descrita, W es CH, V es N, T es C=O, U es NR1R2 y R5 es COR7. En otra modalidad, Y es CONH. En otra R1

modalidad descrita, A1 es alquilo opcionalmente sustituido y A2 es hidrógeno. En otra modalidad descrita, es seleccionado del grupo que consiste de carbocíclico opcionalmente sustituido y alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son seleccionados del grupo que consiste de arilo opcionalmente sustituido con uno o más

grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos haloalquilo, arilo y alquilo inferiores. En otra modalidad descrita, R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y R2 es hidrógeno. En otra modalidad, R es -CHPh2. En otra modalidad descrita, R7 es alquilo opcionalmente sustituido. En otra modalidad, R7 es -CH2CH(CH3)2.

En otra modalidad particular descrita, los miméticos de Smac son compuestos de la Fórmula VIII:

20 en donde A1, A2, V, W, X, Y, R5, T y U tienen los mismos significados descritos anteriormente para la Fórmula I; o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.

En una modalidad descrita, W es CH, V es N, T es C=O, U es NR1R2 y R5 es COR7. En otra modalidad, Y es CONH. En otra R1

modalidad descrita, A1 es alquilo opcionalmente sustituido y A2 es hidrógeno. En otra modalidad descrita, es

25 seleccionado del grupo que consiste de carbocíclico opcionalmente sustituido y alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son seleccionados del grupo que consiste de arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos haloalquilo, arilo y alquilo inferiores. En otra modalidad descrita, R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo

30 inferiores, y R2 es hidrógeno. En otra modalidad descrita, R1 es -CHPh2. En otra modalidad descrita, R7 es alquilo opcionalmente sustituido. En otra modalidad, R7 es -CH2CH(CH3)2.

En otra modalidad particular, los miméticos de Smac son compuestos de la Fórmula IX:

50 en donde A1, A2, V, W, X, Y, R5, T y U tienen los mismos significados descritos anteriormente para la Fórmula I; o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.

55 seleccionado del grupo que consiste de carbocíclico opcionalmente sustituido y alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son seleccionados del grupo que consiste de arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos haloalquilo, arilo y alquilo inferiores. En otra modalidad descrita, R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los

sustituyentes opcionales son arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo, haloalquilo, heteroarilo o alquilo inferiores, y R2 es hidrógeno. En otra modalidad, R1 es -CHPh2. En otra modalidad descrita, R7 es alquilo opcionalmente sustituido. En otra modalidad, R7 es -CH2CH(CH3)2.

Los grupos alquilo útiles incluyen grupos alquilo de C1-18 de cadena lineal o ramificada, especialmente grupos metilo, etilo, propilo, isopropilo, t-butilo, sec-butilo, 3-pentilo, y 3-hexilo. En una modalidad, el alquilo es un grupo alquilo de C1-6.

35 El término "alquilenilo" se refiere a un radical divalente alquil divalente que contiene 1, 2, 3 o 4 grupos metilenos unidos como se ejemplifica por -(CH2)4-.

Los grupos alquenilo útiles incluyen grupos alquilo de C2-18de cadena lineal o ramificada, especialmente etenilo, propenilo, 40 isopropenilo, butenilo, isobutenilo, y hexenilo.

Los grupos alquinilo útiles son los grupos alquinilo de C2-18, especialmente los grupos etinilo, propinilo, butinilo, y 2-butinilo.

grupos cicloalquilo útiles incluyen los grupos cicloalquilo de C3-10. Los grupos cicloalquilo típicos incluyen ciclopropilo, 45 ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, adamantil y norbornilo.

Los grupos arilo útiles incluyen arilo de C6-14, especialmente los grupos fenilo (abreviado como "Ph"), naftilo, fenantrenilo, antracenilo, indenilo, azulenilo, bifenilo, bifenilenilo, y fluorenilo.

50 Los grupos heteroarilo útiles incluyen los grupos heteroarilo de C5-14, especialmente tienilo, benzo[b]tienilo, nafto[2,3b]tienilo, tianthrenilo, furilo, piranilo, isobenzofuranilo, cromenilo, xantenilo, fenoxantenilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, imidazolilo, triazolilo, pirazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, indolizinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolilo, indazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo, isoquinolilo, quinolilo, ftalzinilo, naftiridinilo, quinozalinilo, cinnolinilo, pteridinilo, carbazolilo, β-carbolinilo, fenantridinilo, acridinilo, perimidinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, isotiazolilo, fenotiazinilo, isoxazolilo, furazanilo, fenoxazinilo,

55 1,4-dihidroquinoxalinea-2,3-diona, 7-aminoisocumarina, pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona, 1,2-benzoisoxazol-3-ilo, benzimidazolilo, 2-oxindolilo, y 2-oxobenzimidazolilo. Cuando el grupo heteroaril contiene un átomo de nitrógeno en un anillo, tal átomo de nitrógeno puede estar en la forma de un N-óxido, por ejemplo, un piridil N-óxido, pirazinilo N-óxido, pirimidinilo N-óxido, y similares.

Sustituyentes opcionales incluyen uno o más alquilo; halo; hidroxilo; ácido carboxílico (es decir, -CO2H y sales de estos); haloalquilo; cicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo, halo, hidroxilo o haloalquilo; arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, halo, haloalquilo, arilo o heteroarilo; ariloxi opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, haloalquilo, o heteroarilo; aralquilo; heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, haloalquilo y, arilo; heteroariloxi opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, haloalquilo y arilo; alcoxi; alquiltio; ariltio; amido; amino; aciloxi; arilaciloxi opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, haloalquilo, arilo; difenilfosfiniloxi opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, halo

o haloalquilo; heterociclo opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, haloalquilo y arilo; heterocicloalcoxi opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, haloalquilo y arilo; heterocicloalquilo parcialmente insaturado opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, haloalquilo y arilo; o heterocicloalquiloxi parcialmente insaturado opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo inferior, haloalquilo y arilo.

Los grupos carbocíclico saturado o parcialmente saturado útiles son los grupos cicloalquilo como se definió anteriormente, así como grupos cicloalquenilo, tales como ciclopentenilo, cicloheptenilo y ciclooctenilo. Los grupos carbocíclico incluyen además los grupos que tienen grupos arilo opcionalmente sustituidos condensados tales como tetralina

Los grupos halo o halógeno útiles incluyen flúor, cloro, bromo y yodo.

Los grupos heteroaralquilo y aralquilo útiles incluyen cualquiera de los grupos alquilo C 1-18 mencionados anteriormente sustituidos por uno o más grupos arilo o grupos heteroarilo C 6-14 opcionalmente sustituidos mencionados anteriormente. En una modalidad, el aralquilo es sustituido con dos grupos arilo de C6-14 opcionalmente sustituido. En otra modalidad, el aralquilo es sustituido con un grupo arilo de C6-14 opcionalmente sustituido. En una modalidad, el grupo arilo de C6-14 opcionalmente sustituido es un grupo fenilo opcionalmente sustituido. Los grupos aralquilo útiles incluyen bencilo (abreviado como Bn), fenetilo y naftilmetilo.

Los grupos haloalquilo útiles incluyen los grupos alquil C1-10 sustituidos por uno o más átomos de flúor, cloro, bromo o yodo, por ejemplo, grupos fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, pentafluoroetilo, 1,1-difluoroetilo, clorometilo, clorofluorometilo y triclorometilo.

Los grupos alcoxi útiles incluyen oxígeno sustituido por uno de los grupo alquilo C 1-18mencionados anteriormente.

Los grupos alquiltio útiles incluyen sulfuro sustituido por uno de los grupo alquilo C 1-18mencionados anteriormente. Se incluyen además los sulfóxidos y sulfonas de tales grupos alquiltio.

Los grupos amido útiles incluyen carbonilamido así como cualquier acilo (alcanoilo) C1-6unido a un nitrógeno de amino, por ejemplo, acetamido, propionamido, butanoilamido, pentanoilamido, hexanoilamido así como los grupos acilo sustituido C2-6 sustituidos con arilo.

Los grupos aciloxi útiles son cualquier acilo (alcanoilo) C1-6 unido a un grupo oxi (-O-), por ejemplo, formiloxi, acetoxi, propionoiloxi, butanoiloxi, pentanoiloxi, hexanoiloxi y similares.

Los grupos arilaciloxi útiles incluyen cualquiera de los grupos arilo mencionados anteriormente sustituido en cualquiera de los grupos aciloxi mencionados anteriormente, por ejemplo, grupos 2,6-diclorobenzoiloxi, 2,6-difluorobenzoiloxi y 2,6-di (triflúorometilo) -benzoiloxi.

Los grupos amino útiles incluyen -NH 2, -NHR11, y -NR11R12, en donde R11 y R12 son grupos alquilo o cicloalquilo C1-18 como se definió anteriormente.

Los grupos heterocíclico saturados o parcialmente saturados incluyen los grupos tetrahidrofuranilo, piranilo, piperidinilo, piperizinilo, oxopiperizinilo, pirrolidinilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, indolinilo, isoindolinilo, quinuclidinilo, morfolinilo, isocromanilo, cromanilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, tetronoilo y tetramoilo.

Los grupos arileno útiles incluyen arileno C 6-14 especialmente los grupos fenileno, naftileno, fenantrileno, antracenileno, indanileno, azulenileno, bifenileno, bifenilenileno y fluorenileno.

Los grupos heteroarileno útiles incluyen grupos heteroaril disustituidos tales como 2,5-tienileno, 2,4-imidazoileno, y 1,3triazolileno.

El término "grupo saliente" como se usa en la presente descripción, se refiere a un átomo o grupo que se desprende de un átomo o grupo en lo que se considera ser la parte residual o principal del sustrato en una reacción especificada. En las reacciones de acoplamiento de amida, los grupos salientes ilustrativos incluyen -F, -Cl, -Br, -OH, -OC6F5, -O(CO)alquil y 5 similares. En una modalidad, el grupo saliente es -Cl. En otra modalidad, el grupo saliente es una forma activada de-OH (por ejemplo., OBt, O-acilisourea). Un agente activante (por ejemplo, diciclohexilcarbodiimida (DCC), 1-etil-3-(3dimetilaminopropilo) carbodiimida (EDC), hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi) tripirrolidinofosfonio (PyBop)) se puede emplear para activar un ácido carboxílico (es decir, el grupo saliente es OH) hacia la formación de amida. Tales agentes activantes son bien conocidos por los expertos en la técnica de la síntesis orgánica. Otros aditivos, tales como N

10 hidroxibenzotriazol (HOBt) o N-hidroxisuccinimida (HOSu), se pueden añadir además para optimizar los parámetros de reacción (por ejemplo, velocidad, rendimiento, pureza, racemización).

El término "aislado", como se usa en la presente descripción cuando se refieren al producto de una reacción química significa que el producto o productos deseados se separan de los componentes no deseados de la mezcla de reacción (por

15 ejemplo, solventes, materias primas, reactivos químicos) antes de una transformación química posterior. El (los) producto (s) deseado (s) de una reacción química se puede (n) separar de los componentes no deseados por una variedad de métodos, por ejemplo, filtración a través de celite o gel de sílice seguido por la eliminación de los componentes volátiles (por ejemplo, solvente).

20 El término " grupo protector amina " como se usa en la presente descripción, se refiere al grupo que bloquea (es decir, protege) la funcionalidad de la amina mientras que las reacciones se llevan a cabo en otros grupos funcionales o partes de la molécula. Aquellos con experiencia en la técnica estarán familiarizados con la selección, adhesión y escisión de los grupos protectores aminas y apreciarán que muchos grupos protectores diferentes son conocidos en la técnica, siendo dependiente la idoneidad de un grupo protector u otro particular, del esquema sintético planeado. Los tratados sobre el

25 sujeto están disponibles para la consulta, tales comoGreene y Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ra Ed., págs. 17-245 (J. Wiley & Sons, 1999). Los grupos protectores aminas adecuadas incluyen el grupo carbobenciloxi (Cbz), terc-butiloxicarbonilo (BOC), 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (FMOC) y bencilo (Bn)

El término "aproximadamente," como se usa en la presente, incluye el número mencionado ± 10%. Así, "aproximadamente 30 10" significa 9 a 11.

A lo largo de toda la especificación, se agrupa unos sustituyentes opcionales de estos que se eligen para proporcionar porciones y compuestos estables.

35 Algunos de los compuestos de la presente invención pueden existir como estereoisómeros, que incluyen isómeros ópticos. La invención incluye todos los estereoisómeros, tanto como preparaciones de estereoisómeros puros individuales como preparaciones enriquecidas de cada uno, y tanto las mezclas racémicas de dichos estereoisómeros así como enantiómeros individuales que se pueden separar de acuerdo con métodos que son bien conocidos por los expertos en la técnica.

40 El compuesto de la Fórmula I puede seleccionarse del grupo que consiste de:

o una sal farmacéuticamente aceptable de este. 40 El compuesto de la Fórmula II puede seleccionarse del grupo que consiste de:

25 y

o la base libre de este, u otra sal farmacéuticamente aceptable de este. El compuesto de la Fórmula I puede ser:

55 o una sal farmacéuticamente aceptable de este. Se describe en la presente un proceso para la preparación de un compuesto de la Fórmula XI

que comprende condensar un compuesto de la Fórmula XII

25 con R7CO-L, en donde A1, A2, V, W, X, Y, Z, T, U y R7 tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula I, m es 1 o 2, y L es un grupo saliente. En una modalidad, L es Cl u OBt. En una modalidad, Z es (CR1R2), y R es 0. En otra modalidad, m es 1.

30 En una modalidad, la reacción de condensación se realiza en un solvente orgánico inerte tal como acetonitrilo, benceno, cloroformo, 1,2-dicloroetano, 1,2,-dimetoxietano, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, dioxano, diclorometano, N-metil-2pirrolidinona o tetrahidrofurano. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en tetrahidrofurano. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en diclorometano. En una modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo a aproximadamente -20°C a aproximadamente 25°C. En otra modalidad, la reacción de condensación se

35 lleva a cabo a aproximadamente 20°C. En una modalidad, la reacción de condensación se completa en aproximadamente 1 hora a aproximadamente 48 horas. En otra modalidad, la reacción de condensación se completa en aproximadamente 12 horas.

En una modalidad, L es -OH. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en presencia de un agente

40 activante. En otra modalidad, el agente activante es diciclohexilcarbodiimida, 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio. En otra modalidad, el agente activante es 1-etil-3-(3dimetilaminopropil)carbodiimida. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en presencia de un agente activante y un aditivo que optimiza los parámetros de la reacción tales como la pureza y rendimiento. En otra modalidad, el aditivo es N-hidroxibenzotriazol.

45 El progreso de la reacción de condensación entre un compuesto de la Fórmula XII y k 7CO-L se puede controlar por métodos analíticos conocidos en la técnica, tales como TLC, LC, LC/MS, HPLC, NMR, etc. Un compuesto de la Fórmula XI se puede aislar y purificar por cualquier medio conocido en la técnica tanto cromatografía en columna de fase reversa como normal, (por ejemplo, cromatografía en columna sobre gel de sílice o HPLC de fase reversa) cristalización, extracción, etc.

50 El producto así aislado se puede someter a purificación adicional (por ejemplo, recristalización) hasta que se logra el nivel de pureza deseado. En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XI tiene una pureza de 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% o mayor.

Se describe además en la presente un proceso para la preparación de un compuesto de la Fórmula XIII

10 que comprende condensar un compuesto de la Fórmula XIV

con R7CO-L, en donde A1, A2, V, W, X, Y, Z, T y U tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula I, m es 1 o 2, y L es un grupo saliente. En una modalidad, L es Cl u OBt. En una modalidad, Z es (CR1R2)r y R es 0. En otra modalidad,

25 m es 1.

En una modalidad, la reacción de condensación se realiza en un solvente orgánico inerte tal como acetonitrilo, benceno, cloroformo, 1,2-dicloroetano, 1,2,-dimetoxietano, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, dioxano, diclorometano, N-metil-2pirrolidinona o tetrahidrofurano. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en tetrahidrofurano. En otra

30 modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en diclorometano. En una modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo a aproximadamente -20 °C a aproximadamente 25 °C. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo a aproximadamente 20 °C. En una modalidad, la reacción de condensación se completa en aproximadamente 1 hora a aproximadamente 48 horas. En otra modalidad, la reacción de condensación se completa en aproximadamente 12 horas.

35 En una modalidad, L es -OH u -OBt. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en presencia de un agente activante. En otra modalidad, el agente activante es diciclohexilcarbodiimida, 1-etil-3-(3dimetilaminopropil)carbodiimida o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio. En otra modalidad, el agente activante es 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en

40 presencia de un agente activante y un aditivo que optimiza los parámetros de la reacción tales como pureza y rendimiento. En otra modalidad, el aditivo es N-hidroxibenzotriazol.

El progreso de la reacción de condensación entre un compuesto de la Fórmula XIV y R 7CO-L se puede controlar por métodos analíticos conocidos en la técnica, tales como TLC, LC, LC/MS, HPLC, RMN, etc. Un compuesto de la Fórmula XIII

45 se puede ser aislar y purificar por cualquier medio conocido en la técnica tanto cromatografía en columna de fase reversa como normal (por ejemplo, cromatografía en columna sobre gel de sílice o HPLC de fase reversa) cristalización, extracción, etc. El producto así aislado se puede someter a purificación adicional (por ejemplo, recristalización) hasta que se logra el nivel de pureza deseado. En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XIII tiene una pureza de 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% o mayor.

Se describe adicionalmente en la presente un proceso para la preparación de un compuesto de la Fórmula XV

que comprende condensar un compuesto de la Fórmula XVI

con R7CO-L, en donde A1, A2, V, W, X, T, U y R7 tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula I, m es 1 o 2, y L es un grupo saliente. En una modalidad, L es Cl, OH u OBt. En una modalidad, m es 1.

En una modalidad, L es -OH u -OBt. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en presencia de un

40 agente activante. En otra modalidad, el agente activante es diciclohexilcarbodiimida, 1-etil-3-(3dimetilaminopropil)carbodiimida o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio. En otra modalidad, el agente activante es 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en presencia de un agente activante y un aditivo que optimiza los parámetros de reacción tales como pureza y rendimiento. En otra modalidad, el aditivo es N-hidroxibenzotriazol.

45 El progreso de la reacción de condensación entre un compuesto de la Fórmula XIV y R7CO-L se puede controlar por métodos analíticos conocidos en la técnica, tales como TLC, LC, LC/MS, HPLC, RMN, etc. Un compuesto de la Fórmula XV se puede ser aislar y purificar por cualquier medio conocido en la técnica tanto cromatografía en columna de fase reversa como normal (por ejemplo, cromatografía en columna sobre gel de sílice o HPLC de fase reversa) cristalización, extracción,

50 etc. El producto así aislado se puede someter a purificación adicional (por ejemplo, recristalización) hasta que se logra el nivel de pureza deseado. En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XV tiene una pureza de 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% o mayor.

Se describe adicionalmente en la presente un proceso para la preparación de un compuesto de la Fórmula XVII

que comprende condensar un compuesto de la Fórmula XVIII

con R7CO-L, en donde A1, A2, V, X, T, U y R7 tienen los significados descritos anteriormente para la Fórmula I, m es 1 o 2, y L es un grupo saliente. En una modalidad, L es Cl, OH u OBt. En una modalidad, m es 1.

30 En una modalidad, la reacción de condensación se realiza en un solvente orgánico inerte tal como acetonitrilo, benceno, cloroformo, 1,2-dicloroetano, 1,2,-dimetoxietano, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, dioxano, diclorometano, N-metil-2pirrolidinona o tetrahidrofurano. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en tetrahidrofurano. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en diclorometano. En una modalidad, la reacción de condensación

35 se lleva a cabo a aproximadamente -20 °C a aproximadamente 25 °C. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo a aproximadamente 20 °C. En una modalidad, la reacción de condensación se completa en aproximadamente 1 hora a aproximadamente 48 horas. En otra modalidad, la reacción de condensación se completa en aproximadamente 12 horas.

40 En una modalidad, L es -OH u -OBt. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en presencia de un agente activante. En otra modalidad, el agente activante es diciclohexilcarbodiimida, 1-etil-3-(3dimetilaminopropil)carbodiimida o hexafluorofosfato.de benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio. En otra modalidad, el agente activante es 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en presencia de un agente activante y un aditivo que optimiza los parámetros de la reacción tales como pureza y rendimiento.

45 En otra modalidad, el aditivo es N-hidroxibenzotriazol.

El progreso de la reacción de condensación entre un compuesto de la Fórmula XVIII y R7CO-L se puede controlar por métodos analíticos conocidos en la técnica, tales como TLC, LC, LC/MS, HPLC, RMN, etc. Un compuesto de la Fórmula XVII se puede ser aislar y purificar por cualquier medio conocido en la técnica tanto cromatografía en columna de fase

50 reversa como normal (por ejemplo, cromatografía en columna sobre gel de sílice o HPLC de fase reversa) cristalización, extracción, etc. El producto así aislado se puede someter a purificación adicional (por ejemplo, recristalización) hasta que se logra el nivel de pureza deseado. En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XVII tiene una pureza de 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% o mayor.

55 La descripción en la presente se relaciona además con la preparación de un compuesto de la Fórmula XIX

en donde m es 1 o 2, y P1 es un grupo protector amina que comprende: a) condensar un compuesto de la Fórmula XX

con un compuesto de la Fórmula XXI,

en donde P1 y P2 son grupos protectores amina, y P1 no es igual a P2, para dar un compuesto de la Fórmula XXII

b) convertir el alqueno de la Fórmula XXII en un aldehído, para dar un compuesto de la Fórmula XXIII;

c) eliminar el grupo protector amina P2 de un compuesto de la Fórmula XXIII para dar un compuesto de la Fórmula XXIV;

y

d) reducir el doble enlace C=N de un compuesto de la Fórmula XXIV, para dar un compuesto de la Fórmula XIX.

20 En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XXI es N-α-(tert-butoxilcarbonil)-N-β-(benzoxilcarbonil)-L-diamino-ácido propiónico (Boc-Dap(Z)-OH). En una modalidad, la condensación de un compuesto de la Fórmula XX con un compuesto de la Fórmula XXI se lleva a cabo en presencia de un agente activante. En otra modalidad, el agente activante es diciclohexilcarbodiimida, 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida o hexafluorofosfato de benzotriazol-1

25 iloxi)tripirrolidinofosfonio. En otra modalidad, el agente activante es 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo en presencia de un agente activante y un aditivo que optimiza los parámetros de reacción tales como pureza y rendimiento. En otra modalidad, el aditivo es N-hidroxibenzotriazol.

Grupos protectores aminas P1y P2 que son adecuados parael uso en los procesos de la presente invención son bien

30 conocidos, tales como, pero sin limitarse a trifluoroacetilo, t-butoxicarbonilo (Boc), benciloxicarbonilo (Cbz), aliloxicarbonilo (Alloc), tritilo (trifenilmetilo), 9-fluorenilmetilenoxicarbonilo (Fmoc) y similares. Estos grupos son generalmente capaces de ser introducidos y eliminados selectivamente usando condiciones de reacción suaves que no interfieren con otras partes de los compuestos en cuestión. Estos grupos protectores pueden introducirse o eliminarse en una etapa conveniente usando métodos conocidos en la técnica. Las propiedades químicas de tales grupos protectores, métodos para su introducción y su

35 eliminación son conocidos en la técnica y se pueden encontrar por ejemplo en Greene y Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3ra Ed., págs. 17-245 (J. Wiley & Sons, 1999), incorporada en la presente descripción como referencia en su totalidad.

P1 P2

En una modalidad, y son seleccionados del grupo que consiste de trifluoroacetilo, t-butoxicarbonilo (Boc),

40 benciloxicarbonilo (CBz), alliloxicarbonilo (Alloc), tritil (trifenilmetilo) y 9-fluorenilmetilenoxicarbonilo (Fmoc) de manera que P1 no es igual a P2. En una modalidad, P1 y P2 son grupos protectores ortogonales, es decir, el grupo protector P 1es capaz de ser selectivamente eliminado en presencia del grupo protector P2 o del grupo protector P2 es capaz de ser selectivamente eliminado en presencia del grupo protector P1. Estrategias de grupos protectores ortogonales son conocidas de la técnica. En una modalidad, P1es t-butoxicarbonilo (Boc). En una modalidad, P2 es benciloxicarbonilo (CBz). En una modalidad, P1 es

45 t-butoxicarbonilo (Boc) y P2 es benciloxicarbonilo (CBz).

En una modalidad, la condensación de un compuesto de la Fórmula XX con un compuesto de la Fórmula XXI se realiza en un solvente orgánico inerte tal como acetonitrilo, benceno, cloroformo, 1,2-dicloroetano, 1,2,-dimetoxietano, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, dioxano, diclorometano, N-metil-2-pirrolidinona o tetrahidrofurano. En otra modalidad, la

50 condensación de un compuesto de la Fórmula XX con un compuesto de la Fórmula XXI se lleva a cabo en tetrahidrofurano. En otra modalidad, la condensación de un compuesto de la Fórmula XX con un compuesto de la Fórmula XXI se lleva a cabo en dicloroemetano.

En una modalidad, la condensación de un compuesto de la Fórmula XX con un compuesto de la Fórmula XXI se lleva a

55 cabo a aproximadamente -20 °C a aproximadamente 30 °C. En otra modalidad, la reacción de condensación se lleva a cabo a aproximadamente 20 a aproximadamente 30 °C. En una modalidad, la reacción de condensación se completa en aproximadamente 1 hora a aproximadamente 48 horas. En otra modalidad, la reacción de condensación se completa en aproximadamente 12 horas.

En otra modalidad, el alqueno de la Fórmula XXII se trata con ozono para dar el aldehído de la Fórmula XXIII, y m es 1. En una modalidad, la reacción con ozono se lleva a cabo en un solvente orgánico inerte tal como cloroformo, 1,2-dicloroetano, dioxano, diclorometano o tetrahidrofurano. En otra modalidad, la reacción con ozono se lleva a cabo en diclorometano. En una modalidad, la reacción con ozono se lleva a cabo a aproximadamente -100°C a aproximadamente 0°C. En otra modalidad, la reacción con ozono se lleva a cabo a aproximadamente -78°C. En una modalidad, la reacción con ozono se completa cuando el color de la mezcla de reacción se torna azul, indicando una cantidad excesiva de ozono en la solución.

En una modalidad, el alqueno de la Fórmula XXII se convierte primero a un alcohol primario y el alcohol se oxida para dar un aldehído de la Fórmula XXI, y m es 2. En una modalidad, el alqueno de la Fórmula XXII se convierte a un alcohol primario a través de la hidroboración. En una modalidad, la hidroboración se lleva a cabo en un solvente orgánico inerte tal como acetonitrilo, benceno, 1,2,-dimetoxietano, dioxano, o tetrahidrofurano. En otra modalidad, la hidroboración se lleva a cabo en tetrahidrofurano. En otra modalidad, la hidroboración se lleva a cabo usando 9-borabiciclo[3.3.1]nonano (9-BBN). En una modalidad, el alcohol primario se oxida al aldehído con Dess-Martin periodinane para dar un aldehído de la Fórmula XXIII, y m es 2. En una modalidad, la oxidación se lleva a cabo en un solvente orgánico inerte tal como diclorometano. En una modalidad, la oxidación se lleva a cabo a aproximadamente -20 °C a aproximadamente 25 °C. En otra modalidad, la oxidación se lleva a cabo a aproximadamente 20°C. En una modalidad, la oxidación se completa en aproximadamente 1 hora a aproximadamente 48 horas. En otra modalidad, la oxidación se completa en aproximadamente 12 horas.

En una modalidad, P2 es un grupo Cbz. En otra modalidad, P2es CBz y se escinde por hidrogenación en paladio sobre carbono. En una modalidad, la hidrogenación se lleva a cabo en metanol, etanol, 1-butanol, 2-butanol, 3-butanol, tercbutanol, 1-propanol o 2-propanol. En otra modalidad, la hidrogenación se lleva a cabo en 2-propanol. En una modalidad, la hidrogenación se lleva a cabo a aproximadamente 0°C a aproximadamente 40°C. En otra modalidad, la hidrogenación se lleva a cabo a aproximadamente 20°C a aproximadamente 30°C. En una modalidad, la hidrogenación se completa en aproximadamente 1 hora a aproximadamente 24 horas. En otra modalidad, la hidrogenación se completa en aproximadamente 12 horas.

En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XXIV es aislado antes de la reducción del doble enlace C=N. En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XXIV es aislado por filtración a través de celite. En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XXIV es aislado por filtración a través de celite seguido por evaporación de los solvente (es).

En una modalidad, el doble enlace C=N de un compuesto de la Fórmula XXIV se reduce con H 2 y paladio sobre carbono, Na(CN)BH3 o NaBH(OAc)3. En otra modalidad, el agente reductor es NaBH(OAc)3. En una modalidad, la reducción se lleva a cabo en un solvente orgánico inerte tal como metanol, etanol, 1-butanol, 2-butanol, 3-butanol, tert-butanol, 1-propanol, 2propanol, acetonitrilo, benceno, cloroformo, 1,2-dicloroetano, 1,2,-dimetoxietano, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, dioxano, diclorometano, N-metil-2-pirrolidinona o tetrahidrofurano. En otra modalidad, la reducción se lleva a cabo en tetrahidrofurano. En una modalidad, la reducción se lleva a cabo a aproximadamente 0°C a aproximadamente 25°C. En otra modalidad, la reducción se lleva a cabo a aproximadamente 20°C a aproximadamente 30°C. En una modalidad, la reducción se completa en aproximadamente 1 hora a aproximadamente 24 horas. En otra modalidad, la reacción con ozono se completa en aproximadamente 12 horas.

El progreso de la reacción de cualquiera de las reacciones anteriores para la preparación de un compuesto de la Fórmula XIX se puede controlar por métodos analíticos conocidos en la técnica, tales como TLC, LC, LC/MS, HPLC, NMR, etc. Un compuesto de la Fórmula XIX se puede aislar y purificar por cualquier medio conocido en la técnica tanto cromatografía en columna de fase reversa como normal, (por ejemplo, cromatografía en columna sobre gel de sílice o HPLC de fase reversa) cristalización, extracción, etc. El producto así aislado se puede someter a purificación adicional (por ejemplo, recristalización) hasta que se logra el nivel de pureza deseado. En una modalidad, un compuesto de la Fórmula XIX tiene una pureza de 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% o mayor.

Los compuestos de esta invención se pueden preparar usando métodos conocidos por los expertos en la técnica. Específicamente, los compuestos de la Fórmula VI se pueden preparar como se ilustra mediante las reacciones ilustrativas en los Ejemplos.

Un aspecto importante de la presente invención es que los compuestos de la Fórmula VI inducen la apoptosis y potencian además la inducción de la apoptosis en respuesta a señales de inducción de la apoptosis. Por lo tanto, se contempla que los compuestos sensibilizan las células a los inductores de la apoptosis, que incluyen las células que son resistentes a tales inductores. Los inhibidores de IAP de la presente invención se pueden usar para inducir la apoptosis en cualquier trastorno que se puede tratar, mejorar o prevenir mediante la inducción de la apoptosis. Así, la presente invención proporciona las

composiciones y métodos que se enfocan a los animales caracterizados que sobreexpresan una proteína IAP. En algunas de las modalidades, las células (por ejemplo, células cancerosas) muestran niveles de expresión elevados de proteínas IAP en comparación con muestras no patológicas (por ejemplo, células no cancerosas). En otras modalidades, las células operativamente manifiestan niveles de expresión elevados de proteínas IAP en virtud de ejecutar el programa de apoptosis y la muerte en respuesta a una cantidad eficaz inhibidora de un compuesto de la Fórmula VI, dicha respuesta que ocurre, al menos en parte, debido a la dependencia en tales células en función de la proteína IAP para su supervivencia.

En otra modalidad, la invención pertenece a compuestos de la fórmula VI para el uso al modular un estado asociado a la apoptosis que se asocia con uno o más agentes moduladores de la apoptosis. Ejemplos de agentes moduladores de la apoptosis incluyen, pero sin limitarse a , Fas/CD95, TRAMP, TNF RI, DR1, DR2, DR3, DR4, DR5, DR6, FADD, RIP, TNFα, ligando Fas, TRAIL, anticuerpos para TRAIL-R1 o TRAIL-R2, Bcl-2, p53, BAX, BAD, Akt, CAD, PI3 quinasa, PP1, y proteínas caspasas. Se incluyen además otros agentes, implicados en la fase de iniciación, decisión y degradación de la apoptosis. Ejemplos de agentes moduladores de la apoptosis incluyen agentes, la actividad , presencia, o cambio en la concentración de los cuales, pueden modular la apoptosis en un sujeto. Los agentes moduladores de la apoptosis preferidos son inductores de la apoptosis, tales como TNF o un ligando relacionado con TNF, particularmente un ligando TRAMP, un ligando Fas/CD95, un ligando TNFR-1, o TRAIL.

En algunas modalidades, las composiciones y los compuestos de la presente invención se usan para tratar células, tejidos, órganos, o afecciones patológicas y/o estados de enfermedad en un animal (por ejemplo, un sujeto mamífero que incluyen, pero sin limitarse a, seres humanos y animales veterinarios). En este sentido, varias enfermedades y patologías son susceptibles para el tratamiento o profilaxis usando los presentes métodos y composiciones. Una lista no limitante ilustrativa de estas enfermedades y afecciones incluye, pero sin limitarse a cáncer de mama, cáncer de próstata, linfoma, cáncer de piel, cáncer pancreático, cáncer de colon, melanoma, melanoma maligno, cáncer de ovario, cáncer de cerebro, carcinoma primario de cerebro, cáncer de cabeza-cuello, glioma, glioblastoma, cáncer de hígado, cáncer de vejiga, cáncer de pulmón de células no pequeñas, carcinoma de cabeza o cuello, carcinoma de mama, carcinoma de ovario, carcinoma de pulmón, carcinoma de pulmón de células pequeñas, tumor de Wilms, carcinoma de cuello uterino, carcinoma testicular, carcinoma de vejiga, carcinoma pancreático, carcinoma de estómago, carcinoma de colon, carcinoma de próstata, carcinoma genitourinario , carcinoma de tiroides, carcinoma esofágico, mieloma, mieloma múltiple, carcinoma adrenal, carcinoma de células renales, carcinoma endometrial, carcinoma de la corteza suprarrenal, insulinoma pancreático maligno, carcinoma carcinoide maligno, coriocarcinoma, micosis fungoides, hipercalcemia maligna, hiperplasia cervical, leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica, leucemia granulocítica crónica, leucemia granulocítica aguda, leucemia de células pilosas, neuroblastoma, rabdomiosarcoma, sarcoma de Kaposi, policitemia vera, trombocitosis esencial, enfermedad de Hodgkin, linfoma no-Hodgkin, sarcoma de tejidos blandos, sarcoma osteogénico, macroglobulinemia primaria, y retinoblastoma, y similares, enfermedades autoinmunes mediada por células T y B; enfermedades inflamatorias; infecciones (por ejemplo, como agentes antiulceroso, por ejemplo, en el contexto de la infección por H. pylori); enfermedades hiperproliferativas; SIDA; afecciones degenerativas; enfermedades vasculares (por ejemplo, varicosis primaria) y similares. Los compuestos de la presente invención pueden ser útiles además en el tratamiento de enfermedades en la que existe un defecto en la muerte celular programada o la maquinaria apoptótica por ejemplo, esclerosis múltiple, asma, aterosclerosis y similares. En algunas modalidades, las células cancerosas que se tratan son metastásicas. En otras modalidades, las células cancerosas que se tratan son resistentes a los agentes contra el cáncer.

En algunas modalidades, las infecciones adecuadas para el tratamiento con las composiciones y métodos de la presente invención incluyen, pero sin limitarse a, infecciones causadas por virus, bacterias, hongos, micoplasmas, priones, y similares.

Algunas modalidades de la presente invención proporcionan compuestos de la fórmula VI para el uso en métodos para administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la fórmula VI y al menos un agente terapéutico adicional (que incluyen, pero sin limitarse a, antineoplásicos quimioterapéuticos, agentes moduladores de la apoptosis, antimicrobianos, antivirales, antifúngicos, y agentes anti-inflamatorios) y/o técnica terapéutica (por ejemplo, intervención quirúrgica, y/o radioterapias).

Un número de agentes contra el cáncer adecuados se contemplan para el uso en los métodos de la presente invención. Claramente, la presente invención contempla, pero sin limitarse a, la administración de numerosos agentes contra el cáncer tales como: agentes que inducen apoptosis; polinucleótidos (por ejemplo, antisentido, ribozimas, ARNip); polipéptidos (por ejemplo, enzimas y anticuerpos); miméticos biológicos (por ejemplo, miméticos gosipol o BH3); agentes que se unen (por ejemplo, oligomerizar o complejar) con una proteína de la familia Bcl-2 tal como Bax; alcaloides; agentes alquilantes; antibióticos antitumorales; antimetabolitos; hormonas; compuestos de platino; anticuerpos monoclonales o policlonales (por ejemplo, anticuerpos conjugados con fármacos anticancerígenos, toxinas, defensinas), toxinas; radionucleidos;

modificadores de la respuesta biológica (por ejemplo, interferones (por ejemplo, IFN-α) e interleucinas (por ejemplo, IL-2)); agentes de inmunoterapia adoptiva; factores de crecimiento hematopoyéticos; agentes que inducen diferenciación de la célula tumoral (por ejemplo, ácido todo trans retinoico); reactivos de terapia génica (por ejemplo, reactivos de terapia antisentido y nucleótidos); vacunas tumorales; inhibidores de la angiogénesis; inhibidores de proteosoma: moduladores NF-KB ; compuestos anti-CDK; inhibidores de HDAC; y similares. Numerosos otros ejemplos de compuestos quimioterapéuticos y terapias contra el cáncer adecuadas para la co-administración con los compuestos descritos son conocidos por aquellos con experiencia en la técnica.

En ciertas modalidades, los agentes contra el cáncer comprenden agentes que inducen o estimulan la apoptosis. Los agentes que inducen la apoptosis incluyen, pero sin limitarse a, radiación (por ejemplo, rayos X, rayos gamma, UV).; factores relacionados con el factor de necrosis tumoral (TNF) (por ejemplo, proteínas receptoras de la familia de TNF, ligandos de la familia TNF, TRAIL, anticuerpos para TRAIL-R1 o TRAIL-R2); inhibidores quinasa (por ejemplo, inhibidor quinasa del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), inhibidor quinasa del receptor del factor de crecimiento vascular (VGFR), inhibidor quinasa del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR), inhibidor quinasa del receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR), e inhibidores quinasa Bcr-Abl (tales como GLEEVEC)); moléculas antisentido; anticuerpos (por ejemplo, HERCEPTIN, RITUXAN, ZEVALIN, y AVASTIN); anti-estrógenos (por ejemplo, raloxifeno y tamoxifeno); anti-andrógenos (por ejemplo, flutamida, bicalutamida, finasterida, aminoglutetamida, ketoconazol y corticosteroides); inhibidores de la ciclooxigenasa 2 (COX-2) (por ejemplo, celecoxib, meloxicam, NS-398, y medicamentos anti-inflamatorios no esteroideos (NSAIDs)); fármacos anti-inflamatorios (por ejemplo, butazolidina, DECADRON, DELTASONA, dexametasona, Intensol dexametasona, DEXONA, HEXADROL, hidroxicloroquina, METICORTEN, ORADEXON, ORASONE, oxifenbutazona, PEDIAPRED, fenilbutazona, PLAQUENIL, prednisolona, prednisona, PRELONA y TANDEARIL); y fármacos quimioterapéuticos para el cáncer (por ejemplo, irinotecan (CAMPTOSAR), CPT-11, fludarabina (FLUDARA), dacarbazina (DTIC), dexametasona, mitoxantrona, MYLOTARG, VP-16, cisplatino, carboplatino, oxaliplatino, 5-FU, doxorrubicina, gemcitabina, bortezomib, gefitinib, bevacizumab, TAXOTERE o TAXOL); moléculas de señalización celular; ceramidas y citocinas; estaurosporina, y similares.

En aún otras modalidades, las composiciones y los compuestos para el uso en los métodos de la presente invención proporcionan un compuesto de la Fórmula VI y al menos un agente anti-hiperproliferativo o antineoplásico seleccionado a partir de agentes alquilantes, antimetabolitos, agentes y productos naturales (por ejemplo, hierbas y otra planta y/o compuestos derivados de animales).

Agentes alquilantes adecuados para el uso en las composiciones y métodos presentes incluyen, pero sin limitarse a: 1) mostazas de nitrógeno (por ejemplo, mecloretamina, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalano (L-sarcolisina), y clorambucil); 2) etileniminas y metilmelaminas (por ejemplo, hexametilmelamina y tiotepa); 3) alquil sulfonatos (por ejemplo, busulfán); 4) nitrosoureas (por ejemplo, carmustina (BCNU); lomustina (CCNU); semustina (metil-CCNU) y estreptozocina (estreptozotocina)); y 5) triazenos (por ejemplo, la dacarbazina (DTIC; dimetiltriazenoimida-azolecarboxamida) .

En algunas modalidades, antimetabolitos adecuados para el uso en las composiciones y métodos presentes incluyen, pero sin limitarse a: 1) análogos de ácido fólico (por ejemplo, metotrexato (ametopterina)); 2) análogos de pirimidina (por ejemplo, fluorouracilo (5-fluorouracilo; 5-FU), floxuridina (fluoruro-oxiuridina; FudR), y citarabina (arabinósido de citosina)); y 3) análogos de la purina (por ejemplo, mercaptopurina (6-mercaptopurina, 6-MP), tioguanina (6-tioguanina; TG), y pentostatina (2'-desoxicoformicina)).

Aún en otras modalidades, los agentes quimioterapéuticos adecuados para el uso en las composiciones y métodos de la presente invención incluyen, pero sin limitarse a: 1) alcaloides de la vinca (por ejemplo, vinblastina (VLB), vincristina); 2) epipodofilotoxinas (por ejemplo, etopósido y tenipósido); 3) antibióticos (por ejemplo, dactinomicina (actinomicina D), daunorubicina (daunomicina; rubidomicina), doxorrubicina, bleomicina, plicamicina (mitramicina) y mitomicina (mitomicina C)); 4) enzimas (por ejemplo, L-asparaginasa); 5) modificadores de la respuesta biológica (por ejemplo, interferón-alfa); 6) complejos de coordinación de platino (por ejemplo, cisplatino (cis-DDP) y carboplatino); 7) antracenodionas (por ejemplo, mitoxantrona); 8) ureas sustituidas (por ejemplo, hidroxiurea); 9) derivados de metilhidrazina (por ejemplo, procarbazina (Nmetilhidrazina; MIH)); 10) supresores adrenocorticales (por ejemplo, mitotano (o, p'-DDD) y aminoglutetimida); 11) adrenocorticosteroides (por ejemplo, prednisona); 12) progestinas (por ejemplo, caproato de hidroxiprogesterona, acetato de medroxiprogesterona y acetato de megestrol); 13) estrógenos (por ejemplo, caproato, acetato de medroxiprogesterona y acetato de megestrol); 13) estrógenos (por ejemplo, dietilestilbestrol y etinil estradiol); 14) antiestrógenos (por ejemplo, tamoxifeno); 15) andrógenos (por ejemplo, propionato de testosterona y fluoximesterona); 16) antiandrógenos (por ejemplo, flutamida): y 17) análogos de la hormona liberadora de gonadotropina (por ejemplo, leuprolida).

Cualquier agente oncolítico que se usa de forma rutinaria en un contexto de terapia del cáncer encuentra uso en las

composiciones y métodos de la presente invención . Por ejemplo, la Agencia de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos mantiene un formulario de agentes oncolíticos aprobados para el uso en los Estados Unidos. Agencias homólogas internacionales a la U.S.F.D.A. mantiene formularios similares. La Tabla 1 proporciona una lista de agentes antineoplásicos ilustrativos aprobados para el uso en los Estados Unidos. Aquellos con experiencia en la técnica apreciarán que las "etiquetas del producto" requeridas en todos los quimioterapéuticos aprobados en Estados Unidos describen indicaciones aprobadas, información de la dosificación, datos de toxicidad, y similares, para los agentes ilustrativos.

Los agentes contra el cáncer incluyen además los compuestos que se identificaron por su actividad contra el cáncer pero que no están actualmente aprobados por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos u otras agencias equivalente o están sometidos a evaluación para nuevos usos. Los ejemplo incluyen, pero sin limitarse a, 3-AP, 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato, 17AAG, 852A, ABI-007, ABR-217620, ABT-751, ADI-PEG 20, AE-941, AG-013736, AGRO100, alanosina, AMG 706, anticuerpo G250, antineoplastones, AP23573, apazicuona, APC8015, atiprimod, ATN-161, atrasenten, azacitidina, BB-10901, BCX-1777, bevacizumab, BG00001, bicalutamida, BMS 247550, bortezomib, briostatina1, buserelina, calcitriol, CCI-779, CDB-2914, cefixima, cetuximab, CG0070, cilengitida, clofarabina, fosfato de combretastatina A4, CP-675,206, CP-724,714, CpG 7909, curcumina, decitabina, DENSPM, doxercalciferol, E7070, E7389, ecteinascidina 743, efaproxiral, eflornitina, EKB-569, enzastaurin, erlotinib, exisulind, fenretinida, flavopiridol, fludarabina, flutamida, fotemustina, FR901228, G17DT, galiximab, gefitinib, genisteína, glufosfamida, GTI-2040, histrelin, HKI-272, homoharringtonina, HSPPC-96, proteína de fusión hu14.18-interleucina-2, HuMax-CD4, iloprost, imiquimod, infliximab, interleucina-12, IPI-504, irofulven, ixabepilona, lapatinib, lestaurtinib, leuprolida, inmunotoxina LMB-9, lonafarnib, luniliximab, mafosfamida, MB07133, MDX-010, MLN2704, anticuerpo monoclonal 3F8, anticuerpo monoclonal J591, motexafin, MS-275, MVA-MUC1-IL2, nilutamida, nitrocamptotecina, diclorhidrato de nolatrexed, nolvadex, NS-9, O6-bencilguanina, oblimersen sódico, ONYX-015, oregovomab, OSI-774, panitumumab, paraplatino, PD-0325901, pemetrexed, PHY906, pioglitazona, pirfenidona, pixantrona, PS-341, PSC 833, PXD101, pirazoloacridina, R115777, RAD001, ranpirnasa, análogo de rebecamicina, proteína rhuAngiostatina, rhuMab 2C4, rosiglitazona, rubitecan, S-1, S-8184, satraplatino, SB-15992, SGN0010, SGN-40, sorafenib, SR31747A, ST1571, SU011248, ácido suberoilanilida hidroxámico, suramina, talabostat, talampanel, tariquidar, temsirolimus, inmunotoxina de TGFa-PE38, talidomida, timalfasina, tipifarnib, tirapazamina, TLK286, trabectedina, trimetrexato glucuronato, TroVax, UCN-1, ácido valproico, vinflunina, VNP40101M, volociximab, vorinostat, VX680, ZD1839, ZD6474, zileutón, y triclorhidrato de zosuquidar

En una modalidad, el agente contra el cáncer es seleccionado del grupo que consiste de taxotere, gemcitabina, lapatinib (Tykerb®) y etopósido.

Para una descripción más detallada de los agentes contra el cáncer y otros agentes terapéuticos, los expertos en la técnica se refieren a una serie de manuales instructivos, incluyendo, pero sin limitarse al, vademécum y Goodman y Gilman's "Pharmaceutical Basis of Therapeutics" décima edición, Eds. Hardman y otros, 2002.

La presente invención proporciona compuestos para su uso en los métodos de administración de un compuesto de Fórmula VI con terapia de radiación. La invención no está limitada por los tipos, cantidades, o sistemas de entrega y administración usados para suministrar a una animal la dosis terapéutica de radiación. Por ejemplo, el animal puede recibir radioterapia de fotón, radioterapia de haz de partículas, otros tipos de radioterapias, y combinaciones de estas. En algunas modalidades, la radiación se entrega al animal usando un acelerador lineal. En otras modalidades, la radiación se entrega usando un bisturí gamma.

La fuente de radiación para el animal puede ser externa o interna. La radioterapia externa es la más común e involucra dirigir un haz de radiación de alta energía a un sitio del tumor a través de la piel usando, por ejemplo, un acelerador lineal. Mientras que el haz de radiación se localiza en el sitio del tumor, es casi imposible evitar la exposición del tejido normal y sano. Sin embargo, la radiación externa es generalmente bien tolerada por los animales. La radioterapia interna implica implantar una fuente de emisión de radiación, tales como perlas, cables, sedimentos, cápsulas, partículas y similares, el interior del cuerpo en o cerca del sitio del tumor incluyendo el uso de sistemas de entrega que se dirigen específicamente a las células cancerosas objetivo (por ejemplo, usando partículas unidas a los ligandos que se unen a las células cancerosas). Tales implantes se pueden eliminar tras el tratamiento, o dejar en el cuerpo inactivos. Los tipos de radioterapia interna incluyen, pero sin limitarse a, braquiterapia, irradiación intersticial, irradiación intracavitaria, radioinmunoterapia, y similares.

El animal puede opcionalmente recibir radiosensibilizadores (por ejemplo, metronidazol, misonidazol, Budr intra-arterial, yododesoxiuridina intravenosa (IudR), nitroimidazol, 5-sustituido-4-nitroimidazoles, 2H-isoindoledionas, derivados de [[(2bromoetil)-amino]metil]-nitro-1H-imidazol-1-etanol, nitroanilina, citotoxinas selectivas en hipoxia de ADN-afínico, ligando de ADN halogenado, óxidos de 1,2,4 benzotriazina, derivados de 2-nitroimidazol, derivados de nitroazol que contienen flúor, benzamida, nicotinamida, intercalador de acridina, derivado de 5-tiotretrazol, 3-nitro-1,2,4-triazol, derivado de 4,5dinitroimidazol, texafrinas hidroxiladas, cisplatino, mitomicina, tiripazamina, nitrosourea, mercaptopurina, metotrexato, fluorouracilo, bleomicina, vincristina, carboplatino, epirrubicina, doxorrubicina, ciclofosfamida, vindesina, etopósido, paclitaxel, calor (hipertermia), y similares), radioprotectores (por ejemplo, cisteamina, fosforotioatos dihidrógeno de aminoalquilo, amifostina (WR 2721), IL-1, IL-6, y similares). Los radiosensibilizadores mejoran la muerte de las células tumorales. Los radioprotectores protegen el tejido sano de los efectos dañinos de la radiación.

Cualquier tipo de radiación se puede administrar a un animal, siempre que la dosis de radiación sea tolerada por el paciente

sin efectos secundarios negativos inaceptables. Los tipos adecuados de radioterapia incluyen, por ejemplo, radioterapia ionizante (electromagnética) (por ejemplo, rayos X o rayos gamma) o radioterapia con haz de partículas (por ejemplo, radiación de alta energía lineal)). La radiación ionizante se define como la radiación que comprende partículas o fotones que tienen la energía suficiente para producir la ionización, es decir, la ganancia o pérdida de electrones (como se describe, por ejemplo, en U.S. 5,770,581). Los efectos de la radiación pueden ser al menos parcialmente controlados por el clínico. Preferentemente la dosis de radiación se fracciona para la máxima exposición de la célula objetivo y una toxicidad reducida.

Preferentemente la dosis total de radiación administrada a un animal es aproximadamente .01 Gray (Gy) a aproximadamente 100 Gy. Con mayor preferencia, aproximadamente 10 Gy a aproximadamente 65 Gy (por ejemplo, aproximadamente 15 Gy, 20 Gy, 25 Gy, 30 Gy, 35 Gy, 40 Gy, 45 Gy, 50 Gy, 55 Gy, o 60 Gy) se administran en el transcurso del tratamiento. Mientras que en algunas modalidades, una dosis completa de radiación se puede administrar durante el transcurso de un día, la dosis total se fracciona idealmente y administra durante varios días. Deseablemente, la radioterapia se administra en el transcurso de al menos aproximadamente 3 días, por ejemplo, al menos 5, 7, 10, 14, 17, 21, 25, 28, 32, 35, 38, 42, 46, 52, o 56 días (aproximadamente 1-8 semanas). Por consiguiente, una dosis diaria de radiación comprenderá aproximadamente 1-5 Gy (por ejemplo, aproximadamente 1 Gy, 1.5 Gy, 1.8 Gy, 2 Gy, 2.5 Gy, 2.8 Gy, 3 Gy, 3.2 Gy, 3.5 Gy,

3.8 Gy, 4 Gy, 4.2 Gy, o 4.5 Gy), preferentemente 1-2 Gy (por ejemplo, 1.5-2 Gy). La dosis diaria de radiación debe ser suficiente para inducir la destrucción de las células objetivo. Si se extiende durante un período, preferentemente la radiación no se administra todos los días, permitiendo de ese modo que el animal descanse y que se realicen los efectos de la terapia. Por ejemplo, la radiación se administra de forma deseable en 5 días consecutivos, y no se administra en 2 días, por cada semana de tratamiento, permitiendo de ese modo 2 días de descanso por semana. Sin embargo, la radiación se puede administrar 1 día/semana, 2 días/semana, 3 días/semana, 4 días/semana, 5 días/semana, 6 días/semana, o los 7 días/semana, dependiendo de la capacidad de respuesta de los animales y cualquiera de los efectos secundarios potenciales. La radioterapia se puede iniciar en cualquier momento durante el período terapéutico. Preferentemente, la radiación se inicia en la semana 1 o 2 semanas, y se administra por el tiempo restante del período terapéutico. Por ejemplo, la radiación se administra en las semanas 1-6 o en las semanas 2-6 de un período terapéutico que comprende 6 semanas de tratamiento, por ejemplo, un tumor sólido. Alternativamente, la radiación se administra en semanas 1-5 o semanas 2-5 de un período terapéutico que comprende 5 semanas. Estos esquemas ilustrativos de administración de radioterapia no pretenden, sin embargo, limitar la presente invención.

Agentes terapéuticos antimicrobianos pueden usarse además como agentes terapéuticos en la presente invención. Se puede usar cualquier agente que pueda matar, inhibir, o de cualquier otra forma atenuar la función de organismos microbianos, así como cualquier agente contemplado que tenga tales actividades. Los agentes antimicrobianos incluyen, pero sin limitarse a, antibióticos naturales y sintéticos, anticuerpos, proteínas inhibidoras (por ejemplo, defensinas), ácidos nucleicos antisentido, agentes de ruptura de membrana y similares, usados solos o en conjunto. Claramente, cualquier tipo de antibiótico puede usarse incluyendo, pero sin limitarse a, agentes antibacterianos, agentes antivirales, agentes antifúngicos, y similares.

En algunas modalidades de la presente invención, un compuesto de la Fórmula VI y uno o más agentes terapéuticos o agentes contra el cáncer se administran a un animal bajo una o más de las condiciones siguientes: en diferentes periocidades, en diferentes duraciones, en diferentes concentraciones, por diferentes vías de administración, en una composición única, en composiciones separadas, etc. En algunas modalidades, el compuesto se administra antes al agente terapéutico o contra el cáncer, por ejemplo, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, o 18 horas, 1, 2, 3, 4, 5, o 6 días, 1, 2, 3, o 4 semanas antes de la administración del agente terapéutico o contra el cáncer. En algunas modalidades, el compuesto se administra después del agente terapéutico o contra el cáncer, por ejemplo, 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, o 18 horas, 1, 2, 3, 4, 5, o 6 días, 1, 2, 3, o 4 semanas después de la administración del agente contra el cáncer. En algunas modalidades, el compuesto y el agente terapéutico o contra el cáncer se administran simultáneamente pero en diferentes esquemas, por ejemplo, el compuesto se administra diariamente, mientras que el agente terapéutico o contra el cáncer se administra una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, o una vez cada cuatro semanas. En otras modalidades, el compuesto se administra una vez a la semana, mientras que el agente terapéutico o contra el cáncer se administra diariamente, una vez por semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, o una vez cada cuatro semanas.

Las composiciones dentro del alcance de esta invención incluyen todas las composiciones en donde los compuestos de la presente invención están contenidos en una cantidad que es eficaz para conseguir su propósito previsto. Aunque las necesidades individuales pueden variar, la determinación de intervalos óptimos de las cantidades efectivas de cada componente está dentro del conocimiento de la materia. Típicamente, los compuestos se pueden administrar a mamíferos, por ejemplo, los seres humanos, por vía oral a una dosis diaria de 0.0025 a 50 mg/kg , o una cantidad equivalente de la sal farmacéuticamente aceptable de esta, de peso corporal del mamífero que se trata por trastornos sensibles a la inducción de la apoptosis. Por ejemplo, aproximadamente 0.01 a aproximadamente 25 mg/kg se administra por vía oral para tratar,

mejorar o prevenir tales trastornos. En la inyección intramuscular, generalmente la dosis es aproximadamente la mitad de la dosis oral. Por ejemplo, una dosis intramuscular adecuada puede ser aproximadamente de 0.0025 a aproximadamente 25 mg/kg, por ejemplo, de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 5 mg/kg.

La dosis oral unitaria puede comprender de aproximadamente 0.0.1 a aproximadamente 1000 mg, por ejemplo, aproximadamente 0.1 a aproximadamente 100 mg del compuesto. La dosis unitaria se puede administrar uno o más veces en el día como una o más tabletas o cápsulas que contienen cada una de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 10, convenientemente aproximadamente 0.25 a 50 mg del compuesto o sus solvatos.

En una formulación tópica, el compuesto se puede presentar a una concentración de aproximadamente 0.01 a 100 mg por gramo de portador. En una modalidad, el compuesto se presenta a una concentración de aproximadamente 0.07-1.0 mg/ml, por ejemplo, aproximadamente 0.1-0.5 mg/ml, por ejemplo, aproximadamente 0.4 mg/ml.

Adicionalmente para administrar el compuesto como una sustancia química en bruto, los compuestos de la invención se pueden administrar como parte de una preparación farmacéutica que contiene portadores farmacéuticamente adecuados que comprenden excipientes y auxiliares que facilitan el procesamiento de los compuestos en las preparaciones que farmacéuticamente pueden usarse. Preferentemente, las preparaciones, particularmente aquellas preparaciones que pueden administrarse por vía oral o tópica y que pueden usarse para el tipo de administración preferida, tales como tabletas, grageas, pastillas y cápsulas de liberación lenta, enjuagues bucales y lavados bucales, geles, suspensiones líquidas, enjuagues para el cabello, geles para el cabello, champús y preparaciones que pueden administrarse también por vía rectal, tales como supositorios, así como soluciones adecuadas para la administración por infusión intravenosa, inyección, por vía tópica u oral, contienen de aproximadamente 0.01 a 99 por ciento, por ejemplo, de aproximadamente 0.25 a 75 por ciento de compuesto(s) activo(s), junto con el excipiente.

Las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden administrar a cualquier animal que pueda experimentar los efectos beneficiosos de los compuestos de la invención. El primero de dichos animales son los mamíferos, por ejemplo, seres humanos, aunque la invención no pretende ser tan limitada. Otros animales incluyen animales veterinarios (vacas, oveja, cerdos, caballos, perros, gatos y similares.

Los compuestos y composiciones farmacéuticas de estos se pueden administrar por cualquier medio que alcance el propósito previsto. Por ejemplo, la administración puede ser por vía parenteral, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, transdérmica, bucal, intratecal, intracraneal, intranasal o tópica. Alternativamente, o concurrentemente, la administración puede ser por la vía oral. La dosificación administrada dependerá de la edad, salud y peso del receptor, tipo de tratamiento de concurrente, dependerá si hay, de la frecuencia del tratamiento, y la naturaleza del efecto deseado.

Las preparaciones farmacéuticas de la presente invención se elaboran de una manera que es en sí conocida, por ejemplo, por medio de procesos convencionales de mezcla, granulación, elaboración de grageas, disolución o liofilización. Así, las preparaciones farmacéuticas para uso oral pueden obtenerse combinando los compuestos activos con los excipientes sólidos, opcionalmente triturando una mezcla resultante, y procesando la mezcla de gránulos, después de añadir auxiliares adecuados, si se desea o necesita, para obtener los núcleos de las tabletas o grageas.

Los excipientes adecuados son, particularmente, rellenos tales como sacáridos, por ejemplo lactosa o sacarosa, manitol o sorbitol, preparaciones de celulosa y/o fosfatos de calcio, por ejemplo fosfato tricálcico o hidrógeno fosfato de calcio, así como aglutinantes tales como pasta de almidón, usando, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de patata, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, y/o polivinilpirrolidona. Si se desea, pueden añadirse agentes desintegrantes, tales como los almidones mencionados anteriormente y carboxymetil-almidón además, polivinilpirrolidona reticulado, agar, o ácido algínico o una sal de este, tal como alginato sódico. Auxiliares son, sobre todo, agentes de regulación de flujo y lubricantes, por ejemplo , sílice, talco , ácido esteárico o sus sales, tales como estearato magnésico o estearato cálcico, y/o polietilenglicol. Los núcleos de grageas se proporcionan con revestimientos adecuados que, si se desea, son resistentes a los jugos gástricos. Con este fin, soluciones concentradas de sacáridos pueden usarse, que opcionalmente pueden contener goma arábiga, talco, polivinilpirrolidona, polietilenglicol, y/o dióxido de titanio, soluciones de laca y solventes orgánicos o mezclas de solventes adecuados. Se usan para producir revestimientos resistentes a los jugos gástricos, soluciones de preparaciones de celulosa adecuadas tales como ftalato de acetilcelulosa o ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa. Colorantes o pigmentos comestibles pueden añadirse a los revestimientos de comprimidos o grageas, por ejemplo, para la identificación o para caracterizar combinaciones de dosis del compuesto activo.

Otras preparaciones farmacéuticas que se pueden usar oralmente incluyen cápsulas de dos piezas hechas de gelatina, así

como cápsulas blandas, selladas hechas de gelatina y un plastificante tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas duras pueden contener los compuestos activos en forma de gránulos que pueden mezclarse con rellenos tales como lactosa, aglutinantes tales como almidones, y/o lubricantes tales como talco o estearato magnésico y, opcionalmente, estabilizadores. En cápsulas blandas, los compuestos activos se disuelven o suspenden de preferencia en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, o parafina líquida. Además, pueden adicionarse los estabilizadores.

Preparaciones farmacéuticas posibles que pueden usarse por vía rectal incluyen, por ejemplo, supositorios, que consisten en una combinación de uno o más de los compuestos activos con una base de supositorio. Las bases de supositorio adecuadas son, por ejemplo, triglicéridos naturales o sintéticos, o hidrocarburos de parafina. Adicionalmente, es posible usar además cápsulas rectales de gelatina que consisten en una combinación de los compuestos activos con una base. Posibles materiales de base incluyen, por ejemplo, triglicéridos líquidos, polietilenglicoles, o hidrocarburos de parafina.

Las formulaciones adecuadas para la administración parenteral incluyen soluciones acuosas de los compuestos activos en formas solubles en agua, por ejemplo sales solubles en agua y soluciones alcalinas. Adicionalmente, se pueden administrar las suspensiones de compuestos activos como suspensiones inyectables oleosas adecuadas. Los disolventes o vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos, por ejemplo, aceite de sésamo, o ésteres de ácido graso sintético, por ejemplo, oleato de etilo o triglicéridos o polietilenglicol-400. Las suspensiones inyectables acuosas pueden contener sustancias que aumentan la viscosidad de la suspensión incluyendo, por ejemplo, carboximetilcelulosa sódica, sorbitol, y/o dextrano. Opcionalmente, la suspensión puede contener además estabilizadores.

Las composiciones tópicas de esta invención se formulan preferentemente como aceites, cremas, lociones, ungüentos y similares mediante la elección de portadores adecuados. Los potadores adecuados incluyen aceites vegetales o minerales, vaselina blanca (parafina blanca blanda), grasas o aceites de cadenas ramificadas, grasas animales y alcohol de alto peso molecular (superior a C12). Los portadores preferidos son aquellos en los que el ingrediente activo es soluble. Pueden incluirse además emulsionantes, estabilizadores, humectantes y antioxidantes, así como agentes que imparten color o fragancia, si se desea. Además, pueden emplearse potenciadores de la penetración transdérmica en estas formulaciones tópicas. Ejemplos de tales potenciadores se pueden encontrar en las patentes de Estados Unidos núms. 3,989,816 y4,444,762.

Las cremas se formulan preferentemente a partir de una mezcla de aceite mineral, cera de abejas autoemulsionante y agua, en cuya mezcla se prepara el ingrediente activo disuelto en una pequeña cantidad de un aceite tal como aceite de almendras. Un ejemplo típico de una crema de este tipo es uno que incluye aproximadamente 40 partes de agua, aproximadamente 20 partes de cera de abejas, aproximadamente 40 partes de aceite mineral y aproximadamente 1 parte de aceite de almendra.

Los ungüentos se pueden formular mezclando una solución del ingrediente activo en un aceite vegetal tal como aceite de almendra con parafina blanda caliente y dejando que la mezcla se enfríe. Un ejemplo típico de un ungüento de este tipo es uno que incluye aproximadamente 30% de aceite de almendras y aproximadamente 70% de parafina blanca blanda por peso.

Las lociones se pueden preparar convenientemente disolviendo el ingrediente activo, en un alcohol de alto peso molecular adecuado, tales como propilenglicol o polietilenglicol.

Los siguientes ejemplos son ilustrativos, pero no limitativos, del método y composiciones de la presente invención.

EJEMPLO 1

Síntesis de los miméticos de Smac covalentemente restringidos

Métodos generales: espectros de RMN se adquirieron a una frecuencia de protón de 300 MHz. Desplazamientos químicos de 1H se reportaron con Me4Si (0.00 ppm), CHCl3 (7.26 ppm), CD2HOD (3.31 ppm), o DHO (4.79 ppm) como estándares internos. Desplazamientos químicos de13C se reportaron con CDCl3 (77.00 ppm), CD3OD (49.00 ppm), o 1,4-dioxano (67.16 ppm) como estándares internos. Rotaciones ópticas se midieron a la temperatura ambiente. Compuestos de la invención pueden purificarse mediante HPLC fase reversa (TFA al 0.1% en agua y TFA al 0.1% en acetonitrilo como eluente) y aislarse como sal de TFA.

Procedimiento general A (condensación entre el ácido carboxílico y la amina):

En una solución de dos sustratos en CH2Cl2 (20 mg/mL para el sustrato menor) se añadió EDC (1.1 eq por grupo amino), HOBt (1.1 eq por grupo amino) y N,N-diisopropiletilamino (4 eq por grupo amino) a 0 °C con agitación. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por ocho horas y después se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía para dar el producto.

Procedimiento general B (desprotección de Boc):

En una solución del sustrato en metanol (20 mg/mL) se añadió una solución de HCl en 1,4-dioxano (4 M, 10-20 eq por Boc). La solución se agitó a temperatura ambiente toda la noche y condensó después para dar el producto.

EJEMPLO 2

Síntesis de intermedios miméticos de Smac

15 Intermedios en la ruta sintética de los miméticos de Smac conformacionalmente restringidos se pueden sintetizar usando la metodología descrita en los Esquemas 1-7.

Esquema 1

55 Reactivos y condiciones: (a) i. 4 N HCl en 1,4-dioxano, metanol; ii. Boc-Dap(Z)-OH, EDC, HOBt, N,N-diisopropiletilamina, CH2-Cl2, 52% en dos etapas; (b) O3, después PPh3,CH2Cl2, 90%; (c) H2, 10% Pd-C, i-PrOH, 41%; (d) H2, 10% Pd-C, i-PrOH;

(e) NaBH(OAc)3, THF; (f) 9-BBN (2eq), THF, reflujo, 12h, y después 3N NaOH (2eq), 35% H2O2 (2.5 eq), 0 °C-temperatura

ambiente, 85%; (f) i. periodinano de Dess-Martin, CH2Cl2; ii. H2, 10% Pd-C, i-PrOH, 50% en dos etapas; (h) H2, 10% Pd-C, i-PrOH; (i) NaBH(OAc)3, THF.

La síntesis de los intermedios 5 y 7 se muestra en el Esquema 1. El compuesto 2 se puede preparar en cinco etapas a partir del ácido piroglutámico 1de acuerdo con los métodos reportados (ver: (1) Zhang, J.; Xiong, C.; Wang, W.; Ying, J.; Hruby, V., J. Org. Lett., 2002, 4 (23), 4029-4032, (2) Polyak, F. y Lubell, W. D. J. Org, Chem. 1998, 63, 5937-5949, y (3) Tetrahedron Letters 2005, 46, 945-947.) como una mezcla de dos diastómeros con el isómero de formaR como el mayor producto (la relación es aproximadamente 4: 1). La eliminación del grupo Boc en 2 seguido por la condensación con el ácidoN-α-(tert-butoxilcarbonil)-N-β-(benzoxilcarbonil)-L-diamino-propiónico (Boc-Dap(Z)-OH) da la amida 3. La oxidación del ozono del doble enlace C-C en 3 rindió el aldehído 4. La escisión del grupo Cbz en 4, condensacón intramolecular de la amina resultante con el grupo aldehído y posterior reducción del enamina se realizaron en un recipiente para dar el compuesto 5 bajo los tiempos de reacción prolongados. Alternativamente, la desprotección del grupo CBz de 4, la ciclización intramolecular, aislamiento del intermedio enamina y reducción proporciona el 5. En esta transformación sólo se obtuvo el compuesto 5 y no hubo formación detectable de su isómero, lo que sugiere que el amino aldehído del isómero menor no cicliza bajo estas condiciones.

En una solución del compuesto 2 (540 mg, 2 mmol) en 20 mL de metanol se añadió 4 mL de una solución de 4 N HCl en 1,4-dioxano. La solución se mezcló a temperatura ambiente toda la noche y concentró después para dar una sal de amonio. A una mezcla de esta sal en 15 mL de diclorometano se añadieron 1.17 g (2.4 eq) de Boc-Dap(Z)-OH-DCHA, 460 mg (2.4 mmol) de EDC, 320 mg (2.4 mmol) de HOBt, y 3 mL de N,N-diisopropiletilamina. La mezcla se agitó a temperatura ambiente toda la noche y después se condensó. El residuo se purificó por cromatografía para suministrar el compuesto 3 (YP-348) (580 mg, 59%). RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) (isómero principal) δ 7.34-7.28 (m, 5H), 5.80-5.77 (m, 1H), 5.59 (m, 1H), 5.36-5.33 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 5.19-5.01 (m, 4H), 4.67-4.62 (m, 1H), 4.47-4.44 (m, 1H), 3.76-3.74 (s, 1H), 3.74-3.71 (s, 2H), 2.32-2.30 (m, 1H), 2.16-2.12 (m, 1H), 1.99-1.95 (m, 2H), 1.42 (s, 9H); RMN de 13C (75 MHz, CDCl3) δ 172.4, 170.5, 156.5, 155.2, 136.4, 134.6, 133.8, 128.3, 127.9, 118.5, 117.1, 80.0, 66.6, 59.7, 58.2, 52.6, 43.4, 29.2, 28.1, 26.6.

O3 se burbujeó a través de una solución del compuesto 3 (490 mg, 1 mmol) en 20 mL de CH2Cl2 a -78 °C C hasta que el color se volvió azul pálido. Se burbujeó O3 durante 15 min mucho antes de que se burbujeó aire para deshacerse del exceso de O3. Después de añadir 3 mL de Et3N, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y agitó durante 1h. El solvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía para dar el aldehído 4 (YP-367) (340 mg, 69%). RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) (isómero principal) δ 9.78-9.67 (m, 1H), 7.53-7.32 (m, 5H), 5.44 (s, 1/2 H), 5.32 (s, 1/2 H), 5.15-5.06 (m, 2H),

4.64 (m, 1H), 4.40-4.39 (m, 1H), 3.78-3.76 (s, 3/2 H), 3.76-3.74 (s, 3/2H), 3.48-3.42 (m, 3H), 2.78-2.52 (m, 1H), 2.40-2.20 (m, 1H), 2.16 (m, 2H), 2.06-1.89 (m, 1H), 1.44-1.43 (m, 9H); RMN de13C (75 MHz, CDCl3) δ 200.3, 199.5, 172.6, 172.2, 170.3, 156.5, 136.4, 128.4, 128.0, 66.7, 59.7, 59.1, 54.3, 52.4, 52.3, 48.4, 43.3, 29.6, 28.2, 21.0.

A una solución del compuesto 4 (290 mg, 0.6 mmol) en 20 mL de isopropanol se añadió 0.2 g de 10% Pd/C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo H2 toda la noche, se filtró a través de celite y se concentró. El residuo se disolvió en THF seco. En esta solución se añadió NaBH(OAc)3 (380 mg, 1.8 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente toda la noche, diluyó con CH2Cl2, lavó con salmuera, secó sobre Na2SO4 y concentró. El residuo se purificó por cromatografía para dar el compuesto 5 (72 mg, 35%). [α] 20 D -30.2 (c = 1.7, CHCl3); RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 5.45 (brd, J = 8.0 Hz, 1H), 4.67 (m, 1H), 4.52 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 4.23 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.20 (m, 2H), 2.94 (m, 1H), 2.74 (dd, J = 13.6, 10.9 Hz, 1), 2.35 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 1.86-1.74 (m, 3H), 1.66 (m, 1H), 1.43 (brs, 9H); RMN de 13C (75 MHz, CDCl3, TMS) δ 173.42, .170.60, 155.16, 79.68, 59.46, 58.39, 54.92, 52.44, 46.72, 37.45, 32.15, 29.64, 28.29, 26.98.

La hidroboración del enlace doble C-C en 3 con 9-BBN seguido por la oxidación alcalina del borano resultante proporciona el alcohol 6. La oxidación de 6con periodinano de Dess-Martin proporcionó una mezcla de dos aldehídos, que se ciclizó con el mismo procedimiento que para el compuesto 5 para dar el compuesto 7. Similar a 5, sólo se obtuvo un isómero durante esta transformación.

Datos analíticos del compuesto 7: [α] 20D -23.2 (c = 1.0, CHCl3); RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 5.23 (brd, J = 8.0 Hz, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.65 (dd, J = 9.7, 8.2 Hz), 4.22 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.02-2.80 (m, 4H), 2.38-1.70 (m, 9H), 1.43 (brs, 9H); RMN de13C (75 MHz, CDCl3, TOMS) δ 173.38, 171.59, 155.09, 79.68, 62.03, 59.82, 53.72, 53.15, 52.48, 50.09, 34.66, 34.55, 29.47, 28.31, 27.33.

Esquema 2

Datos analíticos de YP-248P: RMN de 1H muestra que este compuesto tiene dos rotámeros con una relación de 2:1. RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 7.47-7.44 (m, 1H), 7.38-7.32 (m, 4H), 5.65-5.62 (d, J = 8 Hz, 1H), 5.31-5.16 (m, 2H), 4.64

4.60 (m, 1H), 4.51-4.46 (t, J = 8 Hz, 1H), 4.24-4.23 (m, 1H), 4.23-4.21 (m, 1H), 3.75 (s, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.66-3.63 (m, 1H), 3.63-3.61 (m, 1H), 3.61-3.31 (m, 1H), 2.36-2.34 (m, 1H), 2.11-1.76 (m, 6H), 1.44-1.45 (s, 9H).

Datos analíticos del intermedio de amida: RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 5.79 (brd, J = 7.0 Hz, 1H), 4.50-4.35 (m, 2H),

4.05 (m, 1H), 3.98-3.85 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.32-3.04 (m, 2H), 2.54 (m, 1H), 2.40-2.26 (m, 2H), 2.25-1.60 (m, 6H), 1.39 (s, 9H), 0.98-0.89 (m, 6H); RMN de13C (75 MHz, CDCl3) δ 173.12, 172.52, 168.85, 154.69, 79.80, 59.51, 56.11, 54.38, 53.51, 52.23, 46.18, 42.02, 32.51, 31.12, 28.12, 26.54, 25.81, 22.69, 22.40.

Esquema 3

Datos analíticos de YP-237P: [α] 20D -21.5° (c = 1.0, CHCl3); RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 3.71 (t, J = 6.5 Hz, 3H),

3.60: (dd, J = 9.0, 5.4 Hz, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.95-1.63 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.25 (m, 1H), 0.89 (s, 9H), 0.05 (s, 6H); RMN de13C (75 MHz, CDCl3) δ 174.5, 80.8, 61.5, 60.6, 57.5, 38.8, 3.1.8, 30.4, 28.0, 25.9, 18.2, -5.4; HRMS: calcul. m/z para [M+H]+ 330.2464; encontrado 330.2466.

Datos analíticos de YP-238P: [α] 20D -90.0° (c = 1.67, CHCl3); RMN de1H muestra que este compuesto tiene dos rotámeros con una relación de 1:1. RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 7.28 (m, 5H), 5.59 (m, 1H), 5.35 (m, 1H), 5.20-5.05 (m, 2H),

4.85: (m, ½ H), 4.65 (m, ½ H), 4.46 (m, 1H), 4.35 (m, 1H), 3.80 (m, ½ H), 3.70-3.50 (m, 2H), 3.40 (m, 1H), 3.25 (m, ½ H), 2.32 (m, 1H), 2.20-1.50 (m, 4H), 1.46 (s, 4.5H), 1.44 (s, 4.5H), 1.43 (s, 4.5H), 1.41 (s, 4.5H); HRMS: calcul. m/z 558.2791 para [M+Na]+; encontrado 558.2794.

Datos analíticos de YP-239: [α] 20 D -51.6° (c = 1.67, CHCl3); RMN de 1H muestra que este compuesto tiene dos rotámeros con una relación de 2:1. RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 9.76 (s, 2/3 H), 9.71 (s, 1/3 H), 7.40-7.28 (m, 5H), 5.72-5.30 (m, 2H), 5.20-4.95 (m, 2H), 4.90-4.25 (m, 3H), 3.52-3.05 (m, 3H), 2.90-1.60 (m, 4H), 1.50-1.35 (m, 18H); HRMS: calcul. m/z 556.2635 para [M+Na]+; encontrado 556.2629.

Datos analíticos de YP-239P: [α] 20D -8.4° (c = 0.65, CHCl3); RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 5.49 (brd, J = 8.1 Hz, 1H),

4.70 (m, 1H), 4.41 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 4.30 (m, 1H), 3.25-3.18 (m, 2H), 2.89 (m, 1H), 2.75 (dd, J = 13.5, 11.1 Hz, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.18-1.60 (m, 6H), 1.49 (s, 9H), 1.44 (s, 9H); RMN de13C (75 MHz, CDCl3) δ 171.8, 170.4, 155.2, 81.7, 79.5, 60.6, 58.5, 54.9, 52.3, 46.9, 37.5, 32.1, 28.3, 28.0, 27.0; HRMS: calcul. m/z 406.2318 para [M+Na]+; encontrado 406.2317.

Esquema 4

Datos analíticos de YP-244: RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 7.92-7.75 (m, 1H), 7.48-7.46 (m, 1H), 7.37-7.24 (m, 15H), 6.24-6.18 (t, J = 8.3 Hz, 1H), 5.76-5.70 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 4.70-4.65 (m, 1H), 4.57-4.54 (m, 1H), 4.15-4.10 (m, 2H), 3.60-3.40 (m, 1H), 2.67-2.61 (m, 2H), 2.12-2.01 (m, 2H), 1.82-1.76 (m, 2H), 1.48-1.47 (s, 9H).

Datos analíticos de YP-244P2: RMN de 1H muestra que este compuesto tiene dos rotámeros con una relación de 1:1. RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 7.83-7.69 (m, 1H), 7.47-7.45 (m, 1H), 7.36-7.26 (m, 15H), 6.24-6.18 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 4.89-4.79 (m, 1H), 4.70-4.62 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.23-4.07 (m, 2H), 3.60-3.47 (1H), 2.82 (s, 3/2 H), 2.79 (s, 3/2 H), 2.62-2.59 (m, 2H), 2.48-2.30 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 2H), 1.86-1.79 (m, 2H), 1.51 (s, 9/2 H), 1.49 (s, 9/2 H), 1.38-1.35 (d, J =

7.0 Hz, 3H).

Datos analíticos de YP-245: RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 9.09-9.07 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.32-7.18 (m, 10H), 6.99

6.80 (br, 1H), 6.23-6.20 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.08-5.04 (m, 1H), 4.72-4.67 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.33-4.18 (m, 1H), 307-2.94 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.73-2.54 (m, 1H), 2.53-2.38 (m, 1H), 2.31-2.24 (t, J =11 Hz, 1H), 2.18-2.00 (m, 2H), 1.75-1.74 (m, 2H),

1.53 (s, 9H), 1.35-1.26 (d, J = 7.1 Hz, 3H).

Datos analíticos de YP-370: RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 7.60-7.05 (m, 9H), 5.78-5.50 (m, 1H), 5.20-5.11 (m, 2H), 4.65-4.30 (m, 2H), 4.28-4.22 (m, 1H), 3.60-3.48 (m, 1H), 3.42-3.38 (m, 1H), 2.93-2.68 (m, 2H), 2.58-2.40 (m, 1H), 2.28-1.98 (m, 4H), 1.98-1.70 (m, 6H), 1.44 (s, 9H).

Datos analíticos de YP-372: RMN de 1H muestra que este compuesto tiene dos rotámeros con una relación de 1:1. RMN de1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 7.45 (m, 1H), 7.36-7.10 (m, 9H), 6.72-6.58 (m, 1H), 5.21-5.14 (t, J = 9.9 Hz, 2H), 4.82 (m, 1H), 4.48-4.41 (m, 1H), 4.14-4.09 (m, 2H), 3.82-3.60 (m, 1H), 3.20-2.90 (m, 2H), 2.79 (s, 3/2 H), 2.77 (s, 3/2 H), 2.50-2.36 (m, 1H), 2.18-2.01 (m, 4H), 1.89-1.82 (m, 6H), 1.49 (s, 9/2 H), 1.46 (s, 9/2 H), 1.37-1.33 (m, 3H); HRMS: calcul. m/z 698.3530 para [M+Na]+; encontrado 698.3541.

Datos analíticos de YP-373: RMN de 1H (300 MHz, CDCl3, TMS) δ 8.77-8.75 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.21-7.05 (m, 4H), 6.90

6.73 (br, 1H), 5.06-4.98 (m, 2H), 4.65-4.59 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 4.23-4.17 (m, 1H), 3.02-3.01 (m, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.70-2.68 (m, 2H), 2.60-2.48 (m, 2H), 2.38 (m, 1H), 2.12-2.03 (m, 4H), 1.82-1.72 (m, 6H), 1.47 (s, 9H), 1.32-1.29 (d, J = 7.1 Hz, 3H); RMN de13C (75 MHz, CDCl3) δ 170.6, 168.4, 137.6, 136.4, 129.3, 128.9, 127.2, 125.8, 60.3, 58.2 54.4, 49.3, 47.4, 46.8, 34.9, 31.8, 29.0, 28.2, 27.6, 18.7, 14.1; HRMS: calcul. m/z 564.3162 para [M+Na]+; encontrado 564.3163.

Esquema 5

Un compuesto representado por la fórmula A, en donde m es 1-2, y R1y R2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido, se puede preparar con el método mostrado en el Esquema 5. En resumen, la protección del grupo amino en el intermedio a con el grupo protector Cbz da el intermedio b. La hidrólisis del grupo éster de b rinde el ácido c. La condensación de c con la amina NR1R2 proporciona un compuesto de la Fórmula A.

Esquema 6

Un compuesto representado por la Fórmula B en donde A1, A2, Z, X, T, U, m y R5 con los significados según descritos anteriormente en la Fórmula I, se puede preparar como se muestra en el Esquema 6. En resumen, la eliminación del grupo protector Boc en a proporciona la amina b. La condensación de b con el aminoácido protegido por Boc da la amida c. La eliminación del grupo protector Cbz en c proporciona la amina d. La introducción de R5 al grupo amino en d rindió e. R5 puede introducirse por sustitución de d con el haluro de alquilo correspondiente (por ejemplo, Mel) o mediante otras reacciones de desplazamiento nucleofílico con electrófilos adecuados. Cuando R5 es COR7, COR7 puede introducirse por la condensación de d con R7CO-L en donde L es un grupo saliente. Por ejemplo, R7CO-L puede ser el ácido carboxílico correspondiente (es decir, R7CO2H) o ácido clorhídrico (es decir, R7COCl). La eliminación del grupo protector Boc en e proporciona f. La introducción del grupo A1 por sustitución de f con un haluro de alquilo o aminación reductora de f con el aldehído correspondiente proporciona el mimético de Smac representado por la Fórmula B.

En una modalidad, COR7 se introduce por la condensación de d con el ácido carboxílico correspondiente (es decir, R7CO2H). En otra modalidad, la condensación de R7CO2H con d se lleva a cabo en presencia de un agente activante (por ejemplo, diciclohexilcarbodiimida, 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida, hexafluorofosfato de benzotriazol-1iloxi)tripirrolidinofosfonio ). En otra modalidad, el agente activante es 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida. En otra modalidad, la condensación de R7CO2H con d se lleva a cabo en presencia de un agente activante y uno o más aditivos adicionales (por ejemplo, N-hidroxibenzotriazol) para optimizar los parámetros de reacción tal como rendimiento. En una modalidad, la reacción se completa en aproximadamente 1 hora a aproximadamente 24 horas. En una modalidad, la reacción se lleva a cabo a temperatura de aproximadamente -20°C a aproximadamente 25°C. En una modalidad, la reacción se lleva a cabo en un solvente orgánico inerte tales como acetonitrilo, benceno, cloroformo, 1,2-dicloroetano, 1,2,dimetoxietano, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, dioxano, diclorometano, N-metil-2-pirrolidinona o tetrahidrofurano.

Esquema 7

Un compuesto que se representa por la Fórmula C en donde m es 1 o 2, y R1, R2 y R7 con los significados descritos anteriormente en la Fórmula I, puede sintetizarse en el método mostrado en el Esquema 7. La reducción del grupo éster en a rinde un alcohol b. La mesilación del grupo hidroxilo en b seguido por la sustitución del mesilato resultante con ázida sódica proporciona la azida c.La reducción de la azida con PPh3 en THF-H2O proporciona la amina d. La aminación reductora de d con un aldehído R1CHO da la amina e. La introducción de R" del grupo amino en e proporciona un compuesto de la Fórmula C. Cuando R" es R2, puede unirse al grupo amino ya sea por sustitución con haluro de alquilo u otro electrófilo adecuado, o aminación reductora de un aldehído. Cuando R" es COR7, puede introducirse mediante la condensación de e con R7CO-L en donde L es un grupo saliente. En una modalidad, R7CO-L es un ácido (es decir, R7CO2H)

o ácido clorhídrico (es decir, R7COCl).

Ejemplo de Referencia 3 Datos analíticos de YP-245P3: RMN de 1H (300 MHz, D2O, TMS) δ 7.28-7.20 (m, 10H), 5.97 (s, 1H), 5.25 (br, 1H), 4.51 (br, 1H), 3.9.1-3.84 (q,J = 7.1 Hz, 1H), 3.82-3.70 (m, 1H), 3.58-3.55 (m, 1H), 3.48-3.43 (m, 1H), 3.23-3.19 (t, J = 12 Hz, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.56 (s, 3H), 2.40-2.36 (m, 1H), 2.13-1.73 (m, 5H), 1.41-1.38 (d, J = 7.1 Hz, 3H); HRMS: calcul. m/z para [M+H]+ 492.2975; encontrado 492.2971.

Ejemplo de Referencia 4

Datos analíticos de YP-246P: RMN de 1H (300 MHz, D2O, TMS) δ 7.33-7.13 (m, 15H), 6.03-6.01 (m, 1H), 5.32-5.30 (m, 1H), 4.64-4.61 (m, 1H), 4.31 (s, 2H), 3.85-3.83 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 3.69 (m, 1H), 3.59-3.51 (m, 1H), 3.12-3.08 (t, J = 11.6 Hz, 1H),

2.55 (s, 3H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.09-2.04 (m, 1H), 1.81-1.66 (m, 4H), 1.37-1.35 (d, J = 7.1 Hz, 3H); HRMS: calcul. m/z para [M+H]+ 568.3288; encontrado 568.3284.

EJEMPLO 5

Datos analíticos de SM-330: RMN de 1H (300 MHz, D2O, TMS) δ 8.88-8.76 (m, 1H), 7.30-7.18 (m, 10H), 5.95-5.93 (d, J =

4.7 Hz, 1H), 4.93-4.91 (m, 1H), 4.38-4.26 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 3.90-3.86 (m, 1H), 3.69-3.65 (m, 1H), 3.50-3.38 (m, 2H),

2.58 (s, 3H), 2.23-2.18 (m, 1H), 2.04 (s, 3H), 1.93 (s, 2H), 1.81-1.74 (m, 4H), 1.43-1.41 (d, J = 7.0 Hz, 3H); RMN de13C (75 MHz, D2O) δ 175.3, 173.3, 172.9, 170.2, 141.2, 129.2, 128.1, 127.7, 62.3, 62.1 58.5, 57.8, 57.3, 52.6, 51.8, 32.2, 31.3, 27.5, 21.5, 20.7, 15.5; HRMS: calcul. m/z para [M+H]+ 520.2924; encontrado 520.2924.

EJEMPLO 6 Datos analíticos de SM-337: RMN de 1H (300 MHz, CD3OD, TMS) δ 7.34-7.27 (m, 15H), 6.18-6.15 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.60

4.57 (m, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.12-4.07 (m, 1H), 3.99-3.82 (m, 4H), 3.50-3.40 (m, 1H), 2.67 (s, 3/2H), 2.66 (s, 3/2H), 2.34 (m, 1H), 2.07-2.00 (m, 3H), 1.88-1.81 (m, 2H), 1.56-1.52 (d, J = 6.8 Hz, 3H); RMN de13C (75 MHz, CD3OD) δ 174.6, 174.0, 169.6, 169.4, 143.1, 136.4, 130.3, 129.5, 128.6, 128.2, 127.8, 62.7, 58.3, 54.2, 41.6, 33.3, 31.9, 28.2, 16.3.

Ejemplo 7

Datos analíticos de SM-350: RMN de 1H (300 MHz, CD3OD, TMS) δ 8.94-8.92 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.34-7.26 (m, 12H), 7.04

6.98 (m, 2H), 6.18-6.15 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.60-4.57 (m, 1H), 4.31 (br, 1H), 4.02-3.76 (m, 4H), 3.50 (m, 1H), 2.68 (s, 3H),

2.34 (m, 1H), 2.11-1.82 (m, 5H), 1.55-1.53 (d, J= 7.0 Hz, 3H); RMN de13C (75 MHz, CD3OD) δ 173.2, 170.2, 169.7, 164.8, 161.5, 143.1, 132.5, 131.9, 129.6, 128.6, 128.1, 116.2, 62.7, 58.4, 53.9, 40.5, 33.3, 32.3, 31.8, 28.3, 16.3; HRMS: calcul. m/z para [M+Na]+ 636.2962; encontrado 636.2974.

Ejemplo 8

Datos analíticos de SM-356: RMN de 1H (300 MHz, CD3OD, TMS) δ 8.93-8.91 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.38-7.26 (m, 11H), 6.90

6.86 (m, 2H), 6.18-6.16 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.10-5.00 (m, 1H), 4.61-4.58 (m, 1H), 4.40-4.28 (m, 1H), 4.15-3.91 (m, 4H), 3.36 (m, 2H), 2.69 (s, 2H), 2.67 (s, 1H), 2.42-2.28 (m, 1H), 2.02-1.95 (m, 5H), 1.55-1.53 (d, J = 7.0 Hz, 3H); RMN de13C (75 MHz, CD3OD) δ 173.2, 172.4, 170.2, 169.7, 169.4, 143.2, 134.1, 129.6, 128.4, 128.1, 120.1, 112.0, 104.1, 62.7, 58.4, 53.9, 34.2, 33.3, 32.3, 31.7, 28.3, 16.2; HRMS: calcul. m/z para [M+Na]+ 654.2868; encontrado 654.2866.

Ejemplo 9 Datos analíticos de SM-376: RMN de 1H (300 MHz, CD3OD, TMS) δ 8.50-8.43 (m, 1H), 7.46-7.44 (m, 1H), 7.32-7.31 (m, 4H), 7.26-7.24 (m, 1H), 7.15-7.11 (m, 3H), 5.09 (m, 2H), 4.43 (m, 1H), 4.20(m, 1H), 4.01-3.92 (m, 4H), 3.58-3.42 (m, 1H), 2.83-2.81 (m, 2H), 2.70 (s, 1H), 2.68 (s, 2H), 2.38-2.25 (m, 1H), 2.09-1.82 (m, 8H), 1.27-1.53 (d, J = 7.0 Hz, 3H); RMN de13C (75 MHz, CD3OD) δ .174.1, 173.6, 169.6, 169.3, 138.5, 137.9, 136.5, 130.2, 129.8, 128.0, 127.0, 62.9, 58.3, 54.4, 41.6, 32.1, 31.9, 31.4, 30.2, 28.4, 21.7, 16.4; HRMS: calcul. m/z para [M+Na]+ 582.3056; encontrado 582.3080.

Ejemplo 10

Datos analíticos de SM-377: RMN de 1H (300 MHz, CD3OD, TMS) δ 8.50-8.40 (m, 1H), 7.47-7.44 (m, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.15-7.01 (m, 5H), 5.09 (m, 2H), 4.43 (m, 1H), 4.38-4.28 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 4.02-3.93 (m, 4H), 2.83-2.81 (m, 2H),

2.70 (s, 3H), 2.38-2.28 (m, 1H), 2.12-1.82 (m, 8H), 1.56-1.53 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 13C RMN de (75 MHz, CD3OD) δ 173.8, 173.5, 169.7, 169.3, 138.5, 132.5, 131.8, 129.9, 126.9, 116.3, 62.9, 58.3, 57.8, 54.1, 40.6, 33.4, 32.2, 31.7, 30.2, 28.4, 21.7, 16.3; HRMS: calcul. m/z para [M+H]+ 578.3143; encontrado 578.3147.

Ejemplo 11 Datos analíticos de SM-401: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.37 (m, 2H), 7.30 (m, 5H), 7.05 (m, 2H), 4.46 (m, 2H),

4.33 (m, 2H), 3.92-3.81 (m, 6H), 3.54 (m, 1H), 3.32 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.34 (m, 1H), 2.16-1.78 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.3 Hz, 3H). RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 173.2, 168.8, 168.5, 164.0, 160.8, 135.3, 129.4, 129.2, 128.8, 126.9, 115.3, 115.0, 62.0, 61.2, 57.3, 57.1, 53.2, 53.0, 42.9, 42.3, 40.7, 32.5, 31.3, 27.5, 15.5.

Ejemplo 12

Datos analíticos de SM-402: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 8.60 (m, 1H), 7.40 (m, 4H), 7.02 (m, 4H), 4.52-4.43 (m, 2H), 4.35-4.29 (m, 2H), 4.08-3.80 (m, 6H), 3.54 (m, 1H), 3.38 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.33 (m, 1H), 2.13-1.82 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.9 Hz, 3H). RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 173.1, 172.8, 168.8, 168.5, 164.1, 135.1, 131.5, 131.0, 129.2, 115.3, 115.0, 61.9, 57.3, 52.9, 42.3, 39.6, 32.4, 31.3, 30.9, 27.3, 15.3

Ejemplo 13

Datos analíticos de SM-403: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.39-7.22 (m, 9H), 7.08-7.02 (m, 4H), 6.15 (d, J = 6.0, 1H),

4.97 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.02-3.66 (m, 6H), 3.59-3.54 (m, 1H), 2.66 (s, 3H), 2.33 (m, 1H), 2.11-1.80 (m, 5H),

1.53 (d, J = 6.6 Hz, 3H). RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 173.4, 172.4, 168.8, 168.4, 164.2, 160.9, 138.1, 135.3, 129.8, 129.7, 129.6, 129.5, 129.4, 129.0, 128.7, 128.6, 126.9, 115.6, 115.3, 115.0, 72.6, 61.9, 57.3, 56.2, 53.1, 47.0, 40.6, 32.3, 31.5, 31.1, 27.4, 15.5.

Ejemplo 14 Datos analíticos de SM-404: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.37-7.25 (m, 6H), 7.11-6.91 (m, 6H), 6.15 (d, J = 7.5, 1H),

4.83 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.02-3.60 (m, 6H), 3.51 (m, 1H), 2.94 (m, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.23 (m ,1H), 2.11-1.80 (m, 5H), 1.53 (d, J = 6.6 Hz, 3H). RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.0, 172.4, 168.7, 168.4, 163.7, 160.8, 137.9, 137.4, 130.7, 130.6, 129.9, 129.8, 129.6, 129.5, 115.6, 115.3, 115.1, 115.0, 114.0, 71.5, 67.2, 57.4, 56.0, 55.9, 52.8, 51.7, 35.0, 32.3, 31.5, 31.1, 30.7, 27.4, 15.4.

Ejemplo 15

Datos analíticos de SM-405: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.40-7.25 (m, 10H), 6.15 (s, 1H ), 4.61-4.55 (m, 1H), 4.28

4.22 (m, 1H), 4.00-3.95 (m, 2H), 3.86-3.81 (m, 1H), 3.68-3.66 (m, 1H), 3.45-3.40 (m, 1H), 2.94-2.92 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.68-2.57 (m, 2H), 2.34-2.23 (m, 2H), 2.16-1.79 (m, 7H), 1.66-1.53 (m, 4H), 1.52 (d, J = 7.2 Hz, 3H). RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 176.1, 172.2, 168.8, 168.3, 142.2, 142.1, 132.2, 132.0, 129.1, 128.7, 128.4, 127.9, 127.8, 127.7, 127.5, 127.2, 61.8, 57.5, 57.3, 53.1, 38.9, 38.7, 37.2, 32.5, 32.2, 31.4, 31.0, 27.4, 24.9, 15.3.

Ejemplo 16 Datos analíticos de SM-406: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.38-7.25 (m, 10H), 6.14 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.62-4.56 (m, 1H), 4.30-4.25 (m, 1H), 4.05-3.96 (m, 2H), 3.87-3.49 (m, 4H), 2.72 (s, 3H), 2.46 (m, 2H), 2.37-2.32 (m, 1H), 2.15-2.00 (m, 5H), 1.84-1.80 (m, 1H), 1.56 (d, J = 5.4 Hz, 3H), 1.00 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4,300M Hz) δ 175.7, 172.3, 168.8, 168.3, 142.2, 142.1, 132.2, 132.0, 129.1, 129.0, 128.7, 128.4, 127.8, 127.7, 127.5, 127.2, 61.8, 57.4, 57.3, 53.2, 41.7, 38.6, 37.2, 32.2, 31.4, 31.0, 27.4, 26.3, 22.0, 15.3.

Ejemplo 17

Datos analíticos de SM-407: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.31-7.27 (m, 12H), 6.94 (m, 2H), 6.15 (m, 1H), 4.82-4.70 (m, 1H), 4.53 (m, 1H), 4.09-3.58 (m, 5H), 3.36 (m, 1H), 3.05-2.72 (m, 4H), 2.71 (s, 3H), 2.30 (m, 1H), 2.05-1.81 (m, 5H), 1.56 (m, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 173.9, 172.3, 169.4, 168.5, 163.5, 160.2, 142.3, 142.1, 137.5, 132.9, 132.2, 130.8, 130.6, 129.0, 128.6, 127.7, 127.5, 127.3, 115.2, .114.9, 61.9, 57.6, 57.2, 53.1, 52.9, 46.8, 38.2, 35.3, 34.9, 32.4, 31.6,30.8,27.5, 15.8.

Ejemplo 18

Datos analíticos de SM-408: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.35-7.16 (m, 15H), 6.18 (m, 1H), 4.82-4.70 (m, 1H), 4.53 (m, 1H), 4.09-3.58 (m, 5H), 3.30 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 2.98 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.75 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.30 (m, 1H), 2.05-1.81 (m, 5H), 1.56 (m, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.3, 172.4, 169.0, 168.5, 142.3, 141.8, 132.9, 132.1, 129.1, 128.9, 128.7, 128.5, 127.7, 127.6, 127.3, 126.2, 61.8, 57.4, 57.2, 52.8, 46.6, 34.9, 32.3, 31.7, 30.9, 27.5, 15.4.

Ejemplo 19 Datos analíticos de SM-409: RMN de 1H (MeOH-d4, 300M Hz) δ 7.37-7.26 (m, 10H), 6.16 (s, 1H), 4.60 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.06-3.92 (m, 2H), 3.80 (m, 1H), 3.68-3.35 (m, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.56 (m ,2H), 2.30 (m, 1H), 2.05-1.81 (m, 5H), 1.64 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.56 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.96 (t,J = 7.5 Hz, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 175.6, 172.3, 168.7, 168.5, 142.2, 142.1, 132.9, 132.8, 132.2, 132.0, 129.1, 129.0, 128.7, 128.4, 127.7, 127.3, 61.8, 57.4, 57.3, 53.0, 46.9, 35.3, 34.9, 32.4, 31.4, 30.9, 27.3, 18.9, 15.4, 13.3.

Ejemplo 20

Reactivos y condiciones: i. ácido fenilacético, EDC, HOBt, N,N-diisopropiletilamina, CH2Cl2; ii. 3N de LiOH, 1,4-dioxano, después 1 N de HCl; iii. Aminodifenilmetano, EDC, HOBt, N,N-diisopropiletilamina, CH2Cl2; iv. 4N de HCl en 1,4-dioxano, v. N-Boc-N-metil alanina, EDC, HOBt, N,N-diisopropiletilamina, CH2Cl2; vi. $N de HCl en 1,4-dioxano, 62% durante seis etapas.

La condensación de 7 con ácido fenilacético seguido por la hidrólisis del éster metílico dio un ácido que se condensó con aminodifenilamina rindiendo la amida. La eliminación del grupo protector Boc en esta amida proporcionó una sal de amonio. La condensación de esta sal con N-Boc-N-metil-alanina seguido por la eliminación del grupo protector Boc proporcionó SH

207.

Datos analíticos de SM-207: RMN de 1H (300 MHz, D2O) δ 7.22-6.80 (m, 15H), 5.95 (s, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.18-3.45 (m, 5H), 3.42-2.85 (m, 3H), 2.67 (s, 3H), 2.12-0.80 (m, 11H); RMN de13C (75 MHz, D2O) δ 174.27, 172.09, 170.94, 169.24, 142.01, 141.83, 141.68, 134.86, 129.32, 128.16, 128.99, 127.76, 127.34, 71.92, 61.13, 58.57, 57.31, 49.77, 49.21, 49.05, 41.46, 31.44, 18.06, 15.73, 15.62.

Ejemplo de Referencia 21

Datos analíticos de SM-412: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 8.81 (m, 1H), 7.41-7.26 (m, 10H), 6.06 (m, 1H), 4.56-4.43 (m, 3H), 4.11 (m, 2H), 3.99-3.76 (m, 4H), 3.58-3.47 (m, 4H), 3.32 (m, 1H), 2.72 (m, 3H), 2.34-1.80 (m, 6H), 1.60 (m, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300M Hz) δ 172.1, 169.2, 168.7, 164.1, 163.6, 160.2, 142.3, 142.0, 128.7, 128.2, 127.9, 127.7, 127.5, 127.3, 116.3, 62.2, 58.0, 57.8, 53.5, 50.3, 46.4, 37.3, 32.0, 30.8, 27.9, 15.2.

Ejemplo de Referencia 22

Datos analíticos de SM-413: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 9.00 (d, J = 8.1Hz, 1H), 7.41-7.26 (m, 10H), 6.17 (m, 1H),

4.62 (m, 2H), 4.32 (m, 1H), 4.00 (m, 2H), 3.75 (m, 3H), 3.47 (m, 1H), 3.20 (m, 1 H), 2.92 (m, 1H), 2.72 (2s, 3H), 2.30 (m, 1H), 2.07-1.80 (m, 5H), 1.54 (d, J = 7.2 Hz, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.8, 172.4, 171.7, 168.8, 168.5, 142.2, 142.0, 128.7, 128.4, 127.8, 127.7, 127.5, 127.3, 68.2, 61.8, 57.3, 51.7, 46.9, 37.7, 32.2, 30.8, 27.4, 15.2.

Ejemplo de Referencia 23 Datos analíticos de SM-414: RMN de 1H (MeOH-d4, 300M Hz) δ 8.80 (m, 1H), 7.41-7.26 (m, 12H), 6.09 (m, 1H), 5.12 (m, 1H), 4.56 (m, 2H), 4.32 (m, 1H), 4.18 (m,1H), 4.03 (m, 2H), 3.75 (m, 2H), 3.46 (m, 1H), 3.16 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.30-1.80 (m, 6H), 1.54 (m, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 172.2, 171.4, 170.4, 169.1, 168.7, 142.3, 142.2, 136.0, 128.7, 128.4, 128.1, 127.9, 127.6, 127.5, 127.1, 122.4,119.6, 62.1, 57.6, 57.3, 46.4, 45.4, 33.4, 32.3, 30.8, 27.7, 15.2.

Ejemplo de Referencia 24

Datos analíticos de SM-415: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 8.97 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.38-7.25 (m, 10H), 6.16 (m, 1H ),

4.80 (m, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 3.96 (m, 3H), 3.47 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.62 (m, 1H), 2.49 (m, 1H),

2.34 (m, 1H), 2.15-1.87 (m, 5H), 1.56 (m, 3H), 1.08 (s, 9H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.2, 172.5, 169.0, 168.4, 142.1, 142.0, 128.7, 128.5, 127.8, 127.7, 127.5, 127.3, 61.7, 57.4, 57.3, 53.1, 51.9, 46.7, 44.6, 32.5, 31.5, 31.2, 30.8, 29.4, 27.2, 15.3.

Ejemplo de Referencia 25 Datos analíticos deSM-416: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 8.95 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.38-7.25 (m, 10H), 6.16 (m, 1H ),

4.80 (m, 1H), 4.56 (m, 1H), 4.25 (m, 2H), 3.92 (m, 3H), 3.47 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (m, 3H), 2.34 (m, 1H), 2.12-1.81 (m, 8H), 1.56 (m, 4H), 1.47 (m, 1H), 1.30 (m, 1H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.6, 172.4, 169.5, 168.4, 142.2, 142.0, 128.7, 128.4, 127.8, 127.7, 127.5, 127.3, 73.0, 61.7, 57.3, 57.2, 53.1, 51.9, 46.6, 42.0, 39.4, 34.4, 32.5, 31.2, 30.8, 27.2,

15.2.

Ejemplo de Referencia 26

Datos analíticos de SM-418: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.37-7.25 (m, 10H), 6.16 (m, 1H), 4.89(m, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.03-3.83 (m, 3H), 3.66-3.48 (m, 3H), H), 2.70 (m, 3H), 2.33 (m, 1H), 2.08-1.75 (m, 10H),

1.54 (m, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 177.6, 172.4, 169.2, 168.6, 142.2, 142.0, 128.7, 128.5, 128.4, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 127.3, 73.4, 61.7, 57.3, 57.1, 53.0, 51.9, 46.9, 39.4, 38.9, 34.7, 32.7, 31.3, 30.8, 28.0, 27.3, 15.2.

Ejemplo de Referencia 27

Datos analíticos de SM-419: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.37-7.25 (m, 10H), 6.16 (m, 1H), 4.89(m, 1H), 4.58 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 4.03-3.71 (m, 5H), 3.55-3.37 (m, 2H), 2.70 (m, 3H), 2.67 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 2.08-1.75 (m, 6H), 1.54 (m, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 173.5, 172.2, 169.2, 168.6, 142.2, 141.9, 128.8, 128.7, 128.5, 128.4, 128.2, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 127.3, 127.2, 73.1, 67.5, 61.8, 57.3, 46.6, 37.1, 35.9, 32.5, 32.1, 31.4, 30.8, 27.4, 15.2.

Ejemplo de Referencia 28 Datos analíticos de SM-420: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.38-7.25 (m, 10H), 6.16 (s, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 3.98 (m, 2H), 3.75 (m, 1H), 3.42 (m, 1H), 3.24 (m, 1H), 2.68(s, 3H), 2.49 (m, 2H), 2.37-2.32 (m, 1H), 2.15

2.00 (m, 5H), 1.84-1.80 (m, 1H), 1.56 (m, 6H), 1.00 (2d, J = 6.0Hz, 6H), RMN de13C (MeOH-d4,300M Hz) δ 175.4, 172.4, 168.9, 168.6, 142.2, 142.0, 128.7, 128.5, 127.8, 127.7, 127.5, 127.3, 61.8, 57.3, 53.0, 52.0, 46.6, 34.4, 32.5, 31.5, 30.9, 28.0,27.3,22.0,21.9, 15.3.

Ejemplo de Referencia 29

Datos analíticos de SM-421: RMN de 1H (MeOH-d4, 300MHz) δ 8.95 (m, 1H), 7.38-7.14 (m, 15H), 6.17 (m, 1H), 4.85 (m, 1H), 4.56 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.04-3.85 (m, 2H), 3.73 (m, 1H), 3.46 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 2.70 (2s, 3H), 2.62 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.45 (m, 2H), 2.30 (m, 1H), 2.05-1.81 (m, 7H), 1.54 (d, J = 7.2 Hz, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.8, 172.3, 169.0, 168.6, 142.2, 142.1, 141.9, 128.7, 128.5, 128.4, 127.8, 127.5, 127.3, 126.0, 61.8, 57.3, 52.8, 52.0, 46.6, 35.2, 32.9, 32.5, 31.8, 31.4, 30.8, 27.2, 15.3.

Ejemplo de Referencia 30 Datos analíticos de SM-422: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.38-7.25 (m, 10H), 6.18 (s, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.22 (m, 1H), 3.98 (m, 2H), 3.76 (m, 1H), 3.42 (m, 1H), 3.24 (m, 1H), 2.70 (2s, 3H), 2.49 (m, 2H), 2.37-2.32 (m, 1H), 2.15-2.00 (m, 4H), 1.78 (m, 1H), 1.68-1.58 (m, 3H), 1.55 (2d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.27-1.19 (m,2H), 0.95 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 175.3, 172.4, 169.0, 168.6, 142.2, 142.1, 128.7, 128.5, 127.8, 127.7, 127.5, 127.3, 61.8, 57.4, 57.3, 52.9, 51.9, 46.6, 38.7, 32.9, 32.5, 31.3, 30.8, 28.2, 27.3, 23.5, 22.0, 21.9, 15.3.

Ejemplo 31

Datos analíticos de SM-423: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 4.84 (m, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 3.95 (m, 3H),

3.42 (m, 1H), 3.24 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.50 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 2.34 (m, 1H), 2.15-2.00 (m, 10H), 1.65 (m, 1H), 1.55 (2d, J =

7.2 Hz, 3H), 1.16 (m,6H), 1.00 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 172.2, 169.1, 168.6, 61.7, 57.3, 57.2, 56.6, 53.2, 50.3, 46.7, 41.8, 32.7, 32.6, 31.3, 30.8, 27.4, 27.2, 26.0, 25.7, 25.1, 22.0, 21.8, 15.2.

Ejemplo 32

Datos analíticos de SM-425: RMN de 1H (MeOH-d4, 300MHz) δ 7.25-7.18 (m, 4H), 5.36 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.89 (m, 1H),

4.47 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 3.90 (m, 3H), 3.40 (m, 1H), 3.00 (m, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.55-2.41 (m, 3H), 2.38 (m, 2H), 2.15-2.00 (m, 6H), 1.81 (m, 1H), 1.54 (m, 3H), 1.00 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 173.1, 169.1, 168.7, 143.6, 143.4, 128.0, 126.7, 124.7, 124.0, 61.8, 57.3, 56.9, 54.9, 53.1, 51.8, 46.8, 42.1, 41.5, 33.3, 32.7, 31.2, 30.8, 30.0, 27.6, 26.1, 25.9, 22.2, 21.9, 15.2.

Ejemplo 33 Datos analíticos de SM-426: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.64-7.55 (m, 4H), 4.65 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.55 (m, 1H),

4.39 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.22 (m, 1H), 3.98 (m, 2H), 3.76 (m, 1H), 3.42 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.47 (m, 2H), 2.37-2.32 (m, 1H), 2.15-2.00 (m, 6H), 1.83 (m, 1H), 1.54 (m, 3H), 0.95 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 173.5, 169.5, 168.7, 143.6, 143.4, 127.8, 127.5, 125.4, 125.3, 123.0, 61.8, 57.4, 57.2, 56.6, 52.9, 51.8, 46.7, 42.4, 42.1, 41.5, 32.5, 31.3, 30.8, 27.4, 26.2, 23.5, 22.0, 21.9, 15.3.

Ejemplo 34

Datos analíticos de SM-427: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.45 (m, 1H), 7.20-7.10 (m, 3H), 5.07 (m, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.22 (m, 1H), 3.98 (m, 3H), 3.48 (m, 1H), 2.89 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.55 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.44 (m, 1H), 2.30-1.78 (m, 11H), 1.55 (m, 3H), 1.00 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 172.7, 169.5, 168.5, 137.6, 136.9, 128.8, 127.1, 126.0, 61.9, 57.3, 56.7, 53.2, 51.9, 46.7, 42.1, 41.5, 32.6, 31.2, 30.8, 29.3, 27.4, 26.1, 22.2, 21.9, 20.8,

15.2.

Ejemplo 35 Datos analíticos de SM-429: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 MHz) δ 7.64 (m, 3H), 7.53-7.32 (m, 6H), 4.87 (m, 1H), 4.55-4.40 (m, 3H), 4.23 (m, 1H), 3.98 (m, 2H), 3.82 (m, 1H), 3.38 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.46 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.33 (m, 1H), 2.15-1.78 (m, 7H), 1.53 (2d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.98 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.8, 173.2, 169.6, 168.7, 141.7, 141.2, 139.6, 129.2, 128.9, 127.5, 127.1, 126.1, 125.9, 61.8, 57.2, 56.5, 53.0, 51.8, 46.7, 43.2, 42.1, 41.5, 35.0, 32.6, 31.2, 30.8, 27.3, 26.0, 22.2, 21.9, 15.3.

Ejemplo 36

Datos analíticos de SM-430: RMN de 1H (MeOH-d4, 300MHz) δ 8.05 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.81 (d, J= 8.1Hz, 1H), 7.57-7.43 (m, 4H), 4.87-4.80 (m, 3H), 4.49 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 3.98 (m, 2H), 3.85(m, 1H), 3.43 (m, 1H), 2.71 (s, 3H),

2.50 (d, J =6.9Hz, 2H), 2.33 (m, 1H), 2.15-1.78 (m, 7H), 1.53 (2d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.99 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 173.0, 169.3, 168.7, 134.3, 133.9, 131.7, 128.8, 128.2, 126.4, 125.8, 125.5, 123.4, 61.8, 57.3, 56.7, 53.1, 51.8, 46.7, 42.1, 41.4, 41.3, 35.0, 32.6, 31.1, 30.8, 27.3, 26.2, 22.2, 21.9, 15.2.

Ejemplo 37

Datos analíticos de SM-431: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.45 (m, 1H), 7.25-7.17 (m, 3H), 5.40 (t, J= 7.8 Hz, 1H),

4.88 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 3.98 (m, 3H), 3.40 (m, 1H), 3.00 (m, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.55 (m, 2H), 2.44 (m, 1H),

2.34 (m, 2H), 2.15-2.00 (m, 6H), 1.81 (m, 1 H), 1.53 (m, 3H), 1.00 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 173.1, 169.5, 168.6, 143.6, 143.3, 127.8, 126.5, 124.5, 61.9, 57.3, 56.6, 54.8, 53.2, 51.8, 46.7, 42.1, 41.5, 35.1, 33.4, 32.6, 31.2, 30.8, 30.0, 27.4, 26.1, 22.2, 21.9, 15.2.

Ejemplo 38 Datos analíticos de SM-432: RMN de 1H (MeOH-d4, 300MHz) δ 7.38-7.25 (m, 10H), 4.80 (m, 1H), 4.32 (m, 2H), 4.18 (m, 1H), 3.98(m, 2H), 3.87 (m, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.49 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.50 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.32 (m, 1H), 2.15-1.74 (m, 7H), 1.56 (m, 3H), 1.00 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 173.0, 169.1, 168.6, 142.8, 128.6, 128.4, 128.1, 126.7, 61.8, 57.2, 56.7, 53.1, 50.9, 46.7, 44.0, 42.0, 41.5, 32.6, 30.8, 27.1, 26.1, 22.2, 21.9, 15.2.

Ejemplo 39

Datos analíticos de SM-433: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.54-7.22 (m, 9H), 4.86 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.4-4.19 (m, 3H), 4.09-3.84 (m, 3H), 3.40 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.49 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.33-1.74 (m, 8H), 1.53 (2d, J= 6.9 Hz, 3H), 0.98 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 173.1, 169.3, 168.7, 141.9, 141.2, 135.6, 130.0, 129.2, 128.3, 128.1, 127.8, 127.3, 61.8, 57.3, 56.9, 53.2, 51.8, 46.7, 42.0, 41.5, 41.3, 35.0, 32.6, 31.2, 30.8, 27.3, 26.0, 22.2, 21.9, 15.2.

Ejemplo 40 Datos analíticos de SM-434: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.60 (m, 4H), 7.38 (m, 4H), 7.30 (m, 1H), 4.86 (m, 1H), 4.57-4.36 (m, 3H), 4.22 (m, 1H), 4.04-3.89 (m, 3H), 3.42 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.49 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.35-1.79 (m, 8H),

1.53 (2d, J= 6.9 Hz, 3H), 0.98 (m, 6H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.7, 173.2, 169.2, 168.7, 141.1, 140.3, 138.0, 128.9, 128.0, 127.3, 127.1, 126.9, 61.8, 57.3, 56.9, 53.1, 51.8, 46.7, 42.8, 42.1, 41.5, 35.2, 32.6, 31.2, 30.8, 27.4, 26.0, 22.2,21.9, 15.2.

Ejemplo de Referencia 41

Datos analíticos de SM-227: RMN de 1H (300 MHz, D2O) δ 7.34-7.12 (m, 10H), 5.92 (brs, 1H), 5.23 (dd, J = 12.06, 5.34 Hz, 1H), 4.65 (m, 1H), 4.50 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.52 (m, 1H), 3.45 (m, 1H), 3.31 (m, 1H), 3.13 (m, 1H), 2.58 (s, 3H), 2.36 (m, 1H), 2.20-1.72 (m, 5H), 1.41 (d, J = 7.05 Hz, 3H); RMN de13C (75 MHz, D2O) δ 173.93, 170.10, 168.28, 140.81, 140.63, 129.37, 128.33, 128.24, 127.53, 61.31, 59.11, 58.52, 57.15, 48.68, 47.50, 46.10, 31.82, 31.26, 30.94, 27.13, 15.46.

Ejemplo 42

Datos analíticos de SM-211: RMN de 1H (300 MHz, D2O) δ 7.23-7.02 (m, 10H), 5.85 (s, 1H), 4.70 (m, 1H), 4.32 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.65-3.20 (m, 4H), 2.90-2.70 (m, 2H), 2.27-2.03 (m, 3H), 2.01-1.43 (m, 8H), 1.36 (d, J = 6.90 Hz, 3H),

0.78 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 0.76-0.70 (m, 6H); RMN de13C (75 MHz, D2O) δ 176.89, 173.57, 170.10, 170.06, 142.14, 142.08, 129.86, 129.77, 128.72, 128.62, 128.35, 128.21, 62.77, 58.54, 56.95, 49.58, 49.29, 48.82, 48.72, 48.43, 48.14, 43.00, 31.92, 26.74, 22.83, 22.64, 20.33, 16.55, 11.20.

Ejemplo 43 Datos analíticos de SM-212: RMN de 1H (300 MHz, D2O) δ 7.37-7.16 (m, 10H), 6.12 (m, 1H), 4.82 (m, 1H), 4.56 (m, 1H),

4.20 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.42-3.25 (m, 2H), 2.52-1.70 (m, 14H), 1.52 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.98 (t, J = 7.5 Hz, 6H); RMN de13C (75 MHz, D2O) δ 176.45, 173.01, 169.39, 168.33, 141.38, 141.23, 129.27, 129.16, 128.10, 127.73, 127.55, 127.52, 62.77, 62.11, 57.92, 57.01, 52.49, 51.96, 47.58, 46.71, 41.39, 31.82, 27.26, 26.29, 23.69, 22.14,

8.50.

Ejemplo 44

Datos analíticos de SM-213: RMN de 1H (300 MHz, D2O) δ 7.38-7.20 (m, 10H), 6.05 (s, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.62 (m, 1H), 4.53 (m, 1H), 4.36-4.10 (m, 2H), 3.95-3.40 (m, 4H), 3.28-3.10 (m, 1H), 2.50-1.75 (m, 9H), 1.59 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.01-1.85 (m, 6H); RMN de13C (75 MHz, D2O) δ 177.09, 173.01, 169.46, 167.43, 141.52, 141.39, 129.24, 129.16, 128.11, 127.96, 127.78, 127.64, 61.80, 58.06, 57.17, 56.51, 51.72, 49.30, 48.73, 48.25, 47.87, 41.42, 27.32, 26.29, 22.25, 22.15, 21.88, 15.92.

Ejemplo de Referencia 45 Datos analíticos de SM-209: RMN de 1H (300 MHz, D2O δ 7.22-7.05 (m, 4H), 6.95-6.77 (m, 4H), 5.90 (s, 1H), 4.90 (m, 1H), 4.45 (m, 1H), 4.13 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 3.85-3.60 (m, 1H), 3.50-3.10 (m, 3H), 2.80 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.30-1.60 (m, 6H), 1.46 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.12-0.85 (m, 6H); RMN de13C (75 MHz, D2O) δ 180.27, 172.52, 169.36, 160.48, 137.37, 137.19, 129.55, 129.45, 115.81, 115.53, 61.98, 57.32, 56.43, 51.92, 49.98, 46.81, 35.07, 32.70, 31.30, 30.82, 27.44, 19.18, 18.76,

15.53.

Ejemplo 46

Datos analíticos de SM-210: RMN de 1H (300 MHz, D2O) δ 7.22-7.03 (m, 4H), 6.95-6.80 (m, 4H), 5.90 (s, 1H), 4.82 (m, 1H),

4.35 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.82-3.15 (m, 4H), 2.60 (s, 3H), 2.30-1.50 (m, 9H), 1.42 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.82

0.65 (m, 6H); RMN de13C (75 MHz, D2O) δ 176.09, 172.70, 169.50, 160.53, 137.27, 137.14, 129.49, 129.35, 115.92, 115.84, 115.80, 115.62, 62.10, 61.80, 58.07, 56.54, 52.26, 46.59, 42.28, 41.38, 32.40, 31.35, 27.43, 25.98, 22.16, 15.59.

Ejemplo 47

Datos analíticos de SM-230: RMN de 1H (300 MHz, D2O) δ 7.32-7.16 (m, 3H), 7.12-7.05 (m, 2H), 5.02 (m, 1H), 4.32-4.12 (m, 3H), 4.02-3.20 (m, 5H), 3.10 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.28-1.52 (m, 12H), 1.42-1.39 (m, 3H), 0.82-0.60 (m, 6H).

Ejemplo 48 Ejemplo 49

Ejemplo de Referencia 50

Ejemplo de Referencia 51

Datos analíticos de SM-437: RMN de 1H (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 7.45 (m, 1H), 7.30 (m, 4H), 7.14 (m, 1H), 7.02-6.84 (m, 2H), 5.43 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.00-3.77 (m, 4H), 3.56 (m, 1H), 3.40 (m, 1H), 3.00 (m, 6H), 2.70 (s, 3H), 2.49 (m, 1H), 2.28 (m, 1H), 2.00-1.75 (m, 6H), 1.54 (d, J = 6.6 Hz, 3H), RMN de13C (MeOH-d4, 300 M Hz) δ 174.1, 173.0, 169.1, 168.5, 143.6, 143.2, 137.4, 130.6, 127.7, 126.5, 124.5, 124.4, 62.1, 57.3, 54.8, 52.6, 51.6, 46.6, 35.1, 33.4, 32.4, 31.4, 30.8, 30.0, 27.5, 15.2.

Ejemplo 52

Unión de inhibidores a XIAP

Para probar la capacidad de unión de los miméticos de Smac conformacionalmente restringidos en las proteínas IAP, se desarrolló un ensayo de unión in vitro sensible y cuantitativo usando el método basado en la polarización fluorescente y usó para determinar la afinidad de unión de los miméticos de Smac a la proteína XIAP (Nikolovska-Coleska y otros, Anal. Biochem. 332:261-73 (2004)). En este ensayo, 5-carboxifluoresceína (5-Fam) se acopló a la cadena lateral de lisina del péptido Smac mutado, AbuRPF-K-(5-Fam)-NH2(denominado SM5F). El valor Kd de la unión del péptido SM5F a la proteína XIAP BIR3 se determinó siendo 17.92 nM, lo que muestra que este péptido se une al bolsillo superficial de la proteína XIAP con alta afinidad. La proteína recombinante XIAP BIR3 de la XIAP humano (residuos 241-356) fusionada a His-tag fue estable y soluble, y se usó para el ensayo de unión basado en FP.

Los experimentos de unión a FP dependiente de la dosis se llevaron a cabo con diluciones seriadas de los compuestos probados en DMSO. Una muestra de 5 µl de las muestras probadas y la proteína XIAP BIR3 (30 nM) y el péptido SM5F (5 nM) preincubadas en el tampón de ensayo (100 mM de fosfato de potasio, pH 7.5; 100 µg/ml de gamma globulina bovina; azida sódica al 0.02%, adquiridos de Invitrogen ™ Life Technology), se añadieron en placas Dynex de 96-pocillos, fondo redondo, negras (Fisher Scientific) para producir un volumen final de 125 µl. En cada ensayo, se incluyeron el control de péptido unido que contiene la proteína recombinante XIAP BIR3 y SM5F (equivalente a 0% de inhibición) y el control de péptido libre que contiene sólo SM5F libre (equivalente a 100% de inhibición). Los valores de polarización se midieron después de 3 horas de incubación cuando la unión alcanzó el equilibrio usando un lector ULTRA (Tecan U.S. Inc., Research Triangle Park, NC). Los valores de IC50, concentración del inhibidor en la que se desplaza el 50% del péptido unido, se determinaron a partir de un gráfico usando el análisis no-líneal de mínimos cuadrados. El ajuste de curva se realizó usando el usando el programa GRAPHPAD PRISM (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA).

Alternativamente, en un procedimiento optimizado, los experimentos FP se realizaron en las placas Mucrofluor®, ThermoLabsystems, de fondo redondo, negras (Fisher Scientific) usando el lector de placas Ultra (Tecan, Research Triangle Park, NC). Los experimentos de unión dependiente de la dosis se llevaron a cabo con diluciones seriadas de los compuestos activos. Una muestra de 5 µl del compuesto probado y XIAP BIR3 (30 nM) y el péptido SM5F Smac-Flu (5 nM) preincubados en el tampón de ensayo (100 mM fosfato de potasio, pH 7.5; 100 ug/ml de gamma globulina bovina; azida sódica al 0.02%), se añadieron en 96-pocillos para producir un volumen final de 125 µl. En cada ensayo, los controles negativos que contienen XIAP-BIR3 y SM5F Smac-Flu (equivalentes a 0% de inhibición) y controles positivos que contienen sólo el péptido Smac-Flu (equivalente a 100% de inhibición) se incluirán en cada placa de ensayo. Las placas se mezclaron en un agitador durante 15 min e incubaron a temperatura ambiente durante 1-3 h. Los valores de polarización se midieron en la longitud de onda de excitación a 485 nm y longitud de onda de emisión a 530 nm. Los porcentajes de inhibición se derivaron de la ecuación % inhibición = 100[1-(mP -mPf)/(mPb -mPf)], donde mPfes el control del péptido libre (mP mínimo) y mPb es el control del péptido unido (mP máxima). Se determinó la IC50, concentración del inhibidor en la que se desplaza el 50% del péptido unido, del gráfico usando análisis no-lineal de mínimos cuadrados, y el ajuste de curva se realizó usando el programa GraphPad Prism®. El valor de Ki de un mimético de Smac se derivó del valor de IC50 medido y el valor de Kd de SM5F usando un método matemático y programa desarrollado específicamente para los ensayos basados en FP.

Cuando se probaron en el ensayo de unión, los miméticos de Smac conformacionalmente restringidos descritos en la presente invención presentaron afinidad de unión fuerte por la proteína XIAP BIR3 como se muestra en la Tabla 2. Estas afinidades de unión fueron más de 10 veces mejores que la afinidad de unión del péptido de Smac natural AVPI (sec. con núm. de ident.: 1) (1,183 ± 441 nM). Estos datos sugieren que los miméticos de Smac conformacionalmente restringidos actuarán como potentes inhibidores de la actividad IAP.

TABLA 2

Ejemplo 53

Unión de los inhibidores a otras proteínas IAP

Para probar la capacidad de unión de los miméticos de Smac conformacionalmente restringidos a otras proteínas IAP (ML-IAP, cIAP1, y cIAP2) se desarrollaron y optimizaron las condiciones del ensayo. El dominio recombinante cIAP1 BIR3 (residuos 253-363), dominio cIAP2 BIR3 (residuos 238-349), y dominio ML-IAP BIR3 (residuos 63-179), fusionados a Histag, se usaron en los ensayos de unión. Ensayos de unión competitivos de otras proteínas IAP se realizaron de manera similar como descrito para XIAP BIR3. En resumen, se usó el mismo péptido trazador de alta afinidad SM5F Smac-Flu que se une a cIAP1, cIAP2, y ML-IAP con alta afinidad: 4.1 nM, 6.6 nM, y 160 nM, respectivamente. En el ensayo competitivo se usaron la siguiente concentración de proteína y trazador: 10 nM de cIAP1 y 2 nM de SM5F, 25 nM de cIAP2 y 2 nM de SM5F, 300 nM de ML-IAP y 5 nM de SM5F

Ejemplo 54

Inhibición del crecimiento celular con miméticos de Smac conformacionalmente restringidos

El efecto de los compuestos descritos en la presente invención sobre el crecimiento de varias lineas celulares de cáncer se probó. Las células se sembraron en placas de cultivo celular de 96-pocillos fondo plano a una densidad de 3000 células/pocillo con un compuesto probado e incubado a 37°C en una atmósfera de 95% de aire y 5% de CO2 durante 4 dìas. La velocidad de inhibición del crecimiento celular después del tratamiento con diferentes concentraciones del compuesto se determinó usando un estuche de WST-8 sal monosódica de (2-(2-metoxi-4-nitrofenil)-3-(4-nitrofenil)-5-(2, 4 disulfofenil)-2Htetrazolio; Dojindo Molecular Technologies, Inc., Gaithersburg, Mariland). WST-8 se añadió a una concentración final de 10% en cada pocillo, y después las placas se incubaron a 37°C durante 2-3 horas. La absorbancia de las muestras se midió a 450 nm usando un lector ULTRA Tecan (Dispositivo Molecular). La concentración del compuesto probado que inhibe el crecimiento celular en 50% (IC50) se calculó comparando la absorbancia en las células no tratadas y las células tratadas con el compuesto probado.

Los compuestos de la presente invención, cuando probado contra la línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB2131, presentaron actividad inhibidora fuerte como se muestra en la Tabla 3, lo que sugiere que los compuestos son potentes inhibidores del crecimiento de células cancerosas. Los compuestos, cuando probado contra la línea celular de cáncer de ovario SK-OV-3, fueron más potentes aun (Tabla 3).

TABLA 3

cáncer de ovario SK-OV-3 (Tabla 4). Las células se trataron con YP-337 durante 48 horas y la viabilidad celular se determinó usando el ensayo de exclusión con azul tripán. Tabla 4

: % aproximado de muerte celular después de 48 h

Concentración (nM): MDA-MB-231 SK-OV-3

control: <5% <5%

0.1: 10% 20%

1: 35% 40%

10: 60% 65%

100: 75% 75%

Ejemplo 56

Actividad anti-tumoral de sm-406 (AT-406) en el modelo de xenoinjerto de cáncer de mama

La capacidad de SM-406 (AT-406) para actuar como agente anti-tumoral se ensayó en el modelo(ratones desnudos) de xenoinjerto de cáncer de mama MDA-MB-231. SM-406 (AT-406) se administró cada día X 5 por semana durante dos semanas. Como se ilustra en la Fig. 1, SM-406 (AT-406) a dosis de 30, 100 y 200 mg/kg de SM-406 (AT-406) mostró actividad anti-tumoral. Se observó de pérdida de peso dependiente de la dosis hasta 11 % en 100 y 200 mg/kg.

Ejemplo 57

Actividad anti-tumoral de sm-406 (at-406) y taxotere en modelo de xenoinjerto de cáncer de próstata

La capacidad de SM-406 (AT-406) para actuar como un agente anti-tumoral solo y en conjunto con Taxotere se probó en el modelo (ratones desnudos) de xenoinjerto de cáncer de próstata PC-3. SM-406 (AT-406) se administró cada día X 5 por semana, taxotere una vez por semana, durante dos semanas. Como se ilustra en la Fig. 2, SM-406 (AT-406) a dosis de 100 y 200 mg/kg mostró actividad anti-tumoral. Adicionalmente, SM-406 (AT-406) (100 mg/kg) en conjunto con taxotere (8 mg/kg) mostró actividad anti-tumoral mejorada.

Ejemplo 58

Actividad anti-tumoral de sm-406 (at-406) y tykerb® en modelo de xenoinjerto de cáncer de próstata

La capacidad de SM-406 (AT-406) para actuar como un agente anti-tumoral solo y en conjunto con Tykerb® se probó en el modelo (ratones desnudos) de xenoinjerto de cáncer de próstata PC-3. SM-406 (AT-406) se administró cada día X 5 por semana, Tykerb®dos veces por día X 5 por semana durante dos semanas. Como se ilustra en la Fig. 3, SM-406 (AT-406) a dosis de 100 y 200 mg/kg mostró actividad anti-tumoral. Adicionalmente, SM-406 (AT-406) (100 mg/kg) en conjunto con Tykerb® (90 mg/kg) mostró actividad anti-tumoral mejorada.

Ejemplo 59

Actividad anti-tumoral de sm-406 (at-406) y taxotere en modelo de xenoinjerto de cáncer de mama

La capacidad de SM-406 (AT-406) para actuar como un agente anti-tumoral solo y en conjunto con taxotere se probó en el modelo de xenoinjerto de cáncer de mama 2LMP. SM-406 (AT-406) se administró cada día X 5 por semana, taxotere una vez por semana, durante dos semanas. Como se ilustra en la Figura 4, SM-406 (AT-406) a dosis de 100 mg/kg mostró actividad anti-tumoral. Adicionalmente, SM-406 (AT-406) (100 mg/kg) en conjunto con taxotere (12 mg/kg) mostró actividad anti-tumoral.

Ejemplo 60

Actividad anti-tumoral de sm-406 (at-406) y tykerb® en modelo de xenoinjerto de cáncer de mama

La capacidad de SM-406 (AT-406) para actuar como un agente anti-tumoral solo y en conjunto con Tykerb® se probó en el modelo de xenoinjerto de cáncer de mama 2LMP. SM-406 (AT-406) se administró cada día X 5 por semana, Tykerb® cada día durante dos semanas. Como se ilustra en la Fig. 5, SM-406 (AT-406) a dosis de 30, 100 y 200 mg/kg mostró actividad anti-tumoral. Adicionalmente, SM-406 (AT-406) (30, 100 y 200 mg/kg) en conjunto con Tykerb®(90 mg/kg) mostró actividad anti-tumoral mejorada.

Ejemplo 61

Actividad anti-tumoral de SM-406 (AT-406) en el modelo de xenoinjerto de cáncer pancreático

La capacidad de SM-406 (AT-406) para actuar como un agente anti-tumoral se probó en el modelo de xenoinjerto de cáncer pancreático Panc-1. SM-406 (AT-406) se administró cada día X 5 por semana. Como se ilustra en la Fig. 6, SM-406 (AT406) a dosis de 30 y 100 mg/kg mostró actividad anti-tumoral.

Ejemplo 62 Optimización del esquema de dosis de sm-406 (at-406) en el modelo de xenoinjerto de cáncer de mama

Como se ilustra en la Fig. 7, los estudios dirigidos hacia la optimización del esquema de dosificación de SM-406 (AT-406) en el modelo (ratones desnudos) de xenoinjerto de cáncer de mama MDA-MB-231 se llevaron a cabo usando 200 mg/kg de SM-406 (AT-406). La administración cada día X 5, 1-5 días por semana, cada día X 3, 1-3 días por semana o una vez por semana produjo actividad anti-tumoral. La pérdida de peso corporal fue menor en la dosificación semanal (<5%) en comparación con los otros esquemas de dosificación.

Ejemplo 63

Actividad in vitro de sm-406 en lineas celulares de cáncer

La capacidad de SM-406 para inhibir el crecimiento celular como único agente se probó en la línea celular de cáncer de mama MDA-MB-231, líneas celulares de cáncer de ovario SK-OV-3 y OVCAR-4, y línea celular de cáncer de melanoma SK-Mel-2. Las células se trataron durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 8, SM-406 inhibió las cuatro lineas celulares de cáncer con valores de IC50 de 82 nM, 238 nM, 6638 nM y 926 nM para MDA-MB-231, SK-OV-3, SK-Mel-2 y OVCAR-4, respectivamente.

Ejemplo 64

Actividad in vitro de sm-406 en lineas celulares de cáncer

La capacidad de SM-406 para inhibir el crecimiento celular como único agente se probó en las lineas celulares de leucemia HL-60 y SR. Las células se trataron durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 9, SM-406 inhibió ambas lineas celulares con valores de IC50 de 58 nM y 7290 nM, respectivamente.

Ejemplo 65

Actividad in vitro de sm-406 en lineas celulares de cáncer

La capacidad de SM-406 para inhibir el crecimiento celular como único agente se probó en las lineas celulares de cáncer de mama humano BT-549, MDA-MB-415, SUM-159, MDA-MB-468, MDA-MB-453 y 2LMP. Las células se trataron durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 10, SM-406 inhibió el crecimiento celular en las seis lineas celulares.

Ejemplo 66

Actividad in vitro de sm-406 en conjunto con tnfα en la linea celular mda-mb-436

La capacidad de SM-406 en conjunto con TNFα, y SM-428 como único agente, para inhibir el crecimiento celular se probó en las lineas celulares de cáncer de mama humano MDA-MB-436. Las células se trataron con TNFα sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de SM-406, o con SM-428 durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 11, SM-406 en conjunto con TNFα mostró inhibición mejorada del crecimiento celular versus tratamiento con sólo TNFα.

Ejemplo 67

Actividad in vitro de sm-406 en conjunto con tnfα en la linea celular sum-159

La capacidad de SM-406 en conjunto con TNFα, y SM-428 como único agente, para inhibir el crecimiento celular se probó en las linea celular de cáncer de mama humano SUM-159. Las células se trataron con TNFα sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de SM-406, o con SM-428 durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 12, SM-406 en conjunto con TNFα mostró inhibición mejorada del crecimiento celular versus tratamiento con sólo TNFα.

Ejemplo 68 Actividad in vitro de sm-406 en conjunto con trail en la linea celular panc-1

La capacidad de SM-406 en conjunto con TRAIL para inhibir el crecimiento celular se probó en la linea celular pancreática humana Panc-1. Las células se trataron con TRAIL sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de SM-406 durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 13, SM-406 en conjunto con TRAIL mostró inhibición mejorada del crecimiento celular versus tratamiento con sólo TRAIL.

Ejemplo 69

Actividad in vitro de sm-406 en conjunto con trail en la linea celular mda-231 (2lmp)

La capacidadde SM-406 en conjunto con TRAIL para inhibir el crecimiento celular se probó en la linea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-231(2LMP). Las células se trataron con TRAIL sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de SM-406 durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 14, SM-406 en conjunto con TRAIL mostró inhibición mejorada del crecimiento celular versus tratamiento con sólo TRAIL.

Ejemplo 70

Actividad in vitro de sm-406 en conjunto con gemcitabina en la linea celular panc-1

La capacidad de SM-406 en conjunto con gemcitabina para inhibir el crecimiento celular se probó en la linea celular pancreática humana Panc-1. Las células se trataron con gemcitabina sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de SM-406 durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 15, SM-406 en conjunto con gemcitabina mostró inhibición mejorada del crecimiento celular versus tratamiento con sólo gemcitabina.

Ejemplo 71

Actividad in vitro de sm-406 en conjunto con mitoxantrona en la linea celular panc-1

La capacidad de SM-406 en conjunto con mitoxantrona para inhibir el crecimiento celular se probó en la linea celular pancreática humana Panc-1. Las células se trataron con mitoxantrona sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de SM-406 durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 16, SM-406 en conjunto con mitoxantrona mostró inhibición mejorada del crecimiento celular versus tratamiento con sólo mitoxantrona .

Ejemplo 72

Actividad in vitro de SM-406 en conjunto con Roscovitina en la linea celular PC3

La capacidad de SM-406 en conjunto con roscovitina (Ros) para inhibir el crecimiento celular se probó en la linea celular prostática humana PC3. Las células se trataron con SM-406 sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de roscovitina durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 17, SM-406 en conjunto con roscovitina inhibió el crecimiento celular.

Ejemplo 73

Actividad in vitro de SM-406 en conjunto con Taxotere en la linea celular MDA-MB-453

La capacidad de SM-406 en conjunto con taxotere (TXT) para inhibir el crecimiento celular se probó en la linea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-453. Las células se trataron con TXT sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de SM-406 durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 18, SM-406 en conjunto con taxotere mostraron inhibición mejorada del crecimiento celular versus tratamiento con sólo taxotere.

Ejemplo 74 Actividad in vitro de sm-406 en conjunto con vp-16 en la linea celular panc-1 La capacidadde SM-406 en conjunto con VP-16 para inhibir el crecimiento celular se probó en la linea celular pancreática

humana Panc-1. Las células se trataron con VP-16 sólo o en conjunto con diferentes concentraciones de SM-406 durante 4 días. El crecimiento celular se determinó usando un ensayo basado en WST. Como se ilustra en la Fig. 19, SM-406 en conjunto con VP-16 mostró inhibición mejorada del crecimiento celular versus tratamiento con sólo VP-16.

Ejemplo 75 Efecto de sm-406 sobre la proteína ciap-1 en las células mda-mb-231 El efecto de SM-406 y SM-428 sobre la proteína cIAP-1 se midió en las células cancerosas MDA-MB-231. Las células se

trataron con SM-406 o SM-428 a diferentes concentraciones e intervalos de tiempo. Los niveles de proteína se analizaron mediante inmunoelectrotransferencia. Como se ilustra en la Fig. 20, SM-406 redujo los niveles de proteína cIAP-1. Ejemplo 76

Efecto de sm-406 sobre las proteínas ciap-1 y ciap-2 en las células sk-ov-3 El efecto de SM-406 y SM-428 sobre las proteínas cIAP-1 y cIAP-2 se midió en las células cancerosas SK-OV-3. Las células se trataron con SM-406 o SM-428 a diferentes concentraciones e intervalos de tiempo. Los niveles de proteína se analizaron mediante inmunoelectrotransferencia. Como se ilustra en la Fig. 21, SM-406 redujo los niveles de proteína cIAP-1 y cIAP-2.

Ejemplo 77 Inducción de apoptosis por sm-406 en las células mda-mb-231 La inducción de apoptosis por SM-406 o SM-428 se midió en las células de cáncer de mama MDA-MB-231. Las células se

trataron con SM-406 o SM-428 en diferentes periodos de tiempo y se analizó la apoptosis mediante la tinción con Anexina V FITC/yoduro de propidio usando un citómetro de flujo. Como se ilustra en la Fig. 22, 3 µM de SM-406 indujo apoptosis en las células de cáncer de mama MDA-MB-231.

Ejemplo 78 Inducción de Apoptosis por SM-406 en las células SK-OV-3 La inducción de apoptosis por SM-406 o SM-428 se midió en las células de cáncer de ovario SK-OV-3. Las células se

trataron con SM-406 o SM-428 a diferentes concentraciones. La apoptosis se analizó mediante la tinción con Anexina V FITC/yoduro de propidio usando un citómetro de flujo. Como se ilustra en la Fig. 23, 0.1, 0.3, 1 y 3 µM de SM-406 indujeron apoptosis en las células de cáncer de ovario SK-OV-3.

Ejemplo 79 Inducción de apoptosis por sm-406 en las células panc-1 La inducción de apoptosis por SM-406 o SM-428 se midió en las células de cáncer pancreático Panc-1. Las células se

trataron con SM-406 o SM-428 a diferentes concentraciones. La apoptosis se analizó mediante la tinción con Anexina V FITC/yoduro de propidio usando un citómetro de flujo. Como se ilustra en la Fig. 24, 0.3, 1 y 3 µM de SM-406 indujeron apoptosis en las células de cáncer pancreático Panc-1.

Ejemplo 80 Actividad anti-tumoral de sm-406 en el modelo de xenoinjerto mda-mb-231

La capacidad de SM-406 para actuar como un agente anti-tumoral se probó en el modelo de xenoinjerto MDA-MB-231 de cáncer de mama humano en ratones con inmunodeficiencia combinada grave (SCID). El tratamiento se inició cuando los tumores crecieron hasta el tamaño promedio de 150 mm3. SM-406 se dio diaria, 5 días una semana durante 2 semanas a través de sonda oral. Taxotere se dio por vía intravenosa (i.v.) una vez por semana durante 2 semanas. Como se ilustra en la Fig. 25, SM-406 mostró actividad anti-tumoral en 30 y 100 mg/kg de PO.

Ejemplo 81

Actividad anti-tumoral de sm-406 en el modelo de xenoinjerto pc-3

La capacidad de SM-406 para actuar como un agente anti-tumoral se probó en el modelo de xenoinjerto PC-3 de cáncer de próstata humano en ratones desnudos. El tratamiento se inició cuando los tumores crecieron hasta el tamaño promedio de 100 mm3. SM-406 se dio diario, 5 días en la semana durante 2 semanas a través de sonda oral entre los días 15-25 y durante otras 2 semanas entre los días 43-53. Taxotere se dio por vía intravenosa (i.v.) una vez por semana durante 3 semanas en los días 16, 23 y 44. Como se ilustra en la Fig. 26, SM-406 sólo o en conjunto con taxotere mostró actividad anti-tumoral.

Ejemplo 82

Actividad anti-tumoral de sm-406 en el modelo de xenoinjerto 2lmp

La capacidad de SM-406 para actuar como un agente anti-tumoral se probó en el modelo de xenoinjerto 2LMP de cáncer de mama humano en ratones desnudos. SM-406 se dio diario durante 10 días ya sea por vía intraperitoneal (i.p.) u oral (p.o.) entre los días 16-26. Taxotere se dio por vía intravenosa (i.v.) una vez por semana durante 2 semanas. El ligando inductor de apoptosis asociado al factor de necrosis tumoral (TNF) (TRAIL) se administró por vía i.p. una vez al día durante 10 días entre los días 16-26. Como se ilustra en la Fig. 27, SM-406 sólo o en conjunto con TRAIL mostró actividad anti-tumoral.

Ejemplo 83

Unión de sm-406 a los dominios bir3 de las proteínas iap

Las curvas de unión competitiva de SM-406 y SM-428 a los dominios BIR3 de cuatro miembros de las proteínas IAP se determinaron usando un ensayo de unión basado en la fluorescencia polarizada. Las proteínas IAP probadas incluyen: (A) XIAP; (B) cIAP1; (C) cIAP2; (D) ML-IAP. Como se ilustra en la Fig. 28, SM-406 se une a las cuatro proteínas IAP.

Habiendo descrito completamente la invención, entonces se entenderá por los expertos en la técnica que la misma puede realizarse dentro de un intervalo amplio y equivalente de condiciones, formulaciones y otros parámetros sin afectar el alcance de la invención o cualquier modalidad de esta definida mediante las reivindicaciones.

Claims

Reivindicaciones

1. Un compuesto que tiene la Fórmula VI:

en donde:

A1 y A2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo opcionalmente sustituido; X es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo de C1-3 opcionalmente sustituido; T es C=O; U es NR1R2; R1 y R2 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo opcionalmente sustituido, carbocíclico opcionalmente sustituido, heterocíclico opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido y heteroarilo opcionalmente sustituido; R5 es COR7; y R7 es -CH2CH(CH3)2;

o una sal farmacéuticamente aceptable de éste.
2.

El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es alquilo opcionalmente sustituido en donde los sustituyentes opcionales son arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos de C1-6 alquilo, halo, haloalquilo o heteroarilo, R2 es hidrógeno, y R7es -CH2CH(CH3)2, o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.
3.

El compuesto de la reivindicación 1 seleccionado del grupo que consiste de:

y

o una sal farmacéuticamente aceptable de este. 4. Un compuesto seleccionado del grupo que consiste de

y

o la base libre de este u otra sal farmacéuticamente aceptable de este.
5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la Fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
6.

Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable de estos, y un portador farmacéuticamente aceptable.
7.

El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para uso en un método para tratar, mejorar, o prevenir un trastorno sensible a la inducción de apoptosis en un animal
8.

El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para uso en un método para tratar, mejorar, o prevenir el cáncer en un animal.
9.

El compuesto para uso de la reivindicación 8, en donde dicho método para tratar, mejorar o prevenir comprende además administrar un agente contra el cáncer.
10.

El compuesto para uso de la reivindicación 8, en donde dicho método para tratar, mejorar o prevenir comprende además administrar un agonista de TRAIL-R1 o TRAIL-R2.
11.

El compuesto para uso de la reivindicación 10, en donde dicho agonista de TRAIL-R1 o TRAIL-R2 es un anticuerpo.
12.

El compuesto para uso de cualquiera de las reivindicaciones 8-11, en donde dicho cáncer se selecciona del grupo que consiste de cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de próstata, cáncer pancreático, leucemia, melanoma, cáncer de colon, cáncer de hígado, mieloma múltiple, carcinoma de célula renal, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielógena aguda, y sarcoma de tejidos blandos.
13.

El compuesto de cualquier una de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, de uso en un método para prevenir o inhibir la angiogénesis en un animal.
14.

Un estuche que comprende el compuesto de cualquier una de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, e instrucciones para administrar dicho compuesto a un animal.
15.

El estuche de la reivindicación 14, comprende además un agente contra el cáncer.
16.

Un proceso para preparar un compuesto de la Fórmula VI como enumerado en la reivindicación 1 que comprende condensar un compuesto de la Fórmula XII

en donde A1, A2, X, T, y U tienen los significados que se exponen en la reivindicación 1; con R7CO-L, en donde:

V es N;

W es CH;

Y es NHCO;

Z es (CR1R2)r cuando r es 0;

m es 1;

R7 es -CH2CH(CH3)2; y

L es un grupo saliente, para formar un compuesto de la Fórmula VI.