EA016221B1 - Офтальмические композиции и способ лечения аллергических заболеваний глаз - Google Patents

Abstract

В изобретении представлены композиции, наборы и способы для лечения или предупреждения аллергических заболеваний и воспаления глаз и их симптомов, содержащие алкафтадин или его фармацевтически приемлемую соль.

Description

Данное изобретение относится к лечению или предупреждению глазных заболеваний. Более конкретно, изобретение относится к композиции алкафтадина, или 6,11-дигидро-11-(1-метил-4пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновой кислоты, также как и к способам применения таких композиций для лечения или предупреждения воспалительных заболеваний глаз и аллергий.

Родственная заявка

Данная заявка является частичным продолжением непредварительной патентной заявки США, серийный номер 11/688016, которая заявляет приоритет предварительной патентной заявки США, серийный номер 60/788185, озаглавленной Лечение аллергических заболеваний глаз, которая была подана 31 марта 2006 года.

Уровень техники

Аллергические заболевания глазной поверхности включают целый ряд патологических состояний, включая сезонный аллергический конъюктивит (8 АС), хронический (круглогодичный) аллергический конъюктивит (РАС), весенний кератоконъюктивит и атонический кератоконъюктивит. Приблизительно подсчитано, что свыше 20% всего населения страдает от какой-либо формы аллергических заболеваний глаз. Среди них приблизительно 90% страдают от какого-либо из 8АС, РАС или обоих.

Аллергическая реакция глаз является 1дЕ-зависимым (тип I) гиперчувствительным воспалительным ответом, который наиболее часто затрагивает взрослых людей в возрасте от 20 до 40 лет. У восприимчивых людей начальный контакт аллергена с глазной поверхностью стимулирует производство иммунологических антител, специфических к аллергену (1дЕ). Затем 1дЕ связываются с мембраносвязанным рецептором БсеК-1 наивных тучных клеток слизистой глаз. Тучная клетка является гранулоцитом, содержащим ряд преформированных (подготовленных) медиаторов (переносчиков), включая гистамин и протеогликаны. Как только тучная клетка активируется, создаются новые химические медиаторы, которые включают простагландин Ό2, лейкотриены и фактор активации тромбоцитов. Последующий контакт аллергена с тучными клетками, покрытыми 1дЕ, ведет к высвобождению преформированных, а также вновь образованных медиаторов, содержащихся в гранулах тучной клетки.

Клинические симптомы аллергического конъюктивита включают зуд, покраснение, опухание века, отечную припухлость конъюктивы и слезоотделение. Гистамин является первичным медиатором аллергического ответа. После дегрануляции тучной клетки гистамин связывается с рецепторами, расположенными на конъюктиве. Связывание гистамина с рецепторами Н1 на нервных клетках вызывает зуд. Активация рецепторов Н1 и Н2 на эндотелии сосудов вызывает расширение сосудов и повышает их проницаемость, облегчая миграцию воспалительных медиаторов, таких как 1Ь-1а и ТС-1 β, в кровеносный сосуд и последующее привлечение лейкоцитов в ткань конъюктивы. Активация рецепторов гистамина ведет к покраснению глаз, отечной припухлости конъюктивы, опуханию век и экссудации жидкости из кровеносных сосудов в окружающую ткань, что в свою очередь вызывает воспаление. Хемотаксис лейкоцитов, таких как эозинофилы и нейтрофилы, в ткань конъюктивы в свою очередь ведет к дальнейшему повреждению ткани.

Исторически антигистаминные средства являются основой лечения аллергических заболеваний глаз. Эти методы лечения различаются по эффективности, специфичности и продолжительности действия. Противогистаминовые препараты первого поколения, такие как фенирамин и антазолин, известны быстротой проявления своего действия. К сожалению, эти соединения также вызывают дискомфортные ощущения в глазах, и их сила действия убывает уже через несколько часов. Антагонисты Н1 второго поколения, такие как левокабастин и эмадастин, вызывают меньший дискомфорт в глазах и продолжительность их действия несколько больше. Однако эти соединения имеют ограниченные противовоспалительные эффекты и малоспособны к подавлению компонентов поздних фаз воспалительного ответа.

В настоящее время наиболее эффективными способами лечения глазных аллергий являются такие препараты, как олопатадин, кетотифен и азеластин, которые имеют как противогистаминные свойства, так и стабилизирующие свойства в отношении тучных клеток. Эти методы лечения обычно хорошо переносимы, и их эффекты могут длиться до 8-12 ч. Хотя и представленные публике как лучшие по сравнению с соединениями, воздействующими только на уникальный компонент аллергического ответа, эти соединения часто не способны облегчить более одного симптома глазной аллергии.

Влияние препарата на покраснение глаз, отечную припухлость конъюктивы и отечность век предлагает значительное усовершенствование существующих методов лечения. Кроме того, так как большинство современных офтальмических противоаллергических средств имеют ограниченную продолжительность действия, необходимо введение препарата дважды в день. Средство местного применения более продолжительного действия будет предпочтительно, так как его можно закапывать один раз в день. Таким образом, необходимы новые способы лечения, которые могут предложить преимущества в таких областях, как эффективность и продолжительность воздействия, в то же время предлагая схожие показатели безопасности. Данное изобретение относится к этим и другим целям.

- 1 016221

Подробное описание изобретения

Изобретение включает способы лечения или предупреждения глазной аллергии посредством введения алкафтадина в глаза пациента. Описанные изобретения основаны, по меньшей мере частично, на удивительном открытии, что алкафтадин лечит или предупреждает ряд различных симптомов глазной аллергии, что делает его особенно полезным для лечения или предупреждения глазной аллергии. Способы, офтальмические композиции и наборы данного изобретения облегчают клинические симптомы глазной аллергии и глазного воспаления с минимальным системным поглощением активного препарата. Эта необычная комбинация свойств, вместе с превосходным профилем безопасности и переносимостью, при составлении для местного введения в глаза делает лекарственное средство особенно полезным для лечения или предупреждения глазной аллергии. Более конкретно, изобретение включает способ лечения или предупреждения клинических симптомов глазной аллергии, включая введение в глаз пациента эффективного количества алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей.

Алкафтадин, также известный под химическим названием 6,11-дигидро-11-(1-метил-4пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]бензазепин-3-карбоксальдегид, имеет следующую химическую формулу:

Н формула I

Соединение и способы его получения раскрыты в патенте И8 5468743, который введен в данный текст ссылкой во всей полноте для всех целей. Предпочтительные способы и офтальмические композиции данного изобретения содержат соединение алкафтадин формулы I, но, альтернативно, оно может присутствовать в виде соли алкафтадина. Фармацевтически приемлемые соли алкафтадина могут быть образованы с органическими и неорганическими кислотами. Подходящие соли включают, но не ограничены ими, уксусную, 4-ацетамидобензойную кислоту, бензолсульфоновую, камфорсульфоновую, лимонную, моногидрат 2,3:4,6-ди-О-изопропилиден-2-кето-Ь-гулоновой кислоты, муравьиную, фумаровую, соляную, бромисто-водородную, молочную, малеиновую, Ь-(-)яблочную, яблочную, малоновую, миндальную, метансульфоновую, нафталинсульфокислоту, азотную, щавелевую, фталевую, фосфорную, пропионовую, ЭЬ-пироглутаминовую, сахарин, салициловую, янтарную, серную, винно-каменную, трифторуксусную, Ь-(+)винно-каменную и толуолсульфоновую кислоты.

Используемый в данном тексте термин глазная аллергия относится к аллергическим расстройствам глазной поверхности, вызванным патогенными аллергенами. Аллергический конъюктивит является предпочтительной глазной аллергией и включает большой ряд патологических состояний, включая сезонный аллергический конъюктивит (8АС), хронический (круглогодичный) аллергический конъюктивит (РАС), весенний кератоконъюктивит и атопический кератоконъюктивит.

Клинические симптомы глазной аллергии включают, но не ограничены ими, глазной зуд, покраснение глаз, опухание век, отечную припухлость конъюктивы, слезоотделение и носовое воспаление, заложенность носа, ринорею, зуд носа и зуд ушей/неба и чихание. Предпочтительно, чтобы способы изобретения лечили или предотвращали не менее двух клинических симптомов, более предпочтительно не менее трех, еще более предпочтительно более четырех. Например, способы изобретения лечат или предотвращают не менее одного из следующих клинических симптомов, связанных с аллергическим конъюктивитом: глазной зуд, покраснение глаз, отечную припухлость конъюктивы, слезоотделение, опухание век, заложенность носа или ринорею. Предпочтительно способы изобретения лечат или предотвращают глазной зуд и покраснение глаз; лечат или предотвращают глазной зуд, покраснение глаз и отечную припухлость конъюктивы; лечат или предотвращают глазной зуд, покраснение глаз, отечную припухлость конъюктивы и слезоотделение; лечат или предотвращают глазной зуд, покраснение глаз, отечную припухлость конъюктивы, слезоотделение и припухлость век; лечат или предотвращают глазной зуд, покраснение глаз, отечную припухлость конъюктивы, слезоотделение, припухлость век и заложенность носа; лечат или предотвращают глазной зуд, покраснение глаз, отечную припухлость конъюктивы, слезоотделение, припухлость век, заложенность носа и ринорею; лечат или предотвращают заложенность носа и ринорею.

Термин пациент при использовании в данном тексте относится к животным, включая млекопитающих, предпочтительно к людям. Эффективное количество алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей, является количеством вещества, необходимым для лечения или предупреждения симптомов глазной аллергии. Эффективное количество может варьировать от пациента к пациенту в зависимости от способности ал

- 2 016221 кафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей, самих по себе либо в сочетании с одним или более совместимым лекарственным средством, вызывать требуемый ответ у пациента. Другие факторы, определяющие эффективное количество, будут включать, но не ограничены ими, стадию заболевания или тяжесть состояния, которое необходимо облегчить, гормональный статус, возраст, пол, вес пациента, самочувствие пациента и тяжесть патологического состояния, которое лечится, одновременно принимаемых лекарственных средств или особых диет, которым следует конкретный пациент, и других факторов, которые признаются специалистом в данной области, с подходящими дозировками, которые в конечном итоге будут устанавливаться лечащим врачом. Схема приема может быть подобрана для повышения эффективности лечения. Эффективное количество также является тем количеством, при котором какие-либо токсические или вредные действия компонентов перевешиваются терапевтически благоприятными эффектами. Предпочтительно, чтобы для большинства пациентов 50 мкл капель 0,25% офтальмологического раствора содержали 0,125 мг алкафтадина. Допуская, что 100% лекарственного средства систематически всасывается, человек весом 70 кг, вводя глазные капли в оба глаза один раз в день, будет подвержен дозе в 0,25 мг/день или 3,57 мкг/кг в день. Целесообразно признать, что действительное системное воздействие будет меньше, так как, скорее всего, не все количество буде поглощено. Предпочтительно, чтобы эффективное количество алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей составляло от менее чем примерно 0,25 мг до более или равно примерно 0,015 мг, более предпочтительно от примерно 0,030 до примерно 0,14 мг, более предпочтительно от примерно 0,075 до примерно 0,125 мг.

Термин фармацевтически приемлемый, применяемый в данном тексте, относится к веществам, которые обычно не являются токсичными или вредными для пациента при применении с алкафтадином, его фармацевтически приемлемыми солями, его Ν-оксидами, гидратами, сольватами, полиморфами, пролекарствами или их смесями согласно данному изобретению, включая ситуации, когда алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси составляются как офтальмические композиции, как определено в данном тексте.

Алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси могут вводиться пациенту любым способом введения, способствующим доставке лекарственного средства в глаз пациента, в любой фармацевтически пригодной лекарственной форме. Таким образом, препарат может быть введен пациенту в форме офтальмической композиции, как определено в данном тексте, или какой-либо иной композиции, приспособлении или механизма, подходящих для кратковременной или долговременной доставки эффективного количества лекарственного средства в глаз пациента. Лекарственное средство может быть назначено пациенту в виде офтальмических вкладышей, содержащих или покрытых алкафтадином, его фармацевтически приемлемыми солями, его Ν-оксидами, гидратами, сольватами, полиморфами, пролекарствами или их смесями, включая, но не ограничиваясь ими, контактные линзы, точечные пробки или глазные вкладыши. В предпочтительных способах данного изобретения лекарственное средство вводят местно в форме офтальмической композиции, выбранной из группы, состоящей из офтальмических растворов или суспензий (то есть глазных капель), офтальмических мазей или офтальмических гелей.

Кроме того, изобретение включает способ лечения или предупреждения клинических симптомов глазного воспаления, включая введение в глаз пациента эффективного количества алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей. Термины алкафтадин, клинический симптом, пациент, фармацевтически приемлемый, фармацевтически приемлемые соли и эффективное количество имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы. Термин глазное воспаление относится к воспалению любой части передней камеры глаз. Подобное глазное воспаление может быть вызвано любой из последующих причин либо их сочетанием: сухость глаз, ношение контактных линз, бактериальные инфекции, грибковые инфекции или вирусные инфекции. Особо рассматриваемыми причинами глазного воспаления являются бактериальные инфекции или вирусные инфекции.

Дополнительно изобретение включает способ лечения или предупреждения механического симптома, связанного с глазной аллергией или глазным воспалением, включая введение в глаз пациента эффективного количества алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей. Термины алкафтадин, пациент, фармацевтически приемлемый, фармацевтически приемлемые соли, эффективное количество, глазная аллергия и глазное воспаление имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Механические симптомы являются клеточными реакциями, которые вызывают либо подавляют симптомы болезненного состояния, такого как глазная аллергия или глазное воспаление. Механические симптомы включают, но не ограничены ими, истечение жидкости из сосудов, нарушение целостности конъюктивальной эпителиальной запирающей зоны, модуляцию рецептора Н₄ и деградацию тучных клеток. Предпочтительные способы изобретения лечат или предотвращают не менее двух механических симптомов, более предпочтительно лечат или предотвращают не менее трех механических симптомов, даже более предпочтительно лечат или предотвращают не менее четырех механических симптомов. На

- 3 016221 пример, предпочтительные способы изобретения лечат или предотвращают истечение жидкости из сосудов и нарушение целостности конъюктивальной эпителиальной запирающей зоны; лечат или предотвращают истечение жидкости из сосудов, нарушение целостности конъюктивальной эпителиальной запирающей зоны и модуляцию рецептора Н₄; лечат или предотвращают истечение жидкости из сосудов, нарушение целостности конъюктивальной эпителиальной запирающей зоны, модуляцию рецептора Н₄ и деградацию тучных клеток.

Более того, изобретение включает способ лечения или предупреждения назальных симптомов глазной аллергии, включая введение пациенту в нос эффективного количества алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей. Термины алкафтадин, пациент, фармацевтически приемлемый, фармацевтически приемлемые соли, глазная аллергия и эффективное количество имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования. Назальные симптомы аллергии являются набором клинических симптомов, как определено выше, и включают носовое воспаление, заложенность носа, ринорею, носовой зуд и чихание. Особо рассматриваемыми назальными симптомами являются ринорея и заложенность носа.

Алкафтадин может вводиться пациенту в форме офтальмической композиции, как определено в данном тексте, или какой-либо иной композиции, приспособлении или механизма, подходящих для кратковременной или долговременной доставки эффективного количества лекарственного средства в нос пациента, предпочтительно в ноздри. В предпочтительных способах данного изобретения алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси вводятся пациенту местно в ноздри в форме офтальмической композиции, выбранной из группы, содержащей офтальмические растворы или суспензии (то есть назальные капли и спреи (распыляемые растворы)), офтальмические мази или офтальмические гели (как определено в данном тексте).

Далее, изобретение включает способ лечения или предупреждения клинического симптома глазной аллергии, включая введение в глаз пациента эффективного количества алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей. Термины алкафтадин, клинический симптом, глазная аллергия, пациент, фармацевтически приемлемый и фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Использованный в данном тексте термин офтальмическая композиция относится к любой фармацевтически приемлемой композиции, приспособлению для доставки препарата, механизму или системе, предназначенным для введения в глаза. Термин офтальмические композиции включает, но не ограничен ими, растворы, суспензии, гели, мази, контактные линзы, импланты, спреи, препараты пролонгированного действия или любой другой тип композиции, приспособления или механизма, пригодного для кратковременной или долговременной доставки алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей в глаз. В отличие от композиций для орального приема или приема путем инъекций офтальмические композиции проявляют специфические технические характеристики, связанные с их введением в глаза, включая применение фармацевтически приемлемых офтальмических носителей, которые не вызывают различные реакции, такие как, например, раздражение конъюктивы и роговицы, смыкание век, слезоотделение и болезненные реакции. Предпочтительные офтальмические композиции согласно изобретению преимущественно находятся в форме офтальмических растворов или суспензий (то есть глазных капель), офтальмических мазей или офтальмических гелей, содержащих алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Νоксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. В зависимости от конкретной выбранной формы композиции могут содержать различные добавки, такие как буферные средства, изотонические средства, растворители, консерванты, средства, повышающие вязкость, хелатирующие агенты, антиоксиданты и регуляторы рН.

Примеры подходящих консервантов включают, но не ограничиваются ими, хлорбутанол, дегидроацетат натрия, бензалконий хлорид, цетилпиридиний хлорид, фенетиловый спирт, эфиры парагидроксибензойной кислоты и бензетоний хлорид. Средства, повышающие вязкость, могут быть выбраны, например, из метилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы, поливинилового спирта, карбоксиметилцеллюлозы, хондроитинсульфата и их солей. Подходящие растворители включают, но не ограничиваются ими, полиоксиэтиленовое гидрогенизированное касторовое масло, полиэтиленгликоль, полисорбат 80 и полиоксиэтилен моностеарат. Обычные хелатирующие агенты включают, но не ограничиваются ими, эдетат натрия, лимонную кислоту, стабилизирующие агенты, определенные в патентной заявке США № 60/783557, поданной 17 марта 2006 года, озаглавленной Способы стабилизации нестабильных к окислению фармацевтических композиций, и соответствующей ей непредварительной подаче, которые настоящим введены ссылкой во всей полноте. Стабилизаторы включают, но не ограничены ими, например, эдетат натрия и кислый сульфит натрия.

Пригодные регуляторы рН обычно выбираются из, например, гидроксида натрия, гидроксида калия, карбоната натрия, лимонной кислоты, фосфорной кислоты, уксусной кислоты и соляной кислоты. рН офтальмических композиций может находится в пределах от примерно 5 до примерно 8, более предпочтительно от примерно 6,5 до примерно 7,5. Еще более предпочтительно, чтобы рН офтальмических ком

- 4 016221 позиций был около 7,0. Пригодные буферы включают, но не ограничены ими, боратные буферы, фосфатные буферы, карбонатные буферы и ацетатные буферы. Концентрация буфера в офтальмической композиции может варьировать от примерно 1 до примерно 150 мМ или более в зависимости от конкретного выбранного буфера. Предпочтительно концентрация буфера составляет менее 100, более предпочтительно от примерно 1 до примерно 25 мМ, с наиболее предпочтительной концентрацией от примерно 1 до примерно 20 мМ.

Используемый в данном тексте термин носитель предполагает любой носитель, растворитель или наполнитель, пригодный для применения в офтальмологии. Наполнитель относится к компоненту, который обеспечивает одну или более из следующих функций: создает объем, придает удовлетворительные технологические характеристики, помогает контролировать скорость растворения и иным способом придает композициям дополнительные требуемые свойства. Среди прочих, под этим термином подразумеваются соединения, хорошо известные специалистам в данной области, как описано, например, в НапбЬоок οί Рйагтасеибса1 Εχοίρίθηΐδ (Лтспеап Рйагтасеибса1 Аккошабоп, УакЫпЦоп, Ό. С. апб Рйаттасеибса1 Ргекк, Ьопбоп, Епд1апб, 4^4Ь еб. 2003), включенные ссылкой во всей полноте. В частности, наполнители выбираются такие, что офтальмическая композиция не запускает секрецию слез, которые будут вымывать активный компонент. Подходящие наполнители хорошо известны специалисту в данной области, который будет знать, как их подобрать в зависимости от требуемой композиции.

Когда концентрации, количества, процентные отношения и другие числовые данные выражены или представлены в данном тексте в диапазоне величин, следует понимать, что такой диапазон величин применяется только для удобства и краткости и, таким образом, должен быть интерпретирован с целью не только обозначить четко указанные числовые величины как пределы диапазона, но также включать любую конкретную числовую величину или поддиапазон, входящие в данный диапазон, как будто каждая числовая величина или поддиапазон изложены в явном виде. В качестве иллюстрации диапазон концентрации примерно от 1 до примерно 10 вес.% должен интерпретироваться как включающий не только явно обозначенные концентрации примерно от 1 до примерно 10 вес.%, но также конкретные концентрации и поддиапазоны внутри указанного диапазона. Таким образом, включенными в этот числовой диапазон оказываются конкретные концентрации, такие как 2, 5 и 8 вес.%, и поддиапазоны, такие как от 1 до 3 вес.%, от 5 до 9 вес.%, и прочие. При использовании в данном тексте термин примерно означает плюс или минус приблизительно десять процентов указанного значения, так что примерно 50 вес.% обозначает приблизительно от 45 до 55 вес.%.

Обычно концентрация алкафтадина в офтальмических композициях данного изобретения будет составлять от примерно 0,005 до примерно 10,0 вес.%, с предпочтительными концентрациями от примерно 0,005 до примерно 0,4% и с особо предпочтительными концентрациями от примерно 0,1% до примерно 0,35%. Капля 50 мкл 0,25% глазного раствора содержит 0,125 мг алкафтадина. Принимая, что 100% лекарственного средства системно всасывается, человек весом 70 кг, принимая глазные капли билатерально, то есть в каждый глаз один раз в день, будет подвергаться воздействию дозы в 0,25 мг/день или 3,57 мкг/кг в день. Целесообразно принять, что действительное системное воздействие будет меньше, так как, скорее всего, не все количество будет всасываться.

Кроме того, изобретение включает способ лечения или предупреждения механического симптома глазной аллергии, включающий введение в глаз пациента офтальмической композиции, содержащей алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины алкафтадин, механический симптом, пациент, фармацевтически приемлемый и фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Более того, изобретение включает способ лечения или предупреждения клинического симптома глазного воспаления, включая введение в глаз пациента офтальмической композиции, содержащей алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины алкафтадин, клинический симптом, пациент, фармацевтически приемлемый и фармацевтически приемлемые соли, глазное воспаление, офтальмическая композиция имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Более того, изобретение включает способ лечения или предупреждения механического симптома глазного воспаления, включая введение в глаз пациента офтальмической композиции, содержащей алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины алкафтадин, механический симптом, пациент, фармацевтически приемлемый, фармацевтически приемлемые соли, глазное воспаление и офтальмическая композиция имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Далее, изобретение включает офтальмическую композицию, содержащую алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины офтальмическая композиция, алкафтадин, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования. Предпочтительно, чтобы указанная офтальмическая композиция далее содержала наполнитель, как определено в данном тексте.

Изобретение также включает применение алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей,

- 5 016221 его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей для изготовления лекарственных препаратов для лечения или предупреждения клинического симптома глазной аллергии. Термины алкафтадин, клинический симптом, глазная аллергия, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Даже более того, изобретение включает применение алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей для изготовления лекарственных препаратов для лечения или предупреждения клинического симптома глазного воспаления. Термины алкафтадин, клинический симптом, глазное воспаление, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Даже более того, изобретение включает применение алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей для изготовления лекарственных препаратов для лечения или предупреждения механического симптома глазной аллергии или глазного воспаления. Термины алкафтадин, механический симптом, глазная аллергия, глазное воспаление, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Более того, изобретение включает набор, содержащий офтальмическую композицию, содержащую алкафтадин, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси, помещенный в контейнер, изготовленный из фармацевтически приемлемого упаковочного материала. Термины офтальмическая композиция, алкафтадин, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования. Фармацевтически приемлемые упаковочные материалы включают, но не ограничены ими, полиэтилен низкой плотности ('ΈΌΡΕ), полиэтилен высокой плотности (ΗΌΡΕ), полипропилен, полистирол, поликарбонат, полиэфиры (такие как полиэтилентерефталат и полиэтиленнафталат), нейлон, поли(винилхлорид), поли(винилиденхлорид), поли(тетрафторэтилен) и другие вещества, известные специалистам в данной области. Особенно предпочтительны пластические флаконы, изготовленные из ΕΌΡΕ или ΗΌΡΕ. Коммерческие источники подобных материалов включают, но не ограничены ими, ΌυΡοηΐ 20 8спс5 8рсс1а11у ро1ус111у1спс. производимый ΌυΡοηΐ, Тепйе Ροϊχ^ΐΐιχ· 1епе 1830Е Ναΐιιπιΐ. производимый Ε;·ΐ5ΐιη;·ιη С11С1шса1 Сотрапу, ΡιιιόΙΙ 1840 Ρο^όΠΙ-ΥΡικ, производимый Ва§е11. Особо предпочтительным материалом является ΌΌΡΟΝΤ™ 20-6064 (Е.1. би Ροηΐ бе №ιηοιΐΓ5 апб ^трапу, ^ίΐιίηβίοη, ΌΕ), предпочтительный упаковочный материал из ΕΌΡΕ, часто применяемый для изготовления пластических флаконов-капельниц, содержащих офтальмические композиции, посредством литья под давлением с раздувкой, и одобренный для подобного применения Управлением по контролю за качеством пищевых продуктов, медикаментов и косметических средств США. Наборы могут содержать множественные дозировки офтальмических композиций, содержащих алкафтадин, либо одноразовые дозы алкафтадина.

Перед заполнением подобные флаконы в соответствии с предписанием стерилизуются гаммаоблучением либо газообразным этиленоксидом способами, широко известными специалистам в данной области. Однако заявители к удивлению обнаружили, что предпочтительна стерилизация флаконов из ΕΌΡΕ с помощью газа этиленоксида, а не гамма-облучения, так как флаконы, стерилизованные гаммаоблучением, могут демонстрировать снижение стабильности активного компонента.

6,11-Дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) имеет следующую химическую формулу:

Соединение формулы II было раскрыто в патенте υδ 5468743. Предпочтительные способы и офтальмические композиции могут содержать соединение формулы II, как изображено, но соединение формулы II может присутствовать в способах и офтальмических композициях в виде фармацевтически приемлемых солей, Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей.

В частности, изобретение охватывает способ лечения или предупреждения клинического симптома глазной аллергии, включая введение в глаз пациента эффективного количества соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей. Термины соединение формулы II, клинический симптом, глазная аллергия, пациент, фармацевтически приемлемый и фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования. Термин эффективное количество соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей является количеством этого вещества, требуемым для лечения или предупре

- 6 016221 ждения симптомов глазной аллергии. Как описано ранее в ссылках на эффективное количество алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей, эффективное количество соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей может варьировать от пациента к пациенту в зависимости от способности соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей, самого по себе или в сочетании с одним или более совместимым лекарственным средством, вызывать желательный эффект у пациента. Факторы, применяемые для определения эффективного количества, известны специалистам в данной области, и некоторые из этих факторов перечислены в данном тексте. Предпочтительно, чтобы эффективное количество соединения формулы II составляло менее примерно 0,25 мг и более или равно примерно 0,015 мг, более предпочтительно между примерно 0,030 и примерно 0,14 мг, более предпочтительно между примерно 0,075 и примерно 0,125 мг.

Далее, изобретение включает способ лечения или предупреждения клинического симптома глазного воспаления, включая введение в глаз пациента эффективного количества соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей. Термины соединение формулы II, клинический симптом, глазное воспаление, пациент, фармацевтически приемлемый, фармацевтически приемлемые соли и эффективное количество имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Дополнительно изобретение включает способ лечения или предупреждения механического симптома, связанного с глазной аллергией или глазным воспалением, включая введение в глаз пациента эффективного количества соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей. Термины соединение формулы II, пациент, фармацевтически приемлемый, фармацевтически приемлемые соли, эффективное количество, механический симптом, глазная аллергия и глазное воспаление имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Более того, изобретение включает способ лечения или предупреждения назального симптома глазной аллергии, включая введение пациенту в нос эффективного количества соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей. Термины соединение формулы II, пациент, фармацевтически приемлемый, фармацевтически приемлемые соли, назальний симптом и эффективное количество имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Далее, изобретение включает способ лечения или предупреждения клинического симптома глазной аллергии, включая введение в глаз пациента офтальмической композиции, содержащей соединение формулы II, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины соединение формулы II, клинический симптом, пациент, офтальмическая композиция, фармацевтически приемлемый и фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Далее, также изобретение включает способ лечения или предупреждения механического симптома глазной аллергии, включая введение в глаз пациента офтальмической композиции, содержащей соединение формулы II, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины соединение формулы II, механический симптом, пациент, фармацевтически приемлемый и фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Кроме того, изобретение включает способ лечения или предупреждения клинического симптома глазного воспаления, включая введение в глаз пациента офтальмической композиции, содержащей соединение формулы II, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины соединение формулы II, клинический симптом, пациент, фармацевтически приемлемый, фармацевтически приемлемые соли, глазное воспаление и офтальмическая композиция имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Даже более того, изобретение включает способ лечения или предупреждения механического симптома глазного воспаления, включая введение в глаз пациента офтальмической композиции, содержащей соединение формулы II, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины соединение формулы II, механический симптом, пациент, фармацевтически приемлемый и фармацевтически приемлемые соли, глазное воспаление, офтальмическая композиция имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Далее, изобретение включает офтальмическую композицию, содержащую соединение формулы II, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси. Термины офтальмическая композиция, соединение формулы II, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования. Предпочтительно, чтобы указанная офтальмическая композиция далее содержала носитель, как определено в данном тек

- 7 016221 сте.

Даже более того, изобретение включает применение соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей в изготовлении лекарственных препаратов для лечения или предупреждения клинического симптома глазной аллергии. Термины соединение формулы II, клинический симптом, глазная аллергия, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Даже более того, изобретение включает применение соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей в изготовлении лекарственных препаратов для лечения или предупреждения клинического симптома глазного воспаления. Термины соединение формулы II, клинический симптом, глазное воспаление, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Даже более того, изобретение включает применение соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов, пролекарств или их смесей в изготовлении лекарственных препаратов для лечения или предупреждения механического симптома глазной аллергии или глазного воспаления. Термины соединение формулы II, механический симптом, глазная аллергия, глазное воспаление, фармацевтически приемлемые соли имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Кроме того, изобретение включает набор, содержащий офтальмическую композицию, содержащую соединение формулы II, его фармацевтически приемлемые соли, его Ν-оксиды, гидраты, сольваты, полиморфы, пролекарства или их смеси, заключенную в контейнер, изготовленный из фармацевтически приемлемого упаковочного материала. Термины офтальмическая композиция, алкафтадин, фармацевтически приемлемые соли и фармацевтически приемлемый упаковочный материал имеют вышеуказанные значения и предпочтительные пределы использования.

Примеры

Далее изобретение продемонстрировано следующими примерами. Примеры приведены с целью иллюстрации и не предназначены для ограничения объема данного изобретения.

Пример 1. Офтальмические растворы алкафтадина.

Офтальмические растворы, содержащие алкафтадин, были приготовлены в соответствии с табл. 1. Для обеспечения стерильности растворы были пропущены через 0,22-микронный стерилизующий фильтр перед наполнением в флаконы ЬОРЕ, которые предварительно подвергались стерилизации с помощью этиленоксида.

Таблица 1

КОМПОНЕНТ	Концентрация мг/мл	Концентрация мг/мл	Концентрация мг/мл
Алкафтадин	1,0	2,5	5,0
Вторичный кислый фосфат натрия (СЗР)	11,1	пд	11,1
Первичный кислый фосфат калия (ΝΡ)	5,1	5,3	5,6
Хлорид натрия (и$Р)	2,4	2,3	2,1
Бензалконий хлорид (№)	0,2	0,2	0,2
Динатрий эдетат (ϋ3Ρ)	1Д	1,1	1Д
Очищенная вода (иЗР)	Сколько требуется	Сколько требуется	Сколько требуется

Пример 2. Противоаллергическая активность.

Влияние алкафтадина на реакции острой фазы аллергического конъюктивита (отечность и покраснение) сравнивалось с воздействием других известных антиаллергенов у морских свинок, которые системно сенсибилизировались чешуйками кожи кролика и через 17 дней были местно аллергизованы кроличьими аллергенами.

Анестезированным самцам морских свинок-альбиносов (Пипкт-НагИеу), которые весили примерно от 230 до 250 г, вводились внутримышечно в левую четырехглавую мышцу инъекции 50 мкл очищенных кроличьих аллергенов. Кроличьи аллергены состоят из А1(ОН)₃-адсорбированных кроличьих чешуек (На1аЬ, Вги88е18, Ве1дшт), которые были гомогенизированы и дочиста отмыты от консерванта (0,5% (вес./вес.) фенол) стерильным физиологическим раствором.

Алкафтадин вводили в каждый глаз в диапазоне доз от 0,005 до 1,0 мг/кг за 24 и 1 ч перед стимуляцией аллергеном. Другие анализируемые соединения включали оксатомид, кетотифен, астемизол, цетиризин, лоратадин и терфенадин, вводимые в дозировках 0,1 и 1,0 мг/кг.

На 17 день после сенсибилизации в левый глаз закапывали 25 мкл 100% нормальной сыворотки кролика. В то же время, когда происходила индукция аллергеном, в правый глаз закапывали 25 мкл раствора 1,5 мг/мл дигидрохлорида гистамина (98%, §1дта) в деионизованной воде, профильтрованной через ультратонкий фильтр.

- 8 016221

Через 30 мин после индукции опытным лаборантом оценивались отечность и покраснение в тарзальной конъюктиве и конъюктиве глазного яблока обоих глаз и выражались как отсутствующие (0), слабые (1), средние (2), жесткие (3) или очень жесткие (4). Алкафтадин значительно облегчает острые аллергические симптомы, начиная с доз в 0,1 мг/кг. В этом исследовании алкафтадин был установлен как более эффективное средство (на основе эквивалентных доз мг/кг) чем оксатомид, кетотифен и терфенадин и значительно более эффективное по сравнению с астемизолом, цетиризином и лоратадином.

Пример 3. Действие вводимого местно алкафтадина на аллергический конъюктивит.

Было показано, что алкафтадин предотвращает признаки и симптомы аллергического конъюктивита в мышиной модели активной анафилаксии. Самцы мышей 8^К/1 (Т1е 1аск§ои ЬаЬога1огу, Ваг НагЬог, Маше) возраста 5-7 недель и весом от 12,55 до 17,73 г были сенсибилизированы дозой 100 мкл суспензии с 50 мкг пыльцевого аллергена (Сгеег ЬаЬк, 1пс., Ьеиой, ЫС) и 1 мг гидроксида алюминия (Рщйег 8с1еиБПс. Р1й8Ьигдй, РА) путем внутрибрюшинной инъекции за две недели до лечения и стимуляции аллергеном.

На 14 день мыши сначала подвергались общему обследованию, чтобы убедиться, что они не имеют заметного раздражения до введения лекарственного препарата и стимуляции аллергеном. Затем мышам местно в глаза вводился 0,0625% офтальмический раствор алкафтадина, положительный контроль (офтальмический раствор, содержащий комбинацию кетотифена 0,05% и фенирамина 0,5%) или плацебо (индифферентное вещество), до стимуляции глаз 1,5 мг аллергеном аброзии (АНой г;щ\\'ееб) в фосфатносолевом буфере.

Через 15 мин после стимуляции аллергеном мышей анализировали на наличие клинических признаков аллергического конъюктивита путем оценки покраснения конъюктивы, отека конъюктивы, слезоотделения и отечного блефарита (отека век). Жесткость клинических признаков оценивалась опытным лаборантом с применением стандартизированной шкалы 0-2. Алкафтадин оказался более эффективным, чем положительный контроль, в предупреждении зуда, покраснения, отека конъюктивы и отека век, алкафтадин оказался настолько же эффективным, как и положительный контроль, и более действенным по сравнению с плацебо для предотвращения слезоотделения.

Пример 4. Действие офтальмического раствора алкафтадина на людей.

Противоаллергический эффект однократной дозы офтальмического раствора с каждой из трех концентраций алкафтадина из примера 1 оценивался в конъюктивальной стимуляции аллергеном (САС), проведенной на взрослых добровольцах с историей аллергического конъюктивита. Участники экспериментального исследования были выбраны после двух посещений для подтверждения стимуляции аллергеном. Участники экспериментального исследования считались пригодными для исследования, если они имели положительную аллергическую кожную пробу и глазную реакцию на не менее чем один из нескольких убиквитарных (широко распространенных в природе) аллергенов, таких как кошачья шерсть, кошачья перхоть, пыльца деревьев, пыльца злаковых и тому подобные. Затем участники экспериментального исследования были стимулированы аллергеном путем закапывания восстановленного коммерчески доступного аллергена в каждый глаз во время двух отдельных визитов через 16 ч и 15 мин после билатерального введения алкафтадина, РАТАЫОЬ® офтальмического раствора 0,1% олопатадин гидрохлорида (А1сои, 1ис., Еог111 \Уог1к ТХ) или носителя, и оценивалась клиническая эффективность.

Предупреждение глазного зуда.

Пациенты, принимавшие алкафтадин за 16 ч перед стимуляцией аллергеном, показали дозозависимое подавление глазного зуда. Все концентрации алкафтадина демонстрировали сниженное значение оценки зуда (на основе оценки пациентами по пятибалльной шкале) (то есть меньший зуд), чем носитель или РАТАЫОЬ через 3, 5 и 7 мин после стимуляции аллергеном. При стимуляции аллергеном через 15 мин после обработки пациенты, получавшие алкафтадин, демонстрировали дозозависимое подавление глазного зуда по сравнению с плацебо и 0,25% исследуемой группы имело более низкий показатель зуда, чем пациенты, принимавшие носитель или РАТАЫОЬ.

Предупреждение покраснения конъюктивы.

Пациенты, принимавшие алкафтадин за 16 ч перед стимуляцией аллергеном, также демонстрировали дозозависимое подавление покраснения конъюктивы. Оценка проводилась через 7, 15 и 20 мин после стимуляции на основе оценок исследователя с использованием пятибалльной шкалы. Все концентрации алкафтадина показали различные степени снижения в значении оценок покраснения конъюктивы в большинстве оценочных временных точках. Когда стимуляция аллергеном проводилась через 15 мин после приема препарата, 0,25% исследуемой группы имело более низкие показатели, чем пациенты, принимавшие носитель или РАТАЫОЬ.

Предупреждение назальных симптомов.

Схожие результаты наблюдались для предупреждения назальных симптомов, вызванных САС. Назальные симптомы чихания, ринореи, зуда (назального и уха/неба) и заложенности носа оценивались участниками исследования с применением стандартизированной шкалы.

Все концентрации алкафтадина демонстрировали некоторую степень облегчения заложенности носа и ринореи в различные временные точки. Эти числа часто достигали статистической значимости против как плацебо, так и в некоторых случаях активного контроля (р<0,05). Схожие результаты были про

- 9 016221 демонстрированы для параметров носового зуда, зуда неба и уха. Никакого влияния на чихание в этом исследовании продемонстрировано не было; однако базисная линия частоты чихания (до воздействия), скорее всего, была слишком низкой, чтобы выявить терапевтический эффект, даже если он есть. Таким образом, значительное уменьшение ринореи, заложенности носа и зуда неба/уха наблюдались в большинстве экспериментальных временных точках в начале визита и в течение визита.

Пример 5. Влияние стерилизации гамма-облучением.

Алкафтадин чувствителен к окислению, и первичный продукт деградации был выявлен как Ν-оксид со структурой, приведенной ниже. Существование структур Ν-оксида как первичного преобладающего продукта окислительной деградации было подтверждено путем сравнения относительного времени удерживания при НРЬС (высокоэффективной жидкостной хроматографии) с таковым для синтетически произведенных структур Ν-оксида (оказались одинаковы) и также подтверждено с применением массспектрометрии.

Для исследования влияния процесса гамма-облучения, применяемого для стерилизации флаконов БЭРЕ. изучалась химическая стабильность алкафтадина с применением различных партий флаконов, облученных гамма-радиацией или нестерилизованных.

Материалы и методы.

В данном исследовании применялись следующие материалы:

раствор алкафтадина 2,5 мг/мл;

нестерилизованные флаконы БЭРЕ на 5 мл (ΌυΡΘΝΤ 20-6064) от Вйпбег С1а5 СшЬН (Сегшапу); нестерилизованные флаконы БЭРЕ на 5 мл (ΌυΡΘΝΤ 20-6064) от Вехат (Егапее);

стерилизованные (гамма-облучением при 25 кГр) флаконы БЭРЕ (ЭиРОНТ 20-6064) от Вйпбег С1а5 СтЬН;

сцинтилляционные флаконы - 20 мл, чистое стекло с покрытыми тефлоном крышками МШех СУ, блок шприцевых фильтров.

Результаты.

Результаты анализа химической стабильности раствора алкафтадина, хранящегося либо в нестерилизованных флаконах (Вехат или Вйпбег С1а§) либо гамма-облученных флаконах (Вйпбег С1а§), суммированы в табл. 2. Все образцы анализировались с помощью НРЬС через 6 и 14 дней хранения при 50°С. Доступность света не контролировалась во время хранения. Раствор хранился во флаконах Вехат (без стерилизации), Вйпбег С1а5 флаконах (стерилизованы гамма-облучением или без стерилизации) и в стеклянных флаконах.

Таблица 2

Описание контейнера	Процедура стерилизации	Условия хранения	Время (дни)	Алкафтадин (мг/мл)	Ν-оксид (%)
Начальный раствор	Ν/Α	Ν/Α	Ν/Α	2,47	0,02
Стеклянные флаконы	Ν/Α	5'С	6	2,52	0,008
Стеклянные флаконы	Ν/Α	50’С	6	2,57*	0,024
Кехат	Нет	50С	6 14	2,46 2,48	0,015 0,033
Випс1ег О1аз	Нет	50‘С	6 14	2,48 2,48	0,018 0,042
ВипОег О1а5	Υ-облучение	50'С	6 14	2,41 2,39	0,199 0,202

* Образец демонстрировал значительное испарение в соответствии с наблюдаемыми вышеуказанными значениями проб.

Выводы.

Алкафтадин, хранящийся в гамма-облученных флаконах Вйпбег С1а5, демонстрировал значительно повышенные уровни образования Ν-оксида по сравнению со стеклянными флаконами и нестерилизованными флаконами Вехат и Вйпбег С1а5. Эти данные предполагают, что стерилизация гамма-облучением может быть первопричиной окисления путем вызывания химических или физических изменений в поли

- 10 016221 этиленовом флаконе.

Пример 6. Влияние стерилизации этиленоксидом.

Нестерилизованные флаконы Вехат и Вйпбет С1а§ были стерилизованы с применением этиленоксида. Начиналось исследование стабильности, и уровни этиленоксида были определены как <1 м.д. (миллионных долей) (при обычных условиях) с применением аналитического метода экстракции водой (ΆΝ8Ι/ΆΆΜ Ι/ΚΟ: 10993-7) с помощью АррТес (МапеИа. Сеогфа).

Материалы и методы.

В эксперименте использовался 2.5 мг/мл раствор алкафтадина. Флаконы стерилизовались с помощью этиленоксида в соответствии с протоколом. изложенным в табл. 3.

Таблица 3

Фаза	Параметр	Заданное значение
Предварительные условия	Температура	40’ С
	Относительная влажность (%)	60%
	Время	>16 часов
	Время переноса -> стерилизатор	45 минут
Обработка этиленоксидом	Температура	45'С
Начальный вакуум	Давление	70 мбарА
Нагнетание пара	Давление	42 мбарА
Задержка пара	Время	45 минут
Подвергание действию этиленоксида	Нагнетание азота	250 мбарА
	Нагнетание этиленоксида	744 мбарА
	Время простоя газа	3 часа
	Концентрация этиленоксида	800±50 мг/л
Удаление газа	(подсчитано)	75 мбарА
2 промывки азотом	Давление	75_>500—*75 мбарА
I промывка воздухом	Давление Давление	75->500-У75 мбарА
Аэрация	Температура	40*С
	Время	10 дней

Результаты.

Результаты по химической стабильности алкафтадина. хранящегося в стерилизованных этиленоксидом флаконах Вехат и Вйпбет С1а§. суммированы в табл. 4.

Таблица 4

Описание контейнера	Процедура стерилизации	Время (дни) при 50°С	Алкафтадин (мг/мл)	Ν-оксид (%)
Стеклянные флаконы	Ν/Ά	5	2,48	0,022
14	2, 51	0,028
Випйег С1аз	Этиленоксид	5	2,46	0,052
14	2, 48	0, 074
Кехат	Этиленоксид	5	2, 50	0, 018
14	2, 58	0, 025

Выводы.

Основываясь на данных по хранению в течение 14 дней при 50°С при условиях освещенности окружающей среды. алкафтадин имеет значительно более низкие уровни Ν-оксида при хранении в стерилизованных этиленоксидом флаконах Вйпбет С1а5. чем при хранении в гамма-облученных флаконах. В данном эксперименте количество образованного Ν-оксида во флаконах Вехат схоже с таковым в стеклянных флаконах (0.025 и 0.028% соответственно) и слегка повышено по сравнению с флаконами Вйпбет С1а5 (0.074%) после 14 дней хранения при 50°С.

Пример 7. Влияние алкафтадина на дегрануляцию тучных клеток.

Способность алкафтадина к стабилизации клеток оценивалась с применением клеточной линии ВВЬ-ССВ1 (рецептор-1 хемокина крысиного базофильного лейкоза) как способа исследования его способности влиять на стабилизацию тучных клеток. Применение базофильных клеточных линий для оценки способности противоаллергических лекарственных средств к стабилизации клеток является общепринятым. Физиологически базофилы сходны с тучными клетками и содержат преформированные воспали

- 11 016221 тельные медиаторы, которые схожим образом высвобождаются путем дегрануляции, вовлекающей перекрестное связывание 1дЕ. Так как эти клеточные линии являются более легкодоступными, они более удобны для проведения исследования стабилизации, чем линии тучных клеток. Культивируемые клетки КВЬ-ССКТ были сенсибилизированы антителом 1дЕ против ДНК-белкового комплекса. Следом за сенсибилизацией клетки обрабатывались алкафтадином в различных концентрациях либо его основным активным метаболитом (0,083, 0,0083 и 0,00083%) либо офтальмическим носителем (плацебо), и стимулировались ДНК-белковым комплексом и/или ΜΙΡ-1α (макрофагальный воспалительный белок 1 альфа, энхансер (усилитель) дегрануляции), чтобы вызвать дегрануляцию. Также были задействованы 10х и 100х контрольные растворы плацебо (растворы офтальмического носителя) в Ό-ΜΕΜ (модифицированной по способу Дульбекко среде Игла).

Стимуляция только ΌΝΡ-ИБА (2,4-динитрофенил гаптен, конъюгированный с человеческим сывороточным альбумином) и только ΜΙΡ-1α не вызывала значительного уровня дегрануляции. Однако совместная стимуляция вызывала сильный ответ дегрануляцией. При всех трех стимуляциях дегрануляции (только ΌΝΡ-ΗΆ8, только ΜΙΡ-1α и совместная стимуляция) воздействие наибольшей концентрации исходного препарата, метаболита и плацебо приводило к неожиданной и значительной дегрануляции.

В опыте с совместной стимуляцией алкафтадин в концентрациях 0,0083 и 0,00083% превосходил по показателю стабилизации клеток контроль с совместной стимуляцией и отрицательные контроли (плацебо 10х [носитель 3,3% в Ό-ΜΕΜ] и плацебо 100х [носитель 0,33% в Ό-ΜΕΜ] соответственно). Это преимущество было статистически значимо (р<0,0001 для обеих концентраций). Обработка 6,11-дигидро-11(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновой кислотой (САБ # 147083-930) в концентрациях 0,0083 и 0,00083% также превосходила по показателю стабилизации клеток контроль с совместной стимуляцией и отрицательные контроли (плацебо 10х и плацебо 100х соответственно). Опять же была получена статистическая значимость (р<0,0001 для обеих концентраций). При обработке только плацебо 10х также была продемонстрирована некоторая стабилизация по сравнению с контролем совместной стимуляции, и этот эффект был статистически значимым (р<0,05).

Добавление алкафтадина или 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1Ь][3]беназепин-3-карбоновой кислоты (САБ # 147083-93-0) усиливало эффект стабилизации на уровне 10х дозы, демонстрируя положительное влияние анализируемых веществ на стабилизацию мембран. Стабилизация не наблюдалась при 100х разведении. В целом, результаты данного исследования предполагают, что алкафтадин и 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (САБ # 147083-93-0) являются эффективными средствами стабилизации мембран.

Пример 8. Влияние алкафтадина на рецептор Н4 человека.

Исследовалась фармакологическая активность алкафтадина или 6,11-дигидро-11-(1-метил-4пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновой кислоты (САБ # 147083-93-0) на человеческий рецептор гистамина Н₄ (Η₄Β). Η₄Κ является четвертым идентифицированным гистаминовым рецептором и, как оказалось, он, прежде всего, экспрессируется на эозинофилах, Т-клетках, дендритных клетках, базофилах и тучных клетках - типах клеток, непосредственно вовлеченных в развитие и поддержание аллергического ответа. Было показано, что Η₄Β опосредует хемотаксис тучных клеток, эозинофилов и дендритных клеток и может влиять на продукцию цитокинов дендритными клетками и Тклетками. Антагонисты этого рецептора явно противовоспалительные ίη νίνο и эффективны в животных моделях астмы и колита. Алкафтадин и 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-иперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (САБ # 147083-93-0) анализировались с применением клеток, трансфицированных рецептором, на связывание с Η₄Β и для выяснения того, являются ли они агонистами или антагонистами этого рецептора.

Алкафтадин и 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3карбоновая кислота (САБ # 147083-93-0) были подготовлены в концентрации 10 мМ в 100% диметилсульфоксиде (^ΜБΟ) для анализа связывания и 10 мМ в Να/Κ фосфатном буфере, рН 7,0, для клеточных тестов. Осадки клеток из клеток БК-Ν-ΜΟ. трансфицированных человеческим рецептором Н₄, были гомогенизированы в 20 мМ Ττί8-ΗΠ/0,5 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоте (ΕΌΤΑ) рН 8,0 (ТЕ буфер). Надосадочные фракции, собранные после центрифугирования при 800 д, центрифугировались повторно при 30000 д в течение 30 мин. Осадки были ре-гомогенизированы в буфере ТЕ. Для экспериментов по конкурентному связыванию мембраны инкубировались с 10 нМ [³Н]-меченным гистамином с или без тестируемых веществ в течение 45 мин при 25°С. Неспецифическое связывание определялось с использованием 100 мкМ немеченого гистамина. Значения Κ1 подсчитывались на основе экспериментально определенного значения Κ,ι для 5 нМ меченого [³Н]-гистамина и концентрации лиганда 10 нМ согласно Сйепд апй РтизоГГ. Анализировались семь концентраций вещества, перекрывающих диапазон от 10^-11 до 10^-5 М, при этом каждая концентрация анализировалась в трех повторностях. Значения трех повторностей усреднялись, и была построена кривая 1С50 (50% ингибирующая концентрация). Этот эксперимент был проведен дважды, и результаты приведены в виде средних значений в двух экспериментах. Были созданы клеточные линии БК-Ν-ΜΠ экспрессирующие конструкцию с репортерным геном и полнораз- 12 016221 мерным человеческим рецептором Н₄. В качестве репортерного гена применялся ген β-галактозидазы под контролем элементов, отвечающих на циклический аденозинмонофосфат (цАМФ). Клетки высевались в 96-луночные планшеты за ночь до эксперимента. Антагонисты были добавлены за 10 мин до добавления гистамина, который добавлялся непосредственно в клеточную среду. Форсколин (в конечной концентрации 5 мкМ) был добавлен через 10 мин после добавления гистамина. Клетки были возвращены в инкубатор на 6 ч при 37°С. Затем среда удалялась отсасыванием и клетки лизировались в 25 мкл 0,1 х опытного раствора (10 мМ фосфат натрия, рН 8, 0,2 мМ Мд§О₄, 0,01 мМ МпС1₂) и инкубировались при комнатной температуре в течение 10 мин. Затем клетки инкубировались в течение 10 мин в 100 мкл 1х опытного раствора, содержащего 0,5% Тритон и 40 мМ β-меркаптоэтанол. Окрашивание проявлялось с помощью 25 мкл 1 мг/мл раствора субстрата (хлорфенол красный β-Ό-галактопиранозид; Воске Мо1еси1аг ВюскешкаН, Ιηάίαηαροΐίδ. ΙΝ). Интенсивность окрашивания количественно измерялась на микропланшет-ридере (считывающем устройстве для микропланшетов) при поглощении 570 нм. Для определения агонистов добавляли титр соединений от 10^-11 до 1^-4 М в двух повторностях в отсутствие гистамина. Значения повторностей усреднялись и использовались для подсчета ЕС50 (50% эффективная концентрация) для ингибирования/подавления продукции циклического АМФ форсколином. Этот эксперимент был повторен трижды. Эксперимент для определения антагонистов проводился с разведениями гистамина от 10^-10 до 10^-3 М в двух повторностях в присутствии 1,2, 3,7, 11, 33 и 100 мкМ соединения. Значения повторностей усреднялись и ЕС50 для гистамина при каждой из концентраций соединения использовались для построения графика Шилда, чтобы получить значения рА2, которые являются отрицательным логарифмом концентрации вещества, необходимого для того, чтобы сместить ЕС50 гистамина в два раза. Алкафтадин и 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь] [3]беназепин-3карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) анализировались на способность вытеснять [³Н]-гистамин, связанный с мембранами δΚ-Ν-МС клеток, стабильно трансфицированных рецептором Н4. Конкуренция с [³Н]-гистамином выявила, что соединения способны связываться с рецептором. Кривые связывания показали, что алкафтадин связывается с рецептором со средним значением Κ1 в 2,9 мкМ, тогда как 6,11дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) не связывается с рецептором в концентрациях вплоть до 10 мкМ.

Чтобы выяснить, являются ли алкафтадин или 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Нимидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) агонистами рецептора Н₄, был проведен функциональный тест на клетках δΚ-Ν-МС, трансфицированных человеческим рецептором гистамина Н4. Оценивалась способность соединений подавлять вызванное форсколином повышение уровня цАМФ. Результаты показали, что гистамин является агонистом рецептора и вызывает дозозависимое подавление вызванного форсколином повышения уровня цАМФ. Однако ни алкафтадин, ни 6,11дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) не демонстрировали какого-либо подавления уровня цАМФ и, следовательно, не являются агонистами рецептора Н4 в концентрациях вплоть до 100 мкМ.

Чтобы выяснить, являются ли алкафтадин или 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Нимидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) антагонистами рецептора Н₄, оценивалась способность соединений смещать ЕС50 ингибирования гистамином повышения уровня цАМФ, вызванного форсколином, в клетках δΚ-Ν-МС, трансфицированных человеческим рецептором гистамина Н4. Результаты показали, что повышение концентраций алкафтадина вызывало параллельные сдвиги вправо кривых дозозависимого ответа на гистамин (НА), что ведет к повышению значения ЕС50 модуляции рецептора Н4 гистамином. Этот эффект указывает на то, что алкафтадин является конкурентным антагонистом рецептора. Пересечение графика Шилда с осью X дает значение рА₂ в 5,6, что представляет собой отрицательный логарифм концентрации антагониста, необходимой для того, чтобы сдвинуть в два раза ЕС₅₀ гистамина. Теоретически значение рА₂ должно быть равно ρΚ₁, что в действительности наблюдалось (5,6 против 5,5). Алкафтадин или 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Нимидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) не приводили к какому-либо смещению в концентрациях вплоть до 100 мкМ, что согласуется с их неспособностью связывать рецептор.

Эти результаты указывают на то, что алкафтадин связывается с рецептором Н4 со средним значением Κ₁, равным 2,9 мкМ. Ни алкафтадин, ни 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Нимидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) не являются агонистами рецептора Н4 в концентрациях вплоть до 100 мкМ. Однако алкафтадин, но не 6,11-дигидро-11-(1-метил-4пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновая кислота (СА8 # 147083-93-0) (вплоть до 100 мкМ), является антагонистом человеческого рецептора к гистамину Н₄ со значением Κ₁, равным 2,9 мкМ, и значением рА₂, равным 5,6.

Пример 9. Влияние алкафтадина на целостность эпителия конъюктивы.

Чтобы исследовать способность алкафтадина поддерживать целостность эпителия конъюктивы, оценивались изменения экспрессии белков плотного контакта ΖΟ-1 и Е-кадгерина (индукция Екадгерина и качественное изменение распределения ΖΟ-1 - от фокального (локального) до диффузного),

- 13 016221 следующие за стимуляцией специфическим конъюктивальным аллергеном. Эти изменения связаны с повышенной проницаемостью конъюктивальной и других эпителиальных тканей. Этот эксперимент ίη νίνο проверял, какое влияние алкафтадин (местный прием за 1 и 2 ч до стимуляции) оказывает на модуляцию этих белков.

Мыши были сенсибилизированы ЧюП гадетееб (8Κν) в гидроксиде алюминия путем внутрибрюшинного введения (дни 0, 7 и 15) и введения в глаз каплями (дни 8 и 15). Далее на 20 день мыши были сенсибилизированы глазными каплями, содержащими только 8Κ.\ν. На 27 день мышам местно вводились 5 мкл алкафтадина либо носителя/наполнителя за 1 и 2 ч перед стимуляцией. 8Ρ\ν закапывался местно в оба глаза. Также отслеживалась экспрессия изучаемых белков в не подвергнутых обработке глазах. Изменения в экспрессии белков плотного контакта ΖΟ-1 и Е-кадгерина наблюдались через 1 ч после стимуляции конъюктивы аллергеном 8Κ.\ν. Белки детектировались с помощью меченных флуоресцином моноклональных антител, специфических к ΖΟ-1 и Е-кадгерину, и визуализировались с помощью конфокальной микроскопии ^1е88). Не подвергнутые обработке глаза получали от мышей, которые не были сенсибилизированы или стимулированы.

Белки ΖΟ-1 и Е-кадгерин необработанных (без стимуляции и без лечения) мышей демонстрировали качественно фокальное распределение. Однако в сравнении с белками мышей, получавших носитель, последние показали диффузное качественное изменение. Переход от фокального к диффузному окрашиванию связан с повышенной проницаемостью эпителия. При сравнении белков ΖΟ-1 и Е-кадгерина не подвергнутых обработке мышей с таковыми у мышей, получавших алкафтадин, результаты продемонстрировали минимальную разницу в качественных свойствах. Изображения белков ΖΟ-1 и Е-кадгерина демонстрировали отсутствие различий либо минимальные различия между необработанными (отрицательный контроль) мышами и мышами, получавшими алкафтадин, тогда как наблюдалась ясная и отчетливая разница с мышами, получавшими носитель.

Эти результаты предполагают, что алкафтадин поддерживает целостность плотных контактов в конъюктивальном эпителии (охарактеризовано фокальной экспрессией ΖΟ-1) и подавляет индукцию экспрессии Е-кадгерина, что в норме наблюдается после стимуляции конъюктивы специфическим аллергеном.

Пример 10. Влияние алкафтадина на проницаемость сосудов и клеточные инфильтраты.

Аллергическое воспаление может быть разделено на две отличные фазы - раннюю фазу и позднюю фазу. Ранняя фаза воспалительного ответа быстро следует за дегрануляцией тучных клеток и характеризуется неплотным соприкосновением клеток сосудистого эндотелия и истечением (то есть опуханием) и зудом. Поздняя фаза воспалительного ответа имеет пик приблизительно через 24 ч после дегрануляции тучных клеток и характеризуется появлением клеточных инфильтратов (эозинофилы и нейтрофилы). Известно, что как эозинофилы, так и нейтрофилы оказывают сильное действие на потенцирование поздней фазы воспалительного ответа. По прибытии в очаг воспаления эти клетки высвобождают различные пероксидазы и другие противомикробные факторы, которые уничтожают инвазивные (проникающие) патогены, но, в случае тяжелого или хронического воспаления, повреждают окружающие ткани и вызывают дальнейшее высвобождение провоспалительных медиаторов.

В мышиной модели аллергического конъюктивита офтальмический раствор алкафтадина оценивался на предмет способности уменьшать аллергическое воспаление ранней и поздней фаз при местном приеме. Для определения влияния на проницаемость сосудов во время ранней фазы воспалительного ответа оценивалось просачивание красителя синего Эванса. Для оценки противовоспалительной активности в поздней фазе конъюктива была взята за 24 ч, окрашена и анализировалась на наличие инфильтратов эозинофилов и нейтрофилов.

Все мыши были сенсибилизированы ЧюП гадетееб (8Κν) в гидроксиде алюминия путем внутрибрюшинного введения (дни 0, 7 и 14) и закапыванием глазных капель (дни 8 и 15). На 20 день мыши были вновь сенсибилизированы глазными каплями с 8Ρ\ν.

На 27 день за 1 и 2 ч до стимуляции аллергеном дважды местно принимались (закапывались) клинические дозы алкафтадина 2,5 мг/мл или носителя. Алкафтадин и носитель принимались местно в насыщающей дозе 5 мкл в различных подопытных группах животных, основанных на коде рандомизации. Группы (подопытные) были следующие:

1) отрицательный контроль; сенсибилизированы, без стимуляции аллергеном, без лечения (отрицательный контроль) (N=12);

2) сенсибилизированы, стимулированы, без лечения (положительный контроль) (N=12);

3) сенсибилизированы, стимулированы, лечение алкафтадином 2,5 мг/мл (N=10);

4) сенсибилизированы, стимулированы, лечение носителем (N=12).

Проницаемость сосудов определялась посредством определения излияния красителя синего Эванса, следующего за стимуляцией аллергеном, для животных N=6, за исключением группы, получавшей алкафтадин, где N=4 животных были умерщвлены и проанализированы (двое животных умерли во время процедуры). Группы сравнивались с помощью критерия Стьюдента и в качестве статистически значимого принималось значение р<0,05. Было проведено препарирование оставшихся животных, N=6 на группу, через 24 ч после стимуляции конъюктивы аллергеном (САС), чтобы оценить привлечение эозинофи

- 14 016221 лов и нейтрофилов в форникальную область. Ткани обрабатывались в виде блоков, замороженных либо погруженных в формообразователь/пластик перед изготовлением срезов на микротоме. Количества эозинофилов и нейтрофилов определялось посредством световой микроскопии срезов, окрашенных красителем Гимза или гематоксилином-эозином, либо иммуногистохимией с применением моноклональных антител, специфичных в отношении клеток. Группы сравнивались с помощью критерия Стьюдента и в качестве статистически значимого принималось значение р<0,05.

Между отрицательным контролем (группа без стимуляции - группа 1) и стимулированной и не принимавшей лечение (группа 2) группой не было значительной разницы. Однако, как ожидалось, была численная разница с группой 2, имеющей более высокий показатель проницаемости сосудов. Наблюдалась значительная разница между группой, принимавшей носитель (группа 4), и группой, принимавшей алкафтадин (группа 3) (р<0,05), при этом алкафтадин успешно предотвращал повышенную проницаемость сосудов по сравнению с носителем. Как ожидалось, была получена значительная разница между отрицательным контролем (группа без стимуляции - группа 1) и стимулированной, но не получавшей лечение, группой (группа 2). Алкафтадин (группа 3) не предотвращал привлечение эозинофилов и нейтрофилов по сравнению с контролями.

Что касается проницаемости сосудов, обычная индукция повышения проницаемости не наблюдалась в группе 2 (стимулирована и не получавшая лечение). Однако алкафтадин значительно подавлял повышение проницаемости сосудов, следующее за САС, по сравнению с мышами, получавшими лечение только носителем. На основе наблюдений из предыдущих исследований низкий уровень проницаемости сосудов в группе 2 отклоняется от нормы (атипичен) и, скорее всего, наблюдался вследствие ошибки эксперимента, связанной с процедурой опыта ίη νίνο. Пониженная проницаемость сосудов у животных, получавших алкафтадин, является свидетельством в пользу терапевтической роли алкафтадина в данной модели конъюктивальной стимуляции аллергеном.

При оценке привлечения эозинофилов и нейтрофилов значительная разница между отрицательным и положительным контролями предполагает, что модель работает как ожидалось. Однако в применяемых дозах алкафтадин не подавляет привлечение эозинофилов или нейтрофилов в поздней фазе ответа в мышиной модели аллергического конъюктивита с последующей стимуляцией сенсибилизированных мышей.

Результаты данного исследования демонстрируют, что алкафтадин значительно подавлял повышение проницаемости сосудов после стимуляции конъюктивы аллергеном. Однако, по-видимому, не подавляет привлечение эозинофилов или нейтрофилов в поздней фазе ответа в мышиной модели аллергического конъюктивита с последующей стимуляцией сенсибилизированных мышей.

Пример 11. Системный уровень алкафтадина у пациентов.

Пациенты билатерально принимали 0,25% офтальмический раствор алкафтадина в течение семи дней. Уровень в плазме у этих пациентов оценивался перед приемом и через 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 12 и 18 ч после приема капель лекарственного средства на первый и седьмой дни. Концентрации алкафтадина в плазме быстро достигали С_тах и спадали ниже исчисляемого предела (0,01 нг/мл) через 3 ч после приема. Средние значения С_тах (наиболее высокое значение, измеренное в любой временной точке) были довольно низкими, в среднем 0,051 нг/мл на 1 день и 0,060 нг/мл на 7 день; наибольшие концентрации в плазме были меньше чем 0,12 нг/мл для всех испытуемых.

Пример 12. Системные уровни 6,11-дигидро-11-(1-метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1Ь][3]беназепин-3-карбоновой кислоты у пациентов.

Пациенты билатерально принимали 0,25% офтальмический раствор 6,11-дигидро-11-(1-метил-4пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновой кислоты в течение семи дней. Уровень в плазме у этих пациентов оценивался перед приемом и через 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 12 и 18 ч после приема капель лекарственного средства на первый и седьмой дни. Концентрации 6,11-дигидро-11-(1метил-4-пиперидинилиден)-5Н-имидазо[2,1-Ь][3]беназепин-3-карбоновой кислоты в плазме быстро достигали С_тах и снижались ниже исчисляемого предела (0,1 нг/мл) через 12 ч после приема. Средние значения С_тах составляли 3,228 нг/мл на 1 день и 2,715 нг/мл на 7 день; наибольшие концентрации в плазме были 7,23 нг/мл.

Полное раскрытие каждого патента, патентной заявки и публикации, цитируемых или описанных в данном тексте, настоящим введено ссылкой.

Специалисты в данной области примут во внимание, что в предпочтительные варианты осуществления изобретения могут быть внесены многочисленные изменения и модификации и что подобные изменения и модификации могут быть сделаны без отклонений от сущности изобретения. Следовательно, это подразумевает, что прилагаемая формула изобретения охватывает все подобные эквивалентные варианты как являющиеся частью истинного смысла и области действия данного изобретения.

Claims (28)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Офтальмическая композиция, содержащая эффективное количество алкафтадина, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов или их смесей.

   - 15 016221
2. 2. Композиция по п.1, где композиция включает от примерно 0,005 до примерно 10 мас.% алкафтадина, от примерно 0,1 до примерно 0,4 мас.% алкафтадина или от примерно 0,2 до примерно 0,35 мас.% алкафтадина.
3. 3. Композиция по п.1, где эффективное количество алкафтадина составляет от менее чем примерно 0,25 до более чем примерно 0,015 мг.
4. 4. Композиция по п.1, где эффективное количество алкафтадина составляет от примерно 0,075 до примерно 0,125 мг.
5. 5. Композиция по п.1, где эффективное количество алкафтадина составляет от примерно 1,0 до примерно 5,0 мг/мл.
6. 6. Композиция по п.5, где эффективное количество алкафтадина составляет примерно 2,5 мг/мл.
7. 7. Композиция по п.1, где эффективное количество алкафтадина составляет от менее примерно 7,1 до примерно 3,5 мкг/кг в день.
8. 8. Офтальмическая композиция, содержащая количество соединения формулы II, его фармацевтически приемлемых солей, его Ν-оксидов, гидратов, сольватов, полиморфов или их смесей, где соединение формулы II представляет собой
9. 9. Композиция по п.8, где композиция включает от примерно 0,005 до примерно 10 мас.% соединения формулы II, от примерно 0,1 до примерно 0,4 мас.% соединения формулы II или от примерно 0,2 до примерно 0,35 мас.% соединения формулы II.
10. 10. Композиция по п.8, где количество соединения формулы II составляет от менее чем примерно 0,25 до более чем примерно 0,015 мг.
11. 11. Композиция по п.8, где количество соединения формулы II составляет от примерно 0,075 до примерно 0,125 мг.
12. 12. Композиция по п.8, где количество соединения формулы II составляет от примерно 1,0 до примерно 5,0 мг/мл.
13. 13. Композиция по п.12, где эффективное количество соединения формулы II составляет примерно 2,5 мг/мл.
14. 14. Композиция по п.8, где количество соединения формулы II составляет от менее примерно 7,1 до примерно 3,5 мкг/кг в день.
15. 15. Композиция по любому из пп.1-14, где композиция дополнительно включает носитель.
16. 16. Способ лечения глазной аллергии, включающий введение в глаз пациента, нуждающегося в этом, эффективного количества офтальмической композиции по любому из пп.1-15, где офтальмическую композицию вводят пациенту для лечения или предупреждения по меньшей мере одного клинического симптома глазной аллергии.
17. 17. Способ по п.16, где глазная аллергия является аллергическим конъюктивитом.
18. 18. Способ по п.16, где по меньшей мере один клинический симптом является клиническим симптомом глазного воспаления.
19. 19. Способ по любому из пп.16-18, где клинический симптом выбран из группы, состоящий из глазного зуда, покраснения глаз, опухания век, хемозиса, слезоотделения, назального воспаления, заложенности носа, ринореи, назального зуда, зуда уха, зуда неба и чихания.
20. 20. Способ по п.19, где указанный клинический симптом является глазным зудом или покраснением глаз.
21. 21. Способ по любому из пп.16-18, где офтальмическую композицию вводят пациенту для лечения или предупреждения по меньшей мере двух клинических симптомов.
22. 22. Способ по п.21, где по меньшей мере два клинических симптома являются глазным зудом и покраснением глаз.
23. 23. Способ по любому из пп.16-18, где офтальмическую композицию вводят пациенту для лечения или предупреждения по меньшей мере трех клинических симптомов.
24. 24. Способ по п.23, где по меньшей мере три клинических симптома выбраны из группы, состоящей из глазного зуда, покраснения глаз, опухания век, хемозиса и слезоотделения.
25. 25. Способ по любому из пп.16-18, где по меньшей мере один клинический симптом является механическим симптомом, связанным с глазной аллергией или глазным воспалением.
26. 26. Способ по п.25, где механический симптом выбран из группы, состоящей из повышенной проницаемости сосудов, снижения целостности запирающей зоны конъюктивального эпителия, модуляции

    - 16 016221 рецептора Н4 и деградации тучных клеток.
27. 27. Способ по любому из пп.16-18, где по меньшей мере один клинический симптом является назальным симптомом глазной аллергии или глазного воспаления.
28. 28. Способ по п.27, где назальный симптом выбран из группы, состоящей из назального воспаления, заложенности носа, ринореи, назального зуда и чихания.

    Евразийская патентная организация, ЕАПВ

    Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2