EA007902B1 - Новые 1,2,3-замещенные производные индолизина, являющиеся ингибиторами факторов роста фибробластов, способ их получения и фармацевтические композиции, содержащие их - Google Patents

Abstract

Это изобретение относится к соединениям формулы (I)в которой Rпредставляет собой ОН, (С-С)алкокси, карбоксил, (С-С)алкоксикарбонил, -NRR, -NH-SO-Alk, -NH-SO-Ph, -NH-CO-Ph, -N(Alk)-CO-Ph, -NH-CO-NH-Ph, -NH-CO-Alk, -NH-CO-Alk, -O-(CH)-cAlk, -O-Alk-COOR, -O-Alk-O-R, -O-Alk-OH, -O-Alk-C(NH):NOH, -O-Alk-NRR, -O-Alk-CN, -O-(CH)-Ph, -O-Alk-CO-NRR, -CO-NH-(CH)-COOR, -CO-NH-Alk; Rпредставляет собой Н, (С-С)алкил, (С-С)алкилгалогенид, (С-С)циклоалкил или возможно замещенный фенил; А представляет собой -СО-, -SO- или -SO-; Rи Rявляются идентичными или разными и каждый представляет собой Н, (С-С)алкоксил, амино, карбокси, (С-С)алкоксикарбонил, -ОН, -нитро, гидроксиамино, -Alk-COOR, -NRR, -NH-Alk-COOR, -NH-COO-Alk, -N(R)-SO-Alk-NRR, -N(R)-SO-Alk, -N(R)-Alk-NRR, -N(R)-CO-Alk-NRR, -N(R)-CO-Alk, -N(R)-CO-CF, -NH-Alk-HetN, -O-Alk-NRR, -O-Alk-CO-NRR, -O-Alk-HetN или Rи Rсовместно образуют ненасыщенный гетероцикл из 5-6 членов, возможно в форме одной из их фармацевтически приемлемых солей.

Description

Предметом настоящего изобретения являются новые 1,2,3-замещенные производные индолизина, которые являются ингибиторами факторов роста фибробластов (ЕСЕ, Ьа81с йЬгоЫаз! дго\\111 1ас!ог), способ их получения и фармацевтические композиции, содержащие их.

Факторы роста фибробластов представляют собой семейство полипептидов, которых синтезирует большое число клеток во время эмбрионального развития и клетки взрослых тканей в разных патологических состояниях.

Известны некоторые производные нафтиридинаминов и соответствующих мочевин, которые являются селективными ингибиторами ЕСЕ-1 (Ва!1еу В. е! а1., Б1£е Бс1епсе8, (1998), νοί. 62 Νο. 2. рр. 143-150; Тйошр8ои А. е! а1., I. МеФ Скет., (2000), νοί. 43. рр. 4200-4211).

Некоторые производные индолизина раскрыты в заявках на патент и в патентах ИБ 4378362, ЕК 2341578, СВ 2064536, ЕР 0097636, ЕР 302792, ЕР 0382628 и ЕР 0235111. Эти соединения являются полезными в лечении стенокардии и аритмии. Для некоторых из этих соединений описаны свойства ингибирования транслокации кальция.

Заявка на патент ЕР 0022762 также раскрывает некоторые производные индолизина, которые обладают активностью ингибирования ксантиноксидазы и аденозиндезаминазы и урикозурической активностью. Эти соединения могут быть полезными в лечении физиологических нарушений, которые происходят вследствие избытка мочевой кислоты и нарушений иммунной системы и паразитических агентов.

Было обнаружено, что некоторые соединения, производимые из индолизина, являются мощными антагонистами связывания факторов роста фибробластов с их рецепторами.

Соответственно, предметом настоящего изобретения являются новые производные индолизина формулы I

в которой К₁ представляет собой гидроксильный радикал, линейный или разветвленный радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, карбоксильный радикал, алкоксикарбонильный радикал с числом атомов углерода от 2 до 6 или радикал формулы:

-ΝΚ5Κ6

-ΝΗ-8Θ₂-Α1Ε

-ΝΗ-802-РЬ

-ΝΗ-СО-РБ

-Л(А1к)-СО-Рй

-ЛН-СО-МН-Рк

-ЛН-СО-А1к

-ЛН-СО₂-А1к

-О-(СН2)п-сА1к

-О-А1к-СООК7

-О-А1к-О-К₈

-О-А1к-ОН

-О-А1к-С^2):тН

-О-А1к-ЛК₅К₆

-О-А1к-СЛ

-О-(СН2)п-Рк

-О-А1к-СО-ЛК₅К₆

-СО^-(СН₂)_т-СООК₇

-СО-ЛН-А1к, в которой А1к представляет собой алкильный радикал или линейный или разветвленный алкиленовый радикал с числом атомов углерода от 1 до 5, сА1к представляет собой циклоалкильный радикал с числом атомов углерода от 3 до 6, п представляет собой целое число от 0 до 5, т представляет собой целое число от 1 до 5,

К₅ и К₆, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода, линейный или разветвленный алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 или бензильный радикал,

К₇ представляет собой атом водорода или алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5,

К₈ представляет собой алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 или радикал -СО-А1к,

РЕ представляет собой фенильный радикал, который возможно замещен одним или более чем одним из галогеновых атомов, одним или более чем одним из радикалов алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, одним или более чем одним из карбоксильных радикалов или одним или более чем одним из

- 1 007902 алкоксикарбонильных радикалов с числом атомов углерода от 2 до 6,

К₂ представляет собой атом водорода, алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал алкилгалогенида с числом атомов углерода от 1 до 5, содержащий от 3 до 5 галогеновых атомов, циклоалкильный радикал с числом атомов углерода от 3 до 6 или фенильный радикал, который возможно замещен одним или более чем одним из галогеновых атомов, одним или более чем одним из радикалов алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, одним или более чем одним из карбоксильных радикалов или одним или более чем одним из алкоксикарбонильных радикалов с числом атомов углерода от 2 до 6,

А представляет собой радикал -СО-, -80- или -8О₂-, - К₃ и К₄, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода, радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал амино, карбоксильный радикал, алкоксикарбонильный радикал с числом атомов углерода от 2 до 6, гидроксильный радикал, радикал нитро, радикал гидроксиамино, радикал формулы

-А1к-СООК₇

-ПКЩб

-ПН-А1к-СООК₇

-ИН-СОО-А1к

-М(К_п)-8О2-А1к-ИК₉К10

-Ы(К_п)-8О2-А1к

-Н(К₁₁)-А1к-ИК₅К₆

-Н(К₁₁)-СО-А1к-ИК₉К₁₀

-Ы(К_п)-СО-А1к

-Ы(К_п)-СО-СЕз

-ПН-А1к-Не1Ы

-О-АГк-ХК^Кю

-О-А1к-СО-ИК₅К₆

-О-А1к-Не1Ы в которой п, т, А1к, К₅, К₆ и К₇ имеют значение, данное выше для К₁, и

К₉ и К₁₀, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода или алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5,

К₁₁ представляет собой атом водорода или радикал -А1к-СООК₁₂, где К₁₂ представляет собой атом водорода, алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 или бензильный радикал,

НеШ представляет собой 5- или 6-членный гетероцикл, содержащий по меньшей мере один атом азота и возможно другой гетероатом, выбранный из азота и кислорода, или К₃ и К₄ совместно образуют 5- или 6-членный ненасыщенный гетероцикл, при том условии, однако, что, когда К представляет собой радикал алкокси и Κι представляет собой радикал -О-А1к-ИК₉К₁₀ или гидроксильный радикал, К₁ не представляет собой атом водорода или радикал алкокси, возможно в форме одной из их фармацевтически приемлемых солей.

Предпочтительным является соединение формулы I, в котором К₁ представляет собой гидроксильный радикал, линейный или разветвленный радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, карбоксильный радикал, алкоксикарбонильный радикал с числом атомов углерода от 2 до 6 или радикал формулы

-ΝΚ5Κ6

-ПН-8О₂-А1к

-ХН-8О₂-Рй

-КН-СО-Рй

-ХА1к)-СО-РЬ

-К1П-СО-МП-Рй

-КН-СО-А1к

-КН-СО₂-А1к

-О-(СН₂)_п-сА1к

-О-А1к-СООК₇

-О-А1к-О-К₈

-О-А1к-ОН

-О-А1к-ХК₅К₆

-О-А1к-СХ

-О-(СН2)п-Рй

-О-А1к-СО-ХК₅К₆

-СО-ХН-(СН2)т-СООК7

-СО-ХН-А1к в которой

А1к представляет собой алкильный радикал или линейный или разветвленный алкиленовый радикал с числом атомов углерода от 1 до 5, сА1к представляет собой циклоалкильный радикал с числом атомов углерода от 3 до 6, п представляет собой целое число от 0 до 5,

- 2 007902 т представляет собой целое число от 1 до 5,

К₅ и Кб, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода, линейный или разветвленный алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 или бензильный радикал,

К₇ представляет собой атом водорода или алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5,

К₈ представляет собой алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 или радикал -СО-А1к,

Р11 представляет собой фенильный радикал, который, возможно, замещен одним или более чем одним из галогеновых атомов, одним или более чем одним из радикалов алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, одним или более чем одним из карбоксильных радикалов или одним или более чем одним из алкоксикарбонильных радикалов с числом атомов углерода от 2 до 6,

К₂ представляет собой алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5, трифторметильный радикал, циклоалкильный радикал с числом атомов углерода от 3 до 6 или фенильный радикал, который возможно замещен одним или более чем одним из галогеновых атомов, одним или более чем одним из радикалов алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, одним или более чем одним из карбоксильных радикалов или одним или более чем одним из алкоксикарбонильных радикалов с числом атомов углерода от 2 до 6,

А представляет собой радикал -СО- или -ЗО₂-,

К₃ и К4, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода, радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал амино, карбоксильный радикал, алкоксикарбонильный радикал с числом атомов углерода от 2 до 6, радикал нитро, радикал гидроксиамино, радикал формулы

-А1к-СООК₇

-ΝΚ5Κ6

-ИН-А1к-СООК₇

-ΝΗ-СОО-Ак

-М(К_п)-8О₂-А1к-МК₉К₁₀

-М(К₁₁)-8О₂-А1к-М(К₁₁)-А1к-МК₅К₆

-М(К_п)-СО-А1к-МК₉К₁₀

-М(К_п)-СО-А1к-М(К_п)-СО-СР₃

-ΝΗ-Α^-ΗοΐΝ в которой п, т, А1к, К₅, К₆ и К₇ имеют значение, данное выше для К_ь и К₉ и К₁₀, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода или алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5,

Кп представляет собой атом водорода или радикал -А1к-СООК_£2, где К_£2 представляет собой атом водорода, алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 или бензильный радикал,

ΗβΐΝ представляет собой 5- или 6-членный гетероцикл, содержащий по меньшей мере один атом азота и возможно другой гетероатом, выбранный из азота и кислорода, возможно в форме одной из их фармацевтически приемлемых солей.

Особенно предпочтительным является соединение формулы I, в котором К_£ представляет собой радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, карбоксильный радикал, радикал -О-А1к-СООН, в котором А1к представляет собой линейный или разветвленный алкиленовый радикал с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал формулы -О-А1к-Р11. в котором А1к представляет собой алкиленовый радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 и Рй представляет собой фенильный радикал, который возможно замещен одним или более чем одним из галогеновых атомов или одним, или более чем одним из радикалов алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, или одним или более чем одним из карбоксильных радикалов, радикал формулы -ΝΗ-СО-Рй, радикал формулы ^Н-8О₂-Р11 или радикал формулы -ΝΗ-ίΌ-ΝΗ-ΡΙι, -К2 представляет собой алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5,

А представляет собой радикал -СО-,

К₃ и К₄, которые являются разными, каждый представляет собой атом водорода, радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал амино, карбоксильный радикал или алкоксикарбонильный радикал с числом атомов углерода от 2 до 6, возможно в форме одной из его фармацевтически приемлемых солей.

Среди соединений по этому изобретению особенно предпочтительными являются следующие:

(4-амино-3 -метоксифенил)-(1 -метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанон,

3- (4-амино-3 -метоксибензоил)-2-метилиндолизин-1 -ил-карбоновая кислота,

2- {[3 -(4-амино-3 -метоксибензоил)-2-метилиндолизин-1 -ил] окси (уксусная кислота, (4-амино-3 -метоксифенил)-{1-[(4-хлорбензил)окси]-2-метилиндолизин-3-ил}метанон, (4-амино-3-метоксифенил)-{1-[(3-метоксибензил)окси]-2-метилиндолизин-3-ил}метанон,

4- ({[3-(4-амино-3-метоксибензоил)-2-метилиндолизин-1-ил]окси}метил)бензойная кислота,

3- (4-карбоксибензоил)-2-метилиндолизин-1-ил-карбоновая кислота, метил-3 -[(1 -метокси-2-метилиндолизин-3 -илкарбонил] бензоат,

4- [(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]бензойная кислота,

- 3 007902

2-амино-5-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]бензойная кислота,

2-амино-5-({1-[(3-метоксибензоил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)бензойная кислота,

2-амино-5-({2-метил-1-[(3,4,5-триметоксибензоил)амино]индолизин-3-ил}карбонил)бензойная кислота,

2-амино-5-({1-{[(3-метоксифенил)сульфонил]амино}-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)бензойная кислота, возможно в форме одной из его фармацевтически приемлемых солей.

Настоящее изобретение также относится к способу получения соединений формулы I, который отличается тем, что

А) производное индолизина формулы II

где К₁ и К₂ имеют значение, которое дано для формулы I, но К₂ не представляет собой атом водорода или радикал алкилгалогенида, конденсируют с производным формулы III

где X представляет собой атом галогена, а К₃ или К₄, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода, радикал нитро, радикал трифторацетамидо или алкоксикар-

и затем

а) подвергают соединения формулы !а восстановлению для получения соединений формулы ТЪ

К₃ и/или Нд = -ΝΗ₂ в которой К₃ и/или К₄ представляют собой радикал амино, причем эти соединения формулы Й> затем подвергают действию алкилгалогенида для получения соединений формулы I, для которых К) и/или К₃ представляют собой радикал -ΝΙΚ4Κ, (в котором К₅ представляет собой атом водорода и Кб представляет собой алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5) и радикал -ΝΙΙ-ΑΑ-ΝΙΑΚ или радикал -ΝΙ 1-А1к-СХХ'Ж- (в котором К₇ не представляет собой атом водорода), из которых последующим омылением получают соединения формулы I, для которых К) и/или К₃ представляют собой радикал -ΝΙ 1-А1к-СХХ'Ж-, в котором К₇ представляет собой атом водорода, или подвергают ацилированию для получения соединений формулы I, для которых К) и/или К₃ представляют собой радикал -ΝΙ 1-СХ)-А1к или радикал -ΝΙ Ι-ΑΧ)-ΑΙΙ<-Ν К₉К₁₍₎, которые затем подвергают алкилированию для получения радикала -№(К_п)-СО-А1к или радикала -Ν-ΠΟχ-ίΧΙ-ΑΙΑΝΚΕκ,, в кото

- 4 007902 ром К₁₁ представляет собой радикал -А1к-СООК₁₂, в котором К₁₂ не представляет собой атом водорода, причем эти последние соединения затем возможно подвергают омылению для получения соединений формулы I, для которых Кд и/или К₃ представляют собой радикал -Ы-(К₁₁)-СО-Л1к или радикал -К-(К₁₁)-СО-Л1к-НК₉К₁₀, где К₁₁ представляет собой радикал -А1к-СООН, подвергают сульфонилированию для получения соединений формулы I, для которых Кд и/или К₃ представляют собой радикал -N11-8О₂-А1к или радикал -N11-8О₂-А1кΝΚ₉Κ₁₀, которых затем подвергают алкилированию для получения радикала -Ы(Кц)-8О₂-А1к или радикала -^К_п)-8О₂-А1к^К₉К₁₀, где К₁₁ представляет собой радикал -А1к-СООК₁₂, в котором К₁₂ не представляет собой атом водорода, причем эти последние соединения затем возможно подвергают омылению для получения соединений формулы I, для которых Кд и/или К₃ представляют собой радикал -^К_п)-8О₂-А1к или радикал, -^К_п)-8О₂-А1к^К₉К₁₀, где К₁₁ представляет собой радикал -А1к-СООН

b) соединения формулы 16, в которой К₃ и/или К_д представляют собой алкоксикарбонильный радикал, подвергают омылению для получения соединений формулы I, в которой К₃ и/или К представляют собой карбоксильный радикал, или

c) когда К₁ представляет собой радикал бензилокси, подвергают соединения формулы Ы действию трифторуксусной кислоты или подвергают соединения формулы Й гидрогенизированию для получения соединений формулы ΣΓ

ОН

в которой К₃ и/или К_д имеют значения, которые даны выше, и затем соединения формулы ΣΓ подвергают О-алкилированию для получения соединений формулы !д

в которой К₃ и/или К_д имеют значения, которые даны выше, и К₁ представляет собой линейный или разветвленный радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал -О-(СН₂)_п-сА1к, радикал -ОА1к-СООК₇, радикал -О-Л1к^К₅1<„ радикал -О-(СН₂)_п-Рй или радикал -О-А1к-О-К₈, который, когда К₈ представляет собой радикал -СОСН₃, может дать при последующем омылении радикал -О-А1к-ОН- или радикал -О-А1к-СН который при обработке гидроксиламином дает радикал -О-А1к-С(NН₂)=NОН, или

б) когда К₁ представляет собой алкоксикарбонильный радикал, подвергают соединения формулы Ы омылению для получения соединений формулы Ш соон

в которой К3 и/или Кд имеют значения, данные выше, которые затем подвергают действию производного амина для получения соединений формулы I, в которой К₁ представляет собой радикал -СО^Н-А1к, или действию производного аминокислоты для получения соединений формулы I, в которой К₁ представляет собой радикал -СО^Н-(СН₂)_т-СООК₇ или

е) когда К₁ представляет собой радикал -Ν11-СО₂-трет-бутил, подвергают соединения формулы Ы или Й или алкилированию с последующим снятием защиты и возможным вторым алкилированием для получения соединений формулы II, или снятию защиты с последующим ацилированием для получения соединений формулы I], в которой К₅ представляет собой атом водорода, с последующим возможным алкилированием для получения соединений формулы I], в которой К₅ представляет собой алкильный ра дикал

- 5 007902 _ А1к или РН

ИЛИ

ί) когда Кд представляет собой радикал -КН-СО₂-трет-бутил, подвергают соединения формулы 1к, или снятию защиты с последующим ацилированием для получения соединений формулы II

РЬ

или снятию защиты с последующим сульфонилированием для получения соединений формулы 1т

(1т)

или снятию защиты с последующей обработкой фенилизоцианатом для получения соединений формулы Ιη

или

В) когда К₁ представляет собой электрон-акцепторную группу, К₂ представляет собой атом водорода или радикал алкилгалогенида и А представляет собой радикал -СО-, пиридин приводят во взаимодействие с бромацетофеноном формулы IV

которые затем подвергают 1,3-диполярному присоединению цикла этилакрилатом или галогенированным производным этилкротоната в присутствии окислителя для получения соединений формулы 1а, в которой К1 представляет собой этоксикарбонильный радикал и К2 представляет собой атом водорода или

- 6 007902 радикал алкилгалогенида.

Далее показаны схемы синтеза продуктов от 1а до 1д и 1к.

Соединения формулы 1а, в которой К₂ представляет собой атом водорода или радикал алкилгалогенида, А представляет собой радикал -СО- и является электрон-акцепторной группой, такой как алкоксикарбонил, получают в соответствии с известными способами присоединения СИет., (2001), 38, 853-857].

цикла [1.Не1егосус11с

Кватернизация пиридина надлежащим образом замещенным бромацетофеноном дает пиридиний. 1,3-Диполярное присоединение цикла, проводимое с ним, осуществляют в присутствии окислителя, такого как дихромат тетрапиридинкобальта (II), в полярном растворителе, таком как диметилформамид.

Общая схема синтеза

Соединения в соответствии этим изобретением, когда К₃ и/или К4 представляют собой радикал нитро, получают известными способами бензоилирования (Еиг. I. Меб. СИет. СЫт. ТЬег., (1983), 18 (4), рр. 339-346) из производного индолизина формулы II и производного нитробензоилхлорида или производ

- 7 007902 ного нитробензолсульфонилхлорида, причем эти соединения соответствуют соединению формулы III. Так получают соединения формулы 1а.

Соединения формулы 1Ь, в которой К₃ и/или Кд представляют собой радикал амино, получают из соединений формулы 1а восстановлением нитрофункциональной группы. Подвергая соединения формулы 1Ь действию алкилгалогенида, получают соединения формулы 1с, для которых К₃ и/или Кд представляют собой радикал -ΝΚ5Κ5 (в котором К₅ представляет собой атом водорода и К₆ имеет значения, которые даны выше), радикал -ΝΗ-Λ11<-ΝΚ.₅Κ·, или радикал -ΝΗ-Λ11<-ί.’ΟΘΚ-. в котором К₇ не представляет собой атом водорода. Соединения, для которых К₇ представляет собой атом водорода, получают из этих последних соединений, подвергая их последующему омылению.

Ацилированием соединений формулы 1Ь получают соединения формулы 1с, для которых К₃ и/или Кд представляют собой радикал -ΝΗ-ί.Ό-Λ11< или радикал -ΝΗ-ίΌ-ΑΙΚ-ΝΚ-,ΚΐΗ.

Подвергая эти соединения, для которых К₃ и/или К_д представляют собой радикал -ΝΗ-ί.Ό-Α11< или радикал -НН-СО-А1к-ЛК₉К₁₀, алкилированию производным, содержащим алкоксикарбонильный остаток, получают соединения формулы I, для которых К₃ и/или К_д представляют собой радикал -Ы(К₁₁)-СО-А1к или радикал -М(К₁₁)-СО-А1к-МК₉К₁₀, где К₁₁ представляет собой радикал -А1к-СООК₁₂, где К₁₂ не представляет собой атом водорода. Подвергая эти последние продукты омылению, получают соединения, для которых К₃ и/или К_д представляют собой радикал -Ы(К₁₁)-СО-А1к или радикал -М(К₁₁)-СО-А1к-МК₉К₁₀, где К₁₁ представляет собой радикал -А1к-СООН.

Сульфонилированием соединений формулы !Ъ получают соединения формулы К, для которых К₃ и/или К_д представляют собой радикал -ЛН-8О₂-А1к или радикал -ЛН-8О₂-А1к-ЛК₉К₁₀.

Подвергая эти соединения, для которых К₃ и/или К, представляют собой радикал -ЛН-8О₂-А1к или радикал -ЛН-8О₂-А1к-ПК₅К₁₀, алкилированию производным, содержащим алкоксикарбонильный остаток, получают соединения формулы I, для которых К₃ и/или К_д представляют собой радикал -Ы(К₁₁)-8О₂А1к или радикал -М(К₁₁)-8О₂-А1к-МК₉К₁₀, где К_п представляет собой радикал -А1к-СООК₁₂, где К₁₂ не представляет собой атом водорода. Подвергая эти последние продукты омылению, получают соединения, для которых К₃ и/или К, представляют собой радикал -Ы(К₁₁)-8О₂-А1к или радикал -И(К₁₁)-8О₂-А1кΝΚ₉Κ₁₀, где К₁₁ представляет собой радикал -А1к-СООН.

Проведением взаимодействия производного индолизина формулы II с производным алкоксикарбонилбензоилхлорида формулы III получают соединения формулы И, в которой К₃ и/или К_д представляют собой алкоксикарбонильный радикал. Подвергая эти последние соединения омылению, получают соединения формулы К, в которой К₃ и/или К_д представляют собой карбоксильный радикал.

Проведением взаимодействия производного индолизина формулы II с производным трифторацетамидобензоилхлорида формулы III получают соединения формулы Щ в которой К₃ и/или К, представляют собой трифторацетамидный радикал. Подвергая эти последние соединения щелочному гидролизу, получают соединения формулы в которой К₃ и/или Кд представляют собой карбоксильный радикал и/или радикал амино.

Как показывает фиг. 2, начиная с соединений формулы I, в которой К₁ представляет собой радикал бензилокси и К₃ или К_д представляют собой алкоксикарбонильный радикал, можно получать, подвергая эти соединения гидрогенированию, соединения формулы И. Когда К₃ или Кд представляет собой радикал нитро, действием трифторуксусной кислоты получают соединения формулы К.

Подвергая соединения формулы И⁷ О-алкилированию, получают соединения формулы Ц в которой К₁ представляет собой линейный или разветвленный радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал О-(СН₂)_п-сА1к, радикал -О-А1к-СООК₇, радикал -О-А1к-ЫК₅К6, радикал -О-(Сн₂)_п-Рй, радикал -О-А1кО-К₈ (который, когда К₈ представляет собой радикал -СОСН₃, может дать при омылении, радикал -ОА1к-ОН), радикал -О-А1к-СМ который при обработке гидроксиламином может дать радикал -О-А1кС(ЫН₂):КЮН.

Для получения соединений формулы Ш, в которой К₁ представляет собой карбоксильный радикал и А представляет собой радикал -СО- или радикал -8О₂, соединения формулы Б, в которой К₁ представляет собой алкоксикарбонильный радикал, подвергают омылению. Полученные таким образом производные индолизин-1-илкарбоновой кислоты формулы П1 можно затем подвергнуть действию амина, чтобы получить соединения формулы Иг в которой К₁ представляет собой радикал -СО-ЫН-А1к, или действию производного аминокислоты для получения соединений формулы I, в которой К₁ представляет собой радикал -СО-ЛНЦСШЦ-СООШ.

Соединения формулы II, когда К₁ представляет собой радикал -ΝΗ-СОО-трет-бутил или радикал -Ы(СН₃)СН₂С₆Н₅, получают в соответствии с нижеследующими схемами синтеза при использовании реакции Чичибабина (ЗупШеык, (1975), р. 209) для получения индолизинов.

- 8 007902

Соединения формулы II, когда В₁ представляет собой радикал -ОСН₃ или радикал -ОСН₂С₆Н₅, также получают с использованием реакции Чичибабина в соответствии с нижеследующими схемами синтеза:

Соединения формулы I являются мощными антагонистами РОР1 и 2. Их способности ингибировать как образование новых сосудов из дифференцированных эндотелиальных клеток, так и блокировать дифференцировку клеток СЭ34+ СЭ133+ костного мозга взрослых в эндотелиальные клетки была продемонстрирована ίη νίΐΓΟ. Более того, их способность ингибировать патологический ангиогенез была про демонстрирована ίη νίνο.

Вообще, факторы роста фибробластов сильно вовлечены посредством аутокринной, паракринной и юкстакринной секреции в феномены нарушенной регуляции стимуляции роста раковых клеток. Более того, факторы роста фибробластов влияют на ангиогенез в опухолях, который играет преобладающую роль как в росте опухолей, так и феномене метастазирования.

Ангиогенез является процессом генерирования новых капиллярных сосудов из предсуществующих сосудов или мобилизацией и дифференцировкой клеток костного мозга. Так, в процессах неоваскуляризации опухолей наблюдают как неконтролируемую пролиферацию эндотелиальных клеток, так и мобилизацию ангиобластов из костного мозга. Было показано ίη νίΐτο и ίη νίνο, что эндотелиальную пролиферацию стимулируют несколько факторов роста и, в частности, РОР1 или а-РОР и РОР2 или Ь-РОР. Эти два фактора индуцируют пролиферацию, миграцию и продуцирование протеаз эндотелиальными клетками в культуре и неоваскуляризацию ίη νίνο. а-РОР и Ь-РОР взаимодействуют с эндотелиальными клетками посредством двух классов рецепторов, высокоаффинных рецепторов с тирозинкиназной активностью (РОРВ5) и низкоаффинных рецепторов гепаринсульфатпротеогликанового (Н8РО) типа, находящихся на поверхности клеток и во внеклеточных матриксах. При том, что паракринная роль этих двух факторов в эндотелиальных клетках описана широко, а-РОР и Ь-РОР могут действовать на эти клетки в аутокринном процессе. Таким образом, а-РОР и Ь-РОР и их рецепторы представляют собой весьма подходящие мишени для терапевтических воздействий, направленных на ингибирование процесса ангиогенеза (КезЕе! Е., Βοη-δα88οη 8. А., I. С1ш. Ιηνοδΐ, (1999), νοί. 501, рр. 104-1497; Ргез!а Μ., Визпаб М., ЭсП'Ега Р., ТапдЬеШ Е., игЬшаб С., С1иИап1 В. е! а1., Иете ΥογΙ<: Р1епит РиЬЕзйегз, (2000), рр. 7-34, Βίίίοίί^ΐ С, 1апр В., ТЫегу 1.Р., ^οиаηηеаи I., Οηοο^η^ (2002), νοί. 21. рр. 8128-8139).

Более того, систематические исследования с целью определения экспрессии, происходящей из-за а-РОР и Ь-РОР и их рецепторов (РОРВ), в разных типах опухолевых клеток показывают, что клеточный ответ на эти два Р фактора является функциональным в значительном большинстве исследованных человеческих раковых линий. Эти результаты подтверждают гипотезу, что антагонист а-РОР и Ь-РОР может также ингибировать пролиферацию опухолевых клеток (СЕапФег Е.А., 8οδΐιο\νδΙ<ί В.А, ОгееЫеез Е, Аикегтап 8Ъ., Ваиб А., Р1егсе О.Р., Ιη!. I. Сапсег, (1999), νοί. 58. рр. 81-451).

а-РОР и Ь-РОР играют важную роль в росте и поддержании клеток простаты. На животных моделях и людях было показано, что изменение клеточного ответа на эти факторы играет решающую роль в про

- 9 007902 грессии рака простаты. Действительно, при этих патологиях регистрируют как увеличение продукции аЕСЕ и Ь-ЕСЕ фибробластами и эндотелиальными клетками, присутствующими в опухоли, так и увеличение экспрессии ЕСЕК рецепторов на опухолевых клетках. Таким образом, происходит паракринная стимуляция клеток рака простаты, и этот процесс может быть важным компонентом этой патологии. Соединение, обладающее активностью антагониста ЕСЕК рецепторов, такое как соединения по настоящему изобретению, может представлять собой предпочтительную терапию при этих патологиях (Ст Ό., Ворк|ие1 Е., С1т. Сапсег Кез., (1999), νοί. 71. рр. 5-1063; Эо11 1.Л., КеШег Е.К., Сга\\Тог<1 8.Е., Р1пз М.К., СатрЬе11 8.С., Войск Ν.Ρ., Ргоз1а1е, (2001), νο1. 305, рр. 49-293).

Несколько исследований демонстрируют присутствие а-ЕСЕ и Ь-ЕСЕ и их ЕСЕК рецепторов как в линиях клеток опухолей молочной железы человека (в частности МСЕ7), так и в биопсиях этих опухолей. Эти факторы при этой патологии могут быть причиной появления весьма агрессивного фенотипа, вызывающего сильное метастазирование. Таким образом, соединение, имеющее активность антагониста рецептора ЕСЕ, такое как соединения формулы I, может представлять собой предпочтительную терапию при этих патологиях (Уегсоийег-Ейоиай Л-8., Схезхак X., Сгерш М., Ьетоте 1., ВоШу В., Ье ВоигЫз X. е1 а1., Ехр. Се11 Кез., (2001), νο1. 262. рр. 59-68).

Злокачественные меланомы являются опухолями, которые с высокой частотой индуцируют метастазы и очень устойчивы к разным видам химиотерапии. Процессы ангиогенеза играют главную роль в прогрессии злокачественной меланомы. Более того, показано, что вероятность появления метастазов очень сильно возрастает при возрастании васкуляризации первичной опухоли. Клетки меланомы продуцируют и секретируют разные ангиогенные факторы, в том числе а-ЕСЕ и Ь-ЕСЕ. Более того, показано, что ингибирование клеточных эффектов этих двух факторов растворимыми ЕСЕК1 блокирует пролиферацию и выживание опухолевых клеток меланомы ίη νίύΌ и прогрессию опухоли ίη νί\Ό. Таким образом, соединение, имеющее активность антагониста ЕСЕК рецептора, такое как соединения по настоящему изобретению, может представлять собой предпочтительную терапию при этих патологиях (КоТз!аб Е.К., На1зог Е.Е., Сапсег Кез., (2000); Уауоп А., Ма Υ-8., 8аТгап М., К1адзЬгип М., На1аЬап К., Опсодепе, (1997), то1. 14, рр. 2999-3009).

Клетки глиомы продуцируют а-ЕСЕ и Ь-ЕСЕ ш νίΐΓΌ и ш νί\Ό и имеют разные ЕСЕК на своей поверхности. Таким образом, из этого следует, что эти два фактора посредством аутокринного и паракринного действия играют центральную роль в прогрессии опухоли этого типа. Более того, как и у большинства солидных опухолей, прогрессия глиом и их способность индуцировать метастазы сильно зависит от ангиогенных процессов в первичной опухоли. Также было показано, что антисмысловые последовательности ЕСЕК1 блокируют пролиферацию человеческих астроцитом. Более того, описаны производные нафталинсульфонатов для ингибирования клеточных эффектов а-ЕСЕ и Ь-ЕСЕ ш Х11го и ангиогенеза, индуцированного этими факторами роста ш νί\Ό. Интрацеребральная инъекция этих соединений индуцирует весьма значительное увеличение апоптоза и существенное снижение ангиогенеза, что приводит к значительной регрессии глиом у крыс. Таким образом, соединение, имеющее активность антагониста а-ЕСЕ, и/или Ь-ЕСЕ, и/или ЕСЕК рецепторов, такое как соединения по настоящему изобретению, может представлять собой предпочтительную терапию при этих патологиях (Уатайа 8.М., ΥатадисЫ Е., Вго\уп К., Вегдег М.8., Мотзоп К.8., С11а, (1999), νο1. 76„ рр. 28-66; Аидиз1е Р., Сигзе1 Ό.Β., Ьет1еге 8., Ке1тегз Ό., Сиеνаз Р.,Сагсе11ег Е., е! а1., Сапсег Кез., (2001), νο1. 26. рр. 61-1717).

Совсем недавно была документирована потенциальная роль проангиогенных агентов при лейкемиях и лимфомах. Действительно, было доложено, что вообще клеточные клоны при этих патологиях могут либо быть естественным путем уничтожены иммунной системой, либо могут переключиться на ангиогенный фенотип, который способствует их выживанию и затем их пролиферации. Это изменение фенотипа индуцировано чрезмерной экспрессией ангиогенных факторов, в частности макрофагами, и/или мобилизацией этих факторов из внеклеточного матрикса (Тйотаз Ό.Α., С11ез Е.1., Сойез 1., А1Ьйаг М., Кап1аграп Н.М., Ас!а Наета!о1, (2001), νο1. 207, рр. 106-190). Из числа этих ангиогенных факторов Ь-ЕСЕ найдены во многих линиях клеток лимфобластоидных и гемопоэтических опухолей. ЕСЕК рецепторы также присутствуют у большинства этих линий, откуда следуют возможные аутокринные клеточные эффекты а-ЕСЕ и Ь-ЕСЕ, вызывающие пролиферацию этих клеток. Более того, сообщают, что в костном мозге ангиогенез из-за паракринных эффектов коррелирует с прогрессией некоторых из этих патологий.

Более конкретно, показано, что Ь-ЕСЕ в клетках хронической лимфоидной лейкемии индуцирует увеличение экспрессии антиапоптозного белка (Вс12), что приводит к увеличению выживаемости этих клеток и поэтому существенно участвует в их малигнизации. Более того, уровни Ь-ЕСЕ, измеренные в этих клетках, очень хорошо коррелируют с клинической стадией этого заболевания и устойчивостью к химиотерапии, применяемой при этой патологии (флударабин). Таким образом, соединение, имеющее активность антагониста ЕСЕК рецептора, такое как соединения по настоящему изобретению, может представлять собой при этой патологии предпочтительную терапию в комбинации как с флударабином, так и с другими активными продуктами (Тйотаз Э.А.. С11ез Е.1., Сойез 1., А1Ьйаг М., КаПаграп Н.М., Ас!а Наета!о1, (2001), νο1. 207, рр. 106-190; СаЬгПоге 1.Ь. Опсо1од1зЕ (2001), νο1. 6. рр. 4-7).

При хронической миелоидной лейкемии существует корреляция между процессом ангиогенеза в костной ткани и экстрамедуллярными заболеваниями. Различные исследования демонстрируют, что ин

- 10 007902 гибирование ангиогенеза, в частности, соединением, имеющим активность антагониста ЕСЕК рецептора, может представлять собой предпочтительную терапию при этой патологии.

Пролиферация и миграция гладкомышечных клеток кровеносных сосудов вносит вклад в гипертрофию интимы артерий и таким образом играет ведущую роль в атеросклерозе и рестенозе после ангиопластии и эндартеректомии.

Исследования ίη νίνο показывают происходящую после повреждения сонной артерии введением баллона локальную продукцию а-ЕСЕ и Ь-ЕСЕ. В этой же модели нейтрализующие антитела против ЕСЕ2 ингибируют пролиферацию гладкомышечных клеток кровеносных сосудов и таким образом снижают гипертрофию интимы.

Химерный белок ЕСЕ2, связанный с такой молекулой, как сапонин, блокирует связывание Ь-ЕСЕ его ЕСЕК рецепторами, ингибирует пролиферацию гладкомышечных клеток кровеносных сосудов ίη νίίτο и гипертрофию интимы ίη νίνο (Ερδΐβίη С.Е., 81еда11 С.В., Βίτο 8., Ей Υ.Μ., П1хСега1б Ό., С1тси1а11оп, (1991), νο1. 87, ρρ. 84-778; ^аИе^е^ет 1., СисиШющ (1997), ρρ. 96-4083).

Таким образом, антагонисты ЕСЕК рецепторов, такие как соединения по настоящему изобретению, представляют собой предпочтительную терапию в отдельности или в комбинации с соединениями, которые являются антагонистами других факторов роста, участвующих в этих патологиях, таких как фактор роста из тромбоцитов, при лечении патологий, связанных с пролиферацией гладкомышечных клеток кровеносных сосудов, таких как атеросклероз, рестеноз после ангиопластии или после введения внутрисосудистых протезов (расширителей), или во время операции по аорто-коронарному шунтированию.

Гипертрофия сердца происходит в ответ на стресс стенки желудочков, вызываемый перегрузкой в смысле давления и объема. Такая перегрузка может быть последствием многочисленных патофизиологических состояний, таких как гипертензия, коарктация аорты, инфаркт миокарда и разные сосудистые нарушения. Последствиями этой патологии являются морфологические, молекулярные и функциональные изменения, такие как гипертрофия миоцитов сердца, накопление белков матрикса и повторная экспрессия эмбриональных генов. В этой патологии участвует Ь-ЕСЕ. Действительно, добавление Ь-ЕСЕ в культуры кардиомиоцитов новорожденных крыс модифицирует профиль соответствующих генов к сократимым белкам, что приводит к генному профилю, который подобен эмбриональному. Кроме того, миоциты взрослой крысы проявляют гипертрофическую реакцию под действием Ь-ЕСЕ, причем эту реакцию блокируют нейтрализующие антитела против Ь-ЕСЕ. Эксперименты, проведенные ίη νίνο на трансгенных мышах, нокаутных по Ь-ЕСЕ, показывают, что Ь-ЕСЕ является главным стимулирующим фактором для гипертрофии миоцитов сердца при этой патологии (8с1и.111х 1еТ. ЭДШ 8.А., №етаг1 М.Ь., Ке18ет Р.1., Еп§1с 8.1., Ζΐιοιι М. е1 а1., 1. С1ш. 1пус81, (1999), νο1. 19. ρρ. 104-709).

Соответственно, соединение, такое как соединения по настоящему изобретению, имеющее активность антагониста ЕСЕК рецептора, представляет собой предпочтительную терапию при лечении сердечной недостаточности и другой патологии, связанной с дегенерацией сердечной ткани. Это лечение можно проводить в отдельности или в комбинации с существующими лечебными средствами (бетаблокаторы, диуретики, антагонисты ангиотензина, антиаритмические средства, антагонисты кальция, антитромботические средства и т.п.).

Сосудистые нарушения, вызываемые диабетом, характеризуются изменением реактивности сосудов и кровотока, повышенной проницаемостью, чрезмерным пролиферативным ответом и увеличением отложений белков матрикса. Более конкретно, а-ЕСЕ и Ь-ЕСЕ присутствуют в преретинальных мембранах пациентов с диабетическими ретинопатиями, в мембранах подлежащих капилляров, и стекловидном теле пациентов, страдающих пролиферативными ретинопатиями. Для сосудистых нарушений, связанных с диабетом, разработан растворимый рецептор для ЕСЕ, способный связывать как а-ЕСЕ, так и Ь-ЕСЕ (Τί1ΐοη К.С., Όίχοη К..Е., Вгоск Т.А., Εχρ. Θρίη. 1пус51. Эгидк, (1997), νο1. 84, ρρ. 6-1671). Таким образом, соединение, такое как соединения формулы I, имеющее активности антагониста ЕСЕК рецептора, представляет собой предпочтительную терапию в отдельности или в комбинации с соединениями, которые являются антагонистами других факторов роста, участвующих в этих патологиях, таких как фактор роста эндотелия сосудов.

Ревматоидный артрит (РА) представляет собой хроническое заболевание неизвестной этиологии. При том, что он поражает многие органы, самой тяжелой формой РА является прогрессирующее синовиальное воспаление суставов, приводящее к их разрушению. Оказывается, что на прогрессию этого заболевания сильно влияет ангиогенез. Так, а-ЕСЕ и Ь-ЕСЕ были найдены в синовиальной ткани и в жидкости суставов пациента с РА, что указывает на участие этого фактора роста в инициации и/или прогрессии этой патологии. На моделях артрита, вызванного адъювантом у крыс, показано, что чрезмерная экспрессия Ь-ЕСЕ увеличивает тяжесть этого заболевания, тогда как нейтрализующие антитела против Ь-ЕСЕ блокируют прогрессию РА (ТатакНба А., Υοηет^ΐ8и Υ., Окагю 8., №-1када\\'а К., ЫакакЫта Υ., 1п5а Т. е1 а1., 1. Iттиηο1., (2002), νο1. 57, ρρ. 168-450; МаиаЬе Ν., Оба Н., Ыакатига К., Кида Υ., ИсЫба 8., Ка\\'адисЫ Н., КНеитаЮк (1999), νο1. 20. ρρ. 38-714). Таким образом, соединения в соответствии с этим изобретением представляют собой предпочтительную терапию при этой патологии.

Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) включают в себя две формы хронических воспалительных заболеваний кишечника: язвенный колит и болезнь Крона. ВЗК характеризуются иммунными

- 11 007902 дисфункциями, которые приводят к неуместной продукции воспалительных цитокинов, индуцирующих возникновение локальной системы микрососудов. Последствием этого ангиогенеза, имеющего воспалительное происхождение, является ишемия кишечника, вызванная сужением сосудов. У пациентов, страдающих этими патологиями, измерены высокие уровни циркулирующего и локального Ь-ЕСЕ (1<апаха\\'а 8., Ткипоба Т., Опита Е., Марта Т., Кадуата М., КкисЫ К., Атспсап 1оита1 оГ Са81тосп1сго1оду, (2001), νοί. 28. рр. 96-822; Т1югп М., КааЬ Υ., Баг55оп А., Ссгб1п В., На11дгсп К., 8сапбта\зап 1оитиа1 оГ Сайгосп1сто1о§у, (2000), νο1. 12, рр. 35-408). Соединения по этому изобретению, которые проявляют высокую антиангиогенную активность в модели воспалительного ангиогенеза, представляют собой предпочтительную терапию при этих патологиях.

ЕСЕК 1, 2 и 3 участвуют в процессах хондрогенеза и остеогенеза. Мутации, приводящие к экспрессии перманентно активированных ЕСЕК, были связаны с большим числом наследственных заболеваний человека, которые приводят к порокам развития скелета, таким как синдромы Пфейффера (РГс1ГГсг), Крузона (Сгоихоп), Аперта (Арсй), Джексона-Вейсса Цасккоп-Усцк) и синдром свернутой кожи БираСтивенсона (Всагс-81стсп5оп сийк §ута1а). Некоторые из этих мутаций, которые, более конкретно, затрагивают ЕСЕК3, приводят, в частности, к ахондроплазии (АСН), гипохондроплазии (НСН) и танатофорной дисплазии (ТНапаЮрНопс бу8р1а81а), причем АСН является наиболее обычной формой карликовости. С биохимической точки зрения, постоянная активация этих рецепторов происходит при димеризации рецептора в отсутствие лиганда (Сйсп. Ь, Абаг К., Υапд X., Мопкопсдо Е.С., Ы С., Нашсйка Р.У., Υадοп А. и Бспд С.Х., (1999), Т1с 1оитпа1 оГ С1т. [пусзС νο1. 104, Ыо. 11, рр. 1517-1525). Таким образом, соединения по этому изобретению, которые проявляют активность антагониста связывания Ь-ЕСЕ с ЕСЕК и которые таким образом ингибируют димеризацию этого рецептора, представляют собой предпочтительную терапию при этих патологиях.

Благодаря их низкой токсичности и их фармакологическим и биологическим свойствам, соединения по настоящему изобретению находят применение в лечении любой карциномы, имеющей высокий уровень васкуляризации (легких, молочной железы, простаты, пищевода), или индуцирующей метастазы (толстой кишки, желудка, меланомы), или чувствительной к а-ЕСЕ или Ь-ЕСЕ аутокринным образом, или, наконец, при патологиях типа лимфомы или лейкемии. Эти соединения представляют собой предпочтительную терапию в отдельности или в комбинации с надлежащей химиотерапией. Соединения в соответствии с этим изобретением также находят применение при лечении сердечно-сосудистых заболеваний, таких как атеросклероз, рестеноз после ангиопластии, при лечении заболеваний, связанных с осложнениями, которые появляются вследствие введения внутрисосудистых протезов и/или аортокоронарного шунтирования, или других трансплантатов сосудов, или гипертрофии сердца, или сосудистых осложнений диабета, таких как диабетические ретинопатии. Соединения в соответствии с этим изобретением также находят применение в лечении хронических воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит и ВЗК. Наконец, соединения в соответствии этим изобретением могут быть полезными в лечении ахондроплазии (АСН), гипохондроплазии (НСН) и ТБ (танатотропной дисплазии).

В соответствии с другими из его отличий, предметом настоящего изобретения является поэтому фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента соединение формулы I в соответствии этим изобретением или одну из его фармацевтически приемлемых солей, возможно в комбинации с одним или более чем одним из инертных и подходящих эксципиентов.

Выбирают указанные эксципиенты соответственно фармацевтическим стандартным лекарственными формам и желаемым путям введения: перорально, под язык, под кожу, в мышцу, в вену, через кожу, через слизистые, локально или через прямую кишку.

Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно вводят пероральным путем.

В фармацевтических композициях по настоящему изобретению для перорального введения активные ингредиенты можно вводить в стандартной лекарственной форме для введения в виде смеси с общепринятыми фармацевтическими носителями. Подходящие стандартные лекарственные формы включают в себя, например, таблетки, возможно с насечкой, желатиновые капсулы, порошки, гранулы и пероральные растворы или суспензии.

Когда готовят твердую композицию в форме таблеток, главный активный ингредиент смешивают с фармацевтическим носителем, таким как желатин, крахмал, лактоза, стеарат магния, тальк, гуммиарабик и т. п.

Можно покрывать таблетки сахарозой или другими подходящими материалами или же можно обрабатывать их так, чтобы они имели продленную или отложенную активность и непрерывно высвобождали предопределенное количество активного ингредиента.

Препарат в форме желатиновых капсул получают смешиванием активного ингредиента с разбавителем и вливанием этой полученной смеси в мягкие или твердые желатиновые капсулы.

Препарат в форме сиропа или эликсира может содержать активный ингредиент с подсластителем, предпочтительно не содержащим калории, метилпарабеном и пропилпарабеном в качестве антисептиков, усилителем вкуса и подходящим красителем.

Диспергируемые в воде порошки или гранулы могут содержать активный ингредиент в виде смеси

- 12 007902 с диспергирующими агентами, смачивающими агентами или суспендирующими агентами, такими как поливинилпирролидон, и с подсластителями и агентами, корригирующими вкус.

Активный ингредиент можно также вводить в стандартную лекарственную форму в виде микрокапсул, возможно с одним или более чем одним из носителей или добавок.

В фармацевтических композициях в соответствии с настоящим изобретением активный ингредиент может также быть в форме комплекса включения в циклодекстринах, их простых эфирах или их сложных эфирах.

Количество активного ингредиента, подлежащего введению, зависит, как всегда, от степени прогрессии заболевания и от возраста и веса пациента.

Композиции в соответствии с этим изобретением для перорального введения поэтому содержат рекомендованные дозы от 0,01 до 700 мг.

Нижеследующие примеры, данные без ограничения, иллюстрируют настоящее изобретение.

Способы получения

Способ получения I. Синтез трет-бутил-2-метилиндолизин-1-илкарбамата

К 10 г (48 ммоль) трет-бутил-[(пиридин-2-ил)метил]карбамата в 50 мл ацетонитрила добавляют 11,7 г (62,4 ммоль) карбоната калия и 6,3 г (72 ммоль) бромида лития и далее 5 мл (62,4 ммоль) хлорацетона и эту среду нагревают при дефлегмации в течение ночи.

Охлаждают ее и добавляют к ней 40 мл воды и 11,7 г (62,4 ммоль) карбоната калия и нагревают эту среду при 90°С в течение 2 ч 30 мин. Эту реакционную среду охлаждают и экстрагируют этилацетатом.

Органическую фазу удаляют после отстаивания, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Продукт очищают флэш-хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью толуол/этилацетат (95:5). Собирают 6,27 г белого порошка.

Выход: 53%

Точка плавления: 111°С

Способ получения II. Синтез №бензил-Н-метил-И-(2-метилиндолизин-1-ил)амина

Это соединение получают в соответствии с той же процедурой, что и соединение способа получения I, используя реакцию Чичибабина и начиная с 2,47 г №бензил-Н-метил-Ы-[(пиридин-2ил)метил]амина и хлорацетона. Получают 970 мг желтого масла.

Выход: 34%

Масс-спектрометрия (вариант Е8+): МН+ = 251

Способ получения III. Синтез 1-метокси-2-метилиндолизина

Это соединение получают, начиная с 2-(метоксиметил)пиридина и хлорацетона, используя реакцию Чичибабина. Продукт изолируют в виде желтого масла, которое кристаллизуется в морозильнике.

Выход: 77,5%

Масс-спектрометрия (вариант Е8+): МН+ = 161,8

Способ получения IV. Синтез-бензилокси-2-метилиндолизина

Это соединение получают в соответствии с той же процедурой, какая описана в способе получения I, используя реакцию Чичибабина. Продукт изолируют в форме желтого масла.

Выход: 39%

Способ получения V. Синтез метил-5-(хлоркарбонил)-2-[(2,2,2-трифторацетил)амино]бензоата

Стадия А. Синтез 4-амино-3-(метоксикарбонил)бензойной кислоты

150 мг (1,21 ммоль) 4-диметиламинопиридина добавляют к 2,5 г (12,1 ммоль) 2,4-диоксо-1,4дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-6-карбоновой кислоты [описана в 1. Мей. СНсш.. (1981), 24(6), 735-742] в растворе в 10 мл диметилформамида и 10 мл метанола и эту смесь нагревают при 60°С в течение 3 ч. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в воду и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Полученное твердое вещество собирают в этилацетат, фильтруют и сушат. Получают 1,98 г белого порошка.

Выход: 84%

Точка плавления: 224,5°С

Стадия В. Синтез метил-3-(метоксикарбонил)-4-[(2,2,2-трифторацетил)амино]бензоата

868 мкл (6,15 ммоль) трифторуксусного ангидрида быстро добавляют к 1,0 г (5,12 ммоль) 4-амино3-(метоксикарбонил)бензойной кислоты в суспензии в 15 мл дихлорметана. Этот раствор перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Этот раствор концентрируют досуха и полученное твердое вещество собирают в смесь пентан/этиловый эфир и затем отфильтровывают. После сушки получают 1,48 г белого порошка.

Выход: 99%

Точка плавления: 239°С

Стадия С.

530 мкл (7,27 ммоль) тионилхлорида и 3 капли диметилформамида добавляют к 784 мг (2,69 ммоль) метил 3-(метоксикарбонил)-4-[(2,2,2-трифторацетил)амино]бензоата в растворе в 9 мл дихлорметана и

- 13 007902 затем эту среду нагревают при дефлегмации в течение 90 мин. Ее упаривают досуха и избыток тионилхлорида удаляют совместным испарением с толуолом. Получают 834 мг хлорангидрида в форме желтого твердого вещества, которое используют как есть, без дальнейшей очистки, в стадиях бензоилирования индолизинов.

Выход: количественный.

Примеры

Пример 1. (1-Метокси-2-метилиндолизин-3-ил)-(3-метокси-4-нитрофенил)метанон

4,21 г (0,0195 моль) 3метокси-4-нитробензоилхлорида добавляют к 3 г (0,0186 моль) 1-метокси-2метилиндолизина, способ получения которого описан в способе получения III, растворяют в 50 мл 1,2дихлорэтана и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч.

Эту реакционную среду наливают на воду. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают водным раствором бикарбоната натрия (гидрокарбоната натрия) и затем водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под вакуумом.

Остаток очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании дихлорметаном. После упаривания получают 6,05 г желтого твердого вещества.

Выход: 95%

Точка плавления: 287°С.

Примеры 2-28.

Проведением процедуры в соответствии с вышеописанным способом получения синтезируют соединения формулы I, для которых А представляет собой радикал -СО-, описанные в табл. I, бензоилированием по третьей позиции индолизинов, разнообразно замещенных по первой и второй позиции подходящим образом замещенными бензоилхлоридами.

ТаблицаI

Пример	К,	в2	Нз	Р4	Выход (%)	Точка плавления (°С) или масс-спектрометрия (МН+)
2	ОВп	РН	ОМе	νο2	94	186°С
3	ОВп	Ме	ОМе	νο2	95	153°С
4	ОВп	Ме	Н	СО2Ме	70,5	110°С
5	ОМе	сРг	ОМе	νο2	81	112°С
6	ОМе	РН	ОМе	νο2	82	65°С
7	ОМе	Ме	Н	νο2	88	146°С
8	ОМе	Ме	Н	СО2Ме	92	143°С
9	ОМе	Ме	СО2Ме	Η	75	12ГС
10	ОМе	Ме	ΝΟ2	СО2Ме	57	138°С
11	ОМе	Ме	ОМе	СО2Ме	88,5	145°С
12	ОМе	Ме	Н	СН2СО2Ме	75	94°С
13	СО2Е1	Ме	ОМе	-νο2	91	137°С
14	СО2Е1	Ме	ОМе	СО2Ме	45,5	14ГС
15	СО2Е1	РН	ОМе	νο2	85	151°С
16	СО2Е1	Ме	Н	СО2Ме	98	139°С
17	1\1(Ме)Вп	Ме	ОМе	νο2	90	МН+ = 430,3
18	ΝΗΒΟΟ	Ме	ОМе	νο2	76	МН+ = 426,5
19	СО2Е1	Ме	СО2Ме	νο2	92	137°С
20	ОМе	Ме	СО2Ме	νο2	100	150°С
21	ОМе	Ме	νο2	ОМе	90	135°С
пп	Г*Г\ ГТ *		МЛ		ОЛ
		1У1С	ΙΝ4-/2		ου	ии ν
23	СО2Е1	Ме	СО2Ме	νο2	92	137°С
24	ОМе	Ме	СО2Ме	ОМе	69	119°С
25	СО2Е1	Ме	СО2Ме	ОМе	12	110°С
26	ОМе	сРг	СО2Ме	νο2	34	МН+= 395,2
27	ΝΗ-ΒΟΟ	Ме	СО2Ме	νο2	81	92°С
28	ΝΗ-ΒΟΟ	Ме.	СО2Ме	ΝΗΟΟΟΡ3	81	226°С

Βη = бензил

Ме = метил

Εΐ = этил

ВОС = трет-бутоксикарбонил

Пример 29. (1-Амино-2-метилиндолизин-3-ил)-(3-метокси-4-нитрофенил)метанон

2,32 мл трифторуксусной кислоты добавляют каплями к раствору 643 мг (1,51 ммоль) трет-бутил-3(3-метокси-4-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-илкарбамата в 20 мл дихлорметана, охлажденного до 0°С. Как только добавление завершено, этой среде дают вернуться к комнатной температуре и перемешивают ее в течение 4 ч. Эту реакционную среду наливают на насыщенный водный раствор карбоната

- 14 007902 калия и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Полученные кристаллы собирают в изопропиловый эфир, отфильтровывают, промывают изопропиловым эфиром и затем сушат. Получают 425 мг коричневого твердого вещества.

Выход: 87%

Масс-спектрометрия (вариант Е8+) МН⁺ = 326,3

Проведением процедуры в соответствии с вышеописанным способом получения синтезируют соединения формулы I, для которых А представляет собой радикал -СО-, и какие описаны в табл. II, снятием защиты с амина по первой позиции индолизинов с помощью трифторуксусной кислоты.

Таблица II

Пример		*2	Кз	«4	Выход (%)	Точка плавления (°С)
30	νη2	Ме	СО2Ме	νο2	91	162°С
31	νη2	Ме	СО2Ме	ΝΗΟΟΟΕ3	88	23ГС

Пример 32. Х-[3-(3-Метокси-4-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-ил]метансульфонамид

0,292 мл (3,78 ммоль) мезилхлорида добавляют к раствору 350 мг (1,08 ммоль) соединения примера 29 в 3 мл пиридина и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в 1 н. соляную кислоту и экстрагируют дихлорметаном. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Остаток кристаллизуют из этанола. Получают 327 мг желтых кристаллов.

Выход: 75%

Масс-спектрометрия (вариант Е8+) МН⁺ = 404,3

Пример 33. Метил-5-[(3-{[(3-метоксифенил)сульфонил]амино}-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]2-[(2,2,2-трифторацетил)амино]бензоат

Это соединение получают в соответствии с тем же способом, как в предыдущем примере, сульфонилированием метил-5-[(1-амино-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]-2-[2,2,2-трифторацетил)амино]бензоата 3-метоксибензолсульфонилхлоридом. Получают 466 мг желтого порошка.

Выход: 83%

Точка плавления: 220,5°С

Пример 34. Метил-5-[(1-{[(3-метоксианилино)карбониламино}-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил ]2-[(2,2,2-трифторацетил)амино]бензоат

140 мкг (1,05 ммоль) 3-метоксифенилизоцианата добавляют к 400 мг (0,95 ммоль) метил-5-[(1амино-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]-2-[2,2,2-трифторацетил)амино] бензоата, растворенного в 13 мл тетрагидрофурана. Эту реакционную смесь нагревают при 40°С в течение 20 ч и концентрируют под пониженным давлением. Полученный остаток собирают в ацетон, твердое вещество отфильтровывают и промывают его ацетоном и затем этиловым эфиром. Получают 442 мг желтого порошка.

Выход: 82%

Точка плавления: 314°С

Пример 35. (3-Метокси-4-нитрофенил)-[2-метил-1-(метиламино)индолизин-3-ил]метанон

Стадия А. Синтез трет-бутил-3-(3-метокси-4-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-ил-(метил)карбамата

3,05 г (7,2 ммоль) трет-бутил-3-(3-метокси-4-нитробензоил-2-метилиндолизин-1-ил-карбамата в растворе в 50 мл тетрагидрофурана добавляют каплями к 315 мг (7,9 ммоль) гидрида натрия (в виде 60%ой дисперсии в масле) в суспензии в 10 мл тетрагидрофурана, охлажденного до 0°С. После перемешивания в течение 1 ч при 0°С добавляют 0,59 мл (9,5 ммоль) метилйодида, поддерживая эту среду при 0°С. Дают ей вернуться к комнатной температуре и перемешивают ее в течение 1 ч. Эту реакционную среду наливают на насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Получают 3,47 г пены оранжевого цвета.

Выход: 96%

Масс-спектрометрия (вариант Е8+) МН⁺ = 440,3

Стадия В.

мл трифторуксусной кислоты добавляют каплями к раствору 3,38 г (7,7 ммоль) продукта, полученного в стадии А, в 60 мл дихлорметана, охлажденного до 0°С. Когда это добавление завершено, этой среде дают вернуться к комнатной температуре и перемешивают ее в течение 3 ч.

Эту реакционную среду наливают на насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Остаток очищают флэш-хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью толу

- 15 007902 ол/этилацетат (9/1). После упаривания получают 2,2 г красного порошка.

Выход: 76%

Масс-спектрометрия (вариант Е8+) МН⁺ = 340,2

Примеры 36 и 37.

Проведением процедуры в соответствии с примером 35, стадией А, синтезируют соединения формулы I, для которых А представляет собой радикал -СО- и которые описаны в табл. III, алкилированием трет-бутилкарбамата по первой позиции индолизинов 3-метоксибензилхлоридом в присутствии гидрида натрия в растворителе, таком как тетрагидрофуран и диметилформамид.

Таблица III

Пример	Βι	*2		К4	Выход (%)	Точка плавления (°С) или масс-спектрометрия (МН+)
36	Ν(ΒΟΟ)Βη-3-ΟΜθ	Ме	ОМе	νο2	91	МН+ = 546,4
37	Ы(ВОС)Вп-3-ОМе	Ме	СО2Ме	νο2	80	65°С

Примеры 38 и 39.

Проведением процедуры в соответствии примером 35, стадией В, синтезируют соединения формулы I, для которых А представляет собой радикал -СО- и которые описаны в табл. IV, снятием защиты с амина по первой позиции индолизинов с помощью трифторуксусной кислоты.

Таблица IV

Пример	1^1	*2		*4	Выход (%)	Массспектрометрия (МН+)
38	ΝΗΒη-3-ОМе	Ме	ОМе	νο2	89	МН+ = 446,3
39	ΝΗΒπ-3-ОМе	Ме	СОгМе	νη2	99	МН+ = 444,4

Пример 40. [1-(Диметиламино)-2-метилиндолизин-3-ил]-(3-метокси-4-нитрофенил)метанон

382 мг (1,1 ммоль) соединения примера 21 в растворе в 10 мл тетрагидрофурана добавляют каплями к 44 мг (1,1 ммоль) гидрида натрия (в виде 60% дисперсии в масле) в суспензии в 5 мл тетрагидрофурана, охлажденного до 0°С. Как только введение завершено, этой среде дают вернуться к комнатной температуре в течение 1 ч и затем добавляют к ней 69 мкл (1,1 ммоль) метилйодида и перемешивают эту среду при комнатной температуре в течение 17 ч.

Эту реакционную среду наливают на насыщенный водный раствор хлорида натрия и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Остаток очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью толуол/этилацетат (95/5). Получают 143 мг пены оранжевого цвета.

Выход: 37%

Пример 41. {1-[(3-Метоксибензил)-(метил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}-(3-метокси-4-нитрофенил)метанон

595 мг (1,83 ммоль) карбоната цезия и 83 мкл (1,34 ммоль) метилйодида добавляют к 542 мг (1,22 ммоль) {1-[(3-метоксибензил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}-(3-метокси-4-нитрофенилметанона в растворе в 15 мл диметилформамида.

Эту реакционную смесь нагревают при 40°С в течение 21 ч.

Эту смесь вливают в насыщенный раствор хлорида натрия и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают хроматографией на силикагеле при элюировании смесью толуол/этилацетат (95/5). Получают красную смолу.

Выход: 96%

Масс-спектрометрия (вариант Е8+) МН+ = 460,3

Пример 42. Метил-2-амино-5-({1-[3-метоксибензил)(метил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)бензоат

Это соединение получают в соответствии с тем же способом, какой описан в примере выше, начиная с 340 мг (0,76 ммоль) метил-2-амино-5-({1-[(3-метоксибензил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)бензоата. Получают 260 мг твердого вещества оранжевого цвета.

Выход: 80%

Точка плавления: 60°С

Пример 43. Метил-5-({1-[(3-метоксибензоил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)-2-[2,2,2трифторацетил)амино]бензоат

3,37 г (7,6 ммоль) бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфонийгексафторфосфата (ВОР) и

- 16 007902

2,1 мл триэтиламина добавляют к 1,16 г (7,6 ммоль) 3-метоксибензойной кислоты, растворенной в 30 мл диметилформамида и 60 мл дихлорметана.

Эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин и затем добавляют к ней 3,04 г (7,2 ммоль) метил-5-[(1-амино-2-метилиндолизин-3-ил)-карбонил]-2-[2,2,2-трифторацетил)амино] бензоата.

После перемешивания в течение 16 ч при комнатной температуре желтый осадок, полученный в этой реакционной среде, отфильтровывают и промывают его дихлорметаном. Получают 2,38 г желтого порошка.

Выход: 60%

Точка плавления: 239° С

Примеры 44-61.

Проведением процедуры в соответствии с вышеописанным способом синтезируют соединения, описанные в табл. V, сочетанием (1-амино-2-метилиндолизин-3-ил)-(3-метокси-4-нитрофенил)метанона или метил-5-[(1-амино-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]-2-[2,2,2-трифторацетил)амино]бензоата с надлежащей карбоновой кислотой в присутствии бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфонийгексафторфосфата (ВОР).

Таблица V

Пример	Κι	*2	*3		Выход (%)	Точка плавления (°С)
44	ЫНСОР11-4-С1	Ме	ОМе	νο2	76	255°С
45	ЫНСОР11-4-СО2Ме	Ме	ОМе	νο2	88	274°С
46	ЫНСОРН-З-ОМе	Ме	ОМе	νο2	86	180°С
Д7	1ЧНППРИ.гПМа.4.МП.	Μα	ПМс	Ν(Ί.	кп	7ЯА°Г
48	ЫНСОРй-2,3-ОМе	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	87	215°С
49	ЫНСОРй-2,5-ОМе	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	83	214°С
50	ЫНСОРИ-3,4-ОМе	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	76	260°С
51	ЫНСОРН-3,4,5-ОМе	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	83	259°С
52	ЫНСОРК-3,5-ОМе	Ме	СОгМ©	ЫНСОСЕз	74	223°С
53	ЫНСОР11-3-ОМе-4-Ме	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	82	251°С
54	N НСО ΡΙί-З ,4-метил ендиокси	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	79	245°С
55	ЫНСОРй-3-ОМе-4-С1	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	82	264°С
56	ЫНСОРй-З-ОМе-4-Ε	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	27	260°С
57	ЫНСОРй-2,5-ОМе-4-С1	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	82	242°С
58	ЫНСО-5-индолил	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	76	186°С
59	ЫНСОРй-3-ОМе-4-СО2Ме	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	77	19ГС
60	ЫНСОРН-3-ОСЕ3	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕз	60	258°С
61	ЫНСОРИ-2,4,5-ОМе	Ме	СО2Ме	ЫНСОСЕ3	64	253°С

Пример 62. №[3-(3-Метокси-4-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-ил]ацетамид

1,20 мл (12,60 ммоль) уксусного ангидрида добавляют к 410 мг (1,26 ммоль) (1-амино-2метилиндолизин-3-ил)-(3-метокси-4-нитрофенил)-метанона, растворенного в 10 мл дихлорметана.

Эту реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин. Полученный осадок отфильтровывают и промывают этиловым эфиром и затем сушат с получением 295 мг порошка оранжевого цвета.

Выход: 63%

Точка плавления: 238°С

Пример 63. 3-Метокси-Ы-[3-(3-метокси-4-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-ил]-Ы-метилбензамид мг гидрида натрия (60% суспензия в масле) добавляют к 466 мг (1,01 ммоль) 3-метокси-Ы-[3-(3метокси-4-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-ил]-бензамида в растворе в 19 мл тетрагидрофурана.

Эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение 10 мин и затем добавляют к ней 65 мкл метилйодида. После перемешивания в течение 2 ч к этой реакционной среде добавляют воду и затем эту среду экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают хроматографией на силикагеле при элюировании дихлорметаном. Получают 435 мг желтого твердого вещества.

- 17 007902

Выход: 91%

Точка плавления: 190°С

Пример 64. Метил-5-({1-[(3-метоксибензоил)-(метил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)-2нитробензоат

Это соединение получают в соответствии протоколом, описанным в примере выше, метилированием 1,9 г (3,9 ммоль) метил-5-({1-[(3-метоксибензоил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)-2нитробензоата метилйодидом. Получают 1,85 г красного твердого вещества.

Выход: 84%

Точка плавления: 158,5°С

Пример 65. Этил-[3 -(3 -метокси-4-нитробензоил)-2-(трифторметил)индолизин-1 -ил] карбоксилат

Стадия А. Синтез бромида 1-[2-(3-метокси-4-нитрофенил)-2-оксоэтил]пиридиния

467 мкл (5,78 ммоль) пиридина добавляют к 1,32 г (4,82 ммоль) 2-бром-1-(3-метокси-4нитрофенил)-1-этанона, описанного в Ви11. §ос. СЫт. Ег., (1962), 2255-2261, в растворе в 13 мл ацетонитрила и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение 5 ч.

Эту реакционную среду преципитируют.

Добавляют этиловый эфир, отфильтровывают кристаллы, промывают этиловым эфиром и затем сушат. Получают 1,65 г желтых кристаллов.

Выход: 97%

Точка плавления: 216°С.

Стадия В.

500 мг (1,42 ммоль) бромида 1-[2-(3-метокси-4-нитрофенил)-2-оксоэтил]пиридиния добавляют порциями к 219 мкл (1,56 ммоль) триэтиламина в 4,5 мл диметилформамида с последующим добавлением 1,06 мл (7,08 ммоль) этил-4,4,4-трифторкротоната и 561 мг (0,92 ммоль) дихромата тетрапиридинкобальта(11).

Эту реакционную среду нагревают при 90°С в течение 6 ч.

Охлаждают эту реакционную среду и затем наливают ее на 1 н соляную кислоту и экстрагируют полученный таким образом продукт этилацетатом.

Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают водой и затем насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Полученный продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании дихлорметаном. Получают 437 мг желтого порошка.

Выход: 71%

Точка плавления: 63°С

Пример 66. Этил-[3-(3 -метокси-4-нитробензоил)индолизин-1-ил]карбоксилат

Это соединение получают в соответствии с тем же способом, как в предыдущем примере в стадии В, 1,3-диполярным присоединением цикла бромидом 1-[2-(3-метокси-4-нитрофенил)-2оксоэтил]пиридиния (получен в стадии А предыдущего примера) с этилакрилатом. После очистки флэшхроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании дихлорметаном получают желтый порошок.

Выход: 78%

Точка плавления: 168°С

Пример 67. (1-Гидрокси-2-метилиндолизин-3-ил)-(3-метокси-4-нитрофенил)метанон

Раствор 5 г (12 ммоль) [1-(бензилокси-2-метилиндолизин-3-ил]-(3-метокси-4-нитрофенил)метанона, соединения примера 3, в 30 мл трифторуксусной кислоты нагревают при дефлегмации в течение 2 ч.

Эту реакционную среду упаривают под пониженным давлением. Остаток собирают в этилацетат, промывают водным раствором бикарбоната натрия и водой и затем органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают под пониженным давлением.

Полученный продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/метанол (99/1). Получают 2,93 г порошка оранжевого цвета.

Выход: 75%

Точка плавления: 193°С

Пример 68. Метил-4-({ [3-(3-метокси-4-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-ил]окси}метил)бензоат

812 мг (3,37 ммоль) метил-4-(бромметил)-бензоата добавляют к раствору 1 г (3,06 ммоль) (1гидрокси-2-метил-3-индолизинил)-(3-метокси-4-нитрофенил)метанона в 16 мл диметилформамида в присутствии 508 мг (3,68 ммоль) карбоната калия и эту среду нагревают при 90°С в течение 4 ч.

Эту реакционную среду наливают на воду и экстрагируют этилацетатом.

Органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Полученный продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью толуол/этилацетат (9/1). Получают 880 мг желтого порошка.

Выход: 60,5%

Точка плавления: 154°С

- 18 007902

Примеры 69-84.

Проведением процедуры в соответствии со способом, описанным в примере 68, синтезируют соединения, описанные в табл. VI, алкилированием (1-гидрокси-2-метилиндолизин-3-ил)-(3-метокси-4нитрофенил)метанона надлежащим образом выбранными галогенированными производными. Для получения соединения примера 80 соединение примера 79 подвергают омылению.

Таблица VI

ОН*

Κι= ОК'

Соединения формулы !а

Пример	К'	Выход (%)	Точка плавления
69	СН2С6Н5-2С1	90	173°С
70	СН2С6Н5-ЗС1	74	179°С
71	СН2С6Н5-4С1	82	162°С
72	СН2С6Н5-2ОМе	84	148°С
73	СН2С6Н5-ЗОМе	67,5	’ 145°С
74	СН2С6Н5-4ОМе	71	135°С
75	СН2С6Н5-ЗСО2Ме	57	171°С
76	СН2СО2Е1	91	127°С
77	СН2СОЫН2	65 ”	222°0
78	(СН2)2ЫМе2	26	108°С
79	(СН2)2ОАс	68	Масло
80	(СН2)2ОН	90	142°С
81	οη2ον	91,5	176°С
82	ϊΡγ	19	283°С
83	СН2сРг	22	111°С
84	СН2С6Н5-2-СО2Ме	82	146°С

Пример 85. Метил 4-[(1-гидрокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]бензоат

8,75 мл (86,37 ммоль) циклогексена добавляют к 3,45 г (8,64 ммоль) метил-4-[(1-(бензилокси)-2метилиндолизин-3-ил)карбонил]бензоата в 40 мл этанола в присутствии 690 мг 10% Ρά/С и эту среду нагревают при дефлегмации в течение 1 ч.

Эту реакционную среду охлаждают до комнатной температуры, и катализатор удаляют фильтрацией на тальке. Фильтрат под пониженным давлением.

Полученный продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/метанол (98/2). Получают 2,5 г порошка оранжевого цвета.

Выход: 93,5%

Точка плавления: 192° С

Пример 86. Метил-4-{[1-(2-этокси-2-оксоэтокси)-2-метилиндолизин-3-ил]карбонил}бензоат

202 мкл (1,78 ммоль) этилбромацетата добавляют к 500 мг (1,62 ммоль) метил-4-[(1-гидрокси-2метилиндолизин-3-ил)карбонил]бензоата, соединения примера 85, в 10 мл диметилформамида в присутствии 268 мг (1,94 ммоль) карбоната калия и эту среду нагревают при 90°С в течение 1 ч.

Эту реакционную среду охлаждают, наливают на воду и экстрагируют этилацетатом и затем разделяют после отстаивания. Органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и упаривают под пониженным давлением. Полученный продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью толуол/этилацетат (9/1). Получают 570 мг желтого порошка.

- 19 007902

Выход: 89%

Точка плавления: 8Д,5°С

Пример 87. Метил-Д-({1-[(3-метоксибензил)окси]-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)бензоат

Это соединение получают в соответствии с той же процедурой, как и в примере 86, О-алкилированием метил-Д-[(1-гидрокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]бензоата 3-метоксибензилбромидом. Получают желтый порошок, который плавится при 106°С.

Выход: 76%

Пример 88. 3-(3-Метокси-д-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-илкарбоновая кислота

26,2 мл 1н. гидроксида натрия добавляют к 5 г (13,1 ммоль) этил-3-(3-метокси-Д-нитробензоил)-2метилиндолизин-1-илкарбоксилата, соединения примера 13, полученного в соответствии с процедурой примера 1 бензоилированием этил-(2-метилиндолизин-1-ил)-карбоксилата, описанного в 1. Сйст. 8ос, (1963), рр. 3277-3280, в суспензии в 50 мл диоксана, и эту среду нагревают при дефлегмации в течение 17 ч. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в воду, промывают этиловым эфиром и среду отделяют после отстаивания. Водную фазу подкисляют до рН 6 раствором гидросульфата калия и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Получают д,9 г порошка оранжевого цвета.

Выход: количественный

Точка плавления: 215°С

Пример 89. №Этил-3-(3-метокси-Д-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-илкарбоксамид

0,61 мл (Д,3Д ммоль) триэтиламина добавляют к раствору 750 мг (2,12 ммоль) кислоты примера 88 в 12 мл диметилформамида и затем порциями добавляют 983 мг (2,22 ммоль) гексафторфосфата бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфония. Эту среду перемешивают в течение 5 мин при комнатной температуре и затем добавляют к ней 182 мг (2,22 ммоль) гидрохлорида этиламина.

Эту реакционную среду перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, наливают на воду и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании дихлорметаном/метанолом (98/2). Получают 700 мг желтого порошка.

Выход: 87%

Точка плавления: 188°С

Пример 90. Этил-2-({[3-(3-метокси-Д-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-ил]карбонил}амино)ацетат

Это соединение получают в соответствии с тем же способом, что и предыдущее соединение, сочетанием 3-(3-метокси-Д-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1-илкарбоновой кислоты с гидрохлоридом этилглицината.

Продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании дихлорметаном/метанолом (93/7). Получают желтый порошок.

Выход: 86%

Точка плавления: 191°С

Пример 91. 1-Метокси-2-метил-3-[(д-нитрофенил)сульфонил]индолизин

690 мг (3,1 ммоль) д-нитробензолсульфонилхлорида в растворе в д мл 1,2-дихлорэтана добавляют к 500 мг (3,1 ммоль) 1-метокси-2-метилиндолизина, растворенного в 8 мл 1,2-дихлорэтана, и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Эту реакционную среду наливают на воду и дихлорметан. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании циклогексаном/этилацетатом (9/1). Получают 330 мг желтого масла.

Выход: 31%

Пример 92. 1-Метокси-2-метил-3-[(3-нитрофенил)сульфонил]индолизин

Это соединение получают в соответствии с протоколом, описанным для примера выше, сульфонилированием 1 г (6,2 ммоль) 1-метокси-2-метилиндолизина 3-нитробензолсульфонилхлоридом. Получают 5д0 мг желтого масла.

Выход: 98%

Пример 93. Натриевая соль Д-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)сульфонил]бензойной кислоты

Это соединение получают в соответствии с той же процедурой, что и соединение примера 91, сульфонилированием 1-метокси-2-метилиндолизина д-хлорсульфонилбензойной кислотой. Продукт очищают флэш-хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании дихлорметаном/ацетоном (9/1). Получают 120 мг желтого порошка.

Выход: 11%

Продукт, растворенный в метаноле, переводят в соль добавлением одного эквивалента 1н. гидроксида натрия. Метанол выпаривают и остаток кристаллизуют из ацетона. Продукт фильтруют, промыва

- 20 007902 ют ацетоном и затем этиловым эфиром и сушат. Получают 100 мг натриевой соли в виде желтого порошка.

Точка плавления: 175°С

Пример 94. (4-Амино-3-метоксифенил)-(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанон

700 мг 10% Рб/С добавляют к 6 г (0,0176 моль) (1-метокси-2-метил-3-индолизинил)-(3-метокси-4нитрофенил)метанона, соединения примера 1, в 100 мл этанола и затем добавляют 35,71 мл (0,352 моль) циклогексена и нагревают эту среду при дефлегмации в течение 2 ч. Эту реакционную среду охлаждают и фильтруют через тальк, а катализатор промывают дихлорметаном. Фильтрат концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в дихлорметан. Органическую фазу промывают 1н. гидроксидом натрия и затем водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Получается 5,05 г желтого порошка.

Продукт переводят в соль растворением порошка, полученного выше, в 60 мл дихлорметана плюс 20 мл метанола и затем добавлением 21 мл 1н. соляной кислоты в этиловом эфире. После добавления этилового эфира полученный осадок отфильтровывают, промывают этиловым эфиром и затем сушат. Получается 5,4 г желтого порошка в форме гидрохлорида. Выход: 88%

Точка плавления: 198°С

Примеры 95-117.

Проведением процедуры в соответствии с вышеописанным способом получения синтезируют соединения, описанные в табл. VII, восстановлением нитрофункциональной группы соединений формулы 1а циклогексеном в присутствии 10% Рб/С в качестве катализатора.

Таблица VII

Пример		*2	Кз	К4	Выход (%)	Соль	Точка плавления или массспектрометрия (МН+)
95	ОМе	с6н5	ОМе	νη2	90	НС1, 0,45 Η2Ο	209°С
96	ОМе	сРг	ОМе	νη2	95	НС1, 0,15 Н2О	191°С
97	СО2Е1	Ме	ОМе	νη2	91	НС1	194°С
98	ОСН2СО2Е1	Ме	ОМе	νη2	99	НС1	182°С
99	ОСН2СО1ЧН2	Ме	ОМе	νη2	87	НС1	МН+=354,1
100	О(СН2)2ОН	Ме	ОМе	νη2	89	НС1, 0,5 Н2О	205°С
101	ОМе	Ме	Н	νη2	86	НС1, 0,2 Н2О	22ГС
102	ΟΟΝΗΕ1	Ме	ОМе	νη2	72	НС1, 0,45 Н2О	221 °С
103	СО1МНСН2С О2Е1	Ме	ОМе	νη2	91	НС1, 1,05 Н2О	196°С
104	ОМе	Ме	СО2Ме	νη2	87	0,4 Н2О	297°С
105	СО2Е1	Ме	СО2Ме	νη2	95	-	172°С
106	ОМе	Ме	νη2	ОМе	δ2	НС1	209°С
107	СО2Е1	с6н5	ОМе	νη2	86	-	180°С
108	СО2Е1	Ме	νη2	ОМе	85		162°С
109	СО2Е1	СЕз	ОМе	νη2	81	-	75°С
110	СО2Е1	Н	ОМе	νη2	89	-	143°С
111	ΝΗΟΟΡή-4- СО2Ме	Ме	ОМе	νη2	72	НС1	275°С
112	ΝΗΟΟΡή-3ОМе	Ме	ОМе	νη2	77	НС1, 0,4 Н2О	209°С
113	ΝΗ00Ρή(3ОМе)-4-1ЧН2	Ме	ОМе	νη2	82	2НС1, 1 Н2О	178°С
114	ΝΗΑσ	Ме	ОМе	νη2	57	НС1, 0,35 Н2О	253°С
115	Ы(Ме)СОРЬ3-ОМе	Ме	ОМе	νη2	98	НС1	113°С
116	Ν(Μβ)ΟΟΡΚ3-ОМе	Ме	СО2Ме	νη2	99	-	91°С
117	Ν(ΒΟΟ)ΟΟΡίΊ 3-ОМе	Ме	СО2Ме	νη2	98	-	82°С .

- 21 007902

Пример 118. (4-Амино-3-метоксифенил)-{1-[(2-хлорбензил)окси]-2-метилиндолизин-3-ил}метанона гидрохлорид мг 10% Рб/С добавляют к 470 мг (1,04 ммоль) {1-[(2-хлорбензил)окси]-2-метилиндолизин-3-ил}(3-метокси-4-нитрофенил)метанона в 5 мл метанола и 10 мл дихлорметана и далее добавляют 253 мкл (5,21 ммоль) гидрата гидразина и перемешивают эту среду при комнатной температуре в течение ночи. Эту реакционную среду фильтруют на тальке и катализатор промывают метанолом.

Фильтрат концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в этилацетат, органическую фазу промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Получается 460 мг желтого порошка.

Этот продукт переводят в соль растворением порошка, полученного выше, в смеси этилацетата и метанола и затем добавляют 1,25 мл (1,2 эквивалента) 1н. соляной кислоты в этиловом эфире. После добавления этилового эфира полученный осадок фильтруют, промывают этиловым эфиром и затем сушат. Получается 440 мг желтого порошка в форме гидрохлорида с 0,65 Н₂О.

Выход: 90%

Точка плавления: 177°С

Примеры 119-140.

Проведением процедуры в соответствии со способом получения, описанным в примере 118, синтезируют соединения, описанные в табл. VIII, восстановлением нитрофункциональной группы соединений формулы !а гидратом гидразина в присутствии 10% Рб/С в качестве катализатора.

Таблица VIII

Пример	А	Κι	К2	Ез	«4	Выход (%)	Соль	Точка плавления или массспектрометрия (МН+)
119	СО	ОВп	С6Н5	ОМе	νη2	94	НС1, 0,2 Η2Ο	207°С
120	СО	О(СН2)2ЫМе2	Ме	ОМе	νη2	31	2НС1, 2Н2О	246°С
121	СО	ΟΒη-4-С!	Ме	ОМе	νη2	99	НС1	177°С
122	СО	ОВп-З-ОМе	Ме	ОМе	νη2	95	НС1	181°С
123	СО	ОВп-4-ОМе	Ме	ОМе	νη2	99	НС1, 0,3 Н2О	128°С
124	СО	ОВп-2-ОМе	Ме	ОМе	νη2	99	НС1	164°С
125	СО	0Вп-3-СО2Ме	Ме	ОМе	νη2	75	НС1	185°С
126	СО	ОВп-4-СО2Ме	Ме	ОМе	νη2	93	НС1, Н2О	160°С
127	СО	ΟΒη-3-С!	Ме	ОМе	νη2	96	НС1	175°С
128	СО	Ν(Μθ)Βη	Ме	ОМе	νη2	78	НС1, 1,6 Н2О	114°С
129	со	ΝΗΒΟΟ	Ме	ОМе	νη2	95	основание	МН+= 396,4
130	со	ΝΗΜθ	Ме	ОМе	νη2	88	НС1, 1,15 Н2О	210°С
131	со	ΝΗ8Ο2Μθ	Ме	ОМе	νη2	83	НС1	228°С
132	со	ОМе	Ме	νη2	СМ /14 Ο ο	72	-	135°С
133	8О2	ОМе	Ме	Н	νη2	66	-	157°С
134	8О2	ОМе	Ме	νη2	Η	45	-	137°С
135	СО	ОСН2сРг	Ме	ОМе	νη2	99	НС1	18ГС
136	СО	ΟΐΒιι	Ме	ОМе	νη2	60	НС1	103°С
137	со	ΝΜβ2	Ме	ОМе	νη2	80	2НС1, 0,2 Н2О	171°С
138	со	ОВп-2-СО2Е1	Ме	ОМе	νη2	98	НС1, 0,5 Н2О	185°С
139	со	ΝΗΒη-3-ОМе	Ме	ОМе	νη2	72	НС1	186°С
140	со	Ν(Μβ)Βη-3ОМе	Ме	ОМе	νη2	95	НС1, 1,5 Н2О	161°С

Пример 141. 4-Хлор-№[3-(4-амино-3-метоксибензоил)-2-метилиндолизин-1-ил]бензамид

Смесь 384 мг (0,83 ммоль) 4-хлор-Ы-[3-(3-метокси-4-нитробензоил)-2-метилиндолизин-1ил]бензамида и 115 мг оксида платины в 9 мл диметилформамида перемешивают под водородом при давлении 5 бар при комнатной температуре в течение 24 ч и затем фильтруют на тальке. Фильтрат кон

- 22 007902 центрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают хроматографией на силикагеле при элюировании толуолом/ацетоном (от 9/1 до 8/2). К полученному желтому порошку, суспендированному в 5 мл дихлорметана и 5 мл метанола, добавляют 1 мл 1н. соляной кислоты в этиловом эфире. Полученный осадок отфильтровывают, промывают ацетоном и затем растворяют в 2 мл метанола и 40 мл воды. Полученный таким образом гидрохлорид лиофилизируют. Получают 162 мг порошка оранжевого цвета.

Выход: 50%

Точка плавления: 191°С

Пример 142. [1-(2-Гидроксиэтокси)-2-метилиндолизин-3-ил]-(3-метокси-4-нитрофенил)метанон

1,52 мл 1н. гидроксида натрия добавляют к 420 мг (1,02 ммоль) 2-{[3-(3-метокси-4-нитробензоил)2-метилиндолизин-1-ил]окси}этилацетата, соединения примера 79, растворенного в 6 мл диоксана, и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение 6 ч. Эту реакционную среду наливают на воду и этилацетат. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Получают 340 мг порошка оранжевого цвета, который используют без дальнейшей очистки в последующей стадии восстановления нитрогруппы.

Выход: 90%

Точка плавления: 142°С

Пример 143. Натриевая соль 4-[(1-метокси-2-метил-3-индолизинил)карбонил] бензойной кислоты

2,45 мл 1н. гидроксида натрия добавляют к 720 мг (2,23 ммоль) метил-4-[(1-метокси-2метилиндолизин-3-ил)карбонил]бензоата, соединения примера 8, в растворе в 15 мл метанола плюс 15 мл диоксана и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в воду, промывают этиловым эфиром и разделяют после отстаивания. Водную фазу подкисляют 1н. соляной кислотой и экстрагируют дихлорметаном.

Органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Получают 700 мг порошка оранжевого цвета, который суспендируют в 20 мл метанола, после чего к нему добавляют один эквивалент 1 н. гидроксида натрия. Полученный раствор концентрируют под пониженным давлением. Остаток кристаллизуют из ацетона. Продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и затем этиловым эфиром, сушат и получают 680 мг желтого порошка.

Выход (натриевая соль): 92%

Точка плавления >400°С

Примеры от 144 до 157

Проведением процедуры в соответствии со способом, описанным в примере 143, синтезируют соединения, описанные в табл. IX, омылением эфирной функциональной группы соединений формулы Ш.

Таблица IX

Пример	Κι	*2	Кз		Выход (%)	Соль	Точке плевления
144	ОМе	Ме	СО2Н	н	76	Νθ	218°С
145	ОМе	Ме	νο2	СО2Н	85	Νθ	265°С
146	ОМе	Ме	νη2	СО2Н	77	Νθ	315°С
147	ОВп-З-ОМе	Ме	Η	СО2Н	81	Νβ, 0,7 Η2Ο	268°С
148	ОМе	Ме	ОМе	СО2Н	87	Νβ, 1 Η2Ο	235°С
149	ОМе	Ме	Η	СН2СО2Н	91	Νβ, 0,7 Η2Ο	248°С
150	ОМе	Ме	СО2Н	νη2	98	Νθ, 1Η2Ο	258°С
151	ОМе	Ме	СО2Н	νο2	83	Νβ, 0,95 Η2Ο	164°С
152	ОМе	Ме	СО2Н	ОМе	92	Νβ, 0,65 Η2Ο	318°С
153	Н	Ме	СО2Н	νη2	95	Νθ, 1,3 Η2Ο	300°С
154	ОМе	сРг	СО2Н	νη2	100	Νβ, 1,75 Η2Ο	249°С
155	Ν(Μθ)ΟΟΡϊί3-ОМе	Ме	СО2Н	νη2	77	Νβ, 3,2 Η2Ο	230°С
156	ΝΗΒη-3-ОМе	Ме	СО2Н	νη2	83	Νβ, 1,15 Η2Ο	164°С
157	Ν(Μβ)Βη-3ОМе	Ме	СО2Н	νη2	78	Νβ, 1,2 Η2Ο	211°С

Пример 158. 2-Амино-5-({1-[3-метоксибензоил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил}карбонил)бензойная кислота

6,6 мл раствора гидроксида натрия (2н.) добавляют к 3,31 г (6,0 ммоль) метил-5-({1-[(3метоксибензоил)амино]-2-метилиндолизин-3-ил} карбонил)-2- [2,2,2-трифторацетил)амино]бензоата в

- 23 007902 суспензии в 40 мл диоксана и 20 мл метанола. Эту реакционную среду нагревают при дефлегмации в течение 2,5 ч и затем ей дают вернуться к комнатной температуре и концентрируют ее под пониженным давлением. Полученный остаток собирают в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом. После декантирования водную фазу подкисляют молярным раствором соляной кислоты. Полученный осадок отфильтровывают, тщательно промывают водой и сушат под вакуумом. Получают 2,4 г желтого порошка.

Выход: 90%

Точка плавления: 290°С

Натриевая соль, моногидрат: точка плавления: 265°С

Примеры 159-174

Проведением процедуры в соответствии с вышеописанным способом синтезируют соединения формулы I, в которой А представляет собой -СО-, и которые описаны в табл. X, гидролизом метилового эфира и трифторацетамида в К3 и К4 гидроксидом натрия.

Таблица X

Пример	Κι	κ2	Рз	р4	Выхо Д (%)	Соль	Точке плзвления (°С)
159	ΝΗ00ΡΙί-2,3-ОМе	Ме	СО2Н	νη2	75	N3, 3,0 Η2Ο	236°С
160	' ΝΗΟΟΡΙί-2,5-ОМе	Ме	СО2Н	νη2	77	N3, 2,5 Η2Ο	265°С
161	ΝΗΟΟΡΙι-З,4-ОМе	Ме	СО2Н	νη2	79	Νβ, 2,0 Η2Ο	331 °С
162	ΝΗΟΟΡΪι-3,4,5-ΟΜβ	Ме	СО2Н	νη2	92	Νβ, 1,5 Η2Ο	349°С
163	ΝΗΟΟΡίι-3,5-ОМе	Ме	СО2Н	νη2	71	Νβ, 2,0 Н2О	293°С
164	ΝΗΟΟΡίι-(3-ΟΜβ)-4-Μβ	Ме	СО2Н	νη2	78	Νβ, 1,0 Н2О	277°С
165	ΝΗΟΟΡΙί-3,4метилендиокси	Ме	СО2Н	νη2	94	Νβ, 1,8 Н2О	>400°С
166	ΝΗΟΟΡΐΊ-(4-ΟΙ)-3-ΟΜβ	Ме	СО2Н	νη2	67	Νβ, 3,0 Н2О	320°С
167	ΝΗΟΟΡΐΊ-(4-Ε)-3-ΟΜβ	Ме	СО2Н	νη2	72	N8, 2,25 Н2О	276°С
168	ЫНСОРИ-(4-С1)-2,5-ОМе	Ме	СО2Н	νη2	82	Νβ, 2,5 Н2О	280°С
169	ΝΗΟΟ-5-индолил	Ме	СО2Н	νη2	86	Νβ, 2,8 Н2О	296°С
170	МНСОРЬ(3-ОМе)4-СО2Н	Ме	со2н	νη2	74	2Νβ, 2,5 Н2О	323°С
171	ΝΗΟΟΡΙι-3-ОСЕз	Ме	СО2Н	νη2	76	Νβ, 1,5 Н2О	321 °С
172	ΝΗΟΟΡΙι-2,4,5-ΟΜβ	Ме	СО2Н	νη2	53	Νβ, 2,5 Н2О	272°С
173	ΝΗδΟ2Ρή-3-ΟΜβ	Ме	СО2Н	νη2	50	N3, 2 Н2О	238°С
174	ΝΗΟΟΝΗΡΚ-3-ОМе	Ме	СО2Н	νη2	75	Νβ, 1,2 Н2О	378°С

Пример 175. 3-(4-Амино-3-метоксибензоил)-2-метилиндолизин-1-илкарбоновая кислота мл 2 н гидроксида натрия добавляют к 2,1 г (5,96 ммоль) этил 3-(4-амино-3-метоксибензоил)-2метил-1-индолизинкарбоксилата в растворе в 30 мл диоксана и эту среду нагревают при дефлегмации в течение 20 ч. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением.

Остаток собирают в воду, промывают этиловым эфиром и отделяют после отстаивания. Водную фазу подкисляют до рН 6,5 10% водным раствором гидросульфата калия и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Получают 1,8 г желтого порошка.

Выход: 93%

Затем получают две соли этого соединения:

натриевая соль, моногидрат, точка плавления: 224°С;

гидрохлорид, точка плавления: 213°С

Примеры 176-185

Проведением процедуры в соответствии с вышеописанным способом получения синтезируют соединения, описанные в табл. XI, омылением эфирной функциональной группы, содержащейся в заместителе Кд соединений формулы М, в которой А представляет собой радикал -СО-, гидроксидом натрия.

- 24 007902

Таблица XI

Пример	Κι	к2	Кз	Кд	Выход (%)	Соль	Точка плавления (°С)
176	ОСН2СО2Н	Ме	3-ОМе	4-ΝΗ2	91	-	227 °С
177	СО1\1НСН2СО2Н	Ме	3-ОМе	4-ΝΗ2	90	Νθ, 0,95 Η2Ο	297°С
178	ОВп-3-СО2Н	Ме	3-ОМе	4-ΝΗ2	84	N8,1,25 Η2Ο	207°С
179	ОВп-4-СО2Н	Ме	3-ОМе	4-ΝΗ2	76	Νθ, 0,7 Η2Ο	216°С
180	СО2Н	сбн5	3-ОМе	4-ΝΗ2	84	Νθ, 1,25 Η2Ο	305°С
181	ОВп-2-СО2Н	Ме	3-ОМе	4-ΝΗ2	100	Νθ, 1,5 Η2Ο	Разложение при 174°С
182	СО2Н	СЕз	3-ОМе	4-ΝΗ2	87	Νθ, 1 Η2Ο	330°С
183	СО2Н	Н	3-ОМе	4-ΝΗ2	90	Νθ, 1,9 Η2Ο	254°С
184	СО2Н	Ме	3-ΝΗ2	4-ОМе	91	Νθ, 1 Η2Ο	225°С
185	ΝΗΟΟΡΙί-4СО2Н	Ме	ОМе	νη2	48	ΗΟΙ	256°С

Пример 186. Двунатриевая соль 3-(4-карбоксибензоил)-2-метилиндолизин-1-илкарбоновой кислоты 7,47 мл 1н. гидроксида натрия добавляют к 910 мг (2,49 ммоль) этил-3-[4(метоксикарбонил)бензоил]-2-метилиндолизин-1-илкарбоксилата в растворе в 20 мл диоксана плюс 20 мл этанола и эту среду нагревают при дефлегмации в течение 6 ч. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в воду, промывают этиловым эфиром и разделяют после отстаивания. Водную фазу подкисляют 1н. соляной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Получают 650 мг желтого порошка, который суспендируют в 20 мл метанола, и затем к нему добавляют 4,02 мл 1н. гидроксида натрия (2 экв.).

Полученный раствор концентрируют под пониженным давлением. Остаток кристаллизуют из ацетона. Продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и затем этиловым эфиром и сушат. Получают 700 мг желтого порошка.

Выход двунатриевой соли, дигидрата: 81%

Точка плавления: >400°С

Примеры 187-191.

Проведением процедуры в соответствии с примером 186 синтезируют соединения, описанные в табл. XII, омылением эфирных функциональных групп, содержащихся в заместителях К₁ и Кд соединений формулы I, в которой А представляет собой радикал -СО-, 1н. гидроксидом натрия.

Таблица XII

Пример	Κι	К2	Кз	к4	Выход (%)	Соль	Точка плавления (°С)
187	осн2со2н	Ме	Н	СО2Н	90	2Ыа, 2 Н2О	>400°С
188	СО2Н	Ме	ОМе	СО2Н	96	2Ν3,1,5 Н2О	323°С
189	СО2Н	Ме	СО2Н	νη2	82	2Ν3, 1,9 Н2О	336°С
190	СО2Н	Ме	СО2Н	νο2	96	2Ν3, 2.5 Н2О	321°С
191	СО2Н -	Ме	СО2Н	ОМе	66	2Ν3, 1,4 Н2О	310°С

Пример 192. (4- {[3-(Дибутиламино)пропил] амино }-3-метоксифенил)-(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона гидрохлорид

700 мг (2,25 ммоль) (4-амино-3-метоксифенил)-(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона, соединения, описанного в примере 94, растворяют в 5 мл тетрагидрофурана, добавляют к 278,4 мг (2,25 ммоль) трет-бутоксида калия в 5 мл тетрагидрофурана и эту среду перемешивают в течение 15 мин при комнатной температуре.

Затем добавляют 510,5 мг (2,48 ммоль) хлорида дибутиламинопропила в 5 мл тетрагидрофурана и нагревают эту среду при температуре дефлегмации в течение ночи.

Эту реакционную среду охлаждают и наливают на воду и затем экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/ацетон (9/1) и затем (1/1).

Получают 700 мг смолы оранжевого цвета, которую переводят в соль в этиловом эфире добавлени

- 25 007902 ем одного эквивалента 1н. соляной кислоты в этиловом эфире.

Полученные кристаллы отфильтровывают, промывают этиловым эфиром и сушат. Получают оранжевого цвета порошок в форме гидрохлорида с 1,25 Н₂О.

Выход: 65%

Точка плавления: 51°С

Пример 193. [3-Метокси-4-(метиламино)фенил]-(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона гидрохлорид

Это соединение получают в соответствии с той же процедурой, какая описана в примере 192, алкилированием (4-амино-3-метоксифенил)-(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона метилйодидом. Получают желтый порошок.

Выход: 45%

Точка плавления: 172°С

Пример 194. (4-{ [3-(Дибутиламино)пропил]амино}-3-метоксифенил)-(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)метанона дигидрохлорид

Получают в соответствии с процедурой, описанной в примере 192, алкилированием (4-амино-3метоксифенил)-(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)метанона, соединения примера 95, хлоридом дибутиламинопропила. Получают оранжевого цвета порошок (дигидрохлорид: 1,3 Н2О).

Выход: 37%

Точка плавления: 158°С

Пример 195. Этил-2-{2-метокси-4-[(1 -метокси-2-метилиндолизин-3 -ил)карбонил]анилино }ацетат

Это соединение получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 192, алкилированием (4-амино-3-метоксифенил)-(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона, соединения примера 94, этилбромацетатом. Получают желтый порошок.

Выход: 60,5%

Точка плавления: 125°С

Пример 196. 2-{2-Метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино}уксусная кислота

3,15 мл 1 н гидроксида натрия добавляют к 1 г (2,52 ммоль) этил-2-{2-метокси-4-[(1-метокси-2метилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино}ацетата, соединения, полученного в примере 195, в растворе в 10 мл этанола и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в воду, промывают этиловым эфиром и разделяют после отстаивания. Водную фазу нейтрализуют 1н. соляной кислотой. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат и затем собирают в этиловый эфир, фильтруют и сушат. Получают желтый порошок.

Выход: 48,5%

Точка плавления: 196°С

Пример 197. Этил-2-{2-метокси-4-[(1 -метокси-2-фенилиндолизин-3 -ил)карбонил]анилино }ацетат

Это соединение получали в соответствии со способом, описанным в примере 192, алкилированием (4-амино-3-метоксифенил)-(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)метанона, соединения примера 95, этилбромацетатом.

Получают желтый порошок.

Выход: 78%

Точка плавления: 132°С

Пример 198. 2-{2-Метокси-4-[(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино}уксусная кислота

Получают в соответствии с той же процедурой, что и соединение примера 196, омылением этил-2{2-метокси-4-[(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино}ацетата, соединения примера 197, 1 н гидроксидом натрия. Получают желтый порошок.

Выход: 80%

Точка плавления: 206°С

Пример 199. 3-( Дибутиламино)-2№{2-метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3 -ил)карбонил] фенил}пропанамида гидрохлорид

2,5 мл (17,7 ммоль) триэтиламина добавляют к 2,5 г (8,06 ммоль) (4-амино-3-метоксифенил)-(1метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона, соединения примера 94, в 20 мл дихлорметана, охлажденного до 5°С, и далее добавляют 846 мкл (8,86 ммоль) 3-хлорпропионилхлорида в растворе в 10 мл дихлорметана и перемешивают эту среду в течение 3 ч при комнатной температуре. Эту реакционную среду промывают водой и затем насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Полученный остаток растворяют в 40 мл этанола и к нему добавляют 1,7 г (13,2 ммоль) дибутиламина и затем нагревают эту среду при дефлегмации в течение 7 ч. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/метанол (98:2). Получают 2,6 г продукта, который переводят в соль

- 26 007902 добавлением 1н. соляной кислоты в этиловом эфире. Получают желтый порошок (гидрохлорид, 0,25Н2О).

Выход: 65%

Точка плавления: 82°С

Пример 200. 3-(Дибутиламино)-№{2-метокси-4-[(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)карбонил]фенил}пропанамида гидрохлорид

Это соединение получали в соответствии с той же процедурой, какая описана в примере 199, ацилированием (4-амино-3 -метоксифенил)-(1 -метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)метанона 3 -хлорпропионилхлоридом с последующим аминированием дибутиламином. Получают желтый порошок (гидрохлорид, гемигидрат).

Выход: 52%

Точка плавления: 190°С

Пример 201. №(2-Метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]фенил}ацетамид

Это соединение получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 199, ацилированием (4-амино-3-метоксифенил)-(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона, соединения примера 94, ацетилхлоридом. Продукт очищают флэш-хроматографией на кремнеземе при элюировании смесью дихлорметан/метанол (99:1). Получают желтый порошок (0,3Н₂О).

Выход: 73%

Точка плавления: 180°С

Пример 202. Этил-2-метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]фенилкарбамат

Это соединение получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 199, ацилированием (4-амино-3 -метоксифенил)-(1 -метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона этилхлороформатом. Продукт очищают флэш-хроматографией на кремнеземе при элюировании дихлорметаном.

Получают желтый порошок.

Выход: 41%

Точка плавления: 140°С

Пример 203.

Этил-2-{[3-(дибутиламино)пропаноил]-2-метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино} ацетата гидрохлорид

Добавляют каплями 1 г (2,03 ммоль) 3-(дибутиламино-№{2-метокси-4-[(1-метокси-2метилиндолизин-3-ил)карбонил]фенил}пропанамида, соединения примера 199, в растворе в 10 мл диметилформамида, к 89,1 мг (2,23 ммоль) гидрида натрия в виде 60% дисперсии в масле в 10 мл диметилформамида и затем перемешивают эту среду при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем добавляют 247 мкл (2,23 ммоль) этилбромацетата и перемешивают эту среду при комнатной температуре в течение ночи.

Эту реакционную среду наливают на воду и этилацетат. Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением. Продукт очищают флэш-хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/метанол (97:3). Получают 850 мг масла, которое растворяют в этиловом эфире и переводят в соль добавлением одного эквивалента 1н. соляной кислоты в этиловом эфире. Получают желтые кристаллы (гидрохлорид, гидрат).

Выход: 72%

Точка плавления: 67°С

Пример 204. Гидрохлорид 2-{[3-(дибутиламино)пропаноил]-2-метокси-4-[(1-метокси-2метилиндолизин-3-ил)карбонил] анилино }уксусной кислоты

586 мкл 1 н гидроксида натрия добавляют к 340 мг (0,586 ммоль) этил-2-{[3-(дибутиламино)пропаноил]-2-метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино}ацетата, полученного в примере 203, в растворе в 5 мл этанола и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Остаток собирают в воду, промывают этиловым эфиром и разделяют после отстаивания. Водную фазу нейтрализуют 1. соляной кислотой и экстрагируют дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают флэш-хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/метанол (8:2). Получают 230 мг масла, которое растворяют в этилацетате и переводят в соль добавлением одного эквивалента 1 н соляной кислоты в этиловом эфире. Получают желтый порошок (гидрохлорид, 0,6 Н2О)

Выход: 71%

Точка плавления: 151°С

Пример 205. Этил-2-{ [3-(дибутиламино)пропаноил]-2-метокси-4-[(1-метокси-2-фенил-3индолизинил)карбонил] анилино }ацетата гидрохлорид

Получают в соответствии способом, описанным в примере 203, алкилированием 3-(дибутиламино)№[2-метокси-4-[(1 -метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)карбонил]фенил}пропанамида, соединения приме

- 27 007902 ра 200, этилбромацетатом. После перевода в соль 1н. соляной кислотой в этиловом эфире получают желтый порошок (гидрохлорид).

Выход: 55%

Точка плавления: 6Д°С

Пример 206. Гидрохлорид 2-{[3-(дибутиламино)пропаноил]-2-метокси-Д-[(1-метокси-2фенилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино (уксусной кислоты

Получают в соответствии с той же процедурой, как в примере 204, омылением этил-2-{[3(дибутиламино)пропаноил]-2-метокси-Д-[(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил-карбонил]анилино (ацетата, соединения примера 205, 1н. гидроксидом натрия. После перевода в соль 1н. соляной кислотой в этиловом эфире получают желтый порошок.

Выход: 75%

Точка плавления: 113°С

Пример 207. 2-(Дибутиламино)-№{2-метокси-Д-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]фенил(-1-этансульфонамида гидрохлорид

471,5 мкл (3,38 ммоль) триэтиламина добавляют к 1 г (3,22 ммоль) (Д-амино-3-метоксифенил)-(1метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона в 15 мл дихлорметана с последующим добавлением 346,9 мкл (3,22 ммоль) 2-хлорэтилсульфонилхлорида в растворе в 5 мл дихлорметана и эту среду перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Эту реакционную среду промывают водой и затем насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Полученный остаток растворяют в 10 мл этанола. Добавляют 375 мг (2,9 ммоль) дибутиламина и нагревают эту среду при дефлегмации в течение д ч. Эту реакционную среду концентрируют под пониженным давлением. Продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/метанол (98:2). Получают 1,18 г продукта, который переводят в соль добавлением 1 н соляной кислоты в этиловом эфире. Получают желтый порошок (гидрохлорид, гемигидрат).

Выход: 69%

Точка плавления: 91°С

Пример 208. 2-(Дибутиламино)-№{2-метокси-Д-[(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)карбонил] фенил(-1-этансульфонамида гидрохлорид

Это соединение получают в соответствии с той же процедурой, что и соединение примера 207, сульфонилированием (Д-амино-3 -метоксифенил)-(1 -метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)метанона 2хлорэтилсульфонилхлоридом с последующим аминированием дибутиламином. Получают желтый порошок (гидрохлорид, гемигидрат).

Выход: 63%

Точка плавления: 111°С

Пример 209. №{2-Метокси-Д-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]фенил(метансульфонамид

Получают в соответствии с той же процедурой, что и соединение примера 207, сульфонилированием (Д-амино-3 -метоксифенил)-( 1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)метанона метансульфонилхлоридом. Продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью толуол/этилацетат (7:3). Получают желтый порошок.

Выход: 67%

Точка плавления: 165°С

Пример 210. Этил-3-{3-метокси-Д-[(метилсульфонил)амино]бензоил(-2-метилиндолизин-1илкарбоксилат

Это соединение получали в соответствии с той же процедурой, какая описана в примере 207, сульфонилированием этил-3 -(Д-амино-3 -метоксибензоил)-2-метилиндолизин-1-илкарбоксилата, соединения примера 97, метансульфонилхлоридом. Продукт очищают хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью толуол/этилацетат (8:2). Получают желтый порошок.

Выход: 57%

Точка плавления: 178°С

Пример 211. Натриевая соль 3-{3-метокси-д-[(метилсульфонил)амино]бензоил(-2-метилиндолизин1-илкарбоновой кислоты мл каустической соды добавляют к 290 мг (0,675 ммоль) этил-3-{3-метокси-д[(метилсульфонил)амино]бензоил(-2-метилиндолиз-1-илкарбоксилата в 7 мл диоксана плюс 7 мл воды и эту среду нагревают при дефлегмации в течение 6 ч.

Эту среду охлаждают, наливают на воду и нейтрализуют водным раствором гидросульфата калия и затем экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Получают 220 мг желтого порошка. Продукт переводят в соль добавлением одного эквивалента 1н. гидроксида натрия к суспензии продукта в воде и перемешивания при комнатной температуре до достижения растворения.

- 28 007902

Полученный раствор затем лиофилизируют. Получается желтый лиофилизированный продукт (натриевая соль 1,85 Н₂О).

Выход: 81%

Масс-спектрометрия (вариант Е8+) МН⁺ = 403,2

Пример 212. Гидрохлорид 2-{{[2-(дибутиламино)этил]сульфонил}-2-метокси-4-[(1-метокси-2метилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино }уксусной кислоты

Стадия А. Бензил-2-{{[2-(дибутиламино)этил]сульфонил}-2-метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3 -ил)карбонил] анилино } ацетата

125 мг (0,906 ммоль) карбоната калия добавляют к 400 мг (0,755 ммоль) 2-(дибутиламино)-Л-{2метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]фенил}-1-этансульфонамида, соединения примера 207, в растворе в 10 мл диметилформамида с последующим добавлением 142 мкл (0,906 ммоль) бензилбромацетата и эту среду нагревают при 60°С в течение 1 ч. Эту реакционную среду наливают на воду и этилацетат.

Органическую фазу отделяют после отстаивания, промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают флэш-хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/метанол (98:2). Получают 440 мг масла, которое используют прямо в следующей стадии.

Выход: 86%

Стадия В.

1,3 мл (12,7 ммоль) циклогексена добавляют к 430 мг (0,634 ммоль) бензил-2-{{[2(дибутиламино)этил]сульфонил}-2-метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино}ацетата в 5 мл этанола в присутствии 100 мг 10% Рб/С и эту среду нагревают при дефлегмации в течение 3 ч. Эту реакционную среду охлаждают. Катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют под пониженным давлением.

Продукт очищают флэш-хроматографией на колонке с кремнеземом при элюировании смесью дихлорметан/метанол (9:1). Получают 250 мг масла, которое растворяют в этилацетате и переводят в соль добавлением одного эквивалента 1 н соляной кислоты в этиловом эфире. Получают порошок оранжевого цвета (гидрохлорид, дигидрат).

Выход: 67%

Точка плавления: 85°С

Пример 213. Бензил-2-{{[2-(дибутиламино)этил]сульфонил}-2-метокси-4-[(1-метокси-2фенилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино }ацетата гидрохлорид

Это соединение получали в соответствии с той же процедурой, как в примере 212, стадии А, алкилированием 2-(дибутиламино)-Л-{2-метокси-4-[(1-метокси-2-метилиндолизин-3-ил)карбонил]фенил}-1этансульфонамида, бензилбромацетатом.

После перевода в соль 1 н соляной кислотой в этиловом эфире получают желтый порошок (гидрохлорид, гемигидрат).

Выход: 55%

Точка плавления: 95°С

Пример 214. Гидрохлорид 2-{{[2-(дибутиламино)этил]сульфонил}-2-метокси-4-[(1-метокси-2фенилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино}уксусной кислоты

Это соединение получали в соответствии с той же процедурой, как в примере 212, стадии В, гидрогенированием бензил-2-{{[2-(дибутиламино)этил]сульфонил}-2-метокси-4-[(1-метокси-2-фенилиндолизин-3-ил)карбонил]анилино}ацетата, соединения примера 213, циклогексеном в присутствии Рб/С в этаноле. После перевода в соль 1 н соляной кислотой в этиловом эфире получают желтый порошок (гидрохлорид, 1,5Н2О).

Выход: 75%

Точка плавления: 113°С

Пример 215. Исследование связывания ¹²⁵Т-Ь-Г6Г с очищенным рецептором ГСГКаШс способом проксимальных сцинтилляции

На планшеты ΝΒ8 (белый сплошной планшет ΝΒ8 с 96 лунками, СОКЛГЛС 3600) наносят покрытие 0,1% желатином (100 мкл на лунку) в течение 2 ч при 37°С. Под конец этой инкубации средство покрытия удаляют, планшеты ополаскивают и тщательно сушат. В лунки распределяют по 100 мкл буфера для связывания (40 мМ бис-трис-буфер, рН 7,0).

Распределяют разведения соединений по этому изобретению в лунки в количестве 10 мкл на лунку. Затем распределяют в лунки Ь-ГСГ (АМЕК8НАМ АКМ 35050) по 10 мкл на лунку и ГСГКаШс (К&И 8у81ет8 658 ГК) по 10 мкл на лунку. Затем добавляют ¹²⁵1-Ь-ГСГ (Иироп! ΝΕΝ ΝΕΧ 268, удельная активность >70 мкКи) по 10 мкл на лунку и гранулы 8РА (АМЕК8НАМ КРЦЛ 00019) по 50 мкл на лунку. Встряхивают планшет в течение нескольких секунд и инкубируют его в течение 60 мин при 37°С при защите от света.

Под конец инкубации просчитывают планшет на счетчике радиоактивности МШКОВЕТА ТКЗЬиХ

- 29 007902 (УАЬЬАС - РЕКК1ЫЕЬМЕК).

Соединения по этому изобретению демонстрировали специфическую активность между 10^-6 М и 10^-9 М.

Пример 216. Влияние соединений формулы I на пролиферацию эндотелиальных клеток пуповинной вены человека (НИУЕС) против 30 нг/мл Ь-ЕСЕ или 10 нг/мл а-ЕСЕ

Наносят на 24-луночные планшеты (ЕАИСОИ РК1МАК1А) покрытие раствором фибронектина (50 мкг/мл в забуференном фосфатами физрастворе, РВ8) в количестве 200 мкл на лунку.

Инокулируют количество клеток, составляющее 30000/мл/лунка, в смеси, представляющей собой среду КРМ1 1640+10% фетальной телячьей сыворотки (ЕС8)+1% глутамина+гепарин-ЕССЕ (НЕ).

Инкубируют при 37°С в 5% СО₂ в течение времени, нужном клеткам для прикрепления.

Растворяют продукты и готовые растворы в диметилсульфоксиде/реакционной среде, имеющей конечную концентрацию 1 мкМ при окончательной 10^-7 М.

После прикрепления клеток в течение 6 ч при 37°С в присутствии 5% СО₂ эту среду заменяют на КРМ1 1640 с 0,1% Е8С+глутамин+НЕ.

Для дериватизации используют в качестве отрицательного контроля 0,1% ЕС8, в качестве положительного контроля 0% ЕС8 и в качестве контроля 0,1% ЕС8+30 нг/мл Ь-ЕСЕ или 10 нг/мл а-ЕСЕ. Затем проводят инкубирование в течение 24 ч при 37°С в присутствии 5% СО₂.

На второй день ополаскивают клетки одним миллилитром РВ8 и трипсином (200 мкл) и затем собирают их в изотоническом растворе. Проводят подсчет (п>9 мкм).

В этом тесте на пролиферацию эндотелиальных клеток, которую вызывает Ь-ЕСЕ или а-ЕСЕ, соединения по этому изобретению показали специфическую активность между 10^-5 М и 10^-9 М.

Пример 217. Модель ангиогенеза ш νίΙΐΌ

Готовят гели распределением в каждую из лунок слайд-камеры (коллаген типа I из хвоста крыс Вюсоа1 Сс11\\'агс и 8-луночная слайд-камера: ВссЮп Июкткоп 354630) по 160 мкл геля Ма1пдс1, разбавленного 1/6 (Ма1пдс1 с пониженным содержанием факторов роста: ВссЮп Июкткоп 356230) в коллагене (коллаген типа I из хвоста крыс: ВссЮп Июкткоп 354236). Дают гелю образоваться в течение 1 ч при 37°С.

Инокулируют эндотелиальные клетки пуповинной вены человека (НИУЕС гсГ: С-015-10С - саксабс Вю1од1ск, ГИС) или эндотелиальные клетки аорты свиньи (РАЕС) в количестве 15·10³ клеток на лунку в 400 мкл среды ЕВМ (С1опсбск С3121)+2% ЕВ8+10 мкг/мл 1ЕСЕ для НИУЕСк и ИМЕМ+3% ЕС8+ 2 мМ глутамин+1 мМ пируват натрия+1% незаменимых аминокислот (СШСО) для РАЕС.

Стимулируют действием 10 нг/мл Ь-ЕСЕ (ТЕВИ/Рсрго1сск) или 10 нг/мл а-ЕСЕ (ТЕВИ/Рсрго1ссЬ) в присутствии или в отсутствие продуктов по этому изобретению в течение 24 ч при 37°С в присутствии 5% СО2.

После 24 ч фиксируют клетки и окрашивают слайд трихромом Массона перед исследованием под линзами микроскопа при х4 и анализом изображения (программа ВЮСОМ - У1кю1аЬ 2000).

В тесте ангиогенеза ш убго, который индуцируют Ь-ЕСЕ или а-ЕСЕ, соединения по этому изобретению показали специфическую активность между 10^-7 М и 10^-11М.

Пример 218. Модель воспалительного ангиогенеза у мышей

Ангиогенез нужен для развития хронических воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит, ВЗК, а также для развития солидных опухолей. Формирование новых сосудов не только создает возможность для перфузии патологических тканей, но также для транспорта цитокинов, являющихся причиной перехода заболевания в хроническую форму.

Модель, которую описали СоМ11с-Иакк Р. с! а1., (Ό. 1РЕТ., 1995, νο1. 274 Ио. 3, рр. 1463-1472), делает возможным исследование фармакологических агентов, способных модулировать появление ангиогенеза.

Животных, неродственных белых мышей весом около 25 г, анестезируют пентобарбиталом натрия (60 мг/кг; 8апой МПпбоп 8ап1с Ашта1с) через внутрибрюшинную трубку.

Воздушный карман создают на спине мышей подкожным введением 3 мл воздуха.

После возвращения в сознание животные получают воздействие, обычно принудительным кормлением, и получают в карман инъекцию 0,5 мл адъюванта Фрейнда (81дта) с 0,1% кротоновым маслом (81§та).

Семь дней спустя мышей опять анестезируют и помещают на нагревающую поверхность при 40°С. В хвостовую вену инъецируют 1 мл кармина красного (5% в 10% желатине - А1бпс11 СЬстюа1). Затем животных помещают в температуру 4°С на 2-3 ч.

Затем снимают шкуры и сушат в течение 48 ч в сушильном шкафу при 56°С. Взвешивают сухие ткани и помещают в 1,8 мл буфера для ферментации (2 мМ дитиотрейтол, 2 мМ Иа₂НРО₄, 1 мМ ЭДТА, 12 ед./мл папаина) на 24 ч.

Затем растворяют краситель в 0,2 мл 5 М ИаОН. Центрифугируют шкуры при 2000 д в течение 10 мин. Фильтруют супернатанты на мембранах из ацетата целлюлозы с порами 0,2 мкм. Считывают фильтраты в спектрофотометре при 492 нм против калибровочной серии кармина красного.

Исследуют два параметра: сухой вес гранулемы и количество красителя после ферментации этой ткани.

- 30 007902

Выражают результаты как средние значения (± стандартная ошибка среднего). Проверяют различия между группами вариационной статистикой АМ)УА и далее тестом Даннета (Эиппе1), для которого контрольной группой является группа «контроля на растворитель».

Соединения по этому изобретению активны при пероральном введении в дозах от 0,1 до 100 мг/кг.

Пример 219. Модель ангиогенеза в геле МАТКЮЕЬ у мышей

Модель, которую описали РаззапФ е1 а1. (БаЬогаФгу ФуезЕдаЕоп (1992) 67 (Д) рр. 519-52Д), делает возможным исследование фармакологических агентов, способных модулировать появление ангиогенеза, который индуцируется конкретно Ь-РОР. РОР2 (Рерго1есР) добавляют к Ма1пце1 (Веск1оп Эюктзоп), который держат в жидкой форме при Д°С, в количестве 300 нг/мл. После гомогенизирования эту смесь (0,5 мл) вводят подкожно в основание спины самок черных мышей (С57/В16) весом около 20 г, которых предварительно анестезируют пентобарбиталом натрия (60 мг/кг; 8апой Ж|1п1юп 8ап1е Атта1е) внутрибрюшинным путем. Животных подвергают воздействию принудительным кормлением. После 5 дней мышей снова анестезируют и шкуру в основании спины удаляют; на этой стадии оценивают количественные различия в васкуляризации гранулемы (присуждением баллов) и фотографируют гранулемы. Затем выполняют анализ ДНК в гранулемах для количественного определения их клеточности. Для этого ферментируют изолированные гранулемы коллагеназой (3 мг/мл) в течение ночи при 37°С. После центрифугирования при 850 д в течение 10 мин супернатант отбрасывают и осадок снова растворяют в 1,2 мл РВ8, содержащем 1 мМ СаС1₂/1 мМ МдС1₂ и 5 мМ глюкозы. Количество присутствующей ДНК измеряют с помощью набора (СуциапЕОК®, Мо1еси1аг ргоЬе) в соответствии с инструкциями поставщика.

Выражают результаты как средние значения (± стандартная ошибка среднего). Проверяют различия между группами вариационной статистикой АМ)УА и далее тестом Даннета (Эиппе1), для которого контрольной группой является группа «контроля на растворитель».

Для гистологических исследований удаляют гранулемы с мышцами и кожей, фиксируют в течение ночи в 10% растворе формальдегида и погружают в парафин (ЕтЬеббег Бе1са®). Затем делают срезы гранулем с помощью микротома (Бе1са) и окрашивают красителем трихром Массона (Маззоп'з 1псНготе). Затем оценивают неоваскуляризацию гранулем. Уровни васкуляризации находятся между значениями 0 и 5.

Соединения по этому изобретению активны при пероральном введении в дозах от 0,1 до 100 мг/кг.

Пример 220. Модель опухолевого ангиогенеза у мышей

Эта модель делает возможным исследование фармакологических агентов, способных модулировать появление ангиогенеза, индуцированного конкретно развитием опухоли. Мышей С56/В16 весом около 20 г анестезируют пентобарбиталом натрия (60 мг/кг; 8апой Ж|1п1юп 8ап1е Ашта1е) внутрибрюшинным путем. Вызывают опухоли подкожным введением клеток карциномы Льюиса в спину мыши в количестве 2·10⁵ клеток на мышь. Через 5 дней мышей подвергают ежедневно воздействию принудительным кормлением. Размер опухолей измеряют дважды в неделю в течение 21 дня и объем опухоли рассчитывают по формуле [π/6(ω₁χω₂)], где ω₁ представляет собой наибольший диаметр и ω₂ представляет собой наименьший диаметр.

Выражают результаты как средние значения (± стандартная ошибка среднего). Проверяют различия между группами вариационной статистикой АМ)УА и далее тестом Даннета (Эиппе1), для которого контрольной группой является группа «контроля на растворитель».

Соединения по этому изобретению активны при пероральном введении в дозах от 0,1 до 100 мг/кг.

Claims (1)

1. Соединения формулы I в которой К₁ представляет собой гидроксильный радикал, линейный или разветвленный радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, карбоксильный радикал, алкоксикарбонильный радикал с числом атомов углерода от 2 до 6 или радикал формулы -МОЕ,

-ИН-8О₂-А1к

-ΝΗ-8Ο₂-ΡΡ

-νη-со-рр

-И(А1к)-СО-РР -ΝΗ^Ο-ΝΗ-ΡΡ

-ΝΗ-СО-АФ

- 31 007902 ^-СО₂-А1к

-О-(СН2)п-сА1к

-О-А1к-СООК7

-О-А1к-О-К8

-О-А1к-ОН

-О-А1к-С(1\1Н₂)^ОН

-О-А1к^₅Вб

-О-А1к-С№

-О-(СН2)п-Рй

-О-А1к-СО^₅К₆

-СО^-(СН2)т-СООК₇

-СО^-А1к, где А1к представляет собой алкильный радикал или линейный или разветвленный алкиленовый радикал с числом атомов углерода от 1 до 5, сА1к представляет собой циклоалкильный радикал с числом атомов углерода от 3 до 6, η представляет собой целое число от 0 до 5, т представляет собой целое число от 1 до 5,

К5 и К6, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода, линейный или разветвленный алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 или бензильный радикал,

К7 представляет собой атом водорода или алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5,

К8 представляет собой алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5 или радикал -СО-А1к,

Р11 представляет собой фенильный радикал, который возможно замещен одним или более чем одним из галогеновых атомов, одним или более чем одним из радикалов алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, одним или более чем одним из карбоксильных радикалов или одним или более чем одним из алкоксикарбонильных радикалов с числом атомов углерода от 2 до 6,

К2 представляет собой атом водорода, алкильный радикал с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал алкилгалогенида с числом атомов углерода от 1 до 5, содержащий от 3 до 5 галогеновых атомов, циклоалкильный радикал с числом атомов углерода от 3 до 6 или фенильный радикал, который возможно замещен одним или более чем одним из галогеновых атомов, одним или более чем одним из радикалов алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, одним или более чем одним из карбоксильных радикалов или одним или более чем одним из алкоксикарбонильных радикалов с числом атомов углерода от 2 до 6,

А представляет собой радикал -СО-, -8О- или -8О₂-,

К3 и К4, которые являются идентичными или разными, каждый представляет собой атом водорода, радикал алкокси с числом атомов углерода от 1 до 5, радикал амино, карбоксильный радикал, алкоксикарбонильный радикал с числом атомов углерода от 2 до 6, гидроксильный радикал, радикал нитро, радикал гидроксиамино, радикал формулы