EA002908B1

EA002908B1 - Фармацевтические композиции на основе тизоксанида и нитазоксанида

Info

Publication number: EA002908B1
Application number: EA199901012A
Authority: EA
Inventors: Жан-Франсуа Россиньоль
Original assignee: Ромарк Лабораториз Л.С.
Priority date: 1997-05-07
Filing date: 1998-05-06
Publication date: 2002-10-31
Also published as: DK1005342T3; AP9901675A0; CA2418634C; CN100515420C; KR100576646B1; CN1255060A; LV12492B; AU740022B2; IL155799A; IL132516A; EE9900578A; EA199901012A1; PL193275B1; CA2288003A1; SK283947B6; HUP0003330A2; SK151199A3; IL132516A0; UA57079C2; CZ298269B6

Abstract

Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного агента, по крайней мере, одно соединение, выбранное из группы, состоящей из соединений формулы (I)и формулы (II)в которой активный агент находится в форме частиц размером предпочтительней менее 200 мкм, причем средний размер частиц более 10 мкм. Эти фармацевтические композиции особенно полезны для лечения условно-патогенных инфекций у больных с нарушенной или подавленной иммунной системой и для лечения трематодных инфекций.

Description

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей в ка честве активного агента, вещество, выбранное из соединений формулы (I) по крайней мере, одно группы, состоящей из

и формулы (II)

в которой активный агент находится в форме частиц размером предпочтительней менее 200 мкм, причем средний размер частиц более 10 мкм.

Эти фармацевтические композиции особенно полезны для лечения условно-патогенных инфекций у больных с нарушенной или подавленной иммунной системой и для лечения трематодных инфекций.

Описание уровня техники

Существует необходимость разработки способов лечения ряда паразитических и бактериальных инфекций у больных с нарушенной иммунной системой (больных СПИДом, раковых больных, престарелых, пожилых, пациентов с трансплантатами органов, принимавших иммуносупрессивные препараты). Другая сфера касается трематодных инфекций, особенно в тропическом климате. Следовательно, существует необходимость создания фармацевтической композиции, которая бы была переносима пациентами даже с нарушенной иммунной системой.

Более конкретно, Тохор1акта допбп является простейшим, которое наиболее часто вызывает латентную инфекцию центральной нервной системы во всем мире. Многие здоровые люди инфицированы этим паразитом, но обыч но иммунная система держит организм под контролем. Т. допбп является наиболее распростра ненным условно-патогенным микроорганизмом головного мозга больных СПИДом. В настоящее время токсоплазмоз становится все более серьезной проблемой не только из-за СПИДа, но и из-за все более широкого использования иммуносупрессивных препаратов (например, среди пациентов с трансплантатами органов). Токсоплазмоз обычно лечат комбинацией пириметамина и сульфадиазина. Хотя эти препараты являются эффективными, они не уничтожают кис ты паразитов, поэтому лечение пролонгируют в поддерживающей дозе. Токсичность препарата вызывает необходимость в прерывании его приема, особенно у иммуносупрессивных пациентов, что приводит к рецидиву заболевания. Согласно статистике смертность составляет 70% у иммунодефицитных пациентов и средняя продолжительность жизни - около 4 месяцев.

Криптоспоридиоз вызывается микроскопическим простейшим паразитом СгурЮкропб1иш рагуиш. У людей с нормальными иммунными функциями диарея, вызванная С. рагуиш может быть интенсивной и длительной, но может прекратиться без лечения. У больных СПИДом криптоспоридиозная диарея часто угрожает их жизни. Было подсчитано, что 15-20% больных СПИДом страдает от этих состояний. До сих пор нет достаточно эффективной и одобренной терапии криптоспоридиоза.

Наиболее часто определяемым патогеном у больных СПИДом является ЕЩегосуЮхооп Ыепеиы, паразит-микроспоридия, который был обнаружен примерно у четверти пациентов. Сейчас оказывается, что этот крошечный паразит может быть причиной большого количества необъяснимых причин малабсорбции, диареи и атрофии у больных СПИДом. До сих пор не известно эффективного способа его лечения.

Некоторые другие виды микроспоридий поражают ВИЧ инфицированных, такие как, ЕпсерйаНЮхооп йе11ет и ситсий, и новые виды, названные 8ер1а1а йИеЧшаНк. Согласно недавним публикациям распространяющиеся инфекции, вызываемые микроспоридиями, приобретают большое значение.

Инфекция, вызываемая паразитом Нокрога ЬеШ, клинически неотличима от криптоспоридиоза. Наиболее распространенная в тропических странах, в США I. ВеШ зарегистрирована менее чем у 1% пациентов, хотя фактическая заболеваемость значительно выше.

РпеишосуШк саппл обычно классифицируют как простейший паразит; некоторые исследования показали, что может существовать грибок, с которым он может делить определенные генетические последовательности. Р. саппл обычно инфицирует легкие (пневмоцистная пневмония РпеишосуШк Саппл Рпеишоша (РСР)). Сообщалось, что терапия была успешной примерно у 40-60% пациентов, но были проблемы с токсичностью препаратов, особенно у пациентов с нарушенной иммунной системой. Среди многих серьезных проявлений инфекции вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) у детей, РСР выделяется из-за частой заболеваемости, особого возрастного состава и частой смертности. РСР является наиболее общей серьезной условно-патогенной инфекцией у детей с ВИЧ инфекцией; подсчитано, что заболеваемость РСР среди ВИЧ инфицированных младенцев, не получавших профилактического лечения, составляет, по крайней мере, 12% на 1 году жизни. Многие дети умирают сразу после развития РСР.

Комплекс МусоЬас1егшт Аущт (МАК) относится к инфекциям семейства очень похожих микроорганизмов - МусоЬас1егшт аущт и Млп1гасе11и1аге. Когда МАК встречается у людей без поражений иммунной системы, он обычно протекает в форме инфекций респира торного тракта. У ВИЧ инфицированных пациентов МАК часто является рассеянным (рассеянный МАК или РМАК), и может быть поражена система почти любого органа. Согласно недавним исследованиям у 43% пациентов, выживших в течение 2 лет после постановки диагноза СПИД, были обнаружены МАК бактерии. До сих пор не было предложено стандартных методов терапии рассеянного МАК. Обычно назначают комбинации препаратов и, в случае успеха, требуется продолжение лечения в течение жизни. Таким образом, существует настоятельная потребность в более эффективном лечении.

ВИЧ инфицированные особенно чувствительны к инфекции МусоЬас1етшш 1иЬегси1о818, в результате которой ускоряется развитие заболевания. Внелегочный туберкулез редко встречается у не инфицированных ВИЧ людей, но он часто поражает ВИЧ инфицированных. Центр контроля заболеваемости выпустил руководство по лечению туберкулеза, которое направлено на лечение все более распространяющегося туберкулеза, имеющего мультилекарственную резистентность (ΜΌΚ.-ΤΒ). Смертность среди больных СПИДом с ΜΌΚ.-ΤΒ очень высока (примерно 80%), причем значительно ускоряется развитие болезни.

Следовательно, существует настоятельная потребность создания способа лечения этих инфекций, широко распространенных и опасных для человека и животных.

Также существует необходимость в препарате широкого действия для облегчения лечения трематодных инфекций. В настоящее время необходимо диагностировать трематодный патоген и затем назначать специальную медикаментозную терапию этой трематоды. Во многих слаборазвитых странах нет оборудования для диагностики определенных трематод. Благодаря созданию препарата широкого действия отпадет необходимость диагностики.

8сй181окота тапкош, шистосома, является возбудителем шистосомоза, второго по распространению тропического паразитического заболевания людей (после малярии) и наиболее значительной трематодной инфекцией у людей. 8сй151О8ота йаетаЮЬшт - другой важный вид инфекции. Более 200 миллионов людей страдают от шистосомоза во всем мире, в том числе несколько сотен тысяч в США.

Раксю1а йерайса, простая печеночная двуустка, первоначально является возбудителем заболевания у овец, однако человек является факультативным хозяином этого паразита. Паразит пытается выжить при наличии сильного иммунного ответа хозяина. Для лечения был предложен битионол, но не был одобрен для применения в США.

Таким образом, существует необходимость в фармацевтической композиции, которая бы обладала широким спектром действия против трематод.

Сущность изобретения

При исследованиях животных и при клинических испытаниях у людей было обнаружено, что эффективность лечения с использованием соединений формулы (I) и (II) зависит от размеров частиц активного компонента препарата.

Описанные фармацевтические композиции пригодны для лечения трематодных инфекций у человека и животных, возбудителями которых являются 8сй151о5ота тапкопЕ ЗсйШокота йаетаФЬшт, ЗсйМоюта текопщ. ЗсЫкЮкота ]арошсшп. ЗсЫкЮкота т1егса1а1ит; Раксю1а, такие как Раксю1а йерайса и Раксю1а д^апШа, Ра8сю1орк18 Ь18к1 и Иютосоейцт йепйгШсит, Не1егорйуек йе1еторйуек и Мейщопшшк уокода\та.

Эти фармацевтические композиции также эффективны для лечения условно-патогенных инфекций у пациентов с нарушенной иммунной системой, возбудителями которых являются СгурЮкропйшт ратуцт, Нокрота ЬеШ, Еп1етосуУооп Ыепеи81, ЕпсерйаШохооп ш1е811па118, МусоЬас1егшш 1иЬегси1о818, МусоЬас1етшт аушт ш1гасе11и1аге, Рпеитосукйк саппл, Тохор1акта допйй.

Фармацевтическая композиция может быть в форме, приемлемой для орального применения, такой как твердая лекарственная форма, жидкая суспензия или паста.

Краткое описание чертежей

Для лучшего понимания природы и объектов настоящего изобретения приводим следующее описание и чертежи:

фиг. 1 показывает процент снижения уровня инфекции и жизнеспособность клеток хозяина при применении нитазоксанида против Е.йНекОпайк;

фиг. 2 показывает процент снижения уровня инфекции и жизнеспособность клеток хозяина при применении нитазоксанида против У.согпеае;

фиг. 3 показывает процент снижения уровня инфекции и жизнеспособность клеток хозяина при применении альбендазола против Е.йНекЕпайк;

фиг. 4 показывает процент замедления и жизнеспособность клеток хозяина при применении альбендазола против У.сотиеае;

на фиг. 5 и 6 изображен график зависимости значений средней оптической плотности (ΟΌ), полученных для каждой культуры Т.доийп, от концентрации препарата в культуре;

на фиг. 7 представлена схема, основанная на испытаниях эффективности нитазоксанида против микобактерий, выращенных в жидком бульоне;

фиг. 8 показывает процент активных частиц, имеющих размер менее 0 мкм.

Подробное описание изобретения

Способ лечения инфекций по настоящему изобретению включает введение фармацевтической композиции, содержащей в качестве активного агента, по крайней мере, одно соединение, выбранное из группы, состоящей из дезацетилнитазоксанида формулы I он

и нитазоксанида формулы II

Нитазоксанид (ΝΤΖ), соединение формулы I, является родовым названием 2-(ацетолилокси)-Ы-(5-нитро-2-тиазолил)бензамида, соединения, которое впервые синтезировали Россигнол и Кавиер в 1975 г. 2 мг нитазоксанида можно растворить в 1 мл диметилсульфоксида (ДМСО). Нитазоксанид легко поглощается орально.

До сих пор не было показано, что соединения формул I и/или II могут быть широко эффективны против трематодных инфекций, либо, что они не являются особо токсичными и переносятся даже пациентами с нарушенной иммунной системой.

Получение и применение нитазоксанида раскрыто в патенте США 3950351, а также в публикациях автора настоящего изобретения. Дезацетилнитазоксанид, соединение формулы I, которое иногда называют тизоксанидом или бΝΤΖ, является метаболитом нитазоксанида.

В публикации АО 95/28393 автор настоящего изобретения изложил способ производства чистого соединения формулы II, а также применение композиции, содержащей смесь соединений формул I и II.

Сейчас было обнаружено, что твердые частицы соединений формул I и II и их смесей, имеющие размеры в диапазоне от 170 до 520 мкм (средний размер частиц - 352 мкм) сильно снижают эффективность их применения при оральном применении людям и животным. Эффективность таких частиц значительно ниже эффективности существующих фармацевтических продуктов и, следовательно, их нельзя использовать для целей регуляции и в торговле.

В опытах на собаках было обнаружено, что оральное применение одной дозы 50 мг/кг твердых частиц соединения формулы I и соединения формулы II размером менее 5 мкм вызвало сильную побочную реакцию у животных.

Также было обнаружено, что для эффективного и безопасного лечения инфекций, вызванных паразитами, бактериями, грибами и вирусами, у человека и животных, фармацевтическая композиция в твердой форме или в форме водной суспензии должна содержать эффективное количество активного агента в форме твердых частиц размером менее 200 мкм и содержащих соединения формулы I и/или соединения формулы II, причем средний размер частиц должен превышать 10 мкм.

При высоком содержании частиц активного агента размером более 200 мкм по сравнению с содержанием частиц, имеющих размеры в диапазоне от 5 до 200 мкм, значительно снижается химиотерапевтическая активность этих соединений. Предпочтительней, фармацевтические композиции настоящего изобретения не должны содержать более 5 вес.% твердых активных частиц размером более 200 мкм. Более предпочтительно, фармацевтические композиции настоящего изобретения не содержат твердые активные частицы размером более 200 мкм.

Высокое содержание частиц активного агента размером менее 5 мкм по сравнению с содержанием частиц, имеющих размеры в диапазоне от 5 до 200 мкм, может вызвать побочную реакцию у человека и животных. В дополнение, было обнаружено, что частицы размером менее 5 мкм быстрее поглощаются из желудочно-кишечного тракта в кровь и поэтому не так эффективны против паразитов, бактерий, грибов и вирусов, которые обычно живут в желудочнокишечном тракте человека и животных.

Специалисты не могли предположить, что размеры частиц соединения формулы I и соединения формулы II будут оказывать такое большое влияние на их антимикробную активность у человека и животных. Например, в исследованиях, проведенных автором, такие антипаразитические соединения, как альбендазол, мебендазол, никлосамид, празиквантел и метронидазол, не показали такого значительного влияния размера частиц на их антипаразитическую активность у человека и животных. Более того, специалисты не могли предположить, что размеры частиц соединения формулы I и соединения формулы II будут оказывать такое большое влияние на способность человека и животных переносить введение указанного активного агента.

Соединения формул I и II можно вводить либо в твердой форме, либо в форме водной суспензии, и предпочтительней, фармацевтическая композиция должна содержать эффективную дозу активного агента в форме твердых частиц соединений формулы I и/или II, имеющих размеры менее 200 мкм, причем средний размер частиц должен превышать 10 мкм, определенный с помощью СоиИег® СоиШег Ь8 100. Этот прибор использует свет лазера с длиной волны 750 нм для определения размеров частиц с диаметром от 0,4 до 900 мкм с помощью дифракции света. Образцы измеряются в воде с небольшим количеством Тгйои Х-100 для увеличения смачиваемости и дефлокуляции порошка.

Предпочтительней, чтобы средний размер активных твердых частиц был в диапазоне от 10 до 100 мкм, более предпочтительно, от 20 до 50 мкм. Примеры предпочтительных композиций следующие:

- композиция, в которой менее 10 вес.% активных твердых частиц имеют размеры более 100 мкм;

- композиция, в которой, по крайней мере, 50 вес.% активных твердых частиц имеют размеры менее 50 мкм.

Предпочтительней, чтобы средний размер активных твердых частиц был в диапазоне от 10 до 100 мкм, более предпочтительно, от 20 до 50 мкм. В соответствии с предпочтительной реализацией, композиция содержит менее 10 вес.% активных твердых частиц размером менее 5 мкм.

Активный агент или агенты, используемые в твердой форме или в виде суспензии, являются преимущественно смесью твердых частиц соединений формул I и II, имеющих размеры менее 200 мкм, причем весовое содержание соединения формулы I по отношению к весу соединений формулы I и формулы II составляет от 0,5 до 20%, предпочтительней от 0,5 до 10%.

Фармацевтические композиции, описанные выше, могут дополнительно содержать, по крайней мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту. Такими кислотами могут быть следующие: лимонная, глутаминовая, янтарная, этансульфокислота, уксусная, винная, аскорбиновая, метансульфокислота, фумаровая, адипиновая, яблочная и их смеси. Лимонная кислота является очень подходящей.

Отношение веса фармацевтически приемлемой кислоты к весу активного твердого агента предпочтительней составляет от 0,01 до 0,5, более предпочтительно от 0,03 до 0,2. Предпочтительней, чтобы количество кислоты было достаточно для поддержания рН между 2 и 6, более предпочтительно между 3 и 5, наиболее предпочтительно между 3,5 и 4,5.

Методика приготовления и предпочтительные примеры твердых и жидких лекарственных форм фармацевтической композиции раскрыты в публикации ^095/28393 и здесь не приводятся. Эти композиции предпочтительней содержат увлажняющий агент и, возможно, производное крахмала, такие, как описано в патенте США 5 578 621, содержание которых здесь не приводится. Увлажняющий агент, как описано в патенте США 5 578 621, играет роль диспергирующего агента.

Такие фармацевтические композиции либо в твердой, либо в жидкой форме, а также в виде паст или мазей могут содержать дополнительные активные агенты, такие как антибиотики, противовирусные агенты или ингибиторы протонного всасывания. Хотя это не является предпочтительным, такие фармацевтические композиции также могут содержать активные твердые частицы соединения формулы I и/или соединения формулы II размером более 200 мкм.

Эти композиции могут содержать инертные наполнители, известные для приготовления форм, пригодных для орального применения.

Предпочтительней для того, чтобы получить наилучшую эффективность против широкого спектра паразитов, бактерий, грибов и вирусов, коэффициент распределения активных твердых частиц составляет от 0,8 до 2, предпочтительней от 1,1 до 1,9, более предпочтительно, более 1,5, причем этот коэффициент распределения рассчитывают по формуле ?90% = (090% ^- 010%)/((090% ^{+ 0}10%^)/2)где

Р₉₀% - коэффициент распределения при 90%;

0₉₀% - максимальный размер частиц во фракции частиц, соответствующей 90% указанных активных твердых частиц и

0₁₀% - максимальный размер частиц во фракции частиц, соответствующей 10% указанных активных твердых частиц.

Согласно особой реализации изобретения, частицы соединений формулы I и/или II получают способами, описанными выше, и затем измельчают таким образом, что менее 10% указанных частиц имеют размеры более 100 мкм, менее 50% частиц имеют размеры более 50 мкм и менее 10% частиц имеют размеры менее 5 мкм, причем средний размер частиц находится в диапазоне от 20 до 50 мкм. Активные частицы затем гранулируют, используя смесь, содержащую активные твердые частицы и, по крайней мере, один гранулирующий агент. Примеры гранулирующего агента: поливинилпирродидон, вода, спирт, сахароза, гидроксицеллюлоза и их смеси. Предпочтительней, в процессе гранулирования добавляют, по крайней мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту.

Изобретение относится к твердым лекарственным формам, содержащим композицию изобретения, таким как таблетки, рассасывающиеся таблетки, таблетки в оболочке, матриксы и т. д.

Лекарственная форма изобретения содержит, например твердые активные частицы, имеющие размеры менее 200 мкм, причем менее 10% частиц имеют размеры более 100 мкм, менее 50% частиц имеют размеры более 50 мкм и менее 10% частиц имеют размеры менее 5 мкм, средний размер частиц составляет от 20 до 50 мкм.

по крайней мере, один гранулирующий агент;

по крайней мере, один увлажняющий агент;

по крайней мере, одно производное крахмала и по крайней мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту, которую добавляют, предпочтительней, во время грануляции.

Жидкая лекарственная форма изобретения, такая как суспензия, содержит, например в качестве активного агента твердые частицы, содержащие соединения формулы I и/или II, имеющие размеры менее 200 мкм, причем менее 10% частиц имеют размеры более 100 мкм, менее 50% частиц имеют размеры более 50 мкм и менее 10% частиц имеют размеры менее 5 мкм;

по крайней мере, один гранулирующий агент;

по крайней мере, один увлажняющий агент;

по крайней мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту, причем рН суспензии составляет от 2 до 6, предпочтительней, от 3 до 5, более предпочтительно, от 3,5 до 4,5;

по крайней мере, один загуститель, например ксантановую смолу, гуаровую смолу, кристаллическую целлюлозу, смолу карруба, карбоксиметилцеллюлозу или их смесь.

Пасты или мази изобретения для орального применения содержат, например в качестве активного агента твердые частицы, содержащие соединения формулы I и/или II, имеющие размеры менее 200 мкм, причем менее 10% частиц имеют размеры более 100 мкм, менее 50% частиц имеют размеры более 50 мкм и менее 10% частиц имеют размеры менее 5 мкм;

по крайней мере, один увлажняющий агент;

по крайней мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту, причем рН суспензии составляет от 2 до 6, предпочтительней от 3 до 5, более предпочтительно, от 3,5 до 4,5;

по крайней мере, один загуститель, например, ксантановую смолу, гуаровую смолу, кристаллическую целлюлозу, смолу карруба, карбоксиметилцеллюлозу или их смесь.

Пасты или мази изобретения для местного или интравагинального нанесения содержат, например в качестве активного агента твердые частицы, содержащие соединения формулы I и/или II, имеющие размеры менее 200 мкм, причем менее 10% частиц имеют размеры более 100 мкм, менее 50% частиц имеют размеры более 50 мкм и менее 10% частиц имеют размеры менее 5 мкм;

по крайней мере, один увлажняющий агент;

по крайней мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту, причем рН суспензии составляет от 2 до 6, предпочтительней от 3 до 5, более предпочтительно от 3,5 до 4,5;

цетиловый спирт и/или производные глицерида и/или пропиленгликоль;

Описание приготовления фармацевтических композиций

Сухое чистое соединение формулы I и сухое чистое соединение формулы II измельчали и сортировали по размеру частиц с помощью сита.

После измельчения частицы соединений формулы I и II и их смесей имели распределение по размерам, показанное на фиг. 8. Фиг. 8 показывает процент частиц, имеющих размеры менее 0 мкм.

Из данных на этой фигуре видно, что менее 10 вес.% частиц имеют размеры менее, примерно, 5 мкм;

менее 10 вес.% частиц имеют размеры более, примерно, 70 мкм;

средний размер частиц составляет, примерно, 40 мкм;

коэффициент распределения составляет около 1,73, причем этот коэффициент распределения рассчитывают по формуле ?90% = (®90% ^- 010%)/((090% ⁺ 010%)^/2) где

Е₉₀% - коэффициент распределения при 90%,

0ι₀% - максимальный размер частиц во фракции частиц, соответствующей 10% указанных активных твердых частиц.

Предпочтительные примеры таких композиций показаны в следующих таблицах.

Таблица 1. Пример композиции рассасывающихся таблеток для орального применения, содержащей соединения формулы II и формулы I в качестве активных агентов.

Нитазоксанид (99%)+дезацетилнитазоксанид (1 %) 200 мг Микрокристаллическая целлюлоза 116 мг

Авицел рН 102 (продается ГМС-ИЗА)

Кросповидон 25 мг

Стеарат магния 3 мг

Коллоидный диоксид кремния 5 мг

Лимонная кислота 10 мг

Клубничный ароматизатор № 877720 (продается ВоЪег1е1) 10 мг

Сахаринат натрия 2 мг

Таблица 2. Пример композиции таблеток в оболочке для орального применения, содержащей соединения формулы II и формулы I в качестве активных агентов.

Нитазоксанид 500 мг

Кукурузный крахмал 60 мг

Прежелатинизированный кукурузный крахмал 70 мг Стеарат магния 3 мг

Гидроксипропилметилцеллюлоза 5 мг

Сахароза 20 мг

Натриевый крахмал гликолят 30 мг

Лимонная кислота 25 мг

Тальк 8 мг

Стеарат магния 7 мг

Оболочка:

Горячий раствор сахара или обволакивающую пленку напыляли на таблетки или гранулы, содержащие 500 мг активного агента.

Таблица 3. Пример водной суспензии для орального применения, содержащей соединения формулы II и формулы I в качестве активных агентов. рН суспензии около 4,1.

Нитазоксанид (98%)+дезацетилнитазоксанид (2%)2 г

Дистиллированная вода 100мл

Бензоат натрия 0,2г

Сахароза 30,5г

Ксантановая смола 0,2г

Микрокристаллическая целлюлоза и натрий карбоксиметилцеллюлоза 0,8г

Авицел ВС-591 (продается БМС-НЗЛ)

Лимонная кислота 0,2г

Дигидрированный цитрат натрия 50 мг

Клубничный ароматизатор № 877720 (продается ВоЬег!е1) 125 мг

Красный краситель № 33 О и С 1 мг

Таблица 4. Пример пасты для орального применения, содержащей соединения формулы II и формулы I в качестве активных агентов.

Нитазоксанид (98%)+дезацетилнитазоксанид (2%) 500 мг

Минеральное масло10 г

Желтый сахар1 г

Микрокристаллическая целлюлоза и натрий карбоксиметилцеллюлоза0,8 г

Авицел ВС-591 (продается РМС-НЗЛ)

Лимонная кислота0,2 г

Таблица 5. Пример насты или мази для интравагинального или местного нанесения, содержащей соединения формулы II и формулы I в качестве активных агентов.

Нитазоксанид (98%)+дезацетилнитазоксанид (2%) 8г

Кремафор А62 г

Кремафор А25 1,5г

Минеральное масло 7г

Лувитол ЕНО 7г

Моноэфир глицерина 4г

Цетиловый спирт 3г

Симетикон 0,5г

Гермабен II 1г

Пропиленгликоль 3,5г

Дистиллированная вода 62,5г

Фармацевтические композиции изобретения являются композициями, обладающими широким спектром действия на паразитов, бактерии, грибы и вирусы, особенно при оральном применении.

Эффективность и безопасность фармацевтических композиций, описанных выше, была наилучшей у людей и животных. В частности, клинические испытания показали, что описанные фармацевтические композиции, были значительно более эффективны, чем аналогичные композиции с активным соединением, имеющим размеры частиц в диапазоне от 170 до 520 мкм (средний размер частиц = 352 мкм), даже в том случае, если эти частицы больших размеров вводились пациентам в дозах, больших в три раза, и в течение больших периодов времени. В табл. 6 приведены примеры показателей эффективности лечения.

Таблица 6. Сравнение результатов клинических испытаний с использованием соединений формулы I и формулы II, имеющих размеры частиц в диапазоне от 170 до 520 мкм (средний размер частиц = 352 мкм) с результатами, полученными с использованием соединений формулы I и формулы II, имеющих размеры частиц в диапазоне от 5 до 200 мкм (средний размер частиц = 34 мкм).

Соединение формулы I (98%)+соединение формулы II (2%)

	Размеры частиц от 170 до 520 мкм Доза = от 15 до 50 мг/кг в день в течение от 3 до 7 дней	Размеры частиц от 5 до 200 мкм Доза = 15 мг/кг в день в течение 3 дней
	Количество выздоровлений/общее количество пациентов=показатель эффективности лечения (%)	Количество выздоровлений/общее количество пациентов=показатель эффективности лечения (%)
Паразит
В1а81осу8Й8 Ηοιηίηίδ	12/27 = 44%	10/10=100%
Еи1ашоеЬа Ыз1о1уйса	29/47 = 62%	106/133 =80%
С1аг41а 1ашЬ11а	11/37=30%	50/73 = 68%
Лзсапз 1ишЬпсо14е8	3/69 = 4%	144/179=80%
Тпсйипз 1пс1иига	7/48 = 15%	58/79 = 73%

Для каждого из паразитов, указанных в табл. 6, соответствующий показатель эффективности лечения был значительно выше у пациентов, которых лечили активными частицами, имеющими размеры от 5 до 200 мкм, чем у пациентов, которых лечили активными частицами, имеющими размеры от 170 до 520 мкм, со статистическим значением для каждого случая р<0,02 (с использованием стандартного X² теста). Это происходило даже в случаях, когда дозы частиц больших размеров были больше в три раза при большей продолжительности лечения по сравнению с дозами и продолжительностью приема фармацевтических композиций с активным агентом, имеющим размеры частиц менее 200 мкм. У обеих групп пациентов не наблюдалось серьезных побочных эффектов.

Аналогичные результаты были получены в экспериментах с животными.

В дополнение, побочные реакции, наблюдавшиеся у собак после орального применения одной дозы в количестве 50 мг/кг соединения формулы I и соединения формулы II, не были отмечены при интенсивных экспериментах на животных, принимавших соединения формулы I и соединения формулы II, имеющие размеры частиц в диапазоне от 5 до 200 мкм (в среднем > 10 мкм), даже в случаях, когда такая же или большая доза вводилась ежедневно в течение 90 дней или более.

Более того, указанные композиции были стабильны (даже при температурах до 40°С и относительной влажности 65% в течение 6 мес или, в случае жидких водных суспензий, при таких условиях в течение 3 мес), что подтверждает тот факт, что активные ингредиенты не разлагаются и композиции сохраняют свою эффективность в течение такого периода времени после их приготовления, какой необходим для медицинских целей и торговли.

В следующих примерах показана эффективность фармацевтических композиций.

Пример 1 ΟΒΥΡΤΟδΡΟΒΙΌΐυΜ РЛВУИМ

В предварительных клинических испытаниях 30 пациентов с диагнозом СПИД, страдающих криптоспоридиозной диареей, принимали орально нитазоксанид от 500 до 2000 мг ежедневно. Если диарея продолжалась, эти пациенты дополнительно принимали нитазоксанид в течение еще 4 недель в дозе до 2000 мг ежедневно.

пациентов получали лечение в течение 2 или более недель, у 16 из них можно было оценить терапевтический ответ на 8-ой неделе лечения. Из этой последней группы у 12 человек наблюдалось 50%-ное или более уменьшение ежедневной частоты дефекации, у 10 пациентов было отмечено уменьшение или отсутствие паразитов в стуле, причем у четверых организмы не определялись. Для 6 пациентов лечение оказалось полезным, как с точки зрения клинического, так и паразитологического ответа.

У пациентов, которые получали более высокие ежедневные дозы в течение более длительного времени, была большая вероятность положительного ответа.

Изучение действия нитазоксанида на криптоспоридиозную диарею у пациентов с диагнозом СПИД показало уменьшение количества дефекаций у пациентов, принимающих ежедневно 500, 1000, 1500 или 2000 мг лекарства. У участников эксперимента было отмечено среднее значение СЭ4+ - 42 клетки/мм³ (диапазон 0303 клетки/мм³), среднее значение дефекаций 6,7 ежедневно в среднем в течение 15 мес, ооцисты СгурЮкропбшт ранит в стуле, и не отмечено других видимых патогенов. Почти у всех пациентов терапия азитромицином или паромомицином не дала положительных результатов.

Через 23 недели у 9-13 пациентов наблюдался полный клинический ответ (от одной до трех преимущественно сформированных дефекаций), у 4-13 пациентов наблюдался частичный клинический ответ (по крайней мере, 50%-ное уменьшение ежедневных дефекаций или изменение консистенции стула - по крайней мере, 75% сформированного стула). К окончанию испытаний у 8-11 пациентов наблюдалось отсутствие паразитов, а еще у троих - существенное уменьшение уровня ооцист. Наблюдалась тенденция улучшения ответа при ежедневных дозах в 1000 мг или выше и при более длительной терапии. У двух пациентов наблюдались повреждения кожи в виде крапивницы, более 90% пациентов придерживались специальной диеты в течение более 4 недель.

Пример 2 СНУРТО5РСЖПШ:\1 рлвуим

Данные о дозах ίη νίΐτο:

Нитазоксанид растворяли в стерильном диметисульфоксиде (ДМСО) и тестировали против интактных ооцист С.раглтип. инфицировавших монослои клеток, при концентрациях 100 мкг/мл, 10 мкг/мл, 1 мкг/мл и 0,1 мкг/мл. Второе испытание проводили с тестированным нитазоксанидом при дополнительных концентрациях 20, 2, 0,2 и 0,02 мкг/мл. Эти концентрации получали последовательными разбавлениями средой ΌΜΕΜ до получения конечной концентрации ДМСО 0,5%. Контрольная среда также содержала ДМСО в концентрации 0,5%.

В эксперименте использовали культуру клеток ΜΌΒΚΕ5Ό2, выращенную в 7 мм лунках и Сгур1о8ропбшт ранит: ССН1 ооцисты, 5 х 10⁴ на лунку, в эксперименте сравнивали активность паромомицина (положительный контроль) и нитазоксанида (экспериментальное лекарство). Материалы включали иммунную антиСгурЮхропбшт ранит спорозоитную кроличью сыворотку (0,1%) и козье антикроличье антитело, меченное флюоресцеином (1%).

Испытания токсичности

200 мкл среды, содержащей нитазоксанид в концентрациях 100, 10, 1 и 0,1 мкг/мл и соответствующие контрольные пробы, помещали в две лунки на пластину с 96 лунками, содержащими конфлюентные монослои клеток ΜΌΒΚΕ5Ό2, причем две лунки не содержали монослоев. Лекарство инкубировали на монослоях при 37°С в атмосфере 8% СО₂. Через 24 ч (Ι опыт) и 48 ч (опыт 2) в каждую лунку добавляли ΜΤ8 (раствор Овена (О\ссп) и ΡΜ8 в концентрациях 333 мкг/мл и 25 мкМ соответственно. Пластину снова помещали в инкубатор и выдерживали в темноте в течение 2 ч. Через 2 ч 100 мкл каждого супернатанта переносили в новую микролитровую пробирку и проводили иммуноферментный твердофазный анализ при 490 нм. Результаты записывали и анализировали. Токсичность в процентах рассчитывали следующим образом: разность средней оптической плотности (ΟΌ) супернатантов с лекарством и средней оптической плотности (ΟΌ) супернатантов контрольной среды (без лекарства) делили на ΟΌ контрольной среды и умножали на 100.

ОР среды - ОР лекарства х 100

ОР среды

Испытание интактных ооцист С.рагуиш х 10⁴ ооцист С.рап'шп на лунку инкубировали с нитазоксанидом (100, 20, 10, 2, 1, 0,2, 0,1 и 0,02 мкг/мл) при 37°С (8% СО₂) на конфлюентных монослоях клеток ΜΌΒΚΕ5Ό2. Уровень инфекции в каждой лунке определяли и анализировали иммунофлюоресцентным методом через 24 и 48 ч. Снижение уровня инфекции в процентах рассчитывали следующим об разом: разность среднего числа паразитов/10 полей в контрольной среде (без лекарства) и среднего числа паразитов/10 полей в лунках с лекарством делили на число паразитов в контрольной среде и умножали на 100.

Число паразитов в контрольной среде-число паразитов в среде с лекарством/Число паразитов в контрольной среде х 100

Результаты

Опыт 1: 24 ч

Соединение	Концентрация	Среднее (± 8Ώ)*	Токсичность (%)	Снижение уровня инфекции (%)
Инфицированная среда	0	983,5 (± 128,2)	0	0
Паромомицин	2 мг/мл	482 (±47,1)	23,8	51
ΝΤΖ	100 мкг/мл	потеряно	88,1	**
10 мкг/мл	55,5 (± 13,5)	65,1	94,4
1 мкг/мл	224,5 (±28,5)	8,3	77,2
0,1 мкг/мл	474,5 (± 29,5)	19,3	51,8

* Число паразитов/10 полей; 8Ώ - стандартное отклонение ** Нет данных из-за токсичности

Опыт 2: 48 ч

Соединение	Концентрация	Среднее (± 8Ώ)*	Токсичность (%)	Снижение уровня инфекции (%)
Инфицированная среда	0	2231,25 (±90,03)	0	0
Паромомицин	2 мг/мл	580 (± 33,42)	40,8	74,01
ΝΤΖ	100 мкг/мл	68,75 (± 13,77)	92,87	96,92
10 мкг/мл	113,75 (±21,36)	24,93	94,90
1 мкг/мл	1020 (± 158,48)	16,56	54,29
0,1 мкг/мл	1041 (± 191,46)	21,23	53,33

* Число паразитов/10 полей

Влияние нитазоксанида на интактные ооцисты С.ратуит

В опыте 1 нитазоксанид в концентрациях 10, 1 и 0,1 привел к снижению уровня паразитов на 94,4, 77,2 и 51,8% соответственно, и к уровню токсичности клеток до 65,1, 8,3 и 19,3% соответственно. Хотя при 10 мкг/мл имело место почти полное угнетение инфекции, была очевидна высокая степень токсичности. При 1 мкг/мл нитазоксанида снижение уровня инфекции и токсичность клеток была лучше по сравнению с паромомицином при конц. 2 мг/мл (снижение уровня инфекции 77,2% и токсичность 8,3% для нитазоксанида при 1 мкг/мл и снижение уровня инфекции 51% и токсичность 23,8% для паромомицина при 2 мг/мл).

В опыте 2 лекарство модифицировали для получения лучшего распределения доз с минимальной токсичностью. Соответственно, культуры выдерживали в течение 48 ч вместо 24 ч опыта 1. Инкубация в течение 48 ч показала более высокую относительную токсичность, что видно из опытов с паромомицином в обоих опытах. Концентрация нитазоксанида 20 мкг/мл была слишком токсична за 48 ч инкубации, хотя монослои клеток оказались интактными. Возможно, что высокая токсичность, которая влияет на функцию клеток, также воздействует и на развитие инфекции паразитов. При концентрации нитазоксанида 2 мкг/мл наблюдалось значительное снижение уровня инфекции паразитов при относительно низкой клеточной токсичности.

Дополнительные разведения также привели к значительному снижению уровня инфекции и низкой токсичности. При концентрации лекарства 2 мкг/мг умеренная клеточная токсичность и снижение уровня инфекции на 94,90% показали, что нитазоксанид при концентрации 2 мкг/мл превосходит паромомицин с концентрацией 2 мг/мл по влиянию на инфекцию С.ратуит ίη νίίτο (различие в концентрациях в 1000 раз).

Пример III СКУРТОЗРОКЮГОМ РЛКУИМ

Данные о дозах ίη νίίτο и хранении:

Маточные растворы нитазоксанида и дезацетилнитазоксанида (ΝΤΖ и ΝΤΖάοδ) тестировали против интактных ооцист СтурЮкропбшт ратуцт, эксцистированные спорозоиты инфицировали монослои клеток при концентрациях 10, 1, 0,1 и 0,01 мкг/мл. Каждое соединение растворяли в 100%-ном диметилсульфоксиде (ДМСО) и разбавляли до нужных концентраций стерильным ДМСО. Каждая концентрация нитазоксанида и контрольная среда содержала ДМСО в постоянной концентрации 0,025%.

В эксперименте использовали культуру клеток ΜΌΒΚΡ5Ό2, выращенную в 7 мм лунках и СгурЮхропбшт ратгит: ССН1 ооцисты, 5 х 10⁴ на лунку, в эксперименте сравнивали активность паромомицина (положительный контроль) и нитазоксанида (экспериментальное лекарство). Материалы включали иммунную антиС’гурЮхропбшт ратгит спорозоитную кроличью сыворотку (0,1%) и козье антикроличье антитело, меченное флюоресцеином (1%).

Испытания токсичности

200 мкл среды, содержащей раствор нитазоксанида в концентрациях, указанных выше и соответствующие контрольные пробы помещали в две лунки на пластину с 96 лунками, содержащими конфлюентные монослои клеток ΜΌΒΚΡ5Ό2, причем две лунки не содержали монослоев. Лекарство инкубировали на монослоях при 37°С (8% СО₂). Через 48 ч в каждую лунку добавляли МТЗ (раствор Овена (О\тсп) и РМЗ в концентрациях 333 мкг/мл и 25 мкМ со ответственно. Пластину снова помещали в инкубатор и выдерживали в темноте в течение 2 ч. Через 2 ч 100 мкл каждого супернатанта переносили в новую микролитровую пробирку и проводили имму но ферментный твердофазный анализ при 490 нм. Результаты записывали и анализировали. Токсичность в процентах рассчитывали следующим образом: разность средней оптической плотности (Οϋ) супернатантов с лекарством и средней оптической плотности (Οϋ) супернатантов контрольной среды (без лекарства) делили на Οϋ контрольной среды и умножали на 100.

ОР среды - ОР лекарства х 100

ОР среды

Цитотоксичность оценивали в баллах следующим образом: 0,5% токсичность = 0,6 - 25% токсичность = 1, 26-50% токсичность = 2, 5175% токсичность = 3, 76 - 100% токсичность = 4. В качестве стандарта за приемлемый уровень токсичности принимали токсичность 0 или 1 балл. Токсичность 2, 3 и 4 баллов считали высокой по отношению к монослою клеток.

Испытание интактных ооцист С.рагуши х 10⁴ ооцист С. рагу ши на лунку инкубировали с указанными концентрациями нитазоксанида при 37°С (8% СО₂) на конфлюентных монослоях клеток МЛВКР5О2. Уровень инфекции в каждой лунке определяли и анализировали на компьютере иммунофлюоресцентным методом через 48 ч. Снижение уровня инфекции в процентах рассчитывали следующим образом: разность среднего числа паразитов в поле зрения в контрольной среде (без лекарства) и среднего числа паразитов в поле зрения в лунках с лекарством делили на число паразитов в контрольной среде и умножали на 100.

Число паразитов в контрольной среде-число паразитов в среде с лекарствомЧисло паразитов в контрольной среде х 100

Результаты

Испытание ооцист С. ратуши (48 ч)

Лекарство	Конц.	Паразит	± 81)	Токс./Οϋ	±8ϋ	% Сниж.	% Токе.	Балл
Водная среда	0	681,58	±271,02	2,024	±0,18	0	0	0
Паромомицин	2000	115,75	± 44,65	1,219	± 0,009	83,02	39,79	2
Среда 0,025% ДМСО	0	628,50	± 171,94	1,799	±1,45	0	0	0
ΝΤΖ	10	11,75	±7,33	0,413	±0,13	98,13	77,07	4
1	39,67	±13,13	1,618	± 0,326	93,69	10,09	1
0,1	643,42	± 229,73	1,878	±0,154	<0	<0	0
0,01	714,33	± 194,79	1,617	± 0,072	<0	10,12	1
Новый ΝΤΖάεδ	10	13,75	±6,66	0,337	± 0,005	97,81	81,27	4
1	39,92	± 13,49	1,710	±0,033	93,65	4,97	0
0,1	649,86	± 152,19	1,506	±0,119	<0	16,29	1
0,01	749,33	± 139,49	1,721	±0,144	<0	4,36	0

Конц. - мкг/мл; Паразит - среднее число паразитов в поле зрения (анализировали 12 полей); % Сниж. - процент снижения уровня инфекции; % Токе. - процент токсического действия лекарства на клетки.

Приведенные данные свидетельствуют о том, что активность ΝΤΖάεδ, снижающая уровень инфекции, имеет значение, близкое значению активности ΝΤΖ из примера II.

Как нитазоксанид, так и дезацетилнитазоксанид были одинаково эффективны ίη νίΐτο против С.рагуши при испытаниях этих соединений в параллельных опытах; для концентраций 10 и 1 мкг/мл были получены значения процента снижения уровня инфекции 98 и 94% для каждого соединения соответственно. Для нитазоксанида концентрация 1 мкг/мл была минимальной концентрацией, дающей процент снижения уровня инфекции более 90%, в то время как 50%-ное снижение уровня инфекции достигалось при более низких концентрациях нитазоксанида, а именно, 0,2, 0,1 и 0,02 мкг/мл. При таких же условиях эксперимента паромомицин, который использовался в качестве контрольного вещества, был в 2000 раз менее эффективен, при концентрации 2000 мкг/мл процент снижения уровня инфекции составил от 51 до 83%.

Пример IV

Ε.ΙΝΤΕδΤΙΝΑϋΙδ ΑΝΕ) ν.ΟΟΚΝΕΑ

2ΕΚ-13 клетки (линия почечных клеток кролика) помещали на пластины с 24 лунками с концентрацией 2,6 х 10⁵ клеток на лунку (1,0 мл среды; ΚΡΜΙ 1640, 2мМ Ь-глутамина и 5% инактивированной нагреванием эмбриональной бычьей сыворотки). Пластины инкубировали при 37°С в инкубаторе с СО₂ в течение ночи, за это время лунки были конфлюентны (с одним удвоением, которое оценивается как 5 х 10⁵ клеток на лунку).

Организмы 8ер1а1а ί п(С8( ί па 118 (полученные из культуры ткани) добавляли к клеткамхозяевам в соотношении 3:1 в расчете на клетки-хозяева или 15 х 10⁶ организмов на лунку. В результате было инфицировано примерно 50% клеток-хозяев.

Лекарства растворяли в ДМСО, воде или метаноле (в зависимости от растворимости) для получения маточных растворов с концентрацией 1,0 мг/мл, которые хранили при -70°С. Маточные растворы разбавляли средой тканевой культуры. Каждое разведение тестировали в трех лунках.

Среду меняли каждые 3-4 дня (среда содержала свежеразбавленные лекарства).

На шестой день (после добавления паразитов и лекарств) клетки проверяли на токсичность. Контрольные клетки с лекарством, но без паразитов, испытывали на конфлюентность, морфологию клеток и наличие мертвых или подвижных клеток. Клетки, инкубированные только с паразитами, испытывали для подтверждения инфекционности паразитов (а именно на присутствие паразитоносных вакуолей). В клетках инкубировали паразитов и определяли токсичность лекарств на клетки-хозяева и относительное количество паразитоносных вакуолей (высокое, среднее или низкое).

На десятый день к культуре в лунках добавляли по 100 мкл 10%-ного 8Ό8 (додецилсульфат натрия) (0,5% конечная концентрация) для разрушения клеточных мембран и высвобождения микроспоридий. Общее количество паразитов в каждой лунке определяли путем подсчета в аликвоте на гемоцитометре. Результаты представляли в процентах снижения уровня токсичности (относительно инфицированных клеток без лекарства).

Результаты представлены на фиг. 1-4.

Пример V

ТОХОРБА8МА 60ΝΏΙΙ

Нитазоксанид и дезацетилнитазоксанид тестировали против паразитов, а более конкретно, ВН штамм Тохор1акта допби поддерживался последовательными пассажами у мышей. В клеточные культуры МВС5 фибробласт (ВюМспсн.х. Франция), выращенные на пластинах с 96 лунками, высевали Тохор1акта допби. 200 свежесобранных тахизоитов добавляли в каждую лунку с культурой, кроме 8 контрольных лунок (отрицательный контроль). Через 4 ч инкубации к культуре были добавлены растворы лекарств.

Нитазоксанид и дезацетилнитазоксанид тестировали в диапазоне концентраций от 8 х 10^-4 до 40 мг/мл. Лекарства сначала растворяли в ДМСО с концентрацией 2 мг/мл и затем проводили последовательные разбавления культурной средой. Выпадения осадка не наблюдали.

Растворы лекарств добавляли в культуры (8 лунок для каждого разведения), затем пластины с культурой инкубировали в течение 72 ч. Затем культуры фиксировали холодным метанолом. Оценку роста Т.доибп проводили иммуноферментным твердофазным анализом с использованием меченного пероксидазой кроличьего анти-Тохор1акта доиби антитела. Значения оптической плотности регистрировали для каждой лунки.

Результаты представлены в виде графика зависимости оптической плотности для каждой лунки с культурой от концентрации лекарства в культуре. Статистический анализ заключался в регрессионном анализе с доверительной областью 95% и определении кривых доза-ответ из значений оптической плотности для каждого лекарства.

Одну пластину окрашивали С1етка для оценки цитопатического эффекта в культурах.

Проводили три отдельных опыта. В каждом опыте использовали две пластины с культурами для каждого соединения, на каждой пластине для каждой концентрации лекарства использовали по 8 лунок.

Результаты

В трех сериях опытов были получены сходные результаты. Графическое представление этих результатов одного опыта для каждого лекарства отражено на фиг. 5а, Ь, с и 6а, Ь, с.

Нитазоксанид (фиг. 5а, Ь, с):

Для диапазона концентраций от 1 0^-4 мг/л до 0,3 мг/л не было обнаружено снижения уровня инфекции. Значительное снижение было отмечено для концентрации >0,6 мг/л и полное прекращение роста Тохор1акта допбп при концентрации >2,5 мг/л. Однако, заметная токсичность была отмечена на монослое клеток при концентрации >2,5 мг/л.

Микроскопический анализ монослоя показал, что нитазоксанид при концентрации 1,25 мг/л вызвал цитопатический эффект на зараженных клетках с увеличением количества паразитоносных вакуолей и уменьшением количества внутриклеточных паразитов. С помощью регрессионного анализа была рассчитана концентрация 50%-го снижения уровня инфекции, которая составила 1,2 мг/л.

Дезацетилнитазоксанид (фиг. 6а, Ь, с):

Аналогичные результаты были получены для дезацетилнитазоксанида: отсутствие эффекта при концентрациях от 10^-4 мг/л до 0,3 мг/л, снижение уровня инфекции для концентрации >0,6 мг/л и заметная токсичность при концентрации >2,5 мг/л. Концентрация 50%-го снижения уровня инфекции составила 1,2 мг/л.

Полученные результаты были воспроизведены в трех отдельных опытах, оценку влияния лекарства на снижение уровня инфекции проводили на одинаковых культурах для каждой концентрации лекарства.

Как для ΝΓΖ, так и для ККбек наблюдали заметное замедление роста Тохор1акта допби при концентрации примерно 1,2 мг/л с деформацией паразитоносных вакуолей, но без заметного изменения самих паразитов.

Эти результаты показывают, что данные лекарства обладают хорошей активностью против Т.допбп и что, на основании полученного значения концентрации 1 мг/л для сыворотки или тканей, можно ожидать терапевтического эффекта ίη νί\Ό.

Пример VI МУСОВАСТЕВ1А

Было обнаружено, что нитазоксанид обладает антимикробной активностью против туберкулезной палочки. В следующей таблице пред ставлены результаты опытов по определению минимальной ингибирующей концентрации (МИК) нитазоксанида и тизоксанида против МусоЬас!етшт т!гасе11и1аг с помощью методики с растворами агара. Результаты были основаны на нескольких опытах, каждый из которых проводился в течение 3 недель с использованием методики с растворами М1бб1еЬтоок агара. Полученные результаты показали, что МИК нитазоксанида против МусоЬас1епа составляет 2 мкг/мл, а МИК тизоксанида - 4 мкг/мл. В опытах использовали стандартный штамм МусоЬас!етшт т!тасе11и1аг от АТСС и стандартную методику с растворами агара.

МИК нитазоксанида и тизоксанида для МусоЬас1епит т1гасе11и1аге

МИК
Нитазоксанид	2 мкг/мл
Тизоксанид	4 мкг/мл

*МИК определяли стандартной методикой с растворами агара в течение 3 недель с использованием агара МИ01еЬгоок 7Н11.

В опытах использовали стандартный штамм М.т1гасе11и1аг АТСС 13950.

На фиг. 7 представлены результаты, полученные из опытов по испытанию эффективности нитазоксанида против микобактерий, выращенных в жидком бульоне. Для определения роста через 4 ч проводили МТЗ колориметрические испытания. Этот метод предпочтительнее, чем 3-х недельная методика с растворами агара. Как видно из данных на фиг. 7, после добавления нитазоксанида через 72 ч после инициации роста культуры наблюдался немедленный эффект на рост по сравнению с ростом в контрольной среде. Доза нитазоксанида 3 мкг/мл останавливала рост в течение 24 ч, затем наблюдался медленный рост в течение следующих 2 дней. Доза 50 мкг/мл оказывала полное бактериостатическое действие на культуру в течение 144 ч.

Пример VII СКУРТОЗРОКГОГОМ РАКШМ

Действие нитазоксанида проверяли против Сгур!озропбшт ратуит на мышах, инфицированных опытным путем. Нитазоксанид получали от Котагк БаЬогаЮпез. Ь.С. в Тампе, штат Флорида.

Общая доза для человека (1 г в день в течение 7 дней, т. е. 7 г) была изменена для мышей согласно Пагету и Барнсу (Раде! апб Вагпез). Доза для человека была умножена на 0,0026 для мышей (весом примерно 20 г) для получения общего количества лекарства, необходимого для приема утром и вечером в течение 7 дней. Каждая мышь получала 2,6 мг в день (7000 мг х 0,0026/7). Дозы вводились в рот с помощью пластикового шприца с иглой с круглым концом.

Двадцать мышей (возраст 2 дня) были инфицированы путем орального применения 100000 ооцист Сгур!озропбшт ратуит, полученных от инфицированных телят. Перед введением ооцисты концентрировали раствором сахара способом, описанным Баует & ЕШз. Ежедневно брали и анализировали ректальные мазки от каждой мыши, используя модифицированную методику окрашивания №еЫ-Ыее1зеп, описанную Сгасхук и др. Ооцисты появлялись в фекалиях через 2 дня после орального инфицирования животных. На третий день после инфицирования 10 мышей получали по 1,3 мг нитазоксанида утром и вечером в течение 7 дней, 10 других мышей использовались как контрольные без лечения. Ректальные мазки брали ежедневно в течение 7 дней лечения и в течение 7 дней после окончания лечения. Ооцисты суспендировали в масле и подсчитывали в 100 полях под микроскопом.

Результаты

Результаты, представленные в следующей таблице, ясно показывают, что нитазоксанид, введенный в ежедневной дозе 2,6 мг в течение 7 последовательных дней, был эффективен против Сгур!озропбшт ратуит, снижая количество ооцист в фекалиях инфицированных мышей по сравнению с контрольными животными. Тестируемое лекарство снижало количество ооцист у из 10 мышей, проходящих курс лечения, на 3 день приема лекарства. На седьмой, последний день лечения наблюдалось полное отсутствие ооцист в фекалиях по сравнению с контрольными (без лечения) мышами. Этот эффект сохранялся, по крайней мере, в течение последующих дней после окончания лечения, что видно из данных, полученных на 3 и 7 дни после окончания лечения.

Количество ооцист в поле зрения (суспензия ооцист в масле)
	3-й день лечения	Последний день лечения	3-й день после лечения	7-й день после лечения
№ мыши	Контрольная группа	Группа, принимавшая лекарства	Контрольная группа	Группа, при- нимавшая лекарства	Контрольная группа	Группа, при- нимавшая лекарства	Контрольная группа	Группа, при- нимавшая лекарства
1	3,0	0,0	5,0	0,0	4,0	0,0	2,0	0,0
2	4,0	0,0	4,0	0,0	3,0	0,0	1,0	0,0
3	6,0	0,0	5,0	0,0	4,0	0,0	0.5	0,0
4	3,0	2,0	3,0	0,0	2,0	0,0	1,0	0,0
5	5,0	2,0	3,0	0,0	3,0	0,0	0,5	0,0
6	3,0	0,0	4,0	0,0	5,0	0,0	2,0	0,0
7	3,0	0,0	5,0	0,0	4,0	0,0	1,0	0,0
8	5,0	1,0	5,0	0,0	1,0	0,0	0,5	0,0
9	3,0	3,0	3,0	0,0	2,0	0,0	1,0	0,0
10		0,0	5,0	0,0	2,0	0,0	0,5	0,0

Всего	35	8.0	42	0.0	30	0.0	10	0.0
Среднее	3.5	0.8	4.2	0.0	3.0	0.0	1.0	0.0
Эффективность		60%		100%		100%		100%

Пример VIII ΜΥΟΟΒΑΟΤΕΒίυΜ

Нитазоксанид сравнивали с антибиотиком изониазидом. В качестве штамма микобактерий использовали ВСО (ВасШе бе Са1тс11с с! Оиспп). Чувствительность этого штамма была аналогичной чувствительности М.1иЬсгси1о515.

однако этот штамм менее опасный и не требует серьезных мер предосторожности.

Мышам вводили 4 мг лекарства в день в 2 мл подсолнечного масла. Результаты, полученные у мышей, принимавших нитазоксанид, были сравнимы с результатами у мышей, принимавших изониазид.

	10⁷	10⁵
Селезенка	Печень	Легкие	Селезенка	Печень	Легкие
Нитазоксанид	1 575 000	1 575 000	57500	68250	70000	50
800 000	1 550 000	122 000	65000	87500	75
875 000	1 550 000	30000	75000	35000	150
950 000	750 000	75000	60000	60000	50
ΙΝΗ	475 000	1 050 000	11 000	20000	21250	50
255 000	750 000	5750	15250	27500	125
200 000	975 000	4000	60000	52500	50
			20000	37500	50
РВ8	1 500 000	2 125 000	92500	102 500	195 000	750
1 525 000	1 800 000	98000	140 000	175 000	800
1 925 000	1 750 000	177 500	98000	150 000	500
1 675 000	1 800 000	117500	105 000	150 000	750

Пример IX

ЕАЗСЮЬА НЕРАТ1СА

Активность нитазоксанида и дезацетилнитазоксанида проверяли по их действию на Еа§сю1а йсрайеа ίη νίίτο.

Зрелые Е.йсрайса выделяли из желчных протоков печени 3 телят, пораженных фасциолезом, в Ветеринарной медицинской диагностической лаборатории Луизианы, Натбу'к Мас! Расксга. Випкю. ЬА. Трематоды промывали стерильным солевым раствором в течение 1 ч и помещали в стерильный солевой раствор или ВРМ1 (рН 7.4) на дополнительные 3 ч. Затем трематоды инкубировали в стерильной ВРМ1кроличьей сыворотке (50:50 об/об) или ВРМ1 (рН 7.4) в течение ночи при 37°С в атмосфере 5% СО2.

Культуру обрабатывали ίη νίίτο согласно модифицированной методике Ибарра и Дженкинса (1Ьатга апб 1спкш5) (2.Рага511спкб. 70:655661. 1984). Применяя стерильную технику, трематоды дважды промывали по 2-3 мин сбалансированным солевым раствором по Ханку (рН 7.2) и каждую помещали в лунку на пластину с культурой ЬшЬто из 6 лунок, содержащую 10 мл указанных растворов лекарства в культурной среде, которая состояла из стерильной ВРМ1кроличьей сыворотки (50:50 об/об) с 2% крови кролика, 100 частей на миллион пенициллина и 100 частей на миллион стрептомицина. Использовали только те трематоды, которые имели нормальную активность и морфологию. Маточные растворы нитазоксанида и его метаболита дезнитазоксанида, полученные от Вотагк, растворяли в ДМСО (2000 мкг/мл) и разбавляли культурной средой в мерных колбах на 100 мл для получения следующих концентраций лекар ства (100. 50. 25. 10. 5. 3. 1 мкг/мл). По две контрольные трематоды были включены в каждый параллельный опыт, одна с культурной средой без лекарства с ВВС, и одна с культурной средой без лекарства без ВВС.

Исследовали действие лекарств на трематоды, которое проявлялось в их гибели, нарушениях подвижности или изменении морфологии по сравнению с контрольными трематодами. Для тестирования трематод использовали панель, освещенную контржурным светом и линзы с трехкратным увеличением.

Результаты

Опыт 1.

При использовании дезнитазоксанида в дозах 50 и 100 мкг трематоды агонизировали или погибли через 1 ч. При дозе 25 мкг в течение первого часа четыре из 7 трематод агонизировали, две оставались активны, одна была вялой; через 3 ч все, кроме двух вялых трематод, погибли и только одна вялая трематода осталась живой через 4 ч. При дозе 10 мкг снижение активности было отмечено через 1. 3 и 4 ч и все трематоды агонизировали или погибли через 7

ч. При дозах 5 и 3 мкг снижение активности некоторых трематод было отмечено через 24 ч с некоторым слабым всплеском активности при дозе 3 мкг; через 50 ч все погибли кроме одной вялой особи в каждой группе. При дозе 1 мкг некоторая слабая активность была отмечена через 42-74 ч и только 3 активных и одна агонизирующая трематода остались живыми через 91 ч; через 115 ч осталась живой только одна вялая трематода. Смертельный исход наблюдался в контрольной группе с ВВС через 66 ч (одна особь), через 91 ч (одна особь), через 115 ч (четыре особи). В контрольной группе без ВВС через 91 ч все были живы, одна погибла через 115 ч.

Опыт 2.

При использовании нитазоксанида была отмечена более сильная активность при более ранних смертельных исходах и снижении подвижности в 8 параллельных опытах по сравнению с результатами для дезнитазоксанида. При дозах 100, 50 и 25 мкг все трематоды погибли или агонизировали через 1 ч, кроме одной при 25 мкг, она погибла через 3 ч. Соответствующее дозе снижение подвижности для каждой другой группы, обработанной лекарством, начиналось через 1 ч. При дозе 10 мкг только одна особь выжила через 16 ч. При дозе 5 мкг только три особи были активны на 6-й ч и не осталось ни одной активной через 16 ч. Через 23 ч только 2 вялых трематоды в группе с дозой 3 мкг остались живыми; они погибли через 41 ч. При дозе 1 мкг одна погибла через 16 ч, три - через 41 ч и 5 - через 74 ч; три особи остались активны через 91 ч и одна - через 115 ч. В контрольной группе с ВВС 7 из 8 трематод выжили через 74 ч; три через 91 ч и две - через 115 ч. В контрольной группе без ВВС 6 из 8 трематод сохранили активность через 74 ч, четыре остались живы через 91 ч и две сохранили активность через 115 ч.

Смертность трематод в группах с высокими дозами (25, 50, 100 мкг) была высокой и была связана с контрактацией и брюшным искривлением. В группах с низкими дозами большая часть трематод на некоторое время снижала подвижность и была более расслабленной и «уплощенной» во время агонии и гибели. Через 91 ч наблюдалось заражение, которое влияло на точность опыта. При использовании дезнитазоксанида разрастание бактерий и грибов и связанная с этим смертность имела место на двух пластинах параллельных опытов через 115 ч. При использовании нитазоксанида разрастание бактерий и грибов и смертность трематод имела место через 91 ч (две пластины) и через 115 ч (5 пластин). Наблюдения через 139 ч нельзя считать достоверными из-за высокой степени заражения большинства пластин.

Выводы

Опыты показали высокую антитрематодную активность нитазоксанида и дезнитазоксанида. Несколько более высокая активность против Р.йераБса наблюдалась для нитазоксанида по сравнению с дезнитазоксанидом, основным метаболитом, который, как предполагают, является активным на печеночном уровне.

Быстрая смертность трематод ίη νίίτο наблюдается при дозе дезнитазоксанида > 50 мкг через 1 ч, при дозе 25 мкг - через 4 ч и при дозе 10 мкг через 6-7 ч. Доза 10 мкг может быть подходящей, если фармакокинетические данные показывают, что уровень лекарства в тканях сохраняется в течение 6-8 ч после одного приема.

Сильная антитрематодная активность через 74 ч (3 дня) наблюдалась для обоих соединений при дозах 3 и 5 мкг. При дозе 1 мкг наблюдалось длительное сохранение жизни паразитов, но отличное от контрольной группы, которая не обрабатывалась лекарством. Подача такого количества лекарства трематодам в печеночные ткани в течение 3-4 дней может оказать неадекватное действие на паразитов.

Пример Х

РАБСЮЬА СЮАКПСЛ

Нитазоксанид тестировали против незрелых и зрелых Ра§сю1а д1дапПса у инфицированных кроликов, инфицированных опытным путем.

Инкапсулированные Ра§сю1а д1дапПса метацеркарии (ЕМС) были собраны в лист целлофана через 28-35 дней после инфицирования Ь.са11иб1 улиток мирацидием Ра§сю1а д1дапПса методом Абделя-Гани (ЛЬбе1-С11апу), в ходе которого улиток ежедневно в течение 30 мин освещали искусственным светом в чистой дехлорированной водопроводной воде. Полученные инкапсулированные метацеркарии (ЕМС) хранились при 4°С в холодильнике в течение 58 дней под водой, пока они не были использованы для инфицирования опытных животных.

В опыте использовали 40 кроликов Во5са1 весом от 1,5 до 2 кг, которые были разделены на две группы по 20 животных. Животных из группы 1 инфицировали орально 35-40 инкапсулированными метацеркариями, завернутыми в лист салата, который вводили на корень языка животных. После этого рот животного закрывали рукой и держали до тех пор, пока лист салата не был проглочен. Эту группу животных использовали для тестирования эффективности нитазоксанида против незрелых (4-5 недельных) Ра§сю1а ДдагЮса.

Животных из группы 2 орально инфицировали, как описано выше, 10-15 инкапсулированными метацеркариями и использовали для тестирования нитазоксанида против раннезрелых трематод (возраст > 10 недель).

Десять животных из 1 группы принимали 35 мг нитазоксанида утром и вечером в течение 7 последовательных дней через 4 недели после их заражения паразитами в незрелой стадии их развития. Оставшихся 10 животных использовали в качестве контрольных без лечения.

Всех животных кормили сухим кормом до окончания опыта.

Через 7 дней после введения последней дозы нитазоксанида все кролики из каждой группы были убиты. Поверхность печени исследовали на наличие некротических борозд от миграции паразитов, особенно незрелой стадии их развития. Эти некротические участки исследовали двумя хирургическими иглами, чтобы выделить молодых мигрирующих особей трематод, используя технику, описанную Эль-Бахи (Е1-Ва11у). Печень нарезали на маленькие кусоч ки, особенно вокруг борозд миграции, и размягчали под микроскопом, для того, чтобы выделить трематод. Брюшную полость и внутренние поверхности промывали теплой водой. Затем воду собирали, процеживали и исследовали на наличие молодых особей трематод. Всех собранных паразитов, а также их части подсчитывали в обеих группах, у животных, принимавших лекарство и контрольных. Живые трематоды были розового цвета, прозрачными, с неповрежденной оболочкой, легко экстрагировались из тканей печени теплой водой, мертвые трематоды были сероватого цвета и имели поврежденную некротическую поверхность. Эффективность нитазоксанида рассчитывали по формуле % эффективности а - Ь х 100 а

где а - количество трематод, выделенных из фекалий контрольных животных;

Ь - количество трематод, выделенных из фекалий животных, принимавших лекарство.

Результаты

Как показано в табл. 7, наблюдалось уменьшение количества незрелых трематод, выделенных из печени кроликов, в группе, принимавшей лекарство, по сравнению с контрольной группой. Средний процент уменьшения составил 46,77% (диапазон: 40 - 60%).

Таблица 7. Эффективность нитазоксанида против незрелых Г.дщапйса (возраст - 4 недели) у кроликов, инфицированных опытным путем.

	Количество трематод, выделенных из печени
№ кро- лика	Контрольная группа (без лечения)	Кролики, принимавшие лекарство	Эффективность %
1	7	4	42%
2	7	4	42%
3	6	3	50%
4	8	4	50%
5	5	3	40%
6	5	2	60%
7	5	3	40%
8	6	3	50%
9	8	4	50%
10	5	3	40%
Среднее	6,2	3,3	46,77%

В стадии ранней зрелости паразитов нитазоксанид проявил полный эффект (100% уничтожение). По сравнению с контрольными животными, при исследовании печени кроликов, принимавших лекарство, гельминтов не было обнаружено, что показано в табл. 8.

Таблица 8. Эффективность нитазоксанида против Г.дщапПса ранней зрелости (возраст - 10 недель) у кроликов, инфицированных опытным путем.

	Количество	трематод, выделенных из печени
№ кролика	Контрольная группа (без лечения)	Кролики, принимавшие лекарство	Эффективность %
1	4	0.0	100%
2	4	0.0	100%

3	3	100%
4	3	100%
5	2	100%
6	2	100%
7	2	100%
8	3	100%
9	3	100%
10	3	100%
Среднее	2.9	100%

Нитазоксанид, вводимый ежедневно в дозе 70 мг в течение 7 последовательных дней, был умеренно эффективен против незрелых Б.дщапНса и полностью эффективен против паразитов ранней стадии зрелости.

Пример ХШ 8СШ8ТО8ОМА

Нитазоксанид тестировали против 8с1пк6кота тапкою и 8сЫк!окота НетаЮЬшт у мышей, инфицированных опытным путем.

Сорок белых мышей весом от 30 до 50 г разделили на две группы по 20 мышей в группе. Первую группу инфицировали 300-500 свободными активными церкариями 8сЫк!1кота тапкопт суспендированными в 0,25 мл дистиллированной воды, которые были введены каждой мыши путем внутрибрюшинной инъекции. Вторая группа была таким же образом инфицирована церкариями 8с1пк1окота НетаЮЬшт. Затем за этими двумя группами животных наблюдали в лаборатории в течение 70 дней.

Через 70 дней после заражения, десять мышей было пролечено нитазоксанидом орально дозой 1,3 мг утром и вечером в течение 7 последовательных дней. Через 7 дней после окончания лечения все мыши были убиты, гельминтов выделяли из печени каждого животного путем перфузии теплой водой (37°С), подсчитывали количество выделенных шистосом у всех пролеченных и контрольных животных. Эффективность нитазоксанида рассчитывали по формуле:

% эффективности а-Ь х 100 а

где а - количество шистосом, выделенных из фекалий контрольных животных;

Ь - количество шистосом, выделенных из фекалий животных, принимавших лекарство.

Результаты

Из табл. 9 и 10 видно, что нитазоксанид, введенный в ежедневной дозе 2,6 мг в течение 7 последовательных дней, был более эффективен против 8с1пк1окота НетаЮЫюп (сокращение количества гельминтов составило 82,85% по сравнению с контрольной группой), чем против 8сЫкЧкота тапкою (сокращение количества гельминтов составило 59,91% по сравнению с контрольной группой). Эти результаты согласуются с результатами АЬаха и др., согласно которым нитазоксанид не был эффективен против 8сЫкбкота тапкою, что было показано ана лизами на яйца гельминтов у пациентов, прошедших курс лечения.

Таблица 9. Эффективность нитазоксанида против зрелых 8сЫ§1о8оша шаизош (возраст - 13 недель) у мышей.

	Количество трематод, выделенных из печени
№ мыши	Контрольная группа (без лечения)	Мыши, принимавшие лекарство
1	21	10
2	29	9
3	32	10
4	26	11
5	24	13
6	19	10
7	20	9
8	24	12
9	22	8
10	30	7
Всего	247	99
Среднее	24,7	9,9
Эффективность		59,91

Таблица 10. Эффективность нитазоксанида против зрелых 8сЫ§1о8оша Ьеша1оЬшш (возраст - 13 недель) у мышей.

	Количество трематод, выделенных из печени
№ мыши	Контрольная группа (без лечения)	Мыши, принимавшие лекарство
1	18	3
2	16	3
3	14	2
4	19	2
5	12	4
6	10	4
7	13	2
8	12	2
9	17	0,0
10	9	2
Всего	140	24
Среднее	14	2,4
Эффективность		82,85

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims

1. Фармацевтическая композиция для орального применения, содержащая в качестве активного агента, по крайней мере, одно соединение, выбранное из группы, состоящей из соединения формулы I и соединения формулы II причем упомянутый активный агент находится в форме активных частиц, имеющих размеры менее 200 мкм и средний размер более 5 мкм.

2. Композиция по п. 1, в которой средний размер твердых активных частиц составляет от 10 до 100 мкм.

3. Композиция по п. 1, в которой средний размер активных твердых частиц составляет от 20 до 50 мкм.

4. Композиция по п.1, в которой менее 10 вес.% активных твердых частиц имеют размеры более 100 мкм.

5. Композиция по п.1, в которой, по крайней мере, 50 вес.% активных твердых частиц имеют размеры менее 50 мкм.

6. Композиция по п. 1, в которой менее 10 вес.% активных твердых частиц имеют размеры менее 5 мкм.

7. Композиция по п. 1, в которой коэффициент распределения активных твердых частиц составляет от 0,8 до 2, причем этот коэффициент распределения рассчитывают по формуле ?90% = ⁽⁰90»/о ^{- 0}10%^)/((090% ^{+ 0}10%^)/2)где Е₉₀% - коэффициент распределения при 90%;

0₉₀% - максимальный размер частиц во фракции частиц, соответствующей 90% указанных активных твердых частиц, и

8. Композиция по п. 1, в которой коэффициент распределения активных твердых частиц составляет от 1,1 до 1,9, причем этот коэффициент распределения рассчитывают по формуле ?90% = ⁽⁰90% ^{- 0}10%^)/((090% ^{+ 0}10%^)/2) где Е₉₀% - коэффициент распределения при 90%;

9. Фармацевтическая паста для местного применения, которая содержит в качестве активного агента твердые частицы, по крайней мере, одного соединения, выбранного из группы, состоящей из соединения формулы I и соединения формулы II которые имеют размеры менее 200 мкм и средний размер более 5 мкм;

по крайней мере, один загуститель;

по крайней мере, один увлажняющий агент и по крайней мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту, причем рН пасты имеет значение от 2 до 6.

10. Фармацевтическая паста по п.9, которая дополнительно содержит, по крайней мере, один дополнительный компонент, выбранный из группы, состоящей из цетилового спирта, производных глицерида, пропиленгликоля и их смесей.

11. Фармацевтическая композиция для орального применения, содержащая активный агент, гранулированный в присутствии гранулирующего агента, в которой активный агент находится в форме активных твердых частиц, по крайней мере, одного соединения, выбранного из группы, состоящей из соединения формулы I и соединения формулы II

О - СО · СН₃ причем указанные активные частицы имеют размеры менее 200 мкм и средний размер более 5 мкм.

12. Композиция по п.11, в которой гранулирующий агент выбран из группы, состоящей из поливинилпирролидона, воды, спирта, сахарозы, гидроксицеллюлозы и их смесей.

13. Композиция по п.11, в которой гранулированные активные твердые частицы содержат, по меньшей мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту.

14. Композиция по п.13, в которой фармацевтически приемлемая кислота выбрана из группы, состоящей из лимонной, глутаминовой, янтарной, этансульфокислоты, уксусной, винной, аскорбиновой, метансульфокислоты, фумаровой, адипиновой, яблочной и их смесей.

15. Композиция по п.13, в которой весовое отношение фармацевтически приемлемой кислоты и твердых частиц составляет от 0,01 до 0,5.

16. Фармацевтическая композиция для орального применения, содержащая активный агент, увлажняющий агент и производное крахмала, в которой активный агент находится в форме твердых активных частиц, по крайней мере, одного соединения, выбранного из группы, состоящей из соединения формулы I и соединения формулы II (П)

Фиг. 1 причем указанные активные частицы имеют размеры менее 200 мкм и средний размер более 5 мкм.

17. Фармацевтическая композиция по п.16, которая дополнительно содержит, по меньшей мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту.

18. Фармацевтическая композиция по п.16, в которой активные частицы являются гранулированными в присутствии гранулирующего агента для образования гранулированного активного агента, содержащего от 2 до 99,97 вес.% указанного активного соединения и от 0,03 до 10 вес.% гранулирующего агента.

19. Фармацевтическая композиция по п.18, в которой гранулирующий агент выбран из группы, состоящей из поливинилпирролидона, воды, спирта, сахарозы, гидроксицеллюлозы и их смесей.

20. Жидкая суспензия активного агента для орального применения, содержащая активный агент в виде твердых частиц, по меньшей мере, одного соединения, выбранного из группы, состоящей из соединения формулы I _____ он и соединения формулы II причем указанные частицы имеют размеры менее 200 мкм и средний размер более 5 мкм; и по меньшей мере, одну фармацевтически приемлемую кислоту, причем рН суспензии имеет значение от 2 до 6.

21. Суспензия по п.20, в которой рН имеет значение от 3 до 5.

22. Суспензия по п.20, которая дополнительно содержит гранулирующий агент.