EA002161B1

EA002161B1 - Антрациклингликозид, способ его получения, его применение и фармацевтическая композиция

Info

Publication number: EA002161B1
Application number: EA200000025A
Authority: EA
Inventors: Кристина Джерони; Марина Рипамонти; Микеле Карузо; Антонио Суарато
Original assignee: Фармация Энд Апджон С.П.А.
Priority date: 1998-04-15
Filing date: 1999-04-09
Publication date: 2001-12-24
Also published as: ATE230411T1; MY115486A; IL133114A0; HUP0003802A3; AR019046A1; AU749578B2; CN1263532A; HUP0003802A2; EP0989989B1; AU3817499A; UA45493C2; NO996127L; GB9808027D0; CZ451299A3; TW454012B; BR9906305A; JP2002505691A; NO996127D0; DK0989989T3; NZ501931A

Abstract

Антрациклингликозиды формулы (I), где волнистая линия означает, что гидроксильная группа в положении 13 может находиться в α- или β-положении или в виде их смеси, и их применение в качестве противоопухолевых средств, способ их получения путем восстановления антрациклина формулы (II) в присутствии восстановителя в смеси органических растворителей и при необходимости разделения полученной смеси 13(R)- и 13(S)-изомеров на индивидуальные диастереоизомеры, а также применение антрациклингликозидов формулы (I) для лечения человеческого или животного организма консервативным методом.

Description

Изобретение относится к антрациклингликозидам, способу их получения и содержащим их фармацевтическим композициям и может быть использовано в химической промышленности и медицине.

Сущность изобретения

Изобретение относится к антрациклингликозидам, отвечающим формуле (I)

где волнистая линия означает, что гидроксильная группа в положении 13 может находиться в а- или β-положении или в виде их смеси.

Соединения формулы (I) включают производные, в которых гидроксильная группа в положении 13 имеет конфигурацию 13(8), 13(К), или смесь и 13(К) и 13(8) диастереоизомеров, которая представляет собой

4-деметокси-13(8/К)-дигидро-3'-дезамино3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин (1а),

4-деметокси-13 (8)-дигидро-3'-дезамино-3'азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин (1б) и

4-деметокси-13 (К)-дигидро-3 '-дезамино-3'азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин (1в).

Более предпочтительно, настоящее изобретение относится к антрациклингликозидам вышеприведенной формулы (I), отличающимся тем, что атом углерода в положении 13 имеет конфигурацию 8, то есть антрациклингликозид представляет собой 4-деметокси-13 (8)-дигидро3'-дезамино-3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин (1б).

Соединения формулы (I) могут быть получены путем восстановления антрациклина формулы (II) о он о

в присутствии восстановителя, такого как боргидрид натрия, в смеси органических растворителей, таких как дихлорметан и метанол, пред почтительно при температуре ниже 50°С, более предпочтительно при температуре -70°С, и, если желательно и необходимо, путем разделения полученной в результате смеси 13(К)- и 13(8)соединений на индивидуальные диастереоизомеры. Например, индивидуальные 13-дигидродиастереоизомеры могут быть получены путем разделения смеси с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). В частности, разделение с помощью ВЭЖХ можно осуществлять в колонке с обращенной фазой при использовании смеси фосфатного буфера, такого как 10 мМ К₂НРО₄, доведенного до рН = 7,0 с помощью 85 %-ной фосфорной кислоты, с органическим растворителем в качестве подвижной фазы, таким как тетрагидрофуран или ацетонитрил.

Исходным материалом для получения новых антрациклингликозидов является 4деметокси-3 '-дезамино-3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин формулы (II), описанный в патенте США А-5532218.

Изобретение относится, далее, к фармацевтической композиции, включающей антрациклингликозид формулы (I) в смеси с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Могут быть использованы обычные носители и разбавители. Композицию можно готовить и вводить обычным образом.

Соединения согласно изобретению пригодны для лечения человеческого или животного организма консервативными методами. Они полезны в качестве противоопухолевых средств. Они пригодны для лечения лейкоза и твердых опухолей, таких как опухоли толстой кишки, толстой кишки-ректальные опухоли, овариальные опухоли, опухоли молочной железы, простаты, легких, почек, а также меланомы. Следовательно, человека можно лечить методом, включающим введение ему терапевтически эффективного количества соединения согласно изобретению. Таким образом может быть улучшено состояние пациента. Вводимая доза может быть установлена при использовании известных диапазонов доз в области антрациклинов и изменяться в соответствии с активностью, проявляемой соединениями настоящего изобретения в ΐη уйго и ΐη νΐνο противоопухолевых тестах. Пригодные дозы обычно находятся в диапазоне от 1 до 200 мг/м² поверхности тела, предпочтительно от 1 до 100 мг/м², в зависимости от природы и тяжести излечиваемого заболевания и от общего состояния пациента.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения

Соединения формулы (I) испытывали и они найдены активными ΐη νΐίΓο против ряда мышиных и человеческих опухолевых клеточных линий и ΐη νΐνο в случае распространенного Ρ388/ΌΧ мышиного лейкоза.

Ιη νΐίΓΟ и ίη νίνο активность соединения формулы (1а)

В случае ряда мышиных и человеческих опухолевых клеточных линий соединение формулы (1а) обладает высокой цитотоксичностью, как видно из значений ИК₅₀, указанных в табл. 1. Результаты теста ίη νίνο для соединения формулы (1а) в случае распространенного Р388/ОХ мышиного лейкоза представлены в табл. 2.

Таблица 1. Ιη νΐΐτο цитотоксичность соединения формулы (1а)

Клеточная линия ^υ	Соединение формулы (Та) ИК50²⁾, нг/мл; среднее значение±стандартное отклонение
Б1210 ³⁾	3,76 ± 0,13
ΙϋΚΚΆΤ ³⁾	4,87 ± 0,7
СЕМ ³⁾	5,86 ± 0,4
Εονο ⁴⁾	20,3 ± 2

где

1) клетки, инкубированные с соединением в течение 1 ч;

2) ингибирующая на 50% концентрация представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение, рассчитанное из кривых доза-ответ, по крайней мере, для двух экспериментов;

3) подавление роста, определяемое путем подсчета выживших клеток;

4) подавление роста, определяемое путем количественного анализа с помощью 8КВколориметрии.

Таблица 2. Ιη νίνο противоопухолевая активность соедине-

ния формулы (Та) против	распространенного Р388/ЭХ
Соединение	Доза ²⁾(мг/кг/день)	1Ь8 % ³⁾	Тох ⁴⁾	Ι.Τ8 ⁵⁾
1а	2,9	80	0/20	0/20
	3,8	102	4/17	0/17

где

1) клетки лейкоза Р388/ЭХ Ιοήηδοη (10⁵/мышь) вводят путем инъекции внутривенно в день 0;

2) лечение получают внутривенно в день 1 после трансплантации опухоли (день 0); соединение формулы (1а) солюбилизируют в |СТепюρйο^®/этанол= 6,5:3,5]/[изотонический раствор] = 20/80 по объему;

3) увеличение продолжительности жизни: [(среднее время жизни обработанных мышей/среднее время жизни контрольных мышей) х 100] - 100;

4) число токсических смертей/число мышей;

5) оставшиеся в живых (>60 дней) по окончании экспериментов.

Следующий пример иллюстрирует изобретение.

Пример 1. 13 (К/8)-Дигидро-4-деметокси3'-дезамино-3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин (1а)

600 мг (1 ммоль) 4-Деметокси-3'-дезамино3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицина (ΙΙ) растворяют в 50 мл дихлорметана и охлаждают до температуры -70 С. Раствор прика пывают к раствору 120 мг (3,2 ммоль) боргидрида натрия в 5 мл метанола. Спустя 15 мин добавляют 10 мл ацетона, затем реакционную смесь доводят до комнатной температуры, добавляют 500 мл дихлорметана и промывают двукратно по 200 мл водой. Органическую фазу отделяют, концентрируют до небольшого объема и подвергают флэш-хроматографии на силикагеле, используя смесь толуола с ацетоном в объемном соотношении 8:2. Содержащие целевое соединение фракции объединяют, концентрируют до небольшого объема и осаждают с помощью смеси гексана с диэтиловым эфиром в объемном соотношении 85:5, получая 400 мг 13(К/8)-дигидро-4-деметокси-3 '-дезамино-3 'азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицина (1а).

К£ = 0,3 (тонкослойная хроматография на силикагелевой пластине (Мерк) при использовании в качестве элюирующего средства смеси толуола с ацетоном в объемном соотношении 80:20).

1Н-ЯМР-спектр (400 МГц, дейтерохлороформ) δ в м.д.: 1,14, 1,23, 1,72 (м, СН2СН2 азиридина, 1а+1б); 1,27 (д, I = 6,3 Гц , СН₃ -13, 1б); 1,32 (д, I = 6,3 Гц, СН3 -13, 1а); 1,38 (д, I = 6,5 Гц, СН3 - 5', 1а+1б); 1,47 (ддд, I = 2,6, 4,5, 12,5 Гц, СН3 - 3' , 1а+1б); 1,78 (м, Н-2' акс., 1а+1б; Н-8 акс., 1а); 1,87 (дд, I = 4,1, 15,0 Гц, Н - 8 акс., 1б); 2,07 (дд, I = 4,0, 13,4 Гц, Н-2' экв., 1а); 2,10 (дд, I = 4,0, 13,4 Гц, Н-2' экв., 1б); 2,12 (д, I = 7,8 Гц, ОН-13, 1а); 2,35 (ддд, I = 1,7, 2,6, 15,0 Гц, Н-8 экв., 1б); 2,40 (д, I = 3,8 Гц, ОН-13, 1б); 2,54 (ддд, I = 1,7, 2,6, 15,0 Гц, Н-8 экв., 1а); 2,61 (д, I = 19,1 Гц, Н - 10 акс., 1а); 2,65 (д, I = 19,1 Гц, Н -10 акс., 1б); 3,20 (дд, I = 1,9, 19,1 Гц, Н-10 экв., 1а+1б); 3,21 (с, 8О₂СН₃); 3,67 (м, СН-13, 1а); 3,82 (м, СН-13, 1б); 4,11 (м, Н-5', 1а+1б); 4,22 (с, ОН9, 1а); 4,36 (с, ОН-9, 1б); 4,74 (м, Н-4', 1а+1б); 5,27 (дд, 1=2,6, 4,4 Гц, Н-7, 1а); 5,29 (дд, 1=2,6, 4,4 Гц, Н-7, 1б); 5,55 (д, I = 3,8 гц, Н - 1', 1а+1б); 7,84 (м, Н-2+Н-3, Та+Тб); 8,36 (м, Н-1 + Н-4, 1а+1б); 13,38 (с, ОН-11, 1а); 13,39 (с, ОН-11, 1б); 13,59 (с, ОН6, 1а); 13,60 (с, ОН-6, 1б);

масс-спектрометрия (бомбардировка быстрыми атомами) (+) м/е: 604 [МН]⁺.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Антрациклингликозид формулы (I) где волнистая линия означает, что гидроксильная группа в положении 13 может находиться в α- или β-положении или в виде их смеси.
2. Соединение по π. 1, представляющее собой 4-демето кси-13 (§/К)-дигидро-3 ’-дезамино3'-азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин, или 4-деметокси-13(8)-дигидро-3'-дезамино-3'азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин или 4-деметокси-13 (К)-дигидро-3 '-дезамино-3 'азиридинил-4'-метансульфонилдаунорубицин.
3. Способ получения антрациклингликозида формулы (I) по п.1, включающий восстановление антрациклина формулы (II) обходимо, разделение полученной в результате смеси 13 (В)- и 13(§)-соединений на индивидуальные диастереоизомеры.
4. Способ по п.З, в котором восстановителем является боргидрид натрия.
5. Способ по п.З или 4, в котором восстановление осуществляют при температуре ниже 50°С.
6. Способ по п.5, в котором восстановление осуществляют при температуре -70°С.
7. Фармацевтическая композиция, включающая антрациклингликозид формулы (I) по π. 1 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
8. Применение соединения по п.1 или 2 для лечения человеческого или животного организма консервативным методом.
9. Применение соединения по п.1 или 2 в качестве противоопухолевого средства.

в присутствии восстановителя в смеси органических растворителей и, если желательно и не-