DK175121B1 - Mersacidin og dennes forbindelses fysiologisk tålelige salte, fremgangsmåde til fremstilling deraf, lægemiddel indeholdende forbindelsen, dens anvendelse til fremstilling af lægemidler med antibiotisk virkning samt Bacillus specis Y-85,54728 (DSM 4584) - Google Patents
Mersacidin og dennes forbindelses fysiologisk tålelige salte, fremgangsmåde til fremstilling deraf, lægemiddel indeholdende forbindelsen, dens anvendelse til fremstilling af lægemidler med antibiotisk virkning samt Bacillus specis Y-85,54728 (DSM 4584) Download PDFInfo
- Publication number
- DK175121B1 DK175121B1 DK198904037A DK403789A DK175121B1 DK 175121 B1 DK175121 B1 DK 175121B1 DK 198904037 A DK198904037 A DK 198904037A DK 403789 A DK403789 A DK 403789A DK 175121 B1 DK175121 B1 DK 175121B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- mersacidin
- compound
- formula
- culture
- dsm
- Prior art date
Links
- 108010067215 mersacidin Proteins 0.000 title claims abstract description 38
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- JSWKNDSDVHJUKY-MNVIWFPGSA-N CC[C@@H](C)[C@@H]1NC(=O)[C@@H]2CS[C@@H](C)[C@@H](NC(=O)[C@@H]3CS[C@@H](C)[C@@H](NC(=O)[C@H](Cc4ccccc4)NC(=O)[C@@H]4NC(=O)[C@@H]([NH3+])CS[C@H]4C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N4CCC[C@H]4C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NC([C@H](C)S\C=C/NC1=O)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(=O)N2 Chemical compound CC[C@@H](C)[C@@H]1NC(=O)[C@@H]2CS[C@@H](C)[C@@H](NC(=O)[C@@H]3CS[C@@H](C)[C@@H](NC(=O)[C@H](Cc4ccccc4)NC(=O)[C@@H]4NC(=O)[C@@H]([NH3+])CS[C@H]4C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N4CCC[C@H]4C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NC([C@H](C)S\C=C/NC1=O)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(=O)N2 JSWKNDSDVHJUKY-MNVIWFPGSA-N 0.000 title claims description 37
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 13
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims description 7
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 title claims description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 12
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 12
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 2
- 241000194110 Bacillus sp. (in: Bacteria) Species 0.000 claims 1
- 125000006295 amino methylene group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 abstract description 3
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 abstract description 3
- JSWKNDSDVHJUKY-CYGWNLPQSA-N mersacidin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]1[C@H](C)SC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@H](CC(C)C)NC1=O)C(=O)N[C@@H]1[C@H](C)SC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(N/C=C/S[C@@H](C)C(NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC1=O)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2)=O)[C@H](C)CC)NC(=O)[C@H]1[C@@H](SC[C@H](N)C(=O)N1)C)C1=CC=CC=C1 JSWKNDSDVHJUKY-CYGWNLPQSA-N 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 6
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 6
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- DMEYJYUCUFDMEV-VKHMYHEASA-N (2s)-2-(chloroamino)pentanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC[C@H](NCl)C(O)=O DMEYJYUCUFDMEV-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 3
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 3
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 3
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- -1 with organic amines Chemical class 0.000 description 3
- CWNPOQFCIIFQDM-UHFFFAOYSA-N 3-nitrobenzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 CWNPOQFCIIFQDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000003820 Medium-pressure liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004187 Spiramycin Substances 0.000 description 2
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- MYPYJXKWCTUITO-KIIOPKALSA-N chembl3301825 Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)C(O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-KIIOPKALSA-N 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- CSDQQAQKBAQLLE-UHFFFAOYSA-N 4-(4-chlorophenyl)-4,5,6,7-tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C1C(C=CS2)=C2CCN1 CSDQQAQKBAQLLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 241000282461 Canis lupus Species 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 241000186394 Eubacterium Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000186781 Listeria Species 0.000 description 1
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241001674048 Phthiraptera Species 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- 241001312524 Streptococcus viridans Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- UYMKPFRHYYNDTL-UHFFFAOYSA-N ethenamine Chemical group NC=C UYMKPFRHYYNDTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002013 hydrophilic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000012473 microbial detection method Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- PYJJCSYBSYXGQQ-UHFFFAOYSA-N trichloro(octadecyl)silane Chemical group CCCCCCCCCCCCCCCCCC[Si](Cl)(Cl)Cl PYJJCSYBSYXGQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKKJLVBELUTLKV-FIBGUPNXSA-N trideuteriomethanol Chemical compound [2H]C([2H])([2H])O OKKJLVBELUTLKV-FIBGUPNXSA-N 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/50—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link
- C07K7/54—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring
- C07K7/56—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring the cyclisation not occurring through 2,4-diamino-butanoic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/19—Antibiotic
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Oncology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Cephalosporin Compounds (AREA)
Description
DK 175121 B1 I
Den foreliggende opfindelse angår et nyt antibiotikum, I
der betegnes mersacidin, som er angivet i krav l og 2, en I
fremgangsmåde til dets fremstilling ud fra Eubakterium Bacil- I
lus species Y-85,54728 (deponeret den 10. maj 1988 i henhold I
5 til Budapest-traktaten ved Deutsche Sammlung von Mikroor- I
ganismen und Zellkulturen under nr. DSM 4584), denne orga- I
nismes varianter og mutanter, som er angivet i krav 3-7, I
anvendelsen af mersacidin til fremstilling af lægemidler I
med antibiotisk virkning som angivet i krav 9, samt Bacillus I
10 species Y-85,54728 (DSM 4584) som angivet i krav 10. I
Det her omhandlede mersacidin er et cyclisk polypeptid I
med formlen I: I
/S. /CHjV ?H(CH3>2 I
15 CHj CH CH2 CH2 ^ I
h2n-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-h-ch-co I
co-ch-nh-co-ch-nh-co-ch2-nh-co-ch2-nh-co-ch2-nh-co-ch2-nh I
•CH(CH3)2 I
25 CHj_______s_________ I
NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-C-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO I
i i # i I
CH, CH CH, CH, I
I 2 / \ 2 I 2 I
30 I CH \ ch2 I
ch(ch3)2 s-v co2h I
^ ukh-nh-co-ch-nh I
CH-CH, I
35 I 5 I
jf. krav 1. ^2^5 I
i * v » · 2
Konfigurationen af de chirale C-atomer er tydeliggjort i den følgende formel XI: s /S S/ch3T cmotjjj
ίΗ2 > fH2 s ?«2 A
h2n-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-n-ch-co
R S S Ϊ SS
__ -CH 5 & s\ 10 C,l3 CHo"—* I 2 s CO-CH-NH-CO-CH-NH-CO-C^-NH-CO-C^-NH-CO-C^-NH-CO-C^-NH R CHCCH3)2 15 slJ3___—S—________. 1111 I s s s ' ‘?h2
NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-C-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO
ch2 si« !h2 ch2 r ,. I CH \ CH, ^^3¾3 \ ίθ2Η
^ CH-CH-NH-CO-CH-NH
S CH-CHt I ^ 25 C2H5 / j f. krav 2. i
Den foreliggende opfindelse angår ikke blot mersaci-din, men også dette stofs fysiologisk tålelige salte og åben-30 bare kemiske ækvivalenter deraf.
Cycliske peptid-antibiotika er beskrevet i CRC Handbook of Antibiotics (Antibiotika-Handbuch), bind IV, side 263-424, afsnittet "Cyclische Peptide". Antibiotika isoleret fra slægten Bacillus beskrives også i "Antibiotics, Origin, 35 Nature and Properties", udgivet af T. Korzybski et al., bind 3, side 1529-2078 (1978). Polypeptid-antibiotika fra DK 175121 B1 3 andre mikrobioelle kilder er beskrevet i det samme littera-, tursted, jf. bind I, side 311-491.
Ifølge alle tilgængelige data adskiller mersacidin sig imidlertid entydigt fra alle i de ovennævnte litteratur-5 steder beskrevne cycliske polypeptid-antibiotika. I Chemical Abstracts er der ikke registreret nogen forbindelse, der udviser samme molvægt og aminosyresammensætning som mersacidin.
Den til fremstillingen af mersacidin anvendte Eubak-10 terie, kultur-nr. Hoechst India Limited Y-85, 54728, i det følgende betegnet Y-85,54728, er blevet isoleret fra en i Mulund (salt-basinsænkning), Maharashtra, Indien, udvundet jordprøve og identificeret som en Bacillusart.
Fysiologisk tålelige salte af mersacidin kan dannes 15 på almindelig kendt måde med de forskelligste forbindelser, f.eks. med organiske aminer, f.eks. triethylamin eller tri-(2-hydroxyethyl)-amin, med alkali- og jordalkalimetaller, f.eks. Na, K, Mg og Ca med uorganiske syrer, f.eks. svovlsyre eller phosphorsyre og med organiske syrer, f.eks. eddikesyre, 20 citronsyre, benzoesyre, maleinsyre, fumarsyre, vinsyre eller p-toluensulfonsyre.
Den foreliggende opfindelse angår endvidere en fremgangsmåde til fremstilling af det hidtil ukendte antibiotikum, mersacidin, ud fra kultur-nr. Hoechst India Limited Y-25 85,54728 samt denne organismes mutanter og varianter, jf.
krav 3 samt krav 4-7.
Den omhandlede fremgangsmåde omfatter dyrkning af kultur-nr. Y-85,54728, denne organismes mutanter og/eller varianter under aerobe betingelser i et næringsmedium, der 30 indeholder carbon- og nitrogenkilder, uorganiske næringssalte og sporelementer, samt isolering og rensning af det nævnte antibiotikum fra kulturvæsken.
Med hensyn til carbonkilderne kan der eksempelvis være tale om galactose, glycerol, saccharose eller glucose.
35 Galactose foretrækkes som carbonkilde. Som nitrogenkilder foretrækkes gærekstrakt, okseekstrakt, maj sstøbevand, casami- 4
Ulv 175121 bl nosyre eller uorganiske stoffer, f.eks. ammoniumsalte. Majsstøbevand foretrækkes navnlig som nitrogenkilde. Med hensyn til de uorganiske salte kan der f.eks. være tale om natrium-hydrogenphosphat, kaliumhydrogenphosphat, calciumhydrid 5 eller magnesiumsulfat. Sporelementerne kan f.eks. være jern-, mangan-, kobber- eller zinksalte eller andre metalsalte.
Dyrkningen af kulturnr. Y-85,54728 gennemføres fortrinsvis ved temperaturer mellem 26 og 29°C og ved pH-værdier mellem ca. 6,5 og ca. 7,2. Kultur-nr. Y-85,54728 dyrkes navn-10 lig ved 28°C (± 1°C) og en pH-værdi på 7,2.
Dyrkningen gennemføres fortrinsvis i fra ca. 60 til ca. 72 timer, hvorved det her omhandlede antibiotikum fremkommer i optimalt udbytte. Dyrkningen gennemføres fortrinsvis i 66 timer under submerse betingelser i rystekolber samt i 15 laboratoriefermenteringsbeholdere. Efter behov kan der i fermenteringsbeholderne anvendes et skumdæmpende middel, f.eks. DesmophenA, en polyol fra firma Bayer AG, Leverkusen. Forløbet af dyrkningen og dannelsen af det her omhandlede mersacidin kan følges og fastslås ved måling af bioaktivite-20 ten af kulturvæsken i forhold til Staphylococcus aureus 35 209 P, Staphylococcus aureus R 85 og Slcaligenes faecalis under anvendelse af den kendte agarpladedifusionspåvisnings-metode, jf. f.eks. B. Oxoid-Handbuch 1972, 2. oplag, udgiver Oxoid Limited, London, England.
25 I den resulterende kulturvæske befinder mersacidinet sig kun i kulturfiltratet, som skilles fra cellemassen fra centrifugering. Mersacidin kan isoleres fra kulturfiltratet ved en eller flere kendte metoder, f.eks. hydroph veksel-virkningschromatografi, f.eks. på polymere adsorptionsmidler 30 såsom DiaionA HP-20 (Mitsubishi Chemical Inustries, Japan) eller AmberiiteA XAD-2(R) , XAD-7 (R) (polymert adsorbtionsmiddel fra en matrix af polystyren, akrylester eller aminoxid med en gennemsnitlig porediameter på (40-225)·10'10m, Rohm & Haas Co, USA), eller ekstraktion med med vand ikke-bland-35 bare opløsningsmidler, f.eks. ethylacetat eller butanol. Den foretrukne fremgangsmåde er adsorbtion på DiaionA HP-20 med
DK 175121 B1 I
5 I
I efterfølgende desorption af forbindelsen med egnede organiske I
I opløsningsmidler, f.eks. methanol eller acetonitril, eller I
I vandige kombinationer af disse opløsningsmidler. Methanol I
I foretrækkes som opløsningsmiddel til eluering af mersacidin. I
I 5 Fjernelsen af opløsningsmidlet fra de aktive eluater I
I giver rå mersacidin. Den videre rensning kan opnås ved chro- I
I matografi på materialer såsom kiselgel, modificeret kiselgel, I
I cellulose eller SephadexA LH-20 (lipophilt gelfiltreringsma- I
I teriale, producent Pharmacia Fine Chemicals AB, Sverige). I
I 10 Chromatografi af det rå mersacidin på kiselgel under anvend- I
I else af blandinger af vand og acetonitril til eluering ved I
I trinvis forøgelse af vandkoncentrationen med hver gang 5- I
I 10% udgør den foretrukne fremgangsmåde. De aktive eluater I
I (påvist ved hjælp af biopåvisningsmetoden) inddampes til I
I 15 den halvrene forbindelse. Det således opnåede, halvrene I
antibiotikum kan f.eks. renses yderligere ved chromatografi I
på lipophilt gelfiltreringsmateriale, f.eks. SephadexA LH- I
20 under anvendelse af opløsningsmidler såsom vand, MeOH, I
I CHCI3, hexan eller deres tilsvarende kombinationer, eventuelt I
I 20 med efterfølgende behandling med aktivt kulpulver, eller ved I
I præparativ højtryksvæske chromatografi på en kiselgelsøjle I
I under anvendelse af opløsningsmidler, f.eks. MeOH, CH3CN, I
I vand eller deres tilsvarende kombinationer. Præparativ høj- I
I tryksvæskechromatografi på en søjle med HPLC-materiale med I
I 25 octadecyltrichlorsilan-grupper, f.eks. produktet HypersilA I
fra firmaet Shandon i USA, under anvendelse af en blanding I
I i forholdet 70:30 af CH3CN og vand er den foretrukne frem- I
I gangsmåde. Efter fjernelse af det organiske opløsningsmiddel I fra de aktive eluater, f.eks. ved afdestillation i vakuum I 30 og påfølgende frysetørring til fjernelse af vandet, fås I mersacidin som et hvidt pulver.
Mersacidin er på grund af dets antibakterielle virk- I ning jfr. virkningsafprøvningen, egnet til anvendelse som I lægemiddel. Opfindelsen angår således også lægemidler med I 35 et indhold af mersacidin ved siden af gængse, almindeligt I kendte hjælp- og/eller bærestoffer, jf. krav 8, samt an- DK 175121 B1 6 vendeisen af mersacidin til fremstilling af lægemidler med antibiotisk virkning på i og for sig kendt måde, jf. krav 9.
De følgende eksempler tjener til nærmere belysning af opfindelsen.
5
Eksempel 1
Isolering af kulturen Y-85,54728 fra jorden.
(a) Sammensætning af isoleringsnæringsmediet:
Proteosepepton 20,0 g 10 K2S04 1,5 g
MgS04·7H20 1,5 g
Glycerol 10,0 g
Agarpulver 15,0 g
Demineraliseret vand 1 liter 15 pH-værdi 6,8 (b) Jordprøveudstrygning og isolering.
Til 10 g af en fra et saltbassin i Mulund udvundet jordprøve sættes der 90 ml steriliseret, afmineraliseret vand i en 250 ml Erlenmeyerkolbe, og kolben omrystes i 2 2 0 timer på en rundrystemaskine ved 220 omdrejninger. Den ovennævnte jordsuspension rækkefortyndes derpå i trin fra 10 til 10"5. i ml suspension af den sidste fortynding sættes til midten af en steril petri-glasplade (diameter ca. 15,2 cm) , hvorefter ca. 50 ml af det ovennævnte, til 45°C afkølede 25 isolerede medium tilsættes, og pladen omrystes kraftigt. Blandingen af jordsuspension og medium tillades at sætte sig, og den inkuberes i 3 dage ved 28°C (+ 1°C). Petripladen holdes under opsyn med regelmæssige mellemrum og kultur-nr.
Y-85,54728 isoleres fra de voksende mikroorganismer.
30
Eksempel 2
Opnåelse af kulturen Y-85,54728.
Sammensætning af fremstillingsmediet.
Kultur-nr. Y-85,54728 fås på næringsagarmedium med 35 følgende sammensætning:
Pepton 10 g
Okseekstrakt 3 g DK 175121 B1 7 Gærekstrakt 3 g
Agarpulver 15 g
Afmineraliseret vand 1 liter pH-værdi 7,2 5
Efter grundig opløsning af indholdsstofferne ved opvarmning fordeles disse i reagensglas og steriliseres derpå ved 121°C i 20 minutter. Reagensglassene afkøles, og deres indhold får lov at stivne i skrå stilling. Til skrå-10 agarkulturene sættes der ved hjælp af en trådsløjfe kultur-nr. Y-85,54728, og der inkuberes ved 28°C (± 1°C), indtil en god vækst er synlig. De godt opvoksede kulturer opbevares ved +8°C i køleskab.
15 Eksempel 3
Fermentering af kultur Y-85,54728 i rystekolber.
Sammensætning af udsåningskulturmediet:
Casaminosyre 5 g
Majsstøbevand 5 g 20 Glycerol 20 g
Galactose 10 g
Afmineraliseret vand 1 liter pH-værdi 7,2 25 I hvert enkelt tilfælde fordeles 25 ml af det oven nævnte udsåningskulturmedium i 250 ml Erlenmeyer kolber og opvarmes ved 121°C i 20 minutter i autoklav. Kolberne afkøles, og de podes hver gang med en sløjfefuld af den ovennævnte, godt opvoksede kultur fra eksempel 2 og omrystes ved 30 28°C (± 1°C) i 24 timer ved 220 omdrejninger. Den opnåede kulturopløsning anvendes som udsåningskultur til podning af fremstillingskolberne som beskrevet i det følgende.
Fremstilling af antibiotikaet mersacidin i rystekolber: 35 Fremstillingsmediet svarer til det i eksempel 3 be skrevne udsåningsmedium. I hvert enkelt tilfælde fordeles 100 ml af mediet i 500 ml Erlenmeyerkolber, og der opvarmes til 121°C i 20 minutter i autoklav. Kolberne afkøles og _
am * W a* V I
8 podes dernæst med den ovennævnte udsåningskultur {1% efter rumfang pr. rumfang). Fermenteringen gennemføres i en rundrystemaskine ved 220 omdrejninger pr. minut og en temperatur på 28°C (± 1°C) i 66 timer.
5 Produktionen af antibiotiket overvåges ved hjælp af den overfor Staphylococcus aureus 209 P, Staphylococcus aureus R 85 og Slkaligenes faecalis under anvendelse af pladediffusionsmetoden på kendt måde afprøvede bioaktivitetsprofil. Efter indhøstningen centrifugeres kulturvæsken, og 10 mersacidin isoleres fra kulturfiltratet og renses som beskrevet i det følgende.
Eksempel 4
Dyrkning af kultur-nr. Y-85,54728 i fermenteringsbeholdere.
15 Trin 1: Fremstilling af udsåningskulturen i ryste kol ber.
Udsåningskulturmediet fra eksempel 3 (100 ml) anbringes i 500 ml Erlenmeyerkolber med en på 6,8 indstillet forsterilisations-pH-værdi. Mediet 20 steriliseres ved 121°C i 20 minutter i en auto klav, afkøles og podes med en trådsløj fefuld af den godt opvoksede kultur fra eksempel 2. Kolberne inkuberes ved 28°C (± 1°C) i 24 timer i en rundrystemaskine ved 220 omdrejninger pr.
25 minut. Denne vækstkultur anvendes til podning af små fermenteringsbeholdere som beskrevet i det følgende.
Trin 2 Fremstilling af udsåningskulturen i små fermente ringsbeholdere .
30 10 liter af udsåningsmediet (som beskrevet i
eksempel 3) med en på 6,8 indstillet forsterili-sations-pH-værdi anbringes sammen med 0,04% (rumfang pr. rumfang) Desmophen som skumdæmpende middel i en ædelstål fermenteringsbeholder med 35 et rumfang på 15 liter, steriliseres ved 121°C
i 36 minutter i en autoklav, afkøles og podes DK 175121 B1 9 med 4% {rumfang pr. rumfang) udsåningsmateriale fra det ovennævnte trin 1 i eksempel 4 under aseptiske betingelser. Derpå dyrkes der i 24 timer under de følgende betingelser: 5 Temperatur: 28°C (± 1°C)
Omrøringshastighed: 150 omdrejninger pr. minut
Beluftning: 6 liter pr. minut.
Den efter 24 timer opvoksede kultur anvendes til podning af fremstillingsmediet fra trin 3.
10 Trin 3 Fermentering i produktionsmålestok.
100 liter af fremstillingsmediet (svarende til det i eksempel 3 omtalte udsåningsmedium) med en på 6,8 indstillet forsterilisations-pH-værdi og tilsætning af 0,06% Desmophen i en fermente-15 ringsbeholder med et rumfang på 150 liter, eller 250 liter medium med 0,06% Desmophen i en fermenteringsbeholder med et rumfang på 390 liter, steriliseres i 28 minutter ved 121°C in situ og podes med 24% af udsåningskulturen fra trin 2.
20 Der dyrkes under de følgende betingelser:
Temperatur: 28°C (± 1°C)
Omrøringshastighed: 80-100 omdrejninger/minut
Beluftning: 50 liter/minut (ved fermen teringsbeholder med rumfang 25 100 liter) 125 liter/minut (ved fermen teringsbeholder med rumfang 390 liter)
Indhøstningstidspunkt: Efter 66 timer.
30 Produktionen af antibiotiket overvåges ved hjælp af den mod Staphylococcus aureus 209 P, Staphylococcus aureus R 85 og Alkaligenes faecalis afprøvede aktivetets· profil. Kulturvæsken centrifugeres efter indhøstningen, og antibiotiket isoleres 35 og renses fra kulturfiltratet som beskrevet i det følgende.
--- UM/D1Z1 bl 10
Eksempel 5
Isolering og rensning af mersacidin.
Ca. 100 liter af den indhøstede væske skilles fra myceliet ved centrifugering. Det opnåede filtrat (pH-værdi 5 6,8-7,0) føres gennem en 5 liters Diaion HP-20-søjle. Søjlen vaskes først med 50 ml af mineraliseret vand. Den vaskes derpå i rækkefølge med 70% H20 i MeOH (40 liter), 50% H20 i MeOH (50 liter) og 30% H20 i MeOH (50 liter) og vaskevandet bortkastes hver gang. Søjlen elueres endelig med 10 liter 10 MeOH. De aktive eluater inddampes under formindsket tryk til et brunt, olieagtigt stof. Dette udrives med én liter petroleumsether (kogepunktsområde 40-60°C), der filtreres, og filtratet bortkastes. Denne proces gentages, indtil der bliver et pulver tilbage som filtreringsremanens. Der fås 15 herved rå mersacidin som et brulig-gult pulver i en mængde på 12 g.
Rå mersacidin underkastes derpå en middeltryks-væske-chromatografi over 300 g kiselgel (200-300 mesh) i en glas-2 0 søjle med dimensionerne 5,5 cm x 53 cm. Søjlen vaskes med 1,5 liter CH3CN og dernæst med 3 liter 10%'s vandig CH3CN og 15% vandig CH3CN (3 liter) ved en strømningshastighed på 16 ml pr. minut. Der opsamles fraktioner på 250 ml, og disse undersøges ved UV-påvisning ved en bølgelængde på 210 nm og 25 ved mikrobiel påvisningsmetodik. 6 fraktioner (1,5 liter) af de 15%'s vandige C^CN-eluater er aktive og inddampes i vakuum ved 35°C til fjernelse af CH3CN og frysetørres derefter, hvorved der fås 2 g halvrent stof i form af et gulligt pulver.
30 Det således opnåede, halvrene materiale underkastes igen en middeltryks-væskechromatografi på kiselgel (200-300 mesh) i en glassøjle med dimensionerne 4 cm x 54 cm. Søjlen elueres i rækkefølge med 1 liter CH3CN, 1 liter 5%'s vandig CH3CN og 4,5 liter 10%'s vandig CH3CN ved en strømningshas-35 tighed på 30 ml pr. minut. Der opsamles fraktioner på 250 ml, som kontrolleres ved UV-påvisning ved 210 nm og mikrobiel DK 175121 B1 11 påvisning. Mersacidin udvindes ved eluering med 750 ml 10%'s vandig CH3CN, hvorpå der under formindsket tryk ved 35°C og påfølgende frysetørring inddampes, hvorved der fås 593 mg mersacidin i form af et hvidt til hvidligt pulver.
5 Slutrensningen af mersacidin sker ved højtryksvæske- chromatografi på en 4 mm x 250 mm Hypersil (10 μ)-søjle under anvendelse af 30%'s vandig CH3CN som elueringsmiddel og en strømningshastighed på 1,0 ml pr. minut. Fraktionerne opnås med en UV-påvisning ved 210 nm. Under disse betingelser 10 har mersacidin en retentionstid på ca. 3,5 minutter. De tilsvarende fraktioner opsamles, inddampes i vakuum ved 35°C og frysetørres til slut, hvorved der fås 275 mg af antibioti-ket i form af et hvidt pulver. Renheden af mersacidin afprøves på en 4 mm x 120 mm APS-Hypersil (5 μ)-søjle, idet der 15 anvendes en blanding i forholdet 70:30 af CH3CN og H20 som elueringsmiddel, og idet der anvendes en strømningshastighed på 1 ml pr. minut. Papirforskydningshastigheden er 10 mm pr. minut, og der påvises ved 210 nm. Højtryksvæskechromato-grammet fremgår af figur 1 på tegningen.
20
Fysisk-kemiske egenskaber af mersacidin.
Mersacidin er en hidtil ukendt forbindelse, hvis struktur er karakteriseret som et nonadecapeptid med en C-terminal vinylamid-gruppe og 4 intramolekylære sulfidbroer.
25 I tabel I er de fysisk-kemiske egenskaber af mersa cidin sammenfattet: DK 175121 B1 12
Tabel I Fysisk-kemiske egenskaber af mersacidin
Udseende: hvidt, amorft pulver
Karakter: cyclisk polypeptid 5 Smeltepunkt: ca. 240eC (sønderdeling) [a]d20° - 9,4° (c = 0,3, MeOH)
Bruttoformel: C80H12oN20021s4 - bekræftet ved kraftigt opløsende massespektrometri (FAB)-ionisering, matrix 3-nitroben2ylakohol) 10 - målt m/z 1825, 785 for M+H+-ionen - beregnet m/z 1825, 790 for 12c 1H 14N 16q 32s 80 121 20 21 4
Massespektrum (FAB, matrix 3-nitrobenzylakohol) DK 175121 B1 13
Figur 2 •^N-NMR-spektrum (270 MHz, CD3OD) : fig. 3 13C-NMR-spektrum (100 MHz, CD3OH): tab. II Tabel II 13C-NMR-data for mersacidin 5 (7 %1 s opløsning i CD3OH, 310 K)
Kemiske forskydning Multiplicitet Strukturanordning _(dpm)________ 10;42 q C-5 Ile (19) 10 15,97 q C-4* Ile (19) 18/51 q C-4 3-thio-Abu (2) 18'68 q C-4* Val (11) 19>77 5 C-4 Val (11) 20,13 * C-4 3-thio-Abu (4+15) 15 21,28 q C-4 3-thi O-Abu (13) 22,43 t C-3 Cys (1) 22>43 9 C-5* Leu (5) 23,17 « C-5' Leu (14) 23.53 5 C-5 Leu (5) 2 0 23,58 q C-5 Leu (14) 25,47 d C-4 Leu (5) 25,78 d C-4 Leu (14) 26,00 * C-4 Pro (6) 26,68 t C-4 Ile (19) 25 28,17 t C-3 Clu (18) 30,85 t C-3 Pro (6) 32.54 d C-3 Val (11) 33,58 t C-3 Cys (12) 35,21 d C-3 Ile (19) 30 35,59 * C-4 Clu (17) 37>14 * C-3 Cys (18) 37,34 t C-3 Phe (3) 39,39 d C-3 3-thi o-Abu (2) 40,93 * C-3 Leu (14) 35 42,02 t C-3 Leu (5) 42,81 t C-2 Gly (10) 43,38 t C-2 Gly (9) 14
Tabel II (fortsat)
Kemiske forskydning Multiplicitet Strukturanordning _(dpm)________ 5 43,59 d C-3 3-thio-Abu (4) 44,10 t C-2 Cly (7) 44,62 t C-2 Cly (8) 45,50 d C-3 3-thio-Abu (13) 48,67 t C-5 Pro (6) 10 49,46 d C-3 3-thio-Abu (15) 50,42 d C-2 Leu (14) 52,71 d C-2 Leu (5) 55,25 d C-2 Cys (16) 55*72 d C-2 Cys (12) 15 56,72 d C-2 Glu (17) 57;42 d C-2 3-thio-Abu (15) 57/81 d C-2 Phe (3) 58,12 d C-2 Cys (1) 59/07 d C-2 3-thio-Abu (2) 20 59/°8 d C-2 3-thio-Abu (4) 59/19 d C-2 3-thio-Abu (13) 51/60 d C-2 Pro (6) 52/64 d C-2 Ile (19) 53/14 d C-2 Val (11) 103,84 d C-2 Thiovinylamid (20) 112>41 t C-2 dehydro-Ala (16) 127^97 d C-7 Phe (3) 129.56 d C-1 Thiovinylamid (20) 129,71 d C-6 Phe (3) 13°/22 d C-5 Phe (3) 136,96 s C-4 Phe (3) 138.15 s C-2 dehydro-Ala (16) 166.56 s ø.l dehydro-Ala (16) 171.16 s C-l Ile (19) 171*38 s C-l Gly (10) DK 175121 B1 15
Tabel II (fortsat)
Kemiske forskydning Multiplicitet Strukturanordning _(dpm) _ 171>44 s C-l Cys (IB) 5 171.62 s C-l 3-thio-Abu (4) 171»76 ε C-l 3-thio-Abu (15) 3.71,82 s C-l Gly (9) 171,84 6 C-l Leu (5) 171·86 s C-l 3-thio-Abu (13) 10 171.87 s C-l 3-thio-Abu (2) ( 172,59 s C-l Gly (8) 172*74 s C-l Leu (14) 173>06 s C-l Gly (7) 173;76 e C-l Cys (12) 15 174,00 8 C-l Val (11) 174>25 s C-l Glu (17) 174^61 ε C-l Cys (1) 174'81 ε C-l Phe (3) 175/62 b C-l Pro (6) 20 181,31 8 C-5 clu ^17j
Virkningsforsøg: a) Virkning af mersacidin in vitro
De biologiske egenskaber af mersacidin udtrykt som til hæmning af væksten af forskellige mikroorganismer rele-25 vante MHK-værdier er anført i tabel III.
Tabel III
Nummer Testorganismer MHK-værdier (^g/ml) 1. Staph, aureus 209P 0,78 - 1,56 30 2. Staph, aureus Ε 88 6,25 - 12,50 3. Staph, aureus 3066 12,50 - 25,00 4' Staph, aureus 20240 3,12 - 6,25 5. Staph, aureus 20424 1,56 - 3,12 6. Staph, aureus 503 0,78 - 1,56 35 7. Staph, aureus 789 0,78 - 1,56 8. Staph, aureus 722 3,12 - 6,25 9. Staph, aureus SG 511 0,39 - 0,78
Vl\ I « «/ I £. I Dl 16
Tabel III (fortsat)
Nummer Testorganismer MHK-værdier ^g/ml) 10. Staph, aureus 20666 3,12 - 6,25 11. Staph, aureus £ 712 3,12 - 6,25 5 12. Staph, aureus 2B5 0,78 - 1,56 13. Staph, aureus R 85 0,39-0,78 14. Staph, aureus 710 0,39 - 0,78 15. Micrococcus luteus 0,0975-0,195 16. Bacillus subtilis 0,39 - 0,78 10 17. Streptococcus faecalis 0,0975-0,195 18. Str. D 21777 1,56 - 3,12 19. S. epidermidis MRSE 0,5 - 16,0 20. S. epidermidis MSSE 0,5 - 16,0 21. Gruppe. A Streptococci 0,5 - 8,0 15 22. Gruppe B Streptococci 1,0 - 8,0 23. Gruppe C Streptococci 2,0 - 64 24. Gruppe G Streptococci 2,0 - 8,0 25. Streptococci bovis 4,0 - 32,0 26. Streptococcus viridans 0,5 - 32,0 20 27. Streptococcus faecalis 64,0 28. Streptococcus pneumoniae 1,0 - 4,6 29. Corynebacterium JK 2,0-4,0 30. Listeria monocyctogenes 16,0 - 64,0 31. Clostridium species 0,5 - 16,0 25 32. Peptostreptococci species 0,5 - 8,0 33. Propionobacterium genes 1,0 - 16,0 (b) Virkning af mersacidin in vivo I et in vivo-system med laboratoriemus udviser mersacidin en god aktivitet. Ved subkutan indgivelse i en dosis 30 på 9,37 og 25,00 mg pr. kg til eksperimentelt med Staphylococcus aureus SG 511 og S.aureus 710 (resistent mod methicil-lin) inficerede laboratoriemus opnås der en 100%' s helbredelsesgrad. Herudover afprøves den akutte toksicitet for anti-biotiket hos laboratoriemus. Selv ved en dosis på 500 mg 35 pr. kg (subkutan), den hidtil højeste afprøvede koncentration, iagtages der ingen mortalitet hos dyrene. Resultaterne DK 175121 B1 17 er angivet i den følgende tabel IV.
Tabel IV: In vivo-virkning af mersacidin mod S. aureus SG 511-infektion hos mus sammenlignet med vanco-5 mycin.
Anvendt podningsmedium: 1,75 x 109 g KBE/mus
Forbindelse Dosis/anvendelse Antal mus helbredt/- Omtrentlige mg/kg x 3, behandlet (procent- værdier for s.c. mæssig helbredel- ED50, ED90 10 sesgrad) mg/kg x 3
Mersacidin 9,37 53/53 (100) 6.25 38/40 ( 95) 2,59 15 3,12 18/27 ( 67) 5,38 1,60 3/24 ( 12) 0,80 0/27 ( 0)
Vancomycin 18,75 71/71 (100) 20 12,5 59/61 ( 97) 7,20 9,37 48/53 ( 85) 9,37 6.25 13/44 ( 29) 3,12 2/41 ( 5)
In vivo-virkning af mersacidin mod S.aureus E 710 (MRSA) 25 hos mus, sammenlignet med vancomycin.
Anvendt podningsmedium: 5 x 109 g KBE/mus (1 MLD)
Forbindelse Dosis/anvendelse Antal mus helbredt/- Omtrentlige mg/kg x 3, behandlet (procent- værdier for 30 s.c. mæssig helbredel- ED50, EDgo sesgrad) mg/kg x 3
Mersacidin 25,00 12/12 (100) 10,81 35 12,50 10/16 ( 95) 19,59 9,37 4/10 ( 40) 6,25 1/10 ( 10) DK 175121 B1 18
Vancomycin 37,00 6/6 (100) 18,94 25,00 14/21 ( 67) 32,01 12,50 3/11 ( 27) 6,25 0/11 ( 0) 5 In vivo-virkning af mersacidin mod S. aureus SG 511-abces hos rotter i sammenligning med vancomycin.
Anvendt podningsmedium: 2 x 10^ KBU i 5% mucin injiceret under huden.
10 Behandling: 50 mg/kg x 7 dage.
Resultat: Mersacidin formindsker bakteriedannelsen med 1,4 log10 KBU/ml (kolonidannende enheder), og vancomycin reduceret bekateriedannelsen med 0,79 log^ KBU/ml.
15 Eksempel 6
Fremstilling af vandopløselige salte af mersacidin
Mersacidin er vandopløseligt i form af dets alkalimetalsalte. Disse kan f.eks. fremstilles ved omsætning af mersacidin med 1 ækvivalent af det tilsvarende alkalimetal-20 hydroxid i nærværelse af pyridin. Eksempelvis opløses 50 mg mersacidin i 1 ml pyridin, opløsningen afkøles til 0°C, og der tilsættes en opløsning af 1,683 mg KOH i 3 ml destilleret vand under omrøring. Blandingen omrøres ved 0°C i én time og frysetørres derpå. Der fås 49 mg kalium-mersacidin i 25 form af et hvidt pulver. Dette Kalium-mersacidin er opløseligt indtil 160 mg pr. ml vand. kalium-mersacidins antibakte-rielle egenskaber in vitro og in vivo er sammenlignelige med egenskaberne for mersacidin. Relevante forsøgsresultater fremgår af de følgende tabeller V og VI.
30
Tabel V
MHK-værdier for kalium-mersacidin
Nr. Testorganisme MHK-værdier ^g/ml) 1. Staph, aureus 209P 2 35 2. Staph, aureus R 85 2 3. Staph, aureus 710 1 DK 175121 B1 19
Tabel V (fortsat)
Nr. Testorganisme MHK-vaerdier (μζ/πιΐ) 4. Staph, aureus 3066 10 5. Staph, aureus 25923 8 5 6. Staph, epidermidis 32965 6 7. Staph, edidermidis 823 50 8. Staph, haemolyticus 712 10 9. Staph, haemolyticus 809 4 10. Strepto hominis ML 22 10 10 11. Strepto faecalis 29212 15 12. Strepto faecalis 21777 15
Tabel VI
In vivo-virkning af kalium-mersacidin mod S. aureus- og 15 Strept. pyogenes A 77-infektioner hos mus.
Testorganisme Anvendt 50% effektiv podemedium dosis (ED50) mg/kg x 3, s.c.
20 Staph, aureus SG 511 1,75 x 109 2,85 (Methici11in-sensitiv)
Staph, aureus E 710 1 x 1010 6,72 (Methici11in-resistant) 25
Staph, aureus C 31153 2 x 109 15,35 (Methicillin- og Caphalexin- resistent)
Strept. pyogenes A 77 3,8 x 103 0,46 30
Claims (10)
1. Mersacidin, kendetegnet ved, at det har det almene formel:
2. Mersacidin, kendetegnet ved, at det har det almene formel: DK 175121 B1 21 .S. S/CHjV CHtCH3)2 ch2 ^ch ch2 s ch2 ^ 5 h2n-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-nh-ch-co-n-ch-co R S S S 5 I » C0-CH-NH-C0“CH-NH-C0-CH2“NH-C0-CH2‘NH-C0-CH2“NH-C0>CH2-NH R CH(CH3)2 (ii) ch3 . s
15. S S ' " NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-C-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO s ch2 Sqh ch2 r I CH \ CH2
20 CH(CH3>2 \ tø ^ CHsCH-NH-CO-CH-NH ScH-CHt i * C2H5
25 Z 5 samt denne forbindelses fysiologisk tålelige salte.
3. Fremgangsmåde til fremstilling af mersacidin med formlen I eller formlen II ifølge krav 1 eller 2, k e n-30 detegnet ved, at man dyrker Eubakterien Bacillus sp. Y-85,54728 (DSM 4584), dennes mutanter og/eller varianter under aerobe betingelser i næringsmedium indeholdende carbon- og nitrogenkilder, uorganiske næringssalte og sporelementer, hvorpå forbindelsen på gængs måde isoleres fra 35 kulturvæsken og renses. 22 DK 175121 B1
4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at dyrkningen udføres ved temperaturer mellem ca. 26 og ca. 29°C og ved en pH-værdi mellem ca. 6,5 og ca. 7,2.
5. Fremgangsmåde ifølge 3 eller 4, kendete g-5 net ved, at dyrkningen gennemføres ved 28°C (+ 1°C) og ved en pH-værdi på ca. 7,2.
5 A. ,/Ch3Y chcch3>2 ch2 ^ch ch2 ch2 ^ H^N-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-N-CH-CO 2. i ίο S \h3 CH,------- I 2 :0-CH-NH-C0-CH-NH-C0-CH2-NH-C0-CH2-NH-C0-CH2-NH-C0-CH2-NH
15 CH(CHj)2 ?H3____S-__ cn- ' —-CH2 NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH-C-CO-NH-CH-CO-NH-CH-CO I I II I
20 CH? CH £h? CH? / \ * \ *- CH \ CH? CH(CHj)25 s ^ ^ CH'CH-NH-CO-CH-NH
25 I ch-ch, c2h5 1 35 samt denne forbindelses fysiologisk tålelige salte.
6. Fremgangsmåde ifølge et eller flere af kravene 3- 5, kendetegnet ved, at fermenteringen gennemføres i mere end 60 timer.
7. Fremgangsmåde ifølge et eller flere af kravene 3- 6, kendetegnet ved, at forbindelserne med formlen I og formlen II renses ved hjælp af chromatografiske metoder.
8. Lægemiddel, kendetegnet ved, at det indeholder en forbindelse ifølge krav 1 eller krav 2, even- 15 tuelt sammen med gængse hjælpe- og/eller bærerstoffer til lægemiddelfremstilling.
9. Anvendelse af en forbindelse ifølge krav 1 eller krav 2 til fremstilling af lægemidler med antibiotisk virkning,
10. Bacillus species Y-85,54728 (DSM 4584).
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3827868 | 1988-08-17 | ||
| DE3827868A DE3827868A1 (de) | 1988-08-17 | 1988-08-17 | Ein neues antibiotikum, mersacidin, ein verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung als arzneimittel |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK403789D0 DK403789D0 (da) | 1989-08-16 |
| DK403789A DK403789A (da) | 1990-02-18 |
| DK175121B1 true DK175121B1 (da) | 2004-06-07 |
Family
ID=6361001
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK198904037A DK175121B1 (da) | 1988-08-17 | 1989-08-16 | Mersacidin og dennes forbindelses fysiologisk tålelige salte, fremgangsmåde til fremstilling deraf, lægemiddel indeholdende forbindelsen, dens anvendelse til fremstilling af lægemidler med antibiotisk virkning samt Bacillus specis Y-85,54728 (DSM 4584) |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5112806A (da) |
| EP (1) | EP0362520B1 (da) |
| JP (1) | JP2892699B2 (da) |
| KR (1) | KR0139628B1 (da) |
| AT (1) | ATE113296T1 (da) |
| AU (1) | AU613228B2 (da) |
| CA (1) | CA1338171C (da) |
| DE (2) | DE3827868A1 (da) |
| DK (1) | DK175121B1 (da) |
| ES (1) | ES2064398T3 (da) |
| FI (1) | FI94648C (da) |
| HU (1) | HU203906B (da) |
| IE (1) | IE64706B1 (da) |
| IL (1) | IL91317A0 (da) |
| IN (1) | IN167138B (da) |
| NO (1) | NO174517B (da) |
| NZ (1) | NZ230303A (da) |
| PH (1) | PH27179A (da) |
| PT (1) | PT91468B (da) |
| ZA (1) | ZA896245B (da) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0700998B1 (en) * | 1994-09-12 | 2003-11-26 | Aventis Pharma Deutschland GmbH | Recombinant mersacidin and a method for production |
| US5910479A (en) * | 1996-10-18 | 1999-06-08 | Ambi Inc. | Method for the treatment of Streptococcus pneumoniae infection |
| US6861236B2 (en) * | 2002-05-24 | 2005-03-01 | Applied Nanosystems B.V. | Export and modification of (poly)peptides in the lantibiotic way |
| GB0406870D0 (en) | 2004-03-26 | 2004-04-28 | Novacta Biosystems Ltd | Improvements relating to the production of lantibiotics |
| JP2009509519A (ja) * | 2005-09-27 | 2009-03-12 | ノヴァクタ バイオシステムズ リミティッド | ランチビオティックメルサシジンの変種およびそれらの使用 |
| GB0600928D0 (en) | 2006-01-17 | 2006-02-22 | Novacta Biosystems Ltd | Improvements relating to lantibiotics |
| GB0714030D0 (en) * | 2007-07-18 | 2007-08-29 | Novacta Biosystems Ltd | The use of type-B lantibiotic-based compounds having antimicrobial activity |
| GB0714029D0 (en) * | 2007-07-18 | 2007-08-29 | Novacta Biosystems Ltd | Lantibiotic-based compounds having antimicrobial activity |
| ES2520165T3 (es) * | 2009-01-14 | 2014-11-11 | Novacta Biosystems Limited | Derivados de desoxiactagardina |
| CN102388060B (zh) | 2009-02-04 | 2014-09-10 | 诺瓦克塔生物系统有限公司 | 阿肽加定衍生物 |
| GB201001688D0 (en) | 2010-02-02 | 2010-03-17 | Novacta Biosystems Ltd | Compounds |
| GB201013513D0 (en) | 2010-08-11 | 2010-09-22 | Novacta Biosystems Ltd | Formulations |
| KR102582570B1 (ko) * | 2021-03-19 | 2023-09-22 | 한국생명공학연구원 | 유박테리움 칼란데리, 이의 배양액 또는 이의 배양액 추출물을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물 |
| EP4404946A4 (en) * | 2021-09-22 | 2026-01-07 | Biomedit Inc | METHOD FOR INHIBITING DISEASES SURRIDATED BY RESPIRATORY VIRUSES |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4493796A (en) * | 1980-09-12 | 1985-01-15 | Board Of Trustees, Univ. Of Ill. | Didemnins A, B, C, and derivatives thereof, as antiviral agents |
| JPS61134398A (ja) * | 1984-12-06 | 1986-06-21 | Microbial Chem Res Found | 新生理活性物質プリパスタチン及びその製造法 |
-
1988
- 1988-07-04 IN IN193/BOM/88A patent/IN167138B/en unknown
- 1988-08-17 DE DE3827868A patent/DE3827868A1/de not_active Withdrawn
-
1989
- 1989-08-14 DE DE58908558T patent/DE58908558D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-14 EP EP89114990A patent/EP0362520B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-14 ES ES89114990T patent/ES2064398T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-14 AT AT89114990T patent/ATE113296T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-08-15 US US07/393,953 patent/US5112806A/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-15 PH PH39098A patent/PH27179A/en unknown
- 1989-08-15 NZ NZ230303A patent/NZ230303A/en unknown
- 1989-08-15 FI FI893842A patent/FI94648C/fi active IP Right Grant
- 1989-08-15 IL IL91317A patent/IL91317A0/xx unknown
- 1989-08-16 DK DK198904037A patent/DK175121B1/da not_active IP Right Cessation
- 1989-08-16 IE IE263889A patent/IE64706B1/en not_active IP Right Cessation
- 1989-08-16 CA CA000608500A patent/CA1338171C/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-16 HU HU894215A patent/HU203906B/hu unknown
- 1989-08-16 ZA ZA896245A patent/ZA896245B/xx unknown
- 1989-08-16 JP JP1210228A patent/JP2892699B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-16 NO NO893288A patent/NO174517B/no not_active IP Right Cessation
- 1989-08-16 AU AU39966/89A patent/AU613228B2/en not_active Expired
- 1989-08-17 KR KR1019890011679A patent/KR0139628B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-17 PT PT91468A patent/PT91468B/pt not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI893842A7 (fi) | 1990-02-18 |
| ES2064398T3 (es) | 1995-02-01 |
| ZA896245B (en) | 1990-04-25 |
| EP0362520A3 (de) | 1991-10-23 |
| CA1338171C (en) | 1996-03-19 |
| KR0139628B1 (ko) | 1998-07-01 |
| HU203906B (en) | 1991-10-28 |
| FI893842A0 (fi) | 1989-08-15 |
| AU613228B2 (en) | 1991-07-25 |
| NZ230303A (en) | 1992-06-25 |
| ATE113296T1 (de) | 1994-11-15 |
| FI94648C (fi) | 1995-10-10 |
| DE3827868A1 (de) | 1990-02-22 |
| IE64706B1 (en) | 1995-08-23 |
| EP0362520A2 (de) | 1990-04-11 |
| PT91468B (pt) | 1995-05-04 |
| EP0362520B1 (de) | 1994-10-26 |
| US5112806A (en) | 1992-05-12 |
| NO174517B (no) | 1994-02-07 |
| PH27179A (en) | 1993-04-02 |
| AU3996689A (en) | 1990-02-22 |
| NO174517C (da) | 1994-05-18 |
| DE58908558D1 (de) | 1994-12-01 |
| DK403789D0 (da) | 1989-08-16 |
| IL91317A0 (en) | 1990-03-19 |
| IN167138B (da) | 1990-09-01 |
| IE892638L (en) | 1990-02-17 |
| KR900003206A (ko) | 1990-03-26 |
| PT91468A (pt) | 1990-03-08 |
| NO893288L (no) | 1990-02-19 |
| JPH02142800A (ja) | 1990-05-31 |
| JP2892699B2 (ja) | 1999-05-17 |
| FI94648B (fi) | 1995-06-30 |
| DK403789A (da) | 1990-02-18 |
| HUT55054A (en) | 1991-04-29 |
| NO893288D0 (no) | 1989-08-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK175121B1 (da) | Mersacidin og dennes forbindelses fysiologisk tålelige salte, fremgangsmåde til fremstilling deraf, lægemiddel indeholdende forbindelsen, dens anvendelse til fremstilling af lægemidler med antibiotisk virkning samt Bacillus specis Y-85,54728 (DSM 4584) | |
| TANAKA et al. | Brasilinolide A, a new macrolide antibiotic produced by Nocardia brasiliensis: producing strain, isolation and biological activity | |
| AU2011259309A1 (en) | Novel cyclic peptide compound, method for producing same, anti-infective agent, antibiotic-containing fraction, antibiotic, method for producing antibiotic, antibiotic-producing microorganism, and antibiotic produced by same | |
| KR840001255B1 (ko) | 항생물질 a/16686인자 a₂의 제조방법 | |
| US4180564A (en) | A-38533 Antibiotics and process for production thereof | |
| RU2077534C1 (ru) | Тиомаринол, обладающий антибактериальными свойствами, штамм микроорганизма alteromonas rava sank-73390 - продуцент тиомаринола и способ получения антибиотика тиомаринола | |
| US5292892A (en) | Anti-bacterial compound and pharmaceutical compositions thereof | |
| KR101492206B1 (ko) | 하이드록시 지방산의 글리세롤유도체 및 그 제조방법 | |
| US5320955A (en) | 10'desmethoxystreptonigrin production by Streptomyces albus | |
| KR100221687B1 (ko) | 항생제 발히마이신, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 약제 | |
| RU2627187C1 (ru) | Штамм Bacillus pumilus и способ получения антибиотика амикумацина А с его применением | |
| RU2795449C1 (ru) | Новые депсипептидные соединения, обладающие антибактериальной активностью | |
| JP5823733B2 (ja) | 抗生物質産生微生物及びそれが産生した抗生物質 | |
| Kumamoto et al. | M10709, a New Cyclic Peptide Antibiotic from Clinically Isolated Streptomyces sp. | |
| US5451570A (en) | Antibiotic, balhimycin, a process for its production and its use as pharmaceutical | |
| CN114853629B (zh) | 一种二肽类化合物及其制备方法和应用 | |
| US5459141A (en) | Compounds 31668P and 31668U, a process for their production and their use | |
| WO2018127493A1 (en) | Lipolanthipeptides and their uses as antimicrobial agents | |
| JPH0365944B2 (da) | ||
| KR19980017913A (ko) | 신규한 바실러스 속 미생물 및 이로부터 마크로락틴 a를 제조하는 방법 | |
| US20040053380A1 (en) | Process for the preparation of beta-keto aliphatic acid ester | |
| CZ294370B6 (cs) | Amycomycin, způsob jeho přípravy a farmaceutické prostředky, které ho obsahují |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |