DK171027B1 - 5'-Adenosinderivater, pharmaceutiske præparater deraf og anvendelse deraf til fremstilling af pharmaceutiske præparater - Google Patents

Description

DK 171027 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte 5'-adenosinderivater, der er anvendelige som S-adenosylmeth-ionin-decarboxylase-inhibitorer, pharmaceutiske præparater deraf og anvendelsen deraf til fremstilling af pharmaceutiske 5 præparater til behandling af sygdomme og tilstande forbundet med en hurtig proliferation af cellevækst.

Fra J. Med. Chem. 1980, 23, 121-127, og J. Med. Chem. 1982, 25, 550-556, kendes forbindelser, der er nært beslægtede med forbindelserne ifølge opfindelsen, og især følgende 10 forbindelser:

CHo H

I I

H2N-C3H6-N-Ad og H2N-C3H6-N-Ad 15 Disse kendte forbindelser udviser også S-adenosyl-methionin--decarboxylase-inhiberende virkning, men forbindelserne ifølge opfindelsen er overraskende betydelig mere virksomme end de kendte forbindelser.

Den foreliggende opfindelse angår nærmere betegnet 20 5'-adenosinderivater med formlen

R

Q-N-Ad (I) eller et pharmaceutisk acceptabelt salt deraf, hvorhos Ad 25 betyder 5 1 -adenosinyl, R betyder hydrogen eller C;]__7-alkyl, og Q betyder en gruppe med en formlerne CH2

II

H2N-CH2-(CH2)mC-(CH2)aCH2- og H2N-CH2-CH=CH-CH2- 30 (la) (le) hvor m er 0 eller 1, og q er 0 eller 1, idet dog summen af m og q er mindre end 2.

"Ad" delen (det vil sige adenosinyldelen, som inde-35 holder lH-purin-6-amin bundet til β-D-ribofuranosyl) har strukturen DK 171027 B1 2 nh2 f« ^ 5 -1

N

—ch2

OH OH

I de tilfælde hvor Q er repræsenteret med formlen (la), skal det bemærkes, at kun ét af symbolerne m og q kan 15 være én for enhver given forbindelse. I de tilfælde hvor R er forskellig fra H, betyder C1_7-alkyldelen fortrinsvis methyl og ethyl. I de tilfælde hvor Q er repræsenteret med formlen (le), foretrækkes det, at forbindelserne er i deres cis-konfiguration fremfor deres trans-konfiguration. Fore-20 trukne forbindelser er de forbindelser med formlen (I) , hvor Q er repræsenteret ved formlen (le), og de forbindelser, hvor R betyder methyl eller ethyl.

Illustrative eksempler på pharmaceutisk acceptable salte af forbindelserne med formlen I er de forbindelser, 25 der dannes med uorganiske syrer, fortrinsvis med hydrogen-chloridsyre, hydrogenbromidsyre, svolvsyre eller fosforsyre, samt med organiske syrer, såsom methansulfonsyre, salicylsyre, maleinsyre, malonsyre, vinsyre, citronsyre og askorbinsyre. Disse salte kan fremstilles ved standardtek-30 nikker og -metoder som kendt af enhver fagmand.

Opfindelsen angår også et pharmaceutisk præparat, som er ejendommeligt ved, at det indeholder et 5'-adenosin-derivat med formlen I eller et pharmaceutisk acceptabelt salt deraf.

35 Opfindelsen angår desuden anvendelsen af et 5'-ade- nosinderivat med formlen I eller et pharmaceutisk acceptabelt DK 171027 B1 3 salt deraf til fremstilling af et pharmaceutisk præparat til behandling af tilstande og sygdomme forbundet med hurtig proliferation af cellevækst.

Opfindelsen angår endelig 5'-adenosinderivater, som 5 er ejendommelige ved det i krav 8's kendetegnende del angivne, og som er mellemprodukter for fremstillingen af forbindelserne med formlen I.

Egentlig kan fremstillingen af forbindelserne med formlen (I) gennemføres ved anvendelse af teknikker og kemi-10 ske fremgangsmåder, der er analoge med kendte metoder, idet valget af den specifikke fremstillingsmetode afhænger af de sædvanlige faktorer, som der må tages hensyn til i enhver pharmaceutisk forskningsinstitution, såsom tilgængeligheden af og udgifter til udgangsmaterialer, tid for og vanskelig-15 heder med adskillelse og rensning af mellemprodukter og slutforbindelser og sådanne andre faktorer som er kendt og generelt erkendt af enhver fagmand.

Generelt kan fremstillingen af forbindelserne med formlen (I) gengives ved reaktionsrækkefølgen i reaktions-20 skema A som følger:

Reaktionsskema A

R o Ad' R o Ad' 25H”^V_/^ * *2*' A~a- r21*X^ ^ --ci) 0 0 m 00

X 131 X

(2) (4) 30 hvorhos Ad' betyder adeninyl med formlen nh2

35 k- ^-N

N I

DK 171027 B1 4 R2X' er en reaktant med én af formlerne ((3a) og (3e)) CH2

II

PgNH-CH2-(CH2)m-C-(CH2)gCH2X' 5 (3a)

PgNH - CH2 - CH=CH - CH2 X' 10 (3e) hvorhos Pg betyder tert.butoxycarbonyl (Boc) eller phthal-imido (Pht) (i hvilket tilfælde H'et i PgNH-delen naturligvis ikke er til stede) , og m, q og R har de samme betydninger som anført i forbindelse med formlen (I), og X' betyder OTF 15 (triflat) eller chlor, brom eller iod, (idet R2 naturligvis er de dele i (3a) til (3f), der er knyttet til X' delen) .

Ved gennemførelsen af kondensationen af reaktanterne (2) og (3), når X' betyder et halogenid, anvendes betingelserne A-a, hvor ækvimolære mængder af reaktanterne omsættes 20 i nærværelse af en base (fortrinsvis kaliumcarbonat) i et basisk opløsningsmiddel (fortrinsvis acetonitril) ved temperaturer på ca. 30°C til 80°C. Når betingelserne A-b anvendes, det vil sige når X' betyder et triflat, opvarmes reaktanterne sammen ved ca. 30°C til 80°C i nærværelse af en 25 base (fortrinsvis triethylamin) i et basisk opløsningsmiddel (fortrinsvis dimethylformamid). Fjernelse af N-beskyttelsesgrupperne gennemføres let ved standardteknikker, f.eks. behandling med IN svovlsyre ved stuetemperatur i 24-48 timer efterfulgt af behandling med en alkohol (fortrinsvis ethanol) 30 ved ca. 0°C, når beskyttelsesgruppen er tert.butoxycarbonyl, og når beskyttelsesgruppen er phthalimido, gennemføres fjernelsen ved anvendelse af en ethanolisk opløsning af et hydrazin (under anvendelse af klassiske teknikker). Fjernelse af isopropyliden-beskyttelsesgruppen i ribofuranosyldelen 3 5 gennemføres let ved hydrolyse ved stuetemperatur (fortrinsvis ved anvendelse af IN svovlsyre), almindeligvis samtidigt med N-beskyttelsesgrupperne. Isolering og rensning af mellemproduktet og slutprodukterne ifølge reaktionsskema A gennemføres ved standardteknikker, f.eks. omkrystallisation, HPLC, DK 171027 B1 5 flashchromatografi (på silicagel) og lignende.

Fremstillingen af mellemprodukterne, der er nødvendige til kondensationen ifølge reaktionsskema A, det vil sige de mellemprodukter, der er defineret for R2X', kan gennem-5 føres ved anvendelse af tilsvarende kendte fremgangsmåder som de i det følgende beskrevne generiske fremgangsmåder, som er illustreret i de følgende særskilt nævnte eksempler.

I de tilfælde hvor R2X' betyder den subgeneriske gruppe (3e), forløber reaktionen under A-a betingelser, 10 hvor X' fortrinsvis betyder chlor, og N-beskyttelsesgruppen er Boc, og den N-beskyttede 4-chlor-2-buten-l-amin kan hensigtsmæssigt fremstilles som følgende reaktionsskema viser:

Reaktionsskema B 15 HO / S's OH B~a.> H0—// ^ OTHP B’b > 20 ( B-1 ) ( B-2 ) B-c ^ B-d

PhtN—f^ OTHP BocNH ^^ OH

25 ( B-3 ) ( B-Δ ) 30

BocNH—' ^—Cl (B-5 ) 35 DK 171027 B1 6 hvorhos beskyttelsesgrupperne (Pht og Boc) har de tidligere anførte betydninger, og (THP) betyder tetrahydropyran.

I trin B-a omsættes diolen med dihydropyran i nærværelse af en katalytisk mængde pyridinium-p-toluensulfonat 5 ved ca. 0°C i et vandfrit opløsningsmiddel (eller blanding) (f.eks. CH2CI2/THF (2:1)) i ca. 24-48 timer. Omdannelse af (B-2) til (B-3) initieres ved en intermolekylær dehydratise-ringsreaktion af Mitsunobu-typen ved behandling med diethyl-azodicarboxylat (DEAD) og triphenylphosphin under milde neu-10 trale betingelser under en indifferent atmosfære (nitrogen) ved ca. 0°C i et vandfrit opløsningsmiddel (f.eks. THF) i nærværelse af phthalimid, idet reaktionen fortsætter ved stuetemperatur i ca. 12 timer.

Det resulterende (B-3) produkt behandles med hydrazin-15 hydrat i ethanol ved tilbagesvaling i ca. 12 timer for at fjerne phthalimido- og THP-beskyttelsesgrupperne, og den frie amin beskyttes igen med di-tert.butyldicarbonat ved tilbagesvaling i dichlormethan. Alkoholen (B-4) omdannes til chloridet ved omsætning med mesylchlorid under basiske 20 betingelser (TEA) i et vandfrit opløsningsmiddel, fortrinsvis dichlormethan. Dette cis-produkt med formlen (3e), kan efter rensning, almindeligvis ved flashchromatografi på silica-gel, anvendes direkte til kondensation med reaktanterne med formlen (2) ifølge teknikkerne beskrevet for reaktionsskema 25 A.

De følgende eksempler viser fremstillingen af de nødvendige mellemprodukter og slutprodukterne ifølge opfindelsen .

30 DK 171027 B1 7

Eksempel 1

Fremstilling af cis-51-deoxv-51 -(4-amino-2-butenvl)methvl-aminoadenosin 5 Trin A: C i s-4 -1et rahydropvranvloxv-2-buten-l-ol 9,1 ml (100 mmol) dihydropyran sættes dråbevis til en til 0°C afkølet opløsning af 8,8 g (10 mmol) 2-buten- 1,4-diol og 0,25 g (10 mmol) pyridiniumparatoluensulfonat i 10 vandfri dichlormethan/tetrahydrofuran (2:1). Blandingen omrøres i 2 dage ved 0°C, hvorpå den koncentreres under formindsket tryk. Remanensen renses ved flashchromatografi på silicagel (ethylacetat/hexan (3:7)), hvilket giver 8,3 g af den ovenfor anførte forbindelse (49%).

15

Trin B:

Cis-l-phthalimido-4-tetrahvdropvranvloxv-2-buten

Under en nitrogenatmosfære sættes 1,6 ml (10 mmol) diethylazodicarboxylat til en til 0°C afkølet opløsning af 20 1,7 g (10 mmol) cis-4-tetrahydropyranyloxy-2-buten-l-ol, 2,2 g (10 mmol) triphenylphosphin og 1,47 g (10 mmol) phthal-imid i 50 ml vandfri tetrahydrofyran. Når tilsætningen er bragt til ende (5 minutter), får reaktionsblandingen lov at opvarme ved stuetemperatur og omrøres i 12 timer. Derefter 25 koncentreres blandingen under formindsket tryk, hvorpå den fortyndes med 200 ml ethylacetat og vaskes med 150 ml saltvand. Efter sædvanlig oparbejdning (den vandige fase ekstra-heres 3 gange med 100 ml portioner ethylacetat, den organiske fase tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres 30 under formindsket tryk) renses produktet ved flashchromato-grafi på silicagel (ethylacetat/hexan (2:8)), hvilket giver 1,9 g af den ovenfor anførte forbindelse (64%).

Trin C: 35 Cis-tert.butoxvcarbonvl-4-hvdroxv-2-butenvl-l-amin.

En opløsning af 1,9 g (6,3 mmol) cis-l-phthalimido- DK 171027 Bl 8 4-tetrahydropyranyloxy-2-buten og 0,35 ml (6,9 mmol) hydrazinhydrat i 20 ml ethanol opvarmes under tilbagesvaling i 12 timer. Derefter koncentreres blandingen under formindsket tryk, hvorpå den fortyndes med 20 ml IN saltsyre og opvarmes 5 under tilbagesvaling i 2 timer. Derefter skilles phthalyl-hydrazidet fra ved filtrering, og filtratet koncentreres under formindsket tryk. Remanensen optages i 100 ml dichlor-methan, neutraliseres med triethylamin (pH-værdi 8,9), og der tilsættes en opløsning af 1,65 g (7,5 mmol) ditert.butyl-10 dicarbonat i 5 ml dichlormethan. Blandingen opvarmes under tilbagesvaling natten over, og efter sædvanlig oparbejdning fås produktet ved flashchromatografi på silicagel (ethyl-acetat/hexan (25:75)) (0,8 g, 74%).

15 Trin D:

Cis-N-tert.butoxvcarbonvl-4-chlor-2-butenvl-l-amin 0,6 ml (7,6 mmol) mesylchlorid sættes til en til 0°C afkølet opløsning af 1,3 g (7 mmol) cis-tert.butoxycar-bonyl-4-hydroxy-2-butenyl-l-amin og 1,1 ml (7,6 mmol) tri-20 ethylamin i 30 ml vandfri dichlormethan. Blandingen omrøres natten over, og efter sædvanlig oparbejdning renses det ovenfor anførte produkt ved flashchromatografi på silicagel (ethylacetat/hexan (2:8)) (0,8 g, 57%).

25 Trin E:

Cis-51 -deoxv-51 - (N-tert .butoxvcarbonvl-4-amino-2-butenvl)me-thvl-amino-21.31-isopropvlidenadenosin

En opløsning af 0,6 g (3 mmol) cis-N-tert.butoxycar-bonyl-4-chlor-2-butenyl-l-amin, 0,97 g (3 mmol) 5'-deoxy-30 5'-methylamino-2',3'-isopropylidenadenosin, 0,42 g (3 mmol) kaliumcarbonat og 0,05 g (0,3 mmol) natriumiodid i 20 ml acetonitril opvarmes under tilbagesvaling natten over. Derefter fortyndes blandingen med ethylacetat, hvorpå den vaskes med saltvand og tørres over magnesiumsulfat. Derefter renses 35 produktet ved flashchromatografi på silicagel (diethylamin/-chloroform (2:98)) (1,1 g, 55%).

DK 171027 B1 9

Trin F:

Cis-51-deoxv-5'-(4-amino-2-butenvl)methvlaminoadenosin

En opløsning af 0,9 g (1,8 mmol) cis-5'-deoxy-5'-[ (N-tert .butoxycarbonyl-4-amino-2-butenyl)methylamino] -2 1,3'-5 isopropylidenadenosin i 5 ml IN svovlsyre henstår i 2 dage ved stuetemperatur. Derefter fortyndes blandingen ved 200 ml ethanol og afkøles ved 0°C natten over. Bundfaldet skilles fra ved filtrering, opløses i en minimal mængde vand og fældes derefter igen med 200 ml ethanol. Dette gentages 2 10 gange, hvorved der fås den ovenfor anførte forbindelse i et udbytte på 0,5 g, smeltepunkt: 260°C (sønderdeling).

Eksempel 2

Fremstilling af trans-51-deoxv-51 -(4-amino-2-butenvl)methyl -15 aminoadenosin Trin A:

Trans-1-brom-4-phthalimido-2-buten

En blanding af 6,4 g (30 mmol) trans-1,4-dibrom-2-buten og 5,6 g (30 mmol) kaliumphthalimid i 200 ml vandfrit 20 dimethylformamid opvarmes ved 50°C i 24 timer. Derefter koncentreres reaktionsblandingen under formindsket tryk, opløses i ethylacetat, vaskes med saltvand, hvorpå den rene ovenfor anførte forbindelse fås ved flashchromatografi på silicagel (ethylacetat/hexan (15:85)) (3,2 g, 40%).

25

Trin B:

Trans-5 1-deoxv-5 1 - (4-phthalimido-2-butenvl)methvlamino-2 1 .3'-isopropvlidenadenosin

En blanding af 2 g (7,5 mmol) trans-l-brom-4-phthal-30 imido-2-buten, 1,6 g (11,5 mmol) kaliumcarbonat og 2,4 g (7,5 mmol) 5'-deoxy-5'-methylamino-2',3'-isopropylidenadenosin i 100 ml vandfri acetonitril opvarmes under tilbagesvaling natten over. Derefter koncentreres blandingen under formindsket tryk, hvorpå den opløses i dichlormethan, fil-35 treres og renses ved flashchromatografi på silicagel (chloro-form/diethylamin (98:2)) til dannelse af den ovenfor anførte DK 171027 B1 10 forbindelse (1,25 g, 33%).

Trin C:

Trans-5 1 -deoxv-5 1 - (4-tert.butoxvcarbonvlamino-3-buten)methvl-5 amino-21.31 -isopropvlidenadenosin

En blanding af 1 g (2 mmol) trans-51-deoxy-5'-(4-phthalimido-2-butenyl) methylamino-2 1 ,3 ' -isopropylidenadenosin og 0,1 ml (2 mmol) hydrazinhydrat i absolut ethanol opvarmes under tilbagesvaling natten over. Derefter koncentreres 10 blandingen under formindsket tryk, opløses i 30 ml vand, og pH-værdien justeres til 4 med iseddike og afkøles til 0°C. Derefter filtreres blandingen, og filtratet neutraliseres med triethylamin til en pH-værdi på 9 og koncentreres under formindsket tryk. Derpå opløses remanensen i dichlor-15 methan, og der tilsættes 0,45 g (2 mmol) ditert.butyldi-carbonat. Blandingen opvarmes under tilbagesvaling natten over, og efter sædvanlig oparbejdning renses produktet ved flashchromatografi på silicagel (diethylamin/dichlormethan (2:98)) til dannelse af den ovenfor anførte forbindelse 20 (0,5 g, 51%).

Trin D:

Trans-5'-deoxv-5'-(4-amino-2-butenvl)methvlaminoadenosin

En suspension af 0,4 g (0,96 mmol) trans-5'-deoxy-25 5'-(4-tert.butoxycarbonylamino-2-butenyl)methylamino-2',31 - isopropylidenadenosin i 3 ml IN svovlsyre omrøres i 2 dage ved stuetemperatur. Derefter fortyndes blandingen med 100 ml absolut ethanol og afkøles ved 0°C natten over. Produktet skilles fra ved filtrering, opløses i en minimal mængde 30 vand og fældes med 100 ml ethanol. Denne procedure gentages 2 gange, hvilket giver den ovenfor anførte forbindelse (0,16 g), smeltepunkt: 250-260°C (sønderdeling).

35 DK 171027 B1 11

Eksempel 3 51-deoxv-51 -(3-amino-2-methvlenpropvl)methvlaminoadenosin Trin A: 1-phthalimido-3 -chlor-2-methvlenpropan 5 En blanding af 6,55 g (50 mmol) 3-chlor-2-chlormethyl- 1- propen og 5,6 g (30 mmol) kaliumphthalimid i 200 ml vandfrit dimethylformamid opvarmes i 2 dage ved 50°C. Derefter koncentreres blandingen under formindsket tryk, og efter sædvanlig oparbejdning renses produktet ved flashchromato- 10 grafi på silicagel (ethylacetat/hexan (15:85)) (4,2 g, 78%).

Trin B: 5 1 - deoxv-5 1 - (3-phthalimido-2-methvlenpropvl) methvlamino-2' .31 - isopropylidenadenosin 15 En blanding af 0,87 g (5 mmol) l-phthalimido-3-chlor- 2- methylenpropan, 0,7 g (5 mmol) kaliumcarbonat, 0,08 g (0,5 mmol) natriumiodid og 1,6 g (5 mmol) 5 '-deoxy-5 '-methyl-amino-2',3'-isopropylidenadenosin i 100 ml vandfri aceto-nitril opvarmes i 2 dage under tilbagesvaling. Derefter 20 koncentreres blandingen under formindsket tryk, hvorpå den fortyndes med dichlormethan, filtreres, og produktet renses ved flashchromatografi på silicagel (diethylamin/chloroform (2:98)), hvilket giver 2,85 g (78%) af den ovenfor anførte forbindelse.

25

Trin C

5 ' -deoxv-5 1 - (3-tert .butoxvcarbonvlamino-2-methvlenpropvl)me-thvlamino-2',3'-isopropylidenadenosin

En blanding af 2,3 g (4,4 mmol) 5'-deoxy-51 - (3-phthal-30 imido-2-methylenpropyl) methylamino-2 1 , 3 1 - isopropylidenadenosin og 1,5 ml (3 0 mmol) methylhydrazin i 5 ml absolut ethanol opvarmes i 2 dage under tilbagesvaling. Derefter koncentreres blandingen under formindsket tryk, hvorpå den opløses i 5 ml chloroform, og pH-værdien justeres til ca. 9 35 med triethylamin, hvorefter der tilsættes en opløsning af 8,8 g (4,4 mmol) ditert.butyldicarbonat i 5 ml chloroform.

DK 171027 B1 12

Den resulterende blanding opvarmes natten over under tilbagesvaling, og efter sædvanlig oparbejdning renses produktet ved flashchromatografi på silicagel (diethylamin/-chloroform (2:98)), hvilket giver 1,25 g (64%) af den ovenfor 5 anførte forbindelse.

Trin D: 5'-deoxv-5'-(3-amino-2-methvlenoropvl)methvlaminoadenosin

En suspension af 0,65 g (1,3 mmol) 5'-deoxy-5'-(3-10 tert.butoxycarbonylamino-2-methylenpropyl)methylamino-2', 3'-isopropylidenadenosin i 4 ml IN svovlsyre omrøres i 2 dage ved stuetemperatur. Derefter fortyndes blandingen med 150 ml absolut ethanol og henstår ved 0°C natten over. Bundfaldet skilles fra ved filtrering, opløses i en minimal mængde 15 vand og fortyndes med 150 ml absolut ethanol. Dette gentages 2 gange, hvorved der fås den ovenfor anførte forbindelse som hvide krystaller (0,55 g, smeltepunkt: 230-240°C (sønderdeling) ) .

20 Forbindelserne med formlen (I) er inhibitorer af decarboxylaseenzymer, der er involveret i polyamindannelse, og sådanne forbindelser er derfor anvendelige som pharmaco-logiske midler. Forbindelserne med formlen (I) er især stærke og irreversible inhibitorer af S-adenosylmethionindecarboxy-25 lase (AdoMetDC), og de hæmmer derfor i betydeligt omfang dannelsen af spermin og spermidin og er således anvendelige instrumenter i forskeres og klinikeres samling ved undersøgelse af polyamindannelse og til behandling af tilstande og sygdomme beslægtet med hurtig proliferation af cellevækst.

30 Af særlig betydning er anvendelsen af de her omhandlede forbindelser sammen med kendte ornithindecarboxylase-inhibitorer, kendte antitumormidler og immunmodulatorer, der er kendt for deres anvendelse ved sygdomme knyttet til hurtig proliferation af normale og transformerede celler.

3 5 Som det er kendt af enhver fagmand er polyaminer knyttet til både normal og hurtig proliferation af celler, DK 171027 B1 13 og som det også er kendt, er mængderne af polyaminer store i embryoniske systemer, testikler og patienter, der lider af sygdomme knyttet til hurtig proliferation af cellevækst. Der er også kendt, at der er en forbindelse mellem aktivi-5 teten af ornithin-, S-adenosylmethionin-, arginin- og lysin-decarboxylaseenzymerne og polyamindannelse. Med denne indbyrdes forbindelse er de her omhandlede forbindelser med formlen I således også, på grund af deres enestående evne til at inhibere S-adenosylmethionin-decarboxylase, anvendelige 10 til at undersøge biokemiske og pharmacologiske konsekvenser af polyamin-biosynteseblokade i pattedyr, planter, bakterier og protozoer.

Mere specifikt er nogle af de mere lovende slutanvendelser for de her omhandlede forbindelser med formlen I føl-15 gende anvendelser.

Anvendelsen af en AdoMetDC-inhibitor ifølge opfindelsen alene men mere effektivt sammen med en ornithin-decar-boxylaseinhibitor (ODC) i pattedyr som postcoitale svangerskabsforebyggende midler, fremkaldere af menstruation og som 20 første trimester-abortfremkaldere er klar, da en sådan anvendelse ikke kirurgisk trænger ind i livmoderhulen og ikke kræver hospitalsindlæggelse, foruden at indgiften kan ske med et minimum af lægeligt opsyn.

Som det er kendt, har anvendelsen af enkelte midler 25 til anti-neoplastisk kemoterapi kun været begrænset succesrigt og begrænset til meget få ondartetheder. Således vil behandling af sådanne ondartetheder som leukæmi (f.eks. akut lymphocytisk leukæmi, Hodgkins' sygsom), melanom og meta-statisk melanom, multipel myelom, urinblærecarcinom, pro-30 statacarcinom (såvel som godartet renal adenocarcinom, gastrisk adenocarcinom, prostatahypertrofi), pancreatisk adenocarcinom, tyktarmscancer, lungecarcinom, fibrosarcom og brystcarcinom, blive forstærket ved anvendelsen af AdoMetDC-inhibitorerne ifølge opfindelsen i terapeutiske kure sammen 35 med kendte medikamentkombinationer. F.eks. vil anvendelsen af de her omhandlede AdoMetDC-inhibitorer, fortrinsvis med DK 171027 B1 14 ODC-inhibitorer og/eller med interferon, i betydeligt omfang lette en formindskelse af uheldige bivirkninger og øge overlevelsestiden, når de anvendes sammen med sådanne velkendte medikamentkombinationer som vineristin, amethopterin, mer-5 captopurin, prednison (VAMP), cyclophosphamid, arabinosyl-cytosin, oncovin (COAP), mechlorethamin, procarbazin (MOPP), ABVD, CHOP, CAF, FAM og PVE (jævnfør oversigten af N.A. Berger (1986), J. Clin. Invest., 1131-1135). Desuden forbedrer anvendelsen af de her omhandlede forbindelser med 10 formlen I virkningsfuldheden af hindringen af metastaser i cancere i bryst, tyktarm og urinblære med ODC-inhibitorer.

En anden specifik klinisk side af de her omhandlede forbindelser med formlen I er til forstærkning af synergismen mellem ODC-inhibitorer og a-interferon ved behandling af 15 cancere, især metastatisk malign melanom. En anden side er forstærkningen af den enestående vekselvirkning mellem ODC-inhibitorer og methylglyoxalbisguanylhydrazon (MGBG, methyl-GAG), især i tilfælde med tilbagevendende primære hjernetumorer (f .eks. astrocytomer) . Yderligere kan de her omhandlede 20 forbindelser med formlen I være anvendelige til behandling af hyperproliferative lidelser, såsom psoriasis.

Ud over det ovenfor anførte kan forbindelserne ifølge opfindelsen med formlen I også anvendes til behandling af sygdomme, der forårsages af infektioner med animalske para-25 sitter, især parasitiske protozoer og parasitiske nematoder. Ved behandling af sygdomme forårsaget af disse parasitter kan de her omhandlede forbindelser med formlen I anvendes alene eller sammen med ornithin-decarboxylaseinhibitorer og/eller sammen med andre midler, som er kendt for at være 30 anvendelige til behandling af sådanne sygdomme. I nogle tilfælde, såsom ved behandling af Chagas sygdom, foretrækkes det at anvende arginin-decarboxylaseinhibitorer sammen med de her omhandlede forbindelser med formlen I. Af særlig interesse er behandlingen af trypanosomiasis africana, Chagas 35 sygdom og Pneumocystis carinii pneumonia (PCP) i patienter, der lider af aids (især sammen med en ODC-inhibitor) , crypto- DK 171027 Bl 15 sporidiose og malaria.

Endnu mere specifikt er forbindelserne ifølge opfindelsen med formlen I især anvendelige til behandling af (1) sygdomme forårsaget af Onchocerca volvulus, en fila-5 rienematode, der lever i subcutant væv og forårsager hudlæsioner og øjenlæsioner (flodblindhed). Disse sygdomme behandles almindeligvis med diethylcarbamazin, der dræber mikrofilarierne men ikke de fuldt udviklede orme, (2) sygdomme forårsaget af Wuchereria bancrofti, en tråd-10 lignende nematode, som i fuldt udviklet tilstand lever i tynde lymfekar, og som forårsager lymphangitis, dermatitis og cellulitis. Disse sygdomme behandles almindeligvis med diethylcarbamazin, men denne behandling er kendt for at være utilstrækkelig, 15 (3) sygdomme forårsaget af Loa loa, en filarieorm, der forårsager loaiasis, der er karakteriseret ved varm erythema-tøs Calabar-opsvulmning på ekstremiteter og periorbitalt væv, og som også er blevet behandlet med diethylcarbamazin, (4) sygdomme forårsaget af Trichomonas vaginalis, en sek-20 suelt overført flagellat-protozo, der forårsager trichomoniasis, der almindeligvis behandles med metronidazol, (5) sygdomme forårsaget af Giardia lamblia, en protozoparasit med svingtråde, som forårsager giardiasis i tamme hunde og vilde dyr såvel som mennesker, og hvor der som 25 medikament kan vælges mellem quinacrin-hydrochlorid og metronidazol , (6) sygdomme forårsaget af Toxoplasma gondii, en protozoparasit af underklassen coccidia, som forårsager congenital toxoplasmose, der kan behandles med pyrimethamin og sulf- 30 adiazin, (7) sygdomme forårsaget af malariaparasitterne af slægten Plasmodium, f.eks. Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale og Plasmodium malariae, som forårsager malaria. Den sædvanlige behandling sker med chloriquin, qui- 35 ninsulfat, pyrimethanin og sulfadiazin. Ved behandling af denne sygdom er det bedre at anvende de her omhandlede for- DK 171027 B1 16 bindeiser med formlen I i en behandling sammen med de ovenfor anførte midler eller med ODC-inhibitorer, (8) sygdomme forårsaget af Trypanosoma cruzi, en protozo, der forårsager Chagas sygdom, en sygdom, der er kendt for 5 at være vanskelig at behandle. Ved behandlingen af denne sygdom med de her omhandlede forbindelser med formlen I anbefales det, at de anvendes i en behandling sammen med arginin- og agmatin-decarboxylaseinhibitorer, (9) sygdomme forårsaget af afrikanske trypanosomer, såsom 10 Trypanosoma brucei gambiense og Trypanosoma brucei rhode- siense, 2 underarter af hemoflagellater, der forårsager Trypanosomiasis africana, en sygdom, der behandles med suramin og i den seneste tid med eflornithin. Særligt anvendelig til behandling af denne sygdom er forbindelsen cis-5'-deoxy-15 5'-(4-amino-2-butenyl)methylaminoadenosin, (10) sygdomme forårsaget af Leishmania tropica og Leish-mania mexicana, som er årsag til cutan leishmaniasis og visceral leishmaniasis (også kaldet kala-azar eller sort feber), som forårsages af Leishmania donovani.

2 0 Yderligere kan AdoMetDC-inhibitoren ifølge opfindelsen anvendes (alene eller sammen med ODC-inhibitorer) som anti-infektionsmidler, idet den er effektiv til bekæmpelse af bakterier, svampe og virus, der er afhængige af polyaminer for vækst, f.eks. E. coli, Enterobacter, H. influenzae, 25 Mycobacteria-arter, Staphylococcus aureus, Klebsiella, virus, såsom poxvirus, Herpesvirus, picornavirus og influenzavirus. Ved anvendelsen af de her omhandlede forbindelser med formlen I foretrækkes det at anvende sådanne ODC-inhibitorer som α-difluormethylornithin, α-monofluormethylornithin, of-ethyn-30 ylornithin, (e)-2-(fluromethyl)dehydroornithin (og methyl-, ethyl- og andre estere deraf) og (2R, 5R)-6-heptyn-2,5-diamin, idet disse forbindelser og deres anvendelser er tilstrækkelig beskrevet med hensyn til deres fremstilling, deres ODC-in-hiberende egenskaber og deres slutanvendelser (jævnfør In-35 hibition of Polyamine Metabolism (1987) udgivet af P.P. McCann, A.E. Pegg og A. Sjoerdsma).

DK 171027 B1 17

De S-adenosylmethionin-decarboxylase-inhiberende egenskaber af forbindelserne med formel (I) kan let bestemmes ved gængse laboratoriemetoder som kendt af enhver fagmand. F.eks. forårsager cis-51-deoxy-51 -(4-amino-2-butenyl) -5 methylaminoadenosin en inaktivering af rottelever-AdoMetDc in vitro med en tl/2 = 16 minutter ved 0,1 μΜ, en tl/2 =1,6 minutter ved 1 μΜ og en tl/2 = 0,8 minutter ved 2 μΜ.

Som pharmacologisk anvendelige midler kan forbindelserne med formlen (I) indgives på forskellig måde til den 10 patient, der behandles, for at opnå den ønskede virkning. Forbindelserne kan indgives alene eller sammen med en anden ifølge gængse teknikker til en kombineret behandling, idet det skal erindres, at de her omhandlede forbindelser med formlen I fortrinsvis forstærker fastslåede protokoller, 15 når de anvendes til behandling af neoplasmer. Forbindelserne indgives fortrinsvis i form af et pharmaceutisk præparat. Almindeligvis kan forbindelserne indgives oralt, paranteralt, f.eks. intravenøst, intraperitonealt eller subcutant, som en infusion eller topisk, som bestemt af kendte faktorer og 20 er kendt af enhver fagmand. Den indgivne mængde varierer over et bredt område og kan være enhver effektiv mængde afhængig af den patient, der skal behandles, den tilstand, der skal behandles, samt indgiftmåden. En effektiv mængde af den indgivne forbindelse vil variere fra ca. 0,2 mg/kg 25 til 200 mg/kg legemsvægt af patienten pr. behandlingsdosis, og vil fortrinsvis være 1 mg/kg til ca. 50 mg/kg legemsvægt af patienten pr. behandlingsdosis.

Den faste enhedsdosisformer kan være af gængs type. Således kan den faste form være en kapsel, som kan være af 30 den almindelige gelatinetype indeholdende en forbindelse ifølge opfindelsen med formlen I og en bærer, f.eks. et smøremiddel samt indifferente fyldstoffer, såsom lactose, sakkarose og majsstivelse. Ved en anden udførelsesform tabletteres de her omhandlede forbindelser med formlen I 35 med gængse tabletbaser, såsom lactose, sakkarose eller majsstivelse samme med bindemidler, såsom acacie, majsstivelse DK 171027 B1 18 eller gelatine, desintegrerende midler, såsom majsstivelse, kartoffelstivelse eller alginsyre, samt et smøremiddel, såsom stearinsyre eller magnesiumstearat.

Til parenteral indgift kan forbindelserne indgives 5 som injicerbare doseringer af en opløsning eller suspension af forbindelsen i et fysiologisk acceptabelt fortyndingsmiddel sammen med en pharmaceutisk bærer, som kan være en steril væske, såsom vand og olier med eller uden tilsætning af et overfladeaktivt middel og andre pharmaceutisk accep-10 table hjælpestoffer. Eksempler på olier, som kan anvendes i disse præparater, er jordolier, animalske, vegetabilske eller syntetiske olier, såsom jordnøddeolie, soyabønneolie og mineralolie. Generelt foretrækkes der vand, saltvand, vandig dextrose og beslægtede sukkeropløsninger, ethanoler 15 og glykoler, såsom propylenglykol eller polyethylenglykol, som flydende bærere, især til injicerbare opløsninger.

Forbindelserne kan indgives i form af en depotinjektion eller et implantatpræparat, der kan formuleres på en sådan måde, at der opnås en vedvarende frigørelse af den 20 aktive bestanddel. De aktive bestanddele kan komprimeres til pellets eller små cylindre og implanteres subcutant eller intramuskulært som depotinjektioner eller implantater.

I implantater kan der anvendes indifferente materialer, såsom bionedbrydelige polymere eller syntetiske siliconer, f.eks.

25 "Silastic", en siliconegummi fremstillet af Dow-Corning Corporation.

Som det gælder for de fleste generiske klasser af forbindelser egnet til pharmaceutiske anvendelser foretrækkes der visse underklasser og visse specifikke forbindelser.

30 Blandt forbindelserne med formlen (I) ifølge opfindelsen foretrækkes de forbindelser, hvor R betyder hydrogen eller methyl, og de forbindelser, hvor Q repræsenterer formlen (le) i cis-konfigurationen. Foretrukne specifikke forbindelser er cis-5'-deoxy-(4-amino-2-butenyl)methylaminoadenosin, 3 5 cis-5 '-deoxy-(4-amino-2-butenyl) aminoadenosin, samt 5'-deoxy-5'-(3-amino-2-methylenpropyl)methylaminoadenosin, 51-deoxy-5'-(3-amino-2-methylenpropyl)aminoadenosin.

Claims (10)

1. 5 I Q-N-Ad (I) eller er et pharmaceutisk acceptabelt salt deraf, hvorhos Ad betyder 5 '-adenosinyl, R betyder hydrogen eller C-L_7-alkyl, og Q betyder en gruppe med en af formlerne 10 CH2 H H II I I H2N-CH2-(CH2)mC-(CH2)qCH2- og H2N-CH2-C=C-CH2- 15 (la) (le) hvor m er 0 eller 1, og q er 0 eller 1, idet dog summen af m og q er mindre end 2.
2. 2. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R betyder methyl eller H.
3. 3. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at Q betyder en gruppe med formlen (le).
4. 4. Forbindelse ifølge krav 2, kendetegnet ved, at den har cis-konfiguration.
5. 5. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet 25 ved, Q repræsenterer en gruppe med formlen (la).
6. 6. Forbindelse ifølge krav 3, kendetegnet ved, at den er cis-5'-deoxy-5'-(4-amino-2-butenyl)methylaminoadenosin eller cis-5'-deoxy-5'-(4-amino-2-butenyl)aminoadenosin.
7. 7. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er 5'-deoxy-5'-(3-amino-2-methylenpropyl)methylaminoadenosin og 5 1-deoxy-5'-(3-amino-2-methylenpropyl)aminoadenosin. 8. 5'-Adenosinderivat, kendetegnet ved, 35 at det har formlen DK 171027 B1 20 nh2 ,<V»i U JL N R 0 r2n-ch2— 10 i—rH o o X 15 hvori R betyder hydrogen eller C1_7-alkyl/ og R2 betyder en gruppe med formlen Η H , v
8. 20 I || PgNH-CH-(CH2)m-C-(CH2)qCH2- (13a) 25 eller Η Η H I I I PgNH-CH-C=C-CH2- 30 (13e) hvori Pg betyder tert.butoxycarbonyl (Boc) eller phthalimido (Pht) (i hvilket tilfælde H'et i PgNH-delen ikke er til stede) , og m er 0 eller 1, og q er 0 eller 1, idet dog summen 35 af m og q er mindre end 2.
9. 9. Pharmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det indeholder et 5'-adenosinderivat ifølge krav l.
10. 10. Anvendelse af et 5'-adenosinderivat ifølge krav 1 til fremstilling af et pharmaceutisk præparat til behand- 40 ling af tilstande og sygdomme forbundet med hurtig proliferation af cellevækst.