DK164638B

DK164638B - Kombinationspraeparat af pyrimido-pyrimidiner og acetylsalicylsyre og/eller deres farmaceutisk acceptable salte, fremgangsmaade til dets fremstilling samt anvendelse af pyrimido-pyrimidiner og acetylsalicylsyre og/eller salte deraf sammen med farmaceutiske baerere til fremstilling af et kombinationspraeparat

Info

Publication number: DK164638B
Application number: DK330585A
Authority: DK
Inventors: Klaus Ulrich Weithmann; Dirk Seiffge
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1984-07-21
Filing date: 1985-07-19
Publication date: 1992-07-27
Also published as: PT80837B; DK330585D0; EP0169465B1; PH22342A; IL75852A; AU574206B2; AU4519585A; JPH0564615B2; JPS6143117A; HU193793B; PT80837A; NZ212797A; IE851821L; DE3576119D1; CA1247529A; EP0169465A3; IE58612B1; US4694024A; ATE50497T1; EP0169465A2

Description

i

DK 164638 B

Den foreliggende opfindelse angår et kombinations-præparat indeholdende pyrimido-pyrimidiner, acetylsalicylsyre og farmaceutiske bærere, en fremgangsmåde til fremstilling af dette kombinationspræparat samt anvendelsen af pyrimido-5 pyrimidiner og acetylsalicylsyre sammen med farmaceutiske bærere til fremstilling af kombinationspræparatet.

Acetylsalicylsyre er kendt som inhibitor for aggregeringen af humane blodplader, jfr. eksempelvis Br. J. clin. Pharmac. 7 (1979) 283, og der er beskrevet, at de hvad 10 angår undgåelse af thromboser og slagtilfælde kan vise værdifulde terapeutiske effekter, jfr. Blood 52 (1978) 1073, N. Engl. J. Med. 299 (1978) 53. Som virkningsmekanisme er beskrevet, at acetylsalicylsyre inhiberer enzymet cyclooxygenase, som er lokaliseret i blodpladerne, jfr. J. Clin.

I5 Invest. 56 (1975) 624, og følgelig inhiberes biosyntesen af thromboxan A2, som fremmer aggregeringen. Ganske vist kan acetylsalicylsyre også inhibere cyclooxygenasen, som er tilstede i karvæggen, og med det syntesen af prostacykli-net, som inhiberer inhiberingen. Da inhiberingen af den 20 vaskulære cyclooxygenase imidlertid først kan iagttages ved højere doser af acetylsalicylsyre, jfr. Pharmacol. Research Commun 10 (1978) 759, anbefales det som konsekvens heraf at opnå en antithrombotisk virkning med lave acetylsali-syre-doseringer, Lancet, iii (1979) 1213, Prostaglandins 25 and Medicine 4 (1980) 439. Det er imidlertid også beskrevet, at den antithrombotiske virkning af acetylsalicylsyre tager til med stigende dosering, og at man opnår en optimal virkning under betingelser, under hvilke både prostacyklin- og thromboxan-biosyntesen i vid udstrækning inhiberes, jfr.

3® Prostaglandins, Leukotrienes and Medicine 12 (1983) 235.

Pyrimido-pyrimidiner (formel 1, se formelblad), hvorved man i det følgende især skal forstå dipyridamol (2,6-bis-(diethanolamino)4,8-dipiperidino-(5,4-d)-pyrimi-din) og mopidamol (2,6-bis-(diethanolamino)-8-piperidino-35 (5,4-d)-pyrimidin) (se formelblad) anvendes klinisk ligeledes som antithrombotiske og antiaggregatoriske lægemid-

DK 164638 B

2 ler, jfr. Platelets and Thrombosis, side 175, Mills and Poreti (udg.) Academic Press, New York (1977)., eller til inhibering af metastaser. Klinisk især værdifuld er åbenbart også oxygenforsyningens fremme i iskæmiske områder i 5 hjertekransblodkarrene ved infarkt, jfr. Herz-Kreislauf 5 (1973) 519-524. Dipyridamol er beskrevet som stimulator for prostacyklin, jfr. Arch. int. Pharmacodyn. 256 (1982) 327. For kombinationer af dipyridamol og acetylsalicylsyre i forholdet 4:1 til 1:4 er beskrevet overadditive virkninger 10 på den inducerede thrombocytaggregering, jfr. fransk patentskrift nr. 2.368.272, og der er blevet foreslået tilsvarende terapeutiske præparater. Da man ud fra de to komponenter ikke kan opnå stabile ensartede blandinger, har man i det nævnte franske patentskrift foreslået at adskille komponen-15 terne rumligt fra hinanden i lagdelte tabletter eller skal-kerne-tabletter.

Et kombinationspræparat, som indeholder 330 mg acetylsalicylsyre og 75 mg dipyridamol, anvendes allerede medi- ___ cinisk, jfr. Asasantin , Fa. Dr. Karl Thomae GmbH, Bibe-20 rach. Også 1 g acetylsalicylsyre kombineret med 75 mg dipyridamol er allerede blevet anvendt, jfr. Europ. J. Clin. Pharmacol 22 (1982) 309-314. Kombinationen af andre pyrimi-do-pyrimidiner med acetylsalicylsyre i et forhold på fra 0,5 til 0,33 eller endnu mindre er kendt fra fransk patent-25 skrift nr. 2.390.959.

Som det er vist i tabel 1, kan man med kombinationen af 5 mg pr. kg legemsvægt dipyridamol og 22 mg pr. kg legemsvægt acetylsalicylsyre opnå højere antithrombotisk virkninger, end det kan beregnes ved addition af virkningen 30 af de enkelte stoffer, dvs., at denne kombination ikke kun viser de allerede ovennævnte overadditive antiaggregato-riske effekter, men også en overadditiv antithrombotisk effekt. Som det beskrives mere udførligt nedenfor, kan den medicinske anvendelse af acetylsalicylsyre også fremkalde 35 uønskede bivirkninger, eksempelvis gastrointestinale irritationer. Man bør således bestræbe sig på at formindske

DK 164638 B

3 acetylsalicylsyreandelen i.kombinationen, dvs. at vælge forholdet pyrimido-pyrimidin og acetylsalicylsyre større end 0,5. Formindskes acetylsalicylsyreandelen i den nævnte kombination i tabel 1 derefter ved samtidig indgift af fra 5 22 mg pr. kg til 5 mg, kan man i det tilfælde ikke længere påvise nogen signifikant antithrombotisk effekt, dvs., at den formindskelse af acetylsalicylsyreandelen', som er ønsket på baggrund af den medicinske forenelighed, fører til et præparat uden medicinsk effekt.

10 Det har nu overraskende vist sig, at en med tids mæssig afstand på hinanden følgende afgivelse af dels a) py-rimido-pyrimidiner med formlen I (se formelblad og patentkrav 1) eller aktive metabolitter og/eller salte af deraf og dels b) acetylsalicylsyre og/eller deres farmaceutiske 15 acceptable salte i en bestemt rækkefelge muliggør en overmåde stærk forbedring af behandlingen af sygdomme, som er forårsaget af eller karakteriseret ved unormale blodfunktioner eller defekte blodbestanddele. Den tidsmæssigt trindelte afgivelse af komponent a, som først efter fra '2Ό-90 minutter 20 følges af afgivelsen af acetylsalicylsyren eller dens salte, fører til meget stærkere effekter, end hvad der svarer til den beregnede sum af virkningerne af de enkelte komponenter, men også til stærkere effekter, end når de to enkelte stoffer gives samtidigt eller i omvendt rækkefølge. Dette er så 25 meget desto mere overraskende, da den samtidige indgift af pyrimido-pyrimidiner, såsom dipyridamol, og acetylsalicylsyre kun fører til en uvæsentligt stærkere virkning, end man får ved enkeltindgiften af acetylsalicylsyre, jfr. tabel 1 nedenfor.

30 Som pyrimido-pyrimidiner kommer især dipyridamol (se formelblad formel la) og/eller mopidamol (formel Ib) i betragtning, yderligere imidlertid også eksempelvis forbindelserne Ic og Id samt analoge, hvori én eller begge -CI^-CI^-OH-grupper er skiftet ud med -C^-CHiCH^J-OH, 35 eller hvor piperidingruppen er skiftet ud med morpholin-gruppen.

DK 164638 B

4

Kombinationspræparatet ifølge opfindelsen er ejendommeligt ved, at det indeholder a) et pyrimido-pyrimidin med formlen R4 „A/y'R m

,jJU

I2

10 R

hvori mindst én af grupperne R1 og R3 er gruppen -N(CH2“CHR5-0H)2i hvor R^ = hydrogen eller methyl, og mindst én af grupperne R2 og R4 er gruppen /-\

"O

15 som i p-stillingen til nitrogenatomet også kan være afbrudt af oxygen, og hvori de eventuelle øvrige grupper R1, R2, R3 og R4 er hydrogen, 20 eller aktive metabolitter og/eller salte deraf og b) acetylsalicylsyre og/eller dens farmaceutisk acceptable salte, idet vægtforholdet mellem komponenten a) og komponenten b) er større end 0,5, sammen med 25 c) en farmaceutisk bærer der er valgt og udformet på en sådan måde, at komponenten a) bliver frigivet først fra formuleringen, og komponenten b) bliver frigivet efter et tidsinterval på 15 minutter til 2 timer derefter.

Det er overraskende, at den ifølge opfindelsen til- 30 vejebragte medicinske effekt kun lader sig opnå, når den relative acetylsalicylsyreandel ved den tidsmæssigt forskudte (sekventielle eller konsekutive) afgivelse er så lille, at . man ikke underskrider et vægtforhold mellem pyrimido-pyrimidin og acetylsalicylsyre på 0,5. Bliver forholdet mellem 35 komponent a) og acetylsalicylsyrekomponenten b) mindre end 0,5, dvs., forøges acetylsalicylsyreandelen, kan man i det tilfælde, hvad angår den antithrombotiske virkning, ikke

DK 164638 B

5 påvise nogen signifikant forskel mellem samtidig og på hinanden følgende indgift. Det er også overraskende, at man med stigende acetylsalicylsyreandel ikke kan opnå nogen bedre antithrombotisk virkning end ved anvendelsen af kom-5 binationspræparatet ifølge opfindelsen af pyriraido-pyrimidin-komponenterne i kombination med væsentligt mindre mængder acetylsalicylsyre, nemlig et forhold på 0,5 eller mere, eksempelvis 0,8 eller 1.

Kombinationspræparatet ifølge opfindelsen egner sig 10 på grund af deres overadditive virkninger til antithrombotisk, smertestillende, antiaggregatorisk og cytostatisk, især metastase inhiberende, behandling og forebyggelse. Med kombinationspræparaterne ifølge opfindelsen bliver det muligt, at pyrimido-pyrimidin-komponenten frigives først, 15 dvs. før acetylsalicylsyren bliver frigivet (biotilgængelig).

Det er en overraskende fordel, at de mængder af pyri-mido-pyrimidin og acetylsalicylsyrekomponent, der skal anvendes, på grund af den overadditive virkning_ved den forskudte frigivelse kan reduceres til sådanne mængder, som ved 20 deres indgift hver for sig viser en kun minimal farmakologisk virkning, således at bivirkninger, som fremkaldes af høje doser af disse lægemidler, samtidigt kan formindskes. Dette er derfor af stor betydning, fordi acetylsalicylsyre som bekendt i de gængse doseringer kan fremkalde uønskede bi-25 virkninger (jfr. eksempelvis British Journal of Clinical

Pharmacology 1980, 10, Suppl. 2 og International Meeting on Side Effects of Antiinflammatory, Analgesic Drugs, Verona, 13.-15.9.82, Abstracts, såsom astma, allergisk urtikaria, analgetisk nephropathi, Reye syndrom samt mave- og tarm-30 ulcera. Også pyrimido-pyrimidinerne, som dipyridamol, kan vise uønskede bivirkninger, jfr. eksempelvis B. Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 6. oplag, New York, 1980. Ved kombinationspræparatet ifølge opfindelsen kan man nu overraskende drastisk formindske 35 den nødvendige dosering af acetylsalicylsyre til mennesker og dyr og også mængden af dipyridamol og pyrimido-pyrimi-

DK 164638 B

6 diner, således at den almene toksikologiske forenelighed desuden bliver yderligere forbedret.

Egnede farmakologisk acceptable salte af acetylsalicylsyre er salte med farmakologisk acceptable metal-kationer, ammonium, aminkationer eller kvaternære ammonium-

D

kationer. Alkalimetaller, som lithium, natrium og kalium, og jordalkalimetallerne, såsom magnesium og calcium, foretrækkes, skønt man også kan anvende kationiske forme af andre metaller, eksempelvis aluminium, zink og jern.

10 Farmakologisk acceptable aminkationer er eksempel vis aminkationer af primære, sekundære eller tertiære aminer, såsom alkylaminerne, eksempelvis methyl-, dimethyl-, trimethyl-, ethyl-, dibutyl-, triisopropyl-, N-methylhexyl-, benzyl-, β-phenylethylamin, ethylendiamin, diethylentri-25 amin, piperidin, morpholin, piperazin, mono-, di- og tri-ethanolamin, ethyldiethanolamin og N-butylethanolamin.

Egnede aminsalte er også de basiske aminsalte af lysin og arginin. Egnede farmakologiske acceptable kvaternære ammo-niumkationer er eksempelvis tetramethylammonium, tetraethyl-2o ammonium og bénzyltrimethylammonium.

Også dipyridamol og pyrimido-pyrimidiner kan foreligge i form af salte, eksempelvis som chlorid eller fluorid. Pyrimido-pyrimidin-komponenten på den ene side og acetyl-salicylsyre-komponenten på den anden side kan også indgives 25 samtidigt til opnåelse af den overadditive virkning, idet det imidlertid er nødvendigt med en indgift i dosisenheder i separat form, skønt komponenterne også kan indgives i blandinger i en egnet form, som muliggør en tidsligt forskudt frigivelse, eksempelvis på den måde, at acetylsalicylsyren 30 anvendes i en særdeles langsom resorberbar form, eksempelvis som aluminiumsalt.

Dosisenhederne kan foreligge i form af faste former for lægemidler, såsom kapsler (inkl. mikrokapsler, som indeholder eller ikke indeholder farmaceutiske bærere) tab-35 letter (inkl. drageer og piller) eller stikpiller, idet kapselmaterialet ved anvendelse af kapsler varetager funk-

DK 164638 B

7 tionen som bærer, og indholdet eksempelvis kan foreligge som pulver, gel eller emulsion, dispersion eller opløsning. Derved skal man passe på at drage omsorg for, at frigivelsen af de aktive stoffer sker tidsligt trindelt (sekventielt).

5 Det er især fordelagtigt og enkelt at fremstille orale (perorale) præparater med de to aktive stoffer, som indeholder de beregnede mængder af de aktive stoffer sammen med enhver ønsket farmaceutisk bærer. Også et tilsvarende præparat (stikpiller) til den rektale terapi kan fremstil-10 les og anvendes. Ligeledes er den transdermale og parante-rale (intraperitoneale, intravenøse, subkutane, intramu-skulære) injektion af opløsninger, eksempelvis ved hjælp af egnede flerkammer-injektionsenheder, mulig.

Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen forarbejder 15 man a) et pyrimido-pyrimidin med formlen I ifølge krav 1 eller aktive metabolitter og/eller salte deraf og b) acetylsalicylsyre og/eller dens farmaceutisk acceptable salte, med c) farmaceutisk bærere på gængs måde til skal- eller lagdelte tabletter eller stikpiller med pyrimido-pyrimidin-20 komponenten a) i det ydre, især mavesaftopløselige og komponenten b) i kernen eller i det andet lag i en mindre mavesaft-opløselig, dog tarmsaft-opløselig form, eller kombineres i kapsler, på den måde, at vægtforholdet mellem komponent a) og komponent b) er større end 0,5.

25 Den sekventielle frigivelse (biotilgængelighed) af de aktive stoffer opnås generelt, når man på gængs måde, eksempelvis i tabletter, piller eller granulatlegemer, kombinerer acetylsalicylsyre eller dens farmaceutisk acceptable salte i forsinket form med det ønskede pyrixnido-pyri-30 midin, såsom dipyridamol.

Således kan man eksempelvis fremstille skal-kerne--tabletter svarende til teknikkens stade. Ganske vist nævnes der i det franske patentskrift nr. 2.368.272 foruden andre muligheder nok (krav 7), at dipyridamolet ville kunne være 35 indeholdt i tablettens ydre lag, og acetylsalicylsyren i det indre lag. I beskrivelsen og kravene 6, 8 og 9 angives

DK 164638 B

8 også et antal kombinationsmuligheder, ifølge hvilke dipyri-damolet enten skal være indeholdt i det indre lag og omgivet af et tarmsaftopløseligt lag og acetylsalicylsyren af et mavesaftopløseligt lag, eller præparater hvor både 5 dipyridamolet og acetylsalicylsyren er omgivet af et mave-saftopløseligt lag. Med sådanne farmaceutiske præparater kan man imidlertid ingenlunde opnå den ifølge opfindelsen sekventielle frigivelse af de aktive stoffer.

En kombination, i hvilken dipyridamolet er indeholdt 10 i et ydre mere opløseligt, især mavesaftopløseligt lag, og kernen er dannet af en acetylsalicylsyre-tablet, som er omgivet af et mere uopløseligt, især mavesaftuopløseligt lag, er ikke omtalt i det franske patentskrift nr. 2.368.272. Netop med en sådan kombination opnår man imidlertid de for-15 delagtige medicinske virkninger. Kombinationspræparatet ifølge opfindelsen kan være en flerlagstablet, i hvilken det lag, der indeholder acetylsalicylsyre, sikrer en forsinket frigivelse af acetylsalicylsyren. Ganske specielt fordelagtigt er det dog, når acetylsalicylsyren ikke fore-20 ligger i den mavesyreresistente tabletform, men i form af mavesyreresistente mikrokapsler (granulater eller krystaller) .

Det er nemlig kendt, at anvendelsen af mavesyreuop-løselige acetylsalicylsyretabletter er problematisk, jfr.

25 Biopharmaceutics and relevant pharmacokinetics. Enteric coatings. Drug Intelligence Publications. 1. oplag, 1971, side 158-165 samt Aust. N.Z.J. Med. 6 (1976) 45-50 samt Arthritis and Rheumatism 22 (9): 1034-1037, September 1979. Foruden forøget fækal blodudskillelse fra de med disse 30 behandlede patienter skal nævnes de tidsligt stærkt spredte biotilgængeligheder af acetylsalicylsyren. Ifølge opfindelsen skal en tidsafstand ligge på fra 15 minutter til op til 2 timer, fortrinsvis fra 30 til op til 90 minutter og især fra 40 til 70 minutter mellem frigivelsen af pyrimido-35 -pyrimidin-komponenterne og acetylsalicylsyre-komponenten. Resorptionen af acetylsalicylsyre fra mavesyreresistente

DK 164638 B

9 tabletter i tarmen sker imidlertid med en stor indbyrdes individuel tidslig spredning mellem de behandlede patienter. I mange tilfælde sker resorptionen først efter 12 timers forløb. (Current Therapeutic Research 36- (1984) 5 811-818, JAMA 193 (1965) 93-98 samt Pharmacology 30 (1985) 40-44. Yderligere kan sådanne tabletter akkumuleres i mave--tarm-regionen og derved fremkalde betydelige gastrointe-stinale bivirkninger, jfr. J. of Rheum. 11 (1984) 250-251.

I modsætning hertil har småkornede mavesyreuopløse-10 lige granulater som bekendt forskellige fordele, jfr. eksempelvis Current Therapeutic Research 36 (1984) 811-818,

European J. Clin. Pharmacol. 14 (1978) 351-355 og Eur. J.

Clin. Pharmacol. 27 (1984) 74. Ved granulater udgør absorptionsforsinkelsen fra 0,5 til 1 time ved samtidig væ-15 sentligt mindre indbyrdes individuelle svingninger mellem patienterne. En tidsafstand på fra 0,5 til 1 time er fremragende egnet til opnåelsen af de terapeutiske effekter, der kan tilvejebringes ifølge opfindelsen. En yderligere fordel er det, at tidsafstanden mellem frigivelserne af 20 aktivt stof ifølge opfindelsen med mavesyreresistente granulater bliver særdeles pålideligt overholdt. Da de over-additive antithrombotiske virkninger, der kan tilvejebringes med præparatet ifølge opfindelsen, netop er afhængige af tidsintervallet mellem de to indgifter af aktivt stof og 25 frigivelsen, egner mavesyreresistente granulater sig især til fremstillingen af kombinationspræparaterne ifølge opfindelsen. Sådanne acetylsalicylsyregranuler kan foreligge både som blanding med pyrimido-pyrimidin-komponenten i en indifferent farmaceutisk bærer, såsom i en kapsel, og i to 30 forskellige dele i dosisenheden. Præparater, som indeholder acetylsalicylsyre i en form, som tillader en langsom frigivelse i mavesyre, kan imidlertid også finde anvendelse. Eksempelvis kan acetylsalicylsyren være bundet til ionbyttere eller egnede metalioner, såsom aluminium, eller være ad-3i5 sorberet til forsinkelsesmateriale eller være indesluttet i forsinkelsesmateriale (eksempelvis på cellulose- eller

DK 164638B

10 polystyrenharpiksbasis), som eksempelvis befinder sig i det indre af en tablet med svøb, hvis svøb indeholder py-r imido-pyr imidin.

De farmaceutiske præparater ifølge opfindelsen 5 kan fremstilles ved gængse fremgangsmåder såsom presse-, dyppe- eller hvirvellagsmetoder eller kedeldrageering, og indeholder bæremidler og andre gængse hjælpestoffer, såsom stivelse, eksempelvis kartoffel-, majs- eller hvedestivelse, cellulose eller dets derivater, især mikrokry-10 stallinsk cellulose, siliciumdioxid, forskellige sukkerarter, såsom mælkesukker, magnesiumcarbonat og/eller cal-ciumphosphater. Drageeringsopløsningen består sædvanligvis af sukkerarter og/eller stivelsessirup og indeholder gelatine, gummiarabicum, polyvinylpyrrolidon, syntetiske 15 celluloseestere, overfladeaktive substanser, blødgørings-midler, og/eller pigmenter o.lign. tilsætninger,svarende til teknikkens stade. Til fremstilling af lægemiddelformerne kan man anvende ethvert af de gængse flyderegulerings, .smøre- og glidemidler, såsom magnesiumstearat og slippe-20 midler.

Vægtforholdet mellem pyrimido-pyrimidin-komponen-ten og acetylsalicylsyre kan svinge indenfor de angivne grænser. Det optimale forhold kan eksempelvis findes ved hjælp af den nedenfor beskrevne eksperimentelle fremgangs-25 måde. På grund af den overadditive effekt er det muligt at mindske doseringen af de enkelte komponenter væsentligt, nemlig langt under de doseringer, som ville være nødvendige til opnåelse af den samme effekt med enkelt indgifter af acetylsalicylsyre eller pyrimido-pyrimidin eller med den 30 kombinerede samtidige indgivelse af acetylsalicylsyre og pyrimido-pyrimidin. Som følge af nedsættelsen af doseringerne ophører de kendte uforenelighedsreaktioner af pyrimido-pyri-midiner samt af acetylsalicylsyre, eller de reduceres tydeligt. Især bliver det med opfindelsen muligt at indstille 35 vægtforholdet mellem dipyridamol og acetylsalicylsyre til en værdi, større end 0,5. Som det vises nedenfor, kan den

DK 164638 B

11 terapeutiske effekt ved forøgelsen af den relative acetylsal icylsyrevægtandel i kombinationen ifølge opfindelsen til værdier på over 2 (svarende til et forhold mellem komponent a) til b) på under 0,5) nemlig ikke længere øges. Til op-5 nåelse af den overadditive effekt, der kan tilvejebringes med opfindelsen, er det altså fuldstændigt unødvendigt og med henblik på acetylsalicylsyrens bivirkninger endog skadeligt at forøge den relative acetylsalicylsyreandel til det 2- til 3-dobbelte eller mere, som det foreslås i det franske 10 patentskrift nr. 2.390.959. Tværtimod er vægtforholdet mellem pyrimido-pyrimidin og acetylsalicylsyre i kombinationspræparatet ifølge den foreliggende opfindelse større end 0,5 og op til 30, fortrinsvis fra 0,6 til 10, og især ligger det fra 0,6 til 3.

15 Man kan også finde den optimale tidsafstand mellem frigivelsen af pyrimido-pyrimidin-komponenten og acetylsalicyl syrekomponenten og den optimale frigivelseshastighed fra de galeniske præparater ved anvendelse af de beskrevne eksperimentelle fremgangsmåder.

20 Den dosering, der skal anvendes, er selvfølgelig afhængig af forskellige faktorer, såsom de levende væsener, der skal behandles (dvs. mennesker eller dyr, alder, vægt, almindelig sundhedstilstand), symptomernes sværhed, den sygdom, der skal behandles, (såfremt eksisterende) arten af 25 den ledsagende behandling med andre lægemidler og behandlingens hyppighed. Doseringerne indgives almindeligvis op til 5 gange pr. dag. og fortrinsvis fra 1 gang til 3 gange pr. dag. Mængden af bestanddelene skal ligge indenfor det virksomme doseringsområde, som er acceptabelt for det levende 30 væsen, der skal behandles.

Eksempelvis udgør den foretrukne dosis acetylsalicylsyre hos mennesker ved indgivelse alene to til tre gange om dagen fra 500 til 2000, fortrinsvis 1000 mg. Den foretrukne dosis dipyridamol udgør hos mennesker ved indgift alene 2-3 35 gange dagligt fra 10-150, især fra 25 mg til 80 mg. En egnet behandling består følgelig eksempelvis i indgiften af én, 12

DK 164638 B

to eller flere, fortrinsvis fra tre til otte enkelte doseringer af kombinationspræparaterne ifølge opfindelsen på hver gang fra 10 til 150, fortrinsvis mindst 25 og især op til 75 mg dipyridamol og fra 10 til under 300; eksempelvis 5 til 280, fortrinsvis op til 80 mg acetylsalicylsyre, idet mængden naturligt er afhængig af enkeltdoseringernes antal og også af den sygdom, der skal behandles, og en enkeltdosering eksempelvis også kan bestå af flere, samtidigt indgivne tabletter. Dette gælder også for kombinationen ifølge opfin-10 delsen med mopidamol, af hvilket der indgives almindeligvis fra 100 til 600, fortrinsvis fra 200 til 250 mg sammen med fra 10 til under 1200, fortrinsvis fra 100 til 300 mg eller 500 mg acetylsalicylsyre. Udfra disse angivelser kan man let beregne mængderne i 3-kombinationen af acetylsalicylsyre 15 og 2 pyrimido-pyrimidiner.

Midlerne ifølge opfindelsen kan anvendes på samme måde som kendte antithrombotiske midler og midler, som in-hiberer blodpladeaggregeringen samt metastasevirkningen.

In vivo-anvendelser omfatter indgift til mennesker og dyr 20 for at hindre dannelsen af venøst og arterielt størknet blod, såsom til hindring af forbigående iskæmiske anfald og ved langtidsprofylaksen efter hjerteinfarkter og slagtilfælde, samt ved arteriosklerose, men også ved operationsefterbehandling til hindring af postoperative thromboser 25 samt ved efterbehandlingen af kræft til hindring eller formindskelse af metastasevirkningen. Også anvendelse hos patienter, som er sluttet til hjerte-lungemaskiner eller til nyredialyse, er mulig, ligeledes hos patienter med kunstige hjerteklapper og karproteser. Også anvendelsen 30 til de enkelte bestanddeles egentlige indikationer, eksempelvis forbedringer af iltforsyningen til hjertemusklen ved angina pectoris samt til smertelindring og hæmning af betændelse, er mulig.

35

O

DK 164638 B

13

In vivo undersøgelser

Kombinationen af dipyridamol eller, .mopidamol og acetylsalicylsyre vurderes in vivo ved af en forsøgsanordning, ved hvilken der dannes en intravaskulær thrombose 5 med en laser i arteriolerne eller venderne i mesenteriet hos rotter. Bedømmelsen sker ved hjælp af vitalmikroskopisk analyse, jfr. Nature, 218, (1968) 887 og Haemostasis 13 (1983) 61 og IRCS Med. Sci. 12 (1984) 91.

Prøvestofferne indgives i 0,9% natriumchlorid-op-10 løsning (indeholder 1% carboxymethylcellulose (Serva, Heidelberg)) , nemlig enten pr. os, intraperitonealt eller intravenøst. Kontroldyr behandles på tilsvarende måde, men uden prøvestoffer. Som forsøgsdyr anvendes han- eller hun-Sprague Dawley- eller Vistarrotter (legemsvægt på ca. 200 15 g). De dyr, der skal undersøges, præmedicineres med 0,1 mg atropinum sulf. sol. s.c. og anæstetiseres med 100 mg keta-minhydrochlorid og 4 mg xylazin pr. kg legemsvægt i.p. Til undersøgelse tjener arterioler fra det med afluftet para-finolie overtrukne mesenterie med en diameter på ca. 13 20 mikrometer. Strålen fra 4 W Argon-laseren (firma Spectra Physics, Darmstadt) føres ved hjælp af et stråleadoptions-og -justeringsanlæg (Fa. BTG, Miinchen) koaksialt ind i den inverterede strålegang i et mikroskop (ICM 405, LD--Epipland 40/0,60; Fa. Zeiss, Oberkochen, Tyskland). Den 25 anvendte bølgelængde er 514,5 nm med en energi ovenfor objektet på 30,5 mW. Eksponeringstiden pr. enkeltskud er 1/15 sek. Alle måleforløb optages pr. videokamera (Trini-con-rør, Sony, Koln) og indlæses på en båndoptager (Sony, U-matic 3/4").

30 Forsøgsstofferne indgives til forsøgsdyrene i for skellige doseringer oralt 1 time, ved i.v. indgift 10 min. før forsøgsstarten. Kontroldyr får den samme mængde af placeboen. Indgiften af stofferne sker 1) som enkeltindgift, 2) sammen som kombination eller 3) først acetylsalicylsyre 35 og efter én times forløb dipyridamol eller morpidamol samt 4) først dipyridamol eller mopidamol og efter én times for-

O

DK 164638 B

14 løb acetylsalicylsyre (tabel 1). I tabel II vises indflydelsen af forskellige tidsintervaller.

Bedømmelse: 5 Man tæller antallet af skud for at inducere en defineret thrombus. Skudfrekvensen andrager en læsion med et mellemrum på 2 minutter, idet alle thrombér med en mindste størrelse på 1/4 karradius, som dannes i iagttagelsestidsrummet, optælles og opmåles.

10 Den statistiske bedømmelse af forsøgsresultaterne 2 sker ved hjælp af 9C -testen (L. Cavalli-Sforza, Biometrie, Stuttgart, 1969, side 49 ff).

Resultater: 15 Resultaterne er dokumenteret i tabel I. Enkeltind- gifterne på 5 mg pr. kg pr. os acetylsalicylsyre eller di-pyridamol eller mopidamol er ikke signifikant virksomme.

Heller ikke den samtidige indgift af hver gang 5 mg pr. kg dipyridamol og acetylsalicylsyre giver nogerTantithrombo-20 tisk virkning i lasermodellen. Dette er også tilfældet, når man først indgiver acetylsalicylsyre og efter én times forløb dipyridamol. Derimod har anvendelsen af først dipyridamol og efter én times forløb acetylsalicylsyre (hver gang 5 mg pr. kg) en dosisafhængig, signifikant virkning af arte-25 rioler og venoler. Den overadditive effekt af denne tidsligt trindelte indgift i sammenligning med enkeltindgiften dokumenterer sig tydeligt i den procentuelle ændring med henblik på kontroldyrene (tabel I) og kan desuden øges ved kronisk langtidsindgift i én uge. Sammenlignet dermed kan man 30 ved anvendelse af en kombination, bestående af dipyridamol og en høj acetylsalicylsyreandel, ikke mere opnå nogen stigning af den antithrombotiske virkning, nemlig uafhængigt af, om der indgives samtidigt eller i rækkefølgen ifølge opfindelsen.

35 Resultaterne, der er opført på lister i tabel II, viser det optimale tidsrum mellem de to enkelt indgifter.

O

DK 164638 B

15

Den tidsligt trindelte frigivelse kan gennemføres ved hjælp af en i handelen gængs perfusorenhed med to separat styrbare kamre (eksempelvis fra firmaet Braun, Melsungen, Tyskland med tidskontaktur til separat tilkobling 5 af motorfremføring). De to kamre i perfusorenheden fyldes hver gang med dipyridamol-opløsning (svarende til 5 mg dipyridamol pr. kg rotte) eller med acetylsalicylsyre-op-løsning (svarende til 5 mg pr. kg) (natriumchloridopløs-ning som ovenfor). 20 minutter efter injektionen af dipy-10 ridamolopløsningen i halevenen sker injektionen af ace.tyl-salicylsyre-opløsningen, styret af kontakturet. I sammenligningseksperimentet injiceres de to kamre samtidigt. Resultaterne svarer til de måleværdier, som fås efter oral indgift, dvs., at der ved den tidsligt trindelte anvendelse 15 tilvejebringes virkninger, som ligger langt over dem, som fås ved samtidig indgift.

Farmaceutiske præparater

Til opnåelse af de overadditive effekter kan man 2o også anvende suspensioner og faste præparater, som er egnet til den orale, perorale og rektale indgift. Eksempler på sådanne præparater til anvendelsen på mennesker indeholder x mg dipyridamol og/eller mopidamolsom rent stof, eller <R) som i handelen gængse færdigpræparater (Persantin^ drageer 25 eller ampulopløsning fra firmaet Dr. Karl Thomae GmbH,

Biberach, Tyskland) eller dele af disse færdigpræparater, kombineret med y mg acetylsalicylsyre i form af mikrokap-sler (-granulater), som kan fås i handelen, (type M80D fra firma Rohm Pharma GmbH, Weiterstadt, Tyskland, Encaprin®, Procter 30 & Gamble, Connecticut, USA). De farmaceutiske bærere i disse kombinationer er ved opvarmning stivnede geler af (a) 20 vægtprocent gelatine / 1 vægtprocent glycerol i vand samt b) 1 vægtdel agarose i vand samt c) 10 vægtprocent ethyl-cellulose T50 (Hercules GmbH, Hamburg) i acetone/vand (vægt-35 forhold 80:20),'hvergang med 8 vægtprocent irørt dipyridamol eller mopidamol eller også handelen gængse gelatinekapsler 16

DK 164638 B

O

(til anvendelse på mennesker og store dyr fortrinsvis størrelse 0 (firma Kapsugel, Basel)).

De farmaceutiske præparater (se tabel III, eksempeler 1 til 6) indgives i 10 ml mavesaft fra hunde eller 10 ml 5 0,1 normal saltsyre og holdes ved 37°C under skånende omrøring. Portioner af den ovenstående væske udtages til visse tidsintervaller og adskilles og klassificeres ved hjælp af højtryksvæskechromatografi analogt til forskriften i Journal of Chromatography 231 (1982) 216-221. På analog måde 10 anvendes de farmaceutiske præparater i toIvfingertarmsvæske (hund) eller natriumhydrogencarbonat-opløsning (pH-værdien = 7,4) .

In vivo-forsøg på rotter 15 Til anvendelsen reduceres bestanddelene i de i eks.

1 til 6 nævnte præparater hver· gang til de i tabel I beskrevne mængder af aktivt stof, eller man anvender kapsler med størrelsen 4 og 5. Tabel I viser, at der med præparaterne ifølge opfindelsen X, XI og XIII opnås en overadditiv an-20 tithrombotisk virkning, som er langt større end ved samtidig indgift af de samme mængder af de to komponenter. Dermed bliver ved endog forbedret virkning en betydelig formindskelse af den indgivne acetylsalicylsyre og også det indgivne pyrimi-do-pyrimidin og dermed en betydeligt lavere belastning af le-25 gernet mulig.

30 35

DK 164638 B

17

-U

<4-1

♦H

O' (—4 ·—( rH r-4 r-4 H >H

c 4J O O 0_ 0_ o O O

$ O O O O O O O

Cn B v v v v V V V

3 cm a a (¾ λ ft ft ft

'α! X

.* cn S 8,,1^2288^853 5 S 8

TJ CP 0 I I

O) C Ό H

> v4 H 4J

k 0 C +> S c k J2 3 iraocomcMCOinoo o g g >, igS oi-Hoor-coo o η -“i & ° d.

5 8^2 ' O O O o O O θ' -4 H

>, k fe -H 4J <0 I

s g g s § § g 2 s 8 s q s s a s 2 S 5 'i tn "cn^ooooooo o o o o o o •U 0 u rtt-moocNOLncNr^r-' o ω g ijj 0) Sixi-ioinr'cnONCM co cn cn ^ cn cd h S < CN CN CN r-4 CN CN CN CN CO CN ^ _ n 01 "1 r-4 O k 0) k i >i 'ni -t-1 'dJ-H^.CON'N'N'N'N'N' Ν' Ν' Ν' Ν' Ν' Jjjj!

Ο •PMkN'CNCNCNCNCNCN CN CN CN CN CN CN

+J C « 0)

£5 0) < r-4 C

•H

Ό ω

3 u H C

.§<0 4JkcN<DvO<D<0<O<0 CO CD co VO cD cO

k C C >1 rH

8! ti ^ I 0) o 2 i Ό ® I» DUO 00 g «^OD'dicnm^ocNiriLnLnoLncNiOLn m- <noi in 3 c o D1 £ « · ηγν + γΗ<^+ σι o) k « o ex > a ++ + ·<0 a _

Ck cn CP O

Cn'N i) 4J r-H r-4 '—I r-4 5 £ a)d)d>Ed)60)E0) kd) kd) kp * p

'cjm n kkk<0k<0k<0k Ok Ok O )< OH

5 JS Λ >,>i>it0>iU)>iCn>i <H >, <H >, ή >. >k>.

l.*é <1> tø tø W tø tø tø W

h« Π rH.HrH+rH+rH+.-* tø r-ί W >H tø r-H W ^ •H W y K^K^jv.s.S^^dJ^GJ^tøShtø^t1

^ ( i rH O o O cHU C-IO <—I U <—I £ O r-jEO ^ ^ B

fe 0 -ri -Η -Η O -Η O -Η O -Η O -H -r4 O -Η -H O k k k j

C. C ,_| H .H r-4 g H g .H g r-4 i+J-H g+JrH

t0Oca<0<0<0<0<0<0<0i0S O ® 10 ,2 _i m S —I 5Ϊ h a g μ tn m ό m B » d μ Oh » oh o OH » g ^ “

O 5 S H r-4 r-4 -H r-4 *H r-4 -H r-4 t4 rH -Η H H H « H

*, ij t) s- krH kik k >i k k r*-i k k S*i k k ik Ό k ni ΰ >.3 i? .U -U >1 4-) >1 4-) ik -U >i0)4-> >id)4-> >i 0) ^ diHm O C CUfta) tø tø & tø & tø Clctø ft-Ptø ft 4-* tø B^iln ^ίίπ

H O -Η η O U ο ·γ4 0 ·Ηϋ -HU -H <4-4 O -Η <4-4 U -H<kO O <H O

W S Q S < < < Q < o< Q< QOJid Q 0) « O0)<fl 2Φ<0

M

« 4H H

^ Μ Η Η H HH «HH

O kHH>HHH* S ΰ ΰ {g O HH>>>>W><: X ^ *· EH fe

DK 164638 B

18

Tabel II: Virkning af pyrimido-pyrimidin og/eller acetylsalicylsyre ved forskellig indgiftrækkefølge på en LASER-induceret thrombose hos rotter

Indflydelsen af tidsintervallerne mellem iridgifterne af stofferne.

Dosering hver gang 5 mg/kg dipyridamol p.o., derpå efter forløbet af den angivne tid 5 mg/kg acetylsalicylsyre p.o.

% Forandring

Antal Antal i forhold

Stof_dyr_læsioner x_SEM til kontrol X -Test

Kontrol (Placebo) 12 48 2,17 0,01 0 min 6 24 2,25 0,19 4 10 min 6 24 2,27 0,22 5 20 min 6 24 2,56 0,18 18 30 min 6 24 3,23 0,21 49 p<0,01 60 min 6 24 ‘3,27 0,20 51 p<0,01 90 min 4 16 3,05 0,22 41 p<0,01 120 min 4 16 2,30 0,25 6 p<0,01

DK 164638 B

19

CO

I r-i

H

E (Λ II •H ~ n].H^ in O O in O O m O O ιΛΟΟ ιΛΟΟ ιηοο

OgrQ Η Γ0 H ro ·—I ro r-iro H ro ClC2

Ti — g ’· > cn σι o mr-o co o o inoo g ^ o o o o •5 ·Λ 'jco o ^ co o oooo co o o ror'O ooo

tøwO. Η H HH HH HHHH

>i H

H fi n '·.

H O rf Ό Ή r—i >1 U I ^ ^ ^ H D1 Μ X X X X * * (0 -H Q) [Λ U Jj ^~s ^ —» i—» -—· —· —. *— ' ' ' ' ' s f-imm idoo ιο o o lo o o moo moo looo <D η co η η η η η η »nro r-\ m φ ' *-» *—«» *w- ' W 'W' "wr -W- S-r *—* " U>iQ) OOO OOO OOO ooo ooo ooo < (0 >

<#> Q

o Η Η Η Η H 00 i o oooo s

"gflOm^iO'O M

•d S i 3 3 3 S 3 >1T3 Vi Ti S^i £ H -- d ftH >1 H >1 >1 >* >[ 5 ooaaaftftft „ H rt Η 0 Η Η Η H S? Η^-σεΌΌ'σΌ j* .§ .S o o σ> σ g> }? ·* ‘d d s s s e e s t >,HinOOOOO o ρ,ΌΓ-ιηιηΟΌΟΜ c* Η · H gi i φ "dl Q Q Q Q Ο O rT* UTJOOOOOO W-q· HHææroooraæ -j«.

H02 2 2 2 5 S d p* HCD'OO'Og'g' ς! >,heeeeee

ΟΜΗΓ'ΟΐΟΟΟΟ O

υ >, o ooo^io cm ο,,-j .sc tn H rH 10 01 S1 O' > - i h h +j ω H H I £ H K,

2 CgOOm 0) JL

ί oehS ω £ 3 <u -1 ^ "i ? h

m C (U 7! -P

Ur—i rH *H W C «3 *H O Q 0 ^ -H

ιβΜΟ) OJ -O CO 0 S b ,¾ CO 2 -M

EOiW W 18 i-1 9* 4-1 1? m S i?!1-· uuQj CL H g <8 [fl Οι >ι Ό Pfl (rtfljnJ It3 OJ 0 O1 3 Ό Ή ί H D1 hi> £Ja;2 * O ω < WDT5IH0 >1^ 0) 10 >0) ΰ H <0 10 M τ! E «.

H g h h g o a

oj ajr-icMco^rmo OO

η ίο „ <3 Λί

gi ω K

DK 164638 B

20

Formelblad R4 ' N r3 I I T 1 ri R2

Dipyridamol (I a) R·^ = R2 = - N (CH2-<2H2-<2H^ 2 R2 = R4 = N^~~^

Mopidamol (I b) R·*" = R2 = - N (CH2-CH2-OH) 2

R2 = H

4 /-\ R = - N > _v_y I c: R1 og R2 = H R3 = - N (CH2-CH2-OH)2 4 '-\ \_/ 1 4 2 /-\ I d: R og R = H R = - N > — v_/ R2 = - N (CH2-CH2-OH)2

Claims

1. Kombinationspræparat indeholdende et pyrimido--pyrimidin og acetylsalicylsyre, kendetegnet ved, at det indeholder 5 a) et pyrimido-pyrimidin med formlen R4 j*Yy r3 m hvori mindst én af grupperne R1 og R3 er gruppen -N(CH2“CHR5-OH)2/ hvor R5 = hydrogen eller methyl, og mindst 15 én af grupperne R2 og R4 er gruppen /—-v w som i p-stillingen til nitrogenatomet også kan være afbrudt 20 af oxygen, og hvori de eventuelle øvrige grupper R1, R2, R3 og R4 er hydrogen, eller aktive metabolitter og/eller salte deraf og b) acetylsalicylsyre og/eller dens farmaceutisk acceptable salte, 25 idet vægtforholdet mellem komponenten a) og komponenten b) er større end 0,5, sammen med c) en farmaceutisk bærer, der er valgt og udformet på en sådan måde, at komponenten a) bliver frigivet først fra formuleringen, og komponenten b) bliver frigivet efter et 30 tidsinterval på 15 minutter til 2 timer derefter.

2. Præparat ifølge krav l, kendetegnet ved, at komponenten a) foreligger i form af dipyridamol.

3. Præparat ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at det foreligger i en doseringsenhed, der skal 35 indgives oralt eller rektalt, fortrinsvis en enhed, som indeholder fra 10 til 150, fortrinsvis fra 25 til 75 mg DK 164638 B 22 dipyridamol og fra 10 til under 300 mg acetylsalicylsyrekom-ponent eller fra 100 til 600, fortrinsvis fra 200 til 250 mg mopidamol og fra 10 til under 1200, fortrinsvis fra 100 til 500 mg acetylsalicylsyre-komponent.

4. Præparat ifølge krav 1-3, kendetegnet ved, at grænseværdien for vægtforholdet mellem komponent a) og komponent b) ligger mellem 30, specielt 10, især 3, og 0,6.

5. Præparat ifølge krav 1-4, kendetegnet 10 ved, at bærematerialet til acetylsalicylsyrekomponenten indeholder mindst ét forsinkelsesmiddel.

6. Præparat ifølge krav 1-5, kendetegnet ved, at det foreligger i form af mikrokapsler, idet kapselmaterialet til acetylsalicylsyrekomponenten er mavesaft- 15 resistent eller muliggør en forsinket frigivelse.

7. Præparat ifølge krav 1-6, kendetegnet ved, at det foreligger i form af en skal- eller lagdelt tablet, hvori pyrimido-pyrimidin-komponenten er indeholdt i det lag, der skal resorberes hurtigst.

8. Anvendelse af a) pyrimido-pyrimidiner med formlen I ifølge krav 1 eller aktive metabolitter og/eller salte deraf, og b) acetylsalicylsyre og/eller dens farmaceutisk acceptable salte, idet vægtforholdet mellem komponenten a) og 25 komponenten b) er større end 0,5, c) sammen med farmaceutiske bærere, der er valgt og udformet på en sådan måde, at komponenten a) bliver frigivet først fra formuleringen, og komponenten b) bliver frigivet efter et tidsinterval på 15 minutter til 2 timer derefter, 30 til fremstilling af et kombinationspræparat.

9. Fremgangsmåde til fremstilling af kombinationspræparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man forarbejder a) et pyrimido-pyrimidin med formlen I ifølge krav 1 eller aktive metabolitter og/eller salte deraf og b) 35 acetylsalicylsyre og/eller dens farmaceutisk acceptable salte, med c) farmaceutisk bærere på gængs måde til skal- DK 164638 B 23 eller lagdelte tabletter eller stikpiller med pyrimido-pyri-midinkomponenten a) i det ydre, især mavesaftopløselige og komponenten b) i kernen eller i det andet lag i en mindre mavesaft-opløselig, dog tarmsaft-opløselig form, eller kom-5 bineres i kapsler, på den måde, at vægtforholdet mellem komponent a) og komponent b) er større end 0,5.

10. Fremgangsmåde ifølge krav 9, kendetegnet ved, at komponenten a) foreligger i form af dipyri-damol.

11. Fremgangsmåde ifølge krav 9 eller 10, ken detegnet ved, at man fremstiller en doseringsenhed til oral eller rektal indgift, fortrinsvis en enhed, som indeholder fra 10 til 150, fortrinsvis fra 25 til 75 mg dipyridamol og fra 10 til under 300 mg acetylsalicylsyrekom- 15 ponent eller fra 100 til 600, fortrinsvis fra 200 til 250 mg mopidamol og fra 10 til under 1200, fortrinsvis fra 100 til 500 mg acetylsalicylsyre-komponent.

12. Fremgangsmåde ifølge krav 9-11, kendetegnet ved, at grænseværdien for vægtforholdet mellem kom- 20 ponent a) og komponent b) ligger mellem 30, specielt 10, især 3, og 0,6.

13. Fremgangsmåde ifølge krav 9-12, kendetegnet ved, at bærermaterialet til acetylsalicylsyrekomponen-ten indeholder mindst ét forsinkelsesmiddel.

14. Fremgangsmåde ifølge krav 9-13, kendeteg net ved, at præparatet fremstilles i form af mikrokapsler, idet kapselmaterialet til acetylsalicylsyrekomponenten er mavesaftresistent eller muliggør en forsinket frigivelse.

15. Fremgangsmåde ifølge krav 9-14, kendeteg- 30 net ved, at præparatet fremstilles i form af en skaleller lagdelt tablet, hvori pyrimido-pyrimidin-komponenten er indeholdt i det lag, der skal resorberes hurtigst. 35