DK162639B

DK162639B - Bis-dioxopiperazin-derivater, fremgangsmaade til fremstilling heraf og antitumormiddel

Info

Publication number: DK162639B
Application number: DK493384A
Authority: DK
Inventors: Jun-Chao Cai; Muneaki Takase
Original assignee: Zenyaku Kogyo Kk
Priority date: 1983-10-31
Filing date: 1984-10-16
Publication date: 1991-11-25
Also published as: EP0140327A3; CA1244430A; AU571273B2; NO170682B; ES537206A0; EP0140327B1; JPS6097963A; DE3482322D1; NO170682C; US4650799A; DK162639C; EP0140327A2; NO844183L; AU3441684A; JPS6334153B2; ES8507513A1; DK493384A; DK493384D0

Description

DK 162639 B

i 5 Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte bis-dioxopiperazin-derivater og ikke-toxiske salte deraf, en fremgangsmåde til fremstilling deraf og anti-tumor-midler, som indeholder dem.

10 Bis-dioxopiperazinderivaterne ifølge den foreliggende opfindelse angives ved den nedenstående almene formel (I): / Π \ ? ν-Λ R-C-0-CH2-N n-ch2— «) 15 {/ K 0 )i hvori R er en alkylgruppe med fra 1 til 17 kulstofatomer, en cycloalkylgruppe med 3 til 7 kulstofatomer; en mono- eller dihalogeneret lavere alkylgruppe; en 20 monocarboxyleret lavere alkylgruppe; en lavere alkyl gruppe monosubstitueret med alkoxycarbonyl med 2 til 5 kulstofatomer; en lavere alkoxy lavere alkylgruppe; en phenoxy lavere alkylgruppe; en phenoxy lavere alkylgruppe substitueret på phenylkærnen med 1 til 3 halogen-25 atomer; en naphthyloxy lavere alkylgruppe; en phenylthio lavere alkylgruppe; en phenylthio lavere alkylgruppe monosubstitueret på phenylkærnen med halogen; en phenyl lavere alkylgruppe; en phenyl lavere alkylgruppe monosubstitueret på phenylkærnen med halogen, lavere alkyl 30 eller hydroxy; en naphtyl lavere alkylgruppe; en phenyl lavere alkenylgruppe; en phenyl lavere alkenylgruppe mono- eller disubstitueret på phenylkærnen med hydroxy, lavere alkoxy eller acyloxy med 2 til 5 kulstofatomer; en phenylgruppe; en phenylgruppe mono- eller disubstitu- 2

DK 162639 B

1 eret med halogen, lavere alkyl, lavere alkoxy, hydroxy, acyloxy med 2 til 5 kulstofatomer, methylendioxy, nitro, amino, methansulfonylamino eller carboxy; en naphtyl-gruppe? en heterocyclisk gruppe valgt fra gruppen omfat-5 tende pyridyl, furyl og thienyl; en alkoxygruppe med 1 til 8 kulstofatomer; en phenyl lavere alkoxygruppe; en phenyl lavere alkoxygruppe monosubstitueret på phe-nylkærnen med nitro eller lavere alkoxy; en phenoxygrup-pe; eller en phenoxygruppe monosubstitueret på phenyl-10 kærnen med halogen; eller et ugiftigt salt heraf.

I "Abstract, 8th International Congress of Pharmacology p 441, 1981" er der omtalt et stof 1,2-bis(4-morpholino-methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, der er en analog 15 kemisk forbindelse til de kemiske forbindelser ifølge opfindelsen og hvis kliniske virkningsfuldhed som antitumor og radiopotenserende middel er vurderet. Imidlertid er der med den kendte forbindelse et fremstillingsproblem, da den er ekstremt ustabil i prote, polære 20 opløsningsmidler såsom vand og lavere alkohol.

Baseret på de attraktive biologiske aktiviteter for de kendte bis-dioxopiperazinderivater er der udført yderligere synteseundersøgelse på disse derivater med 25 den fremragende aktivitet og farmaceutisk fordelagtige egenskaber. Det har vist sig, at de ovennævnte bis-dioxopiperazinderivater med den almene form (I) udviser bredere spectra af anti-tumoraktivitet, anti-metastatisk aktivitet, farmaceutisk fordelagtig stabilitet i prote, 30 polære opløsningsmidler, og lavere toxicitet sammenlignet med den kendte forbindelse.

De ovennævnte udtryk "lavere alkyl", "lavere alkoxy" og "lavere alkenyl" betegner henholdsvis alkyl med 3

DK 162639 B

1 1-4 carbonatomer, alkoxy med 1-4 carbonatomer og alkenyl med 2-4 carbonatomer. Alkylradikalet med 1-17 carbonatomer udvælges fra gruppen med en normal eller forgrenet carbonkæde såsom methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, 5 n-butyl, isobutyl, tert.butyl, pentadecyl, hexadecyl, heptadecyl. Cycloalkyl-radikalet med 3-7 carbonatomer udvælges fra gruppen bestående af cyclopentyl, cyclo-hexyl, cycloheptyl. Halogen-lavere alkylradikalet udvælges fra gruppen bestående af chlormethyl, brommethyl, 10 dichlormethyl, bromethyl. Carboxy-lavere alkylradikalet udvælges fra gruppen bestående af carboxyethyl, carboxy-propyl. Det lavere alkylradikal substitueret med alkyl-oxycarbonyl med 2-5 carbonatomer udvælges fra gruppen bestående af methoxycarbonylmethyl, methoxycarbonyl-15 ethyl, ethoxycarbonyl-ethyl, methoxycarbonylpropyl.

Det lavere alkoxy-lavere alkylradikal udvælges fra gruppen bestående af methoxymethyl, methoxyethyl, ethoxymethyl. Det substituerede eller usubstituerede phenoxy-lavere alkyl-radikal udvælges fra gruppen bestå-20 ende af phenoxymethy1, phenoxyethyl, p-chlorphenoxyme- thyl, 2,4-dichlorphenoxy-methyl, 2,4,5-trichlorphenoxy-methyl, 1-p-chlorphenoxy-l-methylethyl. Naphthyl-lavere alkylradikalet udvælges fra gruppen bestående af 2-naph-thyloxymethyl, 2-naphthyl-oxyethyl. Det substituerede 25 eller usubstituerede phenylthio-lavere alkylradikal udvælges fra gruppen bestående af phenylthiomethyl, p-bromphenylthiomethyl, p-fluorphenylthiomethyl. Det substituerede eller usubstituerede phenyl-lavere alkylradikal udvælges fra gruppen bestående af benzyl, phen-30 ethyl, o-chlorbenzyl, o-brombenzyl, o-tolylmethyl, «£-hydroxybenzyl. Naphthyl-lavere alkylradikalet udvælges fra gruppen indehold ende 1-naphthylmethyl, 2-naphthyl-ethyl. Det substituerede eller usubstituerede phenyl-lavere alkenylradikal udvælges fra gruppen indeholdende 4

DK 162639 B

1 styryl, cinnamyl, 3,4-dihydroxystyryl, p-methoxystyryl, 3,4-dimethoxystyryl, 3f4-diacetoxystyryl. Det substituerede eller usubstituerede phenyl-radikal udvælges fra gruppen indeholdende phenyl, o-chlorphenyl, o-fluor-5 phenyl, p-chlor-phenyl, p-bromphenyl, o-tolyl, m-tolyl, o-methoxyphenyl, 3,4-dihydroxy-phenyl, 3,4-diacetoxyphe-nyl, 3,4-methylen-dioxyphenyl, p-nitrophenyl, p-cyano-phenyl, p-aminopheny1, p-methan-sulfonylaminophenyl, o-carboxyphenyl. Naphthylradikalet udvælges fra gruppen 10 indeholdende 1-naphthyl, 2-naphthyl. Det heterocykliske radikal udvælges fra gruppen indeholdende 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2-furyl, 3-furyl, 2-thienyl. Alkoxyradika-let med 1-8 carbonatomer udvælges fra gruppen indeholdende methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopro-15 poxy, n-butoxy, isobutoxy, tert.butoxy, 2-ethylhexyloxy.

Det substituerede eller usubstituerede phenyl-lavere alkoxyradikal udvælges fra gruppen indeholdende ben-zyloxy, p-nitrobenzyloxy, o-methoxybenzyloxy, phene-thyloxy. Det substituerede eller usubstituerede phenoxy-20 radikal udvælges fra gruppen indeholdende phenoxy, 0- chlorphenoxy.

Forbindelser ifølge den foreliggende opfindelse er f.eks. som følger: 25 . 1,2-bis(4-acetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l-ylJe than; . 1,2-bis(4-n-butyryloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1- yl)ethan; . 1,2-bis(4-isovaleryloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 30 1-yl)ethan; . 1,2-bis(4-pivaloyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan; . 1,2-bis(4-palmitoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan; s

DK 162639 B

'1 . 1,2-bis(4-stearoyloxymethyl-3/5-dioxopiperazin- 1-yl) ethan ; . 1,2-bis(4-cyclohexylcarbonyloxymethyl-3,5-dioxopi- pe-razin-l-yl)ethan; 5 . 1,2-bis(4-chloracetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan; . 1,2-bis(4-dichloracetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan; . 1,2-bis(4-bromacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 10 1-yl)ethan; . 1,2-bis (4-/S-carboxypropionyloxymethyl-3,5-dioxopi- pe-ra-zin-l-yl)ethan eller natriumsalte deraf; . 1,2-bis(4-Æ-methoxycarbonylpropionyloxymethyl-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan; 15 . 1/2-bis(4-methoxyacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan; . 1/2-bis(4-phenoxyacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan; . 1,2-bis(4-p-chlorphenoxyacetoxymethyl-3,5-dioxopi- 20 pe-ra-zin-l-yl)ethan; . 1/2-bis(4-(2/4-dichlorphenoxyacetoxymethyl)-3/5- dioxopiperazin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-(2/4/5-trichlorphenoxyacetoxymethyl)- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan; 25 . l,2-bis(4-(2-p-chlorphenoxy-2-methylpropionyloxy- methyl)-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan; . 1/2-bis(4-(2-naphthyloxyacetoxymethyl)-3,5-dioxopi- pe-razin-l-yl)ethan; 1/2-bis(4-p-fluorphenylthioacetoxymethyl-3/5-dioxo-30 pi-perazin-l-yl)ethan; . 1/2-bis(4-p-bromphenylthioacetoxymethyl-3,5-dioxo- pipe-razin-l-yl)ethan; . 1/2-bis(4-phenylacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l -yl)ethan; 6

DK 162639 B

1 . 1,2-bis(4-o-chlorphenylacetoxymethyl-3,5-dioxopipe- ra-z in-1-y1)ethan ; . 1,2-bis(4-o-bromphenylacetoxymethyl-3,5-dioxopipe- ra-zin-l-yl)ethan; 5 . 1,2-bis(4-o-tolylacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan; . 1,2-bis (4-°k-hydroxy-o£-phenylacetoxymethyl-3,5-diox- opiperazin-l-yl)ethan ; . 1,2-bis(4-(1-naphthylacetoxymethyl)-3,5-dioxopipe- 10 ra-zin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-cinnamoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l- yl)ethan; . 1,2-bis(4-(3,4-diacetoxycinnamoyloxymethyl)-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan; 15 . 1,2-bis(4-p-methoxycinnamoyloxymethyl-3,5-dioxopi- pe-razin-l-y1)ethan; . 1,2-bis(4-(3,4-dimethoxycinnamoyloxymethyl)-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-benzoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 20 1-yl)ethan; . 1,2-bis(4-o-chlorbenzoyloxymethyl-3,5-dioxopipera- zin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-o-fluorbenzoyloxymethyl-3,5-dioxopipera- zin-l-yl)ethan; 25 . 1,2-bis(4-o-toluoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l- yl)ethan; . 1,2-bis(4-m-toluoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l- yl)ethan; . 1,2-bis(4-o-methoxybenzoyloxymethyl-3,5-dioxopipe- 30 ra-zin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-(3,4-diacetoxybenzoyloxymethyl)-3,5-diox- opiperazin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-(3,4-methylendioxybenzoyloxymethyl)-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan; 7

DK 162639 B

1 . l,2-bis(4-o-carboxybenzoyloxymethyl-3,5-dioxopipe- ra-zin-l-yl)ethan; . 1,2-bis (4-p-aitiinobenzoyloxymethyl-3,5-dioxopipera- zin-l-yl)ethan; 5 . 1,2-bis(4-p-methansulfonylaminobenzoyloxymethyl- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-(1-naphthoyloxymethyl)-3,5-dioxopipera zin-l-yl )ethan; . 1,2-bis(4-(2-pyridylcarbonyloxymethyl)-3,5-dioxopi- 10 pe-razin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-(3-pyridylcarbonyloxymethyl)-3,5-dioxopi- pe-razin-l-yl )'ethan; . 1,2-bis(4-(2-thenoyloxymethyl)-3,5-dioxopiperazin- l-yl) ethan; 15 . lf2-bis(4-(2-furoyloxymethyl)-3,5-dioxopiperazin-l- yl ) ethan; . 1,2-bis(4-methoxycarbonyloxymethyl-3,5-dioxopipera zin-l-yl )ethan; 1,2-bis(4-ethoxycarbonyloxymethyl-3,5-dioxopipera-20 zin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-n-butoxycarbonyloxymethyl-3,5-dioxopipe- ra-zin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-isobutoxycarbonyloxymethyl-3,5-dioxopipe- ra-zin-l-yl)ethan; 25 . 1,2-bis(4-(2-ethylhexyloxycarbonyloxymethyl)-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-p-nitrobenzyloxycarbonyloxymethyl-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan; . 1,2-bis(4-phenoxycarbonyloxymethyl-3,5-dioxopipera- 30 zin-l-yl)ethan.

Forbindelserne (I) ifølge den foreliggende opfindelse kan omdannes til syreadditionssalte, f.eks. hydrochlo-ridet, oxalatet, p-toluensulfonatet eller acetatet.

8

DK 162639 B

X Fremgangsmåden til fremstilling af bis-dioxopiperazin-deri-vaterne med den almene formel (I) består i omsætning af en forbindelse med formel (II) : 5 f 0* 'i ho-ch2-n n-ch2 — n s θ' J2 10 med et reaktivt derivat såsom et chlorid eller et anhydrid af en forbindelse med den almene formel (III) : RCOOH (III) 15 hvor R har den i sammenhæng med formel (I) angivne betydning.

Chloridet af forbindelsen (III) kan udvælges fra 20 gruppen indeholdende acetylchlorid, n-butyrylchlorid, isovalerylchlorid, pivaloylchlorid, palmitoylchlorid, stearoyl-chlorid, cyclohexancarbonylchlorid, chlorace-tylchlorid, dichloracetylchlorid, bromacetylchlorid, methoxyacetyl-chlorid, phenoxyacetylchlorid, p-chlor-25 phenoxyacetylchlorid, 2,4-dichlorphenoxyacetylchlo- rid, 2,4,5-trichlor-phenoxyacetylchlorid, 2-p-chlor-phenoxy-2-methylpropionyl-chloridf 2-naphthyloxyace-tylchlorid, p-bromphenylthio-acetyl-chlorid, p-fluor-phenylthioacetylchlorid, o-chlorphenyl-acetylchlorid, 30 o-bromphenylacetylchlorid,°£-chloracetoxy-oC-phenylace- tylchlorid, 1-naphthylacetyl-chlorid, cinnamoylchlo-r id, 3,4-diacetoxycinnamoylchlorid, p-methoxycinna- moylchlorid, 3,4-dimethoxycinnamoyl-chlorid, benzoyl-chlorid, o-chlorbenzoylchlorid, o-fluorbenzoylchlo- 9

DK 162639 B

1 rid, o-toluoylchlorid, m-toluoylchlorid, o-methoxyben- zoylchlorid, 3,4-diacetoxybenzoylchlorid, 3,4-methy-lendioxybenzoyl-chlorid, p-benzyloxycarbonylami- nobenzoylchlorid, 2-pyridylcarbonylchlorid, 3-pyridyl-5 carbonylchlorid, 2-thenoylchlorid, 2-furoylchlorid, methylchlorformiat, ethylchlorformiat, n-butylchlor-formiat, isobutylchlorformiat, 2-ethylhexylchlorfor-miat, p-nitrobenzylchlorformiat, phenylchlorformiat, medens anhydridet af forbindelsen (III) kan udvælges 10 af gruppen indeholdende edikesyreanhydrid, n-smørsyre- anhydrid, isosmørsyreanhydrid, propionanhydrid, mono-chlor-edikesyreanhydrid, ravsyreanhydrid.

Forbindelsen med formel (II), som er udgangsmateriale 15 ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er en hidtil ukendt forbindelse og kan fremstilles let ved at omsætte l,2-bis(3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan beskrevet i British Patent Specification 1.234.935, med formaldehyd.

20

Ved fremgangsmåden til fremstilling af bis-dioxopipe-razinderivaterne, som den foreliggende opfindelse angår, bør der anvendes mindst to ækvivalente molærmængder af chloridet eller anhydridet af forbindelsen 25 (III) til en molmængde af udgangsmaterialet med formen (II).

Reaktionstemperaturen kan ligge i området fra -10 til 120°C, fortrinsvis fra 0 til 80°C, og reaktionsti-30 den kan varriere fra 1 til 24 timer.

Med hensyn til opløsningsmidlet kan der anvendes et aprot polært opløsningsmiddel, f.eks. DMF, acetoni-tril, chloroform, dichlormethan, ethylacetat, pyridin, 10

DK 162639 B

1 lutidin, picolin, eller blandinger deraf. Den ovennævnte omsætning udføres fortrinsvis i nærværelse af en base såsom pyridin eller triethylamin.

5 Forbindelserne (I) ifølge opfindelsen kan også fremstilles ved at omsætte en forbindelse med formel (II) med en syre med den almene formel (III) i nærværelse af et kondenseringsmiddel såsom l-methyl-2-chlorpyridiniumiodid, 2-chlor-3-ethylbenzoxazoniumte- 10 trafluorborat eller dicyclohexylcarbodiimid.

Ved denne kondensationsreaktion anvendes mindst 2 ækvivalente molmængder af syren med den almene formel (III) til en molmængde af forbindelsen med den almin- 15 delige formel (II).

Reaktionstemperaturen kan variere fra -30 til +100°Cf fortrinsvis fra 0°C til stuetemperatur, og reaktionstiden kan ligge i området fra 1 til 24 timer, hvilket 20 afhænger af reaktionstemperaturen.

Med hensyn til reaktionsopløsningsmidlet, kan et aprot polært opløsningsmiddel, f.eks., DMF, acetoni-tril, chloroform, dichlormethan, eller blandinger 25 deraf anvendes. Fortrinsvis anvendes 4-N,N-dimethyl- aminopyridin eller 4-pyrrolidinopyridin som katalysator i den ovennævnte reaktion.

Når forbindelserne (I) ifølge opfindelsen fremstilles, 30 kan de funktionelle grupper i forbindelsen (III), om nødvendigt, beskyttes på sædvanlig måde.

Endvidere kan et syreadditionssalt af forbindelse (I) ifølge opfindelsen, f.eks. hydrochloridet, oxala- 11

DK 162639 B

1 tet, p-toluensulfonatet, acetatet osv., fremstilles på sædvanlig måde.

Anti-tumor aktivitet for bis-dioxopiperazinderivater-5 ne, som den foreliggende opfindelse angår, bekræftes ved vækstinhibering eller forøgelse af levetiden i forsøgsdyr med typeidentiske tumorer såsom P388 lymphocytleukemi, Lewis lungecarcinom, B-16 melanom og Colon Adenocarcinoma nr. 38 som anført nedenfor.

10 (1) Dyreforsøg med P388 Lymphocytisk Leukemi.

Den behandlede gruppe, til hvilken forbindelsen ifølge opfindelsen administreres, består af syv mus, medens 15 kontrolgruppen består af ti mus. Seksuger gamle hanmus (CDF]_ (BALB/c x DBA/2), 25 +_ 2 g legemsvægt) anvendes som værtsdyr.

Tumorceller (1,0 x 10^) af P388 lymphocytisk leukemi 20 transplanteres intraperitonealt i hver mus. Behandlingen begynder én dag efter transplantationen, og den foreskrevne dosis af hver testforbindelse administreres intraperitonealt til musen én gang om dagen i 9 dage eller på første og femte dagen.

25

Anti-tumoraktiviteten af testforbindelsen vurderes ved raten i forøgelse af levetidsrummet (I.L.S.%), som beregnes med nedenstående formel: 30 LL.-S.O0» (ί-1)*100 T: Gennemsnitlig overlevelsestid for behandlede mus C: Gennemsnitlig overlevelsestid for kontrolmus.

12

DK 162639 B

1 De opnåede resultater er vist i Tabel 1A og IB.

5 10 15 20 25 30 13

DK 162639 B

Tabel 1A Resultater af dyreforsøg med P388 Lymphocytisk Leukemi

Testforbindelse Daglig dosis x dag I.L.S.

(mg/kg) (%) 1.2- bis(4-acetoxymethyl- 200 x 2 45 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 60 x 9 118 20 x 9 63 1.2- bis(4-pivaloyloxymethyl- 200 x 2 66 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 53 1/2-bis(4-chioracetoxymethyl- 200 x 2 38 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 54 1.2- bis(4-p-chlorphenoxyacetoxy- methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)- 200 x 2 94 ethan 20 x 9 40 1.2- bis(4-(2,4-dichlorphenoxy- 200 x 2 72 acetoxymethyl)-3,5-dioxopiperazin- 60 x 9 105 1-yl)ethan 20 x 9 49 lf2-bis(4-(2,4,5-trichlorphenoxy- 200 x 2 94 acetoxymethyl)-3,5-dioxopiperazin- 20 x 9 65 1-yl)ethan 1.2- bis(4-(2-p-chlorphenoxy-2- 200 x 2 114 methylpropionyloxymethyl-3,5- 20 x 9 63 dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-p-fluorphenylthio- acetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 200 x 2 120 1-yl)ethan 1.2- bis(4-p-bromphenylthioacetoxy- methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)- 200 x 2 108 ethan 1.2- bis(4-phenylacetoxymethyl- 200 x 2 204 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 143 1.2- bis(4-o-chlorphenylacetoxy- 200 x 2 83 methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)- 20 x 9 65 ethan 14

DK 162639 B

Tabel IB Resultater af dyreforsøg med P388 Lymphocytisk Leukemi

Testforbindelse Daglig dosis x dag I.L.S.

(mg/kg) (%) 1.2- bis(4-p-methoxycinnamoyloxy- 200 x 2 36 methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)- 20 x 9 78 ethan 1.2- bis(4-(3,4-diacetoxycinnamoyl- 200 x 2 51 oxymethyl)-3,5-dioxopiperazin- 20 x 9 35 1-yl)ethan 1.2- bis(4-benzoyloxymethyl- 200x2 107 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 68 1.2- bis(4-o-chlorbenzoyloxymethyl- 200 x 2 90 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 55 1.2- bis(4-o-fluorbenzoyloxymethyl- 200 x 2 113 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-o-methoxybenzoyloxymethyl- 200 x 2 99 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 113 1.2- bis(4-(2-furoyloxymethyl)- 200 x 2 >200 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-(2-thenoyloxymethyl)- 200 x 2 118 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-methoxycarbonyloxymethyl- 200x2 103 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 75 1.2- bis(4-ethoxycarbonyloxymethyl- 200 x 2 45 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 48 1.2- bis(4-isobutoxycarbonyloxymethyl- 200x2 138 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 60 x 9 175 20 x 9 78 1.2- bis(4-morpholinomethyl- 100 x 2 60 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 20 x 9 90 (kendt forbindelse) 15

DK 162639 B

1 Mod P388 Lymphocytisk Leukemi viser forbindelserne ifølge opfindelsen fremragende I.L.S.(%).

(2) Dyreforsøg med Lewis Lungecarsinom.

5

Den behandlede gruppe, til hvilken forbindelsen ifølge opfindelsen administreres, består af syv mus, medens kontrolgruppen består af ti mus. Seks uger gamle hanmus (BDFi (C57BL/6 x DBA/2), 25 +_ 2 g legemsvægt) anvendes 10 som værtsdyr.

Tumorceller (5 x 10^) af Lewis Lungecarcinom transplanteres subcutant i lyskeregionen på hver mus. Behandlingen begynder én dag efter transplantationen, og den 15 foreskrevne dosis af hver testforbindelse administreres oralt til musen én gang om dagen i otte dage. På den tyvende dag efter transplantationekn udskæres tumorerne på musene og vejes. Anti-tumoraktiviteten af testforbindelsen vurderes ved vækstinhiberingsraten (G.I.%) 20 som beregnes fra følgende formel: G.I. C%) * (ί -'c jx 100 T: Gennemsnitlig tumorvægt for behandlede mus.

25 C: Gennemsnitlig tumorvægt for kontrolmus.

De opnåede resultater er vist i tabel 2.

30 16

DK 162639 B

1 Tabel 2 Resultater af dyreforsøg på Lewis Lungecarcinom.

Testforbindelse Daglig dosis G.I.

(mg/kg) (%) 5 _ 1.2- bis(4-acetoxymethyl- 60 79,6 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-chloracetoxymethyl- 50 66,8 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 10 1.2- bis(4-o-chlorbenzoyloxymethyl- 40 43,7 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-methoxycarbonyloxymethyl- 60 57,7 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan ^5 1,2-bis(4-isobutoxycarbonyloxymethyl- 50 54,4 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-morpholinomethyl- 60 22,6 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan (kendt forbindelse) 20 -

Mod Lewis Lungecarcinom er G.I.(%) for forbindelserne, som den foreliggende opfindelse angår, højere end for sammenligningsforbindelsen, d.v.s. 1,2-bis(4-25 morpholinomethyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan. Endvide re bekræftes det, at forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse undertrykker metastaserne af Lewis

Lungecarcinom signifikant i sammenligning med kontrolgruppen .

30 (3) Dyreforsøg med B-16 Melanom.

Den behandlede gruppe, hvortil forbindelsen ifølge den foreliggende opfindelse administreres, består 17

DK 162639 B

1 af syv mus, medens kontrolgruppen består af ti mus.

Seks uger gamle hanmus (BDFj (C57BL/6 x DBA/2), 25 + _ 2 g legemsvægt) anvendtes som værtsdyr.

5 Tumorceller (5 x 10$) af B-16 Melanom transplanteres intraperitonealt til hver mus. Behandlingen begynder én dag efter transplantationen, og den foreskrevne dosis for hver testforbindelse administreres intraperi-tonealt til musen én gang om dagen i otte dage.

10

Anti-tumoraktiviteten for testforbindelsen vurderes ved raten i forøgelse af levetiden (I.L.S.%), som beregnes på samme måde, som anvendes ved dyreforsøget for P388 Lymphocytisk Leukemi. De opnåede resultater 15 er vist i tabel 3.

20 25 30 18

DK 162639 B

Tabel 3 Resultater af dyrforsøg på B-16 Melanom

Testforbindelse Daglig dosis I.L.S.

(mg/kg) (%) 1/2-bis(4-acetoxymethyl- 20 39 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-chloracetoxymethyl- 20 38 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-(2r4-dichlorphenoxy- 20 35 acetoxyinethyl) -3,5-dioxopiperazin- l-yl) ethan 1.2- bis(4-(2-p-chlorphenoxy-2- 30 86 methylpropionyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-p-fluorphenylthio- 40 83 acetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- l-yl) ethan 1/2-bis(4-phenylacetoxymethyl- 20 83 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-benzoyloxymethyl- 20 87 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-o-chlorbenzoyloxymethyl- 20 65 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-(2-furoyloxymethyl)- 20 .88 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-methoxycarbonyloxymethyl- 30 78 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-isobutoxycarbonyloxymethyl- 20 86 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-morpholinomethyl- 20 40 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan (kendt forbindelse) 19

DK 162639 B

1 Mod B16-Melanom er I.L.S.(%) for forbindelserne, som den foreliggende opfindelse angår, næsten lig med eller over værdien for sammenligningsforbindelsen.

5 (4) Dyreforsøg med Colon Adenocarcinom Nr. 38.

Den behandlede gruppe, hvortil forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse administreres, består af syv mus, medens kontrolgruppen består af ti mus.

10 Seksuger gamle hanmus (BDP^ (C57BL/6 x DBA/2), 25 +_ 2 g legemsvægt) anvendes som værtsdyr.

Tumorceller (40 mg af fragment) af Colon Adenocarcinom Nr. 38 transplanteres subcutant i lyskeregionen på 15 hver mus. Behandlingen begynder én dag efter transplantationen, og den foreskrevne dosis af hver testforbindelse administreres oralt til musen én gang om dagen i otte dage.

20 På 30. dagen efter transplantationen udskæres tumorerne af alle musene og vejes. Anti-tumoraktiviteten af testforbindelsen vurderes ved vækstinhiberingsraten (G.I.%), som beregnes på samme måde, som anvendes i Lewis Lungecarcinom. De opnåede resultater er vist 25 i tabel 4.

30 20

DK 162639 B

1 Tabel 4 Resultater af dyreforsøg med Colon Adenocarcinom Nr. 38

Testforbindelse Daglig dosis G.I.

5 (mg/kg) (%) 1.2- bis(4-acetoxymethyl- 60 68,0 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-isobutoxycarbonyloxymethyl- 60 68,8 10 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-morpholinomethyl- 60 72,8 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan (kendt forbindelse) 15 Mod Colon Adenocarcinom Nr. 38 er G.I.(%) for de forbindelser, den foreliggende opfindelse angår, næsten lig med værdien for sammenligningsforbindelsen.

Toxiciteterne for bis-dioxopiperazinderivaterne ifølge 20 den foreliggende opfindelse undersøges ved nedenstående tests: (5) Akut toxicitetstest.

25 Testgruppen, til hvilken forbindelsen ifølge opfindelsen administreres, består af ti mus. Pemuger gamle hanmus (ddY, 23 +_ 2 g legemsvægt) anvendes som forsøgsdyr.

Disse dyr gives intraperitonealt testforbindelsen, 30 som suspenderes i saltopløsningen, som indeholder carboxymethylcellulose (CMC) med 0,5% og observeres i fjorten dage efter, og LDso-værdien for akut toxicitet bestemmes ved Litchfield-Wilcoxon-metoden. De opnåede 21

DK 162639 B

1 resultater er vist i tabel 5.

Tabel 5 Resultater af Akut toxicitetstest 5 _

Testforbindelse LDsQ-værdi (mg/kg) i.p, p, o« 10 1.2- bis(4-adetoxymethyl- >1000 >2000 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-methoxyoarbonyloxymethyl ca, 500 >2000 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 15 1.2- bis(4-isobutoxycarbonyloxymethyl- >850 >1000 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan 1.2- bis(4-morpholinomethyl- 280 >1000 3.5- dioxopiperazin-l-yl)ethan (kendt forbindelse) 20 _

Disse data viser, at den akutte toxicitet for fobindel- sen ifølge opfindelsen er væsentlig lavere end for sammenligningsforbindelsen.

25

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse kan administreres oralt i sådanne former som tabletter, pulvere, granuler, kapsler, sirupper osv. De kan også administreres parenteralt i former såsom injektioner, 30 som kan omfatte opløselig frysetørret form, suppositorier osv.

22

DK 162639 B

1 Ved fremstilling af disse anvendte former kan der anvendes farmaceutisk tolerable fortyndingsmidler, bindemid-ler, sprængmidler, glitte-midler, suspensioner, emulgerings-midler, antiseptiske midler, stabiliseringsmidler, 5 og dispergeringsmidler, f.eks. lactose, saccharose, stivelse, dextrin, krystallinsk cellulose, kaolin, calcic umcarbonat, talkum, magnesiumstearat, destilleret vand, eller fysiologisk saltopløsning.

10 Selvom de daglige doser af forbindelserne kan variere ifølge tilstanden, alderen og vægten af de personer, der skal behandles, kan den daglige dosis for et'voksent menneske normalt falde indenfor området 50-3000 mg, fortrinsvis fra 500-1000 mg, og kan deles i to eller 15 tre portioner.

På baggrund af de ovennævnte forsøgsdata forventes forbindelserne i den foreliggende opfindelse ikke kun at være nyttige som anti-tumormidler og radiopotenseren- 20 de midler i lighed med den kendte forbindelse l,2-bis(4-morpholinomethyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, men forventes også at have et bredere anti-tumorspektrum og mere fremragende anti-tumoraktivitet. De har endvidere lavere toxicitet end sammenligningsforbindelsen.

25 Desuden udviser forbindelserne (I) i modsætning til sammenligningsforbindelsen fordelagtig stabilitet i prote polære opløsningsmidler. Således har de en bredere farmaceutisk anvendelse som anti-tumormidler.

30 Fremgangsmåden til fremstilling af forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse består af relativt simple trin med høje udbytter og er egnede til industriel produktion.

23

DK 162639 B

1 Opfindelsen belyses nærmere ved nedenstående eksempler.

Preparation: 1,2-bis(4-hydroxymethyl-3,5-dioxopipera- zin-l-yl)ethan 5

En blanding af 2,0 g (7,9 mmol) l,2-bis(3,5-dioxopipera-zin-l-yl) ethan og 10 ml DMF opvarmes ved 130°c i ti minut-ter. Til blandingen sættes gradvis 2 ml af en 37% vandig formaldehydopløsning, og derefter opvarmes 10 blandingen ved 130°C i 1,5 timer. Reaktionsblandingen lades henstå i et køleskab natten over. Det resulterende bundfald opsamles, vaskes med et ethylacetat og tørres under reduceret tryk, hvorved fås 1,6 g af den i overskriften nævnte forbindelse, udbytte 64,7%. Smeltepunkt: 15 170-172°C (omkrystalliseret af dioxan)

Analyse:

Beregnet for Οχ2Ηΐ8Ν4θ6* C 45,86 H 5,77 N 17,83 Fundet: C 45,83 H 5,73 N 17,73 20 Eksempel 1: l,2-Bis(4-acetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan

En blanding af 1,50 g (4,8 mmol) 1,2-bis(4-hydroxym-ethyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, 10 ml pyridin 25 og 5 ml (52,9 mmol) eddikesyreanhydrid omrøres i 12 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandin-gen fortyndes med 20 ml ethylacetat og de resulterende krystaller opsamles og vaskes med ethylacetat og deref-ter med ether og tørres under reduceret tryk, hvorved fås 1,34 30 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 70,5%). Smeltepunkt: 178-181°C (omkrystalliseret af dioxan) 24

DK 162639 B

1 Analyse:

Beregnet for CigH^^Og: C 48,24 H 5,57 N 14,06 Fundet: C 48,02 H 5,48 N 13,88 5 Infrarød absorption (IR) Spektrum (KBr) cm“l: 1740, 1700 (C=0)

Kernemagnetisk resonansspektrum (NMR) (DMSO-dg): <£ ppm= 2,01 (6H, s, -COCH3 x 2) 2,64 (4H, s, >NCH2CH2N<) 10 3,58 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 5,60 (4H, s, >NCH20- x 2)

Eksempel 2: l,2-Bis(4-pivaloyloxymethyl-3,5-dioxopipe- razin-l-yl)ethan 15

Til en blanding af 0,94 g (3,0 mmol) l,2-bis(4-hydroxy-methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 25 ml pyridin sættes 0,78 g (6,5 mmol) pivaloylchlorid i 5 ml pyridin gradvis ved 0°C og derefter omrøres blandingen i 18 20 timer ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet fjernes fra reaktionsblandingen under reduceret tryk, og remanensen ekstraheres med 200 ml ethylacetat. Ekstraktopløsningen vaskes med en mættet natriumbicarbonatopløs-ning og derefter med vand og tørres over magnesiumsul-25 fat. Den ved afdampning af opløsningsmidlet fra eks trakten under reduceret tryk vundne remanens renses ved silicagelsøjlechromatografi (ethylacetat, Rf-værdi = 0,8), hvorved fås 0,75 g af den i overskriften nævnte forbindelse, udbytte 52%. Smeltepunkt: 114- 30 118°C.

IR-Spektrum (KBr): 1720, 1700 (C=0)cm“l 25

DK 162639 B

1 NMR-Spektrum (CDCI3);S ppm= 1.18 (18H, s, -C(CH3)3 x 2) 2,69 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,54 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5 5,76 (4H, s, >NCH20- x 2) I overensstemmelse med den i Eks. 2 beskrevne fremgangsmåde fremstilles nedenstående forbindelser ud fra tilsvarende udgangsmaterialer.

10 . 1,2-Bis(4-isovaleryloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan, udbytte 62%. Smeltepunkt: 72-75°C.

IR-Spektrum (KBr): 1730, 1695 (C=0)cm“l 15 NMR-Spektrum (CDC13):& ppm= 0,94 (12H, d, J=7Hz, -CH x 2) 2.01- 2,09 (2H, m, COCH2CH< x 2) 2.18 (4H, d, J=7Hz, -COCH2CH< x 2) 20 2,72 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,56 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5,75 (4H, s, >NCH20- x 2) . 1,2-Bis(4-palmitoyloxymethyl~3,5-dioxopiperazin- 25 1-yl)ethan, udbytte 30%. Smeltepunkt: 92-94°C.

IR-Spektrum (KBr): 1740, 1685 (C^cirr1 NMR-Spektrum (CDCI3):6 ppm= 30 0,88 (6H, t, J=7Hz, -CH3 x 2) 1.1- 1,4 (52H, m, -(CH2)i3- x 2) 2,30 (4H, t, J=7Hz, -COCH2- x 2) 2,68 (4H, s, >NCH2CH2N<) 26

DK 162639 B

1 3,53 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 5,77 (4H, S, >NCH20- x 2) . 1,2-Bis(4-(2-p-chlorphenoxy-2-methylpropionyloxy- 5 methyl)-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, udbytte 82%.

Smeltepunkt: 108°C (omkrystalliseret af chloroform)

Eksempel 3: 1,2-Bis(4-cyclohexylcarbonyloxymethyl- 3,5-dioxopiperazinl-yl)ethan 10

Til en blanding af 0,32 g (1,0 mmol) 1,2-bis(4-hydroxy-methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 9 ml pyridin sættes gradvis 0,3 ml (2,2 mmol) cyclohexancarbonyl-chlorid, og derefter omrøres blandingen i 12 timer 15 ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen fortyndes med 100 ml ethylacetat og vaskes med 10% svovlsyreopløsning og derefter med vand og tørres. Det rå produkt, der vindes ved afdampning af opløsningsmidlet under reduceret tryk fra den ovennævnte blanding, renses 20 ved silicagelsøjlechromatografi (ethylacetat: chloroform = 2:1, Rf-værdi = 0,6), hvorved fås 0,16 g af den i overskriften nævnte forbindelse i form af en olie, udbytte 30%.

25 IR-Spektrum (KBr): 1730, 1695 (C=0)cm_1 NMR-Spektrum (CDCI3): δppm= 1,2-2,3 (22H, m, cyclohexyl H) 2,69 (4H, s, >NCH2CH2N<) 30 3,53 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5,76 (4H, s, >NCH20- x 2) 1 overensstemmelse med den i Eks. 3 beskrevne fremgangsmåde fremstilles nedenstående forbindelse ud fra det 27

DK 162639 B

1 tilsvarende udgangsmateriale.

. 1,2-Bis(4-phenylacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- l-yl)ethan. Smeltepunkt: 130-132°C (omkrystalliseret 5 af ethylenglycolmonomethylether)

Eksempel 4: 1,2-Bis(4-chloracetoxymethyl-3,5-dioxopipe- razin-l-yl)ethan 10 En blanding af 3,1 g (9,9 mmol) 1,2-bis(4-hydroxymethyl- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, 1,6 ml pyridin og 50 ml chloroform omrøres ved 10°C. Til blandingen tilsættes 1,8 ml (22,6 mmol) chloracetylchlorid gradvis, og derefter omrøres blandingen i 6 timer ved stuetempera-15 tur. Reaktionsblandingen fortyndes med 50 ml chloroform og vaskes med vand og tørres derefter. Den ved afdampning af opløsningsmidlet under reduceret tryk fra den ovennævnte blanding vundne remanens omkrystalliseres af ethylenglycolmonomethylether til dannelse af 2,6 20 g af den i overskriften nævnte forbindelse, udbytte 60,5%. Smeltepunkt: 132,5-133,5°C.

Analyse:

Beregnet for C16H20N4O8CI2*%H20: 25 C 40,37 H 4,45 N 11,77

Pundet: C 40,17 H 4,14 N 11,44 IR-Spektrum (KBr): 1760, 1680 (C=0)cm“l 30 NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 2,68 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,50 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 4,20 (4H, s, -CH2CI x 2) 5,82 (4H, s, >NCH20- x 2) 28

DK 162639 B

1 I overensstemmelse med den i Eks. 4 beskrevne fremgangsmåde fremstilles følgende forbindelse ud fra det tilsvarende udgangsmateriale.

5 . 1,2-Bis(4-isobutoxycarbonyloxymethyl-3,5-dioxopipera- zin-l-yl)ethan, udbytte 88%. Smeltepunkt: 128-130°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethylether).

Analyse: 10 Beregnet for C22H34N40lO: C 51/36 H 6/61 N 10,89

Fundet: C 51,12 H 6,70 N 10,86 IR-Spektrum (KBr): 1750, 1700 (C=0) cm~l 15 NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 0,94 (12H, d, J=7Hz, -CH2CH(C^)2 X 2) 1,92-2,02 (2H, m, -CH2CH(CH3)2 x 2) 2,68 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,52 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 20 3,94 (4H, d, J=7Hz, -CH2CH(CH3)2 x 2) 5,82 (4H, s, >NCH20- x 2)

Eksempel 5: 1,2-Bis (4-(i-carboxypropionyloxymethyl- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan 25

Til en blanding af 1,0 g (3,2 mmol) af l,2-bis(4-hydroxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 20 ml DMF sættes 0,7 g (7,0 mmol) ravsyreanhydrid og 0,7 g triethylamin, og derefter omrøres blandingen 30 i 24 timer i stuetemperatur. Reaktionsblandingen omrøres yderligere 12 timer efter tilsætning af 1,2 g chlor-methylbenzylether, og derefter fjernes opløsningsmidlet under reduceret tryk. Remanensen ekstraheres med chloroform, og ekstraktopløsningen vaskes med vand og tørres.

29

DK 162639 B

1 Den ved afdampning af opløsningsmidlet vundne remanens renses ved silicagelsøjlechromatografi (chloroform: methanol = 20:1, Rf-værdi = 0,6), hvorved fås 0,9 g af benzyloxymethylesteren af den i overskriften 5 nævnte forbindelse.

Esteren opløses i en blanding af 30 ml ethylacetat og ethanol (3:1). Efter tilsætning af 0,2 g 10% palla-dium-på-kul omrøres blandingen i 24 timer ved stuetempe-10 ratur under hydrogen. Derefter afdampes opløsningsmidlet efter frafiltrering af katalysatoren fra filtratet til dannelse af 0,6 g af den i overskriften nævnte forbindelse i form af en viskos og olieagtig forbindelse (udbytte 37%).

15 IR-Spektrum (ren): 1760, 1740, 1700 (C=0)cm~l NMR-Spektrum (DMSO-dø):Sppm= 2,4-2,6 (8H, m, -COCH2CH2CO- x 2) 20 2,65 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,59 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5,62 (4H, s, >NCH20- x 2) 0,93 g af den således vundne i overskriften nævnte 25 forbindelse suspenderes i 10 ml vand. Til suspensionen sættes 10 ml 1,73% vandig natriumcarbonatopløsning gradvis, og blandingen omrøres i 10 min. ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen filtreres, og filtratet frysetørres, hvorved fås 0,91 g af det farveløse pulver-30 agtige natriumsalt af den i overskriften nævnte forbindelse.

IR-Spektrum (KBr): 1740, 1700, 1590 (C=0)cm“l 30

DK 162639 B

1 NMR-Spektrum (DMSO-dg): 8ppm= 2,09 (4H, t, J=7Hz)' -COCH2CH2COO" x 2) 2,37 (4H, t, J=7Hz), 5 2,64 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,57 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5.59 (4H, s, >NCH20- x 2)

Eksempel 6: 1,2-Bis(4-(2,4-dichlorphenoxyacetoxy- 10 methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan

En blanding af 1,0 g (3,2 mmol) 1,2-bis(4-hydroxymethyl- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, 10 ml DMF og 1 ml pyridin omrøres ved stuetemperatur, og 1,6 g (6,7 mmol) 2,4-15 dichlorphenoxyacetylchlorid tilsættes gradvis ved stue temperatur. Blandingen omrøres i 4 timer og lades derefter henstå natten over ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen hældes ud i isvand. Det resulterende bundfald isoleres, vaskes med afkølet vand og tørres og omkry-20 stalliseres af ethylenglycolmonomethylether, hvorved fås 1,0 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 43,6%). Smeltepunkt: 153-155°C.

Analyse: 25 Beregnet for C28H26N4°10c:!-4: C 46,69 H 3,64 N 7,78 Fundet: C 46,41 H 3,94 N 7,55 IR-Spektrum (KBr): 1760, 1690 (C=0)cm-1 30 NMR-Spektrum (DMSO-dg):6 ppm= 2,65 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.59 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 4,95 (4H, s, -COCH2O- x 2) 31

DK 162639 B

1 5,75 (4H, s, >NCH20- x 2)

Cl 7,07 (2H, d, J=9Hz, -£§>C1 x 2)

Cl 5 7,33 (2H, dd, J=3Hz · 9Hz,-<i5>-Cl x 2) Έ

Cl H

7359 (2H, d, J=3Hz, 'C1· x 2) I overensstemmelse med den i Eks. 6 beskrevne frem-10 gangsmåde fremstilles nedenstående forbindelser ud fra de tilsvarende udgangsmaterialer.

1,2-Bis(4-p-chlorphenoxyacetoxymethyl-3,5-dioxopipe-razin-l-yl)ethan, udbytte 50%. Smeltepunkt: 155-15 156°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethyl- ether).

Analyse:

Beregnet for C28H28N4°10C12: 20 C 51,61 H 4,30 N 8,60

Pundet: C 51,45 H 4,46 N 8,78 . 1,2-Bis(4-(2,4,5-trichlorphenoxyacetoxymethyl)- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, udbytte 85%. Smelte-25 punkt: 140-141°C (omkrystalliseret af ethylenglycol- monomethylether).

. 1,2-Bis(4-p-bromphenylthioacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl) ethan, udbytte 67%. Smeltepunkt: 138- 30 139°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethyl- ether).

. 1,2-Bis(4-p-fluorphenylthioacetoxymethyl-3,5-dioxopi- perazin-l-yl)ethan, udbytte 55%. Smeltepunkt: 103- 32

DK 162639 B

1 104°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethyl- ether).

Eksempel 7: 1,2-Bis(4-o-chlorphenylacetoxymethyl- · 5 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan

Til en blanding af 1,02 g l-methyl-2-chlorpyridiumiodid, 10 ml acetonitril, 1,1 ml triethylamin og 0,64 g (2,0 mmol) 1,2-bis(4-hydroxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 10 1-yl)ethan, sættes 0,68 g (4,0 mmol) o-chlorphenyleddi- kesyre opløst i 10 ml acetonitril, og derefter omrøres blandingen i 12 timer ved stuetemperatur. Den ved fjernelse af opløsningsmidlet vundne remanens renses ved silicagelsøjlechromatografi (chloroform: methanol 15 = 20:1, Rf-værdi = 0,6), hvorved fås 0,41 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 33%). Smeltepunkt: 157-162°C.

IR-Spektrum (KBr): 1740, 1690 (C=0)cm“l 20 NMR-Spektrum (CDCI3):Sppm= 2,66 (4H, S, >NCH2CH2N<) 3,53 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 3,78 (4H, s, -CH2-£p> x 2) 25 5,84 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,2-7,4 (8H, m, phenyl H) I overensstemmelse med den i Eks. 7 beskrevne fremgangsmåde fremstilles nedenstående forbindelse ud fra det 30 tilsvarende udgangsmateriale. I stedet for acetonitril anvendes DMF som reaktionsopløsningsmiddel.

. 1,2-Bis(4-o-bromphenylacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl ) ethan, udbytte 25%. Smeltepunkt: 164- 33

DK 162639 B

1 168°C.

IR-Spektrum (KBr): 1740, 1700 (0=0)011-1 5 NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 2,65 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,53 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 3,80 (4H, s, -CH2-<g> x 2) 5,84 (4H, S, >NCH20- x 2) 7,1-7,6 (8H, m, phenyl H)

Eksempel 8: 1,2-Bis (4-aC-hydroxy-QL-phenylacetoxy- methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan I5 Til en blanding af 2,4 g (7,6 mmol) 1,2-bis(4-hydroxy-methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 20 ml pyridin sættes 3,1 g (16,7 mmol) ct-chloracetoxy-o^phenylacetyl-chlorid ved 0°C, og derefter omrøres blandingen i 1 time ved 0°C og derefter 4 timer ved stuetemperatur.

20 Reaktionsblandingen sættes til vand og ekstraheres med chloroform. Ekstraktopløsningen vaskes med 10% svovlsyreopløsning og derefter med vand og tørres over magnesiumsulfat. Det olieagtige produkt, der fås ved at fjerne opløsningsmidlet under reduceret 25 tryk, renses ved silicagelsøjlechromatografi (ethyl-acetat, Rf-værdi = 0,5), hvorved fås 1,0 g af den i overskriften nævnte forbindelse med et chloracetoxy-radikal i form af en olie. En blanding af forbindelsen, 0,4 g (5,2 mmol) thiourea, 0,89 g (10 mmol) natrium-30 acetat og 20 ml THF omrøres i 4 timer ved stuetemperatur. Derefter afdampes opløsningsmidlet under reduceret tryk, og remanensen ekstraheres med chloroform. Den remanens, der kan vindes ved inddampning af ekstraktopløsningen, renses ved søjlechromatografi (ethylacetat: 34

DK 162639 B

1 acetone = 9:1, Rf-værdi = 0,6) til dannelse af 0,2 g af den i overskriften nævnte forbindelse i form af en olie.

5 IR-Spektrum (ren): 1735, 1700 (C=0)cm“l NMR-Spektrum (acetone-dg):S ppm= 2,69 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.56 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 10 5,19 (2H, s, -CO-CH- x 2) 5,76 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,29-7,41 (10H, m, phenyl H)

Eksempel 9: 1,2-Bis(4-(3,4-methylendioxybenzoyl- 15 oxymethyl)-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan

Til en blanding af 0,94 g (3,0 mmol) l,2-bis(4-hydroxy-methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 10 ml pyridin sættes 1,00 g (6,0 mmol) piperonyloylchlorid, og deref-20 ter omrøres blanding i 20 timer ved stuetemperatur.

Til reaktionsblandingen sættes 250 ml chloroform, og opløsningen vaskes med 10% svovlsyreopløsning og derefter med vand, vaskes yderligere med vandig natrium-bicarbonatopløsning og derefter med vand. Derefter 25 fjernes opløsningsmidlet under reduceret tryk, hvorved fås 1,12 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 61%). Smeltepunkt: 195-198°C.

IR-Spektrum (KBr): 1720, 1695 (C=0)cm-1 30 NMR-Spektrum (CDCI3): <fppm= 2,71 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.56 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 35

DK 162639 B

1 5,99 (4H, s,3 l· -OCH2O- x 2, >NCH20- x 2)

6,03 ( 4H, s,J

6,80 (2H, d, J=8Hzj -<C£-0 x 2) 5 H ~ O-, 7,41 (2H, d, J=2Hz, ^.(j x 2) — ,0-7 7,61 (2H, dd, J=8Hz · 2Hz, <Q>-0 x 2)

H

I overensstemmelse med den i Eks. 9 beskrevne fremgangs-10 måde fremstilles nedenstående forbindelser ud fra tilsvarende udgangsmateriale.

. 1,2-Bis(4-cinnamoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan, udbytte 47%. Smeltepunkt: 149-152°C.

15 IR-Spektrum (KBr): 1710, 1695 (C=0)cm_1 NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 2,71 (4H, s, >NCH2CH2N<) 20 3,57 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5,92 (4H, s, >NCH_20- x 2) 6,39 (2H, d, J=16Hz, -CO-§_x 2) 7,36-7,39 (6H, m, phenyl H) 7,48-7,52 (4H, m, phenyl H) 25 7,71 (2H, d, J=16Hz, -CCT^ x 2) . 1,2-Bis(4-(3,4-diacetoxycinnamoyloxymethyl)-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan, udbytte 35%. Smeltepunkt: 83-87°C 30 IR-Spektrum (KBr): 1750, 1695 (C=0)cm_1 NMR-Spektrum (CDCI3):Sppm= 2,30 (12H, s, -OCOCH3 x 4) 36

DK 162639 B

1 2,71 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.57 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 5,92 (4H, s, >NCH20- x 2) 6,34 (2H, d, J=16Hz, Tc°-x 2) 5 7,19-7,38 (6H, m, phenyl H) 7,64 (2H, d, J=16Hz, J^CO- x 2) . 1,2-Bis (4-p-methoxycinnamoyloxymethyl-3,5-dioxopipe- razin-l-yl)ethan, udbytte 75%. Smeltepunkt: 100-10 103°C.

IR-Spektrum (KBr): 1700, 1600 (C=0)cm_1 NMR-Spektrum (CDCI3): S ppm= 15 2,73 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.58 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 3,85 (6H, s, -OCH3 x 2) 5,97 (4H, s, >NCH20- x 2) 6,28 (2H, d, J=16Hz, ^"CO- x 2) 20 6,87-7,60 (8H, m, aromatisk H) 7,73 (2H, d, J=16Hz, j^CO- x 2) . 1,2-Bis(4-(3,4-dimethoxycinnamoyloxymethyl)-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan, udbytte 54%. Smeltepunkt: 25 195-198°C.

IR-Spektrum (KBr): 1720, 1695 (C=0)cm-1 NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 30 2,71 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,57 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 3,89 (6H, s, -OCH3 x 2) 3.91 (6H, s, -OCH3 x 2) 5.92 (4H, s, >NCH20- x 2) 37

DK 162639 B

1 6,25 (2H, d, J=16Hz, ^ CO- x 2) 6,85 (2H, d, J=8Hz, aromatisk H) 7,02 (2H, d, J=l,7Hz, aromatisk H) 7,09 (2H, dd, J=8Hz*l,7Hz, aromatisk H) 5 7,65 (2H, d, J=16Hz, j^CO- X 2)

Eksempel 10: 1,2-Bis(4-o-chlorbenzoyloxymethyl-3,5- dioxopiperazin-1-yl)ethan.

10 Til en blanding af 1,26 g (4,0 mmol) l,2-bis(4-hydroxy-methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 12 ml pyridin sættes 1,40 g (8,0 mmol) o~chlorbenzoylchlorid ved 0°C, og derefter omrøres blandingen 1 time ved 0°C og derefter i 12 timer ved stuetemperatur. Reaktions-15 blandingen sættes til vand og ekstraheres med chloroform. Ekstraksopløsningen vaskes med 10% svovlsyreopløsning og derefter med vand og tørres derefter over magnesiumsulfat. Den lysegule forbindelse, som fås ved at inddampe ekstraktløsningen under reduceret 20 tryk, renses ved silicagelsøjlechromatografi (ethylace-tat: acetone = 9:1, Rf-værdi = 0,5), hvorved fås 1,19 g af den i overskriften nævnte forbindelse, udbytte 50,1%. Smeltepunkt: 161-165°C.

25 Analyse:

Beregnet for C26H24N4<^8i'-*-2: C 52,80 H 4,09 N 9,47 Fundet: C 52,55 H 4,18 N 9,22 30 IR-Spektrum (KBr): 1730, 1695 (C=0)cm“l NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 2,72 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,58 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 38

DK 162639 B

1 6,02 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,26-7,32^ 7,40-7,43 / (8H, m, phenyl H) 7,76-7,80 J 5 I overensstemmelse med den i Eks. 10 beskrevne fremgangsmåde fremstilles nedenstående forbindelser ud fra tilsvarende udgangsmatrialer.

10 . 1,2-Bis(4-benzoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- l-yl)ethan, udbytte 54,2%. Smeltepunkt: 164-166°C.

IR-Spektrum (KBr): 1730, 1710 (C=0)cm“l 15 NMR-Spektrum (CDCI3):Sppm= 2.70 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.70 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 6,03 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,38-7, 44 ”\ 20 7,52-7,58 i (10H, m, phenyl H)

7,97-8,01J

. 1,2-Bis{4-o-fluorbenzoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- l-yl)ethan, udbytte 75%. Smeltepunkt: 151-152°C.

25 . 1,2-Bis(4-o-methoxybenzoyloxymethyl-3,5-dioxopipera-

zin-l-yl)ethan, udbytte 92%. Smeltepunkt: 163-164°C

(omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethylether) 30 . 1,2-Bis(4-methoxyacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin-

l-yl)ethan, udbytte 74%. Smeltepunkt: 117-120°C

IR-Spektrum (KBr): 1740, 1700 (C=0)cm“l 39

DK 162639 B

1 NMR-Spektrum (CDCI3):éppm= 2,71 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,42 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 3,55 (6H, s, -OCH3 x 2) 5 4,03 (4H, s, -C0CH20- x 2) 5,83 (4H, s, >NCH20- x 2)

Eksempel 11: l,2-Bis(4-(3-pyridylcarbonyloxymethyl)~ 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan 10

En blanding af 0,31 g (1,0 mmol) 1,2-bis(4-hydroxy-methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, 0,28 g (2,0 mmol) 3-pyridylcarbonylchlorid og 10 ml pyridin omrøres i 18 timer ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet afdampes 15 fra reaktionsblandingen under reduceret tryk, og remanensen ekstraheres med chloroform. Ekstraktopløsningen vaskes med mættet vandig natriumbicarbonatopløsning og derefter med vand og tørres over magnesiumsulfat.

Den ved afdampning af opløsningsmidlet under reduceret 20 tryk vundne remanens fra ekstraktopløsningen renses ved silicagelsøjlechromatografi (chloroform: ether:methanol = 6:1:1, Rf-værdi = 0,3), hvorved fås 0,12 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 24%). Smeltepunkt: 182-188°C.

25 IR-Spektrum (KBr): 1710, 1690 (C=0)cm-1 NMR-Spektrum (CDCI3):£ ppm= 2,74 (4H, s, >NCH2CH2N<) 30 3,59 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 6,06 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,4-9,2 (8H, m, pyridyl H) I overensstemmelse med den i Eks. 11 beskrevne frem- 40

DK 162639 B

1 gangsmåde fremstilles nedenstående forbindelser ud fra de tilsvarende udgangsmaterialer.

. 1,2-Bis(4-(2-pyridylcarbonyloxymethyl)-3,5-dioxopipe- 5 razin-l-yl)ethan. Smeltepunkt: 163-168°C.

IR-Spektrum (KBr): 1740, 1700 (C=0)cm”l NMR-Spektrum (CDCI3):Sppm= 10 2,72 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,58 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 6,09 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,5-8,7 (8H, m, pyridyl H) 15 . 1,2-Bis(4-(4-pyridylcarbonyloxymethyl)-3,5-dioxopipe- razin-l-yl)ethan. Smeltepunkt: 210-220°C.

IR-Spektrum (KBr): 1730, 1700 (C=0)cm_1 20 NMR-Spektrum (DMSO-dg): &ppm= 2,70 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,65 (8H, S, >NCH2CO- x 4) 5,92 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,77 (4H, d, J=5Hz, pyridyl H) 25 8,79 (4H, d, J=5Hz, pyridyl H)

Eksempel 12: 1,2-Bis(4-(2-thenoyloxymethyl)-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan.

30 Til en blanding af 6,30 g (22 mmol) 1,2-bis(4-hydroxy- methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 60 ml pyridin sættes gradvis ved 0°C 6,45 g (44 mmol) thenoylchlorid, og derefter omrøres blandingen i 4 timer ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet afdampes fra reaktionsblandingen

DK 162639B

41 1 under reduceret tryk, og remanensen ekstraheres med chloroform. Ekstraktopløsningen vaskes med 10% svovlsyreopløsning og derefter med vand og tørres over magnesiumsulfat. Den ved afdampning af opløsningsmidlet 5 fra ekstraktopløsningen under reduceret tryk vundne remanens renses ved silicagelsøjlechromatografi (ethyl-acetat, Rf-værdi = 0,6), hvorved fås 8,20 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 70%). Smeltepunkt: 158-160°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmono-10 methylether).

NMR-Spektrum (CDCI3):6ppm= 2,71 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.57 (8H, s, >NCH2C0- X 4) 15 6,00 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,08 (2H, dd, J=5Hz · 4Hz, { )- x 2)

S

7.57 (2H, dd, J=5Hz · 1Hz, H-TVx 2) “ 'S'

/7—vrH

20 7,79 (2H, dd, J=4Hz · 1Hz, U V x 2) I overensstemmelse med den i Eks. 12 beskrevne fremgangsmåde fremstilles nedenstående forbindelse ud 25 fra det tilsvarende udgangsmateriale.

. 1,2-Bis(4-(2-furoyloxymethyl)-3,5-dioxopiperazin-

l-yl)ethan, udbytte 52%. Smeltepunkt: 166-167°C

(omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethylether) 30

Eksempel 13: 1,2-Bis(4-methoxycarbonyloxymethyl- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan

Til en blanding af 2,20 g (7,0 mmol) 1,2-bis(4-hydroxy- 42

DK 162639 B

1 methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 20 ml pyridin sættes gradvis ved 0°C 1,41 g (14,9 mmol) methylchlor-formiat, og blandingen omrøres i 1,5 time ved 0°C og derefter i 3 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblan-5 dingen sættes til vand og ekstraheres med chloroform. Ekstraktopløsningen vaskes med 10% svovlsyreopløsning og derefter med vand og tørres over magnesiumsulfat.

De ved inddampning af ekstraktopløsningen under reduceret tryk vundne krystaller vaskes med ethylacetat 10 og tørres under reduceret tryk, hvorved fås 1,76 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 58,6%). Smeltepunkt: 162,5-164,5°C.

Analyse: 15 Beregnet for Ci6H22N40;lø : C 44,65 H 5,15 N 13,02

Fundet: C 44,55 H 5,21 N 12,96 IR-Spektrum (KBr): 1760, 1705 (C=0)cm-1 20 NMR-Spektrum (CDCI3): S ppm= 2,67 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,52 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 3.80 (6H, s, -OCH3 x 2) 5.81 (4H, s, ^CI^O- x 2) 25 I overensstemmelse med den i Eks. 13 beskrevne fremgangsmåde fremstilles den følgende forbindelse ud fra det tilsvarende udgangsmateriale.

30 . l,2-Bis(4-ethoxycarbonyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan, udbytte 86%. Smeltepunkt: 99,5-102,5°C.

IR-Spektrum (KBr): 1735, 1695 (C=0)cm“l 43

DK 162639 B

1 NMR-Spektrum (CDCI3):Sppm= 1,30 (6H, t, J=7Hz, -OCH2CH3 x 2) 2,67 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,52 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5 4,22 (4H, q, J=7Hz, -OCH2CH3 x 2) 5,81 (4H, s, >NCH20- X 2)

Eksempel 14: 1,2-Bis(4-n-butoxycarbonyloxymethyl- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan 10

Til en blanding af 1,26 g (4,0 mmol) l,2-bis(4-hydroxy-methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 10 ml pyridin sættes gradvis ved 0°C 1,37 g (10 mmol) n-butylchlor-formiat, og derefter omrores blandingen i 12 timer 15 ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen sættes til 100 ml vand og ekstraheres med chloroform. Ekstraktopløsningen vaskes med vand og derefter med 5% svovlsyreopløsning og med vand og tørres derefter over magnesiumsulfat. Den ved inddampning af ekstraktopløsningen 20 under reduceret tryk vundne remanens renses ved silicag-elsø jlechromatograf i (ethylacetat, Rf-veerdi = 0,65), hvorved fås 1,43 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 69%). Smeltepunkt: 68-71°C.

25 IR-Spektrum (KBr) : 1740, 1695 (C^cnT1 NMR-Spektrum (CDCI3): <5 ppm= 0,92 (6H, t, -OCH2CH2CH2CH3 x 2) 1,34-1,43 (4H, m, -OCH2CH2CE^CH3 x 2) 30 1,59-1,67 (4H, m, -OCH2CH2CH2CH3 x 2) 2,67 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,52 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 4,13-4,18 (4H, m, -OCH2CH2CH2CH3 x 2) 5,81 (4H, s, >NCH20- x 2) 44

DK 162639 B

1 I overensstemmelse med den i Eks. 14 beskrevne fremgangsmåde fremstilles følgende forbindelser ud fra de tilsvarende udgangsmaterialer.

5 . 1,2-Bi s(4-(2-ethylhexyloxycarbonyloxymethyl)-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan, udbytte 86%.

Smeltepunkt: 58-61°C

IR-Spektrum (KBr): 1740, 1700 (C=0)cm_1 10 NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 0,85-0,91 (12H, m, -CH2CH3 x 2-1^2)3¾ x 2) 1,27-1,38 (16H, m, -CH2CH3 x 2-“(CH2)3CH3 x 2) 1,56-1,64 (2H, m, -OCH2CH< x 2) 15 2,67 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,52 (8H, s, >NCH2CO- X 4) 4,06-4,09 (4H, m, -OCE^CIK x 2) 5,81 (4H, S, >NCH20- x 2) 20 . l,2-Bis(4-phenoxycarbonyloxymethyl-3,5-dioxopipera-

zin-l-yl)ethan, udbytte 60%. Smeltepunkt: 138-140°C

IR-Spektrum (KBr): 1750, 1700 (C^JcnT1 25 NMR-Spektrum (CDCI3) : ppm= 2,69 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,56 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5,92 (4H, s, >NCH20- x 2) 30 7,16-7,41 (10H, m, aromatisk H) . 1,2-Bis(4-p-nitrobenzyloxycarbonyloxymethyl-3,5- dioxopiperazin-l-yl)ethan, udbytte 49%.

Smeltepunkt: 158-160,5°C

45

DK 162639 B

1 IR-Spektrum (KBr): 1750, 1700 (0=0)αη-1 NMR-Spektrum (CDCI3):Sppm= 2,68 (4H, s, >NCH2CH2N<) 5 3,53 (8H, s, >NCH2co_ x 4) 5,27 (4H, s, -OCH2-Ph x 2) 5,85 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,53 (4H, d, J=8,6Hz, aromatisk H) 8,23 (4H, d, J=8,6Hz, aromatisk H) 10

Eksempel 15: 1,2-Bis(4-o-methoxybenzoyloxymethyl- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan.

Til en blanding af 3,14 g (10 mmol) 1,2-bis(4-hydroxy-15 methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, 3,35 g (22 mmol) o-methoxybenzoesyre, 0,20 g 4-N,N-dimethylaminopyridin og 60 ml dichlormethan sættes gradvis ved 0°C 4,12 g (20 mmol).dicyclohexylcarbodiimid, og derefter omrøres blandingen i 6 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblan-20 dingen filtreres, og filtratet vaskes med vand og tørres. Den ved afdampning af opløsningsmidlet fra filtratet under reduceret tryk vundne remanens omkrystalliseres af ethylenglycolmonomethylether, hvorved fås 1,81 g af den i overskriften nævnte 25 forbindelse (udbytte 31%). Smeltepunkt: 163-164°C.

Analyse:

Beregnet for C28H30N4°10: C 57,73 H 5,19 N 9,62 30 Pundet: C 57,77 H 5,30 N 9,48 NMR-Spektrum (CDCI3):ppm= 2,70 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,55 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 46

DK 162639 B

1 3,88 (6H, s, -OCH3 x 2) 5,99 (4H, s, >NCH20- x 2) 6,91-6,97 (4H, m, aromatisk H) 7,43-7,50 (2H, m, aromatisk H) 5 7,72-7,75 (2H, m, aromatisk H) I overensstemmelse med den i Eks. 15 beskrevne fremgangsmåde fremstilles følgende forbindelser ud fra tilsvarende udgangsmaterialer.

10 . 1,2-Bis(4-(2-thenoyloxymethyl)-3,5-dioxopiperazin- l-yl)ethan, udbytte 43%. Smeltepunkt: 158-160°C.

Analyse: 15 Beregnet for 022Η22Ν4^2^8: C 49,42 H 4,15 N 10,48 Fundet: C 49,66 H 4,29 N 10,61 NMR-Spektrum (CDCI3 ) : <§ ppm= 20 2,71 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,57 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 6,00 (4H, s, >NCH20- x 2)

H

7,08 (2H, dd, J=5Hz · 4Hz, x 2) S7 25 7,57 (2H, dd, J=5Hz · 1Hz, Η-^Λ- x 2) S '

H

7,79 (2H, dd, J=4Hz · 1Hz, ^ y_ x 2) . 1,2-Bis(4-(2-furoyloxymethyl)-3,5-dioxopiperazin- 30 1-yl)ethan, udbytte 42%. Smeltepunkt: 166-167°C.

Analyse:

Beregnet for 022Η22Ν4θ^ο*ϊ5 H20: C 51,66 H 4,53 N 10,96 47

DK 162639 B

1 Fundet: C 51,79 H 4,41 N 10,89 NMR-Spektrum (CDCI3): 6ppm= 2,71 (4H, s, >NCH2CH2N<) 5 3,57 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 6,00 (4H, s, >NCH20- x 2) 6,50 (2H, dd, J=3,6Hz · 1,6Hz, x 2)

O

7,20 (2H, dd, J=3,6Hz · 0,7Hz, χ 2) 10 0

M

7.58 (2H, dd, J=l,6Hz · 0,7Hz, x 2) xO' . 1,2-Bis (4- (2-naphthyloxyacetoxymethyl) -3,5-dioxopipe- razin-l-yl)ethan, udbytte 30%« 15 Smeltepunkt: 193-195°C«

Analyse:

Beregnet for ¢351134^0104½ H20: C 62,51 H 5,10 N 8,10 20 Fundet: C 62,65 H 5,10 N 7,90 NMR-Spektrum (DMSO-dg):δ ppm= 2,60 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.58 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 25 4,92 (4H, s, -C0CH20- x 2) 5,79 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,20-7,88 (14H, m, naphthyl H) . 1,2-Bis(4-(2-p-chlorphenoxy-2-methylpropionyloxy- 30 methyl)-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan, udbytte 30%. Smeltepunkt: 108°C (omkrystalliseret af chloroform) 48

DK 162639 B

1 Analyse:

Beregnet for C32H3gN40iocl2: C 54,32 H 5,13 N 7,92 Fundet: C 54,07 H 5,01 N 7,7.6 5 NMR-Spektrum (CDCI3) : <^ppm= 1,56 (12H, s, >C(CH3)2 x 2) 2,52 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,44 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 10 5,84 (4H, s, >NCH20- x 2) 6,40-6,80") , i tt\ . (8H, m, phenyl H) 7,08-7,24j . 1,2-Bis(4-p-bromphenylthioacetoxymethyl-3, 5-dioxopi- 15 perazin-l-yl)ethan, udbytte 44%. Smeltepunkt: 138- 139°C.

Analyse:

Beregnet for C28H28N4S2OgBr2: 20 C 43,53 H 3,65 N 7,25

Fundet: C 43,66 H 3,82 N 7,21 NMR-Spektrum (CDCI3):Sppm= 2,65 (4H, s, >NCH2CH2N<) 25 3,49 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 3,59 (4H, s, -COCH2S- x 2) 5,79 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,27 (4H, d, J=8Hz, aromatisk H) 7,42 (4H, d, J=8HZ, aromatisk H) 1,2-Bis(4-p-fluorphenylthioacetoxymethyl-3,5-dioxopi-perazin-l-yl)ethan, udbytte 48%. Smeltepunkt: 103-104°C.

30 49

DK 162639 B

1 IR-Spektrum {KBr) : 1740, 1690 (C^cnf1 NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 2,66 (4H, s, >NCH2CH2N<) 5 3,50 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 3,53 (4H, s, -COCH2S- x 2) 5,78 (4H, s, >NCH20- x 2) 6,97-7,04 {4H, m, aromatisk H) 7,40-7,47 (4H, m, aromatisk H) 10 . 1,2-Bis(4-(1-naphthylacetoxymethyl)-3,5-dioxopipera- zin-l-yl)ethan, udbytte 45%. Smeltepunkt: 223-224°C (omkrystalliseret af chloroform) 15 Analyse:

Beregnet for 0351134^08**5 H20: C 65,54 H 5,35 N 8,49 Fundet: C 65,60 H 5,15 N 8,39 20 NMR-Spektrum (DMSO-d5):S ppm= 2,62 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,60 (8H, s, >NCH2CO- X 4) 4,14 (4H, s, -COCH?-naphthyl x 2) 5,70 (4H, s, >NCH20- x 2) 25 7,40 7,56 1 (14h, m, naphthyl H)

7,80-8,00 J

Eksempel 16: 1,2-Bis (4-(3-methoxycarbonylpropionyloxy- methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan 30

Til en blanding af 1,57 g (5 mmol) 1,2-bis ^-hydroxymethyl^, 5-dioxopiperazin-l-yl) ethan, 1,32 g (10 mmol) methylhydrogensuccinat, 0,10 g 4-N,N-dimethylaminopyri-din og 30 ml tørt dichlormethan sættes gradvis ved 50

DK 162639 B

1 0°C 2,06 g (10 mmol) dicyclohexylcarbodiimid opløst i 10 ml tørt dichlormethan, og derefter omrøres reaktionsblandingen i 1 dag ved stuetemperatur og filtreres. Filtratet vaskes med 5% vandig eddikesyreopløsning 5 og derefter med vand og tørres. Opløsningsmidlet afdampes fra filtratet under reduceret tryk, hvorved fås 2,24 g af den i overskriften nævnte forbindelse, udbytte 83%. Smeltepunkt: 134-139°C (omkrystalliseret af ethyl-englycolmonomethylether).

10 IR-Spektrum (KBr): 1720, 1700 (C=0)cm“l NMR-Spektrum (DMSO-dg):S ppm= 2,5-2,6 (8H, m, -COCH2CH2CO- x 2) 15 2,65 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,30 (6H, s, -COOCH3 x 2) 3,58 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5,76 (4H, s, >NCH20- x 2) 2q I overensstemmelse med den i Eks. 16 beskrevne fremgangsmåde fremstilles nedenstående forbindelser ud fra de tilsvarende udgangsmaterialer.

1,2-Bis(4-m-toluoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin-25 1-yl)ethan. Smeltepunkt: 157-158°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethylether).

Analyse:

Beregnet for C^gl^o^Og^ H20: 3Q C 60,10 H 5,58 N 10,01

Fundet: C 60,34 H 5,44 N 10,03 . 1,2-Bis(4-o-toluoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan. Smeltepunkt: 155-156°C (omkrystalliseret af ethylacetat).

51

DK 162639 B

1 Analyse:

Beregnet for ¢28^30^4^81 C 61,08 H 5,49 N 10,18 Fundet: C 61,17 H 5,69 N 10,22 5 NMR-Spektrum (CDCI3) : S ppxn= 2,57 (6H, s, -CH3 x 2) 2.70 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.56 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 6,00 (4H, s, >NCH20- x 2) 10 7,18-7,85 (8H, m, aromatisk H) . 1,2-Bis{4-o-fluorbenzoyloxymethyl-3,5-dioxopiperazin- l-yl)ethan. Smeltepunkt: 151-152°C.

15 NMR-Spektrum (CDCI3): <$ ppm= 2,73 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,59 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 6,04 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,07-7,92 (8H, m, aromatisk H) 20 . 1,2-Bis(4-(1-naphthoyloxymethyl)-3,5-dioxopiperazin- l-yl)ethan. Smeltepunkt: 206-207°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethylether) 25 Analyse:

Beregnet for 0341130^08*% H20: C 64,65 H 4,95 N 8,87 Fundet: C 64,36 H 4,89 N 8,77 30 NMR-Spektrum (CDC13):<fppm= 2.70 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3.57 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 6,11 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,43-8,89 (14H, m, aromatisk H) 52

DK 162639 B

1 . l,2-Bis(4-phenylacetoxymethyl-3,5-dioxopiperazin- 1-yl)ethan. Smeltepunkt: 130-132°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethylether).

5 Analyse:

Beregnet for C28H3QN4O8: C 61,08 H 5,49 N 10,18 Fundet: C 61,15 H 5,69 N 10,49 NMR-Spektrum (CDCI3) : <§ ppm= 10 2,62 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,51 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 3,63 (4H, s, -COCH2-Ph- x 2) 5,81 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,23-7,34 (10H, m, aromatisk H) 15 . 1,2-Bis(4-(2,4,5-trichlorphenoxyacetoxymethyl)- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan. Smeltepunkt: 140- 141°C (omkrystalliseret af ethylenglycolmonomethylether ) 20

Analyse:

Beregnet for C28H24N40iocl6: C 42,61 H 3,07 N 7,10 Fundet: C 42,77 H 3,18 N 6,90 25 NMR-Spektrum (CDCI3):S ppm= 2,68 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,53 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 4,71 (4H, s, -C0CH20- x 2) 30 5,90 (4H, s, >NCH20- x 2) 6,95 (2H, s, aromatisk H) 7,47 (2H, s, aromatisk H) 53

DK 162639 B

1 Eksempel 17: 1,2-Bis(4-o-carboxybenzoyloxymethyl- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan

Til en blanding af 1,69 g (6,6 mmol) benzylhydrogen-5 phthalat, 0,94 g (3 mmol) 1,2-bis(4-hydroxymethyl-3, 5-dioxopiperazin-l-yl) ethan, 0,05 g 4-N,N-dimethylami-nopyridin og 30 ml tørt dichlormethan sættes gradvis ved 0°C 1,24 g (6 mmol) dicyclohexylcarbomiid opløst i 10 ml tørt dichlormethan, og reaktionsblandingen 10 omrøres natten over ved stuetemperatur og filtreres.

Filtratet vaskes med 5% vandig eddikesyreopløsning og derefter med mættet vandig natriumbicarbonatopløsning og tørres. Den ved afdampning af opløsningsmidlet fra filtratet under reduceret tryk vundne remanens 15 renses ved silicagelsøjlechromatografi (ethylacetat: chloroform = 7:3), hvorved fås 1,16 g af benzylesteren af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 49%), smeltepunkt: 50-52°C. Til en opløsning af 1,16 g (1,47 mmol) af denne ester i 20 ml ethylacetat sættes 20 0,10 g 10% palladium-på-kul, og blandingen omrøres natten over under hydrogen ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen filtreres, og opløsningsmidlet afdampes fra filtratet under reduceret tryk, hvorved fås 0,40 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 25 45%). Smeltepunkt: 167-169°C.

IR-Spektrum (KBr): 1700 (C=0)cm~l.

NMR-Spektrum (DMSO-dø): Sppm= 30 2,67 (4H, S, >NCH2CH2N<) 3,61 (8H, S, >NCH2CO- x 4) 5,84 (4H, s, >NCH20- x 2) 7,5-7,8 (8H, m, aromatisk H) 13,27 (2H, bred s, -COOH) 54

DK 162639 B

1 Eksempel 18: l,2-Bis(4-(p-aminobenzoyloxymethyl)- 3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan.

Til en blanding af 0,63 g (2,0 mmol) 1,2-bis(4-hydroxy-5 methyl-3,5-dioxopiperazin-l-yl)ethan og 10 ml pyridin sættes gradvis ved 0°C 1,27 g (4,4 mmol) p-benzyloxy-carbonylaminobenzoylchlorid opløst i 12 ml pyridin, og derefter omrøres reaktionsblandingen i 1 time ved 0°C og efterfølgende i 16 timer ved stuetemperatur.

10 Den ved afdampning af opløsningsmidlet fra reaktions blandingen under reduceret tryk vundne remanens sættes til 50 ml vand og ekstraheres med chloroform (150 ml x 2). Ekstraktopløsningen vaskes med 10% svovlsyreopløsning og derefter med vand, vaskes yderligere med 15 mættet vandig natriumbicarbonatopløsning og derefter med vand og tørres. Den ved afdampning af opløsningsmidlet fra ekstraktopløsningen vundne remanens renses ved silicagelsøjlechromatografi (ethylacetat), hvorved fås 1,27 g af ben zyloxy carbony Ideri vatet af den i 20 overskriften nævnte forbindelse (udbytte 77,4%). Derivatet (1,27 g) opløses i en blanding af 80 ml ethylacetat og 80 ml ethanol og 0,13 g 10% palladium-på-kul tilsættes, og blandingen omrøres natten over under hydrogen ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen filtreres, 25 og filtratet inddampes. Den vundne remanens renses ved silicagelsøjlechromatografi (chloroform : methanol = 95:5) og omkrystalliseres af ether, hvorved fås 0,39 g af den i overskriften nævnte forbindelse (udbytte 45,7%). Smeltepunkt·: 196-199°C.

30 IR-Spektrum (KBr): 1695, 1600 (C=0)cm“l.

NMR-Spektrum (DMSO-dg):Sppm= 2,68 (4H, S, >NCH2CH2N<) 55

DK 162639 B

1 3,62 (8H, s, >NCH2CO- x 4) 5,77 (4H, s, >NCH20- x 2) 6,55 (4H, d, J=9Hz, aromatisk H) 7,57 (4H, d, J=9Hz, aromatisk H) 5

Til en opløsning af 0,88 g (1,6 mmol) af den således vundne i overskriften nævnte forbindelse i 20 ml pyridin sættes gradvis 0,25 ml (3,2 mmol) methansulfonylchlorid, og reaktionsblandingen omrøres i 1 time ved 0°C og 10 derefter i 2 timer ved stuetemperatur. Den ved afdampning af opløsningsmidlet fra reaktionsblandingen under reduceret tryk vundne remanens sættes til 100 ml vand og ekstraheres med 150 ml ethylacetat. Ekstraktopløsningen vaskes med 10% svovlsyreopløsning og derefter 15 med vand, vaskes yderligere med mættet vandig natriumbi-carbonatopløsning og derefter med vand og tørres.

Den ved afdampning af opløsningsmidlet fra ekstraktopløsningen vundne remanens renses silicagelsøjlechromato-grafi (ethylacetat), hvorved fås 0,43 g l,2-bis(4-2 0 (p-methansulfonylaminobenzoyloxymethyl)-3,5-dioxopipera- zin-l-yl)ethan (udbytte 38%). Smeltepunkt: 95-105°C.

IE-Spektrum (KBr): 1700, 1600 (C=0)cm"l 25 NMR-Spektrum (DMSO-dg):å ppm= 2,68 (4H, s, >NCH2CH2N<) 3,10 (6H, s, -S02CH3 x 2) 3,63 (8H, s, >NCH2C0- x 4) 5.85 (4H, s, >NCH20- x 2) 30 7,28 (4H, d, J=9Hz, aromatisk H) 7.86 (4H, d, J=9HZ, aromatisk H)

Claims

1. Bis-dioxopiperazinderivater kendeteg net ved, følgende generelle formel I: 5 ( Λ o Ί R-C-0-CH2-N n-ch2-- il) y-1 10 o 0 hvori R er en alkylgruppe med fra 1 til 17 kulstofatomer; en cycloalkylgruppe med 3 til 7 kulstof atomer; 15 en mono- eller dihalogeneret lavere alkylgruppe; en monocarboxyleret lavere alkylgruppe; en lavere alkylgruppe monosubstitueret med alkoxycarbonyl med 2 til 5 kulstofatomer; en lavere alkoxy lavere alkylgruppe; en phenoxy lavere alkylgruppe; en phenoxy lavere alkyl-20 gruppe substitueret på phenylksernen med 1 til 3 halogenatomer; en naphthyloxy lavere alkylgruppe; en phenylthio lavere alkylgruppe; en phenylthio lavere alkylgruppe monosubstitueret på phenylkærnen med halogen; en phenyl lavere alkylgruppe; en phenyl lavere alkylgruppe mono-25 substitueret på phenylkærnen med halogen, lavere alkyl eller hydroxy; en naphtyl lavere alkylgruppe; en phenyl lavere alkenylgruppe; en phenyl lavere alkenylgruppe mono- eller disubstitueret på phenylkærnen med hydroxy, lavere alkoxy eller acyloxy med 2 til 5 kulstofatomer; 30 en phenylgruppe; en phenylgruppe mono- eller disubstitu-eret med halogen, lavere alkyl, lavere alkoxy, hydroxy, acyloxy med 2 til 5 kulstofatomer, methylendioxy, nitro, amino, methansulfonylamino eller carboxy; en naphtyl-gruppe; en heterocyclisk gruppe valgt fra gruppen bestå- DK 162639 B 1 ende af pyridyl, furyl og thienyl; en alkoxygruppe med 1 til 8 kulstofatomer; en phenyl lavere alkoxygruppe; en phenyl lavere alkoxygruppe monosubstitueret på phenylkærnen med nitro eller lavere alkoxy; en pheno-5 xygruppe; eller en phenoxygruppe monosubstitueret på phenylkærnen med halogen; eller et ugiftigt salt heraf.

1 PATENTKRAV

2. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er en lavere alkylgruppe; en monohalogen- 10 er et lavere alkylgruppe; en phenoxyleret lavere alkyl gruppe; en phenoxyleret lavere alkylgruppe substitueret på phenylkærnen med 1 til 3 halogenatomer; en phenylthio lavere alkylgruppe; en phenylthio lavere alkylgruppe monosubstitueret på phenylkærnen med halogen; en phenyl 15 lavere alkylgruppe; en phenyl lavere alkylgruppe monosubstitueret på phenylkærnen med halogen; en phenyl lavere alkenylgruppe; en phenyl lavere alkenylgruppe mono- eller disubstitueret på phenylkærnen med lavere alkoxy eller acyloxy med 2 til 5 kulstofatomer; en 20 phenylgruppe; en phenylgruppe monosubstitueret med halogen, lavere alkyl, lavere alkoxy eller acyloxy med fra 2 til 5 kulstofatomer; en heterocyclisk gruppe valgt fra gruppen bestående af furyl og thienyl; eller en lavere alkoxygruppe. 25

3. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er en lavere alkylgruppe.

4. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet 30 ved, at R er methyl.

5. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er en phenoxy lavere alkylgruppe substitueret på phenylkærnen med 1 til 3 halogenatomer. DK 162639 B

6. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er p-chlorphenoxymethyl,2,4-dichlorphenoxyme-thyl, 2,4,5-tri-chlorphenoxymethyl eller 1-p-chlorphen-oxy-l-methylethyl. 5

7. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er en phenylthio lavere alkylgruppe monosubstitueret på phenylkærnen med halogen.

8. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er p-fluorphenylthiomethyl eller p-bromphenyl-thiomethyl.

9. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet 15 ved, at R er en phenyl lavere alkylgruppe eller en phenyl lavere alkylgruppe monosubstitueret på phenylkærnen med halogen.

10. Forbindelse ifølge krav 1,. kendetegnet 20 ved, at R er benzyl eller o-chlorbenzyl.

11. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er en phenylgruppe eller en phenylgruppe monosubstitueret med halogen eller lavere alkoxy. 25

12. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er phenyl, o-fluorphenyl, o-chlorphenyl eller o-methoxyphenyl.

13. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er furyl eller thienyl.

14. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er en lavere alkoxygruppe. DK 162639 B 1

15. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R er methoxy.

16. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet 5 ved, at R er isobutoxy.

17. Fremgangsmåde til fremstilling af bis-dioxopipera-zinderivater med den generelle formel I: f n o N io 0 \ I 7 /T\ R-C-0-CH2-N n-ch2— 1J ' 0)2 15 hvor R har samme betydning som i krav 1, kendetegnet ved, at en forbindelse med formlen II: i V 1 20 7—\ , . H0-CH2-N N-CH2— (n) J-' l o ) 2 25 omsættes med et reaktivt derivat af en forbindelse med den generelle formel III: RCOOH (III) 30 hvor R har den samme betydning som i krav 1.

18. Fremgangsmåde ifølge krav 17, kendetegnet ved, at derivatet af forbindelsen med den generelle formel (III) er et chlorid eller et anhydrid. DK 162639 B

19. Farmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det som anti-tumoraktiv bestanddel indeholder en forbindelse ifølge krav 1 i blanding med et farmaceutisk tolerabelt fortyndingsmiddel eller bæréstof. 5 10 15 20 25 30