DK160271B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 5-halogenvinyl-uracil-derivater - Google Patents

Description

DK 160271 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 5-halogenvi-nyl-uracilderivater med antiviral virkning og med den almene formel

XJ

10 H0 1 o

HO

15 hvor R er et kloratom, bromatom eller jodatom eller fysiologisk acceptable salte deraf med baser som fx salte med alkalimetaller såsom natrium og kalium. Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i krav 1's kendetegnende del angivne.

20 I forbindelserne med formel I er halogenvinylgruppen i E-konfiguration og pyrimidinringen er i β-konfiguration i forhold til cyklopentanringen.

Deoxyuridinderivater såsom 2'-deoxy-5-joduridin (Prussoff og Goz: Handbook of Experimental Pharmacology, 25 Part II of Antineoplastic and Immunosuppressive Agents,

Springer-Verlag, New York 1975, side 272-347) og 2'-deoxy-5-vinyluridin (Cheng et al, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 10, 1, 119-122 (1976)) har vist sig at besidde antiviral virkning. Disse forbindelsers virkning er imidlertid 30 ikke synderlig specifik. GB Patentskrift nr. 1.601.020 angår E-5-(2-brom- og 2-jod-vinyl)-2'-deoxyuridin, der beskrives som havende selektiv antiviral virkning mod Herpes simplex vira. Der er imidlertid et behov for forbindelser med bedre og mere selektiv antiviral virkning.

35 Forbindelserne med formel I er analoge karbocykli- ske uracilderivater som har forbedret selektiv virkning 2

DK 160271 B

mod vira, navnlig hørende til gruppen Herpetoviridae.

Det vil forstås at opfindelsen omfatter fremstilling af de individuelle (+) og (-)-isomere former af forbindelserne med formel I så vel som fuldstæn-5 dige eller partielle racemiske blandinger af sådanne iso-merer. På grund af deres strukturelle lighed med naturligt forekommende forbindelser såsom tymidin er lR,3S-hydroxy-4R-hydroxymetyl-cyklopentyl-isomererne af særlig interesse.

De ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser kan eksistere i tautomere former, fx i formen

OH

X

is HO j »*'

HO

20 og det vil forstås at fremstilling af sådanne tautomere former ligger inden for den foreliggende opfindelses rammer.

Det viste sig først at de ifølge opfindelsen fremstil-25 lede forbindelser var yderst effektive substrater for thymi-dinkinase frembragt af Herpes simplex virus type 1 og Herpes simplex virus type 2, hvilket således kraftigt lod formode at forbindelserne ville have selektiv virkning mod stammer af herpesvira, fx Herpes simplex vira. (J.C. Drach, 30 Annual Reports in Medicinal Chemistry, 15, 1980, 149-161). Yderligere arbejde har virkelig fastslået at disse forbindelser er kraftigt selektive antivirale midler.

Det bør bemærkes at forbindelserne med formel I mangler den glykosidbinding der danner stedet for såvel kemisk 35 som biologisk spaltning i forbindelserne kendt fra britisk patentskrift nr. 1.601.020. Stabilitet mod glykosidspaltning er· naturligvis et værdifuldt træk hos forbindelser til anvendelse in vivo.

3

DK 160271 B

I lyset af deres antivirale virkning egner forbindelserne med formel I og deres fysiologisk acceptable salte med baser sig til behandling af forskellige sygdomme fremkaldt af Herpetoviridae, navnlig Herpes simplex vira, hos 5 mennesker og dyr. Sådanne sygdomme indbefatter stomatitis og udslet, helvedesild, hjernebetændelse og herpesinfek-tioner i øje og genitalier.

Biologiske forsøg 10 Der er foretaget sammenligningsforsøg mellem den ene af de fra ovennævnte britiske patentskrift kendte forbindelser nemlig E-5-(2-bromvinyl)-2'-deoxyuridin, i det følgende betegnet BVDU, og den ved den foreliggende fremgangsmåde fremstillede karbocykliske analog til denne for-15 bindelse, den i omstående eksempler 1 og 2 beskrevne forbindelse, der i det følgende betegnes cBVDU.

1) Ved en undersøgelse in vivo blev grupper på hver fire mus udsat for påvirkning af HSV I virus og fik derefter subkutant indgivet enten BVDU eller cBVDU i doser på 20 100 mg/kg eller 25 mg/kg i fire dage. Både ved doserne på 100 mg/kg og 25 mg/kg døde alle de med BVDU behandlede mus såvel som alle mus i kontrolgruppen. Blandt de mus der blev behandlet med cBVDU overlevede alle de mus der havde fået doser på 100 mg/kg og én af dem der havde fået doser på 25 25 mg/kg.

2) Andre undersøgelser har vist at cBVDU har højere substrataffinitet til HSV I thymidin-kinase end BVDU. Det er en vigtig faktor som tyder på forøget selektivitet. Således er thymidin-kinase et enzym som bevirker fosforyle- 30 ring af nukleosider. Nukleosid-trifosfater inkorporeres i DNA ved hjælp af et andet enzym, DNA-polymerase. HSV I er et DNA-virus som producerer sin egen thymidin-kinase og DNA-polymerase. Celler der er inficeret med HSV I indeholder således to sæt enzymer mens uinficerede celler kun 35 indeholder cellens eget enzymsæt. BVDU og cBVDU er begge nukleosid-analoger som kan fosforyleres ved indvirkning af thymidin-kinase. Trifosfaterne af disse forbindelser 4

DK 160271 B

inhiberer DNA-polymerase og inhiberer følgelig formeringen. Både BVDU og cBVDU har højere substrataffinitet til HSV I thymidin-kinase end cellulær thymidin-kinase. Undersøgelser har imidlertid vist at graden af substrataffini-5 tet af cBVDU er ca. fire gange så høj som BVDU's substrataffinitet. Det er en særdeles ønskelig egenskab for det der ønskes er en forbindelse som selektivt inhiberer den vira-le DNA-formering og ikke den cellulære DNA-formering.

Ud fra den nyeste viden på det antivirale område 10 kan det siges at det er vanskeligere at finde forbindelser med høj antiviral selektivitet end høj antiviral aktivitet, med andre ord at det er et problem at finde frem til forbindelser med lav eller acceptabel cytotoxicitet.

Nedenstående tabel viser en sammenligning mellem 15 den af HSV I og den af human thymidin-kinase fremkaldte fosforyleringsgrad (udtrykt som procent deoxythymidin) af CBVDU og BVDU.

Forbin- % Fosforylering bevirket af thymidin-kinase delse (udtrykt som % deoxythymidin) HSV I Human thymi- Forhold din-kinase cBVDU 1610 126 12,8:1 BVDU 180 59 3,0:1 25 _ 3) Ved undersøgelse af stabiliteten af cBVDU i sammenligning med BVDU inde i menneske-blodplader indeholdende thymidin-fosforylase har det vist sig at cBVDU har højere 30 stabilitet end BVDU. Således undergik BVDU i løbet af en periode på 24 timer total glykosidisk spaltning bevirket af enzymet thymidin-fosforylase under dannelse af den inaktive forbindelse bromvinyluracil, mens cBVDU forblev stabilt. Ustabilitet under de in vivo herskende betingelser 35 har gjort ellers lovende antivirale forbindelser ubrugeli-

DK 160271 B

5 ge og det. er derfor væsentligt at de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen tilvejebragte forbindelser er stabile i menneskeblod.

5

De omhandlede forbindelser kan oparbejdes til indgift på en hvilken som helst konventionel måde såsom i form af farmaceutiske præparater der indeholder mindst én forbindelse 10 med formel I eller et fysiologisk acceptabelt salt deraf med en base tilpasset til brug inden for den humane eller veterinære medicin. Sådanne præparater kan foreligge til brug på konventionel måde i blanding med en eller flere fysiologisk acceptable bærere eller excipienser. Præparaterne kan om ønsket yderligere indeholde et eller flere andre terapeutiske midler som om ønsket kan være et anderledes antiviralt middel.

De omhandlede forbindelser kan således være formuleret til oral, buccal, parenteral, lokal eller rektal indgift.

^ Tabletter og kapsler til oral indgift kan indeholde konventionelle excipienser såsom bindemidler, fx sirup, akaciegummi, gelatine, sorbitol, tragant, slim af stivelse eller polyvinylpyrrolidon, fyldstoffer, fx laktose, sakkarose, majsstivelse, kalciumfosfat eller sorbitol, smøremidler som fx magniumstearat, talkum, polyætylenglykol eller silika, desintegreringsmidler som fx kartoffelstivelse eller natriumstivel-se-glykolat, eller befugtningsmidler såsom natriumlaurylsul-fat. Tabletterne kan være belagte i overensstemmelse med vel- 30 35 6

DK 160271 B

kendte metoder inden for fagområdet. Orale flydende præparater kan være i form af fx vandige eller olieagtige suspensioner, opløsninger, emulsioner, safter eller eliksirer, eller kan foreligge som et tørt produkt til rekonstitution med 5 vand eller anden passende bærevæske før anvendelse. Sådanne flydende præparater kan indeholde konventionelle additiver såsom suspenderingsmidler, fx sorbitolsirup, metylcellulose, glykose/sukkersirup, gelatine, hydroxymetylcellulose, karboxy-metylcellulose, aluminiumstearatgel eller hydrogenerede spise-10 lige fedtstoffer, emulgeringsmidler, fx lecithin, sorbitan- monooleat eller akacia, ikke-vandige vehikler (som kan indbefatte spiselige olier), fx mandelolie, fraktioneret kokosolie, olieestere, propylenglykol eller ætylalkohol,. og konserveringsmidler som fx metyl- eller propyl-hydroxybenzoater eller 15 sorbinsyre. Forbindelserne kan også være formuleret som suppositorier, fx indeholdende konventionelle suppositoriebaser såsom kakaosmør eller andre glycerider.

Til buccal indgift kan præparaterne have form af tabletter eller pastiller formuleret på konventionel måde.

2ø De omhandlede forbindelser kan også formuleres til injektion og kan foreligge i enhedsdosisform i ampuller eller i flerdosisbeholdere ved et tilsat konserveringsmiddel. Præparaterne kan tage form som suspensioner, opløsninger, eller emulsioner i olieagtige eller vandige væsker, og 25 kan indeholde formuleringsmidler såsom suspenderingsmidler, stabiliseringsmidler og/eller dispergeringsmidier. Alternativt kan den aktive ingrediens være i pulverform til opbygning med en passende vehikel, fx sterilt pyrogenfrit vand, før anvendelsen.

3g Til lokal indgift kan de omhandlede forbindelser formuleres som salver, cremer, lotioner, pulvere, pessarer, sprøjtepræparater, aerosoler eller dråbepræparater (fx øjen-dråber eller næsedråber). Salver og cremer kan fx formuleres med en vandig eller olieagtig basis med tilsætning af 35 passende fortykningsmidler og/eller geleringsmidler. En sådan basis kan fx indbefatte vand og/eller en olie såsom flydende- paraffin eller en vegetabilsk olie såsom arakisolie eller risinusolie. Fortykningsmidler som kan anvendes, indbe- 7

DK 160271 B

fatter blød paraffin, aluminiumstearat, cetostearylalkohol, polyætylenglykoler, hydrogenerede lanoliner og bivoks.

Lotioner kan formuleres med et vandigt eller olieag-tigt grundlag og vil almindeligvis også indeholde et eller 5 flere emulgeringsmidler, stabiliseringsmidler, dispergerings-midler, suspenderingsmidler, fortykningsmidler eller farvestoffer.

Pulvere kan formuleres ved hjælp af et hvilket som helst passende pulvergrundlag, fx talkum, laktose eller sti-1 q velse. Dråbepræparater kan formuleres med vandige eller ikke-vandige grundlag som også omfatter et eller flere disperge-ringsmidler, opløseliggørelsesmidler eller suspenderingsmidler .

Aerosolsprøjtepræparater leveres hensigtsmæssigt i form 15 af under tryk værende emballager, med anvendelse af et passende drivmiddel, fx diklordifluormetan, triklorfluormetan, diklor tetr aæt an, kulstofdioxyd eller en anden passende gas.

De omhandlede farmaceutiske præparater kan også indeholde andre aktive ingredienser såsom antimikrobielle midler eller 20 konserveringsmidler.

Præparaterne kan indeholde fra 0,1 til 99% af det aktive materiale. Til lokal administration vil præparatet fx generelt indeholde fra 0,1 til 10% mere foretrukket 0,5 til 5% af det aktive materiale.

25 Til lokal administration er den daglige dosis der anvendes til behandling af et voksent menneske fra 0,1 mg til 100 mg, fortrinsvis 0,5 mg til 10 mg. Imidlertid vil det forstås at omfattende hudinfektioner kan kræve anvendelse af større doser.

30 Til systemisk indgift vil den daglige dosis der anven des til behandling af et voksent menneske ligge fra 50 mg til 5 g, fortrinsvis 100 mg til 2 g, hvilket kan indgives i 1 til 4 daglige doser, fx i afhængighed af indgiftsvejen og patientens tilstand. Når præparaterne omfatter dosisenheder 35 vil hver enhed fortrinsvis indeholde 25 mg til 2 g aktiv ingrediens, fx 50 mg til 500 mg. Til alvorlige infektioner kan forbindelserne indgives ved intravenøs infusion under an- 8

DK 160271 B

vendelse af fx 0,1 til 10 mg/kg/time af den aktive ingrediens .

Hvis man fremstiller de omhandlede forbindelser ved den fremgangsmåde der i krav 1 er betegnet a), udføres 5 reaktionen hensigtsmæssigt i et medium såsom vand, en alkohol, fx metanol eller ætanol, en halogeneret kulbrinte fx kloroform eller kulstoftetraklorid eller en substitueret amid, fx N, N-dimetylformamid, og ved en temperatur i området fra 0°C til +100°C, fortrinsvis fra +30°C 10 til +70°C.

Et velegnet reagens til halogenering er fx et N-halogenamid eller -imid såsom N-bromsuccinimid, N-klor-succinimid, N-jodsuccinimid, N-bromftalamid, N-bromacet-amid, N-bromkaprolaktam eller l,3-dibrom-5,5-dimetyl-hydan-15 toin. Alternativt kan der anvendes molekylært halogen, fx jodklorid, klor eller brom.

I vandigt medium gennemføres behandlingen af en forbindelse med formel II med et halogeneringsmiddel hensigtsmæssigt i nærværelse af en base såsom kaliumacetat.

20 Når forbindelsen med formel II anvendes i form af et salt kan saltet være med en uorganisk eller organisk base. Velegnede salte indbefatter alkalimetalsalte, fx natriumeller kaliumsalte, jordalkalimetalsalte, fx kalciumsalte, 25 30 35

DK 160271 B

9 eller organiske salte, fx triætylaminsalte eller pyridinsal-te.

12 3

Hvor R , R eller R repræsenterer en beskyttelsesgruppe kan den være en hvilken som helst konventionel beskyttel-5 sesgruppe, fx som beskrevet i "Protective Groups in Organic Chemistry", redigeret af J.F.W. McOmie (Plenum Press, 1973). Eksempler på velegnede beskyttelsesgrupper er alkylgrupper såsom metyl, t-butyl eller metoxymetyl, aralkylgrupper såsom benzyl, difenylmetyl eller trifenylmetyl, heterocykliske 1Q grupper såsom tetrahydropyranyl, acylgrupper såsom acetyl og silylgrupper såsom trialkylsilylgrupper, fx trimetylsilyl.

Beskyttelsesgrupperne kan fjernes ved konventionelle metoder hvorved der vindes en forbindelse med formel I. Således kan fx en alkylgruppe, arylgruppe, silyl-15 gruppe eller en heterocyklisk gruppe fjernes ved solvolyse, fx hydrolyse under sure eller basiske betingelser, og en aralkylgruppe kan fraspaltes med et bortrihalogenid fx bortriklorid i et opløsningsmiddel såsom metylenklorid og ved lav temperatur.

20 Forbindelserne med formel II kan fremstilles ved fjer nelse af beskyttelsesgruppen fra karboxylgruppen i en forbindelse med formlen OR1 _^C02r4

25 N

U « III

30 )—' r2o' 12 3 .

hvor R , R og R har de tidligere angivne betydninger og 4 R er en karboxylbeskyttelsesgruppe.

4 R kan være en hvilken som helst konventionel karbox-35 * ylbeskyttelsesgruppe såsom en alkylgruppe, fx metyl eller 4 ætyl, eller en aralkylgruppe, fx benzyl. Gruppen R kan fra-

DK 160271 B

10 spaltes ved konventionelle midler, fx ved hydrolyse under basiske betingelser (fx under anvendelse af vandigt natrium-hydroxyd). Fjernelsen af beskyttelsesgruppen vil generelt kunne effektures ved en temperatur i området fra 0 til +50°C.

4 o 5 Om ønsket kan fjernelsen af beskyttelsesgruppen R også være ledsaget af fjernelsen af en hvilken som helst beskyttelses-12 3 o gruppe R , R eller R hvor en sådan er til stede.

Forbindelserne med formel III kan fremstilles ved omsætning af en forbindelse med formlen 10 OR1

1 „HgX

ry oA»/ 15 P30 R2/ 20 i 2 3 hvor R , R og R har de ovenfor angivne betydninger og X er en anion, fx en kloridion, med en ester af akrylsyre med formlen: ch2=chco2r4 25 4 hvor R har den ovenfor angivne betydning.

Omsætningen gennemføres hensigtsmæssigt i nærværelse af et overgangsmetalkompleks såsom dilithiumpalladiumtetra-klorid i et opløsningsmiddel såsom en alkohol, fx metanol, 30. acetonitril, eller vand og ved en temperatur i området fra 0 til +50°C.

Forbindelserne med formel IV kan fremstilles ved omsætning af en forbindelse med formlen 35

DK 160271 B

11 OR1

A

X) 5 R30 r2o 10 1 2 3 hvor R , R og R har de ovenfor angivne betydninger, med et merkurisalt HgX2 hvor X har den ovenfor angivne betydning.

Merkurisaltet kan fx være merkuriacetat eller et merkurihalogenid, fx merkuriklorid. Om ønsket kan anionen X i forbindelser med formel IV udskiftes efter omsætning af 15 en forbindelse med formel V med et merkurisalt. Fx kan en forbindelse med formel IV, hvori X repræsenterer en acetation, omdannes til en forbindelse med formel IV, hvori X repræsenterer en kloridion, ved omsætning med natriumklorid.

Reaktionen gennemføres hensigtsmæssigt i et opløsnings- 20 middel såsom vand, acetonitril eller en alkohol, fx metanol, ved en temperatur i området fra 0 til +100°C.

Forbindelserne med formel V kan fremstilles ved reduktion med en forbindelse med formlen 25 OR1

A

N I

cXX vi ” "Xj 2 ^

RO

1 2 hvor R og R har de ovenfor angivne betydninger, om nød-35 vendigt efterfulgt af indføringen af en beskyttelsesgruppe R3.

DK 160271 B

12

Velegnede reduktionsmidler til denne reaktion indbefatter alkalimetal- eller jordalkalimetal-borhydrider, såsom natriumborhydrid, eller hydrogen i nærværelse af en katalysator såsom palladium på kulstof. Denne reaktion gennem-5 føres hensigtsmæssigt i et organisk opløsningsmiddel såsom en alkohol, fx metanol eller ætanol, eller en æter, fx te-trahydrofuran, ved en temperatur på fx -20 til +80°C.

3 Når det ønskes at indføre en beskyttelsesgruppe R kan dette udføres ved konventionelle metoder.

1 g Når R i de således fremstillede forbindelser med formel V repræsenterer en beskyttelsesgruppe kan det være hensigtsmæssigt på dette trin at fjerne beskyttelsesgruppen, fx ved hydrolyse under sure betingelser under anvendelse af fx saltsyre i vandig metanol.

15 Forbindelserne med formel VI kan fremstilles ved hy drolyse af en forbindelse med formlen OR1 Λ N i

20 t Μ VII

(r50)2ch^/~J| 2'* 25 R° 12 5 hvor R og R har de ovenfor angivne betydninger og R repræsenterer en substituent afledt fra en alkohol eller diol R^OH, under sure betingelser.

30 Gruppen R^ kan fx være en C^_g alkylgruppe, fx en metylgruppe, eller en aralkylgruppe, fx en benzylgruppe. Al- 5 ternativt kan acetalgruppen (R O^CH- være afledt af en diol således at den har strukturen.

35 f (CH2)n^^CH-

DK 160271 B

13 hvor n fx er 2 eller 3.

Velegnede syrer er både organiske og uorganiske syrer såsom eddikesyre, trifluoreddikesyre, saltsyre og svovlsyre. Reaktionen kan gennemføres ved en hvilken som helst 5 temperatur i området fra 0 til 100°C.

Forbindelserne med formel VII kan fremstilles ved ringslutning af en forbindelse med formlen / oh1

HN N

<r5o,2CV^I Y

\ / 0 VIII

15 r2o/ 12 5 hvor R , R op R har de tidligere angivne betydninger og 20 R^ er en fraspaltelig gruppe. Velegnede fraspaltelige grupper R° indbefatter en C^_g-alkoxygruppe, fx en metoxy- eller ætoxygruppe, en sulfonyloxygruppe, fx en metansulfonyloxy-gruppe eller toluen-p-sulfonyloxygruppe, eller et halogenatom, fx et kloratom eller bromatom.

25

Ringslutningen gennemføres ved at behandle en forbindelse med formel VIII med en base såsom ammoniak, triætylamin, pyridin eller natriumkarbonat. Reaktionen kan gennemføres i et hvilket som helst passende opløsningsmiddel såsom vand, en alkohol, fx metanol, eller en halogeneret kulbrinte, fx 20 metylenklorid, ved en temperatur i området fra 0 til +100°C.

Det vil forstås at hvor R^ repræsenterer hydrogen kan forbindelserne med formel VIII eksistere i den alternative ke-toform.

Forbindelserne med formel VIII kan fremstilles ved 35 acylering af en forbindelse med formlen

DK 160271 B

14 (R 0)2chV^\^nh X(^^nh2 / o 2' 5 RZ0

IX

^ hvor og R^ har de tidligere angivne betydninger, med et acyleringsmiddel med formlen

O

15 r6/^A.r7 6 7 hvor R har den tidligere angivne betydning og R repræsenterer et let udskifteligt atom eller en let udskiftelig gruppe. R kan fx være et halogenatom såsom klor eller brom, 20 en sulfonyloxygruppe såsom metansulfonyloxy eller toluen-p-sulfonyloxy eller en acyloxygruppe, dvs. således at forbindelsen med formel X er et blandet anhydrid dannet fx af et alkylhalogenformiat såsom ætylklorformiat.

Acyleringen kan gennemføres i et opløsningsmiddel så-25 som en keton, fx acetone, en halogeneret kulbrinte, fx kloroform, en ester, fx ætylacetat, eller en blanding af sådanne opløsningsmidler, ved en temperatur i området fra -20 til +50°C. Når R^ repræsenterer et halogenatom kan omsætningen hensigtsmæssigt gennemføres i nærværelse af et syrebindende ^ middel såsom pyridin, triætylamin eller natriumbikarbonat.

Forbindelserne med formel IX kan fx fremstilles ved en Curtius-reaktion. Således kan forbindelserne med formel IX vindes ved aminering af det som mellemprodukt forekommende isocyanat fremstillet ved fx konventionelle metoder, ud-35 fra en forbindelse med formlen

DK 160271 B

15 (r5o) 9ca/\^^co.N,.

y 5 r2° '

XI

2 5 hvor R og R har de tidligere angivne betydninger.

Amineringen kan gennemføres ved at anvende gasfor-^ 8 migt ammoniak eller en opløsning af ammoniak i et opløsningsmiddel såsom en kulbrinte, fx benzen eller toluen, eller en halogeneret kulbrinte, fx kloroform.

Reaktionen gennemføres hensigtsmæssigt i et organisk opløsningsmiddel såsom en æter, tetrahydrofuran, en amid, 15 fx Ν,Ν-dimetylformamid, en halogeneret kulbrinte, fx kloroform eller en kulbrinte, fx benzen, ved en temperatur på fx -20 til +50°C.

Forbindelserne med formel XI kan fremstilles ved omsætning af en forbindelse med formlen 20 (R50),CH ^COR8 25 R2o' 2 5 8 hvor R og R har de ovenfor angivne betydninger og R repræsenterer en hydroxylgruppe eller et let udskifteligt atom o 8 eller en let udskiftelig gruppe, eller når R repræsenterer 30 en hydroxylgruppe, et salt deraf, med en azidkilde.

Det let udskiftelige atom eller den let udskiftelige 8 7 gruppe R kan være som defineret tidligere for gruppen R .

O

Når R° repræsenterer en hydroxylgruppe er azidkilden fortrinsvis et acylazid, fx et fosforazid såsom difenylfos-35 o 8 forylazid. Når R repræsenterer et let udskifteligt atom eller en let udskiftelig gruppe, fx et kloratom, kan azidkilden fx være et alkalimetal- eller jordalkalimetalazid såsom natrium-

DK 160271 B

16 azid.

Reaktionen gennemføres hensigtsmæssigt i et organisk opløsningsmiddel såsom en æter, fx tetrahydrofuran, et amid, fx Ν,Ν-dimetylformamid, en halogeneret kulbrinte såsom kloro-5 form eller en kulbrinte fx benzen, og ved en temperatur i området fra 0 til +150°C, fortrinsvis fra 50 til 100°C, hensigtsmæssigt under en atmosfære af en inaktiv gas, såsom nitrogen.

Salte af forbindelserne med formel XII kan være dan-1q net med uorganiske eller organiske baser. Velegnede salte indbefatter aminsalte såsom triætylaminsalte, alkalimetalsalte såsom natriumsalte og jordalkalimetalsalte såsom kalciumsalte.

O

Forbindelserne med formel XII, hvori R er et let 15 udskifteligt atom eller en let udskiftelig gruppe kan frem- g stilles ud fra de tilsvarende forbindelser hvori R er en hydroxylgruppe ved standardmetoder.

Forbindelserne med formel XII kan fremstilles ved fjernelse af beskyttelsesgruppen fra en forbindelse med formlen 20 (R50) 2C^^y^C02R9 r1o/ χιϊι 25 5... 9

hvor R og R har de tidligere angivne betydninger og R

repræsenterer en beskyttelsesgruppe.

30 R^ kan være en hvilken som helst hensigtsmæssig be skyttelsesgruppe såsom en alkylgruppe, fx en metoxymetylgrup-pe, eller en aralkylgruppe, fx en benzylgruppe, difenylmetyl-gruppe eller trifenylmetylgruppe.

Fjernelsen af beskyttelsesgruppen kan fx udføres ved 35 hydrolyse, fx under basiske betingelser. Velegnede baser indbefatter kaliumkarbonat og natriumbikarbonat.

Reaktionen kan gennemføres i et vandigt reaktionsmedi-

DK 160271 B

17 um såsom vand, en vandig alkohol, fx vandig metanol, eller en vandig keton, fx vandig acetone, ved en temperatur i området fra 0 til +100°C.

Forbindelserne med formel XIII kan fremstilles ved 5 reduktion af en forbindelse med formlen <r5o>2chv^n/co2r9 li 10 , /

RO

2 5 9 hvor R , R og R har de tidligere angivne betydninger.

Reduktionen kan gennemføres under anvendelse af hy-15 drogen i nærværelse af en metalkatalysator såsom palladium, platin, platinoxyd, rhodium eller Raney nikkel, som fx kan være understøttet på trækul, eller der kan anvendes en homogen katalysator såsom tris-trifenylfosfinrhodiumklorid.

Reduktionen kan gennemføres i et organisk opløsnings-20 middel såsom en alkohol, fx ætanol, en ester såsom ætylacetat eller en æter fx tetrahydrofuran ved en temperatur i området fra 0 til 100°C.

Forbindelserne med formel XIV kan fremstilles ved behandling af en forbindelse med formlen 25

iR50)2Cl^£02H

30 0>>v^b

X

hvor R^ har den tidligere angivne betydning, eller et salt deraf, med en base hvorefter det således fremstillede mellemprodukt omsættes med et reagens der er i stand til at indføde 2 9 -33 re beskyttelsesgrupperne R og R . Velegnede baser til reaktionen indbefatter alkyllithium, fx n-butyllithium, alkalime-talhydrider, fx natriumhydrid og lithiumdiisopropylamid/hexa-

DK 160271 B

18 metylfosforamid. Velegnede reagenser til indføring af beskyt- 2 9 telsesgrupperne R og R er fx alkylhalogenider eller aral-kylhalogenider såsom metoxymetylklorid og benzylbromid.

Når forbindelsen med formel XV er i form af et salt kan den være et hvilket som helst uorganisk eller organisk basesalt såsom et alkalimetalsalt, fx natriumsalt, jordal-kalimetalsalt, fx kalc'iumsalt eller en amin fx et triætyl-aminsalt.

Reaktionen gennemføres hensigtsmæssigt i et organisk opløsningsmiddel såsom en æter, fx tetrahydrofuran, eller en kulbrinte, fx benzen, ved en temperatur på -50 til +80°C, fortrinsvis 0 til +50°C.

Forbindelserne med formel XV kan fremstilles ved at omsætte en forbindelse med formlen 15

CHO ^ £0oH

tf / \ xvi 0 b

20 X

5 eller et salt deraf med en alkohol eller diol R OH, hvor R~* har den ovenfor angivne betydning, eller ved transacetali- 25 sering.

Ved omsætning af forbindelsen med formel XVI med R^OH vil alkoholen eller diolen i almindelighed også tjene som reaktionsopløsningsmidlet, men der kan om ønsket anvendes coop løsningsmidler såsom en kulbrinte, fx benzen eller pentan.

30 Transacetaliseringen kan gennemføres under anvendelse af en acetal såsom 2,2-dimetoxypropan.

Protonkilden ved denne reaktion kan fx være en mineralsk eller organisk syre såsom saltsyre, svovlsyre eller eddikesyre, eller en kationbytterharpiks såsom "Dowex" w 35 50GX8. Reaktionen gennemføres hensigtsmæssigt ved en tempe ratur i området fra -20 til +50°C.

Forbindelserne med formel XVI kan fremstilles ved

DK 160271 B

19 ozonolyse af en forbindelse med formlen å 10 hvor R·^ er en trihydrokarbylsilylgruppe.

Ozonolyse udføres fortrinsvis med ozon under nærværelse af et organisk opløsningsmiddel såsom en alkohol fx metanol og/eller en halogeneret kulbrinte fx diklormetan og ved en 15 q lav temperatur fx fra -100 til 0 C, hensigtsmæssigt ved ca.

-80°C. Når ozonolysen er tilendebragt kan det som mellemprodukt vundne ozonid omdannes til en forbindelse med formel XVI ved tilsætning af et mildt retuktionsmiddel såsom metylsulfid og ved at lade temperaturen stige.

20 10

Trihydrokarbylsilylgruppen R kan fx være en tnalkyl-, triaryl- eller triaralkyl-silylgruppe, såsom trimetylsilyl, t-butyldimetylsilyl, trifenylsilyl eller tribenzylsilyl.

Forbindelser med formel XVII kan fremstilles ved at omsætte en forbindelse med formlen 25 % Λ

30 0 /——/ XVIII

H

med en base efterfulgt af reaktion med et silyleringsmiddel.

Basen kan fx være et alkalimetalhydrid såsom natrium-hydrid, et alkyllithium såsom n-butyllithium, eller lithium-diisopropylamid. Silyleringsmidlet kan fx være trihydrokarbyl-

DK 160271 B

20 silylhalogenid, fx trihydrokarbylsilylklorid eller et trihy-drokarbylsilylsulfonat fx trihydrokarbylsilyltriflat.

Reaktionen gennemføres fortrinsvis i et organisk opløsningsmiddel såsom en kulbrinte, fx benzen, eller en æter 5 fx tetrahydrofuran ved en temperatur i området fra -100 til +50°C, med fordel ved mellem -80 og +20°C.

2 3

Forbindelser med formel V, hvor R og R hver repræsenterer en beskyttelsesgruppe kan alternativt fremstilles ved at man omsætter forbindelser med formlen 10

R3a° ~"0Sz 15 R2aO

XIX

2d. 3d hvor R og R repræsenterer beskyttelsesgrupper som tidli- 2 3 20 gere defineret i relation til R og R og Z er en fraspaltelig gruppe, med en forbindelse med formlen OR1

25 I . I XX

u H

hvor R"*· har den tidligere angivne betydning, eller et base-30 salt deraf.

Reaktionen kan gennemføres i et organisk opløsningsmiddel som fx et sulfoxyd såsom dimetylsulfoxyd, et amid såsom dimetylformamid, en æter såsom tetrahydrofuran eller vand. Reaktionen gennemføres i almindelighed ved en. temperatur i 35 området fra 0°C til 120°C fx 30 til 100°C og i nærværelse af en organisk eller uorganisk base såsom natrium- eller ka-liumh'ydrid, -karbonat eller -bikarbonat eller triætylamin.

DK 160271 B

21

Den fraspaltelige gruppe Z kan fx være et halogenatom såsom klor eller brom eller en acyloxygruppe såsom en hydrokarbylsulfonyloxygruppe fx metansulfonyloxy eller p-toluensulfonyloxy.

5 Forbindelser med formel XIX kan fremstilles ved at man behandler forbindelser med formlen

\ / " OH

10 yj XXI

R2a/ 2a 3a hvor R og R har de ovenfor angivne betydninger, med et 15 reagens der tjener til at indeføre den ønskede gruppe Z. Således kan et halogenatom fx indføres ved halogenidionfor-trængning eller under anvendelse af et oxyhalogenidreagens såsom tionylklorid. Alternativt kan en acyloxygruppe Z indføres ved omsætning med et passende acylhalogenid som fx 20 tosylklorid. Reaktionen kan om ønsket gennemføres i nærværelse af en base fx pyridin eller triætylamin og udføres hensigtsmæssigt i et sådant medium som vand, en alkohol fx metanol eller ætanol, en halogeneret kulbrinte såsom kloroform eller kulstoftetraklorid, eller et substitueret amid 25 såsom Ν,Ν-dimetylformamid, eller en keton såsom acetone.

Temperaturerne ligger sædvanligvis i området fra -20°C til +70°C fx 0°C til +50°C. Alternativt kan selve basen anvendes som opløsningsmidlet.

Forbindelser med formel XXI kan fremstilles ved at 30 fjerne beskyttelsesgruppen fra forbindelser med formlen R3aO_

-\/\0Rii XXII

35 /

R2aO

DK 160271 B

22 2 cl 3 cL 1.1 hvor I< og RJ har de ovenfor angivne betydninger og I* repræsenterer en beskyttelsesgruppe såsom dem der er beskre- 2 3 o 11

vet i relation til R og R . Det vil forstås at gruppen R

bør være en der kan fjernes selektivt, fx en trialkylsilyl-5 gruppe såsom en diraetyl-t-butyl-silylgruppe. En sådan gruppe kan fjernes ved omsætning med tetraalkylammoniumhalogeni-der fx tetra-n-butylammoniumfluorid eller med hydrogenfluorid i vandig acetonitril. Reaktionen kan hensigtsmæssigt gennemføres i opløsningsmidler såsom 10 ætere fx tetrahydrofuran og ved en temperatur i området fra -50°C til +50°C fx -20°C til +20°C.

Forbindelser med formel XXII kan fremstilles ved indfø- 2a 3 9.

ring af hydroxylbeskyttelsesgrupper R og R i en forbindelse med formlen 15 y>«u

/ XXIII

HO

20 hvor R^ har den ovenfor angivne betydning.

Indføringen af hydroxylbeskyttelsesgrupperne R^a og R^a kan gennemføres ifølge en hvilken som helst passende kon-25 ventionel metode. Velegnede reagenser til indføringen af beskyttelsesgrupper indbefatter alkyl- og aralkylhalogenider såsom metoxymetylklorid og benzylbromid. Reaktionen gennemføres om ønsket i nærværelse af en base såsom diisopropyl-ætylamin og i organiske opløsningsmidler såsom ætere, såsom 30 tetrahydrofuran, kulbrinter, fx benzen, halogenerede kulbrinter fx diklormetan. Reaktionen kan gennemføres i temperaturområdet fra -50°C til +50°C fx -20°C til +20°C.

Forbindelser med formel XXIII kan fremstilles ved ozo-nolyse af forbindelser med formlen 35

DK 160271 B

23 OR11

c: / XXIV

HO

1 o hvor R·*··*" har den ovenfor angivne betydning, efterfulgt af reduktion af de derfra dannede produkter med et alkalimetal-borhydrid såsom natriumborhydrid. Reaktionen kan gennemføres i organiske opløsningsmidler såsom en alkohol fx metanol, halogenerede kulbrinter fx diklormetan, ætere såsom tetra- 1 g hydrofuran eller i blandinger deraf og ved en temperatur i området fra -70°C til +50°C. Forbindelser med formel XXIV kan fremstilles ud fra forbindelser med formlen *

XXV

25 hvor R"^ har den ovenfor angivne betydning, under anvendelse af et Grignard-reagens der er i stand til at indføre en vi-nylgruppe, fx vinylmagniumbromid. Reaktionen kan hensigtsmæssigt gennemføres i nærværelse af en katalysator såsom kupro-jodid og i et organisk opløsningsmiddel såsom en halogeneret 30 kulbrinte fx diklormetan, en æter fx tetrahydrofuran eller i blandinger deraf og ved en temperatur i området fra -70°C til +50°C:

Forbindelser med formel XXV kan fremstilles ud fra den kendte forbindelse med formlen 35

DK 160271 B

24 -Ό of \ / 6h '"*·«. r,.Λ-1

XXVI

5 ved omsætning med et reagens der tjener til at indføre beskyttelsesgruppen .

Reaktionen kan gennemføres i nærværelse af et koblingsmiddel såsom en imidazol og i et organisk opløsningsmid-10 del såsom et amid fx dimetylformamid og ved en temperatur i området fra -50°C til +50°C fx -20°C til +20°C.

Ifølge opfindelsen kan man til fremstilling af en forbindelse med formel I også omsætte en forbindelse med den i krav 1 viste almene formel XXVII, hvor R og R har de foran 15 angivne betydninger, eller et basesalt deraf med en forbin- 2a 3a delse med den foran viste almene formel XIX hvor R og R er ens eller forskellige beskyttelsesgrupper og Z en fraspaltelig gruppe. Reaktionen er analog med den der er beskrevet foran til dannelse af forbindelser med formel V ved omsætning 20 af forbindelser med formel XXX med forbindelser med formel XX. De foretrukne betingelser er som beskrevet for denne reaktion. Reaktionen efterfølges om nødvendigt af fjernelse af en hvilken som helst tilstedeværende beskyttelsesgruppe, som beskrevet ovenfor.

25 En forbindelse med formel XIX kan eventuelt frem stilles in situ ved behandling af en forbindelse med formel XXI med et dialkylazodikarboxylat fx diætylazodikarboxylat og en tertiær fosfin fx trifenylfosfin i et opløsningsmiddel såsom tetrahydrofuran eller acetonitril.

30 35

DK 160271 B

25

Blandinger af isomerer kan adskilles på et hvilket som helst hensigtsmæssigt trin af syntesen fx enten før eller efter fjernelse af beskyttelsesgrupper. Således kan den ønskede epimer om nødvendigt adskilles fra den tilsva-5 rende epimer ved konventionelle midler, fx ved fraktioneret krystallisation og/eller kromatografi. Optisk aktive isomerer af de omhandlede forbindelser kan vindes ved opspaltning af de racemiske blandinger under anvendelse af konventionelle midler, se fx "Stereochemistry of Carbon Compounds" af E. L.

IQ Eliel (McGraw Hiil, 1962) og "Tables of Resolving Agents" af S. H. Willen.

Forbindelserne med formel I kan omdannes til salte deraf med baser i overensstemmelse med konventionelle metoder ved omsætning med en passende base.

15 Forbindelserne med formlerne II, III, IV, VI, VII, VIII, IX, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI, XIX, XXI, XXII, XXIII,

XXIV og XXV er hidtil ukendte forbindelser der er nyttige som mellemprodukter ved fremstillingen af de omhandlede forbindelser med formel I. Blandt disse hidtil ukendte mellem-20 produkter er forbindelserne med formlerne II, III, IV, VI

og VII kemisk nær beslægtede og de falder alle inden for den almene formel OR1

.-'rA

r i <A->k ft 1 2 hvor R og R har de foran angivne betydninger og hvor enten a

R repræsenterer en gruppe 35 _^ C°2H

26

DK 160271 B

eller _( co2r4 B 3

5 eller en gruppe HgX og R repræsenterer en gruppe -CH~0R

A b ^ eller R repræsenterer hydrogen og R repræsenterer en gruppe -CHO eller -CH-(R50)2, hvor X, R3, R4 og R5 har de ovenfor angivne betydninger.

Forbindelserne med formlerne VIII, IX, XI, XII og XIII

10 er også indbyrdes kemisk nær beslægtede og falder alle inden for den almene formel (r5o)2ch^/\>rc

15 i—/ B

2 ^

RO

2 5 c hvor R og R har de ovenfor angivne betydninger og R re- ^ præsenterer en gruppe med formlen R1. OR1

O

-HNn.

Y '

Q Q

-CON,, - COR eller -C0oR , 30 3 2 8 9 hvor R , R og R har de ovenfor angivne betydninger.

Mellemprodukterne med formlerne XIX, XXI, XXII, XXIII og XXIV er yderligere kemisk nær beslægtede og kan udtrykkes ved formlen 35

DK 160271 B

27 •°tr' Ξ

R

5

D P

hvor enten R repræsenterer en hydroxymetylgruppe og R repræsenterer en hydroxylgruppe, eller R° repræsenterer en

E

beskyttet hydroxymetylgruppe og R repræsenterer en beskyt-

E

tet hydroxylgruppe eller R repræsenterer en hydroxylgrup-10 pe og R repræsenterer en ætenylgruppe og R repræsenterer en hydroxylgruppe,en beskyttet hydroxylgruppe eller en gruppe Z som defineret ovenfor, med det forbehold at enten

D E

repræsenterer R en beskyttet hydroxymetylgruppe og R

F

en beskyttet hydroxylgruppe eller R repræsenterer en be-15 skyttet hydroxylgruppe.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere ved de følgende eksempler på fremstilling af mellemprodukter og slutforbindelser. Nomenklaturen i disse følger Chemical Abstracts' system.

20 Opløsninger blev tørret under anvendelse af magnium sulfat. Hurtig søjlekromatografi (Flash column chromatography) gennemførtes over silika under anvendelse af den metode der er beskrevet af W.E. Still et al, J. Org. Chem., 1978, 14, 2923.

25

Mellemprodukt 1 (3aa,43,76,7aa)-( + )-5-[[(1,1-dimetylætyl)-dimetylsilyl]-oxy]-3a,4,7,7a-tetrahydro-2,2-dimetyl-4,7-metan-l,3-benzodioxol 2q Der fremstilledes en opløsning af lithiumdiisopropyl amid ved at behandle 10,5 g diisopropylamin i 90 ml tør THF afkølet til -15°C under nitrogen med 61,2 ml af 1,7 M opløsning af n-butyllithium i hexan. Efter omrøring i 10 minutter ved ca. -10° til -20°C afkøledes opløsningen til -70°C og der tilsattes dråbevis i løbet af 15 minutter en opløsning af 15,8 g (3aa,46,7e,7aa)-(+)-tetrahydro-2,2-dimetyl- 4,7-metan-l,3-benzodioxyl-5-(4H)-on i 40 ml tørt THF idet

DK 160271 B

28 temperaturen holdtes under -65°C. Opløsningen omrørtes ved -70°C i 3/4 time, der tilsattes 13 ml hexametylfosforamid efterfulgt af 14,2 g t-butyldimetylsilylklorid i 11 ml tør pentan. Blandingen fik lov til at varme op til stuetempera-5 tur i løbet af 2 timer, udhældtes i 300 ml pentan og den organiske fase vaskedes først med 100 ml vand og derpå med 40 ml vand. Opløsningen tørredes og koncentreredes hvorved den rå i overskriften angivne forbindelse vandtes som en olie. Kugelrohr-destillation gav den rene i underskriften 1 g angivne forbindelse som en gul olie i en mængde på 21,6 g. ΐ (CDC13 5,36 (IH, d,=CH-), 5,54, 5,65 (2H, AB dublet m, H-5, H-6), 8,51, 8,61 (6H, 2xs, 2xMe).

Mellemprodukt 2 15 (3aa,4a,6aa)-(+)-6-(dimetoxymetyl)-tetrahydro-2,2-dimetyl- 4aH-cyklopenta-l,3-dioxol-4-karboxylsyre_

Oxygeneret ozon bobledes gennem en opløsning af 20,0 g mellemprodukt 1 i 190 ml tør metanol og 60 ml tørt metylenklorid ved -70°C indtil der fremkom en blå farvning. Der 20

tilsattes 14 ml dimetylsulfid og reaktionsblandingen fik langsomt lov til at nå op på stuetemperatur. Opløsningsmidlerne afdampedes og remanensen blev optaget i 190 ml 2,2-dimetoxypropan og 10 ml tør metanol. Efter afkøling til 0°C

tilsattes der 9 g "Dowex” 50W-X8(H+) og reaktionsblandingen 25 ø e ( ( omrørtes ved 0 C i 3 dage. Harpiksen fjernedes ved filtrering og opløsningsmidlerne afdampedes under vakuum. Remanensen rensedes ved hurtig kromatografi under eluering med metanol/ metylenklorid i forholdet 3:97 hvorved der vandtes 10,4 g af den i overskriften angivne forbindelse i form af et 30 fast stof med smp. 82-83,5°C.

Mellemprodukt 3 (33,4a)-(+)-metoxymetyl-4-(dimetoxymetyl)-3-(metoxymetoxy)- 1-cyklopenten-l-karboxylat_

En opløsning af lithiumdiisopropylamid fremstilledes ved at behandle 17,2 g diisopropylamin i 250 ml tørt THF af-

DK 160271 B

29 kølet til -20°C under nitrogen med 99 ml 1,7m opløsning af n-butyllithium i hexan. Blandingen afkøledes til ca. -65°C og omrørtes i yderligere en halv time. En opløsning af 10,4 g af mellemprodukt 2 i tørt THP tilsattes dråbevis i løbet 5 af 20 minutter idet temperaturen holdtes på -60°C. Derpå fik opløsningen lov til langsomt at varme op til stuetemperatur og omrøringen fortsattes i 1 1/2 time. Der tilsattes 18,44 g metoxymetylklorid og reaktionsblandingen omrørtes ved stuetemperatur i 18 timer. THF afdampedes under vakuum og rema-10 nensen fordeltes mellem 400 ml diætylæter og 50 ml vand.

Den organiske fase vaskedes med.30 ml mættet ammoniumklorid-opløsning og 50 ml mættet natriumbikarbonatopløsning og tørredes. Fjernelse af opløsningsmidlet gav den i overskriften angivne forbindelse i form af en olie i en mængde på 11,8 g.

15 T^CDCl^ 2,25 (IH, =CH) , 4,67 (2H, CC>2CH2OMe) , 5,16-5,34 (3H, m, QciiOC^OMe), 5,66 (IH, d, CH(OMe)2), 6,50, 6,59 (12H, 4xs, 4xOMe); vmax (væskefilm) 1720, 1640 cm

Mellemprodukt 4 2Q --------------- (36,4a)-( + )-metoxymetyl-3-(dimetoxymetyl)-4-(metoxymetoxy)- 1-cyklopentan-karboxylat_ 17,6 g af mellemprodukt 3 og 5,5 g 5%s palladium på kulstof i 300 ml ætanol omrørtes under en hydrogenatmosfære 25 i 4 timer hvorefter reaktionsblandingen filtreredes. Katalysatoren vaskedes med 300 ml ætanol og det forenede filtrat og vaskevæske inddampedes under nedsat tryk hvorved der vandtes 16 g af den i overskriften angivne forbindelse i form af en blanding af epimerer.

30 tfiCDCl-j) 4,75 (2H, COjCH^OMe) , 5,35 (2H, CHOCH2OMe) , 5,70- 6,00 (IH, m, (^CHO), 6,55, 6,60 (12H, 4xs, 4xOMe); vmax (CC14) 1745 cm”1.

Mellemprodukt 5 35 36,4a)-(+)-3-(dimetoxymetyl)-4-(metoxymetoxy)-1-cyklopentan- karboxylsyre_ 40 g kaliumkarbonat sattes til en opløsning af 16 g

DK 160271 B

30 mellemprodukt 4 i 100 ml metanol og 200 ml vand og reaktionsblandingen omrørtes i ca. 16 timer. Opløsningen vaske-des med 150 ml metylenklorid og den vandige fase syrnedes med 320 ml 2N HC1 og ekstraheredes med 3 x 300 ml metylen-5 klorid. Det organiske lag tørredes og koncentreredes hvorved der vandtes 8,2 g af den i overskriften angivne forbindelse i form af en blanding af epimerer.

^(CDCl-j) 1,0-3,0 (IH, bred, C02.H) , 5,3-5,4 (2H, m, MeOC^), 5,87, 5,96 (IH, m, Qch-O), 6,65 (9H, 3s, 3xOMe) 7,00, 7,18 10 (IH, m, ch2co2h).

Mellemprodukt 6 (33,4a)-(+)-N-[[[3-(dimetoxymetyl)-4-(metoxymetoxy)-cyklo- 15 pentyl]-amino]-karbonyl]-3-ætoxy-2-propenamid_

Til 2,8 g mellemprodukt 5 og 1,7 ml triætylamin i 50 ml tør benzen under nitrogenatmosfære sattes der 3,1 g difenyl-fosforylazid og den resulterende opløsning kogtes under tilbagesvaling i 1 1/4 time. Derpå bobledes der ammoniakgas gen-20 nem opløsningen ved 5 til 10°C i 40 minutter. Opløsningsmidlet fjernedes fuldstændigt remanensen blev optaget i 50 ml kloroform og der tilsattes 2,25 ml pyridin. Opløsningen afkøledes (isbad) der tilsattes 2,25 ml 6-ætoxyakryloylklorid og blandingen omrørtes ved stuetemperatur. Efter 48 timer 25 tilsattes der yderligere-2,25 ml syreklorid og omrøringen fortsattes i yderligere 12 timer. Der tilsattes 30 ml vand, det vandige lag ekstraheredes med 30 ml kloroform og de forenede organiske lag vaskedes med først 30 ml og:derpå med 15 ml af en 5%s vandig kaliumhydrogensulfatopløsning og 30 derpå med 50 ml vandig natriumbikarbonat hvorpå der tørredes. Afdampning af opløsningsmidlet gav en olie som rensedes ved hurtig søjlekromatografi og eluering med 5%s metanol/metylenklorid hvorved der vandtes 2,23 g af den i overskriften angivne forbindelse i form af en blanding af epimerer.

35 i;(CDCl-) 2,37 (1Η, d, -CH=CHOEt) , 5,31 (1Η, d, -CH=CHOEt) , 0 ~ -1 ~ v max (CCl4), 1680, 1620, 1545 cm

DK 160271 B

31

Beregnet for C16H28N2°7: C 53'32 H 7/83 N 7,77

Fundet: C 53,47 H 7,83 N 7,66%

Mellemprodukt 7 5 (+)-l-[(33,4a)-3-(dimetoxymetyl)-4-(metoxymetoxy)-cyklopentyl]- 2,4(IH, 3H)-pyrimidlndion_ 2,23 g af mellemprodukt 6 kogtes under tilbagesvaling i 150 ml 0,88 vandig ammoniak i 2 timer og opløsningsmidlet fjernedes ved under 40°C under nedsat tryk. Remanensen fordeltes ^ mellem 50 ml metylenklorid og 30 ml mættet vandig natriumbikarbonat. Det vandige lag ekstraheredes med 2 x 25 ml metylenklorid, de kombinerede organiske lag tørredes og opløsningsmidlet fjernedes ved inddampning under nedsat tryk hvorved der vandtes 1,57 g af den i overskriften angivne forbin-1 5 delse i form af en blanding af epimerer. En lille del af produktet rensedes ved hurtig søjlekromatografi under eluering med 5% metanol/metylenklorid.

T(D20) 2,40, 2,67 (IH, d, H-6) 4,25, 4,26 (IH, d, H-5), 4,85 (IH, m, H-l').

20

Mellemprodukt 8 (+ )—1—[(33,4 a)-3-(hydroxymety1)-4-(metoxymetoxy)-cyklopentyl]- 2,4(lH,3H)-pyrimidindion__ 25 2,05 g mellemprodukt 7 opvarmedes i 50 ml 80%s vandig eddikesyre i 15 minutter ved 80-85°C. Opløsningen fortyndedes med 200 ml benzen og benzenen fjernedes ved stuetemperatur under nedsat tryk. Toluen (200 ml, 100 ml) tilsattes to gange og fjernedes ved 25-30°C under nedsat tryk. Remanensen 30 opløstes i 25 ml tør metanol og 5 ml ætanol og der tilsattes ved 0°C 380 mg natriumborhydrid. Blandingen omrørtes i 15 minutter ved stuetemperatur, der tilsattes 1 ml acetone og opløsningsmidlet fjernedes under nedsat tryk. Remanensen opløstes i 20 ml tør metanol og der tilsattes ca. 0,6 ml trifluor-35 eddikesyre for at syrne opløsningen til pH 2. Fjernelse af opløsningsmidlet under nedsat tryk og rensning af produktet ved hurtig søjlekromatografi under eluering med 10%s metanol/ metylenklorid gav den i overskriften angivne forbindelse i en

DK 160271 B

32 mængde på 1,3 <3 som en blanding af epimerer.

X(CDCl3) 2,43, 2,7 (IH, d, H-6), 4,25, 4,26 (IH, d, H-5), 4,75 (IH, m, H-l').

5 Mellemprodukt 9 (+)-l-[(33,4α)-3-hydroxy-4-(hydroxymetyl)-cyklopenty1]-2,4- (IH, 3H) -pyrimidindion__

En opløsning af 1,3 g mellemprodukt 8 i 30 ml metanol indeholdende 0,5 ml koncentreret saltsyre kogtes under tilba- 10

gesvaling i 25 minutter. Opløsningen neutraliseredes med 2N

natriumhydroxyd efterfulgt af mættet vandig natriumbikarbonat og opløsningsmidlet fjernedes ved under 40°C under nedsat tryk.

30 ml ætanol tilsattes og fjernedes to gange. Remanensen blev optaget i 3 x 20 ml ætanol, filteredes og koncentreredes.

1 5

Hurtig søjlekromatografi under eluering med 20%s metanol/metyl-enklorid gav 700 mg af den i overskriften angivne forbindelse i form af en blanding af epimerer.

^(D20) 2,14, 2,27 (IH, d, H-6), 4,10, 4,13 (IH, d, H-5), 5,00, 5,10 (IH, m, H-l').

20

Mellemprodukt 10 (+)-klor-[1,2,3,4-tetrahydro-l-[(33,4a)-3-hydroxy-4-(hydroxy- metyl)-cyklopenty!]-2,4-dioxo-5-pyrimidinyl]-kviksølv_- 25 Til 400 mg mellemprodukt 9 i 1,5 ml vand sattes der 595 mg merkuriacetat i 4,5 ml vand og opløsningen omrørtes ved 50°C i 4 timer. Der tilsattes ved 40°C 256 mg natriumklorid i 1 ml vand og reaktionsblandingen afkøledes (isbad). Filtrering af det faste stof efterfulgt af tørring ved 60°C 30 under vakuum gav den i overskriften angivne forbindelse i form af et hvidt fast stof som anvendtes direkte i det næste trin.

Mellemprodukt 11 35 ----------------- (+)-(E)-ætyl-3-[l,2,3,4-tetrahydro-l-[(33,4a)-3-hydroxy-4-(hydroxymetyl)-cyklopentyl]-2,4-dioxo-5-pyrimidiny]-2-propenoat 390 mg mellemprodukt 10, 0,75 ml ætylakrylat og 8,7 ml

DK 160271 B

33 af en 0,1 M opløsning af dilitiumpalladiumtetraklorid i metanol omrørtes i 16 timer under nitrogen. Reaktionsblandingen filtreredes, bundfaldet vaskedes med 20 ml varm metanol og hydrogensulfidgas bobledes gennem det kombinerede metanol-5 filtrat og vaskevæsker for at udfælde merkurisulfid. Den resulterende blanding filtreredes gennem hyflo og opløsningsmidlet fjernedes under vakuum. Der tilsattes 5 ml vand som derefter fjernedes under vakuum ved 30°C. Remanensen rensedes ved hurtig kromatografi under eluering med kloroform/ 1 g ætanol i forholdet 6:1 hvorved der vandtes 195 mg af den i overskriften angivne forbindelse.

T([2Hg] DMSO) (blanding af epimerer) 1,56, 1,70 (IH, s, H-6), 2,54, 2,61 (IH, d, CH=CHCC>2Et) , 3,08, 3,14 (IH, d,=CHCC>2Et) .

15 Mellemprodukt 12 (+) — (E) —3 — [ 1,2,3,4-tetrahydro-l-[(3β,4α)-3-hydroxy-4-(hydroxy- metyl)-cyklopentyl]-2,4-dioxo-5-pyrimidinyl]-2-propensyre_ 180 mg mellemprodukt 11 i 2,5 ml 0,5 N vandig natri-umhydroxyd omrørtes ved stuetemperatur i 4 timer. Der til-sattes "Dowex" 50G-X8 kationbytterharpiks indtil opløsningen havde en pH-værdi på 4. Harpiksen filtreredes fra og filtratet inddampedes under vakuum ved 30-35°C hvorved der vandtes 131 mg af den i overskriften angivne forbindelse i form af et smudsighvidt fast stof.

25 4Γ ([^Hg]DMSO) (blanding af epimerer) 1,70, 1,86 (IH, s, H-6), 2,80, 2,86 (IH, d, CH=CHC02H), 3,23, 3,34 (lH,d, =CHC02H).

Mellemprodukt 13 30 (la,36,5a)-( + )-3-[[ (.1,1-dimetylætyl)-dimetylsilyl]-oxy]- 6-oxabicyklo[3,l,0]hexan_

En opløsning af 2,5 g (lot,33,5a)-( + )-3-hydroxy-6-oxabicyklo[3,l,0]hexan i 25 ml tørt DMF behandledes med 3,40 g imidazol, opløsningen afkøledes til 0°C under nitro- 35 gen og der tilsattes 4,15 g t-butyldimetylsilylklorid. Opløsningen omrørtes ved 0°C i 10 minutter, fik lov til at varme op til stuetemperatur og omrøring fortsattes i yderligere 18 timer. Blandingen udhældtes i 150 ml vand og ekstrahere-

DK 160271 B

34 des med 2 x 150 ml pentan. Den organiske fase vaskedes med 2 x 150 ml vand, tørredes og koncentreredes hvorved der vandtes et råt produkt i form af en farveløs olie. Den sidstnævnte rensedes ved hurtig kromatografi under eluering 5 med 7%s ætylacetat/hexan hvorved der vandtes 3,9 g af den i. overskriften angivne forbindelse i form af en farveløs mobil olie. - t(CDCl3) 5,56 (IH, ABX, CHOSi), 6,52 (2H, s, CH-CH), 7,86- 8,08 (4H, ABX, CH2), 9,1 (9H,s, CMe3), 9,96 (6H, s, Me).

10

Mellemprodukt 14 (Ια,2B,4a)-(+)-4-[[(1,1-dimetylætyl)-dimetylsilyl)-oxy)-2-ætenylcyklopentanol_

En under omrøring værende suspension af 190 mg kupro- 15 . . . o jodid i 10 ml tørt THF ved -30 C under nitrogen behandledes dråbevis med 10 ml af en opløsning af lM vinylmagniumbromid i THF hvilket forårsagede at der dannede sig en gråligt farvet suspension. Denne omrørtes ved -30°C i 15 minutter og derpå tilsattes dråbevis en opløsning af 1,50 g mellempro- 20 dukt 13 i 5 ml tør THF. Den resulterende mørktfarvede opløsning omrørtes ved -30°C i 15 minutter hvorpå blandingen fik lov til langsomt at varme op til 0°C (i løbet af ca. 1/2 time) hvorpå den omrørtes i yderligere 2 timer. Reaktionen blev afbrudt ved udhældning i en 100 ml mættet NH.Cl-opløs- 25 4 ning og der ekstraheredes med 2 x 100 ml æter. De forenede organiske ekstrakter vaskedes med yderligere 100 ml af en mættet NH^Cl-opløsning, tørredes og koncentreredes hvorved der vandtes det rå produkt i form af en lysegul olie. Denne rensedes ved hurtig kromatografi under eluering med 8%s ^ ætylacetat/hexan hvorved der vandtes 1,25 g af den i overskriften angivne forbindelse i form af en farveløs olie.

Beregnet for C-^^gC^Si: C 64,40 H 10,81

Fundet: C 64,54 H 11,07%.

35

DK 160271 B

35

Mellemprodukt 15 (la,20,46)-(+)-[[(1,1-dimetylætyl)-dimetylsilyl)-oxy)-2-hydroxy]-cyklopentanmetanol_

Oxygeneret ozon bobledes igennem en opløsning af 5 6,68 g mellemprodukt 14 i 100 ml tør metanol og 50 ml di-klormetan afkølet til -70°C indtil der fremkom en kraftig blå farvning. Derpå tilsattes der hurtigt 1,05 g natriumbor-hydrid i 1 portion og omrøringen ved -70°C fortsattes i 30 minutter. Derpå tilsattes der yderligere 1,05 g natriumbor-hydrid og blandingen fik lov til langsomt (i løbet af ca.

1 time) at varme op til stuetemperatur og derpå omrørtes der i yderligere 30 minutter. Opløsningemidlerne afdampedes og remanensen fordeltes mellem 250 ml diklormetan og 250 ml mættet ammoniumkloridopløsning. Det vandige lag ekstrahere-des yderligere med 250 ml diklormetan og de forenede organiske faser tørredes og koncentreredes hvorved der vandtes det rå produkt i form af en uigennemsigtig viskos olie. Denne rensedes ved hurtig kromatografi under eluering med 5%s metanol/CH-Cl- hvorved der vandtes 5,34 g af den i over-20 2 2 skriften angivne forbindelse i form af en viskos farveløs olie.

Beregnet for ci2H26°3^·*·’0'^ H20: C H

Fundet: C 52,94 H 10,89%.

25

Mellemprodukt 16 (la,36,4a)-(+)-(1,1-dimetylætyl)-dimetyl-[[4-(metoxymetoxy)- 3-[(metoxymetoxy)-metyl]-cyklopentyl]-oxy]-silan_

Til en opløsning af 5,0 g mellemprodukt 15 og 7,87 g 30 (10,6 ml) Ν,Ν-diisopropylætylamin i 100 ml tør diklormetan afkølet til 0°C under nitrogen sattes der dråbevis i løbet af 10 minutter klormetylmetylæter (90%: 5,44 g, 5,19 ml). Blandingen omrørtes ved 0°C i 5 minutter, fik lov til at varme op til stuetemperatur og omrøringen fortsattes natten 35 over. Opløsningen vaskedes med 100 ml vand, det vandige lag ekstraheredes med yderligere 50 ml diklormetan og de forenede organiske lag tørredes. Koncentrering gav det rå produkt i form af en orange olie som rensedes ved hurtig kromatografi

DK 160271 B

36 under eluering med 10%s ætylacetat/hexan hvorved der vandtes 5,1 g af den i overskriften angivne forbindelse i form af en farveløs mobil olie.

Beregnet for C^gH^Oj-Si: C 57,44 H 10,55 5 Fundet: C 57,51 H 10,75%

Mellemprodukt 17 (la,3 a,4 β)-(+)-3-(metoxymetoxy)-4-[(metoxymetoxy)-metyl]-cyklopentanol 1Q -;--

En opløsning af 5,0 g mellemprodukt 16 i 150 ml THF

omrørt og afkølet til 0°C behandledes med 16 ml 1M tetra-n-butylammoniumfluorid i THF. Opløsningen fik lov til at varme op til stuetemperatur og omrørtes i yderligere 4 timer. Blandingen koncentreredes til ca. 30 ml og underkastedes hurtig 15 kromatografi. Eluenng med ætylacetat/hexan i forholdet 9:1 gav 3,2 g af den i overskriften angivne forbindelse i form af en lysegul olie.

r(CDCl3) 5,24-5,4 (4H, 2χΑΒ, 0CH20), 5,67 (IH, m, CHOCH2) 5,9 (IH, m, CHOH), 6,4-6,7 (8H, m+2s, OMe, CHo0), 7,45 (IH, 20 ~ 2 m, CHCH20) 7,6 (IH, d, OH), 7,9-8,4 (4H, m, 2xCH2).

Mellemprodukt 18 (Ια ,3a,4β)-( + )-3-(metoxymetoxy)-4-[(metoxymetoxy)-metyl]- 25 cyklopentanol-4-metylbenzensulfonat__

En blanding af 1 g mellemprodukt 17, 0,96 g paratolu-ensulfonylklorid og 20 ml tør pyridin omrørtes ved stuetemperatur natten over. Pyridinen fjernedes under vakuum ved 35°C, remanensen blev optaget i 50 ml diklormetan og opløsningen 30 vaskedes med 3 x 50 ml kobber(II)sulfatopløsning. Den organiske fase tørredes og koncentreredes hvorved der vandtes det rå produkt i form af en gul olie. Denne rensedes ved hurtig kromatografi. Eluering med ætylacetat/hexan i forholdet 1:1 gav 1,18 g af den i overskriften angivne forbindelse 35 i form af en farveløs olie.

Beregnet for ci7H26°7S: C 54,52 H 6,99

Fundet: C 54,68 H 6,57%.

DK 160271 B

37

Eksempel 1 (+)-(E)-5-(2-bromæteny1)-l-[(Ια,33,4a)-3-hydroxy-4-(hydroxy- metyl)-cyklopentyl]-2,4-(IH,3H)-pyrimidindion_ 110 mg mellemprodukt 12 og 77 mg kaliumacetat i 5 ml 5 vand opvarmedes til 60°C. Der tilsattes i små portioner i løbet af 5 minutter 69,5 mg N-bromsuccinimid og den klare opløsning omrørtes ved 60°C i 10 minutter og derpå ved stuetemperatur i 2 timer. Opløsningsmidlet fjernedes og remanensen rensedes ved søjlekromatografi under eluering med klor-10 roform/ætanol i forholdet 9:1 hvorved der vandtes 10 mg af den i overskriften angivne forbindelse.

t(CD30D) 2,24 (IH, S, H-6), 2,66 (IH, d, CH=CHBr), 3,19 (lH, d, CH=CHBr), 4,93 (IH, m, H-l'), 5,81 (IH, m, H-3'), 6,2-6,4 (2H, m, H-5',5").

15

Eksempel 2 (+)-(E)-5-(2-bromæteny1)-1-[(la, 3 3,4α) -3-hydroxy-4-(hydroxy- metyl)-cyklopentyl]-2,4-(IH,3H)-pyrimidindion_ 20 En blanding af 374 mg mellemprodukt 18, 326 mg (E)- 5-(2-bromvinyl)-uracil og 207 mg finformalet vandfrit kaliumkarbonat omrørtes i 5 ml tørt DMSO ved 90°C under nitrogen i 4 timer. Den mørktfarvede blanding udhældtes i 50 ml vand og ekstraheredes med 3 x 25 ml diklormetan. De forenede orga-25 niske faser vaskedes med 50 ml saltvand, tørredes og koncentreredes hvorved der vandtes en gul olie. Denne rensedes ved hurtig kromatografi under eluering med 2%s metanol/diklormetan hvorved der vandtes 42 mg rå (+)-(E)-5-(2-bromætenyl)-l-[(la, 3 β , 4 a) -3-metoxymetoxy-4-[(metoxymetoxy)-metyl]-cyklopentyl]-30 2,4(1H,3H)-pyrimidindion som blev optaget i 5 ml metanol, der tilsattes 50 mg para-toluensulfonsyre og opløsningen kogtes under tilbagesvaling i 1 time. Blandingen neutraliseredes ved tilsætning af R8050 polyvinylpyridinharpiks (Reilly Corporation) og efterfølgende inddampning på flash-silika (ca.

35 1 g). Sidstnævnte overførtes til en hurtig (flash) kromatogra- feringskolonne under eluering med 10%s metanol/diklormetan hvorved der vandtes 11 mg af den i overskriften angivne forbindelse med smp. 179-183°C (sønderdeling).

DK 160271 B

38

Eksempler på farmaceutiske præparater

Eksempel A Oral kapsel 5 pr. kapsel

Produkt ifølge eksempel 1 eller 2 125,0 mg

NatriumstivelseglykolLat ("Explotab" 12,5 mg

Mikrokrystallinsk cellulose ("Avicel" ® PH) 110,0 mg

Magniumstearat 2,5 mg 10

Kapselpafyldningsvægt 250,0 mg

Fremstil en forblanding af magniumstearat, natrium-stivelseglykollat og en portion af den aktive forbindelse og før den gennem en 250μ sigte. Bland derpå med mikrokrystallinsk cellulose og den resterende del af den aktive forbindelse. Fyld blandingen i to stykker hårde gelatine-kapselskaller til en tilsigtet påfyldningsvægt på 250 mg pr. kapsel.

20

Eksempel B Topi sk creme Mængder til 1 kg

Produkt ifølge eksempel 1 eller 2 20 g 25 Klorkresol 1/0 g

Cetostearylalkohol 72 g

Hvidt blødt paraffin 150 g

Paraffinolie 60 g

Cetamacrogol 1000 18 g 30 Dinatriumhydrogenfosfat 2,0 g

Natriumdihydrogenfosfat (dihydrat) 1,0 g

Natriumhydroxyd eller fosforsyre til pH 7,0

Destilleret vand til 1,00 kg ^ Opvarm 650 ml vand og opløs klorkresol og fosfater.

Tag 100 ml af opløsningen, opløs 2,5 g cetomacrogol 1000 og afkøl. Disperger det formalede lægemiddel i opløsningen under anvendelse af en blander med stor forskydningskraft.

DK 160271 B

39

Smelt cetostearylalkoholen, det hvide bløde paraffin, paraffinolien og den resterende del af cetomacrogol 1000 sammen og bland med den resterende del af den vandige fase ved ikke over 65°C. Omrør til det er koldt. Sæt lægemiddelopslæmnin-5 gen til den vandige cremebase under omrøring. Check pH og indstil den på pH 7,0 med en opløsning af fosforsyre eller natriumhydroxyd eller behov. Bring rumfanget op til den ønskede værdi med vand og omrør. Fyld i lakerede aluminiumsrør til en påfyldningsvægt på 30 g og forsegl.

10

Eksempel C Øjesalve Mængder til 1 kg

Produkt ifølge eksempel 1 eller 2 30 g 15 Hvidt blødt paraffin 770 g

Paraffinolie 200 g

Paraffin og paraffinolie sigtes og steriliseres ved opvarmning til 150°C i 1 time hvorpå der afkøles. Disperger 20 det sterile formalede lægemiddel antiseptisk i paraffinolien.

Til det smeltede hvide bløde paraffin sættes lægemiddelopslæmningen og der omrøres indtil det har sat sig. Når salven er kold fyldes den i sterile tinøjesalvetube med en en påfyldningsvægt på 3,0 g hvorpå der forsegles.

25 30 35

Claims (2)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 5-halogen- vinyl-uracilderivater med den almene formel HN y

10 H°^ c>' HO hvor R er klor, brom eller jod, eller fysiologisk acceptable 15 salte deraf med baser, kendetegnet ved at man a) behandler en forbindelse med formlen _/C02H 2° ^

25 R20 12 3 hvor R , R og R , der kan være ens eller forskellige, hver betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe, eller et salt deraf med et halogeneringsmiddel, eller 3ø b) omsætter en forbindelse med formlen OR1 I y R tr"

35 XXVI1 ° H DK 160271 B hvor R og R1 har de ovenfor angivne betydninger, eller et salt deraf med en forbindelse med formlen R2aO ' 10 2a 3a hvor R og R , der kan være ens eller forskellige, betegner beskyttelsesgrupper og Z betegner en fraspaltelig gruppe, hvorefter man om nødvendigt fjerner en hvilken som 15 helst tilstedeværende beskyttelsesgruppe og/eller omdanner en vunden forbindelse med formel I til et fysiologisk acceptabelt salt deraf med en base.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved at man fremstiller E-5-(2-bromætenyl)-l-[(1α,3β,4α)-20 3-hydroxy-4-(hydroxymety1)-cyklopenty1]-2,4-(lH,3H)-pyrimidin- dion. 25 30 35