DK154264B - Fremgangsmaade til fremstilling af lipid-vesikler - Google Patents

Fremgangsmaade til fremstilling af lipid-vesikler Download PDF

Info

Publication number
DK154264B
DK154264B DK472980AA DK472980A DK154264B DK 154264 B DK154264 B DK 154264B DK 472980A A DK472980A A DK 472980AA DK 472980 A DK472980 A DK 472980A DK 154264 B DK154264 B DK 154264B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
vesicles
thio
yloxy
hexyl
deoxy
Prior art date
Application number
DK472980AA
Other languages
English (en)
Other versions
DK154264C (da
DK472980A (da
Inventor
Marcia R Mauk
John D Baldeschwieler
Ronald C Gamble
Tsung-Ying Shen
Mitree M Ponpipom
Original Assignee
California Inst Of Techn
Merck & Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by California Inst Of Techn, Merck & Co Inc filed Critical California Inst Of Techn
Publication of DK472980A publication Critical patent/DK472980A/da
Publication of DK154264B publication Critical patent/DK154264B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK154264C publication Critical patent/DK154264C/da

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes or liposomes coated or grafted with polymers
    • A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes or liposomes coated or grafted with polymers comprising non-phosphatidyl surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids or non-phosphatidyl liposomes coated or grafted with polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes or liposomes coated or grafted with polymers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
    • Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
    • Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
    • Y10T428/2984—Microcapsule with fluid core [includes liposome]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

i
DK 154264 B
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af lipid-vesikler, der kan anvendes som lymfe-systemførte transporthjælpemidler for terapeutiske og diagnostiske forbindelser.
5 Man har tidligere fremstillet lipid-vesikler og iagttaget dem gennem anvendelse af radioisotopmærkede liposomer, McDougall, I.R. Dunnick, J. K. McNamee, M.G., og Kriss, J. P. (1974) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 71 3487-3491; Hwang, K. J. Mauk, M.R. (1977) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 74, 4991- 10 4993; Hinkle, G.H., Born, G.S. Kessler, W.V., og Shaw, S.M.
(1978) J. Phar. Sci. 67, 795-798. Disse vesikler indeholder forholdsvis små mængder af radioaktive ioner på grund af den begrænsede mængde radioaktive ioner, som er indesluttet i liposomerne ved anvendelsen af enkle ultralyd-behandlings-15 fremgangsmåder. Det interne vandige rumfang af vesikleme er lille med det resultat, at kun nogle få procent af det samlede suspensions rumfang, som indeholder de radioaktive ioner, indkapsles i vesiklen, og resten deraf går tabt for praktiske formål.
20 Den foretrukne ionophor (dette er et generisk udtryk, som beskriver forbindelser, der tiltrækker ioner eller er kraftigt forenelige med ioner) [β5-βα(23γ,35γ), 8pR*p, 9p,llcJJ -5-(methylamino)-2- [[3,9,ll-trimethyl-8-£l-methyl-2-oxo-2-- (lH-pyrrol-2-yl) ethyl] 1,7-dioxasporo [5 ? 5]undec-2-yl] methylQ -25 -4-benzoxazol-carboxylsyre, som i det følgende vil blive betegnet som ionophor A23187, er blevet anvendt til at kom-plexdanne med og bære divalente kationer tværs igennem naturlige og kunstige lipidmembraner, Hyono, A., Hendriks,
Ih., Daemen, F.J.M., og Bonting, S.L. (1975) Biochim Biophys. 30 Acta., 389 34-46; Sarkadi, B., Szasz, I., og Gardos, G.
(1976) J. Membrane Biol., 26, 357-370; LaBell, E.F. og Racker, E. (1977) J. Membrane Biol., 31, 301-315; Pfeiffer, D.R., Taylor, R0¥. og Lardy, H0A0 (1978) Ann. N.Y. Acad. Sci. (under trykning)„ 2
DK 154264 B
Der foreligger ligeledes Deviser for, at A23187 kan danne +3 komplexer med trivalente kationer, f.eks. La , Pfeiffer, D.R., Reed, P.W.,og Lardy, H.A. (1974) Biochemistry, 13, 4007-4014.
Ill 5 Gregoriadis og medarbejdere har mærket liposomer In gennem anvendelsen af 111In-markeret bleomycin, Gregoriadis, G. og Neerunjun, E.D. (1975) Biochem. Biophys. Res. Comm., 65. 537-544; Gregoriadis, G. Neerunjun, D.E., og Hunt, R.
(1977) Life Sci., 21 357-369. De rapporterede, at 27-80% 10 af den tilsatte radioaktivitet var knyttet til phospholipi-det i negativt ladede liposomer, og de iagttog 2-4,5% inkorporering i positivt ladede liposomer.
Man har for nylig, jvf. Anal. Biochem. 9_4, 302 - 307 (1979), fundet en fremgangsmåde til rutinemæssig indføring af radio-15 aktive ioner i lipid-vesikler med mere end 90% udbytte.
Ved denne fremgangsmåde inkorporerer man ionophoren i li-pid-dobbeltlaget, og den anvendes til at bære udefra tilsatte radioaktive ioner til en chelator eller et chelerings-middel, som forinden er blevet opfanget i vesiklerne. Den 20 radioaktive ions binding til cheleringsmidlet er tilstrækkeligt stærk til, at det giver den drivende kraft for net-tooverførsien af radioaktive ioner ind i vesiklerne. Disse radioaktivt mærkede vesikler viser nu mere end 100 gange forøgelse i den specifikke aktivitet i forhold til sådan-25 ne, som har modtaget tilsætning ved simpel ultralyd-behandling.
Man har nu ifølge den foreliggende opfindelse fundet, at det er muligt at fremstille lipid-vesikler med lipid-dob-beltlagsvægge bestående af cholesterol, distearoylphos-30 patidylcholin og et cholesterolsukkerderivat med ladede, hydrophile hovedgrupper, som på kontrollerbar måde afgiver et hvilket som helst lægemiddel eller andet nyttigt middel, som bæres af eller befinder sig inde i den pågældende vesikel.
3
DK 154264 B
Endvidere har disse derivater den egenskab, at de efter indsprøjtning i en pattedyrs-værtsorganisme hurtigt og fortrinsvis akkumulerer i lymfesystemet og/eller i lungen, milten eller leveren. Eftersom sådanne vesikler belastes 5 med et stort udvalg af radioaktive sporingsmidler og lægemidler frembyder vesiklerne fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen en speciel metode til aflevering af lægemidlet til sygdommens specifikke lokalisering. Vesikel-væggen forbliver stort set intakt adskillige timer såle-10 des, at den effektivt kan tjene som bæremiddel. Til sidst nedbrydes vesikelvæggen, og lægemidlet frigives.
Lipid-vesikler indeholdende forbindelserne 6-( 5-cholest-en-3-/S-yloxy)hexyl-l-thio-<*-l), dets 6-amino-6-deoxyanaloge eller dets β-D-galactoanaloge sammen med dipalmitoylphos-15 phatidylcholin og endvidere lipid af uspecificeret natur er omhandlet i Carbohydrate Research, bind 67 (1978) side 55 - 63.
Veksikler indeholdende forbindelserne 6-( 5-cholesten-3/J-yloxy)hexyl-l-thio-P-L-fucopyranosid eller det tilsvarende 20 β-D-galactoderivat sammen med distearoylphosphatidylcholin og cholesterol, er omhandlet i Proc. Natl. Acad. Sci. USA, bind 76, side 765 - 769.
Opfindelsen angår en fremgangsmåde af den i kravets indledning angivne art.
25 Fremgangsmåden er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del angivne.
De omhandlede vesikler fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen anvendes ved administrering til et pattedyr, hvilke vesikler er karakteristiske ved den kontrollerede 30 frigivelse af det bårne middel og dets hurtige intakte akkumulation i lymfesystemet og/eller lungen, milten eller leveren, hvor det endelig frigøres.
4
DK 154264 B
I denne sammenhæng forstås ved udtrykket "vesikler" små sække indeholdende væsker ved indkapsling og/eller inkorporering inden for vesikelvæggen.
Det skal forstås, at den tidligere omtalte ionophor ligele-5 des kan være til stede, når vesiklen bærer en radioaktiv kation. Yed en sådan udførelsesform kan en chelator ligeledes være til stede inden for vesiklen, og det er fortrinsvis nitrilotrieddikesyre (NTA). Man kan imidlertid anvende andre chelatorer for polyvalente metalioner såsom 10 ethylendiamintetraeddikesyre. Når vesiklerne bærer andre midler, såsom organiske materialer, som farmaceutiske forbindelser er anvendelsen af ionophor og cheleringsmiddel unødvendig.
Vesiklerne kan bære eller være forsynet med et stort antal 15 forskellige materialer inclusive enzymer til enzym-erstat-ningsterapi, hormoner, radionuclider, cellemodificerende midler, antigener, antistoffer, interferon-fremkalder, virus-underenhedspartikler, genetisk materiale , såsom rna og DNA, samt lægemidler og farmaceutiske midler i alminde-20 lighed. Vesiklerne kan således som eksempel være antitumor-lægemidler, såsom methotrexat og actinomycin til brug ved cancer-kemoterapi. Vesiklerne fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan ligeledes anvendes ved sygdomsterapi med glycogen-oplagring under anvendelse 25 af amyloglucosidaser indesluttet i vesiklerne.
De vesikler, som har affinitet for lymfesystemet, kan selvfølgelig anvendes til diagnose og behandling af tumorer og metastaser i lymfesystemet.
ΟΟιη
Radioisotoper, såsan Tc^ , kan anvendes til diagnostiske for-30 mål, når de indføres i vesiklerne.
5
DK 154264 B
Vesiklerne anvendes ligeledes ved behandling af lysosomal-oplagringssygdomme til opfyldelse af udvalgte målceller, til eliminering af uønskede materialer i rummene uden om cellerne samt til modifikation af cellestruktur og celleak-5 tivitet.
Det skal forstås, at det radioaktive sporingsmateriale, det cytotoksiske eller terapeutiske middel, der undertiden her simpelthen betegnes som det "bårne middel", kan indkapsles i vesikelvæggen. Det bårne middel kan alternativt· være en 10 del af, d.v.s. dispergeret i eller opløst i, de materialer, der danner vesikelvæggen.
Inkorporering af det bårne middel i vesiklen kan udføres på mange forskellige måder.
En fremgangsmåde, der generelt kan anvendes til vandopløselige 15 og stabile midler, er at opløse midlet i vand, sædvanligvis under isotoniske forhold, at tilsætte de forskellige ve-sikelvægdannende bestanddele og at underkaste den samlede masse ultralydsbehandling.
Vandopløselige bårne midler kan ligeledes inkorporeres i 20 vesiklerne fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen ved anvendelse af den fremgangsmåde, der er omtalt af Szoka et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 75, 4194-4198 (1978).
Denne fremgangsmåde er særlig nyttig for skrøbelige vandopløselige materialer såsom enzymer og hormoner.
25 Lipophile bårne midler kan inkorporeres ved ultralydsbehandling af vesiklerne og påfølgende tilsætning af det lipophile bårne middel. Denne fremgangsmåde er nøjere beskrevet af Huang et al., Biochemistry, 18, 1702-1707 (1979).
Immunoglobulin G er et eksempel på et lipophilt båret mid-30 del, som inkorporeres i vesikelvæggen ved denne fremgangsmåde.
6
DK 154264 B
Opfindelsen forklares nærmere ved hjælp af de efterfølgende eksempler, hvor dele og procentdele er angivet efter vægt, med mindre andet er angivet.
Sammenligningsdata, der gør brug af dicetylphosphat eller 5 stearylamin i stedet for et af de cholesterolderivater, der anvendes i forbindelse med den foreliggende opfindelse, er omfattet af tabel 1 i det følgende.
De forkortelser, der er anvendt i tabellen og den efterfølgende beskrivelse samt på tegningen for de anvendte for-10 bindeiser, er som følger: DSPC = distearoylphosphatidylcholin Choi = cholesterol DCP = dicetylphosphat SA = stearylamin 15 Man = 6-(5-cholesten-3ø-yloxy)hexyl-l-thio-^-D-mannopyrano- sid
AcAmGal = 6-(5-cholesten-3-yloxy)hexyl-2-acetamido-2 deoxy-l-thio-3-D-galactopyranosid NELjGal = 6-(5-cholesten-3-3-yloxy)hexyl-6-amino-6-deoxy-20 l-thio-3-D-galactopyranosid N^Man = 6-(5-cholesten-33-yloxy)hexyl-6-amino-6-deoxy-1-thio-3-D-mannopyranosid På den medfølgende tegning viser fig. 1 - 3 de omhandlede vesiklers grad af intakthed, som bestemt ved PAC ("Pertu-25 bation Angular Correlation" - pertubationsvinkelkorrela- tion se f. eks. Hwang og Mauk, Proc. Natl. Acad. Sci.
USA, 74^ 4991-4995 (1977)) og sammenligner den med vesik-ler omfattende andre dobbeltlagskombinationer, og fig.
3 og 4 viser ændringerne i in vivo vesikelopførsel resul-30 terende fra tilstedeværelsen af aminosukkerderivater af cholesterol anvendt i overensstemmelse med opfindelsen, 7
DK 154264 B
og fig. 4 viser endvidere forsinket udskillelse af visse komplekser af radioaktivt indium. I hver figur er den procentvise intakthed af vesikler afbildet mod tiden i timer.
5 På fig. 1 er resultaterne fra anvendelse af kombinationen DSPC:Chol vist med uudfyldte cirkler og resultaterne fra DSPC:Chol:Man ved uudfyldte trekanter. Begge sæt resultater er angivet til sammenligning med resultaterne under anvendelse af DSPC:CholiNE^Man, som er vist ved uudfyldte kva-10 drater.
På fig. 2 vises to resultater med vesikler fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen. DSPC:Chol:Ni^Man gentages,' igen vist med uudfyldte kvadrater, og resultaterne fra DSPC:CholiNI^-Gal er vist med uudfyldte cirkler.
15 Fig. 3 gentager kurverne fra fig. 1, men med udfyldte cirkler, kvadrater og trekanter i stedet for uudfyldte cirkler, kvadrater og trekanter, og angiver også halveringstider for vesikler indeholdende DSPC:Chol-Man (uudfyldte trekanter viser en lavere dosis end uudfyldte cirkler).
20 Fig. 4 viser igen kurven fra fig. 1 med DSPC:Chol (udfyld te cirkler) sammen med udskillelseshastigheden for indiumkomplekser med EDTA og DTPA (uudfyldte kvadrater og henholdsvis uudfyldte trekanter).
Dette beskrives mere detaljeret i det følgende.
25 EKSEMPEL 1
Unilamellare vesikler med A23187 inkorporeret i dobbeltlaget blev fremstillet under anvendelse af de i tabel 1 anførte cholesterol-derivater (eller DCP eller SA). Ved en typisk 8
DK 154264 B
fremstilling blev cholesterol-derivatet sammen med fri cholesterol, DSPC og A23187 (0,04/umol) opløst i chloroform, tørret til en tynd film ved 60° C under en nitrogenstrøm og derpå tørret under vakuum natten over. Hvor det var øn-5 sket, blev 1 ^uCi af tritueret cholesteryloleat (specifik aktivitet 11 yuCi/^ug) inkluderet i blandingen som mærkningsmateriale for lipid-fasen. De tørrede lipider blev derpå genhydratiseret med 0,5 ml 1 mM NTA i phosphatpufferet saltopløsning (PBS), som består af 0,9% NaCl, 5 mM 10 natriumphosphat, pH 7,4. Blandingen blev underkastet ultralydsbehandling i et glycerolbad, der oprindelig befandt sig ved stuetemperatur (Branson ultralydsapparat med mikrotip af titan og indstillet på styrke), indtil opløsningen blev klar (ca, 5 minutter). Efter lydbehandling blev vesiklerne 15 inkuberet ved 60° C i 10 minutter til udligning af eventuelle strukturfejl. Vesikelsuspensionen blev derpå centrifugeret ved 300 x g til fjernelse af titanfragmenter og stærkt aggregeret materiale. Det NTA, der befandt sig uden for liposomerne, blev derpå fjernet ved at lade præparatet 20 passere igennem en søjle 0,8 x 35 cm "Sephadejl^ G-50", som var bragt i ligevægt med PBS, og som var konditioneret ved tidligere gennemhældning af lipid-vesikler til mætning af de irreversible bindingssteder. Vesiklerne blev elueret i søjlens tomme rum med typisk en fire gange fortynding og 25 95% genindvinding baseret på mærkningen med tritieret cho lesteryloleat .
EKSEMPEL 2
Fremgangsmåde til indføring - Efter chromatografering på "Sephadex" blev vesikel-præparaterne ladet med ^^In^+ under 30 anvendelse af inkuberingsblandinger, der typisk bestod af 500 /ul vesikler, 35 /ul 3,4 /uM natriumcitrat (pH 7,4) og / 11Ί X-l / / 1-50 yul InJ i 2 mM HC1 alt afhængig af den ønskede aktivitet. Et rumfang på to gange PBS svarende til rumfanget af tilsætningen af ^•'L1In^+ blev inkluderet i inkuberings- 9
DK 154264 B
blandingen. Inkuberingstid og temperatur varierede afhængig af ve sikel- sammensætningen, som anført længere nede. Inku-beringeme blev afsluttet ved tilsætning af 50 y-ul 10 mM EDTA (ethylendiamintetraeddikesyre) i PBS og umiddelbart 5 påfølgende chroma tograf er ing af blandingen på "Sephade^ G-50", der var bragt i ligevægt med PBS. EDTA optager tilbageværende indium på ydersiden af vesiklerne således, at søjlen ikke bliver radioaktiv. I de nedenfor anførte resultater blev anvendt A23187 til opnåelse af indføring af lipid-ve-10 sikler med ^^In^"1".
Når vesiklerne sønderdeles in vivo, frigives ^^Ίη^-ΝΤΑ kompleks, og111In^+ er tilgængeligt til binding til i nærhed værende makromolekyler. Binding af ^ilicr>+ til et makromolekyle forårsager en stor ændring i den effektive mo-15 lekulære rotationskorrelationstid på det sted, hvor indiumkærnen befinder sig, og som følge deraf er der en sænkning af den tidsintegrerede vinkelkorrelationsfaktor, f se f. eks. Hwang og Mauk, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 74, 4991-4995 (1977). Denne <G^{oo)> værdi kan således 20 anvendes til at overvåge omfanget af vesiklernes nedbrydning; dens værdi strækker sig fra ca. 0,62 for ·*··^Ιη-ΝΤΑ indeholdt i intakte vesikler til 0,18 for ionen bundet til serumproteiner. Stabiliteten og permeabliliteten for vesikler, der indeholder ^^In-NTA kompleks, blev lige-25 ledes kontrolleret ved den såkaldte PAC-teknik. For alle de systemer, der er anført i tabel 1, forblev værdierne for ^22(^høje efter inkubering ved 37° i 0,5 timer i nærvær af varmeihaktiveret kalveserum. Ved sønderdeling af vesiklerne ved hjælp af en lille tilsætning af isopro- panol faldt værdien for <G99 (<>0)> til en værdi, der kunne 111 3+ forventes for In binding til serumproteiner.
EKSEMPEL 3
Til brug ved undersøgelser in vivo blev vesikler indeholdende '^In-NTA indsprøjtet subcutant i mus af typen Swiss- 10
DK 154264 B
Webster (18 - 22 g) nær ryggens midtlinje på højde med scapulae. På passende tidspunkter blev musene aflivet, og man foretog umiddelbart derefter PAC-målinger på de dele af hudvævet, der viste signifikant radioaktivitet. Mængderne af 5 radionuklider i samtlige organer og væv blev bestemt under anvendelse af en gammatæller af brøndtypen.
Tabel 1 viser den forøgede stabilitet iagttaget fra derivater af cholesterol anvendt i overensstemmelse med opfindelsen, og sammenligninger med fravær af sådanne derivater 10 eller anvendelsen af andre forbindelser i stedet for.
Ændringerne i ve sikierne s opførsel in vivo, som stammer fra tilstedeværelsen af amino-sukkerderivater af cholesterol, er særdeles dramatiske. Halveringstiden for vesikler, som er bærere af aminogalactose- og aminomannose-derivater er bety-15 deligt længere end henholdsvis 100 og 600 timer (tabel 1 og fig. 3), hvor det er anført ved runde markeringer, end halveringstiden for andre derivater.
Mus blev indsprøjtet subcutant med vesikler indeholdende ^"^In-NTA kompleks i suspension i 0,2 ml PBS. Vesiklerne be-20 stod af DSPC:Chol:NH2-Man:A23187 eller DSPC:Chol:NH2-Gal: A23187. Injektionsstedet var på rygsiden af dyret ved legemets midtlinje omtrent på niveau med skulderbladene.
Radioaktiviteten var ikke lokaliseret til indsprøjtningsstedet, således som det var iagttaget med andre vesikel-25 præparater. Radioaktiviteten blev først og fremmest fundet (l) i huden på musens sideoverflade umiddelbart bag ved forbenene (dvs. i hvad der svarer til "armhulen"), eller (2) undertiden i huden på halsen ved kraniets underkant. Dette mønster for fjernelse af vesiklerne fra indsprøjtningsste-30 det er, som det kunne forventes, ved udløb igennem lymfe-kanalerne til de regionale lymfeknuder.
1]
DK 154264 B
En fugtigt udseende, blærelignende opsvulmet stribe i det tidligere beskrevne armhule-område var synlig uden forstørrelse inden for 1 time efter indsprøjtningen. Med unilamellar e vesikler holdt opsvulmningen sig i op til 8 timer efter 5 injektionen og med multilamellare vesikler op til 22 timer.
De efter injektionen iagttagne opsvulmninger svarer til radioaktivitetens lokalisering. Det mønster, som blev iagttaget i autoradiogrammer, viser, at opsvulmningen gengiver intakt overførsel af bolus ved indsprøjtningen. Radio-10 aktiviteten er afgrænset inden for enkelte fibre eller kar.
Den indsprøjtede'radioaktivitet koncentreres hurtigt således, at det radioaktive væv indeholder mindre end 65% af det oprindelige indsprøjtningsrumfang. Måling af ^22( ®«) > værdier på dele af huden indeholdende radioaktivitet viser en oprin-15 delig sænkning (ved<—18 timer), der ikke er iagttaget med andre ve sikel-systemer (fig. 2). Denne sænkning stammer fra en geometrisk virkning af PAC spektrometeret. En reduktion af prøvestørrelsen fra en kugle med 200 yul rumfang til en kugle med 75 yul rumfang resulterer f.eks. i en 25%'s reduk-20 tion i værdien for <^2 (<*>) ^ · Eftersom PAC-værdieme kun afspejler geometrien af den radioaktive del og ikke geometrien i det totale stykke væv, der er blevet analyseret, ville koncentrationen af vesikler i et lille område inden for et vævstykke resultere i en "kunstig" sænkning i procentandelen 25 af intakte vesikler.
For alle andre undersøgte vesikel-systemer iagttog man ikke noget område med lokal opsvulmning, og vesikleme forblev knyttet til huden ved injektionsstedet. Det vil være klart for fagmanden, at sådanne vesikler indeholdende bårne mid-30 ler, som forblev knyttet til injektionsstedet, ligeledes er af betydelig gavnlig virkning, eftersom vesikleme gradvist frigiver de indeholdte bårne midler igennem en længere tidsperiode. Dette er vist ved de i tabel 2 anførte data.
12
DK 154264 B
De virkninger, der er iagttaget ved aminomannose-derivateme af cholesterol, er konstateret som værende afhængig af doseringen (tabel 1 og fig. 3), henholdsvis uudfyldte cirkler og trekanter. Nedsættelse af andelen af aminomannose-derivat 5 reducerer levetiden in vivo og reducerer udstrækningen af blæredannelse. For vesikler med DSPC:Chol:NH^Man i de molære indbyrdes forhold 2:0,9:0,1 blev der ikke iagttaget lokaliseret opsvulmning. Kombination af mannose-derivatet af cholesterol med stearylamin førte ikke til de virkninger, som 10 blev iagttaget med aminomannose-derivatet (tabel l). De vesikler, som indeholder de forenede grupper, forbliver på injektionsstedet, og bevæger sig ikke til eller opkoncentrerer sig ikke ved bagsiden af forbenene, således som det blev i-agttaget ved de am:no-sukkerindeholdende vesikler. Den βρει 5 cificitet, der blev iagttaget ved amino-sukkerderivaterne, er derfor et resultat af overfladegruppernes stereokemi, og det er ikke en simpel additiv virkning af sukker plus ladning. De tidligere nævnte data viser, at en NE^-gruppe anbragt på en mannose- eller galactoserest tilfører betydelig 20 specificitet for lymfesystemet, når vesiklerne indgives sub-cutant.
En vigtig faktor, der skal tages hensyn til ved udviklingen af vesikel-systemer, som er i stand til at tilvejebringe kontrolleret aflevering af terapeutiske midler, er tilgæn-25 geligheden af det frigivne materiale til en given celleplacering eller celledelsplacering, hvad enten det indesluttede materiale frigives introcellulært eller ekstra-cellulært. Til opnåelse af sådan viden undersøgte man in vivo opførslen af indium-komplekser af ethylendiamintetra-30 eddikesyre [(^"^In-EDTA)-^] og indium-komplekser med ethylen-triaminpentaeddikesyre (_( In-DTPA) J . Disse indium-komplekser er meget stabile, og når de indgives subcutant, fjernes de hurtigt fra kredsløbet gennem nyrerne. Faktisk udskilles mere end 90% af [(111In-EDTA)“1] og [(111in-DTPA)-^ ] 13
DK 154264 B
inden for henholdsvis 2,4 og 1,4 timer, når de bliver indgivet på denne måde, (fig. 4), henholdsvis uudfyldte firkanter og trekanter. Fig. 4 viser ligeledes virkningen af vesikelindkapsling på udskillelseshastigheden for komplek-5 serne. For DSPC:Chol vesikler er elimineringen af [(^^In-EDTA)] forsinket med ca. 8 timer i forhold til destruktionen af ve-sikleme, således som den måles ved PAC-teknikken på præparationer indeholdende 111In-NTA. Den forsinkede udskillelse af [(^^In-EDTA) komplekset angivet ved trekanter og af 111 10 (In-DTPA)- komplekset angivet ved firkanter antyder, at vesiklerne kan ødelægges inden for en celle eller et celle-afsnit. Forlænget forsinkelse af udskillelse af [( In-DTPA) ] (fig. 4) er i overensstemmelse med denne hypotese, eftersom membranpermeabiliteten skulle nedsættes med stigende ladning på 15 komplekset. For alle de undersøgte systemer iagttog man en forsinkelse mellem injektionstidspunktet og påbegyndelsen af vesikelødelæggelsen (fig. 3).
Halveringstiden for in vivo ødelæggelse af vesiklerne kan varieres over et område på 50 gange ved inkludering i lipid-20 dobbeltlaget af forskellige carbonhydridforbindelser med ladede hovedgrupper eller sukker-og amino-sukkerderivater af cholesterol. Herved tilvejebringes midler til kontrolleret aflejring og frigivelse af terapeutiske midler ved subcutan indsprøjtning. I kombination med egenskaben med hensyn til 25 frigivelse på bestemte tidspunkter tillader lokalisering af vesikler i lymfevævene, anskueliggørelse og behandling af tumorer og metastaser i lymfesystemet. Derudover giver PAC-iagttagelser i kombination med studier over fordeling i vævene af vesikler indeholdende stabile indiumkomplekser værdi-30 fuld viden om mekanismerne knyttet til vesiklernes metabolisme. Sukkerderivaternes højtudviklede stereospecifikke virkning med hensyn til placeringen af phospholipid-vesiklerne udgør et betydeligt fremskridt inden for fagområdet.
TABEL 1 14
DK 154264 B
Hver enkel subcutan indsprøjtning af lipid-vesikler indeholder typisk 1,0 mg total lipid, 20 ^uCi ^^Ίη^+ bundet til 1 mM NTA inden, i samt phosphatpufret saltopløsning (0,9% 5 NaCl, 5 mM natriumphosphat, pH 7,4) inden i og uden for ve-sikleme. Det samlede indsprøjtningsrumfang er 200 ^ul. Data er baseret på PAC-målinger på huden. 100% intakt-niveau-et svarer til <G9Q (<*«)> værdien for vesikleme forud for indsprøjtningen; 0% intakt svarer til <Gpp(oo)> for InJ 10 bundet.til serumproteiner.
Præparat (molære forhold) Tid (timer), hvori givne procentandele vesikler forbliver intakte _80%_50%_20% 15 DSPC:Chol (2:1) (kontrol) 9 21 43 DSPC:Chol:DCP (2:0,5:0,5)**) 3 12 25 DSPC:Chol:SA (2:0,5:0,5) ** ) 24 41 78 DSPC:Chol:AcAmGal (2:0,5:0,5) 43 84 170 DSPC:Chol:NH2Gal (2:0,5:0,5) 35 100 210 20 DSPC:Choi:NH2Man (2:0,5:0,5) 200 600* DSPC:Chol:NH2Man (2:0,75:0,25) 55 95 250 DSPC:Choi:NH2Man (2:0,9:0,1) 30 55 120 DSPC:Chol:Man:SA **) * (2:0,5:0,25:0,25) 26 70 200 25 * Ekstrapoleret værdi. **) Anvendes til sammenligning med ve- siklerne, fremstillet ifølge opfindelsen DSPC = distearoylphosphatidylcholin
Chol = cholesterol DCP = dicetylphosphat 30 SA = stearylamin
Ac Am Gal= 6-(5-cholesten-3-yloxy)hexyl-2-acetamido- 2-deoxy-l-thio-p-D-galactopyranosid.
NHpGal = 6-(5-cholesten-3P-yloxy)hexyl-6-amino-6~ deoxy-l-thio-p-D-galactopyranosid.
35 NH2Man = 6-(5“Cholesten-3p-yloxy)hexyl-6-amino-6- deoxy-l-thio-a-D-mannopyranosid.
15
DK 154264 B
P
0)
rH
* Ή 03 03 > m
(O
tP
C
^ r-j G) £ § “
1' fcr-« rH
S H <f CO o o. cm <rir\«HW» «»infflNaico is cm -d- js cm m }x{ CM Λ O Λ ·* O ΙΓ\ I—I Λ Λ Λ t» Λ a» A fv κ η k
IT) S [S O+IOH+lVD+iOOHOHOrQtn-d-incMCM iL
Γ* ·· 00 S3 .¾ Η H CM CO OA ΓΛ 5
Qto^o-r-io - - - -3 co<mocq co h d w is m rfl & C\] ΙΌ λΟ ** ^ fO VsO 00 *\*sr*#v*v n ft *\ ft *\ _j a 0<! H-flOm+l'O+IISHOHOOK'vNA^rMCM |§ § ο ΙΛ OCM C0 00 £
> A H ·> 00 ----LavQISCMISCMOOfOOin K
frt CO i—I ** Ο Λ -j” LP\ rH ΙΌ * Λ Λ ^ ^ λ * *> «ν i.
η Ρ Γ CM +| ο W +| ΙΑ+Ι ΙΡ| <|· Ο m Η Ο Ν ΜΛ 4 m + ^ -Ρ I " Ό -. β ', 03 Ρ ·Η g mu ο < α) tu Ε-ι -μ > Μ-Ι -Η 03 (J1 + § η —--------- 1 -——
c U
Η φ Η > Η φ
Η rH
-Ρ ω ο υ> ^ S Ο (Μ ο - ο ΟΟ Ρ CD O^IAd·1 «ΟΟΜΟΟΟΓί *>0 ΙΑ CM Η Φ " ? Γ—I <[- ·>|>Γ\ ·> ·» I 1 rHiH λ “ Λ ΐΗ ·\ Λ Λ «V Λ |—I φ 2 ΚΑ CMVO+lOH+Ifn+KfCMOHdVOCriCO-CALnH g1 1 < * - σ *. d"CM Ό •d'VO rH·' H i^^^cM'O-' -'-KAOASmvOiA'OCMSæo o tj o OS »« »H O fA ·'''·'*·'··'·'·'''*'*· « m ,d in +1 H CM +1 CM +1 CM CM O ISCM O 00 g V. r g
P Ο IT\IT\ LT\ CM Η O O
P ft, η .►lACO» ►-4Ν^3βΗΙΑα) - ri ΙΑ IS 03 2 το lt\ o - -o cmo - * * p p
ej p 00+IH H+IH+IH CM Od" Η O 03 H CO OOd* 0 'O
•P u / P s
? 1/ Sal -H -H
5 -Η/ ω aj nj ci 5 03 > > Sh ® jj E·/ aJ -P (D ri -P ni S 8 -P φ ri rip
^ 7 T) ri PO 03 -μωωτί-ρ?Η£Μ|£^ S S
$ /> O 03d |> Hd>d^03&phS?^ > > Τ' / ffi Η Ό p Φ _ _ £ r>m K P P gSSPPMfflfflPWffi «ΰ Λ 1¾ 16 EKSEMPEL 4
DK 1 54264 B
I dette eksempel indsprøjtes vesiklerne intravenøst. De i tabel 2 anførte data viser, at I^Man-derivatet akkumuleres præferentielt, dvs. med målrettethed, oprindelig i lungen 5 og efter 3 og 24 timer i leveren og milten, idet sidstnævnte er legemets største lymfeorgan.
Det må være underforstået, at de belastede vesikler kan indgives på en hvilken som helst konventionel måde under anvendelse af pharmaceutisk acceptable bærestoffer. Man kan 10 således anvende perorale og parenterale former for indgift.
EKSEMPEL 5
Idet man følger den i eksemplerne 1-2 anvendte fremgangsmåde fremstiller man lipid-vesikler, der er belastet med følgende blandinger.
15 TABEL 3
Dobbeltlagspræparat Båret middel (molforhold) DSPC:Chol:AcAmGal (2:0,5:0,5) Methotrexat DSPC: Choi: M^Gal (2:0,5:0,5). Actinomycin DSPC:Chol:NH2Man (2:0,5:0,5) Tc"m
De efterfølgende eksempler beskriver fremstillingen af visse celleoverfladeacceptorer, som anvendt ved udøvelsen af den foreliggende opfindelse.
EKSEMPEL 6 17
DK 154264 B
6-Deoxy-l ,2:3,4-di-0-isopropyliden-6-phthalimido-a-D-galactose_
Kaliumphthalimid (4,94 g) sættes til en opløsning af 6-de-5 oxy-6-iod-l,2:3,4-di-O-isopropyliden-oc-D-galacto se (9,0 g) i Ν,Ν-dimethylformamid (50 ml). Suspensionen opvarmes under omrøring i 8 timer ved 130°C (badets temperatur]). En anden portion kaliumphthalimid (1,25 g) sættes til den nedkølede, brune opløsning, som derpå opvarmes under omrøring i yderli-10 gere 8 timer ved samme temperatur. Opløsningen inddampes under vakuum til en mørk sirup, som adskilles mellem ethyl-ether og vand. Det mørke, uopløselige materiale frafiltreres og bortkastes, og etherlaget vaskes tre gange med vand, tørres og inddampes til en sirup (bestående af reåktionsproduk-15 tet og udgangsmaterialet). Denne blanding adskilles ved søj-lechromatografi på silicagel med 5% ethylacetat i chloroform som elueringsmiddel. Den 1 overskriften angivne forbindelse isoleres som et krystallinsk materiale, der omkrystalliseres ud fra methanol til dannelse af 5,1 g (54%) af reaktionspro-20 duktet, smp. 138 - 141°C; [litt. smp. 144,5 - 145,5°cJ; MR (chloroform-d) 35,42 (d, ^ 5,0 Hz, H-l), 7,47 - 7,82 (4 aromatiske), 1,23, 1,37, 1,43 og 1,52.
cr3 (2 ).
\ch3 EKSEMPEL 7 6-Deoxy-6-phthalimido-D-galactopyranose 25 En opløsning af 6-deoxy-l,2:3,4-di-0-isopropyliden-6-phthal-imido-a-D-galactose (5,0 g) i iseddikesyre (50 ml) og vand (18 ml) opvarmes i 32 timer ved 80°C (badets temperatur). Opløsningen filtreres, og filtratet inddampes under vakuum til 18
DK 154264 B
en krystallinsk masse. Omkrystallisation ud fra absolut ethanol fører til den i overskriften nævnte forbindelse (3,0 g, 76%), smp. 155°C (dek.), blødgøring ved 95°C.
TEMPEL 8 5 Trin A: 1,2,3,4-Tetra-0-acetyl-6-deoxy-6-phthalimido- D-galactouvranose_ 6-Deoxy-6-phthalimido-D-galactopyranose (2,9 g) acetyleres med eddikesyreanhydrid (12 ml) i pyridin (20 ml) på normal måde til dannelse af 1,2,3,4-tetra-0-acetyl-6-deoxy-6-10 phthalimido-D-galactopyranose (4,30 g), (96%) som en blanding af oc- og β-anomere i det indbyrdes forhold 1:1,6, joc]^ +52,5°, (c 1,0, chloroform); NMR (chloroform-d): 95,70 (d, 2 8,0 Hz, Η-1β), 6,33 (b, H-la).
Trin B: 2,3,4-Tri-0-acetyl-6-deoxy-6-phthalimido-a-D- 15 galactonvrano svlbromid_
En opløsning af 1,2,3,4-tetra-0-acetyl-6-deoxy-6-phthal-imido-D-galactopyranose (4,2 g) i dichlormethan (2 ml) behandles med 30 - 32%! s hydrogenbromid i iseddikesyre (10 ml) i 1 time. Reaktionsblandingen hældes ud i isvand, 20 og reaktionsproduktet ekstraheres umiddelbart med dichlormethan. Det organiske lag vaskes med kold vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning og koldt vand, tørres og inddampes under vakuum til dannelse af den i overskriften nævnte forbindelse i form af en sirup (10,0 g, 91%); NMR (chloro-25 form-d): 6,63 (d, 2 4,0 Hz, H-l), 7,58 - 7,90 (4 aroma tiske), 1,96, 2,07 og 2,13 (3 OAc).
EKSEMPEL 9 19
DK 154264 B
2,3,4-Tri-0-acetyl-6-deoxy-6-phthalimido-l-thio-β-D-galactopyranose_ (A) En opløsning af 2,3,4-tri-0-acetyl-6-deoxy-6-phthal-5 imido-a-D-galactopyranosylbromid (4,0 g) og tMourinstof (0,6? g) i tør acetone (20 ml) opvarmes under -tilbagesvaling i 4 timer. Opløsningen inddampes under vakuum til en sirup, som fordeles imellem vand og dichlormethan. Det organiske lag ekstraheres igen med vand tre gange. De samle-10 de vandige ekstrakter inddampes til dannelse af 2-S-(2,3,4-tri-0-acetyl-6-deoxy-6-phthalimido- β-D-galactopyrano syl) - 2-thiopseudourinstof (3,40 g).
(B) Chloroform (9,0 ml) sættes til en opløsning af 2-S-(2,3,4-tri-0-acetyl-6-deoxy-6-phthalimido-β-D-galactopyrano- 15 syl)-2-thiopseudourinstof (3,4 g) i vand (10 ml) indeholdende kaliummetabisulfit (1,,38 g). Blandingen opvarmes under omrøring og under tilbage svaling i 15 minutter,. Den nedkø-lede opløsning separeres, og det organiske lag tørres og inddampes under vakuum til dannelse af den i overskriften 20 nævnte forbindelse (2,5 g). Dette materiale anvendes direkte til fremstillingen af 6-(5-cholesten-3P-yloxy)hexyl-2,3,4-tri-0-acetyl-6-deoxy-6-phthalimido-l-thio^-D-galactopyranosid.
EKSEMPEL 10 6-(5-Chole sten-3 β-yloxy)hexyl-2,3,4-tri-0-acetyl-6-deoxy-25 6-nhthalimido-l-thio-β-D-galactopyrano sid_
Triethylamin (0,8 ml) sættes til en opløsning af 2,3,4-tri- O-acetyl-deoxy-6-phthalimido-l-thio-β-D-galactopyranose (2,5 g) og β-(5-cholesten-3β-yloxy)-hexyliodid (3,3 g) i dichlormethan (20 ml). Opløsningen holdes ved stuetempera-30 tur under nitrogen natten over og vaskes med vand, tørres og inddampes -under vakuum til en sirup (4,71 g). Dette ma- 20
DK 154264 B
teriale sættes til en silicagel-søjle og elueres med chloroform efterfulgt af 2% ethylacetat i chloroform. De udvalgte fraktioner forenes og inddampes under vakuum til dannelse af den i overskriften nævnte forbindelse (4,0 g, 78%); R^ 0,2 5 (CHCl3-EtOAc. 95:5), [a]^7 -93° (c 1,18, chloroform); MR
(chloroform-d): 7,60-7,91 (4 aromatiske), 1,93, 2,03 og 2,24 (3 OAc) 0,68 (CHj-18).
EKSEMPEL 11 6-(5-Cholesten-3p-yloxy)hexyl-6-amino-6-deoxy-l-thio-p-D-10 galactopyranosid__
En suspension af 6-(5-cholesten-3p--yloxy)hexyl-2,3,4-tri- 0-acetyl-6-deoxy-6-phthalimido-l-thio-p-D-galactopyranosid (710 mg) i methanol (10 ml) og n-butylamin (10 ml) opvarmes under tilbagesvaling i 16 timer. Opløsningen inddampes til 15 en krystallinsk masse. Der tilsættes chloroform, og det faste stof frafiltreres og vaskes med chloroform. De forenede filtrater inddampes til en sirup, som sættes på en silicagel-søjle og elueres med chloroform-methanol-ammoniumhydroxid (80:20:2). De udvalgte fraktioner forenes og inddampes til 20 en sirup, som tritureres med ethylether til dannelse af kry-1 staller (390 mg, 76%); Rf 0,28 (CHCl^MeOH-NH^OH, 80:20:2),
Wd^ ”29,5° (c 1,05, chloroform), m.s. :m/e 665 (M++l).
EKSEMPEL 12 6-(5-Cholesten-3p-yloxy)hexyl-2-acetamido-2-deoxy-l-thio- β-D-galactopyrano sid________ 25 A. 6-(5-Cholesten-3P-yloxy)hexyl-2-acetamido-3,4,6-tri-0-acetvl-2-deoxv-l-thio-3-D-galactonvranosid_ 2-Acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-l-thio-^~D-galacto-30 pyranose (10 mmol) behandles med 6-(5-cholesten-3^-yloxy)- 21
DK 154264B
hexyliodid (10 mmol) i dichlormethan (30 ml) indeholdende 1,5-diazabicycloC5.4.0l -undec-5-en (10 mmol). Omsætningen finder sted i løbet af 1 dag ved stuetemperatur og under nitrogen. Den således fremstillede opløsning vaskes med 5 destilleret vand (20 ml) og tørres med vandfrit natriumsulfat. Den filtrerede opløsning koncentreres til dannelse af en sirup, som sættes på en silicagelsøjle og elueres med chloroform efterfulgt af 1% ethanol i chloroform. Den opnåede forbindelse dannes som et krystallinsk :ma±eriale 10 i et udbytte på 43%, smp. 130 - 133 °C (ethanol), OG D -37° (c = 1,5, chloroform).
B. €-( 5-Cholesten-3^-yloxy )hexyl-2-acetamido-2-dBoxy-l-thio-A-P-galactopyranosid_
Reaktionsproduktet fra trin A omrøres med en basisk ion-15 bytterharpiks, Bio-Rad AG 1-X2 (OH), i ethanol—tetrahydro- furan eller natriummethoxid i methanol til dannelse af titelforbindelsen, udbytte 85%, smp. 241 - 243 °Cn DO D -35° (c = 1,5, Ν,Ν-dimethylformamid).
EKSEMPEL 13 20 Fremstilling af. '2,3,4-tri-0-acetyl-6-0-methylsulfonyl-q-D-mannopyranosylbromld_
En iskold opløsning i 60 ml tør CHgClg af 14,9 g (34,9 mmol) 1,2,3,4,-tetra-0-acetyl-6-0-methylsulfonyl-β-D-mannopyra-nose, der var fremstillet ved den fremgangsmåde, der er 25 beskrevet i J. Fernandez-Bolanos og R.G. Fernandez-Bolanos,
An. Quim., 65 (1969) 1163-1164; Chem. Abstr,, JZ (1970) 133105w, blev behandlet med 21 ml 30-32%’s HBr i iseddikesyre og holdt 2,5 timer ved 25°C. Blandingen blev hældt ud i 400 ml under omrøring værende isvand, separeret, og 30 den vandige fase blev vasket med tre 20 ml alikvote dele CH^C^. De samlede organiske lag blev vasket med vand og
DK 154264 B
22 med mættet NaHCO^-opløsning, tørret med Na^SO^, inddampet, tritureret med petroleumsether (kp. 30-60°C), filtretet og lufttørret til dannelse af 14,6 g (93%) af det faste oc-glycosyTbromidr smp.: 167,5-168,5°C (dekomp,): 5 [α]β5 +120,0 ~ 0,05° (c 1,01 CHCl^); IR 1740 og 1725 (acetat) cm-\
Elementæranalyse for c13HigBr01QS:
Beregnet: C 34,91, H 4,28; Br 17,87; S 7,17 Fundet: C 35,04; H 4,18; Br 17,61; S 7,27.
10 EKSEMPEL 14 6~( 5-cholesten -3p-yloxy)hexyl-2,3,4-tri-0-acetyl-6-azido- 6-deoxy-l-thio-a-D-mannonvranosid_
Det manno sylbromid, der var fremstillet ved den i eksempel 13 beskrevne fremgangsmåde, blev omdannet ved hjælp af 15 isothiouroniumbromidet [85%, hvidt pulver, smp. 87-90°c (dekomp.), IR 3600-3100, 1740, 1640 cm"1] til den tilsvarende thiol [89% farveløs glasagtig masse, IR 2560, 1750-1730 cm ] i overensstemmelse med den fremgangsmåde, der er omtalt i M. Cerny, J. Stanek og J. Pacek, Monatsch.
20 94^ 290-294 (1963). Thiolen blev koblet som i eksempel 9 til dannelse af 61% 6-(5-cholesten-38-yloxy)hexyl~2,3,4-tri-O-acetyl-6-D-methylsulfonyl-l-thio-a-D-mannopyranosid, i form af en hvid glasagtig masse, IR 1740 cm *". Til sidst blev 1,14 g (1,32 mmol) af det forudgående mesylat, 25 0,49 g (7,5 mmol) NaN^ og 40 ml tør DMF rørt sammen ved 70-75°C under Nj i 4,5 timer. Efter afdampning af opløsningsmidlet blev inddampningsresten opløst i 20 ml ether, vasket med tre 10 ml portioner E^O, tørret med MgSO^, og inddampet til dannelse af 1,05 g (97%) af det i over-30 skriften anførte azid i form af en farveløs glasagtig masse, der var homogen ved TLC (12%, EtOAc i benzen på 23
DK 154264 B
25 , silicagel), [ot]n +12,6*0,5° (c 1,02 CHCl-,)? ir 2095 (azid), og 1755 (acetat) cm . En prøve på 0,54 g blev yderligere renset ved søjlechromatografi (silicagel, 12% EtOAc i benzen), hvilket førte til 0,417 g (75% ud-5 bytte) af en farveløs glasagtig masse, der størknede ved langvarig henstand, smp. 68-70°C.
Elementæranalyse for C^-H^N^OgS:
Beregnet: C 66,22; H 9,02; N 5,15; S 3,93.
Fundet: C 66,53; H 8,98; N 5,04; S 3,98.
10 EKSEMPEL 15
Fremstilling af 6-(5-cholesten -3P-yloxy)hexyl-6-azido-6- deoxy-l-thio-a-D-mannopyranosid_
Azidotriacetatet fra eksempel 14 blev afblokeret ved den fremgangsmåde, der er anført i eksempel 10, til dan-15 nelse af 62% af den i overskriften anførte azidotriol i form af en glasagtig masse, IR 3600-3100 (OH)?, 2D95 (azid) cm ^.
Elementæranalyse for :
Beregnet: c 67,88; Ή 9,79; S 4,65.
20 Fundet: C 67,80; H 9,55; S 4,54.
EKSEMPEL 16
Fremstilling af 6-(5-cholesten-33-yloxy)hexyl-6-amino-e-deoxy-l-thio-g-D-mannopyranosid_
En opløsning af 0,163 g (0,236 mmol) af den azidotriol, 25 der var fremstillet ved den i eksempel 15 angivne fremgangsmåde, i 4,0 ml CHCl^ indeholdende 3,0 ml triethyl-

Claims (1)

  1. DK 154264 B amin blev behandlet med tør gasformig H2S ved stuetemperatur i 4,5 time. De flygtige bestanddele blev fjernet ved anvendelse af en rotationsfordamper, og reaktionsproduktet blev isoleret ved præparativ TLC (silicagel, 7:2:1 CHCl^/CH^OH/koncentreret vandig NH^) til dannelse af 65,0 mg (41%) af et hvidt pulver, smp. udefinerbart; IR 3650 (NH2), 3600-3100 (OH) cm"1; MS: 635 (M+ - CH2 = NH+), 503» 470, 386, 368, 353. En prøve på 1 mg blev per-O-trimethylsilyleret med bis-(trimethylsilyl)tri-fluoracetamid i DMF ved 65-70°C i 15 minutter, MS: 1024 (M+), 1009, 951 (M+ - N(Si[CH3]3)2, 523, 501, 368, 174 (basis top). Man optog en MS med høj opløsningsevne for det per-O-trimethylsilylerede saccharidfragment. Analyse, beregnet for 02ΊH^pNO^Si^*: 522,2744. Fundet: 522,2721. Patentkrav : Fremgangsmåde til fremstilling af lipid-vesikler med lipid-dobbeltlagsvægge bestående af cholesterol, distearoylphospha-tidylcholin og et cholesterol-sukkerderivat, kendetegnet ved, at man opløser en effektiv mængde fysiologisk kompatibelt radioaktivt sporingsmateriale, et cyto-toxisk middel eller et terapeutisk aktivt stof i vand, tilsætter cholesterolen og distearoylphosphatidyicholinen og yderligere 6-(5-cholesten-3-yloxy)hexyl-2-acetamido-2-deoxy-l-thio-ø-D-galactopyranosid, 6-(5-cholesten-3^-yloxy)-hexyl-6-amino-6-deoxy-l-thio-/M}-galactopyranosid eller 6-(5-cholesten-3^-yloxy)hexyl-6-amino-6-deoxy-l-thio-(X-D-mannopyranosid og underkaster den således fremstillede blanding en ultralydbehandling.
DK472980A 1979-11-08 1980-11-07 Fremgangsmaade til fremstilling af lipid-vesikler DK154264C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US9234279 1979-11-08
US06/092,342 US4310505A (en) 1979-11-08 1979-11-08 Lipid vesicles bearing carbohydrate surfaces as lymphatic directed vehicles for therapeutic and diagnostic substances

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK472980A DK472980A (da) 1981-05-09
DK154264B true DK154264B (da) 1988-10-31
DK154264C DK154264C (da) 1989-03-28

Family

ID=22232767

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK472980A DK154264C (da) 1979-11-08 1980-11-07 Fremgangsmaade til fremstilling af lipid-vesikler

Country Status (12)

Country Link
US (1) US4310505A (da)
EP (1) EP0028917B1 (da)
JP (1) JPS5675439A (da)
AT (1) ATE7656T1 (da)
AU (1) AU533213B2 (da)
DE (1) DE3068062D1 (da)
DK (1) DK154264C (da)
ES (1) ES496666A0 (da)
GR (1) GR71720B (da)
IE (1) IE50369B1 (da)
NZ (1) NZ195377A (da)
PT (1) PT72040B (da)

Families Citing this family (138)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4394372A (en) * 1980-12-22 1983-07-19 The Procter & Gamble Company Process for making lipid membrane structures
JPS5874619A (ja) * 1981-10-29 1983-05-06 Nippon Shinyaku Co Ltd リポソ−ム及びその製法
US5441745A (en) * 1982-03-30 1995-08-15 Vestar, Inc. Method of delivering micellular particles encapsulating chemotherapeutic agents to tumors in a body
US5435989A (en) * 1982-03-30 1995-07-25 Vestar, Inc. Method of targeting a specific location in a body
JPS58201711A (ja) * 1982-05-19 1983-11-24 Eisai Co Ltd ユビデカレノン含有リポソ−ム被覆体
US4865835A (en) * 1982-06-02 1989-09-12 Begent Richard H J Diagnosis and treatment of tumors
US4460560A (en) * 1982-06-18 1984-07-17 University Of Southern California Drug delivery by polymeric carriers
US4522811A (en) * 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4571332A (en) * 1982-09-19 1986-02-18 Litton Bionetics, Inc. 125 I and 131 I labeled phospholipids
US4603044A (en) * 1983-01-06 1986-07-29 Technology Unlimited, Inc. Hepatocyte Directed Vesicle delivery system
US4574079A (en) * 1983-05-27 1986-03-04 Gavras Haralambos P Radiolabeled angiotensin converting enzyme inhibitors for radiolabeling mammalian organ sites
US4544545A (en) * 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
DE3336583A1 (de) * 1983-09-26 1985-04-25 Udo Dr. 8400 Regensburg Ehrenfeld Erzeugnis zur diagnose und therapie von malignen tumoren
US4708861A (en) * 1984-02-15 1987-11-24 The Liposome Company, Inc. Liposome-gel compositions
US4674480A (en) * 1984-05-25 1987-06-23 Lemelson Jerome H Drug compositions and methods of applying same
US4665897A (en) * 1984-05-25 1987-05-19 Lemelson Jerome H Composition and method for detecting and treating cancer
GB8422876D0 (en) * 1984-09-11 1984-10-17 Secr Defence Silicon implant devices
AU591466B2 (en) * 1984-10-22 1989-12-07 Vestar, Inc. Method of delivering micellular particles encapsulating imaging and chemotherapeutic agents to tumors in a body
CA1298548C (en) * 1984-10-22 1992-04-07 Cary Arnet Presant Method of delivering micellular particles encapsulating imaging and chemotherapeutic agents to tumors in a body
US5019369A (en) * 1984-10-22 1991-05-28 Vestar, Inc. Method of targeting tumors in humans
US4921706A (en) * 1984-11-20 1990-05-01 Massachusetts Institute Of Technology Unilamellar lipid vesicles and method for their formation
CA1267840A (en) * 1984-11-23 1990-04-17 Cary Arnet Presant Method of targeting tumors in humans
US4753788A (en) * 1985-01-31 1988-06-28 Vestar Research Inc. Method for preparing small vesicles using microemulsification
US4740375A (en) * 1985-02-25 1988-04-26 Technology Unlimited, Inc. Gelcores
US4752572A (en) * 1985-08-30 1988-06-21 Eastman Kodak Company Lipid vesicles containing labeled species and their analytical uses
US5622713A (en) * 1985-09-17 1997-04-22 The Regents Of The University Of California Method of detoxifying animal suffering from overdose
IE58981B1 (en) * 1985-10-15 1993-12-15 Vestar Inc Anthracycline antineoplastic agents encapsulated in phospholipid micellular particles
JPS62270531A (ja) * 1985-11-01 1987-11-24 サントル　ナシヨナ−ル　ド　ラ　ルシエルシユ　シヤンテイフイ−ク（セ−・エン・エル・エス） 生体内でのイメ−ジング及び治療用の新規エアロゾル組成物
US4812314A (en) * 1986-02-24 1989-03-14 Yissum Research & Dev. Co. Of The Hebrew Univ. Of Jerusalem And Hadassah Medical Organization Lipid replacement therapy
US5043107A (en) * 1986-08-21 1991-08-27 Vestar Research, Inc. Preparation small unilamellar vesicles including polyene antifungal antibiotics
IE60901B1 (en) * 1986-08-21 1994-08-24 Vestar Inc Improved treatment of systemic fungal infections with phospholipid particles encapsulating polyene antifungal antibiotics
US4963297A (en) * 1987-12-22 1990-10-16 The Liposome Company, Inc. Spontaneous vesticulation of multilamellar liposomes
AU598958B2 (en) * 1987-11-12 1990-07-05 Vestar, Inc. Improved amphotericin b liposome preparation
US4946683A (en) * 1987-11-18 1990-08-07 Vestar, Inc. Multiple step entrapment/loading procedure for preparing lipophilic drug-containing liposomes
US5071598A (en) * 1987-12-03 1991-12-10 California Institute Of Technology Cryoprotective reagent
EP0389570B2 (en) † 1987-12-04 2000-07-19 The Liposome Company, Inc. High integrity liposomes and method of preration and use
JPH03501732A (ja) * 1987-12-22 1991-04-18 ザ　リポソーム　カンパニー，インコーポレイテッド 多重ラメラリポソームの自発的小胞化方法
US5169636A (en) * 1988-03-17 1992-12-08 Nippon Fine Chemical Co., Ltd. Liposomes
NO882653D0 (no) * 1988-06-15 1988-06-15 Apothekernes Lab Doseringsform.
US4931361A (en) * 1988-11-18 1990-06-05 California Institute Of Technology Cryoprotective reagents in freeze-drying membranes
US5049392A (en) * 1989-01-18 1991-09-17 The Liposome Company, Inc. Osmotically dependent vesicles
FR2645741B1 (fr) * 1989-03-20 1995-06-23 Dior Christian Parfums Procede pour fixer un produit sur la membrane d'un keratinocyte au moyen d'une liaison ligand-recepteur, procede de preparation d'un tel produit, produit obtenu, composition cosmetique ou pharmaceutique le contenant et son procede de preparation
US5088499A (en) * 1989-12-22 1992-02-18 Unger Evan C Liposomes as contrast agents for ultrasonic imaging and methods for preparing the same
US5776429A (en) * 1989-12-22 1998-07-07 Imarx Pharmaceutical Corp. Method of preparing gas-filled microspheres using a lyophilized lipids
US5123414A (en) * 1989-12-22 1992-06-23 Unger Evan C Liposomes as contrast agents for ultrasonic imaging and methods for preparing the same
US6146657A (en) * 1989-12-22 2000-11-14 Imarx Pharmaceutical Corp. Gas-filled lipid spheres for use in diagnostic and therapeutic applications
US20020150539A1 (en) * 1989-12-22 2002-10-17 Unger Evan C. Ultrasound imaging and treatment
US5922304A (en) * 1989-12-22 1999-07-13 Imarx Pharmaceutical Corp. Gaseous precursor filled microspheres as magnetic resonance imaging contrast agents
US5352435A (en) * 1989-12-22 1994-10-04 Unger Evan C Ionophore containing liposomes for ultrasound imaging
US5656211A (en) * 1989-12-22 1997-08-12 Imarx Pharmaceutical Corp. Apparatus and method for making gas-filled vesicles of optimal size
US5228446A (en) * 1989-12-22 1993-07-20 Unger Evan C Gas filled liposomes and their use as ultrasonic contrast agents
US5469854A (en) * 1989-12-22 1995-11-28 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods of preparing gas-filled liposomes
US6088613A (en) * 1989-12-22 2000-07-11 Imarx Pharmaceutical Corp. Method of magnetic resonance focused surgical and therapeutic ultrasound
US5705187A (en) * 1989-12-22 1998-01-06 Imarx Pharmaceutical Corp. Compositions of lipids and stabilizing materials
US5773024A (en) * 1989-12-22 1998-06-30 Imarx Pharmaceutical Corp. Container with multi-phase composition for use in diagnostic and therapeutic applications
US5542935A (en) * 1989-12-22 1996-08-06 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic delivery systems related applications
US5209720A (en) * 1989-12-22 1993-05-11 Unger Evan C Methods for providing localized therapeutic heat to biological tissues and fluids using gas filled liposomes
US5733572A (en) * 1989-12-22 1998-03-31 Imarx Pharmaceutical Corp. Gas and gaseous precursor filled microspheres as topical and subcutaneous delivery vehicles
US5580575A (en) * 1989-12-22 1996-12-03 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic drug delivery systems
US5305757A (en) * 1989-12-22 1994-04-26 Unger Evan C Gas filled liposomes and their use as ultrasonic contrast agents
US5230882A (en) * 1989-12-22 1993-07-27 Unger Evan C Liposomes as contrast agents for ultrasonic imaging and methods for preparing the same
US6551576B1 (en) 1989-12-22 2003-04-22 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Container with multi-phase composition for use in diagnostic and therapeutic applications
US6001335A (en) * 1989-12-22 1999-12-14 Imarx Pharmaceutical Corp. Contrasting agents for ultrasonic imaging and methods for preparing the same
US5585112A (en) 1989-12-22 1996-12-17 Imarx Pharmaceutical Corp. Method of preparing gas and gaseous precursor-filled microspheres
US5874062A (en) * 1991-04-05 1999-02-23 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods of computed tomography using perfluorocarbon gaseous filled microspheres as contrast agents
US5205290A (en) 1991-04-05 1993-04-27 Unger Evan C Low density microspheres and their use as contrast agents for computed tomography
US5325860A (en) * 1991-11-08 1994-07-05 Mayo Foundation For Medical Education And Research Ultrasonic and interventional catheter and method
WO1994002068A1 (en) * 1992-07-21 1994-02-03 The General Hospital Corporation System of drug delivery to the lymphatic tissues
US5514784A (en) * 1993-03-19 1996-05-07 Wong; Chi-Huey Thio linked glycosyl compounds
EP0636363B1 (en) * 1993-07-27 2001-05-23 Terumo Kabushiki Kaisha Drug delivery system
US5756067A (en) * 1993-11-08 1998-05-26 Peptide Delivery Systems Pty Ltd Labelled diagnostic compositions and method of their use
US7083572B2 (en) * 1993-11-30 2006-08-01 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Therapeutic delivery systems
JP2787279B2 (ja) * 1994-05-17 1998-08-13 雪印乳業株式会社 糖リン脂質及びその調製法
US5736121A (en) * 1994-05-23 1998-04-07 Imarx Pharmaceutical Corp. Stabilized homogenous suspensions as computed tomography contrast agents
US6235308B1 (en) 1994-06-10 2001-05-22 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Method of treating hypertension
US5622715A (en) * 1994-06-10 1997-04-22 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Method of improving renal function
US6743779B1 (en) 1994-11-29 2004-06-01 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods for delivering compounds into a cell
US5660855A (en) * 1995-02-10 1997-08-26 California Institute Of Technology Lipid constructs for targeting to vascular smooth muscle tissue
WO1996024334A1 (en) * 1995-02-10 1996-08-15 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. Lipid constructs for cytoplasmic delivery of agents
US5830430A (en) * 1995-02-21 1998-11-03 Imarx Pharmaceutical Corp. Cationic lipids and the use thereof
US5997898A (en) * 1995-06-06 1999-12-07 Imarx Pharmaceutical Corp. Stabilized compositions of fluorinated amphiphiles for methods of therapeutic delivery
US6033645A (en) * 1996-06-19 2000-03-07 Unger; Evan C. Methods for diagnostic imaging by regulating the administration rate of a contrast agent
US6521211B1 (en) * 1995-06-07 2003-02-18 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Methods of imaging and treatment with targeted compositions
US6139819A (en) * 1995-06-07 2000-10-31 Imarx Pharmaceutical Corp. Targeted contrast agents for diagnostic and therapeutic use
US6231834B1 (en) 1995-06-07 2001-05-15 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods for ultrasound imaging involving the use of a contrast agent and multiple images and processing of same
US20040208922A1 (en) * 1995-06-07 2004-10-21 The Regents Of The University Of California Method for loading lipid like vesicles with drugs or other chemicals
US5704196A (en) * 1995-09-21 1998-01-06 Douglas Machine Limited Liability Company High speed blank set-up apparatus and methods
CA2252617A1 (en) 1996-05-01 1997-11-06 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods for delivering compounds into a cell
US6414139B1 (en) 1996-09-03 2002-07-02 Imarx Therapeutics, Inc. Silicon amphiphilic compounds and the use thereof
US5846517A (en) * 1996-09-11 1998-12-08 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods for diagnostic imaging using a renal contrast agent and a vasodilator
ES2189974T3 (es) * 1996-09-11 2003-07-16 Imarx Pharmaceutical Corp Procedimientos mejorados para la obtencion de imagenes de diagnostico usando un agente de contraste y un vasodilatador.
US5827532A (en) * 1997-01-31 1998-10-27 The Reagents Of The University Of California Method for loading lipsomes with ionizable phosphorylated hydrophobic compounds, pharmaceutical preparations and a method for administering the preparations
US6090800A (en) 1997-05-06 2000-07-18 Imarx Pharmaceutical Corp. Lipid soluble steroid prodrugs
US6143276A (en) * 1997-03-21 2000-11-07 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods for delivering bioactive agents to regions of elevated temperatures
US6120751A (en) 1997-03-21 2000-09-19 Imarx Pharmaceutical Corp. Charged lipids and uses for the same
US6537246B1 (en) * 1997-06-18 2003-03-25 Imarx Therapeutics, Inc. Oxygen delivery agents and uses for the same
US7452551B1 (en) 2000-10-30 2008-11-18 Imarx Therapeutics, Inc. Targeted compositions for diagnostic and therapeutic use
US20050019266A1 (en) * 1997-05-06 2005-01-27 Unger Evan C. Novel targeted compositions for diagnostic and therapeutic use
US6416740B1 (en) 1997-05-13 2002-07-09 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Acoustically active drug delivery systems
US6548047B1 (en) 1997-09-15 2003-04-15 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Thermal preactivation of gaseous precursor filled compositions
AUPP032097A0 (en) * 1997-11-11 1997-12-04 Peptide Delivery Systems Pty Ltd Improved labelled diagnostic compositions and methods of their use
US6123923A (en) * 1997-12-18 2000-09-26 Imarx Pharmaceutical Corp. Optoacoustic contrast agents and methods for their use
US20010003580A1 (en) 1998-01-14 2001-06-14 Poh K. Hui Preparation of a lipid blend and a phospholipid suspension containing the lipid blend
WO2001005433A2 (en) 1999-07-14 2001-01-25 Board Of Regents, The University Of Texas System Delivery and retention of activity agents to lymph nodes
EP2343047B2 (en) 2000-02-08 2021-03-17 Rice University Optically-active nanoparticles for use in therapeutic and diagnostic methods
JP2004528321A (ja) 2001-04-04 2004-09-16 ノルディック ワクチン テクノロジー アクティーゼルスカブ ステロールおよびサポニンを含むポリヌクレオチド結合複合体
US20060073530A1 (en) * 2001-08-15 2006-04-06 Olaf Schneewind Methods and compositions involving sortase B
ATE492295T1 (de) * 2002-07-02 2011-01-15 Univ Texas Radioaktiv markierte verbindungen und liposome und ihre herstellungs- und anwendungsverfahren
US20060147509A1 (en) * 2002-10-02 2006-07-06 Kirkby Nikolai S Composition for vaccination
AU2004263136A1 (en) * 2003-08-08 2005-02-17 Barnes-Jewish Hospital Emulsion particles for imaging and therapy and methods of use thereof
US20080241262A1 (en) * 2004-03-29 2008-10-02 The University Of Houston System Nanoshells and Discrete Polymer-Coated Nanoshells, Methods For Making and Using Same
CA2618807C (en) * 2005-08-12 2015-01-06 University Health Network Methods and devices for lymphatic targeting
WO2007087418A2 (en) * 2006-01-24 2007-08-02 Imarx Therapeutics, Inc. Composition and method for neuromuscular blockade
AU2007233155B2 (en) 2006-03-29 2012-04-26 Scitech Development Llc Liposomal nanoparticles and other formulations of fenretinide for use in therapy and drug delivery
EP2019667A4 (en) * 2006-04-27 2012-08-22 Barnes Jewish Hospital DETECTION AND IMAGING OF TARGET TISSUE
WO2007127439A2 (en) 2006-04-28 2007-11-08 Children's Hospital Medical Center Compositions comprising fusogenic proteins or polypeptides derived from prosaposin for application in transmembrane drug delivery systems
US20110130444A1 (en) * 2007-05-04 2011-06-02 Stefan Moisyadi Methods and compositions for targeted delivery of gene therapeutic vectors
WO2012119095A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Board Of Regents, The University Of Texas System Fus1/tusc2 therapies
US10279053B2 (en) 2011-07-19 2019-05-07 Nuvox Pharma Llc Microbubble compositions, method of making same, and method using same
CN103565745A (zh) 2012-08-10 2014-02-12 德克萨斯州大学系统董事会 用于治疗中风的神经保护性脂质体组合物和方法
EP2909230B1 (en) 2012-10-19 2019-05-22 Danisco US Inc. Stabilization of biomimetic membranes
EP2727929A1 (en) * 2012-10-30 2014-05-07 Wittycell Method of preparation of alpha galactosyl ceramides compounds
CN108601765A (zh) 2015-12-18 2018-09-28 德克萨斯州大学系统董事会 用于早产管理的治疗剂
SG11201903283UA (en) 2016-10-12 2019-05-30 Univ Texas Methods and compositions for tusc2 immunotherapy
US12117447B2 (en) 2017-11-04 2024-10-15 Sona Nanotech Inc. Metal nanoparticles and methods of making same
US10682411B2 (en) 2018-03-23 2020-06-16 Bexion Pharmaceuticals Inc. Saposin C pharmaceutical compositions and methods of treating cancer
CN112513297B (zh) 2018-03-28 2024-10-22 得克萨斯州大学系统董事会 鉴定从外排体分离的dna中的表观遗传改变
WO2020086701A1 (en) 2018-10-24 2020-04-30 Codiak Biosciences, Inc. Methods to improve potency of electroporation
US12280147B2 (en) 2018-11-09 2025-04-22 Translate Bio, Inc. PEG lipidoid compounds
US20220016029A1 (en) 2018-11-09 2022-01-20 Translate Bio, Inc. Multi-peg lipid compounds
CA3129248A1 (en) 2019-02-08 2020-08-13 Board Of Regents, The University Of Texas System Telomerase-containing exosomes for treatment of diseases associated with aging and age-related organ dysfunction
IL297450A (en) 2020-04-20 2022-12-01 Univ Texas Compositions of biologically active dry powder, methods for production and use
EP4149556A1 (en) 2020-05-14 2023-03-22 Translate Bio, Inc. Peg lipidoid compounds
CN113730603B (zh) * 2020-05-27 2023-01-24 深圳华润九创医药有限公司 米托蒽醌制剂在制备诊治与甲状腺切除相关的疾病的药物中的应用
CN114053436A (zh) * 2020-07-29 2022-02-18 深圳华润九创医药有限公司 米托蒽醌制剂在制备诊治乳腺癌的药物中的应用
WO2022040435A1 (en) 2020-08-19 2022-02-24 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Nanodrugs for targeted drug delivery and use thereof
CN116981697A (zh) 2021-01-14 2023-10-31 森迪生物科学公司 可分泌有效载荷调节
WO2023225160A1 (en) 2022-05-18 2023-11-23 The Children's Hospital Of Philadelphia Compositions and methods for inducible alternative splicing regulation of gene expression

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3663685A (en) * 1968-04-01 1972-05-16 Minnesota Mining & Mfg Biodegradable radioactive particles
US3522346A (en) * 1968-05-31 1970-07-28 Research Corp Nonthrombogenic microcapsules
US3663687A (en) * 1968-06-26 1972-05-16 Minnesota Mining & Mfg Biodegradable parenteral microspherules
US3683066A (en) * 1969-01-14 1972-08-08 Ivan Ascanio Technetium 99m colloidal composition
US3937668A (en) * 1970-07-15 1976-02-10 Ilse Zolle Method for incorporating substances into protein microspheres
DE2249552A1 (de) * 1971-10-12 1973-05-30 Inchema S A Verfahren zur inkapsulation von insbesondere wasserloeslichen verbindungen
US3932657A (en) * 1973-11-12 1976-01-13 The United States Of America As Represented By The United States Energy Research And Development Administration Liposome encapsulation of chelating agents
CH588887A5 (da) * 1974-07-19 1977-06-15 Battelle Memorial Institute
SE7412164L (sv) * 1974-09-27 1976-03-29 Pharmacia Ab Medel for intravaskuler administrering
US3993754A (en) * 1974-10-09 1976-11-23 The United States Of America As Represented By The United States Energy Research And Development Administration Liposome-encapsulated actinomycin for cancer chemotherapy
US3992513A (en) * 1975-01-07 1976-11-16 Atomic Energy Of Canada Limited Labelled phospholipid material colloidially dispersed and sized to localize at preselected organs
DE2656333C2 (de) * 1976-12-13 1985-08-08 Karl Prof. Dr.med. 7302 Ostfildern Theurer Verfahren zur Herstellung von Liposomen, welche Arzneistoffe enthalten
GB1575343A (en) * 1977-05-10 1980-09-17 Ici Ltd Method for preparing liposome compositions containing biologically active compounds
US4193983A (en) * 1978-05-16 1980-03-18 Syva Company Labeled liposome particle compositions and immunoassays therewith

Also Published As

Publication number Publication date
EP0028917A3 (en) 1981-07-15
US4310505A (en) 1982-01-12
JPS5675439A (en) 1981-06-22
EP0028917A2 (en) 1981-05-20
AU533213B2 (en) 1983-11-10
GR71720B (da) 1983-06-21
IE50369B1 (en) 1986-04-02
ATE7656T1 (de) 1984-06-15
PT72040A (en) 1980-12-01
IE802286L (en) 1981-05-08
EP0028917B1 (en) 1984-05-30
PT72040B (en) 1982-09-02
DK154264C (da) 1989-03-28
JPS647966B2 (da) 1989-02-10
AU6420380A (en) 1981-05-14
NZ195377A (en) 1984-07-06
DE3068062D1 (en) 1984-07-05
ES8203222A1 (es) 1982-04-01
DK472980A (da) 1981-05-09
ES496666A0 (es) 1982-04-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK154264B (da) Fremgangsmaade til fremstilling af lipid-vesikler
Guo et al. Receptor-specific delivery of liposomes via folate-PEG-chol
JP3571335B2 (ja) リポゾームマイクロレシーバー組成物および方法
US9226984B2 (en) Entrapment of radionuclides in nanoparticle compositions
CN102266288B (zh) 一种基于胆固醇修饰的还原敏感性肿瘤靶向脂质体
US4971803A (en) Lamellar vesicles formed of cholesterol derivatives
CN108430520A (zh) 长效钆基肿瘤靶向成像与治疗剂
JPH08510748A (ja) リポソームが誘発する生理的副作用の低減
JP2002104993A (ja) 抗腫瘍ワクチン
EP0366770B1 (en) Liposomes coupled to hormones
Patel et al. The pharmacological efficacy of a rigid non-phospholipid liposome drug delivery system
US20030113369A1 (en) Liposomes with enhanced circulation time and method of treatment
JP2019532022A (ja) 癌のイメージングおよび治療のための放射性リン脂質金属キレート
JP2005519861A (ja) 治療剤及び撮像剤としての脂質構築物
US7354567B2 (en) Method of encapsulating metal complex within liposomes
KR900004802B1 (ko) 조영제 및 화학요법제를 캡슐화한 종양의 진단 및 치료용 미셀 입자
JP5429710B2 (ja) 治療薬剤の標的部位への集積及び放出を追跡可能な治療薬剤含有リポソームおよびその製造方法
JP2005298486A (ja) リポソームを含む癌治療用医薬組成物
EP0577146A2 (en) Liposomes coupled to hormones
CN1679957B (zh) 含脂质体的癌症治疗用药物组合物
JP2025114461A (ja) 放射線治療用脂質粒子、作製方法、組み合わせ組成物及びキット
CN120754287A (zh) 一种负载放射性核素标记的天然多酚化合物的药物递送体系及其制备方法和应用
Ponpipom et al. Alteration of Liposomal-Surface Properties with Synthetic Glycolipids
Ravikumar et al. Targeting of tumor-associated antigens (TAA) in experimental immunotherapy
JPS62270531A (ja) 生体内でのイメ−ジング及び治療用の新規エアロゾル組成物

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed