DK149475B - Fremgangsmaade og reagens til bestemmelse af den biologiske aktivitet af herapin i plasma - Google Patents
Fremgangsmaade og reagens til bestemmelse af den biologiske aktivitet af herapin i plasma Download PDFInfo
- Publication number
- DK149475B DK149475B DK057079AA DK57079A DK149475B DK 149475 B DK149475 B DK 149475B DK 057079A A DK057079A A DK 057079AA DK 57079 A DK57079 A DK 57079A DK 149475 B DK149475 B DK 149475B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- reagent
- heparin
- iii
- sample
- plasma
- Prior art date
Links
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 title claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 24
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 19
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 title claims description 8
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 35
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims description 21
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims description 21
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 claims description 10
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 claims description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 7
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 7
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 claims description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 5
- ZYECEUZMVSGTMR-LBDWYMBGSA-N (4s)-4-[[(2s,3s)-2-benzamido-3-methylpentanoyl]amino]-5-[[2-[[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound N([C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZYECEUZMVSGTMR-LBDWYMBGSA-N 0.000 claims description 3
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 claims description 3
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 claims description 3
- 108010031969 benzoyl-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilide Proteins 0.000 claims description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 3
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 6
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 5
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- VYLJFJGMPYBPMN-VXKWHMMOSA-N (2s)-n-[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]-1-[2-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]acetyl]pyrrolidine-2-carboxamide Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)NCC(=O)N1[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)CCC1 VYLJFJGMPYBPMN-VXKWHMMOSA-N 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 108010018472 chromozym TH Proteins 0.000 description 4
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 4
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 2
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 2
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 229910001514 alkali metal chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N (2s)-1-[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]-n-[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]piperidine-2-carboxamide Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C1=CC=CC=C1 YDMBNDUHUNWWRP-VJBWXMMDSA-N 0.000 description 1
- YSRMCZDHEZNRPS-HOTGVXAUSA-N (2s)-5-(diaminomethylideneamino)-2-[[(2s)-1-[2-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]acetyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoic acid Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)NCC(=O)N1[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 YSRMCZDHEZNRPS-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010074105 Factor Va Proteins 0.000 description 1
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 108010039286 S 2238 Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000007321 biological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- QQVNCBCBFNWLJX-KCHLEUMXSA-N n-[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-5-(diaminomethylideneamino)-1-(4-nitroanilino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]benzamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 QQVNCBCBFNWLJX-KCHLEUMXSA-N 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/56—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving blood clotting factors, e.g. involving thrombin, thromboplastin, fibrinogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2337/00—N-linked chromogens for determinations of peptidases and proteinases
- C12Q2337/10—Anilides
- C12Q2337/12—Para-Nitroanilides p-NA
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/81—Protease inhibitors
- G01N2333/8107—Endopeptidase (E.C. 3.4.21-99) inhibitors
- G01N2333/811—Serine protease (E.C. 3.4.21) inhibitors
- G01N2333/8114—Kunitz type inhibitors
- G01N2333/8117—Bovine/basic pancreatic trypsin inhibitor (BPTI, aprotinin)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
- G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
- G01N2333/96425—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals
- G01N2333/96427—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general
- G01N2333/9643—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general with EC number
- G01N2333/96433—Serine endopeptidases (3.4.21)
- G01N2333/96441—Serine endopeptidases (3.4.21) with definite EC number
- G01N2333/96444—Factor X (3.4.21.6)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/974—Thrombin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2400/00—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving carbohydrates
- G01N2400/10—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- G01N2400/38—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence, e.g. gluco- or galactomannans, Konjac gum, Locust bean gum or Guar gum
- G01N2400/40—Glycosaminoglycans, i.e. GAG or mucopolysaccharides, e.g. chondroitin sulfate, dermatan sulfate, hyaluronic acid, heparin, heparan sulfate, and related sulfated polysaccharides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/108331—Preservative, buffer, anticoagulant or diluent
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
- Y10T436/143333—Saccharide [e.g., DNA, etc.]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
149475 i
Opfindelsen angår en fremgangsmåde og et reagens til bestemmelse af den biologiske aktivitet af heparin i plasma.
Bestemmelsen af heparin er en vigtig parameter ved den i tilfælde af thromboserisiko hyppigt gennemførte heparinbehandling.
5 Heparin danner med antithrcmbin III (ar IH) et kompleks, som hæmmer den proteolytiske aktivitet af thrombin„ Da thrombin katalyserer dannelsen af fibrin ud fra fibrinogen, er thrombinak-tiviteten ansvarlig for koagulationen af blod eller plasma og således også for det ved en thrombose dannede fibrinkoagulat.
10 Heparinbehandlingen benyttes hyppigt ved tilstedeværelse af en thromboserisiko (f.eks. før kirurgisk indgreb). En nøjagtig indstilling af heparinkoncentrationen er derfor overordentlig vigtig. I tilfælde af en mindre dosering er der nemlig risiko for en thrombose eller blodprop, hvilket kan føre til døden.
15 For høje heparinkoncentrationer fører til gengæld til forblødninger. Den kvantitative analyse af heparin hører derfor til de undersøgelser, som hyppigt udføres i koagulationslaboratoriet.
Til bestemmelse af heparin anvendes i praksis hovedsagelig 20 to metoder: 1. Bestemmelse af koagulations-(clotting)-aktiviteten i blod eller plasma. De herpå beroende fremgangsmåder er imidlertid utilfredsstillende. Især i det lavere koncentrationsområde er følsomheden for ringe, medens høje koncentrationer som føl-25 ge af ukoagulerbarhed ikke længere kan registreres (se Thromb.
Res. 8, 413 (1976)).
2. I den senere tid anvendelsen af kromogene substrater for enzymet faktor Xa eller thrombin (J. Clin. Chem. Clin. Bio-chem. 15, 239 (1977)).
30 Denne nyere fremgangsmåde beror på følgende princip:
Plasmaprøven, som indeholder heparinet, der skal bestemmes, samt en ubekendt svingende mængde antithrombin III (AT III eller heparin-cofaktor), inkuberes i nærværelse af tilsat 2 149Λ75 AT III med faktor Xa eller thrombin. Faktor Xa sammen med faktor Va, calcium og phospholipid, aktiverer prothrombin under dannelse af thrombin. Faktor X er den ikke-aktiverede form af stoffet, medens faktor Xa er den aktiverede form af faktoren. Det tilsatte AT III skal for det første kompensere de forskellige mængder AT III i prø-5 ven ved fremskaffelse af et overskud, og for det andet er det nødvendigt med henblik på tilstrækkelig forøgelse af følsemheden af prøven, især i det lavere heparinkoncentrationsområde. AT III kan enten tilsættes i fom af normalplaana, son altid indeholder fysiologiske mængder AT III, eller i form af renset AT III. Un-10 der denne inkubation bevirker det i prøven indeholdte heparin ad katalytisk vej en konformat'ionsændring hos AT III, hvilket har aktivering deraf til følge. Det aktiverede AT III er nu i stand til at inaktivere en del af det i inkubationsopløs-ningen indeholdte proteolytiske enzym Xa eller thrombin spon-15 tant gennem dannelse af en kovalent binding. Det ikke af he-parinaktiveret AT III hæmmede proteolytiske enzym kan nu fra et egnet kromogent substrat, i reglen et p-nitroanilinholdigt peptid, såsom Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA eller Tos-Gly-Pro-Arg-pNA, hvor Bz, pNA og Tos står for henholdsvis benzoyl, p-nitroanilid og tosyl, frigøre farvestoffet p-nitroanilin, hvis ekstinktion ved 20 405 nm kan måles. Forskellen mellem den benyttede enzymakti vitet (ΔΕ^/min) og den efter inkubationen målte restaktivitet (ΔΕ /min) sættes ved hjælp af en kalibreringskurve i relation til heparinkoncentrationen i prøven. De efterfølgende reaktionsskemaer belyser denne metode: 25. I) AT III HeR-a---^> AT III+ II) AT III + Enzvm ^ Enzym - AT III + enzym (rest) (overskud) - IH) To s -Gly-Pro-Arg-pNA Tos-Gly-Pro-Arg-OH + p-Ni= 30 troanilin + = aktiveret.
På grund af tilsætning af et overskud af AT III i form af et normalplasma eller som renset AT III er heparinbestemmelsen ifølge denne fremgangsmåde i vidt omfang uafhængig af AT III 35 i plasmaprøven. Man bestemmer således det samlede i prøven tilstedeværende heparin, som via AT III er i stand til at in- 3 143475 aktivere thrombin og faktor Xa. Det har imidlertid nu yderligere vist sig, at dette system har følgende ulempers En ikke sjældent optrædende AT ui-mangel i patientplasma kan på grund af det tilsatte AT III ikke erkendes. I ekstreme, men i kli-5 nikken absolut forekommende tilfælde, hvor patienten praktisk taget ikke længere har noget AT III, ville en alenestående he= parinbehandling være virkningsløs. Heparin ville ikke udøve nogen som helst biologisk virkning på thrombin. Lægen ville således ifølge dette måleprincip få et forfalsket udsagn om 10 patientens koagulationstilstand. Følgelig skal der foruden he= parinbestemmelsen foretages en AT III-bestemmelse.
Opfindelsen tager derfor sigte på at angive en fremgangsmåde, hvormed heparins biologiske aktivitet bestemmes direkte.
Dette opnås ifølge opfindelsen ved hjælp af en fremgangsmåde 15 til bestemmelse af heparins biologiske aktivitet i plasma ved tilsætning af et proteolytisk enzym og et kromogent substrat for enzymet samt måling af det fra det kromogene substrat frigjorte farvestof, og som er ejendommelig ved, at der som proteolytisk enzym anvendes thrombin eller faktor Xa, og at 20 bestemmelsen gennemføres uden tilsætning af antithrombin III.
Ifølge angivelser i litteraturen bliver følsomheden af heparin-bestemmelsen som følge af tilsætningen af renset AT III forøget således, at også små heparinmængder (ned til 10 U/l) kan bestemmes.
25 Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er det imidlertid overraskende muligt, også uden AT III-tilsætning, i det lavere koncentrationsområde at måle heparin i plasma ved normalt AT III-ind-hold med tilstrækkelig følsomhed. Ved prøvegennemførelsen ved 37°C er eksempelvis 20 USP heparin/1 plasma endnu tilstrækkelig 30 nøjagtig at registrere. USP står for United Pharmacopeial Convention. Da intet eksternt AT III længere sættes til prøven, registrerer man i overensstemmelse med den biologiske mekanisme ved thrombininaktiveringen de to parametre heparin og AT III. Via det i prøven indeholdte AT III kan heparinet, som skal be- 4 US475 stemmes i prøven, ikke desto mindre udfolde sin biologiske aktivitet i form af inaktivering af thrombinet. Denne fremgangsmåde gør det muligt for lægen at foretage en direkte forløbskontrol af koaguleringstilstanden i patientens blod ved heparin-behandlingen.
5 Med kromogene substrater for det proteolytiske enzym skal generelt forstås substrater, som under indvirkning af enzymet fraspalter et farvestof. Herved kan der være tale om et i spektrets synlige område bestemmeligt farvestof, et fluorescens · farvestof eller et i det ultraviolette område bestemmeligt far-10 vestof. Som kromogene substrater foretrækkes peptider, som til en arginingruppes carboxygruppe har en via amidbinding bundet farvestofgruppe. Særlig egnet hertil er p-nitroanilid-gruppen samt af denne ved substitution afledte lignende farvestoffer. Også andre aminogruppeholdige farvestoffer kan i-15- midlertid være bundet til arginingruppens carboxylgruppe.
Ved anvendelse af thrombin som substrat anvendes fortrinsvis Bz-Phe-Val-Arg-pNA, H-D-Phe-Pip-Arg-pNA eller Tos-Gly-Pro-Arg-pNA, hvor Pip står for pipecolyl.
Ved anvendelse af faktor Xa anvendes som kromogent substrat 20 fortrinsvis Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA.
Fremgangsmådebetingelserne i henseende til PH-værdf, tid,· tempe-ratur og lignende svarer i det væsentlige til sådanne ved den kendte fremgangsmåde, fortrinsvis arbejdes ved pH 8,0 og med tris(hydroxymethyl)-aminomethan/HCl-puffer. Andre puffersy-25 stemer, såsom tris(hydroxymethyl)-aminomethan/imidazol- eller imidazol/HCl-puffer, er imidlertid også anvendelige. Bestemmelsen foregår hensigtsmæssigt ved stuetemperatur. Bestemmelsen kan imidlertid også gennemføres ved højere temperaturer (30 til 37°C), hvorved der svarende til en højere thrombinak-30 tivitet anvendes lavere enzymkoncentrationer.
Til opnåelse af en optimal ionstyrke i prøvematerialet tilsættes salte, fortrinsvis alkalimetalchlorider, såsom NaCl eller KC1, til pufferopløsningen. Til hæmning af forstyrrende pro- 5 U3475 tease-fremmedaktiviteter i prøveplasmaet anvendes fortrinsvis aprotinin,
Opfindelsen angår endvidere et reagens til bestemmelse af heparin i plasma ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, 5 hvilket reagens består af 0,01 til 0,3 mol/1 puffer, pH 6 til 9, 0,01 til 0,25 mol/1 alkalimetalchlorid, 200 til 1100 NIH/1 thrombin, eller faktor Xa (NIH = National Institute of Health), 10 0,05 til 10 mmol/1 kromogent substrat, 0 til 0,01 g/1 aprotinin, 0 til 0,03 mol/1 ethylendiamintetraeddikesyre, dinatriumsalt,og 0 til 10 g/1 polyethylenglycol.
Fremgangsmåden og reagenset ifølge opfindelsen udmærker sig 15 ved, at der til prøvens gennemførelse kræves en komponent mindre end ved den kendte fremgangsmåde. Følgelig frembyder den manuelle prøve større gennemførlighed. Frem for alt er fremgangsmåden imidlertid bedre egnet til anvendelse i analyseautomater. Endvidere indvirker udeladelsen af AT III-tilsæt-20 ningen overordentlig gunstigt på omkostningerne pr. bestemmelsesmængde. Rådigheden over såvel normal plasma som renset AT III er nemlig en begrænsende faktor. Som væsentlig fordel ved fremgangsmåden skal imidlertid nævnes den for anvenderen 1 klinikken forøgede udsagnsværdi, som beror på, at den kombi-25 nerede effekt af AT III og heparin i plasmaprøven afspejles i måleresultatet.
Fremgangsmåden kan gennemføres kinetisk, hvorved hastigheden af thrombin-udgangsaktivitetens og thrombin-restaktivitetens reaktion tjener som målestørreIser umiddelbart efter begyn-30 delsen af reaktionen med substratet. Endvidere kan også slutværdi-metoden anvendes, ved hvilken reaktionen efter en bestemt måletid standses ved hjælp af pH-forskydning med syrer, f.eks. med eddikesyre.
149475 6
Prøvematerialet kan f.eks. indeholde: 0/045 mol/1 tris/HCl-puffer, pH 8,0, 0,14 mol/1 NaCl, 0,01 mol/1 EDTA (ethylendiamintetraeddikesyre), 9 g/1 polyethylenglycol, 5 0,01 g/1 aprotinin, 300 NIH/1 thrombin, 0,14 mmol/1 Tos-Gly-Pro-Arg-pNA.
Eksempel 1.
Det nedenfor beskrevne eksempel blev gennemført ifølge den 10 kinetiske metode under anvendelse af følgende reagenser:
Reagens 1: 0,05 mol/1 tris/HCl-puffer, pH 8,0, 0,15 mol/1 NaCl, 0,01 mol/1 EDTA, 15 10 g/1 polyethylenglycol, 0,01 g/1 aprotinin, 330 NIH/1 thrombin.
Reagens 2: 1,5. mmol/1 Tos-Gly-Pro-Arg-pNA 20 Bestemmelsésmængde: Målestråling: Hg 405 nm; kuvettens lagtykkels.e: 1 cm, Inkubatioristemperatur: Stuetemperatur.
2,0 ml af reagenset 1 pipetteres ikuvette, 0,02 ml prøve tilsættes og blandes. Der inkuberes i 3 min. ved 25°C, hvor- 25 efter 0,2 ml af reagenset 2 iblandes. Ekstinktionén registre res fra 0 til 3 min. ved 25°C.
Pr. målerække bestemmes en blindværdi. Herved anvendes vand i stedet for prøveplasmaet.
Vurdering: Forskellem mellem ekstinktionsændringen fra 0 til 3 min. for blindværdien og ekstinktionsændringen fra 0 til 3 min. for prø- 149475 7 ven dannes. Denne forskel er et mål for den biologiske aktivitet af heparinet i plasmaet. Ligeledes kan den absolutte ekstinktion efter 3 min. tages i betragtning til vurderingen, således som vist i fig. 1. Denne fig. 1 viser resultaterne 5 for 18 plasmaprøver, som blev tilsat afvejede mængder hepa= rin, så at der fremkom et koncentrationsområde fra 0,05 til 1,0 USP heparin/ml plasma.
Reagenset indeholder ca.: 0,01 til 0,3 mol/1 puffer, pH 6 til 9, 10 0,01 til 0,25 mol/1 NaCl, 0,001 til 0,03 mol/1 EDTA, 200 til 1100 NIH/1 thrombin, > 0,05 mmol/1 substrat, 0 til 0,01 g/1 aprotinin og 15 0 til 10 g/1 polyethylenglycol.
Ovennævnte reagenssammensætning angiver koncentrationsområderne for de enkelte bestanddele, inden for hvilke fremgangsmåden kan gennemføres problemløst.
Eksempel 2.
20 Bestemmelsen skete i overensstemmelse med den kinetiske metode under anvendelse af følgende reagensers
Reagens 1: 0,05 mol/1 Tris/HCl, pH 8,0, 0,15 mol/1 NaCl, 25 0,01 mol/1 EDTA, 10 g/1 polyethylenglycol, 0,01 g/1 aprotinin.
Claims (2)
14 S 4 7 δ Reagens 2: 1,0 inmol/1 Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA. Reagens 3:
8 U/ml faktor Xa.
5 Bestemmelsesmængde: Hg 405 nm, kuvettens lagtykkelse 1 can, inkubationstemperatur = stuetemperatur. 500 /al af reagenset 1, 10 /il prøve og 100 /al reagens 3 pipetteres i kuvette og blandes. Der inkuberes i 3 min. ved 25°C, hvorpå 500 /al reagens 2 iblandes. Ekstinktionen registreres 10 fra 0 til 3 min. ved 25°C. Pr. målerække bestemmes en blindværdi. Herved anvendes vand i stedet for prøveplasmaet. Vurdering: Ligesom i eksempel 1 via justeringskurve. Patentkrav. 15 i. Fremgangsmåde til bestemmelse af den biologiske aktivitet af heparin i plasma ved tilsætning af et proteolytisk enzym og et kromogent substrat for enzymet samt måling af det fra det kromogene substrat frigjorte farvestof, kendetegnet ved, at der som proteolytisk enzym anvendes 20 thrombin eller faktor Xa, og at bestemmelsen gennemføres uden tilsætning af antithrombin ill.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der som kromogent substrat anvendes et peptid, der til en arginingruppes carboxylgruppe har en via amidbinding bun-25 · det p-nitroanilidgruppe.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2812943 | 1978-03-23 | ||
| DE2812943A DE2812943C3 (de) | 1978-03-23 | 1978-03-23 | Verfahren und Reagens zur Bestimmung der biologischen Aktivität von Heparin im Plasma |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK57079A DK57079A (da) | 1979-09-24 |
| DK149475B true DK149475B (da) | 1986-06-23 |
| DK149475C DK149475C (da) | 1986-12-01 |
Family
ID=6035376
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK57079A DK149475C (da) | 1978-03-23 | 1979-02-12 | Fremgangsmaade og reagens til bestemmelse af den biologiske aktivitet af herapin i plasma |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4234682A (da) |
| EP (1) | EP0004271A3 (da) |
| JP (1) | JPS54128796A (da) |
| AR (1) | AR217503A1 (da) |
| AT (1) | AT362080B (da) |
| AU (1) | AU512206B2 (da) |
| BE (1) | BE875014A (da) |
| CA (1) | CA1111334A (da) |
| CH (1) | CH642749A5 (da) |
| DD (1) | DD141952A5 (da) |
| DE (1) | DE2812943C3 (da) |
| DK (1) | DK149475C (da) |
| FI (1) | FI62859C (da) |
| FR (1) | FR2420764A1 (da) |
| GB (1) | GB2017298B (da) |
| HU (1) | HU176068B (da) |
| IE (1) | IE48067B1 (da) |
| IT (1) | IT1112966B (da) |
| LU (1) | LU81070A1 (da) |
| NL (1) | NL7902259A (da) |
| SE (1) | SE445560B (da) |
| ZA (1) | ZA79622B (da) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2903701C2 (de) * | 1979-01-31 | 1980-10-16 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Kontrollreagens für die Bestimmung der Heparinaktivität |
| US4244865A (en) * | 1979-12-03 | 1981-01-13 | Abbott Laboratories | α hydroxy tripeptide substrates |
| DE3005540A1 (de) * | 1980-02-14 | 1981-08-20 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und reagens zur bestimmung der biologischen aktivitaet von heparin im plasma |
| DE3019612A1 (de) * | 1980-05-22 | 1981-11-26 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Stabilisiertes thrombinpraeparat |
| WO1982001377A1 (en) * | 1980-10-09 | 1982-04-29 | Lill Helmut | Method for determining a bm-antithrombin |
| US4473639A (en) * | 1982-09-15 | 1984-09-25 | Miles Laboratories, Inc. | Reagent strip test for antithrombin-III |
| US4543335A (en) * | 1982-12-20 | 1985-09-24 | Miles Laboratories, Inc. | Device and method for the quantitative determination of heparin in mammalian blood plasma |
| US4948724A (en) * | 1985-09-05 | 1990-08-14 | Yin E Thye | Composition, kit and method for assaying heparin and a method for making the composition |
| US4946775A (en) * | 1985-09-05 | 1990-08-07 | Yin E Thye | Composition, kit and method for assaying heparin and a method for making the composition |
| US4851336A (en) * | 1985-09-05 | 1989-07-25 | Yin E Thye | Composition, kit, and method for assaying heparinano a method for making the composition |
| ATE64470T1 (de) * | 1985-09-05 | 1991-06-15 | E Thye Yin | Verfahren und zusammensetzungen zur bestimmung von heparin. |
| US5939325A (en) * | 1989-07-20 | 1999-08-17 | Analytical Control Systems, Inc. | Stable whole blood coagulation controls |
| EP0482088B1 (en) * | 1989-07-20 | 1999-03-31 | Analytical Control Systems, Inc. | Improved stable coagulation controls |
| DE69108896T2 (de) * | 1990-11-05 | 1995-08-24 | Baxter Diagnostics Inc | Verfahren zur bestimmung der konzentration von antikoagulantien. |
| US5308755A (en) * | 1992-06-08 | 1994-05-03 | Research Corporation Technologies, Inc. | Method for measuring heparin |
| EP1325962A1 (en) * | 2001-12-17 | 2003-07-09 | Gentium S.p.A. | A method for determining the biological activity of defibrotide |
| EP1745145A4 (en) * | 2004-05-11 | 2008-03-26 | Heptest Lab Inc | COMPOSITIONS, KIT AND METHOD IN ONE STEP FOR MONITORING COMPOUNDS HAVING XA AND / OR ANTIFACTOR IIA ANTIFACTOR ACTIVITIES |
| US7219827B2 (en) | 2004-11-19 | 2007-05-22 | General Electric Company | Braze end isolation layer for generator armature winding bar and method for applying the isolation layer |
| DE102005038418A1 (de) * | 2005-08-12 | 2007-02-15 | Dade Behring Marburg Gmbh | Faktor Xa-basierter Heparinassay unter Verwendung einer Heparin-modifizierenden Komponente |
| AU2010363814B2 (en) | 2010-11-12 | 2016-05-19 | Gentium S.R.L. | Defibrotide for use in prophylaxis and/or treatment of Graft versus Host Disease (GVHD). |
| EP2484775A1 (de) | 2011-02-07 | 2012-08-08 | Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH | Heparin-insensitives Verfahren zur Bestimmung von direkten Gerinnungsfaktorinhibitoren |
| KR20150044877A (ko) | 2012-06-22 | 2015-04-27 | 젠티엄 에스피에이 | 디파이브로타이드의 생물학적 활성 측정을 위한 유우글로불린에 기초한 방법 |
| EP2843416A1 (de) | 2013-09-02 | 2015-03-04 | Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH | Kontroll- und Kalibratormaterial für die Bestimmung von direkten Antikoagulanzien |
| EP3026122A1 (en) | 2014-11-27 | 2016-06-01 | Gentium S.p.A. | Cellular-based method for determining the potency of defibrotide |
| EP3348649A1 (de) | 2017-01-16 | 2018-07-18 | Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH | Universales kontrollmaterial für gerinnungsfaktorinhibitor-teste |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3769617A (en) * | 1971-12-09 | 1973-10-30 | Rca Corp | Transmission line using a pair of staggered broad metal strips |
| SE380257B (sv) * | 1972-05-02 | 1975-11-03 | Bofors Ab | Nya diagnostiskt verksamma substrat med hog specificitet till trombin och andra proteolytiska enzymer av typen peptidyl-peptid-hydrolaser |
| US4162941A (en) * | 1974-12-05 | 1979-07-31 | Ab Kabi | Method for determining a proteolytic enzyme |
| CH587439A5 (da) * | 1974-12-10 | 1977-04-29 | Daimler Benz Ag | |
| CH622286A5 (da) * | 1975-06-23 | 1981-03-31 | Pentapharm Ag | |
| US4061625A (en) * | 1975-07-11 | 1977-12-06 | Ab Kabi | Novel chromogenic thrombin substrates |
| SE407405B (sv) * | 1975-07-11 | 1979-03-26 | Kabi Ab | Nya kromogena trombinsubstrat |
| DE2601372C3 (de) * | 1976-01-15 | 1980-03-27 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verfahren zur Bestimmung von Antithrombin III |
| NL7602423A (nl) * | 1976-03-08 | 1977-09-12 | Leuven Res & Dev Vzw | Bepaling van heparine in bloedplasma. |
| US4067777A (en) * | 1976-05-13 | 1978-01-10 | Innerfield Irving | Determination of heparin in the blood |
-
1978
- 1978-03-23 DE DE2812943A patent/DE2812943C3/de not_active Expired
-
1979
- 1979-01-16 AT AT32179A patent/AT362080B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-01-16 EP EP79100122A patent/EP0004271A3/de not_active Withdrawn
- 1979-01-31 AU AU43825/79A patent/AU512206B2/en not_active Ceased
- 1979-02-07 CA CA321,067A patent/CA1111334A/en not_active Expired
- 1979-02-07 DD DD79210876A patent/DD141952A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-02-07 JP JP1234279A patent/JPS54128796A/ja active Granted
- 1979-02-08 IE IE238/79A patent/IE48067B1/en not_active IP Right Cessation
- 1979-02-12 DK DK57079A patent/DK149475C/da active
- 1979-02-13 HU HU79BO1763A patent/HU176068B/hu not_active IP Right Cessation
- 1979-02-13 ZA ZA79622A patent/ZA79622B/xx unknown
- 1979-02-13 FI FI790476A patent/FI62859C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-02-14 AR AR275507A patent/AR217503A1/es active
- 1979-02-21 US US06/013,759 patent/US4234682A/en not_active Expired - Lifetime
- 1979-03-20 CH CH261079A patent/CH642749A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-03-21 SE SE7902555A patent/SE445560B/sv not_active IP Right Cessation
- 1979-03-21 GB GB7909974A patent/GB2017298B/en not_active Expired
- 1979-03-22 BE BE194147A patent/BE875014A/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-03-22 NL NL7902259A patent/NL7902259A/xx active Search and Examination
- 1979-03-22 IT IT21220/79A patent/IT1112966B/it active
- 1979-03-23 FR FR7907424A patent/FR2420764A1/fr active Granted
- 1979-03-23 LU LU81070A patent/LU81070A1/de unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK149475B (da) | Fremgangsmaade og reagens til bestemmelse af den biologiske aktivitet af herapin i plasma | |
| JP3047120B2 (ja) | 活性化因子ｖｉｉに関する定量的凝血検定 | |
| US9428790B2 (en) | Simultaneous measurement of thrombin generation and clot strength in plasma and whole blood | |
| US8357539B2 (en) | Activated partial thromboplastin time measuring reagent, activated partial thromboplastin time measuring method, and determination method for determining presence or absence of blood coagulation inhibitor | |
| JP6025105B2 (ja) | ループスアンチコアグラント検出用血液凝固時間の測定方法 | |
| US8802386B2 (en) | Diagnostic test for determining the concentration of transient proteolytic activity in composite biological media | |
| DK163671B (da) | Reagens og fremgangsmaade til fotometrisk bestemmelse af thromboplastintiden, reagensets fremstilling og anvendelse | |
| CA2252983A1 (en) | Method for determining the anticoagulatory potential of a sample | |
| JP3533012B2 (ja) | プロテインｃ／プロテインｓ系の障害を検出する方法 | |
| US5985582A (en) | Thrombin-based assay for antithrombin III | |
| EP0657547B1 (en) | Method of assaying antithrombin iii activity | |
| CA1079166A (en) | Process for the quantitative determination of antithrombin iii | |
| JPH04293500A (ja) | 第ｖｉｉｉ因子活性を測定するための試薬 | |
| NO161079B (no) | Reagens for optisk bestemmelse av blodkoaguleringsforholdet. | |
| DK164512B (da) | Fremgangsmaade til simultan bestemmelse af prokallikrein og den partielle thromboplastintid | |
| US8163513B2 (en) | Method for determining the total clotting activity of a blood or plasma sample | |
| Mischke | Activated partial thromboplastin time as a screening test of minor or moderate coagulation factor deficiencies for canine plasma: sensitivity of different commercial reagents | |
| US5753510A (en) | Calibrator for use in test methods for detecting a defective coagulation factor V | |
| AU674149B2 (en) | Method for the determination of lupus anticoagulant antibodies that cause thrombosis | |
| Scott et al. | A new assay for high molecular weight kininogen in human plasma using a chromogenic substrate | |
| JPH04350560A (ja) | プロテインｓ活性の機能的測定方法 | |
| CA2137342A1 (en) | Test for quantitative thrombin time | |
| JP2966968B2 (ja) | プラスミノーゲン活性化因子及びそのインヒビターの測定方法、並びにその測定用キット | |
| WO2022003349A1 (en) | Method for measuring the activity of a blood clotting factor | |
| JPH1014599A (ja) | アンチトロンビンｉｉｉ 活性測定方法及び測定用試薬 |