DK145610B - 3-oximer af 17alfa-ethynyl-19-nortestosteronestere til anvendelse til undertrykkelse af fertilitet - Google Patents

Description

(19) DANMARK

|Ρ (12) FREMLÆGGELSESSKRIFT od 145610 B

OIREKTORATET FOR PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET

(21) Ansøgning nr. 5358/76 (51) IntCI.8 C 07 J 41/00 (22) Indleveringsdag 23- Jul. 1976 // A 61 K 31/565 (24) Løbedag 23· jul. 1976 (41) Aim. tilgængelig 25· jan. 1977 (44) Fremlagt 27 · else . 1982 (86) International ansøgning nr.

(86) International indleveringsdag -(85) Videreførelsesdag -(62) Stamansøgning nr. -

(30) Prioritet 24. jul. 1975* 598966, US 23- jan. 1976, 652000, US

(71) Ansøger ORTHO PHARMACEUTICAL CORPORATION, Raritan, US.

(72) Opfinder Arvln Pranlal Shroff, US.

(74) Fuldmægtig Th. Ostenfeld Patentbureau A/s.

(54) 3-oximer af 17alfa-ethynyl-19~nor= testoBteronestere til anvendelse til undertrykkelse af fertilitet.

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte estere i D-serien af 3-oximerne af 17a-ethynyl-19-nortestosteron, der kan anvendes til undertrykkelse af fertilitet ved administrering deraf til et dyr eller menneske af hunkøn.

I beskrivelsen til U.S.A. patent nr. 3.780.073 er estrene af 3-oximerne af DL-17a-ethynyl-19-nortestosteron og dens derivater med post-coital aktivitet til undertrykkelse af fertilitet beskrevet. Da _ det i almindelighed er ønskeligt at administrere den mindst mulige

OD

effektive dosis af et hvilket som helst lægemiddel, især et steroid, s— har man gjort sig betydelige anstrengelser for at opspalte disse estere ud fra den betragtning, at aktiviteten hovedsageligt sidder i én isomer.

3" Det ville således være muligt at administrere en mindre dosis af den 1— aktive isomere og opnå det samme resultat som ved en større dosis af * □ 2 145610 racematet. Forud for den foreliggende opfindelse har de aktive D-isomere ikke eksisteret frie for de L-isomere. Der er nu fundet en fremgangsmåde til fremstilling af disse estres D-isomere (hvori aktiviteten af den racemiske blanding hovedsageligt sidder) som rene kemiske forbindelser frie for de L-isomere.

De hidtil ukendte forbindelser ifølge den foreliggende opfindelse er D-serie-forbindelser med den almene formel:

OR

C2H5

___C=CH

-J (I) hvori R er alkanoyl med fra 2 til 10 carbonatomer, såsom acetyl, propionyl, butyryl, pentanoyl eller octanoyl.

Den foretrukne forbindelse ifølge opfindelsen er den, hvori R er acetyl.

Forbindelserne ifølge opfindelsen besidder værdifuld farmakologisk aktivitet som anti-fertilitetsmidler, og mere specielt som midler til undertrykkelse af fertilitet, når de gives post-coitalt.

De er også nyttige som langtidsvirkende forbindelser til undertrykkelse af fertilitet, når de administreres parenteralt, især pre-coitalt. De kan administreres oralt eller på enhver egnet parenteral måde, idet intramuskulær og subcutan administrering foretrækkes. Forbindelserne ifølge opfindelsen er effektive, når de gives pre-coitalt i doser på fra omkring 0,1 - omkring 1,0 mg/kg/dag (fortrinsvis fra omkring 0,1 - omkring 0,5 mg/kg/dag),og når de gives post-coitalt i doser på fra omkring 10 - omkring 20 mg/kg/dag.

Forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse kan anvendes i kombination med andre farmakologisk aktive forbindelser, såsom . f.éks. østrogener som ethinyløstradiol, mestranol, 17a-ethinyløstra-diol-3-cyclopentylether, 173-østradiol, såvel som konjugerede østrogene hormoner.

3 145610

Skønt man skulle forvente, at de aktive D-isomere ville være omkring to gange så kraftige som deres respektive racemater, har det overraskende vist sig, at de D-isomere er omkring ti gange så kraftige som deres tilsvarende racemater. Dette overraskende og uventede spring i styrke er på ingen måde blevet foreslået eller forudsagt med hensyn til aktiviteten af de tidligere kendte forbindelser.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan fremstilles ved, at man omsætter en D-serie 3-keton, som har den almene formel:

OR

C2H5

---C=CH

(II) hvori R har den tidligere anførte betydning, med et hydroxy1-aminhydrohalogenid, såsom hydroxylaminhydrochlorid og lignende, i nærværelse af en base, såsom pyridin, vandigt natriumhydroxid, vandigt natriumacetat og lignende, til dannelse af den tilsvarende D-serie 3-oxim, som har formlen (I).

D-serie 3-ketonen, som har formlen (II), kan fremstilles, ved at man omsætter en D-serieforbindelse, som har den almene formel:

OH

C2H5

---C=CH

(III) 4 145610 med et passende syreanhydrid, såsom eddikesyreanhydrid, propionsyre-anhydrid, smørsyreanhydrid eller caprylsyreanhydrid, til dannelse af en D-serie diester, som har den almene formel:

OR

C2H5 I

I (IV) hvilken derpå ' omdannes ved behandling med en egnet base, såsom et alkalimetalhydroxid til D-serie monoesterketonen, som har formlen (II). Denne fremgangsmåde til fremstilling af forbindelse (II) er beskrevet for DL-forbindelserne i fransk patentskrift nr. 5.529M. D-serie udgangsforbindelserne med formlen (III) er sædvanligvis kendte eller kan fremstilles efter kendte fremgangsmåder.

Opfindelsen belyses nærmere ved hjælp af det følgende eksempel:

Eksempel 1.

D-17ft-acetoxy-133-ethyl-17a-ethynyl-gon-4-en-3-onoxim:

En opløsning af 4,5 g D-173-acetoxy-133-ethyl-17a-ethynyl-gon- 4-en-3-on i 15 ml pyridin og 2,0 g hydroxylaminhydrochlorid opvarmes på et dampbad i 45 minutter. Den afkøles derpå og hældes i en stor mængde is/vand, hvorefter det således dannede faststof frafiltreres og lufttørres. Omkrystallisation fra methylenchlorid-ethanol medfører dannelse af D-173-acetoxy-133-ethyl-17a-ethynyl-gon-4-en-onoxim, smeltepunkt 214-218 °C, a^+41°.

Udgangsmaterialet fremstilles på følgende måde: D-3,173~diacetoxy-133-ethyl-17a-ethynyl-gon-3,5(10)-dien:

En blanding af 1,0 g D-133-ethyl-17a-ethynyl-gon-4-en-173“ ol-3-on, 16 ml eddikesyreanhydrid, 4 ml acetylchlorid og 0,4 ml pyridin opvarmes under tilbagesvaling i 3 timer, hvorefter opløsningsmidlerne fjernes ved fordampning i vakuum. Den resulterende remanens opløses i benzen, og opløsningen udvaskes med vand og 5 U5610 saltvand og tørres. Benzenen fjernes og ved triturerlng med ether i et isbad opnås krystaller af D-3,173-diacetoxy-133-ethyl-17a-ethynyl-gon-3,5(lO)-dien, smeltepunkt 144-150 °C.

D-173-acetoxy-13fi-ethyl-17a-ethynyl-qon-4-en-3-on:

Til en opløsning af 0,35 g D-3,173-diacetoxy-13p-ethyl-17a-ethynyl-gon-3,5(lO)-dien i 60 ml methanol og 10 ml tetrahydrofuran sættes 10 ml af en 2% methanolsk opløsning af kaliumhydroxid. Efter tilsætningen omrøres blandingen i 1 time ved 0 °C under en nitrogenatmosfære, hvorefter den hældes i 400 ml saltvand og neutraliseres med 10% saltsyre. Efter isolering af dette produkt i ether opnås den ønskede D-173-acetoxy-13|3-ethyl-17a-ethynyl-gon-4-en-3-on, smeltepunkt 162-164 °C.

Biologisk forsøg

Antiformeringseffekten af forbindelserne ifølge opfindelsen bestemmes ved det følgende testforsøg. I hvert tilfælde er testmaterialet D-173-acetoxy-13&-ethyl-17a-ethynyl-gon-4-en-3-onoxim.

A. Antiovulatorisk effekt i rotter.

Vaginale sekreter opnåedes dagligt fra voksne hunrotter som bevis på normale 4-dages østruscycler. Udvalgte rotter, der var mellem to østrusperioder, behandledes med testmaterialet, som admini- 3 streredes intragastricalt i 0,5 cm sesamolie, og igen den følgende dag, da dyrene var i proøstrus. Dyrene blev aflivet den næste dag, på hvilken tid de normalt ville have ova i det proximale afsnit af de fallopiske rør. Oviducter blev hver for sig gennemskyllet med saltvandsopløsning til overførsel på et mikroskopobjektglas.Æggeleder-udskylningspræparaterne undersøgtes med et binokulært mikroskop; hvis der var ova til stede, noteredes deres tilstand og antal.

Testmaterialet havde antiovulatoriske egenskaber i rotter ved doseringer så lave som 0,5 mg/kg, når det blev administreret oralt i de to dage, som lå forud for en forventet ovulation. Fem rotter testedes ved hver dosisstørrelse, og ingen ova opdagedes i æggeleder-udvaskningsprøver efter behandling med doser på mindst 0,5 mg/kg.

6 145610

Ved 0,25 mg/kg havde 4 af 5 behandlede rotter normale ova i det reproduktive system. Den femte rotte kunne ikke ovulere (Tabel I).

TABEL I.

Dosis mg/kg/dag behandlet antal ovulerende antal ° 5 4 0,25 5 4 0,5 5 0 1.0 5 0

Anvendelse af DL-173-acetoxy-133-ethyl-173-ethynyl-gon-4-en-3-onoxim som testmateriale· kræver til sammenligning administrering af mindst 5,0 mg/kg til opnåelse af nogen betydningsfuld antiovulatorisk effekt - 10 gange så meget som den D-isomere (Tabel IA).

TABEL IA.

mg/kg/dag behandlet antal ovulerende antal 1.0 5 4 5.0 5 2 10,0 5 0.

B. Afbrydelse af tidlig drægtighed j rotter.

Voksne hunrotter undersøgtes dagligt for vaginal cytologi.

De dyr, som udviste proøstrus-sekreter sattes natten over sammen med fertile hanrotter (1 han/1 hun) og undersøgtes den følgende morgen for vaginal cytologi og nærværelse af sperm« i vaginaludvaskningsprøver. Den dag, der blev observeret sperm i vaginaludvaskningsprøver, betragtedes som den første graviditetsdag. Testmaterialet blev administreret i sesamolie ved sondefodring på graviditetsdag 1 til 6, og rotterne blev dræbt på dag 14 til undersøgelse af uterint indhold.

Når voksne rotter behandledes oralt med testmaterialet i løbet af de første 6 drægtighedsdage, forhindredes implantation. Denne effekt optrådte ved doseringer på 10 - 20 mg/kg. Fertilitetsinhibe- 7 145610 ring var fuldstændig ved 10 mg/kg, hvor der, skønt 1 af 7 rotter viste tegn på implantation, kun var én nidation, og der skete resorption (Tabel II).

TABEL II.

Dosis behandlet antal med antal implantationer mg/kg/dag antal implantationer normale resorberede 0 5 5 65 8 57 5 42 8 10 7 10 1 20 7 0 -

Til sammenligning er administrering af 10,0 mg/kg DL-173-acet-oxy-13f3-ethyl-17a-ethynyl-gon-4-en-3-onoxim som testmateriale ikke effektivt til inhibering af fertilitet (Tabel IIA).

TABEL IIA.

Dosis behandlet antal med antal implantationer mg/kg/dag antal implantationer normale resorberede 1.0 5 4 61 0 5.0 5 5 87 0 10,0 5 5 62 0

Det skal understreges, at det ovenfor anvendte testmateriale er mindst 10 gange mere aktivt end dets racemat med hensyn til dets antiovulatoriske egenskaber i rotter. Ydermere er testmaterialet effektivt til afbrydelse af tidlig drægtighed i rotter ved en dosisstørrelse, hvor racematet er totalt ineffektivt til dette formål.

Disse uventede resultater eksemplificerer anvendeligheden af den foreliggende opfindelse.