DK142767B - Analogifremgangsmåde til fremstilling af 1- og dl-(racem-)formerne af derivater af 6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo(2,1-b)thiazol. - Google Patents

Description

viv (11) FREMLÆ6BELSESSKRIFT 142767 DANMARK (B1) lnt C|3 c 07 D 513/04 (21) Antegning nr. 4679/77 (22) Indlaveret den 20. Okt. 1977 Mg! (24) Lebedag 20. Okt. 1977 (44) Ansøgningen fremlagt og „ fremlæggelsesskriftet offentliggjort den '9* ’ 9«1

DIREKTORATET FOR

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (30) Prioritet begæret fra dan

22. okt. 1976, 44060/76, GB

(71) PFIZER CORPORATION, Calle 15 l/2, Avenida Santa Isabel, Colon, PA.

(72) Opfinder: Michael Raymond Graves Leeming, 7 Beaconsfleld Road, St.

Stephens, Canterbury, Kent, GB: John Kendrick Stubbs, 111 Blenheim Road, Deal, Kent, GB.

(74) Fuldmægtig under sagens behandling:

Internationalt Patent-Bureau.

(54) Analogifremgangsmåde til fremstilling af 1- og dl-(racem-)formerne af derivater af 6-(m-aminophenyl)-2,5,5,6-tetrahydroimidazo(2,1 -b)thi»= zol.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af 1- og dl-(racem-)formerne af hidtil ukendte derivater af 6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol (m-aminotetramisol) med den almene formel 5_i s 2 hvori R er H eller CH^, eller ikke-toksiske syreadditionssalte heraf, hvilke forbindelser er nyttige til bekæmpelse af helminther hos varmblodede dyr.

142767 2

Af typiske ikke-toksiske syreadditionssalte kan der nævnes hydrochloridet, hydrobromidet, hydroiodidet, nitratet, sulfatet, acetatet, lactatet, tartratet og citratet.

De foretrukne forbindelser er 1- og dl-6-{m-(5-methylisoxazol- 3-carboxamido)phenyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol.

Det har vist sig, at de omhandlede forbindelser er betydeligt mere aktive end andre, nært beslægtede 6{m-(isoxazol-carboxamido)phe-nyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazoler, herunder de analoge 5-ethylisoxazol-3-carboxamido- og 5-phenylisoxazol-3-carboxamidofor-bindelser, og positionsmæssigt isomere, såsom 3-methylisoxazol-5-carboxamidoforbindelsen.

1-Formerne er mere aktive end dl-formerne.

Fra tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.147.857 kendes anthel-minthisk virkende derivater (1- og dl-former) af 6-(m-aminophenyl)- 2.3.5.6- tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol, og herunder er der angivet sådanne derivater, hvori aminogruppen er substitueret med pyridyl-carbonyl, thiazolylcarbonyl og furfurylcarbonyl. De med de her omhandlede forbindelser nærmest beslægtede blandt disse heterocyclisk substituerede forbindelser er 6-{m-(thiazolyl-carboxamido)phenyl}- 2.3.5.6- tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazoler, men de her omhandlede forbindelser er disse sidstnævnte forbindelser virkningsmæssigt overlegne, som det vil fremgå af nedenstående forsøgsdata.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del angivne.

De omhandlede forbindelser kan således .fremstilles ved, at man a) omsætter 1- eller dl-6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo-[2,1-b]thiazol (m-aminotetramiso]) med formlen 5._N_.3 med en syre med formlen

0X Λ—COOH

2 hvori R har den under formel I anførte betydning, 3 142767 eller med et funktionelt ækvivalent heraf som acyleringsmiddel, f.eks. et syrehalogenid/ en "aktiveret" ester eller et blandet anhydrid af forbindelsen med formlen III.

De foretrukne syrehalogenider er syrechloridet og -bromidet.

De kan fremstilles ved konventionelle fremgangsmåder, f.eks. ved omsætning af den frie syre med henholdsvis thionylchlorid eller -bromid.

Den foretrukne "aktiverede" ester er succinimidoesteren med formlen R n

ov Λ_COON

^ yj o

Denne kan ligeledes fremstilles ved konventionelle fremgangsmåder, f.eks. ved omsætning af den frie syre med N-hydroxysuccinimid i nærværelse af et dehydratiserende middel, f.eks. dicyclohexylcarbodiimid. En anden foretrukken aktiveret ester er phthalimidoesteren.

Egnede blandede anhydrider har formlen 0_L_L· v hvori R1 betegner en C^-Cg-alkylgruppe eller C^-Cg-alkoxygruppe, mest foretrukket en t-butyl-eller iso-butoxygruppe. De kan fremstilles ved konventionelle fremgangsmåder, f.eks. ved omsætning af den frie syre med henholdsvis det tilsvarende alkanoylchlorid eller alky lchlorformiat, f.eks. pivaloylchlorid eller iso-butylchlorformiat, i nærværelse af en base, såsom triethylamih.

dl-(Racem-) eller 1-m-aminotetramisol skal anvendes som udgangsmateriale, alt efter om man ønsker henholdsvis dl- eller 1-formen af produktet I. dl-m-aminotetramisol kan opspaltes i dets d- og 1-isomere ved anvendelse af den i USA-patentskrifterne nr. 3.673.205 og 3.463.786 beskrevne fremgangsmåde. Endvidere kan 1-formen af produktet I opnås ved opspaltning af dl-formen i dens dextro-og lævo-antipoder. Til dette formål kan der benyttes den i britisk patentskrift nr. 1.402.689 beskrevne fremgangsmåde.

Selv om de omhandlede forbindelser kan fremstilles ved omsætning af forbindelsen II med den frie syre III, foretrækkes det at 4 1Λ2767 anvende syren i form af dens syrechlorid.

Når den frie syreform III anvendes, må omsætningen almindeligvis udføres i nærværelse af et dehydratiserende middel, såsom dicy-clohexylcarbodiimid.

Ved en typisk fremgangsmåde, hvor forbindelse II omsættes med et syrechlorid af forbindelse III, opløses forbindelse II i et vandigt opløsningsmiddel, f.eks. vandigt methanol, pH-værdien sænkes til f.eks. 5 med fortyndet saltsyre, blandingen afkøles,og syrechlo-ridet tilsættes forsigtigt. Efter omrøring af reaktionsblandingen ved stuetemperatur i flere timer kan den syrnes med fortyndet saltsyre og vaskes med et passende opløsningsmiddel, f.eks. methylenchlo-rid. Efter fraskillelse kan den vandige fase gøres basisk til f.eks. pH 8 med en passende base, f.eks. koncentreret ammoniakvand, og eks-traheres med et passende opløsningsmiddel, f.eks. methylenchlorid. Efter fraskillelse kan den organiske fase vaskes med vand ved pH 6 til fjernelse af eventuelt uomsat m-aminotetramiso1 og inddampes til tørhed under formindsket tryk til opnåelse af det ønskede produkt.

Om nødvendigt kan produktet renses ved omkrystallisation af et passende opløsningsmiddel, f.eks. acetone eller ethylacetat, eller ved chromatografi på silica i methylenchlorid indeholdende en lille mængde methanol. Hvis det rensede produkt ikke foreligger i en acceptabel krystallinsk form, kan det optages i ethanol, og overskud af hy-drogenchloridgas kan passeres gennem den ethanoliske opløsning til omdannelse af den frie base til dens hydrochloridsalt. Det krystallinske hydrochlorid kan udvindes ved koncentrering af den opnåede opløsning under formindsket tryk og kan om nødvendigt omkrystalliseres af et passende opløsningsmiddel, f.eks. ethanol eller isopropanol.

Alternativt kan hydrochloridsaltet af produktet fremstilles direkte på følgende måde. Forbindelse II opløses i et passende opløsningsmiddel, f.eks. vandigt acetone, pH-værdien sænkes til f.eks.

5 med fortyndet saltsyre, blandingen afkøles, og syrechloridet af forbindelse III tilsættes langsomt, f.eks. over et tidsrum på 30 minutter. Den opnåede blanding omrøres derefter ved lav temperatur, f.eks. 10°C, i 1/2 til 1 time, og bundfaldet bestående af det ønskede hydrochloridsalt frafiltreres, vaskes med et passende opløsningsmiddel, f.eks. acetone, og tørres.

dl-(Racem-)formerne af de omhandlede forbindelser kan efter fremgangsmåden ifølge opfindelsen også fremstilles ved, at man b) cycliserer en forbindelse med formlen 5 142767 \ H \_CH-CH„_.N_

,.XJ

hvori R har den ovennævnte betydning, X betegner chlor, brom eller hydroxy, og Y betegner hydrogen eller en C^-C^-alkanoylgruppe, med det forbehold, at når X er hydroxy, er Y hydrogen.

Den foretrukne alkanoylgruppe er en acetylgruppe.

Y er fortrinsvis hydrogen.

X er fortrinsvis chlor eller brom.

Cycliseringen af de forbindelser med formlen VI, hvori X er Cl eller Br, og Y er H eller alkanoyl, kan udføres ved opvarmning af dem med overskud af en base, som ikke hydrolyserer amid-bindeleddet, f.eks. vandigt kaliumcarbonat, vandigt triethylamin, vandigt pyridin eller fortyndet ammoniakopløsning. Typiske betingelser er 30-100°C i 1 til 3 timer. Der er typisk chloroform til stede foruden basen, idet chloroformlaget fraskilles efter reaktionen og inddampes til tørhed til opnåelse af det ønskede produkt. 1-Formen kan også her fremstilles ved opspaltning af dl-produktet på konventionel måde.

De forbindelser, hvori X er Cl eller Br, fremstilles almindeligvis ved omsætning af de tilsvarende forbindelser, hvori X er OH eller C-^-C^-alkanoyloxy, med et passende halog eneringsmiddel, f.eks. thionylchlorid eller -bromid. Det er ikke væsentligt at isolere det halogenerede produkt - dette kan cycliseres in situ til det ønskede produkt ved omsætning med basen.

Cycliseringen af de forbindelser med formlen VI, hvori X er hydroxy, og Y er H, kan udføres under milde dehydratiserende betingelser. Dicyclohexylcarbodiimid er et muligt dehydratiserende middel.

Forbindelserne med formlen VI vil almindeligvis opnås og cycliseres i form af deres hydrochlorid- eller hydrobromidsalte.

Forbindelserne med formlen VI kan fremstilles ved med kendte fremgangsmåder analoge fremgangsmåder. Det følgende er en typisk vej: 142767 6 5i Cl.CO θΛ ‘ \_ ?0CH2Br

tx, rS

NH2

(U) Br2 ^jjA

CH3

r—~S

o NH.y Φ

a.. NaBH

i N.Y NHCO—_ £-- ---g ~ ·ί:! ~-Γ*Ί—il thionylchlorid eller -bromid α ^ NN.Y NHCO — X°^CH3 (X = Cl eller Br)

De ikke-toksiske syreadditionssalte kan fremstilles ud fra den tilsvarende frie base på konventionel måde. Hydrochloridsaltene kan f.eks. fremstilles som beskrevet under a) ovenfor.

De omhandlede forbindelser kan administreres alene, men administreres almindeligvis med et ikke-toksisk fortyndingsmiddel eller bærerstof valgt under hensyn til den påtænkte administreringsvej. De kan f.eks. administreres oralt som vandige opløsninger eller i blanding med et dyrefoder eller dyrefodertilskud. Ved parenteral administrering, der fortrinsvis udføres subcutant eller intramuskulært, 7 142767 kan bæreren være vandig, såsom vand eller isotonisk saltopløsning, eller ikke-vandig, såsom polyethylenglycol.

Parenteral administrering af en vandig opløsning foretrækkes, og sådanne opløsninger indeholder typisk 1-20 vægt-% af den aktive forbindelse.

Egnede dosisniveauer er fra 0,5 til 20 mg af den aktive bestanddel pr. kg legemsvægt af dyret.

Forbindelserne er også aktive, når de administreres dermalt, idet den aktive forbindelse absorberes gennem dyrets hud.

De omhandlede forbindelser er navnlig aktive over for nemato-der, som optræder i lunger, maver og tarme hos får, kvæg og andre husdyr.

På basis af de omhandlede forbindelser kan der således tilvejebringes et anthelminthisk middel omfattende 1- eller dl-formen af en forbindelse med formlen I som defineret ovenfor, eller et ik-ke-toksisk syreadditionssalt heraf, og et ikke-toksisk fortyndingsmiddel eller bærerstof.

Ved hjælp af de omhandlede forbindelser kan man udrydde hel-minther hos inficerede dyr, herunder mennesker, idet man til det pågældende dyr eller menneske administrerer en anthelminthisk mængde af 1- eller dl-formen af en forbindelse med formlen I som defineret ovenfor, et ikke-toksisk syreadditionssalt heraf eller et anthelminthisk middel som defineret ovenfor.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere ved hjælp af de efterfølgende eksempler.

Eksempel 1 A. Syrechlorid af 3-carboxy-5-methylisoxazol.

14,6 g 3-carboxy-5-methylisoxazol tilbagesvaledes med 100 ml thionylchlorid i 1 time. Reaktionsblandingen inddampedes derefter til tørhed under formindsket tryk til fjernelse af overskud af thionylchlorid. Derpå tilsattes der toluen, og blandingen inddampedes igen til tørhed under formindsket tryk til opnåelse af det rå syrechlorid, der udgjorde 16 g, og som anvendtes direkte i det næste trin uden yderligere rensning.

B. dl-6-{m-(5-Methylisoxazol-3-carboxamido)phenyl}-2,3,5,6-tetrahy-droimidazol[2,1-b]thiazol.

En opløsning af 1,0 g dl-6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydro-imidazof2,1-b]thiazol i vandigt methanol (7 ml methanol/3 ml vand) syrnedes til pH 5 med 2 N saltsyre, afkøledes til 0°C og holdtes ved 142767 8 denne temperatur, medens 1,3 g af det i trin A fremstillede syrechlo-rid tilsattes portionsvis over et tidsrum på 10 minutter. Den opnåede blanding omrørtes ved 0°C i 1 time og derefter natten over ved stuetemperatur (25°C). Der tilsattes derefter 5 ml 2 N saltsyre, og opløsningen vaskedes med methylenchlorid. Efter fraskillelse blev det vandige lag gjort basisk til pH 8 ved tilsætning af koncentreret ammoniakvand og ekstraheredes med methylenchlorid. Efter fraskillelse vaskedes den organiske fase med vand ved pH 6 til fjernelse af eventuelt uomsat imidazo[2,1-b]thiazol-udgangsmateriale, tørredes over MgSO^ og inddampedes til tørhed under formindsket tryk til opnåelse af det ønskede produkt, dl-6-{m-(5-methylisoxazol-3-carboxamido)phe-nyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol. Produktet omkrystalliseredes af acetone, udbytte 0,7 g, smp. 122-124°C.

Analyse:

Fundet: C 57,95, H 4,90, N 16,76%.

Beregnet for CigH^N^Ss C 58,51, H 4,91, N 17,06%.

C. Monohydrochloridsaltet af dl-6-{m-(5~methylisoxazol-3-carboxami-do) phenyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo [ 2,1-b] thiazol.

Overskud af hydrogenchloridgas ledtes gennem 10 g dl-6-{m-(5-methylisoxazol-3-carboxamido) phenyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo [ 2,1-b] -thiazol, fremstillet som i trin B, i 150 ml ethanol, og opløsningen koncentreredes derpå under farmindsket tryk. Det ønskede monohydrochloridsalt udkrystalliserede af opløsningen og frafiltreredes og omkrystalliseredes af methanol, udbytte 9,3 g, smp. 259-261°C.

Analyse:

Fundet: C 52,30, H 4,73, .N 15,48%.

Beregnet for cieHi6N402s-HCl: C 52,66, H 4,69, N 15,35%.

Ved omkrystallisation af monohydrochloridet af methanol/ether (1:1) opnåedes monohydrochlorid-monohydratet, smp. 115-120°C (sønderdeling). .

Analyse:

Fundet: C 51,06, H 5,09, N 14,12%.

Beregnet for ci6H16N402S-HC1-H20: C 50,19, H 5,00, N 14,63%.

9 142767

Eksempel 2 dl-6-{m-(Isoxazol-3-carboxamido)phenyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo-[2,1-b]thiazol.

På analog måde som i eksempel 1, afsnit B, fremstilledes dl- 6-{m- (isoxazol-3-carboxamido) phenyl }-2,3,5,6-tetrahydroimidazo [ 2,1-b] -thiazol, smp. 114-115°C, ud fra syrechloridet af 3-carboxyisoxazol og dl-6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol. Analyse:

Fundet: C 57,60, H 4,55, N 17,19%.

Beregnet for ci5Hj_4N4°2S: c 57/32/ H 4,46, N 17,83%.

Syrechloridet fremstilledes som i eksempel 1, afsnit A, ud fra den tilsvarende frie syre og thionylchlorid.

Eksempel 3

Monohydrochlorid-monohydratet af dl-6-{m-(lsoxazol-3-carboxamido)phenyl }-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol.

Denne forbindelse fremstilledes på analog måde som i eksempel 1, afsnit C, ved at lede overskud af hydrogenchloridgas gennem en opløsning af produktet ifølge eksempel 2 i ethanol.

Analyse:

Fundet: C 48,21, H 4,46, N 14,95%.

Beregnet for C15H14N402S.HC1.H20: C 48,85, H 4,61, N 15,20%.

Eksempel 4 1-6-{m-(5-Methylisoxazol-3-carboxamido)phenyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo [2,1-b]thiazol.

På analog måde som i eksempel 1, afsnit B, fremstilledes 1-6-{m-(5-methylisoxazol-3-carboxamido)phenyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo-[2,1-b]thiazol, smp. 120°C, ud fra syrechloridet af 3-carboxy-5-me-thylisoxazol og 1-6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]-thiazol.

Analyse:

Fundet: C 57,94, H 4,98, N 16,78%.

Beregnet for C^gH^gN402S: C 58,52, H 4,91, N 17,06%.

Optisk rotation [a]^6=-79,7°.

142767 ίο

Eksempel 5 A. Fremstilling af 3,-acetyl-5-methyl-3-isoxazolcarboxanilid.l/4 hydrat.

coch3 coch3 Q Γ°π x°^ch3 %^\H-co-]j jr +HC1 *N>^ch3

En opløsning af 14,5 g 5-methyl-3-isoxazolcarbonylchlorid i 30 ml acetone sattes til en opløsning af 13,8 g m-aminoacetophenon i 280 ml acetone i nærværelse af 21,0 g vandfrit kaliumcarbonat. Blandingen omrørtes i 1/2 time og fortyndedes derefter med vand. Det udfældede produkt frafiltreredes, vaskedes med vand og tørredes. Udbytte 20,5 g (83% af det teoretiske), smp. 188-190°C.

Analyse:

Fundet: C 62,77, H 5,00, N 10,89%.

Beregnet for εΐ3Η12Ν203 *1/4H20:C 62,77, H 5,03, N 11,26%.

B. Fremstilling af 3'-bromacetyl-5-methyl-3-isoxazolcarboxanilid.

1/2 hydrat.

COCH, COCH^Br 1 O I z τΊ fil

TI TI

xCH3 + Br2 ^0—v,CH3

En opløsning af 12,5 g brom i 60 ml chloroform sattes til en opslæmning af 19 g 3'-acetyl-5-methyl-3-isoxazolcarboxanilid.l/4 hydrat i 190 ml chloroform. Blandingen omrørtes i 1/2 time og fortyndedes med diethylether. Produktet frafiltreredes og tørredes. Udbytte 21,0 g (84% af det teoretiske), smp. 172-174°C.

Analyse:

Fundet: C 46,63, H 3,57, N 7,99%.

Beregnet for ci3HuBrN203 ·1/2Η20: C 46,90, H 3,61, N 8,43%.

11 142767 C. Fremstilling af 3'-[2-(2-imino-3-thiazolidinyl)acetyl]-5-methyl- 3-isoxazolcarboxanilid-hydrobromid.

COCHLBr Γ 2 ^ I? Γ J^rNH.HBr N. J|-NHCO_._, NHCO_._.

^ TjL;C>·^ v-ø Xj ch3

En opløsning af 20 g 3’-bromacetyl-5-methyl-3-isoxazolcarbox-anilid.1/2 hydrat i 400 ml acetone sattes til en omrørt opløsning af 6,5 g 2-amino-2-thiazolin i 400 ml acetone. Blandingen omrørtes i 1/2 time, og produktet filtreredes, vaskedes med acetone og tørredes.

Udbytte 25,9 g (95% af det teoretiske), smp. 275-277°C.

Analyse :

Fundet: C 45,18, H 4,00, N 13,17%.

Beregnet for C16H16N4C>3S -HBr: C 45,17, H 4,13, N 12,88%.

D. Fremstilling af 3[l-hydroxy-2-(2-imino-3-thiazolidinyl)ethyl]-5-methyl-3-isoxazolcarboxanilid-hydrochlorid.

f \=rNH.HBr f Nyy=r»H.HCl W' Yp _

k2æ-_-i/SY^NIK]C,-]j-JT (ii)HCl t -[j I

XX XJ "Ά, 11,5 g natriumborhydrid sattes til en omrørt opslæmning af 23,0 g 31 — [2—(2-imino-3-thiazolidinyl)acetyl]-5-methyl-3-isoxazol-carboxanilid-hydrobromid i 230 ml med methanol denatureret sprit. Blandingen omrørtes i 1/2 time, fortyndedes med vand og filtreredes.

Det opnåede rå produkt opløstes i 240 ml acetone, og til opløsningen sattes en opløsning af hydrogenchlorid i acetone. Det opnåede faste stof frafiltreredes, vaskedes med acetone og tørredes. Udbytte 15,0 g (90% af det teoretiske), smp. 206-208°C.

Analyse:

Fundet: C 50,19, H 5,17, N 15,04%.

Beregnet for C26H18N4°3S -HClsC 50,20, H 4,96, N 14,64%.

142767 12 E. Fremstilling af dl-6-{m-(5-methylisoxazol-3-carboxamido)phenyl}- 2.3.5.6- tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol-monohydrochlorid-monohydrat.

S

Γ VsNH.HCl f^\

Ky (i)soci2 \ 3,8 g 3' - [l-Hydroxy-2- (2-imino-3-thiazolidinyl)ethyl]-5-methyl-3-isoxazolcarboxanilid-hydrochlorid sattes til 12 ml omrørt thionyl-chlorid ved 5°C. Blandingen omrørtes ved 5-10°C i 1/2 time, og opløsningen inddampedes til tørhed ved 25°C under vakuum. Den opnåede remanens omrørtes ved 60°C med en blanding af chloroform og vandig ka-liumcarbonatopløsning i 1 time. Chloroformlaget fraskiltes og inddampedes til tørhed. Det opnåede faste stof opløstes i 200 ml acetone, og til opløsningen sattes en opløsning af saltsyre i acetone. Produktet frafiltreredes, vaskedes med acetone og tørredes. Udbytte 2,6 g (68% af det teoretiske). Produktet vistes ved NMR- og IR-spektrosko-pi at være identisk med produktet ifølge eksempel 1, afsnit C.

Eksempel 6

Fremstilling af dl-6-{m-(5-methylisoxazol-3-carboxamido)phenyl}- 2.3.5.6- tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol-monohydrochlorid-monohydrat.

14,5 g dl-6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]- thiazol omrørtes i 100 ml acetone og 25 ml vand, og der tilsattes 27 ml 2,5 N saltsyre til opnåelse af en klar opløsning med en pH-værdi på ca. 5.

, Denne opløsning omrørtes og afkøledes til 5°C, og en opløsning af 14,5 g 5-methyl-3-isoxazolcarbonylchlorid i 30 ml acetone tilsattes i løbet af 1/2 time ved 5-10°C. Den opnåede blanding omrørtes ved 10°C i 1/2 time, og det udfældede faste stof frafiltreredes, vaskedes med acetone og tørredes. Udbytte 21 g (87,5% af det teoretiske), smp. 118-121°C (sønderdeling). NMR- og IR-spektroskopi og tyndtlags-chromatografi viste, at produktet var identisk med produktet ifølge eksempel 1, afsnit C.

142767 13

Virkningen af de omhandlede forbindelser ved en screeningprøve med tredobbelt infektion på mus mod en samtidig infektion af Nematospiroides dubius, Syphacia obvelata og Hymenolepsis nana kan bestemmes som følger. Albinomus af en vægt på 20 g inficeres og behandles på følgende måde. Idet den første infektion tages som dag 0, inficeres mus med 2000 H. nana ova på dag 0 og 100 N. dubius-larver på dag 5 og udsættes derefter for en Syphacia-inficeret koloni i 4 dage. Musene behandles derefter med prøveforbindelsen i grupper på 4 enten én gang på dag 14 eller på tre efter hinanden følgende dage 14-16 ved oral eller subcutan (s.c.) administrering. Musene obduceres på dag 19 og undersøges for tilstedeværelsen af orm. De opnåede resultater sammenlignes med resultaterne for ubehandlede inficerede kontroldyr (12 pr. gruppe). For N. dubius udføres der fuldstændige optællinger, og virkningen udtrykkes som procentisk formindskelse. Infektionerne med de andre parasitter udtrykkes efter en skala, Syphacia (0-3) og H. nana (0-3), og virkningen udtrykkes ved at sammenligne gennemsnitsværdierne for grupperne. Polyethylenglycol er det stan-dardbæremiddel, der anvendes til at bringe prøveforbindelserne på doseringsformen, men der anvendes dog vandige opløsninger til vandopløselige stoffer, og stoffer, der er uopløselige i både polyethylenglycol og vand, kan formales i kuglemølle i vandigt 1% "Tween'^aO. De anvendte mg/kg-niveauer kan f.eks. være op til 12,5 mg/kg.

Virkningerne af de omhandlede forbindelser mod helminthen N. dubius under anvendelse af den ovennævnte metode,og til sammenligning de tilsvarende virkninger af de i tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.147.857 anførte 6-{m-(thiazolyl-carboxamido)phenyl}- 2,3,5,6-tetrahydroimidazo [2,1-b]thiazoler, betegnet forbindelse A for thiazolyl-2-carboxamido-forbindelsens og forbindelse B for thia-zolyl-4-carboxamido-forbindelsens vedkommende,viste sig at være som følger: 142767 14

Forbindelse Dosis (mg/kg) 12,5 6,25 3,12 1,56 0,78, 0,39

Produkt ifølge eksempel 1, afsnit B, 100% 99% 72% - - % udryddelse (s.c.)

Produkt ifølge eksempel 1, afsnit C, 5 og 6, - 99% 79% 68% % udryddelse (s.c.)

Produkt ifølge eksempel 1, afsnit C, 5 og 6, - - 100% 98% 56% 31% % udryddelse (oral) eksf"Pel 2' 100% 89% 65% 39% % udryddelse (s.c.)

Produkt ifølge eksempel 3, gg% g8% 1(J0% I udryddelse (s.c.) aksf®el 4' 100% 100% 100% % udryddelse (s.c.)

Forbindelse A, 91% 45% 11% (afprøvet % udryddelse (s.c.) (toksisk) som HCl-salt)

Forbindelse B, /100% 96% 36% % udryddelse (s.c.) \l00% 89% 56%

Ved sammenligning af resultaterne ved dosen 3,12 mg/kg ses det, at de her omhandlede forbindelser er de nært beslægtede sammenligningsforbindelser A og B virkningsraæssigt overlegne.