DK142425B - Fremgangsmåde til fremstilling af et antibiotisk aktivt aminoglycosidkompleks kaldet Bu 2183, dets komponenter eller syreadditionssalte deraf. - Google Patents
Fremgangsmåde til fremstilling af et antibiotisk aktivt aminoglycosidkompleks kaldet Bu 2183, dets komponenter eller syreadditionssalte deraf. Download PDFInfo
- Publication number
- DK142425B DK142425B DK564275AA DK564275A DK142425B DK 142425 B DK142425 B DK 142425B DK 564275A A DK564275A A DK 564275AA DK 564275 A DK564275 A DK 564275A DK 142425 B DK142425 B DK 142425B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- antibiotic
- components
- component
- medium
- pseudomonas
- Prior art date
Links
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title description 18
- 239000002253 acid Substances 0.000 title description 13
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 title description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 27
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 24
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 21
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 21
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 15
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 15
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 14
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 11
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 7
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 6
- 241000589774 Pseudomonas sp. Species 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- -1 hydrochloric Chemical class 0.000 description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 5
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 3-(trimethylsilyl)propane-1-sulfonic acid Chemical compound C[Si](C)(C)CCCS(O)(=O)=O TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FIHZWZBEAXASKA-UHFFFAOYSA-N Anthron Natural products COc1cc2Cc3cc(C)cc(O)c3C(=O)c2c(O)c1C=CC(C)C FIHZWZBEAXASKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 4
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 230000006181 N-acylation Effects 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 3
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 3
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 3
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- DPEYHNFHDIXMNV-UHFFFAOYSA-N (9-amino-3-bicyclo[3.3.1]nonanyl)-(4-benzyl-5-methyl-1,4-diazepan-1-yl)methanone dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.CC1CCN(CCN1Cc1ccccc1)C(=O)C1CC2CCCC(C1)C2N DPEYHNFHDIXMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JFNOZOIQSSNDRN-ZLEXBVPCSA-N Antibiotic BN 186A Natural products O=C(N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]([C@@H](N)[C@@H](O)CO)[C@H](O)CN)O[C@H]1CO)CC JFNOZOIQSSNDRN-ZLEXBVPCSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 241000219470 Mirabilis Species 0.000 description 2
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 150000005323 carbonate salts Chemical class 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 2
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- UWAJGPKPIKRBHZ-BOPCDOEQSA-N n-[(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3s,4r,5s)-1,4-diamino-2,5,6-trihydroxyhexan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]acetamide Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@H]([C@@H](O)CN)[C@H](N)[C@H](O)CO)[C@H](O)[C@H]1O UWAJGPKPIKRBHZ-BOPCDOEQSA-N 0.000 description 2
- JFNOZOIQSSNDRN-UHFFFAOYSA-N n-[6-(1,4-diamino-2,5,6-trihydroxyhexan-3-yl)oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]propanamide Chemical compound CCC(=O)NC1C(CO)OC(OC(C(O)CN)C(N)C(O)CO)C(O)C1O JFNOZOIQSSNDRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 238000002103 osmometry Methods 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N putrescine Chemical compound NCCCCN KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXKCUFUYTFWGNK-LIZSDCNHSA-N (2r,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,3r,4s,5s,6s)-5-amino-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 GXKCUFUYTFWGNK-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- RQRVMSIARGXSFL-JGWLITMVSA-N (2r,3s,4r,5s)-4-amino-2,3,5,6-tetrahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](O)C=O RQRVMSIARGXSFL-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- NIRFLDZJGPXMJZ-SLPGGIOYSA-N (2s,3r,4s,5s)-3,6-diaminohexane-1,2,4,5-tetrol Chemical compound NC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](N)[C@H](O)CO NIRFLDZJGPXMJZ-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- LMHVHMYRVUPVRG-ZFYZTMLRSA-N (2s,3r,4s,5s,6s)-5-amino-6-(hydroxymethyl)-2-methoxyoxane-3,4-diol Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N)[C@H](O)[C@H]1O LMHVHMYRVUPVRG-ZFYZTMLRSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VBUYCZFBVCCYFD-JJYYJPOSSA-N 2-dehydro-D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)C(O)=O VBUYCZFBVCCYFD-JJYYJPOSSA-N 0.000 description 1
- LMWMTSCFTPQVCJ-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1.CC1=CC=CC=C1O LMWMTSCFTPQVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHBMMWSBFZVSSR-UHFFFAOYSA-M 3-hydroxybutyrate Chemical compound CC(O)CC([O-])=O WHBMMWSBFZVSSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GXKCUFUYTFWGNK-UHFFFAOYSA-N 4-Trehalosamine Natural products O1C(CO)C(N)C(O)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 GXKCUFUYTFWGNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UWAJGPKPIKRBHZ-YKLFWQROSA-N Antibiotic BN 186B Natural products O=C(N[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]([C@H](N)[C@@H](O)CO)[C@@H](O)CN)O[C@@H]1CO)C UWAJGPKPIKRBHZ-YKLFWQROSA-N 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108010082340 Arginine deiminase Proteins 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CJIMGHJTKSSCHA-CULVAAHOSA-N C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO CJIMGHJTKSSCHA-CULVAAHOSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000196222 Codium fragile Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102000000634 Cytochrome c oxidase subunit IV Human genes 0.000 description 1
- 108050008072 Cytochrome c oxidase subunit IV Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-SVZMEOIVSA-N D-fucopyranose Chemical compound C[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182827 D-tryptophan Natural products 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 239000005792 Geraniol Substances 0.000 description 1
- GLZPCOQZEFWAFX-YFHOEESVSA-N Geraniol Natural products CC(C)=CCC\C(C)=C/CO GLZPCOQZEFWAFX-YFHOEESVSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- GLZPCOQZEFWAFX-UHFFFAOYSA-N KU0063794 Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCO GLZPCOQZEFWAFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 101150027323 PCNP gene Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N Paromomycin II Natural products NC1C(O)C(O)C(CN)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(N)CC(N)C2O)OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)N)OC1CO UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001397 Poly-beta-hydroxybutyrate Polymers 0.000 description 1
- 229920000331 Polyhydroxybutyrate Polymers 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000947836 Pseudomonadaceae Species 0.000 description 1
- 241000589540 Pseudomonas fluorescens Species 0.000 description 1
- 239000005700 Putrescine Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000122973 Stenotrophomonas maltophilia Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRYDSOYOHWGSMD-UHFFFAOYSA-N [C].O Chemical compound [C].O FRYDSOYOHWGSMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002647 aminoglycoside antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- DIOLOCSXUMYFJN-UHFFFAOYSA-N calcium;azane Chemical compound N.[Ca+2] DIOLOCSXUMYFJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001722 carbon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229940023913 cation exchange resins Drugs 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013360 fish flour Nutrition 0.000 description 1
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940113087 geraniol Drugs 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006140 methanolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- HOVAGTYPODGVJG-WLDMJGECSA-N methyl D-glucoside Chemical compound COC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HOVAGTYPODGVJG-WLDMJGECSA-N 0.000 description 1
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-M nonanoate Chemical compound CCCCCCCCC([O-])=O FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000006395 oxidase reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001914 paromomycin Drugs 0.000 description 1
- UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N paromomycin Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000000000 soil microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000011421 subcutaneous treatment Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229960000707 tobramycin Drugs 0.000 description 1
- NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N tobramycin Chemical compound N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 150000008505 β-D-glucopyranosides Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/874—Pseudomonas
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Oncology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
(11) fremlæggelsesskrift 1U2425 ViS/ DANMARK (51,,nt C'3 c o? HP Ism (21) Ansøgning nr. 5642/75 (22) Indleveret den 11· deC. 1975 f(24) Løbedag 11· dec. 1975 (44) Ansøgningen fremlagt og fremlæggelsesskriftet offentliggjort den 27· Okt · 1 980
DIREKTORATET FOR
PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (30) Priontet begæret fra den
12. dec. 1974, 532137., US
30. okt. 1975* 627391* US
(71) BRISTOL-MYERS COMPANY, 345 Park Avenue, New York, N.Y. 10022, US.
(72) Opfinder: HiroBhi Kawaguchi, 2-5-23* Kugayama, Suginami-ku, Tokyo, JP:
Koji Tomita, 5099 Suge, Tama-ku, Kawasaki-shi, Kanagawa, JP: Kei-ichi Fujisawa, 4-9-2, Kamifukuoka, Kamifukuoka-shi, Saitama-ken, JP: Hiroshi Tsukiur a, 1-6-27* Inokashira, Mitaka-shi, Tokyo, JP.
(74) Fuldmægtig under sagens behandling:
Th. Os tenf eld Patent bureau A/S,_^ (54) Fremgangsmåde til fremstilling af et antibiotisk aktivt aminoglycoside kompleks kaldet Bu 2183* dets komponenter eller syreadditionssalte deraf.
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af et hidtil ukendt antibiotisk aminoglycosidkompleks kaldet Bu-2183, dets komponenter Bu-2183 A, A^, B, C og D med den almene formel: ?H2NH2
^ CHOH
O - CH
chnh2
CHOH
ch2oh hvori R betyder henholdsvis C2HgCONH-, n-CgH^COHN-, CH3CONH-, HO- og ΝΗ2_, eller syreadditionssalte deraf.
2 142425
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man dyrker Pseudomonas sp. stamme D946-B83, A.T.C.C. 31086, i et vandigt næringsmedium indeholdende assimilerbare nitrogen- og carbonkilder under submerse aerobe betingelser ved en pH-værdi på 4,5 - 11,0 og en temperatur på 4 - 37°C og udvinder Bu-2183 komplekset fra dyrkningsmediet, hvorpå Bu-2183 komplekset om ønsket adskilles i de individuelle komponenter og/eller omdannes til syreadditionssalte.
Til nærmere belysning af det hidtil ukendte antibiotiske kompleks henvises til tegningen hvor figur 1 viser det infrarøde absorptionsspektrum af fri Bu-2183A base, presset i kaliumbromid, figur 2 det kernemagnetiske resonansspektrum af Bu-2183 A som hydrochloridsaltet opløst i θ£θ under anvendelse af 2.2-dimethyl-2-silapentan-5-sulfonat som intern kontrol og bestemt med et "JEOL" 60 MHz NMR-spektrometer (type ”TNM-C-60HL"), figur 3 det infrarøde absorptionsspektrum af fri Bu-2183 A2 base presset i kaliumbromid, figur 4 det kernemagnetiske resonansspektrum af Bu-2183 A2 som hydrochloridsaltet opløst i D2O under anvendelse af 2.2-dimethyl- 2-silapentan-5-sulfonat som intern kontrol og bestemt med et "JEOL" 60 MHz spektrometer (type "TNM-C-60HL"), figur 5 det infrarøde absorptionsspektrum af fri Bu-2183 B base presset i kaliumbromid, figur 6 det kernemagnetiske resonansspektrum af Bu-2183 B som hydrochloridsaltet opløst i D20 under anvendelse af 2.2-dimethyl- 2-silapentan-5-sulfonat som intern kontrol og bestemt med et "JEOL" 60 MHz spektrometer (type "TNM-C-60HL"), figur 7 det infrarøde absorptionsspektrum af fri Bu-2183 D base presset i kaliumbromid og figur 8 viser det kernemagnetiske resonansspektrum af Bu-2183 D som hydrochloridsaltet opløst i D20 under anvendelse af 2.2-dimethyl- 2-silapentan-5-sulfonat som intern kontrol og bestemt med et "JEOL" 60 MHz NMR spektrometer (type "TNM-C-60HL").
Der kendes en række aminoglycosid-antibiotika såsom kanamycin, 142425 3 gentamycin, streptomycin, neomycin, tobramycin og paromomycin. Der er imidlertid behov for yderligere nye bredspektrede antibiotika, især sådanne der har aktivitet overfor arainoglycosid-resistente organismer såsom pseudomonas.
Den nye art af pseudomonas kaldet Pseudomonas sp. stamme D946-B83 i Bristol-Banyu kulturdepotet er en psykrofilisk jordbakterie, som isoleredes fra en indisk jordprøve. En kultur af organismen er deponeret i American Type Culture Collection, Washington, D.C., og indgår i denne institutions permanente samling af mikro-organismer som A.T.C.C. 31086.
Det hidtil ukendte aminoglycosid kompleks omfatter mindst fem aminoglycosid komponenter hvoraf de tre kaldet Bu-2183 A, Aj og B har vist sig at være biologisk aktive, bg to kaldet Bu-2183 C og D er biologisk inaktive.
Det antibiotiske kompleks Bu-2183 og hver af de 3 ovennævnte biologisk aktive antibiotiske komponenter har et bredt spektrum af antibakteriel aktivitet og hæmmer de fleste aminoglycosid-resistente organismer, herunder pseudomonas arter. Antibiotika Bu-2183, Bu-2183A, Bu~2183A2 og Bu-2183B er værdifulde som antibakte-rielle midler, som ernæringstilskud til dyrefoder og som terapeutiske midler for fjerkræ, dyr og mennesker. De er værdifulde til behandling af infektionssygdomme forårsaget af Gram-positive og Gram-negative bakterier, især sygdomme forårsaget af aminoglycosidresistente organismer. En af de hidtil ukendte biologisk inaktive komponenter i det ved fermentering fremstillede kompleks, nemlig Bu-2183 D, kan anvendes som mellemprodukt ved semi-syntetisk fremstilling (såsom ved N-acylering) af de biologisk aktive komponenter Bu-2183 A, A2 og B.
Denne Bu-218 3-antibiotikum producerende organisme kaldet Pseudomonas sp. stamme D946-B83, A.T.C.C. 31086 er en fuldstændig aerob, ikke-sporedannende og Gram-negativ bakterie. Cellerne er stavformede og producerer unipolære multiflagella. Stamme D946-B83 er en psykrofilisk organisme som vokser ved 4° C men ikke ved 41° C.
142425 4
Den producerer fluorescerende pigment i glutamatmedium og skummet-mælk opløsning men ikke i King's B medium (H. Iizuka, & K. Komagata: An Attempt At Grouping Of The Genus Pseudomonas. J. Gen. Appl. Microbiol. 9: 73-82, 1963. Cytokrome oxidaser produceres ikke.
De morfologiske, dyrkningsmæssige og fysiologiske egenskaber af stamme D946-B83 er beskrevet nedenfor:
Morfologi
Stamme D946-B83 er karakteriseret ved at have motile, ikke-sporedannende og Gram-negative stave. Cellerne er lige, undertiden bøjede i længdeaksens retning, og producerer uni-polære tottede flagella. Poly-β-hydroxybutyrat er ikke indeholdt som en cellulær reserve (R.Y. Stanier, N.J. Palleroni & M. Doudoroff: The Aerobic Pseudomonas: A Taxonomic Study. J. Gen Microbiol. 43: 159-271, 1966). Ingen skede, stilk eller slim produceres.
Vækst egenskaber.
Kolonier på næringsagar og gærekstraktagar: Kraftig vækst.
0.5 - 1.5 mm i diameter efter 1 dag. Diffus, cirkulær og noget hævet. Glat og blød. Opak, hvidlig cremefarvet, senere lys brungulorange. Let viskos. Intet diffunderbart pigment.
Næringssubstrat og gærekstraktsubstrat: Kraftig vækst. Uklar, senere med sediment og lejlighedsvis hinde.
Gærekstrakt-agarstik: Vækst kun på overfladen. Ingen vækst under nogen.form for anaerobe betingelser.
Kemisk defineret uorganisk salt-medium: Moderat vækst ved tilsætning med glucose eller laktat som eneste carbonkilde.
Krav til vækstfaktor: Ingen.
Væksttemperatur: Begrænset vækst ved 4° C. Moderat til kraftig vækst ved 10-32° C. Sparsom vækst ved 37° C. Ingen vækst ved 41° C.
Virkning af mediets pH-værdi: Ingen vækst ved pH-værdi 4.0. Begrænset vækst ved pH-værdi 4.5 og pH-værdi 10.5-11.0. Moderat til god vækst ved pH-værdi 5.5-9.5.
142425 5
NaCl-effekt: Ingen vækst ved 12% NaCl. Begrænset vækst ved 6-9%. Moderat vækst ved 5% eller mindre.
De ovenfor beskrevne morfologiske og dyrkningsmæssige egenskaber ligner egenskaberne hos familien pseudomonadaceae.
Fysiologiske egenskaber.
Stamme D946-B83 producerer diffunderbart fluorescerende pigment i visse medier men ikke i andre, mens en kendt art af pseudomonas, nemlig Pseudomonas fluorescens viser kraftig fluorescens-produktion (Tabel I).
De fysiologiske og biokemiske egenskaber af stamme D946-B83 er vist i Tabel II. Organismens evne til at udnytte carbonhydrat og andre carbonkilder er vist i Tabel III sammenlignet med to kendte Pseudomonas-arter, nemlig PS. fluorescens og Ps. aeruginosa.
Taksonomi.
Stamme D946-B83 synes at tilhøre Pseudomonas-gruppen i betragtning af de ovenfor beskrevne morfologiske, vækstmæssige og fysiologiske egenskaber. I henhold til det taksonomiske system som er foreslået af Stanier et al. (R.Y. Stanier, N.J. Palleroni og M. Doudo-roff: The Aerobic Pseudomonads: A Taxonomic Study. J. Gen. Microbiol. 43: 159-271, 1966) for de aerobe pseudomonader, er stamme D946-B83 temmelig nær beslægtet med Pseudomonas fluorescens bortset fra dens negative æggeblomme-reaktion, negative udnyttelse af inositol og negative oxidase-produktion. Blandt de 13 arter af aerobe pseudomonader, som undersøgtes af Stanier, rapporteres kun pseudomonas maltophilia at udvise negativ oxidase-reaktion. Denne organisme er imidlertid helt forskellig fra stamme D946-B83 ved manglen på fluorescerende pigment, positivt methionin-krav, manglende vækst ved 4° C, negativ arginin-dihydrolase og anden substratudnyttelse. Stamme D946-B83 antages derfor at tilhøre en ny art af slægten pseudomonas.
Antibiotisk kompleks Bu-2183 produceres ved dyrkning af den hidtil ukendte Pseudoroonas-art kaldet Pseudomonas sp. stamme D946-B83, A.T.C.C. 31086, under submerse aerobe betingelser i et 6 142425 vandigt dyrkningsmedium. Organismen dyrkes i et næringsmedium indeholdende en assimilerbar carbonkilde, for eksempel et assimilerbart carbonbydrat. Eksempler på foretrukne carbonkilder omfatter glucose, fructose, mannose, glycerol og lignende. Næringsmediet bør også indeholde en assimilerbar nitrogenkilde som for eksempel fiskemel, soyabønnemel, peptoner etc. Uorganiske næringssalte kan også tilsættes dyrkningsmediet, og sådanne salte kan omfatte ethvert af de sædvanlige salte, der er i stand til at tilvejebringe natrium-, kalium-, ammonium-, calcium-, phosphat-, sulfat-, chlorid-, bromid-, nitrat-, carbonat-ioner og lignende ioner.
Fremstilling af Bu-2183 komplekset kan ske ved en hvilken som helst temperatur som kan bevirke tilfredsstillende vækst af organismen, for eksempel 10-32° C, og sker fortrinsvis ved en temperatur omkring 28-30° C. Sædvanligvis opnås optimal produktion på 3-5 dage. Det optimale pH-interval for mediet viser sig at være en pH-værdi på ca. 5.5-9.5 og mest fordelagtigt indstilles mediet på en pH-værdi på ca. 7. Ved tank-fermentering er det ønskeligt at fremstille et vegetativt inoculum i et næringssubstrat ved at pode substratkulturen med en skrå- eller jord-kultur eller en lyofiliseret kultur af organismen. Efter opnåelse af et aktivt inoculum på denne måde overføres det aseptisk til fermenterings-tankmediet.
En foretrukken fremgangsmåde til fremstilling af det antibiotiske Bu-2183 kompleks er følgende:
En skråagarkultur af Pseudomonas stamme D946-B83 i god vækst anvendtes til podning af et podemedium indeholdende 3% glucose, 2% fiskemel, 0.5% soyabønnemel, 0.2% pepton og 0.6% CaCO^, idet pH-værdien indstilledes på 7.0 før sterilisering. Podekulturen inkuberedes ved 28° C i 48 timer på et rotations-rysteapparat (250 opm) og 2 ml af væksten overførtes til 100 ml fermenteringsmedium i en 500 ml Erlenmeyer-kolbe, som indeholdt 2% glycerol, 2% linolie-frømel, 1% jordnøddemel, 2% fiskemel, 0.3% (NH^^SO^ og 0.5% CaCO^· Antibiotikum-produktionen nåede et maksimum efter 3-5 dages rystning ved 28° C. Den antibiotiske aktivitet i fermenteringssubstratet bestemtes ved en papirskive-agardiffusionsprøve under anvendelse af 7
U2Å2S
Bacillus subtilis PCI 219 som testorganisme. Stamme D946-B83 producerede 1.500 - 2.000 yg/ml af det antibiotiske kompleks ved ryste-kolbe-fermenteringsmetoden.
Når optimal substratstyrke var blevet opnået (som bestemt for eksempel ved den ovenfor nævnte undersøgelsesmetode) indstilledes substratet på en pH-værdi på ca. 2, hvorved det basiske vandopløselige antibiotiske kompleks skiltes fra myceliet og opløstes i det vandige fermenteringsmedium. Substratet filtreredes dernæst, fortrinsvis med filtreringshjælpemiddel, og filtratet indeholdende antibiotiket neutraliseredes til en pH-værdi på ca. 7. Det neutraliserede filtrat sendtes gennem en kationbytter-harpiks, fortrinsvis af "IRC-50 Amberiite"-typen på ammoniumform. Harpiksen udvaskedes dernæst med vand og fortyndet (N/50) NH4OH, og det antibiotiske kompleks elueredes fra harpiksen med et passende elueringsmiddel, for eksempel N/2 NH4OH. De aktive elueringsvæsker forenedes, koncentreredes i vakuum og inddampedes eller lyofiliseredes til Opnåelse af det rå antibiotiske Bu-2183 kompleks.
Det således opnåede rå faststof vistes ved tyndtlags kromatografi at indeholde mindst 3 aktive komponenter, som her kaldes ' Bu-2183 A, Ag og B samt mindst 2 inaktive komponenter der her kaldes Bu-2183 C og D. Bu-2183 komplekset kan adskilles i komponenterne Bu-2183 A, Ag B, C og D ved anvendelse af en kationbytter-harpiks, fortrinsvis en harpiks af "Amberlite CG-50"-typen på ammoniumform. Efter opløsning af komplekset i vand sættes dette til harpiksen, vaskes med vand og fortyndet (N/40) ammoniumhydroxid og elueres med et passende elueringsmiddel. Ammoniumhydroxid (N/20) har vist sig at tillade adskillelse af komponenter Bu-2183 A og B. Yderligere eluering af kolonnen med en mere koncentreret ammoniumhydroxid-opløsning, for eksempel (N/10), giver Bu-2183 C og D, der er ninhydrin-positive men biologisk inaktive. Til opnåelse af renset komponent Bu-2183 Ag er det sædvanligvis nødvendigt at foretage yderligere søjlekromatografi på Bu-2183 A fraktionen til adskillelse af komponenterne Bu-2183 Ag og Bu-2183 A. Fuldstændig adskillelse og rensning af hver komponent opnås ved gentagelse af den ovenfor 8 142425 beskrevne kromatografiske adskillelsesprocedure. Som vist i Tabel IV nedenfor viste to tyndtlags kromatografi-systemer her kaldet S-117 og S-122 sig at være egnede til differentiering af de 4 komponenter Bu-2183 A, B, C og D. Under den kromatografiske rensning af komponent Bu-2183 A som beskrevet nærmere i de følgende eksempler, fandtes en yderligere biologisk aktiv aminoglycosid komponent, som her kaldes Bu-2183 A2. Bu-2183 A2 kan skelnes fra komponent Bu-2183 A ved hjælp af tyndtlags kromatografi-systemerne S-117 og S-122 som vist nedenfor i Tabel V.
Karakteriserende data for antibiotiske Bu-2183 komponenter.
Bu-2183 A.
Det antibiotiske stof Bu-2183 A er en hvid amorf base, som er opløselig i vand, en smule opløselig i methanol og ethanol og praktisk taget uopløselig i n-butanol, acetone og andre sædvanlige organiske opløsningsmidler.
Antibiotikum Bu-2183 A er i stand til at danne salte med syrer, og fremstilling af farmaceutisk acceptable syreadditicnssalte af antibiotiket falder inden for opfindelsens rammer. Eksempler på egnede farmaceutisk acceptable syreadditionssalte omfatter de ikke-toksiske salte med organiske og uorganiske syrer som for eksempel saltsyre, svovlsyre, phosphorsyre, eddikesyre, stearinsyre, propionsyre, vinsyre, maleinsyre, benzosyre, ravsyre og lignende.
Komponenten Bu-2183 A giver positive reaktioner med ninhydrin- og anthron-reagenser men negative reaktioner med Toliens, Fehling og Sakaguchi reagenser.
2 X o
Den specifikke drejning for Bu-2183 A base er [ct]p = + 78.5 (c, 1.0, vand).
En prøve af komponent Bu-2183 A gav ved udfældning fra ethanol følgende analyse som .C2Hj.OH.H2O.
Analyse beregnet: C, 44.24; H, 8.52; N, 9.11; O, 38.13.
142425 9
Fundet: C, 44.25; H, 8.08; N, 9.11; 0 (ved forskel) 38.56.
Di-N-acetatet fra Bu-2183 A opnåedes som farveløse nåle, smeltepunkt 149-150° C. Det har en molekylevægt på 481 som bestemt ved osmometri og vistes ved analyse at være Ci9H35N30ii*H2°*
Analyse beregnet: C, 45.68; H, 7.47; N, 8.41; O, 38.44.
Fundet : C, 45.73; H, 7.49, N, 8.19; 0 (ved forske]) 38.59.
Bu-2183 A er svagt basisk og har titrerbare grupper med pKQ'-værdier på 6.90 og 9.40 i vand. Den omtrentlige molekylevægt for antibiotiket beregnet ud fra titreringsdata er 398.
Komponent Bu-2183 A udviser kun ende-absorption af ultraviolet lys. Ved presning i kaliumbromid har den et infrarødt spektrum i det væsentlige som vist i figur 1 med karakteristiske absorptionsbånd ved følgende bølgelængder i cm 1635 og 1570 (amid) og 1080 og 1020 (hydroxylgrupper). Ved opløsning i deuteriumoxid ved en koncentration på ca. 8%, er NMR-spektret for Bu-2183 A hydrochlorid-salt i det væsentlige som vist i figur 2. Spektret viser en anomer proton ved 6 5.17 ppm (IH, d, J = 3 Hz) og en propionylgruppe ved 6 1.12 (3H, t, J = 7.5 Hz) og 2.29 (2H, g, J = 7.5 Hz) ppm.
Strukturen af Bu-2183 A er bestemt at være
CH3CH2com^^ 0H
H° \
Tx\ ch2nh2
OH 7 CHOH
o—hu I
CHNH0 I 2
CHOH
CH2OH
Bu-2183 &2 ΙΟ 142425
Antibiotisk komponent Bu-2183 A2 er ligesom Bu-2183 A ovenfor en hvid amorf base, darer opløselig i vand, en smule opløselig i methanol og ethanol og praktisk taget uopløselig i N-butanol, acetone og andre sædvanlige organiske opløsningsmidler. Den er i stand til at danne salte med syrer, og fremstilling af farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af Bu-2183 basen falder inden for opfindelsens rammer. Komponent Bu-2183 A2 giver positive ninhydrin- og anthron-reaktioner og negative Tollens-, Fehling- og Sakaguchi-reaktioner.
Den specifikke drejning af Bu-2183 A2 base er [a]D2^ = + 79.1° (c, 0.43, H20).
En prøve af Bu-2183 A2 isoleret som carbonatsaltet vistes ved analyse at være C]_gH33W3°9· 1/2 H2C03·
Analyse beregneti C, 44.79; H, 7.75; N, 9.50; O, 37.96.
Fundet : C, 44.35; H, 7.83; N, 9.21; 0 (ved forskel) 38.61.
Komponent Bu-2183 A2 udviser kun ende-absorption af ultraviolet lys. Ved presning i KBr har den et infrarødt spektrum i det væsentlige som vist i figur 3. Ved opløsning i D20 ved en koncentration på ca. 6% er NMR-spektret af Bu-2183 A2 hydrochloridsalt i det væsentlige som vist i figur 4. Komponent Bu-2183 A2 kan skelnes fra Bu-2183 A og Bu-2183 B ved tilstedeværelsen af en n-butyrylgruppe i NMR-spektret ved δ 0.92 (3H, t), 1.63 (2H, sekstet) og 2.30 (2H, t) ppm i stedet for propionyl- eller acetyl-gruppen i komponenter A og B.
Strukturen af komponent Bu-2183 A2 er bestemt at være CH3(CH2)2CONH—k OH
ΝΛ ch2nh2
OH ] CHOH
O— CH I
CHNH„ I 2
CHOH
ch2oh
Bu-2183 B.
142425 11
Antibiotikum Bu-2183 B ligner i udseende og opløselighed meget komponenterne Bu-2183 A og A2 ved at være en hvid amorf base der er opløselig i vand, en smule opløselig i methanol og ethanol og praktisk taget uopløselig i n-butanol, acetone og andre sædvanlige organiske opløsningsmidler.
Antibiotikum B-2183 B er i stand til at danne salte med syrer, og fremstilling af farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af antibiotiket falder inden for opfindelsens rammer.
Komponent Bu-2183 B giver positiv reaktion med ninhydrin- og anthron-reagenser men negative reaktioner med Tollens, Fehling og Sakaguchi reagenser.
Den specifikke drejning af Bu-2183 B base er [a]D21 = + 85° (c, 1.0, vand).
En prøve af komponent Bu-2183 B gav ved fældning fra ethanol analyse som ci4H29N3°9*C2H5OH*H20·
Analyse beregnet: C, 42.95; H, 8.34; N, 9.36; O, 39.35.
Fundet: C, 42.69; H, 7.78; N, 8.86; 0(ved forskel) 40.67.
Di-N-acetatet af Bu-2183 B opnåedes som farveløse prismer, smeltepunkt 159-162° C. Det har en molekylevægt på 484 bestemt ved osmometri og viser analyse som c^gH33N3°ii*H20*
Analyse beregnet: C, 44.53; H, 7.27; N, 8.66; O, 39.54.
Fundet: C, 44.96; H, 7.44; N, 8.52; O (ved forskel) 39.08.
Bu-2183 B er svagt basisk og har titrerbare grupper med pK - CL · værdier på 7.15 og 9.35 i vand. Den omtrentlige molekylevægt af antibiotiket beregnet ud fra titreringsdata er 409.
Komponent Bu-2183 B udviser kun ende-absorption af ultraviolet lys. Presset i kaliumbromid har den et infrarødt spektrum i det væsentlige som vist i figur 5 med karakteristiske absorptionsbånd 12 142425 følgende bølgelængder i cm 1635 og 1570 (amid) og 1080 og 1020 (hydroxylgrupper). I opløsning i deuteriumoxid ved en koncentration på 10% er NMR-spektret af Bu-2183 B hydrochloridsaltet i det væsentlige som vist i figur 6. NMR-spektret viser at Bu-2183 B kan skelnes fra Bu-2183 A og A2 ved tilstedeværelsen af en acetylgruppe ved δ 2.02 ppm (3H, s,) i stedet for propionyl- eller n-butyryl-gruppen i henholdsvis A og A2.
Komponent Bu-2183 B har strukturen CH.CONH-w oh \Nl_o H0 ^ K\ ?H2m2
OH [ CHOH
0-CH
CHNH«
I 2 CHOH
i^OH
Karakteriserende data for mellemprodukt Bu-2183 D.
Den biologisk inaktive komponent Bu-2183 D er en hvid amorf base, som er opløselig i vand, en smule opløselig i methanol og ethanol og praktisk taget uopløselig i n-butanol, acetone og andre sædvanlige organiske opløsningsmidler.
Forbindelse Bu-2183 D er i stand til at danne salte med syrer, og fremstilling af sådanne syreadditionssalte af basen falder inden for opfindelsens rammer.
Komponent Bu-2183 D giver positive reaktioner med ninhydrin- og anthron-reagenser men negative reaktioner med Toliens, Fehling og Sakaguchi reagenser.
Den specifikke drejning af Bu-2183 D base er = + 72.5° (c, 1.0, vand).
142425 13
En prøve af komponent Bu-2183 D isoleret som carbonatsaltet' ' bestemtes ved analyse at være ci2H27N3°8‘H2C^3·
Analyse beregnet: C, 38.70; H, 7.25; N, 10.42; O, 43.63.
Fundet: C, 38.86; H, 6.93; N, 10.14; O (ved forskel), 44.07.
Bu-2183 D er svagt basisk og har 3 titrerbare grupper ved ρΚα-værdier på 6.95 (2 ækvivalenter) og 9.68 i vand.
Tri-N-acetatet af Bu-2183 D opnåedes5 som farveløse prismer, smeltepunkt 159-162° C. Dette salt bestemtes at være identisk med di-N-acetatet af Bu-2183 B.
Komponent Bu-2183 D udviser kun ende-absorption af ultraviolet lys. Presset i kaliumbromid har den et infrarødt spektrum i det væsentlige som vist i figur 7. Spektret viser den manglende tilstedeværelse af amidcarbonylbåndene, som er tilstede i de biologisk aktive komponenter Bu-2183 A, A2 og B. Ved opløsning i deuteriurfi-oxid ved en koncentration på 10% er NMR-spektret af Bu-2183 D hydrochloridsalt i det væsentlige som vist i figur 8. Strukturen af Bu-2183 D er blevet bestemt som NH2~V. /oh
OH [ CHOH
O—ώ
(!:hnh0 I 2 CHOH I
CH2OH
Strukturbestemmelse af Bu-2183 komponenter.
Mild, sur hydrolyse af Bu-2183 A og B (IN HCl/MeOH, 80° C, 3 timer) gav den samme desacyl-forbindelse C2.2H27N3°8' som var 14 142425 identisk med komponent Bu-2183 D opnået ved kromatografisk deling af det rå Bu-2183 kompleks. Total N-acylering af Bu-2183 D gav tri-N-acetat, ci8H33N3®il' ^er identificeredes som di-N-acetatet af komponent Bu-2183 B.
Sur hydrolyse af Bu-2183 B i et methanolisk hydrogenchlorid (mættet, tilbagesvalingstemperatur, 24 timer) gav en aglycon og en aminosukker sammen med komponent Bu-2183 D. Aglyconen isoleredes som det krystallinske sulfat, smeltepunkt 263-264° C, der ved analyse bestemtes at være C,EL JS-0.-ELSCL 2 . 6 16 2 4 2 4.
Analyse beregnet: C, 25.90, H, 6.52* N, 10.07; S, 11.52.
Fundet: C, 26.10, H, 6.47, N, 9.93, S, 11.29.
220 MHz NMR-spektret for N, 0- hexaacetatet sammen med massespektraldata opnået med N-acetyl-O-TMS-, N-acetyl.diisopropyliden-og hexa-N,O-acetylderivaterne af aglyconen tydede på en 1.4—diamino-2, .3, 5, 6-tetra-ol-struktur for aglycondelen.
Di-N-acetatet af aglyconen opnåedes som farveløse nåle, smeltepunkt 114-115° C og viste sig ved analyse at være C^^Q^Og.
Analyse beregnet: C, 45.45; H, 7.63; N, 10.60.
Fundet: C, 45.37; H, 7.97; N, 10.57.
Da en konfiguration af D-glucose-type måtte antages at være den mest sandsynlige for aglyconen, foretoges fremstilling af 1.4-diamino-l.4-dideoxy-D-sorbitol ud fra 4-amino-4-deoxy-D-glucose og produktet vistes ved tyndtlags kromatografisk og NMR analysen at være aglyconen.
Amino-sukkerdelen opnået i henhold til ovennævnte sure methano-lyse af komponent B rensedes ved "Amberlite CG-50"-kromatografering og adskiltes i a- og 3-former af methylglycosid, hvor a-formen var hovedprodukt. N-acylering af a-methyl-glycosidet gav farveløse prismer, smeltepunkt 185-186° C, der ved analyse viste sig at være C9H17N06· 142425 15
Analyse beregnet: C, 45.95; Η, 7.28; N, 5.95.
Fundet: C, 45.93; Η, 7.43; N, 5.88.
Massespektret for dette N-acetyl-derivat viste et maksimum ved m/e 204 (M-31) som tilskrives tabet af en glycosid methoxylgruppe fra molekylet. Den frie amino-sukkerforbindelse skal således have formlen C-H.-NO...
6 13 5 a- og β-formerne af methylglycosid identificeredes som henholdsvis methyl 4-amino-4-deoxy-a- og Ø-D-glucopyranosid ved hjælp af IR- og NMR-spektre for deres tetra-N,0-acetyl-derivater. IR-spektrene for autentiske prøver af disse sukkerforbindelser isoleret frsj.4-trehalosamin (J. Antibiotics, 27, 145, 1974) var i overensstemmelse med IR-spektrene for de eksperimentale prøver.
Sur hydrolyse af Bu-2183 D i 6N HCl (tilbagesvaling, 3 timer) gav den samme aglycon og amino-sukkerforbindelse som isoleret fra hydrolyzatet af Bu-2183 B.
Bu-2183 C opnået ved kromatografisk adskillelse af det rå Bu-2183 kompleks hydrolyseredes i methanol indeholdende IN HCl véd tilbagesvalingstemperatur i 3 timer. Aglycondelen var identisk med den i de andre komponenter af Bu-2183, og sukkerdelen identifies-1 redes som methyl D-glucosid ved tyndtlags kromatografi, NMR og gas kromatografi. Den molekylære formel for Bu-2183 C er derfor 1 C12H26N2°9*
Baseret på ovenstående data bestemtes strukturerne for Bu-2183 komponenterne at være følgende: R "“V. ν·0Η v—\ H0ΝΛ «Λ
OH I CHOH 1 I O—CH
(1hnh9 cIhoh
c!h2OH
Bu-2183 komponent _R_ 16 142425 A CjH CONH- B CH3CONH- A2 n-C^CONH- C H0- D nh2-
Antimikroblel aktivitet.
In vitro tests viser at komplekset Bu-2183 og de individuelle antibiotiske komponenter Bu-2183 A, A2 og B har et bredt spektrum af antibakteriel aktivitet. Det antibiotiske kompleks og de aktive komponenter er særlig værdifulde til at hæmme de fleste aminogly-cosid-resistente organismer. Komponent Bu-2183 A2 viser sig at være mere aktiv end Bu-2183 B men mindre aktiv end Bu-2183 A.
De minimale inhiberende koncentrationer (MIK) af Bu-2183 A og B bestemtes overfor en lang række forskellige bakterier ved agar-seriefortyndingsmetoden på nærings-agarplader. Et inocula-replike- rende organ ifølge Steers et al. anvendtes. Inokulumstørrelsen 4 indstilledes på 10 fortynding af natgammel kultur af testorganismerne. i hjerteinfusionssubstrat ("Difco"). Resultaterne er vist i Tabel VI sammen med resultaterne for kanamycin, der testedes sammenlignende som reference antibiotikum.
De egentlige aktiviteter af Bu-2183 A og B er moderate eller forholdsvis svage udtrykt ved MIK-værdier, idet komponent A er ca. 2-4 gange mere aktiv end B. De udviser imidlertid et bredt spektrum af antibakteriel aktivitet overfor Gram-positive og Gramnegative bakterier, herunder mange af de aminoglycosid-resistente organismer og pseudomonas stammer.
Tabel VII nedenfor viser minimale inhibitoriske koncentrationer af komponenter Bu-2183 A og A2 overfor et antal patogene organismer.
En prøve af Bu-2183 kompleks med en renhed på omtrentligt 30-40¾ viste sig at hæmme E. coli A20365 ved en koncentration på 142425 17 12.5 yg/ml, K. pneumoniae D-ll ved en koncentration på 12.5 yg/ml og Ps. aeruginosa A 9930 ved en koncentration på 25 yg/ml.
Virkning af medium-pH på MIK.
Virkningen af medium-pH-værdi på MIK -værdien af Bu-2183 A undersøgtes ved agar-seriefortyndingsmetoden under anvendelse af nærings-agarmedium med pH-værdi 6.0, 7.0, 8.0 og 9.0. Resultaterne som er vist i Tabel VIII viste, at aktiviteten af Bu-2183 A voksede ved basisk pH-værdi og faldt ved sur pH-værdi.
Virkning af medium.
Virkningen af medium på aktiviteten af Bu-2183 A og B bestemtes overfor 8 testorganismer. Medierne som teétedes var nærings-agar, hjerteinfusions-agar og Mueller-Hinton agar. Medium pH-værdien indstilledes på pH-værdi 8. Som vist i Tabel IX, forekom den største in vitro aktivitet når nærings-agar anvendtes som testmedium.
In vivo aktivitet og toksicitet.
Bu-2183 A og B vurderedes in vivo på eksperimentale infektioner i mus. De anvendte patogene bakterier var S. aureus Smith, E. coli NIHJ og Ps. aeruginosa A9930. Musene udsattes for en dosis på 100 x LDj-g-værdien af de patogene organismer i en 5% suspension af svinemavemucin. En enkelt subkutan behandling med antibiotiket foretoges straks efter bakterieangrebet (0 time), og efter et dobbelt dosisskema administreredes antibiotiket til tiden 0 og 3 timer efter angrebet. Grupper på 5 mus anvendtes for hvert dosisniveau, og dyrene iagttoges i 5 dage til bestemmelse af den gennemsnitlige beskyttende dosis (PD^-værdi) .
Resultaterne er vist i Tabel X. Bu-2183 A og B bevirkede in vivo aktivitet overfor alle 3 undersøgte infektioner.
*
Den akutte toksicitet af Bu-2183 A og B bestemtes i mus ad de subkutane og intravenøse veje. Musene iagttoges i 15 dage og de intravenøse (i.v.) og subkutane (s.c.) LDgg-værdier af komponent 18 142425
Bu-2183 A viste sig at være henholdsvis 2500 mg/kg og 1000 mg/kg. Komponent Bu-2183 B var langt mindre toksisk end Bu-2183 A, og ingen dødsfald forekom ved doser indtil 2000 mg/kg hverken i .v. eller s.c. under iagttagelsesperioden på 15 dage.
Anvendelighed af komponent Bu-2183 D.
Selvom komponent Bu-2183 D er biologisk inaktiv er den et værdifuldt mellemprodukt til semi-syntetisk fremstilling af de biologisk aktive komponenter Bu-2183 A, A^ og B. Således kan den fri aminogruppe i mellemproduktet Bu-2183 D (efter passende beskyttelse af andre reaktive funktionelle grupper) N-acyleres på i og for sig kendt måde til fremstilling (efter fjernelse af eventuelle beskyttende grupper) af N-propionyl-derivatet Bu-2183 A, N-acetyl-derivatet Bu-2183 B eller N-butyryl-derivatet Bu-2183 TABEL I.
Produktion af fluorescerende pigment.
Bu-2183 fremstiller Ps. fluorescens Medium D946-B83 _ NIHJ B254_ Gærekstrakt-agar - +
King's B medium + + 20% skummet mælkopløsning + + + +
Glutamatsubstrat + + + + 1A2425 19 Τ3 0) > 03 Ρ CJM tU <d
^ P CM Μ M
H — Φ W ® P
P <* P 03 Ρ P
(rt «. 01 P <— Ρ β
P >, β in P CM I
. £ β O Φ Ρ E 1-1
m φ φ 01 (UCMU O
oo Ό Φ fi 03 03 Ρ Φ V M
m u Ο ~ ~ 03 Φ β Ρ P -p &1 ® I (UCP p p O tn P 01 β 03 £ t> ο ε ρ ® ai ρ ρ υ β a E p - >i d< β β p i β β β Φ 5 ® S' 1/1 3.
m Ρ β β Ρ Μ ® Φ tn β · Cn
QrQ+ioai Ρ P tn pp P ° I
fljWHiJi a) 01 - H QlOP β'-' p mg OP op 03 β 03 m w p S PMH Μ Μ P U 03 Λ fN -Q.cn β lijildH Old) id ρ β 03 nj o eiddi p p ai > a) pro a p
Jj ii a k β β β ο £ ρβ op ω
m 0)Ό οι tdidHtøoiPPP ι ® X
Γ00Τ^Μ ρ Ρ a ^ Ρ β a £ !> οι Ρ ΟΡΡΟ COW β Ή . Μ Ρ β 3 ’ (rt pOlXP £ £ β Ρ Ρ Ρ $ Ρ Μ β m go <DQ!id<d0i2fti(d Ε £ ® β s. g MM tntnMMMOlflM Ο Ρ Cn 1 Φ κ ρ αι ηρρροολρ ρ ρ ρ ; μ .π £ φ α, Ό Q -Q 01 01 β Ρ I 01 03 β β Ο β Μ 01 ΡΡ££Ι£Ρ Λ I ^ β β β φβ> ρρ β β spid β ap’d Ί- ωφοαι οιαίβρ οι 336 - ™.
c >pcnp ΦΦββΡίτ>αΐβ £ 3 ® 6 φ βΡθθ) ιβΌΟΟβΟΟΟ « g m · ® β Η tn <ι ρ Μ Ρ Ο Ο ΡΡΟ «" ρ 3« ΗΦ TdOOl PPftftg >i& dP · 0¾ MUJ o >1 01 φ Φ Φ Φ Ε Ρ Φ OP £03 £φι g £ p Ε S a a β £ a ν φ Sg
H £ P O
mm —. c a> S Ρ Ρ Φ 03
S p 03 g P
^ X* t n Cn c
.i Ρ P O
0 ό a ρ ρ >ι a ο Η Φ 03 a ρ ρ Ό a © tn Μ Ρ β Μ X ΟΡ0)·03 υ Ρ β β Ρ 03 π\ i tn Φ Φ Ρ ν ρ ο Μ Ρ m β>>> >>>>> > tn tn οι ® β > “ Ο Ρ Ρ Ρ Ρ Ρ Ρ Ρ Ρ ^3^^2^3 ρ ρρρρ £ £ £ £ £ Ρ Ρ Ρ Μ β Ρ Ρ ni pppid ρ β β β β ρ Μ β Ο Ό β ρ ρ! V m ra Cn m tn Cn tn tn o3 β Q β 0 t oi 01 β oo® o®®®® S hi 3 £ 8 p! $ a a β a β β β β a -- tn p a a a
w! PS
>i h' μ <
φ X
03 β P p id O β S „ ^ ρ Ρ Ρ Φ E 2 φ ο p nj p ra i m Μ Φ ® £ Μ β ρ Ρ p Φ idnamrart poi ® ® ro
οι Ό >i <d ® ® O in E M
Φ p£ppm Όρ ρ E p
p K 00 ββ£-ββ P
O ΟΦΜΜΜΟΡ>ι£ C
β I Μ Ό Ό ® Ρ β Η “ T3 g«>,>,βPO&» Ρ 3 -μ>, ΟΡΛ£®ΛίΡΟ Μ Ρβι β 03 £ Μβ ΟβΡ Ο fi ΦΡ £ΡΦΦ01ΓΟ4ί!β Ρ ΜΡ Φ ΕηΌ ΟΡβιοΟΟβΡ 2C ® φ ΟΦΡΡΜΜΤ)® Φ βΜ Ρ cm®POP®aao-M β ο^ ® ρβαι>)ββ>ι h? 3 33 3 βρ βο μρρ ωρ a>i ρ pa ρ ρβΌ^-ΡΦΡΦΟ ο β £ 0 >1
CnP>i οι Ο W &> Ό ω ρ β β <uow >Hffi o os d 142426 20 co - r—1 C Η _ O ιβ I co W g i—I c - s +* o 3 0) P -P O) p tn -- tn <d m
S 3 n 3 Η O tn P
3 0 O 3 H O g O -P H 3 •h >1 is p 333a d'd
03 r—| ^ Η -P +) 3 C
<u tn i« 4J tr !) bi «1 3 si o\°- 3 3 o p +> +>
+! Η P o\° g +> 3 W
fi Η · 3 PH 6 -P
Old © g H O) +13 O P 'P
to 2 tn -p co o -ri P 3 3 3 co -p co (33+)¾ p 3 -p 03 3 3 03 3 (d H CO 3 O -P £5 3 o .Mes H 3 a +> 0( C g +t 03 3 03
-~ +> to ε 0( 6 ~ w -H 6 2+IO
+J 3 -p 3 +)P+)3+>6rø+> 6 (d s C -H +)+)+) p 3 3 3 -P 3 0) 3 (0 303333 0) P M ti ti »1 dl 6 Ή +) +) tn 3 P P P tr+)(fl+>3 <!>-&>, 03 u o3 p s -o +> +> h to c -p ε -o p h +> g) O CO CO -ri to Ό. +3 3 O CO 3 ^θ. 3 ε
1+1 3 3 +> ,Ο O +3 +1 3 CO +) Cfl+jP
^ > 33 3 -H co C co 3 -Η O -3 3 ri;
c - p to co co to 3 - P W O
rii co-pc-c om-pc-n-p^aj-p ” H 3 -P O P O 03 C CO O -Η 3(3)03+1 H OC-P dJ-P O -P -P 6 O H O O -ri &> o A co A +) P P g 3 +>03 c ,3 £ 0)00) 3 8J +5 -P X tt) O -ri H 05 0(«a ε c υ ω o 66 w m ril E-i tn c -ri c +)
rH
3 >
A -H
> >>> >>>> > >10 +> -Η -p -ri -ri -ri -r| -p -p -p -PI 3 c+) +) +) +> +)+)+)+> +) +>0 tn o -P 3 -P -P 3 3 -P -P 3 3+5 tt)
•ρω b^coco &i tr> to to &> tn +-) C
+10 0)00 tt)d)00 O O) o
Αί A C A 0( CCaOi 3 CO
3 P
tt) 0) I I
02 +) 3 H
C P >i
0) O X
S rH O
tn +5 +3
3 -P O M
a P 3 A 3 i t+i tn i - o 6 4h m h c c i 3 03 O 3 0) -P -P ¢5
3 -P3 +>+>+>+> 03nC
p C 3 CO 3 3 CQJC33C
m OC P C P H 06-HC>i-P
f o 03 -P +1 3 -P (0 +3 3 O N
•P >1 P -P X +) -P P +5 0 3
O 3-P tn+530 O +5 C O A >t C
-p +5C3 33+10(0) -p i+H 3 -P O +1 +1 +1 QJ.X +1 +5
+) ^ 303 p +3 3 3 3 P 0) -X 3 3 A
ω3 O 0) P S tn > _ Φ03 tt)P 0330) 0) (DCfl-PC-Ptn
Eh Ο-P to A C -P o to to tn S tn +) o ω o P 3 H+40+1 HH H g C 3 -P 3 A p O) 3 +> -P 3 tt) (1) 3 O -P g +) H C 3
+)+) +) -P A P P +> +> +) HCO-X+d-PP
-p-p +) C 3 +) +1 +> +> +> +3 +) p 3 £5 +5 >i PC >i O Οί -P ίΡίΡ tp 3Η3γ0·Ρ0(3
+) fil cwcc c tn 3 P
p 03 S 330303 03 tn Q( P
a d<3 q o d d d fea to a 142425 21 1) R. Y. Stanier, N. J. Palleroni & M. Doudoroff: The Aerobic Pseudomonads: A Taxonomic Study. J. Gen. Microbiol. 43: 159-271, 1966.
2) Μ. E. Rhodes: The Characterization Of Pseudomonas Fluorescens.
J. Gen. Microbiol. 21: 221-263, 1959.
3) H. Iizuka & K. Komagata: An Attempt At Grouping Of The Genus Pseudomonas. J. Gen. Appl. Microbiol. 9: 73-82, 1963.
4) H. Iizuka & K. Komagata: Taxonomy Of Genus Pseudomonas With Special Reference To Their Modes Of Metabolism Of Carbon Compounds. J. Gen. Appl. Microbiol. 9: 83-95, 1963 5) V. B. D. Skerman: Abstracts of Microbiological Methods.
Wiley-Interscience, New York, London, Sydney og Toronto, P. 364, 1969.
TABEL III
22 U2425
Udnyttelse af carbonkilder
Stamme Ps. fluorescens Ps. aeruginosa Substrat D946-B83 NIHJ B254_ ATCC 19660
Glycerol + + + L-arabinose + + D-xylose + + L-rhamnose - D-fructose + + + D-galactose + + D-glucose + + + D-mannose + + D-fucose - trehalose + + cellobiose - - maltose - - saccharose - lactose - - raffinose - inositol + D-mannitol + + + D-sorbitol - + dulcitol - geraniol - - + stivelse - - cellulose - inulin - salicin - - acetat + + + propionat + + + (3-OH-butyrat + + + TABEL III (fortsat) 142425 23
Stamme Ps. fluorescens Ps. aeruginosa Substrat D946-B83 NIHJ B254_ ATCC 19660 2-ketogluconat + + + succinat + + + maleat - glycollat - DL-lactat + + + v pelargonat + + + adipat - + p-OH-benzoat + + + m-OH-benzoat - - methanol - + ethanol -- + n-propanol - + phenol - - - cresol - - + · '· monoethanolamin monoethylamin - - diethylamin triethylamin - - testosteron - acetamid - - + arginin + + + valin + + + norleucin - - D-tryptophan - - (3-aminovalerat + - + betain + + + putrescin + + + 142425 24
Basisk medium indeholder pr. liter: 40 ml ΙΜ-phosphat puffer (pH 6.8); 1 g, (NH4)2S04; 20 ml Hutner's vitaminfrie mineralsaltopløsning.
TABEL IV
Tyndtlags-kromatografi af Bu-2183 komponenter
Opløsningsmiddel- _Rf *_
System Plade system_ A B__C__D
S-117 silicagel CHCl3-CH3OH-28%NH4OH 0.39 0.30 0.21 0.23 (1:3:2) S-122 silicagel CHC13-CH30H-2N NH4OH- CH3COOH 0.38 0.27 0.15 0.03 (20:65:40:5)
TABEL V
Tyndtlags-kromatografi af Bu-2183 komponenter A og A2
Opløsningsmiddel- Rf X_
System Plade__system_ A A2 S-117 silicagel CHCl3-CH3OH-28%NH4OH 0.49 0.57 (1:3:2) S-122 silicagel CHCl3-CH3OH-2N NH4OH- CH3COOH 0.39 0.48 (20:65:40:5) påvisning: ninhydrin-reagens
TABEL VI
25 142425
Antibakterielle spektre af Bu-2183 A og B
_MIK (yg/ml)__
Kode-nr. Test organisme Bu-2183A BU-2183B Kanamycin A
Sa-2 S. aureus Smith 12.5 50 0.2
Sa-3 " " D193 25 25 0.4
Sa-4 " " D133 25 >100 0.8
Sa-9 " " D137 100 >100 1.6
Sa-10 " .: A20239 25 100 25
Ec-1 E. coli NIHJ 12.5 50 0.8
Ec-2 " " PO 1495 25 50 0.4
Ec-5 " ML 1630 12.5 50 100
Ec-9 " " NR 79/W677 25 100 25
Ec-10 " " JR 35/C600 6.3 12.5 12.5
Ec-49 " " A20107 12.5 50 25
Ec-53 " " JR 66/W677 6.3 25 25
Ec-55 " *' R 5 25 100 6.3
Ec-62 " " A20895 12.5 50 0.8
Ec-72 " " A20732 12.5 25 12.5
El-2 Ent. cloacae A20364 25 50 100
El-12 " " A21006 25 100 50
Pv-1 Pr. vulgaris A9436 12.5 50 0.2
Pg-2 Pr. morganii A20031 25 50 0.8
Pm-l. Pr. tnirabilis A9554 12.5 25 0.4
Ps-2 Prov. stuartli A20894 >100 >100 0.8
Kp-1 K. pneumoniae Dll 3.1 12.5 0.2 Κρ-8 " " Type 22-3038 25 100 100
Sm-1 Ser, marcescens A20019 >100 >100 0.8
Sm-16 ” ” A21247 100 >i00 >100
Pa-3 Ps. aeruginosa A9930 12.5 25 6.3
Pa-12 " " A20653 25 100 >100
Pa-16 " " # 130 25 100 25
Pa-21 " " A20601 25 50 12.5
Pa-24 " " A20896 25 100 >100
Pa-27 " " GN 315 25 50 100
Px-10 Pseudomonas sp. A20621 >100 >100 12.5 26 142425
TABEL VII
Antibakterielle spektre af Bu-2183 A og MIK (pq/ml)_
Kode-nr. Test organisme BU-2183A Bu-2183
Sa-2 J3. aureus Smith 25 25
Sa-3 " " D193 25 50
Sa-4 " " D133 50 100
Sa-9 " " D137 50 100
Sa-10 ” " A20239 50 100
Ec-1 É. coli NIHJ 25 100
Ec-2 " " P01495 25 >100
Ec-5 " " ML1630 25 50
Ec-9 " " NR79/W677 12.5 25
Ec-10 " " JR35/C600 6.3 6.3
Ec-49 " " A20107 25 50
Ec-53 " " JR66/W677 25 25
Ec-55 " " R5 6.3 25
Ec-62 " " A20895 25 50
Ec-72 " " A20732 12.5 25
El-2 Ent. cloacae A20364 25 100
El-12 " " A21006 25 100
Pv-1 Pr. vulgaris A9436 25 100
Pg-2 Pr. morganii A20031 25 50
Pm-1 Pr. mirabilis A9554 25 50
Ps-2 Prov. stuartii A20894 >100 >100
Kp-1 K. pneumoniae Dll 6.3 12.5
Kp-8 " " Type 22-3028 25 100
Sm-1 Ser. marcescens A20019 >100 >100
Sm-16 " " A21247 >100 >100 pa-3 Ps. aeruginosa A9930 12.5 50
Pa-12 " " A20653 50 >100
Pa-16 " " # 130 25 100
Pa-21 " " A20601 50 >100
Pa-24 " " A20896 50 >100
Pa-27 " " GN315 25 100
Px-10 Pseudomonas S£.A20621 >100 >100
TABEL VIII
142425 27
Virkning af medium-pH-værdi på MIK af Bu-2183 A.
Kode-nr. Stamme pH 6 pH 7 pH 8 pH 9
Ec-1 E. coli NIHJ >50 50 25 12.5
Kp-1 K. pneumoniae D 11 12.5 12.5 12.5 3.1
Pa-1 Ps. aeruginosa D 15 >50 50 25 12.5
Sa-10 S. aureus Smith >50 50 50 50
Bs-1 B. subtilis PCI 219 50 6.3 6.3 6.3
TABEL IX
Virkning af medium p& aktivitet af Bu-2183 A og B.
Kode-nr. Stamme Bu-2183 A Bu-2183 B
NA1 MHA HIA MHA
Ec-1 E. coli NIHJ 12.5 50 100 50 >100 >100
Kp-1 K. pneumoniae Dll 3.1 12.5 25 12.5 50 50
El-2 Ent. cloacae A20364 25 50 100 50 >100 >100
Pv-1 Ps. vulgaris A9436 12.5 50 100 50 >100 >100
Pm-1 Ps. mirabilis A9554 12.5 50 50 25 >100 100
Pa-3 Ps. aeruginosa A9930 12.5 25 50 25 100 >100
Sa-2 S. aureus Smith 12.5 50 50 50 100 >100
Sa-10 S. aureus A20239 25 100 >100 100 >100 >100
Na: Nærings-agar HIA: Hjerteinfusions-agar MHA: Mueller-Hinton agar
TABEL X
142425 28
In Vivo-aktivitet af Bu-2183 A og B.
PD50-værdi i mg/kg (enkelt dosis)
Infektionsorganisme Bu-2183 A Bu-2183 B
S. aureus Smith 42 100 E. coli NIHJ 92 135
Ps. aeruginosa Α993Ό 230 540 PD5Q-værdi i mg/kg (dobbel dosis)
Infektionsorganisme Bu-2183 A
S. aureus Smith 36 x 2 E. coli NIHJ 45 x 2
Ps. aeruginosa A9930 80 x 2.
De følgende eksempler belyser opfindelsen nærmere. "Amberlite IRC-50" og "CG-50" som er omtalt foran og i eksemplerne er handelsnavne for svagt sure kationbytter-harpikser af en carboxylisk-poly-methacrylisk type.
EKSEMPEL 1.
(Fermentering i tank).
Agar-skråkultur af pseudomonas sp. stamme D946-B83 anvendtes til podning af 100 ml podemedium nr. 83B (3% glucose, 2% fiskemel, 0.5% soyabønnemel, 0.2% pepton og 0.6% CaCO^) i 500 ml Erlenmeyer-kolber. Kolberne inkuberedes ved 28° C i 3 dage på et rotationsrysteapparat (250 opm), og 1 liter af podekulturen anvendtes til podning af 300 1 fermenteringsmedium nr. 100 F (2% glycerin, 1% Pharmamedia", 2% fiskemel, 2% linoliefrømel, 0.3% (NH4)2SC>4, 0.6% CaCO^)· Tanken kørtes ved 30° C med omrøring ved 140 opm og en 29 162425 gennemluftningshastighed på 200 1/minut. Substratstyrken bestemtes ved papirskive-agarplademetoden under anvendelse af B. subtilis PCI 219 som prøveorganisme og Bu-2183 A røm prøvestandard. Følgende resultater opnåedes:
Tid (timer) pH-værdi af substrat Styrke (yg/ml) 0 6.7 0 20 7.5 200 30 7.8 400 40 7.9 1.600 50 7.9 1.650 60 8.1 1.700 64 8.1 1.800.
(Ekstraktion).
Det vundne substrat filtreredes med filtreringshjælpemiddel ved pH-værdi 2. Filtratet (19 1) som indeholdt ca. 30 g styrke af Bu-2183 A indstilledes på pH-værdi 7 og omrørtes med 3 1 "Amberlite IRC-50" (NH*-form). Harpiksen fraskiltes, vaskedes i rækkefølge med 10 1 vand og 5 1 N/50 NH^OH og omrørtes dernæst med to 4 liter portioner N/2 NH^OH til eluering af den biologiske aktivitet. De aktive eluater forenedes, koncentreredes i vakuum og lyofiliseredes dernæst til frembringelse af 18.6 g hvidt, fast stof (ca. 700 yg/mg). Dette faste stof opløstes i vand og sattes til en kolonne af "Amberlite CG-50" (NH*-form, 400 ml). Kolonnen vaskedes i rækkefølge med 2.2 1 vand og 3 1 N/40 NH^OH og udvikledes dernæst med N/20 NH^OH. Elua-terne opsamledes fraktioneret og undersøgtes ved biologisk styrkebestemmelse på B. subtilis-pladen og endvidere ved tyndtlags kromatografi (system S-117, ninhydrin). Passende fraktioner forenedes, koncentreredes i vakuum og lyofiliseredes til opnåelse af nedenstående faste stoffer.
142425 30 N/20 NH.OH Fast vægt Bu-2183 komponenter 4 _ (rå)_ 0 - 1.3 liter - ingen aktivitet
-2.5- 2.7 g A
-4.4 - 7.8- A + B (mindre)
- 5.2 - 3.3 B
EKSEMPEL 2.
(Fremstilling af Bu-2183 A)
Den i Eksempel 2 opnåede rå prøve af Bu-2183 A (2.7 g) opløstes i vand og sattes til en kolonne af "Amberlite CG-50" (NH^, 80 ml). Kolonnen elueredes med N/20 NH^OH og hver 15 ml portion af eluatet opsamledes ved hjælp af en fraktionsopsamler. Fraktionerne undersøgtes ved tyndtlags kromatografi-ninhydrin og endvidere ved biologisk styrkebestemmelse, og passende fraktioner forenedes, koncentreredes i vakuum og lyofiliseredes til opnåelse af følgende faste stoffer.
Fraktion nr. Fast vægt Tyndtlags kromatografi 28 - 53 801 mg A + urenheder
54 - 72 1.597 mg A
73 - 95 189 mg A+B (mindre)
Det rene produkt af Bu-2183 A bestemtes ved analyse at være C15H31N3°9*1//2 H2C03:
Analyse beregnet: C, 43.45; H, 7.53; N, 9.81.
Fundet: C, 43.22; H, 7.52; N, 9.49.
Forbindelsens IR- og NMR-spektre er vist i henholdsvis figur 1 og 2. En sammenfatning af NMR-dataene er givet nedenfor: 31 142426
Kemisk skifteværdi Koblingskonstant Relativ _(6, ppm)_ (J, Hz)_ intensitet
1.12 (t) 7.5 3H
2.29 (q) 7.5 2H
3.1-3.35 (m) 2H
3.5-4.3 (m) 12H
5.17 (d) 3.0 IH
s = singlet, d = dublet, t = triplet, q = kvartet, m = multiplet.
EKSEMPEL 3.
(Fremstilling af Bu-2183 B)
Den i Eksempel 2 opnåede rå prøve af Bu-2183 B (3.3 g) opløstes i vand og sattes til en kolonne af "Amberlite CG-50" (NH^, 130 ml). Kolonnen elueredes med N/20 NH4OH og hver 15 ml portion af eluatet opsamledes ved hjælp af en fraktionsops'Mmler. Fraktionerne undersøgtes ved tyndtlags kromatografi-ninhydrin og endvidere ved biologisk styrkebestemmelse, og passende fraktioner forenedes, koncentreredes i vakuum c?g lyofiliseredes til opnåelse af følgende faste stoffer.
Fraktion nr. Fast vægt Tyndtlags kromatografi 1-59 86 mg B+ urenheder
60 - 151 2.792 mg B
152 - 160 356 mg B + urenheder (mindre)
Det rene produkt af Bu-2183 B bestemtes ved analyse at være C14H29N3V1/2 H2C03:
Analyse beregnet: C, 42.02; H, 7.30; N, 10.14.
Fundet: C, 41.92; H, 7.43; N, 9.93.
Forbindelsens IR- og NMR-spektre er vist i henholdsvis figur 5 og 6. En sammenfatning af NMR-dataene er givet nedenfor: 142425 32
Kemisk skifteværdi Koblingskonstant Relativ _(5, ppm) _(J, Hz)_ intensitet
2.02 (s) 3H
3.1-3.2 (m) 2H
3.6-4.3 (m) 12H
5.17 (d) 3.0 IH
s = singlet, d - dublet, m = multiplet.
EKSEMPEL 4·.
(Fremstilling af Bu-2183 C og Bu-2183 D)
Den i Eksempel 2 anvendte kolonne udvikledes yderligere med 1.4 1 N/20 NH^OH, med hvilket der ikke elueredes mere biologisk aktivt materiale. Dernæst udvikledes kolonnen med N/10 NH^OH og eluaterne Tandersøgtes ved tyndtlags-kromatografering sprøjtet med ninhydrin-reagens. Passende fraktioner forenedes, koncentreredes i vakuum og lyofiliseredes til opnåelse af følgende faste stoffer.
N/10 NH^OH Fast vægt Identificering 0 - . 300 ml ---
301 - 1.200 ml 1.638 mg Bu-2183 C
1.201 - 1.900 ml ---
1.901 - 2.400 ml 526 mg Bu-2183 D
EKSEMPEL 5.
Gennem den i Eksempel 3 beskrevne rensningsproces af komponent A isoleredes en ny aktiv komponent fra forløbs-fraktioner og bestemtes som komponent Bu-2183 A2. Den differentieredes fra komponent A ved tyndtlags-kromatografi-systemerne S-117 og S-122 som vist nedenfor:
Bu-2183 A Bu-2183 A2 S-117 Rf =0.49 Rf = 0.57 S-122 Rf = 0.39 Rf = 0.48 142425 33 . ;i , IR- og NMR-spektrene af komponent Bu-2183 A2 er vist i henholdsvis figur 3 og 4. En sammenfatning af NMR-dataene er givet nedenfor:
Kemisk akifteværdi Koblingskonstant Relativ _(6, ppm)_ _(J, Hz)_ intensitet
0.92 (t) 7.5 3H
1.63 (sekstet) 7.5 2H
2.30 (t) 7.5 2H
3.1-3.5 (m) 2H
3.6-4.4 (m) 12H
5.27 (d) 3.0 IH
d = dublet, t = triplet, m = multiplet.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK254479A DK254479A (da) | 1974-12-12 | 1979-06-18 | Mellemprodukt til fremstilling af et aminoglycosid-kompleks |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US53213774A | 1974-12-12 | 1974-12-12 | |
| US53213774 | 1974-12-12 | ||
| US05/627,391 US4012576A (en) | 1974-12-12 | 1975-10-30 | Antibiotic complex Bu 2183 |
| US62739175 | 1975-10-30 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK564275A DK564275A (da) | 1976-06-13 |
| DK142425B true DK142425B (da) | 1980-10-27 |
| DK142425C DK142425C (da) | 1981-03-23 |
Family
ID=27063753
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK564275AA DK142425B (da) | 1974-12-12 | 1975-12-11 | Fremgangsmåde til fremstilling af et antibiotisk aktivt aminoglycosidkompleks kaldet Bu 2183, dets komponenter eller syreadditionssalte deraf. |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4012576A (da) |
| JP (1) | JPS5343589B2 (da) |
| AU (1) | AU497760B2 (da) |
| CA (1) | CA1060820A (da) |
| CH (1) | CH619733A5 (da) |
| DE (1) | DE2556043C3 (da) |
| DK (1) | DK142425B (da) |
| ES (1) | ES443463A1 (da) |
| FI (1) | FI53838C (da) |
| FR (1) | FR2293942A1 (da) |
| GB (1) | GB1525977A (da) |
| GR (1) | GR58535B (da) |
| HU (1) | HU174539B (da) |
| IL (1) | IL48635A (da) |
| LU (1) | LU74002A1 (da) |
| NL (1) | NL7514507A (da) |
| NO (2) | NO144574C (da) |
| PH (1) | PH17247A (da) |
| SE (1) | SE431874B (da) |
| YU (1) | YU37360B (da) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| USRE29903E (en) * | 1975-03-19 | 1979-02-06 | American Cyanamid Company | Antibacterial antibiotics AM31α, AM31β and AM31γ |
| GB1549167A (en) * | 1975-04-11 | 1979-08-01 | Takeda Chemical Industries Ltd | Method for producing aminoglycosidec anitibiotics |
| US7794713B2 (en) | 2004-04-07 | 2010-09-14 | Lpath, Inc. | Compositions and methods for the treatment and prevention of hyperproliferative diseases |
| US20090074720A1 (en) * | 2005-10-28 | 2009-03-19 | Sabbadini Roger A | Methods for decreasing immune response and treating immune conditions |
| US20080213274A1 (en) * | 2005-10-28 | 2008-09-04 | Sabbadini Roger A | Compositions and methods for the treatment and prevention of fibrotic, inflammatory, and neovascularization conditions of the eye |
| US7862812B2 (en) * | 2006-05-31 | 2011-01-04 | Lpath, Inc. | Methods for decreasing immune response and treating immune conditions |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3647779A (en) * | 1970-05-01 | 1972-03-07 | Bristol Myers Co | Kasugamycin substituted antibacterial agents |
| US3795668A (en) * | 1971-11-15 | 1974-03-05 | Parke Davis & Co | Polyamine compounds and methods for their production |
-
1975
- 1975-10-30 US US05/627,391 patent/US4012576A/en not_active Expired - Lifetime
- 1975-12-09 IL IL48635A patent/IL48635A/xx unknown
- 1975-12-10 YU YU3124/75A patent/YU37360B/xx unknown
- 1975-12-10 FI FI753476A patent/FI53838C/fi not_active IP Right Cessation
- 1975-12-10 PH PH17857A patent/PH17247A/en unknown
- 1975-12-10 AU AU87429/75A patent/AU497760B2/en not_active Expired
- 1975-12-11 FR FR7538009A patent/FR2293942A1/fr active Granted
- 1975-12-11 DK DK564275AA patent/DK142425B/da not_active IP Right Cessation
- 1975-12-11 GR GR49587A patent/GR58535B/el unknown
- 1975-12-11 SE SE7514033A patent/SE431874B/xx unknown
- 1975-12-11 NO NO754213A patent/NO144574C/no unknown
- 1975-12-11 GB GB50924/75A patent/GB1525977A/en not_active Expired
- 1975-12-11 CA CA241,523A patent/CA1060820A/en not_active Expired
- 1975-12-12 LU LU74002A patent/LU74002A1/xx unknown
- 1975-12-12 JP JP14738775A patent/JPS5343589B2/ja not_active Expired
- 1975-12-12 CH CH1617375A patent/CH619733A5/de not_active IP Right Cessation
- 1975-12-12 HU HU75BI533A patent/HU174539B/hu unknown
- 1975-12-12 NL NL7514507A patent/NL7514507A/xx not_active Application Discontinuation
- 1975-12-12 DE DE2556043A patent/DE2556043C3/de not_active Expired
- 1975-12-12 ES ES443463A patent/ES443463A1/es not_active Expired
-
1981
- 1981-01-30 NO NO810331A patent/NO146673C/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO144574C (no) | 1981-09-23 |
| HU174539B (hu) | 1980-02-28 |
| GB1525977A (en) | 1978-09-27 |
| NO754213L (da) | 1976-06-15 |
| SE7514033L (sv) | 1976-06-14 |
| FI753476A7 (da) | 1976-06-13 |
| FR2293942A1 (fr) | 1976-07-09 |
| DE2556043C3 (de) | 1978-10-19 |
| AU8742975A (en) | 1977-06-16 |
| JPS5343589B2 (da) | 1978-11-21 |
| DE2556043B2 (de) | 1978-02-02 |
| FR2293942B1 (da) | 1978-07-28 |
| NO144574B (no) | 1981-06-15 |
| GR58535B (en) | 1977-10-31 |
| LU74002A1 (da) | 1977-07-01 |
| NL7514507A (nl) | 1976-06-15 |
| YU312475A (en) | 1983-04-27 |
| DK564275A (da) | 1976-06-13 |
| FI53838C (fi) | 1978-08-10 |
| JPS5191389A (da) | 1976-08-10 |
| FI53838B (fi) | 1978-05-02 |
| CA1060820A (en) | 1979-08-21 |
| PH17247A (en) | 1984-07-03 |
| AU497760B2 (en) | 1979-01-04 |
| NO810331L (no) | 1976-06-15 |
| CH619733A5 (da) | 1980-10-15 |
| NO146673C (no) | 1982-11-17 |
| US4012576A (en) | 1977-03-15 |
| IL48635A0 (en) | 1976-02-29 |
| YU37360B (en) | 1984-08-31 |
| NO146673B (no) | 1982-08-09 |
| SE431874B (sv) | 1984-03-05 |
| DE2556043A1 (de) | 1976-07-08 |
| ES443463A1 (es) | 1977-08-16 |
| IL48635A (en) | 1978-07-31 |
| DK142425C (da) | 1981-03-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4970198A (en) | Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex) | |
| US4743689A (en) | Antibiotic derivative of adenine | |
| US5108912A (en) | Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex) | |
| JPH0689017B2 (ja) | Ｂｂｍ−２４７８ｂ抗生物質 | |
| DK142425B (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af et antibiotisk aktivt aminoglycosidkompleks kaldet Bu 2183, dets komponenter eller syreadditionssalte deraf. | |
| NO159119B (no) | Virvelluftrenser med duggeliminator. | |
| DK168388B1 (da) | Forbindelser i antibiotikumkompleks LL-E33288, lægemidler indeholdende disse forbindelser og mikroorganismekultur til brug ved deres fremstilling | |
| CA1073386A (en) | Glycopeptide antibiotic complex from streptoalloteichus | |
| US4011390A (en) | Semi-synthetic aminocyclitol aminoglycoside antibiotics and methods for the preparation thereof | |
| US3987029A (en) | Antibacterial antibiotics AM31α, AM31β and AM31γ | |
| US4108725A (en) | Antibiotic complex | |
| DK145893B (da) | Fortimiciner til anvendelse som desinfektionsmidler og fremgangsmaade til fremstilling af disse fortimiciner kaldet fortimicin ke og d | |
| SU833166A3 (ru) | "Способ получени агликона антибиотческого а-35512 фактора в4 | |
| NO146141B (no) | Fremgangsmaate til fremstilling av aminocyklitolantibiotika | |
| US5344823A (en) | Antitumor antibiotic BMY-41219 | |
| US4108724A (en) | Method for preparing antibiotic P-2563 using Pseudomonas fluorescens | |
| US4049498A (en) | Methods for the preparation of semi-synthetic aminocyclitol aminoglycoside antibiotics | |
| US4112071A (en) | Antibiotic complex | |
| NO141343B (no) | Fremgangsmaate till fremstilling av aminoglykosid-antibiotika, betegnet xk-88-1,-2, og -5 (seldomyciner). | |
| IE42207B1 (en) | Aminoglyoside antibiotic complex | |
| US4260683A (en) | Process for producing antibacterial agents | |
| US3676490A (en) | New antibiotic | |
| JPS5813156B2 (ja) | シンコウセイブツシツ ｓｆ−１８５４ ブツシツノセイゾウホウ | |
| EP0381124B1 (en) | Novel antibiotic nk130119, process for production of the same and application of the same | |
| US4298599A (en) | Novel antibiotic BN-235 substance, and process for the production thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |