DK141728B

DK141728B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af penicilliner eller ugifte pharmaceutisk acceptable salte deraf

Info

Publication number: DK141728B
Application number: DK665773AA
Authority: DK
Inventors: G Schmidt; K G Metzger
Original assignee: Bayer Ag
Priority date: 1972-12-08
Filing date: 1973-12-07
Publication date: 1980-06-02
Also published as: DK141728C; AR207749A1; SU515458A3; FR2209548A1; JPS4986521A; HU167710B; JPS5747679B2; ES421281A1; NL7316679A; US3931153A; BE808374A; DD112652A5; LU68952A1; IE38615L; DE2260118C2; ZA739331B; GB1409689A; RO65788A; IL43757A; CS187388B2

Description

(S) \R^/ OD FREMLÆGGELSESSKRIFT 141728 DANMARK (51) lnt Cl 3 c 07 B A99/68 §(21) Ansøgning nr. 6657/75 (22) Indleveret den 7· deC. 1975 (23) Løbedag 7· deC. 1975

(44) Ansøgningen fremlagt og . aPD

fremlæggelsesskriftet offentliggjort den 2 * JUH· ly 0*J

DIREKTORATET FOR

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (3°> Prioritet begæret fra den

8. dec. 1972, 2260118, DE 19· jun. 1975, 2260118, DE

(71) BAYER AKTIENGESELLSCHAFT, Leverkusen, DE, <72) Opfinder: Gunter Schmidt, Bismarckstrasse 79a Wuppertal-1, DE: Karl Georg Metzger, PaElkestrasse 5, Wuppertal-1, DE.

(74) Fuldmægtig under sagens behandling;

Ingeniørfirmaet Budde, Schou & Go. _______________ (54) Analogifremgangsmåde til fremstilling af penicilliner eller ugifti= ge, pharmaceutisk acceptable salte deraf.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte penicilliner eller ugiftige, pharmaceutisk acceptable salte deraf som lægemidler i human- og veterinærmedicinen, især ved bakterieinfektioner af akut eller kronisk art. Penicillinerne har den almene formel H1 f /|\ -B-CO-NH-CH-CO-NH c CH, XJ x ^ X/ 3 A-NH^— * -f \ (I) N CH3 / - \

" COOH

hvori R·*" betyder hydrogen, halogen, methyl, hydroxyl, nitro eller 141728 2 A'-NH, hvor A' betyder formyl eller cycloalkylcarbonyl med 3 eller 4 carbonatomer i cycloalkylgruppen, A betyder

0 S

3 " 4 " R -C- eller R -C- 2 hvori R betyder hydrogen, C, . alkyl eller arylsulfenyl, og grup-2 . x 4 pen R -NH- er i p-stilling til substituenten B, 3 R betyder hydrogen, C^_^alkyl substitueret med azido, methoxy, cyclopentyl, cyclopentenyl, cyclohexyl eller bicyclo[2.2.1]heptan--yl, eventuelt med hydroxy substitueret cycloalkyl med 3-7 carbonatomer; cyclohexenyl eller cycloheptenyl; phenyl, der eventuelt er substitueret én eller flere gange med ens eller forskellige sub-stituenter valgt blandt methyl, methoxy, halogen, nitro, trifluor-methyl, azido, amino, methylsulfonyl, methylendioxy og ureido, og R kan endvidere betyde 2-phenyl-ethen-l-yl, 2-(trimethoxyphenyl)--ethen-l-yl, thienyl, amino, methylamino, phenylamino eller fluor-phenylamino, 4 R betyder C-^_^alkylamino, B betyder en enkeltbinding eller -CHj-r -S-CI^-, -CH=CH- eller -co-nh-ch2-, E betyder phenyl eller hydroxyphenyl, og det med * betegnede carbon-atom betyder et asymmetrisk carbonatom, hvilke penicilliner - med hensyn til chiralitetscentret *C - kan foreligge i de to mulige di-astereomere med R- eller S-konfiguration eller som blanding deraf.

Fra DE offentliggørelsesskrift nr. 2.050.087 er det kendt at der kan fremstilles 6-(a-benzoylamino)-acetamidopenicillansyrer, der i 3- eller 4-stillingen i benzoylgruppen bærer en af carbon-syre afledt substituent med formlen 0

R-X-C-X

hvor X betyder 0 eller NH.

Fra beskrivelsen til US-patent nr. 3.268.513 kendes endvidere med penicillinerne med den almene formel (X) stillingsisomere penicilliner, f.eks. D-α-(2-amino-benzoylamino)-benzylpenicillin.

Det har vist sig, at penicillinerne med den almene formel (I) har en overraskende god kemoterapeutisk virkning i forhold til ovennævnte kendte forbindelser, hvilket illustreres nærmere i det følgende. Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at 3 141728 penicilliner med formlen

* S CH

E-CH-CO-NH-__S ,TT, NH, i CH3 S- -V 5

O COORJ

5 hvor R betyder hydrogen, triethylammonium eller natrium, og E og C har de ovenfor angivne betydninger, omgættes med en forbindelse med formlen R1 ^^.-B-COX (III)

A-NH

hvori R^, A og B har de ovenfor anførte betydninger, og X er en aktiveret gruppe eller en hydroxylgruppe, ved en temperatur i området -20 - 50°C i vandfri eller vandholdige opløsningsmidler i nærværelse af en base, hvorpå reaktionsblandingen oparbejdes på gængs måde, og eventuelt overføres de dannede forbindelser i ugiftige, pharmaceutisk acceptable salte deraf.

Til de ikke-toksiske, farmaceutisk acceptable salte hører salte af den sure carboxylgruppe såsom natrium-, kalium-, magnesium-, calcium-, aluminium- og ammoniumsalte og ikke-toksiske, substituerede ammoniumsalte med aminer såsom di- og tri-lavere-alkylaminer, procain, dibenzylamin, Ν,Ν'-dibenzylethylendiamin, N-benzyl-β--phenylethylamin, N-methyl- og N-ethylmorpholin, 1-ephenamin, de-hydroabietylamin, Ν,Ν'-bis-dehydroabietylethylendiamin, N-lavere--alkylpiperidin samt andre aminer, der anvendes til dannelse af penicillinsalte.

Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen foretages aktiveringen af carboxylgruppen i forbindelserne med formlen III, som er betegnet med symbolet X, og som er nødvendig for kondensationen med ampicillinderivatet med formlen II, på i og for sig kendt måde, f.eks. ved syrechloridmetoden, metoden med blandede anhydrider eller metoden med aktiverede estere eller ved en hvilken som helst egnet gængs metode inden for peptidkemien. De acylerede aromatiske aminosyrer bringes til omsætning på carboxylgruppen under anvendelse af de ovenfor nævnte, peptidkemiske metoder i et absolut organisk opløsningsmiddel i nærværelse af ca. 1 molækvivalent af en tertiær 4 141728 organisk base, fortrinsvis N-methylmorpholin, ved en temperatur i området -60 - 30°C, fortrinsvis -20 - 10°C. De aktiverede carbo-xylkomponenter isoleres ikke, men omsættes intermediært med en opløsning af ampicillinderivatet med formlen II (jf. Th. Wieland og H. Bernhard: "Liebigs Ann. Chem." 572, 190 (1951), R. A. Bois-sonnas: "Helv. chim. Acta" 34, 814 (1951) samt J. R. Vaughan og R. L. Osato: "J. Am. Chem. Soc." 73, 3547 (1952)).

Ved thionylchlorid- eller phosphorpentachloridmetoden omdannes de acylerede, aromatiske aminosyrer i vandfri, indifferente organiske opløsningsmidler, f.eks. C^Clj, benzen, tetrahydrofuran, acetone, dioxan eller chloroform, til de tilsvarende syrechlorider.

Hvis der som udgangsstoffer anvendes 4-cyclopropancarbonyl-amino-benzoylchlorid (IVa) og D-a-amino-benzylpenicillin (= ampi-cillin) (V), kan reaktionsforløbet illustreres ved følgende formelskema: + Η8Ν-2η-00-ΝΗ\,__^χ/ CHa ^ ^ σ cooh (IVa) (V)

pH 7,5 NaOH

4 ...

[>-LNH-Q^C0-rø^-C0-NH^_^S-Y^H3 -V 3 U COONa (Via)

Der fås D-α-(4-cyclopropancarbonyl-amino-benzoylamino)-ben-zylpenicillin-Na (Via). Hvis der som udgangsstoffer ved en blandet--anhydrid-syntese anvendes 4-(4-cyclohepten-l-carbonylamino)-benzoesyre (IVb) og D-a-aminobenzylpenicillin (= ampicillin) (V), kan reaktionsforløbet illustreres ved følgende formelskema: 5 141728 (^LhhøXoh + Cl-S-0-C2H9 (IVb)

Cl-C0-0-C2H5 CH3-lQ>

P

(Q-Lnh^^Lo-Lo-c2 h5 + h2 n-ch-co-nhj-ys"y^^ o COORj R, : -N(C2Hs), (V) Q-S-nh^LnhXco-nh^-^c"’ J—N-\ O COONa (VIb)

Der fås D-a-[4-(4-cyclohepten-l-carbonylamino-benzoylamin)]--benzylpenicillin-Na (VIb).

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen som udgangsmaterialer anvendte forbindelser med formlen II er beskrevet i tysk patentskrift nr. 1.156.078, i USA-patentskrift nr. 3.342.677, 3.157.600 2.985.648 og 3.140.282, i sydafrikansk patentskrift nr. 68/0290 samt i USA-patentskrift nr. 3.144.445. De kan - med hensyn til konfigurationen ved det asymmetriske centrum i sidekæden (= *C) forekomme i D=R-form eller L=S-form.

Alle krystalformer og konfigurationer af forbindelserne med den almene formel II er egnede som udgangsmateriale til den her omhandlede omsætning. Konfigurationen af de asymmetriske centre i 6-aminopenicillansyrekernen i forbindelsen med den almene formel II skal være identisk med de tilsvarende asymmetriske centre i den 6-aminopenicillansyre, der f.eks. udvindes af penicillin G ved fermentative processer. De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen anvendte forbindelser med formlen III er til dels kendte. Fremstillingen af de hidtil ukendte udgangsprodukter er beskrevet i eksemplerne. Typiske eksempler på forbindelser med formlen III er følgende: 6 141728 h

Ra-rø-/ycox (νιΐ) o x=^Ri R3-C-NH-^yCOX (VIII) r4-I-nh-^^-cox (IX) R3JLnhJ3^C0X (X) R3-H-NH>_/C0X (XI) £>

Ri R3 j-NH-^^-B-COX (XII) r3-Lnhv-v (XIII)

fj-COX

R.-C-NH

S

Rj-LnHn.

Cy~ COX (XIV)

Rs-g-NH^

Som fortyndingsmidler kan anvendes organiske opløsningsmidler såsom acetone, tetrahydrofuran (THF), dioxan, acetonitril, dimethylformamid (DMF), dimethylsulfoxid og methylenchlorid samt blandinger af de nævnte opløsningsmidler med vand.

Som syrebindende midler anvendes baser, først og fremmest tertiære organiske baser, f.eks. N-methylmorpholin og triethylamin, eller organiske baser. Véd hjælp af disse baser holdes reaktions-blandingens pH-værdi på 6,5-9,2. I tilfælde, hvor der ikke foretages en pH-måling, som ved den blandede-anhydrid-teknik under anvendelse af absolutte organiske opløsningsmidler (THF/DMF/CI^C^) , tilsættes der - såfremt der anvendes 6-D-(a-aminophenylacetamido)-peni- 7 141728 cillansyre (arapicillin) og et vandfrit reaktionsmedium - fortrinsvis 1,5-2,6 molækvivalenter base.

Reaktionstemperaturen kan varieres inden for området -20 - 50°C. Særligt foretrukket er imidlertid en temperatur i området -15 - 20°C.

Ved gennemførelsen af den her omhandlede fremgangsmåde omsættes reaktanterne i ækvimolære mængder. Det kan dog være hensigtsmæssigt at anvende én af de to reaktanter i overskud for at lette isoleringen af det ønskede penicillin og forøge udbyttet. Eksempelvis kan reaktanten med formlen II anvendes med et 10-30% * s overskud, f.eks. ved den blandede anhydrid-metode eller ved metoden med aktiverede estere. Overskuddet af reaktanten med formlen II kan på grund af den gode opløselighed i vandige mineralsyrer let fjernes ved oparbejdning af reaktionsblandingen. På den anden side kan reaktanterne med formlen III imidlertid ligeledes med fordel anvendes med et overskud på f.eks. 10-20%, især ved syrechloridmetoden. Derved udnyttes reaktanterne med f.eks. formlen II bedre, og der kompenseres for den som sidereaktion i vandige opløsningsmidler forekommende sønderdeling af reaktanterne med formlen VII-XIV.

Som eksempler på de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede penicilliner kan nævnes: D-α-(4-cyclopropancarbonylamino-benzoylamino)-benzylpenicil- lin-Na: ^^-CH-CO-APS-ONa NH-C0-^-NH-C0-<^| (Eksempel 1) hvor -APS- betyder O .CH3 0 co- D-α-(4-cyclobutancarbonylaminobenzoylamino)-benzylpenicillin--natrium: 8 141728 ^^-CH-CO-APS-ONa NH-CO-^^-NH-CO-^> (Eksempel 5) D-α-(4-cyclopentancarbonylamino-benzoylamino)-benzylpenicillin--natrium: ^>-CH-CO-APS-ONa

NH-CO^Q>-NH-CO-<Q

(Eksempel 7) D-α-(4-cyclopentancarbonylamino-benzoylamino)-benzylpenicillin--natrium: ^^-(jH-CO-APS-ONa

NH-CO-^^-NH-CO-Q

(Eksempel 13) D-α-14-(4-cyclohepten-l-carbonylamino-benzoylamino)]-benzylpeni-cillin-natrium: ^~^-CH-CO-APS-ONa NH-CO-^^-NH-CO-Q) (Eksempel 14) D-a-[4(3,4,5-trimethoxybenzoylamino-benzoylamino)]-benzylpenicil-lin-natrium: ^^-CH-CO-APS-ONa 0CH3 L-co^nk-go-Q-cgk, och3 (Eksempel 22) 9 141728 D-α-[4(4-aminobenzoylamino-benzoylamino)]-benzyl-penicillin-na-trium: ^^-CH-CO-APS-ONa NH-CO-^-NH-CO-^-NH* (Eksempel 29) D-α-(4-formylamino-benzoylamino)-benzylpenicillin-natrium: (T^VcH-CO-APS-ONa “Ί ~ j

NH-CO^JhNH-fi-H

(Eksempel 41)

Penicillinerne med formlen I har kraftig antibakteriel virkning, som er afprøvet in vivo og in vitro. I den efterfølgende tabel I er angivet in vitro hæmningsværdierne (MHK) i E/ml substrat. Bestemmelsen foretages i flydende medium i rør-rækkefortyndings-test, idet aflæsningen sker efter 24 timers dyrkning ved 37°C.

Som kendte sammenligningsforbindelser anvendes ampicillin og D-a--(2-amino-benzylamino)-benzylpenicillin (forbindelse A), der er kendt fra beskrivelsen til US-patent nr. 3.268.513. MHK-værdien indiceres af det klare rør i fortyndingsrækken. Som substrat anvendes et medium med følgende sammensætning;

Lab Lemco (Oxoid) 10 g

Pepton (Difco) 10 g

NaCl 3 g D(+) Dextrose (Merck) 10 g

Puffer pH 7,4 1000 ml 141728 ίο σ\ % r-ί r-i Η H VO HHi—!^H H r-i π Λ U1N < V V V V V > < Y V vc 3 m 3· 3* 3· m 3· Q 3* ir ^ 0-0 -· o o o e-j Q ro i—! t—I i—i 31 i—I i—I i—! i—1 i—! i—1 i—i 1—I i—i ' ! ' ! 1 i 1 1 1 I ' ^ 1 ^ ^

h » ro v v V * v v V V v V V VVVVVVVVVV

Pi P *”» H

Λω rtf' 3 in3lir3’3'CM3'3'C0mm00mmcM3i3,CMm3''2! Λ Id (O inmmmmromm ini-lCMi-lHrammro.-lVJ ta m cm v ν V v cm V h v V H % io m m io v 31 ir m r—1 (—E i—t I—Il—I -Ϊ11 *“) m ro (NlOiniOiniOlOroroioiOrorOr-troiOr4roiOiO^-l I0 r4 CM V CM V VV V V y v id v m v m mm ir m in-d1 i-l 3· i-l 3* H Hr-I H ·-) r-t ΙΟ Ό Q) Λ o mininmcMmcommmmcomromrommmr-i

a)>-i cm cm cm i-ι v vv V v X Y

-i ν ν V m mm mm mir ^1^4 3* 3* iT i—1 i—1 i—1 i—li—1 i—) m m m . _ .__ K inmm3imirircMirirmcMrMircMirmcMmmir a) inHinmmmmrommi-irofomromHror-ir-) ~

m +) cm <n V o-i v VV vv XC

id id ι-t a A m v m m-31 m m ^ ^ dtiiid i—iifi-i --i —i *—i 0 0 5 m S p la’tji cMirirtn3’ircMirir3,cMCMircM3’mcMmirv£! 33 ,-i rommc^mmrommmroromro mi-iroi-imr-i

<D M ir VVV V VV VV XX

må) m m ir m mm mm mu’

Pi 3 fc i—i-—i m -ή i—i i—i i-i h 1 !-i ‘ " 1 111 H i—1 Q) VO .. _ _h s s mcMmirtncMicM3,iirirmmmi':icM2v3^r ri ' s, g r- m ro m m cm ro rom m m h i-ι h m ro m h 0)Hld 1-1 CM v, CM V V V V > 3 ? m i-i-rio v m n* m ir νβ'·

3 -H 0) EJ) -Η H 3* H m H

B a) g c m E Vi+Jt? vnoommmmmmoommcommmmmcooo m2 S oiom cm tn ininininmincMinincMininininincMCMinm

OHO CO CM CMCMCMCMCMCMHCMCMr-lCMCMCMCMCMi-lHCMV

^ftSav ava ^ vv AV V vS

pQ vo KQ yp yp_VO_vp_10 co omirirircMmoommiræmirmmooæco'^^i

m o .-i m m m ro i—i r-ii-iv r-tVi-iH fj V

-^cmvvvv v i—i .-IV

ro m m m 31 3* 3* ^ CO i—1 i—1 i—i i—l m oomiririrmircoadirmcocomaomcoaoaom^ •r)m rnmmmi-im m .-i η— λ ^ c v .—I i—1 VV V V VV V ? V e o mmmm m31 ir w 3* ii< o O i-l ι-M H H i-l 3 Λ mmmmmmmmmmmmmmmmmmm m o i-ι ininininininininmininininininininininin

-ri m CMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCM CM

y " Λ ΛΑΛααΑΑΑΑΑα^λΑλΛΑΛ5 Λ < m 0 w w ir.-tirmmmcom'-i H . i—l i-l i-l

Λ VVV V VVV ^ i/ V V ^ VV

313131 31 .—i i—i ζ ι-i C, c ♦p4

1 · i-H

r-1 M i—i •3 G -3 •ri o) · .rtr-icMro3*inmr~cocnoi-icMro3iinmt'~co iTico

3 3 tø dl HHi-li-li—I·—li“ii-liorHcM

a) -ri X G

Ά 1-1 0) rt 11 141728 O ^-4-10-4-0010-0^-4---4-00-4-^10-4--4--4-0010-0 σ* ' a v ι-ι v γηη rf'i S a ’"’i t- C Pi v --t v ν' V ^ “ 2 cn 5· -4- -4--4- ς ui 3 a 0 u U Fh 0< Π rHHHrHrHHrHHr4i-tr-trHrHrHi-trHr-t»-li~l u n vvvvvvvvvvvvvvvvvvv

0 M rH

H 3 .CM

0,3 ίο Γ-i^-iV'-t'OiovoronvoininvDroro Φ ø n id rc) in v v rH v w a N N >/ -|J Γ"· Hi- -4- -4* vø V V V0 M i-t H '*·“·

VO

vfvfiOlflOI'Jvrio^lfieiO^eiWffl^N'f Λ pn vovoHHn vDHvomcMinvocscNi vopovo

rH 10 V V V V V CN H CN V rH rH

ι-H vø VO 4- -4- VO VvO

C H rH H 41 rH

H V0 Λ -4--4--0-4--4-^4-100040 ψΐοοονονοεοΊ’οο

CD o VOVOrHVØVØrHVØrHCNin VØinCNinrHCNVØCN

r-l Η V V V V V rH CN V CN H CN r-l r-l

« , vd VD -i VO VO A -Ο V

i—I (—I i—I r-l " H "4* vO ....................

in M lOiOiOiOi'lvil'tvONUJVtlvOlDIDiO^vfPIN

(rt(0 (D rH I—I r*l i—I ΓΟ i—I V0 r-l 0-3 l/l in in in CN 10 10 14 1-3 cm +j vvvv v cn cn cn cn rH cn -> 00^-4-4-4-4- VO a a Y Y * geni --1 'vJ*

Ο -H IS VO VO

— fl tJ

jJ 3 3 (8 CM VO4-IO'01010'4-IOCNOO Ιΐ-Γ'ί'ίΙΝΝΠ in M iniur-i rHiørHrHrHrHiørHrocN vovovovo nrnn 4-1 <u ft <e 4- avvv v Y v ? M rH S β 10 41 41 VO * V0 V0 ** OSS ft rH r-l Hr4 1M 'v, <3 _ _ - . ..

“ a +->-- H.ric 4010-4-4-00101101010101 i 4- oo rH co co cn •r| -rir- rH rH V 10 CN rH H U3 U3 in VO CN A CN CN <"3 rH ·*; M in -rl r4 V^r-I^r4 IN 04 04 r-l C r-t f-t 0)030) 33 0 4-^-0 Λ Λ g 4-1 fl'< S H r-l β ^ JJ o- ^ ¢0 MO 4-i0cn4‘i0CO-0OOc0cO10iOi010-0OOOOCOc0 n, a CN 10 in 1-3 40 rH incNininininmminCNCNCNin

C3 »V CN V V/ CNrHCNCNCNCNCNCNCNrHHrHCN

(Π Ο V 40 <0 V A A 5J. v A 2? i—I 41 r—l i—I 41 4-4* ^ *

VO _VO_vO vO

00 i-HlOrH4-OOi-Hl04'l0l0O4O4'CNCOrHCN'lOl0 m an«#«/ v --· r-^LnOr^^o<r)cNvp’1H,-, \ C V rl v- CN CN V V I-t

m 4- 4- Ί- -D

oo --1 r-i in iOv£)vl'OlO4'4'4'vllN104lv!'tNlvi-fiOO)-fl

-HVO r-|rHVrHrH VO M VOvOI-31-3 rH rH

ihhvvhv v YYa a

0 4-4-4- VD vovoc C

o U --1 H rH

Id

•H

Jm 0 r-J ΦΦΦΦΦΦΦΦ •H vo ιηΐΛΐηΐΛΐηιηίπι/ιιηυγ ιηι/ιΐΛΐηιηιηιηιη

U CM CNCMCMCMCNCNCNCNCNCN CNCNCNCMCNCNCMCnJ

Q) > A V >\ A A A A A *ΛΑΑ*ΑΑΛ £ <c c ^

ϋ <D

in w ΤΓ rH i—I ^31 CO rH i—I rH CN rH v*Q >v0 CO νφ —I CO ’i ^ H VVVV VVvVfy,,AHri^H%/ rH rH rH «| WVC^

^ C

£

•H

1 . rj

rH Μ H

•rl 3 *rt O Vi 3 •ho)· rHcN<-3-4,invor-'C0030-rirHcNiviKfinvot--co 330) cncncncncncncncncni-3 anmmnromcoro 0) -rl M i ft rH c < 12 141728

Ol HH a H sJ >a Η H CO H CD IvQHHH

m n- V V Cv ^ C VVVVl^VAVV

S 3· 5 >j S 5 n co ^ ^

5° H ro H CO

o o o o U E-i

O pd CO HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH

Η Π Vv VVVvVVVV v Vyv VVVvVV

>t m h X! 2 ft g 4J3 «5

O) Hl in lOCDCOHiniOHlOVcoHcDcOlOCOCDCOHHH

r~- V V M CM H vVVVIlvAVV

μ > to -d* V ^d,COCΩCOCMCMlDd,,d,'d,

W H 1—I t—I H co CO Η CO

_ 10 .. ____ ¢^03 10 10 00 100^0)^101010¾¾^^^^ id n cococM intncMHCMcocMcoinininXjoiiDcDcoco

H UO V V H CM CM Η Η V Η V CM CM CM . I V Λ V V

η ίο io v v co ^ αΧΧμο)Ι3!51215

ø HH 'd· -d1 H r-ι ^M<Mr>JHir)HH

H UD CO VO CO η H ^ S CO CO CO CO CO CO CM 'JlO'ilOCOCoinS^^^t o) o in in cm in in in co ιοιηιοιηιηιη,ο ΓνίΟίοιοιο η h cmcmhcmcmcm vcmvcmcmcm i a Y A y 'i W vv λ V CO coAAVm^v3vo'i)va

* ·*; 3· ^ 5 Η ΗΛΛ5™ HinHH

CO CD CD CD ^ CM

m M J>iMlDD10CDi0i0l0CfcDDiDSS'll^lC|'l) id id 0) lOcoioinininHtnHinioininincJmCOiOHrd

c ta +J VV CM CM CM CMVcMvCMCMCM| '*V Λ V V

OO H CD S V A iCfAcI)^iSV;cQ Λ^ο3-Μ·-ψ

SG UJHH Mi< r-4 ' ^CM HIO

O H 13 CO CD 3 CM

Ό b>

SS Ml M1 CM 10 CD ci oa cflcPM’lOCOloiSS’icqiDCO

^ ωα) h u> co co in in co HioiDininmNNiOijH H

+) M CUrt -d· Vv cm CM 5 V v CM CM CM Y 7 y A V V

ιβ o cd co v v C v cgvAVooco^^^^ U1 .s ϊχι Η Η ΜΪ* Ml* ^ N W ^ ^

+) d S CD CO co Η H

Sd Λ

>HHm VD-M'COCOCDCOCO'M'CMcOCO lltnSlinCDiO

'-'.CD •ΗΓ' iiniomininHinioroinin cmcm cm V f! •^HBIHH CM CMCMCM cm V CMCM A A A 3 ϊί H W 3 G O V AVA CD v V A A Ah^

a (D CD cd Η -d* "d* Η V V CO

HS+J +DtJi UD UD CD 10

m £* o· OM

n 13 no CDCDCOCDCDCDCDCOCDCOCDCDCDCOCOCDCOCDCDCO

cd PQ AS cm inincMininincMinininintnminintninininin EH m cmcmhcmcmcmhcmcmcncmcmcmcmcmcmcmcmcmcm

CTt VV A A A VAVAaAAAVAVV

<3·^ *3> ^ "d1 ν V

(Ο 10 CD CD CD CD CD

CO- lOCO'JCOCOCOcTOcfCDlOCOCDcrcrcOCOUDCOcf in η h cd m in cm ovcMHinincocoinHHH^

\ VV CM CM H CMHHVCMCMVICMVAVH

m Mf'M’ VV *d* v V CO cm I ίγ^γ^γ co μΓ'Μ1 ^ -d* h co ao co

H CO CD CO CO CM

in cCcOI'l'i'fCDfflCD'fCMIOCOD'icDD'iCDCOD

CD CO H rn CD CD h — roHinincoinincoHHH

-H H vV VV < VCMCMVCMCNVAvV

H φ -d· uD CO "d1 V V CD I I CD .V -d1 -d1

0 0 >-l HH d'-d'HCOCDHcO

0 U) CD CM CM

Η H id

V; H CD CD CO CD CD CD CD cDCDCOCDCDCDCOUDCDCOCDCO

0 cd in to to in in in m ιηιηιηιηιηιηιηιηιηιηιηιη

H CM CM CM CM CM CM CM CM CMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCM

U A A A A A A A VAV A A A A A A A aA

tu <; ν ίγ

X! UD UD

0 w H

-d· D'd,COcO cDCOHHHcD"d*'d,'d'CD,d'CMCD,d,’d'·-!

H HV HHe-wAV’-tVCDCOHDCOHAVA

VH v 3 C n Η V v 3 / V c5 ^ <

«di d1 C lO CO C CM Ο1 H

Η Η CO

“. c •r| 1 · Ή HH H -

H G *H

O M CD

•h m . aioHcMco'd'in-Hcor'CDCTcoHcMn'd'inuDC^ GCdl ft’d'VV'd’inininininininin

ID Ή DC B

(¾ h a) < 13 141728 O 10(0(0^(0(0^03(0^1(0^(0^10(0^(0(0(0^

(T, Η Η H HH«* HmH(OH(OHH(OHHH

„ s; 3 5 5 ϊ ? 2 3 33355*35*2

Jj rH rH Ή ϋ ϋ u

BH Μ HHrl'HH'a'H'iHHHHHHHHHHHHH

o S n vvvvvyvvvyvvvvVvvvvvv

HH H HH

N ω Λ 3 S HHv£HSHHvorOvevØv£>vOvflvOLr)VOVOHin

CQfrt r*. WVHCMVVV V

in 5^· ^ 5 ^ 55 ^)v5y3v5?i55ii5!£,‘^ rH iH γΗγΗιΗγΗοΗγΗ^ΓγΗγΗ Lø (ΰ ro tf)vDvøcMvovøm»Ævoro^ovøvi)inirt<Ovqinifj«yDCj rH 10 ro V U rH o V CN y V y V r"J CN w y (N ίΜ V »Ή rH V LD S lo 35 v lo ^!35Χϊί5ΐ25ί5(ίίΗ

m >ς}« H rH HrH^f rH rHrHrH^T^iHrH^-tfrH

•H lO \0 lO lO lO Ό n vovo^r yyvoaJiOfl^'T'iXIO^'iJSiit

tu o m m vo vDvflincyiovovovovoininvoinJQinvD

HH CNCNV V V 04 H CV) VVV<N<Ny<NO)0Jv

^ y V LO LO LO V V lOlOlOVV'Sv^VlO

^ yjlyjlrH rHrH? t3* Η Η H H yH

VQVO LO LO lO LO LO LO

U vOLOLOLOLO^LOOOLOæLOLOLOLOLOLOLOLOVOLOVO

03 di ΐπιοΐοίοιοφίο^ΐΛ^νΐΐπίτιΐΛίπίπίοιοΐοίΛίπιπ

c0(0 4-) (NMCNfNrSV^HMr)NNNNMNN(VlN(NM

am H V A V A Λ V V ΧΧΧλϊΧΧα ^^λ ^ OOrtJ^ y Η y y y y y y

+) S C S Ό (O (O (O (O (O (O VOVOVD VO

rfl <u OH

!3 Hl "as' vQ VO (O ([ΙφΰΰιίΙ'ίΌ'βιΟνΒ^'ίΌΌ^'Ο i-t B 3 <uM h io in m mmmmmvommmmvoinmmvovn

n ___u m m cNcycy cycymmcy cvimrvimvcvii^JniVCM

iS Mm dild y A η V V V V VV^VvøV V V VO a

VO vD (O (0 vD (O (O (O (O (O (O (O

H H — 11 1 "*' ...................*"""" """ H 3.2 (0(0^(0(0(0(05¾1 I cy(0 I I IvOvOI I tiOvg

m gu Γ' inH^ininHinvo mm mm iGiG

O * kJ Η H CMV ^nliNVCM OM ΰΰ 2f M

|«μηολ^ 5^3 Λ 33 3

^ 2 <3 (O (O VOVO vO

ΠΗ vQ(OvOvO(0(0(0(Q(0(0(0(0(0(0(0(0(0(0(0(0(0 UD ro ΙΟΙΟΙΟΙΠΙΟΙΛΙΟΙ/ΪΙΛΙΛΙΛΙΛΙΛΙΠΙΠΙΟΙΛΙΠΙΠΙΠΙΓ)

n, a ro CNtNCNCNCNMCNCNNMMtMMNCMOJWNNtNCN

® AA3 Λ$ΛΛ*Α *$****$*** _(O_(O VO VO VO — m vovovooinvomvomvoHHvommHHmvovoo \ w V \/ v y cn V v V v m c\j v vrsyvm m 555 vo 5 v vo *3νονν·'»'»νιοω

CD η Η Η HHM· Η H y y Η H

H VO VO VO vo

H (O m Η H HvDvomvomvOvOvOvOHHvOvOvOvO

η h csvv v v v v y y v y y ^ v y v V

o y J y -vrmvo m vO'Jmvo^r^vovovovo

0 o «! HH Η HHHH HHHH

(O

<d

*H

c*

ϋ H VOVOVO invOvOvOvOvOvOvOvOvOvOvOVOVOvOvO

η vo mmm mmmmmmmmmmmmmmmm H cn γίγμμ cMmnjnJMNPatycyoonacycytycym QJ AAA ΑΑΛαΑαΑΑΑΑΛαΑΑΑΛ Λ <

U

W

M

O* ioyyH^vOH^vl'®y'l'yvO'll'iillvl)vO'fH

p v 9 i® 's· -=9· c s h li 1 · h 2 H U H *1 H G H Ti u u o υ

•h o) · co^o-HrHMro^inLor-cDcno^cMco^Lnvp-H

ncio m m lo åLOLOLOLOLOLOLOLOLOf^r-r^r-r--r-r- gi Q) M ÉT 5 ft H fl) < *· 14 141728 to to in t" 3 ι-l ϋ ο υ ο ο Ο Β CM (Ο Ο < η to

ι—1 CM

fei S

G 3 & ί“ 3 μ G 3 m ns 3

I—i i—I

<D

•ni CO 10 M CO CM to

G to ι-l CM

<u r—1 w tn id td G tn — o o G g c id OH H to tn ρ to &i 3* to

4i 0) 3 3 to CM

P g 0) P fe o g tn tu <w id Pt td '-'HG S dl H \ 0) HH in

h p in H

0) H 0) 3 P

O) G 0) 3 00 tO

td M g G tj cm to

Eh B3 Id OH H CM

g m P 3 A

•H

H

o o 3 •ri 00 G to o \ oo to H CO CM to

p CO H CM

dl H

G o tn H

HP ft -

HG G

OP · Ό

H ftt · 3< G G

C G dl co p Q1

0) H G OG

Οι H 0) H ^ 15 141728

Af tabel I fremgår det, at de nye penicilliner har kraftig kemoterapeutisk, især antibakteriel virkning. Deres virkning strækker sig til gram-positive og gram-negative bakterier. Som eksempler herpå skal nævnes følgende bakteriefamilier, bakterieslægter og bakteriearter: Enterobacteriaceae, f.eks. Escherichia, især Escherichia coli, Klebsiella, især Klebsiella pneumoniae, Enterobakter aeroge-nes, Serratia, Proteus, især Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus morganii, Proteus rettgeri og Salmonella, især Salmonella interitidis. Af Micrococcaceae-familien, f.eks. Staphylococcus aureus og Staphylococcus epidermidis og fra Lactobacteriaceae-familien: f.eks. Streptococcus pyogenes og Streptococcus faecalis (Enterococcus) . De her omhandlede penicilliner har vist sig meget virksomme ved behandling af infektioner forårsaget af Klebsiella-, Proteus-og Pseudomonasbakterier (jf. tabel II).

De her omhandlede pencilliner har antibakteriel virkning.

Dette fremgår af følgende forsøg, som gennemføres med penicillinet ifølge eksempel 1A.

Penicillinet ifølge eksempel 1A fortyndes med Miiller-Hinton- -næringsbouillon under tilsætning af 0,1* glucose til et indhold på 5 5 100 ^ig/ml. I næringsopløsningen findes 1 x 10 - 2 x 10 bakterier pr. ml. De små rør indeholdende denne blanding dyrkes i 24 timer, hvorpå uklarhedsgraden bestemmes. Ingen uklarhed angiver virkning.

Ved en dosering på 100 ^ig/ml er følgende bakteriekulturer fri for uklarhed: Escherichia coli 14, Escherichia coli C 165, Proteus vulgaris 1017, Klebsiella K 10, Klebsiella 63, Salmonella sp.,

Shigella sp., Enterobacter sp., Serratia sp., Proteus indolnegativ sp., Proteus indolpositiv sp., Pasteurella pseudotuberculosis,

Brucella sp., Haemophilus influenzae, Bordetella bronchiseptica, Bacteroides sp., Staphylococcus aureus 133, Neisseria catarrhalis sp., Diplococcus pneumoniae sp., Streptococcus pyogenes W., Enterococcus sp., Lactobacillus sp., Corynebacterium diphteriae gravis, Corynebacterium pyogenes M., Clostridium botulinium, Clostridium tetani, Borrelia sp., Pseudomonas aeruginosa sp., Aeromonas hydro-phila sp.

16 141728 tn

G

O ο . . σ ο ιη 1 1 γ~> ο m &ι

G

>0 0 0 0 0 0 in cm oo ι> m cn tr

G

Ο σ σ σ ο o σ o cm co <n co G in • r-i rG f· H CM CM 'd* G cm

O i—i G r-f G G

•g a) a) a) a) a) +j &i a* cu a* Oi ft

x g ε ε ε ε S

ο o aio <u o two ajo a)o m ωοωοιηοοωοωοο G . A g A g A a g a •ri Η Μ Η Μ Η fe Μ 0) +1 On

44 G

0JO ο

CM

U

>1 ΙΛ Ο ά) Cr

Ο G

GO ο Ο) cn

> G

0) ·Η cn

Η Η G

Η tnl Μ Η ^θ. φ -rt ςτ

G tø > Ο G

0) G O -Η O

Λ O G o o

G 44 A» 0) CO

E4 (U Λ CM

G G

>, G

Q U tJi Q

G G

O G

o o o o o G

• in oo S

ι-i r-t

0) -P

G G H

•3· -η* CG

•ri 0)

fe fe !S G

'— O

G G 4-> tø tø tø -ri

G 0 0 G G

>- G G g 0) O -ri -ri 04

\ ijl tjl 0) G

fe cn o G G cn OG

raio io G G o -Η G

•G -G O) 0) > G

tøG G G G G WH

O -P G G G

OG GO GO 10 O tø O GO

G 0)0 (U o Go GO 0)0 G·«

G14J -GO -GO Go GO -GO >1 G

OG tøcn mm o cn ocn tøcn O O

o A A ε ε A ω -G

SA 0)X<UXOXOXO)X tn -P G G G G O O G S X

KW li« i<(N G^r G^f iici tøfl) 0) 0) G 44

tø tø OG

Pi G) fe H

17 141728

Penicilliners udmærkede og brede antibakterielle virkning gør det muligt at anvende dem såvel i human- som i veterinærmedicinen både til forebyggelse af systemiske eller lokale bakterieinfektioner og til behandling af allerede optrædende bakterieinfektioner.

Penicillinerne kan ved kendte metoder overføres i de gængse præparater, f.eks. tabletter, dragées, kapsler, piller, supposi-' torier og ampuller, hvis indhold af aktivt stof svarer til en brøkdel af eller en mangedobbelt mængde af en enkeltdosis. Enhedsdoserne kan f.eks. indeholde 1, 2, 3 eller 4 enkeltdoser eller 1/2, 1/3 eller 1/4 af en enkeltdosis. En enkeltdosis indeholder fortrinsvis den mængde aktivt stof, som indgives i én indgift, og som sædvanligvis svarer til en hel, 1/2, 1/3 eller 1/4 dagdosis.'

Penicillinerne kan anvendes på gængs måde, f.eks. parente-ralt eller oralt. Doseringen afhænger af infektionens art, infektionskim, legemsvægt og indgiftsarten eller -metoden, men ligeledes af dyrearten eller patienten, præparatformen, anvendelsestidspunktet før eller efter infektionen samt indgiftshyppigheden.

Ved anvendelse i veterinærmedicinen kan penicillinerne indgives sammen med foderet eller foderpræparater eller med drikkevan det. Derved kan en infektion af gram-negative eller gram-positive bakterier hindres. Penicillinerne kan kombineres med andre stoffer til forøgelse af den antibakterielle virkning. En forøget virkning kan f.eks. opnås ved, at nedbrydningen af penicillinerne med formlen (I) hæmmes, f.eks. ved tilsætning af isoxazolylpenicilliner.

Penicillinernes (3-lactamindhold bestemmes fodometrisk og i nogle tilfælde ved IR-spektroskopi.

Alle N-acylerede aromatiske aminosyrer med den almene strukturformel VII-XIV undersøges ved tyndtlagschromatografi på DC-pla-der med kiselgel F-254 (Merck, Darmstadt).

Som elueringsmidler anvendes: SBA: 75 rumfangsprocent sec.butanol 13.5 " 90%’s myresyre 11.5 " vand SBN: 85 " sec.butanol 15 " 10% * s ammoniak PEW: n-propanol/ethylacetat/vand (i forholdet 4:3:3) CMA: 95 rumfangsprocent chloroform 5 " methanol 3 " iseddike 18 141728

Forbindelser med fri aminogruppe gøres synlige ved sprøjtning med en 5%'s opløsning af ninhydrin i en blanding af n-butanol og 2 N eddikesyre (95:5, v/v) og kort opvarmning i tørreskab (80— -100°C). Der anvendes imidlertid oftere chlor/tolidin-reaktion -sprøjtning med tert-butylhypochlorid og derpå (efter kort opvarmning) med en eddikesur opløsning af o-tolidin og kaliumchlorid, (jf. R.H. Mazur, B. W. Ellis og P.S. Cannaratu: "J. Biol. Chemistry" 237, 1619 (1962) og E. von Arx og R. Neher: "J. Chromatogr." (Amsterdam) 12, 329 (1963).

Alle her beskrevne intermediære forbindelser og penicillinderivater har et til deres konstitution svarende IR-spektrum.

Alle penicilliner underkastes analytisk modstrømsfordeling over 29 timer ved anvendelse af petroleumsether/ethylacetat/dimethyl-formamid/vand (i forholdet 3:7:5:5) som fordelingssystem.

Optagelsen af penicillinernes NMR-spektre foretages i CDgOD-opløsning.

Ved beregningen af elementæranalyserne tages der hensyn til penicillinernes vandindhold.

De ved virkningen mod bakteriestammer angivne tal (E/ml) er minimale hæmningskoncentrationer i rør-rækkefortyndingstest efter 24 timers dyrkning.

Fremgangsmåden iføgle opfindelsen belyses nærmere i de efterfølgende eksempler.

Eksempel 1 p......».

/ \-CH-CO-APS-ONa ^ I /=\ /1 HH-CO-/ ^>-NH-C0-/ A) 10 g (0,027 mol) D-a-aminobenzylpenicillin-Na [= ampicil-lin-Na eller 6-(a-aminophenylacetylamino)-natriumpenicillanat] opløses i 100 ml THF under tilsætning af 20 ml vand. Efter afkøling af reaktionsopløsningen til 0-5°C tilsættes dråbevis 7,5 g (0,0336 mol) 4-cyclopropancarbonylamino-benzoylchlorid opløst i 40 ml THF ved is/vand-afkøling i løbet af 30 minutter, idet pH-værdien holdes i området 7,5-7,8 ved samtidig tilsætning af 2 N natriumhydroxidopløsning. Der røres i 30 minutter ved 0-5°C og derefter i 2,5 timer 19 141728 ved stuetemperatur, idet pH-værdien holdes konstant på 7,5 ved tilsætning af en ubetydelig mængde 2 N natriumhydroxidopløsning. Efter destillation af THF fås en sejtflydende masse, seen opløses i vand og ekstraheres 1 gang med ethylacetat.

Den vandige fase adskilles, afkøles til 0°C, tilsættes 250 ml ethylacetat og syrnes med 2 N saltsyre til en pH-værdi på 2,0. Den organiske fase adskilles, og den vandige fase ekstraheres endnu to gange med 80 ml ethylacetat. De kombinerede ethylacetatekstrakter vaskes neutral med vand og tørres over Na2S04 i isskab. Efter afdampning af opløsningsmidlet fås et lyst, harpiksagtigt produkt, som optages i 80 ml absolut methanol, hvorefter der tilsættes en ækvivalent mængde 1 molær opløsning af natrium-2-ethylhexanoat i me-thanolholdig ether. Opløsningen inddampes skånsomt til tørhed i vakuum, og remanensen omkrystalliseres af 90 ml absolut methanol og 600 ml absolut ether.

Udbytte, beregnet på ampicillin-natrium: 9,4 g (62,5%) D-o--(4-cyclopropancarbonylamino-benzoylamino)-benzylpenicillin-Na.

β-Lactamindhold: 91,7%

Analyse: C% H% N% S%

Beregnet for C27H27N40gSNa*lH20 ( 576,6): 56,24 4,89 9,72 5,58

Fundet: 55,2 5,4 9,2 6,0 B) 4-Cyclopropancarbonylamino-benzoesyre.

20 g (0,146 mol) p-aminobenzoesyre (PAB) ppløses i 80 ml THF, og opløsningen tilsættes først 20,4 ml (0,146 mol) triethylamin).

Derpå tildryppes hurtigt 22,5 g (0,216 mol) cyclopropancarboxylsyre-chlorid i 40 ml THF under isafkøling. Efter endt tildrypning tilsættes suspensionen endnu 9,4 ml triethylamin i én portion (pH = 7-8). Reaktionsopløsningen koges i 5 timer under tilbagesvaling, afkøles til stuetemperatur, hvorefter opløsningsmidlet destilleres i vakuum. Remanensen opløses i vand, og den fremkomne opløsnings pH-værdi indstilles på 2,0 med 2 N saltsyre. Remanensen suges fra, vaskes grundigt med vand på nutschen og tørres i luften. Omkrystallisation af THF/petroleumsether.

Udbytte: 28,0 g (93,6%).

Analyse: C% H% N%

Beregnet for (205,2): 64,39 5,40 6,82

Fundet: 64,9 5,6 6,0 20 141728 C) 4-Cyclopropancarbonylamino-benzoylchlorid.

12 g (0,0585 mol) 4-cyclopropancarbonylamino-benzoesyre suspenderes i 35 g benzen p.a. Blandingen behandles i flere timer med 17 g thionylchlorid og 0,2 ml DMF ved 60°C, til der ikke mere udvikles gas. Opløsningen inddampes til tørhed i vakuum, remanensen opløses i THF, og opløsningsmidlet destilleres fuldstændigt.

Udbyttes 9,5 g (73%)

Analyses C% H% N% Cl%

Beregnet for C-^H-^qCINC^ (223,7): 59,06 4,51 6,26 15,85 Fundet: 58,01 4,8 5,5 15,5 NMR-signaler ved S : 1,0-1,3 ppm (5 H) 7,6-8,2 ppm (4 H)

Eksempel 2 O-CH-C0-APS-0Na I /=\ vi NH-CO- -NH-CO-V^ A) Kondensation

Til den ifølge eksempel 1 B) fremstillede, kolde opløsning af det usymmetriske anhydrid sættes ved -15°C den ifølge eksempel 1 C) fremstillede, ligeledes afkølede opløsning af aminkomponenten. Blandingen røres natten over ved gradvis stigende temperatur fra -15°C - 15°C. Næste dag fjernes opløsningsmidlet i vakuum (badtemperatur 20°C), remanensen udrøres med 300 ml vand, og den derved dannede opløsning ekstraheres én gang med ethylacetat. Den vandige fase af køles til 0°C, der tilsættes 200 ml ethylacetat og syrnes med 2 N saltsyre. Den vandige opløsning ekstraheres endnu to gange med portioner på hver 100 ml ethylacetat. De kombinerede, organiske opløsningsmiddelekstrakter vaskes intensivt med vand og tørres derpå over Na2S04 i isskab. Efter filtrering inddampes opløsningen i vakuum, omsættes med en ækvivalent mængde af en 1-molær opløsning af na-trium-2-ethylhexanoat i methanolholdig ether og henstår i 10 minutter ved 0°C. Derpå destilleres opløsningsmidlet, og den fremkomne, halvfaste masse fældes af 90 ml methanol p.a. og 600 ml ether p.a., suges fra og tørres i op til 5 timer i ekssikator over ?2°5 ved 141728 hjælp af højvakuum.

Udbytte, beregnet på carboxylkomponent B: 8,4 g (70,5%) D-α-(4-cyclopropanol-l-carbony1-aminobenzoylamino)-benzylpenicil-lin-Na.

Analyse: C% H% NI S%

Beregnet for C27H27N407SNa-2H20 (610,6): 53,11 5,11 9,17 5,26

Fundet: 52,5 5,9 8,3 5,5 β-Lactamindhold: 93,8% NMR-signaler ved 6 : 1,1-1,4 (4 H), 1,5 (6 H), 4,1 (1 H), 4,2 (1 H), 5,5 (2 H), 5,9 (1 H), 7,3-7,4 ppm (9 H).

B) Aktivering af carboxylkomponenten 4.6 g (0,208 mol) 4-(1-hydroxycyclopropancarbonylamino)--benzoesyre opløses i 20 ml absolut DMF og 40 ml absolut THF. Der tilsættes 2,35 ml . (0,021 mol) N-methylmorpholin samt - efter afkøling til -15°C - 2,1 ml (0,0218 mol) chlormyresyreethylester, og der røres i 15 minutter ved -15 - -10°C.

C) Fremstilling af aminkomponenten 8.7 g (0,025 mol) D-a-aminobenzylpenicillin (= ampicillin) suspenderes i 70 ml CH2C12 og 5,6 ml (0,04 mol) triethylamln i nærværelse af vandfri Na2S04 ved -10°C, hvorpå der røres i 1,5 time ved stuetemperatur. Na2S04 filtreres fra opløsningen, som opbevares ved -10°C til næste reaktionstrin.

Eksempel 3 ./ \-CH-C0-APS-0Na ^ Γ nv=\ „ NH-CO-^ X-NH-CO-/ A) Dette penicillin fremstilles ved den i eksempel 2 beskrevne metode med blandet anhydrid ud fra 29 g (0,0116 mol) 4-cyclopro-pancarbonylamino-2-nitro-benzoesyre, 1,4 ml (0,0125 mol) N-methyl--morpholin og 1,2 ml (0,0125 mol) chlormyresyreethylester.

Som aminkomponent anvendes 4,89 g (0,014 mol) ampicillin med 3,14 ml (0,0224 mol) triethylamin.

22 141728

Udbytte: 5,1 g (74%) D-α-(4-cyclopropancarbonylamino-2-nitro-ben-zoylamino)-benzylpenicillin-Na.

Analyse: C% H%^ N%^ S%

Beregnet for ^-yi^gNgOgSNa * 2H2O (639,6) : 50,70 4,72 10,95 5,02

Fundet: 51,0 6,1 10,0 5,7 β-Lactamindhold: 93,2%.

B) 4-Cyclopropancarbonylamino-2-nitrobenzoesyre 6 g (0,033 mol) 4-Amino-2-nitrobenzoesyre opløses i en blanding (100 ml) af THF og vand (1:1). Opløsningen indstilles på pH 8,5 med 2 N NaOH og omsættes ved stuetemperatur med 3,78 g (0,0363 mol) cyclopropancarboxylsyrechlorid i 25 ml THF. Reaktions-opløsningens pH-værdi holdes ved yderligere tilsætning af 2 N natriumhydroxidopløsning på 8,0-8,5, til omsætningen er afsluttet.

Efter en reaktionstid på 3,5 timer destilleres opløsningsmidlet. Remanensen fortyndes med vand, den vandige opløsning udrystes én gang med ethylacetat og symes til slut med 2 N saltsyre til pH

2,0. Den udfældede olie isoleres ved ethylacetatekstraktion. Efter vask og tørring af ethylacetatfasen inddampes opløsningen til tørhed. Produktet krystalliseres af ethylacetat/petroleumsether.

Tyndtlagschromatografi: Produktet viser sig at være et enkelt i REW, SBA og SMA.

Udbytte: 3,0 g (36,4%).

Analyse: C% H%_ N%

Beregnet for cjj_h;lqN205 (250'2): 52,81 4,03 11,20

Fundet: 51,9 4,2 11,4

Eksempel 4 / \-CH-C0-APS-0Na wn V-/ 2 NH-CO- *^> -NH-C0- / A) Dette penicillin fremstilles ved den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 6,32 g (0,0252 mol) 4-cyclopropancarbonyl-amino-3-nitro-benzoesyre, 2,94 ml (0,0262 mol) N-methylmorpholin, 2,52 ml (0,0262 mol) chlormyresyreethylester og 10,6 g (0,0302 mol) ampicillin med 6,85 ml (0,049 mol) triethylamin.

141728 23

Udbytte: 10,2 g (67#) D-a-(4-cyclopropancarbonylamino-5-nitro--benzoyl-amlno)-benzylpenlcillin-Na.

Analyse: C # Η # N # 5 #

Beregnet for C^^N^gSNa * 2H20 (659,6): 50,7 4,72 10,95 5,02

Fundet: 47,8 5,0 10,1 5,3 β-Lactamindhold: 84,9# B) 4-Cyclopropancarbonylamino-5~nitro--benzoesyre Analogt med den 1 eksempel 5 beskrevne fremgangsmåde acyleres 7,0 g (0,0^84 mol) 5-nitro-4-amino-benzoesyre med 4,42 g (0,0425 mol) eyclopropanoarboxylsyrechlorid.

Udbytte: 6,4 g (66,6#).

Analyse: C # H # N #

Beregnet for CnH10N205 (250,2): 52,81 4,01 11,20

Fundet: 50,4 4,0 11,7

Eksempel 5 ^ -CH-CO-APS-ONa NH-CO- -NH-CO- A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 5,29 g (0,0259 mol) 4-cyclobutancarbonylamino-benzoesyre, 2,78 ml (0,0248 mol) N-methylmorpholln, 2,38 ml (0,0248 mol) chlor-myresyreethylester og 2) 10,0 g (0,0286 mol) ampicillin, 6,47 ml (0,0462 mol) tri-ethylamln.

Udbytte: 11,6 g (84,7#) D-α-(4-eyclobutancarbonylaminobenzoyl-amlno)-benzylpenlclllin-Na.

Analyse: C % H # N # S #

Beregnet for C^^N^OgSNa · 2H20 (608,648) 55,26 5,46 9,20 5,28

Fundet: 54,5 6,4 8,8 5,8 24 141728 β-Lactamindhold: 97» 7$· Β) 4-Cyclobutancarbonylamino-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 7,05 g (0,0514 mol) p-aminobenzoesyre (PAB) og 6,4 g (0,054 mol) cyelobutancarboxylsyre-chlorid.

Udbytte: 6,7 g (59»4#)

Analyse: C fo H $ S $

Beregnet for C]_2H15N°5 (219,245): 65,75 5,98 6,39

Fundet: 64,2 6,0 6,1

Eksempel 6 /\-CH-C0-APS-0Na

\_/ I

NH-C0-/^ -NH-C0- A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 5,5 g (0,0208 mol) 4-cyclobutancarbonylamino-2-nitrobenzoe-syre, 2,46 ml (0,022 mol) N-methylmorpholin, 2,11 ml (0,022 mol) chlormyresyreethylester og 2) 8,72 g (0,025 mol) ampieillin, 5,6 ml (0,04 mol) triethyl- amin.

Udbytte: 8,8 g (68,8$) D-a-(4-eyclobutancarbonylamino-2-nitro-benzoyl-amino)-benzylpenieillin-Na.

Analyse: C $ Η % N % S %

Beregnet for C^^g^OgSNa · 2H20 (653,646): 51,45 4,93 10,71 4,91

Fundet: 52,4 5,8 10,1 5,3 β-Lactamindhold: 91,0$.

B) 4-Cyelobutanearbonylamino-2-nitro-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 10,9 g (0,06 mol) 4-amino-2-nitrobenzoesyre og 7,83 g (0,066 mol) cyclo-butanearboxylsyre ehlorid.

25 141728

Udbytte: 6,3 g (produktet omkrystalliseres af en blanding af ethyl-acetat og petroleumsether.)

Analyse: C # H # N #

Beregnet for σ]_2Ηΐ2Ν205 (264,240): 54,56 4,58 10,60

Pundet: 54,2 4,9 10,60

Eksempel 7 O-CH-C0-APS-0Na I /=\ r~\' NH-CO-./ \-NH-CO-/ A) Analogt med den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde omsættes 8,1 g (0,0323 mol) 4-cyclopentan-carbonylamino-benzoylchlorid med 10,0 g (0,0269 mol) D-a-aminobenzylpenicillin-Na (ampicillin-Na). Udbytte: 14 g (88,5#) D-a-(4-cyclopentancarbonylamino-benzoylamino)--benzylpenicillin-Na.

B) 4-Cyolopentancarbonylamino-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 1 B) beskrevne fremgangsmåde ud fra 31,5 g (0,23 mol) p-aminobenzoesyre og 17,3 g (0,23 mol) cyclopropan-carboxylsyrechlorid i nærværelse af triethylarain.

Udbytte: 31,8 g (59,5#), produktet er fældet af en blanding af ΊΉΡ og petroleumsether.

Analyse:

Cj 5i Ni

Beregnet for C-^H^NO^ (233,270) 66,93 6,48 6,00

Pundet: 66,4 6,6 5,8 C) 4-cyclopentanoarbonylamino-benzoylchlorid 25,9 g (0,111 mol) 4-cyclopentan-earbonylamino-benzoesyre omdannes sammen med 12,1 ml (0,166 mol) thlonylehlorid i nærværelse af CHgcl2 tilbagesvaling til syrechloridet.

Udbytte: 26 g (94#).

Analyse: C # H # N # Cl #

Beregnet for C^H^NOgCl (251,713): 62,03 5,6l 5,57 14,08 Fundet: 60,4 5,6 5,6 13,3 26 141728

Eksempel 8 / \-CH-CO-ArS-ONa HH-CO-/ \ -HH-CO-CHp- /

Λ-J VJ

A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 5,85 g (0,0239 mol) 4-(2-eyclopenten-l-aeetamido)-benzoesyre, 2,78 ml (0,0248 mol) N-methylmorpholin, 2,38 ml (0,0248 mol) chlor-myresyreethylester og 2) 10,0 g (0,0286 mol) ampicillin, 6,47 ml (0,0462 mol) tri-ethylamin.

Udbytte: 10,0 g (70$) D-a-/4-(2-cyclopenten-l-acetamido-benzoylamino)7--benzylpenicillin-Na.

Analyse: C % Η % N % S %

Beregnet for C30H31N4O6SNa * 2H20 (634,7)·· 56,78 5,56 8,83 5,06

Pundet: 56,7 5,7 8,1 4,5 β-Lactamindbold: 98,2% B) 4-(2-cyclopenten-l-acetamido)-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 8,25 g (0,06 mol) p-aminobenzoesyre og 9,5 g (0,067 mol) 2-eyclopenten-l-aeetylchlorid. Udbytte: 13,3 g (90,50).

Tyndtlagschromatografi: Produktet viser sig at være et enkelt i PEW, SBA, MCA (ninhydrin negativ)

Analyse: C % H j N jo

Beregnet for C^H^NO^ (245,3) 68,56 6,16 5,71

Pundet: 63,0 5,7 5,3 NMR-signaler ved δ = 7,7-8,1 (4 H), 5,8 (2 H), 2,5 (2 H), 2,0-2,4 ppm (5 H).

Eksempel 9 O-CH-C0-APS-0Na I /=\ /— NH-C0- ^ ^ -NH-C0-CH2-CH2- _ 27 141728 A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1 1) 6,64 g (0,0239 mol) 4-(3-cyclopentylpropionylamino)-benzoe-syre, 2,78 ml (0,0248 mol) N-methylmorpholin og 2,38 ml (0,0248 mol) ehlormyresyreethylester samt 2) 10,0 g (0,0286 mol) ampicillin og 6,47 ml (0,0462 mol) "tri-ethylamin.

Udbytte: 10,8 g (73,5$) D-a~^4~(3-cyclopentylpropionylaminobenzoyl-amino27~benzylpenicillin“Na

Analyse: · '" ; C_i HJ Nj sf

Beregnet for C^H^^SNa · 3H20 (668,7): 55,68 6,l8 8,38 4,8l

Pundet: 54,6 6,1 7,8 5,4 β-Lactamindhold: 89,3#· B) 4-(3-cyclopentylpropionylamlno)-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 9,63 g (0,07 mol) p-aminobenzoesyre og 12,4 g (0,077 mol) 3-cyclopentylpropionylchlorid. Udbytte: 12,0 g (65,6#)

Analyse: il HJ ni

Beregnet for C^H^NO^ (261,3): 68,95 7,55 5,56

Pundet: 68,8 7,5 5,4

Eksempel 10 / \_CH-C0-APS~0Na \—y I /=\ /—\ NH-CO-^ ^ -NH-CQ-CHg-.CHg-H ^ A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 6,6 g (0,024 mol) 4-(3-cyclohexanpropionylamino)-benzoesyre, 2,78 ml (0,0248 mol) N-methylmorpholin og 2,38 ml (0,0248 mol) ehlormyresyreethylester og 2) 10,0 g (0,0286 mol) ampicillin og 6,47 ml (0,0462 mol) tri-ethylamin.

28 «*™

Udbyttet 10,8 g {66,5%) D-a-^F-tø-cyelohexanpropionylamino-benzoylami-no27"benzylpenicillin-Na *

Analyse: C % Η % N % S %

Beregnet for C^H^N^OgSNa * 2H20 (664,8): 57,82 6,21 8,45 M3

Fondet: 56,8 6,9 8,0 5,4- β-Laetamindtiold: 88,6%, B) 4- (3-cyclohexanpropionylamino)-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 10,0 g (0,073 niol) p-aminobenzoesyre og 14,0 g (0,08 mol) 3-eyelohexanpropionyleh.lorid. Udbytte: 15,8 g (79%)«

Analyse: ϋ ii ϋ '

Beregnet for O^H^UO^ (275,4): 69,78 7,69 5,08

Fundet: 68,9 7,0 4,2

Eksempel II

/=\ / \ -CH-CO-APS-ONa V-/1 NH-CO-/ \-m-co~// \ \_/ A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra: 1) 7 S (0,0286 mol) 4-(l-cyclohexen-l-carbonylamino)-benzoesyre, 3,2 ml (0,0286 mol) N-methylmorpholin og 2,74 ml (0,0286 mol) ehlor-myresyreethylester og 2) 12 g (0,0343 mol) ampicillin ag 7,67 ml (0,0549 mol) tri-ethylamin.

Udbytte: 14,0 g (82^) D-a-/4-(1-cyclohexen-l-carbonylamino-benzoyl- amino)7-benzylpenicillin-Na.

Analyse: C % Η % N % S %

Beregnet for C^H^N^OgSNa · 2H20 (634,7): 56,78 5,56 8,83 5,06

Fundet: 56,0 5,6 7,9 5,3 β-Laetamindhold: 88,05¾.

29 U172* B) 4-(1-eyclohexen-l-carbonylamino)-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ud fra 16,6 g (0,121 mol) p-aminobenzoesyre, 22,0 g (0,152 mol) 1-cyclohexen-l--carboxylsyrechlorid og 21,5 ml (0,152 mol) triethylamin. Omkrystallisation af en blanding af THF og n-pentan.

Udbytte: 15,0 g (50,5%)·

Analyse: £J O iL2

Beregnet for C^H^^NO^ (245,3): 68,56 6,16 5» 71

Fundet: 68,5 6,2 5» 9

Eksempel 12 O-CH-C0-APS-0Na 1 /=\ /~\ NH-CO-^ ^-NH-CO-^ ^ A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 5,85 g (0,0239 mol) 4-(3-cyclohexen-l-carbonylamino)-benzoe-syre, 2,69 ml (0,024 mol) N-methylmorpholin og 2,3 ml (0,024 mol) chlormyresyreethylester og 2) 10 g (0,0286 mol) ampicillin og 6,45 ml (0,046 mol) triethylamin.

Udbytte: 8, 8 g (60,7$) D-ct-^4-(3-cyclohexan-*l-carbonylamino-benzoyl- amino)7-benzylpenicillin-Na.

Analyse: 11 11 Kl 11

Beregnet for C^H^N^SNa · 2H20 (634,7): 56,78 5,56 8,83 5,06

Fundet: 56,5 5,5 7,7 4,4 β-Lactamindhold: 72,8% B) 4-(3-cyclohexen-l-carbonylamino)-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 12 g (0,0875 mol) p-aminobenzoesyre og 13,9 g (0,0963 mol) 3-cyclohexen--1-carboxylsyreehlorid.

Udbytte: 17,2 g (80,5$).

30 T4T7Z9

Analyse: C % Η % N %

Beregnet for (24-5,5): 68,56 6,16 5,71

Pundet: 67,2 5,9 5,2

Eksempel 13 O-CH-CO-APS-ONa I /=\ /“\

V/ \J

A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 7,° g (0,0268 mol) 4-cyclotieptancarbonylamino-benzoesyre, 5,0 ml (0,0268 mol) N-methylmorpholin og 2,58 ml (0,0268 mol) chlormyresyreethylester og 2) 11,2 g (0,0522 mol) ampicillin og 7,2 ml (0,0515 mol) tri-ethylamin.

Udbytte: 12,0 g (75,0$) D-α-(4-cycloheptanearbonylamino-benzoylamino)--benzylpenicillin-Na.

Analyse: C % Η % N % S %

Beregnet for C^H^N^OgSHa ' 3H20 (668,7): 55,68 6,18 8,58 4,80

Pundet: 54,8 6,2 8,0 5,4 β-Laetamindhold: 92,5$» B) 4-Cycloheptancarbonylamino-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 5 beskrevne fremgangsmåde ud fra 5,55 g (0,0405 mol) p-aminobenzoesyre og 8,7 g (0,0425 mol) cycloheptancarboxylsyrechlorid. Udbytte: 9,9 g (94,0$).

Analyse: C % H % U %

Beregnet for C^H^NO^ (261,5): 68,95 7,55 5,56

Fundet: 67,0 7,4 5,2 31 141728

Eksempel 14 O-CH-C0-APS-0Na I _ KH-CO- / \ -NH-CO-1 \ A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 6,0 g (0,0231 mol) 4~(A-cyclohepten-l-carbonylamino)-benzoesyre, 2,69 ml (0,024 mol) Nniethylaorptiolln og 2,3 ml (0,024 mol) chlormyresyreethylester og 2) 9,69 g (0,0277 mol) ampicillin og 6,26 ml (0,0447 mol) tri-ethylamin.

Udbytte: 11,1 g (78,3#) D-a-^4-(4-eyeloheprten-l-carbonylamino-benzoyl-amino27-benzylpenicillin-lia.

Analyse: C # H # H # S. #

MMHBM

Beregnet for c^H^^OgSHa * 2H20 (648,7): 57,40 5,75 8,64 4,96

Fundet: 56,8 6,1 7,7 4,§ β-Lactamindhold: 77,2# B) 4-(4-cyclohepten-l-earbonylamino)-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 4,45 g (0,0324 mol) p-aminobenzoesyre og 5,7 g (0,0359 mol) 4-cyclohepten-l--carboxyIsyrechlorid.

Udbytte: 6,3 g (75#)·

Analyse: C % Η # N #

Beregnet for (259,3): 69,48 6,61 5,40

Fundet: 67,8 6,5 4,8

Eksempel 15 O-CH-C0-APS-0Na I /=\ Kl

NH-CO-/ X-IØI-CO-CSg-i^N^J

32

ttXTZZ

A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 6,53 g (0,0239 mol) 4-^5icyelo(2,2,l)hept-2-yl-acetamido7--benzoesyre, 2,78 ml (0,0248 mol) IT-methylmorpholin og 2,38 ml (0,0248 mol) ehlormyresyreethylester og 2) 10,0 g (0,0286 mol) ampicillin og 6,47 ml (0,0467 mol) triethylamin.

Udbytte: 9,3 g {62%) D-a-i/4-(2-norbornyl-acetamido-benzoyl-amino)7-benzylpenicillin-Na.

Analyse: C % Η % N % S %

Beregnet for O^H^N^OgSNa * 3H20 (680,8): 56,56 6,07 8,23 4,72

Fundet: 54, 9 5,9 8,7 5,7 β-Laetamindixold: 100# B) 4-/5ieyclo-(2,2,1)hept-2-yl-acetamido7-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 9,63 g (0,07 mol) p-aminobenzoesyre og 13,2 g (0,077 mol) bicyclo-(2,2,1)hept--2-yl-acetylchlorid.

Udbytte: 17,4 g (91,2#)

Analyse: C % H % N_%

Beregnet for C^H^NO^ (273,3): 70,32 7,01 5,12

Fundet: 67,1 7,2 5,0 i 33 141728

•r) Ο I

Ν Tf Μ β -Η --------- φ φ U C Λ Ό •Η >ι >ι r-t Η Λ i—f ο ei Μ (ΰ

Ο Ό I

μ >» +1 ,— β Λ φ σ» “* φ ι Ό σ» θ' «η νο Q, r4 β «* *· ' ' ίο to ^ ««ι· m t n * *-» Ο Ο Λ +1 U φ Cl ΙΟ ΟΊ «. >, Tf tf t- ** r4 ο to to β m Ο β « *· -*· k * Φ φ > 3S5eeoo « « 00 00

Tf ο w Ο Ν +> # __ jj β Φ \ να «η *ο ® ο Η Φ Β b 00 ΟΟ νονο 5 η _4 09 μ — - »·· *· w >3 ι τ+ >t® at ^ tn τ * «ο» tn -r+ Ο +> ι ( β Μ « 9 β » ο ·μ β β® ♦ r4 to ^ ,-4 g φ < μ « « -«fin ton ^ χί id Μ φ ^ ·* *· ·*» ** ** β i, u ri Μ ΛΟ Γ" 00 to tn in in z £ Φ >τ in tn to to in m

Ο ι μ 0 U

I X >, Μ ®___ k to A ^ Μ β ,--

K p* I Φ M

Η < XX Ό Λ ® L

I T Φ I 1¾ ÉS

r·* Ο Ο > Ί* 8· _ OOO S Λ r-t m Λ ι ι Λ h ® Ο O ~ 2 ΦΙΒΚΦΦΦβΛ# to o U—Z r-( Λ X (4¾ t° ^ I r-( Μ φ I β /X. ·μ φ CQ. -rf li I Λ Φ U Λ 09 Φ CO ...... 1 - g Ό r) ® Φ μ · μ μ > μ * «Λ t® M4 ® flt Λ - * * > >H<6 Ι-» ·** to M T) S A f- ® to ® λ tf *d _

vo Λ φ Ώ —— ι I

ct i-♦ ¢5 ¢5 C r4 Φ ® tn « β ι μΛ 0 Ό . ° •μ u S^r to n ι 2 2 * r-f ® ® /k. ·β β Ο > β fi ^ +> -η α

s 0 s . * V III A

μ Λ β Τ I I >» Il I

φ φ -μ ο ♦«r* * U A

r-t t-4 <-i Jp T^S' Vsf

Οι ι—( r-( « ι o o J

g 1-( i4 U TfNN N

φ +i o-------- 09 03 ·**( Τ' Λ S β <n

μ Pt . r| S

μ ή β -- η- Z

• z Γ- CN EQ to φ μ — μ ή ω-— to * β φ μ β—ο γ* ™ ο οο μφ +ι +> Ο Ί* 'Ρ ι!· *»* φ in 4J ^40>ο ίίο Ο !3 to β ΟΙ 09 ΦΛ»Μ Ζ— Ζ Oi fc — •μ ® · Q»j< > tn to σ> tn η to Η r+ Τ β ra I β r4 ο .«Ο <-( Ο ι-♦ φ φ Tf ι-+ β Κ Ο» Κ W ^ •Η β» Ο 'β ooOQO1 •“f® 10 2 * θ0Νθ>ίμκ'^ tn r-( (η •Η Φ β Λ ha-3 U --f U ο ΟΙ β « -μ φ Φ^μβ — >-> ^ eu φ μ ι < s_<_® _< 34 T4T728 in γιο ro in ιο Μ - - - - -a- in <r -r •μ Φ Ό ι-4 r-+ tn r- οο β -a-m r-fio ιο οο σι ιη ιο m ^ 2 ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ιμ ιη ιη οο γ» *a*-m rto προ dp rfH r+i-f φ ^ ΟΙ ι-t CN 00 ΤΓ ω μ οοοο ι-4 m ο -a* οο γ- γ- σ >, φ t n - - - - - - - - - - r-ι c mm m m mm m^ m ·*τ (0 Cr G Φ _ <C Μ οο ττσι cnr- μ φ co f—4 io 1-4 r-m mm r-r- nj ΛΟ -- ---- -- -- m rt*m m rr mm r-4ι-t O r-4 +> ιο io mm io io mm mm

G

0 id iw 7____ — G £ a a

H O i I

Η I yx έ H 03 ΙίΌ CU +> r-4

r-4 < o o O O

φ t T Λ Λ dP ° O

Λ Ο Ο ι4Ό r-4 r-4

G O U I G

EH I I ca-H

tn «__;__ a—is O+i mm ιο o μ -- a - - >,dP m ιο o o a A. co r- r-4 oo m Ό D__

I I

rt o a)

I Φ I N G

r-4 φ Λ a) G >1 >, G >10 Φ 03 o >1 x n Λ a) N to O G 0 0

GO) I Λ g G N

® 0 Λ μ Λ I -G G

a N g ω 1 O 3 2 G G γ ε— g ga

O <D t4 O i t+ I

g a rf^ a c Λ. a^- id ‘G S ιό g I o o' o - g - 3 a· G m mm ι-f φ a a mg — *H tn K-'>iG m m G I S U UIO>iO O Ir-» ςτ G -a* n in >1 G — . a^ i id Μ μ 03 - o

Cr-^om co o i-hch μ μ O O σ\ m _ O o r- — r4 Cn 03 a ir io om ιο r- O oi © μ ft) w h m S —’ S - a w m -

Ο,Λί > Ο» o - h m η m a H

SGifi ι-(σι oo mO r-4 o σι m o oim jldH G tn m h ts mtnm h S · « a n οι O 0 & -a· m οι a io —· oGtG ^ — ^ μ S Ό h —' m h ma h H di —- G o o oi O O cn η o ^ S a_ id ca_ id_g> 141728 35 en ιο rlV 00 r4 r4 - - *· *· O o οι ot ro r4 CM C« σι oo ^ LT) Tf 00 Of "** m rfl ^ ^ ^ 4J <*Jr ^r "Ψ tn If ** <o rrt 2 r-* Of O Q 00 3 om met m o «ro o-m IH 2 - ·» · ·* ·“ *» ' * - dp con voi oooo in rr o- r~

N

O

05 4J oo ro r4 r4 00 >, ® r-+« σι σι m r-f «j«a r4 o rlfi « «. ·» - « ·* >- “· “· *- ** ut O tj» tt of ot in vo in t n m m β β <0 u r-t ro in Ό σι O m in «i-4 ro σι ro oo ch r-4 η <- * ·· - < -* *- - - rj 1-40 o* ro oo o- r-4 oo o· O' m m m m min o- <d mm -μ id m ti f k »S Z 5 $2 0f Γ" σι — O|00 - - '

i JL id 5 dP m V£ <N

h| oa hI-ø r- <n . ^ B S>y Λ5 H o o_______—-- <d u o

Λ I I

(O K W ® ™ m

Eh U-Z -P oo ro 0 4) » *· * >, (O Ό· O" r4 00 jø dp o* *e t" o» co II iil c © © © ® O Λ 0

XI tf HS

>4 et Sod

O © Λ ® I

r4 Λ -P A O

i λ i gi o

o o — i g~ V

u ι4 o o ή g 1 α es u o e » 1 * 0 A-3 irS - Λ0 r^\ ror-f· II J ro r4 ® O um ro

r-4/ r4 -— >) M oy*V^\ — >1 P « Jj W

O O I O >1 K ' roiOSotrt« U

φν o æ o* n © o ___o____ id -Z σι m ί* .

10 in cd r-- © -— . O - Z o- Z t'' M 44 o* σι ro cn - Wl ' C o Z cn O ' m00 σιο +»4J MioZr-l Om ro O oj r-t Cn M r-l'-Of- *MO O r"* "4· O' β -M ft tt O r-4 O r4 2 - « Π «Ζ'-' 0,^ > tn o m O O r4 Of r-4 m*. Of ro SPlC « « ot σι <o roo r-4 «n roo ®Or4id »KM'- » « K m » oa ji 0 Q tji o o* «»10« roffi ΛίΜΒΌ (O « r-4 to « 1-4 —· ro »fii'-'ø O O U'O O« Λ5 » ri* CO < » <_ ;mpel 27 1Αί728 τ&τ 5Λ / p'y'j _/ 0 VO O' 4J 10 r- η~ n on (1)03 -- - - -- rjj «31 m ^ m m ^

C

p dp ih m cm n 0 iH o' cm σι or— in cm co Ή σι vo co *3* d)\ 2 -- -- -- -- -- -- 0) *3* m 00 r— «3* »g· co 00 00 σι >ι·Ρ 1—1 tu ftjcj [— co vo m os m C pi rHtM nvo cm vo vo H coo σι vo ft Φ 3 - - -- -- -- -- -- }-i min m nn in Π31 ^ m Φ X) η σ' in co in cm loco cm vo cm cm i-)^ h in nn — ^ — — — — — — — — — — n ,-i ,-h n cm ¢000 m«3< n cm r-vo void min min mm void mm - - ----- - ----- I—.1 I ...... il·— « II I ..........

•P

id

W I

P j E$ ρ Y nJ Ό η ο cm 0 id i. -P h - - ' m 3 £ ϋ O ^ 10 Γ1 — O 1 <d ft o'p co vo r- 1 1-3 ml H 03 (1 —3 I £3 H ft I A Cft Ή h fV---——--

Ή O O

a) a a a> „ _ _q I I _U vo co 0 m "31 <d 3 3 -P - - - - „ -

Eh n—s >!o’P -¾1 r- co m σι h 1 ,q σ\ ^ m -31 co t— 0 -?-----

I I

>1 Ή

X I >1 I

0 fi ft ΰ I

jr} ai -p ¢) a p ft a) ft a) 1 ai i Si i η h 1

g— P — A >i>h(D

•HO I 0 0 r) ft 0 0 M c A. 2 £ 1 Λ

Eh -H i< rH -H /Cs. <I) ti £ O

IS V Ή S Π Ί 3 Φ Φ O

m (ti J- -H cd U JL — Λ ft I

ft — rH φ ([ ^ PH Φ I I I

vf>in II J / \ [I

- O >1 1 O >i o c-j J - >10 Μ N Bl I 31 M tl) --, y η X β φ -β® n — a Φ n —' Ο -H Sh 1 1)0 ft I Φ O u I -H g >1

Vfil N O -31 ft N *3· Td td 03 n - «5 H 3 co 03 — fo --- to r- . co vo t— 3 t— 3 r- p ip — O-n 03 - 03- c; ο ·3< CO o 00 voo -p -P vo 3 σι g --- Or-in^- On H pi w O nvoncM «3* vo ο n ^vo Φ -P IB in 3 ft — ft - 3 — 3- 3 — o,ft >01 r- co vo ο n «s1 r- H m mr*- gpld Η cm no Ho cm cm ο H 00 cm no

UdH ιβ 3 3 cm 3 n 3 cm 3 cm fficM

03OOO1 r— H 3 m — H 3 m — 03 ftpg^rH η,Η nrH n H ft — 3 U U cm ο Ο cn Ο O cm < m μ ft m_ ft ft ft 37

U!f*S

aa r~- co oa » *· «►«tr +> e m o m <rs vo oo isa at« P* — -* 9 Z m m oio t** Ή r4 1-4 r-+i-4r40» ©'s _ _ ta en o oo ►>,41 toti in ca tn ί* Γ-t ® EU - ~ »-··»*

Bf g in ·ν enen < m at nr f* μ o o wo mm Q *> * * ^ ^ ja4 o r~t- en en enere m ic tn in t n t n <·"*

·+> L

nt S_ ! to (tf Ό +1 4-i r-4 m H i O O - o <tf 4» <tf xi o <w z S ai ® — o t » a I ca-r+ w CO (f ^..............

S 3|ψ--

r4 O O

β O O ® <*► et XI I I +4 _!* (β 3t 3* +4 ^-+ E+ O-Z >MO oo oo cø .

ό 1 _ _________ - . '——

I » I

gr* I 7 t £ r ° if £ ®

ft « · to A

® 5 - i -Q 1 u β β JL o /-i r-f R T> o >» β _* i *·» £ „ < o ® «•i Λ ej·η β N Ο p Ο (Γ ^ < S Μ a w if 5 II J i 9 to c £ · ·>ΡΗ« ¢0 β >rj* T — >t §

I Λ ·£ *+ ro I OO

Tt* i i m z mi <tf to

• Z

M t*4 id m β --. o ro to en en

4J-P O ^ O to O

r—I Qifl i>i> n- Φ+4»β» ζ- Z Z m ο,,ν > (31 uf® to to O o ·» S3 I fi 1-4 in CN m IN H (1

Stfri S SS en ffi HJ £U oe tøOQGio— o >«r i* X M gtf o* no» i—i w w o* — a o cj a < S’ m_ < « 38 T41728

Eksempel 27 / \-CH-CO-APS-ONa \_f | HH-CO--MH-CO--H02 A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 11,05 g (0,055 mol) 4-(4-nitrobenzoylamino)-2-nitrobenzoesyre, 5,8 ml (0,054 mol) N-methylmorpholin og 5,26 ml (0,054 mol) chlor-myresyreethylester og 2) 14,0 g (O,04 mol) ampicillin og 8,95 ml (0,064 mol) triethyl- amin.

Udbytte: 8,5 g (56,6$) D-a-/4-(4-nitrobenzoylamino-2-nitrobenzoyl-amino)7-benzylpenicillin-Na.

Analyse: C % Η % N % S %

Beregnet for · 2H20 (720,6): 50,0 4,06 11,67 4,45

Fundet: 49,6 4,4 11,5 5,1 β-Lactamindliold: 86,0$ B) 4-(4-nitrobenzoylamino)-2-nitrobenzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 5 beskrevne fremgangsmåde ud fra 20,0 g (0,11 mol) 4-amino-2-nitro-benzoesyre og 22,4 g (0,121 mol) 4-nitrobenzqylchlorid. Produktet omfældes af THF/HgO.

Udbytte: 29,9 g (82,2$).

Analyse: C % H $ U fo

Beregnet for (531,2): 50,77 2,7^ 12,68

Fundet: 51,5 3,5 13,0

Eksempel 28 / \-CH-C0-APS-0Na I /=\ /=\ vy \_y A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ud fra 15,0 g (0,0492 mol) 4-(4-nitrobenzoyl-amino)-benzoylchlorid og 15,2 g (0,041 mol) ampieillin-Na.

39 141728

Udbytte: 20,5 g (78,5$) D-a-/4-(4-nitrobenzoylamino-benzoylamino)7~ -benzylpenicillin-Na.

Analyse:

Beregnet for C^HggN^OgSNa * 2H20 (675*7): C * H# N % S $ 55*32 4,47 10,37 4,75

Pundet: 53*5 4,4 11,0 5*4 β-Lactamindhold: 88,8#.

B) 4-(4-Nitrobenzoylamino)-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 15 g (0,11 mol) PAB og 26,3 g (0,142 mol) p-nitrobenzoylchlorid.

Udbytte: 30,1 g (96,2%)

Analyse: C % Η % N j Beregnet for Cl4H10N205 (286,2): 58,76 3*53 9*78

Pundet: 58,6 3,4 9*7

Eksempel 29 /^-CH-CO-A^O*.

I /=\ /=\ NH-CO-/ \-NH-CO-/ \-NH2 8,0 g (0,0125 mol) D-a-^4-(4-nitrobenzoylamino-benzoylaminoJ7--benzylpeniclllin-Na opløses 1 250 ml absolut methanol og hydrogeneres i nærværelse af hydrogen 1 nærværelse af 30 g palladium-sort på 90 g calciumcarbonat i 60 minutter ved 0-5°C. Katalysatoren sættes til reaktionsopløsningen i 3 portioner med 20 minutters interval under hydrogeneringen. Opløsningsmidlet fjernes fra katalysatormi, og filtratet inddampes skånsomt til tørhed i vakuum. Remanensen opløses i lidt methanol, og der tilsættes absolut ether. Det dannede bundfald suges fra og tørres intensivt.

Udbytte: 7,0 g (91,9%) D-α-[4-(4-aminobenzoylamlno-benzoylamino)]--benzylpenicillin-Na.

40 141728

Analyse:

Beregnet for C30H28W5°6SNa · 2H20 (645,7): C # Η # N # S # 55,81 5,00 10,85 4,97

Pundet: 54,7 5,7 10,4 5,2 β-Lactamindhold:-62,8#

Eksempel 50 / \-CH-C0-APS-0Na \_/ I /=\ WH-CO- / >.-NH-C0-NHo \_^ A) Dette penicillin fremstilles ved den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 6 g (0,0334 mol) 4-carbamoylaminobenzoesyre, 3,74 ml (0,0334 mol) N-methylmorpholin og 3,72 ml (0,0334 mol) chlormyresyre-ethylester og 2) 18,6 g (0,0535 mol) ampicillin og 12 ml (0,0858 mol) triethyl- amin„

Udbytte: 10,8 g (6l,1#) D-a-(4-carbamoylamino-benzoylamino)-benzyl-penicillin-Na.

Analyse:

Beregnet for C24H24N5°6slTa * 2H20 (569,6): C # Η # N # S # 50,61 4,95 12,29 5,64

Pundet: 50,7 5,1 10,7 5,9 β-Laetamindhold: 90,0#.

B) 4-Carbamoyl-aminobenzoesyre fremstilles ud fra 20 g (0,146 mol) PAB og 12,5 g (0,154 mol) kaliumcyanat. Reaktionsopløsningen røres ved 80°C, indtil der netop dannes en klar opløsning. Opløsningen henstår natten over ved stuetemperatur og syrnes derpå med 2 N saltsyre. Det udfældede materiale suges fra og omkrystalliseres af varm ethanol under tilblanding af vand.

41 141728

Udbytte: 21,8 g (83#)

Analyse: C % Η % N %

Beregnet for CgHgN^ (l8o,2): 53,52 4,48 15,54

Fundet: 55,0 4,6 15,2

Eksempel 31 / \-CH-C0-APS-0Na NH-CO-/ \-N02

Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ud fra 12 g (0,0324 mol) ampicillin-Na og 7,08 g (0,354 mol) 4-nitro-3-methylbenzoylchlorid.

Udbytte: 12,6 g (73,1$) D-a-(4-nitro-3-methyl-benzoylamino)-benzyl-penicillin-Na.

Analyse: £i li li

Beregnet for C^H^N^O^Na · IHgO (552,5): 52,17 4,56 10,14 5,81

Fundet: 52,0 5,0 9,8 5,9 β-Lactamindhold: 12,2%

Eksempel 32 NH-CO-AA-^

Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 29 beskrevne fremgangsmåde ved katalytisk hydrogenering af 5 g (0,0094 mol) D-α-(4-nitro-3-methyl-benzoylamino)-benzylpenicillin-Na.

Udbytte: 4,1 g (87,0$6) D-a-(4-amino-3-methyl-benzoylamino)-benzyl-penicillln-Na.

141728 42

Analyse: C % H jo- Ν % S %

Beregnet for C^H^N^SNa · 2H20 (5^,6): 53,32 5,A0 10,57 5,9½

Pundet: 52,7 5,3 9,5 5,½ β-Lactamindhold: 11,9%

Eksempel 33 / \-CH-C0-APS-0Ha W i /=x HH-CO-/ Λ-HO.

\J 2

Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ud fra 15 g (0,0^3 mol) ampieillin-Na og 9,75 g (0,0526 mol) p-nitrobenzoylchlorid.

Udbytte: 19,2 g (91,5$) D-a-^-nitro-benzoylamino)-benzylpenicillin--Na.

Analyse: C % Η % N %> S %

Beregnet for C^H^N^SNa · lHgO (538,5): 51,30 ^31 10, to 5,96

Pundet: 52,0 5,2 9,½ 5,5 β-Laetamindhold: 76,8$.

43 141728 in cn o r- m n· n* noi *, *» ' *> 03 τι* m mm m n·

-P

O

0 tj· η· in cn cn C m cn cn r~ m to n* ο η m cn cn rj «. . ». ». % ^ ^ *· ^ »» m z QO oo m n* co co mm com men

dp r-l i—f CN CN rlrl CN CN

¢)^ mo m Γ' co i—ί oi+j cn oo m c- n* t'- co in coco m cn >,(]) - > - *· * * >· ' - -*·

r-tfj® mm’N'N· NN ΜΠ ·Ν» in N* TP

as Cn β © to σ co in co mm Q ^ ·* *· ^ ^ ^ n coco ^ m oo cn oo r(P r-ti-i mm r- r~ mm n* n· mm mm i

i tJ

> +i ri cn m o 7 u o - - > id i, n) xi <#> m r~ > Z S PIO cn oo t" η Ο γ I fi I JL ca-rt r-t w rT^ © p+ 11 I----

Λ C

to i T _ É+OO® TPTpOCN coo U U -P ·» - *****“ -

11+1 O f" 00 co oo CO

® ffi >1 dp oo cn f~ cn oo oo V-z € Q ----;-- 0 r-4 I β >1 Ο -Η β β § Ο ©

1 t-t io P M

o S I CU >t o <e -» o m II >i M ©

® H +1 CUO

U >1 © I © © ION

II QU O U P Ο Ό β

< ® S >i U«>i U

U nj cd i on i ο A

! β© cNtJ© W < 0 >^sn, β ο ία -ho u i β Π I -r-t N a ON / \ CN -w I* .J Ufi I < β / \m-§

ΙΦ m i © fa ® i S

-d* Λ Z •'d· Λ ® O N* I

'—N

co US ^ aS - nS co • Z r- Z Η Z - P m cn - men cn r~ cj^-no co n* com co oo m 4-i-P Of'· m O ^ o m o - r-t tn to n· to o γ~· m r-- — vr cn © -P IB co Z —' !S m ZOO-^ IS S'* 04,¾ > Cn n· cn m - m n cn nn co co o on* ΕΡΙΟ m cn o i—i r~ on cn®z ** cn cn cn r-ι m ©ΌΗ© ®cn®co ® ooo ® ® ® cn CQ00&I CN ® CO CN Lilrt Β N CO O'— ,¾ μ gt) m Η—' cn cn cn cn η h hai—p a co u u · u ^ u*u

<g M < m_< ® _rij M

141728 44 lO CM 00 rt in σι co Ή co «. «. ^ «· * -P cn m m <3* m mm Q) CM CM ID 10 CM P~ C F'-io σι in oh cor» oo H in n «te*» *. K. m. ·>»·«► *>» ·- ^ * 44 ιη·Μ* co cm inco ho in ro cm o

oP g; HH CM CM HH CM CM HH CM CM

\

U3JJ LOH ID CXJ CO CO

k^q) co o co cm cm o n co co co o I W ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ni ty trj ό* M1 π* ·μ* m ia min n> m ί* m β © ri! fi gj cO O O in Μ* M· jq o co cm co ior> cno ro cm cm id

^ ^ *» *. ^ *· ^ o OO HH HO 'tf'd' CM CM CO CO

m m m in min mm mmmm +»---- cd oi ti f h lS !S S 4J H 00 10 ~ O I o O *· I L β,β 10 «d* £ > cn η Μι βτίιίΡ o a 00 h (¾ Il \ ic ri! can a) O O----- xi o o

E$ a B (D Ο Γ- CO H CM

O—S +i - “ l +) Horn ro oo o (X, >i c'p co co p- p- vor' ) ___ <u

I I M

OH >i OJ

O >i CD I . P5 ^ I CM CM I I I M >t CM o >1 “00 O w

B Hin I cm Μ β O fi <U

o a o o i an i ω o

I 00 co O (O O I S O) CM IN

CM MN B I Β Ό Η β Μ B O C

B as o-o—u ·Η >1 I >t O Ό 0) c o 00 I NjC - 01 I Η X)

I ΌΧ1 CM ri! +> H <U B NI

co -HO B I <D >1 O O ri! —' S n β O n s β N / \ I 0 ri! H I —·Η O β / \co co Ό tg ro I Ό Η <D *0 B «ri o« d Z o> I aX! Z O I e

Μ* β ID

β ID β P~ β “ Z Z Z σι

MiHCflro CO H COH

IOCMCO vomco VOIOCO^ +)+j o to O · o Ό O O - O Cl H iji cn P~ —- m* cm r-“- m* co P~ ri* - CD +J g cn Z Z “ Z Λ Z “ Z O Z co a i4 > &1 P~ VO O O'M’ CO OO M* CM CT, CO CM CM M1

g d I β CO CM CM H ro CO CO CM H IO co CMB H CM

<D Ό Η β Β Β B <N Β Β Β <m Β B ^ raOOtji to O CO CM'-' Γ“ΗΗ

,¾ (j g!« CM CM H CM CM H CM H

H ft ~ d 0*0 0*0 O · O

^ ra rf? ffl m rijm 45 141728 to in o 4j id in m Tf t·» m m o ©Μ·»». - *· “**» *· * r© mm mm m id m to © m cfi to <n m cn dp r~ u· mm mo to m o·»!· mm \ tg », ^ ». w » » » »- »· » *" *»

0) σι 00 GO 00 σι σι void O tfv HO

Cl) 4-» Η Η H

>i <D

h © Hm m o σι QO

©tu hid mm m Tf mm m Hm β 1) B ».«. » - * «> «· - ** »· *** pjj μ mm Tf Tf mm mm mm mio 0) X) m m γ-» m H to mO (NO H (Ti <#(JI ID Tf Tf o M «. *. %► ·» ** *. «*. >» ·* *“ *“ oo oo mm to hh h m mm mm mm mm mm mm — fe +i ns Ti __ © +i η o m om t n υ o * *· J* * +j © .© m co oo Tfn- μ κ Π3 <#> m oo co <n co 0 f i © m ns i, can — g !=; > ? ϊ------

H ” O

h < tu „ Φ i +j Tf h oo to m m

XtOO-M --- - *· “ «S a U >i dp m m m cd ao r- j^llX) id m oo Tf r-» vo K W T3 a—g d _ U k

H

ό i

C H

HI© I

g O O © O

I © © U KJ S-l o

0 I M I >1 >1 I

ri! u H >1 m X m I K

1 >1© KO© m g

Kp© O KO K I

fi O i Η N U m

0 N O © C K

fø S m a © U

1 © K I XJ

ττ X3 U Η I

____;__I O 1- - m

K

— O

m *-» mm ~ H to K · |J ID ' © ' © . g «. m goo m g ^Hcnmiocno · ω c^o vor» h r- m © to

+)+> om— O — g O

h m tn ττ— TfO'-' K'-» m ^ ©4Jft)tn g m g O g o« m to gto a^l > Cn omoo h1^ m h ·» » O - n to SK i © ^ m m g 5 mg Hm ™ "fæ ^ mm ©Oh© K K r- K Ko ^gm K oo tnoob1 ^ K lomom mm mm jilMgT) mmoo m H— m — m — w ft - 3 U · U U U S3 u

Tf ^ m m κ u <3 141728 46

i—I LO

^ l> Γ0 CM UD

<y> vo co r- ** »· s *·

.jj ζβ k. k. k. k. O C\ LO

(U ^ in -Ν' -Ν' H i-IH

T3

£ LT> CN LTi i—I 00 CN

p oo m σ> σι min no νοσ» η n

Q\p >| ] k k. k k k k k k k k VV

S ο ο ο ο o σι oo ho on d)\ hhhh h hh hh hh in

>1+1 O (N H ^ -¾1 O

HO) O d> Γ- VO Γ~ 00 OH OH Γ" ο £ k k k k k k Hk. * k» *k CCnSJ m in 'sr "a* in ^ mm *3* in

< Φ P

a) HO Ο Ο Γ" H

jq ooomH oo in oo t" ο vo ^ t— k ^ ^ ^ *»* *» ^ O in in in in ho oo hh in m vo vo in in ιο ιο intn inin /*“k +1 i id 6 „ in ^ id η3 f' oo co

+» f -P H

p ns i 0 0 o o 10 o 3 S (β Xi o\° O 00 00 Ή ο , ΡΌ

— I λ. i G

w u 't can > ζ| I j ______ H C \i3 H Ο Ο Φ Φ U U -P οοοοιη co X) I I -P * - id 33 3 >10'P O 00 IN 00 o ^ O—F3 Λ o co oo r- I Ό 0 ----;--r-

r—l *H

I >ι I a)

0 G Φ P

Ό r 0) 0 S Φ

Η Λ Λ N OP

I (DO) a G H >1 ο PP I P Φ I x! w u 3 >t i 0X1 W -P Φ

I h tn £ Si U HO

3 >ιΦ f H~ I >iN

3 GO A fe O SB A G

rij I tU N if ^ 1 Ό 3 -p 0) /¾¾. Xi G ^ Η φ I Φ Λ

f| I a Φ — Φ P oo S I

U I XI I I p >1 SB 10 a i a 'a'Gtn o <"0 o CNJ -"“k ffl ^-k Γ0 ^ * n CM *>. ^ *> - • vo r- o

in nj — cm id ^ H

id cn 3 tk ^ 3 r- n . 3^ w *· on » —· μήιώ vo oo co wo G^o i0 co o <0 o in σι w

+J4J O^O inocN OmiN

H Uii moo) 3^3 ιη·—ο Φ+iajrn ^3 in!P IP o S λ n a > Cr> ^»COO IN -eitkO H ^1003

gd I g CNOH CNCNH (N (NO

Φ Ό H (d B ID a K3K 33H

in 0 0 O' o^ 'Φ o 'S· in 3

.MPSO n h n cn H CNCNO

Hft'-S O U U · Ο Ο · O

m ' < m sd 3 47 141728 00 ΙΟ ον σι oo +) »· * - * Φ cn ο ο ο»

*0 ι—I Γ—ί r—f f—I

G

3 m H to dp oo cn wo in

\ g » - · - ·* 'O

0) oo oo m in 0) m -P > h >10 © Ηΰ <* t- +J &

ø tn m to ion- 0 S

G ø a - *· - * H © iejij^ tj1 ^ mm i-tte

0 -H M

X) cn co -P © 00 m cn ίο Μ

— — — — g H

O CN CN 00 t" 0 in in in in p ©

ή G

p _ P 0

4J -----0 G

3 . id

u < §T3 -H

0 0 A -P H g1 © * iwzguo h o h c

I I 00 to 0 TJ

> 03 I G CO TT a 0 H ft CQ-W -jj

h it __ «2 0 M

0 o o * 2 λ o o " r] Φ 110 „ - cr y

EhKW-G 1/1 00 CN CN O

rj _____ r—I

I >«dP OO cn Η Λ

/k Jo id to -OO

(l I Ό Ha®

U J Co tj* β M

-1 0 >, k tl 0) ___o Λ Ν' J) 0 0 - Ό > 1 03 © i ^ m S ·Ρ CN o ©

I G •»PH

G H æ tf H

I 0 S 0 m Ο H

<| Ο Λ 3 G H 4J

O ftrl> -øg _/ O >1 a -a* C s h G © mø® 03 XI o o — u 1 — / B Λ N H M-l

"HC 0 G

tø® a © m -a* UX3 SO© 0 0 CD -P rf --— 3* 0 -Φ

0 S

0 — I Cn

Is r» -η T3 0

. CN H

p ip cn id ©Pm ί O'1' G Ό ^ +3 +) o «3 cn M >1 rp tT>w -^ji '—’ m —. øxl- 0P S) æ > la om GGr- a>i > & « m o IZ k -Høm

gGlC cn cn cn r~ HI

ø'Ohø a a s a1 η-p- mOOCn oo cn cn -H © to 34 p gø cn cn H'-' oOm

W a O 0*0 -P S

C 0 ** -- — Ο H in < a < m a λ m 48 U1728 o co

Tf cn cn V ki * * +J cq mm in in

(U

nb C cn cn σι 2 Tf o co ττ cn f~ cn co φ| ^ % % h ^ H ^ » ·

dp 'z <Tt co m r~ σι co mm cJ

\ ω φ nb tn +i m o m oo 0 >,0) CN 00 Tf CN Tf m » O 4-1 r4 c! » » - - - *· - - gj ni Di K mm min mm mm g ΰ <D i <C Μ Ό tu Tf σι m m -h

o m η cn n~ cn n- t'- co M

.. _ » - - - ^ - nj O >» n -n* co mTf mm >i mm mm mm mm Λ

C

ni ___i ---4-1

<D

i TJ

g c ni Ό ni (tj 4-1 r4 r4 (O ’ i

S O O - *· rP

0 <3 ni x! o\° σ> m 1 i __. iP n3 m co n3 > S %-f \ ^ % a> f / ' - +j Λ O O <u (d U U (1) 1-1 E-t i i 4J m r-~ t— t" h 3 3 4-) » *· * ** ·Η

U_3 >ι λ° o Tf H σι -P

i Λ m m Tf m m 0Ό ε I__ s

I I I

CO I O c ni C C C (!) a-H ni -H (U _ o ε <d i -uge 2 U πi M O cm>i ^ I On-4 >H o ΛΗ 01 O O >1 ω I O >1(1) &1

U H C Q) / \ H C O O

AOOO / \ O 0 M

>ιΛ N \ / >i-Q c Ξ u u a \/ o u ω ^ <; i ni <u 1 ni Λ

CN U ja CN O I >—I

<D

--- --i I4

O (D

cn tn K —·> Λ

CN CN <U

CN - «· » in r— σι ·η ni o ni m η

. s cn 3 - cn <D

c 44 ω ^ ω oo C

C — o m m o S4 4J4-) O cn Omen 0)

i-4tntn Tf-— o Tf o C

d)4Jfl)tn 0sma _ 3 3 -H

> Di Ξ ^ rH g σι O co H

gClC^CNTfH ™ CN CN r4 H

<D Ό <-4 ni κσ\® 3MK -·4 tn o O b r- m h co cn o

^MgO CN—H CN CN i-4 -H

HA—D O O U · U C

Q) 3 pq 3 CQ C ffl * 49 141728 η ι— ο σι in CM <ΛΟ 00 ιΗ Γ- Ν' ». «. ». ^ ^ * ** η m in m ν* min ·*Ρ Ν> u ι-l h <-»-» ο σι in <* - Ό § cn cn r-* cn r- & tu rrio oo σι t— o mm η h oooo *»%» *» «» w s ^ ^ ^ ^ * ^ (U\g σ\σ> mm oooo mm σι co mm co

Sn -P

,_i ni mo cn r- cn i-· IS c rg CN n· m om t- oo mio cn m rj Hri w ·*. *. ·*·. ** *» ** *- ^0)¾ m io mm mm *<p np «cpm xp'#

P

S tp σι cn cn oo cn in m moo cn h oo m ooo r-io fc,h. ^ *. % ^ *» ** ^ rj «ςρ Γ0 CM CO SD <D CO CN m Ml mio vd vd tn in in tfl in m ι/ϊιο i ® g >* f .32 o r- °° u

£ g Sjj* H « £ I

Η O ^ 14¾ 00 00 00 ffl

> I )—. I G S

cn η Λ cam Λ a < )=\ --— “ ~ ' ~ ™ 2 8 8 2* 3 i" oo m m

3 IS >idp m oh oo o cn if1 S

U-3 Λ oo cot- r-co r-S

6 s___* - --- I I Ή

IO ID

Il II lit £ CO 10® £0 0) Φ (ti G r-iGGO H (d £ Ο Ό a Q.-H φ U (ti tN N u a-H N _ 0 6 P 4JgG O § £ v I ·· P (ti >< I ·* £ <3 Φ I " 8 o ftH OB ο ΛΗΛ Ο Α-Γ1·? «

rt< IISHGO 1 (S r-Ι G P 1 8 H G Μ -P

^ A ο ο m /V u ο o /\ ooo σ> ίΛ >,Λ £ / > >1ΛΗ 0) Ζ-Λ ^-8 7ί g Ο up® Ny u ρλ p ° H -i? t* d 1 ία λ i a o >» iiootn g cn o 1 moim moiej £ (ti ·· __ ______—,.......— a) ---- T3 (ti Λ o — 3 — 3 — ^ es id m h cn o Φ

. 3 p ID ^ ID p B

cm cn^i* Omm OHm cn C-'-'O men rP'PO ·>ΡγΗΟ σ’ +j -p o m m ^ 3 m 3 3 io g £

h tn ra np w om ’-,W,HC rj ^ 7} C* iJ

mjjfHcn 3 3H U U r- O U r- H

Ο,λ: >tnO c-O rPCN hooocn*. CNmoo* h B G IC m CN CN H - m CN CN H m mcNCNiHCPl m

ojrciHcti WKKm MffiMm KSKm 4J

tu o O tu r- HO oo cn cn i— H cn m

ϋ (J |t) CN CN rN CN CN CN I-I - CNr-liH'-^ B

H U · U U*U U*U g ^ C· fe ri* pq < m < ffl < M_ 141728 50 o o co m ld co «a· in o om >—i ctn nm oo ΐ to ooco oooo h o m 'a· oo cn cn ιφ i—I i—I (—I t—I i—I *—I i—I i—1 c 3 H cn ηα co o o\oiH co cn rco id r> vor· om m vo K V ·» ·» *. KV *· *1 ·* * ø \ *3 i> vo cn cn ct\ co vd vo σ\ oo lo lo m

i>1 -P

H (U m CO I'- O CN H

(03 Hm oo ίο η co a· or- cn a

V V V V KV KV KV KV

<;

Xl m cn »a· co η m cn o cn H m <n rim oo mm ^ ^ ^ % V % " *> s " ** U co -a· r^co HH ho >a· -a· f" co mm mm mm mm mm mm

C

I--—-- g g ? (d Ό JL -Ph oo m if N o o

| (d X! ο'Ρ CO o H

H (d Η Ό cn o oo

H s T I C H

H o ω (£L H

> i i

CO CN

H ft 3 —------

(D ril U

Λ I I

cd O O <D

EhUO-P mm mm o i i -P ' - * S s >io'P γ·> cn m o r- co cj — 3 X! cn oo t" m oo r·' i ^ 0 ---£---

X I

O H Xi >i <D -P C P

i i I II

0 g -C t n 0 CO

η H ft 0) Cl id C I

1 Μ Ο.Ϊ H *-* OjH

-PCH go o g o o

c; vi i η *0 rd H (U P td Η P

! \ m 63 Η Λ P ftH Λ >,

Kjy\ " Id (U >i-P >1 I O >1+) tn < / i \ «a1 h i gntn o HdHtu

O O O « >(.-> p >i d) α o o >iX

cn ro m m o —' i o C xi i >tXl C h am Κ'-'νο o ιροη A u p o ό uooich o i id Ζ_Λ i <d x! Ό ^ <U Xi I ft ftnd ft o ft o *—* xi -p 3 ~ i o w <d ^ (d <d r-' 3 co S co 3 r-'

• CN - CN - CN

P H Cfl CO 01 tN 01 IN

m id ω co oo co cn cn +>+) Or^vo Om o co co H Situ o ^ ^ cn *a< ^ O ^ <D -P fB tn 3 S'-' 3 co ^ 3 3m ftX! > tn Μ mo cn >a· m O O on m^O m ^

g C I C in m cn h - X, cn cn 3 - ^ CN CNHH

aiOHid^m am r- m a a mn ma aam id O O I? "a· co t-» m an co cn cn xjpgid mcNHm cn cn cn cn cn η h ^

Hft'-'a 0*0^ u · u ~ U · O

rijcq et, m 51 141728 oo οο σ' ° *

OH 031 U!U) OO

4J ·*·«.·****» *· *· **

(U 03 OO !N rl O'O' HH

T3 Η Η Η H «-* <“t

C

0 o 00 m i*-f dplH 00 Γ'· CN Ό ·<3·0 com ·»·» ** ·* * * *» ·

Q) \ 13 cd oo m tr coco C

η h in oo cn -H

^ r- Γ- cO CT' r-1 'kD 00 o U

^ k K «. *« * *» * * *0 rrt h r) CO CO ^O Φ Η H >i $ ^ u ιηΐη in in min void Λ S i___?

ο I 4J

~ C\ k * n g V ss ^ a HOmuom Η h > ι i © .c <#> «· _r Λ CO CN |4 T) oo Η h A* Μ I G m O' Έ a) < a can S’ Λ i i ? f u a--—-- -¾ i i 2 ® x □ u-2 © ^ 0 4J co id m m +| >i<#> - - ' ‘3

η n oo nj oh S

------—--" ' M

O Cgon O H +> C H A

<fi ( \ U C Η Λ! W I 10 1 -M

. . I—I

----——- td

id ^ -H

C^O «ΙΊ 03 ID ID CG P

h cn ra ί· O " ^ ^ O ^ C

g 3 I c mcNHin nmHH H

>»-> i·'—k A

< tn < iQ <c pa 141728 52

m CM

cm οι ο in co γ~ 4-1 CQ - ' - * - - Ο) ιη ιο ιη ^ C m lt> in οο cm a· 3 »3* ο ιη ο ρ-· ιο m m η ηπ t| J %, h, ·» h. ^ h. hk hk ** hk.

0\0 3 HH CM CM ΗΟΙ ΟΟ Ο Ο Ο Ο \ Η Η Η Η Η i—I Η Η Η Η Η ω ϋ} 4-ΐ ·^ ”=τ οοοο ιη ro >,(1) σι η» ιηοο ο ιο ro ^ σ\ οοοο ρ_| £j h. h. hl *k hk hk hl h. ^ hi *» h· (dtrffi <3· m m io min min min

G <D

C U

D io m r> ro ro io 43 oo o O' σι m m cm cm oo oo h h»·» hi h. hi hi hk h. h. h. h. h.

Cj h cm ·>3·γο -sr m σι σι oh mm mm mm mm mm ιοιο φ ΐ7“|

O -p H m H CM

o υ o

(0 I (0 43 o\° H OO O

3 B BO σι r- f*

X 0 3 IC

Η II CQ. H

CQ CM

η λ a____ <D Cd u 43 110) 1X5 0 0 4-1 σι ΓΟΟ •'tf lO tf &H U U +> * * »· * * - I I >t dp io m «i* r- co oo jrjKXi ίο tf r- mm io

O—S "C

I D

O____

1 11 I

0 C C IC

a co) co) •Η a &43 π) 43 e h o o -p o _

(β O 54 β G G G G

I H I ftH Η I 43 *rj Η a >ih a ogo a o g p 3 6&1 3 H Id >i 3 H(0>1

£4’ I 54 -—* I O Η Η I O Η H

O OH O >1 >1 tn O >1 >1 tn

0 fa >i O OGI O O β I

1 io i 1 Q"' λ 1 °"'

B Ο) N A Λ43 H /\ ft45 H

^ C / \ ^ 54 >3 ζ } — M >i 10) I (C O I c o

343 3 O N ' 3 O N

c^ r- nj id (0 * id » 3 3 ro 3 m

54 04 CQ H CQrO CQ IO

C ^ O H tf io tf f- io tf

4)4-1 OcoO O ^ O O^O

HCntn m^cM^. m cm m cm ^ 0) 4) « tn _ 3 3cn 3 O 3 ro 0 3 O 3 co &Λί > t7> 00 IO O O >. σι 0 CM tf v O CM CM IO ·· g β I β 10 cm cm h cm 1(1 nB H cm ^ ro B H io OIOH id æ B B cm B B co B B o-

in o O t? CO O CM σι H C0 CM O CM tf CM

44 54 g Ό CM CM H CM · H '—* ro· H'-'

Bft'-'p U*U O O O O

53 141728 η i" ί~" .

t'· Ο Γ» 00 04 04 η - ' » *· *· +)c/3 Tjm mm

<D

Ό rj Ο m Ο ' Γ*· 00 ΙΓ) 3 η Ί* VO Tjt ^00 04 00 Ονο ^ Η Ιμΐ *, ·* *. *. *· ·». * *»· * * * ** <*> Ζ οο σν σι ο α\ σνοο vo m m m \ Α ΗΗ Η -4-1 ΟΙΟ» α) ^ m+J ΓΟ m 00 Ο Ο 0» m vo νο μ <η πιο ο Γ'- μη vor*· I £ *, *, tk «* *Ν «* *. ·* *· * *» *** njOiSJ mm vom mvo vom n* m m m C <D rf p Φ 00 VO m 00 vo o _q t~-cN o o vo m oo r" vo oh s k, % H *» *· H ^ ^ ^ n ^ tj· ίΜ h o~ co n« oh σ>σ> inm vovo mm vo vo mm h ^___,_

+> I

Μ Π Ϊ Ti -p -PH 04 μ ^ U I O O '

o o C .C <* <* *2 S

44 U J T) oo cn oo — ni i i c Z K QCL h

X O Z

Η I I________

W <N H ft X

j^fY-P H nm Γ- CO 00 S u U >idP vo m oo h 2 d

i I J3 G\ VO Γ' VO 00 M

X X Ό o—z o ø n i CO — II O C η c c Χ·Ηη >1 il ni (uge o

4JJ3 ί <Ή N

I CO I O I o c X (D C C X H ^ >1 Φ Z ftH HZ O Η Η Λ

I O g ϋ I >i>.tn I O

o η te >i o o c i m -q |x O OHH U I 0-1 Z Ή

JL >1 >1 O' I N C

/N. O C I /5x - M >t «-g

Il ΙΟ-' ΙΊ I « O IO

1--1 ΟιΛΗ L J ftON ft >i ~ M >t — I C —Η I id O I Η Φ I O'

z o N Z I Λ Z I

*»«** ^’—'v (U t-~ nj o- (C vo • z z z

P44 CO O' U1 rn C0H

C-^0 [" r- -vi r- τι* m σ\ Η-P omo Omo Om HCnra m — cm ^ m '-' M — J" ^ Jp T: ; > ον η -vrO oo - n vf o oo *> m ho

g3|d VO PO 04 H O VOM CN H 04 VO N 04 g O

SxlHId χχχσι XXXO X XCOM

in O O εή h m C4 tN vom m XM

VPgO Π 04 H w Μ Η H w OJHO''-'

x P4 ^ D 0*0 CJ · U U · O

<« sex 141728 54 CM I Η

σι O H (U

4j ro tn tn tn h ft

0) - - o S

A tn in tn min h 0) C C tn # 3 0) Λί

tH VO O O P-t (U

0) r·' m m o ot tn \ - · 'd

tn s H ι-l Ol f—I es o C <D

Η -P H i—I HH HH <D S

(Od) "d g S o oo 0 +1 rtjij! «is iom H s< -P Cn 0) ~ - - - - - 0)0 MK s’ s» ro en mm g h 0) I d Λ fl β es es to H id ^ >7 s’ o es es s* m M ^ i tt ^ *- S. fc. Ό nj rss O oo roen hh >t tr

m w m s* s* mm K C

+) C -H

U T__ <ΰ U

O O i ω

144 O I -PC

nJ 1 S <u <t) s k (β 'd "2

X O £ -P H r- CO

Η I I O O - (OM

m es td K C" oo Η Ό HOtKJ'd Γ" m Λ >i

(1) rfj O ld _ -C

Λ I I CO. -H ^ .

(0 O O ?> * ^ U ----- “ ' ' +, ί 4J*

0 _s 0) 00 es O (1) >1 X

1 4J *· * *· HHd /S. jj s· to m h (0 "d Π Ι >idp t-~ tn σ> H +> o

U J S +> (0 M

t/1 AJ ft o s _ (!) 'd 0) ---M 0) Ό I 44 > φ

O H

N M +J H

β 0) <D -H

0) _ Η -P

Λ ^ H (0

0 C ’’P H S

I i4 Η I ' -P O

es +) o (s tn M

>H OH>i K ^ S n S C H K 0) _ 1 01 H M ^ ar tu 44 to —— ft

IH G Μ H

K >i Q) 0) (U

(0 ft ---Λ! £ g

(U to (U

(0 ~ η h ,y H to O) 0) . S 0) ft

M 44 mm «-- C S <D

(i coot td to 4 ni O'

4J4J om S *· (DtOH

h tr> en tn^-'in--' mm C Ai O- 0) -P φ M 2 OCS.^tOCO H 0) 44

a,)4 j>&t':rs'Om^inQln η H gdld to es csss’ to m --- HH

(D'dHtd K K 00 es S Η -μ tooodi m kcs too o ·Ρ l) A! M g es h er» — es es Hal'd pqft'-'D U · U KK Cd m a) h 44 ^ ^ ^ eses ftHtd cm c m o 55 141728 ^(i rr in in in Γ" in n [ \ ·* * * **· ** ® cn m m ^ m ^10 Ό d d oo ko m in m m m o in ^ o m oo t~-o σι ιο cot·'· jB - ·»·* «· *· - ' - - \2 oj H mm o oo σι oo cnco oo r- a) rt H H r—l id

CD -P

n hoi •'i σ> m ^ -D

ooio σι h cnoo d* m H -a1 mo®

~ ^ - ·» - - *» - - - --- 6 η hh hh -a· οί h mm d* m I

mm mm mm mm mm mm Ό

H

D

____—--—-- Ό - >1 k 1

5 η m m ο- I

ZI I ιϋΉ Η χ ?| g----5

3 f V -S , - O«! O S

^ 8 8 >it»p m mm r- H 5^ « I i r** 00 VO Γ*“ r^· Φ a a ti [j u—a ® _ 3 O o § s c e 1 d Λ © © © © Η ΟΛ £ S Dl dim © ft— Λ —

H 0 0 O O D

>, m a h c © g© O -Η o -H «, D I S 1 ^ H m ril U O >i O O © O © © , i m co u —*h U wH Λ W m © I ra >»© l cq !>i © i* rt 0 A ^ « X /\ 3} S fcf m n / \ « o >t C > ffl o >i I β I Λ CD \/ I Xi CD >rt m © m D © m Μ © © -,q - © O - © 0 ft

mi moN muNB

G _ O r- r- r^co-^ r-* o rr M

4J4J om O^O O r-» O Φ

r-\ w lo *—' ^ x—. lo cm *-* m ^ cm C

ο,Λί >d> ^S'i'O ηα - HT na mm - rrmo o·^ H

Sdi© cn (n z m ^ m ® hoo ^m n n ·. h © ό h © a a 00 o a aoo aaam h coooCn m a na Hcsmna m γ-h o j^MSd ηαπσ'-' m· H w moinm *h aft — C) ο·υ o o U'U'-c ,-L ,-L r-L L--- ^ ' ---- ' ' · · Dl <m<;m era i<m 141728 56 r-

ΓΟ CO £— CNJ

-Ο » * » » ø cn m «5 ·ςτ m Ό

G J

Ο CM ΙΟ ΓΟ (Ν C

o\olH f-iO •d* 00 rom Γ» Η (!) *. h. h. ». W *. ^ Γζ5 0)\ S πσ ro cm σσ σσ ο [Π t—I ι—ϊ ι—ϊ Η *Ρ >ι+> α>

rM ci) cm co m σ S

nSG Γ'-ο oooo ro m r»· ι £ Οι «. » .. *. » » » » td rtlcuM "^m roro mm mm -η

M G

0) Τ3 Λ m γμ •Μ' σ >ι cm in σ γ» σπ ^ Η Λ «... .... » » V» β Ο οσ η ο ^ Μ1 cm η ιΰ m <· mm mm mm ι +) ____0) T---fd

e S

td Ό id dj 4Jrl Η <17 0 0 o O Λ (d| μ (d X! o'P O o H §g ? fg H H 1 * i vr*i ^ > e! av----«

X! I 1 0) H

ro O O +> m mco -3< h

E-ι U U +> - » » H

ι i >1 cp m σ Η H 4J

mmxi ^ r·» r- ^-w u—s T3 6 I D ø Q---1 ΰ

I — G

oo ø g c I Oi-tj o

Hl 0 S t— >1 0 H Id

BO OH CP

I G N >i >i CL) 0

(< O O C I O C G

0 HØ O — 0 >ι σ 1 tn Xl U cn X5 tn m W Hl 1 H G 0 η o Λ n (d o h i g ø LA ion ø *· Η G "d< G G 04 » S >i »(dø g cn (d tn co ΟιΛ 0

1 M

X

----ø -—' Ή (dm ø t·» . S 2 » 0

G H cn r» C/l c-» G

G^-»0 γ» σ γ» Γ» ^ G

HH om Om o 0

h tn tn m m· m —- cm G

0 -G ft) cn S O— S S3 ~ H

04,¾ > tn m -a- O cm cm nf^O mco h BPIG vo cm CM!2 » Γ0 CM H » H

ØOHid MKoooo Μ K K 00 H

il OO tJ m K o h moo o

^ G gd CM CM σ CM Γ0 CM H CM H

13 P4 —- D O · O w O · O G

0 >—, .—. P4 dj m <; m <! λ 57 141728

Eksempel 7·1 Ο-CH-CO-APS-ONa I /=\ NH-CO-CHg-/ \-nh-co-/ \ A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 5,78 g (0,0248 mol) (4-cyclobutancarbonylaminophenyl)-eddlke-syre, 2,8 ml (0,025 mol) N-methylmorpholin og 2,4 ml (0,025 mol) chlormyresyreethylester og 2) 10,4 g (0,0298 mol) ampicillin og 6,68 ml (0,0477 mol) triethylamin.

Udbytte: 13,1 g (90,3#) D-a-^T4-cyclobutanoarbonylaminophenyl)-acet-amido7-benzylpenicillin-Na.

Analyse: C # Η # N # S # Beregnet for CggH^N^OgSNa · 2H20 (622,7): 55,95 5,66. 9,00 5,15 Pundet: 56,5 5,8 9,7 5,5 β-Lactamindhold: 87,8#.

B) (4-Cyelobutancarbonylaminophenyl)-eddikesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 7,0 g (0,0464 mol) (p-aminophenyl)-eddikesyre og 6,6 g (0,0557 mol) eyclobutancarboxylsyrechlorid.

Udbytte: 10,0 g (83,3#),

Analyse: C % H # Xf'jt

Beregnet for C^^NO^ (233,3): 66,93 6,48 6,00

Pundet: 66,5 6,3 5,7

Eksempel 72

O-CH-CO-APS-ONa H0X

* Λιι,-nmam, NH-CO-/ \-NH-CO-/ A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 26 beskrevne fremgangsmåde ved N-hydroxy-benztriazol-metoden (jf. W. Kdnig 141728 58 og R. Geiger: "Chem. Ber." 103, 788-798 (1970)) ud fra følgende komponenter: 1) 4,7 g (0,0188 mol) 4-cyclopentancarbonylamino-2-hydroxy--benzoesyre, 2,69 g (0,0198 mol) 1-hydroxy-benztriazol og 4,17 g (0,0202 mol) dicyelohexylcarbodiimid (DCC) og 2) 7,86 g (0,0225 mol) ampicillin og 5,53 ml (0,0394 mol) triethylamin.

Udbytte: 8,4 g (74,0%) D-a-(4-eyclopentancarbonylamino-2-hydroxy--benzoylsmino)-benzylpenieillin-Na.

Analyse; C fo H % N % S %

Beregnet for C^H^N^SNa * 2H20 (638,7): 54,54 5,52. 8,77 5,03 Pundet; 54,3 5,8 9,6 4,8 β-Laetamindhold: 73,8$.

Virkning mod Escherichia coli 14: 2-4 E/ml

Virkning mod Proteus vulgaris 1017: 8 - l6 E/ml

Virkning mod Pseudomonas aeruginosa Walter: 8 - 16 E/ml

Virkning mod Klebsiella 63: 32 - 64 E/ml

Virkning mod Staphylococcus aureus 1756: 32 - 64 E/ml B) 4-Cyelopentancarbonylamino-2-hydroxy-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 8 g (0,0379 mol) 4-amino-2-hydroxy-benzoesyre (natriumsalt med 2 mol HgO) og 5,28 g (0,0398 mol) eyclopentancarboxylsyrechlorid.

Udbytte: 7,2 g (76,3$).

Analyse: C % Η % N %

Beregnet for C^H^NO^ (249,3): 62,63 5,06 5,62

Pundet: 62,7 6,3 5,5

Eksempel 73 O-CH-C0-APS-0Na /0CH3 I /=\ v_/ v/ 5 \cH^ 3 A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 141728 59 1) 5,6 g (0,0157 mol) (3.4.5-trimethoxycinnamoylamino)-benzoesyre, 1,85 ral (0,0163 mol) N-methylmorpholin og 1,57 ml (0,0163 mol) chlormyresyreethylester og 2) 6,58 g (0,0188 mol) ampieillin og 4,26 ml (0,0304 mol) tri-ethylamin.

Udbytte: 9,5 g (83,4#) D-a-/4-(3.4.5-trimethoxycinnainoylamino-benzoyl- amino^Z-benzylpenicillin-Na.

Analyse:

C* H % NJ SJ

Beregnet for C^-^^SNa · 2H20 (746,8): 56,29 5,27 7,51 4,30

Pundet: 54,9 5,7 6,8 4,7 β-Lactaraindhold: 90,2$.

Virkning mod Escherichia coli 14: 2-4 E/ml

Virkning mod Proteus vulgaris 1017: 128 - 256 E/ml

Virkning mod Pseudomonas aeruginosa Walter: 32-64 E/ml Virkning mod Klebsiella 63: 32-64 E/ml B) 4-(3.4.5-trimethoxycinnamoylamino)-benzoesyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 3,3 g (0,0241 mol) PAB og 6,8 g (0,0265 mol) 3.4.5-trimethoxycinnamoyl-chlorid.

Udbytte: 5,6 g (65,1 $) Omkrystallisation fra THF/n-pentan.

Analyse: ci ϋ ϋ

Beregnet for CigHigN06 (357,4): 63,85 5,35 3,91

Fundet: 62,5 5,4 .5,5

Eksempel 74 /" \-CH-C0-APS-0Na ?° /=\ /=\ CH=CH-/ X-NH-C0-/ \-0CH^ 3 A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 6,1 g (0,0171 mol) 4-(3-4.5-trimethoxybenzoylamino)-kanelsyre, 1,98 ml (0,0177 mol) N-methylmorpholin og 1,7 ml (0,0177 mol) chlormyresyreethylester og 50 141728 2) J.lk- g (0,0204 mol) ampicillin og 4,62 ml (0,025 mol) triet hylamin.

Udbytte: 10,3 g (85$) D-a-/4-(3.4.5-trimethoxybenzoylamino-einnamoyl-amino)7-benzylpenicillin-Na.

Analyse: C % H $ N % 3 %

Beregnet for C^H^N^SNa · 2H20 (746,8): 56,29 5,27 7,51 4,30

Fundet: 56,0 6,0 7,0 4,5 β-Laetamindhold: 89,7$.

Virkning mod Escherichia coli 14: 1-2 E/ml

Virkning mod Proteus vulgaris IOI7: 128 - 256 E/ml

Virkning mod Pseudomonas aeruginosa F 41: 8 - l6 E/ml

Virkning mod Klebsiella 63: 32 - 64 E/ml

Virkning mod Staphylococcus aureus 133: <1 E/ml B) 4-(3.4.5-trimethoxybenzoylamino)-kanelsyre fremstilles analogt med den i eksempel 3 beskrevne fremgangsmåde ud fra 5 g (0,0271 mol) p-aminokanelsyre-hydrochlorid og 3.4.5-trimethoxybenzoylchlorid. Udbytte: 6,8 g (70,2$).

Analyse: C fo Η % N %

Beregnet for C19H19N06 (357,4): 63,85 5,55 5,91

Fundet: 63,6 5,4 3,2

Eksempel 75 f~\ -CH-C0-APS-0Na \=/ NH /7—\ j-.

00-.^ "Vy-MH-CO-^ ^-SOgCH^ A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 3,6 g (0,0113 mol) 4-(p-methylsulfonyl-benzoylamino)-benzoesyre, 1,4 ml (0,0125 mol) N-methylmorpholin og 1,2 ml (0,0125 mol) chlormyresyreethylester og 2) 4,75 g (0,0136 mol) ampicillin og 3,05 ml (0,0218 mol) tri-ethylamin.

61 141728

Udbytte: 5,6 g (70$) D-a-/4-(p-methylsulfonylbenzoylamino-benzoyl- amlno^7_t,enzylPenicillin~Na·

Analyse: C % Η % N % S %

Beregnet for C31H2gN408S2Na · 2H20 ( 708,7): 52,55 4,70 7,92 9,06

Pundet: 52,1 5,1 6,3 8,9 β-Lactamindhold: 72,9#*

Virkning mod Escherichia coli 14: 4-8 E/ml

Virkning mod Proteus vulgaris 1017: 128 - 256 E/ml

Virkning mod Pseudomonas aeruginosa F 41: jJ2 - 64 E/ml

Virkning mod Klebsiella 63: 32-64 E/ml

Virkning mod Staphylococcus aureus 133: <1 E/ml

Eksempel 76 H0- / \ -CH-C0-APS-0Na \ NH p. ^ * " CO-./' ^-NH-CO-/ A) Dette penicillin fremstilles analogt med den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde ud fra 1) 7,0 g (0,0l68 mol) p-hydroxyampicillin /D-6-(a-amino~p--hydroxyphenylacetylamino)-penicillin/ og 5,5 g (0,0219 mol) 4-cyclo-pentanearbonylamino-benzoylchlorid (jf. eksempel 7 C).

Udbytte 5,9 g (51,8$) D-a-/4-cyclopentancarbonylamino-benzoylamino7--(p-hydroxybenzyl)-penicillin-Na.

Analyse: ci si y. y

Beregnet for Cg^H^N^O^SNa · 3H2° (656,7): 53,04 5,68 8,53 4,89

Fundet: 52,3 5,8 8,4 6,6 β-Lactamindhold: 79,6#.

Virkning mod Escherichia coli 14: 4-8 E/ml

Virkning mod Proteus vulgaris 1017: >256 E/ml

Virkning mod Pseudomonas aeruginosa F 4l: 32 - 64 E/ml

Virkning mod Klebsiella 63: 128 - 256 E/ml

Virkning mod Staphylococcus aureus 133: < 1 E/ml

Claims

141728 62 Patentkrav. Analogifremgangsmåde til fremstilling af penicilliner med den almene formel R1 E C ' VB-CO-NH-CH-CO-NH i Ν», «> —\ o COOH eller ugiftige, pharmaceutisk acceptable salte deraf, hvori Rx betyder hydrogen, halogen, methyl, hydroxyl, nitro eller A'-NH, hvor A' betyder formyl eller cycloalkylcarbonyl med 3 eller 4 carbonatomer i cycloalkylgruppen,

2 A betyder R

0 S 3 11 4 »I R -C- eller R-C- 2 hvori R betyder hydrogen, C. . alkyl eller arylsulfenyl, og 2 χ-4 gruppen R -NH- er i p-stilling til substituenten B,

3 R betyder hydrogen, C^_^alkyl substitueret med azido, meth-oxy, cyclopentyl, cyclopentenyl, cyclohexyl eller bicyclo[2.2.1]-heptan-yl, eventuelt med hydroxy substitueret cycloalkyl med 3-7 carbonatomer; cyclohexenyl eller cycloheptenyi; phenyl, der eventuelt er substitueret én eller flere gange med ens eller forskellige substituenter valgt blandt methyl, methoxy, halogen, nitro, trifluormethyl, azido, amino, methylsulfonyl, methylendioxy og 3 ureido, og R kan endvidere betyde 2-phenyl-ethen-l-yl, 2-(tri-methoxypheny1)-ethen-l-yl, thienyl, amino, methylamino, phenyl-amino eller fluorphenylamino,

4 R betyder C^_^alkylamino, B betyder en enkeltbinding eller -CH^**/ -S-CE^-, -CH=CH- eller -co-nh-ch2-, E betyder phenyl eller hydroxypheny1, og det med betegnede carbonatom betyder et asymmetrisk carbonatom, hvilke penicilliner -med hensyn til chiralitetscentret C - kan foreligge i de to mulige diastereomere med R- eller S-konfiguration eller som blanding deraf, kendetegnet ved, at penicilliner med formlen