DEF0016063MA - - Google Patents
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Description
BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND
Tag der Anmeldung: 3. November 1954 Bekanntgemacht am 6. Dezember 1956
DEUTSCHES PATENTAMT
Kolloidal lösliche Polysaccharide werden, in der Industrie in, zunehmendem MaBe benötigt. Sie finden
Anwendung als Verdickungsmittel für Arzneimittel-Lösungen, als geschmacksübeirdeckende Stoffe
bei der Tablettenherstellung u. dgl. m.
Die Eigenschaften, der in großen Mengen zur
Verfügung stehenden Polysaccharide, Cellulose und
Stärke sind für diese Zwecke unbefriedigend, da sie entweder gar nicht oder zu schwer in Wasser
löslich sind, Eine Überführung in wasserlösliche Derivate ist mit tiefen chemischen Eingriffen, verbunden.
Die von Mikroorganismen gebildeten· Polysaccharide zeichnen, sich demgegenüber oft durch
eine gute Löslichkeit in Wasser aus. Es war aber bisher nicht einfach, die reinen Kolloide aus Kulturlösungen
herzustellen. Aus diesem Grunde wurden nur wenige Mikroorganismen zur Erzeugung
von Polysacchariden herangezogen;.
Es wurde nun,. gefunden, daß es leicht möglich
ist, aus der Conidienform von Dematium pullulans kolloidal wasserlösliche Polysaccharide zu gewinnten
und rein darzustellen. Erfindungsgemäß läßt man Dematium pullulans auf Nährböden wachsen,
609 710/321
F 16063 IVa/30h
die MCMio- oder Oligosaccharide enthalten· und
bricht den mikrobiologischen Prozeß dann ab, wenn genügend, Schleims.toffe gebildet sind, was meist
nach 2 bis 5 Tagen der Fall ist. Man läßt die Fermentation
zweckmäßig bei 20 bis 400C submers .unter Belüftung ablaufen.
Ein besonderer Vorteil der Verwendung von Dematium pullulans zur Erzeugung von kolloidal
löslichen Polysacchariden besteht darin, daß es sehr leicht gelingt, das Zellmaterial von, den KuI-turlösungen
abzutrennen. So genügt z. B. schon einmaliges Zentrifugieren, um ein völlig zellfreies
Kulturnitrat zu erhalten. Die quantitative! Abtrennung
des Zellmaterials ist aber die Voraussetzung für eine pharmazeutische Verwendbarkeit der erhaltenen
Polysaccharide. Dieser Schritt stößt bei viskosen bakteriellen Kulturlösungen anderer Herkunft
auf erhebliche Schwierigkeiten, Die Aufarbeitung des zellfreien Kulturfiltrates kann durch
Fällen der Polysaccharide mit organischen. Lösungsmitteln erfolgen. Zu besonders reinen, Präparaten
gelangt man, wenn die Polysaccharide nach dem Verfahren des, Patents -948 910 an Calciumhydroxyd
adsorbiert und die Adsorptionsverbindüngen
mit Säure versetzt weiden.-..
Beispiel 1X/--jy >
100 ecm einer Nährlösung der Zusammensetzung
Hefewasser 5°>° ecm
Rohrzucker 30,0 g
K2HPO4 i,o g
MgSO4-7H2O 0,5 g
KCl ., 0,5 g
NaNO3 2,0 g
FeCl3 0,01 g
Leitungswasser 1,0 1
wurden 30 Minuten bei iio° in Schüttelkulturkolben
sterilisiert, mit Dematium pullulans beimpft, 2 Tage bei 260 C kultiviert und sodann, mit
weiteren 5 % Rohrzucker in Form einer konzentrierten sterilen wäßrigen Lösung versetzt. Nach
♦5 wiederum 30stündiger Kulturdauer wurde die
Kulturlösung bei 3000 Umdrehungen pro> Minute zentrifugiert, die überstehende Lösung mit 2 Teilen
. Methanol gefällt und das so gewonnene rohe Polysaccharid zweimal mit Methanol aus wäßriger
Lösung umgefällt. Es resultierte ein weißes, klar wasserlösliches Polysaccharid, dessen Hydrolyseprodukt
sich papierchromatographisch als einheitlich erwies.
25 1 einer Nährlösung folgender Zusammenzetzung
Rohrzucker .., 750,0 g
K0HPO4 25,0 g
MgSO4-7H2O , 12,5 g
KCl .; .....' 12,5 g
NaNO3 50,0 g
FeCl3 0,25g
Maisqueillwassertrockensubstanz .... 62,5 g
Mit Leitungswasser aufgefüllt auf . 25,0 1
wurden 30. Minuten, bei 1100C sterilisiert und in
einem Rührfermenter mit Dematium pullulans beimpft. Unter Belüftung wurde 24 Stunden bei 260 C
kultiviert. Sodann wurden, 1250 g Rohrzucker in
Focm einer konzentrierten, sterilen, wäßrigen Lösung zur Kultur zugesetzt und die Fermentation
bis zur Aufarbeitung des Kulturansatzes weitere 48 Stunden' fortgesetzt. Die Kulturlöeung wurde
zentrifugiert und dadurch zellfrei erhalten, Mit 3 1 40°/oiger Calciumchloridlösung und 3 1 4 n-Natronlauge,
die nacheinander zum Filtrat gegeben wurden, fielen die gesamten kolloidalen Polysaccharide
in Form ihrer unlöslichen Calciumhydroxydadsorptionsverbindungen aus, Die Adsorptionsverbindung
wurde mit Wasser und mit: Methanol gewaschen und in methanolischer Suspension mit 0,8 1 !/^konzentrierter
Salzsäure zerlegt. Das ungelöste zurückbleibende Polysaccharid wurde mit Methanol
gewaschen und getrocknet. Es stellt ein weißes kolloidal in Wasser lösliches Pulver dar.
Claims (3)
- PATENTANSPRÜCHE:ι. Die Verwendung von Dematium pullulans für die Herstellung kolloidal wasserlöslicher Polysaccharide.
- 2. Verfahren zur Herstellung von kolloidal löslichen Polysacchariden, dadurch, gekennzeichnet, daß man Dematium pullulans auf Nährböden wachsen läßt, die Mono- oder Oligosaccharide enthalten, den mikrobiologischen Prozeß, vorzugsweise nach 2 bis 5 Tagen, abbricht, die Zellen abtrennt und aus den erhalte- ioo nen Lösungen die Polysaccharide gewinnt.
- 3. Verfahren nach Anspruch, 2, dadurch gekennzeichnet, daß man Dematium pullulans auf rohrzuckerhaltigen Nährböden bei Temperaturen zwischen 20 und 400 C submers unter aeroben Bedingungen wachsen läßt.© 609 710/321 11.56
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