DE929389C - Verfahren zur Herstellung von Penicillin - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von PenicillinInfo
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Description
- Verfahren zur Herstellung von Penicillin
Die F.riindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Penicillin und insbesondere verbesserten Medien für die Fermentation von Penicillin erzeugenden Schimmelpilzen. Mit dem Ausdruck Penicillin ist eine oder eine Mischung von mehr als einer antibiotischen Substanz gemeint, die durch die Fermentation von Schimmelpilzen, beispielsweise von der Art des Peni- cillium, z. l3. Penicillium notatum und Penicillium chrj-sogenum, erzeugt wird: Beispiele von Antibiotica, die unter den allgemeinen Ausdruck Penicillin fallen, sind solche wie Penicillin G, Penicillin 1 und Peni- cillin F, von denen Penicillin G das bedeutendste ist. Die Penicilline h@iiilen durch die allgemeine Formel worin R verschiedene Gruppen bedeuten kann, dar- gestellt «-erden; im Falle von Penicillin G ist R eine Benzylgruppe. Penicillin wird durch Fermentation eines Penicillin erzeugenden Schinunelpilzes in einem geeigneten Nährmedium erzeugt, und zwar normalerweise bei den Bedingungen einer aeroben Tiefenkultur, und es sind umfangreiche Untersuchungen durchgeführt -worden, um geeignete Nährmedien aufzufinden, mit denen maximale Ausbeuten an Penicillin erzielt werden können. Gegenwärtig werden für eine wirtschaftliche Herstellung von Penicillin Medien auf der Basis von Maisquellwasser verwendet, die neben diesem Material Wasser, Nährsalze, ein Kohlehydrat, wie Lactose, und gewünschtenfalls andere organische Materialien, wie Maisöl, enthalten. Die für die Unterstützung des Wachstums eines Penicillin erzeugenden Schimmel- pilzes erforderliche Zusammensetzung von Medien auf der Basis Maisquellwasser ist bekannt. Ein solches Medium wird hier als ein "Maisquellwassermedium,; bezeichnet. Es ist ebenfalls bekannt, daß die durch Fermenta- tion eines Penicillin erzeugenden Schimmelpilzes in einem geeigneten Maisquellwassermedium erzielten ausbeuten merklich vergrößert werden können, -wenn man in solche Medien bestimmte organische Sub- stanzen, wie Phenvlessigsäure, Phenylacetamid, p-Phe- nvläthylamin (vgl. britische Patentschrift 586 93o) einbringt, und diese Substanzen sind als Precursoren des Penicillins bekanntgeworden. Es -wird ange- nommen, daß diese Substanzen die Gruppe R in der obenerwähnten Formel für Penicillin liefert, da die Art dieser Precursoren die Art des erhaltenen Peni- cillins beeinflußt; wenn das 3Iedium beispielsweise Phenvlessigsäure enthält, werden verbesserte aus- beuten an Benzylpenicillin (Penicillin G) erhalten, während bei Verwendung von p-Oxyphenylessigsäure ein größerer Anteil an p-Oxybenzylpenicillin erhalten wird. Andere Precursoren von der allgemeinen Formel worin R' Wasserstoff, Methyl, Äthyl, niedrigmole- kulare alkvläther und deren Acyloxyderivate be- deuten kann, sind in der britischen Patentschrift f)r3 4q2 erwähnt, -nie beispielsweise Plienylacetyl- äthanolamin. Eine Substanz, die in ihrem Molekül den Rest R der Penicilline enthält und die nach Ein- bringen in ein geeignetes Maisquellwassermedium zu einer gesteigerten Ausbeute an Penicillin anlaß gibt, -wird hier als "Penicillinprecursor@r bezeichnet. In der USA.-Patentschrift 2a.37 gtä wird die Ein- bringung von Substanzen, die dort als -Stilfit ent- haltende Verbindungen,. bezeichnet -werden, in Peni- cillinfermentationsmedier.- beschrieben. Ganz all- gemein werden dort viele schwefelhaltige Verbin- dungen genannt, im speziellen jedoch metallische Stil- fite besprochen. In der Beschreibung wird einerseits die Verwendung von Thiosulfaten erwähnt, anderer- seits werden aber Beispiele -weder für die Verwendung von Thiosulfaten noch für die dabei zu erzielenden Ergebnisse angeführt. Die Zugabe solcher sulfit- haltiger Verbindungen -wird mehr für sogenannte synthetische 3ledien als für 3laisquellwassermedien vorgeschlagen, und es wird tatsächlich angedeutet, daß die Anwesenheit von Stilfit die Verwendung von Maisquellwasser überflüssig macht. Soweit bekannt, hat die Verwendung von Stilfiten bei den Herstellern von Penicillin in England und in den Vereinigten Staaten von Amerika leinen anklang gefunden. Auf Grund umfassender Versuche -wurde nun ge- funden, daß es bei Verwendung eines geeigneten Mais- quellwassermediums für eine optimale Penicillin- herstellung notwendig ist, in dem Medium so---olil eine Quelle für den Rest R des Penicillinmoleküls als auch eine Quelle für den Schwefel (vermutlich für den Thia- zolidenring) zu verschaffen. Beispielsweise wurde beobachtet, daß die Zugabe eines Penicillinprecur- sors, der als solcher schon die Erhöhung der Penicillin- ausbeuten veranlaßt, eine «,"eitere Steigerung der Aus- beute ergibt, wenn eine geeignete Schwefelquelle an- wesend ist. Während in gleicher Weise die An- wesenheit einer Schwefelquelle als solche in einem Medium, das keinen Penicillinprecursor enthält, fördernd wirkt, wird durch die Anwesenheit eines Precursors die Ausbeute noch -weiter gesteigert. Diese Entdeckungen sind bei großen Zusätzen wichtig. So sind beispielsweise vor der vorliegenden Erfindung optimale Ausbeuten durch Zugabe von Phenylacet@-1- äthanolamin in der Größenordnung von 0, 1° " er- zielt worden, und über diese Zahl hinaus erhöhte Mengen ergaben nicht viel mehr Penicillin. Es -wurde nun gefunden, daß größere Mengen von Penicillin- Precursoren verwendet werden können, wenn man auch eine Schwefelquelle einbringt, und <lall dann höhere Ausbeuten an Penicillin erzielt werden k5nnen als bei Verwendung von Precursoren in irgendeiner :Menge ohne eine solche Zugabe; es scheint also, daß der Schimmelpilz, wenn sowohl die Schwefelquelle wie auch der Penicillinprecursor zusammen in dem Medium anwesend sind, fähig ist, jede dieser beiden einzelnen Substanzen besser auszunutzen, als -renn nur eine von ihnen anwesend ist. Die Auswahl einer geeigneten Schwefelquelle für den erfin<@unggemäpn Zweck hat sorgfältige Untersuchungen, erfordert, und es sind eine Anzahl von Quellen, wie beispie lsweise die in der erwähnten USA.-Patentsclirift a T," giS vor- geschlagenen, geprüft -worden. Es wurde jedoch ge- funden, daß nur Thiosulfate befriedigende Ergebnisse zu ergeben scheinen und daß andere schwefel- haltige Verbindungen, -nie Cystein, Sulfate, Stilfite u. dgl., unbefriedigend sind. Weiterhin ist die vor- liegende Erfindung nur bei Kulturbedingungen von Wert, bei denen normalerweise hohe Ausbeuten er- zielt werden können, nämlich bei Tiefenkulturbedin- gungen. Es kann also gesagt werden, daß die Ent- deckung, auf der die vorliegende Erfindung fußt, darin besteht, daß bei der Fermentation unter Tiefen- kulturbedingungen ein Penicillin erzeugender Schim- melpilz in einem geeigneten Maisquellwassermediuni, das sowohl ein Thiosulfat -wie einen Penicillinprecursor enthält, mehr befähigt ist, bei seiner Peiiicillins@-ntllese den Procursor und den Schwefel auszunutzen, so daß größere Mengen an diesen beiden Zusatzsubstanzen verwendet werden können, -ras die Herstellunvon Penicillin in größeren Ausbeuten, als sie bisher möglich waren, zur Folge hat. Bei optimalen Bedingungen können daher Ausbeuten von mehr als ;ooo inter- nationalen Einheiten je Kubikzentimeter erzielt werden. Es sei bemerkt, daß durch Versuche gezeigt worden ist, daß die hohen, durch das erfindungs- gemäße Verfahren zu erzielenden Ausbeuten nicht allgemein bei @'er«'elidung syntlietiscller Medien er- halten werden kühnen, die eine Schwefelquelle und einen Penicillinprecursor, jedoch kein Maisquell- e @2sscr enthalten. Das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung von Penicillin besteht daher darin, (laß ein Penicillin c'rzetigender @cliininiulpilz unter Tiefenlkulturl)edin- gungen in einer) Maisquellwasserinc(liuin, das ein Thiosulfat und einen Penicillinprecursor, wie hier definiert, enthält, fermentiert wird. Es ist ein weiteres Merkmal der Erfindung, daß der Penicillinprecursor Phenylessigsä ure, Phenylacet- ainid, Plielivlacetyliithanolamin oder (1'-Plieny-lätliyl- ;linin ist. Das zur @-er«'endung kommende Thiosulfat sollte zumindest teilweise wasserl-slich sein, und sein hutionischer Anteil sollte in der zur Verwendung kommenden Menge keine Vergiftung des Schimmel- pilzes oder Zerstörung des erzeugten Penicillins ver- ursachen. Durch Vorversuche mit Schüttelflaschen ist leicht festzustellen, ob irgendein spezielles Thio- sulfat gec'i;@net ist; es wird irgendein Natrium- tllic@su@fat, 1i<tliunitliiosulfat, Amnioniunitliiositlfrit oder llagnesiun)tliiosulfat verwendet. Die für die j:rfindung bevorzugten Penicillin er- zl'tigcnd(#n Schitninelpilze sind Penicillium notatuin und f'<'nicillitiril chrvsogenum. \Vie ()l-)en fest;-,stellt, kann n las Mengen an Pctii- cilliiil>rerursor ver«-enden, die gr@)ßer sind als die 11eiigen, die bisher zur Ver«-endung kanten, und inan l)evorzugt die Verwendung von mehr als o,i o," und vorzugs«-eise o,2"" an Procursor, wobei die obere t irenze durch die leichte toxische Wirkung bestimmter 1'r( cursoreit auf den Schimmelpilz bestimmt ist. Es sei beincrlct, daß einige Precursoren während der 1#erinentation schnell verbraucht «-<#rden, ohne daß sie notwendiger«-eisu vom Schimmelpilz für die Syn- these von Penicillin verwendet «-erden, und es ist geg(,ni\-iirtig in solchen Fällen üblich, weitere Mengen an Precursor in dein Maße, wie die Fermentation fort- schreitet, ztizitgc'l)en; ein soklier Precursor ist bei- spiels«-c'isc I'hen@'lessi@säure. 1>ie' Ztig@tlie i\-e iterer Precursormengen v()n Zeit zu Zeit wahrend der Fermentation kann bei dein crfindungs- g#'in<il3cil #'e rfabren ebenfalls notwendig sein. Es ist jedoch nicht notwendig, den Precursortyp zu ver- wt'ildtll, (ler ill der britischen Patentschrift t)i3 4(-)2 (@rtt-Millt ist. I'.s \@-erdun i11) Medium Thiosuliat- inengeii vurwundet, die einem Sch«-ufelgeh@ilt Unt- sprechen, der gri»l.ie r ist als o,oi0 " und vorzugsweise ungefähr o,o2 ° " beträtet. «-un) Thiosulfat verwendet wird. Diu (-)hure Grunze der Zugaben an Precursor und l`I11@)sllliat ist durch die Mengen dieser liusta il(ltelle bestiniiiit, die der in Frage kommende Schinmielpilz erträgt. Wenn zuviul eines oder der beiden Bestand- toile zugegeben wird, findet eine Wachstuinshinderung statt. Trotzdem kann die Menge jedes der beiden Bestandteile, die ein bestimmter Schimmelpilzstamm zuläßt, durch Akklimatisierung der Kultur an die speziellen Bedingungen vergrößert werden. Die Erfindung soll im folgenden an Hand von experimentellen Daten näher erläutert «'erden. Beispiel i Es wurden Versuche zum Vergleich der Wirkung von Natriumsulfat in einer Menge von o,o8 °j" mit variierenden Mengen von Phenyläthv_ lamm und Pheliylacetamid durchgeführt. Der für diese Versuche zur Verwendung gekommene Stamm von Penicillium chrysogenum war PNI 3. Das Grundmedium hatte die folgende Zusammen- setzung Lactose . . . . . . . . . . . . . . . 3,5 "" Feststoffe Maisquell- wasser . . . . . . . . . . . . . . 3,5 0,'0 (Gewicht) KHZPOi ............. 0,4 o ;o Kreide (AN ALAR) ..... 1,0 °;o Maisöl . . . . . . . . . . . . . . . . o,16 ccm pro Flasche, getrennt zugegeben. Je nach ßed@irf «-urelen Natriumthiosulfat und das Phenvlätlivlamin oder Plienylacetamid als Gewichts- anteil zll ;l, eilen des Hauptiriedlums zugegeben. Probeflaschen «-orden in einer Rotationsschüttel- maschine finit 21o Umdrehungen je Minute geschüttelt. Sie wurden dann mikrobiologisch getestet, wobei die folgenden Ergebnissi' gew«nncn «-urdes o,i5 0," Phuny-lacetainicl - 5-Tage-Kultur Versuch Nr. Titer Mittel 1 200 200 200 260 230 200 mit Thiosulfat: o,08 o," lind 0,15 "@" Phenylacetamid Versuch Nr. Titer Mittel 3 6i0 615 62O t 4 ,-5 N .+8o 18o o,3"", Plienylacetamid - kein Thiosulfat Versuch Nr. Titer Mittel J 300 31J 3.30 c32o 325 325 mit Thiosulfat o,oS" " Versuch \i-. Titer Mittel 5C)U 5()J 54n S 155 450 5 Menge -0,1501" - kein Thiosulfat Versuch Nr. Titer Mittel 285 295 310 10 310 315 320 mit Thiosulfat o,o8 °/" Versuch Nr. Titer Mittel ii 485 485 i2 555 545 540 Menge = 0,3 °/" - kein Thiosulfat Versuch Nr. Titer Mittel 13 355 355 14 325 28O 240 mit Thiosulfat o,o8 "/o Versuch Nr. Titer Mittel 15 61o 61o 16 605 565 525 Phenylacetamid - 7-Tage-Kultur Menge 0,i5 °/" Versuch Nr. Titer mittel 17 210 270 330 18 340 325 310 mit Thiosulfat o,o8 °/" Versuch Nr. Titer Mittel i9 550 5-2o 490 20 440 430 420 Menge o,3 °;" Versuch Nr. Titer Mittel 21 210 285 365 22 300 295 290 mit o,o8 Thiosulfat Versuch Nr. Titer Mittel 23 6oo 6oo 24 530 565 600 5-Tage-Kultur - Menge o,i5 °/o Versuch Nr. Titer Mittel 25 315 325 335 26 350 350 mit o,o8°/" Thiosulfat Versuch Nr. Titer Mittel 27 495 495 28 465 465 Menge 0,3 011,) Versuch Nr. . Titer Mittel 29 310 310 30 385 385 mit o,o8 "j" Thiosulfat Versuch Nr. Titer Mittel 31 370 420 470 32 505 495 490 Menge o,6 °/" Versuch Nr. Titer Mittel 33 390 390 34 270 260 255 mit o,o8 °/o Thiosulfat Versuch Nr. Titer Mittel 35 520 485 450 36 425 435 445 Phenyläthylamin - 6-Tage-Iiultur Menge 0,15 ";'" Versuch Nr. Titer Mittel 37 395 395 38 375 J/5 mit o,o8 °/o Thiosulfat Versuch Nr. Titer Mittel 39 550 520 485 40 42-5 475 535 Menge 0,3 °/o Versuch Nr. Titer Mittel 41 470 470 42 455 455 mit 0,o8 °,'" Tbiosulfat Versuch N r. Titer "Mittel 43 560 555 550 44 575 b05 64o Menge 0,611, Versuch N r. Titer Mittel 45 -130 -150 470 46 -160 435 410 finit 0,o8",'" Thiosulfat Versuch Nr. Titer "Mittel 47 J55 550 5-15 48 t>10 565 520 Plicil@-lätli@-lamin - 7-Tage-Kultur Menge o,15 °," Versuch Nrr. Titer "Mittel 49 225 280 330 50 460 .160 mit Thiosulfat (o,oe °, ") Versuch \r. Titer Mittel 51 :190 500 510 52 61o 61o Menge o,3 °; " Versuch \r. Titer Mittel 53 5-1o 540 54 475 475 mit Thiosulfat (0,o8 ": ") Versuch _X r. Titer Mittel 55 575 57o 565 5r1 585 545 51o Menge 0,6 °,'" Versuch Nr. Titer Mittel 37 66o 66o 5'8 -155 450 -1-10 mit Thiosulfat (0,o8"-") Versuch Nr. Titer Mittel 39 575 570 56o h0 t350 63j 615 Fermentation, durch"efiihrt in 5-I-Fermentationsgefäßen Die folgenden mikrohiologischen Titer wurden an 5-d-Fermentationsgefäßen auf dem gleichen Grund- niediuni wie dem für die Schüttelflaschen verwendeten geWonnun. Phenvlacetamid wurde in einer Menge von o,15 und 0,3 ", r, zugesetzt. Ohne Mit \atriumtliiosulfat \a2riumtlüosullat: 0, ninden 0,080,' Plienp1acetainid Pllen@-lacetamid 0,1#5o,7 0 1 0,300 0,15% 1 0,3w'0 70 840 77 0 780 630 82 580 66o 62o 590 94 790 760 870 1030 106 99o 880 103 0 1150 118 920 7.10 1150 ioio 130 930 720 1430 1070 142 78 0 810 980 1090 Beispiel 2 Das folgende Medium wurde für Versuche mit Plienvlacetvlätl)anolamin verwendet Lactose . . . . . . . . . . . . . . . . 3,0 °;'o Feststoffe "Maisquellwasser 3,0 ";'" Kreide ................ 1,o 1'I" KH.PO4 .............. 0,4 °,'u Phenvlacet-,--lätlianolamin. o,i °;" lIais<il ... . . . . . . . . . . . . . . 0,25 °/" (bezogen auf das Volumen) Unter Verwendung von Penicillium chrt-sogenum var. breuistenjnia. (vgl. USA-Patentschrift 2458495) wurden eine Anzahl von Schüttelflaschenversuchen durchgeführt, wobei der Hälfte der Flaschen eine zu- sätzliche Menge von 0,02 °,/" Schwefel in Form von 0,08 "'"t \atriumtliiosulfat zugegeben wurde. Die Er- gebnisse waren die folgenden: lnhtlhationszeit Kontrollversuch -f- Tliiosulfat 5 Tage....... 13.M0 i. E. ccm 1370 i. E.iiccm 1380 - 1:19o - Tage....... 1380 - 1590 - 1320 - 1610 - 7 Tage....... 1175 - 1235 - 1165 - 1310 - Diese Ergebnisse, die bei 5 und 6 Tagen einen An- stieg im Titer von ungefähr 200 internationalen Ein- heiten je Kubikzentimeter bei den Thiosulfatflaschen zeigten, waren statistisch bedeutsam. Da es nicht bekannt war, ob die Wirkung auf eine Eigenschaft des speziellen verwendeten Maisquell- wasseransatzes zurückzuführen war, wurden 14 andere Ansätze in Schüttelflaschen mit und ohne Zugabe von \atriumthiosulfat getestet, und in jedem Falle wurde gefunden, daß durch diese Zugabe ein Anstieg im Titer erhalten wurde. ?als nächstes wurde N atriumthiosulfat in 5-l-Fer- mentationsgefäßen untersucht. Für diese Versuche wurde ein Medium verwendet, das eine höhere Konzen- tration an Lactose und Feststoffen des Maisquell- wassers enthielt Lactose . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3,5 0/0 Feststoffe Maisquellwasser ........... 3,5 0(0 Irreide ............................ i,o o/ 0 RH.PO. .......................... 0,4 0,'`0 Phenylacetyläthanolamin ............ o,i 0 70 o Maisöl . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 0,25 0 Zu diesem Medium wurden wie in den Schüttel- flaschenversuchen 0,o8 % Natriumthiosulfat, die 0,02 0!0 Schwefel entsprechen, zugegeben. Nach 96 und I08 Fermentationsstunden wurden die folgenden Titer erreicht: Flasche 96 Stunden 1o8 Stunden 17 1430 i. E./ccm 1620 i. E./ccm 18 2020 - 165o - 20 1 1430 - 1580 - 21 1550 - 146o - 23 1320 - 1400 - 24 2070 - 186o - Kontrollversuche, die in genau der gleichen Weise, jedoch ohne Natriumthiosulfat durchgeführt wurden, gaben die folgenden Ergebnisse: Flasche 92 Stunden I 116 Stunden 25 1200 750 26 1140 850 .27 logo 930 28 840 1270 29 glo iigo Weitere Versuche in je 5-l-Fermentationsgefäßen wurden in einem 'Medium der folgenden Zusammen- setzung durchgeführt: Lactose ................ 3,5 o;'o Feststoffe Maisquellwasser 3,5 0/0 (bezogen auf Phenylacetyläthanoiamin. o,2 °,'o das Gewicht) Ir W P 0,I . . . . . . . . . . . . . . 0,4 0,!0 N atriumthiosulfat ....... 0,o8 0% Kreide ................ i,o 0/0 Maisöl . . . . . . . . . . . . . . . . . 0,25% Bei diesen Versuchen wurde der Precursor von o,I 0!0 auf o,2 0,10 erhöht, um das durch die Zugabe von N atriumthiosulfat gesteigerte Vermögen zur Erzeu- gung von Penicillin zu unterstützen. Die folgenden Titer zeigen die erzielten Ergebnisse. Flasche 96 Stunden 1o8 Stunden 6 2040 i. E./ccm ig8o i. E./ccm 20 1770 - 2020 - Es wurde dann gefunden, daß das gleiche Medium für andere Stämme von P. chrysogenum ebenso günstig ist. Bei Verwendung von zwei verschiedenen Stämmen wurden die folgenden Titer erhalten: Flasche Nr. 96 Stunden 1 1o8 Stunden Stamm 1 l 13 165o I870 17 1560 2250 I4 216o .'.I30 Stamm 2 I8 2050 1970 15 2020 2230 ?2I 2090 2350 Bei Verwendung von verschiedenen Mengen Mais- quellwasser und Lactose wurden dann Versuchs- ergebnisse gewonnen. Die Titer sind die folgenden: Behandlung Flasche 9(3 1o8 u r. stunden Stunden 1. 3,5 0l0 #VIOW") 24 1800 2-220 3,5 0/0 Lactose 4 Ip40 2100 17 '''22O 1810 2. 4,0 0,10 MOW 16 1900 (84 Std.) - 3,5 0,1o Lactose 13 1990 1700 3. 5,0 % MOW 6 1650 (84 Std.) - 3,5 010 Lactose 20 17S0 710 4. 4,0o/. MOW 5 2 33 0 2100 4,0l)/, Lactose 15 logo 1580 5. 4.5 0/0 MOW ig 166o - 4,00/, Lactose 14 2070 1780 6. 5,o 0ö MOW 21 1580 65o 4,0 °!o Lactose 23 1380 1320 *) 3Iaisquellirasser Lactose . . . . . . . . . . . . . . . . 3,5 0/0 Feststoffe Maisquellwasser 3,5 0,'0 (bezogen auf Phenylacetyläthanolamin. 0,2 0/0 das Gewicht) K H, P O4 . . . . . . . . . . . . . . 0,4 0/0 Natriumthiosulfat ....... 0,o80/0 Irreide ................ i,o 0/0 @leC1111iI1 Lactose ................ 3#J u J#eststolie \Iaisquelhcasser 3,5",I K H=1'01 . . . . . . . . . . . . . . 0,4 Kreide ..... . .......... 1.0 \iaisül ....... . . . . . . . . . . o,1ti ccm pro Flasche, getrennt zugegeben `1ta111211'kl I@. I@JII't'Sü@-el111111, Pjl 3. 1're<nusor Drei @len@-en neutralisierte Phuiivlessigsäure, in Ab- Stä11de11 von 24 Stunden aseptisch zugegeben. Ergebnisse Phenwl- Pllcn#;I- Phinvl- e@i@üurc e;i@-@@iurc esigsäure 1I@Ii @lllt 1-,in Illlt '-,in 11 kein 11- 1'hlr,- 7#i#io- Tl:;o Tl;io T'_lio #nIf,i- `lI@Iat i #llll@it I #Illl:ll,lllfat @tll'at Tage 1' laSChe I 2()J I80 33 5 10 <20 <20 Flasche = 290 .305 335 S <20 <20 Flasche ,i 1 34J Ios I 31- j ,- --20 <20 Mittel . ...... 300 1q3 327 -20 <20 @@ Tag'. I' 1@iSCl@e I . . . I 300 235 415 20 100 l@lascile 2 . . . 34,5 220 I -145 oo 2,5 io Fla#clle 3... 36o 2 5 5 330 ; 50 1 3 0 10 Mittel ....... 335 230 -103 75 5@ 40 l'agu Flasche I .. 35O ?5I 420 jo 14 1 l Flasche 2 ... 440 25J .130 1g0 z8 ti Flasche 3.. - 251 375 20J 14 Mittel .......I 395 I 251 i .108 I 178 1 1 5 I 6 * 2o -Minuten. hei 1,05 Atn1. sterilisiert Es sei bemerkt, daß bei einer Menge von 0,24 °,'" Precursor dessen toxische Wirkung bei Zugabe des Thiosulfats beseitigt wird.
Claims (1)
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PA1E\'I'A\SPRL`CI1L: I. Verfahren zur Herstellung von Penicillin mittels Penicillin erzeugender Schimmelpilze unter Tiefenkulturbedingungen in einem Maisquellwasser- medium und in Gegen -,wart eines Precursors, da- durch gekennzeichnet, daß das Rührmedium außer dein Precursor noch ein Thiosulfat in einer Menge enthält, die gering genug ist, keine wesentliche Henllnung der Fermentation zu Z'er- ursachen. 2. Verfahren nach Anspruch I, dadurch gekenn- zeichnet, daß das Medium wenigstens o,I "" und #-Or7-tigswelse wenigstens o,2 #." des PreclirSOrs lind Wenigstens o,o1 °", und vorzugsweise wenigstens 0,02 °," Schwefel als Thiosulfat enthält. 3. Verfahren nach Anspruch I und 2, dadurch gekennzeichnet, daß als Precursor Phenylessig- säure, Phenvlacetamid, Phen@-lacetvläthanolamin oder 13-Phenvlätli\-lamin und als Thiosulfat Na- triuinthiosulfat, lialiumthiosulfat, Aninionium- tliiosulfat oder -Nlagnesiumthiostilfat verwendet «'erden. 4. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Zu- gaben an Precursor zu dem Medium in Zeitab- ständen «während der Fermentation vorgenommen werden, «wobei der Gesamtgehalt an Precursor gering genug ist, um keine wesentliebe Hemmung der Fermentation zu verursachen. j. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß als Penicillinschiinmelpilz Penicillium chr-,'sogenum vur«-endut wird.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB929389X | 1952-03-10 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE929389C true DE929389C (de) | 1955-06-27 |
Family
ID=10728181
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DEG11180A Expired DE929389C (de) | 1952-03-10 | 1953-03-11 | Verfahren zur Herstellung von Penicillin |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE929389C (de) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE1118401B (de) * | 1959-11-24 | 1961-11-30 | Iabiochemieia Ges Mit Beschrae | Verfahren zur Herstellung von Penicillinen durch Fermentation |
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1953
- 1953-03-11 DE DEG11180A patent/DE929389C/de not_active Expired
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE1118401B (de) * | 1959-11-24 | 1961-11-30 | Iabiochemieia Ges Mit Beschrae | Verfahren zur Herstellung von Penicillinen durch Fermentation |
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