DE730656T1 - Aspergillus poetidus exprimierungssystem - Google Patents
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Claims (24)
1. Aspergillus foetidus Wirtszelle, umfassend eine Nukleinsäuresequenz, die
&iacgr;&ogr; ihrerseits für ein heterologes Enzym kodiert, funktionsfähig verknüpft
2. Wirtszelle nach Anspruch 1, wobei das Enzym aus der Gruppe ausgewählt
ist, die aus einer Catalase, einer Laccase, einer Oxidase, einer Phenoloxidase, aus Oxidoreduktasen, aus einer Cellulase, einer Xylanase,
einer Peroxidase, einer Lipase, einer Esterase, einer Cutinase, einer Protease, einer Aminopeptidase, einer Carboxypeptidase, einer Phytase,
einer Pectinase, einer Pectinlyase, einer Amylase, einer Glucoamylase, einer (-Galactosidase, einer (-Galactosidase, einer (-Glucosidase, einer
(-Glucosidase, einer Mannosidase, einer Isomerase, einer Invertase, einer Ribonuklease, einer Chitinase und einer Desoxyribonuklease besteht.
3. Wirtszelle nach Anspruch 1, wobei der Promotor ein pilzlicher Promotor
ist.
4. Wirtszelle nach Anspruch 1, wobei das Protein ein pilzliches Enzym
ist.
5. Wirtszelle nach Anspruch 1, die auch einen Selektionsmarker umfaßt.
6. Wirtszeile nach Anspruch 5, wobei der Marker aus der Gruppe ausgewählt
ist, die aus argB, trpC, pyrG, amdS und hygB besteht.
7. Wirtszelle nach Anspruch 3, wobei der Promotor aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus den Promotoren der TAKA Amylase von A.
oryzae, der Asparagmproteinase von Rhizomucor miehei, der Glucoamylase
von A. niger, der neutralen (-Amylase von A. niger, der säurestabilen (-Amylase von A. niger, der Lipase von Rhizomucor miehei und
aus einem nativen Promotor von A. foetidus besteht.
8. Aspergilius foetidus Wirtszelle, umfessend eine Nukleinsäuresequenz, die
ihrerseits für ein heterologes pilzliches Enzym, das funktionsfähig mit
einem pilzlichen Promotor verknüpft ist, und für einen Selektionsmarker
kodiert.
9. Zelle nach Anspruch 8, wobei das Enzym aus der Gruppe ausgewählt
ist, die aus einer Catalase, einer Laccase, einer Phenoloxidase, einer Oxidase, aus Oxidoreductasen, aus einer Cellulase, einer Xylanase, einer
Peroxidase, einer Lipase, einer Hydrolase, einer Esterase, einer Cutinase, einer Protease und aus anderen proteolytischen Enzymen, aus einer
Aminopeptidase, einer Carboxypeptidase, einer Phytase, einer Lyase, einer Pectinase und aus anderen pectinolytischen Enzymen, aus einer
Amylase, einer Glucoamylase, einer (-Galactosidase, einer (-Galactosidase, einer (-Glucosidase, einer (-Glucosidase, einer Mannosidase, einer
Isomerase, einer Invertase, einer Transferase, einer Ribonuklease, einer Chitinase und einer Desoxyribonuklease besteht.
10. Wirtszelle nach Anspruch 9, umfassend ein pilzliches Enzym, das aus
der Gruppe ausgewählt ist, die aus einer Lipase, einer Xylanase und einer Cellulase besteht.
11. Wirtszelle nach Anspruch 8, wobei der Promotor aus der Gruppe
ausgewählt ist, die aus den Promotoren der TAKA Amylase von A. oryzae, der Asparaginproteinase von Rhizomucor miehei, der Glucoamylase
von A. niger, der neutralen (-Amylase von A. niger, der säurestabilen
(-Amylase von A. niger, der Lipase von Rhizomucor miehei und aus einem nativen Promotor von A. foetidus besteht.
12. Wirtszelle nach Anspruch 8, wobei der Selektionsmarker aus der Gruppe
ausgewählt ist, die aus argB, trpC, pyrG, amdS und hygB besteht.
13. Wirtszelle nach Anspruch 8, umfassend eine Nukleinsäuresequenz, die
ihrerseits für eine pilzliche Lipase kodiert, funktionsfähig mit einem Promotor der TAKA-Amylase verknüpft, und desweiteren einen amdS
Marker umfaßt.
14. Wirtszelle nach Anspruch 8, umfassend eine Nukleinsäuresequenz, die
ihrerseits für eine pilzliche Xylanase kodiert, funktionsfähig mit einem
Promotor der TAKA-Amylase oder mit einem AMG-Promotor verknüpft, und desweiteren einen amdS oder hygB Marker umfaßt.
15. Verfahren zur Herstellung eines beliebigen Enzyms, umfassend die
Kultivierung einer Aspergillus foetidus Wirtszelle, die eine Nukleinsäuresequenz
umfaßt, die ihrerseits für ein heterologes Protein kodiert, funktionsfähig mit einem Promotor verknüpft, unter Bedingungen, die
die Expression des Proteins und das Gewinnen des Proteins aus der Kultur zulassen.
16. Verfahren nach Anspruch 15, wobei das Protein ein eukaryotisches
Enzym ist.
17. Verfahren nach Anspruch 15, wobei der Promotor ein pilzlicher Promotor
ist.
18. Verfahren nach Anspruch 16, wobei das Protein ein pilzliches Enzym
ist.
19. Verfahren nach Anspruch 16, wobei das Enzym aus der Gruppe ausgewählt
ist, die aus einer Catalase, einer Laccase, einer Phenoloxidase, einer Oxidase, aus Oxidoreductasen, aus einer Cellulase, einer Xylanase,
&iacgr;&ogr; einer Peroxidase, einer Lipase, einer Hydrolase, einer Esterase, einer
Cutinase, einer Protease und aus anderen proteolytischen Enzymen, aus
einer Aminopeptidase, einer Carboxypeptidase, einer Phytase, einer Lyase, einer Pectinase und aus anderen pectinolytischen Enzymen, aus
einer Amylase, einer Glucoamylase, einer (-Galactosidase, einer (-Galactosidase,
einer (-Glucosidase, einer (-Glucosidase, einer Mannosidase, einer Isomerase, einer Invertase, einer Transferase, einer Ribonuklease,
einer Chitinase und einer Desoxyribonuklease besteht.
20. Verfahren nach Anspruch 15, das auch einen Selektionsmarker umiäßt.
21. Verfahren nach Anspruch 20, wobei der Marker aus der Gruppe ausgewählt
ist, die aus argB, trpC, pyrG amdS und hygB besteht.
22. Verfahren nach Anspruch 15, wobei der Promotor aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus den Promotoren der TAKA Amylase von A.
oryzae, der Asparaginproteinase von Rhizomucor miehei, der Glucoamylase
von A. niger, der neutralen (-Amylase von A. niger, der säurestabilen (-Amylase von A. niger und der Lipase von Rhizomucor miehei
besteht.
23. Aspergiiius foetidus Wirtszelle, umfassend eine rekombinante Nukleinsäuresequenz,
die ihrerseits für ein homologes Enzym kodiert und funktionsfähig mit einem Promotor verknüpft ist.
24. Verfahren zur Herstellung eines beliebigen Enzyms, umfassend die
Kultivierung einer Aspergülus foetidus Wirtszelle, die eine rekombinante Nukleinsäuresequenz umfaßt, die ihrerseits für ein homologes Enzym
kodiert, funktionsfähig mit einem Promotor verknüpft, unter Bedingungen, die die Expression des Enzyms und das Gewinnen des Enzyms
&iacgr;&ogr; aus der Kultur zulassen.
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