DE69627659T2

DE69627659T2 - Neue thrombin-inhibitoren, deren herstellung und verwendung

Info

Publication number: DE69627659T2
Application number: DE69627659T
Authority: DE
Inventors: David Gustafsson; Jan-Erik Nyström
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 1995-07-06
Filing date: 1996-07-02
Publication date: 2004-03-04
Anticipated expiration: 2016-07-03
Also published as: TR199800009T1; US6051568A; RU2176645C2; PT836615E; DE69627659D1; KR100435008B1; CA2226256C; PL324483A1; NO324092B1; NZ509474A; IS4639A; ATE238342T1; US20020042396A1; HK1008995A1; US20040087647A1; CN1147504C; CN1195354A; BR9609447A; IL122813A0; NO980015D0

Description

Gebiet der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft neue, pharmazeutisch brauchbare Verbindungen, insbesondere kompetitive Inhibitoren von Trypsin-ähnlichen Serinproteasen, insbesondere Thrombin, ihre Verwendung als Arzneimittel, pharmazeutische Zusammensetzungen, die diese Verbindungen enthalten, und Syntheserouten zu ihrer Herstellung.
Hintergrund
Die Blutgerinnung ist als Schlüsselprozeß sowohl an der Hämostase (d. h. Verhinderung von Blutverlust aus einem beschädigten Gefäß) als auch an der Thrombose (d. h. der Bildung eines Blutgerinnsels in einem Blutgefäß oder im Herz, die manchmal zum Gefäßverschluß führt) beteiligt.
Die Gerinnung ist das Ergebnis einer komplizierten Reihe enzymatischer Reaktionen, wobei in einem der letzten Schritte das Proenzym Prothrombin in das aktive Enzym Thrombin umgewandelt wird.
Das Thrombin spielt bei der Koagulation bekanntlich eine zentrale Rolle. Es aktiviert Thrombozyten, was zu Thrombozytenaggregation führt, wandelt Fibrinogen in Fibrinmonomere um, die spontan zu Fibrinpolymeren polymerisieren, und aktiviert den Faktor XIII, der wiederum die Polymere zu unlöslichem Fibrin vernetzt. Thrombin aktiviert außerdem den Faktor V und den Faktor VIII, was zur Bildung von Thrombin aus Prothrombin mit positiver Rückkopplung führt.
Von effektiven Thrombin-Inhibitoren wird daher erwartet, daß sie antithrombotisch wirksam sind, indem sie die Aggregation von Thrombozyten und die Bildung und Vernetzung von Fibrin inhibieren. Darüber hinaus wird erwartet, daß die antithrombotische Wirkung durch effektive Inhibierung des positiven Rückkopplungs mechanismus verstärkt wird.
Stand der Technik
Die Entwicklung von niedermolekularen Thrombin-Inhibitoren wurde von Claesson in Blood Coagul. Fibrinol. (1994) 5, 411, beschrieben.
Blombäck et al. berichteten in J. Clin. Lab. Invest. 24, Erg. 107, 59, (1969), über Thrombin-Inhibitoren auf der Basis der Aminosäuresequenz um die Spaltstelle für die Fibrinogen-Aα-Kette. Dort wurde nahegelegt, daß von den besprochenen Aminosäuresequenzen die Sequenz Phe-Val-Arg (P9-P2-P1, im folgenden als P3-P2-P1-Sequenz bezeichnet) den wirksamsten Inhibitor darstellt (eine Klassifikation der Substratspezifität findet sich bei Schechten und Bergen, Biophys. Res. Commun. (1967) 27, 157 und (1968) 32, 898).
Thrombin-Inhibitoren auf Basis von Dipeptidylderivaten mit einem α,ω-Aminoalkylguanidin in der P1-Position sind aus der US-PS 4,346,078 und der internationalen Patentanmeldung WO 93/11152 bekannt. Es wurde auch über ähnliche, strukturverwandte Dipeptidylderivate berichtet. So werden beispielsweise in der internationalen Patentanmeldung WO 94/29336 Verbindungen beschrieben, die beispielsweise Aminomethylbenzamidine, cyclische Aminoalkylamidine und cyclische Aminoalkylguanidine in P1-Position aufweisen; in der europäischen Patentanmeldung 0 648 780 werden Verbindungen beschrieben, die beispielsweise cyclische Aminoalkylguanidine in P1-Position aufweisen.
Thrombin-Inhibitoren auf Basis von Peptidylderivaten, die ebenfalls cyclische Aminoalkylguanidine (z. B. entweder 3- oder 4-Aminomethyl-1-amidinopiperidin) in P1-Position aufweisen, sind aus den europäischen Patentanmeldungen 0 468 231, 0 559 046 und 0 641 779 bekannt.
Thrombin-Inhibitoren auf Basis von Tripeptidylderivaten mit Argininaldehyd in P1-Position wurden zuerst in der europäischen Patentanmeldung 0 185 390 beschrieben.
In letzter Zeit wurde über in P3-Position modifizierte Peptidylderivate auf Argininaldehyd-Basis berichtet. So werden z. B. in der internationalen Patentanmeldung WO 93/18060 Hydroxysäuren, in der europäischen Patentanmeldung 0 526 877 Desaminosäuren und in der europäischen Patentanmeldung 0 542 525 O-Methylmandelsäuren in P3-Position beschrieben.
Inhibitoren von Serinproteasen (z. B. Thrombin) auf Basis von elektrophilen Ketonen in P1-Position sind ebenfalls bekannt. So werden beispielsweise in der europäischen Patentanmeldung 0 195 212 Peptidyl-α-ketoester und -amide, in der europäischen Patentanmeldung 0 362 002 Fluoralkylamidketone, in der europäischen Patentanmeldung 0 364 344 α,β,δ-Triketoverbindungen und in der europäischen Patentanmeldung 0 530 167 α-Alkoxyketon-Derivate von Arginin in P1-Position beschrieben.
Andere, strukturell verschiedene Inhibitoren von Trypsin-ähnlichen Serinproteasen auf Basis von C-terminalen Boronsäurederivaten von Arginin und Isothiouronium-Analogen davon sind aus der europäischen Patentanmeldung 0 293 881 bekannt.
In letzter Zeit wurden Thrombin-Inhibitoren auf Basis von Tripeptidylderivaten in den europäischen Patentanmeldungen 0 669 317, 0 686 642 und 0 648 780 und den internationalen Patentanmeldungen WO 95/35309, WO 95/23609, WO 96/25426, EP 672 658 und WO 94/29336 beschrieben.
Es besteht jedoch nach wie vor ein Bedarf an effektiven Inhibitoren von Trypsin-ähnlichen Serinproteasen, wie Thrombin. Es besteht ein besonderer Bedarf an Verbindungen, die sowohl oral bioverfügbar sind als auch Thrombin gegenüber anderen Serinproteasen selektiv inhibieren. Verbindungen mit kompetitiver inhibitorischer Wirkung auf Thrombin sollten insbesondere zur Verwendung als Antikoagulantien und daher bei der therapeutischen Behandlung von Thrombose und verwandten Erkrankungen geeignet sein.
Darstellung der Erfindung
Die Erfindung stellt Verbindungen der Formel I
wobei p und q unabhängig voneinander für 0 stehen;
R¹ für H steht;
R² für H steht;
R³ für Phenyl steht (das durch einen oder mehrere Reste aus der Gruppe C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, Halogen, Hydroxy, Cyano, Nitro, Methylendioxy, Trifluormethyl, N(H)R²⁷ und C(O)OR²⁸ substituiert ist);
R²⁷ für H, C_1-4-Alkyl oder C(O)R²⁹ steht;
R²⁸ und R²⁹ unabhängig voneinander für H oder C_1-4-Alkyl stehen;
R⁴ für H oder C_1-4-Alkyl steht;
Y für C_1-3-Alkylen steht, das gegebenenfalls durch C_1-4-Alkyl, Hydroxy, Methylen oder Oxo substituiert ist;
n für 1 steht; und
B für ein Strukturfragment der Formel IVa steht
wobei
R⁵ für H, Halogen oder C_1-4-Alkyl steht;
und deren pharmazeutisch unbedenklichen Salze (im folgenden als „erfindungsgemäße Verbindungen" bezeichnet) bereit.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können Tautomerie aufweisen. Alle tautomeren Formen und Gemische davon fallen in den Schutzbereich der Erfindung.
Die Verbindungen der Formel I können auch ein oder mehrere asymmetrische Kohlenstoffatome enthalten und können daher optische Isomerie und/oder Diastereomerie aufweisen. Alle Diastereomere lassen sich nach üblichen Methoden trennen, z. B. durch Chromatographie oder fraktionierte Kristallisation. Die verschiedenen Stereoisomere lassen sich durch Trennung eines racemischen oder anderen Gemischs der Verbindungen nach üblichen Methoden isolieren, z. B. durch fraktionierende Kristallisation oder HPLC. Alternativ dazu kann man die gewünschten optischen Isomere durch Umsetzung der entsprechenden optisch aktiven Edukte unter racemisierungs- und epimerisierungsfreien Bedingungen oder durch Derivatisierung, beispielsweise mit einer homochiralen Säure, und anschließende Trennung der diastereomeren Ester mit üblichen Mitteln (z. B. HPLC, Chromatographie an Kieselgel) herstellen. Alle Stereoisomere fallen in den Schutzbereich der Erfindung.
Die Alkylgruppen, die R⁴, R⁵, R²⁷, R²⁸ und R²⁹ darstellen können und von denen R³ und Y substituiert sein können, und die Alkoxygruppen, von denen R³ substituiert sein kann, können geradkettig oder verzweigt und gesättigt oder ungesättigt sein. Alkylengruppen, die Y darstellen kann, können gesättigt oder ungesättigt sein.
Halogengruppen, die R⁵ darstellen kann und von denen R³ substituiert sein kann, schließen Fluor, Chlor, Brom und Iod ein.
Die Wellenlinien am Kohlenstoffatom im Fragment der Formel IVa zeigen die Position an, an der das Fragment gebunden ist.
Abkürzugen sind am Ende dieser Beschreibung aufgeführt.
Zu den bevorzugten erfindungsgemäßen Verbindungen gehören die Verbindungen, in denen R⁵ für H steht.
Zu den bevorzugten Verbindungen der Formel I gehören die Verbindungen, in denen:
Y für CH₂, (CH₂)₂, (CH₂)₃, CH₂CH(CH₃)CH₂, CH_IC(O)CH₂ oder CH₂C(=CH₂)CH₂ steht;
R⁴ für H steht.
Zu den besonders bevorzugten erfindungsgemäßen Verbindungen gehören die Verbindungen, in denen: Y für CH₂, (CH₂)₂ oder CH₂C(=CH₂)CH₂ steht;
Zu den bevorzugten Substituenten für R³ gehören Hydroxy, Fluor, Chlor, Methyl, Methoxy, Amino, Nitro, Trifluormethyl, Methylendioxy, Ethoxy und Propoxy. Besondere Substituenten schließen Hydroxy, Mono- oder Difluor, Chlor, Methyl, Methoxy und Methylendioxy ein.
Zu den besonders bevorzugten erfindungsgemäßen Verbindungen gehören die Verbindungen, in denen Y für CH₂ steht.
Bevorzugt sind die erfindungsgemäßen Verbindungen, in denen die α-Aminosäure im Fragment
die S-Konfiguration aufweist. Die Wellenlinien am Stickstoff- und Kohlenstoffatom im obigen Fragment zeigen die Position an, an der das Fragment gebunden ist.
Bevorzugte erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen, in denen das α-Kohlenstoffatom im Fragment
die R-Konfiguration aufweist. Die Wellenlinie am Kohlenstoffatom im obigen Fragment zeigt die Position an, an der das Fragemnt gebunden ist.
Zu den bevorzugten erfindungsgemäßen Verbindungen gehören:
Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;
Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;
Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;
Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;
Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;
Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;
Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;
Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;
Ph(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;
Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;
Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;
Ph(3-NO₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;
Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;
Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;
Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; und
Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab.
Darstellung
Erfindungsgemäß wird weiterhin ein Verfahren zur Darstellung von Verbindungen der Formel I bereitgestellt, bei dem man:

(a) eine Verbindung der Formel V
wobei p, q, R¹, R² und R³ wie oben definiert sind, mit einer Verbindung der Formel VI
wobei R⁴, Y, n und B wie oben definiert sind, kuppelt; oder
(b) eine Verbindung der Formel VII
wobei p, q, R¹, R², R³, R⁴ und Y wie oben definiert sind, mit einer Verbindung der Formel VIII H₂N-(CH₂)_n-B VIII wobei n und B wie oben definiert sind, kuppelt; beispielsweise in Gegenwart eines Kupplungssystems (z. B. Oxalylchlorid in DMF, EDC, DCC oder TBTU), einer geeigneten Base (z. B. Pyridin, DMAP oder DIPEA) in einem geeigneten organischen Lösungsmittel (z. B. Dichlormethan, Acetonitril oder DMF).

Verbindungen der Formel V sind entweder im Handel erhältlich, in der Literatur gut bekannt oder unter Anwendung bekannter Verfahren erhältlich.
So lassen sich beispielsweise Verbindungen der Formel V darstellen, indem man einen Aldehyd der Formel IX R^3aCHO IX in welcher R^3a für durch einen oder mehrere C_1-4-Alkyl-, C_1-4-Alkoxy-, Halogen-, Hydroxy-, Cyano-, Methylendioxy-, Nitro-, -Trifluormethyl-, N(H)R²⁷- oder C(O)OR²⁸-Reste substituiertes Phenyl steht und R²⁷ und R²⁸ wie oben definiert sind, mit:

(i) einer Verbindung der Formel X, R''CN X in welcher R'' für H oder (CH₃)₃Si steht, beispielsweise bei erhöhter Temperatur (z. B. von über Raumtemperatur, jedoch unter 100°C), in Gegenwart eines geeigneten organischen Lösungmittels (z. B. Chloroform) und gegebenenfalls eines geeigneten Katalysatorsystems (z. B. Benzylammoniumchlorid) umsetzt und anschließend in Gegenwart einer geeigneten Base (z. B. NaOH) hydrolysiert;
(ii) Chloroform, beispielsweise bei erhöhter Temperatur (z. B. von über Raumtemperatur, jedoch unter 100°C), in Gegenwart eines geeigneten organischen Lösungmittels (z. B. Chloroform) und gegebenenfalls eines geeigneten Katalysatorsystems (z. B. Benzylammoniumchlorid) umsetzt und anschließend in Gegenwart einer geeigneten Base (z. B. NaOH) hydrolysiert;
(iii) einer Verbindung der Formel XI,
in welcher M für Mg oder Li steht, umsetzt und anschließend unter dem Fachman gut bekannten Bedingungen oxidativ spaltet (z. B. durch Ozonolyse oder katalysiert durch Osmium oder Ruthenium); oder
(iv) Tris(methylthio)methan unter dem Fachman gut bekannten Bedingungen umsetzt und anschließend in Gegenwart einer geeignten Base hydrolysiert.

Verbindungen der Formeln VI und VII sind entweder im Handel erhältlich, in der Literatur gut bekannt oder unter Anwendung bekannter Verfahren erhältlich. Verbindungen der Formel VI können beispielsweise dargestellt werden, indem man eine Verbindung der Formel XIII
in welcher R⁴ und Y wie oben definiert sind, mit einer wie oben definierten Verbindung der Formel VIII einer Standard-Peptidkupplung unterzieht, beispielsweise unter den oben für die Synthese von Verbindungen der Formel 2 beschriebenen Bedingungen. Analog dazu lassen sich auch Verbindungen der Formel VII durch Standard-Peptidkupplung einer wie oben definierten Verbindung der Formel XIII mit einer wie oben definierten Verbindung der Formel V darstellen, beispielsweise unter Bedingungen, wie sie oben für die Synthese von Verbindungen der Formel I beschrieben wurden.
Verbindungen der Formeln VIII, IX, X, XI und XIII sind entweder im Handel erhältlich, in der Literatur gut bekannt oder unter Anwendung bekannter Verfahren erhältlich. Substituenten an den Phenylgruppen in Verbindungen der Formel V, VII und IX können durch dem Fachmann gut bekannte Verfahren ineinander umgewandelt werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können durch herkömmliche Verfahren aus ihren Reaktionsmischungen isoliert werden.
Dem Fachman wird einleuchten, daß es bei dem obenbeschriebenen Verfahren erforderlich sein kann, die funktionellen Gruppen von Zwischenprodukten durch Schutzgruppen zu schützen.
Zu den funktionellen Gruppen, deren Schutz wünschenswert ist, gehören Hydroxyl-, Amino-, Amidino-, Guanidino- und Carbonsäuregruppen. Geeignete Schutzgruppen für Hydroxy schließen Trialkylsilyl- und Diarylalkylsilylgruppen (z. B. tert.-Butyldimethylsilyl, tert.-Butyldiphenylsilyl oder Trimethylsilyl) und Tetrahydropyranyl ein. Geeignete Schutzgruppen für Hydroxylgruppen, die an benachbarten Kohlenstoffatomen stehen, schließen O,O'-Isopropyliden ein. Geeignete Schutzgruppen für Amino, Amidino und Guanidino schließen tert.-Butyloxycarbonyl oder Benzyloxycarbonyl ein. Amidino- und Guanidinostickstoffatome können einfach oder zweifach geschützt sein. Geeignete Schutzgruppen für Carbonsäure schließen C_1-6-Alkyl- oder Benzylester ein.
Das Schützen und Entschützen von funktionellen Gruppen kann vor oder nach der Kupplung erfolgen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können insbesondere durch Verfahren dargestellt werden, bei denen man eine N-acylierte Aminosäure oder eine N-geschützte Aminosäure kuppelt. Verwendet man eine N-geschützte Aminosäure, so kann man die Acylgruppe nach der Kupplung einführen und dann im Anschluß das Stickstoffatom nach Standardverfahren entschützen.
Die Schutzgruppen lassen sich nach dem Fachmann gut bekannten Methoden, die im folgenden beschrieben sind, Einige geschützte Zwischenprodukte der Formel I, in denen die Amidino- und Guanidinostickstoffatome in B geschützt sind, und die vor dem abschließenden Entschützungsschritt zur Bildung von erfindungsgemäßen Verbindungen anfallen, sind neu.
Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung werden Verbindungen der Formel XIV bereitgestellt
in welcher B¹ für ein Strukturfragment der Formel IVD steht
D¹ und D² unabhängig voneinander für H oder Benzyloxycarbonyl stehen und p, q, R¹, R², R³, R⁴, Y, n und R⁵ wie oben definiert sind, mit der Maßgabe, daß D¹ und D² nicht beide für H stehen.
Die Wellenlinien am Kohlenstoffatom im Fragment der Formel IVd zeigen die Position an, an der das Fragment gebunden ist.
Die Verwendung von Schutzgruppen ist umfassend in "Protective Groups in Organic Chemistry", herausgegeben von J W F McOmie, Plenum Press (1973) und "Protective Groups in Organic Synthesis", 2. Auflage, T W Greene & P G M Wutz, Wiley-Interscience (1991), beschrieben.
Es wird dem Fachmann weiterhin einleuchten, daß, wenngleich solche geschützten Derivate von Verbindungen der Formel I als solche keine pharmakologische Wirkung aufweisen können, sie nach parenteraler oder oraler Verabreichung im Körper zu pharmakologisch aktiven erfindungsgemäßen Verbindungen metabolisiert werden können. Solche Derivate können daher als „Prodrugs" beschrieben werden. Alle Prodrugs von Verbindungen der Formel 2 fallen mit in den Schutzbereich der Erfindung.
Zu den geschützten Derivaten von Verbindungen der Formel I, die besonders als Prodrugs geeignet sind, gehören Verbindungen der Formel XIV.
Medizinische und pharmazeutische Verwendung
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind von Wert, da sie pharmakologisch wirksam sind. Sie sind daher als Pharmazeutika indiziert.
Einen weiteren Gegenstand der Erfindung bilden die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Verwendung als Pharmazeutika.
Insbesondere sind die erfindungsgemäßen Verbindungen starke Inhibitoren von Thrombin, wie beispielsweise in den nachstehend beschriebenen Tests demonstriert wird.
Es wird somit erwartet, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Verwendung bei Zuständen, bei denen die Inhibierung von Thrombin erforderlich ist, geeignet sind.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind somit für die Behandlung bzw. Prophylaxe von Thrombose und Hyperkoagulabilität in Blut und Geweben von Tieren einschließlich Menschen indiziert.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind ferner für die Behandlung von Zuständen indiziert, bei denen ein unerwünschter Thrombinüberschuß ohne Anzeichen von Hyperkoagulabilität vorhanden ist, beispielsweise bei neurodegenerativen Erkrankungen, wie z. B. Alzheimer-Krankheit.
Als besondere Krankheitszustände seien die therapeutische und/oder prophylaktische Behandlung von Venenthrombose und Lungenembolie, Arterienthrombose (wie z. B. bei Myocardinfarkt, instabiler Angina, thrombosebedingtem Schlaganfall und peripherer Arterienthrombose) sowie systemische Embolie, in der Regel ausgehend vom Atrium beim Vorhofflimmern oder von der linken Herzkammer nach transmuralem Myocardinfarkt, genannt.
Außerdem sollten sich die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Verwendung bei der Prophylaxe gegen Reokklusion (d. h. Thrombose) nach Thrombolyse, perkutaner transluminaler Angioplastie (PTA) und koronaren Bypass-Operationen und bei der Prävention der Rethrombosierung nach Mikrochirurgie und Gefäßchirurgie im allgemeinen eignen.
Beispiele für weitere Indikationen sind die therapeutische und prophylaktische Behandlung von durch Bakterien, multiples Trauma, Vergiftung oder einen anderen Mechanismus verursachter disseminierter intravasaler Koagulation, die antikoagulatorische Behandlung, wenn Blut mit Fremdoberflächen im Körper in Berührung steht, wie beispielsweise mit Gefäßtransplantaten, Gefäß-Stents, Gefäßkathetern, mechanischen und biologischen Herzklappenprothesen oder anderen medizinischen Vorrichtungen; und die antikoagulatorische Behandlung, wenn Blut mit medizinischen Vorrichtungen außerhalb des Körpers in Berührung steht, wie z. B. bei der Herz- und Gefäßchirurgie unter Verwendung einer Herz-Lungen-Maschine oder bei der Hämodialyse.
Neben seinen Wirkungen auf den Koagulationsprozeß aktiviert Thrombin bekanntlich eine große Zahl von Zellen (wie z. B. Neutrophile, Fibroblasten, Endothelzellen und Glattmuskelzellen). Daher eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen eventuell auch zur therapeutischen oder prophylaktischen Behandlung von idiopathischem Atemnotsyndrom und Atemnotsyndrom des Erwachsenen, Lungenfibrose nach Strahlenbehandlung oder Chemotherapie, septischem Schock, Septikämie, Entzündungsreaktionen einschließlich u. a. Ödem, akuter oder chronischer Atherosklerose, wie z. B. koronarer Gefäßerkrankung, cerebraler Gefäßerkrankung, peripherer Gefäßerkrankung, Reperfusionsschäden und Restenose nach perkutaner transluminaler Angioplastie (PTA).
Erfindungsgemäße Verbindungen, die Trypsin und/oder Thrombin inhibieren, eignen sich eventuell auch zur Verwendung bei der Behandlung von Pankreatitis.
Einen weiteren Gegenstand der vorliegenden Erfindung bildet die Verwendung einer erfindungsgemäßen Verbindung für ein Verfahren zur Behandlung eines Zustands, bei dem die Inhibierung von Thrombin erforderlich ist, bei dem man einer Person, die an einem derartigen Zustand leidet oder für einen derartigen Zustand anfällig ist, eine therapeutisch wirksame Menge einer erfindungsgemäßen Verbindung der Formel I, wie oben definiert, oder eines pharmazeutisch unbedenklichen Salzes davon verabreicht.
Pharmazeutische Zubereitungen
Die Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen erfolgt normalerweise auf oralem, subcutanem, bukkalem, rektalem, dermalem, nasalem, trachealem, bronchialem- oder anderem parenteralem Weg oder per Inhalation, in Form von pharmazeutischen Zubereitungen, die Wirkstoff entweder in Form einer freien Base oder als pharmazeutisch unbedenkliches nichttoxisches organisches oder anorganisches Säureadditionssalz enthalten, in einer pharmazeutisch unbedenklichen Dosierungsform. Je nach zu behandelnder Störung und zu behandelndem Patienten sowie Verabreichungsweg können die Zusammensetzungen in variierenden Dosen verabreicht werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch mit einem beliebigen Antithrombotikum mit einem anderen Wirkmechanismus, wie z. B. den Thrombocytenaggregationshemmern Acetylsalicylsäure, Ticlopidin, Clopidogrel, Thromboxanrezeptor- und/oder Thromboxansynthetase-Inhibitoren, Fibrinogenrezeptorantagonisten, Prostacyclin-Mimetika und Phosphodiesterase-Inhibitoren kombiniert werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können außerdem bei der Behandlung von thrombotischen Erkrankungen, insbesondere Myocardinfarkt, mit Thrombolytika, wie z. B. Gewebe-Plasminogen-Aktivator (nativ oder rekombinant), Streptokinase, Urokinase, Prourokinase, anisoyliertem Streptokinase-Plasminogen-Aktivator-Komplex (ASPAC), Tierspeicheldrüsen-Plasminogen-Aktivatoren und dergleichen, vereinigt werden.
Einen weiteren Gegenstand der vorliegenden Erfindung bildet somit eine pharmazeutische Formulierung, enthaltend eine wie oben definierte Verbindung der Formel I oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon in Abmischung mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Hilfsstoff, Verdünnungsmittel oder Träger.
Geeignete Tagesdosen der erfindungsgemäßen Verbindungen bei der therapeutischen Behandlung von Menschen liegen bei peroraler Verabreichung bei etwa 0,001–100 mg/kg Körpergewicht und bei parenteraler Verabreichung bei 0,001–50 mg/kg Körpergewicht.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen weisen den Vorteil auf, daß sie im Vergleich zu vorbekannten Verbindungen eine höhere Wirksamkeit, eine geringere Toxizität, eine längere Wirkdauer und einen breiteren Wirkungsbereich aufweisen, stärker sind, weniger Nebenwirkungen verursachen, leichter resorbiert werden oder andere wertvolle pharmakologische Eigenschaften besitzen.
Biologische Tests
Test A
Bestimmung der Thrombingerinnungszeit (TT)
100 μL Humanthrombin (T 6769, Fa. Sigma Chem.) in Pufferlösung, pH 7,4, und 100 μL Inhibitorlösung wurden eine Minute inkubiert. Dann wurden 100 μL gepooltes normales humanes Citratplasma zugesetzt, wonach die Gerinnungszeit in einer automatischen Vorrichtung (KC 10, Amelung) bestimmt wurde.
Aus einer Auftragung der Gerinnungszeit in Sekunden gegen die Inhibitorkonzentration wurde durch Interpolation der IC₅₀TT-Wert ermittelt.
Beim IC₅₀TT-Wert handelt es sich um diejenige Inhibitorkonzentration, bei der sich die Thrombingerinnungszeit für Humanplasma verdoppelt.
Test B
Bestimmung der Activated Partial Thromboplastin Time (APTT)
Die APTT wurde in gepooltem normalen citrierten Humanplasma mit dem PTT Automated 5-Reagenz von Stago bestimmt. Das Plasma wurde mit Inhibitor (10 μl Inhibitorlösung auf 90 μl Plasma) und dann mit dem Reagenz und mit Calciumchloridlösung versetzt, und die APTT der Mischung wurde mit dem Koagulationsanalysator KC 10 (Amelung) nach den Anweisungen des Herstellers des Reagenz bestimmt. Es wurde die Gerinnungszeit in Sekunden gegen die Inhibitorkonzentration im Plasma aufgetragen, und die IC₅₀APTT wurde durch Interpolation ermittelt.
Die IC₅₀APTT ist definiert als die Inhibitorkonzentration in Humanplasma, bei der sich die Activated Partial Thromboplastin Time verdoppelt.
Test C
Bestimmung der Thrombinzeit ex vivo
Die Thrombin-Inhibierung nach oraler oder parenteraler Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde an wachen Ratten untersucht, die ein oder zwei Tage vor dem Versuch mit einem Katheter zur Blutentnahme aus der Arteria carotis versehen wurden. Am Versuchstag wurden nach Verabreichung der Verbindung in festen Zeitabständen Blutproben in Kunststoffröhrchen mit 1 Teil Natriumcitratlösung (0,13 mol pro 1) und 9 Teilen Blut gezogen. Die Röhrchen wurden zentrifugiert, um thrombozytenarmes Plasma zu erhalten. Das Plasma wurde wie unten beschrieben zur Bestimmung der Thrombinzeit verwendet.
100 μl des Ratten-Citratplasmas wurden mit 100 μl einer 0,9%igen Kochsalzlösung verdünnt, wonach die Plasmakoagulation durch Zusatz von humanem Thrombin (T 6769, Fa. Sigma Chem., USA) in Pufferlösung, pH 7,4, 100 μl, gestartet wurde. Die Gerinnungszeit wurde in einer automatischen Vorrichtung (KC 10, Amelung, Deutschland) bestimmt.
Bei Verabreichung einer Verbindung der Formel XIV wurden die Konzentrationen des entsprechenden wirksamen Thrombin-Inhibitors der Formel I im Rattenplasma anhand von Standardkurven abgeschätzt, die die Beziehung zwischen Thrombinzeit in dem gepoolten Ratten-Citratplasma und bekannten Konzentrationen des entsprechenden "wirksamen" Thrombin-Inhibitors in Kochsalzlösung wiedergeben.
Test D
Bestimmung der Thrombinzeit in Urin ex vivo
Wache Ratten wurden nach oraler Verabreichung von erfindungsgemäßen Verbindungen über einen Zeitraum von 24 Stunden in Metabolismuskäfige gesetzt. Die Thrombinzeitbestimmung wurde an dem aufgefangenen Urin folgendermaßen durchgeführt.
Gepooltes normales humanes Citratplasma (100 μl) wurde eine Minute lang mit dem konzentrierten Rattenurin oder Verdünnungen davon mit Kochsalzlösung inkubiert. Dann wurde die Plasmakoagulation durch Zusatz von Humanthrombin (T 6769, Fa. Sigma Chem.) in Pufferlösung (pH 7,4, 100 μl) gestartet. Die Gerinnungszeit wurde in einer automatischen Vorrichtung (KC 10, Amelung) bestimmt.
Nach Verabreichung einer Verbindung der Formel XIV wurden die Konzentrationen des wirksamen Thrombin-Inhibitors der Formel I im Rattenurin anhand von Standardkurven abgeschätzt, die die Beziehung zwischen Thrombinzeit in dem gepoolten normalen humanen Citratplasma und bekannten Konzentrationen des entsprechenden „wirksamen" Thrombin-Inhibitors in Lösung in konzentriertem Rattenurin (oder Verdünnungen davon mit Kochsalzlösung) wiedergeben. Durch Multiplikation der Rattenurin-Gesamtproduktion über den Zeitraum von 24 Stunden mit der abgeschätzten mittleren Konzentration des obengenannten wirksamen Inhibitors im Urin konnte die ausgeschiedene Menge des wirksamen Inhibitors berechnet werden.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele erläutert. Fällt eines der unten angeführten Beispiele nicht in den Schutzumfang der beigefügten Ansprüche, so versteht sich, daß ein solches Beispiel im folgenden lediglich zur Erläuterung angeführt ist.
Beispiele
Allgemeine experimentelle Verfahrensweisen.
Zur Aufnahme der Massenspektren dienten ein Tripelquadrupolmassenspektrometer der Bauart Finnigan MAT TSQ 700 mit Elektrospray-Interface (FAB-MS) und ein Massenspektrometer der Bauart VG Platform II mit Elektrospray-Interface (LC-MS). Zur Durchführung der ¹H-NMR- und ¹³C-NMR-Messungen dienten Spektrometer der Bauart BRUKER ACP 300 und Varian UNITY plus 400 und 500 mit einer ¹H-Betriebsfrequenz von 300,13, 399,96 bzw. 499,82 MHz und einer ¹³C-Betriebsfrequenz von 75,46, 100,58 bzw. 125,69 MHz.
Beispiel 1
Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) Boc-Aze-OH
Kohlensäure-di-tert.-butylester (13,75 g; 63 mmol) wurde bei Raumtemperatur unter Rühren zu einer Mischung von 5,777 g (57 mmol) L-Azetidin-2-carbonsäure (H-Aze-OH) und 6,04 g (57 mmol) Natriumcarbonat in 50 ml Wasser und 100 ml THF gegeben. Nach 60 h, wurde das THF im Vakuum abgezogen, und die Mischung wurde mit Wasser verdünnt und mit 2 M Kaliumhydrogensulfat angesäuert. Extrahieren mit Methylenchlorid und anschließendes Trocknen (Magnesiumsulfat) und Abdampfen des Lösungsmittels lieferte einen Rückstand, der aus Methylenchlorid : Hexan kristallisiert wurde, wodurch man 10,87 g (95%) farblose Kristalle erhielt.
¹H-NMR (300 MHz; CDCl₃): δ 4,85–4,7 (s breit, 1), 4,0– 3,75 (m, 2), 2,65–2,35 (m, 2), 1,4 (s, 9).
(ii) Boc-Aze-Pab(Z)
Bei Raumtemperatur wurde EDC (13,5 g; 70 mmol) zu einer Mischung von Boc-Aze-OH (10,87 g; 54 mmol; aus Stufe (i) oben), H-Pab(Z) × HCl (18,31 g; 57 mmol; dargestellt nach der in der internationalen Patentanmeldung WO 94/29336 beschriebenen Methode) und DMAP (9,9 g; 81 mmol) in Acetonitril (270 ml) gegeben. Nach 16 h wurde das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und durch Essigsäureethylester ersetzt. Die Mischung wurde mit Wasser und einer wäßrigen Citronensäurelösung gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet (Magnesiumsulfat) und das Lösungsmittel wurde im Vakuum abgezogen, wodurch man einen Rückstand erhielt, der nach Kristallisierung aus einer Mischung von Methylenchlorid, Toluol, Diisopropylether und Petrolether Boc-Aze-Pab(Z) (17,83 g) lieferte.
¹H-NMR (300 MHz; CDCl₃): δ 7,85–7,75 (d, 1), 7,45–7,2 (m, 7), 5,2 (s, 2), 4,7 (t, 1), 4,6–4,4 (m, 2), 3,95– 3,8 ("q", 1), 3,8–3,7 (q, 1), 2,5–23 (m, 2), 1,4 (s, 9).
(iii) H-Aze-Pab(Z)
Boc-Aze-Pab(Z) (2,44 g; 5,2 mmol; aus Stufe (ii) oben) wurde in einer Mischung aus 10 ml Trifluoressigsäure und 10 ml Methylenchlorid gelöst. Nach 30 Minuten wurde das Lösungsmittel und die Trifluoressigsäure im Vakuum abgezogen, und der Rückstand wurde in Methylenchlorid gelöst. Die organische Phase wurde mit einer 10%igen Natriumcarbonatlösung gewaschen und getrocknet (Kaliumcarbonat). Abdampfen des Lösungsmittels im Vakuum lieferte einen Rückstand, aus dem man nach Kristallisieren aus Methylenchlorid H-Aze-Pab(Z) (1,095 g; 57%) als farblose Kristalle erhielt.
¹H-NMR (300 MHz; CD₃OD) : δ 7,85–7,75 (d, 2) , 7,45–7,25 (m, 7), 5,2 (s, 2), 4,5 (s, 2), 4,3 (d, 1), 3,65 (q, 1), 3,4–3,3 (m, 1), 2,7–2,5 (m, 1), 2,4–2,2 (m, 1).
(iv) Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Dargestellt nach der von Kelly und LaCour (Synth. Comm. 22, 859 (1992)) beschriebenen Methode wie folgt: Eine Lösung von (R,S)-Hexahydromandelsäure (0,30 g, 1,9 mmol), einer katalytischen Menge an DMAP und Pyridin (0,31 g, 3,9 mmol) in Methylenchlorid (5 ml) wurde tropfenweise mit TMSCl (0,42 g; 3,9 mmol) versetzt. Der Ansatz wurde 4 h bei Raumtemperatur gerührt. Der Ansatz wurde auf 0°C abgekühlt und mit einer katalytischen Menge DMF (3 Tropfen aus einer 2-ml-Spritze) und dann mit Oxalylchlorid (0,25 g; 2,0 mmol) versetzt. Es wurde 1 h bei 0°C gerührt, eine Mischung von H-Aze-Pab(Z) (0,67 g; 1,8 mmol; aus Stufe (iii) oben) und Pyridin (0,50 g; 6,3 mmol) wurde zugesetzt und der Ansatz wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und über Nacht gerührt. Der Ansatz wurde mit einer 10%igen Lösung von Citronensäure in Methanol (6 ml) versetzt. Nach 30 Minuten wurde der Ansatz in einen Scheidetrichter gegossen und mit 30 ml Essigsäureethylester verdünnt, und die wäßrige Phase wurde extrahiert mit Essigsäure ethylester. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit einer gesättigten Hydrogencarbonatlösung und dann mit Kochsalzlösung gewaschen und getrocknet (Na₂SO₄). Nach Eindampfen und Flash-Chromatographie an Kieselgel unter Verwendung einer Methylenchlorid : Methanol-Mischung (99 : 1 bis 92 : 8) als Laufmittel erhielt man die im Untertitel genannte Verbindung (60 mg; 6%).
¹H-NMR (300 MHz; CDCl₃): δ 1,0–1,9 (m, 11 H), 2,4–2,7 (m, 2 H), 3,80 (d, 1 H), 4,05–4,25 (m, 1 H), 4,3–4,5 (m, 2 H) , 4,85–5,0 (m, 1 H) , 5, 18 (s, 2 H) , 7,1–7,5 (m, 7 H), 7,65–7,8 (m, 2 H), 7,86 (t breit, 1 H, Diastereomer und/oder Nebenrotamer), 8,33 (t breit, 1 H, Diastereomer und/oder Hauptrotamer).
¹³C-NMR (75 MHz; CDCl₃) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 174,8, 170,6, 168,0 und 164,5.
(v) Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (60 mg; 0,12 mmol; aus Stufe (iv) oben) wurde in Ethanol (5 ml) gelöst, und 5 % Pd/C und HCl (0,1 ml; konz.) wurden zugegeben. Die Mischung wurde 2 Stunden lang bei Normaldruck hydriert. Nach Filtrierung und Eindampfen wurde das Produkt durch präparative RPLC mit (0,005 M NH₄OAc, 0,005 M HOAc) : CH₃CN 4 : 1 als Laufmittel gereinigt. Es wurde gefriergetrocknet und mit HCl (aq) versetzt, und die Lösung wurde lyophilisiert. Die Ausbeute an Titelprodukt betrug 15 mg (31%).
¹H-NMR (300 MHz; D₂O) das Spektrum wurde durch Diastereomere und/oder Rotamere verkompliziert): δ 0,7– 2,0 (m, 11H), 2,25–2,4 (m, 1H), 2,65–2,9 (m, 1H), 3,79 (d, 1H, Nebenprodukt), 4,03 (d, 1H, Hauptprodukt), 4,05–4,15 (m, 2H, Nebenprodukt), 4,35– 4,45 (m (t breit), 2H, Hauptprodukt), 4,5–4,6 (m, 2 H), 5,20 (m, 1H, Nebenprodukt, das Hauptsignal überlappt mit dem HOD-Signal), 7,5–7,65 (m, 2 H), 7,75– 7,85 (m, 2H).
¹³C-NMR (75 MHz; CDCl₃) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Diastereomere – und/oder Rotamere): δ 176,3, 175,4, 173,7, 173,3, 167,2 und 167,0.
Beispiel 2
Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(iv) beschriebenen Methode (R)-Hexahydromandelsäure (aus 0,60 g; 3,8 mmol) dargestellt, wodurch man 0,15 g (10%) erhielt.
(ii) Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,12 g; 0,24 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt. Ausbeute: 52 mg (54%).
¹H-NMR (300 MHz; D₂O das Spektrum wurde durch Rotamere verkompliziert): δ 0,7–2,0 (m, 11H), 2,25–2,4 (m, 1 H), 2,6–2,9 (m, 1H), 3,79 (d, 1H, Nebenprodukt), 4,02 (d, 1H, Hauptprodukt), 4,05–4,15 (m, 2H, Nebenprodukt), 4,35–4,45 (m, (t breit), 2H, Hauptprodukt), 4,5–4,6 (m, 2H), 5,19 (m, 1H, Nebenprodukt; das Hauptsignal überlappt mit dem HOD-Signal), 7,5–7,65 (m, 2H), 7,75–7,85 (m, 2H).
¹³C-NMR (75 MHz; CDCl₃) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Rotamere): 171,9, 170,2, 169,8 und 163,8.
Beispiel 3
(Et)₂-C(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) H-Aze-Pab(Z) × 2 HCl
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde durch Umsetzung von Boc-Aze-Pab(Z) (siehe Beispiel 1(ii) oben) mit mit gasförmiger HCl gesättigtem EtOAc dargestellt. Die Reaktionsmischung wurde nach einer halben Stunde eingedampft, wodurch man H-Aze-Pab(Z) × 2 HCl in quantitativer Ausbeute erhielt.
(ii) (Et)₂-C(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Eine Mischung von Diethylglycolsäure (0,13 g; 0,80 mmol), H-Aze-Pab(Z) × 2 HCl (0,39 g; 0,88 mmol; aus Stufe (i) oben) und TBTU (0,28 g; 0,88 mmol) in DMF (15 ml) wurde in einem Eisbad gekühlt. DIPEA (0,41 g; 3,2 mmol) wurde zugesetzt, und die Reaktionsmischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die so erhaltene Mischung wurde in 500 ml Wasser gegossen und dreimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigte organische Phasen wurde mit wäßrigem NaHCO₃ und Wasser gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft. Das Rohprodukt wurde einer Flash-Chromatographie an Kieselgel unter Verwendung von Methylenchlorid : THE als Laufmittel unterzogen. Ausbeute: 30 mg (8%).
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 8,04 (t breit, 1H), 7,77 (d, 2H), 7,40 (d, 2H), 7,35–7,2 (m, 5H), 5,17 (s, 2H), 4,90 (m, 1H), 4,46 (dd, 1H), 4,39 (dd, 1H), 4,3–4,2 (m, 2H), 2,66 (m, 1H), 2,44 (m, 1H), 1,8–1,5 (m, 4 H), 0,9–0,75 (m, 6H).
(iii)(Et)₂-C(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus (Et)₂C(OH)-C(O)- Aze-Pab(Z) (30 mg; 0,063 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt. Ausbeute: 19 mg (79%).
¹H-NMR (300 MHz; D₂O; das Spektrum wurde durch Rotamere verkompliziert): δ 7,80 (d, 2H), 7,65–7,5 (m, 2H), 5,43 (m, 1H, Nebenrotamer), 4,90 (m, 1H, Hauptrotamer, 4,6–4,5 (m, 3H), 4,11 (m, 1H, Rotamer), 3,70 (m, 1H, Rotamer), 2,8–2,55 (m, 1H), 2,35–2,15 (m, 1H), 1,9–1,6 (m, 4H), 1,0–0,75 (m, 6H) .
¹³C-NMR (75 MHz; D₂O) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Rotamere): δ 178,3, 177,4, 175,0, 173,5, 167,2.
Beispiel 4
(Ph)₂-C(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) (Ph)₂-C(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus Benzilsäure (0,18 g; 0,80 mmol) dargestellt. Ausbeute: 0,16 g (35 %).
¹H-NMR (300 MHz; D₂O): δ 7,93 (t breit, 1H), 7,71 (d, 2 H), 7,54–7,15 (m, 17H), 5,14 (s, 2H), 4,89 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 4,48 (dd, 1H), 435 (dd, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 2,44 (m, 1H), 2,23 (m, 1H).
(ii)(Ph)₂-C(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus (Ph)₂-C(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,16 g; 0,28 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt. Ausbeute: 90 mg (68%).
¹H-NMR (400 MHz; D₂O) das Spektrum wurde durch Rotamere verkompliziert: δ 7,65–7,55 (m, 2H), 7,4–7,1 (m, 12 H), 5,13 (m, 1H, Nebenrotamer), 4,77 (m, 1H, Hauptrotamer), 4,43 (d, 1H) , 4,40 (d, 1H), 4,12 (m, 1 H, Hauptrotamer), 4,05–3,9 (m, 1H, plus 1H Nebenrotamer), 2,55 (m, 1H, Nebenrotamer), 2,39 (m, 1 H, Hauptrotamer), 2,08 (m, 1H).
¹³C-NMR (75 MHz, D₂O) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Rotamere): δ 175,7, 174,9, 174,6, 173,4, 167,1.
Beispiel 5
n-C₆H₁ ₃-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) n-C₆H₁ ₃-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-2-Hydroxyoctansäure (0,13 g; 0,80 mmol dargestellt, wodurch man 0,25 g (61%) erhielt.
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 8,24 (t breit, 1H, ein Diastereomer), 7,89 (t breit, 1H, ein Diastereomer), 7,8–7,75 (m, 2H), 7,4–7A5 (m, 2H), 735–7,25 (m, 5H), 5,18 (s, 2H), 4,95–4,85 (m, 1H), 4,55–4,35 (m, 2H), 4,2–4,0 (m, 3H), 2,8–2,65 (m, 1H), 2,6–2,4 (m, 1H), 2,0–1,2 (m, 10H), 0,9–0,8 (m, 3H).
(ii) n-C₆H₁ ₃-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus n-C₆H₁₃-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,14 g; 0,28 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 88 mg (78%) erhielt.
¹H-NMR (400 MHz; D₂O): δ 7,7–7,6 (m, 2H), 7,45–7,3 (m, 2H), 5,03 (m, 1H, ein Diastereomer), 4,74 (m, 1H, ein Diastereomer überlappt mit dem Signal von Wasser), 4,45–4,35 (m, 2H), 4,3–4,1 (m, 2H), 4,0–3,8 (m, 1H), 2,65–2,45 (m, 1H), 2,3–2,1 (m, 1H), 1,6–0,9 (m, 10 H), 0,75–0,65 (m, 3H).
¹³C-NMR (75 MHz, D₂O) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Diastereomere und Rotamere): δ 176,8, 176,4, 176,0, 173,5, 173,3, 173,2, 167,2.
Beispiel 6
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab
(i) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R)-Mandelsäure (0,12 g; 0,8 mmol) dargestellt. Das Rohprodukt (0,315 g) wurde durch Flash-Chromatographie (Kieselgel; THF : EtOAc (6 : 4) gereinigt. Ausbeute 0,128 g (32%) eines weißen Pulvers, Reinheit 91,2% (HPLC).
¹H-NMR (499,803 MHz; CDCl₃): δ 8,14 (t, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,72 (d, 2H), 7,33 (t, 4H), 7,28 (m, 3H), 7,22 (d, 2H), 5,18 (s, 2H), 4,92 (s, 1H), 4,79 (dd, 1H), 4,54 (s breit, 1H), 4,39 (d, 2H), 4,00 (q, 1H), 3,53 (q, 1H), 2,48 (m, 1H), 2,24 (m, 1H), 2,19 (s breit, 1H).
¹³C-NMR (125, 688 MHz, CDCl₃) (Carboxyl- und Amidinkohlenstoffatome): δ 173,1, 170,3, 168,1, 164,5.
(ii) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (107 mg; 0,214 mmol; aus Stufe (i) oben) wurde in THF : Wasser (2 : 1) gelöst, 37 mg Pd/C (4 mol% Pd) wurden zugesetzt, und die so erhaltene Lösung wurde 6 Stunden lang hydriert. Die Lösung wurde über Hyflo filtriert und zur Trockne eingedampft. Das so erhaltene weiße Pulver wurde mit 20 ml Wasser, angesäuert mit 0,42 ml 1 M HCl (ca. 2 Äquivalente) versetzt. Die so erhaltene Lösung wurde mit 5 ml EtOAc und 10 ml Diethylether gewaschen und zweimal lyophilisiert. Ausbeute: 72 mg (84%) eines weißen Pulvers. Reinheit: 91% (HPLC).
¹H-NMR (399,968 MHz; D₂O): δ 7,57 (t, 2H), 7,36 (d, 1H) , 7,32 (s, 3), 7,27 (s, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,19 (m, 1H), 5,17 (s, 1H, Hauptprodukt), 5,09 (s, 1H, Nebenprodukt), 5,00 (dd, 1, Nebenprodukt), 4,38 (s, 2, Hauptprodukt), 4,20 (dd, 1H, Hauptprodukt), 3,98 (dd, 2H, Nebenprodukt), 3,97 (m, 1H, Hauptprodukt), 3,75 (dd, 1H), 2,68 (s, 1H, Nebenprodukt), 2,65 (m, 1H, Nebenprodukt), 2,35 (m, 1H, Hauptprodukt), 2,12 (m, 1H, Hauptprodukt), 2,03 (m, 1H, Nebenprodukt).
¹³C-NMR 111,581 MHz, D₂O) (Carbonyl- und Amidinkohlenstoffatome): δ 174,5, 173,2, 172,5, 172,4.
Beispiel 7
Ph(4-CF₃)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) Ph(4-CF₃)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R,S)-4-Trifluormethylmandelsäure (0,19 g; 0,88 mmol) dargestellt. Flash-Chromatographie (Kieselgel, CH₂Cl₂ : THF (6 : 4)) lieferte 0,13 g (26%) eines weißen Pulvers.
¹H-NMR (300 MHz; CDCl₃): δ 9,6–9,2 (b, 1H), 8,1 (t breit, 1H, Diastereomer), 7,9 (t breit, 1H, Diastereomer), 7,7–7,1 (m, 13H), 5,16 (s, 2H), 5,07 (s, 1H, Diastereomer), 4,98 (s, 1H, Diastereomer), 4,80 (m, 1H), 4,5–4,2 (m, 2H), 4,1–3,5 (m, 2H), 2,5– 2,2 (m, 2H).
¹³C-NMR (75 MHz, CDCl₃), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Diastereomer): δ 173,3, 172,4, 170,3, 168,3, 164,4.
(ii) Ph(4-CF₃)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Dargestellt nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus Ph(4-CF₃)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (133 mg; 0,23 mmol; aus Stufe (i) oben), wodurch man die im Titel genannte Verbindung als kristallines weißes Pulver erhielt. Ausbeute 77 mg (70%).
¹H-NMR (300 MHz; D₂O): δ 8,84 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer), 8,73 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer), 8,52 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer), 7,8–7,4 (m, 8H), 5,46, 5,44, 5,30, 5,20 (Singuletts, 1H, Diastereomere/Rotamere), 4,96 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer; andere Signale des gleichen Protons überlappen mit dem HDO-Signal), 4,6– 4,0 (m, 4H), 2,9–2,5 (m, 1H), 2,4–2,1 (m, 1H).
¹³C-NMR (75 MHz, D₂O), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Diastereomere und Rotamere): δ 173,6, 173,3, 173,1, 173,0, 172,9, 167,0.
Beispiel 8
Ph(4-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i)Ph(4-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach Methode 3(ii) aus (R,S)-4-Methoxymandelsäure (0,18 g; 1,0 mmol) dargestellt. Flash-Chromatographie (Kieselgel; EtOAc : MeOH (95 : 5)) lieferte 27 mg (17%) eines weißen Pulvers.
Diastereomerenverhältnis 85 : 15; Signale des Haupt-Diastereomers: ¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 8,19 (m, 1H), 7,80 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,4–7,2 (m, 7H), 7,13 (d, 2H, Nebenrotamer), 6,90 (d, 2H, Hauptrotamer), 6,82 (d, 2H, Nebenrotamer), 5,21 (s, 2H), 4,9–4,85 (m, 2H; darunter ein Singulett bei 4,89 (1H)), 4,6– 4,4 (m, 2H), 4,02 (m, 1H), 3,81 (s, 3 H), 3,55 (m, 1 H), 2,62 (m, 1H), 2,32 (m, 1H).
¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 173,6, 170,3, 167,8, 164,6.
(ii)Ph(4-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus Ph(4-OMe)(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (27 mg; 0,05 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt. Ausbeute 15 mg (68%) eines weißen Pulvers.
Diastereomerenverhältnis 85 : 15; Signale des Haupt-Diastereomers: ¹H-NMR (400 MHz; D₂O): δ 7,7–7,6 (m, 2 H), 7,5–7,3 (m, 4H), 7,18 (d, 2H, Rotamer), 6,97 (d, 2H, Rotamer), 6,9–6,85 (m, 2H, Rotamer), 5,19 (s, 1 H, Rotamer), 5,14 (s, 1H, Rotamer), 5,01 (m, 1H, Rotamer), 4,76 (m, 1H, Rotamer), 4,48 (s, 1H), 4,3– 3,7 (m, 7H, darunter 2 Singuletts bei 3,78, 3,77 (3 H)), 2,73 (m, 1H, Rotamer), 2,46 (m, 1H, Rotamer), 2,3–2,0 (m, 1H)
¹³C-NMR (75 MHz, D₂O), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Rotamere): δ 175,5, 174,1, 173,3, 173,1, 167,1, 167,0.
Beispiel 9
Ph(4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i)Ph(4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R,S)-4-Hydroxymandelsäure (0,34 g; 2,0 mmol) dargestellt. Flash-Chromatographie (Kieselgel, EtOAc/EtOH 9/1) lieferte 0,18 g (17%).
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 7,70 (d, 2H, Nebendiastereomer/Rotamer), 7,64 (d, 2H, Hauptdiastereomer/Rotamer), 7,5–7,0 (m, 7H), 6,82 (d, 2H, Hauptdiastereomer/Rotamer), 6,67 (d, 2H, Nebendiastereomer/Rotamer), 6,43 (d, 2H, Hauptdiastereomer/Rotamer), 5,30, 5,26, 5,22, 5,21 (Singuletts, 2H, Diastereomere/Rotamere), 4,95–4,8 (m, 2H), 4,15–4,05 (m, 2H), 4,03–3,7 (m, 2H), 2,7–2,5 (m, 2H).
(ii) Ph(4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus Ph(4-OH)(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (94 mg; 0,18 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt. Ausbeute: 37 mg (49%) eines weißen Pulvers.
¹H-NMR (600 MHz; D₂O): 6 7,76, 7,72, 7,71, 7,68, 7,52, 7,47, 7,40, 7,35, 7,25, 7,19, 7,11, 6,97, 6,82, 6,76, 6,73, 6,71 (Dubletts, 8H, Diastereomere/Rotamere), 5,19 (s, 1H, Diastereomer/Rotamer), 5,17 (s, 1H, Diastereomer/Rotamer), 5,14 (s, 1H, Diastereomer/Rotamer), 5,01 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer), 4,88 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer; andere Signale des gleichen Protons überlappen mit dem HDO-Signal), 4,6–3,8 (m, 4H), 2,77 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer), 2,62 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer), 2,49 (m, 1H, Diastereomer/Rotamer), 2,3–2,1 (m, 1H).
¹³C-NMR (75 MHz, D₂O), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Diastereomere und Rotamere): δ 175,9, 174,8, 174,3, 173,3, 173,2, 172,9, 167,1.
Beispiel 10
Ph-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) Ph-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R)-Phenylmilchsäure (0,25 g; 1,5 mmol) dargestellt. Flash-Chromatographie (Kieselgel, CH₂Cl₂: THF (6 : 4)) lieferte 0,28 g (36%).
¹H-NMR (500 MHz; CDCl₃): δ 8,19 (m, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,43 (d, 2H), 7,4–7,1 (m, 10H), 5,19 (s, 2H), 4,73 (m, 1H), 4,45–4,25 (m, 2H), 4,19 (m, 1H), 3,86 (m, 1 H), 3,18 (m, 1H), 3,0–2,9 (m, 2H), 2,42 (m, 1H), 2,14 (m, 1H).
¹³C-NMR (125 MHz, CDCl₃), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 174,5, 170,2, 167,9, 164,3.
(ii) Ph-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus Ph-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,22 g; 0,43 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 101,5 mg (57%) eines weißen Pulvers erhielt.
¹H-NMR (600 MHz; D₂O): δ 7,73 (d, 2H, Hauptrotamer), 7,62 (d, 2H, Nebenrotamer), 7,5–7,4 (m, 2H), 7,4–7,2 (m, 5H), 7,10 (m, 2H, Nebenrotamer), 4,71 (m, 1H, Hauptrotamer), 4,5–4,4 (m, 2H), 4,34 (m, 1H), Nebenrotamer), 4,14 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,53 (m, 1 H), 3,05–2,95 (m, 2H, Hauptrotamer), 2,9-2,7 (m, 2H, Nebenrotamer), 2,65–2,5 (m, 1H, Nebenrotamer), 2,5–23 (m, 1H, Hauptrotamer), 2,3–2,1 (m, 1H).
¹³C-NMR (75 MHz, D₂O), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Rotamere): δ 175,9, 175,0, 173,7, 173,2, 167,1, 166,8.
Beispiel 11
Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab
(i) Boc-Pic-OH
Dargestellt nach M. Bodanszky und A. Bodanszky ("The Practise of Peptide Synthesis", Springer-Verlag) unter Verwendung von THF anstelle von Dioxan als Lösungsmittel.
¹H-NMR (300 MHz; CDCl₃): δ 5,0–4,8 (d breit, 1H), 4,0 (s breit, 1H), 3,0 (s breit, 1H), 2,20 (d, 2H), 1,65 (m, 2H), 1,5–1,3 (s + m, 13H).
(ii) Boc-Pic-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(ii) oben beschriebenen Methode aus Boc-Pic-OH (2,02 g; 8,8 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 1,59 g (44%) erhielt.
FAB-MS m/z 495 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 7,83 (d, 2H), 7,43 (d, 2H), 7,36–7,11 (m, 5H), 6,52 (s breit, NH), 5,20 (s, 2H), 4,81–4,72 (m, 1H), 4,61–4,34 (m, 2H), 4,10–3,90 (m, 1H), 2,79–2,64 (m, 1H), 2,36–2,25 (m, 1H), 1,7–1,3 (m, 14H) .
(iii) H-Pic-Pab(Z) × 2 HCl
Boc-Pic-Pab(Z) (1,59 g; 325 mmol; aus Stufe (ii) oben) wurde in 100 ml mit HCl gesättigtem EtOAc gelöst. Die Reaktionsmischung wurde nach einer halben Stunde eingedampft, wodurch man das im Titel genannte Produkt in quantitativer Ausbeute erhielt.
FAB-MS m/z 395 (M + 1)⁺
¹H-NMR (300 MHz; D₂O): 6 7,82 (d, 2H), 7,63–7,41 (m, 7H), 5,47 (s, 2H), 4,69–4,49 (AB-System mit Zentrum δ 4,59, 2H), 4,03 (dd, 1H), 3,52 (bd, 1H), 3,10 (dt, 1H), 2,29 (dd, 1H), 2,08–1,61 (m, 5H).
(iv) H-Pic-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde durch Lösen des Dihydrochlorids aus Stufe (iii) oben in 2M NaOH und anschließendes Extrahieren mit CH₂Cl₂ und Abdampfen des organischen Lösungsmittels dargestellt.
(v) Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R)-Hexahydromandelsäure (0,152 g; 0,96 mmol) und H-Pic-Pab(Z) (0,417 g; 1,06 mmol; aus Stufe (iv) oben) dargestellt. Flash-Chromatographie (Kieselgel, erst EtOAc : Toluol (3 : 2), dann EtOAc) lieferte 90 mg (18%).
¹H-NMR (300 MHz; CDCl₃): δ 7,82 (d, 2H), 7,5–7,2 (m, 7H), 6,63 (t, X-Teil eines ABX-Systems, NH), 5,21 (s, 2H), 5,14 (d, 1H), 4,46 (ABX-System, 2H), 4,26 (scheinbares s, 1H), 3,61 (d breit, 1H), 3,52 (d breit, 1H), 3,06 (dt, 1H), 2,30 (d breit, 1H), 1,92–1,0 (m, 14H), 0,95–0,8 (m, 1H).
¹³C-NMR (75 MHz, CDCl₃), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 174,8, 170,3, 167,8 und 164,6.
(vi) Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus Ch-(R)CH(OH)C(O)-Pic-Pab(Z) (aus 59 mg, 0,11 mmol; aus Stufe (v) oben) dargestellt, wodurch man 19 mg (40%) erhielt.
FAB-MS m/z 401 (M + 1)⁺
¹H-NMR (300 MHz; D₂O) das Spektrum wurde durch Rotamere verkompliziert: δ 7,91–7,72 (m, Haupt- und Nebenrotamer, 2H), 7,58 (d, Nebenrotamer, 2H), 7,53 (d, Hauptrotamer, 2H), 5,17 (scheinbares s breit, Hauptrotamer, 1H), 4,66–4,28 (m, 3H), 3,96 (d breit, Hauptrotamer, 1H), 3,26 (t breit, Hauptrotamer, 1H), 3,05–2,88 (m, Nebenrotamer, 1H), 2,39–2,20 (m, 1H), 2,0–0,75 (m, 16H).
¹³C-NMR (75 MHz, MeOD), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome bei δ 175,86, 173,20, 168,53.
Beispiel 12
Ch-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab × HCl
(i)Ch-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)OH
Eine Lösung von Phenylmilchsäure (2,57 g) und Rhodium auf Aluminiumoxid (0,75 g) in McOH (170 ml) wurde 2 Tage lang in einer H₂-Atmosphäre bei 3 Atmosphären hydriert. Die Mischung wurde über Hyflo filtriert und zur Trockne eingedampft, wodurch man das Produkt in quantitativer Ausbeute erhielt.
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 4,23 (dd breit, 1H), 3,24 (scheinbares s, OH), 1,68 (d breit, 1H), 1,63–1,43 (m, 6H), 143–1,31 (m, 1H), 1,21–1,0 (m, 3H), 0,95–0,75 (m, 157 mg (0,91 mmol) 2H).
(ii) Ch-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1 (iv) beschriebenen Methode aus H-Pic-Pab(Z) x 2 HCl (353 mg; 0,76 mmol; siehe Beispiel 11 (iii) oben) und Ch-CH₂-(R)CH-(OH)-COOH (157 mg; 0,91 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt. Das Produkt wurde einer Flash-Chromatographie (Kieselgel, EtOAc : Toluol (7 : 3)) unterzogen, wodurch man 92 mg (22%) erhielt.
¹H-NMR (300 MHz; CDCl₃): δ 7,72 (d, 2H), 7,46–7,1 (m, 7H), 6,90 (t, NH), 5,18 (s, 2H), 5,07 (d, 1H), 4,45 (d breit, 1H), 4,37 (d, 2H), 3,73–3,47 (m, 2H), 3,10 (t breit, 1H), 2,24 (d breit, 1H), 2,15–2,0 (m, 1H), 1,90 (d breit, 1H), 1,80–1,05 (m, 12H), 1,05–0,75 (m, 3H).
¹³C-NMR (75 MHz, CDCl₃), Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 175,88, 170,43, 168,04 und 164,58.
(iii) Ch-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) oben beschriebenen Methode aus Ch-CH₂-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab(Z) (62 mg; 0,113 mmol; aus Stufe (ii) oben dargestellt, wodurch man 47 mg (92 ) erhielt.
FAB-MS m/z 415 (M + 1)⁺
¹H-NMR (300 MHz; D₂O) das Spektrum wurde durch Rotamere verkompliziert: δ 7,85–7,71 (m, Hauptrotamer und Nebenrotamer, 2H), 7,56 (d, Nebenrotamer, 2H), 7,50 (d, Hauptrotamer, 2H), 5,12 (scheinbares s breit, Hauptrotamer, 1H), 4,68–4,25 (m, 3H, teilweise verdeckt durch HDO), 3,80 (d breit, Hauptrotamer, 1H), 3,24 (t breit, Hauptrotamer, 1H), 2,89 (t breit, Nebenrotamer, 1H), 2,25 (m, 1H), 1,92–0,82 (m, 17H), 0,60–0,40 (m, Hauptrotamer, 1H).
¹³C-NMR (75 MHz, D₂O) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Rotamere): δ 177,10, 173,88, 173,07, 167,24.
Beispiel 13
Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) H-Aze-OMe × HCl
McOH (200 ml) wurde unter einer Argonatmosphäre auf –40°C abgekühlt. Thionylchlorid (47,1 g, 0,396 mol) wurde zugetropft, und die Reaktionsmischung wurde 35 Minuten lang bei –10°C gerührt. H-Az-OH (10,0 g; 0,099 mol) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend eingedampft, wodurch man 16,1 g (100 ) der im Untertitel genannten Verbindung erhielt.
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 5,12–5,24 (m, 1H), 4,08–4,29 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 2,65–2,87 (m, 2H).
(ii) Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-OMe
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(ii) beschriebenen Vorschrift aus R(-)-α-Methoxyphenylessigsäure (0,60 g; 3,6 mmol) und H-Aze-OMe × HCl (0,55 g, 3,6 mmol, aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 0,32 g (34 ) erhielt.
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 7,29–7,48 (m, 5H), 4,71–5,08 (m, 2H), 3,92–4,31 (m, 2H), 3,69–3,83 (m, 3H), 3,19– 3,46 (m, 3H), 2,13–2,65 (m, 2H).
(iii) Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-OH
Eine Lösung von Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-OMe (0,32 g; 1,2 mmol; aus Stufe (ii) oben) in THF (10 ml) wurde mit einer Lösung von Lithiumhydroxid-monohydrat (0,071 g; 1,7 mmol) in H₂O (6 ml) versetzt. Die Reaktionsmischung wurde 3 h gerührt und anschließend eingedampft. Der Rückstand wurde in H₂O gelöst und mit Toluol extrahiert. Der pH-Wert der H₂O-Phase wurde mit wäßriger HCl auf 3 eingestellt, und dann wurde mit Essigsäureethylester extrahiert (viermal). Die vereinigten organischen Phasen wurden eingedampft, wodurch man 0,28 g (92%) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
¹H-NMR (300 MHz; CDCl₃): δ 7,30–7,50 (m, 5H), 4,95–5,10 (m, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,10–4,35 (m, 2H), 3,40 (s, 3H), 2,40–2,80 (m, 2H).
(iv) Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(ii) beschriebenen Vorschrift aus H-Pab(Z) × HCl (0,36 g; 1,0 mmol) und Ph-CH(OMe)-C(O)-Aze-OH (0,25 g; 1,0 mmol; aus Stufe (iii) oben) dargestellt, wodurch man 039 g (76%) als weißes Pulver erhielt.
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 8,29 (m, 1H), 7,77 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,4–7,2 (m, 10H), 5,22 (s, 2H), 4,93 (m, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,44 (m, 2H), 4,15 (m, 2H), 335 (s, 3H), 2,69 (m, 1H), 2,42 (m, 1H).
(v) Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1 (v) beschriebenen Methode aus Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,15 g; 0,29 mmol; aus Stufe (iv) oben) dargestellt, wodurch man 50,4 mg (41%) als weißes Pulver erhielt.
¹H-NMR (400 MHz; CD₃OD; der Aze-α-Wasserstoff und der benzylische Wasserstoff aus dem Mandelsäureester wurden durch das CD₃OH-Signal verdeckt): δ 7,8–7,6 (m, 2H), 7,6–7,4 (m, 2H), 7,4–7,1 (m, 5H), 4,6–4,4 (m, 2H), 4,3– 4,0 (m, 2H), 3,29 (s, 3H), 2,7–2,5 (m, 1H), 2,4–2,1 (m, 1H) .
Beispiel 14
Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R,S)-3-Methoxymandelsäure (270 mg; 1,5 mmol) dargestellt, wodurch man 340 mg (43%) erhielt; Diastereomerenverhältnis 1 : 1.
FAB-MS m/z 531 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 8,14 (m, 1H, Diastereomer), 7,87 (m, 1H, Diastereomer), 7,8–7,0 (m, 10H), 6,9–6,7 (m, 3H), 5,16 (s, 2H), 4,96 (s, 1H, Diastereomer), 4,88 (s, 1H, Diastereomer), 4,85–4,7 (m, 1H), 4,4–4,2 (m, 2H), 4,05–3,9 (m, 1H), 3,71 (s, 3H, Diastereomer), 3,71 (m, 1H, Diastereomer), 3,66 (s, 3H, Diastereomer), 3,58 (m, 1H, Diastereomer), 2,5–2,35 (m, 1H), 2,32 (m, 1H, Diastereomer), 2,20 (m, 1H, Diastereomer).
¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Diastereomere): 6 173,0, 170,5, 170,4, 168,3, 168,2, 164,5.
(ii) Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) beschriebenen Methode aus Ph(3-OMe)(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (230 mg; 0,43 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 126 mg (67%) Produkt erhielt. Diastereomerenverhältnis 1 : 1.
FAB-MS m/z 397 (M + 1)⁺ ¹H-NMR (400 MHz; D₂O; verkompliziert durch (Diastereomere/Rotamere) und einige Verunreinigungen): δ 7,6–7,1 (m, 5H), 6,9–6,6 (m, 3H), 5,2–4,7 (m, 1–2H), 4,4–3,7 (m, 4–5H), 3,63 (s, 3H, Diastereomer/Rotamer), 3,55 (m, 3H, Diastereomer/Rotamer), 2,5–2,3 (m, 1H), 2,2–2,0 (m, 1H).
¹³C-NMR (75 MHz, D₂O) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome (Diastereomere/Rotamere): δ 175,8, 175,4, 174,8, 174,6, 168,5.
Beispiel 15
Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (R,S)-3-Methylmandelsäure
Eine Mischung von 3-Methylbenzaldehyd (12,0 g; 0,1 mol) und Benzyltriethylammoniumchlorid (1,23 g; 0,005 mol) in CHCl₃ (16 ml) wurde bei 56°C gerührt. Die Mischung wurde tropfenweise mit einer Lösung von NaOH (25 g) in H₂O (25 ml) versetzt. Nach Ende der Zugabe wurde die Reaktionsmischung 1 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit H₂O verdünnt (auf ein Volumen von 400 ml) und mit Diethylether (3 × 50 ml) extrahiert. Der pH-Wert der Mischung wurde mit H₂SO₄ (konz.) auf 1 eingestellt, dann wurde mit Diethylether (6 × 50 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet (MgSO₄) und eingedampft. Das Rohprodukt (11,6 g) wurde aus Toluol umkristallisiert, wodurch man 8,47 g (51%) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
LC-MS m/z 165 (M – 1)^– , 331 (2M – 1)^–
¹H-NMR (600 MHz; CD₃OD): δ 7,10-7,28 (m, 4H), 5,08 (s, 1H), 2,32 (s, 3H).
(ii) Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R,S)-3- Methylmandelsäure (0,22 g; 13 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 0,37 g (54%) erhielt.
LC-MS m/z 515 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz; CDCl₃): δ 8,11–8,21 (t, NH), 6,97–7,89 (m, 13H), 5,18–5,24 (m, 2H), 4,83–5,00 (m, 2H), 4,37– 4,58 (m, 2H), 3,50–4,11 (m, 2H), 2,39–2,71 (m, 2H), 2,27–2,38 (m, 3H).
(iii)Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Eine Mischung von Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,105 g; 0,20 mmol; aus Stufe (ii) oben), Essigsäure (0,012 g, 0,20 mmol) und Pd/C (5%, 0,14 g) in Ethanol (12 ml) wurde bei Normaldruck 6 h hydriert. Die Reaktionsmischung wurde filtriert und das Filtrat wurde eingedampft. Das Rohprodukt (97 mg) wurde in H₂O gelöst und lyophilisiert, was ein klebriges Produkt ergab. Das Produkt wurde in HOAc gelöst und nochmals lyophilisiert, ohne daß dies zu einer Verbesserung führte. Das Produkt wurde in H₂O gelöst, über einen HPLC-Filter filtriert und lyophilisiert. Die Ausbeute betrug 67 mg (76%) der im Untertitel genannten Verbindung.
LC-MS m/z 381 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz; D₂O): δ 6,89–7,72 (m, 8H), 4,79–5,23 (m, 2H), 3,76–4,51 (m, 4H), 2,38–2,82 (m, 2H), 2,15– 2,27 (m, 3H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 181,21, 175,43, 174,38, 173,94, 173,23, 173,06, 172,16, 167,00.
Beispiel 16
Ph(3-OEt)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (R,S)-3-Ethoxymandelsäure
(R,S)-3-Hydroxymandelsäure (0,712 g; 4,236 mmol) wurde in Acetonitril (15 ml) gelöst. Es wurde mit K₂CO₃ (2,34 g, 16,94 mmol) versetzt, und Ethyliodid (1,03 ml, 12,71 mmol) wurde zugetropft. Die Reaktionsmischung wurde 2 h auf Rückfluß erhitzt und anschließend eingedampft. Der Rückstand wurde in H₂O (25 ml) und Aceton (6 ml) gelöst, und die Mischung wurde 3 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und die so erhaltene H₂O-Phase wurde mit Essigsäureethylester extrahiert. Der pH-Wert der H₂O-Phase wurde mit wäßrigem KHSO₄ auf 2 eingestellt, und die gebildeten Salze wurden durch Zugabe von weiterem H₂O in Lösung gebracht. Die H₂O-Lösung wurde mit Essigsäureethylester extrahiert (dreimal). Die vereinigten organischen Phasen wurden mit H₂O gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft. Der Rückstand wurde einer präparativen RPLC (25% Acetonitril: 75% 0,1 M HOAc) unterzogen, und die produkthaltigen Fraktionen wurden eingedampft. Die so erhaltene H₂O-Phase würde mit Essigsäureethylester extrahiert (dreimal) und die vereinigten organischen Phasen wurden mit H₂O gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft. Die Ausbeute betrug 182 mg (22 ) der im Untertitel genannten Verbindung.
LC-MS M/Z 195 (M – 1)^–, 391 (2M – 1)^–, 587 (3M – 1)^–.
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6,80–7,27 (m, 4H), 5,08 (s, 1H), 3,99–4,13 (m, 2H), 1,34–1,40 (t, 3H).
(ii) Ph(3-OEt)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R,S)-3-Ethoxymandelsäure (0,178 g; 0,907 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 259 mg (52%) erhielt.
LC-MS m/z 545 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6,77–7,77 (m, 13H), 5,16–5,21 (d, 2H), 4,78–4,99 (m, 2H), 4,27–4,51 (m, 2H), 3,53– 4,07 (m, 4H), 2,21–2,60 (m, 2H), 1,29–1,41 (m, 3H).
(iii) Ph(3-OEt)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15 (iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3-OEt)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,182 g; 0,33 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt, wodurch man 157 mg (100 ) erhielt.
LC-MS m/z 545 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,71–7,79 (m, 2H), 7,49–7,60 (m, 2H), 7,19–7,30 (m, 1H), 6,94–7,02 (m, 2H), 6,81– 6,90 (m, 1H), 5,09–5,18 (m, 1H), 4,74–4,81 (m, 1H), 4,39–4,62 (m, 2H), 3,93–4,35 (m, 4H), 2,10–2,61 (m, 2H), 1,32–1,40 (m, 3H).
¹³C-NMR (100,6 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 180,68, 174,30, 173,50, 173,07, 172,44, 172,26.
Beispiel 17
Ph(3-OPr(n)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (R,S)-3-Allyloxymandelsäure
(R,S)-3-Hydroxymandelsäure (0,504 g; 3,0 mmol) wurde unter einer Stickstoffatmosphäre in trockenem Aceton (25 ml) gelöst. Allylbromid (0,907 g; 7,5 mmol) und trockenes K₂CO₃ (1,037 g; 7,5 mmol) wurden zugesetzt, und die Reaktionsmischung wurde 16 h unter einer Stickstoffatmosphäre gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend eingedampft. Der Rückstand wurde in H₂O (25 ml) und Aceton (6 ml) gelöst, und die Mischung wurde 2 h gerührt (die Umsetzung wurde durch HPLC kontrolliert). Die Mischung wurde eingedampft und die wäßrige Phase wurde mit Essigsäureethylester extrahiert. Der pH-Wert der wäßrigen Phase wurde mit wäßrigem KHSO₄ auf 2 eingestellt, und es wurde mit Essigsäureethylester extrahiert (dreimal). Die vereinigten organischen Phasen wurden mit H₂O gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft, wodurch man das im Untertitel genannte Produkt in einer Ausbeute von 0,175 g (28%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6,87–7,30 (m, 4H), 5,97–6,10 (m, 1H), 5,26–5,44 (m, 2H), 5,20 (s, 1H), 4,51–4,55 (d, 2H).
(ii)Ph(3-OCH₂CH=CH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R, S)-3-Allyloxymandelsäure (0,167 g; 0,8 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 260 mg (58%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 8,09–8,17 (t, NH), 6,79–7,87 (m, 13H), 5,94–6,09 (m, 1H), 5,20–5,44 (m, 4H), 4,86– 5,02 (m, 2H), 4,32–4,62 (m, 4H), 3,54–4,15 (m, 2H), 2,30–2,74 (m, 2H).
(iii)Ph(3-OPr(n))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) beschriebenen Methode aus Ph(3-OCH₂CH=CH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,06 g; 0,1 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt, wodurch man 47 mg (97%) erhielt.
LC-MS m/z 425 (M + 1)⁺, 423 (M – 1)^–
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 6,70–7,71 (m, 8H), 4,70–5,25 (m, 2H), 3,78–4,53 (m, 6H), 2,05–2,80 (m, 2H), 1,56– 1,75 (m, 2H), 0,82–0,95 (m, 3H).
Beispiel 18
Ph(3-OPr(iso))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (R,S)-3-isopropoxymandelsäure
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 16(i) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3-Hydroxymandelsäure (0,70 g; 4,16 mmol), Cs₂CO₃ (5,87 g; 16,65 mmol) und Isopropyliodid (1,25 ml; 12,49 mmol) dargestellt, wodurch man 62 mg (7%) erhielt.
LC-MS m/z 209 (M – 1)^–
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6,81–7,25 (m, 4H), 5,08 (s, 1H), 4,53–4,64 (m, 1H), 1,28–1,32 (d, 6H).
(ii)Ph(3-OPr(iso))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3-Isopropoxymandelsäure (0,063 g; 0,3 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 60 mg (34%) erhielt.
LC-MS m/z 559 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6,75–7,79 (m, 13H), 5,18–5,24 (m, 2H), 4,81–4,99 (m, 2H), 4,31–4,58 (m, 3H), 3,97– 4,15 (m, 1H), 3,55–3,77 (m, 1H), 2,24–2,64 (m, 2H), 1,23–1,33 (m, 6H).
(iii) Ph(3-OPr(iso))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3- OPr(iso))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,05 g; 0,090 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt, wodurch man 41 mg (94%) erhielt.
LC-MS m/z 425 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6,81–7,80 (m, 8H), 5,08–5,18 (m, 1H), 4,74–4,80 (m, 1H), 4,53–4,64 (m, 2H), 4,41– 4,51 (m, 1H), 3,93–4,35 (m, 2H), 223–2,60 (m, 2H), 1,25–1,32 (m, 6H).
¹³C-NMR (100,6 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 181,10, 173,60, 173,15, 172,48, 166,39.
Beispiel 19
Ph(2-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i)Ph(2-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-2-Methoxymandelsäure (0,18 g; 1,0 mmol) dargestellt, wodurch man 80 mg (17%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 8,16–8,22 (t, NH), 6,81–7,85 (m, 13H), 5,16–5,20 (m, 2H), 4,79–4,91 (m, 1H), 4,35– 4,49 (m, 2H), 3,84–4,02 (m, 2H), 3,63–3,80 (m, 3H), 3,32-3,56 (m, 1), 2,21–2,57 (m, 2H).
(ii) Ph(2-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(2-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,08 g; 0,15 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 45 mg (71 I%) erhielt.
FAB-MS m/z 397 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 6,83–7,70 (m, 8H), 4,71–4,97 (m, 1H), 4,34–4,51 (m, 2H), 3,87–422 (m, 3H), 3,67–3,75 (m, 3H), 2,00–2,74 (m; 2H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 179,96, 176,28, 174,97, 174,50, 173,44, 173,59, 173,29, 173,10, 167,12.
Beispiel 20
Ph(3,5-DiOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph(3,5-DiOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3,5-Dimethoxymandelsäure (0,21 g; 1,0 mmol; dargestellt nach der in Synthesis (1974)724 beschriebenen Methode), dargestellt, wodurch man 0,31 g (62%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 8,11–8,16 (t NH), 7,17–7,86 (m, 9H), 6,41–6,49 (m, 3H), 5,21–5,24 (d, 2H), 4,84– 5,03 (m, 2H), 4,29–4,66 (m, 2H), 3,67–4,17 (m, 8H), 2,32–2,72 (m, 2H).
(ii)Ph(3,5-DiOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3,5-DiOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,15 g; 0,27 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 120 mg (100%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,34–7,75 (m, 4H), 6,44–6,66 (m, 3H), 4,67–5,12 (m, 1H), 3,97–4,55 (m, 5H), 3,79 (s, 3H), 3,71–3,74 (m, 3H), 2,14–2,85 (m, 2H).
¹³C-NMR (75,5 MHz; D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: 181,17, 174,85, 173,92, 173,53, 173,09, 172,98, 182,90, 166,77.
Beispiel 21
Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-4-Hydroxy-3-methoxymandelsäure (0,20 g; 1,0) dargestellt, wodurch man 89 mg (16%) erhielt.
LC-MS m/z 547 (M + 1)⁺ , 545 (M – 1)^–
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 8,07–8,15 (m, NH), 6,64–7,86 (m, 12H), 5,20–5,27 (m, 2H), 3,57–5,00 (m, 9H), 2,31– 2,74 (m, 2H).
(ii)Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,085 g; 0,16 mmol; aus Stufe (i) oben dargestellt, wodurch man 57 mg (78 ) erhielt.
FAB-MS m/z 413 (M + 1)+
¹H-NMR (500 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere): δ 6,66–7,83 (m, 8H), 4,80–5,25 (m, 2H), 3,88–4,59 (m, 4H), 3,68–3,88 (m, 3H), 2,10– 2,85 (m, 2H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 182,01, 175,56, 174,43, 174,04, 173,20, 173,05, 166,90, 166,85.
Beispiel 22
Ph(2-F,5-CF₃)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph(2-F,5-CF₃)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-2-Fluor-5-trifluormethylmandelsäure (03 g; 1,2 mmol; dargestellt nach der in Org. Synth. Coll. I, 336 beschriebenen Methode) dargestellt, wodurch man 0,32 g (51%) erhielt.
FAB-MS m/z 587 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,15–7,87 (m, 12H), 5,19–5,30 (m, 2H), 4,87–5,00 (m, 1H), 4,36–4,60 (m, 3H), 4,05– 4,20 (m, 1H), 3,60–3,73 (m, 1H), 2,32–2,72 (m, 2H).
(ii) Ph(2-F,5-CF₃)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(2-F,5-CF₃)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,15 g; 0,26 mmol; aus Stufe (i) oben dargestellt, wodurch man 110 mg (90 %) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,28–7,83 (m, 7H), 5,43–5,65 (m, 1H), 4,82–5,18 (m, 1H), 3,97–4,56 (m, 4H), 2,14– 2,85 (m, 2H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 173,61, 173,33, 173,06, 172,83, 172,68, 172,62, 166,86, 164,27, 161,15, 160,92.
Beispiel 23
Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-2-Hydroxy-2-phenylbutansäure (0,18 g; 1,0 mmol) dargestellt, wodurch man 79 mg (15%) erhielt.
LC-MS m/z 529 (M + 1)⁺ , 527 (M – 1)^–
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,27–7,86 (m, 14H), 5,22 (s, 2H), 4,82–4,93 (m, 1H), 4,39–4,57 (m, 2H), 3,84–3,98 (m, 2H), 2,02–2,64 (m, 4H), 0,86–0,93 (m, 3H).
(ii)Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,08 g; 0,15 mmol; aus Stufe (i) oben dargestellt, wodurch man 62 mg (90%) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
FAB-MS m/z 395 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 7,27–7,84 (m, 9H) , 4,83–5,35 (m, 1H), 3,89–4,60 (m, 4H), 2,40–2,61 (m, 1H), 1,95– 2,30 (m, 3H), 0,78–0,95 (m, 3H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 182,09, 175,79, 175,48, 173,53, 73,23, 167,05.
Beispiel 24
Ph-(R,S)C(Me)(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph-(R,S)C(Me)(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (S)-(+)-2-Hydroxy-2-phenylpropionsäure (0,20 g; 1,2 mmol) dargestellt, wodurch man 0,17 g (31%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) : δ 8,04–8,14 (t, NH) , 7,17–7,80 (m, 14H), 5,20 (s, 2H), 4,76–4,86 (m, 1H), 4,31–4,50 (m, 2H), 3,76–3,94 (m, 2H), 2,19–2,44 (m, 2H), 1,70 (s, 3H).
(ii) Ph-(R,S)C(Me)(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R,S)C(Me) (OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,08 g; 0,16 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 48 mg (78%), Diastereomerenverhältnis 85 : 15, erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, D₂): δ 7,30–7,79 (m, 9H), 3,99–4,82 (m, 5H), 2,09–2,74 (m, 2H), 1,70–1,77 (m, 3H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 176,90, 176,34, 173,89, 173,48, 167,00.
Beispiel 25
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pac × HOAc
(i) Boc-Aze-OSu
Eine Mischung von Boc-Aze-OH (5 g, 25 mmol) und HOSu (2,88 g, 25 mmol) in 25 ml THF wurde in einem Eisbad gekühlt. EDC (4,3 ml, 25 mmol) wurde zugesetzt, und die Lösung wurde über Nacht gerührt. Es wurde eingedampft, in Essigsäureethylester gelöst, mit KHSO₄ (aq, 0,3 M) und Na₂CO₃ (aq, 10%) gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und eingedampft. Kristallisieren aus Essigsäureethylester : Petrolether lieferte 3,78 g (51%) der im Untertitel genannten Verbindung.
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ 4,89 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,95 (m, 1H) , 2,85 (s, 4H) , 2,67 (m, 1H) , 2,45 (m, 1H) , 1,42 (s, 9H) .
(ii) Boc-Aze-Pac(Z)
Eine Mischung von H-Pac(Z) × 2 HCl (0,227 g, 0,63 mmol), Boc-Aze-OSu (0,194 g, 0,65 mmol) und Triethylamin (0,2 ml, 1,4 mmol) in 10 ml THF wurde bei Raumtemperatur 18 h gerührt. Nach dem Eindampfen wurde der Rückstand in Essigsäureethylester gelöst, über eine Schicht Celite filtriert und mit Essigsäureethylester : THF (2 : 1) an einer Kieselgelsäule chromatographiert. Das Laufmittel wurde abgedampft, in Essigsäureethylester gelöst, mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und eingedampft, wodurch man 0,250 g (81%) der im Untertitel genannten Verbindung erhielt.
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ 7,4–7,2 (m, 5H), 5,05 (s, 2H), 4,55 (bt, 1H), 3,85 (q breit, 1H), 3,72 (q breit, 1H), 3,2–3,0 (m, 2H), 2,4–2,2 (m, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,9–1,7 (m, 4H), 1,5–1,3 (m, 11H, darunter s bei 1,37, 9H), 1,0–0,8 (m, 2H).
(iii) H-Aze-Pac(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(i) beschriebenen Methode aus Boc-Aze-Pac(Z) (aus Stufe (ii) oben) und anschließender alkalischer extraktiver Aufarbeitung dargestellt.
(iv) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Aze-Pac(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 1(ii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)OH (0,236 g, 0,89 mmol, hergestellt nach Hamada et al. J. Am. Chem. Soc., (1989), 111, 669) und H-Aze-Pac(Z) (0,25 g, 0,53 mmol; aus Stufe (iii) oben; mit vorhergehender Aktivierung durch 30minütiges Rühren in CH₂Cl₂ : Trifluoressigsäure (1 : 1; 10 ml)) dargestellt, wodurch man 160 mg (48%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,20–7,44 (m, 10H), 5,22 (s, 1H), 5,06–5,16 (m, 2H), 4,80–4,90 (m, 1H), 3,92–4,43 (m 2H), 2,88–3,12 (m, 2H), 2,35–2,60 (m, 2H), 1,25–2,10 (m, 10H), 0,84–0,94 (m, 9H), 0,00–0,15 (m, 6H).
(v) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pac × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Aze-Pac(Z) (0,16 g; 0,25 mmol; aus Stufe (iv) oben), mit Aufreinigung durch RPLC dargestellt, wodurch man 15 mg (14%) erhielt.
FAB-MS m/z 373 (M + 1)⁺
Beispiel 26
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pig × HOAc
(i) Boc-Aze-Pig(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 1(ii) beschriebenen Methode aus Boc-Aze-OH (103 g; 5,12 mmol; siehe Beispiel 1(i) oben) und H-Pig(Z) × 2 HCl (1,86 g; 5,12 mmol; hergestellt nach der in der internationalen Patentanmeldung WO 94/29336 beschriebenen Methode) dargestellt, wodurch man 1,24 g (51%) erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,27–7,43 (m, 5H), 5,12 (s, 2H), 4,60–4,67 (t, 1H), 4,16–4,26 (d, 2H), 3,86–3,95 (m, 1H), 3,74–3,82 (m, 1H), 3,11–3,30 (m, 2H), 2,78– 2,89 (m, 2H), 2,33–2,52 (bs, 2H), 1,71–1,83 (m, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,15–1,29 (m, 2H).
(ii) H-Aze-Pig(Z) × 2 HCl
Boc-Aze-Pig(Z) (1,2 g; 2,53 mmol; aus Stufe (i) oben) wurde in mit HCl gesättigtem Essigsäureethylester (75 ml) 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft, mit Wasser verdünnt und mit Toluol extrahiert. Die wäßrige Phase wurde lyophilisiert, wodurch man 1,085 g (96%) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 7,32–7,46 (m, 5H), 5,28 (s, 2H), 4,99–5,05 (t, 1H), 4,08–4,16 (m, 1H), 3,91–3,99 (m, 3H), 3,13–3,25 (m, 4H), 2,79–2,88 (m, 1H), 2,47–257 (m, 1H), 1,82–1,96 (m, 3H), 1,26–1,40 (m, 2H).
(iii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Aze-Pig(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 25(iv) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)OH (0,401 g; 1,5 mmol) und H-Aze-Pig(Z) × 2 HCl (0,672 g; 1,5 mmol; aus Stufe (iii) oben) dargestellt, wodurch man 350 mg (46%) erhielt.
LC-MS m/z 508 (M + 1)+, 530 (M + Na)⁺
(iv) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pig × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph- (R)CH(OTBDMS)-C(O)-Aze-Pig(Z) (0,1 g; 0,197 mmol; aus Stufe (iii) oben) dargestellt, wodurch man 81 mg (95%) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
LC-MS m/z 374 (M + 1)^–+
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,25–7,50 (m, 5H), 5,15 (s, 1H), 4,65–4,75 (m, 1H), 4,25–4,35 (m, 1H), 3,80–4,00 (m, 3H), 2,95–3,50 (m, 4H), 2,05–2,50 (m, 2H), 1,75– 1,90 (m, 3H), 1,15–1,30 (m, 2H).
Beispiel 27
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-(R,S)Hig × HOAc
(i) H-(R,S)Hig(Z) × 2 HCl
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(i) beschriebenen Methode aus Boc-(R,S)Hig(Z) (hergestellt nach der in der internationalen Patentanmeldung WO 94/29336 beschriebenen Methode) dargestellt.
(ii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OBn
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(ii) beschriebenen Methode aus L-Prolinbenzylester × HCl (2,0 g, 8,26 mmol) und Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)OH (2,0 g, 7,51 mmol, hergestellt nach der von Hamada et al. in J. Am. Chem. Soc. (1989) 111, 669) beschriebenen Methode dargestellt, wodurch man 2,0 g (59%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,22–7,55 (m, 10H), 5,45 (s, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,45–4,55 (m, 1H), 3,70–3,82 (m, 1H), 3,05–3,15 (m, 1H), 1,65–2,15 (m, 4H), 0,85–1,05 (m, 9H), 0,00–0,22 (m, 6H).
(iii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OH
Eine Mischung von Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OBn (1,9 g, 4, 19 mmol, aus Stufe (ii) oben) und Pd/C (10%, 0,21 g) in Ethanol (80 ml) wurde bei Normaldruck 3 h hydriert. Die Reaktionsmischung wurde über Celite filtriert, und das Filtrat wurde eingedampft. Die Ausbeute betrug 1,36 g (91%) der im Titel genannten Verbindung.
LC-MS m/z 362 (M – 1)^–
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 7,20–7,50 (m, 5H), 5,45 (s, 1H), 4,30–4,40 (m, 1H), 3,30–3,70 (m, 2H), 1,75–2,30 (m, 4H), 0,85–1,00 (m, 9H), 0,00–0,20 (m, 6H).
(iv) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-(R,S)-Hig(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 25(iv) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OH (0,36 g; 1 mmol; aus Stufe (iii) oben) und H-(R,S)Hig(Z) × 2 HCl (0,36 g; 1 mmol; aus Stufe (i) oben dargestellt, wodurch man 0,63 g Rohprodukt erhielt, das ohne weitere Aufreinigung für den nächsten Schritt verwendet wurde.
LC-MS m/z 636 (M + 1)⁺
¹³C-NMR (100,5 MHz, CDCl₃) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 171,57, 171,20, 163,79, 159,22.
(v) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-(R,S)Hig(Z)
Eine Mischung von Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-(R,S)Hig(Z) (0,63 g; 1 mmol; aus Stufe (iv) oben) und TFA (10 ml, 20% in CH₂Cl₂) wurde bei Raumtemperatur 3 h gerührt. Der pH-Wert der Reaktionsmischung wurde mit wäßrigem K₂CO₃ auf 9 eingestellt, und die Reaktionsmischung wurde anschließend mit CH₂Cl₂ extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an einer Kieselgelsäule (40 g) unter Verwendung von CH₂Cl₂ (100 ml), CH₂Cl₂ : EtOH 95 : 5 (100 ml ) und CH₂Cl₂ : EtOH (9 : 1; 300 ml) als Laufmittel gereinigt. Die Ausbeute betrug 138 mg (26%) der im Untertitel genannten Verbindung.
LC-MS m/z 522 (M + 1)⁺
¹³C-NMR (100,5 MHz, CDCl₃) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: 6 172,21, 171,20, 163,64, 159,11.
(vi) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-(R,S)Hig × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OH)-C(O)-Pro-(R,S)Hig(Z) (0,071 g; 0,14 mmol; aus Stufe (v) oben dargestellt, wodurch man 49 mg (80%) erhielt.
LC-MS m/z 388 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere): δ 7,32–7,56 (m, 5H), 5,37–5,52 (m, 1H), 4,32–4,64 (m, 1H), 3,57–3,75 (m, 2H), 3,24– 3,56 (m, 4H), 2,89–3,15 (m, 2H), 1,25–2,80 (m, 9H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: 181,92, 174,92, 173,69, 173,03.
Beispiel 28
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Dig × HOAc
(i) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-Dig(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 25(iv) oben beschriebenen Methode aus H-Dig(Z) (0,14 g; 0,507 mmol; siehe die internationale Patentanmeldung WO 94/29336) und Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OH (0,23 g; 0,608 mmol, siehe Beispiel 27(iii) oben) dargestellt, wodurch man 316 mg Rohprodukt erhielt, das ohne weitere Aufreinigung für den nächsten Schritt verwendet wurde.
LC-MS m/z 622 (M + 1)⁺
(ii) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Dig(Z)
Trifluoressigsäure (6 ml; 20% in CH₂Cl₂) wurde bei 0°C zu Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-Dig(Z) (0,315 g; 0,506 mmol; aus Stufe (i) oben) gegeben, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur 2 h gerührt. Der pH-Wert der Reaktionsmischung wurde mit wäßrigem K₂CO₃ auf 8 eingestellt, und die Mischung wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert. Die organische Phase wurde mit wäßrigem NaCl gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft. Das Rohprodukt (250 mg) wurde einer Flash-Chromatographie an einer Kieselgelsäule unter Verwendung von CH₂Cl₂ : MeOH (9 : 1) als Laufmittel unterzogen, wodurch man 180 mg (70 %) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,25–7,39 (m, 10H), 5,32–5,37 (s breit, 1H), 5,08–5,19 (m, 2H), 4,40–4,49 (m, 1H), 4,21–4,35 (m, 2H), 3,87–4,03 (m, 2H), 3,71–3,79 (m, 2H), 3,18–3,32 (m, 2H), 3,00–3,10 (m, 1H), 2,61–2,73 (m, 1H), 2,14–2,24 (m, 1H), 1,62–2,07 (m, 8H).
(iii) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Dig × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Dig (0,14 g, 0,276 mmol; aus Stufe (ii) oben dargestellt, wodurch man 122 mg (94%) erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,27–7,44 (m, 5H), 5,34 (s, 1H), 4,29–4,35 (m, 1H), 4,17–4,25 (m, 2H), 3,75–3,83 (m, 2H), 3,63–3,73 (m, 1H), 3,25–3,34 (m, 1H), 3,08– 3,23 (m, 2H), 2,79–2,90 (m, 1H), 1,71–2,10 (m, 6H).
¹³C-NMR (100,6 MHz; CD₃OD) Amidin- und Carbonylsignale: δ 174,79, 173,26; 158,16.
Beispiel 29
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R oder S)Pic(cis-4-Me)-Pab × HOAc und Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(S oder R)Pic(cis-4-Me)-Pab × HOAc
(i) (R,S)-N-Boc-Pic(cis-4-Me)-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 1(ii) beschriebenen Methode aus (R,S)-N-Boc-Pic(cis-4-Me)-OH (0,88 g; 4,1 mmol; hergestellt nach der in Shuman et al. J. Org. Chem. (1990), 55, 738 beschriebenen Methode) dargestellt, wodurch man 405 mg (19%) erhielt.
FAB-MS m/z 509 (M + 1)+
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,25–7,90 (m, 9H), 5,20 (s, 2H), 4,45–4,50 (m, 2H), 4,30–4,40 (m, 1H), 3,15–3,70 (m, 2H), 170–2,00 (m, 4H), 1,45 (s, 9H), 1,15–1,30 (m, 1H), 0,90–1,05 (m 3H).
(ii) H-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z)
(R,S)-N-Boc-Pic(cis-4-Me)-Pab(Z) (0,40 g; 0,79 mmol; aus Stufe (i) oben) wurde in CH₂Cl₂ (5 ml) gelöst. Es wurde mit Trifluoressigsäure (5 ml) versetzt, und die Mischung wurde 0,5 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und der Rückstand wurde in CH₂Cl₂ gelöst, mit wäßrigem Na₂CO₃ gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und eingedampft. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an einer Kieselgelsäule unter Verwendung von CH₂Cl₂: MeOH 95 : 5 und CH₂Cl₂ : MeOH 9 : 1 als Laufmittel gereinigt. Die Ausbeute betrug 300 mg (94%) der im Untertitel genannten Verbindung.
FAB-MS m/z 409 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 7,25–7,85 (m, 9H), 5,15 (s, 2H), 4,35–4,45 (m, 2H), 2,55–3,60 (m, 3H), 1,85–2,05 (m, 1H), 1,35–1,65 (m, 2H), 0,90–1,20 (m, 5H).
(iii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus H(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z) (0,290 g; 0,71 mmol; aus Stufe (ii) oben) und Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-OH (0,189 g; 0,71 mmol; hergestellt nach in Hamada et al. J. Am. Chem. Soc. (1989) 111, 669 beschriebenen Methode) dargestellt, wodurch man 0,40 g Rohprodukt erhielt, das ohne weitere Aufreinigung für den nächsten Schritt verwendet wurde.
(iv) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z)
Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z) (0,40 g; roh aus Stufe (iii) oben) wurde 3 h mit Trifluoressigsäure (20% in CH₂Cl₂) behandelt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und der Rückstand wurde durch Flash-Chromatographie an einer Kieselgelsäule unter Verwendung von CH₂Cl₂: MeOH (98 : 2, 95 : 5 und 9 : 1) als Laufmittel gereinigt. Die Ausbeute betrug 45 mg (11%) der im Untertitel genannten Verbindung.
(v)Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R oder S)Pic(cis-4-Me)-Pab × HOAc und Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(S oder R)Pic(cis-4-Me)-Pab × HOAc
Eine Mischung von Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z) (0,045 g; 0,083 mmol; aus Stufe (iv) oben) und Pd/C (5 ; 0,06 g) in Ethanol (8 ml) wurde bei Normaldruck 2,5 h hydriert. Die Reaktionsmischung wurde filtriert und das Filtrat wurde eingedampft. Das Rohprodukt wurde einer präparativen RPLC (0,1 M NH₄OAc; 30 Acetonitril) unterzogen, wobei die Diastereomeren getrennt wurden. Die Ausbeute betrug 7 mg an Verbindung 29A mit einem Diastereomerenverhältnis von >99 : 1 und 11 mg an Verbindung 29B mit einem Diastereomerenverhältnis von 98 : 2.
Verbindung 29A:
LC-MS m/z 409 (M + 1)⁺, 407 (M – 1)^–
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,20–7,80 (m, 9H), 5,65 (s, 1H), 4,65–5,35 (m, 1H), 4,40–4,55 (m, 2H), 3,85–4,00 (m, 1H), 3,65–3,75 (m, 1H), 2,65–3,15 (m, 2H), 2,05– 2,20 (m, 1H), 1,05–1,75 (m, 2H), 0,70–0,90 (m, 3H).
Verbindung 29B:
LC-MS m/z 409 (M + 1)⁺, 407 (M – 1)^–
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,25–7,80 (m, 9H), 4,55–5,75 (m, 2H), 4,35–4,50 (m, 3H), 3,75–3,85 (m, 1H), 2,70– 2,80 (m, 1H), 1,80–2,20 (m, 1H), 0,70–1,70 (m, 6H).
Beispiel 30
Ph-(CH₂)₂-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) Ph-(CHz)₂-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus H-Aze-Pab(Z) × 2 HCl (0,434 g, 0,988 mmol) und (R)-(-)-2-Hydroxy-4-phenylbuttersäure (0,162 g, 0,898 mmol), TBTU (0,433 g, 1,348 mmol) und N-Methylmorpholin (0,363 g; 3,59 mmol) in DMF (15 ml) dargestellt, wodurch man 105 mg (22%) erhielt.
LC-MS m/z 529 (M + 1)⁺, 527 (M – 1)^–
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 8,17–8,25 (m, NH), 7,05–7,72 (m, 14H), 5,16–5,22 (m, 2H), 4,71–4,88 (m, 1H), 4,32– 4,41 (m, 2H), 3,92–4,04 (m, 2H), 3,79–3,88 (m, 1H), 2,62–2,86 (m, 2H), 2,29–2,57 (m, 2H), 1,80–1,98 (m, 2H).
(ii) Ph-(CH₂)₂-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) oben beschriebenen Methode aus Ph-(CH₂)₂(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,112 g; 0,212 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 77 mg (84%) erhielt.
LC-MS m/z 395 (M – 1)⁺, 393 (2M – 1)^–
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,77–7,77 (m, 9H), 4,73–5,19 (m, 1H), 4,40–4,62 (m, 2H), 3,92–4,34 (m, 3H), 2,48– 2,84 (m, 3H), 2,09–2,33 (m, 1H), 1,83–2,05 (m, 2H).
¹³C-NMR (100,6 MHz, D₂O; verkompliziert durch Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 175,66, 174,80, 172,56, 172,49, 166,14, 165,87.
Beispiel 31
2-Naphthyl-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (R,S)-(2-Naphthyl)glycolsäure
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(i) oben beschriebenen Methode aus 2-Naphthaldehyd (15,6 g; 100 mmol) dargestellt, wodurch man 12,37 g (61%) erhielt.
LC-MS m/z 201 (M + 1)⁺, 403 (M – 1)^–
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 7,43–7,98 (m, 7H), 5,29–5,35 (m, 1H).
(ii) 2-Naphthyl-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-(2-Naphthyl)glycolsäure (0,162 g; 0,8 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 266 mg (60 ) erhielt.
LC-MS m/z 551 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,18–7,91 (m, 16H), 4,86–5,26 (m, 3H), 4,05–4,60 (m, 3H), 3,52–3,78 (m, 2H), 2,24– 2,73 (m, 2H).
(iii) 2-Naphthyl-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus 2-Naphthyl-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,266 g; 0,48 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt, wodurch man 202 mg (88%) erhielt.
LC-MS m/z 417 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 7,28–7,96 (m, 11H), 5,30–5,40 (m, 1H), 3,95–4,82 (m, 5H), 2,09–2,59 (m, 2H).
Beispiel 32
3-Indolyl-CH₂-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × OHAc
(i) 3-Indolyl-CH₂-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3-(3-(Indolyl)milchsäure (0,21 g; 1,0 mmol) dargestellt, wodurch man 0,22 g (45%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6,57–7,80 (m, 14H), 5,24 (s, 2H), 4,59–4,83 (m, 1H), 4,19–4,51 (m, 3H), 3,69–3,99 (m, 2H), 3,03–3,36 (m, 2H), 2,31–2,56 (m, 2H).
(ii) 3-Indolyl-CH₂-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus 3-Indolyl-CH₂-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,11 g; 0,20 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 75 mg (80%) erhielt.
FAB-MS m/z 420 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,00–7,75 (m, 9H), 4,61–4,71 (m, 1H), 3,74–4,51 (m, 5H), 3,00–3,28 (m, 2H), 1,95– 2,42 (m, 2H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastercomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 179,38, 176,19, 175,56, 173,06, 166,78.
Beispiel 33
(CH₃)₂CH-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (CH₃)₂CH-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R)-2-Hydroxyisovaleriansäure (0,12 g; 1,0 mmol) dargestellt, wodurch man 68 mg (16%) erhielt.
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8,25–8,40 (t, NH), 7,15–7,90 (m, 9H), 5,20 (s, 2H), 4,85–4,95 (m, 1H), 4,30–4,55 (m, 2H), 4,05–4,25 (m, 2H), 3,75–3,90 (m, 1H), 1,65–2,75 (m, 3H), 0,70–1,05 (m, 6H).
(ii) (CH₃)₂CH-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus (CH₃)₂CH-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,068 g, 0,15 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 13 mg (23 %) erhielt.
¹H-NMR (300 MHz, D₂O): δ 7,45–7,80 (m, 4H), 4,85–5,25 (m, 1H), 4,45–4,65 (m, 2H), 4,30–4,40 (m, 1H), 3,80– 4,10 (m, 2H), 2,60–2,80 (m, 1H), 2,20–2,35 (m, 1H), 1,90–2,05 (m, 1H), 0,70–1,00 (m, 6H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: 182,37, 176,34, 175,38, 173,84, 173,26, 167,16.
Beispiel 34
(CH₃)₂CH-(CH₂)₂-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (CH₃)₂CH-(CH₂)₂-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-Isoleucinsäure (0,12 g; 0,88 mmol) dargestellt, wodurch man 0,15 g (36%) erhielt.
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ 7,15–7,80 (m, 9H), 5,20 (s, 2H), 4,85–4,95 (m, 1H), 4,35–4,55 (m, 2H), 3,85–4,20 (m, 3H), 2,40–2,80 (m, 2H), 1,75–2,10 (m, 1H), 1,20– 1,55 (m, 2H), 0,75–1,00 (m, 6H).
(ii) (CH₃)₂CH-(CH₂)₂-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus (CH₃)₂CH-(CH₂)₂-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,13 g; 0,27 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 0,11 g (100%) erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 7,63–7,69 (m, 2H), 7,37–7,46 (m, 2H), 4,72–5,12 (m, 1H), 4,40–4,46 (m, 2H), 4,17– 4,31 (m, 2H), 3,90–4,02 (m, 1H), 2,50–2,69 (m, 1H), 2,11–2,27 (m, 1H), 1,12–1,72 (m, 3H), 0,61–0,85 (m, 6H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 176,97, 176,80, 176,61, 176,19, 173,38, 173,28, 173,17, 173,10, 166,78, 182,02.
Beispiel 35
Ph(3-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
(i) Boc-Pro-Pab(Z) × HCl
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(ii) beschriebenen Methode aus Boc-Pro-OH (10,2 g, 47,4 mmol) unter Zusatz von H-Pab-(Z) × HCl (15,9 g, 49,8 mmol) dargestellt, wodurch man 21,74 g (95,5%) erhielt.
FAB-MS m/z 481 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 8,0–7,8 (m, 2H), 7,5–7,25 (m, 7H), 5,17 (s, 2H), 4,6–4,15 (m, 3H), 3,6–3,35 (m, 2H), 2,3–2,1 (m, 1H), 2,1–1,8 (m, 3H), 1,5–1,3 (zwei breite Singuletts, Boc-Rotamere, 9H).
(ii) H-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(i) beschriebenen Methode und anschließende alkalische extraktive Aufarbeitung aus Boc-Pro-Pab(Z) × HCl (aus Stufe (i) oben) dargestellt.
(iii) Ph(3-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R, S)-3-Hydroxymandelsäure (0,25 g; 1,5 mmol) und H-Pro-Pab(Z) (0,63 g; 1,65 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt, wodurch man 51 mg (6%) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
FAB-MS m/z 531 (M + 1)⁺
(iv)Ph(3-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) oben beschriebenen Methode aus Ph(3-OH)(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,05 g; 0,094 mmol; aus Stufe (iii) oben) dargestellt, wodurch man 30 mg (74%) erhielt.
FAB-MS m/z 397 (M + 1)⁺
¹³C-NMR (75, 5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 175,36, 175,13, 172,92, 167,13.
Beispiel 36
Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
(i) Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)- 3,5-Dimethoxymandelsäure (0,08 g; 0,38 mmol; hergestellt nach der in Synthesis (1974), 724 beschriebenen Methode) und H-Pro-Pab(Z) (0,16 g; 0,42 mmol; siehe Beispiel 35(ii)) dargestellt, wodurch man 61 mg (28%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,70–7,80 (t, NH), 7,08–7,50 (m, 9H), 6,30–6,5C (m, 3H), 5,20 (s, 2H), 5,00–5,10 (m, 1H), 4,25–4,70 (m, 3H), 3,60–3,80 (m, 6H), 3,35–3,55 (m, 1H), 2,95–3,25 (m, 1H), 1,70–2,25 (m, 4H).
(ii)Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,06 g; 0,10 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 35 mg (72 %) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,23–7,80 (m, 4H), 6,41–6,65 (m, 3H), 5,35–5,45 (m, 1H), 4,35–4,60 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,10–3,75 (m, 5H), 1,70–2,35 (m, 4H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 175,28, 175,05, 174,03, 173,46, 172,80, 172,73, 167,11, 166,95.
Beispiel 37
Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
(i) Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3-Methoxymandelsäure (0,27 g; 1,5 mmol) und H-Pro-Pab(Z) (0,57 g; 1,5 mmol; siehe Beispiel 35(ii) oben) dargestellt, wodurch man 158 mg (20%) erhielt.
FAB-MS m/z 545 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,77–7,84 (m, 2H), 7,01–7,48 (m, 8H), 6,80–6,91 (m, 3H), 5,20–5,24 (m, 2H), 5,06– 5,11 (m, 1H), 4,30–4,72 (m, 3H), 3,68–3,79 (m, 3H), 3,38–3,57 (m, 1H), 2,91–3,17 (m, 1H), 1,68–2,31 (m, 4H)
(ii) Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,06 g; 0,11 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 39 mg (75 %) erhielt.
LC-MS m/z 411 (M + 1)⁺, 409 (M – 1)^–
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 6,81–7,84 (m, 8H), 5,47 (s, 1H), 4,35–4,59 (m, 3H), 3,60–3,88 (m, 4H), 3,07–3,29 (m, 1H), 1,74–2,37 (m, 4H).
Beispiel 38
Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aye-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3,4-Methylendioxymandelsäure (0,20 g, 1,0 mmol, hergestellt nach der in Synthesis (1974) 724 beschriebenen Methode) dargestellt, wodurch man 0,22 g (44%) erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, Aceton-d₆): δ 6,68–8,12 (m, 2H), 5,94– 6,05 (m, 2H), 5,18 (s, 2H), 3,81–5,12 (m, 6H), 2,30– 2,54 (m, 2H).
(ii) Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,11 g; 0,20 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 72 mg (76%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 6,64–7,80 (m, 7H), 5,91–6,01 (m, 2H), 4,80–5,24 (m, 2H), 3,88–4,57 (m, 4H), 2,11– 2,84 (m, 2H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 176,03, 175,70, 175,07, 174,82, 168,86.
Beispiel 39
Ph(3-OMe;4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
(i) Ph(3-OMe;4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-4-Hydroxy-3-methoxymandelsäure (0,40 g; 2,0 mmol) und H-Pro-Pab(Z) (0,76 g; 2,0 mmol; siehe Beispiel 35(ii)) dargestellt, wodurch man 132 mg (12%) erhielt.
FAB-MS m/z 561 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6,62–7,84 (m, 12H), 5,20–5,25 (m, 2H), 4,15–5,08 (m, 3H), 3,42–3,84 (m, 4H), 2,91– 3,25 (m, 1H), 1,66–2,37 (m, 4H).
(ii) Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3- OMe, 4-OH)–(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0, 048 g; 0,09 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 23 mg (55%) erhielt.
FAB-MS m/z 427 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 6,72–7,83 (m, 7H), 5,42 (s, 1H), 9,38–4,68 (m, 3H), 3,55–4,10 (m, 4H), 3,09–3,29 (m, 1H), 1,72–237 (m, 4H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O); Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 175,12, 173,25, 167,09.
Beispiel 40
Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
(i) Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde hergestellt nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-2-Hydroxy-2-phenylbutansäure (0,36 g; 2,0 mmol) und H-Pro-Pab(Z) (0,76 g; 2,0 mmol; siehe Beispiel 35(ii) oben), wodurch man 57 mg (5 %) erhielt.
FAB-MS m/z 543 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,24–7,88 (m, 14H), 5,23 (s, 2H), 4,49–4,81 (m, 3H), 2,98–3,25 (m, 2H), 1,99–2,32 (m, 6H), 0,85–0,95 (m, 3H).
(ii) Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,055 g; 0,1 mmol; aus Stufe (i) oben, dargestellt, wodurch man 34 mg (72%) erhielt.
FAB-MS m/z 409 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 7,33–7,82 (m, 9H), 4,38–4,60 (m, 3H), 3,19–3,71 (m, 2H), 1,54–2,34 (m, 6H), 0,73– 0,90 (m, 3H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 182,05, 176,42, 175,73, 175,59, 174,70, 174,47, 167,18.
Beispiel 41
Ph(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (R,S)-3,5-Dimethylmandelsäure
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(i) oben beschriebenen Methode aus 3,5-Dimethylbenzaldehyd (5,0 g; 37 mmol) dargestellt, wodurch man 2,8 g (42 )erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,05 (s, 2H), 6,94 (s, 1H), 5,04 (s, 1H), 2,28 (s, 6H).
(ii) Ph(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R,S)-3,5-Dimethylmandelsäure (0,27 g; 1,5 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 0,403 g (51 ) erhielt.
FAB-MS m/z 529 (M + 1)⁺ ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6,85–7,88 (m, 12H), 5,22–5,26 (m, 2H), 4,84–5,03 (m, 2H), 4,43–4,62 (m, 2H), 3,57– 4,13 (m, 2H), 2,25–2,74 (m, 8H).
(iii) Ph(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) beschriebenen Methode aus Ph(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,102 g; 0,194 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 74 mg (84 %) erhielt.
FAB-MS m/z 395 (M + 1)⁺ ¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 6,76–7,82 (m, 7H), 4,80–5,27 (m, 2H), 3,87–4,62 (m, 4H), 2,20–2,87 (m, 8H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 182,07, 175,60, 174,49, 174,37, 173,96, 173,23, 173,09, 173,05, 172,93, 166,98, 166,90.
Beispiel 42
Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph(3-NO₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R,S)-3-Nitromandelsäure (0,30 g,; 1,5 mmol) dargestellt, wodurch man 0,40 g (48%) erhielt.
LC-MS m/z 545 (M + 1)⁺ ¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,16–8,22 (m, 13H), 5,18–5,23 (m, 2H), 4,85–5,15 (m, 2H), 4,08–4,60 (m, 3H), 3,65– 3,81 (m, 1H), 2,31–2,71 (m, 2H).
(ii) Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) beschriebenen Methode aus Ph(3-NO₂) (R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,102 g; 0,19 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 0,074 g (89 ) erhielt.
LC-MS m/z 382 (M + 1)^– ¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 6,58–7,82 (m, 8H), 4,80–5,25 (m, 2H), 3,60–4,60 (m, 4H), 2,12–2,88 (m, 2H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 181,96, 175,27, 174,25, 173,84, 173,19, 173,01, 166,93.
Beispiel 43
Ph(3-NO₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Anisol (0,030 g; 0,27 mmol) und Trifluormethansulfonsäure (0,138 g; 0,92 mmol) wurden zu einer Mischung von Ph(3-NO₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,100 g; 0,18 mmol; siehe Beispiel 42(i) oben) und CH₂Cl₂ (10 ml) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde 10 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. H₂O wurde zugesetzt, und der pH-Wert wurde mit wäßrigem Na₂CO₃ auf 9 eingestellt. Das CH₂Cl₂ wurde im Vakuum abgezogen und die verbliebene H₂O-Phase wurde mit Diethylether (3 × 5 ml) extrahiert und dann lyophilisiert. Das Rohprodukt wurde einer präparativen RPLC unterzogen, wodurch man nach Lyophilisieren 62 mg (60) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 7,38–8,31 (m, 8H), 4,83–5,50 (m, 2H), 4,03–4,57 (m, 4H), 2,17–2,86 (m, 2H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 181,5, 173,84, 173,39, 173,15, 173,04, 172,96, 172,80, 166,85.
Beispiel 44
Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
(i) Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) beschriebenen Methode aus (R, S)-3-Nitromandelsäure (0,30 g; 1,5 mmol) und H-Pro-Pab-(Z) × 2 HCl (0,75 g; 1,65 mmol; siehe Beispiel 35(ii) oben) dargestellt, wodurch man 0,61 g (73 ) erhielt.
LC-MS m/z 560 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,26–823 (m, 13H), 5,20–5,28 (m, 3H), 4,33–4,73 (m, 3H), 3,46–3,68 (m, 1H), 2,92– 3,14 (m, 1H), 1,79–2,23 (m, 4H).
(ii) Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) beschriebenen Methode aus Ph(3-NO₂)(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,104 g; 0,19 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 64 mg (76) erhielt.
LC-MS m/z 396 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 6,74–7,82 (m, 8H), 5,34–5,40 (m, 1H), 4,35–4,58 (m, 3H), 3,09–3,78 (m, 2H), 1,75– 2,35 (m, 4H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 182,04, 175,38, 175,18, 173,12, 173,04, 167,07.
Beispiel 45
Ph(3-NO₂)-(R oder S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 43 beschriebenen Methode aus Ph(3-NO₂)(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,117 g; 0,21 mmol; siehe Beispiel 44(i) oben) dargestellt. Einige Fraktionen wurden eingeengt, wodurch man 23 mg (45 ) einer Verbindung mit einem Diastereomerenverhältnis von >99 : 1 erhielt.
LC-MS m/z 424 (M – 1); 426 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,31–8,35 (m, 8H), 5,50–5,71 (m, 1H), 3,64–4,57 (m, 4H), 3,24–3,32 (m, 1H), 1,76– 2,42 (m, 4H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 175,21, 173,98, 172,58, 172,18, 167,12, 166,82.
(Durch Einengen von früher eluierten Fraktionen erhielt man 22 mg (43%) des Epimers der obigen Verbindung mit einem Diastereomerenverhältnis von >99 : 1).
Beispiel 46
Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
(i) Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3,4-Methylendioxymandelsäure (0,20 g, 1,0 mmol, hergestellt nach der in Synthesis (1974) 724 beschriebenen Methode) und H-Pro-Pab(Z) × 2 HCl (0,35 g; 0,91 mmol; siehe Beispiel 35(ii) oben) dargestellt, wodurch man 80 mg (16 ) erhielt.
FAB-MS m/z 559 (M + 1)⁺,
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6,69–7,89 (m, 12H), 5,91–6,04 (m, 2H), 4,30–5,28 (m, 2H), 3,00–3,61 (m, 6H), 1,95– 2,35 (m, 4H).
(ii) Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) oben beschriebenen Methode aus Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,08 g; 0,14 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 48 mg (73 ) erhielt.
FAB-MS m/z 425 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 6,81–7,85 (m, 7H), 5,90–6,05 (m, 2H), 5,33–5,44 (m, 1H), 4,37–4,90 (m, 3H), 3,62– 3,77 (m, 1H), 3,13–3,28 (m, 1H), 1,80–2,36 (m, 4H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 175,37, 175,09, 173,66, 173,08, 173,00, 167,03.
Beispiel 47
Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
(i) Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3,5-Difluormandelsäure (0,28 g; 1,5 mmol) und H-Pro-Pab(Z) × 2HCL (0,75 g; 1,65 mmol; siehe Beispiel 35(ii) oben) dargestellt, wodurch man 0,42 g (51%) erhielt.
LC-MS m/z 549 (M – 1)^–; 551 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6,72–7,84 (m, 12H), 5,22 (s, 2H), 5,08 (s, 1H), 4,34–4,73 (m, 3H), 3,41–3,60 (m, 1H), 2,96–3,19 (m, 1H), 1,80–2,34 (m, 4H).
(ii) Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,104 g; 0,19 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 79 mg (88 %) erhielt.
LC-MS m/z 415 (M – 1)^–; 417 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 6,86–7,80 (m, 7H), 5,50 (s, 1H), 3,58–4,72 (m, 4H), 3,19–332 (m, 1H), 1,80–2,37 (m, 4H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 181,87, 175,21, 174,98, 174,12, 172,57, 172,12, 171,97, 167,10, 165,24.
Beispiel 48
Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(OH)-CH₂-OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph-(R)CH(OH)-C(O)OBn
(R)-Mandelsäure (3,0 g, 19,7 mmol) wurde in DMF (50 ml) gelöst und mit Cesiumcarbonat (3,21 g, 9,86 mmol) versetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Mischung wurde mit H₂O (200 ml) verdünnt, und die H₂O-Phase wurde mit EtOAc extrahiert. Nach dem Abtrennen wurde die organische Phase mit wäßriger NaCl gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und eingedampft. Die Ausbeute an der im Untertitel genannten Verbindung betrug 4,2 g (88%).
LC-MS m/z 265 (M + Na)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,17–7,44 (m, 10H), 5,12–5,27 (m, 3H).
(ii) Ph-(R)CH(O-CH₂-CH=CH₂)-C(O)OBn
Eine Mischung von Ph-(R)CH(OH)-C(O)OBn (1,0 g; 4,13 mmol; aus Stufe (i) oben) , Magnesiumsulfat (0, 1 g; 0, 83 mmol) und Silber(I)-oxid (2,58 g; 11,2 mmol) in Petrolether (Sdp. 40–60°C; 25 ml) wurde unter einer Stickstoffatmosphäre und im Dunkeln bei Raumtemperatur gerührt. Allylbromid (0,75 g; 6,19 mmol) wurde zugetropft, und dann wurde Silber(I)-oxid (2,58 g; 11,2 mmol) in zwei Portionen zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde anschließend über Celite filtriert und das Filtrat wurde eingedampft, wodurch man 1,143 g (98 ) der im Untertitel genannten Verbindung erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,20–7,50 (m, 10H), 5,89–5,99 (m, 1H), 5,09–5,31 (m, 4H), 4,99 (s, 1H), 4,03–4,11 (m, 2H) .
(iii) Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(OH)-CH₂OH)-C(O)OBn
Eine Mischung von Ph-(R)CH(O-CH₂-CH=CH₂)-C(O)OBn (0,74 g; 2,62 mmol; aus Stufe (ii) oben), N-Methylmorpholin-N-oxid (0,425 g; 3,15 mmol) und Osmiumtetroxid (0,0027 g; 0,01 mmol) in H₂O : Aceton (2 : 1; 10 ml) wurde bei Raumtemperatur 2 Tage lang gerührt. Natriumpyrosulfit (1,5 g; 7,89 mmol) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde 1 h gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend über Celite filtriert, und das Filtrat wurde eingedampft. Die Ausbeute an der im Untertitel genannten Verbindung betrug 0,51 g (62).
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,16–7,44 (m, 10H), 5,09–5,20 (m, 2H), 4,96 (s, 1H), 3,55–3,97 (m, 5H).
(iv) Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)OBn
Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(OH)-CH₂OH)-C(O)OBn (0,51 g; 1,61 mmol; aus Stufe (ii ) oben) wurde in Aceton (20 ml) gelöst. p-Toluolsulfonsäure-monohydrat (0,007 g, 0,037 mmol) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde 24 h bei Raumtemperatur gerührt. Kaliumcarbonat (0,09 g) wurde zugegeben, und die Reaktionsmischung wurde 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde anschließend über Celite filtriert und das Filtrat wurde eingedampft, wodurch man 0,559 g (97) der im Untertitel genannten Verbindung erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,18–7,48 (m, 10H), 5,01–5,21 (m, 3H), 4,27–4,40 (m, 1H), 4,02–4,11 (m, 1H), 3,76– 3,90 (m, 1H), 3,49–3,67 (m, 2H), 1,34–1,41 (m, 6H).
(v) Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)OH
Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)OBn (0,183 g; 0,51 mmol; aus Stufe (iv) oben) wurde in Ethanol (10 ml) gelöst. Pd/C (5 ; 0,09 g) wurde zugesetzt, und die Reaktionsmischung wurde 1 h bei Normaldruck hydriert. Die Mischung wurde anschließend über Celite filtriert und das Filtrat wurde eingedampft, wodurch man 0,137 g (100 ) der im Untertitel genannten Verbindung erhielt.
LC-MS m/z 265 (M – 1)^–
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,28–7,48 (m, 5H), 4,97 (s, 1H), 4,25–4,35 (m, 1H), 4,01–4,09 (m, 1H), 3,72–3,84 (m, 1H), 3,43–3,65 (m, 2H), 1,30–1,37 (m, 6H).
(vi) Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus Ph- (R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)OH (0,165 g; 0,62 mmol; aus Stufe (v) oben) dargestellt, wodurch man 0,20 g (52 ) erhielt.
LC-MS m/z 613 (M – 1)^–; 615 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,22–7,88 (m, 14H), 5,22 (s, 2H), 4,87–4,95 (m, 2H), 3,40–4,54 (m, 9H), 2,36–2,76 (m, 2H), 1,22–1,42 (m, 6H).
(vii) Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(0)- Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,20 g; 0,325 mmol; aus Stufe (vi) oben) dargestellt, wodurch man 179 mg (100 ) erhielt.
LC-MS m/z 479 (M – 1)^–; 481 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,33–7,80 (m, 9H), 4,81–5,31 (m, 2H), 3,94–4,59 (m, 6H), 3,25–3,80 (m, 3H), 2,16– 2,88 (m, 2H), 1,29–1,44 (m, 6H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 181,99, 173,12, 172,93, 172,18, 166,84.
(viii) Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(OH)-CH₂OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Aze-Pab × HOAc (0,094 g; 0,17 mmol; aus Stufe (vii) oben) wurde in HOAc : H₂O (4 : 1; 10 ml) gelöst, und die Reaktionsmischung wurde 24 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde eingedampft und der Rückstand wurde in H₂O gelöst und lyophilisiert. Die Ausbeute an der im Titel genannten Verbindung betrug 85 mg (100 ).
LC-MS m/z 439 (M – 1)^–; 441 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,32–7,78 (m, 9H), 4,81–5,28 (m, 2H), 3,28–4,56 (m, 9H), 2,15–2,90 (m, 2H).
¹³C-NMR (100,6 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 179,14, 172,93, 172,89, 172,51, 171,96, 166,54.
Beispiel 49
Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(OH)-CH₂OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
(i) Ph-(R)CH(O-CH₂(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)OH (0,108 g; 0,4 mmol; siehe Beispiel 48(v) oben) und H-Pro-Pab(Z) × 2 HCl (0,202 g; 0,46 mmol; siehe Beispiel 35(ii) oben) dargestellt, wodurch man 0,10 g (40 ) erhielt.
LC-MS m/z 627 (M – 1)^–; 629(M + 1)⁺; 651 (M + Na)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,23–7,87 (m, 14H), 5,03–5,27 (m, 3H), 3,34–4,64 (m, 10H), 1,71–2,39 (m, 4H), 1,23– 1,41 (m, 6H).
(ii) Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,100 g; 0,159 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 85 mg (96%) erhielt.
LC-MS m/z 493 (M – 1)^–; 495 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,30–7,82 (m, 9H), 5,22–5,38 (m, 1H), 4,32–4,62 (m, 4H), 4,01–4,11 (m, 1H), 3,22–3,83 (m, 5H), 1,78–2,22 (m, 4H), 1,33–1,44 (m, 6H).
¹³C-NMR (100,6 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 181,47, 174,74, 173,53, 171,64, 171,50, 171,00, 170,94, 166,58.
(iii) Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(OH)-CH₂OH)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 48(viii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(O-CH_Z-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Pro-Pab × HOAc (0,038 g; 0,069 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt, wodurch man 35 mg (98%) erhielt.
LC-MS m/z 453 (M – 1)^–; 455 (M + 1)⁺ ¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,30–7,82 (m, 9H), 5,20–5,38 (m 1H), 3,18–4,60 (m, 10H), 1,70–2,38 (m, 4H).
¹³C-NMR (100,6 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 180,26, 174,74, 173,47, 171,80, 171,26, 166,61.
Beispiel 50
Ph-(R oder S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab × HOAc und Ph-(S oder R)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) Ph-(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂)-C(O)OH
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 48 (iv) oben beschriebenen Methode aus α-Hydroxytropansäüre (3,5 g; 20,35 mmol; hergestellt nach Guthrie et al. Can. J. Chem. (1991) 69, 1904) dargestellt, wodurch man 3,37 g (74) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,30–7,65 (m, 5H), 4,95 (d, 1H) , 4, 10 (d, 1H) , 1, 70 (s, 3H) , 1, 50 (s, 3H) .
(ii) Ph-(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)OH (0,25 g; 1,12 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 0,30 g (53 ) erhielt.
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,20–7,90 (m, 14H), 5,22 (s, 2H), 3,70–5,10 (m, 7H), 2,15–2,75 (m, 2H), 1,40–1,65 (m, 6H) .
(iii)Ph-(R oder S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab × HOAc und Ph-(S oder R)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Eine Mischung von Ph-(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,30 g; 0,53 mmol; aus Stufe (ii) oben), Ammoniumformiat (0,30 g , 4,76 mmol), Ameisensäure (3 Tropfen) und Pd/C (5%, 0,30 g) in Methanol (10 ml) wurde bei Raumtemperatur 30 Minuten lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde über Celite filtriert und das Filtrat wurde eingedampft. Das Rohprodukt (0,29 g) wurde einer präparativen RPLC unterzogen. Einige Fraktionen wurden eingeengt, wodurch man 80 mg (35 ) der Verbindung 50A mit einem Diastereomerenverhältnis von >99 : 1 erhielt. Durch Einengen von später eluierten Fraktionen erhielt man 80 mg (35 ) der Verbindung 50B mit einem Diastereomerenverhältnis von 98 : 2.
Verbindung 50A:
LC-MS m/z 437 (M + 1)+
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,28–7,85 (m, 9H), 3,70–4,95 (m, 7H), 2,10–2,55 (m, 2H), 1,55 (s, 3H), 1,50 (s, 3H).
Verbindung 50B:
LC-MS m/z 437 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,25–7,80 (m, 9H), 3,70–5,00 (m, 7H), 2,25–2,45 (m, 2H), 1,60 (s, 3H), 1,48 (s, 3H).
Beispiel 51
Ph-(R oder S)C(OH)(CH₂OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl und Ph-(S oder R) C (OH) (CH₂OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
(i) Ph-(R oder S)C(OH)(CH₂OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Ph-(R oder S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab × HOAc (0,060 g; 0,12 mmol; Verbindung 50A aus Beispiel 50 oben) wurde in Essigsäure (4 ml) gelöst und mit H₂O (1 ml) versetzt. Die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur und dann 6 h bei 90°C gerührt. HCl (konz.; 1 ml) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde 5 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Essigsäure und HCl wurden im Vakuum in Gegenwart von Toluol und EtOH abgezogen, und der Rückstand wurde in H₂O (4 ml) gelöst und lyophilisiert. Das Rohprodukt wurde einer präparativen RPLC unterzogen, wodurch man 9 mg (16%) der im Titel genannten Verbindung erhielt.
LC-MS m/z 395 (M – 1)^–; 397 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,20–7,85 (m, 9H), 3,90–4,70 (m, 5H), 3,30–3,70 (m, 2H), 2,00–2,65 (m, 2H).
(ii)Ph-(S oder R)C(OH)(CH₂OH)-C(O)-Aze-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Stufe (i) oben beschriebenen Methode aus Ph-(S oder R)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab × HOAc (0,060 g; 0,12 mmol; Verbindung 50B aus Beispiel 50 oben) dargestellt, wodurch man 22 mg (40 ) erhielt.
LC-MS m/z 397 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,20–7,85 (m, 9H), 3,90–4,75 (m, 6H), 3,50–3,60 (m, 1H), 2,10–2,50 (m, 2H).
Beispiel 52
Ph-(R oder S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Pro-Pab × HOAc und Ph-(S oder R)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
(i) Ph-(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)OH (0,25 g; 1,12 mmol; siehe Beispiel 50(i) oben) dargestellt, wodurch man 0,19 g (32 ) erhielt.
FAB-MS m/z 585 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,20–7,95 (m, 14H), 5,25 (s, 2H), 5,10–5,20 (m, 1H), 4,32–4,70 (m, 3H), 3,65–3,95 (m, 2H), 3,00–3,25 (m, 1H), 1,30–2,35 (m, 10H).
(ii) Ph-(R oder S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Pro-Pab × HOAc und Ph-(S oder R)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Pro-Pab × HOAc
Die im Titel genannten Verbindungen wurden nach der in Beispiel 50(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,37 g; 0,63 mmol; aus Stüfe (i) oben) dargestellt. Einige Fraktionen wurden eingeengt, wodurch man 120 mg der Verbindung 52A mit einem Diastereomerenverhältnis von > 99 : 1 erhielt. Durch Einengen der später eluierten Fraktionen erhielt man 120 mg der Verbindung 52B mit einem Diastereomerenverhältnis von 98 : 2.
Verbindung 52A:
LC-MS m/z 451 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,25–7,80 (m, 9H), 4,35–5,05 (m, 4H), 3,80–3,95 (m, 1H), 3,60–3,65 (m, 1H), 3,00– 3,10 (m, 1H), 2,10–2,20 (m, 1H), 1,75–1,90 (m, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,45 (s, 3H)
Verbindung 52B:
LC-MS m/z 451 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,25–7,80 (m, 9H), 4,40–5,10 (m, 4H), 3,30–3,80 (m, 3H), 1,75–2,20 (m, 4H), 1,50– 1,55 (m, 6H).
Beispiel 53
Ph-(R oder S)C(OH)(CH₂OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl und Ph-(S oder R)C(OH)(CH₂OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
(i) Ph-(R oder S)C(OH)(CH₂OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 51(i) oben beschriebenen Methode aus Ph-(R oder S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Pro-Pab × HOAc (0,060 g; 0,12 mmol; Verbindung 52A aus Beispiel 52 oben) dargestellt, wodurch man 2 mg (2 ) erhielt.
LC-MS m/z 409 (M – 1)^–; 411 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,20–7,85 (m, 9H), 4,40–4,60 (m, 3H), 4,05–4,30 (m, 1H), 2,95–3,90 (m, 3H), 1,60– 2,20 (m, 4H).
(ii) Ph-(S oder R)C(OH)(CH₂OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 51(i) oben beschriebenen Methode aus Ph-(S oder R)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Pro-Pab × HOAc (0,060 g; 0,12 mmol; Verbindung 52B aus Beispiel 52 oben) dargestellt, wodurch man 1 mg (1 ) erhielt.
LC-MS m/z 409 (M – 1)^–; 411 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,25–7,85 (m, 9H), 4,40–4,65 (m, 3H), 4,05–4,20 (m, 1H), 325–3,75 (m, 3H), 1,40–2,20 (m, 4H).
Beispiel 54
Ph-(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
(i) Ph-(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde hergestellt nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R)-(-)-2-Hydroxy-2-phenylpropionsäure (0,20 g; 1,2 mmol) und H-Pro-Pab(Z) × 2 HCl (0,50 g; 1,1 mol; siehe Beispiel 35(ii) oben), wodurch man 0,13 g (22 ) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,18–7,87 (m, 14H), 5,25 (s, 2H), 4,37–4,61 (m, 3H), 3,03–3,19 (m, 2H), 1,50–2,17 (m, 7H).
(ii) Ph-(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 1(v) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,13 g; 0,25 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 94 mg (89%) erhielt.
FAB-MS m/z 395 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,37–7,91 (m, 9H), 4,33–4,61 (m, 3H), 3,15–4,01 (m, 2H), 1,72–2,23 (m, 7H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: 176,06, 175,49, 174,88, 166,90.
Beispiel 53
Ph-(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
(i) Ph-(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (S)-(+)-2-Hydroxy-2-phenylpropionsäure (0,20 g; 1,2 mmol) und H-Pro-Pab(Z) × 2 HCl (0, 50 g; 1, 1 mmol; siehe Beispiel 35(ii) oben) dargestellt, wodurch man 0,19 g (33%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,20–7,77 (m, 14H), 5,22 (s, 2H), 4,53–4,58 (m, 1H), 4,32–4,44 (m, 2H), 3,13–3,38 (m, 2H), 1,53–2,04 (m, 7H).
(ii) Ph-(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) oben beschriebenen Methode aus Ph(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,12 g; 0,23 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 80 mg (82) erhielt.
FAB-MS m/z 395 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 7,35–7,84 (m, 9H), 4,47–4,63 (m, 3H), 3,30–3,70 (m, 2H), 1,60–2,29 (m, 7H).
¹³C-NMR (75,5 MHz, D₂O; verkompliziert durch Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 175,58, 175,23, 174,79, 167,07.
Beispiel 56
Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
(i) Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3,4-Difluoromandelsäure (0,20 g; 1,06 mmol) und H-Pro-Pab(Z) × 2HCl (0,53 g; 1,17 mmol; siehe Beispiel 35(ii)oben) dargestellt, wodurch man 445 mg (76 ) erhielt.
LC-MS m/z 549 (M – 1)^–; 551 ((M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6,98–7,74 (m, 12H), 5,16–5,21 (m, 2H), 5,06–5,01 (m, 1H), 4,22–4,56 (m, 3H), 3,32–3,58 (m, 1H), 2,88–3,12 (m, 1H), 1,70–2,12 (m, 4H).
(ii) Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 1(v) oben beschriebenen Methode aus Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,175 g; 0,31 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 127 mg (88 %) erhielt.
LC-MS m/z 417 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,11–7,86 (m, 7H), 5,37 (s, 1H), 4,36–5,00 (m, 4H), 3,66–3,78 (m, 1H), 1,80–2,31 (m, 4H).
¹³C-NMR (100,6 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 174,66, 174,40, 171,96, 171,82, 166,48.
Beispiel 57
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab × HOAc
(i) Boc-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH₃
Eine Mischung von Boc-(R,S)Pic(4-hydroxy)-OCH₃ (1,1 g, 4,25 mmol; hergestellt nach Gillard et al. J. Org. Chem. (1996) 61, 2226), PCC (1,8 g; 8,5 mmol) und Molekularsieben (gepulvert; 3 Å; 1,0 g) in CH₂Cl₂ (20 ml) wurde 4 h bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde mit Diethylether (60 ml) versetzt, und die Reaktionsmischung wurde über eine kurze Kieselgelsäule filtriert, wobei mit EtOAc : Hexan (1 : 1) eluiert wurde. Das Filtrat wurde eingedampft, wodurch man 1,0 g (92) der im Untertitel genannten Verbindung erhielt.
FAB-MS m/z 258 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 4,75–5,20 (m, 1H), 3,55–4,15 (m, 5H), 2,40–2,90 (m, 4H), 1,30–1,65 (m, 9H).
(ii) H-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH₃
Boc-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH₃ (0,48 g; 1,87 mmol; aus Stufe (i) oben) wurde bei Raumtemperatur 30 Minuten lang mit Trifluoressigsäure in CH₂Cl₂ (50%, 4 ml) behandelt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und der Rückstand wurde in CH₂Cl₂ gelöst, mit wäßrigem Na₂CO₃ gewaschen, getrocknet (K₂CO₃) und eingedampft. Die Ausbeute an der im Untertitel genannten Verbindung betrug 0,23 g (78 %).
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 3,65–3,80 (m, 4H), 3,30–3,40 (m, 1H), 2,90–3,00 (m, 1H), 2,30–2,70 (m, 4H).
(iii)Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH₃
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus H(R,S)Pic(4-oxo)-OCH₃ (0,22 g; 1,4 mmol; aus Stufe (ii) oben) und Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)OH (0,372 g; 1,4 mmol; hergestellt nach der in Hamada et al. J. Am. Chem. Soc. (1989) 111, 669 beschriebenen Methode) dargestellt, wodurch man 288 mg (51 ) erhielt.
FAB-MS m/z 406 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,20–7,50 (m, 5H), 5,25–5,70 (m, 2H), 4,15–4,75 (m, 1H), 3,20–3,80 (m, 4H), 2,00– 2,90 (m, 3H), 1,30–1,65 (m, 1H), 0,85–1,15 (m, 9H), 0,10–0,35 (m, 6H).
(iv) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-OH
Eine Mischung von Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH₃ (0,28 g; 0,69 mmol; aus Stufe (iii) oben) und einer Lithiumhydroxidlösung (2 M, 10 ml) in THF (10 ml) wurde 1,5 h bei Raumtemperatur gerührt. Das THF wurde im Vakuum abgezogen und der Rückstand wurde mit KHSO₄ (2 M) angesäuert (pH 2) und mit EtOAc extrahiert. Die organische Phase wurde mit H₂O gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und eingedampft. Die Ausbeute an der im Untertitel genannten Verbindung betrug 0,24 g (89 ).
FAB-MS m/z 392 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7,20–7,55 (m, 5H), 5,15–5,75 (m, 2H), 4,10–4,30 (m, 1H), 3,20–3,80 (m, 1H), 2,05– 3,00 (m, 4H), 1,35–1,55 (m, 1H), 0,90–1,05 (m, 9H), 0,10–0,25 (m, 6H).
(v) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 1(ii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-OH (0,227 g; 0,58 mmol; aus Stufe (iv) oben) dargestellt, wodurch man 92 mg (24%) erhielt.
FAB-MS m/z 657 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6,90–7,90 (m, 14H), 5,10–5,80 (m, 4H), 3,60–4,70 (m, 3H), 2,10–3,20 (m, 4H), 1,40– 1,70 (m, 1H), 0,80–1,10 (m, 9H), 0,00–0,25 (m, 6H).
(vi)Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Stufe (ii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab(Z) (0,09 g; 0,14 mmol; aus Stufe (v) oben) dargestellt, wodurch man 61 mg (82%) erhielt.
FAB-MS m/z 543 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6,95–7,90 (m, 14H), 5,00–5,55 (m, 4H), 3,95–4,70 (m, 2H), 3,20–3,70 (m, 2H), 1,20– 2,80 (m, 4H).
(vii) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(iii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab(Z) (0,061 g; 0,11 mmol; aus Stufe (vi) oben) dargestellt, wodurch man 46 mg (90%) erhielt.
LC-MS m/z 407 (M – 1)^–; 409 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 7,20–7,85 (m, 9H), 5,00–5,80 (m, 2H), 4,35–4,55 (m, 2H), 3,40–4,05 (m, 2H), 1,80– 3,10 (m, 4H).
Beispiel 58
Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R oder S)Pic(4-methylen)-Pab × HOAc und Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(S oder R)Pic(4-methylen)-Pab × HOAc
(i) Boc-(R,S)Pic(4-methylen)-OCH₃
Methyltriphenylphosphoniumbromid (2,68 g; 7,5 mmol) wurde 20 Minuten lang im Vakuum getrocknet und dann bei 0°C in trockenem THF (20 ml) suspendiert. Butyllithium (1,6 N in Hexan; 4,7 ml; 7,5 mmol) wurde zugetropft, und die Mischung wurde 30 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde auf –78°C abgekühlt, und Boc-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH₃ (1,3 g; 5,0 mmol; siehe Beispiel 57 (i) oben) wurde zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 30 Minuten lang bei –78°C und dann 2 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit Ammoniumchlorid versetzt, und nach dem Abtrennen wurde die H₂O-Phase zweimal mit Diethylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet und eingedampft, was ein Rohprodukt ergab, das durch Flash-Chromatographie unter Verwendung von EtOAc : Hexan (30 : 70) als Laufmittel gereinigt wurde, wodurch man 480 mg (37 ) der im Untertitel genannten Verbindung erhielt.
FAB-MS m/z 256 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 4,70–5,10 (m, 3H), 3,95–4,15 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 2,10–3,10 (m, 5H) , 1,35–1,60 (m, 9H).
(ii) H-(R,S)Pic(4-methylen)-OCH₃
Boc-(R,S)Pic(4-methylen)-OCH₃ (0,48 g; 1,88 mmol; aus Stufe (i) oben) wurde bei Raumtemperatur 40 Minuten lang mit Trifluoressigsäure (50 in CH₂Cl₂, 6 ml) behandelt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und der Rückstand wurde in CH₂Cl₂ gelöst , mit Na₂CO₃ (gesättigt) gewaschen, getrocknet (K₂CO₃) und eingedampft. Die Ausbeute an der im Untertitel genannten Verbindung betrug 0,27 g (95%).
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 4,70–4,85 (m, 2H), 3,75 (m, 3H), 3,35–3,45 (m, 1H), 3,15–3,25 (m, 1H), 2,55–2,70 (m, 2H), 2,10–2,30 (m, 3H).
(iii)Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-methylen)-OCH₃
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)OH (0,37 g; 1,4 mmol; hergestellt nach der in Hamada et al. J. Am. Chem. Soc. (1989) 111, 669 beschriebenen Methode) und H-(R,S)Pic(4-methylen)-OCH₃ (0,21 g; 1,4 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt, wodurch man 0,283 g (52 ) erhielt.
FAB-MS m/z 404 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,25–7,55 (m, 5H), 5,15–5,70 (m, 2H), 4,20–4,85 (m, 3H), 3,65–3,75 (m, 3H), 1,90– 3,20 (m, 5H), 0,90–1,10 (m, 9H), 0,10–0,30 (m, 6H).
(iv) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-methylen)-OH
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 57(iv) oben beschriebenen Methode aus Ph (R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-methylen)-OCH₃ (0,28 g; 0,69 mmol; aus Stufe (iii) oben) dargestellt, wodurch man 0,24 g (89) erhielt.
FAB-MS m/z 390 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,15–7,50 (m, 5H), 5,15–5,95 (m, 2H), 3,55–5,00 (m, 3H), 1,75–3,25 (m, 5H), 0,85– 1,05 (m, 9H), 0,10–0,25 (m, 6H).
(v)Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-methylen)-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-methylen)-OH (0,235 g; 0,6 mmol; aus Stufe (iv) oben) und H-Pab(Z) × HCl (0,211 g; 0,66 mmol) dargestellt, wodurch man 0,124 g (35 ) erhielt.
FAB-MS m/z 655 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,10–7,90 (m, 14H), 5,15–5,70 (m, 4H), 4,10–5,05 (m, 4H), 1,75–3,05 (m, 6H), 0,80– 1,10 (m, 9H), 0,00–0,25 (m, 6H).
(vi) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-methylen)-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 57(vi) oben beschriebenen Methode aus Ph(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-methylen)-Pab(Z) (0,08 g; 0,12 mmol; aus Stufe (v) oben) dargestellt, wodurch man 0,06 g (91 ) erhielt.
LC-MS m/z 541 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 7,15–7,90 (m, 14H), 5,20–5,80 (m, 4H), 4,35–4,90 (m, 4H), 3,70–4,15 (m, 1H), 3,20– 3,40 (m, 1H), 1,10–2,90 (m, 4H).
(vii)Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R oder S)Pic(4-methylen)-Pab × HOAc und Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(S oder R)Pic(4-methylen)- Pab × HOAc
Eine Mischung von Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-methylen)-Pab(Z) (0,035 g; 0,065 mmol; aus Stufe (vi) oben), Ammoniumacetat (0,50 g, 7,4 mmol) und Imidazol (0,20 g; 3,0 mmol) in Methanol (5 ml) wurde über Nacht bei 60°C gerührt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und der Rückstand wurde einer präparativen RPLC unterzogen. Einige Fraktionen wurden eingeengt, wodurch man 1,8 mg der Verbindung 58B erhielt. Durch Einengen der später eluierten Fraktionen erhielt man 7 mg der Verbindung 58A.
Verbindung 58A:
LC-MS m/z 405 (M – 1)^–; 407 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 7,15–7,80 (m, 9H), 5,65–5,70 (m, 1H), 4,80–5,25 (m, 1H), 4,45–4,60 (m, 2H), 3,60– 4,00 (m, 2H), 1,30–3,30 (m, 6H).
Verbindung 58B:
LC-MS m/z 407 (M + 1)+
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 7,30–7,80 (m, 9H), 5,45–5,75 (m, 1H), 4,80–5,20 (m, 1H), 4,35–4,70 (m, 3H), 3,75– 3,90 (m, 1H), 1,70–3,05 (m, 6H).
Beispiel 59
Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
(i) (R,S)-3-Chlormandelsäure
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 15(i) oben beschriebenen Methode aus 3-Chlor benzaldehyd (7,03 g; 50 mmol) dargestellt, wodurch man 2 g (21 $) erhielt.
LC-MS m/z 185 (M – 1)^–; 370 (2M – 1)^–
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 7,28–7,51 (m, 4H), 5,14 (s, 1H).
(ii) Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3-Chlormandelsäure (0,149 g; 0,8 mmol; aus Stufe (i) oben) dargestellt, wodurch man 0,30 g (70%) erhielt.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7,08–7,84 (m, 13H), 5,18–5,24 (m, 2H), 4,86–5,01 (m, 2H), 4,02–4,56 (m, 3H), 3,57– 3,76 (m, 1H), 2,30–2,72 (m, 2H).
(iii) Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab × HOAc
Die im Titel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 43 oben beschriebenen Methode aus Ph(3-Cl)(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,10 g; 0,19 mmol; aus Stufe (ii) oben) dargestellt, wodurch man 55 mg (63%) erhielt.
LC-MS m/z 399 (M – 1)^–; 401 (M + 1)⁺
¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 7,10–7,85 (m, 8H), 4,82–5,37 (m, 2H), 3,96–4,79 (m, 4H), 2,14–2,85 (m, 2H)
¹³C-NMR (100,6 MHz, D₂O; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 174,00, 173,17, 172,83, 172,61, 166,59.
Beispiel 60
Ph(3-Cl,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
(i) Ph(3-Cl,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)
Die im Untertitel genannte Verbindung wurde nach der in Beispiel 3(ii) oben beschriebenen Methode aus (R,S)-3-Chlor-4-hydroxymandelsäure (0,25 g; 1,23 mmol) und H-Pro-Pab(Z) × 2 HCl (0,615 g; 1,35 mmol; siehe Beispiel 35(ii) oben) dargestellt, wodurch man 382 mg (55%) erhielt.
LC-MS m/z 564 (M – 1)^–
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ 6,80–7,85 (m, 12H), 5,16–5,25 (m, 3H), 4,35–4,51 (m, 3H), 3,45–3,75 (m, 1H), 3,07– 3,42 (m, 1H), 1,72–2,18 (m, 4H).
¹³C-NMR (100,6 MHz, CD₃OD; verkompliziert durch Diastereomere/Rotamere) Amidin- und Carbonylkohlenstoffatome: δ 174,62, 174,27, 173,02, 172,88, 170,41, 165,04.
(ii) Ph(3-Cl,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab × HCl
Die im Titel genannte Verbindung wurde analog der in Beispiel 43 oben beschriebenen Methode aus Ph(3-Cl,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,10 g; 0,177 mmol; aus Stufe (i) oben), Trifluoressigsäure (3,7 ml; 48 mmol) und Thioanisol (1,04 ml; 8,85 mmol) dargestellt, wodurch man 57 mg (70 ) erhielt.
LC-MS m/z 431 (M + 1)⁺
¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 6,84–7,86 (m, 7H), 5,29–5,42 (m 1H), 4,30–4,68 (m, 3H), 3,05–4,05 (m, 2H), 1,70–2,37 (m, 4H).
Beispiel 61
Die in den Titeln von Beispielen 1 bis 60 genannten Verbindungen wurden in dem obigen Test A untersucht, wobei für alle Verbindungen ein IC₅₀TT-Wert von unter 0,3 μM gefunden wurde.
Abkürzungen
aq = wäßrigem
Aze = Azetidin-2-carbonsäure
Boc = tert.-Butyloxycarbonyl
Bn = Benzyl
Bu = Butyl
Ch = Cyclohexyl
DCC = Dicyclohexylcarbodiimid
DIPEA = Diisopropylethylamin
DMAP = N,N-Dimethylaminopyridin
DMF = Dimethylformamid
EDC = 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-hydrochlorid
Et = Ethyl
EtOH = Ethanol
h = Stunden
HCl = Salzsäure
HOAc = Essigsäure
HOSu = N-Hydroxysuccinimid
H-Dig = 1-Amidino-3-aminoethylazetidin
H-Dig(Z) = 3-Aminoethyl-l-(N-benzyloxycarbonylamidino)azetidin
H-Hig = 1-Amidino-3-aminoethylpyrrolidin
H-Hig(Z) = 3-Aminoethyl-1-(N-benzyloxycarbonylamidino)pyrrolidin
H-Pac = 1-Amidino-4-aminomethylcyclohexan
H-Pac(Z)- 4-Aminomethyl-l-(N-benzyloxycarbonylamidino)cyclohexan
H-Pic = Pipecolinsäure
H-Pig = 1-Amidino-3-aminomethylpiperidin
H-Pig(Z) = 3-Aminomethyl-1-(N-benzyloxycarbonylamidino)piperidin
H-Pab = 1-Amidino-4-aminomethylbenzol
H-Pab(Z) = 4-Aminomethyl-l-(N-benzyloxycarbonylamidino)benzol
PCC = Pyridiniumchlorchromat
HPLC = Hochleistungsflüssigchromatographie
Me = Methyl
Ph = Phenyl
RPLC = Umkehrphasen-Hochleistungsflüssigchromatographie
Su = Succinimid
TBDMS = tert.-Butyldimethylsilyl
TBTU = [N,N,N',N'-Tetramethyl-O-(benzotriazol-1-yl)uroniumtetrafluorborat]
THF = Tetrahydrofuran
THP = Tetrahydropyranyl
TMS = Trimethylsilyl
WSCl = wasserlösliches Carbodiimid
Z = Bensyloxycarbonyl
Die Präfixe n, s, i und t haben ihre normalen Bedeutungen: normal, iso, sekundär und tertiär. Die Stereochmie der Aminosäuren ist, wenn nicht anders angegeben, (S).

Claims

Verbindungen der Formel I
wobei p und q unabhängig voneinander für 0 stehen; R¹ für H steht; R² für H steht; R³ für Phenyl steht (das durch einen oder mehrere Reste aus der Gruppe C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, Halogen, Hydroxy, Cyano, Nitro, Methylendioxy, Trifluormethyl, N(H)R²⁷ und C(O)OR²⁸ substituiert ist); R²⁷ für H, C_1-4-Alkyl oder C (O) R²⁹ steht; R²⁸ und R²⁹ unabhängig voneinander für H oder C_1-4-Alkyl stehen; R⁴ für H oder C_1-4-Alkyl steht; Y für C_1-3-Alkylen steht, das gegebenenfalls durch C_1-4-Alkyl, Hydroxy, Methylen oder Oxo substituiert ist; n für 1 steht; und B für ein Strukturfragment der Formel IVa steht
wobei R⁵ für H, Halogen oder C_1-4-Alkyl steht; und deren pharmazeutisch unbedenkliche Salze.
Verbindungen nach Anspruch 1, wobei R⁵ für H steht, wenn B für ein Strukturfragment der Formel IVa steht.
Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2, wobei R⁴ für H steht.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei Y für CH₂, (CH₂)₂, (CH₂)₃, CH₂CH(CH₃)CH₂ , CH₂C(=O)CH₂ oder CH₂C(=CH₂)CH₂ steht .
Verbindungen nach Anspruch 4, wobei Y für CH₂, (CH₂)₂ oder CH₂C(=CH₂)CH₂ steht.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei R³ durch einen oder mehrere Reste aus der Gruppe Hydroxy, Fluor, Chlor, Methyl, Methoxy, Amino, Nitro, Trifluormethyl, Methylendioxy, Ethoxy und Propoxy substituiert ist.
Verbindungen nach Anspruch 6, wobei R³ durch einen oder mehrere Reste aus der Gruppe Hydroxy, Monooder Difluor, Chlor, Methyl, Methoxy und Methylendioxy substituiert ist.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 7, wobei Y für CH₂ steht.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 8, wobei der Kohlenstoff der α-Aminosäure im Fragment
die S-Konfiguration aufweist.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 9, wobei der α-Kohlenstoff im Fragment
die R-Konfiguration aufweist.
Verbindungen nach Anspruch 1, bei denen es sich um: Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3-NO₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab und Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab handelt.
Pharmazeutische Formulierung, enthaltend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon in einer Mischung mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Adjuvans, Verdünnungsmittel oder Trägerstoff.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 11 oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon zur Verwendung als Pharmazeutikum.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 11 oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon zur Verwendung bei der Behandlung eines Zustands, bei dem es erforderlich ist, Thrombin zu inhibieren.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 11 oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon zur Verwendung bei der Behandlung von Thrombose.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 11 oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon zur Verwendung als Antikoagulationsmittel.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 oder eines pharmazeutisch unbedenklichen Salzes davon als Wirkstoff in der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung eines Zustands, bei dem es erforderlich ist, Thrombin zu inhibieren.
Verwendung nach Anspruch 17, wobei es sich bei dem Zustand um Thrombose handelt.
Verwendung nach Anspruch 17, wobei es sich bei dem Zustand um Hyperkoagulabilität im Blut und Geweben handelt.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 oder eines pharmazeutisch unbedenklichen Salzes davon als Wirkstoff in der Herstellung eines Antikoagulationsmittels.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 1, bei dem man: (a) eine Verbindung der Formel V
wobei p, q, R¹, R² und R³ wie in Anspruch 1 definiert sind, mit einer Verbindung der Formel VI
wobei R⁴, Y, n und B wie in Anspruch 1 definiert sind, kuppelt; oder (b) eine Verbindung der Formel VII
wobei p, q, R¹, R², R³, R⁴ und Y wie in Anspruch 1 definiert sind, mit einer Verbindung der Formel VIII H₂N-(CH₂)_n-B VIII wobei n und B wie in Anspruch 1 definiert sind, kuppelt.
Verbindungen der Formel XIV
wobei B¹ für ein Strukturfragment der Formel IVd
steht; D¹ und D² unabhängig voneinander für H oder Benzyloxycarbonyl stehen und p , q, R¹, R² , R³ , R⁴ , Y , n und R⁵ wie in Anspruch 1 definiert sind, mit der Maßgabe, daß D¹ und D² nicht beide für H stehen.