DE69122828T2 - Hydroxyapatit-antigen-konjugate und verfahren zur auslösung einer poly-ig-immunantwort - Google Patents
Hydroxyapatit-antigen-konjugate und verfahren zur auslösung einer poly-ig-immunantwortInfo
- Publication number
- DE69122828T2 DE69122828T2 DE69122828T DE69122828T DE69122828T2 DE 69122828 T2 DE69122828 T2 DE 69122828T2 DE 69122828 T DE69122828 T DE 69122828T DE 69122828 T DE69122828 T DE 69122828T DE 69122828 T2 DE69122828 T2 DE 69122828T2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- antigen
- iga
- mammal
- composition according
- calcium phosphate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 title description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 44
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 44
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 16
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 15
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical class [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims abstract description 10
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 22
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 12
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 7
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 claims description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 claims 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 claims 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 claims 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 abstract description 29
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 abstract description 28
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 4
- 102400001107 Secretory component Human genes 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 2
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 210000004082 barrier epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000004890 epithelial barrier function Effects 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;fluoride;triphosphate Chemical compound [F-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 2
- 210000001986 peyer's patch Anatomy 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000018889 transepithelial transport Effects 0.000 description 2
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229910014497 Ca10(PO4)6(OH)2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010001682 Dextranase Proteins 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000063180 Idiomarina fontislapidosi Species 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 108010046644 Polymeric Immunoglobulin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100035187 Polymeric immunoglobulin receptor Human genes 0.000 description 1
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 229910052586 apatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 229960001212 bacterial vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 210000000959 ear middle Anatomy 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 108010000165 exo-1,3-alpha-glucanase Proteins 0.000 description 1
- 229910052587 fluorapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940077441 fluorapatite Drugs 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 1
- -1 hydroxyapatite (hydroxylated calcium phosphate Chemical class 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 108010005131 levanase Proteins 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002943 spectrophotometric absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 230000031998 transcytosis Effects 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/52—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an inorganic compound, e.g. an inorganic ion that is complexed with the active ingredient
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
- A61K2039/541—Mucosal route
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
- Die vorliegende Erfindung wurde teilweise durch Unterstützung durch die Regierung der Vereinigten Staaten finanziert, und die US-Regierung besitzt bestimmte Rechte an der Erfindung.
- Die vorliegende Erfindung betrifft allgemein das Gebiet des passiven mukosalen Immunschutzes und Poly-Ig-Immunreagentien und -Techniken. Wir benutzen den Begriff Poly-Ig für die polymeren Klassen an Antikörpern, d.h. IgA und IgM. IgM-Antikörper werden im allgemeinen in einem frühen Stadium der Immunantwort erzeugt und stellen keinen wichtigen Faktor bei der schützenden mukosalen Immunität dar. Somit bezieht sich die Erfindung allgemein auf polymere Ig-Antikörper, und die üblichen und bevorzugten Antikörper für sämtliche erfindungsgemäße Aspekte sind Antikörper der IgA-Klasse, die normalerweise in dimerer Form sezerniert und zu einem geringeren Ausmaß als höhere IgA- Polymere sezerniert werden.
- Viele pathogene Bakterien und Viren gewinnen anfänglich Eintritt in den Körper durch Durchqueren der zellulären Auskleidung (Epithelien) des gastrointestinal, respiratorischen oder Genitaltrakts. Eine spezialisierte Klasse an Antikörpern, IgA- Antikörper, schützt diese Oberflächen. IgA-Antikörper sind dimere oder polymere Moleküle, die von Zellen hergestellt werden, die in den Geweben unter den epithelialen Oberflächen lokalisiert sind. Sie werden durch epitheliale Zellen in Mukosaausscheidungen transportiert, wo sie Pathogene, die noch nicht in den Körper eingetreten sind, vernetzen oder beschichten, wobei sie die Pathogene davon abhalten, mit epithelialen Zellen in Kontakt zu treten und sich daran zu heften. Somit wirken IgA- Antikörper auf Pathogene, die sich außerhalb des Körpers befinden, und sie schützen, indem sie den Eintritt durch die epithelialen Oberflächen in den Körper verhindern.
- Die natürlich vorkommende IgA-Antwort wird durch die Antigenanlieferung an Mukosaoberflächen beeinflußt. Das Antigen tritt in den Körper durch spezifische Sammelstellen (Mikrofaltung oder M-Zellen genannt) ein, die den transepithelialen Antigentransport in Bereiche der Mukosaauskleidung bewirken, enthaltend spezialisierte, organisierte Ansammlungen der Zellen des mukosalen Immunsystems. Insbesondere, wie in Figur 1 gezeigt, binden Antigene A (gezeigt als ausgefüllte Punkte) im Lumen 1 an die Lumenoberfläche von M-Zellen an Stelle 2. Die Antigene werden internalisiert und transcytosiert an 3, um in die intraepitheliale Tasche 4, enthaltend lymphoide Zellen L (B- und T- Zellen) und Antigen-prozessierende/präsentierende Zellen, wie Makrophagenzellen (M), freigesetzt zu werden.
- IgA-Antikörper werden in einem natürlich immunisierten Wirt in Ausscheidungen transportiert durch das Binden an einen spezifischen Rezeptor (als Poly-Ig-Rezeptor bezeichnet) auf den basalen (interioren) Oberflächen von epithelialen und glandulären Zellen, die sich durch die respiratorischen und Verdauungssysteme, den Genitaltrakt und die Brustdrüsen erstrecken. Siehe Solari und Krähenbuhl, "Receptor-Mediated Transepithelial Transport of Polymeric Immunoglobulins", Seiten 269-298 in The Mammary Gland, Neville and Daniel Herausg., Plenum Publishing, Cambridge (1987); Mestecky (1987), J. Clin. Immunol. 7: 265- 276. Rezeptor-IgA-Komplexe werden durch diese Zellen transportiert und per Exocytose auf luminale (exteriore) Zelloberflächen gebracht, wo der Rezeptor enzymatisch gespalten wird, wobei IgA in die Ausscheidungen zusammen mit einem Rezeptorfragment, sekretorische Komponente (SC) genannt, freigesetzt werden. Siehe Mostov et al. (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 7257-7261; Solari, R. und Krähenbuhl, J. P. Cell 36: 61-71 (1984); Kuhn und Krähenbuhl, J. Biol. Chem. 256: 12490-12495 (1981). Es wurde berichtet, daß die sekretorische Komponente den proteolytischen Abbau von IgA verringert. Lindh, J., J. Immunol. 114: 284-286 (1975); Brown, Neucomb, Ishizaka, J. Clin. Invest. 49: 1374 (1974).
- Im allgemeinen rufen bestehende Immunisierungsstrategien, die die Injektion von Antigenen umfassen, die Erzeugung der IgG- Klasse von Antikörpern hervor, die systemisch zirkulieren und Pathogene neutralisieren, nachdem sie in den Körper eingetreten sind. Die Injektion von Antigenen ruft im allgemeinen keine wesentliche IgA-Antwort hervor.
- Anstrengungen, die darauf abzielen, den IgA-Schutz an den Mukosagrenzen auszunutzen, umfassen die orale Immunisierung, entweder für den aktiven Schutz des immunisierten Säugers oder für den passiven Schutz eines anderen Säugers unter Verwendung von Mukosaausscheidungen des immunisierten Tiers. Glass et al., New Eng. J. Med., 308: 1389-1392 (1983); Fubara et al., J. Immunol., 111(2): 395-403 (1973). Monoklonale IgA-Antikörper sind hergestellt worden und direkt auf respiratorische Mukosaoberflächen aufgebracht worden in dem Bemühen, Schutz gegen den Pathogeneintritt zu verleihen. Mazanec et al., J. Virol., 61: 2624-2625 (1987).
- Die aktive Immunisierung kann die Konfrontation der Mukosaoberfläche mit intakten (abgetöteten) Bakterien oder Viren umfassen. Um Gefahren zu vermeiden, die mit diesem Ansatz für bestimmte Pathogene verbunden sein könnten, werden Antigenbestandteile, wie immunogene Oberflächenbestandteile des Pathogens, auf die Mukosaoberfläche angewendet. In einigen Fällen sind diese Antigene an größere Moleküle konjugiert worden. Zum Beispiel ist die B-Untereinheit des Choleratoxins an Antigene konjugiert worden. Siehe Czerkinsky et al., die die orale Verabreichung eines Streptococcen-Antigens, gekoppelt an Choleratoxin-B-Untereinheit, in Infection and Immunity 57: 1072-1077 (1989) berichten. Biologisch abbaubare Mikrokügelchen sind ebenfalls als Antigenträger verwendet worden. Zum Beispiel berichten Eldrigde et al., Curr. Top. Micobiol. Immunol. 146: 59 (1989) über den Einbau von Antigen in biologisch abbaubare Mikrokügelchen. Das trockene Proteinantigen wird in einer Copolymermatrix ohne chemische Konjugation dispergiert.
- Die britische Patenanmeldung 2206585 beschreibt die Immobilisierung der Enzyme Levanase, Mutanase und Dextranase auf Hydroxyapatit (hydroxyliertes Calciumphosphat) oder Fluorapatit und die Verwendung solcher Produkte in Zahnpflegemitteln. Die Partikelgröße des Apatits liegt zwischen 2 bis 200 µm.
- Das Scandinavian Journal of Dental Research, Juni 1983, Band 91, Nr. 3, Seiten 186-190, beschreibt die Verwendung von Suspensionen von Hydroxyapatit zum Aussetzen an Speichel, um darin wirtsspezifische und bakterielle Antigene zu identifizieren. Folgend auf diese Aussetzung wird das speichelausgesetzte Hydroxyapatit verwendet zum Immunisieren von Kaninchen durch subkutane Injektion in Intervallen, und die Antiseren wurden untersucht.
- Wir haben gefunden, daß hydroxylierte Calciumphosphat(HCP)- Partikel einen besonders brauchbaren Träger für Therapeutika darstellen, die durch Mukosaoberflächen eingeführt werden sollen. Konjugate aus HCP und therapeutischen Wirkstoffen (z.B. biologisch aktive Substanzen wie Antigene oder Arzneimittel) werden durch das Epithel transportiert, wo sie die gewünschte therapeutische Antwort - z.B. das Hervorrufen einer Poly-Ig- Immunantwort - hervorrufen.
- Die Erfindung betrifft eine Zusammensetzung umfassend mikropartikuläres hydroxyliertes Calciumphosphat in einer Größe, die geeignet ist zum Transport durch das Epithel in einem Säuger, wobei ein beträchtlicher Anteil des hydroxylierten Calciumphosphates Fragmente darstellt mit einer Größe, die 1 µm nicht überschreitet, und ein Immunogen, umfassend ein Antigen oder eine Antigenmischung, die IgA-produzierende Lymphoblasten in einem Säuger hervorrufen können. Die immunogene Zusammensetzung umfassend ein Antigen oder eine Antigenmischung in Assoziation mit hydroxylierten Calciumphosphat(HCP)-Partikeln wird auf eine Mukosaoberfläche des Säugers verabreicht. Die Antigen-sensibilisierten Lymphoblasten können in geeigneter Weise gewonnen werden und immortalisiert werden, um ein IgA-erzeugendes Hybridom zu ergeben.
- Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung kann in einem Verfahren zum Impfen eines Säugers (insbesondere eines Menschen) verwendet werden, wobei dies das Verabreichen des oben beschriebenen Immunogens auf eine Mukosaoberfläche des Säugers umfaßt.
- Vorzugsweise umfaßt das Antigen eine extern verfügbare Determinante eines Pathogens oder von Spermatozoen, wie ein virales Mantel- oder Hüllprotein, ein Lipopolysaccharid oder ein Zelloberflächenprotein.
- Eine Form von HCP ist Hydroxyapatit (HA), ein gewerblich erhältliches kristallines hydroxyliertes Calciumphosphat, das unten diskutiert wird.
- Die bevorzugten Arten der Verabreichung des aktiven Wirkstoffs gemäß der Erfindung sind oral, vaginal, nasal, rektal, okular oder in das Mittelohr. Die orale Verabreichung kann die Bereitstellung an andere G.I.-Mukosa einschließlich der intestinalen Mukosa ermöglichen.
- Die Erfindung stellt einen effizienten, polyvalenten Komplex bereit, der an die Mukosa (Schleimhaut) anheften kann und der effizient durch die epitheliale Barriere transportiert werden kann, um seinen biologischen Effekt, z.B. die Präsentation an das Mukosaimmunsystem, auszuüben. Die Adsorption von Wirkstoffen, insbesondere Proteinen, an HCP ist relativ einfach, rasch und billig, wobei dies die Erfindung ökonomisch macht. Weiterhin besitzt HCP eine hohe allgemeine Affinität für die Antigene von Interesse, einschließlich Proteine und andere Antigene, wobei dies die Erfindung in breiter Form anwendbar macht. HCP ist im allgemeinen untoxisch, wie sich durch den Umstand zeigt, daß HA ein integraler Bestandteil von Knochen ist, und das systemische Immunsystem trifft regelmäßig auf HA während der normalen Knochenresorption, einem Vorgang, der ständig auf mikroskopischer Ebene in gesunden Individuen abläuft. Demzufolge kann reines HA vermutlich sicher verabreicht werden ohne eine Wirtsimmunantwort, und die Verabreichung kann wiederholt werden als Vehikel für das gleiche oder verschiedene Antigene, ohne eine Anti-Vehikel-Immunantwort hervorzurufen. Weiterhin ist HCP, insbesondere HA, relativ billig. HA kann leicht auf eine Größe verringert werden, die geeignet ist für den transepithelialen Transport durch M-Zellen; und eine solche verringerte Größe ist geeignet für die Verdauung durch Makrophagen und andere Zellen des retikuloendothelialen Systems, so daß die Immunantwort verstärkt wird. Schließlich ist die M-Zellaufnahme und der Transport des Immunogens gemäß der Erfindung relativ selektiv.
- Weitere Merkmale und Vorteile der Erfindung werden deutlich anhand der folgenden Beschreibung und der bevorzugten Ausführungsformen.
- Figur 1 zeigt eine schematische Darstellung der Transcytose von Antigen durch M-Zellen.
- Im allgemeinen können die unten beschriebenen Verfahren und Materialien als Teil einer Strategie für den IgA-Schutz, die ausführlicher in der europäischen Patentanmeldung Nr. 480014A offenbart sind, verwendet werden.
- Insbesondere können Immunogene und Verfahren gemäß der Erfindung mit stabilisierendem Protein verwendet werden, wie in der oben angegebenen Anmeldung beschrieben, um Poly-Ig-Reagentien für die passive Immunisierung zu erzeugen. Die bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung betreffen Hydroxyapatit-Antigenkonjugate und deren Verwendung. Insbesondere stellt Hydroxyapatit eine modifizierte Form des kristallinen Calciumphosphats Ca&sub1;&sub0; (PO&sub4;)&sub6; (OH)&sub2; dar. Es wird als ein Reagenz zur Proteinfraktionierung aufgrund seiner allgemeinen Proteinbindungsfähigkeit verwendet. Gewerblich erhältliches HA besteht im allgemeinen aus tafelähnlichen Kristallen, die chemisch und physikalisch analog zu anorganischem HA in normalem Knochengewebe sind. Solange das Ausgangsmaterial frei von Verunreinigungen ist, sollte die Aufnahme von HA relativ sicher sein, wie sich aus dem Vorkommen von Calcium/Phosphor-Nahrungsmittelergänzungsstoffen, die sich von gemahlenem Knochen ableiten, herleiten läßt, die für den Verzehr entworfen sind.
- Kommerzielles HA mit hoher Auflösung (von Calbiochem) besteht aus Kristallen, deren Größe stark streut. Wie von den Herstellen bereitgestellt, sind die HA-Kristalle wahrscheinlich im Ganzen zu groß, um wirkungsvoll durch die Epithelbarrieren durchtreten zu können. Zum Beispiel ist es unwahrscheinlich, daß Kristalle über 1 µm Länge von M-Zellen aufgenommen werden. Deshalb werden für den Einsatz in der Erfindung kommerzielle HA-Kristalle in kleine, relativ gleichförmige, kristalline Fragmente, z.B. durch Beschallen, gebrochen.
- Die erhaltenen beschallten Kristalle variieren etwas in der Größe, aber ihre Größe überschreitet im allgemeinen nicht 1 µm. Vorzugsweise ist ein wesentlicher Anteil des HA als Fragmente von ungefähr 0,01 bis 0,1 µm vorhanden. Die Fragmentierung kann entweder durch Elektronenmikroskopie oder Lichtstreuung unter Verwendung von Standardtechniken gemessen werden.
- HA bindet die meisten Proteine mit hoher Avidität und Geschwindigkeit bei niedrigen oder physiologisch sicheren Konzentrationen. Von der Bindung wird angenommen, daß sie auf der Wechselwirkung von Calciumstellen mit sauren und Phosphatgruppen von Proteinen und Wechselwirkung der Phosphate mit basischen Proteingruppen abhängt. Proteine mit höhrem Molekulargewicht werden dazu neigen, fester an HA zu adsorbieren, aber die Proteinladung spielt ebenfalls eine Rolle. 1 g HA kann z.B. ungefähr 30 mg Rinderserumalbumin binden. Somit kann HA wirkungsvoll Proteinantigen aus verdünnten Lösungen einfangen, ohne Zusatz von Vernetzungschemikalien, ohne drastische oder denaturierende Bedingungen und ohne wertvolles reines Antigen zu verschwenden.
- HA-adsorbierte Antigene können zur aktiven Impfung von Menschen oder anderen Säugern verwendet werden. Die Erfindung ist insbesondere brauchbar zum Schutz gegen Pseudomonas aeruginosa, Hemophilus influenza, Vibrio cholerae, insbesondere Infektionen durch Gruppe-B-Streptococcen: US-Patent 4,367,221; 4,367,222; 4,367,223; 4,356 263; 4,207,414 (RE 31,672) und WO 87/06267.
- Andere geeignete Antigene sind offenbart in Bacterial Vaccines and Local Immunitiy, Proceedings of the Sclavo Internationale Conference, Siena, Italy 17.-19. November 1986. Spezifische Reagentien, die für HIV-Antigene geeignet sind, sind offenbart in AIDS Research and Reference Reagent Program, National Institute of Health, Juni 1989. Zum Beispiel wird gp120 von MicroGeneSys, Inc. verkauft. Spermatozoen-Zelloberflächenantigene, wie LDH-C4, sind auch bekannt. Siehe z.B. Shaha et al. und Talwar et al., Vaccine 7:97-100 (1989) und Shaha et al. Int. J. Androl. 11: 479 (1988).
- Von besonderer Bedeutung für die Selektion von Antigenen zum Ausüben der Erfindung ist, daß der Mukosaschutz das Vernetzen umfaßt, um den Eintritt in den Körper zu verhindern, und dieser Mechanismus verlangt nicht, daß der polymere Antikörper das Pathogen abtötet oder "neutralisiert". Im Gegensatz dazu umfaßt der systemische (IgG) Schutz das Anbinden, und, um wirkend zu sein, muß im allgemeinen das Pathogen neutralisiert werden. Somit ist nicht jeder IgG-Antikörper, der an das Pathogen bindet, schützend, wie sich durch das Vorliegen von monoklonalen Antikörpern zeigt, die spezifisch Vibrio cholerae binden, dieses aber nicht neutralisieren in dem Sinne, daß sie es vom Besiedeln, Wachsen oder dem Manifestieren von klinischen Symptomen in seinem Wirt abhalten. Das Universum von Antigenen und Determinanten, die zur Verfügung stehen zum Erzeugen von schützenden IgA-Antikörpern, ist somit deutlich erhöht.
- Insbesondere wird das HA-adsorbierte Antigen nach dem oben erläuterten Verfahren hergestellt mit geeigneten Modifikationen für die Massenherstellung. Das HA-adsorbierte Antigen oder die Antigenmischung wird in ein physiologisch akzeptables Vehikel eingebracht und direkt auf das Mukosaoberflächengewebe aufgebracht oder diesem zugeführt, z.B. auf orale, nasale, rektale und/oder vaginale Oberflächen. Die Präparation wird in einem Aerosol, einer Suspension, einer Kaspel und/oder einem Suppositorium verabreicht. Der Fachmann weiß, wie solche Vehikel unter Anwendung bekannter Techniken zu formulieren sind.
- Die Erfindung ist insbesondere nützlich zur Herstellung von IgA-produzierenden Hybridomen. Solche Hybridome können leicht hergestellt werden durch Konfrontation eines Säugers, z.B. durch Anwenden der oben beschriebenen Zusammensetzung auf eine Mukosaoberfläche, und dann Gewinnen der lymphoiden Zellen von Mukosa der Peyer-Plaques oder anderer Mukosa, die reich sind an lymphoidem Gewebe, und dann Fusionieren der lymphoiden Zellen mit Myelomzellen durch bekannte Techniken. Siehe z.B. die oben erwähnte europäische Patentanmeldung Nr. 480014A.
- Die folgenden Beispiele dienen der Erläuterung der Erfindung.
- 2 mg HA (Calbiochem), suspendiert in 20 ml PBS, werden mit einer Sondenbeschallvorrichtung für 30 Minuten bei Raumtemperatur beschallt unter Verwendung der hohen Einstellung (140, 80% der Leistung eines Microson-Zellaufbruchgeräts (Heat Systems Ultrasonics, Inc., Farmingdale, NY). Die durchschnittliche Kristallgröße beträgt ungefähr 0,01 x 0,1 µm nach der Beschallung, wie durch Elektronenmikroskopie gemessen. Eine angemessene Beschallung kann durch die spektrophotometrische Absorption registriert werden. Zum Beispiel ist eine Absorption (gemessen bei 650 nm) einer 2 mg/ml Suspension vor der Beschallung 0,108 O.D. Einheiten, und nach Verringerung der Kristallgröße (wie oben) steigt die O.D. auf 2,060.
- HA-Kristalle dieser Größe, beschichtet bis zur Sättigung mit Proteinen verschiedener Größen in dem Bereich von 65 kD (Albumin) bis 450 kD (Ferritin), wurden, wenn sie in das intestinale Lumen von Mäusen oder Kaninchen eingebracht wurden, selektiv von M-Zellen der Peyer-Plaques gebunden und transportiert. Dieses Verfahren liefert in wirkungsvoller Weise Proteine an Zellen des Mukosaimmunsystems in einer partikulären immunogenen Form.
- Für die orale Immunisierung einer 25-Gramm-Maus: eine kleine Menge (z.B. 30 µg) eines Proteins in 200 µl PBS werden mit einer geeigneten Menge (z.B. 1 mg HA für 30 µg Protein) von zuvor beschalltem und gewaschenem HA gemischt. Die Mischung wird dann geschüttelt für 1 Stunde bei 4ºC, und HA wird dann durch Zentrifugieren für 2 Minuten bei 10000 Upm in einer Mikrozentrifuge pelletiert. Das Pellet wird durch Vortexen oder Beschallen in 200 µl Wasser, das einen Puffer enthalten kann zum Neutralisieren von Magensäure, resuspendiert.
- Weitere Ausführungsformen werden durch die folgenden Ansprüche angegeben.
Claims (6)
1. Zusammensetzung, umfassend einen aktiven Bestandteil in
Verbindung mit hydroxyliertem Calciumphosphat, dadurch
gekennzeichnet, daß das hydroxylierte Calciumphosphat in der
Form von Mikropartikeln einer Größe vorliegt, die für
einen Transport durch das Epithel in einem Säuger geeignet
ist, wobei die Größe im allgemeinen 1 µm nicht
überschreitet, und dadurch, daß der aktive Bestandteil ein Immunogen
umfaßt, welches ein Antigen oder eine Antigenmischung
umfaßt, welche fähig ist, IgA-produzierende Lymphoblasten in
einem Säuger zu erzeugen, an welchen der Komplex durch die
Schleimhaut verabreicht wird.
2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, worin das Antigen eine
äußerlich erreichbare Determinante eines Pathogens oder
von Spermatozoen umfaßt.
3. Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, worin das Antigen
ein virales Kapsidprotein, ein virales Hüllprotein, ein
Zelloberflächen-Lipopolysaccharid oder ein
Zelloberflächen-Protein ist.
4. Zusammensetzung nach einem der vorstehenden Ansprüche,
worin ein wesentlicher Anteil des hydroxylierten
Calciumphosphats aus Partikeln mit einer Größe im Bereich von
0,01-0,1 µm besteht.
5. Zusammensetzung nach einem der vorstehenden Ansprüche zur
Verwendung für die Herstellung eines Produkts für die
Verabreichung an die Schleimhautoberfläche eines Säugers, um
eine immunogene Antwort, umfassend IgA-Antikörper,
hervorzurufen.
6. Verwendung einer Zusammensetzung nach einem der
vorstehenden Ansprüche zur Erzeugung mindestens einer
immortalisierten Lymphoblastenzelle, welche IgA sezerniert, das
spezifisch an ein Antigen binden kann, welche die Schritte
des Isolierens und Immortalisierens mehrerer Lymphoblasten
aus dem Säuger und das Identifizieren mindestens einer
IgA-sezernierenden, immortalisierten Lymphoblastenzelle
unter den immortalisierten Lymphoblasten umfaßt.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/510,154 US5443832A (en) | 1990-04-16 | 1990-04-16 | Hydroxyapatite-antigen conjugates and methods for generating a poly-Ig immune response |
| PCT/US1991/002599 WO1991016072A1 (en) | 1990-04-16 | 1991-04-16 | Hydroxyapatite-antigen conjugates and methods for generating a poly-ig immune response |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE69122828D1 DE69122828D1 (de) | 1996-11-28 |
| DE69122828T2 true DE69122828T2 (de) | 1997-05-28 |
Family
ID=24029591
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE69122828T Expired - Fee Related DE69122828T2 (de) | 1990-04-16 | 1991-04-16 | Hydroxyapatit-antigen-konjugate und verfahren zur auslösung einer poly-ig-immunantwort |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5443832A (de) |
| EP (1) | EP0477339B1 (de) |
| JP (1) | JPH04507106A (de) |
| KR (1) | KR100188836B1 (de) |
| AT (1) | ATE144428T1 (de) |
| AU (1) | AU643011B2 (de) |
| BG (1) | BG60371B1 (de) |
| BR (1) | BR9105718A (de) |
| CA (1) | CA2060318A1 (de) |
| DE (1) | DE69122828T2 (de) |
| HU (1) | HU216103B (de) |
| OA (1) | OA09525A (de) |
| RO (1) | RO109817B1 (de) |
| RU (1) | RU2126270C1 (de) |
| WO (1) | WO1991016072A1 (de) |
| ZA (1) | ZA912838B (de) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5443832A (en) * | 1990-04-16 | 1995-08-22 | Institut Swisse De Recherches Experimentales Sur Le Cancer | Hydroxyapatite-antigen conjugates and methods for generating a poly-Ig immune response |
| GB2245559A (en) * | 1990-06-25 | 1992-01-08 | Farmos Oy | Bioceramic system for delivery of a bioactive compound. |
| US6290962B1 (en) * | 1992-11-03 | 2001-09-18 | Oravax, Inc. | Urease-based vaccine and treatment for helicobacter infection |
| US5972336A (en) * | 1992-11-03 | 1999-10-26 | Oravax Merieux Co. | Urease-based vaccine against helicobacter infection |
| US6440425B1 (en) | 1995-05-01 | 2002-08-27 | Aventis Pasteur Limited | High molecular weight major outer membrane protein of moraxella |
| US8333996B2 (en) * | 1995-05-19 | 2012-12-18 | Etex Corporation | Calcium phosphate delivery vehicle and adjuvant |
| US6290970B1 (en) | 1995-10-11 | 2001-09-18 | Aventis Pasteur Limited | Transferrin receptor protein of Moraxella |
| JPH107575A (ja) * | 1996-06-21 | 1998-01-13 | Synsorb Biotec Inc | 細菌性赤痢の処置 |
| WO1997049431A2 (en) * | 1996-06-21 | 1997-12-31 | Synsorb Biotech, Inc. | Use of oligosaccharides for neutralising e. coli toxins |
| US8728536B2 (en) * | 1996-10-16 | 2014-05-20 | Etex Corporation | Chemotherapeutic composition using nanocrystalline calcium phosphate paste |
| JP2003517452A (ja) * | 1999-02-05 | 2003-05-27 | アルク−アベル・アー／エス | 新規粘膜デリバリーシステム |
| US20020051794A1 (en) * | 2000-08-09 | 2002-05-02 | Alk-Abello A/S | Novel parenteral vaccine formulations and uses thereof |
| AUPR011700A0 (en) * | 2000-09-14 | 2000-10-05 | Austin Research Institute, The | Composition comprising immunogenic virus sized particles (VSP) |
| AU2006204620B2 (en) * | 2000-09-14 | 2008-05-29 | Px Biosolutions Pty Ltd | Composition comprising immunogenic nanoparticles |
| AU2002248289A1 (en) * | 2000-10-20 | 2002-09-04 | Etex Corporation | Chemotherapeutic composition using calcium phosphate paste |
| KR101161784B1 (ko) * | 2003-04-11 | 2012-07-05 | 에텍스 코포레이션 | 골 유도성 골 물질 |
| WO2005074991A1 (ja) * | 2004-02-09 | 2005-08-18 | Kabushiki Kaisha Sangi | 抗腫瘍剤 |
| WO2005100398A1 (ja) * | 2004-04-14 | 2005-10-27 | Bio Matrix Research Inc. | 抗体ライブラリー作製方法 |
| NZ550667A (en) * | 2004-04-15 | 2010-10-29 | Etex Corp | Delayed-setting calcium phosphate pastes for the treatment of orthopedic conditions |
| US20060115499A1 (en) * | 2004-09-27 | 2006-06-01 | Alk-Abello A/S | Liquid allergy vaccine formulation for oromucosal administration |
| EP1797900A1 (de) * | 2004-10-07 | 2007-06-20 | Kabushiki Kaisha Sangi | Zubereitung zur perkutanen/permukosalen absorption |
| EP1872798B1 (de) * | 2005-04-06 | 2013-06-05 | Kabushiki Kaisha Sangi | Intestinales absorptionsfähiges antitumorales mittel |
| FR2885525B1 (fr) * | 2005-05-13 | 2009-09-18 | Urodelia Sa | Medicament notamment anti-cancereux, destine a des traitements par immunotherapie, en particulier autologue |
| WO2007053781A2 (en) * | 2005-11-01 | 2007-05-10 | Novartis Ag | Compositions with antigens adsorbed to calcium phosphate |
| NZ568211A (en) | 2005-11-04 | 2011-11-25 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Influenza vaccines including combinations of particulate adjuvants and immunopotentiators |
| US8147860B2 (en) | 2005-12-06 | 2012-04-03 | Etex Corporation | Porous calcium phosphate bone material |
| CA2710480A1 (en) * | 2007-12-24 | 2009-07-02 | Novartis Ag | Assays for adsorbed influenza vaccines |
| GB201319548D0 (en) * | 2013-11-05 | 2013-12-18 | Medical Res Council | Amorphous magnesium-substituted calcium phosphate compositions and their uses |
| TWI654993B (zh) * | 2016-11-04 | 2019-04-01 | National Health Research Institutes | 陽離子型生物可降解性陶瓷聚合物微粒子用以遞送疫苗之用途 |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3599150A (en) * | 1969-08-01 | 1971-08-10 | Miles Lab | Stabilized aluminum hydroxide suspensions |
| US4016252A (en) * | 1972-04-06 | 1977-04-05 | Institut Pasteur | Calcium phosphate gel for adsorbing vaccines |
| DK143689C (da) * | 1975-03-20 | 1982-03-15 | J Kreuter | Fremgangsmaade til fremstilling af en adsorberet vaccine |
| US4888170A (en) * | 1981-10-22 | 1989-12-19 | Research Corporation | Vaccines obtained from antigenic gene products of recombinant genes |
| JPS59101145A (ja) * | 1982-11-30 | 1984-06-11 | 日本特殊陶業株式会社 | 薬液含浸多孔質セラミツクス |
| US4722840A (en) * | 1984-09-12 | 1988-02-02 | Chiron Corporation | Hybrid particle immunogens |
| US4757017A (en) * | 1984-09-14 | 1988-07-12 | Mcw Research Foundation, Inc. | In vitro cell culture system |
| DK166762B1 (da) * | 1986-01-14 | 1993-07-12 | Nederlanden Staat | Fremgangsmaade til fremstilling af immunogenkomplekser og farmaceutisk sammensaetning indeholdende saadanne komplekser |
| JPS62248487A (ja) * | 1986-04-22 | 1987-10-29 | Dentaru Kagaku Kk | グルカナーゼを固定化したアパタイトおよびその製造法 |
| JPS63196281A (ja) * | 1987-02-12 | 1988-08-15 | Sumitomo Electric Ind Ltd | 細胞培養用基材 |
| US5008116A (en) * | 1988-11-14 | 1991-04-16 | Frederick Cahn | Immunostimulatory microsphere |
| CN1057785A (zh) * | 1990-04-16 | 1992-01-15 | 哈佛大学校长及研究员协会 | 合成多聚免疫球蛋白受体，受体-抗体复合物，生产及应用 |
| US5443832A (en) * | 1990-04-16 | 1995-08-22 | Institut Swisse De Recherches Experimentales Sur Le Cancer | Hydroxyapatite-antigen conjugates and methods for generating a poly-Ig immune response |
-
1990
- 1990-04-16 US US07/510,154 patent/US5443832A/en not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-04-16 AU AU76849/91A patent/AU643011B2/en not_active Ceased
- 1991-04-16 KR KR1019910701882A patent/KR100188836B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1991-04-16 WO PCT/US1991/002599 patent/WO1991016072A1/en active IP Right Grant
- 1991-04-16 JP JP3507783A patent/JPH04507106A/ja active Pending
- 1991-04-16 CA CA002060318A patent/CA2060318A1/en not_active Abandoned
- 1991-04-16 DE DE69122828T patent/DE69122828T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-04-16 BR BR919105718A patent/BR9105718A/pt not_active Application Discontinuation
- 1991-04-16 HU HUP9200135A patent/HU216103B/hu not_active IP Right Cessation
- 1991-04-16 RU SU5010953A patent/RU2126270C1/ru active
- 1991-04-16 ZA ZA912838A patent/ZA912838B/xx unknown
- 1991-04-16 AT AT91907902T patent/ATE144428T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-04-16 EP EP91907902A patent/EP0477339B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-04-16 RO RO148981A patent/RO109817B1/ro unknown
- 1991-12-13 OA OA60114A patent/OA09525A/en unknown
- 1991-12-16 BG BG95635A patent/BG60371B1/bg unknown
-
1998
- 1998-01-16 US US09/008,353 patent/US6541000B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2060318A1 (en) | 1991-10-17 |
| DE69122828D1 (de) | 1996-11-28 |
| AU643011B2 (en) | 1993-11-04 |
| KR920702628A (ko) | 1992-10-06 |
| US5443832A (en) | 1995-08-22 |
| HUT63337A (en) | 1993-08-30 |
| HU9200135D0 (en) | 1992-04-28 |
| ZA912838B (en) | 1992-03-25 |
| AU7684991A (en) | 1991-11-11 |
| OA09525A (en) | 1992-11-15 |
| ATE144428T1 (de) | 1996-11-15 |
| HU216103B (hu) | 1999-04-28 |
| BR9105718A (pt) | 1992-07-21 |
| JPH04507106A (ja) | 1992-12-10 |
| US6541000B1 (en) | 2003-04-01 |
| BG60371B1 (bg) | 1994-11-15 |
| EP0477339B1 (de) | 1996-10-23 |
| WO1991016072A1 (en) | 1991-10-31 |
| BG95635A (bg) | 1993-12-24 |
| RO109817B1 (ro) | 1995-06-30 |
| KR100188836B1 (ko) | 1999-06-01 |
| EP0477339A1 (de) | 1992-04-01 |
| EP0477339A4 (en) | 1993-04-21 |
| RU2126270C1 (ru) | 1999-02-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69122828T2 (de) | Hydroxyapatit-antigen-konjugate und verfahren zur auslösung einer poly-ig-immunantwort | |
| DE60117164T2 (de) | Impfstoffe mit erhöhter immunantwort und verfahren zur deren herstellung | |
| DE69009185T2 (de) | Arzneimittelfreisetzungssystem aus glucan und adjuvant. | |
| DE68926828T2 (de) | Verfahren zur Potenzierung einer Immunreaktion sowie die dazugehörigen Mittel | |
| DE60013773T2 (de) | Methoden zur Herstellung von therapeutischen Kalziumphosphat Partikeln | |
| DE69834921T2 (de) | Antigen enthaltende zusammensetzung, die zusätzlich derivatisierte monoglyceride oder diglyceride als adjuvantien enthält | |
| DE3784720T2 (de) | Produkt, praeparat und methode zum bekaempfen der allergien. | |
| DE69632395T2 (de) | Cochleat-abgabevehikel für biologisch relevante moleküle | |
| DE2736223A1 (de) | Allergen enthaltende substanzen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung | |
| DE69934179T2 (de) | Zusammensetzung enthaltend ein Antigen, ein TH-1 induzierendes Adjuvans und eine im Wasser schwer lösliche Aminosäure zur Verwendung in der Immunisierung | |
| DE69836268T2 (de) | Immunverstärkende Zusammensetzung in fester Verabreichungsform mit Kollagen oder Polydimethylsiloxan als Trägersubstanzen | |
| DE69724970T2 (de) | Verfahren zur behandlung von hypersensitivität typ i unter verwendung von monophosphoryl-lipid a | |
| DE69327214T3 (de) | Zusammensetzung, die sowohl eine lösliche als auch eine unlösliche Form eines Immunogens beinhaltet | |
| DE69115514T2 (de) | Liposomenhaltige intranasale Impfstofformulierung | |
| US20040258763A1 (en) | Methods of manufacture and use of calcium phosphate particles containing allergens | |
| DE69730434T2 (de) | Immunstimulierende lipidformulierung | |
| EP0686030B1 (de) | Mit Antigen beladene Mikropartikel und pharmazeutische Zubereitungen, die diese Mikropartikel enthalten. | |
| DE3788148T2 (de) | Monoklonale Antikörper und deren Verwendung. | |
| DE69127545T2 (de) | Liposomen, die versorgt werden mit t-helfer lympozyten zur unterstützung schwacher antigene als impfstoffe | |
| EP1230932B1 (de) | Verwendung von Antikörpern zur Vakzinierung gegen Krebs | |
| DE19511276C2 (de) | Adjuvans auf der Basis kolloidaler Eisenverbindungen | |
| DE60019726T2 (de) | Impfstofformulierung mit monoglyceriden oder fettsäuren als adjuvans | |
| EP0363835B1 (de) | Verwendung von Zink- oder Eisenhydroxid zur Adjuvierung von Antigenlösungen und auf diese Weise adjuvierte Antigenlösungen | |
| DE69014543T2 (de) | Multivalentes immunogen lmi. | |
| DE60004334T2 (de) | Impfstoffzusammensetzung auf basis von partikeln |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 8364 | No opposition during term of opposition | ||
| 8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |