DE60218443T2

DE60218443T2 - Jasmonate enthaltende therapeutische zusammensetzungen für die behandlung von krebs

Info

Publication number: DE60218443T2
Application number: DE60218443T
Authority: DE
Inventors: Eliezer Flescher; Orit Fingrut
Original assignee: Ramot at Tel Aviv University Ltd
Current assignee: Ramot at Tel Aviv University Ltd
Priority date: 2001-04-04
Filing date: 2002-03-26
Publication date: 2007-10-31
Anticipated expiration: 2022-03-27
Also published as: CA2443623A1; ES2280527T3; AU2002251451A1; CA2443623C; EP1379229B1; DE60218443D1; WO2002080890A3; US20020173470A1; WO2002080890A2; JP2004525163A; EP1379229A2; ATE355056T1; EP1379229B8; JP4266639B2; US6469061B1; IL158281A0

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Arzneimittel zur Verwendung bei der Behandlung einer großen Vielfalt von Malignitäten in Säugern. Die erfindungsgemäße Zusammensetzung ist nicht-toxisch und zielt auf Krebszellen, im Gegensatz zu gesunden peripheren Zellen.
Pflanzen können Stresssituationen durchmachen, welche zur Aktivierung von komplexen genetischen Stoffwechselwegen führen, die physiologische Antworten, die für die Stressquelle angemessen sind, mit sich bringen. Übliche Stresssituationen, denen Pflanzen ausgesetzt sind, schließen extreme UV-Strahlung, osmotischen Schock, Hitzeschock und Befall mit Krankheitserregern ein. In Pflanzen haben sich Stresshormone entwickelt, welche in derartigen Zeiten von Stress freigesetzt werden und verschiedene Kaskaden in Gang bringen, welche in angemessenen Antworten enden. Jasmonsäure (JA) und Methyljasmonat (MJ) gehören zu der Gruppe natürlicher Phyto-Stresshormone, die „Jasmonate" heißen (Sembdner und Parthier, Annu. Rev. Physiol. Plant Mol. Biol., 44, 569–589, 1993). Jasmonsäure ist entscheidend für das intrazelluläre Signalisieren als Antwort auf Verletzung und Methyljasmonat verursacht die Induktion eines Proteinase-Inhibitors, der in niedrigen Konzentrationen als Antwort auf Verwundung oder Befall mit Krankheitserregern akkumuliert (Farmer und Ryan, Proc. Natl. Acad. Sci., 87, 7713–7716, 1990). Jasmonate sind für eine Vielfalt von Verwendungen beim Pflanzenwachstum und der Verbesserung des Ernteertrags patentiert worden. Die Anwendung von Jasmonaten kann ein breites Spektrum an widersprüchlichen Wirkungen auf praktisch alle Pflanzen haben. Diese Wirkungen reichen von Hemmung der Pflanzenentwicklung bis zur Förderung von Prozessen in Pflanzen. Das U.S.-Patent Nr. 6,114,284 offenbart die Verwendung eines Jasmonsäureesters und Giberellin, um Pflanzenwachstum und -Entwicklung synergistisch zu steigern. Das U.S.-Patent Nr. 5,436,226 offenbart die Verwendung eines Jasmonats, um des Keimen und Dunkel-werden bei Knollen, nachdem sie gesammelt wurden, zu hemmen, und das U.S.-Patent Nr. 5,118,711 offenbart die Verwendung von Methyljasmonat um Insekten abzuwehren.
Natriumsalicylat (SA) ist ein Phyto-Stresshormon aus einer anderen Familie und ein zentraler Vermittler der Verteidigungsantworten von Pflanzen auf Krankheitserreger und Verletzung (Ryals et al., Plant Cell, 8, 1809–1819, 1996).
Eine typische Antwort, die Pflanzen bei Befall mit einem mikrobiellen Krankheitserreger verwenden, kann zum Beispiel programmierter Zelltod, hypersensitive Antwort (HR) genannt, sein, welcher zur Bildung einer Zone von toten Zellen um die Infektionsstelle herum führt. Die Schichten aus toten Zellen, die die Stelle des Eindringens des Krankheitserregers umgeben, sollen als physikalische Barriere, die die weitere Proliferation und Ausbreitung des Krankheitserregers hemmt, dienen. Ein nachfolgender Schritt des Prozesses umfasst die Synthese des Phyto-Stresshormons Natriumsalicylat und Akkumulation von antimikrobiellen Wirkstoffen, wie z.B. Proteine, die im Zusammenhang mit der Pathogenese stehen und Phytoalexine (Dangl et al., Plant Cell, 8, 1793–1807, 1996; Mitler und Larn, Trends Microbiol., 4, 10–15, 1996).
Dieser programmierte Zelltod als Antwort auf Befall mit Krankheitserregern erinnert an den programmierten Zelltod, von dem bekannt ist, dass er in Säugerzellen vorkommt. Säugerzellen können durch „unplanmäßige" Nekrose sterben, welche durch äußere Beschädigung verursacht wird und zu Zellexplosion führt, oder auf die organisiertere Weise der Apoptose, auch „programmierter Zelltod" oder „zellulärer Selbstmord" genannt (Willingham, J. Histochem. Cytochem., 47, 1101–1109, 1999). Bei der Apoptose sind biochemische und morphologische Ereignisse gewöhnlich in einer Kaskade von sehr spezifischen und kontrollierten Schritten organisiert, welche die Zerlegung des Kerns und die Schrumpfung der Zelle einschließen und mit der vollständigen Aufspaltung des Zellinhalts zu apoptotischen Körpern enden (Stewart, J. Cancer Inst., 86, 1286–1295, 1994).
Der Prozess der Apoptose ist langsamer als Nekrose und vollzieht sich in ein paar Stunden oder Tagen, je nach Auslöser. Diese Art von Tod kann als „Zell-Selbstmord" betrachtet werden (Willingham, J. Histochem. Cytochem., 47, 1101–1109, 1999).
Hinreichend überraschend, war das Phyto-Stresshormon SA fähig, intrazelluläre biochemische Ereignisse auszulösen, die ebenso für eine Stressantwort in Säugerzellen typisch sind (Schwenger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 4, 2869–2873, 1997; Schwenger et al., J. Cell. Physiol., 179, 109–114, 1999), und war fähig, durch Aktivierung der Caspase-3 (eine zytoplasmatische Säuger-Protease, die für die letzten Schritte der Apoptose unentbehrlich ist) in Zelllinien der menschlichen myeloischen Leukämie Apoptose (programmierten Zelltod) auszulösen (Klampfer et al., Blood, 93, 2386–2394, 1999; Willingham, J. Histochem. Cytochem., 47, 1101–1109, 1999; Porter und Janicke, Cell Death Differ., 6, 99–104, 1999). SA war ebenfalls fähig, Apoptose in Säuger-FS-4-Fibroblasten (Schwenger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 4, 2869–2873, 1997) und in menschlichem Bauchspeicheldrüsenkrebs auszulösen (McDade et al., J. Surg. Res., 83, 56–61, 1999). Die Arzneistofffamilie der nicht-steroidalen anti-inflammatorischen Arzneistoffe (NSAID), von der Salicylsäure ein Vertreter ist, weist wirksame chemopräventive Aktivität auf (Morgan, Gut, 38, 646–648, 1996; Peleg et al., Dig. Dis. Sci., 41, 1319–1326, 1996; Vainio et al., Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev., 6, 749–753, 1997).
Viele Pflanzengene, die auf Umgebungs- und Entwicklungsveränderungen reagieren, werden durch Jasmonsäure, die sich über einen octadecanoiden Stoffwechselweg von Linolensäure ableitet, reguliert. Pflanzenverteidigungsantworten auf bestimmte Wellenlängen von ultravioletter Strahlung erfordern die Aktivierung des octadecanoiden Verteidigungs-Signalwegs (Conconi et al., Nature, 383, 826–829, 1996). Die Freisetzung der Linolensäure aus der Membran in die Zelle und ihre nachfolgende Umwandlung in JA ist analog zu Signalwegen in Säugerzellen, wo das Freisetzen von Arachidonsäure aus der Membran zur Synthese von Eicosanoiden, wie z.B. Prostaglandinen, führt (Needleman et al., Ann. Rev. Biochem., 55, 69–102, 1986). Prostaglandine der A- und J-Reihe, die eine Cyclopentanon-Ringstruktur enthalten, sind wirkstarke Hemmstoffe der Zellproliferation in vitro und sind fähig, die Tumorgenizität in vivo zu unterdrücken (D'Onofrio et al., Int. J. Cancer, 51, 481–488, 1992; Gorospe et al., Mol. Cell. Biol., 16, 762–770, 1996). Die Fähigkeit der Prostaglandine, das Wachstum in einem Spektrum von verschiedenartigen Tumor-Zelllinien aufzuhalten, hat die Möglichkeit aufkommen lassen, dass sie zur Behandlung von menschlichem Krebs nützlich sein könnten (Sasaki und Fukushima, Anti-Cancer Drugs, 5, 131–138, 1994). Zwischen Jasmonaten und Prostaglandinen besteht strukturelle Ähnlichkeit, da beide Cyclopentanone sind, was nahe legt, dass JA und MJ gegen Krebszellen wirksam sein können.
JP-10 29 935 bezieht sich auf ein antiandrogenes Mittel, das mindestens eine Verbindung, ausgewählt aus cis-Jasmon, Methyldihydroisojasmonat, Methyldihydrojasmonat und Dihydrojasmon, welches in Haartonika und Kosmetika verwendet wird, umfasst, zur Behandlung und Verbesserung von vergrößerter Prostata, Prostatatumoren, Akne vulgaris und Seborrhöe, sowie männlicher androgenetischer Alopezie.
Die vorliegende Erfindung offenbart die Verwendung von Vertretern der Phyto-Stresshormon-Familie, „Jasmonate" genannt, zum Unterdrücken und Abtöten von Säuger-Krebszellen, die Haupttypen der menschlichen Malignitäten repräsentieren. Nach bestem Wissen des Anmelders wurden Jasmonate nie als Antikrebsmittel untersucht. Da chemotherapeutische Arzneistoffe zur Verwendung in Säugersystemen gewöhnlich durch Induktion der Apoptose in Krebszellen funktionieren (Bailly et al., Leukemia, 11, 1523–1532, 1997) und Jasmonate an einer apoptotischen Antwort auf Pflanzenstress beteiligt sein sollen, testeten die Anmelder die Fähigkeit der Jasmonate, die Replikation von Säuger-Krebszelllinien von klinischer Bedeutung zu unterdrücken. Die Cytotoxizität der Jasmonate wurde mit der des Phyto-Stresshormons Natriumsalicylat, von dem bekannt ist, dass es für Säuger-Krebszellen cytotoxisch ist, verglichen.
Chemotherapeutische Arzneistoffe sind oft so hochtoxisch, dass sie den Patienten mit zahlreichen Nebenwirkungen, die die Lebensqualität des Patienten ernsthaft vermindern und seine Funktion beeinträchtigen, zurücklassen. Chemotherapieregime können mehrere Monate dauern und können im Fall von Rezidiven wiederholt durchgeführt werden, was sogar einen ambulanten Patienten mit wiederholten Zeiträumen der teilweisen Funktionsbeeinträchtigung zurücklässt. Deshalb besteht der Bedarf für chemotherapeutische Arzneistoffe mit unverminderter Wirkstärke, jedoch mit einem höheren Grad der Spezifität für maligne Zellen, und weniger Nebenwirkungen. Die vorliegende Erfindung offenbart die Verwendung von Jasmonatverbindungen, um Malignitäten zu behandeln. Jasmonate werden gewöhnlich in winzigen Mengen in vielen essbaren Pflanzen, wie z.B. Tomate, Kartoffel und Kürbiskernen, gefunden (Sembdner und Parthier, Annu. Rev. Physiol. Plant Mol. Biol., 44, 569–589, 1993) und sind folglich nicht-toxisch. Von den Anmeldern wird gezeigt, dass Jasmonate hochspezifisch sind; dass sie bei klinisch bedeutenden Krebszelltypen Apoptose auslösen, jedoch nicht die Proliferation von normalen menschlichen Zellen, wie z.B. gesunde Lymphozyten, bewirken. Von den Anmeldern wird zusätzlich gezeigt, dass Jasmonate bei der Behandlung von Lymphom in einem Maus-Krebsmodell wirksam sind.
Es ist die Aufgabe der vorliegenden Erfindung, Jasmonatverbindungen als einen wirkstarken chemotherapeutischen Arzneistoff, mit einem hohen Grad der Spezifität für maligne Zellen, vorzuschlagen. Diese und andere Aufgaben der vorliegenden Erfindung werden aus der detaillierten Beschreibung der bevorzugten Ausführungsformen, die nachstehend folgt, offensichtlicher werden.
In der vorliegenden Erfindung soll der Begriff „Jasmonate" die natürlichen Phytohormone Jasmonsäure und Methyljasmonat einschließen, sowie jegliches natürliche oder synthetische Derivat und jegliche Isomere der Jasmonsäure und von Jasmon. Diese Derivate weisen:

1) eine Niederacylseitenkette am C₃ (freie Säure oder Ester oder Konjugat)
2) eine Keto- oder Hydroxy-(freie Hydroxy- oder Ester-)Einheit am C₆-Kohlenstoff
3) eine n-Pentenyl- oder n-Pentylseitenkette am C₇ auf.

Eine Vielfalt von Jasmonaten kann verwendet werden und schließt ein, ist aber nicht beschränkt auf, diejenigen mit der Formel:
wobei n 0, 1 oder 2 ist,
R₁ OH, Alkoxy, O-Glucosyl oder Imino ist,
R₂ OH, O, Alkoxy oder O-Glucosyl ist,
R₃, R₄ und R₅ H, OH, Alkoxy oder O-Glucosyl sind,
und/oder wobei R₁ und R₂ oder R₁ und R₄ zusammen ein Lacton bilden, und ferner wobei die Bindungen zwischen C₃:C₇, C₄:C₅ und C₉:C₁₀ Doppel- oder Einfachbindungen sein können.
Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung einer Jasmonatverbindung der Formel I:
Formel I
oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von menschlichem Brustkrebs, Hautkrebs, Darmkrebs, Lungenkrebs, Bauchspeicheldrüsenkrebs, Lymphom, Leukämie, Kopf- und Halskrebs, Nierenkrebs, Eierstockkrebs, Knochenkrebs, Leberkrebs oder Schilddrüsenkrebs bei Säugern,
wobei:
n 0, 1 oder 2 ist;
R₁ OH, Alkoxy, O-Glucosyl oder Imino ist,
R₂ OH, O, Alkoxy oder O-Glucosyl ist,
R₃, R₄ und R₅ H, OH, Alkoxy oder O-Glucosyl sind,
und/oder wobei R₁ und R₂ oder R₁ und R₄ zusammen ein Lacton bilden, und ferner wobei die Bindungen zwischen C₃:C₇, C₄:C₅ und C₉:C₁₀ Doppel- oder Einfachbindungen sein können;
oder eines Derivats der Formel, wobei das Derivat mindestens eines der Folgenden aufweist:
eine Niederacylseitenkette am C₃ (freie Säure oder Ester oder Konjugat), eine Keto- oder Hydroxy-(freie Hydroxy- oder Ester-)Einheit am C₆-Kohlenstoff oder eine n-Pentenyl- oder n-Pentylseitenkette am C₇.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung wird das Jasmonat ausgewählt aus Methyljasmonat, Jasmonsäure, Jasmon, 7-iso-Jasmonsäure, 9,10-Dihydrojasmonsäure, 2,3-Didehydrojasmonsäure, 3,4-Didehydrojasmonsäure, 3,7-Didehydrojasmonsäure, 4,5-Didehydrojasmonsäure, 4,5-Didehydro-7-iso-jasmonsäure, Cucurbinsäure, 6-Epicucurbinsäure, 6-Epicucurbinsäurelacton, 12-Hydroxyjasmonsäure, 12-Hydroxyjasmonsäurelacton, 11-Hydroxyjasmonsäure, 8-Hydroxyjasmonsäure, Homojasmonsäure, Dihomojasmonsäure, 11-Hydroxydihomojasmonsäure, 8-Hydroxydihomojasmonsäure, Tuberonsäure, Tuberonsäure-O-β-glucopyranosid, Cucurbinsäure-O-β-glucopyranosid, 5,6-Didehydrojasmonsäure, 6,7-Didehydrojasmonsäure, 7,8-Didehydrojasmonsäure, cis-Jasmon, Methyldihydroisojasmonat, Dihydrojasmon, Aminosäurekonjugaten der Jasmonsäure und den Niederalkylestern, den Träger-Ligand-Konjugaten und den Sterioisomeren davon.
Überdies wird, gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung, der Wirkstoff in einem verträglichen Fettträger gelöst.
Noch weiter umfasst, gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung, die Zusammensetzung zusätzlich mindestens ein anderes Chemotherapeutikum.
Zusätzlich wird gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung die Zusammensetzung zur oralen Verabreichung hergestellt. In derartigen Ausführungsformen liegt die Zusammensetzung in Form, ausgewählt aus einer Emulsion, einer Lösung, einer Kapsel, einer Tablette, vor.
In einer anderen Ausführungsform der vorliegenden Erfindung wird die Zusammensetzung zur Verabreichung durch Injektion hergestellt. Die Zusammensetzung wird hergestellt, sodass sie zur intramuskulären, intraperitonealen oder intravenösen Injektion geeignet ist.
Noch weiter wird, in bestimmten Ausführungsformen, die Zusammensetzung zur topischen Verabreichung hergestellt. Gemäß diesen Ausführungsformen wird die Zusammensetzung in Form, ausgewählt aus einer Salbe, einem Gel oder einer Creme, vorgelegt.
Überdies wird, in manchen Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung, die Zusammensetzung zur Verabreichung durch Inhalation hergestellt. In anderen Ausführungsformen wird die Zusammensetzung zur Verabreichung über ein Zäpfchen hergestellt.
Die vorliegende Erfindung wird hier nur als Beispiel beschrieben, mit Bezug auf die beigefügten Zeichnungen, wobei:
1 ein Diagramm ist, das die Cytotoxizität der Phytohormone Methyljasmonat und Jasmonsäure, gegenüber Salicylsäure, als ein Maß ihrer Konzentration veranschaulicht.
Tabelle 1 ein Vergleich des durch Jasmonsäure, Methyljasmonat und Salicylsäure bewirkten Niveaus der Toxizität auf vier maligne Zelllinien ist.
2 ein Diagramm ist, das die Cytotoxizität des Phytohormons cis-Jasmon als ein Maß seiner Konzentration veranschaulicht.
3 ein Diagramm ist, das die Aktivitätsniveaus des apoptotischen Markerproteins Caspase-3 in mit Jasmonsäure und Methyljasmonat behandelten Molt-4-Zellen veranschaulicht.
4 Fluoreszenzmikroskopie-Bilder veranschaulicht, die apoptotische Veränderungen der Morphologie der Molt-4-Zellen, nach Behandlung mit Jasmonsäure und Methyljasmonat, abbilden.
5 ein Diagramm ist, das die Spezifität der cytotoxischen Wirkung, die Jasmonate auf maligne Zellen ausüben, versus keine Wirkung auf normale Lymphozyten von gesunden Spendern, veranschaulicht.
6 ein Diagramm ist, das den kumulativen Prozentsatz des Überlebens von Mäusen, die mit Jasmonaten behandelt wurden, um die Bildung von Lymphomen zu verhindern, versus unbehandelte Mäuse, veranschaulicht.
Es ist selbstverständlich, dass die detaillierte Beschreibung, die folgt, nur bestimmte bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung veranschaulichen soll. Sie soll auf keinen Fall den Umfang der Erfindung, wie in den Ansprüchen dargestellt, einschränken.
Die vorliegende Erfindung beschreibt die Verwendung von Jasmonaten, um Proliferation zu verhindern und den Tod von malignen Zellen auszulösen.
Besonders bevorzugte Jasmonate schließen Jasmonsäure [(–)-JA und/oder (+)-7-iso-JA], Methyljasmonat, Jasmon und 9,10-Dihydrojasmonsäure und ihre Niederalkylester ein. Andere bevorzugte Jasmonate schließen 4,5-Didehydro-7-iso-JA, 3,7-Didehydro-JA, Cucurbinsäure (CA), 6-Epi-CA, 6-Epi-CA-lacton, 12-Hydroxy-JA, 12-Hydroxy-JA-lacton, 11-Hydroxy-JA, 8-Hydroxy-JA, Homo-JA, Dihomo-JA, 11-Hydroxy-dihomo-JA, 8-Hydroxy-dihomo-JA, Tuberonsäure (TA), TA-O-β-glucopyranosid, CA-O-β-glucopyranosid, Aminosäurekonjugate von JA, sowie die korrespondierenden Niederalkylester von jeder dieser Säuren, ein.
Die Anmelder haben nachstehend bewiesen, dass zwei Jasmonate, Methyljasmonat und Jasmonsäure, eine positive therapeutische Wirkung auf maligne Zellen aufweisen, jedoch normale Zellen, wie z.B. normale zirkulierende Lymphozyten, nicht schädigen. Die folgenden Beispiele weisen nach, dass Jasmonate in Kultur für vier unterschiedliche Typen von malignen Zellen cytotoxisch sind, in Dosen, die als sicher und in Säugern erreichbar betrachtet würden, und dass sie das Wachstum von gesunden Lymphozyten nicht hemmen. Die Anmelder haben zusätzlich bewiesen, in Beispiel 7, dass Jasmonate beim Verlängern der Lebenszeit von Mäusen, denen Lymphomzellen injiziert worden waren, wirksam sind, was zu einer Überlebensrate führt, die signifikant höher ist als die von unbehandelten Mäusen (die 2,25fache Anzahl an Überlebenden gegenüber der unbehandelten Gruppe).
Beispiel 1 – Phyto-Stresshormone sind cytotogisch für vier menschliche transformierte Zelllinien
Vier transformierte Zelllinien aus unterschiedlichen histologischen Entwicklungslinien wurden einem von drei Phyto-Stresshormonen ausgesetzt. Die gewählten Zelllinien repräsentieren vier Typen von Krebs mit weit verbreiteter klinischer Bedeutung. Molt-4 ist eine menschliche T-Lymphoblastenleukämie-Zelllinie, SK-28 sind menschliche Melanomzellen. LNCaP ist eine, auf Androgene ansprechende, menschliche Prostata-Adenokarzinom-Zelllinie und MCF7 ist eine menschliche Brustkarzinom-Zelllinie. Alle Zelllinien wurden von ATCC (Rockville, MD) erworben. Alle Reagenzien wurden von Sigma Chemicals (St. Louis, MO) erworben, sofern nicht anders angegeben. JA und MJ wurden in Ethanol gelöst. Alle Zellkulturen wurden in RPMI-1640 mit 10% fötalem Kälberserum (Biological Industries, Beit-Haemek, Israel) durchgeführt und man ließ die Zellen (außer Molt-4 und Lymphozyten aus dem peripheren Blut) vor jeder nachstehend erwähnten Behandlung anhaften.
LNCaP-, MCF7- und SK-28-Zellen (mit 4 × 10³/Vertiefung) und Molt-4-Zellen (mit 1,5 × 10⁴/Vertiefung) wurden in Platten mit 96 Vertiefungen ausgebracht und über Nacht inkubiert. Das Phyto-Stresshormon wurde in steigenden Konzentrationen zugegeben, wie nachstehend angegeben, und die Toxizität wurde nach 24 Stunden gemessen, unter Verwendung des wässrigen, nicht-radioaktiven Zellproliferationstests CellTiter 96 (Promega, Madison, WI); ein Test, in welchem lebensfähige Zellen ein gefärbtes Produkt produzieren (für Einzelheiten des Protokolls für diesen Test, siehe nachstehend). Dieser Test ist quantitativ, da die Menge der produzierten Farbe unter Verwendung eines ELISA-Lesegeräts gelesen wird.
Die höchste, bei Menschen verwendete, nicht-toxische, pharmakologische Konzentration des nicht-steroidalen anti-inflammatorischen Arzneistoffs SA beträgt annähernd 3 mM (Katzung, Lange Medical Book, Stamford, 1998). Um die zusätzlichen Phyto-Stresshormone JA (Jasmonsäure) und MJ (Methyljasmonat) mit SA zu vergleichen, wurde der gleiche Bereich der Konzentrationen (0,5–3 mM) gewählt. Diese Verbindungen in den oben erwähnten Konzentrationen sind für Mäuse nicht toxisch. Jede Zelllinie wurde mit jedem dieser Hormone in einer Konzentration im Bereich von 0,5–3 mM für 24 Stunden inkubiert, wonach die Cytotoxizität gemessen wurde. Die statistische Signifikanz der Ergebnisse wurde (wo angemessen) mit dem zweiseitigen Studentschen t-Test, n = 3, bestimmt. Die Ergebnisse werden als Mittelwerte ± Standardabweichung vorgelegt.
Bei Bezug auf 1 wird die Cytotoxizität jedes einzelnen der drei Phytohormone als ein Maß seiner Konzentration aufgetragen.

Rauten = Molt-4-Lymphoblastenleukämiezellen,
Quadrate = SK28-Melanomzellen,
Dreiecke = LNCaP-Prostata-Adenokarzinomzellen, die auf Androgene ansprechen,
Kreise = MCF7-Brustkarzinomzellen.

Was 1A betrifft, reagierten alle Zelllinien in dosisabhängiger Art und Weise auf SA. Die Cytotoxizität der SA war bei Molt-4-Lymphoblastenleukämiezellen, SK28-Melanomzellen und MCF7-Brustkarzinomzellen bei allen Konzentrationen signifikant, P < 0,05, und bei LNCaP-menschliche-Prostata-Adenokarzinomzellen ab 1 mM und höher. Von SA wurde hier gezeigt, dass sie die Zellproliferation von unterschiedlichen Krebszellen von 20 bis 40% hemmt, je nach Zelllinie. Diese Feststellung stimmt mit ähnlichen berichteten Beobachtungen, wobei SA das Wachstum von Brustkrebszelllinien-, Rattenhepatom- und menschliche Fibroblastenkulturen hemmte, überein (Sotiriou et al., Anticancer Res., 19, 2997–3006, 1999; Hial et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 202, 446–454, 1977). Eine mögliche Interpretation dieser Daten ist, dass SA in Krebszellen Stress verursacht, was zur Unterdrückung der Proliferation bei jenen Zellen führt.
JA und MJ wurden im Vergleich zu SA untersucht, um zu bestimmen, ob die Wirkungen von SA auf Krebszellen den Phyto-Stresshormonen gemeinsam sind, und ob Jasmonate beim Zielen auf und Hemmen des Wachstums von malignen Zellen für wirksamer erachtet würden als Salicylsäure.
Was 1B betrifft, war die Ansprechbarkeit auf JA dosisabhängig. Die Cytotoxizität von JA war bei Molt-4-Zellen ab 1 mM und höher, bei LNCaP- und SK28-Zellen ab 2 mM und höher und bei MCF7-Zellen bei 3 mM signifikant, P < 0,05. Die Reihenfolge der Sensibilität gegen JA war Molt-4 > SK-28 > LNCaP > MCF7.
Was 1C betrifft, war die Cytotoxizität von MJ bei Molt-4-Zellen bei allen Konzentrationen und bei MCF7-Zellen bei 3 mM signifikant, P < 0,01; und mit P < 0,05 bei LNCaP- und SK28-Zellen ab 2 mM und höher.
Die hier vorgelegten Ergebnisse zeigen, dass MJ das höchste Niveau der Cytotoxizität verursachte. Zum Beispiel lösten 0,5 mM MJ bei Molt-4-Zellen 87,52% Cytotoxizität aus. Die anderen Zelllinien reagierten auf MJ auf dosisabhängige Weise. Die Reihenfolge der Sensibilität war Molt-4 > LNCaP > SK28 > MCF7.
Angemessene Kontrollen bewiesen, dass Ethanol (worin JA und MJ gelöst wurden) selbst keine Cytotoxizität auslöste.
Beispiel 1 weist nach, dass, obwohl Krebszellen von verschiedener Herkunft auf Phyto-Stresshormone reagierten, ihre Antwort unterschiedlich war. Unter den untersuchten Zelllinien reagierte Molt-4 stark auf JA (90% Cytotoxizität bei 3 mM) und MJ (90% Cytotoxizität bei 0,5 mM).
In den Beispielen verwendeter Cytotoxizitätstest
Die Hemmung der Zellproliferation wurde mit dem wässrigen, nicht-radioaktiven Zellproliferationstests CellTiter 96 (Promega, Madison,WI) bestimmt: Auf Vollendung eines gegebenen Versuchs hin, wurden MTS (eine Tetrazoliumverbindung) mit 333 μg/ml + Phenazinmethosulfat (mit 25 μM) zu jeder Vertiefung der Platte mit 96 Vertiefungen für 1 Stunde bei 37°C zugegeben. Dies ließ die Entwicklung einer Farbreaktion, bei der Dehydrogenasen in metabolisch aktiven Zellen das MTS reduzieren zu. Da die Zellen vor der Zugabe von MTS nicht gewaschen wurden, gab es keine möglicherweise lose anhaftenden oder nicht-anhaftenden Zellen, die problematisch hätten sein können. Das lösliche MTS-Formazanprodukt wurde bei einer Wellenlänge von 490 nm mit einem CERES 900 HDI ELISA-Lesegerät (Bio-Tek Instruments, Inc, Highland Park, VT) gemessen. Die optische Dichte ist direkt proportional zu der Anzahl an lebenden Zellen in der Kultur. Die Cytotoxizität (%) wurde auf folgende Weise berechnet: [(OD der Kontrollzellen – OD der Arzneistoff-behandelten Zellen)/OD der Kontrollzellen] × 100.
Beispiel 2 – Cis-Jasmon, eine zusätzliche Jasmonatverbindung, ist für drei menschliche transformierte Zelllinien cytotoxisch
Drei transformierte Zelllinien, aus jenen in Beispiel 1 beschriebenen, wurden cis-Jasmon, das eine zusätzliche Jasmonatverbindung ist (neben JA und MJ), ausgesetzt, um seine Cytotoxizität auf Krebszelllinien zu untersuchen. Der Versuch wurde durchgeführt, wie in Beispiel 1 beschrieben.
Was 2 betrifft, ist cis-Jasmon ein wirkstarkes cytotoxisches Mittel, das die Zellen dosisabhängig beeinflusst. Die Wirkung von cis-Jasmon auf jede Zelllinie war bei jeder verwendeten Konzentration signifikant (wobei die statistische Signifikanz P < 0,01 betrug, wie mit dem t-Test bestimmt). Das einzige Ergebnis, das nicht für signifikant erachtet wurde, war das, das gemessen wurde, wenn die niedrigste verwendete Dosierung von cis-Jasmon, 0,5 mM, auf LNCaP-Zellen angewandt wurde. Die Cytotoxizität überstieg 50% der Zellen in allen untersuchten Zelllinien, wenn cis-Jasmon mit Konzentrationen von 2 mM und darüber angewandt wurde. Bei der höchsten verwendeten Konzentration war cis-Jasmon für 75–85% der transformierten Zellen auf jeder Platte cytotoxisch.
Beispiel 3 – Charakterisierung der durch Jasmonate ausgelösten Schädigung
Da anfänglich die gleiche Anzahl an Zellen in jede Vertiefung in Aliquoten aufgeteilt wurde, spiegelt verringerte Extinktion, wie in Vertiefungen gemessen, die behandelte Zellen enthalten (vorstehend), Zelltod und/oder Abnahme in der Proliferationsrate wider. Um zwischen diesen zwei Möglichkeiten zu unterscheiden, setzten wir einen zusätzlichen Cytotoxizitätstest ein, der den Zelltod durch fehlenden Trypanblau-Ausschluss ermittelt. Zellen wurden mit 0,1% Trypanblau für 2–5 Minuten inkubiert und der Prozentsatz an toten Zellen (jene, die den Farbstoff nicht ausschlossen) wurde mikroskopisch bestimmt.
Was Tabelle 1 betrifft, löste, unter den getesteten Phytohormonen, MJ den Tod am wirksamsten in jeder Zelllinie aus. MJ ist stärker wirksam beim Abtöten menschlicher transformierter Zelllinien, als seine nicht-methylierte Form JA (1B, 1C und Tabelle 1). SA unterdrückte die Proliferation in allen Zelllinien, während JA bei Lymphoblastenleukämiezellen Tod und bei den anderen Zellen Unterdrückung der Proliferation auslöste. Was die relative Empfindlichkeit betrifft, werden Molt-4-Zellen von SK28-, LNCaP- und MCF7-Zellen, in dieser Reihenfolge, gefolgt. Unterschiedliche Empfindlichkeit der unterschiedlichen Zelllinien für die Phyto-Stresshormone legt eine Spezifität des Einflusses jener Verbindungen auf die Zellen nahe.
Es ist wichtig, den Unterschied zwischen SA und Jasmonaten in ihrem Einfluss auf Krebszelllinien zu beachten. SA verursacht Hemmung der Zellproliferation bei den getesteten Zelllinien, JA verursacht Zelltod bei Molt-4-Zellen und Hemmung der Zellproliferation bei SK28-, LNCaP- und MCF7-Zellen, wohingegen MJ bei allen Zelllinien Tod verursacht. Diese Unterschiede könnten mit den unterschiedlichen Strukturen der Phyto-Stresshormone erklärt werden und/oder mit dem Unterschied zwischen den biochemischen Ereignissen, die jene Verbindungen in den Zellen auslösen.
Beispiel 4 – Jasmonate lösen in Molt-4-Zellen Apoptose aus
Erhöhte Caspase-3-Spiegel sind ein spezifischer Marker für den Apoptoseprozess (Porter und Janicke, Cell Death Differ., 6, 99–104, 1999). Um endgültig zu bestimmen, dass die Ursache für den Zelltod Apoptose war, wurde das Niveau der Caspase-3-Aktivität in den Zellen nach Behandlung mit JA und MJ gemessen.
Molt-4-Zellen wurden mit JA und MJ für 2, 4 und 14 Stunden inkubiert und die Aktivitätsniveaus der Apoptose-vermittelnden Protease, Caspase-3, wurden unter Verwendung des Caspase-3(CPP32)-Protease-Testkits (PharMingen, San Diego, CA) bestimmt, wie vom Hersteller vorgeschlagen. Kurz, 2 × 10⁶ Zellen wurden aufgelöst und in 100 μL Reaktionspuffer, der ein fluorogenes Caspase-3(CPP32)-Substrat, Ac-DEVD-AMC enthielt, resuspendiert. Die Reaktionen wurden bei 37°C für 2 Stunden inkubiert und Proben wurden bei einer Anregungswellenlänge von 360 nm und einer Emissionswellenlänge von 460 nm in dem FL600 Mikroplatten-Fluoreszenz-Lesegerät (Bio-Tek Instruments, Winooski, Vermont, USA) getestet.
Was 3 betrifft, wurde dosisabhängige Erhöhung der Caspase-3-Aktivität beobachtet:

(Rauten = 2 Stunden, Quadrate = 4 Stunden, Dreiecke = 14 Stunden.)
Wie in 3 gesehen werden kann, steigerten JA und MJ bei allen Konzentrationen und Zeitpunkten die Caspase-3-Aktivität signifikant, P < 0,05.

Was 3A betrifft, löste Inkubation mit JA für 2 Stunden keine Erhöhung des Spiegels der Caspase-3 aus.
Was 3B betrifft, war, nach 14 Stunden des Aussetzens unter MJ, das Ausmaß des Tods bei 1 mM und darüber derart, dass die Caspase-3-Aktivität nicht bestimmt werden konnte.
Diese Ergebnisse legten nahe, dass JA und MJ apoptotischen Tod bei Molt-4-Zellen auslösten. Um diese Tatsache zu bestätigen, wurden Molt-4-Zellen mit JA (2 mM) und MJ (0,5 mM) für 14 Stunden behandelt und mit Fluoreszenzmikroskopie analysiert, um entscheidende morphologische Kennzeichen der Apoptose, wie z.B. Kondensation und Fragmentierung von Chromatin, zu ermitteln.
Was 4 betrifft, werden Fluoreszenzmikroskopiebilder gezeigt, die Veränderungen der zellulären Morphologie in den Zellkernen der Molt-4-Zellen, nach Behandlung mit den Phyto-Stresshormonen JA oder MJ, abbilden. 5 × 10⁵ Zellen/Probe wurden geerntet, dann durch Zugabe einer Lösung von phosphat-gepufferter Kochsalzlösung (PBS), die [3% Paraformaldehyd und 0,1% Triton X-100] enthielt, für eine Stunde fixiert. Die Zellen wurden für 10 Minuten mit DAPI (1 μg/ml) gefärbt. Die Zellkerne wurden mit Fluoreszenzmikroskopie (mit einem Fluoreszenzmikroskop, Modell Ax70 TRF, hergestellt von Olympus Optical, Japan) bei einer Vergrößerung von 1:400 analysiert. Charakteristische apoptotische Zellkerne sind mit Pfeilen markiert.
Was 4A betrifft, werden unbehandelte Molt-4-Zellen gezeigt.
Was 4B betrifft, wurden Molt-4-Zellen mit JA bei 2 mM für 14 Stunden behandelt. Behandlung mit JA löste Kondensation und Fragmentierung von Chromatin aus.
Was 4C betrifft, wurden Molt-4-Zellen mit MJ bei 0,5 mM für 14 Stunden behandelt. Behandlung mit MJ zerstörte die Zellkernmorphologie in fast allen Zellen vollständig.
Diese Ergebnisse bestätigen, dass JA und MJ apoptotischen Tod bei Molt-4-Zellen verursachten, basierend auf dem Anstieg der Caspase-3-Aktivität, die eines der Kennzeichen der Apoptose ist, und auf charakteristischen morphologischen Veränderungen.
Von SA wurde berichtet, dass es bei myeloische-Leukämie-Zelllinien und bei chronisch lymphozytischen Leukämie-B-Zellen Apoptose und Aktivierung von Caspasen auslöst. Es gibt auch Hinweise, dass SA Apoptose steigert und bei FS-4-Zellen über p38 Apoptose verursacht (Schwenger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 4, 2869–2873, 1997). In jenen Untersuchungen machen, auf Inkubation mit Salicylatkonzentrationen, die höher sind als diejenigen, die im Plasma von Patienten erzielt werden, die auf entzündliche Erkrankungen behandelt werden, unterschiedliche Zelllinien Apoptose durch. In der vorliegenden Erfindung wurden Salicylatkonzentrationen verwendet, die mit denjenigen vergleichbar sind, die im Plasma erzielt wurden. Dies kann den Unterschied zwischen Untersuchungen, wobei SA Apoptose auslöste, und unseren Ergebnissen erklären.
Beispiel 5 – Jasmonate sind für normale Lymphozyten nicht schädlich
Die vorstehend gezeigten Ergebnisse beweisen, dass Phyto-Stresshormone die Fähigkeit besitzen, Krebszellen nachteilig zu beeinflussen. Die Wirkung dieser Pflanzenprodukte wurde an normalen Zellen getestet, um zu bestimmen, ob Jasmonate ebenso auf nicht-kanzeröse Zellen eine nachteilige cytotoxische Wirkung aufweisen.
Normale Lymphozyten wurden folgendermaßen von peripherem Blut getrennt: Mononukleäre Zellen (MNC) aus venösem Blut von gesunden Spendern wurden mit Ficoll-Hypaque(Phamacia Fine Chemicals, Uppsala, Schweden)-Dichtegradientenzentrifugation gesammelt. Die resultierende mononukleäre Zellzubereitung ließ man an Plastikschalen anhaften, um verunreinigende Makrophagen zu entfernen. Die nicht-anhaftenden peripheren Blutlymphozyten wurden zur Verwendung ausgewählt.
Vor der Behandlung mit JA und MJ wurden die normalen Lymphozyten mit TPA (5 ng/ml) und PHA (0,8 μg/ml) für 48 Stunden stimuliert, um die Lymphozyten zu veranlassen zu proliferieren (und so mit unsterblichen malignen Zellen vergleichbar zu sein). Normale Lymphozyten und Molt-4-Zellen wurden in Platten mit 96 Vertiefungen ausgebracht (mit 1,5 × 10⁴/Vertiefung).
Jasmonate oder Salicylsäure wurden mit einer Konzentration von 1 mM oder 3 mM zugegeben und die Zellen wurden für 24 Stunden inkubiert. Die optische Dichte, die lebensfähige Zellen repräsentiert, wurde mit dem wässrigen, nicht-radioaktiven Zellproliferationstests CellTiter 96 bestimmt.
Jedes Phyto-Stresshormon löste bei Molt-4-Zellen signifikante Cytotoxizität aus, P < 0,05, während keines der Hormone bei normalen Lymphozyten eine signifikante Cytotoxizität auslöste.
Was 5 betrifft, wurden normale Blutlymphozyten (dargestellt durch ausgefüllte Balken) praktisch nicht von Phyto-Stresshormonen beeinflusst, im Gegensatz zu den transformierten Molt-4-Lymphoblastenleukämiezellen (dargestellt durch leere Balken).
5A zeigt Behandlung mit SA bei Konzentrationen von 1 mM und 3 mM.
5B zeigt Behandlung mit JA bei Konzentrationen von 1 mM und 3 mM und 5C zeigt Behandlung mit MJ bei Konzentrationen von 1 mM und 3 mM.
Siehe ebenso Tabelle 1, die die Selektivität der Jasmonate für maligne Zellen versus gesunde Zellen veranschaulicht.
In diesem Beispiel wurde der Einfluss der Phyto-Stresshormone auf transformierte Lymphozyten (Molt-4-Zellen) verglichen, versus ihren Einfluss auf normale, aus peripherem Blut extrahierten Lymphozyten. Normale Lymphozyten (die mit TPA/PHA stimuliert worden waren, um Proliferation auszulösen) wurden von SA und Jasmonaten nicht beeinflusst, im Gegensatz zu den transformierten Lymphozyten. Diese Daten unterstützen die mögliche Verwendung von Phyto-Stresshormonen als selektive Antikrebsmittel.
Beispiel 6 – Jasmonate sind für normale Erythrozyten nicht schädlich
Die Wirkung von Jasmonsäure, Methyljasmonat und cis-Jasmon wurde an normalen menschlichen Erythrozyten untersucht. Zu diesem Zweck wurde ein Test eingeführt, welcher Beschädigung an Erythrozyten über die Freisetzung von Hämoglobin beurteilt. Letzteres wurde spektrophotometrisch bei 412 nm gemessen. Als positive Kontrolle wurde destilliertes Wasser verwendet, um völlige Hämolyse auszulösen und die Freisetzung von Hämoglobin zu generieren. Keines der Jasmonate verursachte Hämoglobinfreisetzung aus normalen menschlichen Erythrozyten von drei unterschiedlichen Spendern. Und das, wenn Jasmonate in Konzentrationen angewandt wurden, in denen sie cytotoxische Wirkungen bei Krebszellen (0,5–3 mM) verursachen. Somit sind Jasmonate, neben ihrer Unschädlichkeit für normale menschliche Lymphozyten (wie in Beispiel 5 gezeigt), nicht schädlich für Erythrozyten, wodurch sie ihre selektive Wirkung gegen Krebszellen weiter zeigen.
Beispiel 7 – In-Vivo-Versuche bei Mäusen
Syngene Lymphomzellen wurden einer Testgruppe und einer Kontrollgruppe von Mäusen (Stamm C57BL) injiziert. Die Injektionen wurden entweder subkutan verabreicht oder intraperitoneal. Methyljasmonat wurde oral, durch Injektion direkt in den resultierenden Tumor oder in das Bauchfell verabreicht und die Wirkung auf die Tumorprogression und auf die Überlebensrate wurde analysiert.
400.000 EL-4 Lymphomzellen wurden 20 Testmäusen, oder 19 Kontrollmäusen, des C57BL-Stamms intraperitoneal injiziert.
Vorversuche hatten gezeigt, dass Methyljasmonat bei einer Dosierung von 236–472 mg/kg Körpergewicht für die Verhinderung des Tumorwachstums geeignet war. Deshalb wurde Methyljasmonat in einem Fettträger (0,4% Lipofundin, hergestellt von B. Brown, Melsungen, Deutschland) gelöst und oral bei einer Dosierung von 236 mg/kg Körpergewicht verabreicht. Die Verabreichung erfolgte täglich, über das Trinkwasser, beginnend mit dem Tag der Injektion der Lymphomzellen.
19 Kontrollmäuse erhielten nur den Fettträger (0,4% Lipofundin), ohne darin gelöstes Methyljasmonat.
Die Überlebenszeit von jeder Gruppe der Mäuse wurde gemessen (in Tagen) und analysiert.
Was 6 betrifft, wird ein Kaplan & Meier Survivorship-Funktionsdiagramm gezeigt, das den kumulativen Prozentsatz des Überlebens in jeder Gruppe im Laufe des Versuchs veranschaulicht. Die Überlebensraten waren signifikant höher für die behandelte Gruppe (dargestellt durch Kreuze und durch den Buchstaben „T"), versus der Kontrollgruppe (dargestellt durch Kreise und durch den Buchstaben „C"); wie gesehen werden kann, wurde beispielsweise das Plateau von 50% Überleben von der behandelten Gruppe am 33sten Tag erreicht, im Gegensatz zu dem von der Kontrollgruppe erreichten Plateau von 20% Überleben.
Die Signifikanz dieser Ergebnisse wurde statistisch analysiert, unter Verwendung von zwei hoch-stringenten statistischen Mitteln der Analyse, dem Log-Rank-Test und dem Cox-Mantel-Test. Jeder dieser Tests gewichtet numerisch die Bedeutung eines Tods innerhalb einer der zwei Gruppen von Mäusen, an einem gegebenen Tag, verglichen mit der Anzahl an überlebenden Mäusen im Ganzen.
Die Signifikanz der Ergebnisse wurde für hoch erachtet, p = 0,01492 für den Log-Rank-Test und p = 0,00953 für den Cox-Mantel-Test (wobei ein Ergebnis als signifikant betrachtet wird, falls p < 0,05).
Schließlich erläutern Beispiele 1–7 die Wirkung der strukturell verschiedenartigen Phyto-Stresshormone, Jasmonate und Salicylat, auf Zellproliferation und Lebensfähigkeit bei mehreren verschiedenartigen Krebszelllinien. Es gab vier Haupt-Feststellungen. Erstens, alle untersuchten Stresshormone teilen die Fähigkeit, die Proliferation von Krebszellen nachteilig zu beeinflussen. Jasmonsäure (JA) löste Tod bei Lymphoblastenleukämiezellen aus und verursachte die Unterdrückung der Zellproliferation bei den anderen vorstehend erwähnten menschlichen Krebszellen. Methyljasmonat (MJ) löste Tod bei jeder der Zelllinien aus. Die Phytohormone agierten dosisabhängig in der folgenden Reihenfolge der Sensibilität: Lymphoblastenleukämie > Prostatakrebs > Melanom > Brustkrebs. Zweitens, der durch Jasmonate bei Molt-4-Zellen verursachte Tod wurde als apoptotisch bestimmt, ähnlich dem Mechanismus, den die meisten chemotherapeutischen Arzneistoffe auf der zellulären Ebene einsetzen. Drittens, Jasmonate verursachen keine Beschädigung an normalen Lymphozyten oder Erythrozyten. Viertens, Jasmonate sind nicht nur in vitro wirksam, sondern auch in einem Tiermodell für Lymphom, wobei sie die Überlebensrate signifikant steigern (um das 2,25fache) unter Verwendung einer Dosierung, die bei Mäusen für sicher erachtet wird.

Claims

Verwendung einer Jasmonatverbindung der Formel I:
Formel I zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von menschlichem Brustkrebs, Hautkrebs, Darmkrebs, Lungenkrebs, Bauchspeicheldrüsenkrebs, Lymphoma, Leukämie, Kopf- und Halskrebs, Nierenkrebs, Eierstockkrebs, Knochenkrebs, Leberkrebs oder Schilddrüsenkrebs bei Säugern, wobei: n 0, 1 oder 2 ist; R₁ OH, Alkoxy, O-Glucosyl oder Imino ist, R₂ OH, O, Alkoxy oder O-Glucosyl ist, R₃, R₄ und R₅ H, OH, Alkoxy oder O-Glucosyl sind, und/oder wobei R₁ und R₂ oder R₁ und R₄ zusammen ein Lacton bilden, und ferner wobei die Bindungen zwischen C₃:C₇, C₄:C₅ und C₉:C₁₀ Doppel- oder Einfachbindungen sein können; oder eines Derivats der Formel, wobei das Derivat mindestens eines der Folgenden aufweist: eine Niederacylseitenkette am C₃ (freie Säure oder Ester oder Konjugat), eine Keto- oder Hydroxy-(freie Hydroxy- oder Ester-)Einheit am C₆-Kohlenstoff, oder eine n-Pentenyl- oder n-Pentylseitenkette am C₇.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei das Jasmonat ausgewählt ist aus Methyljasmonat, Jasmonsäure, Jasmon, 7-iso-Jasmonsäure, 9,10-Dihydrojasmonsäure, 2,3-Didehydrojasmonsäure, 3,4-Didehydrojasmonsäure, 3,7-Didehydrojasmonsäure, 4,5-Didehydrojasmonsäure, 4,5-Didehydro-7-iso-jasmonsäure, Cucurbinsäure, 6-Epicucurbinsäure, 6-Epicucurbinsäurelacton, 12-Hydroxyjasmonsäure, 12-Hydroxyjasmonsäurelacton, 11-Hydroxyjasmonsäure, 8-Hydroxyjasmonsäure, Homojasmonsäure, Dihomojasmonsäure, 11-Hydroxydihomojasmonsäure, 8-Hydroxydihomojasmonsäure, Tuberonsäure, Tuberonsäure-O-β-glucopyranosid, Cucurbinsäure-O-β-glucopyranosid, 5,6-Didehydrojasmonsäure, 6,7-Didehydrojasmonsäure, 7,8-Didehydrojasmonsäure, cis-Jasmon, Methyldihydroisojasmonat, Dihydrojasmon, Aminosäurekonjugaten der Jasmonsäure und den Niederalkylestern, den Träger-Ligand-Konjugaten und den Stereoisomeren davon.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei der Wirkstoff in einem verträglichen Fettträger gelöst wird.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung zusätzlich mindestens ein anderes chemotherapeutisches Mittel umfasst.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung zur oralen Verabreichung hergestellt wird.
Verwendung gemäß Anspruch 5, wobei die Zusammensetzung in Form, ausgewählt aus einer Emulsion, einer Lösung, einer Kapsel, einer Tablette, vorliegt.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung zur Verabreichung durch Injektion hergestellt wird.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung zur topischen Verabreichung hergestellt wird.
Verwendung gemäß Anspruch 8, wobei die Zusammensetzung in Form, ausgewählt aus einer Salbe, eines Gels oder einer Creme vorliegt.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung für die Verabreichung durch Inhalation hergestellt wird.
Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung für die Verabreichung durch Zäpfchen hergestellt wird.