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Die
vorliegende Erfindung betrifft eine neue Verwendung von Trifluridin
zur Behandlung von HIV.
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Im
Jahr 1981 wurde das erworbene Immunschwächesyndrom (AIDS) als Erkrankung
erkannt, die das menschliche Immunsystem stark schädigt und
in vielen Fällen
zum Tod des Patienten führt.
Seitdem wurden mehr als 40 Millionen Menschen mit dem menschlichen
Immunschwächevirus
(HIV) infiziert und etwa 12 Millionen Menschen sind an AIDS gestorben.
Im Jahr 1997 wurden etwa 6 Millionen Menschen mit HIV infiziert und
etwa 2,3 Millionen Menschen, einschließlich 460000 Kinder, starben
an AIDS (J.M. Mann et al., Scientific American, Juli 82, 1998).
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Im
Jahr 1985 wurde darüber
berichtet, dass ein synthetisches 3'-Desoxynukleosid, 3-Azid-3'-desoxythymidin (AZT), bei der Inhibierung
einer HIV-Infektion effektiv ist. Seitdem haben sich auch andere
Verbindungen wie z.B. 2',3'-Didesoxyinosin (ddl),
2',3'-Didesoxycytidin
(ddC), 3'-Fluor-3'-desoxythymidin (FLT)
und 2',3'-Didesoxy-2',3'-didehydrothymidin
(d4T) als anti-HIV-Arzneistoffe
als wirksam erwiesen.
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Diese
anti-HIV-Arzneistoffe weisen jedoch viele Mängel auf. Beispielsweise weisen
anti-HIV-Arzneistoffe
wie z.B. AZT eine starke Toxizität
auf, welche die Menge begrenzt, die klinisch verabreicht werden
kann. Daher können
die Arzneistoffe manchmal nicht an Patienten verabreicht werden,
oder selbst wenn sie verwendet werden können, muss deren Verabreichung
häufig
bei vielen Patienten gestoppt werden. Darüber hinaus neigen arzneistoffresistente
virale Stämme
dazu, sich während
einer Monotherapie mit solchen anti-HIV-Arzneistoffen schnell zu
entwickeln, und es gibt auch eine Kreuzresistenz z.B. zwischen AZT
und d4T und zwischen AZT und ddC. Darüber hinaus neigen Patienten
dazu, begleitend zu AIDS verschiedene Komplikationen zu entwickeln.
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Trifluridin
ist eine Verbindung, die erstmals von Heiderberger et al. (Journal
of American Chemical Society, Band 84, 3597 (1962)) synthetisiert
worden ist, und von dieser Verbindung ist bekannt, dass sie eine
starke Antitumoraktivität
in vitro aufweist (Cancer Research, Band 28, 2529 (1968)). Es ist
auch bekannt, dass diese Verbindung eine starke antivirale Aktivität gegen
das Herpes simplex-Virus und das Vaccinia-Virus aufweist, bei denen
es sich um DNA-Viren handelt (Science, Band 145, 585 (1964), Pergamon
Press, New York 1990, 1182–1201).
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Von
Trifluridin ist jedoch bekannt, dass es durch Thymidinphosphorylase
in der Leber, im Dünndarm, usw.,
schnell zersetzt und inaktiviert wird (Cancer Research, Band 32,
247 (1972); Japanese Journal of Cancer and Chemotherapy, Band 8,
262 (1981) und Band 8, 1548 (1981)). In klinischen Versuchen zeigte
Trifluridin unzureichende Antitumoreffekte (Cancer Chemotherapy
Report, Band 55, 205 (1971)).
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Suzuki
et al. (Proceedings of the American Association for Cancer Research
Annual, Band 38, 101 (1997)) beschreiben ein anti-Tumormittel, das
5-Trifluorthymidin und einen Inhibitor einer Thymidinphosphorylase
umfasst. EP A 1 080 726 beschreibt die Verwendung eines Mittels
zur Linderung von Nebenwirkungen, die durch die Verwendung eines
anti-Tumormittels
verursacht werden. EP A 0 763 529 betrifft Uracilderivate mit inhibierenden
Effekten auf vom Menschen stammende Thymidinphosphorylase und ein
anti-Tumormittel, das diese enthält.
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Die
gegenwärtig
zugelassene medizinische Anwendung von Trifluridin ist auf ein ophthalmisches
Präparat
für Herpes-Keratitis
beschränkt,
die durch eine Herpes simplex-Virusinfektion (HSV-Infektion) verursacht wird,
bei dem es sich um eine lokale ophthalmische Behandlung handelt
und das folglich frei von einer Zersetzung durch Thymidinphosphorylase
ist (The Lancet, Band 21, 1189 (1987); Physicians Desk Reference,
50. Auflage, 1204 (1996); American Journal of Ophthalmology, Band
73, 932 (1972); Journal of Acquired Immune Deficiency Syndromes
and Human Retrovirology, Band 12, 147 (1996)).
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Bisher
war es nicht bekannt, dass Trifluridin zur Behandlung einer HIV-Infektion,
bei der es sich um die Ursache von AIDS handelt, geeignet ist.
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Eine
Aufgabe der Erfindung ist die Bereitstellung einer neuen anti-HIV-Zusammensetzung.
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Andere
Aufgaben und Merkmale der Erfindung ergeben sich aus der folgenden
Beschreibung.
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Zur
Lösung
der Probleme des Standes der Technik haben die Erfinder der vorliegenden
Erfindung umfangreiche Forschungen bezüglich synthetischer 2'-Desoxynukleoside
im Hinblick auf verschiedene Aspekte durchgeführt und gefunden, dass Trifluridin
und Derivate davon eine starke anti-HIV-Aktivität aufweisen. Die Erfinder haben
ferner gefunden, dass die Verwendung eines Thymidinphosphorylaseinhibitors
in Kombination mit Trifluridin oder dessen Derivaten die Nebenwirkungen
von Trifluridin und dessen Derivaten vermindern kann, und auch die
in vivo-Konzentration von Trifluridin auf einem Niveau halten kann,
das für
die Behandlung einer HIV-Infektion effektiv ist, wodurch die anti-HIV-Aktivität von Trifluridin
und Derivaten davon verstärkt
wird. Die vorliegende Erfindung beruht auf diesen neuen Erkenntnissen.
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Die
vorliegende Erfindung stellt die Verwendung von mindestens einem
Vertreter, ausgewählt
aus Trifluridin und Derivaten davon, zur Herstellung eines Medikaments
zur Behandlung von HIV bereit.
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Die
vorliegende Erfindung stellt ferner die Verwendung von (a) mindestens
einem Vertreter, ausgewählt
aus Trifluridin und Derivaten davon, und (b) einem Thymidinphosphorylaseinhibitor
zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von HIV bereit.
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Die
erfindungsgemäß definierte
anti-HIV-Zusammensetzung ist zur Behandlung von Syndromen nach einer
HIV-Infektion geeignet.
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Das
Trifluridin oder das Derivat davon, das als Wirkstoff der erfindungsgemäßen anti-HIV-Zusammensetzung verwendet
wird, kann Trifluridin oder jedwede Verbindung sein, die in vivo
in Trifluridin umgewandelt wird.
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Bevorzugte
Beispiele von Trifluridin und Derivaten davon sind Verbindungen,
die durch die
dargestellt werden, wobei
R
1 und R
2 gleich
oder unterschiedlich sein können
und Wasserstoff, Acyl, Niederalkyl, Alkoxyniederalkyl, Tetrahydrofuryl,
Tetrahydropyranyl, Triphenylmethyl, Benzyloxyniederalkyl, Tetrahydrofuryloxyniederalkyl,
Niederalkylcarbamoyl, Niederalkoxycarbonyl, trisubstituiertes Silyl,
disubstituierte Phosphorsäuregruppe,
Benzyl oder Benzoyl sind, wobei die drei Substituenten der trisubstituierten
Silylgruppe und die zwei Substituenten der disubstituierten Phosphorsäuregruppe
aus Niederalkyl, Phenyl und Benzyl ausgewählt sind und gleich oder unterschiedlich
sein können;
R
3 Wasserstoff, Tetrahydrofu ryl oder Benzoyl
darstellt; wenn R
1 oder R
2 Benzyl
ist, kann die Benzylgruppe einen oder mehrere Substituenten, ausgewählt aus
Niederalkyl, Niederalkoxy und Halogen, aufweisen; wenn R
1, R
2 oder R
3 Benzoyl ist, kann die Benzoylgruppe einen
oder mehrere Substituenten, ausgewählt aus Niederalkyl, Niederalkoxy
und Halogen, aufweisen.
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Von
den Verbindungen der Formel (1) ist Trifluridin eine Verbindung,
bei der R1, R2 und
R3 alle Wasserstoff sind. Die Verbindungen
der Formel (1), die von dieser Verbindung verschieden sind, werden
in vivo in Trifluridin umgewandelt und wirken folglich als Prodrugs
von Trifluridin.
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Geeignete
Trifluridinderivate umfassen auch die anti-Tumorverbindungen, die
in den japanischen ungeprüften
Patentveröffentlichungen
Nr. 152898/1983, 36696/1984, 216899/1984, 56996/1985 und 261396/1989
und in WO 90/00557 beschrieben sind.
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In
der Verbindung der Formel (1) kann dann, wenn R1 oder
R2 Acyl ist, das Acyl eine geradkettige
oder verzweigte Acylgruppe sein, die vorzugsweise 2 bis 20 Kohlenstoffatome,
insbesondere 2 bis 10 Kohlenstoffatome aufweist. Spezielle Beispiele
umfassen Acetyl, n-Butyryl, i-Butyryl, t-Butyl, Hexanoyl, Isohexanoyl
und Decanoyl.
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Wenn
R1 oder R2 Niederalkyl
ist, dann kann das Niederalkyl eine geradkettige oder verzweigte
C1-6-Alkylgruppe sein. Spezielle Beispiele
umfassen Methyl, Ethyl, n-Propyl, i-Propyl, n-Butyl, i-Butyl, sec-Butyl, t-Butyl,
Hexyl und Isohexyl.
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Wenn
R1 oder R2 Alkoxyniederalkyl
ist, dann kann das Alkoxyniederalkyl eine geradkettige oder verzweigte
C1-6-, insbesondere C1-3-Alkylgruppe
sein, die mit einer geradkettigen oder verzweigten C1-6-Alkoxygruppe
substituiert ist. Beispiele für
die Alkoxy-Substituentengruppe umfassen Methoxy, Ethoxy, n-Butoxy, i-Butoxy
und t-Butoxy. Beispiele für
die Alkoxyniederalkylgruppe umfassen Methoxymethyl, Ethoxymethyl
und 1-Ethoxyethyl.
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Wenn
R1 oder R2 Benzyloxyniederalkyl
ist, dann kann das Benzyloxyniederalkyl eine geradkettige oder verzweigte
C1-6-, insbesondere C1-3-Alkylgruppe
sein, die mit einer Benzyloxygruppe substituiert ist. Spezielle Beispiele
umfassen Benzyloxymethyl und 1-Benzyloxyethyl.
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Wenn
R1 oder R2 Tetrahydrofuryloxyniederalkyl
ist, dann kann das Tetrahydrofuryloxyniederalkyl eine geradkettige
oder verzweigte C1-6-, insbesondere C1-3-Alkylgruppe sein, die mit einer Tetrahydrofuryloxygruppe substituiert
ist. Spezielle Beispiele umfassen Tetrahydrofuryloxymethyl.
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Wenn
R1, R2 oder R3 Tetrahydrofuryl ist, umfassen Beispiele
dafür 2-Tetrahydrofuryl.
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Wenn
R1 oder R2 Tetrahydropyranyl
ist, umfassen Beispiele dafür
2-Tetrahydropyranyl.
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Wenn
R1 oder R2 Niederalkylcarbamoyl
ist, dann kann das Niederalkylcarbamoyl eine Carbamoylgruppe sein,
die mit einer oder zwei geradkettigen oder verzweigten C1-6-Alkylgruppen substituiert ist. Spezielle
Beispiele umfassen Methylcarbamoyl, Ethylcarbamoyl, n-Butylcarbamoyl, i-Butylcarbamoyl,
t-Butylcarbamoyl, Hexylcarbamoyl und Isohexylcarbamoyl.
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Wenn
R1 oder R2 Niederalkoxycarbonyl
ist, dann kann das Niederalkoxycarbonyl eine Carbonylgruppe sein,
die mit einer geradkettigen oder verzweigten C1-6-Alkoxylgruppe
kombiniert ist. Spezielle Beispiele umfassen Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl,
n-Butoxycarbonyl, i-Butoxycarbonyl, t-Butoxycarbonyl, Hexyloxycarbonyl
und Isohexyloxycarbonyl.
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Wenn
R1 oder R2 trisubstituiertes
Silyl ist, dann kann das trisubstituierte Silyl eine Silylgruppe
mit drei identischen oder unterschiedlichen Substituenten sein,
die aus C1-6-Niederalkyl, Phenyl und Benzyl
ausgewählt
sind. Spezielle Beispiele umfassen Triethylsilyl, t-Butyldimethylsilyl,
Triphenylsilyl, Tribenzylsilyl, Benzyldimethylsilyl und Diphenylmethylsilyl.
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Wenn
R1 oder R2 eine
disubstituierte Phosphorsäuregruppe
ist, dann ist die disubstituierte Phosphorsäuregruppe eine Phosphorsäuregruppe
mit zwei identischen oder unterschiedlichen Substituenten, die aus C1-6-Niederalkyl, Phenyl und Benzyl ausgewählt sind.
Spezielle Beispiele umfassen eine Diethylphosphorsäuregruppe,
eine Diphenylphosphorsäuregruppe
und eine Dibenzylphosphorsäuregruppe.
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Wenn
R1, R2 oder R3 Benzoyl ist, oder wenn R1 oder
R2 Benzyl ist, kann das Benzoyl und das
Benzyl 1 bis 5 Substituenten, vorzugsweise 1 bis 2 Substituenten
aufweisen, der bzw. die aus Niederalkyl, Niederalkoxy und Halogen
ausgewählt
ist bzw. sind. Die Niederalkyl-Substituentengruppe
kann eine geradkettige oder verzweigte C1-6-,
vorzugsweise C1-4-Alkylgruppe sein. Spezielle Beispiele
umfassen Methyl, Ethyl, n-Propyl, i-Propyl, n-Butyl, i-Butyl, sec-Butyl
und t-Butyl. Die Niederalkoxy-Substituentengruppe umfasst eine geradkettige
oder verzweigte C1-6-Alkoxygruppe. Spezielle
Beispiele umfassen Methoxy, Ethoxy, n- Propoxy, i-Propoxy, n-Butoxy, i-Butoxy,
sec-Butoxy und t-Butoxy. Der Halogenatomsubstituent umfasst Fluor,
Chlor, Brom und Iod.
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Die
substituierte Benzoylgruppe umfasst 4-Fluorbenzoyl, 4-Chlorbenzoyl,
3-Fluorbenzoyl, 2-Methoxybenzoyl,
4-Methylbenzoyl und 4-Butylbenzoyl.
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Von
den Verbindungen der Formel (1) sind Verbindungen bevorzugt, bei
denen R1 und R2 gleich
oder unterschiedlich sein können
und Wasserstoff, Acetyl oder 2-Tetrahydrofuryl sind, und R3 2-Tetrahydrofuryl, Benzoyl, 4-Fluorbenzoyl,
4-Chlorbenzoyl, 3-Fluorbenzoyl, 2-Methoxybenzoyl, 4-Methylbenzoyl oder
4-Butylbenzoyl ist; Verbindungen, bei denen R1 und
R2 gleich oder unterschiedlich sein können und
Wasserstoff, Hexyl, 4-Methylbenzoyl, 2-Tetrahydrofuryl oder t-Butyldimethylsilyl
sind und R3 Wasserstoff ist, und die Verbindung,
bei der R1, R2 und
R3 alle Wasserstoff sind.
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In
die anti-HIV-Zusammensetzung der Erfindung kann ein Thymidinphosphorylaseinhibitor
zusammen mit Trifluridin oder Derivaten davon einbezogen werden,
wobei es die anti-HIV-Aktivität von Trifluridin
und Derivaten davon verstärkt.
Beispiele für
den Inhibitor umfassen jedwede Verbindungen, welche die Nebenwirkungen
von Trifluridin oder dessen Derivaten vermindern können und
auch die in vivo-Konzentration aufrechterhalten können, bei
der Trifluridin oder dessen Derivate anti-HIV-Effekte erzeugen kann
bzw. können.
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Als
Thymidinphosphorylaseinhibitor der Erfindung werden z.B. 6-Amino-5-bromuracil,
6-Aminothymin, 6-Amino-5-chloruracil,
3-Cyano-2,6-dihydroxypyridin, Acyclothymidin oder pharmazeutisch
verträgliche
Salze dieser Verbindungen bevorzugt verwendet.
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Beispiele
für Verbindungen,
die als Thymidinphosphorylaseinhibitor der Erfindung bevorzugt verwendet
werden, umfassen ferner Pyrimidindionderivate, die durch die Formel
dargestellt werden, wobei
R
4 Chlor, Brom, Iod, Cyano oder Niederalkyl
ist. R
5 ist eine 4- bis 8-gliedrige heterocyclische
Gruppe, die 1 bis 3 Stickstoffatome enthält und gegebenenfalls einen
oder mehrere Substituenten, ausgewählt aus Niederalkyl, Imino,
Hydroxyl, Hydroxymethyl, Methansulfonyloxy, Amino und Nitro, aufweist, eine
Amidinothiogruppe, wobei eines oder mehrere der Wasserstoffatome
an dem Stickstoffatom durch Niederalkylgruppen substi tuiert sein
kann bzw. können,
eine Guanidinogruppe, wobei ein oder mehrere Wasserstoffatom(e)
an dem Stickstoffatom durch Niederalkyl- oder Cyanogruppen substituiert
sein kann bzw. können, eine
Niederalkylamidinogruppe, eine Aminogruppe, wobei ein oder mehrere
Wasserstoffatom(e) an dem Stickstoffatom durch Niederalkylgruppen
substituiert sein kann bzw. können,
-CH
2N(Ra)(Rb) (wobei Ra und Rb gleich oder
unterschiedlich sein können
und Wasserstoff oder Niederalkyl sind oder Ra und Rb, zusammen mit dem
Stickstoffatom an das sie gebunden sind, einen Pyrrolidinring bilden
können),
-NH-(CH
2)
m-Z (wobei
Z eine Cyanogruppe oder eine Aminogruppe ist, wobei eines oder mehrere
der Wasserstoffatome an dem Stickstoffatom durch Niederalkylgruppen
substituiert sein kann bzw. können,
und m eine ganze Zahl von 0 bis 3 ist), -NRc(CH
2)
n-OH (wobei Rc Wasserstoff oder Niederalkyl
ist und n eine ganze Zahl von 1 bis 4 ist), eine Gruppe -X-Y (wobei
X S oder NH ist und Y gegebenenfalls Niederalkyl-substituiertes
2-Imidazolin-2-yl, 2-Imidazolyl, 1-Methylimidazol-2-yl, 1,2,4-Triazol-3-yl, 2-Pyrimidyl
oder 2-Benzimidazolyl ist) oder Ureido oder Thioureido ist, wobei
eines oder mehrere der Wasserstoffatome an dem Stickstoffatom durch
Niederalkylgruppen substituiert sein kann bzw. können, und pharmazeutisch verträgliche Salze
davon.
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Dieser
Thymidinphosphorylaseinhibitor ist eine bekannte Verbindung, die
in Biochemical Pharmacology, Band 29, 1059 (1980), den japanischen
ungeprüften
Patentveröffentlichungen
Nr. 250324/1988 und 213761/1993 und WO 96/30346 beschrieben ist.
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In
dem Pyrimidindionderivat der Formel (2) ist R4 ein
Niederalkyl, wobei das Niederalkyl eine geradkettige oder verzweigte
C1-4-Alkylgruppe sein kann. Spezielle Beispiele
umfassen Methyl, Ethyl, n-Propyl, i-Propyl, n-Butyl, i-Butyl, sec-Butyl
und t-Butyl. Methyl ist besonders bevorzugt.
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Wenn
R5 eine 4- bis 8-gliedrige heterocyclische
Gruppe mit 1 bis 3 Stickstoffatomen ist, umfassen spezielle Beispiele
1-Azetidinyl, 1-Pyrrolidinyl, 2-Pyrrolin-1-yl, 3-Pyrrolin-1-yl,
1-Pyrrolyl, 1-Pyrazolidinyl,
2-Pyrazolin-1-yl, 3-Pyrazolin-1-yl, 4-Pyrazolin-1-yl, 1-Pyrazolyl,
1-Imidazolidinyl,
2-Imidazolin-1-yl, 3-Imidazolin-1-yl, 4-Imidazolin-1-yl, 1-Imidazolyl,
1,2,3-Triazol-1-yl,
1,2,4-Triazol-1-yl, Piperidino, 1-Piperazyl, Morpholino, 1-Perhydroazepinyl
und 1-Perhydroazocinyl.
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Die
heterocyclische Gruppe kann einen oder zwei Substituenten am Ring
aufweisen. Beispiele für Substituenten
umfassen Niederalkyl, Imino, Hydroxyl, Hydroxymethyl, Methansulfonyloxy,
Amino und Nitro. Die Niederalkyl-Substituentengruppe kann eine geradkettige
oder verzweigte C1-4-Alkylgruppe sein und
spezielle Beispiele umfassen Methyl, Ethyl, n-Propyl, i-Propyl, n-Butyl,
i-Butyl, sec-Butyl und t-Butyl. Methyl ist besonders bevorzugt.
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Spezielle
Beispiele für
heterocyclische Gruppen, die einen oder zwei Substituenten aufweisen
können, umfassen
1-Azetidinyl, 1-Pyrrolidinyl, 2,5-Dimethylpyrrolidin-1-yl, 2-Iminopyrrolidin-1-yl,
3-Hydroxypyrrolidin-1-yl, 2-Hydroxymethylpyrrolidin-1-yl, 3-Methansulfonyloxypyrrolidin-1-yl,
3-Aminopyrrolidin-1-yl, 2-Pyrrolin-1-yl, 3-Pyrrolin-1-yl, 2-Imino-3-pyrrolin-1-yl,
1-Pyrrolyl, 1-Pyrazolidinyl, 2-Methylpyrazolidin-1-yl, 4-Iminopyrazolidin-1-yl,
2-Pyrazolin-1-yl, 3-Pyrazolin-1-yl, 2-Methyl-3-pyrazolin-1-yl, 5-Imino-3-pyrazolin-1-yl,
4-Pyrazolin-1-yl, 2-Methyl-4-pyrazolin-1-yl,
3-Imino-4-pyrazolin-1-yl, 1-Pyrazolyl, 1-Imidazolidinyl, 3-Methylimidazolidin-1-yl,
2-Iminoimidazolidin-1-yl, 2-Imino-3-methylimidazolidin-1-yl, 2-Imino-3-ethylimidazolidin-1-yl,
2-Imino-3-isopropylimidazolidin-1-yl, 2-Imidazolin-1-yl, 3-Imidazolin-1-yl, 4-Imidazolin-1-yl,
3-Methyl-4-imidazolin-1-yl, 2-Imino-4-imidazolin-1-yl, 2-Imino-3-methyl-4-imidazolin-1-yl,
2-Imino-3-ethyl-4-imidazolin-1-yl, 2-Imino-3-isopropyl-4-imidazolin-1-yl, 1-Imidazoly,
2-Methylimidazol-1-yl, 2-Nitroimidazol-1-yl, 4-Nitroimidazol-1-yl, 1,2,3-Triazol-1-yl, 1,2,4-Triazol-1-yl,
3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl, Piperidino, 1-Piperazyl, 4-Methylpiperazin-1-yl, Morpholino,
1-Perhydroazepinyl und 1-Perhydroazocinyl. Bevorzugt sind 1-Azetidinyl,
1-Pyrrolidinyl, 2-Iminopyrrolidin-1-yl, 2-Iminoimidazolidin-1-yl,
2-Imino-3-methylimidazolidin-1-yl,
2-Imino-3-ethylimidazolidin-1-yl, 2-Imino-3-isopropylimidazolidin-1-yl,
2-Imidazolin-1-yl, 2-Imino-3-methyl-4-imidazolin-1-yl, 2-Imino-3-ethyl-4-imidazolin-1-yl
und 1-Imidazolyl.
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Wenn
R5 eine Amidinothiogruppe ist, bei der eines
oder mehrere der Wasserstoffatome am Stickstoffatom durch eine entsprechende
Anzahl von Niederalkylgruppen substituiert sein kann bzw. können, können ein
bis drei der drei Wasserstoffatome am Stickstoffatom der Amidinothiogruppe
durch die vorstehend beispielhaft angegebenen Niederalkylgruppen
substituiert werden. Amidinothio, N1-Methylamidinothio
und N1,N2-Dimethylamidinothio
sind besonders bevorzugt.
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Wenn
R5 eine Guanidinogruppe ist, bei der eines
oder mehrere der Wasserstoffatome am Stickstoffatom durch eine entsprechende
Anzahl von Niederalkyl- oder Cyanogruppen substituiert sein kann
bzw. können,
können
ein bis vier der vier Wasserstoffatome der Guanidinogruppe durch
eine entsprechende Anzahl der vorstehend beispielhaft angegebenen
Niederalkylgruppen oder durch Cyano substituiert werden. 1-Guanidino, 1-Methylguanidino,
3-Methylguanidino,
2,3-Dimethylguanidino und 2-Cyano-3-methylguanidino sind besonders
bevorzugt.
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Wenn
R5 ein Niederalkylamidino ist, dann ist
das Niederalkylamidino eine Amidinogruppe, an die eine Niederalkylgruppe
gebunden ist, wie sie vorstehend beispielhaft angegeben worden ist.
Acetoamidino ist besonders bevorzugt.
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Wenn
R5 eine Aminogruppe ist, bei der eines oder
mehrere der Wasserstoffatome am Stickstoffatom durch eine entsprechende
Anzahl von Niederalkylgruppen substituiert sein kann bzw. können, können ein
oder zwei der zwei Wasserstoffatome der Aminogruppe durch eine entsprechende
Anzahl der vorstehend beispielhaft angegebenen Niederalkylgruppen
substituiert werden. Besonders bevorzugt sind Amino, N-Methylamino, N,N-Dimethylamino,
N-Ethylamino, N,N-Diethylamino,
N-Propylamino und N-Isopropylamino.
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Wenn
R5 -CH2N(Ra)(Rb)
ist, sind bevorzugte Beispiele N-Methylaminomethyl, N,N-Dimethylaminomethyl
und 1-Pyrrolidinylmethyl.
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Wenn
R5 -NH-(CH2)m-Z ist, sind bevorzugte Beispiele N,N-Dimethylhydrazino,
N-(2-Aminoethyl)amino, N-(2-(N,N-Dimethyl)aminoethyl)amino,
N-(3-Aminopropyl)amino und N-(2-Cyanoethyl)amino.
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Wenn
R5 -NRc(CH2)n-OH ist, sind bevorzugte Beispiele N-(2-Hydroxyethyl)-N-methylamino,
N-(3-Hydroxypropyl)amino und N-(4-Hydroxybutyl)amino.
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Wenn
R5 eine -X-Y-Gruppe ist, sind bevorzugte
Beispiele 2-Imidazolin-2-thio, 2-Imidazolin-2-amino, Imidazol-2-thio, 1-Methylimidazol-2-thio,
1,2,4-Triazol-3-thio, Pyrimidin-2-thio und Benzimidazol-2-thio.
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Wenn
R5 Ureido oder Thioureido ist, bei dem ein
oder mehrere Wasserstoffatome) am Stickstoffatom durch eine entsprechende
Anzahl an Niederalkylgruppen ersetzt werden kann bzw. können, umfassen
bevorzugte Beispiele 3-Methylthioureido.
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Vorzugsweise
ist R5 in der Formel (2) eine 4- bis 8-gliedrige
heterocyclische Gruppe, die 1 bis 3 Stickstoffatome enthält und gegebenenfalls
einen oder mehrere Substituenten aufweist, der bzw. die aus Niederalkyl,
Imino, Hydroxyl, Hydroxymethyl, Methansulfonyloxy, Amino und Nitro
ausgewählt
ist bzw. sind; eine Amidinothiogruppe, bei der eines oder mehrere
der Wasserstoffatome an dem Stickstoffatom durch eine entsprechende
Anzahl von Niederalkylgruppen substituiert sein kann bzw. können; eine
Guanidinogruppe, bei der eines oder mehrere der Wasserstoffatome
an dem Stickstoffatom durch eine entsprechende Anzahl von Niederalkylgruppen
oder Cyanogruppen substituiert sein kann bzw. können; oder eine Niederalkylamidinogruppe.
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Insbesondere
ist R5 vorzugsweise 1-Azetidinyl, 1-Pyrrolidinyl,
2-Iminopyrrolidin-1-yl, 2-Iminoimidazolidin-1-yl,
2-Imino-3-methylimidazolidin-1-yl, 2-Imino-3-ethylimidazolidin-1-yl,
2-Imino-3-isopropylimidazolidin-1-yl,
2-Imidazolin-1-yl, 2-Imino-3-methyl-4-imidazolin-1-yl, 2-Imino-3-ethyl-4-imidazolin-1-yl,
1-Imidazolyl, Amidinothio, N1-Methylamidinothio,
N1,N2-Dimethylamidinothio,
1-Guanidino, 1-Methylguanidino, 3-Methylguanidino, 2,3-Dimethylguanidino
oder Acetoamidino.
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Das
Pyrimidindionderivat der Formel (2) ist vorzugsweise eine Verbindung,
bei der R4 Chlor, Brom oder Cyano und R5 1-Pyrrolidinyl, 1-Azetidinyl, 2-Iminopyrrolidin-1-yl,
2-Iminoimidazolidin-1-yl, 1-Imidazolyl, Amidinothio oder 1-Guanidino
ist.
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Das
pharmazeutisch verträgliche
Salz des Pyrimidindionderivats ist nicht speziell beschränkt. Bevorzugt
sind Säureadditionssalze
und/oder basische Salze, die durch Umsetzen des Pyrimidindionderivats
mit einer pharmazeutisch verträglichen
Säure oder
einer basischen Verbindung gebildet werden. Beispiele für solche
Säureadditionssalze
umfassen Salze anorganischer Säuren
wie z.B. Chlorwasserstoffsäure,
Schwefelsäure,
Phosphorsäure
und Bromwasserstoffsäure;
Salze organischer Säuren
wie z.B. Oxalsäure,
Maleinsäure,
Fumarsäure, Äpfelsäure, Weinsäure, Zitronensäure, Benzoesäure, Essigsäure, p-Toluolsulfonsäure und Methansulfonsäure. Bevorzugt
sind Salze von Chlorwasserstoffsäure
oder p-Toluolsulfonsäure.
Beispiele für basische
Salze umfassen Salze von Alkalimetallen oder Erdalkalimetallen wie
z.B. Natrium, Kalium, Magnesium und Calcium; Salze von Aminen wie
z.B. Ammoniak, Methylamin, Dimethylamin, Piperidin, Cyclohexylamin und
Triethylamin.
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Von
den Verbindungen, die als Thymidinphosphorylaseinhibitor verwendbar
sind, sind die Verbindungen der Formel (2) bevorzugt, einschließlich 5-Chlor-6-(2-iminopyrrolidin-1-yl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindion,
5-Brom-6-(1-pyrrolidinyl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindion, 5-Cyano-6-(2-iminopyrrolidin-1-yl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindion,
5-Chlor-6-(2-iminoimidazolidin-1-yl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindion
oder pharmazeutisch verträgliche
Salze dieser Verbindungen.
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Von
den Verbindungen, die als Thymidinphosphorylaseinhibitor verwendbar
sind, sind insbesondere 5-Chlor-6-(2-iminopyrrolidin-1-yl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindionhydrochlorid
und 5-Chlor-6-(2-iminopyrrolidin-1-yl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindiontosylat
bevorzugt.
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In
der vorliegenden Erfindung kann mindestens ein Vertreter, ausgewählt aus
Trifluridin und Derivaten davon, und der Thymidinphosphorylaseinhibitor
in den gewünschten
Einheitsdosierungsformen separat formuliert und unabhängig oder
gleichzeitig verabreicht werden. In dem Fall einer unabhängigen Verabreichung kann
der Thymidinphosphorylaseinhibitor zu jeder Zeit vor oder nach der
Verabreichung von Trifluridin oder eines Derivats davon verabreicht
werden. Der Thymidinphosphorylaseinhibitor wird vorzugsweise innerhalb
eines Zeitraums von etwa 4 Stunden vor bis etwa 4 Stunden nach der
Verabreichung von Trifluridin oder eines Derivats davon verabreicht,
mehr bevorzugt etwa 1 Stunde vor bis etwa 1 Stunde nach der Verabreichung.
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Alternativ
kann eine anti-HIV-Zusammensetzung, die mindestens einen Vertreter,
ausgewählt
aus Trifluridin und Derivaten davon, und den Thymidinphosphorylaseinhibitor
enthält,
in der gewünschten
Einheitsdosierungsform formuliert und verabreicht werden. In diesem
Fall ist das Mischungsverhältnis
des mindestens einen Vertreters, ausgewählt aus Trifluridin und Derivaten
davon, zu dem Thymidinphosphorylaseinhibitor nicht speziell beschränkt. Der
Thymidinphosphorylaseinhibitor wird jedoch üblicherweise in einem Anteil
von etwa 0,05 bis etwa 20 Mol, vorzugsweise von 0,1 bis 5 Mol pro
Mol Trifluridin oder dessen Derivat zugemischt.
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Wenn
5-Chlor-6-(2-iminopyrrolidin-1-yl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindion
oder ein pharmazeutisch verträgliches
Salz davon als Thymidinphosphorylaseinhibitor verwendet wird, beträgt das Molverhältnis des
Inhibitors zu dem mindestens einen Vertreter, ausgewählt aus
Trifluridin und Derivaten davon, üblicherweise etwa 0,05:1 bis
etwa 20:1, vorzugsweise etwa 0,1:1 bis etwa 5:1.
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Wenn
Trifluridinderivate in einer Kombination verwendet werden, wird
die Menge solcher Inhibitoren auf der Basis der Annahme berechnet,
dass die Trifluridinderivate in vivo zu 100 % in Trifluridin umgewandelt werden,
und die Menge wird bezogen auf 1 Mol Trifluridin angegeben.
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Wenn
die anti-HIV-Zusammensetzung, die als Wirkstoff mindestens einen
Vertreter, ausgewählt
aus Trifluridin und Derivaten davon, enthält, oder die anti-HIV-Zusammensetzung,
die als Wirkstoffe mindestens einen Vertreter, ausgewählt aus
Trifluridin und Derivaten davon, und den Thymidinphosphorylaseinhibitor
enthält,
als therapeutischer Arzneistoff für HIV-Infektionen in Säugern, einschließlich Menschen,
verwendet wird, kann die Zusammensetzung gemäß dem therapeutischen Zweck
zu einer pharmazeutisch geeigneten Dosierungsform formuliert werden.
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Insbesondere
kann die Zusammensetzung zu oralen Dosierungsformen wie z.B. Tabletten,
beschichteten Tabletten, Pillen, Pulvern, Granulaten, Kapseln, Flüssigkeiten,
Suspensionen und Emulsionen, und zu parenteralen Dosierungsformen
wie z.B. Injektionen und Zäpfchen
formuliert werden. Solche Dosierungsformen der Zusammensetzung können unter
Verwendung von pharmazeutisch verträglichen Trägern mit bekannten Verfahren,
die in dem Fachgebiet herkömmlich
verwendet werden, hergestellt werden.
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Bei
der Herstellung von Tabletten umfassen geeignete Träger Vehikel
wie z.B. Lactose, Saccharose, Natriumchlorid, Glucose, Harnstoff,
Stärke,
Calciumcarbonat, Kaolin, kristalline Cellulose und Kieselsäure; Bindemittel
wie z.B. Wasser, Ethanol, Propanol, Maisstärke, einfacher Sirup, flüssige Glucose,
flüssige
Stärke, Gelatinelösung, Carboxymethylcellulose,
Schellack, Methylcellulose, Hydroxypropylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose,
Kaliumphosphat und Polyvinylpyrrolidon; Sprengmittel wie z.B. getrocknete
Stärke,
Natriumalginat, Agar-Pulver, Laminaran-Pulver, Natriumhydrogencarbonat,
Calciumcarbonat, Polyoxyethylensoribtanfettsäureester, Natriumlaurylsulfat,
Stearinsäuremonoglycerid,
Stärke
und Lactose; Zerfallsinhibitoren wie z.B. Saccharose, Stearinsäure, Kakaobutter
und hydriertes Öl;
Absorptionsbeschleuniger wie z.B. eine quartäre Ammoniumbase und Natriumlaurylsulfat;
Feuchthaltemittel wie z.B. Glycerin und Stärke; Adsorptionsmittel wie z.B.
Stärke,
Lactose, Kaolin, Bentonit und kolloidale Kieselsäure; und Gleitmittel wie z.B.
gereinigter Talk, Stearinsäuresalz,
Borsäurepulver
und Polyethylenglykol. Die Tabletten können ferner zu beschichteten
Tabletten verarbeitet werden, wie z.B. Zucker-beschichteten Tabletten,
Gelatinebeschichteten Tabletten, Darmtabletten, Film-beschichteten
Tabletten, doppelschichtigen Tabletten oder mehrschichtigen Tabletten.
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Wenn
Pillen durch Formen hergestellt werden, umfassen geeignete Träger Vehikel
wie z.B. Glucose, Lactose, Stärke,
Kakaobutter, hydriertes pflanzliches Öl, Kaolin und Talk; Bindemittel
wie z.B. Gummiarabicumpulver, Tragantpulver, Gelatine und Ethanol;
und Sprengmittel wie z.B. Laminaran und Agar.
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Kapseln
werden üblicherweise
in einer herkömmlichen
Weise durch Mischen des Wirkstoffs der Erfindung mit einem oder
mehreren Träger(n),
die vorstehend beispielhaft genannt worden sind, und Einkapseln des
Gemischs in Hartgelatinekapselschalen, Weichkapselschalen, usw.,
hergestellt.
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Wenn
orale flüssige
Präparate
hergestellt werden, umfassen geeignete Additive Korrigentien, Puffer, Stabilisatoren,
Aromakorrigentien, usw., und orale Lösungen, Sirupe und Elixiere können mit
herkömmlichen Verfahren
hergestellt werden. Als Korrigentien sind weißer Zucker, Bitterorangenschale,
Zitronensäure,
Weinsäure,
usw., geeignet. Geeignete Puffer umfassen Natriumcitrat und geeignete
Stabilisatoren umfassen Tragantgummi, Gummiaraibcum und Gelatine.
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Bei
der Herstellung von Zäpfchen
umfassen geeignete Träger
Polyethylenglykol, Kakaobutter, einen höheren Alkohol oder Ester davon,
Gelatine und halbsynthetisches Glycerid.
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Wenn
das pharmazeutische Präparat
in einer injizierbaren Form bereitgestellt werden soll, wie z.B.
einer Lösung,
einer Emulsion oder einer Suspension, wird das Präparat vorzugsweise
sterilisiert und bezüglich Blut
isotonisch gemacht. Verdünnungsmittel,
die für
ein solches Präparat
verwendet werden können,
sind z.B. Wasser, wässrige
Milchsäurelösung, Ethanol,
Propylenglykol, Macrogole, ethoxylierter Isostearylalkohol, polyoxylierter
Isostearylalkohol und Polyoxyethylensorbitanfettsäureester.
In diesem Fall kann der pharmazeutischen Zusammensetzung Natriumchlorid,
Glucose oder Glycerin in einer Menge zugesetzt werden, die ausreichend
ist, um eine isotonische Lösung
bereitzustellen. Herkömmliche
Lösungsvermittler,
Puffer, Anästhetika und
dergleichen können
der pharmazeutischen Zusammensetzung ebenfalls zugesetzt werden.
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Ferner
können
in die pharmazeutische Zusammensetzung Farbmittel, Konservierungsmittel,
Aromastoffe, Geschmacksstoffe, Süßungsmittel
oder andere Medikamente einbezogen werden.
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Die
Mengen des mindestens einen Vertreters, ausgewählt aus Trifluridin und Derivaten
davon, und des Thymidinphosphorylaseinhibitors in der pharmazeutischen
Zusammensetzung der Erfindung sind nicht besonders kritisch und
können
aus einem breiten Bereich zweckmäßig ausgewählt werden.
Im Allgemeinen beträgt die
Menge jeder dieser Verbindungen in der pharmazeutischen Zusammensetzung
vorzugsweise etwa 1 bis 70 Gew.-%.
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Die
anti-HIV-Zusammensetzung der Erfindung wird an Säuger, einschließlich Menschen,
verabreicht. Bezüglich
des Verabreichungsmodus gibt es keine Beschränkung. Ein geeigneter Modus
kann gemäß der Dosierungsform,
dem Alter des Patienten, dem Geschlecht des Patienten und anderen
Faktoren, und der Schwere der Erkrankung ausgewählt werden. Beispielsweise
werden Tabletten, Pillen, Pulver, Granulate, Kapseln, Lösungen (Flüssigkeiten),
Suspensionen und Emulsionen oral verabreicht. Die Präparate in
injizierbarer Form werden einzeln oder in einem Gemisch mit einer
herkömmlichen
Infusionsflüssigkeit
wie z.B. flüssiger
Glucose oder einer Aminosäureflüssigkeit
intravenös
verabreicht. Ferner werden die In jektionen gegebenenfalls einzeln intraarteriell,
intramuskulär,
intradermal, subkutan oder intraperitoneal verabreicht. Die Zäpfchen werden
intrarektal verabreicht.
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Die
Dosierung der Wirkstoffe der anti-HIV-Zusammensetzung der Erfindung
kann zweckmäßig gemäß dem Verabreichungsmodus,
dem Alter des Patienten, dem Geschlecht des Patienten und anderen
Faktoren, und der Schwere der Erkrankung ausgewählt werden. Die Dosierung des
Trifluridinderivats beträgt üblicherweise
etwa 0,01 bis etwa 50 mg pro kg Körpergewicht und Tag für einen
erwachsenen Menschen, vorzugsweise etwa 0,1 bis etwa 20 mg/kg/Tag.
Die Dosierung des Thymidinphosphorylaseinhibitors beträgt üblicherweise etwa
0,01 bis etwa 100 mg pro kg Körpergewicht
und Tag für
einen erwachsenen Menschen, vorzugsweise etwa 0,05 bis etwa 50 mg/kg/Tag.
Diese pharmazeutischen Präparate
der Erfindung können
einmal täglich oder
in 2 bis 4 aufgeteilten Dosen pro Tag verabreicht werden.
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Nachstehend
sind Referenzbeispiele, Formulierungsbeispiele und Testbeispiele
angegeben, um die Erfindung detaillierter zu veranschaulichen.
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Referenzbeispiel 1
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Synthese von 5-Chlor-6-(2-iminopyrrolidin-1-yl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindionhydrochlorid
(Verbindung 1)
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Sulfurylchlorid
(120 ml) wurde einer Suspension von 163 g 6-Chlormethyluracil in
500 ml Essigsäure bei
Raumtemperatur während
20 min tropfenweise zugesetzt und 3 Stunden bei dieser Temperatur
gerührt. Das
Reaktionsgemisch wurde in Eiswasser (500 ml) gegossen und die resultierenden
Kristalle wurden mittels Filtration gesammelt, wobei 182,3 g 5-Chlor-6-chlormethyluracil
erhalten wurden (Ausbeute: 92 %). Die physikalischen Eigenschaften
dieser Verbindung sind wie folgt:
Schmp.: ≥ 225°C (Zersetzung).
NMR-Spektrum
(DMSO-d6) δ: 4,46 (2H, s), 11,57 (1H, s),
11,71 (1H, s).
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Eine
Lösung
von 5,0 g 5-Chlor-6-chlormethyluracil, 6,14 g 2-Iminopyrrolidin
und 5,24 g Natriumethoxid in 50 ml N,N-Dimethylformamid wurde 14
Stunden bei Raumtemperatur gerührt.
Die resultierenden Kristalle wurden mittels Filtration gesammelt
und in 30 ml Wasser suspendiert. Die Suspension wurde mit Essigsäure neutralisiert
und gewaschen. Die unlöslichen
Substanzen wurden mittels Filtration gesammelt und in 60 ml 1N-Chlorwasserstoffsäure gelöst. Nach
der Zugabe von Aktivkohle wurde das resultierende Gemisch filtriert. Das
Filtrat wurde unter vermindertem Druck konzentriert und der Rückstand
wurde mit Ethanol gewaschen und mittels Filtration gesammelt, wobei
2,68 g der gewünschten
Verbindung erhalten wurden (Ausbeute: 38 %). Die physikalischen
Eigenschaften dieser Verbindung sind wie folgt:
Schmp.: ≥ 255°C (Zersetzung).
NMR-Spektrum
(DMSO-d6) δ: 2,04 (2H, Quintett, J = 7,6
Hz), 2,87 (2H, t, J = 7,6 Hz), 3,59 (2H, t, J = 7,6 Hz), 4,69 (2H,
s), 9,40 (1H, s), 11,46 (1H, s), 11,73 (1H, s).
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Referenzbeispiel 2
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Synthese von 5-Chlor-6-(2-iminopyrrolidin-1-yl)methyl-2,4(1H,3H)-pyrimidindiontosylat
(Verbindung 2)
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Das
Verfahren von Referenzbeispiel 1 wurde wiederholt, jedoch wurde
anstelle von 1N-Chlorwasserstoffsäure p-Toluolsulfonsäure verwendet.
Die Titelverbindung wurde in einer Ausbeute von 26 % erhalten. Die physikalischen
Eigenschaften dieser Verbindung sind wie folgt:
Schmp.: ≥ 210°C (Zersetzung).
NMR-Spektrum
(DMSO-d
6) δ: 2,05 (2H, Quintett, J = 7,7
Hz), 2,29 (3H, s), 2,87 (2H, t, J = 7,7 Hz), 3,60 (2H, t, J = 7,7
Hz), 4,56 (2H, s), 7,11 (2H, d, J = 7,3 Hz), 7,47 (2H, d, J = 7,3
Hz), 9,51 (1H, br s), 11,0–11,8
(2H, sehr breit). Formulierungsbeispiel
1 (Formulierung mit einem Wirkstoff zur oralen Verabreichung)
| Trifluridin | 30,0
mg |
| Lactose | 8,0
mg |
| Kristalline
Cellulose | 4,0
mg |
| Magnesiumstearat | 1,0
mg |
| Talk | 1,0
mg |
| Maisstärke | 3,5
mg |
| Hydroxyprogylmethylcellulose | 2,5 mg |
| Pro
Tablette | 50,0
mg |
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Mit
der vorstehenden Formulierung wurden Tabletten in einer herkömmlichen
Weise hergestellt. Formulierungsbeispiel
2 (Formulierung mit einem Wirkstoff zur oralen Verabreichung)
| Im
Referenzbeispiel 1 erhaltene Verbindung 1 | 14,0
mg |
| Lactose | 4,0
mg |
| Kristalline
Cellulose | 2,0
mg |
| Magnesiumstearat | 1,0
mg |
| Talk | 1,0
mg |
| Maisstärke | 3,5
mg |
| Hydroxypropylmethylcellulose | 2,5 mg |
| Pro
Tablette | 28,0
mg |
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Mit
der vorstehenden Formulierung wurden Tabletten in einer herkömmlichen
Weise hergestellt. Formulierungsbeispiel
3 (Formulierung mit mehreren Wirkstoffen zur oralen Verabreichung)
| Trifluridin | 50,0
mg |
| Im
Referenzbeispiel 1 erhaltene Verbindung 1 | 24,0
mg |
| Lactose | 83,0
mg |
| Maisstärke | 100,0
mg |
| Hydroxypropylmethylcellulose | 3,0 mg |
| Pro
Packung | 240,0
mg |
-
Mit
der vorstehenden Formulierung wurde ein Granulat in einer herkömmlichen
Weise hergestellt. Formulierungsbeispiel
4 (Formulierung mit mehreren Wirkstoffen zur oralen Verabreichung)
| Trifluridin | 10,0
mg |
| Im
Referenzbeispiel 1 erhaltene Verbindung 1 | 180,0
mg |
| Lactose | 83,0
mg |
| Maisstärke | 100,0
mg |
| Hydroxypropylmethylcellulose | 3,0
mg |
| Pro
Packung | 376,0
mg |
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Mit
der vorstehenden Formulierung wurde ein Granulat in einer herkömmlichen
Weise hergestellt. Formulierungsbeispiel
5 (Formulierung mit mehreren Wirkstoffen zur oralen Verabreichung)
| Trifluridin | 30,0
mg |
| Im
Referenzbeispiel 2 erhaltene Verbindung 2 | 140,0
mg |
| Lactose | 24,0
mg |
| Kristalline
Cellulose | 13,0
mg |
| Magnesiumstearat | 1,0 mg |
| Pro
Kapsel | 208,0
mg |
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Mit
der vorstehenden Formulierung wurden Kapseln in einer herkömmlichen
Weise hergestellt. Formulierungsbeispiel
6 (Formulierung mit mehreren Wirkstoffen zur oralen Verabreichung)
| Trifluridin | 20,0
mg |
| Im
Referenzbeispiel 1 erhaltene Verbindung 1 | 1,0
mg |
| Lactose | 4,0
mg |
| Kristalline
Cellulose | 2,0
mg |
| Magnesiumstearat | 1,0
mg |
| Talk | 1,0
mg |
| Maisstärke | 3,0
mg |
| Hydroxypropylmethylcellulose | 2,0 mg |
| Pro
Tablette | 34,0
mg |
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Mit
der vorstehenden Formulierung wurden Tabletten in einer herkömmlichen
Weise hergestellt. Formulierungsbeispiel
7 (Formulierung mit mehreren Wirkstoffen zur Injektion)
| Trifluridin | 5,0
mg |
| Im
Referenzbeispiel 1 erhaltene Verbindung 1 | 1,0
mg |
| Destilliertes Wasser zur Injektion | auffüllen |
| Pro
Ampulle | 5,0
ml |
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Mit
der vorstehenden Formulierung pro Ampulle wurde eine Injektion in
einer herkömmlichen
Weise hergestellt. Formulierungsbeispiel
8 (Formulierung mit mehreren Wirkstoffen für Zäpfchen)
| Trifluridin | 50,0
mg |
| Im
Referenzbeispiel 1 erhaltene Verbindung 1 | 24,0
mg |
| Witepsol
W-35 (Handelsbezeichnung, ein | |
| Produkt von Dynamit Nobel AG) | 1426,0 mg |
| Pro
Zäpfchen | 1500,0
mg |
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Mit
der vorstehenden Formulierung wurde ein Zäpfchen in einer herkömmlichen
Weise hergestellt.
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Pharmakologischer Test
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Testbeispiel 1
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Antivirale Aktivität gegen
den HIV GUN-1-Stamm (Jpn. J. Cancer Res., Band 78, 11–15 (1987))
und den HIV IIIB-Stamm (Science, Band 224, 497–500 (1984)) in MT-2-Zellen
und MT-4-Zellen (Nature, Band 294, 770–771 (1981))
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MT-2-Zellen
und MT-4-Zellen wurden bei 2 × 105 Zellen/ml in RPMI 1640-Medium (mit 10 %
fetalem Kälberserum
(FCS) ergänzt) überführt. Jeweils
500 μl des
Mediums wurde eine unterschiedliche Konzentration einer Trifluridinlösung (nachstehend
als FTD bezeichnet) oder einer trifluridinfreien Lösung zugesetzt.
Die Zellen wurden bei 37°C
kultiviert. Eine Stunde später
wurden die Zellen mit einer Infektionsmultiplizität von 0,05 (MOI
= 0,05) mit HIV infiziert und 2 Tage bei 37°C kultiviert. Abstriche von
MT-2-Zellen und MT-4-Zellen wurden hergestellt und bezüglich HIV-positiver
Zellen mittels eines Fluoreszenz-Antikörpertests getestet (Science, Band
229, 563 (1985)). 3'-Azid-3'-desoxythymidin (nachstehend
als AZT abgekürzt)
wurde als Positivkontrolle verwendet.
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Die
relative Infektionsrate (%), ausgedrückt als Prozentsatz, wurde
aus der Anzahl der HIV-infizierten Zellen
in der mit dem Arzneistoff behandelten Gruppe bezogen auf die Anzahl
der infizierten Zellen in der mit der arzneistofffreien Lösung behandelten
Gruppe als Kontrollgruppe mit der folgenden Gleichung berechnet: Relative Infektionsrate (%) = (N1/N2) × 100, wobei
N1 die Anzahl der HIV-positiven Zellen in
der mit dem Testarzneistoff behandelten Gruppe und N2 die Anzahl
der HIV-positiven Zellen in der Kontrollgruppe ist.
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Als
Indikation der anti-HIV GUN-1-Aktivität zeigt die Tabelle 1 die Infektionsraten
(%) der Testgruppen, die mit den Testarzneistofflösungen mit
unterschiedlichen Konzentrationen behandelt worden sind, bezogen auf
die Infektionsrate (100 %) der Kontrollgruppe.
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Als
Indikation der anti-HIV IIIB-Aktivität zeigt die Tabelle 2 die Infektionsraten
(%) der Testgruppen, die mit den Testarzneistofflösungen mit
unterschiedlichen Konzentrationen behandelt worden sind, bezogen
auf die Infektionsrate (100 %) der Kontrollgruppe.
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Testbeispiel 2
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Cytotoxizität gegen
MT-2-Zellen und MT-4-Zellen
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MT-2-Zellen
und MT-4-Zellen wurden bei 2 × 105 Zellen/ml in RPMI 1640-Medium (mit 10 FCS
ergänzt) überführt. Jeweils
500 μl des
Mediums wurde eine unterschiedliche Konzentration einer FTD-Lösung oder
einer FTD-freien Lösung
zugesetzt. Die Zellen wurden bei 37°C kultiviert. Zwei Tage später wurde
ein Trypanblau-Ausschlusstest durchgeführt und die Anzahl lebender
Zellen in jeder Gruppe wurde gezählt.
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Die
relative Überlebensrate
(%), ausgedrückt
als Prozentsatz, wurde aus der Anzahl der lebenden Zellen in der
mit dem Arzneistoff behandelten Gruppe bezogen auf die Anzahl der lebenden
Zellen in der mit der arzneistofffreien Lösung behandelten Gruppe als
Kontrollgruppe mit der folgenden Gleichung berechnet: Relative Überlebensrate
(%) = (N3/N4) × 100,wobei
N3 die Anzahl der lebenden Zellen in der
mit dem Testarzneistoff behandelten Gruppe und N4 die
Anzahl der lebenden Zellen in der Kontrollgruppe ist.
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Die
Tabelle 3 zeigt die Überlebensraten
(%) der Testgruppen, die mit den Testarzneistofflösungen mit unterschiedlichen
Konzentrationen behandelt worden sind, bezogen auf die Überlebensrate
(100 %) der Kontrollgruppe.
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Testbeispiel 3
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Antivirale Aktivität gegen
den HIV GUN-1-Stamm in C8166-Zellen (Salahuddinn et al., Virology,
Band 129, 51–64
(1983))
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C8166-Zellen
wurden bei 2 × 105 Zellen/ml in RPMI 1640-Medium (mit 10 %
FCS ergänzt) überführt. Jeweils
100 μl des
Mediums wurden 10 μl
einer unterschiedlichen Konzentration einer FTD-Lösung oder
einer FTD-freien Lösung
zugesetzt. Die Zellen wurden bei 37°C kultiviert. Eine Stunde später wurden
die Zellen mit einer Infektionsmultiplizität (MOI) von 0,25 (MOI = 0,25)
mit HIV infiziert und 2 Tage bei 37°C kultiviert. Dann wurde die
Anzahl der durch die HIV-Infektion induzierten Syncytia bestimmt.
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Die
relative Infektionsrate (%), ausgedrückt als Prozentsatz, wurde
aus der Anzahl der HIV-infizierten Zellen
in der mit dem Arzneistoff behandelten Gruppe bezogen auf die Anzahl
der HIV-infizierten Zellen in der mit der arzneistofffreien Lösung behandelten
Gruppe als Kontrollgruppe mit der folgenden Gleichung berechnet: Relative Infektionsrate (%) = (N5/N6) × 100, wobei
N5 die Anzahl der Syncytia in der mit dem
Testarzneistoff behandelten Gruppe und N6 die
Anzahl der Syncytia in der Kontrollgruppe ist.
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Die
Tabelle 4 zeigt die Infektionsraten (%) der Testgruppen, die mit
den Testarzneistofflösungen
mit unterschiedlichen Konzentrationen behandelt worden sind, bezogen
auf die Infektionsrate (100 %) der Kontrollgruppe.
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Testarzneistofflösungen mit
bestimmten Konzentrationen inhibierten die Bildung von Syncytia
stark. Die Zellüberlebensraten
bei solchen Konzentrationen wurden mit dem Trypanblau-Ausschlusstest bestimmt. Die
Zellüberlebensrate
(%) wurde mit der folgenden Gleichung berechnet: Überlebensrate
(%) = (N7/N8) × 100,wobei
N7 die Anzahl der lebenden Zellen in der
mit dem Testarzneistoff behandelten Gruppe und N8 die
Gesamtzahl der lebenden Zellen in der mit dem Testarzneistoff behandelten
Gruppe ist.
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Die
Tabelle 4 zeigt auch die Zellüberlebensraten
(%) bei den verschiedenen Konzentrationen der Testarzneistofflösung.
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Testbeispiel 4
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Tierversuch bezüglich der
Trifluridintoxizität-(FTD-Toxizität-)vermindernden
Wirkung des Thymidinphosphorylaseinhibitors
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FTD
allein oder in einer Kombination mit der Verbindung 1, die im Referenzbeispiel
1 hergestellt worden ist (Molverhältnis FTD/Verbindung 1 = 1/0,5)
wurde männlichen
SD-Ratten (Sprague-Dawley-Ratten) und männlichen Beagle-Hunden während 14
Tagen wiederholt oral verabreicht, um die FTD-Toxizität-vermindernde
Wirkung der Verbindung 1 zu bewerten. An SD-Ratten wurden 15, 50,
150 oder 450 mg/kg FTD allein in einer einzelnen Anwendung verabreicht
(5 Ratten pro Gruppe). Bei der kombinierten Anwendung wurden FTD +
Verbindung 1 in Mengen von 15 + 7 mg/kg, 50 + 24 mg/kg, 150 + 71
mg/kg oder 450 + 212 mg/kg verabreicht (5 Ratten pro Gruppe).
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An
Beagle-Hunde wurden 2, 6 oder 17 mg/kg FTD allein in einer einzelnen
Anwendung verabreicht (3 Hunde pro Gruppe). Bei der kombinierten
Anwendung wurden FTD + Verbindung 1 in Mengen von 17 + 8 mg/kg,
50 + 24 mg/kg oder 150 + 71 mg/kg verabreicht (3 Hunde pro Gruppe).
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Die
Tabelle 5 zeigt die maximale tolerierte Dosis, die nicht zum Tod
führte
(als FTD-Dosis ausgedrückt).
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Gemäß der Tabelle
5 verminderte der Thymidinphosphorylaseinhibitor (Verbindung 1)
die Toxizität
von FTD und durch den Thymidinphosphorylaseinhibitor wurden die
maximal tolerierten Dosen in SD-Ratten und Beagle-Hunden etwa verdreifacht.
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Die
anti-HIV-Zusammensetzung der Erfindung weist die folgenden Vorteile
auf: Trifluridin oder Derivate davon weisen eine hohe anti-HIV-Aktivität auf und
die Verwendung eines Thymidinphosphorylaseinhibitors in Kombination
mit Trifluridin oder dessen Derivaten vermindert die Nebenwirkungen
von Trifluridin und dessen Derivaten und kann auch die in vivo-Konzentration von
Trifluridin auf einem Niveau aufrechterhalten, das zur Behandlung
einer HIV-Infektion effektiv ist.
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Folglich
ist die anti-HIV-Zusammensetzung der Erfindung für die Behandlung von Syndromen
nach einer HIV-Infektion in Säugern
wie z.B. Menschen und Affen sehr effektiv.
