DE3874428T2

DE3874428T2 - Maulbeerbaumextrakte enthaltende liposomzusammensetzung.

Info

Publication number: DE3874428T2
Application number: DE8888401420T
Authority: DE
Inventors: Marc Dumas; Alain Meybeck
Original assignee: LVMH Recherche GIE
Current assignee: LVMH Recherche GIE
Priority date: 1987-06-12
Filing date: 1988-06-10
Publication date: 1993-03-11
Anticipated expiration: 2008-06-11
Also published as: JPH03501843A; DE296923T1; GR3006356T3; ES2052755T3; KR920009587B1; DE3874428D1; WO1988009654A1; KR890701090A; JP2544198B2; US5164182A; ATE80291T1; FR2616328B1; EP0296923A1; EP0296923B1; FR2616328A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft im wesentlichen eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, die einen Maulbeerbaumextrakt, vorzugsweise von Morus Alba, enthält, und eine diese enthaltende pharmazeutische, insbesondere dermatologische, Zusammensetzung mit depigmentierender oder entzündungshemmender Wirkung, oder kosmetische Zusammensetzung. Erfindungsgemäß wird ein Extrakt bevorzugt, der aus ober- oder unterirdischen Teilen des Maulbeerbaums, vorzugsweise Morus Alba L. oder Morus Rubra, erhalten ist, insbesondere den Blättern, den Stengelenden und der Rinde von Trieben oder Wurzeln.
Man weiß, daß der Maulbeerbaum von Natur aus überall in den Bergen und auf Feldern wächst. Er ist eine seit langer Zeit für die Seidenzüchtung angebaute Pflanze. Teile des Maulbeerbaums, insbesondere die Rinde seiner Wurzeln oder seiner Triebe oder Extrakte aus dieser Rinde, die auch "Sohakuhi" genannt werden, werden bereits seit sehr langer Zeit, insbesondere in der chinesischen Medizin, verwendet.
Man schreibt der getrockneten Rinde der Triebe oder Wurzeln des Maulbeerbaums oder ihren Extrakten therapeutische, insbesondere antiphlogistische, diuretische, fiebersenkende Wirkungen sowie Wirkungen als Schmerzmittel, bei der Behandlung von Bronchitis, Asthma, etc. zu.
Erst relativ kürzlich wurde im Rindenextrakt der Triebe oder Wurzeln des Maulbeerbaums, oder auch Sohakuhi, die Anwesenheit von Bleichmitteln entdeckt, die man zur Inhibition der Aktivität von Tyrosinase, einem für die Verfärbung der Haut verantwortlichem Enzym, in kosmetische Zusammensetzungen einarbeitete, wobei man eine depigmentierende Wirkung erzielte (Siehe C.A. Essential Oils, Cosmetics, Band 88, 1978, Seite 227, Abstract 88 : 65874z oder JP-A-50-135.236).
Für pharmakologische Untersuchungen siehe das Dokument Japan Journal of Pharmacology, 1976, 26 (4), 461-9 oder C.A. Band 85, 1976, Seite 48, Abstract 85:137465e. Eine Anwendung des Maulbeerbaumextraktes als Mittel gegen Diabetes ist in FR-A-2 336 941 beschrieben.
Außerdem hat man bereits zahlreiche Substanzen aus dem Rindenextrakt von Trieben oder Wurzeln des Maulbeerbaumes isoliert, von denen der Großteil Wirkstoffe darstellt. Es handelt sich im allgemeinen um Flavone, Derivate davon und insbesondere um Kuwanone.
Das erste Dokument betrifft die Isolation eines weißen kristallinen Pulvers (C.A. 45 (1951), Abstract 9513g.
Die Isolation eines gelblichweißen Pulvers ist in C.A. - 57 (1962), Abstract 3970g beschrieben.
Die Isolation von vier Flavonen ist zum ersten Mal in Tetrahedron Letters Nr. 14, S. 1715-1719, 1968 mit einem entsprechenden Abstract in Chemical Abstracts, Band 69, 1968, S. 3340, Abstract 35869s beschrieben. Andere Flavone, wie Rubraflavon A, B, C oder D, sind im Indian Journal of Chemistry, Band 12, 2. Mai 1974, S. 431-436 mit einem Abstract in C.A., Band 82, 1975, S. 557, Abstract 57520s beschrieben. *-Tocopherol wurde auch von der Rinde der Wurzeln des Maulbeerbaumes isoliert (C.A., Band 82, 1975, S. 213, Abstract 70272a). Andere Flavone, wie Mulberranol, und ein Phenol, wie Alboctalol, wurden auch noch isoliert (C.A., 86 (1977), S. 551, Abstract 86 : 139896r). In der Folge wurden weitere Flavone, wie Morusin und Cyclomorusin isoliert und in C.A., Band 87, 1977, S. 566, Abstract 87 : 167917n beschrieben.
Die Isolation von Kuwanon E ist noch in C.A., Band 89, 1978, Abstract 89 : 211925f beschrieben.
Die Isolation von Kuwanon A, B, C und von Oxidihydromorusin ist noch in C.A., Band 89, 1978, S. 429, Abstract 89 : 103271c beschrieben.
Es wurde auch die Synthese von Tetrahydrokuwanon-C-tetramethylether in Heterocycles, Band 9, Nr. 10, 1978, S. 1355-1366, beschrieben.
Eine detailliertere Beschreibung der Isolation von Kuwanon E ist noch in Heterocycles, Band 9, Nr. 9, aus 1978, gegeben.
Die Isolation von phenolischen Bestandteilen ist in C.A., Band 90, 1979, Abstract 90 : 83661y beschrieben. Die Struktur von Moracenin D, das ein spezielles Flavon bildet, ist mit dem Extraktionsverfahren und als hypotensiv wirksam in Heterocycles, Band 16, Nr. 6, 1981, und auch in C.A., Band 94, 1981, Abstract 94 : 117759m beschrieben.
Die Isolation von Mulberrofuran B ist noch in C.A., Band 95, 1981, Abstract 95 : 147106j beschrieben.
So kann man feststellen, daß der Einsatz von Wurzelrindenextrakt des Maulbeerbaumes als pharmazeutisches oder kosmetisches Produkt wohl bekannt ist, und ebenso die Isolation einer bestimmten Anzahl von aktiven Substanzen.
Für eine detaillierte Zusammenfassung der Extraktionsverfahren wird auch auf Heterocycles, Band 15, Nr. 2, 1981, s 1531 bis 1567, verwiesen.
Weiters beschreibt das Dokument C.A. Band 93, 1980, Abstract 93 : 368620 die Einkapselung von Quercetin in Liposome, um auf die Synthese von DNA und die Erzeugung von Lactat zu wirken und um den Gehalt an zyklischem 3',5'- Adenosinmonophosphat zu erhöhen.
Extrakte von Maulbeerbaumblättern (Morus Alba) wurden aufgrund von eudermischen und eutrophischen Eigenschaften auch zur Herstellung von kosmetischen Zusammensetzungen verwendet (siehe FR-A-2 582 941).
Als Produkt mit einer starken depigmentierenden Wirkung kann man auch die als "Kligman-Trio" bekannte Vereinigung von Wirkstoffen nennen, die auf einer Kombination von Vitamin A- Säure oder Tretinoin, Hydrochinon und eines Kortikoids (Dexamethason) basiert. Die Verwendung eines solchen Produkts war in der Praxis jedoch aufgrund eines erhöhten Irritationscharakters, bedingt durch die Anwesenheit von Vitamin A-Säure, die für ihren Irritationscharakter bekannt ist, und von unerwünschten Nebenwirkungen aufgrund von Hypervitaminose A beschränkt (siehe "The Journal of Investigative Dermatology", Band 73, Nr. 5, Teil I, S. 354-358, insbesondere der vorletzte Absatz der Seite 357, veröffentlicht 1979).
Gerade deswegen erklärt sich die Bedeutung von Maulbeerbaumextrakten, insbesondere der Rindenextrakte von Trieben oder Wurzeln des Maulbeerbaums, die die vorgenannten Nachteile nicht aufweisen, doch ist ihre depigmentierende Wirkung gering.
Weiters ist bereits der Einsatz von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen in pharmazeutischen Zusammensetzungen oder kosmetischen Zusammensetzungen, in denen verschiedene Wirkstoffe eingeführt sind, bekannt (FR-A-2 540 381).
Es wurde nunmehr ganz überraschend und unerwartet gefunden, daß ein Maulbeerbaumextrakt, insbesondere aus den Trieben oder Wurzeln des Maulbeerbaumes, oder jede aktive Substanz, die aus einem solchen Maulbeerbaumextrakt isoliert werden konnte, wie ein Flavon, insbesondere ein Kuwanon, eine stark verbesserte Wirkung zeigt, wann dieser Extrakt bzw. diese Substanz zumindest teilweise in einer wasserhaltigen lamellaren Lipidphase oder in Liposomen eingearbeitet ist. Dies betrifft sämtliche für Maulbeerbaumextrakte oder aus solchen Extrakten isolierte Substanzen, insbesondere Kuwanone, bekannten Wirkungen. Eine noch stärkere Verbesserung der Aktivität wurde hinsichtlich der depigmentierenden Wirkung und der entzündungshemmenden Wirkung beobachtet.
Eine derartige Verstärkungswirkung der Aktivität wird auch erhalten, wenn man in die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder in die Liposome eine Kombination von Maulbeerbaumextrakten oder einer aus solchen Extrakten isolierten aktiven Substanz mit Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, einarbeitet.
Eine merkliche Verbesserung der Aktivität wird auch noch beobachtet, wenn die Maulbeerbaumextrakte mit Hydrochinon allein oder einer Mischung von Hydrochinon mit Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, kombiniert werden.
Daher bezweckt die vorliegende Erfindung die Lösung des neuen technischen Problems, welches in der Schaffung einer neuen Formulierung eines Maulbeerbaumextraktes oder irgendeiner aus einem solchen Extrakt isolierten oder mittels chemischer Synthese rekonstituierten aktiven Substanz liegt, mit der es möglich ist, die Wirksamkeit derselben zu verstärken, um ihre Verwendung in pharmazeutischen, insbesondere dermatologischen, Zusammensetzungen mit depigmentierender oder entzündungshemmender Aktivität oder als kosmetische Zusammensetzung zu ermöglichen.
Die vorliegende Erfindung löst zum ersten Mal auf zufriedenstellende Weise dieses neue technische Problem.
So liefert die vorliegende Erfindung gemäß einem ersten Aspekt eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, die dadurch gekennzeichnet ist, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder die Liposome zumindest teilweise einen Extrakt des Maulbeerbaums, insbesondere von Morus Alba L. oder Morus Rubra, oder mindestens einen aus einem solchen Extrakt isolierten oder durch chemische Synthese erhaltenen Wirkstoff, insbesondere ein Kuwanon, enthalten.
Gemäß einem besonderen Merkmal dieser Zusammensetzung enthält diese einen Extrakt aus Blättern, Stengelenden, Rinde von Trieben oder Wurzelrinde, der durch Extraktion mit einem Lösungsmittel, vorzugsweise ausgewählt aus polaren Lösungsmitteln, insbesondere alkoholischen oder wasserhaltigen alkoholischen Lösungen oder Etherlösungen, einem organischen apolaren Lösungsmittel, wie n-Hexan oder Benzol, oder vorteilhafterweise einer Kombination von beiden, erhalten ist, wobei vorteilhafterweise an erster Stelle eine Extraktion mit einem apolaren organischen Lösungsmittel, gefolgt von einer Extraktion mit einem polaren Lösungsmittel, durchgeführt wird.
Gemäß einer vorteilhaften Ausführungsform der Erfindung ist die genannte Zusammensetzung dadurch gekennzeichnet, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen außerdem mindestens teilweise Kojisäure oder ihre Derivate, insbesondere ihre Salze oder Ester, enthalten.
Gemäß einer wieder anderen, besonders vorteilhaften Ausführungsform der Erfindung enthalten die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen mindestens teilweise Hydrochinon allein oder in Mischung mit Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern.
Gemäß einer Ausführungsvariante dieser Zusammensetzung ist diese dadurch gekennzeichnet, daß der Extrakt allein oder in Mischung mit Hydrochinon und/oder Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, in die Lipidphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingeführt ist.
Gemäß einer anderen Ausführungsvariante dieser Zusammensetzung ist diese dadurch gekennzeichnet, daß der Extrakt allein oder in Mischung mit Hydrochinon und/oder Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, in die Wasserphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingeführt ist.
Gemäß einem zweiten Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung auch eine pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung mit depigmentierender oder entzündungshemmender Wirkung; oder eine kosmetische Zusammensetzung, die dadurch gekennzeichnet ist, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder Liposomen wie zuvor definiert enthält.
Vorzugsweise beträgt der Gewichtsanteil des Trockenextraktes des Maulbeerbaumes oder jeder anderen aus einem solchen Extrakt oder mittels chemischer Synthese erhaltenen Substanz 0,005 bis 1%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung; noch bevorzugter macht er 0,005 bis 0,1% und noch besser 0,05 bis 0,1%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung.
Eine solche Zusammensetzung kann zumindest zum Teil in den wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen außerdem Kojisäure oder ihre Derivate, insbesondere ihre Salze oder Ester, vorzugsweise in einem Gehalt von 0,5 bis 4%, vorzugsweise 0,5 bis 2%, insbesondere etwa 1%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung, enthalten.
Weiters ist, wenn die Zusammensetzung Hydrochinon enthält, dieses zumindest zum Teil in den wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen in einem Gehalt von vorzugsweise 0,5 bis 6%, vorzugsweise 0,5 bis 4%, insbesondere etwa 2%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung enthalten.
Desgleichen kann diese pharmazeutische, insbesondere dermatologische, oder kosmetische Zusammensetzung gemäß einer ersten Variante dadurch gekennzeichnet sein, daß der Extrakt allein oder in Mischung mit Hydrochinon und/oder Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, in die Lipidphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingeführt ist, während gemäß einer anderen Variante der Extrakt all in oder in Mischung mit Hydrochinon und/oder Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, in die Wasserphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingeführt ist.
Die Erfindung umfaßt auch die Verfahren zur Herstellung der Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen bzw. der pharmazeutischen, insbesondere dermatologischen, Zusammensetzung mit depigmentierender oder entzündungshemmender Wirkung, oder der kosmetischen Zusammensetzung, welche dadurch gekennzeichnet sind, daß man in die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder in die Liposome zumindest teilweise einen Extrakt des Maulbeerbaums, insbesondere von Morus Alba L. oder Morus Rubra, oder mindestens eine aus einem solchen Extrakt isolierte oder durch chemische Synthese erhaltene aktive Substanz, insbesondere ein Kuwanon, einarbeitet.
In der vorliegenden Beschreibung und in den Ansprüchen umfaßt der Ausdruck "Lipid-" im Passus "lamellare Lipidphase" sämtliche Substanzen mit einer sogenannten fetten Kohlenstoffkette, nämlich im allgemeinen mehr als 5 Kohlenstoffatomen.
Erfindungsgemäß verwendet man amphiphile Lipide, d. h. solche, die aus Molekülen bestehen, welche eine ionische oder nicht ionische hydrophile Gruppe und eine lipophile Gruppe besitzen, welche amphiphilen Lipide in Gegenwart einer wässerigen Phase lamellare Lipidphasen bilden können. Insbesondere seien unter diesen Lipiden genannt: Phospholipide, Phosphoaminolipide, Glycolipide, Polyoxyethylen-Fettalkohole und Ester von Polyolen, gegebenenfalls Polyoxyethylenen. Solche Substanzen bestehen beispielsweise aus einem Ei- oder Sojalecithin, einem Phosphatidylserin, einem Sphyngomyelin, einem Cerebrosid oder einem Oxyethylen-polyglycerinstearat.
Weitere Ziele, Merkmale und Vorteile der Erfindung gehen klar aus der folgenden erläuternden Beschreibung hervor, die unter Bezugnahme auf mehrere Illustrationsbeispiele erfolgt, welche die Erfindung keineswegs einschränken sollen. In den Beispielen verstehen sich Prozentangaben, wenn nicht anders angegeben, in Gewichtsprozent

BEISPIEL 1 der Erfindung

A - Herstellung einer Pulverförmigen, einen Trockenextrakt aus Maulbeerbaumwurzelrinde enthaltenden Zusammensetzung

Als Rindenextrakt verwendet man Rinden von Maulbeerbaum trieben, einen von der japanischen Firma Marusen Seiyaku Co. Limited vertriebenen Extrakt, im vorliegenden Fall bestehend aus Lot Nr. 412033, der in Form einer durchsichtigen Flüssigkeit mit einem schwachen typischen Geruch, einer braun-gelblichen Farbe, einem pH von 4,4, einer Dichte von 0,951, einem Rückstandgehalt nach dem Eindampfen von 1,83 Gew./Vol.%,. einer UV-Absorption E 1%, 1 cm = 0,61 bei 280 nm, einem Schwermetallgehalt von maximal 10 ppm und einem Arsengehalt von maximal 2 ppm sowie einer positiven Reaktion auf den Tripenoididentifikationstest vorliegt.
Man nimmt 40 ml dieses Maulbeerbaumextraktes und dampft sie zur Trockene ein. Dann löst man diesen Trockenextrakt in 300 ml Dichlormethan, zu dem man 20 g wasserhaltiges Sojalecithin, gegebenenfalls in Anwesenheit eines lyophilen Antioxidationsmittels, z. B. von 0,6 g α-Tocopherol, gibt.
Man zerstäubt die erhaltene Lösung bei 65ºC, wie im Dokument FR-A-2 521 565 beschrieben, um etwa 21 g eines feinen Pulvers zu erzeugen.

B - Herstellung einer Zusammensetzung in Form einer vorteilhafterweise homogenisierten Liposomensuspension

Man dispergiert 20 g des in Stufe A erhaltenen Pulvers in einer auf etwa pH 7,5 gepufferten wässerigen Lösung, um zu einem Endvolumen von 500 ml zu gelangen. Im allgemeinen verwendet man eine Lösung, die 0,8% NaCl und 1,5% NaH&sub2;PO&sub4;, einen sogenannten "Phosphatpuffer", enthält, versetzt mit einem Antioxidans- Stabilisator, wie Ascorbinsäure, in einer Konzentration von 0,05%.
Man erhält so nach der Homogenisierung entweder mit Ultraschall oder in eine Homogenisator unter Druck, z. B. nach dem im Dokument FR-A-2 534 487 beschriebenen Verfahren, eine Liposomen- Suspension.
Führt man beispielsweise eine Homogenisierung mittels einer Ultraschallbehandlung 10 Minuten lang durch, erhält man eine mittlere Liposomendimension in der Größenordnung von 112 Nanometern.
Man wird beobachten, daß man verschiedene Verdünnungen herstellen kann, wenn man die Menge an zu Beginn zugegebenen Extrakten modifiziert oder wenn man das Volumen der Dispersionslösung erhöht, was ein einfaches Verfahren zur Herstellung verschiedener Extraktkonzentrationen darstellt.
In Abwesenheit einer Verdünnung erhält man nach dieser Stufe B 500 ml einer homogenisierten Suspension.

C - Herstellung einer homogenisierten Liposomenzusammensetzung in Gelform

Diese homogenisierte Suspension kann durch Mischen mit einem Gel, wie einem Vinylpolymergel, insbesondere dem unter der Handelsbezeichnung Carbopol® 940 vertriebenen Gel, in ein Gel übergeführt werden.
Zur Herstellung dieses Gels auf klassische Weise dispergiert man daher 25 g Carbopol® 940 in 500 g Wasser in Gegenwart eines Konservierungsmittels und eines üblichen Chelatierungsmittels, dann, nach dem Quellen, neutralisiert man mit Triethanolamin bei pH 7,5. Zu 500 ml der in der obigen Stufe B erhaltenen homogenisierten Suspension gibt man 500 ml des Gels, um ein Gesamtvolumen von 1000 ml zu erhalten.
In dieser gelierten Zusammensetzung beträgt die Konzentration an Trockenextrakt aus Maulbeerbaumwurzelrinden etwa 0,073% und die Konzentration an Lecithin 2%.

BEISPIEL 2

Liposomenzusammensetzung, enthaltend Maulbeerbaumwurzelrindenextrakt und Kojisäure

Man geht wie in Beispiel 1-A vor, mit der Ausnahme, daß man 10 g Kojisäure entweder direkt in den Extrakt oder vorzugsweise in Dichlormethan zugibt.
Man erhält ein Pulver, das Kojisäure mit dem Maulbeerbaumtrockenextrakt enthält.
Dieses Pulver kann nach der in Beispiel 1-B beschriebenen Vorgangsweise dispergiert werden, und dann kann die erhaltene homogene Lösung nach der Vorgangsweise des Beispiels 1-C in ein Gel übergeführt werden.

BEISPIEL 3

Liposomenzusammensetzung, enthaltend Maulbeerbaumwurzelrindenextrakt und Hydrochinon

Man geht wie in Beispiel 1-A vor, mit der Ausnahme, daß man 20 g Hydrochinon entweder direkt in den Extrakt oder vorzugsweise in Dichlormethan zugibt.
In gleicher Weise kann das erhaltene, Hydrochinon mit dem Maulbeerbaumtrockenextrakt enthaltende Pulver nach der in Beispiel 1-B beschriebenen Vorgangsweise dispergiert werden, dann kann die erhaltene homogene Lösung nach der in Beispiel 1-C beschriebenen Vorgangsweise in ein Gel übergeführt werden.

BEISPIEL 4

Liposomenzusammensetzung, enthaltend Maulbeerbaumwurzelrindenextrakt, Kojisäure und Hydrochinon

Man geht wie in Beispiel 1-A vor, mit der Ausnahme, daß man 10 g Kojisäure und 20 g Hydrochinon entweder in den Extrakt oder vorzugsweise in Dichlormethan zugibt.
Weiters gibt man nach einer bevorzugten Ausführungsform im Falle eines Zerstäubungsverfahrens 4 g Natriumsulfit und 5 g L- Ascorbinsäure als Antioxidationsmittel in die gepufferte wässerige Lösung.

BEISPIEL 5

Liposomengel, enthaltend einen Maulbeerbaumrindenextrakt

Anstatt die Wirkstoffe aus dem Maulbeerbaum in die Phospholipidphase einzuarbeiten, bringt man diese folgendermaßen in die Wasserphase ein:
Man löst 8 ml eines Rindenextraktes aus Maulbeerbaumtrieben mit einem Gehalt von etwa 1% Trockenrückstand in 100 ml Phosphatpuffer. Zu dieser Lösung gibt man 2 g einer innigen Mischung, die durch Zerstäuben (gemäß FR-A-2 521 565) von Lecithin und Sitosterin (9 : 1) erhalten wurde. Man behandelt diese Lösung mit Ultraschall, bis man eine Liposomengröße von unter 150 nm erhält. Man gibt neuerlich 100 g eines wässerigen Carbopol® 940-Gels zu.

BEISPIEL 6

Verwendung von Zusammensetzungen gemäß den Beispielen 1 bis 3 zur Bildung einer pharmazeutischen oder kosmetischen Zusammensetzung

Man untersucht die Verwendung der Zusammensetzung des Beispiels 1 als pharmazeutische, insbesondere dermatologische, oder als kosmetische Zusammensetzung, indem man die folgenden Versuchsreihen in vivo ausführt.

Nachweis der depigmentierenden Wirkung

Zur Untersuchung der depigmentierenden Aktivität der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen verwendet man entweder Hairless-Mäuse mit pigmentiertem Schwanz, die zu 90% aus dem Wurf zweier aufeinanderfolgender Kreuzungen stammen, wobei die erste Kreuzung aus einer weiblichen schwarzen Maus C57 mit einer männlichen Maus BL6-HRO oder eb-HRO aus dem Zuchtwahl- und Aufzuchtzentrum für Labortiere, abgekürzt CSEAL von CNRS, von Orleans erhalten wurde, und die Männchen aus diesem Wurf werden danach neuerlich mit einer schwarzen weiblichen Maus C57 gekreuzt.
Man kann auch Hairless-Mäuse mit pigmentierten Ohren und schwarzen Augen Skh : HR-2 verwenden, die es an der Temple University of Health Sciences Center Central Animal Facility von Philadelphia gibt.
Zur Durchführung der Versuchsreihen bringt man auf eine Pigmentzone das in Beispiel 1 erhaltene Produkt in Gelform 5 Tage pro Woche über einen Zeitraum von 6 Wochen bei einer Gruppe von sechs Mäusen auf.
Danach entnimmt man an jeder Maus mittels Biopsie Hautfragmente aus Schwanz oder Ohren in den Zonen, in denen das Produkt aufgebracht wurde, und legt diese 2 Stunden lang in eine Natriumbromidlösung, um von diesen die Epidermis abzutrennen.
Man legt Proben dieser Epidermen zwischen zwei Quarzplättchen. Man trocknet und wiegt dann ab.
Danach unterzieht man diese getrockneten und aufgelegten Epidermisfragmente einer Verdauung mittels Trypsin bei 37ºC 48 Stunden lang.
Man führt danach eine Filtration und eine Zentrifugation bei 3000 U/min 30 min lang aus.
Man sammelt den dunklen Rückstand jeder Maus und bringt diesen in der notwendigen Menge destillierten Wassers in Suspension, um die Messung der optischen Dichte zu ermöglichen. Man erhält so zehn verschiedene Proben.
Man mißt die optische Dichte dieser 10 Proben auf klassische Weise bei 400 nm.
Die für diese zehn Proben abgelesenen Werte werden danach auf 100 mg Gewicht entnommener Epidermis gebracht, und man bestimmt einen Mittelwert der optischen Dichte, welcher als einziger berücksichtigt und in die nachstehende Tabelle I aufgenommen ist.
Es wurden auch Vergleichsversuche mit einem Gel, das 0,073 Gew.% Trockenextrakt von Maulbeerbaumwurzelrinde enthielt und aus demselben Lot wie dem in Beispiel 1 verwendeten stammte (Zusammensetzung A&sub1;), durchgeführt.
Es wurde auch noch eine andere Vergleichszusammensetzung, die nur das Kontrollgel enthielt, bereitet (Zusammensetzung A&sub2;).
Selbstverständlich ist das für die Vergleichszusammensetzungen verwendete Gel identisch mit dem für die Herstellung der Zusammensetzung des Beispiels 1 verwendeten.
Bei einer anderen Vergleichszusammensetzung (Zusammensetzung A&sub3;) wird das "Kligman-Trio" verwendet, bei dem, wie schon erwähnt, Vitamin A-Säure und ein entzündungshemmendes Kortikoid (Dexamethason) in Verwendung sind.
Es wird auch die depigmentierende Aktivität durch einen Vergleich mit den mit dem Kligman-Trio erhaltenen Resultaten nach der folgenden Formel bestimmt:
Depigmentierende Wirkung = DOT - DOA/DOT - DOT.K. ·100
worin
DOA = optische Dichte, erhalten mit der getesteten aktiven Zusammensetzung (Erfindung Bsp. 1 oder Vergleichszusammensetzung A&sub1;, A&sub2; bzw. A&sub3;),
DOT = optische Dichte, erhalten mit der Kontrollzusammensetzung A&sub2;,
DOT.K. = optische Dichte, erhalten mit der Zusammensetzung A&sub3; des Kligman-Trios, welches als positive Kontrolle betrachtet wird.
Aus der Tabelle über die Versuchsergebnisse kann man ersehen, daß der Einsatz von Vitamin A-Säure die beste depigmentierende Wirksamkeit hervorruft.
Weiters verbessert ein Gel mit 0,073% Maulbeerbaumtrockenextrakt (Zusammensetzungen A&sub1;) die depigmentierende Wirkung gegenüber der Kontrollzusammensetzung (A&sub3;) nicht.
Hingegen kann eine Synergiewirkung bei Einbringen des Rindenextraktes von Maulbeerbaumwurzeln in Liposome beobachtet werden (Wert 356 gegenüber 509 bei der Kontrolle und 530 beim Gel desselben Extraktes ohne Liposome).
Man gelangt nämlich von einer nichtvorhandenen Aktivität bei der Zusammensetzung A&sub1;, bezogen auf die Referenzzusammensetzung A&sub3;, zu einer Aktivität von etwa 37% bei der erfindungsgemäßen Zusammensetzung des Beispiels 1, bezogen auf dieselbe Referenzzusammensetzung A&sub3;.
Außerdem haben die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen keine Nebenwirkungen und zeigen insbesondere nicht die Irritationswirkung der Vitamin A-Säure, die immer eine bedeutende Einschränkung bei der Verwendung des "Kligman-Trios" bedeutete.
Daher erweist sich die erfindungsgemäße Zusammensetzung von großem Vorteil als Substitut des Kligman-Trios, das die vorgenannten großen Nachteile aufweist.
Nachstehend sind verschiedene Beispiele für dermatologische und dermokosmetische Zusammensetzungen angeführt.

BEISPIEL 7

Erfindungsgemäße kosmetische Zusammensetzung gegen Flecken im Gesicht

Diese Zusammensetzung besteht aus dem im Rohzustand in Beispiel 1-C erhaltenen Gel, und man bringt sie morgens und abends auf die dunklen Flecken im Gesicht auf, bis die Flecken schwächer werden.

BEISPIEL 8

Antifleckenkrem für die Hände

Man bereitet eine Krem durch einfaches Zusammenmischen der folgenden Bestandteile in den nachstehend in Gramm angeführten Verhältnissen: - Pulver, erhalten in Beispiel 1-A 1 g (mit einem Verhältnis Lecithin: Maulbeerbaumtrockenextrakt (9, 65 : 0,35) - Phosphatpuffer 29 g - Stabilisierte W/O-Emulsion 70 g 100 g

BEISPIEL 9

Erfindungsgemäße dermokosmetische Zusammensetzung gegen Flecken

Es werden die Bestandteile in den folgenden Verhältnissen verwendet: - Pulver, erhalten in Beispiel 2 3 g (das Lecithin : Maulbeerbaumtrockenextrakt 9,65 : 0,35 mit Kojisäure enthält) - Phosphatpuffer 47 g - Gel mit Konservierungsmittel 50 g 100 g
Um die Zusammensetzung herzustellen, dispergiert man zuerst das Pulver im Phosphatpuffer, dann gibt man das Gel zu und erhält dabei eine Zusammensetzung in Gelform, gegebenenfalls unter Erhitzen gemäß den im Beispiel 1-B, 1-C beschriebenen Verfahrensweisen.

BEISPIEL 10

Erfindungsgemäße dermatologische liposomale Zusammensetzung gegen Flecken

Es werden die folgenden Bestandteile in den nachstehend in Gramm angeführten Verhältnissen verwendet: - Pulver, erhalten in Beispiel 3 4 g (das Lecithin: Maulbeerbaumtrockenextrakt 9,65 : 0,35 mit Hydrochinon enthält) - Phosphatpuffer 46 g - Gel mit Konservierungsmittel 50 g 100 g
Um zu dieser Zusammensetzung zu gelangen, wird wie in Beispiel 9 vorgegangen.
In allen diesen Beispielen 8 bis 10 wird das Pulver, das gegebenenfalls Kojisäure oder Hydrochinon enthält, gemäß dem in Beispiel 1-B beschriebenen Verfahren im Phosphatpuffer dispergiert, dann kann man nach der im Beispiel 1-C beschriebenen Verfahrensweise mit Gel gelieren. TABELLE I Resultate von Untersuchungen über die depigmentierende Aktivität Zusammensetzung Bsp. Optische Dichte pro 1000 mg Gewicht entnommene Epidermis Wirksamkeit, bezogen auf A&sub3; (ausgedrückt in %) NS = nicht signifikant

Claims

1. Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, dadurch gekennzeichnet, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder die Liposome zumindest teilweise einen Extrakt des Maulbeerbaums, insbesondere von Morus Alba L. oder Morus Rubra, oder mindestens einen aus einem solchen Extrakt isolierten oder durch chemische Synthese erhaltenen Wirkstoff, insbesondere ein Kuwanon, enthalten.

2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Extrakt aus Blättern, Stengelenden, Rinde von Trieben oder Wurzeln ist, der durch Extraktion mit einem Lösungsmittel, vorzugsweise ausgewählt aus polaren Lösungsmitteln, insbesondere alkoholischen oder wasserhaltigen alkoholischen Lösungen oder Etherlösungen, organischen apolaren Lösungsmitteln, wie n-Hexan oder Benzol, oder vorteilhafterweise einer Kombination von beiden, erhalten ist.

3. Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen außerdem mindestens teilweise Kojisäure oder ihre Derivate, insbesondere ihre Salze oder Ester, enthalten.

4. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen mindestens teilweise Hydrochinon allein oder in Mischung mit Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, enthalten.

5. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Extrakt allein oder in Mischung mit Hydrochinon und/oder Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, in die Lipidphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingeführt ist.

6. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Extrakt allein oder in Mischung mit Hydrochinon und/oder Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, in die Wasserphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingeführt ist.

7. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung mit depigmentierender oder entzündungshemmender Wirkung, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen aufweist, die zumindest teilweise einen Extrakt des Maulbeerbaums, insbesondere von Morus Alba L. oder Morus Rubra, oder mindestens einen aus einem solchen Extrakt isolierten oder durch chemische Synthese erhaltenen Wirkstoff, insbesondere ein Kuwanon, enthalten.

8. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß der Extrakt ein Extrakt aus Blättern, Stengelenden, Rinde von Trieben oder Wurzeln ist, der durch Extraktion mit einem Lösungsmittel, vorzugsweise ausgewählt aus polaren Lösungsmitteln, insbesondere alkoholischen oder wasserhaltigen alkoholischen Lösungen oder Etherlösungen, organischen apolaren Lösungsmitteln, wie n-Hexan oder Benzol, oder vorteilhafterweise einer Kombination von beiden, erhalten ist.

9. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung nach Anspruch 7 oder 8, dadurch gekennzeichnet, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen außerdem mindestens teilweise Kojisäure oder ihre Derivate, insbesondere ihre Salze oder Ester, enthalten.

10. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß die wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen mindestens teilweise Hydrochinon allein oder in Mischung mit Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, enthalten.

11. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 10, dadurch gekennzeichnet, daß der Extrakt allein oder in Mischung mit Hydrochinon und/oder Kojisäure oder ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, in die Lipidphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingeführt ist.

12. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 10, dadurch gekennzeichnet, daß der Extrakt allein oder in Mischung mit Hydrochinon und/oder Kojisäure und ihren Derivaten, insbesondere ihren Salzen oder Estern, in die Wasserphase der wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder der Liposome eingeführt ist.

13. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß der Gewichtsanteil an Maulbeerbaumextrakt 0,005 bis 1%, vorzugsweise 0,005 bis 0,1%, insbesondere 0,05 bis 0,1%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung, beträgt.

14. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 13, dadurch gekennzeichnet, daß die Kojisäure oder ihre Derivate, insbesondere ihre Salze oder Ester, 0,5 bis 4%, vorzugsweise 0,5 bis 2%, insbesondere etwa 1%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung, ausmacht.

15. Kosmetische oder pharmazeutische, insbesondere dermatologische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 14, dadurch gekennzeichnet, daß das Hydrochinon 0,5 bis 6%, vorzugsweise 0,5 bis 4%, insbesondere etwa 2%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung, ausmacht.

16. Kosmetische Zusammensetzung, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine Zusammensetzung auf Basis von wasserhaltigen lamellaren Lipidphasen oder von Liposomen, die zumindest teilweise einen Extrakt von Stengelenden, Triebrinde oder Wurzelrinde des Maulbeerbaums, insbesondere von Morus Alba L. oder Morus Rubra, oder mindestens einen aus einem solchen Extrakt isolierten oder durch chemische Synthese erhaltenen Wirkstoff, insbesondere ein Kuwanon, enthalten, umfaßt.

17. Zusammensetzung nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß sie wie in einem der Ansprüche 2 bis 6 definiert ist.

18. Zusammensetzung nach Anspruch 16 oder 17, dadurch gekennzeichnet, daß das jeweilige Gewichtsverhältnis von Maulbeerbaumextrakten, Kojisäure oder ihren Derivaten oder von Hydrochinon wie in einem der Ansprüche 13, 14 oder 15 definiert ist.