DE2949031A1 - Vakzine - Google Patents
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Description
25:49031
- 4 - 9OO-9234
Vakzinen aus Immunkomplexen und deren Verwendung
Die Erfindung betrifft Vakzinen aus Iminunkorcplexen,
die gegen Viruserkrankungen, insbesondere gegen durch Kerpes-, Myxo- oder Paramyxoviren verursachte
Erkrankungen eingesetzt werden.
Immunkomplexe entstehen durch die Bindung eines Antikörpers an sein entsprechendes Antigen, wobei je
nach der Konzentration der beiden Reaktanden lösliche oder hochmolekulare unlösliche Immunkomplexe erhalten
werden. Vorzugsweise wird bei der Bildung dieser Immunkomplexe ein Ceberschuss an Antigen eingesetzt,
insbesondere wird eine Antigenmenge eingesetzt, die kurz oberhalb des Aequivalenzbereiches der Präzipitationskurve
liegt. Es ist bekannt, dass eine Immunisierung mit Immunkomplexen zur Bildung von Antikörpern
gegen das in diesem Komplex enthaltene Antigen führt. Zur Bildung der Ircmunkoirplexe wird dabei ein Antiserum
verwendet, das von der gleichen Tierspezies stammt, welche mit den Komplexen immunisiert werden
soll. Diese Methode kann auch mit viralen Antigenen zur Erzeugung monospezifischer Antikörper verwendet werden.
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- 5 - 900-9234
Die vorliegende Erfindung basiert auf der Entdeckung, dass eine Impfung mit Immunkomplexen gegen solche
Viren, von denen der Immunkomplex hergeleitet worden ist, einen effektiven Schutz verleiht, auch gegen die
Krankheiten, die durch diese Viren verursacht v/erden.
Gegenstand der Erfindung ist eine Vakzine gegen Krankheiten, welche durch ein Virus verursacht werden,
dadurch gekennzeichnet, dass sie einen Immunkomplex aus Antikörpern und löslichen Antigenen enthält, der
von solchem Virus hergeleitet worden ist.
Zur Gewinnung der Immunkomplexe wird Material, welches
die gelösten Virusantigene enthält, mit den entsprechenden Antikörpern zur Reaktion gebracht. Die
benötigten Antikörper können aus Seren der Spezies, für welche die Vakzine verwendet werden sollen, nach
durchgemachter natürlicher Infektion oder nach Immunisierung gewonnen werden. Im Falle einer Vakzine
für Menschen können kommerzielle humane <f-Globuline
(S)
(z.B. Sandoglobulin ) als Antikörperquelle verwendet werden. Alternativ werden Spender mit hohen Antikörpertitern gegen das gewünschte Virus ausgesucht und deren Serum gepoolt. Im Falle einer Vakzine für eine tierische Spezies (z.B. Pseudorabies für Schweine), kann das benötigte Serum von Tieren gev/onnen werden, welche speziell für diesen Zweck mit dem entsprechenden Virus infiziert wurden oder mehrmals mit einem inaktivierten Virus oder auch mit einer Immunkomplexvakzine immunisiert worden sind.
(z.B. Sandoglobulin ) als Antikörperquelle verwendet werden. Alternativ werden Spender mit hohen Antikörpertitern gegen das gewünschte Virus ausgesucht und deren Serum gepoolt. Im Falle einer Vakzine für eine tierische Spezies (z.B. Pseudorabies für Schweine), kann das benötigte Serum von Tieren gev/onnen werden, welche speziell für diesen Zweck mit dem entsprechenden Virus infiziert wurden oder mehrmals mit einem inaktivierten Virus oder auch mit einer Immunkomplexvakzine immunisiert worden sind.
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- 6 - γ— ~ __ 900-9234
1Tj
Gegenstand der Erfindung ist insbesondere eine Vakzine gegen Krankheiten, die in einer Spezies durch ein
Virus verursacht werden, dadurch gekennzeichnet, dass sie einen Immunkomplex enthält, der aus einem oder
mehreren Antigenen eines solchen Virus und Antikörpern der Spezies gegen das Virus besteht.
Die Immunkomplexe der erfindungsgemässen Vakzine werden in bekannter Weise durch Kombination von Antikörpern,
z.B. in Form des Antiserums oder von V—Globulin,
mit dem löslichen Virusantigen enthaltenden Material gebildet.
Bei dem virusantigenhaltigen Material kann es sich um
a) virale Antigene, welche in das Kulturmedium sezerniert werden, oder
b) solubilisiertes ganz oder teilweise gereinigtes Virus, oder
c) solubilisierte Oberflächen-Antigene aus ganz oder teilweise
gereinigtem Virus, oder
d) solubilisierte Membranen infizierter Zellen, oder
e) solubilisierte infizierte Zellen
handeln.
Die Verfahren zur Herstellung der unter a) bis e) genannten Materialien sind alle bekannt. Beispielsweise kann folgendermassen
beim Herpes simplex-Virus verfahren werden.
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zu a) Infizierte Zellen setzen eine Reihe von Virusproteinen in das Kulturmedium frei. Nach hochtouriger
Zentrifugation des Kulturmediums zur Abtrennung von Viruspartikeln und Zelltrümmern können freigesetzte
virusspezifische Proteine aus dem üeber-
stand durch bekannte biochemische Methoden ankonzentriert und isoliert werden.
zu b) Rohe Virussuspensionen können entweder aus infizier-" c) ten Zellen oder aus deren Kulturmedien gewonnen
werden. Virus wird aus den infizierten Zellen durch
kurzfristiges Quellenlassen der Zellen in hypotonem Puffer mit nachfolgender Homogenisierung der
Zellen im Dounce-Homogenisator freigesetzt und anschliessend durch niedertouriges Zentrifugieren von
den partikularen Restbestandteilen der Zellen be
freit. Aus dem Kulturmedium wird Virus durch hochtouriges Zentrifugieren pelletiert. Die so gewonnenen
Virussupensionen können anschliessend durch Zentrifugation im Sucrose- oder Dextran-Dichtegradienten
gereinigt werden. Nach b) können die
gereinigten Viruspartikel durch Detergentien, wie z.B. Sodium-Dodecyl-Sulfat, Desoxycholat oder einer
Kombination aus mehereren solcher Detergentien, solubilisiert werden. Nach c) können die Oberflächen-Antigene,
insbesondere die Glycoproteine, durch
Detergentien solubilisiert und danach durch hochtourige Zentrifugation vom Restpartikel abgetrennt
werden.
zu d) Membranen von infizierten Zellen können nach bekannten Methoden gewonnen werden. Beispielsweise
-3 werden infizierte Zellen mit 10 M Calciumacetat-
Puffer (pH = 7,0) in physiologischer Kochsalzlösung gewaschen und danach in 0,02 M Tris-HCl-Puffer
(pH = 7,0) mit 0,01 H EDTA suspendiert. Die Zellen
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\l rs
werden in einem Dounce-Homogenisator aufgebrochen und die Kerne durch niedertouriges Zentrifugieren entfernt. Dem Ueberstand wird Sucrose bis zu einer Endkonzentration von 45% (w/w) zugesetzt. Diese Lösung wird als unterste Lage in einem diskontinuierlichen Sucrosegradienten eingesetzt und die Zellmembran-Vesikeln in diesem Gradienten durch 20-stündiges Zentrifugieren bei 26.000 g gebanded. Die Membranvesikeln enthaltende Bande wird abgehoben, 4-fach in Tris-Puffer verdünnt und das Material
werden in einem Dounce-Homogenisator aufgebrochen und die Kerne durch niedertouriges Zentrifugieren entfernt. Dem Ueberstand wird Sucrose bis zu einer Endkonzentration von 45% (w/w) zugesetzt. Diese Lösung wird als unterste Lage in einem diskontinuierlichen Sucrosegradienten eingesetzt und die Zellmembran-Vesikeln in diesem Gradienten durch 20-stündiges Zentrifugieren bei 26.000 g gebanded. Die Membranvesikeln enthaltende Bande wird abgehoben, 4-fach in Tris-Puffer verdünnt und das Material
durch hochtouriges Zentrifugieren pelletiert. Die gereinigten Zellmembranen können danach in geeigneten
Detergentien oder chaotropen Ionen solubilisiert werden (z.B. 5% Triton X-100 oder 2,5 M
Guanidin-HCl).
zu e) Infizierte Zellen werden in etwa gleichem Volumen eines Tris-Glycin-Puffers (pH = 8,4), enthaltend
5% Triton oder 2,5 M Guanidin-HCl, aufgenommen und durch Inkubation bei 37°C für 10 - 30 Minuten und
nachfolgender Ultraschallbehandlung weitgehend solubilisiert. Das solubilisierte Material wird
vom nicht-löslichen Rest durch niedertouriges und anschliessend hochtouriges (60 Minuten 100.000 g)
Zentrifugieren abgetrennt.
Das solubilisierte antigenenthaltende Material kann in bekannter Weise mit Antikörpern kombiniert werden, wie
durch Inkubation mit z.B. einem jf-Globulinpräparat,
wonach der entstandene Immunkomplex zentrifugiert wird.
Die Immunkomplexe können jedoch auch durch gekreuzte Immunelektrophorese in Agarosegel gebildet werden.
Die zu verwendenden Mengen des Antikörpermaterials, z.B.
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Antisera, und des antigenenthaltenden Materials, hängen von den gewünschten Eigenschaften des Immunkomplexes
ab, den man herstellen will.
Im allgemeinen werden in erfindungsgemässen Vakzinen solche Immunkomplexe bevorzugt, die unlöslich sind.
Im allgemeinen werden ebenfalls solche Komplexe bevorzugt, in denen das Antigen in äquivalenter Menge
oder in Ueberschussmenge vorliegt. Es werden besonders solche Komplexe bevorzugt, in denen die Antigenmengen
etwas grosser sind, als die, welche durch den Aequivalenzbereich der Prazipitationskurve bestimmt werden.
Die entstehenden Immunkomplexe können anschliessend durch an sich bekannte Methoden, z.B. Zentrifugieren,
leicht von unerwünschtem Restmaterial abgetrennt werden. Auf diese Weise ist es möglich, die gewünschten viralen
Antigene selektiv von Wirtszellmaterial und viraler DNA und RNA abzutrennen.
Die Verwendung von Immunkomplexen ist damit ein neuer Weg, Vakzinen herzustellen, welche nur die Antigene enthalten,
die für eine Schutzwirkung notwendig sind. Solche Vakzinen sind praktisch frei von Wirtszellmaterial,
welches Anlass für Nebenreaktionen und unerwünschte Sensibilisierung sein kann. Sie sind zudem praktisch frei
von viralen Nukleinsäuren und somit auch für potentiell onkogene Virusarten geeignet.
Die Vakzinen der Erfindung können in bekannter Weise zubereitet werden und können z.B. konventionelle immunologische
Zusatzmittel, wie Aluminiumhydroxid, enthalten.
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Die Dosis der Vakzinen oder besonders des Immunkomplexes,
die verabreicht wird, hängt von verschiedenen wohl bekannten Faktoren ab, wie von der Art des Virus,
wogegen Schutz verlangt wird, von der Spezies, das geschützt werden soll, und vom Grad der gewünschten
immunologischen Reaktion.
Im allgemeinen jedoch kann die geeignete Dosis für jede besondere Vakzine durch bekannte Versuche ermittelt
werden. Die Standarddosen der bekannten, für das gleiche Virus bestimmten Vakzinen können,
soweit bekannt, als Basis für die Bestimmung der geeigneten korrespondierenden Dosen der erfindungsgemässen
Vakzinen genommen werden.
Jedoch können die Vakzinen der Erfindung
manchmal eine grössere Immunität als die bekannten Vakzinen verleihen, wodurch für den gleichen Effekt
geringere Dosen bei der Verabreichung genügen.
Die Vakzinen der Erfindung sind besonders geeignet für den Schutz gegen Krankheiten, die durch Herpes,
Myxo- oder Paramyyoviren, besonders Kerpesviren,
verursacht v/erden. Die entsprechenden dafür bevorzugten Vakzinen enthalten Immunkonplexe, die von diesen Viren
hergeleitet worden sind. Die Kerpesvakzinen werden
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besonders bevorzugt, und zwar aus dem Grund, dass die Reinigung der Herpesviren
ausserordentlich mühsam und schwierig verläuft.
Zur Trennung der essentiellen Antigene von den ungewünschten Komponenten und zu deren Reinigung genügen
ziemlich einfache Methoden, wenn Herpes-Immunkomplexe verwendet werden.
Eine solche Immunkomplexvakzine kann z. B. gegen Herpes simplex Virus Typ 2 folgende Zusammensetzung aufweisen:
1. Nicht lösliche Immunkomplexe, enthaltend:
HSV-spezifische Proteine 100 nq, darin sind im
Falle von HSV 2 hauptsächlich 3 Gruppen von Glycoproteinen im Mol.Gew.Bereich von 120.000 - 130.000,
80.000 - 90.000, 55.000 - 65.000 und im Falle von HSV 1 hauptsächlich 2 Gruppen von Glycoproteinen im
Mol.Gew.Bereich von 120.000 - 130.000 und 55.000 65.000.
Humanes j— Globulin: etwa 300 μ</
2. Triton X-100: maximal 1 μg
3. Physiologische Kochsalzlösung 1 ml
4. Al(OH)3 0,1 % (gegebenenfalls)
Vorzugsweise wird die erfindungsgemässc Vakzine
s.c. appliziert.
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In diesem Versuch wird die Wirksamkeit einer Vakzinierung mit herpesinfizierten solubilisierten Zellen verglichen
mit der Wirksamkeit eines Immunpräzipitates aus solchen Zellen.
a) Gewinnung eines ^-Globulins aus Antiserum gegen Herpes
4 Weisse Auszucht Meerschweinchen werden mit 10 plaquebildenden Einheiten (pfu) Herpes simplex Virus Typ
(HSV 2) in beide Hinterpfoten infiziert. 6 Wochen später erhalten die Tiere 10 pfu s.c. in den Nacken.
10 Tage nach der 2. Immunisierung werden die Tiere durch Herzpunktion entblutet und das Serum durch
niedertouriges Zentrifugieren von den festen Blutbestandteilen abgetrennt. Das Serum wird durch Inkubation
bei 56°C für 60 Minuten inaktiviert. Die f Globuline werden aus diesem Serum durch Zusatz von
gesättigtem Ammonsulfat [20 ml Serum + 10 ml gesättigtes
(NH.)2SO ] ausgefällt. Nach Zentrifugation wird
das Präzipitat in 10 ml physiologischer Kochsalzlösung (0,9% NaCl) aufgenommen und das restliche (NH.)-SO.
durch Dialyse für 48 Stunden gegen NaCl-Lösung entfernt.
Embryonale Meerschweinchenfibroblasten (GPF) werden mit HSV 2 infiziert in einer Multiplizität von 0,04
pfu pro Zelle. Die Kulturen werden 4 8 Stunden bei 36°C inkubiert. Danach werden die Zellen durch niedertouriges
Zentrifugieren vom Kulturmedium getrennt
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Etwa 7.10 Zellen werden in 35 ml eines 0,02 M Tri-Glycin-Puffers
(pH = 8,4), der 5% Triton X-100 enthält, suspendiert und durch Inkubation bei 37°C für 10 Minuten
und anschliessende Ultraschallbehandlung■(3 χ 15 Sekunden)
solubilisiert. Die nicht gelösten Zellbestandteile (in erster Linie die Kerne) werden anschliessend durch Zentrifugation
bei 9.000 g vom gelösten Ueberstand abgetrennt. Dieses Material wird als "Lysat" bezeichnet. 10 ml dieses
Lysates werden mit 20 ml des y-Globulin-Präparates aus
Meerschweinchen-Anti-HSV-Serum versetzt. Die Mischung wird 2 Stunden bei 37°C, danach für 48 Stunden bei 4°C
inkubiert. Die entstandenen Immunkomplexe werden bei
50.000 g für 30 Minuten abzentrifugiert und dieses Präzipitat in 10 ml physiologischer Kochsalzlösung suspendiert.
Dieses Material wird als IK bezeichnet.
c) Tierversuch
Das Lysat wir die IK werden jeweils mit gleichem Volumen inkompletten Freund1sehen Adjuvans vermischt, und jeweils
0,2 ml der Mischung werden pro Dosis appliziert. 20 Meerschweinchen pro Gruppe werden zweimal in 3-wöchigem Abstand
s.c. vakziniert. Eine Woche nach der Boosterinjektion
wird den Tieren eine Blutprobe zur Antikörper-
4 Bestimmung entnommen. Danach werden die Tiere mit 10 pfu HSV 2 intravaginal infiziert. 20 nicht-immunisierte
Tiere werden als Kontrollgruppe ebenfalls infiziert. Die klinische Beobachtung der Tiere erfolgt über 62 Tage p.i.
Beide Vakzinen, das Lysat wie die IK-Vakzine, induzieren
etwa gleiche Titer an neutralisierenden Antikörpern und etwa gleich gute Schutzwirkung gegen die genitale Belastungsinfektion,
d.h. die Primärerkrankung wird abge-
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schwächt und die rekurrierenden Infektionen sind ebenfalls reduziert.
In diesem Versuch wird die protektive Wirksamkeit von Immunkomplexen, welche 1 bis 3 definierte HSV 2-Antigene
enthalten, untersucht.
Ein Lysat aus mit HSV 2 infizierten GPF und y-Globulin
aus einem Anti-HSV-Serum von Meerschweinchen wird, wie in Beispiel 1 beschrieben, hergestellt.
Gewinnung der Inununkomplexe mittels Crossed Immunelektrophorese
im Agarose-Gel:
10 χ 10 cm grosse Glasplatten werden mit 15 ml Agaros*e-Lösung
von 48°C beschichtet. Diese Lösung enthält 1,5% Indubiose A 37 (L'Industrie Biologique Francaise, Clichy),
Elektrophoresepuffer und 0,5 ml anti-HSV- ^-Globulin. Der Elektrophoresepuffer (pH =8,4) enthält in 100 ml:
0,224 g Diäthylbarbitursaure 0,44 g Tris
0,01 g Ca-Lactat 0,02 g NaN-
0,01 g Ca-Lactat 0,02 g NaN-
1,0 ml Triton X-100
Nach Erstarren der Agarose werden in der rechten unteren Ecke der Platten, 1 cm vom Plattenrand entfernt, Löcher
von 4 nun Durchmesser gestanzt und mit jeweils 15 jjI des
Lysates gefüllt. Die Antigene werden in zwei Dimensionen elektrophoretisch aufgetrennt und präzipitiert (1. Dimension
200 V, 2 Stunden, 2. Dimension 100 V, 12 Stunden).
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4 verschiedene Präzipitate werden aus den Platten ausgeschnitten, das entsprechende Material von 16 Platten
gepoolt und das Gel in gefrorenem Zustand pulverisiert. Jede Probe wird danach in 2 ml phosphatgepufferter NaCl-Lösung
(PBS) aufgenommen.
In einem Parallelansatz wird radioaktiv markiertes Lysat als Antigen eingesetzt, die entstandenen Immunpräζitate
anschliessend gelöst und in der SDS-Polyacrylamid-Gel-Elektrophorese
analysiert (Methode nach Norrild und Vestergaard, J. Virol. 1977, 2_2, 113).
Aus diesen "Analysen ergibt sich, dass die aus den Platten
ausgeschnittenen Immunkomplexe folgende HSV 2-Proteine
enthalten:
Probe 1: Glycoprotein von MW 80.000 - 85.000
Probe 2: Glycoprotein von MW 78.000 - 80.000
Probe 3: nichtglycosiliertes Protein, MW 131.000
Probe 4: 3 Glycoproteine, MW 57.000, 115.000 -126.000
Die Immunkomplex-Gel-Suspensionen werden zu gleichen
Teilen mit inkompletten Freund'sehen Adjuvans vermischt.
Je 0,2 ml dieser Mischung wird jeweils zweimal in 3-wochigem Abstand s.c. den Meerschweinchen appliziert
(10 Tieren pro Gruppe). Eine Woche nach der Boosterinjek-
4 tion werden die Meerschweinchen mit 10 pfu HSV 2 s.c.
in die linke Fussohle infiziert und die klinischen Symptome 100 Tage p.i. beobachtet.
Die Tiere, welche mit der Probe 2 bzw. Probe 4 immunisiert worden sind, erwiesen sich als geschützt gegen
das Auftreten rekurrierender Herpesläsionen.
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29A9031
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In diesem Versuch werden die Antikörper zunächst an Al(OH), absorbiert und danach die viralen Antigene an
die absorbierten Antikörper gebunden. A^- Globuline aus Meerschweinschen-Anti-HSV-Serum werden,
wie in Beispiel 1 beschrieben, hergestellt.
Antigen:
Verozellen werden mit HSV 2 in einer Multiplizität von
0,01 pfu/Zelle infiziert und 96 Stunden bei 34° C inkubiert. Die Zellen werden danach durch niedertourige Sentrifugation
vom Kulturmedium abgetrennt und ein Lysat, wie in Beispiel 1 beschrieben, hergestellt.
9 ml Anti-HSV- Is4"-Globuline werden mit 1 ml Alu Gel S
(Serva) vermischt und für 18 Stunden bei 4 C absorbiert. Nicht absorbiertes Protein v/ird danach durch sechsmaliges
Waschen des Alu Gels in PBS entfernt. Das Gel wird in 10 ml PBS suspendiert und mit 10 ml Lysat versetzt.
Die Mischung wird wiederum 18 Stunden bei 4 C inkubiert. Danach wird alles nicht gebundene Material
durch sechsmaliges Waschen des Alu Gels in PBS entfernt. Das Gel wird in 10 ml PBS suspendiert. Dieses Material
wird als "Ag-Ak-Alu-Vakzine bezeichnet.
Als Kontrolle dient ein direkt an Alu Gel absorbiertes Lysat als "Ag-Alu-Vakzine" bezeichnet. Hiefür wird 1 ml
Alu Gel S mit 9 ml PBS verdünnt und mit 10 ml Lysat versetzt. Nach 18 Stunden Inkubation bei 4° C wird das
nicht gebundene Material durch sechsmaliges Waschen des Gels in PBS entfernt und das Gel in 10 ml PBS suspen-
diert· 030029/0552
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Je 5 Meerschweinchen werden zweimal in 3-wöchiyem Abstand
mit 0,5 ir.l der Vakzinen s.c. immunisiert.
5 Kontrolltiere erhalten 0,2 Ssiges Alu Gel in PBS. Line Woche nacn der 2. Immunisierung wird den Tieren
eine Blutprobe zur Antikörperbestimmung entnommen.
Anschliessenci werden die Tiere mit HSV 2 intradermal
in die Flanke infiziert.
Beide Vakzinen induzieren hohe Titer an neutralisierenden Antikörpern und einen guten Schutz gegen die cutanen
Iierpesläsionen. Die Ag-Alu-Vakzine induziert daneben
hohe Titer an Antikörpern gegen die Wirtszellen, welche sowohl als Komplement-abhängige cytotoxische Antikörper
wie auch mittels passiver cutaner Anaphylaxie nachweisbar sind. Die Ag-Ak-Alu-Vakzine induziert dagegen keine
Antikörper gegen Wirtszellmaterial.
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Claims (10)
1. Vakzine gegen Krankheiten, welche durch ein
Virus verursacht werden, dadurch gekennzeichnet, dass sie einen Immunkomplex aus Antikörpern und löslichen
Antigenen enthält, der von solchem Virus hergeleitet ist.
2. Vakzine gegen Krankheiten, welche durch ein Virus in einer bestimmten Spezies verursacht werden,
dadurch gekennzeichnet, dass sie einen Immunkomplex aus einem oder mehreren löslichen spezifischen Antigenen
eines solchen Virus und Antikörpern der Spezies gegen das Virus enthält.
3. Vakzine gegen Krankheiten, welche durch ein Virus verursacht werden, dadurch gekennzeichnet,
dass sie alle essentiellen spezifischen löslichen Antigene gegen ein solches Virus enthält, ohne
wesentliche Anteile dessen nicht essentiellen Komponenten, und diese Antigene als deren Immunkomplex
mit Antikörpern einer solchen Spezies gegen das Virus vorhanden sind.
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4. Vakzine gemäss Ansprüchen 1-3 gegen Krankheiten, welche durch ein Herpesvirus verursacht werden,
dadurch gekennzeichnet, dass sie einen Immunkomplex aus Antikörpern und löslichen Antigenen enthält, der
von solchem Virus hergeleitet worden ist.
5. Vakzine gemäss Ansprüchen 1-4 gegen Krankheiten durch ein Myxo- oder Paramyxovirus verursacht,
dadurch gekennzeichnet, dass sie einen Immunkomplex aus Antikörpern und löslichen Antigenen enthält, der
von solchem Virus hergeleitet worden ist.
6. Vakzine gegen Krankheiten durch das Herpes
simplex-Virus (HSV) verursacht, dadurch gekennzeichnet,
dass sie einen Immunkomplex aus KSV-Antikörpern und löslichen Antigenen enthält, mit löslichen HSV-spezifischen
Antigenen, die mit menschlichem Anti-HSV- £-Globulin komplexiert sind und welche HSV-spezifischen
Antigene, im Falle von HSV 2, mindestens drei Gruppen von Glykoproteinen mit Molekulargewichten
von 120.000 bis 130.000, 80.000 bis 90.000 und 55.000 bis 60.000 und, im Falle von HSV 1, mindestens zwei
Gruppen von Glykoproteinen mit Molekulargewichten von 120.000 bis 130.000 und 55.000 bis 60.000 aufweisen.
7. Vakzine gemäss Ansprüchen 1-6, deren Immunkomplex unlöslich ist.
8. Vakzine gemäss Ansprüchen 1-7, in deren Immunkomplex das Antigen in äquivalenter Menge
oder im Ueberschuss vorliegt.
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9. Vakzine gemäss Ansprüchen 1-8, ein immunologisches
Zusatzmittel enthaltend.
10. Iinmunkomplexe aus Virusantikörpern und
löslichen Virusantigenen, als Wirkstoffe zum Schutz gegen Viruskrankheiten.
./ 11. —»um Schutz—ee
wobei einem Subjekt, das diesenScJiut«-i3faucht, eine
wirksame Menge__äex-Vektrlnegemäss Ansprüchen 1-10
——-■■hf
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