DE2738711C2

DE2738711C2 - Salze des Cefotiams

Info

Publication number: DE2738711C2
Application number: DE2738711A
Authority: DE
Inventors: Kenzo Kyoto Naito; Haruo Hyogo Sinbo; Kazuo Tsukamura
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1976-08-31
Filing date: 1977-08-27
Publication date: 1985-07-11
Also published as: DK385777A; JPS603314B2; DE2738711A1; DK151340C; US4146710A; NO772960L; CH630088A5; FR2364922A1; JPS5329913A; BG60439B2; NL7709614A; HK27784A; GB1589841A; BE858296A; FR2364922B1; SE7709745L; SE426069B; MY8500266A; NL189355C; DK151340B

Description

in der X Chlor oder Brom und η eine Zahl von 0,1 bis 4 ist.

2. Salz des Cefotiams nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß X Chlor ist und η = 1 ist

3. Verfahren zur Herstellung von Salzen des Cefotiams nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise Cefotiam der Forme!

HN

."X

CH₂CONH

N-

CH₂S-

-N i! N

COOH

CH₂CH₂N(CH₃J₂

oder sein Salz mit einem Alkali- oder Erdalkalimetall oder einem organischen Amin in Gegenwart von Wasser oder eines organischen Lösungsmittels oder eines Gemisches von Wasser mit einem organischen Lösungsmittel mit wenigstens zwei molaren Äquivalenten einer Säure der Formel HX, in der X Chlor oder Brom ist, umsetzt und den hierbei gebildeten Feststoff isoliert.

Die Erfindung betrifft Salze des Cefotiams der Formel

HN

HN—π—CH₂CONH-

S ,

-I 11 11

I Il i|

-N J-CH₂S-Il N -2 HX π H₂O T

(I)

COOH

CH₂CH₂N(CHj)₂

in der X Chlor oder Brom ist und η eine Zahl von O, I bis 4 ist, und ein Verfahren zur Herstellung dieser Derivate. Es ist bekannt, daß die Verbindung der Formel

HN

CH₂CONH

(ID

COOH

CH₂CH₂N(CH₃)I

ausgezeichnete antibiotischc Aktivität aufweist (DE-OS 24 61 478). Die Verbindung (II) hat u. a. den Nachteil, daß ihre Reinigung durch die Anwesenheit von zwei basischen Gruppen, nämlich der Iminothiazolin- und Dimcthylaminogruppe, und einer Carboxylgruppe in ihrem Molekül und auf Grund ihrer hohen Wasserlöslichkeit sehr schwierig ist. Ein weiterer Nachteil ist ihre ungenügende Lagerbeständigkeit, da sie in Form der freien Säurt (/,willcrion) oster ihres Sal/cs mit einer Base instabil ist. Die Untersuchungen, die mit dem Ziel unternommen wurden, diese Nachteile auszuschalten, haben ergeben, daß ein festes C'cphalosporinderivat (I) in an sich bekannter Weise hergestellt werden kann, indem die Verbindung (11) oder ein Salz dieser Verbindung mit einem Alkali- oder Erdalkalimetall oder einem organischen Amin in Gegenwart von Wasser oder eines organischen Lösungsmittels oder eines Gemisches von Wasser mit einem organischen Lösungsmittel mit wenigstens zwei molaren Äquivalenten einer Säure der Formel HX (worin X die oben genannte Bedeutung hat) umgesetzt und der hierbei gebildete Feststoff isoliert wird, dati die hierbei erhaltene Verhindungd) sehr lagcrbcständig ist und in Fällen, in denen die Verbindung (1) in kristalliner Form gewonnen werden kann, die sonst schwierig entfernbaren Verunreinigungen nach üblichen Reinigungsverfahren last vollständig entfernt werden können. Der Erfindung liegen die vorstehenden Feststellungen zu

Die Verbindungen der Formel (I) enthalten nie mehr als 4 Wasscrmolekülc. Es gibt vier stabile Hydrate vom Monohydrat bis zum Tetrahydrat. Fernergibt es Fälle, in denen in Abhängigkeil von den Hcrsleilungsbedingungen weniger als ein Wasscrmolckül absorbiert und/oder eingelagert ist, und auch in diesen Fällen können die Verbindungen in Form von Kristallen abgetrennt und isoliert werden. Die Anhydrate sind amorphe oder kristalline Pulver, können jedoch weniger als 1 Mol absorbiertes und/oder eingelagertes Wasser enthalten. Normalerweise zeigen die Verbindungen (I), deren nach der Karl-Fischer-Methode bestimmter Wassergehalt mehr als etwa 1% beträgt, im Röntgenpulverdiagramm die Krislallform, und die Verbindungen (I), deren Wassergehalt mehr als etwa 0,3% beträgt, zeigen die Kristallform bei Beobachtung unter dem Polarisationsmikroskop. Die Verbindungen (I) können auch in amorpher Form (gemäß Röntgenpulverdiagramm und Beobachtung untei dem Polarisationsmikroskop) isoliert werden. Auch diese Produkte fallen stets in den Rahmen der Erfindung. Vom Standpunkt derStabilität und Reinheil liegt η vorzugsweise im Bereich von 1 S // S 2. In diesem Fall liegen die Verbindungen (I) in kristalliner Form vor. Vom kommerziellen Standpunkt ist für diese Produkte ein n-Wert von etwa 1 oder etwa 2 erwünscht. Die Verbindungen (I) können außerdem eine geringe Menge des Reaktionslösungsmittcls, z. B. Methanol, Äthanol, Propanol oder Aceton enthalten. Auch diese lösungsmittelhaltigen Verbindungen gehören zu den Verbindungen (I) gemäß der Erfindung.

Die Verbindungen (I) können nach an sich bekannten Verfahren hergestellt werden. Als Ausgangsverbindungen (II) eignen sich beispielsweise 1) das Reaktionsgemisch, in dem die Verbindung (II) synthetisiert worden ist, 2) eine Lösung, die durch Entfernung des größten Teils der Verunreinigungen aus diesem Reaktionsgemisch erhalten worden ist, 3) das Pulver, das durch Mischen der gemäß (2) erhaltenen Lösung mit einem Lösungsmittel, in dem die Nfcrtindung (II) schwerlöslich ist, erhalten worden ist, und 4) das Pulver, das durch Einengen der 2ü gemäß (2) erhaltenen Lösung zur Trockene oder durch Gefriertrocknen dieser Lösung crhaiien worden ist. Die Ausgangsverbindung (II) kann der Reaktion gemäß der Erfindung in freier Form (Zwitterion) oder in Form eines Salzes mit einem Alkalimetall oder Erdalkalimetall wie Natrium, Kalium oder Lithium oder mit einem organischen Amin, z. B. Triäthylamin, Di-n-butylamin oder Dicyclohexyiamin, unterworfen werden. Als Säure der Formel HX eignet sich Salzsäure oder Bromwasserstoffsäure. Die Säure wird normalerweise in Mengen im Bereich von 2 bis 10 molaren Äquivc-.lcnten, vorzugsweise im Bereich von 2 bis 6 Äquivalenten verwenciet. Eine unter 2 Mol pro Mol der Ausgangsverbindung (II) liegende Menge führt zu einer gewissen Schwierigkeit, homogene Kristalle zu erhalten, während ein unverhältnismäßig großer Überschuß der Säure zu Zersetzung der Ausgangsverbindung (II) führen kann. Unter dem Gesichtspunkt der leichten Betriebsführung, der Ausbeute und des Wirkungsgrades der Reinigung wird die Reaktion in Gegenwart von Wasser oder eines organischen Lösungs- :·>> mittels oder eines Jemisches von Wasser mit einem organischen Lösungsmittel durchgeführt. Als organische Lösungsmittel für die Reaktion cijpen sich

1) Lösungsmittel, in denen die gev ^:)nschte Verbindung (1) schwerlöslich ist, und die in Wasser löslich sind,

z. B. Äthanol, n-Propanol, Isopropanol, Bulanol, Isobutanol, Aceton, Methylethylketon, Acetonitril,Tetrahydrofuran und Dioxan,

2) Gemische eines Lösungsmittels, /.. B. eines der vorstehend unter (1) genannten Lösungsmittel, mit einem Lösungsmittel, in dem die gewünschte Verbindung (I) leicht löslich ist, und das in Wasser löslich ist, z. B. Methanol, Dimethylsulfoxyd, Formamid, Ν,Ν-Dimethylformamid, Ν,Ν-Dimethylaceiamid -ir.a Methylcellosolve®, und 4u

3) Gemische eines der unter (1) genannten Lösungsmittel oder eines der unter (2) genannten Lösungsmittel mit einem Lösungsmittel, in dem die gewünschte Verbindung (I) schwerlöslich ist, und das in Wasser schwerlöslich ist, z. B. Äthylacetat, Äther, Dichlormethan und Chloroform. Besonders zweckmäßig sind Gemische von Wasser mit Aceton, Äthanol, n-Propanol, Isopropanol, Methyläthylketon, Tetrahydrofuran.

Die Reaktion wird normalerweise bei einer Temperatur im Bereich von -10 bis+40⁰C, vorzugsweise 0° bis+ 3O⁰C durchgeführt. Unterhalb von -10⁰C wachsen die Kristalle nur langsam, während eine Temperatur oberhalb von 40⁰C den Nachteil hat, daß die Ausgangsverbindung (II) /ersetzt wird. Die Reaktionszeil hängt von der Reinheit der Ausgangsverbindung (II) und der Art der darin enthaltenen Verunreinigung ab. Wenn jedoch ein Ausgangsmaterial (II) mit einer Reinheit von mehr als 80% verwendet wird, wie es durch ein übliches Reinigungsvcrlahren, z. B. durch Säulcnchromatographic erhalten wird, wird die Reaktion 30 Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise 30 Minuten bis4 Stunden durchgeführt. Das keaktionsprodukt wird beispielsweise durch Filtration, Zentrifugieren oder Gefriertrocknen isoliert. Wenn das organische Lösungsmittel in der isolierten Verbindung (1) enthalten ist, kann die Verbindung (I) als solche verwendet werden, wenn das darin enthaltene organische Lösungsmittel ihre Lagerbeständigkeit und ihre Verwendbarkeit nicht beeinträchtigt.

Nachstehend werden bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung beschrieben.

A) Die Verbindung (II) wird in einem der oben genannten Lösungsmittel gelöst, worauf eine berechnete Menge der Säure MX (worin X die oben genannte Bedeutung hat) zugeset/.t wird. Das Reaktionsprodukt wird gefriergetrocknet, Das Lyophilisat wird unter vermindertem Druck in Gegenwart eines Dchydratisie- w rungsmiltcls wie Kiesclgel oder Phosphorsäureanhydrid getrocknet, wobei das Anhydrat der Verbindung

(I) erhalten wird.

B) Die Verbindung (H) oder ihr Salz wird in Wassc oder in einem Gemisch von Wasser mit einem der vorstehend genannten hydrophilen organischen Lösungsmittel gelöst. Der Lösung wird HX zugesetzt. Nach Beendigung der Reaktion wird ein organisches Lösungsmittel, in dem die gewünschte Verbindung (I) nur schwerlöslich ist, allmählich der erhaltenen Lösung zugesetzt, bis die Lösung trübe zu werden beginnt. Die Lösung wird eine bis mehrere Stunden stehen gelassen, worauf ein organisches Lösungsmittel, in dem die gewünschte Verbindung (I) schwerlöslich ist, allmählich zugesetzt wird, bis keine Kristalle mehr abge-

schieden werden. Die hierbei erhaltenen Kristalle werden beispielsweise durch Filtration oder Zentrifugieren isoliert. Die Kristalle nehmen in Abhängigkeit von den Kristallisationsbedingungen, z. B. von derTemperatur, dem Lösungsmittel oder der Kristallisationszeit, verschiedene Hydratformen an, jedoch sind sie normalerweise Trihydrate. Die erhaltenen Kristalle enthalten in Abhängigkeit von den Reaktionsbedingungen zuweilen geringe Mengen des organischen Lösungsmittels, jedoch kann dieses organische Lösungsmittel im allgemeinen durch Trocknen, das gegebenenfalls unter vermindertem Druck durchgeführt wird, entfernt werden. Gewisse Arten von organischen Lösungsmitteln sind jedoch durch einfaches Trocknen unter vermindertem Druck schwierig zu entfernen. In diesem Fall werden die Kristalle zweckmäßig mit Wasserdampf behandelt, bis etwa 5 bis 10 molare Äquivalente Wasser pro Mol des Anhydrats der

in Verbindung (I) absorbiert sind, wodurch das organische Lösungsmittel entfernt wird. Das erhaltene wasserhaltige Produkt wird dann unter vermindertem Druck (etwa 0 bis 20 mm I Ig) gehalten, wodurch das Wasser allmählich entfernt wird und Kristalle in Form des Tetrahydrats und dann dcsTrihydrats in der genannten Reihenfolge erhalten werden. Wenn die Trihydralkrislalle unter dem vorstehend genannten verminderten Druck in Gegenwart eines Dehydralisierungsmitlcl, /.. U. Phosphorsäureanhydrid, stehengelassen werden, werden Kristalle in Form des Dihydrats, Monohydrats und abschließend das Anhydrit in der genannten Reihenfolge erhalten, !n diesen Kristallen kann weniger als I Mol Wasser (absorbiert oder eingelagert) sein. Als Alternative kann angenommen werden, daß weniger als I Mol Wasser, das aus den verschiedenen Hydraten entfernt worden ist, in diesen Hydraten enthalten (absorbiert oder eingelagert) ist, wobei ein Gemisch von ungleichen Hydraten erhalten werden kann.

C) Das vorstehend genannte Lyophilisat (A) wird mit Wasserdampf in Berührung gebracht, wobei der Wasserdampf absorbiert wird unü Hydratkristaüe gebildet werden. Wenn die Kristalle get roc· iet werden, werden das Tetrahydrat, Trihydrat, Dihyr'-rat, Monohydrat und Anhydrat in dieser Reihenfolge erhalten, wobei weniger als I Mol Wasser in diesen Hydraten und im Anhydrat enthalten (absorbiert oder gebunden) ist.

D) Die Verbindung (II) oder ihr Salz wird in Wasser gelöst, das etwa 5 bis 35% MX (worin M Natrium, Kalium oderLithium ist und X für Chlor oder Brom steht) enthält. Der Lösung wird HX zugesetzt. Durch Kühlen

der Lösung beginnt die gewünschte Verbindung (I) in Form von Kristallen ausgelallt zu werden. Die hierbei erhaltenen Kristalle werden beispielsweise durch Filtration oder Zentrifugieren isoliert. Wenn die Kristalle getrocknet werden, werden das Tetrahydrat, Trihydrat, Dihydrat, Monohydrat und Anhydrat in dieser Reihenfolge gebildet, wobei weniger als I Mol Wasser in diesen Hydraten und im Anhydrat enthalten (absor-.TO biert oder gebunden) ist.

E) Zu dem Gemisch der Verbindung (II) oder ihres Salzes mit dem vorstehend genannten organischen Lösungsmittel, indem die gewünschte Verbindung (I) löslich ist, wird wasserfreies IIX gegeben. Das erhaltene Gemisch wird, falls erforderlich, filtriert und das Fiitrat mil dem oben genannten organischen Lösungsmittel gemischt, in dem die gewünschte Verbindung (I) schwerlöslich ist. Die hierbei gebildete und beispielsweise durch Filtration oder Zentrifugieren isolierte Fällung wird unter vermindertem Druck in Gegenwart eines Dchydratisierungsmittcls wie Kicselgel oder Phosphorsäurcanhydrid getrocknet, wobei ein amorphes Pulver des Anhydrats der Verbindung (I) erhalten wird. Die hierbei erhaltenen Kristalle der gewünschten Verbindung (I) enthalten 2 Mol HX pro Mol der Ausgangsverbindung (II). Dies wird durch die Elementaranalyse und Titration oder durch andere quantitative Analyse bestätigt. Die Kristallinitätder 'verbindung (I) kann durch mikroskopische Untersuchung, mit dem Polarisationsmikroskop oder durch Röntgenbeugungsanalyse ermittelt werden. Das 1 .frarotspektrum des Produkts zeigt schmale scharfe Maxima ungleich den Maxima dos Infrarotspektrums des nicht-kristallinen Pulvers. Es gibt Fälle, in denen die Anzeichen von Kristallinität vom Röntgenpulverdiagramm verschwinden, wenn der Wassergehalt der gewünschten Kristalle durch Trocknen auf weniger als 1 Mol gesenkt worden ist, jedoch sind unter dem

4> Polarisationsmikroskop noch interfcrenzfarben (Anzeichen von Kristallinität) zu beobachten.

Die nach den vorstehend beschriebenen Verfahren (A) und (E) erhaltenen Produkte erscheinen im Röntgenpulverdiagramm und unter dem Polarisationsmikroskop gewöhnlich amorph und weisen schlechtere Stabilität und Reinheit als die Produkte auf, die nach den vorstehend beschriebenen Verfahren (B), (C) und (D) erhallen werden, während sich unter den Produkten einige befinden, die durch Verlust des Kristallwassers die Kristallinität verloren haben (im ungemeinen weniger als 0,3%).

Die Verbindungen (I) gemäß der Erfindung können in Form von Kristallen und/oder als nicht-kristallines f-ulver, das durch Trocknen der Kristalle erhältlich ist, oder in gewissen Fällen als amorphes Pulver verwendet werden, oder sie können in Verbindung mit einem ungiftigen Al kali-oder Erdalkalisalz, z. B.mitNatriumhydrogcncarbonat. Natriumcarbonat oder Trinalriumphosphat, d. h. nach Einstellung aufdcn gewünschte.ι pH-Wfcrt,die Ionenart und lonenstärkc als inji/ierbare oder orale Präparate verabreicht werden. Beispielsweise kann eine Lösung der Verbindung (I) in einer wäßrigen Lösung, die cincstöchiomctrisch äquivalente Menge Natriumcarbonat (nachstehend als »C'«-Lösung bezeichnet) enthält, intramuskulär oder intravenös Warmblütern einschließlich des Menschen, Mäusen, Ratten und Hunden für die Behandlung von Infektionskrankheiten, die

mi durch grampositive Bakterien (z. B. Staphylococcus aureus) oder gramnegative Bakterien (z. B. Escherichia
eoli, Kiebsiclla pncumoniae, Proteus vulgaris, Proteus morganii) verursacht werden, verabreicht werden. Zur Behandlung von Infektionen der Harnwcgc durch Eschcrichia coli beim Menschen oder bei Mausen kann die »C«-Lösung, die etwa 5 bis 50 mg (gerechnet als Anhydrat) der Verbindung (I) pro kg Körpergewicht enthält, täglich intravenös in drei geteilten Dosen verabreicht werden.

Ik/ugsbcispicl
Die antibakteriell c Wirkung (ausgedrückt als Mindest hemm konzentrat ion Ml IK) und dicToxi/itüt der Vcr-

bindung (I), gerechnet als Anhydrat. sind nachstehend genannt.

1) Anlihiiktcricllcs Spektrum (Agarverdiinnung)

Staphylococcus aureus IDA 2(W P 0,39 _:,g/ml

Staphylococcus aureus 1840 0.78 jg/ml

Kscherichia coli NlMJ JC-2 0,2 Vg/ml

l-scherichia coli 0-111 0,05 .g/ml

Fscheriehia coli T-7 1.50 :ig/ml

Klcbsiclla pneumoniae DT ü.l ig/ml in

l'roteus vul^aris IFO 3988 1.56 _;lg/ml

Proteus morganii IFO 3848 0,39 /g/ml

2) Akute To.xizität (Maus, intrapeiitoneal)
CD,,, ä 20 g/kg.

Hie Werte der akuten Toxi/ilät gelten für ein Gemisch der Verbindung (I) mit Natriumcarbonat im Molverhältnis von I : 1.

Es ist/u bemerken, daß die Verbindung (I)gemäß der Erfindung nach Tuulomerisierung eine tautomere Form :o wie folgt annehmen kann:

-CH₁CONH

Il Ii ι

2 H X η H₂O

COOH

CH,CH₂N(CHj)₂

/.ahlreiche Untersuchungen wurden hinsichtlich der Erscheinungsformen dieser Art von Verbindung durchgeführt. Die vorhandene Literatur verweist aul die Thia/olinform der Verbindung unter gewissen Umständen (Ada Crystallographic 27 [19711 326) unddieThiazolform unter anderen Umständen (Chemistry and Industry 1966, Seie 1634). Die Ergebnisse verschiedener Bestimmungen lassen jedoch daraufschließen, daß die Verbindung (I) gemäß der Erfindung in der Thiazolinform auf Grund des Beitrages der Wasserstoffbindung stabil ist, wie die Formel

Γ M W / \ M M

Il 'l ⁴⁰

CH₂S-Il N · 2HX · ;; H,O

N COOH I

CH₂CHjN(CHO₂ -»5

zeigt, also überwiegend diese Thia/olinform annimmt. Hs ist jedoch möglich, daß dieses Gleichgewicht sich je nach den Umständen, unter denen die Verbindung (I) vorliegt, z. B. in Abhängigkeit vom pH-Wert und von der Polarität des Lösungsmittels, der Temperatur und anderen Parametern, nach der einen oder anderen Seite verschiebt. Die Verbindung (I) wird daher hiernach ihrer Thia/olinform bezeichnet, obwohl sie natürlich auch in 5» anderer Weise nach der Thiazolform bezeichnet werden kann.

Die Erfindung wird in den folgenden Beispielen ausführlich erläutert. Die in diesen Beispielen genannten Harze der Handelsbezeichnung »Amberlilc*« sind Produkte der Firma Röhm and Haas Co., USA. Alle Temperaturen sind unkorrigiert, und alle Prozentsätze beziehen sich auf das Gewicht, falls nicht anders angegeben. Die NMR-Spektren wurden mit einem Spektrometer »Varian Modell HA 100«(100 M Hz) oder »T 60« (60 MHzimit Tetramethylsilan als inneren oder äußeren Bezug aufgenommen. Alle /-Werte sind in ppm zu verstehen. Die Abkürzung »s« steht für ein Singictt, »d« für ein Dublett, »t« für ein Triplett, »dd« für ein doppeltes Dublett, »m« für ein Multiplett und »sh« für eine Schulter. Der Wassergehalt der in den Beispielen genannten Verbindungen wurde in allen Fällen nach der Karl Fischer-Methode bestimmt.

Beispiel 1

I) In !.Ol Wasser wurden 263 g eines Lyophilisals von 7_jff-[2-(2-lmino-4-thia/olin^l-yl)acetamido]-3-[l-[2-(N.N-dimethylaminoiathylll H-ietra/ol-S-yll-thiomcthykVcephem^-carbonsäurc (Reinheit von 93% auf Anhydratbasis) gegeben, worauf 1,0 1 Aceton und dann I5l) ml I2n-HCT zugesetzt wurden. Nach Zugabe von 20 g Aktivkohle zu dieser Lösung wurde das Gemisch IO Minuten bei 5°C gerührt, woraufdie Aktivkohle abfiltricrl wurde, /.um Filtral wurden 5 I Aceton gegeben, worauf das Gemisch i Stunde bei 10⁰C gerührt wurde. Dann wurden weitere 2 1 Aceton zugesetzt. Nach weiterem Rühren für 1 Stunde wurden die

gebildeten Kristalle abfiltriert, viermal mit je 500 ml Aceton gewaschen und getrocknet. Hierbei wurden 262 g Kristalle des Carbonsäuredihydrochloridmonohydrats erhalten (Ausbeute 94%, bezogen auf reines Produkt).

IR(KBr)Cm ': 1770 Ctf-Lactam).

Elementaranalysc für C,»H,,N₉O.|S| · 2 IICI ■ IIjO:

Berechnet: C35.06; 114,47; N 20,45; S 15,60; Cl 11,50;

Gefunden: C34.87; 114,52; N 20,01; S 15,33; Cl 11,24.

Wassergehalt:

Berechnet: 2,92%,

Gefunden: 3,15%.

NMR (60 MHz, D₂O) / : 3,20 (s, Thiazolin 5-H), 4,25 (d, 7-il), 4,75 (d, 6-H), 4,9-6,5 (m, 5 x CH₅),
6,85 (s, 2 x CH,).

Die Reinheit dieses Produkts, bestimmt durch Flüssigkeitschromatographic nach der Schnellmethodc, betmo 99 6%. he7ogen auf das Anhydrat. Das RöntRenpulverdiagramm des Produkts zeigte, daß es kristallin war.
:o Bedingungen der Flüssigkeitschromatographie:

Teilungskolonne: Hitachi® Ionenaustauscherharz 2614, 2,1 mm x 50 cm; Säulentemperatur 5O⁰C; EIutionsmittclO,3molarerCitratpuffer, pH 6,5,0,2 ml/Minute; Druck 4,3 kg/cm²; Empfindlichkeit des Schreibers 10 mV; Geschwindigkeit des Streifens 2,5 mm/Min.

2) In Gegenwart von Phosphorsäurcanhydrid wurden 10 g der gemäß Abschnitt 1) erhaltenen Kristalle bei 35⁰C unter vermindertem Druck (2 mm Hg) 3 Stunden getrocknet, wobei 9,8 g Carbonsäuredihydrochlorid · 0,64 H₂O mit einem Wassergehalt von 1,9% erhalten wurden.

Das Röntgenpulverdiagramm ergab, daß dieses Produkt ein nicht-kristallines Pulver war. Die Beobachtung unter dem Polarisationsmikroskop zeigte, daß das Produkt durch die Drehung des Objektträgers eine Interferenzfarbe durch Nicolschc Prismen erzeugte. Dies war der Beweis Pur optische Anisotropie und daher dafür, daß das Pulver kristallin war.

Beispiel 2

In 30 ml Wasser wurden 10 g 7y?[2-(2-Imino-4-thiazolin-4-yl)acetamido]-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)äthyl]-1 H-tetrazol-S-yllthiomethylO-ccphem^-carbonsäure gelöst. Unter Rühren bei 5°C wurden 5,5 ml 12n-HCI und 150 ml Methyläthylketon zugesetzt. Das Gemisch wurde 3 Stunden gerührt und dann über Nacht bei 5°C stehengelassen. Die hierbei gebildeten Kristalle wurden abfiltriert, viermal mit je 20 mi rvieihyiäihyi keton gewäsehen und getrocknet. Hierbei wurden 10,5 g Kristalle des Carbonsäuredihydrochloriddihydrats erhalten.

jo Elementaranalyse Tür Ci_xH₁₁NgO₄S, · 2 HCI · 2H₂O:

Berechnet: C 34,07"; H 4,61; N 19,86; Ci 11,17;

Gefunden: C 33,94; H 4,80; N 20,02; C! 11,15.

Wassergehalt:

Berechnet: 5,68%.

Gefunden: 5,80%.

Beispiel 3

In 1,5 ml Wasser wurden 0,53 g 7/-[2-(2-Imino-4-thiazolin-4-yl)acetamido]-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)-äthylj-l H-tetrazol-5-yl]thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure gelöst. Bei 5°C wurden 0,7 ml wäßrige 5n-HBr-Lösung zugesetzt. Nach Zugabe von 11 ml Aceton wurde das Gemisch 2 Stunden bei 10⁰C gerührt. Dann wurden weitere 5 ml Aceton zugesetzt, worauf das Gemisch 1 Stunde bei 25⁰C gerührt wurde. Die hierbei gebildeten Kristalle wurden abfiltriert, fünfmal mit je 2 ml Aceton gewaschen und an der Luft getrocknet. Das Produkt wurde dann unter vermindertem Druck getrocknet, wobei 0,56 g Kristalle des genannten Carbonsäuredihydrobromiddihydrats erhalten wurden.

NMR (60 MHz, in D₁O) τ : 3,22 (s, Thiazolin 5-H), 4,26 (d, 7-H), 4,75 (d, 6-H), 4,9-6,5 (m, 5 X CH₂), 6,88 (s, 2 x CH,).

Die Kristallinität des Produktes wurde durch das Röntgenpulverdiagramm und die Untersuchung unter dem Polarisationsmikroskop bestätigt.

Beispiel 4

1) In 50 ml Wasser wurden 5,26 g eines Lyophilisats von 7jSl2-(2-lmino-4-thiazoiin-4-yi)acetarnidoj-3-i!-i2-(N,N-dimethylamino)äthyl]-l H-telrazol-5-yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure (Wassergehalt 3,2%; Anteil der Zwätterionenkomponente 95,5%, bestimmt durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schnellmethode) gelöst. Die Lösung wurde auf 5°C gekühlt, worauf 18,7 ml In-HCI zugesetzt wurden.

Durch Gefriertrocknen wurden 6,2 g des genannten Carbonsiiurcdihydro.hlorid 1,5 H₂O in Pulverform erhalten.

Wassergehalt: 4,2% (berechnet für CkHj₁N₁₁O₄S₃ · 2 HCI · 1,5 H₂O : 4,3%).

Elementaranalyse für C₁(H₂₁N₁)O₄S., · 2 HCI · 1,5 H₂O:
Berechnet· C 34,56; H 4,19; N 20,15; CM 1,33;

Gefunden: C34.21; H4,03; N 19,82; Cl 11,50.

Reinheit als Anhydrat (besiimmt durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schnellmeihode): 95,3%. Röntgenpulverdiagramm: nicht-kristallin. Untersuchung unter dem Polarisationsmikroskop (gekreuzte Nicoische Prismen): keine Interferenzfarben wurden beobachtet, wenn der Objektträger gedreht wurde, ein Beweis Pur ein nicht-kristallines Pulver.

2) 2 g des gemäß Abschnitt (1) erhaltenen Produkts wurden unter vermindertem Druck in einem Kieselgel-Exsiccator getrocknet, wobei 1,9 g des genannten Carbonsäuredihydrochlorid · 0,17 H₂O in Pulverform erhalten wurden.

Wassergehalt: 0,5% (berechnet Tür C₁₁₁H₂₁N₁₁O₄S, · 2 HCl · 0,17 H₂O: 0,5%); Reinheit als Anhydrat (bestimmt durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schnellmethode): 95,3%; Röntgenpulverdiagramm: nicht-kristallin; Untersuchung unter dem Polarisationsmikroskop: keine Interl'erenzlärben.

3) In 0,5 g reinem Wasser wurde 1 g eines Lyophilisats des gemäß Abschnitt (1) erhaltenen 7y?[2-(2-Imino-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)-äthyl]-l H-tetrazol-S-yllthiomethyl-S-cephem^- carbonsäuredihydrochlorid · 1,5 H₂O gelöst. Die Lösung wurde 15 Stunden bei 5°C stehen gelassen. Sie wurde dann in einem Phosphorsäureanhydrid-Exsiccator getrocknet, wobei 1,05 g des genannten Carbonsäuredihydrochloriddihydrats in Kristallform erhalten wurden.

Elementaranalyse für C₈H₂₁NgO₄S₁ · 2 HCI · 2 H₂O:

Berechnet: C34,07; 114,61; N 19,86; S 15,16; Cl 11,17;

Gefunden: C33,84; H4,63; N 19,71; S 15,40; Cl 11,29.

Wassergehalt: 6,00% (berechnet 5,68%)

IR (KBr): 1770 cm ' (/f-Lactam) mit schmalen scharfen Maxima, die charakteristisch für den betreffenden Kristall sind, bei 1670, 1190 und 1170 cm '.

Beispiel 5

In 25 ml Wasser wurden 5,5 g eines Lyophilisats der 7ji-[2-(2-Imino-4-thiazolin-4-yl)acetamido]-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)-äthylj-i H-tetrazoi-5-yij ihiomethyi-S-cephcm^-carbunsäufc (Reinheit 93% auf Anhydratbasis) gelöst, worauf 25 ml Aceton und dann 4 ml 12n-HCl zugesetzt wurden. Nach Zugabe von weiteren 100 ml Aceton wurde das Gemisch eine Stunde bei 15°C gerührt, worauf weitere 50 ml Aceton zugesetzt wurden. Das Gemisch wurde 1 Stunde gerührt und filtriert. Das feste Produkt wurde viermal mit je 10 ml Aceton gewaschen. Nach dem Trocknen wurden 5,55 g Kristalle des genannten Carbonsäuredihydrochloridmonohydrats erholten. (Ausbeute 92%, gerechnet als reines Produkt).

Elementaranalyse für C₈Hj₁NyO₄S, ' 2 HCI · 2H₂O:

Berechnet: C 35,06; H 4,41; N 20,45; 5 15,60; Cl 11,50;

Gerunden: C 34,48; H 4,48; N 20,55: S 15,22 Cl 11,49.

Das Röntgenpulverdiagramm dieses Produkts zeigte, daß es ein kristallines Pulver war, dessen durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schnellmethode bestimmte Reinheit 99,4% auf Anhydratbasis betrug.

Beispiel 6

Zu 6,2 g 7/-[2-(2-Imino-4-thia/.olin-4-yl)-acctamido-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)äthyl]-l H-tetrazol-5-yl]lhiomethyl-3-cephcm-4-carbonsüuredihydrochlorid · 1,5 Hydrat, das auf die in Beispiel 4-(l) beschriebene Weise hergestellt worden war, wurden 19 ml 2n-HCl gegeben. Die erhaltene Lösung wurde zusammen mit ml Äthanol 2 Stunden bei 5°C gerührt. Das Gemisch wurde weitere 2 Stunden bei 10°C gerührt, worauf die Fällung abfiltriert, viermal mit je 15 ml Äthanol gewaschen, an der Luft getrocknet und dann unter vermindertem Druck bei 30°C getrocknet wurde. Hierbei wurden 5,6 g des genannten Carbonsäuredihydrochloriddihydrats erhalten.

Das Röntgenpulverdiagramm und die Untersuchung unter dem Polarisationsmikroskop ergaben, daß dieses Produkt kristallin war.

Beispiel 7

1) 5,0 leinermit 12n-HClaufpH 2,0 eingestciitcn wäßrigen Lösung,die510gder5^'[2-(2-irnino-4-thiazoiin-4-yl)acetamido]-3-[l-[2-(N,N-dimethylamiiio)äthyl]-l H-tetrazol-S-yllthtomethylO-cepherrHt-carbonsäure enthielt, wurden auf 10⁰C gekühlt. Nach Zugabe von 7,0 g Aktivkohle wurde die Lösung 5 Mini-ten Berührt. Die Aktivkohle wurde abfillriert und mit 500 ml Wasser gewaschen. Das Filtrat wurde mit dem

Waschwasser vereinigt und unter vermindertem Druck bei einer Innentemperatur von 15 bis 17°C auf 2,28 I eingeengt. Die eingeengte Lösung wurde erneut filtriert und gewaschen. Hierbei wurden 2,38 I Filtrat plus Waschwasser erhalten, das 478 g der genannten Carbonsäure enthielt. Zum Filtrat wurden 0,2 I Aceton und anschließend 170 ml 12 n-l ICI gegeben. Dann wurden 7 I Aceton über eine Zeit von 10 Minuten zugesetzt. Die Lösung wurde 2 Stunden bei 5 bis 10⁰C gerührt, worauf weitere 7 I Aceton über eine Zeit» on 10 Minuten zugesetzt wurden. Anschließend wurde eine weitere Stunde gerührt. Das Gemisch wurde über Nacht stehen gelassen. Die hierbei gebildeten Kristalle wurden abfiltriert und viermal mü je I 1 Aceton gewaschen. Ein Teil des kristallinen Produkts wurde 30 Minuten in einem Exsiccator bei Raumtemperatur und 30 mm Hg getrocknet. Die getrockneten Kristalle enthielten 8.9% Wasser 2,2% eingelagertes Aceton. Der für die Formel

C_litH₂,N„O,S·, · 2HCI · 3 11,0

berechnete Wassergehalt betrug 8,28%. Der übrige Teil der Kristalle wurde in ein gesondertes Glasfilter überführt. Stickstoffgas, das vorher durch Durchleiten durch eine Wasser enthaltende Waschflasche (die Wassertemperatur wurde bei 25 bis 30⁰C gehalten) befeuchtet worden war, wurde in einer Menge von 3 I/ Minute für eine Dauer von 6 Stunden durch die Kristallschicht geleitet. Der Wassergehalt einer Probe betrug 19,5%. Der für die Formel

CHaN₉O₄S₃ · 2 HCl · 8 H₂O

berechnete Wassergehalt betrug 19,41%. Dieses Produkt enthielt kein Aceton. Sein Röntgenpulverdiagramm zeigte, daß es kristallin war. Die Kristalle wurden als etwa 3 cm dicke Schicht ausgebreitet und 1,5 Stunden bei 30⁰C unter vermindertem Druck von 5 mm Hg getrocknet. (Der Wassergehalt einer Probe betrug 17,2%. Der Tür

C₁₁H₂₃N₉O₄S₃-2 HCl ■ 7H₂O

berechnete Wassergehalt betrug 17,41%.) Die Kristalle wurden unter den gleichen Bedingungen weitere

1,5 Stunden getrocknet (der Wassergehall betrug nun 15,4% und der für

C₁₈H₂₃N₉O₄S₃ -2 HCl -6 H₂O

berechnete Wassergehalt 15,3%), worauf weitere 1,5 Stunden getrocknet wurde (hierauf betrug der Wassergehalt 13,3% und der für

C₁₈H₂₃N₉O₄S₃ ■ 2 HCl ■ 5 H₂O

_w berechnete Wassergehalt 13,08%.) Die Kristalle wurden weitere 1,5 Stunden getrocknet. (Der Wassergehalt

betrug nun 10,5% und der für

C₁₈H₂₃N₉O₄S₃-2HCl-4H₂O

berechnete Wassergehalt 10,75%.) Nach dem Trocknen unter den gleichen Bedingungen für weitere

1,5 Stunden hatten die Kristalle die folgenden Eigenschaften:

Wassergehalt 8,50% (fur C₈H^N₁₁O₄S., · 2 HCI · 3 H,0 berechneter Wassergehalt 8,28%). Röntgenpulverdiagramm: kristallin

Cl-Gehalt (bestimmt durch Titration von AgNO₁): 10,6% (berechnet Tür C,_sH₂,N,,O.,S.i · 2 HCI ■ 3 H₂O: 10,8%).

2) Die gemäß Abschnitt (1) erhaltenen Kristalle wurden bei 30⁰C und 2 mm Hg in Gegenwart von Phosphorsäureanhydrid 5 Stunden getrocknet. Hierbei wurden 510 g eines kristallinen Produkts erhalten. Wassergehalt 5,7% (für

C₁₈H₂₃N₉O₄S₃ · 2 HCl · 2 H₂O

berechneter Wassergehalt 5,68%).
Röntgenpulverdiagramm: kristallin.

IR (KBr) cm"¹: 1770 Ge-Lactam) mit scharfen Peaks, die für Kristalle charakteristisch waren, bei 1670, 1190 (Sh) und 1170 cm '.

3) Die gemäß Abschnitt (2) erhaltenen Kristalle wurden 8 Stunden bei 30⁰C unter einem Vakuum von 2 mm Hg in Gegenwart von Phosphorsäureanhydrid getrocknet. Hierbei wurden 495 g eines kristallinen Produkts erhalten. Wassergehalt 3,12% (berechnet für Ci₈H₂₃NoO₄S₁ · 2 HCl ■ H₂O: 2,92%); Reinheit als Anhydrat

(bestimmt durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schnellmethode): 99,5%; Röntgenpulverdiagramm: kristallin.

EIementaranalyse fur Ci₈H₂₃NsO₄S₃ · 2 HCl · H₁O:

Berechnet: C 35,06; H 4,41; " N 20,45; S 15,60; Cl 11,50;

Gefunden: C34,78; H4,5i; N 20,62; S 15,31; Cl 11,77.

[σ]-;" (C = 1%, HO) = + 67,0° Restliches Lösungsmittel (Aceton): nicht mehr als 50 ppm; Cl-Gehalt (bestimmt durch Titration von AgNO,): 11,4%, berechnet 11,50%; A_CTI1> (H₂O): 258 ma (c 19 500); Biotest*): 865 ag/ml.

*) Der Biotest nach der Zy lindermethode wurde unter Verwendung von 7 JJ-[2-(2-Imino-4-thiazolin-4-y>)acetamtdo]- 3-[l-[2-(N.N-dimethylaminc)äthy!l-I H-tetrazol-S-yll-thiomethyl-S-cephem^-carbonsäuredihydrochlorid als Standardprodukt gegen Bacillus subtilis ATCC 6633 als Testmikroorganismus durchgeführt.

Die wasserfreie Zwitterionenverbindung hatte eine Wirksamkeit von 1000 pg/inl. Die berechnete Wirkung einer Probe, die 2 Mo! HCl pro Mol der Zwitterionenverbindung und keine nicht bindende Salzsäure, kein Wasser, kein restliches Lösungsmittel oder eine sonstige Verunreinigung enthält, beträgt 878 ug/ml.

Beispiel 8

1) In 20 ml Wasser wurden 5,26 g eines Lyophilisats der 7_/?-[2-(2-lmino-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)-äthy!H H-tetrazol-5-yl]thiornethyl-3-cephem-4-carbonsäure (Wassergehalt 3,1%; Gehalt an Zwitterionen 93,5%, bestimmt durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schneiimeihode) gelöst. Zur Lösung wurden 20 ml Aceton und dann 4 ml 1On-HCl gegeben. Dann wurden 96 ml Aceton unter Rühren bei 20⁰C über eine Zeit von 10 Minuten zugesetzt. Das Gemisch wurde 2 Stunden gerührt, worauf weitere 72 ml Aceton innerhalb von 20 Minuten zugesetzt wurden. Nach erfolgter Zugabe wurde das Gemisch 30 Minuten gerührt. Die hierbei gebildeten Kristalle wurden abfiltriert und fünfmal mit je 15 ml Aceton gewaschen. Die Kristalle wurden in befeuchteter Luft (relative Feuchtigkeit 58%) 2 Stunden getrocknet Hierbei wurden 6,0 g feuchte Kristalle mit einem Wassergehalt von 13% erhalten. Dieses Produkt wurde unter vermindertem Druck 2 Stunden weiter getrocknet, wober 5,7 g Kristalle (das genannte Carbonsäuredihydrochlorid - 4H₂O) erhalten wurden. Wassergehalt 10,9% (berechnet für CH₂₃N.,O₄S₃ - 2 HCI · 4 H₂O: 10,8%); Reinheit als Anhydrat (bestimmt durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schnellmethode): 99,6%; Röntgenpulverdiagramm: kristallin.

2) In Gegenwart von Phosphorsäureanhydrid wurden 3 g der gemäß Abschnitt (1) erhaltenen Kristalle unter vermindertem Druck von 5 mm Hg 2 Stunden bei 3(J°C und 5 Stunden bei 50⁰C getrocknet. Hierbei wurden 2,6 g des genannten Carbonsäuredlihydrochlorid · 0,1 H₂O in Pulverform erhalten.

Wassergehalt: 0,3% (berechnet fur C₁₈H₂₃N₉O₄S₃ · 2 HCl-0,1 H₂O: 0,3%); Röntgenpulverdiagramm: nicht kristallin; Untersuchung unter dem Polarisationsmikroskop: Während der Objektträger gedreht wurde, wurden Interferenzfarben durch gekreuzte Nicoische Prismen beobachtet, ein Beweis für optische Anisotropie und damit dafür, daß das Pulver kristallin war. Reinheit als Anhydrat (bestimmt durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schnellmethode): 99,6%.

Beispiel 9

1) Zu 5 ml einer wäßrigen Lösung, die 7jö-[2-(2-Imino-4-thiazolin-4-yl)acetamido]-3-[l-(2-(N,N-dimethylamino)-äthyl]l H-tetrazoi-S-yljthiomethyl-S-cephenrwi-carbonsäure enthielt (gemäß Bestimmung durch Flüssigkeitschromatographie nach der Schnellmethodc enthielt diese Lösung 1,05 g der genannten Carbonsäure und 15 mg l-[2-(N,N-Dimethylamino)äthyl]-5-mercapto-l H-tetrazol sowie Spuren anderer Verunreinigungen), wurde 1,0 ml 4n-HCI gegeben. Die erhaltene Lösung wurde allmählich tropfenweise unter Rühren zu 300 ml Aceton gegeben, das vorher auf 5°C gekühlt worden war. Die pulverfbrmige Fällung wurde abfiltriert, viermal mit je 5 ml Aceton gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Hierbei wurden 1,2 g des genannten Carbonsäure · 2 HCI ■ 1,2H₂O in Pulverform erhalten.

Wassergehall 3,45% (berechnet für CH₂₃NgO₄S₃ · 2 HCI 1,2 H,O: 3,48%); Cl-Gchalt (bestimmt durch Titration von AgNO₁): 1 1,6% (berechnet für Ci₁₁Hj₁N₁₁O₄S, · 2 HCI · 1,2 H₂O: 11,4%); Reinheit als Anhydrat (bestimmt durch Flüssigkcitschromatogranhic nach der Schnellmethodc): 96,2%; Röntgenpulverdiagramm: nicht-kristallin.

2) 0.3 g des gemäß dem vorstehenden Abschnitt (1) erhaltenen Pulvers wurden in einer Schale ausgebreitet. in inem verschlossenen Gefäß, das eine gesättigte wäßrige NaBr-Lösung enthielt, ließ man es über Nacht bei 25°C Feuchtigkeit absorbieren. Das Pulver wurde hierbei befeuchtet, anschließend ölig und erstarrte schließlich. Dieser Feststoff wurde unter vermindertem Druck getrocknet, wobei 0,3 g des genannten Carbonsäure · 2HCI · 2,3 H₂O in Kristallform erhalten wurden.

Wassergehalt: 6,6% (berechnet für ChH₃JN₁₁O₄Sj · 2HCI · 2,3 HjO; 6,5%); Reinheit 95,2%; Cl-Gehalt (bestimmt durch EIementaranalyse): 11,5% (berechnet 11,1V«); Röntgenpulverdiagramm: kristallin.

Beispiel 10

Einem Gemisch von 3 ml l,5n-HCI und 3 ml n-Propanol wurden unter Rühren bei 1O⁰C 0,53 g Ί β-[2-(2-\τηί· no-4-thiazolin-4-yl)acetamidol-3-[l-(2-(N,N-dimcthylamino)-äthyl|-l H-tetrazol-5-yllthiomethy 1-3-CePhCm-¹I-carbonsäure zugesetzt. Nach Zugabe von 9 ml n-Propanol wurde das Gemisch 5 Stunden bei 10⁰C gerührt, worauf 9 ml n-Propanol zugesetzt wurden. Das Gemisch wurde über Nacht bei 5°C stehen gelassen. Die extra-

hielten Kristalle wurden abfiltriert, an der LuR getrocknet und abschücBcnd dehydratisiert, wobei 0,50 g des genannten Carbonsäuredihydrochloriddihydrats in Krislallform erhalten wurden.

IR (KBr) cm ': 1770 (/Ϊ-Lactam), 1670, 1190, 1170

Elementaranalyse fur C₁₈H₂₁N₉O₄S₃ · 2 HCl - 2 H₂O:
Berechnet: C 34,07; H 4,61; N 19,86; Cl 11,17;

Gefunden: C 33,81; H 4,50; N 20,11; Cl 10,98.

Vergleichsversuch

Je eine Probe der nachstehend genannten Verbindungen wurde in einer verschlossenen Ampullenflasche 4 Wochen bei 50°C aufbewahrt: Das Natriumsalz, Zwitterion und Monohydrochlorid von 7_/?-[2-{2-Imino-4-thiazolin-4-yl)acetamido]-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)äthyl]-l H-tetrazol-S-yllthiomethyW-cepheirHt-carbonsäure sowie die durch Gefriertrocknen erhaltenen Pulver dieses Dihydrochloride (amorphe Pulver, Beispiel j

4-(2)), das kristalline Dihydrochlorid (Beispiel 1-(I)) und die durch Trocknen des kristallinen Dihydrochlorids j

erhaltenen nicht-kristallinen Pulver (Beispiel l-(2)), die gemäß der Erfindung hergestellt wurden. Dic.erblicbenen restlichen Mengen sind nachstehend genannt.

$

Zu 1,0 g 7jS[2-(2-IminothiazoIin-4-yl)acetamidoJ-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)äthyl]-l H-tetrazol-5-yl]thio- i

methylO-cephem^-carbonsäure wurden 46 ml Wasser und 4 ml 1 n-HCI gegeben. Nach Zugabe von 500 ml Aceton wurde das Gemisch 2 Stunden gerührt, worauf weitere 700 ml Aceton zugesetzt wurden und das M

Gemisch über Nacht bei 5°C stehen gelassen wurde. Die ausgefällten Nadeln wurden abfiltriert, mit Aceton ψ

gewaschen und im Exsiccator 15 Stunden bei 15 bis 20⁰C unter vermindertem Druck getrocknet, wobei 0,4 g Kristalle erhalten wurden.

Elementaranalyse für CmH₂₁N₉O₄S, ■ 2 HCI ■ H₂O · 0,13 Aceton:

Berechnet: C 35,39; H 4,49; N 20,20; Cl 15,38;

Gefunden: C34,78; H 4,53; N 19,87; Cl 15,38.

Wassergehalt: 2,91%.
Röntgenpulverdiagramm: kristallin.

Betspiel 12

Zu 1,7 g 7^-[2-[2-Imino-4-thiazolin-4-yl)-acctamido]-3-[l-[2-(N,N-dimethylamino)äthyl]-l H-tetrazol-5-yl]-

thiomethylO-cephem^-carbonsäure wurden 8 ml 2n-HCI gegeben, worauf 73 ml Äthanol zugesetzt wurden.

Das Gemisch wurde über Nacht bei 5°C stehen gelassen, worauf die ausgefällten Kristalle abfiltriert und 30 Minuten unter vermindertem Druck getrocknet wurden. Hierbei wurde 1,0 g Kristalle erhalten. Das NMR-Spektrum (60 MHz, D₂O) ergab, daß diese Kristalle 0,65 Moi Äthanol pro Mol Carbonsäure enthielten.

Wassergehalt: 7,70%; berechnet für C_1HH₂.,N^O₄S., · 2 HCI · 3 H₂O ■ 0,65 Äthanol: 7,92%. Röntgenpulverdiagramm: kristallin.
ho Elemcntaranalysc für C|_HH_MN_gÖ.,S, · 2 HCI · 2 H₂O:

Berechnet: C 34,07; H 4,61; N 19,86; Cl 11,17;

Gefunden: C 33,81; 114,50; N20.il; Cl 10,98.

Probe-	Wassergehalt	Rest
Kristalle gemäß Beispiel 1-(1)	3,1	99
Pulver von Beispiel l-(2)	1,9	98
Produkt von Beispiel 4-(2)	0,50	86
Natriumsalz (Lyophilisat)	0,48	76
Zwitterion (Lyophilisat)	0,50	54
Monohydrochlorid (Lyophilisat)	0,58	73
Beispiel 11

Claims

Patentansprüche:

1. Salze des Cefotiams der Formel

HN

HN—π—CH₂CONH O

2 HX π H₂O

CH₂CH₂N(CHj)₂