DE2721681B2 - Kontroll-Lösung für diagnostische Nachweisverfahren von im Urin enthaltenen Stoffen - Google Patents

Kontroll-Lösung für diagnostische Nachweisverfahren von im Urin enthaltenen Stoffen

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Description

Die Erfindung betrifft eine Kontroll-Lösung für diagnostische Nachweisverfahren von im Urin enthaltenen Stoffen, die ggf. auch in Form eines in Wasser löslichen Pulvergemisches oder in getrockneter, vorzugsweise in lyophilisierter Form vorliegen kann.
Die immer wiederkehrenden Fehler bei Urin-Analysen hat die Forderung nach mitzuführenden Kontroll-Substanzen laut werden lassen. Insbesondere Schnelldiagnostika, wie Teststreifen, müssen hinsichtlich ihrer Aussagekraft bei der schnellen semiquantitativen Bestimmung eines Urinstatus kontrolliert werden. Die Bestimmung eines Urinstatus würde im wesentlichen erfordern den Nachweis von Glucose, Protein, Keton und Nitrit, ferner Blut- und pH-Wert, um die wichtigsten zu nennen.
Die Empfindlichkeit der diagnostischen Mittel zur Bestimmung der genannten Komponenten gegenüber äußeren Einflüssen, wie z. B. Luftfeuchtigkeit und Temperatur, macht es erforderlich, diese Mittel hinsichtlich ihrer Funktionstüchtigkeit zu kontrollieren. Es besteht deshalb ein Bedarf nach einer Kontroll-Lösung, die sich bei den Analysen, zumindest hinsichtlich einiger Bestandteile des Urins ähnlich verhält wie der Urin selbst.
Man hat deshalb versucht, sogenannte KontroII-Urine zur Verfugung zu stellen. Zum Teil wird hierfür gefriergetrockneter Urin eingesetzt, in welchem nicht stabile Stoffe durch chemisch stabile Äquivalente ersetzt werden.
Obwohl der Nachweis von Nitrit im Urin als Hinweis auf das Vorhandensein Nitrit-bildender Bakterien von großer Bedeutung ist, wurde dieser Bereich in Kontroll-Urinen bisher vernachlässigt. Einen ähnlichen Mangel zeigen die bekannten Kontroll-Urine auch bezüglich ihres Gehaltes an Keton-Körpern, wie Aceton oder Acetessigsäure.
Der Zusatz von Nitrit zu Flüssigkeiten oder zu aufzulösenden Produkten, welche verschiedene Komponenten des Urins simulieren sollen, hat sich als nicht gangbar erwiesen. Anorganische Nitrite erweisen sich als instabil.
Ähnliches gilt auch für Ketonkörper. Aceton eignet sich höchstens für Kontroll-Urine, die in flüssiger Form gehalten werden. Eine Gefriertrocknung von Acetonhaltigem Material ist wegen dessen Flüchtigkeit nicht möglich. Als Bestandteil eines trockenen, wasserlöslichen Pulvers ist Aceton ungeeignet.
Neben der Instabilität einiger Komponenten des Urins, bzw. der dafür in Aussicht genommenen Ersatzstoffe, ist noch zu berücksichtigen, daß Wechselwirkungen der Komponenten untereinander auszuschließen sind, um das Analysenergebnis, welches mit der Mischung erhalten wird, nicht zu beeinträchtigen.
Die Aufgabe der Erfindung besteht nun darin, eine Kontroll-Lösung für diagnostische Urin-Analysen herzustellen, die Ersatzstoffe für Keton-Körper und Nitrit
ίο enthält
Die Aufgabe wird dadurch gelöst, daß sine solche Kontroll-Lösung ein wasserlösliches Acetylacetonat und/oder ein wasserlösliches Hexanitritocoboltat(IlI)-SaIz enthält Dabei dient das Acetylacetonat als Keton-Körper-Ersatz und das Hexanitritocobaltat-(III)-SaIz als Nitrit-Ersatz.
Acetylacetonate im Sinne der Erfindung sind alle wasserlösliche Salze des Acetylacetons. Bevorzugt wird das Aluminiumsalz. Die erfindungsgemäßen Acetylace-
2(i tonate zeigen die geforderten analytischen Eigenschaften als Ersatzsubstanz für Ketone wie Aceton bzw. Acetessigsäure. Als gefriergetrocknetes Mittel sind Acetylacetonate gut rekonstituierbar. Das Lyophilisat ist äußerst lagerfähig. Selbst nach einjähriger Lagerung bei Raumtemperatur reagieren die Salze des Acetylacetons mit Nitroprossidnatrium wie für frisch angesetzte Keton-haltige Lösungen gefordert
Die Konzentration des Acetylacetonats in Lösung soll 10 bis 300 mg/100 ml, vorzugsweise 50—150 mg/100 ml,
ίο betragen.
Als Nitrit-Ersatz im Sinne der Erfindung gelten wasserlösliche Salze des Hcxanitritocobaltat-(lll), z. B. die Natrium-, Lithium-, Kalium-, Ammonium-, Calcium-, Strontium-, Magnesium- oder Bariumsalze, ferner die
« Salze mit organischen Basen wie Methylamin oder Guanidin. Bevorzugt wird das Natriumsalz.
Bei der erfindungsgemäßen Verwendung dieser Verbindungen als Nitritersatz zeigt sich überraschend, daß die Nachweisreaktion für Nitrit auch in Gegenwart
■to eines primären aromatischen Amins über längere Zeit erhalten bleibt. Dies gilt auch für ein gefriergetrocknetes Material. Als Vorteil zeigt sich außerdem, daß Hexanitritocobaltate dem künstlichen Kontroll-Urin eine wünschenswerte natürlich-gelbe Farbe verleiht und damit eine bessere Vergleichbarkeit mit natürlichem Urin ermöglicht.
Die Konzentration des Hexanitritocobaltats soll 0,1 bis 300 mg/100 ml, vorzugsweise 1 bis 10 mg/100 ml, betragen.
ίο Außer Acetylacetonat und/oder Hexanitritocobaltat können die erfindungsgemäßen Kontroll-Lösungen bzw. Lyophilisate weitere Bestandteile enthalten, wie sie in Urin-Ersatzstoffen üblich und bekannt sind. Hierzu gehören beispielsweise Hexosen wie Glucose oder Galactose, Eiweißstoffe wie u. a. Albumin, Globuline oder auch Bence-Jones-Proteine, reduzierende Verbindungen wie Ascorbinsäure, Puffersalze, Harnstoff und Harnsäure, peroxidatisch wirksame Substanzen wie Erythrozyten, Hormone, Steroide und Spurenelemente, ggf. auch Farbstoffe, insbesondere Gallenfarbstoffe. Weiterhin können auch definierte Verbindungen zum Nachweis von Medikamenten, Drogen und Giftstoffen enthalten sein. Die erfindungsgemäße Kontroll-Lösung kann auch in Form eines in Wasser löslichen Pulvergemisches oder in getrockneter, vorzugsweise in lyophilisierter Form, vorliegen.
Mit den folgenden Beispielen wird die Erfindung näher erläutert.
Beispiel 1
In 100 ml eines 0,1 -m-Phosphatpuffers, pH 6, werden gelöst:
100 mg Glucose
75 mg Human-Serum-Albumin
75 mg Aluminiumacetylacetonat
75 mg N-Naphthyläthylendiamin-dihydrochlorid
1 mg Natriumhexanitritocobaltat
Die ockerfarbene Lösung wird filtriert und nach bekannten Verfahren lyophilisiert.
Das Lyophilisat ist mindestens sechs Monate lagerstabil. Zur Rekonstituierung kann es wieder mit 100 ml Wasser aufgelöst werden. In dieser Lösung können außer den anderen Komponenten Keton und Nitrit klar und deutlich mit den entsprechenden Reagenzien-Teststreifen wie in natürlichem Urin nachgewiesen werden.
10
Beispiel 2
0,5 g di-Natriumhydrogenphosphat-12 Hydrat
1,35 g Natrium-di-Hydrogenphosphat-2 Hydrat
0,15 g Glucose
0,05 g Rinder-Serum-Albumin
0,05 g Aluminiumacetylacetonat
0,005 g N-Phenyl-l-Naphthylamin-8-Sulfonsäure
0,001 g Natriumhexanitritocobaltat
Die Komponenten werden gründlich miteinander vermischt und trocken abgefüllt.
Selbst nach einer Lagerzeit von sechs Monaten löst sich der Kontroll-Urin noch in 100 ml Wasser.
Die einzelnen Komponenten können deutlich bestimmt werden. Keton und Nitrit sind mit den jeweiligen Reagenzien-Teststreifen wie in natürlichem Urin nachzuweisen.

Claims (2)

Patentansprüche:
1. Kontroll-Lösung für diagnostische Nachweisverfahren von im Urin enthaltenen Stoffen, d a durch gekennzeichnet, daß sie ein wasserlösliches Acetylaceton at und/oder ein wasserlösliches Hexanitritocobaltat-(III)-Salz enthält
2. Kontroll-Lösung nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie in Form eines in Wasser löslichen Pulvergemisches oder in getrockneter, vorzugsweise in lyophilisierter Form, vorliegt.
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