DE2700698B2

DE2700698B2 - Verfahren zur mikrobiologischen Gewinnung von Einzellerprotein auf Basis von Äthanol

Info

Publication number: DE2700698B2
Application number: DE19772700698
Authority: DE
Inventors: Jose Prof. Dr. Dr. Madrid Garrido-Marquez; Josef Hubert 5000 Koeln Schick
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1977-01-10
Filing date: 1977-01-10
Publication date: 1979-08-30
Also published as: DE2700698A1; DE2700698C3; SU929013A3

Description

Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur mikrobiologischen Gewinnung von Einzellerprotein auf Basis von Äthanol, bei dem in einem wäßrigen, einen pH-Wert von 2J5 bis 4 aufweisenden Nährmedium, das Nährsalze, saures Phosphat und stickstoffhaltige Substanz enthält, in Anwesenheit von Äthanol und Sauerstoff äthanolverwertende Hefen bei Temperaturen von 20 bis 40"C unter aeroben Bedingungen in einem Fermenter kultiviert und die dabei gezüchtete Biomasse abgetrennt und getrocknet als Pfoteinprodukt gewonnen wird.

Es besteht Bedarf an möglichst hochwertigen Nahrungsmitteln, um die ständig wachsende Zahl der Menschen ausreichend und zweckmäßig zu ernähren.

Bekanntermaßen findet die Eiweißherstellung aus Kohlenwasserstoffen ein steigendes Interesse aufgrund der wachsenden Nachfrage nach eiweißhaltigen Produkten. Eine bekannte Möglichkeit zur Herstellung von ϊ Eiweißprodukten, die entweder direkt als Nahrungsmittel für Menschen oder indirekt als Futtermittel für Tiere zu dienen vermögen, ist die mikrobiologische Gewinnung von Einzellerprotein (sogenanntem »single cell protein«; im folgenden abgekürzt als SCP bezeichnet)

ίο durch Züchtung von SCP-bildenden Mikroorganismen, wie Hefen oder Bakterien. Es sind zu diesem Zweck bereits manche Verfahren zur Durchführung von biologischen Gärungsprozessen in Vorschlag gebracht und verschiedene Rohstoffe als Substrate für die Herstellung von SCP vorgeschlagen worden. Beispielsweise begann die Entwicklung mit der Verwertung von Kohlenhydrat-Abfällen aus der Industrie, vrs Melasse aus der Zuckerherstellung, Sägemehl aus der Holzverarbeitung und der in der Zellstoffindustrie anfallenden Sulfitablauge. Neuere Verfahren benutzen aus Erdöl erhältliche Produkte als Substrat; es wurden Mikroorganismen gefunden, die von Rohöl, n-Paraffinen, Methan. Methanol und Äthanol leben können. Jedoch macht die Herstellung von SCP in Nahrungsmittelquali-

2~> tat bisher noch erhebliche Schwierigkeiten. Beim Einsatz von η-Paraffinen als Substrat werden vielfach Bakterien verwendet, die die Steuerung der Prozesse und die Infektionsgefahr im Kulturmedium zu unüberwindbaren Problemen werden lassen. Darüber hinaus

jo ergeben sich bei den bisher bekannten Arbeitsweisen Schwierigkeiten bei der Homogenerhaltung der Vier-Phasen-Mischung: n-Paraffin, Wasser, Luft bzw. Sauerstoff und Feststoff. Die Substrat-Rohstoffe Erdöl und η-Paraffin enthalten darüber hinaus toxische Stoffe, die

α durch aufwendige Reinigungsprozesse entweder aus dem Substrat oder aus dem Endprodukt, der Biomasse, entfernt werden müssen. Eine vollständige Reinigung und die Gewinnung einer Biomasse, die keinerlei Spuren derartiger unerwünschter Stoffe mehr enthält, ist jedoch

*> praktisch nicht möglich. Dies hat zur Folge, daß derartige SCP-Produkte bei der Zulassung als Futtermittel auf den Widerstand von Behörden und Verbraucherorganisationen stießen.
Um diesen Schwierigkeiten aus dem Weg zu gehen

-i^r> wurde bereits vorgeschlagen. Methanol und Äthanol als Substrat für die Herstellung von SCP zu verwenden. Es sind biosynthetischen Verfahren bekannt, bei denen bestimmte Bakterienstämme, beispielsweise die Stämme Methylomonas species und Methylomonas meth-

w anolica, Methylotropnic bacterium, Pseudomonas methanica oder auch Bakterienstämme der Gattungen Bacillus, Actinomyces, Protaminobacter, Micrococcus und Corynebacterium u.a. in einem synthetischen Nährmedium, welches als einzige oder überwiegende

">'> Kohlenstoffquelle Methanol enthält, fermentativ vermehrt werden. Eine weitere Möglichkeit ist die Verwendung von Hefen auf Methanol- bzw. Äthanolhaltigen Substraten, und hier werden insbesondere Candida-Hefen eingesetzt Bei beiden Verfahrensarten

w) erhält man bekanntermaßen Substrat-Ausbeuten, die zwischen 40 und 45% liegen, und deren Sauerstoff-Ausbeute ca. 20 bis 25% beträgt Der Proteingehalt der gewonnenen Eiweißprodukte liegt bei der Verwendung von Hefen bei etwa 60%, bei der Verwendung von

<" Bakterien bei etwa 80%.

Bei Einsatz von Methanol als Substrat besteht der Nachteil, daß die gewonnene Biomasse als Protein für den menschlichen Verbrauch nur indirekt eingesetzt

werden kann, da solche Eiweißprodukte nur als Tierfuttermittel benutzbar sind, solange gegen die Zulassung als Nahrungsmittel direkt für die menschliche Ernährung seitens der Behörden Vorbehalte und Verbote bestehen. Wenn Bakterien eingesetzt werden, besteht dazu der Nachteil, daß große Gefahr von Infektionen durch fremde Bakterien vorhanden ist und dies noch dadurch gefördert wird, daß derartige Prozesse bei einem pH-Wert von 6 bis 7 gefahren werden. Dieser pH-Wert gibt den Fremdbakterien ideale Wachstumgsbedingungen. Durch Einsatz von Hefen, insbesondere gewisser Hefen der Saccharomycetoideae- und Cryptococcoideae-Unterfamilien, wie sie von der amerikanischen Food and Drug Administration zur direkten Verwendung in für den menschlichen is Verbrauch bestimmten Nahrungsmitteln zugelassen sind, auf Äthanol als Substrat und die Gewinnung von als Nahrungsmittelprodukte direkt für den menschlichen Verbrauch geeigneter SCP ermöglicht

Bekannt ist auch ein Verfahren zur Oxydation eines oxydierbaren Materials, insbesondere eines Kohlenwasserstoffes, bei dem Proteine anfallen (DE-OS 22 39 000). In der Beschreibung dieses Verfahrens werden insbesondere Maßnahmen zum Beseitigen von Verunreinigungen in den bei diesem Verfahren auftretenden Gasgemischen hervorgehoben. Die Herstellung der Proteine und die dabei erzielbaren Ausbeuten werden nicht näher erläutert

Beschrieben ist auch noch ein Fermentationsverfahren zur Gewinnung von Proteinen (US-PS 38 56 626). μ Die Beschreibung enthält jedoch keine Schilderung des ganzen Produktionsablaufes. Die Beschreibung beschränkt sich auf die Erläuterung von Bakterienstämmen, Mikroorganismen, bei dem Verfahren verwendete technische Einrichtungen usw. Die Beschreibung enthält keine Hinweise auf erzielbare Ausbeuten, die einen Vergleich mit anderen Fermentationsverfahren zulassen.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein solches Verfahren dieser Art zu schaffen, das mit gegenüber den bekannten Verfahren höherer Substrat- und Sauerstoff-Ausbeute arbeitet und zu SCP-Produkten höherer Reinheit führt.

Die Erfindung ist in den Ansprüchen definiert

Die mit dem erfindungsgemäßen Verfahren gemäß Anspruch 1 erzielbaren hohen Ausbeuten erklären sich daraus, daß durch die tangentiale Einführung des mit den ultrafeinen Sauerstoffblasen angereicherten Nährmediums optimale Bedingungen für das Hefewachstum erreicht werden. Es kommt hinzu, daß bei dem bekannten Verfahren Luft, die an den Vorgängen nicht teilnehmenden Stickstoff enthält, eingeführt wird. In dem Fermenter nimmt dieser Stickstoff entsprechend seinem Anteil in der Luft ein bestimmtes Volumen ein, das für die Reaktionen verloren geht Ein größeres totes « Gasvolumen bildet sich aus. Beim erfindungsgemäßen Verfahren beschränkt sich das Gasvolumen auf den noch nicht verbrauchten Sauerstoff und das bei der Fermentation entstehende Kohlendioxyd. Durch die ständige Bewegung des Kulturmediums und die genannte im Vergleich zum Stand der Technik kurze Aufenthaltszeit des Gas-Flüssigkeits-Feststoff-Gemisches, die einem schnellen Umpumpen entspricht, wird dieses Kohlendioxyd rasch abgezogen und damit der Gasgehalt im Fermenter auf einem Minimum gehalten, es Damit wird praktisch der gesamte Innenraum des Fermenters für die gewünschten zur Bildung der Biomasse führenden Reaktionen ausgenutzt.

Die Verhinderung einer Schaumbildung und das Vermeiden eines Gaspolsters werden gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung (Anspruch 2) dann begünstigt, wenn das Gas-Flüssigkeits-Feststoffgemisch mit einer solchen Umpumpgeschwindigkeit durch den Fermenter durchgeleitet wird, daß sich bildende Gasblasen mitgerissen und vor einer Schaumbildung aus dem Fermer.ter abgeleitet werden.

Hierzu hat sich als zweckmäßig herausgestellt veinen Sauerstoff zuzuführen. Mit dem Erzeugen von reinem Sauerstoff sind Kosten verbunden. Diese werden jedoch durch die bei Verwendung von reinem Sauerstoff entstehenden Vorteile aufgewogen. Zum Beispiel fällt kein N2 an, das eine Schaumbildung begünstigt und nur abgeleitet werden muß. Das Abgas besteht daher lediglich aus CO2 und unverbrauchtem O2.

Als vorteilhaft hat sich weiter herausgestellt, daß die in dem Fermenter entstandene Biomasse außerhalb des Fermenters abgekühlt wird. Hierzu wird sie in einen dem Fermenter nachgeschalteten Wärmetauscher eingeleitet In dessen oberem Bereich wird sie entgast

Vorteilhaft arbeitet man beim erfindungsgemäßen Verfahren so, daß man den pH-Wert des Nährmediums auf 3,5 und die Aufenthaltszeit des Gas-Flüssigkeits-Feststoffgemisches im Fermenter auf 0,6 h~' einstellt und es hat sich als besonders vorteilhaft erwiesen, wenn man mit bis zu 3 ΐπμ zerteiltem Sauerstoff begast

Das erfindungsgemäße Verfahren hat den Vorteil, daß man hohe Substratausbeuten, die zwischen 70 und 80% liegen, und hohe Sauerstoffausbeuten von ca. 80% und mehr erreicht und gleichzeitig SCP-Produkte höchster Reinheit gewinnt

Zu der Beschickung des Fermenters mit reinem Sauerstoff statt mit Luft, wie nach dem Stand der Technik, sei noch ausgeführt daß der Sauerstoff nicht völlig rein zu sein braucht Eine Reinheit von 95% reicht aus. Ebenso darf der Sauerstoff Feuchtigkeit enthalten.

Bei den erfindungsgemäßen Verfahren wird mit einer im Verhältnis zum Durchmesser und zur Höhe des Fermenters hohen Pumpenleistung gearbeitet. Bei einem Volumen von 20 m³ allein im Fermenter wird etwa 30mal pro Stunde umgepumpt Die hohe Pumpenleistung bewirkt weiter, daß sich im Fermenter kein Gaspolster bildet und entstehende Gasblasen sofort weitergeleitet und ausgedrückt werden. Nicht verbrauchter O2 und das entstehende COj werden zusammen mit der entstehenden Biomasse im Fermenter hochgedrückt und können sich erst im Gasraum im oberen Bereich des Wärmetauschers entspannen.

Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren handelt es sich dementsprechend um einen aeroben Gärungsprozeß, bei dem Mikroorganismen in einem im wesentlichen Äthanol als Kohlenstoffquelle enthaltenden Nährmedium gezüchtet werden und dabei eine ganz bestimmte Gas-Flüssigkeits-Verteilung und Mischwirkung zwischen dem Nährmedium und dem zur Begasung des Nährmediums eingesetzten Sauerstoff aufrechterhalten und die Aufenthaltszeit des Gas-Flüssigkeits-Feststoffgemisches im Fermenter auf den angegebenen bestimmten Wert, vorzugsweise 0,6 h¹, eingestellt wird. Ais »Aufenthaltszeit« wird das Verhältnis von Strömungsgeschwindigkeit des Mediums zu dessen Volumen in der Fermentervorrichtung bezeichnet.

Es wurde überraschend gefunden, daß sich bei Begasung von tangential in den Begasungsraum eingebrachter Nährlösung mit ultrafeinen Sauerstoffblasen in der Größenordnung von etwa I bis 7 ΓΠμ,

vorzugsweise 3 πιμ, eine stabile Gas-Flüssigkeits-Feststoff-Dispersion bilden läßt, die mit relativ hoher Geschwindigkeit durch den Fermenterraum geführt werden kann, ohne daß sie bricht und ohne daß die bei den bekannten Verfahren dieser Art lästige Schaumentwicklung eintritt Wie weiterhin gefunden wurde, ist das Hefewachstum in dem so dispergierten Medium optimal und führt zu den gegenüber dem bisherigen Stand der Technik überraschend hohen Substrat- und Sauerstoff-Ausbeuten.

Das erfindungsgemäße Verfahren kann mit zahlreichen für diese Zwecke bekannten Hefestämmen durchgeführt werden. Vorteilhaft verwendbare Hefen sind beispielsweise sporogene Hefen, die sich infolge ihres hohen Dehydrogenase-Alkohol-Niveaus in Medien mit relativ hoher Äthanol-Konzentration zu vermehren vermögen, wie die Spezies S. cheresiensis, S. beticus, S. montuliensis und S. rouxii, sowie Bäckereihefen, wie verschiedene Reben der Spezie S. Cerevisiae. Es können auch die sonstigen für diese Zwecke bekannten geeigneten Hefen, wie die Spezies Hansenuta anomala, Candida utilis und Rhodotorula Glutinis sowie sonstige Candida-Arten, wie Candida curvata, Candida lipolytica, Candida pulcherima, Candida parapsilosis, sonstige Hansenula-Arten, wie Hansenula miso, Hansenula wickerhamii und Saccharomyces-Arten, wie Saccharaomyces carlsbergensis, Saccharamyces cerevisiae, Saccharamyces fragilis und Pichia-Arten, wie Pichia pastoris und Pichia haplophyla auf verschiedenen Nährböden eingesetzt werden. Sämtliche verwendeten Hefen verarbeiten als Kohlenstoffquelle Äthanol in annehmbarer Ausbeute. Unter diesen Hefen hat sich besonders die Hefe Hansenula anomala (Rebe 926) in bezug auf Äthanolausbeute, Wachstumsgeschwindigkeit und besonders hohe Qualität des gewinnbaren Eiweißproduktes bewährt

Bei dem als Kohlenstoffquelle eingesetzten Äthanol kann es sich um Äthanol aus natürlichen Rohstoffen und/oder synthetisches Äthanol, wie es beispielsweise durch Anlagerung von Wasser an hochreines Äthylen industriell gewonnen wird, handeln. Das Äthanol wird dem Kulturmedium in relativ hoher Konzentration, die nach oben durch die bei 15 bis 20% liegende Verträglichkeitsgrenze für die Hefezellen begrenzt ist, vorteilhaft in einer Konzentration von 1 bis 13%, vorzugsweise 10%, zugesetzt.

Kulturmedien, die üblicherweise verwendet werden, enthalten in gebräuchlicher Art assimilierbare Quellen von Stickstoff, Mineralsalze und darin z. B. Phosphor, Magnesium, Calcium, Kalium, Schwefel und Natrium sowie Spurenmineralien, wie Kupfer, Mangan, Molybdän, Zink, Eisen, Bor, Jod u.a. Die relativen Mengen dieser Nährstoffe können in bekannter Weise in Abhängigkeit von dem speziell verwendeten Mikroorganismus schwanken. Darüber hinaus kann das Nährmedium in bekannter Weise Vitamine enthalten, wenn deren Anwesenheit für die Entwicklung des Mikroorganismus förderlich ist in den vortei'haft einsetzbaren Kulturmedien können beispielsweise die folgenden Bestandteile in den angegebenen Mengen vorhanden sein:

Saures Kaliumphosphat (oder eine entsprechende Menge Phosphorsäure) 0,02 bis 0,2%

Ammoniumsullat (oder eine die entsprechende Stickstoffmenge ergebene Menge an Harnstoff) 0,02 bis 1,0%

Magnesiumsulfat 0,01 bis 1,0% Sonstige Wachstumsfaktoren 0,1 bis 10,0% Zu den sonstigen Wachstumsfaktoren können bei-

spielsweise NaCl, KCl, CaCl₂, KJ, FeCl₃, ZnSO₄, CuSO₄, MnSO₄, CoCI₂, H₃PO₃ gehören.

Beispiele für Stickstoffquellen sind neben anorganischen Ammoniumsalzen, wie Ammoniumsulfat, Ammoniumphosphat, Ammoniumchlorid und Ammoniumni- trat, organische Stickstoffverbindungen, wie Harnstoff und ggf. Aminosäuren.

Die Züchtung wird bei Temperaturen von etwa 20 bis 40° C und in einem sauren pH-Bereich von etwa 2,5 bis 4, vorteilhaft bei 35° C und pH 34 durchgeführt

Der Gärprozeß kann chargenweise oder kontinuierlich durchgeführt werden. Beim chargenweisen Betrieb wird das größte Mikroorganismenwachstum innerhalb von 12 bis 24 Stunden nach Züchtungsbeginn erreicht und de* gesamte Inhalt des Fermenters nach gewünsch ter Aufenthaltszeit, vorzugsweiu? 0,6 h-', abgezogen. Bei der kontinuierlichen Verfah; ensführung wird entsprechend der Aufenthaltszeit im Fermenter die erforderliche Menge an frischer Nährlösung periodisch zugeführt, während die entsprechende Menge an

2s Heicsuspension periodisch abgenommen wird

Im Verlauf der chargenweisen Züchtung kann man während der logarithmischen Wachstumsphase des Mikroorganismus auf kontinuierliche Betriebsweise mit der entsprechenden Aufenthaltszeit umstellen.

-Ό Der Sauerstoff kann als reiner Sauerstoff oder verdünnt z. B. in Form von mit Sauerstoff angereicherter Luft zugeführt werden. Es ist zweckmäßig, mit reinem Sauerstoff zu arbeiten, damit das End-Eiweißprodukt ohne zusätzliche Reinigungsmaßnahmen in optimaler Reinheit gewonnen werden kann.

Die erfindungsgemäß erforderliche ultrafeine Verteilung des zugeführten Sauerstoffs in maximal 7 mu, vorteilhaft 1 bis 3 ΐημ kleine Bläschen ktnn durch beliebige bekannte Düsen, poröse Scheiben oder dergleichen erfolgen. Zweckmäßig werden Sintermerallplatten entsprechender Porosität und Porenweite benutzt

Die erfindungsgemäß erforderliche Relativbewegung des strömenden Mediums und de3 zugeführten Sauer-

♦5 stoffs wird vorteilhaft durch tangentiale Zuführung der im Kreislauf bewegten Kulturflüssigkeit zu dem von unten nach oben eingedüsten Sauerstoff bewirkt

Die Mikroorganismen können vom Kulturmedium nach bekannten Verfahren, zum Beispiel durch Zentrifu gieren und/oder Filtration, die mit einer Ausflockungs- stufe kombiniert sein können, abgetrennt werden Das Endprodukt fällt beim erfindungsgemäßen Verfahren in ei itr so hohen Reinheit an, daß man es nach einfachem Waschen und Trocknen für die gewünschten Verwen dungszwecke direkt einsetzen kann.

Beispiel Es wurde folgendes Nährmedium verwendet:

Liter wäßrige Lösung Komponente

Menge

KH₂PO₄ 2,0 ml

(NH₄)₂SO₄ 0,2 g

MgSO₄-7 H₂O 1,0 g

Lösung von anderen Wachstumsfaktoren 10,0 ml

Die Lösung der anderen Wachstumsfaktoren hatte folgende Zusammensetzung:

1 Liter wäßrige Lösung

(Lösung der anderen Wachstumsfaktoren)

Komponente

Menge

CuSO₄ · 5 H₂O ZnSG« · 7 H₂O

MnSO< · H₂O
FeCI₃ · 6 H₂O

0,06 g 1,0 g

0,4 g < 1,0 mg

Diesem Nährmedium, das einen pH-Wert von 3,5 aufwies, wurden 10% synthetisches Äthanol zugesetzt, dann wurde eine als Impfstoff vorbereitete Kultur der Hefespezies Hansenula anomala zugesetzt, und dieses Nährmedium wurde in einem Fermenter im Kreislauf geführt. An einer Steile des Fermenters wurde von unten nach oben in senkrechter Richtung reiner Sauerstoff in ultrafeiner Verteilung in einer Blasengröße von durchschnittlich 3 ΐημ in den Fermenter eingegast und an dieser Stelle das Kulturmedium tangential dazu geleitet. Bei dieser Relativbewegung von tangential geführtem Nährmedium und eingegastem Sauerstoff ergab sich die gewünschte Gas-Flüssigkeits-Feststoff-Dispersion. Bei einem Fermentervolumen von 20 m³ und 30facher Umwälzung/h verblieb der Inhalt jeweils 1,66 Minuten im Fermenter. Die bei der Vermehrung der Hefe auftretende Wärme wurde mittels Kühlwasser

abgeführt. Die Eintrittstemperatur in den Fermenter betrug etwa 33"C, die AusgangstemperatiT lag bei 39°C. Die Verarbeitung des Substrats Äthanol durch die Hefekultur Hansenula wird in erster Stufe durch Reduktion des Äthanols zu Acetaldehyd mittels des Alkohol-Dehydrogenase-Enzyms eingeleitet Der entstandene Acetaldehyd tritt auf dem Wege Acetal-Coenzym A in den Zitronensäure-Zyklus ein.

Bei einem Fermenter-Volumen von 20 m³, einer 30fachen Umwälzung pro Stunde und einer Aufenthaltszeit im Fermenter von 0,6 h '. einer Eintrittstemperatiir von 33°C und einer Austrittstemperatur von 39°C und unter Zuführung von reinem Sauerstoff wurden folgende Ergebnisse erzielt:

Mittlere Fermentertemperatur	ca.35°C
pH-Wert	3,5
Substratkonzentration	0,01%
Äuienthaitszeit	0,b h -'
Produktivität	45 kg kg/m³h
Substratausbeute	75%
Sauerstoffausbeute	80%

Die Produktivität ist bezogen auf Trockenhefe.
Bei einer Umwälzleistung von 600 m³h wurden stündlich 12 m^J Kulturmedium abgezogen und ca. 12 m³ frische Nährlösung zugegeben.

Der Protci.:gchalt des so gewonnenen Produktes lag bei 70% Rohprotein.

Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren zur mikrobiologischen Gewinnung von Einzellerprotein auf Basis von Äthanol, bei dem in einem wäßrigen, einen pH-Wert von 2J5 bis 4 aufweisenden Kulturmedium, das Nährsalze, saures Phosphat und stickstoffhaltige Substanz enthält, in Anwesenheit von Äthanol und Sauerstoff äthanolverwertende Hefen bei Temperaturen von 20 bis 40⁰C unter aeroben Bedingungen in einem Fermenter kultiviert und die dabei gezüchtete Biomasse abgetrennt und getrocknet als Proteinprodukt gewonnen wird, dadurch gekennzeichnet, daß man das in ständiger Bewegung gehaltene Kulturmedium im Kreislauf bewegt, daß man Nährmedium bei jedem Umlauf des Kulturmediums an einer Stelle der Umlaufbahn in tangentialer Richtung einführt, wobei man das Nährmedium mit ultrafeinen Sauerstoffblasen in der Größenordnung von 1 bis 7 Γημ begast, daß man die in dem Fermenter entstehende Biomasse ohne Bildung eines Gaspolsiers durch diesen durchführt, daß man außerhalb des Fermenters entgast und daß man die Aufenthaltszeit des Gas-FIüssigkeits-Feststoffgemisches im Fermenter auf 0,2 bis 1,0 h -' einstellt

2. Verfahren nach Anspruch t, dadurch gekennzeichnet, daß das Gas-Flüssigkeits-Feststoffgemisch mit einer solchen Umpumpgeschwindigkeit durch den Fermenter durchgeleitet wird, daß sich bildende Gasblasen mitgerissen und vor einer Schaumbildung aus dem Fermenter abgeleitet werden.

3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß reiner Sauerstoff zugeführt wird.

4. Verfahren nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die in dem Fermenter entstandene Biomasse außerhalb des Fermenters abgekühlt wird.

5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß die Biomasse in einem dem Fermenter nachgeschalteten Wärmetauscher gekühlt und in dessen oberem Bereich entgast wird.

6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man den pH-Wert des Nährmediums auf 3,5 und die Aufenthaltszeit des Gas-Flüssigkeits-Feststoffgemisches im Fermenter auf 0,6 h-' einstellt.

7. Verfahren nach Anspruch 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß man mit zu 3ηιμ zerteiltem Sauerstoff begast.