DE2549783B2

DE2549783B2 - Triglyceride mit entzündungshemmender Wirkung

Info

Publication number: DE2549783B2
Application number: DE2549783A
Authority: DE
Inventors: David Lyon Montreal Garmaise; Gerard Yvon Duvernay Paris
Original assignee: Abbott Laboratories
Current assignee: Abbott Laboratories
Priority date: 1974-11-07
Filing date: 1975-11-06
Publication date: 1979-06-07
Also published as: ZA756196B; CA1067488A; GB1490603A; DK154287C; FR2290189B1; SE425733B; US3988446A; NL161499B; DK154287B; FR2290189A1; DK499875A; JPS5165706A; NL161499C; CH601167A5; NL7512376A; DE2549783C3; JPS568820B2; SE7512421L; DE2549783A1; AU8541975A

Description

Acetylsalicyloyl-, Indomethacoyl-,

«t-Allyloxy-S-chlorphenyiacetyl-,

2-{6-Methoxynaphthy!)-acetyl-,

2-(6-Methoxynaphthyl)-propionyl-,

5,8,11,14-F.icosatetraynoyl-,

2-[3-Chloro-4-(3-pyrrolinyl)phenyI]-

propionyl-,

2-(3-PhenoxyphenyI)-propionyl-, l-Methyl-5-(4-tolyl)-pyrrol-2-acetyI-, 2-(BenzoyIphenyI)-propionyl-, 4-IsobutylphenylacetyI- oder 4-Isobutylphenylisopropionylrest

bedeutet.

2. Arzneimittel, insbesondere entzündungshemmendes Mittel, enthaltend als Wirksubstanz eine Verbindung der Formel

CH₂-O-R CH-O—R'

CH₂-O-R

in der R und R' die angegebenen Bedeutungen besitzen, neben üblichen Trägerstoffen.

3. Verfahren zur Herstellung von Triglyceriden nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man Dihydroxyaceton zuerst mit der doppelten molaren Menge der Verbindung ROH, in der R die Gruppe CH₃-X-Co- oder ein aktives Derivat davon bedeutet, verestert, den erhaltenen Diester zu dem entsprechenden Alkohol reduziert und das so erhaltene Dialkoylglycerin mit dem Säurechlorid von R' umsetzt.

Entzündungshemmende Mittel werden weiterhin für die Behandlung von Entzündungen in Zusammenhang mit Rheumatismus und ähnlichen Krankheiten, die oft chronischer Natur sind, verwendet. In diesen Fällen muß die Behandlung mit entzündungshemmenden Mitteln über längere Zeiträume fortgesetzt werden und häufig ständig oder doch fast ständig erfolgen. Jedoch erzeugen die meisten heute bekannten entzündungshemmenden Mittel Beschwerden, Schmerzen oder sogar schwere Störungen im Magentrakt. Bei Versuchen zeigen Tiere, die nur die halbe orale letale Dosis erhalten, mäßige bis schwere Magenläsionen bei Gabe

einer einzigen Dosts eines üblichen entzündungshemmenden Mittels, und bei der humanen Anwendung werden oft Geschwüre, Magenblutungen und ähnliches nach chronischer Verabreichung von entzündungshemmenden Mitteln beobachtet

Es bestand daher der Bedarf nach einem entzündungshemmenden Mittel, das von Warmblütern im Magen-Darm-Trakt besser vertragen wird und bei 'oraler Gabe geringe oder keine Magenreizung hervorruft

Gegenstand der Erfindung sind Triglyceride der Formel

CH₂-O-R

CH- O—R' (I)

CH₂- O—R in der R ein Säurerest der Formel

CH₃-X-CO-

wobei X ein gesättigter oder ein ein- oder mehrfach olefinisch ungesättigter zweiwertiger Kohlenwasserstoffrest mit O bis 18 Kohlenstoffatomen ist, und R' einen

Acetylsalicyloyl-, Indomethacoyl-,

4-Allyloxy-3-chlorphenyl-acetyl-,

2-(6-Methoxynaphthyl)-acetyl-,

2-(6-Methoxynaphthyl)-propionyl-,

5,8,11,14-Eicosatetraynoyl-,

2-[3-Chloro-4-(3-pyrrolinyl)-phenyl]-

propionyl-,

2-(3-PhenoxyphenyI)-propionyl-, l-Methyl-5-(4-tolyl)-pyrroI-2-acetyl-, 2-(Benzoylphenyl)-propionyl-, 4-Isobutylphenylacetyl- oder 4-IsobutyIphenylisopropionylrest

bedeutet, ist.

Betreffend R enthält die Säuregruppe demnach insgesamt 2 bis 18 Kohlenstoffatome und in der oben angegebenen Formel bedeutet X vorzugsweise einen -(CH₂)n-Rest, in der η O oder eine ganze Zahl ist. Insbesondere bedeutet X in der Gruppe CH₃-X-CO einen Acetyl-, Butyryl-, Hexanoyl-, Oktanoyl-, Dodekanoyl- oder Palmitoyl-Rest.

Die obengenannten Acylreste mit oraler entzündungshemmender Eigenschaft sind <!le aktiven Prinzipien der meisten bedeutenden entzündungshemmenden Verbindungen, die heute Anwendung finden, da die am häufigsten beschriebenen entzündungswidrigen Mittel organische Säuren sind.

Bei einer allgemeinen Ausführungsform der vorliegenden Erfindung wird Glycerin zuerst mit der entsprechenden Säure der Formel

CH₃XCOOH

zu dem entsprechenden 1,3-Dialkoylglycerin verestert (der Ausdruck »Alkoyl« bedeutet hier die Gruppe CH₃XCO-, wobei X die obengenannte Bedeutung besitzt), das seinerseits mit dem Säurechlorid einer bekannten entzündungshemmenden Verbindung mit einer freien Carbonsäuregruppe verestert wird. Die Darstellung eines solchen Säurechlorids einer »entzündungshemmenden Säure« kann auf die übliche Art unter

Verwendung von Phosphorpentachlorid, Thionylchlorid, Phosphoroxychlorid oder anderen, für eine solche Umsetzung gebräuchlichen anorganischen Reagenzien erfolgen. Diese Säurechloride sind im allgemeinen recht stabil und hochreaktiv, so daß die benötigte Umsetzung zur Herstellung der obengenannten Verbindung im allgemeinen mit Ausbeuten von 60 bis 100% der Theorie verläuft.

Das allgemeine Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen besteht darin, daß man Dihydroxyaceton zuerst mit der doppelten molaren Menge der Verbindung ROH, in der R die Gruppe CH₃-X-CO- oder ein aktives Derivat davon bedeutet, verestert, den erhaltenen Diester zu dem entsprechenden Alkohol reduziert und das so erhaltene Dialkoylglycerin mit dem Säurechlorid von R' umsetzt.

Nach einer bevorzugten Ausführungsform wird in Chloroform suspendiertes Dihydroxyaceton gekühlt, und nach Zugabe eines kleineren Anteils Pyridin werden mindestens zwei molare Anteile eines Alkoylchlorids über einen Zeitraum hin tropfenweise zugegeben. Nachdem man einige Stunden in einem Eisbad gerührt hat, wird der gebildete Niederschlag entfernt und das 13-Dialkoyldihydroxyaceton auf bekannte Weise aufgearbeitet Es wird dann in einem geeigneten Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch aufgenommen und reduziert, wobei man vorzugsweise neutrales Natriumborhydrid verwendet das das gewünschte 1,3-Dialkoylglycerin ergibt Dieses wird auf bekannte Weise aus dem Gemisch isoliert Diese Verbindung wird dann z. B. mit etwa einer äquimolaren Menge des Säurechlorids von Indomethacin (im 'oigenden immer Indomethacoylchlorid genannt) in Anwesenheit eines Salzsäureakzeptors und eines geeigneten organischen Lösungsmittels umgesetzt Nach Isolierung und Umlrdstallisation wird der gebildete Triester der Formel I iu ausgezeichneter Reinheit erhalten.

Auf diese Weise hergestellte Verbindungen können leicht in Dosierungseinheiten für die medizinische Anwendung gebracht werden. Zum Beispiel können Tabletten hergestellt werden, indem man dieses Material mit den üblichen Zusätzen, Geschmackstoffen, Füllstoffen, Puffern und/oder Farbstoffen versetzt, die zusammen mit einem Schmiermittel zu den üblichen Tabletten gepreßt werden können. Ebenso kann ein Gemisch der obengenannten aktiven Verbindung mit Füllern und/oder Puffern oder festen Streckmitteln zu Oblaten oder Pillen verarbeitet werden oder einfach in Gelatinekapseln in geeigneten Dosierungen eingefüllt werden. Vorzugsweise enthält eine Dosierungseinheit zwischen 30 und 1000 mg des aktiven Bestandteils, und ggfs. können andere Arzneimittel damit vermischt werden.

Orale Dosierungsformen des genannten Typs brauchen keinen Überzug zum Überdecken des Geschmacks oder zum Schutz gegen das saure Magenmilieu. Der aktive Bestandteil besitzt nur sehr geringe Säure- und Wasserlöslichkeit, so daß der Geschmack nicht überdeckt zu werden braucht und meist überhaupt keine Magenreizung erfolgt. Auch wenn der aktive Bestandteil den Darmtrakt erreicht, findet die Adsorption ohne Reizung des Darmes statt.

Der aktive Bestandteil ist fettlöslich und durchdringt als solcher die Zellmembranen und liegt im Blutstrom in genügend hohen Dosen vor, um entzündungshemmende Wirkung auszuüben, ohne Nebenwirkungen auf den Darm- oder Magentrakt auszuüben.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen haben unge

wöhnliche und überraschende Eigenschaften gegenüber den Verbindungen nach dem Stand der Technik, nämlich den bekannten entzündungshemmenden Mitteln, die in den erfindungsgemäßen Estern gebunden werden. Diese Vorteile bestehen in erster Linie darin, daß bei Tierversuchen nahezu überhaupt keine Lasionen beobachtet werden und, übertragen auf andere Säugetiere, zeigt dies das vollständige Fehlen irgendeiner Art von Reizung im Magen-Darm-Trakt an. Gleichzeitig können

ίο die erfindungsgemäßen Verbindungen in denselben oder größeren Dosen gegeben werden, um einen höheren Blutspiegel der entzündungshemmenden Komponente, die den Blutstrom und/oder das Lymphsystem als Triglycerid erreicht zu erzielen, obwohl angenom men wird, daß in dem kurzen Augenblick des M-Jeküldurchgangs durch die Membran der Mucosa die Estergruppen in 1- und 3-StelIung vorübergehend abgespalten werden und innerhalb der Mucosalzellen und später in dem Blut- oder Lymphsystem sofort wieder verestert werden. Dies ist von besonderem Interesse, da entzündungshemmende Mittel im allgemeinen ständig öder nahezu ständig verordnet werden müssen, was in der Vergangenheit oft zu ernsten Schäden des Magen-Darm-Trakts beim Patienten führte, die in einer Reizung oder Darmblutungen wie auch im Aktivieren oder Reaktivieren von Geschwüren bestand. Es ist daher von besonderem Interesse, daß mit Hilfe der erfindungsgemäßen Triglyceride bekannte entzündungshemmende Mittel über längere Zeiträume - ohne Reizungen dargereicht werden können. Sie können lang andauernde oder nahezu beständige Spiegel der nauen aktiven Substanzen im Blutstrom oberhalb des minimalen Wirkungsniveaus erzeugen, ohne die Toxizitätsschwelle zu überschreiten, zu erreichen oder ihr überhaupt nur nahe zu kommen.

Wegen der extrem niedrigen Toxizität der Glyceride der Formel I und den extrem geringen Vorkommen von Läsionen und Magenreizungen sind die erfindungsgemäßen Verbindungen bei der Behandlung von Entzün-

düngen und Ödemen von großem Wert Sie können ohne Gefahr von Magen- oder Darmblutungen, Ulcera oder den milderen Formen von Reizungen und Verstimmungen, wie das oft der Fall bei den üblicherweise als entzündungshemmende Mittel gege benen freien Säure ist, über längere Zeiträume verabreicht werden. Die neuen Verbindungen haben äußerst günstige therapeutische Indizes, da in den meisten Fällen selbst bei sehr hohen Dosen keine Toxizität festgestellt werden kann.

so Es ist dem Fachmann bekannt, daß die Dosierung der zu verabreichenden neuen Triglyceride in einem hohen Ausmaß von dem entzündungshemmenden Rest in dem Tri^lycerid abhängt. Daher werden beispielsweise in dem Fall, in dem R' in dem neuen Triglycerid ein Acetylsalicylsäurerest ist, ziemlich große Dosen benötigt und ohne Beschwerden vertragen. Wenn R' ein Indomethacoylrest ist, ist die zu verabreichende gesamte Tagesdosis oder die einzelne Wirkdose viel geringer. Die Dosis hängt auch etwas von der Art der für die 1- oder 3-Stellung im Triglycerid verwendeten Ester ab. Wenn R ein kurzer Rest ist d. h. X 0,2,4 oder 6 Kohlenstoffatome enthält, ist der Anteil von R' im Triglycerid beträchtlich höher, als wenn eine Verbindung verwendet wird, in der X 12 bis 18 Kohlenstoffalo- me enthält. Daher hängt die Dosierung der Wahl von der gewünschten therapeutischen Wirksamkeit der Verbindung in der 2-StelIung und von der Kettenlänge der für R verwendeten aliphatischen Säure ab.

Beispiel 1

a) Dimeres Dihydroxyaceton wird 4 h in einer Vakuum-Trocken-Pistole bei 50⁰C getrocknet 13 g des trocknen Materials werden dann in 500 ml trockenem, s äthanolfreiem Chloroform in einem 1-1-DreihaIsrundkolben mit einem Calciumchloridtrockenrohr und einem Tropftrichter mit Druckausgleich suspendiert Zu dieser Suspension werden bei 5° C 25 ml trockenes Pyridin zugegeben. Das Gemisch wird in einem Eisbad gekühlt ι ο während 76 g frisch destilliertes Palmitoylchlorid tropfenweise über 1 h lang zugegeben werden. Das Reaktionsgemisch wird Ober Nacht bei Raumtemperatur gerührt Der Pyridinhydrochlorid-Niederschlag wird abfiltriert und die Chloroformlösung mit Wasser in t00-ml-Anteilen gewaschen. Die Chloroformlösung wird dann abgedampft, wobei ein gummiartiger Festkörper erhalten wird, der zusammen mit einer kleinen Menge Diäthyläther zerstoßen wird, filtriert wird und 52£ g eines weißen Festkörpers ergibt der aus !3-DipalmitoyIdihydroxygceton besteht F = 79 bis 82° C, Ausbeute: 64% d. Th.

b) ta einem 3-1-Erlenmeyer werden 50,2 g der obengenannten Verbindung in 1100 ml Tetrahydrofuran und 250 ml Benzol unter mechanischem Rühren suspendiert Das Gemisch wird auf 5° C abgekühlt und 70 ml Wasser werden zugesetzt Das Gemisch wird gerührt und 5,02 g neutrales Natriumborhydrid (hergestellt durch Rühren von handelsüblichem Natriumborhydrid in Äthylacetat über Nacht Waschen mit Äther und Trocknen) in Mengen von 0,5 g zugesetzt, wonach die Suspension 45 min lang bei 5°C gerührt wird. Dunn werden 2$ ml Eisessig langsam zugesetzt, um überschüssiges Borhydrid zu zerstören und das Gemisch 30 min lang bei 5° C gerührt, bevor jeweils 300 ml Chloroform und Diäthyläther zugegeben werden. Das Gemisch wird mit zweimal 250 ml Wasser und anschließend mit 250 ml einer 1%igen Natriumdicarbonatlösung gewaschen. Die organische Schicht wird dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und ergibt nach dem Eindampfen einen gummiartigen Festkörper. Dieser wird zusammen mit einer kleinen Menge Aceton verrührt, filtriert und ergibt 44,4 g (88%) 13-Dipalmitoylglycerin als weißer Festkörper vom Schmelzpunkt 71 bis 73° C

c) Zu einer gerührten Lösung von 5,7 g des obengenannten Diesters und 035 g Pyridin in 5CmI äthanolfreiem trockenem Chloroform werden 3,76 g Indomethacoylchlorid (hergestellt gemäß der ES-PS 3 41692) unter Rohren zugesetzt Man läßt das Reaktionsgemisch 40 h lang stehen und behandelt es dann -nit 100 ml Wasser. Die Chloroformschicht wird mit 100 ml verdünnter Salzsäure, 100 ml 5%iger wäßriger Natriumdicarbonatlösung und schließlich zweimal mit 100 ml gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft Der erhaltene feste Rückstand wird in 100 ml Petroläther vom Siedebereich 30 bis 60°C gelöst und auf einer Säule Chromatographien, die 200 g Florisil (ein unter dieser Bezeichnung im Handel erhältliches aktiviertes Magnesiumsilikat von μ der Fisher Scientific Company, Ltd) enthält, das vorher mit Petroläther gewaschen wurde. Zuerst werden einige Verunreinigungen mit Petroläther eluiert und dann wird die Säule mit Petroläther/Diäthyläther(85 :15) und schließlich mit Petroläther/Diäthyläther (50 :50) eluiert es Das letzte Eluai enthält das gewünschte 2-lndomethacoyl-13-dipalmitür'glycerin, das in einer Ausbeute von 6,2 g (68%) mit einem Schmelzpunkt von 64 bis 66⁰C erhalten wird. Umkristallisieren aus Petroläther ergibt die Reinsubstanz vom F = 65 bis 66⁰C. Diese Verbindung hat einen intraperitonealen LD₅₀-Wen von etwa 1000 mg/kg und besitzt keine orale Toxizität

Beispiel 2

Entsprechend dem Verfahren von Beispiel la) werden 11,6 g 13-Dihydroxyaceton und 58,2 g Dodekanoylchlorid in 300 ml Chloroform und 25 ml Pyridiri umgesetzt. Es werden so 48,0 g (82%) 13-Dodekanoyldihydroxyaceton vom F = 67 bis 70⁰C erhalten, die miit Methanol verrieben werden.

Nach der Behandlung dieses Materials entsprechend dem in Beispiel beschriebenen Verfahren wird 13-Didodekanoylglycerin in 86%iger Ausbeute als weißer Festkörper vom F = 48 bis 53° C erhalten.

Durch Umsetzung von 4^7/j dieses Materials mit 4,14 g Indoraethacoylchlorid und 0,95 g Pyridin in 50 ml Chloroform ober 60 h lang wie in Beispiel Ic) werden 43 g 2-Indomethacoyl-13-Didod"kanoylglycerin (64%) vom F = 51 bis52°C erhalten.

Diese Verbindung zeigt ebenfalls keine orale Toxizität und besitzt einen intraperitonealen LDso-Wer*. von etwa 1000 mg/kg.

Beispiel 3

Entsprechend den Beispielen 1 und 2 wird 13-Dihydroxyaceton in die entsprechenden Dioktanoylester überführt die nach dem Kristallisieren aus Petroläther als flockenartiger Festkörper vom F = 57 bis 58° C in einer Ausbeute von 70% der Theorie gehalten werden: Diese Verbindung wird gemäß dem Verfahren von Beispiel 1 b) reduziert und ergibt 13-DioktanoylgIycerin als klares öl in nahezu theoretischer Ausbeute.

Nach Umsetzung von 5,65 g dieses Öls mit 6,17 g Indomethacoylchlorid und 1,73 g Pyridin in 200 ml trockenem Chloroform während 20 h. wie in Beispiel Ic) beschrieben, wird ein Öl erhalten, das gemäß Analyse aus 2-lndomethacoyl-13-dioaktanoy!glycerin besteht

Beispiel 4

Nach dem Verfahren des Beispiels 3 wird 13-Dihydroxyaceton in den entsprechenden 1,3-Dibutyrylester überführt, der zu 13-DibutyryIglycenn umg;setzt wird. Nach seiner Behandlung mit Indomethacoylchlorid wird 2-lndomethacoyl-13-dibutyry!glycerin in 53%iger Ausbeute als öl erhalten.

Beispiel 5

Durch Umsetzung von 5,7 g des Dipalmitoylglycerins nach Beispiel 1 b) mit 2,18 g 2-AcetylsalicylsäurechIorid und 035 g Pyridin in 50 ml Chloroform während 4 d, wie in Beispiel ic) beschrieben, werden Ci₁Og (82%) 2-{2-Acetylsalicylsäure)-13-dipalmitoyl($lycerir. erhalten, das bei 4J bis 44° C schmilzt Dieie Verbindung besitzt einen intraperitonealen LDjo-Wen: von etwa 1000 ml/kg und weist keine orale Toxizität auf.

Beispiel 6

Entsprechend Beispiel 5 wird das 13-Dielodekanoylglycerin aus Beispiel 2 in 2-(2-Acety!sflJicylo;rl)-13-didodekanoylglycerin überführt, das in 61%iger Ausbeute erhalten wird. F - 29 bis 30" C.

Beispiel 7

Analog den vorangehenden Beispielen wird 2-Acetylsalicylsäurechlorid mit 13-Dk>ktanoylglycerin umge-

setzt, was nach dem Aufarbeiten, wie vorstehend beschrieben, das gewünschte l,3-Dioktanoyl-2-(2-acetylsalicy!oyl)glycerin als öl in 7l°/oiger Ausbeute ergibt.

Beispiel 8

Eine Lösung von 5 g ^AIIyloxy-B-chlorophenylessigsäure in 220,6 ml 0,1 n-Natriumhydroxyd wird gefriergetrocknet. Der gummiartige Festkörper wird durch dreimalige azeotrope Destillation mit 200 ml trockenem Benzol im Vakuum in das Natriumsalz der genannten Säure überführt. Dieses wird in kleinen Anteilen zu einer Lösung von 5.08 g Oxalylchlorid in 2^r> ml Benzol gegeben. Weitere 25 ml Benzol werden /ugeset/t und die Lösung I h lang vorsichtig am Rückfluß erhitzt, gekühlt, filtriert und das Filtrat eingedampft. Man erhält 6 g einer rötlich-gelben Flüssigkeit, die als 4-A ilyloxy- 3-chlorphenacetylchlorid identifiziert wurde.

Nach Umsetzung von 5,7g I.J-Dipalmiloylglycerin

0.95 g Pyridin in 50 ml Chloroform während 18 h. wie in Beispiel Ic) beschrieben, werden 5,0g (64%) zu 2-(4-Allylo\y-3-chlorphenacetyl) 1.3-dipalmitoy !glycerin erhalten, die bei 45 bis 6 5 C schmolzen. Diese Verbindung zeigt keine intraperitoneale oder orale Toxi/.ität.

Beispiel 9

Wenn man im Verfahren gemäß Beispiel 8 das 4-Allyloxy-3-chlorphenacetylchlorid durch 2,74 g 2(6-Methoxynaphthyl)-propionylchlorid (hergestellt aus der freien Säure mit Oxalylchlorid. wie in Beispiel 8 beschrieben) eisetzt und die Lösungsmittelmenge auf 70 ml erhöht, führt die Reaktion während 60 h zu einer Ausbeute von 4,9 g (63%) 2-[2-(6-Methoxynaphthyl)-propionyl]-l,3-dipalmitoylglycerin vom F = 66 bis 68⁰C. Diese Verbindung hat keine intraperitoneale oder orale Toxizität.

Beispiel 10

Eine Lösung von 0,42 g Oxalylchlorid in 25 ml Chloroform wird tropfenweise bei 0°C zu einer gerührten Lösung von 55 g Eicosa-5,8.11,14-letraynonsäure in 25 ml Chloroform unter Stickstoff gegeben. Es wird 20 h lang gerührt und das Lösungsmittel dann unter Vakuum entfernt. Der bräunliche Rückstand wird in 25 ml Chloroform gelöst und die Lösung zu 1,06 g 1,3-Dipalmitoyl-glycerin und 0,15 g Pyridin in 35 ml Chloroform gegeben. Man läßt 20 h lang stehen und Chromatographien dann das Reaktionsgemisch über 60 g Florisil, wie in Beispiel 1 beschrieben. Man erhält 380 mg (24%) 2-(5.«,l l,14-Eicosatetraynoyl)-l,3-dipalmitoylglycerin. Das Produkt kann leicht durch NMR-Spektroskopie charakterisiert werden, ist jedoch an der Luft bei Raumtemperatur unstabil.

Beispiel 11

Entsprechend Beispiel 4 wird ^-Diacetylglyeerin mit Indomethacoylchlorid in ungefähr äquimolaren Mengen in trockenem Chloroform umgesetzt und ergibt nach 16 h ein öl mit 66%iger Ausbeute. Nach dem Stehenlassen kristallisiert dieses Material und zeigt einen Schmelzpunkt von 78 bis 80⁰C.

Beispiel 12

Gemäß dem Verfahren nach Beispiel 3 wird 1,3-Dihydroxyaceton zu dem 13-DieicosanoyIester verestert, der in 49%iger Ausbeute mit einem F = 89 bis 90⁰C nach dem Umkristallisieren aus Chloroform/Petroläther erhalten wird. Wenn man diesen Ester gemäß Beispiel Ib) reduziert, erhält man IJ-Dieicosanoylglycerin in 85%iger Ausbeute vom F = 83 bis84^eC.

Durch Umsetzung von 3,41 g dieses Diesters mit ■s 7,07 g Indomethacoylchlorid und 0,435 g Pyridin in 75 ml trockenem Chloroform während 60 h entsprechend Beispiel Ic) erhält man 4,2 g 2-lndomethacoyl-l,3-dieicosanoylglycerin. Dieses schmilzt nach dem Umkri stallisieren aus Petroläther vom Siedebereich 30 bis 6O⁰C bei 70 bis 72° C.

Beispiel 13

Zu einer Lösung von 0.9 g Dihydroxyaceton in 50 ml Chloroform und 1,5 ml Pyridin bei 0 bis 5°C werden 1> tropfenweise 7.48 g frisch destilliertes Linolsäurechlorid über einen Zeitraum von 15 min hinzugeben. Das Gemisch wird I h lang bei Raumtemperatur gerührt, dreimal mit je 100 ml Wasser und einmal mit 100 ml Ss!7<VB33Cr "CVVS'chc" DiC 0!""3"!5Ch" PhsS" "·\Τ^Α ""' Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Es bleiben 7.04 g eines gelben Öls zurück. Dieses wird auf 40 g Florisil adsorbiert und zweimal mit 100 ml Petroläther und zweimal mit Petroläther/Äther (85 : 15) extrahiert. Diese letzten Fraktionen werden eingedampft und geben eine klare gelbliche Flüssigkeit (72% Ausbeute), die durch Infrarot- und NMR-Spektren als 1,3-Dilinoieoyldihydrowaceton identifiziert wurden.

Diese Vj-bindung wird entsprechend Beispiel Ib) t.5h lang bei 5'C hydriert, wobei jedoch vor dem Trocknen und Eindampfen nur Chloroform zugegeben wird. Es bleibt eine gelbliche Flüssigkeit (100% Ausbeute) von 1.3 Diünoleoylglyterin zurück, die dünnschicht-chromatographisch und infrarotspektroskopisch charakterisiert wird.

Die Umsetzung von 3,7 g dieser Verbindung mit 2,26 g Indomethacoylchlorid nach dem Verfahren gemäß Beispiel I c) ergibt 3.8g(67%)2-Indomethacoyl-1.3-dilinoleoylglycerin, das durch NMR-Spektroskopie charakterisiert wird. Diese Verbindung besitzt nahezu dieselben ödemreduzierenden Eigenschaften wie die Verbindung nach Beispiel 1: Bei 21,6 mg/kg wird das Ödem um 22,8% verringert.

Beispiel 14

Die Verbindungen der vorangehenden Beispiele wurden auf ihre Fähigkeit, die Schwellung von künstlich durch Karrageen-Injektionen hervorgerufenen Ödemen in Rattenpfoten zu verringern (W inter et al, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 111.544 [1962]). Tabelle I gibt die Dosis/Wirkungs-Zahlen für die Verbindung des Beispiels 1 (die 39,3% Indomethacinrest im Triglycei.dmolekül enthält) und für die Verbindung des Beispiels 2 (44,8% Indomethacingehalt). Der Vergleich wird mit Indomethacin allein durchgeführt In jedem Fall wurde die angegebene Menge oral verabreicht

Tabelle I

JO

50

55

Verbindung	Vorbehand	Dosis	%Ödem-
des	lungszeit	(mg/kg)	verringe-
Beispiels			jung
1	30-60 min	25	12
1	30-60 min	50	18
1	2h	25	29
1 1	2h	50	26
1	4h	50	38
1	8h	50	20

Fortsetzung

Verbindung

Beispiels

Vorbehandlungszeit

Dosis
(mg/kg)

% Odemverringe rung

2	2h
2	2h
2	2h
Vergleich	2 h
Vergleich	2 h
3	2
3	2
4	2
10	2
Il	2
11	2
12	2
13	2

U	36
25	51
50	43
2,5	33
5,0	44
15,2	48
5,6	14
12,8	26
100	7,3
4,2	9,6
11,4	46
23	11,4
21,6	22,8

Diese Ergebnisse /eigen, daß mit den neuen Triglyceriden hohe Aktivitätsstufen erreicht werden können. Besonders signifikant ist die Tatsache, daß die Aktivität, bezogen auf Indomethacingehalt der verabreichten Verbindungen, sehr ähnlich ist, aber im Fall der Tnglyceride keine Läsionen verursacht. Dies wird an getöteten Tieren gezeigt, denen die obengenannten Verbindungen bei verschiedenen Dosen gegeben wurden: Keine Läsionen (0) wurden bei sechs Tieren festgestellt, die 16 mg/kg der Verbindung nach Beispiel 1 erhielten; keine Läsionen bei sechs Tieren mit Dosen von 4 und 16 mg/kg der Verbindung gemäß Beispiel 2; dagegen ergibt »freies« Indomethacin bei drei von sechs Tieren bei Dosen von 4 mg/kg und bei sechs von sechs Tieren bei 16 mg/kg Läsionen (Rattenversuche).

In demselben Test wurden die Verbindungen der Beispiele 5 bis 9 mit ihren entsprechenden Vergleichsverbindungen verglichen. Als »Vergleichsverbindungen« wurden die freien Säuren des Säurerestes, der in 2-Stellung des neuen Triglycerids gebunden ist, verwendet. Tabelle II zeigt das Verhältnis von Dosis zu Wirkung.

Tabelle II	Vorbe	Dosis in	% Ödem	% der Ver
Verbindung	hand	mg/kg	verrin	gleichsver
des	lung		gerung	bindung
Beispiels	'/2 h	200	3	24%
5	2h	200	11	29%
6	2h	200	15	35%
7	2h	80	26	freie Säure
Vergleich	1 h	50	9	29%
8	1 h	100	26	29%
8	1 h	136	32	29%
8	2h	20	38	freie Säure
Vergleich	2h	25	33	freie Säure
Vergleich

Verbindung Vorbe- Dosis in % Ödem- % der Verdes hand- mg/kg verrin- gleichsver-

Beispiels lung gerung bindung

9
Vergleich

2 h
2h

34 2

15 41

16% freie Säure

Um die Verwendung der obengenannten Verbindungen in der Langzeitbehandlung zu zeigen, wurde die Methode von G 1 e η und Gray, Amer. ]. Vet. Res.. 26. 1180 (1965) mit den neuen Triglyceriden durchgeführt. Nach oraler Gabe von 5 mg/kg täglich der Verbindung des Beispiels 1 vom 14. bis zum 25. Tag zeigt eine Vergrößerung des Rattenhinterpfotenödems von 0,62 ml Hg, während das Vergleichsvehikel 1.49 ml Hg zeigt. Bei der visuellen Bewertung aller vier Glieder ergiui üiesctbc Behandlung CiT"

"■""ΓΐΕ VC Γΐ S3 ι ■ ^ '**

das theoretische Maximum), während das Vergleichsvehikel !3,6 ergibt. Die Zunahme des Körpergewichts beträgt 63,3 g bei den behandelten Tieren und 45,4 g bei den Vergleichstieren.

Die Verbindung gemäß Beispiel 2 zeigt nach Darreichunp an den Tagen 14 bis 25 die folgenden Ergebnisse am Tag 2:5:

Dosis Hinter- visuelle Gewichts

pfotenödem Bewertung zunähme

2,2 mg/kg/d	0,44	8,0	61,4 g
4,4 mg/kg/d	0,55	6,4	69,3 g
8,8 mg/kg/d	0,40	3,6	79,2 g

In keinem Falle wurde eine Reizung oder Bluten des Magen-Darm-Traktes festgestellt.

Beispiele 15 bis 34

Die in den Beispielen der folgenden Tabelle vorgestellten erfindungsgemäßen Triglyceritle wurden analog den in Beispielen 1 bis 13 beschriebenen Verfahren hergestellt und isoliert. Diese neuen Verbindungen werden in der Tabelle entsprechend der in Anspruch 1 angegebenen allgemeinen Formel durch die jeweilige Gruppe R' und den jeweiligen Index η für X charakterisiert. Die Prüfung auf entzündungshemmende Wirksamkeit wurde wiederum an Ratten, wie in Beispiel 14 angegeben, durchgeführt. Die Vorbehandlungsdauer betrug in allen Fällen 2 Stunden.

In der ersten Spalte ist das Herstellungsverfahren eingetragen. Die dort vermerkten Zahlen geben das Beispiel der vorliegenden Anmeldung an, nach dessen Vorschrift der entsprechende Stoff hergestellt wurde. In der letzten Spalte sind die jeweiligen Charakterisierungsmaßnahmen angegeben, wobei die Abkürzungen folgende Bedeutung haben:

Schmelzpunkt in ⁰C
Gute Analyse

Brechungsindex in einem Lösungsmittelgemisch von Cyclohexen/Äthylacetat in dem in Klammern angegebenen Mengenverhältnis m/e = Moieküiion des fcfassenspekirums.

Die Herstellung der Verbindung des Beispiels 31 wird im folgenden Beispiel 35 beschrieben.

Smp
G.A.
Rf

Herstellung

Beispiel
Nr.

R'

η für X Dosis
(mg/kg)

% Ödemverringerung

Physikalische Daten

ο- ι c

s.neue Beschreibung 31

15	A	35
16	B
17	B
18	C
19	C
20	C
21	C
22	C
23	D
24	D
25	D Γ?
27	U. E
28	E
29	E
30	E
', 31	F
32	F
33	G
34	G
Bei spie¹

10 10 2 10 8 6 2 0 8 2 0

Herstellungsverfahren der Verbindung aus Beispiel 31

Die Verbindung von Beispiel 31 wird durch Zugabe von 20 ml Thionylchlorid zu einer Lösung von 12,35 g 2-(4-isobutylphenyl)-propionsäure in 20OmI trockenem Benzol bei 0°C hergestellt. Die Reaktionsmischung wurde 18 h bei Raumtemperatur gerührt und dann 2 h am Rückfluß erhitzt. Bein Abdampfen des überschüssigen Thionylchiorids erhielt man das Säurechlorid in einer Ausbeute von 12,2 g, das sind 91% der Theorie. 6,1 g dieses Säurechlorids wurden in 25 ml trockenem Methylenchlorid gelöst und diese Lösung zu einer Lösung von 4,76 g 1,3-Diacetylglyzerin und 3,95 g trockenem Pyridin in 120 ml trockenem Methylenchlorid hinzugegeben. Die Reaktionsmischung wurde drei Tage bei Raumtemperatur geführt. Das Produkt wurde wie in Beispiel Ic) beschrieben isoliert. Das Produkt wurde auf einer 350-g-Florisil-Säule gereinigt und mit Petroläther/Äther-Gemisch 1 :1 eluiert. Es wurde in einer Ausbeute von 63 g oder 64% der Theorie erhalten.

Beispiel 36

Zur Herstellung von Kapseln für orale Darreichungsformen wird das folgende Verfahren angewandt: 25 g der Verbindung nach Beispiel 1 werden mit 2124 g Lactose und 12,5 Talcumpulver vorgemischt. Die Vormischung wird durch ein geeignetes Sieb gegeben und das gesiebte Pulver dann gemischt und in 17

14

20

14

27

24

19

17

281

175

150

on

ou

100

60

50

32,6

21,3

40

21,3

12,6

11,6

29,5

19,7

17,2

22,8

15,4

in

IV

32

49

30,7

36

29

45

35

Smp. 58-60° Smp. 61-63° Smp. 84-85° Smp. 61-63° Smp. 44-46° m/e 556 m/e 444 m/e 388 G. A. G.A. G.A.

~* /« i.CA

111/ ^ KfVTT

m/e 608

G.A.

m/e 440

m/e 384

G. A., R,-0,76(1 : 1)

G. A., Rf 0,86 (3 : 1)

G.A., R,-0,62(1 : 1)

G-A^R₄-0,61 (3:1)

Gelatinekapseln Nr. 3 in einer Füllmenge von 250 mg pro Kapsel gegeben.
Die folgende Formulierung ist eine typische Tablettenformulierung, die bei der Einarbeitung der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden kann. 13 g Maisstärke, 50 g des obengenannten Triglycerids, 132 g dibasisches Calciumphosphatdihydrat, 1 g Magnesiumstearat und 4 g Talcumpulver werden mit Wasser auf 200 g aufgefüllt. Ein Teil der obengenannten Kornstärke wird zusammen mit eiern aktiven Wirkstoff und dem Calciumphosphat vermählen. Dieses Gemisch wird gemahlen und durch ein Sieb der Maschenweite 0,42 mm gesiebt. Der zurückbleibende Anteil der Maisstärke wird mit Wasser granuliert, erhitzt und mit dem obengenannten Gemisch in einem Heißluftofen bei 50⁰C erhitzt und durch ein Sieb der Maschenweite 0,99 mm gesiebt. Das Talciumpulver und Magnesiumstearat werden dann zugegeben, das Gemisch vermischt, durch ein Sieb der Maschenweite 0,59 mm gesiebt und mindestens 15 min lang gemischt. Zur Herstellung der Tabletten wird das Gemisch mit einem 7,14 mm konvexen Standardstempel gepreßt, was Tabletten von 200 mg Gewicht mit 50 mg aktiver Substanz und einer Härte von 7 bis 9 ergibt

Natürlich können auch andere pharmazeutisch annehmbare Mischungen leicht hergestellt werden, z. B. Suspensionen, Sirupe, Pillen oder Oblaten, die vorzugsweise eine vorbestimmte Menge Aktivsubstanz pro gegebenes Volumen einer solchen Dosierungsform enthalten. Zur Herstellung von flüssigen Präparaten für orale Einnahme wird ein geeignetes nichttoxisches Vehikel verwendet, das die nötigen Geschmacks- und Süßungsmittel enthält, um daraus eine im Geschmack "nd im Mundgefühl angenehme Flüssigkeit herzustellen.

Claims

Patentansprüche:

J.Triglyceride der allgemeinen Formel CH₂-O-R

CH-O-R'

CH₂-O-R

in der R ein Säurerest der Formel CH₃-X-CO-

wobei X ein gesätxigter oder ein ein- oder mehrfach olefinisch ungesättigter zweiwertiger Kohlenwasserstoffrest mit O bis 18 Kohlenstoffatomen ist, und R' einen