DK154287B

DK154287B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af triglycerider

Info

Publication number: DK154287B
Application number: DK499875AA
Authority: DK
Inventors: Gerard Yvon Paris; David Lyon Garmaise
Original assignee: Abbott Lab
Priority date: 1974-11-07
Filing date: 1975-11-06
Publication date: 1988-10-31
Also published as: CH601167A5; DE2549783C3; DK154287C; GB1490603A; FR2290189A1; CA1067488A; FR2290189B1; AU8541975A; JPS5165706A; DE2549783A1; ZA756196B; NL161499B; US3988446A; DK499875A; SE425733B; NL7512376A; JPS568820B2; SE7512421L; DE2549783B2; NL161499C

Description

DK 154287 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte triglycerider med antiinflammatoriske egenskaber.

Antiinflammatoriske midler anvendes i almindelighed til behandling af 5 inflammationer, der er knyttet til rheumatisme og lignende sygdomme, som meget ofte er af kronisk natur. I disse tilfælde kræves behandling med antiinflammatoriske kompositioner i meget lange tidsrum, ofte på permanent eller i det mindste halvpermanent basis. U-heldigvis er flertallet af de antiinflammatoriske midler, som an-10 vendes i dag, af den type, der forårsager ubehag, smerte eller endnu alvorligere, forstyrrelser i fordøjelseskanalen. Det har eksperimentelt kunnet konstateres, at dyr, som kun gives en halv oral, letal dosis, viser moderate til svære sygelige forandringer i maven ved administration af en enkelt dosis af et standardlægemiddel inden 15 for det antiinflammatoriske område, og hos mennesker har der ofte kunnet konstateres ulcerøse tilstande, maveblødninger og lignende ved kronisk administration af inflammatoriske lægemidler.

Den foreliggende opfindelse har som formål at tilvejebringe en fremgangsmåde til fremstilling af antiinflammatoriske forbindelser, 20 som bedre tolereres af varmblodede dyr med hensyn til forstyrrelser i fordøjelseskanalen. Et andet formål med opfindelsen er at tilvejebringe en fremgangsmåde til fremstilling af antiinflammatoriske forbindelser til oral administration, som forårsager minimal eller ingen maveirritation. Et særligt formål med opfindelsen er at 25 tilvejebringe hidtil ukendte og bedre tolererbare antiinflammatoriske midler, som er effektive ved oral administration.

De ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser har den almene formel I

ch2-o-r

30 I

CH-O-R' I

ch2-o-r

DK 154287 B

2 hvor R betegner en acylgruppe med den almene formel CH3-X-CO-, hvor X betegner en binding eller en mættet eller umættet, divalent kæde med 1- 18 carbonatomer, og hvor R' betegner acylenheden i en organisk, farmaceutisk tolerabel syre med antiinflammatoriske egenskaber valgt 5 blandt acetylsalicyloyl, indometacoyl, 4-allyloxy-3-chlorphenylace-tyl, 2-(6-methoxynaphthyl)propionyl, 5,8,11,14-eicosatetraynoyl, 2-[3-chlor-4-(3-pyrrolinyl)phenyl]propionyl, 2-(3-phenoxyphenyl) pro -pionyl, l-methyl-5-(4-tolyl)pyrrol-2-acetyl, 2-(4-benzoylphenyl)pro-pionyl, 4-isobutylphenylacetyl og 4-isobutylphenylisopropionyl.

10 De omhandlede triglycerider har således den aktive gruppe fra et an-tiinflammatorisk lægemiddel i 2-stillingen samt acylgrupper i 1- og 3-stillingen, hvilket har vist sig at give udmærkede antiinflammatoriske egenskaber, uden at der optræder de bivirkninger, som ofte er knyttet til antiinflammatoriske lægemidler i sig selv.

15 Den ovennævnte acylgruppe med orale antiinflammatoriske egenskaber er den aktive bestanddel i de mest værdifulde antiinflammatoriske forbindelser, som anvendes i dag, eftersom de oftest forekommende antiinflammatoriske midler er organiske syrer. Særligt foretrukne grupper R' er f.eks. acylderivater af acetylsalicylsyre, indometacin, 20 4-isobutylphenyleddikesyre, 2-(4-isobutylphenyl)propionsyre, 4-allyl-oxy-3-chlorphenyleddikesyre, 2-(6-methoxynaphthyl)propionsyre, 1-methyl-5-(4-toluyl)pyrrol-2-eddikesyre, 2-(4-benzoylphenyl)pro-pionsyre, 2-(3-phenoxyphenyl)propionsyre og 5,8,11,14-eicosatetra-ynsyre.

25 Af det ovenstående fremgår, at gruppen R er en acylgruppe med i alt 2- 20 carbonatomer, hvorhos X fortrinsvis betegner gruppen -(CH2)n-, hvor n er 0 eller et lige tal. Særlig foretrukne grupper er acetyl, butyryl, hexanoyl, octanoyl, dodecanoyl og palmitoyl.

Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse er ejendommelig 30 ved, at dihydroxyacetone først diesterificeres med en forbindelse med den almene formel CH3XCOOH eller et reaktivt derivat deraf, hvor X har den ovenfor anførte betydning, hvorefter den således vundne diesterketon reduceres til det tilsvarende 1,3-dialkanoylglycerol (udtrykket "alkanoyl" betegner således CH3XCO-, hvor X har den oven- 3

DK 154287 B

for anførte betydning), og det nævnte 1,3-dialkanoylglycerol esterificeres med R'OH eller et reaktivt derivat deraf, fortrinsvis syrechloriderne, hvor R' har den ovenfor anførte betydning. R'OH betegner syren i et kendt antiinflammatorisk middel med en fri 5 carboxylsyregruppe.

Fremstillingen af et syrechlorid af en "antiinflammatorisk syre" kan sædvanligvis udføres på kendt måde under anvendelse af phosphor-pentachlorid, thionylchlorid, phosphoroxychlorid eller andre uorganiske midler, der sædvanligvis anvendes til en sådan omdannelse. Dis-10 se syrechlorider er sædvanligvis meget stabile og stærkt reaktive, hvilket medfører, at den omdannelse, der kræves til fremstilling af den ovenfor anførte forbindelse, sædvanligvis forløber i udbytter på 60-100% af det teoretiske.’

Ved en foretrukken udførelsesform af fremgangsmåden ifølge opfindel-15 sen afkøles dihydroxyacetone suspenderet i chloroform, og efter tilsætning af en mindre mængde pyridin tilsættes mindst 2 molækvivalenter af et alkanoylchlorid dråbevis i løbet af et vist tidsrum. Efter omrøring i flere timer i isbad fraskilles det dannede bundfald, og 1,3-dialkanoyl-dihydroxyacetonet oparbejdes på kendt måde. Det op-20 tages derefter i et passende opløsningsmiddel eller i en passende opløsningsmiddelblanding og reduceres, fortrinsvis under anvendelse af neutralt natriumborhydrid, hvilket fører til det ønskede 1,3-di-alkanoylglycerol, som isoleres fra blandingen på kendt måde. Denne forbindelse omsættes derefter f.eks. med omtrentlig en ækvimolær 25 mængde af syrechloridet af indometacin (herefter kaldt "indometa-coylchlorid") i nærværelse af en hydrogenchloridacceptor og et passende organisk opløsningsmiddel. Efter isolering og omkrystallisation fås den dannede triester med formlen I som et produkt med udmærket renhed.

30 Forbindelser fremstillet på denne måde kan let formuleres i doseringsenhedsform til medicinsk anvendelse. F.eks. kan farmaceutiske tabletter tilberedes ved blanding af dette stof og de sædvanlige typer adjuvanser, smagsmidler, fyldstoffer, puffere og/eller farvestoffer, som sammen med et smøremiddel kan komprimeres til 35 sædvanlige tabletter. Endvidere kan en blanding af den ovenfor an-

DK 154287 B

4 førte aktive forbindelse med fyldstoffer og/eller pufferstoffer eller faste excipienser oparbejdes til flager, piller eller ganske enkelt fyldes i gelatinekapsler i doser af passende størrelse. Fortrinsvis indeholder en dosiserihed mellem 30 og 1000 mg af den aktive bestand-5 del, og, om ønsket, kan der iblandes andre lægemidler.

Orale doseringsformer af den ovenfor angivne slags kræver ingen overtræk med henblik på at maskere smagen eller for at blive beskyttet mod mavesyre. De aktive bestanddele har meget lav syre- og vandopløselighed, hvilket indebærer, at smagen kræver ingen eller kun 10 ringe maskering, og at maveirritation praktisk taget slet ikke forekommer. Når den aktive komponent når det intestinale område, finder absorption sted,uden at tarmene irriteres. Den aktive komponent er lipidopløselig, og som sådan trænger den igennem cellemembranen, hvilket indebærer, at den vil findes i blodet i tilstrækkelig 15 høj dosis til at give antlinflammatorisk virkning uden irriterende bieffekter i tarm- eller maveområdet.

Som kort omtalt ovenfor udviser forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse usædvanlige og overraskende fordele i sammenligning med de tidligere anvendte forbindelser, dvs. de kendte 20 antiinflammatoriske midler, som inkorporeres i esterne fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse. Disse fordele indebærer i første række praktisk taget fuldstændigtfravær af sygelige forandringer ved forsøg på forsøgsdyr, hvilket overført på andre pattedyr giver en klar indikation af i det væsentlige fravær af alle typer irritation i 25 mave-tarmkanalen. Samtidig kan de hidtil ukendte forbindelser administreres i samme eller større doser for at fremkalde højere indhold af den antiinflammatoriske komponent i blodet, hvilken komponent træder ind i blodomløbet og/eller lymfesystemet som et triglycerid, selv om det antages, at netop i det øjeblik, hvor 30 molekylet passerer gennem slimhinden, estergrupperne i 1- og 3-stillingen temporært tabes, hvorhos de imidlertid umiddelbart genesterificeres inde i slimhindecellerne og senere i blod- eller lymfesystemet. Dette er særlig interessant, da antiinflammatoriske midler sædvanligvis må gives på permanent eller semipermanent basis, 35 hvilket hidtil ofte har givet anledning til alvorlige skader eller besvær i mave-tarmkanalen hos brugeren, idet der har optrådt

DK 154287 B

5 irritation eller tarmblødninger samt aktivering eller genaktivering af ulcerøse tilstande. Det er således særlig interessant, at der med triglycerideme fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse kan administreres kendte antiinflammatoriske komponenter i lange tidsrum, 5 uden at der optræder nogen form for irritation. De kan således give langvarige eller semipermanente indhold af den omhandlede, hidtil ukendte aktive komponent i blodet ud over det minimale effektive indhold, uden at det toxiske niveau nogen sinde overskrides, nås eller blot nærmes.

10 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til fremstilling af de hidtil ukendte triglycerider beskrives yderligere i nedenstående eksempler.

Eksempel 1.

a) Dihydroxyacetone-dimer tørres i 4 timer i en vakuumpistol ved 50eC. 13 g af det tørre materiale suspenderes derefter i 500 ml tørt, 15 ethanolfrit chloroform i en én-liters rundbundet tre-halset kolbe, som er forsynet med calciumchlorid-tørringsrør og en trykudjævnende tildrypningstragt. Til denne suspension ved 5°C sættes 25 ml tørt pyridin. Blandingen afkøles i isbad, medens 76 g nydestilleret palmitoylchlorid i løbet af 1 time tilsættes dråbevis. Reaktions- 20 blandingen omrøres ved stuetemperatur natten over. Bundfældet pyridin-hydrochlorid frafiltreres, og chloroformopløsningen vaskes med 100 ml's portioner vand. Chloroformopløsningen inddampes til dannelse af gummiagtig, fast substans, som tritureres med en mindre mængde diethylether og filtreres, hvorved der dannes 52,2 g af en 25 hvid, fast substans, som identificeres som 1,3-dipalmitoyldihydro-xyacetone, og som smelter ved 79-82°C samt fås i et udbytte på 64% af det teoretiske.

b) I en 3-liters Erlenmeyerkolbe suspenderes 50,2 g af den ovenfor anførte forbindelse i 1100 ml tetrahydrofuran og 250 ml benzen under 30 mekanisk omrøring. Blandingen afkøles til 5°C, og der tilsættes 70 ml vand. Blandingen omrøres, og der tilsættes 5,02 g neutralt natrium-borhydrid (fremstillet ved omrøring af kommercielt natriumborhydrid i ethylacetat natten over, vask med ether og tørring) i mængder på 0,5 g, hvorefter suspensionen omrøres ved 5°C i 45 minutter. Derpå

DK 154287 B

e tilsættes 2,5 ml iseddike langsomt for at sønderdele overskydende borhydrid, og blandingen omrøres i 30 minutter ved 5°C, inden der tilsættes 300 ml chloroform og 300 ml diethylether. Blandingen vaskes to gange med hver gang 250 ml vand og derefter med 250 ml 1%'s 5 natriumhydrogencarbonatopløsning. Den organiske fase tørres over vandfrit magnesiumsulfat og inddampes, hvorved der fås et gummi-agtigt,fast stof. Dette stof tritureres med en mindre mængde acetone og filtreres, hvorved der fås 44,4 g (88% af det teoretiske) 1,3-dipalmitoylglycerol i form af et hvidt,fast stof, som smelter ved 10 71-73eC.

c) Til en omrørt opløsning af 5,7 g af den ovenfor nævnte diester og 0,95 g pyridin i 50 ml ethanolfrit, tørt chloroform, sættes under omrøring 3,76 g indometacoylchlorid (fremstillet som beskrevet i spansk patentskrift nr. 341.692). Efter henstand i 40 timer behandles 15 reaktionsblandingen med 100 ml vand. Chloroformfasen vaskes med 100 ml fortyndet saltsyre, 100 ml 5%'s natriumhydrogencarbonatopløsning i vand og endelig to gange med 100 ml vand, tørres over natriumsulfat og inddampes. Den vundne faste remanens opløses i 100 ml petroleums-ether (kogeinterval 30-60°C) og chromatograferes på en søjle 20 indeholdende 200 g Florisil® (et aktiveret magnesiumsilicat, markedsført af Fisher Scientific Company, Ltd.), som i forvejen er vasket med petroleumsether. Nogle forureninger elueres først med petroleumsether, og søjlen elueres derefter med petroleumsether/di-ethylether i forholdet 85:15 og endelig med petroleumsether/diethyl-25 ether i forholdet 50:50. Det sidstnævnte eluat indeholder det ønskede 2-indometacoyl-l,3-dipalmitoylglycerol, som fås i et udbytte på 6,2 g (68% af det teoretiske), og som smelter ved 64-66°C. Ved omkrystallisation af petroleumsether fås et rent stof, som smelter ved 65-66°C. Denne forbindelse har en intraperitoneal LD5Q-værdi på ca. 1000 30 mg/kg og har ingen oral toxicitet.

Eksempel 2.

Der gås frem som beskrevet i eksempel 1 a) under anvendelse af 11,6 g 1,3-dihydroxyacetone og 58,2 g dodecanoylchlorid i 300 ml chloroform og 25 ml pyridin. Ved fremgangsmåden fås 48,0 g (82% af det teoreti

DK 154287 B

7 ske) 1,3-dodecanoyldihydroxyacetone, som smelter ved 67-70°C, og som tritureres med methanol.

Ved behandling af dette materiale på lignende måde som beskrevet i eksempel 1 b) fås 1,3-didodecanoylglycerol i et udbytte, som er 86% 5 af det teoretiske, i form af et hvidt,fast stof, som smelter ved 48-53°C.

Ved omsætning af 4,57 g af dette materiale med 4,14 g indometacoyl-chlorid og 0,95 g pyridin i 50 ml chloroform i 60 timer som beskrevet 1 eksempel 1 c) fås 2-indometacoyl-1,3-didodecanoylglycerol i et ud-10 bytte på 4,3 g (54% af det teoretiske), hvilken forbindelse smelter ved 51-52°C.

Denne forbindelse har en intraperitoneal LDjq-værdi på ca. 1000 mg/kg og har heller ingen oral toxicitet.

Eksempel 3.

15 Ved omsætning af 5,7 g dipalmitoylglycerol fra eksempel lb) og 2,18 g 2-acetylsalicyloylchlorid og 0,95 g pyridin i 50 ml chloroform i 4 dage på den i eksempel 1 c) beskrevne måde fås 6,0 g (82% af det teoretiske) 2-(2-acetylsalicyloyl)-l,3-dipalmitoylglycerol, som smelter ved 43-44°C. Denne forbindelse har en intraperitoneal LD50-20 værdi på ca. 1000 mg/kg og har ingen oral toxicitet.

Eksempel 4.

Analogt med eksempel 3 omdannes 1,3-didodecanoylglycerol fra eksempel 2 til 2-(2-acetylsalicyloyl)-1,3-didodecanoylglycerol, som fås i et udbytte på 61% af det teoretiske. Forbindelsen smelter ved 29-30°C.

25 Eksempel 5.

I analogi med de ovenfor anførte eksempler omsættes 2-acetylsalicyloylchlorid med 1,3-dioctanoylglycerol, som ved oparbejdning på den ovenfor beskrevne måde giver 71% af det ønskede 1,3-dioctanoyl-2-(2-acetylsalicyloyl)glycerol i form af en olie.

DK 154287 B

8

Eksempel 6.

En opløsning af 5 g 4-allyloxy-3-chlorphenyleddikesyre i 220,06 ml 0,1N natriumhydroxidopløsning frysetørres. Det gummiagtige,faste stof lades tre gange danne en azeotrop med 200 ml tørt benzen i vakuum, 5 hvorved der dannes natriumsaltet af den ovenfor anførte syre. Dette sættes portionsvis til en opløsning af 5,08 g oxalylchlorid i 25 ml benzen. Der tilsættes yderligere 25 ml benzen, og opløsningen koges forsigtigt under tilbagesvaling i 1 time, hvorefter den afkøles og filtreres, og filtratet inddampes til dannelse af 6 g af en rød-10 gulfarvet væske, som identificeres som 4-allyloxy-3-chlorphen-acetylchlorid.

Ved omsætning af 5,7 g 1,3-dipalmitoylglycerol med 2,75 g 4-allyloxy-3-chlorphenacetylchlorid og 0,95 g pyridin i 50 ml chloroform i 18 timer på den i eksempel 1 c) beskrevne måde fås 5,0 g (64% af det 15 teoretiske) 2-(4-allyloxy-3-chlorphenacetyl)-1,3-dipalmitoylglycerol, som smelter ved 45-63°C. Denne forbindelse har ingen intraperitoneal eller oral toxicitet.

Eksempel 7.

Ved at gå frem som beskrevet i eksempel 6, men erstatte 4-allyloxy-3-20 chlorphenacetylchlorid med 2,74 g 2-(6-methoxynaphthyl)propionylch-lorid (fremstillet ud fra den frie syre med oxalylchlorid som beskrevet i eksempel 6), og ved at forøge opløsningsmiddelmængden til 70 ml, fås der ved reaktionen, som forløber på 60 timer, et udbytte på 4,9 g (63% af det teoretiske) 2-[2-(6-methoxynaphthyl)pro-25 pionyl]-1,3-dipalmitoylglycerol, som smelter ved 66-68°C. Denne forbindelse har ingen intraperitoneal eller oral toxicitet.

Eksempel 8.

I analogi med eksempel 1 og 2 behandles 1,3-diacetylglycerol med indometacoylchlorid i omtrentlig ækvimolære mængder i tørt chloro-30 form, hvorved der efter 16 timers forløb fås en olie i et udbytte på ϋΚ 154287 Β 9 66% af det teoretiske. Når dette materiale lades henstå, Icrys talli -serer det, og det har herefter et smeltepunkt på 78-80°C.

Eksempel 9.

Der gås frem som beskrevet i eksempel 1 og 2, idet 1,3-dihydroxyace-5 tone esterificeres. til dannelse af 1,3-dieicosanoylestereq, som fås i et udbytte på 49% af det teoretiske, og som smelter ved TJ9-90°C efter amkrystallisation af dhloroform/petroleumsether. Efter reduktion af denne ester på den i eksempel 1 b) beskrevne måde fås 1,3-dielcosanoylglycerol i et udbytte på 85% af det teoretiske.

10 Forbindelsen smelter ved 83-f84°C.

Ved omsætning af 3,41 g af denne diester med 7,07 g indometacoyl-cblorid og 0,435 g pyridin i 15 ml tørt chloroform i 60 timer på den i eksempel 1 c) beskrevne måde fås 4,2 g 2-indometacoyl-l,,3-cdiei-cosanoylglycerol. Denne forbindelse smelter ved 70-72eC efter om-15 krystallisation af petroleumsether med kogeinterval 30-60°C.

Eksempel 10.

Til en opløsning af 0,9 g dihydroxyacetone i 50 ml chloroform og 1,5 ml pyridin ved 0-5“C sættes i løbet af 15 minutter dråbevis 7,48 g nydestilleret linoleoylchlorid.. Blandingen omrøres i 1 dag ved 20 stuetemperatur og vaskes tre gange med 100 ml vand og en gang med 100 ml saltopløsning. Den organiske fase tørres med magnesiumsulfat og inddampes til dannelse af 7,04 g af en gulfarvet olie. Denne olie adsorberes på 40 g Florisil® og ekstraheres to gange med 100 ml petroleumsether og to gange med petroleumsether/ether i forholdet 25 85:15. Disse sidste fraktioner inddampes til dannelse af en klar, gulfarvet væske (udbytte 72% af det teoretiske), som karakteriseres ved hjælp af IR- og NMR-spektra som 1,3-dilinoleoyldihydroxyacetone.

Denne forbindelse hydrogeneres på den i eksempel 1 b) beskrevne måde i 1,5 time ved 0°C, med den forskel, at der kun tilsættes chloroform 30 før tørring. Ved inddampning fås en gulfarvet væske (udbytte 100% af det teoretiske), som består af 1,3-dilinoleoylglycerol, hvilket påvises ved hjælp af tyndtlagschromatografi og IR-spektroskop!.

DK 154287 B

10

Ved omsætning af 3,7 g åf denne forbindelse med 2,26 g indometaco-ylchlorid efter den i eksempel 1 c) beskrevne fremgangsmåde fås 3,8 g (67% af det teoretiske) 2-indometacoyl-l,3-dilinoleoylglycerol, som påvises ved hjælp af NMR-spektroskop!. Denne forbindelse har ødem-5 reduktionsegenskaber, der er praktisk taget identiske med dem, som forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 1 har; ved 21,6 mg/kg reduceres ødem med 22,8%.

Biologisk afprøvning.

Forbindelserne fremstillet ifølge de ovenstående eksempler afprøves 10 for deres evne til at reducere opsvulmningen af kunstigt fremkaldt ødem på rottepoter. Ødemet er fremkaldt ved hjælp af "carageenan"-injektion efter den af Winter et al. Proc. Soc. Exp. Biol. Med.,111, 544 (1962) beskrevne metode. I tabel I er angivet dosis/virknings-data for forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 1 (indeholdende 15 39,3% indometacinenhed i triglyceridmolekylet) og for forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 2 (44,8% indometacinindhold). Sammenligningstests udføres med indometacin per se. I samtlige tilfælde er den angivne mængde den oralt administrerede mængde.

Tabel I

20 Forbindelse Behandlingstid Dosis i mg/kg Procent ødemfremstillet reduktion ifølge eksempel nr.

25 1 30 - 60 minutter 25 12 1 30-60 minutter 50 18 1 2 timer 25 29 1 2 timer 50 26 1 4 timer 50 38 30 1 8 timer 50 20

SDK 154287 B

11 2 2 timer 11 36 2 2 timer 25 J31 2 2 timer 50 4g3 5 Sammenlignings· forbindelse 2 timer 2,5 .33

Sammenlignings- forbindelse 2 timer 5,0 '44 10 Af resultaterne i tabel I fremgår det, at høje aktivitetsniveauer kan opnås med de hidtil ukendte ttriglycerider. Specielt signifikant er det, at aktiviteten, målt efter indometacinindhold, af de .ladministrerede forbindelser er meget ensartet i de forskellige ttilfalde, men at der ikke kan iagttages skader eller sygelige forandringer ved 15 anvendelse af triglycerideme fremstillet ifølge opfindelsen. Dette påvises ved undersøgelse af de aflivede dyr, som havde fået de ovennævnte forbindelser i forskellige doser: ingen skader (0) kunne påvises på seks dyr, som fik 16 mg/kg af forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 1, ingen skader kunne påvises på seks dyr ved doser 20 på 4 og 16 mg/kg af forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 2; "frit" imdometacin udviser skader på 3 dyr af 6 ved 4 mg/kg x>g på 6 dyr af 6 ved 16 mg/kg på rotter.

Ved det samme forsøg sammenlignes de forbindelser, som er fremstillet ifølge eksemplerne 5-9, med den respektive sammenligningsforbin-25 delse. Som "sammenligningsforbindelse" anvendes den frie syre af den acylerihed, som er bundet til 2-stillingen i de omhandlede tri-glycerider. I tabel II vises denne dosisrespons.

DK 154287 B

12

Tabel II

Forbindelse Forbehandling Dosis i mg/kg Procent Procentisk indfremstillet ødemre- hold af sammen- ifølge ek- duktion lignings forbin- 5 sempel nr. delsen 3 1/2 time 200 3 24% 4 2 timer 200 11 29% 5 2 timer 200 15 35% 10 Sammenligningsforbindelse 2 timer 80 26 fri syre 6 1 time 50 9 29% 15 6 1 time 100 26 29% 6 1 time 136 32 29%

Sammenligningsforbindelse 2 timer 20 38 fri syre 20 Sammenlig-ningsfor- bindelse 2 timer 25 33 fri syre 7 2 timer 34 15 16% 25 Sammenligningsforbindelse 2 timer 2 41 fri syre 30 Med henblik på at vise anvendelsen af de ovenfor anførte forbindelser ved behandling i meget lang tid blev der med de nye triglycerider udført den af Glen og Gray, Amer. J. Vet. Res., 26, 1180 (1965) angivne metode. Ved oral administration af en mængde på 5 mg/kg/dag af den ifølge eksempel 1 fremstillede forbindelse fra dag nr. 14 til 35 dag nr. 25 viser ødemet på bagpoten på rotter en forøgelse på 0,62 ml Hg, medens sammenligningsmidlet giver 1,49 ml Hg. Ved visuel

BK 154287B

13 bedømmelse af alle fire ben Æås ved samme behandling en værdi på 8,8 (16 er teoretisk maksimum), imedens sammenligningsforbindelsen giver en værdi på 13,6. Forøgelsen af kropsvægten er 63,3 g hos ide behandlede dyr og 45,4 g hos Ikontroldyrene.

5 Den ifølge eksempel 2 fremstillede forbindelse, administreret på dagene 14-25, giver følgende resultat på dag nr. 25:

Dosis, Ødem på bagpote Visuel bedømmelse Vægtforøgelse mgAg/dag g 10 2,2 0,44 8,0 «1,4 4.4 0,55 6,4 j69,3 8.5 0,40 3,6 77-9,2 I intet tilfælde kunne der observeres mave- eller tarmirrfLtation eller blødning.

15 Takket være den ekstremt lave toxicitet for de omhandlede tr'igly- cerider med formlen I og den ekstremt ringe risiko for sygelige forandringer og maveirritationer er de omhandlede forbindelser meget værdifulde ved behandling af inflammationer og ødem. De kan administreres i meget lange tidsperioder, uden at der foreligger nogen 20 risiko for mave- eller tarmblødninger, ulcer eller mildere former af irritationer og forstyrrelser, som ofte optræder i forbindelse med de frie syrer, der hidtil er blevet anvendt som antiinflammatoriske midler. De omhandlede forbindelser har meget fordelagtige 'terapeutiske indeksværdier, eftersom der i de fleste tilfælde ikke kunne 25 påvises nogen toxicitet, selv ved meget høje doser.

En fagmand på området indser let, at den dosis, der skal administreres af de omhandlede triglycerider, i stor udstrækning afhænger af den antiinflammatoriske enhed i triglyceridet. Når R' i det omhandlede triglycerid således er f.eks. en acetylsalicyloylenhed, skal der 30 anvendes forholdsvis store doser, som tolereres uden ubehag. Når R' er indometacoylkomponenten, er den totale daglige dosis eller den effektive enkeltdosis, som skal administreres, meget mindre. Dosis afhænger også i en vis udstrækning af den type ester, som anvendes i

DK 154287 B

14 1- eller 3-stillingerne i triglyceridet. Når R er en lille enhed, dvs. X indeholder 0, 2, 4 eller 6 carbonatomer, er andelen af R' i triglyceridet betydelig højere, end når der anvendes en sådan forbindelse, hvor X indeholder 12-18 carbonatomer. Den valgte dosis 5 afhænger således af den ønskede terapeutiske aktivitet af den enhed, som er bundet i 2-stillingen, samt kædelængden for den aliphatiske syre, som anvendes som R.

Med henblik på at fremstille kapsler til oral administration anvendes følgende fremgangsmåde: 10 25 g af forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 1 forblandes med 212,5 g lactose og 12,5 g talkumpulver. Forblandingen passeres gennem en passende sigte, og det sigtede pulver blandes derefter og fyldes i gelatinekapsler nr. 3 til en fyldvægt på 250 mg/kapsel.

Nedenstående tilberedning er en typisk tabletformulering, som kan 15 anvendes til at inkorporere de omhandlede forbindelser i tabletter.

13 g majsstivelse, 50 g af det anførte triglycerid, 132 g dibasisk calciumphosphat-dihydrat, 1 g magnesiumstearat og 4 g talkumpulver blandes med vand q.s. ad 200 g. En del af majsstivelsen formales sammen med det aktive lægemiddel og calciumphosphatet; denne blanding 20 formales igen og bringes til at passere gennem en sigte på 40 mesh.

Den resterende del af majsstivelsen granuleres med vand, opvarmes og blandes med den ovenfor anførte blanding i en varmluftsovn ved 50°G og sigtes gennem en sigte på 16 mesh. Talkumpulveret og magne-siumstearatet tilsættes, hvorefter blandingen igen sammenblandes og 25 bringes til at passere gennem en sigte på 30 mesh og blandes i mindst 15 minutter. Til fremstilling af tabletter komprimeres denne blanding under anvendelse af en konveks standardpunsel på 7 mm, som giver en tablet med en hårdhed på 7-9, hvorhos hver tablet vejer 200 mg og indeholder 50 mg af det aktive lægemiddel.

30 Der kan naturligvis også let tilberedes andre farmaceutisk tolerable kompositioner, f.eks. suspensioner, sirupper, piller og flager, der fortrinsvis indeholder en forudbestemt mængde af det aktive stof pr. given volumenenhed af en sådan doseringsform. I tilfælde af et flydende præparat til oral administration anvendes en passende ikke-

Claims

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af et triglycerM med den almene formel I ch2-o-r CH-O-R' I

10 I ®h2-o-r hvor R betegner en acylgruppe med den almene formel CH3-X-ÆD-, hvor X betegner en binding eller en mættet eller umættet, divalent rkæde med 1-18 carbonatomer, og hvor R'' betegner acylenheden i en organisk, 15 farmaceutisk tolerabel syre med anti Inflammatoriske egenskaber valgt blandt acetylsalicyloyl, indometacoyl, 4-allyloxy-3-chlorphenylace-tyl, 2-(6-methoxynaphthyl)propionyl, 5,8,11,14-eicosatetKaynqyl, 2-[3-chlor-4-(3-pyrrolinyl)phenyl]propionyl, 2-(3-phenoxyphenyl)pro-pionyl, l-methyl-5-(4-tolyl)pyrrol-2-acetyl, 2-(4-benzoylpbenyl)pro-20 pionyl, 4-isobutylphenylacetyl<og 4-isobutylphenylisopropionyl, kendetegnet ved, at dihydroxyacetone diesterificeres med en forbindelse med formlen ROH eller et reaktivt derivat deraf , :hvor R har den ovenfor anførte betydning, at den således vundne diesterketon reduceres til den tilsvarende alkohol, og at denne alkohol omsættes 25 med en syre med formlen R'OH eller et reaktivt derivat deraf,, fortrinsvis syrechloridet, hvor R' har den ovenfor anførte betydning.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at X er -(CH2)^q-, °S at R' er ind°-metacoyl.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at X er -(CH2)jlq-, og at R' er 4-allyloxy-3-chlorphenylacetyl. DK 154287 B

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1', kendetegnet ved, at X er - (CH2) JLO-» °§ at ^ er acetyl-salicyloyl.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, 5 kendetegnet ved, at X er -(CH2)iø-, °§ at er 4-iso-butylphenylacetyl eller 4-isobutylphenyl-2-propionyl.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at X er - (CH2) 10 “» °S at er 2-(6-me-thoxynaphthyl)propionyl.

7. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at X er -(^2)^4-, og at R' er indome-tacoyl.

8, Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at X er -(^2)^4-, og at R' er acetyl-15 salicyloyl.

9. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at X er -(CH2)n-, hvor n er 0 eller et lige, helt tal på højst 18.