DE2502706C2 - Verfahren zur Herstellung von 7-Amino-cephem-Verbindungen - Google Patents

Verfahren zur Herstellung von 7-Amino-cephem-Verbindungen

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Description

worin
X ein Wasserstoffatom, eine Hydroxygruppe, Acetoxygruppe, Pyridiniumgruppe oder eine (5-Methyl-13,4-thiadiazol-2-yl)-thiogruppe bedeutet, dadurch gekennzeichnet, daß man eine wäßrige Lösung von Verbindungen der allgemeinen Formel
worin
R eine -COOH- oder -COCOOH-Gruppe bedeutet, mit einer Mikrobenkultur oder Präparation davon in wäßrigem Medium behandelt, die sich von Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 ableitet
Die Erfindung betrifft das durch den Anspruch gekennzeichnete Verfahren zur Herstellung von 7-Amino-cephem-Verbindungen aus 7-subst-Cephem-Verbindungen durch enzymatische Einwirkung von Kulturen, die aus den Mikroorganismus Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 stammen.
Es wurde gefunden, daß ein Mikroorganismus, der zum Genus Comamonas Stamm SY-77· 1 gehört und der aus Bodenproben abgetrennt wurde, eine Aktivität besitzt, um 7-Amino-cephem-Verbindungen aus einer Verbindung der allgemeinen Formel
R-(CHj)3-CONH
N J-CH2X
COOH
(ID
herzustellen, worin
R eine -COOH- oder -COCOOH-Gruppebedeutet und
X die oben gegebene Bedeutung besitzt, wobei die Amidbindung davon gespalten wird.
Der oben beschriebene Mikroorganismus besitzt die folgenden taxonomischen Eigenschaften:
A. Morphologie
Bouillon-Agar-Schrägkulturen wurden bei 30° C optisch und durch das Elektronenmikroskop geprüft. (1) Form und Größe: kurzerstabmit
runden Enden, 0,1 bis 03 x 03 bis 0,5 μ
(2) Metamorphose: einfache oder kurze ίο Kette, keine Kapseln
(3) Motilität: ja, geißelartig
(4) Sporen: keine Sporulation
(5) Gramfärbung: negativ
(6) Säurebeständigkeit: negativ
"" B. Wachstumsbedingungen
auf verschiedenen Medien:
(1) Bouillon-Agarplatte (30° C, 24 Stunden):
die Kolonie ist rund, konvexes Waorisn, glatte Oberfläche, wellige Kanten, weiß bis etwas gelblich-weiß, etwas klebrig, durchscheinend bis opak, keine Dispersion.
(2) Bouillon-Agarschrägplatte (30° C, 24 Stunden): gutes Wachstum, lineares Wachstum, glatte Ober fläche, glänzend, feucht, trübe bis schwach gelblich weiße Oberfläche, durchscheinend bis opak. Medium keine Farbänderung.
(3) Bouillon (30° C, 1 bis 3 Tage):
einheitlich trübe, Spurenausfällung, fadenartige μ Suspension beim Schütteln, kein Film und Ring.
(4) Bouillon-Gelatine-Ausstich (30° C, 24 Stunden):
lineares Wachstum längs der Ausstichlinie, insbesondere in der Mitte bis zum Boden. (5) Sojabohnen-Agarschrägkultur (30° C, 24 Stunden):
gutes Wachstum, gleich wie auf Bouillon-Agar, glatte Oberfläche, glänzend.
(6) Kartoffel-Agarschrägkultur:
gutes Wachstum, weiße Kolonieoberfläche, glatte Oberfläche, etwas klebrig, durchscheinend bis opak, feucht, glänzend, keine Pigmentbildung.
(7) Uckmusmilch (30°C, 25 Tage): fast keine Verflüssigung.
(8) Glucose-Bouillon-AgarschrägkuHur (30°C, 24 Stunden):
besseres Wachstum, verglichen mit der Buillon-Agarschrägkultur, etwas klebrig.
(9) Glucosenitrat-Agar-Schrägkultur so (30°C,lbis3Tage):
fast kein Wachstum.
(10) Tyrosin-Agarschrägkultur(30°C,48 Stunden): Wachstum, Medium wird leicht braun.
(11) Mannit-Hefeextrakt-Agarplatte (30° C, 48 Stunden):
gutes Wachstum, weiß bis schwachgelb, glatte Oberfläche, feucht, konvex, Medium keine Farbänderung.
(12) Bouillon-Agarplatte, 7% NaCI zugegeben fto (30°C,10 Tage):
fast kein Wachstum (U) Glycenn-Pepinn-Agarplatte(30°C,3Tage):
gutes Wachstum, glatte Oberfläche, glänzend, konvex, Medium wird braun. h5 (14) Milch-Agarplatte(30°C,5Tage):
keine Caseinhydrolyse. (15) Taurocholat-Agarplatte(30°C, 15 Tage): kein Wachstum.
C. Physiologische L-Arabinose _
Eigenschaften D-Xylose -
(1) Nitratreduktion: - D-Glucose -
(2) Denitrifikation: - D-Mannose -
(3) Methylrot-Test: - (gelb) D-Fractose -
(4) Voges-Proskauer-Reaktion : + D-Galactose -
(5) Indolbildung: - Maltose -
(6) Hydrogensulfatbildung: - Saccharose -
(7) Stärkehydrolyse: - Lactose -
(8) Verwendung von Citrat: + Treharose -
(9) Verwendung einer anor keine Verwendung Sorbit -
ganischen StickstofTquelle: von Nitrat Mannit -
(10) Pigmentbildung: hängt vom Medium ab Inosit -
(11) Urease: - Stärke _
(12) Oxidase: +
(13) Catalase: +
(14) Gelatineverflüssigung: -
(15) Argininhydrcßyie: -
(16) Gluconatoxydation: -
(17) Wachstumsbereich:
Wachstum: pH bis 12,5
bis 42° C
optimales Wachstum:
pH 7,0 bis 8,5,
28 bis 35° C
08) aerob oder anaerob: aerob
(19) O-F-Test: keine Änderung beim
O-Typ- und F-Typ-Test
(20) Fermentation von Kohlenhydraten:
Säurebildung Gasbildung
Wurden die taxonomischen Eigenschaften des Mikroorganismus Stamm SY-77-1 mit den oben erwähnten mycologischen Eigenschaften unter Bezugnahme auf das »Manual for the Identification of Medical Bacteria« von Cowan und Steeel (Ed. 1965) und »Bergey's Manual of Determinative Bacteriology« (7. Ed. 1961) geprüft und mit Typkulturen der entsprechenden Stämme verglichen, so wurde er als Stamm identifiziert, der zu dem Genus Comamonas gehört. Die Anmelderin hat daher den Stamm SY-77-1 mit einem Kulturtyp verglichen, der von American Type Culture Collection (ATCC) erhältlich ist, und erkannt, daß der Stamm ähnlich ist wie Comamonas terrigena, daß er sich aber in einer Hinsicht unterscheidet, nämlich der Stamm SY-77-1 besitzt eine stärkere Aktivität, um eine Amidbindung der Verbindung (II) zu spalten.
Aus dem Obigen ist erkennbar, daß der Stamm SY-77-1 ein neuer Stamm ist, der zu dem Genus ι Comamonas gehört und als Comamonas sp. SY-77-1 bezeichnet wird. Dieser Stamm wurde unter der Nummer »FERM-P 2410« im Research Institute for Microbiological Industry and Technology, Agency of Industrial Science and Technology, Japan, hinterlegt
in Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein mikrobiologisches neues Verfahren zur Herstellung von 7-Amino-cephem-Verbindungen aus analogen Verbindungen des Cephalosporins C zu schaffen. Dabei sollen wichtige Zwischenprodukte für die Herstellung von
ι ι pharmazeutisch wertvollen Cephalosporinderivaten gebildet werden.
Die Bildung einer Aminoverbindung [I] unter Verwendung des Mikroorganismus Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 kann erreicht werden, indem
:o man den Mikroorganismus züchtet und die Verbindung [II] mit der Mikrobenkultur oder Präparation davon behandelt
Die Züchtung des Mikroorganismus erfolgt vorteilhafterweise bei aeroben Bedingungen, mehr bevorzugt in einer untergetauchten Belüftungskultur. Nährmedien können umfassen eine assimilierbare Quelle für Kohlenstoff, eine assimilierbare Quelle für Stickstoff und Salze. Die Kultu'temperatur beträgt bevorzugt 25 bis 370C und die Kulturzeit beträgt im allgemeinen 2 bis
jo 10 Tage und zu dem Zeitpunkt, wenn die N-Entacylierungsaktivität das Maximum erreicht, sollte die Kultivierung natürlich beendet werden.
Die so erhaltene Mikrobenkultur oder Präparation davon kann zur N-Entacylierungsreaktion von Verbindüngen [II] verwendet werden. Die Herstellung der Mikrobenkultur bringt mit sich, daß die behandelte, gezüchtete Masse eine verbesserte N-Entacylierungsaktivität für die bevorzugte Bildung der Aminoverbindung [I] besitzt, und beispielsweise können, bedingt durch die endo-enzymatische Eigenschaft dei N-Entacylierungsaktivität, gewaschene Mikrobenzellen, die aus der Kulturmasse gesammelt werden, ein zellfreier Extrakt wie gemahlene oder beschallte Zellen, Zell-Lysat, das mit Pufferlösungen oder Cetylpylidiniumchlorid behan-
4Ί delt wurde, gereinigtes oder teilweise gereinigtes N-Entacylierungsenzym, erhalten von. dem zellfreien Extrakt nach bekannten Verfahren wie Aussalzen oder Chromatographie, immobilisierte Enzympräparationen oder Mikrokapseln, die Mikrobenzellen oder Präpara-
jo tionen davon enthalten, verwendet werden und diese besitzen N-Entacylierungsaktivität
Die Mikrokapseln besitzen bevorzugt eine dreidimensionale Struktur (Gelstruktur) und enthalten semiper.Tieables Membranwandpolymer, welches die N-Entacylierungsaktivität nicht inaktiviert und die Kernsubstanz der aktiven N-Entacylierungsaktivitätspräparation umhüllt.
Beispiele von Einkapselungsverfahren sind das Düsenverfahren, wobei die Kernsubstanz in einem mit Wasser mischbaren Lösungsmittel gelöst oder dispergiert wird und wobei das Polymer, das die semipermeable Membranwand bildet, in wäßrigem Medium gelöst wird (japanische Offenlegungsschrift 49-25 128); ein komplexes Emulsionsverfahren in wäßrigem Vehiculum,
h5 bei diesem Verfahren wird das Wandpolymer in einem Lösungsmittel, das mit Wasser nicht mischbar ist, gelöst, welches einen Siedepunkt besitzt, der niedriger ist als der von Wasser, und einen Dampfdruck, der höher ist als
der von Wasser, wobei das Lösungsmittel die N-Entacylierungsaktivität nicht zerstören darf, und anschließend wird eine Kernsubstanz darin dispergiert und die dispergierte Lösung wird in eine wäßrige Lösung getropft oder darin suspendiert, die ein oberflächenaktives Mittel oder Schutzkolloid enthält und dann wird das Lösungsmittel entfernt, wobei Mikrokapseln gebildet werden (publizierte jcpanische Patentanmeldung 47-43 803, japanische Offenlegungsschrift 49-49 679); oder durch Mikroeinkapielung, wobei das Lösungsmittel aus eirer Nicht-Lösungsmitlelemulsion entfernt wird, beispielsweise wird eine Kernsubstanz in einem organischen Lösungsmittel dispergiert oder gelöst, nachdem das Wandpolymer gelöst ist, und dann wird die Lösung in einem Träger emulgiert, der mit dem Lösungsmittel für die Wandpolymerlösung schlecht mischbar ist, so daß eine Emulsion erhalten wird, und zu der Emulsion wird ein Nicht-Lösungsmittel für das Wandpolymer zugegeben, das Nicht-Lösungsmittel für das Wandpolymer, das Nicht-Lösungsmittel sind mit dem Lösungsmittel für das Wandpolymer mischbar, jedoch unmischbar oder schlecht mischbar mit dem Vehiculum, und dabei werden Mikrokapseln gebildet, wobei die N-Entacylierungsaktivität nicta verschlechtert wird (FR-PS 21 66 062); und das Komplexemulsionsverfahren in einem lipophilen Vehiculum, beispielsweise wird das Wandpolymer unter Verwendung eines Lösungsmittels gelöst, wobei das Lösungsmittel mit dem Vehiculum schlecht mischbar ist, mischbar mit Wasser ist und einen Siedepunkt besitzt, der niedriger ist als der von Wasser, und die N-Entacylierungsakxivität nicht zerstört. Dann wird die Kernsubstanz in der Lösung gelöst oder dispergiert und diese Dispersion wird in einem Vehiculum, das flüssiges Paraffin oder ein Silikonöl enthält, emulgiert und dann wird das organische Lösungsmittel entfernt, wobei Mikrokapseln erhalten werden (US-PS 37 14 065).
Die N-Entacylierungsreaktion der Verbindung [ti]
ίο erfolgt im allgemeinen in wäßrigem Medium, bevorzugt bei einem pH-Wert von 6 bis 8. Alternativ können wasserunlösliche Mikrobenzellen oder Präparationen davon in Form einer Suspension oder in Form einer Säule verwendet werden, wobei die Verbindung [H], die N-entacyliert werden soll, in wäßriger Lösung der Verbindung [II] durch die Säule geleitet wird.
Die Umsetzungszeit beträgt im allgemeinen 3 bis 30 Stunden und sollte beendigt werden, wenn die Bildung der Aminoverbindung [I] ihr Maximum erreicht hat. Die Reaktionstemperatur kann von 20 bis 45° C, bevorzugt 30 bis 37° C betragen. Die Substratkonzentration hängt von der N-Entacyli^rungsaktivität ab und kann im allgemeinen 0.1 bis 5% betragen.
Die Ausgangsmaterialien der Formel [II] der Erfindung können nach bekannten Verfahren hergestellt werden. Beispielsweise kann eine Verbindung der Formel [II], die eine COOH-Gruppe als R aufweist, aus einer Verbindung der Formel
— OOC
CH(CH2)jCONH
H3N O
CH2X (HD
COOH
hergestellt werden, worin X die zuvor gegebene Bedeutung besitzt, oder aus einem Salz davon durch Einwirkung von D-Aminosäureoxydase, die von den Mikroorganismen Trigonopsis variabiris usw. stammt, bei aeroben Bedingungen (GB-PS 12 72 769); die Verbindung [HI] oder ein Salz davon wird mit aktivierten Zellen von Trigonopsis variabilis oder Fusarium sp. (japanische Offenlegungsschrift 47-39 595 und japanische Patentanmeldung 49-117/205) behandelt Die Verbindung [II] mit einer -COCOOH-Gruppe als R kann aus der Verbindung [III] in Anwesenheil von Catalase-Aktivität und D-Aminosäureoxydase-Aktivität hergestellt werden.
Der Substituent X in der Formel [II] bedeutet ein Wasses Stoffatom, eine Hydroxygruppe, Acetoxygruppe, Pyridiniumgruppe oder eine (5-Methyl-l,3,4-thiadiazoI-2-yl)-thiogruppe und diese Gruppe kann aus Cephalosporin C nach bekannten Verfahren gebildet werden. Beispielsweise kann eine Verbindung der Formel [III] mit einem Wasserstoffatom in der Gruppe X durch katalytische Reduktion in Anwesenheit von Palladium-Kohle hergestellt werden (US-PS 31 24 576); eine Verbindung der Formel [III] mit einer Hydroxygruppe in der Gruppe X kann durch Einwirkung von Esterase hergestellt werden (publizierte japanische Patentanmeldung 42 - 7553).
Die Verbindung [II] kann in Form eines wasserlöslichen Salzes wie eines Natrium-, Kalium- oder Ammoniumsalzes verwendet werden.
Die so gebildete Aminoverbindung [I] kann nach bekannten Verfahren isoliert und gereinigt werden wie durch Säulenchromatographie, Ionenaustausch oder Ausfällung.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.
Untersuchungsverfahren
für die Aminoverbindung [I]:
Aliquote Teile der Reaktionsmischung werden mit 1 η
so HCI auf einen pH-Wert von 2,5 eingestellt und dann wird die Lösung dreimal mit der halben Menge an Butylacetat gewaschen und dann wird der pH-Wert der Lösung mit 1 η NaOH auf 74 eingestellt Eine aliquote
Menge davon wird mit Phenylacetylchlorid umgesetzt und mit bacillus subtilis PCI 211 während 16 Stunden bei 3Γ€ geprüft.
Dünnschichtchromatographie (TLC):
Träger:
mit Silikagel vorbeschichtet
Entwicklf-I:
n-BuOH : Essigsäure : Wasser(3 :1 :1)
Entwickler II:
n-BuOH : Essigsäure : Pyndin : Wasser
(15:3:10:12)
Entwickler III:
n-BuOH : Fjsigsäure : Formaldehyd : Wasser
(3:1:5:1)
Beispiele I bis 5
100 ml eines wäßrigen Mediums (pH 10,0), welches 0,5% Fleischextrakt. 1% Pepton, 0.1% Hefeextrakt. 0,05% Glutarsäure und 0,5% NaCI enthält, werden in einen 500 ml-Erlenmeyer-Kolben gegeben, 15 Minuten bei 1200C sterilisiert, mit Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 inokuliert und dann unter Rotationsschütteln 8 Tage bei 3O0C kultiviert. Nach der Kultivierung wird die kultivierte Brühe bei 12 000 U/min während 10 Minuten unter Kühlen zentrifugiert, um die Bakterienzellen zu sammeln. Die Masse wird in 50 ml einer 0,1 Mol Phosphatpufferlösung (pH 7.0) suspendiert. Anschließend werden 50 ml eines 0.1 Mol Phosphatpuffers (pH 7.0), die je 3% 3-Acetoxymethyl-7-(4-carboxybutanamid)-ceph-3-em-4-carbon- säure enthalten, zugegeben und dann wird bei 37°C Stunden inkubiert, wobei die Aminoverbindung [I] erhalten wird. Die Züchtung der Bakterien auf gleiche Weise wird wiederholt und alle folgenden Verbindungen werden dami! inkubiert.
3-Methyl-7(4-carboxybutanamid)-ceph-3-em-
4-earbonsäure;
3- Hydroxy methyl- 7-(4-carboxybutanamid)-
ceph-3-em-4-carbonsiHire; N-[7-(4-Carboxybutanamid)-ceph-3-em-3-ylmethyl]-pyridinium-4-carboxylat:und 7-(4-Carboxybutanamid)-3-(5-methyl-1.3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-ceph-3-em-4-carbonsäure.
Die Versuchsergebnisse sind in der folgenden Tabelle aufgeführt.
i>L'is|iici Aminoverbindiing |l
X		 I (K COOII)
Bildungv
vcrhiilmis. '		 TLC
Rl		 Liisungsmittel-
system
I H 72 0.32 I
2 — OCOCH, 53 0.15 I
3 — OH 64 0,33 II
4 -O 58 0,2.1 III
N N
— S
0.17 I
Die Aminoverbindungen wurden durch Dünnschichtchromatographie mit Ninhydrin-Entwickler. Ultraviolettund Bioversuch identifiziert.
Beispiele 6 bis 9
Man arbeitet wie in den Beispielen 1 bis 5 beschrieben und ersetzt die 3-Acetoxymethyl-7-(4-carboxy-butanamid)-ceph-3-em-4-carbonsäure und die anderen Verbindungen durch die folgenden Verbindungen und erhält die im folgenden aufgeführten Ergebnisse. 3-Methy!-7-(5-carboxy-5-oxopentanamido)-ceph-3-em-4-carbonsäure;
3-Acetoxymethyl-7(7-carboxy-5-oxopentanamido)-ceph-3-em-4-carbonsäure;
3-Hydroxymethyl-7-(5-carboxy-5-oxopentanamido)-ceph-3-em-4-carbonsäureund
N-[7-(5-Carboxy-5-oxopentanamido)-ceph-3-em-3-yl-methyl]-pyridinium-4-carboxylat.
Beispiel Aminoverbindung [I] (R = COOH) Bildungs TLC Lösungsmittel
X verhältnis. % Rf system
I
65 0,32 i
6 H 50 0,15 II
7 -OCOCH3 58 0.34
8 — OH
— N
ö,23
III
Beispiel 10
Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 wird auf gleiche Weise wie in Beispiel 4 beschrieben gezüchtet, wobei man 6 I £ulturbrühe erhält. Die Zellen werden mit einer Zentrifuge bei 12 000 U/min während IO Minuten gesammelt und gewaschen. Die so erhaltenen Zellen werden in 0,1 Mol Phosphatpuffer (pH 7,0) suspendiert, um 300 ml Suspension herzustellen. Anschließend fügt man 15 ml Kation-oberflächenaktives Mittel hinzu, rührt 30 Minuten bei Zimmertemperatur, zentrifugiert bei 10 000 U/min während \ύ Minuten, und man erhält 288 ml überstehendes Material.
Das überstehende Material wird in 0,1 Mol Phosphatpufferlösung (pH 7,0) unter Verwendung eines CeIIophanrohrs bei 4°C während 48 Stunden dialysiert. 300 ml Dialysat mit einer N-Entacylierungsaktivität werden erhalten.
n.is so erhaltene Dialysat kann ebenfalls als ΡΓϋ"ίΐΓ3ί!θΓΐ eier N^ikrcbe"kii!iiir bsi der Erfinciuri" verwendet werden und es kann als mikro-eingekapselte Präparation, als gepulverte Präparation, durch Trocknen. Lyophilisierung oder durch Ammoniumsulfat-Ausfällung hergestellt werden.
Beispiel 11
3 g Celluloseacetat (Triacetatform) werden in 100 ml Methylenchlorid gelöst. 3 g gezüchtete Zellen von Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410, erhalten auf gleiche Weise wie in Beispiel I, suspendiert in destilliertem Wasser, werden einheitlich darin dispergie.l bzw. emulgiert. Die so erhaltene Emulsion wird gerührt, in 800 ml 2%iger wäßriger Gelatinelösung bei Zimmertemperatur dispergiert und weiter gerührt, bis das Methylcnchlorid verdampft ist, wobei man Mikrokapseln erhält (Durchmesser 0,1 bis 03 mm), die Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 enthalten. Diese Mikrokapseln können zur Herstellung von Aminoverbindungen [I], wie es im folgenden näher erläutert wird, verwendet werden.
Beispiel 12
Beispiel 11 wird wiederholt, mit der Ausnahme, daß 20 ml überstehendes Material mit einer N-Entacylierungsaktivität, wie es in Beispiel 10 erhalten wurde, anstelle von 3 g Comamonas-Zellen, suspendiert in 20 ml Wasser, verwendet wurden; man erhielt Mikrokapseln der gleichen Größe.
Beispiel 13
21,9 g (Feuchtgewicht) Mikrokapseln, erhalten wie in Beispiel 11 beschrieben, werden in eine Säule mit Mantel (2 χ 9,6 cm, V = 30 ml) gegeben und mit 0,1 Mol Phosphatpuffer (pH 7,0) gewaschen. 840 ml Lösung von 3-Acetoxymethyl-7-(4-carboxybutanamid)-3-cephem-4-carbonsäure in 0,1 Mol Phosphatpuffer (9,92 mg/ml) ..ν erde η eingefiiüt. 865 m! Ekiat, welche? 7-ACA enthalt, werden erhalten (Bildungsverhältnis 84,5%) und dann auf 80 ml konzentriert, dann wird der pH-Wert auf 3,2 eingestellt. Das Konzentrat wird über Nacht bei 4° C stehengelassen, dabei fällt 7-ACA aus (Ausbeute 4,6 g, Reinheit 86,2%).
Beispie! 14
In Beispiel 13 werden die Mikrokapseln, die Comamonas sp. SY-77-1 FERM-P 2410 enthalten, durch Mikrokapseln, die überstehendes Material mit einer N-Entacylierungsaktivität, erhalten in Beispiel 12, ersetzt und das Substrat wird durch eine l%ige Lösung von 3-Acetoxymethyl-7-(4-carboxybutanamid)-3-cephem-4-carboxylat, 3-Methyl-7-(5-carboxy-5-oxopentanamid)-3-cephem-4-carboxylat und 3-Hydroxymethyl-7-(5-carboxy-5-oxopentanamid)-3-cephem-4-carb- oxylat ersetzt, wobei man die Aminoverbindung [I] in Ausbeuten von 87,5%, 78,8% bzw. 79,5% erhält.

Claims (1)

  1. Patentanspruch:
    Verfahren zur Herstellung von 7-Amino-cephem-Verbindungen der allgemeinen Formel
    CH2X
    (I)
    COOH
DE2502706A 1974-01-23 1975-01-23 Verfahren zur Herstellung von 7-Amino-cephem-Verbindungen Expired DE2502706C2 (de)

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