DE2330106C3 - Verfahren zum Bestimmen einer Komponente eines Reaktionssystems sowie Testpapier zur Durchführung des Verfahrens - Google Patents
Verfahren zum Bestimmen einer Komponente eines Reaktionssystems sowie Testpapier zur Durchführung des VerfahrensInfo
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Bestimmen einer Komponente eines Reaktionssystems, das auf der
Oxidation einer chromogenen Verbindung beruht, unter Ausschaltung störender saurer Substanzen mit Hilfe
eines Testpapiers, das die restlichen Komponenten des Reaktionssystems enthält und durchgeführt wird, indem
das Testpapier mit der zu untersuchenden Flüssigkeit in der die zu bestimmende Komponente enthalten ist,
zusammengebracht wird, sowie ein Testpapier zur Durchführung des Verfahrens.
Viele Bestimmungen, sowohl auf chemischem als auch auf biochemischem Gebiet, werden gestört durch das
Vorhandensein unerwünschter Verbindungen. Um die Zuverlässigkeit der Bestimmung zu erhöhen, wird die
Wirkung einer störenden Verbindung häufig durch Maskierung neutralisiert. Die störende Verbindung
kann auch aus dem System entfernt werden, in dem die Bestimmung durchgeführt werden soll, durch Zugabe
eines Absorptionsmittels, wie Aktivkohle oder Bentonit oder einem ionenaustauschenden Material.
Wenn Absorbenticn oder ionenaustauschende Materialien
für diese Zwecke angewandt werden, besteht die Gefahr, daß nicht nur die störende Verbindung oder
Verbindungen aus der zu untersuchenden Flüssigkeit entfernt werden, sondern auch die Komponente des
Reaktionssystems, die bestimmt werden soll.
Bei der Bestimmung von beispielsweise Glucose in Urin mit Hilfe eines Testpapiers, das mit Glucose-oxidase,
Peroxidase und einer chromogenen Verbindung imprägniert ist, werden die Ergebnisse ernsthaft gestört
durch das Vorhandensein reduzierender Komponenten, wie Harnsäure und Ascorbinsäure (Vitamin C).
Aus der GB-PS 1193 594 ist es bekannt, zur
Ausschaltung dieser Stoffe ein Material, z. B. ein Testpapier, zu verwenden, das Anionen-Austauscher-Eigenschaften
besitzt Nach der AT-PS 2 71 735 wird
ίο zum Nachweis von Zuckerarten im Urin ein Teststreifen
verwendet, der die restlichen Komponenten der Reaktion enthält sowie eine Auffangzone aus einem
lonen-Austauscher-Material. Das lonen-Austauscher-Material
kann dabei aus Cellulose hergestellt sein, die mit sauren oder basischen Resten substituiert ist,
nämlich Cellulosephosphat, Cellulosesulfat, Carboxymethylcellulose, Aminoäthylcellulose, Diäthylaminoäthylcellulose
und ein Cellulosederivat, das hergestellt worden ist aus Cellulose, Epichlorhydrin undTriäthanolamin.
Nach den Beispielen werden ausschließlich Anionen-Austauscher verwendet, da nur diese zur
Entfernung von Substanzen, wie Harnsäure und Ascorbinsäure, geeignet sind. Die GB-PS 7 92 200
betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Oxicellulose, die Kationen-Austauscher-Eigenschaften besitzt, durch
Oxidation von Cellulose mit starken Oxidationsmitteln. Derartige Kationen-Austauscher sind zur Entfernung
störender Säuren ungeeignet. Oxidationsmittel, wie Permanganat und Perjodsäure, werden in dieser
Druckschrift als ungeeignet zur Herstellung von Oxicellulose bezeichnet.
Es ist Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein Verfahren zum Bestimmen einer Komponente der oben
angegebenen Art zu entwickeln, bei dem gegebenenfalls in der Probe vorhandene saure Substanzen die
Bestimmung nicht stören und das einfach durchzuführen ist und zuverlässige Ergebnisse liefert.
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Bestimmen einer Komponente eines Reaktionssystems, das auf der
«o Oxidation einer chromogenen Verbindung beruht, unter
Ausschaltung störender saurer Substanzen und mit Hilfe eines Testpapiers, das die restlichen Komponenten des
Reaktionssystems enthält, durchgeführt wird, indem das Testpapier mit der zu untersuchenden Flüssigkeit, in der
die zu bestimmende Komponente enthalten ist, zusammengebracht wird, das dadurch gekennzeichnet
ist, daß die zu untersuchende Flüssigkeit vor oder gleichzeitig mit dem Testpapier mit einem im
wesentlichen aus Cellulose bestehenden oder celluloseartigen Material zusammengebracht wird, das einer
Behandlung mit einem Oxidationsmittel unterworfen worden ist.
Das Verfahren läßt sich besonders einfach durchführen unter Verwendung eines Testpapiers, das die
restlichen Komponenten des Reaktionssystems enthält und das dadurch gekennzeichnet ist, daß es ein Material
enthält oder daraus hergestellt worden ist, das im wesentlichen aus Cellulose oder einer celluloseartigen
Substanz besteht, welche einer Behandlung mit einem
bo Oxidationsmittel unterworfen worden ist.
Das Verfahren eignet sich besonders zur Bestimmung von Humanchoriongonadotropin. In diesem Falle
verwendet man vorzugsweise ein Testpapier, das Antikörper gegen Humanchoriongonadotropin, ein
Iv". Konjugat von Humanchoriongonadotropin und Peroxidase,
unlöslich gemachte Antikörper, ein Substrat für die Peroxidase und eine oxidierbare chromogenc
Verbindung enthält.
Überraschenderweise hat es sich gezeigt, daß das erfindungsgemäß zu verwendende mit einem Oxidationsmittel
behandelte Cellulose-Material die in der zu untersuchenden Flüssigkeit vorhandenen störenden
Verbindungen sehr selektiv inaktiviert und dadurch auf einfache Weise sehr zuverlässige Ergebnisse liefert. Bei
Anwendung dieses Materials, z. B. zur Bestimmung von Glucose in Urin, der Harnsäure und Ascorbinsäure als
störende Verbindungen enthält, mit Hilfe von Glucoseoxidase, Peroxidase und einer oxidierbaren chromogenen
Verbindung, z. B. o-Tolidin oder der reduzierten
Form von 2,6-DichIor-phenolindophenol, üben diese
siörenden Verbindungen keinen nachteiligen Einfluß auf das Ergebnis der Bestimmung aus.
Das erwähnte Material, das im wesentlichen aus Cellulose oder einem celluloseähnlichen Material
besteht, kann mit irgendeinem geeigneten Oxidationsmittel behandelt werden, das es nicht vollständig
zuersiöri. Besonders werden gute Ergebnisse erhalten
mit Perhalogensäuren, Salzen von Persäuren und Hypochloriten, z. B. mit Perjodsäure, Kaliumpermanganat
und Natriumhypochlorit. Als bequeme und billige Behandlungsmethode hat sich die Verwendung handelsüblicher
Bleichflüssigkeit oder deren konzentrierte Form erwiesen.
Der Behandlung folgt natürlich eine sorgfältige Entfernung von überschüssigem Oxidationsmittel von
dem behandelten Material. Außerdem kann das so behandelte Material — wenn nötig — getrocknet
werden.
Das behandelte Material kann getrennt oder zusammen mit einem Testpapier verwendet werden und kann
auch selbst das Testpapier sein. Das behandelte Material eignet sich besonders zur Anwendung auf oder in dem
Testpapicr, das zur Bestimmung einer Komponente eines Reaktionssystems angewandt wird, z. B. bestehend
aus einem Peroxid, Peroxidase und einer oxidierbaren chromogenen Verbindung oder bestehend aus einer
Wasserstoffperoxid liefernden Oxidoreductase, einem geeigneten Substrat dafür, einer Peroxidase und einer
oxidierbaren chromogenen Verbindung. Neben dem behandelten Material enthält das Testpapier alle
Komponenten des Reaktionssystems mit Ausnahme natürlich der zu bestimmenden Komponente. Darüber
hinaus kann das Testpapier einen oder mehrere Hilfsstoffe, z. B. eine Puffersubstanz, enthalten, soweit
erforderlich.
Die Komponenten des Reaktionssystems können entweder als freie Substanzen oder an einen geeigneten
Träger gebunden angewandt werden, wobei die gebundene Form auf verschiedene Arten, z. B. durch
Adsorption oder durch kovalente Bindung mit dem Träger erhalten werden kann. Die zuletzt genannte
Form wird vorzugsweise angewandt, da dadurch verhindert wird, daß die jeweilige Verbindung während
der Bestimmung leicht aus dem Testpapier ausgelaugt wird und da sie außerdem die Möglichkeit ergibt, wenn
gewünscht, indirekt die Menge des Trägermaterials zu bestimmen. So kann z. B. das Testpapier für die
Bestimmung von Peroxidase Wasserstoffperoxid enthalten, das an einen Phosphatpuffer gebunden ist,
während Peroxidase selbst auch an einen geeigneten Träger, /. B. Humanchoriongnnadotropin (HCG), gebunden
sein kann. In dem /ulet/.t genannten Beispiel ist
die gefundene Peroxidasemcnge gleichzeitig ein Maß für die Menge an HCG.
Die Erfindung wird durch die folgenden Heispiele näher erläutert.
Filterpapierstreifen (Cellulose-Filterpapier, 165 g/m2)
von 20 χ 4 cm Größe, wurden in eine Lösung von 4 g Perjodsäure in 600 cm3 Wasser ungefähr 16 Stunden
eingetaucht (über Nacht stehengelassen). Dann wurden die Streifen mit Wasser gewaschen, bis eine negative
Reaktion auf Perjodsäure beobachtet wurde, und anschließend getrocknet
Filterpapierstreifen (83-87 g Papier/m2) in einer
Größe von 20 χ 5 cm, wurden 3 Stunden in eine Lösung
gelegt, bestehend aus 300 cmJ 0,1 n-Kaliumpermanganat
und 30 cm3 4 η-Schwefelsäure. Dann wurden die Streifen
mit 0,1 η-Schwefelsäure gewaschen, bis keine violette bzw. purpurne Farbe mehr sichtbar war. Anschließend
wurden die Streifen mit einer 3%igen Lösung von Wasserstoffperoxid behandelt, bis das gesamte Man-
zo gandioxid, das in dem Papier enthalten war, vollständig
gelöst war. Schließlich wurden die Streifen mit Wasser gewaschen, bis eine negative Reaktion auf Wasserstoffperoxid
auftrat, und anschließend getrocknet.
B e i s ρ i c I 3
Papierstreifen (185 g/m2) wurden 5 Stunden in eine
Nairiumhypochlontlösung (5 g aktives Chlor pro
100cm') gelegt. Nach sorgfältigem Waschen mit
Wasser, bis die Reaktion auf Chlor negativ war
Jo (K J-Stärkepapier), wurden die Streifen getrocknet.
Papierstreifen wie in Beispiel 3 (15 χ 6 cm) wurden ungefähr 16 Stunden in eine Lösung getaucht, bestehend
aus 200 cm1 Natriumhypochlorit (10 g aktives Chlor pro 100 cm') und 200 cm' 4 η-Natriumhydroxid. Nach dem
Waschen mit Wasser, bis die Reaktion auf Chlor negativ war, wurden die Streifen getrocknet.
B e i s ρ i e I 5
100 g Celliilosepulver wurden mit 500 cm' der Lösung
des Beispiels 4 5 Stunden behandeli und dann mit Wasser gewaschen, bis die Reaktion auf Chlor negativ
war und die Reaktion des Waschwassers neutral. Schließlich wurde das Cellulosepulver an der Luft
getrocknet.
(a) Ein Filterpapierstreifen mit einer Breite von 6 cm, der auf die in Beispiel 4 beschriebene Weise hergestellt
worden war, wurde zweimal in einer Phosphatpufferlösung gewaschen (bestehend aus 13,6 g Kaliumdihydrophosphat
in 800 cm1 Wasser, zu der ausreichend 4 n-Natriumhydroxidlösung zugegeben worden war, um
einen pH-Wert von 6,8 zu erhalten und anschließend das Volumen mit Wasser auf 1000 cm3 ergänzt worden war)
und dann getrocknet. Die Pufferlösung wurde aufbewahrt.
(b) 100 mg Ascorbinsäure wurden in 5 cm' Wasser bo gelöst. Anschließend wurde eine Lösung von 100 mg
2,6-Dichlorphenolindophenol (DCPIP) und 400 mg
Polyvinylpyrrolidon (PVP) in 35 cm' absolutem Äthanol zugegeben, wobei man eine leicht gefärbte Lösung
erhielt (ein etwa auftretender Niederschlag kann durch τ. Zentrifugieren entfernt werden).
(c) Dann wurde in der Mitte des Papierstreifens nach (.') längs ein Streifen (Breite ungefähr 5 mm) mit der
nach (b) erhaltenen reduzierten DCPIP-Lösung gezo-
gen und anschließend der Streifen getrocknet.
(d) Zu 200 cm3 der Phosphatpufferlösung nach (a) wurden 16 cm3 einer 30%igen Wasserstoffperoxidlösung
gegeben. Der DCPIP-Streifen nach (c) wurde
getrocknet und anschließend ein Streifen (Breite ungefähr 5 mm) mit der Phosphatpuffer-Wasserstoffperoxid-Lösung
(Ph-H) in einem Abstand daneben gezogen und ebenfalls getrocknet.
(e) Nach dem Trocknen wurde das so hergestellte Papier in Streifen von 6Ox 7 mm geschnitten, und zwar
so, daß in jedem Streifen ein DCPIP- und ein Ph-H-Bereich war.
(f) Zu 0,1 cm3 einer Urinprobe von einer Frau, von der
angenommen wurde, daß sie schwanger war, indem das Vorhandensein von Humanchoriongonadotropin
(HCG) gezeigt werden sollte, wurden 0,1 cm3 Antiserum (Kaninchen-Anti HCG) gegeben, und zwar ausreichend,
um 0,2 Einheiten HCG zu binden.
Nach einer Wartezeit von ungefähr 2 Minuten wurden 0,1 cm3 einer Lösung von HCG-Peroxidasekonjugat
mit einer Potenz von 0,2 Einheiten HCG pro 0,1 eingegeben.
Das Gemisch wurde zwei Minuten stehengelassen und während dieser Zeit ab und zu geschüttelt.
Anschließend wurde eine Suspension von Schaf-Antikaninchen-)'-Globulin,
das an Cellulose gekuppelt war, zugegeben.
Dann wurde die Suspension 5 Minuten sleriengelassen und während dieser Zeit ab und zu geschüttelt.
Anschließend wurde die überstehende Flüssigkeit in einem Papierstreifen, wie unter (e) beschrieben,
absorbiert. Der Streifen wurde so in die Flüssigkeit gehalten, daß der Ph-H-Streifen unterhalb des DCPIP-Streifens
war. Eine deutlich blaue Färbung zeigte das Vorhandensein von HCG in der Urinprobe an.
(g) Der gleiche Test mit einem Papierstreifen, der nicht durch Oxidation vorbehandelt worden war, ergab
jedoch nur eine sehr schwache Farbänderung.
Zu 1 cm3 der in dem Beispiel 6 (f) erwähnten Urinprobe wurden 50 mg Cellulosepulver gegeben, das,
wie im Beispiel 5 beschrieben, vorbehandelt worden war. Das Gemisch wurde 1 Minute geschüttelt und
anschließend 0,1 cm' dieser Flüssigkeit auf das Vorhandensein von HCG entsprechend Beispiel G untersucht,
wobei jedoch ein Testpapier verwendet wurde, das nicht oxidiert worden war. Es bildete sich eine deutliche blaue
Färbung.
Der in Beispiel 6 beschriebene Versuch kann auch durchgeführt werden mit einem Testpapier, das alle
erforderlichen Reagentien enthält. Dabei wird folgendermaßen gearbeitet:
Zu 28,6 cm3 destilliertem Wasser wurden 11,43 g
CuSO4 · 5 H2O unter Erhitzen auf 95°C gegeben. Die
Lösung wurde auf etwa 50 bis 600C abgekühlt. Dann wurden 22,86 cm3 einer 25%igen AmTioniaklösung
zugegeben, wobei sich ein Niederschlag von Cu(OH)2 bildete, der bei weiterer Zugabe von Ammoniak wieder
in Lösung ging. Jetzt wurde die Lösung weiter auf 0 bis 5"C abgekühlt und anschließend 800 mg Saccharose und
1000 mg m-Aminobcnzyloxymcthylcellulose zugegeben.
Für die Herstellung dieser Cellulose wird hingewiesen auf »Methods in Immunology and Imrnunochemistry«,
Bd. I, Herausgeber C. A. W i 11 i a m s und M. W. Chase (Academic Cress. New York, London,
1967, S. 378). Dann wurden 5,7 cm* 10 n-NaOH zugegeben, wobei sich das Cellulosederivat vollständig
löste.
Ein Streifen des in Beispiel 3 angegebenen Filterpapiers in einer Größe von 20 χ 8 cm, der, wie im Beispie! 4
beschrieben, vorbehandelt und mit einer 0,5 m-Lösung von KH2PO4 getränkt und getrocknet worden war,
wurde mit einem Streifen der Cu-Cellulose-Lösung (Breite 15 mm) versehen. Durch das Vorhandensein des
ro primären Phosphats wurde der pH-Wert so stark
erniedrigt, daß die gelöste Cellulose auf dem Papier ausfiel. Es wurde ein blauer Streifen sichtbar. Nun wurde
das Papier einige Zeit mit kalter 0,1 n-H2SO4 gewaschen,
wobei die Waschflüssigkeit regelmäßig durch neue ersetzt wurde. Der gesamte Prozeß, der dazu dient, alle
Spuren von Kupfer zu entfernen, kann bis zu 24 Stunden dauern.
Dann wurden 14g NaNO2 in 1000cm3 1,6 n-H2SO4
gelöst. Das Papier wurde 30 Minuten mit dieser Lösung behandelt (die Lösung wurde 3- bis 4mal durch eine
frische ersetzt). Dann wurde das Papier mit destilliertem Wasser bis zur Neutralität gewaschen und dann in
einem Boratpuffer, der hergestellt worden war durch Lösen von 3,1g H3BOj und 20 cm3 1 n-NaOH in
destilliertem Wasser, Einstellung des pH-Wertes auf 8,6 mit 4 n-NaOH und Ergänzen der Lösung auf 1 I mit
destilliertem Wasser. Dieser Boratpuffer wurde ersetzt durch eine Lösung von Schaf-Aiilikaninchen-j'-Globulin
(2,5 mg pro cm1 in Boratpuffer, pH 8,6) und das Papier über Nacht in dieser Lösung gehalten, wobei der
pH-Wert des Papiers und des Puffers auf 8,6 gehalten wurde. Dann wurde die Globulin-Lösung dekantiert und
das Papier schließlich mit einer gesättigten Lösung von ^-Naphthol im Boratpuffer mit einem pH-Wert von 8,6
J5 behandelt. Diese zuletzt genannte Behandlung wurde
bei Raumtemperatur durchgeführt. Das Papier wurde schließlich mit einem 0,1 m-Phosphatpuffer mit einem
pH-Wert von 6,8, wie im Beispiel 6 erwähnt, gewaschen und getrocknet. Dann wurde dieses Papier mit den
anderen Reaktionskomponenten, nämlich einem Streifen einer reduzierten DCPIP-Lösung, einem Streifen
von Harnstoff-Wasserstoffperoxid (ausgehend von einer l,6%igen Lösung in Äthanol) unterhalb des
Streifens von Cellulose-Schaf-Antikaninchen-y-Globulin
und einem Streifen HCG-Peroxidase-Konjugat und unter dem zuletzt genannten einem Streifen von
Antiserum-(Kaninchen-Anti-HCG) versehen. Die letzten zwei Komponenten wurden in äquivalenten Mengen
aufgebracht und in einer solchen Weise, daß Urin,
so enthaltend 2 E HCG/cm3, genau die Menge an Antiserum binden kann. Zu diesem Zweck muß die
Saugfähigkeit jeder Menge Papier immer wieder bestimmt werden. Als das Papier mit allen Komponenten
versehen und getrocknet worden war, wurde es in
« Streifen geschnitten (Breite 7 mm).
Wenn man Urin in dem Papier absorbiert und wenn ausreichend HCG vorhanden ist, was auf das Vorliegen
einer Schwangerschaft hindeutet, bindet der absorbierte Urin das Antiserum, transportiert das aufgebrachte
mi HCG-Peroxid durch das Papier, setzt auf dem Weg
ausreichend Wasserstoffperoxid aus dem Harnstoff-Wasserstoffperoxid und schließlich der Peroxidase frei,
und das Wasserstoffperoxid reagiert mit dem reduzierten DCPIP, wobei eine blaue Farbe auftritt.
Wenn keine Schwangerschaft vorliegt, reagiert das Antiserum mit dem HCG-Peroxidase-Konjugat, und der
gebildete Komplex wird von der Schaf-Aniikar.inchen-}1-Globulin-Zone
festsehallen FnMirh rireirhi dir·
Glucose-oxidase | 200 mg |
Meerrettichperoxidase | 5 mg |
o-Tolidin | 100 mg |
Zitronensäure | 600 mg |
Natriumeitrat · 2 H2O | i 275 mg |
Wasser | 20 cm3 |
Peroxidase nicht den Redox-Indikator, und das Papier
bleibt ungefärbt.
Zum Nachweis von Glucose in Körperflüssigkeiten wurde ein Filterpapierstreifen, wie im Beispiel 3
beschrieben, vorbehandelt. Anschließend wurde das Papier gesättigt mit einer Lösung, enthaltend die
folgenden Reagentien:
10
15
Nach dem Trocknen wurden die auf diese Weise hergestellten Papierstreifen erfolgreich zur Bestimmung
von Glucose in Körperflüssigkeiten in Gegenwart von üblicherweise störenden reduzierenden Substanzen
angewandt.
Die gleichen guten Ergebnisse wurden erhalten bei Verwendung der reduzierten Form von 2,6-Di-chlorphenolindophenol
anstelle von o-Tolidin (s. Beispiel 10).
Beispiel 10
Testpapier, wie es in Beispiel 9 zum Nachweis von Glucose beschrieben ist, wurde auf die folgende Weise
hergestellt:
(a) Zu 100 mg Vitamin C in 5 cm3 Wasser, wurde eine
Lösung von 100 mg DCPlP und 400 mg PVP in 35 cm3 absolutem Äthanol gegeben.
(b) Filterpapier, das entsprechend Beispiel 4 vorbehandelt worden war, wurde mit einem 0,1-m-Phosphatpuffer
(pH 5,6) getränkt und dann getrocknet. Dann wurde ein Streifen (Breite ungefähr 5 mm) der
reduzierten DCPIP-Lösung [entsprechend (a)] aufgebracht und das Papier getrocknet
(c) Unter diesem Streifen wurde ein Streifen aus einer Lösung von 200 mg Glucose-oxidase und 5 mg Meerrettichperoxidase
in 20 cm3 Wasser aufgebracht
(d) Das so erhaltene Papier wurde getrocknet, anschließend die zu untersuchende Flüssigkeit in
Streifen des jeweiligen Papiers aufgesaugt, und zwar so, daß die Flüssigkeit zunächst das Enzymsystem passieren
mußte, um den Redox-Indikator zu erreichen. Die Intensität der blauen Farbe, die sich zeigte, war um das
Mehrfache größer als die Intensität der blauen Farbe bei dem gleichen Versuch, der mit nicht behandeltem Papier
durchgeführt worden war.
Beispiel 11
Zum Nachweis sehr kleiner Mengen Galactose in Körperflüssigkeiten (das Vorhandensein reduzierender
Substanzen ist durch die Natur der Dinge sehr störend) wurde Papier mit sehr guten Ergebnissen angewandt,
das auf die im Beispiel 1 beschriebene Weise vorbehandelt, anschließend in einer Lösung der
folgenden Zusammensetzung getränkt und getrocknet worden war:
Zusammensetzung der Lösung
0,l-m-Phosphatpuffer(pH 6,8)
Galactose-oxidase (8000 E/mg)
Meerrettich-peroxidase
o-Tolidin
Galactose-oxidase (8000 E/mg)
Meerrettich-peroxidase
o-Tolidin
60 cm3
2 mg
2 mg
20 mg
200 mg in
20 cm3 Äthanol
200 mg in
20 cm3 Äthanol
Beispiel 12
Zum Nachweis von Bacteriuria wurde vorteilhaft von der Tatsache Gebrauch gemacht, daß kleine Mengen
Glucose, die immer in Urin vorhanden sind, durch Mikroorganismen abgebaut werden. So weist die
Tatsache, daß keine Glucose nachgewiesen werden kann, auf das Vorhandensein von Mikroorganismen hin.
Besonders bei den hier herrschenden Versuchsbedingungen ist es wesentlich, daß reduzierende Komponenten
in dem zu untersuchenden Urin nicht vorhanden sind. Das auf die im Beispiel 2 beschriebene Weise
behandelte Papier, das mit den erforderlichen Reagentien entsprechend den Beispielen 9 oder 10 versehen
war, konnte erfolgreich angewandt werden.
Claims (4)
1. Verfahren zum Bestimmen einer Komponente eines Reaktionssystems, das auf der Oxidation einer
chromogenen Verbindung beruht, unter Ausschaltung störender saurer Substanzen und mit Hilfe
eines Testpapiers, das die restlichen Komponenten des Reaktionssystems enthält und durchgeführt
wird, indem das Testpapier mit der zu untersuchenden Flüssigkeit, in der die zu bestimmende
Komponente enthalten ist, zusammengebracht wird, dadurch gekennzeichnet, daß die zu
untersuchende Flüssigkeit vor oder gleichzeitig mit dem Testpapier mit einem im wesentlichen aus
Cellulose bestehenden oder celluloseartigen Material zusammengebracht wird, das einer Behandlung
mit einem Oxidationsmittel unterworfen worden ist.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das im wesentlichen aus Cellulose
bestehende oder celluloseartige Material mit KaIiumpermanganat oder Perjodsäure oder Natriumhypochlorit
behandelt worden ist.
3. Testpapier zur Durchführung des Verfahrens nach Anspruch 1 oder 2, das die restlichen
Komponenten des Reaktionssystems enthält, dadurch gekennzeichnet, daß es ein Material enthält
oder daraus hergestellt worden ist, das im wesentlichen aus Cellulose oder einer celluloseartigen
Substanz besteht, welche einer Behandlung mit einem Oxidationsmittel unterworfen worden ist.
4. Anwendung des Verfahrens nach Anspruch 1 oder 2 oder des Testpapiers nach Anspruch 3 zur
Bestimmung von Humanchoriongonadotropin.
Applications Claiming Priority (1)
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