DE2059788A1 - Bakteriologische Kontrollproben - Google Patents
Bakteriologische KontrollprobenInfo
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Description
RAN 4090/18
Die Erfindung betrifft Kontrollmittel für bakteriologische
Testverfahren und Reagenzien.
Das Auffinden und Identifizieren von Bakterien in Proben von KorperflUssigkeiten von Patienten in mikrobiologischen
Laboratorien erfordert komplizierte Kulturmedien und Reagenzien. Zur Durchführung der notwendigen Tests bereiten die Laboratorien ihre Kulturmedien und Reagenzien
für ihren eigenen Gebrauch häufig selbst zu. Dies kann die Sicherheit der Testergebnisse beeinträchtigen, da viele
Kulturmedien und Reagenzien relativ unstabil sind.
Dta sicherzustellen, dass die im Laboratorium durchgeführten
Tests richtig und genau ablaufen, müssen die Laboratorien ihre Verfahren und Reagenzien mit Kulturen der aufzufindenden
Bakterien überprüfen. Da solche Kulturen vorher-
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sagbare biochemische Eigenschaften besitzen, können die Laboratorien den Wert ihrer Verfahren und Reagenzien abschätzen.
Zum Zweck dieser Ueberprüfung müssen die Laboratorien einen Satz Kulturen kaufen und für deren Fortbestand sorgen.
Da die Kulturen im allgemeinen sehr unstabil sind und häufig Subkulturen angelegt werden müssen, ergibt sich ein Unsicherheitsfaktor,
da jedesmal,wenn von einem Organismus
eine Subkultur angelegt wird,Mutationen auftreten können.
In der klinischen Bakteriologie besteht daher ein Bedarf nach einer leicht verfügbaren und wirtschaftlichen Quelle von
lebensfähigen einheitlich reagierenden Mikroorganismen.
Die übliche Methode Bakterien zu konservieren, die Gefriertrocknung, eignet sich nicht für Kulturen zur routinemassigen
Qualitätskontrolle", da sie umständlich und
teuer ist. Beispielsweise muss eine Ampulle mit gefriergetrockneten Bakterien unmittelbar nach der Rekonstitution
verwendet werden und die Herstellung von gefriergetrockneten Kulturen ist schwierig und teuer. Diese werden daher in
der Regel bevorzugt zur Portpflanzung von grösseren frischen Kulturen verwendet und nicht direkt in bakteriologischen
Verfahren eingesetzt.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein stabiles, preiswertes bakteriologisches Kontrollrnittel in
einheitlich dosierbarer Form bereitzustellen, das direkt in bakteriologischen Testverfahren eingesetzt werden kann.
Erfindungsgemäss wird dies erreicht durch ein Kontrollmittel, das aus stabilen, trockenen, scheibenförmigen Plättchen
besteht, die eine Mischung aus Bakterien, Nährmedien und Stoffen zur Stabilisierung der Lebensfähigkeit der Bakterien
enthalten.
Es wurde entdeckt, dass es möglich ist,geeignete
bakteriologische Kotrollmittel in Form von stabilen Plättchen
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herzustellen, indem in einem Nährgelatine und Stoffe zur Stabilisierung der Lebensfähigkeit der Bakterien enthaltenden
Nährmediuni suspendierte Bakterienkulturen vakuumgetrocknet werden. Kontrollmittel für andere Mikroorganismen, beispielsweise
Pilze, können auf die gleiche Weise hergestellt werden. Die vorliegende Erfindung betrifft jedoch bakteriologische
Kontrollmittel.
Pur die Verwendung gemäss der vorliegenden Erfindung
eignen sich solche nicht-sporenbildende Bakterien, die nach der Trocknung lebensfähig bleiben und unter den Bedingungen
von beschleunigten Stabilitätsprüfungen stabil bleiben. Während unter diesen Bedingungen viele Bakterienarten geeignet sind, werden die üblichen grammnegativen und grammpositiven
Bakterien, auf welche die Tests der klinischen Bakteriologie in der Regel gerichtet sind, bevorzugt. Beispiele
von einigen geeigneten Organismen sind Staphylococcus
aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterobacter cloacae, Salmonella typhiniurium, Proteus vulgaris, Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes und dgl.
Als besonders wirksames und bevorzugtes Nährmedium hat sich eine Mischung von etwa 90 bis etwa 97 Gewichtsprozent
einer Nährgelatine, etwa 0,005 bis etwa 0,015 Gewichtsprozent
Diäthylaminoäthyldextran und etwa 2 bis etwa 10 Gewichtsprozent Natriumglutamat erwiesen. Die beiden letzten Substanzen stabilisieren
die Lebensfähigkeit der Bakterien. Die Erfindung umfasst jedoch auch die Verwendung von anderen Substanzen, die
die Lebensfähigkeit von Bakterien stabilisieren. So kann das Diäthylaminoäthyldextran und das Natriumglutamat durch eine
gleiche Menge von Glucose, Saccharose, Lactose, Mannit oder Polyvinylpyrrolidon ersetzt werden. Ausserdem kann, wenn
Natriumglutamat verwendet wird, das Diäthylaminoäthyldextran durch eine gleiche Menge Dextransulfat ©der Dextran ersetzt verden
Darliberhinaus können, wenn die Konzentration der Nährgelatine
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_ if _
auf etwa 99>1 bis 99>5$ erhöht wird, alle vorher erwähnten
Stabilisatoren durch Zystein, Thioharnstoff, Glutathion und Monothioglycerin ersetzt werden.
Die für die Mischungen gemäss der vorliegenden Erfindung
geeigneten Nährgelatinen sind im allgemeinen kommerziell verfügbar, beispielsweise Bacto Nutrient Gelatin (Difco Co.)
und Nutrient Gelatin (Baltimore Biological Laboratory). Jede andere kommerziell erhältliche Nährgelatine ist geeignet,
vorausgesetzt dass sie getrocknet werden kann und Plättchen mit den erwünschten physikalischen Eigenschaften bildet.
Die Menge der Nährgelatine kann zwar zwischen etwa 90 und etwa 97 Gewichtsprozent des Suspensionsmittels variieren,
Mischungen mit etwa 96 bis 97$ sind jedoch vorzuziehen.
Ein höherer Anteil Nährgelatine würde eine Verschlechterung der Stabilität der Bakterien bewirken während ein geringerer
Anteil Plättchen mit unerwünschten physikalischen Eigenschaften zur Folge hätte.
Die in Kombination mit Natriumglutamat verwendete Menge Diäthylaminoäthyldextran, Dextransulfat oder Dextran
soll ausreichen, um die Stabilität der Lebensfähigkeit der Bakterien sicherzustellen; gewöhnlich ist ein Anteil von
etwa 0,005 bis etwa 0,015 Gewichtsprozent ausreichend, wobei
etwa 0,01$ bevorzugt sind. Besonders bevorzugt ist die Verwendung von Diäthylaminoäthyldextran. Wenn ein Dextran eingesetzt
wird, sollte für den Rest der Mischung Natriumglutamat verwendet werden, und zwar in einer Konzentration von etwa
2 bis etwa 10$, vorzugsweise 3$.
Es wurde gefunden, dass eine Mischung aus Nährgelatine, Diäthylaminoäthyldextran und Natriumglutamat in
den angegebenen Mengen besonders bevorzugt ist, da die Stabilität der sich ergebenden Plättchen ausgezeichnet ist.
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Die Plättchen werden unter antiseptischen Bedingungen hergestellt, um Verunreinigung zu vermeiden. Die Plättchen
entstehen bei der Vakuumtrocknung von Tropfen des Suspensionsmittels mit den Bakterien. Bei der Trooknung werden die
Tropfen in feste scheibenförmige Plättchen übergeführt. Diese Plättchen haben die Form von kreisförmigen Scheiben und
ein Gewicht von etwa 2,8 bis etwa 4,0 mg. Diese Form und
Grosse ergibt sich aus der Grosse der Tropfen und der Oberfläche
auf der sie getrocknet werden. Vorzugsweise werden Plättchen mit einem Gewicht von etwa ~*>,2. mg hergestellt.
Der Begriff "Plättchen" umfasst in der vorliegenden Beschreibung jeden gemäss der vorliegenden Erfindung eingetrockneten
Tropfen.
Vorzugsweise werden die Tropfen auf einer sterilen, nicht klebenden Oberfläche, z.B. einer gewachsten Petrischale,
getrocknet, damit die entstehenden Plättchen leicht entfernt werden können.
Zweckmässigerweise werden die Tropfen auf der sterilen,
nicht klebenden Oberfläche in einem Vakuum von etwa 500 bis 600 mm Hg bei Raumtemperatur getrocknet. Dies kann in einem
CaSO2, enthaltenden Exsiccator erfolgen und dauert in der
Regel etwa 72 Stunden. Andere übliche Verfahren der Vakuumtrocknung
und andere Bedingungen können mit etwa gleichen Ergebnissen verwendet werden.
Die entstehenden Blättchen können in kleinen sterilen, dn Trocknungsmittel, z.B. Sllicagel, CaCIp, CaSO2,, enthaltenden
Gläsern mit Schraubdeckel aufbewahrt werden. Es können auch andere sterile Behälter verwendet werden; die genannten
Gläser sind jedoch zur Etikettierung, zum Versand, zur Lagerung und Verwendung im Laboratorium zweckrnässig.
Der Organismus wird für die Trocknung vorbereitet, 109824/2269
indem man ihn in einer geeigneten Brühe, z.B. Tryptic Soy Broth, etwa 15 bis 24 Stunden lang bei etwa 30 bis 4o°C,
vorzugsweise 37°C,wachsen lässt. Anschliessend wird die
Kultur zentrifugiert und das sich ergebende, die Bakterien enthaltende Sediment im Nährmedium suspendiert und tropfen-
und weise auf eine nicht klebende Oberfläche gebrachtem Vakuum
getrocknet.
Die bei diesem Verfahren entstehenden Plättchen enthalten etwa 10 bis 10 lebensfähige Organismen pro Plättchen
und die Lebensfähigkeit dieser Organismen ist so geschützt, dass leine Aenderung der biochemischen Eigenschaften eintreten
kann. Diese Stabilität wird bewiesen durch einen beschleunigten Stabilitätstest, in dem die Lebensfähigkeit der Organismen
bestehen bleibt, nachdem die Plättchen während 5 bis 7 Stunden Temperaturen von 100° unterworfen wurden. Dieses Ergebnis
ist bemerkenswert, da die gleichen Bakterien bei solchen Temperaturen normalerweise abgetötet werden. Somit
eignen sich die Bakterien in der vorliegenden Form ausgezeichnet für Kontrollzwecke. Die bakteriologischen Laboratorien
haben damit die Möglichkeit einer verbesserten Qualitätskontrolle ihrer Testverfahren und demzufolge die Gewähr für
genauere Tests und zuverlässige Ergebnisse.
Zur Kontrolle eines diagnostischen Testverfahrens werden vorzugsweise zwei Organismen ausgewählt und zwar
einer,für den dieser Test positiv und einer,für den dieser
Test negativ ist. Das einen Organismus enthaltene Plättchen wird dann entweder direkt dsm Testmedium beigegeben oder
es wird,in ein geeignetes flüssiges Wachstumsmedium, z.B. Tryptic Soy Broth, gebracht und etwa 2 bis 24 Stunden inkubiert.
Im letzteren Fall wird eine geeignete Menge der Bakteriensuspension in das Testvorfahren eingesetzt um seine Wirksamkeit
und Genauigkeit zu prüfen.
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In der nachfolgenden Tabelle I sind einige der hauptsächlichsten Identifikationstests für Bakterien und
ihre Reaktion auf den Kontrollorganismus aufgeführt. Die Ergebnisse können beispielsweise dazu verwendet werden,
zu prüfen, ob der Oxidasetest für Pseudomonas aeruginosa im Laboratorium richtig ausgeführt wird. Wenn also der Test mit
Pseudomonas aeruginosa enthaltenden Kontrollplättchen positiv und mit Escherichia coli enthaltenden Kontrollplättchen negativ
ist, bedeutet das, dass das Testverfahren in Ordnung ist.
In Tabelle II sind einige Kolehydrat-Gä^ungsreakti onen
der KontrollOrganismen zusammengestellt.
Diese Daten können beispielsweise dazu verwendet werden, die Ergebnisse des Raffinose-Gä^rungstests zu korrelieren
und festzustellen ob er im Laboratorium richtig durchgeführt
wurde. Wenn also der Test mit Enterobacter cloacae enthaltenden
Kontrollplättchen positiv und mit Proteus vulgaris enthaltenden Kontrollplättchen negativ ist, dann ist das
im Laboratorium ausgeführte Testverfahren in Ordnung.
Tabelle III enthält eine Zusammenstellung der empfohlenen Organismen für die positive und negative Kontrolle
bakteriologischer Tests.
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Reaktionen von Kontrollproben in den hauptsächlichsten Bestimmungstests
P:
σ c
Staphylococcus + cd epidermidis
Enterobacter cloacae
Salmonella typhimurium
Proteus vulgaris
Escherichia coli
Pseudomonas aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa
a.
P Ul
co
„
F F
Ω P Ul
PT O OT
(T)
Ct
et-
ο ω
PT P
CD
ro ca
i-3
ISI | ,_, | O | |
H- | H- | ||
CD | Ct | Ul | Ct |
P | ►-^ | H- | *? |
Ui | P | Ϊ3 | H- |
CD | Ct | I | J3 |
α | i | ||
■ S | DD | CD | Ö |
Ω | H- | p^ | CD |
3 | P | p^ | |
I_J. | 3 | C | P |
J-.
tn |
O | O | σ |
et | X | ο | |
CD | ω | '■<Z | X |
£3 | H1 | c<J | |
ω | P | H1 | |
co | Ui | P | |
CD | cn | ||
CD | |||
H-
O | P | ΟΛ | |
2 | P | Ct | >· |
P | TO | P | |
Μ | M | ||
O | M | P | |
Cs | P | Ul | SS |
P | U) | CD | P |
Ct | φ | Ω | |
CD | M | ||
03
SS
H-Ct
et
CD D-C
et
- NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA + + + + +
- NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA - + + - +
*0
NA NT
- F 4-1 + 4-JP τ- — τ +
= Oxidativ; F = Fermentativ
; Nicht anwendbar
= Nicht getestet
l·+ τ+ + + NA NA+ - +
- - + + +^ - NA NA - - +
-2 + NT NT NT + NA NA - - -
-2 + NT NT NT + NA NA - - -
48 h, schwach nach 24 h
Am oberen Rand positiv
schwach positiv nach 72 h (unsicher)
langsam positiv; negativ nach 24 h; positiv nach 72 h.
CX) OQ
Tabelle 2
Kohlehydrat-Gärungsreaktionen von Kontrollorganismen
Kohlehydrat-Gärungsreaktionen von Kontrollorganismen
jjQ Staphylococcus aureus
κ> Staphylococcus
** epidermidis
κ) Enterobacter cloacae «ο Salmonella typhimurium
Proteus vulgaris Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa
*^s | CD | Ö | ^ | M | tr1 | H | P | S | id | CD | CO | CQ | CG | 1-3 | |
P | H1 | C | N | £3 | pj | J3 | H1 | pi) | Ct | P | O | P | |||
O* | H1 | H-· | CD | O | Jjq* | Ct | J3 | Hb | *3* | M | O | CD | |||
H- | O | O | *"j | 03 | Ct | H | O | H- | »-b | <J | Η | er | O | ||
£3 | D" | H- | H- | H- | O | H- | 03 | Ct | H- | J—I | Ν | H- | P | ||
O | H- | Ct | !3 | Ct | 03 | !3 | CD | [3 | Ö | H- | Ct | P | |||
03 | O | CD | O | CD | O | ||||||||||
O. | ro | 03 | 03 | J3 | O | 03 | |||||||||
O | CD | CD | Ct | 03 | Φ | ||||||||||
Ϊ3 | O | CD | |||||||||||||
H- | 03 | ||||||||||||||
Ct | CD | ||||||||||||||
+ -■+■-■ +
1. Positiv nach 3-6 d
2. Schwach positiv nach 72 h; positiv nach 7 el
4. Schwach positiv nach 48 h; positiv nach 6 d
5. Negativ nach 2 h; positiv nach 7 d (+") = verzögert positiv
3. Negativ nach 72 Stunden, positiv nach 8 Tagen
cn co •-j
Empfohlene Organismen für die positive und negative Kontrolle bakteriologischer Tests.
1. | Escherichia coil | Oxidase | 5. | Staphylococcus epidermidis | aeruginosa | Organismus |
2. | Enterobacter cloacae | Indol | 6. | Salmonella typhimurium | Streptococcus pyogenes | Negativ |
3. | Proteus vulgaris | Methylrot | 7- | Pseudomonas | Empfohlener | 1 oder 2 |
4. | Staphylococcus aureu's | Voges-Proskauer | 8. | Positiv | 2 oder 3 | |
Zitrat | 7 | 2 | ||||
Test | Schwefelwasserstoff (TSI) | 1 | 1 | |||
1. | Urease | 1 | 1 | |||
2. | Lysin-Dekarboxylase | 2 | 1 oder 2 | |||
3- | Ornithin-Dekarboxylase | 2 oder 6 | 1 | |||
4. | Arginin-Dihydrolase | 6 | 2 oder 3 | |||
5. | Katalase | 3 | 3 | |||
6. | Koagulase | 6 | 3 | |||
7. | KCN | 2 | - | |||
8. | DNAase | 2 | 5 | |||
9. | Glukosefermentation | beliebig | 1 | |||
10. | Laktosefermentation | 4 | 5 | |||
11. | Mannitfermentation | 2 | 7* | |||
12. | ß-Hämolyse auf Blut-Agar | 4 | 3 | |||
13. | Bacitracin-Scheiben-Test | 1 | 5 | |||
14. | Natriumhippurat | 1 | 5 | |||
15- | 4 | - | ||||
16. | 8 | 8 | ||||
17- | 8 | |||||
18. | 4 | |||||
19. | ||||||
20. |
* Organismus No. 7 ist negativ für Glukosefermentation, baut
aber das Kohlehydrat oxidativ ab.
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Alle in diesen Tabellen aufgeführten Tests und ihre Sichtbarmachung der positiven und negativen Reaktionen,
welche die Anwesenheit oder das Fehlen eines Organismus durch Wachstum, Färbung oder Farbwechsel anzeigen, sind
bekannt.
Die nachfolgenden Beispiele dienen zur Illustration der Erfindung. Die Temperaturen sind in 0C angegeben.
Plättchen zur Kontrolle bakteriologischer Testverfahren werden wie folgt hergestellt:
Einen bestimmten Organismus lässt man in 10 ml Tryptic Soy Broth etwa 16 bis 18 Stunden bei 37° wachsen. Das Tryptie
Soy Broth setzt sich zusammen aus 17 g pancreatiseh verdautem Casein, 3 S Soyabohnenpepton, 5 g Natriumchlorid,
2,5 S sekundärem Kaliumphosphat, 2,5 g Glucose und 1000 ml
destilliertem Wasser. Der resultierende pH-Wert liegt bei etwa 7*3.
Die sich ergebende Kultur wird zentrifugiert und die überstehende Flüssigkeit entfernt. Das zurückbleibende,
die Bakterien enthaltende Sediment wird in 4 ml einer sterilen Mischung aus 96,99 Gewichtsprozent Nährgelatine, 0,01 Gewichtsprozent
Diäthylaminoäthyldextran und 3 Gewichtsprozent
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Natriumglutamat suspendiert.
Die suspendierten Organismen werden unter antiseptischen Bedingungen mit einer Pasteurpipette in Tropfen von etwa
0,02 bis etwa 0,05 ml auf eine sterile gewachste Petrischale
gebracht. Die Schalen mit den Tropfen werden in einen CaSO^, enthaltenden Exsiccator gebracht, der auf 500-600 mm Hg
evakuiert wird, und bleiben in diesem bei Zimmertemperatur, ungefähr 20-250C, während 72 Stunden. Durch die Trocknung
werden die Tropfen in feste scheibenförmige Plättchen umgewandelt. Die Plättchen werden unter antiseptischen Bedingungen
von der gewachsten Oberfläche entfernt und in kleine, steri Ie,ein Trocknungsmittel, z.B. Silicagel,enthaltende
Gläser mit Schraubverschlüssen gegeben. In jedes Glas kommen etwa JO Plättchen. Diese Gläser eignen sich für
die Zusammenstellung eines Testsatzes für Laboratorien und für Transport und Lagerung.
Dieses Beispiel zeigt die Anwendung der Kontroll-Plättchen,
(a) Indirekte Methode
(a) Indirekte Methode
Ein Plättchen wird unter antiseptischen Bedingungen mit einer sterilen Pinzette aus einem Glas entnommen und
in einen sterilen Behälter mit Schraubverschluss gebracht, der 2 ml steriles Tryptic Soy Broth enthält,und bei 37°
1-2 Stunden inkubiert. Es bildet sich eine Suspension von lebensfähigen Organismen.
Eine kleine Menge dieser Suspension wird dazu verwendet ein entsprechendes biochemisches Testmedium zu impfen.
Durch Beobachtung des Ergebnisses kann die Qualität des Tests bestimmt werden.
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ST
— Ιό -
(b) Direkte Methode
Ein Plättchen wird direkt dem Testmedium beigegeben, wie beispielsweise in dem folgenden Coagulasetest:
Zwei Blättchen, eines mit Staphylococcus aureus und ■ eines mit Staphylococcus epidermidis werden in getrennte,
ein Kaninchenplasma enthaltende Probenröhrchen gegeben. Nach 5 Stunden gerann das Plasma in dem Staphylococcus aureus
enthaltenden Probenröhrchen, während Staphylococcus epidermidis ein negatives Ergebnis zeigte.
Mit Hilfe dieses Tests kann der Bakteriologe feststellen ob sein Coagulasetestverfahren korrekt und genau
durchgeführt wird. Auf die gleiche Weise können die Verfahren der anderen hier beschriebenen Tests ausgewertet
werden.
Die Stabilität der in den Blättchen konservierten Organismen wird durch einen beschleunigten Stabiiitätstest
bestimmt, der wie folgt ausgeführt wird:
Einzelne Blättchen werden in 8 sterile, geschlossene (nicht luftdicht) Reagenzgläser der Grosse 13 x 100 mm gebracht.
Eines der Reagenzgläser dient zur Kontrolle des Wachstums und wird keiner Hitzebehandlung unterzogen. Die übrigen
Reagenzgläser werden in ein thermostatisiertes Oelbad
gebracht. Wenn die Temperatur im Inneren eines zur Kontrolle im Oelbad befindlichen leeren Reagenzglases 100° erreicht
hat, beginnt die Zeitrechnung für die übrigen Proben.
In stündlichen Abständen wird jeweils ein Reagenzglas
mit einem darin enthaltenen Plättchen herausgenommen. Unmittelbar nach der Entnahme werden >
ml Tryptic Soy Broth in das Reagenzglas gegeben. Nach der Zugabe der Brühe werden
alle Reagenzgläser über Nacht bsi J57°C inkubiert und am
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folgenden Tag auf Wachstum untersucht.
Normale Kulturen mit den entsprechenden Organismen würden bei den gleichen Temperaturbedingungen in weniger
als 1 Stunde abgetötet werden. Die Ergebnisse des beschleunigten Stabilitätstests sind wie folgt.
Organismus 9.k^2l^.äl
Pseudomonas aeruginosa ++++++++
Enterobacter cloacae + + + + + + + +
Salmonella typhimurium + + . + + + + + + + = Wachstum
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Claims (1)
- Patentansprüche1. Kontrollmittel für bakteriologische Testverfahren und Reagenzien, dadurch gekennzeichnet, dass es aus stabilen trockenen,scheibenförmigen Plättchen besteht, die eine Mischung aus Bakterien, Nährmedien und Stoffen zur Stabilisierung der Lebensfähigkeit der Bakterien enthalten.2. Kontrollmittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Stoffe zur Stabilisierung der Lebensfähigkeit der Bakterien Diäthylaminoäthyldextran und Natriumglutamat enthalten.3· Kontrollmittel nach Anspruch 2, dadurch gekenn- ;t, dass jedes Plättchen
lebensfähige Bakterien enthält.5 8 zeichnet, dass jedes Plättchen zwischen etwa 10 und 104. Kontrollmittel nach Anspruch 3* dadurch gekennzeichnet, dass die Mischung · · etwa 96>99 Gewichtsprozent Nährgelatine, etwa 0,01 Gewichtsprozent Diäthylaminoäthyldextran und etwa 3,0 Gewichtsprozent Natriumglutamat, jeweils bezogen auf das Trockengewicht, enthält.5· Mischung zur Herstellung stabiler , trockener, scheibenförmiger Plättchen nach Anspruch- 1, dadurcli gekennzeichnet, dass sie Bakterien, eine Nährgelatine und Stoffe zur Stabilisierung der Lebensfähigkeit der Bakterien enthält.6. Mischung nach Anspruch 5» dadurch gekennzeichnet, dass die Stoffe zur Stabilisierung der Lebensfähigkeit der Bakterien Diäthylaminoäthyldextran und Natriumglutamat enthalten. ·7· Mischung nach Anspruch 5> dadurch gekennzeichnet, 109824/2289dass sie etwa 90 bis etwa 97 Gewichtsprozent Nährgelatine, etwa 0,005 bis etwa 0,015 Gewichtsprozent Diäthylaminoäthyldextran und den restlichen Anteil Natriumglutamat enthält.8. Mischung nach Anspruch 5* dadurch gekennzeichnet, dass sie 96,99 Gewichtspozent Nährgelatine, 0,01 Gewichtsprozent Diäthylaminoäthyldextran und J>% Natriumglutamat enthält.9. Verfahren zur Herstellung eines Kontrcllmittels) nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass eine Mischung aus Bakterien, einer Nährgelatine, und Stoffen zur Stabilisierung der Lebensfähigkeit der Bakterien vakuumgetrocknet wird.10. Verfahren zur Herstellung eines Kontrollmittels nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass eine Mischung aus Bakterien, einer Nährgelatine und Diäthylaminoäthyldextran und Natriumglutamat vakuumgetrocknet wird.11. Verfahren ,zur Herstellung eines Kontrollmittels nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass eine Mischung aus* Bakterien, etwa 90 bis etwa 97 Gewichtsprozent Nährgelatine, etwa 0,005 bis etwa 0,015 Gewichtsprozent Diäthylaminoäthyldextran und der Rest Natriumglutamat vakuumgetrocknet wird.12. Verfahren zur Herstellung eines Kontrollrnittels nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass eine Mischung aus Bakterien, 96,99 Gewichtsprozent Nährgelatine, 0,01 Gewichtsprozent Diäthylaminoäthyldextran und 5 Gewichtsprozent Natriumglutamat vakuumgetrocknet wird.15. Verfahren zur Konservierung von Bakterien, da- ' durch gekennzeichnet, dass eine Mischung aus diesen Bakterien, Nährgelatine und Stoffen zur Stabilisierung der Lebensfähigkeit109824/2269dieser Bakterien hergestellt wird und einzelne Tropfen dieser Mischung vakuumgetrocknet werden.14. Verfahren zur Bewertung der Genauigkeit von bakteriologischen Testverfahren und Reagenzien, dadurch gekennzeichnet, dass ein Kontrollmittel nach einem derAnsprüche 1-4 als Probe eingesetzt wird.15. Ausrüstung zur Kontrolle bakteriologischer Testverfahren und Reagenzien, dadurch gekennzeichnet, dass sie geschlossene antiseptische Behälter umfasst, in denen scheibenförmige Plättcheri»bestehend aus stabilen,konservier ten* lebensfähigen Bakterien, etwa 90 bis etwa 97 Gewichtsprozent Nährgelatine, etwa 0,005 bis etwa 0,015 Gewichtsprozent Diäthylaminoäthyldextran und etwa 2 bis etwa 10 Gewichtsprozent Natriumglutamat, enthalten sind,wobei das Gewicht dieser Plättchen etwa 2,8 bis etwa 4,0 mg beträgt.4/2269
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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US88269169 | 1969-12-05 |
Publications (3)
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---|---|
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---|---|
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GB1282378A (en) | 1972-07-19 |
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CH557425A (de) | 1974-12-31 |
NL7017686A (de) | 1971-06-08 |
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Legal Events
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C3 | Grant after two publication steps (3rd publication) | ||
E77 | Valid patent as to the heymanns-index 1977 | ||
8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |