DE2013221A1 - - Google Patents

Description

" Steroid-Glycoside mit 2-Desoxyzuckerresten, Verfaiiren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung " . · ■ :

Priorität; 19. März 1969, Japan, XIr. 20994/69

Die Erfindung betrifft neue Steroid-Glycoside mit 2-D©soxyzuckerresten der allgemeinen Formel

(I)

Γ—O

in der X der Kest eines Sauerstoff enthaltenden Kohlenwasserstoff rings ist, R₁ und fi« Wasserstoffatome, Hydroxylgruppen . oder Acyloxyreete bedeuten, R ein Wasserstoffatom oder einAcyl« rest ist,' der bei-jeder Zückereinheit gleich oder verschieden

sein kann, und η eine Zahl grosser als 1 ist.

Nach einer'bevorzugten Ausführun^sform hat X die Bedeutung einer

. 3-Furylgruppe und η den ^vert 1 oder 2,

Beispiele der erfindun^egemässen Verbindungen sind: 3ß-Z"4-0-(ß-D-Digitoxosyl J-fi-D-digitoxosyUOxy-W-i 3-furyl)-5 ß»14fl-androstan-14-ol,

3ß-/4-0-(0-D-Digitoxo8yl)-ß-D-digitoxosyl7oxy-17ß-(5-furyl)-5ß,l4ß-androstan\-12ß,14-diol,

3ß-/"4-O-( ß-D-Digitoxosyl )-ß-D-digitoxosyl7oxy-17ß-( 3*furyl y-r

5ß,14ß-anarostan-14»l6ö-dlol, 3ß- A-0-( ß-D-Digi tpxosyl )-ß-B-digit oxosyl7oxy-17ß-( 3-furyl )- 5ßfl4ß-androstan-12ß,14fl6ß-tr±ol, '

3ß-(ß-D-Digitoxoeyl)oxy-17ß-(3-f uryl)-5ß,14ß-androstan-14-ol, 3ß-(ß-3i-Digitoxosyl)oxy-17ß-(3-furyl)-5ß»14ß-androstan-12ß,14-

diol, ■.··""

3ß-(ß-D-Digitoxoeyl )03ty_r17ß-( 3-furyl )-5ß, 14ß-öndrostan-14,16ß-

3ß-( ß-D-:Digitoxo8yl) oxy-17ß-< ?-furyl )-5l,14ß-andros tan-12ß, 14,

16ß-triol
w und 4eren Ester. · ' .

Gegenstand vorliegender Erfindung ist weiterhin ein Verfahren zur partiellen Hydrolyse von Steroidglycosiden mit 2-Desoxyzuckerresten, die jedoch nicht auf einen 2-Desoxy-glycosylrest einwirkt, wenn er nicht als endständiger Rest der glycosi disehen Bindung vorliegt.

Es Bind bereite einige Verfahren zur selektiven Hydrolyse von Glyoosiden der 2-Des oxy zucker bekannt. Beispielsweise be-

009540/2253 .' . ,

.·-■ 5 -

schreibt A. Stoll "Helvetica Chimica Acta" 18 (1935), Seife 120, eine selektive enzymatische Hydrolyse von Digilaniüen zur 'Abspaltung der Glucoseeinheit von der glyeosidiöchen Kette· P» Kaieer und Mitarbeiter besehreiben in "Annalen der Chemie", 603 (1957)i Seite 75, eine nicht selektive saure Hydrolyse von Cardenolid-triöigitoxosiden mit Säuren und anschliessender wiederholter, langwieriger Verteilerchroniatographie. Diese Verfahren sind jedoch für eine präparative oder gewerbliche Anwendung wegen ihrer Nichtselöktivität, ihrer niedrigen Ausbeute, ihrer umständlichen Verfahren, ihres umfangreichen Volumens der Reaktionstnischung, der Ähnlichkeit der physikalischen Konstanten der Produkte und anderer Schwierigkeiten unzulänglich_o

Aufgabe bei vorliegender Erfindung war es daher, ein besseres Verfahren eur selektiven Hydrolyse von Glyoosiden iait 2-Desoxy--Zuckereinheitea. als Zuckerrest zu finden. Hierbei sollte 1) die Empfindlichkeit bei der Hydrolyse einer durch Glycolspaltung zu entfernenden spezifischen ZucKereinheit erhöht werden, 2) eine Selektivität unter Ausnutzung der Tatsache geschaffen werden, dass 2-Desoxy-Zuckereinheiten, die keine Endglieder einer glycoeidischen Bindung sind, durch die Reaktion des Verfahrens vorliegender Erfindung nicht angegriffen werden, 3) eine höhere Ausbeute erzielt werden, 4) ein ein-, deutiges" chemisches Verfahren und 5) ein milder und leicht zu handhabender Reaktionsablauf angestrebt werden.

Verfahren zur Hydrolyse von Glycosiden mittels ähnlicher Reaktionen sind an sich begannt (vergl."Journal of the American Chemical Society« 81 (1959), Seite 21*76, (6£ (1947), Seite 246,

BAD ORIGINAL

^und - - .58 (1936),Seite 578; I,J. Goldstein et al. in "Metuode in Carbohydrate Chemistry", Band V, Seite 361 (1965); "Organic Reactions" <2 (194*01 Seite 341; Dugan'in "Canadian Journal of Chemistry" £5 (1965), Seite 2033, und die darin angegebenen LiteraturhinweiBe). Diese Verfahren beziehen sich jedoch nicht auf Glycoside von 2-Desoxy-Zucker und sind ferner auf eine vollständige Hydrolyse von gegenüber normalen Hydrolysebedingungen widerstandsfähigen Glycosiden gerichtet. Bisher waren die Reaktionsbedingungen ziemlich drastisch und gaben keinen Hinweis auf eine selektive Hydrolyse in Bezug auf die Zuckereinheiten·

Sie Lösung der gestellten Aufgabe besteht nun darin, dass man ein Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel, . '

ΙΓ—l-

in der X, R,, R₂ , R_m und η die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, zur Verfügung stellt, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel

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■- 5 -

2033221

OH

ta

■ .H

	y	χ-	fj ·
	I)H	*	2
■ I

(II)

in der X, R₁, R₂· B_1n und η die oben angegebenen Bedeutungen be-.sitzen, mit eines Glycolspaltungsmittel behandelt und die erhaltenen Produkte, gegebenenfalls nach Reduktion, hydrolysiert.

Beim Verfahren vorliegender Erfindung werden daher in einer ersten Stufe die Glycoside einer Glycolspaltung unterworfen, wobei ein Dialdehyd oder dessen Acetale entstehen, diese Produkte gegebenenfalls zu den Dimethylölverbindungen reduziert und dann die Produkte der ersten Stufe in einer zweiten Stufe unter extrem milden Bedingungen hydrolysiert₀ Biese milden Bedingungen gestat-

ten die mögliche Existenz einer instabilen Gruppe im anderen Teil der GlycosidmolekUle. ■

In den Formeln (X) und (II) bedeutet X Z₄B. die tf-, ß- odefy-

Butenolid-Gruppe, die Butanolid^Gruppe, die 2-Furylgruppe oder vorzugsweise die 3-Furylgruppe. .

Der Acylrest des Restes B₀₁ und der Acyloxyrest von R₁ und Rg sind z.B. Alkanoylreste, wie die Pormyl-, Acetyl-, Propionyl-, Butyryl-Jöbanthbyl-, Stearoyl-, Trimethy!acetyl-, terte-Butyl-

i i ' ■ "- . . ■

acetyl-, Cyclohexylcarbonyl-, Apocamphan-l-carbonyl-, Adamantan-

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carbonyl- oder die Cy clopent analkan oyl^r Gruppe, ein ungesättigter aliphatischer Acylreat, wie die CrQtonylgruppe, ein eubstituiertcr aliphatischer Acylreat, v/ie der Halogenacetylrest, die Glyoyl-, lacty1-, Berneteinsäuremonoacyl-, Phenylpropionyl-, Cinnamoyl-Gruppe oder ein gegebenenfalls substituierter Phenoxyacetylreet, ferner ein gegebenenfalls substituierter aromatischer Acylrest, wie die Benzoyl-, Nitrobenzoyl-, Methoxybenzoyl-,

Methylbenzoyl-, Kaphthalincarbonyl-, .Nicotinyl- oder die Puroyl-Gruppe oder ein Halogenbeniaoylrest, oder auch ein anorganischer Acylrest, wie die Kohlensäure·*, Schwefelsäure- oder Phoephorsäuregruppe.

Ausgang8verbindungen für das Verfahren vorliegender Erfindung

sind z.B. '

Digitoxin,

Digoxin, . ' .

Gitoxin, -

Diginatin,

Digitoxigenin-bis-digitoxosid, Digoxigenin-bis-digitoxosid, Gitoxigenin-bis-digitoxosid, Diginatigenin-bis-digitoxosidι

3ß-(ß-I^Digitoxosyl-ß-D-digitoxosyl-fi-D-digitoxoeyl)oxy-17ß-

( 3-f uryl )-5ß»14ß-» andros tan-14-ol, 3ß-(ß-D-Digitoxosyl-ß-D-digitoxoeyl-ß-Ü-digitoxoeyl)oxy^l7ß- '

(3-furyl)-5ß,14ß-anurostan-12ß,14-diol, >ß-(ß-D-Digitoxosyl-ß-D-digitoxosyl-ß-D-digitoxosyl)oxy-17ß- (3-furyl )-5a,14ß-ancLrostan-14»I6ß-diol,.

009840/2253 ..

-■7 r

3ß- (ß-D-Digit oxoeyl-ß-DMligi toxosyl-ß-U-öigitoxosyl) oxy-l7ß* {3-furyX)-5ßF14ß-androetan-i2ß,14,I6ß-triol,

3ß~/4-O-(ß-D-Digitoxoeyl)-ß-D_Tdigitoxosyl7oxy-*17ß-(3~furyl*)-5ß|14ß~anurü8tan-14-ol, " · ·. ...

3 ß-/4-.0-( ß-D-Digit oxosyl )-ß-D-digitoxosyl7oxy-17ß- (3-furyX )-5ß_t14ß-axiürostan-12ß,l4~clioi_l

30-/4«.0-( ß-D-Digitoxosyl )-ß-D~digitQXO8yl7-axy-17ß-( 3-furyl)-'

-ß-2>-digit oxosyl7oxy-17ß-( 3-furyl )-5ß,14ß-antiroetan-.12ß,14,l6ß-triol . . . . oder deren Ester* · . -^Λ

Die erste Stufe des Verfahrens vorliegenuer Erfindung.besteht in einer .Glycolepaltung der vorgenannten Ausgangsmaterialieh an der endständigen -Zuckereinheit mit gegebenenfalls anschlies sender Reduktion. Die Reaktion der ersten Stufe wird durch das nachstehende Reaktionsschema veranschaulicht. .

CH

CH-

CIL

**x\ GJycol,

T"^ J .Spaltung sr _0HC OH mittel j .

CIL

. · CIL

/ V" "r^" ) 'und/oder " _y OH

. OH" (1)

^CH3 ■ ·.

\ -CH-

■ι* /·"·)"—- " · ''JiS ,isoliert.

1—0 Q-A { OHC-CH₂ 0-<\ΙΛ und ·_

. λ,,λ^ \Α V-) .--■-,— >ti^x ί '\ idehtifi-

OHC V "'..^cL/oder ·. . CH J _ziert

Γ · ·" '■<- CH₃-CH-CHOH.'

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Reduktionsmittel , . HOCH_{0 r Λ} ,, .

· HOCH-/ H^ ^methylol)

(gegebenenfalls). "^υυί12 ^0H ' (5)

■ ·' ι

Die Verbindung der Teilformel (1) reagiert mit dem Glyöolspaltungsmittel viel.milder als die entsprechenden 2-hydroxylierten Zuckerverbindungen» Die erhaltenen Produkte sind "Dialdehyde" (2) und deren Acetalej die durch die Teilformeln (3) und (4) veranschaulicht werden· Die Dialdehyde (2) und auch deren Acetale kann man mittels eines üblichen Reduktionsmittels in hoher Ausbeute tu "Dimethylole¹¹ (5) reduzieren· ·

Glycolspaltungemittel können z.B. sein: Chromsäure, Permangana·· te, Salpetersäure, Perschwefelsaure, Kupferhydroxid, Wismutate/f Manganacetat» Jodosobenzol- alkanoate, Osmium te tr oxid, , - '" Rutheniumtetroxid und vorzugsweise Bleitetraacetat» Perjjodate oder Perjodeäure. Die Spaltunosmittel kann man in verschiedenen Lösungsmitteln anwenden» Beispiele hierfür sind Kohlenwasserstoffe, wie Leichtbenzin» Petroläther, Heptan, Hexan, Benzol» Toluol, Xylol oder Cyolohexan, halogen!erte Kohlenwasserstoffe, wie Tetrachlorkohlenstoff, Chloroform, Methylenchlorid, Dichloräthan oder Tetrachldräthan, Äther, wie Diäthyläther, Methylbutylöther, Tetrahydrofuran, Tetrahydropyran,Dioxah oder Äthylenglykoläther, Ester, wie Äthylacetat oder Butylacetat, Ketone» wie Aceton, Methylethylketon oder Cyclohexanon, Alkohole, wie Methanol, Äthanol, Butanol oder Octanol, Carbonsäuren, wie Ee-Bigsäufe, Propionsäure oder Ameisensäure, Basen, wie Pyridin, Collidin oder Chinolin, oder ferner andere Lösungsmittel, wie.

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Dimethylformamid, Mmethylsulfoxid, Wasser oder auoh Mischungen der genannten Lösungsmittel« Gewöhnlich werden..Bleitetr.aacetat. in nicht-polaren Lösungsmitteln und PerJodeäure'und Perjodate in polaren Lösungsmitteln angewendet. Gegebenenfalls kann man andere Lösungsmittel zufügen, um die Reaktionsteilnehmer zu lösen. Im Falle der Verwendung von Per jodaten oder Per jodsäure als GIycolspaltungsmittel und der Verwendung von verdünntem Alkohol als Lösungsmittel können sich Salze der Perjodsäure in dem Medium als Kristalle abscheiden und durch einfache Filtration entfernt werden· Man kann dem Reaktionsmedium zur Neutralisierung saurer | Produkte Basen hinzufügen. Die iteak-tion kann bei niedrigen oaer erhöhten Temperaturen durchgeführt werden« Die Menge des Glycolspaltungsmittels gegenüber dem Ausgangsmaterial beträgt Vorzugs«- ' weise 1 bis 5 Mol-Äquivalente, obwohl man ohne'Nachteil mehr Spaltungsiaittel einsetzen kann. Die Endprodukte kann man nach an sich bekannten Verfahren isolieren, z.B. durch Verdünnen, Konzentrieren, Extrahieren, Filtrieren und dergleichen, öle können durch übliche Verfahren gereinigt werden, wie Umkristallisieren oder. Chromatographieren. Die Produkte kann loan dem Verfahren der nächsten Stufe oane weitere Reinigung unterwerfen» Die so erhaltenen Produkte sind "Dialdehyde" der Teilformel (2) oder deren Acetale,.wie sie durch die Teilformeln (3) und (4) dargestellt sind· Zur gegebenenfalls anschliessenden Reduktion kann «an geeignete Mittel zur Reduktion der "Dialdehyde" der Teilfor-

. mel (2) oder deren Acetale der Teilforineln (3) und (4) zu den entsprechenden "Dimethylolen" der Teilformel (5) verwenden, vorausgesetzt, dass diese Mittel am anderen Seil des Gruncimole~ küls keine irreversiblen Veränderungen hervorrufen.. Beispiele

: bevorzugter Reduktionsmittel beim erfindungsgemässen Verfahren

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aind Borhydridverbindungen, vie Kaliumborhydrid, Hatriumborhydrid, Lithiumborhydrid, Alkylborhydride, Borhydrid, Pyridinboran oder Alkylaminborane, Aluminiumhydridkomplexe/ wie Lithiumalumi*- niumhydrid, Lithiumalkylaluainiumhydride, Litoiuiaalkoxyaluminiumhydride, Natriumaluminiumhydrid, Alkylaluminiuahydride oder Alkoxyaluminiumhydrid©, oder ferner verschiedene äydrierungskatalysatoren, wie Kobalt-Kupfer-Chromit, Ruthenium-Kohle·, Palladium-Kohle oder Palladium-Calciumcarbonat, Auch kann man die Reduktion nach Meerwein-Pondorf oder Meerwein-Schmidt durchführen· Die Reduktion kann in einem Lösungsmittel, wie Kohlen-Wasserstoffen, halogenieren Kohlenwasserstoffen, Äthern, Alkoholen, Estern, Carbonsäuren, Basen oder ».asser, bei erhöhter oder erniedrigter Temperatur ausgeführt werden· Bei der gegebenenfalls angewendeten Reduktion beträgt die Menge des Reduktionsmittels etwa 0 bis 1 Mol-Äquivalent oder mehr. Bevorzugte Ergebnisse werden erhalten, Wenn man.":l bis 10 Mol-Äquivalente von beispielsweise Natriumborhydrid als Reduktionsmittel verwendet« i>ie so hergestellten Produkte kann man nach an eich bekannten Verfahren isolieren, wie Zersetzen des Addukte, Ausfällen durch Zugabe von unlöslichen Lösungsmitteln, Filtrieren, Verdünnen, Extrahieren, Waschen, Trocknen, Verdampfen der Lösungsmittel, Absorbieren, Eluieren oder dergleichen· Auch kann man mehrere dieser Verfahren anwenden. Das Verfahren über den Umweg der Reduktion ist der unmittelbaren Hydrolyse der "Dialdehyde" (2) oder deren Acetale, d.u. der Verbindungen der Teilformeln (3) und ■ (4) tatsächlich äquivalent und ist dem letztgenannten insofern überlegen, dass man weniger Nebenreaktionsprodukte, eine höhere Reinheit des Produktes, eine leichter gereinigte, höhere Ausbeute, usw. erzielt, ohne Rücksicht auf die Verwendung eines

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-ⁿ- ■ 20t3221

teuren Reduktionsmittel!:·

Die zweite Stufe des Verfahrens vorliegender Erfindung besteht in der Hydrolyse der Produkte der ersten Stufe· Die Reaktion der zweiten Stufe kann durch das nachstehende Reactionsschema wiedergegeben werdent ·' ' _r

"Dialdehyd" (2) ß-ELiminierung - CH, oder dessen^ Acetale und/oder Hydrolyse 1—. ■> O) oder (4) · der Acetale >_W—(l·

. j—J

„ ' _m . Hydrolyse der "Dlraethylol¹¹ (5) Acetalgruppen

06)

Sie "Dialdehyde" (2) oder deren Acetale (3) und (4) und die "Dimethylole" (5) werden unter dem Einfluss der verschiedensten Hydroly8ierun£SGiittel weit milder als die entsprechenden 2-Uor-Verbindungen hydrolysiert, die sich von 2-hydroxylierten Zuckereinheiten ableiten. Die bekannten, auf die 2-hydroxylierten Zucker angewendeten Verfahren sollten die fieaktion unter einer strengeren Bedingung als beim Verfahren vorliegender Brfinuung durchführen· Z.B. ist .die Hydrolysebedingung bei Goldstein 0,1 bis 0,5 η Salzsäure 6 bis 8 Stunuen bei Raumtemperatur, die von Dugan Erhitzen mit 5 ^-igem Kaliumhydroxid und die von Kubota (Tetrahedron 2^ (1968), Seite 675) einstündiges Erhitzen unter Rückfluss mit 3 > Kaliumhydroxid in Äthanol und 30 rainutiges Erhitzen unter Rückfluss bei 60⁰C mit 0,1 --jfi' p-Toluolsulfosäure in Dioxan. Unter diesen Bedingungen zeigen empfindliche Gruppen, wie die 2-Desoxy-Zuckereinheiten, die 14-Hydroxygruppe oder der 17-unge8ättigte OxarJ.ng, irreversible Veränderungen/z*B. Bildung von Iso-cardenoliden, Hydrolyse an einer unerwünschten

-Stelle. Dehydrierung una dergleichen· Wenn man dagegen die Hydrolyse mit 0,0065 η Salzsäure bei Raumtemperatur oder mit 0,1 56 Kaliumbicarbonat bei Raumtemperatur aueführt, werden die Ver-· bindungen (2), (3), (4) und (5) in kurzer Zeit hydrolysiert und man erhält die Verbindungen der l'eilforiael (6). Unter den gleichen Bedingungen werden die !»!aldehyde, deren Acetale oder die. Dimethylole, die eich von 2-hydroxyIiarten endständigen Zuckeröinheiten ableiten, d.h. solchen» die sich vom Purpureaglyoosid A durch Reaktion mit ßatriumperjodat ableiten, nicht hydrolysiert· Man erhält das unveränderte Auagangsmaterial zurück. Die Reaktionsfähigkeit der zu hydrolysierenden Verbindungen fällt in^.die Reihenfolge "Dimethylol", "Dialdehyd" und "Dimethyloldiacetat". Aus diesen Angaben kann man schliessen, dass im falle der Diiaethylole eine gewisse Beteiligung der freien, zum.ReaktionsZentrum in Nachbarschaft stehenden Hydroxylgruppe stattfindet· Bei der höheren Reaktionsfähigkeit des Dialdehyds gegenüber dem Dimethyloldiacetat wird vermutet, dass es sich hier um das Ergebnis der Existenz der Carbonylgruppe in ß-Stellung zu dem zu hydrolysierenden Reaktionszentrum handelt· Die Hydrolyse dieser Stufe kann durch die v/irkung eines Mttele erfolgen, das. die Acetale zersetzt und die Alkohole gewinnen ' ' läset. Reaktionsmittel in dieser Stufe können Säuren, Basen oder andere Reaktionsmittel mit äquivalentem Effekt sein, beispieleweise ein mit Ketonen reagierendes Mittel, das eine ß-oxydierte Carbonylverbindung in eine α,ß-ungesättigte Oxoverbindung oder ein Acetal in eine Alkohol- und Ketonbindung mit dem Ketonreaktionsmittel Überführt. Die Säuren können schwäche Säuren, wie

Phenole, aromatische oder aliphatische Carbonsäuren, Silicagel,

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saure Salze, wie Natriumbisulfat, Pyridineulfat oder Ammonium-Chlorid, oder starke Säuren sein, wie Salzsäure, Salpetersäure,. Phosphorsäure oder Perchlorsäure. Die Basen können schwache Basen, wie Aluminiumhydroxid, Calciumcarbonate Kaliumbicarbonat, Natriumbicarbonat, Lithiumbicarbonat, Natriumacetat, Kaliumacetat, Kaliumcarbonat, Natriumcarbonat, Lithiumcarbonat, Ammoniumhydroxid, Pyridin oder Trialkylamine, oder starke Basen sein, wie Kaliumhydroxid, Natriumhydroxid; Lithiumhydroxid, oder'Tetraalkylammbniumhydroxi&e. Die mit Ketonen reagierenden Mittel können Hydrazin, Phenylhydrazin, 2,4-Dinitro-phenylliydrazin, Carbazid oder Hydroxylamin Bein· Diese Hydrolysemittel kann man mit den Ausgangsmaterialien dieser Stufe in Anwesenheit eines Lösungsmittels, wie Wasser oder organischen Lösungsmitteln, in Berührung bringen. Bevorzugte Säure- oder Basenl$onzentrationen sind 0,0001 bis 30 #, bezogen auf die Lösungsmittel. Bevorzugte Ergebnisse erhält man im Falle von 0,1 bis 0,0001 η Mineralsäure oder Behandlung in einem säuren Hedium vom p_H 1 bis A- bei Raumtemperatur über 0,5 bis 48 Stunden. Eine höhere TemperatjirJteann die Reaktionszeit abkürzen. Die Produkte dieser Stufe kann man mittels eines üblichen .Verfahrens, wie Ausfällen, Filtrieren, ! Verdünnen, Extrahieren, Waschen, Trocknen, Absorbieren, KLu^'eren oder dergleichen oder deren Kombinationen mit gegebenenfalls anechlie8sender Reinigung, z.B. durch Chromatographieren oder Umkristallisieren, erhalten. Beim Verfahren vorliegender Erfindung erhält man im Falle der Hydrolyse von Verbindungen der Teilformel (2) mit Säuren, Basen oder Ketonreaktionsmitteln und im Falle der Hydrolyse von Verbindungen der l'eilformel

mit Säuren bevorzugte Ergebnisse, ,..

Nach dem Verfahren vorliegender Erfindung kann man auch vorteilhaft die nachstehend aufgeführten Verbindungen herstellen:

Digitoxigenin-bia-digitoxosid, Digoxigenin-bie-digitoxosid, Gitoxigenin-bis-digitoxosid, Diginatigenin-bis-digitoxosid, Digitoxigenin-mono-digitoxosid, Digoxigenin-mono-digitoxosid, Gitoxigenin-mono-digitoxosid oder Diginatigenin-mono-digitoxoeid.

Pie nach dem Verfahren vorliegender Erfindung erhältlichen Verbindungen sind' gefahrlose, leichte und. starke Cardiotonika. und Diuretika. Sie sind als pharmazeutische Mittel bei der Behandlung von Herzschwächen in der Human- oder Veterinärmedizin in formen von pharmazeutischen Zubereitungen mit einer wirksamen Menge an den Verbindungen und an- einem pharmazeutisch.verträglichen Trägermaterial anwendbar.

Die neuen Verbindungen vorliegender. Erfinuung zeichnen sich durch die allgemeine Formel aus: ·.

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in der R .und ti* Wasserstoffatome oder Hydroxylgruppen bedeuten und n« die Zahl 1 oder 2 ist» und deren i&ter«, Der zuckerfreis Rest dieser Verbindungen leitet eich vom 17ß-(3-*uryl)-5ß_t14ßoudTostan-5ß $14-diol _t 17ß-(3-Furyl)-5ß,14ß-andro8tan-3ß,12 ß,14-trioly 17ß-(3-Fttryl>-5ß,14ß-androßtan-3ß,14fI6ß-triol oder l7ß-(3-PUrylj-5ßa4ß-andrüetän-3ßa2ß^lf,l6ß-te1;rol_; duron Entfernen eines WaBeeretoffatome der Hydroxylgruppe in 3-Stellung ab. Der Zuckerreet dieser Verbindungen ist eine ß-D-üigitoxoeyl- oder eine 4-0-(ß-B-PigitoxosyD-ß-D-digitoxoeyl-Gruppe, Der Aöylreet der Ester kann ein aromatischer oder aliphatiecher

Aoylre&t oder ein anorganischer AcyIreet sein, ■ '

Beiepiele von Verbinaungen nach vorliegender Erfindung eind s 3ß-(ß-B-I>igitoxoeyl)oxy«17ß-(3-furyl)»5ß»14ß-androstan-14-ol, 3ß-(ß-D-Digitoxoeyl)oxy-17ß~(3~furyl)-5ß|l4ß-andro8tan-12a, X4-diol,

3ö-.(ß-D-Digi toxoeyl )oxy-17ß-( 3-f uryl)-5ß ,14ß-androe tan-14,16ß- - diol, ^- ν . _l- . · - ^ _/

3ß-(ß-b-Üieitoxoeyl)oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,Ufi-androetan-iaß,14»

I6ß-triol,
3a-^4-o-(ß-D-Digitoxosyl)-ß-D-digitoxosyl79xy-17ß-< 3-furyl)-5ß,

14ß-anüroeteua-14~ol, . .
3 ß-^-o-C B-P-Uigit oxosyl )-ß-3>-digitoxoeyl7dxy-17ß-( 3-furyl )-

5ß,14ß-andro8ten-12ß_f14-diol, · . 30-/*4^O-(ß-D-Digitoxo8yl)-ß-D-digitoxosyl/oxy^l7flS-(3-furyl)-

5ßtI4ß-androstan-14ι16ß-diol,
3ß-^V-o-(ß-D-Digitoxosyl)-ß-D-digitoxosyl7oxy-17ß-(3-furyl)-

5ß»l4ß-androetan-12ß_r14»i6ß-triol : . oder deren Ester. . . . \ ■ *

Diese Verbindungen können aus den entsprechenden 3ß-Tridigitoxo- ' syloxy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-Verbindungen, die in der britisohen Patentschrift 1 081 647 beschrieben'Sind, oder den 3ß-Bisdigitoxosyloxy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-Verbindungen dieser Urfindung durch Entfernung einer oder zweier Digitoxosyl-Gruppen nach dem Verfahren vorliegender Erfindung oder anderer Verfahren, z.B. nach dem.eingangs erwähnten Verfahren von P. Kaiser und Mitarbeitern, hergestellt werden· Man kann sie

auch aus den entsprechenden Cardenolid-bis- oderjmono-digitoxosiden durch Reduktion des Butenolid-Rings zum Furanring unter Einwirkung eines für die Umwandlung der Butenolid- zur tfurylgruppe geeigneten Reduktionsmittels, wie aktive Aluminiumhydrid-Verbindungen, z.B. Dialky!aluminiumhydride oder Lithiumdialkylaluminiumhydrid, herstellen.

Die Verbindungen vorliegender Erfindung besitzen wertvolle Pharmakologieehe Aktivitäten. Z.B. haben sie eine starke digitaloide cardiotonische Aktivität* Sie zeigen eine inotrope V.'irkvmg, eine chronotrope Wirkung, Arrhythmie und ochliesalich kontraktileri Herzstillstand. Sie erhöhen die kontraktile Amplitude der isolierten Meerschweinchenvorhöfe, isolierten Kanin-· chenherzen und Taubenherzen und zeigen ein den digitaloiden Mitteln spezifisches Elektrocardio^rcomm, Bradykardie, Verzögerung der Herzgeschwindigkeit und Herzflimmern, wenn sie an Tauben geprüft werden. Die nachstehende Tabelle zeigt VereuciisergebniBse bezüglich der cardiotonisehen Aktivität von zwei Verbindüngen.

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BAD ORIGINAL

Tabelle

■ j a>	b)	40 jig	c)	■*)■.	Taube	P.O.	β) '
jverbin- ksolierter dung l-leerschwein- jchen-Herz- rvorhof	isoliertes kaninchenherss	• • 34 19 21 24	1·ν.	0»48	. den von Ne benwirkun gen nach l'asen
toxin J * I 44 II I '· 66	20 jug	0,7 11a2	2,23 2,18	2 i. ' ι "< " 1
Hl 48 . IV 76	17 10 . " 14 16	S, 7

3ß-/4-0-(ß-I>*Pi^itoxsyl-ß-D-digitorosyl)-ß-3>-

eyl/oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,l4ß-androBtan-14,16ß-diölj 3ß-A-0-(ß-D-Digitoxosyl)-ß-D-digitoxoByl7oxy-17ß-(3-furyl)-5ß»14ß-androetan-14-ol;

(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-14»16ß-diol,

(a) Sie durch die Verbinuung in einer Rin'^erlb'eung bei einer Konzehtration von 10 verursachte fcontraktile Amplituüe der isolierten Meerschweinchenvorhöfe werden.im K^iaograph aufgezeichnet· Die Ergebnisse zeigen das prozentuale Ansteigen ijegen den Anfangswert (tiaguus-hethode).

(b) Die Verbindung in einer Hingerlöeung flieset durch das Ko^- ^rronärge"fäs^' des isolierten Kaninchenherzens in Ringerlößuhg, Die Bewegung.des Herzens wird im Kymograph aufgezeichnet und die höchste Aneprechbarkeit wird im prozentualen Anstieg gegen den Anfangewert aufgezeigt (langendorf-Methode)*

0 98 40/22S3

ORIGINAL

(ο) Ein Verfahren der japanischen Pharmacopoeia VlZ, der USA.-Pharmacopoeia XVI usw. zur Untersuchung von Digitalis-

• 9 ,

Präparaten. Eine Lösung der Verbindung in Äthanol wird mit einem ausreichenden Volumen einer iaotonistfhen Matriumchloridlöeung verdünnt und die erhaltene Lösung wiederholt in die PlUgelvene einer Taube durch eine Kanüle in einer Dosis yon 1 ml/kg pro Injektion injiziert, bis die Taube an Herzstillstand stirbt. Die Ergebnisse sind in mg/kg Körpergewicht angegeben.

(d) Die Verbindung wird mit Gummiarabicum vermischt und fein pulverisiert. Die.M-tischung wird zur Herstellung einer gleichmassigen Suspension mit einem Qeiialt an 5 ^er Gummiarabicura mit \ asser vermischt· Me Suspension wird den Tauben oral verabreicht und die mittlere letale Dosis (LDcq) berechnet· Die Ergebnisse beziehen sich auf mg/kg Körpergewicht·

(e) Die für ein Verschwinden der äusseren Symptome von Nebenwirkungen der Verbindungen erforderliche Zeit in Vagen, wenn die Verbindungen an Tauben getestet werden.

Weiterhin erhöhen 3ß-/"4-C-(ß-D-Digitoxosyl)-ß-D-digitoxo8yl7oxj/-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-12ß,14-diol, 3ß-(ß-D-Digitoxosy1)-oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-anurostan-14-ol, 3ß-(li-D-Digitoxoeyl)-oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-12ß,14-diol und 3ß-(ß-D-Digitoxosyl)oxy-17ß-(3-furyl)-5ßfl4--androatan-14tl6ß-diol in einer Konzentration von 10 die kontraktile Amplitude von isolierten Meerscliweinchenvorhöfen bis zu 140 bis 2OC #. Kinige der neuen Verbinuungen zeigen andere pharmakologischö oder physiologische Aktivitäten, z.B. eine Viirkung gegen Viren, eine cytotoxieohe wizkung in vitro, eine diüretische Wirkung, eine die Atmung stimulierende Virkun^; und eine Antidesoxycorticosteron-Wirkun&.

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Aus den Daten ist ersichtlich, daß β die Verbindungen vorliegender Erfindung eine gleicn hohe oder sogar höhere cardiotonieche Wirkung wie Digitoxin und die entsprechenden Butenolid-Derivate besitzen·Sie sind stärker als die entsprechenden Iridigitoxoaide. Ihre letale Dosis ist höher als die der Butenolicl-Verbindüngen. Mit anderen Worten sind ihre Nebenwirkungen geringer bzw. schwächer als die der entsprechenden Butenolid-Verbindungen» Die Uauptwirkünden treten schneller als bei Digitoxin, Jedoch viel langsamer als bei Stroepeeid ein« Die Nebenwirkungen versohwinden schneller als bei den entsprechenden Triglycosiden oder Lactonen. DarÜberhinaus tritt der oardiotonische Effekt leicht auf, und das all&eoteine iSr β cn einübe bild· von Vieren, denen die Verbindungen verabfolgt worden sind, ist leldit und bevorzugt.« Die Verbindungen können oral verabreicht oder durch den Verdauungstrakt absorbiert werden. Digitoxin, das yerbreitetste, j.edooh eeiir stark wirkende caxdiotonische Glycosid, neigt dazu,, sich im Körper des Patienten anzureichern . Andere Verbindungen, wie Gitoxinester, können einen charakteristiacheren Unterschied in den Wirkungen und den Nebenwirkungen wegen der Möglichkeit einer Hydrolyse im Körper zeigen. Die Verbindungen vorliegender g lirfindung überwinden jedoch diese Schwierigkeiten bei den -bekannten Verbindungen. Da die Verbindungen in einem dreistufigen Verfahren aus den reichlich vorhandenen Glycosiden Von Digitaliepflanzen hergestellt werden können, kann man sie in geeigneter Weiee in grossen hengen erzeugen« Ferner sii.d sie in sahireichen pharuazeutisch verträglichen Lösun^smi-t te In löslicher als die entspreciienuen Lactone oder Tridigitoxoside. , "Diese Iierkmale zeigen, dass die Verbindungen vorliegender Erfindung Btarke, gefahrlose und leichte cardiotonische Mittel sind,

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die für die klinische Anwendbarkeit leicht herzustellen und geeignet eincl.

Die vorstehend genannten Aktivitäten zeigen» dass die Verbindungen vorliegender Erfindung für Pharmakologieehe Aktivitäten nützlich sind· Z.B. können sie zur Behandlung von Uerzorkrankungen eingesetzt werden, wie Blutandrang zum Herz» der durch Herzfehler, wie Herzklappenleiden, Hypertension, Arterioaoleroee oüer myocardiale Infarktbildung, verursacht worden ist, oder bei Ödemen, Hautwaeβersucht (Anasarca), Seroperitoneua, Hydrothorax ' oder Dyspnea, die durch Herzfehler oder "Arrythmie, wie ' auriculäres PIiamern, absolute Arrythmie,. kxtraeystolen, Tachycardie oder auriculäree jPlattern verureäoht worden ist, oüer bei akuten Herzfehlern, akutem jilutanurang zu&i Herz, akute Herz-Ryposthenie oder Uerzmuskelerkrankung· Die Verbindungen vorliegender Erfindung werden in einer täglichen Doeie von 0,1^g bie 10 mg/kg Körpergewicht in uer Human- oder Veterinärmedizin angewendet. Der Gehalt an den Verbindungen in den Arzneimitteln iet vorzugsweise gleich;massig, um eine EinheitBdoeierung in Form von Tabletten, Pillen oder Kapseln zur Verwendung als Dosis zur Aufrechterhaltung und/oder Sättigung oder zur Bigitalieierung herzuetellen. Die die Verbindungen enthaltenden Zubereitungen können auch als Diuretika zur Behandlung einiger Symptome, die durch Herzerkranicungen verursacht worden sind, und als Atmungö- ' 6timulierun_oßLiittel in einigen besonderen Fällen verwendet werden. " -

Die Verbindungen kennen in einer groesen Anzahl oraler oder parenteraler Dosierungsformen, allein oder in Kiechung mit anderen wirke auen Verbindungen angewendet werden« Kau kann sie mit

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- f

eineoi pharmazeutischen^ l'rüfcertuaterial. verabreichen, das eine feste oder flüssige Substanz sein kann, in dem die Verbindung gelöst, dispergiert oder suspendiert ist. Ditf. festen Zuber ei tungen.können in Form von Tabletten, Pulvern, Granulaten, Kapseln oder Pillen» und die flüssigen Zubereitungen in Form von Injektionen, Suspensionen, Lösungen-, Emulsionen, ale Sirup oder Elixier vorliegen· Die Säbletten und Granulate können umhüllt sein* ·

Die Beispiele erläutern die Erfindung. Abkürzungen haben die Z Üblichen Bedeutungen. '

Beispiel. 1 · .

(A) Zu einer gerührten Lösung von 1 g Digitoxin in 80 ml 95 /ό-igeoi Äthanol gibt man 1 g Watriumperjodat in IO ml.wasser. Nach- einer Stunde wird das Reaktionsgemisch.filtriert, um Feststoffe zu entfernen. Das Filtrat wird bei einer Temperatur unterhalb 50 C konzentriert· Das konzentrat extrahiert man mit Chloroformβ Die ExtraktIosung wird, mit Wasser gewaschen, überwasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem jf Druck eingedampft· i)er weiese pulverförmig Rückstand des Dialdehyds zeigt im Dünnschichtchromatogramm einen einzigen. Fleck. Ausbeute 0,99 g. A/J?»+ 8,4° (c - 0_#478,-Hetnanol). .Positiv gegen Tollen-Reagens. -

(B-I) Zu einer lösung von 300. mg des rohen Dialdehyds (A) in 30 ml Methanol gibt man 4,5 ml 0,05 η Salzsäure und hält die Lösung 24 Stunden bei Raumtemperatur· Wan neutralisiert das Reaktionsgemiech mit 5 Λ-iger wässriger Natriumbäcarbonatlösung, dampft zur Entfernung des flücntigen Lösungsmittels bei einer

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Temperatur unterhalb 50 C ein Una extrahiert mit Chloroform. Der Chlproformextrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Lösungsmittels eingedampft. Mach der Reinigung von 225 mg Rohprodukt mittels Dünnschichtchrowatographie an Silica^el unter Verwendung einer Mischung von Chloroform und Aceton (2 ti) ala Entwicklungemittel und nach Umkristallisieren .aus einer Miocnung von Äthylacetat und η-Hexan erhält man 124 ng Digitoxigeninbisdigitoxosid vom ¹Tp. 228 bis 23O⁰C. Auebeute« 50 ^, bezogen auf Digitoxin. Ä/jp* +7,3° (c = 0,833, Methanol).

uv» Λ miS⁵°^{H 2l7}»⁵ Φ· (ε " ¹^ ²⁰°)·

• C H C₃₅H₅₄O₁₀; ber.s 66,22; 8,57;

gef.1 65,96; 8,53.

(B-2) Man hält eine Lösung von 200 mg des rohen Dialüehyds (A) in 20 ml Aceton, das 0,1 > Kaliumbicarbonat enthält, 24 Stunden bei Baumtemperatur· Das Reaktionsgemisch wird mit 5 'Λ-iger wässriger Essigsäure neutralisiert, unter vermindertem Druck konzentriert und danach mit Chloroform extrahiert. Die Extraktlösung wird mit V,aaeer gewesenen, über wasserfreiem Katriuiusulfat getrocknet und zur Entfernung dee Lösungsmittels einge-.dampft. Kach der Reinigung, von 166 mg Rückstand mittels Dunnechichtchrofcatotraphie an Silikagel unter Verwendung einer Mischung von Chloroform und Aceton (2si) als Entwicklun^smittel und nacn Umkristallisieren aus einer Mischung von Äthylacetat und η-Hexan erhält man 83 mg Digitoxigenin-bißdigitoxosid vom Fp. 227 bis 23O⁰C. Ausbeute: 50 &, bezogen auf Digitoxin·

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(B-3) Eine Lösung von 2CG mg des rohen Aldehyds (A) in ο in em Gemisch von 2 ml Chloroform und 6 ml Benzol vermischt man mit θ g neutralen Aluminiumoxid und hält das Gemisch 20 Stunden bei Raum* temperatur« -Uann wird das Gemisch zur Entfernung der Festsubstanz filtriert und die Festsubstanz dreimal mit je 100 ml einer Mischung aus Methanol und Chloroform (1:1) gewaschen. Das FiI-trat und die \>aschlösunken werden vereinigt und zur Entfernung der Lösungsmittel eingedampft· Nach der Reinigung von 137 mg Rückstand mittels DUnnschichtchromatographie an Silikagel Unter Verwendung einer Mischung von Chloroform und Aceton (2 s 1) und nach dem Umkristallisieren aus wässrigem Methanol | erhält man 76 mg Digitoxigenin-bisdigitoxosid vom Pp. 227 bis 23O⁰C. Ausbeute 45 ϊ>, bezogen auf ldgitoxiri· .

(B-4) han vermischt eine gerührte Lösung von 500 mg des rohen Diäldehyds (A) in 50 ml 95 'A-i&em Methanol mit 250 mg Natriumborhydrid und hält das Gemisch 1 Stunde bei Kaumtemperatur· Das Reaktionsgemiech wird mit 5 S^-iger wässriger Essigsäure neutralisiert, unter verminderten* Druck eingedampft und dann mit.Chloroform extrahiert. Der Extraüt wird mit Wasser gewaschen, Über wasserfreiem natriumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Lö- \ 8ung8mittels eingedampft. Nach üer Reinigung von 503 mg Rückstand mittele Dünnschichtchromatographie erhält man das Dirnethylol als einzigen Fleck. Das Produkt ist negativ gegen Tollenreagens. Das NMii-Spektrum beweist die Struktur. Man vermischt eine IiöBUng von 45C mg des rohen Dimethylols in 30 ml Methanol mit" 4-,5 ml 0,05.η SeIzsäure und hält die Lösung 3 Stunden bei Baumtemperatur. JJae Reaktionsgeiuisch wird mit 5 £-iger wäseriger Natriumbioarbohatlö8un^ neutralisiert, unter vermindertem Drucfc

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eingedampft und dann mit Chloroform extrahierte Der Extrakt wird mil: Was8er gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann zur Trockene eingedampft. Mach der Reinigung des Rückstandes durch Umkristallisieren aus einer Mischung von Äthyl- ' acetat und η-Hexan erhält man 290 mg Digitoxigenin-bisdigitoxoaid. Ausbeute: menr als 80¹J^,'bezogen auf Digitoxin.

(B-5) Nan erhitzt ein Gemisch aus 200 mg rohem Dialdehyd (A), .12 ml 95 tigern Äthanol, 160 mg Phenylhydrazin-hydrochlorid,

240 mg jtt&triumacetat-trihydrat und 4 ml Wasser 6 Stunaen unter Rückfluss. Das Heaktionsgemisch wird unter vermindertem Druele konzentriert und mit Chloroform extrahiert« Der Extrakt wird mit 0,5 5^-iger Salzsäure und Wasser gewaschen, getrocknet und eingedampft. Man erhält 250 mg Rückstand, der nach Umkristallisieren aus einer Mischung von Aceton und Hexan 32 mg Digitoxigenin-bisdigitoxosid vom Pp, 227 Ws 230⁰C liefert. Ausbeute; 18,8 }£, bezogen auf JDigitoxin·

Beispiel 2 Zu einer gerührten Lösung von 1 g Digoxin in einem Gemisch aus

20 ml Chloroform und 60 ml Methanol fügt man tropfenweise 10 ml einer 10 ji-igen wässrigen !«atriumperjodatlo'sung hinzu und rührt weitere 1,5 Stunden .bei Kaumtemperätur. Zur Entfernung der Festeubstanz wird das Gemisch filtriert und das Filtrat mit IC ml Wasser verdünnt, zur Lntfei>iung des fluchtigen Lösungsmittels unter vermindertem Druck eingedampft und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft, wobei 1,0 g roher Dialdehyd zurückbleibt. Der rohe Dialdehyd wird in 120 ml 95 ')£- igem Methanol gelöst und mit 500 mg Natriumborhydrid unter RUh-

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Γ '

ren bei Raumtemperatur vermischt* Die das Dimethylöl enthaltende Mischung wird weitere 30 Minuten gerührt· Das Gemisch wird auf einen p_H 2,4 gegen Thyibolblau-Re&genspapier mittels 0,1 η Salzsäure eingestellt und 3 Stunden bei Raumtemperatur gehalten· Das Reaktionsgemisoh wird mit 5 #-iger KaliumcarbonatlÖeung auf einen pjj 6,8 bis 7»0 neutralisiert, zur l&tfernung des fltichtigen Lösungsmittels eingedampft und dann mit Chloroform extrahiert· S)ex Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur !entfernung des Lösungsmittels eingedampft. Nach der Reinigung von 707 mg Rückstand

• ■ ■·■■-. ··.'■. ι

durch Umkristallisieren aus einer Mischung von Chloroform und ~ Äther erhält man 587 mg reines Digoxigenin-bisdigitoxosid vom . 195 bis 197⁰C. Ausbeute» 70,3 # der Iheorie.

174C, 1625 cm"*¹.

218 ψ (ζ m 14 500). IRx V^³ 35CO_r 1782, _?

, . ·	3	ber.s	64	C	H
C35B54O13		gef,ι ,	64	,59;.	8,36j
	■		f06j	8,46.
Beispiel

(A) Man fügt zu einer gerührten Lösung von 1 g.Gitoxin in 250 ml einer Miechuüg von Chloroform una Methanol (1 : 1 ) eine Lösung von 1 g Natriumperjodat in 10 ml Vaseer bei Rauutemperatür und hält das erhaltene Reaktionsgemisch 2 Stunden bei. Raumtemperatur· i»as iieaktionsgemisch wird zur Entfernung von tfe staubstanz filtriert, unter vermindertem Druck zur Entfernung des flüchtigen Lösungsmittels konzentriert und dann mit Chloroform extraliiert. Her Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem kaliumsulfat getrocknet'und zur Trockene eingedampft«

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Der Rückstand beträgt 9ÖO ins» reduziert Tollenreagens und zeigt einen einzigen Fleck ues Dialdehyds im Dünnschichtchromato-

(B-I) Man hält eine Lösung von 2OC mg -des rohen Dialdehyds (A) in 20 ml Aceton, das 0,1 ^ Kaliunibicarbonat enthält, 24 Stunden bei Rauateaperatur, Das Reaktionsgeniisch wird mit 5 jk-ifeer wäesrigür iiScigsäure neutralisiert, unter verhindertem Druck konzentriert und dann mit Chloroform extrahiert· Der üxtrakt v.ird mit v,aüser gewaschen, über wasserfreiem Kaliumsulfat getrocknet und unter verhindertem Druck zur Trockene eingedampft. Nach der Reinigung von 148 mg Hückstand mittels Dünnschichtchromatographie an Silikagel unter Verwendung eines Gemisches von Chloroform und Aceton (1 : 1) als iintwici>.lun&saiittel und nach dem Umkristallisieren aus einer Mischung, von Aceton una Hexan erhält 'can. 69 c>g reines Gitoxigenin-bisdigitoxosid vom Pp. 199 his 201⁰C, ^or/p': + 18,6° (c =» 0,591» Methanol)♦ Ausbeute: 40,5 # aus Gitoxin. .

(L-2) Man vermischt eine lösung von .2OC mg des rohen Dialdeh. do (A) in 20 ml Methanol mit 3 ml 0,05 η Salzsäure und hält üas Gemisch 24 Stunden bei Raumtemperatur. Die Reaktionsmischun^ wird mit 5 5i~iger wässriger l.atriumbicarbonatlosung neutralisiert, · unter veruinuerteia Druck konzentriert und mit Chloroform extraniert. Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, tLber wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Nach der Reinigung von 139 mg Rückstand mittels DUnnsckiehtcnromatographie an iilikagel unter V«rv/ondung einer Wischung von Chloroform und Aceton (1:1) als Kntwiclc-

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lun&siaittel und nach dem Umkristallisieren aus einer Ki von Aceton una Hexan erhält man 62 mg Gitoxigehin-bisdigitoxoßid vom Fp. 199 bis 2Cl⁰C. Ausbeute: 36,4 ^ aus Gitoxin·

# ■ _t

(13-3) Zu einer Lösung von 200 mg des rohen, Dialdehyds (A) in ■ 20 ml Methanol fügt man 25 mg Hatriumborhydrid und hält das Gemisch 1 Stunae bei Haumtemperatur· Das Reaktionsgemiech wird mit 5 $-iger wässriger Essigsäure neutralisiert, unter vermindertem Druck eingedampft und dann mit Chloroform extrahiert. Der £x~ trakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockene einge- dampft. Der Rückstand reduziert Tollenreagens nicht und zeigt im Dünnschichtohromatogramm einen einzigen fleck der JLdmethylol-Verbindung. Man veriuischt eine Lösung von 200 mg des rohen Diiaethylols in 20C ml Methanol mit 3,0 ml 0,05 η Salzsäure und hält das Gemisch 2 Stunden bei Haumtemperatur· Das Roaktibnsgemiscü wird mit 5 jt-iger wässriger liatriumbicarbonatlösung neutralisiert, unter vermindertem Druck konzentriert und dann mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit \.aseer'gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Entfernung ues Lösungsmittels ein^edaiapft. Bach-der Reinigung des Rückötaiides I mittels Dünnschiciitchromatographie an Silxkagel unter Verwendung einer Mischung von Chloroform und Aceton (1:1) als ü und nach dem Umkrietallisieren aus "einer Kischung

man
von Aceton und Hexan erhält/130 mg Gitoxigenin-bisd'igitoxosid

vom Pp. 199 bis 215°C. Ausbeute: 78 % aus Gitoxin.

ι + l⁸»⁶ (o = 0,591·, Kethanol)..1IY: A^g? ²¹⁹-(£ = 15 300). IRi.v.£ax^l3 J- 3500, 1785, 1740, 1630, 1S2$

009840/2253 bad o_R,_GINAL

	1	64	C	H
ber.	S	64	,59;	8,36;
gef.		,34·;	8,47·

Beispiel 4

l'ach einem ähnlichen Verfahren wie im Beispiel 2 oxydiert man Di^inatin mit Matriumperjodat eum Dialdehyd, reduziert anschliessend mit Katriuniborhydrid und hydrolysiert mit verdünnter Salzsäure. Man erhält Diginatigenin-bisdigitoxosid·

..2u einer lösung von 140 mg Digitoxin-3'-acetat in 8 ml 95 Jägern Äthanol fügt Dian 140 rag Natriumperjodat in 1,4 ml Wasser und hält das Gemisch 2 Stunden bei Raumtemperatur. Das Reaktiortsgelaiach wird aur Entfernung von Pestsubstanz filtriert, zur iintfcrnuni, des flüchtigen Lösungsmittels konzentriert und dann mit Chloroform extrahiert· Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreies Natriumsulfat getroclcnet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 140 mg eines weissen pulverförmigen Uialdehyds, der £ollenreagens reduziert und das ciiaraKteriBtische lüdi-Spektrum bei 0,30?· zeigt· Man veriuiaciit eine Lösung von 140 mg des rohen Maldeüyds in 20 ml Methanol mit > ml 0,ü5 η Salzsäure und hält die üischung 24 Stunden bei liaumtemperatur. Das Reaktionsgemisch .wird mit 5 #-iger wässriger liatriuinbicarbonatlöeung neutralisiert, unter vermindertem Druck konzentriert una dann mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit Nasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet unü unter vermindertem Druck zur trockne ein£/ed&nprt» Nach der Heiui^uno von 108 mg Rückstand mittels Dünncchichtchroaatographie an Silikagel unter Verwendung einer iiischunü von

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Chloroform und Aceton (2:1) als Entwicklung smitt el und iiach dem Umkristallisieren aus einer Mischung von Aceton und n-üexan erhält man 58 ag Digitoxigenin-bisdigitoxosid-^-acetat vom Pp₁ 140 Ms 145°C· Ausbeute 49,5 Φ der Iheorie·

C₅₇H₅₆O₁₁^Oi jber.: . 63,96; S,42j

gef.: 63,79i 8,76.

Beispiel 6 ·

Zu einer Lösung vori^n> 139 mg Digito2cin-3""-acetat in 8 ml 95 ?£-iger 95 j£-igem Äthanol fügt man eine lösung von 139 mg Hatriumper;jodat in 1,4 ml V.asser und hält das Gemisch 3 Stunden box Kaumtemperatur. Das lieaktionsgeiiiisch wird aur Entfernung von l^?estsubstanz filtriert, zur Entfernung von flüchtigem Lösungsmittel konzentriert und dann mit Chloroform extrahiert· l»er Jtbttrakt wird mit \vasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft« Man erhält 146 mg weissea, pulverförmiger rohen Dialdehyd, der Toiienreagenz reduziert und das charakteristische NMR-Spektrum bei 0»22 und 0,44 Z zeigt, Der rohe Dialdehyd wird in 24 ml Methanol gelöst, mit 3,6 ml 0,05 η Salzsäure vermischt und 24 Stunden bei üaumtemperatur gehalten. Das Keaktionsgemisch wird mit*5 56-iger

a *

wässriger Essigsäure neutralisiert, unter vermindertem Uruek konzentriert und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit V/aaser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft· Nach der Reinigung' von 116 mg Rückstand mittels DünnschichtChromatographie an" Silikagel und nach.dem ·· Umkristallisieren aus wässrigem Methanol erhält man 62 mg Digitöxigenin-bisdigitoxpsid-3"-äcetat vom Fp. 143 bis 147⁰Ce

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Ausbeute: 55,5 $ der Theorie.

M²Q '" + 17,5° (c * 0,253). Methanol)·

' 0 H CH,CO ■

^C37^H56^O11* ¹^^{2 H}2^{0i ber}*^{! 6}^,8C; ⁸»38; 6,28;

gef.x 64,74; . 8,25j 6,01.

Beispiel 7

Zu einer Lösung von 150 mg Digitoxigenin-bisdigitoxosid in 10 ml 95 .£-igem Äthanol fügt man eine Lösung von 150 mg Natriuaiperjodat in 2 ml Wasser und hält das Gemisch 1 Stunde bei-liaumtemperatur. Das Reaktionsge&iisch wird zur Entfernung von Peöt-

Ti substanz filtriert, zur Entfernung des flüchtigen Lösungsmittels konzentriert und dann mit Chloroform extraiiiert. Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Katri um sulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand zeigt im Dünnschicht ehr ouiato&raratd einen einzigen fleck des Dialdehyds unü reduziert. Tollenreagens. 150 mg Dialdehyd werden in 15 ωΐ 95 '/-igem Methanol gelöst, mit 75 m^ liatriumborhydrid vermischt und 2 Stunden bei Kaunitenperauur gehalten. Das iieaktionsgeiaisch wird mit 5 %— iger wässriger Jissigsäure neutrali-

m siert, unter verminuertem Druck konzentriert und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem. Natriumsulfat getrocknet und zur (L'rockne eingedampft. •Der Rückstand zeigt im Dümischichtchroraatogramm einen einzigen Fleck des Dirnetnylols und reduziert nicht Toiienre&^ünSo 135 mg rohes Dimethylol werden in 12 ml Methanol gelöst, mit 1,8 ml 0,05 η Salzsäure vermischt und 2 Stunden bei iiauiatemperatur gehalten. Das Reaktionsgemisch wird, mit 5 ?S-i&er -wässriger Natriurabicarbonatlößunti neutralisiert, zur Entfernung

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flüchtigen Lösungsmittels eingedampft und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird" mit Wasser gewaschen, Über wasecri'roiom · Kaliumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft· liach der Reinigung von 118 mg Rüokstand durch Umkristallisieren auo einer i.iSGhung von Äthjrlacetat und η-Hexan erhält man -Digitoxigeninmonodigitoxosid vom Pp, 197 bis 200°C.

^0H 218 ψ (£ * 15 09o). £*J**i - 5,2° (o * 0,327. Methanol). Auebeutet 76 ^cj» der Theorie. .

A · ■ -

Beispiel 8 .

Zu einer Lösung von 50 mg Bigoxi^enin-bisdigitoxosid in 3 ftl^f ά 95 £-igem Äthanol fügt man eine Lösung von 50 mg ttatriumperjoüat in 0,5 ml Wasser und hält das Gemisch 1 Stunde bei llaumtemperatur. Das Keaktiohsßeaiscli wird zur Entfernung von Festsubstanz filtriert, zur Entfernung von flüchtigem Löoungsmittel künzen» triert und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, Über wasserfreiem natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand zeigt im Dünnschicht- ^f chrociatogram einen einzigen Fleck des Maldehvds und reduziert To.llenreagens. Iten löst 52 mg rohen Dialaehyd in 3 ml 95 'A-r.etnanol, mischt 10 mg llatriumborhydrid hinau und hält das Geraisch 1 stunde- bei Raumtemperatur. Das Reaktionsgemisch v/ird . mit 5 Jt-iger wässriger Essigsäure neutralisiert, unter -vermindertem" Druck konzentriert und dann mit Chloroform extrahiert. Der Kxtrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Katriurasulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Der Mckstand zeigt im Dünhschichtchroniatogramc einen einzi^sn Fleck des Dimethylols unü reduziert nicht Ic11enreagens. Wan löst 45 mg des rohen Dimethylols in 2 icl Ketlianol, mischt

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υ ,05 η ,Salzsäure hinzu una Mit aas Gemisch 1 Stunde bei Kaumtempcratur. Daa Reäktionsgemisch wird mit 5 «/5-iger wässriger Katriunbicarbonatlösung neutralisiert, zur Entfernung de3 flüchtigen Lösungsmittels eingedampft unu dann mit Chloroform extrahiert. Der iixtraKt wird mit Wasser gewaschen, Über waacerfreieia l.atriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft, Nach der Reinigung von 44 mg Rückstand durch Umkrietallioieren auo einem von Äthylacetat und h-üsxan erhält man. Digoxigenin-

monodigitöxosid vom Fp. 210 "bis 212⁰C.

Boinniel 9 '

Zu einer lösung von 250 mg Gitoxigenin-bisdigitoxoßid in 20 ml 95 iC-igen Äthanol fügt man eine Lösung von 250 mg Matriuinperjodat in' 2,5 ml Wasser und hält üas Gemisch 1,5 S tuna en bei Kauratemperatur. Das Reaktionsgeraisch wird zur Entfernung von 'J ΰ st subs tanz filtriert, zur Entfernung des flüchtigen Löaun&enittels konzentriert und dann mit Chlorofon« extrahiert. Der Lxtrakt wird mit '.asser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat ^trocknet und zur Trockne ein^eüacipft. Der Rückstand zeigt ia Dünnschichtcnromatograu'iU einen einzigen Fleck des Dialüeiiyds und reduziert Tollenreagens, l'ian löst 250 mg des rohen Dialdehyd8 in 20 ml 95 ίύ-igera Methanol, luiecht 125 ml Watriumborhvdrid hinzu und hält das Genisch 2 Stunden bei Raumtemperatur» Da& Reacti ons^euisch wird iait 5 J^-ißer wässriger ÜssigBäure neutralisiert, unter verhindertem Druck konzentriert und dann mit Chloroform extrahiert. l>cr iüctrakt wird rät \<aseer gewaschen, u'uer wasoerfreiem Uatrxuiatulfat getrocknet und zur Trockne ein<ie-' dampft. Der Ruckstanc zeigt im Dünnschichtchromatografie einon einzigen Fleck üos jiuiethylols unu reduziert nicht ToUenreagens*

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öAD ORIGINAL

flan löat 230 mg des rohen Dimethylols in 20 ml Methanol,·, mischt .3,5 al 0,05 η Salzsäure hinzu und hält das Gemisch 2 Stunden bei Raumtemperatur· Das Reakt$onsgemisoh wird mit,5 Seiger wässriger ttatriuiabicarbonatlösung neutralisiert, zur ISntfernune, des flüch-' tigen Eödungsmittels eingedampft und dann mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit ,Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Nach der Reinigung von 207 mg Rückstand durch Umkristallisieren aus- einer Mischung von Äthy3.aoettat und η-Hexan erhält man Gitoxigenin-

mpnodigitoxosid vom Fp. 216 bis 218⁰C.

Beispiel IQ

Zu einer Lösung von 100 mg 3ß-"(ß-D-Digitoxösyl-ß-D-ciigitoxosylß-D-digitoxosyl)Oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-14-Ol in 12 ml 95 ji-i&eia Äthanol gibt man' 100 mg Hatriumperjodat iu 1 ml Wasser und hält aas Keaktionsgeniisch 1 Stuntxe bei Raumtemperatur. Das Reaktionsgemiscn wird unter vermindertem"Druck konzentriert' und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit V/asser gewaschen, über wasserfreiem l/atriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur irockne eingedampft. Der Rückstand reduziert.Tö'ilenreagens und zeigt im Dünnschichtchromatogramm einen einzigen Fleck des Dialdehyds „- Jßine Üösung. von 9ö mg des rohen Dialdehyds in 10 ml 95 5^-igem Methanol fügt man zu 50 mg im-feriumborhydrid und hält das Gemisch 1 Stunde bei Raumtemperatur unter Stickstoffe Das Reaktionsgemisch wird mit 5 5&-iger wässriger Essigsäure neutralisiert, bei Raumtemperatur unter · vermindertem Druck konzentriert und dann mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, Über wasserfreiem natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur '

009840/2253

SAD ORIGINAL ,

Trockne eingedampft. Der Rückstand reduziert nicht und zeigt im jJümischichtchroiaatogramu einen einzigen Flock des Dituethylols. Eine Lösung von" 100 mg des rohen üimethylols in 5 eil Methanol vermischt man mit 0,75 ml 0,05 η Salzsäure und hält das Gemisch 3 Stunden b©i Raumtemperatur. Das Reaktionäremisch wird mit 5 #-ifc,er wässriger Natriuubioarbohatlö'öung neutralisiert una mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt v/ird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, und unter vermindertent Druck zur Trockne eingedampft· Nach der

von 70 mg Rückstand durch Umkristallisieren aus einer von Aceton und η-Hexan erhält man 59 mg reines -D-Digitoxosyl)-ß-D-digitoxosy3/oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,

14ß'-anüroatan~14-ol vom Pp. 199 bis 200⁰C. Ausbeute: 74»3 % der

Theorie. fiU^i + 1,0 + 0,8° (c = 0,516, Methanol).

²¹² ^ (£ ^a 5 280). Hi! ^aX*⁵* ^35O° - ^56O

CH
C₅₅S₅₄O₉; 'ber.s -67,93; 8,80;

gef.: 67,96; 8,97.

Beispiel 11

Zu einer gerührten Lösung von 50 mg 3ß-Cß-D-Digitoxosyl-ß-D~ digitoxosyl-ß-D-Kiigitoxosyl)oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-12ß,14-diol in 6 ml Äthanol fügt man tropfenweise eine LöBuri^ von 50 mg üatriumperjodat in 0,5 ml Wasser bei Raumtemperatur« L'ach weiterem 30 minütigen RUhren wird das, Reaktionsgemisch aur Ent* fernung von Festsubstanz filtriert, mit 20 ml Wasser verdüunt, unter vermindertem Druck sur Entfernung des flüchtigen l^ßungsmittelö eingedampft und dann mit Chloroform extrahiert. Per Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem ilatripa.sul-

009840/2263

iC.it getrocknet mid unter vermindertem;·Druck aur trockne ei dampft„ Kon erhält 44 mg rohen Dialdehyd..Eine Lösung van 43 mg dos rohen Dialdehyds in 3 ml 95 ^c/—igem Methanol vermischt ir.an mit 20 mg Ifatriuiriborhydrid und hält das Gemisch 1 'Stunde bei: Raumtemperatur. Das das rohe Dimethylol enthaltende itealitlonsgemisch wird mit 0,1 & Salzsäure auf einen Pj₁ 2,8 gegen Ihymolblau-Iieagenspapier angesäuerte Nach 4-stündigem Rühren unter · stickstoff wixd die Lösung mit 5 9*-iger Katriunbicarbonatlö-· · sung neutralisiert,¹ konzentriert und- mit Chloroform extraiiiert. Der Extrakt vird mit Wasser gewaschen, über wasserfreien Katri-

: · ■ ·■""-■' ι

uinsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Kach der Ixeinigung von 41 mg des Rohproduktes mittels DünnschichtChromatographie an Silikagel unter Verwendung einer Mischung von Chloroform unü Aceton (2 j'.I) als JintwickluniiSMittel und nach dem Umkristallisieren aus einer Wi'schun^, von Chloroform una Äther erhält man 30 mg Sß-^-O-iß-D-Di^itoxosyiy-ß-D-digitozosyilJo^- 17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-12ß_i14-diol vom Fpo 136 -139⁰C. ^p²J + 0_t8 + 0,4^ A/||₅s· + 6i5i 0,5° (C β 1,016, Chloroforw). UT; ^^5^0H: 212 mu (£= 4 640), IR: V^^X3: 3500,'

1600 ei"¹. . ' ' i

■"■"'' C · H ' '

1/2 >J₂0: Der.: 65,30; 8,61;

gef.: , 65,76; 9,13. ■ ■ '

Beispiel 12

Zu. einer gerührten. Lösung von 800 mg 3S-(ß-13'-Digitcj;o8yl~;3-D-

14_tl6ß-diol in 60 ml Äthanol fügt man tropfenweise eine Lös von 800 ag Ratriutnpcrjodat in S ml Vvasser bei Räumt erap era tür

0 09^^072253

l;ach weiterem 45 minütigem Rühren wird das Reaktionsgeniisch zur Entfernung von Pestsubstanz filtriert, mit 20 ml Wasser verdünnt, unter vermindertem Druck zur iintfernung'von flüchtigem . Lösungsmittel eingedampft und dann mit Chloroform extrahiert. i>er Extrakt wird mit V<asser gewaschen, über wasserfreiem Natriuusulfaf getrocknet und unter vermindertem Druck Zur Trockne eingedampft» Wan. urhält 909 mg rohen DialdehycU &iae Lösung von 90ü mg des rohen Dialdehyds in 80 ml 9.5 SS-igsni Methanol vermischt man mit 80 mg Natriumborhydrid und hält das Gemisch 1 Stunae bei Raumtemperatur. Das das rohe Idmethylol enthaltende Reaktionsgeaisch wird mit 0,1 η Salzsäure auf einen p_ß 2,8'gegen Thyraolblau-Keagenspapier. angesäuert. Nach 4 stündigem Rühren unter Sticket off wird die Lösung mit 5 Jfc-ige.r Jiatriumbicarbonatlösunö. neutralisiert, konzentriert und mit Chloroform extrahiert» 'Der Extrakt wird mit V.asser gewaschen, über wasserfreiem Uatriun.suifat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Nach der Reinigung von 724 mg Rohprodukt mittels Dünrischichtchromatographie an SiIikacel unter Verwendung einer Mischung von Chloroform· unu Aceton (2:1) als Entwicklungsmittel und nach dem Umkristallisieren aus einer iiicchung von Aceton und Hexan erhält man 3 β-/4-ο-(ß-D-Digitoxosy1)-ß-D-digitoxosyVoxy-17ß-(3-furyl)-5ß, 14ß-androstan-14-l6a-diol vom Pp. 105 - 135°C· A7^⁷: +10,4 + 0,9° (c β 0,539,Methanol)..ÜVa^5^0H: 212 ψ. (€ * 5 030). XR: Y 2??·3ί 3500, 1603 cm"¹. '

C H

.3/2 H₂O: bsr.: 63,58; 8,68; gefo: 63,59; 8,71.

009840/2253

BAD ORIGINAL

Beispiel 13 ;

3u einer lösung von 100 mg 3ß-/4-0*-(ß-D-Digitbxo8yl)-ß-D-digitoxosy3joxy-17ß-(3~furyl)-5ß»14ß-androstan«*14-ol in 10 ml 95 tigern Äthanol fügt man 1,0 ml einer 10 #-igen wässrigen Lösung von Uatriumperjodat und hält das Gemisch 1 Stunde bei. Raumtemperatur. Das lieaktionsgemisch. wird mit Wasser verdünnt, zur Entfernung von Methanol eingedampft und dann mit Chloroform extrahiert· Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, über y;asserfreiea natriumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Lösungsmittels eingedampft· Man erhält 103 mg rohen Dialdehyd» Der rohe Dialdehyd wird in 8 ml 95 Seigern Methanol gelöst, mit ," " ~ | 15 mg liatriumborhydrid vermischt und' 30 Minuten bei Bäumtempsratur gerührt. Das .das ^methylol enthaltende Eeaktionsgemiscn v/ird mit 0,1 η Salzsäure auf einen p_H 2,4 angesäuert und 3 Stunden bei ltaumtemperatur gehalten. Dann wird die Mischung mit 5 i^-iger wässriger JMatriumbicarbonatlösung auf einen p^ 7»0 neutralisiert, mit*Wasser verdünnt, zur Entfernung von fluchtigem Lösungsmittel eingedampft und mit Chloroform extrahiert· Der'iixtralct wird mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur ]2atfernung des Lösungsmittels eingedampft. Nach der Heini- | gung ron 95 mg Rohprodukt durch Umkristallisieren aus einer Mischung von Methanol und Äthanol erhält man 77 g reines 3ß-( ß-D-BigitoxQsy 1 )oxy-17ß-*( 3-furyl )-5ß, l4ß-andrOs1;an-l4-ol vom Pp, 95 T3is 97°C« [⁰O^* - 10,8 ψ 1,4° (c = 0,361, Methanol).

²¹² «M* · 5 430)i. IR: V^¹Si 3400 - 3600, , C H ■■■'■■

H₂Oj- ber.: 69,99; 9,U; . ,

gef,; 70,30? 9,43o

Q098A0/2253 ' BAD ORIGiNAL

Boispiel 14

Zu einor lösung von 144 mg 3ß-^-0-(ß-D-Digitoxo?yl)-ß-B-digitoxosyl7oxy-17ß-(3-furyl)-5ßtl4ß-anUrostan-14,l6ß-diol In 12 ml 95 #-igem wässrigen Methanol gibt man 1,4 ml einer 10. $£-igen wässrigen lösung von liatriumper;}odat und rührt das Gemisch * 1 Stunde bei Raumtemperatur· Das Reaktionsgemiech -wird mit Nasser verdünnt, zur Entfernung von Methanol eingedampft und dann mit Chloroform extrahiert. Der läxtrakt wird mit Vasser gewaschen, über wasserfreiem liatriuiasulfat getrocknet und zur Entfernung aes Lösungsmittels eingedampft. Man erhält 140 rag rohen Dialdehyd.

" Der rohe Dialdehyd wird in 12 ml 95 tigern Methanol gelöst, mit 20 mg Natriumborhydrid vermischt und 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt· Das.daß Dimethylol enthaltende ReaktlonegGiaisch vdrd mit 0,1 η Salzsäure auf einen p« 2,6 angesäuert und 4 Stunden bei Raumtemperatur gehalten» Dann wird üas Gemisch mi G 5 /£-i&er wässriger iiatriuuibicarbonatlösunß auf einen p_H 7,0 neutralisiert, mit Yiasser verdünnt, zur Entfernung des flüchtigen Lösungsmittels eingedampft und mit Chloroform extrahiert. Dor Extrakt vird zweimal mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Ha-

P triuüisulfat getrocknet und zur Entfernung des Lösungeuittola eingedampft· Nach der Reinigung von 106 mg Rohprodukt durch Umkristallisieren aus einer Mischung von Methanol und Äther erhält man 70 mg reines 5ß-(ß-D-Digitoxosyl)oxy-17i3-(>-furyl5-5ij» I4ß-endrostan-14,l6ß-diol vom Fp₀ 218 bis 21,9°0. βΰ^ι ± 0?»

: + 11,2 + 2,0° (c = 0,4-03, Methanol)

UV: λ ^5^0H 212 mji {ξ = 5 600)-.' IRiV^⁰¹: 3450 on"¹

C H

^C29^H44°7^{S ber%i 6}9»O2;~ 8,79;
gef.: 69,07? 8,94«

009840/2253 BAD ORlG₁NAL

* β»

Beispiel 15 ,

Zu einer Lösung von 120 mg Digitoxigenin-monodigitososxd in 2 ml auf -20 bis -25°C unter Stickstoff gekühltem,' trockenem Tetrahydrofuran fügt man tropfenweise 1,20 ml einer Lösung von ■Uiisobutylaluminiumb^drid in Tetrahydrofuran (208 mg/ml)* Nach. 45 Hinuten vermischt man das Reaktionsgemisch mit 3 ml.. 2 η Schwefelsäure, rührt 15 Minuten bei O⁰C und extrahiert dann mit Chloroform. Der Extrakt wird mit 5 #«iger wässriger Hatriumbiearbonatlösung gewaseh©», über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Lösungsmittels eingedampft«_r Nach der Reinigung von 118 mg Rückstand mittels DÜnnschichtchromato- I graphie an Silikagel unter Verwendung einer Mischung von Aceton , und Chloroform (1 s 2) als Entwicklungemittel und nach dem Umkristallisieren aus einer Mischung von Äther und Pentan erhält man 65 mg 3S-Cß-D-j}igitoxosyl)o3Ey-17ß-(3-furyl)-5ßil4ßandrostan-14-ol vom Pp. 95 bis 97⁰C £<ΰψ % - 10,8 + 1*4°

(c - 0,361, Methanol). UVs Λ J^5^0H 212 mu (£ * 5 430).

IR« V???3: 3400 - 3500, l600 cm"¹

lljfc

Beispiel 16

Zu einer Lösung von 450 mg Digoxigenin-bisdigitoxoeid in 10 ml i auf -30°C gekühltem, trockenem Tetrahydrofuran fügt man 8,8 ml einer Lösung von Diisobuty!aluminiumhydrid in Tetrahydrofuran (258 mg/ml) in 3 Portionen unter Stickstoffatmosphäre. ■ Nach 45 Mnuten wird das Reaktionsgemisch mit 15 ml 2 η Schwefelsäure verwischt, bei O⁰C 15 Minuten gerührt und dann öit Chloroform extrahiert·. DeT Extrakt v.ird mit 5 Seiger wässriger.1\atrium-Tuicarbonatlösun^ gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und ssur Entfernung des Lösungsmittels eingedampfte

009840/2253 ^ßAD original

-40- ' 20Ϊ3221

Nach der Reinigung von 390 mg Rohprodukt mittels Dünnschicht-Chromatographie an Silikagel unter Verwendung einer Kiachung von Chloroform und Aceton (2:1) als Entwicklungsmittel und nach ' dem Umkristallisieren aus einer Mischung von Chloroform und Äther erhält man 303 mg 3ß-/4-O-(ß-D-Digitoxosyl)-ß-D~digitoxosyi7oxy-17ß-(3-furyl)-5ß»14ß-androstan-12ß,14-diol vom Pp₀ 136 bis 139°C. Μψ\ + 0,8 + 0,4° (c » 1,016, Chloroform),

UV: Λ^5^0Η: 212 mu (£ . 4" 640). IR; V ^3; 3500 obT¹.

Beispiel 17

Zu einer gerührten !Lösung von 300 mg Gitoxigenin-biBdigitoxosid in 5 ml Tetrahydrofuran fügt man 1,58 ml Diisobutylaluminium- . ' hydrid in trockenem Tetrahydrofuran (1,1 Mol-Äquivalent) bei . -25⁰C unter Stickstoff hinzu. Nach 30 Minuten gibt man in das Reaktionsgemisch 5 ml 2 η Schwefelsäure, rührt das Gemisch unter ■fciskühlung 10 Minuten und extrahiert die erhaltene ReäktionslÖ-sung mit Chloroform. Der Extrakt vird mit einer wässrigen KaIiuiacarbonatlö8ung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft· Kach der . Reinigung des Rohprodukts durch Umkristallisieren aus einer Mischung von Äther und Pentan erhält man .108 mg 3ß-$-~0-(ß-D«- . Dicitoxosyl)-ß-D-digitoxosyl7oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androstan-14,l6ü-diol vom Pp. 105 biö 135⁰C fuj^¹: + 10,4 + 0,9° (c s 0,539, Methanol).

Beispiel 18

2u einer Lösung von 400 mg Digitoxin in 20 ml Dioxan gibt man 5CO mg Bleitetraacetat und rührt das Gemisch 1,5 Stunden bei Raumtemperatur. Das Eeaktionsgemisch wird zur Entfernung von . fester Substanz filtriert und das FiItrat mit 10 ml Warscr ver-

0 0 9840/2253 . gAD

dünnt. Daa verdünnte Piltrat wird zur Entfernung des flüchtigen Lösungsmittels eingedampft und oiit Chloroform¹ extrahiert» D$x Extrakt wird mit Wasser gewaschen, Über wasserfreiem natriumsulfat getrocknet und zur Entfernung des Lösungsmittels einge- . dampft. Nach der Reinigung von 558 mg Rückstand mittels Dünnsohichtohromatographie an Silikagel unter Verwendung einer Mischung von Chloroform und Äthylacetat (Is 1 ) als jintwicklungs-. mittel und nach dem Umkristallisieren aus einer Mischung von. Äther und- Petroläther, erhält man einen"Dialdehyd", der identisch mit dem nach Beispiel 1 (A) erhaltenen ist. Der erhaltene Dial,-dehyd wird in 95 #-igem Äthanol gelöst und mit 10 mg Natriumborhydrid verciischt. Nach 1 Stunde wird das Reaktionsgemiach mit

1 η Schwefelsäure auf einen P₁₁ 2,4- gegen Thymolblau-Reagenspapier angesäuert und 30 Minuten bei Baumtemperatur gehalten. Das Beaktionsgeiaisch wird mit 0,1 η Katriuiacarbonatlösung neu« tralisiert, zur Entfernung des flüchtigen Lösungsmittela aatajft und mit Chloroform extrahiert.· Der Extrakt wird mit ser gewaschen, Über wasserfreiem Hatriumsulfat getrocknet und 2ur Irockene eingedampft, Hach der Reinigung des Rückstands mittels Dünnschichtchromatographie an Silikagel unter Verwendung g einer Mischung von Chloroform und Aceton (2 : 1) als iSntwick- und nach dem Umkristallisieren aus einer Mischung

von Aceton und n-Hexan erhält man 287 mg Digitoxigenin-bisdi-

o ·

sitoxosid vom Schmelzpunkt 226 bis 230 C. Ausbeute» 8? % der

Bai spiel

Zu einer Iesung von 100-mg ^igitoxin in 4 ml Chloroform und ; ■4 m3. auf 0% ^kiihiten ietraohlorkohlenetoff gibt man 100, mg

•pulverförmiges Rutheniumtetroxid. Nach 30 ninUtigen Rühren vermiedet man das Gemisch mit einer geringen Menge Methanol und filtriert aur Kntfernung von fester Subg.tana«, Das Piltrat wird aur Trockne eingedampft, und man erhält'99 mg eines Rückstandes, . der mit dem nach dem Verfahren des Beispiels 1 (A) erhaltenen

identisch ist. Der Dialdehyd wird in.1 ml 95 ^-igem Äthanol ge« ί löst, mit 8 mg Natriumborhydrid vermischt und die Mischung 30 Minuten auf Raumtemperatur gehalten· Das das rohe Dimethyl öl . .enthaltend^ Reaktionsgemiscu wird mit 0,1 η Sohwefdl&äure auf einen !»«3,5 gegen Thymolblau-lieagenspapier angesäuert, Hach 3 Stunden wird das Keaktionsgemisch mit 5 ?£~iger NatriuabicarbonatlÖBung neutralisiert, Konzentriert und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen» über wasserfreiem natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Nach der Reinigung des Rückstandes mittels Dünnechichtcnromatographie und nach dem Umkristallisieren erhält man 73 mg Digitoxigenin-bisdigitoxosid vom ί·ρ. 228· bis 23O⁰C. Ausbeutes 89 ί* der Theorie.

Beispiel 20

Zu einer Löswig von 100 mg l>igitoxin in 5 ml Essigsäure fügt ms% 1 ml Wasser und 500 mg pulverisiertes Katriumwismutat hinzu. ; Nach 3-stündigem Schütteln bei liaumtewperatur wird da3 üemisch zur"Entfernung von fester Substanz filtriert. Die feste Substanz wird gründlich mit Ätiaylacetat gewaschen. Die Mischung de3 . Ültrats und deir Waschwasser wird zur Irockne eingedampft. Dor Rückstand wird mit ffatriumborhydrid und verdünnter Schwefelsäure nach dem Verfahren gemäes Beispiel 1 (B-4) behandelt» Hon 'erhält·70 mg Digitoxigenin-bisdigitoxosid vom Pp. 228 bis. 23O⁰C, Ausbeute: 85 1* der Theorie.

009840/2253 ■ bad original

^; . - 43- · 20Ϊ3221

Beispiel 23,

Zu einer lösung von 10 mg Digitoxin in 1 ml Benzol fügt man 13 mg Jo&osobenzol-diacetat hinzu« Nach, 5-3tündä£,eui Rühren wird, das Reaktionegemisch mit wässriger ftatriumbisulfatlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft· Eer Rückstand zeigt ila tfünnsehichtchrqmatogramni den Eialdehyd-Fleck. Der Rückstand wird mit Satriumborhydrid und verdünnter Schwefelsäure nach dem Verfahren gemäss Beispiel· Ϊ (B-4) behandelt« Man erhält Digitoxigeniii-bißdigitoxosid vom Fp, 22S bis 231°C

Beispiel 22 " .

Eine Mischung von 9 mg 3ß-^*4-0-.(ß-D-Digitojcosyl)-a-D- . digitoxosvl7oxy-l?ß-C3-furyl)-5ß_f14ß-ancircstan-l4,l6ß-diol_t 0,5 nil Pyridin und C,5 ml Essigsäureanhydrid wird 5 Tage bei Raumtemperatur gehalten. Üas Reaktionsgeuiisch wird in üiswasser gegossen und mit Chloroform extrahiert. Der Extrakt wird nacheinander mit fcaeeer, wässriger flatriucicarbonatlößung und mit wasserverdtinnter Salzsäure gewaschen, Über wasserfreiem natriumsulfat getroeicnet und zur Troclme eingedampft. Nach der Reinigung von 12 mg Rückstand mittels Minnschichtchroaatographie an Silikagel unter Verwendung einer Mischung von Äthylacetat* und Benzol (1 ι 2) als iintwickluzi^siaiutel und nach dem .Vau-:ristallisieren aus einer Mischung von Äther und n^Hexan erhält man amorphes 3ß-/4-O~(ß-D-Digitoxceyl)~ß-D-digitoxosyl/oxy-17ß-(3-furyl)-5ß_f14ß-androstan-l4:iX63-diQl-»tetraacetat von Fp. 103 bis 106°C.

0 0 9 8 4 0/2253 ^BAD

Boispiel 23

In üblicher Weise stellt man eine Tablette aus 0,2 mg 3ß./4-O-(ß-D-Digitoxoeyl)-ß-D-digitoxosy^7oxy-17ß-(3-furyl)-5ß» 14ß~andröstan-14»l6ß-diol, 50 mg Stärke und einer geringen Menge Mögneeiumstearat her. J&nem Patienten verabreicht man täglich entweder 6 Tabletten als Einzeldosis oder 2 Tabletten als' Dauerdosia. ' -

Beispiel .24 . ;

Man stellt ein gefärbtes Pulver aus einem Gew.-Teil

14ß^androutan-14fl6ß-diol und 10 0OC Gew.-.Teilen Stärke her.

Beispiel 25

Einem Patienten wird eine Injektionsflüssigkeit, die eine Lösung von 2 mg 3ß-/^-Ö-(ß-D-Digitoxosyl)-ß-D-diiiitoxoey]_%7oXy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ii-androstan-14-ol ±_π ι ml 20 tigern Alkohol und einen Stabilisator enthält und die unter Stickstoff verschlossen gehalten worden war, in einer Dosis von 2 bis 4 ml/Tag für eine schnelle Saturierung oder bei kritischen Fällen verabreicht»

009840/2253

Claims (1)

1. Patent a-nsprü'che . . ■ - ·"'.

   1. Steroid-Glyeoside mit 2-Desoxyzuckerresten der allgemeinen Formel .

   Ä,

   (I)

   in der X der Rest eines Sauerstoff enthaltenden Kohlenwasserstoffrings ist, PL und PU Wasserstoffatome, Hydroxylgruppen· oder Acyloxyreste/bedeuten, R_m ein Wasserstoffatom oder ein Acylrest ist, der bei jeder Zuckereinheit gleich oder verschieden sein kann, und η eine Zahl grosser als 1 ist»

   2. Verbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel

   R¹

   0 0 00407225 3 V

   BAD ORIQlWAU

   in dor R und K* Waosorofcoffatome oder Hydroxylgruppen sinu und η' die Zahl 1 oder 2 ist, und deren Kster·

   3. 3ß-(ß-D-üigitoxoayl)oxy-17ß-(3-furyl)-5ß,14ß-androsUn-14-ol.

   4. 3ß-(ß-3>-flißitoJCoayl)oxy-i7ß-(3-furyl)-5ß»14ß-androstsn-12ü,

   14-diol.

   5 ο 3ß-( U-D~l)igi toLüijy 1) oxy-17ß-( 3-furyl )»ijß, I4ö-anü r ostan-14» 16ß~diol»

   6. 3ß-(ß
   12ß,14,16ß-triol.

   5ß 114ü-axidros can-14 -λ 1»

   9» 3ß-/4-O-(ß-D-Jjigi tox.osyl)-ß-D-üigitoxojy'l/ox 5üt14ß-anuroatan-14,16ß-dlol»

   11. 3ß-A-0-(ß-I»-ii- :;iti>:i:o

   ■ilol-tetraacetat

   12. Digito^ü;^ϋη/;~h^;. ;d Lgi

   13. Dig it ccci , inin-i)l;. ■! L gitoxosid~3"-aceta

   009840/2253

   14β Verfahren zur Herstellung von Verbindungen nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 13, ü a d u r ο h ge l·: e η η sei ο hn e x, dass man eine Verbindung der allgemeinen For»

   mel ' , .

   CH

   in der X« R,, R„, R und η die oben angegebenen Bedeutungen besitzen« mit einem Glykolspaltungsmittel reagieren lässt und das erhaltene Produkt - gegebenenfalls nach Reduktion - hydrolysiert.

   15* Verfahren nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, dass man als Glycolspaltunüsmittel Perjodsäure, Perjodate ouer Bleitetraacetat verwendet,

   16. Verfahren 2iach den Ansprüchen 14 Ader 15» dadurch gekennz ei ohne t, dass man 1 bis 5 Moläquivalente Per^odsäure, Perjodate oder Bleitetraacetat als Glycolspaltungsmittel anwendet.

   1?. Verfahren nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, dass man den nach der Glycolspaltun^ erhalte»

   0 0 98 40/225 3

   BAD ORIGINAL

   nen Dialdehyd zu einer "Dimethylol"-Verbindung der allgemeinen Formel · ·. - · · · ; ■ .. · ■ '

   HOCH

   CH

   in der X_f R^, R«« sitzen, reduziert»

   oben angegebenen Bedeutungen be

   18. Verfahren nach den Ansprüchen 14 oder 18, dadurch gekennzeichnet, dass nan die Reduktion in Gegenwart von i bis 10 Koläquivalenten hatriuiaborhydrid durchführt·

   19. Verfahren «ur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 2, daduroh gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen ?ornel rr C=O

   009840/2253

   in der R, H* und η* die in Anspruch 2 angegebenen Bedeutungen besitzen, und deren a'ster mit einem Reduktionsmittel zur Ee du zierung der Butenolid-Gruppe in die Puryl-Gruppe behandelt. -

   20. Verfahren nach Anspruch 19, dadurohg e k e η η zeichnet, dass man ala Reduktionsmittel ein aktives

   ■4

   Aluminiumhydrid, vorzugsweise ein Dialkylaluminiumliydrid, verwendet.

   21. Verfahren nach einem oüer mehreren der Ansprüche 14 bis 20, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Pormel .'

   Z—-0

   in der X, R,, R₀, B und η die in Anspruch 1 angegebenen Bedeu-J-cm

   tungen besitzen, und in der Z die Gruppe

   CH

   CII

   OHC

   deren Acetale oder die • Gruppe .

   hoch:

   HOCH

   darstellt, hydrolysiert<

   009840/2253

   -5Q* 20T3221

   t ·

   22. Verfahren nach Anspruch T ·".., daduroh gekennzeichnet, dass mn iie Hydrolyse mit einer Säure, einer Base mier einem Ketor^-e&^tionsaittel durchführt·

   23. Verfahren nat-ü den Ansprüchen 21 .oder 22, dadurch gekennzeichnet, dass man die Hydrolyse durch Behandlung in einem sauren Medium durchführt«

   24. Verfahren nach einem oder mehreren der Ansprüche d bis 23, dadurch gekennzeichnet, dass man die

   Hydrolyse in Gegenwart von 0,1 η bis 0,0001 η Mineralsäure oder T durch Behandlung in einem sauren Medium vom Pu 1 bis 4 durchführt.

   25. Verfahren nach einem oder mehreren der Ansprüche 21 bis 24, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung hydrolysiert, in der X die Butenoliü- oder■Furyl-Gruppe 1st.

   26. Verwendung der Verbindungen der Ansprüche 1 bis 25 ale Arzneimittel in der Human-, Geflügel- oder Veterinärmedizin.

   ~ 27. Verwendung nach Anspruch 26, gekennzeichnet durch einen zusätzlichen Gehalt an einem pharmazeutisch verträglichen Trägermaterial,

   28, Verwendung nach den Ansprüchen 26 bis 27, gekennzeichnet durch einen zusätzlichen Gehalt an einem pharmazeutisch verträglichen festen, flüssigen oder pulverförmig gen Trägermaterial

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