DE1913817A1 - Verfahren zur Vorbereitung,Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben - Google Patents

Verfahren zur Vorbereitung,Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben

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DE1913817A1 DE19691913817 DE1913817A DE1913817A1 DE 1913817 A1 DE1913817 A1 DE 1913817A1 DE 19691913817 DE19691913817 DE 19691913817 DE 1913817 A DE1913817 A DE 1913817A DE 1913817 A1 DE1913817 A1 DE 1913817A1
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Description

BOEHRINGL1R MAMIKIM GMBH 15 61 a
Verfahren zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von
Blut- und Serumproben
Zusatz zur Patentanmeldung Aktenzeichen P 1,7 73 841 «9
Gegenstand der Hauptanmeldung Aktenzeichen P 17 73 841„9 ist ein Verfahren zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben zur Bestimmung der Inhaltsstoffe, vorzugsweise dar Lipide und Glucose, dadurch gekennzeichnet daß man eine abgemessene Menge der zu untersuchenden Flüssigkeit auf einen saugfähigen Träger mit ionenaustauschenden Eigenschaften aufträgt, trocknet und erst unmittelbar vor der Untersuchung eluiert*
In Ausgestaltung der Hauptanmeldung Aktenzeichen P 17 73 84I.9 wurde nun gefunden, daß sich das erfindungsgemäEe Verfahren auch dann besonders gut zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben eignet, wenn diese zur Bestimmung von Galaktose und Cholesterin herangezogen werden sollen.
Es ist bekannt, daß Blutproben hinsichtlich ihres Galaktose- bzw. Cholesteringehaltes ähnlich instabil sind wie glucose- bzw. triglyceridhaltige Proben. Diese Stoffe konnten daher bislang nur im Serum bestimmt werden, wofür umständliche Trennoperationen notwendig waren, welche sich nur mit größeren Blutmengen .durchführen lassen. Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren sind dagegen sämtliche Trennoperationen überflüssig; hierdurch läßt sich die :jur 3es tiitunun,·; benötigte Men^e Blut von 0,5 al auf 0,05 n'l reduzieren. Bedeutsam ist dies insbesondere für Reihenuntersuchungen, da die geringe Blutmenge als Kapillarblut entnommen werden kann und nicht mehr durch Venenpunktion gewonnen werden muß. Ein weiterer wichtiger Vorteil des erfindungagemäßen Verfahrens besteht darin, daß von kleinen Laboratoriumstieren in Reihentests auf Galaktose bzw» Cholesterin erstmals unbeschadet
0 9 8 4 0/0724
mehrere Blutproben entnommen werden können, wodurch die Treffsicherheit der Ergebnisse erheblich gesteigert wird.
Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren vorbereiteten und getrockneten Proben können auf einfache Weise im Briefumschlag versandt werden und gestatten es trotzdem, quantitative Bestimmungen von Galaktose und Chole=» sterin mit großer methodischer Genauigkeit auch noch lange Zeit nach der Blutentnahme durchzuführen»
Als saugfähige Träger mit ionenaustauschenden Eigenschaften verwendet man vorzugsweise die in der Hauptanmeldung beschriebenen lonenaustsuscherpspiar®, fe Galaktose wird vorzugsweise im schwach sauren Bereich stabilisiert» .Die Stabilisierung von Cholesterin erfolgt am besten auf schwach alkalisch eingestellten Anionenausbscherpapieren.
Selbstverständlich ist es möglich, anstelle von Filterpapier mit gleichem Erfolg die in der Hauptanmeldung außerdem erwähnten saugfähigen Träger 9 wie Cellulose, Kunststoffe oder Textilgewebe zu verwenden.
Die Bestimmung der Galaktose erfolgt nach dem Eluieren des saugfähigen Trägers mit Hilfe des Enzyms Galaktose-dehydrogenase im optischen Test nach Warburg bei 366 nm.
Der Nachweis des Cholesterins wird nach dem Eluieren des saugfähigen " Trägers mit einem geeigneten organischen Lösungsmittel, vorzugsweise einem Gemisch von Chloroform und Methanol (2il) nach der von Watson angegebenen Methode (D. Clin. Chim, Acta, £, 637 [i960]) durchgeführt.
In den folgenden Beispielen sind typische und bevorzugte Ausführungsformen des erfindungsgemäßen Verfahrens beschrieben.
0 0 9 8 h 0 / 0 7 2
B e i a ρ i e 1
Galaktose-Bestinnrnng in Rattenblut
Kan verabreicht einer Ratte 0,75 g/kg Galaktose und entnimmt 15 Min. danach fünf Blutproben zu 0,05 ml, welche unmittelbar nach der Entnahme auf die gemäß Beispiel 1 der Hauptanmeldung vorbereiteten Ionenaustauscherpapiere vom Typ Amberlite IR-C 50 aufgetragen werden.
Sur Kontrolle wird eine weitere Blutprobe von 0,2 ml entnommen und nach der Enteiweißung der herkömmlichen Bestimmung im optischen Test nach Warburg zugeführt.
Die präparierten Papierstücke werden,wie im Beispiel 1 der Hauptanmeldung beschrieben, eluiert, worauf daa Eluat ebenfalls dem optischen Test naoh Warburg unterworfen wird.
In der folgenden Tabelle I sind die erhaltenen Werte gegenübergestellt.
Tabelle
Galaktoaebestimmung nach Warburg
Galaktose.in ent- Galaktose im
eiweißter Blut- Papier-Eluat
prooe
[ag >]
56,0 56,1
54,7
55,7
r 55,2
56,9
Kontrolluntersuchungen an Blutproben auf Ionenaustauscherpapier v.eirten naoh mehreren Wochen Lagerung, daß sich der Galaktose-Gehalt nicht wesentlich verändert hat.
0098 4 0/0724
Bei 3 ρ i e 1
Cholesterin-Bestimniut:/? in Kaiiinchenblut'
Kationen-Austauscherpapier Amberlite IRA-400 (Chloridform) wird in quadratische Stücke von 3 cm Kantenlänge zerschnitten. Nach dem Aufbringen von jeweils 0,1 ml Kaninchenblut werden die einzelnen Proben tctrocknet und in einem Schliffreagenzröhrchen mindestens 10 Stunden lang in 5 nil eines Extraktionsgeniisches nach Folch-Sperry (Chloroform-Kethanol 2:1) eluiert. Nach Abschluß der Elution wird das Papier aus dem ochliffreagenzglas entfernt und das Lösungsmittel abgezogen. Der verbleibende Rückstand wird mit 0,1 ml V/asser versetzt, geschüttelt und in derselben Weise wie Blutserum für die Cholesterin-Bestimmung nach Watson verwendet.
In der folgenden Tabelle II werden je θ Einzerbestimmungen aus Serum bzw. aus Papiereluat miteinander verglichen.
Tabelle!!
Cholesterin-Bestimmung nach Watson
Cholesterin im Kaninchenseruc Cholesterin in- Papiereluat
[nie- '/J
77 36
179 173
123 124
10" 105
97
94 97
92 - 93
94 90
Kontrolluntersuchungen an Blutproben auf lonenaustauscherpapier seilten nach mehreren Wochen Lagerung, daß sich der Cholesterin-Gehalt nicht wesentlich verändert hat.
009840/0724

Claims (3)

  1. Patentansprüche
    f 1.!Verfahren zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von
    Blut- und Serumproben· zur Bestimmung von Galaktose und Cholesterin, dadurch gekennzeichnet, daß man eine abgemessene Menge der zu untersuchenden Flüssigkeit auf einen saugfähigen Träger mit ionenaustauschenden Eigenschaften aufträgt, trocknet und erst unmittelbar vor der Untersuchung eluiert.
  2. 2. Verfahren gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man zur Bestimmung von Galaktose in Blut schwach saures Kationenaustauscherpapier verwendet.
  3. 3. Verfahren gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man zur Bestimmung von Cholesterin in Blut schwach basisch eingestelltes Anionenaustauecherpapier verwendet.
    00 9840/07 2
DE19691913817 1968-07-15 1969-03-19 Verwendung eines Verfahrens zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben Expired DE1913817C3 (de)

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DE19691913817 DE1913817C3 (de) 1969-03-19 Verwendung eines Verfahrens zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben
US832432A US3645692A (en) 1968-07-15 1969-06-11 Process for the preparation, preservation and transportation of blood and serum samples for use in clinical analyses
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GB34990/69A GB1235577A (en) 1968-07-15 1969-07-11 Process for the preservation of blood and serum samples
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BR210695/69A BR6910695D0 (pt) 1968-07-15 1969-07-14 Processo para a preparacao conservacao e o transporte de amostras de sangue e soro
ES369558A ES369558A1 (es) 1968-07-15 1969-07-15 Procedimiento para la preparacion, conservacion y transpor-te de muestras de sangre y suero, para la determinacion, de las sustancias contenidas.

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ES369558A1 (es) 1971-06-01
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